MX2007003538A - Derivados de ciclosporina 3-eter y 3-tioeter sustituidos para el tratamiento y prevencion de infeccion de hepatitis c. - Google Patents

Abstract

Esta invencion se refiere a los derivados ciclosporina de la formula general (1):en donde A, B, R1, R2 y X son como se define en la especificacion, y las composiciones farmaceuticas que se preparan a partir de estos, para utilizarlos en el tratamiento del virus de hepatitis C.

Description

DERIVADOS DE CICLOSPORINA 3 -ÉTER Y 3-TIOETER SUSTITUIDOS PARA EL TRATAMIENTO Y PREVENCIÓN DE INFECCIÓN DE HEPATITIS C 1. CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona los derivados de ciclosporina y las composiciones farmacéuticas que se preparan a partir de estos, para uso en el tratamiento o prevención de infección por virus de hepatitis C en un individuo que necesite de este. En algunos aspectos, la presente invención proporciona los métodos de tratamiento de infección por hepatitis C administrando a un individuo que necesite de esto una cantidad de una ciclospórina 3-éter o 3-tioéter de la invención eficaz para tratar o prevenir la infección. 2. ANTECEDENTE En 1989, un virus causante principal de hepatitis no A, no B, post-transfusión se encontró y se denominó virus de hepatitis C (HCV) . Desde entonces se han encontrado algunos tipos de virus hepatitis además del tipo A, B, y C, en donde la hepatitis causada por el HCV se denomina hepatitis C. los individuos infectados con HCV son considerados algún porcentaje de la población mundial, y como característica, un infección con HCV se vuelve crónica.

El HCV es un virus RNA de envoltura, en donde el genoma es un RNA monocatenario hebra positiva y pertenece al género (hepacivirus de flavivirus (del Comité Internacional sobre Taxonomía de virus, Unión Internacional de sociedades microbiológicas) . De los mismos virus de hepatitis, por ejemplo, el virus de hepatitis B (HVC) , que es un virus DNA, se elimina por el sistema inmunitario, y la infección con este virus termina en una infección aguda excepto para recién nacidos y bebes que tengan todavía competencia inmunológica inmadura. Por el contrario, el HCV evita algo el sistema inmunitario del hospedero debido a un mecanismo desconocido. Una vez infectado con este virus, incluso un adulto que tenga un sistema inmunitario maduro con frecuencia desarrolla infección persistente.

Cuando la hepatitis crónica se asocia con la infección persistente con HCV, avanza a cirrosis o cáncer hepático en una tasa elevada. La enucleación del tumor por operación no ayuda mucho, porque el individuo muchas veces desarrolla cáncer hepático recurrente debido a la inflamación secuela en las partes no cancerosas.

Así pues, sería conveniente un método terapéutico eficaz para tratar infección de hepatitis C. Además del tratamiento sintomático para suprimir la inflamación con un agente anti-inflamatorio, el desarrollo de un agente terapéutico que reduzca HCV a un nivel bajo libre de inflamación que erradique HCV ha tenido una enorme demanda. Un agente terapéutico óptimo proporcionaría una respuesta virológica clasificada como una "respuesta virológica sostenida", que se define como niveles no detectables de virus en sangre seis meses o más después de terminar el tratamiento de hepatitis C.

En la actualidad, los tratamientos con interferon, como único agente o en combinación con ribavirina, son el único método eficaz conocido para la erradicación de HCV. Sin embargo, el interferon puede erradicar el virus solamente en alrededor de 33-46% de la población de individuos. Para el resto de los individuos, este no tiene efecto o proporciona solo el efecto temporal. Por tanto,' se espera con gran expectativa un fármaco anti-HCV que se utilice en lugar o al mismo tiempo con interferon.

La ciclosporina A es bien conocida por su actividad inmunosupresiva y un intervalo de usos terapéuticos en los que se incluye la actividad antimicótica, antiparasítica y anti-inflamatoria, así como anti HIV. La ciclosporina A y algunos derivados han sido reportados como una actividad anti-HCV, ver Watashi y col., 2003, Hepa tology 38: 1282-1288, Nakagawa y col., 2004, Biochem . Biophys , Res . Común . 313: 42-7, y Shimotohno y Watashi, 2004, American Transplant Congress, Abstract No. 648 (American Journal of Transplantation, 2004, 4 (s8) : 1-653) .

Sin embargo, un problema con las ciclosporinas conocidas es su nefrotoxicidad. Por ejemplo, la ciclosporina A (ciclosporina) puede provocar nefrotoxicidad y hepatotoxicidad. La nefrotoxicidad, una complicación seria del tratamiento con ciclosporina, se caracteriza por vasoconstricción renal intensa que muchas veces avanza a lesión crónica con daño renal estructural y reversible (Busauschina y col., 2004; Myers y col., 1988) . La nefrotoxicidad asociada con ciclosporina ha sido observada en 25 a 38% de individuos transplantados. La disfunción renal puede ocurrir en cualquier momento y abarca desde un daño reversible temprano a un progreso tardío a insuficiencia renal crónica irreversible. La nefrotoxicidad aguda puede aparecer pronto después de transplante o después de semanas o meses, con oliguria, disminución aguda de la tasa de filtración glomerular y flujo de plasma renal (Kahan, 1989) .

Durante la administración prolongada de ciclosporina, la nefrotoxicidad crónica se caracteriza por un deterioro progresivo y principalmente irreversible de la función renal, y esta soportado por lesiones histológicas que abarcan desde fibrosis estriada a colapso isquémico del penacho, esclerosis glomerular y atrofia tubular.

Los métodos y composiciones eficaces para el tratamiento o prevención de infección de hepatitis C son necesarios para combatir el virus en todo el mundo. 3. COMPENDIO DE LA INVENCIÓN Sorprendentemente se ha encontrado que algunos derivados de ciclosporina 3-sustituidos tienen actividad contra HCV. Asimismo, se ha encontrado que algunos derivados de ciclosporina 3-sustituidos tienen perfiles toxicológicos inesperadamente buenos.

En un aspecto, la presente invención proporciona derivados de ciclosporina que tienen actividad contra HCV. En algunas modalidades, la presente invención proporciona los métodos de tratamiento o prevención de infección por hepatitis C en un individuo que necesite de este administrando al individuo una cantidad eficaz de un derivado de ciclosporina 3-sustituido de la invención. En algunas modalidades, el derivado de ciclosporina sustituido se selecciona del grupo que consiste en un 3-éter ciclosporina, un 3-éter, 4-gama-hidroximetileucina ciclosporina; un 3-tioéter ciclosporina; y un 3-tioéter, 4-gama-hidroximetileucina ciclosporina .

En otro aspecto, la presente' invención proporciona derivados de ciclosporina que tienen actividad contra HCV con un margen de seguridad mejorado (es decir, la diferencia entre el nivel de la dosis de un compuesto necesario para proporcionar control eficaz de HCV y los niveles de dosis que producen toxicidad) .

En otro aspecto, la presente invención proporciona derivados de ciclosporina que tienen mejor nefrotoxicidad y/o hepatotoxicidad en comparación con los compuestos conocidos .

En otro aspecto, la presente invención proporciona un método para el tratamiento para prevención de infección por el virus de hepatitis C en un individuo. En algunos aspectos, el método de la invención consiste en administrar, a un individuo que necesite de este, una cantidad eficaz de un compuesto ciclosporina con un índice terapéutico alto contra el virus de hepatitis C. el índice terapéutico, o la proporción de la concentración citotóxica a la concentración inhibitoria viral, se describe con detalle más adelante.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un método que consiste en administrar una cantidad terapéutica eficaz de un derivado de ciclosporina de la fórmula general (I) : 0) en donde : A es residuo de la fórmula (lía) ó (Ilb) B es etilo, 1-hidroxietilo, isopropilo ó n-propilo; R representa: alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene de 1 a 6 átomos de carbono, como una opción sustituido por uno o mas grupos R 3 que pueden ser iguales o diferentes; alquenilo de cadena lineal o ramificada con desde 2 a 6 átomos de carbono, como una opción, sustituido por uno o más grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, amino, monoalquilamino y dialquilamino; alquinilo de cadena lineal o ramificada con desde 2 hasta 6 átomos de carbono, como una opción, sustituido por uno o más grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, amino, monoalquilamino y dialquilamino; cicloalquilo que tenga desde 3 hasta 6 átomos de carbono, como una opción, sustituido por uno o más grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, amino, monoalquilamino y dialquilamino; alcoxicarbonilo de cadena lineal o ramificada que tenga desde 1 hasta 6 átomos de carbono; 2 R representa isobutilo o 2-hidroxiisobutilo; X representa -S(0)n- u oxígeno; 3 R se selecciona del grupo que consiste en halógeno, hidroxi, carboxilo, alcoxicarbonilo, -NRR y -NR (CH2)mNR4R5; R y R , que pueden ser iguales o diferentes, representan: hidrogeno; alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono, como una opción ? sustituido por uno o más grupos R que pueden ser iguales o diferentes; alquenilo o alquinilo de cadena lineal o ramificada que contiene desde 2 hasta 6 átomos de carbono; cicloalquilo que contenga de 3 a 6 átomos de carbono, opcionalmente sustituido por alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono; fenilo opcionalmente sustituido por desde 1 a 5 grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, alcoxi, alcoxicarbonilo, amino, alquilamino y dialquilamino; un anillo heterocíclico que puede estar saturado o insaturado que contenga 5 a 6 átomos del anillo y desde 1 a 3 heteroátomos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados de nitrógeno, azufre y oxígeno; ó R y R , junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico saturado o insaturado que contiene de 4 a 6 átomos del anillo, cuyo anillo puede opcionalmente contener otro heteroátomo seleccionado del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno y azufre y puede opcionalmente estar sustituido por desde 1 hasta 4 grupos que pueden ser iguales o diferentes seleccionados del grupo que consiste en alquilo, fenilo y bencilo; R representa hidrógeno o alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 1 a 6 átomos de carbono; ? R se selecciona del grupo que consiste en halógeno, hidroxi, carboxilo, alcoxicarbonilo y -NR 8R9; R 8 y R9 que pueden ser iguales o diferentes, cada uno representa hidrógeno o alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 1 a 6 átomos de carbono o alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 1 a 6 átomos de carbono; n es cero, uno o dos; m es un entero desde 2 a 4; halógeno significa flúor, cloro, bromo o yodo; o una sal aceptada para uso farmacéutico de este.

En algunas modalidades, X es 0. En otras modalidades, X es S.

En ciertos casos, los sustituyentes A, B, R 1 y R2 pueden contribuir al esteroisomerismo óptico. Todas estas formas están comprendidas por la presente invención.

Se puede hacer mención, como ejemplo de sales aceptadas para uso f rmacéutico, de las sales con metales alcalinos, por ejemplo, sodio, potasio o litio, o con metales alcalinotérreos, por ejemplo magnesio o calcio, la sal de amonio o las sales de las bases nitrogenadas, por ejemplo etanolamina, dietanolamina, trimetilamina, trietílamina, metilamina, propilamina, disopropilamina, N,N-dimetiletanolamina, bencilamina, dicilohexilamina, N-bencilfenetilamina, N, ' -dibenciletilendiamina, difenilendia ina, benzhidrilamina, quinina, colina, arginina, lisina, leucina o dibencilamina.

Se puede hacer mención, como ejemplos de sales de adición con ácidos aceptados para uso farmacéutico, de las sales formadas con ácidos inorgánicos, por ejemplo, clorhidratos, bro hidratos, sulfatatos, nitratos o fosfatos, o con ácidos orgánicos, por ejemplo succinatos, fumaratos, tartratos, acetatos, propionatos, maleatos, citratos, metansulfonatos, etansulfonatos, p-toluensulfonatos, isoeteionatos o embonatos, o con derivados de sustitución de estos compuestos. Las sales preferidas son succínato, fosfato, citrato, acetato, clorhidratos, metansulfonato y propionato. Algunas de estas sales son novedosas y como tales constituyen otra característica de la presente invención.

Por consiguiente, en algunos aspectos, la presente invención proporciona sales novedosas de los compuestos descritos en la presente. En ciertas modalidades, la presente invención proporciona una sal de un compuesto de acuerdo con la fórmula I, en donde la sal se selecciona del grupo que consiste en clorhidratos, bromhidratos, sulfatos, nitratos, fosfatos, succinatos, fumaratos, tartratos, acetatos, propionatos, maleatos, citratos, metansulfonatos, etansulfonatos, p-toluensulfonatos, isetionatos y embonatos. En algunas modalidades, la sal se selecciona del grupo que consiste en succinato, fosfato, citrato, acetato, clorhidrato, metansulfonato y propionato. 4. DESCRIPCIÓN DE LAS MODALIDADES PREFERIDAS La presente invención proporciona los métodos de tratamiento o prevención de infección de hepatitis C en un individuo que necesite de estos, y las composiciones farmacéuticas y formas de dosificación útiles para estos métodos. Los métodos y las composiciones se describen con detalle en las secciones siguientes. 4.1 Definiciones Cuando se refieren a los compuestos y complejos de la invención, los siguientes términos tienen los siguientes significados a menos que se indique de otro modo.

"Ciclosporina" se refiere a cualquier compuesto ciclosporina conocida para los expertos en la técnica, o un derivado de esta. Ver, por ejemplo, Ruegger y col., 1976, Helv. Chim . Acta . 59: 1075-92; Borel y col., 1977, Immunology 32: 1017-25; el contenido de la cual se incorpora en la presente para referencia en su totalidad. Los compuestos ejemplares de la invención son derivados de ciclosporina. A menos que se indique de otro modo, una ciclosporina descrita en la presente es una ciclosporina A, y un derivado de ciclosporina descrito en la presente es un derivado de ciclosporina A.

"Acilo" se refiere a un radical -C(0)R, donde R es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, cicloheteroalquilo, arilo, arilalquilo, heteroalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo como se define en la presente. Los ejemplos representantes incluyen, pero no se limitan a, formilo, acetilo, ciclohexilcarbonilo, ciclohexilmetil carbonilo, benzoilo, bencilcarbonilo y similares.

"Alquilo" se refiere a grupos hidrocarbilo alifáticos, saturados, monovalentes, particularmente con hasta alrededor de 11 átomos de carbono, más específicamente como un alquilo inferior, desde 1 hasta 8 átomos de carbono y todavía más específicamente, desde 1 hasta 6 átomos de carbono. La cadena hidrocarburo puede ser de cadena lineal o ramificada. Este término se ejemplifica por los grupos como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, ter-butilo, n-hexilo, n-octilo, ter-octilo y similares. El término "alquilo inferior" se refiere a grupos alquilo que tengan 1 a 6 átomos de carbono.

"Alquileno" se refiere a grupos hidrocarbilo alifáticos, saturados, divalentes, particularmente que tengan hasta alrededor de 11 átomos de carbono y más específicamente 1 a 6 átomos de carbono, los cuales pueden ser de cadena lineal o ramificada. Este término se ejemplifica por los grupos como metileno (-CH2-) etileno (-CH2CH2-) , los isómeros propileno (por ejemplo -CHCH2-CH2 y -CH(CH3)CH2-) y similares.

"Alquenilo" se refiere a grupos hidrocarbilo monovalentes, olefínicamente insaturados, de preferencia que tienen hasta aproximadamente 11 átomos de carbono, en particular desde 2 a 8 átomos de carbono, y más preferentemente desde 2 a 6 átomos de carbono, los cuales pueden ser de cadena lineal o ramificados y que tengan por lo menos uno y particularmente desde 1 a 2 sitios de instauración olefínica. Los grupos alquenilo particulares incluyen etenilo -(CH=CH2), N-propenilo (-CH2CH=CH2) , isopropenilo (-C (CH3) =CH2) vinilo y vinilo sustituido, y similares.

"Alquenileno" se refiere a grupos hidrocarbilo divalentes, olefínicamente insaturados, particularmente que tienen hasta alrededor de 11 átomos de carbono y más específicamente 2 a 6 átomos de carbono, los cuales pueden ser de cadena lineal o ramificados y pueden tener por lo menos uno y particularmente desde 1 a 2 sitios de instauración olefínica. Este término se ejemplifica por los grupos como etenileno (-CH=CH-) , los isómeros propenileno (por ejemplo -CH=CHCH2- y -C(CH3)=CH y -CH=C(CH3)-) y similares.

"Alquinilo" se refiere a grupos hidrocarbilo acetilénícamente insaturados, en particular que tienen hasta alrededor de 11 átomos de carbono y más particularmente 2 a 6 átomos de carbono, los cuales pueden ser de cadena lineal o ramificados y con por lo menos y particularmente desde 1 a 2 sitios de instauración alquinilo. Los ejemplos no limitativos particulares de los grupos alquinilo pueden ser acetilénico, etinilo (-C=CH) , propargilo (-CH3C=CH) , y similares.

"Alcoxi" se refiere al grupo -OR donde R es alquilo.

Los grupos alcoxi particulares pueden ser, por ejemplo, metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, ter-butoxi, sec-butoxi, n-pentoxi, n-exoxi, 1, 2-dimetibutoxi y similares.

"Alquilamino" se refiere al grupo alquil-NR'-, en donde R' se selecciona de hidrógeno y alquilo.

"Arilamino" se refiere al -grupo aril-NR'-, en donde R' se selecciona de hidrógeno, arilo y heteroarilo.

"Alcoxicarbonilo" se refiere a un radical -C(O)-alcoxi, donde alcoxi es como se define en la presente.

"Amino" se refiere al radical -NH2.

"Carboxi" se refiere al radical -C(0)OH.

"Dialquilamino" significa un radical -NRR' , donde R y R' independientemente representan un alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, cicloheteroalquilo, cícloheteroalquilo sustituido, heteroarilo, o grupo heteroarilo sustituido como se define en la presente.

