KR20220016049A - Btk 억제제 고리 유도체, 이의 제조 방법 및 이의 약제학적 응용 - Google Patents

Btk 억제제 고리 유도체, 이의 제조 방법 및 이의 약제학적 응용 Download PDF

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KR20220016049A
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지안민 왕
구오쯔 주
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핑밍 탕
샤오강 첸
정강 후앙
슈오타오 우
야오 리
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Abstract

BTK 억제제 고리 유도체, 이의 제조 방법 및 이의 약제학적 응용. BTK 억제제 고리 유도체는 일반 화학식 I로 나타낸 화합물 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정이며, BTK 억제제 고리 유도체는 종양 또는 자가면역 시스템 질병과 같은 BTK-관련 질병을 치료하는 데 사용된다.

Description

BTK 억제제 고리 유도체, 이의 제조 방법 및 이의 약제학적 응용
본 발명은 일반 화학식 I로 나타낸 화합물 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정, 및 이의 중간체 및 이의 제조 방법뿐만 아니라, 종양 또는 자가면역 시스템 질병과 같은 BTK-관련 질병에 있어서의 이의 용도에 관한 것이다.
비수용체 단백질 티로신 키나제의 Tec 패밀리의 구성원인 브루톤 티로신 키나제(BTK)는 B 세포 항원 수용체(BCR) 신호전달 경로에서의 주요 조절인자이며, 림프계, 조혈계 및 혈액계에 분포되어 있다. BTK 돌연변이는 종양 세포 증식, 분화, 및 혈관생성 등에서 하류 신호전달 경로를 활성화시킬 수 있으며, 이는 X 염색체 관련 무감마글로불린혈증; 비호지킨 림프종(NHL); 및 만성 림프구성 백혈병(CLL), 외투 세포 림프종, 및 미만성 대 B-세포 림프종을 포함한 많은 B-세포 악성종양으로 이어질 수 있다. B 세포 및 골수계 세포에서 주로 발현되기 때문에, BTK는 비교적 높은 표적화 능력 및 안전성을 갖는 표적이다.
PROTAC(단백질 가수분해 표적화 키메라) 분자는 표적화된 단백질 및 E3 유비퀴틴 리가제 둘 모두에 결합할 수 있는 이중 기능 화합물들의 부류이다. 이러한 화합물 부류는 세포 내의 프로테아좀에 의해 표적화된 단백질의 인식을 유도하여, 표적화된 단백질의 분해를 야기할 수 있으며, 이는 세포 내의 표적화된 단백질의 함량을 효과적으로 감소시킬 수 있다. 다양한 표적화된 단백질에 결합할 수 있는 리간드를 PROTAC 분자 내로 도입함으로써, PROTAC 기술을 다양한 질병의 치료에 적용하는 것이 가능하며, 이러한 기술은 최근 수년간 상당한 관심을 끌어 왔다.
본 발명은 종양 또는 자가면역 시스템 질병과 같은 BTK-관련 질병의 치료에 사용하기 위한, 신규한 구조, 우수한 효능, 높은 생체이용률 및 더 높은 안전성을 갖는 BTK 억제제를 개발한다.
본 발명은 종양 또는 자가면역 시스템 질병과 같은 BTK-관련 질병의 치료에 사용하기 위한, 신규한 구조, 우수한 효능, 높은 생체이용률, 더 높은 안전성을 갖고, BTK를 억제하거나 분해시킬 수 있는, BTK 억제제 및 E3 유비퀴틴 리가제의 PROTAC 화합물을 개발한다.
본 발명은 일반 화학식 I로 나타낸 화합물 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다:
[화학식 I]
B-L-K
(L은 -Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-로부터 선택되고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 및 Ak5는 각각 독립적으로 CH2, O 또는 결합으로부터 선택되고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 각각 독립적으로 3원 내지 12원 헤테로사이클릭 고리, 3원 내지 12원 사이클로알킬, 6원 내지 10원 아릴 또는 결합으로부터 선택되며, 여기서 헤테로사이클릭 고리, 사이클로알킬 또는 아릴은 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소(=O), C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0 내지 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고, 헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 모두 결합일 수는 없고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 O일 때, 이들은 B에 직접 연결될 수 없고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 결합이 아닐 때, 이들은 서로 직접 연결될 수 없고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 3개가 결합일 때, Ak1, Ak2, Ak3, Ak4, 및 Ak5 중 적어도 하나는 CH2로부터 선택되고 B에 연결되고;
Ak1, Cy1, Ak2, Cy2, Ak3, Cy3, Ak4, Cy4 및 Ak5 중 4개 이상이 결합이 아닐 때, Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 적어도 하나는 피페리딘, 피페라진, 피리미딘 또는 피리딘이 아니고;
B는 B1-W1-B2-B3-B4-로부터 선택되고;
B1은 6원 헤테로아릴 고리 또는 페닐로부터 선택되며, 여기서 헤테로아릴 고리 또는 페닐은 0 내지 4개의 Rb1로 선택적으로 추가로 치환되고, 헤테로아릴 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고;
W1은 -O-, -S-, -NH-, -NHCO- 또는 -CONH-로부터 선택되고;
B2는 6원 헤테로아릴 고리 또는 페닐로부터 선택되며, 여기서 헤테로아릴 고리 또는 페닐은 0 내지 4개의 Rb2로 선택적으로 추가로 치환되고, 헤테로아릴 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고;
B3은 8원 내지 10원 융합 헤테로사이클릭 고리로부터 선택되며, 여기서 융합 헤테로사이클릭 고리는 0 내지 4개의 Rb3으로 선택적으로 추가로 치환되고, 융합 헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고;
B4는 5원 또는 6원 포화 헤테로사이클릭 고리로부터 선택되며, 여기서 포화 헤테로사이클릭 고리는 0 내지 4개의 Rb4로 선택적으로 추가로 치환되고, 포화 헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 함유하고;
Rb1, Rb2, Rb3 또는 Rb4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되며, 알킬 및 알콕시는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0 내지 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
K는
Figure pct00001
로부터 선택되고;
Rk2는 CH2, C=O, S=O, 또는 SO2로부터 선택되고;
Rk1, Rk3 또는 Rk4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, COOH, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되고;
Rk5는 C=O 또는
Figure pct00002
로부터 선택되고; p1 또는 p2는 각각 독립적으로 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택됨).
본 발명의 Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 및 Ak5뿐만 아니라, Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4뿐만 아니라, B2, B3 및 B4는 이들이 각각 독립적으로 하위치환체일 때 하위단위임이 이해되어야 한다.
본 발명의 일부 구현예는
L은 -Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-로부터 선택되고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 및 Ak5는 각각 독립적으로 CH2, O 또는 결합으로부터 선택되고; Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 각각 독립적으로 3원 헤테로사이클릭 고리, 4원 헤테로사이클릭 고리, 5원 헤테로사이클릭 고리, 6원 헤테로사이클릭 고리, 7원 헤테로사이클릭 고리, 8원 헤테로사이클릭 고리, 9원 헤테로사이클릭 고리, 10원 헤테로사이클릭 고리, 11원 헤테로사이클릭 고리, 12원 헤테로사이클릭 고리, 3원 사이클로알킬, 4원 사이클로알킬, 5원 사이클로알킬, 6원 사이클로알킬, 7원 사이클로알킬, 8원 사이클로알킬, 9원 사이클로알킬, 10원 사이클로알킬, 11원 사이클로알킬, 12원 사이클로알킬, 6원 내지 10원 아릴 또는 결합, 바람직하게는 결합, 4원 모노-헤테로사이클릭 고리, 5원 모노-헤테로사이클릭 고리, 6원 모노-헤테로사이클릭 고리, 7원 모노-헤테로사이클릭 고리, 5원 융합 헤테로사이클릭 고리, 6원 융합 헤테로사이클릭 고리, 7원 융합 헤테로사이클릭 고리, 8원 융합 헤테로사이클릭 고리, 9원 융합 헤테로사이클릭 고리, 10원 융합 헤테로사이클릭 고리, 6원 스피로-헤테로사이클릭 고리, 7원 스피로-헤테로사이클릭 고리, 8원 스피로-헤테로사이클릭 고리, 9원 스피로-헤테로사이클릭 고리, 10원 스피로-헤테로사이클릭 고리, 11원 스피로-헤테로사이클릭 고리, 12원 스피로-헤테로사이클릭 고리, 7원 가교-헤테로사이클릭 고리, 8원 가교-헤테로사이클릭 고리, 9원 가교-헤테로사이클릭 고리, 10원 가교-헤테로사이클릭 고리, 4원 모노사이클로알킬, 5원 모노사이클로알킬, 6원 모노사이클로알킬, 7원 모노사이클로알킬, 5원 융합 사이클로알킬, 6원 융합 사이클로알킬, 7원 융합 사이클로알킬, 8원 융합 사이클로알킬, 9원 융합 사이클로알킬, 10원 융합 사이클로알킬, 6원 스피로 사이클로알킬, 7원 스피로 사이클로알킬, 8원 스피로 사이클로알킬, 9원 스피로 사이클로알킬, 10원 스피로 사이클로알킬, 11원 스피로 사이클로알킬, 12원 스피로 사이클로알킬, 7원 가교 사이클로알킬, 8원 가교 사이클로알킬, 9원 가교 사이클로알킬, 10원 가교 사이클로알킬 또는 6원 내지 10원 아릴로부터 선택되며, 여기서 아릴, 사이클로알킬, 모노-헤테로사이클릭 고리, 융합 헤테로사이클릭 고리, 스피로-헤테로사이클릭 고리 또는 가교-헤테로사이클릭 고리는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고, 모노-헤테로사이클릭 고리, 융합 헤테로사이클릭 고리, 스피로-헤테로사이클릭 고리 또는 가교-헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 함유하고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 모두 결합일 수는 없고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 O일 때, 이들은 B에 직접 연결될 수 없고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 결합이 아닐 때, 이들은 서로 직접 연결될 수 없고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 3개가 결합일 때, Ak1, Ak2, Ak3, Ak4, 및 Ak5 중 적어도 하나는 CH2로부터 선택되고 B에 연결되고;
Ak1, Cy1, Ak2, Cy2, Ak3, Cy3, Ak4, Cy4 및 Ak5 중 4개 이상이 결합이 아닐 때, Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 적어도 하나는 피페리딘, 피페라진, 피리미딘 또는 피리딘이 아니고;
B는 B1-W1-B2-B3-B4-로부터 선택되고;
B1은 6원 헤테로아릴 고리 또는 페닐, 바람직하게는 페닐 또는 피리딜로부터 선택되며, 여기서 헤테로아릴 고리, 페닐 또는 피리딜은 0, 1, 2, 3 또는 4개의 Rb1로 선택적으로 추가로 치환되고, 헤테로아릴 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 함유하고;
W1은 -O-, -NHCO- 또는 -CONH-로부터 선택되고;
B2는 6원 헤테로아릴 고리 또는 페닐, 바람직하게는 페닐 또는 피리딜로부터 선택되며, 여기서 헤테로아릴 고리, 페닐 또는 피리딜은 0, 1, 2, 3 또는 4개의 Rb2로 선택적으로 추가로 치환되고, 헤테로아릴 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 함유하고;
B3은 8원 융합 헤테로사이클릭 고리, 9원 융합 헤테로사이클릭 고리 또는 10원 융합 헤테로사이클릭 고리, 바람직하게는 치환 또는 비치환된 이미다조피리미딘, 피라졸로피리미딘, 이미다조피라진, 피라졸로피라진, 이미다조테트라하이드로피리미딘, 또는 피라졸로테트라하이드로피리미딘로부터 선택되며, 여기서, 치환될 때, 융합 헤테로사이클릭 고리, 이미다조피리미딘, 피라졸로피리미딘, 이미다조피라진, 피라졸로피라진, 이미다조테트라하이드로피리미딘, 또는 피라졸로테트라하이드로피리미딘은 0, 1, 2, 3 또는 4개의 Rb3으로 선택적으로 추가로 치환되고, 융합 헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 함유하고;
B4는 5원 포화 헤테로사이클릭 고리 또는 6원 포화 헤테로사이클릭 고리, 바람직하게는 치환 또는 비치환된 아자사이클로펜틸, 피페리딘 또는 피페라진로부터 선택되며, 여기서 헤테로사이클릭 고리, 아자사이클로펜틸, 피페리딘 또는 피페라진은 0, 1, 2, 3 또는 4개의 Rb4로 선택적으로 추가로 치환되고, 포화 헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 함유하고;
K는
Figure pct00003
로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00004
또는
Figure pct00005
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00006
Figure pct00007
또는
Figure pct00008
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00009
Figure pct00010
Figure pct00011
또는
Figure pct00012
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00013
Figure pct00014
Figure pct00015
또는
Figure pct00016
로부터 선택될 수 있고;
Rk2는 CH2, C=O, S=O, 또는 SO2로부터 선택되고;
Rk1, Rk3 또는 Rk4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, COOH, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되고;
Rk5는 C=O 또는
Figure pct00017
로부터 선택되고;
p1 또는 p2는 각각 독립적으로 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택되는 것인, 일반 화학식 I로 나타낸 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예에 따르면,
L은 -Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-로부터 선택되고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 및 Ak5는 각각 독립적으로 CH2, O 또는 결합으로부터 선택되고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 각각 독립적으로 3원 내지 12원 헤테로사이클릭 고리, 3원 내지 12원 사이클로알킬, 6원 내지 10원 아릴 또는 결합으로부터 선택되며, 여기서 헤테로사이클릭 고리, 사이클로알킬 또는 아릴은 H, F, Cl, Br 또는 I로부터 선택되는 0 내지 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고, 헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유한다.
본 발명의 일부 구현예에 따르면, Ak2, Ak3 및 Ak4는 결합이고; Ak1 및 Ak5는 각각 독립적으로 CH2, O 또는 결합으로부터 선택된다.
본 발명의 일부 구현예는
L은 -Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-로부터 선택되고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 및 Ak5는 각각 독립적으로 CH2, O 또는 결합으로부터 선택되고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 각각 독립적으로 치환 또는 비치환된 결합, 페닐, 나프틸, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로부틸-융합-사이클로부틸, 사이클로부틸-융합-사이클로펜틸, 사이클로부틸-융합-사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-사이클로펜틸, 사이클로펜틸-융합-사이클로헥실, 사이클로헥실-융합-사이클로헥실, 사이클로프로필-융합-사이클로부틸, 사이클로프로필-융합-사이클로펜틸, 사이클로프로필-융합-사이클로헥실, 사이클로부틸-스피로-사이클로부틸, 사이클로부틸-스피로-사이클로펜틸, 사이클로부틸-스피로-사이클로헥실, 사이클로펜틸-스피로-사이클로펜틸, 사이클로펜틸-스피로-사이클로헥실, 사이클로헥실-스피로-사이클로헥실, 사이클로프로필-스피로-사이클로부틸, 사이클로프로필-스피로-사이클로펜틸, 사이클로프로필-스피로-사이클로헥실, 아제티디닐, 아자사이클로펜틸, 피페리딜, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 사이클로프로필-융합-아제티디닐, 사이클로프로필-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로프로필-융합-아자사이클로헥실, 사이클로프로필-융합-피페리딜, 사이클로부틸-융합-아제티디닐, 사이클로부틸-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로부틸-융합-아자사이클로헥실, 사이클로부틸-융합-피페리딜, 사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-피페리딜, 사이클로헥실-융합-아제티디닐, 사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로헥실-융합-아자사이클로헥실, 사이클로헥실-융합-피페리딜, 아제티디닐-융합-아제티디닐, 아제티디닐-융합-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-융합-아자사이클로헥실, 아제티디닐-융합-피페리딜, 아자사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-융합-피페리딜, 아자사이클로헥실-융합-아제티디닐, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-융합-피페리딜, 사이클로부틸-스피로-아제티디닐, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 아제티디닐-스피로-아제티디닐, 아제티디닐-스피로-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로부틸-스피로-피페리딜, 사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 사이클로헥실-스피로-피페리딜, 아제티디닐-스피로-피페리딜, 아자사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 아자사이클로헥실-스피로-피페리딜,
Figure pct00018
Figure pct00019
, 바람직하게는 치환 또는 비치환된 결합, 페닐, 나프틸, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 아제티디닐, 아자사이클로펜틸, 피페리딜, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 아제티디닐-융합-아제티디닐, 아제티디닐-융합-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-융합-아자사이클로헥실, 아제티디닐-융합-피페리딜, 아자사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-융합-피페리딜, 사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-융합-아제티디닐, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-스피로-아제티디닐, 아제티디닐-스피로-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 아제티디닐-스피로-피페리딜, 아자사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 또는
Figure pct00020
로부터 선택되며; 이들은 치환될 때, H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, 메틸, 에틸, 이소프로필, 메톡시, 에톡시 또는 이소프로폭시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 모두 결합일 수는 없고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 O일 때, 이들은 B에 직접 연결될 수 없고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 결합이 아닐 때, 이들은 서로 직접 연결될 수 없고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 3개가 결합일 때, Ak1, Ak2, Ak3, Ak4, 및 Ak5 중 적어도 하나는 CH2로부터 선택되고 B에 연결되고;
Ak1, Cy1, Ak2, Cy2, Ak3, Cy3, Ak4, Cy4 및 Ak5 중 4개 이상이 결합이 아닐 때, Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 적어도 하나는 피페리딜, 피페라지닐, 피리미디닐 또는 피리딜이 아니고;
B는
Figure pct00021
또는
Figure pct00022
, 바람직하게는,
Figure pct00023
Figure pct00024
또는
Figure pct00025
로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00026
Figure pct00027
또는
Figure pct00028
로부터 선택될 수 있거나,
B는
Figure pct00029
Figure pct00030
또는
Figure pct00031
로부터 선택될 수 있고;
Rb1, Rb2, Rb3 또는 Rb4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되며, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, 메틸 또는 메톡시로부터 선택되며; 메틸, 메톡시, 알킬 및 알콕시는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br 또는 I로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
n1, n2, n3, n4, n5, n6, n7, n8, n9, n10, n11, 및 n12는 각각 독립적으로 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택되고;
K는
Figure pct00032
또는
Figure pct00033
, 바람직하게는
Figure pct00034
또는
Figure pct00035
로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00036
또는
Figure pct00037
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00038
Figure pct00039
또는
Figure pct00040
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00041
Figure pct00042
Figure pct00043
또는
Figure pct00044
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00045
Figure pct00046
Figure pct00047
또는
Figure pct00048
로부터 선택될 수 있고;
Rk2는 CH2 또는 C=O로부터 선택되고;
Rk1, Rk3 또는 Rk4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, COOH, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH 또는 NH2로부터 선택되고;
p1 또는 p2는 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로부터 선택되는 것인, 일반 화학식 I로 나타낸 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예는
L은 -Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-로부터 선택되고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 및 Ak5는 각각 독립적으로 CH2, O 또는 결합으로부터 선택되고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 각각 독립적으로 치환 또는 비치환된 결합, 페닐, 나프틸, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로부틸-융합-사이클로부틸, 사이클로부틸-융합-사이클로펜틸, 사이클로부틸-융합-사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-사이클로펜틸, 사이클로펜틸-융합-사이클로헥실, 사이클로헥실-융합-사이클로헥실, 사이클로프로필-융합-사이클로부틸, 사이클로프로필-융합-사이클로펜틸, 사이클로프로필-융합-사이클로헥실, 사이클로부틸-스피로-사이클로부틸, 사이클로부틸-스피로-사이클로펜틸, 사이클로부틸-스피로-사이클로헥실, 사이클로펜틸-스피로-사이클로펜틸, 사이클로펜틸-스피로-사이클로헥실, 사이클로헥실-스피로-사이클로헥실, 사이클로프로필-스피로-사이클로부틸, 사이클로프로필-스피로-사이클로펜틸, 사이클로프로필-스피로-사이클로헥실, 아제티디닐, 아자사이클로펜틸, 피페리딜, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 사이클로프로필-융합-아제티디닐, 사이클로프로필-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로프로필-융합-아자사이클로헥실, 사이클로프로필-융합-피페리딜, 사이클로부틸-융합-아제티디닐, 사이클로부틸-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로부틸-융합-아자사이클로헥실, 사이클로부틸-융합-피페리딜, 사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-피페리딜, 사이클로헥실-융합-아제티디닐, 사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로헥실-융합-아자사이클로헥실, 사이클로헥실-융합-피페리딜, 아제티디닐-융합-아제티디닐, 아제티디닐-융합-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-융합-아자사이클로헥실, 아제티디닐-융합-피페리딜, 아자사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-융합-피페리딜, 아자사이클로헥실-융합-아제티디닐, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-융합-피페리딜, 사이클로부틸-스피로-아제티디닐, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 아제티디닐-스피로-아제티디닐, 아제티디닐-스피로-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로부틸-스피로-피페리딜, 사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 사이클로헥실-스피로-피페리딜, 아제티디닐-스피로-피페리딜, 아자사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 아자사이클로헥실-스피로-피페리딜,
Figure pct00049
Figure pct00050
, 바람직하게는 치환 또는 비치환된 결합, 페닐, 나프틸, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 아제티디닐, 아자사이클로펜틸, 피페리딜, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 아제티디닐-융합-아제티디닐, 아제티디닐-융합-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-융합-아자사이클로헥실, 아제티디닐-융합-피페리딜, 아자사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-융합-피페리딜, 사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-융합-아제티디닐, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-스피로-아제티디닐, 아제티디닐-스피로-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 아제티디닐-스피로-피페리딜, 아자사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 또는
Figure pct00051
로부터 선택되며; 이들은 치환될 때, H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, 메틸, 에틸, 이소프로필, 메톡시, 에톡시 또는 이소프로폭시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 모두 결합일 수는 없고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 O일 때, 이들은 B에 직접 연결될 수 없고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 결합이 아닐 때, 이들은 서로 직접 연결될 수 없고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 3개가 결합일 때, Ak1, Ak2, Ak3, Ak4, 및 Ak5 중 적어도 하나는 CH2로부터 선택되고 B에 연결되고;
Ak1, Cy1, Ak2, Cy2, Ak3, Cy3, Ak4, Cy4 및 Ak5 중 4개 이상이 결합이 아닐 때, Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 적어도 하나는 피페리딜, 피페라지닐, 피리미디닐 또는 피리딜이 아니고;
B는
Figure pct00052
, 바람직하게는
Figure pct00053
또는
Figure pct00054
로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00055
로부터 선택될 수 있거나,
B는
Figure pct00056
Figure pct00057
Figure pct00058
또는
Figure pct00059
로부터 선택될 수 있고;
Rb1, Rb2, Rb3 또는 Rb4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되며, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, 메틸 또는 메톡시로부터 선택되며; 메틸, 메톡시, 알킬 및 알콕시는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br 또는 I로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
n1, n2, n3, 및 n4는 각각 독립적으로 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택되고;
K는
Figure pct00060
또는
Figure pct00061
, 바람직하게는
Figure pct00062
또는
Figure pct00063
로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00064
또는
Figure pct00065
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00066
Figure pct00067
또는
Figure pct00068
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00069
Figure pct00070
Figure pct00071
또는
Figure pct00072
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00073
Figure pct00074
Figure pct00075
또는
Figure pct00076
로부터 선택될 수 있고;
Rk2는 CH2 또는 C=O로부터 선택되고;
Rk1, Rk3 또는 Rk4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, COOH, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH 또는 NH2로부터 선택되고;
p1 또는 p2는 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로부터 선택되는 것인, 일반 화학식 I로 나타낸 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예는
L은 -Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-로부터 선택되고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 및 Ak5는 각각 독립적으로 CH2, O 또는 결합으로부터 선택되고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 각각 독립적으로 치환 또는 비치환된 결합, 페닐, 나프틸, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로부틸-융합-사이클로부틸, 사이클로부틸-융합-사이클로펜틸, 사이클로부틸-융합-사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-사이클로펜틸, 사이클로펜틸-융합-사이클로헥실, 사이클로헥실-융합-사이클로헥실, 사이클로프로필-융합-사이클로부틸, 사이클로프로필-융합-사이클로펜틸, 사이클로프로필-융합-사이클로헥실, 사이클로부틸-스피로-사이클로부틸, 사이클로부틸-스피로-사이클로펜틸, 사이클로부틸-스피로-사이클로헥실, 사이클로펜틸-스피로-사이클로펜틸, 사이클로펜틸-스피로-사이클로헥실, 사이클로헥실-스피로-사이클로헥실, 사이클로프로필-스피로-사이클로부틸, 사이클로프로필-스피로-사이클로펜틸, 사이클로프로필-스피로-사이클로헥실, 아제티디닐, 아자사이클로펜틸, 피페리딜, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 사이클로프로필-융합-아제티디닐, 사이클로프로필-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로프로필-융합-아자사이클로헥실, 사이클로프로필-융합-피페리딜, 사이클로부틸-융합-아제티디닐, 사이클로부틸-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로부틸-융합-아자사이클로헥실, 사이클로부틸-융합-피페리딜, 사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-피페리딜, 사이클로헥실-융합-아제티디닐, 사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로헥실-융합-아자사이클로헥실, 사이클로헥실-융합-피페리딜, 아제티디닐-융합-아제티디닐, 아제티디닐-융합-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-융합-아자사이클로헥실, 아제티디닐-융합-피페리딜, 아자사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-융합-피페리딜, 아자사이클로헥실-융합-아제티디닐, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-융합-피페리딜, 사이클로부틸-스피로-아제티디닐, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 아제티디닐-스피로-아제티디닐, 아제티디닐-스피로-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로부틸-스피로-피페리딜, 사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 사이클로헥실-스피로-피페리딜, 아제티디닐-스피로-피페리딜, 아자사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 아자사이클로헥실-스피로-피페리딜,
Figure pct00077
Figure pct00078
, 바람직하게는 치환 또는 비치환된 결합, 페닐, 나프틸, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 아제티디닐, 아자사이클로펜틸, 피페리딜, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 아제티디닐-융합-아제티디닐, 아제티디닐-융합-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-융합-아자사이클로헥실, 아제티디닐-융합-피페리딜, 아자사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-융합-피페리딜, 사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-융합-아제티디닐, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-스피로-아제티디닐, 아제티디닐-스피로-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 아제티디닐-스피로-피페리딜, 아자사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 또는
Figure pct00079
로부터 선택되며; 이들은 치환될 때, H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, 메틸, 에틸, 이소프로필, 메톡시, 에톡시 또는 이소프로폭시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 모두 결합일 수는 없고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 O일 때, 이들은 B에 직접 연결될 수 없고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 결합이 아닐 때, 이들은 서로 직접 연결될 수 없고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 3개가 결합일 때, Ak1, Ak2, Ak3, Ak4, 및 Ak5 중 적어도 하나는 CH2로부터 선택되고 B에 연결되고;
Ak1, Cy1, Ak2, Cy2, Ak3, Cy3, Ak4, Cy4 및 Ak5 중 4개 이상이 결합이 아닐 때, Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 적어도 하나는 피페리딜, 피페라지닐, 피리미디닐 또는 피리딜이 아니고;
B는
Figure pct00080
, 바람직하게는
Figure pct00081
로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00082
로부터 선택될 수 있거나,
B는
Figure pct00083
또는
Figure pct00084
로부터 선택될 수 있고;
Rb1, Rb2, Rb3 또는 Rb4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되며, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, 메틸 또는 메톡시로부터 선택되며; 메틸, 메톡시, 알킬 및 알콕시는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br 또는 I로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
n5, n6, n7, 및 n8은 각각 독립적으로 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택되고;
K는
Figure pct00085
또는
Figure pct00086
, 바람직하게는
Figure pct00087
또는
Figure pct00088
로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00089
또는
Figure pct00090
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00091
Figure pct00092
또는
Figure pct00093
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00094
Figure pct00095
Figure pct00096
또는
Figure pct00097
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00098
Figure pct00099
Figure pct00100
또는
Figure pct00101
로부터 선택될 수 있고;
Rk2는 CH2 또는 C=O로부터 선택되고;
Rk1, Rk3 또는 Rk4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, COOH, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH 또는 NH2로부터 선택되고;
p1 또는 p2는 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로부터 선택되는 것인, 일반 화학식 I로 나타낸 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예는
L은 -Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-로부터 선택되고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 및 Ak5는 각각 독립적으로 CH2, O 또는 결합으로부터 선택되고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 각각 독립적으로 치환 또는 비치환된 결합, 페닐, 나프틸, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로부틸-융합-사이클로부틸, 사이클로부틸-융합-사이클로펜틸, 사이클로부틸-융합-사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-사이클로펜틸, 사이클로펜틸-융합-사이클로헥실, 사이클로헥실-융합-사이클로헥실, 사이클로프로필-융합-사이클로부틸, 사이클로프로필-융합-사이클로펜틸, 사이클로프로필-융합-사이클로헥실, 사이클로부틸-스피로-사이클로부틸, 사이클로부틸-스피로-사이클로펜틸, 사이클로부틸-스피로-사이클로헥실, 사이클로펜틸-스피로-사이클로펜틸, 사이클로펜틸-스피로-사이클로헥실, 사이클로헥실-스피로-사이클로헥실, 사이클로프로필-스피로-사이클로부틸, 사이클로프로필-스피로-사이클로펜틸, 사이클로프로필-스피로-사이클로헥실, 아제티디닐, 아자사이클로펜틸, 피페리딜, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 사이클로프로필-융합-아제티디닐, 사이클로프로필-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로프로필-융합-아자사이클로헥실, 사이클로프로필-융합-피페리딜, 사이클로부틸-융합-아제티디닐, 사이클로부틸-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로부틸-융합-아자사이클로헥실, 사이클로부틸-융합-피페리딜, 사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-피페리딜, 사이클로헥실-융합-아제티디닐, 사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로헥실-융합-아자사이클로헥실, 사이클로헥실-융합-피페리딜, 아제티디닐-융합-아제티디닐, 아제티디닐-융합-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-융합-아자사이클로헥실, 아제티디닐-융합-피페리딜, 아자사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-융합-피페리딜, 아자사이클로헥실-융합-아제티디닐, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-융합-피페리딜, 사이클로부틸-스피로-아제티디닐, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 아제티디닐-스피로-아제티디닐, 아제티디닐-스피로-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로부틸-스피로-피페리딜, 사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 사이클로헥실-스피로-피페리딜, 아제티디닐-스피로-피페리딜, 아자사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 아자사이클로헥실-스피로-피페리딜,
Figure pct00102
Figure pct00103
, 바람직하게는 치환 또는 비치환된 결합, 페닐, 나프틸, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 아제티디닐, 아자사이클로펜틸, 피페리딜, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 아제티디닐-융합-아제티디닐, 아제티디닐-융합-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-융합-아자사이클로헥실, 아제티디닐-융합-피페리딜, 아자사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-융합-피페리딜, 사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-융합-아제티디닐, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-스피로-아제티디닐, 아제티디닐-스피로-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 아제티디닐-스피로-피페리딜, 아자사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 또는
Figure pct00104
로부터 선택되며; 이들은 치환될 때, H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, 메틸, 에틸, 이소프로필, 메톡시, 에톡시 또는 이소프로폭시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 모두 결합일 수는 없고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 O일 때, 이들은 B에 직접 연결될 수 없고;
Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 결합이 아닐 때, 이들은 서로 직접 연결될 수 없고;
Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 3개가 결합일 때, Ak1, Ak2, Ak3, Ak4, 및 Ak5 중 적어도 하나는 CH2로부터 선택되고 B에 연결되고;
Ak1, Cy1, Ak2, Cy2, Ak3, Cy3, Ak4, Cy4 및 Ak5 중 4개 이상이 결합이 아닐 때, Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 적어도 하나는 피페리딜, 피페라지닐, 피리미디닐 또는 피리딜이 아니고;
B는
Figure pct00105
, 바람직하게는
Figure pct00106
로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00107
로부터 선택될 수 있거나,
B는
Figure pct00108
또는
Figure pct00109
로부터 선택될 수 있고;
Rb1, Rb2, Rb3 또는 Rb4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되며, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, 메틸 또는 메톡시로부터 선택되며; 메틸, 메톡시, 알킬 및 알콕시는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br 또는 I로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
n9, n10, n11, 및 n12는 각각 독립적으로 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택되고;
K는
Figure pct00110
또는
Figure pct00111
, 바람직하게는
Figure pct00112
또는
Figure pct00113
로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00114
또는
Figure pct00115
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00116
Figure pct00117
또는
Figure pct00118
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00119
Figure pct00120
Figure pct00121
또는
Figure pct00122
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00123
Figure pct00124
Figure pct00125
또는
Figure pct00126
로부터 선택될 수 있고;
Rk2는 CH2 또는 C=O로부터 선택되고;
Rk1, Rk3 또는 Rk4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, COOH, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH 또는 NH2로부터 선택되고;
p1 또는 p2는 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로부터 선택되는 것인, 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예는
L은
Figure pct00127
Figure pct00128
Figure pct00129
또는
Figure pct00130
Figure pct00131
Figure pct00132
로부터 선택되거나,
L은
Figure pct00133
Figure pct00134
Figure pct00135
또는
Figure pct00136
로부터 선택될 수 있거나,
L은
Figure pct00137
Figure pct00138
Figure pct00139
또는
Figure pct00140
로부터 선택될 수 있고;
L은 좌측으로 B에 연결되고, 우측으로 K에 연결되고;
B는
Figure pct00141
또는
Figure pct00142
로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00143
Figure pct00144
또는
Figure pct00145
로부터 선택될 수 있고;
Rb4는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되며, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, 메틸 또는 메톡시로부터 선택되며; 메틸, 메톡시, 알킬 및 알콕시는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br 또는 I로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
n4, n8, 및 n12는 각각 독립적으로 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00146
Figure pct00147
Figure pct00148
또는
Figure pct00149
로부터 선택될 수 있고;
K는
Figure pct00150
또는
Figure pct00151
로부터 선택되거나;
K는
Figure pct00152
또는
Figure pct00153
로부터 선택될 수 있고;
Rk1은 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, COOH, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH 또는 NH2로부터 선택되고;
p1은 0, 1 또는 2로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00154
Figure pct00155
또는
Figure pct00156
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00157
Figure pct00158
Figure pct00159
Figure pct00160
또는
Figure pct00161
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00162
Figure pct00163
Figure pct00164
또는
Figure pct00165
로부터 선택될 수 있는 것인, 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예는
L은
Figure pct00166
Figure pct00167
Figure pct00168
또는
Figure pct00169
Figure pct00170
Figure pct00171
로부터 선택되거나,
L은
Figure pct00172
Figure pct00173
Figure pct00174
또는
Figure pct00175
로부터 선택될 수 있거나,
L은
Figure pct00176
Figure pct00177
Figure pct00178
또는
Figure pct00179
로부터 선택될 수 있고;
L은 좌측으로 B에 연결되고, 우측으로 K에 연결되고;
B는
Figure pct00180
또는
Figure pct00181
로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00182
Figure pct00183
또는
Figure pct00184
로부터 선택될 수 있고;
Rb4는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되며, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, 메틸 또는 메톡시로부터 선택되며; 메틸, 메톡시, 알킬 및 알콕시는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
n4, n8, 및 n12는 각각 독립적으로 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00185
Figure pct00186
Figure pct00187
또는
Figure pct00188
로부터 선택될 수 있고;
K는
Figure pct00189
Figure pct00190
Figure pct00191
Figure pct00192
또는
Figure pct00193
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00194
Figure pct00195
Figure pct00196
또는
Figure pct00197
로부터 선택될 수 있는 것인, 일반 화학식 I로 나타낸 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예는
L은
Figure pct00198
Figure pct00199
Figure pct00200
또는
Figure pct00201
Figure pct00202
Figure pct00203
로부터 선택되거나,
L은
Figure pct00204
Figure pct00205
Figure pct00206
또는
Figure pct00207
로부터 선택될 수 있거나,
L은
Figure pct00208
Figure pct00209
Figure pct00210
또는
Figure pct00211
로부터 선택될 수 있고;
L은 좌측으로 B에 연결되고, 우측으로 K에 연결되고;
B는
Figure pct00212
또는
Figure pct00213
로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00214
Figure pct00215
또는
Figure pct00216
로부터 선택될 수 있고;
Rb4는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되며, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, 메틸 또는 메톡시로부터 선택되며, 여기서 메틸, 메톡시, 알킬 및 알콕시는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
n4, n8, 및 n12는 각각 독립적으로 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00217
Figure pct00218
Figure pct00219
또는
Figure pct00220
로부터 선택될 수 있고;
K는
Figure pct00221
Figure pct00222
Figure pct00223
또는
Figure pct00224
로부터 선택되는 것인, 일반 화학식 I로 나타낸 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예는
L은
Figure pct00225
Figure pct00226
Figure pct00227
로부터 선택되거나,
L은
Figure pct00228
Figure pct00229
Figure pct00230
Figure pct00231
또는
Figure pct00232
로부터 선택될 수 있거나,
L은
Figure pct00233
Figure pct00234
Figure pct00235
또는
Figure pct00236
로부터 선택될 수 있고;
L은 좌측으로 B에 연결되고, 우측으로 K에 연결되고;
B는
Figure pct00237
로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00238
로부터 선택될 수 있고;
Rb4는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되며, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, 메틸 또는 메톡시로부터 선택되며; 메틸, 메톡시, 알킬 및 알콕시는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br 또는 I로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
n4는 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00239
Figure pct00240
Figure pct00241
또는
Figure pct00242
로부터 선택될 수 있고;
K는
Figure pct00243
또는
Figure pct00244
로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00245
또는
Figure pct00246
로부터 선택될 수 있고;
Rk1은 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, COOH, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH 또는 NH2로부터 선택되고;
p1은 0, 1 또는 2로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00247
Figure pct00248
또는
Figure pct00249
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00250
Figure pct00251
Figure pct00252
또는
Figure pct00253
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00254
Figure pct00255
Figure pct00256
또는
Figure pct00257
로부터 선택될 수 있는 것인, 일반 화학식 I로 나타낸 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예는
L은
Figure pct00258
Figure pct00259
Figure pct00260
로부터 선택되거나,
L은
Figure pct00261
Figure pct00262
Figure pct00263
또는
Figure pct00264
로부터 선택될 수 있거나,
L은
Figure pct00265
Figure pct00266
Figure pct00267
또는
Figure pct00268
로부터 선택될 수 있고;
L은 좌측으로 B에 연결되고, 우측으로 K에 연결되고;
B는
Figure pct00269
로부터 선택되거나
B는
Figure pct00270
로부터 선택될 수 있고;
Rb4는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되며, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, 메틸 또는 메톡시로부터 선택되며; 메틸, 메톡시, 알킬 및 알콕시는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br 또는 I로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
n4는 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00271
로부터 선택될 수 있고;
K는
Figure pct00272
또는
Figure pct00273
로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00274
또는
Figure pct00275
로부터 선택될 수 있고;
Rk1은 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, COOH, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH 또는 NH2로부터 선택되고;
p1은 0, 1 또는 2로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00276
Figure pct00277
또는
Figure pct00278
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00279
Figure pct00280
Figure pct00281
Figure pct00282
또는
Figure pct00283
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00284
Figure pct00285
Figure pct00286
또는
Figure pct00287
로부터 선택될 수 있는 것인, 일반 화학식 I로 나타낸 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예는
L은
Figure pct00288
Figure pct00289
Figure pct00290
Figure pct00291
로부터 선택되거나,
L은
Figure pct00292
Figure pct00293
Figure pct00294
또는
Figure pct00295
로부터 선택될 수 있거나,
L은
Figure pct00296
Figure pct00297
Figure pct00298
또는
Figure pct00299
로부터 선택될 수 있고;
L은 좌측으로 B에 연결되고, 우측으로 K에 연결되고;
B는
Figure pct00300
로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00301
로부터 선택될 수 있고;
Rb4는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되며, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, 메틸 또는 메톡시로부터 선택되며; 메틸, 메톡시, 알킬 및 알콕시는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br 또는 I로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
n8은 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00302
로부터 선택될 수 있고;
K는
Figure pct00303
또는
Figure pct00304
로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00305
또는
Figure pct00306
로부터 선택될 수 있고;
Rk1은 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, COOH, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH 또는 NH2로부터 선택되고;
p1은 0, 1 또는 2로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00307
Figure pct00308
또는
Figure pct00309
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00310
Figure pct00311
Figure pct00312
또는
Figure pct00313
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00314
Figure pct00315
Figure pct00316
또는
Figure pct00317
로부터 선택될 수 있는 것인, 일반 화학식 I에 나타낸 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예는
L은
Figure pct00318
Figure pct00319
Figure pct00320
로부터 선택되거나,
L은
Figure pct00321
Figure pct00322
Figure pct00323
또는
Figure pct00324
로부터 선택될 수 있거나,
L은
Figure pct00325
Figure pct00326
Figure pct00327
또는
Figure pct00328
로부터 선택될 수 있고;
L은 좌측으로 B에 연결되고, 우측으로 K에 연결되고;
B는
Figure pct00329
로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00330
로부터 선택될 수 있고;
Rb4는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되며, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, 메틸 또는 메톡시로부터 선택되며; 메틸, 메톡시, 알킬 및 알콕시는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I로부터 선택되는 0, 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
n12는 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택되거나,
B는
Figure pct00331
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00332
또는
Figure pct00333
로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00334
또는
Figure pct00335
로부터 선택될 수 있고;
Rk1은 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, COOH, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시, 바람직하게는 H, F, Cl, Br, I, OH 또는 NH2로부터 선택되고;
p1은 0, 1 또는 2로부터 선택되거나,
K는
Figure pct00336
Figure pct00337
또는
Figure pct00338
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00339
Figure pct00340
Figure pct00341
또는
Figure pct00342
로부터 선택될 수 있거나,
K는
Figure pct00343
Figure pct00344
Figure pct00345
또는
Figure pct00346
로부터 선택될 수 있는 것인, 일반 화학식 I로 나타낸 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예는 일반 화학식 Ia 또는 일반 화학식 Ib로 나타낸 화합물로부터 선택되는 일반 화학식 I로 나타낸 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다:
[화학식 Ia]
B-Cy1-Cy2-K
[화학식 Ib]
B-Cy1-Cy2-Cy3-K
(B는
Figure pct00347
Figure pct00348
또는
Figure pct00349
Figure pct00350
Figure pct00351
또는
Figure pct00352
로부터 선택되고;
Cy1, Cy2, 및 Cy3은 각각 독립적으로 4원 내지 6원 질소-함유 모노-헤테로사이클릭 고리, 5원 내지 10원 질소-함유 융합 헤테로사이클릭 고리, 6원 내지 10원 질소-함유 스피로-헤테로사이클릭 고리, 4원 내지 6원 모노사이클로알킬 또는 페닐의 치환 또는 비치환된 기 중 하나로부터 선택되며, 여기서 페닐, 사이클로알킬, 모노-헤테로사이클릭 고리, 융합 헤테로사이클릭 고리 또는 스피로-헤테로사이클릭 고리는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0 내지 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고, 모노-헤테로사이클릭 고리, 융합 헤테로사이클릭 고리 또는 스피로-헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하거나,
Cy1, Cy2, 및 Cy3은 각각 독립적으로
Figure pct00353
Figure pct00354
Figure pct00355
또는
Figure pct00356
의 치환 또는 비치환된 기 중 하나로부터 선택되며, 이들은 치환될 때, H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0 내지 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
K는
Figure pct00357
또는
Figure pct00358
로부터 선택됨).
