MX2007011065A

MX2007011065A - Formulacion de una mezcla de flavonoides libres de anillo b y flavanos como un agente terapeutico.

Info

Publication number: MX2007011065A
Application number: MX2007011065A
Authority: MX
Inventors: Qi Jia; Yuan Zhao
Original assignee: Unigen Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2005-03-10
Filing date: 2006-03-10
Publication date: 2007-11-07
Also published as: EP2444093A1; US20060204596A1; JP2008533041A; EP1855528A2; RU2007133167A; WO2006099217A2; NZ560848A; KR20070112247A; RU2411941C2; EP1855528A4; AU2006223281A1; WO2006099217A3; CN101175406A; CN101175406B; CA2599711A1; BRPI0607571A2

Abstract

La presente invencion se refiere a una composicion de material comprendida de una mezcla de dos clases especificas de compuestos -- flavonoides Libres del Anillo B y flavanos - referidos en la presente como UP736 para uso en la prevencion y tratamiento de enfermedades y condiciones relacionadas con agregacion de plaquetas y trombosis inducida por plaquetas. La invencion ademas proporciona una nueva composicion de material comprendida de UP736 en combinacion con anticoagulantes inyectables u orales, agentes antiplaquetas, inhibidores selectivos de COX-2 y farmacos no esteroides anti-inflamatorios (NSAIDs) y un metodo para usar la composicion en la prevencion y tratamiento de enfermedades y condiciones relacionadas con agregacion de plaquetas y trombosis inducida por plaquetas. Finalmente, esta invencion proporciona un metodo para usar UP736 en combinacion con agentes antiplaquetas, anticoagulantes, de profilaxis y NSAIDs como un medio para reducir la dosificacion de estos agentes, disminuir los efectos secundarios asociados con administracion aguda o cronica de estos agentes; contrarrestar o antagonizar los riesgos de administracion aguda o cronica de estos agentes y para lograr beneficios clinicos adicionales y/o multiples.

Description

FORMULACIÓN DE UNA MEZCLA DE FLAVONOIDES LIBRES DE ANILLO B Y FLAVANOS COMO UN AGENTE TERAPÉUTICO CAMPO DE LA INVENCIÓN La invención se refiere a la prevención y tratamiento de enfermedades y condiciones relacionadas con la agregación de plaquetas y trombosis inducida por plaquetas. Específicamente, la presente invención se refiere a una nueva composición de materia comprendida de una mezcla de una combinación de dos clases específicas de compuestos flavonoides Libres de Anillo B y flavanos - también referida en la presente como UP736 para el uso en la prevención y tratamiento de enfermedades y condiciones mediadas por la agregación de plaquetas y trombosis inducida por plaquetas. Esta invención adicionalmente se refiere a un método para usar UP736 como un adyuvante y/o un sinergístico, y/o un agente de potenciación en conjunto con anticoagulantes inyectables u orales, agentes antiplaquetas, fármacos antiinflamatorios no esteroides (NSAIDs) e inhibidores selectivos de COX-2. Finalmente, esta invención se refiere a un método para usar UP736 en combinación con agentes anti-plaquetas, anti-coagulantes, de profilaxis y NSAIDs como un medio para reducir la dosificación de estos agentes, disminuir los efectos secundarios asociados con la administración aguda o crónica de estos agentes; contrarrestar- o antagonizar los Ref. 185791 riesgos de la administración aguda o crónica de estos agentes y para lograr los beneficios clínicos adicionales y/o múltiples .

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La liberación y metabolismo de ácido araquidónico (AA) de la membrana celular resulta en la generación de metabolitos por diversas trayectorias diferentes. De manera discutible, dos de las trayectorias más importantes son mediadas por las enzimas 5-lipoxigenasa (LOX) y ciclooxigenasa (COX) . Existen trayectorias paralelas resultantes de la generación de leucotrienos y prostaglandinas, respectivamente, las cuales juegan papeles importantes en la iniciación y progresión de la respuesta inflamatoria y agregación de plaquetas. En consecuencia, las enzimas responsables de la generación de estos mediadores han llegado a ser los objetivos para muchos nuevos fármacos dirigidos al tratamiento de inflamación y modulación de agregación de plaquetas que contribuye a la patogénesis de enfermedades tales como artritis reumatoide, osteoartritis, y aterotrombosis . La inhibición de la enzima COX es el mecanismo de acción atribuido a la mayoría de los fármacos antiinflamatorios no esteroides (NSAIDS) . Existen dos isoformas distintas de la enzima COX (COX-l y COX-2), las cuales comparten aproximadamente 60% de homología de secuencia, pero difieren en función y perfiles de expresión. La COX-l es una forma constitutiva de la enzima que se ha enlazado a la producción de prostaglandinas fisiológicamente importantes, las cuales ayudan a regular las funciones fisiológicas normales, tal como agregación de plaquetas, protección de función celular en el estómago y mantenimiento de la función del riñon normal. (Dannhardt and Kiefer (2001) Eur. J. Med. Chem. 3_6: 109-26). La segunda isoforma, COX-2, es una forma de la enzima que es inducible por las citocinas pro-inflamatorias, tal como interleucina-lß (IL-lß) y otros factores de crecimiento. (Herschmann (1994) Cáncer Metástasis Rev. 134:241-56; Xie et al . (1992) Drugs Dev. Res. 25:249-65). Esta isoforma cataliza la producción de prostaglandina E2 (PGE2) de ácido araquidónico (AA) . Debido a que el mecanismo de acción de inhibidores de COX se superpone a aquel de los NSAIDs más convencionales, los inhibidores de COX se usan para tratar muchos de los mismos síntomas, incluyendo aterotrombosis, dolor e hinchamiento asociado con inflamación en condiciones momentáneas y enfermedades crónicas. Las plaquetas juegan un papel central en hemostasis normal. Después de la lesión vascular, las plaquetas se filtran en la matriz extracelular a través de la pared endotelial dañada, donde se activan por varios constituyentes en la matriz extracelular incluyendo colágeno, proteoglicanos, fibronectina y otras glicoproteínas adhesivas. En contacto con la matriz extracelular, las plaquetas sufren reacciones múltiples y consecutivas incluyendo adhesión y cambio de forma, secreción de dos tipos de granulos y agregación. Dos mediadores de agregación de plaquetas potentes: difosfato de adenina (ADP) y tromboxano A2 (TxA2) se han identificado. El ADP se libera de plaquetas después que se activan por constituyentes de la matriz extracelular. Además de mediar la agregación de plaquetas, el ADP también mejora la liberación de ADP de otras plaquetas formando un circuito de realimentación positivo para la agregación de plaquetas. El TxA2 se sintetiza y libera de plaquetas, y es un estímulo importante para la agregación de plaquetas también. Conjuntamente con el ADP, el TxA2 establece una reacción autocatalítica que conduce a la construcción de un agregado de plaqueta alargado. Las plaquetas agregadas son importantes para el proceso de coagulación de sangre subsiguiente. Estas plaquetas activadas estimulan la activación local de factores de coagulación de plasma, conduciendo a la generación de un coágulo de fibrina que reforza el agregado de plaquetas. Recientes estudios sugieren que todas las reacciones unidas a la membrana del sistema de coagulación se pueden localizar a la superficie de plaquetas activadas (Conde et al . (2005) Blood 106:1604-1611).

Aunque la adhesión y activación de plaquetas es una respuesta de reparación orientada a lesión vascular súbita, la progresión no controlada de este proceso a través de una serie de circuitos de amplificación autónomos puede conducir a la formación intraluminal de trombo, oclusión vascular, e isquemia momentánea o infarto (Ruggeri (2002) Nat. Med. 8_: 1227-34) . La capacidad de las plaquetas a participar tanto en hemostatis normal como aterotrombosis depende de sus propiedades adhesivas y su capacidad de llegar a ser activadas muy rápidamente en respuesta a varios estímulos. Las plaquetas naturales expresan solamente COX-l. Las plaquetas procesan PGH2 para producir principalmente TxA2, el cual se sintetiza y libera por plaquetas en respuesta a colágeno, trombina y otros estímulos. El TxA2 induce la agregación de plaquetas irreversible a través de su interacción con un receptor acoplado a proteína G, el receptor de TxA2. Por consiguiente, el TxA2 proporciona un mecanismo para amplificar las respuestas de plaquetas a diversos agonistas. Además, el TxA2 es un potente vasoconstrictor, induce la proliferación de células de músculo liso vascular, y es proaterogénico . Como un vasoconstrictor el TxA2 promueve la agregación de plaquetas apropiada. Inhibiendo la enzima COX-l, la aspirina reducirá la producción de TxA2 lo cual conduce a agregación de plaquetas reducida (Patrono et al . (2006) The New England Journal Medicine. 353 : 22 : 237). Las prostaciclinas son producidas en el revestimiento endotelial de arterias y el corazón. El equilibrio entre la prostaciclina (PGI2), un fuerte vasodilatador, y aquel de los tromboxanos, tal como TxA2, es crucial para mantener la función cardiovascular apropiada (Bunting et al . (1983) Br. Med. Bull. 3_9:271). Tanto PGI2 como TxA2 son dependientes de la producción de COX-l y COX-2 en el revestimiento endotelial de arterías y en el tejido cardiovascular del corazón (Caughey et al . (2001) J Immunol, 167:2831; Ribout et al . (2003) Cardiovascular Res _58:582). Se ha mostrado que las relaciones de COX-l y COX-2 afectan el equilibrio tanto de PGI2 como TxA2. La COX-l metaboliza el ácido araquidónico que convierte el ácido graso principalmente a TxA2, mientras que la COX-2 inducida procesa el ácido araquidónico que lo transforma a PGE2 y PGI2 (Oh-ishi (1997) Biochem. Bíophys. Res. Commun. 230:110; Brock: et al . (1999) J. Biol. Chem. 27_4_: 11660). La PIG2 inhibe la agregación de plaquetas en respuesta a todos los agonistas a través de su interacción con el receptor PGI2. El tAx2 es un prostanoide grandemente derivado de COX-l (mayormente de plaquetas) y su biosíntesis es altamente sensible a la inhibición por aspirina (Rocca et al . (2002) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 9_9:7634-9). La PGI2, por otra parte, se deriva predominantemente de COX-2 (McAdam et al . (1999) Proc. Nati.

