KR20240061487A - Plant-derived preservative composition having antioxidant, whitening and wrinkle improvement and soothing effects, and cosmetic composition comprising the same - Google Patents

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KR20240061487A
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Abstract

본 발명은 항산화, 미백, 주름개선 및 진정효과를 갖는 식물유래 방부제 조성물 및 이를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 코코넛 유래 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid), 사탕수수 유래 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol), 코코넛팜 유래 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol), 포도껍질 추출물, 레몬추출물, 라벤더 추출물, 상백피 추출물, 아이비엽 추출물 및 감귤 추출물을 함유하는 혼합 조성물은 100% 식물유래 방부제로서 다양한 세균, 이스트균 및 곰팡이를 억제하는 효과와 방부 기능 외에도 항산화, 미백, 주름개선, 진정 및 항균효과가 있어 피부에 도움을 줄 수 있는 복합 기능성 화장품 방부 소재로써 사용될 수 있다.The present invention relates to a plant-derived preservative composition having antioxidant, whitening, wrinkle-improving and soothing effects, and to a cosmetic composition containing the same, and more specifically, to a plant-derived preservative composition having antioxidant, whitening, wrinkle-improving and soothing effects, and more specifically, to a plant-derived preservative composition, including caprylhydroxamic acid derived from coconut, 1 derived from sugarcane, Contains 3-butylene glycol (1,3-Butylene glycol), caprylyl glycol derived from coconut palm, grape skin extract, lemon extract, lavender extract, Morus bark extract, ivy leaf extract and citrus extract. The mixed composition is a 100% plant-derived preservative that has the effect of suppressing various bacteria, yeast, and mold and has anti-oxidation, whitening, wrinkle improvement, soothing, and antibacterial effects in addition to its anti-oxidation, whitening, anti-wrinkle, soothing, and antibacterial effects, making it a multi-functional cosmetic preservative material that can help the skin. can be used

Description

항산화, 미백, 주름개선 및 진정효과를 갖는 식물유래 방부제 조성물 및 이를 포함하는 화장료 조성물{PLANT-DERIVED PRESERVATIVE COMPOSITION HAVING ANTIOXIDANT, WHITENING AND WRINKLE IMPROVEMENT AND SOOTHING EFFECTS, AND COSMETIC COMPOSITION COMPRISING THE SAME}Plant-derived preservative composition having antioxidant, whitening, wrinkle-improving and soothing effects, and cosmetic composition containing the same

본 발명은 항산화, 미백, 주름개선 및 진정효과를 갖는 식물유래 방부제 조성물 및 이를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a plant-derived preservative composition having antioxidant, whitening, wrinkle-improving and soothing effects, and a cosmetic composition containing the same.

가정 생활용품의 부적절한 화학성분으로 인한 수많은 사고로 인해 소비자들의 화학 물질에 대한 기피 현상이 가속화되고 있으며, 가습기 살균제로 인한 사망 사고, 발암물질이 함유된 대기업 생리대, 살충제 함유 계란 등의 위험에 노출되어 있는 소비자의 무화학 제품에 대한 니즈 증가가 이루어지고 있다. 이에 따라, 인체에 무해하고 안정적인 천연 추출물로 이루어진 원료를 이용한 100% 식물유래 방부제로 본연의 방부효과 외 다양한 효능 효과를 가진 복합 기능성 소재를 개발하려 한다. Due to numerous accidents caused by inappropriate chemical ingredients in household products, consumers' aversion to chemicals is accelerating, and they are exposed to risks such as fatal accidents caused by humidifier disinfectants, sanitary napkins from large companies containing carcinogens, and eggs containing pesticides. Consumer demand for chemical-free products is increasing. Accordingly, we are trying to develop a complex functional material that has various efficacy effects in addition to the natural preservative effect using a 100% plant-derived preservative using raw materials made of natural extracts that are harmless to the human body and stable.

방부는 물질의 부패를 막는 약제 즉, 동식물성 유기물이 미생물의 작용에 의해 부패하는 것을 막는 것이 방부이고, 보존을 목적으로 방부하기 위해서 첨가하는 약제가 방부제이다. 일반적으로 방부제라고 하면 식품, 화장품, 의약품의 변질을 막고 그것을 사용하는 동안에 그 순도를 유지시키기 위해서 첨가하는 것이다. 따라서 인체에 해가 없어야 한다는 것이 필수조건이고, 또 그 첨가로 인해 품질을 손상시키지 않아야 한다. 의약품에서는 벤조산의 나트륨염 등이 점안제, 수제, 주사제 등에 첨가된다. 식품의 경우는 식품보존료라고도 하며, 의약품의 경우와 같이 법(약사법, 식품위생법)으로 그 사용이 규제되고 있다.Preservatives are drugs that prevent the decay of substances, that is, they prevent animal and vegetable organic matter from decaying due to the action of microorganisms, and preservatives are drugs added to preserve them for the purpose of preservation. In general, preservatives are added to foods, cosmetics, and medicines to prevent them from deteriorating and maintain their purity during use. Therefore, it is an essential condition that it be harmless to the human body, and its addition must not damage its quality. In pharmaceuticals, sodium salt of benzoic acid is added to eye drops, homemade preparations, injections, etc. In the case of food, it is also called a food preservative, and its use is regulated by law (Pharmaceutical Affairs Act, Food Sanitation Act) as in the case of drugs.

화장품의 유통은 일반적으로 상온 1년에서 3년간의 유통기간을 가지고 있어 미생물에 더욱 취약하며, 화장품 개봉 후 계속적으로 손과의 접촉으로 인하여 미생물에 매우 취약하다. 따라서 이러한 미생물로부터의 오염을 차단하며 제품의 안전과 품질을 보장하기 위하여 방부력이 높은 방부제를 사용해야 한다. 시중에 유통중인 모든 화장품은 미생물이 증식하는 것을 억제하고 사멸하기 위한 목적으로 방부제를 포함하고 있으며 페녹시에탄올, 파라벤, 클로로페니신, 디소듐이디티에이, 세틸피리디늄클로라이드, 벤잘코늄클로라이드, 은콜로이드 등 30여 가지가 넘는 종류로 다양하다. 하지만 파라벤의 경우 유방암을 유발할 수도 있다는 연구결과가 나오면서 수요가 감소하기 시작했고 이러한 합성 화학성분이 인체에 유해하며 지속적으로 노출된 환경으로 인해 심할 경우 사망에 이르는 경우도 적지 않게 발생한다는 사실이 있다. 이러한 화학 합성 방부제의 유해함 문제점을 해결하고 대체하고자 천연방부제에 관한 연구는 전 세계적으로 꾸준히 진행되고 있으나 현재까지 세계적으로 완벽한 천연 방부제는 아직 개발된 사례가 없으며, 국내 및 해외에서 천연방부제로 몇가지 제품이 출시 되었지만, 이 또한 검증작업에서 배합금지 성분이 검출되거나 5대 균주(Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Aspergillus niger)를 제외한 다른 균종에서는 방부 효능이 없어 미생물 오염에 의한 제품 실패 리크스가 큰 단점들을 지니고 있다. Distribution of cosmetics generally has a shelf life of 1 to 3 years at room temperature, making them more vulnerable to microorganisms. Cosmetics are also highly vulnerable to microorganisms due to continuous contact with hands after opening. Therefore, a preservative with high preservative power must be used to block contamination from these microorganisms and ensure the safety and quality of the product. All cosmetics on the market contain preservatives to inhibit the growth and kill microorganisms, and contain phenoxyethanol, parabens, chlorophenicin, disodium EDTA, cetylpyridinium chloride, benzalkonium chloride, and silver. There are over 30 different types, including colloids. However, in the case of parabens, the demand began to decrease as research showed that they can cause breast cancer, and it is true that these synthetic chemical ingredients are harmful to the human body and that continuous exposure to the environment can lead to death in severe cases. Research on natural preservatives is being conducted steadily around the world in order to solve and replace the harmful problems of chemically synthesized preservatives. However, to date, no perfect natural preservative has been developed in the world, and only a few products with natural preservatives are available at home and abroad. was released, but this also had prohibited ingredients detected in the verification process or had no preservative effect in other strains except for the five major strains (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, and Aspergillus niger), leading to product failure due to microbial contamination. It has major drawbacks.

한편, 사람의 피부는 노화 과정에서 다양한 물리·화학적인 변화가 일어나며 그 원인으로는 크게 내적인 노화(intrinsic aging)와 광노화(photo-aging)로 구분되며 이에 관한 연구가 활발히 이루어져 왔다. 즉, 자외선, 스트레스, 질병상태, 환경인자, 상처, 나이가 들어감에 따라 프리라디칼이 활성화되어 야기될 수 있으며, 이런 상태가 심화될 경우 생체 내에 존재하는 항산화 방어망을 파괴하고, 세포 및 조직을 손상시켜 성인병 및 노화를 촉진하게 된다. 좀 더 구체적으로 말하자면, 피부의 주요 구성물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등이 산화되어 피부세포 및 조직이 파괴되고, 결국 피부노화 현상이 생겨나는 것이다. 특히 단백질의 산화는 피부의 결합조직인 콜라겐(collagen), 히알루론산(hyaluronic acid), 엘라스틴(elastin), 프로테오글리칸(proteoglycan), 피브로넥틴(fibronectin)등이 절단되어 심한 과다 염증반응과 피부의 탄력에 지장을 주게 되고 이것이 더 심해질 경우 DNA의 변이에 의해 돌연변이, 암의 유발, 면역기능 저하의 사태에 이르게 된다. Meanwhile, human skin undergoes various physical and chemical changes during the aging process, and the causes are largely divided into intrinsic aging and photo-aging, and research on these has been actively conducted. In other words, it can be caused by the activation of free radicals due to ultraviolet rays, stress, disease states, environmental factors, wounds, and aging. If this condition worsens, it destroys the antioxidant defense network that exists in the body and damages cells and tissues. This promotes adult diseases and aging. To be more specific, the major components of skin, such as lipids, proteins, polysaccharides, and nucleic acids, are oxidized, destroying skin cells and tissues, and ultimately causing skin aging. In particular, protein oxidation breaks down the skin's connective tissues, such as collagen, hyaluronic acid, elastin, proteoglycan, and fibronectin, causing severe excessive inflammatory reactions and disruption of skin elasticity. If this becomes more severe, it can lead to mutations, cancer, and decreased immune function due to DNA mutations.

그러므로 신체의 대사 과정중 발생하는 프리라디칼이나 자외선 조사, 염증반응에 의해 매개되는 프리라디칼을 소거하여 세포막을 보호하고, 또 이미 손상받은 세포는 활발한 신진대사에 의해 재생화시켜서 세포를 증식시켜야 피부는 빠르게 회복되고 건강한 피부를 유지할 수 있다. 피부는 노화를 거듭할수록 두께가 얇아지고 탄력성이 상실되어 중력의 방향으로 떨어지게 된다. 주름은 피부 매트릭스를 탄력있게 유지시켜주는 콜라겐 뿐만 아니라 콜라겐을 서로 엮어주어 단단하게 지지하는 엘라스틴이라는 단백질 존재한다. 몸 속 콜라겐이 풍부하더라도 지지체인 엘라스틴이 부재하게 되면 콜라겐을 지탱하는 골격 없이 피부는 그대로 무너져 탄력을 잃게 되어 엘라스틴의 부재는 주름 형성에 관여한다. 이에 세포 엘라스틴 분해 효소를 억제함으로써 피부 주름 형성을 예방하고자 하였다.Therefore, the cell membrane must be protected by scavenging free radicals generated during the body's metabolic process, ultraviolet irradiation, and free radicals mediated by inflammatory reactions, and already damaged cells must be regenerated through active metabolism to proliferate cells to maintain healthy skin. You can recover quickly and maintain healthy skin. As skin ages, it becomes thinner, loses elasticity, and falls in the direction of gravity. Wrinkles are caused not only by collagen, which keeps the skin matrix elastic, but also by a protein called elastin, which binds collagen together and supports it firmly. Even if collagen is abundant in the body, if elastin, which is a support, is absent, the skin collapses and loses elasticity without a framework to support collagen, and the absence of elastin is involved in the formation of wrinkles. Therefore, we attempted to prevent the formation of skin wrinkles by inhibiting cellular elastin-degrading enzymes.

다음으로, 색소 침착에 의한 피부 변화이다. 피부색에 영향을 주는 색소로는 멜라닌, 멜라노이드, 카로틴, 헤모글로빈 등이 있는데 이중 가장 중요한 것은 멜라닌으로 생합성에 영향을 미치는 가장 큰 요인은 자외선과 체내 호르몬 분비 정도이다. 멜라닌은 자외선을 흡수 또는 산란시켜 자외선으로부터 피부가 손상되는 것을 방지하는데 큰 역할을 하는데, 특별한 최대흡수파장이 없으며 전 영역의 빛을 흡수한다. 또한 활성산소종을 제거하는 기능이 탁월하나, 때로는 멜라닌 자체가 활성산소를 발생시키기도 하며, 멜라닌 구조내의 카테콜이나 퀴논에 의하여 다른 물질을 환원시키거나 산화시키고, 멜라닌 자체가 자유라디칼의 성질을 나타내기도 한다.Next, there are skin changes caused by pigmentation. Pigments that affect skin color include melanin, melanoid, carotene, and hemoglobin, the most important of which are melanin, and the biggest factors affecting its biosynthesis are ultraviolet rays and the level of hormone secretion in the body. Melanin plays a major role in preventing skin damage from ultraviolet rays by absorbing or scattering ultraviolet rays. It has no particular maximum absorption wavelength and absorbs light in all areas. In addition, the function of removing reactive oxygen species is excellent, but sometimes melanin itself generates reactive oxygen species, reduces or oxidizes other substances by catechol or quinone in the melanin structure, and melanin itself exhibits the properties of free radicals. I pray.

본 발명의 코코넛 유래 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid)는 코코스 야자의 열매로 연한 녹색의 열대 과일인 코코넛에서 유래된 코코넛 오일을 베이스로 하는 성분이다. 코코넛 열매 안쪽의 젤리처럼 생긴 과육은 단맛과 고소한 맛이 나 그대로 먹거나 기름을 짠다. 다 익으면 갈색이 되고 과육도 단단해진다. 코코넛 유래 물질인 카프릴하이드록사믹애씨드는 부드러우면서도 우수한 방부제 역할을 하며 파라벤과 같은 유해성 기존 방부제의 대안으로 사용할 수 있는 물질이다. 특히 중성을 띠는 pH에서 효과적으로 사용될 수 있다. 또한 화장품의 금속 이온의 활성을 막아 안정화시키는 역할도 한다. 해를 끼칠 수도 있는 미생물은 금속이 제한된 환경에서 생존률이 감소하는 것으로 나타났다. 카프릴하이드록사믹애씨드는 안전성이 뛰어나 다양한 제형으로의 적용이 가능하다. Caprylhydroxamic acid derived from coconut of the present invention is a component based on coconut oil derived from coconut, a light green tropical fruit that is the fruit of the cocos palm. The jelly-like flesh inside the coconut fruit has a sweet and savory taste and is eaten as is or squeezed for oil. When fully ripe, it turns brown and the flesh becomes hard. Caprylic hydroxamic acid, a coconut-derived substance, is soft and acts as an excellent preservative, and can be used as an alternative to harmful existing preservatives such as parabens. It can be used particularly effectively at neutral pH. It also acts as a stabilizer by blocking the activity of metal ions in cosmetics. Microorganisms that may cause harm have been shown to have reduced survival rates in metal-limited environments. Caprylic Hydroxamic Acid has excellent safety and can be applied to various formulations.