본 발명의 일부 구현예는
B는
Figure pct00359
Figure pct00360
또는
Figure pct00361
Figure pct00362
Figure pct00363
Figure pct00364
또는
Figure pct00365
로부터 선택되고;
Cy1, Cy2, 및 Cy3은 각각 독립적으로
Figure pct00366
Figure pct00367
Figure pct00368
Figure pct00369
또는
Figure pct00370
의 치환 또는 비치환된 기 중 하나로부터 선택되고;
K는
Figure pct00371
Figure pct00372
Figure pct00373
또는
Figure pct00374
, 바람직하게는
Figure pct00375
Figure pct00376
Figure pct00377
또는
Figure pct00378
로부터 선택되는 것인, 일반 화학식 Ia 또는 일반 화학식 Ib로 나타낸 화합물로부터 선택되는, 일반 화학식 I로 나타낸 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명의 일부 구현예는 하기 중 하나로부터 선택되는 구조를 갖는, 일반 화학식 I로 나타낸 화합물 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다:
Figure pct00379
Figure pct00380
Figure pct00381
Figure pct00382
Figure pct00383
Figure pct00384
Figure pct00385
본 발명의 일부 구현예는 염은 트리플루오로아세테이트로부터 선택되는 것인, 일반 화학식 I로 나타낸 화합물 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정에 관한 것이다.
본 발명은 본 발명에 기재된 화합물 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 BTK 활성 또는 발현 수준과 관련된 질병을 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서의 본 발명에 기재된 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 BTK의 억제 또는 분해와 관련된 질병을 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서의 본 발명에 기재된 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 본 발명에 기재된 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정의 용도에 관한 것이며, 질병은 종양 또는 자가면역 질병으로부터 선택된다.
본 발명은 본 발명에 기재된 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정의 용도에 관한 것이며, 종양은 비호지킨 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 외투 세포 림프종, B 세포 림프종으로부터 선택되고, 자가면역 질병은 류마티스성 관절염 또는 건선으로부터 선택된다.
합성 방법 I:
Figure pct00386
일반 화학식 Z-1 및 일반 화학식 Z-2에 환원적 아미노화, 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응을 수행하여 상응하는 일반 화학식 Z-3을 수득하고; 일반 화학식 Z-3이 반응 부위에 아미노 보호기를 갖는 경우, 아미노 보호기를 먼저 제거하고, 이어서 그것에 일반 화학식 Z-4와의 친핵성 치환 반응을 수행하여 상응하는 일반 화학식 II, 즉 일반 화학식 I을 수득하고, 더 긴 사슬의 제조는 상기 제1 단계에서의 공정을 반복하고 아미노 보호기를 제거함으로써 달성될 수 있으며;
Figure pct00387
,
일반 화학식 Z-2-1 및 일반 화학식 Z-2-2에 친핵성 치환 반응, 커플링 반응 또는 환원적 아미노화를 수행하여 일반 화학식 Z-2-3을 수득할 수 있고, 더 긴 사슬의 제조는 상기 공정을 반복함으로써 달성될 수 있으며;
화학식 Z-2-1이 반응 부위에 아미노 보호기를 갖는 경우, 보호기를 제거하고, 이어서 그것에 일반 화학식 Z-2-2와의 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응 또는 환원적 아미노화를 수행하여 일반 화학식 Z-2-3을 수득할 수 있으며, 더 긴 사슬의 존재는 상기 공정을 반복함으로써 달성될 수 있거나;
일반 화학식 Z-1 및 일반 화학식 Z-2-1에 친핵성 치환 반응, 커플링 반응 또는 환원적 아미노화 반응을 수행하여(사슬 길이는 일반 화학식 Z-2-3에 대한 제조 방법에 의해 증가될 수 있음) 상응하는 일반 화학식 II, 즉, 일반 화학식 I을 수득하며, 여기서 L 사슬의 길이는 일반 화학식 Z-2-3에 대한 제조 방법에 의해 제조될 수 있다.
합성 방법 II:
Figure pct00388
일반 화학식 Z-2가 반응 부위에 아미노 보호기를 갖는 경우, 아미노 보호기를 먼저 제거하고, 그것에 일반 화학식 Z-4와의 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응을 수행하여 상응하는 일반 화학식 Z-5를 수득하고, 일반 화학식 Z-5 및 일반 화학식 Z-1에 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응을 수행하여 상응하는 일반 화학식 II, 즉, 일반 화학식 I을 수득한다.
합성 방법 III:
먼저, 사슬 L의 일부에 일반 화학식 Z-1과의 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응을 수행하고, 이어서 그와 유사하게 사슬 L의 다른 일부와의 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응을 수행하여(합성 방법에 대해서는 일반 화학식 Z-2-3의 제조 참조) 일반 화학식 Z-3을 수득할 수 있고, 일반 화학식 Z-3 및 일반 화학식 Z-4에 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응을 수행하여 상응하는 일반 화학식 II, 즉, 일반 화학식 I을 수득한다.
합성 방법 IV:
대안적으로, 먼저, 사슬 L의 일부에 일반 화학식 Z-4와의 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응을 수행하고, 이어서 그와 유사하게 사슬 L의 다른 일부와의 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응을 수행하여(합성 방법에 대해서는 일반 화학식 Z-2-3의 제조 참조) 일반 화학식 Z-5를 수득할 수 있고, 일반 화학식 Z-5 및 일반 화학식 Z-1에 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응을 수행하여 상응하는 일반 화학식 II, 즉, 일반 화학식 I을 수득한다.
합성 방법 V:
Figure pct00389
일반 화학식 Z-7 및 일반 화학식 Z-2에 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응을 수행하여 일반 화학식 Z-8을 수득하거나,
일반 화학식 Z-7에 사슬 L의 일부와의 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응을 수행하고, 이어서 사슬 L의 다른 일부와의 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응을 수행하여(합성 방법에 대해서는 일반 화학식 Z-2-3의 제조 참조) 일반 화학식 Z-8을 수득하고, 일반 화학식 Z-8을 p-톨루엔설포닐 클로라이드와 반응시켜 일반 화학식 Z-9를 수득하고, 일반 화학식 Z-9에 일반 화학식 Z-10과의 친핵성 치환 반응 또는 커플링 반응을 수행하여 일반 화학식 Z-3을 수득한다.
합성 방법 VI:
Figure pct00390
일반 화학식 Z-1 및 일반 화학식 Z-2-1에 환원적 아미노화 반응을 수행하여 상응하는 일반 화학식 Z-11을 수득하고; 일반 화학식 Z-11이 반응 부위에 아미노 보호기를 갖는 경우, 아미노 보호기를 먼저 제거하고, 이어서 그것에 일반 화학식 Z-2-2와의 환원적 아미노화 반응을 수행하여 일반 화학식 Z-12를 수득하고; 일반 화학식 Z-12가 반응 부위에 아미노 보호기를 갖는 경우, 아미노 보호기를 먼저 제거하고, 이어서 그것에 일반 화학식 Z-4와의 친핵성 치환 반응을 수행하여 일반 화학식 Z-13, 즉, 일반 화학식 I을 수득한다.
합성 방법 VII:
Figure pct00391
일반 화학식 Z-14를 메탄설포닐 클로라이드와 반응시켜 일반 화학식 Z-15를 수득하고, 일반 화학식 Z-15 및 일반 화학식 Z-10에 친핵성 치환 반응을 수행하여 일반 화학식 Z-16을 수득하고; 일반 화학식 Z-16이 반응 부위에 아미노 보호기를 갖는 경우, 아미노 보호기를 먼저 제거하고, 이어서 그것에 일반 화학식 Z-2-1과의 환원적 아미노화를 수행하여 상응하는 일반 화학식 Z-11을 수득하고; 일반 화학식 Z-11이 반응 부위에 아미노 보호기를 갖는 경우, 아미노 보호기를 먼저 제거하고, 이어서 그것에 일반 화학식 Z-2-2와의 환원적 아미노화 반응을 수행하여 일반 화학식 Z-12를 수득하고; 일반 화학식 Z-12가 반응 부위에 아미노 보호기를 갖는 경우, 아미노 보호기를 먼저 제거하고, 이어서 그것에 일반 화학식 Z-4와의 친핵성 치환 반응을 수행하여 일반 화학식 Z-13, 즉, 일반 화학식 I을 수득한다.
일반 화학식 Z-1의 합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638]을 참조하고;
일반 화학식 Z-4의 합성 방법에 대해서는 WO 2017197056을 참조하고;
R1은 (=O), -CHO, F, Cl, Br, I, 또는 OTf로부터 선택되고;
R2는 H, (=O), -CHO, F, Cl, Br, I 또는 아미노 보호기, 바람직하게는 Boc로부터 선택되고;
R3은 NH2, F, Cl, Br, I, OTf, 또는 OH로부터 선택되고;
R4, R5, R6 및 R7은 각각 독립적으로 H, (=O), -CHO, H, F, Cl, Br, I, OTf 또는 아미노 보호기로부터 선택된다.
반대로 언급되지 않는 한, 상세한 설명 및 청구항 둘 모두에 사용되는 용어는 하기 의미를 갖는다:
본 발명의 기 및 화합물에 관여하는 탄소, 수소, 산소, 황, 질소 또는 F, Cl, Br, I는 모두 그들의 동위원소를 포함하며, 본 발명의 기 및 화합물에 관여하는 탄소, 수소, 산소, 황 또는 질소는 그들의 상응하는 동위원소 중 하나 이상에 의해 선택적으로 추가로 치환되며, 여기서 탄소의 동위원소는 12C, 13C 및 14C를 포함하고, 수소의 동위원소는 경수소(H), 듀테륨(D, 중수소(heavy hydrogen)로도 알려짐), 삼중수소(T, 초중수소로도 알려짐)을 포함하고, 산소의 동위원소는 16O, 17O 및 18O를 포함하고, 황의 동위원소는 32S, 33S, 34S 및 36S를 포함하고, 질소의 동위원소는 14N 및 15N을 포함하고, 불소의 동위원소는 17F 및 19F를 포함하고, 염소의 동위원소는 35Cl 및 37Cl을 포함하고, 브롬의 동위원소는 79Br 및 81Br을 포함한다.
"알킬"은 1 내지 20개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지형 포화 지방족 탄화수소 기, 바람직하게는 1 내지 8개의 탄소 원자를 함유하는 알킬, 더 바람직하게는 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 알킬, 추가로 바람직하게는 1 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 알킬을 지칭한다. 비제한적인 예에는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, sec-부틸, 이소부틸, tert-부틸, n-펜틸, 이소아밀, 네오펜틸, n-헥실 및 이들의 다양한 분지형 이성질체가 포함되며; 알킬은 F, Cl, Br, I, 하이드록실, 설프하이드릴, 니트로, 시아노, 아미노, 알킬아미노, 아미도, 알케닐, 알키닐, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬, C1-6 알콕시, 3원 내지 8원 카르보사이클릴, 3원 내지 8원 헤테로사이클릭 기, 3원 내지 8원 카르보사이클릴옥시, 3원 내지 8원 헤테로사이클릴옥시, 카르복실 또는 카르복실레이트 기로부터 선택되는 0 내지 6개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환될 수 있으며; 본 명세서에 기재된 알킬의 정의는 이 정의와 일치한다.
"알콕시"는 -O-알킬을 지칭한다. 비제한적인 예에는 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, sec-부톡시, tert-부톡시, n-펜톡시, n-헥실옥시, 사이클로프로폭시 및 사이클로부톡시가 포함된다. 알킬은 F, Cl, Br, I, 하이드록실, 설프하이드릴, 니트로, 시아노, 아미노, 알킬아미노, 알케닐, 알키닐, 알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릭 기, 카르보사이클릴옥시, 헤테로사이클릴옥시, 카르복실 또는 카르복실레이트 기로부터 선택되는 0 내지 5개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환될 수 있다. 본 명세서에 기재된 알콕시의 정의는 이 정의와 일치한다.
"헤테로사이클릭 기" 또는 "헤테로사이클릭 고리"는 치환 또는 비치환된 포화 또는 불포화 방향족 고리 또는 비방향족 고리를 지칭하며, 방향족 고리 또는 비방향족 고리는 3원 내지 8원 모노사이클릭 고리, 4원 내지 12원 바이사이클릭 고리 또는 10원 내지 15원 트리사이클릭 고리 시스템일 수 있으며, N, O 또는 S로부터 선택되는 1 내지 3개의 헤테로원자를 함유하고, 바람직하게는 3원 내지 8원 헤테로사이클릭 기이며, 헤테로사이클릭 기 내의 선택적으로 치환된 N, S는 다양한 산화 상태로 산화될 수 있다. 헤테로사이클릭 기는 헤테로원자 또는 탄소 원자에 연결될 수 있으며, 헤테로사이클릭 기는 가교 고리 또는 스피로 고리에 연결될 수 있다. 비제한적인 예에는 옥시라닐, 아자사이클로프로필, 옥세타닐, 아제티디닐, 1,3-디옥솔란, 1,4-디옥솔란, 1,3-디옥산, 아자사이클로헵틸, 피리딜, 푸라닐, 티에닐, 피라닐, N-알킬피롤릴, 피리미디닐, 피라지닐, 피리다지닐, 이미다졸릴, 피페리딜, 피페라디닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 1,3-디티아닐, 디하이드로푸라닐, 디하이드로피라닐, 디티올라닐, 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로피롤릴, 테트라하이드로이미다졸릴, 테트라하이드로티아졸릴, 테트라하이드로피라닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조피리딜, 피롤로피리딜, 벤조디하이드로푸라닐, 아자바이사이클로[3.2.1]옥틸, 아자바이사이클로[5.2.0]노닐, 옥사트리사이클로[5.3.1.1]도데실, 아자아다만틸 및 옥사스피로[3.3]헵틸이 포함된다. 헤테로사이클릭 기는 F, Cl, Br, I, =O, 하이드록실, 설프하이드릴, 니트로, 시아노, 아미노, 알킬아미노, 아미도, 알케닐, 알키닐, 알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릭 기, 카르보사이클릴옥시, 헤테로사이클릴옥시, 카르복실 또는 카르복실레이트 기로부터 선택되는 0 내지 5개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환될 수 있다. 본 명세서에 기재된 헤테로사이클릭 기의 정의는 이 정의와 일치한다.
"스피로 고리"는 치환 또는 비치환된 모노사이클릭 고리들 사이에 하나의 탄소 원자(스피로 원자로 지칭됨)를 공유하는 5원 내지 20원 폴리사이클릭 기를 지칭하며, 이 기는 0 내지 5개의 이중 결합을 함유할 수 있고, N, O 또는 S(=O)n으로부터 선택되는 0 내지 5개의 헤테로원자를 함유할 수 있다. 스피로 고리는 바람직하게는 6원 내지 14원, 추가로 바람직하게는 6원 내지 12원, 더 바람직하게는 6원 내지 10원이다. 이의 비제한적인 예에는 하기가 포함된다:
Figure pct00392
Figure pct00393
및
Figure pct00394
. 스피로 고리가 치환될 때, 치환체는 F, Cl, Br, I, 알킬, 사이클로알킬, 알콕시, 할로알킬, 메르캅탄, 하이드록실, 니트로, 설프하이드릴, 아미노, 시아노, 이소시아노, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 기, 가교 고리 기, 스피로 고리 기, 융합 고리 기, 하이드록시알킬, =O, 카르보닐, 알데하이드, 카르복실산, 포르메이트, -(CH2)m-C(=O)-Ra, -O-(CH2)m-C(=O)-Ra, -(CH2)m-C(=O)-NRbRc, -(CH2)mS(=O)nRa, -(CH2)m-알케닐-Ra, ORd 또는 -(CH2)m-알키닐-Ra(여기서, m 및 n은 0, 1 또는 2임), 아릴티오, 티오카르보닐, 실릴 또는 -NRbRc 등으로부터 선택되는 1 내지 5개의 기일 수 있으며, 여기서 Rb 및 Rc는 독립적으로 H, 하이드록실, 아미노, 카르보닐, 알킬, 알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭 기, 아릴, 헤테로아릴, 설포닐, 트리플루오로메틸설포닐로부터 선택된다. 대안적으로, Rb 및 Rc는 5원 또는 6원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릭 기를 형성할 수 있다. Ra 및 Rd는 각각 독립적으로 아릴, 헤테로아릴, 알킬, 알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭 기, 카르보닐, 에스테르 기, 가교 고리 기, 스피로 고리 기 또는 융합 고리 기로부터 선택된다. 본 명세서에 기재된 스피로 고리의 정의는 이 정의와 일치한다.
"융합 고리"는 시스템 내의 각각의 고리가 시스템 내의 다른 고리와 탄소 원자들의 인접한 쌍을 공유하는 폴리사이클릭 기를 지칭하며, 여기서 고리들 중 하나 이상은 0개 이상의 이중 결합을 함유할 수 있으며, 이는 치환 또는 비치환될 수 있으며, 융합 고리 시스템 내의 각각의 고리는 N, S(=O)n 또는 O로부터 선택되는 0 내지 5개의 헤테로원자를 함유할 수 있다. 융합 고리는 바람직하게는 5원 내지 20원, 추가로 바람직하게는 5원 내지 14원, 더 바람직하게는 5원 내지 12원, 훨씬 더 바람직하게는 5원 내지 10원이다. 비제한적인 예에는 하기가 포함된다:
Figure pct00395
Figure pct00396
및
Figure pct00397
융합 고리가 치환될 때, 치환체는 F, Cl, Br, I, 알킬, 사이클로알킬, 알콕시, 할로알킬, 메르캅탄, 하이드록실, 니트로, 설프하이드릴, 아미노, 시아노, 이소시아노, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 기, 가교 고리 기, 스피로 고리 기, 융합 고리 기, 하이드록시알킬, =O, 카르보닐, 알데하이드, 카르복실산, 포르메이트, -(CH2)m-C(=O)-Ra, -O-(CH2)m-C(=O)-Ra, -(CH2)m-C(=O)-NRbRc, -(CH2)mS(=O)nRa, -(CH2)m-알케닐-Ra, ORd 또는 -(CH2)m-알키닐-Ra(여기서, m 및 n은 0, 1 또는 2임), 아릴티오, 티오카르보닐, 실릴 또는 -NRbRc 등으로부터 선택되는 1 내지 5개의 기일 수 있으며, 여기서 Rb 및 Rc는 독립적으로 H, 하이드록실, 아미노, 카르보닐, 알킬, 알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭 기, 아릴, 헤테로아릴, 설포닐, 트리플루오로메틸설포닐로부터 선택된다. 대안적으로, Rb 및 Rc는 5원 또는 6원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릭 기를 형성할 수 있다. Ra 및 Rd는 각각 독립적으로 아릴, 헤테로아릴, 알킬, 알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭 기, 카르보닐, 에스테르 기, 가교 고리 기, 스피로 고리 기 또는 융합 고리 기로부터 선택된다. 본 명세서에 기재된 융합 고리의 정의는 이 정의와 일치한다.
"가교 고리"는 직접 연결되지 않은 임의의 2개의 탄소 원자를 함유하는 폴리사이클릭 기를 지칭하며, 이 기는 0개 이상의 이중 결합을 함유할 수 있고, 치환 또는 비치환될 수 있으며, 가교 고리 시스템 내의 임의의 고리는 N, S(=O)n 또는 O(여기서, n은 0, 1, 또는 2임)로부터 선택되는 0 내지 5개의 헤테로원자 또는 기를 함유할 수 있다. 고리 원자는 5 내지 20개의 원자, 바람직하게는 5 내지 14개의 원자, 추가로 바람직하게는 5 내지 12개의 원자, 훨씬 더 바람직하게는 5 내지 10개의 원자를 함유한다. 비제한적인 예에는 하기가 포함된다:
Figure pct00398
및 아다만탄. 가교 고리가 치환될 때, 치환체는 F, Cl, Br, I, 알킬, 사이클로알킬, 알콕시, 할로알킬, 메르캅탄, 하이드록실, 니트로, 설프하이드릴, 아미노, 시아노, 이소시아노, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 기, 가교 고리 기, 스피로 고리 기, 융합 고리 기, 하이드록시알킬, =O, 카르보닐, 알데하이드, 카르복실산, 포르메이트, -(CH2)m-C(=O)-Ra, -O-(CH2)m-C(=O)-Ra, -(CH2)m-C(=O)-NRbRc, -(CH2)mS(=O)nRa, -(CH2)m-알케닐-Ra, ORd 또는 -(CH2)m-알키닐-Ra(여기서, m 및 n은 0, 1 또는 2임), 아릴티오, 티오카르보닐, 실릴 또는 -NRbRc 등으로부터 선택되는 1 내지 5개의 기일 수 있으며, 여기서 Rb 및 Rc는 독립적으로 H, 하이드록실, 아미노, 카르보닐, 알킬, 알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭 기, 아릴, 헤테로아릴, 설포닐, 트리플루오로메틸설포닐로부터 선택된다. 대안적으로, Rb 및 Rc는 5원 또는 6원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릭 기를 형성할 수 있다. Ra 및 Rd는 각각 독립적으로 아릴, 헤테로아릴, 알킬, 알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭 기, 카르보닐, 에스테르 기, 가교 고리 기, 스피로 고리 기 또는 융합 고리 기로부터 선택된다. 본 명세서에 기재된 가교 고리의 정의는 이 정의와 일치한다.
"모노-헤테로사이클릭 고리"는 모노사이클릭 고리 시스템 내의 "헤테로사이클릭 기" 또는 "헤테로사이클릭 고리"를 지칭하며, 본 명세서에 기재된 모노-헤테로사이클릭 고리의 정의는 이 정의와 일치한다.
"융합 헤테로사이클릭 고리"는 헤테로원자(들)를 함유하는 "융합 고리"를 지칭한다. 본 명세서에 기재된 융합 헤테로사이클릭 고리의 정의는 이 정의와 일치한다.
"스피로-헤테로사이클릭 고리"는 헤테로원자(들)를 함유하는 "스피로 고리"를 지칭한다. 본 명세서에 기재된 스피로-헤테로사이클릭 고리의 정의는 이 정의와 일치한다.
"가교-헤테로사이클릭 고리"는 헤테로원자(들)를 함유하는 "가교 고리"를 지칭한다. 본 명세서에 기재된 가교-헤테로사이클릭 고리의 정의는 이 정의와 일치한다.
"헤테로아릴" 또는 "헤테로아릴 고리"는 치환 또는 비치환된 5원 내지 14원 방향족 고리를 지칭하며, N, O 또는 S(=O)n으로부터 선택되는 1 내지 5개의 헤테로원자 또는 기를 함유하며, 바람직하게는 5원 내지 10원 방향족 고리, 추가로 바람직하게는 5원 또는 6원 방향족 고리이다. 헤테로아릴의 비제한적인 예에는 피리딜, 푸라닐, 티에닐, 피리딜, 피라닐, N-알킬피롤릴, 피리미디닐, 피라지닐, 피리다지닐, 이미다졸릴, 피페리딜, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 1,3-디티아닐, 벤즈이미다졸릴, 벤즈이미다졸, 벤조피리딘, 피롤로피리딘 등이 포함되지만 이로 한정되지 않는다. 헤테로아릴 고리는 아릴, 헤테로사이클릭 기 또는 사이클로알킬 고리에 융합될 수 있으며, 여기서 모(parent) 구조에 연결된 고리는 헤테로아릴 고리이며, 비제한적인 예에는
Figure pct00399
및
Figure pct00400
이 포함된다. 헤테로아릴 고리가 치환될 때, 치환체는 F, Cl, Br, I, 알킬, 사이클로알킬, 알콕시, 할로알킬, 메르캅탄, 하이드록실, 니트로, 설프하이드릴, 아미노, 시아노, 이소시아노, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭 기, 가교 고리 기, 스피로 고리 기, 융합 고리 기, 하이드록시알킬, =O, 카르보닐, 알데하이드, 카르복실산, 포르메이트, -(CH2)m-C(=O)-Ra, -O-(CH2)m-C(=O)-Ra, -(CH2)m-C(=O)-NRbRc, -(CH2)mS(=O)nRa, -(CH2)m-알케닐-Ra, ORd 또는 -(CH2)m-알키닐-Ra(여기서, m 및 n은 0, 1 또는 2임), 아릴티오, 티오카르보닐, 실릴 또는 -NRbRc 등으로부터 선택되는 1 내지 5개의 기일 수 있으며, 여기서 Rb 및 Rc는 독립적으로 H, 하이드록실, 아미노, 카르보닐, 알킬, 알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭 기, 아릴, 헤테로아릴, 설포닐, 트리플루오로메틸설포닐로부터 선택된다. 대안적으로, Rb 및 Rc는 5원 또는 6원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릭 기를 형성할 수 있다. Ra 및 Rd는 각각 독립적으로 아릴, 헤테로아릴, 알킬, 알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭 기, 카르보닐, 에스테르 기, 가교 고리 기, 스피로 고리 기 또는 융합 고리 기로부터 선택된다. 본 명세서에 기재된 헤테로아릴 또는 헤테로아릴 고리의 정의는 이 정의와 일치한다.
"선택적인" 또는 "선택적으로"는 후속으로 설명되는 사건 또는 상황이 일어날 수 있으나 반드시 일어나는 것은 아님을 지칭하며, 이러한 설명은 사건 또는 상황이 일어나거나 일어나지 않은 경우를 포함한다. 예를 들어, "F로 선택적으로 치환된 알킬"은 알킬이 F로 치환될 수 있으나 반드시 그러한 것은 아님을 의미하며, 이러한 설명은 알킬이 F로 치환되는 경우 및 알킬이 F로 치환되지 않는 경우를 포함한다.
"약제학적으로 허용되는 염" 또는 "이의 약제학적으로 허용되는 염"은 유리산 또는 유리 염기의 생물학적 유효성 및 특성을 유지하고, 유리산을 비독성 무기 염기 또는 유기 염기와 반응시킴으로써, 유리 염기를 비독성 무기산 또는 유기산과 반응시킴으로써 수득되는 본 발명의 화합물의 염을 지칭한다.
"약제학적 조성물"은 하나 이상의 본 발명의 화합물, 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 전구약물, 및 다른 화학 성분의 혼합물을 지칭하며, 여기서 "다른 화학 성분"은 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 하나 이상의 다른 치료제를 지칭한다.
"담체"는 유기체에 유의한 자극을 야기하지 않고 투여되는 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 없애지 않는 물질을 지칭한다.
"부형제"는 약제학적 조성물에 첨가되어 화합물의 투여를 용이하게 하는 불활성 물질을 지칭한다. 비제한적인 예에는 탄산칼슘, 인산칼슘, 당, 전분, 셀룰로스 유도체(미세결정질 셀룰로스를 포함함), 젤라틴, 식물성 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 희석제, 과립화제, 윤활제, 접착제 및 붕해제가 포함된다.
