CN101074218B - 三尖杉宁碱衍生物、及其制法和其药物组合物与用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了如通式(I)所示的三尖杉宁碱衍生物，这类三尖杉宁碱衍生物的制备方法，含有这类化合物的组合物，以及这类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用，尤其是在制备抗多药耐药肿瘤药物中的应用。

Description

三尖杉宁碱衍生物、及其制法和其药物组合物与用途

技术领域

本发明公开了如通式(I)所示的三尖杉宁碱衍生物，这类三尖杉宁碱衍生物的制备方法，含有这类化合物的组合物，以及这类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用，尤其是在制备抗多药耐药肿瘤药物中的应用。 

背景技术

萜烯中的紫杉烷类化合物，在生物学和化学领域都是人们所关注的课题。其中尤其紫杉醇具有很好的肿瘤抑制活性，它已经作为抗癌药 

其中，Ac为乙酰基，Bz为苯甲酰基。 

Colin等人在美国专利4,814,470中报道了紫杉醇类似物多烯紫杉醇，它的活性明显高于紫杉醇，并亦作为抗癌药上市，其结构式如下： 

尽管紫杉醇和多烯紫杉醇作为抗癌药有较好的治疗效果，但由于毒副作用大且长期使用宜产生耐药性，目前已有多种肿瘤细胞株对紫杉醇和多烯紫杉醇产生耐药性，使它们的疗效极大下降。因此，需要研制新的化学治疗剂。 

三尖杉宁碱也是紫杉烷类化合物，其活性和紫杉醇接近，同样对耐紫杉醇和多烯紫杉醇的肿瘤无效，目前对其构效关系研究还不透彻， 结构如下： 

发明内容

本发明要解决的一个技术问题是提供一种针对耐紫杉醇和多烯紫杉醇肿瘤有效的新的三尖杉宁碱衍生物。 

本发明要解决的另一个技术问题是提供制备该新的三尖杉宁碱衍生物的方法。 

本发明要解决的又一个技术问题是提供一种药物组合物，其中包括作为活性成份的通式(I)的化合物和药学上可接受的载体。 

本发明要解决的再一个技术问题是提供一种新的三尖杉宁碱衍生物及其组合物作为抗肿瘤剂的应用。 

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案， 

具体地讲，本发明涉及的三尖杉宁碱衍生物如通式(I)所示 

其中， 

R₁选自氢，TMS，TES，TBS或-COX₁，X₁选自C_1-5烷基； 

R₂选自氢，取代的或非取代的C_1-15直链或支链烷基，C_2-15链烯基，C_2-15炔基，未取代、单取代或多取代的芳基及杂芳基，-COX₂；-COX₃-COOX₄；-COX₃-CONX₄X₅； 

R₃选自氢，取代的或非取代的C_1-15直链或支链烷基，C_2-15链烯基，C_2-15炔基，未取代、单取代或多取代的芳基及杂芳基，-OX₆；-SX₆；-NHX₆；-OCOX₆； 

并且， 

X₂，X₃，X₄，X₅，X₆独立地选自氢；取代的或非取代的C_1-15直链 或支链烷基，C_2-15链烯基，C_2-15炔基，未取代、单取代或多取代的芳基及杂芳基； 

所述烷基上的取代基选自羟基，氨基，羧基，羰基，C_1-5烷氧基，卤素，C_1-5烷氧羰基，N-C_1-5烷基氨基甲酰基，氰基，硝基； 

所述芳基及杂芳基上的取代基选自羟基，羟甲基，卤素，C_1-5烷基，C_1-5烷氧基，C_1-5链烯基，酰基，酰氧基，硝基，氨基，酰胺基，氰基，叠氮基； 

优选的C_1-15链烯基选自乙烯基，丙烯基，异丙烯基，丁烯基，异丁烯基，己烯基； 

优选的C_1-15炔基选自乙炔基，丙炔基，异丙炔基，丁炔基，异丁炔基，己炔基； 

优选的芳基选自苯基，萘基，联苯基； 

优选的杂芳基选自呋喃基，噻吩基，吡啶基，苯并呋喃，联吡啶基； 

所述的卤素选自F，Cl，Br，I。 

更优选的R₁和R₂独立的选自氢，甲酰基，乙酰基，丙酰基，丁酰基。 

文中所用符号和术语的含义是： 

“Bz”指苯甲酰基；“Ph”指苯基；“Ac”指乙酰基；“Et”指乙基；“R”除另外定义外一般是指烷基；“TMS”指三甲硅烷基；“TES”指三乙基甲硅烷基；“TBS”指叔丁基二甲基甲硅烷基；“DMAP”指对二甲氨基吡啶；“DMF”指N，N-二甲基甲酰胺；“THF”指四氢呋喃；“DCC”指二环己基碳二亚胺；“PP”指4-吡咯基吡啶；“rt”指室温；“tritonB”指卞基三甲基氢氧化铵； 

根据本发明还涉及制备本发明化合物的方法，下面反应通式IIa，IIb给于具体说明 

具体而言，用C-10位修饰或未修饰的三尖杉宁碱为原料，将C-7位羟基与相应的酸或酰氯缩合；或用C-10位和7位修饰的三尖杉宁碱，脱除2位苯甲酰基，得到关键中间体，再与相应的酸或酰氯缩合。 

上述的酰化反应优选在缩合试剂存在的条件下进行。优选的缩合试剂包括1，3-二环己基酰亚胺(DCC)、二吡啶碳酸酯(2-DPC)、1，3-二异丙基酰亚胺(DIPC)、1-(3-二甲胺丙基)-3-乙基碳酰亚胺(EDCI)；更优选的试剂为DCC，DIPC，EDCI。 

上述的酰化反应优选在催化剂存在的条件下进行。优选的催化剂包括三级胺、吡啶、4-二甲胺基吡啶和4-吡咯基吡啶；更优选的催化剂为4-二甲胺基吡啶和4-吡咯基吡啶。 

上述的酰化反应优选在有机溶剂存在的条件下进行。优选的有机溶剂包括二甲亚砜(DMSO)、甲苯、二氯甲烷、乙二醇二甲醚，1，2-二氯乙烷、四氢呋喃和N，N-二甲基甲酰胺(DMF)；更优选的包括甲苯、四氢呋喃和N，N-二甲基甲酰胺(DMF)。 

