KR20230013101A - 피리딘 유도체 및 이의 용도 - Google Patents

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KR20230013101A
KR20230013101A KR1020227044558A KR20227044558A KR20230013101A KR 20230013101 A KR20230013101 A KR 20230013101A KR 1020227044558 A KR1020227044558 A KR 1020227044558A KR 20227044558 A KR20227044558 A KR 20227044558A KR 20230013101 A KR20230013101 A KR 20230013101A
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윈푸 루오
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슈후이 첸
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메드샤인 디스커버리 아이엔씨.
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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Abstract

본 발명은 일련의 피리딘 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 관련 질환을 치료하기 위한 약물의 제조에 있어서의 이의 용도를 개시하고, 구체적으로, 식(I)으로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 개시한다.

Description

피리딘 유도체 및 이의 용도
본 출원은 출원일자가 2020년 5월 22일 인 중국 특허출원 CN202010444113.6의 우선권을 주장한다. 본 출원은 상기 중국특허출원의 전문을 인용한다.
본 발명은 일련의 피리딘 구조를 갖는 화합물, 이의 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 관련 질환을 치료하기 위한 약물의 제조에 있어서의 이의 용도에 관한 것이며, 구체적으로, 식(I)으로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염에 관한 것이다.
화학 유도물질 사이토카인(즉, 케모카인)은 비교적 작은 단백질(8-10kD)이며, 세포의 이동을 자극한다. 고도로 보존된 제1 시스테인과 제2 시스테인 사이의 아미노산 잔기 수에 따라 케모카인 패밀리는 4개의 서브패밀리로 나뉜다. 단핵구 주화성 단백질-1(MCP-1)은 CC 케모카인 서브패밀리(여기서 CC는 인접한 제1 및 제2 시스테인을 갖는 서브패밀리를 나타낸다)의 구성원이며 세포 표면 케모카인 수용체2(CCR2)에 결합한다. MCP-1은 강력한 케모카인이며, 이는 CCR2에 결합한 후 단핵구 및 림프구가 염증 부위로 이동하는 것을 매개한다(즉, 주화성이다). MCP-1은 또한 심근세포, 혈관내피세포, 섬유아세포, 연골세포, 평활근세포, 사구체 메산지움 세포, 폐포세포, T 림프구, 식도암 등에 의해 발현된다. 단핵구는 염증 조직에 들어간 후, CCR5를 발현하는 대식세포로 분화하여 종양 괴사 인자-α(TNF-α), 인터루킨-1(IL-1), IL-8 CXC 케모카인 서브패밀리(여기서 CXC는 제1 및 제2 시스테인 사이의 하나의 아미노산 잔기를 나타낸다), IL-12, 아라키돈산 대사산물(예를 들어, PGE 2 및 LTB 4), 산소 유래 자유 라디칼기, 매트릭스 메탈로프로티아제 및 보체 성분을 포함하는 여러 전염증 조절제의 2차 공급원을 제공한다.
CCR2 및 CCR5의 상보적 세포 분포 및 차등적 세포 기능은 두개의 수용체의 이중 표적화가 개별 수용체를 표적으로 하는 것보다 더 큰 효능을 가질 수 있다는 이론적 근거를 제공한다. 단핵구/대식세포 생물학에서, CCR2는 골수에서 혈액으로, 혈액에서 조직으로 단핵구의 이동을 매개하는 데 중요한 역할을 하고, 여기서 CCR5는 주로 대식세포가 염증이 있는 조직에서의 활성화, 생존 및 가능한 보유를 조절한다. 또한, CCR5 차단은 단핵구/대식세포에 대한 효과 외에 T세포 반응을 억제함으로써 이중 길항제의 치료 가능성을 개선 할 수 있다. CCR2/5 이중 길항제는 비교적 좋은 약물 가능성을 가지고 있다.
WO2003014105A1은 화합물 세니크리비록(Cenicriviroc)(CVC), 참조물 A를 개시하였으며, 이의 구조는 하기와 같다.
Figure pct00001
Figure pct00002
본 발명은 식(I)으로 표시되는 화합물, 이의 이성질체 또는 약학적으로 허용 가능한 염을 제공하고,
Figure pct00003
상기 식에서,
R1은 각각 독립적으로 할로겐, OH, NH2, CN, C1-3알킬기 및 C1-3알콕시기에서 선택되고, 상기 C1-3알킬기 및 C1-3알콕시기는 1, 2 또는 3개의 F에 의하여 임의로 치환되고,
m은 0, 1 및 2에서 선택되고,
고리A는 5 내지 6원 헤테로사이클로알킬기에서 선택되고,
상기 헤테로사이클로알킬기는 1, 2 또는 3개의 독립적으로 -O-, -NH-, -S- 및 -N-에서 선택되는 헤테로원자 또는 헤테로원자단을 포함한다.
본 발명의 일부 실시형태에 있어서, 상기 R1은 각각 독립적으로 할로겐, OH, NH2, CN, C1-3알킬기 및 C1-3알콕시기에서 선택되고, 기타 변량은 본 발명에 정의된 바와 같다.
본 발명의 일부 실시형태에 있어서, 상기 R1은 각각 독립적으로 메틸기, 에틸기 및 n-프로필기에서 선택되고, 기타 변량은 본 발명에 정의된 바와 같다.
본 발명의 일부 실시형태에 있어서, 상기 고리A는,
Figure pct00004
,
Figure pct00005
및
Figure pct00006
에서 선택되고, 기타 변량은 본 발명에 정의된 바와 같다.
본 발명의 일부 실시형태에 있어서, 상기 구조단위
Figure pct00007
는
Figure pct00008
,
Figure pct00009
,
Figure pct00010
,
Figure pct00011
,
Figure pct00012
및
Figure pct00013
에서 선택되고, 기타 변량은 본 발명에 정의된 바와 같다.
본 발명의 또 다른 일부 실시형태는 상기 변량을 임의로 조합하여 얻는다.
본 발명은 또한 하기 식으로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
Figure pct00014
Figure pct00015
Figure pct00016
Figure pct00017
Figure pct00018
Figure pct00019
Figure pct00020
Figure pct00021
Figure pct00022
Figure pct00023
Figure pct00024
Figure pct00025
.
본 발명의 일부 실시형태에 있어서, 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 하기에서 선택된다.
Figure pct00026
Figure pct00027
Figure pct00028
Figure pct00029
Figure pct00030
Figure pct00031
Figure pct00032
Figure pct00033
Figure pct00034
Figure pct00035
Figure pct00036
Figure pct00037
Figure pct00038
Figure pct00039
Figure pct00040
Figure pct00041
Figure pct00042
Figure pct00043
Figure pct00044
Figure pct00045
Figure pct00046
Figure pct00047
.
본 발명은 또한 CCR2/CCR5 이중 수용체 길항제 관련 질환을 치료하기 위한 약물의 제조에 있어서의 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도를 제공한다.
본 발명의 화합물은 CCR2 및 CCR5 수용체에 대하여 현저한 길항작용을 가진다. 본 발명의 화합물은 인간 간 마이크로솜 시토크롬 P450 동종효소(CYP1A2, CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6 및 CYP3A4)의 활성을 억제할 리스크가 없는 반면, 참조 화합물은 CYP3A4에 대하여 비교적 강한 억제 효과를 가지고 있다.
달리 명시되지 않는 한, 본문에서 사용된 하기 용어와 문구는 다음과 같은 의미를 가진다. 하나의 특정된 용어 또는 문구는 특별히 정의되지 않는 상황에서 확정되지 않거나 명확하지 않은 것으로 간주되어서는 아니되며, 통상적인 의미로 이해되어야 한다. 본문에서 상품 명칭이 나타나면 이는 대응되는 상품 또는 이의 활성 성분을 나타낸다.
여기에서 사용되는 용어 “약학적으로 허용 가능한”은 신뢰 가능한 의학 판단 범위 내에서 그러한 화합물, 재료, 조성물 및/또는 제형은 인간과 동물의 조직과 접촉에 사용하기에 적합하되, 과도한 독성, 자극성, 과민성 반응 또는 기타 문제 또는 합병증이 없으며 합리적인 이익/위험 비율을 의미한다.
용어 “약학적으로 허용 가능한 염”은 본 발명 화합물의 염으로, 본 발명에서 발견된 특정 치환기를 지닌 화합물과 상대적으로 무독의 산 또는 염기로 제조된다. 본 발명의 화합물에 상대적으로 산성인 관능기가 함유될 경우, 순수한 용액 또는 적합한 불활성 용매에서 충족한 양의 염기와 이러한 화합물의 중성 형식으로 접촉시키는 방식으로 염기 부가염을 얻을 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 염기 부가염은 나트륨, 칼륨, 칼슘, 암모늄, 유기 아민 또는 마그네슘염 또는 유사한 염을 포함한다. 본 발명의 화합물에 상대적인 염기성 관능기가 함유될 경우, 순수한 용액 또는 적합한 불활성 용매에서 충족한 양의 산과 이러한 화합물의 접촉시키는 방식으로 산 부가염을 얻을 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 산 부가염의 구현예로 무기산염을 포함하고, 상기 무기산은 예를 들어 염산, 브롬화수소산, 질산, 탄산, 중탄산기, 인산, 인산일수소기, 인산이수소기, 황산, 황산수소기, 요오드화수소산, 아인산등을 포함하고; 및 유기산염을 포함하며, 상기 유기산은 예를 들어 아세트산, 프로피온산, 이소부티르산, 말레산, 말론산, 벤조산, 숙신산, 수베린산, 푸마르산, 락트산, 만델린산, 프탈산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산, 구연산, 타르타르산 및 메탄술폰산과 같은 유사한 산을 포함하고; 또한 아미노산(예를 들어 아르기닌 등)의 염 및 글루쿠론산과 같은 유기산의 염도 포함한다. 본 발명의 일부 특정 화합물은 염기성 및 산성 관능기를 포함하여 임의의 염기 또는 산 부가염으로 전환될 수 있다.
본 발명의 약학적으로 허용 가능한 염은 산기 또는 염기를 함유한 모체 화합물로 통상적인 화학적 방법으로 합성할 수 있다. 일반적인 경우, 이러한 염의 제조 방법은: 물 또는 유기 용매 또는 양자의 혼합물에서 유리산 또는 염기 형식의 이러한 화합물을 화학적으로 칭량된 적절한 염기 또는 산과 반응시켜 제조한다.
본 발명의 화합물은 특정된 기하적 또는 입체 이성질체 형태로 존재할 수 있다. 본 발명에서 예상한 이러한 화합물은 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체가 풍부하게 함유된 혼합물과 같은 시스 및 트랜스 이성질체, (-)- 및 (+)-거울상 이성질체, (R)- 및 (S)-거울상 이성질체, 부분입체 이성질체, (D)-이성질체, (L)-이성질체, 및 라세미체 혼합물과 다른 혼합물을 포함하고, 모든 이러한 혼합물은 전부 본 발명의 범위에 속한다. 알킬기 등 치환기에는 다른 비대칭 탄소 원자가 존재할 수 있다. 이들 모든 이성질체 및 이들의 혼합물은 모두 본 발명의 범위 내에 속한다.
달리 명시되지 않는 한, 용어 “거울상 이성질체” 또는 “광학 이성질체”는 서로 거울상 관계의 입체 이성질체를 나타낸다.
달리 명시되지 않는 한, 용어 “시스-트랜스 이성질체” 또는 “기하학적 이성질체”계는 이중 결합 또는 고리 형성 탄소 원자의 단일 결합으로 인해 자유롭게 회전 할 수 없어 발생한 것이다.
달리 명시되지 않는 한, 용어 “부분입체 이성질체”는 분자가 두 개 또는 여러 개의 카이랄 중심을 가지고 있으며 분자 사이는 비대칭거울상 관계의 입체 이성질체를 나타낸다.
달리 명시되지 않는 한, “(+)”는 우선, “(-)”는 좌선, “(±)”는 라세미체를 나타낸다.
달리 명시되지 않는 한, 쐐기형 실선결합（
Figure pct00048
）과 쐐기형 점선 결합（
Figure pct00049
）으로 하나의 입체 중심의 절대적 배치를 나타내고, 직선형 실선결합（
Figure pct00050
）과 직선형 점선결합（
Figure pct00051
）으로 입체 중심의 상대적 배치를 나타내고, 물결모양선（
Figure pct00052
）으로 쐐기형 실선결합（
Figure pct00053
） 또는 쐐기형 점선결합（
Figure pct00054
）을 나타내고, 또는 물결모양선（
Figure pct00055
）으로 직선형 실선결합（
Figure pct00056
）과 직선형 점선결합（
Figure pct00057
）을 나타낸다.
달리 명시되지 않는 한, 화합물에 탄소-탄소 이중 결합, 탄소-질소 이중 결합 및 질소-질소 이중 결합과 같이 이중 결합 구조가 존재하고, 이중 결합의 각 원자에는 모두 두 개의 상이한 치환기가 연결될 경우(질소 원자를 포함하는 이중 결합에서, 질소 원자의 한쌍의 고립 전자쌍은 이에 연결된 하나의 치환기로 간주한다), 만약 상기 화합물의 이중 결합의 원자와 그 치환기 사이에 물결선(
Figure pct00058
)으로 연결되면, 상기 화합물의 (Z)형 이성질체, (E)형 이성질체 또는 두 가지 이성질체의 혼합물을 나타낸다. 예를 들어, 하기 식(A)는 화합물이 식(A-1) 또는 식(A-2)의 단일 이성질체 형태로 존재하거나 또는 식(A-1) 및 식(A-2)의 두 가지 이성질체의 혼합물 형태로 존재하는 것을 나타내고; 하기 식(B)는 상기 화합물이 식(B-1) 또는 식(B-2)의 단일 이성질체 형태로 존재하거나 식(B-1) 및 식(B-2)의 두 가지 이성질체의 혼합물 형태로 존재하는 것을 나타낸다. 하기 식(C)는 상기 화합물이 식(C-1) 또는 식(C-2)의 단일 이성질체 형태로 존재하거나 식(C-1) 및 식(C-2)의 두 가지 이성질체의 혼합물 형태로 존재하는 것을 나타낸다.
Figure pct00059
(A)
Figure pct00060
(A-1)
Figure pct00061
(A-2)
Figure pct00062
(B)
Figure pct00063
(B-1)
Figure pct00064
(B-2)
Figure pct00065
(C)
Figure pct00066
(C-1)
Figure pct00067
(C-2)
달리 명시되지 않는 한, 용어 “호변 이성질체” 또는 “호변 이성질체 형태”는 실온에서 서로 다른 기능성 이성질체는 동적 평형상태에 있으며 서로 빠르게 전화될 수 있음을 나타낸다. 호변 이성질체가 가능할 경우(용액 중에서와 같이), 호변 이성질체의 화학적 평형에 도달할 수 있다. 예를 들면, 양성자 호변 이성체(proton tautomer)(양성자 전이 호변 이성질체(prototropic tautomer)로도 알려짐)는 케토-에놀이성질화(Keto-enol isomerization) 및 이민-엔아민이성질화(Imine-enamine isomerization)과 같은 양성자 전달에 의한 상호 전환을 포함한다. 원자가 호변 이성질체(valence tautomer)는 결합전자의 재 조합으로 상호 전환을 수행한다. 여기서 케토-에놀 호변 이성질체의 구체적인 실시예는 펜탄-2,4-디온(pentane-2,4-dione)과 4-히드록시펜트-3-엔-2-온(4-hydroxypent-3-en-2-one) 두 가지 호변 이성질체 간의 호변이다.