"전구약물"은 생체내(in vivo)에서 대사를 통해 생물학적 활성을 갖는 본 발명의 화합물로 전환될 수 있는 화합물을 지칭한다. 본 발명의 전구약물은 본 발명의 화합물 내의 아미노 또는 카르복실 기를 개질시킴으로써 제조되며, 그러한 개질은 통상적인 작업 또는 생체내에서 제거되어 모 화합물을 수득할 수 있다. 본 발명의 전구약물이 포유류 개체에게 투여될 때, 전구약물은 분할되어 유리 아미노 또는 카르복실 기를 형성한다.
"공결정"은 수소 결합 또는 다른 비공유 결합의 작용 하에서 활성 약제학적 성분(API) 및 공결정 형성제(CCF)의 조합에 의해 형성되는 결정을 지칭한다. API 및 CCF의 순수한 상태는 둘 모두 실온에서 고체이며, 다양한 성분들 사이에 고정된 화학량론적 비가 존재한다. 공결정은 다성분 결정으로서, 이는 2개의 중성 고체 사이에 형성된 2원 공결정과 중성 고체와 염 또는 용매화물 사이에 형성된 다원소 공결정 둘 모두를 포함한다.
"동물"은 포유동물, 예컨대 인간, 반려 동물, 동물원 동물, 및 가축, 바람직하게는 인간, 말, 또는 개를 포함하는 것으로 의미된다.
"입체이성질체"는 분자 내의 원자들의 공간내 상이한 배열에 의해 생성되는 이성질체를 지칭하며, 이에는 시스-트랜스 이성질체, 거울상 이성질체 및 형태 이성질체가 포함된다.
"선택적인(optional)" 또는 "선택적으로(optionally)" 또는 "선택적인(selective)" 또는 "선택적으로(selectively)"는 후속으로 설명되는 사건 또는 상태가 일어날 수 있으나 반드시 그러하지는 않음을 지칭하며, 이러한 설명은 사건 또는 상태가 일어나는 경우와 일어나지 않은 경우를 포함한다. 예를 들어, "알킬로 선택적으로 치환된 헤테로사이클릭 기"는 알킬이 존재할 수 있으나 반드시 그러하지는 않음을 지칭하며, 이러한 설명은 헤테로사이클릭 기가 알킬 기로 치환된 경우와 헤테로사이클릭 기가 알킬 기로 치환되지 않은 경우를 포함한다.
"DC50"은 단백질의 50%를 분해되게 하는 용량을 지칭한다.
구현예의 상세한 설명
본 발명의 기술적 해결책을 실시예와 함께 하기에 상세히 설명하겠지만, 본 발명의 보호 범주는 이로 한정되지 않는다.
화합물의 구조는 핵자기 공명(NMR) 또는 (및) 질량 분석법(MS)에 의해 결정된다. NMR 이동(shift)(δ)은 10-6(ppm)의 단위로 주어진다. NMR은 (Bruker Avance III 400 및 Bruker Avance 300) NMR 기기로 측정되고, 결정을 위한 용매는 중수소화 디메틸 설폭사이드(DMSO-d6), 중수소화 클로로포름(CDCl3), 중수소화 메탄올(CD3OD)이고, 내부 표준물은 테트라메틸실란(TMS)이고;
MS는 (Agilent 6120B(ESI) 및 Agilent 6120B(APCI))로 측정되고;
HPLC는 Agilent 1260DAD 고압 액체 크로마토그래피(Zorbax SB-C18 100 x 4.6 mm, 3.5 μM)로 측정되고;
Yantai Huanghai HSGF254 또는 Qingdao GF254 실리카 겔 플레이트가 박층 크로마토그래피 실리카 플레이트에 사용되고, 박층 크로마토그래피(TLC)를 위한 실리카 겔 플레이트는 0.15 mm 내지 0.20 mm의 규격을 가지며, 박층 크로마토그래피에 의해 생성물을 분리하고 정제할 때의 규격은 0.4 mm 내지 0.5 mm이다.
컬럼 크로마토그래피의 경우, 200 내지 300 메시 실리카 겔의 Yantai Huanghai 실리카 겔이 담체로서 일반적으로 사용되며;
본 발명의 알려진 출발 물질은 당업계에 알려진 방법에 의해 또는 그에 따라 합성될 수 있거나, Titan Technology Co., Ltd., Energy Chemical Co., Ltd., Shanghai Demo Co., Ltd., Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd., Accela ChemBio Co., Ltd., J&K Scientific Co., Ltd. 및 기타 회사로부터 구매될 수 있으며;
P13I:
Figure pct00401
(합성에 대한 참고문헌: Y. Sun, X. Zhao, N. Ding, H. Gao, Y. Wu, Y. Yang, M. Zhao, J. Hwang, Y. Song, W. Liu, Y. Rao, Cell Res. 2018, 28, 779-781);
Tf: 트리플루오로메틸설포닐;
Boc: tert-부톡시카르보닐;
Ts: p-톨루엔설포닐;
Cbz: 벤질옥시카르보닐;
Ms: 메틸설포닐;
TMS: 트리메틸실란; DMSO: 디메틸 설폭사이드; DMF: N,N'-디메틸포름아미드; DME: 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르; DCM: 디클로로메탄; DIPEA: N,N'-디이소프로필에틸아민; DCE: 1,2-디클로로에탄; Pd2dba3: 트리스(디벤질리덴 아세톤)디팔라듐; JohnPhos: (2-바이페닐)디-tert-부틸포스핀; THF: 테트라하이드로푸란; DIAD: 디이소프로필 아조디카르복실레이트; CDI: N,N'-카르보닐 디이미다졸; MsCl: 메탄설포닐 클로라이드; TFA: 트리플루오로아세트산.
실시예 1:
5-[2-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-7-아자스피로[3.5]노난-7-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 1)
Figure pct00402
단계 1:
tert-부틸 2-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(1b)
Figure pct00403
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638] 참조)(0.200 g, 0.473 mmol)을 5 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, tert-부틸 2-옥소-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(0.100 g, 0.418 mmol) 및 빙초산(0.0567 g, 0.946 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.177 g, 0.836 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 하룻밤 반응을 수행하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 적가함으로써 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물(crude product)을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 9 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(1b)(0.152 g, 수율: 60%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.23 (s, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.44 (t, 2H), 7.24 - 7.05 (m, 5H), 4.70 - 4.60 (m, 1H), 3.35 - 3.25 (m, 4H), 3.22 - 3.16 (m, 2H), 2.97 - 2.87 (m, 2H), 2.78 - 2.65 (m, 1H), 2.24 - 2.11 (m, 2H), 2.03 - 1.94 (m, 2H), 1.94 - 1.84 (m, 4H), 1.60 - 1.51 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.38 (s, 9H).
LCMS m/z = 610.3 [M+1]+.
단계 2:
1-[1-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1c)
Figure pct00404
tert-부틸 2-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(1b)(0.150 g, 0.246 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[1-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1c)(0.090 g, 수율: 72%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 510.3 [M+1]+.
단계 3:
5-[2-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-7-아자스피로[3.5]노난-7-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 1)
Figure pct00405
1-[1-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1c)(0.090 g, 0.18 mmol)을 2 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.049 g, 0.18 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(0.11 g, 0.88 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 90℃에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시켰으며, 이것에 10 mL의 물을 서서히 적가하고, 여과하였다. 여과 케이크를 20 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 이어서 5 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 9 : 1)로 분리하고 정제하여 5-[2-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-7-아자스피로[3.5]노난-7-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 1)(0.092 g, 수율: 68%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.61 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.68 - 7.60 (m, 3H), 7.39 (t, 2H), 7.27 (d, 1H), 7.20 - 7.06 (m, 3H), 7.09 (d, 2H), 7.04 (dd, 1H), 5.56 (br, 2H), 4.97 - 4.90 (m, 1H), 4.80 (s, 1H), 3.38 (dd, 4H), 3.06 (s, 2H), 2.95 - 2.66 (m, 5H), 2.44 (s, 2H), 2.12 (dd, 6H), 1.69 (d, 6H).
LCMS m/z = 383.8 [M/2 +1]+.
실시예 2:
5-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 2)
Figure pct00406
단계 1:
tert-부틸 4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(2a)
Figure pct00407
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638] 참조)(0.500 g, 1.29 mmol)을 5 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, 이것에 tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(0.309 g, 1.55 mmol) 및 빙초산(0.412 g, 6.86 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 65℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 반응 시스템을 실온까지 냉각시키고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.548 g, 2.59 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 하룻밤 반응을 수행하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 적가함으로써 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(2a)(0.310 g, 수율: 42%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.34 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.39 (t, 2H), 7.19 - 7.13 (m, 3H), 7.08 (d, 2H), 5.73 (br, 2H), 4.82 - 4.72 (m, 1H), 4.25 - 4.10 (m, 2H), 3.17 - 3.05 (m, 2H), 2.73 (t, 2H), 2.60 - 2.35 (m, 5H), 2.08 - 1.99 (m, 2H), 1.90 - 1.76 (m, 2H), 1.55 - 1.45 (m, 11H).
단계 2:
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(2b)
Figure pct00408
tert-부틸 4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(2a)(0.310 g, 0.544 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 3-(4-페녹시페닐)-1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(2b)(0.256 g, 수율: > 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 235.8 [M/2+1]+.
단계 3:
tert-부틸 4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(2c)
Figure pct00409
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(2b)(0.256 g, 0.545 mmol)을 3 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(0.130 g, 0.654 mmol) 및 빙초산(0.174 g, 2.89 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 65℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 실온까지 냉각시켰다. 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.231 g, 1.09 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 하룻밤 반응을 수행하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 적가함으로써 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(2c)(0.230 g, 수율: 65%)를 수득하였다.
단계 4:
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(2d)
Figure pct00410
tert-부틸 4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(2c)(0.230 g, 0.352 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(2d)(0.195 g, 수율: > 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 277.3 [M/2 +1]+.
단계 5:
5-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 2)
Figure pct00411
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(2d)(0.165 g, 0.299 mmol)을 2 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.0907 g, 0.328 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(0.193 g, 1.49 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시켰으며, 이것에 10 mL의 물을 서서히 적가하고, 여과하였다. 여과 케이크를 20 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 이어서 5 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 92 : 8)로 분리하고 정제하여 5-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 2)(0.157 g, 수율: 65%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.06 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.67 - 7.64 (m, 3H), 7.46 - 7.40 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 7.25 -7.23 (m, 1H), 7.22 - 7.10 (m, 5H), 5.06 (dd, 1H), 4.67 - 4.57 (m, 1H), 4.10 - 4.02 (m, 2H), 3.06 - 2.82 (m, 7H), 2.62 - 2.47 (m, 3H), 2.35 - 2.07 (m, 7H), 2.06 - 1.97 (m, 1H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.85 - 1.77 (m, 2H), 1.77 - 1.70 (m, 2H), 1.54 - 1.36 (m, 4H).
LCMS m/z = 405.3 [M/2 +1]+.
실시예 3:
5-[5-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-2-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 테트라트리플루오로아세테이트(화합물 3)
Figure pct00412
단계 1:
tert-부틸 2-(5-브로모피리미딘-2-일)-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-5-카르복실레이트(3b)
Figure pct00413
5-브로모-2-클로로-피리미딘(1.0 g, 5.17 mmol)을 10 mL의 무수 에탄올 중에 용해시키고, 2-Boc-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤(1.32 g, 6.20 mmol)을 첨가하고, 이어서 트리에틸아민(1.31 g, 12.9 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 20 mL의 물 및 50 mL의 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 20 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 9 : 1 내지 4 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2-(5-브로모피리미딘-2-일)-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-5-카르복실레이트(3b)(1.80 g, 수율: 94%)를 수득하였다.
단계 2:
tert-부틸 2-[5-(4-하이드록시-1-피페리딜)피리미딘-2-일]-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로 [3,4-c]피롤-5-카르복실레이트(3c)
Figure pct00414
tert-부틸 2-(5-브로모피리미딘-2-일)-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-5-카르복실레이트(3b)(1.0 g, 2.71 mmol)를 10 mL의 건성 톨루엔 중에 용해시키고, 4-하이드록시피페리딘(0.548 g, 5.42 mmol), JohnPhos(2-(디-tert-부틸포스핀)바이페닐)(0.0808 g, 0.271 mmol, CAS:224311-51-7) 및 tert-부톡시나트륨(0.520 g, 5.42 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 질소 대체를 3회 수행하고, 이어서 Pd2(dba)3(0.060 g, 0.135 mmol, CAS:51364-51-3)를 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 20 mL의 디클로로메탄 및 20 mL의 물을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 10 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 4 : 1 내지 0 : 100)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2-[5-(4-하이드록시-1-피페리딜)피리미딘-2-일]-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-5-카르복실레이트(3c)(0.300 g, 수율: 28%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 390.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 2-[5-[4-(p-토실옥시)-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로 [3,4-c]피롤-5-카르복실레이트(3d)
Figure pct00415
tert-부틸 2-[5-(4-하이드록시-1-피페리딜)피리미딘-2-일]-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-5-카르복실레이트(3c)(0.300 g, 0.770 mmol)를 10 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 4-디메틸아미노피리딘(0.113 g, 0.924 mmol)을 첨가하고, 이어서 p-톨루엔설포닐 클로라이드(0.176 g, 0.924 mmol)를 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 20 mL의 포화 중탄산나트륨 용액 및 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 2 : 3 내지 1 : 4)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2-[5-[4-(p-톨릴설포닐옥시)-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-5-카르복실레이트(3d)(0.420 g, 수율: > 99%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 544.3 [M+1]+.
단계 4:
tert-부틸 2-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1- 피페리딜]피리미딘-2-일]-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-5-카르복실레이트(3e)
Figure pct00416
tert-부틸 2-[5-[4-(p-토실옥시)-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-5-카르복실레이트(3d)(0.400 g, 0.736 mmol)를 5 mL의 N,N'-디메틸포름아미드 중에 용해시키고, 3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638] 참조)(0.268 g, 0.883 mmol)을 첨가하고, 이어서 탄산세슘(0.479 g, 1.47 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 10 mL의 물 및 30 mL의 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 10 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피[(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 2 : 3 내지 1 : 4)에서 (디클로로메탄/메탄올(v/v) = 25 : 2)으로]로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-5-카르복실레이트(3e)(0.200 g, 수율: 40%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.37 (s, 1H), 8.19 (s, 2H), 7.70 - 7.62 (m, 2H), 7.44 - 7.34 (m, 2H), 7.21 - 7.13 (m, 3H), 7.13 - 7.05 (m, 2H), 5.80 (br, 2H), 4.94 - 4.85 (m, 1H), 3.85 - 3.75 (m, 2H), 3.72 - 3.58 (m, 2H), 3.54-3.46 (m, 4H), 3.38 - 3.24 (m, 2H), 3.02 - 2.90 (m, 4H), 2.64 - 2.52 (m, 2H), 2.16 - 2.12 (m, 2H), 1.45 (s, 9H).
LCMS m/z = 675.3 [M+1]+.
단계 5:
1-[1-[2-(2,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피롤-5-일)피리미딘-5-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(3f)
Figure pct00417
tert-부틸 2-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-5-카르복실레이트(3e)(0.200 g, 0.296 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 10 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 농축시키고, 이어서 조 생성물에 30 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 추가로 20 mL의 디클로로메탄으로 1회 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[1-[2-(2,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피롤-5-일) 피리미딘-5-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(3f)(0.170 g, 수율: > 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 288.2 [M/2 +1]+.
단계 6:
5-[5-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-2-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 테트라트리플루오로아세테이트(화합물 3)
Figure pct00418
1-[1-[2-(2,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피롤-5-일) 피리미딘-5-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(3f)(0.170 g, 0.296 mmol)을 2 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.090 g, 0.325 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(0.191 g, 1.48 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시켰으며, 이것에 10 mL의 물을 서서히 적가하고, 여과하였다. 여과 케이크를 20 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 이어서 5 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 내지 60%의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 반응 시스템을 동결건조시켜 5-[5-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-1,3,3a,4,6,6a-헥사하이드로피롤로[3,4-c]피롤-2-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 테트라트리플루오로아세테이트(화합물 3)(0.082 g, 수율: 22%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.39 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.19 (s, 2H), 7.69 - 7.59 (m, 3H), 7.40 (t, 2H), 7.20 - 7.12 (m, 3H), 7.11 - 7.06 (m, 2H), 6.96 (d, 1H), 6.70 (dd, 1H), 6.30 (br, 2H), 4.95 - 4.88 (m, 2H), 3.94 - 3.86 (m, 2H), 3.86 - 3.70 (m, 2H), 3.60 (dd, 2H), 3.57-3.48 (m, 2H), 3.41 (dd, 2H), 3.27-3.12 (m, 2H), 3.04 - 2.65 (m, 6H), 2.64-2.51 (m, 2H), 2.19-2.10 (m, 2H).
LCMS m/z = 416.3 [M/2 +1]+.
실시예 4:
5-[2-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 4)
Figure pct00419
단계 1:
tert-부틸 2-(5-브로모피리미딘-2-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(4a)
Figure pct00420
5-브로모-2-클로로-피리미딘 하이드로클로라이드(3a)(1.0 g, 5.17 mmol)을 10 mL의 무수 에탄올 중에 용해시키고, tert-부틸 2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(1.60 g, 6.20 mmol)를 첨가하고, 이어서 트리에틸아민(1.31 g, 12.9 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 20 mL의 물 및 50 mL의 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 30 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 4 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2-(5-브로모피리미딘-2-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(4a)(1.60 g, 수율: 81%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 383.1 [M+1]+.
단계 2:
tert-부틸 2-[5-(4-하이드록시-1-피페리딜)피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(4b)
Figure pct00421
tert-부틸 2-(5-브로모피리미딘-2-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(4a)(1.00 g, 2.61 mmol)를 10 mL의 건성 톨루엔 중에 용해시키고, 4-하이드록시피페리딘(0.264 g, 2.61 mmol), JohnPhos(0.0389 g, 0.130 mmol) 및 tert-부톡시나트륨(0.251 g, 2.61 mmol)을 첨가하였다. 질소 대체를 3회 수행하고, 이어서 Pd2(dba)3(0.060 g, 0.13 mmol)를 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 20 mL의 디클로로메탄 및 20 mL의 물을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 10 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 4 : 1 내지 0 : 100)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2-[5-(4-하이드록시-1-피페리딜)피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(4b)(0.530 g, 수율: 50%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.14 (s, 2H), 4.64 (s, 1H), 3.68 (s, 4H), 3.61 - 3.53 (m, 1H), 3.31 -3.23 (m, 6H), 2.76 - 2.65 (m, 2H), 1.87 - 1.75 (m, 2H), 1.71 - 1.59 (m, 4H), 1.58 - 1.44 (m, 2H), 1.39 (s, 9H).
LCMS m/z = 404.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 2-[5-[4-(p-토실옥시)-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(4c)
Figure pct00422
tert-부틸 2-[5-(4-하이드록시-1-피페리딜)피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(4b)(0.530 g, 1.31 mmol)를 10 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 4-디메틸아미노피리딘(0.321 g, 2.63 mmol)을 첨가하고, 이어서 p-톨루엔설포닐 클로라이드(0.501 g, 2.63 mmol)를 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 20 mL의 포화 중탄산나트륨 용액 및 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 2 : 3 내지 1 : 4)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2-[5-[4-(p-토실옥시)-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(4c)(0.550 g, 수율: 75%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 558.3 [M+1]+.
단계 4:
tert-부틸 2-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(4d)
Figure pct00423
tert-부틸 2-[5-[4-(p-토실옥시)-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(4c)(0.500 g, 0.897 mmol)를 5 mL의 N,N'-디메틸포름아미드 중에 용해시키고, 3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638] 참조)(0.326 g, 1.08 mmol)을 첨가하고, 이어서 탄산세슘(0.584 g, 1.79 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 10 mL의 물 및 30 mL의 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 10 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피[(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 2 : 3 내지 1 : 4)에서 (디클로로메탄/메탄올(v/v) = 25 : 2)으로]로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(4d)(0.230 g, 수율: 37%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 345.3 [M/2 +1]+.
단계 5:
1-[1-[2-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일)피리미딘-5-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(4e)
Figure pct00424
tert-부틸 2-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(4d)(0.230 g, 0.334 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 10 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 농축시키고, 이어서 조 생성물에 30 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 추가로 20 mL의 디클로로메탄으로 1회 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[1-[2-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일) 피리미딘-5-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(4e)(0.197 g, 수율: > 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 589.3 [M+1]+.
단계 6:
5-[2-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 4)
Figure pct00425
1-[1-[2-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일) 피리미딘-5-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(4e)(0.170 g, 0.289 mmol)을 2 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.0877 g, 0.318 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(0.187 g, 1.44 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시켰으며, 이것에 10 mL의 물을 서서히 적가하고, 여과하였다. 여과 케이크를 20 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 이어서 5 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 92 : 8)로 분리하고 정제하여 5-[2-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 4)(0.030 g, 수율: 11%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.06 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.25 (s, 2H), 7.68 - 7.65 (m, 3H), 7.44 (t, 2H), 7.35 (s, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.22 - 7.09 (m, 5H), 5.06 (dd, 1H), 4.90 - 4.80 (m, 1H), 3.77 (s, 4H), 3.63 - 3.58 (m, 2H), 3.55 - 3.47 (m, 4H), 2.95 - 2.85 (m, 3H), 2.63 - 2.51 (m, 2H), 2.40 - 2.27 (m, 2H), 2.05 - 1.97 (m, 3H), 1.83 (s, 4H).
LCMS m/z = 423.3 [M/2 +1]+.
실시예 5:
5-[7-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 5)
Figure pct00426
단계 1:
tert-부틸 7-(5-브로모피리미딘-2-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(5a)
Figure pct00427
tert-부틸 5-브로모-2-클로로-피리미딘(3a)(1.0 g, 5.17 mmol)을 10 mL의 무수 에탄올 중에 용해시키고, 2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트 하이드로클로라이드(1.60 g, 6.20 mmol)를 첨가하고, 이어서 트리에틸아민(1.31 g, 12.9 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 20 mL의 물 및 50 mL의 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 20 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 4 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 7-(5-브로모피리미딘-2-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(5a)(1.60 g, 수율: 81%)를 수득하였다.
단계 2:
tert-부틸 7-[5-(4-하이드록시-1-피페리딜)피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(5b)
Figure pct00428
tert-부틸 7-(5-브로모피리미딘-2-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(5a)(0.500 g, 1.30 mmol)를 10 mL의 건성 톨루엔 중에 용해시키고, 4-하이드록시피페리딘(0.264 g, 2.61 mmol), JohnPhos(0.0389 g, 0.130 mmol) 및 tert-부톡시나트륨(0.251 g, 2.61 mmol)을 첨가하였다. 질소 대체를 3회 수행하고, 이어서 Pd2(dba)3(0.060 g, 0.065 mmol)를 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 20 mL의 디클로로메탄 및 20 mL의 물을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 10 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 4 : 1 내지 0 : 100)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 7-[5-(4-하이드록시-1-피페리딜)피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(5b)(0.200 g, 수율: 38%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 404.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 7-[5-[4-(p-토실옥시)-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(5c)
Figure pct00429
tert-부틸 7-[5-(4-하이드록시-1-피페리딜)피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(5b)(0.380 g, 0.942 mmol)를 10 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 4-디메틸아미노피리딘(0.230 g, 1.88 mmol)을 첨가하고, 이어서 p-톨루엔설포닐 클로라이드(0.359 g, 1.88 mmol)를 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 20 mL의 포화 중탄산나트륨 용액 및 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 2 : 3 내지 1 : 4)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 7-[5-[4-(p-토실옥시)-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(5c)(0.440 g, 수율: 84%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 558.3 [M+1]+.
단계 4:
tert-부틸 7-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(5d)
Figure pct00430
tert-부틸 7-[5-[4-(p-토실옥시)-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(5c)(0.440 g, 0.789 mmol)를 5 mL의 N,N'-디메틸포름아미드 중에 용해시키고, 3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638] 참조)(0.287 g, 0.947 mmol)을 첨가하고, 이어서 탄산세슘(0.514 g, 1.58 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 10 mL의 물 및 30 mL의 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 10 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피[(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 2 : 3 내지 1 : 4)에서 (디클로로메탄/메탄올(v/v) = 25 : 2)으로]로 분리하고 정제하여 tert-부틸 7-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(5d)(0.230 g, 수율: 42%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 689.3 [M+1]+.
단계 5:
1-[1-[2-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일)피리미딘-5-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(5e)
Figure pct00431
tert-부틸 7-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(5d)(0.230 g, 0.334 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 10 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 농축시키고, 이어서 조 생성물에 30 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 추가로 20 mL의 디클로로메탄으로 1회 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[1-[2-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일) 피리미딘-5-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(5e)(0.197 g, 수율: > 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 589.3 [M+1]+.
단계 6:
5-[7-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 5)
Figure pct00432
1-[1-[2-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일) 피리미딘-5-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(5e)(0.170 g, 0.289 mmol)을 2 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.0877 g, 0.318 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(0.187 g, 1.44 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시켰으며, 이것에 10 mL의 물을 서서히 적가하고, 여과하였다. 여과 케이크를 20 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 이어서 5 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 92 : 8)로 분리하고 정제하여 5-[7-[5-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 5)(0.040 g, 수율: 16%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.19 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.18 (s, 2H), 7.65 (d, 3H), 7.39 (t, 2H), 7.22-7.12 (m, 3H), 7.08 (d, 2H), 6.81 (s, 1H), 6.54 (d, 1H), 5.93 (br, 2H), 5.00 - 4.84 (m, 2H), 3.80 (d, 8H), 3.55 (d, 2H), 3.04-2.66 (m, 5H), 2.66-2.50 (m, 2H), 2.20-2.05 (m, 3H), 1.89 (s, 4H).
LCMS m/z = 423.3 [M/2 +1]+.
실시예 6:
5-(3-(4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리트리플루오로아세테이트(화합물 6)
Figure pct00433
Figure pct00434
단계 1:
tert-부틸 4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일) 피페리딘-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(6a)
Figure pct00435
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638] 참조)(0.25 g, 0.59 mmol)을 20 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 빙초산(0.052 g, 0.89 mmol) 및 tert-부틸 4-포르밀피페리딘-1-카르복실레이트(0.152 g, 0.71 mmol)를 연속적으로 첨가하였다. 혼합물을 질소 분위기 하에서 1시간 동안 교반하고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.627 g, 2.96 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응물을 20 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 첨가함으로써 켄칭(quenching)하고, 교반하고, 층 분리를 위해 정치되게 하였다. 수성 상을 디클로로메탄(15 mL x 2)으로 추출하고, 유기 상을 합하고, 30 mL의 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 1 내지 25 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(6a)(0.284 g, 수율: 82%)를 수득하였다.
단계 2:
3-(4-페녹시페닐)-1-(1-(피페리딘-4-일메틸)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(6b)
Figure pct00436
tert-부틸 4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(6a)(0.284 g, 0.487 mmol)를 2 mL의 메탄올로 용해시키고, 10 mL의 포화 에틸 아세테이트 염화염 용액을 적가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시켜 조 생성물을 수득하고, 조 생성물의 pH를 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 8 내지 9로 조정하고, 생성된 용액을 디클로로메탄(20 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축시켜 3-(4-페녹시페닐)-1-(1-(피페리딘-4-일메틸)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(6b)(0.22 g, 수율: 94%)을 수득하였다.
단계 3:
tert-부틸 3-(4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일) 피페리딘-1-일)메틸)피페리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(6c)
Figure pct00437
3-(4-페녹시페닐)-1-(1-(피페리딘-4-일메틸)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(6b)(0.22 g, 0.455 mmol)을 20 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, 빙초산(0.055 g, 0.910 mmol) 및 tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(0.094 g, 0.546 mmol)를 연속적으로 첨가하였다. 혼합물을 질소 분위기 하에서 1시간 동안 교반하고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.578 g, 2.73 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응물을 20 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 첨가함으로써 켄칭하고, 교반하고, 층 분리를 위해 정치되게 하였다. 수성 상을 디클로로메탄(15 mL x 2)으로 추출하고, 유기 상을 합하고, 30 mL의 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 1 내지 25 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-(4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)피페리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(6c)(0.25 g, 수율: 86%)를 수득하였다.
단계 4:
1-(1-((1-(아제티딘-3-일)피페리딘-4-일)메틸)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(6d)
Figure pct00438
tert-부틸 3-(4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)피페리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(6c)(0.25 g, 0.391 mmol)를 2 mL의 메탄올로 용해시키고, 10 mL의 포화 에틸 아세테이트 염화염 용액을 적가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시켜 조 생성물을 수득하고, 조 생성물의 pH를 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 8 내지 9로 조정하고, 이것을 디클로로메탄(20 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축시켜 1-(1-((1-(아제티딘-3-일)피페리딘-4-일)메틸)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(6d)(0.137 g, 수율: 65%)을 수득하였다.
단계 5:
5-(3-(4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리트리플루오로아세테이트(화합물 6)
Figure pct00439
1-(1-((1-(아제티딘-3-일)피페리딘-4-일)메틸)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(6d)(0.137 g, 0.254 mmol)을 10 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, N,N'-디이소프로필에틸아민(0.330 g, 2.54 mmol) 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.1 g, 0.331 mmol)을 연속적으로 첨가하고, 혼합물을 90℃까지 가열하고, 질소 분위기 하에서 6시간 동안 반응시켰다. 반응 용액에 10 mL의 물을 첨가하고, 고체를 침전시키고, 흡인에 의해 여과하고, 여과액을 에틸 아세테이트(40 mL x 2)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 50 mL의 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 1 내지 20 : 1)로 분리하고 정제하여 0.127 g의 조 생성물을 수득하고, 조 생성물을 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 내지 60%의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 반응 시스템을 동결건조시켜 5-(3-(4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리트리플루오로아세테이트(화합물 6)(78 mg, 수율: 27%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.07 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.77-7.62 (m, 3H), 7.50-7.41 (m, 2H), 7.24-7.10 (m, 5H), 6.90 (d, 1H), 6.76 (dd, 1H), 5.08 (dd, 2H), 4.35 (d, 6H), 4.27 (d, 6H), 3.73 (d, 2H), 3.62-3.49 (m, 2H), 2.97-2.80 (m, 3H), 2.57 (dd, 3H), 2.26-1.99 (m, 6H).
LCMS m/z = 398.3 [M/2 +1]+.
실시예 7:
5-(2-(5-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리트리플루오로아세테이트(화합물 7)
Figure pct00440
단계 1:
tert-부틸 7-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(7a)
Figure pct00441
2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(1.0 g, 3.62 mmol)을 20 mL의 DMSO 중에 용해시키고, tert-부틸 2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(0.82 g, 3.62 mmol) 및 DIPEA(N,N-디이소프로필에틸아민)(2.3 g, 3.62 mmol)를 실온에서 첨가하고, 반응물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 물을 첨가하고, 수성 상을 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하고, 유기 상을 합하고, 물(20 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 1 내지 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 7-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(7a)(1.0 g, 수율: 57%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 483.3 [M+1]+.
단계 2:
5-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일)-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 하이드로클로라이드(7b)
Figure pct00442
tert-부틸 7-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(7a)(2.0 g, 4.14 mmol)를 20 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액 중에 용해시키고, 5 mL의 메탄올을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 직접 농축시켜 5-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일)-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 하이드로클로라이드(7b)(1.5 g, 수율: 86%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 383.2 [M+1]+.
단계 3:
1-[1-[(2-클로로피리미딘-5-일)메틸]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(7c)
Figure pct00443
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638] 참조)(2.97 g, 7.0 mmol)을 20 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시켰다. 실온에서, 2-클로로피리미딘-5-포름알데하이드(1.0 g, 7.0 mmol)를 첨가하고, 이어서 1 mL의 아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 반응시켰다. 반응 용액에 트리아세톡시붕수소화나트륨(4.5 g, 21.0 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 반응 용액을 50 mL의 포화 중탄산나트륨 용액에 붓고, 수성 상을 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하고, 유기 상을 합하고, 물(50 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 1-[1-[(2-클로로피리미딘-5-일) 메틸]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(7c)(0.4 g, 수율: 11.1%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 513.6 [M+1]+.
단계 4:
5-[2-[5-[[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]메틸]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 트리트리플루오로아세테이트(화합물 7)
Figure pct00444
1-[1-[(2-클로로피리미딘-5-일) 메틸]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(7c)(0.2 g, 0.39 mmol)을 2 mL의 DMF 중에 용해시켰다. 실온에서, 5-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일)-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 하이드로클로라이드(7b)(0.32 g, 0.78 mmol) 및 트리에틸아민(0.15 g, 1.55 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 80℃까지 가온하고, 5시간 동안 반응시켰다. 반응 용액을 50 mL의 물에 붓고, 수성 상을 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1(50 mL x 3)로 추출하고, 유기 상을 합하고, 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 내지 60%의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 반응 시스템을 동결건조시켜 5-[2-[5-[[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]메틸]피리미딘-2-일]-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 트리트리플루오로아세테이트(화합물 7)(0.08 g, 수율: 20%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.48 (s, 2H), 8.42 (s, 1H), 7.65 (t, 3H), 7.45-7.37 (m, 2H), 7.33 (d, 1H), 7.27-7.13 (m, 4H), 7.13-7.05 (m, 2H), 5.31-5.17 (m, 1H), 5.05 (dd, 1H), 4.31 (s,2H), 3.96 (s, 4H), 3.73 (d, 2H), 3.54-3.43 (m, 4H), 3.43-3.31 (m, 2H), 2.90-2.54 (m, 5H), 2.41 (s, 2H), 2.16 - 2.02 (m, 1H), 1.99-1.88 (m, 4H).
LCMS m/z = 859.3 [M+1]+.
실시예 8:
5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리트리플루오로아세테이트(화합물 8)
Figure pct00445
Figure pct00446
단계 1:
tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(8a)
Figure pct00447
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(2b)(0.256 g, 0.545 mmol)을 20 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, 빙초산(0.049 g, 0.818 mmol) 및 tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(0.131 g, 0.763 mmol)를 연속적으로 첨가하였다. 질소 분위기 하에서, 혼합물을 65℃까지 가열하고, 교반하고, 3시간 동안 반응시키고, 이어서 실온까지 냉각시킨 후, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.693 g, 3.27 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응물을 20 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 첨가함으로써 켄칭하고, 교반하고, 층 분리를 위해 정치되게 하였다. 수성 상을 디클로로메탄(15 mL x 2)으로 추출하고, 유기 상을 합하고, 30 mL의 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100/1 내지 15/1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(8a)(0.301 g, 수율: 88%)를 수득하였다.
단계 2:
1-(1'-(아제티딘-3-일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(8b)
Figure pct00448
tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(8a)(0.301 g, 0.482 mmol)를 2 mL의 메탄올로 용해시키고, 10 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 적가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시켜 조 생성물을 수득하고, 조 생성물의 pH를 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 9 내지 10으로 조정하고, 이것을 디클로로메탄(20 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축시켜 1-(1'-(아제티딘-3-일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(8b)(0.239 g, 수율: 70%)을 수득하였다.