反应温度为10—120℃，优选为30—90℃。 

本发明还涉及以本发明化合物作为活性成份的药物组合物。该药物组合物可根据本领域公知的方法制备。可通过将本发明化合物与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋形剂和/或辅剂结合，制成适于人或动物使用的任何剂型。本发明化合物在其药物组合物中的含量通常为0.1-95重量％。 

本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠等。 

给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等；固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、 软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。 

本发明化合物可以制成普通制剂、也制成是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。 

为了将本发明化合物制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等；湿润剂可以是水、乙醇、异丙醇等；粘合剂可以是淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解剂可以是干淀粉、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、碳酸氢钠与枸橼酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠等；润滑剂和助流剂可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚乙二醇等。 

还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。 

为了将给药单元制成胶囊剂，可以将有效成分本发明化合物与稀释剂、助流剂混合，将混合物直接置于硬胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明化合物先与稀释剂、黏合剂、崩解剂制成颗粒或微丸，再置于硬胶囊或软胶囊中。用于制备本发明化合物片剂的各稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、助流剂品种也可用于制备本发明化合物的胶囊剂。 

为将本发明化合物制成注射剂，可以用水、乙醇、异丙醇、丙二醇或它们的混合物作溶剂并加入适量本领域常用的增溶剂、助溶剂、pH调剂剂、渗透压调节剂。增溶剂或助溶剂可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羟丙基-β-环糊精等；pH调剂剂可以是磷酸盐、醋酸盐、盐酸、氢氧化钠等；渗透压调节剂可以是氯化钠、甘露醇、葡萄糖、磷酸盐、醋酸盐等。如制备冻干粉针剂，还可加入甘露醇、葡萄糖等作为支撑剂。 

此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂或其它添加剂。 

按照本发明，发现通式(I)化合物在药理筛选中显示显著的生物活性，是有价值的抗肿瘤剂。可用于抑制包括人在内的动物体内肿瘤的生长。 

本发明的化合物经过药理体外实验，发现对敏感的肿瘤有很强的抑制作用，其中最活性最强的与紫杉醇相近，但对因P-糖蛋白过量表达 而产生耐药的肿瘤的活性是紫杉醇的几十倍。本发明的化合物对因微管蛋白氨基酸残基突变而产生耐药的肿瘤同样有效，活性强于紫杉醇。 

体内实验显示，本发明化合物对人肺腺癌A549裸鼠异体移植瘤的生长抑制作用较紫杉醇强。 

为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。 

本发明化合物药物组合物的给药剂量依照所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的个体情况，给药途径和剂型等可以有大范围的变化。一般来讲，本发明化合物的每天的合适剂量范围为0.001-150mg/Kg体重，优选为0.1-100mg/Kg体重，更优选为1-60mg/Kg体重，最优选为2-30mg/Kg体重。上述剂量可以一个剂量单位或分成几个剂量单位给药，这取决于医生的临床经验以及包括运用其它治疗手段的给药方案。 

本发明的化合物或组合物可单独服用，或与其他治疗药物或对症药物合并使用。当本发明的化合物与其它治疗药物存在协同作用时，应根据实际情况调整它的剂量。 

具体实施方式

下面的实施例用来进一步说明本发明，但是这并不意味着对本发明的任何限制。 

实施例1 10-去乙酰-三尖杉宁碱的制备 

步骤1：2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-三尖杉宁碱 

将三尖杉宁碱(600mg，0.721mmol)溶于5mlDMF中，加入咪唑(245.5mg，3.61mmol)和叔丁基二甲氯硅烷(543.5mg，3.61mmol)，70℃反应5小时，加入饱和NaHCO₃溶液10ml，用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝5：1。得目标产物637mg(93.4％)。 

步骤2：2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-10-去乙酰-三尖杉宁碱 

将2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-三尖杉宁碱(98mg，0.103mmol)溶于6ml乙醇中，加入85％水合肼(0.625ml)，室温反应2小时，加入饱和NH4Cl溶液10ml，用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无 水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝2：1。得目标产物79.4mg(84.8％)。 

步骤3：10-去乙酰—三尖杉宁碱 

将2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-10-去乙酰-三尖杉宁碱(32mg，0.035mmol)溶于1.4ml乙腈中，依次加入吡啶(0.683ml)和HF(0.375ml)，室温反应24小时，加入30ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO3溶液2×20ml洗，水层用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，氯仿：甲醇＝20：1。得目标产物25.7mg(91.92％) 

¹H300M(CDC1₃)：δ8.10(2H，d，J＝7.2Hz)，7.61(1H，t，J＝7.2Hz)，7.50(2H，t，J＝7.2Hz)，7.28-7.39(5H，m)，6.65(1H，d，J＝9.0Hz)，6.44(1H，dq，J＝7.2，1.4Hz)，6.16(1H，t，J＝8.1Hz)，5.66(1H，d，J＝6.9Hz)，5.59(1H，dd，J＝8.9，2.7Hz)，5.18(1H，s)，4.91(1H，d，J＝7.8Hz)，4.91(1H，brs)，4.39(1H，d，J＝8.7Hz)，4.24(1H，brs)，4.19(1H，d，J＝8.4Hz)，3.87(1H，d，J＝6.9Hz)，3.72(1H，brs)，2.53-2.62(1H，m)，2.34(3H，s)，2.24(2H，d，J＝9.0Hz)，1.82-1.88(1H，m)，1.82(3H，s)，1.76(3H，s)，1.72(3H，d，J＝7.5Hz)，1.21(3H，s)，1.11(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺812.3. 

实施例2-4由反应下面反应流程制得 

实施例2  2-(3-叠氮苯甲酰基)-10-丙酰基-三尖杉宁碱的制备

步骤1-2：同实施例1中步骤1—2描述的方法。 

步骤3：2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-10-丙酰基-三尖杉宁碱 

将2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-10-去乙酰-三尖杉宁碱(155mg，0.171mmol)溶于5mlTHF中，加入CeCl₃(8.4mg)，冰浴，加入丙酸酐(0.22ml，1.71mmol)，30℃反应2小时，加入300ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃溶液2×50ml洗，50ml饱和NaCI溶液洗，水层用乙酸乙酯150ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，过滤，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，丙酮：石油醚＝1：2。得目标产物148.2mg(97％)。 

步骤4：2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-7-三乙基甲硅烷基-10-丙酰基-三尖杉宁碱 

将2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-10-丙酰基-三尖杉宁碱(193mg，0.201mmol)溶于2mlDMF中，加入咪唑(73mg，1.07mmol)和三乙基氯硅烷(0.135ml)室温反应10小时，加入饱和NaHCO3溶液10ml，用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝5：1。得目标产物198mg(91.7％)。 