본 발명의 사탕수수 유래 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene Glycol)은 사탕수수, 포도주, 숙성치즈, 쥐의 간장, 토양효모, 옥수수 오일, 해바라기 오일, 양유지, 생선의 간유 등에 들어있는 성분이다. 사탕수수는 외떡잎식물 벼목 화본과의 여러해살이풀로 열대지방에서 2~6m 높이까지 자란다. 줄기는 무리지어 나오며 자라는데, 곧게 서며 가지를 치지 않는다. 또 알코올 발효, 락토오스 발효생성물 중에 나타난다. 적당한 습윤성, 양호한 용해성 및 항균성이 있고, 피부에 대한 자극성, 독성이 적고 또 글리세린보다 깨끗한 사용감으로 끈적거림이 적기 때문에 각종 크림, 로션, 에어졸 제품, 치약 등의 보습제, 용제, 향료보류제로서 널리 사용되고 있다. 또 폴리에스테르계 가역제, 폴리염화비닐의 가역제, 폴리에스테르수지원료, 알키도수지원료, 폴리우레탄원료에도 응용된다. 그리고 담배, 셀로판, 비니론 필름 등의 습윤제로서도 사용되고 있다. 그 외 피하주사약의 용제, 사료첨가제에도 응용된다.1,3-Butylene Glycol derived from sugar cane of the present invention is used in sugar cane, wine, aged cheese, rat liver, soil yeast, corn oil, sunflower oil, sheep oil, and fish liver oil. It is an ingredient contained in etc. Sugarcane is a perennial herb from the monocot plant family Rice Plantae and grows to a height of 2 to 6 m in tropical regions. The stems grow in groups, stand up straight, and do not branch. It also appears in alcohol fermentation and lactose fermentation products. It has moderate wettability, good solubility and antibacterial properties, is less irritating and toxic to the skin, and has a cleaner feel than glycerin and is less sticky, so it is widely used as a moisturizer, solvent, and fragrance retention agent in various creams, lotions, aerosol products, toothpaste, etc. there is. It is also applied to polyester-based reversible agents, polyvinyl chloride reversible agents, polyester resin raw materials, alkydo resin raw materials, and polyurethane raw materials. It is also used as a humectant in cigarettes, cellophane, and Vinylon films. It is also used as a solvent for subcutaneous injection drugs and as a feed additive.

본 발명의 코코넛팜 유래 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol)은 코코스 야자의 열매로 연한 녹색의 열대 과일인 코코넛의 오일에서 추출된 성분으로 하이드록시기 (-OH)가 붙은 다이올 형태로 피부 보습 유지에 관여하며 화장품의 안정도를 유지하는 기능이 있어 다양한 제품에 폭넓게 적용할 수 있다. 피부를 부드럽게 해주는 동시에 항균의 역할을 하기 때문에 천연 방부제의 역할을 하는 성분이다. 방부효과를 위해 단독으로 사용하는 경우도 있으나, 다른 방부제와 혼합하여 항균력, 항균활성을 증가시키는 방법으로 사용하는 것이 일반적이다. 카프릴릴글라이콜은 녹는점이 높은 편이기 때문에 추운 겨울에는 하얀 고체상으로 존재하지만, 일반적으로는 투명한 액체 상태이다. 피부결과 모발을 부드럽게 관리해 주는 효능도 있다.Caprylyl glycol derived from coconut palm of the present invention is a component extracted from the oil of coconut, a light green tropical fruit, which is the fruit of the cocos palm. It moisturizes the skin in the form of a diol with a hydroxy group (-OH) attached. It is involved in maintenance and has the function of maintaining the stability of cosmetics, so it can be widely applied to a variety of products. It is an ingredient that acts as a natural preservative because it softens the skin and acts as an antibacterial agent. It may be used alone for its preservative effect, but it is commonly used by mixing with other preservatives to increase antibacterial power and antibacterial activity. Because caprylyl glycol has a high melting point, it exists as a white solid in cold winter, but is generally in a transparent liquid state. It also has the effect of gently caring for skin and hair.

본 발명의 포도껍질은 쌍떡잎식물 갈매나무목 포도과의 낙엽성 덩굴식물의 열매인 포도의 겉껍질이다. 한국에는 고려시대에 중국에서 들여온 것으로 추측되며 본격적인 재배는 1900년대에 시작되었다. 포도는 덩굴손이 있으며, 종에 따라서 연속 또는 단속적으로 잎과 마주난다. 길이 3m 내외이고 암수딴그루 또는 양성주로 5~6월에 노란빛을 띤 녹색 꽃이 달린다. 열매는 다육과로 8~10월에 익으며 과피는 짙은 자줏빛을 띤 검은색, 홍색빛을 띤 붉은색, 노란빛을 띤 녹색 등이며 열매의 모양은 공모양, 타원 모양, 양 끝이 뾰족한 원기둥 모양 등 다양하다. 성분으로는 당분(포도당, 과당)이 많이 들어 있어 피로 회복에 좋고 비타민A, B, B2, C, D등이 풍부해서 신진대사를 원활하게 한다. 그밖에 칼슘, 인, 철, 나트륨, 마그네슘 등의 무기질도 들어있다. 생혈 및 조혈작용을 하여 빈혈에 좋고 바이러스 활동을 억제하여 충치를 예방하고 레스베라트롤이라는 성분이 있어서 항산화, 항염증, 항암 등으로 다방면의 효과를 나타낸다. 신경세포를 만드는 신경효소의 활동과 효능을 증진하여 알츠하이머병이나 파킨슨병 등의 퇴행성 질병을 예방하는 데도 도움을 준다. The grape skin of the present invention is the outer skin of grapes, which are the fruit of a deciduous vine plant of the dicotyledonous buckthorn order Grape family. It is presumed that it was brought to Korea from China during the Goryeo Dynasty, and full-scale cultivation began in the 1900s. Grapes have tendrils, which, depending on the species, meet the leaves continuously or intermittently. It is about 3m long and has yellowish green flowers in May-June on dioecious or bisexual plants. The fruit is a fleshy fruit that ripens between August and October. The skin is dark purplish-black, red-red, yellowish-green, etc. The shape of the fruit is ball-shaped, oval-shaped, or cylindrical with pointed ends at both ends. Varies. It contains a lot of sugar (glucose, fructose), which is good for recovering from fatigue, and is rich in vitamins A, B, B2, C, and D, which facilitates metabolism. In addition, it also contains minerals such as calcium, phosphorus, iron, sodium, and magnesium. It is good for anemia by promoting blood production and hematopoiesis, prevents cavities by inhibiting viral activity, and contains a component called resveratrol, which has various effects such as antioxidant, anti-inflammatory, and anti-cancer properties. It also helps prevent degenerative diseases such as Alzheimer's disease and Parkinson's disease by improving the activity and efficacy of neural enzymes that create nerve cells.

본 발명의 레몬은 쌍떡잎식물 쥐손이풀목 운향과의 상록소교목의 열매로 히말라야가 원산지로 비교적 시원하고 기후의 변화가 없는 곳에서 잘 자란다. 이탈리아, 에스파냐, 미국의 캘리포니아 및 오스트레일리아 등에서 많이 재배하는데, 지중해 연안에서 재배하는 것이 가장 품종이 좋다. 높이는 3~6m까지 자라며, 잎은 어긋나고 어릴 때 붉은 색을 띠지만 점점 녹색으로 변한다. 꽃은 5~10월에 피고 잎겨드랑이에 하나씩, 또는 몇 개씩 무리지어 달린다. 꽃봉오리는 붉은 색이고, 꽃의 안쪽은 흰색, 바깥쪽은 붉은빛이 강한 자주색을 띤다. 열매는 1년에 6~10번 수확하는데, 주로 10월 이후부터 다음해 봄까지 수확하고 11~12월에 가장 많이 수확한다. 캘리포니아에서는 연중 수확하며 1~5월에 가장 많이 수확한다. 열매는 타원 모양이고 겉껍질이 녹색이지만 익으면 노란 색으로 변하며 향기가 강하다. 완전히 익기 전인 껍질이 녹색일 때 수확하여 익힌다. 종자는 달걀 모양이고 양 끝이 뾰족하다. 비타민C와 구연산이많기 때문에 신맛이 강하다. 과피에서 레몬유(油)를 짜서 음료·향수 및 레모네이드의 원료로 사용하고, 과즙은 음료·식초·화장품의 원료로 사용하며 과자를 만들 때 향료로도 사용한다. The lemon of the present invention is the fruit of an evergreen tree of the dicotyledonous plant, Rutaceae, and is native to the Himalayas, where it grows well in places where the climate is relatively cool and free of change. It is widely cultivated in Italy, Spain, California in the United States, and Australia, but the best varieties are those grown along the Mediterranean coast. It grows up to 3~6m in height. The leaves are alternate and are red when young, but gradually turn green. Flowers bloom from May to October and hang one by one or in groups of several in the leaf axil. The flower buds are red, the inside of the flower is white, and the outside is a strong reddish purple. Fruits are harvested 6 to 10 times a year, mainly from October until the spring of the following year, with the largest harvest occurring in November and December. In California, it is harvested all year round, with the largest harvest occurring between January and May. The fruit is oval-shaped and has a green outer skin, but when ripe, it turns yellow and has a strong scent. Harvest and cook when the skin is green, before it is fully ripe. The seeds are egg-shaped and have sharp ends. It has a strong sour taste because it contains a lot of vitamin C and citric acid. Lemon oil is squeezed from the peel and used as a raw material for drinks, perfume, and lemonade, and the juice is used as a raw material for drinks, vinegar, and cosmetics, and is also used as a flavoring when making cookies.

본 발명의 라벤더는 쌍떡잎식물 통화식물목 꿀풀과 라반둘라속에 속하는 식물이며 지중해 연안이 원산지이다. 높이는 30∼60cm이고 정원에서 잘 가꾸면 90cm까지 자란다. 전체에 흰색 털이 있으며 줄기는 둔한 네모꼴이고 뭉쳐나며 밑 부분에서 가지가 많이 갈라진다. 잎은 돌려나거나 마주나고 바소 모양이며 길이가 4cm, 폭이 4∼6mm이다. 잎자루는 없으며 잎에 잔털이 있다. 꽃은 6∼9월에 연한 보라색이나 흰색으로 피고 잎이 달리지 않은 긴 꽃대 끝에 수상꽃차례를 이루며 드문드문 달린다. 꽃·잎·줄기를 덮고 있는 털들 사이에 향기가 나오는 기름샘이 있다. 물이 잘 빠지는 모래땅에 약간의 자갈이 섞인 곳에서 잘 자라고 너무 비옥하지 않은 땅이 좋다. 햇빛을 잘 받는 남향과 습하지 않은 곳에서 잘 자란다. 꽃과 식물체에서 향유(香油)를 채취하기 위하여 재배하고 관상용으로도 심는다. 향유는 향수와 화장품의 원료로 사용하고 요리의 향료로 사용할 뿐만 아니라 두통이나 신경안정을 치료하는 데도 쓴다. 라반둘라 오피시날리스(Lavandula officnalis) 또는 라반둘라 안구스티폴리아(Lavandula angustifolia) 종(種)이 주로 아로마서로피에 사용된다. 고대 로마 사람들은 욕조 안에 라벤더를 넣고 목욕을 했으며, 향기가 나도록 말린 꽃을 서랍이나 벽장 등에 넣었다고 한다. 그리고 영국의 엘리자베스 시대에 출판된 가사 책에는 살균·방충용으로 라벤더가 자주 등장하고, 엘리자베스 1세가 라벤더로 만든 사탕과자를 좋아했다는 기록이 있다. 꽃말은 ‘정절’이다. The lavender of the present invention is a plant belonging to the genus Lavandula of the dicotyledonous plant order Lamiaceae and is native to the Mediterranean coast. The height is 30 to 60 cm, and if taken care of well in the garden, it can grow up to 90 cm. There are white hairs all over, and the stem is dull-square, clumped together, and has many branches at the bottom. The leaves are whorled or opposite, lanceolate, 4 cm long and 4 to 6 mm wide. There are no petioles and the leaves have fine hairs. Flowers bloom in light purple or white from June to September and grow sparsely in spikes at the end of long flower stalks without leaves. Between the hairs covering the flowers, leaves, and stems, there are oil glands that emit scent. It grows well in well-drained sandy soil mixed with a little gravel, and prefers soil that is not too fertile. It grows well in a south-facing location that receives plenty of sunlight and in a place that is not humid. It is cultivated to collect fragrant oil from flowers and plants, and is also planted for ornamental purposes. Fragrance oil is used as a raw material for perfumes and cosmetics, as a flavoring agent for cooking, and is also used to treat headaches and nervous disorders. The species Lavandula officnalis or Lavandula angustifolia are mainly used for aromatherapy. It is said that ancient Romans bathed with lavender in their bathtubs, and placed dried, fragrant flowers in drawers or closets. And in household books published during the Elizabethan era in England, lavender often appears as a sterilizing and insect repellent, and there is a record that Queen Elizabeth I liked sweets made from lavender. The language of flowers is ‘fidelity.’

본 발명의 상백피는 뽕나무과의 뽕나무 또는 동속 식물의 뿌리껍질로 만든 약재이며 중국과 일본에서는 뽕나무만을 공정생약에 수재하였다. 뽕나무를 뜻하는 상(桑)은 동방의 성스러운 신목을 뜻하는 약()과 나무 목(木)을 합친 글자라고 한다. 이것은 누에가 먹는 나무인 뽕나무가 신목처럼 효능이 뛰어나기 때문에 이 둘을 구별하기 위하여 사용한 것이다. 이 약은 특이한 냄새가 약간 있고 맛은 달고 성질은 차다. [甘寒] 상백피는 폐열로 인한 해수, 천식을 치료하며 이뇨 작용이 있다. 급성신우염, 허약성부종에 쓰이고 혈압강하 작용이 있으며 코피와 각혈에도 사용한다. 또한 유행성 간염 등에도 쓰인다. 약리작용은 진해, 이뇨, 혈압강하, 진정, 진통, 해열, 진경, 항균작용 등이 보고되었다. 생김새는 반관상 또는 띠 모양을 이루고 가끔 가늘게 세로로 잘라져 있다. 바깥 면은 백색 또는 황갈색을 띠며 주피가 붙어 있는 것은 주피가 황갈색이고 떨어지기 쉬우며 가는 세로주름이 많으며 적갈색을 띤 피목이 있다. 가로로 자른 면은 흰색 또는 엷은 갈색이고 섬유성이며 안쪽 면은 어두운 황갈색이고 평탄하다.Morus bark of the present invention is a medicinal material made from the root bark of the mulberry tree of the Moraceae family or plants of the same genus, and in China and Japan, only the mulberry tree is used in processed herbal medicine. Sang (桑), meaning mulberry tree, is Yak (桑), meaning a sacred tree in the East. It is said to be a combination of ) and tree mok (木). This was used to distinguish between the two because mulberry, the tree that silkworms eat, is as effective as sourwood. This medicine has a slightly peculiar odor, is sweet in taste, and is cold in nature. [Sweet and cold] Morus bark treats seawater and asthma caused by lung heat and has a diuretic effect. It is used for acute pyelonephritis and debilitating edema, has a blood pressure lowering effect, and is also used for nosebleeds and hemoptysis. It is also used for epidemic hepatitis. Pharmacological effects have been reported to include antitussive, diuretic, lowering blood pressure, sedation, analgesic, antipyretic, antispasmodic, and antibacterial effects. The appearance is semi-tubular or band-shaped and is sometimes thinly cut vertically. The outer surface is white or yellow-brown, and those with attached skin have yellow-brown skin that falls off easily, have many thin vertical wrinkles, and have a reddish-brown skin. The side cut horizontally is white or light brown and fibrous, and the inner side is dark yellow brown and flat.

