LT5064B - Avies pararaupų viruso kamienai, skirti panaudoti prieš organų fibrozę - Google Patents
Avies pararaupų viruso kamienai, skirti panaudoti prieš organų fibrozę Download PDFInfo
- Publication number
- LT5064B LT5064B LT2003008A LT2003008A LT5064B LT 5064 B LT5064 B LT 5064B LT 2003008 A LT2003008 A LT 2003008A LT 2003008 A LT2003008 A LT 2003008A LT 5064 B LT5064 B LT 5064B
- Authority
- LT
- Lithuania
- Prior art keywords
- fibrosis
- preventive
- manufacture
- curative effect
- human
- Prior art date
Links
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 title claims abstract description 9
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 title claims description 23
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 title claims description 20
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title claims description 19
- 241000283898 Ovis Species 0.000 title 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 21
- 241000700639 Parapoxvirus Species 0.000 claims abstract description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 18
- 230000009982 effect on human Effects 0.000 claims description 14
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 claims description 14
- 230000003510 anti-fibrotic effect Effects 0.000 claims description 11
- 241000700665 Sheeppox virus Species 0.000 claims description 10
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 7
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 claims description 4
- 241001494479 Pecora Species 0.000 claims description 3
- 108091027544 Subgenomic mRNA Proteins 0.000 claims description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 2
- 244000309464 bull Species 0.000 claims 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 abstract description 28
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 6
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 abstract description 4
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 abstract description 2
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 abstract description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 36
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 20
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 19
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 12
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 11
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 11
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 10
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 7
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 7
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 6
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 6
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 6
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 6
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 6
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 6
- 101000950981 Bacillus subtilis (strain 168) Catabolic NAD-specific glutamate dehydrogenase RocG Proteins 0.000 description 6
- 102000016901 Glutamate dehydrogenase Human genes 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 210000003995 blood forming stem cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 4
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 4
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 4
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 4
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 3
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 3
- 230000003352 fibrogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 3
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 3
- 208000001378 Carbon Tetrachloride Poisoning Diseases 0.000 description 2
- 108020004206 Gamma-glutamyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 2
- YIQKLZYTHXTDDT-UHFFFAOYSA-H Sirius red F3B Chemical compound C1=CC(=CC=C1N=NC2=CC(=C(C=C2)N=NC3=C(C=C4C=C(C=CC4=C3[O-])NC(=O)NC5=CC6=CC(=C(C(=C6C=C5)[O-])N=NC7=C(C=C(C=C7)N=NC8=CC=C(C=C8)S(=O)(=O)[O-])S(=O)(=O)[O-])S(=O)(=O)O)S(=O)(=O)O)S(=O)(=O)[O-])S(=O)(=O)[O-].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+] YIQKLZYTHXTDDT-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013245 carbon tetrachloride model Methods 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 210000001728 clone cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 102000006640 gamma-Glutamyltransferase Human genes 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 2
- BGNGWHSBYQYVRX-UHFFFAOYSA-N 4-(dimethylamino)benzaldehyde Chemical compound CN(C)C1=CC=C(C=O)C=C1 BGNGWHSBYQYVRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CRCWUBLTFGOMDD-UHFFFAOYSA-N 7-ethoxyresorufin Chemical compound C1=CC(=O)C=C2OC3=CC(OCC)=CC=C3N=C21 CRCWUBLTFGOMDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- RZSYLLSAWYUBPE-UHFFFAOYSA-L Fast green FCF Chemical compound [Na+].[Na+].C=1C=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C(=CC(O)=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=CC=1N(CC)CC1=CC=CC(S([O-])(=O)=O)=C1 RZSYLLSAWYUBPE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- -1 GGT Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010002885 Polygeline Proteins 0.000 description 1
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 238000008050 Total Bilirubin Reagent Methods 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 206010046865 Vaccinia virus infection Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- FXAGBTBXSJBNMD-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound CC(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O FXAGBTBXSJBNMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 231100000569 acute exposure Toxicity 0.000 description 1
- 231100000439 acute liver injury Toxicity 0.000 description 1
- 206010001584 alcohol abuse Diseases 0.000 description 1
- 208000025746 alcohol use disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000037319 collagen production Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 201000005332 contagious pustular dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 210000000208 hepatic perisinusoidal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004024 hepatic stellate cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 1
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229960003350 isoniazid Drugs 0.000 description 1
- QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N isoniazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=NC=C1 QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001865 kupffer cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000003228 microsomal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 230000007096 poisonous effect Effects 0.000 description 1
- 229960004250 polygeline Drugs 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000036573 scar formation Effects 0.000 description 1
- BXSDMMPOQRECKB-UHFFFAOYSA-N sodium;chloro-(4-methylphenyl)sulfonylazanide;hydrate Chemical compound O.[Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 BXSDMMPOQRECKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 208000007089 vaccinia Diseases 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
- A61P25/32—Alcohol-abuse
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24211—Parapoxvirus, e.g. Orf virus
- C12N2710/24232—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Virology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Addiction (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Šis išradimas yra susijęs su inaktyvuotų pararaupų virusų panaudojimu gamyboje vaistų, skirtų gydyti ligas, kurias žmogaus organizme lydi padidintas kolageno susikaupimas, galintis paveikti vidaus organus, tokius kaip kepenys, ir odą bei ją lydinčias struktūras. Šis išradimas ypatingai yra susijęs su kepenų fibroze ir kepenų ciroze, sukeltas virusinio hepatito arba etanolio vartojimo, o taip pat cistine fibroze.ą
Description
Šis išradimas yra susijęs su inaktyvuotų pararaupų virusų (parapox virus) panaudojimu žmonėms ligų, kurias lydi padidintas kolageno susikaupimas, dėl kurio gali būti paveikti ir vidaus organai, tokie kaip kepenys, ir oda bei ją lydinčios struktūros, profilaktikai ir gydymui. Ypatingai šis išradimas yra susijęs su kepenų fibroze ir kepenų ciroze, po virusinio hepatito arba etanolio sukeltomis kepenų ligomis, o taip pat cistine fibroze.
Šis išradimas yra ypatingai susijęs su avies pararaupų viruso izoliatų, pvz. D1701, orf-11, graikų orf 176 kamieno, graikų orf 155 kamieno, Naujosios Zelandijos (NZ) izoliatų, pvz. NZ2, NZ7 ir NZ10, bei Baypamun®, kuris išvestas iš D1701, panaudojimu žmonėms.