步骤5：2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-去苯甲酰基-7-三乙基甲硅烷基-10-丙酰基-三尖杉宁碱 

将2-叔丁基二甲基甲硅烷基-7-三乙基甲硅烷基-10-丙酰基-三尖杉宁碱(168mg，0.156mmol)溶于7ml二氯甲烷中，—28℃冰-甲醇浴，滴入tritonB(0.138ml，0.313mmol)，反应15分钟，加入20ml二氯甲烷，用饱和氯化铵溶液20ml洗，水层用乙酸乙酯2×50ml萃取，有机层用20ml饱和NaCl溶液洗，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，将有机层蒸干，硅胶柱层析，正己烷：乙酸乙酯：丙酮＝8：3：1。得目标产物110mg(73％)。 

步骤6：2-(3-叠氮苯甲酰基)-10-丙酰基-三尖杉宁碱 

2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-去苯甲酰基-7-三乙基甲硅烷基-10- 丙酰基-三尖杉宁碱(35.7mg，0.0368mmol)溶于1ml甲苯中，加入间叠氮苯甲酸(62.5mg，0.383mmol)，PP(5.7mg，0.0383mmol)和DCC(79mg，0.383mmol)，65℃反应10小时，加入0.1ml甲醇，过滤，固体用乙酸乙酯洗涤，合并滤液并蒸干，硅胶柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝8：1。得到的产物混有DCU等杂质，不再纯化进行脱保护，溶于1.4ml乙腈中，依次加入吡啶(0.683ml)和HF(0.375ml)，室温反应24小时，加入30ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃溶液2×20ml洗，水层用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，正己烷：乙酸乙酯：丙酮＝8：3：2。得目标产物20.3mg，两步总收率62.3％。 

¹H300M(CDCl₃)：δ7.89(1H，d，J＝8.1Hz)，7.80(1H，m)，7.48(1H，t，J＝7.8Hz)，7.31-7.42(5H，m)，7.24(1H，ddd，J＝1.2，2.4，8.1Hz)，6.49(1H，d，J＝8.7Hz)，6.40(1H，dq，J＝1.5，6.9Hz)，6.28(1H，s)，6.17(1H，t，J＝8.1Hz)，5.66(1H，d，J＝6.9Hz)，5.58(1H，dd，J＝2.7，8.7Hz)，4.94(1H，d，J＝7.8Hz)，4.68(1H，brs)，4.40(1H，m)，4.30(1H，d，J＝8.4Hz)，4.17(1H，d，J＝8.4Hz)，3.80(1H，d，J＝6.9Hz)，3.63(1H，brs)，2.47-2.62(3H，m)，2.37(3H，s)，2.31(2H，overlap)，1.82-1.95(1H，m)，1.78-1.80(6H，brs)，1.72(3H，dd，J＝1.5，6.9Hz)，1.67(3H，s)，1.25(3H，s)，1.23(3H，t，J＝7.8Hz)，1.14(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺909.4 

实施例32-(3-甲氧基苯甲酰基)-10-丙酰基-三尖杉宁碱的制备 

步骤1-5：同实施例2中步骤1—5描述的方法。 

步骤6：2-(3-甲氧基苯甲酰基)-10-丙酰基-三尖杉宁碱 

2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-去苯甲酰基-7-三乙基甲硅烷基-10-丙酰基-三尖杉宁碱(37.2mg，0.0383mmol)溶于1ml甲苯中，加入间甲氧基苯甲酸(58.3mg，0.383mmol)，PP(5.7mg，0.0383mmol)和 DCC(79mg，0.383mmol)，65℃反应24小时，加入0.1ml甲醇，过滤，固体用乙酸乙酯洗涤，合并滤液并蒸干，硅胶柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝8：1。得到的产物混有DCU等杂质，不再纯化进行脱保护，溶于1.4ml乙腈中，依次加入吡啶(0.683ml)和HF(0.375ml)，室温反应24小时，加入30ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃溶液2×20ml洗，水层用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，正己烷：乙酸乙酯：丙酮＝8：3：2。得目标产物21.0mg，两步总收率62.5％。 

¹H300M(CDCl₃)：δ7.71(1H，d，J＝8.1Hz)，7.62-7.69(1H，m)，7.29-7.43(6H，m)，7.15(1H，ddd，J＝0.9，2.7，8.3Hz)，6.51(1H，d，J＝8.7Hz)，6.42(1H，dq，J＝1.5，7.2Hz)，6.39(1H，s)，6.19(1H，t，J＝7.5Hz)，5.66(1H，d，J＝6.9Hz)，5.59(1H dd，J＝2.7，8.6Hz)，4.94(1H，d，J＝7.5Hz)，4.69(1H，brs)，4.36-4.44(1H，m)，4.33(1H，d，J＝8.4Hz)，4.17(1H，d，J＝8.4Hz)，3.88(3H，s)，3.79(1H，d，J＝6.9Hz)，3.63(1H，brs)，2.45-2.63(3H，m)，2.33(3H，s)，2.26(2H，dd，J＝3.0，9.0Hz)，1.86-1.92(1H，m)，1.80(3H，pseud-t，J＝1.2Hz)，1.79(3H，d，J＝1.2Hz)，1.72(3H，dd，J＝1.2，6.9Hz)，1.67(3H，s)，1.25(3H，s)，1.23(3H，t，J＝7.5Hz)，1.14(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺898.4. 

实施例4：10-丙酰基-三尖杉宁碱的制备 

步骤1-3：同实施例2中步骤1-3描述的方法。 

步骤4：10-丙酰基-三尖杉宁碱 

将2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-10-丙酰基-三尖杉宁碱(26mg，0.027mmol)溶于1.4ml乙腈中，依次加入吡啶(0.683ml)和HF(0.375ml)，室温反应24小时，加入30ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃ 溶液2×20ml洗，水层用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，氯仿：甲醇＝20：1。得目标产物21.1mg(92％). 