본 발명의 아이비엽은 쌍떡잎식물 산형화목 두릅나무과의 상록 덩굴식물이다. 유럽, 북아프리카에 널리 분포하며 한국에는 관엽식물로 도입되어 헬릭스라는 이름으로 보급되었다. 원생지에서는 높이가 30m까지 자란다. 잎은 어긋나고 광택이 있는 짙은 녹색이며 길이가 10cm이고 3~5갈래로 갈라지며, 늙은 가지의 잎은 갈라지지 않고 달걀 모양이다. 어린 가지와 작은 꽃자루에 회색을 띤 흰색의 성모(星毛:여러 갈래로 갈라져 별 모양으로 된 털)가 있다. 꽃은 양성화이고 산형꽃차례를 이루며 달린다. 꽃잎은 5개이고 수술과 암술대도 각각 5개이며, 씨방은 5실이다. 원예품종에는 여러 종이 있는데, 대표종인 3색종의 잎은 크고 녹색 바탕에 연한 녹색과 우윳빛 무늬가 불규칙하게 있으며 낮은 기온에서 우윳빛 부분이 연한 붉은빛으로 물든다.The ivy leaf of the present invention is an evergreen vine of the dicotyledonous umbel family, Araliaceae. Widely distributed in Europe and North Africa, it was introduced into Korea as a foliage plant and distributed under the name Helix. In its native habitat, it grows up to 30m in height. The leaves are alternate, glossy, dark green, 10cm long, and split into 3 to 5 branches. The leaves on old branches are not split and are egg-shaped. Young branches and small peduncles have grayish-white star hairs (star-shaped hairs that are divided into several branches). The flowers are bisexual and grow in umbels. There are 5 petals, 5 stamens and 5 styles each, and 5 ovaries. There are several species of horticultural varieties, and the representative species, the tricolor variety, has large leaves with irregular light green and milky patterns on a green background, and the milky parts turn light red at low temperatures.

본 발명의 감귤은 쌍떡잎식물 무환자나무목 운향과 감귤나무아과에 속하는 식물 과수이다. 감귤나무아과 중에서 감귤속·금감속·탱자나무속에 속하는 각 종 및 이들 3속에서 파생되어 온 품종의 총칭이다. 과수로는 감귤속에 따른 귤 종류만 재배된다. 귤종류는 모두 상록관목 또는 소교목으로 가지에 가시가 있다. 감귤류의 원생지는 인도·미얀마·말레이반도·인도차이나·중국·한국·일본까지의 넓은 지역에 이르는데, 특히 동부 히말라야 및 아삼지방과 중국 양쯔강[揚子江] 상류 지방에는 중요한 종(種)의 원생지가 있다. 이들 지방에서는 옛날부터 재배되어 왔다. 한국에서도 오래 전부터 재배되었다고 전하나 확실한 기록은 찾아볼 수 없고, 일본 야사(野史)인 《히고국사[肥後國史]》에 삼한(三韓)으로부터 귤(橘:Tachibana)을 들여왔다고 기록하고 있으며, 《고려사세가(高麗史世家)》에는 1052년(고려 문종 6)에 탐라에서 공물로 바쳐오던 감귤의 양을 100포(包)로 늘린다고 하였다. 그후 조선시대에는 더 많은 기록을 찾아볼 수 있다.《세종실록》에는 1426년(세종 8) 경상도와 전라도 남해안 지방까지 유자(柚子)·감자(柑子)를 심어 시험 재배하게 하였다는 기록이 있으며, 《탐라지과수총설(耽羅誌果樹總說)》에는 1526년(중종 21)에 제주목사 이수동(李壽童)이 감귤밭을 지키는 방호소(防護所)를 늘렸다는 기록이 있다. 이외에도 많은 문헌에서 감귤의 재배에 대한 기록을 찾아볼 수 있으나 오늘날 남아 있는 재래종 감귤은 10여 종에 불과하다. 한국은 세계의 감귤류 재배지 중에서 가장 북부에 있으므로 재배 품종은 1911년 일본에서 도입된 추위에 잘 견디는 귤나무가 주종을 이루고 있다. 1960년 초기에는 서귀포를 중심으로 한 제주도 일부만이 한국 유일한 감귤류 생산지로 알려져 왔으나 그 동안 많은 시험재배 결과 최근에는 해발고도 200m 이하의 제주도 일원과 남부지방의 통영·고흥·완도·거제·남해·금산 등지에서도 일부의 감귤류가 재배되고 있다. 그러나 한국에서 감귤류 생산은 재배품종이 제한되어 있고 재배면적도 적고 생산량도 적은 편이다.The tangerine of the present invention is a plant fruit tree belonging to the dicotyledonous plant order Rutaceae and Citrus subfamily. It is the general name for each species belonging to the genus Citrus, Persimmon, and Angiospermia among the citrus subfamily, as well as the cultivars derived from these three genera. As fruit trees, only tangerine types according to the citrus genus are grown. All tangerine species are evergreen shrubs or small trees and have thorns on their branches. The native land of citrus fruits extends to a wide area, including India, Myanmar, the Malay Peninsula, Indochina, China, Korea, and Japan. In particular, the eastern Himalayas and Assam regions and the upper reaches of the Yangtze River in China are the native land of important species. there is. It has been cultivated in these regions since ancient times. It is said that it has been cultivated in Korea for a long time, but no clear records can be found, and in the Japanese history, Higoguksa, it is recorded that tachibana was imported from the Three Han Dynasties. In 《Goryeo Sasega (高麗史世家)》, it is said that in 1052 (the 6th year of King Munjong's reign of Goryeo), the amount of tangerines offered as tribute from Tamra was increased to 100 bags. Afterwards, more records can be found during the Joseon Dynasty. In the Annals of King Sejong, there is a record that in 1426 (the 8th year of King Sejong's reign), citrons and potatoes were planted in Gyeongsang-do and the southern coastal region of Jeolla-do for trial cultivation. In 《Tamnaji Fruit Tree Summary》, there is a record that in 1526 (the 21st year of King Jungjong's reign), Lee Su-dong, a Jeju pastor, increased the number of protective posts guarding citrus orchards. In addition, records of tangerine cultivation can be found in many literature, but only about 10 types of native tangerines remain today. Since Korea is the northernmost of the world's citrus fruit growing areas, the cultivated varieties are mainly cold-tolerant tangerine trees introduced from Japan in 1911. In the early 1960s, only a part of Jeju Island, centered on Seogwipo, was known as Korea's only citrus production area, but as a result of many experimental cultivations, it has recently been grown in the entire Jeju Island below 200m above sea level and in Tongyeong, Goheung, Wando, Geoje, Namhae, and Geumsan in the southern region. Some citrus fruits are also grown in the country. However, citrus fruit production in Korea is limited in the number of cultivars, the cultivation area is small, and the production volume is low.

특허 제 10-2259004호 에서는 상백피 추출물, 방울양배추 추출물, 소프넛 추출물 및 신선초 추출물을 포함하는 화장품용 방부제 조성물에 대하여 개시하며, 특허 제 10-1533195호 에서는 천연방부제를 사용한 안전한 물티슈 조성물에 대하여 개시, 특허 제 10-1532005호 에서는 유자씨 추출물을 포함하는 천연 방부제 및 그 제조방법에 대하여 개시, 특허 제 10-2394531호 에서는 카프릴릭/카프릭 글리세라이드를 함유하는 방부제 및 이를 포함하는 피부 외용제 조성물에 대한 개시, 특허 제 10-0782599호 에서는 복합천연방부제에 대한 개시, 특허 10-1793266호 에는 천연 암반수와 만다린 농축액을 이용한 천연 방부제 제조방법에 대한 개시, 특허 제 10-2066821호 에서는 천연복합 화장품 방부제 조성물에 대한 개시, 특허 제 10-1427462호 에서는 연교, 하고초, 산사, 목통 추출물로 이루어지는 복합 천연방부제 및 이를 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 대한 개시, 특허 제 10-1667357호 에서는 식물 추출물을 포함하는 천연 방부제 조성물에 대한 개시, 특허 제 10-1776202호 에서는 천연 복합 방부제 조성물 및 그 제조방법을 개시, 특허 제 10-0615892호 에서는 쑥추출물을 함유하는 천연 방부제를 개시, 특허 제 10-1806800호 에서는 황금 추출물을 포함하는 복합 천연 방부제 및 그 제조방법에 대한 개시, 특허 제 10-2272130호 에서는 천연 원료를 이용한 화장료용 방부제 조성물에 대한 개시, 특허 제 10-0723906호 에서는 천연방부제 및 그 제조방법에 대한 개시, 특허 제 10-2146522호 에서는 천연방부제 조성물 및 이를 포함하는 화장료 조성물을 개시, 특허 제 10-1533195호 에서는 천연방부제를 사용한 안전한 물티슈 조성물을 개시, 특허 제 10-1839612호 에서는 식물 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연 방부제 조성물을 개시, 특허 제 10-1818146호 에서는 화이트윌로우바크, 북미사시나무껍질, 님잎, 청호추출물로 이루어지는 천연 방부제 조성물을 개시한다.Patent No. 10-2259004 discloses a preservative composition for cosmetics containing Morus bark extract, Brussels sprout extract, soapnut extract, and herbaceous extract, and Patent No. 10-1533195 discloses a safe wet tissue composition using natural preservatives. Patent No. 10-1532005 discloses a natural preservative containing citron seed extract and a manufacturing method thereof, and Patent No. 10-2394531 discloses a preservative containing caprylic/capric glyceride and an external skin preparation composition containing the same. Patent No. 10-0782599 discloses a composite natural preservative, Patent No. 10-1793266 discloses a method for manufacturing a natural preservative using natural rock water and mandarin concentrate, and Patent No. 10-2066821 discloses a natural composite cosmetic preservative composition. In Patent No. 10-1427462, there is a disclosure of a complex natural preservative consisting of extracts of lotus root, Hagochoe, Sansa, and Mokkol, and a cosmetic composition containing the same as an active ingredient, and in Patent No. 10-1667357, there is a disclosure of a cosmetic composition containing plant extracts. Disclosure of a natural preservative composition, Patent No. 10-1776202 discloses a natural complex preservative composition and its manufacturing method, Patent No. 10-0615892 discloses a natural preservative containing mugwort extract, and Patent No. 10-1806800 discloses a natural preservative containing mugwort extract. Disclosure of complex natural preservatives containing extracts and their manufacturing methods; Patent No. 10-2272130 discloses preservative compositions for cosmetics using natural raw materials; and Patent No. 10-0723906 discloses natural preservatives and their manufacturing methods. , Patent No. 10-2146522 discloses a natural preservative composition and a cosmetic composition containing the same, Patent No. 10-1533195 discloses a safe wet tissue composition using natural preservatives, and Patent No. 10-1839612 discloses a plant complex extract as an active ingredient. Patent No. 10-1818146 discloses a natural preservative composition containing white willow bark, North American aspen bark, neem leaf, and blueberry extract.

하지만, 현재까지 상기 식물유래 복합 천연 추출물의 시너지 효과에 의한 방부 효과 및 항산화, 미백, 주름개선과 진정효과에 관한 특허와 논문은 전무하다.However, to date, there are no patents or papers on the preservative effect, antioxidant, whitening, wrinkle improvement and soothing effect due to the synergistic effect of the plant-derived complex natural extract.

따라서 보다 안전하고 피부 건강 향상을 위한 기능적 특성을 갖는 식물유래 방부제를 개발하고자 하는 연구의 일환으로 여러 천연물의 항산화 활성을 시험한 결과 본 발명자들은 항균, 항바이러스 활성이 좋은 포도껍질, 라벤더꽃, 레몬, 상백피, 아이비엽 및 감귤을 추출하여 최적에 조성 비율로 혼합하였을 때, 그 시너지 효과로 인해 뛰어난 항균 능력을 비롯하여 여러 항산화 기전을 통해 활성 산소종을 효과적으로 제거함으로써 항산화 효과가 우수하다는 것을 확인하였다. 또한, 피부 착색에 관여하는 멜라닌의 생성을 촉진시키는 티로시나아제의 저해를 통한 미백 효과, 피부를 이루고 있는 콜라겐을 서로 엮어주는 역할의 엘라스틴을 분해하는 효소를 저해함으로써 주름 예방 효과를 나타낸다는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.Therefore, as part of a study to develop a plant-derived preservative that is safer and has functional properties for improving skin health, as a result of testing the antioxidant activity of various natural products, the present inventors found that grape skin, lavender flower, and lemon have good antibacterial and antiviral activities. , Morus bark, ivy leaves, and tangerines were extracted and mixed at the optimal composition ratio, and it was confirmed that the synergistic effect resulted in excellent antibacterial ability and excellent antioxidant effect by effectively removing reactive oxygen species through various antioxidant mechanisms. In addition, it was confirmed that it has a whitening effect through inhibition of tyrosinase, which promotes the production of melanin, which is involved in skin pigmentation, and a wrinkle prevention effect by inhibiting the enzyme that decomposes elastin, which plays a role in binding the collagen that makes up the skin. By doing this, the present invention was completed.

따라서, 본 발명의 목적은 항산화, 미백, 주름개선, 진정효과가 뛰어난 100% 식물유래 방부제 조성물에 관한 것으로 더욱 상세하게는 코코넛 유래 애씨드(Acids), 사탕수수, 코코넛팜 유래 글라이콜(Glycols), 포도껍질추출물, 레몬추출물, 라벤더추출물, 상백피추출물, 아이비엽추출물 및 감귤추출물을 유효성분으로 함유하는 혼합 조성물은 100% 식물유래 방부제로서 다양한 세균, 이스트균 및 곰팡이를 이른 시간 안에 억제하는 효과를 확인하였으며, 본연의 방부제 역할 외에도 항산화, 미백, 주름개선, 진정, 항균효과가 뛰어나고 개별 성분 및 추출물에 비해 혼합 조성물의 현저한 효과를 확인함으로써 항산화, 미백, 주름개선, 진정, 항균효과가 뛰어난 100% 식물유래 방부제 조성물 및 화장료 조성물을 제공하는 것이다.Therefore, the purpose of the present invention is to provide a 100% plant-derived preservative composition with excellent antioxidant, whitening, wrinkle improvement, and soothing effects. More specifically, it relates to coconut-derived acids, sugar cane, and coconut palm-derived glycols. , a mixed composition containing grape skin extract, lemon extract, lavender extract, mortar bark extract, ivy leaf extract, and citrus extract as active ingredients is a 100% plant-derived preservative that has the effect of inhibiting various bacteria, yeast, and mold within a short period of time. In addition to its natural preservative role, it has excellent antioxidant, whitening, wrinkle improvement, soothing, and antibacterial effects. By confirming the remarkable effect of the mixed composition compared to individual ingredients and extracts, it is 100% excellent in antioxidant, whitening, wrinkle improvement, soothing, and antibacterial effects. To provide plant-derived preservative compositions and cosmetic compositions.

전술한 목적을 달성하기 위해 본 발명에 따르면, 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol) 79.0 중량%, 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid) 10.0 중량%, 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol) 5.0 중량% 포도껍질 추출물 1.0 중량%, 라벤더꽃 추출물 1.0 중량%, 레몬 추출물 1.0 중량%, 상백피 추출물 1.0 중량%, 아이비엽 추출물 1.0 중량% 및 감귤 추출물 1.0 중량%를 포함하는 방부제 조성물을 제공한다.According to the present invention to achieve the above-described object, 79.0% by weight of 1,3-butylene glycol, 10.0% by weight of caprylhydroxamic acid, and caprylyl glycol A preservative containing 5.0% by weight of caprylyl glycol, 1.0% by weight of grape skin extract, 1.0% by weight of lavender flower extract, 1.0% by weight of lemon extract, 1.0% by weight of Morus bark extract, 1.0% by weight of ivy leaf extract, and 1.0% by weight of citrus extract. A composition is provided.

여기서, 상기 부틸렌글라이콜은 사탕수수 유래이고, 상기 카프릴하이드록사믹애씨드는 코코넛 유래이고, 상기 카프릴릴글라이콜은 팜 또는 코코넛 유래일 수 있다.Here, the butylene glycol may be derived from sugar cane, the capryl hydroxamic acid may be derived from coconut, and the caprylyl glycol may be derived from palm or coconut.