Acad. Sci. USA 9^6:272-7) y es menos susceptible a la inhibición por aspirina. La inhibición altamente selectiva de COX-2 puede promover la trombosis inclinando el equilibrio de la síntesis de PGI2 (trayectoria de COX-2) sobre TxA2 (trayectoria de COX-l) vía la desviación de ácido araquidónico dentro de la trayectoria de COX-l de eisocanoide. (Gaetano (2003) Trends in Pharmacological Sciences. 24 (5) : 245-252). La agregación de plaquetas juega un papel muy importante la inducción y desarrollo de atrotrombosis, la cual es la causa principal de trombosis de vena profunda, embolismo pulmonar, ateroesclerosis, infarto al miocardio, trombosis en vasos cerebrales y/o embolismo de vasos cerebrales que conducen a eventos cerebrovasculares. Los fármacos antiplaquetas, tal como aspirina, y fármacos anticoagulación, tales como heparina y warfarina (Verheugt (2005) Presse Med. 3_4: 1325), inhibidores específicos de trombina, tales como inhibidores no específicos de hirudina, desirudina, bivalirudina y trombina, tales como estatinas (Shen (2006) Front Biosci. 11:113) son actualmente los fármacos estándar usados para el manejo tromboembolismo. Sin embargo, las complicaciones que surgen del sangrado serio son un efecto secundario principal de los fármacos de anticoagulación y de terapia de antiplaquetas de corto plazo de alta dosis. El uso de dosis menores de fármacos de anticoagulación combinados con dosis moderadas a bajas de compuestos antiplaquetas, tal como aspirina se ha mostrado que tiene un valor terapéutico significativo en la reducción de amenaza de sangrado en pacientes con alto riesgo (Harrington et al . (2004) Chest. 126.3 Suppl.513S). Debido a la inhibición irreversible de ciclooxigenasa de plaqueta y la prevención de la formación de TxA2, los fármacos tipo aspirina también se han utilizado a largo plazo para reducir los riesgos de la enfermedad cardiovasculaar, en la prevención de infarto al miocardio agudo y en la prevención de apoplejía oclusiva aguda (Hennekens (2002) Am. J. Manag. Care 8 (22 Suppl. ) :S6919. El efecto secundario más común resultante del uso a largo plazo de aspirina y otros salicilatos anti-plaquetas es la erosión local de la mucosa gástrica debido a la inhibición de COX-l, la cual el importante en el mantenimiento de la integridad del revestimiento de mucosa. Tal daño de la mucosa gástrica puede conducirse de la pérdida de sangre oculta a hemorragia Gl aguda debido a la seria lesión gastroduodental . La administración de dosis a corto plazo de fármacos antiplaquetas también tiene sus propios riesgos, tal como potencial de apoplejía significativamente incrementado y sangrado después de procedimientos quirúrgicos. El ajuste de la dosificación óptima es una opción para reducir estos efectos secundarios (Kong (2004) Am J. Cardiovasc. Drugs 4(3): 151). Las dosis dianas que varían desde 75 mg-150 mg son recomendadas para uso preventivo a largo plazo. Ciertamente cualquiera de los compuestos que pueden mejorar el efecto antiplaquetas de las aspirinas sin incrementar sus efectos secundarios tendrá ventajas terapéuticas significativas (Patrono et al . (2005) New Eng. J. Med. 353 : 22, 2373). Desafortunadamente, actualmente no ha opción disponible, aunque el uso de unos agentes anti-secretopos, tal como un inhibidor de bomba de protones puede reducir el riesgo de sangrado gastrointestinal superior en pacientes que toman fármacos anti-plaquetas . Para dirigir la aspirina y otra toxicidad por NSAID clásica, particularmente ulceración gastrointestinal y hemorragia resultante de la inhibición de COX-l selectiva, dos estrategias se han implementado en el proceso de descubrimiento de fármaco. La primera estrategia involucra la búsqueda de inhibidores selectivos de COX-2, los cuales reducen los efectos secundarios gastrointestinales no usando las funciones protectoras de COX-l en la mucosa gástrica (DeWitt (1999) Mol. Pharmac. 4_:625-631). Este esfuerzo ha conducido al lanzamiento exitoso de diversos fármacos comerciales, tales como Celecoxib y Rofecoxib, los cuales exhiben selectividad contra COX-2. En ensayos clínicos, los inhibidores selectivos de COX-2 demuestran potencia significativa contra el dolor y otros síntomas de inflamación con menor incidencia de eventos gastrointestinales. Sin embargo, un número de efectos secundarios asociados con el uso de inhibidores de COX-2 selectivos gradualmente ha emergido. Por ejemplo, se ha encontrado que estos compuestos promueven los ataques alérgicos y asmáticos, originan insuficiencia renal aguda, insuficiencia cardiaca congestiva, enfermedades cerebrovasculares y coronarias exacerbadas, retraso de crecimiento de hueso roto y curación de úlceras, suprimen el sistema inmune haciendo un ataque de meningitis susceptible a viral, y promueven el desarrollo de úlceras en pacientes con erosiones gástricas o con infección de Heli coba ctor pylori (Rainsford (2001) J. Physiol. - Paris _95: 11-19). Los reportes recientes que un efecto antiinflamatorio significativo para algunos inhibidores de COX-2 altamente selectivos solamente se observó después que el nivel de dosificación alcanzó los niveles en los cuales la actividad de COX-l también se inhibió (Wallace et al .91999) Br. J. Pharmac. 126: 1200-1204 ) , conjuntamente con la generación de prostanoide anti-inflamatorio por la enzima COX-2 a una última fase del proceso de inflamación (Gilroy et a l . (1999) Nature Med. 5:698-701), adicionalmente han desafiado la eficacia de inhibidores de COX-2 selectivos. En 2004, el fármaco Vioxx (Rofecoxib) se retiró voluntariamente del mercado después que un ensayo clínico mostró que la sobre-exposición a este inhibidor de COX-2 altamente selectivo incrementa el riesgo de ataque cardiaco mayor que dos veces comparado con otro NSAID, Naproxeno. Adicionalmente, un ensayo clínico que involucró Celebrx (Celecoxib) , responsabilizado por el Instituto Nacional de Cáncer reveló que un uso de alta dosis a largo plazo de este inhibidor selectivo de COX-2 duplica más el riesgo de ataque cardiaco. El interés del riesgo cardiovascular de otro inhibidor de COX-2 selectivo, Bextra (Valdecoxib) , también se ha elevado (Meier B. Marketing Intensified Trouble for Pain Pilis. The New York Times, Diciembre 19, 2004). De hecho, una revisión de la reciente literatura científica revela que el riesgo incrementado de un evento cardiovascular de Rofecoxib (Vioxx) y otros inhibidores de COX-2 selectivos fue observado tan temprano como el año 2000 (Juni et al . (2004) Lancet. 364 (9450) :2021-2029; Clark (2004) Drug Safety 27 (7) :427-456) . Existe evidencia incrementada, la cual indica que una causa primaria de esta toxicidad cardiaca es la selectividad de COX-2 extremadamente alta de esta clase de fármacos. (Neal et al . (2004) J. Pharm. Sci. 7 (3) :332-336) . Datos recientes indican que la COX-2 se expresa en órganos saludables, tales como las células de mácula densa de riñón/cTALH e intersticiales medulares (Harris et al . (Agosto 2004) Acta Physiol Scand. 181 (4) :543-7) ; en células endoteliales (Párente and Perretti (Jan. 2003) Biochem Pharmacol. 65J_2_: 153-9) ; y en el cerebro (Hoffmann (Noviembre 2000) Curr Med Chem. 7 (11) .1113-20) . En los riñones, la enzima COX-2 es requerida para la producción de PGE2 y PGI2 (prostaciclina) de ácido araquidónico. La PGI2, en particular, es un regulador clave del equilibrio de sodio en el cuerpo (Harris (2000) J Am Soc Nephrol 1_1:2387). La inhibición de PGE2 y PGI2 por inhibidores selectivos de COX-2 dentro de los riñones conduce a la retención de sodio y agua y elevación de la presión sanguínea, cuando la PGE2 disminuye la reabsorción de sodio, mientras la PGI2 es un fuerte vasodilatador el cual mantiene el equilibrio entre el flujo de sangre renal y la velocidad de filtración glomerular, o en términos más simples, la cantidad de orina producida en el cuerpo. La PGI2 también estimula la liberación de renina, la cual causa un incremento en la liberación de aldosterona, la cual luego incrementa la reabsorción de sodio y secreción de potasio. (Carmichael and Shankel (1985) Am J Med 78_:992; Whelton and Hamilton (1991) J Clin Pharmacol 31:588). Para mantener la perfusión renal apropiada, los riñones sobre-regulan la síntesis de PGI2 para contrarrestar los efectos de vasoconstrictores para mantener la función del riñon apropiada. Los individuos más saludables mantienen la presión sanguínea apropiada por si solos equilibrando la admisión de fluidos con la excreción de orina sin interferencia de compuestos que causan vasoconstricción o vasodilatación. En estos individuos, los efectos de vasoconstrictores contraequilibrados por PGI2 no son necesarios. Pero en aquellos individuos con presión sanguínea alta, se encontró que el Vioxx adicionalmente incrementa la presión sanguínea (Lamarque (2004) Bulletin du Cáncer (Montrouge) 91.S117; Whelton et al . (2001) Am J Ther 85:85). Este incremento de presión sanguínea puede contribuir a la incidencia incrementada de infarto al miocardio agudo (AMI, por sus siglas en inglés) (Deray (2004) Presse Med 33: 483) . Las enzimas COX-2 también inducen la expresión de PGE2 y PGI2 en el corazón, las cuales protegen contra el infarto al miocardio agudo (AMI) (Dai and Kloner (2004) J Cardiovascul Pharmacol Therapeutics _9:51). Estudios recientes tanto en conejos como ratones han mostrado que durante un AMI inducido, la COX-2 es significativamente sobre-regulada que actúa para empequeñecer el evento como un mediador antiinfarto (Shinmura et al . (2000) PNAS 9JJ 10197; Guo et al . (2000) Basic Res Cardiol 95:479). Esta actividad anti-infarto previene el daño adicional que ocurra conservando por esto la función cardiovascular. (Bolli et al . (2002) Am J Physiol 282 : H1943) . En modelos animales, los investigadores han mostrado que los niveles de PGI2 fueron abolidos cuando las ratas se administraron con un inhibidor de COX-2 selectivo contra un placebo. Esta carencia de PGI2 previno que los corazones de las ratas contrarrestaran un evento de AMI inducido (Bolli et al . (2002) Am J Physiol 282:H1943; Shinmura et a l . (2002) Am J Physiol 283:H2534). Cuando la COX-2 es inhibida selectivamente, el TxA2 es producido a un nivel mucho mayor en comparación con PGI2. La Vasoconstricción por TxA2 es contra-equilibrada por la vasodilatación inducida por PGI2, la cual reduce el flujo sanguíneo en las arterías alrededor del corazón. Esta reducción del flujo sanguíneo y limitación de nutrientes y suministro de oxígeno puede inclinar el equilibrio en pacientes susceptibles hacia AMI (Bing and Lomnicka (2002) J. Am. Coll. Cardiol 39:521). En resumen, la reciente evaluación de las isoformas de ciclooxigenasa y su función ha demostrado que la carencia de la inhibición de COX-l apreciable es una explicación plausible para el incremento observado en efectos secundarios cardiovasculares asociados con Vioxx (Rofecoxib) y otros inhibidores de COX-2 altamente selectivos. Aún existe una recomendación que el uso de NSAIDs altamente selectivos de COX-2 sin el uso de inhibidores de COX-l adecuados (por ejemplo, aspirina en baja dosis) se deberá evitar. (Neal et al . (2004) J. Pharm. Pharmaceut. Sci. 7 (3) :332-336) . Los recientes esfuerzos anti-inflamatorios se han enfocado en la búsqueda de agentes, los cuales inhiben tanto ciclooxigenasa como lipoxigenasa (Párente (2001) J. Rheumatol. 28:2375-2382; Bertolini et al . (2001) Pharmac. Res. 4_4: 437-450) . Los inhibidores que demuestran especificidad dual para COX y LOX podrían tener el beneficio obvio de inhibir múltiples trayectorias de metabolismo de ácido araquidónico. Tales inhibidores podrían bloquear los efectos inflamatorios de prostaglandinas (PG) , así como también, aquellos de múltiples leucotrienos (LT) limitando su producción. Esto incluye la vasodilatación, vasopermeabilidad y efectos quimiotácticos de PGE2, LTB4, LTD4 y LTE4, también conocida como la sustancia de reacción lenta de anafalaxis. De estos, LTB4 tiene los efectos quimiotácticos y quimiocinéticos más potentes. (Moore (1985) en Prostanoids : pharmacological, physiological and clinical relevance, Cambridge University Press, N.Y., pp. 229-230). El significado del bloqueo de los efectos inflamatorios de PGE2, así como también, aquellos de múltiples leucotrienos (LT) se basa en el reciente descubrimiento que las desventajas del significado de inhibidores de COX-2 selectivos se asocian con la desviación de la trayectoria de ácido araquidónico a la trayectoria de lipoxigenasa, causando por esto la sobreproducción de leucotrienos pro-inflamatorios, quimiotácticos, de daño gastrointestinal, y broncoconstrictivos (Celotti and Laufer (2001) Pharmac. Res. 4_3:429-436) . Se ha determinado que la inflamación gástrica inducida por NSAID es grandemente debido a los metabolitos de LOX, particularmente LTC4 y LTB4 (Kirchner et al . (1997) Prostaglandins Leukot . Essent. Fatty Acids 56:417-423). Los leucotrienos contribuyen a una cantidad significativa de la lesión epitelial gástrica estimulando la infiltración de leucocitos, ocluyendo los microvasos, reduciendo el flujo sanguíneo mucosal y liberando mediadores, proteasas y radicales libres. Los inhibidores de LOX selectivos han demostrado reducción significativa en la severidad o prevención de formación de úlcera inducida por indometacina (Fosslien (1998) Annals Clin. Lab. Sci. 28:67-81). También se ha determinado que inhibiendo las trayectorias de COX, la aspirina y otros inhibidores de COX desvían los metabolitos de ácido araquidónico a la trayectoria de LOX causando liberación incrementada de leucotrieno broncoconstrictivo conjuntamente con un incremento en los niveles de leucotrienos de cisteinilo, el cual conduce a rinoconjuntivitis crónica, pólipos nasales, y asma parecida a una infección respiratoria viral extensa. La frecuencia de asma inducida por aspirina (AIA) en la población asmática es aproximadamente 10 a 20% y los fármacos anti-leucotrieno se han utilizado en el tratamiento de pacientes con AIA. (Babu and Salvi (2000) Chest 118:1470-1476) . Los inhibidores duales también demuestran otros beneficios terapéuticos. Se ha encontrado que reducen la vasoconstricción coronaria en corazones artríticos en un modelo de rata (Gok et al . (2000) Pharmac. 60:41-46), y reducen significativamente las contracciones inducidas por angiotensina II en la artería mamaria interna humana (Stanke-Labesque et al . (2000) Cardiovascular Res. 47_: 376-383) . La activación del receptor opiode puede originar una inhibición presináptica de liberación de neurotransmisor mediadas por metabolitos de LOX de ácido araquidónico en neuronas del cerebro medio. La eficacia de los opioides se mejora sinergísticamente por tratamiento de neuronas del cerebro con inhibidores duales de COX y LOX. Esto puede conducir al desarrollo de medicaciones analgésicas del SNC que involucran combinaciones de dosis disminuidas de opioides e inhibidores duales de COX/LOX (Christie et al . (1999) Inflamm. Res. 48:1-4). Los inhibidores duales de COX y LOX también pueden prevenir la inflamación ocular inducida por proteína de lente tanto en fases tempranas como tardías (Chang et al . J . Ocular Pharmac. 5:353-360). Los inhibidores duales de COX y LOX no solamente suprimen las prostaglandinas que contribuyen a las condiciones inflamatorias agudas, sino también se dirigen a la acumulación de leucotrienos fagocíticos que están directamente asociados con síntomas inflamatorios crónicos. Adicionalmente, los inhibidores duales también proporcionan protección cardiaca de la actividad inhibitoria de COX-l. Estas características sugieren que pueden existir distintas ventajas a los inhibidores duales de COX y LOX sobre los inhibidores de COX-2 selectivos y NSAIDs. Este concepto se ha mostrado que es válido en modelos in vivo con candidatos de fármaco sintético (Fiorucci et al . (2001) Biochem. Pharmac. 62:1433-1438) .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere generalmente a una composición de materia formulada para el uso en la prevención y tratamiento de enfermedades y condiciones relacionadas con la agregación de plaquetas y trombosis inducida por plaquetas. Esta composición de materia es referida en la presente como UP736. La composición de materia está comprendida de una mezcla de dos clases específicas de compuestos - flavonoides Libres de Anillo B y flavanos. Las composiciones comprendidas de flavonoides Libres de Anillo B, flavanos y mezclas de los mismos se describen en la Solicitud de Estados Unidos Serie No. 10/091,362, presentada el 1 de Marzo de 2002, titulada "Identification of Free-B-Ring Flavonoids as Potent COX-2 Inhibitors", Solicitud de Estados Unidos Serie No. 10/104,477, presentada el 22 de Marzo de 2002, titulada "Isolation of a Dual Cox-2 and 5-Lipxigenase Inhibitor form Acacia" y Solicitud de Estados Unidos Serie No. 10/427,746, presentada el 22 de Julio de 2003, titulada "Formulation with Dual Cox-2 and 5-Lipoxigenase Inhibitory Activity" . Cada una de estas referencias se incorpora en la presente para referencia en su totalidad.

