KR880010129A - 외래유전자의 발현제어방법 및 그 방법을 사용한 외래유전자 산물의 생산방법 - Google Patents
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- 발현벡터에 바라던 외래유전자를 삽입한 조환체플라스미드를 도입하고 이 외래유전자의 발현을 가능하게 한 대장균의 배양시 이 대장균에서의 상기 외래유전자의 발현을 제어하는 방법에 있어서, 이 대장균의 배양온도를 40℃ 이상으로 유지하는 것에 의해 상기 외래 유전자의 발현을 제어하는 것을 특징으로 하는 외래유전자의 발현제어방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 외래유전자는 L-페닐알라닌 암모니아리아제 구조유전자인 것을 특징으로 하는 외래유전자의 발현제어방법.
- 제 2항에 있어서, 상기 L-페닐알라닌 암모니아리아제는 아래에 표시한 아미노산 배열을 가지는 것을 특징으로 하는 외래 유전자의 발현제어방법.1 105 Met Ala Pro Ser Leu Asp Ser Ile Ser His11 20Ser Phe Ala Asn Gly Val Ala Ser Ala Lys21 300 Gln Ala Val Asn Gly Ala Ser Thr Asn Leu31 40Ala Val Ala Gly Ser His Leu Pro Thr Thr41 50Gln Val Thr Gln Val Asp Ile Val Glu Lys51 605 Met Leu Ala Ala Pro Thr Asp Ser Thr Leu61 70Glu Leu Asp Gly Tyr Ser Leu Asn Leu Gly71 800 Asp Val Val Ser Ala Ala Arg Lys Gly Arg81 90Pro Val Arg Val Lys Asp Ser Asp Glu Ile91 100Arg Ser Lys Ile Asp Lys Ser Val Glu Tyr101 1105 Leu Arg Ser Gln Leu Ser Met Ser Val Tyr111 120Gly Val Thr Thr Gly Phe Gly Gly Ser Ala121 13010 Asp Thr Arg Thr Glu Asp Ala Ile Ser Leu131 140Gln Lys Ala Leu Leu Glu His Gln Leu Cys141 150Gly Val Leu Pro Ser Ser Phe Asp Ser Phe151 16015 Arg Leu Gly Arg Gly Leu Glu Asn Ser Leu161 170Pro Leu Glu Val Val Arg Gly Ala Met Thr171 18020 Ile Arg Val Asn Ser Leu Thr Arg Gly His181 190Ser Ala Val Arg Leu Bal Bal Leu Glu Ala191 200Leu Leu Thr Phe Leu Asn His Gly Ile Ser25 201 210Pro Ile Val Pro Leu Arg Gly Thr Ile Ser211 220Ala Ser Gly Asp Leu Ser Pro Leu Ser Tyr221 23030 Ile Ala Ala Ala Ile Ser Gly His Pro Asp231 240Ser Lys Val His Val Val His Glu Gly Lys241 250Glu Lys Ihe Leu Tyr Ala Arg Glu Ala Met251 260Glu Leu Phe Asn Leu Glu Pro Val Val Leu261 270Gly Pro Lys Glu Gly Leu Gly Leu Val Asn271 2805 Gly Thr Ala Val Ser Ala Ser Met Ala Thr281 290Leu Ala Leu His Asp Ala His Met Leu Ser291 30010 Leu Leu Ser Gln Ser Leu Thr Ala Met Thr301 310Val Glu Ala Met Val Gly His Ala Gly Ser311 320Phe His Pro Phe Leu His Asp Val Thr Arg321 33015 Pro His Pro Thr Gln Ile Glu Val Ala Gly331 340Asn Ile Arg Lys Leu Len Glu Gly Ser Arg341 35020 Phe Phe Ala Val His His Glu Glu Val Lys351 360Val Lys Asp Asp Glu Gly Ile Leu Arg Gln361 370Asp Arg Tyr Pro Leu Arg Thr Ser Pro Gln371 38025 Trp Leu Gly Pro Leu Val Ser Asp Leu Ile381 390His Ala His Ala Val Leu Thr Ile Glu Ala391 40030 Gly Gln Ser Thr Thr Asp Asn Pro Leu Gly401 410Asp Val Glu Asn Lys Thr Ser His His Gly411 420Gly Asn Phe Gln Ala Ala Ala Val Ala Asn421 430Thr Met Glu Lys Thr Arg Leu Gly Leu Ala431 440Gln