MX2012005691A - Compuestos de espiropiperidina como antagonistas del receptor orl-1. - Google Patents

Abstract

Se describen un antagonista del receptor ORL-1 de fórmula (ver formula) sus usos, y métodos para su preparación. Los antagonistas de ORL-1 son considerados útiles en el tratamiento de depresión y/o el tratamiento de sobrepeso, obesidad y/o mantenimiento de peso post-tratamiento para sobrepeso u obesidad. Ciertos compuestos también han demostrado a través de modelos animales que los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento de migrañas.

Description

COMPUESTOS DE ESPIROPIPERIDINA COMO ANTAGONISTAS DEL RECEPTOR ORL-1 La Orfanina FQ (OFQ)/Nociceptina es un péptido de 1 7 aminoácidos que tiene alta afinidad para el receptor acoplado a la proteína G de ORL- 1 (G PC R). El receptor de ORL1 es un G PCR Clase A que se expresa principalmente en el sistema nervioso central y sistema nervioso periférico así como también en el tracto gastrointestinal, músculo liso y sistema inmune. Mientras se relaciona estructuralmente a receptores/péptidos opioides el sistema de OFQ/Nociceptina no exhibe reactividad cruzada significante a receptores/péptidos opioides clásicos y exhibe actividad anti-opioide en vivo (por ejemplo, la ORQ/Nociceptina se ha reportado por exh ibir propiedades anti-nociceptivas) .

Los antagonistas del receptor FQ de Nociceptina/orfanina (NOC/OFQ) , específicamente agonistas del receptor ORL- 1 han demostrado actividad anti-depresiva y actividad anoréctica en numerosos estudios con modelos anima les para depresión y comportam iento al imenticio. Como tal , los antagonistas ORL- 1 se piensa son útiles en el tratam iento de depresión y/o el tratamiento de sobrepeso, obesidad, y/o manten imiento de peso post-tratamiento para sobrepeso u obesidad.

El documento WO 2003/095427 describe ciertos compuestos de espiropiperidinilo como antagonistas de ORL-1 para uso como analgésicos.

Yosh izumi , Takashi et al . (2008) , Design, synthesis, and estructura-activity relationship study of a novel class of ORL-1 receptor antagonists based on N-biarylmethyl spiropiperidine, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters vol. 18, pg. 3778-3782, describe ciertos compuestos de W-biarilmetil-espiropiperidina como antagonistas selectivos de ORL-1.

La presente invención proporciona una familia de compuestos de 4',5'-hidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pirano] con alta potencia antagonista para el receptor ORL-1 y alta ocupación en vivo del receptor ORL-1 en el CNS. Adicionalmente, ciertos de los compuestos tienen un perfil de cardiotoxicología favorable como se determina por selectividad sobre la actividad del canal hERG, así como también con alta selectividad sobre otros receptores fisiológicamente importantes (por ejemplo, opioides mu, kappa y delta, serotonina y receptores de dopamina). Además, ciertos de los compuestos de la presente invención tienen propiedades biofarmacéuticas y biofarmacéuticas favorables (por ejemplo, solubilidad, exposición oral, y permeabilidad del CNS). Ciertos de los compuestos de la presente invención exhiben metabolismo oxidativo reducido que resulta en biodisponibilidad oral favorable. Ciertos compuestos también han demostrados a través de modelos animales, que los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento de migraña.

La presente invención proporciona compuestos de Fórmula I: I en donde R1 es fluoro o cloro; R2a y p2b son cacja uno hidrógeno o son cada uno fluoro; R3 es hidrógeno, metilo, hidroximetilo, o alcoximetilo (Ci- C3); R4 se selecciona a partir del grupo que consiste de fluoro, cloro, ciano, cianometilo, alquilo (( C3), ciclopropilo, hidroximetilo, metoxi, ciclopropilmetoxi, aminocarbonilmetoxi, alcoximetilo (C^Cs), ciclopropiloximetilo, ciclopropilmetoximetilo, 1 -hidroxi- -metiletilo, aminocarboniloximetilo, metilaminocarboniloximetilo, dimetilaminocarboniloximetilo, aminocarbonilo, aminocarbonilmetilo, -CH2-NR5R6, hidroxiimina, metoxiimina, morfolin-4-ilo, morfolin-4-ilmetilo, Ar1, -CH2Ar1, tetrahidrofuran-2-ilo, 3-oxomorfolin-4-ilmetilo, 2-oxopirrolidin-1 -ilmetilo, y 2-oxopiperidin-1-ilmetilo; R5 es hidrógeno, alquilo C -C3, cianometilo, -C(0)CH3, o aminocarbonilmetilo; R6 es hidrógeno o metilo; y Ar1 es una porción seleccionada a partir del grupo que consiste de imidizol-1-ilo, imidizol-2-ilo, 2-metilimidizol-1-ilo, pirazol-1-ilo, 1 ,2,3-triazol-1-ilo; 1 ,2,3-triazol-2-ilo; 1 ,2,4-triazol-1-ilo, isoxazol-3-ilo, oxazol-5-ilo, y 3-metil-1 ,2,4-oxadiazol-5-ilo; o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.

En otro aspecto de la invención se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula I, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, en combinación con un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable. Una modalidad de este aspecto de la invención, la composición farmacéutica además comprende al menos un ingrediente terapéutico adicional, como por ejemplo, un antidepresivo de SSRI, como por ejemplo, fluoxetina. Además, este aspecto de la invención proporciona una composición farmacéutica adaptada para el tratamiento de depresión que comprende un compuesto de fórmula I, o una sal dei mismo farmacéuticamente aceptable, en combinación con uno o más excipientes, portadores o diluyentes del mismo farmacéuticamente aceptables. En otra modalidad de este aspecto de la invención se proporciona una composición farmacéutica adaptada para el tratamiento de sobrepeso, obesidad y/o mantenimiento de peso, que comprende un compuesto de fórmula I, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, en combinación con uno o más excipientes, portadores o diluyentes del mismo farmacéuticamente aceptables. Una modalidad adicional proporciona una composición farmacéutica adaptada para el tratamiento de migraña que comprende un compuesto de fórmula I , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, en combinación con uno o más excipientes, portadores o diluyentes del mismo farmacéuticamente aceptables.

La presente invención también proporciona un método para tratar depresión en un mamífero que comprende administrar a un mamífero en necesidad de tal tratamiento, una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable. Una modalidad adicional proporciona un método para tratar depresión en un mam ífero que comprende administrar a un mam ífero en necesidad de tal tratamiento, una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, y una cantidad efectiva de un antidepresivo de SSRI, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, como por ejemplo, fluoxetina. Otras modalidades de la invención proporcionan métodos para tratar sobrepeso y/o obesidad , y/o un método para el mantenimiento de peso que comprende administrar a un mam ífero en necesidad de tal tratamiento, una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable. En una modalidad particular de estos aspectos de la invención, el mamífero es un humano.

Esta invención también proporciona un compuesto de fórmula I , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable para uso en terapia. Dentro de este aspecto, la invención proporciona un compuesto de fórmula I , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, para uso en el tratamiento de depresión en mam íferos, particularmente humanos. La invención también proporciona un compuesto de fórmula I , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, en combinación con un antidepresivo de SSRI , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, como por ejemplo, fluoxetina, para uso en el tratamiento de depresión en mamíferos, particularmente humanos. Además, este aspecto de la invención incluye cualquiera de los siguientes: un compuesto de fórmula I, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, para uso en el tratamiento de sobrepeso; un compuesto de fórmula I , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, para uso en el tratamiento de obesidad; un compuesto de fórmula I , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, para uso en el mantenimiento del peso (para mantenimiento de peso), particularmente después del tratamiento para sobrepeso u obesidad ; un compuesto de fórmula I , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, para uso en el tratamiento de migraña.

Otro aspecto de esta invención proporciona el uso de un compuesto de fórmula I, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, en la manufactura de un medicamento para el tratamiento de depresión. Otra modalidad de la invención proporciona el uso de un compuesto de fórmula I, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, en la manufactura de un medicamento para el tratamiento de sobrepeso, obesidad, y/o el mantenimiento de peso. Aún otra modalidad de la invención proporciona el uso de un compuesto de fórmula I , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, en la manufactura de un medicamento para el tratamiento de migraña.

Los compuestos de esta invención son bases, y por consiguiente, reaccionan con un número de ácidos orgánicos e inorgánicos para formar sales farmacéuticamente aceptables. Sales farmacéuticamente aceptables de cada uno de los compuestos de la presente invención se contemplan dentro del alcance de la presente solicitud. El término "sal farmacéuticamente aceptable" como se usa en-la presente, se refiere a cualquier sal de un compuesto de fórmula I que es sustancialmente no tóxica a organismos vivientes. Tales sales incluyen aquellas listadas en Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2-19 (1977), las cuales se conocen por el experto en la técnica.

Las abreviaturas usadas aquí son definidas como sigue: "BSA" significa albúmina de suero bovino. "mCPP" significa mefa-clorofenilpiperazina, un agonista del receptor de serotonina no selectivo.

"EDTA" significa ácido etilendiamina tetraacético.

"EGTA" significa ácido etilenglicol tetraacético.

"GTP" significa trifosfato de guanosina.

"HEPES" significa ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinetansulfónico.

"HPLC" significa cromatografía líquida de alta presión "IC50" significa la concentración en la cual se logra 50% de la inhibición máxima.

"LC/ S" significa cromatografía líquida seguida por espectroscopia de masas.

"LC/MS/MS" significa cromatografía líquida seguida por espectroscopia de masas, seguida por una segunda espectroscopia de masa ionizante. "mFST" significa prueba de nado forzado en ratón; un modelo animal para actividad antidepresiva.

"MS" significa espectroscopia de masas.

" S (ES+)" significa espectroscopia de masas usando ionización por electro-rocío.

"NMR" significa resonancia magnética nuclear.

"Indicador RO" significa 2-[(2-Fluorofenil)metil]-3-(2-fluoroespiro[4,5-dihidrotieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1,-il)-A/,/\/-dimetil-propanamida.

"RO" significa ocupación del receptor. "columna SCX" significa columna de intercambio catiónico fuerte.

"SNAr" significa sustitución aromática nucleofílica.

"SSRI" significa inhibidor selectivo de reabsorción de serotonina. "fBu" significa una porción de butilo terciario.

"TLC" significa cromatografía de capa delgada.

"XRD" significa difracción de rayos-X.

Los compuestos preferidos de la presente invención son compuestos en donde: 1) R1 es cloro; R y R son cada uno fluoro; R1 es cloro y R2a y R2b son cada uno fluoro; R1 es fluoro y R2a y R2 son cada uno hidrógeno; R3 es hidrógeno, metilo, hidroximetilo, o metoximetilo; R3 es metilo; R3 es hidroximetilo; R1 es cloro, R2a y R b son cada uno fluoro, y R3 metilo; 9) R1 es cloro, R2a y R2b son cada uno fluoro, y R3 es hidroximetilo; 10) R4 es fluoro, hidroximetilo, metoximetilo, o pirazol-1-ilmetilo; 11) R4 es fluoro; 12) R4 es hidroximetilo; 13) R4 es metoximetilo; 14) R4 es pirazol-1-ilmetilo; 15) cualquiera de las modalidades preferidas 1) hasta 9) en donde R4 es fluoro; 16) cualquiera de las modalidades preferidas 1) hasta 9) en donde R4 es hidroximetilo; 17) cualquiera de las modalidades preferidas 1) hasta 9) en donde R4 es metoximetilo; 18) cualquiera de las modalidades preferidas 1) hasta 9) en donde R4 es pirazol-1 -ilmetilo; Ciertos compuestos preferidos son [2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2, 3-c]piran-7,4'-piperid¡n]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]-3-piridil]metanol; 2-cloro-4,4-difluoro-1 '-[[3-metil-1 -[3-(pirazol-1 -ilmetil)-2-piridil]pirazol-4-il]metil]espiro[5H-t¡eno[2, 3-c]piran-7,4'-p¡perid¡na]¡ y [4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-1 -(3-fluoro-2-pir¡dil)p¡razol-3-il]metanol; o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, (es decir, los Ejem plos 1 , 23, 53, 62, y 63) Un compuesto particularmente preferido de la presente invención es [2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]- 1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]-3-piridil]metanol , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, como por ejemplo, la sal de L-tartrato y/o la sal de HCI, como se ejemplifica en los ejemplos 1 , 62 y 63.

Los compuestos en donde R2a y R2b son cada uno fluoro son preferidos, debido a que los compuestos tienen un perfil de farmacocinética más favorable, son más estables al metabolismo oxidativo. Esto tiene el efecto general de mejorar la biodisponibilidad oral de los compuestos.

Química General Los compuestos de la presente invención se pueden preparar de conformidad con los siguientes esquemas de reacción sintéticos por métodos bien conocidos y apreciados en el arte. Las condiciones de reacción adecuadas para las etapas de estos esquemas de reacción son bien conocidas en el arte y sustituciones apropiadas de solventes y co-reactivos están también dentro de la habilidad de la técnica. Del mismo modo, se apreciará por aquellos expertos en la técnica, que los intermediarios sintéticos pueden ser aislados y/o purificados por varias técnicas bien conocidas como se necesiten o deseen, y que frecuentemente, será posible usar varios intermediarios directamente en etapas sintéticas subsecuentes con poca o ninguna purificación. Además, el experto en la técnica apreciará que en algunas circunstancias, el orden en el cual las porciones son introducidas no es crítico. El orden particular de etapas requeridas para producir los compuestos de Fórmula I es dependiente del compuesto particular siendo sintetizado, el compuesto de partida, y la labilidad relativa de las porciones sustituidas, como es bien apreciado por el químico experto. Todos los sustituyentes, a menos que se indique de otro modo, son como se define previamente, y todos los reactivos son bien conocidos y apreciados en la técnica.

Esquema de reacción 1 Usando condiciones de reacción de aminación reductiva, el compuesto I I I se hace reaccionar con un pirazol carbaldehído apropiadamente sustituido y un agente reductor tal como triacetoxiborohidruro de sodio, en un solvente adecuado tal como tetrahidrofurano a temperatura ambiente para proporcionar el compuesto I I. Bajo una condición apropiada de acoplamiento, el compuesto I I se acopla con el compuesto IV, en donde Hal es cloro, bromo, o yodo, con un catalizador adecuado tal como yoduro de cobre, una base apropiada tal como carbonato de potasio, en un solvente tal como tolueno a temperatura elevada para dar el compuesto G, en donde R4 es R4 o un precursor de R4. Cuando Hal en el compuesto IV es F o Cl, la sustitución aromática nucleofílica (SNAr) es un método alternativo para elaborar el compuesto G. Más específicamente, el compuesto I I puede reaccionar con el compuesto IV en un solvente apropiado tal como dimetilformamida con una base adecuada tal como carbonato de potasio a temperatura elevada para proporcionar el com puesto G . El compuesto I I I también puede reaccionar con un aldeh ido del compuesto V apropiadamente sustituido bajo condiciones de aminación reductiva como anteriormente, para dar el compuesto G deseado. Cuando R4 es un precursor a R4, entonces es convertido a R4 por métodos conocidos.

Esq uema de reacción 2 Los compuestos I l l a, l l l b, y U le se pueden elaborar como se ilustra en el Esq uema de reacción 2. Los compuestos XIV y XV se hacen reaccionar en un solvente apropiado tal como diclorometano en la presencia de un ácido adecuado tal como ácido trifluoroacético. El trifluoroacetato resultante es basificado con solución acuosa de hidróxido de sodio para dar el compuesto XI I I como una base libre. El compuesto XII I en un solvente adecuado tal como metil í-butil éter, se trata con una solución de cloruro de sulfurilo en ácido acético a temperatura ambiental para dar el compuesto VI I I como una sal de clorhidrato. El compuesto VI I I entonces es protegido con un grupo protector de nitrógeno bajo condiciones bien conocidas a los expertos en la técnica para dar el compuesto VI I . (Por ejemplo, véase: Greene and Wuts, Protective Groups in Orqanic Svnthesis. Tercera Edición, Capítulos 2 y 7, John Wiley and Sons I nc. , (1 999)) . Típicamente, el grupo protector es un grupo Boc (fer- jutiloxicarbonilo) . El compuesto VII se hace reaccionar con /V-bromosuccinimida en un solvente apropiado tal como clorobenceno con irradiación de una fuente de luz para dar un compuesto de bromuro, el cual entonces es tratado con una solución de base tal como bicarbonato de sodio acuoso para proporcionar un compuesto hidroxilo. Con o sin aislamiento, el compuesto hidroxilo puede ser además oxidado bajo condiciones de oxidación adecuadas tales como en bromuro de potasio, tetrametilpiperidin-A/-óxido, y solución acuosa de cloruro de sodio para proporcionar el compuesto VI de cetona deseado. El compuesto VI entonces se hace reaccionar con trifluoruro de (bis(2-metiletil)amino)azufre en un solvente apropiado tal como tetrahidrofurano a temperatura elevada, el producto obtenido es des-protegido para proporcionar el compuesto I l la.

El compuesto de fórmula XI I I se desprotege para dar el compuesto XII con un método similar a aquel usado para elaborar el compuesto VI I . El compuesto XI I en un solvente apropiado tal como tetrahidrofurano a temperatura inferior se trata con una base adecuada tal como tetrametilpiperidina de litio, seguida por adición de N- fluorobencensulfonimida para proporcionar un compuesto de fluoruro, el cual es des-protegido con HCI acuoso y basificado con solución acuosa de NaOH para proporcionar el compuesto lllb.

Por el mismo método usado para elaborar el compuesto VI anterior, el compuesto IX se puede obtener a partir del compuesto XII a través de síntesis de tres etapas, tales como bromación, hidroxilación y oxidación. Cada intermediario puede ser aislado como compuesto puro para reacción adicional o hacerse reaccionar sin aislamiento como se describe en la síntesis del compuesto VI. El compuesto IX entonces se trata con un reactivo de intercambio de metal de halógeno adecuado tal como butil litio en un solvente apropiado tal como tetrahidrofurano bajo temperatura inferior, seguido por un reactivo de fluoración tal como N- fluoro-bencensulfonimida para proporcionar el producto fluorado deseado, el cual es entonces des-protegido apropiadamente para dar el compuesto lile deseado.

Esquema de reacción 3 Z = CHO, COO R = Alquilo Los compuestos de formula V se pueden elaborar como se ilustra en el Esquema de reacción 3. El compuesto XVI se hace reaccionar con el compuesto XVI I para proporcionar el compuesto de fórmula XV bajo condiciones de acoplamiento o SNAr descritas anteriormente para la conversión del compuesto I I al compuesto G. Cuando Z es un grupo éster, puede ser reducido a un alcohol primero con un agente reductor apropiado tal como hidruro de aluminio y litio en un solvente apropiado tal como tetrahidrofurano. El alcohol entonces es oxidado a aldehido con un reactivo de oxidación apropiado tal como óxido de manganeso (IV) en un solvente tal como diclorometano.

Cuando R es el precursor de R4, la transformación de R4 a R4 incluirá pero no se limitará a las reacciones tales como aminación reductiva para proporcionar una nueva amina deseada; la reducción de un éster, cetona o aldehido a un alcohol, el cual puede ser además convertido a un compuesto alcoxi o un carbamato; la reducción de un nitrilo a una amida o una amina; la transformación de un éster a un heterociclo tal como oxadiazol bajo condiciones apropiadas. (Para más ejemplos, véase: Richard C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, Segunda Edición, Capítulos 2 y 7 , John Wiley and Sons I nc. , (1 999)).

Las siguientes Preparaciones y Ejemplos son ilustrativos de métodos útiles para la síntesis de los compuestos de la presente invención. Los nombres para muchos de los compuestos ilustrados en las preparaciones y ejemplos se proporcionan a partir de estructuras dibujadas con 'Symyx Draw 3.1 ' o 'Autonom 2000 Ñame'.

Preparación 1 : 4',5,-Dihidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pirano] 3-Tiofenetanol (123.03 mL, 1.11 mol) se agregó a una solución de A/-fer-Dutox¡carbon¡l-4-piperidona (185 g, 928.48 mmol) en diclorometano (1300 mL) y se agitó a temperatura ambiente. Después ácido trifluoroacético (280.82 mL, 3.71 moles) se agregó por goteo (5 min) mientras se enfrió con un baño de agua/hielo (temperatura interna = 14°C-30°C, precaución: desprendimiento de C02). La mezcla de reacción gradualmente se calentó a temperatura ambiente y agitó a tal temperatura por 20 hr. El solvente se evaporó para proporcionar un sólido cristalino beige después del enfriamiento in vacuo. El sólido se formó en suspensión en metil t-butil éter (200 mL), filtró, lavó con metil t-butil éter (2 x 1000 mL) y secó bajo vacío para proporcionar trifluoroacetato de 4',5,-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]piran]-1 -io como un sólido blanco en 95% de rendimiento. MS = (m/z): 210 (M + 1). Hidróxido de sodio 10 M (220.36 mL, 2.20 mol) se agregó a una suspensión agitada de trifluoroacetato de 4',5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]piran]-1-io (285 g, 881.44 mmol) en diclorometano (1 L) con enfriamiento (baño de agua/hielo) y la mezcla resultante se agitó hasta que se obtuvo una mezcla bifásica. Las fases se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2x200 mL). Los orgánicos combinados se concentraron bajo vacío para obtener un aceite espeso el cual se trituró con agua para obtener un precipitado ligeramente amarillo. Lo precipitado se filtró, lavó con agua (300 mL) y hexano (200 mL) y secó bajo vacío a 35°C por 20 hr. para proporcionar el compuesto del título como un sólido ligeramente amarillo en 86% de rendimiento. MS (m/z): 210 (M+ 1 ) .

