KR20220039838A - 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물, 방법 및 의학 조성물 - Google Patents

Abstract

식물 추출물의 혼합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물 및 방법이 개시되며, 상기 식물 추출물은 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물, 및 적어도 하나의 스키잔드라 추출물을 포함한다. 식물 추출물의 혼합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물 및 방법이 개시되며, 상기 식물 추출물은 페닐프로파노이드, 이량체 및 중합체를 포함하는 하나 이상의 리그난에 대해 농축된 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 하나 이상의 다당류 및 트리테르페노이드에 대해 농축된 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물, 및 하나 이상의 리그난 및 유기산에 대해 농축된 적어도 하나의 스키잔드라 추출물을 포함한다. 식물 추출물의 혼합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물 및 방법이 개시되며, 상기 식물 추출물은 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물, 및 적어도 하나의 포리아 추출물을 포함한다.

Description

간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물, 방법 및 의학 조성물 {COMPOSITIONS, METHODS, AND MEDICAL COMPOSITIONS FOR TREATMENT OF AND MAINTAINING THE HEALTH OF THE LIVER}

본 특허 협력 조약 출원은 2015년 7월 15일에 출원되고, "Compositions and Methods for Liver Health"를 표제로 하는 미국 가특허 출원 일련 번호 62192727호 및 2016년 7월 13일에 출원되고, "Compositions, Methods, and Medical Compositions for Treatment of and Maintaining the Health of the Liver"를 표제로 하는 미국 특허 출원 일련 번호 15208934호에 대한 우선권을 주장하며, 상기 특허 출원들은 공통으로 소유되고, 이들의 전체내용은 참조로서 본원에 포함된다.

주제 분야

본 발명의 주제 분야는 개시된 화합물의 입체이성질체, 약학적 또는 영양학적으로 허용되는 염, 토토머, 글리코시드 및 프로드러그를 포함하는 간 건강 관리에 유용한 화합물 및 조성물, 간 건강을 개선하고 유지시키는 조성물 및 관련 방법이다.

배경

간은 다양한 내인성 및 외인성 유해 물질의 대사 및 해독에 중추적인 역할을 하는 중요한 기관이다. 500개 초과의 화학 반응이 간에서 발생하는 것으로 생각된다. 다양한 생체이물(xenobiotic) 또는 외래 화학 물질이 간독성을 일으키는 것으로 공지되어 있는데, 그 중 유사한 작용 메커니즘으로 인간 유형의 간 독성을 모방하는 동물 모델을 개발하기 위해 아세트아미노펜(n-아세틸-p-아미노페놀 또는 APAP) 및 사염화탄소(CCl₄)가 일반적으로 이용된다. 혈청 또는 간 균질액으로부터의 다양한 바이오마커가 간의 건강 상태를 검토 및/또는 분석하는데 사용되어 왔으며, 여기서 정상 범위로부터 벗어난 변화는 기관에 대한 손상의 지표로 간주된다. 이들 바이오마커 중에서, 가장 빈번하게 사용되는 것은 ALT(알라닌 아미노트랜스페라제), AST(아스파테이트 아미노트랜스페라제), MDA(말론디알데하이드), GSH(글루타티온), SOD(초과산화물 디스뮤타제), c-Jun N-말단 키나제(JNK), GSH-Px(글루타티온 퍼옥시다제), CAT(카탈라제), 및 TNF-알파(종양 괴사 인자-알파)이다. AST, ALT, 전체 빌리루빈, 컨쥬게이션 및 비컨쥬게이션된 빌리루빈, 담즙산, 전체 단백질, 알부민, 글로불린, 및 알칼리성 포스파타제와 같은 간 패널이 간 건강에 대한 표준 스크린 방법으로 사용되어 왔다. ALT 및 AST는 간 손상에 비특이적인 것으로 인지되나, ALT는 간에 대한 상대적 특이성을 나타내었다. 예를 들어, AST는 간(9000:1) 대 근육(5200:1)의 원천 비(origin ratio)를 갖고; 이와 비교하여 ALT는 간(7600:1) 대 근육(750:1)의 원천 비를 갖는다. 전체 AST 및 ALT의 반감기는 각각 17 ± 5시간 및 47 ± 10시간이다. ALT는 실온에서 3일, 냉장고에서 3주, 전체 혈액에서 24시간 동안 안정적이나, ALT는 반복된 냉동 및 해동으로 신속히 악화된다. 혈청 ALT가 본 연구에서 식물 추출물의 효능 스크리닝에 이용되었다.

APAP는 치료 투여량에서 매우 안전하고 효과적인 진통제 및 해열제 약물이다. 이는 미국에서 급성 간부전의 가장 빈번한 원인이다. APAP-유발 간 독성은 임상적으로 관련이 있으며, 잘 연구되었고, 단일 용량으로 생체 내에서 신속히 유되될 수 있으며, 광선요법의 잠재적 간보호 효과를 평가하는데 있어서 통상적인 모델이 되었다.

APAP-유발 세포 사멸은 세포의 중요한 기능을 정지시키는 단일한 비극적 사건에 의해 야기되는 것이 아니라, 대신 이는 JNK 경로를 통해 증폭되는 반응성 대사물 형성 및 미토콘드리아 기능장애의 개시로 시작하여 궁극적으로는 비-기능성 미토콘드리아 및 대량의 DNA 분해를 초래하여 세포를 괴사시키는 일련의 사건을 유도한다.

APAP 독성은 매우 복잡한 경로의 작용 메커니즘으로 발생한다. 이전에 확립된 바와 같이, APAP-유발 세포 사멸의 세포내 신호전달 메커니즘은 P450 효소, 주로 Cyp 2e1 및 1a2(Zaher et al., 1998)에 의한 투여된 용량의 작은 분획의 n-아세틸-p-벤조퀴논 이민(NAPQI)으로의 대사에 의해 개시된다. 정상 조건하에서, 이러한 매우 활성의 대사물은 GSH에 의해 해독되어 광범위한 간 GSH 고갈을 발생시키며(Mitchell et al., 197), 과량시에 치명적이게 된다. 동시에, 증가하는 양의 NAPQI는 단백질 설프하이드릴기와 반응하여 세포 단백질의 공유적 부가물 생성을 야기시킨다(Jollow et al., 1973). 흥미롭게도, 세포 내의 전체 단백질 결합이 미토콘드리아의 부가물만큼 중요하지 않다는 것이 연구에서 밝혀졌다(Tirmenstein and Nelson, 1989; Qiu et al., 2001). 미토콘드리아 단백질 결합은 미토콘드리아 산화 스트레스를 촉발시키며(Jaeschke, 1990), 이는 아폽토시스 신호-조절 키나제 1(Nakagawa et al., 2008) 및 c-Jun N-말단 키나제(JNK)(Hanawa et al., 2008)의 활성화 및 미토콘드리아 JNK 전위(Saito et al., 2010a)에 의한 미토콘드리아 산화 스트레스의 증폭 및 퍼옥시니트라이트 형성을 야기시킨다. 광범위한 산화 스트레스는 최종적으로 막 전위의 붕괴(Kon et al., 2004; Masubuchi et al., 2005; Ramachandran et al., 2011a; Loguidice and Boelsterli, 2011)와 함께 미토콘드리아에서의 막 투과성 전이(MPT) 포어의 개방 및 이후 미토콘드리아로부터의 막간 단백질, 예를 들어, 엔도뉴클레아제 G 및 아폽토시스 유도 인자(AIF)의 방출(Kon et al., 2004; Bajt et al., 2008)을 최종적으로 촉발시킨다. 엔도뉴클레아제 G 및 AIF 둘 모두는 핵으로 전위되어, DNA 단편화(Cover et al., 2005; Bajt et al., 2006, 2011) 및 궁극적으로 세포 사멸을 발생시킨다. 미토콘드리아 막 전위의 붕괴와 ATP 고갈 및 핵 분해가 세포 괴사를 발생시키는 주요 사건이다. 그러므로, 간 보호를 위한 치료적 개입을 계획하는 경우 이들 메커니즘을 차단할 수 있는 다수의 간섭 지점이 있다.

모델의 병리학적 과정의 연대를 아는 것은 치료적 개입에 대한 지침을 제공한다. 산화 스트레스 및 무균 염증이 APAP 독성에서 유의한 역할을 하는 반면, 상기 모델의 병태생리학은 0 내지 2시간 사이의 대사 활성화, 처음 30분 이내의 GSH의 고갈, 2 내지 12시간 사이의 세포 사멸의 세포내 메커니즘, 6 내지 24시간의 시간대의 염증 반응, 및 APAP 독성 후 24 내지 72시간의 시간대의 재생을 포함하는 일련의 사건을 특징으로 한다(Jaeschke et al., 2012a).

언급된 바와 같이, APAP 과량은 세포 사멸을 발생시키는 단백질 부가물 형성(Davern et al., 2006; James et al., 2009), 미토콘드리아 손상 및 핵 DNA 단편화(McGill et al., 2012a)를 특징으로 하는 인간에서의 심각한 간 독성을 야기시킬 수 있다. 따라서, 간 보호를 위한 식물 추출물을 시험하는 경우 유사한 병태생리학적 특징을 공유할 수 있는 동물 모델을 이용하는 것이 바람직하다. 따라서, 생체내 실험을 위해, 마우스가 바람직한 모델인데, 이는 손상이 메커니즘 및 용량-의존성 둘 모두에서 인간 병태생리학과 가장 밀접하게 유사하기 때문이다. 사실, 일부에서는 마우스와 인간 사이의 APAP 간독성에서의 가장 유의한 차이가 ALT 피크가 6 내지 12시간인 마우스에 비해 노출 24 내지 48시간 후에 ALT 피크를 나타내는 인간에서의 더욱 지연된 독성임을 암시한다(Larson, 2007). 이러한 차이는 두 종 사이의 흡수에서의 차이로 인한 것으로 부분적으로 설명될 수 있다. 대조적으로, 천연 생성물 시험에서 대중적이나 래트는 불량한 모델인데, 이는 대부분의 래트 계통이 APAP 독성에 크게 무감각하기 때문이다(Mitchell et al., 1973; McGill et al., 2012b). 1 g/kg 이상의 높은 용량에서도, APAP는 대부분 관련 간 손상을 야기시키지 않는다(Jaeschke et al., 2013). 그리고, GSH 고갈 및 단백질 부가물이 측정될 수 있으나, 마우스에 비해 래트 간 미토콘드리아의 낮은 부가물은 충분한 미토콘드리아 기능이상 및 괴사 세포 사멸을 발생시키는 이후의 증폭 사건을 개시시키에 불충분한 것으로 보인다(McGill et al., 2012b). 두 종 사이의 이들 근본적인 차이는 생약제의 평가 동안 반영되었다. 예를 들어, 래트 연구에서, 3 g/kg의 APAP 용량은 기준선에 비해 약 3배의 혈장 ALT 수준의 증가를 발생시켰고, 생약제는 이러한 약간의 간 손상을 33%만큼 감쇠시켰다(Ajith et al., 2007). 이러한 래트 모델에서 임의의 조직학적 변화는 최소였고, 검출하기 어려웠다. 다른 한편으로, 마우스 연구에서, ALT 증가는 300 mg/kg APAP 용량 후에 기준선의 60배 초과였고, 생약제에 의한 감소는 75%였다(Wan et al., 2012). APAP 독성에 의해 야기된 조직학적 변화 및 약물의 보호 효과는 용이하게 관찰되었다.

제한된 사용을 갖는 할로겐화된 알칸 산업 화학물질인 CCl₄는 광범위한 실험 동물에서 급성 독성 간 손상을 유도하는데 널리 사용되는 널리 공지된 간독소이다. 인간은 작업 환경 및 오염된 식수와 같은 환경 오염으로부터 CCl₄에 노출되어 왔다. 그럼에도 불구하고, 상기 화학물질은 지방 변성, 섬유증, 간세포 사망 및 발암성과 같은 간독성 효과의 작용 메커니즘을 설명하기 위한 모델 화합물로서 오늘날에도 중요한 서비스를 지속적으로 제공한다(Slater 1981; Renner H. 1985; Reynolds 1963). 이는 주로 자유 라디칼 및 지질 과산화의 형성과 관련된 고전적인 화학-유도 간 독성 동물 모델 중 하나로 간주된다.

APAP와 마찬가지로, CCl₄ 독성은 주로 (CYP) 2E1, CYP2B1 또는 CYP2B2의 시토크롬 P450s에 의해 개시되어(Nelson and Harrison, 1987), 반응성 대사 산물인 트리클로로메틸 자유 라디칼(CCl₃-)을 생성시키며, 이는 지질 과산화를 개시시킬 수 있고, 궁극적으로는 반응성 산소종(ROS)의 과잉 생산 및 간세포 손상을 발생시킨다(Poyer et al., 1980; Albano et al., 1982). 상기 과정에서, 이들 라디칼은 세포 분자(핵산, 단백질, 및 지질)에 결합하여, 지질 대사와 같은 중요한 세포 과정을 손상시키고, 지방 변성(지방증)의 잠재적 결과 및 이들 거대분자에 대한 직접 손상을 발생시킨다(Weddle et al., 1976). 이들 라디칼은 또한 산소와 반응하여 고도로 반응성 종인 트리클로로메틸퍼옥시 라디칼 CCl₃OO-를 형성시킬 수 있다. 일단 생성되면, 이는 다중불포화 지방산, 특히 인지질과 관련된 지방산을 공격하고 파괴하는 지질 과산화의 연쇄 반응을 개시시킨다. 이는 미토콘드리아, 세포질그물, 및 형질막의 투과성에 영향을 미쳐, 세포 칼슘 격리 및 항상성을 손실시키고, 이는 이후의 세포 손상에 크게 기여할 수 있다. 이와 관련하여, CCl₄ 독성의 메커니즘을 연구할 뿐만 아니라 지질 과산화의 연쇄 반응을 파괴하여 CCl₄-유발 손상으로부터 간 세포를 보호하기 위해 항산화제 및 라디칼 제거제가 사용되어 왔다(Cheeseman et al., 1987). 분자 수준에서, CCl₄는 세포를 주로 파괴 또는 섬유화로 유도하는 것으로 보이는 과정인 세포에서의 TNF-α(Czaja et al., 1995), 산화 질소(NO)(Chamulitrat et al., 1994, 1995), 및 전환 성장 인자(TGF)(Luckey et al., 2001)를 활성화시킨다. 이들은 항염증 활성을 갖는 식물 추출물이 간 보호에서 잠재적으로 응용될 수 있음을 암시한다. 많은 용량의 CCl₄의 급성 투여는 심각한 괴사를 야기시키나, 간 섬유증을 유도하기 위해 적은 용량의 만성 투여가 빈번히 사용된다.

산화 스트레스는 다양한 내인성 항산화 방어 네트워크와의 상호작용을 통해 유해한 영향을 방해하거나 중화시키는 신체의 고유한 능력과 자유 라디칼의 생성 사이의 불균형이다. 신체 항산화 방어 시스템에 의한 적절한 적응이 결핍된 경우, 반응성 산소종 축적은 스트레스 민감성 세포내 신호전달 경로의 활성화를 초래할 것이며, 이는 차례로 세포 손상을 촉진하여 괴사를 야기시킨다. 산화 스트레스의 손상은 시스템으로서 전신에 영향을 미치지만, 알콜과 같은 유해한 독소를 제거하고 대사시키기 위해 일차적 해독이 발생하는 간과 같은 주요 기관이 수반되는 경우 상기 영향은 더욱 해로워진다. 결과로서, 간은 알콜 및 이의 일차 대사물질인 아세트알데하이드 둘 모두가 반응성 산소종(ROS) 및 하이드록실 라디칼(OH)을 생성하여 간 항산화 방어 시스템을 변경시킴에 따라 알콜-유발 손상에 민감하다. 지방간, 간염, 섬유증, 및 간경화와 같은 가장 흔한 병리학적 질환은 알콜의 반복적 노출의 결과로서 알콜-관련 간 장애에서 관찰된다. 세포 지질, 단백질, 및 DNA 산화와 관련된 이들 결과는 다수의 실험 동물에서 입증되었다(Wu and Cederbaum, 2003). 여기에서, 본 발명자는 APAP와 같은 실질적인 임상적 관련성을 갖는 가장 빈번히 사용되는 동물 모델, 및 고전적인 CCl₄-유발 간독성 모델을 이용하여 확인된 결과를 이용하였다. 간독성을 유도하는데 사용되는 화학 제제와 상관 없이, APAP 및 CCl₄ 모델 둘 모두는 단백질 산화, 지질 과산화 및 DNA 손상을 유발하는 과량의 중간 대사물질에 의해 생성되는 반응성 산소종에 의해 유도된 산화 스트레스에서 중요한 단계를 공유한다.

이를 위해, 간을 치료하고, 간의 건강을 유지시키도록 고안된 조성물, 화합물, 의학 조성물 및 관련 방법을 개발하고, 생산하고, 이용하는 것이 바람직할 것이다. 이상적인 화합물, 의학 조성물 및 조성물은 (1) 포유동물에서 간세포의 손상을 치료하거나 예방하고; (2) 간 건강을 촉진시키고; (3) 포유동물에서 해독 및 항산화 간 효소를 보존시키고; (4) 포유동물에서 간 해독 능력을 증가시키고; (5) 포유동물에서 간 질환을 치료하거나 예방하고; (6) 포유동물에서 간의 염증을 변형시키고; (7) 간 재생 기능을 개선하는 것 중 어느 하나를 포함하는 치료를 달성하기에 충분할 것이다. 이상적인 화합물 및 조성물은 적어도 하나의 식물 추출물로부터 유래되거나, 이를 포함할 수 있으며, 상기 식물 추출물은 농축되거나 농축되지 않을 수 있다. 상기 개발의 일환으로, 고려되는 화합물 및 조성물을 시험하기 위해 빈번하고 허용 가능한 모델을 이용하는 것이 이상적일 것이다. 간 기능저하 메커니즘 내의 포인트들을 차단하고, 이들 결과를 연구함으로써 간 건강을 위한 치료적 개입을 확실하게 고안하는 것이 또한 바람직할 것이다.

주제의 개요

식물 추출물의 혼합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물 및 방법이 개시되며, 상기 식물 추출물은 적어도 하나의 미리스티카(Myristica) 추출물, 적어도 하나의 아스트라갈루스(Astragalus) 추출물, 및 적어도 하나의 스키잔드라(Schizandra) 추출물을 포함한다.

식물 추출물의 혼합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물 및 방법이 개시되며, 상기 식물 추출물은 페닐프로파노이드, 이량체 및 중합체를 포함하는 하나 이상의 리그난에 대해 농축된 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 하나 이상의 다당류 및 트리테르페노이드에 대해 농축된 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물, 및 하나 이상의 리그난 및 유기산에 대해 농축된 적어도 하나의 스키잔드라 추출물을 포함한다.

식물 추출물의 혼합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물 및 방법이 개시되며, 상기 식물 추출물은 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물, 및 적어도 하나의 포리아(Poria) 추출물을 포함한다.

식물 추출물의 혼합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물 및 방법이 개시되며, 상기 식물 추출물은 페닐프로파노이드, 이량체 및 중합체를 포함하는 하나 이상의 리그난에 대해 농축된 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 하나 이상의 다당류 및 트리테르페노이드에 대해 농축된 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물, 및 하나 이상의 다당류 및 트리테르페노이드에 대해 농축된 적어도 하나의 포리아 추출물을 포함한다.

포유동물의 간 기능을 유지시키거나, 간세포 손상을 최소화하거나, 건강한 간을 촉진하거나, 간 항산화 온전성을 보호하거나, 독소를 중화시키거나, 간 건강에 영향을 미치는 자유 라디칼의 작용을 감소시키거나, 반응성 산소종을 제거하거나, 산화 스트레스를 감소시키거나, 독성 대사의 형성을 예방하거나, 간 해독 능력 및/또는 기능을 개선하거나, 간을 청소하거나, 간 구조를 회복시키거나, 독소로부터 간세포를 간 보호하거나, 간의 혈류 및 순환을 돕거나, 간 기능을 지원하거나, 간을 강화시키고 진정시키거나, 간을 안정시키고 강화하거나, 간 동통을 경감시키거나, 유해한 화학물질 및 유기체를 제거하거나, 간의 대사 과정을 지원하거나, 간의 불편함을 경감시키거나, 지방간을 경감시키거나, 간 해독 능력을 개선하거나, 간 효소를 낮추거나, 천연 산화제를 제공하거나, SOD를 증가시키거나, GSH를 증가시키거나, 간세포 과산화를 감소시키거나, 지방산 축적을 감소시키거나, 건강한 항염증 과정을 유지시키거나, 간 면역 기능을 개선하거나, 간세포 재생을 촉진하거나, 간 재생 기능을 개선하거나, 담즙 방출을 자극하거나, 건강한 담즙 흐름을 촉진시키거나, 알콜 숙취 및 과용의 화학물질, 약물 및 처방약과 관련된 증상을 예방하고, 치료하고, 관리하거나, 간을 회춘시키거나, 그 밖의 작용을 위한 의학 조성물이 또한 개시되며, 상기 의학 조성물은 유효 성분으로 고려되는 조성물을 함유한다.

도면의 간단한 설명
도 1은 미리스티카 프라그란스(Myristica fragrans) 70% 에탄올 추출물의 HPLC 크로마토그램을 제시한다.

상세한 설명

요컨대, 본 발명의 개시는 개시된 화합물의 입체이성질체, 약학적 또는 영양학적으로 허용되는 염, 토토머, 글리코시드 및 프로드러그를 포함하는 간 건강 관리에 유용한 화합물 및 조성물, 및 간 건강을 개선하는 관련 방법에 관한 것이다.

고려되는 화합물 및 조성물은 적어도 하나의 식물 추출물로부터 유래되거나, 이를 포함하며, 상기 식물 추출물은 농축되거나 농축되지 않을 수 있다. 상기 개발의 일환으로, 고려되는 화합물 및 조성물을 시험하기 위해 빈번하고 허용 가능한 모델이 이용되었다. 또한, 간 기능저하 메커니즘 내의 포인트들을 차단하고, 이들 결과를 연구함으로써 간 건강을 위한 치료적 개입이 고안되었다. 고려되는 화합물, 의학 조성물 및 조성물은 (1) 포유동물에서 간세포의 손상을 치료하거나 예방하고; (2) 간 건강을 촉진시키고; (3) 포유동물에서 해독 및 항산화 간 효소를 보존시키고; (4) 포유동물에서 간 해독 능력을 증가시키고; (5) 포유동물에서 간 질환을 치료하거나 예방하고; (6) 포유동물에서 간의 염증을 변형시키고; (7) 간 재생 기능을 개선하는 것 중 어느 하나를 포함하는 치료를 달성하기에 충분하다.

식물 추출물의 혼합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물 및 방법이 개시되며, 상기 식물 추출물은 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물, 및 적어도 하나의 스키잔드라 추출물을 포함한다.

식물 추출물의 혼합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물 및 방법이 개시되며, 상기 식물 추출물은 페닐프로파노이드, 이량체 및 중합체를 포함하는 하나 이상의 리그난에 대해 농축된 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 하나 이상의 다당류 및 트리테르페노이드에 대해 농축된 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물, 및 하나 이상의 리그난 및 유기산에 대해 농축된 적어도 하나의 스키잔드라 추출물을 포함한다.

식물 추출물의 혼합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물 및 방법이 개시되며, 상기 식물 추출물은 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물, 및 적어도 하나의 포리아 추출물을 포함한다.

식물 추출물의 혼합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물 및 방법이 개시되며, 상기 식물 추출물은 페닐프로파노이드, 이량체 및 중합체를 포함하는 하나 이상의 리그난에 대해 농축된 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 하나 이상의 다당류 및 트리테르페노이드에 대해 농축된 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물, 및 하나 이상의 다당류 및 트리테르페노이드에 대해 농축된 적어도 하나의 포리아 추출물을 포함한다.