Apart pradinių kamienų, šis išradimas taip pat yra susijęs su palikuonimis, kurie yra gauti persėjant ir/arba adaptuojant prie konkrečių ląstelių, pvz. WI38. Apart pilnų virusų, šis išradimas taip pat yra susijęs su šių virusų dalimis arba fragmentais. Dalimis yra laikomi genominiai arba subgenominiai fragmentai, kurie yra ekspresuojami naudojant tam tikrus vektorius, pavyzdžiui, vaccinia, tinkamose sistemose, pavyzdžiui, fibroblastų ląstelių kultūrose. Fragmetais yra laikomos frakcijos, kurios gaunamos biochemiškai gryninant, pavyzdžiui, chromatografijos būdu, arba dalelės, kurios yra gautos panaudojus fizikinius metodus, tokius kaip suardymas ultragarsu.
Žinoma, kad pararaupų virusas gali stimuliuoti nespecifines imunines reakcijas žinduoliuose. Baypamun®, kuris yra chemiškai inaktyvuoto avies pararaupų viruso D1701 kamieno preparatas, yra naudojamas gyvūnų infekcinių ligų profilaktikai, metafilaksijai ir gydymui ir streso sukeltų ligų prevencijai.
Nors DE 3 504 940 A (Mayr, Anton) patente aprašomas teigiamas Baypamun® poveikis būklėse, tokiose kaip imunonepakankamumas, kurį sukėlė didelės energijos radiacija, chemoterapija, AIDS, imunosupresija, su amžiumi susijęs pakenkimas ir detoksikaciniai poveikiai, jame nėra aprašyta tiesioginis kepenų fibrozės sumažinimas. DE 3 504 940 taip pat aprašoma, kad Baypamun® padidina auglio gydymo efektyvumą kaip papildas ir kad jis apsaugo naujagimius nuo ligų, sukeltų nepakankamos motinos imuninės apsaugos.
Priimant dabartinę žinių padėtį kaip išeities tašką, dabar netikėtai buvo rasta, kad inaktyvuotų pararaupų virusų įvedimas gali sumažinti kepenų fibrozę arba apsaugoti nuo jos. Gyvūnų modeliuose šis poveikis buvo rastas anglies tetrachlorido sukeltos kepenų fibrozės atveju, kuris yra paremtas toksiniu kepenų pakenkimu, ir kepenų fibrozės, kuri yra sukelta panaudojant heterologinį serumą ir kuriame nėra kepenų uždegimo, atveju. Terapinio poveikio mastas taip pat yra netikėtas: perdėtas kolageno, kuris yra susijęs su kepenų fibroze, gaminimasis yra inhibuojamas 60 % anglies tetrachlorido modelio atveju, ir jis yra beveik pilnai inhibuojamas serumo modelio atveju. Sutinkamai su šiais rezultatais iš ilgalaikių eksperimentų, iš ūmaus anglies tetrachlorido įvedimo buvo galima parodyti, kad Baypamun® ir iš aukščiau minėtų avies pararaupų kamienų gauti preparatai inhibuoja kepenų žvaigždinių ląstelių transformaciją į kolageną gaminančias miofibroblastų tipo ląsteles.
Kadangi kepenų fibrozę ir/arba kepenų cirozę gali sukelti įvairūs nuodai, tokie kaip virusinės infekcijos ir piktnaudžiavimas alkoholiu, skirtingi patologijos mechamizmai sueina į bendrą galutinį kelią, t.y. kolageno gaminimąsi. Kaip rodo eksperimentiniai rezultatai su aukščiau aprašytais gyvūnų neinfekciniais modeliais, inaktyvuotų pararaupų virusų įvedimas stebėtinai apsaugo nuo kolageno nusėdimo nepriklausomai nuo jį sukeliančios nuodingos medžiagos.
Taigi pararaupų virusai atveria naują terapinį principą poveikiui sutelkti galutiniame šio kelio etape, kuris yra bendras visoms ligoms, kurios veda į fibrozę.
Šis poveikis duoda pagrindo manyti, kad naudojant pararaupų viruso preparatus bus pasiektas ypatingai efektyvus gydymas net ir viruso sukeltos kepenų fibrozės atveju, kadangi yra žinoma, kad tokie preparatai pasižymi papildomu imunostimuliaciniu poveikiu.
Galingas dabar atrastas Baypamun® priešfibrozinis efektas atveria galimybę naudoti Baypamun® arba NZ2 preparatus kaip etaloninį standartą vertinant priešfibrozinius efektus testuose priešfibrozinėms medžiagoms identifikuoti.
Taigi, inaktyvuoti pararaupų virusai arba jų palikuonys ir iš aukščiau minėtų kamienų gauti preparatai turi visaapimantį priešfibrozinio aktyvumo spektrą ir todėl yra tinkami ne tik kepenų fibrozinių ligų profilaktikai ir gydymui, bet taip pat ir ryšium su kitų organų fibrozinėmis ligomis, pavyzdžiui, plaučių, kasos, širdies ir odos. Kepenų fibrozės ir kepenų cirozės gydymui ypatingai tinka naudoti pararaupų virusų izoliatus.
Priklausomai nuo klinikinės problemos, terapinis agentas pararaupų viruso pagrindu yra vartojamas arba sistemiškai, tai yra, pavyzdžiui, leidžiamas į raumenis, po oda, į veną arba vartojamas peroraliniu būdu arba inhaliacijomis arba, kitu atveju, vietiniu būdu. Tada pararaupų virusas yra išgrynintas ir liofilizuotas ir yra suspenduojamas tinkamame tirpiklyje prieš pat vartojimą, arba yra kitoje tinkamoje kompozicijoje, arba yra skrandžio sultims atsparioje vartojimo formoje arba kitokioje peroralinio vartojimo formoje.
Ryšium su tuo, jį gali būti reikalinga keletą kartų įvesti arba ilgą laiką vartoti pagal chronologines schemas, atitinkančias klinikinės problemos reikalavimus.