¹H300M(CDCl₃)：δ8.11(1H，d，J＝6.9Hz)，7.61(1H，t，J＝7.5Hz)，7.50(2H，t，J＝7.5Hz)，7.31-7.42(5H，m)，6.54(1H，d，J＝9.0Hz)，6.43(1H，dq，J＝1.2，6.9Hz)，6.28(1H，s)，6.20(1H，t，J＝7.5Hz)，5.66(1H，d，J＝7.2Hz)，5.61(1H，dd，J＝3.0，8.7Hz)，4.93(1H，dd，J＝2.1，9.5Hz)，4.70(1H，d，J＝2.4Hz)，4.36-4.42(1H，m)，4.29(1H，d，J＝8.7Hz)，4.18(1H，d，J＝8.4)，3.79(1H，d，J＝7.2)，3.66(1H，brs)，2.47-2.62(3H，m)，2.35(3H，s)，2.25-2.34(2H，m)，1.86-1.91(1H，m)，1.80(3H，s)，1.79(3H，s)，1.72(3H，dd，J＝1.2，6.9Hz)，1.67(3H，s)，1.25(3H，s)，1.23(3H，t，J＝7.5Hz)，1.14(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺884.4. 

实施例52-(3-叠氮苯甲酰基)-三尖杉宁碱的制备 

步骤1：同实施例1中步骤1描述的方法。 

步骤2：2-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-去苯甲酰基-三尖杉宁碱 

将2’—叔丁基二甲基甲硅烷基—三尖杉宁碱(351mg，0.329mmol)溶于7ml二氯甲烷中，—28℃冰—甲醇浴，滴入tritonB(0.308ml)，反应15分钟，加入20ml二氯甲烷，用饱和氯化铵溶液20ml洗，水层用乙酸乙酯2×50ml萃取，有机层用20ml饱和NaCl溶液洗，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，将有机层蒸干，硅胶柱层析，正己烷：乙酸乙酯：丙酮＝8：3：1。得目标产物209mg(67.4％)。 

步骤3：2—(3—叠氮苯甲酰基)—三尖杉宁碱

2’—叔丁基二甲基甲硅烷基—2—去苯甲酰基—三尖杉宁碱(62mg，0.0662mmol)溶于1ml甲苯中，加入间叠氮苯甲酸(121.4mg，0.744mmol)，PP(11mg，0.0742mmol)和DCC(153.51mg，0.744mmol)，65℃反应10小时，加入0.1ml甲醇，过滤，固体用乙酸乙酯洗涤，合并滤液并蒸干，硅胶柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝8：1。得到的产物混有DCU等杂质，不再纯化进行脱保护，溶于1.4ml乙腈中，依次加入吡啶(0.683ml)和HF(0.375ml)，室温反应24小时，加入30ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃溶液2×20ml洗，水层用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，正己烷：乙酸乙酯：丙酮＝8：3：2。得目标产物43mg，两步总收率83.4％。 

¹H300M(CDCl₃)：δ7.89(1H，d，J＝8.1Hz)，7.79(1H，m)，7.48(1H，t，J＝7.8Hz)，7.31-7.40(5H，m)，7.22-7.25(1H，m)，6.49(1H，d，J＝8.7Hz)，6.41(1H，dq，J＝1.5，6.9Hz)，6.27(1H，s)，6.17(1H，t，J＝8.5Hz)，5.66(1H，d，J＝7.2Hz)，5.58(1H，dd，J＝2.7，8.7Hz)，4.94(1H，d，J＝7.5Hz)，4.68(1H，d，J＝2.7Hz)，4.39(1H，dd，J＝6.9，9.45Hz)，4.30(1H，d，J＝8.4Hz)，4.16(1H，d，J＝8.4Hz)，3.79(1H，d，J＝7.2Hz)，2.48-2.62(1H，m)，2.34(3H，s)，2.30(2H，d，J＝9.0Hz)，2.24(3H，s)，1.82-1.91(1H，m)，1.79(6H，s)，1.73(3H，d，J＝6.9Hz)，1.67(3H，s)，1.25(3H，s)，1.14(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺895.4. 

实施例62-(3-甲氧基苯甲酰基)三尖杉宁碱的制备 

步骤1：同实施例1中步骤1描述的方法。 

步骤2：同实施例5中步骤2描述的方法。 

步骤3：2—(3—甲氧基苯甲酰基)—三尖杉宁碱 

2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-2去苯甲酰基-三尖杉宁碱 (56mg，0.0598mmol)溶于1ml甲苯中，加入间甲氧基苯甲酸(113mg，0.742mmol)，PP(11mg，0.0742mmol)和DCC(153.51mg，0.744mmol)，65℃反应10小时，加入0.1ml甲醇，过滤，固体用乙酸乙酯洗涤，合并滤液并蒸干，硅胶柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝8：1。得到的产物混有DCU等杂质，不再纯化进行脱保护，溶于1.4ml乙腈中，依次加入吡啶(0.683ml)和HF(0.375ml)，室温反应24小时，加入30ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃溶液2×20ml洗，水层用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，正己烷：乙酸乙酯：丙酮＝8：3：2。得目标产物37.3mg，两步总收率64.5％。 

¹H300M(CDCl₃)：δ7.70(1H，d，J＝7.5Hz)，7.68(1H，m)，7.30-7.42(6H，m)，7.13(1H，dd，J＝2.7，7.5Hz)，6.55(1H，d，J＝8.7Hz)，6.42(1H，dq，J＝1.2，6.9Hz)，6.26(1H，s)，6.18(1H，t，J＝7.8Hz)，5.65(1H，d，J＝6.9Hz)，5.58(1H，dd，J＝3.0，8.55Hz)，4.93(1H，d，J＝7.5Hz)，4.69(1H，d，J＝3.0Hz)，4.38(1H，dd，J＝6.6，11.0Hz)，4.31(1H，d，J＝8.4Hz)，4.17(1H，d，J＝8.4Hz)，3.86(3H，s)，3.77(1H，d，J＝6.9Hz)，2.48-2.62(1H，m)，2.32(3H，s)，2.28(2H，d，J＝7.2Hz)，1.86-1.90(1H，m)，1.79(3H，s)，1.78(3H，s)，1.71(3H，d，J＝6.9Hz)，1.66(3H，s)，1.25(3H，s)，1.14(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺884.4. 