Incluida en la presente invención está una nueva composición de materia comprendida de una mezcla de al menos un flavonoide Libre Anillo B, al menos un flavano y al menos un agente seleccionado del grupo que consiste de un anticoagulante inyectable, seleccionado del grupo que incluye, pero no limitado a heparina, dalteparina, enoxaparina y tinzaparina; un anticoagulante oral, seleccionado del grupo que incluye, pero no limitado a warfarina, antagonistas de vitamina K e inhibidores de vitamina K reductasa; un agente antiplaquetas, seleccionado del grupo que incluye, pero no limitado a aspirina, clodipogrel y dipiridamol; un fármaco anti-anginas, seleccionado del grupo que incluye, pero no limitado a nitratos, beta-bloqueadores, bloqueadores de calcio, inhibidores de enzima que convierte la angiotensina, y activadores de canal de potasio; un fármaco anti-inflamatorio no esteroide (NSAID) seleccionado del grupo que incluye, pero no limitado a acetaminofeno, ibuprofeno, naproxeno, diclofenaco, salicilatos e indometacina o un inhibidor selectivo de COX-2 seleccionado del grupo que incluye, pero no limitado a rofecoxib, celecoxib, etodolaco y meloxicam. La relación de flavonoides Libres de Anillo B a flavanos en la composición de materia se puede ajustar basada en las indicaciones y los requerimientos específicos con respecto a la prevención y tratamiento de una enfermedad o condición específica. Generalmente, la relación de flavonoides Libres de Anillo B a flavanos puede estar en el intervalo de aproximadamente 99:1 flavonoides Libres de Anillo B: flavanos a aproximadamente 1:99 de flavonoides Libres de Anillo B: flavanos. Es modalidades específicas de la presente invención, la relación de flavonoides Libres de Anillo B a flavanos se selecciona del grupo que consiste de aproximadamente 90:10, 80:20, 70:30, 60:40, 50:50, 40:60, 30:70, 20:80 y 10:90. En una modalidad preferida de la invención, la relación de flavonoides Libres de Anillo B: flavanos en la composición de materia es aproximadamente 85:15. Los flavonoides Libres de Anillo B y flavanos se pueden sintetizar y/o aislar de una planta única o múltiples plantas. En una modalidad preferida, los flavonoides Libres de Anillo B se aislan de una planta o plantas en el género de plantas Scutellaria y los flavanos se aislan de una planta o plasntas en el género de plantas Aca cia y Uncaria . La presente invención adicionalmente incluye métodos para el tratamiento y prevención de enfermedades y condiciones relacionadas con la agregación de plaquetas y trombosis inducida por plaquetas. El método está comprendido de administrar a un hospedador en necesidad del mismo una composición que comprende una mezcla de flavonoides Libres de Anillo B y flavanos sintetizados y/o aislados de una planta única o múltiples plantas. La eficacia de este método se demuestra usando enzimas purificadas, en diferentes líneas celulares y múltiples modelos animales. Las enfermedades y condiciones relacionadas con la agregación de plaquetas y trombosis inducida por plaquetas que se pueden prevenir y tratar de acuerdo con el método de esta invención incluyen, pero no se limitan a trombosis de vena profunda, embolismo pulmonar, ateroesclerosis, infarto al miocardio, trombosis en vasos cerebrales y/o embolismo de vasos cerebrales que conducen a eventos cerebrovasculares, trombosis o circulación periférica y/o microcirculación resultante de isquemia e infarto, fibrilación atrial que está asociada con la estasis de sangre y formación de trombosis en el atrio izquierdo, sitios trombogénicos incluyendo implantaciones artificiales tales como válvulas mecánicas de corazón, desfibriladores, implantaciones quirúrgicas para suministro de fármaco, y caderas, articulaciones y otros órganos exógenos artificiales. La presente invención adicionalmente incluye métodos para usar UP736 como un adyuvante y/o un sinergístico, y/o un agente de potenciación, los métodos comprenden administrar a un hospedador en necesidad de los mismos una cantidad efectiva de una composición de materia comprendida de una mezcla de al menos un flavonoide Libre de Anillo B; al menos un flavano y al menos un agente seleccionado del grupo que consiste de un anticoagulante inyectable, un anticoagulante oral, un agente antiplaquetas, un agente anti-anginas, un fármaco anti-inflamatorio no esteroide (NSAID) o un inhibidor selectivo de COX-2. Los ejemplos de anticoagulantes inyectables incluyen, pero no se limitan a heparina, dalteparina, enoxaparina y tinzaparina. Los ejemplos de anticoagulantes orales incluyen, pero no se limitan a warfarina, antagonistas de vitamina K e inhibidores de vitamina K reductasa. Los ejemplos de agentes antiplaquetas incluyen, pero no se limitan a aspirina, clodipogrel y dipiridamol. Los ejemplos de fármacos antianginas incluyen, pero no se limitan a, nitratos, betabloqueadores, bloqueadores de calcio, inhibidores de enzima que convierte la angiotensina, y activadores de canal de potasio. Los fármacos anti-inflamatorios no esteroides (NSAIDs) incluyen, pero no se limitan a acetaminofeno, ibuprofeno, naproxeno, diclofenaco, salicilatos e indometacina. Finalmente, los ejemplos de inhibidores selectivos de COX-2 incluyen, pero no se limitan a rofecoxib, celecoxib, etodolaco y meloxicam. La presente invención también incluye un método para reducir la dosis estándar de agentes antiplaquetas, anticoagulantes, de profilaxis, inhibidores selectivos de NSAIDs y COX-2 para lograr ya sea la salida clínica equivalente o mejorada. El método comprende administrar a un hospedador con necesidad del mismo una cantidad efectiva de una composición que comprende una mezcla de al menos un flavonoide Libre de Anillo B y al menos un flavano en combinación con el agente antiplaquetas, anticoagulante, de profilaxis, inhibidor selectivo de NSAID o COX-2. La presente invención además incluye una composición y un método para usar UP736 como un adyuvante y/o un inhibidor, y/o un agente potenciador en conjunción con al menos un fármaco no esteroidal anti-inflamatorio (NSAID) , seleccionado del grupo que incluye pero no se limita a acetaminofeno, ibuprofeno, naproxeno, diclofenaco, salicilatos, indometacina; y al menos un inhibidor selectivo de COX-2, seleccionado del grupo que incluye pro no se limita a rofecoxib, celecoxib, etodolac, meloxicam. La composición y método reducen la dosis de NSAIDs requerida para lograr ya sea la salida clínica equivalente o mejorada; resultando en una disminución de los efectos secundarios asociados con la administración aguda o crónica de estos agentes y una combinación o antagonización de los riesgos de administración aguda o crónica de NSAIDs. El método también proporciona un medio para lograr beneficios clínicos adicionales y/o múltiples como se detalla posteriormente. El método comprende administrar a un hospedador con necesidad del mismo una cantidad efectiva de una composición que comprende una mezcla de flavonoides Libres de Anillo B y flavanos en combinación con al menos un NSAID y al menos un inhibidor selectivo de COX-2 y un portador farmacéuticamente aceptable. La presente invención también incluye una composición y método para disminuir o eliminar los efectos secundarios asociados con administración aguda o crónica de agentes antiplaquetas, anticoagulantes, de profilaxis, inhibidores selectivos de NSAIDs y COX-2 por la administración del agente en conjunción con UP736. El método comprende administrar a un hospedador con necesidad del mismo una cantidad efectiva de una composición que comprende una mezcla de flavanos y flavonoides Libres de Anillo B en combinación con el agente antiplaquetas, anticoagulante, de profilaxis, inhibidor selectivo de COX-2 o NSAID y un portador farmacéuticamente aceptable. La presente invención además incluye un método para contrarrestar o antagonizar los riesgos asociados con la administración aguda o crónica de agentes antiplaquetas, anticoagulantes, de profilaxis, inhibidores selectivos de COX-2 y NSAIDs por coadministración del agente con UP736. El método comprende administrar a un hospedador con necesidad de la misma una cantidad efectiva de una composición que comprende una mezcla de flavanoides Libres de Anillo B y flavanos en combinación con aqente antiplaquetas, anticoagulantes, de profilaxis o NSAID y un portador farmacéuticamente aceptable. Finalmente, la presente invención incluye métodos para lograr beneficios clínicos adicionales y/o múltiples por la coadministración de agentes antiplaquetas, anticoagulantes, de profilaxis, inhibidores selectivos de COX-2 y NSAID en combinación con UP736. Como se describe posteriormente, UP736 es un antioxidante potente, el cual regula la producción del ARN mensajero de NFkB y PPAR-?, conduciendo a la bajo regulación específica de TNFa, IL-lß, IL-6 y otras citocinas pro-inflamatorias, tanto en los niveles de producción de proteína como expresión del gen. El método está comprendido de administrar a un hospedador con necesidad del mismo una cantidad efectiva de una composición que comprende una mezcla de flavonoides Libres de Anillo B y flavanos sintetizados y/o aislados de una planta única o plantas múltiples en combinación con el agente antiplaquetas, anticoagulante, de profilaxis, inhibidor selectivo de NSAID o COX-2 y un portador farmacéuticamente aceptable. Los flavonoides Libres de Anillo B, también referido en la presente como flavonas Libres de Anillo B y flavonoles, que se pueden usar de acuerdo con la siguiente invención incluyen compuestos ilustrados por la siguiente estructura general: en donde : Ri, R2, R3, R , y R5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de -H, -OH, -SH, OR, -SR, -NH2, -NHR, -NR2, -NR3+XJ un carbono, oxígeno, nitrógeno o azufre, glicósido de un único o una combinación de azúcares múltiples incluyendo, pero sin limitarse a aldopentosas, metil-aldopentosa, aldohexosas, cetohexosa y sus derivados químicos de los mismos; en donde R es un grupo alquilo que tiene entre 1-10 átomos de carbono; y X se selecciona del grupo de contra aniones farmacéuticamente aceptables incluyendo, pero sin limitarse a hidroxilo, cloruro, yoduro, sulfato, fosfato, acetato, fluoruro, carbonato, etc. Los flavanos que se pueden usar de acuerdo con la siguiente invención incluyen compuestos ilustrados por la siguiente estructura general: en donde Ri, R2, R3, R , y R5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de -H, -OH, -SH, - OCH3, -SCH3, -OR, -SR, -NH2, -NRH, -NR2, -NR3+X", esteres de los grupos de sustitución mencionados, incluyendo, pero sin limitarse a, galato, acetato, cinamoilo y esteres de hidroxil-cinamoilo, esteres de trihidroxibenzoilo y esteres de cafeoilo y sus derivados químicos de los mismos, carbono, oxígeno, nitrógeno o azufre, glicósido de un único o una combinación de azúcares múltiples incluyendo, pero sin limitarse a, aldopentosas, metil aldopentosa, aldohexosas, cetohexosa y sus derivados químicos de los mismos; dímero, trímero y otros flavanos polimerizados; en donde R es un grupo alquilo que tiene entre 1-10 átomos de carbono; y X se selecciona del grupo de contra aniones farmacéuticamente aceptables incluyendo, pero sin limitarse a hidroxilo, cloruro, yoduro, sulfato, fosfato, acetato, fluoruro, carbonato, etc. Los flavonoides Libres de Anillo B de esta invención se pueden obtener por métodos sintéticos y/o extraer de una planta o plantas de las familias de plantas que incluyen, pero no se limitan a Annonaceae , Asteraceae , Bignonia ceae , Combreta ceae , Composi tae, Euphorbiaceae, Labia tae , Lauranceae , Leguminosae , Moraceae , Pina ceae , Pterida ceae , Sinopteridaceae , Ulmaceae y Zingiberaceae . Los flavonoides Libres de Anillo B se pueden extraer, concentrar y purificar a partir de géneros de plantas altas, incluyendo pero sin estar limitados a Desmos, Achyrocline, Oroxylum, Buchenavia , Anaphalis , Cotula , Gnaphalium, Helíchrysum, Centaurea , Eupatorium, Baccharis , Sapium, Scutellaria , Molsa, Colebrookea , Stachys, Origanum, Ziziphora , Lindera, Actinodaphne, Acacia, Derris, Glycyrrhiza, Millettia, Pongamia , Tephrosia , Artocarpus , Ficus, Pityrogramma , Notholaena , Pinus, Ulmus y Alpinia. Los flavanos biológicamente activos de esta invención se pueden obtener por métodos sintéticos y/o extraer de una planta o plantas seleccionadas del género de Acacia y/o Uncaria. En una modalidad preferida, la planta de Acacia se selecciona del grupo que incluye, pero no se limita a A. catechu, A. concinna , A. farnesiana , A. Senegal, A. speciosa , A. arábica, A. caesia, A. pennata, A. sinuata, A. mearnsii , A. picnantha , A. dealbata , A. auriculiformis, A. holoserecia y A. mangium. En una modalidad preferida, la planta Uncaria se selecciona del grupo que consiste de Uncaria gambir , U. lanosa, U. hirsute, U. africana , U. ellíptica , U. orientalis , U. attenuate , U. acida, U. homomalla , U. sessili fructus , U. sterrophylla , U. bernaysii , U. sinensis, U. callophylla , U. rhychophylla , U. tomentosa, U. longi flora , U. hirsute, U. cordata, y U. borneensis . En una modalidad preferida, los flavonoides Libres de Anillo B se aislan a partir de una planta o plantas en el género Scutellaria de plantas y flavanos se aislan a partir de una planta o plantas en el género de plantas Acacia y Uncaria . Como se señaló anteriormente, la relación de flavonoides Libres de Anillo B a flavanos puede estar en el intervalo de aproximadamente 99:1 flavonoides Libres de Anillo B: flavanos a aproximadamente 1:99 de flavonoides Libres de Anillo B: flavanos. En modalidades específicas de la presente invención, la relación de flavonoides Libres de Anillo B a flavanos se selecciona del grupo que consiste de aproximadamente 90:10, 80:20, 70:30, 60:40, 50:50, 40:60, 30:70, 20:80 y 10:90. En una modalidad preferida de la invención, la relación de flavonoides Libres de Anillo B: flavanos en la composición de la materia es aproximadamente 85:15. Se entiende que tanto la descripción general anterior como la siguiente descripción detallada son ejemplares y explicativas solamente y no son restrictivas de la invención como se reivindica.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 muestra un cromatograma de CLAR de un extracto estandarizado aislado de las raíces de S. baicalensis (lote # RM052302-01) que tiene un contenido de flavonoide Libre de Anillo B contenido de 82.2%. Como se puede observar en la Figura, los siguientes diez compuestos se describieron usando CLAR/AFD/EM: baicalina, wogonin-7-glucurónido, oroxilin A 7-glucurónido, baicaleina, wogonina, crisin-7-glucurónido, norwogonin-7-glucurónido, escutelarina, crisina y oroxilina A. La Figura 2 muestra el cromatograma de CLAR de los flavanos extraídos de A . ca techu con 80% de MeOH en agua. La Figura 3 muestra gráficamente el tiempo de sangrado e incremento de porcentaje de tiempo de sangrado en grupos de tratamiento relativos con el control del vehículo usando los datos combinados del Ejemplo 11 (n=9-10) . El tiempo de sangrado promedio e incremento de porcentaje del tiempo de sangrado en grupos de tratamiento relativos al control del vehículo están presentes y se analizan usando la prueba t de Estudiante. La prolongación del tiempo de sangrado de los grupos de tratamiento se expresa como incremento de porcentaje del tiempo de sangrado con relación al control del vehículo. La Figura 4 muestra gráficamente los resultados del Ejemplo 12. En este Ejemplo, UP736 se administró oralmente a una dosis de 100 mg/kg, ya sea solo o en combinación con aspirina a 3, 10 y 30 mg/kg a grupos de 5 ratones machos derivados de ICR, que pesaron 22 + 2 g, 1 hora antes de la sección transversal de la punta (0.3 mm) de cada cola. Además, la aspirina sola a 3, 10, 30 y 100 mg/kg se administró de manera similar a los ratones. La prolongación del tiempo de sangrado por 50 por ciento o más (50%) con relación a un grupo de control de animales se consideró significante .

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Se utilizan varios términos en la presente para referirse a aspectos de la presente invención. Para ayudar en la clarificación de la descripción de los componentes de esta invención, se proporcionan las siguientes definiciones. Se señala que el término "un" o "una" entidad se refiere a uno o más de esta entidad, por ejemplo, un flavonoide se refiere a uno o más flavonoides. Como tal, los términos "un" o "uno", "uno o más" y "al menos uno" son usados intercambiablemente en la presente. "Flavonoides Libres de Anillo B" como se usa en la presente son una clase específica de flavonoides, los cuales tienen grupos no sustituidos en el anillo B aromático, como se ilustra por la siguiente estructura general: en donde Ri, R2, R3, R , y R5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de -H, -OH, -SH, OR, -SR, -NH2, -NHR, -NR2, -NR3+X~, un carbono, oxígeno, nitrógeno o azufre, glicósido de un único o una combinación de azúcares múltiples incluyendo, pero sin limitarse a aldopentosas, metil-aldopentosa, aldohexosas, cetohexosa y sus derivados químicos de los mismos; en donde R es un grupo alquilo que tiene entre 1-10 átomos de carbono; y X se selecciona del grupo de contra aniones farmacéuticamente aceptables incluyendo, pero sin limitarse a hidroxilo, cloruro, yoduro, sulfato, fosfato, acetato, fluoruro, carbonato, etc. _ "Flavanos" como se usa en la presente se refiere a una clase específica de flavonoides, los cuales pueden estar representados generalmente por la siguiente estructura general : en donde Ri, R2, R3, R4, y R5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de -H, -OH, -SH, -OCH3, -SCH3, -OR, -SR, -NH2, -NRH, -NR2, -NR3+X", esteres de los grupos de sustitución, incluyendo, pero sin limitarse a, galato, acetato, cinamoilo y esteres de hidroxil-cinamoilo, esteres de trihidroxibenzoilo y esteres de cafeoilo y sus derivados químicos de los mismos, carbono, oxígeno, nitrógeno o azufre, glicósido de un único o una combinación de azúcares múltiples incluyendo, pero sin limitarse a, aldopentosas, metil aldopentosa, aldohexosas, cetohexosa y sus derivados químicos de los mismos; dímero, trímero y otros flavanos polimerizados; en donde R es un grupo alquilo que tiene entre 1-10 átomos de carbono; y X se selecciona del grupo de contra aniones farmacéuticamente aceptables incluyendo, pero sin limitarse a hidroxilo, cloruro, yoduro, sulfato, fosfato, acetato, fluoruro, carbonato, etc. "Terapéutico" como se usa en la presente, incluye el tratamiento y/o profilaxis. Cuando se usa, terapéutico se refiere a humanos así como también otros animales. "Dosis o cantidad farmacéuticamente o terapéuticamente efectiva" se refiere a un nivel de dosificación suficiente para inducir un resultado biológico deseado. Este resultado puede ser el alivio de los signos, síntomas o causas de una enfermedad o cualquier otra alteración de un sistema biológico que es deseado.