달리 명시되지 않는 한, 용어 “1종의 이성질체가 풍부하게 함유된”, “이성질체가 풍부한”, “1종의 거울상 이성질체가 풍부하게 함유된” 또는 “거울상 이성질체가 풍부한”은 여기서 1종의 이성질체 또는 거울상 이성질체의 함량이 100%보다 적으며, 상기 이성질체 또는 거울상 이성질체의 함량이 60%보다 크거나 같으며, 또는 70%보다 크거나 같고, 또는 80%보다 크거나 같으며, 90%보다 크거나 같고, 95%보다 크거나 같으며 또는 96%보다 크거나 같고, 또는 97%보다 크거나 같으며, 98%보다 크거나 같고, 99%보다 크거나 같으며 또는 99.5%보다 크거나 같고, 또는 99.6%보다 크거나 같으며, 99.7%보다 크거나 같고, 99.8%보다 크거나 같으며 또는 99.9%보다 크거나 같음을 나타낸다.
달리 명시되지 않는 한, 용어 “이성질체 과량” 또는 “거울상 이성질체 과량”은 두가지 이성질체 또는 두가지 거울상 이성질체의 상대적 백분율의 차이 값을 나타낸다. 예를 들어, 여기서 한가지 이성질체 또는 거울상 이성질체의 함량이 90%이고, 다른 한가지 이성질체 또는 거울상 이성질체의 함량이 10%이면 이성질체 또는 거울상 이성질체 과량(ee 값)은 80%이다.
카이랄 합성 또는 카이랄 시약 또는 다른 통상적인 기술을 통해 광학 활성의 (R)- 및 (S)-이성질체와 D 및 L 이성질체를 제조할 수 있다. 본 발명 화합물의 한가지 거울상 이성질체를 얻으려면, 비대칭 합성 또는 카이랄 보조제를 구비한 유도 작용으로 제조할 수 있으며, 여기서 얻어진 부분입체 이성질체 혼합물을 분리하고, 보조 라디칼을 절단하여 순수한 필요되는 거울상 이성질체를 제공한다. 또는, 분자에 염기성 관능기(예를 들어 아미노기) 또는 산성 관능기(예를 들어 카르복실기)가 함유될 경우, 적합한 광학 활성의 산 또는 염기와 부분입체 이성질체의 염을 형성한 후, 본 분야에 공지된 통상적인 방법으로 부분입체 이성질체를 분해한 후, 회수하여 순수한 거울상 이성질체를 얻는다. 이 외에, 일반적으로 거울상 이성질체와 부분입체 이성질체의 분리는 크로마토그래피법으로 구현되고, 상기 크로마토그래피법은 카이랄 고정상을 사용하며, 선택적으로 화학적 유도법과 결합된다(예를 들어 아민으로 카바메이트를 생성한다).
본 발명의 화합물은 상기 화합물을 구성하는 하나 또는 다수의 원자 상에 비천연적 비율의 원자 동위원소를 함유할 수 있다. 예를 들어, 트리튬(3H), 요오드-125(125I) 또는 C-14(14C)와 같은 방사성 동위원소로 화합물을 표지할 수 있다. 다른 예로, 중수소로 수소를 대체하여 중수소화 약물을 형성할 수 있으며, 중수소와 탄소로 구성된 결합은 일반적인 수소와 탄소로 구성된 결합보다 강하고, 중수소화 되지 않은 약물과 비교하여 중수소화 약물은 부작용을 줄이고 약물 안정성을 증가시키며 약물의 효능을 높이고 약물의 생물학적 반감기를 연장하는 등 우세를 가지고 있다. 본 발명의 화합물의 모든 동위원소로 조성된 변환은 방사성이든 아니든 모두 본 발명의 범위 내에 속한다.
용어 “선택적” 또는 “임의로”는 후술되는 상기 서술에는 상기 사건 또는 상황이 발생된 경우 및 상기 사건 또는 상황이 발생되지 않는 경우를 포함하는 사건 또는 상황이 나타날 수 있지만 무조건 나타나는 것은 아닌 것을 지칭한다.
용어 “치환된”은 특정 원자의 임의의 하나 또는 복수개의 수소 원자가 치환기에 의해 치환되는 것을 지칭하고, 특정 원자의 원자가가 정상이고 치환 후의 화합물이 안정적인 중수소 및 수소의 변이체를 포함할 수 있다. 치환기가 케톤기(즉, =O)일 경우, 두 개의 수소 원자가 치환되는 것을 의미한다. 케톤기 치환은 방향기에서 발생하지 않는다. 용어 “선택적으로 치환된”은 치환될 수 있거나, 치환되지 않을 수 있고, 달리 명시되지 않는 한, 치환기의 종류 및 개수는 화학적으로 구현될 수 있는 기초 상에서 임의적일 수 있다.
화합물의 조성 또는 구조에서 임의의 변량(예를 들어 R)이 한번 이상 나타날 경우, 이의 각각의 경우에서의 정의는 모두 독립적이다. 따라서, 예를 들어, 만약 하나의 라디칼이 0 내지 2 개의 R에 의해 치환되면, 상기 라디칼은 선택적으로 두 개 이하의 R에 의해 치환 될 수 있고, 각각의 경우에서의 R은 모두 독립적인 선택항이다. 이 외에, 치환기 및/또는 이의 변이체의 조합은 이러한 조합이 안정적인 화합물을 생성하는 경우에서만 허용된다.
-(CRR)0-와 같이 하나의 연결기의 개수가 0일 경우, 상기 연결기는 단일 결합을 나타낸다.
그중의 하나의 변량이 단일결합에서 선택되는 경우, 상기 두개의 기가 직접 연결됨을 나타내며, 예를 들어 A-L-Z에서 L이 단일결합인 경우 상기 구조는 실제적으로 A-Z임을 나타낸다.
하나의 치환기가 비어 있을 경우, 상기 치환기는 존재하지 않는 것을 나타내는 바, 예를 들어 A-X에서 X가 비어 있을 경우 상기 구조는 실제로 A임을 나타낸다. 나열된 치환기에서 이가 어느 원자를 통해 치환된 라디칼에 연결된 것을 나타내지 않는 경우, 이러한 치환기는 임의의 원자를 통해 결합될 수 있고, 예를 들어, 피리디닐기는 치환기로서 피리딘 고리 중 임의의 하나의 탄소 원자를 통해 치환된 라디칼에 연결될 수 있다.
나열된 연결기의 결합 방향을 명시하지 않은 경우 결합방향은 임의적이며, 예를 들어
Figure pct00068
에서 연결된 기 L은 -M-W-이고, 이 때, -M-W-는 고리 A와 고리 B를 왼쪽에서 오른쪽으로 읽기 순서와 같은 방향으로 연결하여
Figure pct00069
를 형성 할 수 있고, 고리 A와 고리 B를 왼쪽에서 오른쪽으로 읽기 순서와 반대 방향으로 연결하여
Figure pct00070
를 형성할 수 있다. 상기 연결 라디칼, 치환기 및/또는 이의 변이체의 조합은 이러한 조합이 안정적인 화합물을 생성할 경우에만 허용된다.
달리 명시되지 않는 한, 어느 하나의 라디칼에 하나 또는 복수개의 연결 가능한 부위가 있을 경우, 상기 라디칼의 임의의 하나 또는 복수개의 부위는 화학 결합을 통해 다른 라디칼에 연결될 수 있다. 화학 결합의 연결 형태는 무정위이고, 연결 가능한 부위에 H 원자가 존재하는 경우, 화학 결합 연결 시, 해당 부위의 H 원자의 수는 연결된 화학 결합의 수에 따라 상응하게 감소되어 상응한 원자가의 라디칼로 변한다. 상기 부위와 다른 라디칼이 연결된 화학 결합은 직선 실선결합(
Figure pct00071
), 직선 점선결합(
Figure pct00072
), 또는 물결선(
Figure pct00073
)으로 나타낼 수 있다. 예를 들어, -OCH3의 직선 실선결합은 상기 라디칼 중의 산소 원자를 통해 다른 라디칼에 연결되는 것을 나타내고;
Figure pct00074
의 직선 점선결합은 상기 라디칼 중의 질소 원자의 양단을 통해 다른 라디칼에 연결되는 것을 나타내며;
Figure pct00075
의 물결선은 상기 페닐기 라디칼 중의 1부위 및 2부위의 탄소 원자를 통해 다른 라디칼에 연결되는 것을 나타낸다;
Figure pct00076
는 상기 피페리디닐기의 임의의 연결 가능한 부위가 하나의 화학 결합을 통해 다른 기에 연결될 수 있음을 의미하며, 적어도
Figure pct00077
,
Figure pct00078
,
Figure pct00079
,
Figure pct00080
의 4개의 연결형태가 포함되고, -N-에 H원자를 그리더라도
Figure pct00081
는 여전히
Figure pct00082
의 연결형태의 기를 포함하며, 하나의 화학 결합만 연결된 경우, 상기 부위의 H는 이에 따라 하나가 감소되어 상응하는 1가 피페리디닐기로 된다.
달리 명시되지 않는 한, 용어 “C1-3알킬기”는 직쇄 또는 분지쇄의 1 내지 3개의 탄소원자로 구성된 포화 탄화수소기를 나타낸다. 상기 C1-3알킬기는 C1-2 및 C2-3알킬기 등을 포함하며; 1가(예를 들어 메틸기), 2가(예를 들어 메틸렌기) 또는 다가(예를 들어 메틴기)일 수 있다. C1-3알킬기의 예로는 메틸기(Me), 에틸기(Et), 프로필기(예를 들어, n-프로필기 및 이소프로필기를 포함한다)등을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
달리 명시되지 않는 한, 용어 “C1-3알콕시기”는 1개의 산소 원자를 통해 분자의 나머지 부분에 연결된 1 내지 3개의 탄소 원자를 포함하는 알킬 라디칼을 나타낸다. 상기 C1-3알콕시기는 C1-2, C2-3, C3 및 C2알콕시기 등을 포함한다. C1-3알콕시기의 예로는 메톡시기, 에톡시기, 프로폭시기(n-프로폭시기 및 이소프로폭시기를 포함한다) 등을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
달리 명시되지 않는 한, 용어 “5 내지 6원 고리”는 5 내지 6개의 고리 원자로 구성된 사이클로알킬기, 헤테로사이클로알킬기, 사이클로알케닐기, 헤테로사이클로알케닐기, 사이클로알키닐기, 헤테로사이클로알키닐기, 아릴기 또는 헤테로아릴기를 지칭한다. 상기 고리는 단일 고리를 포함하며, 또한 스피로 고리, 앤드 고리 및 브리지 고리와 같은 이중 고리계도 포함한다. 달리 명시되지 않는 한, 상기 각 고리는 선택적으로 O, S 및 N으로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 3개의 헤테로 원자를 포함한다. 상기 5 내지 6원 고리는 5원 및 6원 고리 등을 포함한다 “5 내지 6원 고리”는 예를 들어 페닐기, 피리딜기 및 피페리디닐기 등을 포함하고; 반면에, 용어 ”5 내지 6 헤테로사이클로알킬기”는 피페리디닐기 등을 포함하지만 페닐기는 포함하지 않는다. 용어 “고리”는 적어도 하나의 고리를 함유하는 고리계를 더 포함하고, 여기서 매 하나의 “고리”는 모두 독립적으로 상기 정의에 부합된다.
달리 명시되지 않는 한, 용어 "할로" 또는 "할로겐"은 그 자체로 또는 다른 치환기의 일부분으로 불소, 염소, 브롬 또는 요오드 원자를 나타낸다.
용어 “보호기”는 “아미노 보호기”, “히드록실 보호기” 또는 “메르캅토 보호기”를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 용어 “아미노 보호기”는 아미노기 질소 위치에서 부반응을 방지하는데 적합한 보호기를 지칭한다. 대표적인 아미노 보호기로 포르밀기; 예를 들어 알카노일기 (예를 들어 아세틸기, 트리클로로아세틸기 또는 트리플푸오로아세틸기)와 같은 아실기; tert-부톡시카보닐기(Boc)와 같은 알콕시카보닐기; 벤질옥시카보닐기(Cbz) 및 9-플루오레닐메톡시카보닐기(Fmoc)와 같은 아릴메톡시카보닐기; 벤질기(Bn), 트리페닐메틸기(Tr), 1,1-비스-(4'-메톡시페닐)메틸기와 같은 아릴메틸기; 트리메틸실릴기(TMS) 및 tert-부틸디메틸실릴기(TBS)와 같은 실릴기 등을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 용어 “히드록실 보호기”는 히드록실기 부반응을 억제하는데 적합한 보호기를 지칭한다. 대표적인 히드록실기 보호기로는 메틸기, 에틸기 및 tert-부틸기와 같은 알킬; 알카노일기(예를 들어 아세틸기)와 같은 아실기; 벤질기(Bn), p-메톡시벤질기(PMB), 9-플루오레닐메틸기(Fm) 및 디페닐메틸기(디페닐메틸기, DPM)와 같은 아릴기메틸기; 트리메틸실릴기(TMS) 및 tert-부틸디메틸실릴기(TBS)와 같은 실릴기 등을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 화합물은 본 기술분야의 기술자들에게 공지된 다양한 합성 방법으로 제조될 수 있고, 하기에서 예를 든 구체적인 실시형태, 이를 기타 화학 합성 방법과 결합하여 형성한 실시형태 및 본 기술분야의 기술자들에게 공지된 등가 교체 방식을 포함하며, 바람직한 실시형태로 본 발명의 실시예를 포함하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 화합물의 구조는 본 기술분야의 기술자에게 공지된 통상적인 방법으로 확인할 수 있으며, 본 발명이 화합물의 절대 배치에 관련된 경우, 상기 절대 배치는 본 기술분야의 통상적인 기술적 수단에 의하여 확인할 수 있다. 예를 들어, 단결정 X선 회절법(SXRD)은 배양된 단결정을 Bruker D8 venture 회절계로 수집하여 회절 강도 데이터를 수집하고, 광원은 CuKα 방사선이고, 스캐닝 모드: φ/ω스캔하고, 관련 데이터를 수집한 다음 직접법(Shelxs97)을 사용하여 결정 구조를 분석하면 절대 배치를 확인할 수 있다.