Preparación 2: Espiro[4, 5-dihidrotieno[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-carboxilato de fer-butilo Espiro[4, 5-dihidrotieno[2, 3-c]piran -7,4'-piperidina] (60 g , 286.6 mmol) en 2-metiltetrahidrofurano (600 mL) se agitó a 22°C por 1 0 min. Después, rer-óutoxicarbonil rer-£>util carbonato (65.6 g, 301 mmol) en 2-metiltetrahidrofurano (300 mL) se agregó por goteo. Después de 12 hr. , se agregó una solución acuosa de cloruro de sodio (250 mL) y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se lavó dos veces con 2-metiltetrahidrofurano (2 x 50 mL) y las capas orgánicas se combinaron y lavaron con salmuera, secaron sobre sulfato de sodio, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar el compuesto del título en 99% de rendimiento. MS (m/z): 31 0 (M + 1 ).

Preparación 3: 2-Fluoroespiro[4, 5-dihidrotieno[2,2-c]piran-7,4'-piperidina] 1. 2-fluoroespiro[4,5-dihidrotieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-carboxilato de rer-butilo 2,2,6,6-Tetrametilpiperidina (18.7 ml_, 110.5 mmol) se agregó sobre tetrahidrofurano (200 mL), y la solución se enfrió bajo nitrógeno a -78°C. Se agregó solución 2.5 M de butil litio en hexano (37.2 mL, 93 mmol) y la mezcla se agitó por 30 min a -78°C. Sobre la solución fresca de 2,2,6,6-tetrametilpiperidina de litio se agregó una solución de espiro[4,5-dihidrotieno[2,3-c]piran-7,4,-piperidin]-1'-carboxilato de ter-but\\o (20 g, 58.2 mmol) en tetrahidrofurano (90 mL) manteniendo la temperatura por debajo de -70°C. Después de 20 min. una solución de /V-fluorobencensulfonimida (30.26 g, 93.07 mmol) en tetrahidrofurano (200 mL) previamente enfriada bajo nitrógeno a -20°C se agregó vía cánula. Después de 1 hr. de agitación, se agregaron agua (20 mL) y solución acuosa de cloruro de amonio (50 mL). Después, la capa orgánica se separó y lo acuoso se lavó dos veces con metil f-butil éter (2 x 25 mL). Los orgánicos se combinaron y el solvente se evaporó bajo presión reducida. El material crudo se purificó por HPLC de fase normal usando hexano/ metil t-butil éter como solventes para dar 2-fluoroespiro[4,5-dihidrotieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-carboxilato de fer-butilo en 50% de rendimiento. MS (m/z): 328 (M+1). 2. 2-Fluoroespiro[4, 5-dihidrotieno[2,2-c]piran-7,4'-piperidina] 37% de ácido clorhídrico ( 1 1 .75 mL, 125.22 mmol) se agregó a una solución de 2'-fluoro-4' , 5'-dihidro-1 H-espiro[piperidin-4, 7'-tieno[2,3-c]piran]-1 -carboxilato de fer-butilo (8.2 g , 25.04 mmol) en alcohol isopropílico (57.4 mL) a 45 °C. La solución resultante se agitó a 45°C por 6.5 hr. El solvente se concentró a una suspensión amarilla. Se agregó agua (50 mL) y la mezcla se basificó con solución acuosa de hidróxido de sodio 5N . La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 mL) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mL), secaron sobre sulfato de sodio, filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar el compuesto del título en 96% de rendimiento. MS (m/z): 228 (M + 1 ).

Preparación 4: Clorhidrato de 2'-Cloro-4',5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pirano] HCI Una solución de 4',5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-cjpirano] (50 g, 238.88 mmol) en una mezcla de ácido acético (400 mL) y metil t-butil éter(40 mL) se enfrió a 1 5°C. Después, una solución de cloruro de sulfurilo (21.20 mL, 262.77 mmol) en ácido acético (100 mL) se agregó por goteo en 40 min a tal temperatura (temperatura interna = 15°C-22°C) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 20 hr.

Después, una solución de cloruro de sulfurilo (1 1 .56 mL, 143.33 mmol) en ácido acético (50 mL) se agregó por goteo a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 30 min. y después se agregó por goteo (30 min) sobre enfriamiento de metil t-butil éter (1 L) con baño de agua/hielo con agitación. Una suspensión blanca se formó y el sólido se filtró. Para obtener un segundo cultivo de material, lo filtrado se concentró (rellenando con metil t-butil éter vía rotoevap). El sólido resultante se suspendió en metil t-butil éter (300 mL), la suspensión se agitó a reflujo (baño: 100°C) y se agregó metanol (30 mL) hasta que se formó una suspensión turbia. Después, la suspensión se enfrió a temperatura ambiente durante la noche. La suspensión además se enfrió en un baño de agua/hielo y filtró. El sólido se lavó con metil t-butil éter (50 mL) y combinó con el primer cultivo para dar el compuesto del título en un 60% de rendimiento. S (m/z): 244 (M + 1 ).

Preparación 5: 2,-Cloro-4,,4'-difluoro-4',5'-dihidroespiro[piperidin-4,7,-tieno[2,3-c]pirano] 1 . 2-cloroespiro[4,5-dihidrotieno[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-carboxilato de fer-óutilo A una suspensión de sal clorhídrica de 2-cloroespiro[4,5-dihidrotieno[2,2-c]piran-7,4'-piperidina] (140 g, 0.49 moles) en diclorometano (1.12 L) se agregó trietilamina (67.25 mL, 1.05 mole), 4-piridamina, A/,/V-dimetil- (3.05 g, 0.025 mole) y di-t-butildicarbonato (111.22 g, 0.509 mole) en porciones y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se lavó con HCI 1N (2 x) y agua. La fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, filtró y concentró bajo presión reducida para proporcionar 2-cloroespiro[4,5-dihidrotieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-carboxilato de fer-6utilo en 53% de rendimiento. MS (m/z): 244 (M + 1 -Boc). 2. 4'-oxo-2'-cloro-4',5,-dihidroespiro[piperidin-417'-tieno[2,3-c]piran]-1-carboxilato de rer-óutilo En un reactor enchaquetado de 5L, se agregó N-bromosuccinimida (115.02 g, 639.77 mmol) a una solución de 2-cloroespi ro[4,5-dih id rotieno[2,3-c]piran-7, 4 '-p i perid i n]-1 '-carboxilato de fer-óutilo (200 g, 581.61 mmol) en clorobenceno (1.60 L) a ta. La suspensión resultante se irradió con 3 lámparas de bombilla x 100 w situadas casi en contacto con la pared del reactor interno y la temperatura del reactor se ajustó a 45°C. Después de 4 hr., se agregó A/-bromosuccinimida (26.14 g, 145.40 mmol) y la temperatura se mantuvo a 40°C por 15 hr.. La mezcla de reacción se enfrió a 0°C y se agregó metil Nbutil éter (500 mL). Se filtró el sólido y la solución se concentró a aproximadamente 1000 mL de solución en clorobenceno. Después, se agregó metil f-butil éter (1000 mL), los sólidos se filtraron y lo filtrado se concentró para proporcionar 600 mL de una solución de clorobenceno. Se agregó Sulfóxido de dimetilo (806.47 mL, 11.35 mol) y bicarbonato de sodio (95.38 g, 1.14 mol) se agregaron a temperatura ambiente. Después de agitación 24 hr. a temperatura ambiente, se agregó agua/hielo (1000 mL) y las fases se separaron. La fase orgánica se lavó con agua (2 x 1 L) y concentró para proporcionar una solución en clorobenceno. Después, se agregó diclorometano (1.2 L) y la mezcla se enfrió a 5°C (baño de agua/hielo). Se agregaron bromuro de potasio (20.27 g, 170.31 mmol) y 2,2,6,6-tetrametilpiperidin-/V-óxido (4.43 g, 28.38 mmol). Después, una solución de hipoclorito de sodio al 6% en agua (644.40 mL, 567.68 mmol) ajustada a pH = 9 con bicarbonato de sodio (s) se agregó a la mezcla de reacción a 5°C y la mezcla resultante se agitó 1 hr. a 5°C a temperatura ambiente. Se agregó agua (1 L) y las fases se separaron. La fase orgánica se lavó con agua (2 x 0.5 L) y se enfrió con baño de agua/hielo. Después, bromuro de potasio (2.03 g, 17.03 mmol), 2,2,6,6-tetrametilpiperid¡n-A/-óxido (0.05 g, 0.32 mmoles) y una solución de 6% de hipoclorito de sodio en agua (128.88 mL, 113.54 mmol) ajustada a pH = 9 con bicarbonato de sodio sólido se agregaron a la mezcla de reacción a 5°C y la mezcla resultante se agitó 1 h desde 5°C a temperatura ambiente. Después, se agregó agua (1 L) y las fases se separaron. La fase orgánica se lavó con agua (2 x 1 L) secó y concentró para proporcionar un sólido marrón oscuro.

El sólido se trituró con hexano (500 mL), metil t-butil éter/hexano 5% (250 mL) y metil t-butil éter/hexano 10% (250 mL) para obtener 4,-oxo-2'-cloro-4',5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3- c]p¡ran]-1 -carboxilato de rer-óutilo como un sólido ligeramente marrón en un 66% de rendimiento. MS (m/z) : 258 (M + 1 (Boc)). 3. 2,-cloro-4',4'-difluoro-4', 5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]piran]-1 -carboxilato de íer-£>utilo En un matraz PFA de 500 ml_ cargado con tetrahidrofurano (81 ml_) se agregó trifluoruro de (bis(2-metoxietil)amino)azufre ( 183.62 g, 829.94 mmol) y 4,-oxo-2'-cloro-4' , 5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]piran]-1 -carboxilato de fer-butilo (1 35 g, 377.24 mmol). La suspensión resultante se agitó a 70°C por 24h. Después, se enfrió a temperatura ambiente y vertió lentamente sobre una mezcla de hielo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (4 L) con agitación (desprendimiento de gas). Se usó metil t-butil éter para transferir el material restante de los matraces. Después que el desprendimiento de gas cesó, se agregó bicarbonato de sodio sólido con agitación hasta que se alcanzó un pH 8. La mezcla resultante se extrajo con metil t-butil éter (3 x 500 mL) hasta que no se detectó producto por TLC en la fase acuosa. Los orgánicos combinados se lavaron con agua (3 x 500 mL) y salmuera (500 mL), secaron sobre sulfato de sodio y concentraron para proporcionar un aceite espeso oscuro (250 g) . El material crudo se disolvió en diclorometano y filtró hasta un gel obturador de sílice eluyendo con metil t-butil éter/hexano 10% (6 L) y metil t-butil éter/hexano (4 L). Se recolectaron las fracciones hasta que no se detectó producto por TLC (20% de metil t-butil éter/hexano UV, Rf = 0.5). Lo filtrado se concentró para obtener un sólido ligeramente marrón el cual se secó bajo vacío a 40°C hasta un peso constante para proporcionar 70% de rendimiento de 2'-cloro-4',4,-difluoro-4',5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]piran]-1 -carboxilato de ter-bu\ \o. MS (m/z): 324 ( + 1 fBu). 4. 2'-Cloro-4',4'-difluoro-4',5,-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pirano] Ácido clorhídrico al 37% (74.12 ml_, 789.78 mmol) se agregó a una solución de 2'-cloro-4',4,-difluoro-4',5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]piran]-1-carboxilato de íer-óutilo (60 g, 157.96 mmol) en alcohol isopropílico (420 ml_) a 45°C. La solución resultante se agitó a 45°C por 15 h. Después, la mezcla se concentró a 1/4 de volumen para proporcionar una suspensión blanca. Se agregó agua (100 ml_) y la suspensión se basificó con solución acuosa de hidróxido de sodio 6N para obtener una mezcla de dos capas que se extrajo con metil t-butil éter (3 x 100 ml_). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mL), secaron sobre sulfato de sodio y concentraron para proporcionar un sólido ligeramente marrón el cual se secó bajo vacío hasta el peso constante para proporcionar 97% del compuesto del título. MS (m/z): 280 (M + 1).

Preparación 6: 2,4,4-Trifluoroespiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidina] 1. 2-bromo-4-hidroxi-espiro[4,5-dihidrotieno[2,3-c]piran-7,4'-p¡peridin]-1 '-carboxilato de fer-butilo Se agregó A/-bromosuccinimida (2.2 equiv) a una solución de espiro[4,5-dihidrotieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-carboxilato de ter-óutilo (13.5 g) en clorobenceno (108 mL). La suspensión resultante se irradió con una lámpara de bombilla de 260 w durante la noche. Se agregó más /V-bromosuccinimida (1.7 g) a la mezcla y la mezcla se irradió con una lámpara de bombilla de 260 w por 3 horas. El solvente se eliminó bajo presión reducida dando un residuo que se disolvió en acetona (650 mL) y se agregó una solución de nitrato de plata (8.8g) en agua (650 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente en la oscuridad durante la noche. La mezcla se filtró y la acetona se evaporó. Se agregó acetato de etilo y la capa orgánica se lavó con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, filtró y el solvente se evaporó bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía Isco de fase normal (eluyente: hexano/acetato de etilo 15-60%) para proporcionar 2-bromo-4-hidroxi-espiro[4,5-dihidrotieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-carboxilato de ter-bu\i\o en un 38% de rendimiento. MS (m/z): 426/428 (M+23/M + 2+23). 2. 2'-bromo-4'-oxo-espiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]piran]-1-carboxilato de ter-but\\o Se agregó bromuro de potasio (535.67 mg, 4.50 mmol) a u solución de 2-bromo-4-hidroxi-espiro[4,5-dihidrotieno[2,3-c]piran-7, ciclohexano]-1 '-carboxilato de ter-buXi\o (7.28g) y 2,2,6,6-tetrametilpiperidin-/V-óxido (281.33 mg, 1.80 mmol,) en diclorometano (70 ml_) a 0°C. En otro recipiente, se agregó bicarbonato de sodio a 10% en hipoclorito de sodio acuoso (22.34 mL, 36.01 mmol) hasta pH 9. Esta solución de hipoclorito de sodio-bicarbonato de sodio se agregó por goteo a 0°C y la suspensión oscura resultante se agitó a 0°C por 15 min. Se agregaron diclorometano (20 mL) y agua (20 mL) y las fases se separaron. La fase orgánica se lavó con agua (20 mL) y secó sobre sulfato de sodio. El solvente se eliminó bajo presión reducida para proporcionar 2'-bromo-4'-oxo-espiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]piran]-1-carboxilato de ter-bu\\\o en un 99% de rendimiento. MS (m/z): 346/348 (M+1 íBu/M+3-tBu). 3. 2-bromo-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-carboxilato de ter-bul\\o En un matraz de perfluoroalcoxi de 100 mL se agregó trifluoruro de (bis(2-metoxietil)amino)azufre (5.16 mL, 27.96 mmol) a tetrahidrofurano seco (3.5 mL). Después, se agregó 2'-bromo-4'-oxo-espiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]piran]-1 -carboxilato de íer-óutilo (4.5 g, 11.19 mmol). La solución se agitó a 70 °C durante la noche. Después de tal tiempo, se agregó metil t-butil éter (30 mL), y la mezcla de reacción se vertió cuidadosamente sobre bicarbonato de sodio (solución acuosa saturada) enfriada en un baño de hielo. Se observó desprendimiento de C02 y se agregó bicarbonato de sodio (solución acuosa saturada) hasta pH 8. La mezcla se extrajo con metil t-butil éter. La capa orgánica se decantó, lavó con salmuera (2 x), secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó bajo presión reducida. Lo crudo se purificó por cromatografía Isco de fase normal eluyendo con metil t-butil éter/hexano para proporcionar 3.2 g de 2-bromo-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-carboxilato de fer-óutilo. MS (m/z): 368/370 (M+ 1 -tBu/M+3-tBu). 4. 2,4,4-trifluoroespiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-carboxilato de ter-bul\\o Butil litio en hexano 2.5 M (47 ml_) se agregó sobre una solución de 2-bromo-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-carboxilato de ter-b t \o (1 .99 g , 4.69 mmol) en tetrahidrofurano (50 ml_) bajo nitrógeno y a -78°C. La mezcla se agitó a -78°C por 1 hora y se agregó /V-fluoro-bencensulfonimida sólida (3.69 g, 1 1 .73 mmol). La mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se agregó solución acuosa saturada de cloruro de amonio y la fase orgánica se extrajo con acetato de etilo, secó sobre sulfato de sodio y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El material crudo se purificó por cromatografía Isco de fase normal (hexano/acetato de etilo 3-12%) para proporcionar 1 .3 g de 2,4,4-trifluoroespiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7)4'-piperidin]-1 '-carboxilato de rer-6utilo que es además purificado por HPLC para obtener 0.818 g de tal compuesto. MS (m/z): 308 (? + 1 -fBu). 5. 2,4,4-Trifluoroespiro[5H-tieno[2 , 3-c]piran-7,4'-piperídina] 2,4,4-trifluoroespiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-carboxilato de í-Buti lo (2.00g , 5.50 mmol) se disolvió en ácido clorhídrico (4N en dioxano) ( 10 ml_, 40 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 h y después se pasó a través de un cartucho SCX de 50 g (intercambio de catión sólido) para proporcionar 1 .3 g del compuesto del título después de la evaporación de amoníaco 2N en fracción de metanol. MS (m/z): 264 (M+ 1 ).

Preparación 7: 2-Cloro-4,4-difluoro-1 '-[(3-metil-l H-pirazol-4-il)metil]espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidina] A una solución de 2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidina ( 105 g , 375 mmol) en tetrahidrofurano ( 1 .58 L) se agregó 3-metil-1 H-pirazol-4-carbaldehído (43.40 g , 394.12 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 hr. Después, se agregó triacetoxiborohidruro de sodio en polvo (95.46 g, 450.42 mmol) en 3 porciones. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 15 h. Después, la mezcla de reacción se vertió sobre una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio-hielo (400 mL). Las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo ( 100 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con 50% de salmuera y un sólido precipitó en la fase orgánica. La fase orgánica se concentró para dar 170 g del compuesto del título. MS (m/z): 374 (M+1).

Los compuestos de la Preparación 8-11 se prepararon esencialmente como se describe en la Preparación 7 usando 1,2- dicloroetano como solvente.

Preparación 12: 2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2,3-c]pi 7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-3-metil-pirazol-1-il]piridin-3-carbaldehído A un matraz de 250 mL se agregaron yoduro de cobre(l) (1.91 g, 10.03 mmol), 2-cloro-4,4-difluoro-1 '-[(3-metil-1 H-pirazol-4-il)met¡l]espiro[5H-tieno[2,3-c]p¡ran-7,4'-piper¡d¡na] (25 g, 66.87 mmol), carbonato de potasio (19.60 g, 140.43 mmol), tolueno (50 mL) y una barra de agitación. La mezcla de reacción se desgasificó por 5 ciclos de vacío/relleno. Después, se agregaron 2-bromo-3-formil piridina (18.66 g, 100.31 mmol) y frans-N,N'-dimetilciclohexan-1 ,2-diamina (3.16 mL, 20.06 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente por 5 minutos. Después, se sumergió en un baño de aceite precalentado a 115°C y agitó por 15 h a tal temperatura. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, diluyó con 300 mL de acetato de etilo y filtró a través de celita. Se lavó con acetato de etilo (100 mL) y solución acuosa de hidróxido de amonio (3%) (4 x 100 mL) para remover restos de cobre, y después, se lavó con agua (50 mL) y salmuera (50 mL). La solución se secó sobre sulfato de sodio. El solvente se evaporó in vacuo para dar un sólido bronceado. El sólido se filtró a través de una almohadilla de gel de sílice usando como eluyente 2-propanol/diclorometano (3% a 5% de 2-propanol) para dar el compuesto del título en 69% de rendimiento. MS (m/z): 479 (M+1 ).

Preparación 1 3: 2-[4-[(2-Fluoroespiro[4, 5-dihidrotieno[2, 3-c]p piperidin]-! '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]piridin-3-carbaldeh ído El compuesto de la Preparación 1 3 se preparó esencialmente como se describe en la Preparación 12 usando 2-bromopiridin-3-carbaldehído y 2-fluoro-1 '-[(3-metiM H-pirazol-4-il)metil]espiro[4,5-dihidrotieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidina]. El residuo se purificó por cromatografía Isco de fase normal para proporcionar 83% del compuesto del título. MS (m/z): 427 (M + 1 ) .

Preparación 14: A/-[(2-Cloro-3-piridil)metil]acetamida A una solución de (2-cloro-3-piridil)metanamina (300 mg, 2.10 mmol) en diclorometano (2 mL) a temperatura ambiente se agregó anhídrido de ácido acético (198.88 µ ?_, 2. 10 mmol) y trietilamina (293.26 µ?_, 2.10 mmol) . Después de 1 h la reacción se apagó con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y extrajo con diclorometano. La capa orgánica se separó, secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó in vacuo para proporcionar 184 mg de A/-[(2-cloro-3-piridil)metil]acetamida. MS (m/z): 185 (M + 1) Preparación 15: (2-Bromo-3-p¡ridil)metil metansulfonato 1. (2-Bromo-3-pir¡dil)metanol A un matraz de fondo redondo de 2L (ajustado con barra agitadora, bajo nitrógeno y a 0°C) que contiene 2-bromo-3-piridin-carboxaldehído (22.15 g, 119.08 mmol) y metanol (200 mL), se agregó borohidruro de sodio (1.35 g, 35.72 mmol) en tres porciones. Después de 1 h a 0°C, se agregó agua (200 mL) y la reacción se concentró bajo presión reducida para remover el metanol. El residuo resultante se disolvió en acetato de etilo y lavó con agua (200 mL). La extracción orgánica se lavó con salmuera, secó sobre sulfato de magnesio, filtró y concentró para proporcionar 22 g de (2-bromo-3-piridil)metanol como un sólido blanco. MS (m/z): 188 (M + 1), 190 (M+3). 2. (2-Bromo-3-piridil)metil metansulfonato Se agregó trietilamina (8.90 mL) a un matraz de fondo redondo que contiene una solución de (2-bromopiridin-3-il)metanol (8 g, 42.55 mmol) en diclorometano (212 mL) a 0°C, después se agregó cloruro de metansulfonilo (3.95 mL) y la mezcla se agitó a tal temperatura por 1 .5 h. Después de tal tiempo la mezcla se lavó con agua y la capa orgánica se decantó, secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó bajo presión reducida para proporcionar 10.4 g del compuesto del título usado sin purificación adicional . MS (m/z): 266, 268 (M + 1 ; M+3).