포유동물의 간 기능을 유지시키거나, 간세포 손상을 최소화하거나, 건강한 간을 촉진하거나, 간 항산화 온전성을 보호하거나, 독소를 중화시키거나, 간 건강에 영향을 미치는 자유 라디칼의 작용을 감소시키거나, 반응성 산소종을 제거하거나, 산화 스트레스를 감소시키거나, 독성 대사의 형성을 예방하거나, 간 해독 능력 및/또는 기능을 개선하거나, 간을 청소하거나, 간 구조를 회복시키거나, 독소로부터 간세포를 간 보호하거나, 간의 혈류 및 순환을 돕거나, 간 기능을 지원하거나, 간을 강화시키고 진정시키거나, 간을 안정시키고 강화하거나, 간 동통을 경감시키거나, 유해한 화학물질 및 유기체를 제거하거나, 간의 대사 과정을 지원하거나, 간의 불편함을 경감시키거나, 지방간을 경감시키거나, 간 해독 능력을 개선하거나, 간 효소를 낮추거나, 천연 산화제를 제공하거나, SOD를 증가시키거나, GSH를 증가시키거나, 간세포 과산화를 감소시키거나, 지방산 축적을 감소시키거나, 건강한 항염증 과정을 유지시키거나, 간 면역 기능을 개선하거나, 간세포 재생을 촉진하거나, 간 재생 기능을 개선하거나, 담즙 방출을 자극하거나, 건강한 담즙 흐름을 촉진시키거나, 알콜 숙취 및 과용의 화학물질, 약물 및 처방약과 관련된 증상을 예방하고, 치료하고, 관리하거나, 간을 회춘시키거나, 그 밖의 작용을 위한 의학 조성물이 또한 개시되며, 상기 의학 조성물은 유효 성분으로 고려되는 조성물을 함유한다.

고려되는 구현예에서, 조성물, 화합물 또는 의학 조성물은 적어도 하나의 간 장애를 경감시키는 것을 돕거나, 적어도 하나의 간 장애를 구원하기 위해 사용될 수 있으며, 상기 간 장애는 바이러스성 간염, 알콜 간염, 자가면역 간염, 알콜 간질환, 지방간 질환, 지방증, 지방간염, 비알콜성 지방간 질환, 약물 유발성 간질환, 간경화증, 섬유증, 간부전, 약물 유발성 간부전, 대사 증후군, 간세포 암종, 담관암종, 원발 쓸개관 간경화증, 담모세혈관, 길버트 증후군, 황달, 또는 임의의 다른 간 독성 관련 적응증, 및 일반적으로 환자에 대해 허용가능한 독성을 갖는 간 독성 관련 적응증 또는 임의의 다른 간 관련 적응증 또는 이들의 임의의 조합을 포함한다.

상기 과정에서, 일부 식물 추출물이 한 모델에서만 혈청 ALT에서의 감소를 나타낸 것이 관찰되었고, 따라서 진정한 히트(hit)로 간주되는 선도물질(lead)에 대해 둘 모두의 모델에서 효능을 나타내어야 한다는 기준이 설정되었다. 이러한 기준은 스크리닝으로부터 양성 히트의 수를 줄이는데 도움이 되었다. 이러한 과정에서, 둘 모두의 모델에서 유의하고 재현 가능한 효능으로 인해 미리스티카, 아스트라갈루스, 스키잔드라, 포리아 및 아르테미시아(Artemisia)가 선택되었다.

육두구과(Myristicaceae)에 속하는 미리스티카 프라그란스는 약용의 약초 약으로도 널리 공지된 향신료인 육두구 및 메이스(mace)의 중요한 공급원이다. 이는 인도네시아, 말레이시아, 중국의 광동 및 운남, 카리브해의 그레나다, 인도의 케랄라, 스리랑카 및 남아메리아 국가와 같은 열대 국가에서 널리 재배되고 있으며, 설사 방지, 구토 방지, 복통 진정, 진통, 최면, 신경보호 및 식욕 자극을 포함하는 다양한 약리학적 특성을 갖는다.

방향성 오일은 이러한 약초 약의 주요 활성 성분이다. 미리스티카 프라그란스의 주요 화학 성분은 미리스티신(myristicin), 미리스트산, 엘레미신(elemicin), 사프롤(saffrole), 유게놀(eugenol), 팔미트산, 올레산, 라우르산 및 다른 산이다. 정유는 향료로서 또는 향수 중에 사용될 수 있으며, 이는 또한 마비 및 류마티스의 치료에서 유용하다. 정유의 주요 성분 중 하나인 미리스티신은 지질다당류/D-갈락토사민 유발성 간 손상 모델에서 효능 있는 간보호 활성을 갖는 것으로 보고되었다. 미리스티신은 또한 효능 있는 항진균, 항산화 항염증 특성을 갖는다.

아스트라갈루스 멤브라나세우스(Astragalus membranaceus) 뿌리는 일반명 라딕스 아스트라갈리(Radix Astragali), 아스트라갈루스 뿌리, 또는 황기(중국)를 갖는 콩과(Fabaceae)(레??(legumes))의 한 대중적인 중국 약초이다. 황기는 전통 중국 의약에서 사용되는 50종의 기초 약초 중 하나이며, 광범위한 생물학적 기능을 갖는 많은 TCM 제조물에 포함되었다. 이는 본래 달고, 자연에서 약간 벌레와 유사한 모양이고, 강장제 및 이뇨제로 작용하고, 폐 및 가슴의 장애를 경감시키고, 기와 혈을 기르고, 치핵을 치료하는 약초로 기재되었다. 이는 최근에 심혈관 장애, 간염, 신장 질환, 및 당뇨병에 대한 치료제로 연구되었다. 아스트라갈루스의 뿌리 추출물은 동물에서 사염화탄소(CCl₄)에 의해 발생된 간 손상에 대한 보호 효과를 갖는 것으로 보고되었다.

라딕스 아스트라갈리의 추출물 내의 주요 활성 성분은 플라보노이드, 사포닌, 및 다당류이다. 플라보노이드, 주로 이소플라본은 순환계에 도움이 되고, 위장계를 진정시키는 항산화제로 작용한다. 라딕스 아스트라갈리로부터 보고된 40종이 넘는 사포닌 중에서, 아스트라갈로시드(astragaloside)는 심혈관, 면역, 소화, 신경, 및 암 질환과 관련된 광범위한 약리학적 활성을 갖는 주요 마커 화합물로 확인되었다. 아스트라갈란스(astragalans)로 언급되는 라딕스 아스트라갈리의 다당류는 뿌리에서 상대적으로 높은 함량으로 발견되었다. 상업용 아스트라갈루스 추출물 내의 다당류 함량은 10% 내지 90%의 맞춤형 수준으로 표준화될 수 있다. 라딕스 아스트라갈리의 면역조절 효과는 특히 암 치료에서 방사선 및 화학요법 환자에 대해 이의 다당류에 기인한다. 아스트라갈루스 다당류는 또한 다양한 연구에서 항염증, 항종양, 및 간보호 활성을 갖는 것으로 보고되었다.

구멍장이버섯과(Polyporaceae)의 진균인 포리아 코코스 울프(Poria cocos wolf)는 중국에서 복령(

) 및 일본에서 마츠호도(matsuhodo)의 일반명을 갖는 중국 적송 또는 다른 침엽수의 뿌리에서 자라는 약용 버섯으로, 이는 또한 호엘렌(hoelen), 포리아, 투카호(tuckahoe), 또는 중국 뿌리로도 공지되어 있다. 이의 라틴 명명법은 여러번 개정되었으며, 현재 식물명으로서 울피포리아 엑스텐사(Wolfiporia extensa)를 갖는다. TCM에서 주요 성분 중 하나인 복령은 많은 고대의 달임(decoction) 및 제조법에 포함되었으며, 이는 복령 5가지 제조법, 4가지 주요 약초 조합, 계피 및 복령 제조법 등과 같이 오늘날에도 여전히 널리 사용된다. 복령의 특성은 이뇨제, 진정제 및 강장제로서의 작용을 포함한다. 복령의 전통적인 용도는 구역, 구토, 설사, 식욕 상실, 위궤양뿐만 아니라 불면증 및 기억상실의 치료를 포함한다. 항미생물, 항진균, 항산화, 신경보호, 항염증, 항혈관신생 및 항암 효능을 포함하는 많은 생물학적 활성이 상기 진균 또는 진균 추출물에 대해 보고되었다. P. 코코스 에탄올 추출물의 항염증 메커니즘은 지질다당류(LPS) 자극 RAW 264.7 대식세포에서 NF-κB 신호전달 경로의 비활성화를 통한 iNOS, COX-2, IL-1β, 및 TNF-α의 억제를 통해 입증된다. 인간 말초 혈액 단핵구로부터의 다양한 사이토카인의 분비에 대한 포리아 코코스의 억제 효과가 또한 보고되었다.

복령의 주요 성분은 건조 진균 자실체의 91-98%인 β-글루칸 형태의 다당류(파키만(Pachyman))이다. 포리아 코코스 다당류에 대한 다양한 생물학적 기능, 예를 들어, 항산화, 항고혈당, 복통 진정, 항염증, 항암 및 면역학적 조절이 포리아 코코스 다당류에 대해 보고되었다. 다당류는 생체내 및 시험관내 둘 모두에서 다양한 암 계통에 대해 항종양 활성을 갖는 것으로 보고되었다. 트리테르페노이드는 복령에서 활성 성분으로 또한 확인되었으며, 이는 주로 항암, 항염증 효능, 및 또한 잠재적인 면역학적 활성에 대해 활발히 연구된다. 포리아 코코스의 항염증 메커니즘이 완전히 이해되지는 않았지만, 포스포리파제 A 효소 억제가 여러 연구에 의해 확인되었다.

한국에서 "인진(yinjin)"으로도 공지된 다양한 수집 시기에 따라 중국에서 일반명 "인진(yinchen)" 또는 "인진호(yinchenhao)"를 갖는 아르테미시아 카필라리스(Artemisia capillaris)는 다양한 고대 중국 약전 주해서에 포함된 일반적으로 사용되는 TCM 중 하나이다. 아르테미시아 카필라리스의 가장 초기의 기록은 농업 및 약용 식물에 대한 중국 서적인 신농본초경(약초 약의 고전)에서 황달 치료, 습기 제거 및 이뇨제로 기록되었다. 수성 추출물 및 에탄올 추출물 둘 모두는 시험관내 검정 및 생체내 동물 연구 둘 모두에서 간보호 효능을 갖는 것으로 보고되었다. 카테킨, 쿠마린, 플라보노이드, 유기산, 수용성 다당류, 및 폴리펩티드가 아르테미시아 카필라리스의 간 보호 활성을 담당하는 활성 성분으로 보고되었다.

미리스티카 추출물은 표적 화합물 또는 조성물의 일부로 이용될 수 있는 고려되는 성분 또는 구성성분이다. 미리스티카 추출물은 M. 알바(M. alba), M. 암플리아타(M. ampliata), M. 안다마니카(M. andamanica), M. 아르파켄시스(M. arfakensis), M. 아르젠테아(M. argentea), M. 아트레센스(M. atrescens), M. 바실라니카(M. basilanica), M. 브라키포다(M. brachypoda), M. 브레비스티페스(M. brevistipes), M. 부크네리아나(M. buchneriana), M. 비싸세아(M. byssacea), M. 세일라니카(M. ceylanica), M. 신나모메아(M. cinnamomea), M. 코아크타(M. coacta), M. 콜린리드스달레이(M. colinridsdalei), M. 콘스퍼사(M. conspersa), M. 코르티카타(M. corticata), M. 크라싸(M. crassa), M. 닥틸로이데스(M. dactyloides), M. 다시카르파(M. dasycarpa), M. 데프레싸(M. depressa), M. 데보겔리이(M. devogelii), M. 엘리프티카(M. elliptica), M. 엑스텐사(M. extensa), M. 파시쿨라타(M. fasciculata), M. 필리페스(M. filipes), M. 피쑤라타(M. fissurata), M. 플라보비렌스(M. flavovirens), M. 프루기페라(M. frugifera), M. 기간테아(M. gigantea), M. 길레스피에아나(M. gillespieana), M. 글로보사(M. globosa), M. 홀룬기이(M. hollrungii), M. 이나에쿠알리스(M. inaequalis), M. 인크레디빌리스(M. incredibilis), M. 이너스(M. iners), M. 이눈다타(M. inundata), M. 이리아(M. irya), M. 칼크만니이(M. kalkmanii), M. 크젤베르기이(M. kjellbergii), M. 라시오카르파(M. lasiocarpa), M. 레프토필라(M. leptophylla), M. 롱기페티올라타(M. longipetiolata), M. 로위아나(M. lowiana), M. 마크란타(M. macrantha), M. 마그니피카(M. magnifica), M. 마그니피카(M. magnifica), M. 마인가이이(M. maingayi), M. 말라바리카(M. malabarica), M. 말라바리카(M. malabarica), M. 맥시마(M. maxima), M. 메디테라네아(M. mediterranea), M. 밀레푼크타타(M. millepunctata), M. 나나(M. nana), M. 올리바세아(M. olivacea), M. 오르나타(M. ornata), M. 오비카르파(M. ovicarpa), M. 파키카르피디아(M. pachycarpidia), M. 파필라티폴리아(M. papillatifolia), M. 페르라에비스(M. perlaevis), M. 페티올라타(M. petiolata), M. 필리펜시스(M. philippensis), M. 필로셀라(M. pilosella), M. 필로시겜마(M. pilosigemma), M. 폴리안타(M. polyantha), M. 프실로카르파(M. psilocarpa), M. 푸비카르파(M. pubicarpa), M. 피그마에아(M. pygmaea), M. 로부스타(M. robusta), M. 산고웬시스(M. sangowoensis), M. 사르칸타(M. sarcantha), M. 쉴레크테리(M. schlechteri), M. 시뮬란스(M. simulans), M. 싱클레어리이(M. sinclairii), M. 소게리엔시스(M. sogeriensis), M. 숙카다네아(M. succadanea), M. 탐라우엔시스(M. tamrauensis), M. 테이즈스만니이(M. teijsmannii), M. 트리안테라(M. trianthera), M. 울트라바시카(M. ultrabasica), M. 베루쿨로사(M. verruculosa), M. 윤나넨시스(M. yunnanensis) 및 다른 미리스티신 농축 식물 아니스 종자(핌피넬라 아니숨(Pimpinella anisum), 핌피넬라 불가레(Pimpinella vulgare), 일리시움 아니사툼(Illicium anisatum), 일리시움 베룸(Illicium verum)), 파슬리(페트로셀리눔 크리스품(Petroselinum crispum)), 시라(dill)(아네툼 그라베올렌(Anethum graveolen)), 리구스티쿰(ligusticum)(리구스티쿰 시넨세 올리브.(ligusticum sinense Oliv.) 및 L. 제홀렌세(L. jeholense)), 퀸 앤즈 레이스(Queen Anne's lace)(다우쿠스 카로타 L. 아종 카로타(Daucus carota L. subsp. carota)), 당근(다우쿠스 카로타 L. 아종 사티부스 (Hoffm.) 아르캉.(sativus (Hoffm.) Arcang.)) 또는 이들의 임의의 조합물을 포함하는 임의의 적합한 공급원으로부터 획득될 수 있다.

일부 구현예에서, 고려되는 미리스티카 추출물은 약 0.01% 내지 약 99.9%의 페닐프로파노이드 또는 리그난 이량체 및 중합체를 포함한다. 고려되는 구현예에서, 추출물은 물, 에탄올, 메탄올, 알콜, 혼합 물 용매 또는 이들의 조합물을 이용함으로써 추출될 수 있다.

고려되는 바와 같이, 적합한 리그난은 사프롤(Safrole), 이소미리스티신(Isomyristicin), 1-(3,4,5-트리하이드록시페닐)-2-프로펜 1,2-메틸렌, 3-Me 에테르, 안트리시놀(Anthriscinol), 4-알릴시린골(4-Allylsyringol), 안트리시놀(Anthriscinol), 3-(3-메톡시-4,5-메틸렌디옥시페닐)-2-프로펜-1-올, 엘레미신(Elemicin), 이소엘레미신(Isoelemicin), 3',4',5'-트리메톡시신나밀 알콜, 3'-메톡시-4',5'-메틸렌디옥시신나밀 알콜, 메톡시유게놀, 파라크메린 A(Parakmerin A), 4,7'-에폭시-3,8'-빌리근-7-엔-3',4',5-트리올 5-메테르, 오토바인(Otobain), 카가야닌(Cagayanin), 오스트로바일리그난 5(Austrobailignan 5), 1,2-디하이드로데하이드로과이아레트산, 데하이드로디이소유게놀, 이소디하이드로카리나티딘, 이소리카린 A(Isolicarin A), 오토바페놀(Otobaphenol), 마세리그난(Macelignan), 3',4,4',5-테트라하이드록시-3,8'-빌리근-8-엔, 과이아신(Guaiacin), 디하이드로과이아레트산, 5-[3-(4-하이드록시-3-메톡시페닐)-1,2-디메틸프로필]-3-메톡시-1,2-벤젠디올, 오토바논(Otobanone), 카가야논(Cagayanone), 주이호닌 B(Zuihonin B), 3,4:3',4'-비스(메틸렌디옥시)-7,7'-에폭시리그난, 하이드록시오토바인(Hydroxyotobain), 이소갈카틴(Isogalcatin), 오스트로바이리그난 7(Austrobailignan 7), 마킬린 F(Machilin F), 7-하이드록시오스트로바이리그난 5, 사우루리놀(Saururinol), 2-(4-알릴-2-메톡시페녹시)-1-(4-하이드록시-3-메톡시페닐)-1-프로파놀, 프라그란신 A2(Fragransin A2), 넥탄드린 B(Nectandrin B), 미리스타르게놀 A(Myristargenol A), 미리스타르게놀 B, 2,3-디하이드로-7-메톡시-2-(3-메톡시-4,5-메틸렌디옥시페닐)-3-메틸-5-(1-프로페일)벤조푸란, 프라그란솔 C(Fragransol C), 프라그란솔 D, 2-(4-알릴-2,6-디메톡시페녹시)-1-(3,4-메틸렌디옥시페닐)-1-프로파놀, 2-(4-알릴-2,6-디메톡시페녹시)-1-(4-하이드록시-3-메톡시페닐)-1-프로파놀, 프라그란신 C2, 프라그란신 C3b, 프라그란신 C3a, 프라그란신 C1, 프라그란솔 A, 미리스이소리그난(Myrisisolignan), 2-(4-알릴-2,6-디메톡시페녹시)-1-(3,4-디메톡시페닐)-1-프로파놀, 프라그란신 D3, 프라그란신 D2, 프라그란신 D1, 비롤론긴 B(Virolongin B), 2-(4-알릴-2,6-디메톡시페녹시)-1-(3-하이드록시-4,5-디메톡시페닐)-1-프로파놀, 프라그란신 B2, 프라그란신 B3, 프라그란신 B1, 미리스티카놀 B(Myristicanol B), 3,4-메틸렌, 3',5'-디-Me 에테르, Ac, 2-(4-알릴-2,6-디메톡시페녹시)-1-(3,4,5-트리메톡시페닐)-1-프로파놀, 미리스티카놀 A, 3,4-메틸렌, 3',5'-디-Me 에테르, 벤조일, 아르젠테아네(Argenteane), 또는 이들의 임의의 조합물을 포함한다.

아스트라갈루스 추출물은 표적 화합물 또는 조성물의 일부로 이용될 수 있는 고려되는 성분 또는 구성성분이다. 아스트라갈루스 추출물은 A. 몽골리우스(A. mongholius), A. 톤골렌시스(A. tongolensis), A. 티베타누스(A. tibetanus), A. 캄프토돈투스(A. camptodontus), A. 악수시스(A. aksusis), A. 플로리두스(A. floridus), A. 크리소프테루스(A. chrysopterus), A. 마오웨넨시스(A. maowenensis), A. 윤나넨시스 프랑크.(A. yunnanensis Franch.), A. 에르네스티이 콤브(A. ernestii Comb), 헤디사룸 폴리보트리스(Hedysarum polybotrys), A. 푸비플로루스(A. pubiflorus), 메디카고 사티바 L.(Medicago sativa L.), 멜리로투스 수아베올렌스 레데브.(Melilotus suaveolens Ledeb.), 멜리로투스 알부스 데스르.(Melilotus albus Desr.), 카라가나 시니카(Caragana sinica), 옥시트로피스 카에룰레아(Oxytropis caerulea), 옥시트로피스 글라브라(Oxytropis glabra), 둔바리아 빌로사 마키노(Dunbaria villosa Makino), 말바 로툰디폴리아 L.(Malva rotundifolia L.), 알타에아 오피시날리스(Althaea officinalis), 또는 이들의 임의의 조합물을 포함하는 임의의 적합한 공급원으로부터 획득될 수 있다. 고려되는 추출물은 0.01% 내지 약 100%의 다당류 및 약 0.01% 내지 약 100%의 트리테르페노이드를 포함할 수 있다.

