CN109069550B - 减少微生物在家禽孵化场中大量繁殖的方法 - Google Patents
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Abstract
本申请描述了将产芽孢细菌和乳酸菌施用于家禽孵化柜,以将细菌大量繁殖改变为更有益的微生物群,从而积极地影响表现参数,例如整个生产中的死亡率、体重增加和饲料转化率。
Description
对生物材料保藏的参考
本申请包含对生物材料保藏的参考,该保藏通过引用结合在此。有关完整信息参见实例1。
对序列表的引用
本申请含有计算机可读形式的序列表。该计算机可读形式通过引用结合在此。
索引至序列表:
SEQ ID NO:1是保藏为NRRL B-50964的乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)FM18的16S rDNA。
SEQ ID NO:2是保藏为NRRL B-50959的乳酸片球菌TY036的16S rDNA。
SEQ ID NO:3是保藏为NRRL B-50960的屎肠球菌(Enterococcus faecium)MFF109的16S rDNA。
SEQ ID NO:4是保藏为NRRL B-50914的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)AM0904的16S rDNA。
SEQ ID NO:5是保藏为NRRL B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122的16S rDNA。
SEQ ID NO:6是保藏为NRRL B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2的16S rDNA。
技术领域
本发明涉及将产芽孢细菌和/或乳酸菌施用于家禽孵化柜,以将微生物大量繁殖(microbial bloom)改变为更有益的微生物群,积极地影响表现参数,例如整个家禽生产中的死亡率、体重增加和/或饲料转化率。
背景技术
由于消费者需求的增加,现代家禽孵化场的大小和规模都已扩大。孵化场产量的增加需要增加相关的操作,例如人员和车辆的移动以及近乎连续使用的孵化场设施。为了确保生产健康无病的雏鸡,必须遵守最高的卫生标准,特别是对于蛋和任何与蛋接触的设备。孵化场中需要特别注意的一个区域是孵化柜,在孵化柜中雏鸡将孵化并暴露于定殖于原始肠道的第一批细菌。
通常,孵化柜中存在的细菌可能对新生雏鸡不利,并且甚至可能是有害的,例如沙门氏菌(Salmonella)、大肠杆菌(E.coli)、假单胞菌(Pseudomonas)、链球菌(Streptococcus)、葡萄球菌(Streptococcus)、肠球菌(Enterococcus)等。孵化柜温暖潮湿的气候有利于这些生物的生长,因此减少污染和防止“微生物大量繁殖”至关重要。此外,家禽的胃肠道(GIT)依赖于健康的肠道细菌来刺激肠道和免疫发育。新生家禽越早暴露于这些“好的”细菌,它们越不可能被致病菌定殖,并且它们的GIT就会越早开始发育。
传统地,孵化场环境卫生是通过使用抗菌化学品,主要是熏制甲醛来减少孵化器中的病原体来实现的。当蛋到达孵化场后,有时对其进行消毒以去除从母鸡和粪便中转移的微生物。这并不能除去所有细菌,这些细菌会在温暖、潮湿的环境中继续生长,并且在转移到孵化柜后可能会大量繁殖。这也可能降低蛋的孵化率。通常用甲醛熏蒸孵化柜以防止这种大量繁殖,尽管甲醛可能对雏鸡本身造成一些不良影响,因为甲醛是已知的刺激物,并且对于孵化场人员来说是安全隐患。高浓度的甲醛会对禽和人类粘膜产生刺激,并引发哮喘样症状,且对人类有致癌作用。许多国家已经开始禁止或大幅降低甲醛的短期暴露限值,因此在过去几年中已经测试了各种替代品。此外,甲醛的处理需要大量的安全培训和专门的设备来实现安全应用。
已经提出了甲醛的几种化学替代品,例如季铵和戊二醛。尽管戊二醛更安全且不致癌,但仍被认为是一种刺激物并且具有毒性,因此最大暴露限值设定为0.05ppm。虽然更安全,但这些化学替代品在控制孵化器内的细菌“大量繁殖”上效果不佳。
随着对员工安全的考虑增加和从食品链中去除化学品的消费者的推动,对农业工业中卫生和微生物控制的生物解决方案的研究越来越多。甲醛和其他化学消毒剂也无法满足对于暴露于有益的共生细菌的需要。
为了实现这一目的,在孵化后应用益生菌细菌配制品。这些通常在雏鸡加工期间或安置于家禽农场后不久应用于孵化场。
Promsopone等人(J.Food Protection[食品防护杂志]61(2):176-180(1998))描述了嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、粪链球菌(streptococcus faecium)和鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)特异性抗体用于减少肉鸡仔中鼠伤寒沙门氏菌的用途。
然而,从孵化到第一次暴露于这些益生菌的时间可以在孵化后长达48小时,这取决于给定雏鸡的实际孵化时间以及孵化后施用益生菌的时间。由于肉鸡平均仅生存42天,因此48小时是向其提供有益微生物之前的重要时段。此外,由于致病菌在孵化器和孵化场环境中相对较为常见,因此雏鸡在共生之前更容易暴露于病原体。
因此需要一种配制品,例如益生菌配制品,其控制孵化场中细菌大量繁殖,而不具有甲醛和其他化学消毒剂的缺点。
发明内容
本发明涉及一种用于改善家禽的一种或多种表现参数的方法,所述方法包括在家禽孵化柜中施用一种或多种益生菌的步骤。
本发明还涉及能够在家禽孵化柜中施用所述组合物后改善家禽的一种或多种表现参数的组合物。在一个优选的实施例中,所述组合物包括至少一种乳酸菌(例如保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18、保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036、或保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109)和/或至少一种芽孢杆菌(例如保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904、保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122、或保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2)。根据以上经鉴定的登录号,将细菌分离株保藏在农业研究机构培养物保藏中心(NRRL),北大学街(North UniversityStreet)1815号,皮奥瑞亚(Peoria),伊利诺伊州(IL)61604,美国。
附图说明
图1示出了在实验1中施用细菌配制品后孵化器中存在的一般细菌的量。
图2示出了在实验1中施用细菌配制品后孵化器中存在的乳酸菌的量。
图3示出了在实验1中施用细菌配制品后孵化器中存在的革兰氏阴性/大肠菌群的量。
图4示出了在体外覆盖测定法中关于家禽病原体减少对一般细菌和乳酸菌分离株的组合的评估。
图5示出了在实验2中施用细菌配制品后孵化器中存在的乳酸菌的量。
图6示出了在实验2中施用细菌配制品后孵化器中存在的革兰氏阴性/大肠菌群的量。
图7示出了在实验3中细菌配制品对肉鸡仔的7天体重和死亡率的影响。
图8示出了在商业环境实验3中细菌配制品对在售肉鸡的体重和存活率的影响。
图9示出了在商业环境实验3中细菌配制品对在售肉鸡饲料转化率的影响。
定义
除非另外定义,否则本文使用的所有技术术语和科学术语均具有与本披露所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。虽然任何类似或等同于本文所描述的那些方法与材料均可以用于实践或试验本披露的主题,但描述了优选的方法和材料。出于本披露的目的,以下术语定义如下。
在此使用的冠词“一个”和“一种”是指一个/种或多于一个/种(即,至少一个/种)该冠词的语法宾语。通过举例,“一个元件”意指一个元件或多于一个元件。
术语“约”是指与参考数量、水平、值、数目、频率、百分比、尺寸、大小、含量、重量或长度相比,其数量、水平、值、数目、频率、百分比、尺寸、大小、含量、重量或长度相差多达30%、25%、20%、15%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%或1%。
贯穿本披露,除非上下文另有要求,否则词语“包括(comprise)”、“包括(comprises)”和“包括(comprising)”应当理解为意指包括规定的步骤或要素或者多个步骤或要素的组,但不排除任何其他步骤或要素或者多个步骤或要素的组。
术语“由……组成”意指包括并限于在短语“由……组成”中间的任何内容。因此,短语“由……组成”是指列出的要素是必需的或强制性的,并且不存在其他要素。术语“基本上由……组成”意指包括在该短语之间列出的任何要素,并且限于不干扰或有助于本披露中针对所列要素指定的活性或作用的其他要素。因此,短语“基本上由……组成”是指列出的要素是必需的或强制性的,但是其他要素是任选的并且可以存在或不存在,这取决于它们是否实质上影响所列要素的活性或作用。
术语“施用(administering)”或“施用(administer)”包括优选通过口服给药向动物提供本披露的益生菌配制品。
“降低(decreased)”或“减少(reduced)”的量通常是“统计学上显著”的量,并且可以包括1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、100、200、250、500、1000倍或更多倍(包括其间和大于1的所有整数和小数点(例如,1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9))的降低(相比不存在益生菌配制品的情况下动物产生的量)。降低可包括相比于不存在益生菌配制品的情况下动物产生的量为至少1log(Log10)或更多的降低。降低或减少的量可以包括相比于不存在益生菌配制品的情况下动物产生的量为至少约5倍、10倍、15倍、20倍、25倍或30倍的降低。
与不存在益生菌配制品的情况下动物产生的应答相比,应答中的“降低”可能是“统计学上显著的”,并且可以包括1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或100%的降低,包括其间的所有整数。
“增加”的量通常是“统计学上显著的”量,并且可以包括为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、100、200、250、500、1000或更多倍(包括其间的和大于1的所有整数和小数点(例如,1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9))的增加(相比不存在益生菌配制品的情况下动物产生的量)。增加可包括相比于不存在益生菌配制品的情况下动物产生的量为至少1log(Log10)或更多的增加。增加的量可以包括相比于不存在益生菌配制品的情况下动物产生的量为至少约5倍、10倍、15倍、20倍、25倍或30倍的增加。
