MX2014009102A - Practicas mejoradas de granja avicola. - Google Patents

Practicas mejoradas de granja avicola.

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Abstract

La presente invención se relaciona con los métodos para mejorar el ambiente dentro de una instalación avícola que incluye reducir la producción de amoníaco en una instalación avícola, inhibir las enzimas ureasas en los polluelos de aves de corral, reducir los niveles de bacterias patógenas en los polluelos de aves de corral, mejorar la productividad de las granjas avícolas, reducir o prevenir la pododermatitis en las aves de corral criadas en instalaciones avícolas de producción en masa y controlar los parásitos en los polluelos de ave de corral. También se describen las composiciones, convenientes para el uso en tales métodos, que comprenden por lo menos un microorganismo del género Bacillus y por lo menos un biotensioactivo donde el biotensioactivo está presente en una cantidad de 2 mg/l a 7000 mg/l.

Description

PRACTICAS MEJORADAS DE GRANJA AVICOLA Campo de la invención La presente invención se relaciona con métodos para mejorar el ambiente dentro de una instalación avícola incluyendo reducir la producción amoníaco en una instalación avícola, inhibiendo enzimas de ureasa en los lechos de aves de corral, reducir los niveles de bacterias patogénicas en los lechos de aves de corral, mejorar la productividad de granjas avícolas, reducir o prevenir la pododermatitis en aves de corral criadas en instalaciones avícolas de producción en masa y controlar las plagas en los lechos de aves de corral. También se describen composiciones, adecuadas para usarse en tales métodos, que comprenden al menos un microorganismo del género Bacillus y al menos un biosurfactante, en donde el biosurfactante está presente en una cantidad de 2 mg/l a 7000 mg/l.
Antecedentes de la invención Para proporcionar alimento para una población creciente, la producción total de granos, carnes, vegetales y productos lácteos ha aumentado 70% en los últimos 50 años. De manera correspondiente, el crecimiento en la industria avícola ha aumentado dramáticamente. El valor US de producción de pollos de engorda, huevos, pavos y pollos en 2010 fue USD$34.7 billones, aumentado por 10% de 2009. Las exportaciones de aves de corral estadounidenses alcanzaron 7 billones de libras de peso por cada año de 2008 a 2010. Adicionalmente, existe un interes creciente en la sección de alimentos de pollo de especialidad del mercado avícola.
Para sostener la producción y crecimiento avícola en la producción avícola, instalaciones de producción en masa que alojan decenas de miles a millones de aves son comunes en granjas avícolas. Sin embargo, estas instalaciones tienen problemas de producción que son perjudiciales a la salud de las aves y resultan en menor alimentación, menos peso y/o provocan enfermedad en la población de aves.
La estrecha proximidad de las aves de corral en las instalaciones en masa significa que las aves están en contacto no solo con sus propias heces sino también con las heces de otras aves. Esto resulta en patógenos gastromtestinales que se esparcen rápidamente a través de una instalación. Algunos patógenos gastrointestinales de aves, tales como Salmonella spp., Clostridium spp., Campylobacter spp., y Escherichia spp., también son patogénicos para humanos y sus niveles en granjas avícolas son monitoreados.
Los niveles de bacterias patogénicas en poblaciones de aves de corral han sido controlados tradicionalmente mediante la administración de antibióticos a las aves de corral. Sin embargo, en años recientes algunos países, tales como países europeos, han prohibido el uso de antibióticos que también son usados en humanos, debido al surgimiento de bacterias patogénicas resistentes a antibióticos.
Un medio para anular las bacterias patogénicas en las aves ha sido adicionar microorganismos probióticos a sus alimentos y se ha encontrado que esto mejora la salud del ave, la producción de carne y la producción de huevo (Khalid et al., “Effect of Probiotic on some Physiological Parameters in Broller Breeders” (Efecto de probióticos sobre algunos parámetros fisiológicos en reproductores de pollos de engorda), International Journal of Poultry Science, 2011 , 10(8): 626-628).
Los probióticos alimentados a las aves de corral pueden incluir microorganismos no patogenicos, tales como Bacillus subtilis (US 4,919,936, US 7,247,29 y US 7,754,469). Sin embargo, estas composiciones deben ser adecuadas para consumo por las aves de corral y cualquier aditivo alimenticio adicional con actividad antibiótica puede ser regulado por los reguladores de la industrial.
Adiclonalmente, algunas de las bacterias patogénicas incluyen enzimas de ureasa que hidrolizan la urea y ácido úrico encontrado en las heces de las aves de corral, y por ello producen amoníaco. Altos niveles de amoníaco en las instalaciones son perjudiciales a la salud de las aves y las regulaciones de la industrial requieren que los niveles de amoníaco en instalaciones avícolas de producción en masa sean mantenidos por debajo de 25 ppm.
El control de niveles de amoníaco es actualmente alcanzado sobre los primeros 8 a 10 días de producción mediante el uso de un químico neutralizante ácido adicionado a los lechos avícolas. Los químicos neutralizantes ácidos comunes incluyen sales de sulfato, sales de bisulfito y ácidos orgánicos, tal como ácido cítrico. Sin embargo, estos químicos neutralizantes solo están activos durante la producción inicial y son consumidos por aproximadamente el día 10 de producción. Subsecuentemente, el control de amoníaco es logrado usando ventiladores. Otra dificultad con el uso de químicos neutralizantes ácidos es que están en constante contacto con las patas de las aves y provocan o exacerban la pododermatitis provocada por infección con Staphylococcus y ampollas de sus patas.
Las composiciones comprendiendo Bacillus spp., tambien han sido usadas en deodorizar compsiciones debido a su capacidad para excretar enzimas extracelulares que descomponen el desecho (US 8,025,874). Una de estas composiciones comprende una cepa especifica de Bacillus subtilis, NRRL B-50147, y es particularmente útil para controlar el olor en el lecho de los animales. Sin embargo, estas composiciones requieren el uso de cepas específicas de B. subtilis y también incluyen otros adsorbentes tales como arcilla. Tales composiciones tampoco están indicadas como adecuadas para uso en gran escala en ambientes, tales como granjas avícolas de producción en masa.
Existe la necesidad de un tratamiento efectivo para instalaciones avícolas de producción en masa para reducir y/o controlar la producción de amoníaco y que sea efectivo para controlar y/o reducir las bacterias patogénicas en lechos avícolas y estiércol avícola, reduciendo por ello el olor, previniendo la infección en las aves de corral y consumidores y mejorando la salud y productividad de aves de corral.
Breve descripción de la invención La presente invención es predicada en parte sobre el descubrimiento de que una composición comprendiendo al menos un microorganismo Bacillus y al menos un biosurfactante, tal como surfactina, es útil para controlar las bacterias patogenicas y al producción de amoníaco en instalaciones de granjas avícolas de producción en masa.
En un aspecto de la invención, se proporciona un método para mejorar el ambiente dentro de una instalación de granja avícola comprendiendo aplicar a lechos avícolas o estiércol avícola dentro de la instalación de granja avícola, una composición que comprende al menos un microorganismo del género Bacillus y al menos un biosurfactante, en donde el biosurfactante está presente en la composición en una cantidad de entre aproximadamente 2 mg/l y 7000 mg/l.
En algunas modalidades, el ambiente es mejorado al controlar o reducir la producción de amoníaco en la instalación de granja avícola. En algunas modalidades, el control o reducción en producción de amoníaco es al menos en parte resultante de controlar o reducir las bacterias productoras de ureasa en los lechos avícolas y/o de la reducción o inhibición de enzimas ureasa en los lechos avícolas o estiércol avícola.
En algunas modalidades, el ambiente es mejorado al controlar o reducir bacterias patogénicas en los lechos avícolas o estiércol avícola.
En algunas modalidades, el ambiente es mejorado al controlar las plagas de lechos avícolas, tales como escarabajos y moscas y sus respectivas larvas.
En algunas modalidades, la mejora en el ambiente, mejora de la alimentación, puesta de huevos, ganancia de peso y otras medidas de productividad dentro de la instalación avícola.
En otro aspecto de la invención se proporciona un metodo para prevenir o reducir la dermatitis de cojinetes de patas (pododermatitis) y dermatitis gangrenosa en las aves de corral en una instalación de granja avícola, que comprende aplicar a lechos avícolas dentro de la instalación de granja avícola, una composición que comprende al menos un microorganismo del género Bacillus y al menos un biosurfactante, en donde el biosurfactante está presente en la composición en una cantidad de entre aproximadamente 2 mg/l y 7000 mg/l.
En algunas modalidades, la prevención o reducción de pododermatitis resulta del control o reducción de microorganismos de Staphylococcus y/o Pseudomonas en los lechos avícolas. En algunas modalidades, la pododermatitis puede ser reducida o prevenida mediante la reducción o falta de uso de compuestos ácidos neutralizantes en los lechos avícolas.
En otro aspecto de la invención, se proporciona una composición comprendiendo al menos un microorganismo del género Bacillus y al menos un biosurfactante, en donde el biosurfactante está presente en la composición en una cantidad de entre aproximadamente 2 mg/l y 7000 mg/l.
En algunas modalidades, la composición comprende 50 a 7000 mg/l de biosurfactante. En algunas modalidades, la composioen es un concentrado, el cual puede ser diluido adicionalmente antes de usarse. En esta smodalidades, el biosurfatant epuede estar presente en uan cantidad de 500 mg/l hasta 7000 mg/l, especlamente 800 mg/l hasta 7000 mg/l u 850 mg/l a 6000 mg/l. En alguna smdoaldiades, la composición está en forma diluida comprendiendo biosurfactante en el rango de 2 mg/l a 850 mg/l, especialmente 2 mg/l a 800 mg/l o 2 mg/ a 500 mg/l. En algunas modalidades, la composición comprende además un surfactane, especialmente un surfactante aniónico.
En algunas modalidades, la composición comprende la especie Bacillus RSA-203.
Descripción detallada de la invención 1. Definiciones Los artículos “un” y “una” son usados en la presente para referirse a uno o a más de uno (es decir, al menos uno) del objeto gramatical del artículo. A manera de ejemplo, “un elemento” significa un elemento o más de un elemento.
Como se usa en la presente, el término “aproximadamente” se refiere a una cantidad, nivel, valor, dimensión, tamaño o cantidad que varía por tanto como 30%, 25%, 20%, 15%, o 10% a una cantidad de referencia, nivel, valor, dimensión, tamaño o cantidad.
A lo largo de esta especificación y las reivindicaciones que siguen, a menos que el contexto lo requiera de otra manera, la palabra “comprender”, y variaciones tales como “comprende” y “comprendiendo”, será entendida por implicar la inclusión de un entero o paso o grupo de enteros o pasos declarados, pero no la exclusión de cualquier otro entero o paso o grupo de enteros o pasos.
Como se usa en la presente, el término “ambiente dentro de una instalación de granja avícola” se refiere a las áreas de alojamiento de aves de corral de una instalación de granja avícola, tales como graneros, en los cuales las aves de corral son criadas y/o donde los huevos son puestos, e incluyen el piso o un piso de granero, los residuos avícolas usados en el granero, el aire y calidad de aire en el granero y las superficies duras dentro del granero.
Como se usa en la presente, el termino “aves de corral” se refiere a aves domesticadas mantenidas por humanos para los fines de obtiene huevos, carne y/o plumas. Las aves de corral incluyen pollos, aves acuáticas y aves de caza. Ejemplos de aves de corral incluyen pollos, pavos, patos, gansos, codornices, faisanes, palomas, pichones, emúes, avestruces y reas.