"Placebo" se refiere a la sustitución de la dosis o cantidad farmacéuticamente o terapéuticamente efectiva de dosis suficiente para inducir a un biológico deseado que puede aliviar los signos, síntomas o causas de una enfermedad con una sustancia no activa. Un "hospedador" o "paciente" es un sujeto vivo, humano o animal, al cual las composiciones descritas en la presente se administran. Por consiguiente, la invención descrita en la presente puede ser usada para veterinaria así como también aplicaciones humanas y los términos "paciente" u "hospedador" no serían construidos de una manera limitante. En el caso de aplicaciones veterinarias, las variaciones de dosificación se pueden determinar como se describe posteriormente, tomando en cuenta el peso corporal del animal. "Expresión de genes" se refiere a la transcripción de un gen a ARNm. "Expresión de proteinas" se refiere a la traducción de ARNm a una proteína. La presente invención se refiere generalmente a una composición de materia formulada para uso en la prevención y tratamiento de enfermedades y condiciones relacionadas a agregación de plaquetas y trombosis inducida por plaquetas. Esta composición de materia se refiere en la presente como UP736. La composición de materia está comprendida de un compuesto individual o una mezcla de dos clases específicas de compuestos - flavonoides Libres de Anillo B y flavanos. La relación de flavonoides Libres de Anillo B a flavanos en la composición de la materia se puede ajustar basado en las indicaciones y los requerimientos específicos con respecto a la prevención y tratamiento de una condición o enfermedad específica. Generalmente, la relación de flavonoides Libres de Anillo B a flavanos puede estar en el intervalo de aproximadamente 99:1 flavonoides Libres de Anillo B: flavanos a aproximadamente 1:99 de flavonoides Libres de Anillo B: flavanos. En modalidades específicas de la presente invención, la relación de flavonoides Libres de Anillo B a flavanos se selecciona del grupo que consiste de aproximadamente 90:10, 80:20, 70:30, 60:40. 50:50, 40:60, 30:70, 20:80 y 10:90. En una modalidad preferida de la invención, la relación de flavonoides Libres de Anillo B: flavanos en la composición de la materia es aproximadamente 85:15. En una modalidad de la presente invención, el extracto de flavonoide Libre de Anillo B estandarizado está comprendido de los compuestos activos con una pureza de entre 1-99% (en peso) de flavonoides Libres de Anillo B total como se define en los Ejemplos 3, 4 y 8. Baicalina es el principal componente activo en el extracto, el cual se cuenta por aproximadamente 50-90% (en peso) de los flavonoides Libres de Anillo B totales. En una modalidad preferida, el extracto estandarizado contiene >70% de flavonoides Libres del Anillo B totales de los cuales >75% de los flavonoides Libres del Anillo B es baicalina. En una modalidad, el extracto de flavano estandarizado está comprendido de los compuestos activos con una pureza de entre 1-99% (en peso) de flavanos totales como se define en los Ejemplos 5, 6, y 7. La catequina es el principal componente activo en el extracto y se cuenta por 50-90% (en peso) de los flavanos totales. En una modalidad preferida, el extracto de flavano estandarizado contiene >50% de flavanos totales en los cuales >70% de flavanos es catequina . En una modalidad UP736 es producida mezclando ya sea extractos de plantas como se detalló anteriormente o equivalentes sintéticos de los mismos en una relación de 99:1 a 1:99 (flavonoides Libres del Anillo B:flavanos). La relación preferida de flavonoides Libres del Anillo B a flavanos es 85:15 de flavonoides Libres de Anillo B: flavanos como se definieron en el ejemplo 9. La concentración de Flavonoides Libres de Anillo B en UP736 puede ser desde aproximadamente 1% a 99% y la concentración de flavanos en UP736 puede ser desde 99% a 1%. En una modalidad preferida de la invención, la concentración de Flavonoides Libres de Anillo B total en UP736 es aproximadamente 75% con un contenido de baicalina de aproximadamente 60% de peso total del UP736; y la concentración de flavanos total en UP736 es aproximadamente 10% con un contenido de catequina de aproximadamente 9%. En esta modalidad, los componentes activos totales (Flavonoides Libres de Anillo B más flavanos) en UP736 son >80% del peso total. La presente invención incluye una evaluación de diferentes composiciones de Flavonoides Libres de Anillo B y flavanos usando modelos enzimáticos y in vivo para optimizar la formulación y obtener la actividad fisiológica deseada. Hasta la fecha, el Solicitante de la invención actual es ignorante de cualquiera de los reportes de una formulación que combina solamente Flavonoides Libres de Anillo B y flavanos como los componentes biológicamente activos primarios para el tratamiento de enfermedades y condiciones. La carencia de sustitución de uno de los anillos aromáticos del flavonoide Libre de Anillo B juega un papel muy importante en la producción de estos compuestos eficaces. Diferente de muchos otros fármacos anti-inflamatorios no esteroides (NSAIDs) y compuestos que se presentan naturalmente, los flavonoides Libres de Anillo B, tal como baicalina, tienen un anillo aromático de baja polaridad en un lado de la molécula y glucuronido de alta polaridad y dos grupos hidroxilo en el otro lado. Este arreglo estructural permite que estos compuestos se dirijan a tejidos y células.

La combinación de flavonoides Libres de Anillo B con flavanos para producir la composición de materia referida en la presente como UP736 ofrece un modulador sinergístico y potente tanto de trayectorias de COX como LOX del sistema eicosanoide. Claramente se demuestra en la presente que la combinación de flavonoides Libres de Anillo B y flavanos proporciona una modulación más equilibrada de las enzimas COX-l y C0X2. Por ejemplo, la aspirina, un inhibidor selectivo de COX-l, el cual es más de 150 veces selectivo contra COX-l, causa efectos secundarios gastrointestinales. A la inversa, Vioxx, celebrex y Bextra, los cuales son inhibidores de COX-2 selectivos que tienen 50-200 veces más potencia contra la enzima COX-2, no causan mucho daño gastrointestinal, sin embargo, estos fármacos selectivos de COX-2 incrementan los riesgos cardiovasculares. Un perfil de la inhibición de COX-l y COX-2 por el componente purificado baicalina, la cual se aisló de S . baicalensis mostró casi dos veces la selectividad contra COX-2 (el IC50 para COX-l se determinó que es 0.44 µg/ml/unidad de enzima y el IC50 para COX-2 se determinó que es 0.28 µg/ml/unidad. Mientras que, un perfil de la inhibición de COX-l y COX-2 por una composición de materia comprendida de más de 90% de catequinas aisladas de A . ca techu, es casi tres veces más selectivo de COX-l. Para, catequina, el IC50 de inhibición de COX-l se calculó como 0.11 µg/ml/unidad de enzima y el IC50 par COX-2 se calculó como 0.42 µg/ml/unidad. Una combinación de una mezcla de flavonoides Libres de Anillo B extraídos de las raíces de S . baicalensis y flavanos aislados de la corteza de A . ca techu en una relación de 80:20, para obtener una composición de materia, referida después como UP736, proporciona una selectividad de COX-l contra COX-2 equilibrada de 2:1. Esta formulación, la cual proporciona un equilibrio entre la mayor actividad de COX-2 de baicalina y la mayor actividad de COX-l de catequina, ofrece modulación óptima de la trayectoria de eicosanoide sin los efectos secundarios gastrointestinales asociados con los NSAIDs selectivos de COX-l y riesgos cardiovasculares asociados con inhibidores selectivos de COX-2. También es significativo que el mecanismo de acción sea completamente diferente entre los fármacos actualmente disponibles referenciados anteriormente y la fórmula natural UP736. La aspirina, Vioxx, celebrex y Bextra irreversiblemente enlazan a la enzima COX a través de los enlaces covalentes para formar complejos de enzima-inhibidor estrechamente enlazados. Tal interacción dramática completamente cambia el sitio activo de la enzima y el saco lateral y destruye la enzima. (Walker et al. (2001) Biochem. 357 : 709-718 ) . Los flavonoides en UP736, por otra parte, inhiben la enzima COX a través de un enlace más débil y reversible debido a sus propiedades antioxidantes. En este proceso interactivo, la estructura y función de la enzima COX no son irreversiblemente alteradas lo cual resulta en una tolerancia mucho mejor y perfil de seguridad para UP736. La inhibición de la actividad de LOX por un extracto de flavano aislado de A . ca techu, se valoró usando un ensayo de selección de lipooxigenasa in vi tro . Mediante la adición de flavanos a los flavonoides Libres de Anillo B, la UP736 también inhibe la actividad de 5-lipooxigenasa (LOX) . La inhibición de LOX resulta en una disminución de la acumulación de leucotrienos fagocíticos, los cuales están directamente asociados con los síntomas de inflamación crónica, y también reduce los efectos secundarios gastrointestinales potenciales. Es evidente que la combinación de flavonoides Libres de Anillo B con flavanos proporciona el beneficio adicional de reducir significativamente la producción de leucotrienos. Esta reducción en la producción de leucotrienos es con mucho superior a los fármacos anti-inflamatorios no esteroides tradicionales tal como ibuprofeno en el término del mejoramiento de la eficacia y reducción de los efectos secundarios como se discute en la sección de antecedentes. Las ventajas de una formulación comprendida de una mezcla de extractos de flavonoide Libre de Anillo B y flavano también se demostraron por dos estudios en animales, los cuales mostraron que esta nueva composición de materia exhibió efectos sinergísticos inesperados. La composición de materia usada en estos dos estudios estuvo comprendida de una mezcla de flavonoides Libres de Anillo B obtenidos de extracto de semilla Oroxyl um indicum (10. Og) (lote #040723) que tiene un contenido de crisina en flavonoide Libre de Anillo B de 62.3% y flavanos derivados de extracto de planta entera Unicaria gambir (40.0 g) (lote #UG0407-050420) con contenido de catequina total de 32.5%. Una combinación de dos extractos anteriores en una relación de mezclado de 80:20 proporciona una formulación llamada UP736 (50.0 g, Lote #BH-283-14-1). El extracto de flavonoide Libre de Anillo B individual de las semillas de Oroxylum indicum, extracto de flavano de las plantas completas de Unicaria gambir, y una combinación de aquellos extractos (UP736) se administraron oralmente en una dosificación de 100 mg/kg usando un control de indometacina en un modelo animal de inflamación aguda, Prueba de Hinchamiento de Oído de Ratón. La inhibición del hinchamiento de oído (50.8% de inhibición) de UP736 fue significativamente mejor que la misma dosis de componentes individuales 36.5% de extracto de Uncaria gambir, y 31.7% de extracto de Oroxyl um indi cum, respectivamente. En otro ensayo de inhibición de hinchamiento de oído de ratón inducido por ácido araquidónico, los efectos sinergísticos también se observaron en una formulación llamada UP736-K, la cual se mezcló en una relación de 9:1 con un extracto de flavonoide Libre de Anillo B de las raíces de S . bai calensis que contiene 25% baicalina y un 40% de extracto de catequina de la planta completa de Uncaria gambir. La UP736-K contuvo 24% de baicalina y 4% de catequinas. El extracto de flavonoide Libre de Anillo B individual de las raíces de S . baicalensis, extracto de flavano de plantas completas de Unicaria gambir, y una combinación de aquellos extractos (UP736-K) se administraron oralmente en una dosificación de 100 mg/kg usando un control de indometacina. La UP736-K mostró mejoramiento estadísticamente significativo en la reducción de edema con relación a cada uno de los extractos individuales. Adicionalmente, debido a la diferente disponibilidad biológica, es decir velocidad y porcentaje de compuestos biológicamente activos que penetran la membrana de célula epitelial y las concentraciones locales de compuestos biológicamente activos, la combinación de los dos diferentes tipos de compuestos (flavanos de mayor polaridad contra flavonoides Libres de Anillo B de menor polaridad) ofrece inhibición de COX/LOX en sitio, rápida por los flavanos biológicamente activos, conjuntamente con modulación de duración más larga de la trayectoria de COX/LOX por los flavonoides Libres de Anillo B biológicamente activos. Toma aproximadamente dos horas después de la administración oral de flavonoides Libres de Anillo B en UP736 alcanzar concentraciones eficaces. Sin embargo, la concentración en suero de los flavonoides Libres de Anillo B permanecerá arriba de los niveles terapéuticos por aproximadamente 10 horas después de la administración oral. Para compensar la carencia de biodisponibilidad rápida de flavonoides Libres de Anillo B, la formulación de flavanos tipo catequina ofrece un beneficio complementario. Los estudios de la biodisponibilidad de catequinas, quercetina, y epigalocatequina-3-galato (Kao et al . (2000) Endocrinology 141 (3) :980-987; Koga and Meydani (2001) Am. J. Clin. Nutr. 73:941-948; Lee et al . (2002) Cáncer Epidemiol. Biomarker Prevention 1_1: 1025-1032 ) muestran que el Cmax y Tmax de catequina ocurren rápidamente (aproximadamente 45 minutos) y la vida media se reportó que es 2 horas. Por lo tanto, combinando flavonoides Libres de Anillo B con flavanos, las catequinas que penetran rápidamente alcanzan concentraciones en suero eficaces en aproximadamente 0.5 horas después de la administración oral. Cuando la concentración de catequina cae, el segundo componente activo, los flavonoides Libres de Anillo B alcanzan concentraciones bioactivas que durarán hasta 12 horas después de la administración oral. En conclusión, la formulación UP736 se diseña para tener efectos de COX/LOX en sitio rápidos que resultan de los flavanos, tal como catequina y efectos que duran más tiempo resultantes de los flavonoides Libres de Anillo B, tal como baicalina. Tales efectos sinergísticos y complementarios también se realizarán vía suministro tópico de la fórmula. Finalmente, en una modalidad preferida de la formulación, la cual tiene cantidades significativas de flavonoides Libres de Anillo B (80% en peso) con concentración comparativamente inferior de flavanos (20% en peso) , los flavanos anti-oxidante más potentes funcionarán tanto como conservadores naturales contra degradación oxidante de los flavonoides Libres de Anillo B como para neutralizar y amortiguar la composición que permite el suministro de los componentes activos principales - los flavonoides Libres de Anillo B al pH óptimo y condiciones de ionización. La catequina contiene cuatro grupos hidroxilo fenólicos, lo cual hace a este compuesto más ácido y sensible a tensión oxidante. La Capacidad de Absorción Radical de Oxígeno extremadamente alta (ORAC, por sus siglas en inglés, a 20,000) de catequina demuestra sus propiedades antioxidantes. Basado en la prueba de tensión de catequina pura bajo condiciones variadas, tal como pH, la existencia de H202 y iones metálicos, se determina (los datos están disponibles pero no mostrados) que la catequina es estable bajo condiciones neutras tanto a 4°C como 40°C, pero no bajo condiciones básicas o cuando se expone a iones metálicos, tal como Fe3+. Aún bajo condiciones débilmente básicas (pH=7.5) la catequina se descompone. Sin embargo, se puede conservar por un número de conservadores, incluyendo pero no limitado a cloruro de estaño (SnCl2) , bisulfato/metabisulfito de sodio (SBS), y otros conservadores. Incluida en la presente invención está una nueva composición de materia comprendida de una mezcla de al menos un flavonoide Libre de Anillo B, al menos un flavano y al menos un agente seleccionado del grupo que consiste de un anticoagulante inyectable, seleccionado del grupo que incluye, pero no se limita a heparina, dalteparina, enoxaparina y tinzaparina; un anticoagulante oral, seleccionado del grupo que incluye, pero no se limita a warfarina, antagonistas de vitamina K e inhibidores de vitamina K reductasa; un agente antiplaquetas, seleccionado del grupo que incluye, pero no limitado a aspirina, clodipogrel y dipiridamol; un fármaco anti-anginas, seleccionado del grupo que incluye, pero no limitado a nitratos, beta-bloqueadores, bloqueadores de calcio, inhibidores de enzima que convierte la angiotensina, y activadores de canal de potasio; un fármaco anti-inflamatorio no esteroide (NSAID) seleccionado del grupo que incluye, pero no limitado a acetaminofeno, ibuprofeno, naproxeno, diclofenaco, salicilatos e indometacina o un inhibidor selectivo de COX-2 seleccionado del grupo que incluye, pero no limitado a rofecoxib, celecoxib, etodolaco y meloxicam.

