KR20230000530A - 녹용 추출물을 포함하는 키 성장 촉진용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 키 성장 촉진용 조성물에 대한 것으로서, 구체적으로, 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 키 성장 촉진용 조성물에 관한 것이다. 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)를 혼합함으로써 각각의 추출물이 단독으로 존재하는 경우 보다 인간 연골 및 조골 줄기세포 분화율이 우수하고, 성장호르몬(rhGH) 투여군에 비해 혈당 상승폭이 유의적으로 감소하여 혈당의 급격한 혈당 상승이 나오지 않는 안정성의 측면에서 효과가 있으며, 골밀도를 저하 시키지 않고, 동물실험에서 성장호르몬(rhGH) 투여군과 동등한 수준의 키 성장 결과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 키 성장 촉진용 조성물은 천연물이므로 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있어, 의약품 또는 식품으로 사용될 수 있다.
본 발명의 키 성장 촉진용 조성물은 천연물이므로 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있어, 의약품 또는 식품으로 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 키 성장 촉진용 조성물에 대한 것으로서, 구체적으로 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 키 성장 촉진용 조성물에 관한 것이다. 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)를 혼합함으로써 각각의 추출물이 단독으로 존재하는 경우 보다 인간 연골 및 조골 줄기세포 분화율이 우수하고, 성장호르몬(rhGH) 투여군에 비해 혈당 상승폭이 유의적으로 감소하여 혈당의 급격한 혈당 상승이 나오지 않는 안정성의 측면에서 효과가 있으며, 골밀도를 저하 시키지 않고, 동물실험에서 성장호르몬(rhGH) 투여군과 동등한 수준의 키 성장 결과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 키 성장 촉진용 조성물은 천연물이므로 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있어, 의약품 또는 식품으로 사용될 수 있다.
우리 사회는 최근 경제 성장으로 영양사태의 개선 및 식습관의 변화로 인해 소아와 아동, 청소년의 발육상태가 크게 개선되는 추세이다. 일반적으로 성장의 의미는 신장의 증가에 국한되는 경우가 많지만, 의학적으로는 형태학적 및 해부학적 크기와 기능이 증가하는 것으로, 골격과 근육이 커지고 강화되는 것을 수반하게 되는데 이와 같은 성장은 호르몬의 작용에 의하여 이루어지게 된다.
성장 촉진을 위한 방법으로는 성장호르몬 제제 투여, 일리자노프 수술 등의 방법들이 알려져 있으나 이러한 방법들은 부작용의 수반에 대한 우려가 매우 크며, 건강기능식품 복용 등의 방법은 충분한 효과를 제공하지 못한다는 단점을 갖는다.
즉, 성장호르몬의 투여는 인슐린 저항성을 증가시키고, 2형 당뇨의 위험성을 증가시키며, 혈당 상승과 2형 당뇨의 발생 가능성 등 여러 가지 부작용을 야기할 수 있다. 또한, 일리자노프 수술은 양측 하지의 길이가 비대칭인 경우 주로 사용되는 수술법이나, 정상적이지만, 키가 작은 사람에게 시술할 경우 정상보행을 하지 못하는 심각한 부작용이 발생할 수 있다.
최근 연구에서는 성장 호르몬 투여에 따른 부작용 및 외과적 수술에 의한 부작용을 피하면서, 안전하게 성장을 유도하는 방법으로서 천연물을 활용하는 방법이 주목받고 있다. 구체적으로 천연물을 자연스럽게 섭취함으로써 성장호르몬의 분비를 촉진시켜 궁극적으로 키 성장을 유도할 수 있는 방법이 모색되고 있으며, 이에 따라 천연물 탐색이 활발히 이루어지고 있다.
그러나, 상기와 같은 활발한 연구활동에도 불구하고, 키 성장에 실질적인 효과를 제공할 수 있는 천연물은 아직 보고되고 있지 않은 실정이다.
이와 같은 상황 하에 본 발명에서는 오래전부터 천연물로서 널리 사용되어져 온 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)를 이용한 키 성장 연구는 보고된 바 없다. 이에 본 발명자들은 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물의 효과에 대하여 연구하던 중 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 또는 복분자(Rubi Fructus) 단독 추출물과, 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물의 인간 연골 및 조골줄기세포 분화율을 평가하였고, 그 결과 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)에 녹용(Cervus Parvum Cornu)을 혼합함으로써 시너지적으로 우수한 세포 분화율을 나타내면서 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있음을 확인하였고, 또한, 성장호르몬(rhGH) 투여군에 비해 혈당 상승폭이 유의적으로 감소하여 혈당의 급격한 혈당 상승이 나오지 않는 안정성의 측면에서 효과를 확인하여, 의약품 또는 식품으로 사용될 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
Effects of growth hormone treatment on glucose metabolism in idiopathic short stature. Korean Journal of Pediatrics. Kwon et al., 2006
Incidence of diabetes mellitus and impaired glucose tolerance in children and adolescents receiving growth-hormone treatment. Lancet. Cutfiled et al., 2000
이에, 본 발명자들은 부작용이 많은 합성 약물, 성장호르몬을 대체할 만한 안전하면서 효능이 과학적으로 입증된 천연물 유래의 의약품 또는 식품을 개발하기 위하여 연구한 결과, 다양한 천연물 중에서 효모(Saccharomyces cerevisiae)와 복분자(Rubi Fructus)를 이용할 경우 다른 생약 천연 추출물(숙지황(Rehmanniae Radix Preparata), 녹용(Cervi Parvum Cornu), 두충(Eucommiae Cortex), 오가피(Acanthopanacis Cortex), 홍화씨(Carthami Semen), 백수오(Cynanchi Wilfordii Radix), 사인(Amomi Fructus), 당귀(Angelica Gigas Root))에 비해 세포 분화율이 우수하게 나타남을 확인하여, 효모(Saccharomyces cerevisiae)와 복분자(Rubi Fructus)를 키 성장용 조성물의 조성으로 선정하였다.
