KR20230163490A

KR20230163490A - 재조합 l-아스파라기나제의 복용 및 투여

Info

Publication number: KR20230163490A
Application number: KR1020237037001A
Authority: KR
Inventors: 미림 최; 통 린; 제프리 실버만
Original assignee: 재즈 파마슈티칼즈 아일랜드 리미티드
Priority date: 2021-03-30
Filing date: 2022-03-30
Publication date: 2023-11-30
Also published as: US20220313798A1; EP4313121A1; CL2023002914A1; WO2022212571A1; WO2022211829A1; JP2024512784A; AU2022246850A9; CA3213527A1; CN117355325A; AU2022246850A1; CO2023014650A2; US20220323556A1

Abstract

본 발명은 사람 대상체(subject)에게 L-아스파라기나제를 복용시키는 단계를 포함하여, 사람 대상체에서 아스파라긴 고갈에 의해 치료가능한 질환을 치료하기 위한 조성물 및 방법을 제공한다.

Description

재조합 L-아스파라기나제의 복용 및 투여

관련 출원의 전후 참고

본 출원은 이의 전문이 본원에 포함된, 2021년 3월 30일자로 출원된 미국 가특허원 제63/168,224호에 대한 우선권을 주장한다.

서열 목록

본 출원은 ASCII 양식으로 전자 제출되고 이의 전문이 본원에 참고로 포함된 서열 목록을 포함한다. 2022년 3월 30일자로 생성된, 상기 ASCII 사본(copy)은 48929-4009_SL.txt로 명명되며 크기는 6,543 바이트(byte)이다.

기술 분야

본 발명은 L-아스파라기나제의 복용 요법(dosing regimen)을 제공한다.

일반적으로 L-아스파라기나제로 알려진 L-아스파라긴 아미노하이드롤라제 활성을 지닌 단백질은 어린이가 하기 질병으로 고통을 받는 환자의 큰 부분을 차지하는, 급성 림프구성 백혈병(Acute Lymphoblastic Leukemia; ALL) 및 림프모구 림프종(lymphoblastic lymphoma; LBL)을 포함하는, 잠재적으로 치명적인 다양한 질환의 치료를 위해 성공적으로 사용되어 왔다.

세균 기원의 L-아스파라기나제는 고 면역원성(high immunogenic)이고 항원성 잠재능(antigenic potential)을 갖는다. 현재 현재 1차 치료(first line treatment)로서 시판 중인 것은 이. 콜라이(E. coli) 유래된 L-아스파라기나제 및 페가스파르가제이다. 이러한 생성물은 환자에서 부작용 과민성 반응(adverse hypersensitivity reaction), 예를 들면, 알레르기 반응(allergic reaction), 무증상 불활성화(silent inactivation), 및 아나필릭시성 쇼크(anaphylactic shock)를 유발할 수 있다. 이러한 생성물에 대해 과민성 반응을 경험한 환자는 흔히 치료를 중단하여야 하며, 이는 보다 불량한 예후 및 생존율을 야기한다. 이러한 환자는 과민성 반응을 경험한 후 Erwinaze®로 전환한다. Erwinaze®은 수년 동안 공급 문제로 어려움을 겪었고, 보고된 바에 따르면 제조하는데 9개월이 걸릴 수 있다(참고: https://www.statnews.com/2016/10/31/cancer-drug-shortage/ 및 https://www.drugs.com/drug-shortages/asparaginase-erwinia-chrysanthemi-482). 심지어 오늘날까지도 이러한 문제는 지속되고 있으며 Erwinase® 부족현상은 일반적이다(참고: https://www.accessdata.fda.gov/scripts/drugshortages/dsp_ActiveIngredientDetails.cfm?AI=Asparaginase%20Erwinia%20Chrysanthemi%20(Erwinaze)&st=c). FDA는 제조업체에게 "원료 물질 또는 세포주에서의 변화는 Erwinase®의 동일성, 강도, 품질, 순도 또는 잠재능에 부정적으로 영향을 미칠 실질적인 가능성을 갖는다는 경고 서한을 발행하였다.

이. 콜라이-유래된 아스파라기나제(E. coli-derived asparaginase)에 대해 면역학적 교차-반응(immunological cross-reactivity)이 없는 L-아스파라기나제(예를 들면, 슈도모나스 플루오레센스(Pseudomonas fluorescens)에서 재조합적으로 생산된 재조합 L-아스파라기나제)에 대한 신규하고 증진된 복용 요법에 대한 필요성이 존재한다. 복용 요법은 1차 치료요법으로서 또는 사람 대상체(subject)가 과민성(hypersensitivity)을 경험하는 경우 천연(native)의 이. 콜라이-유래된 L-아스파라기나제 및/또는 장기-작용하는(long-acting) 이. 콜라이-유래된 L-아스파라기나제에 대한 대체물로서 사용될 수 있다. 재조합 L-아스파라기나제에 대한 신규 복용 요법은 ALL/림프모구 림프종(LBL)을 지닌 환자의 경우 유의적인 의학적 요구(다중-제제 화학치료적 요법(multi-agent chemotherapeutic regimen)의 구성성분으로서)를 해결할 수 있다. L-아스파라기나제에 대한 신규의 복용 요법은 또한 결장직장 암(colorectal cancer; CRC), 광범위 큰 B-세포 림프종(diffuse large B-cell lymphoma; DLBCL) 및 급성 골수성 백혈병(acute myeloid leukemia; AML), 특히 Wnt 음성 CRC(Wnt negative CRC) 및 R/R AML을 지닌 환자에 대한 유의적인 의학적 요구(예를 들면, 제한없이 다중 제제 화학치료적 요법의 구성성분인 복용 요법)를 해결할 수 있다.

발명의 간단한 요약

따라서, 본 개시내용은 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 면역학적 교차-반응이 없는 재조합 L-아스파라기나제를 제공한다.

일 양태에서, 본 개시내용은 이를 필요로 하는 사람 대상체에서 암(cancer)을 치료하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 사람 대상체에게 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제 이외의 L-아스파라기나제를 시간-순서 용량의 세트(set of time-ordered dose)로 투여하는 단계를 포함하고; 여기서 시간-순서 용량의 세트는 제1 용량에 이은 제2 용량을 포함하고, 제1 용량은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 하나이고, 제2 용량은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 다른 하나이고, 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 제1 용량이 약 50 mg/m²인 경우 3일이고, 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 제1 용량이 약 25 mg/m²인 경우 2일이고, 추가의 L-아스파라기나제는 제2 용량이 약 50 mg/m²인 경우 3일 동안 대상체에게 투여되지 않고, 추가의 L-아스파라기나제는 제2 용량이 약 25 mg/m²인 경우, 사람 대상체에게 2일 동안 투여되지 않고, 여기서 약 25 mg/m²에서의 용량은 혈관내로 투여되고, 여기서 약 50 mg/m²에서의 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 약 50 mg/m²이고, 제2 용량은 약 25 mg/m²이고, 시간-순서 용량의 세트는 제2 용량 후 제3 용량을 추가로 포함하고, 제3 용량은 약 25 mg/m²이고, 여기서 사람 대상체에 대한 제2 용량과 제3 용량의 투여 사이의 기간은 2일이다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 금요일에 투여되고 제2 용량은 월요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 금요일에 투여되고, 제2 용량은 월요일에 투여되고, 제3 용량은 수요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 약 25 mg/m²이고, 제2 용량은 약 50 mg/m²이고, 시간-순서 용량의 세트는 제2 용량 후 제3 용량을 추가로 포함하고, 제3 용량은 약 25 mg/m²이고, 사람 대상체에 대한 제2 용량과 제3 용량의 투여 사이의 기간은 3일이다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고 제2 용량은 금요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고, 제2 용량 금요일에 투여되고, 제3 용량은 월요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 약 25 mg/m²이고, 제2 용량은 약 50 mg/m²이고, 시간-순서 용량의 세트는 제1 용량 전에 제3 용량을 추가로 포함하고, 제3 용량은 약 25 mg/m²이고 제3 용량은 사람 대상체에게 제1 용량 2일 전에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고 제2 용량은 금요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고, 제2 용량은 금요일에 투여되고, 제3 용량은 월요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 방법은 제3 용량을 추가로 포함하고, 여기서 제1 용량은 월요일에 투여되고, 제2 용량은 수요일에 투여되고, 제3 용량은 금요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 25 mg/m²이고, 제2 용량은 25 mg/m²이고, 제3 용량은 50 mg/m²이다. 일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게 L-아스파라기나제의 시간-순서 용량 세트의 다수의 예를 투여하는 단계를 추가로 포함하고, 여기서 재조합 L-아스파라기나제의 시간-순서 용량 세트의 각각의 각자의 예는 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예(instance)에서 시간-순서 용량의 세트의 이전의 예의 완료 후 대상체에게 투여된다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 100개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 15개이다. 일부 구현예에서, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 천연이다. 일부 구현예에서, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 장기-작용(long-acting)한다. 일부 구현예에서, 장기-작용 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페그아스파라기나제(pegasparaginase)이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 테트라머(tetramer)이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머(monomer)는 서열 번호: 1을 포함한다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 95 퍼센트의 서열 동일성(sequence identity)을 갖는다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내었다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 성인이다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 소아이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 6% 미만의 응집(aggregation)을 입증한다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 1% 미만의 응집을 입증한다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 비-동결건조(non-lyophilizing)된다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(nadir serum asparaginase activity; NSAA) 검정은 L-아스파라기나제로 치료한 후 투여 후에 0.1 IU/mL 이상이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여(co-administeration)된다.

다른 양태에서, 본 개시내용은 사람 대상체의 암 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 하고, 상기 방법은: 사람 대상체에게, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 용량에 대한 대체물(substitute)로서, L-아스파라기나제의 일련의 6회의 용량을 혈관내 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 6회의 용량 중 4회는 약 25 mg/m²이고, 6회의 용량 중 2회는 약 50 mg/m²이고, 약 50 mg/m²인 2회의 용량의 투여 사이의 시간은 7일이고, 약 25 mg/m2인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 2일이고,

약 50 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량 사이의 투여 사이의 시간은 3일이고, 여기서 약 25 mg/m²에서의 용량은 혈관내 투여되고, 여기서 약 50 mg/m²에서의 용량은 근육내 투여되고, 여기서 L-아스파라기나제는 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 아니다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 다수의 용량 내 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 개개 용량은 L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량의 예로 별도로 대체된다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페그아스파라기나제이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함한다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 95 퍼센트의 서열 동일성을 갖는다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타낸다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제 치료요법을 종료한다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 성인이다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 소아이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 6% 미만의 응집을 입증한다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 1% 미만의 응집을 입증한다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 비-동결건조된다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA)은 L-아스파라기나제를 사용하여 치료한 후 투여 후에 0.1 IU/mL 이상이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여된다. 일부 구현예에서, 암은 급성 림프구성 백혈병(ALL) 또는 림프모구 림프종(LBL)이다. 일부 구현예에서, 암은 결장직장 암(colorectal cancer; CRC)이다. 일부 구현예에서, CRC는 Wnt-음성 CRC(Wnt-negative CRC) 또는 Wnt-돌연변이 CRC(Wnt-mutant CRC)이다. 일부 구현예에서, 암은 급성 골수성 백혈병(acute myeloid leukemia; AML)이다. 일부 구현예에서, AML은 R/R AML이다. 일부 구현예에서, 암은 DLBCL이다.

다른 양태에서, 본 개시내용은 사람 대상체의 암 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 하고, 상기 방법은 사람 대상체에게, 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 개개 용량에 대해 재조합 L-아스파라기나제의 일련의 7회 용량을 혈관내 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 일련의 용량 중 각각의 용량은 재조합 L-아스파라기나제 약 25 mg/m²의 양이고, 일련의 용량의 각각의 용량의 투여 사이의 시간은 2일이다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 다수의 용량 내 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 개개 용량은 재조합 L-아스파라기나제의 일련의 7회 용량의 예로 별도로 대체된다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페그아스파라기나제이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함한다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 95 퍼센트의 서열 동일성을 갖는다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내었다. 일부 구현예에서, 사람 대상체은 성인 환자이다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 소아 환자이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 6% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 3% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 1% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 비-동결건조된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정은 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 투여 후 0.1 IU/mL 이상이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여된다.

다른 양태에서, 본 개시내용은 사람 대상체의 암 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 하고, 상기 방법은: 사람 대상체에게, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 용량에 대한 대체물로서, L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량을 혈관내 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 6회의 용량 중 4회는 약 25 mg/m²이고, 6회의 용량 중 2회는 약 50 mg/m²이고, 약 50 mg/m²인 2회의 용량의 투여 사이의 시간은 7일이고, 약 25 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 2일이고, 약 50 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 3일이고, 여기서 L-아스파라기나제는 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 아니다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 다수의 용량 내 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 개개 용량은 L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량 중의 예로 별도로 대체된다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페그아스파라기나제이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함한다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 95 퍼센트의 서열 동일성을 갖는다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내었다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제 치료요법을 종료하였다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 성인이다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 소아이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 6% 미만의 응집을 입증한다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 1% 미만의 응집을 입증한다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제 비-동결건조된다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정은 L-아스파라기나제를 사용하여 치료한 후 투여 후에 0.1 IU/mL 이상이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서, 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여된다.

다른 양태에서, 본 발명은 이를 필요로 하는 사람 대상체에서 암을 치료하는 방법을 제공하고, 상기 방법은: 사람 대상체에게 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제 이외의 L-아스파라기나제를, 시간-순서 용량의 세트로서 혈관내 투여하는 단계를 포함하고; 여기서 시간-순서 용량의 세트는 제1 용량에 이어 제2 용량을 포함하고, 제1 용량은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 하나이고, 제2 용량은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 다른 것이고, 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 제1 용량이 약 50 mg/m²인 경우 3일이고 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 제1 용량이 약 25 mg/m²인 경우 2일이고, 추가의 L-아스파라기나제는 제2 용량이 약 50 mg/m²인 경우 대상체에게 2일 동안 투여되지 않고 추가의 L-아스파라기나제는 제2 용량이 약 25 mg/m²인 경우 대상체에게 2일 동안 투여되지 않는다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 약 50 mg/m²이고, 제2 용량은 약 25 mg/m²이고, 시간-순서 용량의 세트는 제2 용량 후 제3 용량을 추가로 포함하고, 제3 용량은 약 25 mg/m²이고, 여기서 사람 대상체에 대한 제2 용량과 제3 용량의 투여 사이의 기간은 2일이다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 금요일에 투여되고 제2 용량은 월요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 금요일에 투여되고, 제2 용량은 월요일에 투여되고, 제3 용량은 수요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 약 25 mg/m²이고, 제2 용량은 약 50 mg/m²이고, 시간-순서 용량의 세트는 제2 용량 후 제3 용량을 추가로 포함하고, 제3 용량은 약 25 mg/m²이고, 사람 대상체에 대한 제2 용량과 제3 용량의 투여 사이의 기간은 3일이다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고 제2 용량 금요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고, 제2 용량 금요일에 투여되고, 제3 용량은 월요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 약 25 mg/m²이고, 제2 용량은 약 50 mg/m²이고, the 시간-순서 용량의 세트는 제1 용량 전에 제3 용량을 추가로 포함하고, 제3 용량은 약 25 mg/m²이고, 제3 용량은 사람 대상체에게 제1 용량 2일 전에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고 제2 용량 금요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고, 제2 용량은 금요일에 투여되고, 제3 용량은 월요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 방법은 제3 용량을 추가로 포함하고, 여기서 제1 용량은 월요일에 투여되고, 제2 용량은 수요일에 투여되고, 제3 용량은 금요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 25 mg/m²이고, 제2 용량은 25 mg/m²이고, 제3 용량은 50 mg/m²이다. 일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게 L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예를 혈관내 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 재조합 L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 각각의 개개 예는 대상체에게 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예 중 시간-순서 용량의 세트의 이전 예의 완료시 투여된다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 100개 사이이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 15개 사이이다. 일부 구현예에서, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 천연이다. 일부 구현예에서, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 장기-작용한다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페그아스파라기나제이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함한다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 95 퍼센트의 서열 동일성을 갖는다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내었다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 성인이다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 소아이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 6% 미만의 응집을 입증한다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 1% 미만의 응집을 입증한다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 비-동결건조된다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정은 L-아스파라기나제를 사용하여 치료한 후 투여 후에 0.1 IU/mL 이상이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여된다. 일부 구현예에서, 암은 급성 림프구성 백혈병(ALL) 또는 림프모구 림프종(LBL)이다. 일부 구현예에서, 암은 결장직장 암(CRC)이다. 일부 구현예에서, CRC는 Wnt-음성 CRC 또는 Wnt-돌연변이 CRC이다. 일부 구현예에서, 암은 급성 골수성 백혈병(AML)이다. 일부 구현예에서, AML은 R/R AML이다. 일부 구현예에서, 암은 DLBCL이다.

본 발명은 첨부되는 도면과 함께 판독시 하기 상세한 설명으로부터 가장 잘 이해될 것이다. 도면에는 하기 도들이 포함된다:
도 1은 실시예 2에서 안전성 연구의 결과를 나타낸다.
도 2는 실시예 5에 요약된 SEC-HPLC 방법에 의해 평가된 재조합 L-아스파라기나제(R-CRIS), 이. 콜라이-유래된 재조합 크리산타스파제(E.coli crisantaspase; E.coli RC), 및 Erwinase®의 순도를 나타낸다.
도 3은 실시예 5에 요약된 SEC-MALLS 방법에 의해 평가된 재조합 L-아스파라기나제(R-CRIS), 이. 콜라이-유래된 재조합 크리산타스파제(E.coli RC), 및 Erwinase®의 순도를 나타낸다.
도 4는 실시예 5에 요약된 침전 속도 AUC 데이타의 분석으로부터 수득된 결과를 나타낸다.
도 5는 실시예 6에 요약된 방출 방법에 따라 SE-UHPLC에 의해 평가된 재조합 L-아스파라기나제의 크기 프로파일(size profile)을 나타낸다.
도 6은 실시예 6에 요약된 SEC-MALLS를 사용하여 측정된 재조합 L-아스파라기나제 속에 존재하는 고 분자량 종(species)을 나타낸다.
도 7은 실시예 6에 요약된 바와 같은 재조합 L-아스파라기나제(상업적인 규모)의 표준화된 침강 계수 분포(normalized sedimentation coefficient distribution)를 나타낸다.
도 8은 실시예 6에 요약된 바와 같은 Erwinase®(상업적인 규모)의 표준화된 침강 계수 분포를 나타낸다.
도 9는 실시예 7에 따른 용량(dose) 후 48 및 72시간 째에 SAA 수준을 지닌 건강한 지원자의 비율을 나타낸다. 약어: ERW, 아스파라기나제 에르위니아 크리산테미(Erwinia chrysanthemi); IM, 근육내; IV, 정맥내; SAA, 혈청 아스파라기나제 활성.
도 10은 실시예 7에 기술된 연구에서 SAA를 기준으로 한 PK 요약을 나타낸다. 약어: AUC_0-inf, 0시간째부터 무한대까지 외삽된 곡선하 면적(area under the curve); AUC_0-t, 0시간째부터 마지막 정량화가능한 SAA의 사간까지의 곡선하 면역; C_48h, 48시간 째에 SAA; C_72h, 72시간 째에 SAA; CL, 청소(clearance); C_max, 최대 SAA; CV, 변동 계수(coefficient of variation); ERW, 아스파라기나제 에르위니아 크리산테미(에스위니아 크리산테미); IM, 근육내; IV, 정맥내; PK, 약동학(pharmacokinetics); SAA, 혈청 아스파라기나제 활성; t_max, C_max가 관찰된 시간; t_1/2, 반감기(half-life); V, 분포 용적. ^aIM 치료의 경우, CL = CL/F(겉보기 청소) 및 V = Vz/F(겉보기 분포 용적). IV 치료의 경우, CL = CL 및 V = Vss(정상 상태(steady state)에서 분포 용적의 평가). ^bn = t_1/2, AUC_0-inf, CL, 및 V의 경우 5. N는 노출된 건강한 지원자의 수이다. 평균(CV%)은 중앙값(median) 및 범위로 보고된, t_max 값을 제외한 모든 매개변수를 나타낸다.
도 11은 실시예 7에 기술된 바와 같은 치료 후 TEAE를 나타낸다. 약어: ERW, 아스파라기나제 에르위니아 크리산테미; IM, 근육내; IV, 정맥내; TEAE, 치료-응급 부작용(emergent adverse event). ^aMedDRA 사전, 버젼 22.0을 사용한 바람직한 용어; 치료-관련된 TEAE는 빈도의 내림 차수(descending order of frequency)로 나타낸다.
도 12는 개개의 SAA-시간 프로파일을 나타낸다. 약어: ERW, 아스파라기나제에스위니아 크리산테미; IM, 근육내; IV, 정맥내; SAA, 혈청 아스파라기나제 활성. 추가의 설명은 실시예 7에서 찾을 수 있다.
도 13은 실시예 7에 추가로 기술된 바와 같은 평균(95% CI) SAA-시간 프로파일을 나타낸다. 약어: CI, 신뢰 구간(confidence interval); IM, 근육내; IV, 정맥내; SAA, 혈청 아스파라기나제 활성.
도 14는 A) JZP-458 IM에 대한 평균 SAA-시간 프로파일을 나타낸다. JZP-458은 아, 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 면역원성 교차-반응성을 지니지 않는 효소를 생성하는 신규한 슈도모나트 플루레센스 발현 플랫폼을 사용하여 생산된 재조합 에르위니아 아스파라기나제이다. 약어: ERW, 아스파라기나제 에스위니아 크리산테미; IM, 근육내; SAC, 혈청 아스파라기나제 농도. 주목: 정량화의 하한치(Lower limit of quantitation; LLOQ) = 1.00 ng/mL. LLOQ 이하의 값은 0으로 설정하였다, B) JZP-458 IV에 대한 평균 SAA-시간 프로파일을 나타낸다. ERW, 아스파라기나제 에스위니아 크리산테미; IV, 정맥내; SAC, 혈청 아스파라기나제 농도. 주목: 정량화의 하한치 (LLOQ) = 1.00 ng/mL. LLOQ 미만의 값은 0으로 설정하였다, B) JZP-458 IV에 대한 평균 SAA-시간 프로파일, ERW, 아스파라기나제 에르위니아 크리산테미; IV, 정맥내; SAC, 혈청 아스파라기나제 농도. 주목: 정량화용 하향치(LLOQ) = 1.00 ng/mL. LLOQ 미만의 값은 0으로 설정하였다, C) 개개의 아스파라기나제 농도-시간 프로파일. ERW, 아스파라기나제 에스위니아 크리산테미; IM, 근육내; IV, 정맥내; SAC, 혈청 아스파라기나제 농도, 및 D) JZP-458 IM 및 IV 투여의 경우 SAC와 SAA 사이의 관련성. 약어: IM, 근육내; IV, 정맥내; SAA, 혈청 아스파라기나제 활성; SAC, 혈청 아스파라기나제 농도. 주목: 회귀 선 방정식(Regression line equation): SAC = 1407.9 × SAA; 피어슨 상관 계수(Pearson correlation coefficient) = 0.9779. 추가의 설명은 실시예 7에서 찾을 수 있다.
도 15는 실시예 7에서의 연구에 추가로 기술된 평균 SAA-시간 프로파일 및 상응하는 평균 혈장 L-아스파라긴 수준을 나타낸다. 약어: IM, 근육내; IV, 정맥내; SAA, 혈청 아스파라기나제 활성. 주목: 정량화의 하한치(LLOQ): 아스파라기나제 활성 = 0.0250 IU/mL; L-아스파라긴 = 0.0250 ug/mL. LLOQ 이하의 값은 0으로 설정하였다.
도 16은 실시예 7에서의 연구에 대한 기본선 인구통계학(baseline demographics)을 나타낸다. 약어: ERW, 아스파라기나제 에스위니아 크리산테미; IM, 근육내; IV, 정맥내; SD, 표준 편차. ^a민족성은 자체-보고되었고; 건강한 지원자는 하나 이상의 민족성으로 확인될 수 있다.
도 17은 실시예 7에서의 연구에 추가로 기술된 바와 같은 JZP-458에 대한 용량 비례성 평가(Dose Proportionality Assessment)를 나타낸다. 약어: AUC_0-inf, 0시간째부터 무한까지 외삽된 곡선하 영역; AUC_0-t, 0시간째부터 마지막 정량화가능한 SAA의 시간 까지의 곡선 하 영역; CI, 신뢰 구간; C_max, 최대 SAA; IM, 근육내; IV, 정맥내 PK, 약동학; SAA, 혈청 아스파라기나제 활성. 결과는 강력한 모델을 기바으로 한다: ln(매개변수) = 인터셉트(intercept) + 기울기(slope) × ln(용량).
도 18은 실시예 7에 기술된 바와 같은 SAC를 기반으로 한 PK 요약을 나타낸다. 약어: AUC_0-inf, 0시간째부터 무한까지 외삽된 곡선하 영역; AUC_0-t, 0시간째부터 마지막 정량화가능한 SAA까지 곡선하 영역; CL, 제거; C_max, 최대 SAA; CV, 변동 계수; ERW, 아스파라기나제 에스위니아 크리산테미; IM, 근육내; IV, 정맥내; PK, 약동학; t_1/2, 반감기; SAA, 혈청 아스파라기나제 활성; SAC, 혈청 아스파라기나제 농도; t_max, C_max가 관찰되는 시간; V, 분포 용적.^aIM 치료의 경우, CL = CL/F(겉보기 청소) 및 V = Vz/F(겉보기 분포 용적). IV 치료의 경우, CL = CL 및 V = Vss(정상 상태에서 분포의 용적의 평가). ^bAUC_0-inf, CL, 및 V의 경우 n = 3; t_1/2의 경우 n = 5. N은 노출된 건강한 지원자의 수이다. 평균(CV%)은 중앙값 및 범위로 보고된, t_max 값을 제외한 모든 매개변수를 나타낸다.
도 19는 SAC를 기반으로 한 JZP-458에 대한 용량 비례 평가(Dose Proportionality Assessment)를 나타낸다. 약어: AUC_0-inf, 0시간째부터 무한까지 외삽된 곡선 하 영역; AUC_0-t, 0시간째부터 마지막 정량화가능한 SAA의 시간까지 곡선 하 영역; CI, 신뢰 구간; C_max, 최대 SAA; IM, 근육내; IV, 정맥내; PK, 약동학; SAA, 혈청 아스파라기나제 활성; SAC, 혈청 아스파라기나제 농도. 결과는 강력한 모델을 기반으로 한다: ln(매개변수) = 인터셉트 + 기울기 × ln(용량).
도 20은 실시예 7에서의 연구에 대한 연구 설계를 나타낸다. 약어: ERW, 아스파라기나제 에스위니아 크리산테미; IM, 근육내; IV, 정맥내; PK, 약동학.
도 21은 모든 치료에 대한 평균 SAA-시간 프로파일 및 실시예 7에서의 연구에서 추가로 기술된 바와 같은 상응하는 평균 혈장 L-글루타민 수준을 나타낸다. 약어: IM, 근육내; IV, 정맥내; SAA, 혈청 아스파라기나제 활성. 주목: 정량화의 하한치(LLOQ): 아스파라기나제 활성 = 0.0250 IU/mL; L-글루타민 = 0.250 ug/mL. LLOQ 이하의 값은 0으로 설정하였다. 약어: IM, 근육내; IV, 정맥내; SAA, 혈청 아스파라기나제 활성. 주목: 정량화의 하한치(LLOQ): 아스파라기나제 활성 = 0.0250 IU/mL; L-글루타민 = 0.250 ug/mL. LLOQ 이하의 값은 0으로 설정하였다.
도 22는 부분 A IM JZP-458 용량 코호트(Cohort)(실시예 8)를 나타낸다. SDRC는 코호트 1에 대한 안전성 및 내성 문제(tolerability issues)를 평가하여 상이한 용량 수준에서 추가의 참여자가 필요한지의 여부 또는 확장 코호트(코호트 2)로 진행하기 위한 적절한 IM JZP-458 용량이 측정되었는지의 여부를 평가할 것이다. SDRC는 각각의 서브코호트(subcohort)에서 6 내지 13명의 평가가능한 참여자가 과정 1을 완료한 경우 NSAA 및 안전성/내성 데이타를 고찰할 것이다; 등록(enrollment)은 SDRC 고찰을 위한 명시된 시점에서 중지하지 않을 것이다. 약어: IM = 근육내; IU = 국제 단위; NSAA = 최저의 혈청 아스파라기나제 활성; SDRC = 연구 데이타 고찰 위원회(Study Data Review Committee).
도 23은 부분 B JZP-458 용량 코호트(실시예 8)를 나타낸다. SDRC는 코호트 1에서 참여자에 대한 안전성 및 내성 문제를 평가하여 상이한 용량 수준에서 추가의 참가자가 필요한지의 여부를 측정할 것이다. SDRC는 각각의 서브코호트에서 6명의 평가가능한 참여자가 과정 1을 완료한 경우 NSAA 및 안전성/내성 데이타를 고찰할 것이다. 약어: IU = 국제 단위; IV = 정맥내; NSAA = 최저의 혈청 아스파라기나제 활성; SDRC = 연구 데이타 고찰 위원회.
도 24는 과정 1에서 JZP-458를 사용한 SAA 결과(IU/mL)의 요약을 나타낸다(평가가능한 참여자)(실시예 8).
도 25는 과정 1에서 마지막 48 및 72시간 째에 ≥ 0.1 및 ≥ 0.4 IU/mL의 NSAA 수준을 지닌 환자의 비율을 나타낸다(평가 참여자)(실시예 8).
도 26은 95% 예측 간격을 사용하여 모의시험된(simulated) JZP-458 중앙 SAA 프로파일을 나타낸다 - 세미-로그 규모(Semi-log scale)(FMW 복용 스케쥴)(실시예 8 IM 모의시험된 모델). 약어: IM = 근육내; FMW = 금요일, 월요일, 수요일; SAA = 혈청 아스파라기나제 활성. 중심 선은 중앙값이고; 밴드(95% 예측 구간(prediction interval))은 2.5번째(하부) 및 97.5번째(상부) 퍼센트를 나타낸다. x-축은 추가 오프셋(extra offset)와 함께 336시간까지 표시되고, 플롯팅(plotting)된 데이타는 과정 출발 후 504시간까지 모의시험된 관찰을 포함한다.
도 27은 표적 SAA 최저 수준(trough level)을 달성하기 위해 예측된 JZP-458로 치료된 환자의 비율을 나타낸다(FMW 복용 스케쥴)(실시예 8 IM 모의시험된 모델).
도 28은 치료-응급 부작용(treatment-emergent adverse event)의 개관을 나타낸다(안전성 분석 세트)(실시예 8).
도 29는 등급 3 또는 4의 치료-응급 부작용을 나타낸다(안전성 분석 세트 코호트 1a)(실시예 8).
도 30은 등급 3 또는 4의 치료-응급 부작용을 나타낸다(안전성 분석 세트 코호트 1a)(실시예 8). 퍼센트는 안전성 분석 세트에서 참여자의 수를 분모로 하여 계산하였다. 부작용은 MedDRA 22.1을 사용하여 SOC 및 PT에 대해 코딩(coding)하였다. AE의 중증도(severity)는 CTCAE 5.0을 사용하여 기록하였다. TEAE는 연구의 말기 전체에서 연구 치료의 제1 용량에서 또는 후에 발생 일(onset date)을 사용한 임의의 사건(event) 또는 연구의 말기 전체에서 연구의 제1 용량 날짜 이후 중증도가 악화되는 임의의 진행 중인 사건으로 정의되었다. 약어: AE = 부작용; CTCAE = 부작용에 대한 일반적인 전문용어 기준; IM = 근육내 주사; PT = 바람직한 용어; SOC = 시스템 기관 부류(system organ class); TEAE = 치료-응급 부작용.
도 31은 연구 JZP458-201 - 실시예 9에 기술된 바와 같은 치료-응급 부작용의 요약(데이타 마감 일(Data cut-off date): 2021년 10월 14일)을 나타낸다. 약어: CTCAE = 부작용에 대한 일반적인 전문용어 기준; IM = 근육내; MedDRA = 규제 활동을 위한 의학 사전(Medical Dictionary for Regulatory Activities); MWF = 월요일, 수요일, 금요일; PT = 바람직한 기간; SOC = 시스템 기관 클래스(System Organ Class); TEAE = 치료-응급 부작용. (a) 용량은 월요일, 수요일, 금요일 스케쥴에 투여되었다. (b) 초기 분석을 위한 데이타 마감 일(2020년 10월 14일)에 사망한 참여자는 없었다. 3명의 태아의 경우는 2020년 10월 15일 및 2021년 1월 11일에 보고되었다. 퍼센트는 안전성 분석 세트에서 참여자의 수를 분모로 하여 계산하였다. 부작용은 MedDRA 22.1을 사용하여 SOC 및 PT에 대해 코딩(coding)하였다. AE의 중증도는 CTCAE 5.0을 사용하여 기록하였다. TEAE는 연구 치료의 제1 용량의 설정일 또는 이후에 연구 말기 전체에서 임의의 사건 또는 연구 치료의 제1 용량의 설정일 후 연구 말기 전체에서 중증도에 있어서 악화된 임의의 진행 중인 사건으로 정의하였다.
도 32는 연구 JZP458-201 - 실시예 10 및 11에 논의된 바와 같은 코호트 1c(안전성 분석 세트; 데이타 마감 일: 2021년 1월 11일)에서 응급 부작용의 요약을 나타낸다. 약어: CTCAE = 부작용에 대한 일반적인 전문용어 기준; IM = 근육내; MedDRA = 규제 활동을 위한 의학 사전; PT = 바람직한 기간; SOC = 시스템 기관 클래스. TEAE = 치료-부작용. 퍼센트는 안전성 분석 세트에서 참여자의 수를 분모로 하여 계산하였다. 부작용은 MedDRA 22.1을 사용하여 SOC 및 PT에 대해 코딩하였다. AE의 중증도는 CTCAE 5.0을 사용하여 기록하였다. TEAE는 연구 치료의 제1 용량의 설정일 또는 후에 연구 말기 전체에서 임의의 사건 또는 연구 치료의 제1 욜양의 설정일 후 연구 말기 전체에서 중증도에 있어서 악화된 진행 중인 사건으로 정의하였다.
도 33a, 도 33b, 및 도 33c는 연구 JZP458-201의 업데이트(update) - 실시예 12에 기술된 바와 같은 인구통계학적 및 기본 특성(2021년 7월 19일로서 설정된 안전성 분석)을 나타낸다. 약어: ALL = 급성 림프구성 백혈병; B ALL = B-세포 급성 림프구성 백혈병; B LBL = B 세포 림프구성 백혈병; BSA = 체 표면적; IM = 근육내; LBL = 림프모구 림프종; T ALL = T 세포 급성 림프구성 백혈병; T 세포 림프모구 림프종; T LBL = T 세포 림프모구 림프종. 퍼센트는 안전성 분석 세트에서 참여자의 수를 분모로 사용하여 계산하였다. 진단 이후의 시간(개월)은 '[(연구일 1 - 진단일 + 1)/365.25]*12'의 정수를 취하여 계산한다. 기본 값(baseline value)은 JZP-458의 제1 용량의 시작일 전 또는 시작일 및/또는 시간(연구 1일째)에 수득된 최신의 누락(missing)되지 않은 값으로 정의된다. 연구 1일째는 JAP-458의 제1 용량일로 정의된다.
도 34는 연구 JZP458-201에서의 업데이트 - 실시예 12에 기술된 바와 같은 과정 1(2020년 7월 19일자의 효능 분석 세트)에서 FZP-458(근육내 및 정맥내)를 사용한 혈청 아스파라기나제 활성 결과(IU/mL)의 요약을 나타낸다. 약어: CI = 신뢰 구간; IM = 근육내; IV = 정맥내; MW= 월요일, 수요일; MWF = 월요일, 수요일, 금요일; Q1 = 첫번째 사분위수; Q3 = 세번째 사분위수; NSAA = 최저의 혈청 아스파라기나제 활성; SAA = 혈청 아스파라기나제 활성. 효능 분석 세트는 과정 1에서 프로토콜이 정의된 샘플 수집 윈도우(protocol-defined sample collection window)(± 2시간) 내에서 수집된 적어도 하나의 48-시간 또는 72-시간 NSAA 평가를 사용한 JZP-458의 적어도 1개의 용량을 제공받은 참여자를 포함한다.
도 35은 연구 JZP458-201의 업데이트 - 실시예 12에 기술된 바와 같은 과정 1(2021년 7월 19일자의 약동학적 분석 세트)에서 근육내 및 정맥내 JZP-458에 대한 혈청 아스파라기나제 농도와 혈청 아스파라기나제 활성 사이의 상관관계를 나타낸다. 약어: IM = 근육내; IV = 정맥내; PK = 약동학적; SAA = 혈청 아스파라기나제 활성; SAC = 혈청 아스파라기나제 농도.
도 36a 및 도 36b는 연구 JZP458-201의 업데이트 - 실시예 12에 기술된 바와 같은 선형 및 세미 대수 규모(Simi logarithmic Scale)(2021년 7월 19일자의 약력학적 분석 세트)의 과정 1에서 근육내 및 정맥내 JZP-458을 사용한 상응하는 평균 혈장 L-아스파라긴 수준에 대한 평균 혈청 아스파라기나제 활성 대 시간 프로파일을 나타낸다.
도 37a, 도 37b, 및 도 37c는 연구 JZP458-201의 업데이트 - 선형 및 세미 대수 규모(2021년 7월 19일자의 약력학적 분석 세트)의 과정 1에서 근육내 및 정맥내 JZP-458을 사용한 상응하는 평균 혈장 L-글루타민 수준에 대한 평균 혈청 아스파라기나제 활성 대 시간 프로파일을 나타낸다. 약어: FMW = 금요일, 월요일, 수요일; IM = 근육내; IV = 정맥내; MWF = 월요일, 수요일, 금요일; PD = 약력학적; SAA = 혈청 아스파라기나제 활성; WFM = 수요일, 금요일, 월요일. 정량화의 하한치 (LLOQ): SAA 0.0350 IU/mL, L-글루타민 = 0.250 μg/mL. LLOQ 이하의 값은 0으로 설정하였다. 세미-대수 플롯의 경우, 세미-대수 규모의 SAA 만이다. 평균이 0인 경우, 값은 규모가 0에서 정의되지 않으므로, 세미-대수 플롯에서의 누락으로 여겨질 것이다.
도 38은 실시예 12에 기술된 바와 같은 JZP-458의 용량 비례의 원칙(Dose Proportionality)을 나타낸다. 약어: AUC = 농도-시간 곡선 영역; Cmax = 최대 SAA; Cmax, 6 = 과정 1 동안 6번째 복용 후 최대 SAA; DP = 약물 생성물.
도 39는 실시예 12에서 JZP-458의 축적을 나타낸다. 약어: C_max = 최대 SAA; C_max,6 = 과정 1 동안 6번째 복용 후 최대 SAA.
도 40은 실시예 12에 요약된 티어드 면역원성 시험 전략(Tiered Immunogenicity Testing Strategy)을 나타낸다. 약어: ADA = 항약물 항체; NR = 비반응성.
도 41 연구 JZP458-201 - 실시예 12에 기술된 바와 같은 항약물 항체 수집(데이타 마감 일: 2021년 7월 19일)을 사용한 과정의 최대 수. 약어: ADA = anti-drug antibody; IM = 근육내; IV = 정맥내; MWF = 월요일, 수요일, 금요일.
도 42a 및 도 42b는 연구 JZP458-201 - 실시예 12에 기술된 바와 같은 2021년 7월 19일자의 과정 1에서 적어도 1의 SAA 수준 < 0.1 IU/mL를 갖는 ADC+ 참여자에서 SAA 수준의 요약을 나타낸다. 약어: ADA = 항약물 항체; BLQ = 정량화 한계 이하(below the limit of quantification); FMW = 금요일, 월요일, 수요일; h = 시간; MWF = 월요일, 수요일, 금요일; N/A = 적용 불가능; SAA = 혈청 아스파라기나제 활성.
도 43은 실시예 12에 기술된 바와 같은 면역원성 결과의 요약을 나타낸다. 약어: ADA = 항-약물 항체; IM = 근육내; IV = 정맥내; NAb = 중화 항체.

