MXPA02008662A

MXPA02008662A - Dispositivos para la determinacion de la concetracion de analito y metodos de fabricar y usar los mismos.

Info

Publication number: MXPA02008662A
Application number: MXPA02008662A
Authority: MX
Inventors: Yeung Sin Yu
Original assignee: Lifescan Inc
Priority date: 2001-09-05
Filing date: 2002-09-04
Publication date: 2005-02-17
Also published as: TWI283747B; IL151307A0; PL355789A1; EP1291653B1; CZ20022966A3; IL151307A; HK1051403A1; DE60221080D1; RU2002123659A; KR20030021143A; CA2398077A1; AR036396A1; ATE366930T1; US20030044854A1; JP2003139772A; DE60221080T2; CN1285911C; US20050042135A1; ES2289054T3; EP1291653A2

Abstract

Se proveen tiras de prueba para determinar la concentracion por lo menos de un analito, por ejemplo glucosa, en una muestra fisiologica y metodos para su fabricacion y uso; las presentes tiras de prueba incluyen un elemento de transferencia para facilitar la transferencia de muestra a un area de reaccion de la tira de prueba; en ciertas modalidades, el elemento de transferencia, tipicamente poroso, tiene una primera area y una segunda area, y en ciertas modalidades las dos areas tienen grosores diferentes; en otras modalidades, el elemento de transferencia es no poroso y esta configurado para transferir la muestra, trasladandola por capilaridad entre el elemento de transferencia y el area de reaccion de la primera tira; en los presentes metodos, el elemento de transporte facilita las transferencias de una muestra a un area de reaccion de la tira de prueba; las tiras de prueba y los metodos presentes encuentran uso en una variedad de aplicaciones diferentes, particularmente la determinacion de las concentraciones de glucosa.

Description

DISPOSITIVOS PARA LA DETERMINACION DE LA CONCENTRACION DE ANALITO Y METODOS DE FABRICAR Y USAR LOS MISMOS CAMPO DE LA INVENCION El campo de esta invención es la determinación de la concentración de analito, particularmente la determinación de la concentración en muestras fisiológicas y más particularmente la determinación de la concentración de glucosa.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION La determinación de la concentración de analito en muestras fisiológicas es de importancia siempre creciente para la sociedad de hoy en día. Tales ensayos encuentran uso en una variedad de entornos de aplicación, incluyendo pruebas clínicas de laboratorio, pruebas en casa, etc., en que los resultados de tales pruebas desempeñan un papel prominente en la diagnosis y el manejo de una variedad de condiciones mórbidas. Los analitos de interés incluyen la glucosa para el manejo de la diabetes, el colesterol para controlar las condiciones cardiovasculares y similares. En respuesta a esta importancia creciente de la determinación de la concentración de analito, se ha desarrollado una variedad de protocolos y dispositivos para la determinación de la concentración de analito para las pruebas tanto clínicas como en casa. Por ejemplo, se conocen varias tiras de prueba colorimétricas o fotométricas que contienen uno o más reactivos de prueba asociados con un área de prueba o reacción, en que los reactivos se convierten a diferente tono de color dependiendo de la concentración de un analito particular, tal como glucosa en una muestra de sangre que se ha aplicado al área de reacción de la tira de prueba. Se mide la concentración de la glucosa en la sangre, ya sea comparando el cuadro de color a color o insertando la tira en un medidor, tal como un fotómetro de reflectancia o similar, el cual determina automáticamente la concentración a partir del cambio de color causado por la reacción entre los reactivos de prueba y el analito. Típicamente, una tira de prueba y más particularmente una tira de prueba colorimétrica o fotométrica, incluye (1 ) un substrato que incluye uno o más reactivos de reacción o prueba, es decir un área de reacción, (2) una capa de soporte que provee soporte estructural a la tira e incluye a menudo una abertura a través de la misma para observar el substrato y (3) un material que ayuda a la transferencia de muestra al área de reacción, es decir un material o estructura de transferencia o filtración. Sin embargo, para determinar la concentración de un analito en una muestra fisiológica, se debe obtener en primer lugar una muestra fisiológica y ponerla en contacto con un área de reacción de la tira de prueba, a fin de que la muestra fisiológica, y más particularmente el analito de interés o derivado del mismo, pueda reaccionar con los reactivos de prueba asociados con el área de reacción. A fin de obtener una medición precisa de los analitos particulares de interés, se debe aplicar un volumen mínimo de muestra al área de reacción. Se puede apreciar que las mediciones imprecisas pueden resultar en consecuencias serias e incluso que amenacen la vida para aquellos cuyas vidas dependen del control frecuente de un analito en su cuerpo, por ejemplo el control de la glucosa para los diabéticos. Las figuras 5A y 5B muestran vistas de una tira de prueba convencional ejemplar. La figura 5A muestra una vista desarrollada de la configuración de una tira de prueba convencional y la figura 5B muestra la tira de prueba configurada de la figura 5A. La tira de prueba 300 incluye, como se describe anteriormente, una capa de soporte 306 que tiene una abertura 308 a través de la misma, un área de reacción 304 y un material de transferencia 302 asociado con el área de reacción 304, es decir que se encuentra directamente arriba o encima del área de reacción 304. Como se puede ver, el material de transferencia de fluido 302 es una pieza unidimensional de material. Es decir, la forma y las dimensiones tales como el grosor y el ancho del material de transferencia 302 son constantes a través de la estructura entera. Típicamente, el material de transferencia está fabricado generalmente de manera que tenga un grosor de aproximadamente 0.508 a 0.762 milímetros, un ancho de aproximadamente 5.08 a 7.62 milímetros y una longitud de aproximadamente 22.86 a 27.94 milímetros Típicamente, un paciente obtiene una muestra fisiológica, tal como sangre, fracciones de sangre o fluidos intersticiales, de un sitio de punción del dedo o del brazo, en que el volumen de la muestra obtenida de tal punción puede variar considerablemente dependiendo del paciente particular, el sitio de muestreo y similares. Se aplica la muestra en primer lugar al material o estructura de transferencia en comunicación con el área de reacción de la tira de prueba y se filtra luego una porción de la muestra a través del área de reacción. El material de transferencia está configurado y dimensionado usualmente de manera que retenga o contenga la muestra en exceso, a fin de que la muestra en exceso no contamine otras porciones de la tira de prueba o contamine porciones de un dispositivo automático al cual se inserte la tira de prueba para realizar automáticamente los procedimientos de prueba. Tal contaminación puede causar resultados falsos o imprecisos. Siendo así, este material de transferencia auxilia en el acopio de muestra y ayuda a disipar o extender la muestra uniformemente sobre el área de reacción, retener la muestra en exceso y puede servir además para extraer por filtración o excluir componentes no deseados en la muestra, antes de que lleguen al área de reacción. Aunque este material desempeña un papel importante en la transferencia de muestra al área de reacción, tiene ciertas desventajas asociadas con el mismo. En primer lugar y antes que otra cosa, para transferir la muestra a través del material al área de reacción, la porción del material sobre el área de reacción debe alcanzar en primer lugar la saturación, en que el volumen de la muestra que se necesita para saturar el material es mucho mayor que el requerido por el área de reacción para realizar una prueba precisa. Usualmente, se necesita un volumen de muestra de aproximadamente 7 a 50 microlitros y más usualmente de aproximadamente 7 a 10 microlitros para saturar el filtro o material de transferencia de las tiras de prueba comúnmente configuradas, sin embargo se necesita realmente tan sólo de 1 a 3 microlitros en el área de reacción. Siendo así, es evidente que este material de transferencia determina el volumen de muestra que requiere el paciente, no el volumen real necesitado por el área de reacción para realizar una prueba precisa. Este volumen un poco más grande de muestra necesitado para saturar este material es a menudo difícil de obtener de un paciente. Por ejemplo, la obtención de este volumen puede requerir el uso de una aguja de diámetro grande y/o la penetración más profunda a la piel. Incluso si se usa un una aguja de diámetro grande y/o una aguja ha penetrado profundamente en la piel, a menudo una primera punción produce volumen insuficiente para la prueba particular que se está realizando y por lo tanto se debe punzar nuevamente la piel hasta que se obtenga finalmente un volumen suficiente. Estos factores pueden aumentar la incomodidad y el dolor sentidos por el paciente, y pueden ser extremadamente difíciles de lograr para aquellos individuos cuya sangre capilar no se extrae fácilmente. Puesto que este procedimiento de muestreo puede requerir la repetición frecuente en el transcurso de un solo día, para muchos pacientes el dolor asociado con el acopio de muestra se hace rápidamente menos tolerable o intolerable por completo. Además, las configuraciones convencionales de tira de prueba que usan un material para transferir la muestra a la tira de prueba requieren que se aplique la muestra directamente al centro del material de transferencia por la parte superior de la tira de prueba. En otras palabras, el paciente debe o bien (1 ) mantener la tira de prueba con el material de transferencia orientado hacia arriba y voltear el dedo hacia el material a fin de que la gota de muestra extraída del mismo vaya hacia abajo sobre la tira o, alternativamente, (2) posicionar la tira, con el lado del material de transferencia hacia abajo, sobre un dedo con una gota de muestra orientada hacia arriba. De cualquier manera, se oculta la vista del material del paciente, bloqueando la vista de cuánta muestra se ha aplicado a material y por lo tanto de cuánto más se necesita hasta que se sature el material. Esta desventaja resulta a menudo en que los pacientes apliquen un volumen de muestra mayor que la que se requiere, contribuyendo además al dolor y la incomodidad asociados con el acopio de muestra. Como tal, hay interés continuo en el desarrollo de nuevos dispositivos y métodos para su uso en la determinación de las concentraciones de analitos en una muestra fisiológica. De interés particular sería el desarrollo de tales dispositivos y métodos de uso de los mismos que requieran volúmenes mínimos de muestreo, es decir el material de transferencia posea pequeños volúmenes vacíos, permitan la disipación o extensión de la muestra uniformemente sobre el área de reacción, retengan la muestra en exceso, filtren los componentes no deseados en la muestra antes de que lleguen al área de reacción, sean fáciles de usar y fáciles de fabricar.