일부 구현예에서, 고려되는 트리테르페노이드는 아스켄도시드 A(Askendoside A), 아세틸아스트라갈로시드 I(Acetylastragaloside I), 아그로아스트라갈로시드 I(Agroastragaloside I), 아그로아스트라갈로시드 II, 아그로아스트라갈로시드 III, 아그로아스트라갈로시드 IV, 아그로아스트라갈로시드 V, 알렉산드로시드 I(Alexandroside I), 아르마토시드 I(Armatoside I), 아르마토시드 II, 아세르네스티오시드 A(Asernestioside A), 아세르네스티오시드 B, 아세르네스티오시드 C, 아스켄도시드 B(Askendoside B), 아스켄도시드 C, 아스켄도시드 D, 아스켄도시드 F, 아스켄도시드 G, 아스켄도시드 K, 아스트라크리소시드 A(Astrachrysoside A), 아스트라갈로시드 I(Astragaloside I), 아스트라갈로시드 II, 아스트라갈로시드 III, 아스트라갈로시드 IV, 아스트라갈로시드 V, 아스트라갈로시드 VI, 아스트라갈로시드 VII, 아스트라게놀(Astragenol), 아스트라멤브란게닌(Astramembrangenin), 아스트라멤브라닌 II(Astramembrannin II), 아스트라멤브라노시드 A(Astramembranoside A), 아스트라멤브라노시드 B, 아스트라시에베르시아닌 I(Astrasieversianin I), 아스트라시에베르시아닌 II, 아스트라시에베르시아닌 III, 아스트라시에베르시아닌 IX, 아스트라시에베르시아닌 V, 아스트라시에베르시아닌 XI, 아스트라시에베르시아닌 XII, 아스트라시에베르시아닌 XIII, 아스트라시에베르시아닌 XV, 아스트라베루신 I(Astraverrucin I), 아스트라베루신 II, 아스트라베루신 III, 아스트라베루신 IV, 아스트라베루신 V, 아스트라베루신 VI, 아스트라베루신 VII, 아스트로자노시드 A(Astrojanoside A), 아주키사포닌 II(Azukisaponin II), 바이부토시드(Baibutoside), 비쿠스포시드 A(Bicusposide A), 비쿠스포시드 B, 비쿠스포시드 C, 비쿠스포시드 D, 비쿠스포시드 E, 비쿠스포시드 F, 브라키오시드 A(Brachyoside A), 브라키오시드 B, 브라키오시드 C, 카스피쿠시드 I(Caspicuside I), 카스피쿠시드 II, 세팔로토시드 A(Cephalotoside A), 시세로시드 A(Ciceroside A), 시세로시드 B, 클로베르사포닌 IV(Cloversaponin IV), 콤플라나틴(Complanatin), 사이클로아드수르게닌(Cycloadsurgenin), 사이클로알피게닌(Cycloalpigenin), 사이클로알피게닌 A, 사이클로알피게닌 B, 사이클로알피게닌 C, 사이클로알피오시드(Cycloalpioside), 사이클로알피오시드 A, 사이클로알피오시드 B, 사이클로알피오시드 C, 사이클로알피오시드 D, 사이클로아라로시드 B(Cycloaraloside B), 사이클로아라로시드 C, 사이클로아라로시드 D, 사이클로아라로시드 E, 사이클로아라로시드 F, 사이클로아스카우로시드 A(Cycloascauloside A), 사이클로아스카우로시드 B, 사이클로아스시도시드 A(Cycloascidoside A), 사이클로아스게닌 A(Cycloasgenin A), 사이클로아스게닌 B, 사이클로아스게닌 C, 사이클로칸토게닌(Cyclocanthogenin), 사이클로칸토시드 A(Cyclocanthoside A), 사이클로칸토시드 B, 사이클로칸토시드 C, 사이클로칸토시드 D, 사이클로칸토시드 E, 사이클로칸토시드 F, 사이클로칸토시드 G, 사이클로카르포시드(Cyclocarposide), 사이클로카르포시드 A, 사이클로카르포시드 B, 사이클로카르포시드 C, 사이클로세팔로게닌(Cyclocephalogenin), 사이클로세팔로시드 I(Cyclocephaloside I), 사이클로세팔로시드 II, 사이클로키비노시드 B(Cyclochivinoside B), 사이클로키비노시드 C, 사이클로키비노시드 D, 사이클로디섹토시드(Cyclodissectoside), 사이클로엑소시드(Cycloexoside), 사이클로갈레기노시드 A(Cyclogaleginoside A), 사이클로갈레기노시드 B, 사이클로갈레기노시드 D, 사이클로갈레기노시드 E, 사이클로갈게기닌(Cyclogalgeginin), 사이클로글로비세포시드 A(Cycloglobiceposide A), 사이클로글로비세포시드 B, 사이클로글로비세포시드 C, 사이클로마크로게닌 B(Cyclomacrogenin B), 사이클로마크로시드 A(Cyclomacroside A), 사이클로마크로시드 B, 사이클로마크로시드 C, 사이클로마크로시드 D, 사이클로마크로시드 E, 사이클로오르비코시드 A(Cycloorbicoside A), 사이클로오르비코시드 B, 사이클로오르비코시드 C, 사이클로오르비코시드 D, 사이클로오르비게닌(Cycloorbigenin), 사이클로오르비게닌 A, 사이클로오르비게닌 B, 사이클로오르비게닌 C, 사이클로피크난토게닌(Cyclopycnanthogenin), 사이클로시에베르시오시드 C(Cyclosieversioside C), 사이클로시에베르시오시드 H, 사이클로시베르시오시드 E(Cyclosiversioside E), 사이클로스티풀로시드 A(Cyclostipuloside A), 사이클로스티풀로시드 B, 사이클로트리섹토시드(Cyclotrisectoside), 사이클로유니폴리오시드 A(Cyclounifolioside A), 사이클로유니폴리오시드 B, 사이클로유니폴리오시드 D, 다시안토게닌(Dasyanthogenin), 디하이드로사이클로오르비게닌 A(Dihydrocycloorbigenin A), 엘론가토시드(Elongatoside), 에레모필로시드 A(Eremophiloside A), 에레모필로시드 B, 에레모필로시드 C, 에레모필로시드 D, 에레모필로시드 E, 에레모필로시드 F, 에레모필로시드 G, 에레모필로시드 H, 에레모필로시드 I, 에레모필로시드 J, 에레모필로시드 K, 하레프토시드 C(Hareftoside C), 하레프토시드 D, 하레프토시드 E, 히스피다신(Hispidacin), 황기예게닌 I(Huangqiyegenin I), 황기예닌 A(Huangqiyenin A), 황기예닌 B, 황기예닌 D, 황기예닌 E, 황기예닌 F, 황기예닌 G, 황기예닌 H, 황기예닌 I, 황기예닌 J, 이소아스트라갈로시드 I(Isoastragaloside I), 이소아스트라갈로시드 II, 이소아스트라갈로시드 IV, 이소콤플라나틴(Isocomplanatin), 카히리코시드 I(Kahiricoside I), 카히리코시드 II, 카히리코시드 III, 카히리코시드 IV, 카히리코시드 V, 마크로필로사포닌 A(Macrophyllosaponin A), 마크로필로사포닌 B, 마크로필로사포닌 C, 마크로필로사포닌 D, 마크로필로사포닌 E, 말로닐아스트라갈로시드 I(Malonylastragaloside I), 몽골리코시드 A(Mongholicoside A), 몽골리코시드 B, 몽골리코시드 I, 몽골리코시드 II, 올레이폴리오시드 A(Oleifolioside A), 올레이폴리오시드 B, 오르비코시드(Orbicoside), 오르비게닌(Orbigenin), 프루시아노시드 A(Prusianoside A), 프루시아노시드 B, 퀴스쿠아게닌(Quisquagenin), 퀴스발로시드 B(Quisvaloside B), 루빅산틴(Rubixanthin), 알미테이트(almitate), 루빅산틴(Rubixanthin), 사포게닌 A(Sapogenin A), 사포게닌 III, 세코마크로게닌 B(Secomacrogenin B), 시에베로시드 I(Sieberoside I), 시에베로시드 II, 소야사포게놀 B(Soyasapogenol B), 토멘토시드 I(Tomentoside I), 토멘토시드 II, 트리고노시드 I(Trigonoside I), 트리고노시드 III, 트로자노시드 A(Trojanoside A), 트로자노시드 B, 트로자노시드 C, 트로자노시드 D, 트로자노시드 E, 트로자노시드 F, 트로자노시드 I, 트로자노시드 J, 아스트라갈로시드 VIII(Astragaloside VIII), 11-p-쿠마로일네페티신(Coumaroylnepeticin) 또는 이들의 임의의 조합물을 포함하는 적어도 하나의 적합한 트리테르페노이드를 포함할 수 있다.

포리아 추출물은 표적 화합물 또는 조성물의 일부로 이용될 수 있는 고려되는 성분 또는 구성성분이다. 포리아 추출물은 폴리포어 버섯(polypore mushroom), 아가리쿠스 수브루페센스(Agaricus subrufescens), 아가리쿠스 블라제이(Agaricus blazei), 안트로디아 캄포라테(Antrodia camphorate), 볼레투스 에둘리스(Boletus edulis), 코리올루스 파르가메누스(Coriolus pargamenus), 코리올루스 헤테로모르푸스(Coriolus heteromorphus), 크리토더마 시트리눔(Crytoderma citrinum), 플라물리나 벨루티퍼(Flammulina velutiper), 포르미토프시스 시티시나(Formitopsis cytisina), 포르미토프시스. 피니콜라(Formitopsis. pinicola), 가노더마 루시둠(Ganoderma lucidum), 가노더마 시넨세(Ganoderma sinense), 가노더마 추가에(Ganoderma tsugae), 글로에필룸 사에피아리움(Gloephyllum saepiarium), 그리폴라 프론도사(Grifola frondosa), 헤리시움 에리나세우스(Hericium erinaceus), 히드넬룸 펙키이(Hydnellum peckii), 렌티누스 에도데스(Lentinus edodes), 미크로포루스 플라벨리포르미스(Microporus flabelliformis), 모르켈라 에스쿨렌타(Morchella esculenta), 오피오코르디셉스 시넨시(Ophiocordyceps sinensi), 피프토로루스 베툴리누스(Piptororus betulinus), 플레우로투스 네브로덴시스(Pleurotus nebrodensis), 폴리포루스 움벨라투스(Polyporus umbellatus), 폴리포루스 투베라스터(Polyporus tuberaster), 포리아 코코스(Poria cocos), 스키조필룸 코뮤네(Schizophyllum commune), 스켈레토쿠티스 불가리스(Skeletocutis vulgaris), 트라메테스 기보사(Trametes gibbosa), 트라메테스 베르시콜로르(Trametes versicolor)(코리올루스 베르시콜로르(Coriolus versicolor)), 우스틸라고 마이디스(Ustilago maydis), 또는 이들의 임의의 조합물을 포함하는 임의의 적합한 공급원으로부터 획득될 수 있다. 고려되는 추출물은 0.01% 내지 약 100%의 다당류 및 약 0.01% 내지 약 100%의 트리테르페노이드를 포함할 수 있다.

일부 구현예에서, 포리아 추출물로부터 분리된 고려되는 트리테르페노이드는 25-하이드록시파킴산, 25-하이드록시-3-에피투물로스산, 16,25-디하이드록시에부리콘산, 3,16,25-트리하이드록시-24-메틸렌라노스타-7,9(11)-디엔-21-산, 16,25-디하이드록시데하이드로에부리코산, 15-하이드록시데하이드로투물로스산, 6-하이드록시데하이드로파킴산, 3,16,26-트리하이드록시라노스타-7,9(11),24-트리엔-21-산, 3,4-세코라노스타-4(28),7,9(11),24-테트라엔-3,26-디오산; (24Z)-포름, 프레근-7-엔-3,11,15,20-테트롤, 포리코산 DM, 26-하이드록시포리코산 DM, 포리코산 D, 포리코산 CM, 포리코산 C; 25-하이드록시, 포리코산 CE, 포리코산 C, 포리코산 BM, 포리코산 B; 데옥시 포리코산 B, 에부리코디올, 포리코산 G, 포리코산 GM, 포리코산 A, 포리코산 AM, 포리코산 AE, 25-메톡시포리코산 A, 포리코산 H, 25-하이드록시포리코산 H, 포리코산 HM, 6,7-데하이드로포리코산 H, 데하이드로에부리콜산, 3-하이드록시라노스타-7,9(11),24-트리엔-21-산, 5,8-에피디옥시-3,16-디하이드록시-24-메틸렌라노스타-6,9(11)-디엔-21-산, 포리코산 E, 포리아코손 A, 포리아코손 B, 포리코산 F, 29-하이드록시폴리포렌산 C, 29-하이드록시데하이드로투물로스산, 29-하이드록시데하이드로파킴산, 파킴산, 아세틸파킴산, 데하이드로파킴산, 3,16-디하이드록시-24-메틸렌라노스타-7,9(11)-디엔-21-산; 3-O-(4-하이드록시벤조일), 3-에피데하이드로투물로스산, 3-에피데하이드로파킴산, 3,16-디하이드록시라노스타-7,9(11),24-트리엔-21-산, 16-하이드록시트라메텐산, 3,16-디하이드록시라노스타-8,24-디엔-21-산 또는 이들의 임의의 조합물을 포함하는 적어도 하나의 적합한 트리테르페노이드를 포함할 수 있다.

아르테미시아 추출물은 표적 화합물 또는 조성물의 일부로 이용될 수 있는 고려되는 성분 또는 구성성분이다. 아르테미시아 추출물은 아르테미시아 압신티움(Artemisia absinthium), 아르테미시아 아브로타눔 L.(Artemisia abrotanum L.), 아르테미시아 아프라(Artemisia afra), 아르테미시아 아누아 L(Artemisia annua L), 아르테미시아 아르보레센스(Artemisia arborescens), 아르테미시아 아시아티카(Artemisia asiatica), 아르테미시아 캄페스트리스(Artemisia campestris), 아르테미시아 데세르티(Artemisia deserti), 아르테미시아 이와요모기(Artemisia iwayomogi), 아르테미시아 루도비시아나(Artemisia ludoviciana), 아르테미시아 불가리스(Artemisia vulgaris), 아르테미시아 오엘란디카(Artemisia oelandica), 아르테미시아 프린셉스 팜프(Artemisia princeps Pamp), 아르테미시아 사크로룸(Artemisia sacrorum), 아르테미시아 스코파리아(Artemisia scoparia), 아르테미시아 스텔레리아나(Artemisia stelleriana), 아르테미시아 프리기다 윌드(Artemisia frigida Willd), 아르테미시아 아네토이데스 마트프.(Artemisia anethoides Mattf.), 아르테미시아 아네티폴리아 웨버.(Artemisia anethifolia Weber.), 아르테미시아 파우리에르 나카이(Artemisia faurier Nakai), 오리가눔 불가레(Origanum vulgare), 시페노스테기아 키넨시스(Siphenostegia chinensis), 또는 이들의 임의의 조합물을 포함하는 임의의 적합한 공급원으로부터 획득될 수 있다.

아르테미시아 추출물은 본원에서 고려되고 있는 바와 같은 하나 이상의 생체고분자에 대해 농축될 수 있다. 아르테미시아 추출물로부터 분리된 고려되는 중합체 및 생체고분자는 물, 메탄올, 에탄올, 알콜, 물-혼합 용매 또는 이들의 조합물을 포함하는 임의의 적합한 용매로 추출된다. 고려되는 구현예에서, 아르테미시아 추출물은 약 500 g/mol보다 높은 개별 또는 중간 분자량을 갖는 약 0.01% 내지 약 99.9%의 생체고분자를 포함한다. 일부 고려되는 구현예에서, 아르테미시아 추출물은 약 750 g/mol보다 높은 개별 또는 중간 분자량을 갖는 약 0.01% 내지 약 99.9%의 생체고분자를 포함한다. 다른 고려되는 구현예에서, 아르테미시아 추출물은 약 1000 g/mol보다 높은 개별 또는 중간 분자량을 갖는 약 0.01% 내지 약 99.9%의 생체고분자를 포함한다.

우웨이지(Wuweizi) 및 우렌쿰(Wurenchum)으로도 공지된 스키잔드라 키넨시스(Schisandra chinensis)는 전통적으로 폐 및 신장 기능부전의 질환에 사용된다. 이는 또한 만성 기침 및 호흡곤란, 설사, 야간 발한, 소모 장애, 과민성, 심계항진 및 불면증의 경우뿐만 아니라 질병과 관련된 피로를 치료하기 위한 일반적인 강장제로 지정된다. 현대 약물요법에서, 표본제작 실험 및 임상적 증거는 사염화탄소 유발성 간독성, 글루타티온 고갈 및 자극된 글루타티온 환원효소의 활성을 예방하는 스키잔드라 추출물의 간보호 특성을 암시한다. 스키잔드라의 주요 활성 원리는 래트 간 세포질에서 산화적 인산화 과정에 참여하는 일부 효소의 활성을 증가시킴에 의한 활력을 주는 특성, 및 또한 증가된 초과산화물 디스뮤타제 및 카탈라제 활성을 갖고, 래트 간 미세소체에서 고시폴 유발성 초과산화물 음이온 생성을 억제할 수 있는 스키잔드린(Schizandrin)으로 언급되는 리그난이다. 스키잔드라 과일 추출물의 간보호 효과가 간염을 갖는 환자에 대한 중국 문헌에 보고되었고, 임상 조절 시험에서 4주 및 8주 이내에 혈청 ALT 수준에서의 68%(72/107) 및 44%(36/72)의 개선을 발생시켰다.

스키잔드라 추출물은 표적 화합물 또는 조성물의 일부로 이용될 수 있는 고려되는 성분 또는 구성성분이다. 스키잔드라 추출물은 스키잔드라 키넨시스(Schisandra chinensis), 스키잔드라 엘론가테(Schisandra elongate), 스키잔드라 글라브라(Schisandra glabra), 스키잔드라 글라우세센스(Schisandra glaucescens), 스키잔드라 헨리이(Schisandra henryi), 스키잔드라 인카르나테(Schisandra incarnate), 스키잔드라 란시폴리아(Schisandra lancifolia), 스키잔드라 네글렉타(Schisandra neglecta), 스키잔드라 니그라(Schisandra nigra), 스키잔드라 프로핀쿠아(Schisandra propinqua), 스키잔드라 푸베센스(Schisandra pubescens), 스키잔드라 레판다(Schisandra repanda), 스키잔드라 루브리플로라(Schisandra rubriflora), 스키잔드라 루브리폴리아(Schisandra rubrifolia), 스키잔드라 시넨시스(Schisandra sinensis), 스키잔드라 스파에란드라(Schisandra sphaerandra), 스키잔드라 스페난테라(Schisandra sphenanthera), 스키잔드라 토멘텔라(Schisandra tomentella), 스키잔드라 투베르쿨라타(Schisandra tuberculata), 스키잔드라 베스티타(Schisandra vestita), 스키잔드라 비리디스(Schisandra viridis), 스키잔드라 윌스니아나(Schisandra wilsoniana) 또는 이들의 조합물을 포함하는 임의의 적합한 공급원으로부터 획득될 수 있다.

스키잔드라 추출물은 본원에서 고려되고 있는 바와 같이 하나 이상의 리그난 및 유기산에 대해 농축될 수 있다. 스키잔드라 추출물로부터 분리된 고려되는 리그난은 스키잔드린, 데옥시스키잔드린, γ-스키잔드린, 슈도-γ-스키잔드린, 우웨이지수 B(Wuweizisu B), 우웨이지수 C, 이소스키잔드린, 프레고미신(Pregomisin), 에오스키잔드린(eoschizandrin), 스키잔드롤(Schizandrol), 스키잔드롤 A, 스키잔드롤 B, 스키잔테린(Schisantherin) A, B, C, D, E, 루브스키잔테린(Rubschisantherin), 스키잔헤놀 아세트드테(Schisanhenol acetdte), 스키잔헤놀 B, 스키잔헤놀, 고미신(Gomisin) A, B, C, D, E, F, G, H, J, N, O, R, S, T, U, 에피고미신 O(Epigomisin O), 안젤로일고미신(Angeloylgomisin) H, O, Q, T, 이글로일고미신(igloylgomisin) H, P, 안젤로이이소고미신 O(Angeloyisogomisin O), 벤조일-고미신 H, O, P, Q, 벤조일-이소고미신 또는 이들의 조합물이다. 스키잔드라 추출물로부터 분리된 고려되는 유기산은 말산, 시트르산, 시키미산 또는 이들의 조합물을 포함한다.

따라서, 실제 적용을 위해, 산화 스트레스의 반복된 노출로부터 간을 보호하는 향상된 효능을 갖는 특별한 혼합물을 발견하는 아이디어는 알콜 유발성 간 손상, 전반적인 피로 및 탈진을 염두해 두고 착상되었다. 역사적으로, 일부 식물성 약품은 생물학적 시스템에서 항산화 작용과 관련된 것으로 보고되었으며, 자유 라디칼의 제거제로서 작용하여 다양한 인간 질환에 대한 약초 약에서 사용된다. 고려되는 구현예에서, 역사적인 간 관련 효능 및 안전성 데이터를 갖는 식물 물질이 조합되었고, 전반적인 간 건강에 대한 이들의 지정에서 유리한 부스트를 제공하는 것으로 간주되었다.

고려되는 물질 및 성분은 다양한 정도의 억제를 입증하였다. 미리스티카로부터의 추출물은 아세트아미노펜에 의해 야기된 간 손상의 높은 보호(400 mg/kg의 용량에서 최대 94.4%)를 나타내는 것으로 보였으며, 더 높은 투여량(즉, 500 mg/kg)에서, 추출물은 사염화탄소 유발성 간독성 모델에서 37.6%의 억제만 나타내었다. 유사하게, 아스트라갈루스는 아세트아미노펜 모델에서 혈청 ALT에서 통계적으로 유의하지 않은 50.6% 억제를 나타낸 반면, 사염화탄소 유발성 간독성 모델에서 혈청 ALT에서 통계적으로 유의한 34.1%의 감소가 입증되었다. 다른 한편으로, 스키잔드라는 비히클 대조군과 비교하는 경우 사염화탄소 유발성 간독성 모델에서 400 mg/kg의 용량에서 혈청 ALT 수준에서 47.6% 감소를 나타내었고; 대조적으로, 500 mg/kg과 같은 더 높은 용량에서, 아세트아미노펜 유발성 간 손상 모델에서 관찰된 억제는 41.4%였다. 포리아 및 아르테미시아는 둘 모두의 모델에서 유사하고 적당한 간 보호 활성을 나타내었다. 각각의 식물에 대해 별개의 모델에서 관찰된 이들 강력한 개별적 성과를 고려해 볼때, 둘 모두의 모델에서 더 나은 결과를 위해 이들 식물 추출물을 조합하는 아이디어가 보강되었다. 이전 연구에서 다양한 정도의 간 보호 능력을 갖는 개별적 식물 물질 미리스티카("M"), 아스트라갈루스("A"), 스키잔드라("S"), 및 포리아("P")의 항산화 활성이 입증되었다. 그러나, 이들은 "MAP"(미리스티카, 아스트라갈루스 및 포리아) 또는 "MAS"(미리스티카, 아스트라갈루스 및 스키잔드라)로 지정된 조성물을 생성시키기 위해 특정한 비로 이전에 함께 조합된 적이 없다.

고려되는 조성물은 CCl₄ 유발성 간독성 모델을 이용하여 1:1, 1:2, 2:1, 1:4 및 4:1과 같은 특정 비로 선도물질을 개발함으로써 먼저 제형화되었다. 이의 높은 정도의 혈청 ALT 억제로 인해, 미리스티카 프라그란스는 CCl₄ 모델에서 개시된 비에 대해 각각의 식물 물질(스키잔드라 키넨시스, 아르테미시아 카필라리스, 아스트라갈루스 멤브라나세우스 또는 포리아 코코스)과 쌍을 이루는 주요 성분으로 선택되었고, 400 mg/kg의 용량으로 시험되었다. 미리스티카 프라그란스가 스키잔드라 키넨시스, 아르테미시아 카필라리스, 아스트라갈루스 멤브라나세우스 또는 포리아 코코스와 함께 제형화된 경우에 모든 비에 대해 혈청 ALT에서 다양한 정도의 통계적으로 유의한 억제, 및 이에 따른 손상으로부터의 추정된 간 보호가 관찰되었다. 미리스티카가 아르테미시아와 함께 제형화된 경우에 가장 높은 혈청 ALT 억제가 관찰되었으나, 미리스티카 및 아스트라갈루스 혼합물에 대해 가장 낮은 억제가 관찰되었다.

미리스티카의 최적 효능 역치를 염두해 두고 진행하여, 가장 낮은 백분율의 억제 및 이에 따른 적은 양의 미리스티카를 갖는 비(즉, 각각 1:4의 비의 MA=미리스티카:아스트라갈루스)가 선택되었고, 포리아 또는 스키잔드라와 같은 세번째 성분이 첨가되어 앞에서 설명된 바와 같은 MAP 및 MAS로 지정된 조성물이 생성되었다. 놀랍게도, MA로의 포리아 또는 스키잔드라의 첨가는 제공된 비에 대해 혈청 ALT 수준의 억제의 동역학에서 급격한 변화를 야기시켰다. 이 시점에서 관찰된 억제는 CCl₄ 모델에서 조성물 MAS(1:4의 비의 MA에 20 중량%의 스키잔드라 첨가 및 400 mg/kg의 투여량) 및 조성물 MAP(1:4의 비의 MA에 20 중량%의 포리아 첨가 및 400 mg/kg의 투여량)에 대해 각각 82.0% 및 80.8%였다. 동일 투여량(400 mg/kg)의 1:4의 비의 MA 혼합물에 대해 관찰된 41.3% 억제와 비교하는 경우, MAS(82.0%) 및 MAP(80.8%)에 대해 관찰된 현행 억제는 거의 두배였고, 따라서 강화된 간 보호를 위한 조성물의 첨가된 성분의 중요성을 나타낸다. 이들 발견은 또한 APAP 유발 모델에서 재현되었다.