与不存在益生菌配制品的情况下动物产生的应答相比,应答中的“增加”可能是“统计学上显著的”,并且可以包括1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或100%的增加,包括其间的所有整数。
术语“分离的”是指实质上(substantially)或基本上(essentially)不含在其天然状态下通常伴随其的组分的材料。例如,分离的细菌分离株可以指已经从在天然存在的环境中存在的天然或非天然存在的组分中纯化或除去的细菌分离株。
术语“修饰”包括“降低”一种或多种可量化的参数或指征,任选地通过定义的和/或统计学上显著的量。“降低(decrease)”或“降低(decreasing)”,“减少(reduce)”或“减少(reducing)”通常是指益生菌配制品相对于对照配制品引起的应答在动物中产生较小的生理应答的能力。相关的生理应答对于本领域技术人员来说是显而易见的。“降低”或“减少”的量通常是“统计学上显著的”量,并且可以包括为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50或更多倍(例如,100、500、1000倍)(包括其间的和大于1的所有整数和小数点(例如,1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9))的降低(相比不存在益生菌配制品的情况下动物产生的量)。降低可包括相比于不存在益生菌配制品的情况下动物产生的量为至少1log(Log10)或更多的降低。降低或减少的量可以包括相比于不存在益生菌配制品的情况下动物产生的量为至少约5倍、10倍、15倍、20倍、25倍或30倍的降低。
如本文所使用的,术语“量化(quantifying)”、“量化(quantification)”或其他相关词语是指确定参数或指征的单位体积中的数量、质量或浓度。
如本文所使用的,术语“家禽”是指家养的禽。家禽包括野禽、水禽和猎禽。家禽的实例包括但不限于鸡、肉鸡、蛋鸡、矮脚鸡、火鸡、鸭、鹅、珍珠鸡、孔雀、鹌鹑、鸠鸽(doves)、鸽子(pigeon)(乳鸽)和野鸡,优选鸡、肉鸡、蛋鸡和火鸡。
死亡率定义为在收获前死亡或被剔除的禽的百分比。降低的死亡率是良好的群体健康和低疾病发病率的标志。
体重/体重增加意味着当动物的整体健康状况得到改善(花费在应激或疾病上的资源减少)时,生长速率增加,GIT工作更优化,动物可以获得更多营养,和/或饲料摄入量增加。
饲料转化率是饲料转化为体重(饲料摄入量/体重)的度量。饲料转化率的提高归因于动物对营养物质的吸收增加。这可能意味着动物能够更好地吸收营养,因为1)动物的吸收能力发生变化;2)动物GIT中有更多的可用营养素。使用此度量,较低的数字/比率优于较高的数字。
“孵化”意味着打破蛋壳,从而雏鸡从蛋中出来。因此,10%的孵化意味着10%的蛋已经打破外壳,鸡已经出现;20%的孵化意味着20%的蛋已经打破外壳,鸡已经出现,以此类推。
“破壳”是指蛋中的雏鸡打破外壳试图孵化。有时雏鸡在破壳后立刻死亡。因此,10%的破壳意味着10%的蛋通过雏鸡破壳而打破了外壳,20%的破壳意味着20%的蛋通过雏鸡破壳而打破了外壳,以此类推。孵化柜是用于保持设置禽蛋的适当条件的机器。
术语“益生菌”在本文中用于活微生物,用于向人或动物施用以获得对人和动物的相关益处。
术语“细菌大量繁殖”和“微生物大量繁殖”在本文中可互换使用,并且被理解为致病菌水平的增加,例如致病菌水平的快速增加,例如,由于温暖、潮湿的环境。
大肠菌群是本领域技术人员已知的并且是杆状革兰氏阴性非产芽孢细菌和能动的细菌或不能动的细菌,当在35℃-37℃孵育时,其可以通过产酸和产气来发酵乳糖。它们的存在用于表明可能存在粪便来源的其他病原性生物。大肠菌群的实例包括但不限于以下属的细菌:柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、肠杆菌属(Enterobacter)、哈夫尼菌属(Hafnia)、克雷伯菌属(Klebsiella)、沙门氏菌属和埃希氏杆菌属(Escherichia)。
发明详述
改善家禽的一种或多种表现参数的方法
在一个方面,本发明涉及一种改善家禽的一种或多种表现参数的方法,所述方法包括在家禽孵化柜中施用一种或多种益生菌的步骤。
在优选的实施例中,通过将所述一种或多种益生菌喷雾到家禽孵化柜中来进行施用。通风系统将优选地确保家禽孵化柜中的良好分布。在甚至更优选的实施例中,所述一种或多种益生菌是粉末配制品,例如干粉配制品。该干粉配制品将确保家禽孵化柜中的良好分布。一种或多种益生菌的应用优选通过直接向孵化柜进行干喷并通过柜中的通风系统使所述一种或多种益生菌流通来实现。一个实施例涉及干喷递送,例如通过气动系统。所述一种或多种益生菌优选为芽孢形式。
在该方法的一个优选实施例中,所述一种或多种益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株,例如以芽孢形式。在另一个优选的实施例中,所述一种或多种益生菌包含一种或多种乳酸菌菌株,例如以芽孢形式。在具体实施例中,所述一种或多种益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株(例如,以芽孢形式)和一种或多种乳酸菌菌株(例如,以芽孢形式)。
因此,本发明人发现,当作为益生菌提供时,一种或多种芽孢杆菌属菌株和/或一种或多种乳酸菌菌株对细菌大量繁殖朝向更有益的微生物群和/或家禽的表现参数发展具有积极作用。本发明人还惊奇地发现,一种或多种芽孢杆菌属菌株可以与一种益生菌中的一种或多种乳酸菌菌株组合,所述益生菌对细菌大量繁殖朝向更有益的微生物群和/或家禽的表现参数发展具有积极作用。
在该方法的具体实施例中,所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109或其突变体的所有鉴别特征。
该方法还涉及一个实施例,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2或其突变体的所有鉴别特征。
该方法的另一个实施例涉及一种或多种益生菌,所述益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109。
根据本发明的方法还涉及一个实施例,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
在具体实施例中,该方法涉及一种或多种益生菌,所述益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,以及
一种或多种益生菌,所述益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
在另一具体实施例中,该方法涉及一种或多种益生菌,所述益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,和
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036;
和一种或多种益生菌,所述益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
在该方法的另一个实施例中,所述一种或多种益生菌包含选自下组的16S rDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:3具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(e)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(f)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
在一个实施例中,上述方法导致一种或多种表现参数的改善,所述表现参数选自下组,该组由以下组成:体重增加、生长速率、饲料转化率和总体健康状况或其任何组合。该方法可以进一步导致促进家禽肠道和/或免疫发育的健康肠道细菌的增加。在一个实施例中,该方法导致乳酸菌和/或芽孢杆菌的水平增加。在一个实施例中,该方法导致孵化器中乳酸菌和/或芽孢杆菌的水平增加。在一个实施例中,该方法导致雏鸡的GIT中乳酸菌和/或芽孢杆菌的水平增加。在一个实施例中,该方法导致孵化器和雏鸡的GIT中乳酸菌和/或芽孢杆菌的水平增加。
在该方法的另一个实施例中,该施用导致家禽孵化柜中的细菌大量繁殖被修饰或控制。这可能意味着致病菌的水平降低。在一个实施例中,在这一点上,致病菌可以选自下组,该组由以下组成:大肠菌群、沙门氏菌、大肠杆菌、假单胞菌、链球菌、葡萄球菌和肠球菌。优选地,该方法导致家禽的环境微生物群转变为更有益的益生菌之一。在该方法的一个实施例中,施用导致致病菌的降低,所述致病菌选自下组,该组由以下组成:大肠菌群、沙门氏菌、大肠杆菌、假单胞菌、链球菌、葡萄球菌和肠球菌。在该方法的一个实施例中,施用导致致病菌的降低,所述致病菌选自下组,该组由以下组成:大肠菌群、沙门氏菌和大肠杆菌。
在该方法的另外的实施例中,施用导致孵化场中的大肠菌群的水平降低。在该方法的另外的实施例中,施用导致孵化柜中的大肠菌群的水平降低。在该方法的又另外的实施例中,施用导致孵化场中大肠菌群的水平降低至少25%,例如至少30%或至少40%。在该方法的又另外的实施例中,施用导致孵化柜中的大肠菌群的水平降低至少25%,例如至少30%或至少40%。在该方法的又另外的实施例中,施用导致孵化场中的大肠菌群的水平降低至少50%。在该方法的又另外的实施例中,施用导致孵化柜中的大肠菌群的水平降低至少50%。在该方法的另外的实施例中,施用导致孵化场中的大肠菌群的水平降低至少1log。在该方法的另外的实施例中,施用导致孵化柜中的大肠菌群的水平降低至少1log。在该方法的另外的实施例中,施用导致孵化场中的大肠菌群的水平降低至少2log。在该方法的另外的实施例中,施用导致孵化柜中的大肠菌群的水平降低至少2log。
在优选的实施例中,该方法涉及鸡和/或火鸡的处理。在一个实施例中,该方法涉及肉鸡和/或蛋鸡的处理。
在优选的实施例中,该方法涉及在孵化前在家禽孵化柜中施用一种或多种益生菌。可替代地,该方法涉及在孵化后例如在孵化后24小时内,例如在孵化后20、18、16、14、12、10、8、6、4、2、1小时之内,在家禽孵化柜中施用一种或多种益生菌。在一个实施例中,一些蛋是已孵化的,一些没有孵化。当在家禽孵化柜中施用一种或多种益生菌时,优选小于90%是已孵化的,例如小于80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、10%、5%或小于1%是已孵化的。
施用可以重复一次或多次,例如,在孵化之前和/或之后,例如重复2、3、4、5、6、7、8、9或10次。可替代地,可以在孵化柜中连续地施用。
在该方法的优选的实施例中,所述一种或多种益生菌具有一种或多种选自下组的特性,该组由以下组成:
i)在商业规模的固态发酵中稳健地形成高质量的芽孢,
ii)在深层发酵中稳健地生长并在冻干后保持稳定性,
iii)成功在家禽胃肠道中萌发并定殖于家禽胃肠道,
