KR830007827A - 신규 재조합 플라스미드의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
내용 없음
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
도면 1 E.Coli 지질단백질 유전자를 둘러싸고 있는 814 염기쌍 DNA배열의 도식적 설명으로써 전사의 시작과 종결은 화살표(▲)로 표시되어 있고 DNA배열에서 부터 추론할 수 있는 전지질단백질의 78 아미노산 배열도 보여주고 있으며 DNA암호가닥에 해당하는 코우돈이 아래에 나타나 있다.
도면 2 E.Coli의 지질단백질 m-RNA의 완전한 322누클레오티드 배열을 보여준다. m-RNA배열에서 추론되는 전지질단백질 아미노산의 배열을 또한 나타내고 있고 누클레오티드에 대응하는 코우돈이 아래에 나와 있다.
도면 4 본 발명의 클로운 매개체를 사용하여 진핵단백질 또는 인간의 전 인슐린과 같은 바람직한 폴리펩티드를 표현 할 수 있는 과정을 도식적으로 설명한 것이다. 그것에는 전사의 개시와 종결부위가 화살표(▲)로 표시되어 있고 번역개시와 종결부위도 화살표(▲)로 표시되어 있다.
도면 5-26 본 발명의 재접합 플라즈미드클로운 매개체의 생성에 대한 적절한 방법의 도식적 설명이다. 거기에는 다양한 제한핵산 중간분해분할 부위의 위치를 나타내며 Ampr과 Tcr은 암피실린과 테트라싸이클린에 저항성이 있는 유전자를 나타낸다.
도면 27 암호가닥이 인간의 전 인슐린에 대한 구조적인 유전자를 함유하는 유전자의 구조를 도식적으로 설명한 것이다. 거기에서 전인슐린분자의 아미노산 배열이 또한 나타나 있으며 DNA암호가닥에 대응하는 코우돈이 나타나 있다.
도면 28 인간의 전인슐린에 대한 유전자 암호가 플라즈미드 클로운 매개체에 삽입되는 방법을 도식적으로 설명하고 있다.
Claims (18)
- 형질전환에 의해 박테리아숙주내내에 플라스미드를 삽입한 적어도 하나의 폴리펩타이드의 아미노산 배열에 대한 두번째 DNA배열암호에, 그람음성균의 외박 단백질 유전자로부터 유도된 적어도 하나의 기능 분절에 대한 첫번째 DNA배열암호를 플라스미드의 해독상에서 연결시키고 이들의 많은 집단의 생성키 위하여 분리배양시킴을 특징으로 하는, 형질전환된 박테리아 숙주내에서 적어도 하나의 폴리펩타이드를 표현하기 위한 클로운매개체로서 사용하기에 적합한 재조합 폴라스미드를 제조하는 방법.
- 두번째 DNA배열을 받아들이기에 적합한 부위에 첫번재 DNA배열을 연결시키고, 두번째 DNA배열을 삽입단계에서 플라스미드내에 삽입한 후 이어서 이 플라스미드를 박테리아 숙주내에 삽입하는 상기 1에 따른 방법.
- 플라스미드가 박테리아 숙주로부터 생성된 상기1 또는 2에 따른 방법.
- 적어도 하나의 기능분절이 프로모터신호를 지니는 상기 1,2 또는 3에 따른 방법.
- 적어도 하나의 기능분절이 5'-비번역된 영역을 지니는 상기 4에 따른 방법.
- 적어도 하나의 기능분절이 비번역된 영역과 전사 종결 신호를 지니는 상기 1 내지 5에 따른 어느 하나의 방법.
- 삽입부위가 촉진자(promotor)신호와 5'-비번역된 영역아래 및, 3'-비번역된 영역과 전사 종결신호 위에 위치하는 상기 1 내지 6에 따른 어느 하나의 방법.
- 그람음성균이 에스테리치아 콜리(E.Coli)인 상기 1 내지 7에 따른 어느 하나의 방법.
- 외막 단백질 유전자가 E.Coli 지질 단백질 유전자가 구성되고, 외막 단백질이 E.Coli의 지질단백질로 구성된 상기 8에 따른 방법.
- 적어도 하나의 폴리펩타이트가 포유동물의 호르몬으로 구성된 상기 1 내지 9에 따른 어느 하나의 방법.
- 삽입 부위가 촉진자 신호와 5'-비번역된 영역의 아래 및 3'-비번역된 영역과 전사종결신호의 위에 위치하는 상기 3과 7내지 10의 어느 하나에 따른 방법.
- 첫번째 DNA배열이, 박테리아 숙주의 세포질막을 통하여 생성물을 직접적으로 전이시킬 수 있는 펩타이드 확장에 대해 암호화하는 상기 11에 따른 방법.
- 펩타이드 확장을 암호하는 DNA배역위에 삽입부위가 위치하는 상기 11에 따른 방법.
- 펩타이드 확장을 암호화하는 DNA배열의 3'말단에 삽입 부위가 위치하는 상기 11에 따른 방법.
- 첫번째 DNA배열이 그람음성균의 외막 단백질의 모든 아미노산 배열에 대해 암호화하는 상기 11에 따른 방법.
- 삽입부위가 그람음성균의 외막 단백질의 모든 아미노산 배열을 암호화하는 DNA배열내에 위치하는 상기 15에 따른 방법.
- EcoR I, Hind Ⅲ 및 BAm HI제한 헥산중간분해요소에 대한 인식 배열을 함유하는 DNA배열로 삽입부위가 구성된 3 및 9에 따른 방법.
- 폴리펩타이드의 아미노산 배열에 대한 암호 DNA배열암호를 해독상에서 그람음성균의 외부막 단백질 유전자로부터 유도된 적어도 하나의 기능분절에 대한 배열에 연결시켜 재접합 플플라스미드를 창조시킨 후, 상기 집단으로부터 폴리펩타이드를 생산해내는, 상기 18 또는 19의 형질변환된 박테리아 숙주내에서 폴리펩타이드를 생성하는 방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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