그러나, 효모(Saccharomyces cerevisiae)와 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 이용할 경우 효모(Saccharomyces cerevisiae), 복분자(Rubi Fructus)의 단독 추출물에 비해 인간 연골 및 조골줄기세포 분화율이 감소함을 확인하여, 효모(Saccharomyces cerevisiae), 복분자(Rubi Fructus)와 함께 사용할 천연물을 연구하였고, 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)에 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 혼합한 결과 효모(Saccharomyces cerevisiae), 복분자(Rubi Fructus) 또는 녹용(Cervi Parvum Cornu) 단독 추출물, 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물 보다 인간 연골 및 조골 줄기 세포의 분화율이 우수하여 키 성장을 촉진할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명은 키 성장 촉진용 조성물을 제공하는 것을 해결과제로 하며, 유효성분으로 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 포함하는 키 성장 촉진용 조성물을 제공하는 것을 구체적인 해결과제로 한다.
나아가, 본 발명은 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물이 약리학적으로 가장 우수한 상승 효과를 나타낼 수 있는 비율로 혼합된 혼합 추출물을 제공하는 것을 특별한 해결과제로 한다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명에서는 하기와 같은 수단을 개시한다.
일 양태에서, 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 키 성장 촉진용 조성물을 개시한다.
본 발명에 따른 조성물은 키 성장의 촉진 효과를 나타낸다. 보다 특별하게는, 인간 연골 및 조골 줄기세포 분화율이 우수하여 키 성장의 촉진 효과를 나타내어 키 성장 촉진용 의약품/식품으로서 유용하게 활용될 수 있다.
또한, 성장호르몬(rhGH) 투여군에 비해 혈당 상승폭이 유의적으로 감소하여 혈당의 급격한 상승이 나오지 않는 안전성의 측면에서 효과가 있으며, 성장호르몬(rhGH) 투여군에 비해 골밀도를 저하 시키지 않고, 동물실험에서 성장호르몬(rhGH) 투여군과 동등한 수준의 키 성장 결과를 나타낼 수 있다.
도 1은 녹용(Cervi Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae), 복분자(Rubi Fructus), 두충(Eucommiae Cortex), 오가피(Acanthopanacis Cortex), 홍화씨(Carthami Semen), 백수오(Cynanchi Wilfordii Radix), 사인(Amomi Fructus), 당귀(Angelicae Gigantis Radix) 및 숙지황(Rehmanniae Radix Preparata) 단독 추출물의 인간 연골 및 조골줄기세포 분화율의 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물의 농도 별 인간 연골 및 조골줄기세포 분화율의 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 효모(Saccharomyces cerevisiae), 복분자(Rubi Fructus)의 단일 및 복합 추출물과 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus) 복합 추출물의 인간 연골 및 조골줄기세포 분화율의 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 성장 호르몬(rhGH)과 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus) 복합 추출물을 투여한 흰쥐의 혈중 글루코오스 농도를 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물의 농도 별 인간 연골 및 조골줄기세포 분화율의 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 효모(Saccharomyces cerevisiae), 복분자(Rubi Fructus)의 단일 및 복합 추출물과 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus) 복합 추출물의 인간 연골 및 조골줄기세포 분화율의 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 성장 호르몬(rhGH)과 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus) 복합 추출물을 투여한 흰쥐의 혈중 글루코오스 농도를 측정한 결과를 나타낸 것이다.
이하 본 명세서에 대하여 더욱 상세히 설명한다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각에 대한 다른 설명 및 실시형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기에 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
본 명세서에서 사용되는 「포함하는」과 같은 표현은, 해당 표현이 포함되는 문구 또는 문장에서 특별히 다르게 언급되지 않는 한, 다른 실시예를 포함할 가능성을 내포하는 개방형 용어(open-ended terms)로 이해되어야 한다.
본 발명의 발명자들은, 부작용이 많은 합성 약물, 특히 성장호르몬의 경우 인슐린 저항성을 증가시키고, 2형 당뇨의 위험성을 증가시키며, 혈당 상승과 2형 당뇨의 발생 가능성 등 여러 가지 부작용을 야기할 수 있어, 주기적인 혈당 검사가 필요하기 때문에, 성장호르몬을 대체할 만한 안전하면서 효능이 과학적으로 입증된 천연물 유래의 의약품 또는 식품을 개발하기 위하여 연구한 결과, 다양한 천연물 중에서 효모(Saccharomyces cerevisiae)와 복분자(Rubi Fructus)의 경우 다른 생약 천연 추출물(숙지황(Rehmanniae Radix Preparata), 녹용(Cervi Parvum Cornu), 두충(Eucommiae Cortex), 오가피(Acanthopanacis Cortex), 홍화씨(Carthami Semen), 백수오(Cynanchi Wilfordii Radix), 사인(Amomi Fructus), 당귀(Angelicae Gigantis Radix))에 비해 인간 연골 및 조골 줄기 세포 분화율 평가에서 우수한 결과를 나타남을 확인하여, 효모(Saccharomyces cerevisiae)와 복분자(Rubi Fructus)를 키 성장용 조성물의 조성으로 선정하였다.
그러나, 본 발명의 발명자들은 효모(Saccharomyces cerevisiae)와 복분자(Rubi Fructus)를 조합한 혼합 추출물의 경우 효모(Saccharomyces cerevisiae) 단독 추출물 및 복분자(Rubi Fructus)의 단독 추출물에 비해 인간 연골 및 조골 줄기 세포 분화율이 감소함을 확인하여, 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)와 함께 사용할 또 다른 천연물을 연구하였고, 1차 평가에서 이용한 녹용(Cervus Parvum Cornu)을 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)와 혼합한 결과 효모(Saccharomyces cerevisiae), 복분자(Rubi Fructus) 또는 녹용(Cervus Parvum Cornu) 단독 추출물, 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물 보다 인간 연골 및 조골 줄기 세포의 분화율이 우수하여 키 성장을 촉진할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
키 성장 촉진용 조성물
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명에서는 하기와 같은 수단을 개시한다.
일 양태에서, 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 키 성장 촉진용 조성물을 개시한다.
본 발명의 키 성장 촉진용 조성물은 키 성장 효과가 있는 것으로 확인되었으므로 성장 장애의 예방 또는 개선 용도로 사용될 수 있다.