단계 3:
5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리트리플루오로아세테이트(화합물 8)
Figure pct00449
1-(1'-(아제티딘-3-일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(8b)(0.239 g, 0.456 mmol)을 10 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, N,N'-디이소프로필에틸아민(0.295 g, 2.28 mmol) 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.164 g, 0.592 mmol)을 연속적으로 첨가하고, 혼합물을 90℃까지 가열하고, 질소 분위기 하에서 6시간 동안 반응시켰다. 반응 용액에 10 mL의 물을 첨가하고, 고체를 침전시키고, 흡인에 의해 여과하고, 여과액을 에틸 아세테이트(40 mL x 2)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 50 mL의 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100/1 내지 20/1)로 분리하고 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 내지 60%의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 반응 시스템을 동결건조시켜 5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리트리플루오로아세테이트(화합물 8)(0.207 g, 수율: 40%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.07 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.66 (d, 2H),7.45 (t, 2H), 7.23-7.09 (m, 5H), 6.89 (s, 1H), 6.75 (d, 1H), 5.19-5.04 (m, 2H), 4.40 - 4.05 (m, 7H), 3.76-3.27 (m, 7H),2.97-2.75 (m, 2H), 2.64-2.52 (m, 3H), 2.40-2.19 (m, 4H), 2.08-1.79 (m, 3H).
LCMS m/z = 781.3 [M+1]+.
실시예 8-1:
5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 8-1)
Figure pct00450
화합물 8(2 g)을 50 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 혼합된 용액을 28%의 질량 분율의 진한 암모니아수(50 mL x 5)로 세척하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물에 20 mL의 에틸 아세테이트를 첨가하고, 3시간 동안 교반하고, 여과하고, 여과 케이크를 진공-건조시켜 유리 염기 5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 8-1)(1.3 g)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.22 (brs, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.67 - 7.60 (m, 3H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.19 - 7.10 (m, 3H), 7.10 - 7.04 (m, 2H), 6.78 (d, 1H), 6.51 (dd, 1H), 5.89 (brs, 2H), 4.96 - 4.88 (m, 1H), 4.83 - 4.70 (m, 1H), 4.14 - 4.04 (m, 2H), 3.92 - 3.84 (m, 2H), 3.39 - 3.30 (m, 1H), 3.18 - 3.04 (m, 2H), 3.00 - 2.91 (m, 2H), 2.90 - 2.65 (m, 3H), 2.56 - 2.32 (m, 5H), 2.16 - 2.01 (m, 3H), 2.01 - 1.84 (m, 4H), 1.73 - 1.59 (m, 2H).
LC-MS m/z = 781.4 [M+1]+.
실시예 9:
5-(4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 테트라트리플루오로아세테이트(화합물 9)
Figure pct00451
단계 1:
tert-부틸 4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(9a)
Figure pct00452
3-(4-페녹시페닐)-1-(1-(피페리딘-4-일메틸)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(6b)(0.44 g, 0.91 mmol)을 10 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(0.24 g, 1.18 mmol)를 실온에서 첨가하고, 혼합물을 50℃까지 가열하고, 1시간 동안 교반하고, 이어서 실온까지 냉각시켰다. 반응 용액에 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.48 g, 2.28 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 반응 용액을 50 mL의 포화 중탄산나트륨 용액에 붓고, 수성 상을 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하고, 유기 상을 합하고, 물(50 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 tert-부틸 4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(9a)(0.31 g, 수율: 51%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 667.4 [M+1]+.
단계 2:
1-(1-([1,4'-바이피페리딘]-4-일메틸)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(9b)
Figure pct00453
tert-부틸 4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(9a)(0.31 g, 0.46 mmol)를 6 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 2 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 20 mL의 2 N 수산화나트륨 수용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 수성 상을 디클로로메탄(10 mL x 3)으로 추출하고, 유기 상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 1-(1-([1,4'-바이피페리딘]-4-일메틸)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(9b)(0.17 g, 수율: 65%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 567.4 [M+1]+.
단계 3:
5-(4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 테트라트리플루오로아세테이트(화합물 9)
Figure pct00454
1-(1-([1,4'-바이피페리딘]-4-일메틸)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(9b)(0.17 g, 0.3 mmol)을 5 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.1 g, 0.36 mmol) 및 N,N'-디이소프로필에틸아민(0.3 g, 2.3 mmol)을 실온에서 첨가하고, 혼합물을 80℃까지 가온하고, 3시간 동안 반응시켰다. 반응 용액을 20 mL의 물에 붓고, 수성 상을 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1(30 mL x 3)로 추출하고, 유기 상을 합하고, 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 내지 60%의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 반응 시스템을 동결건조시켜 5-(4-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 테트라트리플루오로아세테이트(화합물 9)(0.11 g, 수율: 45%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.06 (s, 1H), 9.46 (d, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.72 - 7.55 (m, 3H), 7.47 - 7.41 (m, 3H), 7.35 - 7.29 (m, 1H), 7.22 - 7.12 (m, 5H), 5.10 - 5.05 (m, 2H), 4.26 (d, 2H), 3.71 (d, 2H), 3.63 - 3.39 (m, 4H), 3.32 - 3.17 (m, 2H),3.07 - 2.85 (m, 6H), 2.65 - 2.51 (m, 4H), 2.32 - 1.94 (m, 8H), 1.72 - 1.69 (m, 2H), 1.48 - 1.45 (m, 2H).
LCMS m/z = 412.3 [M/2 +1]+.
실시예 10:
5-(4-(3-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)아제티딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 테트라트리플루오로아세테이트(화합물 10)
Figure pct00455
단계 1:
tert-부틸 3-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)아제티딘-1-카르복실레이트(10a)
Figure pct00456
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638] 참조)(0.5 g, 1.29 mmol)을 15 mL의 DME 중에 용해시키고, tert-부틸 3-포르밀아제티딘-1-카르복실레이트(0.31 g, 1.68 mmol)를 실온에서 첨가하고, 반응물을 실온에서 0.5시간 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.68 g, 3.22 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 물을 첨가하고, 수성 상을 디클로로메탄(30 mL x 3)으로 추출하고, 유기 상을 합하고, 물(20 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 1 내지 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)아제티딘-1-카르복실레이트(10a)(0.65 g, 수율: 91%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 556.4 [M+1]+.
단계 2:
1-(1-(아제티딘-3-일메틸)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(10b)
Figure pct00457
tert-부틸 3-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)아제티딘-1-카르복실레이트(10a)(0.61 g, 1.17 mmol)를 6 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 2 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 20 mL의 2 N 수산화나트륨 수용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 수성 상을 디클로로메탄(10 mL x 3)으로 추출하고, 유기 상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 1-(1-(아제티딘-3-일메틸)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(10b)(0.47 g, 수율: 89%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 456.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 4-(3-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)아제티딘-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트(10c)
Figure pct00458
1-(1-(아제티딘-3-일메틸)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(10b)(0.47 g, 1.03 mmol)을 10 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(0.27 g, 1.34 mmol)를 실온에서 첨가하고, 혼합물을 50℃까지 가열하고, 1시간 동안 교반하고, 이어서 실온까지 냉각시켰다. 반응 용액에 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.55 g, 2.58 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 반응 용액을 50 mL의 포화 중탄산나트륨 용액에 붓고, 수성 상을 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하고, 유기 상을 합하고, 물(50 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 tert-부틸 4-(3-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)아제티딘-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트(10c)(0.31 g, 수율: 48%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 639.8 [M+1]+.
단계 4:
3-(4-페녹시페닐)-1-(1-((1-(피페리딘-4-일)아제티딘-3-일)메틸)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(10d)
Figure pct00459
tert-부틸 4-(3-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)아제티딘-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트(10c)(0.31 g, 0.49 mmol)를 6 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 2 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 20 mL의 2 N 수산화나트륨 수용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 수성 상을 디클로로메탄(10 mL x 3)으로 추출하고, 유기 상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 3-(4-페녹시페닐)-1-(1-((1-(피페리딘-4-일)아제티딘-3-일)메틸)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(10d)(0.18 g, 수율: 65%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 539.7 [M+1]+.
단계 5:
5-(4-(3-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)아제티딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 테트라트리플루오로아세테이트(화합물 10)
Figure pct00460
3-(4-페녹시페닐)-1-(1-((1-(피페리딘-4-일)아제티딘-3-일)메틸)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(10d)(0.18 g, 0.34 mmol)을 5 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.12 g, 0.37 mmol) 및 N,N'-디이소프로필에틸아민(0.3 g, 2.3 mmol)을 실온에서 첨가하고, 혼합물을 80℃까지 가온하고, 3시간 동안 반응시켰다. 반응 용액을 20 mL의 물에 붓고, 수성 상을 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1(30 mL x 3)로 추출하고, 유기 상을 합하고, 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 내지 60%의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 반응 시스템을 동결건조시켜 5-(4-(3-((4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)메틸)아제티딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 테트라트리플루오로아세테이트(화합물 10)(0.13 g, 수율: 48%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.06 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.72-7.54 (m, 3H), 7.48-7.39 (m, 3H), 7.33-7.31 (m, 1H), 7.24-7.09 (m, 5H), 5.10-5.05 (m, 3H), 4.25-4.08 (m,7H), 3.70-3.38 (m, 6H), 3.01-2.89 (m, 3H), 2.69-2.39 (m, 4H), 2.22-2.19 (m, 2H), 2.10-1.89 (m, 3H), 1.41-1.39 (m, 2H).
LCMS m/z = 398.3 [M/2 +1]+.
실시예 11:
5-[4-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 헥사트리플루오로아세테이트(화합물 11)
Figure pct00461
단계 1:
tert-부틸 3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(11a)
Figure pct00462
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638] 참조)(0.500 g, 1.29 mmol)을 5 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(0.266 g, 1.55 mmol) 및 빙초산(0.412 g, 6.86 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 65℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 실온까지 냉각시키고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.548 g, 2.59 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 하룻밤 반응을 수행하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 적가함으로써 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(11a)(0.700 g, 수율: > 99%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 542.3 [M+1]+.
단계 2:
1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11b)
Figure pct00463
tert-부틸 3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(11a)(0.700 g, 1.29 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11b)(0.410 g, 수율: 72%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 442.2 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(11c)
Figure pct00464
1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11b)(0.410 g, 0.929 mmol)을 5 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(0.222 g, 1.11 mmol) 및 빙초산(0.296 g, 4.92 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 65℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 실온까지 냉각시키고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.394 g, 1.86 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 하룻밤 반응을 수행하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 적가함으로써 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(11c)(0.380 g, 수율: 66%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.35 (s, 1H), 7.67-7.61 (m, 2H), 7.43-7.35 (m, 2H), 7.21-7.12 (m, 3H), 7.11-7.05 (m, 2H), 5.56 (br, 2H), 4.82-4.72 (m, 1H), 4.07-3.93 (m, 2H), 3.72-3.55 (m, 2H), 3.15-2.87 (m, 5H), 2.81 (t, 2H), 2.49-2.35 (m, 2H), 2.17-1.97 (m, 5H), 1.75-1.67 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.35-1.25 (m, 2H).
단계 4:
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-(4-피페리딜)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11d)
Figure pct00465
tert-부틸 4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(11c)(0.380 g, 0.608 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-(4-피페리딜)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11d)(0.256 g, 수율: 80%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 263.3 [M/2 +1]+.
단계 5:
tert-부틸 4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(11e)
Figure pct00466
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-(4-피페리딜)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11d)(0.256 g, 0.488 mmol)을 3 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(0.117 g, 0.585 mmol) 및 빙초산(0.155 g, 2.59 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 65℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 실온까지 냉각시키고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.207 g, 0.976 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 하룻밤 반응을 수행하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 적가함으로써 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(11e)(0.244 g, 수율: 71%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 708.5 [M+1]+.
단계 6:
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11f)
Figure pct00467
tert-부틸 4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(11e)(0.244 g, 0.345 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 100 mL의 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1로 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11f)(0.209 g, 수율: > 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 304.8 [M/2 +1]+.
단계 7:
tert-부틸 4-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(11g)
Figure pct00468
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11f)(0.208 g, 0.342 mmol)을 3 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(0.102 g, 0.513 mmol) 및 빙초산(0.109 g, 1.81 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 65℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 실온까지 냉각시키고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.145 g, 0.684 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 하룻밤 반응을 수행하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 적가함으로써 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 7 : 3)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 4-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(11g)(0.152 g, 수율: 56%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 396.3 [M/2 +1]+.
단계 8:
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4-피페리딜]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11h)
Figure pct00469
tert-부틸 4-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(11g)(0.152 g, 0.192 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 100 mL의 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1로 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4-피페리딜]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11h)(0.133 g, 수율: > 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 346.4 [M/2 +1]+.
단계 9:
5-[4-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 헥사트리플루오로아세테이트(화합물 11)
Figure pct00470
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4-피페리딜]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11h)(0.130 g, 0.188 mmol)을 2 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.0676 g, 0.245 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(0.122 g, 0.941 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시켰으며, 이것에 10 mL의 물을 서서히 적가하고, 여과하였다. 여과 케이크를 20 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 이어서 5 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 내지 60%의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 반응 시스템을 동결건조시켜 5-[4-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 헥사트리플루오로아세테이트(화합물 11)(0.013 g, 수율: 4%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.06 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.78-7.62 (m, 4H), 7.47-7.40 (m, 2H), 7.36-7.28 (m, 1H), 7.26-7.06 (m, 5H), 5.08 (dd, 1H), 4.89-4.78(m, 1H), 4.31-4.10 (m, 5H), 4.04-3.88 (m, 4H), 3.68-3.45 (m, 6H), 3.07-2.81 (m, 6H), 2.65-2.53 (m, 2H), 2.41-1.82 (m, 12H), 1.76-1.48 (m, 5H), 1.32-1.21 (m, 4H).
LCMS m/z = 474.4 [M/2 +1]+.
실시예 12:
5-[4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 펜타트리플루오로아세테이트(화합물 12)
Figure pct00471
단계 1:
tert-부틸 4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1- 피페리딜]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(12a)
Figure pct00472
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(2d)(0.8 g, 1.45 mmol)을 20 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, N-tert-부톡시카르보닐-4-피페리돈(0.9 g, 4.51 mmol)을 첨가하고, 이어서 아세트산(0.4 g, 6.67 mmol) 및 무수 황산나트륨(1 g)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 85℃에서 3시간 동안 반응을 수행하고, 실온까지 냉각시키고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(2 g, 9.43 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 포화 중탄산나트륨 용액을 적가함으로써 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 이어서 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH (v/v) = 50/1 내지 5/1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(12a)(0.7 g, 수율: 70%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 736.5 [M+1]+.
단계 2:
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4-피페리딜]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(12b)
Figure pct00473
tert-부틸 4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(12a)(0.7 g, 0.95 mmol)를 5 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 용매를 감압 하에서 제거하고, 20 mL의 디클로로메탄 및 2 mL의 에탄올을 첨가하고, 생성된 용액을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 수성 상을 20 mL의 디클로로메탄 및 2 mL의 에탄올로 추가로 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4-피페리딜]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(12b)(0.60 g, 수율: 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 636.3 [M+1]+.
단계 3:
5-[4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 펜타트리플루오로아세테이트(화합물 12)
Figure pct00474
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4-피페리딜]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(12b)(0.25 g, 0.39 mmol), 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.11 g, 0.39 mmol) 및 트리에틸아민(0.12 g, 1.2 mmol)을 3 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 혼합된 용액을 90℃까지 가온하고, 12시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 10 mL의 물을 첨가하고, 여과하였다. 여과 케이크를 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 내지 60%의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 반응 시스템을 동결건조시켜 5-[4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 펜타트리플루오로아세테이트(화합물 12)(0.15 g, 수율: 28%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.07 (s, 1H), 10.05 (br, 2H), 8.33 (s, 1H), 7.75 - 7.62 (m, 3H), 7.48 - 7.39 (m, 3H), 7.35 - 7.29 (m, 1H), 7.24 - 7.10 (m, 5H), 5.27 - 5.04 (m, 3H), 5.04 - 4.35 (br, 5H), 4.30 - 4.20 (m, 2H), 3.73 - 3.43 (m, 8H), 3.13 - 2.84 (m, 6H), 2.64 - 2.54 (m, 2H), 2.40 - 2.17 (m, 6H), 2.15 - 1.87 (m, 7H), 1.77 - 1.60 (m, 2H).
LCMS m/z = 892.4 [M+1]+.
실시예 13:
5-[3-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 13)
Figure pct00475
단계 1:
tert-부틸 3-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(13a)
Figure pct00476
50 mL 반응 플라스크에 3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11f)(420 mg, 0.69 mmol), 아세트산(41.4 mg, 0.69 mmol), tert-부틸 3-옥소 아제티딘-1-카르복실레이트(118 mg, 0.69 mmol), 트리아세톡시붕수소화나트륨(292.5 mg, 1.38 mmol) 및 디클로로메탄(20 mL)을 연속적으로 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 흡인에 의해 여과하고, 여과액을 포화 중탄산나트륨 용액(8 mL)으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 이어서 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 흡인에 의해 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜 tert-부틸 3-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(13a)(350 mg, 수율: 67%)를 수득하였다.
단계 2:
1-[1-[1-[1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-4-피페리딜]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(13b)
Figure pct00477
tert-부틸 3-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(13a)(350 mg, 0.46 mmol)를 8 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액 중에 용해시키고, 5 mL의 메탄올을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 직접 농축시키고, 이어서 반응 시스템을 에틸 아세테이트(30 mL)로 희석시키고, 포화 중탄산나트륨 용액(10 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(5 mL x 3)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜 1-[1-[1-[1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-4-피페리딜]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(13b)(180 mg, 수율: 59%)을 수득하였다.
단계 3:
5-[3-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 13)
Figure pct00478
1-[1-[1-[1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-4-피페리딜]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(13b)(180 mg, 0.27 mmol)을 DMSO(20 mL) 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(74.5 mg, 0.27 mmol) 및 DIPEA(174.4 mg, 1.35 mmol)를 실온에서 첨가하고, 반응물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 물을 첨가하고, 수성 상을 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하고, 유기 상을 합하고, 물(20 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 1 내지 20 : 1)로 분리하고 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 내지 60%의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 제조된 생성물을 알칼리화하고 농축시켜 5-[3-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 13)(63 mg, 수율: 25%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.37 (s, 1H), 7.74 - 7.49 (m, 4H), 7.43 - 7.34 (m, 2H), 7.18 - 7.13 (m, 3H), 7.09 - 7.04 (m, 2H), 6.77 (d, 1H), 6.51 (dd, 1H), 5.67 (br, 2H), 5.01 - 4.88 (m, 2H), 4.34 - 4.20 (m, 1H), 4.08 (t, 2H), 3.90 - 3.82 (m, 2H), 3.58 - 3.50 (m, 2H), 3.38 - 3.30 (m, 1H), 3.13 - 3.05 (m, 1H), 3.00 - 2.70 (m, 11H), 2.46 (t, 2H), 2.38 - 2.29 (m, 2H), 2.19 - 2.14 (m, 2H), 1.94 - 1.86 (m, 6H), 1.81 - 1.74 (m, 2H), 1.67-1.59 (m, 2H), 1.44 - 1.39 (m, 2H), 0.99 - 0.90 (m, 2H).
LCMS m/z = 460.4 [M/2 +1]+.
실시예 14
5-[4-[4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 헥사트리플루오로아세테이트(화합물 14)
Figure pct00479
단계 1:
tert-부틸 4-[4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1- 피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(14a)
Figure pct00480
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4-피페리딜]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(12b)(0.3 g, 0.47 mmol)을 20 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, N-tert-부톡시카르보닐-4-피페리돈(0.28 g, 1.42 mmol)을 첨가하고, 이어서 아세트산(0.14 g, 2.36 mmol) 및 0.5 g의 무수 황산나트륨을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 혼합물을 85℃까지 가온하고, 3시간 동안 반응시키고, 실온까지 냉각시켰다. 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.5 g, 2.36 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 포화 중탄산나트륨 수용액을 적가함으로써 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 이어서 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH (v/v) = 50/1 내지 5/1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 4-[4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(14a)(0.13 g, 수율: 33%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 819.5 [M+1]+.
단계 2:
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4-피페리딜]-4-피페리딜]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 펜타트리플루오로아세테이트(14b)
Figure pct00481
tert-부틸 4-[4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(14a)(0.13 g, 0.16 mmol)를 2 mL의 DCM 중에 용해시키고, 2 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 용매를 감압 하에서 제거하고, 조 생성물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
LCMS m/z = 719.5 [M+1]+.
단계 3:
5-[4-[4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 헥사트리플루오로아세테이트(화합물 14)
Figure pct00482
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4-피페리딜]-4-피페리딜]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 펜타트리플루오로아세테이트(14b)(0.20 g, 0.16 mmol), 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.05 g, 0.17 mmol) 및 트리에틸아민(0.12 g, 1.2 mmol)을 3 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 혼합된 용액을 120℃까지 가온하고, 6시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 10 mL의 물을 첨가하고, 여과하였다. 여과 케이크를 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 농도(v/v, 하기와 동일함) 내지 60% 농도의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 반응 시스템을 동결건조시켜 5-[4-[4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 헥사트리플루오로아세테이트(화합물 14)(0.06 g, 수율: 25%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.06 (s, 1H), 10.01 (br, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.74 - 7.62 (m, 3H), 7.48 - 7.40 (m, 3H), 7.35 - 7.28 (m, 1H), 7.24 - 7.10 (m, 5H), 5.24 - 4.92 (m, 3H), 4.60 - 4.17 (m, 9H), 3.75 - 3.45 (m, 11H), 3.13 - 2.85 (m, 8H), 2.67 - 2.56 (m, 2H), 2.40 - 2.20 (m 7H), 2.14 - 1.88 (m, 8H), 1.77 - 1.57 (m, 2H).
LCMS m/z = 975.5 [M+1]+.
실시예 15:
5-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 15)
Figure pct00483
단계 1:
5-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 15)
Figure pct00484
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11f)(164 mg, 0.27 mmol)을 20 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(74.5 mg, 0.27 mmol) 및 DIPEA(174.4 mg, 1.35 mmol)를 실온에서 첨가하고, 반응물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 물을 첨가하고, 수성 상을 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하고, 유기 상을 합하고, 물(20 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 1 내지 20 : 1)로 분리하고 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 농도 내지 60% 농도의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 제조된 생성물을 알칼리화하고 농축시켜 5-[4-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 15)(58 mg, 수율: 25%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.38 (s, 1H), 7.75 - 7.58 (m, 4H), 7.54 - 7.51 (m, 1H), 7.40 - 7.36 (m, 2H), 7.17 - 7.13 (m, 3H), 7.08 - 7.02 (m, 3H), 5.65 (s, 2H), 4.95 - 4.91 (m, 2H), 4.32 - 4.20 (m, 1H), 3.97 (d, 2H), 3.61 (s, 1H), 3.53 (s, 1H), 3.11 - 3.10 (m, 1H), 2.99 - 2.90 (m, 7H), 2.86 - 2.85 (m, 1H), 2.80 - 2.69 (m, 3H), 2.60 - 2.59 (m, 1H), 2.49 - 2.44 (m, 1H), 2.27 - 2.14 (m, 4H), 1.95 - 1.86 (m, 6H), 1.77 - 1.72 (m, 2H), 1.67 - 1.61(m, 2H), 0.96 - 0.94 (m, 2H).
LCMS m/z = 864.5 [M+1]+.
실시예 16:
5-[4-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피롤리딘-1-일]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 16)
Figure pct00485
Figure pct00486
단계 1:
tert-부틸 3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜] 피롤리딘-1-카르복실레이트(16a)
Figure pct00487
50 mL 반응 플라스크에 3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638] 참조)(1.16 g, 3 mmol), 아세트산(180 mg, 3 mmol), tert-부틸 3-옥소-피롤리딘-1-카르복실레이트(555.7 mg, 3 mmol), 트리아세톡시붕수소화나트륨(953.7 mg, 4.5 mmol) 및 디클로로메탄(40 mL)을 연속적으로 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 흡인에 의해 여과하고, 여과액을 포화 중탄산나트륨 용액(30 mL)으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 이어서 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 흡인에 의해 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜 tert-부틸 3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피롤리딘-1-카르복실레이트(16a)(1.2 g, 수율: 72%)를 수득하였다.
단계 2:
3-(4-페녹시페닐)-1-(1-피롤리딘-3-일-4-피페리딜)피라졸로[3,4-b]피리딘-4-아민(16b)
Figure pct00488
tert-부틸 3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피롤리딘-1-카르복실레이트(16a)(1.1 g, 2 mmol)를 10 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액 중에 용해시키고, 5 mL의 메탄올을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 직접 농축시키고, 이어서 반응 시스템을 에틸 아세테이트(30 mL)로 희석시키고, 포화 중탄산나트륨(10 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(5 mL x 3)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜 3-(4-페녹시페닐)-1-(1-피롤리딘-3-일-4-피페리딜)피라졸로[3,4-b]피리딘-4-아민(16b)(837 mg, 수율: 92%)을 수득하였다.
단계 3:
tert-부틸 3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피롤리딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(16c)
Figure pct00489
50 mL 반응 플라스크에 3-(4-페녹시페닐)-1-(1-피롤리딘-3-일-4-피페리딜)피라졸로[3,4-b]피리딘-4-아민(16b)(837 mg, 1.84 mmol), 아세트산(110.4 mg, 1.84 mmol), tert-부틸 3-옥소 아제티딘-1-카르복실레이트(315 mg, 1.84 mmol), 트리아세톡시붕수소화나트륨(924 mg, 4.36 mmol) 및 디클로로메탄(40 mL)을 연속적으로 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 흡인에 의해 여과하고, 여과액을 포화 중탄산나트륨 용액(20 mL)으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 이어서 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 흡인에 의해 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜 tert-부틸 3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피롤리딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(16c)(680 mg, 수율: 61%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 611.4 [M+1]+.
단계 4:
1-[1-[1-(아제티딘-3-일)피롤리딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(16d)
Figure pct00490
tert-부틸 3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피롤리딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(16c)(680 mg, 1.11 mmol)를 8 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액 중에 용해시키고, 5 mL의 메탄올을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 직접 농축시키고, 이어서 반응 시스템을 에틸 아세테이트(30 mL)로 희석시키고, 포화 중탄산나트륨(10 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(5 mL x 3)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜 1-[1-[1-(아제티딘-3-일)피롤리딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(16d)(420 mg, 수율: 74%)을 수득하였다.
단계 5:
tert-부틸 4-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피롤리딘-1-일]아제티딘-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(16e)
Figure pct00491
50 mL 반응 플라스크에 1-[1-[1-(아제티딘-3-일)피롤리딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(16d)(420 mg, 0.82 mmol), 아세트산(49.2 mg, 0.82 mmol), tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(163.4 mg, 0.82 mmol), 트리아세톡시붕수소화나트륨(348 mg, 1.64 mmol) 및 디클로로메탄(35 mL)을 연속적으로 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 흡인에 의해 여과하고, 여과액을 포화 중탄산나트륨 용액(15 mL)으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 이어서 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 흡인에 의해 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜 tert-부틸 4-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피롤리딘-1-일]아제티딘-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(16e)(320 mg, 수율: 56%)를 수득하였다.
단계 6:
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)아제티딘-3-일]피롤리딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(16f)
Figure pct00492
tert-부틸 4-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피롤리딘-1-일]아제티딘-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(16e)(320 mg, 0.46 mmol)를 8 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액 중에 용해시키고, 5 mL의 메탄올을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 직접 농축시키고, 이어서 반응 시스템을 에틸 아세테이트(30 mL)로 희석시키고, 포화 중탄산나트륨(10 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(5 mL x 3)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜 3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)아제티딘-3-일]피롤리딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(16f)(210 mg, 수율: 77%)을 수득하였다.
단계 7:
5-[4-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피롤리딘-1-일]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 16)
Figure pct00493
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-[1-(4-피페리딜)아제티딘-3-일]피롤리딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(16f)(210 mg, 0.35 mmol)을 DMSO(20 mL) 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(96.7 mg, 0.35 mmol) 및 DIPEA(174.4 mg, 1.35 mmol)를 실온에서 첨가하고, 반응물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 물을 첨가하고, 층들을 분리하였다. 수성 상을 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하고, 유기 상을 합하고, 물(20 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 1 내지 20 : 1)로 분리하고 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 농도 내지 60% 농도의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 제조된 생성물을 알칼리화하고 농축시켜 5-[4-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피롤리딘-1-일]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 16)(58 mg, 수율: 32%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.38 (s, 1H), 7.75 - 7.50 (m, 4H), 7.42 - 7.35 (m, 2H), 7.256-7.25(m, 1H), 7.19 - 7.10 (m, 3H), 7.08-7.06 (m, 2H), 7.04 - 6.98 (m, 1H), 5.72 (s, 2H), 5.00-4.90(m, 2H), 4.67 (s, 2H), 4.38 - 4.18 (m, 1H), 3.86 - 3.74 (m, 2H), 3.47-3.42 (m, 2H), 3.13 - 2.98 (m, 6H), 2.90 - 2.64 (m, 6H), 2.45-2.43 (m, 1H), 2.37 - 2.32 (m, 2H), 2.19 - 2.10 (m, 5H), 2.05-2.03 (m, 2H), 1.81 - 1.77 (m, 2H), 0.98-0.90 (m, 2H).
LCMS m/z = 425.8 [M/2 +1]+.
실시예 17:
5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 17)
Figure pct00494
Figure pct00495
단계 1:
tert-부틸 3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(17a)
Figure pct00496
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638] 참조)(0.500 g, 1.29 mmol)을 5 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(0.266 g, 1.55 mmol) 및 빙초산(0.412 g, 6.86 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 65℃에서 3시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.548 g, 2.59 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 하룻밤 반응을 수행하였다. 반응 용액에 포화 중탄산나트륨 용액을 적가하여 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 이것을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(17a)(0.700 g, 수율: > 99%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 542.3 [M+1]+.
단계 2:
1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17b)
Figure pct00497
tert-부틸 3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(17a)(0.700 g, 1.29 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17b)(0.410 g, 수율: 72%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 442.2 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(17c)
Figure pct00498
1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17b)(0.200 g, 0.453 mmol)을 5 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(0.116 g, 0.680 mmol) 및 빙초산(0.0544 g, 0.906 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 65℃에서 3시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.192 g, 0.906 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 하룻밤 반응을 수행하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 반응 용액에 적가함으로써 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(17c)(0.150 g, 수율: 56%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 597.3 [M+1]+.
단계 4:
1-[1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17d)
Figure pct00499
tert-부틸 3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(17c)(0.140 g, 0.235 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17d)(0.100 g, 수율: 86%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 497.3 [M+1]+.
단계 5:
5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 17)
Figure pct00500
1-[1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17d)(0.100 g, 0.201 mmol)을 2 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.0667 g, 0.242 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(0.130 g, 1.01 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 90℃에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시켰으며, 이것에 10 mL의 물을 서서히 적가하고, 여과하였다. 여과 케이크를 20 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 이어서 5 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 17)(0.063 g, 수율: 42%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.99 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.72 - 7.57 (m, 3H), 7.45 - 7.32 (m, 2H), 7.21 - 7.11 (m, 3H), 7.10 - 7.04 (m, 2H), 6.78 (d, 1H), 6.52 (dd, 1H), 5.81 (brs, 2H), 4.92 (dd, 1H), 4.87 - 4.71 (m, 1H), 4.08 - 3.99 (m, 2H), 3.94 - 3.83 (m, 2H), 3.76 - 3.65 (m, 1H), 3.64 - 3.49 (m, 2H), 3.20 - 3.04 (m, 3H), 3.00 - 2.64 (m, 5H), 2.52 - 2.34 (m, 2H), 2.18 - 1.89 (m, 5H).
LCMS m/z = 377.3 [M/2 +1]+.
실시예 17-1:
5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]이소인돌린-1,3-디온(화합물 17-a)
5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-[(3S)2,6-디옥소-3-피페리딜]이소인돌린-1,3-디온(화합물 17-b)
Figure pct00501
Figure pct00502
단계 1: 화합물 17-a 및 화합물 17-b의 제조
고성능 액체 크로모토그래피에 의해 화합물 17로부터 화합물 17-a와 화합물 17-b를 분리하고 제조하였다. 제조 조건은 다음과 같았다:
기기 및 분취용 컬럼: Thar 200 분취용 SFC(SFC-7)를 사용하여 액체 상을 제조함, 분취용 컬럼 모델: ChiralCel OJ, 250 x 50 mm I.D., 10 μm.
제조 방법: 조 생성물을 메탄올/디클로로메탄으로 용해시켜 샘플 용액으로 제조하였다.
이동상 시스템: sCO2(초임계 CO2)/에탄올, 등용매 용리: sCO2/에탄올 = 55/45.
유량: 200 mL/분
화합물 17-a 및 화합물 17-b에 대한 분석 방법:
기기: Agilent HPLC1260
크로마토그래피 컬럼: Daicel CHIRALPAK IC
규격: 4.6 mm x 250 mm, 5 μm
이동상 A: 20 mM의 중탄산암모늄 용액(디에틸아민을 사용하여 pH를 9.0으로 조정함)
이동상 B: 아세토니트릴
컬럼 온도: 35℃
유량: 0.8 mL/분
파장: 264 nm
용리 프로그램: 이동상 A : B = 20 : 80, 50분 동안 등용리.
화합물 17-a의 체류 시간: 32.234분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.04 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.69 - 7.60 (m, 3H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.21 - 7.11 (m, 3H), 7.11 - 7.05 (m, 2H), 6.78 (d, 1H), 6.52 (dd, 1H), 5.63 (brs, 2H), 4.92 (dd, 1H), 4.85 - 4.72 (m, 1H), 4.09 - 3.98 (m, 2H), 3.93 - 3.82 (m, 2H), 3.74 - 3.64 (m, 1H), 3.61 - 3.50 (m, 2H), 3.16 - 3.01 (m, 3H), 2.99 - 2.64 (m, 5H), 2.52 - 2.34 (m, 2H), 2.17 - 1.95 (m, 5H).
화합물 17-b의 체류 시간: 36.797 min. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.37 (s, 1H), 7.68 - 7.57 (m, 3H), 7.43 - 7.33 (m, 2H), 7.20 - 7.10 (m, 3H), 7.10 - 7.04 (m, 2H), 6.78 (d, 1H), 6.52 (dd, 1H), 5.71 (brs, 2H), 4.92 (dd, 1H), 4.84 - 4.72 (m, 1H), 4.08 - 3.98 (m, 2H), 3.91 - 3.82 (m, 2H), 3.76 - 3.64 (m, 1H), 3.60 - 3.50 (m, 2H), 3.16 - 3.01 (m, 3H), 2.98 - 2.62 (m, 5H), 2.51 - 2.34 (m, 2H), 2.17 - 1.97 (m, 5H).