이들 3개의 식물 물질(미리스티카:아스트라갈루스:포리아 또는 미리스티카:아스트라갈루스:스키잔드라)를 제형화하는 장점이 결정되는 경우, MAP 또는 MAS 조성물 처리로 관찰된 이로운 효과가 200 mg/kg의 용량의 제공된 비로 이의 성분 각각에 대해 관찰된 효과를 단순히 합산한 것을 기초로 하는 예측 효과를 초과하는 명백히 흥미롭지만 예기치 않은 상승작용이 이들 3개의 식물 물질의 조합으로부터 관찰되었다.

집합적으로, 이들 전통적으로 널리 공지된 민간 약용 식물을 MAP 또는 MAS를 생성시키기 위해 특정 비로 조합시키는 것이 다수의 동물 모델에서 현저한 간 보호 활성으로 입증된 것처럼 조성물에 신규성을 제공하는 것으로 이해된다.

고려되는 구현예에서, 미리스티카 추출물 및 아스트라갈루스 추출물은 약 4:1 내지 약 1:4 범위의 중량비로 혼합된다. 다른 고려되는 구현예에서, 포리아 추출물은 약 5 내지 약 50%의 중량 백분율로 MA 혼합물과 추가로 혼합된다. 고려되는 구현예에서, MAP의 비는 약 4:16:5이다. 또 다른 구현예에서, 스키잔드라 추출물은 약 5 내지 약 50%의 중량 백분율로 MA 혼합물과 추가로 혼합된다. 고려되는 구현예에서, MAS의 비는 약 4:16:5이다.

고려되는 화합물, 의약 조성물 및 조성물은 적어도 하나의 간 보호제를 포함하거나, 추가로 포함하거나, 이로 구성될 수 있다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 간 보호제는 밀크 씨슬(milk thistle), 쿠르쿠마(curcuma), 부플레우룸(bupleurum), 감초, 샐비어, 모루스(morus), 호베니아(hovenia), 짚신나물(agrimony), 쿠드라니아(cudrania), 리세움(lyceum), 시트러스, 프루누스(prunus), 옐로우 뮴(yellow mume), 한국 김(Korea gim), 민들레, 비티스(vitis), 포도 종자, 루부스(rubus), 동백나무, 녹차, 크릴 오일, 효모, 대두의 식물 분말 또는 식물 추출물; 분리되고 농축된 실리마린, 플라보노이드, 인지질, 티오(thio), 피크노게놀(pycnogenol), 젤라틴(gelatin), 대두 레시틴, 췌장 효소; 천연 또는 합성 N-아세틸-시스테인, 타우린, 리보플라빈, 니아신, 피리독신, 엽산, 카로틴, 비타민 A, 비타민 B2, B6, B16, 비타민 C, 비타민 E, 글루타티온, 분지쇄 아미노산, 셀레늄, 구리, 아연, 망간, 코엔자임 Q10, L-아르기닌, L-글루타민, 포스파티딜콜린 등 및/또는 이들의 조합물을 포함하거나, 이들로 구성될 수 있다.

개시된 화합물의 생체내 대사 생성물이 또한 본원에서 고려된다. 상기 생성물은, 예를 들어, 주로 효소적 과정으로 인한 투여된 화합물의 산화, 환원, 가수분해, 아미드화, 에스테르화 등으로부터 발생될 수 있다. 따라서, 고려되는 화합물은 고려되는 화합물 또는 조성물을 이의 대사 생성물을 생성시키기에 충분한 기간 동안 포유동물에 투여하는 것을 포함하는 과정에 의해 생성된 화합물이다. 상기 생성물은 통상적으로 검출 가능한 용량의 본 발명의 개시의 방사선 표지된 화합물을 래트, 마우스, 기니아 피그, 개, 고양이, 돼지, 양, 말, 원숭이 또는 인간과 같은 동물에 투여하여 충분한 시간 동안 대사가 발생하도록 한 후, 소변, 혈액 또는 다른 생물학적 샘플로부터 이의 전환 생성물을 분리시킴으로써 확인된다.

본원에서 사용되는 문구 "안정한 화합물" 및 "안정한 구조"는 상호교환적으로 사용되며, 반응 혼합물로부터 유용한 정도의 순도로 분리하여 생존하고, 효과적인 치료제로의 제형화에 대해 견디는 충분히 강한 화합물을 나타내기 위해 사용된다.

본원에서 사용되는 용어 "포유동물"은 인간 및 가축, 예를 들어, 실험실 동물 또는 애완 동물(예를 들어, 래트, 마우스, 기니아 피그, 고양이, 개, 돼지, 소, 양, 염소, 말, 토끼, 영장류), 및 비-가축, 예를 들어, 야생동물 등을 포함한다.

본원에서 사용되는 용어 "선택적" 또는 "선택적으로"는 상호교환적으로 사용될 수 있으며, 이후 기재되는 요소, 성분, 사건 또는 상황이 발생하거나 발생하지 않을 수 있음을 의미하며, 요소, 성분, 사건 또는 상황이 발생하는 예 및 이들이 발생하지 않는 예를 포함한다. 예를 들어, "선택적으로 치환되는 아릴"은 아릴 라디칼이 치환되거나 치환되지 않을 수 있음을 의미하며, 다른 말로 상기 기재는 치환된 아릴 라디칼 및 치환이 없는 아릴 라디칼 둘 모두를 포함한다.

고려되는 화합물, 의학 조성물 및 조성물은 적어도 하나의 약학적 또는 영양학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하거나, 이들을 추가로 포함하거나, 이들로 구성될 수 있다. 본원에서 사용되는 문구 "약학적 또는 영양학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제"는 인간 또는 가축에서 사용하기에 허용되는 것으로 미국 식품의약청에 의해 승인된 임의의 애쥬번트, 담체, 부형제, 활택제, 감미제, 희석제, 보존제, 염료/착색제, 향미 증강제, 계면활성제, 습윤제, 분산제, 현탁제, 안정화제, 등장화제, 용매, 또는 유화제를 포함한다.

고려되는 화합물, 의학 조성물 및 조성물은 적어도 하나의 약학적으로 또는 영양학적으로 허용되는 염을 포함하거나, 이들을 추가로 포함하거나, 이들로 구성될 수 있다. 본원에서 사용되는 문구 "약학적으로 또는 영양학적으로 허용되는 염"은 산 부가염 및 염기 부가염 둘 모두를 포함한다.

본원에서 사용되는 문구 "약학적으로 또는 영양학적으로 허용되는 산 부가염"은 생물학적 유효성 및 자유 염기의 특성을 보유하고, 생물학적 또는 달리 바람직하지 않지는 않고, 무기산, 예를 들어, 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등, 및 유기산, 예를 들어, 아세트산, 2,2-디클로로아세트산, 아디프산, 알긴산, 아스코르브산, 아스파르트산, 벤젠설폰산, 벤조산, 4-아세트아미도벤조산, 캄포르산, 캄포르-10-설폰산, 카프르산, 카프로산, 카프릴산, 탄산, 신남산, 시트르산, 사이클라민산, 도데실황산, 에탄-1,2-디설폰산, 에탄설폰산, 2-하이드록시에탄설폰산, 포름산, 푸마르산, 갈락타르산, 겐티스산, 글루코헵톤산, 글루콘산, 글루쿠론산, 글루탐산, 글루타르산, 2-옥소-글루타르산, 글리세로포스포르산, 글리콜산, 히푸르산, 이소부티르산, 락트산, 락토바이오산, 라우르산, 말레산, 말산, 말론산, 만델산, 메탄설폰산, 뮤신산, 나프탈렌-1,5-디설폰산, 나프탈렌-2-설폰산, 1-하이드록시-2-나프토산, 니코틴산, 올레산, 오로트산, 옥살산, 팔미트산, 파모산, 프로피온산, 피로글루탐산, 피루브산, 살리실산, 4-아미노살리실산, 세바스산, 스테아르산, 숙신산, 타르타르산, 티오시안산, p-톨루엔설폰산, 트리플루오로아세트산, 운데실렌산 등으로 형성되는 염을 나타낸다.

본원에서 사용되는 문구 "약학적으로 또는 영양학적으로 허용되는 염기 부가염은 생물학적 유효성 및 자유 산의 특성을 보유하고, 생물학적 또는 달리 바람직하지 않지는 않은 염을 나타낸다. 이들 염은 자유 산으로의 무기 염기 또는 유기 염기의 첨가로부터 제조된다. 무기 염기로부터 유래된 염은 소듐, 포타슘, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망간, 알루미늄 염 등을 포함한다. 특정 구현예에서, 무기 염은 암모늄, 소듐, 포타슘, 칼슘, 또는 마그네슘 염이다. 유기 염기로부터 유래된 염은 일차, 이차, 및 삼차 아민, 치환된 아민, 예를 들어, 천연 발생의 치환된 아민, 사이클릭 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예를 들어, 암모니아, 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 디에탄올아민, 에탄올아민, 데아놀, 2-디메틸아미노에탄올, 2-디에틸아미노에탄올, 디사이클로헥실아민, 리신, 아르기닌, 히스티딘, 프로카인, 하이드라바민, 콜린, 베타인, 베네타민, 벤자틴, 에틸렌디아민, 글루코사민, 메틸글루카민, 테오브로민, 트리에탄올아민, 트로메타민, 퓨린, 피페라진, 피페리딘, N-에틸피페리딘, 폴리아민 수지 등의 염을 포함한다. 특히 유용한 유기 염기는 이소프로필아민, 디에틸아민, 에탄올아민, 트리메틸아민, 디사이클로헥실아민, 콜린, 또는 카페인을 포함한다.

종종, 결정화는 고려되는 화합물의 용매화물을 생성시키거나, 고려되는 화합물을 포함한다. 본원에서 사용되는 용어 "용매화물"은 고려되는 화합물, 의학 조성물 또는 조성물의 하나 이상의 분자와 용매의 하나 이상의 분자를 포함하는 응집물을 나타낸다. 용매는 물일 수 있고, 이러한 경우, 용매화물은 수화물일 수 있다. 대안적으로, 용매는 유기 용매일 수 있다. 따라서, 고려되는 화합물, 의학 조성물 또는 조성물은 수화물, 예를 들어, 일수화물, 이수화물, 반수화물, 세스퀴수화물, 삼수화물, 사수화물 등뿐만 아니라 상응하는 용매화된 형태로 존재할 수 있다. 고려되는 화합물, 의학 조성물 또는 조성물은 진정한 용매화물일 수 있는 한편, 다른 경우에는, 고려되는 화합물, 의학 조성물 또는 조성물은 단지 외래의 물을 보유하거나, 물 및 일부 외래의 용매의 혼합물일 수 있다.

"약학적 조성물" 또는 "영양학적 조성물"은 고려되는 화합물, 의학 조성물 또는 조성물 및 포유동물, 예를 들어, 인간으로의 생물학적 활성 화합물의 전달을 위해 당 분야에서 일반적으로 허용되는 매질의 제형을 나타낸다. 예를 들어, 고려되는 약학적 화합물, 의학 조성물 또는 조성물은 독립형 조성물로서, 또는 처방약, 처방전 없이 구입할 수 있는(OTC) 약, 식물성 약제, 약초 약, 유사요법의 약물(homeopathic agent) 내의 성분으로서, 또는 정부 기관에 의해 검토되고 승인되는 임의의 다른 형태의 건강 관리 제품으로 제형화되거나 사용될 수 있다. 예시적이고 고려되는 영양학적 조성물은 단독형 조성물로서, 또는 식품, 신규한 식품, 기능성 식품, 음료, 바, 식품 향료, 식품 첨가제, 의료용 식품, 식이 보충제, 또는 한방 제품 내의 영양 또는 생체활성 성분으로서 제형화되거나 사용될 수 있다. 당 분야에서 일반적으로 허용되는 매질은 이에 대한 모든 약학적 또는 영양학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함한다.

본원에서 사용되는 문구 "~에 대해 농축된"은 추출 또는 다른 제조 전에 식물 물질 또는 다른 공급원의 중량에서 발견되는 하나 이상의 활성 화합물의 양 또는 활성에 비해 하나 이상의 활성 화합물의 양 또는 활성에서의 적어도 약 2배 내지 약 1000배의 증가를 갖는 식물 추출물 또는 다른 제조물을 나타낸다. 특정 구현예에서, 추출 또는 다른 제조 전의 식물 물질 또는 다른 공급원의 중량은 건조 중량, 습윤 중량, 또는 이들의 조합일 수 있다.

본원에서 사용되는 "주요 활성 성분" 또는 "주요 활성 구성성분"은 적어도 하나의 생물학적 활성이 있을 수 있는, 식물 추출물 또는 다른 제조물에서 발견되거나, 식물 추출물 또는 다른 제조물에 대해 농축되는 하나 이상의 활성의 고려되는 화합물을 나타낸다. 특정 구현예에서, 농축된 추출물의 주요 활성 성분은 상기 추출물에서 농축된 하나 이상의 활성 화합물일 것이다. 일반적으로, 하나 이상의 주요 활성 성분은 다른 추출물 성분과 비교하여 하나 이상의 측정 가능한 생물학적 활성 또는 효과의 대부분(즉, 50% 초과)을 직접적 또는 간접적으로 제공할 것이다. 특정 구현예에서, 주요 활성 성분은 추출물의 중량 백분율을 기준으로 소량의 성분(예를 들어, 추출물 내에 함유된 성분의 약 50%, 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 또는 1% 미만)일 수 있으나, 원하는 생물학적 활성의 대부분을 여전히 제공할 수 있다. 주요 활성 성분을 함유하는 임의의 고려되는 조성물은 또한 주요 활성 성분의 수준이 아닌 농축된 조성물의 약학적 또는 영양학적 활성에 기여하거나 기여하지 않을 수 있는 소량의 활성 성분을 함유할 수 있으며, 소량의 활성 성분 단독은 주요 활성 성분의 부재하에서 효과적이지 않을 수 있다.

본원에서 사용되는 문구 "유효량" 또는 "치료적 유효량"은 포유동물, 예를 들어, 인간에게 투여되는 경우 (1) 포유동물에서 간세포의 손상을 치료하거나 예방하고; (2) 간 건강을 촉진시키고; (3) 포유동물에서 해독 및 항산화 간 효소를 보존시키고; (4) 포유동물에서 간 해독 능력을 증가시키고; (5) 포유동물에서 간 질환을 치료하거나 예방하고; (6) 포유동물에서 간의 염증을 변형시키고; (7) 간 재생 기능을 개선하는 것 중 어느 하나 이상을 포함하는 치료를 달성하기에 충분한 고려되는 화합물, 의학 조성물 또는 조성물의 양을 나타낸다. "치료적 유효량"을 구성하는 고려되는 화합물, 의학 조성물 또는 조성물의 양은 화합물, 치료되는 질환 및 이의 중증도, 투여 방식, 치료 기간, 또는 치료되는 대상체의 체중 및 연령에 따라 다양할 것이나, 당업자가 자신의 지식 및 본 개시내용을 고려하여 결정할 수 있다.

본원에서 사용되는 "보충제"는 천연 상태 또는 생물학적 과정과 관련된 특정 상태, 구조 또는 기능을 개선하거나, 촉진하거나, 지원하거나, 증가시키거나, 조절하거나, 관리하거나, 제어하거나, 유지시키거나, 최적화시키거나, 변형시키거나, 감소시키거나, 억제하거나, 예방하는(즉, 질병을 진단하거나, 치료하거나, 완화시키거나, 치유하거나, 예방하는데 사용되지 않는) 생성물을 나타낸다. 특정 구현예에서, 보충제는 식이 보충제이다. 예를 들어, 간 건강-관련 질환과 관련하여, 식이 보충제는 간 기능을 유지시키거나, 간 세포 손상을 최소화시키거나, 항산화 온전성을 보호함으로써 건강한 간을 촉진하거나, 간 건강에 영향을 미치는 자유 라디칼의 작용을 감소시키거나, 간 해독 능력 및/또는 기능을 개선하거나, 간 기능을 지원하거나, 간 통증을 경감시키거나, 간의 불편함을 경감시키거나, 지방간을 경감시키거나, 간 해독 능력을 개선하거나, 간 면역 기능을 개선하거나, 간 재생 기능을 개선하는 등에 사용될 수 있다. 특정 구현예에서, 식이성 보충제는 특별한 카테고리의 식이, 식품 또는 둘 모두이나, 약물은 아니다.

용어 "치료하는" 또는 "치료" 또는 "개선하는"은 상호교환적으로 사용될 수 있고, 관심 질병 또는 질환에 걸리거나 걸린 것으로 의심되는 포유동물, 예를 들어, 인간에서의 관심 질병 또는 질환의 치료적 치료 또는 방지적/예방적 치료를 나타내며, 이는 (i) 포유동물에서, 특히 이러한 포유동물이 질환에 걸리기 쉬우나, 아직 질환에 걸린 것으로 진단되지 않은 경우에, 포유동물에서 질병 또는 질환이 발생하는 것을 예방하거나; (ii) 질병 또는 질환을 억제, 즉, 질병 또는 질환의 발달을 억제하거나; (iii) 질병 또는 질환을 경감, 즉, 질병 또는 질환의 회귀를 야기시키거나; (iv) 기저 질병 또는 질환을 다루지 않고 질병 또는 질환으로부터 발생하는 증상을 경감(예를 들어, 통증 경감, 염증 감소, 해독 능력의 손실 감소)시키는 것을 포함한다.

본원에서 사용되는 용어 "질병" 및 "질환"은 상호교환적으로 사용될 수 있거나, 특정 병 또는 질환이 공지된 원인 물질을 갖지 않아서(따라서, 병인이 아직 밝혀지지 않음), 이에 따라 질병으로 아직 인식되지는 않았지만 바람직하지 않은 상태 또는 증후군으로 인식된다는 점에서 상이할 수 있으며, 여기서 임상의에 의해 더욱 특정하거나 덜 특정한 세트의 증상이 확인된다. 특정 구현예에서, 고려되는 화합물, 의학 조성물, 조성물 및 방법은, 예를 들어, 간염, 알콜 간 질환, 간경화 또는 모두를 치료하기 위해 사용된다.

본원에서 사용되는 "통계적 유의성"은 스튜던츠 t-검정(Students t-test)을 이용하여 계산되는 0.050 이하의 p 값을 나타내며, 측정되는 특정 사건 또는 결과가 우연히 발생했을 가능성이 희박함을 나타낸다.

본원에서 사용되는 화학 명명 프로토콜 및 임의의 구조도는 ACD/Name Version 9.07 소프트웨어 프로그램 또는 ChemDraw Ultra Version 11.0 소프트웨어 명명 프로그램(CambridgeSoft)을 이용한 I.U.P.A.C. 명명법 시스템의 변형된 형태이며, 본 발명의 개시의 화합물은 중심 코어 구조, 예를 들어, 이미다조피리딘 구조의 유도체로서 본원에서 명명된다. 본원에서 사용되는 복잡한 화학명에 있어서, 치환기 그룹은 그것이 그룹에 부착되기 전에 명명된다. 예를 들어, 사이클로프로필에틸은 사이클로프로필 치환기를 갖는 에틸 백본을 포함한다.

특정 구현예에서, 고려되는 화합물 및 조성물(예를 들어, 약학적, 영양학적)은 간 건강을 촉진하거나; 간 건강을 개선하거나; 간 건강을 유지시키거나; 간 건강을 치료하거나 관리하거나; 간 건강을 지원하거나; 간 해독 기능의 정상적이고 편안한 범위를 지원하거나; 간의 자유 라디칼 청소 능력을 개선하거나; 화학물질, 약물, 대사물, 및 생물학적 독소로부터 유래된 유해한 자유 라디칼의 손상을 감소시키거나; 간 건강에 영향을 미치는 효소를 보존시키거나, B/C형 간염 바이러스 감염, 알콜 소비, 대사 장애, 비-알콜성 지방간 질환(NAFLD), 비-알콜성 지방간염(NASH), 알콜성 간질환, 간성 뇌병증, 간 섬유증식 질환(간 섬유증), 저산소증/재산소화 동안의 간세포 손상, 또는 이들의 임의의 조합, 또는 본원에 기재된 임의의 다른 관련 적응증으로 인한 만성 산화 스트레스 유발성 간 손상으로부터 보호하기에 충분한 양으로, 일반적으로 환자에게 허용되는 독성으로 투여될 수 있다.

특정한 다른 구현예에서, 본 발명의 개시의 화합물 및 조성물(예를 들어, 약학적, 영양학적)은 간염, 알콜 간 질환, 지방간 질환, 간경화, 섬유증, 대사 증후군, 간부전, 간세포 암종, 원발 쓸개관 간경화증, 또는 임의의 다른 관련된 적응증을 치료하기에 충분한 양으로, 일반적으로 환자에게 허용되는 독성으로 투여될 수 있다.

순수한 형태이거나 적절한 약학적 또는 영양학적 조성물 형태의 고려되는 화합물, 의학 조성물 또는 조성물, 또는 이의 약학적 또는 영양학적으로 허용되는 염의 투여는 유사한 효용을 제공하기 위해 제제의 허용되는 임의의 투여 방식을 통해 수행될 수 있다. 고려되는 약학적 또는 영양학적 조성물은 고려되는 화합물과 적절한 약학적 또는 영양학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 조합함으로써 제조될 수 있으며, 고체, 반고체, 액체 또는 가스성 형태의 제조물, 예를 들어, 정제, 캡슐, 분말, 과립, 연고, 용액, 좌약, 주사액, 흡입제, 젤, 미세구, 및 에어로졸로 제형화될 수 있다. 상기 약학적 또는 영양학적 조성물을 투여하는 통상적인 경로는 경구, 국소, 경피, 흡입, 비경구, 설하, 협측, 직장, 질내, 또는 비내를 포함한다.

일부 구현예에서, 고려되는 약학적 또는 영양학적 제형은 약 0.5 중량 퍼센트 내지 약 90 중량 퍼센트의 추출 혼합물의 활성 성분을 포함한다. 일부 구현예에서, 고려되는 조성물은 인간 또는 동물의 체중 kg 당 약 0.01 내지 약 500 mg의 용량으로 투여된다.

본원에서 사용되는 용어 "비경구"는 피하 주사, 정맥내, 근내, 흉골내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 고려되는 약학적 또는 영양학적 조성물은 그 안에 함유된 활성 성분이 환자로의 조성물의 투여시 또는 투여 직후에 생체 이용가능해지도록 제형화된다. 일부 구현예에서, 고려되는 조성물 및 화합물은 이들이 투여 후에 시간 방출될 수 있도록 설계되거나 제형화될 수 있다.

특정 구현예에서, 고려되는 조성물은 하나 이상의 투여 단위의 형태로 대상체 또는 환자에게 투여되고, 여기서, 예를 들어, 정제는 단일 투여 단위일 수 있고, 에어로졸 형태의 고려되는 화합물의 용기는 복수의 투여 단위를 보유할 수 있다. 상기 투여 형태를 제조하는 실제 방법은 당업자에게 공지되어 있거나, 당업자에게 명백할 것이며, 예를 들어, 문헌[Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition (Philadelphia College of Pharmacy and Science, 2000)]을 참조한다. 투여되는 고려되는 조성물은 임의의 사건에서 본 발명의 개시의 교시내용에 따라 관심 질병 또는 질환의 치료를 위해 치료적 유효량의 고려되는 화합물 또는 이의 약학적 또는 영양학적으로 허용되는 염을 함유할 것이다.

고려되는 약학적 또는 영양학적 조성물은 고체 또는 액체의 형태로 존재할 수 있다. 일 양태에서, 담체(들)은 미립자이며, 따라서 조성물은, 예를 들어, 정제 또는 분말 형태이다. 담체(들)은 액체일 수 있으며, 조성물은, 예를 들어, 구강 시럽, 주사 가능한 액체, 또는, 예를 들어, 흡입 투여에 유용한 에어로졸이다.

경구 투여용으로 의도된 경우, 약학적 또는 영양학적 조성물은 고체 또는 액체 형태이며, 반고체, 반액체, 현탁액 및 젤 형태가 고체 또는 액체로서 본원에서 고려되는 형태 내에 포함된다.

