KR20240112123A

KR20240112123A - 강화약쑥 추출물을 포함하는 피부 미백용 조성물

Info

Publication number: KR20240112123A
Application number: KR1020230004314A
Authority: KR
Inventors: 신현정; 이원희; 이승호; 조혜선
Original assignee: 주식회사 한국인삼공사
Priority date: 2023-01-11
Filing date: 2023-01-11
Publication date: 2024-07-18

Abstract

본 발명은 강화약쑥 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

Description

강화약쑥 추출물을 포함하는 피부 미백용 조성물{A Composition for brightening skin comprising Ganghwa mugwort extract}

본 발명은 강화약쑥 추출물을 포함하는 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.

쑥(Artemisia sp.)은 우리나라에 자생하고 있는 국화과 다년생 식물이며 예로부터 중요한 약용식물로 널리 사용되어 왔고 특히, 만성위장병, 하복부통, 천식, 구충 및 악취제거에 효과가 있다고 알려져 왔다. 쑥은 독특한 향과 맛을 지니고 있어 여러 형태의 식품으로 이용되어 왔으며, 최근 들어 쑥의 고유한 생리활성을 이용하여 식품에 응용하고자 하는 연구가 활발히 진행되어 왔다. 쑥은 강화쑥, 황해쑥, 사철쑥 등 여러 종류가 있다. 쑥에는 인체에 유익한 식이섬유, 비타민, 미네랄이 다량 함유되어 있어 식용으로 널리 이용되고 있을 뿐만 아니라 위장병, 변비, 신경통, 관절염, 냉병, 천식, 간염, 습진, 피부가려움증 등에 효능이 있고, 특히 급만성 간염을 비롯하여 지방간, 간경화, 간암에 현저한 효능을 나타낸다는 사실이 알려져 있어 약용으로 사용된다. 쑥은 수분, 단백질, 지방, 조섬유뿐만 아니라 알칼로이드, 비타민, 무기질 등을 포함하고 있고, 필수지방산, 섬유소, 회분량이 많아 체중조절식품으로도 유용하게 사용할 수 있다.

한편, 멜라닌은 자연계에 널리 분포하는 페놀류의 고분자 물질로 검은 색소와 단백질의 복합체이다. 멜라닌은 인체의 피부에 존재하며 자외선에 대항하는 기능을 수행하고 아민, 유리기, 금속이온 등과 같은 세포 독성물질에 대한 제거제로 작용하여 세포를 보호하는 작용을 한다. 반면에 체내, 외적인 여러 요인에 의해 멜라닌 생성이 증가되어 다량의 멜라닌이 각질형성세포에 전달되고 피부 상피층에 축적되어 과색소침착 현상이 나타나며 이런 멜라닌의 과잉생산은 인체에 기미, 주근깨를 형성하고 피부노화를 촉진하며 피부암의 유발에 관여하는 것으로 알려졌다.

최근 미에 대한 소비자들의 관심이 증가하면서 피부 미백에 대한 관심이 증가하고 있다. 일반적으로 알려진 미백 성분으로서, 코지산(Kojic acid) 또는 알부틴(Arbutin) 등과 같은 티로시나제 효소활성을 억제하는 물질에는 하이드로퀴논 (Hydroquinone), 비타민 C (L-Ascorbic acid) 또는 이들의 유도체와 각종 식물 추출물이 있다. 이들은 멜라닌 색소의 합성을 저해함으로써, 피부 톤을 밝게 하여 피부 미백을 실현할 수 있을 뿐만 아니라, 자외선, 호르몬 또는 유전에 기인한 기미나 주근깨 등의 피부 과색소 침착증의 개선이 가능하다. 그러나 피부 적용 시, 자극과 발적 등의 안전성의 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 실질적인 효과를 기대할 수 없는 문제점이 있다. 따라서, 생체에 안전하고, 유효성분이 안정하면서도 기존의 미백 효과가 있는 물질보다 효과가 우수한 미백 원료의 개발이 절실히 요망되고 있다.

본 발명은 보다 안전한 천연물로부터 미백 원료를 개발하고자 예의 노력한 결과, 강화약쑥 추출물의 멜라닌 생성 저해 효과가 우수함을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 일 측면은 강화약쑥 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.

