KR950030791A - 생물조직 보존방법 및 그를 위한 관류액 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 생물조직 보존방법, 특히 조직을 구성하는 세포의 특성 및 기능을 유지 할 수 있는 생물조직의 저온 보존방법, 보존방법 및 생물조직 보존을 위한 용액조성물, 특히 장기의 이식, 임상적 및 비임상적 연구를 위한 장기등의 생물조직 보존에 적당한 양액 조성물을 제공하는 것이다.
동물을 기관으로 통하는 혈관에 관유액을 주입하고,상기 기관중의 혈액을 상기 관류액으로 치환하며, 상기 동물로부터 절제된 상기 기관의 적어도 일부를 냉각하고, 액체 질소 온도까지 온도를 저하시켜 상기기관의 조직을 보존하는 생물조직 보존방법에 있어서, 상기 혈관에 제1관류액으로서 실질적으로 융혈을 발생시키지 않는 제1당질액을 주입하고, 상기 기관중의 혈관내의 혈액을이 제1당질액으로 치환하며, 이어서 상기 기관으로 통하는 혈관에 제2관류액으로서 수용액이 액체 질소 온도에서 서로 분리되지 않고 또한 실질적으로 결정을생성시키지 않는 당질과, 물과의 혼합액이 액체 질소 온도에서 서로 분리되지 않고 또한 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 유기용매를 포함하는 제2당질액을 주입하여, 상기 기관중의 상기 제1당질액을 상기 제2당질액으로 치환하고, 그후 액체 질소 온도까지 냉각함을 특징으로 하는 생물조직 보존방법, 보존재생 방법 및 이들을 위한 용액 조성물에 관한 것이다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
Claims (71)
- 동물을 기관으로 통하는혈관에 관류액을 주입하고, 상기 기관중의 혈액을 상기 관류액으로 치환하며, 상기 동물로부터 절제된 상기기관의 적어도 일부를 냉각하고, 액체 질소 온도까지 온도를 저하시켜 상기 기관의 조직을 보존하는 생물조직 보존방법에 있어서, 상기 혈관에 제1관류액으로서 실질적으로 용해를 발생 시키지 않는 제1당질액을 주입하고, 상기 기관중의 혈관내의 혈액을 이 제1당질액으로 치환시키며, 이어서 상기 기관으로 통하는 혈관에 제2관류액으로서, 수용액이 액체 질소 온도에서 서로 분리되지 않고 또한 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 당질과, 물과의 혼합액이 액체 질소 온도에서 서로 분리되지 않고 또한 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 유기 용매를 포함하는 제2당질액을 주입하고 ,상기기관중의 상기 제1당질액을 상기 제2당질액으로 치환하며, 그후 액체 질소 온도까지 냉각 시킴을 특징으로 하는 생물조직 보존방법.
- 제1항에 있어서, 상기 제2당질액이 상기 당질로서 만니톨을 포함하는 생물조직 보존방법.
- 제1항또는 2항에 있어서, 상기유기 용매가 디메틸설폭사이드 또는 글리세린인 생물조직 보존방법.
- 제1항내지 3항중의 어느 하나에 있어서, 상기 제1당질액에 의한 상기 혈액 치환보다 후에 상기기관의 전부 또는 소정부분을 상기 동물로부터 절제하는 생물조직 보존방법.
- 제1항 내지 4항중의 어느 하나에 있어서, 상기 제1당질액이 글루코TM를 포함하는 생물조직 보존방법.
- 제1항내지 5항중의 어느 하나에 있어서, 상기 제1당질액이 모노아민옥시다제 저해작용을 갖는 물질을 포함하는 생물조직 보존방법.
- 제1항내지 6항중의 어느 하나에 있어서, 상기동물이 포유동물인 생물조직 보존방법.
- 동물의 기관으로 통하는 혈관에 관류액을 주입하고, 상기기관중의 혈액을 상기 관류액으로 치환시키며, 상기 동물로부터 절제된 상기기관의 적어도 일부를 냉각하고, 액체 질소 온도까지 온도를 저하시켜상기 기관의 조직을 보존하는 생물조직 보존방법에 있어서, 상기 기관을 포함하는 영역의 말초신경을 차단하고 ,상기혈관에 제1관류액으로서 실질적으로 용혈을 발생 시키지 않는 제1의 등장당질액을 주입하여, 상기 기관중의 혈관내의 혈액을 이 제1당질액으로 치환시키며 ,이어서 상기 기관으로 통하는 혈관에 제2관류액으로서 수용액이 액체 질소 온도에서 서로 분리되지 않고 또한 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 당질과, 물과의 혼합액이 액체 질소 온도에서 서로분리되지 않고 또한 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 유기용매를 포함하는 제2당질액을 주입하고, 상기 기관중의 상기 제1당질액을 상기 제2당질액으로 치환시키며, 그후 액체 질소 온도까지 냉각시킴을 특징으로 하는 생물조직 보존방법.