实施例7—14由反应下面反应流程制得 

实施例7  2-(3-甲氧基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱的制备 

步骤1-2：同实施例1中步骤1-2描述的方法 

步骤3：2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-10-三乙基甲硅烷基-三尖杉宁碱 

将2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-10-去乙酰-三尖杉宁碱(300mg，0.332mmol)溶于10mlTHF中，N₂保护，-10℃冰盐浴，加入N，O-双(三乙基甲硅烷基)-三氟乙酰胺(1ml)和LHMDS(3ul)，反应10分钟，加入饱和NaHCO₃溶液10ml，用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1。得目标产物314mg(92.6％)。 

步骤4：2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-10-三乙基甲硅烷基-7-丙酰基-三尖杉宁碱 

将2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-10-三乙基甲硅烷基-三尖杉宁碱(300mg，0.171mmol)溶于5mlTHF中，冰浴，加入丙酸酐(0.40ml)，室温反应20小时，加入300ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃溶液2×50ml洗，50ml饱和NaCl溶液洗，水层用乙酸乙酯150ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，过滤，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，丙酮∶石油醚＝1∶2。得目标产物301.0mg(95.1％)。 

步骤5：2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-去苯甲酰基-10-三乙基甲硅烷基-7-丙酰基-三尖杉宁碱 

将2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-10-三乙基甲硅烷基-7-丙酰基-三尖杉宁碱(168mg，0.156mmol)溶于7ml二氯甲烷中，-28℃冰-甲醇浴，滴入tritonB(0.138ml，0.313mmol)，反应15分钟，加入20ml二氯甲烷，用饱和氯化铵溶液20ml洗，水层用乙酸乙酯2×50ml萃取，有机层用20ml饱和NaCl溶液洗，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，将有机层蒸干，硅胶柱层析，正己烷∶乙酸乙酯∶丙酮＝8∶3∶1。得目标产物110mg(73％)。 

步骤6：2-(3-甲氧基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱 

2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-去苯甲酰基-10-三乙基甲硅烷基-7-丙酰基-三尖杉宁碱(26mg，0.0268mmol)溶于1ml甲苯中，加入间甲氧 基苯甲酸(40.76mg，0.268mmol)，PP(2.38mg，0.016mmol)和DCC(55.28mg，0.268mmol)，65℃反应10小时，加入0.1ml甲醇，过滤，固体用乙酸乙酯洗涤，合并滤液并蒸干，硅胶柱层析，石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1。得到的产物混有DCU等杂质，不再纯化进行脱保护，溶于1.4ml乙腈中，依次加入吡啶(0.683ml)和HF(0.375ml)，室温反应24小时，加入30ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃溶液2×20ml洗，水层用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，正己烷∶乙酸乙酯∶丙酮＝8∶3∶2。得目标产物18.5mg，两步总收率72.9％。 

¹H 300M(CDCl₃)：δ7.70(1H，d，J＝7.2Hz)，7.62(1H，brs)，7.31-7.43(6H，m)，7.15(1H，dd，J＝2.1，8.1Hz)，6.61(1H，d，J＝8.7Hz)，6.44(1H，q，J＝6.9Hz)，6.15(1H，t，J＝8.4Hz)，5.66(1H，d，J＝6.6Hz)，5.59(1H，dd，J＝2.4，9.0Hz)，5.45(1H，dd，J＝7.2，10.2Hz)，5.28(1H，s)，4.91(1H，d，J＝8.4Hz)，4.69(1H，d，J＝2.1Hz)，4.35(1H，d，J＝8.4Hz)，4.20(1H，d，J＝8.7Hz)，3.97(1H，overlapped)，3.96(1H，d，J＝6.9Hz)，3.87(3H，s)，3.6(1H，brs)，2.46-2.56(1H，m)，2.34(3H，s)，2.25(2H，m)，2.24(2H，q，J＝7.8Hz)，1.91-1.95(1H，m)，1.86(3H，s)，1.81(6H，brs)，1.73(3H，d，J＝6.9Hz)，1.20(3H，s)，1.09(3H，t，J＝7.5Hz)，1.08(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺898.3，[M+K]⁺914.3. 

实施例8  2-(3-叠氮苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-尖杉宁碱的制备 

步骤1-5：同实施例7中步骤1-5描述的方法。 

步骤6：2-(3-叠氮苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱 

2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-去苯甲酰基-10-三乙基甲硅烷基-7-丙酰基-三尖杉宁碱(20mg，0.0206mmol)溶于1ml甲苯中，加入间叠氮苯甲酸(33.6mg，0.206mmol)，PP(1.8mg，0.0124mmol)和DCC(42.5mg， 0.206mmol)，65℃反应10小时，加入0.1ml甲醇，过滤，固体用乙酸乙酯洗涤，合并滤液并蒸干，硅胶柱层析，石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1。得到的产物混有DCU等杂质，不再纯化进行脱保护，溶于1.4ml乙腈中，依次加入吡啶(0.683ml)和HF(0.375ml)，室温反应24小时，加入30ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃溶液2×20ml洗，水层用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，正己烷∶乙酸乙酯∶丙酮＝8∶3∶2。得目标产物15.0mg，两步总收率76.5％。 

¹H(CDCl₃，300MHz)：δ7.89(1H，d，J＝7.2Hz)，7.79(1H，brs)，7.49(1H，t，J＝7.2Hz)，7.21-7.40(6H，m)，6.57(1H，d，J＝8.7Hz)，6.42(1H，q，J＝6.7Hz)，6.14(1H，t，J＝8.9Hz)，5.66(1H，d，J＝7.5Hz)，5.59(1H，dd，J＝2.7，9.0Hz)，5.46(1H，dd，J＝7.5，10.5Hz)，5.29(1H，s)，4.92(1H，d，J＝8.5Hz)，4.68(1H，d，J＝2.7Hz)，4.32(1H，d，J＝8.1Hz)，4.19(1H，d，J＝8.1Hz)，3.98(1H，d，J＝7.2Hz)，3.97(1H，overlapped)，3.60(1H，brs)，2.52(1H，ddd，J＝7.3，9.5，15.0Hz)，2.34(3H，s)，2.21-2.34(2H，m)，2.25(2H，q，J＝7.6Hz)，1.92(1H，m)，1.84(3H，s)，1.83(3H，s)，1.80(3H，s)，1.72(3H，d，J＝6.9Hz)，1.21(3H，s)，1.09(3H，t，J＝7.5Hz)，1.08(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺909.3，[M+K]⁺925.3. 

