KR920004571A - 헤파린 결합 향신경성 인자(hbnf)를 암호하는 유전자, 이를 포함하는 발현 벡터 및 숙주 세포, 및 hbnf의 생성 방법 및 사용방법 - Google Patents

헤파린 결합 향신경성 인자(hbnf)를 암호하는 유전자, 이를 포함하는 발현 벡터 및 숙주 세포, 및 hbnf의 생성 방법 및 사용방법 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

헤파린 결합 향신경성 인자(HBNF)를 암호하는 유전자, 이를 포함하는 발현 벡터 및 숙주세포, 및 HBNF의 생성 방법 및 사용방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 인간 HBNF의 상보적 DNA클로닝, 뉴클레오티드 및 추론된 아미노산 서열에 관한 것이다. (a) HBNF를 암호하는 4개의 오버랩된 부분적 cDNAs의 다이아그램, 상부 라인은 HBNF 암호 영역 및 가정된 3´폴리 (A) 지대를 각각 나타내는 검고 해치를 넣은 칸들을 갖는 mRNA를 나타낸다. 제한 부위 : H=Hind Ⅲ, K=Kpnl, P=Pstl : nt=클론의 －뉴클레오티드 길이. (b) 추론된 아미노산 서열(단일－문자 암호)과 클론 HHC7,8, 10 및 12의 합한 뉴클레오티드 서열, 정상적 유형에서 보여지는 아미노산은 가능한 168 아미노산 전구체 단백질을 나타내는 부가적 32개 굵은 활자의 아미노산에 선행하는 성숙한 인간 HBNF의 136개 아미노산을 나타낸다. 밑줄 그어진 아미노산 서열은 유전자를 클로닝하는데 사용되는 올리고뉴클레오티드 표지자의 고안에 이용되는 두개의 펩티드를 나타낸다. 클론 HHC7에서 누락된 3개의 뉴클레오티드는 칸으로 채워져 있고 성숙 단백질의 시작은 화살로 지시되어 있다.
제2도는 인간 HBNF 단백질의 발현 및 기능적 특징화를 예증한다. (a) HBNF 단백질 샘플의 SDS´－PAGE겔 전기영동, 단백질 표준은 BRL로 부터였다. 레인 N, 정제된 소의 HBNF 단백질(100g), 레인+및－이소프로필－B－D－티오갈락토피라노시드(IPTG)유도된 및 유도되지 않는, 세균 발현 구조 pETHHS를 함유하는 배양물, (b)쥐의 뇌뉴론에 있어서 신경세포돌기 자연성장 분석.
(A)쥐 뇌 HBNF의 부재하 또는 (B) 존재(320ng/ml)하, (C)정제된, 세균성으로 생성된 인간 HBNF(160ng/ml) 또는 (D)(320ng/ml),
제3도는 성숙한 생쥐 및 인간의 조직내 HBNF mRNA의 노던 블로트(Northern blot)분석을 보여준다. (a)각각 조직, 심장, 폐, 뇌, 흉선, 위, 다리근육, 간, 신장, 비장으로부터; 레인당 20ug 총 RNA가 적용되었다. (b) 성숙한 생쥐 및 인간 뇌로부터 10ug총 RNA를 비교하는 RNA분석.

Claims (12)

  1. 헤파린 결합 향신경성 인자 (HBNF)를 암호하는 정제되고 분리된 유전자.
  2. 제1항에 있어서, 생물학적으로 활성이 HBNF 단백질을 암호하느, 제1도에 묘사된 서열, 또는 이의 부분을 갖는 유전자.
  3. 제1항에 있어서, 매우 엄격한 표준 조건하에 제1도에 묘사된 서열과 교잡가능한 유전자.
  4. 제1항의 유전자로 숙주세포를 형질 전환시키고, 숙주세포에 의한 유전자의 발현을 허용하는 조건하에 숙주세포를 배양하는 것으로 구성되는, 실질적으로 순수한 HBNF 단백질의 생성 방법.
  5. 제1항의 유전자를 포함하는 발현 벡터.
  6. 제1항의 유전자를 포함하는 숙주 세포.
  7. 제6항에 있어서, ACTT 68385 로서 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉숀에 기탁된 세포.
  8. 제1도 또는 제5도에 묘사된 서열, 및 HBNF 생물학적 활성을 보유하는 유사체 또는 이들의 단편들을 갖는 정제된 분리된 HBNF 단백질.
  9. 제약리학적으로 허용가능한 담체와 함께, 제8항의 단백질의 효과적인 양으로 구성된 치료 조성물.
  10. 제8항의 단백질의 효과적인 양의 존재하에 신경세포를 배양하는 것으로 구성된 시험관내 신경세포의 증식을 유지하거나 촉진하는 방법.
  11. 생체내 손상된 신경 세포를 수복하거나 치료하는 방법으로, 제8항의 단백질을 발현할 수 있는 적합한 유전자전환 세포의 효과적인 양을 상기 치료가 필요한 개체에게 투여하는 것을 구성된 방법.
  12. HBNF 단백질의 효과적인 양을 비분화된 세포에 적용시키는 것으로 구성된 비분화된 세포의 분화를 유발하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019910014258A 1990-08-20 1991-08-19 헤파린 결합 향신경성 인자(hbnf)를 암호하는 유전자, 이를 포함하는 발현 벡터 및 숙주 세포, 및 hbnf의 생성 방법 및 사용방법 KR920004571A (ko)

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