KR900001165B1

KR900001165B1 - 빈카류코블라스틴 유도체의 제조방법

Info

Publication number: KR900001165B1
Application number: KR1019840001689A
Authority: KR
Inventors: 조셉 쿨리난 조오지
Original assignee: 릴리 인더스트리스 리미티드; 티.알.크로우더
Priority date: 1983-03-30
Filing date: 1984-03-30
Publication date: 1990-02-27
Also published as: AU560423B2; PT78321B; PL246932A1; KR840008161A; AU2614484A; SU1326196A3; EG16223A; ATE57187T1; EP0123441B1; GR79898B; PT78321A; NZ207674A; JPS59184189A; PL142754B1; PH20036A; ES531080A0; PL254899A1; FI841259A0; FI82939B; CA1225395A

Abstract

내용 없음.

Description

빈카류코블라스틴 유도체의 제조방법

본 발명은 4-데스아세틸인돌-디하이드로인돌 알카로이드의 이관능성 에스테르 유도체에 관한 것이다.

빈카 로시(Vinca rosea)로부터 얻을 수 있는 알카로이드는 포유동물의 실험적 악성종양의 성장에 역작용을 미치게 하는 제약 화학적으로 최대의 생산적인 분야를 제공하는 것이다. 최초 알카로이드 중 몇몇은 식물의 잎에서 추출하거나 크로마토그라피에 의한 정제에 의하여 얻었으며 이들은 활성을 갖는 것임을 알 수 있었다. 빈카식물의 잎으로부터 직접 얻을 수 있는 활성 항종양 알카로이드는 VLB(빈블라스틴, 빈카류코블라스틴), 빈크리스틴(류코크리스틴), 류로진(빈류로진), 류로지딘(빈로지딘), 류로포트민(포트밀류로진)과 데옥시 VLB "A"와 "B"(4'-데옥시 VLB과 4'-데옥시 류로지딘)가 있다.

빈카 알카로이드의 화학적 변이는 몇가지 이유로 늦게 개시된 것인데, 첫째, 그 분자구조가 극히 복잡하여 다른 기에 영향을 주지 않고 분자의 한 특수 관능기를 변이시키는 반응을 화학자가 발견하는 것이 지연된 것이다. 둘째, 원하는 화학요법성을 결여한 이량체 알카로이드는 빈카 로시 추출물로부터 회수 또는 제조했으며, 이들의 구조결정은 이들 비활성 화합물이 하나 또는 그 이상의 활성 알카로이드를 갖는 이성체에 구조적으로 가깝게 결부되는데 따라 결정된다. 따라서, 공지의 항암성 알카로이드를 화학적으로 조금만 변화시켜도 항종양 활성에는 큰 효과를 나타낸다.

이러한 제한 때문에, 빈카 로시로부터 얻은 인돌-디하이드로인돌 알카로이드의 변이는 분자상의 단 세위치 ; C-3, C-4'와 C-4에만 집중된다. 첫째, 최근 성공한 변이중의 하나로, C-3변이를 생각해 보면, 기초적인 인돌디하이드로 인돌의 변이로 C-3카르복스아미드 유도체가 제조되며, 이의 대부분은 활성 항-종양제로 제조되었다.(미국특허 제4, 166, 810호와 Conrad 등의 J.Med. Chem. 22, (1979) 참조). 4-데스아세틸 VLB-카르복수아미드 번데신)는 유럽 몇몇 나라에서 종양세포 붕괴제로 시판되고 있다. 이는 생식 세포종양을 함유하는 여러 가지 통상의 종양과 더불어 몇몇 빈크리스틴-내성 백혈병을 치료하는데 효과적이다. 3-하이드록시 및 3-에스테르 관능기와 이시시아네이트의 반응으로 대응하는 옥사졸리딘디올 유도체가 생성되고, 이 중 하나인 N-클로로에틸 유도체(빈졸리딘)는 현재 임상시험에 사용되고 있다. 해당 옥사졸리딘디온 유도체는 밀러와 구로우스키에 서술되어 있다.(1981년 3월 31일자 제공고된 미국특허 제RE 30, 560호).

변이되는 분자상의 제2위치는 C-4'이고, 이러한 변이의 대부분은 개량된 플로보브스키 반응(포티어등, J. C.S.Chem.Comm., 670, (1975)에 의하여 빈돌린과 카나란틴을 결합시키거나 VLB 또는 류로시딘의 탈수 반응(구토우스키와 밀러, 미국특허 제4, 029, 663)에 의하여 만들 수 있는 3',4'-안하이드로 유도체를 기초로 한다. 탄수반응르로 델타3'.4'-안하이드로 유도체와 더불어 2개의 엑소-이중 결합 이성체가 생성된다. 에폭사이드, 디올 등을 형성하는 이들 이중결합 중 어느 하나를 관능화시키면 C-4'에서 화학적 변이가 일어난다.

성공적으로 변이를 가져오는 인돌-디하이드로인돌의 제3위치는 C-4이다. 첫째, 상기의 모든 빈카 알카로이드에 존재하는 아세톡시기의 가수분해로 활성 항종양성 4-데스아세틸 유도체가 생성된다.(빈데신, 이는 C-3카르복스아미드로서 4-데스아세틸 유도체이다). 둘째, 하그로브(미국특허 제3, 387,001호와 제3,392,173호)는 새로운 4-데스아세틸 VLB, 4-데스아세틸 빈크리스틴 등의 4-아실 유도체를 제조했다. 이들 새로운 유도체 가운데, 4-클로로아세틸 VBL가 있는데, 이 화합물은 아민) 예를 들어 디메틸아민과 반응하여 유효한 항암 약제로서함께 즉 빈글리시네이트, N, N-EL-메틸 4-글리시닐 VLB를 생성시킨다.

다른 변이로서 라이트와 노이스(미국특허 제4,122,082호)는 4-데스아세틸 VLB의 4-히드록시를 4-케토화합물로 산화시키고, 톰프선(미국특허 제4, 195, 022호)은 이 케톤을 4-에피히드록시(4α-히드록시)로 환원시키며, 이 화합물은 항암 활성을 갖는다.

인돌-디하이드로인돌 가교 이량체 ; 즉 비스-아미드에 의하여 3-카르복실에 가교 결합하는 같거나 다른 알카로이드 부분은 콘래드와 제르존(미국 특허 제4,199, 504호)에 서술되어 있다. 또한 인돌-디하이드로인돌빈카 알카로이드 이량체는 분자의 다른 위치에서 가교결합을 하지 않으므로 빈카 사량체를 형성한다.

VLB와 빈크리스틴은 단백질과 접합되어 방사능면역 시험에서 유용한 물질을 형성한다. 4-데스아세틸 VLB, 3-카르복스아지드(데스아세틸 빈블라스틴 아지드)와 대응하는 빈크리스틴 화합물은 이에 사용된 유도체이다 ; 이 반응의 예를 든 콘레드 등의 문헌, J.Med. Chem., 22, 391(1979)와, 유럽 특허 제41, 935호와 미국특허 제4, 203, 898호 참조.