본 발명에서 사용된 모든 용매는 시판되는 것이다. 본 발명은 하기와 같은 약칭을 사용한다: aq는 물을 대표하고; EDC는 N-(3-디메틸아미노프로필)-N’-에틸카르보디이미드 염산염을 대표하고; eq는 당량, 등량을 대표하고; DMF는 N,N-디메틸포름아미드를 대표하고; DCM은 디클로로메탄을 대표하고; DMSO는 디메틸술폭시드를 대표하고; EtOH는 에탄올을 대표하고; MeOH는 메탄올을 대표하고; Boc2O는 디-tert-부틸 디카보네이트를 대표하고; TFA는 트리플루오로아세트산을 대표하고; DMP는 데스-마틴 산화제를 대표한다.
화합물은 인위적으로 또는 ChemDraw®소프트웨어를 사용하여 명명되며, 시판되는 화합물은 공급업체의 목록명칭을 사용한다.
아래 실시예를 통하여 본 발명을 상세하게 설명하지만, 본 발명은 어떠한 불리한 제한도 받지 않는다. 본 명세서에서는 본 발명을 상세히 설명하였고, 이의 구체적인 실시예도 개시하였으나 본 기술분야의 통상의 기술자라면 본 발명의 요지와 범위를 벗어나지 않는 범위에서 본 발명의 구체적인 실시 형태를 다양하게 변화 및 개선하는 것은 명백할 것이다.
참조예 1
Figure pct00083
합성경로:
Figure pct00084
단계1: 화합물 AA-1-2의 합성
화합물 AA-1-1(100g), p-톨루엔술포닐클로라이드(146.67g), 트리에틸아민(233.54g)을 디클로로메탄(0.5L)에 용해시킨 후 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온으로 냉각시키고, 감압하여 용매를 제거하고, 물(400mL)을 가하여 잔여물을 용해시키고, 수상을 에틸 아세테이트로 3회(1.5L) 추출하고, 합병한 유기상을 포화 식염수로 2회(400mL) 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 건조제를 여과하여 제거한 후 감압 하에 용매를 제거하여 AA-1-2를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.73 (d, J=8. 00Hz, 2H), 7.27 (d, J=8.00 Hz, 2H), 4.05-4.10 (m, 2H), 3.50-3.55 (m, 2H), 3.30 (t, J=6.4 Hz, 2H), 2.37 (s, 3H), 1.35-1.44 (m, 2H), 1.16-1.27 (m, 2H), 0.81 (t, J=7.2 Hz, 3H).
단계2: 화합물 AA-1의 합성
화합물 AA-1-2(170.10g), p-하이드록시페닐보론산 피나콜 에스테르(137.44g)를 아세토니트릴(1.6L)에 용해시키고, 실온에서 탄산칼륨(86.32g)과 요오드화칼륨(10.37g)을 가하였다. 얻어진 용액을 60℃의 질소 가스 보호 하에 12시간 동안 교반하여 반응시켰다. 실온으로 냉각시킨 후, 감압하여 용매를 제거하고, 물(500mL)을 가하여 잔여물을 용해시키고, 수상을 에틸 아세테이트로 3회(2L×3) 추출하고, 합병한 후 감압하여 용매를 제거하고, 컬럼 크로마토그래피를 통해 화합물 AA-1을 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.78-7.71 (m, 2H), 6.95-6.88 (m, 2H), 4.19-4.12 (m, 2H), 3.83-3.75 (m, 2H), 3.54 (t, J=6.8 Hz, 2H), 1.65-1.57 (m, 2H), 1.44-1.36 (m, 2H), 1.34 (s, 12H), 0.93 (t, J=7.2 Hz, 3H).
참조예 2
Figure pct00085
합성경로:
Figure pct00086
단계1: 화합물 AA-2-2의 합성
테트라부틸암모늄 브로마이드(86.58g) 및 수산화칼륨(339.6g)을 톨루엔(5000mL)에 현탁시키고, 상기 혼합 용액을 16시간 동안 환류시킨 후 피페리딘-2-온(500.00g) 및 p-메톡시벤질 클로라이드(1.03kg)를 가하였다. 상기 혼합 용액을 100℃로 유지시키면서 24시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온으로 냉각시킨 후, 물로 3회(2000mL×3) 세척하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축하였다. 농축한 용액을 크로마토그래피 컬럼으로 분리하여 화합물 AA-2-2를 얻었다.
단계2: 화합물 AA-2-4의 합성
화합물 AA-2-2(40g) 및 수산화나트륨(7.29g)의 수(200mL)용액을 80℃에서 24시간 동안 교반하였다. 0℃에서 농염산(7.38mL)으로 중화하여 AA-2-3의 혼합 용액을 얻었다. 실온에서 상기 혼합물에 탄산나트륨(65.66g) 및 디메틸술폭시드(600mL)를 가하였다. 그 다음 100℃에서 혼합물에 5-브로모-2-플루오로-벤즈알데히드(46.11g)를 적가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 48시간 동안 환류시켰다. 빙욕 냉각 하에 염화암모늄(1mol/L)수용액으로 반응을 pH=7로 조절하고, 에틸 아세테이트(1L×3)로 추출하였다. 유기층을 물 및 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고 농축하였다. 잔여물을 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트=200:1 내지 1:1）로 정제하였다. 화합물 AA-2-4를 얻었다.
단계3: 화합물 AA-2-5의 합성
화합물 AA-2-4(10g) 및 탄산나트륨(12.61g)의 아세토니트릴(100mL) 혼합물에 요오도메탄(22g)의 아세토니트릴(50mL)용액을 가하였다. 질소 가스 보호 하에, 반응 혼합물을 15℃ 내지 30℃에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(300mL)로 퀀칭시키고, 에틸 아세테이트(400mL×2)로 추출하였다. 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고 농축하였다. 조질의 생성물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트=50:1 내지 20:1 내지 10:1)로 정제하여 화합물 AA-2-5를 얻었다.
1H NMR (400 MHz,CDCl3)δ ppm 10.31 (s, 1H), 7.89 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.54 (dd, J=9.2, 2.4 Hz, 1H), 7.04 (d, J=8.4 Hz, 2H), 6.97 (d, J=9.02 Hz, 1H), 6.80 (d, J=8.4 Hz, 2H), 4.21 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.63 (s, 3H), 3.07 (t, J=6.8 Hz, 2H), 2.25 (t, J=6.8 Hz, 2H), 1.46 - 1.58 (m, 4H).
단계4: 화합물 AA-2-6의 합성
디메틸 카보네이트(42.8g) 용액중에서 화합물 AA-2-5(11g)에 나트륨 메톡사이드(6.84g)를 가하였다. 이를 60℃로 가열시킨 후 60℃에서 35시간 동안 교반하였다. 암모늄 클로라이드(1mol/L) 수용액으로 pH(7 내지 8)를 조절하고, 반응 혼합물을 여과하였다. 케이크를 감압 농축하여 화합물 AA-2-6을 얻었다.
1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 7.74 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.05 - 7.11 (m, 3H), 6.88 (d, J=8.4 Hz, 2H), 6.53 (d, J=9.2 Hz, 1H), 4.39 (s, 2H), 3.80 (d, J=2.0 Hz, 6H), 3.48 (t, J=5.2 Hz, 2H), 2.58 (t, J=6.0 Hz, 2H), 1.47 (d, J=5.6 Hz, 2H).
단계5: 화합물 AA-2-7의 합성
화합물 AA-2-6(10g)의 톨루엔(50mL)용액에 트리플루오로아세트산(100mL)을 가하였다. 반응 혼합물을 60℃로 가열한 후 60℃에서 8시간 동안 교반하였다. 빙욕 냉각 하에 포화 탄산수소나트륨으로 반응 혼합물을 pH=7로 중화시키고, 에틸 아세테이트(250mL×2)로 혼합물을 추출하였다. 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고 농축하였다. 잔여물을 실리카겔 컬럼(석유 에테르/에틸 아세테이트=50:1 내지 5:1)으로 정제하여 화합물 AA-2-7을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ ppm 7.66 (s, 1H), 7.39-7.05 (m, 1H), 6.85 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.36 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.51 (t, J=5.2 Hz, 2H), 2.75 (d, J=6.8 Hz, 2H), 1.49-1.40 (m, 2H).
단계6: 화합물 AA-2의 합성
25℃에서, AA-2-7(7.5g, 25.32mmol, 1eq) 및 AA-1(8.92g, 27.86mmol, 1.1eq)을 디메틸술폭시드(62.5mL) 및 물(12.5mL)에 용해시킨 다음, 이에 Pd(dppf)Cl2(926.50mg, 1.27mmol, 0.05eq) 및 탄산칼륨(10.50g, 75.97mmol, 3eq)을 가하고, 80℃에서, 질소 가스 보호 하에 18시간 동안 반응시켰다. 먼저 용액을 여과한 다음, 여액에 물 100mL를 가한 후, 에틸 아세테이트로 3회(100mL×3) 추출하고, 합병한 유기상을 포화 식염수로 1회 세척한 다음, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 감압 농축하여 흑색 오일 상태의 생성물을 얻었다. 오일 상태의 물질을 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르:에틸 아세테이트=20:1 내지 8:1)로 분리하여 화합물 AA-2를 얻었다. MS-ESI (m/z):410.0[M+1]+.
참조예 3
Figure pct00087
합성경로:
Figure pct00088
단계1: 화합물 AA-3A의 합성
25℃에서, AA-2(69g) 및 테트라히드로푸란-4-카르브알데하이드(38.46g)의 디클로로메탄(1500mL)용액에 염화아연(22.97g) 및 트리아세톡시 수소화 붕소 나트륨(107g)을 가하고 질소 가스 하에 18시간 동안 교반하였다. 먼저 반응 용액에 물 500mL를 가한 후, 디클로로메탄으로 3회(500mL×3) 추출하고, 유기상을 합병한 후 포화 식염수로 1회(500mL) 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고 여과하고 감압 농축하고 실리카겔 컬럼으로 분리(석유 에테르:에틸 아세테이트=20:1 내지 9:1)하여 AA-3A를 얻었다.
참조예 4
Figure pct00089
합성경로:
Figure pct00090
단계1: 화합물 AA-3B의 합성
실온에서 AA-2(327.24mg) 및 테트라히드로푸란-2-카르브알데하이드(0.1g)를 디클로로메탄(5mL)에 용해시키고, 10분 동안 교반한 후, 트리아세톡시 수소화 붕소 나트륨(635.09mg)을 가하고, 25℃의 질소 가스 보호 하에 14시간 동안 반응시켰다. 용액에 물 5ml를 가한 후, 디클로로메탄으로 3회(10mL×3) 추출하고, 합병한 유기상을 포화 식염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고 여과하고 감압 농축하여 황색의 오일 상태의 물질을 얻었다. 생성물을 HPLC로 분리(컬럼 유형: Boston Green ODS 150×30mm×5μm; 이동상: [물(0.075%TFA)-ACN]; ACN%: 80% 내지 100%, 8min)하여 AA-3B를 얻었다.
단계2: 화합물 AA-3B-A 및 AA-3B-B의 합성
AA-3B(700mg) 시료를 SFC로 분리(컬럼 유형: Cellulose 2 150×4.6mm I.D., 5μm; 이동상: A: CO2, B: 메탄올(0.05% DEA); 구배: 40% B; 유속: 2.5mL/min; 컬럼 온도: 35℃; 컬럼 압력: 1500psi.)하여 화합물 AA-3B-A(머무름시간 5.053min) 및 AA-3B-B(머무름시간 5.514min)를 얻었다.
참조예 5
Figure pct00091
합성경로:
Figure pct00092
단계1: 화합물 AA-3C-2의 합성
0℃에서, AA-3C-1(5g)을 용해시킨 디클로로메탄(120mL)에 DMP(21.54g)를 가한 후, 전체 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 규조토로 여과하고, 여액을 실리카겔 분말과 직접 교반하였다. 상기 여액을 교반한 후 실리카겔 컬럼으로 분리(석유 에테르:에틸 아세테이트=10:1 내지 5:1)하여 화합물 AA-3C-2를 얻었다.
단계2: 화합물 AA-3C의 합성
25℃에서, AA-2(3.17g) 및 AA-3C-2(0.9g)를 용해시킨 디클로로메탄(30mL)용액을 0.5시간 동안 교반한 다음, 상기 혼합물에 트리아세톡시 수소화 붕소 나트륨(3.29g)을 가한 후, 전체 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 물(100mL)을 가한 다음, 디클로로메탄으로 3회(50mL×3) 추출하고, 합병한 유기상을 포화 식염수로 1회(100mL) 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과한 후 감압 농축하여 황색의 오일 상태의 물질을 얻었다. 황색의 오일 상태의 물질을 실리카겔 컬럼으로 분리(석유 에테르:에틸 아세테이트=10:1 내지 1:1)하여 AA-3C를 얻었다.
단계3: 화합물 AA-3C-A 및 AA-3C-B의 합성
AA-3C(0.75g)를 SFC로 분해하여 AA-3C-A(머무름시간: 5.053min) 및 AA-3C-B(머무름시간: 5.514min)를 얻었다. SFC:(컬럼 유형: Cellulose 2 150×4.6mm I.D., 5μm 이동상: A: CO2, B: 메탄올(0.05% DEA) 구배: 40% B, 유속: 2.5mL/min 컬럼 온도: 35℃ 압력: 1500psi). MS-ESI (m/z): 510.0[M+1]+.
참조예 6
Figure pct00093
합성경로:
Figure pct00094
단계1: 화합물 BB-1-2의 합성
25℃에서, BB-1-1(5.0g) 및 DMF(1.07g)의 디클로로메탄(50.00mL)용액에 염화옥살릴(10.07g)을 적가하여 3시간 동안 교반하고, 메탄올(10mL)을 가하여 1시간 동안 교반한 후, 반응 용액을 농축하여 BB-1-2를 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3)δ ppm 9.32 (s, 1H), 9.09 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.05 (s, 3H).
단계2: 화합물 BB-1-3의 합성
질소 가스 분위기 100℃ 하에, 다이옥세인(45mL)과 물(15mL)의 혼합 용매에 BB-1-2(5.0g) 및 비닐트리플루오로붕산칼륨(3.9g)을 가하고 Pd(dppf)Cl2(213mg) 및 탄산칼륨(8.06g)을 가하여 12시간 동안 교반하고, 농축하여 다이옥세인을 제거하고, 잔여물에 물(10mL)을 가한 후 디클로로메탄(20mL×3)으로 추출하고, 유기상을 합병하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축한 후, 잔여물을 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트=10/1)로 정제하여 BB-1-3을 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3)δ ppm 9.00 (s, 1H), 8.57 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.48-7.37 (m, 2H), 5.78 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.48 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H).
단계3: 화합물 BB-1-4의 합성
25℃의 수소 가스(15psi)하에, BB-1-3(1.00g)의 테트라히드로푸란(10.00mL) 용액에 Pd/C(1.80g, 10%순도)를 가하여 3시간 동안 교반하고, 여과하고, 농축하여 조질의 생성물 BB-1-4(880 mg)를 얻었으며 직접 다음 단계에 사용하였다.