본 발명에 있어서, 용어 「성장 장애」 란, 정상 변이 저신장증 또는 질병에 의해 2차적으로 오는 저신장증을 의미한다. 상기 정상 변이 저신장증은 가족성 저신장, 체질적 성장 지연, 협의의 특발성 저신장일 수 있다. 또한, 질병에 의해 2차적으로 오는 저신장증은 1차성 성장 장애(내인성 장애) 또는 2차성 성장 장애(외인성 성장 장애)일 수 있으며, 상기 1차성 성장 장애로는 골연골 이형성증, 염색체 이상(다운 증후군 또는 터너 증후군)에 의한 저신장, 부당 경량아(자궁 내 성장 지연), 프레더-윌리 증후군에 의한 저신장, 러셀-실버 증후군에 의한 저신장, 누난 증후군에 의한 저신장이 있으며, 상기 2차성 성장 장애로는 만성 전신성 질환에 의한 저신장, 성장호르몬 결핍증에 의한 저신장, 갑상샘 저하증에 의한 저신장, 쿠싱증후군에 의한 저신장, 정신사회적 왜소증이 있다.
본 발명에 있어서, 용어 「녹용(Cervus Parvum Cornu)」이란, 어린 사슴의 뿔을 약용으로 사용하는 것을 의미한다. 녹용 (Cervus Parvum Cornu)은 일반적으로 수분을 5 내지 7%, 조단백질을 55 내지 62%, 조지방을 1 내지 2% 및 조회분을 27 내지 35% 함유하고 있으며, 무기물 조성으로는 칼슘, 인, 칼륨, 나트륨, 마그네슘, 철, 망간, 아연 등을 포함하고, 아미노산 조성에 있어서는 시스틴, 메티오닌 및 아스파르트산을 함유하는 것으로 알려져 있다.
본 발명에 있어서, 용어 「효모(Saccharomyces cerevisiae)」란, Saccharomyces cerevisiae를 건조한 건조물로서, 비발효성이고 45% 정도의 단백질을 함유하고 있으며, 비타민 비(B)군과 인의 함량이 높다.
본 발명에 있어서, 용어 「복분자(Rubi Fructus)」란, 복분자(Rubi Fructus) 꽃이 지면서 맺는 초록색의 열매를 말하는 것으로 이는 4월 내지 9월에 수득하는 것이 바람직하고, 보다 바람직하게는 5월 내지 8월, 가장 바람직하게는 5월 내지 7월에 수득한다. 상기 초록색의 열매라 함은 460 nm - 580 nm파장을 나타내는 색의 열매를 말하며, 보다 바람직하게는 490 nm - 570 nm 파장을 나타낸다.
본 발명에 있어서, 용어 「생약(crude drug)」이란, 용매, 초임계 또는 초음파 추출 처리되지 않은 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 일부 또는 전부를 의미한다.
본 발명에 있어서, 용어 「추출물」이란, 당업계에서 조추출물(crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로는 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함하며, 구체적으로 상기 본 발명의 추출처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나, 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.
즉, 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물은 상술한 용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제 과정을 추가적으로 적용하여 얻은 것을 포함한다. 예컨대, 상기 추출물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 통과시켜 얻은 분획, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 다른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물에 포함된다. 또한, 본 발명의 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
본 발명에 있어서, 용어 「녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물」이란, (i) 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)를 각각 추출하여 얻어진 녹용(Cervus Parvum Cornu) 추출물, 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물 및 복분자(Rubi Fructus) 추출물을 혼합하는 방식, 및 (ii) 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합물을 추출하는 방식으로 얻어지는 추출물을 모두 의미한다.
본 발명에 있어서, 상기 혼합 추출물 내의 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 배합 중량비(w/w)는 1 ~ 3 : 1 ~ 3 : 1 ~ 3 일 수 있으며, 바람직하게는 1 ~ 2 : 1 : 1 ~ 2 일 수 있고, 보다 바람직하게는 1 : 1 : 1 일 수 있으며, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 용어 「배합 중량비(w/w)」란, 단일 생약 추출물의 중량비 또는 추출 전 혼합물 내 단일 생약들의 중량비를 나타낸다. 예를 들어, 본 발명의 혼합 추출물이 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus) 각각의 단일 생약의 추출물을 각각 제조한 후 3종 생약의 추출물을 혼합하는 방식으로 제조되는 경우, 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus) 각각의 단일 생약을 용매로 추출한 후 여과, 농축한 건조물의 중량비를 나타낸다. 또한, 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합물을 추출하는 단일 추출공정을 통해 제조되는 경우, 상기 혼합물에 포함된 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus) 각각의 단일 생약들의 중량비를 나타낸다.
여기서, 생약들의 혼합비가 상기 범위를 벗어나면 약리학적 효과를 나타낼 수 있는 성분의 추출 효율이 떨어져 기대하는 악리학적 효과가 감소되는 문제가 발생한다.
본 발명에 있어서, 상기 혼합 추출물은 각각의 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)을 (a) 용매 추출법, (b) 초임계추출법 또는 (c) 초음파 추출법에 의해 추출된 것일 수 있으며, 바람직하게는 용매 추출법에 의해 추출된 것일 수 있고, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 용어 「용매 추출법」이란, 특정 물질인 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)에 포함된 추출 대상 물질을 액체 용매에 용해시킨 후, 추출 대상 물질이 용해된 용매를 분리하여 정제하는 방법을 의미한다.
본 발명에 있어서, 용어 「초임계 추출법」이란, 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)을 추출조에 주입시키고 초임계 상태의 조건에서 초임계 유체 단독, 또는 초임계 유체와 보조용매를 추출조에 통과시켜 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus) 내에 존재하는 특정물질을 추출하는 것을 의미한다. 상기 추출조에 유입되는 초임계 유체에 의해 상기 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)로부터 추출된 물질은 분리조에 포집된다. 추출 수율은 추출변수인 온도, 압력, 유량, 원료 입자의 크기, 추출시간, 수분함량에 의존한다. 추출이 끝난 후 분리조에 포집된 추출물질은 회수된다.