"Halógeno" o "halo" se refiere a cloro, bromo, flúor o yodo .

"Hidroxi" se refiere al radical -OH.

"Nitro" se refiere al radical - O2.

"Tioalcoxi" se refiere al grupo -SR, donde R es alquilo.

"Sulfanilo" se refiere al radical HS-. "Sulfanilo sustituido" se refiere a un radical como puede ser RS- en donde R es cualquier sustituyente descrito en la presente. En algunas modalidades, "sulfanilo sustituido" se refiere a un radical -SR, donde R es un grupo alquilo o cicloalquilo como se define en la presente que puede opcionalmente estar sustituido como se define en la presente. Los ejemplos representativos pueden ser, pero no se limitan a, metiltio, etiltio, propiltio, butiltio, y similares.

"Sulfinilo" se refiere al radical -S(0)H. "Sulfinilo sustituido" se refiere a un radical como S(0)-R en donde R es cualquier sustituyente descrito en la presente.

"Sulfonilo" se refiere al radical divalente -S(02)-. "Sulfonilo sustituido" se refiere a un radical como -S(02)-R, en donde R es cualquier sustituyente descrito en la presente. En las modalidades particulares, R, se selecciona de H, alquilo inferior, alquilo, arilo, y heteroarilo.

"Sal aceptada para uso farmacéutico" se refiere a cualquier sal de un compuesto de esta invención que conserve sus propiedades biológicas y que no sea toxica o de otro modo no deseada para el uso farmacéutico. Estas sales pueden ser obtenidas a partir de una variedad de contraiones orgánicos e inorgánicos bien conocidos en la técnica e incluyen [sic] . Tales sales incluyen: (1) sales de adición acida formadas con ácidos orgánicos o inorgánicos como ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico, sulfámico, acético, trifluoroacético, tricloroacético, propiónico, hexanóico, ciclopentilpropiónico, glicólico, glutámico, pirúvico, láctico, malónico, succínico, sórbico, ascórbico, málico, maléico, fumárico, tartárico, cítrico, benzoico, 3- (4-hidroxibenzoil) benzoico, pícrico, cinámico, mandélico, ftálico, láurico, metansulfónico, etansulfónico, 1,2-etandisulfónico, 2-hidroxietansulfónico, bencensulfónico, 4-clorobencensulfónico, 2-naftalensulfónico, 4-toluensulfónico, canfórico, canforsulfónico, 4-metilbiciclo [2.2.2] -oct-2-en-l-carboxílico, glucoheptónico, 3-fenilpropiónico, trimetilacético, ter-butil acético, lauril sulfúrico, glucónico, benzoico, glutámico, hidroxinaftóico, salicílico, esteárico, ciclohexilsulfámico, quínico, mucónico y ácidos similares; o (2) sales formadas cuando un protón ácido presente en el compuesto precursor (a) se sustituye por un ion metálico, por ejemplo un ion de metal alcalino, un ion de metal alcalinotérreo o un ion de aluminio o hidróxidos de metal alcalino o de metal alcalinotérreo como hidróxido de sodio, potasio, calcio, magnesio, aluminio, litio, zinc y bario, amoniaco o (b) coordinados con una base orgánica, como aminas alifáticas, alicíclicas o aromáticas orgánicas, como amoniaco, metilamina, dimetilamina, dietilamina, picolina, etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, etilendiamina, licina, arginina, ornitina, colina, N,N'-dibenciletilendiamina, cloroprocaína, dietanolamina, procaína, N-bencilfenetilamina, N-metilglucamina piperazina, tris (hidroximetil) -aminometano, tetrametilamonio hidróxido y similares.

Las sales además incluyen, por ejemplo solamente, sodio, potasio, calcio, magnesio, amonio, tetraalquilamonio y similares, y cuando el compuesto contiene una funcionalidad básica, las sales de ácidos orgánicos o inorgánicos, no tóxicos, como hidrohaluros, por ejemplo clorhidrato y bromhidrato, sulfato, fosfato, sulfamato, nitrato, acetato, trifluoracetato, tricloacetato, propionato, hexanoato, ciclopentilpropionato, glicolato, glutarato, piruvato, lactato, malonato, succinato, sorbato, ascorbato, malato, maleato, fumarato, tartrato, citrato, benzoato, 3- (4-hidroxibenzoil) benzoato, picrato, cinamato, mandelato, ftalato, taurato, metansulfonato (mesilatos) , etansulfonato, 1, 2-etandisulfonato, 2-hidroxietansulfonato, bencensulfonato (besilato) , 4-clorobencensulfonato (2-naftalensulfonato, 4-toluensulfonato, canforato, canforsulfonato, 4-metilbiciclo [2.2.2] -oct-2-en-l-carboxilato, glucoheptonato, 3-fenilpropionato, trimetilacetato, ter-butilacetato, laurilsulfato, gluconato, benzoato, glutamato, hidroxinaftoato, salicilato, estearato, ciclohexilsulfamato, quinato, muconato y similares.

El término "catión fisiológicamente aceptable" se refiere a un contraión catiónico no tóxico, fisiológicamente aceptable de un grupo ácido funcional. Estos cationes son ejemplificados por los cationes sodio, potasio, calcio, magnesio, amonio y tetralquilamonio y similares .

"Solvato" se refiere a un compuesto de la presente invención o una sal de éste, que además incluye una cantidad estequiométrica o no estequiométrica de disolvente unido por fuerzas intermoleculares no covalentes. Cuando el disolvente es agua, el solvato es un hidrato.

Se entiende que los compuestos que tienen la misma fórmula molecular pero difieren en la naturaleza o secuencia de la unión de sus átomos o en el arreglo de sus átomos en el espacio se denominan "isómeros". Los isómeros que difieren en el ordenamiento de sus átomos en el espacio se denominan "estereoisómeros" .

Los estereoisómeros que no son imágenes especulares entre sí se denominan "diasterómeros" y aquellos que son imágenes especulares que no se pueden súper poner entre sí se denominan "enantiómeros". Cuando un compuesto tiene un centro asimétrico, por ejemplo, cuando este esta unido a cuatro grupos diferentes, es posible un par de enantiómeros. Un enantiómero puede ser caracterizado por la configuración absoluta de su centro asimétrico y se denomina (- ) ó (S) de acuerdo con las reglas de Cahn y Prelog (Cahn y col., 1966, Angew, Chem. 78: 413-447 Angew. Chem . Int . Ed. Engl . 5: 385-414 (errata: Angew. Chem . Int . Ed. Engl . 5: 511); Prelog y Helmchen, 1982, Angew Chem . 94: 614-631 Angew Chem . Internat . Ed. Eng. 21: 567-583; Mata y Lobo, 1993, Tetrahedron : Asymmetry 4: 657-669) o se pueden caracterizar por la forma en la que la molécula gira el plano de la luz polarizada y se denomina dextrorrotatorio o levorrotatorio (es decir, como isómeros (+) ó (-) , respectivamente) . Un compuesto quiral puede existir como enantiómero individual o como una mezcla de estos. Una mezcla que contiene proporciones equivalentes de enantiómeros se conoce como una mezcla "mezcla racémica" .

En algunas modalidades, los compuestos de esta invención pueden poseer uno o más centros asimétricos; estos compuestos pueden, por tanto, ser producidos como el anantiómero (R) ó ( S) individual o como una mezcla de estos. A menos que se indique de otro modo, por ejemplo, por la designación de la estereoquímica de alguna posición de una fórmula, la descripción o nombramiento de un compuesto particular en la especificación y las cláusulas esta destinado a incluir los enantiómeros individuales y las mezclas, racémicas o de otro modo, de estos. Los métodos para la determinación de la estereoquímica y separación de los estereoisómeros son bien conocidos en la técnica. En las modalidades particulares, la presente invención proporciona los estereoisómeros de los compuestos representados en la presente después del tratamiento con base.

En algunas modalidades, los compuestos de la invención son "estereoquímicamente puros". Un compuesto estereoquímicamente puro tiene un nivel de pureza estereoquímica que sería reconocido como "pura" por los expertos en la técnica. Desde luego, este nivel de pureza será menor que 100%. En algunas modalidades, "estereoquímicamente puro" designa un compuesto que esta prácticamente libre de isómeros alternos. En modalidades, particulares, el compuesto es 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5% ó 99.9% libre de otros isómeros.

"Sarcosina" o "Sar" se refiere al aminoácido conocido por los expertos en la técnica con la estructura -N (Me) CH2C (O) -. Los expertos en la técnica pueden reconocer la sarcocina como N-metil glicina.

Cuando se utiliza en la presente, los términos "individuo" y "paciente" se utilizan de manera indistinta en la presente. Los términos "individuo" e "individuos" se refiere a un animal, preferentemente un mamífero, incluido un no primate (por ejemplo una vaca, cerdo, caballo, gato, perro, rata y ratón) y un primate (por ejemplo un mono como puede ser un mono cynomolgous, un chimpancé y un humano), y más preferentemente un humano. En una modalidad, el individuo es refractario o no sensible a los tratamientos actuales para infección de hepatitis C. En otra modalidad, el individuo es un animal de granja (por ejemplo un caballo, vaca, cerdo, etcétera) o una mascota (por ejemplo un perro o un gato) . En una modalidad preferida, el individuo es un humano.

Cuando se utiliza en la presente, los términos "agente terapéutico" y "agentes terapéuticos" se refiere a algún agente o agentes que pueden utilizarse en el tratamiento, manejo o mejoría de un trastorno o uno o más síntomas de estos. En algunas modalidades, el término "agente terapéutico" se refiere a un compuesto de la invención. En algunas otras modalidades, el término "agente terapéutico" se refiere no se refiere [sic] a un compuesto de la invención. Preferentemente, un agente terapéutico es un agente que es conocido por ser útil para, o ha sido o esta actualmente siendo utilizado para el tratamiento, manejo, prevención o mejoría de un trastorno o uno o más síntomas de este. "cantidad terapéutica eficaz" significa una cantidad de un compuesto o complejo o composición que, cuando se administra a un individuo para el tratamiento de una enfermedad, es suficiente para efectuar tal tratamiento para la enfermedad. Una "cantidad terapéutica eficaz" puede variar dependiendo de, entre otras, el compuesto, la enfermedad y su gravedad, la edad, peso, etcétera, del individuo que va a ser tratado.

"Tratamiento" de alguna enfermedad o trastorno se refiere, en una modalidad, a la mejoría de una enfermedad o trastorno que existe en un individuo. En otra modalidad, "tratamiento" se refiere a la mejoría de por lo menos un parámetro físico, el cual puede ser no perceptible por el individuo. En todavía otra modalidad "tratamiento" se refiere a la modulación de la enfermedad o trastorno, física (por ejemplo la estabilización de un sistema perceptible) o fisiológicamente (por ejemplo la estabilización de un parámetro físico) o ambos. En todavía otra modalidad, "tratamiento" se refiere al retrazo del inicio de la enfermedad o trastorno.

Cuando se utiliza en la presente, los términos "agente profiláctico" y "agentes profilácticos" cuando se utiliza se refiere a cualquier agente o agentes que puedan utilizarse en la prevención de un trastorno o uno o más síntomas de estos. En algunas modalidades, el término "agente profiláctico" se refiere a un compuesto de la invención. En algunas otras modalidades, el término "agente profiláctico" no se refiere a un compuesto de la invención. De preferencia, un agente profiláctico es un agente que es conocido por ser útil para, o ha sido o se esta utilizando para la prevención o impedir el inicio, desarrollo, avance y/o gravedad de un trastorno.

Cuando se utiliza en la presente, los términos "prevenir", "prevención", se refiere a la prevención de la recurrencia, inicio o desarrollo de uno o más síntomas de un trastorno en un individuo resultante de la administración de un tratamiento (por ejemplo un agente profiláctico o terapéutico) , o la administración de una combinación de tratamientos (por ejemplo una combinación de agentes profilácticos o terapéuticos) .

Cuando se utiliza en la presente, la frase "cantidad profiláctica eficaz" se refiere a la cantidad de un tratamiento (por ejemplo agente profiláctico) que sea suficiente para dar como resultado la prevención del desarrollo, recurrencia o inicio de uno o más síntomas asociados con un trastorno (o para intensificar o mejorar el efecto o los efectos profilácticos de otro tratamiento (por ejemplo otro agente profiláctico) .

El término "etiqueta" se refiere a una presentación de tema escrito, impreso o gráfico en el envase inmediato de un artículo, por ejemplo el material escrito presentado en un vial que contenga un agente farmacéutico activo.

El término "rotulado" se refiere a todas las etiquetas y otra materia escrita, impresa o gráfica en cualquier artículo o cualquiera de sus envases o envolturas o que acompañe tal artículo, por ejemplo un inserto de envase o video cintas con instrucciones o DVD que acompañen o se asocie con un envase o un agente farmacéutico activo. 4.2 Modalidades de la invención La presente invención se base, en parte, en el descubrimiento que los compuestos de la invención son eficaces para el tratamiento y prevención de infección de hepatitis C en un individuo que necesite de éste. Por consiguiente, la presente invención proporciona los métodos de tratamiento de infección de hepatitis C en un individuo que necesite de estos. La presente invención además proporciona los métodos de prevención de infección de hepatitis C en un individuo que necesite de estos. En general, los métodos de la invención comprenden el paso de administrar al individuo que necesite de estos una cantidad de un compuesto de la invención eficaz para el tratamiento o prevención de la infección de hepatitis C. los métodos de tratamiento están descritos con detalle en las secciones siguientes. El compuesto puede ser cualquier compuesto de la invención como se describe en las secciones siguientes. En algunas modalidades, el compuesto esta en forma de una composición farmacéutica o forma de dosificación, como se describe en las secciones siguientes .

Si bien no se pretende apegarse a alguna teoría específica de operación, se considera que los compuestos de la invención inhiben la replicación multiplicación del virus de hepatitis C (HCV) por un mecanismo distinto de una terapia HCV actual. La terapia actual para HCV, como se menciona antes, es la co-administración de interferon y rivabirina. Se considera que el tratamiento actual opera por la modulación del sistema inmunitario de un individuo para tratar o prevenir la infección por HCV. Se considera que los compuestos de la presente invención funcionan modulando o inhibiendo los procesos celulares cruciales para la replicación o multiplicación del HCV en un hospedero. Estos mecanismos están analizados en los ejemplos más adelante.

Operando por un mecanismo novedoso, los compuestos, composiciones y métodos de la invención ofrecen una terapia novedosa para el tratamiento o prevención de infección por HCV. Como tales, estos son ventajosos para cualquier individuo infectado con, o en riesgo de infección con HCV, y particularmente para individuos que no han respondido al tratamiento actual.

En las modalidades de la invención, el individuo puede ser cualquier individuo infectado con, o en riesgo de infección con HCV. La infección o riesgo de infección se puede determinar de acuerdo con cualquier técnica considerada apropiada por el practicante experto en la técnica. Los individuos particularmente preferidos son humanos infectados con HCV.

El HCV puede ser cualquier HCV conocido para los expertos en la técnica. Hay por lo menos seis genotipos y por lo menos 50 subtipos de HCV actualmente conocidos para los expertos en la técnica. El HCV puede ser de cualquier genotipo o subtipo conocido para los expertos en la materia. En algunas modalidades, el HCV es de un genotipo o subtipo todavía no caracterizado. En algunas modalidades, el individuo se infecta con HCV de un solo genotipo. En ciertas modalidades, el individuo se infecta con HCV de subtipos múltiples o genotipos múltiples.

En algunas modalidades, el HCV es genotipo 1 y puede ser de cualquier subtipo. Por ejemplo, en algunas modalidades, el HCV es subtipo la, Ib ó le. Se considera que la infección por HCV de genotipo 1 responde deficientemente a la terapia actual con interferon. Los métodos de la presente invención pueden ser ventajosos para el tratamiento de infección por HCV con genotipo 1.

En algunas modalidades, el HCV es diferente del genotipo 1. En algunas modalidades, el HCV es genotipo 2 y puede ser de cualquier subtipo. Por ejemplo, en algunas modalidades, el HCV es subtipo 2a, 2b, ó 2c. En algunas modalidades, el HCV es genotipo 3 y puede ser de cualquier tipo. Por ejemplo, en algunas modalidades, el HCV es subtipo 3a, 3b o 10a. En ciertas modalidades, el HCV es genotipo 4 y puede ser de cualquier subtipo. Por ejemplo, en ciertas modalidades, el HCV es subtipo 4a. En ciertas modalidades, el HCV es genotipo 5 y puede ser de cualquier subtipo. Por ejemplo, en ciertas modalidades, el HCV es subtipo 5a. En ciertas modalidades, el HCV es genotipo 6 y puede ser de cualquier subtipo. Por ejemplo, en ciertas modalidades, el HCV es subtipo 6a. 6b, 7b, 8b, 9a u lia. Ver, por ejemplo, Simmonds, 2004, J Gen Virol . 85: 3173-88; Simmonds, 2001, J. Gen. Virol. 82, 693-712, los contenidos de las cuales se incorporan para referencia en sus totalidades.

En ciertas modalidades de la invención, el individuo nunca ha recibido terapia o profilaxis para infección por HCV. En otras modalidades de la invención, el individuo ha recibido previamente terapia o profilaxis para infección por HCV. Por ejemplo, en ciertas modalidades, el individuo no ha respondido al tratamiento de HCV. En realidad, bajo la terapia de interferon actual, hasta 50% o más individuos HCV no responden al tratamiento. En algunas modalidades, el individuo puede ser un individuo que recibió terapia pero continuó sufriendo de infección viral o uno o más síntomas de ésta. En algunas modalidades, el individuo puede ser un individuo que recibió terapia pero no logró una respuesta virológica sostenida. En ciertas modalidades, el individuo ha recibido tratamiento para infección por HCV pero ha fallado en mostrar una reducción 2 logio en l°s niveles de RNA de HCV después de 12 semanas de tratamiento. Se considera que los individuos que no han mostrado más de una reducción 2 logio en el RNA de HCV de suero después de 12 semanas de tratamiento tienen una oportunidad de 97-100% de no responder. Puesto que los compuestos de la presente invención actúan por mecanismos que no son el tratamiento de HCV actual, se considera que los compuestos de la invención deben ser eficaces en el tratamiento de estos individuos que no responden.