또한, 상기 방부제 조성물은, 포도껍질을 70% 에탄올에 혼합하여 포도껍질 추출물을 추출하는 단계; 정제수, 에탄올 및 메틸나노플루오로부틸에테르(Methyl nonafluorobutyl ether)-메틸나노플루오로이소부틸 에테르(Methyl nonafluoroisobutyl ether) 혼합물을 각각 67.0 중량%, 30.0 중량%, 3.0 중량%를 혼합한 액 99.0 중량% 및 상기 포도껍질 추출물 1.0 중량%로 혼합하여 용해시킨 후 2 일간 5 ℃의 냉장 조건에서 분리, 정제하는 단계; 라벤더꽃, 레몬, 상백피, 아이비엽 및 감귤을 각각 5.0 중량% 및 1,3-부틸렌글라이콜 (1,3-Butylene glycol)을 95.0 중량%로 80 ℃에서 2시간동안 추출물을 추출하는 단계; 상기 추출물을 추출 완료 후 0.45μm filter로 여과하는 단계; 및 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol) 79.0 중량%, 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid) 10.0 중량%, 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol) 5.0 중량%, 포도껍질 추출물 1.0 중량%, 라벤더꽃 추출물 1.0 중량%, 레몬 추출물 1.0 중량%, 상백피 추출물 1.0 중량%, 아이비엽 추출물 1.0 중량%, 감귤 추출물 1.0 중량% 혼합하는 단계; 를 포함하는 제조방법에 의해 제조되는 것일 수 있다.In addition, the preservative composition includes the steps of mixing grape skin with 70% ethanol to extract grape skin extract; 99.0% by weight of a liquid containing 67.0% by weight, 30.0% by weight, and 3.0% by weight of purified water, ethanol, and methyl nonafluorobutyl ether-methyl nanofluoroisobutyl ether mixture, respectively, and Mixing and dissolving 1.0% by weight of the grape skin extract and then separating and purifying it under refrigerated conditions at 5°C for 2 days; Extracting extracts from 5.0% by weight of lavender flowers, lemon, linden bark, ivy leaves, and tangerines and 95.0% by weight of 1,3-butylene glycol at 80° C. for 2 hours, respectively; Filtering the extract with a 0.45μm filter after completion of extraction; and 79.0% by weight of 1,3-Butylene glycol, 10.0% by weight of Caprylhydroxamic acid, 5.0% by weight of Caprylyl glycol, grape skin. Mixing 1.0% by weight of extract, 1.0% by weight of lavender flower extract, 1.0% by weight of lemon extract, 1.0% by weight of Morus bark extract, 1.0% by weight of ivy leaf extract, and 1.0% by weight of citrus extract; It may be manufactured by a manufacturing method including.

또한, 상기 방부제 조성물을 포함하는 항산화, 미백 및 주름개선용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, a cosmetic composition for antioxidant, whitening, and wrinkle improvement comprising the preservative composition is provided.

전술한 바와 같은 본 발명에 따르면, 본 발명의 식물유래 방부제 조성물은 그 시너지 효과로 인해 뛰어난 항균, 항바이러스 효과를 확인하였고, 그 외에도 뛰어난 항산화와 티로시나아제 저해를 통한 미백 및 엘라스타제 저해를 통한 주름개선 효과 등 부가적인 기능을 갖고 있으므로, 피부에 도움을 줄 수 있는 복합 기능성 화장품 방부 소재로써 사용될 수 있다.According to the present invention as described above, the plant-derived preservative composition of the present invention has been confirmed to have excellent antibacterial and antiviral effects due to its synergistic effect, and in addition, it has excellent antioxidant properties and whitening and elastase inhibition through tyrosinase inhibition. Since it has additional functions such as wrinkle improvement effect, it can be used as a complex functional cosmetic preservative material that can help the skin.

이상에서의 본 발명에 따른 효과는 상기에 한정되는 것은 아니며, 기타 본 발명의 효과들은 후술할 실시예 및 청구범위에 기재된 사항을 통하여 본 발명이 속하는 분야의 통상의 지식을 가진 자에 의하여 분명하게 이해될 수 있을 것이다.The effects according to the present invention described above are not limited to the above, and other effects of the present invention will be clearly apparent to those skilled in the art through the examples and claims described later. It will be understandable.

도 1은 본 발명의 방부제 조성물의 DPPH 소거 시험 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 방부제 조성물의 ABTS 소거 시험 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 방부제 조성물의 SOAR 시험 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 방부제 조성물의 FRAP 시험 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 본 발명의 방부제 조성물의 미백효과(Tyrosinase inhibition) 시험 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 본 발명의 방부제 조성물의 주름개선효과(Elastase inhibition) 시험 결과를 나타낸 것이다.
Figure 1 shows the results of a DPPH scavenging test of the preservative composition of the present invention.
Figure 2 shows the results of the ABTS elimination test of the preservative composition of the present invention.
Figure 3 shows the SOAR test results of the preservative composition of the present invention.
Figure 4 shows the FRAP test results of the preservative composition of the present invention.
Figure 5 shows the results of a whitening effect (Tyrosinase inhibition) test of the preservative composition of the present invention.
Figure 6 shows the results of the wrinkle improvement effect (Elastase inhibition) test of the preservative composition of the present invention.

이하, 본 발명에 대하여 보다 상세하게 설명하도록 한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 발명은 항산화, 미백, 주름개선 및 진정효과를 갖는 식물유래의 방부제 조성물 및 이를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 코코넛 유래 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid), 사탕수수 유래 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol), 코코넛팜 유래 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol), 포도껍질 추출물, 레몬 추출물, 라벤더 추출물, 상백피 추출물, 아이비엽 추출물 및 감귤 추출물을 함유하는 혼합 조성물은 100% 식물유래 방부제로서 다양한 세균, 이스트균 및 곰팡이를 억제하는 효과와 방부 기능 외에도 항산화, 미백, 주름개선, 진정, 항균효과가 있다.The present invention relates to a plant-derived preservative composition having antioxidant, whitening, wrinkle-improving and soothing effects, and to a cosmetic composition containing the same, and more specifically, to caprylhydroxamic acid derived from coconut and 1 derived from sugarcane. , Contains 1,3-Butylene glycol, Caprylyl glycol derived from coconut palm, grape skin extract, lemon extract, lavender extract, Morus bark extract, ivy leaf extract, and citrus extract. The mixed composition is a 100% plant-derived preservative that has the effect of suppressing various bacteria, yeast, and mold, and has anti-oxidation, whitening, wrinkle improvement, soothing, and antibacterial effects in addition to preservative functions.

구체적으로 본 발명은 식물유래 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol), 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid), 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol), 포도껍질 추출물, 라벤더꽃 추출물, 레몬 추출물, 상백피 추출물, 아이비엽 추출물, 감귤 추출물로부터 유익한 활성 성분을 조합하여 그 동반상승 효과로 인해 방부제로써의 역할 외에도 항산화, 미백, 주름개선, 진정효과가 뛰어나고 개별 성분 및 추출물에 비해 혼합하여 사용한 조성물의 현저히 뛰어난 효과를 확인하였다.Specifically, the present invention relates to plant-derived 1,3-butylene glycol, caprylhydroxamic acid, caprylyl glycol, grape skin extract, and lavender. By combining beneficial active ingredients from flower extract, lemon extract, Morus bark extract, ivy leaf extract, and citrus extract, their synergistic effect not only acts as a preservative but also has excellent antioxidant, whitening, wrinkle improvement, and soothing effects compared to individual ingredients and extracts. The significantly superior effect of the composition used by mixing was confirmed.

본 발명에서 사용되는 용어 “추출물”은 건조시료의 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.The term “extract” used in the present invention refers to an extract obtained by extraction treatment of a dried sample, a diluted or concentrated liquid of the extract, a dried product obtained by drying the extract, a crude product or purified product of the extract, or a mixture thereof, etc. This includes the extract itself and all formulations of the extract that can be formed using the extract.

본 발명의 상기 추출물의 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 본 발명에서 사용될 수 있는 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출벌, 여과법, 환류 추출법, 침출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있고, 바람직하게는 냉침 추출법을 이용하여 수행할 수 있다.The method for extracting the extract of the present invention is not particularly limited, and may be extracted according to a method commonly used in the art. Non-limiting examples of extraction methods that can be used in the present invention include hot water extraction, ultrasonic extraction, filtration, reflux extraction, and leaching, which can be performed alone or by combining two or more methods. and can preferably be performed using a cold immersion extraction method.

본 발명의 복합 천연물을 추출하는 데에 사용하는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비 제한적인 예로는 물, 증류수, 에탄올, 메탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 프로판올, 부틸렌글라이콜, 프로필렌글라이콜, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 디클로로메탄, 에틸아세테이트, 메틸렌클로라이드, n-헥산, 염산, 초산, 포름산, 디에틸에테르, 페트로레움에테르 및 사이클로헥산으로 이루어진 군 중에서 선택되는 1 이상의 용매 등을 들 수 있으며, 바람직하게는 알코올을 용매로 사용하는 경우에 탄소수 1 내지 4의 알코올(메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올)을 사용할 수 있다.The type of extraction solvent used to extract the complex natural product of the present invention is not particularly limited, and any solvent known in the art can be used. Non-limiting examples of the extraction solvent include water, distilled water, ethanol, methanol, propanol, isopropanol, butanol, propanol, butylene glycol, propylene glycol, acetone, ether, benzene, chloroform, dichloromethane, ethyl acetate, and methylene. One or more solvents selected from the group consisting of chloride, n-hexane, hydrochloric acid, acetic acid, formic acid, diethyl ether, petroleum ether and cyclohexane, and preferably, when alcohol is used as the solvent, it has 1 carbon atom. Alcohols from 4 to 4 (methanol, ethanol, propanol, butanol) can be used.

본 발명의 화장료 조성물은 상술한 본 발명의 방부제 조성물과 화장품학적 유효량(cosmetically effective amount) 및 화장품학적으로 허용되는 담체를 포함하여 제조할 수 있다.The cosmetic composition of the present invention can be prepared including the preservative composition of the present invention described above, a cosmetically effective amount, and a cosmetically acceptable carrier.

화장료 조성물의 외형은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는, 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다.The appearance of the cosmetic composition contains a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base. These are all formulations suitable for topical application, such as solutions, gels, solids, pasty anhydrous products, emulsions obtained by dispersing the oil phase in the water phase, suspensions, microemulsions, microcapsules, microgranules or ionic forms (liposomes) and It may be provided in the form of a non-ionic vesicular dispersant, or in the form of a cream, skin, lotion, powder, ointment, spray or concealer stick. These compositions can be prepared according to conventional methods in the art. The composition according to the invention can also be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant.

본 발명의 일실시예에 따른 상기 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 구성된 제형에서 선택된 하나 이상의 제형일 수 있다.The cosmetic composition according to an embodiment of the present invention is not particularly limited in its formulation, and for example, skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisture lotion, nutritional lotion, massage cream. It may be one or more formulations selected from formulations consisting of nutritional cream, moisture cream, hand cream, foundation, essence, nutritional essence, pack, soap, cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion, and body cleanser.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal fiber, plant fiber, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as the carrier ingredient. You can.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, or polyamide powder can be used as the carrier component. In particular, when the formulation is a spray, chlorofluorohydrocarbon and propane may be used as carrier ingredients. /May contain propellants such as butane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solvating agent or emulsifying agent is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 , 3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic esters, polyethylene glycol or fatty acid esters of sorbitan.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, the carrier ingredients include water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester, and polyoxyethylene sorbitan ester, and microcrystalline Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar, or tracant may be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing agent, the carrier ingredients include aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyl taurate, sarcosinate, and fatty acid amide. Ether sulfate, alkylamidobetaine, fatty alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, linoline derivative, or ethoxylated glycerol fatty acid ester can be used.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에는 상기 방부제 조성물 이외에 기능성 첨가물 및 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분이 추가로 포함될 수 있다. 상기 기능성 첨가물로는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 성분을 포함할 수 있다.The cosmetic composition according to an embodiment of the present invention may further include functional additives and components included in general cosmetic compositions in addition to the preservative composition. The functional additive may include ingredients selected from the group consisting of water-soluble vitamins, oil-soluble vitamins, polymer peptides, polymer polysaccharides, sphingolipids, and seaweed extract.

본 발명의 화장료 조성물에는 또한, 상기 기능성 첨가물과 더불어 필요에 따라 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분을 배합해도 된다. 이외에 포함되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제 또는 정제수 등을 들 수 있다.In addition to the above-mentioned functional additives, the cosmetic composition of the present invention may also contain components included in general cosmetic compositions, if necessary. Other ingredients included include oils and fats, moisturizers, emollients, surfactants, organic and inorganic pigments, organic powders, ultraviolet absorbers, disinfectants, antioxidants, plant extracts, pH adjusters, alcohols, pigments, fragrances, blood circulation promoters, Cooling agents, antiperspirants, or purified water may be used.

본 발명의 상기 복합 천연물 건조시료는 각각의 건조 중량을 기준으로 하여 포도껍질 0.01 ~ 20.0중량% , 라벤더꽃 0.01 ~ 20.0중량%, 레몬 0.01 ~ 20.0중량%, 상백피0.01 ~ 20.0중량%, 아이비엽 0.01 ~ 10.0중량% 및 감귤 0.01 ~ 10.0중량%로 이용할 수 있다.The dried sample of the composite natural product of the present invention contains 0.01 to 20.0% by weight of grape skin, 0.01 to 20.0% by weight of lavender flowers, 0.01 to 20.0% by weight of lemon, 0.01 to 20.0% by weight of mortar bark, and 0.01% by weight of ivy leaves, based on their respective dry weights. It is available in ~10.0% by weight and 0.01~10.0% by weight of tangerine.

상기 조성과 공정으로 얻어진 천연 추출물 복합하였을 때 뛰어난 방부 효과와 항산화효과, 미백 효과, 주름개선 효과를 나타낸다.When combined with the natural extract obtained through the above composition and process, it exhibits excellent preservative, antioxidant, whitening, and wrinkle-improving effects.

본 발명의 방부제 조성물은 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol) 79.0 중량%, 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid) 10.0 중량%, 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol) 5.0 중량% 포도껍질 추출물 1.0 중량%, 라벤더꽃 추출물 1.0 중량%, 레몬 추출물 1.0 중량%, 상백피 추출물 1.0 중량%, 아이비엽 추출물 1.0 중량% 및 감귤 추출물 1.0 중량%를 포함할 수 있다.The preservative composition of the present invention contains 79.0% by weight of 1,3-Butylene glycol, 10.0% by weight of Caprylhydroxamic acid, and 5.0% by weight of Caprylyl glycol. Weight% may include 1.0% by weight of grape skin extract, 1.0% by weight of lavender flower extract, 1.0% by weight of lemon extract, 1.0% by weight of Morus bark extract, 1.0% by weight of ivy leaf extract, and 1.0% by weight of tangerine extract.

여기서 부틸렌글라이콜은 사탕수수 유래이고, 상기 카프릴하이드록사믹애씨드는 코코넛 유래이고, 상기 카프릴릴글라이콜은 팜 또는 코코넛 유래인 것이 바람직하다.Here, butylene glycol is preferably derived from sugar cane, the capryl hydroxamic acid is derived from coconut, and the caprylyl glycol is preferably derived from palm or coconut.

본 발명의 항산화, 미백, 주름개선, 진정, 항균효과가 뛰어난 100% 식물유래 방부제 조성물에 있어 상기 복합 천연 추출물의 함량은 화장료 조성물 전체 중량 대비 0.0001 내지 10 중량%인 것이 바람직하며, 이러한 복합 천연 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 화장수류, 에센스류, 크림류, 팩류, 패치류, 피부접착용 겔류, 파운데이션류, 메이크업베이스류 등의 다양한 제형으로 제조될 수 있고, 통상적인 화장료 제조법에 적용시킬 수 있다.In the 100% plant-derived preservative composition with excellent antioxidant, whitening, wrinkle improvement, soothing, and antibacterial effects of the present invention, the content of the complex natural extract is preferably 0.0001 to 10% by weight based on the total weight of the cosmetic composition, and this complex natural extract Cosmetic compositions containing can be manufactured in various formulations such as lotions, essences, creams, packs, patches, skin adhesive gels, foundations, and makeup bases, and can be applied to conventional cosmetic manufacturing methods.

구체적으로 액상, 크림상, 페이스트상 및 고체상 등 다양한 성상으로 적용이 가능하며, 이들 각 제형에 적합하고 당업계에 주지된 각종의 통상적인 보조제와 담체를 포함할 수 있다.Specifically, it can be applied in various forms such as liquid, cream, paste, and solid, and may contain various common auxiliaries and carriers that are suitable for each of these formulations and are well known in the art.

