KR920701426A - 다중 돌연변이된 섭티리신 동족체 및 그를 암호화하는 dna 결합서열 및 그의 제조 방법 - Google Patents

다중 돌연변이된 섭티리신 동족체 및 그를 암호화하는 dna 결합서열 및 그의 제조 방법

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Abstract

내용 없음

Description

다중 돌연변이된 섭티리신 동족체 및 그를 암호화하는 DNA 결합서열 및 그의 제조 방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 무수아스파틸글리신을 형성하기 위한 표 1에 나타난 바와같은 섭티리신의 위치 218 및 219의 Asn-Gly잔기를 고리화한 것과 염기 촉매를 사용한 그의 가수분해를 개략적으로 나타냄.

Claims (25)

  1. 섭티리신 동족체에 있어서, (1)자연 발생적인 바실루스 섭티리신의 칼슘 결합 부위에 존재하는 하나이상의 아미노산을 음전하를 가지는 아미노산으로 치환하고, (2)자연발생적인 바실루스 섭티리신의 하나 이상의 Asn-Gly 결합 서열을 삭제하거나 다른 아미노산으로 치환하고, (3)하나 이상의 메티오닌 잔기를 다른 아미노산으로 치환하고, (4)삼인조 촉매지점 부근의 하나 이상의 아미노산 잔기를 다른 아미노산으로 치환 함으로써 자연 발생적인 바실루스 섭티리신의 하나 이상의 아미노산이 변이된 아미노산 결합 서열을 가짐을 특징으로 하는 섭티리신 동족체.
  2. 제1항에 있어서, 상기 동족체는 섭티리신 칼스버그, 십티리신 DY, 섭티리신 BPN', 바실루스 섭티리스의 aprA 섭티리신 및 바실루스 메센테리쿠스로 부터의 섭티리신 중에서 선택한 자연 발생적인 바실루스섭티리신의 동족체임을 특징으로 하는 섭티리신 동족체.
  3. 제1항에 있어서, Asp41, Leu75, Asn76, Asn77, Ser78, Ile79, Gly80, Val81, Thr208및 Thr214로 대표되는 칼슘 결합 부위내의 하나 이상의 아미노산을 음전하를 가지는 아미노산으로 치환함을 특징으로 하는 섭티리신 동족체.
  4. 제3항에 있어서, 음전하를 가지는 아미노산은 Asp 또는 Glu임을 특징으로 하는 섭티리신 동족체.
  5. 제4항에 있어서, Asn76이 Asp76으로 치환된 섭티리신 동족체.
  6. 제4항에 있어서, Ile78이 Glu79으로 치환된 섭티리신 동족체.
  7. 제4항에 있어서, Asn76이 Asp76으로 치환되고, Ile79가 Glu79로 치환된 섭티리신 동족체.
  8. 제1항에 있어서, Asn-Gly결합서열내의 Asn잔기가 다른 아미노산의 잔기로 치환된 섭티리신 동족체.
  9. 제8항에 있어서, 상기 Asn-Gly결합 서열내의 Asn잔기가 Sen, Val, Thr, Cys, Glu 및 Ile가운데 선택한 아미노산 잔기로 치환된 섭티리신 동족체.
  10. 제9항에 있어서, 상기 Asn-Gly결합서열 내의 Asn잔기가 Ser잔기로 치환된 섭티리신 동족체.
  11. 제10항에 있어서, 위치 109의 Asn 잔기가 Ser잔기로 치환된 섭티리신 동족체.
  12. 제10항에 있어서, 위치 218의 Asn 잔기가 Ser잔기로 치환된 섭티리신 동족체.
  13. 제10항에 있어서, 위치 109 및 218의 Asn잔기가 Ser잔기로 치환된 섭티리신 동족체.
  14. 제13항에 있어서, [Asp76, Ser109, Ser218]섭티리신, [Glu79, Ser109, Ser218]섭티리신, 및 [Asp76, Glu79, Ser109, Ser218]섭티리신으로 구성되는 그룹 가운데 선택된 섭티리신 동족체.
  15. 제1항에 있어서, 상기 하나 이상의 메티오닌 잔기가 알라닌 또는 루이신으로 치환된 섭티리신 동족체.
  16. 제15항에 있어서, Met222가 Ala로 치환된 섭티리신 동족체.
  17. 제15항에 있어서, Met124가 Leu 또는 Ala로 치환된 섭티리신 동족체.
  18. 제1항에 있어서, 상기 삼인조 촉매지점 부근의 하나이상의 아미노산이 Ile31, Ser33, Ser62, Ser63, Tyr217, 및 Arg247인 섭티리신 동족체.
  19. 제18항에 있어서, Leu31, Thr33, Asn62, Gly65, Leu217, 및 Leu247과 같은 하나 이상의 치환체를 포함하는 섭티리신 동족체.
  20. 제1항에 있어서, 바실루스 섭티리신은 표 1에 나타난 바와같은 자연발생적인 아미노산 결합서열을 가지는 섭티리신 동족체.
  21. Glu79, Leu124또는 Ala124, Leu217, Thr33, Asn62, Leu31, Leu247및 Gly63으로 구성된 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 치환체를 부가적으로 가지는 [Asp76, Ser109, Ser218, Ala222]십티리신.
  22. 제1항에 있어서, [Asp76, Ser109, Ser218, Ala222]십티리신; [Leu31, Asp76, Ser109, Ser218, Ala222]섭티리신; [Asp79, Ser109, Leu124, Ser218, Ala222]섭티리신; [Asp76, Ser109, Ala124, Ser218, Ala222]섭티리신으로 구성된 그룹으로부터 선택된 섭티리신 동족체.
  23. 칼슘 결합부위 및 Asn-Gly 결합 서열을 포함하는 아미노산 결합서열을 가지는 상기 바실루스 섭티리신의 동족체를 암호화하는 DNA결합 서열에 있어서, (1)칼슘 결합 부위내의 하나 이상의 아미노산을 암호화하는 코돈을 삭제하거나 음전하를 가지는 아미노산을 암호화하는 코돈으로 치환하고; (2)Asn-Gly결합서열 내의 하나 이상의 아미노산을 암호화하는 코돈을 삭제하거나 다른 아미노산 잔기를 암호화하는 코돈으로 치환하고; (3)하나 이상의 메티오닌 잔기를 암호화하는 코돈을 다른 아미노산을 암호화하는 코돈으로 치환하고; (4)삼인조 촉매지점 부근의 하나 이상의 아미노산을 암호화하는 코돈을 다른 아미노산을 암호화하는 코돈으로 치환한 바실루스 섭티리신의 동족체를 암호화하는 DNA 결합 서열.
  24. 칼슘 결합 부위를 가지는 바실루스 섭티리신의 증진된 열 및 pH 및 산화에 대한 안정성을 가지는 섭티리신 동족체의 제조방법에 있어서, 바실루스 섭티리신의 칼슘 결합 부위의 아미노산 잔기는 음전하를 가진 아미노산으로 치환하고, Asn-Gly결합서열 내의 하나 이상의 아미노산은 치환하거나 삭제하고, 하나이상의 메티오닌 잔기는 다른 아미노산으로 치환하고, 삼인조 촉매 지점 부근의 하나 이상의 아미노산 잔기는 다른 아미노산으로 치환하는 과정으로 구성되는 열 및 pH 및 산화에 대한 안정성을 증진시키는 섭티리신 동족체의 제조방법.
  25. 제1항의 섭티리신 동족체를 세정제 제제형내에 효과적인 양으로 포함하는 조성물.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개되는 것임.
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