MX2010005393A - Derivados de cefalomanina, su preparación, composición farmacéutica y uso de los mismos. - Google Patents

Abstract

La presente invención describe derivados de cefalomanina de la fórmula general (I), un proceso para la preparación de tales derivados de cefalomanina, una composición que contiene tales compuestos, y el uso de los compuestos en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de tumores, especialmente tumores resistentes a múltiples fármacos. (ver formula).

Description

DERIVADOS DE CEFALOMANINA, Sü PREPARACIÓN, COMPOSICIÓN FARMACÉUTICA Y USO DE LOS MISMOS CAMPO DE LA INVENCIÓN j La presente invención describe derivados ¡ de cefalomanina de la fórmula general (I) , un proceso para la preparación de tales derivados de cefalomanina, na composición que contiene tales compuestos, y el uso de dichos compuestos en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de tumores, especialmente tumores resistentes a múltiples f rmacos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los taxanos pertenecen a los terpenos, y son de interés tanto en los campos biológicos como químicos . El taxol (paclitaxel) , uno de los taxanos, presenta una buena actividad inhibitoria contra los tumores . Se , ha comercializado como fármaco contra el cáncer, y tienej la siguiente estructura: en donde, Ac es acetilo, y Bz es de benzoílo.

La Patente US No. 4,814,470 de Colin et. al. ha descrito docetaxel, un análogo de taxol, cuya actividad es significativamente más fuerte que el taxol. El docetaxel también se ha comercializado como fármaco contra el cáncer, y tiene la siguiente estructura: ¡ El taxol y el docetaxel tienen un mecanismot de acción único. Ellos promueven principalmente la i polimerización de tubulinas e inhiben la despolimerización de las mismas, dando por resultado la disposición anormal de los haces de microtúbulos y la formación ' de cladosclereidas Así, los husos pierden las funciones normales, y el ciclo celular se bloquea en el periodo G2/M, llevando a la muerte de las células cancerosas (Schiff, P.B.; Fant, J.; Horwitz S.B. Nature. 1979, 277: 665). Actualmente éstos son los fármacos contra el cáncer de mayor venta, debido a su efecto único y significativamente útil contra una variedad de tumores que no se pueden tratar con otros fármacos contra el cáncer. ¡ El taxol ha obtenido gran éxito en la terapia clínica. Sin embargo, todavía tiene algunas desventajas que hay que superar. La ineficacia en la quimioterapia con taxol en pacientes con tumores primarios y secundarios resistentes a los fármacos se ha convertido en un problema cada vez más grave en el uso del taxol, junto a otras desventajas, por ejemplo, escasa solubilidad en agua, recursos limitados, y similares. Además, el docetaxel es también ineficaz en los tumores que son resistentes al taxol. Estos problemas restringieron en gran medida ¡ la i aplicación de taxol y docetaxel. El desarrollo de nuevos taxanos, fármacos contra el cáncer eficaces en tumores resistentes a múltiples fármacos es de gran importancia.

Es bien sabido que uno de los principales factores que producen el fracaso de la quimioterapia p!ara tumores es la resistencia a múltiples fármacos de los tumores. Las razones de la aparición de resistencia a múltiples fármacos son muy complejas. La resistencia a los fármacos del taxol se asocia principalmente con | la sobreexpresión de P-glicoproteínas y mutaciones de tubulinas, que son los objetivos de este tipo de fármacos. La resistencia a los fármacos, mediada por tubulinas puede derivarse de las mutaciones de los residuos de aminoácidos. Además, disminuye la capacidad de enlace del taxol! a tubulinas variantes, dando por resultado la disminución de la actividad del taxol . Las P-glicoproteínas pueden mojver una gran variedad de compuestos ectogénicos, incluidos los fármacos quimioterapéuticos , fuera de las células por transporte activo, haciendo que la concentración de los compuestos en las células tumorales sea menor que la concentración eficaz. | Los tumores resistentes a fármacos pueden ser superados, principalmente por las siguientes vías: (1) administración de los fármacos contra el cáncer ; en combinación con agentes de reversión de MDR, en particular los inhibidores de P-glicoproteína; (2) el descubrimiento de nuevos fármacos contra el cáncer eficaces en tumores resistentes a fármacos. En general se han llevado a cabo investigaciones basadas en la primera vía, y |Son teóricamente posibles, además, se han reportado algunos buenos resultados experimentales in vivo e in vitro. Sin embargo, es lamentable que no se haya obtenido hasta ahora un efecto clínicamente ideal. Por lo tanto, la atención se volvió hacia la segunda vía, es decir, el desarrollo! de nuevos fármacos contra el cáncer que también son eficaces en tumores resistentes a fármacos. Esto se ha convertido en un foco de la investigación de los taxanos en todo! el í mundo. Se han reportado algunos compuestos de taxano de segunda generación, eficaces en tumores resistentes a múltiples fármacos, por ejemplo, B S-148876, IDN-5109. La actividad de estos compuestos contra tumores resistentes a múltiples fármacos es significativamente mayor que la del taxol y docetaxel, y en la actualidad, han avanzado a la fase de prueba clínica. I La cefalomanina es análoga al taxol en la estructura (se muestra a continuación) , su contenido en 'las plantas es alto (1 a 2°/000' comparable con el contenido de I taxol) , y su efecto sobre los tumores resistentes y sensibles es similar al taxol. Pero la cefaloman¡ina actualmente no se utiliza lo suficiente, porque por, lo general se descartó como subproducto de taxol durante la separación industrial. Ahora, hemos hecho modificaciones utilizando cefalomanina, un análogo de taxol, como compuesto líder, esto es benéfico tanto para el desarrollo de nuevos medicamentos como para la utilidad total de jlos recursos .

CONTENIDO DE LA INVENCION j Un problema técnico a resolver por la presente i invención es proporcionar nuevos derivados de cefalomanina que sean eficaces en los tumores resistentes a taxol y docetaxel.

Otro problema técnico a resolver por la presente invención es proporcionar un nuevo proceso para la preparación de dichos derivados de cefalomanina. ! Otro problema técnico a resolver por la presente invención es proporcionar una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la fórmula general (I) cpmo ingrediente activo y un portador farmacéuticamente aceptable.

Otro problema técnico más a resolver por , la I presente invención es proporcionar el uso de nuevos derivados y composiciones de cefalomanina que los contie'nen como agente antineoplásico .

Para resolver los problemas técnicos mencionados anteriormente, la presente invención proporciona ;las soluciones técnicas siguientes: I Específicamente, los derivados de cefalomanina' de la presente invención se representan por la fórmula general (I) (I) en donde, | R-L se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, TMS, TES, TBS y -COXlt y X1 se selecciona | de alquilo de C1-s; I I R2 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo de ^-15 sustituido o sin sustituir, lineal o ramificado, alquenilo de C2-15, alquinilo de C2-1S, arilo y heteroarilo sin sustituir, mono- ! y multisustituidos, -COX2; -COX3-COOX4 ; -COX3-CONX4X5 ; : se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo de C,_-1S sustituido o sin sustituir lineal o ramificado, alquenilo de C2-15, alquinilo de C2-1S arilo y heteroarilo sin sustituir, mono-multisustituidos, -0X6; -SX6; -NHX,; -OCOX,; X2 , x3, X4 , X- Xc se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, i alquilo de Cx-15 sustituido o sin sustituir, lineal o ramificado, alquenilo de C2-15, alquinilo de C2-15, ariló y heteroarilo sin sustituir, mono- y multisustituidos ; los sustituyentes para el alquilo se seleccionan del grupo que consiste de hidroxi, amino, carboxilo, carbonilo, alcoxi de ^-5, halo, alcoxicarbonilo de ,^, N-alquilcarbamoilo de C1-5, ciano, nitro; los sustituyentes para arilo y heteroarilo se seleccionan del grupo que consiste de hidroxi, hidroximetilo, halo, alquilo de ^-5? alcoxi de c]-5, alquenilo de C1-5, . acilo, aciloxi, nitro, amino, amido, ciano, azido; j el alquenilo de se selecciona del grupo que consiste de vinilo, propenilo, isopropenilo, butenilo, isobutenilo, hexenilo; el alquinilo de 0?-15 se selecciona del grupo que consiste de etinilo, propinilo, isopropinilo, butinilo, isobutinilo, hexinilo; el arilo preferido se selecciona del grupo que consiste de fenilo, naftilo, bifenilo; el heteroarilo preferido se selecciona del grupo que consiste de furilo, tienilo, piridilo, benzofurilo, bipiridilo; el halo se selecciona entre F, Cl, Br, I. J í Ri y R2 mas preferidos se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, formilo, acetilo, propionilo.

Los símbolos y términos utilizados tienen los siguientes significados: "Bz" representa benzoílo, "Ph." representa feni'lo; "Ac" representa acetilo, "Et" representa etilo; "R" por lo general representa alquilo, a menos que se indique lo contrario; "TMS" representa trimetilsililo; "TES" I representa trietilsililo; "TBS" representa ter-butildimetilsililo; "DMAP" representa ¡ p-dimetilaminopiridina; "DMF" representa N,N-dimetilformamida, "THF" representa tetrahidrofurano; "EjCC" representa diciclohexilcarbodiimida; »pp" representa 4-pirrolilpiridina, "r.t." representa la temperatura ambiente; "TritonB" representa hidróxido de benciltrimetilamonio . | La presente invención se refiere también a un proceso para la preparación de compuestos de acuerdo con' la presente invención, que se ilustra en los siguientes esquemas lia y Ilb: ! Ilb Específicamente, el hidroxilo en la posición C-7 de la cefalomanina modificada o sin modificar en la posición C-10 como material de partida, se condensó con un ácido o cloruro de acilo correspondiente para producirj el compuesto de la fórmula lia; alternativamente, después de la eliminación de benzoílo en la posición 2 de la cefalomanina modificada, tanto en la posición C-10 como' en la posición C-7 como material de partida, se proporcionó un intermediario clave, el intermediario después se conde'nsó con un ácido o cloruro de acilo correspondiente para producir el compuesto de la fórmula Ilb. ' La reacción de acilación como se mencionó anteriormente se realizó preferentemente en presencia de un agente de condensación. Los agentes de condensación preferidos incluyen 1 , 3 -diciclohexilcarbodiimida (DCC), carbonato de dipiridilo (2-DPC) , 1 , 3 -diisopropil- i carbodiimida (DIPC) , 1- (3 -dimetilaminopropil) -3 -etilcarbodiimida (EDCI) ; los agentes más preferidos (son DCC, DIPC, EDCI.