Literatura pertinente Las referencias de interés incluyen: las patentes de E.U.A. Nos. 6.168.957 B1.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION Se proveen tiras de prueba para determinar la concentración por lo menos de un analito, por ejemplo glucosa, en una muestra fisiológica y métodos para su fabricación y uso. Las presentes tiras de prueba incluyen un elemento de transferencia para facilitar la transferencia de muestra a un área de reacción de la tira de prueba. En ciertas modalidades, el elemento de transferencia, típicamente poroso, tiene una primera área y una segunda área, y en ciertas modalidades las dos áreas tienen grosores diferentes. En otras modalidades, el elemento de transferencia es no poroso y está configurado para transferir la muestra, trasladándola por capilaridad entre el elemento de transferencia y el área de reacción de la primera tira. En los presentes métodos, el elemento de transporte facilita las transferencias de una muestra a un área de reacción de la tira de prueba. Las tiras de prueba y los métodos presentes encuentran uso en una variedad de aplicaciones diferentes, particularmente la determinación de las concentraciones de glucosa.

BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBUJOS Las figuras 1A-1D son modalidades ejemplares de las tiras de prueba de la presente invención que tienen un elemento de transporte poroso por lo menos con una primera área y una segunda área que tienen grosores diferentes. La figura 1A muestra una vista desarrollada de una modalidad en que el elemento de transporte tiene una segunda área sustancialmente rectangular y la figura 1 B muestra la tira de prueba configurada de la figura 1A. La figura 1C muestra una vista desarrollada de una modalidad en que el elemento de transporte tiene una segunda área sustancialmente circular y la figura 1 D muestra la tira de prueba configurada de la figura 1C. La figura 1E muestra una vista desarrollada de una modalidad en que el elemento del transporte tiene dos extensiones laterales operativamente asociadas con el mismo. La figura 1F muestra la tira de prueba configurada de la figura 1 E. la figura 1G muestra una vista desarrollada de una modalidad en que la capa de soporte de la tira de prueba tiene muescas en la misma. Las figuras 2A-2C son modalidades de la presente invención que tienen un elemento de transporte no poroso. La figura 2A muestra una vista desarrollada de una modalidad que tiene un elemento de confinamiento de muestra. La figura 2B muestra la tira de prueba configurada de la figura 2A. La figura 2C muestra una modalidad de un elemento de transporte no poroso que tiene una segunda área de forma sustancialmente rectangular y extensiones laterales.

La figura 3A muestra una vista desarrollada de otra modalidad de la presente tira de prueba que tiene una capa separadora, una capa no porosa y una capa de confinación de muestra. La figura 3B muestra la tira de prueba configurada de la figura 3A. La figura 4A muestra una modalidad ejemplar de un ensamble de moldeo por comprensión para su uso en la fabricación de tiras de prueba de la presente invención que tienen áreas de grosores diferentes. La figura 4B muestra el ensamble de la figura 4A que tiene un material precursor de elemento de transporte posicionado en el mismo. La figura 4C muestra una vista lateral de un elemento de transporte ejemplar que se ha formado mediante los presentes métodos en su estado no doblado. La figura 4D muestra una vista lateral del elemento de transporte formado de la figura 4C en su estado comprimido. La figura 5A muestra una vista desarrollada de la modalidad de la tira de prueba convencional y la figura 5B muestra la tira de prueba configurada de la figura 5A.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Se proveen tiras de prueba para determinar la conceF&actón por lo menos de un analito, por ejemplo glucosa, en una muestra fisiológica y métodos para su fabricación y uso. Las presentes tiras de prueba incluyen un elemento de transferencia para facilitar la transferencia de muestra a un área de reacción de la tira de prueba. En ciertas modalidades, el elemento de transferencia, típicamente poroso, tiene una primera área y una segunda área, y en ciertas modalidades las dos áreas tienen grosores diferentes. En otras modalidades, el elemento de transferencia es no poroso y está configurado para transferir la muestra, trasladándola por capila dad entre el elemento de transferencia y el área de reacción de la primera tira. En los presentes métodos, el elemento de transporte facilita las transferencias de una muestra a un área de reacción de la tira de prueba. Las tiras de prueba y los métodos presentes encuentran uso en una variedad de aplicaciones diferentes, particularmente la determinación de las concentraciones de glucosa. En la descripción más detallada de la presente invención, se describirán en primer lugar los presentes dispositivos, seguido esto por una apreciación crítica de los presentes métodos de fabricación y métodos de uso para poner en práctica los presentes dispositivos. Antes de que se describa la presente invención, se ha de entender que esta invención no está limitada a las modalidades particulares descritas, ya que las mismas pueden variar desde luego. Se ha de entender también que la terminología usada en la presente es con el propósito de describir modalidades particulares solamente y no se pretende que sea limitante, ya que el alcance de la presente invención estará limitado solamente por las reivindicaciones anexadas. Cuando se provee un intervalo de valores, se sobreentiende que cada valor que interviene, al décimo de la unidad del límite inferior a no ser que el contexto dicte claramente de otra manera, entre los límites superior e inferior del intervalo y cualquier otro valor expresado o que intervenga en ese intervalo expresado está comprendido dentro de la invención. Los límites superior e inferior de estos intervalos más pequeños pueden estar incluidos independientemente en los intervalos más pequeños incluidos también dentro de la invención, sujetos a cualquier límite específicamente excluido en el intervalo expresado. Cuando el intervalo expresado incluye uno o ambos límites, se incluyen también en la invención los intervalos que excluyen cualesquiera dos de esos límites incluidos. A no ser que se defina de otra manera, todos los términos técnicos y científicos usados en la presente tienen el mismo significado que entiende comúnmente un experto en la técnica a la cual pertenece esta invención. Aunque se pueden usar también cualesquiera métodos y materiales similares o equivalentes en los descritos en la presente, en la puesta en práctica o a prueba de la presente invención, se describen ahora los métodos y materiales preferidos. Se debe mencionar que como se usa en la presente y en las reivindicaciones anexadas, las formas singulares "un", "una", "el" y "la" incluyen referentes plurales a no ser que el contexto dicte claramente de otra manera. Siendo así, por ejemplo, la referencia a "una tira de prueba" incluye una pluralidad de tales tiras de prueba y la referencia a "el dispositivo" incluye la referencia a uno o más dispositivos y equivalentes del mismo conocidos por los expertos en la técnica, etc.