본 발명은 다음 일반식(I)의 화합물과 이의 염을 제공한다.

R-O-CO-X-CO-Z (I)

(상기식에서 R은 다음 일반식(II)과 같은, 4-아세톡시 또는 4-히드록시 항종양성 이량체 인돌디하이드로인돌 알카로이드로부터 유도된 이량체 인돌-디하이드로인돌기가 바람직하다.

(상기식에서 R²는 H, CH₃또는 CHO이고 ; R⁴와 R⁵가 별개로 존재하고 있는 경우에는 R⁵는 H이고, R³와 R⁴중 하나는 에텔이고 다른 하나는 H 또는 OH이다 ; R⁴와 R⁵가 이들에 부착되는 탄소원자와 함께 존재하고 있는 때에는, 옥시란 환을 형성하고, R³는 에틸이고 ; R¹은 COOH, COOC_1-3알킬 또는 CO-R⁶이고, 여기서 R⁶는 NH₂, NH-C_1-3알킬, NH-CH₂CH₂Cl, 1-필로리딜, 1-피페리딘일 또는 NH-CH₂CH₂YCH₃(여기서 Y는 S나 O 또는 카르복시 보호기)이고 ; Z는 OH, OC_1-3알킬, OR, NH₂, NHNH₂또는 카르복시 활성화기(Z¹) 또는 카르복시 보호기(Z²)이고 ; X는 C_1-4직쇄 알킬렌, C_2-8분지쇄 알킬렌, C_2-4알켄일렌, C_3-4알킨일렌, C_3-6시클로알킬렌, 페닐렌, 히드록시-치환 C_1-4알킬렌 또는 직접 결합이다. 일반식(I)에서 가 일때 R기는 같거나 다르다.

일반식(I)에서 Z가 OR, OH, O-C_1-3알킬, NH₃또는 NHNH₂인 본 발명의 화합물은 쥐에 이식한 종양에 대하여 항종양성을 나타내는 화합물로서 유용하고, 또한 항핵분열성을 갖는다.

일반식(I)에서 Z가 카르복시 활성화(아실화)기일때 이는 화학분야, 특히 펩티드 화학분야에서 사용되고 있는 공지의 기이고, 이러한 기는 본 분야에 공지되어 있는데, 예를 들어 M. Bodanszky, Y.S.Klausner와 M.A.Ondetti, 제2판(1976) John Wiley ＆ Sons의 펨티트 합성 P.85-136에 기재되어 있다. Z가운데에는 아지드(-N₃)기, 할로겐 원자, 예를 들어 취소 특히 염소, 일반식 R⁷CO.O(여기서 R⁷은 지방족 잔기 또는 방향족 잔기, 예를 들면 C_1-3알킬)의 아실옥시기, 알콕시기, 바람직하기로는 C_1-3알콕시 또는 아릴옥시기, 메탄설폰일옥시, 토실옥시 또는 벤젠설폰일옥시기, 이미다졸일기 또는 N-아실히드록실아민 유도체의 잔기와 결합하여도 좋고, 예를 들면 Z는 석신이미독시, 프탈이미독시 또는 벤조트리아졸릴옥시가 있다.

Z가 카르복시 보호기이거나, R¹이 COR⁶이고, R⁶가 카르복시 보호기일 때, 이는 본 목적에 사용되는 기로서 공지되어 있다. 이러한 술어는 카르복실산의 관능성을 저지 또는 보호하기 위하여 사용되는 통상의 보호기를 의미하고, 반면에 화합물의 다른 관능기에 관한 반응도 행할 수 있다. 이러한 카르복시 보호기는 가수분해 또는 가수소분해에 의하여 대응하는 카르복실산으로 용이하게 분열시킴을 알 수 있다. 카르복실산 에스테르 보호기를 예를 들면 일반식 OR⁷의 기가 있으며 여기서 R⁷은 tert-부틸, 벤질, 4-메톡시벤질, C_2-6알카노일옥시메틸, 2-요도메틸, p-니트로벤질, 디페닐메틸(벤즈히드릴), 펜아실, 4-할로펜아실, 디메틸알릴, 2.2.2-트리클로로에틸, 트리(C_1-3알킬)실일, 석신이미드메틸 등 에스테르형성부분이 있다. "유기 화학의 보호기" 제5장에서 E. Haslam에 의하여 서술된 바와 같은 기타 공지의 보호기도 적당하게 사용할 수 있다.

이러한 카르복시 활성화기 또는 보호기를 예를 들면 Cl, Br, N₃, 이미다졸릴,

석신이미독시

프탈이미독시

벤조트리아졸일옥시

메탄설폰일옥시, 토실옥시, 벤젠설폰옥시등, 아실화기(Z¹) 또는 CCl₃CH₃O, CBr₃CHO, CH₂ICH₂O, 벤질옥시, 메틸벤질옥시, t-부틸옥시, 알릴옥시, 메톡시벤질옥시, 니트로벤질옥시, 펜아실옥시, 니트로펜아실옥시, 메톡시펜아실옥시, 메틸펜아실옥시, 디페닐메톡시, 트리틸옥시(트리페닐메톡시), 트리메틸실일옥시 등 카르복시 보호기(Z²)가 있다.

X기를 예를 들면 메틸렌, 에틸렌, 프로필렌, 부틸렌, 비닐, 프로페닐렌, 부텐일렌, 부틴일렌, 에틴일렌, 히드록시에틸렌, 1,2-디히드록시에틸렌, 1,2-디메틸에틸렌, 1,2,3,4-테트라히드록시부틸렌, 3,4-디메틸부틸렌, 1,4-시클로헥실렌, 1,4-페닐렌, 1,2-페닐렌 등이 있다. X는 C_1-4알킬렌, C_2-4알켄일렌, C_2-4알키닐렌, C_3-6시클로알킬렌 또는 페닐렌이 바람직하고, 특히 C_1-4알킬렌이 바람직하다.