- 제8항에 있어서, 상기 동물을 혈관내 또는 복강내에 말초신경 차단제를 도입함으로서 말초신경을 차단하는 생물조직 보존방법.
- 제9항에 있어서, 상기 말초신경 차단제가 모노아민옥시다제 저해작용을 갖는 물질인 생물조직 보존방법.
- 동물로부터 절제된 기관의 적어도 일부를 냉각하고, 액체질소 온도까지 온도를 저하시켜 보존하는 생물조직 보존방법에 있어서, 상기절제된 기관의 적어도 일부를 조직시료로서 서로 평행으로 고정된 다수의 금속침으로 이루어진 침집합제로 꿰뚫고, 이 침집합체로 꿰뚫은 상기시료를 소정의 속도로 서서히 냉각하고, 온도를 액체 질소 온도까지 더욱 저하시켜 액체 질소 온도에서 보존함을 특징으로 하는 생물조직 보존방법.
- 제11항에 있어서, 상기 소정을 속도가 -80℃까지 평균 매분 1.3℃ 이내인 생물조직 보존방법.
- 동물로 인해 절제된 기관의 적어도 일부를 냉각하고, 액체 질소 온도까지 온도를 저하시켜 보존하는 생물조직 보존방법에 있어서, 상기 절제된 기관의 적어도 일부를 조직시료로서 , 금속대좌에 서로 평행으로 고정된 다수의 금속침으로 이루어진 침집합제를 꿰뚫고, 이 침집합제로 꿰뚫은 상기시료를 소정을 속도로 서서히 냉각하고, 온도를 액체 질소 온도까지 더욱 저하시켜 액체 질소 온도에서 보존하며 ,보존을 종료할 때에, 상기 조직시료를 해동하기 위해 상기침집합체의 대좌를 온도를 4분을 넘지 않는 시간내에 20℃ 이상으로 함을 특징으로 하는 생물조직 보존방법.
- 동물의 기관으로 통하는 혈관에 관류액을 주입하고, 상기 기관중의 혈액을 상기 관류액으로 치환하며, 상기동물로부터 절제된 상기 기관의 적어도 일부를 냉각하고, 액체 질소 온도까지 온도를 저하시켜 보존하는 생물조직 보존방법에 있어서, 상기 혈관에 제1관류액으로서 실질적으로 용혈을 발생시키지 않는 제1당질액을 주입하고, 상기기관중의 혈관내의 혈액을 이 제1당질액으로 치환하며, 이어서 상기 기관으로 통하는 혈관에제2관류액으로서, 수용액이 액체 질소 온도에서 서로분리되지 않고 또한 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 당질과, 물과의 혼합액이 액체 질소 온도에서 있어서 분리되지 않고 또한 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 유기용매을 포함하는 제2당질액을 주입하고, 상기 기관중의 상기 제1당질액을 상기 제2당질액으로 치완시키며, 상기동물로부터 절제된 상기 기관의 적어도 일부를 조직시료로서 ,서로평행으로 고정된 다수의 금속침으로 이루어진 침집합제로 꿰뚫고, 이 침집합제로 꿰뚫은 조직시료를 소정의 속도로 서서히 냉각하고, 온도를 액체 질소 온도까지 더욱 저하시켜 액체 질소 온도에서 보존함을 특징으로 하는 생물조직 보존방법.
- 제14항에 있어서, 상기 유기 용매가 디메틸설폭사이드 또는 글리세린이 생물조직 보존방법.
- 제14항또는 15항에 있어서, 상기 제2당질액이 상기 당질로서 만니톨을 포함하는 생물조직 보존방법.
- 제14항 내지 16항중의 어느 하나에 있어서, 상기 제1당질액이 글루코스를 포함하는 생물조직 보존방법.
- 제14항 내지 17항중의 어느 하나에 있어서, 상기소정의 속도가 -80℃까지 평균 매분1.3℃이내인 생물조직 보존방법.
- 제14항에 있어서, 상기 제1당질액에 의한 상기 혈액치환보다 후에 상기 기관의 전부 또는 소정의 부분을 상기 동물로부터 절제하는 생물조직 보존방법.
