MXPA02010264A

MXPA02010264A - 2-guanidino-4-aril-quinazolinas como inhibidores de nh-3.

Info

Publication number: MXPA02010264A
Application number: MXPA02010264A
Authority: MX
Inventors: Claudia Wilm
Original assignee: Merck Patent Geschrankter Haft
Priority date: 2000-04-18
Filing date: 2001-03-22
Publication date: 2003-04-25
Also published as: SK13472002A3; PL356559A1; KR20030011789A; CA2406161A1; RU2002130246A; JP2004501082A; CN1422260A; HUP0300909A2; NO20024997L; EP1274691A1; ZA200209274B; US20040224965A1; BR0109867A; NO20024997D0; DE10019062A1; HUP0300909A3; WO2001079186A1; AR028914A1; AU2001293373A1

Abstract

Compuestos de la Formula I,(Ver formula) donde Ar es un fenilo o naftilo insustituido o monosustituido por R3 , R1, R2 es, independientemente entre si, H, A, OA o CF3, R3 es A, OA, Hal o CF3 es alquilo con 1,2,3,4,5 o 6 atomos de carbono, Hal es F, Cl, Br o I y sus sales y solvatos fisiologicamente inofensivos como inhibidores NHE-3.

Description

2-GUANIDINO-4-ARIL-QUINAZOLINAS COMO INHIBIDORES DE NHE-3 Descripción de la Invención La invención se refiere a compuestos de la Fórmula I donde Ar es un fenilo o naftilo insustituido o monosustituido por R3 ' R1, R~ es, independientemente entre si, H, A, OA o CF3, R3 es A, OA, Hal o CF3 A es alquilo con 1,2,3,4,5 o 6 átomos de carbono, Hal es F, Cl, Br o I y sus sales y solvatos fisiológicamente inofensivos como inhibidores NHE-3. La Fórmula I comprende también compuestos tautómeros de la Fórmula I' REF: 141657 Otros inhibidores del subtipo 3 del intercambiador sodio/protones se describen por ejemplo en la patente EP 0 825 178. Los compuestos de la Fórmula I y su uso para otros fines se han descrito ya en la patente US 3.131.187. Los derivados de quinazolinil-guanidina han sido descritos por V.I.Shvedov et al. en Pharm. Chem. J. (Traduc. al inglés) 1980, 14, 532-538 o en Khim. arm. Zh.1980, 14, 38-43, asi como por S.C. Bell et al. en J. Med. Pharm. Chem. 1962, 5, 63-69. El objeto de la invención es encontrar nuevos compuestos con propiedades valiosas, especialmente tales que pueden ser utilizados para obtener medicamentos. Sorpresivamente se comprobó que los compuestos de la Fórmula 1 y sus sales no solamente son bien tolerables sino que inhiben el intercambiador de sodio/protones del subtipo Los compuestos de la Fórmula 1 pueden ser utilizados como medicamentos en medicina humana y veterinaria. Se sabe que los intercambiadores Na+/H+ forman una familia de por lo menos seis isoformas diferentes (NHE-1 a NHE-6) , todas las cuales ya han sido clonadas. Mientras que el subtipo NHE-1 está distribuido ubicuamente en los tejidos de todo el cuerpo, los demás subtipos de NHE se expresan selectivamente en órganos específicos como los riñones o la pared luminal y contraluminal del intestino delgado. Esta distribución refleja las funciones especificas que cumplen las distintas isoformas, esto es, por una parte, la regulación del valor pH intracelular y el volumen celular por medio del subtipo NHE-1 y por otra, la absorción y reabsorción de Na+ en el intestino y los riñones por medio de las isóformas NHE-2 o NHE-3. La isoforma NHE-4 se encuentra principalmente en el estómago. La expresión de NHE-5 se limita a los tejidos del cerebro y las neuronas y NHE-6 es la isoforma que permite el intercambio de sodio/protones en los mitocondrios . La isoforma NHE-3 se expresa especialmente en la membrana apical de los tubos renales proximales. De alli que una sustancia inhibidora de NHE-3 ejerce, entre otros, un efecto protector de los riñones.