상기 조성물은 화장료 조성물 또는 약학적 조성물일 수 있다.

본 발명의 다른 측면은 강화약쑥을 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하는 단계;를 포함하는 강화약쑥 추출물의 제조방법을 제공한다.

본 발명의 강화약쑥 추출물 또는 이의 분획물은 멜라닌의 생성을 억제하는 활성을 가지므로, 이를 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 미백을 위한 화장료 또는 약학적 조성물로 이용될 수 있다. 또한, 본 발명의 강화약쑥 추출물 또는 이의 분획물은 안전한 천연식물로부터 추출한 원료이므로, 피부에 자극없이 피부 미백 또는 피부 과색소 침착을 예방 또는 개선하는 용도로 사용할 수 있다.

도 1은 쑥의 종류에 따른 추출물의 멜라닌 생성 억제율을 나타낸 것이다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명의 일 측면은 강화약쑥 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.

상기 쑥 속(Artemisia L.)은 국화과(Asteraceae), 국화족(Anthemideae) 내에 속하는 가장 큰 속으로서 전 세계적으로 종과 종하분류군을 포함하여 500여 분류군 이상이 주로 북반구의 중·고위도 온대성 기후지역에 넓게 분포하며, 일부 분류군이 한대성 기후지역과 건조지역, 남반구지역에 각각 분포하는 여러해살이 풀이다.

특히, 상기 쑥은 강화약쑥(Artemisia Argy)일 수 있다. 강화약쑥은 강화 지역에서 주로 자생하는 황해쑥의 일종으로서, 잎이 넓고 짙은 녹색이며 키는 70 cm 내외로 곧게 자란다. 강화약쑥의 꽃은 중앙 양성화가 임성인 두상화서 구조이며, 약 3 mm 정도의 크기의 이삭모양으로 7월 내지 9월에 피고, 연보라색을 띤다. 꽃턱에 털이 없는 특징이 있다. 또한, 강화약쑥의 잎은 사자발 모양으로 갈라져 있으며 백색선모가 매우 뚜렷하게 관찰된다. 강화약쑥은 강화군의 지리적 특산품으로 인정받아 지리적 표시 품목으로 등록된 강화도 지역에서 자생하는 쑥, 예컨대 강화군에서 자생하는 사자발쑥, 싸주아리쑥일 수 있다. 수 있다.

상기 강화약쑥 추출물은 식물체 전체를 대상으로 추출한 것일 수 있고, 또는 상기 식물체의 꽃, 줄기, 잎, 뿌리, 열매, 열매의 껍질 등에서 선택되는 적어도 하나를 대상으로 추출한 것일 수 있으며, 특히 상기 식물체의 줄기 또는 잎을 대상으로 추출한 것일 수 있다.

본 발명의 "추출물"은 당업계에 공지된 추출 및 분리 방법을 사용하여 천연물로부터 추출 및 분리하여 수득한 것을 의미하며, 상기 강화약쑥 추출물은 적절한 용매를 이용하여 상기 강화약쑥으로부터 추출한 것이며, 예를 들어 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성 용매 가용 추출물 등이나, 이들의 희석액, 농축액, 조정제물, 정제물, 액상을 제거하여 수득한 고형분 등을 모두 포함한다. 추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법이 이용될 수 있고, 특히 용매추출법이 이용될 수 있다. 상기 용매추출법은 상기 식물을 다양한 용매에 침지한 다음, 일정시간 동안 추출하는 방법이다. 추출온도는 저온, 상온, 고온일 수 있고, 구체적으로 추출온도는 10℃, 13℃, 15℃, 18℃, 20℃로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 하한; 및 30℃, 32℃, 35℃, 38℃, 40℃로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 상한으로부터 선택되는 온도일 수 있다. 예컨대, 추출 온도는 10 내지 40℃, 15 내지 35℃, 20 내지 30℃일 수 있다. 추출 온도가 상기 범위일 때 강화약쑥에서 미백 활성을 갖는 유효성분이 가장 많이 추출될 수 있다. 또한, 추출 시간은 1분 내지 30일, 5분 내지 15일, 10분 내지 10일 일 수 있다.