- 동물을 기관으로 통하는 혈관에 실질적으로 용혈을 발생시키지 않는 제1당질액을 주입하고, 상기 기관중의 혈액을 상기 제1당질액으로 치완시키며, 이 치환의 사이 또는 치환후에 상기 기관의 전부 또는 소정을 부분을 절제하고 ,이어서 상기혈관에 수용액이 액체 질소 온도에서 서로 분리되지 않고 또는 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 당질과, 물과를 혼합액이 액제 질소 온도에서 서로 분리되지 않고 또는 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 유기용매를 포함하는 제2당질액을 주입하고 ,상기 기관중의 상기 제1당질액을 상기 제2당질액으로 치환시키고, 이제 2당질액으로 치환된 상기 기관의 적어도 일부를 조직시료로서, 서로 평행으로 고정된 다수의 금속침으로 이루어진 침집합체로 꿰뚫고, 상기 침집합체로 꿰뚫은 상기시료를 소정을 속도로 서서히 냉각하고, 온도를 액체 질소 온도까지 더욱 저하시켜 액체 질소온도에서 보존하며, 보존을 종료할 때에는 상기 침집합체의 적어도 일부의 온도를 4분을 넘지 않는 시간 내에 20℃이상으로서 ,상기시료의 온도를 상기 제2당질액의 빙점 이상으로 상승시켜, 상기 시료를 상기 침집합체로부터 인발함으로서 달성되는 생물조직 보조방법.
- 제20항에 있어서, 상기 냉각을 소정의 속도가 -80℃까지 평균 매분 1.3℃ 이내인 생물조직보존방법.
- 제20항또는 21항에 있어서, 상기 제1당질액이 글루코스를 포함하는 생물조직 보존방법.
- 제20항에 있어서, 보존을 종료할때에 상기 침집합체가 금속대좌를 갖고, 이 대좌의 온도를 3분 이내에 20℃ 이상으로 하는 생물조직 보존방법.
- 동물을 기관으로 통하는 혈관에 실질적으로 용혈을 발생시키지 않는 제1당질액을 주입하고, 상기 기관중의 혈액을 상기 제1당질액으로 치환하며, 이어서 상기 혈관에 수용액이 액체 질소 온도에서 서로 분리되지않고 또한 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 당질과, 물과를 혼합액이 액체 질소 온도에서 서로 분리되지않고 또한 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 유기 용매를 포함하는 제2당질액을 주입하고, 상기 기관중의 상기 제1당질액을 상기제2당질액으로 치환하며, 이 제2당질액으로 치환된 상기 기관의 전부 또는 소정의 부분을상기 동물로 인해 절제하고, 이것을 조직시료로서, 금속대좌에 서로 평행으로 고정된 다수의 금속침으로 이루어진 침합합체로 꿰뚫고, 상기 침집합체로 꿰뚫은 상기 시료를 소정의 속도로 서서히 냉각하고, 온도를 액체질소 온도까지 더욱 저하시켜 액체 질소 온도에서 보존하며, 보존을 종료할 때에는 상기 침집합체의 적어도일부의 온도를 소정을 시간내에 20℃ 이상으로서, 상기 시료의 온도를 상기 제2당질액의 빙점 이상으로 상승시켜, 상기 시료를 상기 침집합체로 인해 인발함으로서 달성되는 생물조직 보존방법.
- 제24항에 있어서, 상기 유기 용매가 디메틸설폭사이드 또는 글리세린인 생물조직 보존방법.
- 제25항에 있어서, 상기 제2당질액이 상기 당질로서 만니톨을 포함하는 생물조직 보존방법.
- 제24항에 있어서, 상기 제1당질액이 글루코스를 포함하는 생물조직 보존방법.
- 제24항에 있어서, 상기 냉각의 소정을 속도가 -80℃까지 평균 매분 1.3℃ 이내인 생물조직 보존방법.
- 제24항또는 25항에 있어서, 보존을 종료할 때에 상기 침집합체의 대좌의 온도를 3분 이내에 20℃이상으로 하는 생물조직 보존방법.