El uso terapéutico de una sustancia inhibidora selectiva de isoformas NHE-3 es múltiple. Los inhibidores de NHE-3 inhiben o reducen los daños en tejidos y necrosis celulares posteriores a episodios patofisiológicos hipóxicos e isquémicos que producen un aumento de la actividad de NHE, como ocurre durante una isquemia renal o durante el retiro, el transporte y la perfusión de un riñon en un transplante renal. Los compuestos de la Fórmula I tienen efecto citoprotector, ya que impiden la absorción excesiva de sodio y agua en las células de órganos que tienen poco aprovisionamiento de oxigeno. Los compuestos de la Fórmula I tienen efecto hipotensor y son apropiados como sustancias para medicamentos destinados al tratamiento de la hipertensión. También son apropiados como diuréticos. Los compuestos de la Fórmula I actúan solos o en combinación con inhibidores de NHE de otros subtipos como antiisquémicos y pueden emplearse en trombosis, ateroesclerosis, espasmos vasculares, para la protección de órganos como por ejemplo los riñones y el higado, antes y durante operaciones y en insuficiencias renales crónicas y agudas .

También se pueden usar para el tratamiento de apoplejía cerebral, edema cerebral, isquemias del sistema nervioso, diferentes formas de shock, por ejemplo shock alérgico, cardiológico, hipoyolémico o bacteriano, asi como para mejorar el impulso respiratorio en por ejemplo en los siguientes estados: apnea del sueño central, muerte súbita del lactante, hipoxia posoperatoria y otros trastornos respiratorios . Por combinación con un inhibidor de carboanhidrasa es posible seguir mejorando la actividad respiratoria. Los compuestos de la Fórmula I tienen efecto inhibidor de la proliferación de células, por ejemplo la proliferación celular del fibroblasto y la proliferación de las células lisas de los músculos vasculares y por lo tanto pueden usarse para el tratamiento de enfermedades cuyo origen primario o secundario es la proliferación celular. Los compuestos de la Fórmula I pueden ser utilizados para tratar complicaciones diabéticas tardías, enfermedades cancerosas, enfermedades fibróticas, disfunciones endoteliales, hipertrofia e hiperplasia de órganos, especialmente hiperplasia prostática o hipertrofia prostática.

También son aptos como diagnósticos para determinar y diferenciar ciertas formas de hipertonía, de ateroesclerosis, diabetes y de enfermedades proliferativas. Dado que los compuestos de la Fórmula I también pueden influir ventajosamente el nivel de lipoproteina en suero, pueden usarse para tratar un nivel de grasa en sangre aumentado, ya sean solos o en combinación con otros medicamentos . El objeto de la invención es el uso de compuestos de la Fórmula I y sus sales fisiológicamente inofensivas y/o solvatos según la reivindicación 1, para la preparación de medicamentos destinados al tratamiento de trombosis, estados isquémicos del corazón, del sistema nervioso periférico y central y de la apoplejía, estados isquémicos de órganos periféricos y miembros y para el tratamiento de estados de shock. También es objetivo de esta invención, el uso de compuestos de la Fórmula I y sus sales fisiológicamente inofensivas y/o solvatos según la reivindicación 1, para la preparación de medicamentos destinados a ser utilizados en intervenciones quirúrgicas y transplante de órganos y para conservar y guardar transplantes para fines quirúrgicos.

También es objetivo de esta invención, el uso de compuestos de la Fórmula I y sus sales fisiológicamente inofensivas y/o solvatos de la reivindicación 1, para preparar un medicamento para el tratamiento de enfermedades cuyo origen primario o secundario es la proliferación celular, para el tratamiento o profilaxis de trastornos del metabolismo de las grasas y del impulso respiratorio. También es objetivo de esta invención, el uso de compuestos de la Fórmula I y sus sales fisiológicamente inofensivas y/o solvatos de la reivindicación 1, para preparar un medicamento para el tratamiento de la isquemia renal, enfermedades isquémicas del intestino o para la profilaxis de enfermedades renales agudas o crónicas. Por ejemplo en la Patente US 5.871.919 se describen métodos para identificar sustancias que inhiben el subtipo-3 de intercambiador de sodio/protones. En los compuestos de la Fórmula I, para todos los residuos que aparecen frecuentemente, por ejemplo A, se considera que su significado es independiente entre si. Se entienden por hidratos y solvatos, por ejemplo los hemi-, mono- o dihidratos y por solvatos por ejemplo compuestos de adición alcohólica como p.ej. metanol o etanol.