Preparación 16: 2-(2-Bromo-3-piridil)propan-2-ol Diisopropilamida de litio (2M, 12.5 mL, 25 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano (40 mL) y enfrió a -78°C. Se agregó 2-Bromopiridina (3.9 g, 25 mmol) por goteo y la reacción se agitó por 3 hr. antes de agregar acetona (1 mL, secado sobre tamices moleculares recientemente activados) y se dejó calentar a temperatura ambiente. La reacción se apagó con cloruro de amonio saturado y extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía instantánea en columna en sílice, eluyendo con 20% de hexano/íer-óutil metil éter para dar el compuesto del título (1 .4 g, 26%). 1 H-N MR (d6-sulfóxido de dimetilo): 8.23 (dd, J= 1.9, 4.5 Hz, 1 H), 8. 1 9 (dd, J=2.0, 7.8 Hz, 1 H), 7.44 (dd, J=4.5, 7.7 Hz, 1 H), 5.43 (s, 1 H) , 2.1 2 (s, 1 H), 1 .46 (s, 6H) .

Preparación 17: 3-metil-1 H-pirazol-4-carboxilato de etilo Se agregó ácido sulfúrico (18 mL, 337.69 mmol) a una suspensión de ácido 1 H-pirazol-4-carboxílico, 3-metil- (10 g, 79.29 mmol) en etanol (90 mL) y la mezcla se agitó a 85°C por 20 h. Después de tal tiempo, el solvente se removió parcialmente. El residuo se basificó con solución de hidróxido de sodio 1M a pH 6-7 y extrajo con diclorometano. La capa orgánica se decantó, secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó bajo presión reducida para proporcionar 10.3 g del compuesto del titulo que se usó sin purificación adicional. MS (miz): 155 (M+1).

Preparación 18: 2-fluoropiridin-3-carboxilato de metilo Diisopropilamida de litio 2 M (11.3 mL, 22.5 mmol) se agregó lentamente sobre una solución de 2-fluoropiridina (2 g, 20.5 mmol) en tetrahidrofurano (90 mL) bajo atmósfera de nitrógeno a -78°C. Después de 4 h a tal temperatura, se agregó cloroformiato de metilo (1.9 mL, 24.6 mmol) y la mezcla se agitó por una hora adicional a -78°C y se dejó alcanzar la temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se vertió lentamente sobre agua y extrajo en dietil éter. La capa orgánica se lavó con salmuera, secó sobre sulfato de sodio y el solvente se evaporó in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía Isco de fase normal eluyendo con hexano/dietil éter (9/1) para dar 495.2 mg del compuesto del título. MS (miz): 156 (M + 1).

Preparación 19: 1 -(3-Fluoro-2-piridil)-3-metil-pirazol-4-carbaldehído Alcohol f-Butil potásico (29.25 g, 260.68 mmol) se agregó a una solución de 3-metil-1 H-pirazol-4-carbaldehído (26.00 g, 236.12 mmol) en dimetilformamida (250 mL) enfriada en un baño acuoso. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 10 min. Después, se agregó 2,3-dif luorpiridina (25g, 217.24 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 20 hr. La mezcla se vertió sobre una mezcla de agua/hielo y extrajo en acetato de etilo (3 x 20 mL). Los orgánicos se secaron sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando como eluyente hexano/alcohol isopropílico para proporcionar el material crudo con dimetilformamida residual. El material entonces se disolvió en acetato de etilo (100 mL) y lavó con agua (3 x 20 mL). La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y concentraron para dar 19 g del compuesto del título. MS (m/z): 206 (M+1).

Preparación 20: 2-(4-Formil-3-metil-pirazol-1-il)piridin-3-carbonitrilo El compuesto de la Preparación 20 se preparó esencialmente como se describe en la Preparación 19 usando 3-metil-1H-pirazol-4-carbaldehído y 2-fluoropiridin-3-carbonitrilo. El compuesto del título se obtuvo con un rendimiento de 23%. MS (m/z): 213 (M + 1).

Preparación 21: 2-(4-formil-3-metil-pirazol-1 -il)piridin-3-carboxilato de metilo Una mezcla de 3-metil-1 H-pirazol-4-carbaldehído (300 mg, 2.72 mmol), carbonato de potasio (565 mg, 4.08 mmol), 2-f luoropiridin-3-carboxilato de metilo (507 mg, 3.27 mmol) y dimetilformamida (2 ml_) se agitó a 60°C por 16 h. Se agregó agua y el compuesto se extrajo en acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera, secó sobre sulfato de sodio y el solvente se evaporó. La mezcla cruda se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando hexano:acetato de etilo, 2:1 como eluyente para proporcionar 422 mg del compuesto del título. MS (m/z): 246 (M + 1).

El compuesto de la Preparación 22-23 puede ser preparado esencialmente como se describe en la Preparación 21 usando el reactivo 2-cloro piridilo correspondiente.

Preparación 1 -[3-(Dimetilaminometil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carbaldehído 1 . 1 -[3-(dimetilaminometil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carboxilato de etilo Este compuesto se preparó esencialmente como se describe en la Preparación 7 usando 1 -(3-formil-2-piridil)-3-metil-pirazol-4-carboxilato de etilo y dimetilamina en un 95% de rendimiento y se usó sin purificación adicional después del desarrollo. MS (m/z): 289 (M+1) 2. 2. [1-[3-(Dimetilaminometil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-il]metanol A una solución de 1-[3-(dimetilaminometil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carboxilato de etilo (217.7 g, 0.75 mmol) en tetrahidrofurano (5 ml_) enfriada a 0°C y bajo nitrógeno, se agregó hidruro de aluminio y litio 1M en tetrahidrofurano (0.9 ml_, 0.9 mmol) y la mezcla se agitó a tal temperatura por 5 minutos. La reacción se apagó con solución acuosa saturada de cloruro de amonio y lo crudo se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, secó sobre sulfato de sodio y el solvente se evaporó in vacuo. En este ejemplo particular el compuesto no se aisló en la extracción orgánica y se separó finalmente de la solución acuosa con un cartucho SCX para proporcionar 146 mg (78%) de [1-[3-(dimetilaminometil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-il]metanol que se usó sin purificación adicional. MS (m/z): 247 (M+1). 3. 1-[3-(Dimetilaminometil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carbaldehído 3,3,3-Triacetoxi-3-yodoftaluro (0.553 g, 1.3 mmol) se agregó a una solución de [1-[3-(dimetilaminometil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-iljmetanol (0.146 g, 0.59 mmol) en diclorometano (4 mL) a temperatura ambiente. Después de una hora la reacción se apagó por adición de solución de carbonato de sodio 2N y el compuesto se extrajo en diclorometano. La capa orgánica se separó, secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó in vacuo para proporcionar 126 mg de 1-[3-(dimetilaminometil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carbaldehído que se usó sin purificación adicional. MS (m/z): 245 (M + 1).

Preparación 25: 1 -(3-Fluoro-2-piridil)-3-(iso pro poxi metí l)pirazol-4-carbaldehído 1. 3-(bromometil)-1 -(3-fluoro-2-piridil)pirazol-4-carboxilato de etilo A una solución de 1 -(3-fluoro-2-p¡ridil)-3-metil-pirazol-4-carboxilato de etilo (10.2 g, 40.9 mmol) en clorobenceno (205 ml_), se agregó /V-bromosuccinimida (8 g) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó e irradió bajo una lámpara de 100W a temperatura ambiente durante la noche. Después se agregó más /V-bromosuccinimida (2 g) y después de 2 hr., no se detectó material de partida. Los sólidos se filtraron y el solvente se evaporó. Lo crudo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando como eluyente diclorometano y metanol para dar 5.3 g de 3-(bromometil)-1-(3-fluoro-2-piridil)pirazol-4-carboxilato de etilo. MS (m/z): 328; 330 (M + 1; M+3). 2. 1 -(3-fluoro-2-piridil)-3-(isopropoximetil)pirazol-4-carboxilato de isopropilo A una solución de 3-(bromometil)-1 -(3-fluoro-2-piridil)pirazol-4-carboxilato de etilo (1.5 g, 4.57 mmol), en propan-2-ol (23 mL), se agregó isopropoxido de litio (3.02 g) y la mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Después de tal tiempo se agregó más isopropoxido de litio (4.5g) en tres porciones de 1.5 g cada 16 horas. Después de la última adición, la mezcla de reacción finalmente se agitó a 40°C por 16 horas. El solvente se evaporó y el residuo se disolvió en acetato de etilo y lavó con salmuera. La capa orgánica se decantó y secó sobre sulfato de sodio. El solvente se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando como eluyente diclorometano y metanol para dar 317 mg de 1-(3-fluoro-2-piridil)-3-(isopropoximetil)pirazol-4-carboxilato de isopropilo. MS (m/z): 322(M+1). 3. [1-(3-Fluoro-2-piridil)-3-(isopropoximetil)pirazol-4-il]metanol A una solución de 1 -(3-fluoro-2-piridil)-3-(isopropoximetil)pirazol-4-carboxilato de isopropilo (316 mg, 0.98 mmol) en dietil éter (4.9 mL) bajo nitrógeno y enfriada a 0°C, se agregó hidruro de aluminio y litio 1M en tetrahidrofurano (1.2mL). La mezcla se agitó a 0°C por 1 hora. Se agregó agua (46pL) y agitó por 5 min, después 15% de solución acuosa de NaOH (46µ?) y agua (138µ?) se agregaron sucesivamente. Los sólidos se filtraron y el solvente se evaporó para obtener 241 mg de [1 -(3-fluoro-2-piridil)-3-(¡sopropoximetil)p¡razol-4-¡l]metanol que se usó sin purificación adicional. MS (m/z): 266(M + 1 ). 4. 1 -(3-Fluoro-2-piridil)-3-(isopropoximetil)pirazol-4-carbaldehído Una mezcla de [1 -(3-fluoro-2-piridil)-3- (isopropoximetil)pirazol-4-il]metanol (241 mg ; 0.91 mmol) y óxido de manganeso (IV) (791 mg) se agitó en diclorometano (5 mL) a temperatura ambiente durante la noche. Después de tal tiempo, la mezcla de reacción se filtró sobre celita y el solvente se evaporó para obtener 1 97 mg del compuesto del título que se usó sin purificación adicional. MS (m/z): 264 (M + 1 ).

Preparación 26: 1 -(3-Fluoro-2-piridil)-3-(metoximetil)pirazol-4-carbaldehído 1 . 1 -(3-fluoro-2-piridil)-3-(metoximetil)pirazol-4-carboxilato de etilo A una solución de éster etílico del ácido 3-bromometil-1 -(3-fluoro-piridin-2-il)-1 H-pirazol-4-carboxílico ( 1 . 13 g , 3.44 mmol) en acetona (23 ml_), se agregaron yoduro de potasio (200.1 mg), carbonato de potasio (865.33 mg) y metanol (4.18 ml_). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 48 horas. Se detectaron metil y etil éster del compuesto deseado. Los solventes se evaporaron. El residuo se diluyó con diclorometano y lavó con agua. La capa orgánica se decantó, secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó. Se purificó lo crudo por cromatografía Isco de fase normal usando como eluyente acetato de etilo y hexano para proporcionar 599 mg de una mezcla de tanto metil como etil ésteres. MS (m/z): 266 (M+1) y 280 ( + 1). 2. [ 1-(3-Fluoro-2-pir¡d i l)-3-(metoxi metil) pi razo 1-4-il]metanol Este compuesto se preparó esencialmente como se describe en la etapa 3 de la preparación 25 (etapa de reducción) en un 93% de rendimiento y se usó como material de partida 1 -(3-fluoro-2-piridil)-3-(metoximetil)pirazol-4-carboxilato de etilo (en una mezcla que contiene también el metil éster). [1-(3-Fluoro-2-piridil)-3-(metoximetil)pirazol-4-il]metanol se usó sin purificación adicional. MS (m/z): 238 (M + 1). 3. 1-(3-Fluoro-2-piridil)-3-(metoximetil)pirazol-4-carbaldehído Este compuesto se preparó esencialmente como se describe en la etapa 4 de la preparación 25 (etapa de oxidación) en un 91% de rendimiento y se usó como material de partida [1 -(3-fluoro-piridin-2-il)-3-metoximetil-1 H-pirazol-4-il]-metanol. El compuesto del titulo se usó sin purificación adicional. MS (m/z) Preparación 27: 3-Metil-1 -(3-morfolino-2-piridil)pirazol-4-carbaldehído Una mezcla -2-pirid¡l)-3-met¡l-pirazol-4-carbaldehído (230 mg, 1.12 mmol) y morfolina (2 ml_, 22.93 mmol) se calentó bajo irradiación de microondas (temperatura 160°C, tiempo de elevación: 2 min, tiempo de retención: 10 min, potencia: 250 W). El exceso de morfolina se eliminó in vacuo y el residuo se diluyó en diclorometano y lavó en solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La capa orgánica se separó, secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando hexano/acetato de etilo como eluyente (desde 50 hasta 100% en acetato de etilo) para proporcionar 72% del compuesto del título. MS (m/z): 273 (M+1).

Preparación 28: 2-Bromo-3-(metoximetil)piridina A una solución de (2-bromopiridin-3-il)metanol (20 g, 106.37 mmoles) en 140 mL de tetrahidrofurano, se agregó 60% de hidruro de sodio en aceite mineral (6.38 g, 155.5 mmol) a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La solución se agitó a 0°C por 30 minutos. Se agregó yoduro de metilo (7.95 mL, 127.6 mmol) sobre la solución y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se apagó por adición de agua y lo crudo se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó in vacuo para proporcionar 2-bromo-3-(metox¡met¡l)piridina en un 98% de rendimiento que se usó sin purificación adicional. MS (m/z): 202 (M+1), 204 (M+3).

Los compuestos a partir de la Preparación 29-30 se prepararon esencialmente como se describe en la Preparación 28 usando los reactivos de yoduro de alquilo correspondientes.

Preparación 31: 2-Bromo-3-(isopropoximetil)-piridina 1. 2-Bromo-3-(bromometil)-piridina Un matraz Schlenk de 25 mL se cargó con alcohol 2-bromo- 3-piridin bencílico (1g, 5.32 mmol) y diclorometano (15 mL). La solución resultante se enfrió a 0°C en un balo de agua/hielo-sal con agitación magnética vigorosa. Después tribromuro de fósforo (0.55 mL, 5.80 mmol) se agregó por goteo para controlar el exoterma por debajo de 10°C. Resultó una suspensión espesa y después de la adición, el baño se removió y la suspensión se calentó a temperatura ambiente. Después la mezcla se calentó gradualmente a reflujo por 3 h y después a temperatura ambiente durante la noche.

Sobre la mezcla previamente enfriada a 0°C, se agregó agua-hielo y después pH ajustado a básico agregando solución de carbonato de sodio 2M. La capa orgánica se separó y la solución acuosa se lavó dos veces con diclorometano (2 x 10 mL). Todos los orgánicos se combinaron, secaron sobre sulfato de magnesio, filtraron y el solvente se evaporó bajo presión reducida para proporcionar 1.2 g de 2-bromo-3-bromometil-piridina que se usó sin purificación adicional. 2. 2-Bromo-3-(isopropoximetil)-piridina A una solución de alcohol isopropílico (7.31 mL, 95.65 mmol) en dimetilformamida (50 mL) a 0°C se agregó hidruro de sodio (3.63 g, 90.87 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 30 minutos (esta reacción se corrió usando una cubierta como protección especial). Después, 2-bromo-3-bromometil-piridina (6 g, 23.91 mmol) en 10 mL de dimetilformamida se agregó vía jeringa y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 h. Se agregó agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo, lavó con salmuera y agua, secó sobre sulfato de magnesio, filtró y el solvente se evaporó bajo presión reducida. El material crudo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando acetato de etilo y hexano como eluyente (gradiente de 5 hasta 25% de acetato de etilo) para proporcionar 3.67 g del compuesto del título. MS (m/z): 230, 232 (M + 1, M+3) Preparación 32: 2-(2-Bromo-3-piridil)acetonitrilo Una mezcla de 2-bromo-3-bromometil-piridina (840 mg, 3.35 mmol) y cianuro de sodio (187.99 mg, 3.68 mmol) se agitó y sometió a reflujo por 1h en una mezcla de agua (10 mL)-etanol (2 mL). La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano y lavó con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La capa orgánica se separó, secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó in vacuo para dar 83% del compuesto del título que se usó sin purificación adicional. MS (m/z): 197 (M + 1), 199 (M+3).

Preparación 33: 1 -[3-(Ciclopropoximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4- carbaldehído 1 . 1 -[3-(hidroximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carboxilato de etilo A una solución de éster etílico del ácido 1 -(3-formil-piridin- 2-il)-3-metil- 1 H-pirazol-4-carboxílico ( 1 g , 3.9 mmol) en metanol (25 mL), se agregó borohidrato de sodio (220.2 mg , 5.8 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 2 hr. El solvente se eliminó y lo crudo se disolvió en acetato de etilo y lavó con solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La capa orgánica se separó, secó sobre sulfato de sodio, filtró y el solvente se evaporó bajo presión reducida para dar 1 g de 1 -[3-(hidroximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carboxilato de etilo. MS (m/z): 262 (M+ 1 ) 2. 3-metil-1 -[3-(viniloximetil)-2-piridil]pirazol-4-carboxilato de etilo Trifluoroacetato de Paladio(l l) (5. 1 mg, 1 5.3 pmoles) y 4,7-difenil-fenantrolina (5.1 mg, 1 5.3 pmoles) se disolvieron en n-butil vinil éter (6.1 mL, 61 .2 mmol) y éster etílico del ácido 1 -(3-hidroximetil-piridin-2-il)-3-metil-1 H-pirazol-4-carboxílico (800 mg , 3.1 mmol) y se agregaron unas gotas de trietilamina. El matraz se selló y agitó a 75°C por 24 horas. Después la mezcla se enfrió a 24°C y filtró a través de una almohadilla de celita. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando hexano y acetato de etilo como eluyentes (5-20% en acetato de etilo) para dar 605 mg de 3-metil-1 -[3-(viniloximetil)-2-piridil]pirazol-4-carboxilato de etilo. MS (m/z): 288 (M+1) 3. 1 -[3-(ciclopropoximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carboxilato de etilo Dietilzinc en hexano 1.0 M (365.7 µ?_, 3.5 mmol) se agregó bajo nitrógeno a diclorometano (0.9 ml_). La solución se enfrió a 0°C y una solución de ácido trifluoroacético (268.4 µ?_, 3.5 mmol) en diclorometano (0.9 ml_) se agregó muy lentamente. Después de 20 min se agregó una solución de diyodometano (286.1 µ?, 3.5 mmol) en diclorometano (0.9 ml_). Después de 20 min adicionales, se agregó una solución de éster etílico del ácido 3-metil-1-(3-viniloximetil-piridin-2-il)-1 H-pirazol-4-carboxílico (510 mg, 1.8 mmol) en diclorometano (0.9 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se agregó HCI 5% y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, secó sobre sulfato de sodio y el solvente se eliminó bajo presión reducida. Lo crudo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando hexano y acetato de etilo como eluyentes (5-20% en acetato de etilo) para dar 310 mg de 1-[3-(ciclopropoximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carboxilato de etilo. MS (m/z): 302 (M + 1) 4. 1 -[3-(Ciclopropoximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carbaldehído A una solución de éster etílico del ácido 1 -(3-ciclopropoximetil-piridin-2-il)-3-metil-1 H-pirazol-4-carboxílico (41 0 mg , 1 .03 mmol) en tetrahidrofurano (0.15 M) a 0°C bajo nitrógeno, se agregó hidruro de aluminio y litio 1 .0 M en tetrahidrofurano (1 .2 equiv). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 h y se agregó solución acuosa saturada de cloruro de amonio y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, secó sobre sulfato de sodio y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El material crudo se disolvió en diclorometano (14 mL) y se agregó óxido de manganeso (IV) (1 .2 g, 1 3.9 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche y después se filtró a través de una almohadilla de celita y el solvente se evaporó bajo presión reducida. Lo crudo se pasó a través de una almohadilla de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo y diclorometano). El solvente se eliminó bajo presión reducida para proporcionar 90 mg del producto del título. MS (m/z): 258 (M+ 1 ).