단계4: 화합물 BB-1-5의 합성
25℃에서, BB-1-4(880mg)의 테트라히드로푸란(10.00mL)용액에 알루미늄수소화 리튬(303mg)을 가하여 1시간 동안 교반하고, 반응 용액에 황산나트륨 10수화물(10g)을 가하고 물(10mL)을 더 가하여, 디클로로메탄(10mL×3)으로 추출하고, 유기상을 합병하여, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 조질의 생성물 BB-1-5(470mg)를 얻었으며 직접 다음 단계에 사용하였다.
단계5: 화합물 BB-1-6의 염산염의 합성
25℃하에, BB-1-5(470mg)의 디클로로메탄(5.00mL)용액에 염화티오닐(2.04g)을 가하여 2시간 동안 교반한 후, 반응 용액을 직접 농축하여 BB-1-6(670mg, 염산염)을 얻었으며 직접 다음 단계에 사용하였다.
단계6: 화합물 BB-1-7의 합성
25℃하에, BB-1-6(670mg, 염산염) 및 4-아미노티오페놀(1.31g)의 디클로로메탄(5.00mL) 현탁액에 트리에틸아민(1.06g)을 가하여 4시간 동안 교반하고, 반응 용액을 농축한 후 컬럼 크로마토그래피로 직접 정제(석유 에테르/에틸 아세테이트=4/1 내지 0/1)하여 BB-1-7을 얻었다. MS-ESI m/z: 245.0 [M+H]+.
단계7: 화합물 BB-1의 합성
40℃하에, BB-1-7(630mg)의 디클로로메탄(10.00mL)용액에 30% 과산화수소(2.92g)를 가하여 18시간 동안 교반하고, 아황산나트륨(10g)을 가하여 30분 동안 교반한 후, 여과하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축하고, 잔여물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 BB-1을 얻었다. MS-ESI m/z: 261.1 [M+H]+.
참조예 7
Figure pct00095
합성경로:
Figure pct00096
단계1: 화합물 BB-2-2의 합성
0℃에서, 2M의 트리메틸실릴디아조메탄(239.06mL)을 BB-2-1(10g)의 디클로로메탄(100mL) 용액에 천천히 적가하여 1시간 동안 반응시켰다. 반응 용액에 아세트산을 기포가 더 생성되지 않을 때까지 천천히 적가한 후, 포화 탄산수소나트륨 용액(300mL)을 가하고, 디클로로메탄(300mL×3)으로 추출하고, 유기상을 합병하여, 포화 식염수(500mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 여과하고, 농축한 후, 조질의 생성물을 컬럼으로 분리하고 정제(석유 에테르/에틸 아세테이트=20/1)하여 화합물 BB-2-2를 얻었다. MS-ESI (m/z):205.9[M+1]+.
단계2: 화합물 BB-2-3의 합성
80℃의 질소 가스 분위기 하에, BB-2-2(11g)를 50% 트리메틸보록신(40.21g)의 물(30mL) 및 디메틸술폭시드(150mL)용액에 가한 후, 탄산칼륨(22.14g) 및 Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(4.36g)를 가하여 12시간 동안 반응시키고, 반응 용액에 물(500mL)을 가하여, 에틸 아세테이트(200mL×3)로 추출하고, 유기상을 합병한 후, 포화 식염수(1L)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축하고, 조질의 생성물을 컬럼으로 분리하고 정제(석유 에테르/에틸 아세테이트=10/1)하여 화합물 BB-2-3을 얻었다. MS-ESI (m/z):185.9[M+1]+.
단계3: 화합물 BB-2-4의 합성
25℃에서, BB-2-3(4.4g)을 비닐트리플루오로붕산칼륨(9.53g)의 물(10mL) 및 디메틸술폭시드(50mL)용액에 가한 다음, 탄산칼륨(9.83g) 및 Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(1.94g)를 가한 후, 반응 용액을 80℃에서 12시간 동안 반응시켰다. 반응 용액에 물(100mL)을 가하여, 에틸 아세테이트(50mL×3)로 추출하고, 유기상을 합병하고, 포화 식염수(100mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 유기상을 회전 증발하여 농축하고, 조질의 생성물을 컬럼으로 분리하고 정제(석유 에테르/에틸 아세테이트=10/1)하여 화합물 BB-2-4를 얻었다. MS-ESI (m/z):178.0[M+1]+.
단계4: 화합물 BB-2-5의 합성
25℃에서, 수소화 병을 세척 및 건조시키고, 아르곤 가스 분위기 하에 Pd/C(200mg, 10%순도)를 가한 후, BB-2-4(1g)의 메탄올(20mL) 용액을 수소화 병에 부어 넣고, 수소 가스(20psi) 분위기 하에 12시간 동안 반응시켰다. 반응 용액을 규조토를 통해 여과하고, 여액을 회전 증발시키고 농축하여 조질의 생성물 BB-2-5를 얻었다.
단계5: 화합물BB-2-6의 합성
0℃에서, BB-2-5(1.1g)의 테트라히드로푸란(10mL)용액을 알루미늄수소화 리튬(500mg)의 테트라히드로푸란(20mL)용액에 적가한 후, 25℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 반응 용액에 물(0.5mL), 15%의 NaOH(0.5mL), 물(1.5mL)을 천천히 가하고, 1시간 동안 교반한 후, 여과하고, 여액을 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 여액을 회전 증발시키고 농축하여 조질의 생성물 BB-2-6을 얻었다. MS-ESI (m/z):151.9[M+1]+.
단계6: 화합물 BB-2-7의 합성
0℃에서, 염화티오닐(2.20g)을 BB-2-6(930mg)의 디클로로메탄(20mL)용액에 적가한 후, 25℃에서 40분 동안 반응시켰다. 반응 용액을 직접 회전 증발시켜, 조질의 생성물 BB-2-7을 얻었다. MS-ESI (m/z):170.0[M+1]+.
단계7: 화합물 BB-2-8의 합성
25℃에서, BB-2-7(1g)을 4-아미노티오페놀(1.03g) 및 트리에틸아민(1.79g)의 이소프로판올(15mL)용액에 가하여 12시간 동안 반응시킨 후, 반응 용액을 회전 증발하여 농축하고， 조질의 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 분리하고 정제(디클로로메탄/메탄올=100/1 내지 20/1)하여 BB-2-8을 얻었다. MS-ESI (m/z):259.0[M+1]+.
단계8: 화합물 BB-2의 합성
BB-2-8(0.9g)의 아세토니트릴(25mL) 및 물(25mL)의 용액에 과황산수소칼륨(1.07g)을 가하고, 반응 용액을 0℃에서 40분 동안 교반하였다. 먼저 반응 용액에 포화 아황산나트륨 용액을 전분 KI 시험지가 파란색으로 변하지 않을 때까지 적가하고, 반응 용액을 직접 회전 증발시키고 농축하여 CH3CN과 물을 제거하였다. 조질의 생성물을 컬럼으로 분리하고 정제(디클로로메탄/메탄올=100/1 내지 20/1)하여 BB-2를 얻었다. MS-ESI (m/z): 275.0[M+1]+.
참조예 8
Figure pct00097
합성경로:
Figure pct00098
단계1: 화합물 BB-3-2의 합성
0℃에서, 2M의 트리메틸실릴디아조메탄(8.74mL)을 BB-3-1(2.00g)의 디클로로메탄(20mL)용액에 천천히 적가하여 1시간 동안 반응시킨 후, 반응 용액에 기포가 생성되지 않을 때까지 아세트산을 천천히 적가한 다음, 포화 탄산수소나트륨 용액 30mL를 가하고, 디클로로메탄(30mL×3)으로 추출하고, 유기상을 합병하고, 포화 식염수(50mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시켰다. 유기상을 회전 증발시켜 농축하고, 조질의 생성물을 컬럼으로 분리하고 정제(석유 에테르/에틸 아세테이트=20/1)하여 화합물 BB-3-2를 얻었다. MS-ESI (m/z):185.9[M+1]+.
단계2: 화합물 BB-3-3의 합성
25℃에서, BB-3-2(3.25g)의 비닐트리플루오로붕산칼륨(3.25g)을 물(8mL) 및 디메틸술폭시드(40mL) 용액에 가한 다음, 탄산칼륨(3.35g) 및 Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(660mg)를 가한 후 반응 용액을 80℃에서 12시간 동안 반응시켰다. 반응 용액에 물(100mL)을 가하고 에틸 아세테이트(50mL×3)로 추출하고, 유기상을 합병한 후, 포화 식염수(100ml)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 반응 용액을 회전 증발시키고 농축한 후, 조질의 생성물을 컬럼으로 분리하고 정제(석유 에테르/에틸 아세테이트=100/1 내지 10/1)하여 화합물 BB-3-3을 얻었다. MS-ESI (m/z):178.0[M+1]+.
단계3: 화합물 BB-3-4의 합성
25℃에서, 수소화 병을 세척 및 건조시키고, 아르곤 가스 분위기 하에 Pd/C(200mg, 10%순도)를 가한 후, BB-3-3(710mg)의 메탄올(20mL)용액을 수소화 병에 부어넣은 다음, 수소 가스(15psi) 분위기 하에 12시간 동안 반응시키고, 반응 용액을 규조토로 여과하고, 여액을 회전 증발시켜 농축하여 조질의 생성물 BB-3-4를 얻었다. MS-ESI (m/z):180.0[M+1]+.
단계4: 화합물 BB-3-5의 합성
0℃에서, 알루미늄수소화 리튬(305mg)을 BB-3-4(720mg)의 테트라히드로푸란(20mL)용액에 가하여 25℃에서 1시간 동안 반응시킨 후, 반응 용액에 물(0.3mL), 15% NaOH(0.3mL), 물(0.9mL)을 가하고 20분 동안 교반한 후 여과하고, 여액을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 조질의 생성물 BB-3-5를 얻었다. MS-ESI (m/z):152.0[M+1]+.
단계5: 화합물 BB-3-6의 합성
0℃에서, 염화 티오닐(1.94g)을 BB-3-5(820mg)의 디클로로메탄(20mL)용액에 적가한 후, 25℃에서 40분 동안 반응시키고, 반응 용액을 직접 회전 증발시켜 조질의 생성물 BB-3-6을 얻었다. MS-ESI (m/z):169.8[M+1]+.
단계6: 화합물 BB-3-7의 합성
25℃에서, BB-3-6(920mg)을 4-아미노티오페놀(950mg) 및 트리에틸아민(1.65g)의 이소프로판올(15mL)용액에 가하여 12시간 동안 반응시킨 후, 반응 용액을 회전 증발시키고 농축하고, 유기상을 회전 증발하여 농축하고, 조질의 생성물을 컬럼으로 분리하고 정제(디클로로메탄/메탄올=100/1 내지 20/1)하여 BB-3-7을 얻었다. MS-ESI (m/z):259.1[M+1]+.
단계7: 화합물 BB-3의 합성
BB-3-7(290mg)의 아세토니트릴CH3CN(15mL) 및 물(15mL)의 용액에 과황산수소칼륨(310.50mg)을 가하여, 반응 용액을 0℃에서 40분 동안 교반하였다. 먼저 반응 용액에 포화 아황산나트륨 용액을 전분 KI 시험지가 파란색으로 변하지 않을 때까지 적가하고, 반응 용액을 직접 회전 증발시키고 농축하여 아세토니트릴과 물을 제거하였다. 조질의 생성물을 컬럼으로 분리하고 정제(디클로로메탄/메탄올=100/1 내지 20/1)하여 BB-3을 얻었다. MS-ESI (m/z):275.0[M+1]+.
참조예 9
Figure pct00099
합성경로:
Figure pct00100
단계1: 화합물 BB-4-2의 합성
25℃ 및 질소 가스 보호 하에, BB-4-1(5g) 및 탄산세슘(15.81g)이 용해된 다이옥세인(150mL) 및 물(15mL)에 트리메틸보록신(30.47g, 50%순도)을 가하고 Pd(dppf)Cl2(888mg)를 가한 후, 반응 용액을 100℃ 및 질소 가스 보호 하에 17시간 동안 교반하고, 반응 용액을 물(200mL)에 가한 다음, 에틸 아세테이트로 3회(150mL×3) 추출하고, 합병한 유기상을 물로 1회(100mL) 세척하고, 포화 식염수로 3회(100mL) 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 농축하여 황색의 오일 상태의 물질을 얻었다. 황색의 오일 상태의 물질을 실리카겔 컬럼으로 분리(석유 에테르:에틸 아세테이트=20:1 내지 4:1)하여 BB-4-2를 얻었다. MS-ESI (m/z): 166.0[M+1]+.
단계2: 화합물 BB-4-3의 합성
0℃에서, BB-4-2(3.1g)를 용해한 테트라히드로푸란(30mL)에 알루미늄수소화 리튬(712mg)을 가한 후, 전체 혼합물을 0℃에서 3시간 동안 교반하고, 반응 용액에 물, 15% 수산화나트륨 수용액, 물(0.7mL, 2.1mL, 0.7mL)을 순차적으로 가하고, 10분 간격으로 교반한 후, 혼합물을 규조토로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 조질의 생성물 BB-4-3을 얻었다. MS-ESI (m/z):[M+1]+.
단계3: 화합물 BB-4-4의 합성
0℃에서, BB-4-3(2.6g)을 용해한 디클로로메탄(120mL)에 염화티오닐(4.51g)을 가한 후, 전체 혼합물을 45℃에서 2시간 동안 교반하고, 반응 용액을 직접 감압 농축하여 조질의 생성물 BB-4-4를 얻었다. MS-ESI (m/z): 155.8[M+1]+.
단계4: 화합물 BB-4-5의 합성
0℃에서, BB-4-4(3.64g)를 용해한 이소프로판올(30mL)에 트리에틸아민(5.75g)을 가하고, 10분 동안 교반한 후, 상기 혼합물에 4-아미노티오페놀(2.61g)을 가하고, 전체 혼합물을 25℃ 및 질소 가스 보호 하에 20시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 직접 감압 농축하여 고체 잔여물을 얻었다. 고체 잔여물을 실리카겔 컬럼으로 분리(디클로로메탄/메탄올=100:1 내지 15:1)하여 BB-4-5를 얻었다. MS-ESI (m/z): 244.9[M+1]+.
단계5: 화합물 BB-4의 합성
0℃에서, BB-4-5(2g)의 아세토니트릴(10mL) 및 물(10mL)의 용액에 과황산수소칼륨(2.52g)을 가하고, 반응 용액을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 포화 아황산나트륨 수용액(30mL)을 가하여 퀀칭시키고, 퀀칭시킨 후, 반응 용액을 직접 감압 농축하여 아세토니트릴 및 물을 제거하고, 상기 혼합물에 디클로로메탄:메탄올(10:1)의 혼합 용액(150mL)을 가하여, 1시간 동안 교반한 후, 규조토로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 담황색 고체를 얻은 다음, 상기 혼합물에 디클로로메탄(20mL)을 가하여, 1시간 동안 교반한 후, 규조토로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 담황색 고체를 얻었다. 담황색 고체를 실리카겔 컬럼으로 분리(디클로로메탄:메탄올=100:1 내지 20:1)하여 BB-4를 얻었다. MS-ESI (m/z): 260.9[M+1]+.