En las fórmulas que anteceden, A significa alquilo, es lineal o ramificado y tiene 1,2,3,4,5 o 6 átomos de C. A significa preferentemente metilo, también etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo o ter-butilo; también pentilo, 1-, 2- o 3-metilbutilo, 1,1-, 1,2- o 2,2- dimetilpropilo, 1-etilpropilo, hexilo, 1-, 2-, 3- o 4- metilpentilo, 1,1-, 1,2-, 1,3-, 2,2-, 2,3- o 3,3- dimetilbutilo, 1- o 2-etilbutilo, 1-etil-l-metilpropilo, 1- etil-2-metilpropilo, 1,1,2- o 1, 2, 2-trimetilpropilo . OA significa preferentemente metoxi, etoxio, propoxi, isopropoxi o butoxi. Hal significa preferentemente F, Cl o Br, pero también I. Ar es fenilo o naftilo insustituido, también preferentemente fenilo o naftilo monosustituido por A, fluoro, cloro, bromo, iodo, metoxi, etoxio, propoxi, butoxi o CF3. Por to tanto, el objeto de la invención es especialmente el uso de aquellos compuestos de la Fórmula I en los cuales por lo menos uno de los residuos mencionados tiene uno de los significados preferidos mencionados. Algunos grupos preferidos de compuestos pueden expresarse por las siguientes formas parciales la a II, las que responden a la Fórmula I y cuyos residuos, que no se describen más detalladamente, tienen el significado indicado en la Fórmula I donde, sin embargo: En la R1 es H o Hal En Ib R1 es H 1 o Hal R2 H En le R1 H o Hal R2 H Ar fenilo En Id R1 es H o Hal R2 H R3 es A, OA o Hal En le Ar es fenilo En If Ar es fenilo R1,R2 son, independientemente, H, A, OA, Hal o CF3 En Ig Ar significa fenilo insustituido o .3 monosustituido por R~ R1 es H o Hal R' H R" es A, OA o Hal En Ih Ar es fenilo monosustituido por R 3 R1 es H o Hal R2 H R es A, OA o Hal En Ii Ar es fenilo monosustituido por R" R1 es H, Hal, OA o A R2 H R3 es Hal En Ij Ar es fenilo monosus R1 es H, Hal, OA o A R2 H o OA R3 es Hal En Ik Ar es fenilo insustituido o monosustituido por R3 R1 es H, Hal, OA o A R2 H o OA R3 es Hal En II Ar es fenilo insustituido o mono- o bisustituido por R3 R1 es H, Hal, OA o A R2 H, Hal , OA o A R3 es Hal o A A es alquilo con 1,2,2 o 4 átomos C o CF3 También son objeto de la presente invención los nuevos compuestos seleccionados del grupo formado por: 6-cloro-4- (2-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina 6-bromo-4- (2-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6, 7-dimetoxi-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, 7-cloro-4- (2-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina 8-metil-4-feni1-2-quinazolinil-guanidina; 6-cloro-4- (2-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-trifluorometil-4 -feni1-2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (3, 4-dimetilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (3-fluor-4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (3-cloro-4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (4-etilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (4-trifluormetilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-8-fluoro-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-7-metil-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (2, 4-dimetilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (3-bromfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (4-bromfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (4-isopropilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (2-bromfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (3-fluoro-4-trifluormetil-fenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-8-metil-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (4-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (2-clorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 4- (3-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (3-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-8-cloro-4-feni1-2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-7-cloro-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, asi como sus sales y solvatos fisiológicamente inofensivos. Los compuestos de la Fórmula I y también las sustancias de partida para su preparación, se preparan según métodos conocidos, tal como se describe en la literatura (p. ej . obras estándar como Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart) y en condiciones de reacción que son conocidas y apropiadas para tales transformaciones. También es posible hacer uso de variantes de por si conocidas que aqui no se describirán en detalle. Si asi se desea, las sustancias de partida también pueden prepararse in si tu, de manera que no sean aisladas de la mezcla de reacción, sino que se las transforma inmediatamente en compuestos de la Fórmula I. Las 2-guanidino-4-aril-quinazolinas de la Fórmula I se preparan preferentemente transformando o-aminofenilcetonas de la Fórmula II Ar donde R1, R2 y Ar tienen los significados mencionados en la reivindicación 1, con 1-cianoguanidina . La transformación se realiza en un solvente inerte. Como solvente inerte son apropiados, por ejemplo: hidrocarburos tales como hexano, petroléter, benceno, toluol o xilol; hidrocarburos clorados como tricloretileno, 1 , 2-dicloroetano, tetracloruro de carbono, cloroformo o diclorometano; alcoholes como metanol, etanol, isopropanol, n-propanol, n-butanol o ter-butanol; éteres como dietiléter, diisopropiléter, tetrahidrofurano (THF) o dioxano; glicoléteres como etilenglicolmonometil- o monoetiléter (metilglicol o etilglicol) , etilenglicoldimetiléter (diglime) ; cetonas como acetona o butanona; amidas como acetamida, dimetilacetamida, N-metilpirrolidona (NMP) o dimetilformamida (DMF) ; nitrilos como acetonitrilo; sulfóxidos como dimetiisulfóxido (DMSO); sulfuro de carbono; ácidos carboxilicos como ácido fórmico o ácido acético; compuestos nitro como nitrometano o nitrobenceno; esteres como acetato de etilo o mezclas de los mencionados solventes. Preferentemente se utiliza DMF, agua o un alcohol. Muy preferentemente, la reacción se lleva a cabo sin un solvente, es decir, en fusión, a temperaturas de entre 100 y 200°C. Resulta ventajosa la presencia de un catalizador ácido como A1C13, TÍCI3, ácido p-toluolsulfónico, BF3, ácido acético, ácido sulfúrico, ácido oxálico, POCI3 o pentóxido de fósforo. Una variante preferida consiste en que una de las sustancias de la reacción se usa como sal, por ejemplo en forma de hidrocloruro. Otro método valioso para preparar los compuestos de la Fórmula I consiste en que en vez de 1-cianoguanidina se transforma un compuesto de la Fórmula III HN=CX-NH-C (=NH) -NH2 III donde X es -SA, -SAr, OA o OAr y Ar y A tienen por ejemplo los significados mencionados en la reivindicación 1, con un compuesto de la Fórmula II.