La reacción de acilación como se mencionó anteriormente se realizó preferentemente en presencia de un catalizador. Los catalizadores preferidos incluyen aminas terciarias, piridina, 4-dimetilaminopiridina ; 4-pirrolilpiridina; los catalizadores más preferidos son 4-dimetilaminopiridina y 4 pirrolilpiridina .

? La reacción de acilación como se mencionó anteriormente se realizó preferentemente en presencia de un solvente orgánico. Los solventes orgánicos preferidos incluyen sulfóxido de dimetilo (DMSO) , tolueno, cloruro de metileno, éter dimetílico de etilenglicol , 1,2-dicloroetano, tetrahidrofurano y N, N-dimetilformamida (DMF) ; los solventes orgánicos más preferidos incluyen tolueno, tetrahidrofurano y N, N-dimetilformamida (DMF) . ' La temperatura de reacción varía desde 10 hasta 120°C, preferentemente desde 30 hasta 90°C.

La presente invención se refiere también a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención como ingrediente activo. La composición farmacéutica puede ser preparada de acuerdo con métodos bien conocidos en la técnica. El compuesto de la presente invención puede formularse en cualesquier formas farmacéuticas adecuadas para la administración a los humanos o animales en combinación con uno o más excipientes y/o adyuvantes farmacéuticamente aceptables, sólidos o líquidos. En general, el contenido del compuesto de la presente invención en la composición farmacéutica es de 0.1 a 95% en peso. | El compuesto de acuerdo con la presente invención o de una composición farmacéutica que comprende , el compuesto puede ser administrado en forma de dósis unitaria, las vías de administración pueden ser intestinal o parenteral, tales como la administración oral, intravenosa, intramuscular, subcutánea, nasal, la mucosa bucal, oftálmica, pulmonar y las vías respiratorias, dérmica, vaginal, rectal, etc.

Las formas de dosificación para la administración pueden ser formas de dosificación líquida, sólida o semisólida. Las formas de dosificación líquidas pueden ¡ser las soluciones (que incluyen las soluciones verdaderas y soluciones coloidales) , emulsiones (incluyendo tipo aceite/agua, tipo agua/aceite y emulsiones múltiples) , suspensiones, inyecciones (que incluyen las inyecciones i acuosas, inyecciones en polvo e infusiones) , gotas para 'los ojos, gotas nasales, lociones y linimentos, etc.; .las formas de dosificación sólidas pueden ser tabletas (que incluyen las tabletas convencionales, tabletas entéricas, í tabletas bucales, tabletas dispersables, tabletas masticables, tabletas efervescentes, tabletas que ' se -desintegran oralmente) , cápsulas (que incluyen cápsulas i duras, cápsulas blandas, cápsulas entéricas) , gránulos, pellas, pildoras en forma de gota, supositorios, membranas, parches, inhalaciones en aerosoles/polvo, rocíos, etc.; las i formas de dosificación semisólidas pueden ser ungüentos, geles, pastas, etc. .

Los compuestos de la presente invención se pueden formular en formulaciones comunes, así como ! en formulaciones de liberación sostenida, formulaciones, de liberación controlada, formulaciones dirigidas al objetivo y sistemas de distribución de partículas. \ Para formular los compuestos de la presente I I invención en forma de tabletas, se puede utilizar ampliamente una variedad de excipientes bien conocidos! en la técnica, que incluyen los diluyentes, aglutinantes, agentes humectantes, desintegradores, lubricantes, deslizantes. Los diluyentes pueden ser almidones, dextrinas, sacarosa, glucosa, lactosa, manitol, sorbiJol, xilitol, celulosa microcristalina, sulfato de calcio, fosfato ácido de calcio, carbonato de calcio y similares; los agentes humectantes pueden ser agua, etanol, isopropanol y similares; los aglutinantes pueden ser pasta de almidón, dextrinas, jarabe, miel, solución de glucosa, celulosa microcristalina, mucílago de acacia, pasta de gelatina, carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, etilcelulosa, resinas acrílicas, carbómero, polivinilpirrolidorias , polietilenglicoles y similares; los desintegradores pueden ser almidones secos, celulosa microcristalina, hidroxipropilcelulosa con baja sustitución, j polivinilpirrolidonas reticuladas, croscarmelosa de sodio, carboximetil-almidón sódico, bicarbonato de sodio y ácido j cítrico, ásteres de ácidos grasos de polioxietilen-sorbitol, lauril-sulfato de sodio y similares; jlos lubricantes y deslizantes pueden ser talco, dióxido de silicio, estearato, ácido tartárico, parafina líquida, polietilenglicoles y similares.

Las tabletas pueden ser procesadas adicionalmente para formar tabletas recubiertas, por ejemplo, tabletas recubiertas con azúcar, tabletas recubiertas con película, tabletas con recubrimiento entérico, o tabletas con doble capa y tabletas de múltiples capas.

A fin de formular la unidad de dosificación en cápsulas, los compuestos de acuerdo con la presente invención como ingrediente activo se pueden mezclar jcon diluyentes, aglutinantes y desintegradores, en gránulos o pellas, a continuación se cargan en cápsulas duras o blandas. Los diluyentes, aglutinantes, agentes humectantes, desintegradores, deslizantes para la preparación de las tabletas de los compuestos de acuerdo con la presente invención también se pueden utilizar para la preparación de las cápsulas de los compuestos de acuerdo con la presente invención.

Para formular los compuestos de acuerdo coni la presente invención en inyecciones, se puede utilizar como solvente agua, etanol, isopropanol, propilenglicol o luna mezcla de los mismos, y a los cuales se puede agregar la cantidad adecuada de solubilizantes , cosolventes, modificadores del pH, agentes de control de la presión osmótica. Los solubilizantes o solventes auxiliares pudden ser poloxámero, lecitina, hidroxipropil- -ciclodextrina, y similares; los modificadores del pH pueden ser fosfatos, acetatos, ácido clorhídrico, hidróxido de sodio, ! y similares; los agentes de control de la presión osmótica pueden ser cloruro de sodio, manitol, glucosa, fosfato, ? acetato, y lo semejante. Para la preparación de las inyecciones de polvo liofilizado, también se pueden agregar i como agentes de soporte manitol, glucosa, etc. | Además, los colorantes, conservadores, agentes fragantes, agentes saborizantes u otros aditivos también se pueden agregar a las formulaciones farmacéuticas si ¡ es necesario .

De acuerdo con la presente invención, jlos compuestos de la fórmula general (I) muestran una actividad biológica significativa en la prueba de selección farmacológica, y son útiles los agentes antineoplásicos . Pueden ser utilizados para inhibir el crecimiento de tumores en el cuerpo de los animales, incluyendo los seres humanos . j De acuerdo con los experimentos farmacológicos in vitro, se ha descubierto que los compuestos de acuerdo ¡ con la presente invención presentan potente efecto inhibidor sobre los tumores sensibles, en donde el compuesto con la actividad más fuerte presenta actividad comparable al taxol i para los tumores sensibles; sin embargo, su actividad' es decenas de veces más alta que la del taxol para los tumores resistentes a fármacos, que se origina de la sobreexpresión de P-glicoproteínas . Los compuestos de acuerdo con la presente invención también son eficaces para los tumores resistentes a fármacos, a causa de las mutaciones de ¡los residuos de aminoácidos de tubulinas, y sus actividades son más fuertes que el taxol.

El experimento in vivo reveló que el efectoj de inhibición del crecimiento de los compuestos de acuerdo con la presente invención sobre el tumor de xenoinjerto: de ratones desnudos de adenocarcinoma pulmonar humano A54íi es más fuerte que el de taxol.

Con el fin de lograr el propósito del tratamiento y mejorar el efecto del tratamiento, el medicamento de la presente invención o composición farmacéutica se puede administrar mediante cualquier forma conocida para la administración.

La dosis de los compuestos o composiciones farmacéuticas de la presente invención puede variar en un amplio intervalo, dependiendo de la naturaleza y la gravedad de las enfermedades a prevenir o tratar, de( la condición individual de los pacientes o animales, las vías de administración, formas de dosificación, y similares. En general, el intervalo de dosis diaria adecuada de los compuestos de acuerdo con la presente invención oscila desde 0.001 hasta 150 mg/kg de peso corporal, de preferencia desde 0.1 hasta 100 mg/kg de peso corporal, más preferentemente desde 1 hasta 60 mg/kg de peso corporal, y lo más preferentemente desde 2 hasta 30 mg/kg de peso corporal. Dicha dosis puede ser administrada como una unidad de dosis única o unidades de dosis divididas, en I función de la experiencia clínica de los médicos y| el régimen de dosis, incluyendo el uso de otras maneras terapéuticas .

Los compuestos o composiciones de la presente invención pueden ser administrados solos o en combinación con otros agentes terapéuticos o los agentes para el tratamiento sintomático. Cuando un compuesto de la presente invención es sinérgico con otros agentes terapéuticos, la dosis debe ajustarse de acuerdo a la condición de la práctica.