본 발명 화합물의 염은 R¹이 COOH이고, Z가 OH일때 C-3카르복실산의 양이온염으로, 예를들면 나트륨, 칼륨, 테트라메틸 암모늄염 등이 있다. 또한 제약적으로 수용할 수 있는 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 취화 수소산, 옥화 수소산, 아인산 등과 같은 무독성 무기산으로부터 유도된 염과, 지방적 모노 및 디카르복실산, 페닐-치환 알카노산, 히드록시알카노산과 히드록시알칸디오인산, 방향족산, 지방족 및 방향족 설폰산 등과 같은 무독성 유기산으로부터 유도된 염이 있다. 따라서 제약적으로 수용할 수 있는 염은 황산염, 피로황산염, 중황산염, 아황산염, 중아황산염, 질산염, 인산염, 모노하이드로겐 인산염, 디하이드로겐 인산염, 메타인산염, 피로인산염, 염화물, 취화물, 옥화물, 초산염, 프로피온산염, 데칸산염, 카프릴산염, 아크릴산염, 개미산염, 이소부티르산염, 카프르산염, 헵탄산염, 프로피올산염, 옥살산염, 말론산염, 석신산염, 수베르산염, 세바크산염, 푸마르산염, 말레산염, 만델산염, 부틴-1,4-디오에이트, 헥신-1,6-디오에이트, 안식향산염, 클로로안식향산염, 메틸안식향산염, 디니트로안식향산염, 히드록시안식향산염, 메톡시안식향산염, 프탈산염함께 테레프탈산염, 벤젠설폰산염, 톨루엔설폰산염, 클로로벤젠설폰산염, 키실렌설폰산염, 페닐초산염, 페닐프로피온산염, 페닐부티르산염, 구연산염, 젖산염, β-히드록시부티르산염, 글리콜산염, 말산염, 나프탈렌-1-설폰산염, 나프탈렌-2-설폰산염, 메실산염 등이 있다.

본 발명 화합물의 합성은 단계적으로 행할 수 있다. 첫째, 하그로브 미국특허 제 3,392,173호의 방법에 의하여 제조된 일반식 ROH의 4-데스아세틸인돌-디하이드로인돌을 다음 일반식의 카르복실산 무수물로 아실화하여 Z가 OH이고 R과 X가 전술한 바와 같은 일반식(I)의 화합물을 제조한다 :

(상기식에서 X는 전술한 바와 같다)

Z가 O-C_1-3알킬인 화합물은 통상의 에스테르화 방법에 의하여 C_1-3알칸올을 사용하여 반-산, R-CO-X-COOH로부터 제조한다. 메탄올이 알칸올로서 바람직한데 그 이유는 ROH의 출발물질에 존재하는 다른 에스테르기가 메틸에스테르이고 따라서 에스테르 교환물제를 크게 피할 수 있기 때문이다.

인돌-디하이드로인돌과 석신 무수물등을 반응시켜, R이 COOH 또는 COR⁶(여기서 R⁶는 카르복시 보호기)인 일반식(I)의 화합물을 제조할 때, C-3에스테르와 C-4에스테르기는 먼저 가수분해하여, 예를 들어 VLB에서, 4-데스아세틸 빈블라스틴산을 얻을 수 있다.(미국특허 제4, 012, 390호 참조). 다음 C-3카르복실기는 전술한 카르복시 보호기로 보호되어야 한다. C-4에서 유리 히드록실을 갖는 이러한 C-3카르복시 보호 유도체는 전술한 바와 같이 무수물과 반응시킨다. 생성된 화합물을 화학적으로 처리하여 Z가 아실화 부분인 일반식(I)의 화합물을 제조하고 이때 반응조건은 중성 또는 염기성으로 하여, C-3카르복시 보호기의 이탈을 피한다. 원하는 말단기 Z를 알맞게 존재시킨 후, C-3에서 카르복시 보호기를 제거하여 R¹이 COOH인 일반식(I)의 화합물을 생성시킨다. 또한 다음 일반식의 화합물 :

R-O-CO-X-CO-OC_1-3알킬

은 아실화제 : 즉 반-에스테르, Cl-CO-X-CO-O-C_1-3알킬과 같은 반-산염화물을 사용하여 직접 제조할 수 있다. 기타 아실화기는 Cl대신에 사용할 수 있고, 아실화 부분은 통상 다음 일반식으로 표시할 수 있다 :

Z¹-CO-X-CO-OC_1-3알킬

(상기식에서 X는 전술한 바와 같고 Z¹은 Cl, Br, N₃, 석신이미드옥시, 프탈이미드옥시, 메탄설폰일옥시, 토실옥시, 페닐설폰일옥시, 벤조트리아졸일옥시 또는 다른 아실화 부분을 나타낸다) 또한 Z가 카르복시 보호기인 일반식 Z¹-CO-X-CO-Z²의 아실화제를 사용하여 일반식 R-O-CO-X- CO-Z²의 화합물을 제조할 수 있다.

Z가 NH₂또는 NHNH₂인 일반식(I)의 화합물은 암모니아 또는 히드라진일을 사용하여 "활성화"빈카 이량체(R기) 다음 일반식의 4-헤미산 :

R-O-CO-X-CO-Z

(상기식에서 Z는 Cl이 바람직하다)을 형성시켜서 제조할 수 있다. 혼합된 무수물은 반-산을 N-메틸몰폴린과 알킬 클로로포름메이트로 계속적으로 처리하여 형성시킬 수 있다. 혼합된 무수물과 알콜성 암모니아 또는히드라진과의 반응으로 원하는 반-아미드가 생성된다. 화합물을 R¹이 COOH이고, Z가 NH₂또는 NHNH₂인 화합물을 제조할 때, R¹카르복실기를 먼저 보호하는 조건으로 표준 기초적 반응을 사용할 수 있다.

Z가 OR(여기서 R은 일반식(II)으로 표시되는 인돌-디하이드로인돌이다)인 화합물은 다음 일반식의 아실화 부분 :

R-O-CO-X-CO-Z¹

을 형성시킨 다음 이를 C-3에서 유리 카르복실기를 먼저 보호하는 조건으로, 같거나 다른 4-데스아세틸인돌-디하이드로인돌 알카로이드, ROH와 반응시켜서 제조하며, 이러한 보호기는 반응이 완료되었을 때, 임의로 제거한다. 상기 몇몇 유도체를 제조하기 위한 다른 방법은 카르보디이미드, 예를 들어 DDC(디시클로헥실카르보디이미드) 또는 EEDQ(N-에톡시카르보닐-2-에톡시-1,2-디하이드로퀴놀린)등과 같은 결합제를 무수반응 조건하에서 반-산 HO-CO-X- CO-Z²(여기서 Z²는 카르복시 보호기이다)와 사용하는 것이다. 예를들면, 최초 4-석신옥시 유도체를 DCC의 존재하에 ROH와 HO-CO-CH₂-CH₂-CO-Z²로부터 제조하고, 이로부터 다음 일반식의 화합물을 제조한다 :

R-O-CO-X-CO-Z²

카르복시 보호기를 제거한 다음, 생성된 유리산을 히드록시프날이미드, 히드록시벤조트리아졸, 히드록시석신이미드, 할로겐화제, 아지드등과 반응시켜서 다음 일반식의 반응성 아실화 중간체를 생성시킨다 :

R-O-CO-X-CO-Z³

(상기식에서 Z³는 석신이미드옥시, 벤조트리아졸일옥시, 프탈이미드옥시, Cl, Br, N₃등이다.)