본 발명에 있어서, 용어 「초음파 추출법」이란, 용매를 이용하는 추출에 있어 20 kHz 이상의 높은 주파수의 초음파를 가하는 공법을 의미한다. 이 경우, 적정 수준의 초음파가 용매를 통과함에 따라 발생하는 공동화현상(Cavitation)으로 인하여 높은 에너지를 발생시켜 세포 벽 및 세포 내부 구조를 파열시킴으로써, 용매가 세포로 침투하게 되어 추출 효율이 증가된다.
구체적으로, 본 발명에 있어서, 용매 추출법에 의해 추출된 추출물은 당업계에 공지된 통상적인 추출용매를 이용하여 얻을 수 있다. 추출용매로는 극성 용매 또는 비극성 용매를 이용할 수 있다. 극성 용매로는 (a) 물, (b) C1-C4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예: 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 노말-프로판올, 이소-프로판올 및 노말-부탄올 등), (c) 아세트산, 또는 상기 극성 용매들의 혼합물을 포함한다. 비극성 용매로는 아세톤, 아세토나이트릴, 에틸아세테이트, 메틸아세테이트, 부틸아세테이트, 플루오로알칸, 헥산, 에테르, 클로로포름, 디클로로메탄 또는 상기 비극성 용매들의 혼합물을 포함한다. 바람직하게는, 본 발명의 추출물은 물, C1-C4의 저급 알코올 또는 이의 혼합물을 용매로 사용하여 수득한 것이고, 보다 바람직하게는 물 또는 에탄올로 사용하여 수득한 것일 수 있으며, 상기 에탄올은 순수 에탄올 용액뿐만 아니라 에탄올 수용액을 포함할 수 있으며, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 상기 C1-C4의 저급 알코올은 10 내지 70%(v/v)의 C1-C4의 저급 알코올 수용액일 수 있으며, 바람직하게는 20 내지 60%(v/v)의 C1-C4의 저급 알코올 수용액, 보다 바람직하게는 25 내지 55%(v/v) 의 C1-C4의 저급 알코올 수용액일 수 있고, 구체적으로는 50%(v/v) 에탄올 수용액 일 수 있으며, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 본 발명의 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus) 생약의 혼합 추출물 제조단계는 녹용(Cervus Parvum Cornu)을 상기 용매에서 선택된 1종 이상, 예컨대, 물, 또는 10 내지 70%(v/v), 바람직하게는 20 내지 60%(v/v), 보다 바람직하게는 약 25 내지 55%(v/v)의 에탄올 수용액으로 추출하여 녹용(Cervus Parvum Cornu) 추출물을 얻는 단계;
효모(Saccharomyces cerevisiae)를 상기 용매에서 선택된 1종 이상, 예컨대, 물, 또는 10 내지 70%(v/v), 바람직하게는 20 내지 60%(v/v), 보다 바람직하게는 약 25 내지 55%(v/v)의 에탄올 수용액으로 추출하여 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물을 얻는 단계;
복분자(Rubi Fructus)를 상기 용매에서 선택된 1종 이상, 예컨대, 물, 또는 10 내지 70%(v/v), 바람직하게는 20 내지 60%(v/v), 보다 바람직하게는 약 25 내지 55%(v/v)의 에탄올 수용액으로 추출하여 복분자(Rubi Fructus) 추출물을 얻는 단계; 및
추출단계에서 얻어진 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)을 배합 중량비(w/w) 기준으로 1 ~ 3 : 1 ~ 3 : 1 ~ 3의 비율, 바람직하게는 1 ~ 2 : 1 : 1 ~ 2, 보다 바람직하게는 1 : 1 : 1 로 혼합하는 단계를 포함할 수 있다.
보다 자세하게는, 생약(녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus) 각각 또는 녹용(Cervus Parvum Cornu)과 효모(Saccharomyces cerevisiae)와 복분자(Rubi Fructus) 혼합물)에 상기 용매를 가하고 3 내지 10 시간 환류 추출하는데, 여기서 용매의 사용량은 생약 원료 중량의 5 내지 20배가 적당하며, 온도는 70 내지 100℃인 것이 좋다. 추출 후 여과하여 여과액을 모으고, 다시 잔사에 다시 약 5 내지 20배 중량의 용매를 가하여 3 내지 10시간 재추출하고 여과하여 이전의 여액과 혼합함으로써 추출 효율을 높일 수 있다. 이와 같이 2차에 걸친 추출 및 각각의 추출 후 얻어진 여과액을 혼합함으로써 추출 효율을 높일 수 있으나, 본 발명의 추출물이 추출 회수에 한정되는 것은 아니다.
상기 생약 추출물 제조시 사용되는 용매의 양이 너무 적으면 교반이 어렵게 되고 추출물의 용해도가 낮아져 추출효율이 떨어지게 되고, 지나치게 많은 경우는 다음의 정제단계에서 사용되는 저급 알코올의 사용량이 많아져 경제적이지 못하여 취급상 문제가 발생할 수 있으므로, 용매의 사용량은 상기 범위로 하는 것이 좋다.
본 발명의 바람직한 예에서는 1차 추출 후 다시 재추출하는 방법을 채택할 수 있는데, 이는 생약 추출물을 대량 생산하는 경우 효과적으로 여과를 한다 하더라도 생약 자체의 수분 함량이 높기 때문에 손실이 발생하게 되어 1차 추출만으로는 추출효율이 떨어지므로 이를 방지하기 위함이다. 또한, 각 단계별 추출효율을 검증한 결과 2차 추출에 의해 전체 추출량의 80 내지 90% 정도가 추출되는 것으로 밝혀졌고, 3차 이상의 다단계 추출은 경제성이 없는 것으로 판단된다.
상기와 같이 1, 2차에 걸쳐 용매로 추출하여 얻은 추출액은 최종 여과단계를 거친 후 40 내지 70 ℃로 감압 농축하여 추출물 총량의 1/2 내지 1/10 중량으로 농축시킨 후 분무건조시킴으로써 분말상태의 생약 추출물로서 제조될 수 있다.