본 발명의 100% 식물유래 방부제 조성물은 화장품의 방부제로써 항균, 항바이러스 효과가 뛰어나며, 기존의 화장품 방부제 성분과는 다르게 합성 화학물질을 포함하지 않고 항산화, 미백, 주름개선의 부수적인 효과를 갖추고 있다. The 100% plant-derived preservative composition of the present invention has excellent antibacterial and antiviral effects as a preservative for cosmetics. Unlike existing cosmetic preservative ingredients, it does not contain synthetic chemicals and has secondary effects of antioxidant, whitening, and wrinkle improvement. .

이하에서 본 발명의 이해를 돕기위해 실시예, 비교예, 시험예 등의 구체적인 예를 들어 설명하기로 한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, to help understand the present invention, specific examples such as examples, comparative examples, and test examples will be described. However, the following examples are merely illustrative of the present invention, and the content of the present invention is not limited by the following examples.

<실시예 1><Example 1>

깨끗하게 수세한 후 건조된 포도껍질을 70% 에탄올에 혼합하여 12시간동안 포도껍질 추출물을 추출하였다. 포도껍질 추출을 통해 얻고자 한 활성 성분인 레스베라트롤(Resveratrol)을 색과 취를 제거하기 위해, 정제수, 에탄올 및 메틸나노플루오로부틸에테르(Methyl nonafluorobutyl ether)-메틸나노플루오로이소부틸에테르(Methyl nonafluoroisobutyl ether) 혼합물(Novec 7100,3M,USA)을 각각 67.0 중량%, 30.0 중량%, 3.0 중량%를 혼합한 액 99.0 중량%에 상기 포도껍질 추출물을 1.0 중량%로 혼합하여 용해시킨 후 2 일간 5 ℃의 냉장 조건에서 분리, 정제하여 재결정화 하였다. 건조된 라벤더꽃, 레몬, 상백피, 아이비엽 및 감귤을 각각 5.0 중량% 및 천연 유래 물질인 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol) 95.0 중량%로 혼합하여 80 ℃에서 2시간동안 추출하였다. 상기 추출물은 추출 완료 후 혼합하여 0.45μm filter로 여과를 실시하였다. 그리고 난 후 이 여과액과 코코넛, 사탕수수, 코코넛 오일 유래 물질인 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol), 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid) 및 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol)과 혼합하여 최종 100% 식물유래 방부제 조성물 시료를 완성하였다. 최종 혼합 비율은 1,3-부틸렌글라이콜 79.0 중량%, 카프릴하이드록사믹애씨드 10.0 중량%, 카프릴릴글라이콜 5.0 중량%, 포도껍질 추출물 1.0 중량%, 라벤더꽃 추출물 1.0 중량%, 레몬 추출물 1.0 중량%, 상백피 추출물 1.0 중량%, 아이비엽 추출물 1.0 중량% 및 감귤 추출물 1.0 중량% 으로 구성하였다.After washing thoroughly, the dried grape skins were mixed with 70% ethanol and the grape skin extract was extracted for 12 hours. In order to remove the color and odor of resveratrol, the active ingredient obtained through grape skin extraction, purified water, ethanol, and methyl nanofluorobutyl ether-methyl nanofluoroisobutyl ether were used. ether) mixture (Novec 7100, 3M, USA) at 67.0 wt%, 30.0 wt%, and 3.0 wt%, respectively, and 1.0 wt% of the grape skin extract was dissolved in 99.0 wt% of the mixture and then incubated at 5°C for 2 days. It was separated, purified, and recrystallized under refrigerated conditions. Mix dried lavender flowers, lemon, bark, ivy leaves, and tangerines with 5.0% by weight each and 95.0% by weight of 1,3-butylene glycol, a natural substance, at 80°C for 2 hours. It was extracted during. The extract was mixed after completion of extraction and filtered through a 0.45μm filter. Then, this filtrate and coconut, sugar cane, and coconut oil-derived substances such as 1,3-Butylene glycol, Caprylhydroxamic acid, and caprylyl glycol (Caprylyl glycol) to prepare the final 100% plant-derived preservative composition sample. The final mixing ratio is 79.0% by weight of 1,3-butylene glycol, 10.0% by weight of caprylic hydroxamic acid, 5.0% by weight of caprylyl glycol, 1.0% by weight of grape skin extract, 1.0% by weight of lavender flower extract, and lemon. It consisted of 1.0% by weight of extract, 1.0% by weight of Morus bark extract, 1.0% by weight of ivy leaf extract, and 1.0% by weight of citrus extract.

<비교예 1><Comparative Example 1>

깨끗하게 수세한 후 건조된 포도껍질을 70% 에탄올에 혼합하여 12시간동안 포도껍질 추출물을 추출하였다. 포도껍질 추출을 통해 얻고자 한 활성 성분인 레스베라트롤(Resveratrol)을 색과 취를 제거하기 위해, 정제수, 에탄올 및 메틸나노플루오로부틸에테르(Methyl nonafluorobutyl ether)-메틸나노플루오로이소부틸에테르(Methyl nonafluoroisobutyl ether) 혼합물(Novec 7100,3M,USA)을 각각 67.0 중량%, 30.0 중량%, 3.0 중량%를 혼합한 액 99.0 중량%에 상기 포도껍질 추출물을 1.0 중량%로 혼합하여 용해시킨 후 2 일간 5 ℃의 냉장 조건에서 분리, 정제하여 재결정화 하였다. 건조된 라벤더꽃, 레몬, 상백피, 아이비엽 및 감귤을 각각 5.0 중량% 및 천연 유래 물질인 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol) 95.0 중량%로 혼합하여 80 ℃에서 2시간동안 추출하였다. 상기 추출물은 추출 완료 후 혼합하여 0.45μm filter로 여과를 실시하였다. 그리고 난 후 이 여과액과 코코넛, 사탕수수, 코코넛 오일 유래 물질인 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol), 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid), 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol)과 혼합하여 최종 100% 식물유래 방부제 조성물 시료를 완성하였다. 최종 혼합 비율은 1,3-부틸렌글라이콜 79.0 중량%, 카프릴하이드록사믹애씨드 6.0 중량%, 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol) 5.0 중량%, 포도껍질 추출물 2.0 중량%, 라벤더꽃 추출물 1.0 중량%, 레몬 추출물 1.0 중량%, 상백피 추출물 2.0 중량%, 아이비엽 추출물 2.0 중량% 및 감귤 추출물 2.0 중량% 으로 구성하였다. After washing thoroughly, the dried grape skins were mixed with 70% ethanol and the grape skin extract was extracted for 12 hours. In order to remove the color and odor of resveratrol, the active ingredient obtained through grape skin extraction, purified water, ethanol, and methyl nanofluorobutyl ether-methyl nanofluoroisobutyl ether were used. ether) mixture (Novec 7100, 3M, USA) at 67.0 wt%, 30.0 wt%, and 3.0 wt%, respectively, and 1.0 wt% of the grape skin extract was dissolved in 99.0 wt% of the mixture and then incubated at 5°C for 2 days. It was separated, purified, and recrystallized under refrigerated conditions. Mix dried lavender flowers, lemon, bark, ivy leaves, and tangerines with 5.0% by weight each and 95.0% by weight of 1,3-butylene glycol, a natural substance, at 80°C for 2 hours. It was extracted during. The extract was mixed after completion of extraction and filtered through a 0.45μm filter. Then, this filtrate and coconut, sugar cane, and coconut oil-derived substances such as 1,3-Butylene glycol, Caprylhydroxamic acid, and caprylyl glycol (Caprylyl glycol) to prepare the final 100% plant-derived preservative composition sample. The final mixing ratio is 79.0% by weight of 1,3-butylene glycol, 6.0% by weight of capryl hydroxamic acid, 5.0% by weight of caprylyl glycol, 2.0% by weight of grape skin extract, and 1.0% by weight of lavender flower extract. It consisted of 1.0% by weight of lemon extract, 2.0% by weight of Morus bark extract, 2.0% by weight of ivy leaf extract, and 2.0% by weight of tangerine extract.

<비교예 2><Comparative Example 2>

깨끗하게 수세한 후 건조된 포도껍질을 70% 에탄올에 혼합하여 12시간동안 포도껍질 추출물을 추출하였다. 포도껍질 추출을 통해 얻고자 한 활성 성분인 레스베라트롤(Resveratrol)을 색과 취를 제거하기 위해, 정제수, 에탄올 및 메틸나노플루오로부틸에테르(Methyl nonafluorobutyl ether)-메틸나노플루오로이소부틸에테르(Methyl nonafluoroisobutyl ether) 혼합물(Novec 7100,3M,USA)을 각각 67.0 중량%, 30.0 중량%, 3.0 중량%를 혼합한 액 99.0 중량%에 상기 포도껍질 추출물을 1.0 중량%로 혼합하여 용해시킨 후 2 일간 5 ℃의 냉장 조건에서 분리, 정제하여 재결정화 하였다. 라벤더꽃, 레몬, 상백피, 아이비엽 및 감귤은 각각 5.0 중량% 및 천연 유래 물질인 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol) 95.0 중량%로 혼합하여 80 ℃에서 2시간동안 추출하였다. 상기 추출물은 추출 완료 후 혼합하여 0.45μm filter로 여과를 실시하였다. 그리고 난 후 이 여과액과 코코넛, 사탕수수, 코코넛 오일 유래 물질인 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol), 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid) 및 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol)과 혼합하여 최종 100% 식물유래 방부제 조성물 시료를 완성하였다. 최종 혼합 비율은 1,3-부틸렌글라이콜 79.0 중량%, 카프릴하이드록사믹애씨드 7.0 중량%, 카프릴릴글라이콜 5.0 중량%, 포도껍질 추출물 2.0 중량%, 라벤더꽃 추출물 1.0 중량%, 레몬 추출물 1.0 중량%, 상백피 추출물 1.0 중량%, 아이비엽 추출물 2.0 중량% 및 감귤 추출물 2.0 중량% 으로 구성하였다. After washing thoroughly, the dried grape skins were mixed with 70% ethanol and the grape skin extract was extracted for 12 hours. In order to remove the color and odor of resveratrol, the active ingredient obtained through grape skin extraction, purified water, ethanol, and methyl nanofluorobutyl ether-methyl nanofluoroisobutyl ether were used. ether) mixture (Novec 7100, 3M, USA) at 67.0 wt%, 30.0 wt%, and 3.0 wt%, respectively, and 1.0 wt% of the grape skin extract was dissolved in 99.0 wt% of the mixture and then incubated at 5°C for 2 days. It was separated, purified, and recrystallized under refrigerated conditions. Mix 5.0% by weight of lavender flowers, lemon, bark, ivy leaves, and tangerines with 95.0% by weight of 1,3-butylene glycol, a natural substance, and extract at 80°C for 2 hours. did. The extract was mixed after completion of extraction and filtered through a 0.45μm filter. Then, this filtrate and coconut, sugar cane, and coconut oil-derived substances such as 1,3-Butylene glycol, Caprylhydroxamic acid, and caprylyl glycol (Caprylyl glycol) to prepare the final 100% plant-derived preservative composition sample. The final mixing ratio is 79.0% by weight of 1,3-butylene glycol, 7.0% by weight of caprylic hydroxamic acid, 5.0% by weight of caprylyl glycol, 2.0% by weight of grape skin extract, 1.0% by weight of lavender flower extract, and lemon. It consisted of 1.0% by weight of extract, 1.0% by weight of Morus bark extract, 2.0% by weight of ivy leaf extract, and 2.0% by weight of citrus extract.

<비교예 3><Comparative Example 3>

깨끗하게 수세한 후 건조된 포도껍질을 70% 에탄올에 혼합하여 12시간동안 포도껍질 추출물을 추출하였다. 포도껍질 추출을 통해 얻고자 한 활성 성분인 레스베라트롤(Resveratrol)을 색과 취를 제거하기 위해 정제수, 에탄올 및 메틸나노플루오로부틸에테르(Methyl nonafluorobutyl ether)-메틸나노플루오로이소부틸에테르(Methyl nonafluoroisobutyl ether) 혼합물(Novec 7100,3M,USA)을 각각 67.0 중량%, 30.0 중량%, 3.0 중량%를 혼합한 액 99.0 중량%에 상기 포도껍질 추출물을 1.0 중량%로 혼합하여 용해시킨 후 2 일간 5 ℃의 냉장 조건에서 분리, 정제하여 재결정화 하였다. 라벤더꽃, 레몬, 상백피, 아이비엽 및 감귤은 각각 5.0 중량% 및 천연 유래 물질인 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol) 95.0 중량%로 혼합하여 80 ℃에서 2시간동안 추출하였다. 상기 추출물은 추출 완료 후 혼합하여 0.45μm filter로 여과를 실시하였다. 그리고 난 후 이 여과액과 코코넛, 사탕수수, 코코넛 오일 유래 물질인 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol), 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid) 및 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol)과 혼합하여 최종 100% 식물유래 방부제 조성물 시료를 완성하였다. 최종 혼합 비율은 1,3-부틸렌글라이콜 79.0 중량%, 카프릴하이드록사믹애씨드 8.0 중량%, 카프릴릴글라이콜 5.0 중량%, 포도껍질 추출물 2.0 중량%, 라벤더꽃 추출물 1.0 중량%, 레몬 추출물 1.0 중량%, 상백피 추출물 1.0 중량%, 아이비엽 추출물 1.0 중량% 및 감귤 추출물 2.0 중량% 으로 구성하였다. After washing thoroughly, the dried grape skins were mixed with 70% ethanol and the grape skin extract was extracted for 12 hours. Resveratrol, the active ingredient obtained through grape skin extraction, was mixed with purified water, ethanol, and methyl nonafluorobutyl ether to remove the color and odor. ) 1.0% by weight of the grape skin extract was dissolved in 99.0% by weight of the mixture (Novec 7100, 3M, USA) at 67.0% by weight, 30.0% by weight, and 3.0% by weight, respectively, and incubated at 5°C for 2 days. It was separated, purified, and recrystallized under refrigerated conditions. Mix 5.0% by weight of lavender flowers, lemon, bark, ivy leaves, and tangerines with 95.0% by weight of 1,3-butylene glycol, a natural substance, and extract at 80°C for 2 hours. did. The extract was mixed after completion of extraction and filtered through a 0.45μm filter. Then, this filtrate and coconut, sugar cane, and coconut oil-derived substances such as 1,3-Butylene glycol, Caprylhydroxamic acid, and caprylyl glycol (Caprylyl glycol) to prepare the final 100% plant-derived preservative composition sample. The final mixing ratio is 79.0% by weight of 1,3-butylene glycol, 8.0% by weight of caprylic hydroxamic acid, 5.0% by weight of caprylyl glycol, 2.0% by weight of grape skin extract, 1.0% by weight of lavender flower extract, and lemon. It consisted of 1.0% by weight of extract, 1.0% by weight of Morus bark extract, 1.0% by weight of ivy leaf extract, and 2.0% by weight of citrus extract.