EJEMPLOS Los siguientes ejemplos sirven para ilustrar la presente invención sin limitar el alcance de la misma. ¡ Ejemplo 1: Preparación de 10-desacetil-cefalomanina Paso 1: 2 ' - ter-butildimetilsilil-cefalomanina Cefalomanina (600 mg, 0.721 mmol) se disolvió en 5 mi de DMF, a continuación se agregaron imidazol (245.5 mg, 3.61 mmol) y cloruro de ter-butildimetilsililo (543.5 mg, 3.61 mmol) . Después de reaccionar a 70°C durante 5 horas, se agregaron 10 mi de NaHC03 acuoso saturado. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . {Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sóbre sulfato de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo, se evaporó hasta sequedad. Se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo : acetato de etilo = 5:1) para dar el producto del título (637 |mg, 93.4%) . j Paso 2: 2' -ter-butildimetilsilil-10-desacetil-cefalomanina 2 ' -ter-butildimetilsilil-cefalomanina (98 ¡mg, j 0.103 mmol) se disolvió en 6 mi de etanol, a continuación se agregó hidrato de hidrazina al 85% (0.625 mi). Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 2 horas, se i agregaron 10 mi de NH4C1 acuoso saturado. La mezcla Ifue aforada con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato j de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. A continuación, se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo : acetato de etilo = 2:1) para dar el producto del título (79.4 mg, 84.8%). j Paso 3: 10-desacetil-cefalomanina 2' -ter-butildimetilsilil-10-desacetil-cefalomanina (32 mg, 0.035 mmol) se disolvió en 1.4 ml| de acetonitrilo, se agregaron de forma secuencial piridina (0.683 mi) y HF (0.375 mi) . Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 24 horas, se agregaron 30 mi de acetato de etilo. La mezcla se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 20 mi), y la capa acuosa se extrajo jcon acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. Después, la capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (cloroformo: metanol = 20:1) para dar i el producto del título (25.7 mg, 91.92%). ¡ *H 300M (CDC13) : d 8.10 (2H, d, J = 7.2 Hz) , 7.61 1 I (1H, t, J = 7.2 Hz), 7.50 (2H, t, J = 7.2 Hz) , 7.28 a 7.39 (5H, m) , 6.65 (1H, d, J = 9.0 Hz) , 6.44 (1H, dq, J = 7.2, 1.4 Hz) , 6.16 (1H, t, J = 8.1 Hz) , 5.66 (1H, d, J" = 6.9 Hz) , 5.59 (1H, dd, J = 8.9, 2.7 Hz) , 5.18 (1H, s) , 4.91 (1H, d, J = 7.8 Hz), 4.91 (1H, s amplio), 4.39 (1H, d, J = 8.7 Hz) , 4.24 (1H, s amplio), 4.19 (1H, d, J" = 8.4 Hz) , 3.87 (1H, d, J = 6.9 Hz), 3.72 (1H, s amplio), 2.53 a 2.62 (1H, m) , 2.34 (3H, S) , 2.24 (2H, d, J = 9.0 Hz) , 1.82 a 1.88 (1H, m) , 1.82 (3H, s) , 1.76 (3H, s) , 1.72 (3H, d, J = 7.5 Hz) , 1.21 (3H, s) , 1.11 (3H, s) . ESI-MS: m/z [M+Na] + 812.3.

Los Ejemplos 2-4 se prepararon de acuerdo guíente esquema Ejemplo 2: Preparación de 2- (3 -azidobenzoil) -10-propionil-cefalomanina Pasos 1-2: Son los mismos procedimientos descritos en los Pasos 1-2 del Ejemplo 1.

Paso 3: 2' -ter-butildimetilsilil-10-propionil-cefalomanina 2 ' -ter-butildimetilsilil-10-desacetil-cefalomanina (155 mg, 0.171 mmol) se disolvió en 5 mi de THF, a continuación se agregó CeCl3 (8.4 mg) , enfriando en baño de hielo. Se agregó anhídrido propiónico (0.22 mi, 1.71 mmol) . Después de reaccionar a 30°C durante 2 horas, se agregaron 300 mi de acetato de etilo, y se lavaron con NaHC03 acuoso saturado (2 x 50 mi) y 50 mi de solución saturada de NaCl . La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (150 mi) . Las capas de acetato de etilo ' se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se filtraron. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetona: éter de petróleo = 1:2) para dar el producto título (148.2 mg, 97%).

Paso 4: 2' -ter-butildimetilsilil-7-trietilsilil-10-propionil-cefalomanina j 2 ' -ter-butildimetilsilil-10-propionil-cefalomanina (193 mg, 0.201 mmol) se disolvió en 2 mi de í DMF, a continuación se agregaron imidazol (73 mg, 1.07 mmol) y cloruro de trietilsilil (0.135 mi). Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 10 horas, se agregó NaHC03 acuoso saturado (10 mi) . La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 5:1) para dar el producto del título (198 mg, 91.7%).

I Paso 5: 2 ' -ter-butildimetilsilil-2-desbenzoií-7-trietilsilil-10-propionilcefalomanina 2-ter-butildimetilsilil-7-trietilsilil-10-propionil-cefalomanina (168 mg, 0.156 mmol) se disolvió en 7 mi de cloruro de metileno. Después de enfriar a -28 °C en baño de hielo y metanol, se agregó por goteo TritonB (0.138 mi, 0.313 mmol) . Después de reaccionar durante 15 minutos, se agregaron 20 mi de cloruro de metileno. La mezcla se lavó con cloruro de amonio acuoso saturado (20 mi) . La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mi) . La capa orgánica se lavó con 20 mi de solución saturada de NaCl, luego se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y se filtró. La capa orgánica se evaporó hasta sequedad. Se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (n-hexano: acetato de etilo: acetona = 8:3:1) para dar el producto del título (110 mg, 73%) . j Paso 6: 2- (3-azidobenzoil) -10-propionil-cefalomanina 2' -ter-butildimetilsilil-2-desbenzoil-7- | trietilsilil-10-propionil-cefalomanina (35.7 mg, 0.0368 mmol) se disolvió en 1 mi de tolueno, a continuación, se agregaron ácido m-Azidobenzoico (62.5 mg, 0.383 mmol), PP (5.7 mg, 0.0383 mmol) y DCC (79 mg, 0.383 mmol). Después de reaccionar a 65 °C durante 10 horas, se agregó 0.1 mi de metanol, y después se filtró. El sólido se lavó con acetato de etilo. Los filtrados se combinaron y se evaporaron hasta sequedad. A continuación, se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo: acelato de etilo = 8:1). El producto resultante se contaminó con impurezas tales como DCU, y el producto se desprotegió, ¡sin purificación adicional, como sigue. El producto se disolvió en 1.4 mi de acetonitrilo, a continuación se agregaron secuencialmente piridina (0.683 mi) y HF (0.375 mi). Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 24 horas, se agregó 30 mi de acetato de etilo, luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 20 mi) . La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (n-hexano: acetato de etilo: acetona = 8:3:2) para dar el producto del título (20.3 mg, 62.3% de la producción total en dos pasos) . lH 300M (CDC13) : d 7.89 (1H, d, J = 8.1 Hz), 7.80 (1H, m) , 7.48 (1H, t, J = 7.8 Hz) , 7.31 a 7.42 (5H, m) , 7.24 (1H, ddd, J = 1.2, 2.4, 8.1 Hz), 6.49 (1H, d, J" = 8.7 Hz) , 6.40 (1H, dq, J = 1.5, 6.9 Hz) , 6.28 (1H, s) , 6.17 (1H, t, J = 8.1 Hz) , 5.66 (1H, d, J = 6.9 Hz) , 5.58 (1H, dd, J- = 2.7, 8.7 Hz) , 4.94 (1H, d, J = 7.8 Hz) , 4.68 (1H, s amplio), 4.40 (1H, m) , 4.30 (1H, d, J" = 8.4 Hz) , 4.17 (1H, d, J" = 8.4 Hz) , 3.80 (1H, d, J = 6.9 Hz) , 3.63 (1H|, S I amplio), 2.47 a 2.62 (3H, m) , 2.37 (3H, s) , 2.31 (2H, superpuesto), 1.82 a 1.95 (1H, m) , 1.78 a 1.80 (6Hl, s amplio), 1.72 (3H, dd, J = 1.5, 6.9 Hz) , 1.67 (3H, s) , 1.25 I (3H, s) , 1.23 (3H, t, J = 7.8 Hz) , 1.14 (3H, s) . ESI^ S: m/z [M+Na]+ 909.4.

Ejemplo 3: Preparación de 2- (3-metoxibenzoil) -10-propionil-cefalomanina Pasos 1-5: Son los mismos procedimientos descritos en los Pasos 1-5 del Ejemplo 2. | Paso 6: 2- (3-metoxibenzoil) -10-propionil-cefalomanina 2' -ter-butildimetilsilil-2-desbenzoil-7- ¡ trietilsilil-10-propionil-cefalomanina (37.2 mg, 0.0383 mmol) se disolvió en 1 mi de tolueno, a continuación se agregaron ácido m-metoxibenzoico (58.3 mg, 0.383 mmol),! PP (5.7 mg, 0.0383 mmol) y DCC (79 mg, 0.383 mmol). Después de reaccionar a 65°C durante 24 horas, se agregó 0.1 mi de metanol, con posterior filtración. El sólido se lavó j con acetato de etilo. Los filtrados se combinaron y se evaporaron hasta sequedad. A continuación, se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 8:1). El producto resultante se contaminó con impurezas tales como DCU, y el producto se desprotegió, sin purificación adicional, como sigue. El producto se disolvió en 1.4 mi de acetonitrilo, a continuación se agregaron secuencialmente piridina (0.683 mi) y HF (0.375 mi). Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 24 horas, se agregó 30 mi de acetato, de etilo, luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 20 mi) . La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (n-hexano: acetato de etilo: acetona = 8:3:2) para dar el producto del título (21.0 mg, 62.5% de la producción total en , dos pasos) . lH 300M (CDC13) : d 7.71 (1H, d, J = 8.1 Hz) , 7.62 a 7.69 (1H, m) , 7.29 a 7.43 (6H, m) , 7.15 (1H, ddd, J = 0.9, 2.7, 8.3 Hz) , 6.51 (1H, d, J = 8.7 Hz) , 6.42 (1H, !dq, J" = 1.5, 7.2 Hz) , 6.39 (1H, s) , 6.19 (1H, t, J = 7.5 Hz) , 5.66 (1H, d, J = 6.9 Hz) , 5.59 (1H dd, J = 2.7, 8.6 Hz) , 4.94 (1H, d, J = 7.5 Hz) , 4.69 (1H, s amplio), 4.36 a 4.44 (1H, m) , 4.33 (1H, d, J" = 8.4 Hz) , 4.17 (1H, d, J" = 8.4 Hz) , 3.88 (3H, s) , 3.79 (1H, d, J = 6.9 Hz) , 3.63 (1H, s amplio), 2.45 a 2.63 (3H, m) , 2.33 (3H, s) , 2.26 (2H, dd, J = 3.0, 9.0 Hz), 1.86-1.92 (1H, m) , 1.80 (3H, pseudo-t, J = 1.2 Hz) , 1.79 (3H, d, J = 1.2 Hz) , 1.72 (3H, dd, J = 1.2, 6.9 Hz) , 1.67 (3H, s) , 1.25 (3H, s) , 1.23 (3H, t , J = 7.5 Hz) , 1.14 (3H, S) . ESI-MS: m/z [M+Na] + 898.4.