Como se usa en la presente, el término “vinaza" se refiere a un subproducto de la industria del azúcar obtenido a partir del procesamiento de la caña de azúcar o remolacha. Las melazas producidas durante el procesamiento de azúcar son fermentadas para producir etanol y ácido ascórbico. El residuo dejado después de esta fermentación es referido como vinaza. La vinaza es un líquido viscoso con un contenido de sólidos totales de 2-10% p/v, alta acidez pH 4-5 y alto BOD (30 000 - 40 000). 2. Métodos de la invención La invención se refiere a métodos para mejorar el ambiente en una instalación avícola, especialmente una instalación avícola de producción en masa. Los métodos comprendiendo contactar los lechos avícolas o estiercol avícola con una composición comprendiendo al menos un microorganismo del género Bacillus y al menos un biosurfactante, en donde el biosurfactante está presente en la composición en una cantidad de entre aproximadamente 2 mg/l y 7000n mg/l. Los métodos pueden ser usados en granjas avícolas para controlar o reducir las bacterias patogénicas, controlar o reducir la producción de amoníaco, tratar o prevenir la pododermatitis avícola, o controlar o prevenir la infestación de plagas en instalaciones avícolas. La composición también puede mejorar la productividad en instalaciones avícolas.
La instalación de granja avícola puede ser una instalación donde las aves de corral son producidas para consumo o una instalación donde las aves de corral son mantenidas por sus huevos, plumas u otros productos avícolas.
En algunas modalidades, los métodos son para controlar las bacterias patogénicas en lechos avícolas o estiércol avícola. Las bacterias patogénicas pueden ser patógenos gastromtestinales de aves de corral. Las bacterias patogénicas pueden provocar enfermedad en las aves de corral, tales como diarrea o pododermatitis. Las bacterias patogénicas también pueden ser bacterias patogénicas que infectan humanos. En algunas modalidades, las bacterias patogénicas son seleccionadas de Salmonella spp., Closridium spp., Campylobacter spp., Escherichia spp., Pseudomonas spp. y Staphylococcus spp. Por ejemplo, las bacterias patogénicas pueden ser seleccionadas de Salmonella entérica, Campylobacter jejuni, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli y Clostridium perfringens.
Las bacterias pueden haber desarrollado o no resistencia a antibióticos o vacunas estándares.
En otro aspecto de la invención, existe un metodo para tratar o prevenir pododermatitis avícola o dermatitis gangrenosa. La pododermatitis avícola también conocida como dermatitis de cojinete de pata y dermatitis gangrenosa son condiciones que afectan las patas de aves de corral que viven en un ambiente cubierto con lechos avícolas. En algunos casos, la pododermatitis o dermatitis gangrenosa es exacerbada por la presencia de enmiendas de lechos avícolas, tales como ácidos neutralizantes, que son usados para controlar la producción de amoniaco en lechos avícolas, por ejemplo, alumbre, sales de bisulfito y otros ácidos. La pododermatitis avícola o dermatitis gangrenosa pueden ser provocadas por Staphylococcus aureus o Pseudomonas aeruginosa que está presente en la materia fecal de aves de corral que está presente en los lechos avícolas. Estas condiciones resultan en infección y ampollas en las patas de aves de corral, quemaduras de corvejón y/o ampollas en la pechuga.
En algunas modalidades, los métodos son para controlar o reducir amoníaco que es producido en instalaciones avícolas. Se piensa que el amoniaco es producido por hidrólisis de urea y ácido úrico que se encuentra en las heces de aves de corral en los lechos avícolas o estiércol avícola. La hidrólisis de urea y ácido úrico para producir amoníaco es acelerada por la presencia de enzimas ureasa que están presentes en o son excretadas por bacterias en las heces de aves de corral. Sin desear ligar a una teoría, se cree que la composición reduce la actividad de enzima ureasa en materia fecal de aves de corral al controlar o matar los microbios conteniendo ureasa en la materia fecal. Las ureasas catalizan la degradación de ácido úrico a amoníaco dentro de la materia fecal. Por lo tanto, en un aspecto de la invención, se proporciona un método para controlar o inhibir la actividad de enzimas ureasas en los lechos avícolas o estiércol avícola.
En algunas modalidades, la concentración de amoníaco en la instalación avícola es controlada a un nivel por debajo de 25 ppm, la concentración máxima de amoníaco permitida en instalaciones avícolas. En algunas modalidades, la concentración de amoníaco es mantenida por debajo de 20 ppm, 15 ppm o 10 ppm. Ventajosamente, la concentración de amoníaco puede ser mantenida por debajo de 25 ppm durante entre 2 y 50 días, por ejemplo, 5 y 50 días, 10 y 50 días, 15 y 50 días, 20 y 50 días, especialmente un periodo de tiempo suficiente para que las aves de corral crezcan desde polluelos hasta adultos. Ventajosamente, mantener la concentración de amoníaco por debajo de 25 ppm reduce o elimina la necesidad del uso de ventiladores en las instalaciones, lo cual es consumidor de energía y costoso.
En otro aspecto, los métodos de la invención se refieren a controlar plagas en los lechos avícolas. En modalidades particulares, las plagas son plagas invertebradas, tales como insectos. En una modalidad, la plaga es seleccionada de escarabajos negros, especialmente larvas de escarabajos negros, y moscas tales como tábanos, tábanos pequeños, moscas negras de basura, moscas, mosquitas domésticas y moscas de los establos, moscas verdes, moscardas, moscas de la carne, moscardones y demás moscas domesticas.
Todavía en otro aspecto de la Invención, el método mejora la productividad de las aves de corral e instalación avícola. La reducción en bacterias patogénicas y/o reducción de niveles de amoníaco mejora la salud general de las aves de corral aumentando su alimentación y crecimiento y produciendo patas saludable. El aumento de productividad puede manifestarse mediante peso promedio incrementado de las aves de corral, la producción de más huevos o huevos más grandes y/o la producción de patas de pollos saludables vendibles. El aumento de productividad puede manifestarse a sí mismo mediante peso promedio incrementado de las aves de corral, la producción de más huevos o huevos más grandes y/o la producción de patas de pollo saludables vendibles para el mercado asiático de alimentos.
En algunas modalidades, la composición o composición diluida es atomizada sobre los lechos avícolas. En algunas modalidades, la composición es usada pura. En otras modalidades, la composición es diluida, por ejemplo, con agua. Sin embargo, una concentración bactericida de biosurfactante de al menos 2 mg/l, especialmente 50 mg/l es mantenida. En algunas modalidades, la composición es diluida por 1 parte v/v de composición en 2 partes de agua a 1 parte v/v de composición 30 partes de agua, por ejemplo, 1 parte de composición es 2 a 25 partes de agua, 1 parte de composición en 5 a 20 partes de agua, especialmente 1 parte de composición en 10 partes de agua, 1 parte de composición en 11 partes de agua, 1 parte de composición en 12 partes de agua, 1 parte de composición en 13 partes de agua, 1 parte de composición en 14 partes de agua, 1 parte de composición en 15 partes de agua, 1 parte de composición en 16 partes de agua, 1 parte de composición en 17 partes de agua, 1 pate de composición en 18 partes de agua, 1 parte de composición en 19 partes de agua o 1 parte de composición en 20 partes de agua.
Cuando ia composición de la invención es diluida, la composición puede comprender aproximadamente 1 a 40% v/v de la composición diluida, especialmente 1 a 3% v/v, 1 a 2% v/v, 1 a 15% v/v, 1 a 12% v/v 0 1 10% v/v, más especialmente aproximadamente 2 a 8%.
La composición, ya sea diluida o no diluida, puede ser aplicada a los lechos avícolas en una cantidad de 1 galón por 50 pies cuadrados a 1 galón por 150 pies cuadrados (0.8 l/m2 a 0.27 l/m2), especialmente 1 galón por 75 pies cuadrados a 1 galón por 125 pies cuadrados (0.54 l/m2 a 0.33 l/m2) o 1 galón por 90 pies cuadrados a 1 galón por 20 pies cuadrados (0.45 l/m2 a 0.34 l/m2).
En algunas modalidades, los lechos avícolas comprenden uno o más de virutas de madera, aserrín, paja, cáscaras de cacahuate, cáscaras de arroz, caña de azúcar rallada y otros materiales orgánicos de bajo costo, absorbentes, secos, de bajo costo. El tipo de material orgánico usado puede ser dictado por las cosechas locales y sus materiales de desechos orgánicos secos.
En algunas modalidades, la composición es aplicada a los lechos avícolas entre nidadas de aves de corral y por lo tanto el lecho comprende materia fecal antes de la introducción de la siguiente nidada de pollos. La composición de la invención puede ser aplicada a los lechos avícolas 1 a 10 días antes de la introducción de la siguiente nidada de pollos, especialmente 3 a 7 días antes.
En algunas modalidades, la composición es aplicada a estiercol avícola, por ejemplo, en instalaciones productoras de huevo, tales como aquéllas conteniendo aves de corral enjauladas.
En algunas modalidades, los lechos avícolas o estiércol avícola pueden ser sometidos a hilerado antes o después de la aplicación de la composición de la invención. En algunas modalidades, la composición aplicada al hilerado comprende microorganismos en forma de esporas. 3. Composiciones de la invención En un aspecto de la presente invención se proporciona una composición comprendiendo al menos un microorganismo del género Bacillus. En otras modalidades, la composición comprende más de un microorganismo del género Bacillus, por ejemplo, 2, 3, 4, 5 o 6 microorganismos. En algunas modalidades, el al menos un microorganismo a partir del género Bacillus es seleccionado de Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus pumilus, Bacillus popillae, Bacillus circulans y mezclas de los mismos, especialmente Bacillus subtilis y Bacillus licheniformis y mezclas de los mismos, más especialmente Bacillus subtilis.
En algunas modalidades, el al menos un microorganismo del género Bacillus es una cepa específica de Bacillus subtilis, especialmente Bacillus subtilis subespecie subtilis NRRL B-3383 (US Department of Agriculture, Agricultural Research Service, ARS Culture Collection NRRL), B, subtilis ATCC 21331 , B. subtilis ATCC 21332, B, subtilis SD901 (FERM BP.7666) y B. subtilis RSA-203 o una mezcla de los mismos. En algunas modalidades, el al menos un microorganismo del genero Bacillus comprende B. subtilis RSA-203. En algunas modalidades, el al menos un microorganismo del género Bacillus es una combinación de Bacillus subtilis NRRL B-3383 y Bacillus subtilis RSA-203.
RSA-203 es un microorganismo que es una cepa de Bacillus subtilis. Es un microbio b-hemolítico, gram-positivo, aeróbico, con forma de barra, capaz de formar endosporas. El análisis de secuencia de ácido nucleico confirma que es una cepa de B. subtilis. Una muestra de este microorganismo fue depositada en el depósito ATCC, 10801 University Boulevard, Manassas, Virginia 20110-2209, Estados Unidos de América, el 9 de enero de 2013, y se le ha asignado el acceso no.
RSA-203 produce cantidades significativas del biosurfactante surfactina. Si las condiciones de cultivo incluyen remoción de espumado durante cultivo, la surfactina puede ser producida en cantidades de 250 mg/l a 100 mg/l en el medio de cultivo y 850 mg/l a 2 g/l en el espumado.
En algunas modalidades, el microorganismo está en un estado vegetativo. En otras modalidades, el microorganismo está en un estado durmiente, por ejemplo, una endospora. Todavía en otras modalidades, el microorganismo está presente en una mezcla de estados durmiente y vegetativo.
La composición puede comprender cualquier cantidad adecuada de microorganismo del genero Bacillus para alcanzar una población adecuada cuando se aplica a lecho avícola. Sin desear ligar a una teoría, se piensa que el microorganismo es capaz de tomar ventaja de fuentes alimenticias en los lechos avícolas de manera más efectiva que otros microorganismos, tales como bacterias patogénicas. Esto resulta en que los microorganismos del género Bacillus superan a los otros microorganismos, de manera que los otros microorganismos no prosperan o mueren. Cantidades adecuadas de microorganismo del género Bacillus están entre 1 x 104 cfu/ml a 1 x 1013 cfu/ml.
En algunas modalidades, el al menos un biosurfactante es producido mediante el microorganismo del género Bacillus que está en la composición. En otras modalidades, el al menos un biosurfactante no es producido por el microorganismo del género Bacillus que está en la composición.
En algunas modalidades, el al menos un biosurfactante es un péptido antimicrobiano, especialmente un biosurfactante de lipopéptido cíclico. En algunas modalidades, el biosurfactante es uno de surfactante, liquenisina, iturina, fengicina o mezclas de los mismos, más especialmente surfactina, liquenisina o mezclas de las mismas, muy especialmente surfactante. Cada uno de estos biosurfactantes puede contener mezclas de compuestos, que varían en longitud de cadena de la porción de ácido graso del lipopéptido.
