KR930023462A - 인간 리포코틴-1 을 포함하는 신규한 유전자 운반체와 이를 이용한 인간 리포코틴-1의 제조방법 - Google Patents

인간 리포코틴-1 을 포함하는 신규한 유전자 운반체와 이를 이용한 인간 리포코틴-1의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 인체 리포코틴-1 유전자를 포함하는 신규한 유전자 운반체와 이를 함유하는 균주를 배양하여 인간 리포코틴-1(lipocortin-1)을 유전자 재조합 기술을 이용하여 대량 생산하는 방법에 관한 것으로, 특히 리포코틴-1의 생산수율이 매우 높은 재조합 유전자 운반체를 제조하고 이를 이용하여 대장균 내에서 인간 리포코틴-1을 대량 생산하는 방법에 관한 것이다.

Description

인간 리포코틴-1을 포함하는 신규한 유전자 운반체와 이를 이요한 인간 리포코틴-1의 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 인간 리포코틴-1 유전자를 함유하는 유전자 운반체 pLCI-S의 제한효소 지도를 나타내며, 제2도는 유전자 운반체 pHT12의 제한효소 지도를 나타내며, 제3도는 리포코틴-1 발현 유전자 운반체인 pHT21의 제조전략을 도시한 것이다.

Claims (8)

  1. 유전자 재조합 방법에 의하여 인간 리포코틴-1을 제조함에 있어서, 리포코틴-1 유전자를 trc 프로모터를 가지는 유전자 운반체(pHT112,pHT121)에 클로닝시켜서 발현 유전자 운반체(pHT21,pHT2)를 제조한 후 이것으로 대장균을 형질변환시켜서 그 형질변환된 대장균을 배양하여 리포코틴-1을 발현 유도시킴을 특징으로 하는 인간 리포코틴-1의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 리포코틴-1 유전자는 운반체 pLCI-S로부터 유래함을 특징으로 하는 인간 리포코틴-1의 제조방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 배양은 대장균 균주 E. coli JM109/pHT21(KCTC 8506P)와 E. coli HB101/pHT2(KCT 8505P)를 28℃에서 12~24시간 배양하고 다시 신선한 배양액 1%로 접종시키고 40℃에서 OD600=0.6까지 배양시킨 다음, 이소프로필 티오-β-D 갈락토사이드(IPTG)를 0.1mM 되도록 첨가하여 6~10시간 배양시켜 시행함을 특징으로 하는 인간 리포코틴-1의 제조방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 대장균에서 발현 생산된 리포코틴-1은 가용성 단백질로 생산되는 것을 특징으로 하는 인간 리포코틴-1의 제조방법.
  5. trc 프로모터를 가지는 인간 리포코틴-1 발현유전자 운반체 pHT21.
  6. trc 프로모터를 가지는 인간 리포코틴-1 발현유전자 운반체 pHT2.
  7. 인간 리포코틴-1 발현유전자인 pHT21을 가지며, 인간 리포코틴-1의 생산을 가지는 대장균 균주 JM109/pHT21(KCTC 8506P).
  8. 인간 리포코틴-1 발현유전자인 pHT2을 가지며, 인간 리포코틴-1의 생산능을 가지는 대장균 균주 HB101/pHT2(KCTC 850P).
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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