참조예 10
Figure pct00101
합성경로:
Figure pct00102
단계1: 화합물 BB-5-2의 합성
0℃에서, 트리메틸실릴디아조메탄(2M, 19.53mL)을 BB-5-1(5g)의 디클로로메탄(50mL) 및 메탄올(5mL)의 용액에 천천히 적가하고, 0℃에서 1시간 동안 반응시킨 후, 먼저 반응 용액에 기포가 생성되지 않을 때까지 아세트산을 적가한 다음, 포화 탄산수소나트륨 용액(50mL)을 가하고 디클로로메탄(50mL×3)으로 추출한 후, 유기상을 합병하고, 포화 식염수(50mL)로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과한 후 감압 농축하여 조질의 생성물 BB-5-2를 얻었다. MS-ESI (m/z): 205.8[M+1]+.
단계2: 화합물 BB-5-3의 합성
25℃ 및 질소 가스 보호 하에, BB-5-2(5.4g) 및 탄산세슘(17.08g)을 용해한 다이옥세인(150mL) 및 물(15mL)에 화합물 50% 트리메틸보록신(26.94g, 50%순도)을 가하고, 상기 혼합물에 Pd(dppf)Cl2(575mg)를 가한 후, 전체 반응 용액을 100℃ 및 질소 가스 보호 하에 15시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 물(200mL)에 가하고, 에틸 아세테이트로 3회(150mL×3) 추출하고, 합병한 유기상을 물로 1회(100mL) 세척하고, 포화 식염수로 3회(100mL) 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과한 다음 감압 농축하고 실리카겔 컬럼으로 분리(석유 에테르:에틸 아세테이트=20:1 내지 4:1)하여 BB-5-3을 얻었다. MS-ESI (m/z): 166.0[M+1]+.
단계3: 화합물 BB-5-4의 합성
0℃에서, BB-5-3(0.05g)을 용해한 테트라히드로푸란(30mL)에 알루미늄수소화 리튬(12mg)을 가한 후, 전체 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 황산나트륨 10수화물을 가하고, 20분 동안 교반한 후, 혼합물을 규조토로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 조질의 생성물 BB-5-4를 얻었다.
단계4: 화합물 BB-5-5의 합성
0℃에서, BB-5-4(0.04g)가 용해된 디클로로메탄(10mL)에 염화 티오닐(69mg)을 가한 후, 전체 혼합물을 45℃에서 3시간 동안 교반하고, 반응 용액을 직접 감압 농축하여 조질의 생성물 BB-5-5를 얻었다. MS-ESI (m/z): 155.8[M+1]+.
단계5: 화합물 BB-5-6의 합성
0℃에서, BB-5-5(0.056g)를 용해한 이소프로판올(20mL)에 트리에틸아민(109mg)을 가하고, 10분 동안 교반한 후, 상기 혼합물에 4-아미노티오페놀(68mg)을 가하고, 전체 혼합물을 25℃ 및 질소 가스 보호 하에 12시간 동안 교반하고, 반응 용액을 직접 감압 농축한 다음 실리카겔 컬럼으로 분리(디클로로메탄:메탄올=100:1 내지 15:1)하여 BB-5-6을 얻었다. MS-ESI (m/z): 244.9[M+1]+.
단계6: 화합물 BB-5의 합성
0℃에서, BB-5-6(0.07g)의 아세토니트릴(10mL) 및 물(10mL)의 용액에 과황산수소칼륨(88.06mg)을 가하고 1시간 동안 반응시켰다. 반응 용액을 포화 아황산나트륨 수용액(30mL)에 가하여 퀀칭시키고, 퀀칭시킨 후, 반응 용액을 직접 감압 농축하여 아세토니트릴 및 물을 제거하고, 상기 혼합물에 디클로로메탄:메탄올(10:1)의 혼합 용액(150mL)을 가하여, 1시간 동안 교반한 후, 규조토로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 담황색 고체를 얻은 다음, 상기 혼합물에 디클로로메탄(20mL)을 가하여, 1시간 동안 교반한 후, 규조토로 여과하고, 여액을 감압 농축하고 실리카겔 플레이트로 분리(디클로로메탄:메탄올=100:1 내지 15:1)하여 BB-5를 얻었다. MS-ESI (m/z): 260.9[M+1]+.
참조예 11
Figure pct00103
합성경로:
Figure pct00104
단계1: 화합물 BB-6-2의 합성
25℃에서, BB-6-1(5g)을 비닐트리플루오로붕산칼륨(13.00g)의 다이옥세인(100mL) 및 물(10mL)의 용액에 가하고, 탄산칼륨(6.71g) 및 Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(991mg)를 가한 후, 반응 용액을 100℃에서 12시간 반응시키고 반응 용액에 물(300mL)을 가하여, 에틸 아세테이트(100mL×3)로 추출하고, 유기상을 합병하고, 포화 식염수(300mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 유기상을 회전 증발시켜 농축하고, 조질의 생성물을 컬럼으로 분리하고 정제(석유 에테르/에틸 아세테이트=100/1 내지 10/1)하여 화합물 BB-6-2를 얻었다. MS-ESI (m/z):190.0[M+1]+.
단계2: 화합물 BB-6-3의 합성
25℃에서, 수소화 병을 세척하고 불어서 건조시키고, 아르곤 가스 분위기 하에 Pd/C(150mg, 10%순도)를 가한 후, BB-6-2(280mg)의 MeOH(15mL)용액을 수소화 병에 부어넣은 다음, 수소 가스(40psi) 분위기 하에 40℃에서 12시간 동안 반응시키고, 반응 용액을 규조토로 여과하고, 여액을 회전 증발시키고 농축하여 조질의 생성물 BB-6-3을 얻었다. MS-ESI (m/z):194.0[M+1]+.
단계3: 화합물 BB-6-4의 합성
BB-6-3(0.33g)을 테트라히드로푸란(3mL)에 용해시킨 후, 빙욕 하에 10분 동안 교반하고, 알루미늄수소화 리튬(71mg)을 가하여 2시간 동안 반응시키고, 물:15%NaOH:물=1:1:3으로 퀀칭시킨 다음, 여과하고 농축하여 조질의 생성물 BB-6-4를 얻었다. MS-ESI (m/z):166.0[M+1]+.
단계4: 화합물 BB-6-5의 합성
25℃에서, BB-6-4(0.37g)를 디클로로메탄(3mL)에 용해시킨 후, 빙욕 하에 염화 티오닐(799mg)을 가하고, 40℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용액을 직접 농축하여, 조질의 생성물 BB-6-5를 얻었다. MS-ESI (m/z):183.9[M+1]+.
단계5: 화합물 BB-6-6의 합성
25℃에서, BB-6-5(0.411g) 및 4-아미노티오페놀(364mg)을 이소프로판올(10mL)에 용해시킨 후, 트리에틸아민(679mg)을 가하고, 25℃의 질소 가스 보호 하에 12시간 동안 반응시키고, 용액을 농축하고 컬럼 크로마토그래피로 정제(디클로로메탄:메탄올=100:1 내지 15:1)하여 BB-6-6을 얻었다. MS-ESI (m/z):273.1[M+1]+.
단계6: 화합물 BB-6의 합성
25℃에서, BB-6-6(0.56g)을 물(3mL) 및 아세토니트릴(3mL)의 혼합 용매에 용해시킨 후, 과황산수소칼륨(505mg)을 가하고, 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 먼저 50mL의 포화 아황산나트륨 용액을 가하여 퀀칭시킨 다음, 에틸 아세테이트로 3회(50mL×3) 추출하고, 합병한 유기상을 포화 식염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축하였다. 컬럼 크로마토그래피로 정제(디클로로메탄:메탄올=100:1 내지 15:1)하여 BB-6을 얻었다. MS-ESI (m/z):289.1[M+1]+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ=8.39 ppm (d, J=5.2 Hz, 1 H), 7.21 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 6.98 (d, J=5.6 Hz, 1 H), 6.69 (d, J=8.4Hz, 2 H), 4.38 (d, J=12.80 Hz, 1 H), 3.95 - 4.05 (m, 3 H), 2.68 (br d, J=7.6 Hz, 2 H), 2.55 (br dd, J=7.6, 4.4 Hz, 2 H), 1.23 (t, J=7.6 Hz, 3 H), 1.17 (t, J=7.6Hz, 3 H).
실시예 1
Figure pct00105
합성경로:
Figure pct00106
단계1: 화합물 WX001-1의 합성
25℃에서, 화합물 AA-3A(0.603g)를 메탄올(10mL) 및 물(2mL)에 용해시키고 수산화나트륨(521mg)을 가하고, 반응 용액을 50℃로 가열하여 43시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 2M 희염산 용액으로 pH=3으로 조절하고, 에틸 아세테이트(30mL×3)로 추출하고, 유기상을 합병하고, 포화 식염수로 1회(100mL) 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하여 건조제를 제거하고, 여액을 감압 농축하고 용매를 증발시켜 WX001-1을 얻었다. MS-ESI (m/z):494.20[M+1]+.
단계2: 화합물 WX001의 합성
25℃에서, WX001-1(95mg) 및 BB-1(0.05g, 192.05μmol, 1eq)을 용해한 피리딘(3mL)에 EDCI(74mg)를 가하고, 전체 혼합물을 60℃ 및 질소 가스 보호 하에 4시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 에틸 아세데이트 50mL를 가하고, 감압 농축하였다. 직접 분취 플레이트로 분리(디클로로메탄:메탄올=12:1)하여 WX001을 얻었다.
MS-ESI (m/z): 736.5[M+1]+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ ppm 0.94 (t, J=7.40 Hz, 3H), 1.25 (t, J=7.4 Hz, 3 H), 1.33 - 1.49 (m, 4 H), 1.57 - 1.64 (m, 4 H), 1.68 - 1.75 (m, 2 H), 2.03 - 2.16 (m, 1 H), 2.61 (br s, 2 H), 2.69 (q, J=7.3 Hz, 2 H), 3.17 (br d, J=6.4 Hz, 2 H), 3.39 (br t, J=11.4 Hz, 2 H), 3.49 - 3.59 (m, 4 H), 3.74 - 3.85 (t, J=4.8 Hz 2 H), 4.02 (br dd, J=11.4, 7.8 Hz, 2 H), 4.06 - 4.13 (d, J=12.8 Hz 1 H), 4.13 - 4.22 (m, 3 H), 6.85 (br d, J=8.8 Hz, 1 H), 6.98 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.17 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 7.36 (d, J=8.4 Hz, 3 H), 7.40 - 7.50 (m, 3 H), 7.53 (s, 1 H), 7.74 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 7.79 - 7.90 (m, 2 H), 8.43 (d, J=5.2 Hz, 1 H).
실시예 2
Figure pct00107
합성경로:
Figure pct00108
단계1: 화합물 WX002-1의 합성
25℃에서, AA-3C-B(0.9g)를 용해한 메탄올(10mL) 및 물(2mL)에 수산화나트륨(353mg)을 가하고, 전체 혼합물을 60℃에서 18.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 먼저 감압 농축하고 스핀하여 메탄올을 제거하고, 농축된 오일 상태의 물질을 2M의 희염산으로 pH=3으로 조절하고, 상기 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회(50mL×3) 추출하고, 합병한 유기상을 포화 식염수로 1회(50mL) 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 농축하여 WX002-1을 얻었다. MS-ESI (m/z):496.3[M+1]+.
단계2: 화합물 WX002의 합성
25℃에서, WX002-1(95mg) 및 BB-1(50mg)을 용해한 피리딘(3mL)에 EDCI(74mg)를 가하고, 전체 혼합물을 60℃ 및 질소 가스 보호 하에 4시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 에틸 아세테이트 50mL를 가한 후, 감압 농축하여 황색의 오일 상태의 물질을 얻었다. 황색의 오일 상태의 물질을 직접 prep-TLC로 분리(SiO2, DCM:MeOH=12:1)하여 WX002를 얻었다. MS-ESI (m/z):738.6[M+1]+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ ppm 0.94 (t, J=7.2 Hz, 3 H), 1.24 (t, J=7.6 Hz, 3 H), 1.34 - 1.47 (m, 2 H), 1.50 - 1.67 (m, 6 H), 2.58 (br s, 2 H), 2.68 (q, J=7.6 Hz, 2 H), 3.19 - 3.36 (m, 2 H), 3.37 - 3.53 (m, 2 H), 3.56 (t, J=6.8 Hz, 2 H), 3.61 - 3.72 (m, 2 H), 3.72 - 3.78 (m, 2 H), 3.78 - 3.85 (m, 3 H), 3.88 (dd, J=11.6, 2.0 Hz, 1 H), 3.94 - 4.03 (m, 1 H), 4.05 - 4.12 (m, 1 H), 4.13 - 4.22 (m, 3 H), 6.88-6.98 (m, 2 H), 7.16 (d, J=5.2 Hz, 2 H), 7.36 (d, J=8.4 Hz, 3 H), 7.40 - 7.48 (m, 3 H), 7.52 (s, 1 H), 7.74 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.84 (s, 1 H), 7.91 (br s, 1 H), 8.43 (d, J=5.2 Hz, 1 H).
단계3: 화합물 WX003-1의 합성
25℃에서, AA-3C-A(0.9g)를 용해한 메탄올(10mL) 및 물(2mL)에 수산화나트륨(353mg)을 가하고, 전체 혼합물을 60℃에서 18.5시간 동안 교반하고, 혼합물을 먼저 감압 농축하고 회전시켜 메탄올을 제거한 다음, 농축된 오일 상태의 물질을 2M의 희염산으로 pH=3으로 조절하고, 상기 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회(50mL×3) 추출하고, 합병한 유기상을 포화 식염수로 1회(50mL) 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 감압 농축하여 WX003-1을 얻었다. MS-ESI (m/z):496.2[M+1]+.
단계4: 화합물 WX003의 합성
25℃에서, WX003-1(95mg) 및 BB-1(50mg)을 용해한 피리딘(3mL)에 EDCI(74mg)를 가하고, 전체 혼합물을 60℃ 및 질소 가스 보호 하에 4시간 동안 교반하고, 반응 용액에 에틸 아세테이트 50mL를 가하여 감압 농축한 후 prep-TLC로 분리(SiO2, DCM:MeOH=12:1)하여 WX003을 얻었다. MS-ESI (m/z):738.6[M+1]；
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.94 (t, J=7.2 Hz, 3 H), 1.25 (t, J=7.2 Hz, 3 H), 1.33 - 1.46 (m, 2 H), 1.55 - 1.65 (m, 4 H), 2.59 (br s, 2 H), 2.69 (q, J=7.8 Hz, 2 H), 3.21 - 3.35 (m, 2 H), 3.37 - 3.53 (m, 2 H), 3.56 (t, J=6.6 Hz, 2 H), 3.61 - 3.78 (m, 4 H), 3.78 - 3.85 (m, 3 H), 3.85 - 3.91 (m, 1 H), 3.98 (br s, 1 H), 4.07 - 4.20 (m, 4 H), 6.89 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 6.98 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.18 (d, J=5.2 Hz, 1 H), 7.36 (m, 3 H), 7.40 - 7.49 (m, 3 H), 7.53 (s, 1 H), 7.74 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.81 - 7.89 (m, 2 H), 8.43 (d, J=5.2 Hz, 1 H).