상기 추출물이 용매추출법으로 얻어지는 경우, 상기 용매는 극성 용매, 비극성 용매 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 극성 용매의 대표적인 예로는 물, 저급 알코올, 아세톤, 프로필렌글리콜, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜 등을 들 수 있고, 상기 저급 알코올은 탄소수 1 내지 6, 탄소수 1 내지 4, 특히 탄소수 1 내지 2의 1급 또는 2급 알코올을 의미할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 상기 비극성 용매의 대표적인 예로는 에테르, 클로로포름(chloroform), 헥산(hexane), 시클로헥산(cyclohexane), 메틸렌클로라이드(methylene chloride) 등을 들 수 있다, 구체적으로 상기 용매는 상기 저급 알코올과 물이 50:50 내지 80:20, 60:40 내지 75:25의 비율로 혼합된 용매일 수 있으나, 이에 한정되는 아니다. 용매가 상기와 같을 때, 미백 활성을 갖는 유효성분이 가장 많이 추출될 수 있다.

본 발명의 구체적인 실시예에서는, 상온에서 70% 에탄올 수용액을 이용한 용매추출법으로 강화약쑥을 추출한 추출물을 수득하였고, 상기 추출물은 증류수나 100% 에탄올을 용매로 상온에서 추출한 경우 또는 70% 에탄올 수용액을 용매로 60℃에서 추출한 경우보다 미백 활성을 갖는 유효성분을 가장 많이 포함하는 것을 확인하였다.

상기와 같은 추출방법으로 강화약쑥 추출물을 제조하는 경우, 상기 강화약쑥 추출물은 디카페오일퀸산(dicaffeoylquinic acid, DCQA)을 포함한다.

상기 디카페오일퀸산은 퀸산(quinic acid)과 2개의 카페익산(caffeic acid) 단위로 구성된 에스테르이며, 카페올기(caffeoyl group)를 2개 이상 포함하는 퀸산(quinic acid) 또는 이의 유도체들은 천연물로부터 분리된 피토케미칼(phytochemical)로서 피부에 자극을 유발하지 않아 안전하다.

상기 디카페오일퀸산은 하기 화학식 1의 일반식을 갖는 것일 수 있다.

[화학식 1]

상기 화학식 1에서 R¹, R², R³, R⁴는 각각 독립적으로 수소 또는 카페오일(caffeoyl)기이고,

상기 R¹, R², R³, R⁴중에서 수소는 2개이다.

구체적으로, 상기 디카페오일퀸산은 1,3-디카페오일퀸산, 1,4-디카페오일퀸산, 1,5-디카페오일퀸산, 3,4-디카페오일퀸산, 3,5-디카페오일퀸산, 4,5-디카페오일퀸산일 수 있고, 그 중에서 3,5-디카페오일퀸산, 4,5-디카페오일퀸산, 3,4-디카페오일퀸산일 수 있고, 특히, 3,5-디카페오일퀸산(3,5-dicaffoyl quinic acid, 3,5-DCQA)일 수 있다.

상기 디카페오일퀸산 유도체 중 3,5-디카페오일퀸산은 화학식 2을 갖는 화합물일 수 있다.

[화학식 2]

상기와 같은 추출방법으로 강화약쑥 추출물을 제조하는 경우, 상기 강화약쑥 추출물에는 디카페오일퀸산을 높은 함량으로 포함될 수 있다. 구체적으로 상기 강화약쑥 추출물에 포함된 디카페오일퀸산 중에서 3,5-디카페오일퀸산(3,5-dicaffoylquinic acid, 3,5-DCQA)은 45 mg/g 이상, 50 mg/g 이상, 55 mg/g 이상, 특히 60 mg/g 이상의 함량으로 포함될 수 있다. 상기 강화약쑥 추출물은 디카페오일퀸산을 상기와 같은 함량으로 포함하므로, 다른 종류의 쑥 추출물보다 미백 효과가 우수하다.

본 발명의 구체적인 실시예에서는 강화약쑥의 70% 에탄올 추출물에 유파폴린과 유파틸린에 비해서 3,5-디카페오일퀸산의 함량이 250배 내지 1,000배 이상 많이 포함된 것으로 확인되었다.