Finalmente, los compuestos de la Fórmula I pueden obtenerse por transformación de 2-cloro-4-arilquinazolinas de la Fórmula IV Ar R donde Ar, R1 y R2 tienen los significados indicados en la reivindicación 1, con guanidina. Una base de la Fórmula I puede transformarse con un ácido en la correspondiente sal de adición acida, por ejemplo transformando cantidades equivalentes de la base y del ácido en un solvente inerte, como etanol, y concentrando. Para esta transformación entran en consideración, sobre todo, los ácidos que proveen sales fisiológicamente inofensivas. Asi por ejemplo, se pueden usar ácidos inorgánicos, como ácido sulfúrico, ácido nítrico; hidrácidos, como ácido clorhídrico o ácido bromhidrico; ácidos fosfóricos, como ácido ortofosfórico, ácido sulfaminico, además ácidos orgánicos, especialmente ácidos carboxilicos, sulfónicos o sulfúricos monobásicos o polibásicos, alifáticos, aliciclicos, aralifáticos, aromáticos o heterociclicos, por ejemplo, ácido fórmico, ácido acético, ácido propiónico, ácido piválico, ácido dietilacético, ácido malónico, ácido succinico, ácido pimélico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido málico, ácido cítrico, ácido glucónico, ácido ascórbico, ácido nicotinico, ácido isonicotinico, ácido metan- o etansulfónico, ácido etanodisulfónico, ácido 2-hidroxietansulfónico, ácido bencensulfónico, ácido p-toluensulfónico, ácidos naftalin-mono- y disulfónicos, ácido laurilsulfúrico . Para aislar y/o purificar los compuestos de la Fórmula I se pueden usar sales con ácidos no fisiológicamento inofensivos, por ejemplo picratos. También es un objetivo de la presente invención, el uso de los compuestos de la Fórmula I y/o sus sales fisiológicamente inofensivas como inhibidores de NHE-3 y/o, para la obtención de preparaciones farmacéuticas, especialmente por via no-quimica. Para ello pueden ser incluidos, junto con por lo menos un vehiculo o sustancia auxiliar sólida, liquida y/o semiliquida y eventualmente en combinación con una o varias otras sustancias activas, en una forma de administración dosificada.