Ejemplo 4: Preparación de 10 -propionil -cefalomanina Pasos 1-3: Son los mismos procedimientos descritos en los Pasos 1-3 del Ejemplo 2.

Paso 4: 10 -propionil-cefalomanina 2' -ter-butildimetilsilil-10-propionil-cefalomanina (26 mg, 0.027 mmol) se disolvió en 1.4 mi de acetonitrilo, a continuación se agregaron secuencialménte piridina (0.683 mi) y HF (0.375 mi). Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 24 horas, se agregó 30 mi de acetato de etilo, luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 20 mi) . La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sííice (cloroformo: metanol = 20:1) para dar el producto del título (21.1 mg, 92%).

XH 300M (CDC13) : d 8.11 (1H, d, J = 6.9 Hz), 7.61 (1H, t, J = 7.5 Hz) , 7.50 (2H, t , J = 7.5 Hz), 7.31 a 7.42 (5H, m) , 6.54 (1H, d, J = 9.0 Hz) , 6.43 (1H, dq, J = 1.2, 6.9 Hz) , 6.28 (1H, s) , 6.20 (1H, t, J = 7.5 Hz) , 5.66 (1H, d, J = 7.2 Hz), 5.61 (1H, dd, J = 3.0, 8.7 Hz) , 4.93 (1H, dd, J = 2.1, 9,5 Hz) , 4.70 (1H, d, J = 2.4 Hz) , desde 4.36 hasta 4.42 (1H, m) , 4.29 (1H, d, J = 8.7 Hz) , 4.18 (1H, d, J = 8.4), 3.79 (1H, d, J = 7.2), 3.66 (1H, s amplio), desde 2.47 hasta 2.62 (3H, m) , 2.35 (3H, s) , desde 2.25 hasta 2.34 (2H, m) , desde 1.86 hasta 1.91 (1H, m) , 1.80 (3H, s) , 1.79 (3H, s), 1.72 (3H, dd, J = 1.2, 6.9 Hz) , 1.67 (3H, s) , 1.25 (3H, s) , 1.23 (3H, t, J = 7.5 Hz) , 1.14 (3H, s) . ESI-MS: m/z [M+Na] + 884.4.

I Ejemplo 5: Preparación de 2- (3 -azidobenzoil) -cefalomanina Paso 1: Es el mismo que el procedimiento descrito en el Paso 1 del Ejemplo 1.

Paso 2: 2-ter-butildimetilsilil-2-desbenzoil-cefalomanina 2 ' -ter-butildimetilsilil-cefalomanina (351 mg, 0.329 mmol) se disolvió en 7 mi de cloruro de metileno,; se enfrió a -28°C en baño de hielo y metanol, a continuación se agregó por goteo TritonB (0.308 mi) . Después de reaccionar durante 15 minutos, se agregó 20 mi de cloruro de metileno. La capa orgánica se lavó con 20 mi de solución saturada de cloruro de amonio. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mi) . La capa orgánica se lavó con 20 mi de solución saturada de NaCl . La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y se filtró. La capa orgánica se evaporó hasta sequedad. Se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (n-hexáno: acetato de etilo: acetona = 8:3:1) para dar el producto del título (209 mg, el 67.4%).

I Paso 3: 2- (3-azidobenzoil) -cefalomanina 2' -ter-butildimetilsilil-2-desbenzoil-cefalomanina (62 mg, 0.0662 mmol) se disolvió en 1 mi de tolueno, a continuación se agregaron ácido n?-azidobenzóico (121.4 mg, 0.744 mmol), PP (11 mg, 0.0742 mmol) y DCC (153.51 mg, 0.744 mmol) . Después de reaccionar a 65°C durante 10 horas, se agregó 0.1 mi de metanol, luego se filtró. El sólido se lavó con acetato de etilo. El filtrado se combinó y se evaporó hasta sequedad. A continuación, se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 8:1). El producto resultante se contaminó con impurezas tales como DCU, y el producto se desprotegió, sin purificación adicional, como sigue. El producto se disolvió en 1.4 mi de acetonitrilo, luego se agregaron secuencialmente piridina (0.683 mi) y HF (0.375 mi). Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 24 horas, se agregó 30 mi de acetato de etilo, luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 20 mi) , la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice ! (n-hexano: acetato de etilo: acetona = 8:3:2) para dar¡ el producto del título (43 mg, 83.4% de la producción total en dos pasos) .

H 300M (CDClj) : d 7.89 (1H, d, J = 8.1 Hz) , 7.79 (1H, m) , 7.48 (1H, t, J = 7.8 Hz) , 7.31 a 7.40 (5H, m) , 7.22 a 7.25 (1H, m) , 6.49 (1H, d, J = 8.7 Hz) , 6.41 (1H, dq, J = 1.5, 6.9 Hz) , 6.27 (1H, s) , 6.17 (1H, t, J = 18.5 Hz), 5.66 (1H, d, J = 7.2 Hz) , 5.58 (1H, dd, J = 2.7, 8.7 Hz) , 4.94 (1H, d, J = 7.5 Hz) , 4.68 (1H, d, J = 2.7 Hz) , 4.39 (1H, dd, J = 6.9, 9.45 Hz) , 4.30 (1H, d, J = 8.4 Hz) , 4.16 (1H, d, J = 8.4 Hz) , 3.79 (1H, d, J = 7.2 Hz) , 2.48-2.62 (1H, m) , 2.34 (3H, s) , 2.30 (2H, d, J = 9.0 Hz) , 2.24 (3H, s) , 1.82 a 1.91 (1H, m) , 1.79 (6H, s) , 1.73 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.67 (3H, s) , 1.25 (3H, s) , 1.14 (3H, s) . ÉSI-MS: m/z [M+Na] + 895.4.

Ejemplo 6: Preparación de 2 - (3 -metoxibenzoil) -cefalomanina Paso 1: Es el mismo procedimiento descrito en el Paso 1 jdel Ejemplo 1.

Paso 2: Es el mismo procedimiento descrito en el Paso 2 jdel Ejemplo 5.

Paso 3: 2- (3 -metoxibenzoil) -cefalomanina ; I 2' -ter-butildimetilsilil-2-desbenzoil- | cefalomanina (56 mg, 0.0598 mmol) se disolvió en 1 mí de tolueno, ácido m-metoxibenzoico (113 mg, 0.742 mmol), PP (11 mg, 0.0742 mmol) y DCC (153.51 mg, 0.744 mmol). Después de reaccionar a 65°C durante 10 horas, se agregó 0.1 mi de metanol, luego se filtró. El sólido se lavó con acetato de etilo. Los filtrados se combinaron y se evaporaron hasta i sequedad. A continuación, se llevó a cabo una cromatográfía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 8:1) . El producto resultante se contaminó con impurezas tales como DCU, y el producto se desprotegió, sin purificación adicional, como sigue. El producto se disolvió en 1.4 mi de acetonitrilo, a continuación se agregaron secuencialmente piridina (0.683 mi) y HF (0.375 mi) . Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 24 horas, se agregó 30 mi de acetato de etilo, luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 20 mi) , la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas! de ! acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato i de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (n-hexano: acetato de etilo: acetona = 8:3:2) para dar el producto del título (37.3 mg, 64.5% de rendimiento total en dos pasos) .

*H 300M (CDC13) : d 7.70 (1H, d, J = 7.5 Hz) , 7.68 (1H, m) , desde 7.30 hasta 7.42 (6H, m) , 7.13 (1H, dd, J = 2.7, 7.5 Hz) , 6.55 (1H, d, J = 8.7 Hz) , 6.42 (1H, dq, J = 1.2, 6.9 Hz) , 6.26 (1H, s) , 6.18 (1H, t, J = 7.8 Hz) , 5.65 (1H, d, J = 6.9 Hz) , 5.58 (1H, dd, J = 3.0, 8.55 Hz) , 4.93 (1H, d, J = 7.5 Hz) , 4.69 (1H, d, J" = 3.0 Hz) , 4.38 (lH, dd, J = 6.6, el 11.0 Hz) , 4.31 (1H, d, J = 8.4 Hz) , 4.17 (1H, d, J" = 8.4 Hz) , 3.86 (3H, s) , 3.77 (1H, 6.9 Hz) , 2.48-2.62 (1H, m) , 2.32 (3H, s) , 2.28 (2H, 7.2 Hz) , 1.86 a 1.90 (1H, m) , 1.79 (3H, s) , 1.78 (3H, s) , 1.71 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.66 (3H, s), 1.25 (3H , s) , 1.14 (3H, S) . ESI-MS: m/z [M+Na] + 884.4. i Ejemplos 7-14 se prepararon de acuerdo al siguiente esquema: Ejemplo 7: Preparación de 2- (3 -metoxibenzoil) -7-propioriilj-10 -desacetil -cefalomanina Pasos 1-2: Son los mismos procedimientos descritos en ¡los Pasos 1-2 del Ejemplo 1.