Lipopéptidos cíclicos, tal como surfactina, tienen una porción de peptido cíclico y una porción derivada de un ácido graso. La surfactina tiene un péptido cíclico de siete aminoácidos incluyendo tanto D- como L-aminoácidos, Glu-Leu-D-Leu-Val-Asp-D-Leu-Leu, enlazados desde el extremo N al extremo C para formar una porción cíclica mediante un ácido b-hidroxi graso de C12-C17 como se muestra a continuación.
La liquenisina tiene una estructura similar con la secuencia de aminoácidos que difiere de surfactina, Gln-Leu-D-Leu-Val-Asp-D-Leu-lle, enlazada desde el extremo N al extremo C para formar una porción cíclica por un ácido b-hidroxi graso de C12-C17.
La fengicina es un lipopéptido cíclico teniendo la secuencia Glu-D-Orn-Tyr-D-Allo-Thr-Glu-D-Ala-Pro-Glu-D-Tyr-lle, donde el péptido es cielizado entre el grupo tirosina fenoxi de la posición 3 y el extremo C de la lie en la posición 10, el ácido graso está unido al péptido formando una amida con el extremo N.
La iturina se refiere a un grupo de péptidos cíclicos con la secuencia Asn-D-Tyr-D-Asn-GIn-Pro-D-Asn-Ser, en la cual el extremo N y el extremo C están conectados por un ácido b-amino graso de longitud variante.
La composición comprende biosurfactante en una cantidad de 2 mg/l a 7000 mg/l, por ejemplo, 50 mg/l a 7000 mg/l. En algunas modalidades, la composición está en la forma de un concentrado que puede ser diluido antes de usarse. Por ejemplo, el concentrado puede comprender biosurfactante a una concentración de 500 mg/l a 7000 mg/l, 800 mg/l a 7000 mg/l u 850 mg/l a 6000 mg/l. En algunas modalidades, la composición está en forma diluida y comprende biosurfactante en el rango de 2 mg/l a 850 mg/l, especialmente 2 mg/l a 800 mg/l o 2 mg/l a 500 mg/l. En algunas modalidades, la composición comprende biosurfactante en una cantidad de aproximadamente 50 mg/l a 4000 mg/l, 50 mg/l a 2000 mg/l, 100 mg/l a 2000 mg/l, 400 mg/l a 2000 mg/l o aproximadamente 750 mg/l a 1500 mg/l.
La composición comprende un portador acuoso, por ejemplo, agua, amortiguador o caldo de cultivo. En algunas modalidades, la composición acuosa es amortiguada a un pH desde 3 y 8. Por ejemplo, el amortiguador de ácido cítrico puede ser usado para mantener un pH de 3 a 6 o un amortiguador de fosfato, tal como fosfato monosódico, fosfato monopotásico, fosfato disódico o fosfato dipotásico, pueden ser usados para mantener un pH desde 4.8 a 8. En algunas modalidades, la composición tiene un pH desde 3 a 6. En otras modalidades, la composición tiene un pH de 6 a 8.
En algunas modalidades, la composición comprende además al menos un surfactante. El surfactante puede ser aniónico, catiónico, no iónico o zwitteriónico. En algunas modalidades, el surfactante tiene un Balance hidrofílico lipofílico (HLB) de 12 o mayor, especialmente en el rango de 12 a 14. Los surfactantes adecuados incluyen aquellos referidos en McCutcheons’s Emulsifiers & Detergents (Emulsificantes y detergentes de McCutchen), Edición internacional, 1998 y ediciones subsecuentes, por ejemplo, aquéllos referidos en las páginas 223 a 231 del índice HLB de la Edición de 198. Surfactantes no iónicos ejemplares incluyen alquil y polialquil ésteres de óxido de (poli)etileno, alquil y polialquil éteres de óxido de (poli)etileno, alquil y polialquil ésteres de sorbitán opcionalmente polietoxilado, alquil y polialquil éteres de sorbitán opcionalmente polietoxilado, alquil y polialquil glicósidos o poliglicósidos, en particular alquil y polialquil glucósidos o poliglucósidos, alquil y polialquil ésteres de sacarosa, alquil y polialquil ésteres de glicerol opcionalmente polietoxilados, alquil y polialquil éteres de glicerol opcionalmente polietoxilados, y mezclas de los mismos. Surfactantes aniónicos ejemplares incluyen alquil éter sulfatos, carboxilatos, derivados de aminoácidos, sulfonatos, tales como alquilo lineal benceno sulfonatos, o ácidos sulfónicos, isetionatos, tauratos, sulfosuccinatos, alqulsulfoacetatos, poli péptidos , sales metálicas de C10-C30, notablemente ácidos grasos de C12-C20, en particular estearatos de metales, y mezclas de los mismos. En una modalidad particular, el surfactante es un alquilo lineal benceno sulfonato o ácido sulfónico, especialmente ácido dodecilbencenosulfónico.
Alquil y polialquil ésteres de óxido de (poli)etileno adecuados incluyen aquéllos teniendo un número de unidades de óx9ido de etileno (EO) variando desde 2 hasta 200, por ejemplo, estearato 40 EO, estearato 50 EO, estearato 100 EO, laurato 20 EO, laurato 40 EO, diestearato 150 EO. Alquil y polialquil eteres de óxido de (poli)etileno adecuados incluyen aquéllos teniendo un número de unidades de óxido de etileno (EO) variando desde 2 hasta 200, por ejemplo, cetil éter 23 EO, oleil éter 50 EO, fitosterol 30 EO, estearet 50, estearet 100, behenet 100. Alquil y polialquil ésteres de sorbitán adecuados opcionalmente polietoxilados incluyen aquéllos teniendo un número de unidades de óxido de etileno (EO) variando desde 0 hasta 100, por ejemplo, laurato de sorbitán 4 o 20 EO, en particular polisorbato 20 (o monolaurato de sorbitán de polioxietileno (20)), tal como el producto Tween 20 comercializado por la compañía Uniqema, palmitato de sorbitán 20 EO, estearato de sorbitán 20 EO, oleato de sorbitán 20 EO o Cremophor (RH 40, RH 60, etc.) de BASF. Alquil y polialquil éteres de sorbitán adecuados, opcionalmente polietoxilados, incluyen aquéllos teniendo un número de unidades de óxido de etileno (EO) variando desde 0 hasta 100. Alquil y polialquil glucósidos o poliglucósidos adecuados, incluyendo aquéllos conteniendo un grupo alquilo teniendo desde 6 hasta 30 átomos de carbono y especialmente desde 6 hasta 18, o incluso desde 8 hasta 16 átomos de carbono, y conteniendo un grupo glucósido, especialmente conteniendo desde 1 hasta 5, notablemente 1 , 2 o 3 unidades de glucósido. Los alquilpoliglucósidos pueden ser seleccionados, por ejemplo, de decilglucósido (alquil-Cg/Cn-poliglucósido (1.4)), tal como el producto comercializado bajo el nombre Mydol 10® por la compañía Kao Chemicals o el producto comercializado bajo el nombre Plantacare 2000 UP® por la compañía Henkel y el producto comercializado bajo el nombre ORAMIX NS 10® por la compañía SEPPIC; capril il/capril glucósido, tal como el producto comercializado bajo el nombre Plantacare KE 3711® por la compañía Cognis u ORAMIX CG 110® por la compañía SEPPIC; laurilglucósido, tal como el producto comercializado bajo el nombre Plantacare 1200 UP® por la compañía Henkel o Plantaren 1200 N® por la compañía Henkel; cocoglucósído, tal como el producto comercializado bajo el nombre Plantacare 818 UP® por la compañía Henkel; ca pri I i íg I ucósido, tal como el producto comercializado bajo el nombre Plantacare 810 UP® por la compañía Cognis; y mezclas de los mismos. Los alquil y polialquil esteres de sacarosa adecuados incluyen, por ejemplo, Crodseta F 150, monolaurato de sacarosa comercializado bajo el nombre Crodesta SL 40 y los productos comercializados por Ryoto Sugar Ester, por ejemplo, palmitato de sacarosa comercializado bajo la referencia Ryoto Sugar Ester P 1670, Ryoto Sugar Ester LWA 1695, y Tyoto Sugar Ester 01570. Los alquil y polialquil ésteres adecuados de glicerol opcionalmente polietoxilados, incluyen aquéllos teniendo un número de unidades de óxido de etileno (EO) variando desde 0 hasta 100 y un número de unidades de glicerol variando desde 1 hasta 30, por ejemplo, monolaurato de hexaglicerilo y estearato de glicerilo de PEG-30. Los alquil y polialquil éteres de glicerol adecuados opcionalmente polietoxilados, incluyen aquéllos teniendo un número de unidades de óxido de etileno (EO) variando desde 0 hasta 100 y un número de unidades de glicerol variando desde 1 hasta 30. Ejemplos incluyen Nikkol Batyl alcohol 100, Nikkol Chimyl alcohol 100. Alquil eter sulfatos adecuados incluyen, por ejemplo, lauril éter sulfato de sodio (C 12-14 70-30) (2.2 EO) comercializado bajo los nombres SIPON AOS225 o TEXAPON N702 por la compañía Henkel, lauril éter sulfato de amonio (C12-14 70-30) (3 EO) comercializado bajo el nombre SIPON LEA 370 por la compañía Henkel, alquil (C12-C14) éter (9 EO) sulfato de amonilo comercializado bajo el nombre RHODAPEX AB/20 por la compañía Rhodia Chimie, y la mezcla de lauril y oleil éter sulfato de sodio y de magnesio comercializada bajo el nombre EMPICOL BSD 52 por la compañía Albright & Wilson.
El surfactante puede estar presente en una cantidad para ayudar con la humectación de lecho avícola cuando la composición es aplicada. Las cantidades adecuadas incluyen 0.01 a 10% p/p, especialmente 0.1 % a 5% p/p, más especialmente 0.1 a 1 % p/p de la composición.
En algunas modalidades, la composición comprende además un ácido orgánico. En algunas modalidades, el ácido orgánico es seleccionado de ácido cítrico, ácido acético, ácido láctico, ácido tartárico, ácido ascórbico y similares, especialmente ácido cítrico. El ácido orgánico es incluido para ajustar el pH entre 3 y 6 y puede ayudar a neutralizar amoníaco libre en el lecho avícola, el cual está presente cuando la composición es aplicada al lecho o que es producido después de la aplicación de la composición al lecho avícola.
Otros componentes opcionales de la composición incluyen fragancias, tal como extracto de aceite cítrico y similares. Tales fragancias pueden ser sintéticas o naturales, pero de preferencia naturales; y tintes, los cuales pueden ser útiles para identificar el lecho avícola tratado. Tintes adecuados incluyen tintes de grado alimenticio, tales como FD&C verde #5, FD&C Verde #3,FD&C Azul #1 ,FD&C Azul #2, FD&C Rojo #40, FD&C Rojo #3, FD&C Amarillo #5, FC&D #6, Verde S, Amarillo qumolina, Carmoisina, Ponceau 4R, Patent Blue V, anato, clorofilina, cochinilla, betanina, azafrán, tumerico, licopeno, jugo de saúco, pandan y guisante mariposa.
La composición de la invención puede ser preparada en un cultivo microbiano. El microorganismo del género Bacillus puede ser producido mediante téenicas de cultivo estándares. Por ejemplo, un biorreactor es cargado con sales de agua desmineralizada y nutrientes y mezclado. El medio de cultivo es inoculado entonces con un cultivo del microorganismo deseado. La biomasa es entonces aireada, agitada e incubada a una temperatura adecuada, por ejemplo, 35°C, hasta que el crecimiento microbiano deseado es obtenido. El crecimiento microbiano deseado puede ser determinado mediante densidad óptica a 600 nm (OD6oonm)· En modalidades particulares, el cultivo es continuado hasta que la densidad óptica alcanza OD6oonm > 1 -5 a 2.5, especialmente 1.7 a 2.0.
