KR980002064A - β-프룩토푸라노시다아제 활성을 가진 폴리펩티드 - Google Patents

β-프룩토푸라노시다아제 활성을 가진 폴리펩티드 Download PDF

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Abstract

미생물 유전자 발현에 의해 수득되는 β-프룩토푸라노시다아제 활성을 가진 폴리펩티드, 이 폴리펩티드를 코우드하는 DNA, 이 DNA를 적당한 숙주속에 도입하여 수득되는 형질 전환체, 이 형질 전환체를 배양하여 폴리펩티드를 생성시키고 생성된 폴리펩티드를 배양물로부터 채취하는 폴리펩티드의 제조방법 및 프룩토푸라노실 공여체와 프룩토푸라노실 수용체를 폴리펩티드 존재하에 반응시키는 단계를 포함하는 프룩토푸라노실 전이 방법이 개시되어 있다.

Description

β-프룩토푸라노시다아제 활성을 가진 폴리펩티드
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (24)

  1. 미생물 유전자의 발현에 의해 수득되고 부분 아미노산 서열로서 전체적으로 혹은 부분적으로 서열번호(SEQ ID NO : ) 1 및 2의 아미노산 서열을 가지고 있는 β-프룩토푸라노시다아제 활성을 가진 분리된 폴리펩티드 :
    서열번호(SEQ ID NO : ) 1 :
    서열번호(SEQ ID NO : ) 2 :
  2. 청구항 1에 있어서, 프룩토푸라노실 공여체와 프룩토푸라노실 수용체 사이의 프룩토푸라노실 전이를 촉진시키는 활성을 가진 폴리펩티드.
  3. 청구항 1에 있어서, 아래의 물리화학적 성질을 가진 폴리펩티드 :
    (1) 분자량
    소디움 도데실 술페이트 폴리아크릴아미드 겔 전기영동 (SDS-PAGE)에서 약 44,000~54,000 달톤;
    (2) 최적 pH
    40℃에서 10분간 유지했을 경우 약 5.5~6.0;
    (3) 최적 온도
    pH 6.0에서 10분간 유지했을 경우, 칼슘 이온 부재하에서는 약 45℃이고 칼슘이온 존재하에서는 약 50℃;
    (4) pH 안전성
    4℃에서 24시간 유지했을 경우 pH 약 5.0~8.0에서 안정함;
    (5) 열적 안정성
    pH 6.0에서 1시간 유지했을 경우 온도 약 45℃까지 안정함.
  4. 청구항 1에 있어서, 아래의 서열번호(SEQ ID NO : ) 3 및 그 상동물(homologs)로 된 군으로부터 선택되는 아미노산 서열을 가진 폴리펩티드:
    서열번호(SEQ ID NO : ) 3 :
  5. 청구항 1에 있어서, 미생물을 숙주로 사용하고, 바실루스속에 속하는 미생물 유래의 유전자를 상기 숙주 중에서 발현시켜 수득되는 폴리펩티드.
  6. 청구항 1의 폴리펩티드를 코우드 하는 DNA.
  7. 청구항 6에 있어서, 서열번호(SEQ ID NO : ) 4, 그 상동물 및 이들의 상보물로 된 군으로부터 선택되는 뉴클레오티드 서열을 가진 DNA :
    서열번호(SEQ ID NO : ) 4 :
  8. 청구항 6에 있어서, 서열번호(SEQ ID NO : ) 5 및 그 상보물로 된 군으로부터 선택되는 뉴클레오티드 서열을 가진 DNA :
    서열번호(SEQ ID NO : ) 5 :
  9. 청구항 6에 있어서, 바실루스속에 속하는 미생물에서 유래하는 DNA.
  10. 자체 복제성 벡터를 가진 청구항 1의 폴리펩티드를 코우드하는 DNA.
  11. 청구항 10에 있어서, 서열번(SEQ ID NO : ) 4, 그 상동물 및 이들의 상보물로 된 군으로부터 선택되는 뉴클레오티드 서열을 가진 DNA.
  12. 청구항 10에 있어서, 서열번호(SEQ ID NO : ) 5 및 그 상보물로 된 군으로부터 선택되는 뉴클레오티드 서열을 가진 DNA.
  13. 청구항 10에 있어서, 바실루스속에 속하는 미생물에서 유래하는 DNA.
  14. 청구항 1의 폴리펩티드를 코우드하는 DNA를 적당한 숙주속에 도입하여 수득되는 형질 전환체.
  15. 청구항 14에 있어서, 상기 숙주가 미생물인 형질 전환체.
  16. 청구항 1의 폴리펩티드를 코우드하는 DNA를 숙주속에 도입하여 수득되는 형질 전환체를 영양배지에서 배양하여 상기 폴리펩티드를 생성시키고, 생성된 폴리펩티드를 배양물로부터 채취하는 단계를 포함하는 β-프룩토푸라노시다아제 활성을 가진 폴리펩티드의 제조방법.
  17. 청구항 16에 있어서, 채취단계는 원심분리, 염석, 투석, 여과, 농축, 분별침강, 이온교환 크로마토그래피, 겔 여과 크로마토그래피, 등전 크로마토그래피, 소수 크로마토그래프, 역상 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 겔 전기영동 및 등전 전기영동으로 된 군으로부터 선택되는 1종 이상인 제조방법.
  18. 프룩토푸라노실 공여체와 프룩토푸라노실 수용체를 청구항 1의 폴리펩티드 존재하에 반응시키는 단계를 포함하는 프룩토푸라노실 전이 방법.
  19. 청구항 18항에 있어서, 상기 프룩토푸라노실 공여체가 수크로오스, 라피노오스 및 에를로오스로 된 군으로부터 선택되는 1종인 프룩토푸라노실 전이 방법.
  20. 청구항 18에 있어서, 상기 프룩토푸라노실 수용체가 알코올류, 당 알코올류 및 분자내에 β-프룩토푸라노시다아제 결합이 없는 당류로 된 군으로부터 선택되는 1종인 프룩토푸라노실 전이 방법.
  21. 청구항 18에 있어서, 반응 생성물이 크실로실프룩토시드, 에를로오스, 이소말토실프룩토시드, 락토수크로오스 및 프룩토실트레할로오스로 된 군으로부터 선택되는 1종인 프룩토푸라노실 전이 방법.
  22. 청구항 18항에 있어서, 프룩토푸라노실 수용체 0.1~10 중량부를 프룩토푸라노실 공여체 1 중량부와 pH 3.5~8.0 및 온도 60℃ 이하에서 반응시키는 프룩토푸라노실 전이 방법.
  23. 청구항 14의 형질 전환체의 생물학적으로 순수한 배양물.
  24. 청구항 23에 있어서, 상기 숙주가 미생물인 배양물.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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