실시예 3
Figure pct00109
합성경로:
Figure pct00110
Figure pct00111
단계1: 화합물 WX004-1의 합성
25℃에서, AA-3B-A(470mg)를 메탄올(10mL) 및 물(2mL)의 혼합 용액에 용해시킨 후, 수산화나트륨(114mg)을 가하고, 50℃에서 14시간 동안 교반하였다. 용액을 감압 농축하고, 희염산으로 용액을 pH=5 내지 6으로 조절하고, 에틸 아세테이트로 3회(20mL×3) 추출하고, 합병한 유기상을 포화 식염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 감압 농축하여 화합물 WX004-1을 얻었다. MS-ESI (m/z):480.2[M+1]+.
단계2: 화합물 WX004의 합성
25℃에서, WX004-1(92mg) 및 BB-1(50mg)을 용해한 피리딘(3mL)에 EDCI(74mg)를 가하고, 전체 혼합물을 60℃ 및 질소 가스 보호 하에 4시간 동안 교반하고, 반응 용액에 에틸 아세테이트 50mL를 가하고, 감압 농축한 후 prep-TLC로 분리(SiO2, DCM: MeOH=12:1)하여 WX004를 얻었다. MS-ESI (m/z):722.4(M+1)+;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3 H), 1.24 (t, J=7.6 Hz, 3 H), 1.34 - 1.47 (m, 2 H), 1.53 - 1.65 (m, 6 H), 1.85 - 2.03 (m, 2 H), 2.06 - 2.18 (m, 1 H), 2.60 (br s, 2 H), 2.63 - 2.73 (m, 2 H), 3.32 - 3.47 (m, 2 H), 3.56 (t, J=6.6 Hz, 2 H), 3.66 - 3.75 (m, 1 H), 3.75 - 3.84 (m, 3 H), 3.90 - 3.98 (m, 1 H), 4.04 - 4.11 (m, 1 H), 4.14 - 4.18 (m, 3 H), 4.19 - 4.28 (m, 1 H), 6.86 - 7.04 (m, 3 H), 7.16 (d, J=5.2 Hz, 1 H), 7.29 - 7.49 (m, 6 H), 7.53 (s, 1 H), 7.74 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.86 (s, 1 H), 7.94 (br s, 1 H), 8.43 (d, J=5.2 Hz, 1 H).
단계3: 화합물WX005-1의 합성
25℃에서, AA-3B-B(450mg)를 메탄올(10mL) 및 물(2mL)의 혼합 용액에 용해시킨 후, 수산화나트륨(109mg)을 가하고, 50℃에서 14시간 동안 교반하였다. 용액을 감압 농축하고, 희염산으로 용액을 pH=5 내지 6으로 조절하고, 에틸 아세테이트로 3회(20mL×3) 추출하고, 합병한 유기상을 포화 식염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 감압 농축하여 화합물 WX005-1을 얻었으며, 직접 다음 단계에 사용하였다. MS-ESI (m/z):480.2[M+1]+.
단계4: 화합물 WX005의 합성
25℃에서, WX005-1(92mg) 및 BB-1(50mg)을 용해한 피리딘(3mL)에 EDCI(74mg)를 가하고, 전체 혼합물을 60℃ 및 질소 가스 보호 하에 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 에틸 아세테이트 50mL를 가한 후, 감압 농축하고 prep-TLC로 분리(SiO2, DCM:MeOH=12:1)하여 화합물 WX005를 얻었다. MS-ESI (m/z):722.4[M+1]+;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3 H), 1.24 (t, J=7.4 Hz, 3 H), 1.34 - 1.47 (m, 2 H), 1.50 - 1.65 (m, 6 H), 1.85 - 2.04 (m, 2 H), 2.11 (br dd, J=7.4, 5.0 Hz, 1 H), 2.60 (br s, 2 H), 2.67 (q, J=7.6 Hz, 2 H), 3.30 - 3.48 (m, 2 H), 3.56 (t, J=6.6 Hz, 2 H), 3.70 (m, 1 H), 3.76 - 3.84 (m, 3 H), 3.89 - 3.98 (m, 3 H), 4.04 - 4.12 (m, 1 H), 4.13 - 4.22 (m, 3 H), 4.24 (br s, 1 H), 6.88 - 7.03 (m, 3 H), 7.16 (d, J=5.2 Hz, 1 H), 7.31 - 7.48 (m, 6 H), 7.53 (s, 1 H), 7.74 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 7.86 (s, 1 H), 7.93 (br s, 1 H), 8.43 (d, J=5.2 Hz, 1 H).
실시예 4
Figure pct00112
합성경로:
Figure pct00113
60℃에서, WX001-1(90mg)을 피리딘(3mL)에 용해시키고 BB-2(50mg) 및 EDCI(70mg)를 가하여 4시간 동안 반응시키고, 반응 용액을 농축하여 피리딘을 제거한 후 물(20mL)을 가하고, DCM/MeOH=20/1로 추출(20mL×2)하고, 유기상을 합병하고, 포화 식염수(20mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 여과하고, 농축하여, 잔여물을 pre.TLC(DCM/MeOH=15/1)로 정제한 후 SFC로 분리하여 화합물 WX006(머무름시간: 9.742min) 및 WX007(머무름시간: 11.790min)을 얻었다.
SFC분해 조건: 컬럼 유형: ChiralPak AD-3 150×4.6mm I.D., 3μm; 이동상: A: CO2 B:IPA (0.05% DEA); 구배: 40% B; 유속: 2.5mL/min; 컬럼 온도: 40℃; 컬럼 압력: 100 bar.
WX006 MS-ESI (m/z): 750.2(M+1)+
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.40 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.45-7.32 (m, 6H), 7.00 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.83 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.39 (d, J = 12.8Hz, 1H), 4.15 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 4.06-4.00 (m, 3H), 3.81 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.57-3.52 (m, 4H), 3.39 (t, J = 11.2 Hz, 2H), 3.16 (d, J = 6.8 Hz, 2H)，2.59-2.54 (m, 4H), 2.36 (s, 3H), 2.11-2.08 (m, 1H)，1.72-1.58 (m, 6H), 1.44-1.35 (m, 4H), 1.18 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 0.93 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
WX007 MS-ESI (m/z): 750.4(M+1)+
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.33 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.44-7.31 (m, 6H), 6.99 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.37 (d, J = 12.8Hz, 1H), 4.14 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 4.05-3.99 (m, 3H), 3.80 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.56-3.49 (m, 4H), 3.38 (t, J = 11.2 Hz, 2H), 3.15 (d, J = 6.8 Hz, 2H)，2.59-2.52 (m, 4H), 2.34 (s, 3H), 2.09-2.04 (m, 1H)，1.71-1.57 (m, 6H), 1.44-1.36 (m, 4H), 1.16 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 0.93 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 5
Figure pct00114
합성경로:
Figure pct00115
단계1: 화합물 WX008 및 WX009의 합성
60℃에서, WX004-1(70mg)을 피리딘(3mL)에 용해시키고 EDCI(56mg) 및 BB-2(48mg)를 가하여 4시간 동안 반응시킨 후, 반응 용액을 농축하여 피리딘을 제거한 다음 물(20mL)을 가하고, DCM/MeOH=20/1로 추출(20mL×2)하고, 유기상을 합병하고, 포화 식염수(20mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 여과하고, 농축하고, 잔여물을 pre.TLC(DCM/MeOH=15/1)로 정제한 후 SFC로 분해하여 화합물 WX008(머무름시간: 2.258min) 및 WX009(머무름시간: 3.404min)를 얻었다. SFC분리 조건: 컬럼 유형: ChiralPak AD-3 50×4.6mm I.D., 3μm; 이동상: A: CO2 B: 이소프로판올(0.05% DEA); 구배: 40% B; 유속: 4L/min; 컬럼 온도: 35℃; 컬럼 압력: 1500psi.
WX008 MS-ESI (m/z): 736.4(M+1)+
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.34 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.52 (s, 1H), 7.44-7.30 (m, 6H), 7.00 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.9 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.38 (d, J = 12.8Hz, 1H), 4.15 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 4.04-4.00 (m, 3H), 3.94 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.82-3.67 (m, 4H), 3.55 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.44 (d, J = 6.8 Hz, 2H)，2.58-2.53 (m, 4H), 2.37 (s, 3H), 2.14-2.07 (m, 1H)，2.03-1.89 (m, 6H), 1.44-1.35 (m, 4H), 1.17 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 0.93 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
WX009 MS-ESI (m/z): 736.4(M+1)+
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.34 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.44-7.31 (m, 6H), 7.00 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.92 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.39 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.26-4.20 (m, 1H), 4.15 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 4.04 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.94 (q, J = 7.6 Hz, 1H), 3.82-3.70 (m, 4H), 3.55 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.44-3.32 (m, 2H)，2.58-2.53 (m, 4H), 2.38 (s, 3H), 2.14-2.07 (m, 1H)，2.03-1.89 (m, 2H), 1.72-1.55 (m, 5H), 1.44-1.33 (m, 2H), 1.17 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 0.93 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
단계2: 화합물 WX010 및 WX011의 합성
60℃에서, WX005-1(70mg)을 피리딘(3mL)에 용해시키고 EDCI(56mg) 및 BB-2(48mg)를 가하여 1시간 동안 반응시키고, 농축하여 피리딘을 제거한 후 물(20mL)을 가하고, DCM/MeOH=20/1로 추출(20mL×2)하고, 유기상을 합병하고, 포화 식염수(20mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 여과하고, 농축하고, 잔여물을 pre.TLC(DCM/MeOH=15/1)로 정제한 후 SFC로 분해하여 화합물 WX010(머무름시간: 3.214min) 및 WX011(머무름시간: 5.999min)을 얻었다.
SFC분해 방법: 컬럼 유형: ChiralPak AD-3 50×4.6mm I.D., 3μm; 이동상: A: CO2 B: 이소프로판올(0.05% DEA); 구배: 40% B; 유속: 4L/min; 컬럼 온도: 35℃; 컬럼 압력: 1500psi.
WX010 MS-ESI (m/z): 736.4(M+1)+
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.34 (d, J = 5.2 Hz, 1H), , 7.77-7.73 (m, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.47-7.33 (m, 6H), 7.02-6.93 (m, 4H), 4.40 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.26-4.22 (m, 1H), 4.16 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 4.06 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 3.97-3.92 (m, 1H), 3.82-3.68 (m, 4H), 3.60-3.54 (m, 3H), 3.45-3.33 (m, 2H)，2.62-2.54 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 2.15-2.08 (m, 1H)，2.00-1.89 (m, 2H), 1.65-1.55 (m, 5H), 1.45-1.34 (m, 2H), 1.18 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 0.94 (t, J = 7.2 Hz, 3H)；
WX011 MS-ESI (m/z): 736.5(M+1)+
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.34 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.91 (brs, 1H), 7.77-7.73 (m, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.46-7.32 (m, 6H), 7.02-6.93 (m, 4H), 4.40 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.25-4.22 (m, 1H), 4.16 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 4.06 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.97-3.92 (m, 1H), 3.82-3.68 (m, 4H), 3.60-3.54 (m, 3H), 3.45-3.33 (m, 2H)，2.62-2.54 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 2.15-2.08 (m, 1H)，2.03-1.91 (m, 2H), 1.67-1.55 (m, 5H), 1.45-1.36 (m, 2H), 1.16 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 0.94 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 6
Figure pct00116
합성경로:
Figure pct00117
25℃에서, EDCI(70mg)를 BB-3(50mg) 및 WX001-1(90mg)의 피리딘(2mL)용액에 가하고, 60℃에서 2시간 동안 반응시키고, 반응 용액에 물(5mL)을 가하고, 에틸 아세테이트로 추출(5mL×3)하고, 유기상을 합병하고, 포화 식염수(10mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후, 유기상을 회전 증발시켜 농축하고, 조질의 생성물을 prep-TLC로 분리하고 정제(SiO2, DCM:MeOH=20:1)한 후 SFC로 분해하여 화합물 WX012(머무름시간: 7.475min) 및 WX013(머무름시간: 9.823min)을 얻었다.
SFC분해 방법: 컬럼 유형: (S,S)Whelk-01 100Х4.6mm I.D., 5μm； 이동상: A: CO2 B: (20% 아세토니트릴/80% 메탄올) (0.05% 디에틸아민); 구배: 50% B; 유속: 2.5L/min; 컬럼 온도: 40℃.
WX012：MS-ESI (m/z): 750.2(M+1)+
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.87 ppm (s, 1 H), 7.74 (d, J=8.80 Hz, 2 H), 7.69 (s, 1 H),7.54 (s, 1 H), 7.46 (d, J=8.40 Hz, 2 H), 7.45 - 7.41 (m, 1 H), 7.33 - 7.41 (m, 3 H), 7.05 - 6.96 (m, 3 H), 6.84 (d, J=8.80 Hz, 1 H), 4.15 (dd, J=9.16, 4.14 Hz, 3 H), 4.09 - 3.98 (m, 3 H), 3.84 - 3.71 (m, 2 H), 3.60 - 3.50 (m, 4 H), 3.40 (br t, J=11.00 Hz, 2 H), 3.17 (br d, J= 6.80 Hz, 2 H), 2.64 (dt, J=7.80 Hz, 4 H), 2.52 (s, 3 H), 2.10 (br s, 1 H), 1.73 (br s, 2 H), 1.63 - 1.57 (m, 4 H), 1.50 - 1.37 (m, 4 H), 1.23 (t, J=7.60 Hz, 3 H), 0.94 (t, J=7.20 Hz, 3 H)；
WX013：MS-ESI (m/z): 750.4(M+1)+
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.88 ppm (s, 1 H), 7.74 (d, J=8.5 Hz, 2 H), 7.70 (s, 1 H), 7.54 (s, 1 H), 7.49 - 7.45 (m, 2 H), 7.43 (m, 1 H), 7.39 (s, 1 H), 7.38 - 7.34 (m, 2 H), 7.03 (s, 1 H), 6.98 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 6.84 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 4.19 - 4.12 (m, 3 H), 4.08 - 3.98 (m, 3 H), 3.84 - 3.79 (m, 2 H), 3.58 - 3.51 (m, 4 H), 3.40 (m, 2 H), 3.17 (m, 2 H), 2.63 (m, 4 H), 2.51 (s, 3 H), 2.16 - 2.04 (m, 1 H), 1.74 - 1.68 (m, 4 H), 1.61 (m, 2 H), 1.49 - 1.36 (m, 4 H), 1.23 (t, J=7.8 Hz, 3 H), 0.94 (t, J=7.40 Hz, 3 H).