Un proceso ejemplar incluye cargar un biorreactor con agua desmineralizada, fosfato monopotásico, fosfato disódico, nitrato de amonio, extracto de levadura, sulfato de magnesio, cloruro de calcio, sulfato ferroso, sulfato de manganeso, ácido etilen diamino tetraacético de sodio (EDTA) y glucosa. Después del mezclado, el medio de cultivo es inoculado con un Bacillus sp. apropiado. El cultivo es entonces aireado y agitado a 300 rpm durante aproximadamente 12 horas a 35°C. El proceso de cultivo fue completado cuando la densidad celular alcanzó 1 x 1014 (cfu) por mi u OD60onm entre 1.7 y 2.0.
Aunque en algunas modalidades, la composición puede comprender el medio de cultivo conteniendo microorganismo y biosurfactante en cantidades suficientes producidas directamente del proceso de cultivo. En otras modalidades, el biosurfactante es adicionado al medio de cultivo o una composición comprendiendo el microorganismo en estado vegetativo o endospora.
En algunas modalidades, el proceso de cultivo puede ser realizado usando microorganismos Bacillus que no producen cantidades suficientes de biosurfactante para uso en la invención. En algunas modalidades, el proceso de cultivo incluye el paso de remoción continua de biosurfactante mediante destilación de espuma, alentando por ello al microorganismo a producir mayores cantidades de biosurfactante al suprimir el biosurfactante conforme es producido. Todavía en otras modalidades, el microorganismo del genero Bacillus es aislado, por ejemplo, en forma de endospora, y no está en medio de cultivo y por lo tanto, no contiene biosurfactante. En estas modalidades, una cantidad deseada de biosurfactante puede ser adicionada al microorganismo para formar una composición de la invención.
El biosurfactante puede ser producido como se describe antes o mediante otros métodos conocidos en la téenica. La producción de biosurfactantes, tal como surfactina, se describe en la literatura, por ejemplo, en US 3,687,926, JP-A-6-121668, US 3.030,789, US 7,011 ,969, We¡ et al. Enz. Microbiol. Technol. 1989, 22:724-728, Sheppard et a 11 , Appl. Microbiol. Biotechnol., 1989, 27:486-489, Milligan et al., Appl. Microbiol. Biotechnol., (1989), 31 :486-489, Kim et al., J. Ferment. Bioeng., 1997, 84:41-46 y Cooper et al., Appl. Environ, Microbiol., 1981 , 42:408-412.
En modalidades particulares, el microorganismo del género Bacillus en la composición es un microbio productor de biosurfactante.
El biosurfactante puede ser producido por un microbio productor de biosurfactante. Sin embargo, en modalidades particulares, el al menos un microbio productor de biosurfactante es del género Bacillus , por ejemplo, puede ser seleccionado de Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus pumilus, Bacillus popilliae, Bacillus circulans y mezclas de los mismos. En algunas modalidades, un microbio productor de biosurfactante está presente en el medio de cultivo líquido. En otras modalidades, dos microbios productores de biosurfactante están presentes en el medio de cultivo líquido. Todavía en otra modalidad, tres microbios productores de biosurfactante están presentes en el medio de cultivo líquido. Todavía en otras modalidades, cuatro microbios productores de biosurfactantes están presentes en el medio de cultivo líquido. En algunas modalidades, el al menos un microbio productor de biosurfactante es una mezcla de cinco microbios productores de biosurfactante. El al menos un microbio productor de biosurfactante puede ser una cepa de microbio conocida por producir biosurfactantes en rendimientos mejorados. Por ejemplo, muchas especies de Bacillus producen biosurfactantes, sin embargo, Bacillus subtilis y Bacillus licheniformis son conocidos por producir cantidades significativas de biosurfactantes. Adicionalmente, las cepas específicas de Bacillus subtilis son conocidas por producir rendimientos mejorados de biosurfactantes, tales como B. subtilis ATCC 21331 , B. subtilis ATCC 21332, B. subtilis SD901 (FERM BP.7666). Muchas cepas de microbios productores de biosurfactante están comercial o públicamente disponibles. En modalidades particulares, el al menos un microbio productor de biosurfactante es seleccionado de B. subtilis NRRL B-3383 o B. subtilis ATCC 21331 los cuales ambos están públicamente disponibles. En otras modalidades, el microorganismo producto de biosurfactante es B. subtilis RSA-203, una nueva cepa de B. subtilis encontrada por producir rendimientos significativos del biosurfactante, surfactina.
En algunas modalidades, el amenos un microbio productor de biosurfactante es una mezcla de B. subtilis y B. licheniformis. En otras modalidades, el al menos un microbio productor de biosurfactante es una mezcla de B. subtilis, B. licheniformis, B. amyloliquefaciens, B. pumilus y Bacillus popilliae. En estas modalidades, la proporción de cada microbio puede ser ajustada para determinar la cantidad de diferentes biosurfactantes producidos. En algunas modalidades, el B. subtilis está presente en una mezcla de microbios productores de biosurfactantes en aproximadamente 50-98% de la mezcla, especialmente 60-95%, 70-95%, 80-95%, más especialmente aproximadamente 90%.
En algunas modalidades, la fuente de carbono usada en el medio de cultivo líquido es un azúcar o carbohidrato. Ejemplos de fuentes de carbono adecuadas incluyen glucosa, glicerina, almidón, sacarosa, melaza y vinaza o mezclas de los mismos. En algunas modalidades, la fuente de carbono comprende glucosa. En otras modalidades, la fuente de carbono comprende vinaza.
En algunas modalidades, la cantidad de fuente de carbono, tal como glucosa, melaza y/o vinaza, en el medio de cultivo es desde 3-20% p/v, especialmente 3-15% p/v, más especialmente 3-12% p/v o 3-10% p/v, muy especialmente aproximadamente 10% p/v. En algunas modalidades, la cantidad de fuente de carbono es variada para obtener una concentración deseada de biosurfactante en el caldo de cultivo.
El biosurfactante producido es de preferencia un biosurfactante de lipopoeptido cíclico, tal como surfactina, liquenisina, iturina, fengicina y mezclas de las mismas. Cada uno de estos biosurfactantes puede contener mezclas de compuestos variando en la longitud de cadena de la porción de ácido graso del lipopéptido. La modulación de condiciones decrecimiento y nutrientes permite la producción de biosurfactantes con proporciones variantes de longitudes de cadena de ácido graso de lípido.
En algunas modalidades, el biosurfactante producido es seleccionado de surfactina y liquenisina y mezclas de las mismas. En otras modalidades, el biosurfactante producido es surfactina.
La temperatura del proceso de cultivo es 25°C a 40°C, especialmente 30°C a 40°C, más especialmente aproximadamente 30°C a 35°C, por ejemplo, 32C° a 35°C. La temperatura usada puede depender de la identidad del microbio productor de biosurfactante. Una persona experta en la téenica podría determinar la temperatura apropiada para una población bacteriana dada mediante métodos de ensayo de rutina.
El pH del medio de cultivo es mantenido entre 4 y 8, especialmente 6 y 8, o 6 y 7.5, más especialmente 6.3 a 7.2, por ejemplo, 6.3 a 6.7.
El ínóculo de al menos un microbio productor de biosurfactante es adicionado al medio de cultivo en una cantidad para alcanzar una OD6oonm inicial igual a 0.1 a 0.15. En algunas modalidades, el inóculo es un cultivo teniendo una OD60onm de 1.3 a 2.5. En algunas modalidades, el inóculo es un cultivo en fase de crecimiento medio logarítmica con una OD6oonm de 1.3 a 1.6 y se adiciona al nuevo cultivo en una cantidad para alcanzar una OD60onm de 0.1 a 0.15. La cantidad requerida puede ser calculada fácilmente, por ejemplo, inóculos con OD6oonm de 1.5 será adicionada en proporción de 10% v/v para obtener un nuevo medio de cultivo con una OD60onm de 0.15.
En algunas modalidades, el medio de cultivo líquido comprende además una fuente de nitrógeno catabolizable. En algunas modalidades, la fuente de nitrógeno catabolizable es seleccionada de un a sal inorgánica conteniendo nitrógeno o compuesto orgánico conteniendo nitrógeno, por ejemplo, sales de amonio, sales de nitrato, urea, peptona, extracto de carne, extracto de levadura, torta de soya, licor de maceración líquida de maíz, peptona o harina derivada de legumbres, tales como soya, frijol de adzuki, chícharo, haba, garbanzo, lenteja y alubia o extractos de tal harina o mezclas de los mismos. En modalidades particulares, la fuente de nitrógeno catabolizable es una sal inorgánica, tal como una sal de amonio o sal de nitrato, especialmente nitrato de amonio, cloruro de amonio, acetato de amonio, carbonato de amonio, bicarbonato de amonio, nitrato de potasio, nitrato de sodio, nitrato de magnesio, y nitrato de calcio o mezclas de los mismos. En modalidades particulares, la fuente de nitrógeno catabolizable es nitrato de amonio, nitrato de sodio, cloruro de amonio o mezclas de los mismos, por ejemplo, nitrato de sodio, nitrato de amonio o una mezcla de los mismos.
La cantidad de fuente de nitrógeno catabolizable presente en el medio de cultivo liquido dependerá de la naturaleza de la fuente y la disponibilidad del nitrógeno dentro de la fuente. Por ejemplo, la fuente de nitrógeno puede estar presente en una cantidad de 1 a 20 g/l. Cuando la fuente de nitrógeno es una fuente de nitrógeno inorgánica, puede estar presente en una cantidad de 1 a 10 g/l, especialmente 2 a 7 g/l, más especialmente 3.5 a 4.5 g/l.
En algunas modalidades, el medio de cultivo líquido comprende además al menos una sal inorgánica, tales como sulfatos, fosfatos, cloruros, especialmente de metales, tales como manganeso, hierro, sodio, potasio, magnesio y calcio. En algunas modalidades, las sales inorgánicas son seleccionadas de sulfatos y fosfatos de iones, tales como manganeso, magnesio, sodio, potasio y hierro o mezclas de tales sales. En una modalidad particular, la al menos una sal inorgánica es seleccionada de sulfato de manganeso, fosfato de sodio, cloruro de calcio, sulfato de magnesio, sulfato ferroso y mezclas de los mismos, especialmente fosfato de sodio, sulfato de magnesio, sulfato ferroso y mezclas de los mismos, especialmente fosfato de sodio, sulfato de manganeso y sulfato ferroso o mezclas de los mismos.
Las sales inorgánicas varían en una cantidad dependiendo de las sales usadas. Si una fuente de fosfato está presente, puede estar presente en una cantidad de aproximadamente 1 a 10 g/l, especialmente 2 a 7 g/l, más especialmente 4 a 7 g/l, muy especialmente 5 a 6 g/l. Donde las sales inorgánicas son adicionadas para proporcionar elementos en trazas, tales como hierro, manganeso y calcio, las cantidades variarán entre 1 mg/l y 5 g/l, por ejemplo, sales de calcio pueden ser adicionadas en una cantidad de 0.5 g/l a 1 g/l, las sales de hierro pueden ser adicionadas en una cantidad de 1 a 10 mg/l, las sales de manganeso pueden ser adicionadas en una cantidad de 0.5 a 1 g/l, las sales de magnesio pueden ser adicionadas en una cantidad de 0.5 g/l a 5 g/l.
En algunas modalidades, el medio de cultivo comprende además un agente quelante. Los agentes quelantes particulares incluyen ácidos amino carboxílicos y sales de los mismos, tales como ácido etilen diamino tetraacetico (EDTA), ácido dietilentriamino pentaacético, ácido hidroxietilendiamino triacético, ácido 1 ,2-diamino-ciclohexano tetraacético, ácido etilenglicol-bis([beta]-aminoetil éter)-N,N,N’,N’-tetraacético (EGTA), ácido dietilentriamino-pentaacético (DPTA), ácido trietilentetramino hexaacético (TTG), ácido aminodiacético y ácido hidroxietil aminodiacético. Agentes quelantes particulares son sales y sales mezcladas de EDTA, tales como sales dipotásicas, de amonio, calcio, disódicas, trisódicas y tetrasódicas, muy preferiblemente sales disódicas o tetrasódicas de EDTA, especialmente EDTA disódico. El agente quelante está presente en una cantidad de entre 0.1 y 5 mg/l, especialmente 0.5 a 3 mg/l, más especialmente 1 a 2.5 mg/l de medio de cultivo.