实施例9：2-(3-氯苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱 

步骤1-5：同实施例7中步骤1-5描述的方法。 

步骤6：2-(3-氯苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱 

2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-去苯甲酰基-10-三乙基甲硅烷基-7-丙酰基-三尖杉宁碱(23mg，0.0237mmol)溶于1ml甲苯中，加入间氯苯甲酸(37.1mg，0.237mmol)，PP(2.1mg，0.014mmol)和DCC(48.9mg，0.237mmol)，65℃反应10小时，加入0.1ml甲醇，过滤，固体用乙酸乙酯洗涤，合并滤液并蒸干，硅胶柱层析，石油醚∶ 乙酸乙酯＝8∶1。得到的产物混有DCU等杂质，不再纯化进行脱保护，溶于1.4ml乙腈中，依次加入吡啶(0.683ml)和HF(0.375ml)，室温反应24小时，加入30ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃溶液2×20ml洗，水层用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，正己烷∶乙酸乙酯∶丙酮＝8∶3∶2。得目标产物17.5mg，两步总收率78.3％。 

¹H(CDCl₃，500MHz)：δ8.10(1H，s)，8.00(1H，d，J＝7.5Hz)，7.59(1H，dd，J＝1.5，8.0Hz)，7.46(1H，t，J＝8.0Hz)，7.30-7.414(5H，m)，6.59(1H，d，J＝8.5Hz)，6.44(1H，q，J＝7.0Hz)，6.13(1H，t，J＝9.0Hz)，5.62(1H，d，J＝7.5Hz)，5.59(1H，dd，J＝2.5，9.0Hz)，5.44(1H，dd，J＝7.5，10.5Hz)，5.28(1H，s)，4.92(1H，d，J＝8.5Hz)，4.69(1H，d，J＝1.5Hz)，4.30(1H，d，J＝8.5Hz)，4.18(1H，d，J＝9.0Hz)，3.97(1H，d，J＝6.5Hz)，3.97(1H，overlapped)，3.60(1H，brs)，2.51(1H，ddd，J＝7.3，9.5，15.0Hz)，2.34(3H，s)，2.28(2H，m，overlapped)，2.25(2H，q，J＝7.6Hz)1.92(1H，m)，1.84(3H，s)，1.82(3H，s)，1.81(3H，s)，1.73(3H，d，J＝6.9Hz)，1.20(3H，s)，1.09(3H，t，J＝7.5Hz)，1.07(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺902.3，[M+K]⁺918.3. 

实施例10  2-(3-甲基-2-丁烯酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱的制备 

步骤1-5：同实施例7中步骤1-5描述的方法。 

步骤6：2-(3-甲基-2-丁烯酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱 

2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-去苯甲酰基-10-三乙基甲硅烷基-7-丙酰基-三尖杉宁碱(20mg，0.0206mmol)溶于1ml甲苯中，加入3-甲基-2-丁烯酸(20.6mg，0.206mmol)，PP(1.8mg，0.0124mmol)和DCC(42.5mg，0.206mmol)65℃反应10小时，加入0.1ml甲醇，过滤，固体用乙酸乙酯洗涤，合并滤液并蒸干，硅胶柱层析，石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1。得到的产物混有DCU等杂质，不再纯化进行脱保护，溶于1.4ml乙腈中，依次加入吡啶(0.683ml)和HF (0.375ml)，室温反应24小时，加入30ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃溶液2×20ml洗，水层用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，正己烷∶乙酸乙酯∶丙酮＝8∶3∶2，得目标产物7.5mg，两步总收率45.2％。 

¹H(CDCl₃，300MHz)：δ7.29-7.42(5H，m)，6.59(1H，d，J＝8.7Hz)，6.46(1H，q，J＝6.9Hz)，6.13(1H，t，J＝8.9Hz)，5.69(1H，s)，5.58(1H，dd，J＝1.8，8.7Hz)，5.39-5.45(2H，overlapped)，5.25(1H，s)，4.91(1H，d，J＝7.8Hz)，4.67(1H，d，J＝1.8Hz)，4.46(1H，d，J＝8.1Hz)，4.20(1H，d，J＝8.1Hz)，3.97(1H，brs)，3.85(1H，d，J＝6.3Hz)，3.47(1H，brs)，2.49(1H，ddd，J＝7.3，9.6，14.5Hz)，2.28(1H，dd，J＝9.0，15.3Hz)，2.24(2H，q，J＝7.2Hz)，2.23(3H，s)，2.20(3H，s)，2.16(1H，dd，J＝15.4，9.0Hz)，1.97(3H，s)，1.91(1H，m)，1.85(3H，s)，1.79(3H，s)，1.79(3H，s)，1.76(3H，d，J＝7.2Hz)，1.20(3H，s)，1.08(3H，t，J＝8.1Hz)，1.04(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺846.3.3，[M+K]⁺862.3. 

实施例11  2-(3-甲基-3-丁烯酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱的制备 

步骤1-6：同实施例10中步骤1-6描述的方法。为实施例10中步骤6的一个副产物，收率27％。 

¹H(CDCl₃，300MHz)：δ7.29-7.42(5H，m)，6.59(1H，d，J＝8.7Hz)，6.46(1H，q，J＝6.7Hz)，6.11(1H，t，J＝8.7Hz)，5.58(1H，d，J＝8.7Hz)，5.41and 5.40(2H，overlapped)，5.24(1H，s)，4.99(1H，s)，4.92(2H，brs)，4.67(1H，d，J＝1.8Hz)，4.51(1H，d，J＝8.1Hz)，4.23(1H，d，J＝8.1Hz)，3.95(1H，brs)，3.84(1H，d，J＝6.3Hz)，3.48(1H，brs)，3.11(1H，d，J＝15.9Hz)，3.03(1H，d，J＝15.0Hz)，2.49-2.53(1H，m)，2.17-2.29(3H，m)，2.22(3H，s)，2.12(1H，dd，J＝9.0，15.4Hz)，1.92(1H，m)，1.87(3H，s)，1.85(3H，s)， 1.79(3H，s)，1.78(3H，s)，1.76(3H，d，J＝7.2Hz)，1.19(3H，s)，1.08(3H，t，J＝7.5Hz)，1.01(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺846.3.3，[M+K]⁺862.3. 

