KR20230015063A - 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트 - Google Patents
코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20230015063A KR20230015063A KR1020210096359A KR20210096359A KR20230015063A KR 20230015063 A KR20230015063 A KR 20230015063A KR 1020210096359 A KR1020210096359 A KR 1020210096359A KR 20210096359 A KR20210096359 A KR 20210096359A KR 20230015063 A KR20230015063 A KR 20230015063A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- sample
- pad
- coronavirus
- fragment
- diagnosing
- Prior art date
Links
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 title claims abstract description 53
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 title claims abstract description 24
- 238000009833 condensation Methods 0.000 claims abstract description 48
- 230000005494 condensation Effects 0.000 claims abstract description 48
- 108090000975 Angiotensin-converting enzyme 2 Proteins 0.000 claims abstract description 30
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 29
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 25
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 24
- 102000053723 Angiotensin-converting enzyme 2 Human genes 0.000 claims abstract description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 16
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims abstract description 10
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims abstract description 10
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 108010061994 Coronavirus Spike Glycoprotein Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 229940096437 Protein S Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 101710198474 Spike protein Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 241001678559 COVID-19 virus Species 0.000 claims description 21
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 18
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 11
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 11
- 241000315672 SARS coronavirus Species 0.000 claims description 10
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 9
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 9
- 241000711467 Human coronavirus 229E Species 0.000 claims description 6
- 241000482741 Human coronavirus NL63 Species 0.000 claims description 6
- 241001428935 Human coronavirus OC43 Species 0.000 claims description 6
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 4
- 208000025721 COVID-19 Diseases 0.000 claims description 3
- 208000001528 Coronaviridae Infections Diseases 0.000 claims description 3
- 241001109669 Human coronavirus HKU1 Species 0.000 claims description 3
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 claims description 3
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 claims description 3
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 claims description 3
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 claims description 3
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 claims description 3
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 claims description 3
- 241000127282 Middle East respiratory syndrome-related coronavirus Species 0.000 claims description 3
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 claims description 3
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 claims description 3
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 claims description 3
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 3
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 claims description 3
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 claims description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 3
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 claims description 3
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 claims description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 3
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 claims description 3
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 claims description 3
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 claims description 3
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 claims description 3
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 claims description 3
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 claims description 3
- 210000001138 tear Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 2
- 208000036071 Rhinorrhea Diseases 0.000 claims 1
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 claims 1
- 102100035765 Angiotensin-converting enzyme 2 Human genes 0.000 description 13
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 7
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 6
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 description 6
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 5
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 3
- 238000012124 rapid diagnostic test Methods 0.000 description 3
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 102100031673 Corneodesmosin Human genes 0.000 description 2
- 101710139375 Corneodesmosin Proteins 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- 201000003176 Severe Acute Respiratory Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
- G01N33/537—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody
- G01N33/538—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody by sorbent column, particles or resin strip, i.e. sorbent materials
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
- G01N33/54386—Analytical elements
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/06—Auxiliary integrated devices, integrated components
- B01L2300/069—Absorbents; Gels to retain a fluid
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
- B01L2300/0809—Geometry, shape and general structure rectangular shaped
- B01L2300/0825—Test strips
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L2300/00—Additional constructional details
- B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
- B01L2300/0887—Laminated structure
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
- G01N2333/08—RNA viruses
- G01N2333/165—Coronaviridae, e.g. avian infectious bronchitis virus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
본 출원은 시료를 수용하는 제1 샘플 패드; 상기 제1 샘플 패드에 유입된 시료에 포함된 중화항체와 특이적으로 결합하는 코로나바이러스 스파이크 단백질 또는 그의 단편과 골드 입자의 컨쥬게이트를 포함하는 제1 축합 패드; 상기 스파이크 단백질 또는 그의 단편과 특이적으로 결합하는 ACE2 단백질 또는 그의 단편을 포함하는 제2 축합 패드; 상기 제2 축합 패드의 일 단부와 접촉하여 구비되고, 상기 ACE2 단백질 또는 그의 단편과 특이적으로 결합하는 항체가 고정된 멤브레인; 및 상기 멤브레인의 일 단부와 접촉하여 구비되고, 반응이 종료된 시료를 흡수하는 흡수 패드; 를 포함하는 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트와 이를 이용한 중화항체 검출 방법에 관한 것이다.
Description
본 출원은 코로나바이러스 진단용 래피드 키트에 관한 것이다.
SARS-CoV-2(코로나-19)의 팬더믹(pandemic)으로 현재까지 전 세계적으로 누적 확진자는 3천여만명, 사망자는 90여만명에 육박하고 있을 정도로 SARS-CoV-2는 세계인의 건강에 심각한 위협이 될 뿐만 아니라 사회 안정 및 경제 발전에도 위협이 되고 있다. 이에 많은 연구자들이 이 SARS-CoV-2에 대비할 수 있는 기술, 예를 들어 SARSCoV-2의 진단, 예방, 치료를 위한 기술의 개발을 위해 많은 노력을 기울이고 있다.