경구 투여를 위한 고체 조성물로서, 약학적 또는 영양학적 조성물은 분말, 과립, 압축 정제, 환약, 캡슐, 추잉 검, 웨이퍼, 바 등으로 제형화될 수 있다. 상기 고체 조성물은 통상적으로 하나 이상의 비활성 희석제 또는 식용 담체를 함유할 것이다. 또한, 결합제, 예를 들어, 카르복시메틸셀룰로스, 에틸 셀룰로스, 사이클로덱스트린, 미정질 셀룰로스, 검 트래거캔쓰 또는 젤라틴; 부형제, 예를 들어, 전분, 락토스 또는 덱스트린, 붕해제, 예를 들어, 알긴산, 소듐 알기네이트, Primojel®, 옥수수 전분 등; 윤활제, 예를 들어, 마그네슘 스테아레이트 또는 Sterotex®; 활택제, 예를 들어, 콜로이드성 실리콘 디옥사이드; 감미제, 예를 들어, 수크로스 또는 사카린; 착향제, 예를 들어, 페퍼민트, 메틸 살리실레이트 또는 오렌지 착향제; 및 착색제 중 하나 이상이 존재할 수 있다.

약학적 또는 영양학적 조성물이 캡슐, 예를 들어, 젤라틴 캡슐의 형태로 존재하는 경우, 이는 상기 유형의 물질에 더하여 액체 담체, 예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜 또는 오일을 함유할 수 있다.

고려되는 약학적 또는 영양학적 조성물은 액체, 예를 들어, 엘릭서, 시럽, 젤, 용액, 에멀젼 또는 현탁액의 형태로 존재할 수 있다. 액체는 두가지 예로서 경구 투여용 또는 주사에 의한 전달용일 수 있다. 경구 투여용으로 의도된 경우, 유용한 조성물은 본 발명의 화합물에 더하여 감미제, 보존제, 염료/착색제 및 향미 증강제 중 하나 이상을 함유한다. 주사에 의해 투여하고자 하는 조성물에서, 계면활성제, 보존제, 습윤제, 분산제, 현탁제, 완충제, 안정화제 및 등장화제 중 하나 이상이 포함될 수 있다.

용액이거나, 현탁액이거나, 다른 유사한 형태이건 간에 고려되는 액체의 약학적 또는 영양학적 조성물은 멸균 희석제, 예를 들어, 주사용수, 염수 용액, 예를 들어, 생리식염수, 링거액, 등장성 소듐 클로라이드, 고정유, 예를 들어, 용매 또는 현탁 매질로서 작용할 수 있는 합성 모노 또는 디글리세라이드, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 다른 용매; 항균제, 예를 들어, 벤질 알콜 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예를 들어, 아스코르브산 또는 소듐 바이설파이트; 킬레이트제, 예를 들어, 에틸렌디아민테트라아세트산; 완충제, 예를 들어, 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트 및 긴장성의 조절을 위한 제제, 예를 들어, 소듐 클로라이드 또는 덱스트로스의 애쥬번트 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 비경구 제조물은 유리 또는 플라스틱으로 제조된 앰풀, 일회용 주사기 또는 다중 용량 바이알에 넣을 수 있다. 생리식염수는 일반적으로 유용한 애쥬번트이다. 주사 가능한 약학적 또는 영양학적 조성물은 멸균 조성물이다.

비경구 또는 경구 투여용으로 의도되는 고려되는 액체의 약학적 또는 영양학적 조성물은 적합한 투여량이 획득될 수 있는 일정량의 고려되는 화합물, 의학 조성물 또는 조성물을 함유해야 한다.

고려되는 약학적 또는 영양학적 조성물은 국소 투여용으로 의도될 수 있으며, 이 경우 담체는 적합하게는 용액, 에멀젼, 크림, 로션, 연고, 또는 젤 베이스를 포함할 수 있다. 베이스는, 예를 들어, 바셀린, 라놀린, 폴리에틸렌 글리콜, 꿀벌 왁스, 무기질유, 희석제, 예를 들어, 물 및 알콜, 및 유화제 및 안정화제 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 증점제는 국소 투여용의 약학적 또는 영양학적 조성물 내에 존재할 수 있다. 경피 투여용으로 의도하는 경우, 조성물은 경피 패치 또는 이온삼투압 장치를 포함할 수 있다.

고려되는 약학적 또는 영양학적 조성물은, 예를 들어, 직장에서 용융되어, 약물을 방출할 좌약의 형태로 직장 투여용으로 의도될 수 있다. 직장 투여용 조성물은 적합한 비자극성 부형제로서 유성 베이스를 함유할 수 있다. 상기 베이스는 라놀린, 코코아 버터 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.

고려되는 약학적 또는 영양학적 조성물은 고체 또는 액체 투여 단위의 물리적 형태를 변형시키는 다양한 물질을 포함할 수 있다. 예를 들어, 조성물은 활성 성분 주위에 코팅 껍질을 형성하는 물질을 포함할 수 있다. 코팅 껍질을 형성하는 물질은 통상적으로 비활성이며, 예를 들어, 당, 쉘락, 및 다른 장용성 코팅제로부터 선택될 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 젤라틴 캡슐에 넣을 수 있다.

고체 또는 액체 형태의 고려되는 약학적 또는 영양학적 조성물은 고려되는 화합물에 결합함으로써 화합물의 전달을 돕는 제제를 포함할 수 있다. 이러한 능력으로 작용할 수 있는 적합한 제제는 모노클로날 또는 폴리클로날 항체, 단백질 또는 리포솜을 포함한다.

고체 또는 액체 형태의 고려되는 약학적 또는 영양학적 조성물은, 예를 들어, 생체이용률을 개선하기 위해 입자의 크기를 감소시키는 것을 포함할 수 있다. 부형제를 갖거나 부형제를 갖지 않는 조성물 내의 분말, 과립, 입자, 미세구 등의 크기는 크고(예를 들어, 눈에 보이거나 적어도 100 μm 크기), 작고(예를 들어, 약 100 μm 내지 약 100 nm의 크기 범위일 수 있음), 나노이고(예를 들어, 100 nm 이하의 크기일 수 있음), 크기 및 벌크 밀도를 개선하는 그 사이의 임의의 크기 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다.

고려되는 약학적 또는 영양학적 조성물은 에어로졸로 투여될 수 있는 투여 단위를 포함하거나, 이로 구성될 수 있다. 용어 에어로졸은 콜로이드 특성의 시스템으로부터 가압 패키지로 구성된 시스템까지 이르는 다양한 시스템을 나타내기 위해 사용된다. 전달은 액화 또는 압축 가스 또는 활성 성분을 분배하는 적합한 펌프 시스템에 의해 이루어질 수 있다. 본 발명의 개시의 화합물의 에어로졸은 활성 성분(들)을 전달하기 위해 단일상, 이상, 또는 삼상 시스템으로 전달될 수 있다. 에어로졸의 전달은 필요한 용기, 작동기, 밸브, 하위용기 등을 포함하며, 이들은 함께 키트를 형성할 수 있다. 당업자는 과도한 실험 없이 가장 적절한 에어로졸(들)을 결정할 수 있다.

고려되는 약학적 또는 영양학적 조성물은 약학적 또는 영양학적 분야에 널리 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 주사에 의해 투여되는 것으로 의도되는 약학적 또는 영양학적 조성물은 고려되는 화합물과 멸균 증류수를 조합하여 용액을 형성시킴으로써 제조될 수 있다. 계면활성제는 균일한 용액 또는 현탁액의 형성을 촉진하기 위해 첨가될 수 있다. 계면활성제는 고려되는 화합물과 비공유적으로 상호작용하여 수성 전달 시스템에서의 화합물의 용해 또는 균일한 현탁을 촉진하는 화합물이다.

고려되는 화합물, 조성물 및 의학 조성물, 또는 이들의 약학적 또는 영양학적으로 허용되는 염은 이용되는 특정 화합물의 활성; 화합물의 대사 안정성 및 작용 길이; 환자의 연령, 체중, 전반적 건강, 성별, 및 식이; 투여 방식 및 시간; 배출 속도; 약물 조합; 특정 장애 또는 질환의 중증도; 및 요법을 받는 대상체를 포함하는 다양한 요인에 따라 가변적일 치료적 유효량으로 투여된다.

고려되는 화합물, 조성물 및 의학 조성물, 또는 이들의 약학적 또는 영양학적으로 허용되는 유도체는 또한 하나 이상의 다른 치료제의 투여와 동시에, 또는 투여 전에, 또는 투여 후에 투여될 수 있다. 상기 조합 요법은 고려되는 화합물 및 하나 이상의 추가 활성제를 함유하는 단일한 약학적 또는 영양학적 투여 제형의 투여뿐만 아니라 자체의 별도의 약학적 또는 영양학적 투여 제형으로의 고려되는 화합물 및 각각의 활성제의 투여를 포함한다. 예를 들어, 고려되는 화합물 및 또 다른 활성제는 단일한 경구 투여 조성물, 예를 들어, 정제 또는 캡슐로 함께 환자에게 투여될 수 있거나, 각각의 제제는 별도의 경구 투여 제형으로 투여될 수 있다. 별도의 투여 제형이 사용되는 경우, 고려되는 화합물 및 하나 이상의 추가 활성제는 본질적으로 동일한 시간에, 즉, 동시에, 또는 별도의 시차를 두어, 즉, 순차적으로 투여될 수 있으며; 조합 요법은 이들 모든 요법을 포함하는 것으로 이해된다.

본 발명의 설명에서, 기재된 화학식의 치환기 또는 변수의 조합은 상기 기여가 안정한 화합물을 발생시키는 경우에만 허용되는 것으로 이해된다.

본원에 기재된 방법에서 중간 화합물의 작용기가 적합한 보호기에 의해 보호될 필요가 있음이 또한 당업자에 의해 인지될 것이다. 상기 작용기는 하이드록시, 아미노, 머캅토 및 카르복실산을 포함한다. 하이드록시에 대해 적합한 보호기는 트리알킬실릴 또는 디아릴알킬실릴(예를 들어, t-부틸디메틸실릴, t-부틸디페닐실릴 또는 트리메틸실릴), 테트라하이드로피라닐, 벤질 등을 포함한다. 아미노, 아미디노 및 구아니디노에 대해 적합한 보호기는 t-부톡시카르보닐, 벤질옥시카르보닐 등을 포함한다. 머캅토에 대한 적합한 보호기는 C(O)R"(여기서, R"은 알킬, 아릴 또는 아릴알킬임), p-메톡시벤질, 트리틸 등을 포함한다. 카르복실산에 대한 적합한 보호기는 알킬, 아릴 또는 아릴알킬 에스테르를 포함한다. 보호기는 당업자에게 공지되어 있고 본원에 기재된 바와 같은 표준 기술에 따라 첨가되거나 제거될 수 있다. 보호기의 사용은 전체내용이 참조로서 본원에 포함되는 문헌[Green, T.W. and P.G.M. Wutz, Protective Groups in Organic Synthesis (1999), 3rd Ed., Wiley]에 상세히 기재되어 있다. 당업자가 인지할 바와 같이, 보호기는 또한 중합체 수지, 예를 들어, 왕 수지(Wang resin), 링크 수지(Rink resin) 또는 2-클로로트리틸-클로라이드 수지일 수 있다.

고려되는 화합물의 상기 보호된 유도체는 그 자체로 약리학적 활성을 갖지 않을 수 있으나, 이들은 포유동물에 투여될 수 있고, 이후에 신체 내에서 대사되어 약리학적으로 활성인 화합물을 형성할 수 있음이 당업자에 의해 또한 인지될 것이다. 따라서, 상기 유도체는 "프로드러그"로 기재될 수 있다. 고려되는 화합물의 모든 프로드러그는 본 발명의 개시의 범위 내에 포함된다.

또한, 자유 염기 또는 산 형태로 존재하는 고려되는 화합물은 당업자에게 공지된 방법에 의해 적절한 무기 또는 유기 염기 또는 산을 이용한 처리에 의해 이의 약학적 또는 영양학적으로 허용되는 염으로 전환될 수 있다. 고려되는 화합물의 염은 표준 기술에 의해 이의 자유 염기 또는 산 형태로 전환될 수 있다.

일부 구현예에서, 고려되는 화합물, 조성물 및/또는 의학 조성물은 식물 공급원, 예를 들어, 실시예 및 본 출원 전체에 걸쳐 다른 곳에 포함된 식물로부터 분리될 수 있다. 고려되는 추출물 및 화합물의 분리에 적합한 식물 부분은 잎, 나무껍질, 나무줄기, 나무줄기 껍질, 줄기, 줄기 껍질, 잔가지, 괴경, 뿌리, 뿌리 껍질, 껍질 표면(예를 들어, 코르크 조직, 코르크 형성층, 코르크 피층, 또는 이들의 임의의 조합물을 포함할 수 있는 주피 또는 폴리덤(polyderm)), 어린 싹, 근경, 종자, 과일, 수꽃술군, 암술군, 꽃받침(calyx), 수술, 꽃잎, 꽃받침(sepal), 암술잎(암술), 꽃, 또는 이들의 임의의 조합물을 포함한다. 고려되는 식물 추출물은 줄기, 줄기 껍질, 나무줄기, 나무줄기 껍질, 잔가지, 괴경, 뿌리, 뿌리 껍질, 어린 싹, 종자, 근경, 꽃 및 다른 생식 기관, 잎, 다른 공중 부분 또는 이들의 조합물로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 식물 부분으로부터 유래될 수 있다. 일부 관련 구현예에서, 고려되는 화합물은 식물 공급원으로부터 분리되고, 언급된 치환기 중 임의의 치환기를 함유하도록 합성적으로 변형된다. 이와 관련하여, 식물로부터 분리된 고려되는 화합물의 합성 변형은 당 분야에 공지되어 있고, 충분히 당업자의 지식 범위 내에 있는 임의의 수의 기술을 이용하여 달성될 수 있다.

실시예

실시예 1: 동물

25-30g의 체중을 갖는 7-8주령의 목적 사육 마우스를 Charles River Laboratories(Wilmington, MA)로부터 구입하였다. 동물을 도착한 후에 1주일 동안 순응시킨 후, 체중을 재고, 이들 각각의 그룹으로 무작위로 배정하였다. ICR 마우스(5/케이지)를 폴리프로필렌 케이지에서 사육하고, 이들 꼬리 상의 번호에 의해 개별적으로 확인하였다. 각각의 케이지는 와이어 바 뚜껑 및 여과 탑(filtered top)(Allentown, NJ)으로 덮었다. 각각의 개별적 케이지를 프로젝트 번호, 시험 항목, 용량 수준, 그룹, 및 동물 번호를 나타내는 케이지 카드로 확인하였다. Harlan T7087 소프트 콥(soft cob) 깔짚을 사용하였고, 적어도 매주 2회 변경하였다. 동물에게 담수 및 설치류 먹이 #T2018(Harlan Teklad, 370W, Kent, WA)를 자유롭게 제공하였고, 12시간의 명암 주기로 온도 조절실(22.2℃)에서 사육하였다. 모든 동물 실험을 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 가이드와 일치하는 기관 지침에 따라 수행하였다.

실시예 2: 아세트아미노펜(APAP) 또는 사염화탄소(CCL4)-유발 간 손상 동물 모델

예방 및 개입을 다루기 위해 다음과 같이 균형을 이룬 치료 계획을 세우고, 최적화시켰다: APAP-유발 간독성 모델에 대해, 따뜻한 염수(G-Biosciences로부터의 Lot#132908, Quality Biological로부터의 Lot# 720729)(60℃까지 가열하고, 주위 온도로 냉각시킴)에 용해된 400 mg/kg 용량의 APAP(Lot# MKBQ8028V, Sigma)를 밤새 금식한 ICR/CD-1 마우스에 경구 투여하여 독성을 유도하였다. CCl₄-유발 간독성 모델에 대해, 옥수수 오일에 용해된 25 μl/kg 용량의 CCl₄(Lot#SHBD5351V, Sigma)를 밤새 금식한 ICR/CD-1 마우스에 복막내 투여하여 독성을 유도하였다. 둘 모두의 모델에 대해, 물질을 APAP 또는 CCl₄ 투여 전 -48시간, -24시간, -2시간 및 유도 후 +6시간에 투여하였다. 전체적으로, 마우스에 화학 유도 전 3회 용량 및 화학 유도 후 1회 용량을 투여하였다. 10% Tween-20(Amresco로부터의 Lot# 0134C141), 1% CMC(Spectra로부터의 Lot# NH0454) 또는 1% MC(Lot#SLBK4357V)를 모든 물질에 대해 담체 비히클로 사용하였다. APAP 또는 CCl₄가 없는 대조군 마우스에 담체 비히클만 투여하였다. 혈청 ALT를 T24에서 결정하였다(Phoenix Laboratories, Everett, WA).

실시예 3: 유기 추출물의 제조 및 간 보호 효능에 대한 스크리닝

식물을 수집하고, 이들의 활성 화합물 특성을 기초로 하여 다양한 용매로 제조하고, 마우스에서 본 발명의 간독성 동물 모델에서 스크리닝하였다. 표 1의 하기 식물은 마우스에서의 아세트아미노펜-유발 모델 또는 CCl4 유발 모델에서 다양한 수준으로 혈청 ALT 억제를 나타내었다. 둘 모두의 모델에서 효능을 갖는 식물만 추가 연구를 위해 선택될 것이다.

표 1: 식물 추출물의 개요

실시예 4: APAP 및 CCL4-유발 간독성 모델에 대한 식물 추출물의 간 보호 활성

간 보호 및 재생에 대한 역사적 사용법을 기초로 하여 수집된 유산 채집물로부터의 식물 물질을 70% 에탄올을 이용하여 추출하고, APAP 및 CCl₄-유발 간 독성 둘 모두에서의 이들의 효능에 대해 스크리닝하였다. 물질을 표 2에 명시된 투여량으로 동물에게 경구 투여하였다. 하기 표에 기재된 바와 같이, 마우스가 개시된 투여량의 추출물로 처리된 경우 혈청 ALT 및 유의성에서의 다양한 정도의 억제가 관찰되었다. 추출물 미리스티카 프라그란스 및 스키잔드라 키넨시스 각각에 대해 APAP 모델에서 94.4% 및 CCl₄ 모델에서 47.6%의 가장 높은 억제가 관찰되었다.

표 2: APAP/CCl₄-유발 간 독성 모델에서의 식물 추출물에 대한 혈청 ALT의 억제 퍼센트

나머지 추출물에 대해 둘 모두의 모델에서 매우 유사한 수준의 억제가 관찰되었으나, 수집된 식물 물질 중, 푸에라리아 로바타 및 가노더마 루시뎀(Ganoderma lucidem)에 대한 효능은 주로 CCl₄ 모델에 국한되었으며, APAP 모델에서 백분율 또는 유의성에서 재현성을 나타내는데 실패하였다. 특히, 유의성과 무관하게, 모델 중 하나에서 30% 이상의 억제를 갖는 추출물을 추가로 평가하였다.

실시예 5: 아스트라갈루스 멤브라나세우스 및 포리스 코코스 추출물의 제조

분쇄된 아스트라갈루스 멤브라나세우스 뿌리 분말은 물로 추출되어, UV 비색 방법에 의해 20% 이상의 다당류 및 HPLC 방법에 의해 0.3% 이상의 아스트라갈로시드의 명세를 갖는 물 추출물이 획득될 수 있었다. 메탄올 추출물(ME) 또는 에탄올 추출물(EE), 에탄올:H₂O(7:3) 추출물, 에탄올:H₂O(1:1) 추출물, 및 에탄올:H₂O(3:7) 추출물 각각을 제공하기 위해 용매를 메탄올 또는 에탄올로 대체하여 유사한 결과가 획득되었다.

건조되고 분쇄된 포리스 코코스의 과일 몸체를 먼저 에탄올로 추출한 후 물로 추출하여 비-극성 성분 및 극성 성분 둘 모두를 추출하였다. 에탄올 추출물 및 물 추출물을 함께 조합하여 UV 비색 방법에 의해 20% 이상의 다당류 및 HPLC 또는 비색 방법에 의해 10% 이상의 트리테르펜의 명세를 갖는 최종 포리스 코코스 추출물을 생성시켰다. 메탄올 추출물(ME) 또는 에탄올 추출물(EE), 에탄올:H₂O(7:3) 추출물, 에탄올:H₂O(1:1) 추출물, 에탄올:H₂O(3:7) 추출물 및 물 추출물 각각을 제공하기 위해 용매를 메탄올 또는 에탄올로 대체하여 유사한 결과가 획득되었다.

실시예 6: 아르테미시아 카필라리스의 유기 추출물의 제조

건조되고 분쇄된 공중 부분의 아르테미시아 카필라리스(2.5 kg)를 절단하고, 분쇄시킨 후, 약 15배 부피(37.5 L)의 물 중 70% 에틸 알콜(v/v)로 추출하였다. 추출을 3시간 동안 85℃에서 수행하였다. 여과 후, 에탄올 용액을 40℃에서 진공하에서 회전 증발기로 농축시켰다. 이러한 추출 및 농축 절차를 2시간 동안 10배 부피(25 L)의 물 중 70% 에틸 알콜(v/v)로 2회 반복하였다. 농축된 추출 용액을 진공 건조 오븐으로 증발 건조시켜, 19.2%의 추출 수율로 480 g의 아르테미시아 카필라리스 70% EtOH 추출물 분말(lot# RN367-3-60M)을 생성시켰다.

건조되고 분쇄된 아르테미시아 카필라리스 풀잎(180.4 g)을 각 횟수에서 1시간 동안 환류시켜 물 중 70% 에탄올로 3회 추출하였다. 유기 용액을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 20.9%의 수율로 70% 에탄올 추출물(R594-70EE) 37.7 g을 생성시켰다. 메탄올 추출물(ME) 또는 에탄올 추출물(EE), 에탄올:H₂O(7:3) 추출물, 에탄올:H₂O(1:1) 추출물, 에탄올:H₂O(3:7) 추출물 및 물 추출물 각각을 제공하기 위해 동일한 절차를 이용하나, 유기 용매를 메탄올 또는 에탄올로 대체하여 유사한 결과가 획득되었다.

실시예 7: 스키잔드라 키넨시스 과일로부터의 유기 추출물의 제조

전체 20 g의 스키잔드라 키넨시스의 건조된 과일을 2개의 100 ml 스테인리스 강철 튜브에 로딩하고, 80도 및 1500 psi의 압력에서 ASE 300 자동화 추출기를 이용하여 물 중 유기 70% EtOH로 2회 추출하였다. 추출 용액을 자동 여과시키고, 수집하였다. 조합된 용액을 회전 증발기로 증발 건조시켜, 미정제 70% EtOH 추출물(9.65 g, 49.5%)을 생성시켰다.

메탄올 추출물(ME) 또는 에탄올 추출물(EE), 에탄올:H₂O(7:3) 추출물, 에탄올:H₂O(1:1) 추출물, 에탄올:H₂O(3:7) 추출물 및 물 추출물 각각을 제공하기 위해 동일한 절차를 이용하나, 유기 용매를 메탄올 또는 에탄올로 대체하여 유사한 결과가 획득되었다.

스키잔드라 키넨시스 추출물을 70% 에탄올/30% 물(v/v)에 의한 건조된 과일의 추출로 제조하였다. 추출물을 추가로 가공하여 스키잔드린, 스키잔테린 A, 스키잔드린 A(데옥시스키잔드린), 및 스키잔드린 B를 포함하는 2% 이상의 전체 스키잔드린을 갖는 분말 형태의 추출물(Lot#)을 생성시켰다.