<비교예 4><Comparative Example 4>

깨끗하게 수세한 후 건조된 포도껍질을 70% 에탄올에 혼합하여 12시간동안 포도껍질 추출물을 추출하였다. 포도껍질 추출을 통해 얻고자 한 활성 성분인 레스베라트롤(Resveratrol)을 색과 취를 제거하기 위해, 정제수, 에탄올 및 메틸나노플루오로부틸에테르(Methyl nonafluorobutyl ether)-메틸나노플루오로이소부틸에테르(Methyl nonafluoroisobutyl ether) 혼합물(Novec 7100,3M,USA)을 각각 67.0 중량%, 30.0 중량%, 3.0 중량%를 혼합한 액 99.0 중량%에 상기 포도껍질 추출물을 1.0 중량%로 혼합하여 용해시킨 후 2 일간 5 ℃의 냉장 조건에서 분리, 정제하여 재결정화 하였다. 라벤더꽃, 레몬, 상백피, 아이비엽 및 감귤은 각각 5.0 중량% 및 천연 유래 물질인 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol) 95.0 중량%로 혼합하여 80 ℃에서 2시간동안 추출하였다. 상기 추출물은 추출 완료 후 혼합하여 0.45μm filter로 여과를 실시하였다. 그리고 난 후 이 여과액과 코코넛, 사탕수수, 코코넛 오일 유래 물질인 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol), 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid) 및 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol)과 혼합하여 최종 100% 식물유래 방부제 조성물 시료를 완성하였다. 최종 혼합 비율은 1,3-부틸렌글라이콜 79.0 중량%, 카프릴하이드록사믹애씨드 9.0 중량%, 카프릴릴글라이콜 5.0 중량%, 포도껍질 추출물 2.0 중량%, 라벤더꽃 추출물 1.0 중량%, 레몬 추출물 1.0 중량%, 상백피 추출물 1.0 중량%, 아이비엽 추출물 1.0 중량% 및 감귤 추출물 1.0 중량% 으로 구성하였다. After washing thoroughly, the dried grape skins were mixed with 70% ethanol and the grape skin extract was extracted for 12 hours. In order to remove the color and odor of resveratrol, the active ingredient obtained through grape skin extraction, purified water, ethanol, and methyl nanofluorobutyl ether-methyl nanofluoroisobutyl ether were used. ether) mixture (Novec 7100, 3M, USA) at 67.0 wt%, 30.0 wt%, and 3.0 wt%, respectively, and 1.0 wt% of the grape skin extract was dissolved in 99.0 wt% of the mixture and then incubated at 5°C for 2 days. It was separated, purified, and recrystallized under refrigerated conditions. Mix 5.0% by weight of lavender flowers, lemon, bark, ivy leaves, and tangerines with 95.0% by weight of 1,3-butylene glycol, a natural substance, and extract at 80°C for 2 hours. did. The extract was mixed after completion of extraction and filtered through a 0.45μm filter. Then, this filtrate and coconut, sugar cane, and coconut oil-derived substances such as 1,3-Butylene glycol, Caprylhydroxamic acid, and caprylyl glycol (Caprylyl glycol) to prepare the final 100% plant-derived preservative composition sample. The final mixing ratio is 79.0% by weight of 1,3-butylene glycol, 9.0% by weight of caprylic hydroxamic acid, 5.0% by weight of caprylyl glycol, 2.0% by weight of grape skin extract, 1.0% by weight of lavender flower extract, and lemon. It consisted of 1.0% by weight of extract, 1.0% by weight of Morus bark extract, 1.0% by weight of ivy leaf extract, and 1.0% by weight of citrus extract.

<시험예 1> 항균 시험<Test Example 1> Antibacterial test

항균 효과를 측정하기 위하여 사용한 균주로는 그람양성균으로 포도상구균(Staphylococcus aureus ATCC 6538P), 그람음성균으로 대장균(Escherichia coli ATCC 8739), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027), 효모로는 캔디다 효모(Candida albicans ATCC 10231), 사상균으로 흑국균(Aspergillus niger ATCC 22343)을 한국생명공학연구원 생물자원센터(KCTC, Korea)로부터 분양받아 사용하였다. 포도상구균, 대장균, 녹농균 세 종류의 세균은 고압증기멸균기에서 121℃에서 15분간 멸균한 상온의 broth 배지에 첫 배양 후 72시간동안 37℃ 조건에서 Incubation한 후 한 번 계대배양을 5회 실시하는 방법으로 적응화 기간을 거쳐 안정화하였다. 캔디다 효모, 흑국균과 같은 진균은 120시간 동안 24℃에서 Incubation하여 한 번 계대배양을 5회 실시하는 방법으로 배양 조건에서 안정화한 후에 실험에 사용하였다. 세균은 1 × 106 cfu/㎖, 진균은 1 × 105 cfu/㎖이 되도록하여 정제수에 1%로 희석한 샘플에 접종한 후 4시간, 24시간, 48시간, 120시간, 168시간 배양하여 시간별로 균수를 체크하여 초기 접종량에서 얼마만큼 사멸했는지 체크하여 방부 처방의 적합여부를 판단하였다. 세균의 경우 7일 후 균수 10 cfu/㎖ 이하, 진균의 경우 1 × 103 cfu/㎖ 이하를 적합으로 판단하였다. 시험 결과는 하기 표 1부터 표 5까지 다섯가지 균의 생장 정도를 수치로 나타내었다. 표 1에 나타난 바와 같이, 5대 균주 중 하나인 포도상구균의 생장은 120시간이 지난 이후에 실시예와 비교예 네 가지의 시험군에서 완전히 저해되어 전부 사멸되었음이 확인되었다. 표 2에 나타난 바와 같이 대장균의 경우 접종 후 120시간 이후 비교예 1과 비교예 2를 제외하고 모든 균의 사멸이 이루어진 것을 확인할 수 있다. 표 3이 보여주는 바와 같이, 녹농균 균주에 대해 시험군 접종 120시간 후에 실시예 1과 비교예 4만 균의 사멸이 관찰되었고 나머지 시험군의 경우 168시간이 지난 후에 완전한 균의 사멸이 확인되었다. 표 4, 표 5에 나타난 바와 같이 캔디다 효모 및 흑국균과 같은 효모와 곰팡이의 사멸은 접종 후 168시간 동안 실시예 1을 제외하고는 아무 시험군도 항균 효능을 보이지 않았다. The strains used to measure the antibacterial effect were Gram-positive bacteria ( Staphylococcus aureus ATCC 6538P), Gram-negative bacteria ( Escherichia coli ATCC 8739) and Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, and yeast ( Candida albicans ATCC). 10231), and Aspergillus niger ATCC 22343) was used as a filamentous fungus obtained from the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology Biological Resources Center (KCTC, Korea). Three types of bacteria, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, and Pseudomonas aeruginosa, are first cultured in broth medium at room temperature sterilized at 121°C for 15 minutes in a high-pressure steam sterilizer, then incubated at 37°C for 72 hours, and then subcultured five times. It was stabilized after an adaptation period. Fungi such as Candida yeast and Black Aspergillus were used in experiments after stabilizing them under culture conditions by incubating them at 24°C for 120 hours and subculturing them five times. Bacteria were inoculated at 1 The number of bacteria was checked over time to determine how much had died from the initial inoculation dose to determine whether the preservative prescription was appropriate. For bacteria, a bacterial count of 10 cfu/ml or less after 7 days, and for fungi, a count of 1 × 10 3 cfu/ml or less was considered appropriate. The test results numerically expressed the growth degree of the five types of bacteria in Tables 1 to 5 below. As shown in Table 1, it was confirmed that the growth of Staphylococcus aureus, one of the five major strains, was completely inhibited and killed in the four test groups of Examples and Comparative Examples after 120 hours. As shown in Table 2, in the case of E. coli, it can be confirmed that all bacteria were killed 120 hours after inoculation, except for Comparative Examples 1 and 2. As Table 3 shows, death of 40,000 bacteria in Example 1 and Comparative Example was observed 120 hours after inoculation of the test group with respect to the Pseudomonas aeruginosa strain, and complete death of the bacteria in the remaining test groups was confirmed after 168 hours. As shown in Tables 4 and 5, none of the test groups showed antibacterial efficacy except for Example 1 for 168 hours after inoculation in terms of killing yeasts and molds such as Candida yeast and Black Aspergillus.

즉, 실시예 1에 해당하는 식물유래 복합 추출물의 조성이 5대 균주 모두에 항균 효과를 갖추고 있으며, 포도상구균, 대장균, 녹농균과 같은 세균에는 강력한 사멸 효과를 확인할 수 있었다. In other words, the composition of the plant-derived complex extract corresponding to Example 1 has an antibacterial effect on all five major strains, and a strong killing effect on bacteria such as Staphylococcus aureus, Escherichia coli, and Pseudomonas aeruginosa was confirmed.

시간
시험군
hour
test group
Staphylococcus aureus ATCC 6538P
Anti-microbial Effect (cfu/㎖)
Staphylococcus aureus ATCC 6538P
Anti-microbial Effect (cfu/㎖)
접종inoculation 4시간4 hours 24시간24 hours 48시간48 hours 120시간120 hours 168시간168 hours 실시예 1Example 1 1.0 × 106 1.0 × 10 6 3.8 × 104 3.8 × 10 4 5.1 × 102 5.1 × 10 2 2.9 × 102 2.9 × 10 2 < 10 < 10 < 10 < 10 비교예 1Comparative Example 1 1.0 × 106 1.0 × 10 6 3.7 × 104 3.7 × 10 4 5.6 × 102 5.6 × 10 2 1.2 × 102 1.2 × 10 2 < 10 < 10 < 10 < 10 비교예 2Comparative Example 2 1.0 × 106 1.0 × 10 6 2.1 × 105 2.1 × 10 5 5.2 × 103 5.2 × 10 3 3.0 × 102 3.0 × 10 2 < 10 < 10 < 10 < 10 비교예 3Comparative Example 3 1.2 × 106 1.2 × 10 6 5.6 × 104 5.6 × 10 4 5.8 × 102 5.8 × 10 2 5.3 × 105.3 × 10 < 10 < 10 < 10 < 10 비교예 4Comparative Example 4 1.0 × 106 1.0 × 10 6 3.8 × 104 3.8 × 10 4 5.1 × 102 5.1 × 10 2 2.9 × 102 2.9 × 10 2 < 10 < 10 < 10 < 10

시간
시험군
hour
test group
Escherichia coli ATCC 8739
Anti-microbial Effect (cfu/㎖)
Escherichia coli ATCC 8739
Anti-microbial Effect (cfu/㎖)
접종inoculation 4시간4 hours 24시간24 hours 48시간48 hours 120시간120 hours 168시간168 hours 실시예 1Example 1 1.1 × 106 1.1 × 10 6 3.0× 103 3.0×10 3 1.1 × 103 1.1 × 10 3 3.6 × 102 3.6 × 10 2 < 10< 10 < 10 < 10 비교예 1Comparative Example 1 1.1 × 106 1.1 × 10 6 5.5× 103 5.5×10 3 2.9 × 103 2.9 × 10 3 4.2 × 102 4.2 × 10 2 1.1 × 102 1.1 × 10 2 < 10 < 10 비교예 2Comparative Example 2 1.1 × 106 1.1 × 10 6 6.1× 103 6.1×10 3 4.3 × 102 4.3 × 10 2 3.8 × 102 3.8 × 10 2 1.1 × 101.1 × 10 < 10 < 10 비교예 3Comparative Example 3 1.1 × 106 1.1 × 10 6 3.0× 103 3.0×10 3 1.1 × 103 1.1 × 10 3 3.6 × 102 3.6 × 10 2 < 10< 10 < 10 < 10 비교예 4Comparative Example 4 1.0 × 106 1.0 × 10 6 6.2× 103 6.2×10 3 1.1 × 103 1.1 × 10 3 3.7 × 102 3.7 × 10 2 < 10< 10 < 10 < 10

시간
시험군
hour
test group
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
Anti-microbial Effect (cfu/㎖)
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
Anti-microbial Effect (cfu/㎖)
접종inoculation 4시간4 hours 24시간24 hours 48시간48 hours 120시간120 hours 168시간168 hours 실시예 1Example 1 1.1 × 106 1.1 × 10 6 9.7 × 104 9.7 × 10 4 5.4 × 102 5.4 × 10 2 1.8 × 101.8 × 10 < 10< 10 < 10 < 10 비교예 1Comparative Example 1 1.3 × 106 1.3 × 10 6 7.8 × 105 7.8 × 10 5 8.8 × 104 8.8 × 10 4 5.5 × 103 5.5 × 10 3 1.2 × 103 1.2 × 10 3 < 10 < 10 비교예 2Comparative Example 2 1.1 × 106 1.1 × 10 6 2.9 × 105 2.9 × 10 5 1.2 × 104 1.2 × 10 4 2.5 × 103 2.5 × 10 3 3.3 × 102 3.3 × 10 2 < 10 < 10 비교예 3Comparative Example 3 1.1 × 106 1.1 × 10 6 2.8 × 105 2.8 × 10 5 8.6 × 104 8.6 × 10 4 1.6 × 104 1.6 × 10 4 1.2 × 101.2 × 10 < 10 < 10 비교예 4Comparative Example 4 1.0 × 106 1.0 × 10 6 3.4 × 105 3.4 × 10 5 1.8 × 104 1.8 × 10 4 2.9 × 103 2.9 × 10 3 < 10 < 10 < 10 < 10

시간
시험군
hour
test group
Candida albicans ATCC 10231
Anti-microbial Effect (cfu/㎖)
Candida albicans ATCC 10231
Anti-microbial Effect (cfu/㎖)
접종inoculation 4시간4 hours 24시간24 hours 48시간48 hours 120시간120 hours 168시간168 hours 실시예 1Example 1 1.1 × 106 1.1 × 10 6 3.8 × 105 3.8 × 10 5 1.3 × 104 1.3 × 10 4 1.5 × 103 1.5 × 10 3 1.8 × 102 1.8 × 10 2 < 10< 10 비교예 1Comparative Example 1 1.0 × 106 1.0 × 10 6 3.5 × 105 3.5 × 10 5 2.6 × 104 2.6 × 10 4 1.4 × 104 1.4 × 10 4 4.3 × 103 4.3 × 10 3 2.0 × 103 2.0 × 10 3 비교예 2Comparative Example 2 1.0 × 106 1.0 × 10 6 5.0 × 105 5.0 × 10 5 4.1 × 104 4.1 × 10 4 1.8 × 104 1.8 × 10 4 3.8 × 103 3.8 × 10 3 2.2 × 103 2.2 × 10 3 비교예 3Comparative Example 3 1.0 × 106 1.0 × 10 6 3.2 × 105 3.2 × 10 5 4.5 × 104 4.5 × 10 4 1.0 × 104 1.0 × 10 4 2.3 × 103 2.3 × 10 3 1.8 × 103 1.8 × 10 3 비교예 4Comparative Example 4 1.1 × 106 1.1 × 10 6 3.3 × 105 3.3 × 10 5 4.3 × 104 4.3 × 10 4 6.6 × 103 6.6 × 10 3 2.2 × 103 2.2 × 10 3 1.4 × 103 1.4 × 10 3

시간
시험군
hour
test group
Aspergillus niger ATCC 22343
Anti-microbial Effect (cfu/㎖)
Aspergillus niger ATCC 22343
Anti-microbial Effect (cfu/㎖)
접종inoculation 4시간4 hours 24시간24 hours 48시간48 hours 120시간120 hours 168시간168 hours 실시예 1Example 1 1.1 × 106 1.1 × 10 6 4.1 × 105 4.1 × 10 5 7.9 × 104 7.9 × 10 4 4.6 × 103 4.6 × 10 3 2.3 × 102 2.3 × 10 2 < 10< 10 비교예 1Comparative Example 1 1.1 × 106 1.1 × 10 6 5.6 × 105 5.6 × 10 5 6.6 × 104 6.6 × 10 4 2.9 × 103 2.9 × 10 3 2.6 × 103 2.6 × 10 3 1.5 × 103 1.5 × 10 3 비교예 2Comparative Example 2 1.0 × 106 1.0 × 10 6 3.6 × 105 3.6 × 10 5 6.7 × 104 6.7 × 10 4 5.9 × 103 5.9 × 10 3 4.0 × 103 4.0 × 10 3 3.3 × 103 3.3 × 10 3 비교예 3Comparative Example 3 9.6 × 105 9.6 × 10 5 6.2 × 104 6.2 × 10 4 2.5 × 104 2.5 × 10 4 1.7 × 104 1.7 × 10 4 2.1 × 103 2.1 × 10 3 1.1 × 103 1.1 × 10 3 비교예 4Comparative Example 4 1.0 × 106 1.0 × 10 6 5.0 × 104 5.0 × 10 4 3.7 × 104 3.7 × 10 4 1.4 × 104 1.4 × 10 4 1.8 × 103 1.8 × 10 3 1.1 × 103 1.1 × 10 3

<시험예 2> 항산화 시험법 - DPPH free radical 소거<Test Example 2> Antioxidant test method - DPPH free radical scavenging

DPPH free radical 소거 시험법을 통해 항노화 기능성 효능 평가를 진행하였다. 실시예 1에 해당하는 100% 식물유래 방부제 조성물은 0.125%, 0.25%, 0.5%, 1.0%, 2.0%로 용매에 희석한 시료를 준비해 실험에 사용하였다. DPPH solution을 0.2mM로 준비하여 시료와 100ul씩 1:1의 비율로 시험관에 넣고 15분간 빛을 차단한 조건에서 반응시킨 후 540nm에서 Micro plate reader를 이용하여 흡광도를 측정하였다. 양성대조군으로 이미 항산화 효과가 뛰어난 것으로 알려진 Ascorbic acid 200μg/ml (0.02%)를 사용하였다. 측정된 흡광도를 이용하여 하기 계산식 1과 같은 방법으로 항산화 효능을 평가하였다.Anti-aging functional efficacy was evaluated using the DPPH free radical scavenging test. The 100% plant-derived preservative composition corresponding to Example 1 was used in experiments by preparing samples diluted in solvent to 0.125%, 0.25%, 0.5%, 1.0%, and 2.0%. DPPH solution was prepared at 0.2mM and placed in a test tube at a ratio of 1:1 with the sample (100ul each), reacted under light-blocked conditions for 15 minutes, and then the absorbance was measured using a micro plate reader at 540nm. Ascorbic acid 200μg/ml (0.02%), which is already known to have excellent antioxidant effects, was used as a positive control. Antioxidant efficacy was evaluated using the measured absorbance using the method shown in Equation 1 below.