신속진단검사(Rapid diagnostic test, RDT)는 래피드 키트 분석 또는 면역크로마토그래피 키트 분석이라고도 불린다. 래피드 키트 분석은, 제1 샘플 패드, 멤브레인, 흡수 패드를 포함하는 면역 크로마토그래피 스트립에 의한 분석방법으로서, 사용자가 생물학적 또는 화학적 샘플로부터 분석 물질을 특별한 기술이나 장비 없이 1-100 마이크로리터의 샘플로 2-30분 사이에서 간단하게 검출할 수 있다.
신속진단검사는 생물학적 물질 또는 화학적 물질이 서로 특이적으로 부착하는 성질을 이용하여 분석 물질을 단시간에 정성 및 정량적으로 검사할 수 있는 방법으로, 신속진단검사는 단순히 면역 크로마토그래피 스트립을 사용하거나, 이와 같은 면역 크로마토그래피 스트립을 플라스틱 하우징 내부에 장착한 형태의 면역 크로마토그래피 키트가 사용된다.
단순히 면역 크로마토그래피 스트립을 사용할 때는 시료를 담은 용기가 별도로 필요하지만 하우징에 내장된 면역 크로마토그래피 키트는 하우징에 준비된 투입구에 시료를 직접 투입함으로서 별도의 실험용기가 필요 없어 사용하기 간편하다.
본 발명자들은 SARS-CoV-2에 특이적인 중화항체를 탐지하는 효과가 우수한 키트를 개발하기 위해 지속적인 연구를 거듭한 결과, 본 발명을 완성하였다.
본 출원이 해결하고자 하는 과제는 코로나바이러스의 중화항체를 신속하고 간편하게 진단할 수 있고, 민감도와 반응성이 우수한 키트를 제공하는 것이다.
본 출원의 일 실시예는 시료를 수용하는 제1 샘플 패드; 상기 제1 샘플 패드에 유입된 시료에 포함된 중화항체와 특이적으로 결합하는 코로나바이러스 스파이크 단백질 또는 그의 단편과 골드 입자의 컨쥬게이트를 포함하는 제1 축합 패드; 상기 스파이크 단백질 또는 그의 단편과 특이적으로 결합하는 ACE2 단백질 또는 그의 단편을 포함하는 제2 축합 패드; 상기 제2 축합 패드의 일 단부와 접촉하여 구비되고, 상기 ACE2 단백질 또는 그의 단편과 특이적으로 결합하는 항체가 고정된 멤브레인; 및 상기 멤브레인의 일 단부와 접촉하여 구비되고, 반응이 종료된 시료를 흡수하는 흡수 패드; 를 포함하는 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트를 제공한다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 제1 축합 패드는, 상기 제1 샘플 패드 하부에 구비되어 다른 패드와 접촉하지 않을 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 제1 샘플 패드의 포어는 상기 제1 축합 패드의 포어보다 작을 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 키트는, 상기 제1 샘플 패드의 포어보다 작은 포어를 가지고, 시료를 여과하는 제2 샘플 패드; 를 더 포함할 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 제2 샘플 패드는, 일 단부가 상기 제1 샘플 패드의 일 단부와 접촉하고, 타 단부가 제2 축합 패드의 일 단부와 접촉하여 구비되며, 상기 제1 축합 패드와 이격하여 위치할 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 스파이크 단백질 또는 그의 단편은, 수용체 바인딩 도메인(Receptor binding domain: RBD)을 포함할 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 ACE2 단백질 또는 그의 단편은, Fc 절편, Fab 절편, scFv 절편, scFv-Fc 절편, Fv 절편, 디아바디(diabody), 키메라 항체, 인간화 항체 및 인간 항체로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나와 결합된 복합체(complex)일 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 ACE2 단백질 또는 그의 단편은, ACE2 단백질의 세포외 도메인을 포함할 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 멤브레인은, 나일론, 폴리에스터, 셀룰로오스, 폴리설폰, 폴리비닐리덴디플루오라이드, 셀룰로오스 아세테이트, 폴리우레탄, 유리섬유, 및 니트로셀룰로오스의 군에서 선택되는 적어도 하나 이상의 물질로 이루어질 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 패드들을 부착시키는 지지체; 및 상기 패드들을 수납하며, 시료를 투입하는 시료 주입부 및 멤브레인의 반응 결과를 관찰하기 위한 측정부를 구비한 하우징; 을 더 포함할 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 지지체는, 플라스틱 또는 유리일 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 코로나바이러스는, 사스-코로나바이러스-2(SARS-CoV-2), 인간 코로나바이러스 229E (HCoV-229E), 인간 코로나바이러스 OC43 (HCoV-OC43), 중증급성호흡기증후군 코로나바이러스 (SARS-CoV), 인간 코로나바이러스 NL63 (HCoV-NL63), 인간 코로나바이러스 HKU1 및 중동호흡기증후군 코로나바이러스 (MERS-CoV)로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나일 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 시료는, 혈액, 혈장, 혈청, 눈물, 침, 소변, 콧물, 체액 또는 가래일 수 있다.