실시예 8: 스키잔드라 키넨시스 추출물의 HPLC 분석 및 정량

스키잔드라 키넨시스 과일을 물로 추출하였다. 여과 후, 수용액을 분무 건조에 의해 추가로 농축 건조시켰다. 과일 견과를 건조시키고, 분말로 분쇄시키고, 에탄올로 추출하였다. 에탄올 용액을 여과시키고, 농축시키고, 말토덱스트린과의 혼합 후에 분무 건조에 의해 추가로 건조시켰다. 물 추출물 및 에탄올 추출물을 함께 혼합하여 스키잔드린, 스키잔테린 A, 스키잔드린 A(데옥시스키잔드린), 및 스키잔드린 B를 포함하는 7.1%의 전체 스키잔드린을 갖는 최종 스키잔드라 키넨시스 추출물을 제조하였다.

4개의 활성 마커 화합물인 스키잔드린(lot #110857, National institute for food and control, china), 스키잔테린 A(lot #11529-200503, National institute for food and control, china), 스키잔드린 A(데옥시스키잔드린, lot #110764-200107, National institute for food and control, china), 및 스키잔드린 B(lot #110765-200508, National institute for food and control, china)을 스키잔드라 키넨시스 추출물에서 확인하였고, 스키잔드라 키넨시스 참조 기준 물질(lot#140217, National Institute for Food and Control, China)을 이용하여 확인하였다.

참조 기준 물질과 비교하여 UV 파장 250 nm를 갖는 Hitachi HPLC 시스템에서 C18 역상 컬럼(Phenomenex, Luna C18, 10 μm, 250 mm x 4.6 mm)을 이용한 HPLC에 의해 활성 마커 화합물을 정량하였다. 컬럼을 1 mL/분 유량으로 물 및 아세토니트릴로 용리시켰다. 이러한 실시예에 대한 구배 표가 표 3에 제시된다. 각각의 개별적 피크를 확인하고, 통합시킨 후, 스키잔드린, 스키잔테린 A, 스키잔드린 A 및 스키잔드린 B를 포함하는 4개의 화합물의 전체 함량을 RSM을 기초로 하여 계산하였고, 상기 정보는 표 4에 제시된다. 스키잔드라 과일 추출물에서의 전체 스키잔드린은 1-8%의 범위 내인 것으로 발견될 수 있었다.

표 3: 스키잔드라 키넨시스 추출물 정량을 위한 HPLC 이동상 구배 표

표 4: 스키잔드라 키넨시스 추출물에서의 스키잔드린 함량.

실시예 9: 스키잔드라 과일 추출물에서의 유기산의 HPLC 정량

다양한 수집물로부터 사내(in-house) 생성된 70% EtOH 추출물 내의 말산, 시키미산 및 시트르산의 존재를 확인하였고, 이는 표 5에 기재되어 있다. 유기산을 5℃에서 20분 동안 동용매 조건하에서 이동상으로서 50mM 포타슘 디하이드로겐 포스페이트(H₃PO₄를 이용하여 2.8로 pH 조정됨)와 함께 0.7 ml/분의 유량으로 Hypersil GOLD aQ 컬럼(4.6x250mm, 5 μm)을 이용한 HPLC에 의해 정량적으로 분석하였다. 유기산을 205 nm에서 UV 검출기를 이용하여 검출하고, 유기산 기준과의 비교에 의해 체류 시간을 기초로 하여 확인하였다.

표 5: 스키잔드라 키넨시스의 추출물 내의 유기산 함량의 HPLC 정량

실시예 10: 미리스티카 프라그란스 추출물의 제조

건조되고 분쇄된 미리스티카 프라그란스 종자(304 g)를 각 횟수에서 1시간 동안 환류시켜 물 중 70% 에탄올로 3회 추출하였다. 유기 용액을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 15.2%의 수율로 70% 에탄올 추출물(R603-70E) 46.3 g을 생성시켰다. 메탄올 추출물(ME) 또는 에탄올 추출물(EE), 에탄올:H₂O(7:3) 추출물, 에탄올:H₂O(1:1) 추출물, 에탄올:H₂O(3:7) 추출물 및 물 추출물 각각을 제공하기 위해 동일한 절차를 이용하나, 유기 용매를 메탄올 또는 에탄올로 대체하여 유사한 결과가 획득되었다.

실시예 11: 미리스티카 프라그란스 추출물의 HPLC 분석 및 정량

미리스티신은 간보호 특성을 갖는 미리스티카 프라그란스에서 보고된 마셀리간(maceligan) 화합물이었다. 미리스티카 프라그란스 추출물을 Hitachi HPLC 시스템에서 C18 역상 컬럼(Phenomenex, Luna C18, 10 μm, 250 mm x 4.6 mm)을 이용한 HPLC에 의해 미리스티신(15201, Cayman, USA)을 정량함으로써 분석하였다. 컬럼을 250 nm의 UV 파장으로 1 mL/분의 유량으로 18분 동안 물 중 40% MeOH에서 100% MeOH로의 구배 용리로 용리시켰다. 미리스티카 프라그란스 종자 추출물을 10 mg/mL의 농도로 MeOH에 용해시키고, 20 uL 용액의 주입에 의해 분석하였다. 70% 에탄올 추출물 내의 미리스티신 함량은 2% 내지 6% 범위였다. 알맞은 미리스티신 피크가 물 추출물(L530-WE)에서 검출될 수 없었다. 70% 에탄올 추출물 및 물 추출물을 CCl₄ 유발 간 독성 마우스 모델에서 시험하였다. 물 추출물 및 70% 에탄올 추출물 둘 모두는 물 추출물에 대해 32.63% 억제, 70% 에탄올 추출물에 대해 95.61% 억제로 400 mg/kg에서 간보호 활성을 나타내었다. 표 6은 미리스티카 프라그란스 추출물 내의 미리스티신 함량 및 생체내 데이터를 제시한다.

표 6: 미리스티카 프라그란스 추출물 내의 미리스티신 함량 및 생체내 데이터

실시예 12: 미리스티카 프라그란스 추출물의 분획화

미리스티카 프라그란스 70% 에탄올 추출물(R603-70E, 10 g)을 헥산(100 mL)과 물(150 mL) 사이에 3회 분배시켰다. 조합된 헥산 용액을 진공에 의해 용매를 제거하여, 헥산 추출물(HE) 5.6 g을 생성시켰다. 수성층을 에틸 아세테이트(100 mL)로 3회 추출하였다. 조합된 에틸 아세테이트 층을 진공하에서 건조시켜, 에틸 아세테이트 추출물(EA) 1.3 g을 생성시켰다. 수성층을 부탄올(100 mL)로 3회 추가로 추출하여, 부탄올 추출물(BU) 0.7 g을 생성시켰다. 잔여 수성층을 동결-건조시켜, 수성 추출물(WA) 2.3 g을 생성시켰다. HE, EA, BU 및 WA를 HPLC로 추가로 분석하고, 마우스의 CCl4 유발 간독성 모델에서 시험하였다.

미리스티신은 HE에서 주로 발견되었고, EA, BU 및 WA에서 검출되지 않았다. 미리스티신(15201, Cayman, USA)을 동일 모델에서 시험하였고, 50 mg/kg에서 99.7% ALT 억제로 강력한 효능을 나타내었다. 27.5% 미리스티신만큼 높은 미리스티신을 함유하는 HE는 50 mg/kg 투여량의 미리스티신과 비교하여 P ≤ 0.01로 200 mg/kg 수준에서 95.3% ALT 수준 감소로 유사한 억제를 나타내었고, 이는 미리스티신이 미정제 추출물의 간보호 효능을 담당하는 주요 활성 화합물 중 하나임을 나타낸다. EA, BU 및 WA는 동일 투여량 200 mg/kg에서 이러한 CCl4 모델에서 비활성인 것으로 밝혀졌다. 표 7은 미리스티카 프라그란스 구획 분획의 미리스티신 함량 및 생체내 효능을 제시한다.

표 7: 미리스티카 프라그란스 구획 분획의 미리스티신 함량 및 생체내 효능

실시예 13: CCl4-유발 간독성 모델에서의 미리스티카 프라그란스 추출물 및 이의 분획의 용량-반응 효과

미리스티카 프라그란스 및 이의 분획의 용량-관련 간 보호 활성을 평가하기 위해 CCl₄-유발 간독성 모델을 이용하였다. 각각의 분획을 200 mg/kg의 용량으로 시험한 한편, 용량-반응 연구를 위해 50-200 mg/kg의 용량 범위를 선택하였다. 이러한 연구에서, 50 mg/kg 용량의 가능한 활성 마커 미리스티신을 또한 시험하였다. 하기 표 8에서 관찰되는 바와 같이, 50-200 mg/kg의 미리스티카로 처리된 마우스에 대해 명백한 용량-관련 억제(즉, 44.8-99.5% 억제)가 관찰되었다. 마우스가 200 mg/kg 용량의 미리스티카로 처리된 경우 사염화탄소에 의해 야기된 간 손상에서 거의 완전한 억제가 관찰되었다. 이들 데이터는 혈청 ALT에서 50% 억제를 발생시키기 위해 마우스가 50-75 mg/kg의 용량 수준의 미리스티카로 처리되는 것이 필요할 수 있음을 암시한다.

부탄올, 에탄올 및 물 추출물 분획이 이러한 모델에서 불활성인 한편, 헥산 추출물 부분으로 처리된 마우스는 비히클 처리된 손상된 마우스와 비교하는 경우 혈청 ALT에서 95.3% 억제를 나타내었다.

표 8: CCL4-유발 간독성 모델에서의 미리스티카 프라그란스 및 이의 분획의 용량-관련 간 보호 효과

50 mg/kg의 미리스티신으로 처리된 마우스는 비히클 처리된 손상된 마우스와 비교하는 경우 혈청 ALT에서 99.7% 억제를 나타내었고, 이는 미리스티카 프라그란스에서의 주요 활성 화합물로서의 미리스티신의 가능성을 확인한다.

실시예 14: CCl4-유발 간독성 모델에서의 스키잔드라 키넨시스, 아르테미시아 카필라리스, 아스트라갈루스 멤브라나세우스 또는 포리아 코코스를 갖는 미리스티카 프라그란스 추출물의 간 보호 활성

선도 식물에 대한 개별적 간 보호 데이터를 문서화하여, 이들 식물 물질에 대한 예기치 않은 혼합을 이용한 예기치 않거나 향상된 결과에 대한 조사를 1:1, 1:2, 2:1, 1:4 및 4:1과 같은 특정 비로 이들을 제형화함으로써 시작하였다. 가장 높은 정도의 억제로 인해, CCL4 모델에서 지정된 비로 각각의 식물 물질과 쌍을 이루는 주요 성분으로서 미리스티카 프라그란스를 선택하였고, 400 mg/kg의 용량으로 시험하였다. 하기 표 9에서 관찰되는 바와 같이, 미리스티카 프라그란스가 스키잔드라 키넨시스, 아르테미시아 카필라리스, 아스트라갈루스 멤브라나세우스 또는 포리아 코코스와 함께 제형화된 경우에 모든 비에 대해 혈청 ALT에서 통계적으로 유의한 억제, 및 이에 따른 사염화탄소 유발 손상으로부터의 추정된 간 보호가 관찰되었다. 미리스티카가 스키잔드라, 아스트라갈루스, 아르테미시아 및 포리아와 혼합된 경우 억제 범위는 각각 42.4-70.0%, 41.3-80.7%, 88.8-99.8% 및 91.0-99.8%였다. 미리스티카가 아르테미시아(2:1 및 4:1) 및 포리아(1:1)와 혼합되는 경우 가장 높은 간 보호 활성이 관찰되었고; 미리스티카가 1:1의 비로 아스트라갈루스와 제형화되는 경우 가장 낮은 간 보호 활성이 관찰되었다.

표 9: CCL4-유발 간독성 모델에서의 스키잔드라, 아스트라갈루스, 아르테미시아 또는 포리아와 혼합된 미리스티카 조성물의 효능

실시예 15: CCl4-유발 간독성 모델에서의 특정 비의 스키잔드라 키넨시스, 아르테미시아 카필라리스, 아스트라갈루스 멤브라나세우스 또는 포리아 코코스를 갖는 미리스티카 프라그란스 추출물의 간 보호 활성의 평가

아스트라갈루스와 함께 제형화된 미리스티카의 1:4 비가 혈청 ALT에서 가장 낮은 억제(즉, 41.3%)를 발생시켰다는 사실을 감안할 때, 세번째 성분(스키잔드라 또는 포리아)을 10 중량% 또는 20 중량%로 400 mg/kg의 전체 용량으로 첨가되도록 선택하였고, CCL4 및 APAP 유발 간독성 모델 둘 모두에서 간 보호 활성에 대한 반응에서의 변화에 대해 평가하였다. "MA"는 각각 1:4 비의 미리스티카 및 아스트라갈루스의 조성을 나타낸다. 하기 표 10에 기재된 바와 같이, 실제로 스키잔드라 또는 포리아의 첨가가 제공된 비에 대해 혈청 ALT 수준의 억제 동역학에서 급격한 변화를 야기시켰다. 이 시점에서 관찰된 억제는 CCL4 모델에서 조성물 MAS2(20% 스키잔드라 첨가) 및 조성물 MAP2(20% 포리아 첨가)에 대해 각각 82.0% 및 80.8%였다. 1:4의 비의 혼합물 미리스티카 및 아스트라갈루스(MA) 단독에 대해 관찰된 41.3% 억제와 비교하는 경우, MAS2 및 MAP2에 대해 관찰된 현행 억제는 거의 두배였고, 따라서 강화된 간 보호를 위한 조성물의 첨가된 성분의 중요성을 나타낸다. 다른 한편으로, MAS를 생성시키기 위해 조성물 MA에 첨가된 스키잔드라의 백분율(10% 또는 20%)과 관계없이, APAP 유발 간독성 모델에서 혈청 ALT에서의 90% 초과의 억제가 관찰되었다. 이러한 더 큰 억제는 포리아가 MAP를 생성시키기 위해 MA에 20 중량%로 첨가되는 경우에 또한 공유되었으며, 즉, APAP 모델에서 92.7%였다.

이들 집합적인 데이터는 다수의 조성물이 간을 보호하는데 효능을 나타내었으나 예기치 않은 향상된 간 보호 활성이 달성될 수 있음을 암시하며, 20 중량%의 포리아 코코스 또는 스키잔드라 키넨시스 추출물이 둘 모두의 모델에서 1M:4A 비로 첨가되어 조성물 MAP 또는 MAS에 대해 최종 4m:16A:5p 또는 4m:16A:5s 비를 생성시킨 경우에 가장 높은 보호가 관찰되었다. 결과로서, 이러한 비 4:16:5 비가 선도 조성으로 간주되었다. 3개의 역사적으로 널리 공지된 식물을 상기 표시된 특정 비로 조합하였다.

표 10: APAP/CCL4-유발 간독성 모델에서의 조성물 MAP 또는 MAS의 효능

실시예 16: APAP 및 CCl4-유발 간독성 모델에서의 특정 비의 미리스티카 프라그란스 추출물과 스키잔드라 키넨시스, 아스트라갈루스 멤브라나세우스 및/또는 포리아 코코스를 포함하는 조성물의 용량-반응 효과

1:4의 비의 미리스티카 및 아스트라갈루스에 20 중량%의 세번째 성분을 첨가함으로써 조성물 MAP 및 MAS의 탁월한 간 보호 능력이 입증되면, 유의한 간 보호를 초래하는 이들 조성물의 최적 투여량을 APAP 및 CCL4 유발 모델 둘 모두에서 평가하였다. 마우스를 10% tween 20에 현탁된 200 mg/kg, 300 mg/kg 및 400 mg/kg 용량의 조성물 MAP 및 MAS를 경구 위관영양법으로 투여하였다. 비히클 대조군 그룹에 담체 용액만 투여하였다. 표 11에서 관찰되는 바와 같이, CCL4-유발 독성 모델에서, 혈청 ALT에서 용량-관련 억제가 조성물에 대해 관찰되었다. MAP에 대해 66.9%(p=0.0015), 80.0%(p=0.0002) 및 83.7%(p=0.0002) 억제, MAS에 대해 54.1%(p=0.0109), 74.9%(p=0.0004) 및 79.7%(p=0.0002) 억제가 200 mg/kg, 300 mg/kg 및 400 mg/kg의 용량으로 처리된 마우스에 대해 각각 관찰되었다. 유사하게, APAP-유발 손상 모델에서, 혈청 ALT에서 용량-관련 억제가 조성물에 대해 관찰되었다. MAP에 대해 25.8%(p=0.49), 62.9%(p=0.01) 및 88.1%(p=0.0001) 억제, MAS에 대해 32.4%(p=0.16), 62.7%(p=0.02) 및 78.7%(p=0.0007) 억제가 200 mg/kg, 300 mg/kg 및 400 mg/kg의 용량으로 처리된 마우스에 대해 각각 관찰되었다. 200 mg/kg 투여량에서 관찰된 억제가 둘 모두의 조성물에 대해 APAP 모델에서 통계적으로 유의하지 않았으나, 관찰된 혈청 ALT에서의 억제는 조성물의 개별적 성분보다 훨씬 컸고, 이는 더 나은 간 보호 활성을 위해 이들 3개의 개별 물질을 제형화시켜 조성물 MAP 및 MAS를 생성시키는 것의 명백한 장점을 암시한다. CCL4 모델에서 모든 그룹에 대해 100% 생존률이 있었지만, APAP 모델에서 이러한 비율은 MAP에 대해 50-100% 및 MAS에 대해 70-700% 범위이다. 효능과 동시에, APAP 모델에서 관찰된 생존률은 동물에 투여되는 조성물의 양과 관련이 있었다. 예를 들어, 200 mg/kg의 MAP 또는 MAS가 투여된 마우스는 각각 50% 및 70% 생존률을 가졌으나, 투여되는 가장 높은 용량(400 mg/kg)에서 둘 모두의 조성물에 대해 100% 생존률이 관찰되었다.

여기서, 본 발명자는 시험되는 가장 낮은 용량(200 mg/kg)에서 보이는 바와 같이 조성물 MAP 및 MAS에서의 각각의 식물 비와 동등한 투여량으로 미리스티카, 아스트라갈루스, 스키잔드라, 및 포리아와 같은 개별적 식물의 효능을 시험하였다. 표 11에서 관찰되는 바와 같이, CCL4 모델에서, 32 mg/kg의 용량의 미리스티카는 혈청 ALT에서 40.7% 억제와 함께 CCL4 모델에서 100% 생존률을 발생시켰다. 조성물의 나머지 성분은 비히클 처리된 손상된 마우스와 비교하는 경우 13.5-18.1% 범위의 크기로 독성을 악화시켰다. 다른 한편으로, APAP 모델에서, 40 mg/kg의 포리아로 처리된 마우스는 비히클 대조군과 비교하는 경우 혈청 ALT에서 4.3% 억제를 나타낸 반면, 다른 성분은 6.8-33.1%의 범위 내로 간 손상을 증가시켰다.

표 11: APAP/CCL4-유발 간독성 모델에서의 조성물 MAP 및 MAS의 용량-관련 간 보호

실시예 17: MAP 및 MAS 조성물에 대한 상승작용의 평가

APAP 및 CCL4 모델 둘 모두에서 미리스티카 프라그란스, 아스트라갈루스 멤브라나세우스, 포리아 코코스 및 스키잔드라 키넨시스를 조합시키는 이점을 평가하기 위해 널리 사용되는 상승작용 계산식인 콜비 방정식(Colby's equation)(Colby, 1967)을 이용하였다. 이러한 방법에서, 두개 이상의 물질의 공동 제형화는 특정 종점 측정의 관찰된 값이 가설적으로 계산된 값보다 같거나 크면 상승작용을 갖는 것으로 추정될 것이다. 하기 표 12에서 관찰되는 바와 같이, 현행 연구에서, 관찰된 값은 어느 모델에서도 예상된 이론적 값보다 컸으며, 이는 조성물 MAP 또는 MAS를 생성시키기 위해 특정 비로 3개의 성분을 제형화하는데 있어서 상승작용의 존재를 나타낸다. 미리스티카 프라그란스, 아스트라갈루스 멤브라나세우스, 및 포리아 코코스 또는 미리스티카 프라그란스, 아스트라갈루스 멤브라나세우스 및 스키잔드라 키넨시스를 넣는 장점은 APAP 또는 CCL4에 의해 야기된 간 손상의 예기치 않은 향상된 보호에 의해 확인되었다.

표 12: 간 보호에서의 미리스티카 프라그란스, 아스트라갈루스 멤브라나세우스, 포리아 코코스, 및 스키잔드라 키넨시스의 예기치 않은 상승작용 활성.

실시예 18: CCL4-유발 간독성 모델에서의 MAP 및 MAS 조성물의 효능 확인 연구

APAP 및 CCL4 모델 둘 모두에서 조성물 MAP 및 MAS의 일관된 간 보호 활성이 입증되면, CCL4 유발 간독성 모델을 이용하여 추가적인 포괄적 확인 연구를 수행하였다. 마우스에 150, 200 및 300 mg/kg의 용량의 조성물 MAS 또는 MAS를 위관 영양법으로 경구 투여하였다. 200 mg/kg 용량의 밀크 씨슬을 참조로 포함시켰다. 모든 물질에 대한 담체 비히클로서 10% tween 20을 사용하였다. 대조군 마우스에 tween 20만 투여하였다. 혈청 알라닌 트랜스아미나제(ALT) 외에도, 간 패널, 예를 들어, 전체 단백질, 전체 빌리루빈, 직접 및 간접 빌리루빈, 알부민, 글로불린, 아스파테이트 트랜스아미나제(AST), 담즙산, 알칼리성 포스파타제(ALP) 및 γ-글루타밀 트랜스페라제(GTT)를 T24에서 대조군, CCL4, 밀크 씨슬, MAP(150, 200 및 300 mg/kg), 및 MAS(150, 200, 및 300 mg/kg)에 대해 측정하였다.

하기 표 13 및 14에서 관찰되는 바와 같이, 많은 주요 간 독성 지표 바이오마커에서 명백한 용량-관련 억제가 있었다. 둘 모두의 조성물(MAP 및 MAS)은 유의한 간 보호 활성을 나타내지만, 조성물 MAS는 조성물 MAP보다 약간 더 강한 효능을 나타내었다. 생체의 바이오마커에 대한 이러한 실질적인 데이터의 조절이 주어지면, 둘 모두의 조성물에 대한 최소의 유효 투여량은 150 mg/kg일 수 있음이 추론될 수 있다. 조성물 효능 분석의 유사한 방법을 유지하여, 조성물 MAP는 비히클 처리된 손상된 마우스와 비교하는 경우 ALT에서 30.8-71.1% 억제 및 AST에서 41.7-75.7% 억제를 발생시켰다. 유사하게, 비히클 처리된 손상된 마우스와 비교하는 경우 조성물 MAS에 대해 ALT에서 47.5-82.6% 억제 및 AST에서 55.6-85.4% 억제가 관찰되었다. 전체적으로, 조성물 MAP 및 MAS는 다수의 빈번히 모니터된 간 바이오마커에서 간 손상에 대한 더 큰 보호를 제공하였다.

표 13: CCL4-유발 간독성 모델에서의 MAP/MAS로 처리된 마우스에 대한 간 패널 분석물 수준의 개요.

표 14: CCL4 모델에서 비히클 처리된 마우스에 비한 MAP/MAS 그룹으로부터의 간 패널 마커의 변화 퍼센트의 개요.