En ciertas modalidades, el individuo es un individuo que abandonó el tratamiento de HCV por uno o más episodios adversos asociados con el tratamiento. En algunas modalidades, el individuo es un individuo en el que la terapia actual no está indicada. Por ejemplo, algunas terapias para HCV se asocian con episodios neuropsiquiátricos . El tratamiento con interferon (IFN)-alfa más ribavirina se asocia con una alta tasa de depresión. Los síntomas depresivos han sido vinculados a un resultado peor en un número de trastornos médicos . Los episodios neurop-siquiátricos que ponen en riesgo la vida o son fatales, incluido el suicidio, ideas suicida y homicida, depresión, recurrencia de adicción/sobre dosis de medicamentos y comportamiento agresivo han ocurrido en individuos con y sin un trastorno psiquiátrico previo durante tratamientos para HCV. La depresión inducida por interferon es una limitación para el tratamiento de hepatitis C crónica, especialmente para individuos con trastornos psiquiátricos. Los efectos colaterales psiquiátricos son comunes con tratamiento con interferon y responsables de aproximadamente 10% a 20% de interrupciones del tratamiento actual para infección por HCV.

Por consiguiente, la presente invención propone los métodos de tratamiento o prevención de infección de HCV en individuos donde el riesgo de episodio neuropsiquiátricos, depresión, contraindica el tratamiento con la terapia HCV actual. La presente invención también proporciona los métodos de tratamiento o prevención de infección de HCV en individuos donde un episodio neuropsiquiátrico, como depresión, o riesgo de tal, indica la interrupción del tratamiento con terapia HCV actual. La presente invención además proporciona los métodos de tratamiento o prevención de infección de HCV en individuos donde un episodio neuropsiquiátrico, como depresión, o riesgo de esta, indica reducción de la dosis de la terapia HCV actual.

La terapia actual también se contraindica en individuos que son hipersensibles a interferon o ribavirina, o ambos, o cualquier otro componente de un producto farmacéutico para administración de interferon o ribavirina. La terapia actual no esta indicada en individuos con he oglobinopatías (por ejemplo talasemia mayor, anemia de células en media luna) y otros individuos en riesgo de efectos colaterales hematológicos de la terapia actual. Los efectos colaterales hematológicos comunes incluyen supresión de médula ósea, neutropenia y trombocitopenia. Además, la ribavirina es toxica para las células sanguíneas rojas y se asocia con hemolisis. Por consiguiente, la presente invención también proporciona los métodos de tratamiento o prevención de infección de HCV en individuos hipersensibles a interferon o ribavirina, o ambos, individuos con hemoglobinopatía, por ejemplo individuos con talasemia mayor e individuos con anemia de células de media luna, y otros individuos en riesgo de efectos colaterales hematológicos de la terapia actual.

En algunas modalidades, el individuo ha recibido terapia de HCV y descontinuó esa terapia antes de la administración de un método de la invención. En otras modalidades, el individuo ha recibido terapia y continúa recibiendo esa terapia junto con la administración de un método de la invención. Los métodos de la invención pueden ser co-administrados con otra terapia o HCV de acuerdo con el juicio de un experto en la técnica. En modalidades ventajosas, los métodos o composiciones de la invención pueden ser co-administrados con una dosis reducida de la otra terapia para HCV.

En ciertas modalidades, la presente invención proporciona los métodos de tratamiento de un individuo que es refractario o resistente al tratamiento con interferon. Por ejemplo, en algunas modalidades, el individuo puede ser un individuo que ha fallado en responder al tratamiento con uno o más agentes seleccionados del grupo que consiste en interferon, interferon a, interferon a pegilado, interferon más ribavirina, interferon a más ribavirina e interferon a pegilado más ribavirina. En algunas modalidades, el individuo puede ser un individuo que ha respondido deficientemente al tratamiento con uno o más agentes seleccionados del grupo que consiste en interferon, interferon a, interferon a pegilado, interferon más ribavirina, interferon a más ribavirina e interferon a pegilado más ribavirina.

En otras modalidades, la presente invención proporciona los métodos de tratamiento de infección de HCV en individuos en estado de embarazo o pueden estar en estado de embarazo puesto que el tratamiento actual también esta contraindicado en mujeres embarazadas.

En algunas modalidades, el individuo tiene, o esta en riesgo de, co-infección de HCV con HIV. Por ejemplo, en estados unidos 30% de individuos HIV están coinfectados con HCV y la evidencia indica que las personas infectadas con HIV tienen un curso mucho más rápido de su infección de hepatitis C. Maier y Wu, 2002, World J Gastroenterol 8: 577-57. Los métodos de la invención pueden ser utilizados para tratar o prevenir infección de HCV en estos individuos. Se considera que la eliminación de HCV en estos individuos reducirá la mortalidad debido a la enfermedad hepática en etapa terminal. En realidad, el riesgo de enfermedad hepática progresiva es mayor en individuos con inmunodeficiencia que define SIDA grave en comparación con los que no la tienen. Ver, por ejemplo, Lesens y col., 1999, J Infect Dis 179: 1254-1258. Ventajosamente, los compuestos de la invención han demostrado suprimir el HIV en individuos HIV. Ver, por ejemplo, las Patentes US Nos. 5,977,067; 5,994,299; 5,948,884 y 6,583,265 y las Publicaciones del PCT Nos. WO 99/32512, WO 99/65280, el contenido de las cuales se incorporan por este medio para referencia en sus totalidades. Así pues, en algunas modalidades, la presente invención propone los métodos de tratamiento o prevención de infección por HIV e infección por HCV en individuos que necesiten de estos.

En algunas modalidades, los métodos o composiciones de la invención se administran a un individuo luego de trasplante hepático. La hepatitis C es una causa principal de trasplante de hígado en EUA, y muchos individuos que sufren trasplante hepático permanecen positivos de HCV luego del trasplante. La presente invención propone métodos de tratamiento de estos individuos HCV recurrente con un compuesto o composición de la invención. En ciertas modalidades, la presente invención proporciona los métodos de tratamiento de un individuo antes, durante o luego de trasplante de hígado para prevenir infección de HCV recurrente. 4.2.1 Compuestos de la invención En algunas modalidades, la presente invención proporciona los métodos de tratamiento o prevención de infección de hepatitis C en un individuo que necesite de estos, administrando al individuo una cantidad eficaz de un compuesto de la invención. En algunas modalidades, el compuesto de la invención es un derivado de ciclosporina eficaz para el tratamiento o prevención de infección de hepatitis C en un individuo que necesite de este. A menos que se indique de otro modo, el término "ciclosporina" cuando se utiliza en la presente se refiere al compuesto ciclosporina A como es sabido para los expertos en la técnica. Ver, por ejemplo, Ruegger y col., Helv. Chim. Acta. 59: 1075-92; Borel y col., 1977, Immunology 32: 1017-25; los contenidos de los cuales se incorpora en la presente para referencia en su totalidad. El término "derivado de ciclosporina" se refiere a cualquier derivado de ciclosporina con actividad contra infección de hepatitis C, sea el derivado natural, sintético o semisintético .

En las modalidades particulares, el derivado de ciclosporina difiere de ciclosporina A en la tercera posición, es decir, la posición de N-metilglicina, conocida para los expertos en la técnica. En ciertas modalidades, el derivado de ciclosporina es un 3-éter ciclosporina. En otras modalidades, el derivado de ciclosporina es un 3-tioéter ciclosporina. El derivado de ciclosporina puede además comprender otras modificaciones de ciclosporina conocidas para los expertos en la técnica. En las modalidades ventajosas, la ciclosporina además comprende un residuo 4-gama-hidroximetileucina. Por consiguiente, en algunas modalidades, el derivado de ciclosporina es un 3-éter, 4-gama-hidroxímetíleucina. En otras modalidades, el derivado de ciclosporina es un 3-tioéter, 4-gama-hidroximetileucina .

En ciertas modalidades, la presente invención proporciona los métodos de tratamiento o prevención de infección de hepatitis C en un individuo que consiste en administrar al individuo una cantidad terapéutica o profiláctica eficaz de un derivado de ciclosporina de la fórmula general (I) , o una sal o solvato aceptado para uso farmacéutico de este.

(I).

En la formula (I), A, B, X, R 1, y R2 son como se define en lo anterior.

En ciertas modalidades, A es de acuerdo con la fórmula (Ha) . En otras modalidades, A es de acuerdo con la fórmula (Hb) . En la modalidad preferida, A es un residuo de la fórmula (Ha) anterior.

En modalidades preferidas, B es etilo.

Preferentemente, R es 2-aminoetilo, 2-aminopropilo, 2-monoalquilaminoetilo, 2-monoalquilaminopropilo, 2-dialquilaminoetilo, 2-dialquilaminopropilo, 2-monocicloalquilaminoetilo, 2-monocicloalquilaminopropilo, 2-dicicloalquiloaminoetilo ó 2-dialquilaminopropilo, en donde alquilo es de cadena lineal o ramificado que contiene de 1 a 4 átomos de carbono, y cicloalquilo contiene de 3 a 6 átomos de carbono.

En otra modalidad preferida, . R es alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene desde 1 hasta 4 átomos de carbono (más preferentemente 1 ó 2 átomos de carbono) , 3 opcionalmente sustituido por un grupo R . 2 En ciertas modalidades, R es isobutilo. En otras 2 modalidades, R es 2-hidroxi isobutilo.

Preferentemente, X es oxígeno o azufre. En algunas modalidades, X ex oxígeno. En otras modalidades, X es azufre.

R es preferentemente hidroxi ó NR R , en donde R y R , que pueden ser las mismas o diferentes, cada uno representa hidrógeno o alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 1 a 6 átomos de carbono (más preferentemente desde 1 hasta 4 átomos de carbono) . En otra modalidad preferida, R 3 es -NR4R5.

En ciertas modalidades, cuando X es azufre, preferentemente R se selecciona del grupo que consiste en N, -dimetilaminoetilo, N, -dietilamino etilo, N-metil-N-terbutilaminoetilo y N-etil-N-ter-butilaminoetilo . 2 En algunas modalidades, X es azufre, R es isobutilo y R se selecciona del grupo que consiste en N,N-dimetilamino etilo, N,N-dietilaminoetilo, N-metil-N-ter-butilamino y N-etil-N-ter-butilamino etilo. 2 En algunas modalidades, X es azufre, R es 2-hidroxi isobutilo y R se selecciona del grupo que consiste en N, N-dimetilaminoetilo, N,N-dietilaminoetilo, N-metil-N-ter-butilaminoetilo y N-N-ter-butilaminoetilo.

Otros compuestos preferidos de la fórmula (I) son aquellos en los cuales R es alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 2 a 6 átomos de carbono, opcionalmente sustituido por un grupo R ; o alquenilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 2 a 4 átomos de carbono; y R 3 es hidroxi, -NR4R5 o etoxi..

Otros compuestos preferidos de fórmula (I) son aquellos en los cuales cada uno de R y R , que pueden ser los mismos o diferentes, es hidrógeno; alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga desde 1 hasta 4 átomos de carbono, o R 4 y R5, junto con el á rtomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo saturado que contiene 6 átomos del anillo; los átomos del anillo diferentes de nitrógeno siendo independientemente seleccionados de carbono y oxígeno.

En otra modalidad preferida, R se selecciona del grupo que consiste en halógeno, hidroxi, carboxilo, alcoxicarbonilo, -NR4R5 y -NR6 (CH2)mNR4R5.

Preferentemente, halógeno es flúor, cloro o bromo, y más preferentemente flúor o cloro.

Los compuestos de fórmula (I) en la cual X es oxígeno y R es 2-etoxietilo, o las sales aceptado para uso farmacéutico de estos, también son preferidos.

Los compuestos de fórmula (I), en los cuales X es oxigeno o azufre y R 1 es propilo sustituido por -NR R5 o metoxi, o las sales aceptadas para uso farmacéutico de estos, también son preferidos.

Entre estos compuestos más preferidos utilizados en el método de la presente invención, están los derivados de ciclosporina enlistados a continuación: 3-metoxiciclosporina; 3-etoxiciclosporina; 3-propoxiciclosporina; : 3-isopropoxiciclospo ina; 3- (2-aminoetoxi) ciclosporina; 3- (2-N-metilaminoetoxi) ciclosporina; 3- (2-N-etilaminoetoxi) ciclosporina; 3- (2-dimetilaminoetoxi) ciclosporina; 3- (2-dietilaminoetoxi) ciclosporina; 3- (2-ter-butil-metilaminoetoxi) ciclosporina; 3- (2-ter-butil-etilaminoetoxí) cíclosporina; 3- [ (R) 2- (N, -dimetilamino) etiltio-Sar] -4- [4' -hidroxi- MeLeu] -ciclosporina; 3- [ (R) 2- (N, N-dimetilamino) etiltio-Sar] -ciclosporina; 3- [ (R) 2- (hidroxi) etiltio-Sar] -4- [4' -hidroxi-MeLeu] -ciclosporina; 3- [ (R) 2- (hidroxi) etiltio-Sar] -ciclosporina; 3- [ (R) 2- (N, N-dietilamino) etiltio-Sar] -4- [4' -hidroxi-MeLeu] -ciclosporina; 3- [ (R) 2- (N, N-dietilamino) etiltio-Sar] -ciclosporina; 3- (sec-butoxi) ciclosporina; 3-[2- (1, 4-dihidropirid-l-il) etoxi) ciclosporina; y sus sales aceptables aceptadas para uso farmacéutico.

Los compuestos particularmente preferidos, útiles en el método de la invención, incluyen los siguientes: Compuesto Nombre A 3-metoxiciclosporina B 3- (2-aminoe'toxi) ciclosporina C 3- (2-N,N-dimetilaminoetoxi) ciclosporina D 3- (isopropoxi) ciclosporina E 3- (2-etilbutoxi) ciclosporina F 3- (2, 2-dimetilpropoxi) ciclosporina G 3- (2-hidroxietoxi) ciclosporina H 3- (3-hidroxipropoxi) ciclosporina I 3- [2- (N-metilamino) etoxi] ciclosporina J 3- [2- (N-metil-N-isopropilamino) etoxi] ciclosporina K 3- [2- (piperidin-1-il) etoxi] ciclosporina L 3- [2- (N-morfolin) etoxi) ciclosporina M 3-etoxiciclosporina N 3- (2-metoxietiltio) -4- (gama- hidroximetileucina) ciclosporina O 3-[ (R) -2- (N, -dimetilamino) etiltio-Sar] -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporina P 3-etiltiociclosporina Q 3-propeniltiociclosporina R 3- [ (2-metoxi) etiltio] ciclosporina S 3- (metiltio) -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporína T 3- (metoxi) -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporina U 3- (prop-2-en-l-oxi) -4- (gama- hidroximetileucina) ciclosporina V 3- (isopropoxi) -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporina W 3- (etoxi) -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporina X 3- [2- (metoxi) etoxi] -4- (gama- hidroximetileucina) ciclosporina I 3- [3- (metoxi) propoxi] -4- (gama- hidroximetileucina) ciclosporina En adelante se utilizan las letras A a Y de los compuestos .

En las modalidades particulares, la presente invención proporciona un método de tratamiento o prevención de infección por el virus de hepatitis C en un individuo administrando, a un individuo que necesite de este, una cantidad eficaz de un compuesto de la invención seleccionado del grupo que consiste en los compuestos A a Y, o una sal aceptada para uso farmacéutico de estos.

El compuesto 0, o una sal aceptada para uso farmacéutico de este, es particularmente preferido, debido a su elevado nivel de actividad y su perfil toxicológico, como se describe en los ejemplos más adelante.

En ciertas modalidades, los derivados de ciclospopna de acuerdo con la invención en los cuales R es alquilo sustituido por uno o mas grupos R 3, donde R3 es -NR4R5 ó -NR6 (CH2) mNR4R5 y R4, R5 y R6 son como se define en lo anterior, se pueden convertir en las sales de adición con ácidos por los métodos conocidos. Se entiende que estas sales también entran dentro del alcance de la presente invención. Las sales ejemplares de la invención, y los métodos de su preparación, están descritos en las secciones siguientes.

En las modalidades útiles de la invención, el compuesto esta en forma pura. La pureza puede ser cualquier pureza conocida para los expertos en la técnica como la pureza absoluta, la pureza estereoquímica o ambas. En algunas modalidades, el compuesto de la invención es por lo menos 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ó 99% puro. En algunas modalidades, el compuesto de la invención es por lo menos 90% puro. En otras modalidades de la invención, el compuesto es por lo menos 98% puro. Los métodos para purificar los compuestos de la invención se describen más adelante. 4.2.2 Preparación de los compuestos de la invención Los compuestos de la invención se pueden preparar, aislar u obtener por cualquier método evidente para los expertos en la técnica. Los métodos ejemplares para la preparación están descritos con detalle en los ejemplos siguientes .

Además, las ciclosporinas sustituidas en la posición 3 por grupos tioéter o éter pueden ser preparadas de acuerdo con los métodos descritos en las Patentes US Nos. 5,977,067; 5,994,299, 5,948,884, y 6,583,265 y en las Publicaciones del PCT Nos. WO 99/32512, WO 99/67280. El contenido de estas referencias se incorpora por este medio para referencia en sus totalidades.