이들 중간체를 같거나 다른 인돌-디하이드로인돌 ROH와 반응시켜서 가교결합된 빈카 사량체를 생성시키거나또는 면역 글로불린 또는 면역 글로불린의 단편과 반응시켜서, 예를 들어 방사능 면역시험에 유용한 접합체를 형성시키거나 다성분지계(多性分枝系) 또는 단성(單性)분지계 항체와 반응시켜서 항암성 약제를 제조한다. 또한 "활성화"유도체를 저급알콜과 반응시켜서 다음 일반식의 반-에스테르를 생성시킬 수 있다 :

R-O-CO-X-CO-O-C_1-3알킬

제조한 화합물에서 X가 히드록시 ; 디히드록시 또는 테트라히드록시 C_1-4알킬렌인 경우, 즉 화합물의 제조시 말산, 타르타르산 또는 삭카르산으로부터 유도된 결합기인 때 피란일기와 같은 보호기로 히드록시 또는 히드록실을 보호하는 것이 필요하다. 또한 트리메틸실일기와 같은 트리알킬실일기를 사용할 수 있다. 타르타르산과 같은 비시날디히드록시 화합물의 경우에는, 아세틸, 특 이소프로필리덴 또는 시클로히드록실리덴 유도체를 사용할 수 있다.

X가 직접 결합기(이 결합기는 옥살산으로부터 생성된다)인 때에는 헤미-옥살레이트가 3-히드록실과 환화를 이루기 때문에 옥살일클로라이드를 사용할 수가 없다. 그러나 일반식 Cl-CO-CO-Z²의 옥살산 유도체 또는 옥살레이트 반-에스테르는 사용할 수 있으며, 가수분해된 에스테르 또는 카르복시 보호기는 아실화 부분, 즉 R-CO-CO-X-CO-Z¹으로 동시에 변환하는 동안 제거된다.

통상 구조식 R-O-CO-X-CO-Z¹(여기서 Z¹은 Cl, Br, 토실옥시, 벤젠설폰일옥시, 메탄설폰일옥시, N₃또는 다른 아실화부분이다)의 본 발명 화합물은 R과 Z가 둘다 인돌-디하이드로인돌 알카로이드기를 함유하는 본 발명의 화합물들을 제조하는데 유용할 뿐만 아니라 전술한 바와 같이 다성분지계 및 단성분지계 항체와 같은 면역 글로불린에 결합시키는데 유용하므로 방사능 면역시험에 적합하고 항암성을 갖는 집합체를 제공한다.

이러한 접합체는 통상의 반응 조건하에서, 예를 들어 수성 매체하에 5-25℃의 온도, 바람직하기로는 실온에서함께 7.5-9.5의 pH, 바람직하기로는 8.0-9.0의 조건으로 다성분지계 또는 단성분지계 항체를 구조식 R-O-CO-X-CO-Z¹의 화합물과 반응시켜서 제조한다. 이반응으로 면역글로불린 분자의 유리 아미노기, 예를 들어 리신 잔기로부터 유도된 아미노기에서 하나 또는 그 이상의 빈카 잔기를 공유 결합시키는 결과는 가져온다. 결합되는 잔기의 수는 반응물의 농도와 반응기간에 따르며 평균수는 예를 들어 통상 3에서 14 또는 20까지이다.

반응의 실시예를 들면, 디옥산과 같은 적합한 용제에 용해시킨 일반식 R-O-CO-Z1의 화합물 용액을 0.34M의 붕산 완충액에 용해한 면역글로불린의 완충용액에 pH 8.6으로 서서히 적하한다. 접합체는 겔여과에 의하여 단리시키고 포화 황산 암모늄에 저장하는데, 접합체는 예를 들어 인산염 완충화 식염액과 같은 완충용액을 사용하여 pH 7.4로 투석(透析)하므로서 쉽게 용액으로 되돌릴 수 있으며, 또한 접합체를 4℃ 또는 냉동온도, 즉 20℃의 냉장고에서 저장할 수 있다.

이러한 접합체를 제조하는데 바람직한 물질은 다음과 같은 인간 또는 동물 종양과 관련된 항원에 대한 단성분지계 또는 다성분지계 항체가 있다.

(ⅰ) 발암 항원으로 면역된 염소 또는 양으로부터 얻은 1g(면역글루불린)

(ⅱ) 토끼의 항급성 임파 아세포 백혈병 혈청으로부터 얻은 1g

(ⅲ) 급성 임파 아세포 백혈병, 급성 척수 아세포 백혈병, 만성 임파 아세포 백혈병과 난성 과립구 백혈병에 대하여 발현되는 여러 가지 영장류 항혈청으로부터 얻은 1g

(ⅳ) 폐암 물질로 면역시킨 염소 또는 양으로부터 얻은 1g

(ⅴ) 항-인체 결장직장 암 항체를 분비하는 잡종계 쥐로부터 얻은 단성분지계 1g

(ⅵ) 항-인체 흑색 종양 항체를 분비하는 잡종계 쥐로부터 얻은 단성분지계 1g

(ⅶ) 인체 백혈병 세포와 반응하는 항체를 분비하는 잡종계 쥐로부터 얻은 단성분지계 1g

(ⅷ) 인체 신경 아세포종 세포와 반응하는 항체를 분비하는 잡종계 쥐로부터 얻은 단성분지계 1g

(ⅸ) 인체 유방암 항원과 반응하는 항체를 분비하는 잡종계 쥐로부터 얻은 단성분지계 1g

(ⅹ) 인체 난소 암세포와 반응하는 항체를 분비하는 잡종계 쥐로부터 얻은 단성분지계 1g

(xi) 인체 골육중 세포와 반응하는 항체를 분비하는 잡종계 쥐로부터 얻은 단성분지계 1g

(xii) 폐암에 대한 항체를 분비하는 잡종계 쥐로부터 얻은 단성분지계 1g

본 발명의 화합물을 제조하는데 유용한 4-데스아세틸인돌-디하이드로인돌 알카로이드와 ROH출발물질은 다음 이원 구조식으로 표시할 수 있다.

(상기식에서 R²는 H, CH₃또는 CHO이고 ; R⁴와 R⁵가 별개 존재하고 있는 때는 R⁵는 H이고 R³와 R⁴중 하나는 에틸이고 다른 하나는 H 또는 OH이다 ; R⁴와 R⁵가 이들에 부착되는 소원자와 함께 존재하고 있는 때에는 옥시란 환을 형성하고, R³는 에틸이고 ; R¹은 COOH, COOC_1-3알킬 또는 COR⁶이고, 여기서 R⁶는 NH₂, NH-C_1-3알킬, NH-CH₂-CH₂Cl, 1-필로리딜, 1-피페리딘일 또는 NH-CH₂CH₂YHC₃(여기서 Y는 S 또는 O이다)이다.