또한, 상기 분획물은 상기 추출물로부터 통상의 분획 공정을 추가적으로 수행하여 수득된 것이다. 예컨대 상기 통상의 분획 공정은 다양한 용매를 처리하여 수행하는 용매 분획법, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 수행하는 한외여과 분획법, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)를 수행하는 크로마토그래피 분획법 및 이의 조합 등이 될 수 있다. 특히, 본 발명의 상기 강화약쑥 추출물의 분획물은 용매 분획법으로 수득될 수 있는데, 상기 용매 분획법은 서로 섞이지 않는 용매 사이의 분배를 이용하여 분획물을 수득하는 방법으로서, 물, 알코올, 아세톤 등의 극성용매; 헥산, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 메틸렌클로라이드 등의 비극성 용매;를 개별적으로 또는 2종 이상 혼합한 혼합물이 상기 용매 분획법의 용매로 사용될 수 있다. 상기 용매 분획법은 저온, 상온 또는 고온에서 1분 내지 30일, 5분 내지 15일, 10분 내지 10일동안 수행될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 또한, 용매분획시 통상의 추출기기, 초음파분쇄 추출기, 분별깔때기 또는 분획기를 이용할 수 있다. 상기 제조된 추출물 또는 이의 분획물은 이후 감압농축 또는/및 동결건조하여 용매를 제거할 수 있다. 특히, 상기 강화약쑥 추출물을 에틸아세테이트, 헥산, 클로로포름 및 부탄올로 구성된 군에서 선택된 어느 하나에 의해 분획하는 경우, 3,5-디카페오일퀸산의 함량이 증가할 수 있다.

한편, 본 발명의 상기 강화약쑥 추출물 또는 이의 분획물은 피부 미백 효과가 있다.

본 명세서에서 용어 "피부"는 동물의 체표를 덮는 조직을 의미하는 것으로서, 얼굴 또는 몸 등의 체표를 덮는 조직뿐만 아니라, 두피와 모발을 포함하는 최광의의 개념이다.

본 발명에서 용어 '미백'은 피부에서 멜라닌 색소의 합성을 저해하거나, 분해를 촉진함으로써 피부 톤을 밝게 할 뿐만 아니라, 자외선, 호르몬 또는 유전에 기인한 기미나 주근깨 등의 피부 과색소 침착을 개선하는 것을 말한다. 예컨대, 피부에 존재하는 멜라노사이트(melanocyte)에서 멜라닌 생성을 억제하는 것 또는 멜라닌체의 형성, 성숙 및 전환을 억제하는 것을 의미할 수 있으나 이에 한정하지 않고 피부에서 멜라닌 생성을 억제시켜 피부 톤을 밝게 하는 것을 의미할 수 있다.

상기 조성물은 강화약쑥 추출물 또는 이의 분획물에 대해 농도 의존적으로 멜라닌 생성을 10% 이상, 20% 이상, 30% 이상, 50% 이상, 90% 이상 억제할 수 있다. 본 발명의 구체적인 실시예에서는, 강화약쑥을 상온에서 70% 에탄올 수용액으로 추출한 강화약쑥의 추출물을 5 μg/ml, 10 μg/ml, 20 μg/ml을 처리했을 때, 멜라닌 생성을 각각 약 20%, 57%, 95% 이상 억제하는 것으로 확인하였다. 이에 반해, 다른 종류의 쑥을 같은 조건에서 추출하였을 때, 멜라닌 생성 억제 효과가 농도의존적으로 증가하지 않거나, 오히려 멜라닌 생성을 촉진함을 확인하였다. 본 발명의 조성물은 양성 대조군인 알부틴보다 적은 농도에서도 멜라닌 생성 억제율이 높아 미백 효과가 우수함을 확인하였다.

한편, 상기 조성물은 화장료 조성물일 수 있다.

상기 화장료는 인체를 청결미화하여 용모를 밝게 변화시키거나 피부의 건강을 유지 또는 증진하기 위하여 인체에 사용되는 물품 또는 이의 원료를 의미하며, 인체에 대한 작용이 경미한 것을 말한다. 통상적인 의미로서 로션, 크림, 오일, 세정용 제품 및 기능성 화장품 및 이의 원료를 모두 포함한다. 기능성 화장료란 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 화장품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 화장품 군이나 화장료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 생체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 화장료를 의미한다.