La presente invención adicionalmente incluye métodos para tratar y prevenir enfermedades y condiciones relacionadas con la agregación de plaquetas y trombosis inducida por plaquetas. La trombosis es la formación innecesaria de coágulos sanguíneos que pueden ser venosos o arteriales. La UP736 se puede utilizar como un agente antiplaquetas, anti-coagulante y de profilaxis para la prevención y tratamiento de las enfermedades y condiciones mencionadas anteriormente. El método está comprendido de administrar a un hospedador en necesidad del mismo una cantidad efectiva de una composición que comprende una mezcla de flavonoides Libres de Anillo B y flavanos sintetizados y/o aislados de una planta única o múltiples plantas. Las enfermedades y condiciones relacionadas a la agregación de plaquetas y trombosis inducida por plaquetas que se pueden prevenir y tratar de acuerdo con el método de esta invención incluyen, pero no se limitan a trombosis de vena profunda, embolismo pulmonar, ateroesclerosis, infarto al miocardio, trombosis en vasos cerebrales y/o embolismo de vasos cerebrales que conducen a eventos cerebrovasculares, trombosis o circulación periférica y/o microcirculación resultante de isquemia e infarto, fibrilación atrial que está asociada con la estasis de sangre y formación de trombosis en el atrio izquierdo, sitios trombogénicos incluyendo implantaciones artificiales tales como válvulas mecánicas de corazón, desfibriladores, implantaciones quirúrgicas para suministro de fármaco, y caderas, articulaciones y otros órganos exógenos artificiales. La presente invención adicionalmente incluye métodos para usar UP736 como un adyuvante y/o un agente sinergístico y/o de potenciación, los métodos comprenden administrar a un hospedador en necesidad de los mismos una cantidad efectiva de una composición de materia comprendida de una mezcla de al menos un flavonoide Libre de Anillo B, al menos un flavano y al menos un agente seleccionado del grupo que consiste de un anticoagulante inyectable, un anticoagulante oral, un agente anti-plaquetas, un agente anti-anginas, un fármaco anti-inflamatorio no esteroide (NSAID) o un inhibidor selectivo de COX-2. Los ejemplos de anticoagulantes inyectables incluyen, pero no se limitan a heparina, dalteparina, enoxaparina y tinzaparina. Los ejemplos de anticoagulantes orales incluyen, pero no se limitan a warfarina, antagonistas de vitamina K e inhibidores de vitamina K reductasa. Los ejemplos de agentes antiplaquetas incluyen, pero no se limitan a aspirina, clodipogrel y dipiridamol. Los ejemplos de fármacos antianginas incluyen, pero no se limitan a, nitratos, betabloqueadores, bloqueadores de calcio, inhibidores de enzima que convierte la angiotensina, y activadores de canal de potasio. Los fármacos anti-inflamatorios no esteroides (NSAIDs) incluyen, pero no se limitan a acetaminofeno, ibuprofeno, naproxeno, diclofenaco, salicilatos e indometacina. Finalmente, los ejemplos de inhibidores selectivos de COX-2 incluyen, pero no se limitan a rofecoxib, celecoxib, etodolaco y meloxicam. La presente invención también incluye un método para reducir la dosis estándar de agentes anti-plaquetas, anti-coagulantes, de profilaxis, NSAIDs e inhibidores selectivos de COX-2 para lograr ya sea el rendimiento clínico equivalente o mejorado. El método comprende administrar a un hospedador en necesidad del mismo una cantidad efectiva de una composición que comprende una mezcla de al menos un flavonoide Libre de Anillo B y al menos un flavano, ya sea sintetizado y/o aislado de una planta única o múltiples plantas y un portador farmacéuticamente aceptable en combinación con el agente anti-plaquetas, anti-coagulante, de profilaxis, NSAID o inhibidor selectivo de COX-2. La UP73 es un producto derivado de dos plantas tradicionales que contienen antioxidantes y otros compuestos dietéticos que se presentan naturalmente que ayudan al cuerpo en múltiples formas. La UP736 no es un inhibidor de COX-2 selectivo, sino más bien es 2.25 veces más selectivo contra COX-l contra COX-2, y además inhibe naturalmente la 5-lipooxigenasa (LOX) , la cual regula la trayectoria que produce múltiples leucotrienos quimiotácticos y de vasodilatación. La actividad inhibidora que se presente naturalmente de UP736 hacia COX-2 como se ensayó por inhibición enzimática es aproximadamente 50-400 veces menos efectiva en comparación con los fármacos de COX-2 altamente selectivos - Rofecoxib y Celecoxib - como se muestra en la tabla 1.

Tabla 1. Actividad de COX-2 de UP736 Con relación a Inhibidores de COX-2 Conocidos La UP736 también es un antioxidante potente, el cual regula naturalmente la producción del ARN mensajero de NFKB y PPAR-?, conduciendo a la regulación descendente específica de TNFa, IL-lß, IL-6 y otras citocinas pro-inflamatorias tanto en la expresión de genes como niveles de producción de proteínas. La presente invención incluye adicionalmente una composición y un método para usar UP/36 como un adyuvante y/o un agente sinergístico y/o de potenciación en conjunto con al menos un fármaco anti-inflamatorio no esteroide (NSAID) , incluyendo pero limitado a acetaminofeno, ibuprofeno, naproxeno, diclofenaco, salicilatos, indometacina; y al menos unos inhibidores selectivos de COX-2, incluyendo pero no limitado a rofecoxib, celecoxib, etodolaco, meloxicam. La composición y método reduce la dosis de NSAIDs requerida para lograr ya sea el rendimiento clínico equivalente o mejorado; resultando en una disminución de los efectos secundarios asociados con la administración aguda o crónica de NSAIDs y una acción contraria o antagonización de los riesgos de administración aguda o crónica de NSAIDs. El método y composición también logran beneficios clínicos adicionales y/o múltiples resultantes de la regulación descendente específica de TNFa, IL-lß, IL-6 y otras citocinas pro-inflamatorias como se describió anteriormente. La presente invención también incluye una composición y método para disminuir o eliminar los efectos secundarios asociados con la administración agua o crónica de agentes anti-plaquetas, anti-coagulante, de profilaxis, NSAIDs e inhibidores selectivos de COX-2 por la administración del agente en combinación con UP736. El método comprende administrar a un hospedador en necesidad del mismo una cantidad efectiva de una composición que comprende una mezcla de flavonoides Libres de Anillo B y flavanos sintetizados y/o aislados de una planta única o múltiples plantas en combinación con el agente anti-plaquetas, anti-coagulante, de profilaxis, NSAID o inhibidor selectivo de COX-2 y un portador farmacéuticamente aceptable. La presente invención adicionalmente incluye un método para contrarrestar o antagonizar los riesgos asociados con la administración agua o crónica de agentes anti-plaquetas, anti-coagulante, de profilaxis, NSAIDs e inhibidores selectivos de COX-2 por la co-administración del agente con UP736. El método comprende administrar a un hospedador en necesidad del mismo una cantidad efectiva de una composición que comprende una mezcla de flavonoides Libres de Anillo B y flavanos sintetizados y/o aislados de una planta única o múltiples plantas en combinación con el agente anti-plaquetas, anti-coagulante, de profilaxis, NSAID o inhibidor selectivo de COX-2 y un portador farmacéuticamente aceptable. Finalmente, la presente invención incluye métodos para lograr los beneficios clínicos adicionales y/o múltiples por la co-administración de agentes anti-plaquetas, anticoagulantes, de profilaxis, NSAIDs e inhibidores selectivos de COX-2 en combinación con UP736. Como se señaló anteriormente, la UP736 es un antioxidante potente, el cual regula la producción del ARN mensajero de NFKB y PPAR-?, conduciendo a la regulación descendente específica de TNFa, IL-lß, IL-6 y otras citocinas pro-inflamatorias, tanto en la expresión de genes como niveles de producción de proteínas. El método está comprendido de administrar a un hospedador en necesidad del mismo una cantidad efectiva de una composición que comprende una mezcla de flavonoides Libres de Anillo B y flavanos sintetizados y/o aislados de una planta única o múltiples plantas en combinación con el agente anti-plaquetas, anti-coagulante, de profilaxis, NSAID o inhibidor selectivo de COX-2 y un portador farmacéuticamente aceptable. La presente invención se dirige hacia composiciones terapéuticas que comprenden los agentes terapéuticos de la presente invención. Los agentes terapéuticos de la invención actual se pueden administrar por cualquier medio adecuado, incluyendo, por ejemplo, administración parenteral, tópica, oral o local, tal como intradérmicamente, por inyección, o por aerosol. El modo de administración particular dependerá de la condición a ser tratada. Se contempla que la administración de lo agentes de la presente invención pueda ser vía cualquier fluido corporal, o cualquier objetivo o cualquier tejido accesible a través de un fluido corporal. En la modalidad preferida de la invención, el agente se administra por dosificación oral. Tal suministro se puede administrar localmente a cualquier área afectada. Una composición terapéutica se puede administrar en una variedad de formas de dosificación unitarias dependiendo del método de administración. Por ejemplo, las formas de dosificación unitarias adecuadas para la administración oral de un animal incluyen polvo, tabletas, pildoras y cápsulas. Los métodos de suministro preferidos para una composición terapéutica de la presente invención incluyen la administración intravenosa y administración local, por ejemplo, por inyección o administración tópica. Un reactivo terapéutico de la presente invención se puede administrar a cualquier animal, preferiblemente a mamíferos, y más preferiblemente a humanos. Para modos particulares de suministro, una composición terapéutica de la presente invención se puede formular para incluir otros componentes tal como un excipiente farmacéuticamente aceptable, un adyuvante, y/o portador. Por ejemplo, las composiciones de la presente invención se pueden formular en un excipiente que el animal a ser tratado puede tolerar. Los ejemplos de tales excipientes, incluyen pero no se limitan a celulosa, dióxido de silicio, dextratos, sucrosa, glicolato de almidón de sodio, fosfato de calcio, sulfato de calcio, agua, solución salina, solución de Ringer, solución de dextrosa, manitol, solución de Hank, y otras soluciones salinas fisiológicamente equilibradas, acuosas. Los vehículos no acuosos, tales como aceites fijos, aceite de sésamo, oleato de etilo, o triglicéridos también se pueden usar. Otras formulaciones útiles incluyen suspensiones que contienen agentes mejoradores de viscosidad, tales como carboximetilcelulosa de sodio, sorbitol, o dextrano. Los excipientes también pueden contener cantidades menores de aditivos, tales como sustancias que mejoran la isotonicidad y estabilidad química. Los ejemplos de amortiguadores incluyen amortiguador de fosfato, amortiguador de bicarbonato, amortiguador Tris, histidina, citrato, y glicina, o mezclas de los mismos, mientras los ejemplos de conservadores incluyen timerosal, m- o o-cresol, formalina y alcohol bencílico. Las formulaciones estándar ya sea pueden ser inyectables líquidos o sólidos, los cuales pueden ser tomados en un líquido adecuado como una suspensión o solución para inyección. Por consiguiente, en una formulación no líquida, el excipiente puede comprender dextrosa, albúmina de suero humana, conservadores, etc., al cual agua estéril o solución salina se puede adicionar previo a la administración . En una modalidad de la presente invención, la composición también puede incluir un adyuvante o un portador. Los adyuvantes son típicamente sustancias que generalmente mejoran la función de la fórmula en la prevención y tratamiento de indicaciones relacionadas con las trayectorias de COX y LOX. Los adyuvantes adecuados incluyen, pero no se limitan a, adyuvante de Freund; otros componentes de pared celular bacteriana; sales a base de aluminio; sales a base de calcio; sílice; boro, histidina, sulfatos de glucosamina, sulfato de Condroitina, gluconato de cobre, polinucleótidos; vitamina D, vitamina K, toxoides; cartílago de tiburón y bovino; proteínas de suero; proteínas de revestimiento viral; otras preparaciones derivadas de bacterias; gamma interferón; adyuvantes de copolímero de bloque, tal como adyuvante de Titermax de Hunter (Vaxcel. TM., Inc. Norcross, Ga . ) ; adyuvantes Ribi (disponibles de Ribi ImmunoChem Research, Inc., Hamilton, Mont . ) ; y saponinas y sus derivados, tal como Quil A (disponible de Superfos Biosector A/S, Dinamarca) . Los portadores son típicamente compuestos que incrementan la vida media de una composición terapéutica en el animal tratado. Los portadores adecuados incluyen, pero no se limitan a, formulaciones poliméricas de liberación controlada, implantes biodegradables, liposomas, bacterias, virus, aceites, esteres, y glicoles. Una modalidad de la presente invención es una formulación de liberación controlada que es capaz de liberar lentamente una composición de la presente invención en un animal. Como se usa en la presente, una formulación de liberación controlada comprende una composición de la presente invención en un vehículo de liberación controlada. Los vehículos de liberación controlada adecuados incluyen, pero no se limitan a, polímeros biocompatibles, otras matrices poliméricas, cápsulas, microcápsulas, micropartículas, preparaciones de bolo, bombas osmóticas, dispositivos de difusión, liposomas, lipoesferas, y sistemas de suministro trandérmico. Otras formulaciones de liberación controlada de la presente invención incluyen líquidos que, en la administración a un animal, forman un sólido o un gel in situ. Las formulaciones de liberación controlada preferidas son biodegradables (es decir, biogastable) . Una vez que la composición terapéutica se ha formulado, se puede almacenar en viales estériles como una solución, suspensión, gel, emulsión, sólido, o polvo deshidratado o liofilizado, o directamente se encapsula y/o se forma en tabletas con otros portadores inertes para administración oral. Tales formulaciones se pueden almacenar ya sea en una forma lista para usar o requieren reconstitución inmediatamente previo a la administración. La manera de administrar las formulaciones que contienen las composiciones para suministro sistémico puede ser vía oral, subcutánea, intramuscular, intravenosa, intranasal o vaginal o supositorio rectal. La cantidad de la composición que será efectiva en el tratamiento de un trastorno o condición particular dependerá de la naturaleza del trastorno o condición, lo cual se puede determinar por técnicas clínicas estándar. Además, los ensayos in vi tro o in vivo opcionalmente se pueden emplear para ayudar a identificar los intervalos de dosificación óptimos. La dosis precisa a ser empleada en la formulación también dependerá de la ruta de administración, y la seriedad o avance de la enfermedad o condición, y se deberá decidir de acuerdo con el profesional médico y cada una de las circunstancias del paciente. La dosis efectiva se puede extrapolar de curvas de dosis-respuesta derivadas de sistemas de prueba de modelo animal o in vitro. Por ejemplo, una cantidad efectiva de la composición fácilmente se puede determinar administrando dosis graduadas de la composición y observando el efecto deseado. El método de tratamiento de acuerdo con esta invención comprende administrar internamente o tópicamente a un paciente en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición comprendida de una mezcla de flavonoides Libres de Anillo B y flavanos o una mezcla de al menos un flavonoide Libre de Anillo B, unos flavanos y un agente seleccionado del grupo que consiste de un anticoagulante inyectable, un anticoagulante oral, un agente antiplaquetas, un fármaco anti-anginas, un fármaco anti-inflamatorio no esteroide (NSAID) o un inhibidor selectivo de COX-2. La pureza de la mezcla incluye, pero no se limita a 0.01% a 100%, dependiendo de la metodología usada para obtener los compuestos. En una modalidad preferida, las dosis de la mezcla de flavonoides Libres de Anillo B y flavanos y composiciones farmacéuticas que contienen la misma están en una cantidad no tóxica eficaz generalmente seleccionada del intervalo de 0.01 a 200 mg/kg de peso corporal. Las personas expertas en la técnica que usan prueba clínica de rutina son capaces de determinar las dosis óptimas para la dolencia particular a ser tratada. Un método general para preparar los extractos se describe en el ejemplo 1. El proceso de extracción produce un extracto orgánico y acuoso para cada una de las especies examinadas. Los resultados de la extracción de varias especies se describen en la tabla 2. Para identificar eficientemente los compuestos activos de extractos de plantas, un proceso de fraccionamiento de alto rendimiento se utilizó, como se describe en el ejemplo 2. Brevemente, los extractos acuosos y orgánicos activos se fraccionaron usando dos diferentes metodologías, respectivamente. Las fracciones se colectaron en una placa de 96 cavidades profundas. Cada una de las fracciones luego se probó para su actividad biológica. La separación, purificación e identificación de los flavonoides Libres de Anillo B presentes en el extracto orgánico de Scutellaria orthocalyx se describen en el ejemplo 3. Con referencia a la figura 1, diez compuestos se elucidaron, con Baicalina siendo identificada como el componente activo principal. El ejemplo 4 y tabla 3 describen el contenido y cantidad de los flavonoides Libres de Anillo B en cinco extractos de planta activos de tres diferentes especies de plantas. Los flavonoides Libre de Anillo B están presente en cantidades mucho mayores en los extractos orgánicos contra los extractos acuosos. La separación, purificación e identificación de los componentes activos presentes en el extracto orgánico de Acacia ca techu se describen en el ejemplo 5. Usando la metodología descrita en el ejemplo 5, la catequina y epicatequina se identificaron como los dos compuestos activos principales en el extracto orgánico de las raíces de Aca cia ca techu, que tienen valores IC50 de 5-7 µg/ml. La cuantificación de CLAP de los extractos activos de Aca cia ca techu y Unicaria gambir se describe en el ejemplo 6. Los resultados se describen en la tabla 4 la cual muestra que el contenido de flavano en los extractos orgánicos y acuosos de A . ca techu, como se determina por CLAP, es 30.4% y 1.0%, respectivamente. El ejemplo 7 describe un método general para la preparación de un extracto estandarizado de Aca cia . En este ejemplo, los flavanos de A . ca techu se extrajeron con diferentes sistemas de solvente. Los resultados se describen en la tabla 5. El método mejorado de esta invención comprende: extracción de la biomasa molida de una planta que contiene flavanos con un solvente orgánico o una combinación de solventes orgánicos y/o agua; neutralización y concentración del extracto neutralizado; y purificación del extracto por recristalización y/o cromatografía. Se puede ver de la tabla 5, que 80% de metanol en agua es uno de los solventes preferidos para la extracción de flavanos de plantas Aca cia . Como se proporcionó anteriormente, estos flavanos se pueden aislar del género de plantas Aca cia y Unicaria . El método de esta invención se puede extender al aislamiento de estos compuestos de cualquier fuente de planta que contiene estos compuestos. El ejemplo 8 describe un método general para la preparación de un extracto estandarizado de varias especies Scutellaria . En el ejemplo 8, los flavonoides Libres de Anillo B de dos especies Scutellaria se extrajeron con diferentes sistemas de solvente. Los resultados se describen en las tablas 6 y 7. El método de esta invención comprende: extracción de la biomasa molida de una planta que contiene flavonoides Libres de Anillo B con únicos o combinación de solventes orgánicos y/o agua; neutralización y concentración del extracto neutralizado; y purificación del extracto por recristalización y/o cromatografía. Como se proporcionó anteriormente, estos flavonoides Libres de Anillo B se pueden aislar de los géneros de más de veinte familias de plantas. El método de esta invención se puede extender al aislamiento de estos compuestos de cualquier fuente de planta que contiene estos compuestos. El ejemplo 9 describe un método general para la preparación de la composición UP736, la cual está comprendida de un mezclado de propiedad de dos extractos estandarizados, que contienen flavonoides Libres de Anillo B y flavanos, respectivamente. En el método general descrito en el ejemplo 9 la composición se prepara usando dos extractos estandarizados aislados de Acacia y Scutellaria , respectivamente, conjuntamente con o sin excipientes. El extracto de Acacia usado en el ejemplo 9 contuvo >60% de flavanos totales, como catequina y epicatequina, y el extracto de Scutellaria contuvo >70% de flavonoides Libres de Anillo B, el cual fue principalmente baicalina. El extracto de Scutellaria contuvo otras cantidades menores de flavonoides Libres de Anillo B como se describe en la tabla 8. Uno o más excipientes son opcionalmente adicionados a la composición de materia. La cantidad de excipiente adicionado se puede ajustar basado en el contenido activo actual de cada ingrediente deseado. Una tabla de mezclado para cada lote individual de producto se debe generar basado en la especificación de producto y resultados QC para lote individual de ingredientes. Las cantidades adicionales de ingredientes activos en el intervalo de 2-5% se recomienda que cumplan la especificación de producto. El ejemplo 9 ilustra una tabla de mezclado que se generó para un lote de UP736 (Lote #G1702). Diferentes relaciones de mezclado del producto UP736 formulado también se prepararon probadas para su actividad biológica. El ejemplo 10 demuestra el efecto sinergístico que una composición comprendida de una mezcla de UP736 y aspirina tiene en la inhibición de agregación de plaquetas inducida por ácido araquidónico. Los resultados se describen en las tablas 9 y 10, las cuales demuestran que mientras la UP736 sola tuvo poca actividad anti-agregatoria a concentraciones de hasta 10 µM, lo anti-agregatorio de la aspirina fue significativamente incrementada a dosificaciones tan bajas como 0.007 µM de UP736. Disminuyendo la dosis de aspirina se podrá, teóricamente, disminuir el riesgo de complicaciones de sangrado. Sin embargo, la aspirina en dosis muy bajas no es eficaz en el tratamiento o prevención de ciertas enfermedades y condiciones. Por ejemplo, un tratamiento a largo plazo de infarto al miocardio agudo, el efecto de las dosis menores de 75 mg diario no es claro (Hennekens (2002) Am. J. Manag. Care 8(22 Suppl) : S691-700 ) . Además, la resistencia a aspirina ocurre en individuos quiénes no responden a bajas dosis de aspirina (Patrono (2005) Thromb. Haemost. 8:1597-602). La invención actual resuelve el problema usando UP736 para potenciar la actividad de agregación anti-plaquetas dramáticamente conferida por bajas dosis de aspirina. El ejemplo 11 ilustra que la UP736 sola y en combinación con aspirina tiene poco efecto en el tiempo de sangrado. Los resultados se describen en las tablas 11-14. Nótese que en toda esta solicitud se proporcionan varias citas. Cada cita es específicamente incorporada en la presente en su totalidad para referencia. Los siguientes ejemplos se proporcionan para propósitos ilustrativos solamente y no se proponen para limitar el alcance de la invención.