상기식에서 R¹이 CO-OCH₃이고, R²가 메틸이고, R³가 히드록실이고, R⁴가 에틸이고, R⁵가 H일 때, 4-데스아세틸 VLB(4-데스아세틸 빈블라스틴)을 나타내고 ; R¹이 CO-OCH₃이고 R²가 포르밀이고, R³가 히드록실이고, R⁴가 에틸이고, R⁵가 H일 때, 4-데스아세틸 빈크리스틴을 나타내고 ; R¹이 CO-OCH₃이고, R²가 메틸이고, R³가 에틸이고, R⁴가 히드록실이고, R⁵가 H일 때 4-데스아세틸 류로시딘을 나타내고 ; R¹이 CO-OCH₃이고, R²-메틸 또는 포르밀이고, R³가 에틸이고, R⁴와 R⁵가 함께 탄소에 결합되어 α-에폭사이드환을 형성할 때, 4-데스아세틸 류로신과 4-데스아세틸 류로포르민을 각각 나타내고 ; R¹이 CO-OCH₃이고, R²가 메틸이고, R³가 에틸이고, R⁴와 R⁵가 H일 때, 4-데스아세틸 데옥시 VLB "B" 또는 4-데스아세틸-4'-데옥시류로시딘 또는 4-데스아세틸-4'-에피데옥시 VLB을 나타내고 ; R¹이 CO-OCH₃이고, R²가 메틸이고, R⁴가 에틸이고 R³와 R⁵가 H 일 때, 4-데스아세틸 데옥시 VLB "A" 또는 4-데스아세틸-4'-데옥시 VLB를 나타내며 ; R¹이 CO-OCH₃이고, R²가 CHO이고, R³가 에틸이고, R⁴와 R⁵가 H일 때, 4-데스아세틸-4'-에피데옥시-빈크리스틴(4-데스아세틸-1-포르밀-1-데스메틸-4'-데옥시류로시딘)을 나타내고 ; R¹이 CO-NH₂이고, R²이 메틸이고, R³이 OH이고, R⁴가 에틸이고 R⁵가 H일 때, 빈데신(4-데스아세틸-VLB 3-카르복스아미드)를 나타낸다.

일반식(III)으로 표시되는 4-데스아세틸인돌-디하이드로인돌 알카로이드의 다른 3-카르복스아미드 유도체는 다음과 같이 명명할 수 있다 ; 3-(2-메틸티오)에틸 카르복스아미드 유도체, 3-(2-메톡시)에틸카르복스아미드, 3-카르복스히드라지드, 3-피롤리딘일 유도체, N-메틸카르복스아미드 유도체 등, 단 각아미드기는 상기 R¹에 포함된다. R¹이 카르복실기인 일반식(II)에 따른 화합물은 "오익산"이라 하여 다음과 같이 명명한다 ; 4-데스아세틸 빈블라스틴산, 4-데스아세틸 류로신산, 4-데스아세틸 빈크리스틴산 등이 있다. 4-데스아세틸 빈블라스틴산 유도체의 제조에 있어서, 3-카르복실은 무수물 또는 다른 아실화제, Z¹-CO-X-COOC_1-3알킬과 반응하기 전에, Z²가 전술한 바와 같은 의미를 갖는 카르복시 보호기중 하나로 보호되어 야 하고, 이러한 반응생성물, R-O- CO-X-COOX_1-3알킬은 제2카르복시 보호기를 사용하지 않는 경우, 가수분해되어 아실화기, (COZ¹)예를 들어 COCl, COBr, CO-N₃, 석신이미드옥시등을 갖는 헤미산으로 변환되는 것은 본 분야의 전문가는 잘 알 것이다.

4-데스아세틸 유도체(III)의 원 알카로이드류에 관한 문헌은 다음과 같다 ; 류로신(미국특허 제3,370,057호), VLB(미국특허 제3,097,137호), 류로시딘(빈로시딘)과 류로크리스틴(빈크리스틴으로 후술함)(들은 미국특허 제3,205,220호), 데스메틸 VLB(미국특허 제3,354,163호), 빈데신과 기타 3-카르복스아미드(미국특허 제4,203,898호), 빈블라스틴산, 빈크리스틴산등(미국특허 제4,012,390호), 4-에피빈크리스틴(미국특허 제4,143,041호)류로포르민, 포르밀류로신(미국특허 제4,279,816호)와, 데옥시 VLB "A"와 "B"[Tetrahedron Letters, 783(1958)].

일반식(II)에 따른 대표적인 화합물의 예를 들면 다음과 같다. 구조식 R-O-CO-CH₂- CH₂-COOH의 화합물을 명명을 쉽게 하기 위하여 VLB 4-헤미석신네이트라 표시하며, 모든 R기에 대하여 통상적으로 4-데스아세틸 술어를 생략한다.

[실시예 1]

[VLB-4-헤미석신네이트의 제조]

2g의 4-데스아세틸 VLB를 피리딘에 용해시키고 이 용액에 2g의 석신무수물을 가한다. 반응혼합물을 5시간 동안 상온에서 교반한다(0-50℃의 온도를 이 반응에 사용하여도 좋다). 휘발성 성분을 감압하에 증발시켜 제거하고 잔유물을 CH₂Cl₂에 포집한다. CH₂Cl₂층 5%중탄산 나트륨용액으로 세척한 다음 수세한다.

유기층을 건조하고, 용제를 감압하에 제거한다. 이렇게 제조된 VLB 4-헤미석신네이트는 다음과 같은 물리적 특성을 갖는다 :

적외선 흡수 극대부위 : 1737, 1615, 1460, 1434cm^-1

nmr(CDCl₃) : 8.05, 7.54, 7.14, 6.58, 5.83, 5.46, 5.28, 3.80, 3.78, 3.69, 3.62, 2.71, 0.92, 0.79ppm.

황산염은 무수에탄올에 VLB 헤미석신네이트를 용해시키고 이에 2%에탄올성 황산을 첨가하여 pH를 3.95로 한 다음 휘발성 성분을 증발시켜서 제조한다. 이 황산염의 물리적 특성은 다음과 같다.

U.V.(H₂O)극대부위 : 214, 268, 283, 312cm^-1

IR(KBr)흡수극대부위 : 3400(광범위), 1740cm^-1

적정치(66%DMF) : pKa=4.80, 6.10, 7.80

상기 방법을 사용하여 다음과 같은 화합물들을 제조한다 : 4-데스아세틸빈크리스틴으로부터 빈크리스틴 4-헤미석신네이트 ; 수량=700mg(1.95g의 원료에서), 화합물은 다음과 같은 물리적 특성을 갖는다.