iv)改善家禽表现参数(例如死亡率、体重增加(BWG)和/或饲料转化率(FCR)),
v)改善幼小雏鸡的家禽表现参数(例如,在第7至10天测量的雏鸡体重和/或均匀性的改善),
vi)在体外和体内研究中抑制常见的家禽病原体,和
vii)保持在孵化柜环境中的生存力。
在该方法的另一个优选的实施例中,一种或多种益生菌能够减少孵化柜环境中革兰氏阴性细菌的发生率和/或降低生命终止死亡率和/或改善饲料转化率,和/或增加家禽的体重增加。
益生菌在孵化柜中的应用优选地在雏鸡暴露于可能具有终生有害作用的非有益或致病菌之前向肠道提供先驱定殖菌。
该应用方法优选地对孵化柜中的所有雏鸡提供均匀处理,可能改善群体均匀性。
通过干喷应用消除了湿喷应用可能伴随的储存(保质期)和应用问题。已经显示所使用的分离株和制剂在孵化柜环境中在所需的时间段内是稳定的。
组合物
在优选的方面,本发明涉及包括一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株的组合物。
在优选的实施例中,对于该组合物,所述一种或多种乳酸菌选自下组,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109或其突变体的所有鉴别特征。
在优选的实施例中,对于该组合物,所述一种或多种芽孢杆菌选自下组,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2或其突变体的所有鉴别特征。
在具体实施例中,对于该组合物,所述一种或多种乳酸菌选自下组,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109。
在另一个具体实施例中,对于该组合物,所述一种或多种芽孢杆菌选自下组,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
在具体实施例中,对于该组合物,所述一种或多种乳酸菌选自下组,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109;
和一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
在优选的实施例中,对于该组合物,所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株包含选自下组的16S rDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:3具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(e)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(f)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
在优选的实施例中,根据本发明的芽孢杆菌属菌株和/或乳酸菌菌株或者根据本发明的组合物具有选自下组的一种或多种特性,该组由以下组成
i)在商业规模的固态发酵中稳健地形成高质量的芽孢,
ii)在深层发酵中稳健地生长并在冻干后保持稳定性,
iii)成功在家禽胃肠道中萌发并定殖于家禽胃肠道,
iv)改善家禽表现参数(例如死亡率、BWG、FCR),
v)在体外和体内研究中抑制常见的家禽病原体,和
vi)保持在孵化柜环境中的生存力。
在另一个优选的实施例中,根据本发明的芽孢杆菌属菌株和/或乳酸菌菌株或者根据本发明的组合物能够减少孵化柜环境中革兰氏阴性细菌的发生率和/或降低生命终止死亡率和/或改善饲料转化率,和/或增加家禽的体重增加。
在具体实施例中,所述组合物包含载体,例如包含以下或由以下组成的载体:a)麦麸片和/或b)碳酸钙和/或c)抗结块剂/流动剂。
从家禽和环境样品中分离芽孢杆菌属分离株(B2、NP122、AM0904),并评估它们在固态发酵系统中稳健生长和形成孢子的能力。还通过体外和体内实验评估了它们在鸡胃肠道内萌发、形成生物膜以及抑制常见家禽和食物相关病原体的能力。
从家禽样品中分离出片球菌属(Pedicoccus)分离株(PVG-18、TY036)并评估它们在深沉发酵系统中生长并在冻干后保持稳定性的能力。还通过体外和体内实验评估了它们抑制常见家禽病原体的能力。选择这些分别用于抑制新生家禽中的病原体和用于GIT的早期刺激。
优选地,该益生菌是分离的。
优选实施例
在下文的一组项目中给出了本发明的优选实施例。
1.一种用于改善家禽的一种或多种表现参数的方法,所述方法包括在家禽孵化柜中施用一种或多种益生菌的步骤。
2.如项目1所述的方法,其中通过将所述一种或多种益生菌喷雾到家禽孵化柜中来进行施用。
3.如项目1或2所述的方法,其中所述一种或多种益生菌是粉末配制品,例如干粉配制品。
4.如项目1-3中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株。
5.如项目1-4中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种乳酸菌菌株。
6.如项目1-5中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
7.如项目1-6中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109或其突变体的所有鉴别特征。
8.如项目1-7中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2或其突变体的所有鉴别特征。
9.如项目1-8中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109。
10.如项目1-9中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成:
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
11.如项目1-10中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含选自下组的16S rDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:3具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(e)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(f)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
12.如项目1-11中任一项所述的方法,其中所述一种或多种表现参数选自下组,该组由以下组成:体重增加、生长速率、饲料转化率和总体健康状况。
13.如项目1-12中任一项所述的方法,其中家禽孵化柜中的细菌大量繁殖被修饰或控制。
14.如项目1-13中任一项所述的方法,其中该家禽是鸡和/或火鸡。
15.如项目1-14中任一项所述的方法,其中同时施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
16.如项目1-15中任一项所述的方法,其中随后以任何顺序施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
17.如项目1-16中任一项所述的方法,其中随后施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用所述一种或多种乳酸菌菌株之前施用一种或多种芽孢杆菌属菌株。
18.如项目1-17中任一项所述的方法,其中随后施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用一种或多种芽孢杆菌属菌株之前施用一种或多种乳酸菌菌株。
19.如项目1-18中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株以干配制品施用。
20.如项目1-19中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株以湿配制品如水性配制品施用。
21.如项目1-20中任一项所述的方法,其中所述一种或多种乳酸菌菌株以干配制品施用。
22.如项目1-21中任一项所述的方法,其中所述一种或多种乳酸菌菌株以湿配制品如水性配制品施用。
23.如项目1-22中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株施用超过一次,例如2、3、4、5、6、7、8、9、10或多于10次。
24.如项目1-23中任一项所述的方法,其中所述一种或多种乳酸菌菌株施用超过一次,例如2、3、4、5、6、7、8、9、10或多于10次。
25.如项目1-24中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株以选自下组的剂量施用,该组由以下组成:每只禽1x105至1x106CFU芽孢杆菌、每只禽1x106至1x107CFU芽孢杆菌、每只禽1x107至1x108CFU芽孢杆菌、每只禽1x108至1x109CFU芽孢杆菌、每只禽1x109至1x1010CFU芽孢杆菌、每只禽1x1010至1x1011CFU芽孢杆菌、每只禽1x1011至1x1012CFU芽孢杆菌,或其任何组合。
26.如项目1-25中任一项所述的方法,其中所述一种或多种乳酸菌菌株以选自下组的剂量施用,该组由以下组成:每只禽1x104至1x105CFU乳酸菌、每只禽1x105至1x106CFU乳酸菌、每只禽1x106至1x107CFU乳酸菌、每只禽1x107至1x108CFU乳酸菌、每只禽1x109至1x1010CFU乳酸菌、每只禽1x1010至1x1011CFU乳酸菌、每只禽1x1011至1x1012CFU乳酸菌,或其任何组合。
27.如项目1-26中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌和/或该一种或多种乳酸菌菌株在转移至孵化柜时施用。
28.如项目1-27中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌和/或一种或多种乳酸菌菌株在选自下组的时间施用,该组由以下组成:从10%破壳至20%破壳、从20%破壳至30%破壳、从30%破壳至40%破壳、从40%破壳至50%破壳、从50%破壳至60%破壳、从60%破壳至70%破壳、从70%破壳至80%破壳、从80%破壳至90%破壳、从90%破壳至100%破壳,或其任何组合。
29.如项目1-28中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌和/或一种或多种乳酸菌菌株在选自下组的时间施用,该组由以下组成:从10%孵化至20%孵化、从20%孵化至30%孵化、从30%孵化至40%孵化、从40%孵化至50%孵化、从50%孵化至60%孵化、从60%孵化至70%孵化、从70%孵化至80%孵化、从80%孵化至90%孵化、从90%孵化至100%孵化,或其任何组合。