Los compuestos pueden ser purificados después de la síntesis por cualquier técnica evidente para los expertos en la materia para purificar derivados de ciclosporina. En algunas modalidades, un compuesto de la invención se purifica por cromatografía. Por ejemplo, un compuesto de la invención se puede purificar utilizando cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) . Un ejemplo útil de la purificación por HPLC es como sigue: una columna HPLC de dimensiones 10 mm (d) x 50 mm (I) que contiene fase estacionaria fase inversa de 5 mm (octadecil silano u octasilano) se equilibra con una fase móvil que contiene 0.1% de ácido fórmico, 50 a 90% de agua y 50 a 10% de acetonitrilo. Es importante señalar que la columna se calienta a por lo menos 65°C, o potencialmente hasta 85°C. La fase móvil fluye a 10 a 16 mL/minuto y se calienta a 60°C. Aproximadamente 5 a 25 mg del derivado de ciclosporina se carga en la columna en 0.1 a 0.8 mL de un disolvente, preferentemente dimetiisulfóxido. Se mantiene el flujo de la fase móvil, y su composición se ajusta en un gradiente lineal hasta 90% ó 100% de acetonitrilo durante un tiempo de 20 a 60 minutos. Los picos del compuesto se detectan utilizando detección por dispersión de luz evaporativa y/o detección ultra violeta variable en un ajuste de longitud de onda de 205 a 215 nm, los picos del compuesto se recolectan en la fase móvil la cual se elimina en vacío; las muestras se secan perfectamente en vacío y se analizan por NMR, IR y HPLC-MS para determinar la identidad y pureza. 4.2.3 Sales farmacéuticas de los compuestos de la invención Como se ya se mencionó, un derivado de ciclosporina de la invención puede estar en forma neutra, o en una forma de sal. La forma de sal puede ser cualquier sal conocida para los expertos en la técnica. Las formas salinas particularmente útiles son aquellas que se coordinan con fosfato, citrato, acetato, cloruro, metansulfonato o propionato.

Donde un compuesto de la presente invención, por ejemplo un compuesto de la invención, se sustituye con una porción básica, se puede formar una sal de adición acida. El ácido que puede utilizarse para preparar una sal de adición acida incluye preferentemente el que produce, cuando se combina con la base libre, una sal aceptada para uso farmacéutico, es decir, una sal cuyo anión sea no tóxico para un individuo en la dosis farmacéutica de la sal. Las sales aceptadas para uso farmacéutico dentro del alcance de la invención son aquellas derivadas de los siguientes ácidos: ácidos minerales como el ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido sulfámico y ácido nítrico; y ácidos orgánicos como acético, trifluoroacético, tricloroacético, propiónico, hexanóico, ciclopentilpropiónico, glicólico, glutárico, pirúvico, láctico, malónico, succínico, sórbico, ascórbico, málico, maléico, fumárico, tartárico, cítrico, benzoico, 3- (4-hidroxibenzoil) benzoico, pícrico, cinámico, mandélico, ftálico, láurico, metansulfónico, etansulfónico, 1,2-etandisulfónico, 2-hidroxietan sulfónico, bencensulfónico, 4-clorobencensulfónico, 2-naftalensulfónico, 4-toluensulfónico, canfórico, canforsulfónico, 4-metilbiciclo [2.2.2] -oct-2-en-l-carboxílico, glucoheptónico, 3-fenilpropiónico, trimetilacético, ter-butilacético, laurilsulfúrico, glucónico, benzoico, glutámico, hidroxinaftóico, salicílico, esteárico, ciclohexilsulfámico, quínico, mucónico y ácidos similares.

Las sales de adición acida correspondientes incluyen hidroaluros, por ejemplo clorhidrato y bromhidrato, sulfato, fosfato, sulfamato, nitrato, acetato, trifluoroacetato, tricloro acetato, propionato, hexanoato, ciclopentilpropionato, glicolato, glutarato, piruvato, lactato, malonato, succinato, sorbato, ascorbato, malato, maleato, fumarato, tartrato, citrato, benzoato, 3- (4-hidroxibenzoil) benzoato, picrato, cinamato, mandelato, talato, laurato, metansulfonato (mesilato), etansulfonato, 1, 2-etandisulfonato, 2-hidroxietansulfonato, bencensulfonato (besilato) , 4-clorobencensulfonato, 2-naftalensulfonato, 4-toluensulfonato, canforato, canforsulfonato, 4-metilbiciclo [2.2.2] -oct-2-en-l-carboxilato, glucoheptonato, 3-fenilpropionato, trimetilacetato, ter-butilacetato, laurilsulfato, gluconato, benzoato, glutamato, hidroxinaftoato, salicilato, estearato, cicloexilsulfamato, quinato, muconato y similares.

De acuerdo con otra característica de la invención, las sales de adición acida de los compuestos de esta invención pueden ser preparadas por reacción con la base libre con ácido apropiado, mediante la aplicación o adaptación de los métodos conocidos. Por ejemplo, las sales de adición acida de los compuestos de esta invención pueden ser preparadas disolviendo la base libre en solución acuosa o acuosa-alcohol u otros disolventes apropiados que contengan el ácido apropiado y aislando la sal evaporando la solución, o por reacción de la base libre y ácido en un disolvente orgánico, en cuyo caso la sal se separa directamente o se puede obtener por concentración de la solución.

Las sales de adición acida de los compuestos de esta invención, por ejemplo, los compuestos de la invención, pueden ser regeneradas a partir de las sales por la aplicación o adaptación de los métodos conocidos. Por ejemplo, los compuestos precursores de la invención pueden ser regenerados a partir de sus sales de adición acida por tratamiento con un álcali, por ejemplo, solución acuosa de bicarbonato de sodio o solución acuosa de amoniaco.

Cuando un compuesto de la invención, por ejemplo un compuesto de la invención, se sustituye por una solución acida, se pueden formar sales de adición básica. Las sales aceptadas para uso farmacéutico, incluidas por ejemplo las sales de metales alcalinos y de metales alcalino férreos, dentro del alcance de la invención son aquellas derivadas de las siguientes bases: hidruro de sodio, hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, hidróxido de calcio, hidróxido de magnesio, hidróxido de aluminio, hidróxido de litio, hidróxido de zinc, hidróxido de bario y aminas orgánicas como las aminas alifáticas, alicíclicas o aromáticas orgánicas, como amoniaco, metilamina, dimetilamina, dietilamina, picolina, etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, etilendiamina, licina, arginina, ornitina, colina, N, N' -dibenciletilendiamina, cloroprocaína, dietanolamina, procaína, N-bencilfenetilamina, N-metilglucamina, piperazina, tris (hidroximetil) -aminometano, hidróxido de tetrametilamonio y similares .

Las sales metálicas de los compuestos de la presente invención, por ejemplo los compuestos de la invención, se pueden obtener poniendo en contacto un hidruro, hidróxido, carbonato o compuesto reactivo similar de metal elegido en un disolvente acuoso u orgánico con la forma acida libre del compuesto. Los disolventes acuosos empleados pueden ser agua o pueden' ser una mezcla de agua con un disolvente orgánico, preferentemente, un alcohol como metanol o etanol, una cetona como acetona, un éter alifático como tetrahidrofurano o un éster como acetato de etilo. Estas reacciones normalmente se realizan a temperatura ambiente, pero si se desean pueden realizarse con calentamiento.

Las sales amina de los compuestos de la presente invención, por ejemplo los compuestos de la invención, pueden obtenerse poniendo en contacto una amina en un disolvente acuoso u orgánico con la forma acida libre del compuesto. Los disolventes acuosos apropiados pueden ser agua y mezclas de agua con alcoholes como metanol o etanol, éteres como tetrahidrofuranos, nitrilos como acetonitrilo o cetonas como acetona. Las sales de aminoácidos pueden ser preparadas del mismo modo.

Las sales de adición básica de los compuestos de esta invención, por ejemplo los compuestos de la invención, se pueden regenerar a partir de las sales por la aplicación o adaptación de los métodos conocidos. Por ejemplo, los compuestos precursores de la invención pueden ser regenerados a partir de sus sales de adición básica por tratamiento con un ácido, por ejemplo el ácido clorhídrico. 4.2.4 Composiciones farmacéuticas y métodos de administración Los derivados de ciclosporina que se utilizan en el método de la presente invención preferentemente se proporcionan utilizando las composiciones farmacéuticas que contienen por lo menos un compuesto de la fórmula general (I) , si es apropiado en forma de sal, utilizada sola en forma de una combinación con uno o más portadores compatibles y aceptados para uso farmacéutico como diluyentes o adyuvantes, o con otro agente anti HCV. En la práctica clínica, los derivados de ciclosporinas de la presente invención pueden ser administrados por cualquier vía tradicional, en particular por la vía oral, parenteral, rectal o por inhalación (por ejemplo en forma de aerosoles) . Los derivados de ciclosporina de la presente invención preferentemente se administran por vía oral.

Puede hacerse uso, como composiciones sólidas para administración oral, de tabletas, pildoras, cápsulas de gelatina dura, polvos o granulos. En estas composiciones, el producto activo de acuerdo con la invención se mezcla con uno o más diluyentes o adyuvantes inertes, como sacarosa, lactosa o almidón.

Estas composiciones pueden contener sustancias que no sean diluyentes, por ejemplo un lubricante, como estearato de magnesio, o un recubrimiento propuesto para la liberación controlada.

Se puede hacer uso, como composiciones líquidas para administración oral, de soluciones que sean aceptadas para uso farmacéutico, suspensiones, emulsiones, jarabes o elíxires que contengan diluyentes inertes como' agua o parafina líquida. Estas composiciones también pueden contener sustancias que no sean diluyentes, por ejemplo productos humectantes edulcorantes o saborizantes.

Las composiciones para administración pa'renteral pueden ser emulsiones o soluciones estériles. Se puede hacer uso, como disolvente o vehículo, de propilenglicol, un polietielenglicol, aceites vegetales, en particular aceite de oliva, o éteres orgánicos inyectables, por ejemplo oleato de etilo. Estas composiciones también pueden contener adyuvantes, en particular agentes humectantes, isotonizantes, emulsificantes, dispersantes y estabilizantes. La esterilización puede llevarse a cabo en diversas formas, por ejemplo utilizando un filtro bacteriológico, por radiación o por calentamiento. Estas también pueden prepararse en forma de composiciones sólidas estériles las cuales pueden ser disueltas en el momento de uso en agua estéril o cualquier otro medio estéril inyectable.

Las composiciones para administración rectal son supositorios o cápsulas rectales que contienen, además del principio activo, excipientes como manteca de cacao, glicéridos semisintéticos o polietilenglicoles.

Las composiciones también pueden ser aerosoles. Para su uso en la forma de aerosoles líquidos, las composiciones pueden ser soluciones estériles estables o composiciones sólidas disueltas en el momento de uso en agua estéril apirogénica, en salina o cualquier otro vehículo aceptado para uso farmacéutico. Para su uso en forma de aerosoles secos destinados para ser directamente inhalados, el principio activo se divide finamente y se combina con un diluyente o vehículo sólido, soluble en agua, por ejemplo dextrano, manitol o lactosa.

En una modalidad preferida, una composición de la invención es una composición farmacéutica o una forma de dosificación unitaria individual. Las composiciones farmacéuticas y las formas de dosificación unitaria individuales de la invención contienen una cantidad profiláctica o terapéutica eficaz de uno o más agentes profilácticos o terapéuticos (por ejemplo un compuesto de la invención, u otro agente profiláctico o terapéutico) y uno o más portadores o excipientes aceptados para uso farmacéutico comunes. En una modalidad específica y en este contexto, el término "aceptado para uso farmacéutico" significa aprobado por una dependencia regulatoria del gobierno federal o estatal o enlistado en la farmacopea de los EUA u otra farmacopea generalmente reconocida para uso en animales y más particularmente en humanos. El término "portador" se refiere a un diluyente, adyuvante (por ejemplo el adyuvante de Freund (completo e incompleto) ) , excipiente o vehículo con el cual se administra el terapéutico. Estos portadores farmacéuticos pueden ser líquidos estériles como agua y aceites, incluidos aquellos de origen de petróleo, animal, vegetal o sintético, como aceite de cacahuate, aceite de frijol de soya, aceite mineral, aceite de ajonjolí y similares. El agua es un portador preferido cuando la composición farmacéutica se administra por vía intravenosa. Las soluciones salinas y las soluciones acuosas de dextrosa y glicerol también pueden emplearse como portadores líquidos, particularmente para soluciones inyectables. Los ejemplos de los portadores farmacéuticos apropiados están descritos en "Remington' s Pharmaceutical Sciences" por E. W. Martin.

Las composiciones farmacéuticas comunes y las formas de dosificación contienen uno o más excipientes. Los excipientes apropiados son bien conocidos para los expertos en la técnica de la farmacia y los ejemplos no limitativos de estos excipientes apropiados incluyen almidón, glucosa, lactosa, sacarosa, gelatina, malta, arroz, harina, gis, gel de sílice, estearato de sodio, monoestearato de glicerol, talco, cloruro de sodio, leche desnatada seca, glicerol, propilenglicol, agua, etanol y similares. Si un excipiente particular es apropiado para la incorporación en una composición farmacéutica o forma de dosificación depende de diversos factores bien conocidos en la técnica que pueden ser, pero no se limitan a, la forma en la que la forma de dosificación se administrará a un individuo y los ingredientes activos específicos en la forma de dosificación. La composición o forma de dosificación unitaria individual, si se desea, también puede contener cantidades menores de agentes humectantes o emulsificadores, o agentes amortiguadores del pH.

Las composiciones libres de lactosa de la invención pueden contener excipientes que son bien conocidos en la técnica y se enlistan, por ejemplo, en la Farmacopea de Estados Unidos (USP) SP (XXI) /NF (XVI). En general, las composiciones libres de lactosa contienen un ingrediente activo, un aglutinante/diluyente y un lubricante en cantidades farmacéuticas compatibles y aceptables. Las formas de dosificación libres de lactosa ejemplares contienen un ingrediente activo, celulosa microcristalina, almidón pregelatinizado y estearato de magnesio .

Esta invención además comprende las composiciones farmacéuticas anhidras y las formas de dosificación que contienen ingredientes activos, dado que el agua puede facilitar la degradación de algunos compuestos. Por ejemplo, la adición de agua (por ejemplo 5%) se acepta ampliamente en la técnica farmacéutica como medio de simular el almacenamiento de largo plazo para determinar las características como vida en almacenamiento o la estabilidad de las formulaciones con el tiempo. Ver, por ejemplo, Jens T. Carstensen, Drug Stability: Principies & Practice, 2a ed. Marcel Dekker, NY, NY, 1995, pp. 379 80. En efecto, el agua y calor aceleran la descomposición de algunos compuestos. Así pues, el afecto del agua sobre una formulación puede ser de gran importancia puesto que la humedad se encuentra comúnmente durante la fabricación, manejo, envasado, almacenamiento, embarque y uso de las formulaciones.

Las composiciones farmacéuticas anhidras y las formas de dosificación de la invención se pueden preparar utilizando ingredientes anhidros o que contengan poca humedad y condiciones de baja humedad. Las composiciones farmacéuticas y las formas de dosificación que contienen lactosa y por lo menos un ingrediente activo que consiste en una amina primaria o secundaria preferentemente son anhidras si se espera contacto considerable con la humedad durante la fabricación, envasado y/o almacenamiento.

Una composición farmacéutica anhidra debe prepararse y almacenarse de modo que se mantenga su naturaleza anhidra. Por consiguiente, las composiciones anhidras preferentemente se envasan utilizando materiales conocidos para evitar la exposición al agua de modo que estas puedan estar incluidas equipos de formulación apropiados. Los ejemplos del envasado apropiado incluyen, pero no se limitan a foils sellados herméticamente, plásticos, envases para dosis unitaria (por ejemplo viales) , envases de burbuja o blister y paquetes de tiras .

La invención además comprende las composiciones farmacéuticas y formas de dosificación que contienen uno o más compuestos que reducen la velocidad mediante la cual se descompondrá el ingrediente activo. Estos compuestos, que se mencionan en la presente como "estabilizadores" incluyen, pero no se limitan a, antioxidantes como el ácido ascórbico, amortiguadores de pH o búfer salinos.

Las composiciones farmacéuticas y las formas de dosificación unitaria individuales pueden tomar la forma de soluciones, suspensiones, emulsión, tabletas, pildoras, cápsulas, polvos, formulaciones de liberación prolongada, y similares. La formulación oral puede incluir portadores normales como los grados farmacéuticos de manitol, lactosa, almidón, estearato de magnesio, sacarina de sodio, celulosa, carbonato de magnesio, y otros. Estas composiciones y las formas de dosificación contendrán una cantidad profiláctica o terapéutica eficaz de un agente profiláctico o terapéutico preferentemente en forma purificada, junto con una cantidad apropiada de portador para ofrecer la forma para la administrar apropiada al individuo. La formulación debe adecuarse al modo de administración. En una modalidad preferida, las composiciones farmacéuticas o formas de dosificación unitaria individuales son estériles y en forma apropiada para administración a un individuo, preferentemente un individuo animal, más preferentemente un individuo mamífero y más preferentemente un individuo humano.