Todas las publicaciones mencionadas en la presente están incorporadas en la presente por referencia y exponen y describen los métodos y/o materiales en conexión con los cuales están citadas las publicaciones. Las publicaciones discutidas en la presente están provista solamente por su exposición antes de la fecha de presentación de la presente solicitud. Nada en la presente se ha de interpretar como una admisión de que la presente invención no está autorizada a antedatar tal publicación en virtud de su invención previa. Además, las fechas de publicación provistas pueden ser diferentes de las fechas reales de publicación que necesiten confirmarse independientemente.

Dispositivos Como se resume anteriormente, la presente invención provee tiras de prueba para determinar la concentración de un analito en una muestra fisiológica, en que las tiras de prueba están configuradas de manera que requieran solamente un volumen mínimo de muestra. Las presentes tiras de prueba encuentran uso en la determinación de una extensa variedad de diferentes concentraciones de analito, en que los analitos representativos incluyen, pero no se limitan a los mismos, glucosa, colesterol, lactato, alcohol y similares. En muchas modalidades de los presentes dispositivos, se usan las tiras de prueba para determinar la concentración de glucosa en una muestra fisiológica, por ejemplo fluido intersticial, sangre, fracciones de sangre, constituyentes de los mismos y similares.

Aunque se ha de entender que una variedad de tipos diferentes de tiras de prueba puede ser adecuada para su uso con la presente invención, por ejemplo colorimétricas o fotométricas (usadas en la presente intercambiablemente) y electroquímicas, se describirá por este medio la presente invención con referencia a un sistema de ensayo fotométrico, en que tal descripción es a manera de ejemplo y no de limitación. Generalmente, las presentes tiras de prueba incluyen un substrato, por ejemplo una membrana porosa o similar, e incorpora uno o más reactivos de prueba, en que los reactivos de prueba reaccionan con los componentes o analitos en una muestra fisiológica aplicada a la misma. Se hace referencia en la presente a esta membrana porosa con los reactivos asociados, como el área o las zonas de reacción de la tira de prueba. La membrana está asociada típicamente con una capa de refuerzo o soporte y la tira de tira puede incluir también un elemento de transporte de fluido, típicamente un elemento de transferencia poroso fijado a un lado de la membrana, en que la capa de soporte está fijada típicamente al otro lado de la membrana (véanse las figuras 1A y 1 B para una modalidad ejemplar de tal tira de prueba). Una abertura a través de la capa de soporte provee una vista de la membrana. En aquellos dispositivos que tienen un elemento de transporte poroso, se aplica la muestra fisiológica al elemento de transporte y por lo menos una porción de la muestra aplicada, es decir el volumen necesario para hacer una medición precisa, se desplaza a través del elemento de transporte al área de reacción. En otras modalidades de las presentes tiras de prueba, la capa o el elemento de transporte no poroso está presente en lugar del elemento de transporte poroso, en que se aplica la muestra fisiológica entre la capa no porosa y la membrana porosa. Se describirán ahora con más detalle los componentes de las tiras de prueba y varias modalidades de los mismos.

La membrana porosa La membrana de la tira de prueba puede ser de composición uniforme o puede ser un substrato revestido. Incluye un lado de la muestra al cual está fijado en medio de transporte u otra capa del material, como se describirá posteriormente, y un lado de prueba en que se observa un cambio de color, a partir del cual se determina la detección y/o la concentración de un analito. El lado de prueba incluye uno o más reactivos de prueba que reaccionan con la muestra para producir un producto detectable relacionado con la detección y/o la cantidad por lo menos de un analito en la muestra. Usualmente, la membrana es porosa y más usualmente tiene un intervalo extenso de tamaños de poro. Siendo así, después de pasar a través del elemento de transferencia o de ser transferida de otra manera, por ejemplo trasladada mediante fuerzas capilares, etc. La sangre entra al lado de la muestra de la membrana y se encuentra con poros cada vez más pequeños conforme penetra a través de la membrana. Eventualmente, los sólidos tales como las células sanguíneas rojas alcanzan una posición en la membrana en que ya no pueden penetrar aun más. El resto de la muestra, que contiene todavía glucosa disuelta, penetra a través del lado de prueba. Los materiales de membrana adecuados incluyen, pero no se limitan a los mismos, polisulfona, nylon, nitrocelulosa, ésteres de celulosa, etc. La muestra que ha pasado a través de la membrana reacciona por lo menos con un reactivo de prueba, haciendo así que se forme un colorante absorbente de la luz en el volumen vacío cerca del lado de prueba, colorante que afecta sustancialmente la reflectancia desde la membrana. El tamaño de la membrana porosa puede variar dependiendo de una variedad de factores, en que tales factores incluyen los reactivos de prueba particulares usados y similares. Sin embargo, para realizar una medición precisa el volumen mínimo requerido por el área de reacción es usualmente de aproximadamente 0.1 a 5 microlitros, usualmente de aproximadamente 1 a 3 microlitros y más usualmente de aproximadamente 1.5 a 2.5 microlitros.