Paso 3: 2 ' -ter-butildimetilsilil-10-trietilsilil-cefalomanina ? 2' -ter-butildimetilsilil-10-desacetil- ' cefalomanina (300 mg, 0.332 mmol) se disolvió en 10 ml de THF bajo atmósfera de N2, luego se enfrió en baño de hielo y sal a -10°C y se agregaron N, 0-bis (trietilsilil) -trifluoroacetamida (1 ml) y LHMDS (3 µ?) . Después j de reaccionar durante 10 minutos, se agregó NaHC03 acuoso saturado (10 ml) , a continuación se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro.» La I capa de acetato de etilo se evaporo hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 5:1) para dar el producto del título (314 mg, 92.6%). í I Paso 4: 2 ' -ter-butildimetilsilil-10-trietilsilil-7-propioni1-cefalomanina 2 ' -ter-butildimetilsilil-10-trietilsilil-cefalomanina (300 mg, 0.171 mmol) se disolvió en 5 ml de THF, luego se enfrió en baño de hielo, y se agregó anhídrido propiónico (0.40 ml) . Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 20 horas, se agregó 300 mi de acetato de etilo, luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 50 mi) y solución saturada de NaCl (50 mi) . La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (150 mi) . La capa de acetato de etilo se combinó, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y se filtró. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetona: éter de petróleo = 1:2) para dar el producto título (301.0 mg, 95.1%).

Paso 5: 2 ' -ter-butildimetilsilil-2-desbenzoil l0-trietilsilil-7-propionil-cefalomanina 2 ' -ter-butildimetilsilil-10-trietilsilil-7-propionil-cefalomanina (168 mg, 0.156 mmol) se disolvió en 7 mi de cloruro de metileno, luego se enfrió en baño de hielo y metanol a -28°C, y se agregó por goteo TritonB (0.138 mi, 0.313 mmol) . Después de reaccionar durante 15 i minutos, se agregó 20 mi de cloruro de metileno, luego se lavó con 20 mi de solución saturada de cloruro de amonio. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mi) . La capa orgánica se lavó con 20 mi de solución saturada de NaCl . La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y se filtró. La capa orgánica se evaporó hasta ! sequedad. Se llevó a cabo una cromatografía en columna ¡ sobre gel de sílice (n-hexano: acetato de etilo: acetona = 8:3:1) para dar el producto del título (110 mg, 73%) Paso 6: 2- (3 -metoxibenzoil) -7-propionil-10-desacetil-cefalomanina 2 ' -ter-butildimetilsilil-2-desbenzoil-10- | trietilsilil-7-propionil-cefalomanina (26 mg, 0.0268 mmol) se disolvió en 1 mi de tolueno, se agregaron ácido m-metoxibenzoico (40.76 mg, 0.268 mmol) , PP (2.38 mg, oJoi6 mmol) y DCC (55.28 mg, 0.268 mmol). Después de reaccionar a 65°C durante 10 horas, se agregó 0.1 mi de metanol, luego se filtró. El sólido se lavó con acetato de etilo. Los filtrados se combinaron y se evaporaron hasta sequedad.

Después se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 8:1) . j El producto resultante se contaminó con impurezas tales como DCU, y el producto se desprotegió, sin purificación I adicional, como sigue. El producto se disolvió en 1.4 mi de acetonitrilo, a continuación, se agregaron secuencialmente piridina (0.683 mi) y HF (0.375 mi). Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 24 horas, se agregó 30 mi de acetato de etilo, luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 20 mi) , la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La capaj de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (n-hexano: acetato de etilo: acetona = 8:3:2) para dar el producto del título (18.5 mg, 72.9% de rendimiento total en dos pasos) . lH 300 (CDC13) : d 7.70 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.62 (1H, s amplio), 7.31 a 7.43 (6H, m) , 7.15 (1H, dd, J = 2.1, 8.1 Hz) , 6.61 (1H, d, J = 8.7 Hz) , 6.44 (1H, q, J = 6.9 Hz) , 6.15 (1H, t, J = 8.4 Hz) , 5.66 (1H, d, J" = 6.6 Hz) , 5.59 (1H, dd, J = 2.4, 9.0 Hz) , 5.45 (1H, dd, J = 7.2, 10.2 Hz) , 5.28 (1H, s) , 4.91 (1H, d, J = 8.4 Hz) , 4.69 (1H, d, J = 2.1 Hz) , 4.35 (1H, d, J = 8.4 Hz) , 4.20 (1H, d, J = 8.7 Hz) , 3.97 (1H, superpuesto), 3.96 (1H, d, J = 6.9 Hz) , 3.87 (3H, s) , 3.6 (1H, s amplio), 2.46 a 2.56 (1H, m) , 2.34 (3H, I s) , 2,25 (2H, m) , 2.24 (2H, q, J = 7.8 Hz) , 1.91 a í.95 (1H, m) , 1.86 (3H, s) , 1.81 (6H, s amplio), 1.73 (3H, d, J = 6.9 Hz) , 1.20 (3H, s) , 1.09 (3H, t, J = 7.5 Hz) , 1.08 (3H, s) . ESI-MS: m/z [ +Na] + 898.3, [M+K] + 914.3. \ Ejemplo 8: Preparación de 2- (3 -azidobenzoil) -7 -propionil^ 10-desacetil-cefalomanina Pasos 1-5: Son los mismos procedimientos descritos en los Pasos 1-5 del Ejemplo 7.

Paso 6: 2- (3-azidobenzoil) -7-propionil-10-desacetil-cefalomanina | 2 ' -ter-butildimetilsilil-2-desbenzoil-10-trietilsilil-7-propionil-cefalomanina (20 mg, 0.0206 mmol) se disolvió en 1 mi de tolueno, y se agregaron ácido, m-azidobenzoico (33.6 mg, 0.206 mmol), PP (1.8 mg, 0.0124 mmol) y DCC (42.5 mg, 0.206 mmol). Después de reaccionar a 65 °C durante 10 horas, se agregó 0.1 mi de metanol, luego se filtró. El sólido se lavó con acetato de etilo. Los filtrados se combinaron y se evaporaron hasta sequedad, I seguido de una cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 8:1). El producto resultante se contaminó con impurezas .tales como DCU, y el producto se desprotegió, sin purificación adicional, como i sigue. El producto se disolvió en 1.4 mi de acetonitrilo, a continuación se agregaron secuencialmente piridina (0:683 mi) y HF (0.375 mi). Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 24 horas, se agregó 30 mi de acetato de etilo, luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 20 mi) , la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (n-hexano: acetato de etilo: acetona = 8:3:2) para dar el producto del título (15.0 mg, 76.5% de producción total en dos pasos) .

H (CDC13, 300 MHz) : d 7.89 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.79 (1H, s amplio), 7.49 (1H, t, J = 7.2 Hz) , 7.21-7.40 (6H, m) , 6.57 (1H, d, J = 8.7 Hz) , 6.42 (1H, q, J" = 6.7 i Hz) , 6.14 (1H, t, J = 8.9 Hz) , 5.66 (1H, d, J = 7.5 Hz) , 5.59 (1H, dd, J = 2.7, 9.0 Hz) , 5.46 (1H, dd, J = 7.5, 10.5 Hz), 5.29 (1H, s) , 4.92 (1H, d, J" = 8.5 Hz) , 4.68 (1H, d, J" = 2.7 Hz), 4.32 (1H, d, J = 8.1 Hz) , 4.19 (1H, d, J = 8.1 Hz) , 3.98 (1H, d, J = 7.2 Hz) , 3.97 (1H, superpuesto), 3.60 I (1H, s amplio), 2.52 (1H, ddd, J = 7.3 , 9.5, 15.0 Hz), 2.34 ¡ (3H, s) , 2.21 a 2.34 (2H, m) , 2.25 (2H, q, J" = 7.6 Hz) , 1.92 (1H, m) , 1.84 (3H, s) , 1.83 (3H, s) , 1.80 (3H, s) , 1.72 (3H, d, J = 6.9 Hz) , 1.21 (3H, s) , 1.09 (3H, t, J = 7.5 Hz) , 1.08 (3H, s) . ESI-MS: m/z [M+Na]† 909.3, [MVK] + 925.3.

Ejemplo 9: 2- (3-clorobenzoil) -7-propionil-lO-desacetil-cefalomanina Pasos 1-5: Son los mismos procedimientos descritos en los Pasos 1-5 del Ejemplo 7.

Paso 6: 2- (3-clorobenzoil) -7-propionil-10-desacetil-cefalomanina j 2 ' -ter-butildimetilsilil-2-desbenzoil-10- j trietilsilil-7-propionil-cefalomanina (23 mg, 0.0237 mmol) se disolvió en 1 mi de tolueno, se agregaron ácido m-clorobenzoico (37.1 mg, 0.237 mmol), PP (2.1 mg, 0.014 mmol). y DCC (48.9 mg, 0.237 mmol). Después de reaccionar a 65°C durante 10 horas, se agregó 0.1 mi de metanol, luego se filtró. El sólido se lavó con acetato de etilo. Los filtrados se combinaron y se evaporaron hasta sequedad, seguido de una cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 8:1). El producto resultante se contaminó con impurezas tales como DCU, y el producto se desprotegió, sin purificación adicional, como sigue. El producto se disolvió en 1.4 mi de acetonitrilo, a continuación se agregaron secuencialmente piridina (0.683 mi) y HF (0.375 mi). Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 24 horas, se agregó 30 mi de acetatcj de etilo, luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 20 mi) , la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo : una cromatografía en columna sobre gel de sílice (n-hexano: acetato de etilo: acetona = 8:3:2) para dar el productojdel título (17.5 mg, 78.3% de rendimiento total en dos pasos).

'H (CDC13, 500 Hz) : d 8.10 (1H, s) , 8.00 (1H, d, J = 7.5 Hz) , 7.59 (1H, dd, J = 1.5, 8.0 Hz) , 7.46 (1H, t, J = 8.0 Hz) , 7.30 a 7.414 (5H, m) , 6.59 (1H, d, J" = 8.5 Hz) , 6.44 (1H, q, J = 7,0 Hz) , 6.13 (1H, t, J = 9.0 Hz) , 5.62 (1H, d, vi = 7.5 Hz) , 5.59 (1H, dd, J = 2.5, 9.0 Hz) , 5.44 (1H, dd, J = 7.5, 10.5 Hz), 5.28 (1H, s) , 4.92 (1H, J = 8.5 Hz) , 4.69 (1H, d, J = 1.5 Hz) , 4.30 (1H, ? 44 Hz) , 4.18 (1H, d, J = 9.0 Hz) , 3.97 (1H, d, J = 6.5 Hz) , 3.97 (1H, superpuesto), 3.60 (1H, s amplio), 2.51 (1H, ddd, J = 7.3, 9.5, 15.0 Hz) , 2.34 (3H, s) , 2.28 (2H, m, superpuesto), 2.25 (2H, q, J = 7.6 Hz) 1.92 (1H, m) , 1.84 (3H, s) , 1.82 (3H, s) , 1.81 (3H, s) , 1.73 (3H, d, J = 6.9 Hz) , 1.20 (3H, s) , 1.09 (3H, t, J" = 7.5 Hz) , 1.07 (3H, s) . ESI-MS: m/z [M+Na] + 902.3, [M+K] + 918.3.