Šis išradimas yra susijęs su pararaupų virusų izoliatų, kurie yra gauti iš D1701, orf-11 kamienų, graikų orf 176 kamieno, graikų orf 155 kamieno ir Naujosios Zelandijos (NZ) kamienų, panaudojimu vaistų, kurie turi prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozę, gamyboje. Pirmenybė yra teikiama Naujosios Zelandijos (NZ) kamienų, t.y. NZ2, NZ7 ir NZ10 kamienų, panaudojimui vaistų, kurie turi prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozę, gamyboje, o labiausiai tinkamas yra NZ2. Be to, aukščiau aprašyti pararaupų virusai gali būti modifikuojami persėjant arba adaptuojant prie tinkamų ląstelių, ir tokie pararaupų virusai, kurie buvo gauti persėjant arba adaptuojant, gali būti naudojami vaistų, kurie turi prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozę, gamyboje; todėl peršėjimui arba adaptavimui, pavyzdžiui, galima naudoti žmonių ląsteles, tokias kaip WI-38, MRC-5, jaučio ląsteles, tokias kaip BK-K13A47/Reg arba MDBK, ir avies ląsteles, tokias kaip MDOK. Vaistų, kurie turi prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozę, gamyboje taip pat galima naudoti aukščiau minėtų pararaupų virusų dalis arba fragmentus. Dalimis yra laikomi genominiai arba subgenominiai fragmentai, kurie yra ekspresuojami tinkamose sistemose, pavyzdžiui, fibroblastų ląstelių kultūrose, naudojant tam tikrus vektorius, tokius kaip vaccinia virusai, o fragmetais yra laikomos frakcijos, kurios gaunamos biochemiškai gryninant, pavyzdžiui, chromatografijos būdu, virusines daleles, kurios yra ekspresuotos arba kurios yra fiziškai suardytos, pavyzdžiui, veikiant ultragarsu. Be to, šis išradimas yra susijęs su aukščiau aprašytų avies pararaupų viruso kamienų arba modifikacijų, kurios yra gaunamos iš jų kaip aprašyta aukščiau, panaudojimu derinyje su kitais agentais vaistų ir vaistinių preparatų, kurie turi prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozes, gamyboje ir su Baypamun® (paties arba derinyje su kitais agentais) panaudojimu vaistų ir vaistinių preparatų, kurie turi prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozes, gamyboje. Labiausiai šis išradimas yra susijęs su aukščiau aprašytų avies pararaupų viruso kamienų arba iš jo gautų aukščiau aprašytų modifikacijų panaudojimu derinyje su kitais agentais peroralinio vartojimo kompozicijoje, pavyzdžiui skrandžio sultims atspariose kapsulėse.
Be to, šis išradimas yra susijęs su Baypamun® arba NZ2 preparatų, kaip etalono priešfibroziniams poveikiams įvertinti testuose priešfibrozinių medžiagų identifikavimui, panaudojimu.
Čia pateiktas kaip pavyzdys avies pararaupų virusas NZ-2 buvo deponuotas 2001 m. liepos 10 d. Europos ląstelių kultūrų kolekcijoje, Taikomosios mikrobiologijos ir tyrimų centre, Porton Down, Salisbury, VViltshire, SP4 OJG, United Kingdom. Depozito numeris yra 01071006.
pavyzdys
Avies pararaupų viruso D1701 (Baypamun®) poveikis
Metodika:
Baypamun® (sausa medžiaga) - preparatas, išskirtas iš chemiškai inaktyvuotų avies pararaupų virusų D1701 kamieno, - pagal nurodymus buvo ištirpintas injekcijoms skirtame vandenyje (titras, remiantis TCID50 (50 % audinių kultūros infektyvios dozės), buvo apie 107/ml).
Kontrolinei gyvūnų grupei, kaip placebo tirpalas, buvo įvestas Polygeline tirpalas, turintis tą patį baltymo kiekį kaip ir Baypamun® tirpalas.
Gyvūnui per vieną kartą buvo suleista i.p. 0,5 ml tirpalo. Leidžiama tris kartus per savaitę, bet niekada viena po kitos einančiose dienose.
Baypamun® buvo tirtas dviejuose gyvūnų modeliuose, kuriuose skyrėsi fibrozės kilmė, t.y. anglies tetrachlorido modelyje ir kiaulės serumo modelyje.
Pastovus veikimas anglies tetrachloridu yra standartinis metodas eksperimentinei kepenų fibrozei sukelti, po kurios atsiranda cirozė (McLean E.K., McLean A.E.M., Sutton P.M., Instant cirrhosis. Br. J. Exp. Pathol. 1969;
50: 502-506). Jis yra visuotinai pripažintas žmogaus kepenų fibrozės ir kepenų cirozės modelis. Buvo naudotos Sprague-Davvley žiurkių patelės. Norint užtikrinti maksimalią anglies tetrachlorido mikrosominio metabolizmo indukciją, savaitę prieš eksperimento pradžią gyvūnams su geriamuoju vandeniu buvo duodama 1 g izoniazido/l. Kas penktą dieną peroraliniu būdu buvo duodama anglies tetrachlorido 0,1 ml/100 g kūno masės dozė (anglies tetrachloridas:mineralinė alyva = 1:1). Po septynių savaičių gyvūnai buvo numarinti ir ištirti. Lygiagrečiai su anglies tetrachloridu buvo veikiama Baypamun®.
Veikimas heterologiniu serumu, pavyzdžiui, žiurkių atveju kiaulės serumu, yra panašus metodas, kuris yra dažnai naudojamas literatūroje kepenų fibrozei su po jos einančia ciroze sukelti; šis metodas, skirtingai nuo kitų modelių, sukelia tik minimalų kepenų parenchiminių ląstelių pakenkimą ir uždegimą (Bhunchet, E. and Wake, K. (1992): Role of mesenchymal cell population in porcine serum-induced rat liver fibrosis. Hepatology 16:14521473). Sprague-Davvley žiurkių patelės buvo veikiamos 2x per savaitę po 0,5 ml sterilaus kiaulės serumo (Sigma)/gyvūnui, o kontroliniai gyvūnai gavo sterilaus fiziologinio natrio chlorido tirpalo (2x per savaitę, 0,5 ml/gyvūnui, i.p.). Baypamun® buvo leidžiamas lygiagrečiai su kiaulės serumu, bet niekada neleidžiamas tą pačią dieną. Po septynių savaičių gyvūnai buvo numarinti ir kolageno kiekiui nustatyti buvo išimtos kepenys.
Kepenų audinio histologiniams tyrimams iš dešiniosios priekinės kepenų skilties buvo išimti standartizuoti skersiniai audinių cilindrai (maždaug 10x2 mm). Užšaldytos išpjovos buvo dažomos 0,1 % Picrosirius raudonojo tirpalu kepenų fibrozės metu susidariusiam randui aptikti.