본 출원의 일 실시예는 상기 래피드 키트를 이용하여 사스-코로나바이러스-2(SARS-CoV-2) 중화항체를 검출하는 방법을 제공한다.
본 출원의 일 실시예는 상기 래피드 키트를 이용하여 사스-코로나바이러스 감염증(COVID-19) 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법을 제공한다.
본 출원에 따른 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트는 신속하고 간편하게 시료 내의 코로나바이러스의 항체의 존재 여부를 검출할 수 있는 장점이 있다.
또한, 본 출원에 따른 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트는 민감도와 반응성이 매우 우수하다는 장점이 있다.
도 1은 본 출원의 일 실시예에 따른 래피드 키트의 적층 구조를 나타낸 것이다.
도 2는 비교예 1을 나타낸 것으로, 제1 축합 패드가 제1 샘플 패드의 일 단부와 접촉하여 위치하고, 제2 축합 패드와 직접 접촉하여 위치한 래피드 키트의 적층 구조를 나타낸 것이다.
도 3은 실시예 1의 래피드 키트에서 시료 주입부에 분석하고자 하는 혈액을 떨어뜨렸을 때 반응 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 비교예 1의 래피드 키트에서 시료 주입부에 분석하고자 하는 혈액을 떨어뜨렸을 때 반응 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 비교예 1을 나타낸 것으로, 제1 축합 패드가 제1 샘플 패드의 일 단부와 접촉하여 위치하고, 제2 축합 패드와 직접 접촉하여 위치한 래피드 키트의 적층 구조를 나타낸 것이다.
도 3은 실시예 1의 래피드 키트에서 시료 주입부에 분석하고자 하는 혈액을 떨어뜨렸을 때 반응 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 비교예 1의 래피드 키트에서 시료 주입부에 분석하고자 하는 혈액을 떨어뜨렸을 때 반응 결과를 나타낸 것이다.
이하, 본 출원을 보다 상세히 설명한다.
이하의 특정한 기능적 설명들은 단지 본 출원의 개념에 따른 실시예를 설명하기 위하여 예시된 것으로, 본 출원의 개념에 따른 실시예들은 다양한 형태로 실시될 수 있으며 본 명세서에 설명된 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 아니된다.
본 출원의 개념에 따른 실시예는 다양한 변경을 가할 수 있고 여러가지 형태를 가질 수 있으므로 특정 실시예들은 본 명세서에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 출원의 개념에 따른 실시예들을 특정한 개시 형태에 한정하려는 것이 아니며, 본 출원의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
본 명세서에서 사용하는 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로 본 출원을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한 복수의 표현을 포함한다.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 출원이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 의미를 갖는 것으로 해석되어야 하며, 본 명세서에서 명백하게 정의하지 않는 한 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
아래에서는 첨부한 도면을 참조하여 본 출원이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 출원의 실시예를 상세히 설명한다. 그러나 본 출원은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다. 그리고 도면에서 본 출원을 명확하게 설명하기 위해서 설명과 관 계없는 부분은 생략하였으며, 명세서 전체를 통하여 유사한 부분에 대해서는 유사한 도면 부호를 붙였다
명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미하며, 하나 또는 그 이상의 다른 특징이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부분품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
본 출원의 명세서 전체에서 사용되는 정도의 용어 "~(하는) 단계" 또는 "~의 단계"는 "~ 를 위한 단계"를 의미하지 않는다.
사스 코로나바이러스(SARS-CoV-2)는 스파이크 단백질의 수용체-결합 도메인 부분이 숙주 세포의 ACE2 수용체와 결합하는 것을 통해 생체 내부로 감염된다. 이에 본 발명자는 중화항체가 이 RBD에 결합하여 SARS-CoV-2의 스파이크 단백질과 숙주 세포의 ACE2 수용체와의 결합을 억제하는 경쟁 반응을 이용하여 본 발명을 완성하였다.
시료 내에 존재하는 중화항체는 코로나바이러스의 스파이크 단백질의 RBD(Receptor Binding Domain)와 결합함으로써, 코로나바이러스의 스파이크 단백질의 RBD(Receptor Binding Domain)와 표적 세포의 ACE2(Angiotensin-converting enzyme 2) 수용체의 결합을 억제할 수 있다.
본 명세서에서 중화항체는 최대한 넓은 의미로 사용되며, 구체적으로 무손상(intact) 단일클론 항체, 다클론 항체, 2종 이상의 무손상 항체로부터 형성된 다중특이성 항체(예를 들어, 이중특이성 항체), 및 목적하는 생물학적 활성을 나타내는 항체 단편을 포함한다. 항체는 특이적인 항원을 인식하고 결합할 수 있는 면역계에 의하여 생성되는 단백질이다. 그 구조적인 면에서, 항체는 통상적으로 4개의 아미노산 쇄(2개의 중쇄 및 2개의 경쇄)로 이루어진 Y-형상의 단백질을 가진다. 각각의 항체는 주로 가변 영역 및 불변 영역의 2개의 영역을 가진다. Y의 팔의 말단 부분에 위치한 가변 영역은 표적 항원에 결합하고 상호작용한다. 상기 가변 영역은 특정 항원 상의 특이적 결합 부위를 인식하고 결합하는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. Y의 꼬리 부분에 위치한 불변 영역은 면역계에 의하여 인식되고 상호작용한다. 표적 항원은 일반적으로 다수의 항체 상의 CDR에 의하여 인식되는, 에피토프라고 하는 다수의 결합 부위를 가지고 있다. 상이한 에피토프에 특이적으로 결합하는 각각의 항체는 상이한 구조를 가진다. 그러므로 한 항원은 하나 이상의 상응하는 항체를 가질 수 있다.