상기 화장료 조성물은 화장품, 예를 들면, 크림, 로션, 앰플, 스킨, 에센스, 샴푸, 비누 등으로 제공될 수 있으며, 기초 화장료 조성물(화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼 및 클렌징 워터와 같은 세안제, 팩, 보디오일), 색조 화장료 조성물(파운데이션, 립스틱, 메이크업 베이스), 또는 마스크 팩 또는 팩의 형태로 제조될 수 있다.

상기 화장료 조성물이 적용될 수 있는 부위는 피부를 신체 부위에 사용될 수 있으며, 예컨대 상기 피부를 포함하는 신체 부위는, 얼굴, 목, 손등, 두피 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 화장료 조성물은 적용되는 부위에 다양한 투여 경로, 예를 들면 전신 또는 국소, 특히 국소 투여, 경피, 또는 주사, 특히 경피 경로로 투여될 수 있다.

상기 화장료 조성물은 유효 성분으로서 상기 강화약쑥 추출물 또는 이의 분획물 외에, 통상적인 화장료 조성물에 포함되는 성분을 포함할 수 있다. 예컨대 크림 제형의 조성물은 식물성 오일, 유화제, 증점제, 향료, 물, 산화방지제, 및 UV 흡수제를 포함할 수 있다. 본원에 따른 조성물에 포함되는 상기 추출물의 함량은 목적하는 제품의 구체적 용도 또는 제형 등에 따라 달라질 수 있으나, 전체 조성물 중에 약 0.001 내지 100 중량%로 포함될 수 있고, 상기 화장용 조성물은 상기 강화약쑥 추출물 이외에 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및/또는 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함할 수 있다.

상기 화장용 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산에스테르가 있다.

또한, 상기 조성물은 약학적 조성물일 수 있다.

상기 약학적 조성물은 강화약쑥 추출물 또는 이의 분획물을 포함하므로, 멜라닌 생성을 효과적으로 억제하여 과다색소침착에 기인한 색소 질환을 효과적으로 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.

상기 피부 색소 질환은 과다색소침착에 기인한 질환으로, 피부 또는 손발톱의 특정 부위에서 멜라닌의 과도한 증가에 의해 다른 부위에 비해 검거나 어둡게 되는 질환을 의미한다. 바람직하게는 상기 피부 색소 질환은 기미, 주근깨, 노인성 색소반, 잡티, 모반 또는 일광흑색증(solar lentigines) 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에서, "예방"은 본 발명의 조성물을 이용하여 피부 미백 또는 과다색소침착에 기인한 색소 질환의 증상을 차단하거나, 그 증상의 억제 또는 지연시키는 모든 행위라면 제한없이 포함할 수 있다. 본 발명에서, "개선"은 본 발명의 조성물을 이용하여 피부 미백 또는 과다색소침착에 기인한 색소 질환의 증상이 호전 또는 이롭게 변경되는 모든 행위라면 제한없이 포함할 수 있다. 또한, 본 발명에서, "치료"는 본 발명의 조성물을 이용하여 피부 미백 또는 과다색소침착에 기인한 색소 질환의 증상이 호전되거나 이롭게 되는 모든 행위라면 제한없이 포함할 수 있다.

상기 약학적 조성물은 상기와 같은 유효성분 외에, 약학적으로 허용 가능한 담체(carrier) 또는 첨가제를 더 포함할 수 있다.

상기 '약학적으로 허용가능한'의 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않는다는 의미이다. 상기 담체는 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물로 정의된다.