실시예 17-a
5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]이소인돌린-1,3-디온(화합물 17-a)
Figure pct00503
단계 1:
디메틸 4-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)프탈레이트(17e)
Figure pct00504
1-[1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17d)(83 g, 0.167 mol)을 400 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 디메틸 4-플루오로프탈레이트(40 g, 0.188 mol)(합성 방법에 대해서는 문헌[Beilstein J. Org. Chem. 2017, 13, 2659-2662] 참조) 및 DIPEA(43.17 g, 0.334 mol)를 첨가하고, 반응물을 85℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 4 L의 물을 첨가함으로써 황색 고체를 침전시켰으며, 이것을 흡인에 의해 여과하고 건조시켜 조 생성물 4-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)프탈레이트(17e)(120 g)를 수득하였다.
LC-MS m/z = 689.3 [M+1]+.
단계 2:
4-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)프탈산(17f)
Figure pct00505
상기 조 생성물 4-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)프탈레이트(17e)(120 g)를 400 mL의 1,4-디옥산 중에 용해시키고, 300 mL의 메탄올 및 200 mL의 5 mol/L의 수산화나트륨 용액을 첨가하고, 반응물을 75℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켜 대부분의 메탄올 및 1,4-디옥산을 제거하고, 잔부에 1 L의 물을 첨가하고, 1 L의 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 9 : 1의 혼합 용매로 추출하였다. 수성 상을 분리하고(아세트산을 사용하여 수성 상의 pH를 5.0으로 조정함), 이어서 1 L의 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 9 : 1의 혼합 용매로 추출하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 4-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)프탈산(17f)(93 g)을 수득하였다.
LCMS m/z = 661.3 [M+1]+.
단계 3:
5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]이소인돌린-1,3-디온(화합물 17-a)
Figure pct00506
상기 조 생성물 4-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)프탈산(17f)(40.0 g)을 200 mL N,N-디메틸포름아미드 중에 용해시키고, N-메틸이미다졸(7.20 g, 87.7 mmol)을 첨가하고, 이어서 테트라메틸클로로우레아 헥사플루오로포스페이트(20.0 g, 71.3 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 200 mL의 무수 메탄올을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 잔류물에 500 mL의 물을 첨가하고, 1시간 동안 슬러리화하고 감압 하에서 흡인에 의해 여과하였다. 여과 케이크를 100 mL의 물로 1회 세척하고, 수집하고 건조시켜 조 생성물(40 g)을 수득하였다. 조 생성물(28.0 g)을 175 mL의 N,N-디메틸포름아미드 중에 용해시키고, 디이소프로필에틸아민(8.03 g, 62.1 mmol)을 첨가하고, 이어서 HATU(18.9 g, 49.7 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, (R)-3-아미노피페리딘-2,6-디온 하이드로클로라이드(8.90 g, 54.1 mmol)(합성 방법에 대해서는 문헌[Heterocycles 2015, 91, 764-781] 참조) 및 디이소프로필에틸아민(8.03 g, 62.1 mmol)을 연속적으로 첨가하고, 실온에서 30분 동안 교반을 계속하였다. 반응 용액을 교반하면서 700 mL의 물에 서서히 적가하고, 감압 하에서 흡인에 의해 여과하였다. 여과 케이크를 50 mL의 물로 세척하고, 수집하고, 300 mL의 메탄올 및 디클로로메탄(v/v) = 1 : 9의 혼합 용매로 희석시키고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 350 mL의 디클로로메탄 및 디이소프로필에틸아민(8.03 g, 62.1 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 100 mL의 물 및 100 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 100 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 93 : 7)로 분리하고 정제하여 5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-[(3R)-2,6-디옥소-3-피페리딜]이소인돌린-1,3-디온(화합물 17-a)(16.0 g, 화합물 17d로부터 계산된 3-단계 수율: 42%, ee = 96%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.04 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.69 - 7.60 (m, 3H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.21 - 7.11 (m, 3H), 7.11 - 7.05 (m, 2H), 6.78 (d, 1H), 6.52 (dd, 1H), 5.63 (brs, 2H), 4.92 (dd, 1H), 4.85 - 4.72 (m, 1H), 4.09 - 3.98 (m, 2H), 3.93 - 3.82 (m, 2H), 3.74 - 3.64 (m, 1H), 3.61 - 3.50 (m, 2H), 3.16 - 3.01 (m, 3H), 2.99 - 2.64 (m, 5H), 2.52 - 2.34 (m, 2H), 2.17 - 1.95 (m, 5H).
LCMS m/z = 753.3 [M+1]+.
실시예 17-b
5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]이소인돌린-1,3-디온(화합물 17-b)
Figure pct00507
단계 1:
디메틸 4-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)프탈레이트(17e)
Figure pct00508
1-[1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17d)(83 g, 0.167 mol)을 400 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 디메틸 4-플루오로프탈레이트(40 g, 0.188 mol)(합성 방법에 대해서는 문헌[Beilstein J. Org. Chem. 2017, 13, 2659-2662] 참조) 및 DIPEA(43.17 g, 0.334 mol)를 첨가하고, 반응물을 85℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 4 L의 물을 첨가함으로써 황색 고체를 침전시켰으며, 이것을 흡인 여과하고 건조시켜 조 생성물 4-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)프탈레이트(17e)(120 g)를 수득하였다.
LC-MS m/z = 689.3 [M+1]+.
단계 2:
4-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)프탈산(17f)
Figure pct00509
상기 조 생성물 4-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)프탈레이트(17e)(120 g)를 400 mL의 1,4-디옥산 중에 용해시키고, 300 mL의 메탄올 및 200 mL의 5 mol/L의 수산화나트륨 용액을 첨가하고, 반응물을 75℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켜 대부분의 메탄올 및 1,4-디옥산을 제거하고, 잔부에 1 L의 물을 첨가하고, 1 L의 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 9 : 1의 혼합 용매로 추출하였다. 수성 상을 분리하고(아세트산을 사용하여 수성 상의 pH를 5.0으로 조정함), 이어서 1 L의 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 9 : 1의 혼합 용매로 추출하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 4-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)프탈산(17f)(93 g)을 수득하였다.
LCMS m/z = 661.3 [M+1]+.
단계 3:
5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]이소인돌린-1,3-디온(화합물 17-b)
Figure pct00510
상기 조 생성물 4-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)프탈산(17f)(40.0 g)을 200 mL N,N-디메틸포름아미드 중에 용해시키고, N-메틸이미다졸(7.20 g, 87.7 mmol)을 첨가하고, 이어서 테트라메틸클로로우레아 헥사플루오로포스페이트(20.0 g, 71.3 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 200 mL의 무수 메탄올을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 잔류물에 500 mL의 물을 첨가하고, 1시간 동안 슬러리화하고 감압 하에서 흡인에 의해 여과하였다. 여과 케이크를 100 mL의 물로 1회 세척하고, 수집하고 건조시켜 조 생성물(40 g)을 수득하였다. 조 생성물(40.0 g)을 200 mL의 N,N-디메틸포름아미드 중에 용해시키고, 디이소프로필에틸아민(11.5 g, 89.0 mmol)을 첨가하고, 이어서 HATU(27.0 g, 71.0 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, (S)-3-아미노피페리딘-2,6-디온 하이드로클로라이드(12.7 g, 77.2 mmol)(합성 방법에 대해서는 문헌[Heterocycles 2015, 91, 764-781] 참조) 및 디이소프로필에틸아민(11.5 g, 89.0 mmol)을 연속적으로 첨가하고, 실온에서 30분 동안 교반을 계속하였다. 반응 용액을 교반하면서 800 mL의 물에 서서히 적가하고, 감압 하에서 흡인에 의해 여과하였다. 여과 케이크를 100 mL의 물로 세척하고, 수집하고, 600 mL의 메탄올 및 디클로로메탄(v/v) = 1 : 9의 혼합 용매로 희석시키고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 400 mL의 디클로로메탄 및 디이소프로필에틸아민(11.5 g, 89.0 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 100 mL의 물 및 100 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 100 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 93 : 7)로 분리하고 정제하여 5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]이소인돌린-1,3-디온(화합물 17-b)(20.0 g, 화합물 17d로부터 계산된 3-단계 수율: 37%, ee = 93%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.37 (s, 1H), 7.68 - 7.57 (m, 3H), 7.43 - 7.33 (m, 2H), 7.20 - 7.10 (m, 3H), 7.10 - 7.04 (m, 2H), 6.78 (d, 1H), 6.52 (dd, 1H), 5.71 (brs, 2H), 4.92 (dd, 1H), 4.84 - 4.72 (m, 1H), 4.08 - 3.98 (m, 2H), 3.91 - 3.82 (m, 2H), 3.76 - 3.64 (m, 1H), 3.60 - 3.50 (m, 2H), 3.16 - 3.01 (m, 3H), 2.98 - 2.62 (m, 5H), 2.51 - 2.34 (m, 2H), 2.17 - 1.97 (m, 5H).
LCMS m/z = 753.3 [M+1]+.
실시예 18:
시스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 18)
Figure pct00511
단계 1:
시스-tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(18a)
Figure pct00512
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638] 참조)(1.5 g, 3.88 mmol)을 10 mL의 DMSO 및 50 mL의 DCE 중에 용해시키고, N-Boc-3-플루오로-4-피페리돈(2.1 g, 9.70 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(4.1 g, 19.40 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 용액에 80 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 적가하고, 혼합된 용액을 100 mL의 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 시스 tert-부틸-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1-카르복실레이트(18a)(980 mg, 수율: 43%)를 수득하였다.
LC-MS m/z = 588.3 [M+1]+.
단계 2:
시스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(18b)
Figure pct00513
시스-tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1-카르복실레이트(18a)(0.5 g, 0.85 mmol)를 50 mL의 DCM 중에 용해시키고, 10 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 시스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(18b)(0.60 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 488.5 [M+1]+.
단계 3:
시스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(18c)
Figure pct00514
시스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(18b)(540 mg)를 15 mL의 1,2-디클로로에탄 및 2 mL의 DMSO 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(564 mg, 3.30 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.4 g, 6.60 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 용액에 80 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 적가하고, 혼합된 용액을 50 mL의 DCM으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 시스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(18c)(290 mg)를 수득하였다.
LCMS m/z = 643.3 [M+1]+.
단계 4:
시스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(18d)
Figure pct00515
시스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(18c)(290 mg, 0.45 mmol)를 10 mL의 DCM 중에 용해시키고, 2 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 시스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(18d)(0.30 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 543.5 [M+1]+.
단계 5:
시스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 18)
Figure pct00516
시스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(18d)(0.3 g)를 8.5 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(250 mg, 0.90 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 10 mL의 물을 첨가하고, 50 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 시스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 18)(80 mg)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.05 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.71 - 7.61 (m, 3H), 7.47 - 7.39 (m, 2H), 7.22 - 7.08 (m, 5H), 6.82 - 6.78 (m, 1H), 6.66 (dd, 1H), 5.11 - 4.92 (m, 2H), 4.71 - 4.58 (m, 1H), 4.15 - 4.05 (m, 2H), 3.92 - 3.77 (m, 2H), 3.45 - 3.36 (m, 1H), 3.17 - 3.02 (m, 3H), 2.99 - 2.82 (m, 2H), 2.64 - 2.53 (m, 3H), 2.47 - 2.39 (m, 2H), 2.23 - 1.97 (m, 5H), 1.96 - 1.79 (m, 3H), 1.75 - 1.64 (m, 1H).
LCMS m/z = 799.3 [M+1]+.
실시예 18-1:
시스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 18-1)
Figure pct00517
화합물 18(50 mg)을 28%의 질량 분율의 진한 암모니아수(10 mL) 중에 용해시키고, 혼합된 용액을 DCM(12 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 28%의 질량 분율의 진한 암모니아수(12 mL x 3)로 세척하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물에 10 mL의 석유 에테르를 첨가하고, 0.5시간 동안 슬러리화하고, 슬러리를 여과하여 유리 염기 시스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 18-1)(35 mg)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.16 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.69 - 7.59 (m, 3H), 7.43 - 7.34 (m, 2H), 7.21 - 7.03 (m, 5H), 6.78 (d, 1H), 6.52 (dd, 1H), 5.72 (brs, 2H), 5.20 - 4.97 (m, 1H), 4.96 - 4.88 (m, 1H), 4.87 - 4.73 (m, 1H), 4.16 - 4.04 (m, 2H), 4.00 - 3.85 (m, 2H), 3.52 - 3.43 (m, 1H), 3.36 - 3.13 (m, 3H), 3.10 - 3.00 (m, 1H), 2.95 - 2.62 (m, 5H), 2.59 - 2.35 (m, 3H), 2.25 - 2.00 (m, 6H), 1.89 - 1.79 (m, 1H).
LCMS m/z = 799.3 [M+1]+.
실시예 19:
트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 19)
Figure pct00518
단계 1:
tert-부틸 3-플루오로-4-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(19b)
Figure pct00519
tert-부틸 3-플루오로-4-피페리돈-카르복실레이트(19a)(6.51 g, 30.0 mmol)를 80 mL의 무수 메탄올 중에 용해시키고, 붕수소화나트륨(2.28 g, 60.0 mmol)을 실온에서 일부씩 서서히 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 용액을 150 mL의 포화 중탄산나트륨 용액으로 켄칭하고, 100 mL의 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 2 : 1)로 분리하고 정제하여 시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물 tert-부틸 3-플루오로-4-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(19b)(5.7 g, 시스/트랜스 = 2.5 : 1, 수율: 87%)를 수득하였다.
LC-MS m/z = 220.1 [M+1]+.
단계 2:
트랜스-tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-카르복실레이트(19c)
Figure pct00520
시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물 tert-부틸 3-플루오로-4-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(19b)(시스/트랜스 = 2.5 : 1)(1.0 g, 4.56 mmol) 및 3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1.15 g, 3.80 mmol)을 40 mL의 THF 중에 용해시키고, 트리페닐포스핀(1.5 g, 5.72 mmol)을 첨가하였다. DIAD(1.15 g, 5.69 mmol)를 질소 분위기 하에서 서서히 적가하였다. 첨가의 완료 후에, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응의 완료 후에, 시스템에 50 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 100 mL의 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-카르복실레이트(19c)(0.8 g, 수율: 35%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 505.4 [M+1]+.
단계 3:
트랜스-1-(3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(19d)
Figure pct00521
트랜스-tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-카르복실레이트(19c)(800 mg, 1.59 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 트랜스-1-(3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(19d)(0.90 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 405.3 [M+1]+.
단계 4:
트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(19e)
Figure pct00522
트랜스-1-(3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(19d)(0.8 g)를 35 mL의 DCE 및 5 mL의 DMSO 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(542 mg, 3.17 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.68 g, 7.92 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 수용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 50 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(19e)(930 mg)를 수득하였다.
LCMS m/z = 560.5 [M+1]+.
단계 5:
트랜스-1-(1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(19f)
Figure pct00523
트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(19e)(500 mg, 0.89 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 트랜스-1-(1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(19f)(0.65 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 460.3 [M+1]+.
단계 6:
트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-카르복실레이트(19g)
Figure pct00524
트랜스-1-(1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(19f)(650 mg)를 25 mL의 DCE 및 2 mL의 DMSO 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(485 mg, 2.83 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.12 g, 5.28 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 시스템에 60 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 60 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-카르복실레이트(19g)(450 mg)를 수득하였다.
LCMS m/z = 615.6 [M+1]+.
단계 7:
트랜스-1-(1-([1,3'-바이아제티딘]-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(19h)
Figure pct00525
트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-카르복실레이트(19g)(400 mg, 0.65 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 4 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 트랜스-1-(1-([1,3'-바이아제티딘]-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(19h)(0.56 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 515.5 [M+1]+.
단계 8:
트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 19)
Figure pct00526
트랜스-1-(1-([1,3'-바이아제티딘]-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(19h)(0.5 g)를 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 3 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(352 mg, 1.28 mmol)을 첨가하고, 반응물을 외부조(external bath) 내에서 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 19)(120 mg)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.05 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.73 - 7.60 (m, 3H), 7.48 - 7.40 (m, 2H), 7.23 - 7.10 (m, 5H), 6.80 (d, 1H), 6.66 (dd, 1H), 5.25 - 5.00 (m, 2H), 4.88 - 4.75 (m, 1H), 4.12 - 4.00 (m, 2H), 3.89 - 3.78 (m, 2H), 3.75 - 3.62 (m, 1H), 3.54 - 3.39 (m, 2H), 3.28 - 2.96 (m, 4H), 2.95 - 2.77 (m, 2H), 2.64 - 2.53 (m, 2H), 2.30 - 2.08 (m, 3H), 2.07 - 1.92 (m, 2H).
LCMS m/z = 771.3 [M+1]+.
실시예 19-1:
트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 19-1)
Figure pct00527
화합물 19(95 mg)을 28%의 질량 분율의 진한 암모니아수(17 mL) 중에 용해시키고, 혼합된 용액을 DCM(20 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 28%의 질량 분율의 진한 암모니아수(20 mL x 3)로 세척하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물에 17 mL의 석유 에테르를 첨가하고, 0.5시간 동안 슬러리화하고, 슬러리를 여과하여 유리 염기 트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 19-1)(80 mg)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.30 (brs, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.69 - 7.61 (m, 3H), 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.21 - 7.04 (m, 5H), 6.79 (d, 1H), 6.53 (dd, 1H), 5.73 (brs, 2H), 5.36 - 5.13 (m, 1H), 4.97 - 4.83 (m, 2H), 4.11 - 4.00 (m, 2H), 3.94 - 3.84 (m, 2H), 3.76 - 3.56 (m, 3H), 3.30 - 3.05 (m, 4H), 2.93 - 2.64 (m, 4H), 2.54 - 2.39 (m, 1H), 2.23 - 2.02 (m, 4H).
LCMS m/z = 771.3 [M+1]+.
실시예 20:
트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 20)
Figure pct00528
단계 1:
트랜스-tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(20a)
Figure pct00529
트랜스-1-(3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(19d)(520 mg)를 15 mL의 DCE 및 2 mL의 DMSO 중에 용해시키고, N-Boc-4-피페리돈(1.05 g, 5.27 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.12 g, 5.28 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 시스템에 50 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 50 mL의 DCM으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(20a)(500 mg)를 수득하였다.
LCMS m/z = 588.4 [M+1]+.
단계 2:
트랜스-1-(3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(20b)
Figure pct00530
트랜스-tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(20a)(500 mg, 0.85 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 트랜스-1-(3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(20b)(0.60 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 488.3 [M+1]+.
단계 3:
트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(20c)
Figure pct00531
트랜스-1-(3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(20b)(600 mg)를 35 mL의 DCE 및 2 mL의 DMSO 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(727 mg, 4.25 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(900 mg, 4.25 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 시스템에 80 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 50 mL의 DCM으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(20c)(550 mg)를 수득하였다.
LCMS m/z = 643.4 [M+1]+.
단계 4:
트랜스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(20d)
Figure pct00532
트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(20c)(500 mg, 0.78 mmol)를 25 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 트랜스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(20d)(0.55 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 543.2 [M+1]+.
단계 5:
트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 20)
Figure pct00533
트랜스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(20d)(0.5 g)를 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 3 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(310 mg, 1.12 mmol)을 첨가하고, 반응물을 외부조 내에서 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1 내지 8 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 20)(120 mg)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.05 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.72 - 7.61 (m, 3H), 7.47 - 7.40 (m, 2H), 7.22 - 7.10 (m, 5H), 6.79 (d, 1H), 6.65 (dd, 1H), 5.19 - 4.94 (m, 2H), 4.83 - 4.70 (m, 1H), 4.15 - 4.05 (m, 2H), 3.89 - 3.76 (m, 2H), 3.41 - 3.34 (m, 1H), 3.00 - 2.81 (m, 4H), 2.63 - 2.52 (m, 2H), 2.49 - 2.32 (m, 4H), 2.24 - 2.10 (m, 1H), 2.07 - 1.94 (m, 2H), 1.94 - 1.82 (m, 2H), 1.82 - 1.70 (m, 2H), 1.57 - 1.41 (m, 2H).
LCMS m/z = 799.3 [M+1]+.
실시예 20-1:
트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 20-1)
Figure pct00534
화합물 20(90 mg)을 28%의 질량 분율의 진한 암모니아수(17 mL) 중에 용해시키고, 혼합된 용액을 DCM(20 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 28%의 질량 분율의 진한 암모니아수(20 mL x 3)로 세척하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물에 17 mL의 석유 에테르를 첨가하고, 0.5시간 동안 슬러리화하고, 슬러리를 여과하여 유리 염기 트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 20-1)(70 mg)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.86 (brs, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.71 - 7.60 (m, 3H), 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.21 - 7.11 (m, 3H), 7.11 - 7.04 (m, 2H), 6.79 (d, 1H), 6.53 (dd, 1H), 5.78 (brs, 2H), 5.33 - 5.10 (m, 1H), 4.97 - 4.81 (m, 2H), 4.16 - 4.06 (m, 2H), 4.00 - 3.86 (m, 2H), 3.48 - 3.34 (m, 2H), 3.08 - 2.94 (m, 3H), 2.93 - 2.65 (m, 3H), 2.59 - 2.36 (m, 4H), 2.17 - 1.97 (m, 4H), 1.96 - 1.85 (m, 2H), 1.78 - 1.62 (m, 2H).
LCMS m/z = 799.3 [M+1]+.
실시예 21:
5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-6-플루오로이소인돌린-1,3-디온(화합물 21)
Figure pct00535
단계 1:
2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5,6-디플루오로이소인돌린-1,3-디온(21b)
Figure pct00536
4,5-디플루오로프탈산(21a)(500 mg, 2.47 mmol)을 25 mL의 아세토니트릴 중에 용해시키고, 3-아미노피페리딘-2,6-디온 하이드로클로라이드(0.41 g, 2.49 mmol) 및 CDI(0.8 g, 4.94 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 외부조 내에서 가열 환류시키고, 4시간 동안 반응시켰다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 2 : 1)로 분리하고 정제하여 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5,6-디플루오로이소인돌린-1,3-디온(21b)(0.4 g, 수율: 55.0%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 295.2 [M+1]+.
단계 2:
5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-6-플루오로이소인돌린-1,3-디온(화합물 21)
Figure pct00537
1-[1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17d)(0.25 g, 0.50 mmol)을 10 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 1 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5,6-디플루오로이소인돌린-1,3-디온(21b)(180 mg, 0.61 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 외부조 내에서 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가함으로써 켄칭하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-6-플루오로이소인돌린-1,3-디온(화합물 21)(100 mg, 수율: 26%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.07 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.70 - 7.63 (m, 2H), 7.58 (d, 1H), 7.48 - 7.40 (m, 2H), 7.22 - 7.09 (m, 5H), 6.92 (d, 1H), 5.06 (dd, 1H), 4.74 - 4.61 (m, 1H), 4.24 - 4.14 (m, 2H), 4.00 - 3.88 (m, 2H), 3.66 - 3.55 (m, 1H), 3.49 - 3.39 (m, 2H), 3.08 - 2.78 (m, 6H), 2.64 - 2.52 (m, 2H), 2.29 - 2.13 (m, 2H), 2.09 - 1.96 (m, 3H), 1.96 - 1.85 (m, 2H).
LCMS m/z = 771.3 [M+1]+.
실시예 22:
4-[3-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 22)
Figure pct00538
1-(1'-(아제티딘-3-일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(8b)(0.12 g, 0.23 mmol)을 3 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 0.2 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(90 mg, 0.30 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 외부조 내에서 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 4-[3-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 22)(58 mg, 수율: 32%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.41 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.63 (d, 2H), 7.48 - 7.35 (m, 3H), 7.22 - 7.11 (m, 4H), 7.10 - 7.05 (m, 2H), 6.60 (d, 1H), 5.80 (brs, 2H), 4.92 (dd, 1H), 4.87 - 4.68 (m, 1H), 4.44 - 4.31 (m, 2H), 4.11 - 4.01 (m, 2H), 3.30 - 3.08 (m, 3H), 3.02 - 2.93 (m, 2H), 2.92 - 2.68 (m, 4H), 2.63 - 2.39 (m, 4H), 2.14 - 2.09 (m, 3H), 1.99 - 1.89 (m, 4H), 1.77 - 1.62 (m, 2H).
LCMS m/z = 781.3 [M+1]+.
실시예 23:
5-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 23)
Figure pct00539
단계 1:
tert-부틸 4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(23a)
Figure pct00540
1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(11b)(0.12 g, 0.27 mmol)를 5 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(0.5 g, 3.0 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.6 g, 3.0 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 적가하고, 혼합된 용액을 30 mL의 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(23a)(0.15 g, 수율: 88%)를 수득하였다.
LC-MS m/z = 625.3 [M+1]+.
단계 2:
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-(4-피페리딜)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(23b)
Figure pct00541
tert-부틸 4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(23a)(0.15 g, 0.24 mmol)를 5 mL의 DCM 중에 용해시키고, 1.5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 적가하여 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 혼합된 용액을 30 mL의 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-(4-피페리딜)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(23b)(0.12 g, 수율: 95%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 525.3 [M+1]+.
단계 3:
5-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 23)
Figure pct00542
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-(4-피페리딜)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(23b)(0.12 g, 0.23 mmol)을 3 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 0.4 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(90 mg, 0.30 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 외부조 내에서 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 5-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 23)(6 mg, 수율: 4%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.64 - 7.58 (m, 2H), 7.41 - 7.34 (m, 2H), 7.27 - 7.24 (m, 1H), 7.19 - 7.10 (m, 3H), 7.09 - 7.01 (m, 3H), 5.80 (brs, 2H), 4.92 (dd, 1H), 4.86 - 4.75 (m, 1H), 4.22 - 4.04 (m, 2H), 3.98 - 3.88 (m, 2H), 3.54 - 3.34 (m, 3H), 3.03 - 2.68 (m, 8H), 2.49 - 2.33 (m, 3H), 2.28 - 2.06 (m, 5H), 2.00 - 1.93 (m, 3H).
LCMS m/z = 781.3 [M+1]+.
실시예 24:
5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피롤리딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 24)
Figure pct00543
1-[1-[1-(아제티딘-3-일)피롤리딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(16d)(0.1 g, 0.20 mmol)을 3 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 0.2 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(75 mg, 0.27 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 외부조 내에서 90℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피롤리딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 24)(30 mg, 수율: 20%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.75 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.67 - 7.62 (m, 3H), 7.43 - 7.36 (m, 2H), 7.21 - 7.12 (m, 3H), 7.11 - 7.07 (m, 2H), 6.79 (d, 1H), 6.52 (dd, 1H), 5.74 (brs, 2H), 4.93 (dd, 1H), 4.88 - 4.76 (m, 1H), 4.14 - 4.06 (m, 2H), 3.97 - 3.89 (m, 2H), 3.62 - 3.53 (m, 1H), 3.28 - 3.16 (m, 1H), 3.15 - 3.00 (m, 2H), 2.97 - 2.70 (m, 6H), 2.67 - 2.58 (m, 1H), 2.57 - 2.39 (m, 4H), 2.35 - 2.23 (m, 2H), 2.16 - 2.09 (m, 3H).
LCMS m/z = 767.3 [M+1]+.
실시예 25:
3-[5-[3-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-옥소-이소인돌린-2-일]피페리딘-2,6-디온(화합물 25)
Figure pct00544
1-(1'-(아제티딘-3-일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(8b)(0.635 g, 1.21 mmol)을 12 mL의 1,4-디옥산 중에 용해시키고, 3-(5-브로모-1-옥소-이소인돌린-2-일) 피페리딘-2,6-디온(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2018, 61, 492-503] 참조)(0.587 g, 1.82 mmol) 및 탄산세슘(1.17 g, 3.63 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 질소 대체를 3회 수행하고, 메탄설폰산(2-디사이클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시-1,1'-바이페닐)(2-아미노-1,1'-바이페닐-2-일)팔라듐(II)(RuPhos-Pd-G3)(0.300 g, 0.363 mmol)를 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 질소 대체를 3회 수행하고, 반응물을 밀봉 튜브 내에서 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 20 mL의 디클로로메탄 및 10 mL의 물을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 20 mL의 디클로로메탄으로 추가로 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 3-[5-[3-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]-1-옥소-이소인돌린-2-일]피페리딘-2,6-디온(화합물 25)(0.045 g, 수율 5%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.92 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.69 - 7.63 (m, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.47 - 7.40 (m, 2H), 7.22 - 7.08 (m, 5H), 6.54 - 6.46 (m, 2H), 5.03 (dd, 1H), 4.80 - 4.62 (m, 1H), 4.25 (dd, 2H), 4.05 - 3.95 (m, 2H), 3.74 - 3.63 (m, 2H), 3.36 - 3.28 (m, 1H), 3.20 - 2.97 (m, 2H), 2.96 - 2.83 (m, 3H), 2.64 - 2.09 (m, 7H), 2.05 - 1.74 (m, 7H), 1.65 - 1.43 (m, 2H).
LCMS m/z = 767.4 [M+1]+.
실시예 26:
3-[5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-1-옥소-이소인돌린-2-일]피페리딘-2,6-디온(화합물 26)
Figure pct00545
1-[1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17d)(0.600 g, 1.21 mmol)을 12 mL의 1,4-디옥산 중에 용해시키고, 3-(5-브로모-1-옥소-이소인돌린-2-일) 피페리딘-2,6-디온(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2018, 61, 492-503] 참조)(0.586 g, 1.81 mmol) 및 탄산세슘(1.17 g, 3.63 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 질소 대체를 3회 수행하고, 메탄설폰산(2-디사이클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시-1,1'-바이페닐)(2-아미노-1,1'-바이페닐-2-일)팔라듐(II)(RuPhos-Pd-G3)(0.300 g, 0.363 mmol)를 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 질소 대체를 3회 수행하고, 혼합물을 밀봉 튜브 내에서 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 20 mL의 디클로로메탄 및 10 mL의 물을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 20 mL의 디클로로메탄으로 추가로 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 3-[5-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-1-옥소-이소인돌린-2-일]피페리딘-2,6-디온(화합물 26)(0.053 g, 수율: 6%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.91 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.70 - 7.63 (m, 2H), 7.52 - 7.40 (m, 3H), 7.23 - 7.08 (m, 5H), 6.55 - 6.44 (m, 2H), 5.03 (dd, 1H), 4.72 - 4.61 (m, 1H), 4.24 (dd, 2H), 3.99 - 3.87 (m, 2H), 3.74 - 3.58 (m, 3H), 3.48 - 3.36 (m, 2H), 3.04 - 2.78 (m, 6H), 2.64 - 2.52 (m, 1H), 2.41 - 2.28 (m, 1H), 2.25 - 2.14 (m, 2H), 2.07 - 1.83 (m, 5H).
LCMS m/z = 739.3 [M+1]+.
실시예 27:
4-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 27)
Figure pct00546
1-[1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17d)(0.100 g, 0.201 mmol)을 2 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.0667 g, 0.242 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(0.130 g, 1.01 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 90℃에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시켰으며, 이것에 10 mL의 물을 서서히 적가하고, 여과하였다. 여과 케이크를 20 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 이어서 5 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 4-[3-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 27)(0.063 g, 수율: 42%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.05 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.69 - 7.63 (m, 2H), 7.56 (dd, 1H), 7.47 - 7.40 (m, 2H), 7.23 - 7.08 (m, 6H), 6.79 (d, 1H), 5.05 (dd, 1H), 4.72 - 4.62 (m, 1H), 4.25 - 4.14 (m, 2H), 4.00 - 3.90 (m, 2H), 3.57 - 3.48 (m, 1H), 3.47 - 3.39 (m, 2H), 3.04 - 2.78 (m, 6H), 2.63 - 2.45 (m, 2H), 2.27 - 2.13 (m, 2H), 2.07 - 1.83 (m, 5H).
LCMS m/z = 753.3 [M+1]+.
실시예 28:
5-[3-[3-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 28)
Figure pct00547
Figure pct00548
단계 1:
tert-부틸 3-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(28b)
Figure pct00549
(R)-3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(28a)(1.00 g, 2.59 mmol)을 10 mL의 클로로포름 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(0.665 g, 3.88 mmol) 및 빙초산(0.311 g, 5.18 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 70℃에서 3시간 동안 반응을 수행하고, 실온까지 냉각시키고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.10 g, 5.18 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응의 완료 후에, 포화 중탄산나트륨 용액을 적가함으로써 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(28b)(0.600 g, 수율: 43%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 542.2 [M+1]+.
단계 2:
1-[(3R)-1-(아제티딘-3-일)-3-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(28c)
Figure pct00550
tert-부틸 3-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(28b)(0.600 g, 1.11 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 10 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[(3R)-1-(아제티딘-3-일)-3-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(28c)(0.450 g, 수율: 92%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 442.2 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 3-[3-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(28d)
Figure pct00551
1-[(3R)-1-(아제티딘-3-일)-3-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(28c)(0.300 g, 0.680 mmol)을 10 mL의 클로로포름 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(0.174 g, 1.02 mmol) 및 빙초산(0.0816 g, 1.36 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 70℃에서 3시간 동안 반응을 수행하고, 실온까지 냉각시키고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.288 g, 1.36 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응의 완료 후에, 포화 중탄산나트륨 용액을 적가함으로써 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[3-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(28d)(0.090 g, 수율: 22%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 597.3 [M+1]+.
단계 4:
1-[(3R)-1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-3-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(28e)
Figure pct00552
tert-부틸 3-[3-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(28d)(0.090 g, 0.15 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[(3R)-1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-3-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(28e)(0.075 g)을 수득하였다.
LCMS m/z = 497.3 [M+1]+.
단계 5:
5-[3-[3-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 28)
Figure pct00553
1-[(3R)-1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-3-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(28e)(0.075 g, 0.201 mmol)을 2 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.050 g, 0.066 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(0.098 g, 0.76 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 90℃에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시켰으며, 이것에 10 mL의 물을 서서히 적가하고, 여과하였다. 여과 케이크를 20 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 이어서 5 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 9 : 1)로 분리하고 정제하여 5-[3-[3-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 28)(0.050 g, 수율: 44%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.04 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.68 - 7.59 (m, 3H), 7.47 - 7.39 (m, 2H), 7.22 - 7.09 (m, 5H), 6.77 (d, 1H), 6.64 (dd, 1H), 5.04 (dd, 1H), 4.83 - 4.72 (m, 1H), 4.06 - 3.98 (m, 2H), 3.82 - 3.73 (m, 2H), 3.66 - 3.56 (m, 1H), 3.45 - 3.32 (m, 2H), 3.06 - 2.72 (m, 6H), 2.63 - 2.45 (m, 2H), 2.37 - 2.27 (m, 1H), 2.07 - 1.95 (m, 3H), 1.90 - 1.78 (m, 2H), 1.72 - 1.58 (m, 1H).
LCMS m/z = 753.4 [M+1]+.
