KR950032621A - 신규한 재조합 발현벡터 및 그를 이용한 인간 알파 인터페론의 제조방법 - Google Patents

신규한 재조합 발현벡터 및 그를 이용한 인간 알파 인터페론의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 외래 유전자를 발현시킬 수 있는 재조합 대장균의 발현벡터 및 그를 이용한 인간 알파 인터페론의 제조방법에 관한 것이다. 좀 더 구체적으로, 본 발명은 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhymurium)의 L-arabinose 오페론을 이용한 유도성 발현벡터 및 이 벡터에 인간 알파 인터폐론 유전자를 삽입한 재조합 발현벡터로 형질 전환된 미생물을 L-arabinose 첨가하고 배양함으로써 인간 알파 인터페론을 대량으로 제조하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은 살모넬라의 L-arabinose 오페론을 이용한 유도성 발현벡터 △pMA을 구축하고, 인간 알파 인터페론 유전자를 삽입하여 제조한 벡터 △pMAIFNα로 대장균을 형질전화시켜 배양한 결과, 기존의 어떠한 발현벡터 보다도 인간 알파 인터페론의 발현율이 높고 유도조절이 정확하였다. 따라서 본 발명의 △pMA를 이용하여 펩타이드의 항생제 및 인체호르몬 ,각종 싸이토카인 및 항원등과 같이 생물학적 활성을 갖는 다양한 단백질을 대량 생산할 수 있을것으로 예상되며, 아울러 △pMA 에 인간 알파 인터페론 유전자가 삽입된 △pMAIFNα는 인간 알파 인터페론의 산업적 생산에 이용될 수 있을 것이다.

Description

신규한 재조합 발현벡터 및 그를 이용한 인간 알파 인터페론의 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 본 발명의 재조합 발현벡터 △pMA를 구축하는 과정을 나타내는 도식이다. 제2도는 본 발명의 재조합 발현벡터 △pMA의 유전자 지도를 나타낸다. 제3도는 △pMA발현벡터의 araB 프로모터 조절부위의 샤인- 달가노 염기서열과 번역개시부호(translantional initiation codon)를 Nde I 제한 효소좌위로 변형(mutagenesis)시킨 염기서열을 분석한 결과를 나타낸다.

Claims (5)

  1. i) 살모넬라 티피무리움 (Salmonella typhymurium)의 L-arabinose 오페론으로 부터 유래한 샤인-달가노 염지서열이 변형된 araB 프로모터; ⅱ)다양한 외래 유전자를 클로닝 시킬 수 있는 다클론부위 ⅲ)araC 단백질 유전자; 및 ⅳ)대장균으로부터 유래한 rrnBT1T2종사 종결 유전자를 포함하는 L-arabinose 유도성 발현벡터 △pMA
  2. 제1항의 대장균 발현벡터 △pMA에 인간 알파 인터페론 유전자를 삽입시켜 제조한 △pMAIFNα
  3. 제1항의 △pM로 형질전환된 대장균(Escherchia coil) 균주 MC1061(KCCM-10054)
  4. 제2항의 △pMAIFNα으로 형질전환된 대장균(Escherchia coil) 균주 MC1061(KCCM-10053)
  5. L-arabinose를 첨가하고 제4항의 대장균을 배양하는 공정을 포함하는 인간 알파 인터페론을 제조하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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