Una composición farmacéutica de la invención se formula para que sea compatible con su vía de administración propuesta. Los ejemplos de las vías de administración pueden ser, pero no se limitan a, parenteral, por ejemplo intravenosa, intradérmica, subcutánea, intramuscular, subcutánea, oral, bucal, sublingual, inhalación, intranasal, transdérmica, tópica, transmucosa, intratumoral, intra-sinovial y rectal. En una modalidad específica, la composición se formula de acuerdo con los procedimientos habituales como una composición farmacéutica adaptada para administración intravenosa, subcutánea, intramuscular, oral, intranasal o tópica a seres humanos. En una modalidad, una composición farmacéutica se formula de acuerdo con los procedimientos habituales para la administración subcutánea a seres humanos. Por lo regular, las composiciones para administración intravenosa son soluciones en buffer acuoso isotónico, estéril. De ser necesario, la composición también puede incluir un agente solubilizador y un anestésico local como lignocaína para aliviar el dolor en el sitio de la inyección.

Los ejemplos de las formas de dosificación pueden ser, pero no se limitan a: tabletas, caplets, cápsulas como las cápsulas de gelatina elástica blanda, cachets, trociscos, pastillas, dispersiones, supositorios, ungüentos, cataplasmas (emplastos); pastas, polvos; vendajes; cremas, soluciones, parches; aerosoles (por ejemplo rocíos nasales o inhaladores) ; geles, formas de dosificación líquidas apropiadas para la administración oral o mucosa a un individuo, incluidas las suspensiones (por ejemplo suspensiones líquidas acuosas o no acuosas, emulsiones aceite en agua o emulsiones líquidas agua en aceite) , soluciones y elíxires; las formas de dosificación líquida apropiadas para administración parenteral a un individuo; y sólidos estériles (por ejemplo sólidos cristalinos o amorfos) que pueden ser reconstituidos para ofrecer las formas de dosificación líquida apropiadas para administración parenteral a un individuo.

La composición, forma y tipo de formas de dosificación de la invención normalmente variará dependiendo de su uso. Por ejemplo, una forma de dosificación que se utilice en el tratamiento inicial de infección viral puede contener cantidades más grandes de uno o más de los ingredientes activos que contiene en comparación con la forma de dosificación que se utilice en el tratamiento de mantenimiento de la misma infección. Del mismo modo, una forma de dosificación parenteral puede contener cantidades más pequeñas de uno o más de los ingredientes activos que contiene comparado con una forma de dosificación oral que se utilice para tratar la misma enfermedad o trastorno. Estas y otras formas en las que las formas de dosificación específicas comprendidas por esta invención variarán entre sí serán fácilmente evidentes para los expertos en la técnica. Ver, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18a ed., Mack Publishing Easton PA (1990) .

En general, los ingredientes de las composiciones de la invención son suministrados por separado o mezclados entre sí en formas de dosificación unitaria, por ejemplo, como un polvo liofilizado seco o concentrado libre de agua en un envase herméticamente sellado, como puede ser una ampolleta o sachet que indique la cantidad del agente activo. Cuando la composición puede ser administrada por infusión, se puede dispensar con una botella para infusión que contenga agua o salina grado farmacéutico, estéril, cuando la composición se administra por inyección se puede proporcionar una ampolleta de agua estéril para inyección o salina de modo que los ingredientes puedan ser mezclados antes de la administración .

Las formas de dosificación comunes de la invención contienen un compuesto de la invención, o una sal, solvato o hidrato aceptado para uso farmacéutico de este se encuentran dentro del intervalo [sic] desde cerca de 0.1 mg a cerca de 100 mg por día, dado como una dosis única una vez al día en la mañana, pero preferentemente como dosis dividas a lo largo del día tomados con el alimento. Las formas de dosificación particulares de la invención tienen aproximadamente 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 1.0, 2.0, 2.5, 5.0, 10.0, 15.0, 20.0, 25.0, 50.0, 100, 200, 250, 500 ó 1000 mg de la ciclosporina activa. 4.2.4.1 Formas de dosificación oral Las composiciones farmacéuticas de la invención que son apropiadas para la administración oral se pueden preparar como formas de dosificación independientes, como pueden ser, pero no se limitan a, tabletas (por ejemplo tabletas masticables) , caplets, cápsulas y líquidos (por ejemplo jarabes con sabor). Estas formas de dosificación contienen las cantidades predeterminadas de ingredientes activos, y pueden prepararse por los métodos de la farmacia bien conocidos para los expertos en la técnica. Ver en general Remington's Pharmaceutical Sciences, 18a ed., Mack Publishing Easton PA (1990).

En las modalidades preferidas, las formas de dosificación oral son sólidas y se preparan bajo condiciones anhidras con ingredientes anhidros, como se describe con detalle en las secciones anteriores. Sin embargo, el alcance de la invención se extiende más allá de las formas de dosificación oral sólidas, anhidras. Como tal, otras formas se describen en la presente.

Las formas de dosificación oral comunes de la invención se preparan combinando el ingrediente o los ingredientes activos en una mezcla íntima con por lo menos un excipiente de acuerdo con las técnicas de la composición farmacéutica convencionales. Los excipientes pueden tomar una amplia variedad de formas, dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración. Por ejemplo, los excipientes apropiados para uso en las formas de dosificación líquida oral o aerosol incluyen, pero no se limitan a, agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes saborizantes, preservadores y agentes colorantes. Los ejemplos de los excipientes apropiados para utilizarlos en las formas de dosificación oral sólidas (por ejemplo polvos, tabletas, cápsulas y caplets) incluyen, pero no se limitan a, almidones, azúcares, celulosa microcristalina, diluyentes, agentes granuladotes, lubricantes, aglutinantes y agentes desintegradores .

Debido a su facilidad de administración, las tabletas y cápsulas representan las formas unitarias de dosificación oral más ventajosas, en cuyo caso se emplean excipientes sólidos. Si se desea, las tabletas se pueden recubrir por las técnicas acuosas o no acuosas normalizadas. Estas formas de dosificación pueden ser preparadas por cualquiera de los métodos de la farmacia. En general, las composiciones farmacéuticas y formas de dosificación se preparan mezclando en forma uniforme e íntima los ingredientes activos con portadores líquidos, portadores sólidos finamente divididos o ambos, y luego moldeando el producto en la presentación deseada si es necesario.

Por ejemplo, una tableta puede ser prepara por compresión o moldeado. Las tabletas comprimidas pueden ser preparadas comprimiendo en una máquina apropiada los ingredientes activos en una forma de flujo libre como polvo o granulos. Opcionalmente mezclados con un excipiente. Las tabletas moldeadas pueden prepararse moldeando en una máquina apropiada una mezcla de compuesto en polvo humedecido con un diluyente líquido inerte .

Los ejemplos de los excipientes que se pueden utilizar en las formas de dosificación oral de la invención pueden ser, pero no se limitan a aglutinantes, diluyentes, desintegrantes y lubricantes. Los aglutinantes adecuados para uso en las composiciones farmacéuticas y formas de dosificación incluyen, pero no se limitan a, almidón de maíz, almidón de papa u otros almidones, gelatina, gomas naturales y sintéticas como acacia, alginato de sodio, ácido algínico, otros alginatos, tragacanto en polvo, goma de guar, celulosa y sus derivados (por ejemplo etilcelulosa, acetato de celulosa, carboximetilcelulosa de calcio, carboximetilcelulosa de sodio) , polivinilpirrolidona, metilcelulosa, almidón pregelatinizado, hidroxipropilmetilcelulosa (por ejemplo los Nos. 2208, 2906,2910), celulosa microcristalina y mezclas de estos.

Los ejemplos de los diluyentes apropiados para utilizarlos en las composiciones farmacéuticas y las formas de dosificación descritas en la presente pueden ser, pero no se limitan a, talco, carbonato de calcio (por ejemplo granulos o en polvo), celulosa microcristalina, celulosa en polvo, dextratos, caolín, manitol, ácido silícico, sorbitol, almidón, almidón pregelatinizado y mezclas de estos. El aglutinante o diluyente en las composiciones farmacéuticas de la invención normalmente estará presente desde cerca de 50 a cerca de 99% en peso de la composición farmacéutica o forma de dosificación.

Las formas apropiadas de celulosa microcristalina pueden ser, pero no se limitan a, los materiales comercializados como AVICEL PH 101, AVICEL PH 103, AVICEL RC 581, AVICEL PH 105 (disponible de FMC Corporation, American Viseóse División, Avicel Sales, Marcus Hook, PA) , y mezclas de estos. Un aglutinante específico es una mezcla de celulosa microcristalina y carboximetilcelusa de sodio comercializada como AVICEL RC 581. Los excipientes o aditivos anhidros o de poca humedad apropiados pueden ser AVICEL PH 103™ y Starch 1500 LM.

Los desintegrantes se utilizan en las composiciones de la invención para producir tabletas que se desintegren cuando se expongan a un entorno acuoso. Las tabletas que contienen demasiado desintegrante pueden desintegrarse durante el almacenamiento, mientras que las que contienen demasiado poco pueden no desintegrarse a una velocidad deseada o bajo las condiciones deseadas. Así pues, una cantidad suficiente de desintegrante que no sea demasiada ni muy poca para alterar en forma perjudicial la liberación del ingrediente activo debe utilizarse para formar las formas de dosificación oral sólidas de la invención. La cantidad de desintegrante utilizado varía con base en el tipo de formulación y se puede averiguar fácilmente por los expertos en la técnica. Las composiciones farmacéuticas comunes contienen desde cerca de 0.5 a cerca de 15% en peso de desintegrante, específicamente desde cerca de 1 a cerca de 5% en peso de desintegrante .

Los desintegrantes que se pueden utilizar en las composiciones y formas de dosificación farmacéuticas de la invención incluyen, pero no se limitan a, agar agar, ácido algínico, carbonato de calcio, celulosa microcristalina, croscarmelosa de sodio, crospovidone, polacrilinpotasio, glicolato almidón de sodio, almidón de papa o tapioca, almidón pregelatinizado, otros almidones, arcillas, otras algínas, otras celulosas, gomas y mezclas de estos.

Los lubricantes que se pueden utilizar en las composiciones farmacéuticas y formas de dosificación de la invención pueden ser, pero no se limitan a, estearato de calcio, estearato de magnesio, aceite mineral, aceite mineral ligero, glicerina, sorbitol, manitol, polietilenglicol, otros glicoles, ácido esteárico, lauril sulfato de sodio, talco, aceite vegetal hidrogenado (por ejemplo aceite de cacahuate, aceite de semilla de algodón, aceite de girasol, aceite de ajonjolí, aceite de oliva, aceite de maíz y aceite de soya) , estearato de zinc, oleato de etilo, laureato de etilo, agar y mezclas de estos. Otros lubricantes pueden ser, por ejemplo, gel de sílice siloide (AEROSIL 200, fabricado por W. R. Grace Co. de Baltimore, MD) , un aerosol coagulado de sílice sintético (comercializado por Deggusa Co. de Plano, TX) , CAB O SIL (un producto dióxido de silicio pirogénico comercializado por Cabot, Co de Boston, MA) , y mezclas de estos. Si se utilizan los lubricantes normalmente se utilizan en una cantidad de menos de alrededor de 1% en peso de las composiciones o formas de dosificación farmacéuticas en las que se incorporan. 4.2.5 Formas de dosificación de liberación retardada Los ingredientes activos como los compuestos de la invención pueden ser administrados por medios de liberación controlada o por dispositivos de suministro que son bien conocidos para los que cuentan con las habilidades ordinarias en la técnica. Los ejemplos pueden ser, pero no se limitan a, los descritos en las Patentes US Nos. 3,845,770; 3,916,899; 3,536,809; 3,598,12 y 4,008,719; 5,674,533; 5,059,595; 5,591,767; 5,120,548; 5,073,543; 5,639,476; 5,354,556 y 5,733,566, cada una de las cuales se incorpora en la presente para referencia. Estas formas de dosificación pueden ser utilizadas para proporcionar liberación lenta o controlada de uno o más ingredientes activos utilizando, por ejemplo, hidropropilmetilcelulosa [sic] , otras matrices poliméricas, geles, membranas permeables, sistemas osmóticos, recubrimientos multicapa, micropartículas, liposomas, microesferas o una combinación de estos para ofrecer el perfil de liberación deseada en diferentes proporciones. Las formulaciones de liberación controlada apropiadas conocidas para los expertos en la técnica, incluidas las descritas en la presente, se pueden seleccionar fácilmente para utilizarlas con los ingredientes activos de la invención. La invención de este modo comprende formas de dosificación unitaria individuales apropiadas para administración oral como pueden ser, pero no se limitan a, tabletas, cápsulas, gelcaps y caplets que se adaptan para la liberación controlada.

Todos los productos farmacéuticos de liberación controlada tienen un objetivo común de mejorar el tratamiento medicinal sobre el obtenido por sus contra partes no controladas. En teoría, el uso de una preparación de liberación controlada diseñada óptimamente en el tratamiento médico se caracteriza por un mínimo de sustancia activa empleada para curar o controlar el estado en una cantidad mínima de tiempo. Las ventajas de las formulaciones de liberación controlada pueden ser actividad prolongada del fármaco, frecuencia reducida de la dosis y aumento en el cumplimiento del individuo. Además, las formulaciones de liberación controlada pueden ser utilizadas para afectar el tiempo de inicio de la acción u otras características como niveles sanguíneos del fármaco, y pueden así afectar la presencia de efectos colaterales (por ejemplo los adversos) .

La mayor parte de las formulaciones de liberación controlada están diseñadas para liberar inicialmente una cantidad de fármaco (ingrediente activo) que produzca de inmediato el efecto terapéutico deseado, y en forma gradual continua liberar las demás cantidades de fármaco para mantener este nivel de efecto terapéutico o profiláctico durante un tiempo prolongado. Para mantener este nivel constante de fármaco en el cuerpo, el fármaco debe ser liberado de la forma de dosificación a una velocidad que sustituirá la cantidad de fármaco que se este metabolizando y excretando del cuerpo. La liberación controlada de un ingrediente activo se puede simular mediante diversas condiciones como pueden ser, pero no se limitan a, pH, temperatura, enzimas, agua u otras condiciones fisiológicas o compuestos. 4.2.6 Formas de dosificación parenteral Si bien las formas de dosificación oral anhidras, sólidas son preferidas, la presente invención también proporciona las formas de dosificación parenteral. Las formas de dosificación parenteral pueden ser administradas a los individuos por diversas vías que pueden ser, pero no se limitan a, la vía subcutánea, intravenosa (incluida la inyección émbolo) , intramuscular, e intraarterial. Debido a que su administración normalmente deriva las defensas naturales del individuo contra contaminantes, las formas de dosificación parenteral preferentemente son estériles o pueden ser esterilizadas antes de la administración a un individuo. Los ejemplos de las formas de dosificación parenteral pueden ser, pero no se limitan a, soluciones listas para inyección, productos secos listos para ser dísueltos o suspendidos en un vehículo para inyección aceptado para uso farmacéutico, suspensiones listas para inyección y emulsiones.

Los vehículos apropiados que pueden utilizarse para proporcionar las formas de dosificación parenteral de la invención son bien conocidos para los expertos en la técnica. Los ejemplos pueden ser, pero no se limitan a: agua para inyección USP; vehículos acuosos como pueden ser, pero no se limitan a, cloruro de sodio inyección, inyección de Ringer, inyección de dextrosa, inyección de dextrosa y cloruro de sodio y la inyección de Ringer lactosada; vehículos miscibles en agua como pueden ser, pero no se limitan a, alcohol etílico, polietilenglicol y polipropilenglicol; y vehículos no acuosos como pueden ser, pero no se limitan a, aceite de maíz, aceite de semilla de algodón, aceite de cacahuate, aceite de sésamo, oleato de etilo, mirístato de isopropilo y benzoato de bencilo.

Los compuestos que aumentan la solubilidad de uno o más de los ingredientes activos descritos en la presente también se pueden incorporar en las formas de dosificación parenteral de la invención. 4.2.7 Formas de de dosificación transdérmica, tópica y mucosa Si bien las formas de dosificación oral anhidras, sólidas son preferidas, la presente invención también proporciona formas de dosificación transdérmica, tópica y mucosa. Las formas de dosificación transdérmica, tópica y mucosa de la invención pueden ser, pero no se' limitan a, soluciones oftálmicas, rocíos, aerosoles, cremas, lociones, ungüentos, geles, soluciones, emulsiones, suspensiones u otras formas conocidas para un experto en la técnica. Ver, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18a ed., Mack Publishing Easton PA (1980 & 1990) ; and Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 4a ed. Lea & Febiger, Philadephia (1985) . Las formas de dosificación apropiada para tratar tejidos mucosos dentro de la cavidad oral se pueden formular como lavados bucales o como geles orales. Además, las formas de dosificación transdérmica pueden ser parches "tipo depósito" o "tipo matriz", los cuales pueden ser aplicados a la piel y usarse durante un tiempo específico para permitir la penetración de una cantidad deseada de ingredientes activos, Los excipientes apropiados (por ejemplo portadores y diluyentes) y otros materiales que pueden ser utilizados para proporcionar las formas de dosificación transdérmica, tópica y mucosa comprendidas por esta invención son bien conocidos para quienes cuentan con las habilidades en la técnica farmacéutica, y dependen del tejido específico al que se aplicará determinada composición o forma de dosificación farmacéutica. Teniendo esto presente, los excipientes comunes pueden ser, pero no se limitan a, agua, acetona, etanol, etilenglicol, propilenglicol, butan-1, 3-diol, miristato de isopropilo, palmitato de isopropilo, aceite mineral y mezclas de estos para formar lociones, tinturas, cremas, emulsiones, geles o ungüentos, que sean no tóxicos y aceptados para uso farmacéutico. Los humedecedores o humectantes también pueden ser adicionados a las composiciones y formas de dosificación farmacéuticas si se desea. Los ejemplos de estos ingredientes adicionales son bien conocidos en la técnica. Ver, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18a ed., Mack Publishing Easton PA (1980 & 1990) .