발명의 상세한 설명

세균 기원의 L-아스파라기나제는 높은 면역원성 및 항원성 잠재능을 갖는다. 이러한 생성물은 환자에서 알레르기 반응(allergic reaction), 사일런트 불활성화(silent inactivation), 및 아나필락시 쇼크(anaphylactic shock)를 포함하는 과민성 부작용 반응(adverse hypersensitivity reaction)을 일으킨다. L-아스파라기나제는 L-아스파라긴 아미노하이드롤라제 활성을 지닌 효소이다. L-아스파라기나제 효소 활성은 아스파라긴의 아세트산 및 암모니아로의 탈아미드화뿐만 아니라, 글루타민의 글루탐산 및 암모니아로의 탈아미드화를 포함할 수 있다. 이, 콜라이 및 에스위티아 크리산테미로부터의 L-아스파라기나제는 아스파라긴 고갈로 치료된 다양한 질환, 예를 들면, ALL 및 LBL을 치료하는데 일반적으로 사용된다. 건강한 세포는 아스파라긴을 생산할 수 있지만, 일부 질환이 있는 세포는 아스파라긴 신테타제를 결여하므로 아스파라긴을 생산할 수 없다. L-아스파라기나제가 질환이 있는 환자에게 투여되는 경우, L-아스파라기나제는 가용성 아스파라긴의 수준을 감소시키고, 질환이 있는 세포를 고갈시키지만 건강한 세포는 고갈시키지 않아서 선택적인 질환이 있는 세포 사멸을 이끈다. 이. 콜라이로부터의 L-아스파라기나제를 사용한 치료 후 발달된 항체는 에스위니아 크리산테미로부터의 L-아스파라기나제와 교차-반응하지 않는다. 에스위니아 크리산테미에서 생산된 L-아스파라기나제는 제조를 위한 긴 리드 타임(lead time)을 필요로 한다(예를 들면, Erwinase®). 본 발명은 이. 콜라이로부터의 L-아스파라기나제와 교차-반응하지 않고 이. 콜라이-유래된 L-아스프라기나제 및 에스위니아 크리산테미-유래된 L-아스파라기나제보다 증진된 L-아스파라기나제에 대한 신규하고 증진된 복용 요법(dosing regimen)을 포함한다. 이러한 증진은 본원에 기술되어 있다.

I. 정의

달리 명확하게 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 용어는 당해 분야에서 이의 의미에 따라 이해될 것이다.

본원에 사용된 바와 같은, 용어 "아스파라긴의 고갈에 의해 치료가능한 질환"은 상태 또는 장애에 포함되거나 이에 관여된 세포가 L-아스파라긴을 합성하는 능력을 결여하거나 또는 감소된 능력을 갖는 상태 또는 장애를 지칭한다. L-아스파라긴의 고갈 또는 부족(deprivation)은 부분적이거나 실질적으로 완전할 수 있다(예컨대, 당해 분야에 공지된 방법 및 장치를 사용하여 검출할 수 없는 수준까지).

본원에 사용된 바와 같은, 용어 "치료학적 유효량"은 목적한 치료학적 효과를 생산하는데 요구되는, 단백질(예컨대, 아스파라기나제 또는 이의 재조합 L-아스파라기나제)의 양을 지칭한다.

용어 "서열 번호: 1의 서열을 포함하는"은 단백질의 아미노산이 서열 번호: 1에 엄격하게 제한되지 않을 수 있지만 추가의 아미노산을 함유할 수 있음을 의미한다.

용어 "대상체" 또는 "환자"는 동물, 포유동물, 또는 여전히 추가의 사람 환자를 의도한다.

용어 "벡터(vector)로 형질전환된 숙주 세포 또는 비-사람 숙주"는 본원에 기술된 바와 같은 벡터 또는 핵산을 포함하는 숙주 세포 또는 비-사람 숙주에 관한 것이다. 폴리펩타이드의 발현을 위한 숙주 세포는 당해 분야에 잘 공지되어 있고 원핵 세포 뿐만 아니라 진핵 세포를 포함한다. 상술한 숙주 세포에 대한 적절한 배양 배지 및 조건은 당해 분야에 공지되어 있다.

"숙주 또는 숙주 세포를 배양하는"은 숙주 또는 숙주 세포 내에서 본원에 정의된 바와 같은 단백질, 예를 들면, 융합 단백질 및/또는 본원에 정의된 바와 같은 폴리펩타이드 및/또는 아스파라기나제의 발현을 포함한다.

본원에 사용된 바와 같은, 예를 들면, 조성물 속의 성분의 면적, 용적, 양, 농도, 공정 온도, 공정 시간, 수율, 유동 속도, 압력, 및 유사 값, 및 이의 범위를 변형시키는 용어 "약"은 예를 들면, 화합물, 조성물, 농축물 또는 사용 제형을 제조하는데 사용된 대표적인 측정 및 취급 과정을 통해; 이러한 과정에서 부두의한 오류를 통해; 제조, 공급원, 또는 방법을 수행하는데 사용된 출발 물질 또는 성분의 순도에서의 차이를 통해; 및 유사 고려사항을 통해 발생할 수 있는 수치적 양에서의 변화을 지칭한다. 용어 "약"은 또한 예를 들면, 특수한 초기 농도 또는 혼합물을 지닌 조성물 또는 제형을 혼합하거나 가공함으로 인해 상이해지는 특수한 초기 농도 또는 혼합물, 및 양을 지닌 조성물, 제형, 또는 세포 배양물의 노화로 인해 상이해지는 양을 포함한다. 용어 "약"에 의해 변형되는 것에 상관없이 본원에 첨부된 청구범위는 이러한 양에 대한 등가물을 포함한다. 용어 "약"은 추가로 기술된 참고 값과 유사한 값의 범위를 지칭할 수 있다. 특정의 구현예에서, 용어 "약"은 기술된 참고 값의 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 퍼센트 이하 이내에 속하는 값의 범위를 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "공-투여(co-administration)", "공-투여하는(co-administering)", "와 함께 투여된(administered in combination with)", "와 함께 투여하는(administering in combination with)", "동시에(simultaneous)" 및 "공존하는(concurrent)"은 2개 이상의 활성 약제학적 성분을 사람 대상체에게 투여함으로써 활성 약제학적 성분 및/또는 이의 대사산물 둘 다가 동시에 사람 대상체 속에 존재하도록 함을 포함한다. 공-투여는 별개의 조성물로 동시 투여, 상이한 시점에 별개의 조성물로 투여, 또는 2개 이상의 활성 약제학적 성분이 존재하는 조성물로 투여를 포함한다. 별개의 조성물로 동시 투여 및 제제 둘 다가 존재하는 조성물로 투여가 또한 본 발명의 방법에 포함된다.

본원에 사용된 바와 같은, 용어 "치료학적 유효량"은 목적한 치료학적 효과를 생산하는데 요구되는 단백질(예컨대, 재조합 L-아스파라기나제 또는 이의 접합체)의 양을 지칭한다.

용어 "이. 콜라이-유래된 L-아스파라기나제", "이. 콜라이로부터의 L-아스파라기나제", "이. 콜라이 아스파라기나제", 및 "이. 콜라이 L-아스파라기나제"는 이. 콜라이 내에서 천연적으로 생산된 아스파라기나제를 지칭하기 위해 상호교환적으로 사용된다.

용어 "에르위니아-유래된 L-아스파라기나제", "에르위니아 아스파라기나제", "에르위니아 L-아스파라기나제", "에르위니아 아스파라기나제", "에르위니아로부터의 L-아스파라기나제", 및 "에르위니아로부터의 아스파라기나제"는 에르위니아에서 천연적으로 생산된 아스파라기나제를 지칭하기 위해 본원에서 상호교환적으로 사용된다.

용어 "에스위니아 크리산테미로부터의 L-아스파라기나제", "에스위니아 크리산테미 L-아스파라기나제" 및 "에스위니아 크리산테미-유래된 L-아스파라기나제"는 에스위니아 크리산테미에서 천연적으로 생산된 아스파라기나제와 상호교환적으로 사용된다. 에스위니아 크리산테미(또한 펙토박테이룸 크리신테미(Pectobacterium chrysanthemi)로서 공지됨)는 딕케야 크리산테미(Dickeya chrysanthemi)로 재명명되었다. 따라서, 용어 에스위니아 크리산테미, 펩토박테리움 크리산테미(Pectobacterium chrysanthemi) 및 디케야 크리산테미(Dickeya chrysanthemi)는 본원에 상호교환적으로 사용된다.

Erwinaze®(Biologic License Application 125359)는 환자에서 ALL의 치료를 위해 미국에서 상업적으로 승인된 에스위니아 크리산테미 L-아스파라기나제 제II형 생성물이다. 이의 활성 성분은 에스위니아 크리산테미 L-아스파라기나제 제II형(참고: 본원에 참고로 포함된 Erwinaze® 패키지 삽입물(package insert))이다.

용어 "상동성" 및 "서열 동일성"은 본원에서 상호교환적으로 사용된다. 단백질 서열과 관련하여 아미노산 서열 동일성 퍼센트(%)는 서열을 정렬하고 필요한 경우 갭을 도입하여 최대 서열 동일성 퍼센트를 달성하고, 서열 동일성의 부분으로서 임의의 보존적 치환을 고려하지 않은 후, 특정(모(parental)) 서열에서 아미노산 잔기와 동일한 후보물 서열 내 아미노산 잔기의 퍼센트로서 정의된다. 아미노산 서열 동일성 퍼센트를 측정할 목적을 위한 정렬은 당해 분야의 기술내에 있는 다양한 방법으로, 예를 들면, 공공 이용가능한 컴퓨터 소프트웨어, 예를 들면, BLAST, BLAST-2, ALIGN 또는 Megalign(DNASTAR) 소프트웨어를 사용하여 달성할 수 있다. 당해 분야의 숙련가는 비교되는 서열의 전체 길이에 걸쳐 최대의 정렬을 달성하는데 요구된 임의의 알고리즘을 포함하는, 정렬을 측정하기 위해 적절한 매개변수를 결정할 수 있다. 하나의 특수한 프로그램은 본원에 참고로 포함된 미국 공보 제20160244525호의 단락 [0279] 내지 [0280]에 요약된 ALIGN-2 프로그램이다. 본 발명의 아미노산 서열("본 발명 서열")과 모 아미노산 서열 사이의 동일성 정도는 가장 짧은 것에 상관없이, 2개의 서열의 정렬내 정확한 일치(match)의 수를 "본 발명의 서열"의 길이, 또는 모 서열의 길이로 나눈 것으로서 계산된다. 결과는 동일성 퍼센트로 나타낸다. 일부 구현예에서, 2개 이상의 아미노산 서열은 적어도 50%, 60%, 70%, 80%, 또는 90% 동일하다. 일부 구현예에서, 2개 이상의 아미노산 서열은 적어도 95%, 97%, 98%, 99%, 또는 심지어 100% 동일하다.

복용(dosong)의 문맥에서 사용된 바와 같은 용어 "2일"은 제1 용량과 제2 용량 사이의 시간의 양을 지칭하고, 여기서 제2 용량은 제1 용량 후에 투여된다. 예를 들어, 제1 용량이 주어진 주의 월요일에 투여된 경우, 제1 용량 후 2일째에 투여된 제2 용량은 주어진 주의 수요일에 투여될 수 있다. 용어 "2일"은 제1 용량이 제2 용량과 동일한 일시(time of day)에 투여되는 상황, 뿐만 아니라 제1 용량이 제2 용량 외에 상이한 일수에 투여되는 상황을 포함한다. 따라서, 상기 예에서, 제1 용량이 주어진 주의 월요일에 투여되고 제2 용량이 수요일에 투여된 경우, 제1 용량은 주어진 주의 월요일 이른 아침에 투여되고, 제2 용량은 주어진 주의 수요일 오후 또는 저녁에 투여될 수 있고 여전히 용어 "2일"의 범위 내에 포함된다. 역으로, 제1 용량이 주어진 주의 월요일 오후 또는 저녁에 투여될 수 있고, 제2 용량이 주어진 주의 수요일 아침에 투여될 수 있으며, 여전히 용어 "2일"의 범위 내에 포함된다.

복용의 문맥에서 사용된 바와 같은 용어 "3일"은 제1 용량과 제2 용량 사이의 시간의 양을 지칭하고, 여기서 제2 용량은 제1 용량 후에 투여된다. 예를 들면, 제1 용량이 주어진 주의 금요일에 투여된 경우, 제1 용량 후 3일째에 투여된 제2 용량은 주어진 주 직후 주의 월요일에 투여될 수 있다. 용어 "3일"은 제1 용량이 제2 용량과 동일한 일시에 투여되는 상황 뿐만 아니라, 제1 용량이 제2 용량과는 상이한 일시에 투여되는 상황을 포함한다. 따라서, 상기 실시예에서, 제1 용량이 주어진 주의 금요일에 투여되고 제2 용량이 주어진 주 직후 주의 월요일에 투여된 경우, 제1 용량은 주어진 주의 금요일 이른 아침에 투여될 수 있고, 제2 용량은 주어진 주 직후 주의 월요일 오후 또는 저녁에 투여될 수 있고 여전히 용어 "3일"의 영역 내에 포함된다. 역으로, 제1 용량은 주어진 주의 금요일 오후 또는 저녁에 투여될 수 있고, 제2 용량은 주어진 주의 바로 다음 주 월요일 아침에 투여될 수 있으며 여전히 용어 "3일"의 영역 내에 포함된다.

복용의 문맥에서 사용된 바와 같은 용어 "7일"은 제1 용량과 제2 용량 사이의 시간의 양을 지칭하고, 여기서 제2 용량은 제1 용량 후에 투여된다. 예를 들면, 제1 용량이 주어진 주의 금요일에 투여되고, 제1 용량이 투여된 후 7일째에 투여된 제2 용량은 주어진 주의 바로 다음 주의 금요일에 투여될 수 있다. 용어 "7일"은 제1 용량이 제2 용량과 동일한 일시에 투여되는 상황 뿐만 아니라, 제1 용량이 제2 용량과 상이한 일시에 투여되는 상황을 포함한다. 따라서, 상기 예에서, 제1 용량이 주어진 주의 금요일에 투여되고 제2 용량이 주어진 주 직후 주의 금요일에 투여된 경우, 제1 용량은 주어진 주의 금요일 이른 아침에 투여될 수 있고 제2 용량은 주어진 주의 바로 다음 주의 금요일 오후 또는 저녁에 투여될 수 있고 여전히 7일의영역 내에 포함될 수 있다. 역으로, 제1 용량은 주어진 주의 금요일 오후 또는 저녁에 투여되고, 제2 용량은 주어진 주 직후 주의 금요일 아침에 투여될 수 있으며 여전히 7일의 범위 내에 포함된다.

복용의 문맥에서 사용된 바와 같은 용어 "약 48시간"은 제1 용량과 제2 용량 사이의 시간의 양을 지칭하고, 여기서 제2 용량은 제1 용량 후에 투여된다. 예를 들면, 제1 용량이 주어진 주의 월요일에 투여된 경우, 제1 용량 후 약 48시간 째에 투요된 제2 용량은 주어진 주의 수요일에 투여될 수 있다. 용어 "약 48시간"은 제1 용량이 제2 용량과 동일한 일시에 투여된 상황 뿐만 아니라, 제1 용량이 제2 용량과 상이한 일시에 투여된 상황을 포함한다. 따라서, 상기 예에서, 제1 용량이 주어진 주의 월요일에 투여되고 제2 용량이 주어진 주의 수요일에 투여된 경우, 제1 용량은 주어진 주의 월요일 이른 아침에 투여될 수 있고, 제2 용량은 주어진 주의 수요일 오후 또는 저녁에 투여될 수 있으며 여전히 용어 "약 48시간"의 범위 내에 포함된다. 역으로, 제1 용량은 주어진 주의 월요일 오후 또는 저녁에 투여될 수 있고, 제2 용량은 주어진 주의 수요일 아침에 투여될 수 있으며 여전히 용어 "약 48시간"의 범위 내에 포함된다.

복용의 문맥에서 사용된 바와 같은 용어 "약 72시간"은 제1 용량과 제2 용량 사이의 시간의 양을 지칭하고, 여기서 제2 용량은 제1 용량 후에 투여된다. 예를 들면, 제1 용량이 주어진 주의 금요일에 투여되고, 제1 용량후 약 72시간 째에 투여된 제2 용량은 주어진 주의 바로 다음 주의 월요일에 투여될 수 있다. 용어 "약 72시간"은 제1 용량이 제2 용량과 동일한 일시에 투여되는 상황 뿐만 아니라, 제1 용량이 제2 용량과 상이한 일시에 투여되는 상황을 포함한다. 따라서, 상기 예에서, 여기서 제1 용량이 주어진 주의 금요일에 투여되고 제2 용량이 주어진 주의 바로 다음 주의 월요일에 투여된 경우, 제1 용량은 주어진 주의 금요일 이른 아침에 투여될 수 있고, 제2 용량은 주어진 주의 바로 다음 주 월요일의 오후 또는 저녁에 투여될 수 있고 여전히 용어 "약 72시간"의 범위 내에 포함된다. 역으로, 제1 용량은 주어진 주의 금요일 오후 또는 저녁에 투여될 수 있고, 제2 용량은 주어진 주의 바로 다음 주의 월요일 아침에 투여될 수 있으며 여전히 용어 "약 72시간"의 범위 내에 포함된다.

복용의 문맥에서 사용된 바와 같은 용어 "약 168시간"은 제1 용량과 제2 용량 사이의 시간의 양을 지칭하고, 여기서 제2 용량은 제1 용량 후에 투여된다. 예를 들면, 제1 용량이 주어진 주의 금요일에 투여된 경우, 제1 용량 후 약 168시간 째에 투여된 제2 용량은 주어진 주의 바로 다음 주의 금요일에 투여될 수 있다. 용어 "약 168시간"은 제1 용량이 제2 용량과 동일한 일시에 투여된 상황 뿐만 아니라, 제1 용량이 제2 용량과 상이한 일시에 투여된 상황을 포함한다. 따라서, 상기 예에서, 제1 용량이 주어진 주의 금요일에 투여되고 제2 용량이 주어진 주의 바로 다음 주의 금요일에 투여된 경우, 제1 용량은 주어진 주의 금요일 이른 아침에 투여될 수 있고, 제2 용량은 주어진 주의 바로 다음 주의 금요일 오후 또는 저녁에 투여될 수 있으며 여전히 용어 "약 168시간"의 범위 내에 포함된다. 역으로, 제1 용량은 주어진 주의 금요일 오후 또는 저녁에 투여될 수 있고, 제2 용량은 주어진 주의 바로 다음 주의 금요일 아침에 투여될 수 있으며 여전히 용어 "약 168시간"의 범위 내에 포함된다.

II. 재조합 L-아스파라기나제

일 양태에서, 본원에 제공된 본 개시내용에 따른 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제이다. 추가의 양태에서, 본원에 기술된 본 발명에 따른 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라긴 아미노하이드롤라제의 활성을 지닌 효소이다. 이러한 재조합 L-아스파라기나제의 효소 활성은 아스파라긴의 아스파르트산 및 암모니아로의 탈아미드화 뿐만 아니라, 글루타민의 글루탐산 및 암모니아로의 탈아미드화도 포함할 수 있다.

일부 구현예에서, 본원에 개시된 바와 같은 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머로서 활성이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머로서 활성 효소이다. 테트라머는 4개의 소단위(subunit)(또한 모노머로서 공지됨)로 구성된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 4개의 동일한 35kD 소단위로 이루어진 테트라머이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 비-설파이드 결합된 테트라머성 치료학적 단백질이다. 특수한 구현예에서, 멀티머(multimer)성 재조합 L-아스파라기나제의 소단위 또는 모노머 각각은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함한다. 특수한 구현예에서, 테트라머성 재조합 L-아스파라기나제의 소단위 또는 모노머 각각은 서열 번호: 1의 아미노산 서열을 포함한다. 다른 구현예에서, L-아스파라기나제는 신호 펩타이드 및/또는 리더 서열(leader sequence)가 있거나 없는 에스위니아 크리산테미 NCPPB 1066(Genbank 수탁 번호 제CAA32884호, 이의 전문이 본원에 참고로 포함됨)로부터 유래된다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 다중 소단위, 예를 들면, 4개의 소단위 또는 모노머(테트라머)로 구성된다. 상응하는 변형된 재조합 단백질은 이후, 예컨대, 이러한 테트라머의 모노머 각각에 접합된 1 내지 20개(또는 그 이상)의 펩타이드로 이루어질 수 있다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 모노머 및 L-아스파라기나제 모노머 각각에 접합된 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 및 20개(또는 그 이상)의 펩타이드를 포함한다. 구체적인 구현예에서, L-아스파라기나제는 다수의 소단위 또는 모노머를 포함하는 멀티머, 예를 들면, 테트라머이고, 이러한 테트라머내 모노머 각각은 1개의 펩타이드에 접합되어, 각각의 모노머에 대해 하나씩, 4개의 접합된 펩타이드를 포함하는 테트라머를 생성한다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-모노머 각각에 접합된 1 내지 4개의 펩타이드를 포함하는 테트라머이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-모노머 각각에 접합된 4 내지 20개의 펩타이드를 포함하는 테트라머이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-모노머의 각각에 접합된 6 내지 18개의 펩타이드를 포함하는 테트라머이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-모노머 각각에 접합된 6 내지 18개의 펩타이드를 포함하는 테트라머이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-모노머 각각에 접합된 10 내지 15개의 펩타이드를 포함하는 테트라머이다.

일 양태에서, 본 발명은 재조합 L-아스파라기나제 및 다수의 화학적으로 부착된 펩타이드 서열을 갖는 변형된 단백질에 관한 것이다. 추가의 양태에서, 펩타이드 서열의 길이는 약 10 내지 약 100, 약 15 내지 약 60 또는 약 20 내지 약 40개이다.

재조합 L-아스파라기나제의 단편, 바람직하게는 재조합 L-아스파라기나제의 단편은 현재 기술된 발명에서 사용될 수 있다. 용어 "재조합 L-아스파라기나제의 단편"(예컨대, 서열 번호: 1의 재조합 L-아스파라기나제의 단편)은 재조합 L-아스파라기나제의 서열이 본원에 예시된 재조합 L-아스파라기나제(예컨대, 서열 번호: 1의 재조합 L-아스파라기나제)에서보다 더 적은 아미노산을 포함할 수 있지만 여전히 L-아미노하이드롤라제 활성을 부여하기에 충분함을 의미한다. 예를 들면, "재조합 L-아스파라기나제의 단편은" 본원에 예시된 재조합 L-아스파라기나제(예컨대, 서열 번호: 1의 재조합 L-아스파라기나제) 중 하나의 적어도 약 150개 또는 200개의 연속된 아미노산(예를 들면 약 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 326의 연속된 아미노산)인 단편/으로 이루어진 단편이고/이거나, 여기서 상기 단편은 상기 본원에 예시된 재조합 L-아스파라기나제(예컨대, 서열 번호: 1의 재조합 L-아스파라기나제)의 N-말단으로부터 결실된 50개 이하(예컨대, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 또는 50개 이하)의 아미노산을 갖고/갖거나 상기 본원에 예시된 재조합 L-아스파라기나제(예컨대, 서열 번호: 1의 재조합 L-아스파라기나제)의 C-말단으로부터 결실된 75 내지 100개 이하(예컨대, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 75, 80, 85, 90, 95 또는 100개 이하)의 아미노산을 갖고/갖거나 상기 본원에 예시된 재조합 L-아스파라기나제(예컨대, 서열 번호: 1의 재조합 L-아스파라기나제)의 N-말단 및 C-말단 둘 다에서 결실된 아미노산을 갖고, 여기서 결실된 아미노산의 총 수는 125개 또는 150개 이하의 아미노산일 수 있다.

실제로, 당해 분야의 숙련가는 실질적으로 이의 L-아스파라기나제 활성을 보유하는 상동성 단백질을 선택 및 설게하는 방법을 이해할 것이다. 전형적으로, 네슬러 검정(Nessler assay)을 마쉬본(Mashburn) 및 휘스톤(Wriston)에 의해 기술된 방법(이의 전문이 본원에 참고로 포함된, Mashburn, L., and Wriston, J. (1963) "Tumor Inhibitory Effect of L-Asparaginase," Biochem Biophys Res Commun 12, 50)에 따라 L-아스파라기나제 활성을 측정하는데 사용한다.

폴리펩타이드를 이의 효소 활성을 유지하면서, 하나 이상의 아미노산의 치환, 삽입, 결실 및/또는 첨가에 의해 변형시킬 수 있음은 당해 분야에 잘 공지되어 있다. 이러한 문맥에서 용어 "하나 이상의 아미노산"은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 이상의 아미노산을 지칭할 수 있다. 예를 들면, 단백질의 기능적 특성에 영향을 미치지 않는 화학적으로 등가의 아미노산에 의한 주어진 위치에서의 하나의 아미노산의 치환은 일반적이다. 치환은 하기 그룹 중 하나 내에서의 변화로 정의될 수 있다:

작은 지방족, 비-극성 또는 약간의 극성의 잔기: Ala, Ser, Thr, Pro, Gly

극성의, 음으로 하전된 잔기 및 이의 아미드: Asp, Asn, Glu, Gln

극성의, 양으로 하전된 잔기: His, Arg, Lys

큰 지방족의, 비-극성의 잔기: Met, Leu, Ile, Val, Cys

큰 방향족 잔기: Phe, Tyr, Trp.

따라서, 하나의 음의로 하전된 잔기의 다른 것(예를 들면, 아스파르트산의 경우 글루탐산)에 대한 치환 또는 하나의 양으로 하전된 잔기의 다른 것(예를 들면, 아르기닌의 경우 라이신)에 대한 치환은 기능적으로 등가의 생성물을 생산하는 것으로 예측될 수 있다.

아미노산이 변형된 위치 및 아미노산 서열 내에서 변형될 수 있는 아미노산의 수는 특별히 제한되지 않는다. 당해 분야의 숙련가는 단백질의 활성에 영향을 미치지 않고 도입시킬 수 있는 변형을 인식할 수 있다. 예를 들면, 단백질의 N- 또는 C-말단에서 변형은 특정 상황 하에서 단백질의 활성을 변경시키지 않는 것으로 예측될 수 있다. 아스파라기나제와 관련하여, 특히, 많은 특성화가, 특히 서열, 구조, 및 활성 촉매 부위를 형성하는 잔기와 관련하여 이루어져 왔다. 이는 효소의 활성에 영향을 미치지 ?方? 변형시킬 수 있는 잔기와 관련한 가이드를 제공한다. 세균 공급원으로부터 모든 공지된 L-아스파라기나제는 일반적인 구조적 특징을 갖는다. 모두 2개의 인접한 모노머의 N-과 C-말단 도메인 사이의 4개의 활성 부위를 갖는 호모테트라머이다(이의 전문이 본원에 참고로 포함된, Aghaipour (2001) Biochemistry 40, 5655-5664). 모두는 이의 3차 및 4차 구조에서 높은 유사성 정도를 갖는다(이의 전문이 본원에 참고로 포함된, Papageorgiou (2008) FEBS J. 275, 4306-4316). L-아스파라기나제의 촉매 부위의 서열은 에스위니아 크리산테미, 에르위니아 카로토보라(Erwinia carotovora), 및 이. 콜라이 L-아스파라기나제 II(Id) 사이에서 고도로 보존되어 있다. 활성 부위 유연한 루프(active site flexible loop)는 아미노산 잔기 14 내지 33번을 함유하고, 구조적 분석은 Thr15, Thr95, Ser62, Glu63, Asp96, 및 Ala120이 리간드(Id)와 접촉함을 나타낸다. 아가이포르(Aghaipour) 등은 이의 기질과 복합화된 효소의 고 해상도 결정 구조를 실험함으로써 에스위니아 크리산테미 L-아스파라기나제의 4개의 활성 부위의 상세한 분석을 수행하였다(Aghaipour (2001) Biochemistry 40, 5655-5664). 코트지아(Kotzia) 등은 에르위니아의 수개의 종 및 아종으로부터의 L-아스파라기나제에 대한 서열을 제공하였고, 단백질이 에르위니아 크리산테미와 에르위니아 카로토보라(Erwinia carotovora) 사이에 단지 약 75 내지 77%의 동일성을 가지고 있다고 해도, 이는 각각 여전히 L-아스파라기나제 활성을 가진다(Kotzia (2007) J. Biotechnol. 127, 657-669). 물라(Moola) 등은 에스위니아 크리산테미 3937 L-아스파라기나제의 에피토프 맵핑(epitope mapping) 연구를 수행하였고 아스파라기나제의 면역원성을 감소시키기 위한 시도에서 다양한 항원성 서열을 돌연변이시킨 후에도 효소 활성을 보유할 수 있었다(Moola (1994) Biochem. J. 302, 921-927). L-아스파라기나제에서 수행된 집중적인 특성화의 측면에서, 당해 분야의 숙련가는 효소 활성을 여전히 유지하면서 단편 및/또는 서열을 치환하는 방법을 측정할 수 있다. 보다 구체적으로, 서열 번호: 1의 단백질의 단편은 또한 본 발명의 재조합 L-아스파라기나제에 사용된 단백질의 정의 내에 포함된다. 용어 "서열 번호: 1의 단편"은 폴리펩타이드의 서열이 전체 길이의 서열 번호: 1보다 더 적은 아미노산을 포함할 수 있지만 L-아미노하이드롤라제 활성을 부여하기에 충분한 단백질을 보유함을 의미한다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 서열 번호: 1을 포함하는 단백질과 적어도 약 80%의 상동성 또는 동일성을 갖는다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 서열 번호: 1의 아미노산 서열에 대해 적어도 약 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90% 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 동일성의 서열 동일성을 포함한다. 용어 "상동성" 및 "서열 동일성"은 본원에서 상호교환적으로 사용된다. 용어 "서열 번호: 1의 서열을 포함하는"(예를 들면, L-아스파라기나제가 서열 번호: 1의 아미노산 서열에 대해 100% 상동성 또는 서열 동일성을 갖는 경우)은 아스파라기나제의 아미노산 서열이 서열 번호: 1에 엄격하게 제한되지 않을 수 있지만 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 이상의 추가의 아미노산을 함유할 수 있음을 의미한다.

서열 번호: 1은 다음과 같다:

본 개시내용은 또한 본원에 기술된 재조합 L-아스파라기나제를 암호화(encoding)하는 핵산, 특히 본원에 정의된 바와 같은 서열 번호: 1을 암호화하는 핵산에 관한 것이다.

A. 페길화(PEGylation)

특정의 양태에서, 본원에 기술된 바와 같은 본 발명의 재조합 L-아스파라기나제는 중합체를 추가로 포함하고/하거나 이에 접합된다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같은 재조합 L-아스파라기나제는 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 모이어티(moiety)에 접합된다. 다른 양태에서, 재조합 L-아스파라기나제는 PEG 모이어티에 접합되지 않는다.

중합체는 무독성의 수용성 중합체, 예를 들면, 다당류, 예컨대, 하이드록시에틸 전분, 폴리 아미노산, 예컨대, 폴리 라이신, 폴리에스테르, 예컨대, 폴리락트산, 및 폴리 알킬렌 옥사이드, 예컨대, 폴리에틸렌 글리콜(PEG)의 그룹으로부터 선택된다. 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 또는 모노-메톡시-폴리에틸렌글리콜(mPEG)은 당해 분야에 잘 공지되어 있고 직쇄 및 측쇄 중합체를 포함한다. 일부 중합체의 예, 특히 PEG는 하기에 제공되며, 이들 각각은 이의 전문이 본원에 참고로 포함된다: 미국 특허 제5,672,662호; 미국 특허 제4,179,337호; 미국 특허 제5,252,714호; 미국 특허원 공보 제2003/0114647호; 미국 특허 제6,113,906호; 미국 특허 제7,419,600호; 미국 특허 제9,920,311호; PCT 공보 제WO2019/109018호, 및 PCT 공보 제W02004/083258호.

이러한 중합체의 품질은 다분산성 지수(polydispersity index; PDI)에 의해 특성화된다. PDI는 주어진 중합체 샘플 속의 분자량의 분포를 반영하며 수 평균 분자량으로 나눈 중량 평균 분자량으로부터 계산된다. 이는 중합체의 배치의 개개 분자량의 분포를 나타낸다. PDI는 항상 1보다 큰 값을 가지지만, 중합체 쇄가 이상적인 가우스 분포(ideal Gauss distribution)(=일분산성(monodispersity))에 접근하므로, PDI는 1에 접근한다.

일 구현예에서, 접합체는 다음 화학식을 갖는다: Asp-[NH--CO--CH.sub.2)x-CO--NH-PEG]n, 여기서 Asp는 재조합 L-아스파라기나제이고, NH는 라이신 잔기의 NH 그룹 중 하나 이상 및/또는 Asp의 N-말단이고, PEG는 폴리에틸렌 글리콜 모이어티이고, n은 Asp 내 허용가능한 아미노 그룹(예컨대, 라이신 잔기 및/또는 N-말단)의 적어도 약 40% 내지 약 100%를 나타내는 숫자이고, x는 약 1 내지 약 8, 보다 구체적으로, 약 2 내지 약 5의 범위의 정수이다. 구체적인 구현예에서, PEG는 모노메톡시-포리에틸렌 글리콜(mPEG)이다.

B. 파실화(PASylation)

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 프롤린- 또는 알라닌-함유 펩타이드에 접합된다. 다른 양태에서, 재조합 트리산타스파제는 프롤린-, 알라닌-, 또는 세린-함유 펩타이드에 접합되지 않는다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 (i) 서열 번호: 1의 아미노산 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 동일성을 갖는 재조합 L-아스파라기나제 및 (ii) 하나 이상의 폴리펩타이드(들)를 포함하는 융합 단백질이고, 여기서 폴리펩타이드는 프롤린 및 알라닌 아미노산 잔기만으로 이루어진다.

이러한 융합 단백질(fusion protein)에서, 프롤린 및 알라닌 아미노산 잔기 만으로 이루어진 폴리펩타이드 내 프롤린 잔기는 폴리펩타이드의 약 10% 초과 내지 약 70% 미만을 구성한다. 따라서, 이러한 융합 단백질에서, 폴리펩타이드 내 아미노산 잔기의 총 수의 10% 내지 70%가 프롤린 잔기인 것이 바람직하고; 보다 바람직하게는, 폴리펩타이드 내에 포함된 아미노산 잔기의 총 수의 20% 내지 50%는 프롤린 잔기이고; 심지어 보다 바람직하게는, 폴리펩타이드 내에 포함된 아미노산 잔기의 총 수의 30% 내지 40%(예컨대, 30%, 35% 또는 40%)는 프롤린 잔기이다. 폴리펩타이드는 다수의 아미노산 반복물(repeat)을 포함할 수 있고, 여기서 상기 반복물은 프롤린 및 알라닌 잔기로 이루어지고 여기서 6개 이하의 연속적인 아미노산 잔기가 동일하다. 특히, 폴리펩타이드는 아미노산 서열 AAPAAPAPAAPAAPAPAAPA(서열 번호: 2) 또는 환형의 재배치된 버젼(circular permuted version) 또는 (a) 서열의 전체로서 또는 부분으로서 서열의 멀티머(들)를 포함할 수 있거나 또는 이로 이루어질 수 있다. 다른 양태에서, 재조합 L-아스파라기나제는 구체적으로 이러한 폴리펩타이드를 결여하는데, 예컨대, 재조합 L-아스파라기나제는 프롤린 잔기의 상술한 퍼센트 또는 반복물을 함유하는 폴리펩타이드에 접합하지 않는다.

본 발명은 또한 재조합 L-아스파라기나제, 특히 본원에 정의된 바와 같은 융합 단백질을 암호화하는 핵산에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 뉴클레오타이드 서열은 서열 번호: 1을 포함하는 재조합 L-아스파라기나제 및 폴리펩타이드 중 어느 것을 암호화하는 서열이고, 여기서 폴리펩타이드는 프롤린 및 알라닌 아미노산 잔기 만으로 이루어지고, 바람직하게는 여기서 단백질은, 하나 이상의 아미노산이 첨가, 결실, 삽입 또는 치환된 것을 제외하고는, 본원에 기술된 융합 단백질이고, 단 이러한 아미노산 서열을 갖는 융합 단백질은 L-아스파라기나제 활성을 보유한다. 다른 양태에서, 뉴클레오타이드 서열은 서열 번호: 1을 포함하는 임의의 재조합 L-아스파라기나제를 암호화하는 서열이고, 여기서 이러한 서열은 프롤린 및 알라닌 아미노산 잔기 만으로 이루어진 폴리펩타이드(또는 이를 함유하는 융합 단백질을 암호화하는 서열의 일부)에 접합되지 않는다.

본 개시내용에 따른 재조합 L-아스파라기나제는 당해 분야에 공지된 방법, 특히 예시적인 구현예를 위해 본원에 참고로 포함된 미국 특허 제10,174,302호 및 PCT 출원 제WO2019/109018호에 개시된 방법을 사용하여 제조할 수 있다.

C. 재조합 L-아스파라기나제를 포함하는 조성물

본 개시내용은 또한 재조합 L-아스파라기나제를 포함하는 조성물을 제공한다. 이러한 조성물은 재조합 L-아스파라기나제를 다른 성분(예를 들면, 그러나 제한없이, 완충제, 염, 및 부형제)과 함께 포함할 수 있다. 이러한 조성물은 L-아스파라기나제를 대상체에게 투여하기 위한 비히클(vehicle), 예를 들면, 입자, 분말, 및 캡슐화(encapsulation)를 포함할 수 있다.

일부 구현예에서, 본원에 기술된 재조합 L-아스파라기나제가 캡슐화될 수 있다. 적혈구 내에서 아스파라기나제의 캡슐화는 예를 들면, 치료학적 지수(therapeutic index)를 증진시키기 위해 제공될 수 있다(D. Schrijvers et al., Clin. Pharmacokinet. 2003, 42 (9): 779-791). 캡슐화 방법 및 특히 L-아스파라기나제의 캡슐화와 관련된 모든 기술은 예를 들면, 이의 전문이 본원에 참고로 포함된, 제EP1773452호에 기술되어 있다.

III. 재조합 L-아스파라기나제 및 이의 조성물의 기능적 양태 및 다른 특성

인식될 바와 같이, 재조합 L-아스파라기나제의 기능적 양태 및 다른 특성의 본원에 논의를 또한 현재 개시된 발명의 재조합 L-아스파라기나제를 포함하는 조성물에 적용시킬 수 있다.

일부 양태에서, 본원에 기술된 재조합 L-아스파라기나제는 야생형 L-아스파라기나제와 비교하여 환자에서 보다 낮은 면역원성 반응을 유발할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 재조합 L-아스파라기나제는 천연의 L-아스파라기나제와 비교하여 단일 용량 후 보다 큰 AUC 값을 가질 수 있다. 본원에 기술된 재조합 L-아스파라기나제의 이러한 특성은 이. 콜라이 L-아스파라기나제 또는 이의 페길화된 형태에 대해 이미 과민성을 가졌을 수 있는 환자에게 유리하다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 재조합 L-아스파라기나제는 단일 용량의 투여 후 특수한 기간 동안, 예컨대, 약 1주, 2주, 3주, 4,주, 5주, 6주, 7주, 8주, 9주, 10주, 11주, 12주 이상 동안, 어떠한 유의적인 항체 반응을 생성하지 않는다. 하나의 예에서, "유의적인 항체 반응을 생성하지 않는다"는 재조합 L-아스파라기나제를 제공받은 대상체가 당해 분야이 인식된 매개변수 내에서 항체-음성인 것으로 확인됨을 의미한다. 항체 수준은 당해 분야에 공지된 방법, 예를 들면 ELISA 또는 표면 공명 검정(surface plasmon resonance assays)으로 측정될 수 있다(Zalewska-Szewczyk (2009) Clin. Exp. Med. 9, 113-116; Avramis (2009) Anticancer Research 29, 299-302, 이들 각각은 이의 전문이 본원에 참고로 포함됨).