실시예 29:
5-(3-(3-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 29)
Figure pct00554
Figure pct00555
단계 1:
tert-부틸 3-하이드록시피롤리딘-1-카르복실레이트(29b)
Figure pct00556
tert-부틸 3-옥소 피롤리딘-1-카르복실레이트(29a)(5.56 g, 30.0 mmol)를 80 mL의 무수 메탄올 중에 용해시키고, 붕수소화나트륨(2.28 g, 60.0 mmol)을 일부씩 서서히 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 반응물을 150 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 첨가함으로써 켄칭하고, 200 mL의 DCM으로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 2 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-하이드록시피롤리딘-1-카르복실레이트(29b)(4.7 g, 수율: 84%)를 수득하였다.
LC-MS m/z = 188.1 [M+1]+.
단계 2:
tert-부틸 3-((메틸설포닐)옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트(29c)
Figure pct00557
tert-부틸 3-하이드록시피롤리딘-1-카르복실레이트(29b)(1.0 g, 5.34 mmol)를 30 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, DIPEA(2.1 g, 16.25 mmol)를 첨가하고, 이어서 MsCl(0.74 g, 6.41 mmol)을 실온에서 서서히 적가하였다. 첨가의 완료 후에, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 40 mL의 물을 첨가하고, 생성된 용액을 100 mL의 DCM으로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 5 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-((메틸설포닐)옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트(29c)(1.4 g, 수율: 98%)를 수득하였다.
LC-MS m/z = 266.2 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 3-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일) 피롤리딘-1-카르복실레이트(29d)
Figure pct00558
tert-부틸 3-((메틸설포닐)옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트(29c)(1.0 g, 3.77 mmol) 및 3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(0.75 g, 2.48 mmol)을 40 mL의 DMF 중에 용해시키고, 탄산칼륨(1.24 g, 8.99 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(29d)(0.91 g, 수율: 78%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 473.4 [M+1]+.
단계 4:
3-(4-페녹시페닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(29e)
Figure pct00559
tert-부틸 3-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-카르복실레이트(29d)(910 mg, 1.87 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 3-(4-페녹시페닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(29e)(1.1 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 373.3 [M+1]+.
단계 5:
tert-부틸 3-(3-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(29f)
Figure pct00560
3-(4-페녹시페닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(29e)(420 mg)를 15 mL의 DCE 및 2 mL의 DMSO 중에 용해시키고, Boc-아제티디논(253 mg, 1.48 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(628 mg, 2.96 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 시스템에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 생성된 용액을 100 mL의 DCM으로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-(3-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(29f)(320 mg)를 수득하였다.
LCMS m/z = 528.5 [M+1]+.
단계 6:
1-(1-(아제티딘-3-일)피롤리딘-3-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(29g)
Figure pct00561
tert-부틸 3-(3-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(29f)(320 mg, 0.61 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 1-(1-(아제티딘-3-일)피롤리딘-3-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(29g)(380 mg)를 수득하였다.
LCMS m/z = 428.4 [M+1]+.
단계 7:
tert-부틸 3-(3-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-카르복실레이트(29h)
Figure pct00562
1-(1-(아제티딘-3-일)피롤리딘-3-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(29g)(380 mg)를 15 mL의 DCE 및 2 mL의 DMSO 중에 용해시키고, Boc-아제티디논(210 mg, 1.22 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(515 mg, 2.44 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 시스템에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 생성된 용액을 100 mL의 DCM으로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-(3-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-카르복실레이트(29h)(300 mg)를 수득하였다.
LCMS m/z = 583.6 [M+1]+.
단계 8:
1-(1-([1,3'-바이아제티딘]-3-일)피롤리딘-3-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(29i)
Figure pct00563
tert-부틸 3-(3-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-카르복실레이트(29h)(300 mg, 0.51 mmol)를 10 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 1-(1-([1,3'-바이아제티딘]-3-일)피롤리딘-3-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(29i)(0.38 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 483.4 [M+1]+.
단계 9:
5-(3-(3-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 29)
Figure pct00564
1-(1-([1,3'-바이아제티딘]-3-일)피롤리딘-3-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(29i)(0.38 g)를 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 3 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(211 mg, 0.77 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1 내지 5 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-(3-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 29)(130 mg)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.06 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.78 - 7.57 (m, 3H), 7.49 - 7.35 (m, 2H), 7.27 - 7.05 (m, 5H), 6.78 (d, 1H), 6.64 (dd, 1H), 5.49 - 5.31 (m, 1H), 5.05 (dd, 1H), 4.14 - 3.97 (m, 2H), 3.87 - 3.76 (m, 2H), 3.71 - 3.61 (m, 1H), 3.53-3.39 (m, 3H), 3.23 - 3.06 (m, 3H), 2.96 - 2.70 (m, 4H), 2.65 - 2.45 (m, 2H), 2.41 - 2.24 (m, 2H), 2.07 - 1.95 (m, 1H).
LCMS m/z = 739.3 [M+1]+.
실시예 30:
(7S)-7-[1-[1-[1-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드 트리플루오로아세테이트(화합물 30)
Figure pct00565
단계 1:
tert-부틸 4-[4-[(7S)-3-카르바모일-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(30b)
Figure pct00566
(S)-2-(4-페녹시페닐)-7-(피페리딘-4-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(30a)(95% ee)(합성 방법에 대해서는 WO 2018033853 참조)(0.2 g, 0.48 mmol) 및 tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(0.57 g, 2.87 mmol)를 20 mL의 클로로포름 중에 용해시키고, 아세트산(0.14 g, 2.4 mmol)을 첨가하고, 이어서 1 g의 4
Figure pct00567
분자체 및 1 g의 무수 황산나트륨을 첨가하였다. 혼합물을 65℃까지 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.61 g, 2.87 mmol)을 첨가하고, 이 온도에서 하룻밤 교반을 계속하였다. 반응 용액을 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 50 : 1 내지 7 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 4-[4-[(7S)-3-카르바모일-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(30b)(0.2 g, 수율: 69%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 601.3 [M+1]+.
단계 2:
(7S)-2-(4-페녹시페닐)-7-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(30c)
Figure pct00568
tert-부틸 4-[4-[(7S)-3-카르바모일-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일]-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(30b)(0.2 g, 0.33 mmol)를 5 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에서 반응 용액으로부터 제거하고, 20 mL의 디클로로메탄 및 2 mL의 에탄올의 혼합된 용액을 첨가하였다. 생성된 용액을 50 mL의 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 수성 상을 20 mL의 디클로로메탄 및 2 mL의 에탄올의 혼합된 용액으로 추가로 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 (7S)-2-(4-페녹시페닐)-7-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(30c)(0.16 g, 수율: 96%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 501.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 3-[4-[4-[(7S)-3-카르바모일-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로 [1,5-a]피리미딘-7-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(30d)
Figure pct00569
(7S)-2-(4-페녹시페닐)-7-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(30c)(0.14 g, 0.28 mmol) 및 tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(0.24 g, 1.4 mmol)를 20 mL의 클로로포름 중에 용해시키고, 아세트산(0.08 g, 1.4 mmol)을 첨가하고, 이어서 1 g의 4
Figure pct00570
분자체 및 1 g의 무수 황산나트륨을 첨가하고, 혼합물을 65℃까지 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.3 g, 1.4 mmol)을 첨가하고, 이 온도에서 하룻밤 교반을 계속하였다. 반응 용액을 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 50 : 1 내지 7 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[4-[4-[(7S)-3-카르바모일-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(30d)(0.1 g, 수율: 55%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 656.4 [M+1]+.
단계 4:
(7S)-7-[1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드 트리플루오로아세테이트(30e)
Figure pct00571
tert-부틸 3-[4-[4-[(7S)-3-카르바모일-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일]-1-피페리딜]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(30d)(0.1 g, 0.15 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 2 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 용매를 감압 하에서 반응 용액으로부터 제거하여 (7S)-7-[1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드 트리플루오로아세테이트(30e)(0.12 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 556.3 [M+1]+.
단계 5:
(7S)-7-[1-[1-[1-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드 트리플루오로아세테이트(화합물 30)
Figure pct00572
(7S)-7-[1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드 트리플루오로아세테이트(30e)(0.12 g)를 3 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.04 g, 0.16 mmol) 및 트리에틸아민(0.07 g, 0.67 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 120℃까지 가온하고, 4시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 10 mL의 물 및 20 mL의 에틸 아세테이트를 첨가하고, 추출하고, 이어서 용매를 감압 하에서 유기 층으로부터 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 50 : 1 내지 10 : 1)로 분리하고 정제하여 (7S)-7-[1-[1-[1-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드 트리플루오로아세테이트(화합물 30)(45 mg)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.05 (s, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.50 (d, 2H), 7.45 - 7.38 (m, 2H), 7.21 - 7.14 (m, 1H), 7.12 - 7.02 (m, 4H), 6.78 (d, 1H), 6.72 - 6.61 (m, 2H), 5.05 (dd, 1H), 4.16 - 3.96 (m, 3H), 3.87 - 3.73 (m, 2H), 3.35 - 3.28 (m, 1H), 2.97 - 2.78 (m, 3H), 2.58 - 2.52 (m, 11H), 2.10 - 1.73 (m, 8H), 1.72 - 1.45 (m, 4H).
LCMS m/z = 812.4 [M+1]+.
실시예 31:
(7S)-7-[1-[1-[1-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]아제티딘-3-일]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드 트리플루오로아세테이트(화합물 31)
Figure pct00573
Figure pct00574
단계 1:
tert-부틸 3-[4-[(7S)-3-카르바모일-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(31a)
Figure pct00575
(S)-2-(4-페녹시페닐)-7-(피페리딘-4-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(30a)(95% ee)(합성 방법에 대해서는 WO 2018033853 참조)(0.2 g, 0.48 mmol) 및 tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(0.41 g, 2.40 mmol)를 20 mL의 클로로포름 중에 용해시키고, 아세트산(0.14 g, 2.4 mmol)을 첨가하고, 이어서 1 g의 4
Figure pct00576
분자체 및 1 g의 무수 황산나트륨을 첨가하였다. 혼합물을 65℃까지 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.61 g, 2.87 mmol)을 첨가하고, 이 온도에서 하룻밤 교반을 계속하였다. 반응 용액을 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 50 : 1 내지 7 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[4-[(7S)-3-카르바모일-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(31a)(0.25 g, 수율: 91%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 573.4 [M+1]+.
단계 2:
(7S)-7-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(31b)
Figure pct00577
tert-부틸 3-[4-[(7S)-3-카르바모일-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(31a)(0.25 g, 0.44 mmol)를 5 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에서 반응 용액으로부터 제거하고, 20 mL의 디클로로메탄 및 2 mL의 에탄올의 혼합된 용액을 첨가하였다. 생성된 용액을 50 mL의 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 수성 상을 20 mL의 디클로로메탄 및 2 mL의 에탄올의 혼합된 용액으로 추가로 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 (7S)-7-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(31b)(0.19 g, 수율: 92%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 473.4 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 3-[3-[4-[(7S)-3-카르바모일-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(31c)
Figure pct00578
(7S)-7-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(31b)(0.19 g, 0.40 mmol) 및 tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(0.34 g, 2.01 mmol)를 20 mL의 클로로포름 중에 용해시키고, 아세트산(0.12 g, 2.01 mmol)을 첨가하고, 이어서 1 g의 4 Å 분자체 및 1 g의 무수 황산나트륨을 첨가하고, 혼합물을 65℃까지 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.43 g, 2.01 mmol)을 첨가하고, 이 온도에서 하룻밤 교반을 계속하였다. 반응 용액을 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 50 : 1 내지 7 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[3-[4-[(7S)-3-카르바모일-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(31c)(0.14 g, 수율: 46%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 628.3 [M+1]+.
단계 4:
(7S)-7-[1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(31d)
Figure pct00579
tert-부틸 3-[3-[4-[(7S)-3-카르바모일-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(31c)(0.14 g, 0.22 mmol)를 5 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에서 반응 용액으로부터 제거하고, 20 mL의 디클로로메탄 및 2 mL의 에탄올의 혼합된 용액을 첨가하였다. 생성된 용액을 50 mL의 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 수성 상을 20 mL의 디클로로메탄 및 2 mL의 에탄올의 혼합된 용액으로 추가로 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 (7S)-7-[1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(31d)(0.10 g, 수율: 85%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 528.3 [M+1]+.
단계 5:
(7S)-7-[1-[1-[1-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]아제티딘-3-일]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드 트리플루오로아세테이트(화합물 31)
Figure pct00580
(7S)-7-[1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(31d)(0.03 g, 0.057 mmol)를 3 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.019 g, 0.068 mmol) 및 트리에틸아민(0.022 g, 0.17 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 120℃까지 가온하고, 4시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 10 mL의 물을 첨가하고, 20 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 용매를 감압 하에서 유기 층으로부터 제거하고, 잔류물을 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 내지 60%의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 반응 시스템을 동결건조시켜 (7S)-7-[1-[1-[1-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]아제티딘-3-일]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드 트리플루오로아세테이트(화합물 31)(15 mg)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.05 (s, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.53 - 7.47 (m, 2H), 7.45 - 7.38 (m, 2H), 7.21 - 7.14 (m, 1H), 7.13 - 6.98 (m, 4H), 6.96 - 6.44 (m, 3H), 5.06 (dd, 1H), 4.22 - 3.60 (m, 11H), 3.45 - 3.26 (m, 4H), 2.97 - 2.64 (m, 3H), 2.63 - 2.45 (m, 2H), 2.34 - 2.15 (m, 1H), 2.12 - 1.50 (m, 7H).
LCMS m/z = 784.3 [M+1]+.
실시예 32:
5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-6-플루오로이소인돌린-1,3-디온(화합물 32)
Figure pct00581
1-(1'-(아제티딘-3-일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(8b)(290 mg, 0.55 mmol)을 10 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 1 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5,6-디플루오로이소인돌린-1,3-디온(21b)(150 mg, 0.51 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 외부조 내에서 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-6-플루오로이소인돌린-1,3-디온(화합물 32)(150 mg, 수율: 34%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.06 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.70 - 7.63 (m, 2H), 7.60 (d, 1H), 7.48 - 7.39 (m, 2H), 7.23 - 7.09 (m, 5H), 6.92 (d, 1H), 5.07 (dd, 1H), 4.69 - 4.57 (m, 1H), 4.28 - 4.18 (m, 2H), 4.02 - 3.90 (m, 2H), 3.30 - 3.21 (m, 1H), 3.07 - 2.96 (m, 2H), 2.94 - 2.80 (m, 3H), 2.69 - 2.52 (m, 2H), 2.41 - 2.27 (m, 3H), 2.24 - 2.08 (m, 2H), 2.07 - 1.96 (m, 1H), 1.96 - 1.70 (m, 6H), 1.56 - 1.39 (m, 2H).
LCMS m/z = 799.3 [M+1]+.
실시예 33:
4-[8-아미노-3-[(2S)-1-[1-[1-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피롤리딘-2-일]이미다조[1,5-a]피라진-1-일]-N-(2-피리딜)벤즈아미드(화합물 33)
Figure pct00582
Figure pct00583
단계 1:
tert-부틸 4-[(2S)-2-[8-아미노-1-[4-(2-피리딜카르바모일)페닐]이미다조[1,5-a]피라진-3-일]피롤리딘-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(33b)
Figure pct00584
(S)-4-(8-아미노-3-(피롤리딘-2-일)이미다조[1,5-a]피라진-1-일)-N-(피리딘-2-일)벤즈아미드(33a)(0.500 g, 1.25 mmol)를 5 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, N-tert-부톡시카르보닐-4-피페리돈(0.374 g, 1.88 mmol) 및 빙초산(0.150 g, 2.50 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 65℃에서 3시간 동안 반응을 수행하고, 실온까지 냉각시키고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.531 g, 2.50 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 하룻밤 반응을 수행하였다. 반응 시스템에 포화 중탄산나트륨 용액을 적가하여 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 이것을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 4-[(2S)-2-[8-아미노-1-[4-(2-피리딜카르바모일)페닐]이미다조[1,5-a]피라진-3-일]피롤리딘-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(33b)(0.340 g, 수율: 47%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 583.3 [M+1]+.
단계 2:
4-[8-아미노-3-[(2S)-1-(4-피페리딜)피롤리딘-2-일]이미다조[1,5-a]피라진-1-일]-N-(2-피리딜)벤즈아미드(33c)
Figure pct00585
tert-부틸 4-[(2S)-2-[8-아미노-1-[4-(2-피리딜카르바모일)페닐]이미다조[1,5-a]피라진-3-일]피롤리딘-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(33b)(0.340 g, 0.583 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 디옥산 하이드로클로라이드 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 19 : 0 내지 1 : 1)로 분리하고 정제하여 4-[8-아미노-3-[(2S)-1-(4-피페리딜)피롤리딘-2-일]이미다조[1,5-a]피라진-1-일]-N-(2-피리딜)벤즈아미드(33c)(0.206 g, 수율: 73%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 483.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 3-[4-[(2S)-2-[8-아미노-1-[4-(2-피리딜카르바모일)페닐]이미다조[1,5-a]피라진-3-일]피롤리딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(33d)
Figure pct00586
4-[8-아미노-3-[(2S)-1-(4-피페리딜)피롤리딘-2-일]이미다조[1,5-a]피라진-1-일]-N-(2-피리딜)벤즈아미드(33c)(0.200 g, 0.414 mmol)를 5 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, 2 mL의 디메틸 설폭사이드를 첨가하고, 이어서 tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(0.106 g, 0.622 mmol) 및 빙초산(0.0498 g, 0.829 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 65℃에서 3시간 동안 반응을 수행하고, 실온까지 냉각시키고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.176 g, 0.829 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 시스템에 포화 중탄산나트륨 용액을 적가하여 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 이것을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[4-[(2S)-2-[8-아미노-1-[4-(2-피리딜카르바모일)페닐]이미다조[1,5-a]피라진-3-일]피롤리딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(33d)(0.090 g, 수율: 34%)를 수득하였다.
단계 4:
4-[8-아미노-3-[(2S)-1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]피롤리딘-2-일]이미다조[1,5-a]피라진-1-일]-N-(2-피리딜)벤즈아미드(33e)
Figure pct00587
tert-부틸 3-[4-[(2S)-2-[8-아미노-1-[4-(2-피리딜카르바모일)페닐]이미다조[1,5-a]피라진-3-일]피롤리딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(33d)(0.090 g, 0.14 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 디옥산 하이드로클로라이드 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 4-[8-아미노-3-[(2S)-1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]피롤리딘-2-일]이미다조[1,5-a]피라진-1-일]-N-(2-피리딜)벤즈아미드(33e)(0.076 g, 수율: > 99%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 538.3 [M+1]+.
단계 5:
4-[8-아미노-3-[(2S)-1-[1-[1-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피롤리딘-2-일]이미다조[1,5-a]피라진-1-일]-N-(2-피리딜)벤즈아미드(화합물 33)
Figure pct00588
4-[8-아미노-3-[(2S)-1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]피롤리딘-2-일]이미다조[1,5-a]피라진-1-일]-N-(2-피리딜)벤즈아미드(33e)(0.076 g, 0.141 mmol)를 2 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.0468 g, 0.170 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(0.0913 g, 0.707 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 90℃에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시켰으며, 이것에 10 mL의 물을 서서히 적가하고, 여과하였다. 여과 케이크를 20 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 이어서 5 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 4-[8-아미노-3-[(2S)-1-[1-[1-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]아제티딘-3-일]-4-피페리딜]피롤리딘-2-일]이미다조[1,5-a]피라진-1-일]-N-(2-피리딜)벤즈아미드(화합물 33)(0.055 g, 수율: 49%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 - 8.37 (m, 2H), 8.20 - 7.98 (m, 3H), 7.83 - 7.75 (m, 1H), 7.73 - 7.56 (m, 2H), 7.51 - 7.38 (m, 1H), 7.29 - 7.21 (m, 1H), 7.16 - 7.05 (m, 2H), 6.80 - 6.71 (m, 1H), 6.48 - 6.40 (m, 1H), 5.50 (brs, 2H), 4.99 - 4.89 (m, 1H), 4.53 - 4.41 (m, 1H), 4.13 - 4.02 (m, 1H), 3.99 - 3.83 (m, 1H), 3.82 - 3.32 (m, 4H), 2.97 - 2.58 (m, 6H), 2.56 - 2.30 (m, 2H), 2.25 - 1.55 (m, 11H).
LCMS m/z = 794.3 [M+1]+.
실시예 34:
5-[1-[4-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥실]아제티딘-3-일]옥시-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 34-a)
5-[1-[4-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥실]아제티딘-3-일]옥시-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 34-b)
Figure pct00589
Figure pct00590
단계 1:
1-[(3R)-1-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-3-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(34a)
Figure pct00591
(R)-3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(28a)(1.00 g, 2.59 mmol)을 10 mL의 클로로포름 중에 용해시키고, 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-온(0.606 g, 3.88 mmol) 및 빙초산(0.311 g, 5.18 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 70℃에서 3시간 동안 반응을 수행하고, 이어서 실온까지 냉각시키고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.10 g, 5.18 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 시스템에 포화 중탄산나트륨 용액을 적가하여 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 이것을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 1-[(3R)-1-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-3-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(34a)(0.530 g, 수율: 39%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 527.3 [M+1]+.
단계 2:
4-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥사논(34b)
Figure pct00592
1-[(3R)-1-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-3-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(34a)(0.530 g, 1.01 mmol)을 5 mL의 테트라하이드로푸란 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 염산 수용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 농축시키고, 이어서 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 20 mL의 디클로로메탄으로 추가로 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 4-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥사논(34b)(0.480 g, 수율: 99%)을 수득하였다.
단계 3:
tert-부틸 3-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]옥시아제티딘-1-카르복실레이트(34d)
Figure pct00593
2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-하이드록실 이소인돌린-1,3-디온(34c)(합성 방법에 대해서는 US20180099940 참조)(1.00 g, 3.65 mmol)을 10 mL의 DMF 중에 용해시키고, tert-부틸 3-((메틸설포닐)옥시)아제티딘-1-카르복실레이트(1.01 g, 4.01 mmol) 및 탄산세슘(2.38 g, 7.29 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 마이크로파 하에서 110℃에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 20 mL의 물 및 50 mL의 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 20 mL의 에틸 아세테이트로 추가로 추출하고, 유기 층을 합하였다. 유기 상을 20 mL의 포화 염화나트륨으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 얻어진 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 4 : 1 내지 1 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]옥시아제티딘-1-카르복실레이트(34d)(0.670 g, 수율: 43%)를 수득하였다.
단계 4:
5-(아제티딘-3-일옥시)-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 하이드로클로라이드(34e)
Figure pct00594
tert-부틸 3-[2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일]옥시아제티딘-1-카르복실레이트(34d)(0.670 g, 1.56 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 10 mL의 2 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 여과하고, 여과 케이크를 수집하고, 건조시켜 5-(아제티딘-3-일옥시)-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 하이드로클로라이드(34e)(0.484 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 330.1 [M+1]+.
단계 5:
5-[1-[4-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥실]아제티딘-3-일]옥시-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 34-a)
5-[1-[4-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥실]아제티딘-3-일]옥시-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 34-b)
Figure pct00595
5-(아제티딘-3-일옥시)-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 하이드로클로라이드(34e)(0.066 g)를 2 mL의 무수 메탄올 중에 용해시키고, 중탄산나트륨 고체(0.020 g, 0.24 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 여과하고, 여과 케이크를 1 mL의 메탄올로 세척하고, 여과액을 합하고 농축시키고, 이어서 잔류물을 2 mL의 클로로포름 중에 용해시켰다. 0.5 mL의 DMSO, 빙초산(0.022 g, 0.36 mmol) 및 4-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥사논(34b)(0.13 g, 0.27 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 70℃에서 5시간 동안 교반하고, 실온까지 냉각시켰다. 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.077 g, 0.36 mmol)을 첨가하고, 실온에서 하룻밤 반응을 수행하였다. 반응 시스템에 포화 중탄산나트륨 용액을 적가하여 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 10 mL의 디클로로메탄으로 추가로 1회 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 6 : 1)로 분리하고 정제하여 2개의 순수한 생성물, 5-[1-[4-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥실]아제티딘-3-일]옥시-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 34-a)(23 mg) 및 5-[1-[4-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥실]아제티딘-3-일]옥시-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 34-b)(25 mg)을 수득하였다.
화합물 34-a: (전개 용매: 디클로로메탄/메탄올 = 10 : 1, Rf 값 = 0.45)
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.79 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.67 - 7.61 (m, 2H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.21 - 7.12 (m, 4H), 7.11 - 7.05 (m, 3H), 5.64 (brs, 2H), 5.54 - 5.37 (m, 1H), 4.95 (dd, 1H), 4.88 - 4.79 (m, 1H), 3.89 - 3.77 (m, 2H), 3.54 - 3.40 (m, 1H), 3.36 - 3.15 (m, 2H), 3.12 - 3.01 (m, 2H), 2.95 - 2.65 (m, 5H), 2.46 - 2.40 (m, 1H), 2.28 - 2.09 (m, 4H), 2.06 - 1.95 (m, 3H), 1.92 - 1.72 (m, 5H), 1.49 - 1.44 (m, 1H).
LCMS m/z = 796.3 [M+1]+.
화합물 34-b: (전개 용매: 디클로로메탄/메탄올 = 10 : 1, Rf 값 = 0.35)
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.77 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.66 - 7.60 (m, 2H), 7.42 - 7.36 (m, 2H), 7.20 - 7.05 (m, 7H), 5.60 (brs, 2H), 5.32 - 5.16 (m, 1H), 4.99 - 4.88 (m, 2H), 3.99 - 3.87 (m, 2H), 3.42 - 3.00 (m, 5H), 2.94 - 2.62 (m, 5H), 2.58 - 2.46 (m, 1H), 2.27 - 2.06 (m, 8H), 1.98 - 1.88 (m, 2H), 1.53 - 1.44 (m, 1H), 1.20 - 1.11 (m, 2H).
LCMS m/z = 796.4 [M+1]+.
실시예 35
5-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피라졸-1-일]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 35)
Figure pct00596
Figure pct00597
단계 1:
tert-부틸 4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(35a)
Figure pct00598
tert-부틸 4-(4-요오도피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트(0.500 g, 1.33 mmol)를 2 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, 3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015, 58, 9625-9638] 참조)(0.615 g, 1.59 mmol), L-프롤린(0.0610 g, 0.530 mmol) 및 탄산칼륨(0.550 g, 3.98 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 질소 대체를 3회 수행하고, 요오드화제1구리(0.0505 g, 0.265 mmol)를 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 혼합물을 100℃까지 가열하고, 5시간 동안 반응시켰다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 5 mL의 물 및 10 mL의 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 10 mL의 에틸 아세테이트로 추가로 추출하고, 유기 층을 합하였다. 유기 상을 10 mL의 포화 염화나트륨으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 얻어진 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(35a)(0.0730 g, 수율: 9%)를 수득하였다.
단계 2:
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-(4-피페리딜)피라졸-4-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(35b)
Figure pct00599
tert-부틸 4-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피라졸-1-일]피페리딘-1-카르복실레이트(35a)(0.0730 g, 0.115 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 농축시키고, 이어서 조 생성물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-(4-피페리딜)피라졸-4-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(35b)(0.0615g, 수율: > 99%)을 수득하였다.
단계 3:
5-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피라졸-1-일]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 35)
Figure pct00600
3-(4-페녹시페닐)-1-[1-[1-(4-피페리딜)피라졸-4-일]-4-피페리딜]피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(35b)(0.0600 g, 0.112 mmol)을 2 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.0402 g, 0.146 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(0.0724 g, 0.560 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 10 mL의 물을 첨가하고, 여과하였다. 여과 케이크를 20 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 이어서 5 mL의 포화 염화나트륨으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 얻어진 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 92 : 8)로 분리하고 정제하여 5-[4-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]피라졸-1-일]-1-피페리딜]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 35)(0.0350 g, 수율: 40%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.73 - 7.69 (m, 1H), 7.68 - 7.60 (m, 2H), 7.43 - 7.36 (m, 2H), 7.33 (d, 1H), 7.29 - 7.26 (m, 2H), 7.21 - 7.05 (m, 6H), 6.15 (brs, 2H), 4.99 - 4.83 (m, 2H), 4.36 - 4.28 (m, 1H), 4.12 - 4.02 (m, 2H), 3.58 - 3.49 (m, 2H), 3.23 - 3.12 (m, 2H), 2.95 - 2.67 (m, 5H), 2.63 - 2.50 (m, 2H), 2.30 - 2.21 (m, 2H), 2.18 - 2.05 (m, 5H).
LCMS m/z = 792.3 [M+1]+.
실시예 36
5-[1-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥실]아제티딘-3-일]옥시-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 36-a)
5-[1-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥실]아제티딘-3-일]옥시-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 36-b)
Figure pct00601
Figure pct00602
단계 1:
1-[1-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(36a)
Figure pct00603
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015 , 58, 9625-9638] 참조)(1.00 g, 2.59 mmol)을 5 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-온(0.606 g, 3.88 mmol) 및 빙초산(0.311 g, 5.18 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 65℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 실온까지 냉각시키고, 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.10 g, 5.18 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액에 포화 중탄산나트륨 용액을 적가하여 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 이것을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 19 : 1)로 분리하고 정제하여 1-[1-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(36a)(0.800 g, 수율: 59%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 527.3 [M+1]+.
단계 2:
4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥사논(36b)
Figure pct00604
1-[1-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(36a)(0.800 g, 1.52 mmol)을 10 mL의 테트라하이드로푸란 중에 용해시키고, 10 mL의 4 N 염산 수용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 농축시키고, 잔류물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 수성 상을 20 mL의 디클로로메탄으로 추가로 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 얻어진 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 19 : 1 내지 9 : 1)로 분리하고 정제하여 4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥사논(36b)(0.600 g, 수율: 82%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 483.3 [M+1]+.
단계 3:
5-[1-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥실]아제티딘-3-일]옥시-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 36-a)
5-[1-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥실]아제티딘-3-일]옥시-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 36-b)
Figure pct00605
5-(아제티딘-3-일옥시)-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 하이드로클로라이드(34e)(0.056 g, 0.15 mmol)를 2 mL의 무수 메탄올 중에 용해시키고, 중탄산나트륨 고체(0.017 g, 0.20 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 여과하고, 여과 케이크를 1 mL의 메탄올로 세척하고, 여과액을 합하고 농축시키고, 이어서 잔류물을 2 mL의 클로로포름 중에 용해시켰다. 0.5 mL의 DMSO, 빙초산(0.018 g, 0.30 mmol) 및 4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥사논(36b)(0.11 g, 0.23 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 70℃에서 5시간 동안 교반하고, 실온까지 냉각시켰다. 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.064 g, 0.30 mmol)을 첨가하고, 실온에서 하룻밤 반응을 수행하였다. 반응 시스템에 포화 중탄산나트륨 용액을 적가하여 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 10 mL의 디클로로메탄으로 추가로 1회 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 6 : 1)로 분리하고 정제하여 순수한 생성물 5-[1-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥실]아제티딘-3-일]옥시-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 36-a)(0.020 g) 및 또 다른 이성질체 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 분취용 HPLC(기기 및 분취용 컬럼: Glison GX-281을 사용하여 액체 상을 제조함; 분취용 컬럼 모델: Sunfire C18, 5 μm, 내경 x 길이 = 30 mm x 150 mm)에 통과시켰다. 제조 방법: 조 생성물을 메탄올 및 디메틸 설폭사이드로 용해시키고, 0.45 μm 필터막으로 여과하여 샘플 용액으로 제조하였다. 이동상 시스템: 아세토니트릴/물(0.1% TFA를 함유함). 구배 용리 방법: 5% 농도 내지 60% 농도의 아세토니트릴에 의한 구배 용리(용리 시간: 15분), 반응 시스템을 동결건조시켜 순수한 생성물 5-[1-[4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]사이클로헥실]아제티딘-3-일]옥시-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 36-b)(7 mg)를 수득하였다.
화합물 36-a: (전개 용매: 디클로로메탄/메탄올 = 10 : 1, Rf 값 = 0.45)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.09 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.89 - 7.83 (m, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.47 - 7.41 (m, 2H), 7.33 - 7.28 (m, 2H), 7.23 - 7.10 (m, 5H), 5.16 - 5.00 (m, 3H), 3.87 - 3.75 (m, 2H), 3.58 - 3.39 (m, 4H), 3.22 - 3.05 (m, 3H), 2.95 - 2.84 (m, 1H), 2.68 - 2.53 (m, 3H), 2.46 - 2.40 (m, 1H), 2.26 - 2.14 (m, 2H), 2.09 - 1.95 (m, 2H), 1.84 - 1.68 (m, 5H), 1.49 - 1.37 (m, 3H).
LCMS m/z = 796.3 [M+1]+.
화합물 36-b: (전개 용매: 디클로로메탄/메탄올 = 10 : 1, Rf 값 = 0.35)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.11 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.74 - 7.61 (m, 2H), 7.50 - 7.32 (m, 4H), 7.26 - 7.09 (m, 5H), 5.38 - 5.29 (m, 1H), 5.18 - 5.05 (m, 2H), 4.78 - 4.63 (m, 2H), 4.43 - 4.24 (m, 2H), 3.66 - 3.56 (m, 2H), 3.28 - 3.21 (m, 3H), 2.95 - 2.84 (m, 1H), 2.68 - 2.54 (m, 2H), 2.29 - 1.94 (m, 8H), 1.60 - 1.45 (m, 2H), 1.36 - 1.22 (m, 4H).
LCMS m/z = 796.2 [M+1]+.
실시예 37
5-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]사이클로헥속시]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 37)
Figure pct00606
Figure pct00607
단계 1:
1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-올(37b)
Figure pct00608
1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-온(37a)(1.00 g, 6.40 mmol)을 10 mL의 무수 메탄올 중에 용해시키고, 붕수소화나트륨(0.484 g, 12.8 mmol)을 서서히 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 20분 동안 반응을 수행하였다. 반응 시스템에 20 mL의 포화 염화암모늄 수용액을 서서히 적가하고, 생성된 용액을 디클로로메탄(30 mL x 2)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-올(37b)(0.800 g, 수율: 79%)을 수득하였다.
단계 2:
1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일 메탄설포네이트(37c)
Figure pct00609
1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-올(37b)(0.800 g, 5.06 mmol)을 10 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 트리에틸아민(1.28 g, 12.6 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 빙조 내에서 0℃까지 냉각시키고, 이어서 메탄설포닐 클로라이드(1.16 g, 10.1 mmol)를 서서히 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 혼합물을 실온까지 서서히 가온하고, 2시간 동안 반응시켰다. 반응 시스템에 20 mL의 포화 중탄산나트륨 용액 및 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에테르 (v/v) = 1 : 4 내지 3 : 7)로 분리하고 정제하여 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일 메탄설포네이트(37c)(0.640 g, 수율: 54%)를 수득하였다.