Kontrastiniam sustiprinimui buvo naudojami Fast Green kontrastiniai dažai. Kepenų fibrozės laipsnis buvo nustatytas kiekvienoje atpjovoje kaip viso ploto procentinė dalis, išmatuota pagal Picrosirius raudonuoju nudažytą plotą. Videomikroskopinis spalvos detektavimas buvo standartizuotas ir laikomas pastovus viso eksperimento metu. 64 kvadratai standartizuotame 31 mm2 tinklelyje buvo matuojami esant 50 kartų galutiniam padidinimui.
Norint kiekybiškai nustatyti kepenų žvaigždinių ląstelių (HSC; taip pat Ito ląstelių arba A vitaminą akumuliuojančių ląstelių) transformacijos apimtį po ūmaus žiurkių poveikio anglies tetrachloridu, histochemiškai buvo detektuotos α-lygiųjų raumenų aktino-teigiamos ląstelės. α-Lygiųjų raumenų aktinoteigiamas plotas buvo nustatytas, esant 200 kartų galutiniam padidinimui, kiekvienoje išpjovoje kiekvienu atveju 16-je centrinių skiltelių 248x180 ųm laukeliuose. Žinoma, kad HSC transformacija į kolageną ir augimo faktorių produkuojančias panašias į miofibroblastus ląsteles yra lemiama kepenų fibrozės sukėlimo stadija. Todėl transformuotos HSC yra ankstyvasis kepenų fibrogeninio aktyvumo rodiklis.
Buvo naudotas Leica Ouantimed 500MC (Leica Germany) pusiau automatinis morfometras.
Norint nustatyti OH-proliną, kiekvienu atveju 50-100 mg kepenų audinio buvo išdžiovinta ir pavirinta maždaug 17 vai. su 6N HCI. Nugarinus rūgštį vakuuminėje krosnyje, liekana buvo ištirpinta 5 ml distiliuoto vandens ir nufiltruotas šis tirpalas. Kambario temperatūroje 25 min. buvo inkubuojama 200 μΙ šio nufiltruoto tirpalo su 200 μΙ etanolio ir 200 μΙ oksidacijos tirpalo (7 % vandeninio chloramino T hidrato tirpalas, praskiestas 1:4 acetatiniu-citratiniu buferiu, pH 6,0). Po to pridedama 400 μΙ Erlicho reagento (12 g 4dimetilaminobenzaldehido 20 ml etanolio + 2,74 ml koncentruotos sulfato rūgšties 20 ml etanolio). Palaikius 35 °C temperatūroje 3 valandas, matuojama sugertis esant 573 nm bangos ilgiui. Standartams buvo naudoti vandeniniai OH-prolino (Sigma) tirpalai. OH-prolino kiekis kepenų mėginiuose buvo apskaičiuotas miligramais gramui kepenų sausos masės.
Norint kontroliuoti reaktingo deguonies laisvųjų radikalų susidarymą, buvo matuota kepenyse redukuoto α-tokoferolio (a-TOC) - laisvuosius radikalus gaudančio agento - koncentracija, o laisviesiems radikalams jautraus fermento 7-etoksirezorufino deetilazės (EROD) aktyvumas buvo matuojamas serume. Abu parametrai yra būdingai slopinami apnuodijant anglies tetrachloridu ir duoda galimybę įvertinti audinio oksidacinio pakenkimo stiprumą.
Gyvūno kepenų būklė buvo nustatyta matuojant kai kuriuos standartinius serumo parametrus: alanin-aminotransferazę (ALT), šarminę fosfatazę (AP), aspartat-aminotransferazę (AST), γ-glutamil-transferazę (GGT), glutamat-dehidrogenazę (GLDH) ir bendrąjį bilirubiną (TBIL).
Rezultatai:
Poveikis Baypamun® žymiai sumažina kepenų fibrozinę degeneraciją anglies tetrachloridu paveiktose žiurkėse (Fig.1). Be to, galima stebėti beveik pilną HSC pakitimų inhibavimą (Fig.2). Proliferuojančių neparenchiminių ląstelių skaičius Baypamun® paveiktų gyvūnų kepenyse yra žymiai sumažintas (Fig.3). Neparenchiminės ląstelės apima HSC ir Kupffer’io ląsteles, kurios panašiai dalyvauja fibrogenezėje.
Kepenų ląstelių pakenkimo indikatoriai serume, tokie kaip ALT, AP, AST, GGT, GLDH ir TBIL (1 lentelė) rodo tendenciją virsti normaliais.
Tas pats EROD ir α-tokoferolio koncentracijų sumažėjimas kontrolinėje grupėje ir Baypamun® paveiktoje grupėje rodo, kad abiejose grupėse yra toksinių reaktingų deguonies laisvųjų radikalų, atsirandančių dėl apnuodijimo anglies tetrachloridu (1 ir 2 lentelės). Todėl Baypamun® “priešfibrozinio” poveikio galimybė dėl jo detoksikacinio poveikio gali būti atmesta.
Serumo modelyje Baypamun® rodo beveik pilną fibrozės slopinimą (Fig.4): Baypamun® paveiktose žiurkėse ir hidroksiprolino kiekis, ir sirius raudonuoju nusidažantys plotai kepenyse yra faktiškai tokie patys, kaip ir sveikuose kontroliniuose gyvūnuose, tuo tarpu jie yra padidėję 7 kartus serumu paveiktose kontrolinėse žiurkėse. Baypamun® grupėje kolageno kiekio padidėjimas, kurį sukelia poveikis kiaulės serumu yra tik 10 % atitinkamos kontrolinės grupės reikšmės.
pavyzdys
Avies pararaupų viruso NZ2 kamienas
Metodika:
NZ2 virusas buvo replikuotas talpų serijose. Šiam tikslui BK 3A klono ląstelės buvo auginamos 3-5 dienas ląstelių auginimo lėkštėse (37 °C) EMEM g + 10 % FCS, kol ląstelių kolonijos buvo 90-100 % susinėjusios. Keturios ląstelių auginimo lėkštės buvo naudotos kaip inokuliantas kiekvienai talpos serijai, o pastaroji buvo užpildyta terpe (EMEM 2 g + 10 % FCS) iki 2,5 I tūrio.