본 발명의 재조합 L-아스파라기나제를 포함하는 조성물은 Erwinase® 및 이. 콜라이 내에서 재조합적으로 발현된 에스위니아 크리산테미 L-아스파라기나제를 함유하는 것과 비교하여 감소된 응집을 나타낸다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 재조합 L-아스파라기나제를 포함하는 조성물은 다른 형태의 L-아스파라기나제를 함유하는 조성물과 비교하여 감소된 응집을 입증한다. 예를 들면, 본 발명의 접합되지 않은 재조합 L-아스파라기나제를 제조하는 방법은 Erwinase® 및 이. 콜라이 내에서 재조합적으로 발현된 에스위니아 크리산테미 L-아스파라기나제보다 더 낮은 응집을 생성한다. Erwinase®의 배치(batch)를 제조하는 공정은, 예를 들면, 약 6%의 응집을 지닌 생성물을 생성한다(참고: 실시예 5 및 실시예 6). 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제의 배치는 일반적으로 약 1% 응집 미만이다(참고: 실시예 5 및 실시예 6).

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 다른 L-아스파라기나제보다 더 큰 순도를 갖는다. 일부 구현예에서, 순도는 아스파라기나제의 주어진 샘플 속의 응집의 양을 입증함으로써 측정된다. 응집의 양은 당해 분야에 기술된 다양한 방법, 예를 들면, 그러나 이에 한정되지 않는, 크기-배제 크로마토그래피(Size-Exclusion Chromatogaphy; SEC-HPLC), 크기-배제 초고성능 액체 크로마토그래피(Size-Exclusion Ultrahigh-Performance Liquid Chromatography; SE-UHPLC), 크기 배제 크로마토그래피-다중-각 광 산란(Size Exclusion Chromatography-Multi-Angle Light Scattering; SEC MALLS), 및 침강 속도 분석 초원심분리(sedimentation velocity Analytical Ultracentrifugation; svAUC)에 의해 입증될 수 있다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 0.25%, 0.2%, 0.1%, 또는 0.01% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제를 함유하는 조성물에서 관찰된 응집의 양은 1 내지 10% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제를 함유하는 조성물에서 관찰된 응집의 양은 10% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 9% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 8% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 7% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 6% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 5% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 4% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 3% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 2% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 1% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 0.5% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 0.25% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 0.2% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 0.1% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 0.01% 미만이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 0.01% 내지 10%이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 약 0.01% 내지 약 9%이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 약 0.01% 내지 약 8%이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 약 0.01% 내지 약 7%이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 약 0.01% 내지 약 6%이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 약 0.1% 내지 약 5%이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 약 0.2% 내지 약 4%이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 약 0.25% 내지 약 3%이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 약 0.5% 내지 약 2%이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 약 1%이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 응집의 양은 1%이다.

보다 적은 양의 응집은 전형적으로 보다 적은 면역원성을 지닌 생성물을 생성함이 당해 분야의 숙련가에게 공지되어 있다. 면역원성은 임상에서 부작용을 유발하는 주요 인자이며 연방 의약국(Federal Drug Administration; FDA)에 의해 규제된다(참고: U.S. Department of Health and Human Services, Guidance for Industry: Immunogenicity Assessment for Therapeutic Protein Products, 2014, p.15-17 of Quaternary Structure: Product Aggregates and Measurement of Aggregates https://www.fda.gov/media/85017/download; 또한 참고: Ratanji et al; Immunogenicity of therapeutic proteins: Influence of Aggregation. Journal of Immunotoxicology, 2014; 11(2): 99-109; Wang et al; Immunogenicity of Protein Aggregates- Concerns and Realities, International Journal of Pharmaceutics, 2012, 431(1-2): 1-11; 및 Moussa et al, Immunogenicity of Therapeutic Protein Aggregates, Journal of Pharmaceutical Sciences, 2016; 105(2): 417-430).

또한, 응집은 효소의 작용 능력을 방해하고 또한 활성 효소의 총 수율의 감소를 유발할 수 있으므로, 단백질 응집은 효소 활성과 관련되어 있다. 단백질 응집집은 제조 및 개발, 치료제가 환자에게 도달하는데 까지 걸리는 시간의 지연 및 비용의 증가에 대한 챌린지(challenge)를 유발한다. 본 개시내용의 재조합 크리산타스파제는 이. 콜라이에서 재조합적으로 발현된 다른 에스위니아 크리산테미 L-아스파라기나제 및 에스위니아 크리산테미-유래된 L-아스파라기나제보다 더 낮은 응집을 입증한다. 재조합 L-아스파라기나제의 이러한 양태는 이것이 당해 분야보다 개선되도록 한다.

본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 상기 단락에서의 특성 또는 본원에 기술된 임의의 다른 특성의 임의의 조합을 가질 수 있다.

IV. 재조합 L-아스파라기나제의 제조 방법

일부 구현예에서, 본원에 기술된 재조합 크리산타스파제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 슈도모나스 플루오레센스는 천연의 L-아스파라기나제를 결핍하고 있다.

일부 구현예에서, 본 개시내용는 가용성 형태의 재조합 L-아스파라기나제를 고 수율로 세포질 생산하는 방법을 제공하고, 여기서 재조합 단백질은 이의 천연의 숙주에서 보다 적은 수율로 세포질적으로 생산된다. 이의 천연 숙주, 에스위니아 크리산테미에서, L-아스파라기나제는 세포질 내에 생산된다. 본 발명은 숙주 세포의세포질 내에 가용성이고/이거나 활성인 재조합 L-아스파라기나제를 고 수율로 생산하도록 하는 방법을 제공한다. 구현예에서, 본원에 제공된 방법은 슈도모나달레스(Pseudomonadales), 슈도모나드(Pseudomonad), 슈도모나스(Pseudomonas), 또는 슈도모나스 플루오레센스 숙주 세포의 세포질 내에서 가용성이고/이거나 활성인 재조합 L-아스파라기나제를 고 수율로 생산한다.

재조합 L-아스파라기나제를 제조하는데 사용될 수 있는 방법은 예를 들면, 미국 공보 제2019/0127742호에 기술되어 있고, 이는 재조합 L-아스파라기나제의 제조 방법과 관련된 모든 목적 및 특히 모든 기술을 위해 이의 점문이 참고로 본원에 포함된다. 본원에 기술된 방법에서 사용하기 위해 L-아스파라기나제를 단리 및/또는 개발하는 추가의 방법은 제WO 2011/003886A1호, 제WO 2018/234492A1호, 제WO 2019/109018호, 제WO 2021/078988호, 및 2021년 5월 14일자로 출원된 제PCT/US2021/032627호를 포함하고, 이들은 각각 L-아스파라기나제에 대한 제조 및 개발 방법에 관한 모든 목적 및 특히 모든 기술을 위해 이의 전문이 본원에 참고로 포함된다.

V. 치료 방법 및 재조합 아스파라기나제 단백질의 용도

A. 질환 또는 장애

본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 사람 대상체에서 질환의 치료에 사용될 수 있고, 여기서 질환은 아스파라긴의 고갈에 의해 치료가능하다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 암의 치료에 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 재조합 L-아스파라기나제의 투여 이전에 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 사일런트 불활성화(silent inactivation)를 경험하였다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 재조합 L-아스파라기나제의 투여 이전에, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 알레르기 반응을 경험하였다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 재조합 L-아스파라기나제의 투여 이전에 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 아나필락시를 경험하였다. 알레르기(allergy) 또는 과민성(hypersensitivity)에 대한 객관적인 신호의 비-제한적 예는 아스파라기나제 효소에 대해 "양성인 항체"를 시험함을 포함한다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 암의 치료에 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 급성 림프구성 백혈병(ALL)의 치료 또는 이의 치료에 사용하기 위한 의약(medicament)의 제조에 유용하다. L-아스파라기나제를 사용한 치료 후 ALL 환자에서 재발의 발생은 조기 재발(예컨대, 유도 후 30 내지 36개월째에 유지 상 동안 일부)된 소아 ALL 환자의 대략 10 내지 25%로 높게 남아있다. 이. 콜라이-유래된 L-아스파라기나제로 치료한 환자가 재발된 경우, 이. 콜라이 제제를 사용한 후속적인 치료는 "예방" 효과를 초래할 수 있고, 이에 의해, 이. 콜라이 제제는 후속적인 투여 동안 증가된 면역원성을 갖는다. 일 구현예에서, 본 발명의 재조합 L-아스파라기나제는 다른 아스파라기나제 제제로 이미 치료받은 재발된 ALL을 지닌 환자를 치료하는 방법에서 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 재발된 ALL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 PEG 모이어티와 접합된다. 일부 구현예에서, 재발된 ALL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 PEG 모이어티에 접합되지 않는다. 일부 구현예에서, 재발된 ALL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 프롤린- 또는 알라닌-함유 펩타이드와 접합된다. 일부 구현예에서, 재발된 ALL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 프롤린- 또는 알라닌-함유 펩타이드와 접합되지 않는다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 림프모구 림프종(LBL)의 치료 또는 이의 치료에 사용하기 위한 의약의 제조에 유용하다. ALL을 지닌 환자에 대해 유사하게, 일부 구현예에서, 재발된 LBL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 PEG 모이어티와 접합된다. 일부 구현예에서, 재발된 LBL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 PEG 모이어티와 접합되지 않는다. 일부 구현예에서, 재발된 LBL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 프롤린- 또는 알라닌-함유 펩타이드와 접합된다. 일부 구현예에서, 재발된 LBL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 프롤린- 또는 알라닌-함유 펩타이드와 접합되지 않는다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 결장직장 암(CRC)의 치료 또는 이의 치료에 사용하기 위한 의약의 제조에 사용된다. 일부 구현예에서, CRC를 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 PEG 모이어티와 접합된다. 일부 구현예에서, CRC를 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 PEG 모이어티와 접합되지 않는다. 일부 구현예에서, CRC를 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 프롤린- 또는 알라닌-함유 펩타이드와 접합된다. 일부 구현예에서, CRC를 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 프롤린- 또는 알라닌-함유 펩타이드와 접합되지 않는다. 일부 구현예에서, CRC는 Wnt-음성 CRC이다. 일부 구현예에서, CRC는 Wnt-돌연변이체 CRC이다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 급성 골수성 백혈병(acute myeloid leukemia; AML)의 치료 또는 이의 치료에 사용하기 위한 의약의 제조에 유용하다. 일부 구현예에서, ALL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 PEG 모이어티와 접합된다. 일부 구현예에서, ALL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 PEG 모이어티와 접합되지 않는다. 일부 구현예에서, ALL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 프롤린- 또는 알라닌-함유 펩타이드와 접합된다. 일부 구현예에서, ALL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 프롤린- 또는 알라닌-함유 펩타이드와 접합되지 않는다. 일부 구현예에서, AML은 재발되는/난치성의 급성 골수성 백혈병(relapsed/refractory acute myeloid leukemia; R/R AML)이다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 광범위 큰 b 세포 림프종(diffuse large b cell lymphoma; DLBCL)의 치료 또는 이의 치료에 사용하기 위한 의약의 제조에 유용하다. 일부 구현예에서, DLBCL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 PEG 모이어티와 접합된다. 일부 구현예에서, DLBCL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 PEG 모이어티와 접합되지 않다. 일부 구현예에서, DLBCL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 프롤린- 또는 알라닌-함유 펩타이드와 접합된다. 일부 구현예에서, DLBCL을 지닌 환자에게 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 프롤린- 또는 알라닌-함유 펩타이드와 접합되지 않는다.

본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제가 치료하는데 유용한 질환 또는 장애는 다음을 포함하나, 이에 한정되지 않는다; 악성종양(malignancy), 또는 암, 예를 들면, 그러나 이에 한정되지 않는, 혈액 악성종양(hematalogic malignancy), 림프종(lymphoma), 비-호지킨 림프종(non-Hodgkin's lymphoma), NK 림프종(NK lymphoma), 췌장 암(pancreatic cancer), 호지킨 질환(Hodgkin's disease), 거대 세포 면역아세포 림프종(large cell immunoblastic lymphoma), 급성 전골수구성 백혈병(acute promyelocytic leukemia), 급성 골수성 백혈병(acute myelocytic leukemia), 급성 골수단구성 백혈병(acute myelomonocytic leukemia), 급성 단핵구 백혈병(acute monocytic leukemia), 급성 T-세포 백혈병(acute T-cell leukemia), 급성 골수성 백혈병(acute myeloid leukemia; AML), 이형형 B-세포 골수단구성 백혈병(biphenotypic B-cell myelomonocytic Leukemia), 만성 림프구성 백혈병(chronic lymphocytic leukemia), 림프육종(lymphosarcoma), 망막육종(reticulosarcoma), 및 흑색육종(melanosarcoma), 및 광범위 큰 B-세포 림프종(광범위 큰 B-세포 림프종; DLBCL). 재조합 L-아스파라기나제가 치료하는데 유용한 질환 또는 장애는 신장 세포 암종(renal cell carcinoma), 신장 세포 선암종(renal cell adenocarcinoma), 교모세포종(glioblastoma), 예를 들면, 다형성 교모세포종(glioblastoma multiforma) 및 교모세포종 성상세포종(glioblastoma astrocytoma), 수모세포종(medulloblastoma), 횡문근육종(rhabdomyosarcoma), 악성 흑색종(malignant melanoma), 표피양 암종(epidermoid carcinoma), 편평 세포 암종(squamous cell carcinoma), 폐 암종(lung carcinoma), 예를 들면, 거대 세포 폐 암종(large cell lung carcinoma) 및 소 세포 폐 암종(small cell lung carcinoma), 자궁내막 암종(endometrial carcinoma), 난소 선암종(ovarian adenocarcinoma), 난소 사상암종(ovarian tetratocarcinoma), 자궁 경부 선암종(cervical adenocarcinoma), 유방 암종(breast carcinoma), 유방 선암종(breast adenocarcinoma), 유방관 암종(breast ductal carcinoma), 췌장 선암종(pancreatic adenocarcinoma), 췌장관 암종(pancreatic ductal carcinoma), 결장 암종(colon carcinoma), 결장 선암종(colon adenocarcinoma), 결장직장 선암종(colorectal adenocarcinoma), 방광 이행 세포 암종(bladder transitional cell carcinoma), 방광 유두종(bladder papilloma), 전립선 암종(prostate carcinoma), 골육종(osteosarcoma), 골의 상피성 암종(epitheloid carcinoma of the bone), 전립선 암종(prostate carcinoma), 및 갑상선 암(thyroid cancer)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 암은 고형 암(solid cancer), 예를 들면, 폐 암 또는 유방 암일 수 있다. 아스파라긴 고갈에 반응하는 대표적인 비-악성 혈액 질환은 면역계-매개된 혈액 질환(immune system-mediated blood disease), 예를 들면, 그러나 이에 한정되지 않는 감염성 질환(infectious disease), 예를 들면, HIV 감염에 의해 유발된 것(즉, AIDS)를 포함한다. 아스파라긴 의존성과 관련된 비-혈액 질환은 자가면역 질환(autoimmune disease), 예를 들면, 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis), 교원성 혈관 질환(collagen vascular diseases), AIDS, 골관절염(osteoarthritis), 이삭 증후군(Issac's syndrome), 건선(psoriasis), 인슐린 의존성 진성 당뇨병(insulin dependent diabetes mellitus), 다발 경화증(multiple sclerosis), 경화성 범뇌염(sclerosing panencephalitis), 전신 홍반 루푸스(systemic lupus erythematosus; SLE), 류마티스 열(rheumatic fever), 염증성 창자 질환(inflammatory bowel disease)(예컨대, 궤양성 결장염(ulcerative colitis) 및 크론 질환(Crohn's disease)), 원발성 담도 간경변(primary billiary cirrhosis), 만성 활성 간염(chronic active hepatitis), 사구체신염(glomerulonephritis), 중증 근무력증(myasthenia gravis), 심상성 천포창(pemphigus vulgaris), 및 그레이브스 질환(Graves' disease)을 포함한다. 질환을 유발하는 것으로 예측된 세포는 임의의 적합한 시험관 내(in vitro) 또는 생체 내(in vivo) 검정, 예컨대, 시험관 내 검정에서 아스파라긴 의존성에 대해 시험될 수 있고, 여기서 성장 배지는 아스파라긴을 결여하고 있다.

본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제가 치료하는데 유용한 질환 또는 장애는 육종(sarcoma), 유방 암, 전이성 유방 암(metastatic breast cancer), 간암(liver cancer), 위 암(stomach cancer), 결장직장 암(colorectal cancer), 및 두부 및 경부 암(head and neck cancer)을 포함한다.

B. 아스파라긴 의존성에 대한 시험 방법

질환을 유발하는 것으로 예측된 세포는 임의의 적합한 시험관 내 또는 생체 내 검정, 예컨대, 시험관 내 검정에서 아스파라긴 의존성에 대해 시험될 수 있고, 여기서 성장 배지는 아스파라긴을 결여하고 있다. 따라서, 일부 구현예에서, 본 개시내용은 환자에서 검출가능한 질환을 치료하는 방법에 관한 것이고, 이러한 방법은 환자에게 유효량의 본 발명의 재조합 L-아스파라기나제를 투여하는 단계를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 질환은 ALL이다. 구체적인 구현예에서, 질환은 LBL이다. 특수한 구현예에서, 아스파라긴 고갈에 의해 검출가능한 질환의 치료에 유용한 재조합 L-아스파라기나제는 서열 번호: 1의 서열을 포함한다. 추가의 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 PEG와 같은 중합체에 접합되지 않는다.

C. 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA)을 평가하기 위한 방법

사람 대상체에서 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA)을 평가하기 위한 방법을 사람 대상체의 평가를 위해 수행할 수 있다. 일부 구현예에서, 혈청 샘플을 사람 대상체로부터 취하여 NSAA를 평가한다. 일부 구현예에서, 전혈 샘플을 대상체로부터 취하여 NSAA를 평가한다. 일부 구현예에서, NSAA를 평가하는 것은 환자에게 재조합 L-아스파라기나제를 제공하기 전에 수행된다. 일부 구현예에서, NSAA를 평가하는 것은 환자에게 재조합 L-아스파라기나제를 제공한 후에 수행된다.

D. 치료요법 라인(Line of Therapy)

1차 치료요법은 질환에 대해 제공된 첫번째 치료이다. 1차 치료요법은 단독치료요법(monotherapy) 또는 치료의 표준 세트일 수 있다.

2차 치료요법(second line therapy)은 단독치료요법 또는 치료의 표준 세트일 수 있다. 2차 치료요법은 1차 치료가 실패한 후, 이의 효과(부분적으로 또는 전체적으로)를 상실한 후, 견디지 못할 부작용을 가진 후, 환자가 특정 이유로 1차 치료를 중단하기로 선택한 후, 또는 현재의 치료보다 더 우수한 결과를 가질 수 있는 신규 치료가 이용가능하게 된 후에 주어진 치료이다. 일부 구현예에서, 2차 치료요법은 부가적인 또는 상승적인(synergistic) 결과를 위해 1차 치료요법에 더하여 사람 대상체에게 제공될 수 있다.

3차, 4차, 5차, 6차, 및 임의의 추가 라인의 치료요법을 포함하는 추가의 라인의 치료요법은 2차 치료요법과 유사하게 정의되지만 이러한 경우에 1차 및 2차 치료요법 둘 다는 실패하거나, 이의 효과(부분적으로 또는 전체적으로)를 잃거나, 견디지 못하는 부작용을 가지거나 환자가 특정 이유로 1차 및/또는 2차 치료요법으로부터 중단하는 것을 선택하거나, 1차 및 2차 치료보다 더 우수한 결과를 가질 수 있는 신규한 치료가 이용가능하게 되거나, 이러한 이유 중 어떠한 조합이다. 치료요법의 추가의 라인은 단독치료요법 또는 치료의 표준 세트일 수 있다. 일부 구현예에서, 치료요법의 추가의 라인은 사람 대상체에게 유리한 부가적인 또는 상승적인 결과를 위해 1차 및/또는 1차 치료요법에 더하여 주어질 수 있다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 치료는 1차 치료요법으로서 투여될 것이다. 다른 양태에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 치료는 환자, 특히 ALL 및 LBL을 지닌 환자에서 2차 치료요법으로서 투여될 것이고, 이러한 환자에서 알레르기 또는 과민성, 예를 들면, "사일런트 불활성화"의 객관적인 신호가 다른 아스파라기나제 제제, 특히, 천연의 에스케리키아-콜라이(Escherichia-coli)-유래된 L-아스파라기나제 또는 이의 페길화된 변이체(ㅍ페가스파르가제)에 대해 진행되었다. 알레르기 또는 과민성의 객관적인 신호의 비-제한적 예는 아스파라기나제 효소에 대해 "양성인 항체"를 시험하는 것을 포함한다. 환자는 이. 콜라이로부터의 적어도 하나의 L-아스파라기나제에 대해 사전의 과민성을 가지고 있을 수 있고/있거나, 에스위니아 크리산테미로부터의 적어도 하나의 L-아스파라기나제에 대해 사전의 과민성을 가지고 있을 수 있다. 과민성은 알레르기 반응(allergic reaction), 아나필락시성 쇼크(anaphylactic shock), 및 사일런트 불활성화(silent inactivation)로 이루어진 그룹으로부터 선택될 수 있다. 구체적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 페가스파르가제를 사용한 치료 후 2차 치료요법에서 사용된다. 보다 구체적인 구현예에서, 2차 치료요법에 사용된 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 슈도모나달레스 플루오레센스 세포에서 생산된, 보다 구체적으로 테트라머를 포함하는 L-아스파라기나제를 포함하고, 여기서 각각의 모노머 또는 소단위는 서열 번호: 1의 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 이. 콜라이-유래된 L-아스파라기나제에 대해 과민성이고/이거나 에스위니아 크리산테미-유래된 L-아스파라기나제에 대해 사전 과민성을 가지고 있을 수 있는 환자에서 2차 치료요법으로 사용된다. 이. 콜라이-유래된 L-아스파라기나제는 이. 콜라이-유래된 L-아스파라기나제의 천연 형태 또는 장기-작용하는 형태일 수 있다. 천연의 이. 콜라이-유래된 L-아스파라기나제는 서열 번호: 3 또는 하기의 예 중 어느 것, 예를 들면, 그러나 이에 한정되지 않는, 크라스티닌(Bayer), 엘스파르(Merck), 키드롤라제(Rhone-Poulenc) 및 류나제(Kyowa)에 의해 확인될 수 있다(또한 참고: ASPG2_ECOLI, Uniprot 수탁 번호 제P00805호, https://www.uniprot.org/uniprot/P00805).

서열 번호: 3은 하기와 같다:

일부 구현예에서, 재조합 아스파라기나제는 CRC를 지닌 환자에서 2차 치료요법으로서 투여될 것이다. 일부 구현예에서, 재조합 아스파라기나제는 Wnt-음성 CRC를 지닌 환자에서 2차 치료요법으로서 투여될 것이다. 일부 구현예에서, 재조합 아스파라기나제는 Wnt-돌연변이체 CRC를 지닌 환자에서 2차 치료요법으로서 투여될 것이다. 일부 구현예에서, 재조합 아스파라기나제는 AML을 지닌 환자에서 2차 치료요법으로서 투여될 것이다. 일부 구현예에서, 재조합 아스파라기나제는 재발되는/난치성의 AML을 지닌 환자에서 2차 치료요법으로서 투여될 것이다. 일부 구현예에서, 재조합 아스파라기나제는 DLBCL을 지닌 환자에서 2차 치료요법으로서 투여될 것이다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 천연의 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제를 제공받은 환자를 사용한 2차 치료요법으로서 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 하나의 용량은 환자에게 천연의 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 하나의 용량에 대한 대체물로서 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제를 제공받은 환자를 사용한 2차 치료요법으로서 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 6개 용량은 환자에게 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 하나의 용량에 대한 대체물로서 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 7개 용량은 환자에게 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 하나의 용량에 대한 대체물로서 투여된다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페가스파라제이다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 칼라스파르가제이다(참고: Liu, G., Space for Calaspargase? A New Asparaginase for Acute Lymphoblastic Leukemia Clin Cancer Res 2020;26:325-7). 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 치료는 3차 치료요법으로서 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 치료는 4차 치료요법으로서 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 치료는 5차 치료요법으로서 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 치료는 6차 치료요법으로서 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 치료는 유지 치료요법(maintenance therapy)으로서 투여된다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체물로서 환자에게 재조합 L-아스파라기나제를 투여하는 것은 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 치료 주기 내에서 어느시간에도 일어날 수 있다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 어디든 1 내지 14회 용량이다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 또는 14회 용량이다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 2 내지 12회 용량이다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 4 내지 10회 용량이다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 4 내지 10회 용량이다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 4 내지 8회 용량이다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 4 내지 6회 용량이다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체물로서 재조합 L-아스파라기나제를 환자에게 투여하는 것은 환자가 과민성을 경험하는 경우에 따라 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 치료 주기 내 어느때에도 일어날 수 있다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 치료는 다중-제제 화학치료법(multi-agent chemotherapy)과 함께 공-투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 치료는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여된다. 일부 구현예에서, 다른 제제 외에 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 환자의 치료는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성으로 진행된 환자에 대해 아스파라기나제의 이용가능성을보증하는데 도움을 준다. 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 다중-제제 화학치료 요법의 부분일 수 있는 제제의 예는 사이타라빈, 빈크리스틴, 다우노루비신, 메토트렉세이트, 유보코린, 독소루비신, 안트라사이클린, 코르티코스테로이드 및 글루코코르티오드(프레드니손, 프레드니솔론, 및/또는 덱사메타손을 포함하나, 이에 한정되지 않음), 사이클로포스파미드, 6-머캅토퓨린, 베네토클락스, 및 에토포시드를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일부 구현예에서, 다중-제제 화학치료 요법은 재조합 L-아스파라기나제 및 하나의 추가의 화학치료제이다. 일부 구현예에서, 다중-제제 화학치료 요법은 재조합 L-아스파라기나제 및 2개 이상의 추가의 화학치료제이다.

예로서, ALL을 지닌 환자는 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 다중-제제 화학치료법과 함께 유도, 통합(consolidation) 또는 강화(intensification), 및 유지(maintenance)를 포함하는 3개의 화학치료법 상 동안에 공-투여받을 것이다. 구체적인 예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 아스파라긴 신테타제 억제제(예컨대, 이의 전문이 본원에 참고로 포함된 제WO 2007/103290호에 제시된 바와 같은)와 함께 공-투여된다. 다른 구체적인 예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 아스파라긴 신테타제 억제제와 함께 공-투여되지 않지만, 다른 화학치료법 약물과 함께 공-투여된다. 다른 구체적인 예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 아스파라긴 신테타제 억제제 및 다른 화학치료법 약물과 함께 공-투여된다. 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료법 요법의 부분으로서 다른 화합물 전에, 후에, 또는 이와 동시에 공-투여될 수 있다. 특수한 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된 단백질, 및 보다 구체적으로, 서열 번호: 1의 서열을 포함하는 재조합 L-아스파라기나제를 포함한다.

VI. 조성물, 제형, 투여 경로, 및 복용

A. 조성물,제형 및 투여 경로

본 발명은 또한 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 약제학적 조성물은 환자에게 표준 기술을 사용하여 투여할 수 있다. 기술 및 제형은 일반적으로 문헌: Remington's Pharmaceutical Sciences, 22nd edition, Mack Publishing, 2015(본원에 참고로 포함됨)에서 찾을 수 있다. 본원에 개시된 구현예는 각각 본원에 재조합 L-아스파라기나제의 투여 및 용도와 관련된 모든 목적 및 특히 모든 기술을 위해, 참고로 본원에 포함된, 예를 들면, 2020년 10월 23일자로 출원된 제WO2021/078988호 및 2021년 5월 14일자로 출원된 제PCT/US2021/032627호에 기술된 다른 요법과 함께 또는 이와 더불어 추가로 활용될 수 있다.

적합한 투여량 형태는, 부분적으로, 사용 또는 도입 경로, 예를 들면, 주사(비경구)에 의존한다. 이러한 투여량 형태는 치료제가 표적 세포에 도달하도록 할 수 있거나 달리는 목적한 치료학적 효과를 가질 수 있다. 예를 들면, 혈류로 주사된 약제학적 조성물은 바람직하게는 가용성이다. 본 개시내용에 따른 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 염 및 이의 복합체로서 제형화될 수 있다. 약제학적으로 허용되는 염은 이들이 투여되는 양 및 농도로 존재하는 무독성 염이다. 이러한 염의 제제는 이를 이의 생리학적 효과로부터 방지하지 않고 화합물의 물리적 특성을 변경시킴으로써 약제학적 사용을 촉진시킬 수 있다. 생리학적 특성에서 유용한 변경은 융점을 낮추어 경점막 투여를 촉진시키고 용해도를 증가시켜 보다 높은 농도의 약물을 투여하는 것을 촉진시키는 것을 포함한다. 변형된 단백질의 약제학적으로 허용되는 염은 당해 분야의 숙련가가 인식할 바와 같이, 복합체로서 존재할 수 있다. 약제학적으로 허용되는 염은 산 부가 염, 예를 들면, 설페이트, 하이드로클로라이드, 푸마레이트, 말레에이트, 포스페이트, 설파메이트, 아세테이트, 시트레이트, 락테이트, 타르트레이트, 메탄설포네이트, 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트, 사이클로헥실설파메이트, 및 퀴네이트를 함유하는 것을 포함한다. 약제학적으로 허용되는 염은 산, 예를 들면, 염산, 말레산, 황산, 인산, 설팜산, 아세트산, 시트르산, 락트산, 타르타르산, 말론산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 벤젠설폰산, p-톨루엔설폰산, 사이클로헥실설팜산, 푸마르산, 및 퀸산으로부터 수득될 수 있다. 약제학적으로 허용되는 염은 또한 산성 작용 그룹, 예를 들면, 카복실산 또는 페놀이 존재하는 경우, 염기 부가 염, 예를 들면, 벤자틴, 클로로프로카인, 콜린, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, 메글루민, 프로카인, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 칼륨, 나트륨, 암모늄, 알킬아민, 및 아연을 포함한다. 예를 들면, 상기 문헌: Remington's Pharmaceutical Sciences을 참고한다. 이러한 염은 적절한 상응하는 염기를 사용하여 제조할 수 있다. 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 또한 본 발명에 따른 약제학적 조성물 내로 포함시켜 특수한 아스파라기나제의 투여를 촉진할 수 있다. 본 발명의 실시에 사용하기 적합한 담체의 예는 탄산칼슘, 인산칼슘, 다양한 당, 예를 들면, 락토스, 글루코스, 또는 슈크로스, 또는 전분의 유형, 셀룰로스 유도체, 젤라틴, 식물성 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 및 생리학적으로 상용성인 용매를 포함한다. 생리학적으로 상용성인 용매의 예는 주사용 수(water for injection; WFI)의 멸균 용액, 염수 용액 및 덱스트로스를 포함한다. 본 발명에 따른 약제학적 조성물은 상이한 경로, 예를 들면, 정맥내(IV) 및 근육내(IM) 투여로 투여될 수 있다. 주사의 경우, 약제학적 조성물은 액체 용액, 바람직하게는 생리학적으로 상용성인 완충제 또는 용액, 예를 들면, 염수 용액, 행크스 용액(Hank's solution), 또는 링커 용액(Ringer's solution) 속에서 제형화된다. 또한, 화합물은 고체 형으로 제형화될 수 있고 사용 직전에 재용해되거나 현탁될 수 있다. 예를 들면, 재조합 L-아스파라기나제의 동결건조된 형태가 생산될 수 있다. 구체적인 양태에서, 재조합 L-아스파라기나제는 근육내로 투여된다. 바람직한 구체적인 양태에서, 재조합 L-아스파라기나제는 정맥내로 투여된다.

바람직한 구현예에서, 약제학적 조성물은 동결건조되지 않는다. 추가의 구현예에서, 약제학적 조성물은 용액이다. 일부 구현예에서, 최종의 동결건조 단계는 유도된 스트레스를 유발할 수 있고 화합물의 분해를 촉진할 수 있다. 일부 구현예에서, 동결건조는 응집을 증가시킬 수 있다. 일부 바람직한 구현예에서, 재조합 크리산타스파제는 근육내로 투여된다. 일부 추가의 바람직한 구현예에서, 재조합 크리산타스파제는 정맥내로 투여된다. 투여 형태의 이러한 바람직한 구현예의 경우에, 재조합 L-아스파라기나제의 어떠한 형태, 예를 들면, 변형된 및 변형되지 않은 형태로 투여될 수 있음이 인식될 것이다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 사람 대상체에게 특정 시점에서 정맥내로 투여될 것이고 동일한 사람 대상체에게 다른 특정 시점에서 근육내로 투여될 것이다.

B. 복용(dosing)

일부 구현예에서, 용량은 사람 대상체에게 특정 시점에 걸쳐 특정 빈도로 투여된 양이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 용량은 과민성이 진정된 경우에만 과민성을 지닌 사람 환자에게 주어질 것이다.

예시적인 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 사람 대상체에게 약 10mg/m² 내지 100mg/m²의 양으로 투여된다.

예시적인 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 사람 대상체에게 약 25mg/m² 내지 약 50mg/m²의 양으로 투여된다.

예시적인 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 5일 연속의 기간에 걸쳐 격일로 근육내 투여되고 2일 연속의 휴식 기간이 이어지고, 여기서 양은 약 25 mg/m²이다.

예시적인 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 5일 연속의 기간에 걸쳐 격일로 정맥내 투여되고 나머지 2일 연속이 휴식 기간이 이어지며, 여기서 양은 약 50 mg/m²이다.

추가의 예시적인 구현예 및 복용에 관해 본원의 논의 중 어느 것에 따라, 이러한 양으로 투여된 재조합 L-아스파라기나제는 중합체, 예를 들면, PEG 모이어티와 접합되지 않고/않거나 알라닌 및/또는 프롤린 잔기 만을 포함하는 펩타이드에 접합되지 않는다.

1. 용량의 양(Dose amount)

전달되어야 할 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제의 양은 많은 인자, 예를 들면, IC50, EC50, 화합물의 생물학적 반감기, 환자의 연령, 체격, 체중, 및 생리학적 상태, 및 치료될 질환 또는 장애에 의존할 것이다. 고려되어야 하는 이러한 및 다른 인자의 중요성은 당해 분야의 숙련가에게 잘 공지되어 있다. 일반적으로, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제의 양은 환자 신체의 표면적의 평방 미터 당 약 1 밀리그램(mg/m²) 내지 1,000/m²의 범위로, ALL 또는 LBL을 포함하나, 이에 한정되지 않는 질환을 투여하기 위해 약 10 mg/m² 내지 약 100 mg/m²의 투여량의 범위로 투여될 것이다. 물론, 다른 투여량 및/또는 치료 요법을 주치의에 의해 결정된 바와 같이, 사용할 수 있다.

일부 구현예에서, 방법은 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 약 10 mg/m²내지 약 100 mg/m²의 양으로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 10 mg/m²내지 100 mg/m²의 양으로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 95, 또는 95 mg/m² 또는 이의 등가의 양(예를 들면, 단백질 함량 기준)으로 투여된다. 보다 구체적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 및 약 100 mg/m²로 이루어진 그룹으로부터 선택된 양으로 투여된다. 보다 구체적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 내지 약 1, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 95, 95, 100, 200, 또는 300 mg/m² 이상의 용량으로 투여된다. 보다 구체적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 300, 200 100, 95, 80, 75, 70, 65, 60, 55, 50, 45, 40, 35, 30, 25, 20, 15, 10, 5, 또는 1 mg/m² 이하의 용량으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 12 mg/m²내지 약 90 mg/m²의 양으로 투여된다. 다른 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 20 mg/m²내지 약 80 mg/m²의 양으로 투여된다. 다른 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25 mg/m²내지 약 70 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25 mg/m²내지 약 80 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 37.5 mg/m²내지 약 80 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 37.5 mg/m²내지 약 65 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25 mg/m²내지 약 37.5 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25 mg/m²내지 약 100 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25 mg/m²내지 약 65 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25 mg/m²내지 약 80 mg/m²의 양으로 투여된다.

일부 구현예에서, 방법은 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 약 25 mg/m²내지 약 50 mg/m²의 양으로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 25 mg/m²내지 50 mg/m²의 양으로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 또는 50 mg/m²의 양 또는 이의 등가의 양(예를 들면, 단백질 함량 기준)으로 투여된다.

예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 20 mg/m²내지 약 30 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 22.5 mg/m²내지 약 28.5 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 23 mg/m²내지 약 27 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 24 mg/m²내지 약 26 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 24.5 mg/m²내지 약 25.5 mg/m²의 양으로 투여된다.

예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 40 mg/m²내지 약 60 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 42.5 mg/m²내지 약 58.5 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 43 mg/m²내지 약 57 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 44 mg/m²내지 약 56 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 45 mg/m²내지 약 55 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 46 mg/m²내지 약 54 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 47.5 mg/m²내지 약 52.5 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 48 mg/m²내지 약 52 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 49 mg/m²내지 약 51 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 49.5 mg/m²내지 약 50.5 mg/m²의 양으로 투여된다.

예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 30 mg/m²내지 약 75 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 35 mg/m²내지 약 70 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 40 mg/m²내지 약 65 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 45 mg/m²내지 약 60 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 50 mg/m²내지 약 55 mg/m²의 양으로 투여된다.

예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 40 mg/m²내지 약 75 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 45 mg/m²내지 약 70 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 50 mg/m²내지 약 65 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 55 mg/m²내지 약 60 mg/m²의 양으로 투여된다.

예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 40 mg/m²내지 약 60 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 45 mg/m²내지 약 55 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 47.5 mg/m²내지 약 50 mg/m²의 양으로 투여된다.

예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 30 mg/m²내지 약 35 mg/m²의 양으로 투여된다.

예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 30 mg/m²내지 약 95 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 35 mg/m²내지 약 90 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 40 mg/m²내지 약 85 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 45 mg/m²내지 약 80 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 50 mg/m²내지 약 75 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 55 mg/m²내지 약 70 mg/m²의 양으로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 60 mg/m²내지 약 65 mg/m²의 양으로 투여된다.

예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 30 mg/m²and 약 60 mg/m². 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 35 mg/m²and 약 55 mg/m². 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 40 mg/m²and 약 50 mg/m². 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 42.5 mg/m²내지 약 57.5 mg/m²의 양으로 투여된다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 10 mg/m²내지 약 50 mg/m²의 양으로 근육으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 12.5 mg/m² 내지 약 47.5 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 15 mg/m²내지 약 45 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 20 mg/m²내지 약 42.5 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 22.5 mg/m²내지 약 40 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 24 mg/m²내지 약 39 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 27 mg/m²내지 약 37.5 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 30 mg/m²내지 약 45 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 25 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25 mg/m²내지 약 80 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 37.5 mg/m²내지 약 80 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다.. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 37.5 mg/m²내지 약 65 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25 mg/m²내지 약 37.5 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 30 mg/m²내지 약 75 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 35 mg/m²내지 약 70 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 40 mg/m²내지 약 65 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 45 mg/m²내지 약 60 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 50 mg/m²내지 약 55 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 40 mg/m²내지 약 75 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 45 mg/m²내지 약 70 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 50 mg/m²내지 약 65 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 55 mg/m²내지 약 60 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 40 mg/m²내지 약 60 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 45 mg/m²내지 약 55 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 47.5 mg/m²내지 약 50 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 30 mg/m²내지 약 35 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 10 mg/m² 내지 약 95 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 20 mg/m² 내지 약 60 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 22.5 mg/m² 내지 약 57.5 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25 mg/m² 내지 약 55 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 27.5 mg/m² 내지 약 47.5 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 30 mg/m² 내지 약 45 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 32.5 mg/m² 내지 약 42.5 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 21.5 mg/m² 내지 약 38.5 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 36 mg/m² 내지 약 45 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 37.5 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 50 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 50 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다.