Ejemplo 1. Preparación de Extractos Orgánicos y Acuosos de Plantas Acacia , Uni caria y Scutellaria El material de planta de corteza de Aca cia ca techu (L) Willd. , partes etéreas de Unicaria hirsute, partes etéreas de Unicaria sinensis, cortezas de Unicaria tomentosa , raíces de Scutellaria orthocalyx, raíces de Scutellaria baicalensis o planta completa Scutellaria la teriflora se molió a un tamaño de partícula no mayor que 2 mm. El material de planta molido seco (60 g) luego se transfirió a un matraz Eerlenmeyer y se adicionó metanol : diclorometano (1:1) (600 ml) . La mezcla se sacudió por una hora, se filtró y la biomasa se extrajo de nuevo con metanol : diclorometano (1:1) (600 ml). Los extractos orgánicos se combinaron y se evaporaron bajo vacío para proporcionar el extracto orgánico (véase tabla 2 posterior) . Después de la extracción orgánica, la biomasa se secó con aire y se extrajo una vez con agua ultra pura (600 ml) . La solución acuosa se filtró y se secó por congelación para proporcionar el extracto acuoso (véase tabla 2 posterior) .

Tabla 2. Rendimiento de Extractos Orgánicos y Acuosos de Especies Acacia, Uncaria y Scutellaria Ejemplo 2. Fraccionamiento de PAR de Extractos Activos El extracto orgánico (400 mg) de planta activa se cargó sobre una columna instantánea preempacada (DI de 2 cm x 8.2 cm, 10 g de gel de sílice) . La columna se eluyó usando un sistema de purificación de alto rendimiento (PAR) Hitachi con una fase móvil de gradiente de (A) 50:50 EtOAc: hexano y (B) metanol de 100% A a 100% B en 30 minutos a una velocidad de flujo de 5 ml/min. La separación se monitoreó usando un detector UV de longitud de onda de banda ancha y las fracciones se colectaron en una placa de 96 cavidades profundas a 1.9 ml/cavidad usando un colector de fracción Gilson. La placa de muestra se secó bajo centrifugación y bajo vacío. Se utilizó DMSO (1.5 ml) para disolver las muestras en cada celda y una porción (100 µl) se tomó para el ensayo de inhibición BIOLÓGICA. El extracto acuoso (750 mg) de la planta activa se disolvió en agua (5 ml) , se filtró a través de un filtro de jeringa de 1 µm y se transfirió a un vial de Cromatografía Líquida de Alta Presión (CLAP) de 4 ml . La solución luego se inyectó por un automuestrador en una columna de fase inversa empacada (C-18, tamaño de partícula de 15 µm, DI de 2.5 cm x 10 cm con inserto de precolumna) . La columna se eluyó usando un sistema de purificación de alto rendimiento (PAR) Hitachi con una fase móvil de gradiente de (A) agua y (B) metanol de 100% A a 100% B en 20 minutos, seguido por 100% metanol por 5 minutos a una velocidad de flujo de 10 ml/min. La separación se monitoreó usando un detector UV de longitud de onda de banda ancha y las fracciones se colectaron en una placa de 96 cavidades profundas a 1.9 ml/cavidad usando un colector de fracción Gilson. La placa de muestra se secó por congelación. Se utilizó agua ultra pura (1.5 ml) para disolver las muestras en cada celda y una porción (100 µl) se tomó para el ensayo de inhibición biológica.

Ejemplo 3. Aislamiento y Purificación de los Flavonoides Libres de Anillo B Activos del Extracto Orgánico de Scutellaria El extracto orgánico (5 g) de las raíces de Scutellaria orthocalyx, aislado como se describió en el ejemplo 1, se cargó en la columna instantánea preempacada (120 g de sílice, 40 µm tamaño de partícula 32-60 µm, 25 cm x 4 cm) y se eluyó con una fase móvil de gradiente de (A) 50:50 EtOAc: hexano y (B) metanol desde 100% A a 100% B en 60 minutos a una velocidad de flujo de 15 ml/min. Las fracciones se colectaron en tubos de ensayo a 10 ml/fracción. El solvente se evaporó bajo vacío y la muestra en cada fracción se disolvió en 1 ml de DMSO y una alícuota de 20 µl se transfirió a una placa de plato poco profundo de 96 cavidades y se probó para actividad biológica (datos no mostrados). Basado en los resultados de ensayo biológico, las fracciones activas #31 a #39 se combinaron y evaporaron. Los análisis por CLAP/AFD y CL/EM mostraron un compuesto principal con unos tiempos de retención de 8.9 minutos y un pico de EM a 272 m/e. El producto se purificó adicionalmente en una columna de semi-preparación C18 (25 cm x 1 cm) , con una fase móvil de gradiente de (A) agua y (B) metanol, durante un período de 45 minutos a una velocidad de flujo de 5 ml/minuto. Se colectaron ochenta y ocho fracciones para producir 5.6 mg de sólido amarillo claro. La pureza se determinó por CLAP/AFD y CL/EM, y comparación con estándares y datos de RMN. XH RMN: d ppm. (DMSO-d6) 8.088 (2H, m, H-3', 5'), 7.577 (3H, m, H-2 ' , 4 ' , 6 * ) , 6.932 (ÍH, s, H-8), 6.613 (ÍH, s, H-3) . EM: [M+l]+ = 271 m/e. El compuesto se identificó como baicaleína. Usando cromatografía de columna C-18 preparativa, otros flavonoides Libres de Anillo B se aislaron e identificaron usando un extracto estandarizado aislado de las raíces de Scutellaria bai calensis (lote #RM052302-01 ) , que tiene un contenido de flavonoide Libre de Anillo B de 82.2%. Once estructuras se elucidaron usando CLAP/AFD/EM como se ilustra en la figura 1. Con referencia a la figura 1, los once compuestos identificados fueron baicalina, wogonin-7-glucuronido, oroxilina A 7-glucuronido, baicaleína, wogonina, crisin-7-glucuronido, 5-metil-wogonin-7-glucuronido, escutelarina, norwogonina, crisina y oroxilina A.

Ejemplo 4. Cuantificación de CLAP de Flavonoides Libres de Anillo B en Extractos Activos Aislados de Scutellaria orh tocalyx (raíces), Scutellaria baicalensis (raíces) y Oroxyl um indicum (semillas). La presencia y cantidad de flavonoides Libres de Anillo B en los cinco extractos activos aislados de las tres diferentes especies de plantas se han confirmado y se describen en la tabla 3. Los flavonoides Libres de Anillo B se analizaron cuantitativamente por CLAP usando una columna Luna C-18 (250 x 4.5 mm, 5 µm) usando un gradiente de ácido fosfórico al 1% y acetonitrilo de 80% a 20% en 22 minutos.

Los flavonoides Libres de Anillo B se detectaron usando un detector UV a 254 nm y se identificaron basado en el tiempo de retención por comparación con estándares de flavonoide Libre de Anillo B.