본 발명은 상기 중화항체의 기능적 변이체를 포함한다. 중화항체들은 변이체들이 SARS-CoV-2 또는 이의 S 단백질에 특이적으로 결합하기 위해 본 발명의 중화항체와 경쟁할 수 있고, SARS-CoV-2에 중화 능력을 보유한다면 본 발명의 중화항체의 기능적 변이체로 간주된다. 기능적 변이체는 1차 구조적 서열이 실질적으로 유사한 유도체를 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니며, 예를 들면, 생체외(in vitro) 또는 생체내(in vivo) 변형, 화학약품 및/또는 생화학 약품을 포함한다. 이와 같은 변형으로는 예를 들어 아세틸화, 아실화, 뉴클레오티드 또는 뉴클레오티드 유도체의 공유 결합, 지질 또는 지질 유도체의 공유 결합, 가교, 이황화 결합 형성, 글리코실화, 수산화, 메틸화, 산화, 페길화, 단백질 분해 및 인산화 등이 포함된다. 기능적 변이체는 선택적으로 중화항체의 아미노산 서열과 비교하여 하나 이상의 아미노산의 치환, 삽입, 결실 또는 그들의 조합을 함유하는 아미노산 서열을 포함하는 항체일 수 있다.
더욱이 기능적 변이체는 아미노 말단 또는 카르복시 말단 중 하나 또는 모두에서 아미노산 서열의 절단체(truncated form)를 포함할 수 있다. 본 발명의 중화항체의 기능적 변이체는 동일하거나 다르거나, 더 높거나 낮은 결합 친화력을 가질 수 있지만, 여전히 SARS-CoV-2 또는 이것의 S 단백질에 결합할 수 있다. 일 예로, 골격구조, 초가변(Hypervariable) 영역, 특히 경쇄 또는 중쇄의 상보성 결정 영역(Complementarity-determining region, CDR)을 포함하나 이에 한정되지 않는 가변 영역의 아미노산 서열이 변형될 수 있다. 일반적으로 경쇄 또는 중쇄 영역은 3개의 CDR 영역을 포함하는, 3개의 초가변 영역 및 더욱 보존된 영역, 즉 골격 영역(FR)을 포함한다. 초가변 영역은 CDR로부터의 아미노산 잔기와 초가변 루프로부터의 아미노산 잔기를 포함한다. 기능적 변이체는 중화항체 또는 그것의 일부를 PCR 방법, 올리고머 뉴클레오티드를 이용한 돌연변이 생성 및 부분 돌연변이 생성을 포함하는 공지의 일반 분자생물학적 방법에 의해 변화시키거나 유기합성 방법으로 얻을 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
도 1은 본 출원의 일 실시예에 따른 래피드 키트의 적층 구조를 나타낸 것이다.
도 1을 참조하면, 상기 래피드 키트는, 시료를 수용하는 제1 샘플 패드(10); 상기 제1 샘플 패드에 유입된 시료에 포함된 중화항체와 특이적으로 결합하는 코로나바이러스 스파이크 단백질의 수용체 바인딩 도메인(Receptor binding domain: RBD)과 골드 입자의 컨쥬게이트(RBD-GNP: receptor binding domain-gold nano particle)를 포함하고, 상기 제1 샘플 패드 하부에 구비되어 제1 샘플 패드 외의 다른 패드와 접촉하지 않는 제1 축합 패드(20); 상기 제1 샘플 패드의 일 단부와 접촉하여 구비되고, 상기 RBD와 특이적으로 결합하는 ACE2-항체 절편 컨쥬게이트를 포함하는 제2 축합 패드(40); 상기 제2 축합 패드의 일 단부와 접촉하여 구비되고, 상기 ACE2와 특이적으로 결합하는 항체가 고정된 멤브레인(50); 및 상기 멤브레인의 일 단부와 접촉하여 구비되고, 반응이 종료된 시료를 흡수하는 흡수 패드(60); 를 포함한다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 