예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25 mg/m²내지 약 37.5 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25 mg/m²내지 약 100 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25 mg/m²내지 약 65 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 25mg/m²내지 약 80 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 30 mg/m²내지 약 35 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 30 mg/m²내지 약 95 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 35 mg/m²내지 약 90 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 40 mg/m²내지 약 85 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 45 mg/m²내지 약 80 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 50 mg/m²내지 약 75 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 55 mg/m²내지 약 70 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 60 mg/m²내지 약 65 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 30 mg/m²내지 약 60 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 35 mg/m²내지 약 55 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 40 mg/m²내지 약 50 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 42.5 mg/m²내지 약 57.5 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 30 mg/m²내지 약 75 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 35 mg/m²내지 약 70 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 40 mg/m²내지 약 65 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 45 mg/m²내지 약 60 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다. 예시적인 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 50 mg/m²내지 약 55 mg/m²의 양으로 근육내 또는 정맥내로 투여된다.

다른 구현예에서, 방법은 비-재조합 L-아스파라기나제와 비교하여 환자에서 보다 적은 면역원성 반응을 유발하는 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 투여하는 단계를 포함한다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게, 일련의 재조합 L-아스파라기나제의 7회 용량을 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 일련의 각각의 용량은 재조합 L-아스파라기나제 약 20 mg/m²이고, 일련의 각각의 용량의 투여 사이의 시간은 2일이다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게, 일련의 재조합 L-아스파라기나제의 7회 용량을 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 일련의 각각의 용량은 재조합 L-아스파라기나제 약 22.5 mg/m²이고, 일련의 각각의 용량의 투여 사이의 시간은 2일이다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게, 일련의 재조합 L-아스파라기나제의 7회 용량을 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 일련의 각각의 용량은 재조합 L-아스파라기나제 약 25 mg/m²이고, 일련의 각각의 용량의 투여 사이의 시간은 2일이다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게, 일련의 재조합 L-아스파라기나제의 7회 용량을 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 일련의 각각의 용량은 재조합 L-아스파라기나제 약 27.5 mg/m²이고, 일련의 각각의 용량의 투여 사이의 시간은 2일이다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게, 일련의 재조합 L-아스파라기나제의 7회 용량을 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 일련의 각각의 용량은 재조합 L-아스파라기나제 약 30 mg/m²이고, 일련의 각각의 용량의 투여 사이의 시간은 2일이다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게, 일련의 L-아스파라기나제의 6회 용량을 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 6회의 용량 중 4회는 약 25 mg/m²이고, 6회의 용량 중 2회는 약 50 mg/m²이고, 약 50 mg/m²인 2회의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 7일이고 약 25 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 2일이고 약 50 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 3일이고, 여기서 L-아스파라기나제는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 아니다. 일부 구현예에서, 약 25 mg/m²인 용량은 정맥내로 투여되고, 약 50 mg/m²인 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 근육내 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 혈관내로 투여된다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게, L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량을 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 6회의 용량 중 4회는 약 22.5 mg/m² 내지 약 27.5 mg/m²이고, 6회의 용량 중 2회는 약 47.5 mg/m² 내지약 52.5 mg/m²이고, 약 47.5 mg/m² 내지 약 52.5 mg/m²인 2회의 용량의 투여 사이의 시간은 7일이고, 약 22.5 mg/m² 내지 약 27.5 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 2일이고, 약 47.5 mg/m² 내지 약 52.5 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 7일이고, 여기서 L-아스파라기나제는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 아니다. 일부 구현예에서, 약 22.5 mg/m²내지 약 27.5 mg/m²인 용량은 정맥내로 투여되고, 약 47.5 mg/m² 내지 약 52.5 mg/m²인 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 혈관내로 투여된다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게, L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량을 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 6회의 용량 중 4회는 약 20 mg/m² 내지 약 30 mg/m²이고, 6회의 용량 중 2회는 약 45 mg/m² 내지 약 55 mg/m²이고, 약 45 mg/m² 내지 약 55 mg/m²인 2회의 용량의 투여 사이의 시간은 7일이고, 약 20 mg/m² 내지 약 30 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 2일이고, 약 45 mg/m² 내지 약 55 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 3일이고, 여기서 L-아스파라기나제는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 아니다. 일부 구현예에서, 약 20 mg/m² 내지 약 30 mg/m²인 용량은 혈관내로 투여되고, 약 45 mg/m² 내지 약 55 mg/m²인 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 혈관내로 투여된다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제 이외의 L-아스파라기나제를, 시간-순서 용량의 세트로서, 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고; 여기서 시간-순서 용량의 세트는 제1 투여에 이은 제2 투여를 포함하고, 제1 용량은은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 하나이고, 제2 용량은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 다른 것이고, 제1 용량이 약 50 mg/m²인 경우 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 3일이고, 제1 용량이 약 25 mg/m²인 경우 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 2일이고, 제2 용량이 약 50 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 3일 동안 투여되지 않고 제2 용량이 약 25 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 2일 동안 투여되지 않는다. 일부 구현예에서, 약 25 mg/m²인 어떠한 용량도 혈관내로 투여되고 약 50 mg/m²인 어떠한 용량도 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 혈관내로 투여된다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제 이외의 L-아스파라기나제를, 시간-순서 용량의 세트로서 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고; 여기서 시간-순서 용량의 세트는 제1 용량에 이은 제2 용량을 포함하고, 제1 용량은 (i) 약 47.5 mg/m² 내지 약 52.5 mg/m² 및 (ii) 약 22.5 mg/m² 내지 약 27.5 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 하나이고, 제2 용량은 (i) 약 47.5 mg/m² 내지 약 52.5 mg/m² 및 (ii) 약 22.5 mg/m² 내지 약 27.5 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 다른 것이고, 제1 용량이 약 47.5 mg/m² 내지 약 52.5 mg/m²인 경우, 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 3일이고, 제1 용량이 약 22.5 mg/m² 내지 약 27.5 mg/m²인 경우 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 2일이고, 제2 용량이 약 47.5 mg/m² 내지 약 52.5 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 3일 동안 투여되지 않고, 제2 용량이 약 22.5 mg/m² 내지 약 27.5 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 2일 동안 투여되지 않는다. 일부 구현예에서, 약 22.5 mg/m² 내지 약 27.5 mg/m²인 어떠한 용량도 혈관내로 투여되고 약 47.5 mg/m² 내지 약 52.5 mg/m²인 어떠한 용량도 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 혈관내로 투여된다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제 이외의 L-아스파라기나제를, 시간-순서 용량의 세트로서 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고; 여기서 시간-순서 용량의 세트는 제1 용량에 이은 제2 용량을 포함하고, 제1 용량은 (i) 약 45 mg/m² 내지 약 55 mg/m² 및 (ii) 약 20 mg/m² 내지 약 30 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 하나이고, 제2 용량은 (i) 약 45 mg/m² 내지 약 55 mg/m² 및 (ii) 약 20 mg/m² 내지 약 30 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 다른 것이고, 제1 용량이 약 45 mg/m² 내지 약 55 mg/m²인 경우 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 3일이고, 제1 용량이 약 20 mg/m² 내지 약 30 mg/m²인 경우 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 2일이고 제2 용량이 약 45 mg/m² 내지 약 55 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 3일 동안 투여되지 않고, 제2 용량이 약 20 mg/m² 내지 약 30 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 2일 동안 투여되지 않는다. 일부 구현예에서, 약 20 mg/m² 내지 약 30 mg/m²인 어떠한 용량도 혈관내로 투여되고 약 45 mg/m² 내지 약 55 mg/m²인 어떠한 용량도 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 혈관내로 투여된다.

2. 용량 빈도

구체적인 구현예에서, 치료는 약 1 mg/m² 내지 약 1000 mg/m², 전형적으로 약 10 mg/m²내지 약 100 mg/m²의 범위의 용량에서, 1주 당 약 3회 내지 1개월 당 약 1회, 전형적으로, 1주당 1회 또는 격주 당 1회의 범위의 스케쥴에서, 단일 제제(예컨대, 단독치료요법)으로서 또는 화학치료법 약물, 예를 들면, 그러나 이에 한정되지 않는, 글루코코르티코이드, 코르티코스테로이드, 항암 약물 또는 다른 제제, 예를 들면, 그러나 이에 한정되지 않는, 메토트렉세이트, 덱사메타손, 프레드니손, 프레드니솔론, 빈크리스틴, 사이클로포스파미드, 및 안트라사이클린과의 조합물의 부분으로서 투여될 것이다.

본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료법 요법의 부분으로서 다른 화합물 전에, 후에, 또는 이와 동시체 투여될 수 있다. 특수한 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된 단백질을 포함하고, 보다 구체적으로, 재조합 L-아스파라기나제는 서열 번호: 1에 따른 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라긴을 검출불가능한 수준까지 고갈시킨 용량에서 당해 분야에 공지된 방법 및 장치를 사용하여 단일 용량의 경우 약 3일 내지 약 10일(예컨대, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10일)의 기간 동안 투여된다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 1주당 3회 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 5일 연속의 기간에 걸쳐 격일로 투여되고, 2일 연속의 휴식 기간이 이어진다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 월요일, 수요일, 및 동일한 주의 금요일에 투여된다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 적어도 1 내지 3주 동안 1주 당 3회 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 1 내지 3주 동안 5일 연속의 기간에 걸쳐 격일로 투여되고, 2일 연속의 휴식 기간이 이어진다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 월요일, 수요일, 및 동일한 주의 금요일에 약 1 내지 3주 동안 투여된다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 2주 동안 1주 당 3회 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 2주 동안 5일 연속의 기간에 걸쳐 격일로 투여되고, 2일 연속의 휴식 기간이 이어진다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 월요일, 수요일, 및 동일한 주의 금요일에 약 2주 동안 투여된다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 1주당 3회 2주 동안 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 2주 동안 5일 연속의 기간에 걸쳐 격일로 투여되고, 2일 연속의 휴식 기간이 이어진다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 월요일, 수요일, 및 동일한 주의 금요일에 2주 동안 투여된다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 1주 당 3회 투여되고, 환자가 아스파라긴의 고갈에 의해 치료가능한 질화을 더 이상 가지지 않을 때까지 지속된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 5일 연속의 기간에 걸쳐 격일로 투여되고, 2일 연속의 휴식 기간이 이어진다, 환자가 아스파라긴의 고갈에 의해 치료가능한 질환을 더 이상 가지지 않을 때까지 지속된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 월요일, 수요일, 및 동일한 주의 금요일에 투여되고, 환자가 아스파라긴의 고갈에 의해 치료가능한 질환을 더 이상 가지지 않을 때까지 지속된다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 1주 당 3회 투여되고, 환자가 치료를 중지하거나 연기하기를 결정할 때까지 지속된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 5일 연속의 기간에 걸쳐 격일로 투여되고, 2일 연속의 휴식 기간이 이어지고, 환자가 치료를 중지하거나 연기하기를 결정할 때까지 지속된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 월요일, 수요일, 동일한 주의 금요일에 투여되고, 환자가 치료를 중지하거나 연기하기를 결정할 때까지 지속된다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 48시간 마다 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 40 내지 58시간 마다 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 42 내지 56시간 마다 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 44 내지 52시간 마다 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 46 내지 50시간 마다 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 72시간 마다 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 64 내지 80시간 마다 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 66 내지 78시간 마다 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 68 내지 76시간 마다 투여된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 약 70 내지 74시간 마다 투여된다.

일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제는 이. 콜라이-유래된 L-아스파라기나제에 대해 과민성이고/이거나 에스위니아 크리산테미-유래된 L-아스파라기나제에 대해 사전 과민성을 가졌을 수 있는 환자를 사용한 2차 치료요법으로서 투여된다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 사람 대상체에게 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 용량에 대한 대체물로서 투여된다. 일부 구현예에서, 6회 용량의 재조합 L-아스파라기나제가 사람 대상체에게 1회 용량의 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체물로서 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 7회 용량이 사람 대상체에게 1회 용량의 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체물로서 투여된다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페가스파르가제이다. 추가의 구현예에서, 6회의 별개의 용량은 약 2주의 기간에 걸쳐 일어날 수 있다. 다른 추가의 구현에에서, 7회의 별개의 용량은 약 2주에 걸쳐 일어날 수 있다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제에 대한 용량 요법은 주기를 포함하고, 여기서 주기는 제1 용량, 제2 용량, 및 제3 용량을 포함하고, 여기서 주기는 임의로 반복가능하고, 여기서 제1 용량, 제2 용량, 및 제3 용량은 약 48 내지 72시간 떨어져서 투여된다.

일부 구현예에서, 용량의 양은 주기(cycle) 내에서 변할 수 있다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제에 대한 용량 요법은 주기를 포함하고, 여기서 주기는 임의로 반복될 수 있고, 여기서 주기는 5일 연속에 걸쳐 격일로 재조합 L-아스파라기나제의 투여와, 이어서 2일 연속의 휴식 기간을 포함하고, 여기서 주기의 제1 용량은 25 mg/m²이고, 주기의 제2 용량은 25 mg/m²이고 주기의 제3 용량은 50 mg/m²이고, 2일 연속의 휴식 기간이 이어진다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제에 대한 용량 요법은 주기를 포함하고, 여기서 주기는 임의로 반복될 수 있고, 여기서 주기는 5일 연속에 걸쳐 격일로 재조합 L-아스파라기나제의 투여와, 이어서 2일 연속의 휴식 기간을 포함하고, 여기서 주기의 제1 용량은 25 mg/m²이고, 주기의 제2 용량은 25 mg/m²이고 주기의 제3 용량은 37.5 mg/m²이고, 2일 연속의 휴식 기간이 이어진다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제에 대한 용량 요법은 주기를 포함하고, 여기서 주기는 임의로 반복될 수 있고, 여기서 주기는 5일 연속에 걸쳐 격일로 재조합 L-아스파라기나제의 투여와, 이어서 2일 연속의 휴식 기간을 포함하고, 여기서 주기의 제1 용량은 37.5 mg/m²이고, 주기의 제2 용량은 37.5 mg/m²이고 주기의 제3 용량은 37.5 mg/m²이고, 2일 연속의 휴식 기간이 이어진다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제에 대한 용량 요법은 주기를 포함하고, 여기서 주기는 임의로 반복될 수 있고, 여기서 주기는 5일 연속에 걸쳐 격일로 재조합 L-아스파라기나제의 투여와, 이어서 2일 연속의 휴식 기간을 포함하고, 여기서 주기의 제1 용량은 37.5 mg/m²이고, 주기의 제2 용량은 25 mg/m²이고 주기의 제3 용량은 37.5 mg/m²이고, 2일 연속의 휴식 기간이 이어진다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제에 대한 용량 요법은 주기를 포함하고, 여기서 주기는 임의로 반복될 수 있고, 여기서 주기는 5일 연속에 걸쳐 격일로, 재조합 L-아스파라기나제의 투여와, 이어서 2일 연속의 휴식 기간을 포함하고, 여기서 주기의 제1 용량은 37.5 mg/m²이고, 주기의 제2 용량은 25 mg/m²이고 주기의 제3 용량은 25 mg/m²이고, 2일 연속의 휴식 기간이 이어진다. 일부 구현예에서, 주기의 제1 용량은 월요일에 투여되고, 주기의 제2 용량은 수요일에 투여되고, 주기의 제3 용량은 금요일에 주어진다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제에 대한 용량 요법은 주기를 포함하고, 여기서 주기는 임의로 반복될 수 있고, 여기서 주기는 5일 연속에 걸쳐 격일로 재조합 L-아스파라기나제의 투여와, 이어서 2일 연속의 휴식 기간을 포함하고, 여기서 주기의 제1 용량은 25 mg/m²이고, 주기의 제2 용량은 25 mg/m²이고 주기의 제3 용량은 50 mg/m²이고, 2일 연속의 휴식 기간이 이어진다. 일부 구현예에서, 주기의 제1 용량은 월요일에 투여되고, 주기의 제2 용량은 수요일에 주어지고, 주기의 제3 용량은 금요일에 주어진다.

일부 구현예에서, 본 개시내용은 사람 대상체에서 아스파라기나제를 고갈시켜 급성 림프구성 백혈병(ALL) 또는 림프모구 림프종(LBL)을 치료하는 방법을 제공하고, 이러한 방법은: 월요일, 수요일, 및 금요일에, 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제를 사람 대상체에게 근육내 투여함으로써, 사람 대상체가 2주 기간에 걸쳐 총 7회 용량의 L-아스파라기나제를 제공받도록 하는 단계를 포함한다.

일부 구현예에서, 본 개시내용은 사람 대상체에서 아스파라기나제를 고갈시켜 암, 예를 들면, 그러나 이에 한정되지 않는 급성 림프구성 백혈병(ALL), 림프모구 림프종(LBL), 결장직장 암(CRC), 급성 골수성 백혈병(AML)을 치료하는 방법을 제공하고, 이러한 방법은: (a) 월요일 및 수요일에, 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제를 사람 대상체에게 근육내 또는 혈관내로 투여하고, (b) 금요일에, 약 50 mg/m²의 L-아스파라기나제를 사람 대상체에게 근육내 또는 혈관내로 투여함으로써, 사람 대상체가 2주의 기간에 걸쳐 총 L-아스파라기나제의 6회 용량을 제공받도록 하는 단계를 포함한다.

용량 요법은 임의의 수의 주에 대한 임의의 수의 주기 또는 본원에 명시된 임의의 종점까지를 포함한다.

3. 투여 시간(dose time)

일부 구현예에서, 사람 대상체에 대한 투여 시간은 짧은 기간, 예를 들면, 근육내 주사에 의해 전달된 경우 즉시 또는 1초 내지 5분이다. 다른 양태에서, 사람 대상체에 대한 투여 시간은 예를 들면, 정맥내 주사로 전달된 경우, 보다 긴 기간이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 투여 시간은 약 5분 내지 약 4시간 동안 지속된다. 예시적인 구현예에서, 사람 대상체에 대한 투여 시간은 90분 내지 약 150 분 사이에서 지속된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체에 대한 투여 시간은 약 2시간 지속된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체에 대한 투여 시간은 2시간 지속된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체에 대한 투여 시간은 약 45분 내지 약 75분 사이에서 지속된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체에 대한 투여 시간은 약 1시간 지속된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체에 대한 투여 시간은 1시간 지속된다.

4. 바람직한 복용 요법

일부 구현예에서, 본 개시내용은 사람 대상체에서 암을 치료하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 급성 림프구성 백혈병(ALL) 또는 림프모구 림프종(LBL)을 지닌 사람 대상체를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 결장직장 암(CRC)를 지닌 사람 대상체를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 Wnt-음성 결장직장 암(CRC)를 지닌 사람 대상체를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 Wnt-돌연변이체 결장직장 암(CRC)를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 급성 골수성 백혈병(AML)을 지닌 사람 대상체를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 광범위 큰 B-세포 림프종(DLBCL)을 지닌 사람 대상체를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 재발되는/난치성의 AML(R/R AML)을 지닌 사람 대상체를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 1차 치료요법으로서 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 2차 치료요법으로서 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 3차, 4차, 또는 5차 치료요법으로서 사용될 수 있다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 천연의 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 대체될 수 있다. 일부 구현예에서, 1회 용량의 재조합 L-아스파라기나제가 사람 대상체에게 1회 용량의 천연의 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체물로서 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 대체될 수 있다. 일부 구현예에서, 6회 용량의 재조합 L-아스파라기나제는 사람 대상체에게 1회 용량의 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체물로서 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제의 7회 용량은 사람 대상체에게 1회 용량의 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체물로서 투여된다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페가스파르가제이다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 치료는 유지 치료요법으로서 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제를 사람 대상체에게 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체물로서 투여하는 것은 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 치료 주기 내 어떠한 시간에서 일어날 수 있다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 1 내지 14회 용량의 어느 것이다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 또는 14회의 용량이다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 2 내지 12회 용량 사이이다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 4 내지 10회 용량 사이이다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 4 내지 10회 용량 사이이다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 4 내지 8회 용량 사이이다. 일부 구현예에서, 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 치료 주기는 4 내지 6회 용량 사이이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제를 사람 대상체에게 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체물로서 투여하는 것은 사람 대상체가 과민성을 경험하는 때에 의존하여 천연의 또는 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 치료 주기 내 어떠한 시간에서도 일어날 수 있다. 물론, 다른 대체 치료 요법이, 주치의에 의해 결정된 바와 같이, 사용될 수 있다. 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제의 양은 하이브리드 용량 양식(hybrid dose format)으로 투여될 수 있고, 여기서 용량의 양은 복용 요법 내에서 변한다. 일반적으로, 하이브리드 복용 양식 하에 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제의 양은 질환, 예를 들면, 그러나 이에 한정되지 않는 질환을 치료하기 위해 약 25 mg/m² 내지 약 50 mg/m²의 범우에서 투여될 것이다. 일부 구현예에서, 25 mg/m²의 용량은 혈관내 투여되고 50 mg/m²의 용량은 근육내 투여된다. 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제의 양은 하이브리드 투여 양식으로 투여될 수 있고, 여기서 투여 방법은 복용 요법 내에서 변한다. 일부 구현예에서, 하이브리드 투여 양식은 정맥내 및 근육내 투여를 포함할 것이다. 물론, 다른 투여량 및/또는 치료 요법이 주치의에 의해 결정된 바와 같이, 사용될 수 있다.

일부 구현예에서, 본 개시내용은 사람 대상체의 암 치료를 대체하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 급성 림프구성 백혈병(ALL) 또는 림프모구 림프종(LBL)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 결장직장 암(CRC)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 Wnt-음성 결장직장 암(CRC)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 Wnt-돌연변이체 결장직장 암(CRC)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 광범위 큰 B-세포 림프종(DLBCL)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 급성 골수성 백혈병(AML)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 재발되는/난치성의 AML(R/R AML)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 1차 치료요법으로서 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 2차 치료요법으로서 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 3차, 4차, 또는 5차 치료요법으로서 사용될 수 있다.

(a) 용량 요법 1: 25mg/m ² 에서 7회 용량

일부 구현예에서, 본 발명은 사람 대상체의 암 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 급성 림프구성 백혈병(ALL) 또는 림프모구 림프종(LBL)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 결장직장 암(CRC)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 Wnt-음성 결장직장 암(CRC)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 Wnt-돌연변치에 결장직장 암(CRC)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 광범위 큰 B-세포 림프종(DLBCL)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 급성 골수성 백혈병(AML)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 재발되는/난치성의 (R/R) 급성 골수성 백혈병(AML)에 대한 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 개개 용량에 대한 대체체로서, 일련의 재조합 L-아스파라기나제의 7회 용량을 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 일련에서 각각의 용량은 약 25 mg/m²의 양의 재조합 L-아스파라기나제이고, 일련에서 각각의 용량의 투여 사이의 시간은 2일이다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 개개 용량에 대한 대체체로서, 일련의 재조합 L-아스파라기나제의 7회 용량을 근육내 또는 혈관 내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 일련에서 각각의 용량은 약 25 mg/m²의 양의 재조합 L-아스파라기나제이고, 일련에서 각각의 용량의 투여 사이의 시간은 약 48시간이다.

일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페그아스파라기나제(pegasparaginase)이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함한다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 70 퍼센트, 적어도 75 퍼센트, 적어도 80 퍼센트, 적어도 85 퍼센트, 적어도 90 퍼센트, 적어도 95 퍼센트, 적어도 96 퍼센트, 적어도 97 퍼센트, 적어도 98 퍼센트, 또는 적어도 99 퍼센트의 서열 동일성을 갖는다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 대체 이전에 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내었다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 성인 환자이다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 소아 환자이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 6% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 1% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 비-동결건조된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성 (NSAA) 검정은 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 투여 후 0.1 IU/mL 이상이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여된다.

(b) 용량 요법 2: 25mg/m ² /25mg/m ² /50mg/m ² 에서 6회 용량으로 2회(X2)

본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제의 양은 혼합된 용량 양식으로 투여되고, 여기서 용량의 양은 복용 요법 내에서 변한다. 일반적으로, 혼합된 복용 양식 하에서 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제의 양은 질환, 예를 들면, 그러나 이에 한정되지 않는, 암을 치료하기 위해 약 25 mg/m² 내지 약 50 mg/m²의 범위에서 투여된다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 ALL 또는 LBL이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 CRC이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 Wnt-음성 CRC이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 Wnt-돌연변치체 CRC이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 광범위 큰 B-세포 림프종(DLBCL)이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 AML이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 R/R AML이다. 물론, 다른 투여량 및/또는 치료 요법을 주치의에 의해 결정된 바와 같이, 사용할 수 있다.

일부 구현예에서, 본 개시내용은 암에 대해 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 급성 림프구성 백혈병(ALL) 또는 림프모구 림프종(LBL)에 대해 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 결장직장 암(CRC)에 대해 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 Wnt-음성 결장직장 암(CRC)에 대해 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 Wnt-돌연변이체 결장직장 암(CRC)에 대해 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 광범위 큰 B-세포 림프종(DLBCL)에 대해 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 급성 골수성 백혈병(AML)에 대해 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 재발하는/난치성의 급성 골수성 백혈병(R/R AML)에 대해 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 각각 개개의 용량에 대한 대체물로서, L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량으로 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 6회의 용량 중 4회는 약 25 mg/m²이고, 6회의 용량 중 2회는 약 50 mg/m²이고, 약 50 mg/m²인 2회의 용량의 투여 사이의 시간은 7일이고, 약 25 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 2일이고, 약 50 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 3일이고, 여기서 L-아스파라기나제는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 아니다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게 각각의 용량의 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체체로서, L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량으로 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 6회의 용량 중 4회는 약 25 mg/m²이고, 6회의 용량 중 2회는 약 50 mg/m²이고, 약 50 mg/m²인 2회의 용량의 투여 사이의 시간은 7일이고, 약 25 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 2일이고, 약 50 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 3일이고, 여기서 L-아스파라기나제는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 아니고, 여기서 25 mg/m²의 용량은 혈관내 투여되고 50 mg/m²의 용량은 근육내 투여된다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게, 각각의 용량의 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체물로서, L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량을 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 6회의 용량 중 4회는 약 25 mg/m²이고, 6회의 용량 중 2회는 약 50 mg/m²이고, 약 50 mg/m²인 2회의 용량의 투여 사이의 시간은 약 168시간이고, 약 25 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 약 48시간이고, 약 50 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 약 72시간이고, 여기서 L-아스파라기나제는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 아니다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게 각각의 용량의 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체물로서, L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량을 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 6회의 용량 중 4회는 약 25 mg/m²이고, 6회의 용량 중 2회는 약 50 mg/m²이고, 약 50 mg/m²인 2회의 용량의 투여 사이의 시간은 약 168시간이고, 약 25 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 약 48시간이고, 약 50 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 약 72시간이고, 여기서 L-아스파라기나제는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 아니고, 여기서 25 mg/m²의 용량은 혈관내 투여되고 50 mg/m²의 용량은 근육내 투여된다.

일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페그아스파라기나제이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함한다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 70 퍼센트, 적어도 75 퍼센트, 적어도 80 퍼센트, 적어도 85 퍼센트, 적어도 90 퍼센트, 적어도 95 퍼센트, 적어도 96 퍼센트, 적어도 97 퍼센트, 적어도 98 퍼센트, 또는 적어도 99 퍼센트의 서열 동일성을 갖는다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내었다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 성인 환자이다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 소아 환자이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 6% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 1% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 비-동결건조된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정은 재조합 L-아스파라기나제로 투여한 후 0.1 IU/mL 이상이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여된다.

일부 구현예에서, 본 개시내용은 사람 대상체의 암 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 하고, 상기 방법은: 사람 대상체에게 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 용량에 대한 대체물로서, L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량을 근육내 또는 혈관내로투여하는 단계를 포함하고, 여기서 6회의 용량 중 4회는 약 25 mg/m²이고, 6회의 용량 중 2회는 약 50 mg/m²이고, 약 50 mg/m²인 2회의 용량의 투여 사이의 시간은 6 내지 8일이고, 약 25 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 2일이고, 약 50 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 3일이고, 여기서 L-아스파라기나제는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 아니다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페그아스파라기나제이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함한다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 70 퍼센트, 적어도 75 퍼센트, 적어도 80 퍼센트, 적어도 85 퍼센트, 적어도 90 퍼센트, 적어도 95 퍼센트, 적어도 96 퍼센트, 적어도 97 퍼센트, 적어도 98 퍼센트, 또는 적어도 99 퍼센트의 서열 동일성을 갖는다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내었다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 성인 환자이다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 소아 환자이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 6% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 1% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 비-동결건조된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정은 재조합 L-아스파라기나제로 투여한 후 0.1 IU/mL 이상이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여된다. 일부 구현예에서, 암은 림프구성 백별병(ALL)이다. 일부 구현예에서, 암은 림프모구 림프종(LBL)이다. 일부 구현예에서, 암은 결장직장 암이다. 일부 구현예에서, 암은 Wnt-음성 결장직장 암이다. 일부 구현예에서, 암은 결장직장 암이다. 일부 구현예에서, 암은 Wnt-돌연변이체 결장직장 암이다. 일부 구현예에서, 암은 광범위 큰 B-세포 림프종(DLBCL)이다. 일부 구현예에서, 암은 급성 골수성 백혈병(AML)이다. 일부 구현예에서, 급성 골수성 백혈병은 재발하는/난치성의 AML이다.

일부 구현예에서, 본 개시내용은 사람 대상체의 암 치료를 대체하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 하고, 상기 방법은: 사람 대상체에게, 각각의 용량의 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체물로서, L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량을 근육내 또는 혈관내 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 6회의 용량 중 4회는 약 25 mg/m²이고, 6회의 용량 중 2회는 약 50 mg/m²이고, 약 50 mg/m²인 2회의 용량의 투여 사이의 시간은 6 내지 8일이고, 약 25 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 2일이고, 약 50 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 3일이고, 여기서 L-아스파라기나제느 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 아니고, 여기서 25 mg/m²은 혈관내로 투여되고 50 mg/m²은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페그아스파라기나제이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함한다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 70 퍼센트, 적어도 75 퍼센트, 적어도 80 퍼센트, 적어도 85 퍼센트, 적어도 90 퍼센트, 적어도 95 퍼센트, 적어도 96 퍼센트, 적어도 97 퍼센트, 적어도 98 퍼센트, 또는 적어도 99 퍼센트의 서열 동일성을 갖는다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내었다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 성인 환자이다. 일부 구현예에서, 사람 대상체 소아 환자이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 6% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 1% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 비-동결건조된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정은 재조합 L-아스파라기나제로 투여한 후 0.1 IU/mL 이상이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여된다.

(c) 복용 요법 3: 3일 간격으로 50/25

본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제의 양은 하이브리드 복용 양식으로 투여될 수 있고, 여기서 용량 양 및 용량 시간은 복용 요법 내에서 변한다. 일반적으로, 하이브리드 복용 양식 하에서 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제의 양은 약 25 mg/m² 내지 약 50 mg/m²의 범위에서 투여되어 질환, 예를 들면, 그러나 이에 한정되지 않는 ALL 또는 LBL, CRC, AML, 또는 DLBCL을 치료할 것이다. 일부 구현예에서, CRC는 Wnt-음성 CRC이다. 일부 구현예에서, CRC는 Wnt-돌연변이체 CRC이다. 일부 구현예에서, AML은 R/R AML이다. 물론, 다른 투여량 및/또는 치료 요법도 주치의에 의해 결정된 바와 같이 사용될 수 있다.

일부 구현예에서, 본 개시내용은 이를 필요로 하는 사람 대상체에서 급성 림프구성 백혈병(ALL) 또는 림프모구 림프종(LBL)을 치료하는 방법을 제공한다.

일부 구현예에서 방법은 사람 대상체에게 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제 이외의 L-아스파라기나제를, 시간-순서 용량의 세트로서 근육내 투여하는 단계를 포함하고; 여기서 시간-순서 용량의 세트는 제1 용량에 이은 제2 용량을 포함하고, 제1 용량은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 하나이고, 제2 용량은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 다른 것이고, 제1 용량이 약 50 mg/m²인 경우 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 3일이고, 제1 용량이 약 25 mg/m²인 경우 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 2일이고 제2 용량이 50 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 3일 동안 투여되지 않고, 제2 용량이 25 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 2일 동안 투여되지 않는다.

일부 구현예에서, 제1 용량은 약 50 mg/m²이고 제2 용량은 약 25 mg/m²이고 시간-순서 용량의 세트는 제2 용량 후 제3 용량을 추가로 포함하고, 제3 용량은 약 25 mg/m²이고, 사람 대상체에 대한 제2 용량과 제3 용량의 투여 사이의 기간은 2일이다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 금요일에 투여되고 제2 용량은 월요일에 투여된다. 일부 추가의 구현예에서, 제1 용량은 금요일에 투여되고, 제2 용량은 월요일에 투여되고, 제3 용량은 수요일에 투여된다.

일부 구현예에서, 제1 용량은 약 25 mg/m²이고, 제2 용량은 약 50 mg/m²이고, 시간-순서 용량의 세트는 제2 용량 후 제3 용량을 추가로 포함하고, 제3 용량은 약 25 mg/m²이고, 사람 대상체에 대한 제2 용량과 제3 용량의 투여 사이의 기간은 3일이다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고 제2 용량은 금요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고, 제2 용량은 금요일에 투여되고, 제3 용량은 월요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 약 25 mg/m²인 어떠한 용량도 혈관내로 투여되고 약 50 mg/m²인 어떠한 용량도 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 혈관내로 투여된다.

일부 구현예에서, 제1 용량은 약 25 mg/m²이고, 제2 용량은 약 50 mg/m²이고, 시간-순서 용량의 세트는 제1 용량 전에 제3 용량을 추가로 포함하고, 제3 용량은 약 25 mg/m²이고, 제3 용량은 사람 대상체에게 제1 용량 2일 전에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고 제2 용량은 금요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고, 제2 용량은 금요일에 투여되고, 제3 용량은 월요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 약 25 mg/m²인 어떠한 용량도 혈관내로 투여되고 약 50 mg/m²인 어떠한 용량도 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 혈관내로 투여된다.

일부 구현예에서, 방법은 제1 용량, 제2 용량 및 제3 용량을 포함하고, 여기서 제1 용량은 월요일에 투여되고, 제2 용량은 수요일에 투여되고, 제3 용량은 금요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 25 mg/m²이고, 제2 용량은 25 mg/m²이고, 제3 용량은 50 mg/m²이다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게 L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예를 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 재조합 L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 각각의 개개 예는 대상체에게 시간-순서 용량의 세트의 이전 예의 다수의 예에서 시간-순서 용량의 세트의 다수의 완료시 투여된다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 100개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 80개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 60개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 50개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 50개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 30개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 30개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 15개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 14개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 13개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 12개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 11개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 10개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 9이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 8개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 7개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 6개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 5개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 4개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 4 내지 6개이다.

일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페그아스파라기나제이다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함한다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 70 퍼센트, 적어도 75 퍼센트, 적어도 80 퍼센트, 적어도 85 퍼센트, 적어도 90 퍼센트, 적어도 95 퍼센트, 적어도 96 퍼센트, 적어도 97 퍼센트, 적어도 98 퍼센트, 또는 적어도 99 퍼센트의 서열 동일성을 갖는다.

일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내었다. 일부 구현예에서, 사람 대상체 성인 환자이다. 일부 구현예에서, 사람 대상체 소아 환자이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 6% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 1% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 비-동결건조된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정은 재조합 L-아스파라기나제의 투여 후 0.1 IU/mL 이상이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여된다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제에 대한 용량 요법은 주기를 포함하고, 여기서 주기는 임의 반복될 수 있고, 여기서 주기는 격일마다 5일 연속의 기간에 걸쳐 재조합 L-아스파라기나제의 투여와, 이어서 2일 연속의 휴식 기간을 포함하고, 여기서 주기의 제1 용량은 25 mg/m²이고, 주기의 제2 용량은 25 mg/m²이고, 주기의 제3 용량은 50 mg/m²이고, 2일 연속의 휴식 기간이 이어진다. 일부 구현예에서, 주기의 제1 용량은 월요일에 투여되고, 주기의 제2 용량은 수요일에 주어지고, 주기의 제3 용량은 금요일에 주어진다.

(d) 복용 요법 3: 약 72시간 간격으로 50/25

본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제의 양은 하이브리드 복용 양식으로 투여될 수 있고, 여기서 용량의 양 및 투여 시간은 복용 요법 내에서 변한다. 일반적으로, 하이브리드 복용 양식 하에서 본 개시내용의 재조합 L-아스파라기나제의 양은 질환, 예를 들면, 그러나 이에 한정되지 않는 암을 치료하기 위해 약 25 mg/m² 내지 약 50 mg/m²의 범위에서 투여될 것이다. 이러한 복용 요법을 사용하여 치료된 일부 암은 ALL 또는 LBL, CRC, AML, 또는 DLBCL을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일부 구현예에서, CRC는 Wnt-음성 CRC이다. 일부 구현예에서, CRC는 Wnt-돌연변이체 CRC이다. 일부 구현예에서, AML은 R/R AML이다. 물론, 다른 투여량 및/또는 치료 요법도 주치의에 의해 결정된 바와 같이, 사용될 수 있다.

일부 구현예에서, 본 개시내용은 암을 치료하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 급성 림프구성 백혈병(ALL) 또는 림프모구 림프종(LBL)을 치료하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 결장직장 암(CRC)을 치료하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 Wnt-음성 결장직장 암(CRC)을 치료하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 Wnt-돌연변이체 결장직장 암(CRC)을 치료하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 광범위 큰 B-세포 림프종(DLBCL)을 치료하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 급성 골수성 백혈병(AML)치료하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 재발하는/난치성의 급성 골수성 백혈병(R/R AML)을 치료하는 방법을 제공하고, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 한다.

일부 구현예에서, 방법은 사람 대상체에게 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제 이외의 L-아스파라기나제를, 시간-순서 용량의 세트로서 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 포함하고; 여기서 시간-순서 용량의 세트는 제1 용량에 이은 제2 용량을 포함하고, 제1 용량은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 하나이고, 제2 용량은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 다른 것이고, 제1 용량이 약 50 mg/m²인 경우 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 약 72시간이고, 제1 용량이 약 25 mg/m²인 경우 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 약 48시간이고, 제2 용량이 약 50 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 약 72시간 동안 투여되지 않고, 제2 용량이 약 25 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 약 48시간 동안 투여되지 않는다. 일부 구현예에서, 약 25 mg/m²인 어떠한 용량도 혈관내로 투여되고 약 50 mg/m²인 어떠한 용량도 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 혈관내로 투여된다.

일부 구현예에서, 제1 용량은 약 50 mg/m²이고, 제2 용량은 약 25 mg/m²이고, 시간-순서 용량의 세트는 제2 용량 후 제3 용량을 추가로 포함하고, 제3 용량은 약 25 mg/m²이고, 사람 대상체에 대한 제2 용량과 제3 용량의 투여 사이의 기간은 약 48시간이다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 금요일에 투여되고 제2 용량은 월요일에 투여된다. 일부 추가의 구현예에서, 제1 용량은 금요일에 투여되고, 제2 용량은 월요일에 투여되고, 제3 용량은 수요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 약 25 mg/m²인 어떠한 용량도 혈관내로 투여되고 약 50 mg/m²인 어떠한 용량도 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 혈관내로 투여된다.

일부 구현예에서, 제1 용량은 약 25 mg/m²이고, 제2 용량은 약 50 mg/m²이고, 시간-순서 용량의 세트는 제2 용량 후 제3 용량을 추가로 포함하고, 제3 용량은 약 25 mg/m²이고, 사람 대상체에 대한 제2 용량과 제3 용량의 투여 사이의 기간은 약 72시간이다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고 제2 용량은 금요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고, 제2 용량은 금요일에 투여되고, 제3 용량은 월요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 약 25 mg/m²인 어떠한 용량도 혈관내로 투여되고 약 50 mg/m²인 어떠한 용량도 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 혈관내로 투여된다.