상기 강화약쑥 추출물 또는 이의 분획물, 특히 강화약쑥 추출물은 단독으로 또는 어떤 편리한 담체 등과 함께 혼합하여 투여될 수 있고, 그러한 투여 제형은 단회 투여 또는 반복 투여 제형일 수 있다. 상기 조성물은 고형 제제 또는 액상 제제일 수 있다. 고형 제제는 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 좌제 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 고형 제제에는 담체, 착향제, 결합제, 방부제, 붕해제, 활택제, 충진제 등이 포함될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 액상 제제로는 물, 프로필렌 글리콜 용액 같은 용액제, 현탁액제, 유제 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 적당한 착색제, 착향제, 안정화제, 점성화제 등을 첨가하여 제조할 수 있다. 예를 들어, 산제는 본 발명의 유효 성분인 끈끈이대나물 추출물과 유당, 전분, 미결정셀룰로오스 등 약제학적으로 허용가능한 적당한 담체를 단순 혼합함으로써 제조될 수 있다. 과립제는 본 발명의 끈끈이대나물 추출물 및 약학적으로 허용가능한 적당한 담체 및 폴리비닐피롤리돈, 하이드록시프로필셀룰로오스 등의 약학적으로 허용가능한 적당한 결합제를 혼합한 후, 물, 에탄올, 이소프로판올 등의 용매를 이용한 습식과립법 또는 압축력을 이용한 건식과립법을 이용하여 제조될 수 있다. 또한 정제는 상기 과립제를 마그네슘스테아레이트 등의 약학적으로 허용가능한 적당한 활택제와 혼합한 후, 타정기를 이용하여 타정함으로써 제조될 수 있다.

본 발명의 다른 측면은, 3,5-디카페오일퀸산의 함량이 강화된 강화약쑥 추출물의 제조 방법을 제공한다.

상기 제조방법은 강화약쑥을 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 10 내지 40℃에서 추출하는 단계;를 포함한다.

상기 혼합 용매는 탄소수 1 내지 6의 알코올과 물을 저급 알코올과 물이 40:60 내지 85: 15, 50:50 내지 80:20, 55:45 내지 80:20, 60:40 내지 75:25의 비율로 혼합한 것일 수 있다.

상기 제조방법으로 강화약쑥의 추출물을 제조하는 경우 3,5-디카페오일퀸산의 함량을 45mg/g 이상, 50mg/g 이상, 55mg/g, 60mg/g 이상 포함할 수 있다.

상기 강화약쑥, 추출 방법, 추출 시간, 피부 미백에 관한 설명은 상술한 바를 원용하며 중복하여 설명하지 않는다.

이하, 실시예를 통해 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다.

그러나 이들 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것일 뿐 어떠한 의미로든 본 발명의 범위가 이들 실시예로 한정되는 것은 아니다.

쑥 추출물의 제조

생약재 온라인 판매 사이트에서 구입한 강화약쑥 100g에 70% 에탄올 수용액을 1L를 넣고 24시간 동안 상온에서 교반시킨 후 여과하였다. 이러한 침적 및 여과 과정을 2회 반복하여 수득한 여과액을 농축하여 제조한 고형분을 70% 에탄올 추출물로 실험에 사용하였다.

위와 같은 방법으로 생약재 온라인 판매 사이트에서 구입한 애엽, 인진쑥, 개똥쑥 각각 100g에 70% 에탄올 수용액을 1L를 넣고 24시간 동안 상온에서 교반 시킨 후 여과하였다. 이러한 침적 및 여과 과정을 2회 반복하여 수득한 여과액을 농축하여 제조한 고형분을 70% 에탄올 추출물로 실험에 사용하였다.

쑥 추출물의 유효성분의 분석

[2-1] 쑥의 종류에 따른 유효성분의 함량 분석

상기 실시예 1에서 제조한 쑥 추출물에 포함된 미백 활성 성분인 디카페올퀸산의 함량을 분석하였다.

구체적으로, 상기 실시예 1에서 제조한 쑥의 70% 에탄올 추출물 100 mg을 10 mL 용량플라스크에 넣고 메탄올을 표시선까지 채운 다음 0.45 μm 실린지필터로 여과하였다. 이후 상기 여과한 시료에서 디카페올퀸산 중 가장 많이 포함된 3,5- DCQA를 표준으로 하여 이의 함량을 HPLC로 측정하였다.

HPLC 분리조건으로 유속은 1.0 mL/min, 시료는 5 μL를 주입하여 아세토니트릴(A 용매)과 1% 인산수용액(B 용매)을 이동상으로 사용하였고, A 용매 20-60%, B용매 80-40%로 농도에 변화를 주어 50분간 수행하였다. 컬럼의 온도는 30 ℃, UV 파장은 327 nm로 고정하여 HPLC 분석을 수행하였다.