Tabla 3. Contenido de Flavonoide Libre de Anillo B en Extractos de Plantas Activos Ejemplo 5. Aislamiento y Purificación de Compuestos Activos del Extracto Orgánico de Acacia ca techu El extracto orgánico (5 g) de las raíces de A . ca techu, aislado como se describió en el ejemplo 1, se cargó en la columna instantánea preempacada (120 g de sílice, 40 µm tamaño de partícula 32-60 µm, 25 cm x 4 cm) y se eluyó con una fase móvil de gradiente de (A) 50:50 EtOAc: hexano y (B) metanol desde 100% A a 100% B en 60 minutos a una velocidad de flujo de 15 ml/min. Las fracciones se colectaron en tubos de ensayo a 10 ml/fracción. El solvente se evaporó bajo vacío y la muestra en cada fracción se disolvió en DMSO (1 ml) y una alícuota de 20 µl se transfirió a una placa de plato poco profundo de 96 cavidades y se probó para actividad biológica (datos no mostrados) . Basado en los resultados de ensayo biológico, las fracciones activas #32 a #41 se combinaron y evaporaron para producir 2.6 g de sólido. Los análisis por CLAP/AFD y CL/EM mostraron dos compuestos principales con tiempos de retención de 15.8 minutos y 16.1 minutos, respectivamente. El producto se purificó adicionalmente en una columna de semi-preparación C18 (25 cm x 1 cm) , se cargó con 212.4 mg de producto y se eluyó con una fase móvil de gradiente de (A) agua y (B) acetonitrilo (ACN) , durante un período de 60 minutos a una velocidad de flujo de 5 ml/minuto. Se colectaron ochenta y ocho fracciones y compuestos activos se aislaron. El compuesto 1 (11.5 mg) y compuesto 2 (16.6 mg) . La pureza se determinó por CLAP/AFD y datos CL/EM por comparación con estándares (catequina y epicatequina) y datos de RMN.

Compuesto 1. 13C RMN: d ppm (DMSO-d6) 27.84 (C4), 66.27 (C3), 80.96 (C2), 93.78 (C9) , 95.05 (C7), 99.00 (C5) , 114.48 (C12), 115.01 (C15), 118.36 (C16) , 130.55 (Cll), 144.79 (C14), 155.31 (C6) , 156.12 (CIO), 156.41 (C8). :H RMN: d ppm. (DMSO- d6) 9.150 (ÍH, s, OH), 8.911 (ÍH, s, OH), 8.835 (ÍH, s, OH), 8.788 (ÍH, s, OH), 6.706 (ÍH, d, J = 2 Hz, H2 ' ) , 6.670 (ÍH, d, J = 8.0 Hz, H-6'), 6.578 (ÍH, dd, J = 2, 8 Hz, H-5'), 5.873 (ÍH, d, J = 2 Hz, H8), 5.670 (ÍH, d, J = 2 Hz, H6), 4.839 (ÍH, d, J = 4 Hz, OH), 4.461 (ÍH, d, J = 7.3 Hz, H2), 3.798 (ÍH, m, H3), 2.625 (ÍH, m, H4b) , 2.490 (ÍH, m, H4a) . EM: [M+l]+ = 291 m/e. Este compuesto se identificó como catequina. Compuesto 2. 13C RMN: d ppm (DMSO-d6) 28.17 (C4), 64.87 (C3), 78.02 (C2), 94.03 (C9), 95.02 (C7), 98.44 (C5), 114.70 (C12), 114.85 (C15), 117.90 (C16) , 130.56 (Cll), 144.39 (C14), 155.72 (C6), 156.19 (CÍO), 156.48 (C8). XH RMN: d ppm. (DMSO-d6) 9.083 (ÍH, s, OH), 8.873 (ÍH, s, OH), 8.777 (ÍH, s, OH), 8.694 (ÍH, s, OH), 6.876 (ÍH, d, J = 2 Hz, H2 ' ) , 6.646 (2H, s, H-5', 6'), 5.876 (ÍH, d, J = 2 Hz, H8), 5.700 (ÍH, d, J = 2 Hz, H6) , 4.718 (ÍH, s, OH), 4.640 (ÍH, d, J = 4.5 Hz, H2), 3.987 (ÍH, d, J = 4.5 Hz, H3) , 2.663 (ÍH, dd, J = 4.6, 6.3 Hz, H4b) , 2.463 (ÍH, dd, J = 4.6, 6.3 Hz, H4a) . EM: [M+l]"1 = 291 m/e. Este compuesto se identificó como epicatequina .

Ejemplo 6. Cuantificación de CLAP de Extractos Activos de Aca cia ca techu y Uni caria gambir El contenido de flavano en los extractos orgánicos y acuosos aislados de corazón de madera de Acacia ca techu se cuantificó por CLAP usando un detector de Arreglo de FotoDiodos (CLAP/AFD) y una columna Luna C18 (250 mm x 4.6 mm) . Los flavanos se eluyeron de la columna usando un gradiente de acetonitrilo de 10% a 30% ACN durante un período de 20 minutos, seguido por 60% ACN por cinco minutos. Los resultados se describen en la tabla 4. Un perfil de la purificación de CLAP se muestra en la figura 2. Los flavanos se cuantificaron basado en los datos de tiempo de retención y AFD usando catequina y epicatequina como estándares. Los tiempos de retención para los dos flavanos principales fueron 12.73 minutos y 15.76 minutos, respectivamente.

Tabla 4. Contenido de flavano en Extractos de Planta Activos El contenido de flavano en un extracto estandarizado (Lote #UG0407-050420) aislado de plantas completas de Unicaria gambir se cuantificaron por C1AP usando un detector de Arreglo de FotoDiodos (CLAP/AFD) y una columna Luna C18 (250 mm x 4.6 mm) . Los flavanos se eluyeron de la columna usando un gradiente de acetonitrilo de 10% a 30% ACN durante un período de 20 minutos, seguido por 60% ACN por cinco minutos. Los flavanos se cuantificaron basado en los datos de tiempo de retención y AFD usando catequina como estándares como 28.6% catequina y 3.9% epicatequina .

Ejemplo 7. Preparación de un Extracto Estandarizado de Acacia ca techu La Aca cia ca techu (500 mg de corteza molida) se extrajo con los siguientes sistemas de solvente. (1) 100% agua, (2) 80:20 agua ¡metanol, (3) 60:40 agua ¡metanol, (4) 40:60 agua :metanol, (5) 20:80 agua :metanol, (6) 100% metanol, (7) 80:20 metanol: THF, (8) 60:40 metanol:THF. Los extractos se concentraron y secaron en bajo vacío. La identificación de los componentes químicos en cada extracto se logró por CLAP usando un detector de Arreglo de FotoDiodos (CLAP/AFD) y una columna C18 de 250 mm x 4.6 mm. Los componentes químicos se cuantificaron basado en los datos de tiempo de retención y AFD usando catequina y epicatequina como estándares. Los resultados se describen en la tabla 5. Como se muestra en la tabla 5, el extracto de flavano generado de la extracción de solvente con 80% metanol/agua proporcionó la mejor concentración de componentes flavano.

Tabla 5. Solventes para Generar Extractos de Flavano Estandarizados de Acacia catechu Ejemplo 8. Preparación de Extractos de Flavonoide Libres de Anillo B E standarizados de varias especies Scutellaria La Scutellaria orthocalyx (500 mg de raíz molida) se extrajo dos veces con 25 ml de los siguientes sistemas de solvente. (1) 100% agua, (2) 80:20 agua :metanol, (3) 60:40 agua:metanol, (4) 40:60 agua :metanol, (5) 20:80 agua :metanol, (6) 100% metanol, (7) 80:20 metanol: THF, (8) 60:40 metanol: THF. Los extractos se combinaron, concentraron y secaron en bajo vacío. La identificación de los componentes químicos en cada extracto se realizó por CLAP usando un detector de Arreglo de FotoDiodos (CLAP/AFD) y una columna C18 de 250 mm x 4.6 mm. Los componentes químicos se cuantificaron basado en los datos de tiempo de retención y AFD usando baicaleína, baicalina, escutelareína, wogonina como estándares. Los resultados se describen en la tabla 6.

Tabla 6. Cuantificación de Flavonoides Libres de Anillo B Extraidos de Scutellaria orthocalyx La Scutellaria baicalensis (1000 mg de raíz molida) se extrajo dos veces usando 50 ml de una mezcla de metanol y agua como sigue: (1) 100% agua, (2) 70:30 agua ¡metanol, (3) 50:50 agua ¡metanol, (4) 30¡70 agua ¡metanol, (5) 100% metanol. Los extractos se combinaron, concentraron y secaron en bajo vacío. La identificación de los componentes químicos se realizó por CLAP usando un detector de Arreglo de FotoDiodos (CLAP/AFD) y una columna C18 de 250 mm x 4.6 mm. Los componentes químicos en cada extracto se cuantificaron basado en los datos de tiempo de retención y AFD usando estándares de baicaleína, baicalina, escutelareína, wogonina. Los resultados se describen en la tabla 7.

Tabla 7. Cuantificación de Flavonoides Libres de Anillo B Extraidos de Scutellaria baicalensis Ejemplo 9. Preparación de una Formulación con un Extracto de Flavonoide Libre de Anillo B Estandarizado de las Raíces de Scutellaria baicalensis y un Extracto de Flavano Estandarizado de la Corteza de Acacia ca techu Una nueva composición de materia, referida en la presente como UP736 se formuló usando dos extractos estandarizados de Aca cia y Scutellaria , respectivamente, conjuntamente con uno o más excipientes. Un ejemplo general para preparar tal composición se describe posteriormente. El extracto de Aca cia usado en este ejemplo contuvo >60% de flavanos totales, como catequina y epicatequina, y el extracto de Scutellaria contuvo >70% de flavonoides Libres de Anillo B, el cual fue principalmente baicalina. El extracto de Scutellarias contuvo otras cantidades menores de flavonoides Libres de Anillo B como se describe en la tabla 8. Uno o más excipientes se adicionaron a la composición de materia. La relación de flavano y flavonoides Libres de Anillo B se puede ajustar basado en las indicaciones y los requerimientos específicos con respecto a la actividad biológica del producto. La cantidad de los excipientes se puede ajustar basado en el contenido activo actual de cada ingrediente. Una tabla de mezclado para cada lote individual de producto se debe generar basado en la especificación de producto y resultados QC para lote individual de ingredientes. Las cantidades adicionales de ingredientes activos en el intervalo de 2-5% se recomiendan para cumplir la especificación de producto. La tabla 8 ilustra una tabla de mezclado que se generó para un lote de UP736 (Lote #G1702) . El extracto de raíz de Scutellaria bai calensis (38.5 kg) (lote #RM052302-01) que tiene un contenido de flavonoide Libre de Anillo B de 82.2% (baicalina); extracto de corteza de Aca cia ca techu (6.9 kg) (lote #RM052902-01) con contenido de flavano total de 80.4%; y excipiente (5.0 kg de Candex) se combinaron para proporcionar una formulación UP736 (50.4 kg) que tiene una relación de mezclado de 85:15. La tabla 8 proporciona la cuantificación de los flavonoides Libres de Anillo B y flavanos de este lote específico de UP736 (Lote #G1702), determinada usando los métodos proporcionados en los ejemplos 4 y 6. Con referencia a la tabla 8, este lote específico de UP736 contiene 86% de ingredientes activos totales, incluyendo 75.7% de flavonoides Libres de Anillo B y 10.3% de flavanos. Dos diferentes niveles de dosificación de producto final en forma de cápsula se produjeron de este lote de UP736 (50.0 kg) : 125 mg por dosis (60 cápsulas) y 250 mg por dosis (60 cápsulas) . Usando el mismo procedimiento, otros dos lotes de UP736 se prepararon usando una combinación de un extracto de flavonoide Libre de Anillo B estandarizado de raíces de Scutellaria bai calensis y un extracto de flavano estandarizado de corteza de Acacia cetechu que tiene una relación de mezclado de 50:50 y 20:80, respectivamente .

Tabla 8. Contenido de Flavonoide Libre de Anillo B y Flavano de UP736 Ejemplo 10. Demostración del Efecto Sinergístico de una Composición Comprendida de una Mezcla de UP736 y Aspirina en la Inhibición de Agregación de Plaquetas Inducida por Acido Araquidónico El efecto sinergístico de una composición comprendida de una mezcla de UP736 y aspirina en la inhibición de agregación de plaquetas inducida por ácido araquidónico se demostró en un ensayo de agregación de plaquetas usando plasma rico en plaquetas preparado de Conejos New Zealand. Los conejos (2.75 ± 0.25 kg) se trataron con citrato de trisodio (concentración final de 0.13 M) . La UP736, aspirina o combinaciones de los mismos se disolvieron en 0.3% DMSO y se incubaron con el plasma a 37°C por 5 minutos. El efecto agonista o antagonista de los compuestos se cuantificó por densidad óptica de agregación. Los criterios de significación usados para el efecto agonista son aquellos > 50% de agregación de plaquetas con relación a la respuesta de ácido araquidónico. Los criterios de significación usados para antagonista son aquellos > 50% de inhibición de agregación de plaquetas inducida por ácido araquidónico. En este ensayo, varias concentraciones de UP736 (10, 2 y 0.2 µM) y aspirina (30 y 3 µM) se probaron individualmente ya sea como agonista o antagonista de agregación de plaquetas en plasma de conejo rico en plaquetas. La tabla 9 muestra los resultados de la prueba (Prueba #1) .

Tabla 9. Efecto Sinergistico de Mezclas de UP736® y Aspirina en la Inhibición de Agregación de Plaquetas Inducida por AA En otro ensayo (Prueba #2) realizado bajo las mismas condiciones experimentales, las mezclas de UP736 a concentraciones menores (=.2, 0.067, 0.022 y 0.007 µM) y aspirina a una concentración de 3 µM se probaron. Los resultados se describen en la tabla 10. Los resultados del estudio de agregación de plaquetas demuestran que la UP736 sola tiene poca acitividad anti-agregatoria a concentraciones de hasta 10 µM (tablas 9 y 10). Sin embargo, la actividad de agregación anti-plaquetas de aspirina a una dosis muy baja (3 µM) fue significativamente incrementada por UP736 aún a la concentración más baja probada (0.007 µM) .

Tabla 10. Efecto Sinergistico de una Mezcla de UP736® y Aspirina en la Inhibición de Agregación de Plaquetas Inducida por AA Ejemplo 11. Efecto de UP736 y Mezclas de UP736 y Aspirina sobre el Tiempo de Sangrado Aunque la UP736 exhibió un efecto sinergístico con aspirina en la inhibición de agregación de plaquetas (tablas 9 y 10), ni la UP736 sola ni en combinación con aspirina mostró un efecto sustancial en el tiempo de sangrado en ratones. El ensayo de tiempo de sangrado se condujo de acuerdo con el método descrito por Minsker and Kling (1997) Thrombosis Research 10:619-622) y Butler et al . (1982) Thromb Haemostas 4_7_: 46-49. Los artículos de prueba se administraron a cinco ratones macho ICR una hora antes de la sección transversal estandarizada de la punta (1.0 mm) de cada cola. Los ratones contenidos en soportes se suspendieron inmediatamente verticalmente con las puntas de cola sumergidas en un tubo de ensayo que contiene solución salina a 37°C. No existió ajuste de tiempo de corte máximo. Las mediciones iniciaron cuando el sangrado actual se observó y se detuvieron cuando el sangrado cesó por 15 segundos o más tiempo en cualquier tiempo. Los datos se analizaron usando la prueba t de Student. En un ensayo (Prueba #3), la aspirina sola a 3, 10, 65 y 100 mg/kg o UP736 a una dosis de 100 mg/kg, sola o en combinación con aspirina a 3, 10 y 65 mg/kg se administró oralmente a grupos de 5 ratones macho ICR. Los resultados se describen en la tabla 11, la cual muestra los tiempos de sangrado promedio y porcentaje de incrementos de tiempo de sangrado en los grupos de tratamiento sobre el control de vehículo. Con referencia a la tabla 11, los resultados demuestran que el efecto de UP736 en el tiempo de sangrado no es significativo y el efecto de UP736 en combinación con aspirina a concentraciones incrementadas que varían de 3 mg/kg a 65 mg/kg fue limitado, y fue menor que el efecto otorgado por 100 mg/kg de aspirina sola. El ensayo se repitió bajo las mismas condiciones experimentales (Prueba #4). Los resultados se describen en la tabla 12, la cual muestra tiempos de sangrado promedio y porcentajes de incremento de tiempo de sangrado en grupos de tratamiento con relación al control de vehículo (n=5) . Como se puede ver en las tablas 11 y 12, se obtuvieron resultados muy consistentes en los dos experimentos. Los datos de los dos experimentos se combinaron y presentaron en la tabla 13 y figura 3 (n = 9-10) .