일부 구현예에서, 제1 용량은 약 25 mg/m²이고, 제2 용량은 약 50 mg/m²이고, 시간-순서 용량의 세트는 제1 용량 전에 제3 용량을 추가로 포함하고, 제3 용량은 약 25 mg/m²이고, 제3 용량은 사람 대상체에게 제1 용량 전 약 48시간 째에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고 제2 용량은 금요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 용량은 수요일에 투여되고, 제2 용량은 금요일에 투여되고, 제3 용량은 월요일에 투여된다. 일부 구현예에서, 약 25 mg/m²인 어떠한 용량도 혈관내로 투여되고 약 50 mg/m²인 어떠한 용량도 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 근육내로 투여된다. 일부 구현예에서, 모든 용량은 혈관내로 투여된다.

일부 구현예에서, 방법은 사람에게 대상체 L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예를 근육내 또는 혈관내로 투여하는 단계를 추가로 포함하고, 여기서 재조합 L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 각각의 개개 예는 대상체에게 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예 중 시간-순서 용량의 세트의 이전 예의 완료시에 투여된다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 100개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 80개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 60개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 50개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 40개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 30개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 20개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 15개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 14개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 13개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 12개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 11개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 10개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 9개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 8개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 7개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 6개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 5개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 2 내지 4개이다. 일부 구현예에서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예는 4 내지 6개이다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함한다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 70 퍼센트, 적어도 75 퍼센트, 적어도 80 퍼센트, 적어도 85 퍼센트, 적어도 90 퍼센트, 적어도 95 퍼센트, 적어도 96 퍼센트, 적어도 97 퍼센트, 적어도 98 퍼센트, 또는 적어도 99 퍼센트의 서열 동일성을 갖는다.

일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내었다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 성인 환자이다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 소아 환자이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 6% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 1% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 비-동결건조된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정은 재조합 L-아스파라기나제로 투여한 후 0.1 IU/mL 이상이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여된다.

일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제에 대한 용량 요법은 주기를 포함하고, 여기서 주기는 임의로 반복가능하고, 여기서 주기는 5일 연속의 기간에 걸쳐 격일로 재조합 L-아스파라기나제의 투여에 이은 약 48시간의 휴식 기간을 포함하고, 여기서 주기의 제1 용량은 25 mg/m²이고, 주기의 제2 용량은 25 mg/m²이고, 주기의 제3 용량은 50 mg/m²이고, 약 48시간의 휴식 기간이 이어진다. 일부 구현예에서, 주기의 제1 용량은 월요일에 투여되고, 주기의 제2 용량은 수요일에 주어지고, 주기의 제3 용량은 금요일에 주어진다.

(e) 추가의 바람직한 복용 요법

일부 구현예에서, 본 개시내용은 사람 대상체에서 아스파라기나제를 고갈시켜 암을 치료하는 방법을 제공하고, 이러한 방법은: 월요일, 수요일, 및 금요일에, 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제를 사람 대상체에게 혈관내 투여함으로써, 사람 대상체가 2주의 기간에 걸쳐 총 7회 용량의 L-아스파라기나제를 제공받도록 하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 ALL 또는 LBL이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 CRC이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 Wnt-음성 CRC이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 Wnt-돌연변이체 CRC이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 광범위 큰 B-세포 림프종(DLBCL)이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 AML이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 R/R AML이다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페그아스파라기나제이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함한다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 70 퍼센트, 적어도 75 퍼센트, 적어도 80 퍼센트, 적어도 85 퍼센트, 적어도 90 퍼센트, 적어도 95 퍼센트, 적어도 96 퍼센트, 적어도 97 퍼센트, 적어도 98 퍼센트, 또는 적어도 99 퍼센트의 서열 동일성을 갖는다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내었다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 성인 환자이다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 소아 환자이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 6% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 1% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 비-동결건조된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정은 재조합 L-아스파라기나제로 투여한 후 0.1 IU/mL 이상이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여된다.

일부 구현예에서, 본 개시내용은 사람 대상체에서 아스파라기나제를 고갈시켜 암을 치료하는 방법을 제공하고, 이러한 방법은: (a) 월요일 및 수요일에, 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제를 사람 대상체에게 혈관내 투여하고, (b) 금요일에, 약 50 mg/m²의 L-아스파라기나제를 사람 대상체에게 근육내 투여함으로써; 사람 대상체가 2주 기간에 걸쳐 L-아스파라기나제의 총 6회 용량을 제공받도록 하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 ALL 또는 LBL이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 CRC이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 Wnt-음성 CRC이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 Wnt-돌연변이체 CRC이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 AML이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 R/R AML이다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 광범위 큰 B-세포 림프종(DLBCL)이다. 일부 구현예에서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제는 페그아스파라기나제이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함한다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 테트라머이고, 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 70 퍼센트, 적어도 75 퍼센트, 적어도 80 퍼센트, 적어도 85 퍼센트, 적어도 90 퍼센트, 적어도 95 퍼센트, 적어도 96 퍼센트, 적어도 97 퍼센트, 적어도 98 퍼센트, 또는 적어도 99 퍼센트의 서열 동일성을 갖는다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내었다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 성인 환자이다. 일부 구현예에서, 사람 대상체는 소아 환자이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 6% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 L-아스파라기나제의 1% 미만의 응집을 입증한 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 비-동결건조된다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산된다. 일부 구현예에서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정은 재조합 L-아스파라기나제로 투여한 후 0.1 IU/mL 이상이다. 일부 구현예에서, 재조합 L-아스파라기나제는 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여된다.

실시예

실시예 1: 독성 및 독성역학(Toxicokinetics)을 평가하기 위한 연구

재조합 L-아스파라기나제의 독성 및 독성역학(TK)을 랫트(rat)에서 2주간 매일 정맥내 주입 연구로 우수 실험실 관리기준(good laboratory practice; GLP)으로 연구하였다. 2주의 회복상을 또한 포함시켜 효과의 가역성(reversibility) 또는 지속성을 평가하였다. 재조합 L-아스파라기나제가 생명공학-유래된 생성물임을 고려하여, 항-약물 항체(anti-drug antibody; ADA)의 개발을 모든 주요 연구 동물에서 예측하여 평가함으로써 연구 결과의 해석을 보조하였다.

수컷 및 암컷 Crl:CD(SD) 랫트의 4개 그룹(n=10마리/성별/그룹)에게 0, 4.6, 15.2, 및 45.6 mg/kg의 재조합 L-아스파라기나제를 각각 투여하였다. 회복 동물을 대조군 및 고 용량 그룹(n=5마리/성별/그룹)에 포함시켰다. 독성역학적 동물(대조군 그룹의 경우 n=3마리/성별, 및 n=9마리/성별/용량 그룹)을 또한 포함시켰다. 동물은 재조합 L-아스파라기나제를 2-시간 정맥내 주입(±10분)을 통해 대퇴부 정맥에 이식된 카테터(catheter)의 수단으로 5 mL/kg/시간의 용량에서 제공받았다. 비히클 및 대조군 물품은 20 mM의 인산나트륨, 50 mM의 염화나트륨, 및 6.4%의 트레할로스이었고, pH는 7.0이었다.

감시 그룹(sentinel group)에게 또한 주요 연구의 개시 전에 최고 용량을 복용시키고 2일 동안 관찰하였으며, 부검없이 3일째에 희생시켰다.

사망률(mortality), 임상 관찰, 체중, 체중 변화, 사료 소비, 안과 관찰, 및 임상 및 해부학적 병리학을 독성역학(혈청 아스파라기나제 활성(SAA)을 통해 평가된 바와 같음) 및 항-약물 항체 분석과 함께 문서화하였다.

그룹 1(대조군) 내지 3(15.2 mg/kg)에서 독성 및 독성역학적 동물에게 14일 동안 복용시켰고 이의 계획된 부검까지 생존시켰다. 그룹 4에서의 복용(45.6 mg/kg)은 동물을 부검하거나 이의 지정된 그룹에 따라 2주 회복시킨 시점에서 부정적인 임상 관찰로 인하여 6일째에 중단하였다. 그룹 1에서 획복 동물에게 비히클을 1일 1회 14일 동안 투여한 후, 이어 6일 회복시킴으로써 그룹 4에서 회복 동물로서 동일한 달력 날짜에 희생시켰다.

SAA Cmax 및 AUC0-24에 의해 평가된 바와 같이, 노출은 1일째에 4.6로부터 45.6 mg/kg/일까지 및 14일째에 4.6으로부터 15.2 mg/kg/일까지의 용량 수준에서의 증가로 증가하였다. Cmax 및 AUC0-24 값에서의 증가는 1일째에 4.6으로부터 15.2까지 및 15.2으로부터 45.6 mg/kg/일까지 및 14일째에 4.6으로부터 15.2 mg/kg/일까지 대략 용량 비례적이었지만, 1일째에 4.6으로부터 45.6 mg/kg/일까지로, AUC0-24는 용량에서의 10배 증가로 18배 증가하였다. SAA Cmax 및 AUC0-24 값에서 유의적인 성별 차이는 존재하지 않는다. SAA의 추적은 랫트에서 다중 용량 후에도 관찰되지 않았다.

조기에 안락사시킨 고 용량 그룹으로부터의 동물에서, 임상 관찰은 입모(piloerection), 거친 털(rough haircoat), 발의 붉은 피부(red skin of the feet), 및 선명한 구강 분비물(clear oral discharge)을 포함하였다. 감소된 조혈(hematopoiesis)의 지표인 유의적인 혈액학적 변화가 주목되었고 감소된 망상적혈구, 혈소판, 및 백혈구 수를 포함하였다. 이러한 변화는 회복 동물에서 가역적인 것으로 밝혀졌다. 증가된 혈당 및 요소 질소 농도 뿐만 아니라 감소된 단백질 및 간 효소는 각각 탈수(dehydration), 신전 질소혈증(prerenal azotemia), 단백질 손실(protein loss) 또는 구획 이동(compartmental shift) 및 간의 효소 활성의 하향조절(hepatic downregulation of enzymatic activity)을 제시한다. 육안 관찰(macroscopic observation)은 현미경적 상관관계가 결여된 1마리의 암컷의 선 위장(glandular stomach) 내 점막의 국소적인 적색 변색으로 제한되었다. 현미경적 발견은 대퇴골의 골수 내에서 감소된 세포질(cellularity), 심근 괴사(myocardial necrosis) 및 출혈(hemorrhage), 비선형 위장/십이지장 내 점막하 부종(submucosal edema)/농양(abscess) 및 상피 증식(epithelial hyperplasia)/미란(erosion), 감소된 적색 비수(red pulp), 골수외 조혈(골수외 조혈), 및 비장내 림프구, 흉선 내 감소된 피질 림프세포 및 췌장 내 분비 고갈을 포함하였다. 이러한 변화는 부작용으로 고려하였다. 수컷 및 암컷에서 비장 및 흉선 중량의 증가는 회복 희생(recovery sacrifice)에서 주목되었지만 회복과 일치하는 것으로 고려하였다. 회복 동물에서 현미경적 평가는 수행되지 않았다.

사료 소비 및 체중에서 용량-관련된 감소가 ≤15.2 mg/kg/일을 투여받은 동물에서 주목되었고 입모는 15.2 mg/kg/일에 주목되었다. 용량-관련된 혈액학 및 임상 화학 변화는 일반적으로 고-용량 그룹에서 관찰된 것과 일치하였지만, 보다 적은 크기가 대부분의 동물에서 관찰되었다. 이러한 임상 병리학 변화는 부작용이 아닌 것으로 고려하였다. 최소 내지 약간 감소된 적혈구 전구체 및 증가된 골수구 전구체로 이루어진 저(low)- 및 중간(mid)-용량 그룹에서 현미경적 발견은 혈액학 발견과 일치하였다. 감소된 비장 중량은 감소된 골수외 조혈 및 적색 비수와 관련된 반면 감소된 흉선 중량은 현미경적 상관관계를 결여하였다.

결론적으로, 수컷 및 암컷 Crl:CD(SD) 랫트는 비히클 대조군 물품 또는 4.6, 15.2, 또는 45.6 mg/kg/일의 재조합 L-아스파라기나제를 정맥내 주입을 통해 1일 1회 14일 동안 제공받았다. 빈사 상태(moribund condition)에서 희생 및 복용 상(dosing phase)의 6일째에 복용의 중지를 요구하는 부작용의 임상 관찰, 및 대퇴골 내 골수의 감소된 세포질, 심장에서 심근 괴사 및 출혈, 비선형 위장 내 점막하 부종 또는 농양 및 상피 증식, 및 위장 또는 십이장의 미란/궤양이 45.6 mg/kg/일을 투여받은 동물에서 발생하였다. 부작용이 없는 임상 관찰, 임상 병리학 변화, 및 현미경 발견은 ≤15.2 mg/kg/일을 투여받은 동물에서 발생하였다. 따라서, 부작용이 관찰되지 않은 수준(no observed adverse effect level; NOAEL)은 15.2mg/kg/일이다.

본 연구의 강조부분(highlight)은 다음을 포함한다: 대조군 및 고 용량에서 회복 그룹(n=5마리/성별/그룹)을 지닌 수컷 및 암컷 Crl:CD(SD) 랫트(n=10 마리/성별/그룹). 재조합 L-아스파라기나제(0, 4.6, 15.2, 또는 45.6 mg/kg/일)을 매일 2시간 정맥내 주입으로 14일까지 투여하였다. 부작용의 임상 관찰은 고 용량 그룹에서 6일째에 희생 및 복용의 중지를 요구하였다. 대퇴부내 골수의 부정적으로 감소된 세포질, 심장 내 괴사 및 출혈, 및 비선형 위장/십이지장 내 미란, 부종, 증식, 농양 및/또는 궤양이 고 용량 그룹에서 발생하였다. 부작용이 아니지만 정성적으로 유사한 임상 관찰, 임상 병리학 변화, 및 현미경적 발견이 ≤15.2 mg/kg/일을 투여받은 동물에서 발생하였다. 부작용이 관찰되지 않는 수준(NOAEL)은 15.2 mg/kg/일인 것으로 측정되었다.

실시예 2: 안전성을 평가하기 위한 연구

대상체는 18 내지 55세이었고 시험자에 의해 측정된 바와 같이 양호한 건강 상태이었다. 용량 코호트 1에서, 대상체를 무작위처리(1:1)하고 단일의 재조합 L-아스파라기나제 용량(25 mg/m²)을 2시간 정맥내(IV) 주입(N = 6) 또는 근육내(IM) 주사(N = 6)를 제공하였다. 재조합 L-아스파라기나제의 안전성, 내성, 및 약동학을 평가하여 다른 복용 코호트에 대한 요구를 측정한 후, 용량 코호트 2 무작위처리된 대상체(1:1)에게 단일의 재조합 L-아스파라기나제 용량 37.5 mg/m²을 IV로(N = 6) 또는 12.5 mg/m²을 IM(N = 6)로 제공하였다. 재조합 L-아스파라기나제는 환자내 임상 단위(inpatient clinical unit)로 투여하였고; 대상체는 5일째에 안전하여 퇴원하고 6일 및 30일째에 후속 전화를 받았다. 주요 목적은 각각의 코호트에 대해 IV 및 IM 복용에 의한 재조합 L-아스파라기나제의 안전성 및 내성을 평가하기 위한 것이었다. 2차 목적은 혈청 아스파라기나제 활성(SAA)을 기반으로 IV 및 IM 투여에 의한 재조합 L-아스파라기나제 약동학의 특성화를 포함하였다.

등록된 24명의 대상체 중에서, 인구통계학적 특성(평균 ± SD)은 다음을 포함하였다: 연령(38.4 ± 8.30세), 체중(77.04 ± 10.00 kg), 및 체 표면적(1.91 ± 0.15 m²). 또한, 대상체의 63%는 남성이고, 97%는 히스패닉계(Hispanic)/라틴계(Latino) 민족이었고, 83%는 백인이고, 17%는 흑인/아프리카계 미국인이었다. 안전성 및 약동학 둘 다를 본 연구에서 평가하였다. 안전성의 경우, 12명 중 8명(67%)의대상체가 용량 코호트 1에서 ≥1의 부작용을 가졌다(IV = 4명의 대상체 ; IM = 4명의 대상체). 용량 코호트 2에서는, 12명 중 11명(92%)의 대상체가 ≥1의 부작용을 가졌다(IV = 6명의 대상체; IM = 5명의 대상체). 중증의 부작용(serious adverse event) 또는 등급 ≥3의 부작용은 복용 코호트 어느 것에서도 어떠한 대상체에 대해 보고되지 않았다. 각각의 복용 코호트에서 ≥2명의 대상체에 발생한 가장 일반적인 치료-응급 부작용은 매스꺼움이었다(도 1, 참고: 표 1). 소화불량은 재조합 L-아스파라기나제 12.5 mg/m²을 IM로 제공받은 대상체에서 가장 일반적인 부작용이었다(도 1, 참고: 표 1). 약동학 평가는 IM으로 투여한 경우, 재조합 L-아스파라기나제 혈청 아스파라기나제 활성 수준은 12.5 및 25 mg/m² 용량의 코호트에서 복용 후 48시간 및 72시간째에 6명 중 6명(100%)의 대상체에서 ≥0.1 IU/mL로 달성되었다. 이후 IV 투여로, 혈청 아스파라기나제 활성 수준은 25 mg/m²의 용량 수준에서 복용 후 48시간 째에 6명 중 6명(100%)의 대상체에서 및 복용 후 72시간 째에 6명 중 4명(67%)의 대상체에서 ≥0.1 IU/mL을 달성하였지만, 6명 중 6명(100%)의 대상체는 37.5 mg/m²의 용량 수준에서 복용 후 48시간 및 72시간째에 ≥0.1 IU/mL를 달성하였다(도 1, 참고: 표 2).

건강한 성인에서 재조합 L-아스파라기나제 투여는 잘 견디어졌고 기대되지 않는 부작용, 보고된 혈청 아스파라기나제 활성 및 등급 ≥3의 부작용은 없었다. 아스파라긴 고갈의 대리 마커(surrogate marker)인, 혈청 아스파라기나제 활성의 수준 ≥0.1 IU/mL은 IM 및 IV 재조합 L-아스파라기나제를 제공받은 모든 사람 대상체에서 48시간째에 달성되었다. SAA 수준 ≥0.1 IU/mL는 또한 25 mg/m²의 IV 그룹에서 2명의 대상체를 제외하고, 재조합 L-아스파라기나제 복용 후 72시간 째에 모든 대상체에서 달성되었다. 본 연구로부터의 약동학 및 안전성 데이타 전체를 기반으로, 추천된 3개의 상(phase) 중 2개의 출발 용량은 월요일/수요일/금요일 복용 스케쥴에서 IM 투여 경로의 경우 25 mg/m²이고, IV 투여 경로의 경우 37.5 mg/m²이다.

실시예 3: 집단 약동학(Population Pharmacokinetic; PK) 모델 개발 및 모의시험(Simulation)

집단 PK 모델을 재조합 L-아스파라기나제에 대해 건강한 성인 대상체(healthy adult subject; sbj)에서 제1상 단일-용량 연구로부터의 집중적인 혈청 아스파라기나제 활성(SAA) 데이타를 사용하여 개발하고, PK 매개변수에서 고유의 공변 효과(effects of intrinsic covariate)(체중, 체 표면적, 연령, 성별, 및 인종)를 평가하였다. 이러한 집단 PK 모델을 개발하여 중심 상(pivotal phase) 2/3 재조합 L-아스파라기나제 연구를 위해 선택한 출발 용량을 통지하였다. 25 mg/m²[N = 6] 및 37.5 mg/m²[N = 6]에서 정맥내(IV) 데이타, 및 12.5 mg/m²[N = 6] 및 25 mg/m²[N = 6]에서 근육내(IM) 데이타를 포함하는 총 24명의 대상체를 포함시켰다. 개발된 모델을 사용하여 성인 및 소아 SAA 프로파일(1000 sbj/집단)을 모의시험하여 상이한 용량, 스케쥴, 및 투여 경로를 기반으로 ≥0.1 IU/mL의 치료학적 표적 저점(trough) SAA 수준을 달성하는 경향성을 탐구하였다.

IV 및 IM 경로 둘 다를 기술하는 최종 모델은 선형 제거(linear elimination; IV) 및 혼합된 차수 흡수(mixed order absorption)(IM 만)를 지닌 1-구획 모델이며, 중량은 SAA 청소(clearance)에서 상대 공변량(allometric covariate)으로서 포함하였다. 체격 매트릭스(Body size metrics), 즉, 체중 및 BSA(체 표면적)를 통계적으로 유의적인 공변량으로 확인하였고 재조합 L-아스파라기나제 PK에서 2.8% 및 3.4% 변동성(variability)을 차지하였다. 제1상 데이타 및 집단 PK 모델링 및 모의시험을 기반으로, 제2/3 상 연구에 대해 추천된 출발 용량은 월요일/수요일/금요일 복용 스케쥴에서 IM 투여 경로의 경우 25 mg/m²이고 IV 투여 경로의 경우 37.5 mg/m²이었다. 추천된 용량 및 스케쥴은 투여 후 72시간 째에 최저 SAA 수준 ≥0.1 IU/mL을 유지하는 것으로 기대된다.

실시예 4: 안전성 및 효능을 평가하기 위한 연구

본 시험은 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성(알레르기 반응 또는 사일런트 불활성화)이고 이의 치료 계획에서 1회 이상의 용량의 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 남아있는 급성 림프구성 백혈병(ALL) 또는 림프모구 림프종(LBL)을 지닌 환자에서 재조합 L-아스파라기나제의 개방-표지(open-label), 다중 센터(multicenter), 용량 확인 및 약동학적 상(pharmacokinetic Phase) 2/3 연구이다(표 3). 연구를 설계하여 아스파라기나제 활성에 의해 측정된 바와 같이, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성으로 진행된 환자에서 재조합 L-아스파라기나제의 내성 및 효능을 평가하는 것이다. 이러한 환자에 대해, 6회 용량의 재조합 L-아스파라기나제를 장기 작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 용량에 대해 대체한다. 개개 환자 치료 기간은 환자의 원래의 치료 계획에 남아있는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제 용량의 수에 따라 변한다.

본 연구는 2개의 순차적인 부분으로 이루어진다: 부분 A는 근육내(IM) 투여를 위한 재조합 L-아스파라기나제의 용량을 측정하고 안전성 및 효능을 확인하였고; 부분 B는 정맥내(IV) 재조합 L-아스파라기나제의 최적 용량 및 스케쥴을 정의하였다.

연구의 부분 A는 2개의 IM 코호트를 가졌다. 코호트 1은 반복 용량/확증적 코호트(confirmatory cohort)이고, 여기서 최종 IM 용량 수준이 선택될 것이다. 코호트 2는 최종 IM 용량 수준 및 스케쥴의 효능 및 안전성을 확인하기 위한 확장 코호트(expansion cohort)이다.

부분 B는 반복 용량으로서 ALL/LBL 환자에서 추가의 연구를 위한 재조합 L-아스파라기나제의 IV 투여의 최적 용량을 정의하기 위해 수행될 것이다.

재조합 L-아스파라기나제의 추가의 과정은 환자가 임상적 이점을 얻는 한 각각의 환자의 원래의 치료 계획을 기반으로 측정될 것이다.

혈액 샘플을 예정된 시점에서 수집하여 혈청 아스파라기나제 활성 활성을 측정할 것이고, 환자를 부작용에 대해 모니터링(monitoring)하였다. 재조합 L-아스파라기나제 치료의 면역원성 또한 평가하였다.

주요 목적은 (1) IM 재조합 L-아스파라기나제 투여의 1차 과정 동안 반응율을 측정하고(반응율은 치료의 1차 과정 동안 ≥0.1 IU/mL인 마지막 72시간 최저의 혈청 아스파라기나제 활성 수준을 지닌 환자의 비율로서 정의된다), 및 (2) 치료-응급 부작용(treatment-emergent adverse event; TEAE)의 발생을 평가하는 것이다.

제2 목적은 (1) 2주의 기간(time frame)으로, 재조합 L-아스파라기나제의 IM 투여의 1차 과정 동안 마지막 48시간의 최저의 혈청 아스파라기나제 활성 수준 ≥0.1 IU/mL을 지닌 환자의 비율, (2) 2주의 기간으로, 재조합 L-아스파라기나제의 IM 투여의 1차 과정 동안 마지막 48시간의 최저의 혈청 아스파라기나제 활성 수준 ≥0.4 IU/mL을 지닌 환자의 비율, (3) 2주의 기간으로, 재조합 L-아스파라기나제의 IM 투여의 1차 과정 동안 마지막 72시간 동안 최저의 혈청 아스파라기나제 활성 수준 ≥0.4 IU/mL을 지닌 환자의 비율, (4) 마지막 복용 후 30일까지 기간으로 집단 약동학 접근법 및 노출 관련된 상관관계를 사용한 혈청 아스파라기나제 활성을 기반으로 한 IM 재조합 L-아스파라기나제의 약동학의 특성화, (5) 마지막 복용 후 30일까지의 기간으로 재조합 L-아스파라기나제에 대한 항-약물 항체 형성의 발생을 측정하기 위한 것이다.

적합 기준(eligibility criteria)은 남성 및 여성 둘 다에 대해 허용한다. 포함 기준(inclusion criteria)은: (1) ALL 또는 LBL로 진단된 소아 및 성인 환자, (2) 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 알레르기 반응을 가졌거나 사일런트 불활성화를 가진 환자, (3) 그/그녀의 치료 계획에서 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 1회 이상의 과정이 남은 환자, (4) 시험자의 의경에서 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 이들의 사전 알레르기 반응으로부터 완전히 회복되어야만 하는 환자를 포함한다. 배제 기준(exclusion criteria)은: (1) 에스위니아 크리산테미-유래된 L-아스파라기나제 또는 재조합 L-아스파라기나제를 사전에 제공받은 환자, (2) 재발된 ALL 또는 LBL을 가진 환자, (3) 재조합 L-아스파라기나제의 과정 1 동안에 재조합 L-아스파라기나제와 동시(48시간 내)에 다른 시험 제제를 현재 제공받고 있고/있거나 시험 장치로 치료되고 있는 환자, (4) ≥ 등급 3 췌장염(≥ Grade 3 pancreatitis)의 병력을 가진 환자, (5) 카테터-관련된 혈전 사고(catheter-related thrombotic event)를 제외하고, 아스파라기나제-관련된 ≥ 등급 2의 출혈 현상 또는 항응고 치료요법을 요구하는 아스파라기나제-관련된 혈전증을 가진 환자를 포함한다.

추가의 시험은 37.5 mg/m² 초과의 보다 높은 용량에서 추가의 서브코호트(subcohort)를 사용하는 것일 것이고, 각각의 추가의 용량 수준(들)은 앞서의 용량 수준으로부터 50% 증가를 초과하지 않는다.

본 연구는 IV 제형 뿐만 아니라 IM 제형의 평가를 위한 등록을 허용하며; 연구 센터 참여는 후원자의 재량에 있을 것이다.

검출불가능한 SAA 수준은 본 시험을 수행하기 위한 CLIA 하에 승인된 인증받은 실험실에서 정의한 바와 같은, 정량화의 하한치(lower limit of quantification)를 기반으로 할 수 있다. CLIA-인증된 실험실은 이의 검정 방법론에 따라 상이한 정량화 한계를 이용하며, 검출불가능한 SAA 수준을 측정하기 위한 결과는 실험실마다 변할 수 있다.

혈청 아스파라기나제 농도는 본 연구의 경우 PK 함량과 동일하다. SAP(이는 혈청 아스파라기나제 농도를 사용함)와 실험실 튜브에서 표지(이는 PK 함량을 사용함) 사이의 정렬.

시험 윈도우(testing window)는 특정의 바람직한 구현예에서, 모든 실험실 시험, 예를 들면, 응고 시험 및 스크리닝에서 시험실 시험의 경우 7일이다.

실시예 5: 단백질 응집을 평가하기 위한 연구

적격성 연구(qualification study)는 실험실 규모로 생산된 소 규모 재조합 L-아스파라기나제 배치에서 수행되었다. 본 연구는 재조합 L-아스파라기나제의 품질, 안전성, 및 잠재능이 딕케야 크리산테미(Dickeya chrysanthemi)의 천연 발효로부터의 천연 L-아스파라기나제(현재 임상 사용 중)와 비교가능하였고 대안의 발현 시스템 및 정제 공정의 사용에 의해 부정적으로 영향받지 않음을 보증하는 시판 생성물 Erwinase®와의 분석적 비교능으로 이루어졌다.

SEC-HPLC 방법: 크기 배제 크로마토그래피에 의한 순도의 측정을 Phenomenex BioSep SEC-s4000 컬럼을 사용하는 SEC-HPLC를 사용하여 수행하였다. 컬럼은 이동상(50mM 포스페이트, 200mM NaCl, pH 7.0)으로 1 mL/min에서 주입 전 1시간 동안 수행하였다. BioRad 겔 여과 표준물(Gel Filtration Standard)을 이동상에서 1 mg/mL로 희석시키고 이동상 블랭크(mobile phase blank)의 다중 주사 후 3회 주입하여 컬럼을 깨끗하게 하였다. 재조합 L-아스파라기나제, 이. 콜라이-유래된 재조합 크리산타스파제, 및 Erwinase®의 순도를 평가하였다(도 2).

SEC-HPLC 결과는 테트라머 뿐만 아니라 응집물 피크를 나타내는 주요 피크를 나타낸다. 재조합 L-아스파라기나제(0.3%)와 비교하는 경우 에르위나제(Erwinaze) CAMR176(6%)에서 보다 높은 양을 지닌 모든 샘플에서 HMW 응집의 다양한 수준이 존재한다.

크기 배제 크로마토그래피-다중-각 광 산란(SEC MALLS) 방법: C.52.S1640 및 Solvias 표준 작업 과정을 사용하여, 시험 용액을 모든 샘플에 대해 이중으로 제조하였다. 샘플을 제형 완충제를 사용하여 10mg/mL로 희석시키고 혼합하였다. 적어도 4 mL를 제조하였다. 샘플 용액을 0.2μM 주사기 여과기를 통해 HPLC 바이알 내로 직접 여과하였다. 처음의 몇 방울을 버렸다. 단백질 농도가 10 mg/mL 미만인 경우, 750 μg을 주입할 수 있도록 주입 용적을 조절할 필요가 있었다. 다음의 샘플 및 참고를 이러한 기술로 분석하였다: 모든 스트레스를 받지 않는 배치(non-stressed batch), 모든 배치는 각각 5회 및 10회 동안 < -75℃에서 밤새 동결 및 실온에서 3시간 해동으로 인하여 스트레스를 받았다. 결과는 도 3에 나타낸다.

SEC MALLS 결과는 재조합 l-아스파라기나제(1%)와 비교하여 Erwinaze® CAMR176(6%)에서 더 높은 수준의 HMW 응집의 수준을 지닌 SEC-HPLC 결과를 입증한다.

침강 속도(Sedimentation Velocity AUC; svAUC) 방법: 재조합 L-아스파라기나제 및 Erwinaze® 샘플을 20 mM의 인산나트륨, pH 7.0 속에서 10 mg/mL로 희석시키고 동일한 완충제에 대해 투석하였다. 이후에, 샘플을 AN-60Ti 분석 로터(analytical rotor)에 놓고 Beckman-Coulter ProteomeLab XL-분석 한외원심분리기(analytical ultracentrifuge) 내로 로딩(loading)하였다. 데이타는 피터 슈크(Peter Schuck)가 개발한 c(s) 방법을 사용하여 N.I.H.에서 분석하고 그의 분석 프로그램 SEDFIT(버젼 11.3)에서 시행하였다. 수득되는 크기 분포를 등급화하고 피크를 OriginLab Origin® 버젼 9.0을 사용하여 통합시켰다. 도 4에서, 결과는 재조합 L-아스파라기나제가 최고의 동질성을 나타내고(최저의 응집물 함량 1%로 인해) Erwinase® 물질은 적어도 균질하다(응집물 5%). 결론적으로, 다중 직교 방법(multiple orthogonal method)에 의한 측정시, 재조합 L-아스파라기나제는 Erwinase® 보다 더 낮은 응집물 수준을 갖는다.

실시예 6: 상업적인 규모의 단백질 응집을 평가하기 위한 연구

이러한 적격성 연구는 1000L(의도된 시판 규모)에서 수행된 전체 규모의 재조합 L-아스파라기나제 배치에서 수행하였다. 연구는 실시예 5의 소규모(small scale; SS) 재조합 L-아스파라기나제 비교능 연구를 전체규모(1000L)에서 보증하기 위해 시판 생성물 Erwinase®을 사용한 분석 비교능(analytical comparability)으로 이루어졌다. 연구는 또한 SEC-MALLS 방법을 사용하여 재조합 L-아스파라기나제를 특성화하였다.

1 mL의 분취량(aliquot)의 재조합 L-아스파라기나제를 5 mL의 PETG 병(Bottle)에 피펫팅(pipetting)하고 -20℃에 저장하였다. 제형은 20mM 인산나트륨, 50mM 염화나트륨, 6.4% 트레할로스이고 pH는 7.0이었다.

SE-UHPLC 방법: UV 검출을 사용한 크기 배제 한외 고압 액체 크로마토그래피(SE-UPLC)를 사용하여 분자의 크기, 즉, 유체역학적 반경을 기반으로 재조합 L-아스파라기나제 DS 샘플의 순도를 측정하였다. 샘플 및 참고 물질을 이동상(10 mM 포스페이트, 0.3M 아르기닌, 0.05% 나트륨 아지드) 속에서 2.5 mg/mL로 희석시키고 Waters Acquity UPLC(BEH 200 SEC, 1.7μm, 4.6x30mm) 컬럼 상에 주입하였다. 재조합 L-아스파라기나제 DS를 0.4 mL/min에서 등용매적으로 용출시켰다. 순도 프로파일을 280 nm에서 UV 검출에 의해 특성화한다. 순도를 위해 테트라머 %(주요 피크), HMW % 및 LMW %를 통합하여 보고한다. 재조합 L-아스파라기나제 DS이 SE-UPLC 프로파일은 효소의 테트라머 형태로서 뿐만 아니라 하기 SEC-MALLS 분석에서 옥토머(octomer)로서 확인된 HMW 피크로서 확인된 주요 피크로 이루어진다. 또한 매우 낮은 수준으 저 분자량(LMW) 백 쇼울더(back shoulder)이 존재한다. 영역 퍼센트(percent area)를 도 5에 나타낸다.

실시예 5에서의 소 규모 데이타와 일치하여 SEC-UPLC는 재조합 L-아스파라기나제 FS 배치(0.2%)가 에르위나제 CAMR-174(6%)보다 유의적으로 더 낮은 응집 값을 가짐을 나타내었다.

SEC-MALLS 방법: 재조합 L-아스파라기나제의 2개의 샘플(A 및 B) 속에 존재하는 고 분자량 종을 다중 각 광 산란 검출기(Multi Angle Light Scattering detector; SEC-MALLS)에 커플링된 SEC-MALLS 크기 배제 크로마토그래피를 사용하여 측정하였다. 샘플을 제형 완충제로 희석시키고 Minidawn Treos MALLS 검출기가 장착된 SuperdexTM 200 증가 컬럼(Increase column)에 주입하였다. 도 6은 UV 피크 영역 퍼센트를 설명한다. 결과는 재조합 L-아스파라기나제가 옥타머 수준이 낮고 보다 높은 차수의 응집물을 지닌 테트라머 형태로 주로 존재함을 나타낸다. 적은 수준의 LMW 종이 또한 주목되었다.

재조합 L-아스파라기나제 및 Erwinaze® 샘플을 20 mM 인산나트륨, pH 7.0 속에서 10 mg/mL로 희석시키고 동일한 완충제에 대해 투석하였다. 이후에, 샘플을 AN-60Ti 분석 회전자(analytical rotor)에 놓고 Beckman-Coulter ProteomeLab XL-분석 한외원심분리에 로딩하였다. 데이타를 피터 슈크(Peter Schuck)가 N.I.H.에서 개발한 c(s)를 사용하여 분석하고 그의 분석 프로그램 SEDFIT(버젼 11.3)로 수행하였다. 수득되는 크기 분포를 등급화하고 피크를 OriginLab Origin® 버젼 9.0을 사용하여 통합하였다.

도 7 및 도 8에서 알 수 있는 바와 같이, 재조합 L-아스파라기나제는 낮은 수준의 옥타머(0.61%) 및 보다 높은 차수의 응집물(0.07%)을 지닌 효소의 테트라머 형태에서 99.2%로 매우 균질하다. 이는 SE-UHPLC 및 SEC-MALLS 방법에서 관찰된 낮은 응집물 수준을 입증한다. Erwinase® 배치는 보다 이질성(heterogeneous)인 것으로 관찰되었고 93.6%는 보다 높은 수준(6.4%)의 HMW 종(species)이 존재하는 테트라머로서 확인되었다.

실시예 7: 건강한 성인 지원자에서 재조합 에르위니아 아스파라기나제(JZP-458)의 안전성, 내성, 및 약동학의 무작위처리된 제1 상 연구

JZP-458는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 면역학적 교차-반응성이 없는 효소를 생성하는 신규한 슈도모나스 플루오레센스(Pseudomonas fluorescens) 발현 플랫폼을 사용하여 생산된 재조합 에르위니아 아스파라기나제이다. 단일 용량의 JZP-458의 안전성, 내성, 및 약동학을 평가하기 위해, 무작위처리된, 단일-센터, 개방-표지의 제1상 연구를 건강한 성인 지원자에게 근육내(IM) 주사 또는 정맥내(IV) 주입을 통해 주어진 JZP-458을 사용하여 수행하였다. 아스파라기나제 효능을 평가를 측정하는데 있어서, 혈청 아스파라기나제 활성(SAA) 수준은 아스파라긴 고갈에 대한 대리 마커로서 제공하였고, 최저의(nadir) SAA(NSAA) 수준 ≥0.1 IU/mL를 임상 실시에서 적절한 아스파라긴 고갈을 입증하기 위해 허용된 역치(accepted threshold)이었다.

방법. 제1 상의, 무작위처리된, 단일-센터, 개방-표지 연구를 2018년 11월19일과 2019년 5월 20일 사이에 미국에서 수행하였다. 연구는 텍사스주 오스틴에 소재하는 IntegReview Institutional Review Board에 의해 수행되었고 플로리다주 마이애미에 소재하는 QPS Miami Research Associates(Miami Clinical Research)에서 헬싱키 선언(Declaration of Helsinki) 및 우수한 임상 실시 가이드라인(Good Clinical Practice guideline)에 따라 수행하였다. 모든 건강한 지원자는 등록 전에 서면 동의서(written informed consent)를 제공하였다. 적격한 지원자는 스크리닝 및 -1일째에 시험자에 의해 측정된 바와 같이 우수한 건강 상태에 있고 연구-특이적인 요건을 이해하고 이에 부합할 수 있는 정상의 체 질량 지수(즉, 19.0 내지 30.0 kg/m²)를 지닌 연령이 18 내지 55세인 남성 및 임신하지 않은, 비수유 여성이었다. 연구로부터의 주요 배제사항은 후원자 및/또는 시험자의 의견 상, 연구의 결과 또는 수행을 혼란하게 하거나 건강한 지원자에 대해 위험을 지닌 임의의 질병, 신체 소견(physical finding), 실험실 시험 또는 심전도 소견(electrocardiogram finding)의 병력 또는 존재를 포함하였다. 이는 약물의 분포, 물질대사, 또는 배출을 방해할 수 있는 임의의 조건을 포함하였다.

연구 설계. 본 연구는 복용 전 2 내지 28일 사이에 적격성에 대해 건강한 성인 지원자를 스크리닝하였다(도 20). 자격을 갖춘 건강한 지원자를 기본선 평가를 위해 -1일째에 연구 센터에서 점검한 다음, 입원 병동(inpatient clinic)에 입원하고 1일째에 연구 약물의 단일 용량을 제공받았다. 모든 지원자는 이들이 5일째에 퇴원할 때가지 약동학(PK) 및 안전성 평가를 위한 입원 병동에 남았다. 부작용(AE)에 관한 안전성 후속 전화는 6일 및 30일째에 이루어졌다.