그 결과, 하기 표 1에 나타난 바와 같이, 다른 쑥보다도 강화약쑥의 70% 에탄올 추출물에 3,5-DCQA의 함량이 1.5배 내지 2배 이상 가장 많이 포함된 것을 확인할 수 있었다.

쑥 종류	강화약쑥	애엽	개똥쑥	인진쑥
3,5-DCQA(mg/g)	63.218	40.911	38.738	32.898

[2-2] 추출 방법에 따른 유효성분의 함량 분석

강화약쑥에서 미백 활성 유효성분인 3,5-DCQA의 함량을 가장 많이 추출할 수 있는 추출방법을 찾기 위해, 추출 방법을 달리하여 3,5-DCQA의 함량을 분석하였다.

구체적으로, 상기 실시예 1와 같은 방법으로 추출하되, 추출 온도만 상온 또는 60℃로 달리하여 강화약쑥의 70% 에탄올 추출물을 수득하였다. 대조군으로는 같은 조건에서 강화약쑥을 증류수로 추출한 증류수 추출물을 수득하였다. 이후, 상기 수득한 강화약쑥의 70% 에탄올 추출물 또는 증류수 추출물에 대해여 상기 실시예 2-1과 같은 방법으로 3,5-디카페오일퀸산의 함량을 측정하였다.

그 결과, 하기 표 2에 나타난 바와 같이, 70% 에탄올 추출물과 달리, 증류수 추출물은 3,5-디카페오일퀸산이 거의 추출되지 않았다. 70% 에탄올 수용액을 용매로 하는 경우에도 상온에서 추출하는 경우 63.218 ㎎/g 함량으로 검출되어, 60℃에서 추출하는 경우보다 3,5-디카페오일퀸산이 2배 이상 많이 포함되는 것을 확인할 수 있다. 상기와 같은 실험 결과로부터, 강화약쑥을 상온에서 에탄올 수용액으로 추출하는 방법이 3,5-DCQA의 함량을 강화하는 가장 바람직한 방법임을 알 수 있었다.

추출방법	70% 에탄올		증류수
추출방법	상온	60℃	상온	60℃
3,5-DCQA (mg/g)	63.218	34.298	0.247	8.778

피부 미백 효과 확인

본 발명의 화장료 조성물이 실제로 피부 미백 효과가 있는지 확인하기 위해, 상기 실시예 1에서 제조한 쑥 추출물의 멜라닌 생성 억제 활성을 비교하였다.

구체적으로, 쥐 멜라닌형성세포(murine melanocyte)를 6웰 플레이트에 각 1Х10⁴ 세포/웰로 접종하였다. 접종 24시간 후, 멜라닌 생성을 유도하는 IBMX(isobutylmethylxanthine) 및 상기 실시예 1에서 제조한 각 쑥의 추출물을 5 ㎍/㎖ 내지 20 ㎍/㎖로 계열희석한 시료를 처리하였다. 양성 대조군에는 IBMX 및 알부틴을 처리하고, 음성 대조군에는 IBMX만을 세포에 처리하였다. 처리 72시간 후 세포를 회수하고 1N NaOH로 용해하여 세포 내 멜라닌을 검출하였다. 무처리군(배양액만 처리), 음성 대조군(IBMX만 처리), 양성 대조군(IBMX와 알부틴을 농도별 처리), 시험군(IBMX와 각 시료를 농도별 처리)의 흡광도(OD405)를 측정하고 음성 대조군의 멜라닌 생성 억제율을 0으로, 무처리군의 멜라닌 생성 억제율을 100으로 하여 각 군의 멜라닌 생성 억제율을 측정하였다.

그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, 강화약쑥의 70% 에탄올 추출물의 경우 5 ㎍/㎖ 농도로 처리하여도 멜라닌의 생성이 19.2% 억제되었고, 20 ㎍/㎖의 농도로 처리하는 경우 멜라닌 생성량이 95.4% 억제되어, 강화약쑥 에탄올 추출물에 농도의존적으로 멜라닌 생성이 억제되었다. 이에 반해, 다른 종류의 쑥(애엽, 개똥쑥, 인진쑥)의 경우, 추출물을 20 ㎍/㎖의 농도로 처리하여도 멜라닌 생성이 전혀 억제되지 않고, 오히려 멜라닌 생성량이 증가하는 것으로 확인되었다. 강화약쑥 추출물은 알부틴보다 적은 농도에서도 높은 멜라닌 생성 억제 효과를 갖고 있으므로 본 발명의 조성물이 기미나 주근깨 개선 및 피부 미백에 유용하게 사용할 수 있음을 알 수 있었다. 이로부터, 본 발명의 조성물은 다른 쑥의 추출물을 포함하는 조성물보다 미백 효과가 현저히 우수함을 확인하였다.