También son objetivo de la invención preparaciones farmacéuticas que contienen por lo menos un inhibidor de NHE-3 de la Fórmula 1 y/o una de sus sales o solvatos fisiológicamente inofensivos. Estas preparaciones pueden ser usadas como medicamentos en medicina humana o veterinaria. Se pueden usar como vehículos, sustancias orgánicas o inorgánicas apropiadas para administración enteral (por ejemplo, oral) , parenteral o tópica, que no reaccionen con los nuevos compuestos, como por ejemplo, agua, aceites vegetales, benzilalcoholes, alquilenglicoles, polietilenoglicoles, triacetato de glicerina, gelatina, hidratos de carbono, como lactosa o almidón, estearato de magnesio, talco, vaselina. Para administración oral son útiles, especialmente, las tabletas, pildoras, grageas, cápsulas, polvos, granulados, jarabes, jugos o gotas; para administración rectal, los supositorios, para administración parenteral, las soluciones, preferentemente oleosas o acuosas, además, las suspensiones, emulsiones o implantes; para la administración tópica, las pomadas, cremas o polvos; para administración transdérmica en parches . Los nuevos compuestos pueden ser también liofilizados y los productos liofilizados obtenidos, por ejemplo, pueden ser 1! usados para la fabricación de preparados para inyecciones. Las preparaciones mencionadas pueden ser esterilizadas y/o pueden contener sustancias auxiliares, como deslizantes, conservantes, estabilizadores y/o humectantes, emulsionantes, sales para modificar la presión osmótica, sustancias tampones, colorantes, saborizantes y/o varias otras sustancias activas, por ejemplo, uno o varias vitaminas. Las preparaciones farmacéuticas para administrar en forma de aerosol o spray incluyen por ejemplo soluciones, suspensiones o emulsiones de la sustancia activa de la Fórmula I en una solución farmacéuticamente inofensiva. Los compuestos de la Fórmula I y sus sales y solvatos fisiológicamente inofensivos pueden usarse para el tratamiento y/o la profilaxis de las enfermedades y afecciones mencionadas más arriba. Para ello, las sustancias son administradas, por lo general, preferentemente en dosis que oscilan entre 0,1 y 100 mg, especialmente entre 1 y 10 mg por unidad de dosis. La dosis diaria se ubica preferentemente entre aprox. 0,001 y 10 mg/kg. del peso corporal. La dosis especifica correspondiente a cada paciente depende, sin embargo, de los más diversos factores, por ejemplo, de la eficacia del compuesto especial, usado; de la edad, del peso del paciente, del estado general de salud, del sexo, de la comida, del momento y de la via de administración, de la velocidad de eliminación, de la combinación de medicamentos y de la gravedad de cada enfermedad, para la cual se aplica la terapia. Se prefiere la administración oral. Los compuestos inhibidores de NHE-3 se seleccionan del siguiente grupo. 4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, P.F. 247-250 °C (descomposición) ; 4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P. F.236-238 °C; 6-cloro-4-feni1-2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 309-310°C; 4- ( -bromfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 185-189°C; 4- (4-clorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 296-297°C; 4- (4-metoxifenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 275-277°C; 4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 300-301 °C; 6-cloro-4- (2-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 275-276°C; 7-metil-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 300-301°C; 6-brom-4- (2-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 294-295°C; 7-cloro-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 288-290°C; 7-metoxi-4-feni1-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 280-282°C; 5-metoxi-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 272-273°C; 6, 7-dimetoxi-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 220-222°C; 6-metoxi-4-feni1-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 278-279 °C; 8-cloro-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 309-310°C; 5-cloro-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 300°C; 7-cloro-4- (2-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 281-283°C; 6-cloro-4- (4-clorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 261-262°C; ß-brom-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, desc. 291-293°C; 6-metil-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 295-296°C; 6-fluoro-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 283-285°C; 6-fluoro-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 193-195°C; 6-cloro-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 312°C; 8-metil-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 285-286°C; 6-cloro-4- (2-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 308°C; 6-cloro-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 336°C; 6-trifluorometil-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P. F.300-302°C; 6-cloro-4- (3, 4-dimetilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F.323-325°C; 6-cloro-4- (3-fluor-4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F.317-320°C; 6-cloro-4- (3-cloro-4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F.336-338°C; 6-cloro-4- (4-etilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, p-toluolsulfonato,P.F.179-184°C; 6-cloro-4- (4-trifluormetilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, dihidrocloruro, P.F.329-332°C; 6-cloro-8-fluor-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, p-toluolsulfonato,P.F.290-300°C; 6-cloro-7-metil-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, p-toluolsulfonato, P.F.360°C; 6-cloro-4- (2, 4-dimetilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, p-toluolsulfonato; 6-cloro-4- ( 3-bromfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F.319-323 °C; 6-cloro-4- (4-bromfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F.330°C; 6-cloro-4- (4-isopropilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P. F.326-329°C; 6-cloro-4- (2-bromfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P. F.316-318°C; 6-cloro-4- ( 3-fluoro-4-trifluormetil-fenil ) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P. F.230-232 °C; 6-cloro-8-metil-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F.310°C; 6-cloro-4- (4-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P. F.346-348 °C; - 6-cloro-4- (2-clorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, p-toluolsulfonato, P.F.332-336°C; 4- (3-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F. 160-163°C; 6-cloro-4- (3-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, descomposición a partir de 308°C; 6-cloro-8-cloro-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, hidrocloruro, P.F.163-166°C; 6-cloro-7-cloro-4-feni1-2-quinazolinil-guanidina, p-toluolsulfonato, P.F. 269-271 °C.