이는 총 30명의 건강한 성인 지원자가 등록된 개방-표지 연구(open-label study)이었다. 연구는 JZP-458에 대한 적용형 설계를 사용하였고, 여기서 코호트 1에 대한 출발 용량은 25 mg/m²이었고, 코호트 2에 대한 용량 선택은 코호트 1로부터의 안전성, 내성, 및 PK 데이타를 기반으로 하였다. 센티넬 복용 접근법(sentinel dosing approach)은 연구에서 투여된 처음 2명의 지원자에 대한 JZP-458을 수반하였고, 이는 JZP-458 용량 코호트 1 만으로 무작위처리하였다. 이러한 2명의 지원자를 각각의 투여 경로에 대해 1명씩, IM 또는 IV JZP-458로 무작위처리하였다. 처음 2명의 지원자에 대한 안전성 및 내성이 시험자 및 후원자에 의해 허용된 것으로 고려되었으므로(AE ≥ 등급 3과 관련된 연구-약물은 없음), 1주는 초기 코호트(JZP-458 용량 코호트 1 및 에르위나제 용량 코호트)에서 나머지 지원자의 복용으로부터 센티넬 복용 지원자를 분리하였다.

다음에 16명의 지원자를 JZP-458 및 에르위나제 용량 코호트로 무작위처리하였고 10명의 지원자를 JZP-458 용량 코호트 1으로 무작위처리하고 6명의 지원자를 에르위나제 용량 코호트로 무작위처리하였다. JZP-458 용량 코호트 1 및 에르위니아 용량 코호트 내에서, 지원자를 IM 또는 IV 치료 그룹으로 1:1 비율로 무작위처리하였다. 이러한 무작위 방식은 모든 18명의 지원자를 IM JZP-458, IV JZP-458, IM 에르위나제, 또는 IV 에르위나제로 2:2:1:1 비율로 무작위처리하는 것과 동등하지만, 처음 2명의 무작위처리된 지원자가 센티넬 복용 접근법 후 IM JZP-458 및 IV JZP-458을 제공받도록 보증하였다.

JZP-458 용량 코호트 1에서 모든 지원자에 대한 안전성, 내성, 및 PK 데이타를 시험자 및 후원자가 평가하여 다른 코호트, JZP-458 용량 코호트 2에 지원자로 등록시킬 필요성을 측정하였다. 그러나, SAP 개발 동안, JZP-458 용량 코호트 2가 수행될 수 있고, 사전 수집된 안전성, 내성, 및 PK 데이타를 평가하여 이러한 코호트에서 사용될 용량 수준을 측정하는 것을 측정하였다. JZP-458 용량 코호트 2의 경우, 12명의 추가의 지원자를 IM 또는 IV 치료 그룹으로 1:1 비율로 무작위처리하였다.

목적. 일차 목적은 치료-응급 부작용(treatment-emergent adverse event; TEAE)의 발생 및 활력 신호(vital sign) 및 실험실 시험에서 임상적으로 유의적인 변화에 의해 평가된, 건강한 성인 지원자에서 JZP-458(IM 또는 IV)의 단일 용량의 안전성 및 내성을 평가하기 위한 것이었다. 이차 목적은 SAA 데이타를 기반으로, 건강한 성인 지원자에서 JZP-458(IM 또는 IV)의 단일 용량의 PK를 특정화하기 위한 것이었다. 추가의 평가는 JZP-458에 대한 혈청 아스파라기나제 농도(SAC), 및 건강한 성인에서 JZP-458의 약력학적(PD) 효과를 평가하기 위한 L-아스파라긴 및 L 글루타민 수준의 측정을 포함하였다.

약동학적/약력학적 샘플 수집 및 생물분석 방법. PK/PD 평가를 위한 일련의 혈액 샘플을 복용 후 96시간 까지 예정된 시점에서 건강한 지원자로부터 수집하였다. IM 복용의 경우, 샘플을 복용 전(predose) 및 복용 후(after dosing) 0.5, 1, 1.5, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 24, 36, 48, 72, 및 96시간 째에 취하였다. IV 복용의 경우, 샘플을 복용 전 및 주입의 시작 후 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 5, 6, 8, 10, 12, 24, 36, 48, 72, 및 96시간째에 취하였다. PK 분석을 위한 혈액 샘플을 표지된 4 mL의 EDTA 튜브 내로 수집하고 샘플이 혈청으로 원심분리될 때까지 빙상에 유지시켰다. PD 분석을 위한 혈액 샘플을 4 mL의 EDTA 튜브 내로 수집하고 샘플이 혈장으로 원심분리될 때까지 빙(ice) 상에 유지시켰다.

PK 샘플에 대한 생물분석학적 분석을 Charles River Laboratories(일리노이주 스코키에 소재)가 수행하였다. PK 샘플을 SAA 수준에 대해 검증된 효소 활성 방법을 사용하여 사람 혈청 속에서 0.025 IU/mL 내지 0.15 IU/mL의 범위에 걸쳐 검정하였다. 또한, PK 샘플을 SAC에 대해 검증된 ECLIA 효소 함량 검정을 사용하여 사람 혈청 속에서 1.0 ng/mL 내지 128 ng/mL의 범위에 걸쳐 검정하였다. PD 샘플을 L-아스파라긴 및 L-글루타민 농도에 대해 Syneos Health(뉴저지주 프린스톤 소재)가, 인증된 액체 크로마토그래피 탄뎀 분광법(liquid chromatography tandem mass spectrometry; LC/MS/MS) 방법을 사용하여 L 아스파라긴의 경우 0.025 μg/mL 내지 10.0 μg/mL의 범위에 걸쳐서 및 L-글루타민의 경우 0.250 μg/mL 내지 100 μg/mL에 걸쳐서 검정하였다.

약동학적 및 통계적 분석. JZP-458의 PK는 주로 SAA 데이타를 기반으로 평가하였다. 다음의 PK 매개변수를 비구획 분석(noncompartmental analysis)을 사용하여 Phoenix WinNonlin 버젼 6.3에서 주로 평가하였다: C_max = 최대 SAA; C_48h = 48시간 때에 SAA 값; C_72h = 72시간 째에 SAA 값; t_max = C_max에 도달하는 시간; AUC_0-t = 0시간으로부터 마지막 정량화가능한 SAA의 시간까지 SAA-시간 곡선 하 영역; AUC_0-inf= 0시간으로부터 무한까지 SAA-시간 곡선 하 영역; CL = 청소(clearance); Vss = IV 복용 후 정상 상태에서 분포 용적의 평가; V_z/F = IM 복용 후 분포의 겉보기 용적(apparent volume), 및 t_1/2= 말기 제거 반감기(terminal elimination half-life).

설명적 통계학(n, 평균, 표준 편차, 중앙값, 최대값 및 최소값)을 사용하여 연속 데이타를 요약하였지만, 카운트(count) 및 퍼센트를 사용하여 범주 데이타를 요약하였다. 사후 분석(post hoc analysis)을 수행하여 SAA와 혈청 아스파라기나제 농도(SAC) 사이의 관계를 평가하였다. 상관관계 및 선형 회귀 분석(linear regression analysis)을 연구 약물에 의해 및 투여 경로에 따라서, 뿐만 아니라 투여 경로에 의해 수행하였다. 선형 회귀 모델링(linear regression modeling)에서, SAC는 종속 변수(dependent variable)이고 SAA는 독립 변수(independent variable)이었다. 마지막으로, 공식적인 가설 시험은 수행되지 않았다.

결과. 각각의 투여 경로에 대해 시험된 최대 용량(즉, IM의 경우 25 mg/m² 및 IV의 경우 37.5 mg/m²)에서, JZP-458은 건강한 지원자의 100%에 대해 복용 후 72시간째에 혈청 아스파라기나제 활성(SAA) 수준 ≥0.1 IU/mL를 달성하였다. 모든 JZP-458 용량 수준은 잘 견디어졌다. 예상되지 않은 부작용(AE), 중증의 AE, 및 등급 3 이상의 AE는 없었다. 이러한 연구로부터 약동학 및 안전성 데이타를 기반으로, 중심 상(pivotal phase) 2/3 연구에 대해 추천된 JZP-458 출발 용량은 월요일/수요일/금요일 복용 스케쥴에서 IM 투여의 경우 25 mg/m²이고 IV 투여의 경우 37.5 mg/m²이다.

기본선 인구통계학(baseline demographics). 총, 30명의 건강한 성인 지원자를 등록하였고 연구에서 무작위처리하였다. 포함된 30명의 지원자 중, 30명 모두가 30일째에 최종의 스케쥴된 안전성 후속 전화를 포함하는, 연구를 완료하였다. 전체 기준 인구통계학(평균 ± SD)은 38.4 ± 8.30세의 평균 ± SD 연령, 77.04 ± 9.998 kg의 체중, 및 1.91 ± 0.150 m²의 BSA를 포함하였다(도 1b). 또한, 63%는 남성이었고, 97%는 히스패닉계 또는 라틴계 민족성이고, 83%는 백인이고, 17%는 흑인/아프리카 미국인이었다.

약동학 분석. PK 분석 세트는 연구에 등록된 모두 30명의 건강한 지원자(100%)로 이루어졌다.

혈청 아스파라기나제 활성 데이타. 본 연구에서, JZP-458 용량 코호트 1에 대한 출발 용량은 25 mg/m²이었다. 개개 SAA-시간 프로파일을 모든 치료 그룹에 대해 생성하였다(도 12). 복용 전 SAA 값은 모든 지원자 및 모든 치료에 대해 정량 한계(limit of quantitation) 미만이었다. 복용 후 48시간 및 72시간째에 SAA 수준이 ≥0.1 IU/mL 및 ≥0.4 IU/mL인 지원자의 수 및 비율은 도 9에 나타낸다.

코호트 2의 용량 수준을 코호트 1으로부터의 안전성, 내성, 및 PK SAA 데이타를 기반으로 측정하였다. 코호트 1에서 관찰된 예측되지 않은 AE, 보고된 중증 AE, 및 등급 3 이상의 AE는 없었다. 25 mg/m²에서 코호트 1에서 JZP-458에 대한 PK SAA 데이타는 도 12에 나타낸다. 25 mg/m²의 IM 용량의 경우, 복용 후 72시간 째에 SAA 값은 6명의 건강한 지원자 중 6명(100%)에서 ≥0.1 IU/mL이었다. 코호트 2에서, IM 용량 수준을 12.5 mg/m²로 50%까지 감소시켜 이러한 용량에서 용량 비례성(dose proportionality) 및 안전성 프로파일을 연구하였다. 대안적으로, 25 mg/m²의 IV 용량의 경우, 복용 후 72시간째에 SAA 값은 6명 중 4명(67%)의 건강하 지원자에서만 ≥0.1 IU/mL이었다. 이는 25 mg/m²의 IV 용량이 72시간 동안 ≥0.1 IU/mL의 SAA 수준을 유지하는데 부적절함을 시사하였다. 따라서, 코호트 2에서, IV 용량 수준은 37.5 mg/m²로 50%까지 증가하였다.

JZP-458의 IM 투여 후, SAA 수준은 12.5 mg/m² 및 25 mg/m² 용량 수준 둘 다에 대해 복용 후 48시간 및 72시간째에 6명 중 6명(100%)의 건강한 지원자에서 ≥0.1 IU/mL를 달성하였다. JZP-458의 IV 투여 후, SAA 수준은 25 mg/m²의 용량 수준에서 복용 후 48시간 째에 6명 중 6명(100%)의 건강한 지원자 및 72시간째에 6명 중 4명(67%)의 건강한 지원자에서 ≥0.1 IU/mL를 달성하였지만, SAA 수준은 37.5 mg/m²의 용량 수준에서 복용 후 48시간 및 72시간 둘 다에서 6명 중 6명(100%)의 건강한 지원자에서 ≥0.1 IU/mL를 달성하였다. 동일한 용량 수준에서, IM 투여 경로는 IV와 비교하는 경우 보다 높은 수준의 SAA를 유지할 수 있었다. ERW를 제공받은 건강한 지원자에 대한 SAA 데이타를 또한 도 12 및 도 9에 나타낸다.

SAA에 대한 평균 및 95% 신뢰 구간(CI) 곡선을 25 mg/m²에서 IM 투여 및 37.5 mg/m²에서 IV 투여의 경우 JZP-458에 대해 관찰된 데이타를 기반으로 생성시켰다(N = 각각 6명; 도 13). 데이타는 95% CI의 보다 낮은 결합이 JZP-458의 경우 25 mg/m²에서 IM 투여 및 37.5 mg/m²에서 IV 투여 둘다에 대해 복용 후 72시간째에 ≥0.1 IU/mL를 달성하였음을 나타내었다(IM 및 IV의 경우 95% CI의 보다 낮은 결합은 각각 0.31107 IU/mL 및 0.09476 IU/mL이었다). 이러한 데이타는 중심 상 2/3 연구에 대한 용량 추천을 촉진하였다.

SAA를 기반으로 한 PK 매개변수를 모든 치료 그룹에 대해 요약하였다(도 10). IM 투여된 경우, JZP-458은 SAA를 기반으로 느리게 흡수되었고, 12.5 mg/m² 및 25 mg/m² 용량 각각의 투여 후 중앙 tmax는 24시간 및 36시간이었다. 23.4시간 및 19.1시간의 평균 t_1/2값은 12.5 mg/m² 및 25 mg/m² 각각의 투여 후 추정되었다. IV 투여된 경우, JZP-458 SAA 수준은 25 mg/m² 및 37.5 mg/m² 용량 각각의 투여 후 11.5시간 및 12.6시간의 평균 t_1/2로 감소하였다. 일반적으로, IM 투여 후 JZP-458의 t_1/2는 IV 주입보다 더 길었다. 더욱이, 분포 용적은 혈장 용적과 대략적으로 동일하였다.

SAA를 기반으로 한 용량 비례 평가(dose proportionality assessment)는 JZP-458 노출이 SAA를 기반으로 용량이 증가함에 따라 증가하였음을 나타내었다(도 17). IM 및 IV 투여 둘 다의 경우, JZP-458 SAA 노출(C_max 및 AUC)에서의 증가는 연구된 용량 범위에 대해 대략적으로 용량-비례하였다. IM 투여 경로에 대한 JZP-458의 생체이용능을 또한 계산하였고; SAA 데이타를 기반으로 34.5% 내지 36.8%에서 추정되었다.

혈청 아스파라기나제 농도 데이타: 역사적으로, 아스파라기나제 PK는 SAA 데이타를 기반으로 측정하였다. 그러나, 효소 함량 검정을 개발하여 사람 혈청 속에서 JZP-458 아스파라기나제 농도를 측정하였다.

개개 및 평균 SAC-시간 프로파일을 모든 치료 그룹에 대해 생성시키고(도 14a 내지 c), SAC를 기반으로 한 PK 매개변수를 도 18에 요약한다. IM 투여된 경우, JZP-458은 SAC를 기반으로 느리게 흡수되었고, 12.5 mg/m² 및 25 mg/m² 용량 둘 다에 대해 30시간의 중앙 tmax 값은 30시간이었다. 28.9시간 및 25.4시간의 평균 t_1/2 값은 JZP-458에 대해 각각 12.5 mg/m² 및 25 mg/m²에서 추정되었다. JZP-458의 IV 투여 후, SAC 수준은 25 mg/m² 및 37.5 mg/m² 용량 각각의 투여 후 12.0시간 및 12.7시간의 평균 t_1/2로 감소하였다.

용량 비례성 및 생체이용능을 또한 SAC를 기반으로 JZP-458에 대해 평가하였다(도 19). JZP-458 노출은 SAC를 기반으로 용량이 증가함에 따라 증가하였다. IM 및 IV 투여의 경우, SAC를 기반으로 한 JZP-458 노출에서의 증가(C_max및 AUC)는 연구된 용량 범위에 대해 대략적으로 용량-비례적이었다. IM 투여 경로의 경우, 생체이용능은 SAC 데이타를 기반으로 JZP-458에 대해 37.7% 내지 43.9%로 추정되었다.

SAA와 SAC의 관계를 추가로 JZP-458에 대해 탐구하였다(도 14d). JZP-458에 대한 투여 경로에 걸쳐 평가한 경우, 강력한 양성 연관성이 0.95 초과의 상관 계수(correlation coefficient)로 SAA와 SAC 사이에서 관찰되었다. 추가로, 선형 회귀 모델로부터의 방정식은 SAC = 1407.9 × SAA이었다. 이러한 데이타는 SAA 수준이 0.1 IU/mL인 경우, 상응하는 SAC가 건강한 성인 집단에서 대략 141 ng/mL일 수 있음을 시사한다.

약력학적 데이타. 아스파라기나제는 아미노산 아스파라긴을 아스파르트산 및 암모니아로 가수분해한다. 아스파라긴의 혈장 수준은 치료 기간 전체에서 모니터링하였다. 시간 프로파일에 걸쳐 평균 SAA 대 평균 혈장 아스파라긴 농도는 도 15에 제공한다. 기본선(복용 전) 평균 혈장 아스파라긴 농도는 IM 및 IV 그룹에 대해 유사하였다; 개개 아스파라긴 농도는 모든 지원자의 경우 5.09 μg/mL 내지 13.8 μg/mL의 범위이었고, 이는 문헌에 보고된 값과 일치한다. JZP-458 투여(IM 및 IV) 후, 평균 혈장 아스파라긴 수준은 복용 전 농도(코호트 1: IM 및 IV 각각에 대해 8.62 μg/mL 및 8.96 μg/mL; 코호트 2: IM 및 IV 각각에 대해 6.42 μg/mL 및 5.89 μg/mL)에서 경로 둘다에 대해 검정 정량화의 하한치(LLOQ; 0.025 μg/mL) 이하의 수준까지 신속하게 고갈되었고, 96시간 째에 최종의 샘플 수집 시점 전체에서 검출불가능하게 남았다. 데이타는 SAA와 혈장 아스파라긴 수준에서의 감소 사이에 직접적인 상관관계가 있었음을 나타내었다. 모든 JZP-458 용량 수준에서, 혈장 아스파라긴 수준은 JZP-458 투여로 완전히 고갈되었다. 이러한 제1상의 건강한 지원자 연구에서 시험된 최고의 JZP-458 용량(즉, IM의 경우 25 mg/m² 및 IV의 경우 37.5 mg/m²)에서, JZP-458은 각각의 경로의 경우 건강한 지원자의 100%에 대해 복용 후 72시간 째에 ≥ 0.1 IU/mL의 SAA 수준을 달성하였지만, 또한 복용 후 96시간 전체에서 혈장 아스파라긴 수준의 완전한 고갈을 야기하였다.

아스파라긴 외에, 아스파라기나제는 또한 글루타민을 글루탐산 및 암모니아로 가수분해할 수 있지만, 효능을 훨씬 낮다. 글루타민의 혈장 수준을 모든 치료에 대해 모니터링하였다(도 17). 기본선(복용 전) 평균 혈장 글루타민 농도는 IM 및 IV 그룹에 대해 유사하였고; 개개 글루타민 복용 전 농도는 모든 지원자의 경우 60.4 μg/mL 내지 146 μg/mL의 범위이었고, 이는 또한 문헌에 보고된 값과 일치한다. 데이타는 평균 혈장 글루타민 수준이 JZP-458의 IV 투여 후 복용 전 농도가 코호트 1 및 코호트 2 각각에 대해 106.5 및 74.0 μg/mL으로부터 대략 12시간 동안 검정 검정 LLOQ 미만의 수준(0.25 μg/mL)으로 신속하게 떨어졌음을 나타내었고, 이후 글루타민 수준은 복용 후 96시간 째에 최종의 샘플 수집 시점에서 대략 복용 전 수준으로 회복하였다. IM 경로의 경우, 평균 혈장 글루타민 수준은 JZP-458의 IM 투여 후 감소하였고, 최저 글루타민 수준이 복용 후 36시간째에 25 mg/m² 및 12.5 mg/m²각각의 경우 79% 및 47%의 글루타민 고갈로 관찰되었고, 이후 글루타민 수준은 복용 후 96시간의 마지막 샘플 수집 시점에서 복용 전과 유사한 수준으로 회복하였다. L-글루타민의 완전한 고갈은 관찰되지 않았고; 글루타민 수준은 단지 부분적인 고갈까지 중간 정도로 영향을 받았고, 데이타는 L-아스파라긴에 대해 관찰된 것보다 더 다양하였다.

안전성 및 내성. 본 제1상 연구에서 JZP-458에 대해 관찰된 안전성 프로파일은 다른 아스파라기나제의 프로파일과 일치하였다. JZP-458의 모든 용량 수준은 잘 견디어졌고; 예측되지 않은 AE, 중증의 AE, 및 등급 3 이상의 AE는 없었다. 각각의 복용 코호트에서 ≥2의 건강한 지원자에서 발생하는 가장 일반적인 TEAE는 매스꺼움이었다(도 11).

논의. 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 예측된 면역학적 교차-반응성이 없는 재조합 에르위니아 아스파라기나제인, JZP-458는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성으로 진행되는 ALL 또는 LBL을 지닌 환자에 대한 아스파라기나제 치료요법의 이용가능성을 보증하기 위해 개발되고 있다. 각각의 투여 경로에 대해 시험된 최고의 용량(즉, IM의 경우 25 mg/m² 및 IV의 경우 37.5 mg/m²)에서의 이러한 무작위처리된, 단일-센터의, 개방-표지, 제1상 연구에서, JZP-458은 각각의 경로에서 건강한 성인 지원자의 100%에 대해 복용 후 72시간 째에 ≥0.1 IU/mL의 SAA 수준을 달성하였다. 본 연구에서 관찰된 SAA 수준은 또한 JZP-458이 혈장 아스파라긴 수준을 완전히 고갈시킬 수 있음을 나타내었다. 이는 본 연구로부터 측정된 아스파라긴 농도에 의해 확인되었다. 모든 JZP-458 용량 수준에서, 혈장 아스파라긴 수준은 IM 및 IV 투여 경로 둘다를 사용한 JZP-458 치료로 완전히 고갈되었다. 또한, 본 연구에서 JZP-458에 대한 안전성 프로파일은 다른 아스파라기나제의 프로파일과 일치하였다. JZP-458의 모든 용량 수준은 견디어졌고; 예측되지 않은 AE, 보고된 중증 AE, 및 등급 3 이상의 AE는 없었다.

누적된 PK 및 안전성 데이타를 기반으로, 추천된 중심상(pivotal phase) 2/3 JZP-458 출발 농도는 월요일/수요일/금요일 복용 스케쥴에서 IM 투여 경로의 경우 25 mg/m²이고 IV 투여 경로의 경우 37.5 mg/m²이었다. 이러한 용량은 건강한 성인 지원자에서 제1상 연구에서 6명 중 6명(100%)의 건강한 지원자에서 복용 후 72시간 째에 ≥0.1 IU/mL의 SAA 수준을 달성하였고, 이러한 용량은 중심 상 2/3 연구에서 치료 기간 전체에서 ≥0.1 IU/mL의 SAA 수준을 유지하는 것으로 예측된다.

아스파라기나제 치료요법의 완료는 증진된 환자 결과에 중요하고, 앞서의 연구에 나타낸 바와 같다. Dana-Farber 암 연구소(Cancer Institute) ALL 컨소시엄 프로토콜 91-01 연구에서, 계획된 총 30주의 아스파라기나제 치료요법 중 ≤25주의 완료로 정의된, 아스파라기나제 불내성(intolerance)을 지닌 환자는 ≥26주의 아스파라기나제 치료요법을 받은 환자와 비교하는 경우 유의적으로 더 낮은 5년 EFS를 가졌다(각각 73% 대 90%; P <0.01). 최근의 어린이 종양학 그룹 연구(Children's Oncology Group study)는 이의 처방된 아스파라기나제 용량을 완료하지 않은 고-위험 및 느린 조기-반응 표준-위험 ALL 환자가 모든 처방된 아스파라기나제 용량을 제공받은 환자와 비교하여 유의적으로 열등한 EFS를 가졌음을 입증하였다. 주목하게도, 에르위니아 아스파라기나제 대체를 사용한 치료요법의 과정을 완료한 과민성 반응을 지닌 환자는 이의 1차 아스파라기나제 치료요법의 과정을 완료한 환자와 유사한 EFS를 나타내었다. 이러한 연구는 이의 처방된 아스파라기나제 용량을 완료한 환자가, 1차 또는 2차 아스파라기나제와는 상관없이, 일찍 중지한 환자보다 보다 우수한 결과를 가짐을 시사한다. 이러한 결과는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성이 발달하는 환자가 이의 전체 치료 과정을 완료할 수 있도록 보증하는 대안의 아스파라기나제 제제에 대한 필요성을 강조한다.

결론. 각각의 투여 경로에 대해 시험한 최고의 용량(즉, IM의 경우 25 mg/m² 및 IV의 경우 37.5 mg/m²)에서, JZP-458은 이러한 제1상 연구에서 건강한 성인 지원자의 100%에 대해 각각의 경로에서 72시간 째에 ≥0.1 IU/mL의 SAA 수준을 달성하였고, 예측하지 않은 AE, SAE, 또는 등급 ≥3 AE가 없는 완전한 아스파라긴 고갈을 야기하였다. 이러한 연구로부터의 누적 PK 및 안전성 데이타를 기반으로, 추천된 상 2/3 JZP-458 출발 용량은 월요일/수요일/금요일 복용 스케쥴에서 IM 투여 경로의 경우 25 mg/m²이고 IV 투여 경로의 경우 37.5 mg/m²이다. JZP-458은 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 과민성을 진행하는 ALL/LBL 환자에 대한 치료 대안으로서 사용될 수 있다.

실시예 8: 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성인 ALL/LBL 환자(코호트 1a a및1b)에서 JZP-458의 상 2/3 연구

JZP-458의 개방-표지, 다중센터, 용량 확인, 및 PK 연구를 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성(알레르기 반응 또는 사일런트 불활성화)인 ALL/LBL을 지닌 지원자(임의의 연령)에 대해 설계하였다. 본 연구는 아스파라긴 고갈 및 항-약물 항체(ADA) 수준에 대한 추가의 지원적 분석으로 혈청 아스파라기나제 활성에 의해 측정된 바와 같이, JZP-458의 내성 및 효능을 평가하기 위해 설계하였다. 6회 용량의 JZP-458을 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 용량에 대해 대체하였다. JZP-45을 사용한 연속 2주의 치료를 하나의 과정으로 정의한다.

연구 설계. 본 연구는 2개의 부분으로 이루어진다: IM 투여에 대한 JZP-458의 용량을 측정하고 안전성 및 효능을 확인하기 위한 부분 A; 및 IV JZP-458의 최적 용량 및 스케쥴을 정의하기 위한 부분 B(참고: 도 22 및 도 23). 부분 A 및 부분 B는 평행으로 시험할 수 있다: 코호트 1에서, 최적 용량을 측정하고; 코호트 2에서, 최적 용량에서 치료된 지원자의 수를 확장시킨다. 부분 B(IV)는 부분 A를 반영한다: 둘 다의 부분에서, JZP-458의 과정(2주에 걸쳐 6회 용량)은 월요일, 수요일, 또는 금요일에 시작할 수 있고, 지원자 당 과정의 수는 이의 개개 치료 계획에 의존할 것이다. 각각의 부분에서, JZP-458의 과정(2주에 걸쳐 6회 용량)은 월요일, 수요일, 또는 금요일에 시작할 수 있고; 지원자 당 과정의 수는 이의 개개 치료 계획에 의존할 것이다. 출발 용량은 IM 투여 경로의 경우 25 mg/m²이었다(코호트 1a). 출발 용량은 제1 상 연구 결과를 기반으로 선택하였다.

목적. 본 연구의 1차 목적은 1차 과정 동안 ≥ 0.1 IU/mL의 마지막 72 시간 NASS 수준에서 정의되는, 코호트 1 및 코호트 2에서 반응에 의해 측정된 것으로서 IM JZP-458 투여의 효능을 측정하고, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성인 지원자에서 IM JZP-458의 안전성 및 내성을 평가하기 위한 것이다. 추가의 목적은 다음을 포함하였다:

주요 2차 목적: 1차 과정 동안 ≥ 0.1 IU/mL의 마지막 48시간 NASS 수준으로 정의된, 코호트 1 및 코호트 2에 의해 측정된 바와 같은 IM JZP-458 투여의 효능을 측정하기 위한 것이다.

2차 목적: 1) 1차 과정 동안 ≥ 0.4 IU/mL의 마지막 48시간 및 마지막 72시간 NASS 수준으로 정의된 것으로서, 코호트 1 및 코호트 2에서 반응에 의해 측정된 바와 같은 IM JZP-458 투여의 효능을 측정하고, 2) PPK 접근법을 사용하여 IM JZP-458의 PK를 특성화하고 모든 용량 수준으로부터 모든 지원자의 데이타 및 모든 시점으로부터 샘플의 데이타를 사용한 E-R 상관관계를 탐구하고, 3) JZP-458의 반복 투여 후 IM JZP-458의 면역원성을 평가하기 위한 것이다.

탐구 목적(연구의 부분 B의 경우). 1) 1차 과정 동안 마지막 48 시간 NSAA ≥ 0.1 IU/mL 및 마지막 72 시간 NSAA ≥ 0.1 IU/mL로서 정의된, 반응에 의해 측정된 바와 같은 IV JZP-458 투여의 효능을 측정하고, 2) 1차 과정 동안 마지막 48 시간 NSAA ≥ 0.4 IU/mL 및 마지막 72 시간 NSAA ≥ 0.4 IU/mL로서 정의된, 반응에 의해 측정된 IV JZP-458 투여의 효능을 측정하고, 3) 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성인 ALL/LBL을 지닌 지원자에서 IV JZP-458의 안전성 및 내성을 평가하고, 4) 집단 PK 접근법을 사용하여 IV JZP-458의 PK를 특성화하고 5) JZP-458의 반복된 투여 후 IV JZP-458의 면역원성을 평가하기 위한 것이다.

1차 결과: 2020년 10월 7일 기준으로, 31명의 지원자를 중심 상 2/3 연구(JZP458-201)의 코호트 1a에 등록시키고 56명의 지원자를 코호트 1b에 등록시켰다. 코호트 1a의 1차 프로토콜-정의된 SDRC 평가는 6명의 평가가능한 지원자로부터의 데이타를 포함하였고, 코호트 1a의 제2 SDRC 평가는 16명의 평가가능한 지원자로부터의 누적 데이타를 포함하였다. 각각의 SDRC 추천은 이러한 시기에 모든 이용가능한 데이타의 고찰을 기반으로 한다. 평가가능한 효능 데이타의 평가 후 및 IM 25 mg/m² 용량 수준에서 관찰된 예상하지 못한 안전성 사고는 없었으므로, IM 37.5 mg/m² 용량 수준 평가를 개시하였다(코호트 1b). 1차 지원자를 2020년 6월 29일에 코호트 1b에 등록시켰다. 코호트 1b의 SDRC 평가는 코호트 1b에 등록된 1차의 7명의 지원자를 통한 1차 고찰로서 2020년 9월 1일에 이루어졌다. 이러한 고찰은 모든 이용가능한 SAA 데이타, PPK 모델링 및 모의시험 데이타, 및 연구로부터의 안전성 데이타를 포함하였다. 1차 결과는 SDRC 헌장에 따라, 코호트 1b에서 적어도 13명의 평가가능한 지원자에 대한 데이타가 이용가능한 경우 연구의 후속적인 고찰로 변형없이 지속적인 등록을 또한 뒷받침하였다. 코호트 1a(N = 31) 및 1b(N = 17)로부터의 이용가능한 1차 결과는 하기 요약한다.

혈청 아스파라기나제 활성 수준. 혈청 샘플을 SAA에 대해 검정하였다. SAA 수준은 효능 및 반응에 대한 대리 마커로서 제공된다. SAA에 대한 생체분석적 분석은 Charles River Laboratories(일리노이주 스코키에 소재)가 Skokie, IL), 0.035 IU/mL 내지 0.210 IU/mL의 범위에 걸쳐 사람 혈청 및 JZP-458 참고 표준(로트 번호 RM-M-009; 693 U/mg의 특이 활성)에서 검증된 효소 활성 방법을 사용하여 수행하였다.

코호트 1에서 평가가능한 지원자는 적어도 3회 용량의 IM JZP-458를 제공받고 과정 1의 2차 1/2 동안 프로토콜-정의된 샘플 수집 윈도우(window)(± 2시간) 내에서 수집된 72시간 NSAA 수준을 갖는 지원자로 정의되었다. 31명의 지원자는 25 mg/m²에 등록하였고 26명의 지원자는 프로토콜 당 코호트 1에서 1차 효능 목표의 목적을 위해 평가가능한 것으로 고려하였다. 평가불가능한 것으로 고려되는 지원자에 대한 이유는 다음을 포함하였다: 1) 2명의 지원자는 정의된 샘플 수집 시간 윈도우 밖에서 수집된 72시간 PK 샘플을 가졌다. 2) 1명의 지원자는 수집된 72시간 PK 샘플을 가지지 않았다. 3) 1명의 자웡자는 사전 동의를 철회하였고 PK 샘플을 수집하지 않았다. 4) 1명의 지원자는 상승된 지질(bioanalytical laboratory, Charles River Laboratory에 의해 평가됨)로부터의 검정 방해로 인하여 평가불가능한 SAA 값을 가졌다. 이러한 지원자는 과정 1 동안 기본선에서 등급 2의 고중성지방혈증(hypertriglyceridemia)(318 mg/dL) 및 등급 4 고중성지방혈증(2679 mg/dL)(TEAE로서 보고됨; 참고: 하기 안전성 요약의 세부사항)을 가졌다. 지원자의 트리글리세라이드는 JZP-458의 후속적인 과정 동안 기본선 이하로 지속적으로 감소하였고, 보다 최근에, 지원자는 과정 5를 완료하였고 트리글리세라이드 수준은 234 mg/dL(등급 1)로 감소하였다.

17명의 지원자가 코호트 1b의 1차 분석(37.5 mg/m2)에 포함되었고, 16명의 지원자는 코호트 1에서 1차 효능 목표 목적을 위해 평가하였다(1명의 지원자는 정의된 수집 윈도우 밖에서 수집된 72 시간 PK 샘플을 가졌으므로, 1차 종점에 대해 배제시켰디만 다른 종점에는 포함된다). 주요 시점에서 1차의 개개 SAA 결과는 도 24에 요약되어 있다. 1차로 관찰된 SAA 결과는 25 mg/m²의 JZP-458 IM 용량 수준에서(N = 26명의 평가가능한 지원자), 복용 후 마지막 72시간 및 48시간에서 평균(95% CI) SAA 수준이 각각 0.1560(0.1144 내지 0.1976) 및 0.4504(0.3637 내지 0.5370)임을 나타낸다(복용 후 마지막 72시간 및 48시간에서 중앙값[제1의 사분위, Q1; 제3의 사분위, Q3] SAA 수준은 각각 0.1345[0.0886, 0.2178] 및 0.4091[0.2813, 0.6577]이었다). 37.5 mg/m²의 JZP-458 IM 용량 수준에서(N = 16명의 평가가능한 지원자), 복용 후 마지막 72시간 및 48시간에서 평균(95% CI) SAA 수준은 각각 0.2605(0.1326 내지 0.3884) 및 0.7146(0.3976 내지 1.0316)이었다(복용 후 72시간 및 48시간에서 중앙값[Q1, Q3] SAA 수준은 각각 0.1732[0.1157, 0.2849] 및 0.6503 [0.3248, 0.8736]이었다.

복용 후 마지막 72시간 및 48시간에서 NSAA 수준이 ≥ 0.1 IU/mL 및 ≥ 0.4 IU/mL인 지원자의 비율을 도 25에 나타낸다. 25 mg/m²(N = 26명의 평가가능한 지원자) 및 37.5 mg/m²(N = 16 평가가능한 지원자)의 JZP-458 IM 용량 수준에서, 지원자의 65.4% 및 81.3% 각각이 마지막 72시간 평가(1차 종점)에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성하였고; 지원자의 96.2% 및 93.8% 각각은 마지막 48시간 평가(주요 2차 종점)에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL을 달성하였다.

집단 약동학적 모델링 및 모의시험: 예비 PPK 분석(2차 종점)을 SAA 데이타를 사용하여 수행하였다(데이타는 2020년 9월 28일에 수령하였다). JIM JZP-458을 제공받은 ZP458-201 연구로부터 47명의 지원자(25 mg/m²에서 30명의 지원자 및 37.5 mg/m²에서 17명의 지원자)의 총 319개의 정량화가능한 SAA 종점(과정 1에서만)을 PPK 모델 개발에 포함시켰다. 모델을 SAA 데이타에 맞추어 구조 모델을 확인하였다. 체중, 신장, 체 표면적, 연령, 성별, 인종, 민족성, 질환, 및 질환 아형(disease subtype)을 JZP-458 SAA 청소 및 용적에서의 잠재적인 공변량으로서 시험하였다. 체중 만이 통계적으로 유의적인 것으로 밝혀졌으며 모델에 포함되었다.

JZP-458에 대해 개발된 공변량 모델(covariate model)은 선형 제거 및 1 차수 흡수를 지닌 1-구획 IM 만의 모델이었고, 체중은 JZP-458 SAA 청소 및 용적에 대한 계량형 공변량(allometric covariate), 및 비례 잔류 오차 모델(proportional residual error model)로서 포함되었다. 모델 진단은 예측된 데이타와 관찰된 데이타 및 예측 모델링 방법론을 기반으로 양호한 맞춤(fit)을 나타내었다.

공변량 모델을 사용하여 환자 SAA 프로파일(N = 용량 수준 당 2000명의 대상체)를 모의시험하여 ≥ 0.1 IU/mL의 치료학적 NSAA 수준을 달성하는 경향성을 탐구하였다. 모의시험된 가상 집단은 대상체를 질병 통제 국민 건강 및 영양 시험 조사 데이타 센터(Centers for Disease Control National Health and Nutrition Examination Survey Data)에서 인구통계를 대체하여 재샘플링함으로써 생성하였다. 모의시험 집단은 2 내지 85세 범위이었고, 체중은 8.9 내지 174.6 kg(중앙값 62.7 kg)이었다.

금요일, 월요일, 수요일(FMW) 및 MWF 복용 스케쥴 둘 다를 치료의 1개 과정 당 6개 용량에 대해 모의시험하였고, FMW 스케쥴에 집중하였는데, 그 이유는 이것이 단지 1회 복용 후 처음 72시간 NSAA로 가장 보존적인 시나리오를 나타내었기 때문이었다. 모의시험 데이타는 출발일이 마지막 48시간 또는 72시간 시점에 대해 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL을 지닌 환자의 모의시험된 퍼센트에 영향을 미치지 않음을 나타내었다. 중앙값 및 95% 예측 구간을 사용한 FMW 복용 스케쥴에 대한 모의시험된 프로파일을 도 26에 나타낸다. NSAA ≥ 0.1 IU/mL를 달성하는 환자의 모의시험된 퍼센트의 표처리된 요약 및 25 내지 80 mg/m² 범위의 IM 용량에 대한 평균 예측된 SAA 수준을 도 27에 나타낸다.

PPK 모델링 및 모의시험을 기반으로, FMW 스케쥴에서 37.5 mg/m² JZP-458의 IM 용량에서, JZP-458는 환자의 87%에서 마지막 72 시간 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성하고(95% CI: 85.5% 내지 88.5%) 환자의 99.9%에서 마지막 48시간 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL(95% CI: 99.7% 내지 100%)을 달성하는 것으로 예측되었고; 모의시험된 평균 NSAA 수준은 마지막 72 및 48시간에서 각각 0.29(95% 예측 구간: 0.06 내지 0.88) 및 0.58(95% 예측 구간: 0.2 내지 1.32)이었다. PPK 모델은 이러한 50 mg/m²용량에서 환자의 94.2%가 복용 후 72시간째에 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성할 수 있음을 예측한다.