본 발명에 사용된 추출 방법은 통상적으로 사용되는 모든 방법일 수 있으며, 예컨대, 냉침, 열수추출, 초음파 추출, 초고압 추출 또는 환류 냉각 추출법일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 조성물 내의 유효성분으로서의 혼합 추출물의 함량은 사용 형태 및 목적, 환자 상태, 증상의 종류 및 경중 등에 의하여 적절하게 조절할 수 있으며, 고형분 중량 기준으로 10 내지 100 중량%, 바람직하게는 50 내지 70 중량%일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
식품 조성물
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 식품 조성물일 수 있고, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물은 키 성장 촉진 효과가 있는 것으로 확인되었으므로, 성장 장애의 예방 또는 개선 용도로 사용될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 생약 성분을 포함하고 있으므로 부작용 없이 키 성장을 촉진할 수 있다.
또한, 본 발명의 식품 조성물은 독성 및 부작용이 없으므로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있다.
이때 본 발명의 식품 조성물은 키 성장의 촉진 작용을 달성하기에 유효한 양으로 특별히 한정되는 것은 아니나, 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 100 중량%인 것이 바람직하다.
본 발명에 있어서, 상기 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 식품 조성물의 첨가물로 사용하는 경우 이를 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 개선 또는 건강 등의 각 사용 목적에 따라 적합하게 결정할 수 있다.
본 발명에 있어서, 식품 조성물은 유효성분으로서 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 뿐만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 키 성장 촉진용 식품 조성물이 드링크제와 음료류로 제조되는 경우에는 본 발명의 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 및 각종 식물 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.
식품 조성물의 제형은 산제, 과립제, 환, 정제, 캡슐제의 형태뿐만 아니라 일반 식품 또는 음료의 형태 어느 것이나 가능하다.
구체적으로, 상기 식품 조성물은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 일반 식품으로는 이에 한정되지 않지만 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지 콘비프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게티, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치즈 등), 식용식물 유지, 마가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등에 상기 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 첨가하여 제조할 수 있다.
일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 상기 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물은 원료 100 중량부에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가할 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 또한 본 발명은 천연물인 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 이용하는 점에서 안전성 면에서 문제가 없으므로 상기 범위 이상의 양으로도 사용할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물이 건강음료 조성물로 이용되는 경우, 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강음료 조성물 100 mL당 일반적으로 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g 일 수 있다.
상기 외에 본 발명에 따른 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제를 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 키 성장 촉진용 식품 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 제한되지 않으나 본 발명의 식품 조성물 100 중량부 대비 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명은 식품 조성물을 포함하는 건강기능식품 또는 건강보조식품을 제공한다. 본 발명에 있어서, 용어 「건강기능식품 또는 건강보조식품」이란, 건강기능식품에 관한 법률에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, 용어 「기능성」이라 함은, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미하며, 본 발명에 있어서, 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있다. 이와 같이 하여 얻어지는 본 발명의 건강기능식품 또는 건강보조식품은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 매우 유용하다. 이와 같은 건강기능식품 또는 건강보조식품에 있어서의 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물의 첨가량은, 대상인 건강기능식품의 종류에 따라 달라 일률적으로 규정할 수 없지만, 식품 본래의 맛을 손상시키지 않는 범위에서 첨가하면 되며, 대상 식품에 대하여 통상 0.01 내지 50 중량%, 바람직하기로는 0.1 내지 20 중량%의 범위이다. 한 구체예에서, 본 발명의 건강기능식품 또는 건강보조식품은 음료의 형태일 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 상기 「식품 첨가물」로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전처에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.
상기 「식품 첨가물 공전」에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼륨, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물, 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물, L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류들을 들 수 있다.
약학 조성물
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 약학 조성물일 수 있고, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 키 성장 촉진 효과가 있는 것으로 확인되었으므로, 성장 장애의 예방 또는 개선 용도로 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 유효 성분으로 함유하고, 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 및 멸균 주사용액의 형태로 제제화될 수 있다.
본 발명에 있어서, 용어 「약학적으로 허용 가능한」은, 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 위장 장애, 현기증 등과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 조성물을 말한다.
본 발명에 있어서, 용어 「약학적으로 허용 가능한 담체」는, 전형적으로 약학적 조성물의 액체 또는 비액체 기초를 포함한다. 만약 약학적 조성물이 액체 형태로 제공된다면, 담체는 전형적으로 피로겐 없는 물; 등장성 식염수 또는 버퍼 (수용성) 용액, 예를 들어 인산염, 구연산 등 버퍼 용액이다. 주사 버퍼는 특정한 기준 매질 (Reference media)에 고장성, 등장성 또는 저장성 기준일 수 있어, 즉 버퍼는 특정한 기준 매질에 높은, 같은 또는 낮은 염 함량을 가질 수 있으며, 바람직하게는, 삼투압 또는 다른 농도 효과에 의한 세포 손상을 유도하지 않는, 앞서 언급된 염의 상기 이러한 농도가 사용될 수 있다. 기준 매질은 혈액, 림프, 세포질 액상, 또는 다른 체액, 또는 예를 들어 일반적인 버퍼 또는 액체로써 「생체 외」 방법에 기준 매질로 사용될 수 있는 체액과 같은, 예를 들어 「생체 내」 방법에서 발생하는 액체이다. 이러한 일반적 버퍼 또는 액체는 통상의 기술자에게 알려져 있다.
상기 약학적으로 허용가능한 담체는 당업계에서 통상적으로 사용되는 것들, 예컨대 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 포함하나 이에 국한되지 않는다.
또한, 본 발명의 약학 조성물은 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제, 기타 약제학적으로 허용가능한 첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 액상제, 현탁제, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 환제 또는 엑스제의 형태로 제조될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구 투여 (예를 들어, 도포 또는 정맥 내, 피하, 복강 내 주사)할 수 있다.
본 발명에 있어서, 용어 「경구 투여」는 병리학적 증상을 호전하기 위한 약제를 입으로 주입하는 방법이며, 본 발명에 있어서, 용어 「비경구투여」는 입으로 투여하는 것을 제외한 피하, 근육내, 정맥, 튜브를 이용한 복강내로 투여하는 방법을 의미한다.