实施例12  2-(3-甲基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱的制备 

步骤1-5：同实施例7中步骤1-5描述的方法。 

步骤6：2-(3-甲基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱 

2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-去苯甲酰基-10-三乙基甲硅烷基-7-丙酰基-三尖杉宁碱(20.6mg，0.0213mmol)溶于1ml甲苯中，加入间甲基苯甲酸(58mg，0.426mmol)，PP(4mg，0.027mmol)和DCC(87.7mg，0.425mmol)，65℃反应10小时，加入0.1ml甲醇，过滤，固体用乙酸乙酯洗涤，合并滤液并蒸干，硅胶柱层析，石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1。得到的产物混有DCU等杂质，不再纯化进行脱保护，溶于1.4ml乙腈中，依次加入吡啶(0.683ml)和HF(0.375ml)，室温反应24小时，加入30ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃溶液2×20ml洗，水层用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，正己烷∶乙酸乙酯∶丙酮＝8∶3∶2。得目标产物8.1mg，两步总收率44.4％ 

¹H(CDCl₃，300MHz)：δ7.89-7.93(2H，m)，7.28-7.41(7H，m)，6.62(1H，d，J＝9.3Hz)，6.44(1H，q，J＝6.6Hz)，6.13(1H，t，J＝8.4Hz)，5.66and 5.62(2H，overlapped)，5.45(1H，dd，J＝7.2，10.8Hz)，5.28(1H，s)，4.92(1H，d，J＝9.6Hz)，4.71(1H，d，J＝1.8Hz)，4.32(1H，d，J＝8.4Hz)，4.21(1H，d，J＝7.5Hz)，3.96(1H，d，J＝6.6Hz)，3.96(1H，brs，overlapped)，3.57(1H，brs)，2.48-2.58(1H，m)，2.43(3H，s)，2.36(3H，s)，2.25(2H，q，J＝7.5Hz)，2.20-2.30(2H，m，overlapped)，1.91-1.96(1H，m)，1.85(3H，s)，1.82(6H，s)，1.72-1.74(3H，d，J＝6.9Hz)，1.21(3H，s)，1.08(3H，t，J＝7.5Hz)，1.08(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺882.4. 

实施例13  2-(3-氰基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱的制备 

步骤1-5：同实施例7中步骤1-5描述的方法。 

步骤6：2-(3-氰基苯甲酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱 

2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-去苯甲酰基-10-三乙基甲硅烷基-7-丙酰基-三尖杉宁碱(12.3mg，0.0127mmol)溶于1ml甲苯中，加入间氰基苯甲酸(18.6mg，0.127mmol)，PP(1.2mg，0.0081mmol)和DCC(26.22mg，0.127mmol)，65℃反应10小时，加入0.1ml甲醇，过滤，固体用乙酸乙酯洗涤，合并滤液并蒸干，硅胶柱层析，石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1。得到的产物混有DCU等杂质，不再纯化进行脱保护，溶于1.4ml乙腈中，依次加入吡啶(0.683ml)和HF(0.375ml)，室温反应24小时，加入30ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃溶液2×20ml洗，水层用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，正己烷∶乙酸乙酯∶丙酮＝8∶3∶2。得目标产物6mg，两步总收率54.4％ 

¹H(CDCl₃，300MHz)：δ8.43(1H，s)，8.36(1H，d，J＝7.5Hz)，7.90(1H，d，J＝7.8Hz)，7.67(1H，t，J＝7.2Hz)，7.32-7.42(5H，m)，6.53(1H，d，J＝8.7Hz)，6.50(1H，q，J＝6.6Hz)，6.16(1H，t，J＝8.7Hz)，5.65and 5.63(2H，overlapped)，5.47(1H，dd，J＝4.8，11Hz)，5.31(1H，s)，4.93(1H，d，J＝9.0Hz)，4.71(1H，d，J＝2.4Hz)，4.25(1H，d，J＝7.5Hz)，4.19(1H，d，J＝8.9Hz)，4.00(1H，d，J＝6.6Hz)，2.46-2.58(1H，m)，2.36(3H，s)，2.26(2H，q，J＝7.8Hz)，2.22-2.29(2H，m，overlapped)，1.92-1.97(1H，m)，1.85(6H，s)，1.79(3H，s)，1.72(3H，d，J＝6.9Hz)，1.22(3H，s)，1.09(3H，t，J＝7.5Hz)，1.08(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺893.4，[M+K]⁺909.4. 

实施例14  2-(2-丁烯酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱的制备 

步骤1-6：同实施例7中步骤1-6描述的方法。只是将步骤6中的间甲氧基苯甲酸换为2-丁烯酸。 

步骤1-5：同实施例7中步骤1-5描述的方法。 

步骤6：2-(2-丁烯酰基)-7-丙酰基-10-去乙酰基-三尖杉宁碱 

2’-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-去苯甲酰基-10-三乙基甲硅烷基-7-丙酰基-三尖杉宁碱(37.9mg，0.039mmol)溶于1ml甲苯中，加入2-丁烯酸(33.57mg，0.39mmol)，PP(5.78mg，0.039mmol)和DCC(80.5mg，0.39mmol)，65℃反应10小时，加入0.1ml甲醇，过滤，固体用乙酸乙酯洗涤，合并滤液并蒸干，硅胶柱层析，石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1。得到的产物混有DCU等杂质，不再纯化进行脱保护，溶于1.4ml乙腈中，依次加入吡啶(0.683ml)和HF(0.375ml)，室温反应24小时，加入30ml乙酸乙酯，用饱和NaHCO₃溶液2×20ml洗，水层用乙酸乙酯3×50ml萃取，合并乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，将乙酸乙酯层蒸干，硅胶柱层析，正己烷∶乙酸乙酯∶丙酮＝8∶3∶2。得目标产物20.4mg，两步总收率69％ 

¹H(CDCl₃，300MHz)：δ7.32-7.40(5H，m)，7.10(1H，dq，J＝7.8，15.1Hz)，6.58(1H，d，J＝9.3Hz)，6.46(1H，q，J＝6.9Hz)，6.14(1H，t，J＝8.4Hz)，5.88(1H，d，J＝15.1Hz)，5.59(1H，dd，J＝2.4，9.3Hz)，5.46(1H，d，J＝6.6Hz)，5.43(1H，dd，J＝7.8，10.7Hz)，5.26(1H，s)，4.92(1H，dd，J＝2.2，9.3Hz)，4.68(1H，d，J＝2.4Hz)，4.44(1H，d，J＝8.4Hz)，4.20(1H，d，J＝9.3Hz)，3.96(1H，brs)，3.87(1H，d，J＝6.9Hz)，3.44(1H，brs)，2.46-2.53(1H，m)，2.26(3H，s)，2.22-2.31(2H，m，overlapped)，1.96(3H，d，J＝6.9Hz)，1.92(1H，m overlapped)，1.88(3H，s)，1.80(3H，s)，1.79(3H，s)，1.76(3H，d，J＝6.6Hz)，1.20(3H，s)，1.08(3H，t，J＝6.9Hz)，1.04(3H，s).ESI-MS：m/z[M+Na]⁺832.3. 