Preparación 34: 1 -[3-(Metoximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carbaldehído 1. 1 -[3-(metoximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carboxilato de etilo Este compuesto se preparó esencialmente como se describe en la Preparación 12 usando 3-metil-1 H-pirazol-4-carboxilato de etilo y 2-bromo-3-(metoximetil)piridina en un 83% de rendimiento. MS (m/z): 276 (M+1). 2. [1-[3-(Metoximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-iljmetanol Este compuesto se preparó esencialmente como se describe en la Preparación 24 (etapa 2) usando 1 -[3-(metoximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carboxilato de etilo en un 88% de rendimiento. MS (m/z): 234 (M+1). 3. 1-[3-(Metoximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-carbaldehído Una mezcla de [1-[3-(metoximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-il]metanol (2.2 g, 9.4 mmol) y óxido de manganeso (IV) (19 g, 188.8 mmol) se agitó en diclorometano (20 ml_) a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se filtró sobre celita y el solvente se evaporó bajo presión reducida para proporcionar 1.8 g del compuesto del título que se usó sin purificación adicional. MS (m/z): 232 (M+1).

Preparación 35: 2-Bromo-3-(imidazol-1-ilmetil)piridina A una solución de metansulfonato de (2-bromo-3-piridil)metilo (2.5 g, 9.39 mmol) en etanol (46.97 mL) a temperatura ambiente, se agregaron carbonato de potasio (2.62 g) y 1H-imidazol (1.31 g) . La mezcla se agitó a 50°C. Una especie de emulsión espesa se formó y se agregó 10 mL de etanol y el tipo de emulsión se agitó a 50°C durante la noche. Se agregó agua hasta que todos los sólidos se disolvieron. Después, se concentró bajo presión reducida y el residuo se diluyó con acetato de etilo y lavó con bicarbonato de sodio (solución acuosa saturada). La capa orgánica se decantó, secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó in vacuo. El material crudo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando como eluyente diclorometano y metanol (98/2 a 90/10) para proporcionar 1.42 g del compuesto del título. MS (m/z): 238, 240 (M + 1, +3).

Los compuestos de la Preparación 36-40 se prepararon esencialmente como se describe en la Preparación 35 a partir de los heteroanillos nitrogenados correspondientes. a) Ambos compuestos se obtuvieron en la mima reacción.

Preparación 41 : 2-[(2-Bromo-3-piridil)oxi]acetamida A una solución de 2-bromo-3-piridinol ( 1 .5 g, 8.49 mmol) en tetrahidrofurano ( 1 5 mL) a 0°C se agregó 60% de hidruro de sodio en aceite mineral (509.44 mg , 12.74 mmol) y la mezcla se agitó a tal temperatura por 30 min. Después se agregó acetamida, 2-cloro- (16.98 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante el fin de semana. La mezcla se apagó con agua y extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó in vacuo para dar el compuesto del título en un 75% de rendimiento. El compuesto se usó sin alguna purificación adicional. MS (m/z): 231 (M+1), 233 (M+3).

Preparación 42: 2-Bromo-3-(ciclopropilmetoxi)piridina A una solución de 2-bromo-3-piridinol (500 mg, 2.83 mmol;) en dimetilformamida (3 mL) se agregó a 0°C 60% de hidruro de sodio en aceite mineral (169.81 mg, 4.25 mmol). La mezcla se agitó a tal temperatura por 15 min y se agregó bromometilciclopropano (329.66 pL, 3.40 mmol). Después la reacción se agitó a temperatura ambiente por 1 h y se apagó con agua y extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, lavó con salmuera, secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó in vacuo. Lo crudo se pasó a través de un obturador corto de gel de sílice y el compuesto se eluyó con diclorometano para proporcionar 23% del compuesto del título. MS (m/z): 228 (M + 1), 230 (M+3).

Preparación 43: 1-(3-fluoro-2-piridil)-4-formil-pirazol-3-carboxilato de etilo 1 4-formil-1 H-pirazol-3-carboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo de 1 00 mL se cargó con clorhidrato de semicarbazida (2 g , 1 7.93 mmol) , piruvato de etilo (1 1 .8 mL) y etanoato de sodio (2.97 g). Después se agregó agua (9 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 90 minutos, después se filtró y los sólidos se lavaron con más agua. El sólido blanco se secó bajo vacío en un horno (40°C) durante la noche. Se obtuvo 2.66 g de 2-(carbamoilhidrazono)-propanoato de etilo puro.

Se agregó cloruro de fosforilo (3.28 mL) por goteo a dimetilformamida (7. 1 3 mL) a 0°C. Se removió el baño enfriante para alcanzar la temperatura ambiente después, la mezcla se calentó a 40°C y el 2-(carbamoilhidrazono)propanoato de etilo previamente obtenido (2.66 g, 1 5.36 mmol) se agregó en varias porciones sobre 15-20 min (desprendimiento de gas durante la adición) . Cuando la temperatura interna es 55°C, el baño de calentamiento se remueve de manera que temperatura interna se mantiene en el intervalo de 60-70°C. Después, la mezcla se calentó a 80°C. Casi no se observó más desprendimiento de gas una vez que la reacción se estabilizó a 80°C. La suspensión resultante se agitó a 80°C por 2 h . La mezcla de reacción se vertió sobre una mezcla de hielo/agua (30 mL) y agitó para dar una suspensión. 50% de solución de hidróxido de sodio se agregó por goteo hasta que se alcanzó pH 10. La solución se agitó a 50°C por 5 min. La solución después se enfrió con un baño de agua/hielo y 35% de solución acuosa de ácido clorhídrico se agregó hasta pH 7. La mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se decantó, secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó bajo presión reducida. El residuo se trituró con hexano y algunas gotas de diclorometano para dar 1 .6 g de 4-formil-1 H-pirazol-3-carboxilato de etilo que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional . MS (m/z): 1 69 (M + 1 ). 2. 1 -(3-fluoro-2-piridil)-4-formil-pirazol-3-carboxilato de etilo Una mezcla de 4-formil- 1 H-pirazol-3-carboxilato de etilo (1 .6 g, 9.52 mmol), 2,3-difluorpiridina ( 1 .20 g) y carbonato de potasio ( 1 .97 g) en dimetilformamida (8 mL) se calentó y agitó a 1 00°C por 1 .5 h. Después, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se agregó agua, y la fase orgánica se extrajo con acetato de etilo, decantó, secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó bajo presión reducida. Se purificó lo crudo por cromatografía Isco de fase normal usando acetato de etilo y hexano para dar 71 1 mg del compuesto del título. MS (m/z): 264 (M+1 ).

Preparación 44: 3-Metil-1 -(3-(tetrahidrofuran-2-il)piridin-2-il)-1 H-pirazol-4-carbaldehído 1 . 3-(2,5-Dihidrofuran-2-il)-2-fluoropiridina A un tubo de prueba de tapa roscada que contiene acetato de potasio (440 mg , 4.5 mmol), se agregaron bromuro de tetrabutilamonio (1.4 g, 4.5 mmol) y tamices moleculares 4A en dimetilformamida seca (1.8 mL) bajo 2-fluoro-3-yodopiridina de nitrógeno (400 mg, 1.8 mmol), 2,3-dihidrofurano (1.4 mL, 18 mmol) y acetato de paladio (20 mg, 0.09 mmol). El tubo de reacción se selló rápidamente y agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con dietil éter y la mezcla se filtró sobre celita. Lo filtrado se lavó con agua, secó sobre sulfato de magnesio, filtró y el solvente se evaporó in vacuo. El residuo resultante se purificó por gel de sílice usando cromatografía Isco de fase normal eluyendo con hexano: acetona (gradiente desde 5 hasta 30% en acetona) para dar 170 mg de 3-(2,5-dihidrofuran-2-il)-2-fluoropiridina. MS (m/z): 166 (M + 1). 2. 2-Fluoro-3-(tetrahidrofuran-2-il)piridina Un matraz de fondo redondo que contiene 3-(2,5-dihidrofuran-2-il)-2-fluoropiridina (170 mg, 1 mmol) y 10% de Pd/C en metanol (3.1 mL) se evacuó bajo vacío y llenó con hidrógeno con la ayuda de un globo. La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente y filtró sobre celita. El solvente se evaporó in vacuo para dar 148 mg de 2-fluoro-3-(tetrahidrofuran-2-il)piridina. MS (m/z): 168 (M+1). 3. 3-Metil-1-(3-(tetrahidrofuran-2-il)piridin-2-il)-1H-pirazol-4-carbaldehído A un tubo de prueba de tapa roscada que contiene 2-fluoro-3-(tetrahidrofuran-2-il)piridina (148 mg, 0.88 mmol) en dimetilformamida (2.2 mL) se agregaron 3-metil-1 H-pirazol-4-carbaldehído (81 mg, 0.74 mmol) y carbonato de potasio (152 mg, 1.1 mmol). El tubo de reacción se selló rápidamente (precaución: acumulación de posible presión; se usó un protector de seguridad) y agitó en un baño de aceite precalentado a 110°C por 18 h con la ayuda de un agitador magnético. La mezcla se diluyó con agua y extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, secó sobre sulfato de magnesio, filtró y el solvente se evaporó in vacuo. El residuo resultante se purificó por gel de sílice usando cromatografía Isco de fase normal eluyendo con hexano: acetona (gradiente desde 5 hasta 20% en acetona) para dar 116 mg del compuesto del título. MS (m/z): 258 (M+1).

Preparación 45: 3-(2-Bromo-pirid-3-il)isoxazol 1. Oxima de 2-Bromopir¡din-3-carbaldehído A una solución de 2-bromopiridin-3-carbaldehído (2.04 g) en etanol (25 mL) se agregó clorhidrato de oxilamina (948 mg, 13.16 mmol) y etanoato de sodio (1.09 g, 13.16 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El solvente se evaporó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre diclorometano y agua. La capa orgánica se separó, secó sobre sulfato de sodio, filtró y el solvente se evaporó in vacuo para dar 2 g de oxima de 2-bromopiridin-3-carbaldehído. MS (m/z): 201/203 (M + 1/M+3). 2. [3-(2-Bromo-3-piridil)¡soxazol-5-il]-tr¡met¡ l-si laño A una suspensión agitada de oxima de 2-bromopiridin-3-carbaldehído (400 mg, 1.99 mmol) en diclorometano (3.98 ml_) a 0°C, se agregaron en porciones piridina (201.13 µ?, 2.49 mmol) seguida por N-clorosuccinimida (337.19 mg, 2.49 mmol). Después, se agregaron trimetilsilil)acetileno (350.60 µ?, 2.49 mmol) seguido por trietilamina (346.68 µ?, 2.49 mmol). La mezcla se agitó desde 0°C a temperatura ambiente. Después de dos horas, se agregaron más piridina (321.81 µ?, 3.98 mmol) y /V-clorosuccinimida (539.51 mg, 3.98 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 16 horas. La mezcla de reacción después se apagó con solución saturada de cloruro de amonio. Las capas se separaron y los orgánicos se secaron sobre sulfato de magnesio, filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar [3-(2-bromo-3-piridil)isoxazol-5-il]-trimetil-silano en rendimiento cuantitativo. MS (m/z): 297/299 (M + 1/M+3). 3. 3-(2-Bromo-3-piridil)isoxazol A una solución de [3-(2-bromo-3-piridil)isoxazol-5-il]-trimetil-silano (620 mg, 2.09 mmol) en metanol (18 mL), se agregó carbonato de potasio (29.12 mg, 208.59 µp???ße) en una porción. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 24 h. El solvente se removió en vacío. Lo crudo se dividió entre acetato de etilo y solución saturada de cloruro de amonio. Los orgánicos se lavaron con agua y secaron sobre sulfato de magnesio, filtraron y concentraron bajo presión reducida. Lo crudo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando como eluyente hexano/acetato de etilo desde 66/33 hasta 50/50 para dar 140 mg del compuesto del título como un sólido blanco. MS (m/z): 225/227 (M+1 /M+3). .

Preparación 46: 1 -(3-Cloro-2-piridil)-3-metil-pirazol-4-carbaldehído A una solución de 3-metil-pirazol-4-carbaldehído (0.5 g, 4.5 mmol) en dimetilformamida seca ( 1 5 mL) se agregó carbonato de potasio (2.5 g, 18 mmol,) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a 40 °C por 30 min y después se agregó 1 -fluoro-2-cloropiridina (0.77 g, 6 mmol,). La mezcla de reacción se calentó a 70 °C por 16 h. Después de la terminación, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, diluyó con agua y después extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, filtró y concentró bajo presión reducida. La mezcla cruda se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con hexano/acetato de etilo (75:25, 65: 35) para proporcionar 0.525 g (52%) del compuesto del título. MS (m/z): 222 (M+ 1 ).

Preparación 47: 1 -(3-Ciclopropil-2-piridil)-3-metil-pirazol-4-carbaldehído 1. Ester etílico del ácido 1 -(3-Bromo-piridin-2-il)-3-metil-pirazol-4-carboxílico A la solución de Ester etílico del ácido 3-metil-pirazol-4-carboxílico (2.0 g, 13 mmol) en dimetilformamida seca (30 ml_) se agregó carbonato de potasio (7.2 g, 52 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a 40°C por 30 min y después se agregó 1 -fluoro-2-bromopiridina (3.0 g, 17 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 70 °C por 4 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, diluyó con agua y después extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida. La mezcla cruda se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con hexano/acetato de etilo (85:15, 80:20) para proporcionar 3.2 g (79 %) de Éster etílico del ácido 1 -(3-bromo-piridin-2-il)-3-metil-pirazol-4-carboxílico. MS (miz): 312 (M+3), 310 (M + 1). 2. Éster etílico del ácido 1-(3-Ciclopropil-piridin-2-il)-3-metil-pirazol-4-carboxílico Una mezcla de Éster etílico del ácido 1-(3-bromo-piridin-2-il)-3-metil-pirazol-4-carboxílico (1.5 g, 5.5 mmol), fosfato de potasio (4.0 g, 19.2 mmol), ácido ciclopropilborónico (0.7 g, 8.2 mmol) y tolueno/agua (2:1, 15 mL) se desgasificó con nitrógeno y se agregaron tricilohexilfosfeno (0.1 53 g , 0.54 mmol) y acetato de paladio (0.061 g, 0.27 mmol). La mezcla se desgasificó nuevamente con nitrógeno y el recipiente de reacción se selló y calentó a 1 00 °C por 16 h . La mezcla de reacción se concentró, diluyó con agua y extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, filtró y concentró bajo presión reducida. La mezcla cruda se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con hexano/acetato de etilo (85: 1 5) para proporcionar 1 .6 g (93%) de Éster etílico del ácido 1 -(3-ciclopropil-piridin-2-il)-3-metil-pirazol-4-carboxílico. MS (m/z): 272 (M + 1 ). 3. [1 -(3-Ciclopropil-piridin-2-il)-3-metil-pirazol-4-il]-metanol A una suspensión agitada de hidruro de aluminio y litio (0.44 g, 1 1 .7 mmol) en tetrahidrofurano seco (25 mL) se agregó una solución de Éster etílico del ácido 1 -(3-bromo-piridin-2-il)-3-metil-pirazol-4-carboxílico (1 .6 g, 5.8 mmol) en tetrahidrofurano seco (5 mL) bajo atmósfera de nitrógeno a -78 °C. Después de la adición completa la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente después de agitar durante la noche. La mezcla de reacción se apagó con hidróxido de sodio 1 N después filtró a través de celita. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica combinada se lavó con agua y salmuera, secó sobre sulfato de sodio, filtró y concentró para proporcionar 1 .1 g (84%) de [1 -(3-ciclopropil-piridin-2-il)-3-metíl-pirazol-4-il]-metanol . MS (m/z): 230 (M+1 ). 4. 1 -(3-Ciclopropil-2-piridil)-3-metil-pirazol-4-carbaldehído A una solución de [1 -(3-ciclopropil-pir¡din-2-il)-3-metil-pirazol-4-il]-metanol (1 .1 g, 5.0 mmol) en diclorometano seco ( 15 mL) se agregó clorocromato de piridinio ( 1 .2 g , 5.5 mmol) bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 2 h y después filtró a través de celita. Lo filtrado se concentró bajo presión reducida. La mezcla cruda se purificó en gel de sílice eluyendo con hexano/acetato de etilo (90: 1 0, 80: 20) para proporcionar 0.2 g (20%) del compuesto del título. MS (m/z): 228 (M + 1 ).

Preparación 48: 4-[(2-Bromo-3-piridil)metil]morfolin-3-ona A una solución de 2-bromo-3-bromometil-piridina (0.68 g, 2.36 mmol) en dimetilformamida (1 0 mL) se agregaron hidruro de sodio (0.1 1 g, 60% de suspensión, 2.82 mmol), morfolin-3-ona (0.20 g, 1 .97 mmol) y yoduro de tetrabutilamonio (catal ítico) a 0 °C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 16 horas. Después de la terminación, la mezcla de reacción se dividió entre acetato de etilo (25 mL) y agua (25 mL). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 25 mL) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y concentraron in vacuo. El material crudo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con hexano/acetato de etilo (55:45) para proporcionar 0.35 g (66%) del compuesto del título. MS (miz): 271/273 (M+1, M+3).

Los compuestos de la Preparación 49-50 se prepararon esencialmente como se describe en la Preparación 48 a partir del reactivo lactama correspondiente.

Preparación 51: 1-(3-Cloro-2-piridil)-4-formil-pirazol-3-carboxilato de etilo A una solución de 4-formil-pirazol-3-carboxilato de etilo (1.70 g, 10.1 mmol) y 3-cloro-2-fluoropiridina (1.99 g, 15.1 mmol) en dimetilformamida (20 mL) se agregó carbonato de potasio (2.80 g, 20.2 mmol) y la mezcla se agitó a 100 °C por 16 horas. Después de la terminación, la mezcla de reacción se dividió entre agua (25 mL) y acetato de etilo (25 mL). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 25 mL) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, concentraron in vacuo y purificaron por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con hexano/acetato de etilo (50:50) para proporcionar 1.5 g (54 %) del compuesto del título. MS (m/z): 280 (M + 1).

Preparación 52: 1 -(3-metil-2-pir¡dil)-4-formil-pirazol-3-carboxilato de etilo Una mezcla de 1-(3-cloro-2-piridil)-4-formil-pirazol-3-carboxilato de etilo (1.0 g, 3.5 mmol), trimetilboroxina (0.44 g, 3.50 mmol) y carbonato de potasio (1.4 g, 10.1 mmol) en dioxano (18 mL) y agua (2 mL) se desgasificó con gas de nitrógeno por 10 min y después se agregó trifenilfosfina de paladio (0.40 g, 0.3 mmol) y agitó a 110 °C por 16 h. Después de la terminación, la mezcla de reacción se dividió entre diclorometano (50 mL) y agua (25 mL). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 25 mL) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y concentraron in vacuo. La mezcla cruda se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con hexano/acetato de etilo (70:30) para proporcionar 0.12 g (13 %) del compuesto del título. MS (m/z): 260 (M+ 1 ).

Ejemplo 1 : (Z.)-tartrato de [2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]-3-piridiljmetanol A una solución de 2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol- 1 -il]piridin-3-carbaldehído (12.50 g , 26.10 mmol) en diclorometano ( 125 mL) a 0°C se agregó borohidruro de sodio (0.395 g, 10.44 mmol) y metanol (37.50 mL). El baño de hielo se removió y la reacción se agitó a temperatura ambiente por 30 min. Se agregó agua (50 mL) y la mezcla se concentró a la mitad del volumen resultando en un precipitado sólido pegajoso blanco. Se agregó diclorometano (1 00 mL) y la mezcla bifásica se separó. La capa orgánica se lavó con agua (50 mL), secó sobre sulfato de sodio y concentró a la mitad del volumen (alrededor de 100 mL). Se agregó metil er-¿>util éter (100 mL) y la solución se concentró para proporcionar un precipitado. El sólido se filtró y secó bajo vacío para dar 12 g de [2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]-3-piridil]metanol. MS (m/z): 481 (M+1).

La base libre del compuesto del título (0.48 g, 1 mmol) se disolvió en 3 mL de metanol y se agregó una solución de ácido (/.)-tartárico (0.15g, 1 mmol) en metanol. La mezcla se agitó por diez minutos. El solvente se evaporó y el residuo se secó in vacuo durante la noche para dar (L)-tartrato de [2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-3-metil-pirazol-1-il]-3-piridil]metanol en un rendimiento cuantitativo. MS (m/z): 481 (M+1).

Ejemplo 2: 2-Cloro-4,4-difluoro-1 '-[[1 -[3-(4H-imidazol-2-il)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-il]metil]espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidina] Una solución de 40% de glioxal en agua (4.69 mL, 40.71 mmol) y amoníaco 2N en metanol (54.29 mL, 108.57 mmol) se agregaron a una suspensión de 2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piper¡din]-1'-il)metil]-3-metil-pirazol-1-il]piridin-3-carbaldehído (6.50 g, 13.57 mmol) en metanol (10 mL). La mezcla de reacción se agitó por cinco minutos a 0°C y después a 40°C por 1 hr. Se agregó diclorometano (10 mL) a la suspensión disolviendo casi todo el material. La mezcla se agitó por 4 hr. resultando en una solución ligeramente marrón. La solución se agitó por 8 hr. a 40°C. Se agregaron 40% de Glioxal en agua (2.34 mL, 20:36 mmol) y amoníaco 2N en metanol (27.14 mL, 54.29 mmol) y la mezcla se agitó a 40°C por 15 hr. La mezcla de reacción se concentró a aproximadamente 100 mL y vertió sobre hielo/agua (400 mL) y se formó un precipitado sólido beige. El sólido se filtró, lavó con agua y secó bajo vacío (7 g). El sólido se combinó con otro material crudo preparado esencialmente por el mismo método (10 g). El sólido combinado se disolvió en diclorometano y filtró a través de una almohadilla de gel de sílice eluyendo con diclorometano/metanol (96/4). Las fracciones que contienen el producto se combinaron y concentraron para proporcionar un sólido ligeramente amarillo (11 g). El sólido se extrajo con 10% de hexano/diclorometano bajo reflujo y lo filtrado se concentró. El sólido además se purificó vía cromatografía de gel de sílice eluyendo con mezclas de htdróxido de amonio 2N en metanol/diclorometano, para proporcionar 6.5 g del compuesto del título. MS (miz): 518 (M+1).