경구 투여를 위한 고형제제에는 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 연질캡슐제, 환제 등이 포함된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액상제, 유제, 시럽제, 에어로졸 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제로는 각각 통상의 방법에 따라 멸균된 수용액, 액상제, 비수성용제, 현탁제, 에멀젼, 점안제, 안연고제, 시럽, 좌제, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사제제의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 안연고제, 점안제, 파스타제 또는 카타플 라스마제의 약제학적 조성물을 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 국소 투여의 조성물은 임상적 처방에 따라 무수형 또는 수성형일 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학적으로 허용가능한 첨가제는 상기 약학적 조성물에 대해 0.1~99.9 중량부 포함될 수 있으며, 구체적으로는 0.1~50 중량부를 포함할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여시간, 투여경로, 배설속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물의 일반적인 투여량은 성인 기준으로 0.001-1000 mg/kg 범위 내이다. 또한 인체 내 투여량은 동물실험을 근거로 환산할 수 있다(Shin et al., J Korean Oriental Medicine 31(3):1-7, 2010).
이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 기술하는 실시예들에 한정되는 것으로 해석되지 않는다. 본 명세서의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
최적의 천연물 탐색
키 성장에 효과가 있는 천연물을 탐색하기 위해 녹용(Cervi Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae), 복분자(Rubi Fructus), 두충(Eucommiae Cortex), 오가피(Acanthopanacis Cortex), 홍화씨(Carthami Semen), 백수오(Cynanchi Wilfordii Radix), 사인(Amomi Fructus), 당귀(Angelicae Gigantis Radix) 및 숙지황(Rehmanniae Radix Preparata) 총 10종의 천연물을 1차적으로 선정하고, 10종의 천연물을 추출물로 제조한 후 세포 실험을 진행하여 키 성장에 효과가 있는 천연물의 추출물을 탐색하였다.
이하 10종의 천연물에 대한 추출물의 제조방법을 참고예로 설명한다.
참고예
참고예 1. 녹용(Cervi Parvum Cornu) 추출물의 제조
참고예 1-1. 열수 추출물의 제조
녹용(Cervi Parvum Cornu) 1kg에 물 10L를 가하여 98℃에서 8시간 추출하고 상온냉각시킨 후 마이크로필터로 여과하였다. 이렇게 얻어진 추출액은 55±5℃에서 감압농축하여 약 1kg의 농축물을 얻었고 분무건조하여 녹용(Cervi Parvum Cornu) 열수추출물을 제조하였다.
참고예 1-2. 에탄올 추출물의 제조
상기 참고예 1-1의 물을 30% 에탄올로 하고 83℃에서 추출하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-1과 동일한 방법으로 녹용(Cervi Parvum Cornu) 추출물을 제조하였다.
참고예 2. 효모(
Saccharomyces cerevisiae
) 추출물의 제조
참고예 2-1. 열수 추출물의 제조
상기 참고예 1-1의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 효모(Saccharomyces cerevisiae)로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-1과 동일한 방법으로 효모(Saccharomyces cerevisiae) 열수 추출물을 제조하였다.
참고예 2-2. 에탄올 추출물의 제조
상기 참고예 1-2의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 효모(Saccharomyces cerevisiae)로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-2와 동일한 방법으로 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물을 제조하였다.
참고예 3. 복분자(Rubi Fructus)
추출물의 제조
참고예 3-1. 열수 추출물의 제조
상기 참고예 1-1의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 복분자(Rubi Fructus)로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-1과 동일한 방법으로 복분자(Rubi Fructus) 열수 추출물을 제조하였다.
참고예 3-2. 에탄올 추출물의 제조
상기 참고예 1-2의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 복분자(Rubi Fructus)로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-2와 동일한 방법으로 복분자(Rubi Fructus) 추출물을 제조하였다.
참고예 4. 두충(Eucommiae Cortex) 추출물의 제조
참고예 4-1. 열수 추출물의 제조
상기 참고예 1-1의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 두충(Eucommiae Cortex)으로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-1과 동일한 방법으로 두충(Eucommiae Cortex) 열수 추출물을 제조하였다.
참고예 4-2. 에탄올 추출물의 제조
상기 참고예 1-2의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 두충(Eucommiae Cortex)으로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-2와 동일한 방법으로 두충(Eucommiae Cortex) 추출물을 제조하였다.
참고예 5. 오가피(Acanthopanacis Cortex) 추출물의 제조
참고예 5-1. 열수 추출물의 제조
상기 참고예 1-1의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 오가피(Acanthopanacis Cortex) 로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-1과 동일한 방법으로 오가피(Acanthopanacis Cortex) 열수 추출물을 제조하였다.
참고예 5-2. 에탄올 추출물의 제조
상기 참고예 1-2의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 오가피(Acanthopanacis Cortex)로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-2와 동일한 방법으로 오가피(Acanthopanacis Cortex) 추출물을 제조하였다.
참고예 6. 홍화씨(Carthami Semen) 추출물의 제조
참고예 6-1. 열수 추출물의 제조
상기 참고예 1-1의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 홍화씨(Carthami Semen)로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-1과 동일한 방법으로 홍화씨(Carthami Semen) 열수 추출물을 제조하였다.
참고예 6-2. 에탄올 추출물의 제조
상기 참고예 1-2의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 홍화씨(Carthami Semen)로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-2와 동일한 방법으로 홍화씨(Carthami Semen) 추출물을 제조하였다.
참고예 7. 백수오(Cynanchi Wilfordii Radix) 추출물의 제조
참고예 7-1. 열수 추출물의 제조
상기 참고예 1-1의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 백수오(Cynanchi Wilfordii Radix)로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-1과 동일한 방법으로 백수오(Cynanchi Wilfordii Radix) 열수 추출물을 제조하였다.
참고예 7-2. 에탄올 추출물의 제조
상기 참고예 1-2의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 백수오(Cynanchi Wilfordii Radix)로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-2와 동일한 방법으로 백수오(Cynanchi Wilfordii Radix) 추출물을 제조하였다.
참고예 8. 사인(Amomi Fructus) 추출물의 제조
참고예 8-1. 열수 추출물의 제조
상기 참고예 1-1의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 사인(Amomi Fructus)으로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-1과 동일한 방법으로 사인(Amomi Fructus) 열수 추출물을 제조하였다.
참고예 8-2. 에탄올 추출물의 제조
상기 참고예 1-2의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 사인(Amomi Fructus)으로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-2와 동일한 방법으로 사인(Amomi Fructus) 추출물을 제조하였다.