단계 3:
5-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일옥시)-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(37d)
Figure pct00610
2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-하이드록실 이소인돌린-1,3-디온(34c)(합성 방법에 대해서는 US20180099940 참조)(0.0500 g, 0.182 mmol)을 2 mL의 DMF 중에 용해시키고, 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일 메탄설포네이트(37c)(0.0474 g, 0.201 mmol) 및 탄산세슘(0.119 g, 0.365 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 마이크로파 하에서 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 20 mL의 물 및 50 mL의 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 20 mL의 에틸 아세테이트로 추가로 추출하고, 유기 층을 합하였다. 유기 상을 20 mL의 포화 염화나트륨으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에테르 (v/v) = 1 : 4 내지 1 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일옥시)-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(37d)(0.0240 g, 수율: 32%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 415.1 [M+1]+.
단계 4:
2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-5-(4-옥소사이클로헥속시)이소인돌린-1,3-디온(37e)
Figure pct00611
5-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일옥시)-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(37d)(0.024 g, 0.058 mmol)을 5 mL의 테트라하이드로푸란 중에 용해시키고, 5 mL의 4 N 염산 수용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 농축시키고, 조 생성물에 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 9 내지 10으로 조정하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 층을 20 mL의 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1로 추가로 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-5-(4-옥소사이클로헥속시)이소인돌린-1,3-디온(37e)(0.021 g, 수율: > 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 371.1 [M+1]+.
단계 5:
5-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]사이클로헥속시]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 37)
Figure pct00612
1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17b)(0.025 g, 0.057 mmol)을 2 mL의 클로로포름 중에 용해시키고, 빙초산(0.0068 g, 0.11 mmol) 및 2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)-5-(4-옥소사이클로헥속시)이소인돌린-1,3-디온(37e)(0.021 g, 0.057 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 70℃에서 5시간 동안 교반하고, 실온까지 냉각시켰다. 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.024 g, 0.11 mmol)을 첨가하고, 실온에서 하룻밤 반응을 수행하였다. 반응 용액에 포화 중탄산나트륨 용액을 적가하여 pH를 9 내지 10으로 조정하고, 20 mL의 디클로로메탄을 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 상을 10 mL의 디클로로메탄으로 추가로 추출하고, 유기 층을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 6 : 1)로 분리하고 정제하여 5-[4-[3-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]아제티딘-1-일]사이클로헥속시]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 37)(0.020 g, 수율: 44%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.09 (s, 1H), 8.26 - 8.20 (m, 1H), 7.86 - 7.77 (m, 1H), 7.69 - 7.63 (m, 2H), 7.50 - 7.39 (m, 3H), 7.38 - 7.32 (m, 1H), 7.23 - 7.08 (m, 5H), 5.15 - 5.07 (m, 1H), 4.81 - 4.59 (m, 2H), 3.60 - 3.39 (m, 3H), 2.95 - 2.81 (m, 4H), 2.64 - 2.53 (m, 2H), 2.26 - 2.11 (m, 3H), 2.10 - 1.73 (m, 9H), 1.70 - 1.36 (m, 5H).
LCMS m/z = 796.3 [M+1]+.
실시예 38
5-[3-[3-[(3S,4R)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 38)
Figure pct00613
Figure pct00614
단계 1:
tert-부틸 (3S,4S)-3-플루오로-4-메틸설포닐옥시-피페리딘-1-카르복실레이트(38b)
Figure pct00615
tert-부틸 (3S,4S)-3-플루오로-4-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(38a)(2.0 g, 9.13 mmol)를 30 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, DIPEA(4.48 g, 34.66 mmol)를 첨가하고, 이어서 메탄설포닐 클로라이드(1.6 g, 13.97 mmol)를 서서히 적가하였다. 첨가의 완료 후에, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 40 mL의 물로 켄칭하고, 100 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 5 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3S,4S)-3-플루오로-4-메틸설포닐옥시-피페리딘-1-카르복실레이트(38b)(2.65 g, 수율: 98%)를 수득하였다.
단계 2:
tert-부틸 (3S,4R)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(38c)
Figure pct00616
tert-부틸 (3S,4S)-3-플루오로-4-메틸설포닐옥시-피페리딘-1-카르복실레이트(38b)(2.45 g, 8.25 mmol) 및 3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1.0 g, 3.30 mmol)을 20 mL의 DMF 중에 용해시키고, 탄산세슘(2.14 g, 6.6 mmol)을 첨가하고, 반응물을 100℃에서 7시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온까지 냉각시키고, 반응 시스템에 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3S,4R)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(38c)(0.9 g, 수율: 54%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 505.3 [M+1]+.
단계 3:
1-[(3S,4R)-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(38d)
Figure pct00617
tert-부틸 (3S,4R)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(38c)(0.9 g, 1.79 mmol)를 10 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 60 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 100 mL의 디클로로메탄으로 3회 추출하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[(3S,4R)-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(38d)(0.7 g, 수율: 97%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 405.2 [M+1]+.
단계 4:
tert-부틸 3-[(3S,4R)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(38e)
Figure pct00618
1-[(3S,4R)-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(38d)(0.7 g, 1.73 mmol)을 35 Ml의 DCE 및 5 mL의 DMSO 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(542 mg, 3.17 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.68 g, 7.93 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 50 mL의 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[(3S,4R)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(38e)(0.88 g, 수율: 91%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 560.5 [M+1]+.
단계 5:
1-((3S,4R)-1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(38f)
Figure pct00619
tert-부틸 3-[(3S,4R)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(38e)(880 mg, 1.57 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 50 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 50 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-((3S,4R)-1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸[3,4-d]피리미딘-4-아민(38f)(0.65 g, 수율: 90%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 460.3 [M+1]+.
단계 6:
tert-부틸 3-[3-[(3S,4R)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(38g)
Figure pct00620
1-((3S,4R)-1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸[3,4-d]피리미딘-4-아민(38f)(650 mg, 1.42 mmol)을 25 mL의 DCE 및 2 mL의 DMSO 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(485 mg, 2.84 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.12 g, 5.28 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 시스템에 60 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 60 mL의 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[3-[(3S,4R)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)]피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(38g)(0.46 g, 수율: 53%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 615.6 [M+1]+.
단계 7:
1-[(3S,4R)-1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(38h)
Figure pct00621
tert-부틸 3-[3-[(3S,4R)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)]피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(38g)(400 mg, 0.65 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 4 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 30 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[(3S,4R)-1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(38h)(0.28 g, 수율: 84%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 515.5 [M+1]+.
단계 8:
5-[3-[3-[(3S,4R)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 38)
Figure pct00622
1-[(3S,4R)-1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(38h)(0.28 g, 0.54 mmol)을 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 3 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(300 mg, 1.09 mmol)을 첨가하고, 반응물을 외부조 내에서 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 5-[3-[3-[(3S,4R)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 38)(0.126 g, 수율: 30%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.69 - 7.61 (m, 3H), 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.21 -7.05 (m, 5H), 6.79 (d, 1H), 6.53 (dd, 1H), 5.68 (brs, 2H), 5.20 - 5.01 (m, 1H), 4.99 - 4.82 (m, 2H), 4.10 - 4.02 (m, 2H), 3.96 - 3.87 (m, 2H), 3.80 - 3.66 (m, 1H), 3.66 - 3.56 (m, 2H), 3.32 -2.97 (m, 6H), 2.92 - 2.65 (m, 3H), 2.49 - 2.29 (m, 1H), 2.29 - 2.19 (m, 1H), 2.17 - 2.07 (m, 2H).
LCMS m/z = 771.3 [M+1]+.
실시예 39:
5-(3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 39)
Figure pct00623
단계 1:
tert-부틸 (3R,4S)-3-플루오로-4-((메틸설포닐)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트(39b)
Figure pct00624
tert-부틸 (3R,4S)-3-플루오로-4-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(39a)(2.0 g, 9.13 mmol)를 30 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, DIPEA(2.76 g, 21.35 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃까지 냉각시키고, 메탄설포닐 클로라이드(1.25 g, 10.91 mmol)를 서서히 적가하였다. 첨가의 완료 후에, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 반응물을 40 mL의 물을 첨가함으로써 켄칭하고, 50 mL의 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 3 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3R,4S)-3-플루오로-4-((메틸설포닐)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트(39b)(2.7 g, 수율: > 99%)를 수득하였다.
단계 2:
tert-부틸 (3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-카르복실레이트(39c)
Figure pct00625
tert-부틸 (3R,4S)-3-플루오로-4-((메틸설포닐)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트(39b)(2.20 g, 7.41 mmol) 및 3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1.0 g, 3.30 mmol)을 30 mL의 DMF 중에 용해시키고, 탄산세슘(3.23 g, 9.91 mmol)을 첨가하고, 반응물을 100℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 이것에 50 mL의 물을 첨가하고, 50 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 50 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-카르복실레이트(39c)(900 mg, 수율: 54%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 505.3 [M+1]+.
단계 3:
1-((3R,4R)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(39d)
Figure pct00626
tert-부틸 (3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-카르복실레이트(39c)(900 mg, 1.79 mmol)를 15 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 10 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 50 mL의 디클로로메탄으로 추출하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-((3R,4R)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(39d)(670 mg, 수율: 93%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 405.3 [M+1]+.
단계 4:
tert-부틸 3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(39e)
Figure pct00627
1-((3R,4R)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(39d)(670 mg, 1.66 mmol)을 35 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(566 mg, 3.31 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.4 g, 6.61 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 30 mL의 디클로로메탄으로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(39e)(860 mg, 수율: 93%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 560.3 [M+1]+.
단계 5:
1-((3R,4R)-1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(39f)
Figure pct00628
tert-부틸 3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(39e)(810 mg, 1.45 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 N 수산화나트륨 수용액으로 용해시키고, 30 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 1-((3R,4R)-1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(39f)(0.63 g, 수율: 95%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 460.2 [M+1]+.
단계 6:
tert-부틸 3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-카르복실레이트(39g)
Figure pct00629
1-((3R,4R)-1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(39f)(580 mg, 1.26 mmol)을 30 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(432 mg, 2.53 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.07 g, 5.05 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 시스템에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 30 mL의 디클로로메탄으로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-카르복실레이트(39g)(600 mg, 수율: 77%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 615.3 [M+1]+.
단계 7:
1-((3R,4R)-1-([1,3'-바이아제티딘]-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(39h)
Figure pct00630
tert-부틸 3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-카르복실레이트(39g)(550 mg, 0.896 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 4 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 30 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 1-((3R,4R)-1-([1,3'-바이아제티딘]-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(39h)(0.43 g, 수율: 93%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 515.2 [M+1]+.
단계 8:
5-(3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 39)
Figure pct00631
1-((3R,4R)-1-([1,3'-바이아제티딘]-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(39h)(300 mg, 0.584 mmol)을 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(274 mg, 0.993 mmol)을 첨가하고, 반응물을 외부조 내에서 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 39)(300 mg, 수율: 67%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.61 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.69 - 7.61 (m, 3H), 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.20 - 7.05 (m, 5H), 6.79 (d, 1H), 6.53 (dd, 1H), 5.80 (brs, 2H), 5.35 - 5.14 (m, 1H), 4.97 - 4.83 (m, 2H), 4.09 - 4.01 (m, 2H), 3.93 - 3.85 (m, 2H), 3.75 - 3.55 (m, 3H), 3.29 - 3.05 (m, 4H), 2.92 - 2.64 (m, 4H), 2.53 - 2.39 (m, 1H), 2.22 - 2.05 (m, 4H).
LCMS m/z = 771.3 [M+1]+.
실시예 40:
5-(3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 40)
Figure pct00632
단계 1:
tert-부틸 (3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(40a)
Figure pct00633
1-((3R,4R)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(39d)(800 mg, 1.98 mmol)을 35 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(787 mg, 3.95 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.68 g, 7.93 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 30 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(40a)(970 mg, 수율: 83%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 588.3 [M+1]+.
단계 2:
1-((3R,4R)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(40b)
Figure pct00634
tert-부틸 (3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(40a)(960 mg, 1.64 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 30 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-((3R,4R)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(40b)(0.79 g, 수율: 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 488.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(40c)
Figure pct00635
1-((3R,4R)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(40b)(540 mg, 1.11 mmol)을 30 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(380 mg, 2.22 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(940 mg, 4.44 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 시스템에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 30 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(40c)(630 mg, 수율: 88%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 643.4 [M+1]+.
단계 4:
1-((3R,4R)-1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로 [3,4-d]피리미딘-4-아민(40d)
Figure pct00636
tert-부틸 3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(40c)(600 mg, 0.93 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 30 mL의 디클로로메탄으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-((3R,4R)-1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(40d)(0.47 g, 수율: 93%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 543.3 [M+1]+.
단계 5:
5-(3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 40)
Figure pct00637
1-((3R,4R)-1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(40d)(350 mg, 0.65 mmol)을 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(267 mg, 0.97 mmol)을 첨가하고, 반응물을 외부조 내에서 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-((3R,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 40)(380 mg, 수율: 74%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.76 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.69 - 7.61 (m, 3H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.20 - 7.11 (m, 3H), 7.11 - 7.05 (m, 2H), 6.79 (d, 1H), 6.52 (dd, 1H), 5.83 (brs, 2H), 5.29 - 5.10 (m, 1H), 4.97 - 4.80 (m, 2H), 4.12 - 4.06 (m, 2H), 3.95 - 3.85 (m, 2H), 3.45 - 3.31 (m, 2H), 3.06 - 2.92 (m, 3H), 2.91 - 2.68 (m, 3H), 2.56 - 2.35 (m, 4H), 2.16 - 1.93 (m, 4H), 1.92 - 1.82 (m, 2H), 1.74 - 1.58 (m, 2H).
LCMS m/z = 799.3 [M+1]+.
실시예 41:
5-(3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 41)
Figure pct00638
단계 1:
tert-부틸 (3R,4R)-3-플루오로-4-((메틸설포닐)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트(41b)
Figure pct00639
tert-부틸 (3R,4R)-3-플루오로-4-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(41a)(3.0 g, 13.70 mmol)를 80 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 트리에틸아민(4.15 g, 41.09 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0℃까지 냉각시키고, 이어서 메탄설포닐 클로라이드(1.88 g, 16.41 mmol)를 서서히 적가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 용액을 40 mL의 물로 켄칭하고, 100 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 3 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3R,4R)-3-플루오로-4-((메틸설포닐)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트(41b)(4.1 g, 수율: > 99%)를 수득하였다.
단계 2:
tert-부틸 (3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-카르복실레이트(41c)
Figure pct00640
tert-부틸 (3R,4R)-3-플루오로-4-((메틸설포닐)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트(41b)(3.92 g, 13.20 mmol) 및 3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(2.0 g, 6.60 mmol)을 50 mL의 DMF 중에 용해시키고, 탄산세슘(6.45 g, 19.80 mmol)을 첨가하고, 반응물을 100℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온까지 냉각시키고, 반응 시스템에 80 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 50 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-카르복실레이트(41c)(2.5 g, 수율: 75%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 505.3 [M+1]+.
단계 3:
1-((3R,4S)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(41d)
Figure pct00641
tert-부틸 (3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-카르복실레이트(41c)(2.5 g, 4.96 mmol)를 60 mL의 DCM 중에 용해시키고, 20 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 60 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 100 mL의 디클로로메탄으로 추출하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-((3R,4S)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(41d)(2.1 g, 수율: > 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 405.3 [M+1]+.
단계 4:
tert-부틸 3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(41e)
Figure pct00642
1-((3R,4S)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(41d)(900 mg, 2.23 mmol)을 35 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(762 mg, 4.46 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.89 g, 8.92 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 50 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(41e)(1.18 g, 수율: 95%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 560.3 [M+1]+.
단계 5:
1-((3R,4S)-1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(41f)
Figure pct00643
tert-부틸 3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)아제티딘-1-카르복실레이트(41e)(800 mg, 1.43 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 50 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 50 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-((3R,4S)-1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(41f)(0.57 g, 수율: 87%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 460.2 [M+1]+.
단계 6:
tert-부틸 3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-카르복실레이트(41g)
Figure pct00644
1-((3R,4S)-1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(41f)(500 mg, 1.09 mmol)을 30 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(372 mg, 2.18 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.93 g, 4.39 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 시스템에 50 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 50 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-카르복실레이트(41g)(480 mg, 수율: 72%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 615.3 [M+1]+.
단계 7:
1-((3R,4S)-1-([1,3'-바이아제티딘]-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(41h)
Figure pct00645
tert-부틸 3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-카르복실레이트(41g)(480 mg, 0.78 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 30 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-((3R,4S)-1-([1,3'-바이아제티딘]-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(41h)(0.40 g, 수율: > 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 515.2 [M+1]+.
단계 8:
5-(3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 41)
Figure pct00646
1-((3R,4S)-1-([1,3'-바이아제티딘]-3-일)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(41h)(300 mg, 0.58 mmol)을 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(242 mg, 0.88 mmol)을 첨가하고, 반응물을 외부조 내에서 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로피페리딘-1-일)-[1,3'-바이아제티딘]-1'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 41)(280 mg, 수율: 63%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.07 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.68 - 7.60 (m, 3H), 7.41 - 7.34 (m, 2H), 7.19 - 7.04 (m, 5H), 6.78 (d, 1H), 6.51 (dd, 1H), 5.86 (brs, 2H), 5.18 - 5.00 (m, 1H), 4.98 - 4.81 (m, 2H), 4.08 - 4.00 (m, 2H), 3.92 - 3.84 (m, 2H), 3.74 - 3.66 (m, 1H), 3.66 - 3.56 (m, 2H), 3.26 - 2.95 (m, 6H), 2.90 - 2.65 (m, 3H), 2.46 - 2.29 (m, 1H), 2.28 - 2.17 (m, 1H), 2.16 - 2.05 (m, 2H).
LCMS m/z = 771.3 [M+1]+.
실시예 42:
5-(3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 42)
Figure pct00647
단계 1:
tert-부틸 (3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(42a)
Figure pct00648
1-((3R,4S)-3-플루오로피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(41d)(0.9 g, 2.23 mmol)을 35 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(887 mg, 4.46 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.89 g, 8.92 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 50 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(42a)(1.08 g, 수율: 83%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 588.3 [M+1]+.
단계 2:
1-((3R,4S)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(42b)
Figure pct00649
tert-부틸 (3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(42a)(800 mg, 1.36 mmol)를 30 mL의 DCM 중에 용해시키고, 10 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 50 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 50 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-((3R,4S)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(42b)(600 mg, 수율: 91%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 488.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(42c)
Figure pct00650
1-((3R,4S)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(42b)(550 mg, 1.13 mmol)을 30 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(380 mg, 2.22 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.95 g, 4.48 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 시스템에 50 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 50 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(42c)(620 mg, 수율: 85%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 643.4 [M+1]+.
단계 4:
1-((3R,4S)-1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(42d)
Figure pct00651
tert-부틸 3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(42c)(580 mg, 0.90 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 30 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-((3R,4S)-1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(42d)(480 mg, 수율: 98%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 543.3 [M+1]+.
단계 5:
5-(3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 42)
Figure pct00652
1-((3R,4S)-1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(42d)(300 mg, 0.55 mmol)을 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(229 mg, 0.83 mmol)을 첨가하고, 반응물을 외부조 내에서 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-((3R,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 42)(340 mg, 수율: 77%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.63 - 9.46 (m, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.68 - 7.61 (m, 3H), 7.41 - 7.34 (m, 2H), 7.20 - 7.04 (m, 5H), 6.79 (d, 1H), 6.52 (dd, 1H), 5.78 (brs, 2H), 5.23 - 5.00 (m, 1H), 4.97 - 4.77 (m, 2H), 4.13 - 4.06 (m, 2H), 3.93 - 3.84 (m, 2H), 3.42 - 3.29 (m, 2H), 3.27 - 3.14 (m, 1H), 3.08 - 2.92 (m, 3H), 2.92 - 2.65 (m, 4H), 2.65 - 2.46 (m, 2H), 2.18 - 2.06 (m, 2H), 2.02 - 1.84 (m, 4H), 1.76 - 1.61 (m, 2H).
LCMS m/z = 799.3 [M+1]+.
실시예 43
5-[3-[3-[(3S,4S)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 43)
Figure pct00653
단계 1:
tert-부틸 (3S,4R)-3-플루오로-4-메틸설포닐옥시-피페리딘-1-카르복실레이트(43b)
Figure pct00654
tert-부틸 (3S,4R)-3-플루오로-4-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(43a)(6.0 g, 27.39 mmol)를 30 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, DIPEA(7.06 g, 54.62 mmol)를 첨가하고, 이어서 메탄설포닐 클로라이드(0.376 g, 3.28 mmol)를 서서히 적가하였다. 첨가의 완료 후에, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 40 mL의 물로 켄칭하고, 100 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 5 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3S,4R)-3-플루오로-4-메틸설포닐옥시-피페리딘-1-카르복실레이트(43b)(7.97 g, 수율: 98%)를 수득하였다.
단계 2:
tert-부틸 (3S,4S)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(43c)
Figure pct00655
tert-부틸 (3S,4R)-3-플루오로-4-메틸설포닐옥시-피페리딘-1-카르복실레이트(43b)(2.45 g, 8.25 mmol) 및 3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1.0 g, 3.30 mmol)을 20 mL의 DMF 중에 용해시키고, 탄산세슘(2.14 g, 6.57 mmol)을 첨가하고, 반응물을 100℃에서 7시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온까지 냉각시키고, 반응 시스템에 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3S,4S)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(43c)(0.9 g, 수율: 54%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 505.3 [M+1]+.
단계 3:
1-[(3S,4S)-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(43d)
Figure pct00656
tert-부틸 (3S,4S)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(43c)(0.9 g, 1.79 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 60 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 100 mL의 디클로로메탄으로 3회 추출하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[(3S,4S)-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(43d)(0.7 g, 수율: 97%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 405.3 [M+1]+.
단계 4:
tert-부틸 3-[(3S,4S)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(43e)
Figure pct00657
1-[(3S,4S)-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(43d)(0.7 g, 1.73 mmol)을 35 mL의 DCE 및 5 mL의 DMSO 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(542 mg, 3.17 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.68 g, 7.93 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 50 mL의 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[(3S,4S)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(43e)(800 mg, 수율: 83%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 560.3 [M+1]+.
단계 5:
1-[(3S,4S)-1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(43f)
Figure pct00658
tert-부틸 3-[(3S,4S)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-카르복실레이트(43e)(500 mg, 0.89 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 50 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 50 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[(3S,4S)-1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(43f)(0.4 g, 수율: 98%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 460.2 [M+1]+.
단계 6:
tert-부틸 3-[3-[(3S,4S)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(43g)
Figure pct00659
1-[(3S,4S)-1-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(43f)(0.4 g, 0.87 mmol)을 25 mL의 DCE 및 2 mL의 DMSO 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(485 mg, 2.83 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.12 g, 5.28 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 시스템에 60 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 60 mL의 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-[3-[(3S,4S)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(43g)(450 mg, 수율: 84%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 615.3 [M+1]+.
단계 7:
1-[(3S,4S)-1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(43h)
Figure pct00660
tert-부틸 3-[3-[(3S,4S)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-카르복실레이트(43g)(400 mg, 0.65 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 4 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 30 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-[(3S,4S)-1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(43h)(0.33 g, 수율: 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 515.2 [M+1]+.
단계 8:
5-[3-[3-[(3S,4S)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 43)
Figure pct00661
1-[(3S,4S)-1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(43h)(0.33 g, 0.64 mmol)을 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 3 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(352 mg, 1.28 mmol)을 첨가하고, 반응물을 외부조 내에서 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 5-[3-[3-[(3S,4S)-4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-3-플루오로-1-피페리딜]아제티딘-1-일]아제티딘-1-일]-2-(2,6-디옥소-3-피페리딜)이소인돌린-1,3-디온(화합물 43)(125 mg, 수율: 25%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.61 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.69 - 7.61 (m, 3H), 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.21 - 7.05 (m, 5H), 6.79 (d, 1H), 6.53 (dd, 1H), 5.80 (brs, 2H), 5.35 - 5.13 (m, 1H), 4.97 - 4.83 (m, 2H), 4.09 - 4.01 (m, 2H), 3.93 - 3.85 (m, 2H), 3.75 - 3.55 (m, 3H), 3.29 - 3.06 (m, 4H), 2.92 - 2.65 (m, 4H), 2.53 - 2.39 (m, 1H), 2.22 - 2.05 (m, 4H).
LCMS m/z = 771.3 [M+1]+.
실시예 44:
5-(3-((3S,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 44)
Figure pct00662
단계 1:
tert-부틸 (3S,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(44a)
Figure pct00663
1-[(3S,4S)-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(43d)(800 mg, 1.98 mmol)을 35 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(787 mg, 3.95 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.68 g, 7.93 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 30 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3S,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(44a)(970 mg, 수율: 83%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 588.3 [M+1]+.
단계 2:
1-((3S,4S)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(44b)
Figure pct00664
tert-부틸 (3S,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(44a)(650 mg, 1.11 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 30 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-((3S,4S)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(44b)(540 mg, 수율: > 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 488.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 3-((3S,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(44c)
Figure pct00665
1-((3S,4S)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(44b)(500 mg, 1.03 mmol)을 30 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(350 mg, 2.05 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(870 mg, 4.10 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 시스템에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 30 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-((3S,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(44c)(560 mg, 수율: 85%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 643.4 [M+1]+.
단계 4:
1-((3S,4S)-1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시-페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(44d)
Figure pct00666
tert-부틸 3-((3S,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(44c)(500 mg, 0.78 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 30 mL의 디클로로메탄으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-((3S,4S)-1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시-페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(44d)(420 mg, 수율: > 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 543.3 [M+1]+.
단계 5:
5-(3-((3S,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 44)
Figure pct00667
1-((3S,4S)-1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(44d)(310 mg, 0.57 mmol)을 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(236 mg, 0.86 mmol)을 첨가하고, 반응물을 외부조 내에서 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-((3S,4S)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 44)(310 mg, 수율: 68%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.49 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.71 - 7.58 (m, 3H), 7.43 - 7.33 (m, 2H), 7.22 - 7.11 (m, 3H), 7.11 - 7.03 (m, 2H), 6.83 - 6.74 (m, 1H), 6.57 - 6.47 (m, 1H), 5.78 (brs, 2H), 5.33 - 5.09 (m, 1H), 4.98 - 4.79 (m, 2H), 4.16 - 4.04 (m, 2H), 3.96 - 3.85 (m, 2H), 3.46 - 3.31 (m, 2H), 3.07 - 2.91 (m, 3H), 2.91 - 2.65 (m, 3H), 2.57 - 2.34 (m, 4H), 2.18 - 1.93 (m, 4H), 1.92 - 1.82 (m, 2H), 1.74 - 1.58 (m, 2H).
LCMS m/z = 799.3 [M+1]+.
실시예 45:
5-(3-((3S,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 45)
Figure pct00668
Figure pct00669
단계 1:
tert-부틸 (3S,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(45a)
Figure pct00670
1-[(3S,4R)-3-플루오로-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(38d)(1.1 g, 2.72 mmol)을 35 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(1.08 g, 5.43 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(2.31 g, 10.90 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 50 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3S,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(45a)(1.4 g, 수율: 88%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 588.3 [M+1]+.
단계 2:
1-((3S,4R)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(45b)
Figure pct00671
tert-부틸 (3S,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트(45a)(1.4 g, 2.38 mmol)를 30 mL의 DCM 중에 용해시키고, 10 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 50 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 50 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-((3S,4R)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(45b)(1.2 g, 수율: > 99%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 488.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 3-((3S,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(45c)
Figure pct00672
1-((3S,4R)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(45b)(600 mg, 1.23 mmol)을 30 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(421 mg, 2.46 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.04 g, 4.91 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 시스템에 50 mL의 중탄산나트륨 용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 50 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-((3S,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(45c)(700 mg, 수율: 89%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 643.4 [M+1]+.
단계 4:
1-((3S,4R)-1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(45d)
Figure pct00673
tert-부틸 3-((3S,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트(45c)(600 mg, 0.93 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 N 수산화나트륨 용액으로 용해시키고, 30 mL의 DCM으로 3회 추출하였다. 유기 상을 30 mL의 1 N 수산화나트륨 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-((3S,4R)-1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(45d)(0.44 g, 수율: 87%)을 수득하였다.
LCMS m/z = 543.3 [M+1]+.
단계 5:
5-(3-((3S,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 45)
Figure pct00674
1-((3S,4R)-1'-(아제티딘-3-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(45d)(300 mg, 0.55 mmol)을 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(229 mg, 0.83 mmol)을 첨가하고, 반응물을 외부조 내에서 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-((3S,4R)-4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 45)(220 mg, 수율: 50%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.37 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.68 - 7.60 (m, 3H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.20 - 7.04 (m, 5H), 6.79 (d, 1H), 6.52 (dd, 1H), 5.74 (brs, 2H), 5.23 - 5.02 (m, 1H), 4.97 - 4.79 (m, 2H), 4.14 - 4.05 (m, 2H), 3.94 - 3.84 (m, 2H), 3.41 - 3.29 (m, 2H), 3.27 - 3.15 (m, 1H), 3.07 - 2.92 (m, 3H), 2.92 - 2.66 (m, 4H), 2.65 - 2.48 (m, 2H), 2.18 - 2.06 (m, 2H), 2.03 - 1.84 (m, 4H), 1.75 - 1.61 (m, 2H).
LCMS m/z = 799.3 [M+1]+.
실시예 46-1:
트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온-P1(화합물 46-1)
Figure pct00675
또는
Figure pct00676
Figure pct00677
Figure pct00678
단계 1:
시스-tert-부틸 3-플루오로-4-하이드록시-피페리딘-1-카르복실레이트(46b)
Figure pct00679
tert-부틸 3-플루오로-4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(46a)(13.0 g, 59.8 mmol)를 130 mL의 무수 메탄올 중에 용해시키고, 붕수소화나트륨(4.52 g, 119.5 mmol)을 서서히 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 용액을 60 mL의 포화 염화암모늄 용액으로 켄칭하고, 200 mL의 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 4 : 1 내지 7 : 3)로 분리하고 정제하여 시스-tert-부틸 3-플루오로-4-하이드록실-피페리딘-1-카르복실레이트(46b)(9.0 g, 수율: 69%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.70 - 4.51 (m, 1H), 3.99 - 3.83 (m, 2H), 3.79 - 3.60 (m, 1H), 3.52 - 3.33 (m, 1H), 3.25 - 3.10 (m, 1H), 1.95 (br.s, 1H), 1.89 - 1.69 (m, 2H), 1.46 (s, 9H).
단계 2:
시스-tert-부틸 3-플루오로-4-메틸설포닐옥시-피페리딘-1-카르복실레이트(46c)
Figure pct00680
시스-tert-부틸 3-플루오로-4-하이드록실-피페리딘-1-카르복실레이트(46b)(1.20 g, 5.47 mmol)를 12 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 트리에틸아민(0.720 g, 7.12 mmol)을 첨가하고, 이어서 메탄설포닐 클로라이드(0.940 g, 8.21 mmol)를 0℃에서 서서히 적가하였다. 첨가의 완료 후에, 0℃에서 30분 동안 반응을 수행하였다. 0℃에서, 반응 용액에 10 mL의 포화 염화암모늄 용액을 적가하여, 실온에 이를 때까지 반응물을 켄칭하였다. 액체 분리를 수행하고, 수성 상을 20 mL의 디클로로메탄으로 추가로 추출하고, 유기 상을 합하였다. 유기 상을 20 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 시스-tert-부틸 3-플루오로-4-메틸설포닐옥시-피페리딘-1-카르복실레이트(46c)(1.60 g)를 수득하였다.
단계 3:
트랜스-tert-부틸 4-아지도-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(46d)
Figure pct00681
상기 조 생성물 시스-tert-부틸 3-플루오로-4-메틸설포닐옥시-피페리딘-1-카르복실레이트(46c)(1.60 g)를 10 mL의 DMF 중에 용해시키고, 아지드화나트륨(1.05 g, 16.2 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 95℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 10 mL의 물을 첨가하고, 50 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 상을 20 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 추가로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 9 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-tert-부틸 4-아지도-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(46d)(0.900 g, 화합물 46b로부터 계산된 2-단계 수율: 67%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.46 - 4.25 (m, 1H), 4.21 - 4.00 (m, 1H), 3.87 - 3.77 (m, 1H), 3.71 - 3.59 (m, 1H), 3.19 - 2.97 (m, 2H), 2.06 - 1.94 (m, 1H), 1.59 - 1.49 (m, 1H), 1.46 (s, 9H).
단계 4: 트랜스-tert-부틸 4-아미노-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(46e)
Figure pct00682
트랜스-tert-부틸 4-아지도-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(46d)(0.900 g, 3.68 mmol)를 10 mL 무수 에탄올 중에 용해시키고, 150 mg의 10% 팔라듐 탄소를 첨가하고, 혼합물을 H2 분위기 하에서 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 흡인에 의해 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 20 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-tert-부틸 4-아미노-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(46e)(0.500 g, 수율: 62%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.42 - 4.19 (m, 1H), 4.18 - 3.92 (m, 2H), 2.98 - 2.69 (m, 3H), 1.93 - 1.82 (m, 1H), 1.55 (br.s, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.41 - 1.28 (m, 1H).
단계 5:
트랜스-tert-부틸 3-플루오로-4-(4-옥소-1-피페리딜)피페리딘-1-카르복실레이트(46f)
Figure pct00683
펜탄-1,4-디엔-3-올(5.0 g, 59.4 mmol)을 50 mL의 1,2-디클로로에탄 중에 용해시키고, 2-요오드옥시벤조산(IBX)(33 g, 117.8 mmol)을 첨가하고, 반응물을 70℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 흡인에 의해 여과하고, 여과액을 다음 단계에 직접 사용하였다.
트랜스-tert-부틸 4-아미노-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(46e)(3.6 g, 16.5 mmol)를 10 mL의 무수 메탄올 중에 용해시키고, 디이소프로필에틸아민(4.26 g, 33.0 mmol)을 첨가하고, 이어서 상기 여과액을 첨가하고, 반응물을 70
Figure pct00684
에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트(v/v) = 4 : 1 내지 2 : 3)로 분리하고 정제하여 트랜스-tert-부틸 3-플루오로-4-(4-옥소-1-피페리딜)피페리딘-1-카르복실레이트(46f)(4.0 g, 수율: 81%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.61 - 4.31 (m, 2H), 4.16 - 4.00 (m, 1H), 3.06 - 2.91 (m, 4H), 2.87 - 2.66 (m, 3H), 2.45 (t, 4H), 1.90 - 1.79 (m, 1H), 1.60 - 1.48 (m, 1H), 1.46 (s, 9H).
LCMS m/z = 301.3 [M+1]+.