药理实验： 

实验例1  本发明的化合物细胞水平的细胞毒活性筛选实验 

取对数生长期细胞培养于96孔培养板内，每孔100μl(含1000-1200个肿瘤细胞)。次日，给药组加入含有不同浓度化合物，每药设4～5个剂量组，每组至少设三个平行孔。对照组加入与化合物等体积的溶剂。置37℃，5％CO₂温箱中培养，4天后弃去培养液，每孔加入200μl0.2％MTT溶液(RPMI 1640配制)。37℃孵育4小时，弃去上清，每孔加入DMSO200μl溶解甲簪颗粒，轻度振荡后，用酶标仪，在参考波长450nm、检测波长570nm条件下测定光密度值(OD)。以溶剂对照处理的肿瘤细胞为对照组，用下面公式计算药物对肿瘤细胞的抑制率，并计算IC₅₀： 

(结果列于表1中) 

表1.本发明的部分化合物的体外细胞毒活性结果 

KB为人口腔上皮癌细胞株；KB/V为人口腔上皮癌细胞长春新碱耐药株；A549为人肺腺癌细胞株；A549/Taxol为人肺腺癌细胞的紫杉醇耐药株。

实验例2 本发明的化合物的动物体内活性实验 

1受试药物： 

名称：实施例8，紫杉醇 

制剂：实施例8，紫杉醇均为原料，白色粉末。 

配制方法：紫杉醇，实施例8化合物均用协和药厂提供的注射用溶剂配成所需浓度。 

2实验动物： 

动物来源：中国医学科学院实验动物研究所动物繁育场 

种属：BALB/c(nu/nu)裸小鼠 

合格证号：京动许017号 

体重：19—22g 

性别：♀ 

各组动物数：每组6-8只 

饲养环境：SPF级。 

3实验步骤： 

动物经1周适应后，皮下接种人肺腺癌A549细胞，待肿瘤生长至100—300mm³后，将动物随机分组(dO)。给药剂量紫杉醇为10mg/kg，实施例8为5mg/kg。腹腔注射给药。给药时间紫杉醇，实施例8均为d0-d4天，每天1次，共5次。每周测2次瘤体积，称鼠重，记录数据。待肿瘤长至d35天，处死裸鼠，测量瘤体积，并剥瘤称瘤重和体重，肿瘤体积(V)计算公式为： 

V＝1/2×a×b²  其中a、b分别表示长、宽。

表1.本发明化合物对人肺腺癌A549裸鼠异体移植瘤的生长抑制作用 

dO：分笼给药时间；dn：第1次给药后35天。*P<0.01vs对照 

表2.本发明化合物对人肺腺癌A549裸鼠异体移植瘤瘤重和动物体重的影响 

4结论： 

紫杉醇能抑制人肺腺癌A549裸鼠异体移植瘤的生长；实施例8对人肺腺癌A549裸鼠异体移植瘤的生长抑制作用较紫杉醇强。

Claims (11)

1.如通式(I)所示的三尖杉宁碱衍生物

其特征在于，

R₁选自氢，或-COX₁，X₁选自C_1-5烷基；

R₂选自-COX₂；

R₃选自-OCOX₆；

并且，

X₂选自氢，甲基，乙基，丙基；

X₆选自未取代或单取代的苯基；所述苯基上的取代基选自卤素，

C_1-5烷基，C_1-5烷氧基，氰基，叠氮基。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于

所述的卤素选自F，Cl，Br，I。

3.根据权利要求2所述的化合物，其特征在于，R₁选自氢，乙酰基，丙酰基，丁酰基。

4.如通式(I)所示的三尖杉宁碱衍生物

其选自：

R₁是乙酰基，R₂是氢，R₃是3-叠氮苯甲酰氧基的式(I)化合物；

R₁是乙酰基，R₂是氢，R₃是3-甲氧基苯甲酰氧基的式(I)化合物；

R₁是丙酰基，R₂是氢，R₃是3-叠氮苯甲酰氧基的式(I)化合物；

R₁是丙酰基，R₂是氢，R₃是3-甲氧基苯甲酰氧基的式(I)化合物；

R₁是丙酰基，R₂是氢，R₃是苯甲酰氧基的式(I)化合物；

R₁是氢，R₂是丙酰基，R₃是3-甲氧基苯甲酰氧基的式(I)化合物；

R₁是氢，R₂是丙酰基，R₃是3-叠氮苯甲酰氧基的式(I)化合物；

R₁是氢，R₂是丙酰基，R₃是3-氯苯甲酰氧基的式(I)化合物；

R₁是氢，R₂是丙酰基，R₃是3-甲基苯甲酰氧基的式(I)化合物；

或

R₁是氢，R₂是丙酰基，R₃是3-氰基苯甲酰氧基的式(I)化合物。

5.一种式IIa化合物的制备方法，其特征在于，

R₁选自氢，或-COX₁，X₁选自C_1-5烷基；X₂选自氢，甲基，乙基，丙基；

即用C-10位修饰或未修饰的三尖杉宁碱为原料，将C-7位羟基与相应的酸缩合；

再脱去2’位的保护基叔丁基二甲基甲硅烷基。

6.一种式IIb化合物的制备方法，其特征在于，

R₁选自氢，或-COX₁，X₁选自C_1-5烷基；

X₂选自氢，甲基，乙基，丙基；

X₆选自未取代或单取代的苯基；所述苯基上的取代基选自卤素，

C_1-5烷基，C_1-5烷氧基，氰基，叠氮基；

用C-10位和7位修饰的三尖杉宁碱，脱除2位苯甲酰基，再与相应的酸缩合；

再脱去2’位的保护基叔丁基二甲基甲硅烷基。

7.根据权利要求5-6中任意一项权利要求的制备方法，其特征在于，酯化反应中

缩合试剂选自N，N′-二环己基碳二亚胺、二(2-吡啶)碳酸酯、N，N′-二异丙基碳二亚胺、1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亚胺盐酸盐；

催化剂选自三级胺；

有机溶剂选自二甲亚砜、甲苯、二氯甲烷、乙二醇二甲醚，1，2-二氯乙烷、四氢呋喃和N，N-二甲基甲酰胺。

8.根据权利要求7的制备方法，其中三级胺为4-二甲氨基吡啶。

9.一种药物组合物，其特征在于，含有作为活性成分的权利要求1一4中任意一项权利要求中至少一种化合物和药学上可接受的载体。

10.如权利要求1-4中任意一项权利要求中所述的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

11.根据权利要求10的应用，其特征在于，所述的肿瘤选自多药耐药人肺腺癌、多药耐药人口腔上皮癌。