Ejemplo 3: 2-Fluoro-1'-[[1 -[3-(1 H-imidazol-2-il)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-il]metil]espiro[4,5-dihidrotieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidina] Este compuesto se preparó esencialmente como se describe en el Ejemplo 2 usando 2-[4-[(2-fluoroespiro[4,5-dihidrotieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]piridin-3-carbaldehído. El residuo se purificó por cromatografía Isco de fase normal para proporcionar 32% del compuesto del título: espectro de masas (m/z): 465 (M+1).

Ejemplo 4: 5-(2-(4-((2'-Cloro-4',4'-difluoro-4',5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]piran]-1-il)metil)-3-metil-1 H-pirazol-1 - il)piridin-3-il)oxazol A un tubo de prueba de tapa roscada que contiene 2-(4-((2'-cloro-4l,4'-difluoro-4,,5,-dihidroespiro[piperidin-4,7,-tieno[2,3-c]piran]-1-il)metil)-3-metil-1 H-pirazol-1 -il)nicotinaldehído (0.120 g, 0.25 mmol) en metanol (2.5 mL) se agregaron carbonato de potasio (0.104 g, 0.75 mmol) e isocianuro de p-toluensulfonilmetilo (0.054 g, 0.28 mmol) bajo nitrógeno. El tubo de reacción se selló rápidamente (precaución: acumulación de posible presión; se usó un protector de seguridad) y se agitó en un baño de aceite precalentado a 65°C por 3 hr. con la ayuda de un agitador magnético. La mezcla se diluyó con metanol y purificó usando un cartucho SCX de 2 g. El solvente se evaporó in vacuo. El residuo resultante se purificó por cromatografía Isco de fase normal eluyendo con hexano/etanol (5-30%) para dar 0.093 g del compuesto del título. S (m/z): 518 (M + 1) Ejemplo 5: (Z-)-Tartrato de 2-Cloro-4,4-difluoro-1 '-[[1 -(3-fluoro-2-piridil)-3-metil-pirazol-4-il]metil]espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidina] A una solución de 2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidina] (19.99 g, 64.33 mmol) en 1 ,2-dicloroetano (120 mL) se agregó 1-(3-fluoro-2-piridil)-3-metil-pirazol-4-carbaldehído (12 g, 58.48 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 15 min. Después, se agregó triacetoxiborohidruro de sodio en polvo (18.59 g, 87.72 mmol) (temperatura interna 25-35°) y la suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente por 15 hr. Se agregó una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio en mezcla de hielo (200 mL) en porciones con agitación. Las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con íer-dutil metil éter (30 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (50 mL) y 50% salmuera (50 mL), secaron sobre sulfato de sodio y concentraron para proporcionar un aceite espeso el cual se purificó vía cromatografía de gel de sílice usando mezclas de diclorometano/metanol como eluyente para dar 18 g de un aceite espeso el cual se trituró con hexano y 10% de íer-óutil metil éter/hexano para proporcionar 16.5 g de 2-cloro-4,4-difluoro-1'-[[1-(3-fluoro-2-piridil)-3-metil-pirazol-4-il]metil]espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidina]. MS (m/z): 469 (M + 1).

La sal de tartrato se preparó esencialmente como se describe en el Ejemplo 1. MS (m/z): 469 (M + 1).

Los compuestos de Ejemplo 6 - 15 se prepararon esencialmente como se describe en el Ejemplo 5 usando el aldehido correspondiente.

Las reacciones se llevaron a cabo usando tetrahidrofurano como solvente.

Ejemplo 16: 2-Cloro-4,4-difluoro-1 '-[[3-metil- 1 -(3-tetrahidrofuran-2-il-2- piridil)pirazol-4-il]metil]espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piper¡dina] A un tubo de prueba de tapa roscada que contiene una mezcla de 3-metil-1 -(3-(tetrahidrofuran-2-il)p¡rid¡n-2-il)-1 H-pirazol-4-carbaldehído (192 mg, 0.75 mmol), 2'-cloro-4',4'-difluoro-4\5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pirano (209 mg, 0.75 mmol) y ácido acético (43 µ?_, 0.75 mmol) en 1 ,2-dicloroetano (2.6 ml_), se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (238 mg, 1.1 mmol). El tubo de reacción se selló y se agitó a temperatura ambiente por 18 hr. con la ayuda de un agitador magnético. La mezcla se diluyó con metanol y purificó usando un cartucho SCX de 10 g y el solvente se evaporó in vacuo. El residuo resultante se purificó además por cromatografía Isco de fase normal eluyendo con hexano:acetona (gradiente desde 5 hasta 30% en acetona) para dar 113 mg del compuesto del título como una mezcla racémica. MS (m/z): 521 (M + 1).

La resolución enantiomérica se llevó a cabo bajo condiciones de SCF (cromatografía de fluido supercrítico) usando Chiralpak AD-H® (Chiral Technologies, Inc., West Chester, Pensilvania, USA) como fase estacionaria y dióxido de carbono/metanol/dimetil etilamina (0.2%) como fase móvil. El primer eluyente es el enantiomero deseado.

Ejemplo 17: (L)-Tartrato de 2-Cloro-4,4-difluoro-1 '-[[1 -(3-fluoro-2-piridil)-3-(isopropoximetil)pirazol-4-il]metil]espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidina] A una solución de 2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2, 3-c]piran-7,4'-piperidina] ( 1 70 mg , 0.61 mmol) en diclorometano (2.4 ml_), se agregó 1 -(3-fluoro-2-piridil)-3-(isopropoximetil)pirazol-4-carbaldehído (192 mg). La mezcla se agitó 10 min a temperatura ambiente. Después, se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (268.3 mg), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se diluyó con diclorometano y se apagó lentamente con bicarbonato de sodio (solución saturada). La fase orgánica después se extrajo con más diclorometano, decantó, secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó bajo presión reducida. El residuo se purificó por HPLC de fase inversa para dar 67.9 mg de 2-cloro-4,4-difluoro-1 '-[[1 -(3-fluoro-2-piridil)-3-(isopropoximetil)pirazol-4-il]metil]espiro[5H-tieno[2, 3-c]piran-7,4'-piperidina]. MS (m/z) : 527 (M + 1 ).

La sal de tartrato se preparó esencialmente como se describe en el Ejemplo 1 . MS (m/z): 527 (M + 1 ).

Ejemplo 18: (L)-Tartrato de 2-Cloro-4,4-difluoro-1 '-[[1 -[3-(metoximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-il]metil]espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'- piperidina] A un tubo de prueba de tapa roscada se agregó yoduro de cobre (I) (1.15 g, 6.02 mmol), 2-cloro-4,4-d¡fluoro-1'-[(3-metil-1 H-pirazol-4-¡l)metil]esp¡ro[5H-t¡eno[2,3-c]piran-7,4'-piperid¡na] (15 g, 40.12 mmol), carbonato de potasio (11.76 g, 84.26 mmol), 15 ml_ de tolueno (previamente burbujeado con nitrógeno por 20 minutos) y una barra agitadora. La mezcla de reacción se burbujeó con nitrógeno por 10 min adicionales y después se agregaron 2-bromo-3-metoximetil-piridina (10.54 g, 52.16 mmol), y trans-N, N'-dimetilciclohexano-1 ,2-diamina (1.90 mL, 12.04 mmol). El tubo de reacción se selló rápidamente (precaución: acumulación de posible presión; se usó un protector de seguridad), se agitó a temperatura ambiente por 5 min y sumergió en un baño de aceite precalentado a 115°C por 24 h. La muestra se enfrió descendentemente a temperatura ambiente, diluyó con acetato de etilo y filtró a través de celita. El solvente se evaporó in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando hexano/ acetato de etilo (30-70%). Se recolectaron las fracciones deseadas y se evaporaron. Algunas fracciones impuras (<2g) se repurificaron por cromatografía Isco de fase normal usando hexano/acetato de etilo (20-60% en acetato de etilo) como eluyente. Todas las fracciones que contienen el compuesto final se combinaron y se evaporaron a sequedad in vacuo. El residuo se disolvió en diclorometano y lavó con 10% de solución acuosa de hidróxido de amonio para remover los residuos de cobre. El solvente orgánico se evaporó y el compuesto se secó durante la noche para proporcionar 13 g de 2-cloro-4,4-difluoro-1'-[[1-[3-(metoximetil)-2-piridil]-3-metil-pirazol-4-il]metil]espiro[5H-tieno[2,3-c]piran-7,4'-piperidina]. MS (m/z): 495 (M+1).

La sal de tartrato se preparó esencialmente como se describe en el Ejemplo 1. MS (m/z): 495 (M + 1).

Los compuestos del Ejemplo 19 - 35 se prepararon esencialmente como se describe en el Ejemplo 18 a partir de la 2-bromo-piridina 3-sustituida correspondiente (ejemplos 19-32 y 34-35) o la 2-yodo-3-piridina sustituida (ejemplo 33).

Ejemplo 36: 2-Cloro-4,4-difluoro-1 '-[[1 -(3-metoxi-2-piridil)-3-metil-pirazol-4-il]metil]espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidina] A un tubo de prueba con tapa roscada se agregaron yoduro de cobre(l) (23.74 mg, 0.125 mmol), 2-cloro-4,4-difluoro-1 '-[(3-metiM H-pirazol-4-il)metil]espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidina] (233,00 mg, 0.623 mmol), carbonato de potasio (182.71 mg, 1.31 mmol), tolueno (2 mL) (previamente burbujeado con nitrógeno por 20 min) y una barra agitadora. La mezcla de reacción se burbujeó con nitrógeno por 20 minutos y después se agregaron 2-yodo-3-metoxipiridina (302.01 mg, 1.25 mmol) y trans- , N'-dimetilcicIohexan-l ,2-diam¡na (39.31 µ?, 0.25 mmol). El tubo de reacción se selló rápidamente (precaución: usar un escudo de seguridad por posible la acumulación de presión) y se sumergió en un baño de aceite precalentado a 110°C por 24 horas con la ayuda de un agitador magnético. Después, la mezcla se vertió en Columna SCX (25g) y se eluyó con metanol y después solución de amoníaco 2N en metanol. La fracción básica se concentró y el residuo resultante se purificó por HPLC básico para proporcionar 162 mg del compuesto del título. MS (m/z): 481 (M + 1).

Ejemplo 37: 2-Cloro-4,4-difluoro-1 '-[[1 -(3-¡soxazol-3-il-2-pir¡dil)-3-metil-pirazol-4-¡l]met¡l]espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-p¡per¡dina] Este compuesto esencialmente se preparó como se describió en el Ejemplo 36 usando 2-cloro-4,4-difluoro- 1 '-[(3-metil-1 H-pirazol-4-il)metil]espiro[5H-tien[2, 3-c]piran-7,4'-piperidina] y 3-(2-bromo-pirid-3-il)isoxazol como material de partida . El residuo se purificó por cromatografía Isco de fase normal (se usó acetato de etilo como eluyente) para proporcionar 45% del compuesto del título: espectro de masa (m/z): 518 (M + 1 ) Ejemplo 38: 2-(2-(4-((2'-Cloro-4\4,-difluoro-4\ 5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]piran]-1 -il)met¡l)-3-metil- 1 H-pirazol-1 -il)piridin-3-il)propan-2-ol A un tubo de prueba con tapa roscada que contiene 2-(2-bromo-3-piridil)propan-2-ol (520 mg , 2.41 mmol) en dimetilformamida seca (3.2 ml_), se agregaron bajo nitrógeno 4-((2'-cloro-4',4'-difluoro-4,,5l-dihidroespiro[piperidin-4, 7'-tien[2 ,3-c]piran]- 1 -il)metil)-3-metil-1 H-pirazol (600 mg, 1 .6 mmol) , óxido de cobre(l) (23 mg , 160 pinoles), (R, R)-(-)-N, N'-dimetil-1 ,2-ciclohexandiamina (68 mg, 480 pmoles) y carbonato de cesio ( 1040 mg , 3.2 mmol). El tubo de reacción se selló rápidamente (precaución: usar el escudo de seguridad con la posible acumulación de presión) y se selló en un baño de aceite precalentado a 1 10°C por 16 h con la ayuda de un agitador magnético. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y el solvente se evaporó in vacuo. El residuo resultante se purificó por gel de sílice usando cromatografía Isco de fase normal eluyendo con hexano:etanol (gradiente de 2 hasta 1 5% en etanol) para proporcionar 310 mg del compuesto del título. MS (m/z): 509 (M+1 ) Ejemplo 39: (Z.)-Tartrato de 1 -[2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H- tien[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)iTietil]-3-rrietil-pirazol-1 -il]-3-piridil]-/V-metil-metanamina La base libre del compuesto del título se preparó esencialmente como se describió en la Preparación 7 usando 2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol- 1 -il]pir¡din-3-carbaldeh ído y metilam ina en un 51 % de rendimiento. S (m/z): 494 ( + 1 ).

La sal de tartrato esencialmente se preparó como se describió en el Ejemplo 1 . MS (m/z): 551 (M + 1 ).

Los compuestos del Ejemplo 40-44 se prepararon esencialmente como se describió en el Ejemplo 39 a partir del aldehido y amina correspondiente. (Ejemplo 43 se preparó usando 1 ,2-dicloroetano como el solvente) Ejemplo 45: (l)-Tartrato de oxima de 2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]- 1 '-il)metil]-3-rnetil-pirazol- 1 -il]piridin-3-carbaldeh ído A una solución de 2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]piridin-3-carbaldehído (0.21 0 g, 0.438 mmol) en etanol (3 ml_), se agregaron clorhidrato de hidroxilamina (0.038 g , 0.526 mmol) y etanoato de sodio (0.044 g, 0.526 mmol) y la mezcla se agitó a reflujo por 1 h. El solvente se evaporó y el residuo se extrajo con acetato de etilo y agua. La capa orgánica se separó, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y el solvente se evaporó in vacuo. El residuo se purificó por HPLC de fase inversa básica para proporcionar 0.110g de oxima de 2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]piridin-3-carbaldeh ido. MS (m/z): 494 (M + 1).

La sal de tartrato esencialmente se preparó como se describió en el Ejemplo 1. MS (m/z): 494 (M + 1).

Los compuestos del Ejemplo 46-47 se prepararon esencialmente como se describió en el Ejemplo 45 a partir del aldehido e hidroxilamina correspondiente.

Ejemplo 48: (L)-Tartrato de [2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperid¡n]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]-3-piridil]metanamina 1 . 2-[[2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]-3-piridil]metil]isoindolin-1 ,3-diona Se agregó diisopropil azodicarboxilato (0. 1 05 ml_, 0.54 mmol) a una solución de [2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]-3-piridil] metanol (0.173 g , 0.36 mmol), ftalamida (0.079 mg, 0.54 mmol) y trifenilfosfina (0.142 g, 0.54 mmol) en tolueno (3 m l_) a 0°C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El solvente se removió y el residuo se purificó, primero usando un cartucho SCX 2 g y después por evaporación de amon íaco 2N en fracción de metanol por cromatografía Isco de fase normal eluyendo con hexano/etanol (3%-30%) para proporcionar 0.201 g de 2-[[2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]-3-piridil]metil]isoindolin-1 , 3-diona . MS (m/z): 61 0 (M + 1 ). 2. (L)-Tartrato de [2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]-3-piridil]metanamina A un matraz que contiene 2-[[2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]-3-piridil]metil]isoindolin-1 ,3-diona (0.201 g , 0.33 mmol) y 24 µ? de agua en etanol (2.5 mL) se agregó monohidrato de hidrazina (0.04 g , 0.79 mmol). La mezcla de reacción se sometió a reflujo por 2.5 hr. y después se diluyó con metanol y se purificó usando un cartucho SCX 2 g. Después por evaporación de amoníaco 2N en fracción de metanol, el producto resultante se purificó por cromatografía Isco de fase normal eluyendo con etanol y una solución de hidróxido de amonio al 15% (7N en metanol) en etanol (gradiente de 25-90% del eluyente básico) proporcionando 129 mg del compuesto del título, MS (m/z) : 480 (M+ 1 ). La sal de tartrato esencialmente se preparó como describió en el Ejemplo 1 . MS (m/z): 480 (M+ 1 ) .

Ejemplo 49: (L)-Tartrato de 2-[4-[(2-Fluoroespiro[4,5-dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol- 1 -il]piridin-3-carboxamida 1 . 2-[4-[(2-Fluoroespiro[4, 5-dihidrotien[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pi razo 1-1 -il]pirid¡n-3-carbonitrilo: Este compuesto esencialmente se preparó como se describió en la Preparación 7 usando 2-fluoroespiro[4, 5-dihidrotien[2, 3-c]piran-7,4'-piperidina] y 2-(4-formil-3-metil-pirazol-1 -il)piridin-3-carbonitrilo. El residuo se purificó por SCX para proporcionar 2-[4-[(2-fluoroespiro[4, 5-dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]piridin-3-carbonitrilo en un 32% de rendim iento. MS (m/z): 424 (M+ 1 ). 2. (Z-)-Tartrato de 2-[4-[(2-Fluoroespiro[4,5- dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]piridin-3-carboxamida A una solución de 2-[4-[(2-fluoroespiro[4, 5-dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-p¡peridin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol- 1 -il]piridin-3-carbonitrilo (0.71 mmol, 0.30 g) en dimetilsulfóxido (7.5 mL), se agregó carbonato de potasio (0.049 g, 0.35 mmol) y la mezcla se enfrió a 0-5°C antes de agregar 33% de solución de peróxido de hidrógeno en agua (0.39 mL, 3.78 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 2 h. Después, se agregó cuidadosamente ag ua y la mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se decantó, se secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó bajo presión reducida. Lo crudo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando como eluyente mezclas de diclorometano/metanol para proporcionar 0.252 g que se purificaron adicionalmente por H PLC de fase inversa para proporcionar 0.1 98 g de 2-[4-[(2-fluoroespiro[4,5-dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-p¡ razo 1-1 -il]piridin-3-carboxamida. MS (m/z): 442 (M+ 1 ).

La sal de tartrato esencialmente se preparó como se describió en el Ejemplo 1 . MS (m/z): 442 (M + 1 ) .

Ejemplo 50: (L)-Tartrato de 2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]piridin-3-carboxamida El compuesto del título se preparó esencialmente como se describió en el Ejemplo 49 usando 2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidina] y 2-(4-formil-3-metil-pirazol-1 - i I) pi rid i n -3-carbonitrilo como material de partida en un 15% de rendimiento total (22% de rendimiento en la primera etapa y 66% de rendimiento en la segunda etapa). MS (m/z): 494 (M+1 ) .

Ejemplo 51 : (L)-Tartrato de 2-[2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-¡l)met¡l]-3-metil-pirazol-1 - i I ] 3 -piridil]acetamida A una solución de 2-[2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H- tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -M]-3-piridi.l]acetonitrilo (170 mg, 346.96 moles) en sulfóxido de dimetilo (4 mL) se agregó carbonato de potasio (23.98 mg, 173.48 moles) y la mezcla se enfrió a 0-5°C. Se agregó 33% de solución de peróxido de hidrógeno en agua (189.54 µ?_, 1.84 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente 16 hr. y después se agregaron más 33% de solución de peróxido de hidrógeno en agua (189.54 µ?_, 1.84 mmol) y carbonato de potasio (23.98 mg, 173.48 moles). Se agregó agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó in vacuo. El compuesto se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando diclorometano y amoníaco 2N en metanol como eluyentes (1.5 hasta 6% en amoníaco 2N en metanol) para proporcionar 19% de base libre del compuesto del título. MS (m/z): 508 (M + 1).

La sal de tartrato se preparó esencialmente como se describió en el Ejemplo 1. MS (m/z): 508 (M + 1).

Ejemplo 52: (L)-Tartrato de /V-metilcarbamato de [2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-¡l)metil]-3-metil-pirazol-1-il]-3-piridil]metilo Se agregó metilisocianato (5.80 µ?_, 0.096 mmol) a una solución de 2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-3-metil-pirazol-1-il]-3-pir¡dil]metanol (0.042 g, 0.087 mmol) en diclorometano (1 mL) a temperatura ambiente. Después de 1 h no se observó evolución de reacción por LC/MS, se agregaron trietilamina (12.17 µ?_, 87.32 moles) y metilisocianato (5.8 µ?, 0.096 mmol) y la reacción se agitó durante la noche. Se agregaron más trietilamina (12.17 µ?_, 87.32 pmoles) y metilisocianato (5.8 µ?_, 0.096 mmol) y después de 24 h el solvente se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía Isco de fase normal con diclorometano/hidróxido de amonio 2N en metanol (0 hasta 5% en hidróxido de amonio 2N en metanol) como eluyente para proporcionar 0.041 g de A/-metilcarbamato de [2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-3-metil-pira2ol-1-il]-3-piridil]metilo. MS (m/z): 538 (M+1).

La sal de tartrato esencialmente se preparó como se describió en el Ejemplo 1. MS (m/z): 538 (M + 1).