Ensayos Farmacológicos A continuación se describe el método que se usa para caracterizar los compuestos de la Fórmula I como inhibidores de NHE-3. Los compuestos de la Fórmula I fueron caracterizados en cuanto a su selectividad con respecto a las isoformas NHE-1 a NHE-3. Las tres isoformas fueron expresadas en forma estable en lineas de células de fibroblasto de ratón. El efecto inhibidor de los compuestos fue juzgado por determinación de la absorción de 22Na+ sensible a la EIPA en las células, después de la acidosis intracelular.

Materiales y Métodos Lineas de células LAP 1 que expresan las diferentes isoformas de NHE Las lineas de células que expresan las isoformas NHE-1, -2 y -3 (una linea de células de fibroblasto de ratón) fueron obtenidas por el Prof. J. Pouysségur (Niza, Francia). Las transfecciones se llevaron a cabo según el método de Franchi et al. (1986). Las células fueron cultivadas en medio Eagle, modificación de Dulbeccos (DMEM) con 10% de suero fetal de ternero (FKS) . Para la selección de las células que expresan NHE se usó el método denominado "matar con ácido" de Sardet et al. (1989). Las células fueron incubadas primeramente durante 30 min en un buffer que contenia NH4C1 y libre de bicarbonato y sodio. A continuación se retiró el NHC1 lavándolas con un buffer libre de bicarbonato, NH4C1 y sodio y luego se incubaron con buffer sin bicarbonato que contenia NaCl. Solamente aquellas células que expresan funcionalmente el NHE pudieron sobrevivir a la acidificación intracelular a la que fueron expuestas.