El metodo de cultivo puede ocurrir en una pequeña escala en matraces de laboratorio en un incubador o pueden ocurrir en mayor escala, tal como una escala industrial en un biorreactor. El método es conducido bajo condiciones aeróbicas.
La duración del proceso de cultivo dependerá de las condiciones de cultivo. En algunas modalidades, el proceso de cultivo tiene una duración de 8 a 120 horas, especialmente 8 a 72 horas, 8 a 48 horas u 8 a 24 horas, por ejemplo, 10 a 14 horas. La duración del proceso de cultivo es dependiente de alcanzar una densidad celular mayor que ODeoonm de 1.3 para producción de surfactina.
En algunas modalidades, el proceso comprende además aireación del medio de cultivo para proporcionar oxígeno disuelto. Normalmente, esto involucra burbujear aire a través del medio de cultivo a una velocidad de entre 1 l/minuto a 3 l/minuto, especialmente aproximadamente 1.5 l/minuto. La velocidad de aireación puede ser determinada fácilmente por una persona experta en la téenica. La aireación puede ocurrir a partir del Inicio del proceso de cultivo o puede comenzar después de que el proceso de cultivo ha comenzado, especialmente desde el inicio del proceso de cultivo. En modalidades particulares, la aireación mantiene una concentración de oxígeno disuelto de aproximadamente 20 a 40%, especialmente 25 a 35%. En algunas modalidades, la concentración de oxígeno disuelto es mantenida a aproximadamente 30%.
Una vez que la producción de biosurfactante ha comenzado, el medio de cultivo puede espumar debido a la presencia de biosurfactante. En algunas modalidades, la producción de espuma puede ser controlada al atomizar el espumado con una mezcla de alcohol, tal como etanol y solvente, tal como cloruro de dimetileno o acetona. En algunas modalidades, el biorreactor en el cual la fermentación es hecha es a prueba de explosiones. En algunas modalidades, el equipo de recolección de espuma es a prueba de explosiones. El grado de presión para el cual el equipo debe soportar es determinado por la presión de bomba y velocidad de flujo en la columna de espuma.
En algunas modalidades, la producción de espumado es alentada y el espumado es recolectado del recipiente de cultivo. El espumado comprende el biosurfactante producido. La espuma puede ser recolectada vía una válvula rotatoria en hacia un tanque con un ligero vacío o un tanque con una columna de atomización para romper la espuma. El biosurfactante puede ser aislado del espumado recolectado. En algunas modalidades, el biosurfactante es aislado mediante acidificación, seguido por extracción líquido/líquido y entonces evaporación de los líquidos.
En otras modalidades, el biosurfactante es aislado del medio de cultivo despues de que el proceso de cultivo se completa. Por ejemplo, el medio de cultivo crudo puede ser centrifugado para remover la biomasa. El sobrenadante es entonces acidificado a pH ácido, por ejemplo, pH 2 con ácido, tal como HCI. El pH ácido resulta en la precipitación del biosurfactante, el sobrenadante acidificado puede ser puesto a 4°C durante un periodo para asegurar que la precipitación está completa. El precipitado es recolectado entonces, por ejemplo, mediante centrifugación o filtración y es resuspendido en agua. El pH de la suspensión es ajustado a pH alcalino, tal como pH 8 para solubilizar el precipitado. La solución acuosa resultante puede ser extraída con un solvente orgánico, tal como diclorometano, acetato de etilo, cloroformo, especialmente diclorometano, y la fase orgánica evaporada para dar el biosurfactante en forma cristalina de alta pureza. En algunas modalidades, el biosurfactante puede ser recolectado mediante destilación de espuma durante el cultivo o después de que se completa el cultivo. El biosurfactante recolectado o aislado puede ser adicionado a otros cultivos o composiciones comprendiendo microorganismos del género Bacillus, especialmente donde el microorganismo está en forma de endospora. Esto permite que la composición de la invención tenga una mayor concentración de biosurfactante que lo que podría ser obtenido normalmente de o tolerado por el microorganismo.
La composición de la invención puede ser preparada al adicionar biosurfactante a una composición comprendiendo el microorganismo para proporcionar biosurfactante en una cantidad entre 2 mg/l a 7000 mg/l. En algunas modalidades, el microorganismo está en medio de cultivo. En otras modalidades, el microorganismo está en agua, especialmente agua deionizada. En algunas modalidades, el microorganismo está en caldo de cultivo y es diluido con agua, especialmente agua deionizada.
En algunas modalidades, donde el microorganismo producto de biosurfactante es un microorganismo del género Bacillus, el cultivo del microorganismo para uso en la composición también produce el biosurfactante. Por lo tanto, al menos un biosurfactante en el microorganismo y composición puede ser producido en un solo paso. En esta modalidad, la composición puede comprender medio de cultivo y biosurfactante. En esta modalidad, si el biosurfactante incrementado es requerido, puede adicionarse más biosurfactante.
En algunas modalidades, al menos alguno de los microorganismos del género Bacillus en la composición está en forma de espora. En este momento, el surfactante como se describe antes también puede ser adicionado.
En algunas modalidades, el caldo de cultivo a partir de producción concurrente de microorganismo del género Bacillus y biosurfactante es diluido y las endosporas se forman mediante adición del caldo de cultivo a una mezcla de agua, ajustador de pH tal como hidróxido de sodio, fosfato monopotásico o ácido cítrico, y surfactante.
En algunas modalidades, después de la formación de endosporas, se agrega biosurfactante adicional a la composición, por ejemplo, en cantidades de 100 a 1000 mg/l, especialmente aproximadamente 40 a 750 mg/l.
La composición de la invención comprende el microorganismo en cualquier cantidad adecuada, sin embrago, en algunas modalidades, el microorganismo está presente en una cantidad de aproximadamente 1 x 104 cfu/ml a 1 x 1013 cfu/ml.
En otro aspecto de la invención, se proporciona un microbio Bacillus subtilis RSA-203.
La invención será descrita ahora con referencia a los siguientes ejemplos, los cuales ilustran algunos aspectos preferidos de la invención. Sin embargo, se entenderá que la particularidad de la siguiente descripción de la invención no reemplazará la generalidad de la descripción precedente.
Breve descripción de la figura La Figura 1 es una representación gráfica que muestra el crecimiento de microorganismos con el tiempo con cantidades variantes de iones sulfato.
Ejemplos Ejemplo 1 : Producción de biosurfactante de surfactina La cepa Bacillus subtilis NRRL B-3383 (originalmente obtenida del United States Department o fAGriculture) de cultivo bacteriano fue transferida a un volumen de 2% en volumen de inóculo en matraces de agitación de 4 I conteniendo 2.5 I de caldo MMS basado en 10% de vinaza. El caldo MMS basado en vinaza contiene: Los matraces fueron colocados en agitadores orbitales (SKC 6100, Jeio Tech) a 150 rpm mientras que se incuba a 30°C (MCO-801 C Incubator, Sanyo). Despues de 72 horas, los matraces fueron removidos del incubador y la biomasa se removió del caldo de cultivo crudo mediante centrifugación a 8,500 rpm durante 20 min a 4°C (Sorvall Evolution RC).
El pH del sobrenadante resultante fue llevado a un pH de 2.0 usando HCI, lo cual resultó en precipitación de surfactina y el sobrenadante se almacenó durante la noche a 4°C para asegurar la precipitación completa. El precipitado fue recolectado mediante centrifugación a 5,00 rpm durante 20 minutos a 4°C. Aproximadamente 2.5 g/l de material crudo fue recolectado en la pella. La pella fue suspendida en agua deionizada y el pH se ajustó a 8.0 usando NaOH 1 M. La solución acosa fue extraída con un volumen igual de diclorometano. La capa de diclorometano fue separada y se permitió que se evaporara para proporcionar surfactina cristalina purificada en una cantidad de 50 mg/l a 750 mg/l.
Las muestras de surfactina cristalina fueron examinadas por pureza contra una composición estándar de surfactina pura (Sigma Aldrich, 98% pura). El análisis de la composición estándar por LC-MS mostró picos con tiempos de retención a 1.03, 1.23, 1.61 , 1.74, 2.15 y 2.93 minutos. La pureza fue calculada con base en el área pico.
Cuatro muestras probadas por pureza usando el metodo anterior fueron encontradas como 80%, 56%, 58% y 61 % puras.
Ejemplo 2: Producción de mezclas de surfactina y liquenisina Se usaron Bacillus subtilis y Bacillus licheniformis para inocular matraces de agitación de 4 I conteniendo caldo MMS basado en 10% de melaza. El caldo MMS basado en melaza contiene: Los matraces fueron colocados en agitadores orbitales (SKC 6100, Jeio Tech) a 150 rpm mientras se incubaban a 30°C (MCO-801 C Incubator, Sanyo). Después de 72 horas, los matraces fueron removidos del incubador y la biomasa se removió del caldo de cultivo mediante centrifugación a 8,500 rpm durante 20 min a 4°C (Sorvall Evolution RC).
Ejemplo 3: En un biorreactor de 1 litro, se preparó una solución amortiguadora conteniendo 800 mi de agua desmineralizada, fosfato monopotáslco (20.4 g), fosfato disódico (28.4 g) y extracto de levadura (5 g). El amortiguador fue mezclado y el pH ajustado a 7. Entonces el amortiguador fue sometido a autoclave. En un biorreactor de 1 I, se mezclaron 200 mi de la solución amortiguadora con sulfato de magnesio (2 mi de 12 g/100 mi de solución), cloruro de calcio (1 mi, 0.1 M), heptahidrato de sulfato ferroso (1 mi, 15.7 g/100 mi de solución), monohidrato de sulfato de manganeso (1 mi, 3.8 g/100 mi de solución), EDTA de sodio (1 mi, 0.18 g/100 mi de solución) y glucosa (20 mi, 20 g/80 g de agua deionizada) y nitrato de amonio (10 mi, 82 g/200 mi de solución), las esporas de especie Bacillus fueron inoculadas en el biorreactor a 2% en peso. La biomasa fue agitada a 300 rpm durante 12 horas a 35°C. El Bacillus fue inoculado hasta que la densidad celular fue 1 x 1014 por mi y la ODeoonm fue 2.2.
Ejemplo 4: Coproducción de especie Bacillus y biosurfactante 2200 Ib (998 kg) de agua desmineralizada se adicionaron a un reactor de acero inoxidable de 560 galones (2200 I) y se calentaron a 35°C. 8.7 Ib (3.95 kg) de fosfato monopotásico y 13.3 Ib (6 kg) de fosfato disódico se adicionaron y la composición se mezcló. El sulfato de magnesio (240 g), cloruro de calcio 833 g), EDTA (2.2 g) disuelto en 100 mi de agua, sulfato ferroso (104 g), sulfato de manganeso (41.7 g), monohidrato de dextrosa (10.7 Ib, 4.85 kg), extracto de levadura sometido a autoclave (.14 Ib, 0.97 kg), cloruro de amonio &.1 Ib, 2.77 kg) y nitrato de sodio (9.6 Ib, 4.35 kg) se adicionaron y la mezcla se continuó a una temperatura de 35°C. Se adicionaron 23 I de inóculo de Bacillus teniendo una OD6oonm) de 2.2 y una tensión superficial mayor que 50 dinas/cm. La mezcla fue mezclada y mantenida a 35°C y aireada a un nivel de oxígeno disuelto de 50% con aire filtrado. El cultivo fue detenido cuando el medio de cultivo alcanzó una densidad óptica de 1.7 a 2.0 unidades de absorbencia.
Ejemplo 5: Composición Una composición para uso en los metodos de la invención fue preparada entonces mediante dilución adicional del medio de cultivo producido en el Ejemplo 4. En un reactor de dilución de acero inoxidable de 1000 galones, se adicionaron 2200 Ib (998 kg) de agua desmineralizada y fosfato monosódico (5 Ib, 2.27 kg) se adicionó con agitación. El hidróxido de sodio (5-60 Ib, 2.27-27.2 kg) y < 1 % en peso de ácido dodecilbencenosulfónico no iónico fue adicionado. El pH fue ajustado a 6-8 con hidróxido de sodio. Las bacterias cultivadas y medio fueron adicionados entonces y la composición fue mezclada. La tensión superficial fue verificada y se adicionó condensado de espuma de surfactina concentrado adicional para proporcionar una tensión superficial de 27-35 dinas/cm.