Ejemplo 53: (L)-Tartrato de [4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]p¡ran-7,4'-piper¡din]-1'-il)metil]-1-(3-fluoro-2-p¡ridil)p¡razol-3-il]metanol 1. 4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-1 -(3-fluoro-2-pir¡dil)pirazol-3-carboxilato de etilo A una solución de 1 -(3-f luoro-2-piridil)-4-f orm il-pirazol-3-carboxilato de etilo (342.5 mg) en 1 ,2-dicloroetano (6.7 mL), se agregó 2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidina] (280 mg, 1 mmol). La mezcla se agitó por 10 min. Después, se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (442 mg) y la mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Se agregó bicarbonato de sodio (solución acuosa saturada) y la fase orgánica se extrajo con diclorometano, se secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó in vacuo. Lo crudo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando como eluyente acetato de etilo y hexano para proporcionar 450 mg de 4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-1-(3-fluoro-2-piridil)pirazol-3-carboxilato de etilo. MS (m/z): 527 (M + 1). 2. (L)-Tartrato de [4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]p¡ran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-1-(3-fluoGo-2-pir¡d¡l)p¡razol-3-¡l]metanol A una solución de 4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-1-(3-fluoro-2-piridil)pirazol-3-carboxilato de etilo (250 mg, 0.47 mmol) en tetrahidrofurano (2.37 ml_) bajo atmósfera de nitrógeno y se enfrió a 0°C, se agregó lentamente hidruro de aluminio y litio 1 M en tetrahidrofurano (569.3 µ?_). La mezcla se agitó a la misma temperatura por 30 minutos. Después, se agregó 22 µ? de agua y el baño enfriante se removió y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 5 min, antes de agregar 22pL de solución acuosa de hidróxido de sodio al 15% y 65 pL de agua. Los sólidos se filtraron y el solvente se evaporó. Lo crudo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando como eluyente diclorometano y metanol para proporcionar 141 mg del compuesto del título como base libre. MS (m/z): 485 (M+1).

La sal de tartrato esencialmente se preparó como se describió en el Ejemplo 1. MS (m/z): 485 (M + 1).

Método alterno para preparar la base libre del Ejemplo 53: 1. 4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-1 H-pirazol-3-carboxilato de etilo A una suspensión ae ..-cioro-^,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidina ( 1 8.3 g , 65.42 mmol) en tetrahidrofurano (0.2 L) se agregó 4-formil-1 H-pirazol-3-carboxilato de etilo ( 1 0 g , 59.47 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura am biente por 1 0 min. Después, se agregó triacetoxiborohidruro de sodio en polvo ( 16.39 g , 77.31 mmol). La mezcla se agitó a temperatura am biente por 1 .5 h . Después, la mezcla de reacción se vertió sobre solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio fría (200 m L) . Las fases se separaron. La fase acuosa se basificó con solución saturada de NaHC03 y se extrajo con acetato de etilo (1 00 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con solución saturada de NaHC03, se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron para proporcionar 22.5 g del compuesto del título. MS (m/z): 432 (M + 1 ). 2. 4-[(2-cloro-4,4-d¡fluoro-espiro[5H-tien[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-¡l)metil]-1 -(3-fluoro-2-piridil)pirazol-3-carboxilato de etilo A una solución de 4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-1 H-pirazol-3-carboxilato de etilo (22.5 g, 52.10 mmoles) en dimetilformamida (225.00 mL) se agregó carbonato de potasio (10.80 g, 78.14 mmoles) y 2,3-difluoropiridina (7.19 g, 62.52 mmoles) y la suspensión resultante se agitó a 60°C 15h. Después, la mezcla de reacción se vertió sobre Hielo/salmuera (30 mL) y se agregó CH2CI2 (50 mL) a la suspensión resultante. La solución se lavó con H20 (2x50 mL). Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron para proporcionar un crudo el cual se purificó vía filtración Si02 eluyendo con mezclas de 2-propanol/CH2CI2 para proporcionar 18 g del compuesto del título. MS (m/z): 527 (M + 1). 3. [4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-1-(3-fluoro-2-piridil)pirazol-3-il]metanol A una solución de 4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-1 -(3-fluoro-2-pirídil)pirazol-3-carboxilato de etilo (2.6 g, 4.93 mmoles) en tetrahidrofurano (26.00 mL) bajo atmósfera N2 y se enfrió a -10C, se agregó lentamente por goteo Hidruro de diisobutilaluminio 1 M en tolueno (23.68 mL, 23.68 mmoles). Después, la mezcla de reacción se agitó a la misma temperatura por 15 min y después, el baño frío se removió y la mezcla se calentó a temperatura ambiente. Después, se agregó H20 ( 1 00 mL) por goteo a -10°C. La suspensión resultante se extrajo con EtOAc (2x30 mL). Los orgánicos combinados se lavaron con H20 (50 mL) y salmuera (50 mL), se secaron sobre Na2S04 y concentraron para proporcionar un aceite marrón ligero que se disolvió en metil t-butil éter ( 10 mL) y cristales blancos cristalizados. La suspensión formada se agitó y se agregó por goteo hexano (1 0 mL) mientras se agitó. Lo sólido se filtró para proporcionar 2 g del compuesto del título. MS (m/z) : 485 (M+ 1 ).

Ejemplo 54: 2-(4-((2,-Cloro-4',4'-difluoro-4,, 5'-dihidroespiro[piperidin-4,7,-tien[2,3-c]piran]-1 -il)metil)-3-metil-1 H-pirazol-1 -íl)-3-(3-metil-1 ,2,4-oxadiazol-5-il)-piridina 1 . . Éster metílico del ácido 2-(4-((2'-Cloro-4',4'-difluoro-4,,5'-dihidroespiro[piperidin-4 , 7'-tien[2,3-c]piran]-1 -il)metil)-3-metil-1 H-pirazol-1 -il)-nicotínico A un tubo de prueba con tapa roscada se agregaron óxido de cobre(l) (1 1 mg, 0.08 mmol), 2-cloro-4,4-d¡fluoro-1 '-[(3-metil-1 H-pirazol-4-il)metil]espiro[5H-tien[2, 3-c]piran-7 ,4'-piperidin] (300 mg, 0.8 mmol), carbonato de cesio (523 mg , 1 .6 mmol) , dimetilformamida seca (1 .6 mL) y una barra agitadora. La mezcla de reacción se burbujeó con nitrógeno por 20 minutos y después se agregaron 2-yodopiridin-3-carboxilato de metilo (51 1 mg , 1 .9 mmol) y frans-N , N'-dimetilciclohexan-1 ,2-diamina (0.24 mmol; 34 mg) . El tubo de reacción se selló rápidamente (precaución : usar el escudo de seguridad con la posible acumulación de presión) y se sumergió en un baño de aceite precalentado a 1 1 0°C por 16 horas con la ayuda de un agitador magnético. Después, la mezcla se vertió en Columna SCX (10 g) y se eluyó con metanol y después solución de amon íaco 2 N en metanol. La fracción básica se concentró y el residuo resultante se purificó por gel de sílice usando cromatografía Isco de fase normal eluyendo con hexano:etanol (gradiente de 2 hasta 1 5% en etanol) para proporcionar 307 mg de éster metílico del ácido 2-(4-((2'-cloro-4' ,4'-difluoro-4',5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tien[2, 3-c]piran]- 1 -il)metil)-3-metil-1 H-pirazol-1 -il)-nicotínico. MS (m/z): 309 (M + 1 ). 2. 2-(4-((2'-Cloro-4' ,4'-d¡fluoro-4' , 5'-dihidroespiro[piperidin-4, 7'-tien[2,3-c]piran]- 1 -il)metil)-3-metil-1 H-pirazol-1 -il)-3-(3-metil-1 ,2,4-oxadiazol-5-il)-piridina A una solución de acetamida oxima ( 1 54 mg , 2. 1 mmol) en 7 ml_ tetrahidrofurano, se agregaron bajo argón 1 39 mg de tamices moleculares 4A molidos e hidruro de sodio (2. 1 mmol; 84 mg como el 60% en aceite mineral). La mezcla se dejó agitar por 30 min a 50°C. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, se agregó éster metílico del ácido 2-( -((2'-cloro-4,,4'-difluoro-4',5,-dihidroespiro[piperidin-4, 7'-tien[2, 3-c]piran]-1 -il)metil)-3-metil-1 H-pirazol-1 -il)-nicotínico (309 mg, 0.6 mmol) y después la mezcla se calentó a 50°C durante 40 min. Se apagó después del enfriamiento con agua y se extrajo con diclorometano. Después del secado de la fase orgánica con sulfato de magnesio y evaporación del solvente, el residuo se diluyó en metanol y se purificó usando un cartucho SCX 5g. El residuo resultante se purificó adicionalmente por H PLC-MS de fase inversa semipreparativa usando una columna XBridge (5um , 1 9x1 00mm) y un gradiente entre 60 y 80% de B en A en 5 min a flujo de 25 mL/min (condiciones básicas A: bicarbonato de amonio 20mM pH9 y B: acetonitrilo) para proporcionar 71 mg del compuesto del título. MS (m/z): 533 (M+ 1 ).

Ejemplo 55: (/-)-Tartrato de 2-Cloro-1 '-[[1 -(3-c!oro-2-p¡ridil)-3-met¡l-pirazol-4-il]metil]-4,4-difluoro-espiro[5H-t¡en[2,3-c]piran-7,4'-p¡per¡d¡na] A una solución de 2'-cloro-4',4'-difluoro-4',5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-t¡en[2,3-c]p¡rano] (0.2 g, 0.71 mmol) en 1,2-dicloroetano (5 mL) se agregaron 1 -(3-cloro-2-piridil)-3-metil-pirazol-4-carbaldehído (0.19 g, 0.86 mmol) y unas pocas gotas de ácido acético. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 1 hora. Se agregó Triacetoxiborohidruro de sodio (0.315 g, 1.43 mmol) y se agitó a temperatura ambiente por 14 horas. Después de la terminación, la mezcla de reacción se diluyó con diclorometano y se lavó con solución de bicarbonato de sodio saturado y salmuera. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró ¡n vacuo. La mezcla cruda se purificó por HPLC para proporcionar 0.195 g (56%) de 2-cloro-1 '-[[1-(3-cloro-2-piridil)-3-metil-pirazol-4-il]metil]-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidina]. MS (m/z): 485 (M + 1).

La sal de tartrato esencialmente se preparó como se describió en el Ejemplo 1. MS (m/z): 485 (M + 1).

Ejemplo 56: (Z-)-Tartrato de 2-Cloro-1 '-[[1 -(3-ciclopropil-2-piridil)-3-metil-pirazol-4-¡l]metil]-4,4-difluoro-esp¡ro[5H-tien[2,3-c]p¡ran-7,4'-piperidina] El compuesto del título se preparó esencialmente como se describió en el Ejemplo 55 usando 2'-cloro-4',4'-difluoro-4',5l-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]pirano] y 1 -(3-ciclopropil-2-piridil)-3-metil-pirazol-4-carbaldehído como material de partida en un 41% de rendimiento. MS (miz): 491 (M + 1).

Ejemplo 57: 4-[[2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1,-il)metil]-3-met¡l-pirazol-1 -il]-3-piridil]metil]morfolin-3-ona Se desgasificó una mezcla de 2-cloro-4,4-difluoro-1'-[(3- metil-1 H-pirazol-4-il)metil]espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidina] (0.20 g, 0.53 mmol), 4-[(2-bromo-3-p¡rid¡l)metil]morfol¡n-3-ona (0.21 g, 0.77 mmol), yoduro de cobre(l) (0.015 g, 0.078 mmol) y carbonato de cesio (0.36 g, 1.10 mmol) en dimetilformamida (5 ml_) por burbujeo con argón durante 15 minutos. Se agregó (1 ^ ^-/V./V'-dimetilcicIohexan-1,2-diamina (0.02 g, 0.14 mmol) mientras se desgasificó por 15 minutos y después la mezcla se calentó a 130°C por 16 horas. Después de la terminación, la mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se filtró a través de celita. El residuo se lavó con acetato de etilo (2 x 25 ml_) y lo filtrado se lavó con agua (30 ml_). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 25 ml_) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron in vacuo. La mezcla cruda se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano/metanol (96:4) para proporcionar 0.09 g (30%) del compuesto del título. MS (m/z): 564 (M+1).

Los compuestos del Ejemplo 58-59 se prepararon esencialmente como se describió en el Ejemplo 57 de los intermediarios descritos en la preparación 49 y 50 respectivamente.

Ejemplo 60: [4-[(2-Cloro-4,4-d¡fluoro-esp¡ro[5H-tien[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]- 1 '-il)metil]-1 -(3-cloro-2-piridil)pirazol-3-il]metanol 1. 4-((2'-cloro-4',4'-difluoro-4',5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]piran]-1-il)metil)-1-(3-cloro-2-piridil)-1 H-pirazol-3-carboxilato de etilo A una solución de clorhidrato de 2'-cloro-4',4'-difluoro-4,,5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]pirano] (0.35 g, 1.1 mmol) y 1-(3-cloropiridin-2-il)-4-formil-pirazol-3-carbox¡lato de etilo (0.3 g, 1.0 mmol) en 1 ,2-dicloroetano (20 ml_) se agregó /V-metil morfolina (0.33 g, 3.2 mmol) y tamices moleculares (0.10 g). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 1 h. Se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (0.58 g, 2.7 mmol) y se agitó a temperatura ambiente por 16 h. Después de la terminación, la mezcla de reacción se filtró a través de celita y se dividió entre diclorometano (15 mL) y agua (15 mL). La fase acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 30 mL) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron in vacuo. La mezcla cruda se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano/metanol (98:2) para proporcionar 0.4 g (67 %) de etilo 4-((2'-cloro-4',4'-difluoro-4,>5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]piran]-1-il)metil)-1 -(3-cloro-2-piridil)-1 H-pirazol-3-carboxilato. MS (m/z): 543 (M + 1). 2. [4-[(2-Cloro-4,4-d¡fluoro-esp¡ro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-1-(3-cloro-2-piridil)pirazol-3-il]metanol A una solución de 4-((2'-cloro-4,,4'-difluoro-4,,5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]piran]-1-il)metil)-1 -(3-cloro-2-ptridil)-1 H-pirazol-3-carboxi lato de etilo (0.4 g, 0.73 mmol) en tetrahidrofurano (5 mL) y etanol (5 mL) se agregó borohidruro de litio (1.80 mL, solución 2.0M en tetrahidrofurano, 3.68 mmol) a 0 °C y se agitó a temperatura ambiente por 16 h. Después de la terminación, la mezcla de reacción se apagó con agua (10 mL) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 25 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron in vacuo. La mezcla cruda se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano/metanol (97:3) para proporcionar 0.14 g (39 %) del compuesto del título. S (m/z): 500 (M+1).

Ejemplo 61: [4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-1-(3-metil-2-piridil)pirazol-3-il]metanol El compuesto del título se preparó esencialmente como se describió en el Ejemplo 60 usando clorhidrato de 2'-cloro-4',4'-difluoro-4',5'-dihidroespiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]pirano] y 1 -(3-metilpiridin-2-il)-4-formil-pirazol-3-carboxilato como material de partida en un 14% de rendimiento. MS (m/z): 481 (M + 1).

Ejemplo 62: [2-[4-[(2-Cloro-4,4-d¡fluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]p piperidin]-1'-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]-3-pirid¡l]metanol 1. 2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran- 7,4'-piperid¡n]-1 '-¡l)metil]-3-metil-p¡razol-1 -il]pirid¡n-3-carbaldehído Una mezcla de 2-cloro-4,4-difluoro-1 '-[(3-met¡l-1 H-pirazol-4-il)met¡l]espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperid¡na] (168.4 g, 451 mmol), Cul (12.9 g, 67.7 mmol) y carbonato de potasio (131 g, 947 mmol) en tolueno anhidro (340 mL) se desgasificó a temperatura ambiente por 30 min. Se agregaron secuencialmente 2-bromo-piridin-3-carbaxaldehído (125 g, 677 mmol) y rra/7S-N,N'-dimetilciclohexan-1 ,2-diamina (21.3 mL, 135.4 mmol). Los contenidos se desgasificaron 30 min antes del calentamiento a 105 °C, mientras se agitaron por 18 hr. El análisis LC/MS de la mezcla de reacción reveló el consumo total de 2-cloro-4,4-difluoro-1'-[(3-metil-1 H-pirazol-4-il)metil]espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidina]. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con acetato de etilo (1.5 L), se agitó y se filtró a través de una almohadilla de celita. El licor madre se lavó secuencialmente con 10% de hidróxido de amonio (5 x 100mL), agua (3 x 100mL), y salmuera.

Después se secó (sulfato de sodio), se fi ltró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó en gel de s ílice usando 50% acetato de etilo en hexano que contiene 1 % de trietilamina para proporcionar 2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2, 3-c]piran-7 ,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]piridin-3-carbaldeh ido como un sólido (1 56 g , 72% de rendimiento) . MS (m/z) : 479 (M + 1 ) . 2. [2-[4-[(2-Cloro-4 ,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol- 1 -il]-3-pirid il]metanol A una solución de 2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol- 1 -il]piridin-3-carbaldehído ( 1 80 g , 377 mmol) en diclorometano anhidro (1 .5 L) a 0°C secuencialmente se agregó borohidruro de sodio (7.2 g , 188.5 mmol) y metanol anhidro (0.5 L) y los contenidos se les permitió llegar a temperatura ambiente mientras se agitaron por 30 min. El análisis LC/MS de la mezcla de reacción reveló la terminación . Los volátiles se removieron bajo presión reducida y el residuo obtenido se dividió entre diclorometano (2 L) y agua (300 ml_). Las capas se separaron y la capa orgánica secuencialmente se lavó con solución acuosa de hidróxido de sodio 1 N (300 mL), agua (3 x 300m L) , salmuera , se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó en gel de sílice usando 50-55% acetato de etilo en hexano que contiene 1 % de trietilamina para proporcionar [2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2, 3-c]piran-7,4'-pi peridi n]-1 '-i l)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]-3-piridil]metanol como u n sólido ( 167 g, 92% de rendimiento). MS (m/z): 481 (M + 1).

Ejemplo 63 Sal clorhídrica de [2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-3-metil-pirazol-1-¡l]-3-piridiljmetanol Se calentó [2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-3-metil-pirazol-1-il]-3-piridil]metanol (157.4 g, 328 mmol) en acetato de etilo (1.5 L) a 80 °C hasta que se obtuvo una solución clara. A la solución caliente que contiene base libre lentamente se agregó HCI 5-6N en isopropanol (65.6 mL, 328 mmol) y los contenidos se agitaron vigorosamente se permitió a la mezcla alcanzar temperatura ambiente durante 2 horas. Se observó precipitación a mitad del trayecto a través de la adición de HCI. Lo sólido blanco resultante se filtró, se lavó con éster de dietilo (3 x 1 L), se secó bajo vacío a 50°C por 3 días para proporcionar sal clorhídrica de [2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)metil]-3-metil-pirazol-1-il]-3-piridil]metanol como un sólido blancuzco (165 g, 97% de rendimiento). MS (m/z): 481 (M + 1).

Compuesto indicador de ocupación de receptor: (/.)-Tartrato de 2-[(2-Fluorofenil)metil]-3-(2-fluoroespiro[4,5-dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-piperid in]-1 '- \)-N, /V-dimetil-propanamida 1. 3-(2-fluoroespiro[4,5-dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)propanoato de ter-butilo Se disolvió 2-fluoroespiro[4,5-d¡hidrot¡en[2,2-c]piran-7,4'-piperidina] (2.7 g, 11.9 mmol) en metanol (60 mL). Después, se agregó trietilamina (2.65 mL) y acrilato de ter-butilo (3.55 mL, 23.76 mmol) y la mezcla se calentó a 65°C por 5 h. Lo caliente se removió y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El solvente se evaporó y lo crudo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando acetato de etilo/hexano 1/1 como eluyente para proporcionar 4.2 g del compuesto deseado como aceite incoloro. MS (m/z): 356 (M + 1). 2. 2-[(2-fluorofenil)metil]-3-(2-fluoroespiro[4,5-dih¡drotien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)propanoato de ter-butilo A una solución agitada de 3-(2-fluoroespiro[4,5-dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il) propanoato de ter-butilo (4.9 g, 13.78 mmol) en tetrahidrofurano (41 mL) bajo N2 y se enfrió a -78°C, se agregó por goteo bis(trimetilsilil)amida litio 1 M (41,35 mL, 41.45 mmol). La mezcla resultante se agitó a la misma temperatura por 3 horas. Después, se agregó 1 ,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1 H)-pirimidinona (1.33 mL, 11.03 mmol), y la solución resultante se agitó a la misma temperatura por 30 min. A la mezcla resultante, se agregó bromuro de 2-fluorobencilo (2.33 mL, 19.3 mmol) en tetrahidrofurano seco (1 mL) y la agitación continuó. La temperatura se dejó llegar de -78°C a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción cruda se apagó con solución saturada acuosa de cloruro de amonio y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se decantó, se secó sobre sulfato de magnesio, el solvente se evaporó y lo crudo obtenido se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando acetato de etilo/hexano de 5/95 hasta 20/80 para proporcionar 5.06 g del compuesto del título obtenido como aceite incoloro. MS (m/z): 464 (M + 1). 3. Sal trifluoroacético del ácido 2-[(2-Fluorofenil)metil]-3-(2-fluoroespiro[4,5-dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-p¡peridin]-1 '-il)propanoico Una mezcla de 2-[(2-fluorofenil)metil]-3-(2-fluoroespiro[4,5-dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)propanoato de ter-butilo (5.06 g, 10.91 mmol) y ácido trifluoroacético (26.20 mL, 218 mmol) se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El solvente se evaporó a sequedad y lo crudo se usó sin purificación adicional. 4. 2-[(2-Fluorofenil)met¡l]-3-(2-fluoroesp¡ro[4,5-dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)-A/,/V-dimetil-propanamida Se agregaron subsecuentemente sal trifluoroacético del ácido 2-[(2-Fluorofenil)met¡l]-3-(2-fluoroespiro[4,5-dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1'-il)propanoico (5.68 g, 10.89 mmol) se disolvió en diclorometano (218 ml_), después trietilamina (12.14 mL, 87.13 mmol), clorhidrato de dimetilamina (1.80 g, 21.78 mmol), Clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (4.18 g, 21.78 mmol), e hidrato de 1 -hidroxibenzotriazol (3.34 g, 21.78 mmol) a la solución a 0°C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 5 horas. La mezcla de reacción se trató con solución saturada acuosa de bicarbonato de sodio y se extrajo con diclorometano (3 x 20 mL). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó bajo presión reducida. Lo crudo se purificó por cromatografía Isco de fase normal usando diclorometano/amonio 2N en metanol de 100/0 hasta 90/10 como eluyente para proporcionar 4.0 g (84.5%) del compuesto del título. MS (m/z): 435 (M + 1). 5. (L)-Tartrato de 2-[(2-Fluorofenil)metil]-3-(2-fluoroespiro[4,5-dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)-/V, /V-dimetil-propanamida Se llevó a cabo resolución enantiómerica de 2-[(2-fluorofenil)metil]-3-(2-fluoroespiro[4,5-dihidrotien[2,3-c]piran-7,4'-piperÍdin]-1'-¡l)-A/,/V-d¡metil-propanamida racémica (2.3 g, 5.29 mmol) con una columna Chiralpak AD® (Chiral Technologies, Inc., West Chester, PensMvania, USA) usando hexano/0.2% dimetil etil amina en etanol 9/1. El compuesto deseado se obtuvo en 36% de rendimiento como el primer enantiómero eluido La sal de tartrato esencialmente se preparó como se describió en el Ejemplo 1. MS (m/z): 435 (M + 1).