Caracterización de sustancias inhibidoras de NHE con respecto a la selectividad de sus isoformas Se analizó la selectividad de los compuestos con respecto a las isoformas en las lineas de células de fibroblasto de ratón arriba mencionadas que expresan las isoformas NHE-1, NHE-2 y NHE-3 usando el método descrito por Counillon et al. (1993) y Scholz et al. (1995). Las células fueron acidificadas intracelularmente según el método de NH4ClPrepulse y a continuación, fueron acidificadas por incubación en un buffer libre de bicarbonato que contenia 22Na+. A raiz de la acidificación intracelular se activó la NHE y las células absorbieron sodio. El efecto del compuesto de ensayo se expresó como inhibición de la absorción de 22Na+ sensible a la EIPA (etilisopropilamilorida) . Las células que expresaron NHE-1, NHE-2 y NHE-3 fueron sembradas con una densidad de 5-7,5 x 104 células/cavidad en placas de microtitulado de 24 cavidades y cultivadas durante 24-48 hrs hasta la confluencia. El medio fue aspirado y las células fueron incubadas durante 60 min a 37 °C en el buffer de NH4C1 (NH4CI 50 nM, cloruro de colina 70 mM, MOPS 15 mM, pH 7,0). A continuación se retiró el buffer y las células fueron recubiertas rápidamente dos veces con el buffer de lavado de cloruro de colina (cloruro de colina 120 mM, mM PIPES/Tris 15 mM, 0,1 M Ouabaina, MgCl2 1 mM, CatCl2 2 mM, pH 7,4). Las células fueron incubadas en este buffer durante 6 min. Al finalizar el tiempo de incubación se retiró el buffer de incubación por aspiración. Para eliminar la radioactividad extracelular, las células fueron lavadas rápidamente cuatro veces con solución helada de NaCl tamponada con fosfato (PBS) . Luego, se suspendieron las células por adición de 0,3 ml de NaOH 0,1 N por cavidad. Las soluciones que contenían los fragmentos de células fueron pasadas a tubos de centelleo. Cada cavidad fue lavada nuevamente dos veces con 0,3 ml de NaOH 0,1 N y la solución de lavado también se echó en los correspondientes tubos de centelleo. El contenido del tubo que contenia la siembra de células fue mezclado con el cóctel de centelleo, determinándose la radioactividad absorbida por las células por determinación de radiación ß. Literatura Counillon et al. (1993) Mol. Pharmacol. 44: 1041-1045 Franchi et al. (1986) Proc. Nati .Acad. Sci . USA 83: 9388-9392 Morgan & Canessa (1990) J. Membrane Biol. 118, 193-214 Sardet et al. (1989) Cell 56: 271-280 Scholz et al. (1995) Cardiovasc. Res. 29: 260-268. Los siguientes ejemplos se refieren a preparaciones farmacéuticas.

Ejemplo A: frascos-ampolla para inyección Una solución de 100 g de un inhibidor de NHE-3 de la Fórmula I y 5 g de fosfato hidrógeno disódico se ajusta a pH 6,5 en 3 L de agua bidestilada con ácido clorhídrico 2N, se filtra en forma estéril, se envasa en frascos-ampolla para inyecciones, se liofiliza en condiciones estériles y los frascos se cierran en condiciones estériles. Cada frasco-ampolla contiene 5 mg de sustancia activa.

Ejemplo B: Supositorios Se funde una mezcla de 20 g de un inhibidor de NHE-3 de la fórmula I con 100 g de lecitina de soya y 1400 g de manteca de cacao, se vierte en moldes y se deja enfriar. Cada supositorio contiene 20 mg de sustancia activa.

Ejemplo C: Solución Se prepara una solución de 1 g de un inhibidor de NHE-3 de la Fórmula I, 9,38g NaH2P04 «2 H20, 28,48 g Na2HP04 «12 H20 y 0,1 g cloruro de benzalconio en 940 ml de agua bidestilada. Se ajusta el pH a 6,8, se completa hasta 1 L y se esteriliza por radiación. Esta solución puede ser aplicada en forma de colirio.

Ejemplo D: Pomada Se mezclan 500 mg de un inhibidor de NHE-3 de la Fórmula I con 99,5 g de vaselina en condiciones asépticas.

Ejemplo E: Tabletas Para obtener tabletas se prensa en forma habitual una mezcla de 1 kg de un inhibidor de NHE-3 de la fórmula I, 1,4 kg de lactosa, 1,2 kg de almidón de papa, 0,2 kg de talco y 0,1 kg de estearato de magnesio, de manera que cada tableta contenga 10 mg de sustancia activa.