래피드 키트는, 시료를 수용하는 제1 샘플 패드(10); 상기 제1 샘플 패드에 유입된 시료에 포함된 중화항체와 특이적으로 결합하는 코로나바이러스 스파이크 단백질의 수용체 바인딩 도메인(Receptor binding domain: RBD)과 골드 입자의 컨쥬게이트(RBD-GNP)를 포함하고, 상기 제1 샘플 패드 하부에 구비되어 제1 샘플 패드 외의 다른 패드와 접촉하지 않는 제1 축합 패드(20); 상기 제1 샘플 패드의 일 단부와 접촉하여 구비되고, 시료를 여과하는 제2 샘플 패드(30); 상기 제2 샘플 패드의 일 단부와 접촉하여 구비되고, 상기 RBD와 특이적으로 결합하는 ACE2-항체 절편 컨쥬게이트를 포함하는 제2 축합 패드(40); 상기 제2 축합 패드의 일 단부와 접촉하여 구비되고, 상기 ACE2와 특이적으로 결합하는 항체가 고정된 멤브레인(50); 및 상기 멤브레인의 일 단부와 접촉하여 구비되고, 반응이 종료된 시료를 흡수하는 흡수 패드(60); 를 포함한다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 래피드 키트는 시료가 단방향으로 이동하는 구조로 제조될 수 있다. 구체적으로, 시료는 제1 샘플 패드(10), 제2 축합 패드(40), 멤브레인(50), 흡수 패드(60)의 순서로 이동하거나, 제1 샘플 패드(10), 제2 샘플 패드(30), 제2 축합 패드(40), 멤브레인(50), 흡수 패드(60)의 순서로 이동하면서 각각의 반응이 일어나게 된다. 시료가 제1 샘플 패드(10)에 머무를 때, 제1 샘플 패드(10)의 하부에 위치하는 제1 축합 패드(20)에서 시료 내의 중화항체가 RBD-GNP 접합체와 반응한 후, 제2 샘플 패드(30)로 이동할 수 있다.
시료 안에 중화항체가 있는 경우, 중화항체가 제1 축합 패드 상의 RBD-GNP 접합체와 선반응하여 다음 단계에 ACE2와 결합하지 않고, 그대로 흘러게 된다. RBD-GNP 접합체와 결합하지 않은 free ACE2가 이동하면서 멤브레인의 검사선에 고정된 항체와 결합하게 되므로 발색이 나타나지 않는다. 그러나, 시료 안에 중화항체가 없는 경우 RBD-GNP 접합체가 이동하면서 ACE2와 결합하고, 이들이 이동하면서 멤브레인의 검사선에 고정된 항체와 결합하게 된다. 따라서 골드 입자의 색이 노출되게 된다. 골드 입자의 발색 띠(band)의 발색 정도를 확인함으로서 항체의 존재 여부와 항체의 양을 육안으로 확인할 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 제1 축합 패드는(20), 상기 제1 샘플 패드(10) 하부에 구비되어 다른 패드와 접촉하지 않고, 상기 제2 샘플 패드(30)는 상기 제1 축합 패드(20)와 이격하여 위치하면서 상기 제1 샘플 패드(10)의 일 단부와 접촉하여 구비될 수 있다.
도 1과 같이 제1 축합 패드(20)가 제1 샘플 패드의 하부에 구비된 경우 시료와 제1 축합 패드의 컨쥬게이트가 충분히 반응할 수 있는 시간을 확보한다는 장점이 있다. 더욱이 제1 축합 패드(20)가 제1 샘플 패드(10)와만 접촉하고, 다른 패드들과는 접촉이 되지 않기 때문에 시료 내의 중화항체와 제1 축합 패드(20)의 RBD-GNP 접합체가 충분히 반응한 후에 시료가 제1 샘플 패드(10)와 접촉하여 구비된 다음 단계의 패드로 흘러가게 된다.
도 2는 비교예를 나타낸 것으로, 제1 축합 패드가 제1 샘플 패드의 일 단부와 접촉하여 위치하고, 다음 단계의 패드인 제2 샘플 패드나 제2 축합 패드와 직접 접촉하여 위치한 래피드 키트의 적층 구조를 나타낸 것이다.