적외흡광 극대부위 : 1740, 1684cm^-1

nmr(CDCl₃) : 8.77, 8.15, 8.11, 7.72, 7.54, 6.90, 6.83, 5.89, 5.39, 5.21, 4.69, 4.51, 3.86, 3.74, 3.67ppm

황산염은 유리염기(400mg)의 에탄올용액에 2% 에탄올성 황산을 가하여 제조한다 ; 수량=330mg : Rf치(실리카겔, 메탄올)=0.16

빈데신 4-헤미석신네이트는 300mg의 빈데신(데스아세틸 VLB C-3카르복스아미드)로부터 제조한다 ; 수량 290mg. 이 화합물은 다음과 같은 물리적 특성을 갖는다.

적외선흡수 극대부위 : 3450, 1733, 1693cm^-1

nmr(CDCl₃) : 8.07, 7.52, 7.10, 6.54, 6.08, 5.92, 5.49, 5.27, 3.70, 3.59, 3.46, 2.83, 0.91, 0.78ppm.

황산염은 상기와 같이 제조한다(200mg 의 유리염기로 160mg의 액체 비결정성 분말을 얻는다). tlc Rf(실리카겔, 메탄올)=0.56.

4-데스아세틸-4'-에피데옥시 VLB(1080mg)으로부터 4'-에피데옥시 VBL 4-헤미석신네이트 제조 ; 수량=540mg ;

Rf치(SiO₂, 1 : 1 EtoAc/MeOH)=0.08

4-데스아세틸 빈블라스틴 산으로부터 빈블라스틴산 4-헤미석신네이트제조. 이 화합물은 다음과 같은 물리적 특성을 갖는다 ;

Rf치(SiO2겔, MeOH)=0.23

nmr(CDCl₃) : 8.05, 7.52, 7.11, 6.57, 6.06, 5.71, 5,26, 5.14, 3.75, 3.60, 2.82, 0.90, 0.76ppm.

상기 방법에 따라서, 4-데스아세틸 VLB를 말레무수물과 반응시켜서 VLB 4-헤미말레에이트를 형성시킨다. 이 화합물은 다음과 같은 물리적 특성을 갖는다.

적외선흡수 극대부위 : 1730, 1590cm^-1

nmr(CHCl₃) : 8.61, 8.04, 7.50, 7.12, 6.59, 6.48, 5.78, (J=12Hz) 6.09, 5.7, 5.51, 5.3, 3.79, 2.70ppm.

상기 방법에 의하여 VLB 4-헤미글루타레이트를 제조하고(3g의 출발물질로부터 700mg을 얻는다), 이의 물리적 특성은 다음과 같다 :

적외선 흡수 극대부위 : 3450, 1736

nmr(CHCL₃) : 8.07, 7.53, 7.13, 6.53, 6.13, 5.83, 5.45, 5.24, 3.80, 3.68, 3.63, 2.69, 0.91, 0.81ppm

Rf치(SiO2, 1 : 1 EtoAc/MeOH)=0.25 황산염(수율=50%)

Rf치(SiO2, 1 : 1 EtoAc/MeOH)=0.08

4-데스아세틸인돌-디하이드로인돌 빈카 이량체의 상기 아실화에 있어서, 3-OH의 부수적 아실화는 하그로브 방법, 미국특허 제3,392,173호에 따라 습성 실리카겔과 처리하여 반전시킬수 있다. 또한 이 화합물은 용출액으로 초산에틸/메탄올 용제 혼합물을 사용하여 실리카겔 상에서 크로마토그라피하여 3-아실유도체 또는 기타 반응 부산물로부터 정제할 수 있다.

[실시예 2]

["활성화" VLB 4-헤미석신네이트와 접합체의 제조]

90mg의 VLB 4-헤미석신네이트를 2ml의 CH₂Cl₂에 용해시키고, 이에 15㎕의 N-메틸몰풀린을 가하고 생성된 용액을 약 0℃로 냉각시킨다. 약 20㎕의 이소부틸클로로포름메이트를 가한 다음 20mg의 N-히드록시석신이미드를 가한다. 반응혼합물을 약 15분동안 환류하에 가열하고, 용제와 다른 휘발성 성분을 감압하에 증발시켜 제거한다. 검상 잔유물을 더 이상 정제하지 않고 그대로 단백질과 접합시키는데 사용한다. 이 화합물은 다음과 같은 구조를 갖는다 ;

(상기식에서 R은 전술한 바와 같은 VLB기이다)

이 화합물은 4-(3-(1-석신이미도옥시카르보닐))프로피온일 VLB와 같이 계통적으로 명명될수 있다. 이는 다음과 같은 물리적 특성을 갖는다 :

적외선흡수 극대부위 : (CHCl₃)1741, 1718cm^-1

별개의 실험조작에서 다음과 같은 구조식을 갖는 VLB 4-헤미석신네이트와 이소부틸카르본산의 무수물이 혼합된 중간체를 단리시키며 이는 다음과 같은 특성을 갖는다 :

적외선흡수 극대부위 : 3450, 1738, 1820cm^-1

nmr(CDCl₃) : 8.05, 7.45, 7.15, 6.40, 6.10, 5.88, 5.42, 5.37, 4.00, 3.81, 3.76, 2.74, 0.95ppm.

R-O-CO-CH₂-CH₂-CO-O-CO-O-이소부틸

(상기 식에서 R은 C-4에서 혼합된 무수물 관능기에 결합된 VLB이다)

DMF에 "활성화" VLB 4-헤미석신네이트를 용해시킨 14.7mg/ml 용액(350㎕)을, 0.34M붕산 완충액 pH8.6에 쥐의 단성분지계 항-폐소세포 암 항체를 용해시킨 20.0mg/ml용액(2.0ml)에 급하게 교반하면서 가한다. 4시간동안 실온에서 교반한 후 반응혼합물을 1N HC1을 사용하여 pH7.4 로 조정하고 원심분리하여 정제한다. 생성물을 인산완충식염으로 평형하게 한 Bio-Gel P-6의 2.0×22.0(67.0ml)컬럼에서 겔 여과하여 단리시킨다. 나머지 최종물을 수집하고 (9.7ml)270과 280mm에서 분광분석법에 의하여 단백질과 데스아세틸 빈블라스틴을 분석한다. 이렇게 제조된 접합체는 1g몰당 7.5몰의 VLB를 함유한다.

활성화기가 1-석신이미드옥시기인 "활성화" VLB 4-헤미석신네이트를 제조하는 개량된 방법은 다음과 같다.

1g VLB 4- 헤미석신네이트를 20ml의 메틸렌디클로라이드 중의 380mg의 N-메틸몰폴린과 혼합하고 390mg의 이소부틸클로로포롬메이트를 가한다. 이 반응 혼합물을 약45분동안 질소가스하에 약 0℃에서 교반한다. 795mg의 N-히드록시석신이미드를 가하고 반응 혼합물을 N₂하에 약45분동안 교반하면서 환류온도에서 가열한다. 반응 혼합물을 냉각한 다음, 냉각 혼합물을 탈염수로 세척한 후 Na₂SO₄로 즉시 건조시킨다. 건조제를 여과하여 분리하고 여과물을 감압하에 증발건조한다 ;

잔유량=900mg ; Tlc로 90% 이상 순도를 나타냄.