미백 활성 유효성분 함량 분석

본 발명의 조성물에서 미백 활성을 나타내는 주성분이 3,5-디카페오일퀸산인지 확인하기 위해, 미백 활성을 가지는 것으로 알려진 유파폴린, 유파틸린, 3,5-디카페오일퀸산의 함량을 분석하였다.

구체적으로, 상기 실시예 1에서 제조한 쑥의 70% 에탄올 추출물 약 100 mg을 정확히 달아 10 mL 용량플라스크에 넣고 메탄올을 표시선까지 채운 다음 0.45 μm 실린지필터로 필터한 액을 검액으로 하여 상기 실시예 2와 같은 HPLC 조건으로 유파폴린, 유파틸린, 3,5-DCQA의 함량을 측정하였다. 같은 방법으로 상기 실시예 2에서 제조한 증류수 추출물, 100% 에탄올 추출물에서도 유파폴린, 유파틸린, 3,5-DCQA의 함량을 분석하였다.

그 결과, 하기 표 3에 나타난 바와 같이, 강화약쑥의 70% 에탄올 추출물에 포함된 3,5-디카페오일퀸산의 함량이 유파폴린 또는 유파틸린 대비 내지 250배 내지 1,000배 이상 많은 것으로 확인되었다. 상기와 같은 실험 결과로부터 강화약쑥에 70% 에탄올 추출물에서 미백 효과를 나타내는 주 유효성분은 유파폴린 또는 유파틸린이 아닌 3,5-디카페오일퀸산일 것을 알 수 있었다.

함량 (mg/g)	증류수	70% 에탄올	100% 에탄올
유파폴린(Eupafolin)	ND	0.06	0.18
유파틸린(Eupatilin)	ND	0.25	1.40
3,5-DCQA	0.25	63.22	0.97

Claims

강화약쑥 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 조성물은 화장료 조성물인 것인, 피부 미백용 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 강화약쑥 추출물은 디카페올퀸산을 포함하는 것인 피부 미백용 조성물.
청구항 3에 있어서,
상기 디카페올퀸산은 3,5-디카페오일퀸산, 1,3-디카페오일퀸산, 1,4-디카페오일퀸산, 1,5-디카페오일퀸산, 3,4-디카페오일퀸산 및 4,5-디카페오일퀸산으로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나인것인 피부 미백용 조성물.
청구항 3에 있어서,
상기 디카페오일퀸산은 45 mg/g 이상의 농도로 포함된 것인, 피부 미백용 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 추출물은 강화약쑥을 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 것인 피부 미백용 조성물.
청구항 6에 있어서,
상기 혼합 용매는 탄소수 1 내지 6의 알코올과 물이 50:50 내지 80:20으로 혼합된 것인 피부 미백용 조성물.
청구항 6에 있어서,
상기 추출물은 강화약쑥을 10 내지 40℃에서 추출한 것인 피부 미백용 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 추출물은 멜라닌 생성을 억제하는 것인, 피부 미백용 조성물.
강화약쑥 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 포함하는 과다색소침착에 기인한 색소 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
청구항 10에 있어서,
상기 과다색소침착에 기인한 색소 질환은 기미, 주근깨, 노인성 색소반, 잡티, 모반 또는 일광흑색증(solar lentigines)인, 과다색소침착에 기인한 색소 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
강화약쑥을 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하는 단계;를 포함하는 강화약쑥 추출물의 제조방법.
청구항 12에 있어서,
상기 혼합 용매는 탄소수 1 내지 6의 알코올과 물을 50:50 내지 80:20의 비율로 혼합한 것인 강화약쑥 추출물의 제조방법.
청구항 12에 있어서,
상기 추출하는 단계는 10 내지 40℃에서 수행하는 것인 강화약쑥 추출물의 제조방법.