- 동물을 기관으로 통하는 혈관에 실질적으로 혈관을 발생시키지 않는 제1당잴액을 주입하고, 상기 기관중의 혈액을 상기 제1당질액으로 치환하며, 이어서 상기혈관에, 수용액이 액체질소 온도에서 서로 분리되지 않고 또는 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 당질과, 물과의 혼합액이 액체 질소 온도에서 서로 분리되지 않고 또한 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 유기용매를 포함하는 제2당질액을 주입하고, 상기기관중의 상기 제1당질액을 상기 제2당질액으로 치환하며, 이 제2당질액으로 치환된 상기기관의 전부 또는 소정을 부분을 조직시료로서, 서로 평행으로 고정된 다수의 금속침으로 되는 침집합체로 꿰뚫고, 상기침집합체로 꿰뚫은 상기 시료를 소정의 속도로 서서히 냉각하고, 온도를 액체 질소 온도까지 더욱 저하시켜 액체 질소 온도에서 보존하며, 보존을 종료할 때에는 소정의 시간 내에 상기시료의 온도를 상기 제2당질액의 빙점 이상으로 상승시켜, 상기 시료를 상기 침집합체로 인해 인발함으로서 달성되는 생물조직보존방법.
- 제30항에 있어서, 상기 냉각을 소정을 속도가 -80℃까지 평균 매분 1.3℃ 이내인 생물조직 보존방법.
- 제30항 또는 31항에 있어서, 보존을 종료할 때 상기시료의 온도를 4분내에 -5℃이상 5℃ 이하로 상승시키는 생물조직 보존방법.
- 제32항에서, 보존을 종료할에 상기 시료의 온도를 4분내에 -5℃이상 5℃이하로 상승시키고 평균 매분 2.5℃미만의 비율로 25℃이상으로 상승시키는 생물조직의 보존방법.
- 동물의 기관으로 통하는 혈관에 관류액을 주입하고, 상기 기관중의 혈액을 상기 관류액으로 치환하며,상기 동물로부터 절제된 상기 기관의 적어도 일부를 냉각하고, 온도를 액체질소온도까지 저하시켜 상기기관의 조직의 적어도 일부를 보존하는 생물조직 보존방법에 있어서, 상기관류액을 주입 하기 전에 미리상기 동물의 상기 기관의 포함하는 영역의 말초신경을 차단하고, 상기기관으로 통하는 혈관에 실질적으로 용혈을 발생시키지 않는 제1당질액을 주입하고, 상기 기관 중의 혈액을 상기 제1당질액으로 치환하고,이치환중 또는 그후에 상기동물로부터 상기 기관을 절제하며 ,이어서 상기기관으로 통하는 혈관에 수용액이 액체 질소온도에서 서로 분리되지 않고 또는 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 당질과 물과의 혼합액이 액체 질소 온도에서 서로 분리되지 않고 또는 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 유기용매를 포함하는 제2당질액을 주입하고, 상기 기관중의 상기 제1당질액을 상기제2당질액으로 치환하며, 이 제2당질액으로 치환된 상기 기관의 적어도 일부를 조직시료로서 ,서로평행으로 고정된 다수의 금속침으로 이루어진 침집합체로 꿰뚫고, 상기 침집합체로 꿰뚫은 상기 시료를 소정을 송도로서서히 냉각하고 ,온도를 액체질소온도까지 더욱 저하시켜 액체 질소 온도에서 보존하며, 보존을 종료할 때에는 4분을 넘지 않는 시간 내에 상기 시료의 온도를 상기 제2당질액의 빙점 이상으로 상승시켜, 상기 시료를 상기 침집합체로부터 인발함으로서 달성되는 생물조직보존방법.
- 제34항에 있어서, 상기 유기용매가 디메틸설폭사이드 또는 글리세린인 생물조직 보존방법.
- 제34항 또는 35항에 있어서, 상기 제2당질액이 상기 당질로서 만니톨의 포함하는 생물조직보존방법.
- 제34항에 있어서 ,상기 제1당질액이 글루코스를 포함하는 생물조직 보존방법.
- 제34항에 있어서, 상기 냉각의 소정을 속도가 -80℃까지 평균 매분 1.3℃이내인 생물조직 보존방법.
- 제34항에 있어서 ,보존을 종료할 때에 상기시료의 온도를 4분 이내에 -5℃이상 5℃이하로 상승시키고, 평균 매분 4℃이하의 비율로 25℃이상으로 상승시키는 생물조직 보존방법.
- 동물로부터 절제된 기관의 적어도 일부를 냉각하고, 온도를 액체 질소 온도까지 저하시켜 보존한 후,상기 조직시료를 해동하여 생물활성을 회복시키는 생물조직 보존 재생방법에 있어서, 상기 절제된 기관의 전부 또는 소정을 부분을 서로 평행으로 고정된 복수의 금속침으로 이루어 진침집합체로 꿰뚫어 냉각하고, 액체 질소 온도에서 조직시료로서 보존하며 ,보존을 종료할 때, 상기금속침의 적어도 일단을 가온하여 4분 이내에 상기 조직시료의 온도를 -5℃이상 5℃이하로서 상기 조직 시료를 해동하고, 상기침집합체로부터 상기 조직시료를 빼내어, 해동후 상기 조직시료의 온도를 평균 매분 2.5℃미만의 비율로서 25℃이상으로 상승시키고, 상기 조직시료의 생물 활성을 회복시킴을 특징으로 하는 생물조직 보존재생방법.