El elemento de transporte Como se describe anteriormente, el elemento de transporte está configurado para aceptar una muestra fisiológica, por ejemplo sangre entera, y transportar por lo menos una porción de esa muestra a la membrana. El elemento de transporte está configurado o dimensionado típicamente para extenderse más allá de uno o más extremos del área de reacción, a fin de formar un depósito para retener las cantidades en exceso de la muestra. Como se describe anteriormente, en las tiras de prueba reactivas convencionales de ese tipo, el elemento de transporte entero, incluyendo las áreas de depósito, es capaz generalmente de retener de aproximadamente 12 a 230 microlitros de sangre, usualmente de aproximadamente 30 a 80 microlitros de sangre, mientras que la porción o área directamente arriba del área de reacción es típicamente capaz de retener de aproximadamente 5 a 15 microlitros de sangre, usualmente de aproximadamente 6 a 10 microlitros de sangre y pasando de aproximadamente 1.5 a aproximadamente 2.5 microlitros de sangre al área de reacción. Como se indica anteriormente, el elemento de transporte de fluido puede ser poroso o, en otras modalidades, puede ser no poroso. En aquellas modalidades porosas, el elemento de transporte de fluido puede ser de una variedad de materiales, incluyendo fibras naturales, tales como algodón o papel (es decir celulosa), así como poliéster, poliamidas, polietileno y otros polímeros sintéticos. En ciertas modalidades, el material puede estar tratado con un agente tensioactivo. El polietileno tratado con agente tensioactivo es particularmente adecuado para su uso en la presente Invención, tal como polietileno poroso tratado con agente tensioactivo obtenible de Porex Corp. de Fairbum, GA. En aquellas modalidades no porosas de la presente invención, el elemento de transporte está hecho de un material no poroso y es típicamente un material plástico no poroso altamente humectable, tal como una película antiempañante. Las películas antiempañantes adecuadas incluyen la película de poliéster 3M 9962 AF, fabricada por 3m Corporation, St. Paul, N, u otras películas poliméricas tales como poliéster, poliestireno, poliolefina, policarbonato, etc. en que pueden estar incluidos agentes humectantes adecuados, tales como ésteres de sorbitano de ácidos grasos, ésteres alquilfenoietoxietllénicos de ácido oleico, etc. En muchas modalidades de la presente invención, por ejemplo aquellas modalidades que emplean un elemento de transferencia poroso, el elemento de transporte incluye por lo menos dos áreas: una primera área y una segunda área. La primera área, posicionada sustancialmente arriba de la estructura de soporte de la tela de prueba, está configurada y actúa como un depósito para retener cantidades en exceso de la muestra. La segunda área, posicionada sustancialmente arriba del área de reacción de la tira, está configurada para transportar o transferir por lo menos una porción de una muestra del fluido fisiológico al área de reacción de la tira de prueba. Como se menciona anteriormente, las tiras de prueba de la presente invención están configuradas o dimensionadas para requerir solamente un volumen mínimo de muestra a fin de realizar una prueba precisa, es decir el elemento de transferencia requiere solamente una muestra mínima o un volumen vacío a fin de hacer pasar el volumen de muestra requerido al área de reacción. En otras palabras, típicamente la segunda área, que es el área más responsable de transportar muestra al área de reacción, por ejemplo el área que se encuentra sustancialmente arriba del área de reacción está configurada y conformada para requerir solamente un volumen mínimo de muestra antes de que se sature y haga pasar un volumen requerido de muestra al área de reacción. Más específicamente, el paciente necesita proveer menos muestra a fin de saturar la segunda área, mientras que la segunda área es capaz de transferir todavía el volumen de muestra necesitado por el área de reacción. Por ejemplo, la segunda área está configurada y/o conformada para requerir menos de aproximadamente 4 a 5 microlitros de muestra, antes de que pueda hacer pasar de aproximadamente 1.5 a 2.5 microlitros de muestra al área de reacción de la tira de prueba. En algunas de las presentes tiras de prueba, por lo menos una dimensión (forma, tamaño, etc.) de la segunda área del elemento de transporte difiere por lo menos de una dimensión de la primera área del elemento de transporte, como se describirá ahora con mayor detalle. Haciendo referencia ahora a las figuras, en que números similares se refieren a componentes o elementos similares, la figura 1A ilustra una vista desarrollada de una modalidad ejemplar del presente dispositivo. La figura 1A muestra el dispositivo 2 que tiene una capa de soporte 4 con la abertura 3 a través de la misma, a la cual están asociadas la membrana 6 y por lo tanto el área de reacción 8. Se muestra la abertura 3 teniendo una configuración redondeada, pero se contemplan también otras formas en esta invención. En aquellas modalidades en que la abertura es de forma sustancialmente redonda, es decir sustancialmente circular, ovalada, elíptica y similar, el diámetro de la abertura 3 varía usualmente de aproximadamente 0.254 a 5.334 milímetros, usualmente de aproximadamente 3.556 a 5.08 milímetros y más usualmente de aproximadamente 3.81 a 4.826 milímetros. El dispositivo 2 incluye también el elemento de transporte poroso 10, en que el elemento de transporte poroso 10 tiene por lo menos las primeras áreas 12 y una segunda área 14. Las áreas de depósito de muestra en exceso, es decir las primeras áreas 12, tienen típicamente un volumen de poro de aproximadamente 40 a 60%, más usualmente de aproximadamente 45% a 55%, pero en cualquier caso el volumen de poro usualmente no excede aproximadamente 55%, ni desciende el volumen de poro usualmente debajo de 45%. El área 14 tiene típicamente un volumen de poro de aproximadamente 20 a 50%, más usualmente de aproximadamente 25 a 45%, pero en cualquier caso el volumen de poro usualmente no excede aproximadamente 40%, y el volumen de poro desciende usualmente debajo de aproximadamente 25%. El tamaño de los poros de la segunda área 14 varía típicamente de aproximadamente 50 a 200 mieras, usualmente de aproximadamente 60 a 150 mieras y más usualmente de aproximadamente 80 a 120 mieras. Típicamente, la longitud total del elemento de transporte, es decir la longitud total de todas las áreas, varía de aproximadamente 12.7 a 38.1 milímetros, usualmente de aproximadamente 20.32 a 30.48 milímetros y más usualmente de aproximadamente 22.86 a 27.94 milímetros, y el ancho del elemento de transporte varía de aproximadamente 3.81 a 15.24 milímetros, usualmente de aproximadamente 4.572 a 10.16 milímetros y más usualmente de aproximadamente 5.08 a 7.62 milímetros. Como se describe anteriormente, en ciertas modalidades de la presente invención, ciertas dimensiones de las primeras áreas y las segundas áreas difieren. En otras palabras, las áreas pueden diferir a fin de que cada área esté configurada para proveer óptimamente su función respectiva. Cada una de las primeras áreas 12 del dispositivo 2 tiene una longitud 16 que varía de aproximadamente 2.54 a 11.43 milímetros, usualmente de aproximadamente 5.588 a 13.97 milímetros y más usualmente de aproximadamente 7.62 a 1 1.43 milímetros y cada una tiene un ancho 18 que varía de aproximadamente 4.064 a 15.24 milímetros, usualmente de aproximadamente 4.572 a 10.16 milímetros y más usualmente de aproximadamente 5.08 a 7.62 milímetros. Una característica de la segunda área 14 es que está configurada y dimensionada a fin de que provea el transporte de muestra óptimo a la reacción. La segunda área puede ser de una variedad de formas, incluyendo, pero no limitándose a las mismas, una forma que sea sustancialmente rectangular, cuadrada, circular, ovalada, elíptica, de diamante y similares. Cuando la segunda área 14 tiene una forma sustancialmente rectangular o cuadrada tal como la modalidad representada por el dispositivo 2, tiene típicamente una longitud 20 que varía de aproximadamente 2.54 a 10.16 milímetros, usualmente de aproximadamente 3.81 a 8.89 milímetros y más usualmente de aproximadamente 5.08 a 7.62 milímetros, y un ancho 22 que varía de aproximadamente 3.81 a 15.24 milímetros, usualmente de aproximadamente 4.562 a 10.16 milímetros y más usualmente de aproximadamente 5.08 a 7.62 milímetros. En las modalidades de la figura 1A que tiene una segunda área sustancialmente rectangular, típicamente la porción de la segunda área en esencia directamente sobre la abertura 3 es capaz de saturarse con un volumen de muestra en el intervalo de aproximadamente 1 a 7 microlitros, usuaimente de aproximadamente 3 a 6 microlitros y más usuaimente de aproximadamente 4 a 5 microlitros y haciendo pasar un volumen de área de reacción en el intervalo de aproximadamente 0.1 a 5.0 microlitros, usuaimente de aproximadamente 1.0 a 3.0 microlitros y más usuaimente de aproximadamente 1.5 a 2.5 microlitros. La figura 1 B muestra la tira de prueba configurada de la figura 1A. En las modalidades que tienen una segunda área sustancialmente circular, tales como las modalidades representadas por la figura 1C, la segunda área 32 tiene típicamente un diámetro que varía de aproximadamente 2.54 a 5.384 milímetros, usuaimente de aproximadamente 3.556 a 5.08 milímetros y más usuaimente de aproximadamente 3.81 a 4.826 milímetros. En las modalidades de la figura 1C que tienen una segunda área sustancialmente circular, típicamente la segunda área es capaz de saturarse con un volumen de muestra en el intervalo de aproximadamente 1 a 7, microlitros, usuaimente de aproximadamente 3 a 6 microlitros y más usuaimente de aproximadamente 1.5 a 2.5 microlitros, y hacer pasar un volumen al área de reacción en el intervalo de aproximadamente 0.1 a 5.0 microlitros, usuaimente de aproximadamente 1.0 a 3.0 microlitros y más usuaimente de aproximadamente 1.5 a 2.5 microlitros. La figura 1 D muestra la tira de prueba configurada de la figura C. Otra característica de las modalidades particulares de las figuras 1A a 1 D (y también de las figuras 1 E a 1G, como se describirá posteriormente) es que la primera área y la segunda área del elemento de transporte tienen grosores diferentes. (Sin embargo, como se menciona anteriormente, la primera área y la segunda área pueden ser del mismo grosor). Más específicamente en aquellas modalidades en que difieren los grosores de las áreas, el grosor de cada una de las primeras áreas 12 es mayor que el grosor de la segunda área. En otras palabras, la relación de los grosores de cada una de las primeras áreas al grosor de la segunda área, es decir el grosor de cada una de las primeras áreas al grosor de la segunda área, varía de aproximadamente 1.1 a 1.9, típicamente de aproximadamente 1.1 a 1.7 y más típicamente de aproximadamente 1.2 a 1.5. Según lo anterior, el grosor de cada una de las primeras áreas varía de aproximadamente 0.483 a 0.787 milímetros, usualmente de aproximadamente 0.508 a 0.762 milímetros y más usualmente de aproximadamente 0.583 a 0.686 milímetros, mientras que el grosor de la segunda área varía de aproximadamente 0.381 a 0.5588 milímetros, usualmente de aproximadamente 0.406 a 0.533 milímetros y más usualmente de aproximadamente 0.472 a 0.508 milímetros. La figura 1 E ilustra una vista desarrollada de una modalidad ejemplar de la presente tira de prueba que tiene una o más extensiones ubicadas a los lados del elemento de transporte para hacer pasar la muestra al elemento de transporte y la figura 1 F muestra la tira de prueba configurada de la figura 1B. Como tal, el dispositivo 40 de la figura 1 E es sustancialmente el mismo que los dispositivos de las figuras 1A a 1 D (mostrado en la presente con el elemento de transporte sustancialmente circular de la figura 1C, pero el elemento de transporte puede ser de cualquier forma adecuada, como se describe anteriormente), excepto que la segunda área 32 del elemento de transporte incluye por lo menos dos extensiones laterales 44 asociadas con la segunda área 32, en que tales extensiones laterales están configuradas para facilitar la aplicación de la muestra al elemento de transporte y más específicamente a la segunda área 32 del elemento de transporte. En ciertas modalidades en que una o más extensiones laterales están presentes, se puede reducir al mínimo la longitud total del material poroso, es decir las longitudes de las primeras áreas y las segundas áreas juntas, reduciendo al mínimo las longitudes de las primeras secciones. Esta modalidad particular incluye dos extensiones laterales, cada una posicionada a lados sustancialmente opuestos del elemento de transporte de fluido, pero será evidente que se puede usar cualquier número de extensiones laterales, se pueden usar por ejemplo de 1 a 50 extensiones laterales. Sin consideración del número de extensiones laterales, típicamente el material del cual están hechas las extensiones laterales es el mismo material que la segunda área 32, a fin de que sea una pieza unitaria de construcción, es decir la misma pieza de material. Sin embargo, las extensiones laterales 44 pueden estar hechas también de un material diferente del segundo elemento 32. Se puede usar una variedad de materiales diferentes en la fabricación de las extensiones laterales, en que el único requisito es que el material permita que se traslade por capilaridad la muestra o se transporte de otra manera a una segunda área del elemento de transporte. Cuando las extensiones laterales son del mismo material que el elemento de transporte, es decir son de un material poroso, las extensiones laterales tienen típicamente un ancho que varía de aproximadamente 5.08 a 6.35 milímetros, usualmente de aproximadamente 0.762 a 1.524 milímetros y más usualmente de aproximadamente 11. 43 a 13.97 milímetros. La longitud de las extensiones laterales varía generalmente de aproximadamente 0.508 a 1.78 milímetros, usualmente de aproximadamente 0.763 a 1.524 milímetros y más usualmente de aproximadamente 1 1.43 a 13.97 milímetros. En otra modalidad de las presentes tiras de prueba, las extensiones laterales 44 son estructuras alargadas, huecas o tubulares, de tal manera que las extensiones laterales tienen un canal o lumen de transporte de fluido a través de las mismas (no mostrado), de tal manera que las extensiones laterales son capaces de transferir la muestra a la segunda área de la tira de prueba a través del canal en que los canales pueden estar dimensionados de manera que ejerzan una fuerza capilar sobre un fluido fisiológico. La figura 1G ilustra una vista desarrollada todavía de otra modalidad ejemplar de la presente invención. En esta modalidad particular, el dispositivo 50 es sustancialmente el mismo que el dispositivo 40 de la figura 1 E, excepto por la configuración de la capa de soporte. La capa de soporte 5 incluye la abertura 3 descrita en las modalidades previas, sin embargo la capa de soporte 5 incluye también las muescas 7, las cuales se encuentran sustancialmente adyacentes o próximas a la abertura 3. En esta modalidad particular, se muestran dos muescas, sin embargo se puede usar cualquier número de muescas, por ejemplo por lo menos una muesca puede estar formada, dos muescas pueden estar formadas o más muescas pueden estar formadas en la capa de soporte. Como tal, la membrana 6 y las extensiones laterales 44 resaltan o se extienden más allá de la capa de soporte en la posición de las muescas. Las muescas 7 están configuradas por lo tanto para reducir al mínimo la contaminación de la muestra a la parte inferior 9 de la capa de soporte 5, en que tal contaminación puede resultar en que un dispositivo automatizado tal como un medidor (no mostrado), al cual se inserte el dispositivo para determinar automáticamente la concentración por lo menos de una analito en la muestra, esté sucio y cause posiblemente también lecturas incorrectas o erróneas del medidor. Típicamente, la longitud de una muesca variará de aproximadamente 0.254 a 0.508 milímetros, usualmente de aproximadamente 0.381 a 1.016 milímetros y más usualmente de aproximadamente 0.508 a 0.762 milímetros, y el ancho de la muesca, es decir la distancia que se corta o secciona en relieve la muesca en la capa de soporte, variará de aproximadamente 2.54 a 12.7 milímetros, usualmente de aproximadamente 5.08 a 10.16 milímetros y más usualmente de aproximadamente 6.35 a 8.89 milímetros. La figura 2A ilustra una vista desarrollada de otra modalidad ejemplar de la presente invención y la figura 2B muestra la tira de prueba configurada de la figura 2A. En esta modalidad particular el elemento de transporte es no poroso, en que cada elemento de transporte no poroso está configurado para transportar una muestra al área de reacción, trasladando la muestra entre el elemento de transporte y la membrana, típicamente por acción capilar. Según lo anterior, el elemento de transporte no poroso se puede encontrar en esencia directamente adyacente, es decir en esencia directamente arriba, de la membrana o puede estar separado de la membrana, es decir la membrana no porosa se puede encontrar a una distancia arriba o adyacente a la membrana. Siendo así, el elemento de transporte no poroso se puede encontrar a una distancia de aproximadamente 0 a 0.0254 milímetros arriba de la membrana, usualmente de aproximadamente 0 a 0.0025 milímetros arriba de la membrana. En esta modalidad, el dispositivo 60 tiene un elemento de transporte 62 que es de un material plástico no poroso, tales como aquellos materiales adecuados descritos anteriormente. Usualmente, cada una de las primeras áreas 64, la segunda área 66 y las extensiones laterales 68 están hechas todas del material no poroso. En ciertas modalidades de los presentes dispositivos, el elemento de transporte 62, y en particular la superficie inferior 62 del elemento de transporte 62, incluye un medio para dirigir la muestra, por ejemplo, un eje para dirigir el flujo de muestra de manera regular o predecible. Tal medio de dirección de muestra puede incluir, pero no está limitado a los mismos, un patrón tal como un patrón de nudo o uno o más resaltos (no mostrados) posicionados sobre la superficie inferior 63. Además, el patrón puede incluir uno o más resaltos que tengan ranuras o canales en los mismos para ayudar adicionalmente en dirigir la muestra, o cualquier combinación de los anteriores.