30.一种组合物,所述组合物包含一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
31.如项目30所述的组合物,其中所述一种或多种乳酸菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109或其突变体的所有鉴别特征。
32.如项目30或31所述的组合物,其中所述一种或多种芽孢杆菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2或其突变体的所有鉴别特征。
33.如项目30-32中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种乳酸菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109。
34.如项目30-33中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种芽孢杆菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
35.如项目30-34中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株包含选自下组的16S rDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:3具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(e)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(f)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
36.如项目30-35中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种乳酸菌处于芽孢形式。
37.如项目30-36中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种芽孢杆菌处于芽孢形式。
38.如项目30-37中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种乳酸菌是分离的。
39.如项目30-38中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种芽孢杆菌是分离的。
40.如项目30-39中任一项所述的组合物,其中该组合物是干配制品。
41.如项目30-39中任一项所述的组合物,其中该组合物是湿配制品。
另外的优选实施例:
在下文的一组项目中给出了本发明的另外的优选实施例。
1.一种用于改善家禽的一种或多种表现参数的方法,所述方法包括在家禽孵化柜中施用一种或多种益生菌的步骤。
2.如项目1所述的方法,其中通过将所述一种或多种益生菌喷雾到家禽孵化柜中来进行施用。
3.如项目1或2所述的方法,其中所述一种或多种益生菌是粉末配制品,例如干粉配制品。
4.如项目1-3中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株。
5.如项目1-4中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种乳酸菌菌株。
6.如项目1-5中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
7.如项目1-6中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109或其突变体的所有鉴别特征。
8.如项目1-7中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,和
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征。
9.如项目1-8中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2或其突变体的所有鉴别特征。
10.如项目1-7或9中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109。
11.如项目1-10中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,和
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
12.如项目1-11中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
13.如项目1-7、9-10或12中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含选自下组的16S rDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:3具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(e)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(f)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
14.如项目1-13中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含选自下组的16S rDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(e)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
15.如项目1-14中任一项所述的方法,其中所述一种或多种表现参数选自下组,该组由以下组成:体重增加、生长速率、饲料转化率和总体健康状况。
16.如项目1-15中任一项所述的方法,其中家禽孵化柜中的细菌大量繁殖被修饰或控制。
17.如项目1-16中任一项所述的方法,在可能的范围内,其中在家禽孵化柜中的细菌大量繁殖被修饰、控制或降低(与未应用该方法的家禽孵化柜中的细菌大量繁殖相比)。
18.如项目1-17中任一项所述的方法,其中该家禽是鸡和/或火鸡。
19.如项目1-18中任一项所述的方法,其中同时施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
20.如项目1-18中任一项所述的方法,其中随后以任何顺序施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
21.如项目1-18中任一项所述的方法,其中随后施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用所述一种或多种乳酸菌菌株之前施用一种或多种芽孢杆菌属菌株。
22.如项目1-18中任一项所述的方法,其中随后施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用一种或多种芽孢杆菌属菌株之前施用一种或多种乳酸菌菌株。
23.如项目1-18中任一项所述的方法,其中逐步施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用所述一种或多种乳酸菌菌株之前施用一种或多种芽孢杆菌属菌株。
24.如项目1-18中任一项所述的方法,其中逐步施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用一种或多种芽孢杆菌属菌株之前施用一种或多种乳酸菌菌株。
25.如项目1-24中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株以干配制品施用。
26.如项目1-24中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株以湿配制品如水性配制品施用。
27.如项目1-26中任一项所述的方法,其中所述一种或多种乳酸菌菌株以干配制品施用。
28.如项目1-26中任一项所述的方法,其中所述一种或多种乳酸菌菌株以湿配制品如水性配制品施用。
29.如项目1-28中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株施用超过一次,例如2、3、4、5、6、7、8、9、10或多于10次。
30.如项目1-28中任一项所述的方法,其中所述一种或多种乳酸菌菌株施用超过一次,例如2、3、4、5、6、7、8、9、10或多于10次。
31.如项目1-30中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株以选自下组的剂量施用,该组由以下组成:每只禽1x105至1x106CFU芽孢杆菌、每只禽1x106至1x107CFU芽孢杆菌、每只禽1x107至1x108CFU芽孢杆菌、每只禽1x108至1x109CFU芽孢杆菌、每只禽1x109至1x1010CFU芽孢杆菌、每只禽1x1010至1x1011CFU芽孢杆菌、每只禽1x1011至1x1012CFU芽孢杆菌,或其任何组合。
32.如项目1-31中任一项所述的方法,其中所述一种或多种乳酸菌菌株以选自下组的剂量施用,该组由以下组成:每只禽1x104至1x105CFU乳酸菌、每只禽1x105至1x106CFU乳酸菌、每只禽1x106至1x107CFU乳酸菌、每只禽1x107至1x108CFU乳酸菌、每只禽1x109至1x1010CFU乳酸菌、每只禽1x1010至1x1011CFU乳酸菌、每只禽1x1011至1x1012CFU乳酸菌,或其任何组合。
33.如项目1-32中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌和/或该一种或多种乳酸菌菌株在转移至孵化柜时施用。
34.如项目1-33中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌和/或一种或多种乳酸菌菌株在选自下组的时间施用,该组由以下组成:从10%破壳至20%破壳、从20%破壳至30%破壳、从30%破壳至40%破壳、从40%破壳至50%破壳、从50%破壳至60%破壳、从60%破壳至70%破壳、从70%破壳至80%破壳、从80%破壳至90%破壳、从90%破壳至100%破壳,或其任何组合。
35.如项目1-34中任一项所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌和/或一种或多种乳酸菌菌株在选自下组的时间施用,该组由以下组成:从10%孵化至20%孵化、从20%孵化至30%孵化、从30%孵化至40%孵化、从40%孵化至50%孵化、从50%孵化至60%孵化、从60%孵化至70%孵化、从70%孵化至80%孵化、从80%孵化至90%孵化、从90%孵化至100%孵化,或其任何组合。