Dependiendo del tejido específico que ha de ser tratado, los componentes adicionales pueden ser utilizados antes, junto con o después del tratamiento con los ingredientes activos de la invención. Por ejemplo, es posible utilizar mejoradores de la penetración para ayudar a suministrar los ingredientes activos al tejido. Los mejoradores de la penetración apropiados pueden ser, pero no se limitan a: acetona; diversos alcoholes como etanol, oleilo o tetrahidrofurilo; alquilsulfóxidos como dimetiisulfóxido; dimetilacetamida; dimetilformamida; polietilenglicol; pirrolidonas como polivinil pirrolidona; los grados colidon (Povidone, polividone) ; urea; y diversos esteres de azúcar solubles o insolubles en agua como Tween 80 (polisorbato 80) y Span 60 (monoestearato de sorbitan) .

El pH de la composición farmacéutica o forma de dosificación, o del tejido al que se aplica la composición farmacéutica o forma de dosificación, también puede ajustarse para mejorar el suministro de uno o más ingredientes activos. Del mismo modo, la polaridad de un portador disolvente, su fuerza iónica o tonicidad también se puede ajustar para mejorar el suministro. Los compuestos como los estearatos también pueden ser adicionados a las composiciones . farmacéuticas o formas de dosificación para alterar ventajosamente la hidrofilicidad o lipofilicidad de uno o más ingredientes activos para mejorar el suministro. En este sentido, los estearatos pueden servir como un vehículo lípido para la formulación, como un agente emulsificante o tensoactivo, y como un agente mejorador del suministro o mejorador de la penetración. Diferentes sales, hidratos o solvatos de los ingredientes activos pueden ser utilizados para ajustar más las propiedades de la composición resultante. 4.2.8 Dosificación y formas de dosificación unitaria En la terapéutica humana, el doctor determinará la posología que considere más apropiada de acuerdo con el tratamiento preventivo o curativo y de acuerdo con la edad, peso, etapa de infección y otros factores específicos para el individuo que ha de ser tratado. En general, las dosis son desde cerca de 1 a cerca de 1000 mg por día para un adulto, o desde cerca de 5 a cerca de 250 mg por día o desde cerca de 10 a 50 mg por día para un adulto. En algunas modalidades, las dosis son desde cerca de 5 a cerca de 400 mg por día, y más preferentemente 25 a 200 mg por día por adulto. Las tasas de dosis desde aproximadamente 50 a cerca de 500 mg por día también son preferidas.

En otros aspectos, la presente invención propone los métodos de tratamiento o prevención de infección por el virus de hepatitis C en un individuo administrando, a un individuo que necesite de estos, una cantidad eficaz de un compuesto de la invención, o una sal aceptada para uso farmacéutico de este, con un elevado índice terapéutico contra el virus de hepatitis C. El índice terapéutico se puede medir de acuerdo con cualquier método conocido para los expertos en la técnica, como puede ser el método que se describe en los ejemplos siguientes. En algunas modalidades, el índice terapéutico es la proporción de una concentración a la que el compuesto es tóxico, a la concentración que es eficaz contra el virus de hepatitis C. La toxicidad se puede medir por cualquier técnica conocida para el experto incluida la citotoxicidad (por ejemplo la IC50 ó IC90) y la dosis letal (por ejemplo LD50 o LD90) . Del mismo modo, las concentraciones eficaces se pueden medir por cualquier técnica conocida para los expertos incluida la concentración eficaz (por ejemplo EC50 o EC90) y la dosis eficaz (por ejemplo ED50 ó ED90) . Preferentemente, mediciones similares se comparan en la proporción (por ejemplo la IC50/EC50) , IC90/EC90, LD50/ED50 o LD90/ED90) . En algunas modalidades, el índice terapéutico puede ser tan alto como 2.0, 5.0, 10.0, 15.0, 20.0, 25.0, 50.0, 75.0, 100.0, 125.0, 150.0 ó superior.

La cantidad del compuesto o composición de la invención que será eficaz en la prevención, tratamiento, manejo o mejoría de un trastorno o uno o más síntomas de este variará con el tipo y gravedad de la enfermedad o estado, y la vía mediante la cual se administre el ingrediente activo. La frecuencia y dosificación también variará de acuerdo con factores específicos para cada individuo, dependiendo del tratamiento específico (por ejemplo agentes terapéuticos o profilácticos) administrado, la gravedad del trastorno, enfermedad o estado, la vía de administración, así como la edad, peso corporal, respuesta y el historial médico del individuo. Las dosis eficaces pueden ser extrapoladas a partir de curvas de dosis-respuesta obtenidas de sistemas de prueba in vitro o en modelos animales.

Las dosis ejemplares de un compuesto son cantidades en miligramos o microgramos del compuesto activo por kilogramo de individuo o peso muestra (por ejemplo aproximadamente 10 mg por kilogramo a aproximadamente 50 miligramos por kilogramo, alrededor de 100 microgramos por kilogramo a alrededor de 25 miligramos por kilogramo, o alrededor de 100 microgramos por kilogramo, a alrededor de 10 miligramos por kilogramo) . Para las composiciones de la invención, la dosificación administrada a un individuo normalmente es 0.140 mg/kg a 3 mg/kg del peso corporal del individuo, con base en el peso del compuesto activo. Preferentemente, la dosis que se administra a un individuo es entre 0.20 mg/kg y 2.00 mg/kg, o entre 0.30 mg/kg y 1.50 mg/kg del peso corporal del individuo.

En general, el intervalo de la dosis diaria recomendada de una composición de la invención para los estados descritos en presente se encuentran dentro del intervalo desde cerca de 0.1 mg a cerca de 100 mg por día, dado como una sola dosis una vez al día o como dosis divididas a lo largo de un día. En una modalidad, la dosis diaria se administra dos veces al día en dosis igualmente divididas. Específicamente, un intervalo de dosis diaria debe ser desde cerca de 10 mg a cerca de 200 mg por día, más específicamente, entre cerca de 10 mg y alrededor de 150 mg por día, o incluso más específicamente entre cerca de 25 y alrededor de 100 mg por día. Puede ser necesario utilizar dosificaciones del ingrediente activo fuera de los intervalos descritos en la presente en algunos casos, como será evidente para los que cuentan con las habilidades ordinarias en la técnica. Además, se debe observar que el clínico o médico tratante sabrá como y cuando interpretar, ajustar o terminar el tratamiento junto con la respuesta del individuo.

Diferentes cantidades terapéuticas eficaces pueden ser aplicables para diferentes enfermedades y estados, como será bien sabido por los que cuentan con las habilidades ordinarias en la técnica. Del mismo modo, cantidades suficientes para prevenir, manejar tratar o aminorar estos trastornos, pero insuficientes para provocar, o suficientes para reducir, los efectos adversos asociados con la composición de la invención también están comprendidos por las cantidades de dosificación antes descritas y los programas de la frecuencia de la dosis. Además, cuando a un individuo se administran múltiples dosis de una composición de la invención, no todas las dosis necesitan ser las mismas. Por ejemplo, la dosis administrada al individuo puede ser aumentada para mejorar el efecto profiláctico o terapéutico de la composición o puede ser disminuida para reducir uno o más efectos colaterales que este experimentando un individuo específico.

En una modalidad específica, la dosificación de la composición de la invención o una composición de la invención, basada en el peso del compuesto activo, administrado para prevenir, tratar, manejar o mejorar un trastorno, o uno o más síntomas de este, en un individuo, es 0.1 mg/kg, 1 mg/kg, 2 mg/kg, 3 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg, 6 mg/kg, 10 mg/kg ó 15 mg/kg, o más del peso corporal de un individuo. En otra modalidad, la dosis de la composición de la invención o una composición de la invención administrada para prevenir, tratar, manejar o aminorar un trastorno, o uno o más síntomas de este en un individuo es una dosis unitaria de 0.1 mg a 200 mg, 0.1 mg a' 100 mg, 0.1 mg, a 50 mg, 0.1 mg a 25 mg, 0.1 mg a 20 mg, 0.1 mg a l5 mg, O.l mg a lO mg, 0.1 mg a 7.5 mg, 0.1 mg a 5 mg, 0.1 mg a 2.5 mg, 0.25 mg a 20 mg, 0.25 mg a 15 mg, 0.25 mg a 12 mg, 0.25 mg a 10 mg, 0.25 mg a 7.5 mg, 0.25 mg a 5 mg, 0.25 mg a 2.5 mg, 1 mg a 20 mg, 1 mg a 15 mg, 1 mg a 12 mg, 1 mg a 10 mg, 1 mg a 7.5 mg, 1 mg a 5 mg, 1 mg a 2.5 mg.

En algunas modalidades, el tratamiento o prevención se puede iniciar con uno o más dosis de carga de un compuesto o composición de la invención seguida por una o más dosis de mantenimiento. En estas modalidades, la dosis de carga puede ser, por ejemplo, alrededor de 60 a alrededor de 400 mg por día, o cerca de 100 a cerca de 200 mg por día durante un día a 5 semanas. La dosis de carga puede ser seguida por una o más dosis de mantenimiento. Cada dosis de mantenimiento puede ser, independientemente, alrededor desde cerda de 10 mg a alrededor de 200 mg por día, más específicamente, entre cerca de 25 mg y cerca de 150 mg por día o incluso más específicamente entre cerca de 25 y cerca de 80 mg por día. Las dosis de mantenimiento preferentemente se administran diario y pueden ser administradas como dosis únicas o como dosis divididas.

En algunas modalidades, una dosis de un compuesto o composición de la invención se puede administrar para obtener una concentración en estado estacionario del ingrediente activo en sangre o suero del individuo. La concentración en estado estacionario se puede determinar por la medición de acuerdo con las técnicas disponibles para los expertos y puede ser pasada en las características físicas del individuo como altura, peso y edad. En algunas modalidades, una cantidad suficiente de un compuesto o composición de la invención se administra para obtener una concentración en estado estacionario en sangre o suero del individuo desde cerca de 300 a cerca de 400 ng/mL, desde cerca de 400 a alrededor de 1600 ng/mL, o desde cerca de 600 a alrededor de 120 ng/mL. Las dosis de carga pueden ser administradas para lograr las concentraciones de sangre o suero en estado estacionario de alrededor de 1200 a alrededor de 8000 ng/mL o alrededor de 2000 a alrededor de 4000 ng/mL durante 1 a 5 días. Las dosis de mantenimiento se pueden administrar para obtener una concentración en estado estacionario en sangre o suero del individuo desde cerca de 300 a cerca de 4000 ng/mL, desde cerca de 400 a cerca de 1600 ng/mL o desde cerca de 600 a cerca de 1200 ng/mL.

En ciertas modalidades, la administración de la misma composición de la invención se puede repetir y las administraciones pueden ser separadas por al menos un día, 2 días, 3 días, 5 días, 10 días, 15 días, 30 días, 45 días 2 meses, 75 días, 3 meses ó 6 meses. En otras modalidades, la administrar del mismo agente profiláctico o terapéutico puede repetirse y la administración se puede separar por al menos un día, 2 días, 3 días, 5 días, 10 días, 15 días, 30 días, 45 días 2 meses, 75 días, 3 -meses ó 6 meses.

En algunos aspectos, la presente invención proporciona dosificaciones unitarias que contienen un compuesto de la invención, o una sal aceptada para uso farmacéutico de este, en una forma apropiada para la administración. Estas formas están descritas con detalle en lo anterior. En algunas modalidades, la dosificación unitaria contiene 1 a 1000 mg, 5 a 250 mg ó 10 a 50 mg del ingrediente activo. En modalidades particulares, las dosificaciones unitarias contienen alrededor de 1, 5, 10, 25, 50, 100, 125, 250, 500 ó 1000 mg del ingrediente activo. Estas dosificaciones unitarias pueden ser preparadas de acuerdo con las técnicas que son conocidas para quienes cuentan con las habilidades de la técnica. 4.3 Equipos La invención también proporciona los equipos o kits para utilizarlos en los métodos de tratamiento o profilaxis de infección por HCV. Los equipos pueden contener un compuesto farmacéutico o composición de la invención e instrucciones que proporcionan información a un proveedor de cuidados de la salud respecto al uso para tratar o prevenir infección bacteriana. Las instrucciones pueden ser las instrucciones pueden ser proporcionadas en forma impresa o en la forma de un medio electrónico como un disco flexible, Cd o DVD, o en forma de una dirección de sitio Web donde se pueden obtener estas instrucciones. Una dosis unitaria de un compuesto o composición de la invención puede incluir una dosis de modo que cuando se administre a un individuo, un nivel en plasma terapéutico o profiláctico eficaz del compuesto o composición se pueda mantener en el individuo durante al menos un día. En algunas modalidades, un compuesto o composición de la invención puede ser incluido como una composición farmacéutica acuosa estéril o composición en polvo seco (por ejemplo liofilizado) . En una modalidad, el compuesto es de acuerdo con la fórmula I.

En algunas modalidades se proporciona un envase apropiado. Cuando se utiliza en la presente, "envase" se refiere a una matriz o material sólido que se utiliza en forma acostumbrada en un sistema y que puede mantener dentro de los limitados fijados un compuesto o composición de la invención apropiado para administración a un individuo. Estos materiales pueden ser vidrio y plástico (por ejemplo polietileno, polipropileno y policarbonato) , botellas, viales, papel, plástico y envolturas laminadas de plástico-hoja metálica y similares. Si se emplean técnicas de esterilización con ases de electrones, el envase debe tener densidad suficientemente baja para permitir la esterilización del contenido.

Los equipos de la invención también pueden contener, además del compuesto o composición de la invención, otros compuestos o composiciones para utilizarlos con el compuesto o las composiciones como se describe en los métodos anteriores.

Los siguientes ejemplos demuestran la síntesis de los derivados de ciclosporina representativos que se utilizan en la presente invención y los siguientes ejemplos de referencia demuestran la síntesis de los intermediarios en su preparación. Estos ejemplos no están destinados, ni deben ser considerados, como limitantes del alcance de la invención. Será evidente que la invención puede ser practicada de otro modo particularmente descrito en la presente. Numerosas modificaciones y variaciones de la presente invención son posibles en vista de las enseñanzas de la presente y, por tanto, están dentro del alcance de la invención. 5. EJEMPLOS 5.1. Ejemplo 1: 3-metoxiciclosporina Una solución de 3- (mercaptobenztiazol-2-iltio) ciclosporina (0.4 g, 0.28 mmol) y ácido canforsulfónico (0.7 g, 3 mmol) en tetrahidrofuranos seco y metanol seco se calentó a 50°C durante 2 horas. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente y se adicionó bicarbonato de sodio saturado, éter y agua. Las capas fueron separadas y la fase acuosa se extrajo con dietil éter. Los extractos orgánicos combinados fueron secados sobre sulfato de magnesio anhidro, filtrados y evaporados a sequedad. La cromatografía repetida sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de diclorometano y acetato de etilo produjo 120 mg de 3-metoxiciclosporina (compuesto A) .

Las señales NMR para este compuesto en deuterocloroformo son a 5.83 ppm (sarcocina H) , 3.49 ppm (metoxi CH3) , 83.5 ppm (sarcosina C) y 58.7 ppm (metoxi CH3) . 5.2 Ejemplo 2 : 3- (2-aminoetoxi) ciclosporina A una solución de 3- (N-Fmoc-2-aminoetoxi) ciclosporina (0.52 g, 0.35 mmol) en dimetilformamida (16 mL) se adicionó piperidina (4 mL) . La mezcla se agitó bajo nitrógeno durante 1.25 h. la mezcla resultante fue diluida con acetato de etilo (25 mL) y agua (25 L) . La fase orgánica fue lavada con agua (20 mL) , salmuera (2 x 10 mL) se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y evaporó a sequedad. El material resultante fue purificado por cromatografía repetida en gel de sílice eluyendo con un gradiente de metanol/acetato de etilo hasta un 100% de metanol produciendo 3- (2-aminoetoxi) ciclosporina (compuesto B) como goma blanca (130 mg) . Las señales NMR para este compuesto en deuterocloroformo son a 5.95 ppm (sarcosina H) .

Formación de sal El compuesto B (130 mg) fue disuelto en diclorometano y se trató con una solución de ácido metansulfónico (1 L de una solución 0.1 M en diclorometano) ; la agitación se continuó durante 10 minutos. Se evaporó el disolvente y el residuo se trituró con dietil éter para obtener un sólido blanco (120 mg) . 5.3. Ejemplo 3: 3- (2-dimetilaminoetoxi) ciclosporina Una solución de 3- (2-aminoetoxi) ciclosporina (0.375 g, 0.3 mmol), formalina (0.8 mmol) y ácido fórmico (1.33 mmol) en 1,4-dioxano se calentó a 80°C durante 5 h. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente y se diluyó con bicarbonato de sodio saturado. La mezcla resultante fue extraída con diclorometano, los extractos orgánicos combinados fueron secados sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y evaporaron. El residuo fue purificado por cromatografía repetida en columna sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de metanol/diclorometano hasta 100% de metanol para obtener 3- (2-dimetilaminoetoxi) ciclosporina (compuesto C, 230 mg) .

Las señales NMR para este compuesto en deuterocloroformo son a 6.01 ppm (sarcosina H) y 82.6 ppm (sarcosina C) .

Formación de la sal A la solución del compuesto C (194 mg) en ter-butilmetiléter y metanol se adicionó una solución de ácido clorhídrico (2 mL de una solución 2.0 M en éter) . La mezcla resultante fue agitada durante 1 hora y luego se evaporo los disolventes. El residuo fue triturado con éter para obtener un sólido amarillo pálido (154 mg) . 5.4. Ejemplo 4: 3-Metoxi-4- (ga a- idroximetil leucina) -ciclosporina 3-metoxi-4- (gama-hidroximetil leucina) -ciclosporina : A una solución de 1, 4-di-acetil-3-metoxi-4- (ga a-hidoximetil leucina) -ciclosporina (275 mg) en metanol (15 mL) se adicionó 25% en peso de metóxido de sodio en metanol (0.12 mL) y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente durante 24 h en nitrógeno. El metanol fue eliminado a presión reducida y el residuo se diluyó con acetato de etilo (50 L) , se lavó con cloruro de amonio saturado (30 mL) , salmuera (30 mL) y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. Después de la eliminación de disolvente, el residuo fue purificado utilizando cromatografía líquida preparativa para producir 33 mg del compuesto del título (compuesto T) .