Aunque el material del cual está hecho el elemento de transporte difiere del material de los elementos de transporte descritos anteriormente, es decir el elemento de transporte es no poroso en contraste con los elementos de transporte porosos descritos anteriormente, la configuración es sustancialmente la misma. En otras palabras, las primeras áreas 64, la segunda área 66 y las extensiones laterales 68 son de forma y dimensiones sustancialmente iguales de los elementos correspondientes en el dispositivo 50 de la figura 1 G, excepto que las primeras y la segunda áreas no difieren necesariamente de grosor. Puesto que se aplica la muestra desde los lados de la tira y el elemento de transporte es no poroso, se pueden reducir al mínimo las longitudes de las primeras secciones 64, ya que no proveen funciones de depósito. Como tal, el grosor del elemento de transporte 62 no poroso, es decir el grosor de todas las áreas del elemento de transporte 62 no poroso, varía de aproximadamente 0.0254 a 0.0580 milímetros, usualmente de aproximadamente 0.0762 a 0.381 milímetros y más usualmente de aproximadamente 0.127 a 0.3048 milímetros En esta modalidad particular, la segunda área del elemento de transporte es circular, se contemplan sin embargo también otras formas en esta invención, tal como una forma sustancialmente rectangular o similar, como representa el elemento de transporte mostrado en la figura 2C, en que el elemento de transporte de 2C muestra la segunda área 69 y las extensiones laterales 71 sustancialmente cuadradas o rectangulares.