예비 아스파라긴 고갈 결과. 약력학적 샘플을 아스파라긴 농도에 대해 Syneos Health(뉴저지주 프린스톤 소재)가, 인증된 액체 크로마토그래피 탄뎀 분광법을 사용하여 0.025 내지 10.0 μg/mL(생물마커 부분 인증 보고서 수정(Biomarker Partial Validation Report Amendment) 1, SN 0044)의 범위에 걸쳐 평가하였다. 아스파라긴 검정을 위한 혈액 샘플을 수집 직후 얼음 속에 두고 가공된 혈장을 -80℃에서 30분 동안 저장하여 생체 내 아스파라긴 수준을 나타내는 분석 측정을 보증하였다. 아스파라긴 수준을 측정하여 복용 간격에 걸쳐 JZP-458의 유효성을 뒷받침하였다. 평균 기본선 아스파라긴 수준은 코호트(25 mg/m²)에서 치료한 30명의 지원자의 경우 10.2557 μg/mL(95% CI: 9.2175 내지 11.2938)이었고 코호트 1b (37.5 mg/m²)에서 17명의 지원자의 경우 10.2282 μg/mL(95% CI: 7.1852 내지 13.2712)이었으며, 이는 문헌에 보고된 값(Tong 2014)과 일치한다. 대부분의 지원자의 경우, 혈장 아스파라긴의 완전한 고갈이 대부분의 샘플에서 관찰되었는데, 예컨대, 혈장 아스파라긴 수준은 복용 전 수준으로부터 검정 정량화의 하한치(0.025 μg/mL) 이하 또는 근처의 수준까지 신속하게 고달되었고, 과정 1의 치료 기간 전체에서 복용 전 6까지 지속되었고, 여기서 마지막 샘플을 수집하였다. 4명의 지원자는 아스파라긴에서 일시적으로 낮은 수준의 증가를 가졌다(코호트 1a로부터 3명 및 코호트 1b로부터 1명).

예비 안전성 결과. 코호트 1a에서, 총 31명의 지원자는 JZP-458 IM 25 mg/m²를 투여받았다. 코호트 1b에서, 데이타는 JZP-458 IM 37.5 mg/m²를 투여한 17명의 지원자에 대해 이용가능하다.

TEAE의 개관은 도 28에서 용량 코호트로 나타낸다. 지원자의 대부분은 적어도 1개의 TEAE를 경험하였다. JZP-458 IM 25 mg/m² 코호트에서, 가장 흔한 TEAE는 호중구 수 감소(지원자의 32.3%, 31명 중 10명), 백혈 세포 수 감소(지원자의 25.8%, 31명 중 8명), 빈혈(지원자의 22.6%, 31명 중 7명)이었다(표 4, 코호트 1a). JZP-458 IM 37.5 mg/m² 코호트에서, 가장 흔한 TEAE는 구토(지원자의 35.3%, 17명 중 6명) 및 매스꺼움(지원자의 23.5%, 17명 중 4명))이었다(도 27, 코호트 1b).

JZP-458 IM 25 mg/m² 코호트(N = 31)에서, 등급 3 또는 4 TEAE가 18명의 지원자(58.1%)에서 보고되었고, 호중구 수 감소(29.0%), 백혈 세포 수(blood cell count) 감소(16.1%), 및 열성 중성구감소증(febrile neutropenia)(19.4%)의 등급 3 또는 4의 TEAE가 가장 일반적이었다(표 6). 전반적으로, 등급 3 이상의 치료-응급의, 예상되지 않은, 임상적으로 유의적인 비혈액학적 독성은 1명의 지원자에서 보고되었다(연구 약물과 관련된 것으로 여겨진, 등급 4의 과중성지질혈증(hypertriglyceridemia))(표 6 및 리스팅(Listing) 1, 코호트 1a). 중증 TEAE는 JZP-458 IM 25 mg/m² 코호트에서 9명의 지원자(29.0%)에서 보고되었다(표 5). 중증 TEAE는 1명의 지원자에서 어지럼증(presyncope); 1명의 지원자에서 비루(rhinorrhea) 및 열상중성구감소증; 1명의 지원자에서 열상 중성구감소증, 탈수, 및 발열(pyrexia); 1명의 지원자에서 약물과민성(drughypersensitivity) 및 열상 중성구감소증; 1명의 지원자에서 열상 중성구감소증; 1명의 지원자에서 열상의 중성구감소증 및 구내염(stomatitis); 1명의 지원자에서 악화된 점막염(mucositis) 구강; 1명의 지원자에서 발열; 및 1명의 지원자에서 메트헤모글로빈혈증(methemoglobinemia)을 포함하였다. 이러한 중증의 TEAE 모두는 1명의 지원자에서 약물 과민성 및 열상의 중성구감소증의 사건을 제외하고는, 연구 약물과 관련되지 않는 것으로 고려되었다.

전반적으로, 1명의 지원자(JZP-458 25 mg/m²)가 연구 약물의 중단을 초래하는 TEAE를 경험하였다. 지원자(4세)는 과정 1의 용량 5일째에 세페핌 및 설팜에톡사졸/트리메토프림에 대해 등급 2의 알레르기 반응(중증아님)을 나타내었다.

이러한 약물 둘 다는 중지하였다. 후속적으로, JZP-458의 과정 2의 용량 3을 제공받은 후 1일째에, 지원자는 약물 과민성(등급 3)의 중증 TEAE를 경험하였다. 다음날, 사건이 해결되고 지원자는 퇴원하였다. 이러한 사고는 연구 약물과 관련된 것으로 고려되며 연구 약물의 중지를 이끌었다(목록 1, 코호트 1a). JZP-458 IM 37.5 mg/m² 코호트(N = 17명)에서, 6명의 지원자는 등급 3 또는 4의 TEAE를 경험하였고, 열성 중성구감소증(17.6%, 17명 중 3)이 가장 일반적이었다(도 30 및 목록 1, 코호트 1b). JZP-458 IM 37.5 mg/m² 코호트에서 3명의 지원자는 중증 TEAE(1명의 지원자에서 구토 및 복부 통증[연구 약물과 관련되지 않음]; 1명의 지원자에서 약물과민성[[그대로의 용어(verbatim term): JZP-458에 대한 알레르기 반응; 연구 약물과 관련됨] 및 열성중성구감소증[연구 약물과 관련됨]; 및 1명의 지원자에서 열성 중성구감소증[연구 약물과 관련됨; 2회의 사건])를 경험하였다(도 28). 등급 3 이상의 치료-응급의, 예상하지 못한, 임상적으로 유의적인 비-혈액학적 독성 사건이 이러한 지원자에서 보고되었고 TEAE는 연구 중단을 초래하지 않았다(도 29, 코호트 1b).

아스파라기나제에 대한 목적한 부작용은 알레르기 반응, 췌장염(pancreatitis), 및 혈전증(thrombosis)을 포함한다(Stock 2011; Kearney 2009; Pieters 2011; Plourde 2014; Kloos 2020; Asparlas, Summary Basis of Approval 2018). 이러한 예비 안전성 분석에 대한 데이타 컷오프로 인하여, 1명의 지원자(코호트 1a) 만이 ≥ 등급 3의 알레르기 반응/과민성 반응(상기 논의됨)을 경험하였고 ≥ 등급 3의 췌장염 또는 혈전증을 경험한 지원자는 없었다. 사망은 보고되지 않았다.

요약하면, 관찰된 TEAE 프로파일은 다른 아스파라기나제와 일치하며, JZP-458의 용량 수준 둘 다(25 및 37.5 mg/m²)가 지원자에서 잘 견디어짐을 나타내었다.

SDRC에서 내부 및 외부 전문가에 의한 이용가능한 연구 데이타의 완전한 고찰을 기반으로, 유리한 이점:위험 프로파일과 함께, 37.5 mg/m²의 JZP-458 용량이 JZP-458의 등록을 위한 적절한 용량이다. 이러한 용량은 환자가 이의 아스파라기나제의 치료 요법을 완료하도록 보증할 수 있고, 이점:위험 및 최소 유효 복용량에 대한 FDA 가이드라인과 일치한다.

안전성. 추가의 안전성 연구를 최소 82명의 지원자로 수행할 것이며, 예를 들면, 코호트 1a으로부터의 31명(25 mg/m²) 및 코호트 1b로부터의 51명(37.5 mg/m²)이 안전성 평가에 이용가능할 것이다. 47명의 지원자(25 mg/m²에서 31명의 지원자 및 37.5 mg/m²에서 17명의 지원자)에서 예비 데이타는 37.5 mg/m²의 제안된 용량이 안전하고 잘 견디어짐을 입증하였다. 예비 안전성 분석에서, 1명의 지원자(코호트 1a, 25 mg/m²) 만이 ≥ 등급 3의 알레르기 반응/과민성을 경험하였고 ≥ 등급 3의 췌장염 또는 혈전증을 경험한 지원자는 없었다. 약물 과민성의 등급 3의 중증 사건(serious adverse event; SAE)(연구 약물과 관련됨)은 연구 약물의 중지를 초래하였고; TEAE로 인해 연구를 중지하는 다른 지원자는 없었다.

효능 데이타. 조기 효능 평가를 위한 표준은 0.1 IU/mL의 표적 SAA 값, 뿐만 아니라 아스파라긴 고갈의 확인 및 아스파라기나제에 이미 노출된 환자에 대해 임상적으로 적절한 반응의 고려를 기반으로 한다. 예비 관찰된 SAA 결과는 25 mg/m²이 JZP-458 IM 용량 수준(N = 26명의 평가가능한 지원자)에서, 복용 후 마지막 72 및 48시간째에 평균 (95% CI) SAA 수준은 각각 0.1560(0.1144-0.1976) 및 0.4504(0.3637-0.5370)(복용 후 마지막 72 및 48시간에서 중앙값 [Q1, Q3] SAA 수준은 각각 0.1345 [0.0886, 0.2178] 및 0.4091 [0.2813, 0.6577]이었다)을 나타내었다. 복용 후 37.5 mg/m²의 JZP-458 IM 용량 수준(N = 16명의 평가가능한 지원자), 마지막 72 및 48시간째에 평균(95% CI) SAA 수준는 각각 0.2605 (0.1326-0.3884) 및 0.7146 (0.3976-1.0316)(복용 후 마지막 72 및 48시간째에 중앙값 [Q1, Q3] SAA 수준은 각각 0.1732 [0.1157, 0.2849] 및 0.6503 [0.3248, 0.8736]이었다)이었다.

25 및 37.5 mg/m²이 JZP-458 IM 용량 수준에서, 지원자의 65.4% 및 81.3% 각각이 마지막 72시간 평가(예비 종점)에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성하였고; 지원자의 96.2% 및 93.8% 각각이 마지막 48시간 평가(주요 2차 종점)에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성하였다. 37.5 mg/m²(N = 16명)에서 , 마지막 72시간 평가에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성한 지원자의 퍼센트는 1차 종점 기준(통계적 분석 계획(statistical analysis plan)[SAP]에 정의된 바와 같음)을 충족하지 않았지만, 결과는 과민성 반응 후 치료를 위해 비-이. 콜라이-기반 아스파라기나제를 제공받은 환자에 대한 공공 관찰되거나 예측된 비율(80% 내지 88%)와 일치하는 임상적으로 적절한 반응률을 입증한다(Vrooman 2010; Panetta 2020;Salzer 2013). 37.5 mg/m²(N = 16명)에서, 마지막 48시간 평가(2차 주요 종점)에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성한 지원자의 퍼센트는 93.8%이었고 IA(N = 51명의 지원자)에 대한 SAP에서 요약된 예비명시된 성공 기준을 충족하는 것으로 예측된다.

JZP-458의 효능의 추가의 확인은 예비 PPK 결과에서 입증된다. 예비 PPK는 관찰된 데이타와 일치하였고 제안된 37.5 mg/m² 용량 선택에 대한 추가의 뒷받침을 제공한다. PPK 모델링 및 모의시험(2차 종점)을 기반으로, FMW 스케쥴에서 37.5 mg/m² JZP-458의 IM 용량에서, JZP-458은 환자의 87%에서 마지막 72시간 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL(95% CI: 85.5% 내지 88.5%)을 달성하고 환자의 99.9%에서 마지막 48시간 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL(95% CI: 99.7% 내지 100%)을 달성하는 것으로 예측되며; 모의시험된 평균 NSAA 수준은 마지막 72 및 48시간에서 각각 0.29(95% 예측 구간: 0.06 내지 0.88) 및 0.58(95% 예측 구간: 0.2 내지 1.32)이었다. 모의시험 결과는 출발일이 마지막 72 또는 48시간 시점의 경우 NSAA 수준이 ≥ 0.1 IU/mL인 한자의 퍼센트에 영향을 미치지 않음을 나타내었다.

PPK 분석은 모델이 모든 환자, 시점, 및 용량 수준에 걸쳐 유용한 데이타를 사용하므로 관찰된 데이타의 풍부한 지지 및 BLA를 위한 총 데이타 패키지를 제공한다. PPK 모델 결과는, 이용가능한 모든 임상 및 PK 데이타를 기반으로, JZP-458의 노출-반응 특성을 나타낼 수 있다. 이러한 모델은 범주화된 데이타에 의존하지 않으므로, 이는 관련된 시점에서 NSAA 수준의 신뢰가능한 예측을 제공한다. 모델은 JZP-458 IM 투여 후 72시간 NASS 수준 ≥ 0.1 IU/mL을 지닌 환자의 퍼센트가 이. 콜라이-기반 아스파라기나제 생성물을 사용한 환자의 집단에서 예측된 반응과 일치함을 입증한다. 모델화된 SAA 값은 37.5 mg/m²의 IM 용량이 MWF 복용 스케쥴에서 적절한 용량임을 시사한다.

JZP-458에 대해 확인된 37.5 mg/m² 용량의 추가의 척도로서, 승인된 방법(Biomarker Partial Validation Report Amendment 1, SN 0044)에 의해 측정된 바와 같은 전체 아스파라긴 고갈의 목표가 달성되었다. 25 및 37.5 mg/m²에서 복용 기간 전체에서 최저에서(at trough) 측정된 것에 대한 기본선 아스파라긴 수준의 비교는 아스파라긴의 거의 완전한 고갈을 일관되게 입증하였다. 이러한 패턴으로부터의 편차는 작고 일시적이었다. 잠재적인 용량의 효과, 독성 연구, 주사 수의 효과, 바이알의 수 뿐만 아니라 다른 인자를 평가하였다. 이러한 연구는 보다 높은 부작용의 증가된 위험의 잠재적인 효과 더 높은 용량의 균형을 맞추었다.

실시예 9: JZP-458에 대한 총괄적인 임상 데이타 패키지: 코호트 1a 및 1b에 대한 관찰된 효능 데이타, PD 데이타, 안전성 데이타, 및 면역원성 데이타

다음은 MWF에서 IM 투여된 25/25/50 mg/m² JZP-458의 효능 및 안전성을 뒷받침하는 데이타의 4개의 주요 성분이다:

1. 코호트 1a 및 1b로부터의 관찰된 효능 데이타. 25 mg/m²(N = 29명) 및 37.5 mg/m2(N = 51명) JZP-458 IM 투여된 MWF/WFM/FMW에서, 과정 1에서 마지막 72 시간 평가에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성한 지원자의 퍼센트는 각각 65.5%(95% CI: 48.2%, 82.8%) 및 80.4%(95% CI: 69.5%, 91.3%)이었다(초기 분석 표 9.2.1.1). 25 mg/m²(N = 32명) 및 37.5 mg/m²(N = 53명) JZP-458 IM 투여된 MWF/WFM/FMW에서, 과정 1에서 마지막 48시간 평가에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성한 지원자의 퍼센트는 각각 96.9%(95% CI: 90.8%, 100%) 및 98.1%(95% CI: 94.5%, 100.0%)이었다. 95% CI의 보다 낮은 결합은 90%를 초과하고, 이는 48시간 마다 25 mg/m2 및 37.5 mg/m2 JZP-458 복용의 효능을 뒷받침한다.

2. 코호트 1a(N = 32명) 및 1b(N = 53명)으로부터 PD 데이타.

25 및 37.5 mg/m² JZP-458의 IM 용량의 투여는 혈장 아스파라긴 수준의 완전한 고갈을 야기하였다. 혈장 아스파라긴 수준은 예비용량 수준으로부터 검정 정량화의 하한치(0.025 μg/mL) 이하 또는 근처까지 급속히 감소하였고, 과정 1의 치료 과정 전체에서 용량 6까지 지속되었고, 여기서 마지막 샘플을 수집하였다. 4명의 지원자는 혈장 아스파라긴에 있어서 일시적으로 낮은 수준의 증가를 가졌다(코호트 1a로부터 3명 및 코호트 1b로부터 1명).

3. 코호트 1a 및 1b로부터의 안전성 데이타(코호트 및 전체에 의한).

코호트 1a 및 1b(N = 86명)으로부터의 조합된 안전성 데이타를 기반으로, ALL/LBL을 지닌 지원자에서 JZP-458의 전체 안전성 프로파일은 JZP-458가 잘 견디어지고, JZP-458의 안전성 프로파일이 예측가능하며 아스파라기나제의 확립된 안전성 프로파일과 일치함을 입증하였다.

4. 부작용. 전반적으로, 지원자의 96.5%(86명 중 83명)는 연구 동안 1회 이상의 치료-응급 부작용(TEAE)을 경험하였다(도 31). 전반적으로, 가장 흔한 TEAE는 빈혈(지원자의 37.2%[86명 중 32명]), 호중구 수 감소(지원자의 34.9%[86명 중 30명]), 및 혈소판 수 고갈(지원자의 29.1%[86명 중 25명])이었다. 가장 흔한 치료-관련된 TEAE는 호중구 수 감소(지원자의 18.6%[86명 중 16명), 빈혈(지원자의 15.1%[86명 중 13명]), 및 메스꺼움(지원자의 15.1%[86명 중 13명])이었다.

실시예 10: 코호트 1c의 안전성 연구

코호트 1c(MWF에서 IM 투여된 25/25/50 mg/m²)에 대한 예비 안전성(TEAE) 데이타는 JZP-458의 이러한 용량 및 요법이 잘 견디어지고 아스파라기나제 생성물의 잘 확립된 안전성 프로파일과 일치함을 나타낸다. 예비 데이타는 코호트 1c에서, 지원자의 81.3%(16명 중 13명)이 1회 이상의 TEAE를 경험하였다(도 32). 전반적으로, 가장 흔한 TEAE는 빈혈(지원자의 25.0%[16명 중 4명]), 혈소판 감소(지원자의 25.0%[16명 중 4명]), 및 림프구 수 감소, 호중구 수 감소, 및 백혈 세포수 감소(각각 지원자의 18.8%[16명 중 3명])이었다.

예비 데이타는 또한 코호트 1c에서 사망한 지원자가 없음을 나타낸다. 16명의 지원자 중 4명(25.0%)은 SAE를 경험하였다. 1명의 지원자는 급성 췌장염(등급 3)의 치료-관련된 SAE를 가졌고, 이는 연구 약물 중단을 초래하였다. 이러한 사건은 연구 13일째에 시작되었고, 연구 24일째에 해결되었다. 코호트 1c에서 예비 데이타에서 TEAE로 인해 연구 약물을 중지한 지원자는 없었다. 또한, 코호트 1c(N = 16명)에 대한 예비 데이타에서, 알레르기 반응(예를 들면, 과민성 및 아나필락시) 또는 혈전증의 TEAE는 발생하지 않았다.

데이타 마감일 기준으로, 코호트 1c에서 16명의 지원자 중 2명(12.5%)이 췌장염의 TEAE를 경험하였고; 둘 다 시험자에 의해 JZP-458과 관련된 것으로 평가되었다. 첫번째 지원자는 과정 1의 용량 6을 제공받은 후 4일째에 등급 2 췌장염으로 발전하였다. 지원자는 다른 증상없이 등급 2 상복부 통증(epigastric pain)을 시작하였고 871 U/L(참고 범위 73 내지 393 U/L)의 상승된 리파제를 가졌다. 아밀라제는 시험자에 의해 정한 한계 이내인 것으로 보고되었다(값은 제공되지 않음). 시험자는 증상이 치료없이 신속하게 해결되었고 리파제가 8일 후 300 U/L로 감소하였다고 기술하였다. 시험자는 사건을 등급 2 췌장염 및 JZP-458과 관련된 것으로 평가하였다. JZP-458으로 취한 조치는 없었고 지원자는 어떠한 추가의 문제없이 본 사건의 발생 후 14일째에 JZP-458의 과정 2를 시작하였다. 과정 2의 시작시 실험실 결과는 리파제 218 U/L 및 아밀라제 64(참고 범위: 25 내지 115 U/L)이었다.

2차 지원자는 과정 1의 용량 6을 완료한 후 1일째에 등급 3 췌장염으로 발전하였다. 지원자는 좌측 상복부, 중복부, 및 좌측 하복부로 방사되는 중증도의 복부 통증으로 응급실에 내원하였다(10명 중 8명). IV 모르핀을 제공하였고 통증은 10명 중 7명으로 감소하였다. 관련 실험실 결과는 리파제 549 U/L(참고 범위: 73 내지 393) 및 아밀라제 47 U/L(범위 25 내지 115 U/L)를 포함하였다. X-선은 중증도의 변비(constipation)를 나타내었다. COVID 시험 및 뇨 배양물은 음성이었다. 지원자는 정밀검사(work-up) 및 췌장염의 치료를 위해 입원하였다. 사건은 대략 10일 후에 해결되었고, 리파제 결과는 이 날짜에 범위 이내로 돌아왔다(리파제 355 U/L). 시험자는 사건을 JZP-458과 관련된 것으로 평가하였고, 지원자는 등급 3 췌장염으로 인하여 연구 13일째에 치료를 종료하였다.

임상 데이타베이스의 예비 고찰을 JZP458-201에서 췌장염의 보고를 위해 수행하였다. 코호트 1c로부터의 44명의 지원자를 포함하여, 현재 등록된 161명의 지원자 중에서, 모든 코호트에 걸쳐 췌장혐의 사건을 보고하는 7명의 경우가 존재하였다. 5명의 보고는 코호트 1c에서 2명의 지원자 외에 코호트 1b에서 등록된 지원자에서 발생하였다. 7명의 보고 중 6명은 중증으로 고려되었고, 1명은 중증이 아닌 것으로 고려되었다. 췌장염의 6명의 중증 보고 중 2명은 코호트 1b에서 1명의 지원자에서 발생하였고, 상술된 바와 같이, 후에 사망하였다(1명의 지원자는 패혈증(sepsis)으로 진행되어 사망하였고, 다른 지원자는 식도기관루(esophageotracheal fistula)와 관련된 흡인성 폐렴(aspiration pneumonia)으로 진행하여 사망하였다). 전반적인 췌장염의 발병률은 아스파라기나제에 대한 예측 범위 내에 있다.

요약. 진행중인 연구 JZP458-201에서, 긍정적인 이점:위험 프로파일을 갖는 3개 용량 요법을 평가하였다. 전체 데이타는 장기 작용하는 이. 콜라이 아스파라기나제의 한 과정을 대체하기 위해 6개 용량에 걸쳐 주어진 MWF 스케쥴에서 IM 투여된 25/25/50 mg/m² JZP-458의 효능을 뒷받침한다. JZP-458의 안전성 프로파일(코호트 1a, 1b, 및 코호트 1c에 대한 예비 데이타)은 아스파라기나제 생성물의 확립된 안전성 프로파일과 비교가능하다.

실시예 11: 60일 업데이트: 코호트 1a, 1b, 및 1c로부터의 효능 PK 및 PD 데이타

코호트 1a(N = 32명) 및 1b(N = 53명)으로부터의 이용가능한 효능, PK(SAA), 및 PD 데이타. 이용가능한 데이타는 데이타 추출 데이타 전에 생물분석 실험실에 의해 분석된 데이타 마감 일 전체에서 코호트 1a(N = 33) 및 1b(N = 53)에 대해 수집된 데이타를 포함한다.

코호트 1c(N = 16명)으로부터의 효능, PK(SAA), 및 PD 데이타. 데이타 마감 일 현재, 총 17명의 지원자(투여받지 않은 1명의 지원자를 포함함)를 코호트 1c(MWF에서 IM 투여된 25/25/50 mg/m²)에 등록하였다. 연구 약물의 적어도 1회 용량을 제공받은 16명의 지원자의 경우, 연구 시점 동안 중앙값(범위)은 4.75주(1.9 내지 7.1주)이었고, 연구에서 2명의 지원자는 < 2주이었고, 연구에서 3명의 지원자는 2 내지 < 4주이었고, 연구에서 9명의 지원자는 4 내지 < 6주이었고, 연구에서 2명의 지원자는 6 내지 < 8주이었다. 이러한 16명의 지원자 중에서, 7명은 치료의 1개 과정을 제공받았고 9명은 치료의 2개 과정을 제공받았다.

예비 결과를 기반으로, MWF(N = 13명)에서 IM 투여된 25/25/50 mg/m² JZP-458에서, 과정 1에서 마지막 72 및 48시간 평가에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL에 달성하는 지원자의 퍼센트는 각각 92.3%(13명 중 12명의 지원자) 및 92.3%(13명 중 12명의 지원자)이었다. 이러한 결과는 MWF 스케쥴에서 IM 투여된 25/25/50 mg/m² JZP-458의 효능을 뒷받침한다. 과정 1에서 마지막 72 및 48시간 평가에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성하지 않는 1명의 지원자(12 내지 < 18세)는 온카스파르에 대해 등급 3 알레르기 반응을 가졌고 지원자가 증상을 가지기 시작하는 경우 주입의 대략 5%를 제공하였다. JZP-458의 제1 용량을 7일 후 투여하였다. 스크리닝 및 1일째에 지원자의 실험실 값(예를 들면, 헤모글로빈, 빌리루빈, 트리글리세라이드, 및 콜레스테롤)은 상승하지 않았다. 2개의 AE가 이러한 지원자에 대해 현재까지 보고되었다: 과정 1의 마지막 용량(용량 6) 후에 발생한, 인후통(throat pain)(관련되지 않음) 및 경증(등급 1) 주사 부위 반응(JZP-458과 관련됨). 과정 1에서, 이러한 지원자는 NSAA 수준 > 0.1 IU/mL(용량 1 후 2.5 및 48시간째에 및 용량 2 후 48시간째에)를 가졌고, 이는 용량 3 후 72시간째(마지막 72시간 평가)에서 0.0453 IU/mL, 용량 5 후 2.5시간째에 0.1369 IU/mL, 용량 4 후 48시간 째에 BLQ, 및 용량 5 후 48시간 째(마지막 48시간 평가)에 0.0510 IU/mL로 감소하였다. 이러한 지원자에 대한 ADA 데이타는 진행중이다.

실시예 12: 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성인 ALL/LBL 환자에서 JZP-458의 제2/3 상 연구

이는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성(알레르기 반응 또는 사일런트 불활성화)인 ALL/LBL을 지닌 지원자(임의의 연령)에서 JZP-458의 진행중인 개방-표지된, 다중센터, 용량 확인, 및 PK 연구이다. 본 연구는 아스파라긴 고갈 및 ADA 수준에 대한 추가의 지원적 분석과 함께 SAA에 의해 측정된 바와 같은, JZP-458의 내성 및 효능을 평가하기 위해 설계된다. 6회 용량의 JZP 458를 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 용량에 대해 대체한다. JZP-458을 사용한 2주 연속의 치료를 과정 1로 정의한다. JZP-458의 과정(2주에 걸쳐 6회 용량)은 월요일, 수요일, 또는 금요일에 시작하고; 지원자 당 과정의 수는 이의 개개 치료 계획에 의존한다.

본 연구는 2개 부분으로 이루어진다: IM 투여에 대해 JZP-458의 용량을 결정하고 안전성 및 효능을 확인하는 부분 A; 및 IV JZP-458의 최적 용량 및 스케쥴을 정의하는 부분 B.

부분 A: 코호트 1a를 2주에 걸쳐 MWF 스케쥴에서 25 mg/m²의 IM 용량에서 개시하였다. 코호트 1a로부터의 데이타는 6명의 평가가능한 지원자를 MWF 스케쥴에서 IM 25 mg/m² 용량에 등록한 후 및 다시 16의 평가가능한 지원자로부터의 누적 데이타를 사용하여 평가하였다. 복용 후 마지막 72시간째에 NSAA 수준을 지닌 지원자의 퍼센트는 프로토콜-정의된 한계점(threshold) 미만이었고, IM 25 mg/m2 용량 수준에서 허용가능한 안전성 프로파일로 인하여, 재즈(Jazz)는 MWF 스케쥴에서 37.5 mg/m²의 IM 용량으로 상승시킬 것을 결심하였다(코호트 1b).

처음 7명의 지원자, 및 다시 누적적으로 17명의 평가가능한 지원자를 코호트 1b에 등록시킨 후 안전성 데이타, SAA 데이타, PPK 모델링 및 모의시험 결과를 평가하였다. 재즈는 이후에 코호트 1b에서 변형없이 MWF 스케쥴에서 37.5 mg/m²의 용량에서 등록을 지속할 것을 결정하였다.

PPK 모델링 및 FDA와의 논의를 기반으로, 코호트 1c를 개시하여 월요일 및 수요일에 25 mg/m²의 용량 및 금요일에 50 mg/m²의 용량을 평가하였다. 코호트 1a(N = 30명) 및 1b(N = 32명)의 과정 1로부터의 지원자 데이타를 사용한 예비 PPK 모델은 MWF 복용 스케쥴을 뒷받침하는 최적의 용량이 장기-작용하는 이. 콜라이 아스파라기나제의 모든 용량을 대체하기 위한 총 6회 용량에 대해 MWF에서 투여된 25/25/50 mg/m²의 용량임을 예측하였다. 2021년 7월 19일자를 기준으로, 총 51명의 지원자가 코호트 1c에 등록되었다.

부분 B

부분 B 코호트 1a(IV 용량 확인): 당해 코호트에서 지원자는 6회 IV 용량의 JZP 458을 제공받을 것이고; 적어도 6명의 평가가능한 지원자의 표적이 등록되었다. 평가가능한 지원자는 적어도 3회 용량의 IV JZP 458을 제공받고 과정 1의 1/2 동안 72시간의 NSAA 수준(± 2 시간 윈도우에서 수득됨)을 갖는 지원자로 정의된다. 혈액 샘플을 SAA 수준 측정 및 다른 PK/PD 실험 평가를 위해 수집하였다. IV JZP 458의 추가의 과정은 지원자가 임상 이익을 얻는 한 지원자 원래의 치료를 기반으로 투여할 것이고; 지원자의 치료 계획에서 남아있는 장기 지속하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 후속적인 스케쥴된 용량은 지원자의 아스파라기나제 치료가 완료될 때까지 IV JZP 458의 과정과 동등한, 6회 용량으로 대체될 것이다.

코호트에서 모든 요구된 지원자를 등록시키고 6회 용량의 JZP 458로 치료한 후, 용량 수준을 평가하고 추가의 지원자/코호트에 대한 필요성을 SDRC로 결정할 것이다.

부분 B(가능한 추가의 코호트를 위한 IV JZP 458 측정): 초기 IV 복용 코호트에서 6명의 평가가능한 지원자 중 6명이 72 시간 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL을 가지고 안전성 및 내성이 SDRC에 의한 고찰을 기반으로 허용가능한 경우, 용량은 추가의 평가를 위한 용량으로 확인될 수 있다. 용량이 확인되지 않는 경우, 추가의 용량 코호트는 (단락 8.1/프로토콜 수정 02/단락 3.1.3)에 기술된 바와 같이 시험될 수 있다.

본 요약은 2021년 7월 19일자의 데이타 마감 일을 사용한 분석 서브세트의 결과를 나타내고, 이는 부분 A(코호트 1a [MWF 스케쥴에서 IM 25 mg/m²; N = 33명], 코호트 1b[MWF 스케쥴에서 IM 37.5 mg/m²; N = 83명], 및 코호트 1c[월요일 및 수요일에 투여된 IM 25 mg/m² 및 금요일에 투여된 50 mg/m2; N = 51명]) 및 부분 B(월요일 및 수요일에 IV 투여된 25 mg/m² 및 금요일에 IV 투여된 50 mg/m²; N = 62)로부터의 지원자를 포함한다.

연구의 1차 목적은 제1 과정 동안 마지막 72시간 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL로서 정의된, 코호트 1 및 코호트 2에서의 반응에 의해 측정된 바와 같은 IM JZP-458의 효능을 측정하고, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성인 ALL/LBL을 지닌 지원자에서 IM JZP-458의 안전성 및 내성을 평가하기 위한 것이다.

2021년 7월 19일 데이타 마감 일 기준으로, 총 228명의 지원자(부분 A: 코호트 1a[IM 25 mg/m² MWF]에서 33명, 코호트 1b[IM 37.5 mg/m² MWF]에서 83명, 및 코호트 1c[IM 25 (MW)/50 (F) mg/m²]에서 51명; 부분 B: 코호트 1a[IV 25 (MW)/50 (F) mg/m²]에서 62명)를 연구에 등록하였다. 2021년 7월 19일 현재, 부분 A에서 28명(16.8%)의 지원자 및 부분 B에서 39명(62.9%)의 지원자는 연구에서 JZP-458 치료를 제공받는 것을 지속하였다.

부분 A(IM)에서, 167명의 지원자 중 총 35명(21.0%)이 JZP-458 치료를 중단하였다(167명 중 21명[12.6%]은 TEAE로 인하여, 167명 중 8명[4.8%]은 의사 결정으로 인하여, 167명 중 3명[1.8%]은 진행성 질환(progressive disease)으로 인하여, 167명 중 1명[0.6%]은 부모 또는 안내자에 의한 철회로 인하여, 167명 중 1명[0.6%]은 지원자 철회로 인하여, 및 167명 중 1명[0.6%]은 "다른 이유"로 인하여 중단하였다). 부분 A에서 167명 중 총 3명[1.8%]의 지원자는 2021년 7월 19일 데이타 마감일 기준으로 사망하였다.

부분 B(IV)에서, 62명의 지원자 중 22명(35.5%)이 JZP-458 치료를 중단하였다(62명 중 15명[24.2%]은 TEAE로 인하여, 62명 중 4명[6.5%]은 의사 결정으로 인하여, 62명 중 1명[1.6%]은 재발성 질환으로 인하여, 62명 중 1명[1.6%]은 지원자에 의한 철회로 인하여, 및 62명 중 1명[1.6%]은 "다른" 이유로 인하여 중단하였다). 부분 B에서 2021년 7월 19일 데이타 마감 일에 사망한 지원자는 없었다.

전반적으로, 부분 A(IM)의 경우, 지원자의 대부분은 백인(167명 중 115명[68.9 %])이고; 등록시 중앙값 나이는 10세(범위: 1 내지 25세)이었다. 안전성 평가 세트에서 167명의 지원자 중, 44명(26.3%)은 < 6세이었고, 57명(34.1%)은 6 내지 < 12세이었고, 45명(26.9%)은 12 내지 < 18세이었고, 21명(12.6%)은 ≥ 18에이었다. 여성 지원자(167명 중 64명[38.3%])보다 더 높은 남성 지원자(167명 중 103명 [61.7%])이 안전성 분석 세트에 포함된다.

부분 B(IV)의 경우, 지원자의 대부분은 백인(61명 중 43명[70.5%])이었고; 등록시 중앙값 나이는 10세(범위: 1 내지 24세)이었다. 안전성 분석 세트에서 61명의 지원자 중, 20명(32.8%)은 < 6세이었고, 14명(23.0%)은 6 내지 < 12세이었고, 17명(27.9%)은 12 내지 < 18세이었고, 10명(16.4%)은 ≥ 18세이었다. 여성 지원자(61명 중 25명[41.0%])보다 더 높은 남성 지원자(61명 중 36명 [59.0%])이 안전성 분석 세트에 포함된다.

전반적으로, 부분 A(IM)에서, 1차 질병 상태는 167명의 지원자 중 115명[74.3%]이 의 경우 B-세포 ALL로, 167명의 지원자 중 26명[15.6%]이 T 세포 ALL로, 167명의 지원자 중 16명[9.6%]이 T-세포 LBL로, 및 167명의 지원자 중 1명(0.6%)이 B 세포 LBL로 보고되었다. 전반적으로, 연구 1일과 관련하여, 1차 진단 이래로 시간은 지원자(167명 중 122명[73.1%])의 대부분의 경우 0 내지 3개월의 범위이었다. 사전 아스파라기나제 치료는 모든 지원자(167명 중 167명)의 경우 온카스파르이었고, 연구 1일과 관련하여, 마지막 아스파라기나제 치료 이후 평균 시간은 24.3일(범위: 2 내지 158일)이었다.

전반적으로, 부분 B(IV)에서, 1차 질환 상태는 61명의 지원자 중 51명[83.6%]의 경우 B-세포 ALL, 61명의 지원자 중 7명[11.5%]의 경우 T 세포 ALL, 61명의 지원자 중 2명(3.3%)의 경우 B 세포 LBL, 및 61명의 지원자 중 1명[1.6%]의 경우 T-세포 LBL이었다. 전반적으로, 연구 1일과 관련하여, 1차 진단 이후로 시간은 지원자 대부분(61명 중 47명[77.0%])의 경우 0 내지 3개월의 범위이었다. 사전 아스파라기나제 치료는 대부분의 지원자(61명 중 60명[98.4%])의 경우 온카스파르이었고 연구 1일과 관련하여, 마지막 아스파라기나제 치료 이후 평균 시간은 24.9일이었다(범위: 2 내지 138일). 인구학적 및 기본선 특성은 도 33에 제공된다.

혈청 아스파라기나제 활성을 기반으로 한 약동학: 부분 A(IM)에서, PK 분석 세트는 25 mg/m² MWF 코호트에서 32명의 지원자(97.0%), 37.5 mg/m² MWF 코호트에서 83명의 지원자(100%), 및 25(MW)/50 (F) mg/m² 코호트에서 51명의 지원자(100%)이었고; 부분 B(IV)에서, PK 분석 세트는 25 (MW)/50 (F) mg/m²의 용량에서 JZP 458 IV를 제공받은 60명(96.8%)의 지원자로 이루어졌다.

관찰된 SAA 결과는 25 mg/m² MWF, 37.5 mg/m² MWF, 및 25 (MW)/50 (F) mg/mg²의 JZP-458 IM 용량 수준에서, 복용 후 마지막 72 및 48시간에서 평균 및 중앙 SAA 수준은 ≥ 0.1 IU/mL이었다(도 34).

부분 A(IM)

MWF 스케쥴로 투여된 25 및 37.5 mg/m²의 JZP-458 IM 용량 수준에서, 지원자의 64.3%(95% CI: 46.5%, 82.0%) 및 90.8%(95% CI: 84.3%, 97.3%) 각각이 치료의 1차 과정 동안 마지막 72시간 평가에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL을 달성하였다. JZP 458이 25 (MW)/ 50 (F) mg/m²의 용량에서 IM 투여된 경우, 지원자의 89.8%(95% CI: 81.3%, 98.3%)이 치료의 1차 과정 동안 마지막 72시간 평가에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성하였다.

MWF 스케쥴로 투여된 25 및 37.5 mg/m²의 JZP-458 IM 용량 수준에서, 지원자의 96.9%(95% CI: 90.8%, 100.0%) 및 98.8%(95% CI: 96.4%, 100.0%) 각각이 치료의 1차 과정 동안 마지막 48시간 평가에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성하였다. JZP 458이 25 (MW)/ 50 (F) mg/m²의 수준에서 IM 투여된 경우, 지원자의 95.9%(95% CI: 90.4%, 100.0%)가 치료의 1차 과정 동안 마지막 48시간 평가에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성하였다.

부분 B (IV)

MWF 스케쥴로 투여된 JZP-458 IV 용량 수준 25 (MW)/50 (F) mg/m²에서, 지원자의 40.0%(95% CI: 26.4%, 53.6%) 각각이 치료의 1차 과정 동안 마지막 72시간 평가에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성하였다.

25 (MW)/ 50 (F) mg/m²의 용량에서 IV 투여된 JZP-458 IV 용량 수준에서, 지원자의 89.8%(95% CI: 82.1%, 97.5%)가 치료의 1차 과정 동안 마지막 48시간 평가에서 NSAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL를 달성하였다.

혈청 아스파라기나제 농도를 기반으로 한 약동학: SAA와 SAC의 관계를 JZP-458에 대해 JZP458-201 연구 내에서 탐구하였다.