Ejemplo 10: Preparación de 2- (3 -metil-2 -butenoil)! -7-propionil- 10 -desacetil-cefalomanina Pasos 1-5: Son los mismos procedimientos descritos en los Pasos 1-5 del Ejemplo 7.

Paso 6: 2- (3-metil-2-butenoil) -7-propionil-10-desacejil-cefalomanina j I 2' -ter-butildimetilsilil-2-desbenzoil-10- j trietilsilil-7-propionil-cefalomanina (20 mg, 0.0206 mmol) se disolvió en 1 mi de tolueno y se agregaron ácido 3-metil-2-butenoico (20.6 mg, 0.206 mmol) , PP (1.8 mg, 0.0124 mmol) y DCC (42.5 mg, 0.206 mmol). Después de reaccionar a 65°C durante 10 horas, se agregó 0.1 mi de metanol, luego se filtró. El sólido se lavó con acetato de etilo. Los filtrados se combinaron y se evaporaron hasta seguido de una cromatografía en columna de gel (éter de petróleo: acetato de etilo = 8:1) . El producto resultante se contaminó con impurezas tales como DCU, y el producto se desprotegió, sin purificación adicional, como sigue. El producto se disolvió en 1.4 mi de acetonitriló, a continuación se agregaron secuencialmente piridina (0.683 mi) y HF (0.375 mi). Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 24 horas, se agregó 30 mi de acetato de etilo, luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 20 mi) . La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (n-hexano: acetato de etilo: acetona = 8:3:2) para dar el producto del título (7.5 mg, 45.2% de rendimiento total en dos pasos).

XH (CDC13, 300 MHz) : d 7.29-7.42 (5H, m) , 6.59 i (1H, d, J = 8.7 Hz), 6.46 (1H, q, J = 6.9 Hz) , 6.13 (1H,| t, J = 8.9 Hz) , 5.69 (1H, s) , 5.58 (1H, dd, J = 1.8, 8.7 Hz) , 5.39-5.45 (2H, superpuesto), 5.25 (1H, s) , 4.91 (1H, d, J = 7.8 Hz) , 4.67 (1H, d, J = 1.8 Hz) , 4.46 (1H, d, J = 8.1 Hz) , 4.20 (1H, d, J = 8.1 Hz) , 3.97 (1H, s amplio), 3.85 (1H, d, J = 6,3 Hz) , 3.47 (1H, s amplio), 2.49 (1H, ddd, J = 7.3, 9,6, 14.5 Hz) , 2.28 (1H, dd, J = 9.0, 15.3 Hz) , 2.24 (2H, q, J = 7.2 Hz) , 2.23 (3H, s) , 2.20 (3H, s) , 2.16 (1H, j dd, J = 15.4, 9.0 Hz) , 1.97 (3H, s) , 1.91 (1H, m) , Í.85 (3H, S) , 1.79 (3H, S) , 1.79 (3H, s) , 1.76 (3H, d, J = 7.2 Hz) , 1.20 (3H, s) , 1.08 (3H, t, J = 8.1 Hz) , 1.04 (3H, ¡s) . i ESI-MS: m/z [M+Na] + 846.3.3, [M+K] + 862.3.

Ejemplo 11: Preparación de 2- (3-metil-3-butenoil) -7-propionil - 10 -desacetil -cefalomanina i Pasos 1-6: Son los mismos procedimientos descritos en los Pasos 1-6 del Ejemplo 10. Se obtuvo como un subproducto en el Paso 6 del Ejemplo 10, 27% de rendimiento. ¡ H (CDC13, 300 MHz) : d 7.29-7.42 (5H, m) , 6.59 (1H, d, J = 8.7 Hz) , 6.46 (1H, q, J = 6.7 Hz) , 6.11 (1H, t, I I J 8.7 Hz), 5.58 (1H, d, J = 8.7 Hz) , 5.41 y 5.40 (2H, superpuesto), 5.24 (1H, s) , 4.99 (1H, s) , 4 s amplio), 4.67 (1H, d, J = 1.8 Hz) , 4.51 (1H, 8.1 Hz) , 4.23 (1H, d, J = 8.1 Hz), 3.95 (1H, s amplio), 3.84 (1H, d, J" = 6,3 Hz), 3.48 (1H, s amplio), 3.11 (1H, d, J = 15.9 Hz), 3.03 (1H, d, J = 15.0 Hz) , 2.49-2.53 (1H, m) , 2.17-2.29 (3H, m) , 2.22 (3H, s) , 2.12 (1H, dd, J = S.0, 15.4 Hz) , 1.92 (1H, m) , 1.87 (3H, s) , 1.85 (3H, s) , 1.79 (3H, s) , 1.78 (3H, s) , 1.76 (3H, d, J = 7.2 Hz) , 1.19 ¿3H, s) , 1.08 (3H, t, J = 7.5 Hz) , 1.01 (3H, s) . ESI-MS: \m/z [M+Na]+ 846.3.3, [M+K] + 862.3.

Ejemplo 12: Preparación de 2- (3-metilbenzoil) -7 -propionil' 10-desacetil-cefalomanina Pasos 1-5: Son los mismos procedimientos descritos en los Pasos 1-5 del Ejemplo 7. j Paso 6: 2- (3-metilbenzoil) -7-propionil-10-desacetil-cefalomanina 2' -ter-butildimetilsilil-2-desbenzoil-10-trietilsilil-7-propionil-cefalomanina (20.6 mg, 0.0213 mmol) se disolvió en 1 mi de tolueno, se agregaron ácido m-metilbenzoico (58 mg, 0.426 mmol), PP (4 mg, 0.027 mmol) y i DCC (87.7 mg, 0.425 mmol). Después de reaccionar a 65°C durante 10 horas, se agregó 0.1 mi de metanol, luego se filtró. El sólido se lavó con acetato de etilo. Los filtrados se combinaron y se evaporaron hasta sequedad, seguido de una cromatografía en columna de gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 8:1) . El producto resultante se contaminó con impurezas tales como DCU, y el producto se desprotegió, sin purificación adicional, como sigue. El producto se disolvió en 1.4 mi de acetonitrilo, a continuación, se agregaron secuencialmente piridina (0.683 mi) y HF (0.375 mi) . Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 24 horas, se agregó 30 mi de acetato de etilo, luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 20 mi) . La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (n-hexano: acetato de etilo: acetona = 8:3:2) para dar el producto jdel título (8.1 mg, 44.4% de rendimiento total en dos pasos) .

*H (CDC13 , 300 MHz) : d 7.89-7.93 (2H, m) , 7.28-7.41 (7H, m) , 6.62 (1H, d, J = 9.3 Hz) , 6.44 (1H, q, ¡J = 6.6 Hz) , 6.13 (1H, t , J = 8.4 Hz), 5.66 y 5.62 (2H, superpuesto), 5.45 (1H, dd, J = 7.2, 10.8 Hz) , 5.28 (1H, S) , 4.92 (1H, d, J = 9,6 Hz) , 4.71 (1H, d, J = 1.8 Hz) , 4.32 (1H, d, J = 8.4 Hz) , 4.21 (1H, d, J" = 7.5 Hz) , 3.96 (1H, d, J = 6.6 Hz) , 3.96 (1H, s amplio, superpuesto), 3.57 (1H, s amplio), 2.48-2.58 (1H, m) , 2.43 (3H, s) , 2.36 (3H, s) , 2.25 (2H, q, J = 7.5 Hz) , 2.20-2.30 (2H, m, j superpuesto), 1.91 a 1.96 (1H, m) , 1.85 (3H, s) , 1.82 (6H, s), 1.72-1.74 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.21 (3H, s) , 1.08 (3H, t, J = 7.5 Hz) , 1.08 (3H, s) . ESI- S: m/z [M+Na] + 882.4., Ejemplo 13: Preparación de 2- (3 -cianobenzoil) -7 -propionilj-10-desacetil-cefalomanina Pasos 1-5: Son los mismos procedimientos descritos en los Pasos 1-5 del Ejemplo 7.

Paso 6: 2- (3-cianobenzoil) -7-propionil-10-desacetil-cefalomanina ! 2' -ter-butildimetilsilil-2-desbenzoil-10-trietilsilil - 7 -propionil- 10 -desacetil-cefalomanina (12.3 mg, 0.0127 mmol) se disolvió en 1 mi de tolueno, se agregaron ácido m-cianobenzoico (18.6 mg, 0.127 mmol) ,J PP (1.2 mg, 0.0081 mmol) y DCC (26.22 mg, 0.127 mmol) . Después de reaccionar a 65°C durante 10 horas, se agregó 0.1 mi de metanol, luego se filtró. El sólido se lavó con acetato de etilo. Los filtrados se combinaron y se evaporaron hasta I sequedad, seguido de una cromatografía en columna de gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 8:1) . El producto resultante se contaminó con impurezas tales como DCU, y el producto se desprotegió, sin purificación adicional, como sigue. El producto se disolvió en 1.4 mi de acetonitrilo, a continuación se agregaron secuencialmente piridina (0.683 mi) y HF (0.375 mi) . Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 24 horas, se agregó 30 mi de acetato de etilo, luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 20 mi) . La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llev a cabo una cromatografía en columna sobre gel de sílice (rihexano: acetato de etilo: acetona = 8:3:2) para dar el producto del título (6 mg, 54.4% de rendimiento total en dos pasos) .