도 2와 같이 제1 축합 패드(20)가 제1 샘플 패드(10)의 하부에 위치하지 않고, 제1 샘플 패드(10)의 일 단부와 접촉하여 위치하고, 다음 단계의 패드인 제2 샘플 패드(30)나 제2 축합 패드(40)와 직접 접촉하여 구비되면, 시료 내의 항체가 RBD-GNP 접합체와 충분히 반응하지 못한 채로 다음 단계의 패드로 이동하게 된다. 이 경우 중화항체와 결합하지 않은 RBD-GNP 접합체가 ACE2와 결합하게 되는 경우가 발생한다. 따라서, 항체가 존재하는데도 골드 입자의 색이 노출되게 되어 민감도가 떨어지는 문제가 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 제1 샘플 패드(10)의 포어는 상기 제1 축합 패드(20)의 포어보다 작을 수 있다. 상기 제2 샘플 패드(30)의 포어는 상기 제1 샘플 패드(10)의 포어보다 작을 수 있다. 상기 제1 축합 패드(20)의 포어가 작으면 골드 입자가 패드에 흡착될 수도 있으므로 제1 축합 패드(20)의 포어는 제1 샘플 패드(10)의 포어보다 큰 것이 바람직하다. 상기 제2 샘플 패드(30)의 포어는 제1 샘플 패드(10)에서 미처 여과되지 않은 시료를 한번 더 여과시키는 장점이 있기 때문에 제1 샘플 패드(10)의 포어보다 제2 샘플 패드(30)의 포어가 작은 것이 바람직하다. 예를 들어, 혈액의 경우 제1 샘플 패드(10)를 전혈 분리패드를 사용하고 있으므로 충분히 혈구를 분리시키고 있다. 그리고, 제1 샘플 패드(10)에서 미처 분리되지 않은 혈구를 제2 샘플 패드(30)에서 다시 한번 더 분리시켜서 다음 단계의 반응성과 민감도를 더 좋게 하는 장점이 있다. 또한, 제2 샘플 패드(30)는 제2 축합 패드에서 ACE2와의 반응 전까지 시료 내의 중화항체와 RBD-GNP 접합체와의 반응이 충분히 일어날 수 있도록 시간을 지연시키는 역할을 할 수 있는 장점이 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 ACE2 단백질 또는 그의 단편은, Fc 절편, Fab 절편, scFv 절편, scFv-Fc 절편, Fv 절편, 디아바디(diabody), 키메라 항체, 인간화 항체 및 인간 항체로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나와 결합된 복합체(complex)일 수 있다. 더욱 구체적으로, 상기 ACE2 단백질 또는 그의 단편은, ACE2 - Fc 복합체일 수 있다.
ACE2 단백질만 멤브레인 위에 점적하는 경우 민감도가 떨어져서 표지가 선명하지 않는 문제가 있다. ACE2와 항체 절편의 복합체를 제2 축합 패드에 포함시키는 경우, 이들이 이동하면서 멤브레인 상의 항체와 결합하는 경우에는 민감도와 특이도가 매우 높다는 장점이 있다.
본 출원의 일 실시예에서 ACE2 단백질 또는 그의 단편은, ACE2 단백질의 세포외 도메인을 포함할 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 멤브레인(50)은, 나일론, 폴리에스터, 셀룰로오스, 폴리설폰, 폴리비닐리덴디플루오라이드, 셀룰로오스 아세테이트, 폴리우레탄, 유리섬유, 및 니트로셀룰로오스의 군에서 선택되는 적어도 하나 이상의 물질로 이루어질 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 패드들을 부착시키는 지지체(70); 및 상기 패드들을 수납하며, 시료를 투입하는 시료 주입부(1) 및 멤브레인의 반응 결과를 관찰하기 위한 측정부(2)를 구비한 하우징(100, 200); 을 더 포함할 수 있다. 상기 하우징은 하우징 상판(100)과 하우징 하판(200)으로 이루어질 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 지지체(70)는, 플라스틱 또는 유리일 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 코로나바이러스는, 사스-코로나바이러스-2(SARS-CoV-2), 인간 코로나바이러스 229E(HCoV-229E), 인간 코로나바이러스 OC43 (HCoV-OC43), 중증급성호흡기증후군 코로나바이러스(SARS-CoV), 인간 코로나바이러스 NL63(HCoV-NL63), 인간 코로나바이러스 HKU1 및 중동호흡기증후군 코로나바이러스(MERS-CoV)로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나일 수 있다.
본 출원의 일 실시예에서 상기 시료는, 혈액, 혈장, 혈청, 눈물, 침, 소변, 콧물, 체액, 가래, 폐 세포, 폐 조직의 점액 또는 호흡기 조직일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
본 출원의 일 실시예는 상기 래피드 키트를 이용하여 사스-코로나바이러스-2(SARS-CoV-2) 중화항체를 검출하는 방법을 제공한다.
본 출원의 일 실시예는 상기 래피드 키트를 이용하여 사스-코로나바이러스 감염증(COVID-19) 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법을 제공한다.
이하 본 발명을 실시예 및 비교예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예 및 비교예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예
1: 사스-코로나바이러스-2(SARS-
CoV
-
2)의
중화항체
진단
도 1과 같이 패드를 적층하고 래피드 키트를 만들었다. 시료 주입부에 분석하고자 하는 혈액을 떨어뜨렸을 때 반응 결과를 도 3에 나타내었다. 도 3에서 중화항체가 존재하는 양성(+)일 때 발색되지 않고, 중화항체가 존재하지 않는 음성(-)일 때 선명하게 발색 띠가 나타나는 것을 확인할 수 있다.
비교예
1: 사스-코로나바이러스-2(SARS-
CoV
-
2)의
중화항체
진단
도 2와 같이 패드를 적층하여 래피드 키트를 만들었다. 시료 주입부에 분석하고자 하는 혈액을 떨어뜨렸을 때 반응 결과를 도 4에 나타내었다. 도 4에서 중화항체가 존재하는 양성(+)과 중화항체가 존재하지 않는 음성(-) 모두에서 선명하게 발색 띠가 나타나는 것을 확인할 수 있다. 이는 제1 축합 패드의 RBD와 중화항체가 충분히 반응하지 않고, 시료가 제2 축합 패드로 이동하여 중화항체가 존재하는데도 불구하고 RBD가 ACE2와 결합하였기 때문이다. 도 2의 래피드 키트는 민감성과 특이도가 현저하게 떨어짐을 확인할 수 있다.