- 제40항에 있어서, 해동후 온도를 25℃까지 상승시키는 사이에 상기조직시료로 통하는 혈관에 당질 및혈청단백을 포함하는 완충액을 관류시킴으로서, 상기조직시료의 생물활성을 회복시키는 생물조직보존재생방법.
- 제40항에 있어서, 상기 완충액이 디부틸사이클릭 AMP을 포함하는 생물조직 보존재생방법.
- 동물의 기관으로 통하는 혈관에 관류액을 주입하고, 상기 기관중의 혈액을 상기 관류액으로 치환하며, 상기 동물로부터 절제된 상기 기관의 적어도 일부를 냉각하여, 액체 질소 온도까지 온도를 저하시키고 상기 기관의 조직을 보존한 후 ,상기 조직시료를 해동하여 생물활성을 회복시키는 생물조직 보존재생방법에 있어서 ,상기절제된 기관의 전부 또는 소정의 부분을 ,서로 평행으로 고정된 복수의 금속침으로이루어진 침집합체로 꿰뚫어 냉각하고, 액체 질소 온도에서 조직시료로서 보존하며, 보존을 종료할 때에,상기금속침의 적어도 일단을 가온하여 4분이내에 상기 조직시료의 온도를 -5℃이상 5℃이하로서 상기조직시료를 해동하고 ,상기침집합체로부터 상기 조직시료를 빼내어, 상기 조직시료의 온도를 평균 매분2.5℃미만의 비율로서 25℃이상으로 상승시키고, 상기 조직시료의 생물활성을 회복시킴을 특징으로 하는생물조직 보존재생방법.
- 동물의 기관으로 통하는 혈관에 주입하고 상기 기관중의 혈액을 바꿔 놓기 위해 관류액으로서 이용하는 수성액 조성물로서, 나트륨, 칼륨, 수소, 염소, 인산의 각 이온으로 이루어진 pH7.4의 완충액과, 1 내지 5중량%의 글루코스와, 1.5 내지 7.5중량%의 포유동물혈정 알부민으로 구성되고, 염화나트륨 농도가0.15±0.05몰인 수성액 조성물.
- 동물을 기관으로 통하는 혈관에 주입하고 상기 기관중의 혈액을 바꿔 놓기 위한 관류액으로서 이용하는 수성액조성물로서, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 수소, 염소, 인산, 황산, 중탄산의 각 이온으로 이루어진 pH7.4의 완충액과, 1 내지 5중량%의 글루코스와, 1.5내지 7.5중량%의 우혈청 알부민으로 구성되고, 염화나트륨 농도가 0.15±0.05몰인 수성액 조성물.
- 제45항에 있어서, 상기 완충액이 크렙스-헨셀라이트 중탄산염 완충액과 동일한 조성을 갖는 수성액조성물.
- 제44항 내지 46항중의 어느 하나에서, 말초신경 차단제를 포함하는 수성액 조성물.
- 제47항에 있어서, 상기 말초신경 차단제가 모노아민옥시다제 저해작용을 갖는 물질인 수성액 조성물.
- 동물을 기관으로 통하는 적어도 하나의 혈관에 주입하여 상기 기관의 조직중의 혈관 및 상기 조직을구성하는 세포의 간격을 채우고, 상기 조직의 보존을 가능하게 하기 위한 관류액 및 보존액으로서 이용하는 수성액 조성물로서, 나트륨, 칼륨, 수소, 염소, 인산의 각 이온으로 이루어진 pH7.4의 완충액과, 3내지 8중량%의 만니톨과, 1.5내지 7.5중량%의 디메틸설폭사이드 또는 글리세린으로 구성되고, 염화나트륨농도가 0.15±0.05몰인 수성액 조성물.
- 동물의 기관으로 통하는 적어도 하나의 혈관에 주입하여 상기기관의 조직중의 혈관및 상기 조직을 구성하는 세포의 간격을 채우고, 상기 조직의 보존을 가능하게 하기 위한 관류액및 보존액으로서 이용하는수성액 조성물로서, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 수소, 염소, 인산, 황산, 중탄산의 각이온으로 이루어진pH7.4의 완충액과 3 내지 8중량% 만니톨과 ,1.5내지 7.5중량%의 우혈청 알부민과, 3내지 15중량%의 디메틸설폭사이드 또는 글리세린으로 구성되고, 염화나트륨 농도가 0.15±0.05몰인 수성액 조성물.