Po inkubavimo 37 °C temperatūroje 3-5 dienas (90-100 % susiliejusių kolonijų), terpė buvo pakeista EMEM 2 g be serumo ir kultūra buvo užkrėsta NZ2 virusu (MOI, 0,001-0,01).
Kai buvo pasiekta 100 % CPE (inkubuojama 37 °C temperatūroje maždaug 7-8 dienas), buvo išskirtas virusas. Šiam tikslui viruso suspensija buvo padalinta alikvotomis į sterilius terpės maišelius ir užšaldyta -80 °C temperatūroje. Po to suspensija buvo atšildyta 37 °C temperatūroje inkubavimo kameroje ir atskirtos ląstelės panaudojant giliąją filtraciją (porų dydis 5 ųm). Po to viruso suspensija buvo sukoncentruojama 20-40 kartų padidinai koncentraciją ultrafiltravimo būdu (100 kDa galutinė riba). Kitu atveju, virusas gali būti sukoncentruojamas ultracentrifuguojant (ΊΊ45, 30000 aps./min., 4 °C, 60 min.).
Suspensijoje esančio viruso titras, gautas koncentruojant, buvo nustatytas titruojant BK 3A klono ląstelėmis. Sureguliavus viruso titrą iki 6,0 reikšmės, skiedžiant EMEM terpe be FCS, virusas buvo inaktyvuotas šiluma 58 °C temperatūroje 2 vai. Inaktyvacija buvo tikrinama panaudojant inaktyvavimo kontrolę BK 3A klono ląstelėmis.
Avies pararaupų viruso NZ2 kamienas buvo tiriamas panaudojant kiaulės serumu indukuotą žiurkių kepenų fibrozės modelį, jau naudotą 1 pavyzdyje:
Sprague-Dawley žiurkių patelės buvo veikiamos 2x per savaitę po 0,5 ml sterilaus kiaulės serumo (Sigma)/gyvūnul, o kontroliniai gyvūnai gavo sterilaus fiziologinio natrio chlorido tirpalo (2x per savaitę, 0,5 ml/gyvūnui, i.p.).
NZ2 kamienas buvo leidžiamas i.p. 3x per savaitę imant atitinkamai 1,1 x105 ir 5,0x105 TCID50/gyvūnui dozes (įleidžiamas kiekis: 0,5 ml/gyvūnui). Mažesnės dozės atveju pradinė medžiaga buvo praskiesta ląstelių auginimo terpe (Eagle’s minimali pagrindinė terpė, Sigma). Kontroliniams gyvūnams buvo suleista ląstelių auginimo terpė. Nors NZ2 kamienas buvo leidžiamas lygiagrečiai su serumu, bet niekada nebuvo leidžiamas tą pačią dieną. Po septynių savaičių gyvūnai buvo numarinti, išimtos kepenys ir kepenų fibrozės apimtis buvo kiekybiškai įvertinta ir morfometriškai, ir nustatant OH-proilno kiekį. Nustatymo metodika aprašyta 1 pavyzdyje.
Rezultatai:
Kolageno nustatymo rezultatai yra pavaizduoti Fig.5. Netikėtai rasta, kad paveikus NZ2 kamienu galima nuslopinti kepenų fibrozės atsiradimą: lyginant su sveikais gyvūnais, serumu paveikti kontroliniai gyvūnai turėjo labai padidntą OH-prolino kiekį ir sirius raudonuoju nudažomo kolageno kiekį. Šį padidėjimą sumažino NZ2 nuo dozės priklausančiu būdu. Poveikio dydis taip pat yra netikėtas: 5x105 TCID50 dozė sumažino kolageno kiekio padidėjimą kepenyse iki mažiau nei 10 % kontrolinės reikšmės. Kokybinis histologinių preparatų įvertinimas parodė, kad gyvūnų, turinčių kolageno pertvaras, dalis yra sumažinta nuo 93 % (14/15) iki 33 % (5/15) 1,5x105 TCID50 grupėje ir iki 0 % 5,0x105 TCID50 grupėje.
pavyzdys
PPVO priešfibrozinis poveikis, įvedus peroraliniu būdu
PPVO buvo sudėtas kaip sausas liofilizatas į skrandžio sultims atsparias kapsulės (Elanco, Indianapolis, JAV).
Keturios grupės po 6 eksperimentinius gyvūnus buvo veikiamos taip: viena kontrolinė grupė (1 grupė) gavo tik skrandžio sultims atsparią kapsulę (be PPVO), kuri buvo įvesta peroraliniu būdu, ir dar buvo suleistas i.p. sterilus natrio chlorido tirpalas (0,5 ml/gyvūnui). Antra grupė gavo skrandžio sultims atsparią kapsulę (be PPVO) peroraliniu būdu su 0,5 ml anglies tetrachlorido/gyvūnui, ir buvo suleista i.p. 0,5 ml fiziologinio natrio chlorido tirpalo. Trečios grupės gyvūnai vėl gavo peroraliniu būdu skrandžio sultims atsparią kapsulę (be PPVO) kartu su 0,5 ml anglies tetrachlorido gyvūnui. Be to, 3 grupės gyvūnai gavo PPVO D1701 (5x106 TCIDso/gyvūnui dozė) 0,5 ml injekcijoms skirto vandens, suleidžiant tirpalą i.p. būdu. Ketvirta grupė gavo peroraliniu būdu PPVO D1701 (5x106 TCID50/gyvūnui dozė, sudėta į skrandžio sultims atsparią kapsulę) kartu su 0,5 ml anglies tetrachlorido.
Ketvirtos grupės gyvūnai taip pat gavo 0,5 ml sterilaus natrio chlorido tirpalo, kuris buvo suleistas i.p. būdu.
Po 48 valandų buvo išimtos kepenys ir ot-lygiųjų raumenų aktino (aSMA)-teigiamas centrinių skiltelių plotas buvo nustatytas histochemiškai kiekvienam gyvūnui, kaip bendro ploto, išmatuoto atitinkamose audinių išpjovose, procentai (Johnson S.J., Hines J.E., Burt A.D. Phenotypic modulation of perisinusoidal cells following acute liver injury: a ųuantative analysis. Int. J. Exp. Path. 1992; 73:765-772). Ši reikšmė yra kepenų žvaigždinių ląstelių transformacijos matas.
Pagal aukščiau duotą aprašymą buvo atliktos dvi eksperimentų serijos. Pirmos eksperimentų serijos rezultatai yra pateikti 3 lentelėje, o antros eksperimentų serijos rezultatai yra pateikti 4 lentelėje.