Ciertas modalidades del presente dispositivo pueden incluir la presencia de un elemento de confinamiento de muestra. Por ejemplo, las figuras 2A y 2B muestran el dispositivo 60 con un elemento de confinamiento de muestras 70 en que tal elemento de confinación está configurado para evitar que la muestra que se puede hacer fluir sobre el lado superior o de arriba del dispositivo 60, es decir ubicado en el lado 72 del elemento de transporte 62 de la muestra, contamine un medidor al cual se puede insertar el dispositivo 60. Usualmente, el elemento de confinamiento de muestra 70 tiene longitud y ancho sustancialmente iguales al del elemento de transporte no poroso al cual está asociado, aunque el elemento de confinamiento de muestra puede ser más pequeño o más grande que el elemento de transporte no poroso al cual está asociado. El elemento de confinamiento de muestra 70 incluye típicamente las muescas 73, en que tales muescas forman el área 74 que se encuentra sustancialmente arriba de la segunda área 66 del elemento de transporte 62. El elemento de confinamiento de muestra 70 está configurado para confinar o retener sustancialmente la muestra a un área abajo o debajo del elemento de confinamiento de muestra. El elemento de confinamiento de muestra puede estar hecho de una variedad de materiales, con la única condición de que el material no impida sustancialmente la reacción de la tira de prueba, es decir la determinación de la concentración por lo menos de un analito en la muestra del fluido fisiológico aplicada a la misma, en que los materiales representativos incluyen, pero no se limitan a los mismos, polieíileno, polipropileno, poliéster, policarbonato, poliestireno, poliamida, etc. La figura 3A ilustra una vista desarrollada de otra modalidad ejemplar de la presente invención y la figura 3B muestra la tira de prueba configurada de la figura 3A. En esta modalidad, posicionada sobre un primer lado, es decir el lado de aplicación de la muestra, de la membrana 6 está la capa separadora 76 que tiene una abertura 77 formada en la misma, en que tal abertura está posicionada sustancialmente arriba de la membrana para dirigir la muestra a la misma. La capa separadora 76 puede estar fabricada de cualquier material conveniente, en que los materiales adecuados representativos incluyen, pero no se limitan a los mismos, poliéster, polietileno, polipropileno, poliestireno, policarbonato, poliamida, etc., en que las superficies de la capa separadora pueden estar tratadas de manera que sean adhesivas con respecto a sus respectivos materiales o capas adyacentes, manteniendo así la estructura del dispositivo. La capa separadora 76 está configurada generalmente para proveer un área de transporte capilar 79 entre la membrana 6 y el elemento de transporte no poroso 78, descrito posteriormente, de tal manera que la muestra es trasladada, típicamente por fuerzas capilares, entre la membrana 6 y el elemento de transporte no poroso 78. Como tal, el grosor de la capa separadora 76 varía generalmente de aproximadamente 0.0254 a 0.381 milímetros, usualmente de aproximadamente 0.0254 a 0.1778 milímetros y más usualmente de aproximadamente 0.0508 a 0.1524 milímetros La capa separadora 76 tiene generalmente una longitud que varía de aproximadamente 7.62 a 38.1 milímetros, usualmente de aproximadamente 12.7 a 30.48 y más usualmente de aproximadamente 22.86 a 27.94 milímetros El ancho de la capa separadora 76 varían típicamente de aproximadamente 3.81 a 15.24 milímetros, usualmente de aproximadamente 4.572 a 10.16 milímetros y más usualmente de aproximadamente 5.08 a 7.62 milímetros. La abertura 77, configurada para transferir y confinar sustancialmente la muestra a la membrana 6, tiene generalmente un diámetro en el intervalo de aproximadamente 0.254 a 5.334 milímetros, usualmente de aproximadamente 3.556 a 5.08 milímetros y más usualmente de aproximadamente 3.81 a 4.826 milímetros Como se menciona anteriormente, el dispositivo 80 incluye un elemento de transporte no poroso 78, como se menciona anteriormente, y un elemento de confinamiento de muestra 70. Según lo anterior, el elemento de transporte no poroso 78 está posicionado entre la capa separadora 76 y el elemento de confinamiento de muestra 70, en que el elemento de confinamiento de muestra 70 está configurado para evitar que la muestra contamine un medidor, como se describe anteriormente, y un elemento de transporte no poroso 78 está configurado para formar un área capilar entre sí mismo y la membrana, a través de la cual la muestra se desplaza a la membrana 6. Típicamente, la longitud y el ancho del elemento de transporte no poroso 78 son sustancialmente iguales a la longitud y el ancho de la capa separadora 76. En esta modalidad particular, la forma de la membrana no porosa está representada como una estructura rectangular sólida y sin embargo otras formas son adecuadas también, tales como las formas de los elementos de transporte de las figuras 2A a 2C.