36.一种组合物,所述组合物包含一种或多种芽孢杆菌属菌株和/或一种或多种乳酸菌菌株。
37.如项目36所述的组合物,所述组合物包含一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
38.如项目36或37所述的组合物,所述组合物进一步包含硅酸盐流动助剂。
39.如项目36-38中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种乳酸菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109或其突变体的所有鉴别特征。
40.如项目36-39中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种乳酸菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,和
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征。
41.如项目36-40中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种芽孢杆菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2或其突变体的所有鉴别特征。
42.如项目36-39或41中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种乳酸菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109。
43.如项目36-42中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种乳酸菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,和
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036。
44.如项目36-43中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种芽孢杆菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
45.如项目36-39、41、42或44中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株包含选自下组的16S rDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:3具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(e)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;以及
(f)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
46.如项目36-45中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株包含选自下组的16S rDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(e)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
47.如项目36-46中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种乳酸菌处于芽孢形式。
48.如项目36-47中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种芽孢杆菌处于芽孢形式。
49.如项目36-48中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种乳酸菌是分离的。
50.如项目36-49中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种芽孢杆菌是分离的。
51.如项目36-50中任一项所述的组合物,其中该组合物是干配制品。
52.如项目36-51中任一项所述的组合物,其中该组合物是湿配制品。
53.一种改善家禽的一种或多种表现参数的益生菌。
54.如项目53所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株。
55.如项目53或54所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种乳酸菌菌株。
56.如项目53-55中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株或一种或多种乳酸菌菌株。
57.如项目53-56中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含另外的细菌菌株。
58.如项目53-57中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
59.如项目53-58中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109或其突变体的所有鉴别特征。
60.如项目53-59中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,和
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征。
61.如项目53-60中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2或其突变体的所有鉴别特征。
62.如项目53-59或61中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109。
63.如项目53-62中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,和
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
64.如项目53-63中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
65.如项目53-59、61、62或64中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含选自下组的16S rDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:3具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(e)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(f)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
66.如项目53-65中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含选自下组的16SrDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(e)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
67.一种益生菌,用于处理家禽以改善一种或多种表现参数,其中该益生菌在家禽孵化柜中施用。
68.如项目67所述的益生菌,其中通过将一种或多种益生菌喷雾到家禽孵化柜中来进行施用。
69.如项目67或68所述的益生菌,其中该益生菌是粉末配制品,例如干粉配制品。
70.如项目67-69中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株。
71.如项目67-70中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种乳酸菌菌株。
72.如项目67-71中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
73.如项目67-72中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109或其突变体的所有鉴别特征。
74.如项目67-73中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,和
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征。
75.如项目67-74中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2或其突变体的所有鉴别特征。
76.如项目67-73或75中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109。
77.如项目67-76中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,和
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
78.如项目67-77中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
79.如项目67-73、75、76或78中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含选自下组的16S rDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:3具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(e)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(f)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
80.如项目67-79中任一项所述的益生菌,其中该益生菌包含选自下组的16SrDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(e)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
81.如项目67-80中任一项所述的益生菌,其中所述一种或多种表现参数选自下组,该组由以下组成:体重增加、生长速率、饲料转化率和总体健康状况。
82.如项目67-81中任一项所述的益生菌,其中家禽孵化柜中的细菌大量繁殖被修饰或控制。