참고예 9. 당귀(Angelicae Gigantis Radix) 추출물의 제조
참고예 9-1. 열수 추출물의 제조
상기 참고예 1-1의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 당귀(Angelicae Gigantis Radix)로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-1과 동일한 방법으로 당귀(Angelicae Gigantis Radix) 열수 추출물을 제조하였다.
참고예 9-2. 에탄올 추출물의 제조
상기 참고예 1-2의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 당귀(Angelicae Gigantis Radix)로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-2와 동일한 방법으로 당귀(Angelicae Gigantis Radix) 추출물을 제조하였다.
참고예 10. 숙지황(Rehmanniae Radix Preparata) 추출물의 제조
참고예 10-1. 열수 추출물의 제조
상기 참고예 1-1의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 숙지황(Rehmanniae Radix Preparata)으로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-1과 동일한 방법으로 숙지황(Rehmanniae Radix Preparata) 열수 추출물을 제조하였다.
참고예 10-2. 에탄올 추출물의 제조
상기 참고예 1-2의 녹용(Cervi Parvum Cornu)을 숙지황(Rehmanniae Radix Preparata)으로 하는 것을 제외하고, 상기 참고예 1-2와 동일한 방법으로 숙지황(Rehmanniae Radix Preparata) 추출물을 제조하였다.
세포실험 방법
상기 10종 추출물이 연골 중간엽 줄기세포 분화에 미치는 영향을 확인하기 위하여, 인간배아줄기세포가 연골 중간엽 줄기세포로 분화하는 비율을 측정하였다. 10종 추출물은 디메틸설폭사이드(Dimethyl Sulfoxide; DMSO)에 녹여서 사용되었다. 인간배아줄기세포(WA09, WiCell(USA))는 GeltrexTM (Thermo Fisher, USA)에 배양된 후 소태아혈청 (Fetal Bovine Serum)을 10%(v/v) 첨가한 DMEM 배지 (Dulbecco's modified Eagle's medium)에 10일간, 이후 10종 추출물이 희석된 DMEM 배지에 10일간 배양되었다. 분화 효율을 측정하기 위해 무작위 세포분화 20일 후 세포를 확보하여 메쉬캡에 여과 후 FACS 튜브에 보관하였다. 연골 중간엽 줄기세포의 핵심 지표인 CD-73의 발현을 측정하기 위해 세포는 anti-CD73(R&D)로 염색되었고, FACS(Sony)를 이용해 양성반응을 보이는 세포 수를 계산하였다. 분화율은 DMSO 만을 처리한 대조군의 값을 100%로 하여 계산하였다.
결과
도 1은 상기 세포실험 방법을 통해 녹용(Cervi Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae), 복분자(Rubi Fructus), 두충(Eucommiae Cortex), 오가피(Acanthopanacis Cortex), 홍화씨(Carthami Semen), 백수오(Cynanchi Wilfordii Radix), 사인(Amomi Fructus), 당귀(Angelica Gigantis Radix) 및 숙지황(Rehmanniae Radix Preparata) 단독 추출물의 인간 연골 및 조골줄기세포 분화율의 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 1을 참조하면, 총 10종의 천연물 중 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물과 복분자(Rubi Fructus) 추출물에서 분화율이 유의적으로 증가한 것을 확인하여, 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물과 복분자(Rubi Fructus) 추출물을 1차적으로 선정하였다.
상기 1차 결과로부터 가장 효과가 우수하게 나온 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물 단독으로 이용한 키 성장 촉진용 조성물의 개발을 모색하고자, 2차 실험을 진행하였다.
구체적으로, 도 2는 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물의 농도 별 인간 연골 및 조골줄기세포 분화율의 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 2를 참조하면, 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물을 10 μg/ml 이용한 경우 대비 20 μg/ml을 이용하였을 때 우수한 결과가 나오지 않음을 확인할 수 있다.
따라서, 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물 만으로는 한계가 있으므로, 효모(Saccharomyces cerevisiae) 이외에 다른 천연 추출물을 복합할 필요가 있다.
추출물을 복합하기 위해, 1차 세포 실험에서 가장 효과가 우수한 복분자(Rubi Fructus) 추출물과 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물을 혼합함으로써 복분자(Rubi Fructus) 추출물과 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물을 단독 투여하였을 때 대비 시너지 효과가 발생하는지 확인하기 위해 3차 세포 실험을 수행하였다.
도 3을 참조하면, 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물의 경우 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물 대비 CD73의 발현 및 세포 분화가 좋지 않음을 확인하였다.
따라서, 복분자(Rubi Fructus) 추출물과 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물 각각은 CD73의 발현 및 세포 분화가 우수하여 키 성장을 촉진시킬 수 있는 추출물이라고 평가하였으나, 이를 혼합함으로써 시너지 효과가 발생하지 않음을 확인하였다.
따라서, 복분자(Rubi Fructus) 추출물과 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물에 추가적으로 다른 천연물의 추출물을 혼합하여 시너지 효과를 확인하고자 하였으며, 10종의 천연물 중에서, 키 성장에 효과가 있다고 전혀 알려지지 않은 녹용(Cervi Parvum Cornu) 추출물을 이용하였다.
구체적으로, 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus) 추출물을 배합 중량비(w/w) 기준으로 1 : 1 : 1의 비율로 혼합할 경우 시너지적 효과(상승 효과)가 발생함을 확인하여(도 3 참조), 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus) 추출물을 혼합하는 것이 키 성장 촉진용 조성물의 최적의 조합임을 도출하였다.
실시예
상기 실험을 통해 키 성장 촉진용 조성물의 최적의 조합을 도출한 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 하기 방법에 의해 제조하였다.
실시예 1. 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(
Saccharomyces cerevisiae
) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물의 제조
상기 참고예 1~3에 따라 제조된 녹용(Cervus Parvum Cornu) 추출물, 효모(Saccharomyces cerevisiae) 추출물 및 복분자(Rubi Fructus) 추출물을 배합 중량비(w/w) 기준으로 1 : 1 : 1의 비율로 혼합하여 혼합 추출물을 제조하였다.