[계산식 1][Calculation Formula 1]

DPPH free radical scavenging acitivity (%) : (1 - A/B))*100 DPPH free radical scavenging activity (%): (1 - A/B))*100

A: 시료의 반응 후의 흡광도A: Absorbance after reaction of sample

B: 공시료의 반응 후의 흡광도B: Absorbance after reaction of blank sample

DPPH Radical scavenging activity DPPH Radical scavenging activity 식물유래 방부제 조성물 Plant-derived preservative composition Ascorbic
acid
Ascorbic
acid
투여농도
(%)
Administration concentration
(%)
0.1250.125 0.250.25 0.50.5 1.01.0 2.02.0 0.020.02
소거율(%)Eradication rate (%) 12.2912.29 19.3219.32 37.6437.64 51.6651.66 85.985.9 82.18%82.18%

상기 표 6에 나타난 바와 같이, 100% 식물유래 방부제 조성물의 함량이 높아질수록 활성산소종 소거율은 농도 의존적으로 증가하는 추세를 보였다(도 1). 또한, 2% 농도에서는 양성대조군으로 사용한 Ascorbic acid 0.02%보다 강력한 항산화 능력이 확인되었다. As shown in Table 6, as the content of the 100% plant-derived preservative composition increased, the reactive oxygen species scavenging rate tended to increase in a concentration-dependent manner (Figure 1). In addition, at a concentration of 2%, stronger antioxidant ability was confirmed than that of Ascorbic acid 0.02% used as a positive control.

<시험예 3> 항산화 시험법 - ABTS Radical 소거 <Test Example 3> Antioxidant test method - ABTS Radical elimination

ABTS 항산화 활성 평가를 통한 항노화 기능성 평가를 진행하였다. ABTS와 DPPH 시험법의 차이점으로는 DPPH는 친유성 물질의 항산화 활성을 평가하는 것에 유리하고 시험 준비가 간편한 반면, ABTS는 친유성 물질과 친수성 물질 모두 측정이 가능한 장점이 있지만 시험에 있어 시간 소요가 비교적 많이 된다는 것이 단점이다. 시험에 사용한 실시예 1에 해당하는 100% 식물유래 방부제 조성물은 다섯 개의 농도(0.125%, 0.25%, 0.5%, 1.0%, 2.0%)로 용매에 희석하여 사용하였다. 양성대조군으로는 항산화 활성이 뛰어난 것으로 이미 알려진 Ascorbic acid 200μg/ml (0.02%)를 사용하였다. 7.4mM의 2,2-azino-bis과 Potassium persulphate 2.6mM을 1:1(v/v)로 혼합하여 24시간 동안 차광한 상태에서 반응을 유도하여 ABTS Stock solution을 제조하였다. 이후 ABTS stock solution을 Micro plate reader를 이용하여 735nm 흡광조건에서 1.0의 흡광도가 측정되도록 희석하고 이 액을 시험에 사용하는 ABTS Solution으로 하였다. 시료 20ul와 ABTS Solution 180ul를 교반하여 실온에서 10분간 방치하여 항산화 평가를 위한 반응을 유도하였다. 이후 735nm에서 흡광도를 측정하여 수치를 얻은 다음 하기 계산식 2와 같은 방법으로 항산화 활성 정도를 산출하였다. Anti-aging functionality was evaluated through ABTS antioxidant activity evaluation. The difference between the ABTS and DPPH test methods is that DPPH is advantageous for evaluating the antioxidant activity of lipophilic substances and is easy to prepare for the test, while ABTS has the advantage of being able to measure both lipophilic and hydrophilic substances, but the test is time-consuming. The downside is that it is relatively large. The 100% plant-derived preservative composition corresponding to Example 1 used in the test was diluted in a solvent at five concentrations (0.125%, 0.25%, 0.5%, 1.0%, 2.0%). Ascorbic acid, 200 μg/ml (0.02%), which is already known to have excellent antioxidant activity, was used as a positive control. ABTS Stock solution was prepared by mixing 7.4mM of 2,2-azino-bis and 2.6mM of Potassium persulphate at a ratio of 1:1 (v/v) and inducing a reaction under light blocking conditions for 24 hours. Afterwards, the ABTS stock solution was diluted to measure an absorbance of 1.0 at 735 nm absorbance conditions using a micro plate reader, and this solution was used as the ABTS solution used in the test. 20ul of the sample and 180ul of ABTS Solution were stirred and left at room temperature for 10 minutes to induce a reaction for antioxidant evaluation. Afterwards, the absorbance was measured at 735 nm to obtain a value, and then the degree of antioxidant activity was calculated using the method shown in Equation 2 below.

[계산식 2][Calculation Formula 2]

ABTS radical scavenging acitivity (%) : (1 - A/B))*100 ABTS radical scavenging activity (%): (1 - A/B))*100

A: 시료의 반응 후의 흡광도A: Absorbance after reaction of sample

B: 공시료의 반응 후의 흡광도B: Absorbance after reaction of blank sample

ABTS Radical scavenging activity ABTS Radical scavenging activity 식물유래 방부제 조성물 Plant-derived preservative composition Ascorbic
acid
Ascorbic
acid
투여농도
(%)
Administration concentration
(%)
0.1250.125 0.250.25 0.50.5 1.01.0 2.02.0 0.020.02
소거율(%)Eradication rate (%) 23.0923.09 34.3334.33 52.3852.38 62.6762.67 87.4187.41 81.2281.22

표 7에 나타난 바와 같이 ABTS 시험법을 통해 100% 식물유래 방부제 조성물의 항산화 능력을 확인하였을 때 투여 농도에 따라 농도의존적으로 소거율이 증가하며 DPPH Radical scavenging acitvity와 수치의 차이는 있으나 동일한 패턴의 항산화 효과가 확인되었다(도 2). ABTS 시험법으로 항산화 효과를 이차 검증한 것으로 100% 식물유래 방부제 조성물의 강력한 항산화 능력을 확인할 수 있었다.As shown in Table 7, when the antioxidant ability of a 100% plant-derived preservative composition was confirmed through the ABTS test method, the clearance rate increased in a concentration-dependent manner depending on the administered concentration, and although there was a difference in value from DPPH Radical scavenging acitvity, the same pattern of antioxidant activity was observed. The effect was confirmed (Figure 2). Through secondary verification of the antioxidant effect using the ABTS test method, the strong antioxidant ability of the 100% plant-derived preservative composition was confirmed.

<시험예 4> 항산화 시험법 - SOAR<Test Example 4> Antioxidant test method - SOAR

SOD는 생물체 내에서 생성되는 과산화물인 Superoxide를 환원시키는 항산화 효소의 일종으로 생체 조직 및 세포를 손상시키는 산화력이 강한 독성물질인 활성 산소를 제거하는 역할을 한다. 활성산소를 분해하는 항산화 효소의 일종인 SOD 활성 시험법을 통해 100% 식물유래 방부제 조성물의 항산화 효과를 확인하였다. Superoxide anion 소거능(SOAR)은 Nitro blue tetrazolium(NBT) 환원법을 이용하여 측정하였다. 시험에 사용한 시료인 실시예 1에 해당하는 100% 식물유래 방부제 조성물은 다섯 개의 농도(0.125%, 0.25%, 0.5%, 1.0%, 2.0%)로 용매에 희석하여 사용하였다. 양성대조군으로 Ascorbic acid 200μl/ml (0.02%)를 사용하였고, 실험 방법은 다음과 같다. Superoxide anion radical은 xanthine(0.4 mM/L)이 함유된 0.1M PBS(pH 8.0)에 xanthine oxidase(0.049 U/ml)를 반응시켜 생성키시고 NBT 0.25mM/L를 첨가하여 생성된 O2-와 반응하여 발생이 되도록 하였으며, 시료를 동시에 투여하여 시료에 의한 Superoxide anion 소거 효과를 측정하였다. 시료가 Superoxide anion 소거능을 나타낼 경우 O2-에 의한 NBT 환원 정도가 저해를 받게 되어 발색의 강도가 줄어들게 되는 정도를 Fluorescence spectrophotometer를 이용하여 560nm에서 형광도를 측정하였다. Superoxide anion 소거능은 다음의 계산식 3에 따라 나타내었다.SOD is a type of antioxidant enzyme that reduces superoxide, a peroxide produced within living organisms, and serves to remove active oxygen, a highly oxidizing toxic substance that damages biological tissues and cells. The antioxidant effect of the 100% plant-derived preservative composition was confirmed through the SOD activity test method, a type of antioxidant enzyme that decomposes free radicals. Superoxide anion scavenging ability (SOAR) was measured using the Nitro blue tetrazolium (NBT) reduction method. The sample used in the test, a 100% plant-derived preservative composition corresponding to Example 1, was diluted in a solvent at five concentrations (0.125%, 0.25%, 0.5%, 1.0%, 2.0%). Ascorbic acid 200μl/ml (0.02%) was used as a positive control, and the experimental method was as follows. Superoxide anion radical is generated by reacting xanthine oxidase (0.049 U/ml) with 0.1M PBS (pH 8.0) containing xanthine (0.4mM/L), and O 2 - produced by adding 0.25mM/L of NBT. It was allowed to react and generate, and the sample was administered simultaneously to measure the effect of the sample on eliminating superoxide anion. If the sample exhibits superoxide anion scavenging ability, the degree of reduction of NBT by O 2 - is inhibited and the intensity of color development is reduced. The fluorescence was measured at 560 nm using a fluorescence spectrophotometer. Superoxide anion scavenging ability was expressed according to the following calculation formula 3.

[계산식 3] [Calculation Formula 3]

Superoxide anion radical scavenging acitivty (%) = {(B-B’)-(A-A’)}/(B-B’)*100 Superoxide anion radical scavenging activity (%) = {(B-B’)-(A-A’)}/(B-B’)*100

A: 시료 0.1ml + NBT 1.0ml + xanthine oxidase 효소액 1.0ml 혼합액의 흡광도 A: Absorbance of sample 0.1ml + NBT 1.0ml + xanthine oxidase enzyme solution 1.0ml mixture

B: 정제수 0.1ml + NBT 1.0ml + xanthine oxidase 효소액 1.0ml 혼합액의 흡광도 B: Absorbance of the mixture of 0.1ml purified water + 1.0ml NBT + 1.0ml xanthine oxidase enzyme solution

A’: 시료 0.1ml + NBT 1.0ml의 흡광도 A’: Absorbance of 0.1ml sample + 1.0ml NBT

B’: 정제수 0.1ml + NBT 1.0ml의 흡광도 B’: Absorbance of 0.1ml purified water + 1.0ml NBT

SOAR activity SOAR activity 식물유래 방부제 조성물 Plant-derived preservative composition Ascorbic
acid
Ascorbic
acid
투여농도
(%)
Administration concentration
(%)
0.1250.125 0.250.25 0.50.5 1.01.0 2.02.0 0.020.02
활성 (%)activation (%) 7.187.18 18.0118.01 23.6323.63 54.6254.62 82.2882.28 76.2876.28

상기 표 8에 나타난 바와 같이, 100% 식물유래 방부제 조성물을 0.125%, 0.25%, 0.5%, 1.0%, 2.0%를 처리한 결과, 각각의 활성은 7.18%, 18.01%, 23.63%, 54.62%, 82.28%로 나타났다. 100% 식물유래 방부제 조성물을 투여한 최대 농도인 2.0%에서는 항산화 효과가 뛰어난 것으로 알려져 양성대조군으로 사용한 물질인 Ascorbic acid 0.02% 농도를 투여한 것보다 높은 활성을 보였다(도 3). 이를 통해 100% 식물유래 방부제 조성물은 활성산소를 분해하는 효소 중 하나인 Superoxide dismutase의 활성을 증진시키는 메커니즘을 통해 항산화 효과를 나타내는 것을 확인하였다. As shown in Table 8, as a result of treating 0.125%, 0.25%, 0.5%, 1.0%, and 2.0% of the 100% plant-derived preservative composition, the respective activities were 7.18%, 18.01%, 23.63%, 54.62%, It was found to be 82.28%. The maximum concentration of 100% plant-derived preservative composition, 2.0%, was known to have excellent antioxidant effect and showed higher activity than that administered at 0.02% concentration of ascorbic acid, a substance used as a positive control (Figure 3). Through this, it was confirmed that the 100% plant-derived preservative composition exhibits an antioxidant effect through a mechanism that enhances the activity of superoxide dismutase, one of the enzymes that decomposes free radicals.

<시험예 5> 항산화 시험법 - FRAP<Test Example 5> Antioxidant test method - FRAP

Ferric reducing ability of plasma (FRAP) 시험법을 통해 실시예 1에 해당하는 100% 식물유래 방부제 조성물의 항산화능을 확인하였다. FRAP 시험법은 Ferric ion이 Ferrous로의 전환 과정을 통하여 시료의 항산화능을 측정하는 방법이다. 실시예 1 에 해당하는 100% 식물유래 방부제 조성물은 0.125%, 0.25% 0.5% 1.0%, 2.0% 다섯가지 농도로 용매에 희석하여 시료로 사용하였다. 300mM의 acetate buffer(pH 3.6) : 10mM의 TPTZ(2,4,6-tripyridyl-s-triazine) : 20mM FeCl6H2O를 10:1:1의 비율로 혼합하여 FRAP Solution을 준비하였다. FRAP Solution을 다섯 개의 시험관에 3ml씩 첨가한 후 용매에 희석한 다섯가지 농도의 실시예 1 에 해당하는 100% 식물유래 방부제 조성물을 각각 0.1ml씩, 증류수를 0.3ml씩 투여하여 5분간 37℃ Oven에서 반응시킨 후 590 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 양성 대조군으로는 Trolox 10μg/ml (0.001%)를 이용하였고 하기 계산식 4과 같이 계산하여 항산화 효과를 산출하였다.The antioxidant activity of the 100% plant-derived preservative composition corresponding to Example 1 was confirmed through the Ferric reducing ability of plasma (FRAP) test. The FRAP test method is a method of measuring the antioxidant capacity of a sample through the conversion process of ferric ion to ferrous. The 100% plant-derived preservative composition corresponding to Example 1 was diluted in a solvent at five concentrations of 0.125%, 0.25%, 0.5%, 1.0%, and 2.0% and used as a sample. FRAP Solution was prepared by mixing 300mM acetate buffer (pH 3.6): 10mM TPTZ (2,4,6-tripyridyl-s-triazine): 20mM FeCl 6H 2 O in a ratio of 10:1:1. After adding 3 ml of FRAP Solution to five test tubes, 0.1 ml of each of the 100% plant-derived preservative compositions corresponding to Example 1 in five different concentrations diluted in solvents and 0.3 ml of distilled water were added and placed in an oven at 37°C for 5 minutes. After reaction, the absorbance was measured at 590 nm. As a positive control, Trolox 10 μg/ml (0.001%) was used, and the antioxidant effect was calculated using Equation 4 below.