부분 A (IM):

JZP-458를 ALL/LBL을 지닌 지원자에서 IM 투여한 경우, 강력한 양성 관련성이 SAA와 SAC 사이에서 관찰되었고, 과정 1로부터 혼주된 JZP 458 IM 25 mg/m² MWF, IM 37.5 mg/m² MWF, 및 IM 25 (MW)/50 (F) mg/m²에 대한 상관 계수는 0.9640(피어슨 상관 계수)이었다(도 35). 추가로, 선형 회귀 모델로부터의 방정식은 SAC = 1254.7 × SAA이었다(도 35). 이러한 데이타는 SAA 수준이 0.1 IU/mL에 있는 경우, 상응하는 혈청 아스파라기나제 농도가 당해 환자 집단에서 대략 125 ng/mL일 수 있음을 시사한다.

부분 B (IV)

JZP-458가 ALL/LBL을 지닌 지원자에서 IV 투여된 경우, 강력한 긍정적인 관련성이 SAA와 SAC 사이에서 관찰되었고, 과정 1로부터 JZP 458 IV 25 (MW)/50 (F) mg/m²에 대한 상관 계수는 0.9263(피어슨 상관 계수)이었다(도 35). 또한, 선형 회귀 모델로부터의 방정식은 SAC = 1080.8 × SAA이었다(도 35). 이러한 데이타는 SAA 수준이 0.1 IU/mL에 있는 경우, 상응하는 혈청 아스파라기나제 농도가 당해 환자 집단에서 대략 108 ng/mL일 수 있음을 시사하였다.

약력학적 결과: PD 분석 세트는 연구의 부분 A(IM)에 등록된 166명(99.4%)의 지원자 및 연구의 부분 B(IV)에 등록된 60명(96.8%)의 지원자로 이루어졌다. PD 샘플을 인증된 액체 크로마토그래피 탄뎀 질량 분광법 방법을 사용하여 L-아스파라긴의 경우 0.025 내지 10.0 μg/mL 및 L-글루타민의 경우 0.250 내지 100 μg/mL의 범위에 걸쳐 사람에서 L-아스파라긴 및 L-글루타민 농도에 대해 평가하였다.

혈장 L-아스파라긴 고갈:

부분 A(IM): 혈장 아스파라긴의 완전한 고갈이 25 mg/m² MWF, 37.5 mg/m²MWF, 및 25 (MW)/50 (F) mg/m²에서 JZP-458의 IM 복용 후 관찰되었다. 과정 1에서, 중앙값 복용 전 L-아스파라긴 농도는 모든 용량 수준 및 모든 스케쥴의 경우 7.5865 내지 11.3215 μg/mL의 범위이었다. 지원자의 대부분의 경우, 혈장 아스파라긴의 완전한 고갈이 관찰되었다. 도 36a, 36b, 및 36c는 25 mg/m² MWF, 37.5 mg/m²MWF, 및 25 (MW)/50 (F) mg/m²에서 JZP-458의 용량의 IM 투여 후, 평균 혈장 아스파라긴 수준이 복용 전 수준으로부터 검정 LLOQ(0.025 μg/mL) 미만 또는 근처의 수준까지 신속하게 떨어짐을 나타낸다. 감소된 혈장 아스파라긴 수준은 과정 1의 치료 과정 전체에서 복용 전 6까지 지속되었고, 여기서 마지막 샘플을 수집하였다. 4명의 지원자는 혈장 아스파라긴에서 일시적으로 낮은 수준의 증가를 가졌다(코호트 1a로부터 3명의 지원자 및 코호트 1b로부터 1명의 지원자).

부분 B (IV): 혈장 아스파라긴의 완전한 고갈은 25 (MW)/50 (F) mg/m²에서 JZP-458의 IV 복용 후 관찰되었다. 과정 1에서, 평균 복용 전 L-아스파라긴 농도는 모든 용량 스케쥴의 경우 8.2218 내지 8.9348 μg/mL의 범위이었다. 대부분의 지원자의 경우, 혈장 아스파라긴의 완전한 고갈이 관찰되었다. 도 36a 내지 36c는 25 (MW)/50 (F) mg/m²에서 JZP-458의 용량의 IV 투여 후, 평균 혈장 아스파라긴 수준이 복용 전 수준으로부터 검정 LLOQ(0.025 μg/mL) 미만 또는 근처의 수준까지 신속하게 감소하였음을 나타낸다. 감소된 혈장 아스파라긴 수준은 과정 1의 치료 과정 전체에서 복용 전 6까지 지속되었고, 여기서 마지막 샘플을 수집하였다. 2명의 지원자는 혈장 아스파라긴에서 낮은 내지 중간 수준의 증가를 가졌다.

혈장 L-글루타민 고갈:

부분 A(IM): 혈장 글루타민이 또한 25 mg/m² MWF, 37.5 mg/m² MWF, 및 25 (MW)/50 (F) mg/m²에서 JZP-458의 IM 복용 후 관찰되었다. 과정 1에서, 평균 복용 전 L-글루타민 농도는 모든 용량 수준 및 모든 스케쥴에서 88.3000 내지 112.7875 μg/mL의 범위이었다. 도 37a 내지 37c는 평균 L 글루타민 수준이 25 mg/m² MWF, 37.5 mg/m²MWF, 및 25 (MW)/50 (F) mg/m²의 용량에서 JZP-458의 IM 투여 후 감소하였지만, L 글루타민의 완전한 고갈은 평균 프로파일을 기반으로 관찰되지 않았고, 글루타민 수준은 단지 중간정도로 영향을 받았음을 나타낸다.

부분 B(IV): 혈장 글루타민의 고갈이 또한 25 (MW)/50 (F) mg/m²에서 JZP-458의 IV 복용 후 관찰되었다. 과정 1에서, 평균 복용 전 L-글루타민 농도는 모든 용량 스케쥴에서 99.3727 내지 111.0048 μg/mL의 범위이었다. 도 37a 내지 37c는 평균 L 글루타민 수준이 25 (MW)/50 (F) mg/m²의 용량에서 JZP-458의 IV 투여 후 감소하였음을 나타낸다. L 글루타민의 완전한 고갈은 단지 주입 말기에 복용 후 바로 관찰되었고; 과정 1 동안 치료 과정 전체의 다른 시점에서, 글루타민 수준은 단지 중간정도로 영향을 받았다.

JZP-458의 임상 약리학은 PPK 분석에 의해 특성화되었다. 건강한 지원자에서 연구 JZP458-101로부터의 데이타의 PPK 분석은 제2/3 상 연구에서 출발 용량 및 복용 스케쥴의 선택을 촉진시켰다. 제2/3 상 연구 JZP458-201에서, 드믄 SAA 샘플을 ALL/LBL을 지닌 지원자로부터 수집하였다. 연구 JZP458-201(부분 A: 코호트 1a [N = 33; MWF 스케쥴에서 IV 투여된 25 mg/m² JZP458], 1b [N = 83; MWF 스케쥴에서 IM 투여된 37.5 mg/m² JZP458, 및 1c [N = 51; 25 (MW)/50 (F) mg/m²로서 IM 투여된 JZP458]; 부분 B: N = 61; 25 [MW]/50 [F] mg/m²로서 IV 투여된 JZP458)에서 ALL/LBL을 지닌 228명의 지원자로부터의 데이타(2021년 7월 19일 현재)를 사용한 집단 PK 및 E-R 분석을 수행하여 PPK 매개변수를 평가하고 JZP-458의 최적의 효과적인 용량을 확립하였다.

흡수: JZP-458는 IM 투여 후 느리게 흡수된다. JZP-458의 6번째 복용 후 JZP 458의 개개의 예측된 Tmax의 평균(범위)는 연구 JZP458 201로부터 코호트 1a 및 1b(N = 85)로부터의 데이타를 사용한 PPK 분석을 기준으로 ALL/LBL을 지닌 지원자에서 13.1(5.85 내지 20.2)시간이다.

분포: 40 kg인 환자에서 JZP-458에 대한 V/F의 집단 추정치(population estimate)는 연구 JZP458 201로부터 코호트 1a 및 1b에서 ALL/LBL을 지닌 85명의 지원자로부터의 데이타의 PPK 분석을 기준으로 3.35(표준 오차: 0.46) L이다.

물질대사: JZP-458은 단백질분해에 의해 물질대사되는 효소이다.

제거: JZP-458 PK는 선형 제거 및 순차적인 혼합 차수 흡수를 사용한 1-구획 IM 모델에 의해 기술되어 있으며, 중량은 JZP-458 CL/F 및 V/F에서 계량형 공변량(allometric covariate)으로서 포함된다. 과정 1에서 제1 용량의 모의시험 후 JZP-458의 개개의 예측된 t1/2의 평균(SD)은 16.1(1.38)시간이다. 40 kg 환자에서 JZP-458에 대한 CL/F의 집단 평가는 연구 JZP458 201에서 코호트 1a 및 1b에서 ALL/LBL을 지닌 85명의 지원자의 데이타의 PPK 분석을 기준으로 0.416(표준 오차: 0.0193) L/h이다.

용량 비례성(Dose Proportionality): JZP-458에 대한 용량 비례성을 건강한 지원자에서 제1상의, 단일-용량 연구 JZP458-101 및 ALL/LBL을 지닌 지원자에서 제2/3상 연구 JZP458-201에서 평가하였다. 연구 JZP458-101에서, JZP-458 노출(C_max 및 AUC)은 SAA를 기반으로 용량이 증가하면서 증가하였고, JZP-458 SAA 노출에서의 증가는 IM 투여의 경우 12.5 내지 25 mg/m²의 용량 범위 사이에서 대략 용량-비례한다. 연구 JZP458-201에서, PPK 분석을 기반으로, JZP-458의 첫번째 및 6번째 용량 후 모델-예측된 C_max 및 AUC 값(각각 C_max,1및 C_max,6)은 도 38에 나타낸다. 25로부터 37.5 mg/m²로의 1.5배의 용량 증가로, C_max 37.5 mg/m²/C_max 25 mg/m²의 비는 평균 각각 1.63 및 1.62이었고 AUC 37.5 mg/m²/AUC 25 mg/m²의 비는 1.69이었다. 이러한 결과는 JZP-458 SAA 노출에서의 증가(C_max 및 AUC)가 IM 투여의 경우 25 내지 37.5 mg/m²의 용량 범위 사이에서 대략 용량-비례하였음을 나타낸다.

축적: JZP-458에 대한 축적을 ALL/LBL을 지닌 지원자에서 제2/3 상 연구 JZP458-201에서 평가하였다. 연구 JZP458-201에서, 복용 빈도 및 t_1/2(16.1시간)을 기반으로, IM JZP-458에 대한 누적 비는 48시간의 복용 간격으로 추정되는 1.15이었다. 연구 JZP458-201에서 JZP-458의 첫번째 및 여섯번째 용량 후 PPK 모델 예측된 C_max 값은 도 39에 나타낸다. 축적 비(C_max,6/C_max,1로서 계산됨)는 25 및 37.5 mg/m²의 JZP-458에 대해 각각 1.18 및 1.17이었고, 이는 매우 약한 축적을 시사한다.

JZP-458에 대한 면역원성의 통합된 요약을 모듈 5.3.5.3/ ISI에서 제공한다. 전반적으로, 다른 아스파라기나제와 비교하여 JZP-458에 대해 예측된 추가의 위험은 없다.

다단계 접근법(multi-tiered approach)을 사용하여 임상 연구 JZP458-201에서 JZP458의 면역원성을 평가하였다(도 40). 제1 단계에서, 혈청 샘플을 JZP-458에 결합하는 ADA의 검출을 위해 스크리닝하였다. 스크리닝 검정으로부터 어떠한 잠재적으로 ADA 양성인 샘플을 지닌 혈청 샘플을 결합의 특이성의 확인을 위해 재시험한다. 확인된 항체를 갖는 샘플을 추가로 적정하여 ADA 반응의 크기를 측정한다. 또한, 확인된 항체를 지닌 샘플을 추가로 JZP 458의 중화 활성에 대해 평가한다.

연구 JZP458-201에서, 면역원성 샘플을 각각의 과정에서 제1 용량 이전, 과정 1에서 용량 6 이전, 및 연구 방문 말기(마지막 과정에서 마지막 복용 후 30일 [±3])에 모든 지원자로부터 수집한다. ADA를 시험하기 위한 추가의 샘플은 지원자가 알레르기 반응을 경험하는 경우 수득될 수 있다. 지원자가 치료이하(subtherapeutic) NSAA 수준(< 0.1 IU/mL)을 갖는 것으로 측정된 경우, 혈액 샘플이 이용가능할 때 ADA에 대한 시험을 수행할 수 있다. 또한, 연구의 말기 이전에 수득한 샘플로부터 양성의 ADA를 나타내는 지원자의 경우, 이의 JZP-458의 마지막 과정의 지원자의 마지막 복용 후 대략 6개월까지 후속적인 ADA 샘플을 수집하기 위한 노력이 이루어진다. 이러한 ADA 양성 지원자의 경우, 이의 후속적인 ADA 샘플은 수득된 마지막 샘플이 될 것이다. 모든 면역원성 샘플을 승인된 방법을 사용하여 도 40에 기술된 바와 같이 평가한다.

부분 A(IM)에서, 총 217, 500, 및 245개의 샘플을 IM 25 mg/m² MWF, IM 37.5 mg/m² MWF, 및 25 (MW)/50 (F) mg/m²용량 코호트의 IM 용량 각각에서 지원자로부터 수집하였다. 데이타 마감 일 기준으로, ADA 데이타는 코호트 1a에서 33명의 지원자로부터 5.0(14명 중 1명) 과정, 코호트 1b에서 83명의 지원자로부터 4.0(15명 중 1명) 과정, 및 코호트 1c에서 51명의 지원자로부터 4.0(11명 중 1명)의 중앙(범위)으로부터 이용가능하였다. 부분 B(IV)에서, 총 174개의 샘플을 25 (MW)/50 (F) mg/m²의 용량의 IV 투여 후 지원자로부터 수집하였다. 데이타 마감 일 기준으로, ADA 데이타는 1.0(10명 중 1명) 과정의 중앙(범위)으로부터 이용가능하였다. ADA 수집된 과정의 최대 수즌 도 41에 범주화하여 요약되어 있다.

부분 A(IM): 데이타 마감 일 기준으로, IM JZP 458을 제공받은 167명 중 83명(49.7%)의 지원자는 JZP 458에 대해 양성의 ADA인 것으로 확인되었다. 이들 83명의 ADA 양성 지원자 중에서, 83명 중 11명의 지원자는 연구 동안 치료-관련된 과민성 반응을 경험하였고 83 명중 4명의 지원자는 NAb를 가졌다. 167명 중 총 84명(50.3%)의 지원자는 JZP-458에 대해 ADA 음성이었고, 84명 중 5명의 지원자는 연구 동안 치료-관련된 과민성 반응을 경험하였다.

83명의 ADA 양성 지원자 중, 7명의 지원자는 복용 전 1일째에 ADA 양성이었고, 모두 연구 동안 적어도 1회 ADA 음성이 되었다. 복용 전 1일째에 ADA 양성 상태는 이러한 지원자에서 과정 1 SAA 수준에 영향을 미치지 않았고; 모든 7명의 지원자는 과정 1 동안 모든 이용가능한 48 및 72시간 시점에서 SAA 수준 ≥ 0.1 IU/mL을 가졌다. JZP-458의 투여 후 양성 ADA로 진행된 76명의 지원자가 존재하였고; 이러한 76명의 지원자 중 51명은 후속적으로 연구 동안 적어도 1회 ADA 음성이 되었다.

항약물(antidrug) 항체 상태를 PPK 분석에서 JZP 458의 PK에 대한 잠재적인 공변량으로 평가하였고, 이는 유의적인 공변량이 아닌 것으로 측정되었다. 관찰된 데이타를 기반으로, 과정 1에서 일치 시점(matching timepoint)에서 보다 낮은 SAA 수준(< 0.1 IU/mL)을 지닌 4명의 ADA 양성 지원자가 도 42a 및 도 42b에서 관찰되었다. 이러한 4명의 지원자에 대한 SAA 및 SAC 데이타는 크게 관련되어 있고, 이는 관찰된 낮은 SAA가 낮은 SAC에 기인할 수 있음을 시사한다. 과정 1에서 일치 시점에서 높은 SAA 수준(≥ 0.1 IU/mL)을 지닌 17명의 ADA 양성 지원자가 관찰되었고, 이는 낮은 SAA가 양성 ADA에 기인하지 않을 수 있음을 시사한다.

부분 B (IV): 데이타 마감 일 기준으로, IV 투여에 의해 JZP 458을 제공받은 지원자의 분석은 61명 중 20명(32.8%)의 지원자가 JZP-458에 대해 양성 ADA로 확인되었음을 나타내었다. 이러한 20명의 ADA 양성 지원자 중, 9명의 지원자는 연구 동안 치료-관련된 과민성 반응을 경험하였다. 총 41명의 지원자는 JZP-458에 대해 ADA 음성이었고 이러한 지원자 중 5명은 연구 동안 치료-관련된 과민성 반응을 경험하였다. 관찰된 데이타를 기반으로, 과정 1에서 일치 시점에 보다 낮은 SAA 수준(< 0.1 IU/mL)을 지닌 3명의 ADA 양성 지원자가 관찰되었다(도 42a 및 도 42b). 이러한 3명의 지원자에 대한 SAA 및 SAC 데이타는 크게 관련되어 있으며, 이는 관찰된 낮은 SAA가 낮은 SAC에 기인할 수 있음을 시사한다.

면역원성 결과의 요약에 대해서는 도 43을 참고한다.

본 발명의 구현예 및 적용이 나열 및 실시예의 방식으로 일부 상세히 기술되어 있지만, 많은 추가의 변형이 본원에 함유된 본 발명의 개념을 벗어나지 않고 가능할 수 있음이 당해 분야의 숙련가에게 명백할 수 있다. 본원에 인용된 모든 참고는 이의 전문이 본원에 포함된다.

SEQUENCE LISTING <110> JAZZ PHARMACEUTICALS IRELAND LTD. <120> DOSING AND ADMINISTRATION OF RECOMBINANT L-ASPARAGINASE <130> 49170-4009 <150> 63/168,224 <151> 2021-03-30 <160> 3 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 327 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> recombinant L-asparaginase <400> 1 Ala Asp Lys Leu Pro Asn Ile Val Ile Leu Ala Thr Gly Gly Thr Ile 1 5 10 15 Ala Gly Ser Ala Ala Thr Gly Thr Gln Thr Thr Gly Tyr Lys Ala Gly 20 25 30 Ala Leu Gly Val Asp Thr Leu Ile Asn Ala Val Pro Glu Val Lys Lys 35 40 45 Leu Ala Asn Val Lys Gly Glu Gln Phe Ser Asn Met Ala Ser Glu Asn 50 55 60 Met Thr Gly Asp Val Val Leu Lys Leu Ser Gln Arg Val Asn Glu Leu 65 70 75 80 Leu Ala Arg Asp Asp Val Asp Gly Val Val Ile Thr His Gly Thr Asp 85 90 95 Thr Val Glu Glu Ser Ala Tyr Phe Leu His Leu Thr Val Lys Ser Asp 100 105 110 Lys Pro Val Val Phe Val Ala Ala Met Arg Pro Ala Thr Ala Ile Ser 115 120 125 Ala Asp Gly Pro Met Asn Leu Leu Glu Ala Val Arg Val Ala Gly Asp 130 135 140 Lys Gln Ser Arg Gly Arg Gly Val Met Val Val Leu Asn Asp Arg Ile 145 150 155 160 Gly Ser Ala Arg Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Ala Ser Thr Leu Asp Thr 165 170 175 Phe Lys Ala Asn Glu Glu Gly Tyr Leu Gly Val Ile Ile Gly Asn Arg 180 185 190 Ile Tyr Tyr Gln Asn Arg Ile Asp Lys Leu His Thr Thr Arg Ser Val 195 200 205 Phe Asp Val Arg Gly Leu Thr Ser Leu Pro Lys Val Asp Ile Leu Tyr 210 215 220 Gly Tyr Gln Asp Asp Pro Glu Tyr Leu Tyr Asp Ala Ala Ile Gln His 225 230 235 240 Gly Val Lys Gly Ile Val Tyr Ala Gly Met Gly Ala Gly Ser Val Ser 245 250 255 Val Arg Gly Ile Ala Gly Met Arg Lys Ala Met Glu Lys Gly Val Val 260 265 270 Val Ile Arg Ser Thr Arg Thr Gly Asn Gly Ile Val Pro Pro Asp Glu 275 280 285 Glu Leu Pro Gly Leu Val Ser Asp Ser Leu Asn Pro Ala His Ala Arg 290 295 300 Ile Leu Leu Met Leu Ala Leu Thr Arg Thr Ser Asp Pro Lys Val Ile 305 310 315 320 Gln Glu Tyr Phe His Thr Tyr 325 <210> 2 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 2 Ala Ala Pro Ala Ala Pro Ala Pro Ala Ala Pro Ala Ala Pro Ala Pro 1 5 10 15 Ala Ala Pro Ala 20 <210> 3 <211> 348 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> native E. coli-derived L-asparaginase <400> 3 Met Glu Phe Phe Lys Lys Thr Ala Leu Ala Ala Leu Val Met Gly Phe 1 5 10 15 Ser Gly Ala Ala Leu Ala Leu Pro Asn Ile Thr Ile Leu Ala Thr Gly 20 25 30 Gly Thr Ile Ala Gly Gly Gly Asp Ser Ala Thr Lys Ser Asn Tyr Thr 35 40 45 Val Gly Lys Val Gly Val Glu Asn Leu Val Asn Ala Val Pro Gln Leu 50 55 60 Lys Asp Ile Ala Asn Val Lys Gly Glu Gln Val Val Asn Ile Gly Ser 65 70 75 80 Gln Asp Met Asn Asp Asn Val Trp Leu Thr Leu Ala Lys Lys Ile Asn 85 90 95 Thr Asp Cys Asp Lys Thr Asp Gly Phe Val Ile Thr His Gly Thr Asp 100 105 110 Thr Met Glu Glu Thr Ala Tyr Phe Leu Asp Leu Thr Val Lys Cys Asp 115 120 125 Lys Pro Val Val Met Val Gly Ala Met Arg Pro Ser Thr Ser Met Ser 130 135 140 Ala Asp Gly Pro Phe Asn Leu Tyr Asn Ala Val Val Thr Ala Ala Asp 145 150 155 160 Lys Ala Ser Ala Asn Arg Gly Val Leu Val Val Met Asn Asp Thr Val 165 170 175 Leu Asp Gly Arg Asp Val Thr Lys Thr Asn Thr Thr Asp Val Ala Thr 180 185 190 Phe Lys Ser Val Asn Tyr Gly Pro Leu Gly Tyr Ile His Asn Gly Lys 195 200 205 Ile Asp Tyr Gln Arg Thr Pro Ala Arg Lys His Thr Ser Asp Thr Pro 210 215 220 Phe Asp Val Ser Lys Leu Asn Glu Leu Pro Lys Val Gly Ile Val Tyr 225 230 235 240 Asn Tyr Ala Asn Ala Ser Asp Leu Pro Ala Lys Ala Leu Val Asp Ala 245 250 255 Gly Tyr Asp Gly Ile Val Ser Ala Gly Val Gly Asn Gly Asn Leu Tyr 260 265 270 Lys Ser Val Phe Asp Thr Leu Ala Thr Ala Ala Lys Thr Gly Thr Ala 275 280 285 Val Val Arg Ser Ser Arg Val Pro Thr Gly Ala Thr Thr Gln Asp Ala 290 295 300 Glu Val Asp Asp Ala Lys Tyr Gly Phe Val Ala Ser Gly Thr Leu Asn 305 310 315 320 Pro Gln Lys Ala Arg Val Leu Leu Gln Leu Ala Leu Thr Gln Thr Lys 325 330 335 Asp Pro Gln Gln Ile Gln Gln Ile Phe Asn Gln Tyr 340 345

Claims

이를 필요로 하는 사람 대상체(subject)에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은:
사람 대상체에게 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제(E-coli.-derived asparaginase) 이외의 L-아스파라기나제를, 시간-순서 용량의 세트(set of time-ordered dose)로 투여하는 단계를 포함하고; 여기서
시간-순서 용량의 세트는 제1 용량에 이은 제2 용량을 포함하고,
제1 용량은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 하나이고,
제2 용량은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 다른 것이고,
제1 용량이 약 50 mg/m²인 경우 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 3일이고,
제1 용량이 약 25 mg/m²인 경우 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 2일이고,
제2 용량이 약 50 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 3일 동안 투여되지 않고,
제2 용량이 약 25 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 2일 동안 투여되지 않고,
여기서 약 25 mg/m²에서의 용량은 혈관내 투여되고,
여기서 약 50 mg/m²에서의 용량은 근육내 투여되는, 방법.
제1항에 있어서, 여기서
제1 용량이 약 50 mg/m²이고,
제2 용량이 약 25 mg/m²이고,
시간-순서 용량의 세트는 제2 용량 후 제3 용량을 추가로 포함하고,
제3 용량은 약 25 mg/m²이고
여기서 사람 대상체에 대한 제2 용량과 제3 용량의 투여 사이의 기간은 2일인, 방법.
제2항에 있어서, 제1 용량이 금요일에 투여되고 제2 용량이 월요일에 투여되는, 방법.
제2항에 있어서, 제1 용량이 금요일에 투여되고, 제2 용량이 월요일에 투여되고, 제3 용량이 수요일에 투여되는, 방법.
제1항에 있어서,
제1 용량이 약 25 mg/m²이고,
제2 용량이 약 50 mg/m²이고,
시간-순서 용량의 세트는 제2 용량 후 제3 용량을 추가로 포함하고,
제3 용량이 약 25 mg/m²이고,
사람 대상체에 대한 제2 용량과 제3 용량의 투여 사이의 기간은 3일인, 방법.
제5항에 있어서, 제1 용량이 수요일에 투여되고 제2 용량이 금요일에 투여되는, 방법.
제5항에 있어서, 제1 용량이 수요일에 투여되고, 제2 용량이 금요일에 투여되고, 제3 용량이 월요일에 투여되는, 방법.
제1항에 있어서,
제1 용량이 약 25 mg/m²이고,
제2 용량이 약 50 mg/m²이고,
시간-순서 용량의 세트는 제1 용량 전에 제3 용량을 추가로 포함하고,
제3 용량이 약 25 mg/m²이고,
제3 용량은 사람 대상체에게 제1 용량 2일 전에 투여되는, 방법.
제8항에 있어서, 제1 용량이 수요일에 투여되고 제2 용량이 금요일에 투여되는, 방법.
제8항에 있어서, 제1 용량이 수요일에 투여되고, 제2 용량이 금요일에 투여되고, 제3 용량이 월요일에 투여되는, 방법.
제1항에 있어서, 방법이 제3 용량을 추가로 포함하고, 여기서 제1 용량은 월요일에 투여되고, 제2 용량은 수요일에 투여되고, 제3 용량은 금요일에 투여되는, 방법.
제11항에 있어서, 제1 용량이 25 mg/m²이고, 제2 용량이 25 mg/m²이고, 제3 용량이 50 mg/m²인, 방법.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 방법이 사람 대상체에게 L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예(instance)를 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 재조합 L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 각각의 개개 예는 대상체에게 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예 중 시간-순서 용량의 세트의 이전 예의 완료시 투여되는, 방법.
제13항에 있어서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예가 2 내지 100개인, 방법.
제13항에 있어서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예가 2 내지 15개인, 방법.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 천연인, 방법.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 장기-작용하는(long-acting), 방법.
제17항에 있어서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 페그아스파라기나제(pegasparaginase)인, 방법.
제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 테트라머(tetramer)이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머(monomer)는 서열 번호: 1을 포함하는, 방법.
제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 95 퍼센트의 서열 동일성(sequence identity)을 갖는, 방법.
제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성(hypersensitivity)을 나타내는, 방법.
제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 성인인, 방법.
제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 소아인, 방법.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 6% 미만의 응집(aggregation)을 입증하는, 방법.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 1% 미만의 응집을 입증하는, 방법.
제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 비-동결건조(non-lyophilizing)되는, 방법.
제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 슈도모나스 플루오레센스(Pseudomonas fluorescens)에서 재조합적으로 생산되는, 방법.
제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(nadir serum asparaginase activity: NSAA) 검정이 L-아스파라기나제를 사용하여 치료한 후 투여 후에 0.1 IU/mL 이상인, 방법.
제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 다중-제제 화학치료적 요법(multi-agent chemotherapeutic regimen)의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여(co-administering)되는, 방법.
사람 대상체의 암 치료를 대체하는 방법으로서, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 하고, 상기 방법은:
사람 대상체에게, 장기-작용하는(long-acting) 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 용량에 대한 대체물(substitute)로서, L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량을 투여하는 단계를 포함하고, 여기서
6회의 용량 중 4회는 약 25 mg/m²이고,
6회의 용량 중 2회는 약 50 mg/m²이고,
약 50 mg/m²인 2회의 용량의 투여 사이의 시간은 7일이고,
약 25 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량 사이의 투여 시간은 2일이고,
약 50 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 3일이고,
여기서 약 25 mg/m²에서의 용량은 혈관내 투여되고,
여기서 약 50 mg/m²에서의 용량은 근육내 투여되고,
여기서 L-아스파라기나제는 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 아닌, 방법.
제30항에 있어서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 다수 용량 중 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 개개 용량이 L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량의 예(an instance of the series of six doses)로 별도로 대체되는, 방법.
제31항에 있어서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 페그아스파라기나제인, 방법.
제30항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함하는, 방법.
제30항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 95 퍼센트의 서열 동일성을 갖는, 방법.
제30항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내는, 방법.
제30항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제 치료요법을 종결한, 방법.
제30항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 성인인, 방법.
제30항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 소아인, 방법.
제30항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 6% 미만의 응집을 입증하는, 방법.
제30항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 1% 미만의 응집을 입증하는, 방법.
제30항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 비-동결건조되는, 방법.
제30항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 슈도모나스 플루오레센스(Pseudomonas fluorescens)에서 재조합적으로 생산되는, 방법.
제30항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정이 L-아스파라기나제를 사용하여 치료한 후 투여 후에 0.1 IU/mL 이상인, 방법.
제30항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여되는, 방법.
제1항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 급성 림프구성 백혈병 (acute lymphoblastic leukemia; ALL) 또는 림프모구 림프종(lymphoblastic lymphoma; LBL)인, 방법.
제1항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 결장직장 암(colorectal cancer; CRC)인, 방법.
제46항에 있어서, CRC가 Wnt-음성 CRC(Wnt-negative CRC) 또는 Wnt-돌연변이체 CRC(Wnt-mutant CRC)인, 방법.
제1항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 급성 골수성 백혈병(acute myeloid leukemia; AML)인, 방법.
제48항에 있어서, AML이 R/R AML인, 방법.
제1항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 DLBCL인, 방법.
사람 대상체의 암 치료를 대체하는 방법으로서, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 하고, 상기 방법은:
사람 대상체에게, 각각의 개개 용량 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대한 대체물로서, 재조합 L-아스파라기나제의 일련의 7회 용량을 혈관내 투여하는 단계를 포함하고,
일련의 각각의 용량은 재조합 L-아스파라기나제의 약 25 mg/m²의 양이고,
일련의 각각의 용량의 투여 사이의 시간은 2일인, 방법.
제51항에 있어서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 다수의 용량 중 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 개개 용량이 재조합 L-아스파라기나제의 일련의 7회 용량의 예로 별도로 대체되는, 방법.
제52항에 있어서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 페그아스파라기나제인, 방법.
제51항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 재조합 L-아스파라기나제가 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함하는, 방법.
제51항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 재조합 L-아스파라기나제가 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 95 퍼센트의 서열 동일성을 갖는, 방법.
제51항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내는, 방법.
제51항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 성인 환자인, 방법.
제51항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 소아 환자인, 방법.
제51항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 재조합 L-아스파라기나제가 L-아스파라기나제의 6% 미만의 응집을 입증하는 조성물로 투여되는, 방법.
제51항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 재조합 L-아스파라기나제가 L-아스파라기나제의 3% 미만의 응집을 입증하는 조성물로 투여되는, 방법.
제51항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 재조합 L-아스파라기나제가 L-아스파라기나제의 1% 미만의 응집을 입증하는 조성물로 투여되는, 방법.
제51항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 재조합 L-아스파라기나제가 비-동결건조되는, 방법.
제51항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, 재조합 L-아스파라기나제가 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산되는, 방법.
제51항 내지 제63항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정이 재조합 L-아스파라기나제를 사용한 투여 후 0.1 IU/mL 이상인, 방법.
제51항 내지 제64항 중 어느 한 항에 있어서, 재조합 L-아스파라기나제가 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여되는, 방법.
암에 대해 사람 대상체의 치료를 대체하는 방법으로서, 여기서 사람 대상체는 이를 필요로 하고, 상기 방법은:
사람 대상체에게, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 용량에 대한 대체물로서, L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량을 혈관내 투여하는 단계를 포함하고, 여기서
6회의 용량 중 4회는 약 25 mg/m²이고,
6회의 용량 중 2회는 약 50 mg/m²이고,
약 50 mg/m²인 2회의 용량의 투여 사이의 시간은 7일이고,
약 25 mg/m²인 일련의 용량의 투여 사이의 시간은 2일이고,
약 50 mg/m²인 일련의 용량과 다음 용량의 투여 사이의 시간은 3일이고,
여기서 L-아스파라기나제는 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 아닌, 방법.
제66항에 있어서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 다수의 용량 중 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제의 각각의 개개 용량이 L-아스파라기나제의 일련의 6회 용량의 예로 별도로 대체되는, 방법.
제67항에 있어서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 페그아스파라기나제인, 방법.
제66항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함하는, 방법.
제66항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 95 퍼센트의 서열 동일성을 갖는, 방법.
제66항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내는, 방법.
제66항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제 치료요법을 종결한, 방법.
제66항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 성인인, 방법.
제66항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 소아인, 방법.
제66항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 6% 미만의 응집을 입증하는, 방법.
제66항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 1% 미만의 응집을 입증하는, 방법.
제66항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 비-동결건조되는, 방법.
제66항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산되는, 방법.
제66항 내지 제78항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정이 L-아스파라기나제를 사용하여 치료한 후 투여 후에 0.1 IU/mL 이상인, 방법.
제66항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여되는, 방법.
이를 필요로 하는 사람 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이:
사람 대상체에게 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제 이외의 L-아스파라기나제를, 시간-순서 용량의 세트로서 혈관내 투여하는 단계를 포함하고; 여기서
시간-순서 용량의 세트는 제1 용량에 이은 제2 용량을 포함하고,
제1 용량은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 하나이고,
제2 용량은 (i) 약 50 mg/m² 및 (ii) 약 25 mg/m²의 L-아스파라기나제 중 다른 것이고,
제1 용량은 약 50 mg/m²인 경우, 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 3일이고,
제1 용량이 약 25 mg/m²인 경우 사람 대상체에 대한 제1 용량과 제2 용량의 투여 사이의 기간은 2일이고,
제2 용량이 약 50 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 3일 동안 투여되지 않고,
제2 용량이 약 25 mg/m²인 경우 추가의 L-아스파라기나제는 대상체에게 2일 동안 투여되지 않는, 방법.
제81항에 있어서,
제1 용량이 약 50 mg/m²이고,
제2 용량이 약 25 mg/m²이고,
시간-순서 용량의 세트는 제2 용량 후 제3 용량을 추가로 포함하고,
제3 용량이 약 25 mg/m²이고,
여기서 사람 대상체에 대한 제2 용량과 제3 용량의 투여 사이의 기간은 2일인, 방법.
제82항에 있어서, 제1 용량이 금요일에 투여되고 제2 용량이 월요일에 투여되는, 방법.
제82항에 있어서, 제1 용량이 금요일에 투여되고, 제2 용량이 월요일에 투여되고, 제3 용량이 수요일에 투여되는, 방법.
제81항에 있어서,
제1 용량이 약 25 mg/m²이고,
제2 용량이 약 50 mg/m²이고,
시간-순서 용량의 세트는 제2 용량 후 제3 용량을 추가로 포함하고,
제3 용량이 약 25 mg/m²이고,
사람 대상체에 대한 제2 용량과 제3 용량의 투여 사이의 기간은 3일인, 방법.
제85항에 있어서, 제1 용량이 수요일에 투여되고 제2 용량이 금요일에 투여되는, 방법.
제85항에 있어서, 제1 용량이 수요일에 투여되고, 제2 용량이 금요일에 투여되고, 제3 용량이 월요일에 투여되는, 방법.
제81항에 있어서,
제1 용량이 약 25 mg/m²이고,
제2 용량이 약 50 mg/m²이고,
시간-순서 용량의 세트는 제1 용량 전에 제3 용량을 추가로 포함하고,
제3 용량이 약 25 mg/m²이고,
제3 용량은 사람 대상체에게 제1 용량 2일 전에 투여되는, 방법.
제88항에 있어서, 제1 용량이 수요일에 투여되고 제2 용량이 금요일에 투여되는, 방법.
제88항에 있어서, 제1 용량이 수요일에 투여되고, 제2 용량이 금요일에 투여되고, 제3 용량이 월요일에 투여되는, 방법.
제81항에 있어서, 방법이 제3 용량을 추가로 포함하고, 여기서 제1 용량은 월요일에 투여되고, 제2 용량은 수요일에 투여되고, 제3 용량은 금요일에 투여되는, 방법.
제91항에 있어서, 제1 용량이 25 mg/m²이고, 제2 용량이 25 mg/m²이고, 제3 용량이 50 mg/m²인, 방법.
제81항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서, 방법이 사람 대상체에게 L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예를 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 재조합 L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 각각의 개개 예가 대상체에게 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예 중 시간-순서 용량의 세트의 이전 예의 완료시 투여되는, 방법.
제93항에 있어서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예가 2 내지 100개인, 방법.
제93항에 있어서, L-아스파라기나제의 시간-순서 용량의 세트의 다수의 예가 2 내지 15개인, 방법.
제81항 내지 제95항 중 어느 한 항에 있어서, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 천연(native)인, 방법.
제81항 내지 제95항 중 어느 한 항에 있어서, 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 장기-작용하는, 방법.
제97항에 있어서, 장기-작용하는 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제가 페그아스파라기나제인, 방법.
제81항 내지 제98항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1을 포함하는, 방법.
제81항 내지 제98항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 테트라머이고, 여기서 테트라머의 각각의 모노머는 서열 번호: 1에 대해 적어도 95 퍼센트의 서열 동일성을 갖는, 방법.
제81항 내지 제100항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 이. 콜라이-유래된 아스파라기나제에 대해 과민성을 나타내는, 방법.
제81항 내지 제101항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 성인인, 방법.
제81항 내지 제101항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체가 소아인, 방법.
제81항 내지 제103항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 6% 미만의 응집을 입증하는, 방법.
제81항 내지 제103항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 1% 미만의 응집을 입증하는, 방법.
제81항 내지 제105항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 비-동결건조되는, 방법.
제81항 내지 제106항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 슈도모나스 플루오레센스에서 재조합적으로 생산되는, 방법.
제81항 내지 제107항 중 어느 한 항에 있어서, 사람 대상체로부터의 혈청 샘플로부터 측정된 바와 같은 최저의 혈청 아스파라기나제 활성(NSAA) 검정이 L-아스파라기나제를 사용하여 치료한 후 투여 후에 0.1 IU/mL 이상인, 방법.
제81항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, L-아스파라기나제가 다중-제제 화학치료적 요법의 부분으로서 하나 이상의 다른 화학치료제와 함께 공-투여되는, 방법.
제51항 내지 제109항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 급성 림프구성 백혈병 (ALL) 또는 림프모구 림프종(LBL)인, 방법.
제51항 내지 제109항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 결장직장 암(CRC)인, 방법.
제111항에 있어서, CRC가 Wnt-음성 CRC 또는 Wnt-돌연변이체 CRC인, 방법.
제51항 내지 제109항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 급성 골수성 백혈병(acute myeloid leukema; AML)인, 방법.
제113항에 있어서, AML이 R/R AML인, 방법.
제51항 내지 제109항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 DLBCL인, 방법.