실시예 19: 급성 에탄올-유발 간 독성 모델에서의 MAP 조성물의 간 보호 효과

모델 유도: MAP 조성물의 간보호 활성을 "폭음" 에 대한 급성 알콜 유발 간 독성 모델을 이용하여 평가하였다. 이러한 연구에서, 18-24 g 체중의 수컷 CD-1 마우스를 8주령에서 구입하였고(Charles River Laboratories, Inc., Wilmington, MA), 1주일 동안 순응시켰다. 동물에 300 mg/kg의 경구 용량의 조성물을 전체 4회 용량으로 투여하였다. 투여량 선택은 이전에 수행된 아세트아미노펜(APAP) 및 사염화탄소(CCl4)-유발 간 독성 모델을 기초로 하여 수행되었다. 마우스를 3회 경구 용량의 MAP 또는 실리마린(Silymarin)으로 예비 처리한 후, 12 ml/kg 투여 부피의 50%의 에탄올(lot #: SHBG1307V, Sigma, St. Louis, MO)을 위관 영양법으로 투여한 후, 전체 3회 용량으로 12시간마다 투여하였다[69]. 마지막 경구 처리 용량을 두번째와 세번째 에탄올 투여 사이에 제공하였다. 마우스를 혈청 및 조직 수집을 위해 에탄올의 마지막 용량 후 12시간 동안 금식시켰다. 본 연구에서 양성 대조군으로서 200 mg/kg의 경구 용량의 실리마린(제품명: S0292; Lot# BCBJ0393V; Sigma, Saint Louis, MO)을 사용하였다. 에탄올이 없는 대조군 마우스는 담체 비히클만 투여하였다. 모든 시험된 물질에 대한 담체 비히클로서 10% Tween-20(Lot# 0134C141, Amresco, Solon, OH)을 사용하였다. 에탄올이 없는 대조군 마우스는 담체 비히클만 투여하였다. 간 조직을 검시 직후 수집하고, -80℃ 냉동기로 옮길때까지 드라이아이스 상에서 유지시켰다. 이후, 물질을 최종 표본 처리 및 바이오마커(SOD, GSH 및 TG) 분석을 위해 드라이아이스 중에서 계약 연구소(Brunswick Laboratories, 200 Turnpike Rd, MA 01772, USA)로 운송하였다. 간의 일부인 각각의 마우스로부터의 좌측 엽을 10% 완충 포름알데하이드에서 고정시키고, 조직 처리 및 조직학적 검사를 위해 Nationwide Histology(Veradale, WA)로 보냈다.

실시예 20: 급성 에탄올-유발 간 독성 모델로부터의 간 기능에 대한 MAP의 효과

혈청을 30분 실온 응고 후에 혈청 분리관을 이용하여 T24에서 채혈한 혈액으로부터 분리시키고, Phoenix Laboratories(Everett, WA)의 Beckman Coulter AU2700을 이용한 자독화 비색 검정에서 ALT(알라닌 아미노트랜스페라제), AST(아스파테이트 아미노트랜스페라제), 전체 단백질, 알부민, 전체 빌리루빈, 콜레스테롤(CHOL), 트리글리세라이드(TRIG), 고밀도 지질단백질(HDL) 및 저밀도 지질단백질(LDL) 모니터링을 위해 10분 동안 3000 rpm에서 회전시켰다.

동물에서 ALT 및 AST의 혈청 수준에서의 유의한 상승은 종종 간 손상을 반영한다^[70]. 표 15에서 관찰되는 바와 같이, ALT 및 AST 둘 모두는 알콜 단독으로 처리된 마우스에서 유의하게 상승되는 것으로 밝혀졌으며, 이는 급성 알콜-유발 간 손상의 유도를 입증한다. 마우스를 전체 4일 연속 동안 300 mg/kg의 경구 용량으로 MAP를 처리한 경우 상기 마커의 과도한 증가는 46.3%(ALT) 및 43.6%(AST)로 유의하게 억제되었다. MAP의 활기 있는 보호 활성은 또한 혈청 알부민 및 전체 단백질 생성에서의 통계적으로 유의한 증가에 의해 뒷받침되었다(표 15). 이들 결과는 조성물이 급성 알콜-유발 손상에 대해 간을 보호하는 것을 입증한다. 적어도 본 연구에서, 모니터된 모든 혈청 파라미터에서 유의한 변화가 200 mg/kg 용량의 실리마린으로 처리된 마우스에 대해 관찰되지 않았다(표 15).

표 15: 간 기능에 대한 척도로서의 임상 화학 결과

실시예 21: 급성 에탄올-유발 간 독성 모델로부터의 간 균질액 내의 산화 스트레스 바이오마커(GSH 및 SOD) 및 트리글리세라이드 함량에 대한 MAP의 효과

글루타티온(GSH), 초과산화물 디스뮤타제(SOD) 및 트리글리세라이드(TG) 측정: A) 샘플 제조 - 동결된 조직을 분쇄기를 이용하여 조립 분말로 분쇄시켰다. 19.6 μM EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산)을 함유하는 1 mL의 PBS(인산염-완충 염수)를 약 0.2 g의 분쇄된 조직에 첨가하고, Omni International로부터의 균질화기를 이용하여 얼음 배쓰에서 1분 동안 균질화시켰다. 이후, 혼합물을 4℃에서 10,000 rpm에서 15분 동안 원심분리시켰다. 상층액의 일부를 SOD, 트리글리세라이드, 및 단백질 분석에 사용하였다. 나머지 상층액을 GSH 분석을 위해 추가로 가공하였다. B) GSH 분석을 위해, 단백질로부터의 간섭을 피하기 위해 상층액의 일부를 동일 부피의 100 mg/mL의 머캅토프로피온산(MPA) 용액과 혼합하여 단백질제거하였다. 혼합물을 볼텍싱 후에 5분 동안 실온에서 방치한 후, 4℃에서 10,000 rpm에서 15분 동안 원심분리하였다. 단백질제거된 상층액을 CAYMAN Chemical Co., Inc.(Ann Arbor, MI)로부터의 글루타티온 검정 키트를 이용하여 GSH 함량에 대해 평가하였다. C) SOD 분석 - SOD 검정은 잔틴 옥시다제 및 잔틴에 의해 유도된 초과산화물 라디칼의 상반변화(dismutation)를 측정하기 위해 테트라졸륨 염을 이용하는 비색 검정이며, 제공된 샘플에서의 SOD의 활성은 SOD 표준을 이용하여 생성된 표준 곡선에 의해 정량된다. SOD의 한 단위는 초과산화물 라디칼의 50% 상반변화를 나타내는데 필요한 효소의 양으로 정의된다. CAYMAN Chemical Co., Inc.(Ann Arbor, MI)로부터의 초과산화물 디스뮤타제 검정 키트를 분석을 위해 사용하였다. 조직 균질액의 단백질 농도를 PierceTM BCA 단백질 검정 키트를 통해 억제제의 단백질 농도를 평가함으로써 결정하였다. D) 트리글리세라이드 분석 - 비색 검출되는 생성물(540 nm), 퀴논이민의 형성을 발생시키는 지질단백질 리파제, 글리세롤 키나제, 글리세롤-3-포스페이트 옥시다제, 및 글리세롤-3-포스페이트 퍼옥시다제를 수반하는 효소 반응의 캐스케이드에 의해 트리글리세라이드를 검출하였다. CAYMAN Chemical Co., Inc.(Ann Arbor, MI)로부터의 트리글리세라이드 검정 키트를 이러한 분석에 이용하였다. E) 재료 및 장비 - Omni International(Kennesaw, GA)로부터의 균질화기(카탈로그 번호 TH-01); Omni International(Kennesaw, GA)로부터의 Hard Tissue Omni Tip™ Plastic Homogenizing Probes(7mm x 110mm); Eppendorf(Hauppauge, NY)로부터의 냉장 원심분리기(모델 번호 5402); Biotek(Shoreline, WA)으로부터의 마이크로플레이트 판독기(모델 번호 Synergy HT)를 사용하였다.

글루타티온은 과도한 고갈이 산화 스트레스 및 간 손상을 유도할 수 있는 내인성 또는 외인성 화학 손상 및 이의 반응성 산소종 부산물에 대해 세포를 보호하는 II상 항산화 효소 중 하나이다. 표 16에 기재된 바와 같이, 간 조직 전체 글루타티온 수준은 조성물 MAP로 처리된 동물에서 유의하게 더 높은 것으로 밝혀졌다. 정상 대조군 마우스에 비해 알콜로 처리된 마우스 및 비히클 대조군에 대해 GSH의 증가된 수준이 또한 나타났다. 금식한 동물이 GSH의 낮은 수준을 갖는 것이 이전에 보고되었다[71]. 한편, 마지막 에탄올 투여 12시간 후, 에탄올 그룹은 정상 대조군에 비해 SOD 활성을 36.9%로 유의하게 감소시켰다. 표 16에서 관찰되는 바와 같이, MAP는 고갈된 초과산화물 디스뮤타제를 60% 초과만큼 보충(에탄올 그룹에 비함)시켰다. 실제로, SOD 수준에서의 증가는 간 독성 유도가 없는 정상 대조군 동물에서의 것과 동등하였다. 이들 II상 효소의 증가는 MAP 조성물의 강한 항산화 활성을 제공하는 것을 서로 입증한다. 또한, 에탄올 투여는 간에서 TG의 유의한 축적을 유도하였다(표 16). MAP 경구 처리는 간 TG 수준의 증가를 12%만큼 명백히 억제하였고, MAP의 효과는 정상 대조군 마우스에 대해 관찰된 것과 동등하였다(표 16). 이들 결과는 MAP가 알콜성 지방증에 대해 효과적일 수 있음을 나타낸다.

표 16: 간 산화 바이오마커에 대한 MAP의 효과

실시예 22: 급성 에탄올-유발 간 독성 모델로부터의 MAP의 항-알콜성 지방간염(ASH) 활성

정상 대조군(N=12), 에탄올 + 비히클(N=10), 및 에탄올 + MAP(300 mg/kg, N=12) 처리 그룹으로부터의 간 조직을 10% 완충 포름알데하이드에 고정시키고, 조직학적 검사를 위해 파라핀 왁스에 포매시켰다. 표본을 밤새 주기로 등급화된 알콜 및 자일렌을 이용하여 Shandon Excelsior ES 조직 처리기에서 처리하였다. 이후, 조직을 4 마이크론으로 절단하고, 사쿠라(sakura) DRS-601 슬라이드 염색기를 이용하여 진행성 헤마톡실린 및 에오신 염색을 이용하여 염색하였다. 전체 염색 필드를 다수의 배율로 임의의 세포 및 구조 변화에 대해 평가하였고, 풍선화 변성(ballooning degenerations)(중증도 스코어 0-4), 소수포성 지방증(중증도 스코어 0-4), 세포질 응축(중증도 스코어 0-4), 간세포 공포형성(중증도 스코어 0-4), 및 괴사(중증도 스코어 0-4)에 대해 변형된 비-알콜성 지방간염(NASH) 임상 연구 네트워크[72]를 이용한 조직병리학적 스코어링에 적용시켰다.

미처리 대조군 동물의 간 조직은 명확한 세포질, 정상 쿠퍼 세포 및 정상적인 큰 핵을 갖는 간세포의 정상적인 구조를 나타내었다. 비히클 처리된 에탄올-공격 마우스에서, 간 조직은 광범위한 영역의 간 지방증, 세포질 응축 및 현저한 핵 수축을 갖는 왜곡된 구조를 나타내었다. 일부 퇴행성 풍선화, 공포형성 및 문맥주위 염증이 또한 이들 그룹에서 관찰되었다. 다른 한편으로, 식별 가능한 정상 세포 구조, 더 적은 정도의 구조 변화가 MAP로 처리된 마우스에서 명백하였다(표 17). 표 17에서 관찰되는 바와 같이, MAP는 비히클 처리된 알콜 유발성 질병 모델과 비교하는 경우 풍선화 변성, 미세 및 거대 혈관 지방증, 세포질 또는 핵 응축 및 수축뿐만 아니라 문맥주위 및 괴사주변 염증의 통계적으로 유의한 감소를 나타내었다. 이후, 알콜성 지방간염 스코어(ASH 스코어)를 이들 정량 값을 이용하여 결정하였다. 이들 조직병리학적 발견을 함께 취합하면 에탄올 그룹의 것에 비해 300 mg/kg MAP 조성물로 경구 처리된 마우스에 대해 알콜성 지방간염 스코어에서 통계적으로 유의한 감소를 발생시켰다(표 18).

표 17: 에탄올-유발 간독성 모드의 MAP로 처리된 마우스로부터의 간 조직의 H&E 염색 분석

표 18: 알콜성 지방간염(ASH) 스코어

따라서, 개시된 화합물의 입체이성질체, 약학적 또는 영양학적으로 허용되는 염, 토토머, 글리코시드 및 프로드러그를 포함하는 간 건강 관리에 유용한 화합물 및 조성물의 특정 구현예 및 방법과 함께 간 건강을 개선하고 유지시키는 관련 방법이 개시되었다. 그러나, 이미 기재된 것 이외에 더 많은 변형이 본원의 본 발명의 개념을 벗어남이 없이 가능함이 당업자에게 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 주제는 본원의 개시내용의 사상을 제외하고는 제한되지 않는다. 또한, 명세서 및 청구범위를 해석함에 있어서, 모든 용어는 문맥과 일치하는 가능한 가장 넓은 방식으로 해석되어야 한다. 특히, 용어 "포함하다" 및 "포함하는"은 배타적이지 않은 방식으로 요소, 성분 또는 단계를 언급하는 것으로 해석되어야 하며, 이는 언급된 요소, 성분 또는 단계가 명백히 언급되지 않은 다른 요소, 성분 또는 단계와 함께 존재하거나, 이용되거나, 조합될 수 있음을 나타낸다.

참고문헌

하기 나열되는 참고문헌 각각은 본원에 이미 개시된 참고문헌의 전체 인용이다. 이들 참고문헌 각각은 전체내용이 참조로서 본원에 포함되는 것이 인지되어야 한다.

Claims (28)