전술한 본 출원의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 출원이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 출원의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.
이상으로 본 출원의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당 업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 출원의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 출원의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다. 또한, 청구범위에서 정의하고 있는 본 출원의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태도 본 출원의 권리범위에 속하는 것이다.
1: 시료 주입부 2: 측정부
10: 제1 샘플 패드 20: 제1 축합 패드
30: 제2 샘플 패드 40: 제2 축합 패드
50: 멤브레인 60: 흡수 패드
70: 지지체 100: 하우징 상판
200: 하우징 하판
10: 제1 샘플 패드 20: 제1 축합 패드
30: 제2 샘플 패드 40: 제2 축합 패드
50: 멤브레인 60: 흡수 패드
70: 지지체 100: 하우징 상판
200: 하우징 하판
Claims (12)
- 시료를 수용하는 제1 샘플 패드;
상기 제1 샘플 패드에 유입된 시료에 포함된 중화항체와 특이적으로 결합하는 코로나바이러스 스파이크 단백질 또는 그의 단편과 골드 입자의 컨쥬게이트를 포함하는 제1 축합 패드;
상기 스파이크 단백질 또는 그의 단편과 특이적으로 결합하는 ACE2 단백질 또는 그의 단편을 포함하는 제2 축합 패드;
상기 제2 축합 패드의 일 단부와 접촉하여 구비되고, 상기 ACE2 단백질 또는 그의 단편과 특이적으로 결합하는 항체가 고정된 멤브레인; 및
상기 멤브레인의 일 단부와 접촉하여 구비되고, 반응이 종료된 시료를 흡수하는 흡수 패드; 를 포함하고,
상기 제1 축합 패드는,
상기 제1 샘플 패드 하부에 구비되어 상기 제1 샘플 패드 외의 다른 패드와 접촉하지 않는 것을 특징으로 하는 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트.
- 청구항 1에 있어서,
상기 제1 샘플 패드의 포어는 상기 제1 축합 패드의 포어보다 작은 것을 특징으로 하는 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트.
- 청구항 2에 있어서,
상기 제1 샘플 패드의 포어보다 작은 포어를 가지고, 시료를 여과하는 제2 샘플 패드; 를 더 포함하고,
상기 제2 샘플 패드는,
일 단부가 상기 제1 샘플 패드의 일 단부와 접촉하고, 타 단부가 제2 축합 패드의 일 단부와 접촉하여 구비되며, 상기 제1 축합 패드와 이격하여 위치하는 것을 특징으로 하는 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트.
- 청구항 1에 있어서,
스파이크 단백질 또는 그의 단편은,
수용체 바인딩 도메인(Receptor binding domain: RBD)을 포함하는 것을 특징으로 하는 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트.
- 청구항 1에 있어서,
상기 ACE2 단백질 또는 그의 단편은,
Fc 절편, Fab 절편, scFv 절편, scFv-Fc 절편, Fv 절편, 디아바디(diabody), 키메라 항체, 인간화 항체 및 인간 항체로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나와 결합된 복합체(complex)인 것을 특징으로 하는 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트.
- 청구항 1에 있어서,
ACE2 단백질 또는 그의 단편은,
ACE2 단백질의 세포외 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트.
- 청구항 1에 있어서,
상기 멤브레인은,
나일론, 폴리에스터, 셀룰로오스, 폴리설폰, 폴리비닐리덴디플루오라이드, 셀룰로오스 아세테이트, 폴리우레탄, 유리섬유 및 니트로셀룰로오스의 군에서 선택되는 적어도 하나 이상의 물질로 이루어지는 것을 특징으로 하는 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트.
- 청구항 1에 있어서,
상기 패드들을 부착시키는 지지체; 및
상기 패드들을 수납하며, 시료를 투입하는 시료 주입부 및 멤브레인의 반응 결과를 관찰하기 위한 측정부를 구비한 하우징; 을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트.
- 청구항 1에 있어서,
상기 코로나 바이러스는,
사스-코로나바이러스-2(SARS-CoV-2), 인간 코로나바이러스 229E (HCoV-229E), 인간 코로나바이러스 OC43 (HCoV-OC43), 중증급성호흡기증후군 코로나바이러스 (SARS-CoV), 인간 코로나바이러스 NL63 (HCoV-NL63), 인간 코로나바이러스 HKU1 및 중동호흡기증후군 코로나바이러스 (MERS-CoV)로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 코로나 바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트.
- 청구항 1에 있어서,
상기 시료는,
혈액, 혈장, 혈청, 눈물, 침, 소변, 콧물, 체액 또는 가래인 것을 특징으로 하는 코로나 바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트.
- 청구항 1 내지 청구항 10 중 어느 한 항의 상기 래피드 키트를 이용하여 사스-코로나바이러스-2(SARS-CoV-2) 중화항체를 검출하는 방법.