83.如项目67-82中任一项所述的益生菌,其中家禽孵化柜中的细菌大量繁殖被修饰、控制或降低(与未应用该益生菌的家禽孵化柜中的细菌大量繁殖相比)。
84.如项目67-83中任一项所述的益生菌,其中该家禽是鸡和/或火鸡。
85.如项目67-84中任一项所述的益生菌,其中同时施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
86如项目67-84中任一项所述的益生菌,其中随后以任何顺序施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
87.如项目67-84中任一项所述的益生菌,其中随后施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用一种或多种乳酸菌菌株之前施用一种或多种芽孢杆菌属菌株。
88.如项目67-84中任一项所述的益生菌,其中随后施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用一种或多种芽孢杆菌属菌株之前施用一种或多种乳酸菌菌株。
89.如项目67-84中任一项所述的益生菌,其中逐步施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用所述一种或多种乳酸菌菌株之前施用一种或多种芽孢杆菌属菌株。
90.如项目67-84中任一项所述的益生菌,其中逐步施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用一种或多种芽孢杆菌属菌株之前施用一种或多种乳酸菌菌株。
91.如项目67-90中任一项所述的益生菌,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株以干配制品施用。
92.如项目67-91中任一项所述的益生菌,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株以湿配制品如水性配制品施用。
93.如项目67-92中任一项所述的益生菌,其中所述一种或多种乳酸菌菌株以干配制品施用。
94.如项目67-93中任一项所述的益生菌,其中所述一种或多种乳酸菌菌株以湿配制品如水性配制品施用。
95.如项目67-94中任一项所述的益生菌,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株施用超过一次,例如2、3、4、5、6、7、8、9、10或多于10次。
96.如项目67-94中任一项所述的益生菌,其中所述一种或多种乳酸菌菌株施用超过一次,例如2、3、4、5、6、7、8、9、10或多于10次。
97.如项目67-96中任一项所述的益生菌,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株以选自下组的剂量施用,该组由以下组成:每只禽1x105至1x106CFU芽孢杆菌、每只禽1x106至1x107CFU芽孢杆菌、每只禽1x107至1x108CFU芽孢杆菌、每只禽1x108至1x109CFU芽孢杆菌、每只禽1x109至1x1010CFU芽孢杆菌、每只禽1x1010至1x1011CFU芽孢杆菌、每只禽1x1011至1x1012CFU芽孢杆菌,或其任何组合。
98.如项目67-97中任一项所述的益生菌,其中所述一种或多种乳酸菌菌株以选自下组的剂量施用,该组由以下组成:每只禽1x104至1x105CFU乳酸菌、每只禽1x105至1x106CFU乳酸菌、每只禽1x106至1x107CFU乳酸菌、每只禽1x107至1x108CFU乳酸菌、每只禽1x109至1x1010CFU乳酸菌、每只禽1x1010至1x1011CFU乳酸菌、每只禽1x1011至1x1012CFU乳酸菌,或其任何组合。
99.如项目67-98中任一项所述的益生菌,其中所述一种或多种芽孢杆菌和/或该一种或多种乳酸菌菌株在转移至孵化柜时施用。
100.如项目67-99中任一项所述的益生菌,其中所述一种或多种芽孢杆菌和/或一种或多种乳酸菌菌株在选自下组的时间施用,该组由以下组成:从10%破壳至20%破壳、从20%破壳至30%破壳、从30%破壳至40%破壳、从40%破壳至50%破壳、从50%破壳至60%破壳、从60%破壳至70%破壳、从70%破壳至80%破壳、从80%破壳至90%破壳、从90%破壳至100%破壳,或其任何组合。
101.如项目67-100中任一项所述的益生菌,其中所述一种或多种芽孢杆菌和/或一种或多种乳酸菌菌株在选自下组的时间施用,该组由以下组成:从10%孵化至20%孵化、从20%孵化至30%孵化、从30%孵化至40%孵化、从40%孵化至50%孵化、从50%孵化至60%孵化、从60%孵化至70%孵化、从70%孵化至80%孵化、从80%孵化至90%孵化、从90%孵化至100%孵化,或其任何组合。
102.一种或多种益生菌在制造用于改善家禽的一种或多种表现参数的药物中的用途,其中所述一种或多种益生菌施用至家禽孵化柜中的家禽。
103.一种或多种益生菌用于改善家禽的一种或多种表现参数的用途,所述用途包括将一种或多种益生菌施用至家禽孵化柜中的家禽的步骤。
104.如项目102或103所述的用途,其中通过将所述一种或多种益生菌喷雾到家禽孵化柜中来进行施用。
105.如项目102-104中任一项所述的用途,其中所述一种或多种益生菌是粉末配制品,例如干粉配制品。
106.如项目102-105中任一项所述的用途,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株。
107.如项目102-106中任一项所述的用途,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种乳酸菌菌株。
108.如项目102-107中任一项所述的用途,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
109.如项目102-108中任一项所述的用途,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109或其突变体的所有鉴别特征。
110.如项目102-109中任一项所述的用途,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,和
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征。
111.如项目102-110中任一项所述的用途,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2或其突变体的所有鉴别特征。
112.如项目102-109或111中任一项所述的用途,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109。
113.如项目102-112中任一项所述的用途,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,和
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
114.如项目102-113中任一项所述的用途,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
115.如项目102-109、110-112或114中任一项所述的用途,其中所述一种或多种益生菌包含选自下组的16S rDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:3具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(e)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(f)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
116.如项目102-115中任一项所述的用途,其中所述一种或多种益生菌包含选自下组的16S rDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(e)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
117.如项目102-116中任一项所述的用途,其中所述一种或多种表现参数选自下组,该组由以下组成:体重增加、生长速率、饲料转化率和总体健康状况。
118.如项目102-117中任一项所述的用途,其中家禽孵化柜中的细菌大量繁殖被修饰或控制。
119.如项目102-118中任一项所述的用途,在可能的范围内,其中在家禽孵化柜中的细菌大量繁殖被修饰、控制或降低(与未应用该方法的家禽孵化柜中的细菌大量繁殖相比)。
120.如项目102-119中任一项所述的用途,其中该家禽是鸡和/或火鸡。
121.如项目102-120中任一项所述的用途,其中同时施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
122.如项目102-120中任一项所述的用途,其中随后以任何顺序施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株。
123.如项目102-120中任一项所述的用途,其中随后施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用一种或多种乳酸菌菌株之前施用一种或多种芽孢杆菌属菌株。
124.如项目102-120中任一项所述的用途,其中随后施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用一种或多种芽孢杆菌属菌株之前施用一种或多种乳酸菌菌株。
125.如项目102-120中任一项所述的用途,其中逐步施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用所述一种或多种乳酸菌菌株之前施用一种或多种芽孢杆菌属菌株。
126.如项目102-120中任一项所述的用途,其中逐步施用所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株并且其中在施用一种或多种芽孢杆菌属菌株之前施用一种或多种乳酸菌菌株。
127.如项目102-126中任一项所述的用途,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株以干配制品施用。
128.如项目102-127中任一项所述的用途,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株以湿配制品如水性配制品施用。
129.如项目102-127中任一项所述的用途,其中所述一种或多种乳酸菌菌株以干配制品施用。
130.如项目102-129中任一项所述的用途,其中所述一种或多种乳酸菌菌株以湿配制品如水性配制品施用。
131.如项目102-129中任一项所述的用途,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株施用超过一次,例如2、3、4、5、6、7、8、9、10或多于10次。