[계산식 4] [Calculation Equation 4]

FRAP radical scavenging activity (%) = (1 - (A/B))*100FRAP radical scavenging activity (%) = (1 - (A/B))*100

A: 시료액의 반응 후 흡광도 A: Absorbance after reaction of sample solution

B: 공시료의 반응 흡광도B: reaction absorbance of blank sample

FRAP scavenging activity FRAP scavenging activity 식물유래 방부제 조성물 Plant-derived preservative composition TroloxTrolox 투여농도
(%)
Administration concentration
(%)
0.1250.125 0.250.25 0.50.5 1.01.0 2.02.0 0.0010.001
저해율(%)Inhibition rate (%) 11.4811.48 26.9926.99 43.7843.78 66.6166.61 83.5783.57 52.3452.34

상기 표 9에서 보여지는 바와 같이, FRAP 시험법을 통해 측정한 100% 식물유래 방부제 조성물의 항산화 능력은 투여농도 1.0%부터 양성대조군으로 사용한 Trolox 0.001%를 투여하였을 때의 항산화율 52.34% 보다 높은 66.61%로 확인되었고, 투여농도 2.0%에서는 83.57%로 매우 높은 항산화능이 확인되었다(도 4). 종합하면, 4가지의 항산화 능력 측정 시험을 통해 100% 식물유래 방부제 조성물은 다양한 메커니즘으로 항산화 효과를 줄 수 있는 소재임을 확인하였다.As shown in Table 9, the antioxidant capacity of the 100% plant-derived preservative composition measured through the FRAP test method is 66.61%, which is higher than the antioxidant rate of 52.34% when 0.001% of Trolox, used as a positive control, was administered from an administration concentration of 1.0%. %, and at an administered concentration of 2.0%, a very high antioxidant capacity of 83.57% was confirmed (Figure 4). In summary, through four tests to measure antioxidant capacity, it was confirmed that the 100% plant-derived preservative composition is a material that can provide antioxidant effects through various mechanisms.

<시험예 6> 미백 활성 시험법 - Tyrosinase 저해 활성 시험법<Test Example 6> Whitening activity test method - Tyrosinase inhibitory activity test method

Tyrosinase 저해 활성 평가를 통한 미백 기능성 평가를 진행하였다. 시험 방법은 식품의약품안전처에서 고시한 피부의 미백에 도움을 주는 기능성 화장품 유효성평가 가이드라인을 참고하여 진행하였다. 식품의약품안전처에서 고시한 방법은 다음과 같다. 시료를 용매(Ethyl alcohol)에 완전히 용해시킨 다음 Tyrosinase 활성 저해 능력을 평가할 다섯 가지의 농도를 준비하였다. 시험관에 0.1M 인산염완충액(PBS, pH 6.5±0.5) 220μl, 시료액 20μl, Mushroom tyrosinase solution (1500~2000 U/ml) 20μl를 순서대로 투여하였다. 이 액에 1.5mM 타이로신액40μl를 넣고 37℃에서 10~15분 동안 반응시킨 다음 490nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료액 대신 시료를 녹인 용매를 사용하여 공시료액으로 하여 보정하였고, 양성대조군으로는 알부틴을 사용하여 시료의 활성 정도를 비교하였다. 하기 계산식 4를 이용하여 Tyrosinase 저해 활성 능력을 산출하였다. Whitening functionality was evaluated through evaluation of tyrosinase inhibitory activity. The test method was conducted by referring to the guidelines for evaluating the effectiveness of functional cosmetics that help whiten the skin notified by the Ministry of Food and Drug Safety. The method announced by the Ministry of Food and Drug Safety is as follows. The sample was completely dissolved in a solvent (ethyl alcohol), and then five concentrations were prepared to evaluate the ability to inhibit Tyrosinase activity. 220 μl of 0.1M phosphate buffer solution (PBS, pH 6.5 ± 0.5), 20 μl of sample solution, and 20 μl of mushroom tyrosinase solution (1500-2000 U/ml) were sequentially administered to the test tube. 40 μl of 1.5mM tyrosine solution was added to this solution, reacted at 37°C for 10 to 15 minutes, and absorbance was measured at 490 nm. Instead of the sample solution, the solvent in which the sample was dissolved was used as a blank sample solution for correction, and the level of activity of the sample was compared using arbutin as a positive control. Tyrosinase inhibitory activity was calculated using equation 4 below.

[계산식 4] [Calculation Equation 4]

Tyrosinase 활성저해율(%) = (100 - (B-B‘)/(A-A’))*100Tyrosinase activity inhibition rate (%) = (100 - (B-B‘)/(A-A’))*100

A: 공시료액의 반응 후의 흡광도A: Absorbance after reaction of blank sample solution

B: 시료액의 반응 후의 흡광도B: Absorbance after reaction of sample solution

A’, B’ : Tyrosinase 대신 완충액으로 대체하여 측정한 흡광도 A’, B’: Absorbance measured by replacing Tyrosinase with buffer solution

Tyrosinase inhibition activity Tyrosinase inhibition activity 식물유래 방부제 조성물 Plant-derived preservative composition ArbutinArbutin 투여농도
(%)
Administration concentration
(%)
0.1250.125 0.250.25 0.50.5 1.01.0 2.02.0 0.040.04
저해율(%)Inhibition rate (%) 26.7826.78 43.1943.19 61.3361.33 72.0672.06 78.4778.47 54.1154.11

상기 표 10에서 나타난 바와 같이, 100% 식물유래 방부제 조성물의 투여 농도가 증가할수록 피부 색소 침착에 관여하는 Tyrosinase를 저해하는 것을 확인할 수 있었다. 100% 식물유래 방부제 조성물의 투여 농도가 0.5% 일 때 부터 미백에 도움을 주는 물질인 Arbutin을 0.04% 투여했을 때 보다 높은 Tyrosinase 저해율을 나타내었으며, 2.0% 투여 농도에서 최대 78%로 측정되었다(도 5). 이를 통해 100% 식물유래 방부제 조성물은 낮은 농도에서부터 뛰어난 Tyrosinase 저해 활성을 띄는 미백 기능성 소재임을 알 수 있었다.As shown in Table 10, it was confirmed that as the administered concentration of the 100% plant-derived preservative composition increased, Tyrosinase, which is involved in skin pigmentation, was inhibited. When the administration concentration of the 100% plant-derived preservative composition was 0.5%, the Tyrosinase inhibition rate was higher than when Arbutin, a substance that helps whitening, was administered at 0.04%, and was measured at a maximum of 78% at the concentration of 2.0% (Figure 5). Through this, it was found that the 100% plant-derived preservative composition is a whitening functional material with excellent Tyrosinase inhibitory activity even at low concentrations.

<시험예 7> 주름개선 활성 시험법 - Elastase 저해 활성 시험법<Test Example 7> Wrinkle improvement activity test method - Elastase inhibition activity test method

Elastase 저해 활성 평가를 통한 주름개선 기능성 평가를 진행하였다. 실험에 사용한 Vegan preser는 0.125%, 0.25%, 0.5%. 1.0%, 2.0%로 농도를 조절하여 각각의 활성을 비교하였다. Elastase 저해 활성은 10mM의 Tris-HCl buffer (pH 8.0)에 N-succinyl-(Ala)3-p-nitroamilide 1.1mM 농도의 기질 100μl를 가한 후, 10mM Tris-HCl buffer (pH 8.0)에 녹인 Elastase from porcine pancreas type IV 0.4U/ml의 효소를 15μl를 첨가하여 37℃에서 20분 동안 반응한 후 Micro plate reader를 이용하여 450nm에서 흡광도를 측정하였다. 양성대조군으로는 Oleanolic acid 10μg/ml를 사용하였고 공시료는 시료를 용해할 때 사용한 용매를 사용하였다. Elastase 억제 활성은 하기 계산식 5를 이용하여 저해율을 산출하였다. Wrinkle improvement functionality was evaluated through evaluation of elastase inhibitory activity. Vegan preser used in the experiment was 0.125%, 0.25%, and 0.5%. The concentrations were adjusted to 1.0% and 2.0% and the respective activities were compared. Elastase inhibitory activity was determined by adding 100 μl of N-succinyl-(Ala)3-p-nitroamilide 1.1mM substrate to 10mM Tris-HCl buffer (pH 8.0) and then dissolving Elastase in 10mM Tris-HCl buffer (pH 8.0). 15 μl of 0.4 U/ml enzyme of porcine pancreas type IV was added and reacted at 37°C for 20 minutes, and then the absorbance was measured at 450 nm using a micro plate reader. Oleanolic acid 10 μg/ml was used as a positive control, and the solvent used to dissolve the sample was used as a blank sample. Elastase inhibitory activity was calculated by calculating the inhibition rate using Equation 5 below.

[계산식 5] [Calculation Equation 5]

Elastase 활성저해율(%) = (100 - (B-B‘)/(A-A’))*100Elastase activity inhibition rate (%) = (100 - (B-B‘)/(A-A’))*100

A: 공시료액의 반응 후의 흡광도A: Absorbance after reaction of blank sample solution

B: 시료액의 반응 후의 흡광도B: Absorbance after reaction of sample solution

A’, B’ : Tyrosinase 대신 완충액으로 대체하여 측정한 흡광도 A’, B’: Absorbance measured by replacing Tyrosinase with buffer solution

Elastase inhibition activity Elastase inhibition activity 식물유래 방부제 조성물 Plant-derived preservative composition Oleanolic acid Oleanolic acid 투여농도
(%)
Administration concentration
(%)
0.1250.125 0.250.25 0.50.5 1.01.0 2.02.0 0.0010.001
저해율(%)Inhibition rate (%) 12.7512.75 26.4726.47 45.1145.11 60.9860.98 83.7283.72 42.5142.51

상기 표 11에서 나타난 바와 같이, 100% 식물유래 방부제 조성물의 투여 농도가 증가할수록 피부 주름을 유발하는 Elastase를 유의미하게 저해하는 것을 확인할 수 있었다. Tyrosinase 저해 활성 결과와 마찬가지로 100% 식물유래 방부제 조성물의 투여 농도가 0.5%일 때 부터 양성대조군으로 사용한 Oleanolic acid 0.001% 투여했을 때 보다 높은 Elastase 저해율을 나타내었으며, 2.0% 투여 농도에서 최대 78%로 측정되었다(도 6). 이를 통해 100% 식물유래 방부제 조성물은 낮은 농도에서부터 뛰어난 Elastase 저해를 통해 피부의 탄력이 무너지는 것을 방지해 주름 발생을 막고 예방하는 방법으로 주름개선에 도움을 줄 수 있을 것으로 보여진다.As shown in Table 11 above, it was confirmed that as the administered concentration of the 100% plant-derived preservative composition increased, Elastase, which causes skin wrinkles, was significantly inhibited. Similar to the Tyrosinase inhibitory activity results, when the administered concentration of the 100% plant-derived preservative composition was 0.5%, the Elastase inhibition rate was higher than when 0.001% Oleanolic acid used as a positive control was administered, and the maximum was measured to be 78% at the 2.0% administered concentration. (Figure 6). Through this, it appears that the 100% plant-derived preservative composition can help improve wrinkles by preventing the development of wrinkles by preventing the skin's elasticity from collapsing through excellent elastase inhibition at low concentrations.

Claims (4)

1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol) 79.0 중량%, 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid) 10.0 중량%, 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol) 5.0 중량% 포도껍질 추출물 1.0 중량%, 라벤더꽃 추출물 1.0 중량%, 레몬 추출물 1.0 중량%, 상백피 추출물 1.0 중량%, 아이비엽 추출물 1.0 중량% 및 감귤 추출물 1.0 중량%를 포함하는 방부제 조성물.
1,3-Butylene glycol 79.0% by weight, Caprylhydroxamic acid 10.0% by weight, Caprylyl glycol 5.0% by weight, grape skin extract 1.0 A preservative composition comprising 1.0% by weight of lavender flower extract, 1.0% by weight of lemon extract, 1.0% by weight of Morus bark extract, 1.0% by weight of ivy leaf extract, and 1.0% by weight of citrus extract.
제1항에 있어서,
상기 부틸렌글라이콜은 사탕수수 유래이고, 상기 카프릴하이드록사믹애씨드는 코코넛 유래이고, 상기 카프릴릴글라이콜은 팜 또는 코코넛 유래인 것을 특징으로 하는 방부제 조성물.
According to paragraph 1,
A preservative composition, characterized in that the butylene glycol is derived from sugar cane, the capryl hydroxamic acid is derived from coconut, and the caprylyl glycol is derived from palm or coconut.
제1항에 있어서,
상기 방부제 조성물은,
포도껍질을 70% 에탄올에 혼합하여 12시간 동안 포도껍질 추출물을 추출하는 단계;
정제수, 에탄올 및 메틸나노플루오로부틸에테르(Methyl nonafluorobutyl ether)-메틸나노플루오로이소부틸에테르(Methyl nonafluoroisobutyl ether) 혼합물을 각각 67.0 중량%, 30.0 중량%, 3.0 중량%를 혼합한 액 99.0 중량% 및 상기 포도껍질 추출물을 1.0 중량%로 혼합하여 용해시킨 후 2 일간 5 ℃의 냉장 조건에서 분리, 정제하는 단계;
라벤더꽃, 레몬, 상백피, 아이비엽 및 감귤을 각각 5.0 중량% 및 1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol) 95.0 중량%로 80 ℃에서 2시간동안 추출물을 추출하는 단계;
상기 추출물을 추출 완료 후 0.45μm filter로 여과하는 단계; 및
1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene glycol) 79.0 중량%, 카프릴하이드록사믹애씨드(Caprylhydroxamic acid) 10.0 중량%, 카프릴릴글라이콜(Caprylyl glycol) 5.0 중량%, 포도껍질 추출물 1.0 중량%, 라벤더꽃 추출물 1.0 중량%, 레몬 추출물 1.0 중량%, 상백피 추출물 1.0 중량%, 아이비엽 추출물 1.0 중량%, 감귤 추출물 1.0 중량% 혼합하는 단계;
를 포함하는 제조방법에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는 방부제 조성물.
According to paragraph 1,
The preservative composition is,
Extracting grape skin extract by mixing grape skin with 70% ethanol for 12 hours;
99.0% by weight of a liquid containing 67.0% by weight, 30.0% by weight, and 3.0% by weight of purified water, ethanol, and methyl nonafluorobutyl ether-methyl nanofluoroisobutyl ether mixture, respectively; Mixing and dissolving the grape skin extract at 1.0% by weight, then separating and purifying the grape skin extract under refrigerated conditions at 5° C. for 2 days;
Extracting extracts from lavender flowers, lemons, coriander bark, ivy leaves, and tangerines with 5.0% by weight and 95.0% by weight of 1,3-butylene glycol, respectively, at 80°C for 2 hours;
Filtering the extract with a 0.45μm filter after completion of extraction; and
1,3-Butylene glycol 79.0% by weight, Caprylhydroxamic acid 10.0% by weight, Caprylyl glycol 5.0% by weight, grape skin extract Mixing 1.0% by weight, 1.0% by weight of lavender flower extract, 1.0% by weight of lemon extract, 1.0% by weight of Morus bark extract, 1.0% by weight of ivy leaf extract, and 1.0% by weight of tangerine extract;
A preservative composition, characterized in that it is manufactured by a manufacturing method comprising.
제1항 내지 제3항 중에 어느 한 항의 방부제 조성물을 포함하는 방부, 항산화, 미백 및 주름개선용 화장료 조성물.A cosmetic composition for preservative, antioxidant, whitening and wrinkle improvement comprising the preservative composition of any one of claims 1 to 3.
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