Ejemplo 6: Composición El método del Ejemplo 5 se repitió con la excepción de que el pH se ajustó a 3.5 a 5 con ácido cítrico.
Ejemplo 7: Producción de amoníaco en lecho de pollos El lecho de pollos conteniendo heces de pollo se dividió en dos cajas de yarda cúbica (0.7646 m3) en cantidades iguales. Una caja fue monitoreada por la producción de amoníaco sin tratamiento adicional (control). La otra caja fue tratada al atomizar el lecho de pollo con una composición comprendiendo microbios de la especie Bacillus incluyendo B. subtilis, residuo de vinaza y surfactina. La composición fue derivada de proceso de cultivo y diluida a 5-25% por litro con agua y el lecho fue tratado a una razón de 1 I por 100 metros cuadrados.
Resultados: La caja de control tuvo una concentración de amoníaco de 20 ppm. La caja tratada tuvo una concentración de amoníaco de 8 ppm.
Ejemplos 8: Producción de amoníaco en graneros avícolas Se usaron cuatro graneros avícolas (pollos de engorda), teniendo cada uno un área de 22,000 pies cuadrados (2044 m2) y alojando 22,300 aves. En las cuatro casas, el lecho avícola fue tratado 5 días antes de la colocación de polluelos en el granero.
El granero Uno fue tratado con la composición del Ejemplo 4. 12.5 (47.3 I) galones de la composición del Ejemplo 5 se mezclaron con 185 galones (700 I) de agua y entonces se mezclaron y atomizaron sobre el lecho de aves comprendiendo aserrín y compota a la mitad del granero. Este proceso fue repetido con otros 12.5 galones (47.3 I) de composición en 185 galones (700 I) de agua para tratar la otra mitad del granero.
El Granero Dos fue tratado con la composición del Ejemplo 5. 12.5 galones (47.3 I) de la composición del Ejemplo 5 se mezclaron con 185 galones (700 I) de agua, entonces se mezclaron y atomizaron sobre el lecho avícola en la mitad del granero. Este proceso se repitió con otros 12.5 galones (47.3 I) de composición en 185 galones (700 I) de agua para tratar la otra mitad del granero.
Los Graneros Tres y Cuatro fueron tratados con bisulfato de aluminio, una substancia de ajuste de pH. En cada granero, 1650 libras (748 kg) de bisulfato de aluminio se mezclaron en 500 galones (1893 I) de agua y se atomizaron sobre el lecho avícola.
En cada granero, el tratamiento acuoso fue aplicado mediante un atomizador de 6 boquillas motorizado equipado con y alimentado desde un tanque de 200 galones (757 I), montado sobre un vehículo de cuatro ruedas. Despues de la aplicación, el lecho avícola fue hilerado por tractor.
Después del tratamiento, se tomaron tres muestras de lecho a partir de cada uno de los Graneros y se analizaron por gas amoníaco.
Los polluelos fueron colocados en los graneros y se tomaron muestras de aire en los días 1 , 5, 16, 21 y 39 y se analizaron por concentraciones de amoníaco usando tubos Drager (Drager Safety Inc., Pittsburgh, PA, EE.UU.)· Los resultados son mostrados en la Tabla 1.
Tabla 1 Ventiladores plenos indica que la ventilación mecánica del granero fue requerida para controlar las concentraciones de amoníaco.
Las aves de corral en los cuatro graneros fueron valoradas por salud, morbidez y peso. Las aves de corral en los cuatro graneros estuvieron en buena salud.
Las patas de las aves fueron analizadas por clasificación de patas; las patas saludables se clasificaron como 1 , a patas infectadas y ampolladas calificadas como 4. En los Graneros Uno y Dos la clasificación de patas fue 1. No hubo aves que tuvieran ampollas en sus patas.
Los niveles de morbidez en los Graneros Uno y Dos fue reducida por un promedio de 133 aves en comparación con los Graneros Tres y Cuatro.
Los pesos de las aves aumentaron en los Graneros Uno y Tos por 15 a 20 puntos en comparación con los Graneros Tres y Cuatro. Esto equivale a un total de 11 ,000 Ib (4989.6 kg) de peso adicional en 35 días en los Graneros Uno y Dos.
Ejemplo 9: En el día 21 del ensayo de granja avícola del Ejemplo 8, se tomó una muestra de lecho avícola y el lecho fue analizado al platinar en placas de agar. Las placas fueron incubadas y entonces manchadas mediante manchado Gram. Solo estuvieron presentes especies Gram positivas.
Ejemplo 10: Control de patógenos de salmonella El estiercol avícola fue esterilizado mediante autoclave a una temperatura mínima de 121 °C durante 35 minutos, para asegurar que las muestras no incluían bacterias competitivas. Después de la esterilización, el estiércol de pollo fue inoculado con Salmonella entérica y se permitió incubar durante 24 horas. Después de la incubación, las muestras no de control de estiércol de pollo fueron tratadas con una composición del Ejemplo 6 al atomizar aproximadamente 100 ml de composición sobre el estiércol de pollo (25 g). Las muestras de control incluyeron estiércol de pollo esterilizado y estiércol de pollo esterilizado inoculado con Salmonella entérica y se incubaron durante 24 horas, pero estos controles no fueron tratados con la composición del Ejemplo 6.
Las muestras fueron analizadas por crecimiento bacteriano, tanto Salmonella enterica como Bacillus subtilis en el medio de crecimiento (ATT medio 3, agar nutriente). El análisis de los controles fue realizado después de la esterilización (tiempo 0), después de la inoculación e incubación durante 24 horas (tiempo 0) y el análisis de las muestras de prueba se realizó a 3, 6, 24, 48 y 96 horas después de la aplicación de la composición del Ejemplo 6.
Una prueba de Trile Azúcar Hierro (TSI) complementaria se usó para distinguir entre el crecimiento de Bacillus spp. y Salmonella spp. La Salmonella entérica produce sulfuro de hidrógeno que resulta en un color obscuro en esta prueba, mientras que el Bacillus spp. no.
La presencia de Salmonella entérica fue valorada durante un periodo de cuatro días después del periodo de cuatro días, las muestras de prueba fueron re-inoculadas con Salmonella entérica y se incubaron durante 24 horas. Las muestras fueron evaluadas entonces durante un periodo adicional de cuatro días. Las muestras para reinoculación han sido inoculadas inicialmente con Salmonella entérica incubada durante 24 horas, tratada con la composición del Ejemplo 5, incubadas durante 4 días, entonces reinoculadas con Salmonella entérica e incubadas durante 24 horas. Entonces se analizó una muestra en el tiempo cero (control) y después a 3, 6, 24, 48 y 96 horas. Los resultados son mostrados en la Tabla 2.
Tabla 2 No hubo crecimiento de Salmonella enterica patogénica observado en alguna de las muestras de prueba tratadas con la composición del Ejemplo 6 durante 3 horas a 96 horas. Adicionalmente, no hubo crecimiento de Salmonella entérica en las muestras re-inoculadas durante 3 horas a 96 horas.
Esto demuestra que la composición comprendiendo un microorganismo del género Bacillus y biosurfactante es efectiva contra S. entérica encontrada en estiércol avícola. El tratamiento es efectivo dentro de 3 horas y tiene un efecto duradero.
Ejemplo 11 : Control de plagas 25 galones (95 I) de la composición del Ejemplo 6 se adicionaron a 400 galones (1514 I) de agua y se atomizaron en 21 ,000 pies cuadrados (1950.9 m2) de lecho avícola. El lecho avícola fue entonces hilerado. El lecho fue verificado por larvas de escarabajo negro y cualquier larva encontrada fue recolectada y monitoreada. Las larvas de escarabajo negro expiraron dentro de 2 horas de exposición al tratamiento de lecho. No se encontraron larvas de escarabajo negro vivas en el lecho tratado 24 horas despues del tratamiento.
Ejemplo 12: Control de patógeno Campylobacter jejuni El estiércol avícola fue esterilizado al someter a autoclave a una temperatura mínima de 121 °C durante 35 minutos, para asegurar las muestras incluidas sin bacterias competitivas. Después de la esterilización, el estiércol avícola fue inoculado con Campylobacter jejuni. Las muestras no de control de estiércol avícola fueron tratadas con una composición del Ejemplo 6 al atomizar aproximadamente 100 pl de composición sobre el estiércol avícola (25 g). Los controles incluyeron estiércol avícola esterilizado y estiércol avícola esterilizado inoculado con Campylobacter jejuni pero ninguna muestra fue tratada con una composición del Ejemplo 6. Las muestras fueron incubadas a 42°C.
Las muestras fueron analizadas por crecimiento bacteriano en medio de Campylobacter jejuni. Los análisis de los controles fueron realizados después de la esterilización (tiempo 0), después de la inoculación e incubación durante 24 horas (tiempo 0) respectivamente, y el análisis de las muestras de prueba se realizó a 3, 6, 24, 48 y 96 horas después de la composición del Ejemplo 6.
Después del periodo de prueba de 96 horas, las muestras de prueba fueron re-inoculadas con Campylobacter jejuni. Una muestra (control 4) fue valorada en el tiempo 0 para confirmar la viabilidad de las bacterias. Las muestras re-inoculadas fueron entonces incubadas durante 96 horas y valoradas nuevamente. Los resultados son mostrados en la Tabla 3.
Tabla 3 No hubo Campylobacter jejuni patogénico observado en alguna de las muestras de prueba tratadas con una composición del Ejemplo 6 a partir de 3 horas a 96 horas. Adicionalmente, no hubo crecimiento observado en la muestra re-inoculada después de 96 horas de incubación.
Esto demuestra que la composición comprendiendo un microorganismo del género Bacillus y biosurfactante es efectiva contra c. jejuni encontrada en estiércol avícola. El tratamiento fue efectivo dentro de 3 horas y tuvo un efecto duradero.
Ejemplo 13: Control de amoníaco en instalación avícola de puesta de huevos Una instalación de puesta de huevos de cuatro plantas teniendo aves en jaulas y el estiércol cayendo sobre bandas transportadas, fue valorada por concentración de amoníaco. En la instalación, el estiércol de las plantas superiores es entregado por banda transportadora a una puerta de plataforma con forma en v que separa los pisos superior e inferior. Cuando la puerta se abre, el estiércol (16000 Ib (7257.6 kg)) es depositado sobre una hilera de aproximadamente 6 pies (1.828 m) de alto.
La hilera de estiércol fue rociada con una composición del Ejemplo 5 en 4 ubicaciones.
En las ubicaciones 1 y 2, la composición fue aplicada pura. En las ubicaciones 3 y 4, la composición del Ejemplo 5 fue aplicada diluida 1 :16 con agua. No se usaron ventiladores si los niveles de amoníaco permanecieron por abajo de 50 ppm.
Cuando el estiércol fue dejado sin tratar y no se usaron los ventiladores para dispersar el amoníaco producido, los niveles de amoníaco en la instalación alcanzaron 500 ppm. Cuando se usaron los ventiladores, los niveles de amoníaco fueron reducidos a <50 ppm.
Los niveles de amoníaco fueron muestreados a intervalos despues de tratamiento y los resultado son mostrados en la Tabla 4.
Tabla 4 atomi inefectivo resultó en niveles de amoniaco incrementados pero cayeron sobre reaplicación correcta.
Los resultados muestran que la aplicación de la composición de la invención a estiércol avícola fue capaz de mantener los niveles de amoníaco por debajo de 50 ppm durante más de 28 días.
En una variación, el estiércol puede ser tratado al rociar con una dosificación baja continua mientras está siendo depositados obre la puerta de plataforma o mientras está ubicado en la puerta de plataforma para proporcionar contacto con más área de superficie.