본래의 방법에 따라, VLB 4-헤미글루타레이트를 메틸렌클로라이드 용액 중의 N-메틸폴린, 이소부틸클로로포름메이트와 N-히드록시석신이미드로 계속적으로 처리하면 400mg의 4-글로타릴 VLB로부터 160mg의 4-(4-(1-석신이미드옥시카르보닐)부티릴 VLB를 얻는다.

전술한 방법에 따라, 4'-에피데옥시 VLB 4-헤미-석신네이트를 4-(3-(1-석신이미드옥시카르보닐))프로피온일 VLB로 변환시킨다. 1 : 1 EtoAc/MeOH를 사용하여 SiO₂겔상에서 크로마토그라피한다 ; Rf=0.23 540mg의 출발물질 헤미석신네이트로부터 수량=360mg.

전술한 방법에 따라, "활성화" 빈데신 4-헤미석신네이트 또는 4-(3-(1-석신이미드옥시카르보닐))프로피온일빈데신을 제조한다. 이 화합물은 다음과 같은 물리적 특성을 갖는다 :

적외선흡수 극대부위 : 3520, 3470, 3400, 1810, 1791, 1744

광범위한 쇼울더를 나타내는 부위 : 1744-1650cm^-1

nmr(CDCl₃) : 8.08, 7.45, 7.15, 6.44, 6.12, 5.85, 5.48, 5.32, 3.79, 3.64, 3.58, 2.85, 2.84, 0.95, 0.78ppm.

또한 4-(3-(1-석신이미드옥시카르보닐))프로피온일 빈크리스틴을 제조한다 ; 256mg의 출발물질로부터 수량=140mg.

적외선흡수 극대부위 : 3460, 1810, 1785, 1744, 1718과 1683cm^-1

nmr(CDCl₃) : 8.79, 8.19, 8.14, 7.78, 7.41, 7.18, 6.97, 6.84, 5.92, 5.42, 5.35, 4.72, 4.52, 3.81, 3.78, 3.71, 2.85, 0.83 ppm.

[실시예 3]

[메틸VLB 4-헤미석신네이트의 제조]

200mg의 VLB 4-헤미석신네이트를 10ml의 무수초산에 용해시킨다. 5ml의 빙초산을 가한 다음 5방울의 피리딘을 함유하는 200ml의 메탄올을 가한다. 이 용액을 한시간 반 동안 냉각한 다음, 16시간 동안 실온에서 유지한다. 휘발성성분을 증발시키면 오일이 생성된다. 잔유물을 물에 용해시키고 수용액을 14N수산화 암모늄 수용액을 가하여 염기성으로 만든다. 염기성 수성층을 CH₂Cl₂로 추출하고, CH₂Cl₂추출물을 수세하고 건조시킨다. 용제를 제거하면 잔유물 VLB 4-석신네이트의 메틸에스테르(4-(3-메톡시카르보닐)프로피온일 VLB라고도 함)가 남는다.

반-메틸에스테르를 제조하는 개량된 방법은 다음과 같다 ; 실시예 2에 언급한 바와 같이, N-히드록시석신이미드로 활성화된 1020mg의 VLB 4-헤미석신네이트를 25ml의 MeOH에 용해시키고, 반응을 N₂하에 밀폐하여 광선으로부터 보호한다. 18시간 후, 휘발성 성분을 감압하에 제거하고, 잔유물을 EtoAc에서 EtoAc-MeOH(1 : 1)로 용출되는 HPLC실리카 겔 컬럼에서 크로마토그라피한다. tlc로 측정된 원하는 생성물을 함유하는 유분을 혼합한다. 휘발성 성분을 감압하에 제거하면 황갈색 비결정성 분말인 310mg의 메틸-4-헤미석신네이트 VLB를 얻는다. 황산염을 통상의 방법으로 제조한다(2BEtOH에서 2% H₂SO).

상기 방법으로 제조된 다른 메틸에스테르는 다음과 같다 ;

메틸빈데신 4-헤미석신네이트

Rf(SiO₂, 1 : 1 EtoAc/MeOH)=0.5

적외선흡수 극대부위 : 1735, 1699cm^-1

질량 스펙트럼 : 867(M⁺), 836(M-31), 808(M-59)

nmr(CDCl₃) : 9.94, 8.05, 7.52, 7.14, 6.98, 6.58, 6.12, 5.87, 5.53, 5.30, 3.79, 3.69, 3.62, 3.47, 2.74, 0.90, 0.81ppm.

황산염 : Rf(SiO₂, 1 : 1 EtoAc/MeOH)=0.55, 메틸 4'-에피데옥시 VLB 4-석신네이트

질량 스펙트럼 : 866(M⁺), 864, 894, 908, 339(M-빈돌린분), 139

적외선흡수 극대부위 : 1743cm^-1

nmr(CDCl₃) : 8.03, 7.55, 7.16, 6.60, 6.10, 5.89, 5.46, 5.39, 3.82, 3.72, 3.64, 2.76

[실시예 4]

[4-석신노일 VLB 아미드의 제조]

1g의 VLB 4-헤미석신네이트를 약25ml의 이염화 메틸렌에 용해시킨다. 이 용액에 200mg의 N-메틸물폴린을 질소가스하에 가하고 반응혼합물을 얼음배드에서 냉각시킨다. 200mg의 이소부틸클로로포름메이트를 가하고 반응혼합물을 15분동안 약0℃로 실온에서 교반한다. 다음이 반응 혼합물을 증발건조하면 황갈색의 검을 얻는다. 검을 메탄올성 암모니아에 용해시키고 약48시간 동안 N₂분위기하에 실온에서 유지한다. 휘발성 성분을 증발시키면 통상 4-석신오일 VLB 아미드로 명명되는, VLB 4-헤미석신네이트의 아미드(4-석신네이트)로 된 잔유물을 얻는다. 이 아미드는 다음과 같은 물리적 특성을 갖는다 ;

적외선흡수 극대부위 : 1738, 1685cm^-1

질량 스펙트럼 : 867(M⁺), 355, 154

nmr(CDCl₃) : 9.86, 8.04, 7.53, 7.12, 6.63, 6.10, 5.85, 5.48, 5.32, 3.81, 3.80, 3.73, 3.62, 2.72, 0.90, 0.82ppm.