Métodos de fabricación Como se resume anteriormente, la presente invención provee métodos de fabricar tiras de prueba de reactivo. Más particularmente, la presente invención provee métodos de fabricar el elemento de transporte de fluido de la tira de prueba de reactivo. Por tira de prueba de reactivo se da a entender un artículo de fabricación que incluye por lo menos un material de soporte, una membrana y un elemento de transporte de fluido. Se describen anteriormente con mayor detalle las tiras de prueba de reactivo ejemplares que se pueden producir usando los presentes métodos. Siendo así, una característica de la presente invención es el elemento de transporte que está configurado para transferir eficientemente una muestra de fluido fisiológico al área de reacción de la tira de prueba. En ciertas modalidades de la presente invención, como se describe anteriormente, el elemento de transporte puede ser un elemento de transporte poroso y puede incluir varias áreas o secciones, en que varias secciones pueden ser de dimensiones y/o formas diferentes. Por ejemplo, el grosor de una primera área de un elemento de transporte poroso puede ser mayor que el grosor de una segunda área del elemento de transporte (véanse las figuras 1A-1 G). Los materiales adecuados de los cuales se puede hacer el elemento de transporte incluyen, pero no se limitan a los mismos, fibras naturales, tales como algodón o papel (es decir celulosa), así como poliésteres, poliamidas, polietileno y otros polímeros sintéticos. En ciertas modalidades, se puede tratar el material con un agente tensioactivo. El polietileno tratado con agente tensioactivo es particularmente adecuado para su uso en la presente invención; por ejemplo polietileno poroso disponible de Porex Corp. de Fairburn, GA. El moldeo por compresión es un tipo de procedimiento de fabricación que es particularmente adecuado para fabricar el elemento de transporte poroso de la presente invención y más particularmente para configurar el elemento de transporte poroso con una forma y/o patrón deseados. Una ventaja del moldeo por compresión es la capacidad de usar la misma pieza de material para fabricar las varias áreas de elemento de transporte poroso, es decir fabricar el elemento de transporte poroso como pieza unitaria de construcción que tiene áreas o áreas de dimensiones diferentes. Además, la capacidad de elaborar conforme a especificaciones individuales y detallar con precisión ciertas dimensiones del elemento de transporte poroso es consecuentemente todavía otra ventaja de usar el moldeo por compresión. Generalmente en los presentes métodos, se posiciona el material de interés que se ha de comprimir, entre porciones de un ensamble de moldeo por compresión y se juntan las dos porciones a presión, a menudo a presión y calor, para comprimir o conformar de otra manera el material entre las mismas. Típicamente, las porciones del ensamble de moldeo por compresión están hechas de un material sustancialmente duro y fuerte a fin de que soporte la presión y/o el calor usados en los presentes métodos. Según lo anterior, después de la provisión del ensamble de moldeo por compresión, se provee un elemento de transporte poroso precursor. El elemento poroso precursor puede ser de cualquier tamaño conveniente, por ejemplo puede estar dimensionado para proveer un elemento de transporte poroso o puede estar dimensionado para proveer una pluralidad de elementos de transporte porosos. El siguiente paso de los presentes métodos, enseguida de la provisión del precursor del elemento de transporte poroso, es colocar el precursor entre las dos porciones separadas del ensamble de moldeo por compresión, en que tales porciones están configuradas para recibir el precursor y formar el precursor con forma o patrón predeterminados. Según lo anterior, se coloca el precursor entre dos porciones que tienen superficies alineables, por ejemplo una porción macho que tiene un resalto que es una imagen negativa de la forma deseada, por ejemplo una imagen negativa de una segunda área de un elemento de transporte de fluido como se describe anteriormente y una porción hembra que tiene una cavidad o ranura para recibir el resalto de la porción macho. Enseguida del posicionamiento de precursor entre las dos porciones del ensamble, se ajustan las superficies de las dos herramientas. Más específicamente, se pone la superficie de una de las porciones en proximidad estrecha a la superficie, o en contacto con la misma, de la otra porción, con el precursor posicionado entre las dos superficies, de tal manera que un área del precursor asociado con el resalto de la porción macho se posiciona o empuja a la correspondiente ranura hembra y se comprime. Típicamente, la presión con que se juntan las superficies es suficientemente grande para posicionar y comprimir el precursor entre las porciones macho y hembra del ensamble, pero no tan grande que dañe o afecte de otra manera adversamente el precursor. Específicamente, la presión es suficientemente grande para comprimir un área del precursor y más específicamente para formar un área del precursor asociada con una segunda área del elemento de transporte, como se describe anteriormente, a fin de que el grosor de la segunda área formada sea menor que el grosor de las áreas precursoras asociadas con las primeras áreas de un elemento de transporte. Por ejemplo, la relación de cada una de las primeras áreas al grosor de la segunda área, es decir el grosor de las primeras áreas al grosor de la segunda área, varia de aproximadamente 27.94 a 48.26 milímetros, típicamente de aproximadamente 27.94 a 43.18 milímetros y más típicamente de aproximadamente 30.48 a 38.1 milímetros. Según lo anterior, el grosor de cada una de las primeras áreas varía de aproximadamente 0.4826 a 0.7864 milímetros, usualmente de aproximadamente 0.508 a 0.762 milímetros y más usualmente de aproximadamente 0.5334 a 0.6858 milímetros, mientras que el grosor de la segunda área varía de aproximadamente 0.381 a 0.5588 milímetros, usualmente de aproximadamente 0.4064 a 0.5334 milímetros y más usualmente de aproximadamente 0.4318 a 0.508 milímetros. Se aplica presión suficiente para lograr el espacio deseado entre las dos porciones del ensamble de moldeo por compresión, específicamente entre las dos porciones en el centro sustancial de la segunda área. El espacio libre varía típicamente de aproximadamente 0.254 a 0.508 milímetros, usualmente de aproximadamente 0.3048 a 0.4572 milímetros y más usualmente de aproximadamente 0.3048 a 0.381 milímetros. A menudo, se aplica también calor para formar el elemento de transporte, en que se aplica tal calor o bien antes o durante la aplicación de presión, por ejemplo se puede aplicar calor a temperaturas que varían de aproximadamente 40 a 120°C. Enseguida de la compresión, se retira el elemento de transporte comprimido del ensamble. En aquellas modalidades en que el precursor está dimensionado para proveer una pluralidad de elementos de transporte, se corta entonces el precursor en una pluralidad de elementos de transporte. Haciendo referencia nuevamente a los dibujos, la figura 4A muestra una modalidad ejemplar de ensamble de herramienta adecuado para su uso en el moldeo por compresión del elemento de transporte poroso de la presente invención. Se ha de entender que se puede usar cualquier ensamble de molde conveniente, tal como ensambles de estampa circulares o rotatorios y similares. La figura 4A muestra un ensamble de molde por compresión 80 que tiene un primer elemento, es decir una base o porción hembra 88, en que la porción hembra incluye una cavidad o ranura 84 en la misma, y un segundo elemento, es decir una porción macho o superior 86 alineable que tiene un resalto 88 que puede ser recibido por la ranura 84. El resalto 88 provee una imagen negativa u opuesta del área deseada del elemento de transporte poroso que se ha de comprimir o conformar, tal como la segunda área del elemento de transporte poroso de las figuras 1A a 1 G. Inicialmente, como se muestra en la figura 4A, las porciones macho y hembra del ensamble de herramienta están separadas para recibir un elemento de transporte precursor. La figura 4B muestra un precursor 00 posicionado entre los dos elementos 82 y 86. La figura 4C muestra una vista lateral de un elemento de transporte ejemplar que se ha formado mediante los presentes métodos en estado no doblado, por ejemplo el elemento de transporte 10 de la figura 1A. El elemento de transporte 90 incluye las primeras áreas 12 y la segunda área 14, en que el grosor de la segunda área es menor que el grosor de las primeras áreas, debido a los métodos de moldeo por compresión descritos anteriormente. La figura 4D muestra una vista lateral del elemento de transporte formado de la figura 4C, mostrado en la misma en su estado comprimido o doblado durante o después de la compresión. El elemento de transporte moldeado está asociado entonces operativamente con los otros componentes de la tira de prueba de cualquier manera conveniente de tal manera que en su estado no doblado, el elemento de transporte o mejor dicho la segunda sección del mismo está configurada y posicionada de manera sustancialmente directa encima de la membrana, de manera que no hay un intersticio, o no hay sustancialmente un intersticio entre sí misma y la membrana subyacente, es decir el elemento aplica una fuerza elástica a la membrana subyacente, de tal manera que reposa (sustancial mente) sobre la membrana y puede aplicar incluso una fuerza elástica a la membrana.

Métodos de uso Como se resume anteriormente, la presente invención provee también métodos para determinar la concentración de un analito en una muestra, en que los métodos permiten ventajosamente la transparencia eficiente de la muestra al área de reacción de la tira de prueba. Más específicamente, se describen métodos para aplicar una muestra de fluido a la tira de prueba, en que se usa tal tira de prueba para determinar la concentración por lo menos de un analito de una muestra fisiológica. Los presentes métodos encuentran uso en la determinación de una variedad de diferentes concentraciones de analitos, en que los analitos representativos incluyen glucosa, colesterol, lactato, alcohol y similares. En muchas modalidades, se emplean los presente métodos para determinar la concentración de glucosa en una muestra fisiológica. Aunque en principio se pueden usar los presentes métodos para determinar la concentración de un analito de una variedad de diferentes muestras fisiológicas, tal vez como orina, lágrimas, saliva y similares, son particularmente adecuados para su uso en la determinación de la concentración de un analito en un fluido intersticial, sangre o fracciones de sangre y más particularmente en sangre entera.

Generalmente, se aplica una muestra de fluido fisiológico a un área de reacción de una tira de prueba, en que se puede transportar tal muestra al área de reacción haciéndola pasar a través de un elemento de transporte o aplicándola directamente al área de reacción. En aquellas modalidades de los presentes métodos en que se transporta la muestra al área de reacción de la tira de prueba, haciéndola pasar a través de un elemento de transporte, se puede aplicar la muestra directamente al elemento de transporte o aplicar primeramente a una porción de la tira de prueba asociada operativamente con el elemento de transporte, porción que mueve o facilita luego el transporte de la muestra al elemento de transporte. En aquellas modalidades en que se aplica la muestra directamente a la vía de reacción, se puede transportar la muestra mediante fuerzas capilares al área de reacción. Se describirán ahora con más detalle los varios métodos de aplicación del fluido fisiológico. Como se describe anteriormente, se puede aplicar la muestra directamente al elemento de transporte o se puede aplicar primeramente a otra porción o estructura de la tira de prueba y mover juego o transportar de otra manera al elemento de transporte, antes de que se haga pasar luego por lo menos una porción de la muestra al área de reacción desde el elemento de transporte. En otras palabras, se puede aplicar la muestra directamente a la parte posterior del elemento de transporte o se puede alimentar previamente al elemento de transporte por la vía de uno o más lados del elemento de transporte, en que tal alimentación lateral permite ventajosamente al usuario inspeccionar el elemento de transporte, es decir el elemento de transporte queda sin obstruir por el dedo del usuario u otro dispositivo que contenga la muestra, tal como un tubo capilar o similar, en que tal inspección sin obstruir permite la visualización de cuándo se satura el elemento de transporte con la muestra, evitando así el llenado excesivo de elemento de transporte que puede causar lecturas incorrectas de la concentración de analito. Según lo anterior, se puede aplicar la muestra ¡nicialmente a uno o más lados de la tira de prueba en que se mueve luego la muestra o se hace pasar al elemento de transporte. En ciertos métodos, se aplica la muestra a uno o más elementos asociados operativamente con los lados del elemento de transporte, tal como una o más extensiones laterales descritas anteriormente, en que tales elementos transfieren la muestra al elemento de transporte, por ejemplo trasladándola por capilaridad a través del elemento de aplicación de muestra al elemento de transporte. En algunos otros métodos, se hace pasar la muestra al elemento de transporte a través de lumen del elemento de aplicación de la muestra, típicamente mediante fuerzas capilares. Típicamente, se aplica la muestra en el intervalo de aproximadamente 1 a 8 microlitros a una o más extensiones laterales, usualmente de aproximadamente 5.5 a 7.5 microlitros y más usualmente de aproximadamente 6 a 7 microlitros. Se puede poner también en contacto la muestra directamente con el área de reacción de una tira de prueba. Por ejemplo, se puede trasladar la prueba mediante fuerzas capilares a través del área de reacción. En una modalidad semejante de los presentes métodos, se traslada por capilaridad la muestra entre el área de reacción, o mejor dicho una membrana incluyendo el área de reacción y una segunda etapa o estructura de material tal como un elemento de transporte no poroso descrito anteriormente (véanse por ejemplo las figuras 2A-3). Siendo así, en una modalidad particular en que se traslada por capilaridad la muestra entre la membrana y una segunda capa, se aplica un volumen del fluido fisiológico en el intervalo de aproximadamente 1 a 4 microlitros, usualmente de aproximadamente 2.5 a 3.5 microlitros y más usualmente de aproximadamente 2.5 a 3 microlitros, entre la membrana y una segunda capa, y luego se traslada la muestra de fluido fisiológico a través de la membrana mediante fuerzas capilares formadas por la configuración de la membrana y la segunda capa, y más particularmente la superficie inferior de la segunda capa. Se puede trasladar por capilaridad la muestra de manera predecible o regular, en que se puede efectuar dicha manera predecible con una muestra que dirija medios, tal como un patrón seleccionado, tal como un patrón de nudo, resaltos o similares, asociados por la segunda capa, en que tales patrones, el resalto, etc. ayudan a dirigir el flujo de la muestra. Alternativamente, se puede usar una capa adicional posicionada entre dos capas, en que una capa adicional tiene una abertura en la misma para dirigir el flujo de la muestra (véase por ejemplo la figura 3).