실시예 7
Figure pct00118
합성경로:
Figure pct00119
단계1: 화합물 WX014 및 WX015의 합성
25℃에서, EDCI(70mg)를 BB-3(50mg) 및 WX004-1(87mg)의 피리딘(2mL)용액에 가하고, 60℃에서 2시간 동안 반응시키고, 반응 용액에 물(5mL)을 가하고, 에틸 아세테이트로 추출(5mL×3)하고, 유기상을 합병하고, 포화 식염수(10mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후, 유기상을 회전 증발시켜 농축하고, 조질의 생성물을 prep-TLC로 분리하고 정제(SiO2, DCM:MeOH=20:1)한 후 키랄 분해하여 화합물 WX014(머무름시간: 7.236min) 및 WX015(머무름시간: 9.585min)를 얻었다.
SFC분해 방법: 컬럼 유형: (S,S)Whelk-01 100×4.6mm I.D., 5μm； 이동상: A: CO2 B: (20% 아세토니트릴/80% 메탄올) (0.05% 디에틸아민); 구배: 50% B; 유속: 2.5L/min; 컬럼 온도: 40℃; 컬럼 압력:100 bar.
WX014： MS-ESI (m/z): 736.3(M+1)+
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.98 ppm (s, 1 H), 7.76 - 7.71 (m, 3 H), 7.53 (s, 1 H), 7.47 - 7.32 (m, 6 H), 7.02 (s, 1 H), 7.00 - 6.90 (m, 3 H), 4.27 - 4.13 (m, 4 H), 4.07 - 3.91 (m, 2 H), 3.84 - 3.67 (m, 5 H), 3.60 - 3.52 (m, 3 H), 3.52 - 3.32 (m, 2 H), 2.66 - 2.56 (m, 3 H), 2.51 (s, 3 H), 2.15 - 2.07 (m, 1 H), 2.06 - 1.88 (m, 2 H), 1.66 - 1.55 (m, 5 H), 1.40 (m, 2 H), 1.22 (t, J=7.4 Hz, 3 H), 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3 H)；
WX015: MS-ESI (m/z):736.4(M+1)
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.94 ppm (br s, 1 H), 7.74 (m, 3 H), 7.53 (s, 1 H), 7.49 - 7.32 (m, 6 H), 7.07- 6.92 (m, 4 H), 4.24 (br s, 1 H), 4.20 - 4.12 (m, 3 H), 4.11 - 3.99 (m, 1 H), 3.99 - 3.86 (m, 1 H), 3.87 - 3.77 (m, 3 H), 3.76 - 3.67 (m, 1 H), 3.64 - 3.49 (m, 3 H), 3.48 - 3.33 (m, 2 H), 2.72 - 2.56 (m, 4 H), 2.56 - 2.48 (m, 3 H), 2.12 (br s, 1 H), 2.04 - 1.89 (m, 2 H), 1.62 (m, 5 H), 1.46 - 1.36 (m, 2 H), 1.22 (m, J=7.4 Hz ,3 H), 0.94 (m, J=7.4 Hz ,3 H).
단계2: 화합물 WX016 및 WX017의 합성
25℃에서, EDCI(70mg)를 BB-3(50mg) 및 WX005-1(87mg)의 피리딘(2mL)용액에 가하고, 60℃에서 2시간 동안 반응시키고, 반응 용액에 물(5mL)을 가하고, 에틸 아세테이트로 추출(5mL×3)하고, 유기상을 합병하고, 포화 식염수(10mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 유기상을 회전 증발시켜 농축하고, 조질의 생성물을 prep-TLC로 분리하고 정제(SiO2, DCM:MeOH=20:1)한 후 키랄 분해하여 화합물 WX016(머무름시간: 6.733min) 및 WX017(머무름시간: 8.815min)을 얻었다.
SFC분해 방법: 컬럼 유형: (S,S)Whelk-01 100×4.6mm I.D., 5μm； 이동상: A: CO2 B: (20% 아세토니트릴/80% 메탄올) (0.05% 디에틸아민); 구배: 50% B; 유속: 2.5L/min; 컬럼 온도: 40℃; 컬럼 압력:100 bar.
WX016: MS-ESI (m/z):736.3(M+1)
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.93 ppm (br s, 1 H), 7.78 - 7.69 (m, 3 H), 7.55 (s, 1 H), 7.48 - 7.33 (m, 6 H), 7.04 (s, 1 H), 7.00 - 6.92 (m, 3 H), 4.24 (br s, 1 H), 4.19 - 4.12 (m, 3 H), 4.11 - 4.02 (m, 1 H), 4.02 - 3.89 (m, 1 H), 3.84 - 3.68 (m, 4 H), 3.56 (m, 3 H), 3.52 - 3.33 (m, 2 H), 2.68 - 2.57 (m, 4 H), 2.53 (s, 3 H), 2.16 - 2.08 (m, 1 H), 2.05 - 1.88 (m, 2 H), 1.65 - 1.57 (m, 5 H), 1.40 (m, 2 H), 1.23 (t, J=7.4 Hz, 3 H), 0.94 (t, J=7.40 Hz, 3 H)；
WX017: MS-ESI (m/z):736.3(M+1)
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.00 ppm (s, 1 H)，7.77 - 7.70 (m, 3 H)，7.53 (s, 1 H)，7.47 - 7.32 (m, 6 H)，7.03 - 6.91 (m, 4 H)，4.28 - 4.19 (m, 1 H)，4.18 - 4.12 (m, 3 H)，4.08 - 3.99 (m, 1 H)，3.99 - 3.89 (m, 1 H)，3.84 - 3.67 (m, 4 H)，3.60 - 3.52 (m, 3 H)，3.46 - 3.32 (m, 2 H)，2.66 - 2.56 (m, 4 H)，2.51 (s, 3 H)，2.16 - 2.05 (m, 1 H)，2.04 - 1.88 (m, 2 H)，1.66 - 1.56 (m, 5 H)，1.40 (m, 2 H)，1.22 (t, J=7.4 Hz, 3 H)，0.94 (t, J=7.40 Hz, 3 H).
실시예 8
Figure pct00120
합성경로:
Figure pct00121
25℃에서, WX001-1(57mg) 및 BB-4(30mg)를 용해한 피리딘(3mL)에 EDCI(44mg)를 가하고, 전체 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 교반하고, 반응 용액에 에틸 아세테이트 50ml를 가한 후, 감압 농축하고 prep-TLC로 분리(SiO2, DCM:MeOH=12:1)하고 SFC로 분해하여 WX018(머무름시간: 9.606min) 및 WX019(머무름시간: 11.154min)를 얻었다.
SFC분리 방법: 컬럼 유형: ChiralPak AD-3 150×4.6mm I.D., 3μm; 이동상: A: CO2 B:IPA (0.05% DEA); 구배: 40% B; 유속: 2.5mL/min; 컬럼 온도: 40℃; 컬럼 압력: 100bar.
WX018： MS-ESI (m/z): 736.5(M+1)+
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3 H), 1.34 - 1.46 (m, 4 H), 1.59 - 1.66 (m, 4 H), 1.71 (br d, J=12.0 Hz, 2 H), 2.10 (m, 1 H), 2.21 (s, 3 H), 2.39 (s, 3 H), 2.55 - 2.66 (m, 2 H), 3.17 (br d, J=6.8 Hz, 2 H), 3.40 (br t, J=11.0 Hz, 2 H), 3.47 - 3.61 (m, 4 H), 3.78 - 3.88 (m, 2 H), 3.99 - 4.11 (m, 3 H), 4.16 (t, J=4.8 Hz, 2 H), 4.39 (d, J=12.8 Hz, 1 H), 6.85 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 6.90 - 7.02 (m, 3 H), 7.34 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 7.39 - 7.49 (m, 5 H), 7.53 (s, 1 H), 7.75 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 7.80 (s, 1 H), 8.30 (d, J=5.2 Hz, 1 H).
WX019： MS-ESI (m/z): 736.5(M+1)+
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3 H), 1.35 - 1.50 (m, 4 H), 1.59 - 1.66 (m, 4 H), 1.71 (br d, J=13.2 Hz, 2 H), 2.10 (br s, 1 H), 2.21 (s, 3 H), 2.39 (s, 3 H), 2.54 - 2.64 (m, 2 H), 3.17 (br d, J=6.4 Hz, 2 H), 3.40 (br t, J=11.0 Hz, 2 H), 3.48 - 3.61 (m, 4 H), 3.78 - 3.86 (m, 2 H), 3.98 - 4.10 (m, 3 H), 4.16 (t, J=4.8 Hz, 2 H), 4.39 (d, J=13.2 Hz, 1 H), 6.85 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 6.91 - 7.01 (m, 3 H), 7.34 (d, J=2.4 Hz, 1 H), 7.38 - 7.49 (m, 5 H), 7.53 (s, 1 H), 7.75 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.81 (s, 1 H), 8.30 (d, J=4.8 Hz, 1 H).
실시예 9
Figure pct00122
합성경로:
Figure pct00123
단계1: 화합물 WX020의 합성
25℃에서, WX004-1(55mg) 및 BB-4(30mg)를 용해한 피리딘(3mL)에 EDCI(44mg)를 가하고, 전체 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 교반하고, 반응 용액에 에틸 아세테이트 50ml를 가한 다음, 감압 농축하고 직접 prep-HPLC로 분리(알칼리성)하여 WX020을 얻었다. MS-ESI (m/z):722.5(M+1)+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3 H), 1.32 - 1.47 (m, 2 H), 1.55 - 1.66 (m, 6 H), 1.92 - 1.99 (m, 2 H), 2.05 - 2.17 (m, 1 H), 2.20 (s, 3 H), 2.41 (s, 3 H), 2.60 (br s, 2 H), 3.29 - 3.48 (m, 2 H), 3.56 (t, J=6.2 Hz, 2 H), 3.67 - 3.84 (m, 4 H), 3.94 (q, J=7.5 Hz, 1 H), 4.06 (d, J=12.8 Hz, 1 H), 4.16 (t, J=4.8 Hz, 2 H), 4.23 (m, 1 H), 4.39 (d, J=12.8 Hz, 1 H), 6.90 - 7.00 (m, 4 H), 7.33 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 7.37 - 7.49 (m, 5 H), 7.54 (s, 1 H), 7.76 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.87 (s, 1 H), 8.30 (d, J=5.2 Hz, 1 H).
단계2: 화합물WX021의 합성
25℃에서, WX005-1(55mg) 및 BB-4(30mg)를 용해한 피리딘(3mL)에 EDCI(44mg)를 가하고, 전체 혼합물을 60℃ 에서 4시간 동안 교반하고, 반응 용액에 에틸 아세테이트 50mL를 가한 후, 감압 농축하고 prep-HPLC로 분리(알칼리성)하여 WX021을 얻었다. MS-ESI (m/z):722.5(M+1)+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3 H), 1.40 (m, 2 H), 1.53 - 1.72 (m, 6 H), 1.88 - 2.02 (m, 2 H), 2.07 - 2.16 (m, 1 H), 2.19 (s, 3 H), 2.40 (s, 3 H), 2.53 - 2.64 (m, 2 H), 3.31 - 3.46 (m, 2 H), 3.56 (t, J=6.6 Hz, 2 H), 3.66 - 3.84 (m, 4 H), 3.90 - 3.98 (m, 1 H), 4.06 (d, J=13.2 Hz, 1 H), 4.12 - 4.19 (m, 2 H), 4.19 - 4.28 (m, 1 H), 4.38 (d, J=13.2 Hz, 1 H), 6.88 - 7.00 (m, 4 H), 7.32 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 7.36 - 7.48 (m, 5 H), 7.53 (s, 1 H), 7.75 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 7.91 (br s, 1 H), 8.30 (d, J=4.8 Hz, 1 H).
실시예 10
Figure pct00124
합성경로:
Figure pct00125
25℃에서, WX001-1(76mg) 및 BB-5(40mg)를 용해한 피리딘(3mL)에 EDCI(59mg)를 가하고, 전체 혼합물을 60℃ 및 질소 가스 보호 하에 4시간 동안 교반하고, 반응 용액에 에틸 아세테이트 50mL를 가한 후, 감압 농축하고 prep-TLC로 분리(SiO2, DCM:MeOH=12:1)하여 WX022를 얻었다. MS-ESI (m/z):736.5(M+1)+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3 H), 1.35 - 1.51 (m, 4 H), 1.55 - 1.65 (m, 4 H), 1.71 (br d, J=11.6 Hz, 2 H), 2.10 (br s, 1 H), 2.27 (s, 3 H), 2.50 (s, 3 H), 2.56 - 2.65 (m, 2 H), 3.17 (br d, J=7.2 Hz, 2 H), 3.40 (br t, J=11.2 Hz, 2 H), 3.51 - 3.59 (m, 4 H), 3.76 - 3.84 (m, 2 H), 3.97 - 4.06 (m, 2 H), 4.06 - 4.13 (m, 2 H), 4.13 - 4.19 (m, 2 H), 6.85 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 6.98 (d, J=8.8 Hz, 3 H), 7.33 - 7.49 (m, 6 H), 7.54 (s, 1 H), 7.69 - 7.77 (m, 3 H), 7.85 (s, 1 H).
실시예 11
Figure pct00126
합성경로:
Figure pct00127
Figure pct00128
단계1: 화합물 WX023의 합성
25℃에서, WX004-1(37mg) 및 BB-5(20mg)를 용해한 피리딘(3mL)에 EDCI(29mg)를 가하고, 전체 혼합물을 60℃ 및 질소 가스 보호 하에 3시간 동안 교반하고, 반응 용액에 에틸 아세테이트 50mL를 가한 후, 감압 농축하고 prep-TLC로 분리(SiO2, DCM:MeOH=12:1)하여 WX023을 얻었다. MS-ESI (m/z):722.5(M+1)+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3 H), 1.36 - 1.45 (m, 2 H), 1.60 - 1.67 (m, 4 H), 1.88 - 2.01 (m, 2 H), 2.05 - 2.16 (m, 1 H), 2.27 (s, 3 H), 2.52 (s, 3 H), 2.56 - 2.65 (m, 2 H), 3.33 - 3.47 (m, 2 H), 3.52 - 3.63 (m, 3 H), 3.67 - 3.84 (m, 5 H), 3.91 - 3.98 (m, 1 H), 4.09 (s, 2 H), 4.16 (t, J=4.89 Hz, 2 H), 4.20 - 4.30 (m, 1 H), 6.92 - 7.03 (m, 4 H), 7.34 - 7.43 (m, 4 H), 7.46 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 7.53 - 7.57 (m, 1 H), 7.69 - 7.78 (m, 3 H), 7.82 - 7.90 (m, 1 H).