- 제50항에 있어서, 상기 완충액이 크렙스-헨셀라이트 중탄산염 완충액과 동일한 조성을 갖는 수성액조성물.
- 동물의 기관으로 통하는 적어도 하나의 혈관에 주입하여 상기기관중의 혈액을 배제함과 동시에, 상기기관의 조직중의 혈관 및 상기 조직을 구성하는 세포를 간격을 채우고, 상기 조직의 보존을 가능하게 하기 위한 관류액으로서, 나트륨, 칼륨, 수소, 염소, 인산의 각 이온으로 이루어진 pH7.4의 완충액과, 1 내지5중량%의 글루코스와, 1.5내지 7.5중량%의 우혈청 알부민으로 구성되고 염화나트륨 농도가 0.15±0.05몰인 상기 기관중의 혈액을 배제하고, 그것을 바꿔 놓기 위한 제1의 수성액 조성물과, 나트륨칼륨, 수소,염소, 인산의 각 이온으로 이루어진 pH7.4의 완충액과, 3 내지 8중량%의 만니톨과, 1.5 내지 7.5중량%의우혈청 알부민과 ,3내지 15중량%의 디메틸설폭사이드 또는 글리세린으로 구성되고 염화나트륨 농도가0.15±0.05몰인 상기 기관의 조직중의 혈관 및 상기 조직을 구성하는 세포의 간격을 채우고, 상기 조직의보존을 가능하게 하기 위한 제2의 수성액 조성물과의 조합으로 구성되는 관류액.
- 동물을 기관으로 통하는 적어도 하나의 혈관에 주입하여 상기기관중의 혈액을 배제함과 동시에, 상기기관의 조직중의 혈관 및 상기 조직을 구성하는 세포의 간격을 채우고, 상기조직의 보존을 가능하게 하기 위한 관류액으로서, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 ,수소, 염소, 인산, 황산, 중탄산의 각 이온으로 이루어진 pH7.4의 완충액과, 1 내지 5중량%의 글루코스와, 1.5 내지 7.5중량%의 우혈청 알부민으로 구성되고, 염화나트륨 농도가 0.15±0.05몰인 상기 기관중의 혈액을 배제하여 ,그것을 바꿔 놓기 위한 제1의 수성액 조성물과, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 수소, 염소, 인산, 황산, 중탄산의 각 이온으로 이루어 진pH7.4의 완충액과 ,3내지 8중량%의 만니톨과, 1.5내지 7.5중량%의 우혈청 알부민과 ,3 내지 15중량%의디메틸설폭사이드 또는 글리세린으로 구성되고, 염화나트륨농도가 0.15±0.05몰인 상기 기관의 조직중의혈관 및 상기 조직을 구성하는 세포의 간격을 채우며, 상기 조직의 보존을 가능하게 하기 위한 제2의 수성액 조성물과의 조합으로 구성되는 관류액.
- 제53항에 있어서, 상기 완충액이 각각 크렙스-헨셀라이트 중탄산염 완충액과 동일한 조성을 갖는 관류액.
- 10℃이하의 온도에서 보존된 조직으로 통하는 적어도 하나의 혈관에, 나트륨, 칼륨, 수소, 염소, 인산의 각 이온으로 이루어진 pH7.4의 완충액과, 0.5 내지 3중량%의 글루코스와, 0.5내지 3중량%의 만니톨과,1.5내지 7.5중량%의 혈청 알부민으로 구성되고, 염화나트륨 농도가 0.15±0.05몰인 상기 관류액을 주입하여,상기 조직중의 혈관 및 상기 조직을 구성하는 세포의 간격을 채우고 있던 액을 배제 또는 치환하고,상기 조직의 생물활성의 회복 전에 조직의 온도를 평균 매분 2.5℃미만의 속도로 25℃까지 상승시키는보존후 조직의 처리 방법.
- 제55항에 있어서, 상기 관류액이 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 수소, 염소, 인산, 황산, 중탄산의 각이온으로 이루어진 보존후 조직의 처리 방법.