Difracción en Polvo de Rayos X El patrón XRD del sólido cristalino se obtuvo en un difractrómetro en polvo de rayos X Bruker D4 Endeavor, equipado con una fuente ? CuKa = 1.54060 A) y un detector Vantec, que opera a 35 kV y 50 mA. La muestra se escanea entre 4 y 40°C en 29 , con un tamaño de etapa de 0.0087°C en 2T y una velocidad de escaneo de 0.5 segundos/etapa, y con 0.6 mm de divergencia, 5.28 anti-dispersión fijo y 9.5 mm de aberturas detectoras. El polvo seco se envasa en un soporte de muestra de cuarzo y se obtiene una superficie lisa usando un porta objetos de vidrio. Los patrones de difracción en forma de cristal se recolectaron a temperatura ambiente y humedad relativa. El entorno se removió antes conseguir el máximo. Es bien conocido en la técnica de cristalografía que, para cualquier forma de cristal proporcionada, las intensidades relativas de los picos de difracción pueden variar debido a la orientación preferida resultando de factores tales como morfología de cristal y hábito. En donde los efectos de la orientación preferidas está presentes, las intensidades del máximo son alteradas, pero las posiciones del máximo característico del polimorfo no se han modificado. Véase, por ejemplo, The United States Pharmacopeia #23, National Formulary #18, páginas 1843-1844, 1995. Además, es bien conocido en la técnica de cristalografía que para cualquier forma de cristal proporcionada de las posiciones de máximo angular pueden variar ligeramente. Por ejemplo, las posiciones del máximo pueden cambiar debido a una variación en la temperatura o humedad en el cual se analiza una muestra, del desplazamiento de muestra o la presencia o ausencia de un estándar interno. En el presente caso, una variabilidad de posición del máximo de ± 0.1° en 2T puede tomar en cuenta estas posiciones potenciales son obstaculizar la identificación inequívoca de la forma de cristal indicada. La combinación de una forma de cristal se puede hacer en base de cualquier combinación única de máximos distinguibles (en unidades de 0 2T), típicamente los máximos más prominentes.

De esta forma, una muestra cristalina preparada de la base libre de (2-{4-[(2'-cloro-4\4'-difluoro-4\5'-dihidro-1 H-espiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]piran]-1 -M) metí l]-3-meti 1-1 H-pi razo 1-1 - il}piridin-3-il)metanol se caracteriza por un patrón XRD usando radiación CuKa que tiene máximos de difracción (valores 2 teta) como se describe en la Tabla 1 posterior. La forma de cristal única se puede confirmar con una subserie de máximos distintos a partir de este patrón de difracción completo. De esta forma, en una modalidad de la presente invención se proporciona una forma cristalina de (2-{4-[(2'-cloro-4',4'-difluoro-4',5'-dihidro-1 H-espiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]piran]-1 - il)metil]-3-metil-1 H-pirazol-1-il}piridin-3-il)metanol caracterizada por un patrón XRD usando radiación CuKa que tiene máximos de difracción a 11.1 en combinación con uno o más de los máximos seleccionados del grupo que consiste de 5.5, 13.5, 17.8 y 22.3 ± 0.1° en 2T. En otra modalidad, la presente invención proporciona una forma cristalina de clorhidrato de (2-{4-[(2'-cloro-4',4'-difluoro-4',5'-dihidro-1 H-espiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]piran]-1 -il)metil]-3-metil-1 H-pirazol- 1 -il}piridin-3-il)metanol caracterizado por un patrón XRD usando radiación CuKa que tiene máximos de difracción a 5.5, 11.1, 13.5, 17.8 y 22.3 ± 0.1° en 2T.

Tabla 1: Máximos de difracción en polvo de rayos X de la base libre de (2-{ -[(2,-cloro-4,,4,-difluoro-4,,5'-dih¡dro-1H-espiro[piperidin-4,7,-tien[2,3-c]piran]-1-il)metil]-3-metil-1 H-pirazol-1 -il}piridin-3-il)metanol De manera similar, una muestra preparada de la sal HCI de (2-{4-[(2,-cloro-4,,4,-difluoro-4,,5,-dihidro-1H-espiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]piran]-1 -il)metil]-3-meti 1-1 H-pirazol-1 -il}piridin-3-il)metanol es caracterizada por un patrón XRD usando radiación CuKa que tiene máximos de difracción (valores 2 teta) como se describe en la Tabla 2 posterior. La forma de cristal única se puede confirmar con una subserie de máximos distintos a partir de este patrón de difracción completa. De esta forma, en una modalidad de la presente invención se proporciona una forma cristalina de clorhidrato (2-{4-[(2'-cloro-4,,4'-difluoro-4,,5'-dihidro-1 H-espiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]piran]-1-il)metil]-3-metil-1 H-pirazol-1-il}piridin-3-il)metanol caracterizado por un patrón XRD usando radiación CuKa que tiene máximos de difracción a 16.2 en combinación con uno o más de los máximos seleccionados del grupo que consiste de 10.8, 12.1 y 21.1 ± 0.1° en 2T. En otra modalidad, la presente invención proporciona una forma cristalina de clorhidrato (2-{4-[(2'-cloro-4',4'-dif luoro-4',5'-d¡h¡dro-1 H-espiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]piran]-1-il)metit]-3-metil-1 H-pirazol-1-il}piridin-3-il)metanol caracterizado por un patrón XRD usando una radiación CuKa que tiene máximos de difracción a 10.8, 12.1, 16.2 y 21.2° ± en 0.1° en 2T.

Tabla 2: Máximos de difracción el polvo de rayos X de la sal HCI de (2-{4-[(2'-cloro-4',4,-difluoro-4',5'-dihidro-1 H-espiro[piperidin-4,7'-tien[2,3-c]piran]-1-il)metil]-3-metil-1 H-pirazol-1 - il}piridin-3-il)metanol Los datos de la literatura (Przydzial and Heisler, 2008, supra; Reinscheid 2006, supra) y los datos generados en estudios animales no cínicos soportan una papel para antagonistas de nociceptina en tratamiento de depresión, obesidad y trastornos alimenticios, y migraña. Específicamente se ha encontrado que los antagonistas del receptor nociceptina son efectivos en modelos de roedores depresión tanto solo como en combinación con antidepresivos de inhibidor de recuperación tricíclicos o selectivos serotonérgicos (SSRI), en modelos de roedor para inhibir hiperfagia, inhibir recuperación de peso después de pérdida de peso previo, y en modelos para migraña. Sin embargo, estudios conducidos en ratones agónicos del receptor nociceptina han demostrado que la acción de antagonistas de nociceptina en la prueba natación forzada (medida de la actividad antidepresiva) y en la alimentación que induce ayuno (actividad antiobesidad) es dependiente del genotipo, que soporta un mecanismo específico de acción antagonista nociceptina en estos modelos animales. Como los trastornos previamente descritos representan condiciones clínicas co-mórbido comunes, un antagonista del receptor nociceptina puede ser particularmente efectivo en estas poblaciones de paciente específico, tales pacientes con mayor trastorno depresivo, trastorno de atracón, sobrepeso, obesidad y obesidad con trastornos de humor clínico co-mórbido.

Para demostrar además las características de los presentes compuestos, compuestos representativos se corren en los siguientes ensayos in vitro e in vivo: Enlace del Receptor in vitro Los ensayos de enlace de radíoligando son comúnmente usados para determinar la afinidad (K¡) o potencia de un compuesto para enlazarse a un receptor particular o proteína objetivo. Un ensayo de enlace del receptor [3H]-OFQ/nociceptina a base de filtración se desarrolla en base de formatos de ensayo previos (Ardati A, Henningsen RA, Higelin, J, Reinscheid RK, C i ve 11 i O. Mosma FJ Jr. Mol Pharmacol. 1997 Mayo; 51 (5):816-24) con modificaciones menores. Los ensayos de enlace [3H]-OFQ/nociceptina se llevan a cabo en placas de 96 cavidades de cavidad profunda. Se lleva a cabo estudios de competencia [3H]OFQ (concentración final del ensayo 0.2 nM) con 5- 10 de proteína de membrana (aislada de células de ovario de hámster Chino (células CHO) que expresan receptores ORL 1 humanos clonados) a un volumen final de ensayo de 0.5 mi de amortiguador que contiene 20 mM HEPES, pH 7.4, 5 mM MgCI2, 1 mM EGTA, 1 00 m M NaCI, 0. 1 % de albúmina de suero de bovino. Las muestras se incuban por 60 minutos a temperatura ambiente, la cual se encontró ser óptima ensayos de competencia. Los ensayos se terminaron por filtración a través de filtros de fibra de vidrio (Wallac filtermat A) [pretratados con 0.3% de polietilenimina (Sigma) por 1 hora] en un cosechador celular Tómete, y los filtros se lavaron tres veces con 5 mL de 50 mM Tris HCI enfriado en hielo, pH 7.4. Las esteras de filtro son entonces secadas y sumergidas en escintilante Meltilex A y la radioactividad contada en un contador de escintilación Wallac Microbeta. El enlace específico se determinó por desplazamiento con nociceptina no etiquetada 100 n M. Las curvas se trazaron como el porcentaje de enlace específico y los valores IC50 se determinaron usando una curva de respuesta de dosis sigmoidal con inclinación variable. Los valores K¡ se calculan a partir del IC50 por la ecuación de Cheng and Prusoff (Cheng, Y.C. , and Prusoff, W. H . , Biochem. Pharmacol. 22, 3099-31 08 ( 1 973)) en donde K¡ =IC50 x ( 1 +D x Kd" 1 )-1.

De manera similar, K¡ para los receptores opioides mu, kappa y delta, serotonina, dopamina, adrenérgico, muscarínico e histamina, así como también el enlace al transportador de norepinefrina, canal de sodio, canal de cloruro y canal de calcio, pueden ser determinados usando membranas que expresan el receptor/transportador/canales deseados y las moléculas competidoras de radioligando correspondiente apropiadas.

Los compuestos ejemplificados son probados esencialmente como se describe anteriormente y se encuentran por tener alta afinidad para el receptor ORL-1. Los K¡ para el receptor ORL-1 para los compuestos ejemplificados se encuentran por ser de menos de 2 nM, mientras que el K¡ para otros receptores/transportadores/canales probados se encuentran por ser significativamente mayores. Los compuestos de los Ejemplos 62, 23, y 53 son probados esencialmente como se describe anteriormente y se encuentra que tienen afinidades como se muestra en la Tabla 3 abajo.

Tabla 3. Datos de selectividad ND = no determinado Por lo tanto, las dosis fisiológicamente relevantes de los compuestos de la invención no se espera que interactúen sustancialmente con estos sitios ¡n vivo, y de este modo, se espera eviten efectos indeseados asociados con tal actividad.

Bloqueo Funcional in vitro de Activación de la Proteína-G Mediada por el Agonista-Enlace de-GTPy-[35S].

La estimulación mediada por el agonista de los receptores acoplados a la proteína G, resulta en la activación de los complejos de heterotrímeros de la proteína ?aß? asociada con la membrana, y representa la primera etapa en la transduccion de señales extracelulares para modificación de las trayectorias intracelulares. La primera etapa en la activación de la activación mediada por el receptor del heterotrímero de proteínas Gapy, es el intercambio de guanosina difosfato (GDP) unido a la subunidad Ga por guanosina trifosfato (GTP). El enlace de GTP a la subunidad Ga causa disociación de las subunidades de heterotrímero, G3 y Gy, resultando en la modulación de varias cascadas de señalización intracelular. La med ición de la activación de la proteína G mediada por el receptor, puede ser medida usando el análogo radioetiquetado no hidrolizable de GTP, GTP-y-[35S] . Utilizando esta metodolog ía, la afinidad del antagonista (Kb) se mide en membranas que expresan los receptores nociceptina/O R L 1 humanos clonados usando un ensayo de enlace de GTP-y-[35S] de conformidad con los protocolos previamente descritos con modificaciones menores (DeLapp et al. , J Pharmacol Exp Ther. 1 999 May; 289(2):946-55; Ozaki et al . , Eur J Pharmacol. 2000 Aug 1 8;402( 1 -2):45-53) . Los ensayos se conducen en un volumen de 200 µ? con la siguiente composición amortiguadora: 1 00 mM NaCI, 20 mM HEPES , 5 mM gCI2, 1 mM EDTA, 0.1 % BSA, 3 µ? GDP, 0.5 nM [35S]GTPYS. La suspensión de membrana del receptor ORL1 se agrega a una concentración de 20 g de proteína por cavidad y la estimulación del receptor se logra usando 300 nM de nociceptina/OFQ. Perlillas de S PA revestidas con aglutinina de germen de trigo (Amersham, Arlington Hts. , I L) se agregan a 1 mg por cavidad para determinar el [35S]GTPyS unido a la membrana. Las placas son selladas e incubadas por 2 hrs. a temperatura ambiente. Las placas son entonces colocadas a 4°C durante la noche para permitir que las perlillas de SPA sedimentes y después se cuentan en una Wallac icrobeta. Se determina el enlace específico de [ SjGTPyS como la diferencia en CPM observada en la ausencia y presencia de 1 0 µ? de GTPvS no etiquetado. Los datos son trazados como porcentajes del enlace específico de [3 S] GTPYS. Las curvas son trazadas como el porcentaje de enlace específico y los valores IC50 se determinan usando una curva de respuesta de dosis sigmoidal con inclinación variable. La afinidad antagonista (Kb) se estima de conformidad con DeLapp et al. , 1999, usando una modificación de la ecuación de Cheng y Prusoff (1973) en donde Kb = IC50 ( 1 +D x EC50" 1 )"1.

Los compuestos Ejem plificados son probados esencialmente como se describe anteriormente y se encontraron por ser antagonistas potentes del receptor ORL-1 . Los KB para el receptor ORL-1 de los compuestos ejemplificados se encuentran por ser menos de 6 nM. Los compuestos de los Ejemplos 1 , 23 , y 53 son probados esencialmente como se describe anteriormente y se encuentra que tienen Kb para el receptor ORL-1 de 0.20, 1 .52 , y 0.62 nM , respectivamente.

Ocupación del Receptor in vivo La ocupación del receptor (RO) usando LC/MS/MS ha sido establecida como una forma para medir el acoplamiento objetivo central de antagonista ORL-1 putativo in vivo. La ocupación del receptor (RO) de Nociceptina/ORL1 se midió en el hipotálamo, una estructura la cual contiene una alta densidad de sitios de enlace de nociceptina/ORL1 que están dentro de la barrera hematoencefálica, usando un nuevo indicador RO de antagonista ORL1 /nociceptina propietario, 2-[(2-fluorofenil)metil]-3-(2-fluoroespiro[4, 5-dihidrotieno[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 ,-il)-/\/, A/- dimetil-propanamida, (Indicador RO). Estas mediciones se hacen sin la necesidad de un indicador radioetiquetado como se publica previamente para otros receptores con modificaciones (Chernet E, Martin LJ, Li D, Need AB, Barth VN, Rash KS, Phebus LA. Use of LC/MS to assess brain tracer distribution in precl i nical , in vivo receptor occupancy studies: dopamine D2, serotonin 2A and NK-1 receptors as examples. Life Sci. 78(4):340-6, 2005.).

Se ha establecido una correlación positiva entre la nociceptina central /RO ORL1 y eficacia en la modulación del comportamiento alimenticio y prueba de nado forzado en roedores. La nociceptina central/RO ORL1 es medida a 6 o 24 horas después de la administración oral del compuesto de prueba a ratas. Ratas macho Sprague-Dawley (Harían Sprague-Dawley, Indianápolis, IN) son tratadas oralmente con un compuesto de prueba, o vehículo (20% Captisol, 25 mM amortiguador de fosfato, pH 2.0). A 6 o 24 horas después de la administración del compuesto de prueba/vehículo, todos los animales son administrados intravenosamente, con una dosis de 3 pg/kg de Indicador RO. En el tiempo de la administración del Indicador RO que el RO se considera ser medido. Cuarenta minutos después de la administración del Indicador RO, las ratas son sacrificadas por dislocación cervical y se remueve el hipotálamo. El nivel de indicador RO se mide en cada muestra de tejido.

El estándar de referencia de literatura centralmente activa (-)-c/s-1-metil-7-[[4-(2,6-diclorofenil)piperidin-1-il]metil]-6,7,8,9-tetrahidro-5H-benzociclohepten-5-ol (SB612111, véase Magdalena and Heisler, supra), un potente antagonista selectivo del receptor ORL1/nociceptina, es usado como un control positivo para establecer el nivel Indicador RO asociado con 100% de nociceptina/RO ORL1. El SB612111 se administra intravenosamente a una dosis de 30 mg/kg 1 hr. previo al indicador RO (una dosis que resulta en aproximadamente 100% de RO de receptores ORL1/nocicepttna hipotalámicos).

Las muestras hipotalámicas son homogenizadas en 4 volúmenes (p/v) de acetonitrilo que contiene 0.1% de ácido fórmico y centrifugadas a 14,000 RPM por 16 min. Los sobrenadantes son recolectados y diluidos a un volumen final de 0.3 mL con agua estéril. La medición del Indicador RO se lleva a cabo usando un HPLC modelo 1200 de Agüente (Agilent Technologies, Palo Alto, CA) y un espectrómetro de masas API 4000. La separación cromatográfica usa una columna 2.1 X 50 mm C18 (Agilent parte número 971700-907) y una fase móvil que consiste de 38% de acetonitrilo en agua con un total de contenido de ácido fórmico al 0.1%. La detección de Indicador RO se realiza monitoreando la transición de precursor a ión de producto con una relación de masa a carga (miz) de 435 a 239, con niveles cuantificados por comparación a estándares preparados en homogenados de tejido cerebral. El porcentaje cero de RO se calcula como el nivel de Indicador RO en el hipotálamo de animales pretratados con vehículo, lo cual representa la suma de enlace específico y no específico (todos los receptores disponibles al indicador). El nivel inferior del Indicador RO en animales pretratados con la dosis intravenosa muy alta de SB612111, el grupo de control positivo, representa el enlace no específico y se asigna el valor de 100% ocupación (receptores no disponibles al indicador). El nivel de Indicador RO encontrado en el hipotálamo del grupo tratado con el compuesto de prueba es linealmente interpolado entre estos dos puntos para calcular el RO para el compuesto de prueba.

Los compuestos Ejemplificados son probados esencialmente como se describe anteriormente y se encuentra que tienen alta ocupación al receptor en el receptor ORL-1 . Las ocupaciones del receptor para los compuestos ejemplificados se encuentran por ser entre aproximadamente 40 y aproximadamente 1 30% para dosis de 3 mg/kg después de 6 hr. , o entre aproximadamente 20 y aproximadamente 96% de RO para 3 mg/kg de dosis después de 24 hr. Las ocupaciones del receptor para los compuestos de los Ejemplos 62, 23 y 53 se ensayan esencialmente como se describe anteriormente para 3 mg/kg de dosis después de 6 hr. y se encuentran por tener 1 04, 80 y 83% RO, respectivamente. Como tal, se espera que los compuestos de la presente invención tengan biodisponibilidad favorable y penetración en el CNS a los receptores ORL-1 objetivo.

Actividad del canal de hERG El bloqueo de conducción de canal K+ en el corazón se asocia con la cardiotoxicidad en la forma de prolongación de ondas QT. La afinidad (K¡) de los antagonistas del receptor de nociceptina ejemplificados para el canal de K+ de ERG humano (hERG), se determina en células HEK293 q ue expresan hERG clonado usando el radioligando antagonista del cana l hERG [3H]astemizol (2 nM de concentración de ensayo final) de conformidad con procedimientos bien conocidos (véase por ejemplo, Finlayson K, et al. (Eur J Pharmacol. 412(3):203-12, 2001) Los ensayos de enlace de [3H]Astemizol se realizan en el contrato de investigación de la compañía Cerep (París Francia) de conformidad con procedimientos estándares.