Pirmoje eksperimentų serijoje α-SMA-teigiamas centrinių skilčių plotas gyvūnų, kurie gavo PPVO D1701 i.p. suleidimo būdu, kepenyse (3 grupė), buvo nepaaiškinamai (ir priešingai kitai eksperimento patirčiai) didesnis nei gyvūnų, kurie negavo PPVO. Dėl šios priežasties buvo atlikta 2 eksperimentų serija kaip pakartotinas eksperimentas.
Abiejose eksperimentinėse serijose buvo stebimas maždaug 50 % transformacijos inhibicija, lyginant su kontroline grupe (kiekvienu atveju 2 grupe) netikėtu ir besiderinančiu būdu po peroralinio PPVO D1701 įvedimo (abiem atvejais 4 grupė). Antroje eksperimentų serijoje šis transformacijos inhibavimas po peroralinio PPVO D1701 įvedimo (4 grupė) yra panašaus dydžio, kaip ir tuo atveju, kai PPVO D1701 buvo suleistas į pilvaplėvę (3 grupė).
Iš šių rezultatų galima daryti išvadą, kad po peroralinio įvedimo PPVO taip pat turi priešfibrozinį poveikį.
lentelė
Baypamun® įtaka į kepenų būklės parametrus, kaip intoksikacijos rodiklius, serume
ALT U/l | AST U/l | AP U/l | GGT U/l | GLDH U/l | TBIL μπηοΙ/Ι | EROD nmol g/min. | |
Kontrolė | 49,1 | 45,7 | 162,8 | 0,8 | 12,5 | 1,6 | 0,30 |
SNV | 3,7 | 8,7 | 14,76 | 0,2 | 7,9 | 0,2 | 0,02 |
CCI4 | 95,6 | 92,4 | 392,7 | 6,1 | 37,1 | 2,9 | 0,15 |
SNV | 14,7 | 14,1 | 43,0 | 1,3 | 14,8 | 0,3 | 0,01 |
CCL+Baypamun® | 72,0 | 65,9 | 329,5 | 4,5 | 18,2 | 1,9 | 0,17 |
SNV | 9,9 | 9,1 | 26,9 | 0,8 | 4,0 | 0,2 | 0,03 |
ALT: alaninaminotransferazė; AST: aspartataminotransferazė; AP: šarminė fosfatazė; GGT: γ-glutamiltransferazė; GLDH: glutamatdehidrogenazė; TBIL: bendras bilirubinas: EROD: 7-etoksirezorufindeetilazė.
lentelė
Baypamun® įtaka į kepenų a-tokoferolį | |
a-tokoferolis nmol/ audinių g | |
Kontrolė | 73,1 |
SNV | 2,2 |
Anglies tetrachloridas | 35,7 |
SNV | 2,3 |
Anglies tetrachloridas+ Baypamun® | 38,5 |
SNV | 6,1 |
lentelė
PPVO įtaka, suleidus jį į pilvaplėvę arba įvedus peroraliniu būdu, į kepenų žvaigždinių ląstelių transformaciją po fibrogeninės anglies tetrachlorido dozės įvedimo (1 eksperimentų serija)
Fibrozė | įvedimas | Dozė | a-SMA (%) |
1 grupė nepaveikta | tuščia kapsulė peroraliniu būdu + vanduo injekcijoms i.p | 0,28±0,79 | |
2 grupė CCI4 | tuščia kapsulė peroraliniu būdu + vanduo injekcijoms i.p | 2,76±0,79 | |
3 grupė CCI4 | PPVO vandenyje injekcijoms i.p. + tuščia kapsulė peroraliniu būdu | 5x106 TCIDso/gyvūnui | 5,05±2,0 |
4 grupė CCI4 | PPVO kapsulėje peroraliniu būdu + vanduo injekcijoms i.p. | 5x106 TCIDso/gyvūnui | 1,46±0,34 |
lentelė
PPVO įtaka, suleidus jį į pilvaplėvę arba įvedus peroraliniu būdu, į kepenų žvaigždinių ląstelių transformaciją po fibrogeninės anglies tetrachlorido dozės įvedimo (2 eksperimentų serija)
Fibrozė | įvedimas | Dozė | a-SMA (%) |
1 grupė nepaveikta | tuščia kapsulė peroraliniu būdu + vanduo injekcijoms i.p | 0,20±0,04 | |
2 grupė CCI4 | tuščia kapsulė peroraliniu būdu + vanduo injekcijoms i.p | 3,18±0,56 | |
3 grupė CCI4 | PPVO vandenyje injekcijoms i.p. + tuščia kapsulė peroraliniu būdu | 5x106 TCIDso/gyvūnui | 1,22±0,35 |
4 grupė CCI4 | PPVO kapsulėje peroraliniu būdu + vanduo injekcijoms i.p. | 5x106 “ TCID50/gyvūnui | 1,55±0,34 |
Claims (10)
- IŠRADIMO APIBRĖŽTIS1. Pararaupų virusų izoliatų panaudojimas vaistų, turinčių prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozę, gamyboje.
- 2. Pararaupų virusų, pavyzdžiui D1701, orf-11 kamienų, graikų 176 kamieno, graikų 155 kamieno ir Naujosios Zelandijos (NZ) kamienų, izoliatų panaudojimas vaistų, turinčių prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozę, gamyboje.
- 3. Pararaupų virusų izoliatų panaudojimas pagal 1 - 2 punktus, besiskiriantis tuo, kad Naujosios Zelandijos (NZ) kamienai, naudojami vaistų, turinčių prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozę, gamyboje, yra NZ2, NZ7 ir NZ10 kamienai.
- 4. Pararaupų virusų panaudojimas pagal 1 - 3 punktus, besiskiriantis tuo, kad pararaupų virusai buvo modifikuoti persėjant arba adaptuojant prie tinkamų ląstelių, vaistų, turinčių prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozę, gamyboje.
- 5. Pararaupų virusų panaudojimas pagal 1 - 3 punktus, kuriame pararaupų virusai buvo modifikuoti persėjant arba adaptuojant prie tinkamų ląstelių, vaistų, turinčių prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozę, gamyboje, besiskiriantis tuo, kad peršėjimui arba adaptacijai yra naudojamos žmogaus ląstelės, tokios kaip VVI-38 arba MRC-5, jaučio ląstelės, tokios kaip BK-K13A47/Reg arba MDBK, ir avies ląstelės, tokios kaip MDOK.