Ile Gly Lys Leu Asn Phe thr Gln Leu441 4505 Thr Glu Met Leu Asn Ala Gly Met Asn Arg451 460Gly Leu Pro Ser Cvs Leu Ala Ala Glu Asp461 47010 Pro Ser Leu Ser Tyr His Cys Lys Gly Leu471 480Asp Ile Ala Ala Ala Ala Tyr Thr Ser Glu481 490Leu Gly His Leu Ala Asn Pro Val Thr Thr491 50015 His Val Gln Pro Ala Glu Met Ala Asn Gln501 510Ala Val Asn Ser Leu Ala Leu Ile Ser Ala511 52020 Arg Arg Thr Thr Glu Ser Asn Asp Val Leu521 530Ser Leu Leu Ala Thr His Leu Tyr Cys531 540Val Leu Gln Ala Ile Asp Leu Arg Ala Ile541 55025 Glu Phe Glu Phe Lys Lys Gln Phe Gly Pro551 560Ala Ile Val Ser Leu Ile Asp Gln His Phe561 57030 Gly Ser Ala Met Thr Gly Ser Asn Leu Arg571 580Asp Glu Leu Val Glu Lys Val Asn Lys Thr581 590Leu Ala Lys Arg Leu Glu Gln Thr Asn Ser591 600Tyr Asp Leu Val Pro Arg Trp His Asp Ala601 610Phe Ser Phe Ala Ala Gly Thr Val Val Glu611 6205 Val Leu Ser Ser Thr Ser Leu Ser Leu Ala621 630Ala Val Asn Ala Trp Lys Val Ala Ala Ala631 64010 Glu Ser Ala Ile Ser Leu Thr Arg Gln Val641 650Arg Glu Thr Phe Trp Ser Ala Ala Ser Thr651 660Ser Ser Pro Ala Leu Ser Tyr Leu Ser Pro661 67015 Arg Thr Gln Ile Leu Tyr Ala Phe Val Arg671 680Glu Glu Leu Gly Val Lys Ala Arg Arg Gly681 69020 Asp Val Phe Leu Gly Lys Gln Glu Val Thr691 700Ile Gly Ser Asn Val Ser Lys Ile Tyr Glu71125 Leu Leu Lys Met Leu 716 Ala
- 제 1항에 있어서, 상기 대장균은 조환체플라스미드 PSYPL-3을 유지하는 대장균 MT 10424주 (FERM P-9024)인 것을 특징으로 하는 외래유전자의 발현제어방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 대장균은 조환체플라스미드 PYtrp 6을 유지하는 대장균 MT 10414주(FERM P-8876)인 것을 특징으로 하는 외래 유전자의 발현제어방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 대장균은 조환체플라스미드 PSW 115를 유지하는 대장균 MT 10423주(FERM P-9023)인 것을 특징으로 하는 외래 유전자의 발현제어방법.
- 발현벡터에 바라던 외래유전자를 삽입한 조환체플라스미드를 도입하고 이 외래유전자의 발현을 가능하게 한 대장균을 배양하고, 이 외래유전자를 발현시켜서 이 외래유전자에 코오드된 외래유전자산물을 생산하는 방법에 있어서, a) 40℃ 이상으로 배양온도를 유지해서 상기 대장균을 배양하는 제 1배양 과정과, b) 이 제 1배양과정에서 증식한 대장균을 40℃ 미만의 배양온도에서 배양하는 제 2배양과정을 가지는 것을 특징으로 하는 대장균에서의 외래유전자산물의 생산방법.
- 제 7항에 있어서, 상기 외래유전자 산물은 L-페닐알라닌 암모니아리아제인 것을 특징으로 하는 대장균에서의 외래유전자 산물의 생산방법.
- 제 8항에 있어서, 상기 L-페닐알라닌 암모니아리아제는 제 3항에 표시된 아미노산 배열을 가지는 것을 특징으로 하는 대장균에서의 외래유전자 산물의 생산방법.
- 제 7항에 있어서, 상기 대장균은 조환체플라스미드 PSYPL-3을 유지하는 대장균 MT 10424주(FERM P-9024)인 것을 특징으로 하는 대장균에서의 외래유전자 산물의 생산방법.
- 제 7항에 있어서, 상기 대장균은 조환체플라스미드 PYtrp 6을 유지하는 대장균 MT 10414주(FERM P-8876)인 것을 특징으로 하는 대장균에서의 외래유전자 산물의 생산방법.
- 제 7항에 있어서, 상기 대장균은 조환체플라스미드 PSW 115을 유지하는 대장균 MT 10423주(FERM P-9023)인 것을 특징으로 하는 대장균에서의 외래유전자 산물의 생산방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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