KR930021786A - 유전자 조작을 이용한 사람 프로인슐린 융합단백질의 생산 - Google Patents
유전자 조작을 이용한 사람 프로인슐린 융합단백질의 생산 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 유전자조작을 이용하여 사람의 프로인슐인 융합단백질을 생산하는 데 있어서 프로인슐린 융합단백질의 안정성과 발현율을 증가시키는 방법에 관한 것이다.
먼저 사람 프로인슐인 유전자를 cDNA 클로닝 방법으로 대장균 숙주의 클로닝하였다. 이 플라스미스를 발현백터인 pEX2에 도입(pEX2-PI)하고, 융합단백질 유전자 중 베타 갈락토시다제 유전자 부분을 줄였다(pKB49).
이를 벡터를 대장균 pop2136 형질전환하여 발현한 결고, 발현시간과 발현율을 각각 4시간과 25%로 동일하였으나 베타 갈라토시다제 유전자가 줄어든 pKB49의 경우 1리터 발효시 생성된 총 프로인슐린 양은 pEX2-PI(16mg/l)보다 4배이상 증가한 70mg 이었다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 사람 프로인슐린 융합단백질 발현 벡터의 제작 개요도이다.
제2도는 프로인슐린 유전자가 도입된 재조합 대장균으로부터 생성된 프로인슐린 융합단백질의 SDS-폴리아크릴아마이드 젤 전기영동 사진이다.
제3도는 재조합 벡터 pKB 49가 도입된 대장균 pop2136의 플라스크 배양에서의 성장곡선이다.
Claims (3)
- 사람 프로인슐린 융합단백질 유전자를 대장균에서 발현시켜 사람 프로인슐린 융합단백질을 대량 생산함에 있어서, 사람 프로인슐린 융합단백질의 베타 갈락토시다제 유전자부분의 크기가 줄어든 유전자와 파지람다 PR프로모우터를 함유한 대장균발현 벡터에 삽입하여 제조하는 발현벡터 PKB49로 대장균을 형질전환 시킨후 형질 전환된 대장균을 배양하여, 사람 프로인슐린 융합단백질을 생산함을 특징으로 하는 사람 프로인슐린 융합단백질의 제조방법.
- 사람 프로인슐린 융합단백질의 베타 갈락토시다제 유전자 부분의 크기가 줄어든 유전자와 파지람다 PR프로모텨를 함유한 대장균 발현벡터 pKB 49
- 사람 프로인슐린 융합단백질의 베타 갈락토시다제 유전자 부분의 크기가 줄어든 유전자와 파지람다 PR프로우텨를 함유한 대장균 발현벡터로 형질전환된 대장균 KFCC 1061.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의햐여 공개되는 것임.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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| KR1019920005629A KR930021786A (ko) | 1992-04-01 | 1992-04-01 | 유전자 조작을 이용한 사람 프로인슐린 융합단백질의 생산 |
Applications Claiming Priority (1)
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Publications (1)
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| KR930021786A true KR930021786A (ko) | 1993-11-23 |
Family
ID=67257423
Family Applications (1)
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| KR1019920005629A KR930021786A (ko) | 1992-04-01 | 1992-04-01 | 유전자 조작을 이용한 사람 프로인슐린 융합단백질의 생산 |
Country Status (1)
| Country | Link |
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| KR (1) | KR930021786A (ko) |
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1992
- 1992-04-01 KR KR1019920005629A patent/KR930021786A/ko not_active Application Discontinuation
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