Rf(SiO₂, 1 : 1 EtoAc/MeOH)=0.38

황산염 : Rf(SiO₂, 1 : 1 EtoAc/MeOH)=0.33

대응하는 히드라지드, 즉 4-석신오일 VLB히드라지드를 메탄올성 히드라진과 최대로 짧은 반응시간을 사용하여 상기와 같이 제조한다. 이 화합물은 다음과 같은 물리적 특성을 갖는다 :

Rf(SiO₂, 1 : 1 EtoAc/MeOH)=0.23

적외선흡수 극대부위 : 3400, 3450, 1739, 1680cm^-1

nmr(CDCl₃) : 9.88, 8.03, 7.53, 7.12, 6.55, 6.10, 5.85, 5.46, 5.27, 3.79, 3.60, 2.30, 0.88, 0.81ppm.

[실시예 5]

[메틸VLB 4-아디포에이트의 제조]

1.4g의 4-데스아세틸 VLB를 50ml의 이염화 메틸렌에 용해시키고, 3g의 마디프산을 가한다음, 3g의 디시클로헥실카르보디이미드를 가한다. 반응 혼합물을 약24시간 동안 상온에서 무수분위기 하에 유지시킨다. 반응 혼합물을 여과한 다음 여과 케이크를 이염화 메틸렌으로 세척한다. 이염화 메틸렌을 증발시키면 잔유물을 얻는다. 이를 용출액으로 1 : 1 초산에틸/메탄올 용제 혼합물을 사용하여 실리카겔상에서 크로마토그라피하여 정제한다. 크로마토그라피한 주생성물은 메틸VLB 4-아디포에이트이고, 이는 크로마토그라피하는 동안 미반응 디시클로헥실카르보디이미드와 메탄올의 존재에 의하여 생성된다 :

수량=200mg ; nmr, 극대 3.63(CH₃O-새로운 메틸에스테르) ; 질량 스펙트럼 ; 극대 910 (M⁺)924(M+14), 879, 852, 355, 154.

상기 일반식(Ⅱ)으로 표시되는 화합물의 범위를 예시하면 다음과 같다. 이들 화합물의 명명에 있어, 원인돌-디하이드로인돌 이량체에 존재하는 기를 새로운 관능기로 대치했다 ; 즉 4-아세톡시는 4-석신옥시로 대치했고, 3-메틸카르복실레이트는 카르복스아미드로 대치했으며, 이틸기를 제거한다. 예를 들면 4-데스아세틸 VLB 4-석신네이트 대신에 VLB 4-석신네이트 또는 4-데스아세틸-3-데스메톡시-카르보닐-VLB 3-카르복스아미드 4-석신네이트 대신에 빈데신 4-석신네이트로 명명했다.

4'-데옥시-4-(3-(1-석신이미드록시))프로피온일 VLB

4'-데옥시-4-(3-에톡시카르보닐)프로피온일-1-포르밀류로시딘

4'-데옥시-1-프로밀류로시딘-4-말레에이트

4'-데옥시-1-포르밀-4-(3-아지도카르보닐)프로판오일류로시딘

4-(4-t-부틸옥시카르보닐)부틴일류로신

4-(5-(1-프탈이미드옥시)발레릴빈블라스틴산

4-(3-메톡시카르보닐)프로피올릴 빈크리스틴산

4-(3-(2-벤조트리아졸일옥시))프로피온일 빈크리스틴3-(2-클로로에틸)카르복스아미드

4-(3-트릴일옥시카르보닐)프로피온일류로시딘 3-(1-필로리딜)카르복스아미드

4'-데옥시 VLB 3-헤미글루타레이트류로신 3-헤미아디페이트

비스-(4-(4-데스아세틸 VLB))석신네이트

비스-(4-(4-데스아세틸 VLB 3-카르복스아미드))말레에이트

상기식에서 Z가 OR, OH, NH₂, NHNH₂또는 O-C_1-3알킬인 본 발명의 화합물은 쥐에 이식한 종양에 대하여 활성을 갖는 항종양 화합물로서 유용하다. Z가 석신이미드옥시, 프탈이미드옥시, Br, Cl, N₃, 벤조트리아졸일옥시, 토실옥시, 벤젠설폰일옥시 또는 메탄설폰일옥시인 화합물은 전술한 바와 같이, 항체 접합체의 제조에 유용하다.

핵분열 저지제로서 Z가 OR, OH, NH₂, NHNH₂또는 O-C_1-3알킬인 상기 일반식(I)에 따른 화합물의 유용성이 입증되므로, 분열 중기에서 분열정지 능력에 관한 증명은 표준조작법으로 측정한다. 이러한 연구 결과는 표I에 표시했으며, 표에서 난1은 화합물의 이름을 나타내고, 난2는 해당 화합물의 매질중 농도(mcg/ml)를 나타내고 있는 분열중기의 분열 정지 능력을 증명한다.

상기 화합물은 쥐에 이식한 종양에 대하여 활성을 나타내며, 이러한 정보는 표 2에 요약했으며, 표 2에서 난1은 화합물의 이름을 표시했고, 난2는 종양명을 나타내고, 난3은 mg/Kg의 투약량을 나타내고, 난4는 종량 억제율을 나타낸다. P1534J는 백혈병이고, 6C3HED는 임파성 육종을 나타낸다.

Claims

일반식 ROH의 화합물을 일반식 A-CO-X-CO-B (여기서 A와 B는 함께 -O-결합을 형성한다)의 화합물과 반응시킴을 특징으로 하는 다음 일반식의 화합물과 이의 산부가염의 제조방법.

R-O-CO-X-CO-Z

(상기식에서 X는 C_1-4알킬렌이고, 또는 C_2-4, Z는 OH이고; R은 다음 일반식(II)의 4-아세톡시 또는 4-히드록시 항종양성 이량체화인돌-디하이드로인돌 알카로이드로부터 유도된 이량체인돌-디하이드로인돌기고,

(여기서 R¹은 COOH, COOC_1-3알킬 또는 CONH₂이고, R²는 C₃또는 CHO이고 ; R³는 OH이고, R⁴가 에틸이고 R⁵가 수소이거나 또는 R³는 에틸이고, R⁴가 수소이고 R⁵가 수소인 것이다)
일반식 RCO-X-COOH의 화합물을 활성화제와 반응시킨 다음 생성된 활성화 생성물을 C_1-3알카놀, 암모니아 또는 히드라진과 반응시킴을 특징으로 하는 다음 일반식의 화합물과 이의 산부가염의 제조방법.

R-O-CO-X-CO-Z

(상기식에서 X는 C_1-4알킬렌 또는 C_2-4알케닐렌이고, Z는 OC_1-3알킬, NH₂또는 NH NH₂이고, R은 다음 일반식(II)의 4-아세톡시 또는 4-히드록시 항종양성 이량체화인돌-디하이드로인돌 알카로이드로부터 유도된 이량체인돌-디하이드로인돌기이고,

(여기서 R¹은 COOH, COOC_1-3알킬 또는 CONH₂이고, R²는 CH₃또는 CHO이고 ; R³는 OH이고, R⁴가 에틸이고 R⁵가 수소이거나, 또는 R³는 에틸이고, R⁴가 수소이고 R⁵가 수소인 것이다)