실험예
실험 방법
1. 실험동물
50±10 g의 Sprague-Dawley 계 3주령 암컷 흰 쥐들을 다음과 같이 무작위로 5마리 씩 5개 그룹으로 나누었다. 동물은 온도(23±2 ℃)와 습도(55±10 %) 및 명암 주기 12시간 (07:00~19:00)이 조절되는 동물 사육실에서 사육하였다. 일주일간 사료와 물을 충분히 공급하면서 환경에 적응시킨 후 대조군(생리식염수), KDM 투여군(50, 100, 200 mg/kg) 그리고 재조합성장호르몬(rhGH) 투여군으로 분류하였다. KDM 투여군은 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물 50, 100, 200 mg/kg을 4주간 매일 12시간 간격으로 2회 경구 투여 하였으며, rhGH 투여군은 성장호르몬(rhGH)을 20 μg/kg 농도로 매일 1회 피하주사 하였다.
2. 혈당 상승폭 분석
녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물(KDM: 50 mg/kg, 100 mg/kg, 200 mg/kg)과, 성장호르몬(rhGH)의 투여 후 혈당을 시간 별로 측정하였고, 그 결과를 도 4에 나타내었다.
혈액 내 혈당 변화를 조사하기 위해, 4 주 경과 후 모든 동물을 24 시간 동안 절식 시킨 다음 2g/㎏ 의 글루코오스를 섭취시킨 후, 0, 15, 30, 45, 60, 90, 120 분 마다 Accu-Chek Performa system (Roche Diagnostics, Mannheim, Germany) 사용하여 혈당량을 측정하였다.
3. 경골길이 및 골밀도 분석
녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물(KDM: 50 mg/kg, 100 mg/kg, 200 mg/kg)과 성장호르몬(rhGH)의 투여 전과 투여 28일차에 micro-CT (Viva CT 80, Scanco Medical)를 사용하여 뼈 길이, 미네랄 농도 및 미세구조를 분석하였다.
4. 체중(Body weight) 및 몸 길이 분석
녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물(KDM: 50 mg/kg, 100 mg/kg, 200 mg/kg)과 성장호르몬(rhGH)의 투여 전과 투여 28일차에 micro-CT (Viva CT 80, Scanco Medical)를 사용하여 흰쥐의 성장 상태를 확인하고자 체중은 매일 측정하였고, 식이 섭취량과 코-항문(N-A) 및 코-꼬리(N-T) 길이는 매주 한번 측정하였다.
실험예 1. 혈당 상승폭 분석
도 4를 참조하면, 실시예 1에 따른 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물 50 mg/kg, 100 mg/kg, 200 mg/kg 투여군(KDM)은 성장 호르몬(rhGH) 투여군 대비 혈당의 급격한 상승이 나오지 않는 안전성의 측면에서 효과가 있음을 확인하였다.
따라서 급격한 혈당상승과 같은 부작용이 수반되는 성장 호르몬(rhGH)의 사용을 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물로 대체할 수 있다는 가능성을 확인하였다.
실험예 2. 경골 길이 및 골밀도 분석
표 1을 참조하면, 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물 50 mg/kg, 100 mg/kg, 200 mg/kg 투여군(KDM)은 경골 길이 성장에 있어서 성장 호르몬 투여군(rhGH)과 동등한 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
[표 1]
표 2를 참조하면, 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물 50 mg/kg, 100 mg/kg, 200 mg/kg 투여군(KDM)은 골밀도에 있어서 대조군 대비 골밀도의 감소가 없는 안전성의 측면에서 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
[표 2]
실험예 3. 체중(Body weight) 및 몸 길이 분석
표 3을 참조하면, 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물 50 mg/kg, 200 mg/kg 투여군(KDM)은 체중에 유의적인 영향을 주지 않으면서 몸길이 성장에 있어서 성장 호르몬 투여군(rhGH)과 동등하거나 더 우수한 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
[표 3]
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 관련 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자에게 있어 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구범위와 그의 등가물에 의하여 정의될 것이다.
Claims (6)
- 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae), 복분자(Rubi Fructus)의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 키 성장 촉진용 조성물.
- 제 1항에 있어서, 상기 혼합 추출물 내의 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)의 배합 중량비(w/w)는 1 ~ 3 : 1 ~ 3 : 1 ~ 3 인 것인 키 성장 촉진용 조성물.
- 제 1항에 있어서, 상기 혼합 추출물은 각각의 녹용(Cervus Parvum Cornu), 효모(Saccharomyces cerevisiae) 및 복분자(Rubi Fructus)를 물, C1-C4의 저급 알코올 또는 이의 혼합물을 용매로 하여 추출한 후 혼합한 추출물인 것을 특징으로 하는 키 성장 촉진용 조성물.
- 제 3항에 있어서, 상기 C1-C4의 저급 알코올은 10 내지 70%(v/v)의 C1-C4의 저급 알코올 수용액인 것을 특징으로 하는 키 성장 촉진용 조성물.
- 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 키 성장 촉진용 조성물. - 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은 약학 조성물인 것을 특징으로 하는 키 성장 촉진용 조성물.
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| KR1020210082654A KR102672925B1 (ko) | 2021-06-24 | 2021-06-24 | 녹용 추출물을 포함하는 키 성장 촉진용 조성물 |
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| Publication Number | Publication Date |
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| KR20230000530A true KR20230000530A (ko) | 2023-01-03 |
| KR102672925B1 KR102672925B1 (ko) | 2024-06-11 |
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| KR1020210082654A KR102672925B1 (ko) | 2021-06-24 | 2021-06-24 | 녹용 추출물을 포함하는 키 성장 촉진용 조성물 |
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|---|---|
| KR (1) | KR102672925B1 (ko) |
-
2021
- 2021-06-24 KR KR1020210082654A patent/KR102672925B1/ko active IP Right Grant
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Effects of growth hormone treatment on glucose metabolism in idiopathic short stature. Korean Journal of Pediatrics. Kwon et al., 2006 |
| Incidence of diabetes mellitus and impaired glucose tolerance in children and adolescents receiving growth-hormone treatment. Lancet. Cutfiled et al., 2000 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR102672925B1 (ko) | 2024-06-11 |
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