- 동물의 기관으로 통하는 혈관에 관류액을 주입하고 상기 기관중의 혈액을 상기 관류액으로 치환하며,상기 동물로부터 절제된 상기 기관의 적어도 일부를 냉각하고, -80℃를넘지 않는 온도까지 온도를 저하시켜 보존하는 생물조직 보존방법에 있어서, 상기 혈관에 제1관류액으로서 실질적으로 용혈을 발생시키지 않는 제1당질액을 주입하고, 상기 기관중의 혈관내의 혈액을 제1관류액으로 치환하며, 이어서 상기 기관으로 통하는 혈관에 제2관류액으로서, 수용액이 상기 온도에서 서로 분리되지 않고 또는 실질적으로결정을 생성시키지 않는 당질과, 물과의 혼합액이 상기 온도에서 서로 분리되지 않고 또한 실질적으로결정을 생성시키지 않는 유기 용매를 포함하는 제2당질액을 주입하고, 상기 기관중의 상기 제1당질액을상기 제2당질액으로 치환하며, 이들 치환중 또는 후에 상기 기관의 전부 또는 소정의 부분을 절제하여,상기의 제2당질액으로 치환된 상기 기관의 적어도 일부를 조직시료로서, 평행으로 고정된 다수의 금속침으로 되는 침집합체로 꿰뚫고, 상기 침집합체로 꿰뚫은 상기 시료를 소정의 농도로 -80℃까지 서서히 냉각하며, 필요하면 온도를 더욱 저하시켜 그 온도에서 보존하고, 보존을 종료할때에는 상기 시료의 온도를4분이내에 상기 제2당질액의 빙점 이상으로 상승시켜 상기 시료를 해동하며, 상기 시료를 상기 침집합체로부터 인발함으로서 달성되는 생물조직 보존방법.
- 제57항에 있어서, 상기 소정의 속도가 평균 매분 1.3℃내에 생물조직 보존방법.
- 제57항 또는 58항에 있어서, 상기 제1당질액이 말초신경 차단제를 포함하는 생물조직 보존방법.
- 60. 제59항에 있어서, 상기-80℃을 넘지 않는 온도가 액체 질소 온도인 생물조직 보존방법.
- 동물의 기관으로 통하는 혈관에 관류액을 주입하고 상기 기관중의 혈액을 상기 관류액으로 치환하며,상기 동물로부터 절제된 상기기관의 적어도 일부을 냉각하고, -80℃를 넘지 않는 온도까지 온도를 저하시켜보존하는 생물조직 보존방법에 있어서, 상기 혈관에 제1관류액으로서 실질적으로 용혈을 발생시키 않고, 또말초신경 차단제를 포함하는 제1당질액을 주입하여, 상기 기관중의 혈관내의 혈액을 제1당질액으로 치환하고,이어서 상기 기관으로 통하는 혈관에 제2관류액으로서, 수용액이 상기 온도에서 서로 분리되지 않고 또한 실질적으로 결정을 생성시키지 않는 당질과, 물과의 혼합액이 상기 온도에서 서로 분리되지 않고 또한 실질적으로결정을 생성시키지 않는 유기 용매를 포함하는 제2당질액을 주입하여, 상기 기관중의 상기 제1당질액을 상기제2당질액으로 치환하며, 상기 치환중 또는 후에 상기 기관의 전부 또는 소정의 부분을 절제하여, 상기의 제2당질액으로 치환된 상기기관의 적어도 일부를 조직시료로서, 평행으로 고정시킨 다수의 금속침으로 이루어진침집합체로 꿰뚫고, 상기침집합체로 꿰뚫은 상기 시료를 소정의 속도로 -80℃까지서서히 냉각하며, 필요하면 온도를 더욱 저하시켜 그온도에서 보존하고, 보존을 종료할 때에는 상기시료의 온도를 4분 이내에 상기제2당질액의 빙점이상으로 상승시켜 상기 시료를 해동하며, 상기 시료를 상기 침집합체로부터 인발하고, 상기시료의 온도를 평균 매분 4℃를 넘지 않는 속도로 25℃로 상승 시킴으로서 달성되는 생물조직 보존방법.
- 제61항에 있어서, 상기소정의 속도가 평균 매분1.3 이내인 생물조직 보존방법.
- 제61항또는 62항에 있어서, 상기시료의 온도를 4분 이내에 -5℃ 내지 ＋5℃의 온도로 상승시키고 상기시료를 해동하는 생물조직 보존방법.
- 제61, 62항 또는 63항에 있어서, 상기 시료의 온도를 25℃로 상승시키는 속도를 평균 매분2.5℃미만으로 하는 생물조직 보존방법.