- 청구항 1 내지 청구항 10 중 어느 한 항의 상기 래피드 키트를 이용하여 사스-코로나바이러스 감염증(COVID-19) 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210096359A KR20230015063A (ko) | 2021-07-22 | 2021-07-22 | 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트 |
| PCT/KR2022/010554 WO2023003334A1 (ko) | 2021-07-22 | 2022-07-19 | 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210096359A KR20230015063A (ko) | 2021-07-22 | 2021-07-22 | 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20230015063A true KR20230015063A (ko) | 2023-01-31 |
Family
ID=84979505
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020210096359A KR20230015063A (ko) | 2021-07-22 | 2021-07-22 | 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20230015063A (ko) |
| WO (1) | WO2023003334A1 (ko) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101782862B1 (ko) | 2016-04-26 | 2017-09-29 | 원광대학교산학협력단 | 메르스바이러스 진단용 단세포군 항체 및 면역크로마토그래피 진단키트 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20160120675A (ko) * | 2015-04-08 | 2016-10-18 | 주식회사 디에이치랩 | 래피드 정량 진단 키트 |
| KR102261179B1 (ko) * | 2019-06-12 | 2021-06-07 | 주식회사 지엠디바이오텍 | 측면 흐름 분석-기반의 면역 검출용 접합체 및 이를 사용한 면역 검출 방법 |
| CN111983226A (zh) * | 2020-03-25 | 2020-11-24 | 新加坡国立大学 | SARSr-CoV抗体的检测 |
| KR102229225B1 (ko) * | 2020-09-04 | 2021-03-19 | (주)셀트리온 | 사스-코로나바이러스-2 표면의 스파이크 단백질에 결합하는 사스-코로나바이러스 감염증의 진단용 결합 분자 |
-
2021
- 2021-07-22 KR KR1020210096359A patent/KR20230015063A/ko unknown
-
2022
- 2022-07-19 WO PCT/KR2022/010554 patent/WO2023003334A1/ko active Application Filing
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101782862B1 (ko) | 2016-04-26 | 2017-09-29 | 원광대학교산학협력단 | 메르스바이러스 진단용 단세포군 항체 및 면역크로마토그래피 진단키트 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2023003334A1 (ko) | 2023-01-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102229225B1 (ko) | 사스-코로나바이러스-2 표면의 스파이크 단백질에 결합하는 사스-코로나바이러스 감염증의 진단용 결합 분자 | |
| KR102205028B1 (ko) | 사스-코로나바이러스-2에 중화 활성을 갖는 결합 분자 | |
| US20230204568A1 (en) | Measuring trail by lateral flow immunoassay | |
| JP5852657B2 (ja) | イムノクロマトグラフィー装置、方法およびキット | |
| US20070269835A1 (en) | Reagent for determining laminin 5 antigen in biological sample and assay method | |
| US11255855B1 (en) | COVID-19 spike-ACE2 binding assay for drug and antibody screening | |
| US11009506B2 (en) | Kit for rapid diagnosis of asthma or allergy disease | |
| CN117280214A (zh) | SARS-CoV-2的免疫测定方法及免疫测定试剂盒、以及单克隆抗体或其抗体片段 | |
| WO2021237243A1 (en) | Immunochromatographic device for detection of neutralising antibodies to coronaviruses | |
| KR20230015063A (ko) | 코로나바이러스 중화항체 진단용 래피드 키트 | |
| JP7454945B2 (ja) | 血液中のユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼｌ１レベルを測定するための、改善された方法 | |
| KR20230084469A (ko) | Sars-cov-2를 검출하기 위한 검정법 | |
| US11137395B1 (en) | SARS-CoV-2 (COVID-19) spike-AXL binding assay | |
| CN117683121B (zh) | 抗水痘-带状疱疹病毒抗体及其应用 | |
| CN220120823U (zh) | 一种新型冠状病毒IgG/IgM抗体联合检测试剂盒 | |
| CN116593689A (zh) | 区分新冠抗体来源的免疫层析双试纸条 | |
| WO2021194980A2 (en) | Rapid diagnostic immunoassay for presence of viral antigen | |
| KR20210118343A (ko) | 사스-코로나바이러스-2에 중화 활성을 갖는 결합 분자 | |
| KR20220013297A (ko) | 코로나바이러스 슈퍼패밀리에 중화 활성을 갖는 결합 분자 | |
| KR20220013302A (ko) | 코로나바이러스 슈퍼패밀리에 중화 활성을 갖는 결합 분자 | |
| KR20210118344A (ko) | 사스-코로나바이러스-2 결합 분자 | |
| KR20220013303A (ko) | 코로나바이러스 슈퍼패밀리에 중화 활성을 갖는 결합 분자 | |
| KR20220013289A (ko) | 코로나바이러스 슈퍼패밀리에 중화 활성을 갖는 결합 분자 | |
| KR20220013287A (ko) | 코로나바이러스 슈퍼패밀리에 중화 활성을 갖는 결합 분자 | |
| KR20220013311A (ko) | 코로나바이러스 슈퍼패밀리에 중화 활성을 갖는 결합 분자 |