132.如项目102-130中任一项所述的用途,其中所述一种或多种乳酸菌菌株施用超过一次,例如2、3、4、5、6、7、8、9、10或多于10次。
133.如项目102-132中任一项所述的用途,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株以选自下组的剂量施用,该组由以下组成:每只禽1x105至1x106CFU芽孢杆菌、每只禽1x106至1x107CFU芽孢杆菌、每只禽1x107至1x108CFU芽孢杆菌、每只禽1x108至1x109CFU芽孢杆菌、每只禽1x109至1x1010CFU芽孢杆菌、每只禽1x1010至1x1011CFU芽孢杆菌、每只禽1x1011至1x1012CFU芽孢杆菌,或其任何组合。
134.如项目102-133中任一项所述的用途,其中所述一种或多种乳酸菌菌株以选自下组的剂量施用,该组由以下组成:每只禽1x104至1x105CFU乳酸菌、每只禽1x105至1x106CFU乳酸菌、每只禽1x106至1x107CFU乳酸菌、每只禽1x107至1x108CFU乳酸菌、每只禽1x109至1x1010CFU乳酸菌、每只禽1x1010至1x1011CFU乳酸菌、每只禽1x1011至1x1012CFU乳酸菌,或其任何组合。
135.如项目102-134中任一项所述的用途,其中所述一种或多种芽孢杆菌和/或一种或多种乳酸菌菌株在转移至孵化柜时施用。
136.如项目102-135中任一项所述的用途,其中所述一种或多种芽孢杆菌和/或一种或多种乳酸菌菌株在选自下组的时间施用,该组由以下组成:从10%破壳至20%破壳、从20%破壳至30%破壳、从30%破壳至40%破壳、从40%破壳至50%破壳、从50%破壳至60%破壳、从60%破壳至70%破壳、从70%破壳至80%破壳、从80%破壳至90%破壳、从90%破壳至100%破壳,或其任何组合。
137.如项目102-136中任一项所述的用途,其中所述一种或多种芽孢杆菌和/或一种或多种乳酸菌菌株在选自下组的时间施用,该组由以下组成:从10%孵化至20%孵化、从20%孵化至30%孵化、从30%孵化至40%孵化、从40%孵化至50%孵化、从50%孵化至60%孵化、从60%孵化至70%孵化、从70%孵化至80%孵化、从80%孵化至90%孵化、从90%孵化至100%孵化,或其任何组合。
实例
生物材料的鉴定、表征和保藏
已经根据布达佩斯条约,在农业研究机构培养物保藏中心(AgriculturalResearch Service Culture Collection(NRRL)),北大学街(North University Street)1815号,皮奥瑞亚(Peoria),伊利诺州,61604,美国,保藏了以下生物材料,并且给出以下登录号:
鉴定 | 登录号 | 保藏日期 |
乳酸片球菌TY036 | NRRL B-50959 | 2014年4月1日 |
乳酸片球菌FM18 | NRRL B-50964 | 2014年4月1日 |
屎肠球菌MFF109 | NRRL B-50960 | 2014年4月1日 |
解淀粉芽孢杆菌AM0904 | NRRL B-50914 | 2014年3月7日 |
解淀粉芽孢杆菌NP122 | NRRL B-50910 | 2014年3月7日 |
解淀粉芽孢杆菌B2 | NRRL B-50908 | 2014年3月7日 |
这些菌株保藏在如下条件下,所述条件确保其被国外专利法决定授权的未定期间可获得使用培养物的权利。保藏物代表了被保藏菌株的基本上纯的培养物。根据一些国家的国外专利法,保藏物是可获得的,在这些国家提交申请主题的保藏物或其子代。然而应理解,保藏物的可用性不构成将本发明主题用于由政府行为批准的专利权的实践的许可。
生物材料的描述
乳酸片球菌TY036于2013年由太平洋兽医集团美国公司(Pacific Vet Group USAInc.)在美国从家禽中分离出来。乳酸片球菌FM18于2003年由阿肯色大学(University ofArkansas)在美国从家禽中分离出来。屎肠球菌MFF109于2013年由太平洋兽医集团美国公司在美国从家禽中分离出来。解淀粉芽孢杆菌AM0904于2009年由阿肯色大学在美国从家禽中分离出来。解淀粉芽孢杆菌NP122于2008年由阿肯色大学在美国从家禽中分离出来。解淀粉芽孢杆菌B2于2009年由阿肯色大学在美国从家禽中分离出来。
实例1:益生菌分离株筛选
之前筛选了候选细菌分离株的益生菌潜力。之前已经证明芽孢杆菌能够在基本培养基上稳健快速生长。这些菌株还显示出在体外和体内抑制病原体的能力。之前已经显示乳酸菌分离株FM18在体外和体内均抑制沙门氏菌和产气荚膜梭菌(Clostridiumperfringens)。之前已经显示乳酸菌菌株TY036和MFF109促进新生家禽的早期肠道发育。
针对常见家禽病原体的体外试验。
将芽孢杆菌分离株(AM0904、NP122和B2)在琼脂平板上与肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)、鼠伤寒沙门氏菌、海德堡沙门氏菌(SalmonellaHeidelberg)、肯塔基沙门氏菌(Salmonella Kentucky)、产气荚膜梭菌和大肠杆菌一起孵育,并测定抑制区。
将乳酸菌分离株(FM18和TY036)在琼脂平板与肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、海德堡沙门氏菌、肯塔基沙门氏菌、产气荚膜梭菌和大肠杆菌一起孵育,并测定抑制区,见表1。
表1.针对常见病原体的体外覆盖试验
简言之,将LAB分离株在de Man、Rogosa和Sharpe(MRS)肉汤中培养过夜,同时在37℃孵育。将芽孢杆菌在胰蛋白酶大豆肉汤中培养过夜,同时在37℃孵育。使用无菌环将LAB转移到MRS平板上或将芽孢杆菌转移到胰蛋白酶大豆琼脂平板上,使得单个密集菌落将在平板或双平板的中心生长。对于LAB,将该平板在37℃孵育48小时或对于芽孢杆菌,孵育24小时。在孵育期间,将目的病原体的过夜培养物在适当的培养基中在37℃孵育。将100微升病原体培养物添加到保持在45℃的10ml胰蛋白酶大豆软琼脂中。将胰蛋白酶大豆软琼脂倒在含有LAB/芽孢杆菌分离株的MRS/胰蛋白酶大豆琼脂平板上,并在37℃孵育过夜。
实例2:在孵化器中测试细菌配制品以达到对致病菌的环境控制
实验1
评估几种测试配制品在商业孵化器中的效果并针对对照孵化器进行测量。商业种禽群体被分层,使得进入的细菌负荷是受控因素。所有的孵化器都在一个共同的孵化器大厅里。对照孵化器不用益生菌或化学品处理。处理组如下所示:1)阴性对照2)单剂量的干芽孢杆菌芽孢(DBS)加水性乳酸菌溶液(LAB)3)单次应用水性芽孢杆菌芽孢(WBS)加LAB 4)3次应用WBS和LAB。所有应用组均使用手持式气动喷雾器进行。转移时给予单次处理。三个应用组在转移时、20%孵化和50%孵化时处理。每次DBS的剂量约为每只禽3x 108个芽孢。每次WBS的剂量约为每只禽3x 108个芽孢。每次LAB的剂量约为每只禽3x 106cfu。干芽孢杆菌芽孢分别在固态培养基中生产、干燥、研磨,并且然后计数。湿芽孢杆菌芽孢分别在肉汤发酵中生长、离心、冻干、研磨,并且然后计数。分别以5:5:1比例的NP122:B2:AM0904给予芽孢。乳酸菌(TY036、MFF109和FM18)分别在肉汤发酵中生长、离心、冻干、研磨,并且然后计数。包含等量的每种菌株。为了测量非选择性回收,在以下每个点将6板胰蛋白酶大豆琼脂放入孵化器中持续5分钟:转移、50%破壳、20%孵化、50%孵化和75%孵化。为了测量革兰氏阴性细菌,在以下每个点将6板麦康基氏琼脂(MacConkey agar)放入孵化器中持续5分钟:转移、50%破壳、20%孵化、50%孵化和75%孵化。为了测量乳酸菌,在以下每个点将6板麦康基氏琼脂放入孵化器中持续5分钟:转移、50%破壳、20%孵化、50%孵化和75%孵化。对于所有板类型,将板在37℃孵育24小时。单剂量的干芽孢杆菌证明在所有时间点都能给出更高的需氧细菌计数,如图1。在视觉上,这些平板上的主要菌落形态是芽孢杆菌。在对照和单剂量的所有时间点,乳酸菌计数都很低。所有时间点的LAB组,图2。LAB在50%孵化和75%孵化时间点增加。在测量的四个时间点中的三个时间点,处理组中的革兰氏阴性菌回收较低,图3。这些结果表明干芽孢杆菌芽孢比孵化器中的水性芽孢杆菌持续更长时间。这些结果也表明LAB不会长时间存在于孵化器中。因此需要多剂量的LAB。所有处理均显著减少了革兰氏阴性菌。这表明这些配制品是减少孵化柜内细菌的病原体大量繁殖(即细菌大量繁殖)的潜在候选者。
实验2
评估测试配制品在孵化器中的效果并针对对照孵化器进行测量。种禽群体被分层,使得进入的细菌负荷是受控因素。所有的孵化器都在一个共同的孵化大厅,并且是属于同一类型的。对照孵化器未用益生菌处理,但用甲醛处理。处理组是干芽孢杆菌芽孢(DBS)加三剂量的水性乳酸菌溶液的三次施用,并与对照(甲醛处理的)孵化器进行比较。芽孢杆菌芽孢分别在固态培养基中生产、干燥、研磨,并且然后计数。分别以5:5:1比例的NP122:B2:AM0904给予芽孢。乳酸菌(TY036、MFF109和FM18)分别在肉汤发酵中生长、离心、冻干、研磨,并且然后计数。包含等量的每种菌株。在处理期间,所述三剂量提供1x109个芽孢/禽和1x107cfu的乳酸菌/禽。为了测量非选择性回收,在以下每个点将6板胰蛋白酶大豆琼脂放入孵化器中持续5分钟:转移、50%破壳、20%孵化、50%孵化和75%孵化。为了测量革兰氏阴性细菌,在以下每个点将6板麦康基氏琼脂(MacConkey agar)放入孵化器中持续5分钟:转移、50%破壳、20%孵化、50%孵化和75%孵化。为了测量乳酸菌,在以下每个点将6板MRS琼脂放入孵化器中持续5分钟:转移、50%破壳、20%孵化、50%孵化和75%孵化。对于所有板类型,将板在37℃孵育24小时。在转移、20%孵化和50%孵化时进行处理。所有时间点的总需氧平板计数均较高,图4。处理组的主要菌落形态是芽孢杆菌。所有时间点的乳酸菌计数也均较高,图5。在处理过的孵化器中,在所有时间点,革兰氏阴性细菌也较高,图6。这些结果表明,与对照组相比,由配制品提供的有益细菌存在并且在处理组中的量更高。虽然处理组中革兰氏阴性细菌的数量也较高,但增加量小于0.5log10cfu。将其与苛刻的化学品甲醛进行比较。这表明该配制品在减少孵化柜内细菌大量繁殖方面可以是甲醛的有效替代品。
实例3:测试细菌配制品改善肉鸡的性能。