- 동물의 기관으로 통하는 혈관에 관류액을 주입하고, 상기 기관중의 혈액을 상기 관류액으로 치환하며, 상기 동물로부터 절제된 상기 기관의 적어도 일부를 냉각하고, 10℃이하로 온도를 저하시켜 보존하는생물조직 보존방법에 있어서, 상기 혈관에 제1관류액으로서 나트륨,칼륨, 수소, 염소 및 인산이온을 포함하는 pH7.4의 완충액과, 1 내지 5중량%의 글루코스와, 1.5내지 7.5중량%의 우혈청알부민으로 구성되고,염화나트륨 농도가 0.15±0.05몰인 제1당질액을 주입하여, 상기 기관중의 혈관내의 혈액을 제1당질액으로치환하며, 이어서 상기 기관으로 통하는 혈관에 제2관류액으로서, 나트륨, 칼륨, 수소, 염소 및 인산이온을 포함하는 pH7.4의 완충액과 ,3내지 8중량%의 만니톨과 1.5내지 7.5중량%의 우혈청 알부민과, 3 내지15중량%의 디메틸설폭사이드 또는 글리세린으로 구성되고, 염화나트륨 농도가 0.15±0.05몰인 제2당질액을 주입하여, 상기 기관의 상기제1당질액을 상기 제2당질액으로 치환하며 ,상기의 제2당질액으로 치환된상기기관의 적어도 일부를 조직 시료로서, 상기 온도까지 냉각하고 그 온도에서 보존함으로서 되는 생물조직 보존방법.
- 제65항에 있어서, 상기 제1당질액또는 상기 제2당질액에 의한 치환중 또는 그 후에 ,상기기관의 전부또는 소정의 부분을 절제하는 생물조직 보존방법.
- 제65항에 있어서, 상기 제1당질액이 말초신경 차단제를 포함하는 생물조직 보존방법.
- 동물의 기관으로 통하는 혈관에 관류액을 주입하고, 상기 기관중의 혈액을 상기 관류액으로 치환하며,상기동물로부터 절제된 상기기관의 적어도 일부를 냉각하고, 10℃를넘지 않는 온도까지 온도를 저하시켜보존하는 생물조직 보존방법에 있어서, 상기 혈관에 제1관류액으로서 나트륨, 칼륨, 수소, 염소 및 인산이온을 포함하는 pH7.4의 완충액과, 1 내지 5중량%의 글루코스와, 1. 5내지 7.5중량%의 우혈청 알부민으로 구성되고 ,염화나트륨 농도가 0.15±0.05몰인 제1당질액을 주입하여, 상기 기관중의 혈관내의 혈액을이 제1당질액으로 치환하며, 이어서 상기 기관으로 통하는 혈관에 제2관류액으로서 나트륨, 칼륨 ,수소,염소 및 인산 이온을 포함하는 pH7.4의 완충액과, 3 내지 8중량%의 만니톨과, 1.5 내지 7.5중량%의 우혈청알부민과, 3 내지 15중량%의 디메틸설폭사이드 또는 글리세린으로 구성되고, 염화나트륨 농도가 0.15±0.05몰인 제2당질액을 주입하여, 상기 기관중의 상기 제1당질액을 상기 제2당질액으로 치환하며, 이들치환중 또는 후에 상기기관의 전부 또는 소정의 부분을 절제하고 ,상기의 제2당질액으로 치환된 상기기관의 적어도 일부를 조직 시료로서, 평행으로 고정된 다수의 금속침으로 되는 침집합체로 꿰뚫고, 상기침집합체로 꿰뚫은 상기시료를 소정의 속도로 상기 온도까지 냉각하고, 그 온도에서 보존하며, 상기 시료의 해동이 필요하면 상기 시료의 온도를 상기 제2당질액의 빙점 이상으로 상승시켜, 상기 시료를 상기침집합체로부터 인발함으로서 달성되는 생물조직 보존방법.
- 제68항에 있어서 ,상기소정의 속도가 평균 매분 1.13℃이내인 생물조직 보존방법.
- 상기동물로부터 절제된 상기 기관의 적어도 일부를 냉각하고, 10℃이하의 온도에서 보존하는 생물조직 보존방법에 있어서, 상기절제된 기관의 적어도 일부를 조직시료로서, 서로 평행으로 고정된 다수의 금속침으로 되는 침집합체로 꿰뚫고, 이 침집합체로 꿰뚫은 상기 시료를 냉각하고, 상기 온도까지 온도를저하시켜 보존함을 특징으로 하는 생물조직 보존방법.
- 제70항에 있어서, 상기 냉각의 속도가 -80℃까지 평균 매분 1.3℃이내인 생물조직 보존방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개되는 것임.
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