Los Ejemplos 62, 23, y 53 son ensayados esencialmente como se describe anteriormente y se encuentran por tener baja actividad, con K¡ de 6.08, 1.21, y 8.6 µ? respectivamente. La comparación en la concentración de plasma in vivo necesaria para producir 80 por ciento de RO (EC80 de RO) de receptores de nociceptina/ORL1 en el CNS para el compuesto del ejemplo 62 es aproximadamente 41 n . Como tal, existe una gran separación entre las concentraciones necesarias para producir ocupación del receptor in vivo fisiológicamente relevante de receptores de nociceptina/ORL1 y las concentraciones necesarias para la actividad del canal K+ de hERG. Por lo tanto, dosis fisiológicamente relevantes de los compuestos de la invención no se espera que ¡nteractúen sustancialmente con sitios hERG in vivo, y de este modo, se espera que no tengan efecto sustancial en la prolongación de QT.

Prueba de Nado Forzado en Ratones (mFST) La mFST es un ensayo in vivo bien establecido para actividad antidepresiva (Li et al. J Pharmacol Exp Ther. 319(1):254-9, 2006.). Ratones tratados con antidepresivos conocidos clínicamente efectivos (inhibidores selectivos de la reabsorción de serotonina y/o antidepresivos tricíclicos), exhiben el comportamiento de tiempo consumido reducido inmóvil después de ser colocados en un tanque de agua, un comportamiento asociado con desesperación. La mFST se usa para evaluar la actividad similar antidepresiva potencial de nuevos antagonistas de nociceptina/ORL1 de conformidad con los métodos previamente publicados (Li et al. J Pharmacol Exp Ther. 319(1 ):254-9, 2006.). Brevemente, se usaron ratones NIH-Swiss macho (Harían Sprague-Dawley, Indianápolis, IN) que pesan entre 25-30 g. Los animales alojados en grupo son removidos del vivero al área de prueba en sus propias jaulas y se dejan adaptar al nuevo ambiente por al menos 1 hora antes de las pruebas. Alternativamente, ratones macho tipo nativo 129S6 y agénicos al receptor de nociceptina/ORL1 , se usaron para confirmar que la dependencia de la respuesta al compuesto de prueba fue dependiente del receptor de ORL1/nociceptina. Todos los compuestos se prepararon en 20% de Captisol, 25 mM amortiguador de fosfato, pH 2.0 al día del uso. Los ratones se colocaron en un cilindro (diámetro: 10 cm; altura: 25 cm) llenado con 6 cm de agua (22-25°C) por 6 min. Se registró la duración de la inmovilidad durante los últimos 4 minutos del periodo de 6 min de la prueba. Un ratón se registró como inmóvil cuando flotó sin movimiento o hizo solamente aquellos movimientos necesarios para mantener su cabeza arriba del agua.

Los compuestos representativos son probados esencialmente como se describe anteriormente y se encuentra que reducen significativamente los tiempos de inmovilización en ratones de tipo nativo. Los compuestos de los Ejemplos 62, 23, y 53, se ensayaron esencialmente como se describe anteriormente y se encontraron por tener ED6o de 24.9, 9.5, y 12.9 mg/Kg respectivamente, con efectos máximos de 45%, 58%, y 54% de reducciones en tiempo de inmovilización, respectivamente. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención se espera tengan actividad antidepresiva in vivo.

Además, los compuestos de la presente invención pueden ser usados en combinación con otros antidepresivos conocidos para producir eficacia intensificada. El compuesto del Ejemplo 62 se probó esencialmente como se describe anteriormente en combinación con 10 mg/kg de fluoxetina y se encuentra por reducir significativamente además, el tiempo de inmovilización sobre ya sea fluoxetina o el compuesto del Ejemplo 62 solo. Véase Tabla 4 siguiente.

Tabla 4 Prueba de Nado Forzado en Ratón- Tratamiento de Combinación con Fluoxetina * Reducción estad ísticamente significante sobre el vehículo, Ej. 62 solo y fluoxetina sola.

Aún además, estos efectos de tiempos de inmovilización reducidos no se observaron cuando se usaron ratones agénicos ORL- 1 , una cepa de ratones diseñados por ingeniería carecen del receptor ORL-1 , mostrando que el efecto es sin em bargo mediado por el receptor ORL-1 . El compuesto del Ejemplo 62 se probó esencialmente como se describe anteriormente usando ratón tipo nativo en una rama del estudio y un ratón agénico ORL-1 en una segunda rama del estudio, y se encontró por reducir significativamente el tiempo de inmovilización en el ratón de tipo nativo, pero no mostró efecto en el ratón agénico. Un antidepresivo inhibidor de la reabsorción de norepinefrina, imiprimina, se corre como un control positivo y se encuentra que reduce los tiempos de inmovilización en tanto los ratones agénicos como de tipo nativo a un grado equivalente, mostrando que el efecto de comportamiento mediado por el mecanismo de reabsorción de norepinefrina está intacto en la cepa de ratón agénico.

Bloqueo de Hiperfagia inducida por Ayuno en Ratones El bloqueo de hiperfagia inducida por ayuno en roedores es un modelo aceptado para trastornos alimenticios hiperfágicos.

(Hollopeter G, Erickson JC, Seeley RJ, Marsh DJ , Palmiter RD.

Response of neuropeptide Y-deficient mice to feeding effectors. Regul Pept. 1998 Sep 25;75-76: 383-9. ) Todos los experimentos se realizaron en ratones agónicos ORL y de tipo nativo, machos de doce semanas de edad no experimentados, mantenidos en un antecedente congénito 129S6. Los ratones son individualmente alojados un m ínimo de 3 d ías previo al comienzo de las pruebas para eliminar cualquiera de los efectos de estrés debido al cam bio de grupo a alojamiento individual. Tres ratones/genotipos son aleatoriamente asignados a cada grupo de tratamiento al día de la prueba . Se toman mediciones de peso corporal pre-ayuno, y el alimento entonces se retira de las jaulas durante la noche. Los ratones son ayunados por aproximadamente 1 5 horas. A la siguiente mañana, a los ratones se les da de una a tres dosis de fármaco o vehículo vía alimentación forzada oral 30 minutos previo a ganar acceso a alimento. Los fármacos son disueltos en 20% de Captisol disuelto en 25 mM de amortiguador de fosfato, pH 2.0. Las mediciones de peso corporal se toman inmediatamente previas al tratamiento del fármaco o 24 horas después que se restaura el acceso al alimento. Vale la pena señalar que todos los ratones independientes del genotipo pierden -5-1 0% de peso corporal después del ayuno durante la noche. Las mediciones de toma de alimento se registraron 1 hora después del acceso a alimento, como se índica, en peso del al imento restante a 1 hora. Se debe notar que la toma de alimento medida es durante la fase de luz, un tiempo durante el cual los ratones están típicamente en reposo y normalmente no comen . Después de la prueba inicial, los ratones son probados por 1 semana con acceso a alimento ilimitado. Después de la semana de prueba , los ratones son probados nuevamente de conformidad con el diseño de cuadrado latino mostrado en la Tabla 5.

Tabla 5. Se usó un diseño de cuadrado Latino para determinar las curvas de respuesta de dosis de acción anoréctica de nuevos antagonistas ORL en ratones agénicos ORL y de tipo nativo.

Los compuestos representativos son probados inicialmente como se describe anteriormente y se encuentra que reducen significativamente la hiperfagia inducida por ayuno en ratones. Los Ejemplos 62, 23, y 53, son ensayados como se describe anteriormente y se encuentra que bloquean sustancialmente la hiperfagia inducida por ayuno. El efecto no se observó en la cepa de ratón agénico de ORL-1, demostrando que el efecto es mediado a través del receptor ORL-1. El agonista de 5-HT2c, mCPP, se usa como un control positivo y se encontró por reducir significativamente la hiperfagia igualmente en ratones tanto de tipo nativo como en la cepa de ratón agénico de ORL-1. Como tal, se espera que los compuestos de la presente invención sean útiles en el tratamiento de sobrepeso y/o obesidad y/o para mantenimiento de peso, como por ejemplo, el tratamiento de atracones.

Modelo de Extravasación de Proteína de Plasma Dural (PPE) en Rata - Protocolo de Dosificación Oral Todos los compuestos probados son preparados en una solución de veh ículo que contiene 20% de Captisol en 25 mM de amortiguador de fosfato (pH 2.0) . El compuesto de control positivo, sumatriptano, se disolvió en salina . Ratas macho Sprague-Dawley de Harían Laboratories (250 a 350 g), que han sido ayunadas durante la noche, se dosificaron con el com puesto de prueba, sumatriptano o vehículo por alimentación forzada oral (2 mL/kg). Cincuenta minutos posteriores a la dosis, las ratas son anestesiadas con Nembutal (60 mg/kg , ip) y colocadas en jaula estereotáxica con la barra incisora ajustada a -2.5 mm . Después de una incisión en la l ínea media del cuero cabelludo sagital, 2 pares de agujeros bilaterales se taladraron a través del cráneo (3.2 mm posteriormente, 1 .8 y 3.8 mm lateralmente, todas las coordenadas de referencia al bregma). Pares de electrodos de estimulación de acero inoxidable (Rhodes Medical Systems Inc), se aislaron excepto en las puntas, son bajados a través de los agujeros en ambos hemisferios a una profundidad de 9.2 mm por debajo de la duramadre Una solución de albúmina de suero bovino (BSA) etiquetada con tinte de isotiocianato de fluoresceína (FITC) (FITC-BSA) (20 mg/kg, iv), se inyectó en la vena femoral 2 m inutos previo a la estimulación eléctrica del ganglio trigeminal para funcionar como el marcador para la extravasación de la proteína. Sesenta minutos después de la dosificación con el com puesto de prueba o veh ículo, el gang lio trigeminal izquierdo se estimuló eléctricamente por 5 minutos a una intensidad de corriente de 1.0 mA (5 Hz, 5 minutos de duración).

Cinco minutos después de la estimulación, las ratas son sacrificadas por exsanguinación con 40 mi de salina, la cual también enjuagó FIT/BSA residual fura de los vasos sanguíneos. La parte superior del cráneo se removió para recolectar las membranas durales. Las muestras de membrana se removieron de ambos hemisferios, se enjuagaron con agua, y se extendieron en forma plana en un porta objetos para microscopio. Los porta objetos se secaron durante 15 minutos en un calentador de portaobjeto y se cubrieron con una solución glicerol/agua al 70%.

Se usó un microscopio fluorescente equipado con un monocromador de rejilla y un espectrómetro para cuantificar la cantidad de tinte FITC-BSA en cada muestra dural. El microscopio se equipó con una interfaz de etapa motorizada con una computadora personal. Esto facilita el movimiento controlado por computadora de la etapa, con mediciones fluorescentes a 25 puntos (etapas 500 µ?t?) en cada muestra dural. La extravasación se induce por estimulación eléctrica del ganglio trigeminal en un efecto ipsilateral (que ocurre únicamente en el costado de la duramadre en el cual el ganglio trigeminal se estimula). Esto permite a la otra mitad de la duramadre (estimulada) ser usado como control. Se calcula la relación de extravasación (que es la relación de la cantidad de extravasación en la duramadre del costado estimulado comparado al costado no estimulado). Los animales dosificados con vehículo solo o una dosis no efectiva del compuesto de prueba, tienen una relación de extravasación de aproximadamente 2, mientras los intensidad de corriente de 1 .0 mA (5 Hz, 5 minutos de duración) .

Cinco minutos después de la estimulación, las ratas son sacrificadas por exsanguinación con 40 mi de salina, la cual también enjuagó FIT/BSA residual fura de los vasos sangu íneos. La parte superior del cráneo se removió para recolectar las membranas durales. Las muestras de membrana se removieron de ambos hemisferios, se enjuagaron con agua, y se extendieron en forma plana en un porta objetos para microscopio. Los porta objetos se secaron durante 15 minutos en un calentador de portaobjeto y se cubrieron con una solución glicerol/agua al 70% .

Se usó un microscopio fluorescente equipado con un monocromador de rejilla y un espectrómetro para cuantificar la cantidad de tinte FITC-BSA en cada muestra dural. El microscopio se equipó con una interfaz de etapa motorizada con una computadora personal. Esto facilita el movimiento controlado por computadora de la etapa, con mediciones fluorescentes a 25 puntos (etapas 500 pm) en cada muestra dural. La extravasación se induce por estimulación eléctrica del ganglio trigeminal en un efecto ipsilateral (que ocurre únicamente en el costado de la duramadre en el cual el ganglio trigeminal se estimula). Esto permite a la otra mitad de la duramadre (estimulada) ser usado como control. Se calcula la relación de extravasación (que es la relación de la cantidad de extravasación en la duramadre del costado estimulado comparado al costado no estimulado). Los animales dosificados con vehículo solo o una dosis no efectiva del compuesto de prueba, tienen una relación de extravasación de aproximadamente 2 , mientras los tratamientos totalmente efectivos resultan en una relación de aproximadamente 1 .

Los resultados son expresados como valores medios con errores estándares de la media (± SEM) . Todas las evaluaciones estadísticas se condujeron utilizando ANOVA seguido por comparación con el grupo de control por el Método Dunnett. La significancia estadística se asume cuando p<0.05. Los análisis estad ísticos se realizaron usando software de análisis estad ístico JMP (SAS Research I nstitute, versión 6.0.2).

El compuesto del Ejemplo 62 se probó esencialmente como se describe anteriormente y se encuentra que bloquea efectivamente la extravasación en una manera dependiente de la dosis. (Véase Tabla 5 abajo). Como un resultado, se espera que los compuestos de la presente invención sean útiles en el tratamiento de migraña.

Tabla 5. Ensayo de extravasación de proteína de plasma dural en rata (PPE) para el compuesto del Ejemplo 62. *Estad ísticamente significante contra Vehículo.

Formación de metabolito reactivo hacia estabilidad La literatura precedente sugiere una correlación entre la formación de metabolito reactivo y toxicidades cl ínicas conocidas como reacciones de fármaco idiosincráticas (IDRs), a pesar que no se ha establecido un efecto causal directo. Se asume que los metabolitos reactivos pueden jugar un papel en I DRs cl ínicos, minimizando el potencial para bioactivación oxidativa se ha propuesto como un medio para mejorar el perfil de seguridad total de compuestos que contienen características estructurales asociadas con la reactividad, (véase Baillie, Thomas A. , Aporoaches to the Assessment of Stable and Chemically Reactive Drug Metabolites in Early Clinical Triáis, Chemical Research in Toxicology, vol 22(2) 2009). Para este fin , compuestos representativos de la presente invención y compuestos relacionados se seleccionan usando un ensayo de captura microsomal hepático en rata, usando glutationa como un nucleófilo endógeno, para entender el potencial para bioactivación oxidativa de la porción de tienilo. De los compuestos probados, aquellos en donde Rza y R2b son hidrógeno se encontraron por mostrar evidencia de formación de conjugado de glutationa que sugiere oxidación en la porción de tienilo. De los compuestos probados, aquellos en donde R2a y R2b son fluoro, se encontraron que no muestran formación de conjugado de glutationa. (Véase tabla 3, posterior). La carencia de formación de conjugado de glutationa para las moléculas que contienen gem-difluoro sugiere que el sustituyente gem-difluoro reduce la propensión química inherente para bioactivación como prueba en el ensayo.

Tabla 3. Formación de conjugado de glutationa en homogeneizado microsomal hepático Aunque es posible administrar compuestos empleados en los métodos de esta invención directamente sin cualquier formulación, los compuestos son usualmente administrados en la forma de composiciones farmacéuticas que comprenden al menos un compuesto de Fórmula I, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, como un ingrediente activo y al menos un portador, diluyente y/o excipiente farmacéuticamente aceptable. Estas composiciones pueden ser administradas por una variedad de rutas que incluyen oral, intranasal, transdermal, subcutánea, intravenosa, intramuscular y pulmonar. Estas composiciones farmacéuticas y procesos para prepararlas son bien conocidas en la técnica . Véase, por ejemplo, Rem igton: The Science and Practice of Pharmacy (University of the Sciences in Philadelphia, ed. , 21 ed. , Lippincott William & Wilkins Co. , 2005) .

Las composiciones son preferiblemente formuladas en forma de dosificación unitaria, cada dosificación contiene de aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 500 mg , más usualmente de aproximadamente 1 .0 hasta aproximadamente 200 mg, como por ejemplo entre aproximadamente 5 y 50 mg del ingrediente activo. El término "forma de dosificación unitaria" se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para sujetos humanos u otros mam íferos, cada unidad que contiene una cantidad predeterminada de material activo calculado para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con al menos un portador, diluyente y/o excipiente farmacéuticamente aceptable.

Los compuestos de Fórmula I son generalmente efectivos sobre un amplio intervalo de dosificación. Por ejemplo, las dosificaciones por d ía normalmente caen dentro del intervalo de aproximadamente 0.01 hasta aproximadamente 50 mg/kg, más usualmente de aproximadamente 0.05 hasta 5.0 mg/kg , y como por ejemplo entre 0.1 y 1 .0 mg/kg de peso corporal. En algunos casos los niveles de dosificación por debajo del limite inferior del intervalo antes mencionado puede ser más que adecuado, mientras en otros casos dosis aún más grandes pueden ser empleadas sin provocar cualquier efecto secundario perjudiciales, y por lo tanto en intervalo de dosificación anterior no pretende limitar el alcance de la invención de cualquier forma. Se entenderá que la cantidad del compuesto actualmente administrado puede ser determinado por un médico, en la vista de las circunstancias relevantes, que incluyen la condición a ser tratada, la ruta elegida de administración , el compuesto actual o compuesto administrado, la edad, peso y respuesta del paciente individual, y la severidad de los síntomas del paciente.

Claims (14)

1. REIVINDICACIONES compuesto de la fórmula caracterizado porque R1 es fluoro o cloro; R2a y R2b son cada uno hidrógeno o son cada uno fluoro; R3 es hidrógeno, metilo, hidroximetilo, o alcoximetilo (Ci-c3); R4 se selecciona a partir del grupo que consiste de fluoro, cloro, ciano, cianometilo, alquiloíd-Ca), ciclopropilo, hidroximetilo, metoxi, ciclopropilmetoxi, aminocarbonilmetoxi, alcoximetilo (C^Ca), ciclopropiloximetilo, ciclopropilmetoximetilo, 1-hidroxi-1-metiletilo, aminocarboniloximetilo, metilaminocarboniloximetilo, dimetilaminocarboniloximetilo, aminocarbonilo, aminocarbonilmetilo, -CH2-NR5R6, hidroxiimina, metoxiimina, morfolin-4-ilo, morfolin-4-ilmetilo, Ar , -CH2Ar1, tetrahidrofuran-2-ilo, 3-oxomorfolin-4-ilmetilo, 2-oxopirrolidin-1 -ilmetilo, y 2-oxopiperidin-1-ilmetilo; R5 es hidrógeno, alquilo Ci-C3, cianometilo, -C(0)CH3l o aminocarbonilmetilo; R6 es hidrógeno o metilo; y Ar1 es una porción seleccionada a partir del grupo que consiste de imidizol-1-ilo, imidizol-2-ilo, 2-metilimid izol-1 -ilo, pirazol-1-ilo, 1 ,2,3-triazol-1 -ilo; 1 ,2,3-triazol-2-ilo; 1 ,2,4-triazol-1 -ilo, isoxazol-3-ilo, oxazol-5-ilo, y 3-metil-1 ,2,4-oxadiazol-5-ilo; o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
2. 2. El compuesto de conformidad con la Reivindicación 1, caracterizado porque R1 es cloro, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
3. 3. El compuesto de conformidad con ya sea la Reivindicación 1 o 2, caracterizado porque R2a y R2b son cada uno fluoro, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
4. 4. El compuesto de conformidad con la Reivindicación 1, caracterizado porque R1 es fluoro y R2a y R2b son cada uno hidrógeno, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
5. 5. El compuesto de conformidad con cualquiera de las Reivindicaciones 1 hasta 4, caracterizado porque R3 es metilo, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
6. 6. El compuesto de conformidad con cualquiera de las Reivindicaciones 1 hasta 5, caracterizado porque R4 es fluoro, hidroximetilo, metoximetilo, o pirazol-1 -ilmetilo, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
7. 7. El compuesto de conformidad con la Reivindicación 1, caracterizado porque es [2-[4-[(2-cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2, 3-c]piran-7 ,4'-piperid in]- 1 '-il)metil]-3-metil-pi razo 1-1 -il]-3-piridil]metanol ; 2-cloro-4,4-difluoro-1 '-[[3-metil-1 -[3-(pirazol-1 -ilmetil)-2-piridil]pirazol-4-il]metil]espiro[5H-tieno[2, 3-c]piran-7,4'-piperidina]; o [4-[(2-clo ro-4,4-difluo ro-espiro[5H-t ieno[2 ,3-c] piran -7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-1 -(3-fluoro-2-piridil)pirazol-3-il]metanol; o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable
8. 8. El compuesto de conformidad con la Reivindicación 1 , caracterizado porque es [2-[4-[(2-Cloro-4,4-difluoro-espiro[5H-tieno[2, 3-c]piran-7,4'-piperidin]-1 '-il)metil]-3-metil-pirazol-1 -il]-3-piridil]metanol, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
9. 9. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 8, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.
10. 1 0. La composición farmacéutica de conformidad con la Reivindicación 9, caracterizada porque además comprende al menos un ingrediente terapéutico adicional.
11. 1 1 . La composición farmacéutica de conformidad con la Reivindicación 1 0, caracterizada porque el ingrediente terapéutico adicional es un antidepresivo de SSRI .
12. 12. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 8, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, para uso en terapia.
13. 1 3. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 8, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, para uso en el tratamiento de obesidad o sobrepeso en un humano.
14. 14. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 8, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, para uso en el tratamiento de migraña. 1 5. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 8, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, para uso en el tratamiento de depresión.