Ejemplo F: Grageas En forma análoga al ejemplo E se prensan tabletas que luego se recubren con una capa de sacarosa, almidón de papa, talco, goma tragacanto y colorante en la forma habitual.

Ejemplo G: Cápsulas Se llenan cápsulas de gelatina dura con 2 kg de un inhibidor de NHE-3 de la Fórmula I de manera habitual, de modo que cada cápsula contenga 20 mg de sustancia activa. Ejemplo H: Ampollas Una solución de 1 kg de un inhibidor de NHE-3 de la Fórmula I en 60 L de agua bidestilada se filtra en condiciones estériles y se llenan las ampollas, se liofilizan en condiciones estériles y se cierran en condiciones estériles. Cada ampolla contiene 10 mg de sustancia activa. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el convencional para la manufactura de los objetos a que la misma se refiere.

Claims

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones .

1. Los compuestos de conformidad con la Fórmula I, caracterizados porque; Ar es un fenilo o naftilo insustituido o monosustituido por R3, R1, R2 es, independientemente entre si, H, A, OA o CF3, R3 es A, OA, Hal o CF3 A es alquilo con 1,2,3,4,5 o 6 átomos de carbono, Hal es F, Cl, Br o I y sus sales y solvatos fisiológicamente inofensivos como inhibidores NHE-3.

2. El uso de compuestos de la Fórmula I de conformidad con la reivindicación 1 y sus sales y/o solvatos fisiológicamente inofensivos, caracterizados porque sirven para la preparación de un medicamento para el tratamiento de la hipertonía, trombosis, estados isquémicos del corazón, del sistema nervioso periférico y central y de la apoplejía, estados isquémicos de órganos periféricos y miembros y para el tratamiento de estados de shock.

3. El uso de compuestos de la Fórmula I de conformidad con la reivindicación 1 y sus sales y/o solvatos fisiológicamente inofensivos, caracterizados porque sirven para preparar un medicamento de uso durante intervenciones quirúrgicas y transplante de órganos y para conservar y guardar transplantes para fines quirúrgicos.

4. El uso de compuestos de la Fórmula I de conformidad con la reivindicación 1 y sus sales y/o solvatos fisiológicamente inofensivos caracterizados porque sirven para preparar un medicamento para el tratamiento de enfermedades cuyo origen primario o secundario es la proliferación celular, para el tratamiento o profilaxis de trastornos del metabolismo de las grasas y del impulso respiratorio.

5. El uso de compuestos de la Fórmula I de conformidad con la reivindicación 1 y sus sales y/o solvatos fisiológicamente inofensivos, caracterizados porque sirven para preparar un medicamento para el tratamiento de la isquemia renal, enfermedades isquémicas del intestino o para la profilaxis de enfermedades renales agudas o crónicas.

6. La preparación farmacéutica caracterizada porque contiene por lo menos un inhibidor de NHE-3 de conformidad con la reivindicación 1 y/o una de sus sales y/o solvatos fisiológicamente inofensivos.

7. Los compuestos seleccionados del grupo formado por: 6-cloro-4- (2-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina 6-bromo-4- (2-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6, 7-dimetoxi-4-fenil-2-quinazolinil-guanidina, 7-cloro-4- (2-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina 8-metil-4-feni1-2-quinazolinil-guanidina; 6-cloro-4- (2-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-trifluorometil-4-feni1-2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (3, 4-dimetilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (3-fluor-4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (3-cloro-4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (4-etilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (4-trifluormetilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-8-fluor-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-7-metil-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (2, 4-dimetilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (3-bromfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (4-bromfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (4-isopropilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (2-bromfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (3-fluoro-4-trifluormetil-fenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-8-metil-4- (4-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- ( 4-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (2-clorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 4- (3-metilfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-4- (3-fluorfenil) -2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-8-cloro-4-feni1-2-quinazolinil-guanidina, 6-cloro-7-cloro-4-feni1-2-quinazolinil-guanidina, asi como sus sales y solvatos fisiológicamente inofensivos.