*H (CDC13, 300 MHz) : d 8.43 (1H, s) , 8.36 (1H, d, J = 7.5 Hz) , 7.90 (1H, d, J = 7.8 Hz), 7.67 (1H, t, J" = 7.2 Hz) , 7.32-7.42 (5H, m) , 6.53 (1H, d, J = 8.7 Hz) , 6.50 I 1H, q, J = 6.6 Hz) , 6.16 (1H, t, J = 8.7 Hz) , 5.65 y 5.63 (2H, superpuesto), 5.47 (1H, dd, J = 4.8, 11 Hz) , 5.31 (1H, s) , 4.93 (1H, d, J = 9.0 Hz) , 4.71 (1H, d, J = 2.4 Hz) , 4.25 (1H, d, J = 7.5 Hz) , 4.19 (1H, d, J = 8.9 Hz) , 4.00 (1H, d, J = 6.6 Hz) , 2.46-2.58 (1H, m) , 2.36 (3H, s) , 2.26 (2H, J = 7.8 Hz) , 2.22-2.29 (2H, m, superpuesto), 1.92-1.97 1H, m) , 1.85 (6H, s) , 1.79 (3H, s) , 1.72 (3H, d, J = 6.9 Hz) , (3H, s) , 1.09 (3H, t, J = 7.5 Hz) , 1.08 (3H, s) . ESI m/z [M+Na]+ 893.4, [M+K] + 909.4.

Ejemplo 14: Preparación de 2 - (2 -butenoil) -7 -propionil desacetil -Cefalomanina Los Pasos 1-6 son similares a los procedimientos descritos en los Pasos 1-6 del Ejemplo 7, excepto que el ácido m-metoxibenzoico en el Paso 6 se sustituyó por el ácido 2-butenoico.

Pasos 1-5: Son los mismos procedimientos descritos en los Pasos 1-6 del Ejemplo 7. i Paso 6: 2- (2-butenoil) -7-propionil-10-desacetil- i cefalomanina 2 ' -ter-butildimetilsilil-2-desbenzoil-10- I trietilsilil-7-propionil-cefalomanina (37.9 mg, 0.039 mmol) se disolvió en 1 ral de tolueno, a continuación se agregaron ácido 2-butenoico (33.57 mg, 0.39 mmol) , PP (5.78 mg, 0.039 mmol) y DCC (80.5 mg, 0.39 mmol). Después de reaccionar a 65°C durante 10 horas, se agregó 0.1 mi de metanol, luego se filtró. El sólido se lavó con acetato de etilo. ¡Los i filtrados se combinaron y se evaporaron hasta sequedad, seguido de una cromatografía en columna de gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 8:1). El producto resultante se contaminó con impurezas tales como DCU, y el producto se desprotegió, sin purificación adicional, como sigue. El producto se disolvió en 1.4 mi de acetonitrilo, a continuación, se agregaron secuencialmente piridina (0.683 mi) y HF (0.375 mi). Después de reaccionar a temperatura ambiente durante 24 horas, se agregó 30 mi de acetatcj de etilo, luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x¡ 20 mi) . La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las capas de acetato de etilo se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La capa de acetato de etilo se evaporó hasta sequedad. Y se llevó a cabo juna cromatografía en columna sobre gel de sílice (n-hexáno: acetato de etilo: acetona = 8:3:2) para dar el producto del título (20.4 mg, 69% de rendimiento total en dos pasos).

*H (CDC13, 300 MHz) : d 7.32-7.40 (5H, m) , 7.10 (1H, dq, J = 7.8, 15.1 Hz) , 6.58 (1H, d, J = 9.3 Hz) , 6.46 (1H, q, J = 6.9 Hz), 6.14 (1H, t, J = 8.4 Hz) , 5.88 (1H; d, J = 15.1 Hz) , 5.59 (1H, dd, J" = 2.4, 9.3 Hz) , 5.46 (1H, d, J = 6.6 Hz) , 5.43 (1H, dd, J = 7.8, 10.7 Hz) , 5.26 (1H, s) , 4.92 (1H, dd, J" = 2.2, 9.3 Hz) , 4.68 (1H, d, J = 2.4 Hz) , 4.44 (1H, d, J = 8.4 Hz) , 4.20 (1H, d, J = 9.3 Hz) , 3.96 (1H, s amplio), 3.87 (1H, d, J = 6.9 Hz) , 3.44 (1H , s amplio), 2.46-2.53 (1H, m) , 2.26 (3H, s) , 2.22-2.31 (2H, m, superpuesto), 1.96 (3H, d, J" = 6.9 Hz) , 1.92 (1H, m, superpuesto), 1.88 (3H, s) , 1.80 (3H, s) , 1.79 (3H, s) , 1.76 (3H, d, J = 6.6 Hz) , 1.20 (3H, s) , 1.08 (3H, t, J = 6.9 Hz) , 1.04 (3H, s) . ESI-MS: m/z [M+Na] + 832.3.

Experimentos farmacológicos: Experimento 1 prueba de investigación de citotoxicidad a nivel celular de los compuestos de esta invención Las células tumorales en la fase de registro! se incubaron en placas de 96 pozos a una densidad de 1-1.2 x 104 células/ml, 100 1/pozo. 24 horas más tarde, las células en tratamiento se expusieron a los agentes probados a diferentes concentraciones. Cada uno de los agentes probados tuvo 4-5 dosis, y cada dosis tuvo al menos 3 pozos paralelos. Las células control se expusieron a solventes en el mismo volumen con los agentes de tratamiento. Las células se cultivaron a 37°C en un incubador de células con 5% de C02 y 95% de atmósfera de aire. Después de 4 días de cultivo, el medio de incubación se retiró, a continuación se agregó a cada pozo 200 1 de MTT al 0.2% (preparado por RPMI 1640) y las placas se incubaron a 37°C durante 4 horas. El sobrenadante se desechó y se disolvió el producto resultante formazán con 200 1 de DMSO en cada pozo . La absorbancia a una longitud de onda de referencia de 45Q nm y una longitud de onda de prueba de 570 nm se leyó en un lector de microplacas después de agitar suavemente . La velocidad inhibidora del fármaco se calculó utilizando la siguiente ecuación e IC50, tomando las células tumoráles expuestas a solvente como las células control.

Valor DO promedio de células control - el valor DO promedio de células tratadas Velocidad inhibidora = x 100% Valor DO promedio de células control (los resultados se presentan en la Tabla 1) ! Tabla 1. Resultados de citotoxicidad in vitro de algunos compuestos de la invención Muestra IC50 (M) KB KB/V A549 A549/Taxol Ejemplo 1 3.37 x 1(T7 >1 x 10"6 >1 x 10"6 >1 x ÍO'6 Ejemplo 2 1.03 x 10"9 1.53 x 10"7 8.79 x 10"8 >1 x A549/T 2.6 X 10~8 1.4 x 10"9 MCF-7 4.1 X ÍO"10 6.8 x 10"lc MCF-7/D 3.3 x 10"7 2.7 x 10~7 BGC-823 6.3 X 10~9 1.3 x IO"9 BGC-803 2.5 x 10"9 2.4 x 10"9 KB 1.8 X 10"9 4.9 x 10"1C A549/T: la subcepa resistente a taxol de la cepa A5491 de células humanas de adenocarcinoma pulmonar; MCF-7/D: sublínea resistente a adriamicina de la cepa MCF-7 de células humanas de adenocarcinoma mamario Experimento 2 Experimentos de actividad in vivo de ¡los compuestos de la invención 1 Agentes probados: Nombre : Ej emplo 8 , taxol Preparación: tanto el Ejemplo 8 como el taxol son ingredientes farmacéuticos activos, en polvo blanco. ¡ i Método de compuestos: el Taxol y el Ejemplo 8 se prepararon a la concentración requerida utilizando solvente para inyección que fue facilitado por la fábrica farmacéutica Pekin Union. 2 Animales de experimentación: Fuente: El campo de crianza de animales del Instituto de Investigación de Animales de Laboratorio, Academia China de Ciencias Médicas Géneros: BALB/c (nu-nu) ratones desnudos ! Número de certificación: permiso para animales de Beijing No. 017 Peso: 19-22 g Género : $ Número de animales de cada grupo: 6-8 cada grupo Ambiente de crianza: SPF I 3 Métodos : Después de una semana de adaptación, a ¡los animales se les implantó subcutáneamente las células A549 de adenocarcinoma pulmonar humano o A2780 de cáncer j de ovario humano o BGC-823 de carcinoma gástrico humano. 'Los animales fueron agrupados aleatoriamente (do) cuando los tumores alcanzaron 100-300 mm3. Se inició la administraJión i.p. diaria de Taxol (10 mg/kg) y el Ejemplo 8 (5 mg/kg) en el tumor xenoinj ertado de adenocarcinoma pulmonar humano A549 en ratones desnudos del dO al d4 para hacer un total de 5 veces; Taxol (30 mg/kg) en el tumor xenoinj ertadoi de cáncer de ovario humano A2780 en ratones desnudos del do al d3 para hacer un total de 4 veces y en el tumor xenoinj ertado de carcinoma gástrico humano BGC-823 | en ratones desnudos del do al d2 para hacer un total de 3 veces; Ejemplo 8 (5 mg/kg, 15 mg/kg, 30 mg/kg) tanto en el tumor xenoinjertado de cáncer de ovario humano A2780 y BGC-823 en ratones desnudos del dO al d3 para hacer un total de 4 veces. Los pesos de los animales y las mediciones de los tumores se tomaron cada 2 semanas y se registraron. Al final del estudio «330 o d35), los ratones desnudos fueron sacrificados y se pesaron. Después de que los animales fueron sacrificados, el tejido del tumor se cortó y se pesó. El volumen tumoral se determinó mediante la siguiente ecuación: j V = 1/2 x a x b2 en donde a representa la longitud, mientras que b representa la anchura Los efectos inhibidores del crecimiento de los compuestos de la invención sobre el tumor xenoinjertado de cáncer de ovario humano A2780 en ratones desnudos se muestran en la Figura 3.

Los efectos inhibidores del crecimiento de los compuestos de la invención sobre el tumor xenoinjertado de carcinoma gástrico humano BGC-823 en ratones desnudos^ se muestran en la Figura 4.