Ejemplo 14: Producción de biosurfactante alternativa Tabla 5 Una cantidad apropiada de agua filtrada fue adicionada al biorreactor y se llevó a 35°C. El agua fue aireada continuamente a partir de este punto. Los nutrientes listados antes en la Tabla 5 fueron adicionados con el orden dado. La adición de fuentes de amonio y nitrato fueron adicionadas justo antes de la inoculación de la preparación para prevenir cualquier bacteria contaminante de crecer debido a la falta de nitrógeno. El Inoculo fue adicionado en una cantidad para alcanzar una OD66nm inicial de ~ 0.15. Las condiciones de cultivo y proceso se monitorearon mediante mediciones de densidad óptica a OD66nm· La producción de biosurfactante fue monitoreada mediante mediciones de tensión superficial. La tensión superficial del caldo puede ser titulada al medir el fluido de cultivo puro y hacer diluciones para determinar que el nivel de biosurfactante está por arriba de la Concentración de Micela Crítica (CMC). La tensión superficial no aumentará hasta que la surfactina sea diluida por debajo de CMC.
La cepa de microorganismo puede ser monitoreada al cultivar muestras sobre MMS-Y y placas de agar de sangre. Si se usa un cultivo mezclado y los tipos de colonia pueden ser diferenciados en una placa de agar, los inóculos y el cultivo final deberían ser diluidos serialmente para realizar conteos de placa de cada cepa. Esto no solo puede determinar la pureza del cultivo sino tambien si una cepa compite con las otras.
Ejemplo 15: El efecto de sulfato a diferentes concentraciones sobre el cultivo El efecto de sulfato sobre caldo de cultivo fue probado al remover todas las fuentes de sulfato de los medios y reemplazarlas con sales de cloruro. El caldo de cultivo contenía amortiguador de fosfato monopotásico/fosfato dipotásico ajustado a pH 7 con hidróxido de potasio. Las muestras fueron entonces enriquecidas con concentraciones variantes de sulfato de sodio (1.8 M) a 1 ml/l, 0.8 ml/l, 0.6 ml/l, 0.4 ml/l y 0.2 ml/l. Cada media hora se evaluaron la densidad óptica, el pH y la tensión superficial. Esta prueba se hizo con la cepa bacteriana RSA-203.
Los resultados son mostrados en la Figura 1. Los resultados muestran que los microorganismos crecen igualmente bien con sales de cloruro que con sales de sulfato. En todas las muestras, la tensión superficial ha caído y se ha estabilizado alrededor de 27 dinas por 5 horas.

Claims (26)

REIVINDICACIONES
1. Un metodo para mejorar el ambiente dentro de una instalación de granja avícola comprendiendo aplicar a lecho avícola o estiércol avícola en la instalación de granja avícola una composición comprendiendo al menos un microorganismo del género Bacillus y al menos un biosurfactante, en donde el biosurfactante está presente en la composición en una cantidad de entre aproximadamente 2 mg/l y 7000 mg/l.
2. Un método de acuerdo con la reivindicación 1 , en donde la producción de amoníaco en una instalación de granja avícola es reducida o controlada.
3. Un método de acuerdo con la reivindicación 2, en donde las enzimas ureasa en lecho avícola o estiércol avícola son reducidas y/o inhibidas.
4. Un método de acuerdo con la reivindicación 1 , en donde las bacterias patogénicas en lecho avícola son controladas y/o reducidas.
5. Un método de acuerdo con la reivindicación 4, en donde la bacteria patogénica es seleccionada de una o más de Salmonella spp., Campylobacger spp., Staphylococcus spp., Escherichia spp., Pseudomonas spp. y Clostridium spp.
6. Un método de acuerdo con la reivindicación 5, en donde la bacteria patogénica es seleccionada de uno o más de Salmonella entérica, Campylobacter jejunio, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aerugenosa y Clostridium perfringens.
7. Un metodo de acuerdo con la reivindicación 1 , en donde la productividad de la instalación avícola es mejorada.
8. Un método de acuerdo con la reivindicación 1 , en donde las plagas en lecho avícola son controladas.
9. Un método de acuerdo con la reivindicación 9, en donde la plaga son larvas de escarabajo negro.
10. Un método para prevenir o reducir la pododermatitis avícola o dermatitis gangrenosa en una instalación de granja avícola comprendiendo aplicar a lecho avícola en la instalación de granja avícola, una composición comprendiendo al menos un microorganismo del género Bacillus y al menos un biosurfactante, en donde el biosurfactante está presente en la composición en una cantidad de entre aproximadamente 2 mg/l y 7000 mg/l.
11. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la composición es aplicada al atomizar sobre el lecho avícola.
12. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 , en donde el biosurfactante está presente en una cantidad de 2 a 850 mg/l.
13. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en donde el al menos un microorganismo del género Bacillus es al menos una cepa de Bacillus subtilis.
14. Una composición comprendiendo al menos un microorganismo del género Bacillus y al menos un biosurfactante, en donde el biosurfactante está presente en una cantidad de 2 mg/l a 7000 mg/l.
15. Una composición de acuerdo con la reivindicación 14, en donde el al menos un microorganismo del genero Bacillus está presente en una cantidad de 1 x 104 cfu/ml a 1 x 1013 cfu/ml.
16. Una composición de acuerdo con la reivindicación 14 o reivindicación 15, en donde el al menos un microorganismo del género Bacillus está presente en el estado vegetativo, como una endospora o una mezcla de estado vegetativo y endosporas.
17. Una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 16, en donde el microorganismo es seleccionado de Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus pumilus, Bacillus popilliae y mezclas de los mismos.
18. Una composición de acuerdo con la reivindicación 17, en donde el microorganismo es seleccionado de Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis y mezclas de los mismos.
19. Una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 18, en donde el Bacillus subtilis es RSA-203.
20. Una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 19, en donde el biosurfactante es seleccionado de surfactina, liquenisina, fengicina, iturina y mezclas de las mismas.
21. Una composición de acuerdo con la reivindicación 20, en donde el biosurfactante es seleccionado de surfactina, liquenisina y mezclas de las mismas.
22. Una composición de acuerdo con la reivindicación 21 , en donde el biosurfactante es surfactina.
23. Una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 22, en donde el biosurfactante está presente en una cantidad de 50 a 7000 mg/l.
24. Una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 22, que comprende además un surfactante.
25. Una composición de acuerdo con la reivindicación 24, en donde el surfactante es un surfactante de ácido alquilbenceno sulfónico.
26. Un microorganismo, el cual es RSA-203 depositado con ATTC el 9 de enero de 2013 bajo el acceso no. PTA-13451.
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Families Citing this family (89)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9526238B2 (en) * 2013-11-18 2016-12-27 Edgar Lyle Mitchell Chemical delivery system for controlling beetle populations in a poultry house
CN104263681A (zh) * 2014-09-09 2015-01-07 中国石油化工股份有限公司 一株产耐高温高盐脂肽的枯草芽孢杆菌th-2及其用途
AU2015365575A1 (en) * 2014-12-15 2017-07-27 Global Bioprotect Ip Pty Ltd Compositions and methods of use
UY36334A (es) * 2014-12-29 2017-04-28 Fmc Corp Composiciones de bacillus licheniformis rt1184 y metodos de usos para beneficiar el crecimiento de las plantas
US9540291B2 (en) * 2015-02-10 2017-01-10 Land View, Inc. Coating for improved granular fertilizer efficiency
US9745060B2 (en) 2015-07-17 2017-08-29 Topcon Positioning Systems, Inc. Agricultural crop analysis drone
US10576519B2 (en) 2015-09-10 2020-03-03 Locus Oil Ip Company, Llc Enhanced microbial production of biosurfactants and other products, and uses thereof
US10231441B2 (en) 2015-09-24 2019-03-19 Digi-Star, Llc Agricultural drone for use in livestock feeding
US10321663B2 (en) 2015-09-24 2019-06-18 Digi-Star, Llc Agricultural drone for use in livestock monitoring
EP3373731A1 (en) * 2015-11-10 2018-09-19 Chr. Hansen A/S Microbial pesticidal composition and production thereof
CN109069550B (zh) * 2016-01-25 2022-10-04 诺维信公司 减少微生物在家禽孵化场中大量繁殖的方法
DE202016103370U1 (de) * 2016-06-27 2017-09-28 Big Dutchman International Gmbh Trocknungsvorrichtung zur Trocknung einer Substanz, Geflügelhaltesystem
CN105884547A (zh) * 2016-06-29 2016-08-24 兰赫(上海)生物科技有限公司 一种果树专用叶面肥及其制备方法
CN106222205B (zh) * 2016-08-02 2020-01-24 大连市环境科学设计研究院 一种利用秸秆发酵制备生物表面活性剂的方法
AU2017322409B2 (en) 2016-09-08 2023-03-30 Locus Ip Company, Llc Distributed systems for the efficient production and use of microbe-based compositions
JP7071386B2 (ja) 2016-11-16 2022-05-18 ローカス アグリカルチャー アイピー カンパニー リミテッド ライアビリティ カンパニー 線虫防除のための材料および方法
MX2019006780A (es) * 2016-12-11 2019-12-02 Locus Oil Ip Company Llc Productos microbianos y su uso en biorremedicacion y para remover parafina y otras sustancias contaminantes desde los equipos de produccion y procesamiento de petroleo y gas.
FR3061410B1 (fr) * 2016-12-30 2020-07-10 Lipofabrik Composition biostimulante de la croissance des plantes obtenue a partir de surnageant de culture de souches bacillus sp.
CR20190357A (es) * 2017-01-06 2019-11-12 Locus Ip Co Llc Sistemas y métodos novedosos de fermentación
MX2019009309A (es) * 2017-02-07 2019-10-04 Locus Oil Ip Company Llc Materiales y metodos para reducir la viscosidad de petroleo.
MY189456A (en) * 2017-02-09 2022-02-14 Locus Oil Ip Company Llc Compositions and methods for reducing hydrogen sulfide and microbial influenced corrosion in crude oil, natural gas, and in associated equipment
MX2019010453A (es) 2017-03-03 2019-10-15 Locus Oil Ip Company Llc Composicion y metodos para digestion mejorada microbiana de polimeros en pozos de fractura.