Las señales NMR para este compuesto en deuterocloroformo son a (ppm) 5.80 (singlete, sarcosina H) y cuatro señales doblete NH a 7.14, 7.39, 7.69 y 7.96.

LCMS (ESI ) : calculado para C63H113NnO?4 : 1247 , encontrado 1248 . 5 (M + H) + . 5.5. Ejemplo 5-13: 3-éter ciclosporinas Los ingredientes compuestos de la fórmula (I) anteriores en los que A es un residuo de la fórmula (lia) anterior, B es etilo, X es oxígeno y R es isobutilo también fueron preparados procedimiento en una forma semejante descrita en el ejemplo especificado o el ejemplo de referencia para cada producto: 5.6 Ejemplo 14: 3- (2-metoxietiltio) -4- (gama- hidroximetil leucina) ciclosporina Amoniaco líquido (30 mL) se condensó en un matraz bajo nitrógeno. Se adicionó amida de sodio (1.0 g) seguido por una solución de 4- (gama-hidroximetil leucina) -ciclosporina (1.22 g, 1.0 mmol) en ter-butilmetil éter (20 mL) . La mezcla fue agitada a -35°C durante 90 minutos. Se adicionó disulfuro de 2-metoxietilo (5.9 g) y se continuó la agitación durante otras 2 horas a -35°C. Se adicionó cloruro de amonio sólido (1.5 g) y la mezcla se agitó a -33°C durante 10 minutos. Después de calentar hasta la temperatura ambiente, la mezcla fue diluida con ter-butilmetil éter, se lavó con agua, salmuera y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. Después de la eliminación del disolvente, el residuo fue purificado utilizando cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo primero con acetato de etilo/heptano luego con metanol/acetato de etilo, para producir 50 mg de 3- (2-metoxietiltio) -4- (gama-hidroximetil leucina) ciclosporina (compuesto N) . Las señales NMR para este compuesto en deutorecloroformo son a (ppm): 5.97 (Singlete, sarcosina H) , y cuatro señales doblete en NH a 7.14, 7.47, 7.62 y 7.92. LCMS (ES): calculado para C65H117N11014S : 1307, encontrado 1308.6 (M + H) + . 5.7 Ejemplos 15-19: 3-tioéter ciclosporinas Los siguientes compuestos de fórmula (I) anteriores en los que A es un residuo de fórmula (lia) anterior, B es etilo y X es azufre también fueron preparados procedimiento en la misma forma descrita en el ejemplo especificado o el ejemplo de referencia para cada producto: 5.8 Ejemplo de referencia 1: 3- (mercaptobenztiazol- 2-iltio) ciclosporina A una solución de diisopropilamida de litio (LDA) (10.0 mmol) en tetrahidrofurano seco a -70°C bajo una atmósfera inerte se adicionó, gota a gota, una solución de ciclosporina A (1.2 g, 1.0 mmol) en tetrahidrofurano seco, se continuó la agitación a -70°C durante 1 h, después de este tiempo se adicionó en una porción disulfuro de bis-benzotiazol sólido (5 g, 15 mmol) . La suspensión resultante se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 18 h. La mezcla se filtró y el filtrado se trató con agua y se evaporó a sequedad. El residuo fue disuelto en acetato de etilo y se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y evaporó a sequedad. La gota café resultante (3.3 g) se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con acetato de etilo/isohexano para producir 3-(mercaptobenztiazol-2-iltio) ciclosporina como un sólido beige (0.33 g, ) . Las señales NMR de este compuesto en deuterocloroformo son a 6.98 ppm (sarcosina H) . 5.9 Ejemplo de referencia 2: 3- (N-Fmoc-2- aminoetoxi) -ciclosporina A una solución de 3- (mercaptobenztiazol-2-iltio) ciclosporina (0.7 g, 0.5 mmol) en tetrahidrofurano seco se adicionó ácido canforsulfónico (0.175 g, 0.75 mmol) y el éster 9H-fluoren-9-ilmetílico del ácido (2-hidroxietil) -carbámico (1.7 g, 6 mmol), la solución resultante fue calentada a 50°C durante 4.5 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se diluyó con acetato de etilo (25 mL) . La solución fue lavada con sulfato de sodio saturado (20 mL) , salmuera (20 mL) , se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y evaporó a sequedad. El residuo fue purificado por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo/diclorometano produciendo 3- (N-Fmoc-2-aminoetoxi) ciclosporina como una goma (0.52 g) . Las señales NMR para este compuesto en deuterocloroformo son a 5.9 ppm (sarcosina H) . 5.10 Ejemplo de referencia 3: Éster 9H-fluoren-9- ilmetilico del ácido (2-hidroxietil) -carbámico A una mezcla en agitación de etanolamina (0.49 g, 8 mmol) de tetrahidrofurano, agua y bicarbonato de sodio (1.5 g, 18 mmol) a 6°C se adicionó una solución de 9-fluorenilmetilcloroformato (2.27 g, 8.8 mmol) en tetrahidrofurano en una porción, la agitación se agitó durante una hora permitiendo que la mezcla se calentara a la temperatura ambiente. La mezcla fue diluida con agua y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados fueron secados sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y evaporaron para un producto crudo. El producto crudo fue recristalizado a partir de diclorometano para obtener el éster 9H-fluoren-9-ilmetílico del ácido (2-hidroxi-metil) carbámico como un sólido blanco (1.2 g) . 5.11 Ejemplo de referencia 4: 1 , 4-di-acetil-3-metoxi- 4- (gama-hidroximetil leucin) ciclosporina A una solución de 1, 3, 4-tri-acetil-4- (gama-hidroximetil leucina) -ciclosporina (295 mg) en metanol (5 mL) se adicionó ácido canforsulfónico (45 mg) ; la mezcla resultante se agitó a 50°C durante 5 h en nitrógeno. Se eliminó metanol a presión reducida y el residuo fue diluido con acetato de etilo (50 mL) , se lavó con bicarbonato de sodio saturado (30 mL) , salmuera (30 mL) y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. Después de la eliminación del disolvente, 275 mg del compuesto del título se obtuvo y se utilizó para el siguiente paso sin más purificación.

Las señales NMR para este compuesto en deuterocloroformo son a (ppm) 1.92 (singlete, OAc), 2.00 (singlete, OAc), 5.71 ppm (singlete, sarcosina H) , y 4 señales doblete NH 7.33, 7.43, 8.03 y 8.51. LCMS (ESI): calculado para C63H113N11O14 : 1331, encontrado 1332.6 (M + H) . 5.12 Ejemplo de referencia 5: 1,3, 4-tri-acetil-4- (gama-hidroximetil leucina) -ciclosporina A una solución de en ácido acético glacial (8 mL) se adicionó acetato 1, 4-di-acetil-3-feniltio-4- (gama-hidroximetil leucina) -ciclosporina (389 mg) , mercúrico (389 mg) y la mezcla resultante fue agitada a 50°C durante 3 h bajo nitrógeno. Se eliminó el ácido acético a presión reducida y el residuo fue diluido con acetato de etilo (50 mL) , se lavó con bicarbonato de sodio saturado (30 mL) , salmuera (30 mL) y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. Después de la eliminación del disolvente, el residuo fue purificado utilizando cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo primero con acetato de etilo/heptano (30:70), luego metanol/acetato de etilo (0.2/100), para producir 280 mg del compuesto del título. 5.13 Ejemplo de referencia 6: 1, 4-di-acetil-3- feniltio-4- (gama-hidroximetil leucina) - ciclosporina A una solución de 3-feniltio-4- (gama-hidroximetil Leucina) -ciclosporina (550 mg) en diclorometano seco (10 mL) se adicionaron 4-diinetilamino piridina (310 mg) , trietilamina (0.35 mL) y anhídrido acético (0.16 mL) en este orden, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 60 h bajo nitrógeno. Esta fue diluida con acetato de etilo (50 mL) , se lavó con agua (50 mL) , HCl 1.0 N (50 mL) , bicarbonato de sodio saturado (50 mL) , salmuera (50 mL) y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. Después de la eliminación del disolvente y el secado en vacío, se obtuvo 389 mg del compuesto del título.

Las señales NMR para este compuesto en deuterocloroformo son a (ppm) 2.00 (3H, singlete, OAc), 2.04 (3H, singlete, OAc), 6.11 (1H) , (singlete, sarcosina H) , 7.20, 7.37, (6H, multiplote, NH y fenilo), y 3 señales doblete NH 7.44, 8.03 y 8.52. 5.14 Ejemplo de referencia 7: 3-feniltio-4- (gama- hidroximetil Leucina) -ciclosporina Amoniaco líquido (30 mL) se condensó en un matraz bajo nitrógeno. Se adicionó amida de sodio (1.0 g) seguido por una solución de 4- (gama-hidroximetil leucina) -ciclosporina (1.22 g, 1.0 mmol) en ter-butilmetil éter (15 mL) . La mezcla se agitó a -35°C durante 90 min. Después, una solución de disulfuro de difenilo (4.4 g, 20 mmol) en ter-butil metil éter (15 mL) se adicionó y se continuó la agitación durante otras 2 h a -35°C. Se adicionó cloruro de amonio sólido (1.5 g) y la mezcla se agito a -33°C durante 10 minutos. Después del calentamiento a temperatura ambiente, la mezcla fue diluida con ter-butil metil éter (50 mL) , se lavó con agua (50 mL) , salmuera (50 mL) y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. Después de la eliminación del disolvente, el residuo fue purificado utilizando cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo primero con acetato de etilo/heptano (30:70), luego metanol/acetato de etilo (0.2:100), para producir 550 mg del compuesto del título.

Las señales NMR para este compuesto en deuterocloroformo son a (ppm) 6.12 (1H, singlete, sarcosina H) , 7.33 (5H, multiplote, pH) y 4 señales doblete NH 7.14, 7.39, 7.65 y 7.96. 5.15 Ejemplo 20: Sales de [(R)-2-(N,N- dimetilamino) etiltio-Sar] 3 [4' -hidroxi-MeLeu] 4- siclosporina (compuesto O) El presente ejemplo demuestra las sales aceptadas para uso farmacéutico de la invención que presentan solubilidad ventajosa para utilizarlas en los métodos de la invención.

[ (R) -2- (N, -dimetilamino) etiltio-Sar] 3 [4' -hidroxi-MeLeu] 4-ciclosporina A (1.0 g) se disolvió en 10 L de etiléter. El ácido correspondiente (1.0 equivalente) se adicionó y se agitó a 25°C durante 2 h. El precipitado se recolectó por filtración y se lavó con éter frío, se secó en vacío y se analizó. En los ejemplos de las sales acetato y propionato 10 L de heptano fue adicionado a la solución de éter para favorecer la precipitación. La solubilidad de cada sal en búfer biológico, a saber, salina amortiguada con fosfato (PBS) de Dubelcco) se determinó utilizando titulación turbidimétrica (Schote y col., 2002. J Pharm Sciences 91 (3) : 856) . El búfer pH 7.2 tiene concentraciones fisiológicas de calcio, magnesio, sodio, potasio, fosfato y cloro. La solubilidad de ciclosporina en PBS es 0.015 a 0.020 i-iM, mientras que las sales son solubles en el intervalo de 0.45 a 0.65 mM. Se prepararon las siguientes sales del compuesto O: Sal Punto de Resonancia sarcosina Solubilidad fusión (°C) XH -NMR (ppm) PBS mM Fosfato 167-169 5.84 0.534 Citrato 148-150 5.91 0.532 Acetato 117-119 5.92 0.612 HCl 175-178 5.81 0.497 Metansulfonato 150-155 5.82 0.537 Propionato 110-112 5.95 0.522 5.16: Ejemplo 21: Actividad HCV El ejemplo presente demuestra que los compuestos de la invención son eficaces contra infección de HCV.

Además, el ejemplo presente demuestra que los compuestos de la invención tienen eficacia ventajosa, o citotoxicidad, o ambos si se comparan con ciclosporina A.

Los compuestos de la presente invención (como sales preparadas como se describe en los Ejemplos 1 a 21) fueron analizadas para la actividad contra HCV utilizando los métodos adaptados de los descritos por Kriger y col., 2001, Journal of Virology, 75: 4614-4624, Petschmann y col., Jorunal of Virology 76: 4008-4021, y utilizando construcciones de RNA de HCV como se describe en la Patente No. 6,630,343. El contenido de estas referencias se incorpora por este medio para referencia en sus totalidades.

Los compuestos fueron examinados en la línea de células de hematoma humano ET (lub ubi neo/ET) , un replicón RNA de HCV que contiene un indicador luciferasa estable (LUC) . El ET del replicón RNA de HCV contiene el extremo 5' de HCV (con el Sitio de Entrada del Ribosoma Externo de HCV (IRES) y los primeros cinco aminoácidos de la proteína central de HCV) que impulsa la producción de una luciferasa de luciérnaga (LUC) , ubiquitina y la proteína de fusión neomicina fosfotransferasa (NeoR) . La disociación de ubiquitina libera las proteínas LUC y NeoR. El elemento EMCV IRES controla la traducción de las proteínas estructurales de HCV NS3-NS5. La proteína NS3 disocia la poliproteína HCV para liberar las proteínas NS3, NS4A, NS4B, NS5A y NS5B maduras que son necesarias para la replicación o multiplicación de HCV. En el extremo 3' del replicón esta el NTR3' auténtico de HCV. La actividad del indicador LUC es directamente proporcional a los niveles de replicación del HCV y los compuestos antivirales control positivo producen una respuesta antiviral reproducible utilizando el punto final LUC.

Los compuestos fueron disueltos en DMSO en concentraciones cinco semi log cada una, abarcando desde 0.02 a 2.0 µM, 0.03 a 3 µM, 2.0 a 20 µM ó 1 a 100 µM. cultivos subconfluentes de la línea ET fueron plaqueados en placas de 96 pozos dedicadas para el análisis de los números de células (citotoxicidad) o actividad antiviral y el día siguiente los compuestos fueron adicionados a los pozos apropiados. Las células fueron procesadas 72 h después cuando las células eran todavía subconfluentes. La actividad antiviral fue expresada como EC5o y ECgo, la concentración eficaz del compuesto que redujo la replicación viral 50% y 90%, respectivamente. Los valores EC50 y EC90 del compuesto fueron obtenidos de los niveles de RNA de HCV evaluados como actividad LUC derivadas del replicón RNA de HCV. La citotoxicidad fue expresada como la IC50 y la IC90, la concentración del compuesto que inhibió la viabilidad celular en un 50% y 90%, respectivamente. Los valores IC50 e IC90 del compuesto fueron calculados utilizando un ensayo colorimétrico como una indicación de los números de células y la citotoxicidad. La actividad del indicador LUC es directamente proporcional a los niveles de RNA de HCV en la línea de células humanas . El ensayo del HCV-replicón fue validado en experimentos paralelos utilizando interferon interferon alfa-2B como control positivo. La ciclosporina también fue analizada por medio de comparación. Los compuestos de la invención inhiben potentemente la replicación del HCV en célula hepáticas humanas a un mayor grado que la ciclosporina. Además, si se considera el nivel de citotoxicidad, muchos de los compuestos de esta invención presentan un margen de seguridad más amplio (por ejemplo, IC50 de citotoxicidad contra EC50 antiviral) en comparación con ciclosporina .

Los resultados fueron como sigue (a menos que se indique de otro modo todos los valores se expresan en nM) , "N/D" significa que los datos no fueron determinados . 5.17 Ejemplo 22: Unión de ciclofilina y actividad HCV El presente ejemplo proporciona otros métodos para evaluar la eficacia de los compuestos de la invención para el tratamiento o prevención de infección de HCV en un individuo que necesite de estos.

Se ha demostrado que algunas ciclosporinas son eficaces en el tratamiento o prevención de infección de HCV mediante la unión de la ciclosporina a ciclofilina B (CyPB) . Ver Watashi y col., 2005, Molecular Cell 19: 111-122; Nakaga a y col., 2005 Gastroenterology 129 (3): 1031-41; el contenido de la cual se incorpora por este medio para referencia en su totalidad. Aunque se pretende apegarse a ninguna teoría particular de operación, se considera que ciclofilina B es crucial para la replicación eficiencia del genoma de HCV. La ciclosporina A y los derivados de ciclosporina que inhiben la ciclofilina B pueden reducir drásticamente la replicación del HCV en ensayos normales.