将由三种芽孢杆菌分离株(AM0904、NP122)组成的干粉配制品中的细菌配制品与同样是干粉形式的三种乳酸菌菌株(FM18、TY036和MFF109)组合。通过机械气动分配器在转移、20%孵化和50%孵化、和75%孵化时施用配制品。在处理期间,所述四剂量提供1x 109个芽孢/禽和1x 107cfu的乳酸菌/禽。芽孢杆菌芽孢分别在固态培养基中生产、干燥、研磨,并且然后计数。分别以5:5:1比例的NP122:B2:AM0904给予芽孢。乳酸菌(TY036、MFF109和FM18)分别在肉汤发酵中生长、离心、冻干、研磨,并且然后计数。包含等量的每种菌株。将粉末应用到孵化器的通风系统中,并使用搅拌扇将来自配制品的有益细菌分配到孵化柜周围。在处理组和对照组之间随机分配种禽群体以控制进入的细菌负荷和蛋大小。在对照组和处理组之间划分单个孵化器过道以控制孵化器环境。另外的合同商业农场分为对照组和治疗组,以控制养成房(禽舍)环境和管理。共评估了16个房间(8个处理过的房间和8个对照房间)(400,000只肉鸡)。测量7天体重和死亡率。在每个处理或对照的房间中,称重10个禽分组中的至少400只雏鸡。从房间内从不同点取雏鸡以减少取样误差。7天死亡率取自鸡群管理者观察禽舍维持的记录。处理组具有改善的7天体重和改善的7天死亡率,图7。处理组中在售鸡群的体重和存活率也得到了改善,图8。处理过的鸡群的饲料转化率升高7个点,图9。肉鸡积分器使用其数据收集方法报告了鸡群数据的结束。这些结果表明,细菌配制品在7天和鸡群结束时均改善了表现。体重和存活率显示从7天到鸡群结束的持续分歧。饲料转化率提高7个点显示饲料利用率提高3.5%,其为肉鸡生长的主要成本,也是鸡群健康和表现的指标。
实例4:测试细菌配制品处理过的雏鸡的耐热芽孢、假定乳酸菌(LAB)和革兰氏阴性菌
测试用实例3的细菌配制品或甲醛处理的雏鸡的肠道的耐热芽孢、假定乳酸菌(LAB)和革兰氏阴性细菌。
材料与方法
就在从孵化器中取出雏鸡之前,每个处理组从孵化器中取出12只禽。将禽运送(约1小时)到适当的研究设施并通过CO2窒息进行人道安乐死。将含有十二指肠、回肠和盲肠的肠道包无菌取出并分别均质化。将肠样品以1:4wt/vol的速率稀释在无菌盐水中。通过将200μl样品(N)置于无菌96孔板的第一行中并通过将20μl转移至180μl无菌盐水来依次稀释至10-7稀释度来进行十倍稀释。将稀释液(N至10-7)以10μl滴在MRS琼脂和麦康基氏琼脂上进行铺板。对于胰蛋白酶大豆琼脂(TSA)铺板,将肠样品在80℃巴氏灭菌10分钟,然后将200μl转移到96孔板中。其余的稀释和铺平板方法与MRS和麦康基氏琼脂相同。在37℃孵育24小时后计数琼脂平板。
结果与讨论
如表2所示,用细菌配制品处理的雏鸡的GIT中发现耐热芽孢显著增加。实验1中异常高的计数是由于样品在稀释和铺板之前未进行巴氏灭菌。随后的实验包括巴氏灭菌步骤。
表2.商业肉鸡仔在孵化当天(DOH)的耐热芽孢计数的平均计数(Log10CFU/g)。平均值基于n=12并以±Std Err显示。*表示甲醛和细菌配制品组之间的显著差异(p<0.05)
计数从用甲醛或细菌配制品处理的雏鸡的GIT分离的假定乳酸菌(LAB)的数量,并显示在表3中。除了实验5之外,所有实验都表明,与甲醛处理的雏鸡相比,从雏鸡GIT中回收的LAB数量降低。该观察结果的一个假设是,选择细菌配制品产品中的两个乳酸片球菌菌株以超过其他LAB分离株,并且可以抑制其他野生型LAB的生长和定殖,从而减少存在的LAB的总数。这种趋势在实验5中没有出现,尽管在甲醛组中看到的LAB数量异常低可能是导致这一结果的原因。
表3.DOH商业肉鸡仔中的假定乳酸菌计数的平均计数(Log10CFU/g)。平均值基于n=12并以±Std Err显示。*表示甲醛和细菌配制品组之间的显著差异(p<0.05)
表4中显示了被分离的革兰氏阴性细菌的数量,所述革兰氏阴性细菌被认为是对宿主而言是致病的或无益的。除了实验5之外,在细菌配制品处理的禽中,革兰氏阴性细菌的数量显示低于甲醛处理的禽。已显示细菌配制品中的所有益生菌分离株对常见的革兰氏阴性分离株具有抑制作用。在实验5中,甲醛和细菌配制品组之间的革兰氏阴性细菌计数相同,尽管两组的总数都非常低。细菌配制品很可能只能将革兰氏阴性菌数量降低到一定水平,因为非常低的水平导致肠道细菌密度低,使细菌配制品分离株和革兰氏阴性菌进行直接竞争不太可能。
表4.DOH商业肉鸡仔中的假定革兰氏阴性细菌计数的平均计数(Log10CFU/g)。平均值基于n=12并以±Std Err显示。*表示甲醛和细菌配制品组之间的显著差异(p<0.05)。
Claims (13)
1.一种用于改善家禽的一种或多种表现参数的方法,所述方法包括在家禽孵化柜中施用一种或多种益生菌的步骤,所述一种或多种益生菌包含一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株,
其中所述一种或多种乳酸菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109或其突变体的所有鉴别特征,
其中致病菌的水平降低,并且
其中当在家禽孵化柜中施用所述一种或多种益生菌时,小于90%的蛋是已孵化的。
2.如权利要求1所述的方法,其中当在家禽孵化柜中施用一种或多种益生菌时,小于的蛋80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、10%、5%或小于1%是已孵化的。
3.如权利要求1所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌和一种或多种乳酸菌菌株在选自下组的时间施用,该组由以下组成:从10%孵化至20%孵化、从20%孵化至30%孵化、从30%孵化至40%孵化、从40%孵化至50%孵化、从50%孵化至60%孵化、从60%孵化至70%孵化、从70%孵化至80%孵化、从80%孵化至90%孵化、从90%孵化至100%孵化,或其任何组合。
4.如权利要求3所述的方法,其中所述一种或多种芽孢杆菌和一种或多种乳酸菌菌株在从10%孵化至90%孵化的时间施用。
5.如权利要求1-4中任一项所述的方法,其中通过将所述一种或多种益生菌喷雾到家禽孵化柜中来进行施用。
6.如权利要求1-5中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌是粉末配制品,例如干粉配制品。
7.如权利要求1-6中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2或其突变体的所有鉴别特征。
8.如权利要求1-7中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含
a)一种或多种选自下组的乳酸菌,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,以及
b)一种或多种选自下组的芽孢杆菌,该组由以下组成
iv)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
v)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
vi)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
9.如权利要求1-8中任一项所述的方法,其中所述一种或多种益生菌包含选自下组的16SrDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:3具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16srDNA;
(d)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(e)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16srDNA;和
(f)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16srDNA。
10.如权利要求1-9中任一项所述的方法,其中所述一种或多种表现参数选自下组,该组由以下组成:体重增加、生长速率、饲料转化率和总体健康状况。
11.一种组合物,所述组合物包含一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株,所述组合物进一步包含硅酸盐流动助剂,
其中所述一种或多种乳酸菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109或其突变体的所有鉴别特征,以及其中所述一种或多种芽孢杆菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904或其突变体的所有鉴别特征,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122或其突变体的所有鉴别特征,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2,该菌株具有保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2或其突变体的所有鉴别特征。
12.如权利要求11所述的组合物,其中
(a)所述一种或多种乳酸菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50964的乳酸片球菌FM18,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50959的乳酸片球菌TY036,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50960的屎肠球菌MFF109,并且
(b)所述一种或多种芽孢杆菌选自下组,该组由以下组成
i)保藏为NRRL保藏号B-50914的解淀粉芽孢杆菌AM0904,
ii)保藏为NRRL保藏号B-50910的解淀粉芽孢杆菌NP122,和
iii)保藏为NRRL保藏号B-50908的解淀粉芽孢杆菌B2。
13.如权利要求11或12所述的组合物,其中所述一种或多种芽孢杆菌属菌株和一种或多种乳酸菌菌株包含选自下组的16SrDNA序列,该组由以下组成:
(a)与SEQ ID NO:1具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(b)与SEQ ID NO:2具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(c)与SEQ ID NO:3具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、10至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;
(d)与SEQ ID NO:4具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16srDNA;
(e)与SEQ ID NO:5具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA;和
(f)与SEQ ID NO:6具有至少98%,例如至少98.2%、至少98.4%、至少98.6%、至少98.8%、至少99.0%、至少99.2%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%,至少99.8%、至少99.9%或100%序列一致性的16s rDNA。
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