Los efectos inhibidores del crecimiento de los compuestos de la invención sobre el cáncer pulmonar( de Lewis en ratones se muestran en la Figura 5. ! Los efectos inhibidores del crecimiento de los compuestos de la invención sobre el tumor xenoinj ertado de adenocarcinoma pulmonar humano A549 en ratones desnudos se muestran en la Figura 6. I Tabla 3. Actividad inhibidora del crecimiento de los compuestos de la invención sobre el tumor xenoinjertado A2780 en ratones desnudos Grupo Dosis Animales peso corporal (g) TV RTV 1 T/C (mg/kg) (%) dO dn inicial final dO Dn control 7 7 22.0 25.1 149.9+59.0 1447.4+941.2 9.7 ' taxol 30x4 7 6 22.7 23.3 137.9+21.0 604.8+525.0 * 4.4 45.4 7.5x4 7 6 22.4 25.5 127.6+65.9 989.3±658.9 7.8 80.3 Ejemplo 8 15x4 7 5 22.0 25.2 130.2+36,0 855.6+500.3 6.6 68.1 30x4 7 6 22.0 22.3 157.1+56.2 529.6+454.8 * 3.4 34.9 Nota: dO : momento de la primera administración desde j aumenta en jaulas individuales; dn: 30 días después de primera administración. * P0<0.05 vs . control Tabla 4. Actividad inhibidora del crecimiento de los compuestos de la invención sobre tumores xenoinjertádos BGC-823 en ratones desnudos Grupo Dosis Animales Peso corporal TV RTV T/C (mg/kg) dO/dn (g) (%) inicial final dO Dn Control 7/7 26.0 27.7 136.3+33.5 3290.3+709.8 27.33 Taxol 30x3 7/4 25.2 23.9 98.8+47.35 104.9+144.9** 0.66 2.41 7.5x4 7/5 24.7 26.1 101.1+17.4 2057.5+1756.4 17.45 63.84 15x4 7/4 25.2 23.8 104.4+16 1 156.6±403.9* 9.27 33.90 30x4 7/5 25.0 23.9 99.7+34.3 177. K199.0** 0.47 4.57 Nota: dO : momento de la primera administración desde aumenta en j ulas individuales; dn 30 días después de primera administración. * P0<0.05 vs . Control Tabla 5. Actividad inhibidora de Lx2-32c en cáncer pulmonar de Lewis en ratones I Grupo Dosis Peso corporal (g) Peso del tumor (g) Inhibición (Mg/kg) inicial final Promedio SD (96) Control 19.6 24.0 2.87 1.13 taxol 10x6 19.7 19.4 1.96 0.81 31.64 LX2-32c 2.5x8 20.0 22.0 2.07 0.22 27.77 5x8 20.0 20.4 1.96 0.68 32.46 10x8 19.5 16.8 0.69 0.33 76.08 Tabla 6 Actividad inhibidora del crecimiento de los compuestos de esta invención sobre tumores xenoinjertcidos A549 en ratones desnudos Grupo Dosis Animales Peso corporal TV RTV T/C (mg/kg) dO/dn (g) x+SD (%) inicial final inicial final Control 7/7 22.1 27.6 41 1+136 4862±1861 1 1.82 Taxol 30x3 8/6 22.0 24.3 468+135 2152+474 4.6 38.9 7.5x3 7/6 21.6 21.8 431+94 3090+900 7.2 60.7 Lx2-32c 15x3 8/7 22.4 25.1 432±1 15 2897+950 6.7 56.7 30x3 8/6 21.8 23.2 415+85 1646+450 4.0 33.56 4. Conclusión El taxol puede inhibir el crecimiento de la línea j celular humana A549 de adenocarcinoma pulmonar, la cepa A278Ó de células humanas de cáncer de ovario, cáncer pulmonar de Lewis y tumor xenoinjertado de cepa BGC-823 de células humanas de i carcinoma gástrico en ratones desnudos. El compuesto del Ejemplo 8 tiene un efecto más fuerte sobre la cepa A549 de células humanas de adenocarcinoma pulmonar, la cepa A2780 de células humanas de cáncer de ovario, tumor xenoinjertado de cáncer pulmonar de Lewis en ratones desnudos que el taxol . El efecto inhibidor sobre el tumor xenoinjertado de la cepa BGC-823 de células humanas de carcinoma gástrico en ratones desnudos del compuesto del Ejemplo 8 es igual al taxol.

Claims (11)

REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto seleccionado de derivados cefalomanina de la fórmula general (I) , en donde Rx se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, TMS, TES, TBS y -COXx, y en donde X1 se selecciona de alquilo de C1-5; R2 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo de 0?-15 sustituido o sin sustituir, lineal o ramificado, alquenilo de C2-15, alquinilo de C2-1S, arilo y heteroarilo sin sustituir, mono- y muítisustituidos, -COX2; -COX3-COOX4; y -COX3-CONX4Xs ; ¡ R3 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo de sustituido o sin sustituir, lineal o ramificado, alquenilo de C2-15, alquinilo de C2-15, arilo y heteroarilo sin sustituir, mono- , y multisustituidos, -0X6; -SX6; -NHX6 y -OCOX6 ; ' en donde, X2, X3, X4 y X5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo de !-15 sustituido o sin sustituir, lineal o ramificado, alquenilo de C2-15, alquinilo de C2-15 y arilo y heteroarilo sin sustituir, mono- y multisustituidos ; ! X6 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo de ^-^ sustituido o sin sustituir, lineal o ramificado, alquenilo de C2-15, alquinilo de C2-15, arilo mono o multisustituido y heteroarilo sin sustituir, mono- o multisustituido; j los sustituyentes para dicho alquilo se seleccionan del grupo que consiste de hidroxi, amino, I carboxilo, carbonilo, alcoxi de <- 5, halo, alcoxicarbonilo de C1-5, N-alquilcarbamoílo de C^, ciano y nitro; los sustituyentes para dicho arilo y heteroarjilo I se seleccionan del grupo que consiste de hidroxi, hidroximetilo, halo, alquilo de ^ - 5 , alcoxi de Ci-5, alquenilo de C1-s, acilo, aciloxi, nitro, amino, amido, ciano y azido.

2.- El compuesto según la reivindicación 1, caracterizado además porque el alquenilo de C^-^ se selecciona del grupo que consiste de vinilo, propenilo, isopropenilo, butenilo, isobutenilo y hexenilo; ' el alquinilo de C^-.^ se selecciona del grupo que consiste de etinilo, propinilo, isopropinilo, butinilo, isobutinilo y hexinilo; el arilo se selecciona del grupo que consiste| de fenilo, naftilo y bifenilo; el heteroarilo se selecciona del grupo que consiste de furilo, tienilo, piridilo, benzofurilo y bipiridilo; y el halo se selecciona del grupo que consiste de F, Cl, Br y I.

3. - El compuesto según la reivindicación ! 2, caracterizado además porque ? y R2 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, formilo, acetilo, propionilo y butirilo. ¡

4.- El compuesto según la reivindicación 3, caracterizado además porque dicho compuesto se selecciona del grupo que consiste de: j 2- (3-azidobenzoil) -cef lomanina { 2- (3 -metoxibenzoil) -cefalomanina 2- (3-azidobenzoil) -10-propionil-cefalomanina 2- (3 -metoxibenzoil) -10-propionil-cefalomanina t 2- (3-metoxibenzoil) -7-propionil-10-desacetil- ; cefalomanina 2- (3-azidobenzoil) -7-propionil-10-desacetil- | cefalomanina ! 2- (3 -clorobenzoil) -7-propionil-10-desacetil- cefalomanina 2- (3-metilbenzoil) -7-propionil-10-desacetil- cefalomanina j 2- (3-cianobenzoil) -7-propionil-10-desacetil- cefalomanina 2- (3-metil-2-butenoil) -7-propionil-10-desacetil- cefalomanina 2- (3-metil-3-butenoil) -7-propionil-10-desacetil- cefalomanina 2- (2-butenoil) -7-propionil-10-desacetil- j cefalomanina

5. - Un proceso para la preparación de un compuesto como el que se reclama en las reivindicacionejs 1 a 4, caracterizado porque comprende na el hidroxilo en la posición C-7 de la lomanina modificada o sin modificar en la posición C-10 como material de partida, se condensó con un ácido o cloruro de acilo correspondiente para producir el compuesto de la fórmula lia; o j la cefalomanina modificada, tanto en las posiciones C-10 como C-7, después de la eliminación de benzoílo en la posición 2, se condensaron con un ácido o cloruro de acilo correspondiente para producir el compuesto de la fórmula Ilb. ¡

6. - El proceso según la reivindicación 5, caracterizado además porque los agentes de condensación utilizados en la reacción de acilación incluyen 1,3-diciclohexilcarbodiimida, carbonato de dipiridilo, 1,3-diisopropilcarbodiimida, 1- (3 -dimetilaminopropil) L3-etilcarbodiimida .

7.- El proceso según la reivindicación 5, caracterizado además porque los catalizadores utilizados en la reacción de acilación incluyen aminas terciarias, piridina, 4 -dimetilaminopiridina y 4 -pirrolilpiridina .

8. - El proceso según la reivindicación 5, caracterizado además porque los solventes orgánicos utilizados en la reacción de acilación incluyen sulfóxido de dimetilo, tolueno, cloruro de metileno, éter dimetílico de etilenglicol, 1, 2-dicloroetano, tetrahidrofurano y ,N-dimetilformamida . |

9.- Una composición f rmacéutica, caracterizada porque comprende al menos un compuesto como el que se reclama en las reivindicaciones 1-4 como ingrediente activo y un portador farmacéuticamente aceptable.

10.- El uso de un compuesto como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1-4, para preparar un medicamento útil para el tratamiento j de tumores .

11. El uso como el que se reclama en la reivindicación 10, en donde los tumores incluyen adenocárcinoma pulmonar humano resistente a múltiples fármacos, cáncer de ovario resistente a múltiples fármacos, cáncer gástrico humano resistente a múltiples fármacos, adenocárcinoma pulmonar humano sensible, cáncer de ovario sensible, cáncer gástrico humano sensible.