1. 식물 추출물의 혼합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물로서, 상기 식물 추출물이 적어도 하나의 미리스티카(Myristica) 추출물, 적어도 하나의 아스트라갈루스(Astragalus) 추출물, 및 적어도 하나의 버섯 추출물 포리아(Poria) 또는 적어도 하나의 스키잔드라(Schizandra) 추출물을 포함하는, 조성물.
2. 식물 추출물의 혼합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물로서, 상기 식물 추출물이 하나 이상의 리그난에 대해 농축된 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 하나 이상의 다당류 및 트리테르페노이드에 대해 농축된 아스트라갈루스 추출물, 및 하나 이상의 다당류 및 트리테르페노이드에 대해 농축된 버섯 추출물 포리아 또는 하나 이상의 리그난 및 유기산에 대해 농축된 스키잔드라 추출물을 포함하는, 조성물.
3. 제2항에 있어서, 하나 이상의 리그난이 페닐프로파노이드, 이량체, 중합체 또는 이들의 조합물을 포함하는 간의 치료 및 간 건강 유지를 위한 조성물.
4. 제1항에 있어서, 적어도 하나의 미리스티카 추출물 및 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물이 4:1 내지 1:4 범위의 중량비로 혼합되는 조성물.
5. 제1항에 있어서, 적어도 하나의 포리아 추출물이 5-50%의 중량 백분율로 적어도 하나의 미리스티카 추출물 및 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물의 혼합물과 추가로 혼합되는 조성물.
6. 제1항에 있어서, 적어도 하나의 스키잔드라 추출물이 5-50%의 중량 백분율로 적어도 하나의 미리스티카 추출물 및 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물의 혼합물과 추가로 혼합되는 조성물.
7. 제1항에 있어서, 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물 및 적어도 하나의 포리아 추출물의 혼합물이 4:16:5의 비로 혼합되는 조성물.
8. 제1항에 있어서, 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물 및 적어도 하나의 스키잔드라 추출물의 혼합물이 4:16:5의 비로 혼합되는 조성물.
9. 제1항에 있어서, 적어도 하나의 미리스티카 추출물이 0.01% 내지 99.9%의 페닐프로파노이드 또는 리그난 이량체 및 중합체를 포함하는 조성물.
10. 제1항에 있어서, 적어도 하나의 미리스티카가 M. 알바(M. alba), M. 암플리아타(M. ampliata), M. 안다마니카(M. andamanica), M. 아르파켄시스(M. arfakensis), M. 아르젠테아(M. argentea), M. 아트레센스(M. atrescens), M. 바실라니카(M. basilanica), M. 브라키포다(M. brachypoda), M. 브레비스티페스(M. brevistipes), M. 부크네리아나(M. buchneriana), M. 비싸세아(M. byssacea), M. 세일라니카(M. ceylanica), M. 신나모메아(M. cinnamomea), M. 코아크타(M. coacta), M. 콜린리드스달레이(M. colinridsdalei), M. 콘스퍼사(M. conspersa), M. 코르티카타(M. corticata), M. 크라싸(M. crassa), M. 닥틸로이데스(M. dactyloides), M. 다시카르파(M. dasycarpa), M. 데프레싸(M. depressa), M. 데보겔리이(M. devogelii), M. 엘리프티카(M. elliptica), M. 엑스텐사(M. extensa), M. 파시쿨라타(M. fasciculata), M. 필리페스(M. filipes), M. 피쑤라타(M. fissurata), M. 플라보비렌스(M. flavovirens), M. 프루기페라(M. frugifera), M. 기간테아(M. gigantea), M. 길레스피에아나(M. gillespieana), M. 글로보사(M. globosa), M. 홀룬기이(M. hollrungii), M. 이나에쿠알리스(M. inaequalis), M. 인크레디빌리스(M. incredibilis), M. 이너스(M. iners), M. 이눈다타(M. inundata), M. 이리아(M. irya), M. 칼크만니이(M. kalkmanii), M. 크젤베르기이(M. kjellbergii), M. 라시오카르파(M. lasiocarpa), M. 레프토필라(M. leptophylla), M. 롱기페티올라타(M. longipetiolata), M. 로위아나(M. lowiana), M. 마크란타(M. macrantha), M. 마그니피카(M. magnifica), M. 마그니피카(M. magnifica), M. 마인가이이(M. maingayi), M. 말라바리카(M. malabarica), M. 말라바리카(M. malabarica), M. 맥시마(M. maxima), M. 메디테라네아(M. mediterranea), M. 밀레푼크타타(M. millepunctata), M. 나나(M. nana), M. 올리바세아(M. olivacea), M. 오르나타(M. ornata), M. 오비카르파(M. ovicarpa), M. 파키카르피디아(M. pachycarpidia), M. 파필라티폴리아(M. papillatifolia), M. 페르라에비스(M. perlaevis), M. 페티올라타(M. petiolata), M. 필리펜시스(M. philippensis), M. 필로셀라(M. pilosella), M. 필로시겜마(M. pilosigemma), M. 폴리안타(M. polyantha), M. 프실로카르파(M. psilocarpa), M. 푸비카르파(M. pubicarpa), M. 피그마에아(M. pygmaea), M. 로부스타(M. robusta), M. 산고웬시스(M. sangowoensis), M. 사르칸타(M. sarcantha), M. 쉴레크테리(M. schlechteri), M. 시뮬란스(M. simulans), M. 싱클레어리이(M. sinclairii), M. 소게리엔시스(M. sogeriensis), M. 숙카다네아(M. succadanea), M. 탐라우엔시스(M. tamrauensis), M. 테이즈스만니이(M. teijsmannii), M. 트리안테라(M. trianthera), M. 울트라바시카(M. ultrabasica), M. 베루쿨로사(M. verruculosa), M. 윤나넨시스(M. yunnanensis) 및 다른 미리스티신 농축 식물 아니스 종자(핌피넬라 아니숨(Pimpinella anisum), 핌피넬라 불가레(Pimpinella vulgare), 일리시움 아니사툼(Illicium anisatum), 일리시움 베룸(Illicium verum)), 파슬리(페트로셀리눔 크리스품(Petroselinum crispum)), 시라(dill)(아네툼 그라베올렌(Anethum graveolen)), 리구스티쿰(ligusticum)(리구스티쿰 시넨세 올리브(ligusticum sinense Oliv.) 및 L. 제홀렌세(L. jeholense)), 퀸 앤즈 레이스(Queen Anne's lace)(다우쿠스 카로타 L. 아종 카로타(Daucus carota L. subsp. carota)), 당근(다우쿠스 카로타 L. 아종 사티부스 (Hoffm.) 아르캉.(sativus (Hoffm.) Arcang.)) 또는 이들의 임의의 조합물을 포함하거나, 이들로부터 선택되는 조성물.
11. 제2항에 있어서, 하나 이상의 페닐프로파노이드 및 리그난에 대해 농축된 적어도 하나의 미리스티카 추출물을 포함하는 조성물로서, 적어도 하나의 추출물이 물, 에탄올, 메탄올, 알콜 및 물 혼합 용매를 이용하여 미리스티카 식물로부터 추출되는, 조성물.
12. 제3항에 있어서, 미리스티카 추출물로부터 분리된 하나 이상의 페닐프로파노이드 또는 리그난 이량체 및 중합체의 혼합물이 사프롤(Safrole), 이소미리스티신(Isomyristicin), 1-(3,4,5-트리하이드록시페닐)-2-프로펜 1,2-메틸렌, 3-Me 에테르, 안트리시놀(Anthriscinol), 4-알릴시린골(4-Allylsyringol), 안트리시놀(Anthriscinol), 3-(3-메톡시-4,5-메틸렌디옥시페닐)-2-프로펜-1-올, 엘레미신(Elemicin), 이소엘레미신(Isoelemicin), 3',4',5'-트리메톡시신나밀 알콜, 3'-메톡시-4',5'-메틸렌디옥시신나밀 알콜, 메톡시유게놀, 파라크메린 A(Parakmerin A), 4,7'-에폭시-3,8'-빌리근-7-엔-3',4',5-트리올 5-메테르, 오토바인(Otobain), 카가야닌(Cagayanin), 오스트로바일리그난 5(Austrobailignan 5), 1,2-디하이드로데하이드로과이아레트산, 데하이드로디이소유게놀, 이소디하이드로카리나티딘, 이소리카린 A(Isolicarin A), 오토바페놀(Otobaphenol), 마세리그난(Macelignan), 3',4,4',5-테트라하이드록시-3,8'-빌리근-8-엔, 과이아신(Guaiacin), 디하이드로과이아레트산, 5-[3-(4-하이드록시-3-메톡시페닐)-1,2-디메틸프로필]-3-메톡시-1,2-벤젠디올, 오토바논(Otobanone), 카가야논(Cagayanone), 주이호닌 B(Zuihonin B), 3,4:3',4'-비스(메틸렌디옥시)-7,7'-에폭시리그난, 하이드록시오토바인(Hydroxyotobain), 이소갈카틴(Isogalcatin), 오스트로바이리그난 7(Austrobailignan 7), 마킬린 F(Machilin F), 7-하이드록시오스트로바이리그난 5, 사우루리놀(Saururinol), 2-(4-알릴-2-메톡시페녹시)-1-(4-하이드록시-3-메톡시페닐)-1-프로파놀, 프라그란신 A2(Fragransin A2), 넥탄드린 B(Nectandrin B), 미리스타르게놀 A(Myristargenol A), 미리스타르게놀 B, 2,3-디하이드로-7-메톡시-2-(3-메톡시-4,5-메틸렌디옥시페닐)-3-메틸-5-(1-프로페일)벤조푸란, 프라그란솔 C(Fragransol C), 프라그란솔 D, 2-(4-알릴-2,6-디메톡시페녹시)-1-(3,4-메틸렌디옥시페닐)-1-프로파놀, 2-(4-알릴-2,6-디메톡시페녹시)-1-(4-하이드록시-3-메톡시페닐)-1-프로파놀, 프라그란신 C2, 프라그란신 C3b, 프라그란신 C3a, 프라그란신 C1, 프라그란솔 A, 미리스이소리그난(Myrisisolignan), 2-(4-알릴-2,6-디메톡시페녹시)-1-(3,4-디메톡시페닐)-1-프로파놀, 프라그란신 D3, 프라그란신 D2, 프라그란신 D1, 비롤론긴 B(Virolongin B), 2-(4-알릴-2,6-디메톡시페녹시)-1-(3-하이드록시-4,5-디메톡시페닐)-1-프로파놀, 프라그란신 B2, 프라그란신 B3, 프라그란신 B1, 미리스티카놀 B(Myristicanol B), 3,4-메틸렌, 3',5'-디-Me 에테르, Ac, 2-(4-알릴-2,6-디메톡시페녹시)-1-(3,4,5-트리메톡시페닐)-1-프로파놀, 미리스티카놀 A, 3,4-메틸렌, 3',5'-디-Me 에테르, 벤조일, 아르젠테아네(Argenteane), 또는 이들의 임의의 조합물을 포함하거나, 이들로부터 선택되는 조성물.
13. 제1항에 있어서, 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물이 A. 몽골리우스(A. mongholius), A. 톤골렌시스(A. tongolensis), A. 티베타누스(A. tibetanus), A. 캄프토돈투스(A. camptodontus), A. 악수시스(A. aksusis), A. 플로리두스(A. floridus), A. 크리소프테루스(A. chrysopterus), A. 마오웨넨시스(A. maowenensis), A. 윤나넨시스 프랑크.(A. yunnanensis Franch.), A. 에르네스티이 콤브(A. ernestii Comb), 헤디사룸 폴리보트리스(Hedysarum polybotrys), A. 푸비플로루스(A. pubiflorus), 메디카고 사티바 L.(Medicago sativa L.), 멜리로투스 수아베올렌스 레데브.(Melilotus suaveolens Ledeb.), 멜리로투스 알부스 데스르.(Melilotus albus Desr.), 카라가나 시니카(Caragana sinica), 옥시트로피스 카에룰레아(Oxytropis caerulea), 옥시트로피스 글라브라(Oxytropis glabra), 둔바리아 빌로사 마키노(Dunbaria villosa Makino), 말바 로툰디폴리아 L.(Malva rotundifolia L.), 알타에아 오피시날리스(Althaea officinalis), 또는 이들의 임의의 조합물로부터 선택되는 조성물.
14. 제1항에 있어서, 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물이 0.01% 내지 100%의 다당류 및 0.01% 내지 100%의 트리테르페노이드를 포함하는 조성물.
15. 제2항에 있어서, 아스트라갈루스 추출물로부터 분리된 트리테르페노이드 또는 트리테르페노이드의 혼합물이 아스켄도시드 A(Askendoside A), 아세틸아스트라갈로시드 I(Acetylastragaloside I), 아그로아스트라갈로시드 I(Agroastragaloside I), 아그로아스트라갈로시드 II, 아그로아스트라갈로시드 III, 아그로아스트라갈로시드 IV, 아그로아스트라갈로시드 V, 알렉산드로시드 I(Alexandroside I), 아르마토시드 I(Armatoside I), 아르마토시드 II, 아세르네스티오시드 A(Asernestioside A), 아세르네스티오시드 B, 아세르네스티오시드 C, 아스켄도시드 B(Askendoside B), 아스켄도시드 C, 아스켄도시드 D, 아스켄도시드 F, 아스켄도시드 G, 아스켄도시드 K, 아스트라크리소시드 A(Astrachrysoside A), 아스트라갈로시드 I(Astragaloside I), 아스트라갈로시드 II, 아스트라갈로시드 III, 아스트라갈로시드 IV, 아스트라갈로시드 V, 아스트라갈로시드 VI, 아스트라갈로시드 VII, 아스트라게놀(Astragenol), 아스트라멤브란게닌(Astramembrangenin), 아스트라멤브라닌 II(Astramembrannin II), 아스트라멤브라노시드 A(Astramembranoside A), 아스트라멤브라노시드 B, 아스트라시에베르시아닌 I(Astrasieversianin I), 아스트라시에베르시아닌 II, 아스트라시에베르시아닌 III, 아스트라시에베르시아닌 IX, 아스트라시에베르시아닌 V, 아스트라시에베르시아닌 XI, 아스트라시에베르시아닌 XII, 아스트라시에베르시아닌 XIII, 아스트라시에베르시아닌 XV, 아스트라베루신 I(Astraverrucin I), 아스트라베루신 II, 아스트라베루신 III, 아스트라베루신 IV, 아스트라베루신 V, 아스트라베루신 VI, 아스트라베루신 VII, 아스트로자노시드 A(Astrojanoside A), 아주키사포닌 II(Azukisaponin II), 바이부토시드(Baibutoside), 비쿠스포시드 A(Bicusposide A), 비쿠스포시드 B, 비쿠스포시드 C, 비쿠스포시드 D, 비쿠스포시드 E, 비쿠스포시드 F, 브라키오시드 A(Brachyoside A), 브라키오시드 B, 브라키오시드 C, 카스피쿠시드 I(Caspicuside I), 카스피쿠시드 II, 세팔로토시드 A(Cephalotoside A), 시세로시드 A(Ciceroside A), 시세로시드 B, 클로베르사포닌 IV(Cloversaponin IV), 콤플라나틴(Complanatin), 사이클로아드수르게닌(Cycloadsurgenin), 사이클로알피게닌(Cycloalpigenin), 사이클로알피게닌 A, 사이클로알피게닌 B, 사이클로알피게닌 C, 사이클로알피오시드(Cycloalpioside), 사이클로알피오시드 A, 사이클로알피오시드 B, 사이클로알피오시드 C, 사이클로알피오시드 D, 사이클로아라로시드 B(Cycloaraloside B), 사이클로아라로시드 C, 사이클로아라로시드 D, 사이클로아라로시드 E, 사이클로아라로시드 F, 사이클로아스카우로시드 A(Cycloascauloside A), 사이클로아스카우로시드 B, 사이클로아스시도시드 A(Cycloascidoside A), 사이클로아스게닌 A(Cycloasgenin A), 사이클로아스게닌 B, 사이클로아스게닌 C, 사이클로칸토게닌(Cyclocanthogenin), 사이클로칸토시드 A(Cyclocanthoside A), 사이클로칸토시드 B, 사이클로칸토시드 C, 사이클로칸토시드 D, 사이클로칸토시드 E, 사이클로칸토시드 F, 사이클로칸토시드 G, 사이클로카르포시드(Cyclocarposide), 사이클로카르포시드 A, 사이클로카르포시드 B, 사이클로카르포시드 C, 사이클로세팔로게닌(Cyclocephalogenin), 사이클로세팔로시드 I(Cyclocephaloside I), 사이클로세팔로시드 II, 사이클로키비노시드 B(Cyclochivinoside B), 사이클로키비노시드 C, 사이클로키비노시드 D, 사이클로디섹토시드(Cyclodissectoside), 사이클로엑소시드(Cycloexoside), 사이클로갈레기노시드 A(Cyclogaleginoside A), 사이클로갈레기노시드 B, 사이클로갈레기노시드 D, 사이클로갈레기노시드 E, 사이클로갈게기닌(Cyclogalgeginin), 사이클로글로비세포시드 A(Cycloglobiceposide A), 사이클로글로비세포시드 B, 사이클로글로비세포시드 C, 사이클로마크로게닌 B(Cyclomacrogenin B), 사이클로마크로시드 A(Cyclomacroside A), 사이클로마크로시드 B, 사이클로마크로시드 C, 사이클로마크로시드 D, 사이클로마크로시드 E, 사이클로오르비코시드 A(Cycloorbicoside A), 사이클로오르비코시드 B, 사이클로오르비코시드 C, 사이클로오르비코시드 D, 사이클로오르비게닌(Cycloorbigenin), 사이클로오르비게닌 A, 사이클로오르비게닌 B, 사이클로오르비게닌 C, 사이클로피크난토게닌(Cyclopycnanthogenin), 사이클로시에베르시오시드 C(Cyclosieversioside C), 사이클로시에베르시오시드 H, 사이클로시베르시오시드 E(Cyclosiversioside E), 사이클로스티풀로시드 A(Cyclostipuloside A), 사이클로스티풀로시드 B, 사이클로트리섹토시드(Cyclotrisectoside), 사이클로유니폴리오시드 A(Cyclounifolioside A), 사이클로유니폴리오시드 B, 사이클로유니폴리오시드 D, 다시안토게닌(Dasyanthogenin), 디하이드로사이클로오르비게닌 A(Dihydrocycloorbigenin A), 엘론가토시드(Elongatoside), 에레모필로시드 A(Eremophiloside A), 에레모필로시드 B, 에레모필로시드 C, 에레모필로시드 D, 에레모필로시드 E, 에레모필로시드 F, 에레모필로시드 G, 에레모필로시드 H, 에레모필로시드 I, 에레모필로시드 J, 에레모필로시드 K, 하레프토시드 C(Hareftoside C), 하레프토시드 D, 하레프토시드 E, 히스피다신(Hispidacin), 황기예게닌 I(Huangqiyegenin I), 황기예닌 A(Huangqiyenin A), 황기예닌 B, 황기예닌 D, 황기예닌 E, 황기예닌 F, 황기예닌 G, 황기예닌 H, 황기예닌 I, 황기예닌 J, 이소아스트라갈로시드 I(Isoastragaloside I), 이소아스트라갈로시드 II, 이소아스트라갈로시드 IV, 이소콤플라나틴(Isocomplanatin), 카히리코시드 I(Kahiricoside I), 카히리코시드 II, 카히리코시드 III, 카히리코시드 IV, 카히리코시드 V, 마크로필로사포닌 A(Macrophyllosaponin A), 마크로필로사포닌 B, 마크로필로사포닌 C, 마크로필로사포닌 D, 마크로필로사포닌 E, 말로닐아스트라갈로시드 I(Malonylastragaloside I), 몽골리코시드 A(Mongholicoside A), 몽골리코시드 B, 몽골리코시드 I, 몽골리코시드 II, 올레이폴리오시드 A(Oleifolioside A), 올레이폴리오시드 B, 오르비코시드(Orbicoside), 오르비게닌(Orbigenin), 프루시아노시드 A(Prusianoside A), 프루시아노시드 B, 퀴스쿠아게닌(Quisquagenin), 퀴스발로시드 B(Quisvaloside B), 루빅산틴(Rubixanthin), 알미테이트(almitate), 루빅산틴(Rubixanthin), 사포게닌 A(Sapogenin A), 사포게닌 III, 세코마크로게닌 B(Secomacrogenin B), 시에베로시드 I(Sieberoside I), 시에베로시드 II, 소야사포게놀 B(Soyasapogenol B), 토멘토시드 I(Tomentoside I), 토멘토시드 II, 트리고노시드 I(Trigonoside I), 트리고노시드 III, 트로자노시드 A(Trojanoside A), 트로자노시드 B, 트로자노시드 C, 트로자노시드 D, 트로자노시드 E, 트로자노시드 F, 트로자노시드 I, 트로자노시드 J, 아스트라갈로시드 VIII(Astragaloside VIII), 11-p-쿠마로일네페티신(Coumaroylnepeticin) 또는 이들의 임의의 조합물을 포함하거나 이들로부터 선택되는 조성물.
16. 제1항에 있어서, 포리아 추출물이 폴리포어 버섯(polypore mushroom) 아가리쿠스 수브루페센스(Agaricus subrufescens), 아가리쿠스 블라제이(Agaricus blazei), 안트로디아 캄포라테(Antrodia camphorate), 볼레투스 에둘리스(Boletus edulis), 코리올루스 파르가메누스(Coriolus pargamenus), 코리올루스 헤테로모르푸스(Coriolus heteromorphus), 크리토더마 시트리눔(Crytoderma citrinum), 플라물리나 벨루티퍼(Flammulina velutiper), 포르미토프시스 시티시나(Formitopsis cytisina), 포르미토프시스. 피니콜라(Formitopsis. pinicola), 가노더마 루시둠(Ganoderma lucidum), 가노더마 시넨세(Ganoderma sinense), 가노더마 추가에(Ganoderma tsugae), 글로에필룸 사에피아리움(Gloephyllum saepiarium), 그리폴라 프론도사(Grifola frondosa), 헤리시움 에리나세우스(Hericium erinaceus), 히드넬룸 펙키이(Hydnellum peckii), 렌티누스 에도데스(Lentinus edodes), 미크로포루스 플라벨리포르미스(Microporus flabelliformis), 모르켈라 에스쿨렌타(Morchella esculenta), 오피오코르디셉스 시넨시(Ophiocordyceps sinensi), 피프토로루스 베툴리누스(Piptororus betulinus), 플레우로투스 네브로덴시스(Pleurotus nebrodensis), 폴리포루스 움벨라투스(Polyporus umbellatus), 폴리포루스 투베라스터(Polyporus tuberaster), 포리아 코코스(Poria cocos), 스키조필룸 코뮤네(Schizophyllum commune), 스켈레토쿠티스 불가리스(Skeletocutis vulgaris), 트라메테스 기보사(Trametes gibbosa), 트라메테스 베르시콜로르(Trametes versicolor)(코리올루스 베르시콜로르(Coriolus versicolor)), 우스틸라고 마이디스(Ustilago maydis), 또는 이들의 임의의 조합물을 포함하거나, 이들로부터 선택되는 조성물.
17. 제1항에 있어서, 적어도 하나의 포리아 추출물이 약 0.01% 내지 100%의 다당류 및 약 0.01% 내지 100%의 트리테르페노이드를 포함하는 조성물.
18. 제2항에 있어서, 적어도 하나의 포리아 추출물로부터 분리된 트리테르페노이드 또는 트리테르페노이드의 혼합물이 25-하이드록시파킴산, 25-하이드록시-3-에피투물로스산, 16,25-디하이드록시에부리콘산, 3,16,25-트리하이드록시-24-메틸렌라노스타-7,9(11)-디엔-21-산, 16,25-디하이드록시데하이드로에부리코산, 15-하이드록시데하이드로투물로스산, 6-하이드록시데하이드로파킴산, 3,16,26-트리하이드록시라노스타-7,9(11),24-트리엔-21-산, 3,4-세코라노스타-4(28),7,9(11),24-테트라엔-3,26-디오산; (24Z)-포름, 프레근-7-엔-3,11,15,20-테트롤, 포리코산 DM, 26-하이드록시포리코산 DM, 포리코산 D, 포리코산 CM, 포리코산 C; 25-하이드록시, 포리코산 CE, 포리코산 C, 포리코산 BM, 포리코산 B; 데옥시 포리코산 B, 에부리코디올, 포리코산 G, 포리코산 GM, 포리코산 A, 포리코산 AM, 포리코산 AE, 25-메톡시포리코산 A, 포리코산 H, 25-하이드록시포리코산 H, 포리코산 HM, 6,7-데하이드로포리코산 H, 데하이드로에부리콜산, 3-하이드록시라노스타-7,9(11),24-트리엔-21-산, 5,8-에피디옥시-3,16-디하이드록시-24-메틸렌라노스타-6,9(11)-디엔-21-산, 포리코산 E, 포리아코손 A, 포리아코손 B, 포리코산 F, 29-하이드록시폴리포렌산 C, 29-하이드록시데하이드로투물로스산, 29-하이드록시데하이드로파킴산, 파킴산, 아세틸파킴산, 데하이드로파킴산, 3,16-디하이드록시-24-메틸렌라노스타-7,9(11)-디엔-21-산; 3-O-(4-하이드록시벤조일), 3-에피데하이드로투물로스산, 3-에피데하이드로파킴산, 3,16-디하이드록시라노스타-7,9(11),24-트리엔-21-산, 16-하이드록시트라메텐산, 3,16-디하이드록시라노스타-8,24-디엔-21-산 또는 이들의 임의의 조합물을 포함하거나, 이들로부터 선택되는 조성물.
19. 제1항에 있어서, 적어도 하나의 스키잔드라 추출물이 스키잔드라 키넨시스(Schisandra chinensis), 스키잔드라 엘론가테(Schisandra elongate), 스키잔드라 글라브라(Schisandra glabra), 스키잔드라 글라우세센스(Schisandra glaucescens), 스키잔드라 헨리이(Schisandra henryi), 스키잔드라 인카르나테(Schisandra incarnate), 스키잔드라 란시폴리아(Schisandra lancifolia), 스키잔드라 네글렉타(Schisandra neglecta), 스키잔드라 니그라(Schisandra nigra), 스키잔드라 프로핀쿠아(Schisandra propinqua), 스키잔드라 푸베센스(Schisandra pubescens), 스키잔드라 레판다(Schisandra repanda), 스키잔드라 루브리플로라(Schisandra rubriflora), 스키잔드라 루브리폴리아(Schisandra rubrifolia), 스키잔드라 시넨시스(Schisandra sinensis), 스키잔드라 스파에란드라(Schisandra sphaerandra), 스키잔드라 스페난테라(Schisandra sphenanthera), 스키잔드라 토멘텔라(Schisandra tomentella), 스키잔드라 투베르쿨라타(Schisandra tuberculata), 스키잔드라 베스티타(Schisandra vestita), 스키잔드라 비리디스(Schisandra viridis), 스키잔드라 윌스니아나(Schisandra wilsoniana) 또는 이들의 조합물을 포함하거나, 이들로부터 선택되는 조성물.
20. 제2항에 있어서, 적어도 하나의 스키잔드라 추출물로부터 분리된 하나 이상의 리그난이 스키잔드린(Schisandrin), 데옥시스키잔드린, γ-스키잔드린, 슈도-γ-스키잔드린, 우웨이지수 B(Wuweizisu B), 우웨이지수 C, 이소스키잔드린, 프레고미신(Pregomisin), 에오스키잔드린(eoschizandrin), 스키잔드롤(Schizandrol), 스키잔드롤 A, 스키잔드롤 B, 스키잔테린(Schisantherin) A, B, C, D, E, 루브스키잔테린(Rubschisantherin), 스키잔헤놀 아세트드테(Schisanhenol acetdte), 스키잔헤놀 B, 스키잔헤놀, 고미신(Gomisin) A, B, C, D, E, F, G, H, J, N, O, R, S, T, U, 에피고미신 O(Epigomisin O), 안젤로일고미신(Angeloylgomisin) H, O, Q, T, 이글로일고미신(igloylgomisin) H, P, 안젤로이이소고미신 O(Angeloyisogomisin O), 벤조일-고미신 H, O, P, Q, 벤조일-이소고미신 또는 이들의 조합물인 조성물.
21. 제2항에 있어서, 스키잔드라 추출물로부터 분리된 하나 이상의 유기산이 말산, 시트르산, 시키미산 또는 이들의 조합물을 포함하는 조성물.
22. 제1항에 있어서, 적어도 하나의 식물 추출물이 줄기, 줄기 껍질, 나무줄기, 나무줄기 껍질, 잔가지, 괴경, 뿌리, 뿌리 껍질, 어린 싹, 종자, 근경, 꽃, 과일, 종자, 및 다른 생식 기관, 잎 및 다른 공중 부분을 포함하는 그룹으로부터 추출되는 조성물.
23. 제1항에 있어서, 조성물이 하나 이상의 공지된 간 보호제를 추가로 포함하며, 간 보호제가 밀크 씨슬(milk thistle), 알로에, 아르테미시아 쿠르쿠마(Artemisia curcuma), 부플레우룸(bupleurum), 감초, 샐비어, 모루스(morus), 호베니아(hovenia), 짚신나물(agrimony), 쿠드라니아(cudrania), 리세움(lyceum), 시트러스, 프루누스(prunus), 옐로우 뮴(yellow mume), 한국 김(Korea gim), 민들레, 비티스(vitis), 포도 종자, 루부스(rubus), 동백나무, 녹차, 크릴 오일, 효모, 대두의 식물 분말 또는 식물 추출물; 분리되고 농축된 실리마린, EGCG, 카테킨, 플라보노이드, 인지질, 티오(thio), 피크노게놀(pycnogenol), 젤라틴(gelatin), 대두 레시틴, 췌장 효소; 천연 또는 합성 N-아세틸-시스테인, 타우린, 리보플라빈, 니아신, 피리독신, 엽산, 카로틴, 비타민 A, 비타민 B2, B6, B16, 비타민 C, 비타민 E, 글루타티온, 분지쇄 아미노산, 셀레늄, 구리, 아연, 망간, 코엔자임 Q10, L-아르기닌, L-글루타민, 포스파티딜콜린 등으로 구성된 군으로부터 선택되는 조성물.
24. 제1항에 있어서, 조성물이 약학적 또는 영양학적으로 허용되는 담체, 희석제, 또는 부형제를 추가로 포함하며, 약학적 또는 영양학적 제형이 약 0.5 중량 퍼센트(wt%) 내지 약 90 중량 퍼센트의 추출물 혼합물의 활성 성분을 포함하는 조성물.
25. 제24항에 있어서, 조성물이 정제, 경질 캡슐, 연질 겔 캡슐, 분말, 과립, 액체, 팅크제, 사셰이(sashay), 준비된 드링크 샷(ready to drink shot), 또는 로젠지로 제형화되는 조성물.
26. 제1항에 있어서, 조성물이 인간 또는 동물 체중 kg 당 0.01 내지 500 mg의 용량으로 투여되는 조성물.
27. 식물 추출물의 혼합물을 포함하는 유효량의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 포유동물의 간 기능을 유지시키거나, 간세포 손상을 최소화하거나, 건강한 간을 촉진하거나, 간 항산화 온전성을 보호하거나, 독소를 중화시키거나, 간 건강에 영향을 미치는 자유 라디칼의 작용을 감소시키거나, 반응성 산소종을 제거하거나, 산화 스트레스를 감소시키거나, 독성 대사의 형성을 예방하거나, 간 해독 능력 및/또는 기능을 개선하거나, 간을 청소하거나, 간 구조를 회복시키거나, 독소로부터 간세포를 간 보호하거나, 간의 혈류 및 순환을 돕거나, 간 기능을 지원하거나, 간을 강화시키고 진정시키거나, 간을 안정시키고 강화하거나, 간 동통을 경감시키거나, 유해한 화학물질 및 유기체를 제거하거나, 간의 대사 과정을 지원하거나, 간의 불편함을 경감시키거나, 지방간을 경감시키거나, 간 해독 능력을 개선하거나, 간 효소를 낮추거나, 천연 산화제를 제공하거나, SOD를 증가시키거나, GSH를 증가시키거나, 간세포 과산화를 감소시키거나, 지방산 축적을 감소시키거나, 건강한 항염증 과정을 유지시키거나, 간 면역 기능을 개선하거나, 간세포 재생을 촉진하거나, 간 재생 기능을 개선하거나, 담즙 방출을 자극하거나, 건강한 담즙 흐름을 촉진시키거나, 알콜 숙취 및 과용의 화학물질, 약물 및 처방약과 관련된 증상을 예방하고, 치료하고, 관리하거나, 간을 회춘시키거나, 그 밖의 작용을 위한 방법으로서, 상기 식물 추출물이 적어도 하나의 미리스티카 추출물, 적어도 하나의 아스트라갈루스 추출물, 및 적어도 하나의 버섯 추출물 포리아 또는 적어도 하나의 스키잔드라 추출물을 포함하는, 방법.
28. 제27항에 있어서, 간 장애 또는 질환이 바이러스성 간염, 알콜 간염, 자가면역 간염, 알콜 간질환, 지방간 질환, 지방증, 지방간염, 비알콜성 지방간 질환, 약물 유발성 간질환, 간경화증, 섬유증, 간부전, 약물 유발성 간부전, 대사 증후군, 간세포 암종, 담관암종, 원발 쓸개관 간경화증, 담모세혈관, 길버트 증후군, 황달, 또는 임의의 다른 간 독성 관련 적응증, 및 일반적으로 환자에 대해 허용가능한 독성을 갖는 간 독성 관련 적응증 또는 임의의 다른 간 관련 적응증 또는 이들의 임의의 조합인 방법.

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