- 6. Virusų dalių arba fragmentų panaudojimas pagal 1-5 punktus vaistų, turinčių prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozę, gamyboje, besiskiriantis tuo, kad dalimis yra laikomi genominiai arba subgenominiai fragmentai, kuriuos ekspresuoja tinkami vektoriai, tokie kaip vakcinijos virusai, tinkamose sistemose, tokiose kaip fibroblastų ląstelių kultūros, o fragmentais yra laikomos frakcijos, kurios gaunamos biochemiškai gryninant, kaip antai chromatografijos būdu, ekspresuotas arba fiziškai suardytas virusų daleles.
- 7. Vieno iš izoliatų panaudojimas pagal 1-6 punktus derinyje su kitais vaistais vaistų ir farmacinių preparatų, turinčių prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozę, gamyboje.
- 8. Avies pararaupų viruso D1701 (paties arba derinyje su kitais vaistais) panaudojimas vaistų ir farmacinių preparatų, turinčių prevencinį arba gydomąjį poveikį į žmonių organų fibrozę, gamyboje.
- 9. Avies pararaupų viruso D1701 arba NZ2 preparatų panaudojimas etaloniniu standartu priešfibroziniams poveikiams įvertinti, identifikuojant priešfibrozines medžiagas.
- 10. Avies pararaupų viruso D1701 panaudojimas pagal 8 punktą, besiskiriantis tuo, kad farmaciniai preparatai ir vaistai yra tinkami peroraliniam vartojimui.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE10033581 | 2000-07-11 | ||
DE10122233A DE10122233A1 (de) | 2000-07-11 | 2001-05-08 | Verwendung von Stämmen des Parapoxvirus ovis gegen Organfibrosen |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
LT2003008A LT2003008A (lt) | 2003-07-25 |
LT5064B true LT5064B (lt) | 2003-11-25 |
Family
ID=26006334
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
LT2003008A LT5064B (lt) | 2000-07-11 | 2003-02-03 | Avies pararaupų viruso kamienai, skirti panaudoti prieš organų fibrozę |
Country Status (30)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US6632647B2 (lt) |
EP (1) | EP1303302B1 (lt) |
JP (1) | JP5106736B2 (lt) |
CN (1) | CN1452496B (lt) |
AR (1) | AR028800A1 (lt) |
AU (2) | AU8582701A (lt) |
BG (1) | BG107447A (lt) |
CA (1) | CA2415399C (lt) |
CZ (1) | CZ200372A3 (lt) |
DK (1) | DK200300014A (lt) |
EE (1) | EE200300019A (lt) |
FI (1) | FI20030038A (lt) |
GB (1) | GB2383752B (lt) |
HK (1) | HK1054330B (lt) |
HR (1) | HRP20030097A2 (lt) |
HU (1) | HU227668B1 (lt) |
IL (1) | IL153826A0 (lt) |
LT (1) | LT5064B (lt) |
LU (1) | LU90996B1 (lt) |
LV (1) | LV12991B (lt) |
MA (1) | MA25765A1 (lt) |
MX (1) | MXPA03000278A (lt) |
NO (1) | NO20030081D0 (lt) |
NZ (1) | NZ523535A (lt) |
PL (1) | PL360839A1 (lt) |
RU (1) | RU2003104522A (lt) |
SE (1) | SE0300033L (lt) |
SI (1) | SI21171A (lt) |
SK (1) | SK382003A3 (lt) |
WO (1) | WO2002004019A2 (lt) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE19922407A1 (de) * | 1999-05-14 | 2000-11-16 | Bayer Ag | Organ-, gewebs- und zellspezifisches Immuntherapeutikum für chronische virale Infektionen, sowie entzündliche, degenerative und proliferative Erkrankungen insbesondere der Leber sowie Krebs auf der Basis von rekombinantem Parapoxvirus |
AU2002353031A1 (en) | 2001-12-07 | 2003-06-23 | Bayer Corporation | Use of parapox b2l protein to treat cancer and modify immune responses |
US6752995B2 (en) * | 2002-04-15 | 2004-06-22 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Nucleic acid and polypeptide sequences useful as adjuvants |
EP1574211A1 (en) * | 2004-03-09 | 2005-09-14 | Inserm | Use of antagonists of the CB1 receptor for the manufacture of a composition useful for the treatment of hepatic diseases |
WO2012045473A1 (en) * | 2010-10-07 | 2012-04-12 | Technische Universität München | Viruses for the treatment of fibrosis |
EA201891848A1 (ru) * | 2016-02-16 | 2019-02-28 | Осака Юниверсити | Фармацевтическая композиция для применения в лечении фиброза |
TW201919675A (zh) * | 2017-09-07 | 2019-06-01 | 德商艾庫瑞斯公司 | 使用羊副痘疹病毒(Parapoxvirus ovis;PPVO)及至少一種額外抗病毒藥之經B型肝炎病毒(HBV)感染之個體之組合療法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3504940A1 (de) | 1984-02-17 | 1985-10-31 | Mayr, Anton, Prof. Dr.med.vet. Dr.h.c.mult., 8000 München | Multipotente paramunitaetsmediatoren, verfahren zu ihrer herstellung und diese mediatoren enthaltende arzneimittel |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2714665A1 (de) * | 1977-04-01 | 1978-10-05 | Mayr Anton | Praeparat zur behandlung von herpes zoster und anderen herpes-infektionen, sowie verfahren zu seiner herstellung |
US4360510A (en) * | 1979-11-30 | 1982-11-23 | Proctor Julian W | Method for screening anti-tumor agents of the reticulo-endothelial stimulant class |
US4663306A (en) * | 1983-09-23 | 1987-05-05 | Ribi Immunochem Research, Inc. | Pyridine-soluble extract-refined detoxified endotoxin composition and use |
DE3816139A1 (de) * | 1987-10-17 | 1989-04-27 | Bayer Ag | Verfahren zur herstellung von paramunitaetsinducern |
DE4405841C1 (de) * | 1994-02-23 | 1995-01-05 | Mayr Anton Prof Dr Med Vet Dr | Multipotente Paramunitätsinducer auf der Basis von Kombinationen von Pockenviruskomponenten, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel |
PT885013E (pt) * | 1996-04-15 | 2002-01-30 | Anton Mayr Prof Dr Med Vet Dr | Utilizacao de indutores de para-imunidade multipotentes baseados em poxvirus ou parapoxvirus atenuados e nao imunogenicos para a fabricacao de medicamentos |