Por consiguiente, los compuestos de la presente invención han demostrado ser eficaces para el tratamiento o prevención de infección por HCV evaluando su unión o modulación de ciclofilina, por ejemplo ciclofilina B. la modulación de ciclofilina mediante un compuesto de esta invención se mide de acuerdo con las técnicas normalizadas, por ejemplo, las descritas en Watashi y col., 2005, las descritas en Nakawaga y col., 2005, o las descritas en Billich y col., J. Virol . 69: 2451-2461, el contenido de las cuales se incorpora por este medio para referencia en su totalidad. 5.18: Ejemplo 23: Actividad HIV Los compuestos de la presente invención fueron analizados para la actividad anti-retroviral contra virus de inmunodeficiencia humana-1 (HIV) utilizando infección de la línea de células T-linfoblastoide humana, CEM-SS, con el HIV cepa HIV-1IIIB (Weislo y col., 1989, J. Na ti . Cáncer Inst . 81: 577-586). En este ensayo de citoprotección MTS, cada experimento incluyó pozos control de células (células solamente) , pozos control de virus (células más virus), pozos de toxicidad de fármaco (células fármaco solamente) , pozos control colorimétrico de fármaco (fármaco solamente) así como pozos experimentales (fármaco más células más virus) . Los compuestos primero fueron disueltos en DMSO y se analizaron utilizando diluciones 6 semi log, comenzando con una alta concentración de 20 ó 2 µM. A cada pozo se adicionó HIV-1RF en un volumen de 50 µL, la cantidad de virus determinada para dar aproximadamente 90% de aniquilación celular en los 6 días después de la infección. A la terminación del ensayo, las placas del ensayo fueron obtenidas con el colorante MTS a base de tetrazolio, soluble (CellTiter 96 Reagent, Promega) para determinar la viabilidad de las células y cuantificar la toxicidad del compuesto. El MTS se metaboliza por las enzimas de la mitocondria de células metabólicamente activas para producir un producto formazan soluble, proporcionando un análisis cuantitativo de la viabilidad celular y la citotoxicidad del compuesto. El ensayo fue validado en experimentos paralelos utilizando Zidovudine (3'-azido-3' -deoxitimidina o AZT) como control positivo. El ensayo incluyo las determinaciones de la EC50 del compuesto (la concentración que inhibe la replicación del virus en 50%), la IC50 (concentración que da como resultado 50% de la inhibición del crecimiento de las células) y el índice de selectividad (IC50/EC50) .

Los resultados para los compuestos seleccionados fueron como sigue (a menos que se indique de otro modo todos los valores se expresan en nM) .

Actividad Citotoxicidad índice de HIV selectividad Compuesto ECso ICso IC50/EC50 D 1360 >20000 >15 H 1380 13300 10 L 1930 19500 10 N 350 20000 57 0 60 20000 JJ3 P 160 6150 38 Q 230 1 ^880 82 R 500 17300 35 S 90 14000 156 T 60 18000 300 u 110 13400 122 V 440 >20000 >45 w 6S0 >20000 >29 X 1000 >20000 >20 V 520 >20000 >3S 5.19 Ejemplo 24: Formas de dosificación oral Uno o más compuestos de la invención se pueden formular como cápsula. Tal cápsula puede contener 10 a 200 mg del compuesto y uno o más excipientes seleccionados del grupo que consiste en celulosa microcristalina, almidón pregelatinizado, lactosa, glicolato almidón de sodio, crospovidone, povidone, hidroxipropilcelulosa, estearato de magnesio y dióxido de silicio. La composición resultante se puede encapsular con uno o más composiciones de encapsulación normales como gelatina o un plastificador.

Uno o más de los compuestos de la invención se puede formular como una sal en un jarabe o elixir. El compuesto o los compuestos pueden estar en una concentración total de 5 a 50 mg/mL. El jarabe o elixir además puede contener polietilenglicol, propilenglicol, mezclas de polietilen glicol, PEG 400, un copolímero en bloques de óxido de etileno y óxido de propileno (por ejemplo poloxamer 407), polisorbato 20, etanol, azúcar, ácido cítrico y/o saborizante.

Todas las publicaciones y solicitudes de patente mencionadas en esta especificación se incorporan en la presente para referencia como si cada publicación o solicitud de patente individual fuera específica e individualmente indicada como incorporada para referencia, aunque la invención ha sido descrita en términos de las diferentes modalidades preferidas, los expertos se darán cuenta que algunas modificaciones, sustituciones, omisiones y cambios pueden hacerse sin apartarse del espíritu de esta. Por consiguiente, se pretende que el alcance de la presente invención se limite solamente por el alcance de las reivindicaciones siguientes, incluidos los equivalentes de estas.

Claims (25)

REIVINDICACIONES

1. ün método de tratamiento o prevención de infección del virus de hepatitis C en un individuo que necesite de este, el método consiste en administrar al individuo una cantidad terapéutica y eficaz de un derivado de ciclosporina de la fórmula general (I) : en donde: 0) A es residuo de la fórmula (lia) ó (Ilb) B es etilo, 1-hidroxietilo, isopropilo ó n-propilo; R es alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene de 1 a 6 átomos de carbono, como una opción sustituido por uno o más grupos R que pueden ser iguales o diferentes; alquenilo de cadena lineal o ramificada con desde 2 a 6 átomos de carbono, como una opción, sustituido por uno o más grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, amino, monoalquilamino y dialquilamino; alquinilo de cadena lineal o ramificada con desde 2 hasta 6 átomos de carbono, como una opción, sustituido por uno o más grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, amino, monoalquilamino y dialquilamino; cicloalquilo que tenga desde 3 hasta 6 átomos de carbono, como una opción, sustituido por uno o más grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, amino, monoalquilamino y dialquilamino; alcoxicarbonilo de cadena lineal o ramificada que tenga desde 1 hasta 6 átomos de carbono; R es isobutilo o 2-hidroxiisobut?lo; X es -S(0)n- u oxígeno; 3 R se selecciona del grupo que consiste en halógeno, hidroxi, carboxilo, alcoxicarbonilo, -NR R y -NR (CH2)mNR4R5; R4 y R5, que pueden ser iguales o diferentes, representan: hidrogeno; alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono, como una opción ? sustituido por uno o más grupos R que pueden ser iguales o diferentes; alquenilo o alquinilo de cadena lineal o ramificada que contiene desde 2 hasta 6 átomos de carbono; cicloalquilo que contenga de 3 a 6 átomos de carbono, opcionalmente sustituido por alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono; fenilo opcionalmente sustituido por desde 1 a 5 grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, alcoxi, alcoxicarbonilo, amino, alquilamino y dialquilamino; un anillo heterocíclico que puede estar saturado o insaturado que contenga 5 a 6 átomos del anillo y desde 1 a 3 heteroátomos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados de nitrógeno, azufre y oxígeno; ó R y R , junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico saturado o insaturado que contiene de 4 a 6 átomos del anillo, cuyo anillo puede opcionalmente contener otro heteroátomo seleccionado del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno y azufre y puede opcionalmente estar sustituido por desde 1 hasta 4 grupos que pueden ser iguales o diferentes seleccionados del grupo que consiste en alquilo, fenilo y bencilo; R es hidrógeno o alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 1 a 6 átomos de carbono; 7 R se selecciona del grupo que consiste en halógeno, hidroxi, carboxilo, alcoxicarbonilo y -NR 8R9; Q Q R y R que pueden ser iguales o diferentes, cada uno representa hidrógeno o alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 1 a 6 átomos de carbono o alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 1 a 6 átomos de carbono; n es cero, uno o dos; m es un entero desde 2 a 4; o una sal aceptada para uso farmacéutico de este.

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, en el que A es un residuo de fórmula (lia) y B es etilo.

3. El método de conformidad con la reivindicación 1, en el cual R es 2-aminoetilo, 2-aminopropilo, 2-monoalquilaminoetilo, 2-monoalquilaminopropilo, 2-dialquilaminoetilo, 2-dialquilaminopropilo, 2-monocicloalquilaminoetilo, 2-monocicloalquilaminopropilo, 2-dicicloalquiloaminoetilo o 2-dialquilaminopropilo, en donde alquilo es de cadena lineal o ramificada que contiene desde 1 a 4 átomos de carbono, y cicloalquilo contiene desde 3 a 6 átomos de carbono.

4. El método de conformidad con la reivindicación 1, en el que X es oxígeno o azufre.

5. El método de conformidad con la reivindicación 1, en el que X es oxígeno.

6. El método de conformidad con la reivindicación 1, en el que X es azufre.

7. El método de conformidad con la reivindicación 1, en el cual X es azufre y R se selecciona del grupo que consiste en dimetilaminoetilo, dietilaminoetilo, metil-ter-butilamino y etil-ter-butiloaminoetilo.

8. El método de conformidad con la reivindicación 1, en el que el derivado de ciclosporina de fórmula (1) es: 3-metoxiciclosporina; 3- (2-aminoetoxi) ciclosporina; 3- (2-N, N-dimetilaminoetoxi) ciclosporina; 3- (isopropoxi) ciclosporina; 3- (2-etilbutoxi) ciclosporina; 3- (2, 2-dimetilpropoxi) ciclosporina; 3- (2-hidroxietoxi) ciclosporina; 3- (3-hidroxipropoxi) ciclosporina; 3- [2- (N-metilamino) etoxi] ciclosporina; 3- [2- (N-metil-N-isopropilamino) etoxi] ciclosporina; 3- [2- (piperidin-1-il) etoxi] ciclosporina; 3- [2- (N-morfolin) etoxi) ciclosporina; 3-etoxiciclosporina; 3- (2-metoxietiltio) -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporina; 3- [ (R) -2- (N, N-dimetilamino) etiltio-Sar] -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporina; 3-etiltiociclosporina; 3-propeniltiociclosporina; 3- [ (2-metoxi) etiltio] ciclosporina; 3- (metiltio) -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporina; 3- (metoxi) -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporina; 3- (prop-2-en-l-oxi) -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporina; 3- (isopropoxi) -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporina; 3- (etoxi) -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporina; 3- [2- (metoxi) etoxi] -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporina; 3- [3- (metoxi) propoxi] -4- (gama-hidroximetileucina) ciclosporina; o una sal aceptada para uso farmacéutico de estos

9. El método de conformidad con la reivindicación 1, en el que el derivado de ciclosporina se administra por vía oral.

10. El método de conformidad con la reivindicación 1, en el que la cantidad del derivado de ciclosporina administrada es desde cerca de 1 a cerca de 1000 mg por día.

11. El método de conformidad con la reivindicación 10, en el cual la cantidad del derivado de ciclosporina administrada es desde cerca de 25 a 200 mg por día.

12. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el individuo es refractario o resistente al tratamiento con inteferon.

13. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el individuo esta co-infectado con HIV.

14. El uso de un derivado de ciclosporina de la fórmula general (I) : (I) en donde A, B, R , R y X son como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o una sal aceptada para uso farmacéutico de estos, en la fabricación de un medicamento para la prevención y/o tratamiento de infección por virus de hepatitis C.

15. Un método para el tratamiento o prevención de infección del virus de hepatitis C en un individuo, el método consiste en administrar una cantidad terapéutica eficaz de 3- [ (R) -2- (N, -dimetilamino) etiltio-Sar] -4-(gama-hidroximetil leucina) ciclosporina, o una sal aceptada para uso farmacéutico de esta.

16. El uso de 3- [ (R) -2- (N, N-dimetilamino) etiltio-Sar] -4-(gama-hidroximetil leucina) ciclosporina, o una sal aceptada para uso farmacéutico de esta, en la fabricación de un medicamento para la prevención y/o tratamiento de infección por virus de hepatitis C.

17. Un método para el tratamiento o prevención de infección de virus de hepatitis C en un individuo, el método consiste en administrar una cantidad terapéutica eficaz de un derivado de ciclosporina de la fórmula general (I) : 0) en donde : A es residuo de la fórmula (lía) ó (Ilb) B es etilo, 1-hidroxietilo, isopropilo ó n-propilo ; R es : alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene de 1 a 6 átomos de carbono, como una opción 3 sustituido por uno o mas grupos R que pueden ser iguales o diferentes; alquenilo de cadena lineal o ramificada con desde 2 a 6 átomos de carbono, como una opción, sustituido por uno o más grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, amino, monoalquilamino y dialquilamino; alquinilo de cadena lineal o ramificada con desde 2 hasta 6 átomos de carbono, como una opción, sustituido por uno o más grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, amino, monoalquilamino y dialquilamino; cicloalquilo que tenga desde 3 hasta 6 átomos de carbono, como una opción, sustituido por uno o más grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, amino, monoalquilamino y dialquilamino; alcoxicarbonilo de cadena lineal o ramificada que tenga desde 1 hasta 6 átomos de carbono; es isobutilo o 2-hidroxiisobutilo; X es -S(0)n- u oxígeno; 3 R se selecciona del grupo que consiste en halógeno, hidroxi, carboxilo, alcoxicarbonilo, -NR 4R5 y -NR6 (CH2)mNR4R5; R y R , que pueden ser iguales o diferentes, representan: hidrogeno; alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono, como una opción 7 sustituido por uno o más grupos R que pueden ser iguales o diferentes; alquenilo o alquinilo de cadena lineal o ramificada que contiene desde 2 hasta 6 átomos de carbono; cicloalquilo que contenga de 3 a 6 átomos de carbono, opcionalmente sustituido por alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono; fenilo opcionalmente sustituido por desde 1 a 5 grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, alcoxi, alcoxicarbonilo, amino, alquilamino y dialquilamino; un anillo heterocíclico que puede estar saturado o insaturado que contenga 5 a 6 átomos del anillo y desde 1 a 3 heteroátomos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados de nitrógeno, azufre y oxígeno; o R 4 y R5, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico saturado o insaturado que contiene de 4 a 6 átomos del anillo, cuyo anillo puede opcionalmente contener otro heteroátomo seleccionado del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno y azufre y puede opcionalmente estar sustituido por desde 1 hasta 4 grupos que pueden ser iguales o diferentes seleccionados del grupo que consiste en alquilo, fenilo y bencilo; R es hidrógeno o alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 1 a 6 átomos de carbono; R se selecciona del grupo que consiste en halógeno, hidroxi, carboxilo, alcoxicarbonilo y -NR 8R9; R 8 y R9 que pueden ser iguales o diferentes, cada uno representa hidrógeno o alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 1 a 6 átomos de carbono o alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 1 a 6 átomos de carbono; n es cero, uno o dos; m es un entero desde 2 a 4; o una sal aceptada para uso farmacéutico de este.

18. Una sal aceptada para uso farmacéutico del derivado de ciclosporina de la fórmula general (I) : ¡T) en donde: A es residuo de la fórmula (lia) ó (Ilb) : B es etilo, 1-hidroxietilo, isopropilo ó n-propilo; R1 es alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene de 1 a 6 átomos de carbono, como una opción 3 sustituido por uno o más grupos R que pueden ser iguales o diferentes; alquenilo de cadena lineal o ramificada con desde 2 a 6 átomos de carbono, como una opción, sustituido por uno o más grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, amino, monoalquilamino y dialquilamino; alquinilo de cadena lineal o ramificada con desde 2 hasta 6 átomos de carbono, como una opción, sustituido por uno o más grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, amino, monoalquilamino y dialquilamino; cicloalquilo que tenga desde 3 hasta 6 átomos de carbono, como una opción, sustituido por uno o más grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, amino, monoalquilamino y dialquilamino; alcoxicarbonilo de cadena lineal o ramificada que tenga desde 1 hasta 6 átomos de carbono; R es isobutilo o 2-hidrox??sobut?lo; X es -S(0)n- u oxígeno; 3 _, R se selecciona del grupo que consiste en halógeno, hidroxi, carboxilo, alcoxicarbonilo, -NR 4R5 y -NR6 (CH2)mNR4R5; R4 y R5, que pueden ser iguales o diferentes, representan: hidrogeno; alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono, como una opción sustituido por uno o más grupos R que pueden ser iguales o diferentes; alquenilo o alquinilo de cadena lineal o ramificada que contiene desde 2 hasta 6 átomos de carbono; cicloalquilo que contenga de 3 a 6 átomos de carbono, opcionalmente sustituido por alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono; fenilo opcionalmente sustituido por desde 1 a 5 grupos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, alcoxi, alcoxicarbonilo, amino, alquilamino y dialquilamino; un anillo heterocíclico que puede estar saturado o insaturado que contenga 5 a 6 átomos del anillo y desde 1 a 3 heteroátomos que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados de nitrógeno, azufre y oxígeno; ó R y R , junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico saturado o insaturado que contiene de 4 a 6 átomos del anillo, cuyo anillo puede opcionalmente contener otro heteroátomo seleccionado del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno y azufre y puede opcionalmente estar sustituido por desde 1 hasta 4 grupos que pueden ser iguales o diferentes seleccionados del grupo que consiste en alquilo, fenilo y bencilo; R es hidrógeno o alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 1 a 6 átomos de carbono; 7 R se selecciona del grupo que consiste en halógeno, hidroxi, carboxilo, alcoxicarbonilo y -NR 8R9; R 8 y R9 que pueden ser iguales o diferentes, cada uno representa hidrógeno o alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 1 a 6 átomos de carbono o alquilo de cadena lineal o ramificada que contenga de 1 a 6 átomos de carbono; n es cero, uno o dos; m es un entero desde 2 a 4; o una sal aceptada para uso farmacéutico de este.

19. La sal aceptada para uso farmacéutico de la reivindicación 18, caracterizada porque la sal es un fosfato, citrato, acetato, cloruro, metansulfonato o propionato.

20. Un hidrato de la sal de la reivindicación 18.

21. Una sal aceptada para uso farmacéutico de 3-[(R)-2-(N, N-dimetilamino) etiltio-Sar] -4- (gama-hidroximetil leucina) ciclosporina .

22. La sal de la reivindicación 21, caracterizada porque la sal es un fosfato, citrato, acetato, cloruro, metansulfonato o propionato.

23. Un hidrato de la sal de la reivindicación 21 o la reivindicación 22.

24. Un compuesto de fórmula general (I) como se define en la reivindicación 1, en la que A es un residuo de fórmula (lia) como se define en la reivindicación 1, B es etilo, X es oxígeno, R 1 es metilo y R2 es 2-h?drox? isobutilo, el cual es 3-metoxi-4- (gama-hidroximetil leucina) ciclosporina .

25. Una composición que contiene el compuesto de la reivindicación 24, en combinación ' con uno o más portadores compatibles y aceptados para uso farmacéutico.