Sin consideración de si se dirige la muestra en forma regular o no, se puede aplicar la muestra entre la membrana mencionada anteriormente y la segundas capas, introduciendo la muestra desde el lado de la tira de prueba. Por ejemplo, la segunda capa puede incluir extensiones laterales (véase por ejemplo la figura 2A-2B). Como tal, se puede introducir la muestra a las extensiones laterales y se puede mover o transportar luego la muestra de los elementos al área entre la segunda capa y la membrana, a fin de que se traslade mediante fuerzas capilares a través de la membrana.

Equipos La presente invención provee también equipos para su uso en la práctica de los presente métodos. Los equipos de la presente invención incluyen por lo menos una de las presentes tiras de prueba, en que tales tiras de prueba incluyen un elemento de transferencia del fluido, típicamente poroso, para transferir la muestra a un área de reacción de la tira de prueba, en que el elemento de transferencia de fluido puede ser poroso e incluir una primer área y una segunda área de grosor diferente y/o el elemento de transporte puede ser no poroso. A menudo, los equipos de la presente invención incluyen una pluralidad de tales tiras de prueba. Los equipos pueden incluir también un elemento de lanceta reutilizable o desechable para tener acceso y/o reunir la muestra de la piel. Además, el equipo puede incluir también un medidor reutilizable o desechable que se puede usar con las presentes tiras de prueba. Ciertos equipos pueden incluir varios tipos de tiras de prueba, por ejemplo en que varias tiras de prueba contienen reactivos iguales o diferentes, por ejemplo tiras de prueba electroquímicas y/o colorimétricas. Finalmente, los equipos pueden incluir también instrucciones para usar los presentes dispositivos para determinar la concentración por lo menos de un analito en una muestra fisiológica. Se pueden imprimir las instrucciones sobre un substrato, tal como un papel o plástico, etc. Como tales, las instrucciones pueden estar presentes en los equipos como una porción insertada en el paquete, en las etiquetas del envase del equipo o los componentes del mismo (es decir asociados con el paquete o su paquete), etc. En otras modalidades, las instrucciones están presentes como un archivo de datos de almacenamiento electrónico presente en un medio de almacenamiento legible por computadora, adecuado, por ejemplo CD-ROM, diskette, etc. Es evidente por la descripción y la discusión anteriores que la invención descrita anteriormente provee una manera sencilla, rápida y conveniente de obtener una muestra fisiológica y determinar una concentración de analito de la misma. La invención descrita anteriormente provee varias ventajas, incluyendo facilidad de uso, eficiencia y dolor mínimo. Como tal, la presente invención representa una contribución significante a la técnica. Todas las publicaciones y patentes citadas en esta memoria descriptiva se incorporan a la presente por referencia, como si se indicara específica e individualmente que se incorpora por referencia cada publicación o patente individual. La cita de cualquier publicación es por su exposición antes de la fecha de presentación y no se debe interpretar como una admisión de que la presente invención no está autorizada a antefechar tal publicación en virtud de su invención previa. Aunque se ha descrito la invención precedente con cierto detalle a manera de ilustración y ejemplo con propósitos de claridad de entendimiento, es fácilmente evidente para los expertos en la técnica a la luz de las enseñanzas de esta invención que se pueden hacer ciertos cambios y modificaciones a la misma sin desviarse del espíritu y alcance de las reivindicaciones anexadas.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1.- Una tira de prueba para determinar la concentración por lo menos de un analito en una muestra fisiológica, caracterizada dicha tira de prueba porque comprende un elemento de transferencia de fluido para transferir dicha muestra a un área de reacción de dicha tira de prueba, comprendiendo dicho elemento de transferencia de fluido por lo menos una primera área y una segunda área, en que el grosor de dicha primera área difiere del grosor de dicha segunda área.

2.- Una tira de prueba para determinar la concentración por lo menos de un analito en una muestra fisiológica, caracterizada dicha tira de. prueba porque comprende un elemento de transferencia de fluido para transferir dicha muestra a un área de reacción de dicha tira de prueba, comprendiendo dicho elemento de transferencia de fluido por lo menos una primera área y una segunda área, en que dicha segunda sección está configurada para recibir la muestra y dicha primera sección está configurada para recibir la muestra en exceso.

3.- La tira de prueba de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada además porque el elemento de transporte de fluido comprende un material poroso.

4. - La tira de prueba de conformidad con las reivindicaciones 1 y 2, caracterizada además porque dicha segunda área es capaz de saturarse con un volumen de muestra de aproximadamente 1 a 7 microlitros.

5. - La tira de prueba de conformidad con las reivindicaciones 1 y 2, caracterizada además porque dicha segunda área es capaz de transferir un volumen de muestra de aproximadamente 0.1 a 5.0 microlitros al área de reacción de dicha tira de prueba.

6. - La tira de prueba de conformidad con las reivindicaciones 1 y 2, caracterizada además porque dicha segunda área comprende adicionalmente por lo menos una extensión lateral.

7. - La tira de prueba de conformidad con la reivindicación 6, caracterizada además porque dicha tira de prueba comprende además una capa de soporte, en que dicha capa de soporte comprende por lo menos una muesca en la misma y dicho elemento de aplicación de muestra (por lo menos uno) está configurado para extenderse más allá de dicha muesca (por lo menos una).

8. - Un método para hacer un elemento de transporte de una tira de prueba, caracterizado dicho método porque comprende: (a) proveer un ensamble de molde por compresión configurado para hacer un elemento de transporte que tiene por lo menos una primera área y una segunda área, en que el grosor de dicha primera área y dicha segunda área difieren; (b) insertar un material precursor dentro de dicho ensamble de molde; y (c) aplicar presión a dicho material precursor para proveer dicho elemento de transporte que tiene por lo menos una primera área y una segunda área, en que el grosor de dicha primera área y dicha segunda área difieren.

9.- Un método para determinar la concentración por lo menos de un analito en una muestra fisiológica, caracterizado dicho método porque comprende aplicar la muestra a una tira de prueba constituida de un elemento de transporte de fluido, en que dicho elemento de transporte de fluido está constituido por lo menos por una primera área y una segunda área que tienen grosores diferentes.