DE19922407A1 (de) * | 1999-05-14 | 2000-11-16 | Bayer Ag | Organ-, gewebs- und zellspezifisches Immuntherapeutikum für chronische virale Infektionen, sowie entzündliche, degenerative und proliferative Erkrankungen insbesondere der Leber sowie Krebs auf der Basis von rekombinantem Parapoxvirus |
IL139593A (en) * | 2000-11-09 | 2010-12-30 | Biogem Optical Ltd | Method for the detection of viable microorganisms |
-
2001
- 2001-07-11 SI SI200120047A patent/SI21171A/sl not_active IP Right Cessation
- 2001-07-11 EP EP01965110A patent/EP1303302B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-11 US US09/903,005 patent/US6632647B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-11 SK SK38-2003A patent/SK382003A3/sk not_active Application Discontinuation
- 2001-07-11 AU AU8582701A patent/AU8582701A/xx active Pending
- 2001-07-11 GB GB0302629A patent/GB2383752B/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-11 EE EEP200300019A patent/EE200300019A/xx unknown
- 2001-07-11 NZ NZ52353501A patent/NZ523535A/xx unknown
- 2001-07-11 WO PCT/EP2001/007978 patent/WO2002004019A2/de active IP Right Grant
- 2001-07-11 AU AU2001285827A patent/AU2001285827B2/en not_active Expired
- 2001-07-11 MX MXPA03000278A patent/MXPA03000278A/es active IP Right Grant
- 2001-07-11 PL PL36083901A patent/PL360839A1/xx not_active Application Discontinuation
- 2001-07-11 AR ARP010103291A patent/AR028800A1/es not_active Application Discontinuation
- 2001-07-11 IL IL15382601A patent/IL153826A0/xx active IP Right Grant
- 2001-07-11 CN CN018151272A patent/CN1452496B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-11 HU HU0303830A patent/HU227668B1/hu not_active IP Right Cessation
- 2001-07-11 CZ CZ200372A patent/CZ200372A3/cs unknown
- 2001-07-11 JP JP2002508473A patent/JP5106736B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-11 CA CA2415399A patent/CA2415399C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-11 LU LU90996A patent/LU90996B1/en active
- 2001-07-11 RU RU2003104522/15A patent/RU2003104522A/ru not_active Application Discontinuation
-
2003
- 2003-01-08 NO NO20030081A patent/NO20030081D0/no not_active Application Discontinuation
- 2003-01-08 BG BG107447A patent/BG107447A/bg unknown
- 2003-01-10 DK DK200300014A patent/DK200300014A/da not_active Application Discontinuation
- 2003-01-10 FI FI20030038A patent/FI20030038A/fi not_active IP Right Cessation
- 2003-01-10 MA MA26995A patent/MA25765A1/fr unknown
- 2003-01-10 SE SE0300033A patent/SE0300033L/xx not_active Application Discontinuation
- 2003-02-03 LT LT2003008A patent/LT5064B/lt not_active IP Right Cessation
- 2003-02-10 HR HR20030097A patent/HRP20030097A2/xx not_active Application Discontinuation
- 2003-02-11 LV LVP-03-13A patent/LV12991B/lv unknown
- 2003-09-15 HK HK03106614.0A patent/HK1054330B/zh not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3504940A1 (de) | 1984-02-17 | 1985-10-31 | Mayr, Anton, Prof. Dr.med.vet. Dr.h.c.mult., 8000 München | Multipotente paramunitaetsmediatoren, verfahren zu ihrer herstellung und diese mediatoren enthaltende arzneimittel |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
BHUNCHET E, WAKE K.: "Role of mesenchymal cell populations in porcine serum-induced rat liver fibrosis", HEPATOLOGY, 1992, pages 1452 - 1473 |
JOHNSON, S. J., HINES, J. E., BURT, A. D.: "Phenotypic modulation of perisinusoidal cells following acute liver injury: a quantitative analysis", INT. J. EXP. PATH., 1992, pages 765 - 772 |
MCLEAN EK, MCLEAN AE, SUTTON PM.: "Instant cirrhosis. An improved method for producing cirrhosis of the liver in rats by simultaneous administration of carbon tetrachloride and phenobarbitone", BR J EXP PATHOL., 1969, pages 502 - 506 |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Yoon et al. | An oncolytic herpes simplex virus type 1 selectively destroys diffuse liver metastases from colon carcinoma | |
RU2461630C2 (ru) | Применение комбинации вируса миксомы и рапамицина для терапевтического лечения | |
JP2011157399A (ja) | 癌および慢性ウイルス感染の治療処置のための粘液腫症ウイルスの使用 | |
Bennett et al. | Studies on poxvirus infection in cats | |
ES2245831T3 (es) | Procedimiento para destruir tumores y celulas endoteliales asociadas a tumor utilizando mutantes adenovirales. | |
LT5064B (lt) | Avies pararaupų viruso kamienai, skirti panaudoti prieš organų fibrozę | |
JP5950964B2 (ja) | 臓器線維形成に対するパラポックスウイルスovis株の使用 | |
EP1578959A1 (en) | Immunizing fish against viral infection | |
Garza et al. | Evaluation of the efficacy of modified vaccinia Ankara (MVA)/IMVAMUNE® against aerosolized rabbitpox virus in a rabbit model | |
US20160136212A1 (en) | Myxoma virus mutants for cancer treatment | |
Tonew et al. | Replication and persistence of coxsackieviruses B3 in human fibroblasts | |
CN112472791A (zh) | CsA脂质体在制备抗SARS-CoV-2药物中的应用 | |
CN116211865B (zh) | 一种化合物Ibrutinib在制备抗病毒药物中的应用、药物组合物 | |
US11591616B1 (en) | Apoptotic upregulation by myxoma virus expressing walleye dermal sarcoma virus orfC | |
Weissenbacher et al. | Sensitivity of human conjunctival tissue cultures to adenovirus 8, herpes simplex and vaccinia viruses. Induction of resistance by an interferon inducer |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC9A | Transfer of patents |
Owner name: AICURIS GMBH & CO. KG, DE Effective date: 20060824 |
|
MM9A | Lapsed patents |
Effective date: 20140711 |