US11414591B2 (en) 2017-04-09 2022-08-16 Locus Oil Ip Company, Llc Microbial products and uses thereof to improve oil recovery
WO2018191174A1 (en) 2017-04-09 2018-10-18 Locus Ip Company, Llc Materials and methods for maintaining industrial, mechanical and restaurant equipment
KR20190140063A (ko) 2017-05-07 2019-12-18 로커스 아이피 컴퍼니 엘엘씨 피부 건강을 위한 화장품 조성물 및 이를 사용하는 방법
WO2018231791A1 (en) 2017-06-12 2018-12-20 Locus Oil Ip Company, Llc Remediation of rag layer and other disposable layers in oil tanks and storage equipment
US10367750B2 (en) * 2017-06-15 2019-07-30 Mellanox Technologies, Ltd. Transmission and reception of raw video using scalable frame rate
WO2018237137A1 (en) * 2017-06-21 2018-12-27 Locus Oil Ip Company, Llc TREATMENT FOR THE VALORIZATION OF HEAVY RAW PETROLEUM
US11555142B2 (en) * 2017-07-26 2023-01-17 Locus Solutions Ipco, Llc Two-step process for microbial enhanced oil recovery
CN110996667A (zh) 2017-07-27 2020-04-10 轨迹农业Ip有限责任公司 毕赤酵母的高效生产及其在促进植物和动物健康中的用途
WO2019022996A1 (en) 2017-07-27 2019-01-31 Locus Oil Company, Llc ENHANCED SELECTIVE AND NON-SELECTIVE SHUTTERING METHODS FOR WATER INJECTION IN ENHANCED PETROLEUM RECOVERY
AU2018307361A1 (en) 2017-07-27 2020-03-12 Locus Ip Company, Llc Compositions for enhancing bioavailability of pharmaceuticals, supplements and ingested substances
US11279965B2 (en) 2017-08-27 2022-03-22 Locus Oil Ip Company, Llc Symbiotic fermentation of Acinetobacter and Bacillus and applications thereof
TW201920649A (zh) * 2017-08-30 2019-06-01 美商微辰生命有限公司 用於有害生物之防治之氨氧化微生物
CA3077378A1 (en) 2017-09-27 2019-04-04 Locus Oil Ip Company, Llc Materials and methods for recovering oil from oil sands
EP3694523A4 (en) 2017-10-13 2021-07-07 Locus IP Company, LLC METHODS AND SUBSTANCES FOR PREVENTION AND TREATMENT OF NEURODEGENERATIVE DISEASES
WO2019089730A1 (en) 2017-10-31 2019-05-09 Locus Ip Company, Llc Matrix fermentation systems and methods for producing microbe-based products
WO2019094615A1 (en) 2017-11-08 2019-05-16 Locus Oil Ip Company, Llc Multifunctional composition for enhanced oil recovery, improved oil quality and prevention of corrosion
CN107956461A (zh) * 2017-11-28 2018-04-24 烟台史密得机电设备制造有限公司 一种利用酒糟和酒糟废水提高油藏采收率的方法
CN108003858A (zh) * 2017-11-28 2018-05-08 烟台史密得机电设备制造有限公司 一种利用酒厂酒糟增产的方法
CN107762462A (zh) * 2017-11-28 2018-03-06 烟台史密得机电设备制造有限公司 一种利用酒厂酒糟提高单井产量的方法
CN107989583A (zh) * 2017-11-28 2018-05-04 烟台史密得机电设备制造有限公司 一种利用酒糟废水进行单井吞吐采油的方法
CN107762445A (zh) * 2017-11-28 2018-03-06 烟台史密得机电设备制造有限公司 一种利用酒糟和酒糟废水提高单井产量的方法
CN107939359A (zh) * 2017-11-28 2018-04-20 烟台史密得机电设备制造有限公司 一种利用酒糟废水提高原油采收率的方法
CN108005624A (zh) * 2017-11-28 2018-05-08 烟台史密得机电设备制造有限公司 一种酒糟和酒糟废水资源化利用的方法
CN107762446A (zh) * 2017-11-28 2018-03-06 烟台史密得机电设备制造有限公司 一种酒糟和酒糟废水综合利用的方法
CN107762463A (zh) * 2017-11-28 2018-03-06 烟台史密得机电设备制造有限公司 一种酒厂酒糟资源化利用的方法
CN107939360A (zh) * 2017-11-28 2018-04-20 烟台史密得机电设备制造有限公司 一种利用酒厂酒糟提高油藏采收率的方法
MX2020006748A (es) 2017-12-26 2020-11-09 Locus Ip Co Llc Composiciones de conservacion de alimentos organicos.
EP3731804A4 (en) 2017-12-28 2022-01-05 Locus IP Company, LLC ORAL HEALTH COMPOSITION WITH PURIFIED BIO SURFACTANT AND / OR THEIR DERIVATIVES
US11412740B2 (en) 2018-01-15 2022-08-16 Locus Ip Company, Llc Large-scale aerobic submerged production of fungi
CN108477621A (zh) * 2018-02-05 2018-09-04 江苏大学 一种环脂肽营养咀嚼片及其制备方法
EP3758497A4 (en) 2018-02-26 2021-11-24 Locus Agriculture IP Company, LLC MATERIALS AND METHOD OF CONTROLLING INSECT PEST WITH ENTOMOPATHOGENIC FUNGI
WO2019175777A1 (en) * 2018-03-12 2019-09-19 Better Air International Limited Compositions comprising bacterial strains and use thereof in controlling pathogenic microorganisms
WO2019175780A1 (en) 2018-03-12 2019-09-19 Better Air International Limited Compositions comprising bacterial strains and use thereof in controlling pathogenic microorganisms
WO2019175783A1 (en) 2018-03-12 2019-09-19 Better Air International Limited Compositions comprising bacterial strains and use thereof in controlling pathogenic microorganisms
WO2019175782A1 (en) 2018-03-12 2019-09-19 Better Air International Limited Compositions comprising bacterial strains and use thereof in controlling pathogenic microorganisms
CA3095321A1 (en) 2018-03-27 2019-10-03 Locus Oil Ip Company, Llc Multi-functional compositions for enhanced oil and gas recovery and other petroleum industry applications
CA3098893A1 (en) 2018-04-30 2019-11-07 Locus Oil Ip Company, Llc Compositions and methods for paraffin liquefaction and enhanced oil recovery in oil wells and associated equipment
CR20200600A (es) 2018-05-08 2021-06-25 Locus Agriculture Ip Co Llc Productos a base de microbio para mejorar la raíz de la planta y la salud inmune
EP3801463A4 (en) 2018-05-25 2022-05-04 Locus IP Company, LLC THERAPEUTIC COMPOSITIONS FOR IMPROVED HEALING OF WOUNDS AND SCARS
US11549053B2 (en) 2018-07-30 2023-01-10 Locus Solutions Ipco, Llc Compositions and methods for enhanced oil recovery from low permeability formations
CA3109949A1 (en) 2018-08-20 2020-02-27 Locus Oil Ip Company, Llc Methods for paraffin removal and extended post-primary oil recovery
WO2020069148A1 (en) * 2018-09-27 2020-04-02 Locus Ip Company, Llc Compositions and methods for controlling pathogens in livestock production operations
US20210267214A1 (en) * 2018-10-09 2021-09-02 Locus Ip Company, Llc Materials and Methods for Enhanced Carbon Utilization and/or Sequestration as well as Reducing Deleterious Atmospheric Gases
EP3952662A4 (en) 2019-04-12 2022-12-21 Locus IP Company, LLC IMPROVED PASTURE TREATMENTS THAT ENABLE CARBON SEQUESTRATION AND REDUCTION OF GREENHOUSE GAS EMISSIONS FROM LIVESTOCK
CR20210618A (es) 2019-05-10 2022-03-11 Locus Ip Co Llc Composiciones y métodos para el tratamiento de las condiciones pulmonares relacionadas con biopelículas
ES2795574B2 (es) * 2019-05-21 2021-06-03 Univ Vigo Proceso para la extracción acuosa de biosurfactantes a partir de los licores de lavado de maíz o "corn steep liquor"
AU2020298217A1 (en) 2019-06-20 2022-01-27 Locus Ip Company, Llc Co-cultivation of a myxobacterium and acinetobacter for enhanced production of emulsan
WO2020263692A1 (en) * 2019-06-22 2020-12-30 Locus Ip Company, Llc Production of mel-like glycolipids and lipopeptides using a bacillus sp. microorganism
CA3144950A1 (en) * 2019-06-26 2020-12-30 Locus Oil Ip Company, Llc Compositions and methods for paraffin liquefaction and enhanced oil recovery using concentrated acids
CA3144947A1 (en) * 2019-06-26 2020-12-30 Locus Oil Ip Company, Llc Multi-functional compositions comprising concentrated acids for enhanced oil and gas recovery
US20220372434A1 (en) * 2019-10-04 2022-11-24 Global Bioprotect Ip Pty Ltd A system and process for producing a biosurfactant and formulations comprising same
CN110699408A (zh) * 2019-10-21 2020-01-17 天津大学 利用混菌发酵提高表面活性素产量的方法
CN110669811A (zh) * 2019-10-21 2020-01-10 天津大学 一种提高表面活性素产量的方法
CN110747126A (zh) * 2019-11-14 2020-02-04 河北农业大学 一种产脲酶抑制剂的菌株筛选方法及减少粪便氨排放的方法
CN111019858B (zh) * 2019-12-17 2021-06-15 中国农业大学 一种抑制细菌生物膜形成的饲用地衣芽孢杆菌及其应用
EP4102983A1 (en) * 2020-02-11 2022-12-21 Locus IP Company, LLC Methods and compositions for reducing deleterious enteric atmospheric gases in livestock
AU2021236400A1 (en) * 2020-03-13 2022-09-15 Kemin Industries, Inc. A method for controlling clostridium infection in animals
JPWO2021205919A1 (es) * 2020-04-08 2021-10-14
CN115916958A (zh) * 2020-04-14 2023-04-04 轨迹Ip有限责任公司 应用于农业、牲畜健康和环境保护的芽孢杆菌菌株
BR112022021698A2 (pt) * 2020-04-26 2023-01-17 Neozyme Int Inc Composições em pó secas e métodos e usos das mesmas
CN111742903A (zh) * 2020-06-22 2020-10-09 黄丽 一种控制新疆牲畜养殖场所卫生害虫数量的方法
CN112063563A (zh) * 2020-09-22 2020-12-11 安徽同富共强农业生态园有限公司 一种禽畜粪便除臭复合菌剂的制备方法以及使用方法
CN112079899B (zh) * 2020-09-30 2022-04-08 陕西科技大学 一种解淀粉芽孢杆菌发酵液中抗菌脂肽的分离方法
US11497195B2 (en) 2020-10-29 2022-11-15 Dog Gon Wild, Inc. Poultry behavioral development system
JP2024510227A (ja) * 2021-03-15 2024-03-06 ローカス ソリューションズ アイピーシーオー，エルエルシー 健康な土壌を保存し、劣化した土壌を修復するための微生物組成物
WO2023009705A1 (en) * 2021-07-29 2023-02-02 Microbial Discovery Group, Llc Methods of treating pododermatitis
CN113717895B (zh) * 2021-09-23 2024-02-23 洛阳欧科拜克生物技术股份有限公司 一种抑菌型芽孢杆菌及其液体发酵步骤、抑菌试验方法

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3030789A (en) 1957-04-27 1962-04-24 Rothenberger Jakob Automatic clothes washing machine
FR7981M (es) 1967-10-21 1970-06-08
GB2108389B (en) * 1981-11-06 1985-08-14 Auchincloss Thomas R Improvements in and relating to the rearing of livestock
JPS63209580A (ja) 1987-02-25 1988-08-31 Karupisu Shokuhin Kogyo Kk バチルス・ズブチリスｃ−３１０２
US4905761A (en) * 1988-07-29 1990-03-06 Iit Research Institute Microbial enhanced oil recovery and compositions therefor
US5244660A (en) * 1992-01-30 1993-09-14 Brien Gerard T O Use of Bacillus thuringiensis berliner var. kurstaki to reduce the occurrence of darkling beetles in poultry houses
JPH06121668A (ja) 1992-08-27 1994-05-06 Kobe Steel Ltd 微細生物の培養及び微細生物による物質生産法
US5945333A (en) * 1997-08-26 1999-08-31 Ag Tech Products, Inc. Biological poultry litter treatment composition and its use
CN1294259C (zh) * 2000-09-29 2007-01-10 昭和电工株式会社 枯草菌表面活性剂的生产方法
ATE441707T1 (de) 2000-09-29 2009-09-15 Showa Denko Kk Verfahren zur surfactin herstellung
RU2211861C1 (ru) * 2002-03-18 2003-09-10 Институт биологии Уфимского научного центра РАН ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis - ПРОДУЦЕНТ ТЕРМО- И БИОСТОЙКИХ ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
US7247299B2 (en) 2002-11-27 2007-07-24 Kemin Industries, Inc. Antimicrobial compounds from Bacillus subtilis for use against animal and human pathogens
US7994138B2 (en) * 2004-06-01 2011-08-09 Agscitech Inc. Microbial biosurfactants as agents for controlling pests
US7754469B2 (en) 2005-11-30 2010-07-13 Agtech Products, Inc Microorganisms and methods for treating poultry
US8025874B2 (en) * 2008-04-17 2011-09-27 Danisco A/S Bacillus strains useful for animal odor control
WO2009158617A1 (en) * 2008-06-27 2009-12-30 Novozymes A/S Bacillus amyloliquefaciens strain
DK2348880T3 (en) * 2008-09-17 2015-01-26 Bayer Cropscience Lp PROCEDURE FOR USING A BACILLUS SUBTILIS TRIAL FOR IMPROVING ANIMAL HEALTH
EP2384335A1 (en) * 2008-12-10 2011-11-09 Pan-Eco S.A. Biosurfactant composition produced by a new bacillus licheniformis strain, uses and products thereof
CN101665773B (zh) * 2008-12-23 2012-05-30 中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所 一种微生物菌剂及其制备方法和畜禽粪便的处理方法
AR076150A1 (es) * 2009-03-26 2011-05-18 Basf Se Uso de sintetico y biologico fungicidas en combinacion para controlar hongos daninos

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