Tabla 11. Tiempo de Sangrado Promedio y % de Incremento de Tiempo de Mezclado en la Prueba #3 (n=5) Tabla 12. Tiempo de Sangrado Promedio y % de Incremento de Tiempo de Mezclado en la Prueba #4 (n=5) Tabla 13. Tiempo de Sangrado Promedio y % de Incremento de Tiempo de Mezclado (Prueba #3 y #4) (n=9-10) Para verificar los resultados de tiempo de sangrado, la UP736 o UP736 en combinación con aspirina se probó de nuevo en un estudio independiente (Prueba #5) usando un procedimiento modificado realizado. La UP736 se administró oralmente a una dosis de 100 mg/kg, sola o en combinación con aspirina a 3, 10 y 30 mg/kg a grupos de 5 ratones macho derivados ICR, que pesan 22 ± 2 g, 1 hora antes de la sección transversal de la punta (0.3 mm) de cada cola. Además, la aspirina sola a 3, 10, 30 y 100 mg/kg fue dada de manera similar a los ratones. Los ratones, en soportes, se suspendieron inmediatamente verticalmente con la distancia de 2 cm de cada cola sumergida en un tubo de ensayo que contiene solución salina a 37°C. Un tiempo de corte máximo de 180 segundos se ajustó. Si el sangrado cesó por 15 segundos o más tiempo en cualquier tiempo durante los 180 segundos de período de observación, las mediciones se descontinuaron y cualquier sangrado subsiguiente no se podría considerar. La prolongación del tiempo de sangrado por 50 por ciento o más (50%) con relación a un grupo de control de animales se consideró significativa. Los resultados son consistentes con aquellos obtenidos de los experimentos descritos anteriormente (Prueba #3 y #4). El efecto de UP736 a una dosis de 100 mg/kg en el tiempo de sangrado no fue significativo y el efecto de UP/36 a 100 mg/kg en combinación con aspirina a 30 mg/kg fue menor que el efecto otorgado por la aspirina sola a 100 mg/kg (tabla 14 y figura 4) Tabla 14. Tiempo de Sangrado Promedio y % de Incremento de Tiempo de Mezclado en la Prueba #5 (n=5) Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES
Habiéndose descrito la invención como antecede se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones: 1. Composición de materia, caracterizada porque está comprendida de una mezcla de al menos un flavonoide Libre de Anillo B, al raenos un flavano y al menos un agente seleccionado del grupo que consiste de un anticoagulante inyectable, un anticoagulante oral, un agente antiplaquetas, un fármaco anti-anginas, un fármaco anti-inflamatorio no esteroide (NSAID) o un inhibidor selectivo de ciclooxigenasa-2 (COX-2) . 2. Composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque la relación de flavonoide Libre de Anillo B a flavano en la composición se selecciona del intervalo de aproximadamente 99:1 flavonoide Libre de Anillo B: flavano a aproximadamente 1:99 de flavonoide Libre de Anillo B: flavano.
3. Composición de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque la relación de flavonoide Libre de Anillo B: flavano en la composición de materia es aproximadamente 85:15.
4. Composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el flavonoide Libre de Anillo B se selecciona del grupo de compuestos que tienen la siguiente estructura: en donde : Ri, R2, R3, R4, y R5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de -H, -OH, -SH, OR, -SR, -NH2, -NHR, -NR , -NR3 +XJ un carbono, oxígeno, nitrógeno o azufre, glicósido de un único o una combinación de azúcares múltiples incluyendo, aldopentosas, metil-aldopentosa, aldohexosas, cetohexosa y sus derivados químicos de los mismos; en donde R es un grupo alquilo que tiene entre 1-10 átomos de carbono ; y X se selecciona del grupo de contra aniones farmacéuticamente aceptables incluyendo, hidroxilo, cloruro, yoduro, sulfato, fosfato, acetato, fluoruro y carbonato.
5. Composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el flavano se selecciona del grupo de compuestos que tienen la siguiente estructura: en donde Ri, R2, R3, R4, y R5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de -H, -OH, -SH, - OCH3, -SCH3, -OR, -SR, -NH2, -NRH, -NR2, -NR3 +XJ esteres de los grupos de sustitución, independientemente seleccionados del grupo que consiste de galato, acetato, cinamoilo y esteres de hidroxil-cinamoilo, esteres de trihidroxibenzoilo y esteres de cafeoilo; un carbono, oxígeno, nitrógeno, azufre, glicósido de un único o una combinación de azúcares múltiples incluyendo, aldopentosas, metil aldopentosa, aldohexosas, cetohexosa y sus derivados químicos de los mismos; dímero, trímero y otros flavanos polimerizados; en donde R es un grupo alquilo que tiene entre 1-10 átomos de carbono; y X se selecciona del grupo de contra aniones f rmacéuticamente aceptables incluyendo, pero no limitados a hidroxilo, cloruro, yoduro, sulfato, fosfato, acetato, fluoruro, carbonato.
6. Composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el flavonoide Libre de Anillo B y el flavano se obtienen por síntesis orgánica o se aislan de una planta.
7. Composición de conformidad con la reivindicación 6, caracterizada porque el flavonoide Libre de Anillo B y el flavano se aislan de una parte de la planta seleccionada del grupo que consiste de tallos, cortezas de tallos, troncos, cortezas de troncos, ramas, tubérculos, raíces, cortezas de raíz, brotes jóvenes, semillas, rizomas, flores y otros órganos reproductores, hojas y otras partes etéreas .
8. Composición de conformidad con la reivindicación 6, caracterizada porque el flavonoide Libre de Anillo B se aisla de una familia de plantas seleccionada del grupo que consiste de Annonaceae, Asteraceae, Bignoniaceae , Combretaceae , Composi tae, Euphorbiaceae, Labiatae, Lauranceae, Leguminosae , Moraceae , Pinaceae , Pteridaceae , Sinopteridaceae, Ulmaceae y Zingiberacea .
9 . Composición de conformidad con la reivindicación 6, caracterizada porque el flavonoide Libre de Anillo B se aisla de un género de plantas seleccionado del grupo que consiste de Desmos, Achyrocline, Oroxylum, Buchenavia, Anaphalis, Cotula , Gnaphalium, Helichrysum, Centaurea , Eupatorium, Baccharis, Sapium, Scutellaria, Molsa, Colebrookea, Stachys , Origanum, Ziziphora , Lindera, Actinodaphne , Acacia , Dems , Glycyrrhiza , Millet tia, Ponga ia, Tephrosia, Artocarpus , Ficus, Pi tyrogramma, Notholaena, Pinus, Ulmus y Alpinia .
10. Composición de conformidad con la reivindicación 6, caracterizada porque el flavano se aisla de unas especies de plantas seleccionadas del grupo que consiste de Acacia catechu, Acacia concinna , Acacia farnesiana, Acacia Senegal , Acacia speciosa, Acacia arábica, Acacia caesia , Acacia penna ta , Acacia sinuate, Acacia mearnsii , Acacia picnantha , Acacia dealbata, Acacia auriculiformis, Acacia holoserecia y Acacia mangium; Uncaria gambir, Uncaria lanosa , Uncaria hirsute , Uncaria africana, Uncaria elliptica , Uncaria orientalis, Uncaria at tenua te, Uncaria acida , Uncaria homomalla, Uncaria sessilifructus , Uncaria sterrophylla , Uncaria bernaysii , Uncaria sinensis, Uncaria callophylla , Uncaria rhychophylla, Uncaria tomentosa, Uncaria longi flora, Uncaria hirsute , Uncaria corda ta, y Uncaria borneensis .
11. Composición de conformidad con la reivindicación 6, caracterizada porque el flavonoide Libre de Anillo B se aisla de una planta o plantas en el género de plantas Scutellaria y el flavano se aisla de una planta o plantas en el género de plantas Acacia y Uncaria .
12. Composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el anticoagulante inyectable se selecciona del grupo que consiste de heparina, dalteparina, enoxaparina y tinzaparina.
13. Composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el anticoagulante oral se selecciona del grupo que consiste de warfarina, antagonistas de vitamina K e inhibidores de vitamina K reductasa.
14. Composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el agente antiplaquetas se selecciona del grupo que consiste de aspirina, clodipogrel y dipiridamol.
15. Composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el fármaco antianginas se selecciona del grupo que consiste de nitratos, beta-bloqueadores, bloqueadores de calcio, inhibidores de enzima que convierte la angiotensina, y activadores de canal de potasio.
16. Composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el NSAID se selecciona del grupo que consiste de acetaminofeno, ibuprofeno, naproxeno, diclofenaco, salicilatos e indometacina .
17. Composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el inhibidor selectivo de COX-2 se selecciona del grupo que consiste de rofecoxib, celecoxib, etodolaco y meloxicam.
18. Uso de una composición que comprende una mezcla de flavonoides Libres de Anillo B y flavanos conjuntamente con un portador f rmacéuticamente aceptable, para elaborar un medicamento para prevenir y tratar enfermedades y condiciones relacionadas con la agregación de plaquetas y trombosis inducida por plaquetas, en un hospedador en necesidad del mismo.
19. Uso de conformidad con la reivindicación 18, en donde la composición se administra en una dosificación seleccionada de 0.01 a 200 mg/kg de peso corporal.
20. Uso de conformidad con la reivindicación 18, en donde las rutas de la administración se seleccionan del grupo que consiste de administración oral, tópica, por supositorio, intravenosa e intradérmica; intragástrica, intramuscular, intraperitoneal e intravenosa.
21. Uso de conformidad con la reivindicación 18, en donde las enfermedades y condiciones relacionadas con la agregación de plaquetas y trombosis inducida por plaquetas se seleccionan del grupo que consiste de trombosis de vena profunda, embolismo pulmonar, ateroesclerosis, infarto al miocardio, trombosis en vasos cerebrales y/o embolismo de vasos cerebrales que conducen a eventos cerebrovasculares, trombosis o circulación periférica y/o microcirculación resultante de isquemia e infarto, fibrilación atrial que está asociada con la estasis de sangre y formación de trombosis en el atrio izquierdo, sitios trombogénicos incluyendo implantaciones artificiales tales corao válvulas mecánicas de corazón, desfibriladores, implantaciones quirúrgicas para suministro de fármaco, y caderas, articulaciones y otros órganos exógenos artificiales.
22. Método para usar una composición de materia comprendida de una mezcla de al menos un flavonoide Libre de Anillo B y al menos un flavano como un adyuvante y/o un agente sinergístico y/o de potenciación para el suministro de un agente seleccionado del grupo que consiste de un anticoagulante inyectable, un anticoagulante oral, un agente antiplaquetas, un fármaco anti-anginas, un fármaco antiinflamatorio no esteroide (NSAID) o un inhibidor selectivo de ciclooxigenasa-2 (COX-2) , caracterizado porque comprende la administración del agente a un hospedador en necesidad del mismo en combinación con la mezcla de flavonoide Libre de Anillo B y flavano.
23. Método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el anticoagulante inyectable se selecciona del grupo que consiste de heparina, dalteparina, enoxaparina y tinzaparina.
24. Método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el anticoagulante oral se selecciona del grupo que consiste de warfarina, antagonistas de vitamina K e inhibidores de vitamina K reductasa.
25. Método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el agente antiplaquetas se selecciona del grupo que consiste de aspirina, clodipogrel y dipiridamol .
26. Método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el fármaco anti-anginas se selecciona del grupo que consiste de nitratos, betabloqueadores, bloqueadores de calcio, inhibidores de enzima que convierte la angiotensina, y activadores de canal de potasio .
27. Método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el NSAID se selecciona del grupo que consiste de acetaminofeno, ibuprofeno, naproxeno, diclofenaco, salicilatos e indometacina.
28. Método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el inhibidor selectivo de COX-2 se selecciona del grupo que consiste de rofecoxib, celecoxib, etodolaco y meloxicam.
29. Método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque la composición se administra en una dosificación seleccionada de 0.01 a 200 mg/kg de peso corporal.
30. Método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque las rutas de la administración se seleccionan del grupo que consiste de administración oral, tópica, por supositorio, intravenosa e intradérmica; intragástrica, intramuscular, intraperitoneal e intravenosa.
31. Uso de una composición de materia comprendida de una mezcla de al menos un flavonoide Libre de Anillo B y al menos un flavano en combinación con el agente anti-plaquetas, anti-coagulante, y de profilaxis o NSAID, para elaborar un medicamento para reducir la dosificación estándar de un agente seleccionado del grupo que consiste de un agente anti-plaquetas, anti-coagulante, de profilaxis, un NSAID y un inhibidor selectivo de COX-2.
32. Uso de conformidad con la reivindicación 31, en donde la composición se administra en una dosificación seleccionada de 0.01 a 200 mg/kg de peso corporal.
33. Uso de conformidad con la reivindicación 31, en donde las rutas de la administración se seleccionan del grupo que consiste de administración oral, tópica, por supositorio, intravenosa e intradérmica; intragástrica, intramuscular, intraperitoneal e intravenosa.
34. Uso de una composición de materia comprendida de una mezcla de al menos un flavonoide Libre de Anillo B y al menos un flavano en combinación con el agente anti-plaquetas, anti-coagulante, y de profilaxis, NSAID o inhibidor selectivo de COX- 2, para elaborar un medicamento para disminuir o eliminar los efectos secundarios causados por la administración aguda o crónica de un agente seleccionado del grupo que consiste de un agente anti-plaquetas, anti-coagulante, de profilaxis y un NSAID.
35. Uso de conformidad con la reivindicación 34, en donde la composición se administra en una dosificación seleccionada de 0.01 a 200 mg/kg de peso corporal.
36. Uso de conformidad con la reivindicación 34, en donde las rutas de la administración se seleccionan del grupo que consiste de administración oral, tópica, por supositorio, intravenosa e intradérmica; intragástrica, intramuscular, intraperitoneal e intravenosa.
37. Uso de una composición de materia comprendida de una mezcla de al menos un flavonoide Libre de Anillo B y al menos un flavano en combinación con el agente anti-plaquetas, anti-coagulante, de profilaxis o NSAID, para elaborar un medicamento para contrarrestar o antagonizar los riesgos de la administración aguda o crónica de un agente seleccionado del grupo que consiste de un agente antiplaquetas, anti-coagulante, de profilaxis, un NSAID y un inhibidor selectivo de COX-2.
38. Uso de conformidad con la reivindicación 37, en donde la composición se administra en una dosificación seleccionada de 0.01 a 200 mg/kg de peso corporal.
39. Uso de conformidad con la reivindicación 37, en donde las rutas de la administración se seleccionan del grupo que consiste de administración oral, tópica, por supositorio, intravenosa e intradérmica; intragástrica, intramuscular, intraperitoneal e intravenosa.