단계2: 화합물 WX024의 합성
25℃에서, WX005-1(37mg) 및 BB-5(20mg)를 용해한 피리딘(3mL)에 EDCI(29mg)를 가하고, 전체 혼합물을 60℃ 및 질소 가스 보호 하에 4시간 동안 교반하고, 반응 용액에 에틸 아세테이트 50mL를 가한 후, 감압 농축하고 prep-TLC로 분리(SiO2, DCM:MeOH=12:1)하여 WX024를 얻었다. MS-ESI (m/z):722.5(M+1)+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3 H), 1.32 - 1.46 (m, 2 H), 1.55 - 1.60 (m, 3 H), 1.87 - 2.02 (m, 3 H), 1.90 - 2.00 (m, 2 H), 2.06 - 2.17 (m, 1 H), 2.25 (s, 3 H), 2.50 (s, 3 H), 2.61 (br s, 2 H), 3.32 - 3.47 (m, 2 H), 3.51 - 3.63 (m, 2 H), 3.67 - 3.84 (m, 4 H), 3.90 - 3.98 (m, 1 H), 4.09 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 4.12 - 4.18 (m, 2 H), 4.20 - 4.28 (m, 1 H), 6.90 - 7.01 (m, 4 H), 7.32 - 7.43 (m, 4 H), 7.45 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 7.54 (s, 1 H), 7.69 - 7.77 (m, 3 H), 7.88 (s, 1 H).
실시예 12
Figure pct00129
합성경로:
Figure pct00130
25℃에서, WX001-1(150mg) 및 BB-6(88mg)을 용해한 피리딘(3mL)에 EDCI(117mg)를 가하고, 60℃ 에서 3시간 동안 교반하고, 용액을 직접 농축한 후, prep-HPLC로 분리하였다. WX025를 얻었다. MS-ESI (m/z):764.6(M+1)+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ=8.42 ppm (d, J=5.2 Hz, 1 H), 7.83 (s, 1 H), 7.74 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.53 (s, 1 H), 7.38 - 7.49 (m, 5 H), 7.35 (d, J=2 Hz, 1 H), 6.95 - 7.04 (m, 3 H), 6.85 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 4.41 (d, J=13.2 Hz, 1 H), 4.16 (t, J=4.8 Hz, 2 H), 3.99 - 4.10 (m, 3 H), 3.78 - 3.84 (m, 2 H), 3.49 - 3.59 (m, 4 H), 3.40 (br t, J=10.8Hz, 2 H), 3.17 (br d, J=6.4 Hz, 2 H), 2.70 (q, J=7.6 Hz, 2 H), 2.51 - 2.59 (m, 2 H), 2.02 - 2.16 (m, 1 H), 1.70 (br d, J=12.4 Hz, 2 H), 1.56 - 1.65 (m, 6 H), 1.35 - 1.47 (m, 4H), 1.22 - 1.29 (m, 3H), 1.18 (t, J=7.6 Hz, 3 H), 0.94 (t, J=7.6 Hz,3H).
생물 시험 데이터:
실시예 1： CCR2/ CCR5 체외 실험
실험목적:
FLIPR Calcium assay에 의해 세포내 칼슘 신호 변화를 검출하고, 화합물의 IC50 값을 지표로 하여, CCR2 및 CCR5 수용체에 대한 화합물의 억제 효과를 평가하는 것이다.
실험재료:
1, 세포주: 세포를 접종하고 37℃, 5%CO2인큐베이터에서 밤새 온육하였다.
CCR2/CCR5 밀도: 1M(20k/well)
Figure pct00131
2, 시약: Fluo-4 Direct, (Invitrogen, Cat# F10471)
3, 실험기기:
폴리리신에 의하여 코팅된 384 셀 플레이트(Greiner #781946)
384 웰 화합물 플레이트(Greiner #781280)
FLIPR, 분자 기기
ECHO, Labcyte
4, 화합물:
화합물을 DMSO에 용해시켜 10mM 용액으로 제조하고, 화합물 용액을 질소 가스 상자에 넣었다.
Figure pct00132
작용제 참조 화합물：
Figure pct00133
실험 단계 및 방법:
FLIPR 측정 완충액에서 프로베네시드를 제조: 77mg 프로베네시드에 FLIPR 측정 완충액 1mL를 가하여, 250mM 용액으로 제조하였다. 매일 신선하게 제조하였다.
2X(8μM)Fluo-4 DirectTM 로딩 완충액(매 10mL당)
Fluo-4 DirectTM 크리스탈(F10471) 한 병을 해동하였다.
샘플병에 10mL FLIPR 측정 완충액을 가하였다.
매 10mL의 Fluo-Direct에 0.2mL의 프로베네시드를 가하였다. 최종 측정 농도는 2.5mM였다.
회전시키고, 5분 이상 방치하였다(빛을 차단한다).
매일 신선하게 제조하였다.
실험 단계:
a) 작용제 화합물의 제조:
MCP-1을 0.5μM(최종 100nM)에서 시작하여 FLIPR 측정 완충액 1:2에서 10포인트 희석하였다. RANTES를 0.5μM(최종 100nM)에서 시작하여 FLIPR 측정 완충액 1:3에서 10포인트 희석하였다. DRC 플레이트의 각 웰에 20uL의 연속으로 희석된 화합물 완충액을 가하였다.
b) 길항제 화합물의 제조: 길항제 참조 화합물
표준 화합물을 1mM에서 시작하여 DMSO 1:3에서 11포인트 희석하였다. 시험 화합물을 2mM에서 시작하여 DMSO 1:3에서 11포인트 희석하였다. Echo를 사용하여 250nL의 화합물 용액을 세포 플레이트에 옮겼다(Greiner＃781946).
c) 인큐베이터에서 세포 플레이트를 꺼낸 후, 피펫을 사용하여 20uL의 2X Fluo-4 Direct 비세척 로딩 완충액을 384웰 세포 배양 플레이트에 가볍게 분주하였다. 최종 세포 플레이트의 체적은 40μL였다.
d) 37℃ 5%CO2에서 50분, 실온에서 10분 동안 배양하였다.
e) 인큐베이터에서 세포 플레이트를 꺼낸 후, FLIPR에 넣었다. 복합 플레이트 및 팁 박스를 FLIPR에 넣었다.
f) DRC 플레이트의 경우:
1) FLIPRTETRA에서 프로그램을 실행하였다.
2) 형광 신호를 판독하였다.
3) 10μL의 화합물을 DRC 플레이트에서 세포 플레이트로 옮겼다.
4) 형광 신호를 판독하였다.
5) 판독값 90부터 최대 허용되는 "최대 내지 최소"의 값까지 계산하였다. FLIPR을 사용하여 각 세포주의 EC80 값을 계산하였다.
6) 작용제 참조 화합물의 5배 EC80 농도를 준비하였다.
g) 복합 플레이트의 경우(1-첨가):
1) FLIPRTETRA에서 프로그램을 실행하였다.
2) 10μL의 5배 EC80 농도의 작용제 참조 화합물을 복합 플레이트에서 세포 플레이트로 옮겼다.
3) 형광 신호를 판독하였다.
4) 판독값 90부터 최대 허용되는 "최대 내지 최소"의 값까지 계산하였다.
h) Prism으로 데이터를 분석하고, 화합물의 IC50 값을 계산하였다.
실험 결과는 표 1에 나타내는 바와 같다:
FLIPR 검출 IC50(nM) 테스트 결과
화합물 번호 CCR2 CCR5 화합물 번호 CCR2 CCR5
WX001 17.64 4.36 WX014 1.39 12.13
WX002 19.54 7.47 WX015 21.36 -
WX003 16.46 11.65 WX016 1.75 16.42
WX004 19.37 6.47 WX017 34.00 -
WX005 20.88 8.90 WX018 - 15.25
WX006 15.92 - WX019 - 3.90
WX007 1.96 5.74 WX020 - 5.61
WX008 15.18 - WX021 - 5.89
WX009 1.84 4.64 WX022 - 13.56
WX010 13.70 - WX023 - 9.71
WX011 1.15 3.79 WX024 - 11.28
WX012 1.50 8.40 WX025 2.26 4.26
WX013 19.93 -
"-"는 측정을 하지 않았음을 나타낸다.
결론: CCR2 및 CCR5 수용체에 대한 본 발명의 화합물의 길항 효과는 현저하였다.
실시예 2： 인간 간 마이크로솜 시토크롬 P450 동종효소(CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6 및 CYP3A4) 활성의 억제 효과.
CYP의 5종의 동종효소의 총 다섯 개의 특이성 프로브 기질인 페나세틴(Phenacetin, CYP1A2), 디클로페낙(Diclofenac, CYP2C9), (S)-메페니토인((S)-Mephenytoin, CYP2C19), 덱스트로메토르판(Dextromethorphan， CYP2D6), 미다졸람(Midazolam， CYP3A4)을 각각 인간 간 마이크로솜 및 시험 화합물과 함께 배양하고, 환원형 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 인산(NADPH)을 가하여 반응을 개시하였으며, 반응이 끝난 후 시료를 처리하고 액체 크로마토그래피 탠덤 질량 분석법(LC-MS/MS)을 사용하여 특이성 기질에 의해 생성된 5 종의 대사 산물이 아세트아미노펜(Acetaminophen), 4'-히드록시디클로페낙(4'-Hydroxydiclofenac), 4'-히드록시메페니토인(4'-Hydroxymephenytoin), 덱스트로판(Dextrorphan), 1'-히드록시미다졸람(1'-Hydroxymidazolam)에 대한 농도를 정량적으로 검출하여, 대응되는 반 억제 농도(IC50)를 계산하였다.
화합물 번호 IC50(μM)
CYP1A2 CYP2C9 CYP2C19 CYP2D6 CYP3A4-M
참조 화합물(Cenicriviroc) >50 >50 >50 >50 0.75
참조물 A >50 >50 >50 >50 0.786
WX007 >50 >50 >50 >50 >50
WX009 >50 >50 >50 >50 4.6
WX012 >50 22.6 10.1 >50 >50
실험 결론: WX007, WX009, WX012는 인간 간 마이크로솜 시토크롬 P450 동종효소(CYP1A2, CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6 및 CYP3A4)의 활성을 억제할 위험이 없는 반면, 참조 화합물 및 참조물 A는 CYP3A4에 대하여 비교적 강한 억제 효과를 나타냈다.
실시예 3： 마우스의 약동학적 비교 시험
본 연구에서는 수컷 C57BL/6 마우스를 시험동물로 선택하고, LC/MS/MS 방법을 사용하여 시험 화합물 WX009 및 참조 화합물을 각각 정맥 주사 및 경구 투여한 후 다양한 시점에서의 마우스의 혈장내 약물 농도를 정량적으로 측정하여, 마우스에서의 상기 두 개의 화합물의 약동학적 특성을 평가하였다.
시험 화합물의 투명한 용액을 미정맥을 통해 C57BL/6 마우스(밤새 금식, 7 내지 10주령)의 체내에 주사하고, 시험 화합물을 C57BL/6 마우스(밤새 금식, 7 내지 10주령)에 위내 투여하였다. 동물은 모두 약물을 투여한 후 0.0833, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8 및 24시간 뒤 각각 경정맥 또는 미정맥에서 약 30μL의 혈액을 채취하여 EDTA-K2를 가한 항응고제 튜브에 넣고, 4℃에서, 15분 동안 3000g로 원심 분리하여 혈장을 얻었다. LC-MS/MS 방법을 사용하여 혈장 농도를 측정하고, WinNonlinTM Version 6.3(Pharsight, Mountain View, CA) 약동학 소프트웨어를 사용하여 비구획 모델 선형 대수 사다리꼴 방법에 의해 관련 약동학적 파라미터를 계산하였다.
마우스에서의 시험 화합물 WX009 및 참조 화합물의 약동학적 파라미터
마우스의 약동학적 파라미터 정맥 주사(2mg/kg) 경구투여(10mg/kg)
혈장클리어런스(mL/min/kg) 반감기(h) 피크 도달 농도(nM) 피크 도달 시간(h) 약물 시간 곡선하 면적(0-inf, nM.h) 생체 이용률
참조 화합물(Cenicriviroc) 2.28 3.55 1533 1.0 6401 6.02
WX009 0.46 4.4 5076 2.0 37356 8%
결론: WX009의 혈장클리어런스 속도는 참조 화합물에 비하여 느리고, 경구 혈장 노출량(AUC0-inf)은 참조 화합물의 약 6배였다. 설치류 마우스에서 WX009는 참조 화합물보다 비교적 우수한 약동학적 특성을 나타낸다.

Claims (8)

  1. 식(I)으로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염：
    Figure pct00134

    상기 식에서,
    R1은 각각 독립적으로 할로겐, OH, NH2, CN, C1-3알킬기 및 C1-3알콕시기에서 선택되고, 상기 C1-3알킬기 및 C1-3알콕시기는 1, 2 또는 3개의 F에 의하여 임의로 치환되고,
    m은 0, 1 및 2에서 선택되고,
    고리A는 5 내지 6원 헤테로사이클로알킬기에서 선택되고,
    상기 헤테로사이클로알킬기는 1, 2 또는 3개의 독립적으로 -O-, -NH-, -S- 및 -N-에서 선택되는 헤테로원자 또는 헤테로원자단을 포함한다.
  2. 제1항에 있어서,
    R1은 각각 독립적으로 할로겐, OH, NH2, CN, C1-3알킬기 및 C1-3알콕시기에서 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  3. 제2항에 있어서,
    R1은 각각 독립적으로 메틸기, 에틸기 및 n-프로필기에서 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  4. 제1항에 있어서,
    고리A는
    Figure pct00135
    ,
    Figure pct00136
    및
    Figure pct00137
    에서 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  5. 제1항에 있어서,
    구조단위
    Figure pct00138
    는
    Figure pct00139
    ,
    Figure pct00140
    ,
    Figure pct00141
    ,
    Figure pct00142
    ,
    Figure pct00143
    및
    Figure pct00144
    에서 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  6. 하기 식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00145
    Figure pct00146
    Figure pct00147
    Figure pct00148
    Figure pct00149
    Figure pct00150
    Figure pct00151
    Figure pct00152
    Figure pct00153
    Figure pct00154
    Figure pct00155
    Figure pct00156
    .
  7. 제6항에 있어서,
    하기 식에서 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00157
    Figure pct00158
    Figure pct00159
    Figure pct00160
    Figure pct00161
    Figure pct00162
    Figure pct00163
    Figure pct00164
    Figure pct00165
    Figure pct00166
    Figure pct00167
    Figure pct00168
    Figure pct00169
    Figure pct00170
    Figure pct00171
    Figure pct00172
    Figure pct00173
    Figure pct00174
    Figure pct00175
    Figure pct00176
    Figure pct00177
    Figure pct00178
    .
  8. CCR2/CCR5 이중 수용체 길항제 관련 질환을 치료하기 위한 약물의 제조에 있어서의, 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도.
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