단계 6:
트랜스-tert-부틸 3-플루오로-4-(4-하이드록시-1-피페리딜)피페리딘-1-카르복실레이트(46g)
Figure pct00685
트랜스-tert-부틸 3-플루오로-4-(4-옥소-1-피페리딜)피페리딘-1-카르복실레이트(46f)(4.0 g, 13.3 mmol)를 40 mL의 무수 메탄올 중에 용해시키고, 붕수소화나트륨(0.505 g, 13.3 mmol)을 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 실온에서 10분 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액에 25 mL의 포화 염화암모늄 용액을 적가하여 반응물을 켄칭하고, 생성된 용액을 50 mL의 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 유기 상을 합하고, 30 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 9 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-tert-부틸 3-플루오로-4-(4-하이드록시-1-피페리딜)피페리딘-1-카르복실레이트(46g)(3.2 g, 수율: 80%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.65 - 4.40 (m, 1H), 4.38 - 4.22 (m, 1H), 4.09 - 3.91 (m, 1H), 3.76 - 3.61 (m, 1H), 2.99 - 2.39 (m, 7H), 2.00 - 1.71 (m, 3H), 1.65 - 1.41 (m, 12H).
LCMS m/z = 303.3 [M+1]+.
단계 7:
트랜스-tert-부틸 3-플루오로-4-[4-(p-토실옥시)-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(46h)
Figure pct00686
트랜스-tert-부틸 3-플루오로-4-(4-하이드록시-1-피페리딜)피페리딘-1-카르복실레이트(46g)(1.80 g, 5.95 mmol)를 18 mL의 피리딘 중에 용해시키고, p-톨루엔설포닐 클로라이드(2.27 g, 11.9 mmol)를 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 30 mL의 물 및 60 mL의 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 상을 20 mL의 포화 중탄산나트륨 용액, 40 mL의 0.5 mol/L 염산 및 20 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 연속적으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 트랜스-tert-부틸 3-플루오로-4-[4-(p-토실옥시)-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(46h)(2.48 g)를 수득하였다.
단계 8:
트랜스-tert-부틸-4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(46i)
Figure pct00687
3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1.50 g, 4.95 mmol)을 10 mL의 DMF 중에 용해시키고, 상기 조 생성물 트랜스-tert-부틸 3-플루오로-4-[4-(p-토실옥시)-1-피페리딜]피페리딘-1-카르복실레이트(46h)(2.48 g) 및 탄산세슘(3.24 g, 9.94 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 첨가의 완료 후에, 반응물을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 10 mL의 물 및 20 mL의 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 액체 분리를 수행하고, 유기 상을 5 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 100 : 0 내지 50 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-tert-부틸 4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트(46i)(0.900 g, 수율: 31%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), 7.69 - 7.62 (m, 2H), 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.21 - 7.11 (m, 3H), 7.11 - 7.05 (m, 2H), 5.64 (br.s, 2H), 4.86 - 4.74 (m, 1H), 4.69 - 4.46 (m, 1H), 4.42 - 4.25 (m, 1H), 4.12 - 3.94 (m, 1H), 3.19 - 3.03 (m, 2H), 2.87 - 2.63 (m, 5H), 2.50 - 2.34 (m, 2H), 2.12 - 2.01 (m, 2H), 1.93 - 1.84 (m, 1H), 1.63 - 1.50 (m, 1H), 1.47 (s, 9H).
단계 9:
트랜스-tert-부틸-4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트-P1(46i-1)
트랜스-tert-부틸-4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트-P2(46i-2)
[화학식 46i-a]
Figure pct00688
및
[화학식 46i-b]
Figure pct00689
고성능 액체 크로모토그래피에 의해 화합물 46i로부터 화합물 46i-1과 화합물 46i-2를 분리하고 제조하였다. 제조 조건은 다음과 같았다:
기기 및 분취용 컬럼: MG II 분취용 SFC(SFC-1)를 사용하여 액체 상을 제조함, 분취용 컬럼 모델: ChiralPak IC, 250 x 30 mm I.D., 10 μm.
제조 방법: 조 생성물을 메탄올/디클로로메탄으로 용해시켜 샘플 용액으로 제조하였다.
이동상 시스템: sCO2/이소프로판올(0.1% 암모니아수를 함유함), 등용매 용리: sCO2/이소프로판올(0.1% 암모니아수를 함유함) = 55/45.
유량: 80 mL/분
화합물 46i-1 및 화합물 46i-2에 대한 분석 방법:
기기: Waters UPC2 분석용 SFC(SFC-H)
크로마토그래피 컬럼: CHIRALPAK IC
규격: 150 mm x 4.6 mm, 3 μm
이동상 A: sCO2
이동상 B: 이소프로판올(0.05% 디에틸아민을 함유함)
컬럼 온도: 35℃
유량: 2.5 mL/분
파장: 254 nm
등용매 용리: 이동상 A : B = 60 : 40.
화합물 46i-1의 체류 시간: 6.576분(절대 배치는 결정되지 않았으며, 그의 구조는 상기 화학식 46i-a 및 화학식 46i-b 중 하나였음);
화합물 46i-2의 체류 시간: 8.951분(절대 배치는 결정되지 않았으며, 그의 구조는 상기 화학식 46i-a 및 화학식 46i-b 중 하나였을 뿐만 아니라, 그것은 화합물 46i-1의 이성질체였는데, 즉, 화합물 46i-1의 구조가 화학식 46i-a의 구조였을 때, 화합물 46i-2의 구조는 화학식 46i-b였고; 화합물 46i-1의 구조가 화학식 46i-b의 구조였을 때, 화합물 46i-2의 구조는 화학식 46i-a였음).
단계 10:
트랜스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P1(46j)
트랜스-tert-부틸 4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트-P1(46i-1, 그의 구조는 화학식 46i-a 및 화학식 46i-b 중 하나였음)(420 mg, 0.71 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 mol/L NaOH 용액으로 용해시키고, DCM(30 mL x 4)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 1 mol/L NaOH 용액(30 mL x 2)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 트랜스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P1(46j)(340 mg, 수율: 98%)을 수득하였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 10번째 단계에서의 원료(화합물 46i-1)의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), 7.71 - 7.61 (m, 2H), 7.43 - 7.33 (m, 2H), 7.20 - 7.11 (m, 3H), 7.11 - 7.04 (m, 2H), 5.52 (br.s, 2H), 4.84 - 4.72 (m, 1H), 4.71 - 4.46 (m, 1H), 3.43 - 3.33 (m, 1H), 3.17 - 2.99 (m, 3H), 2.86 - 2.75 (m, 1H), 2.74 - 2.50 (m, 4H), 2.49 - 2.31 (m, 2H), 2.11 - 1.97 (m, 2H), 1.94 - 1.84 (m, 1H), 1.84 - 1.70 (m, 1H), 1.62 - 1.48 (m, 1H).
LCMS m/z = 488.3 [M+1]+.
단계 11:
트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트-P1(46k)
트랜스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P1(46j)(300 mg, 0.62 mmol)을 30 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(211 mg, 1.23 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(522 mg, 2.46 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 DCM(30 mL x 3)으로 추출하고, 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트-P1(46k)(380 mg, 수율: 95%)을 수득하였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 10번째 단계에서의 원료(화합물 46i-1)의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
LCMS m/z = 643.4 [M+1]+.
단계 12:
트랜스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P1(46l)
트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트-P1(46k)(380 mg, 0.59 mmol)을 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 mol/L NaOH 용액으로 용해시키고, DCM(30 mL x 4)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 1 mol/L NaOH 용액(30 mL x 2)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 트랜스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P1(46l)(260 mg)을 수득하였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 10번째 단계에서의 원료(화합물 46i-1)의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
LCMS m/z = 543.3 [M+1]+.
단계 13:
트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온-P1(화합물 46-1)
[화학식 46-a]
Figure pct00690
또는
[화학식 46-b]
Figure pct00691
상기 조 생성물 트랜스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P1(46l)(260 mg)을 15 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(191 mg, 0.69 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 30 mL의 물을 첨가함으로써 켄칭하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온-P1(화합물 46-1)(220 mg, 화합물 46k로부터 계산된 2-단계 수율: 47%)을 수득하였다. 화합물 46-1의 구조는 상기 46-a 및 46-b에 나타낸 구조들 중 하나였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 10번째 단계에서의 원료(화합물 46i-1)의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.28 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.69 - 7.60 (m, 3H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.20 - 7.11 (m, 3H), 7.10 - 7.04 (m, 2H), 6.79 (d, 1H), 6.53 (dd, 1H), 5.71 (br.s, 2H), 4.93 (dd, 1H), 4.87 - 4.60 (m, 2H), 4.14 - 4.07 (m, 2H), 3.90 - 3.81 (m, 2H), 3.50 - 3.40 (m, 1H), 3.24 - 2.98 (m, 3H), 2.94 - 2.62 (m, 7H), 2.50 - 2.33 (m, 2H), 2.17 - 1.94 (m, 6H), 1.70 - 1.60 (m, 1H).
LCMS m/z = 799.3 [M+1]+.
실시예 46-2:
트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온-P2(화합물 46-2)
Figure pct00692
또는
Figure pct00693
Figure pct00694
단계 1:
트랜스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P2(46m)
트랜스-tert-부틸 4-[4-[4-아미노-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]-1-피페리딜]-3-플루오로-피페리딘-1-카르복실레이트-P2(46i-2, 실시예 46-1에서 화합물 46i-1의 이성질체)(420 mg, 0.71 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 mol/L NaOH 용액으로 용해시키고, DCM(30 mL x 4)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 1 mol/L NaOH 용액(30 mL x 2)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 트랜스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P2(46m)(330 mg, 수율: 95%)을 수득하였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 (화합물 46i-2)의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), 7.70 - 7.61 (m, 2H), 7.43 - 7.34 (m, 2H), 7.20 - 7.11 (m, 3H), 7.10 - 7.05 (m, 2H), 5.54 (brs, 2H), 4.85 - 4.72 (m, 1H), 4.68 - 4.46 (m, 1H), 3.43 - 3.33 (m, 1H), 3.17 - 2.99 (m, 3H), 2.86 - 2.75 (m, 1H), 2.74 - 2.50 (m, 4H), 2.48 - 2.31 (m, 2H), 2.10 - 1.96 (m, 2H), 1.93 - 1.81 (m, 1H), 1.79 - 1.62 (m, 1H), 1.61 - 1.46 (m, 1H).
LCMS m/z = 488.3 [M+1]+.
단계 2:
트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트-P2(46n)
트랜스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P2(46m)(300 mg, 0.62 mmol)을 30 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(211 mg, 1.23 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(522 mg, 2.46 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 DCM(30 mL x 3)으로 추출하고, 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트-P2(46n)(390 mg, 수율: 98%)을 수득하였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 (화합물 46i-2)의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
LCMS m/z = 643.4 [M+1]+.
단계 3:
트랜스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P2(46o)
트랜스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트-P2(46n)(370 mg, 0.58 mmol)을 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 30 mL의 5 mol/L NaOH 용액으로 용해시키고, DCM(30 ml x 4)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 1 mol/L NaOH 용액(30 mL x 2)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 트랜스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P2(46o)(270 mg)을 수득하였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 (화합물 46i-2)의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
LCMS m/z = 543.3 [M+1]+.
단계 4:
트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온-P2(화합물 46-2)
[화학식 46-b]
Figure pct00695
또는
[화학식 46-a]
Figure pct00696
상기 조 생성물 트랜스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P2(46o)(270 mg)을 15 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(191 mg, 0.69 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 30 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 트랜스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온-P2(화합물 46-2)(260 mg, 화합물 46n으로부터 계산된 2-단계 수율: 56%)을 수득하였다. 화합물 46-2의 구조는 상기 46-b 및 46-a에 나타낸 구조들 중 하나였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 첫 번째 단계에서의 원료(화합물 46i-2)의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였으며, 즉, 화합물 46-2는 실시예 46-1에서의 화합물 46-1의 이성질체였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.86 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.69 - 7.60 (m, 3H), 7.43 - 7.34 (m, 2H), 7.21 - 7.11 (m, 3H), 7.10 - 7.04 (m, 2H), 6.79 (d, 1H), 6.53 (dd, 1H), 5.63 (brs, 2H), 4.93 (dd, 1H), 4.87 - 4.59 (m, 2H), 4.14 - 4.07 (m, 2H), 3.90 - 3.81 (m, 2H), 3.50 - 3.40 (m, 1H), 3.25 - 3.00 (m, 3H), 2.94 - 2.62 (m, 7H), 2.51 - 2.35 (m, 2H), 2.18 - 1.94 (m, 6H), 1.77 - 1.62 (m, 1H).
LCMS m/z = 799.3 [M+1]+.
실시예 47:
(7S)-7-(1-(1-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일)아제티딘-3-일)피페리딘-4-일)-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(화합물 47)
Figure pct00697
(7S)-7-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(31b)(250 mg, 0.53 mmol)를 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 1.0 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(220 mg, 0.80 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 (7S)-7-(1-(1-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일)아제티딘-3-일)피페리딘-4-일)-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(화합물 47)(210 mg, 수율: 54%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 - 8.41 (m, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.53 - 7.46 (m, 2H), 7.40 - 7.32 (m, 2H), 7.18 - 7.11 (m, 1H), 7.10 - 7.01 (m, 4H), 6.78 (d, 1H), 6.63 - 6.57 (m, 1H), 6.52 (dd, 1H), 5.21 (br.s, 2H), 4.95 - 4.87 (m, 1H), 4.14 - 4.05 (m, 2H), 3.98 - 3.78 (m, 2H), 3.47 - 3.29 (m, 3H), 3.06 - 2.64 (m, 5H), 2.35 - 2.05 (m, 4H), 2.02 - 1.86 (m, 2H), 1.86 - 1.76 (m, 1H), 1.74 - 1.38 (m, 4H).
LCMS m/z = 729.3 [M+1]+.
실시예 48:
(7S)-7-(1'-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(화합물 48)
Figure pct00698
(7S)-2-(4-페녹시페닐)-7-[1-(4-피페리딜)-4-피페리딜]-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(30c)(250 mg, 0.50 mmol)를 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 1.0 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(207 mg, 0.75 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 (7S)-7-(1'-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1,3-디옥소-이소인돌린-5-일)-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-2-(4-페녹시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-카르복스아미드(화합물 48)(200 mg, 수율: 53%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.81 (br.s, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.53 - 7.45 (m, 2H), 7.40 - 7.32 (m, 2H), 7.29 - 7.24 (m, 1H), 7.19 - 7.10 (m, 1H), 7.10 - 6.99 (m, 5H), 6.62 - 6.57 (m, 1H), 5.26 (br.s, 2H), 4.97 - 4.88 (m, 1H), 4.16 - 4.06 (m, 1H), 4.04 - 3.94 (m, 2H), 3.46 - 3.36 (m, 2H), 3.21 - 3.03 (m, 2H), 3.03 - 2.91 (m, 2H), 2.90 - 2.65 (m, 4H), 2.47 - 2.22 (m, 3H), 2.22 - 2.02 (m, 5H), 1.87 - 1.58 (m, 6H).
LCMS m/z = 757.3 [M+1]+.
실시예 49-1
시스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온-P1(화합물 49-1)
Figure pct00699
또는
Figure pct00700
Figure pct00701
단계 1:
시스-tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트-P1(18a-1)
및
시스-tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트-P2(18a-2)
[화학식 18a-a]
Figure pct00702
및
[화학식 18a-b]
Figure pct00703
고성능 액체 크로모토그래피에 의해 화합물 18a로부터 화합물 18a-1과 화합물 18a-2를 분리하고 제조하였다. 제조 조건은 다음과 같았다:
기기 및 분취용 컬럼: MG II 분취용 SFC(SFC-1)를 사용하여 액체 상을 제조함, 분취용 컬럼 모델: 셀룰로스-2, 250 x 30 mm I.D., 5 μm.
제조 방법: 조 생성물을 메탄올/디클로로메탄으로 용해시켜 샘플 용액으로 제조하였다.
이동상 시스템: sCO2/에탄올(0.1% 암모니아수를 함유함), 등용매 용리: sCO2/에탄올(0.1% 암모니아수를 함유함) = 60/40.
유량: 50 mL/분
화합물 18a-1 및 화합물 18a-2에 대한 분석 방법:
기기: Waters UPC2 분석용 SFC(SFC-H)
크로마토그래피 컬럼: 셀룰로스-2, I.D.
규격: 150 mm x 4.6 mm, 3 μm
이동상 A: sCO2
이동상 B: 에탄올(0.05% 디에틸아민을 함유함)
컬럼 온도: 35℃
유량: 2.5 mL/분
파장: 220 nm
등용매 용리: 이동상 A : B = 60 : 40.
화합물 18a-1의 체류 시간: 7.201분; 절대 배치는 결정되지 않았으며, 그의 구조는 상기 화학식 18a-a 및 화학식 18a-b 중 하나였음;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.29 (s, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.35 - 7.27 (m, 2H), 7.23 - 7.16 (m, 1H), 7.13 - 7.04 (m, 3H), 7.03 - 6.97 (m, 2H), 5.51 (br.s, 2H), 4.99 - 4.62 (m, 2H), 4.46 - 4.10 (m, 2H), 3.14 - 2.94 (m, 2H), 2.87 - 2.25 (m, 7H), 2.01 - 1.86 (m, 3H), 1.65 - 1.57 (m, 1H), 1.39 (s, 9H).
화합물 18a-2의 체류 시간: 8.585분. 절대 배치는 결정되지 않았으며, 그의 구조는 상기 화학식 18a-a 및 화학식 18a-b 중 하나였을 뿐만 아니라, 그것은 화합물 18a-1의 이성질체였는데, 즉, 화합물 18a-1의 구조가 화학식 18a-a의 구조였을 때, 화합물 18a-2의 구조는 화학식 18a-b였고; 화합물 18a-1의 구조가 화학식 18a-b의 구조였을 때, 화합물 18a-2의 구조는 화학식 18a-a였음.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.29 (s, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.35 - 7.27 (m, 2H), 7.21 - 7.16 (m, 1H), 7.13 - 7.04 (m, 3H), 7.03 - 6.97 (m, 2H), 5.41 (br.s, 2H), 5.00 - 4.60 (m, 2H), 4.53 - 4.03 (m, 2H), 3.15 - 3.00 (m, 2H), 2.92 - 2.22 (m, 7H), 2.02 - 1.85 (m, 3H), 1.69 - 1.51 (m, 1H), 1.39 (s, 9H).
단계 2:
시스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P1(49a)
시스-tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트-P1(18a-1, 그의 구조는 화학식 18a-a 및 화학식 18a-b 중 하나였음)(1.0 g, 1.7 mmol)을 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 적가하고, 30 mL의 디클로로메탄 및 50 mL의 물을 첨가하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 시스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P1(49a)(0.8 g)을 수득하였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 (화합물 18a-1)의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
LC-MS m/z = 488.3 [M+1]+.
단계 3:
시스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트-P1(49b)
상기 조 생성물 시스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P1(49a)(0.8 g)을 30 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥사아제티딘-1-카르복실레이트(0.6 g, 3.5 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.7 g, 3.3 mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 첨가하고, 50 mL의 디클로로메탄 및 50 mL의 물을 첨가하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 시스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트-P1(49b)(1.0 g, 화합물 18a-1로부터 계산된 2-단계 수율: 92%)을 수득하였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 (화합물 18a-1)의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
LC-MS m/z = 643.4 [M+1]+.
단계 4:
시스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P1(49c)
시스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트-P1(49b)(1.0 g, 1.56 mmol)을 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 적가하고, 30 mL의 디클로로메탄 및 50 mL의 물을 첨가하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 시스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P1(49c)(0.7 g)을 수득하였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 (화합물 18a-1)의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
LCMS m/z = 543.3 [M+1]+.
단계 5:
시스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온-P1(화합물 49-1)
[화학식 49-a]
Figure pct00704
또는
[화학식 49-b]
Figure pct00705
상기 조 생성물 시스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P1(49c)(0.2 g)을 5 mL의 DMSO 중에 용해시키고, DIPEA(0.21 g, 1.6 mmol) 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.14 g, 0.5 mmol)을 첨가하고, 반응물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 에틸 아세테이트 및 50 mL의 물을 첨가하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 시스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온-P1(화합물 49-1)(0.05 g, 화합물 49b로부터 계산된 2-단계 수율: 14%)을 수득하였다. 화합물 49-1의 구조는 상기 49-a 및 49-b에 나타낸 구조들 중 하나였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 두 번째 단계에서의 원료(화합물 18a-1)의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.97 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.69 - 7.59 (m, 3H), 7.43 - 7.34 (m, 2H), 7.20 - 7.04 (m, 5H), 6.78 (d, 1H), 6.52 (dd, 1H), 5.69 (brs, 2H), 5.13 - 4.88 (m, 2H), 4.84 - 4.73 (m, 1H), 4.15 - 4.05 (m, 2H), 3.99 - 3.87 (m, 2H), 3.52 - 3.43 (m, 1H), 3.28 - 3.12 (m, 3H), 3.09 - 3.00 (m, 1H), 2.93 - 2.33 (m, 8H), 2.24 - 2.00 (m, 6H), 1.84 - 1.76 (m, 1H).
LCMS m/z = 799.3 [M+1]+.
실시예 49-2
시스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온-P2(화합물 49-2)
Figure pct00706
또는
Figure pct00707
Figure pct00708
단계 1:
시스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P2(49d)
시스-tert-부틸 4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-카르복실레이트-P2(18a-2, 그의 구조는 화학식 18a-a 및 화학식 18a-b 중 하나였음, 화합물 18a-1의 이성질체)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 적가하고, 30 mL의 디클로로메탄 및 50 mL의 물을 첨가하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 시스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P2(49d)(0.62 g)을 수득하였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 화합물 18a-2의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
LC-MS m/z = 488.3 [M+1]+.
단계 2:
시스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트-P2(49e)
상기 조 생성물 시스-1-(3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P2(49d)(0.62 g)을 30 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥사아제티딘-1-카르복실레이트(0.43 g, 2.5 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.64 g, 3.0 mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 첨가하고, 50 mL의 디클로로메탄 및 50 mL의 물을 첨가하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 시스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트-P2(49e)(0.6 g, 화합물 18a-2로부터 계산된 2-단계 수율: 67%)을 수득하였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 화합물 18a-2의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
LC-MS m/z = 643.4 [M+1]+.
단계 3:
시스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P2(49f)
시스-tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-카르복실레이트-P2(49e)(0.6 g, 0.93 mmol)을 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 5 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 용액을 서서히 적가하고, 30 mL의 디클로로메탄 및 50 mL의 물을 첨가하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 시스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P2(49f)(0.45 g)을 수득하였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 화합물 18a-2의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였다.
LCMS m/z =543.3 [M+1]+.
단계 4:
시스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온-P2(화합물 49-2)
[화학식 49-b]
Figure pct00709
또는
[화학식 49-a]
Figure pct00710
상기 조 생성물 시스-1-(1'-(아제티딘-3-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민-P2(49f)(0.2 g)을 5 mL의 DMSO 중에 용해시키고, DIPEA(0.21 g, 1.6 mmol) 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.14 g, 0.5 mmol)을 첨가하고, 반응물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 에틸 아세테이트 및 50 mL의 물을 첨가하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 시스-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)-3'-플루오로-[1,4'-바이피페리딘]-1'-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온-P2(화합물 49-2)(0.27 g, 화합물 49e로부터 계산된 2-단계 수율: 82%)을 수득하였다. 화합물 49-2의 구조는 상기 49-a 및 49-b에 나타낸 구조들 중 하나였으며, 이의 키랄 탄소의 배치는 첫 번째 단계에서의 원료(화합물 18a-2)의 상응하는 키랄 탄소의 배치와 일치하였으며, 즉, 화합물 49-2는 화합물 49-1의 이성질체였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.66 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.67 - 7.60 (m, 3H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.20 - 7.11 (m, 3H), 7.10 - 7.04 (m, 2H), 6.78 (d, 1H), 6.52 (dd, 1H), 5.79 (brs, 2H), 5.13 - 4.88 (m, 2H), 4.83 - 4.72 (m, 1H), 4.16 - 4.04 (m, 2H), 4.00 - 3.86 (m, 2H), 3.52 - 3.42 (m, 1H), 3.24 - 3.12 (m, 3H), 3.09 - 3.00 (m, 1H), 2.91 - 2.32 (m, 8H), 2.23 - 1.98 (m, 6H), 1.84 - 1.76 (m, 1H).
LCMS m/z = 799.4 [M+1]+.
실시예 50:
5-(3-(2-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 50)
Figure pct00711
Figure pct00712
단계 1:
tert-부틸 2-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(50a)
Figure pct00713
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015, 58, 9625-9638] 참조)(400 mg, 1.04 mmol)을 5 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 2-옥소-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(493 mg, 2.06 mmol), 빙초산(0.15 mL, 2.6 mmol) 및 무수 황산나트륨(700 mg)을 실온에서 연속적으로 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(655 mg, 3.09 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 물을 첨가하고, 수성 상의 pH를 2 mol/L 수산화나트륨 수용액을 사용하여 10으로 조정하고, 생성된 용액을 디클로로메탄(30 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 물(20 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1 내지 8 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]피페리딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(50a)(600 mg, 수율: 95%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 610.4 [M+1]+.
단계 2:
1-(1-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(50b)
Figure pct00714
tert-부틸 2-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]피페리딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(50a)(600 mg, 0.98 mmol)를 4 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 2 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액의 pH를 2 mol/L 수산화나트륨 용액을 사용하여 10으로 조정하고, 수성 상을 디클로로메탄(10 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(50b)(458 mg)을 수득하였다.
LCMS m/z = 510.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 3-(2-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-일)아제티딘-1-카르복실레이트(50c)
Figure pct00715
상기 조 생성물 1-(1-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(50b)(458 mg)을 5 mL의 DCE 중에 용해시키고, 및 1-Boc-3-아제티디논(308 mg, 1.80 mmol), 빙초산(0.13 mL, 2.25 mmol) 및 무수 황산나트륨(700 mg)을 실온에서 연속적으로 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(634 mg, 2.99 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 물을 첨가하고, 수성 상의 pH를 2 mol/L 수산화나트륨 용액을 사용하여 10으로 조정하고, 생성된 용액을 디클로로메탄(30 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 물(20 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1 내지 8 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-(2-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-일)아제티딘-1-카르복실레이트(50c)(501 mg, 화합물 50a로부터 계산된 2-단계 수율: 77%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 665.4 [M+1]+.
단계 4:
1-(1-(7-(아제티딘-3-일)-7-아자스피로[3.5]노난-2-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(50d)
Figure pct00716
tert-부틸 3-(2-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-일)아제티딘-1-카르복실레이트(50c)(501 mg, 0.75 mmol)를 5 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 2 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 실온에서 2.5시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액의 pH를 2 mol/L 수산화나트륨 용액을 사용하여 10으로 조정하고, 수성 상을 디클로로메탄(10 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-(7-(아제티딘-3-일)-7-아자스피로[3.5]노난-2-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(50d)(350 mg)을 수득하였다.
LCMS m/z = 565.4 [M+1]+.
단계 5:
5-(3-(2-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 50)
Figure pct00717
상기 조 생성물 1-(1-(7-(아제티딘-3-일)-7-아자스피로[3.5]노난-2-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(50d)(192 mg)을 5 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(102 mg, 0.37 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(220 mg, 1.70 mmol)을 실온에서 첨가하고, 반응물을 80℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 20 mL의 물에 붓고, 수성 상을 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1의 혼합 용매(30 mL x 3)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1 내지 8 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-(2-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 50)(112 mg, 화합물 50c로부터 계산된 2-단계 수율: 33%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.29 (s, 1H), 7.61 - 7.52 (m, 3H), 7.36 - 7.28 (m, 2H), 7.16 - 6.97 (m, 5H), 6.70 (d, 1H), 6.44 (dd, 1H), 5.76 (br.s, 2H), 4.85 (dd, 1H), 4.80 - 4.66 (m, 1H), 4.06 - 3.96 (m, 2H), 3.86 - 3.76 (m, 2H), 3.28 - 3.18 (m, 1H), 3.07 - 2.96 (m, 1H), 2.86 - 2.57 (m, 5H), 2.43 - 2.31 (m, 3H), 2.31 - 2.17 (m, 3H), 2.09 - 1.92 (m, 7H), 1.77 - 1.66 (m, 2H), 1.65 - 1.54 (m, 4H).
LCMS m/z = 821.4 [M+1]+.
실시예 51:
5-(2'-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7,7'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-7-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 51)
Figure pct00718
Figure pct00719
단계 1:
tert-부틸 2-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(51a)
Figure pct00720
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015, 58, 9625-9638] 참조)(1.0 g, 2.59 mmol)을 35 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 2-옥소-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(1.24 g, 5.18 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.37 g, 6.46 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 수용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 디클로로메탄(30 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(51a)(1.5 g, 수율: 95%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 610.4 [M+1]+.
단계 2:
1-(1-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(51b)
Figure pct00721
tert-부틸 2-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(51a)(1.5 g, 2.46 mmol)를 20 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-(1-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(51b)(1.8 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 510.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 2'-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7,7'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-7-카르복실레이트(51c)
Figure pct00722
상기 조 생성물 1-(1-(1-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(51b)(1.8 g)를 40 mL의 DCE 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(620 mg, 7.38 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 이어서 tert-부틸 2-옥소-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(1.18 g, 4.93 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.56 g, 7.36 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 시스템에 60 mL의 포화 중탄산나트륨 수용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 디클로로메탄(80 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2'-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7,7'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-7-카르복실레이트(51c)(1.2 g, 화합물 51a로부터 계산된 2-단계 수율: 67%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 733.3 [M+1]+.
단계 4:
1-(1-(7,7'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-2'-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시-페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(51d)
Figure pct00723
tert-부틸 2'-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7,7'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-7-카르복실레이트(51c)(300 mg, 0.41 mmol)를 5 mL의 메탄올 중에 용해시키고, 10 mL 2 N 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반시켰다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-(7,7'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-2'-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(51d)(0.36 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 633.5 [M+1]+.
단계 5:
5-(2'-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7,7'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-7-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 51)
Figure pct00724
상기 조 생성물 1-(1-(7,7'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-2'-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(51d)(0.36 g)를 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(138 mg, 1.64 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(166 mg, 0.60 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 여과하였다. 고체를 수집하고, 물로 세척하고, 이것을 50 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(2'-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-7,7'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-7-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 51)(120 mg, 화합물 51c로부터 계산된 2-단계 수율: 33%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.38 (s, 1H), 7.70 - 7.59 (m, 3H), 7.43 - 7.34 (m, 2H), 7.29 - 7.24 (m, 1H), 7.22 - 6.98 (m, 6H), 5.75 (br.s, 2H), 4.93 (dd, 1H), 4.84 - 4.71 (m, 1H), 3.48 - 3.26 (m, 4H), 3.09 - 2.98 (m, 2H), 2.93 - 2.80 (m, 2H), 2.79 - 2.65 (m, 3H), 2.50 - 2.17 (m, 5H), 2.17 - 1.91 (m, 10H), 1.90 - 1.48 (m, 12H).
LCMS m/z = 889.5 [M+1]+.
실시예 52:
5-(2-((3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 52)
Figure pct00725
단계 1:
tert-부틸 (3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-카르복실레이트(52a)
Figure pct00726
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015, 58, 9625-9638] 참조)(1.0 g, 2.59 mmol)을 35 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 (3aR,6aS)-5-옥소 헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-카르복실레이트(1.17 g, 5.19 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.37 g, 6.46 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 수용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 디클로로메탄(30 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-카르복실레이트(52a)(1.4 g, 수율: 91%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 596.4 [M+1]+.
단계 2:
1-(1-((3aR,6aS)-옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(52b)
Figure pct00727
tert-부틸 (3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-카르복실레이트(52a)(1.5 g, 2.52 mmol)를 20 mL의 DCM 중에 용해시키고, 8 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-((3aR,6aS)-옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(52b)(1.6 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 496.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 2-((3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(52c)
Figure pct00728
상기 조 생성물 1-(1-((3aR,6aS)-옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(52b)(0.8 g)를 30 mL의 DCE 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(386 mg, 4.60 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 이어서 tert-부틸 2-옥소-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(550 mg, 2.30 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(731 mg, 3.45 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 시스템에 60 mL의 포화 중탄산나트륨 수용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 DCM(80 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2-((3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(52c)(0.63 g, 화합물 52a로부터 계산된 2-단계 수율: 70%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 719.5 [M+1]+.
단계 4:
1-(1-((3aR,6aS)-2-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(52d)
Figure pct00729
tert-부틸 2-((3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(52c)(300 mg, 0.42 mmol)를 5 mL의 메탄올 중에 용해시키고, 10 mL의 2 mol/L 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-((3aR,6aS)-2-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(52d)(0.36 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 619.4 [M+1]+.
단계 5:
5-(2-((3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 52)
Figure pct00730
상기 조 생성물 1-(1-((3aR,6aS)-2-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(52d)(0.36 g)를 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(138 mg, 1.64 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(166 mg, 0.60 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 여과하였다. 고체를 수집하고, 물로 세척하고, 이것을 50 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(2-((3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 52)(100 mg, 화합물 52c로부터 계산된 2-단계 수율: 27%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.06 (br.s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.68 - 7.60 (m, 3H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.29 - 7.24 (m, 1H), 7.20 - 6.99 (m, 6H), 5.84 (br.s, 2H), 4.98 - 4.90 (m, 1H), 4.83 - 4.71 (m, 1H), 3.44 - 3.29 (m, 4H), 3.25 - 3.14 (m, 2H), 2.94 - 2.66 (m, 4H), 2.64 - 2.31 (m, 9H), 2.30 - 2.07 (m, 5H), 2.07 - 1.93 (m, 4H), 1.89 - 1.59 (m, 6H), 1.46 - 1.32 (m, 2H).
LCMS m/z = 875.4 [M+1]+.
실시예 53:
5-((3aR,3'aR,6aS,6'aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)도데카하이드로-1H-[2,5'-바이(사이클로펜타[c]피롤)]-2'(1'H)-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 53)
Figure pct00731
단계 1:
tert-부틸 (3aR,3'aR,6aS,6'aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)도데카하이드로-1H-[2,5'-바이(사이클로펜타[c]피롤)]-2'(1'H)-카르복실레이트(53a)
Figure pct00732
상기 조 생성물 1-(1-((3aR,6aS)-옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(52b)(0.5 g)를 30 mL의 DCE 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(386 mg, 4.60 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 이어서 tert-부틸 (3aR,6aS)-5-옥소 헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-카르복실레이트(0.45 g, 2.0 mmol)를 첨가하고, 40℃에서 1시간 동안 반응을 계속하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.42 g, 2.0 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 시스템에 60 mL의 포화 중탄산나트륨 수용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 DCM(80 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3aR,3'aR,6aS,6'aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)도데카하이드로-1H-[2,5'-바이(사이클로펜타[c]피롤)]-2'(1'H)-카르복실레이트(53a)(0.25 g, 화합물 52a로부터 계산된 2-단계 수율: 45%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 705.5 [M+1]+.
단계 2:
3-(4-페녹시페닐)-1-(1-((3aR,3'aR,6aS,6'aS)-테트라데카하이드로-1H-[2,5'-바이(사이클로펜타[c]피롤)]-5-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(53b)
Figure pct00733
tert-부틸 (3aR,3'aR,6aS,6'aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)도데카하이드로-1H-[2,5'-바이(사이클로펜타[c]피롤)]-2'(1'H)-카르복실레이트(53a)(0.25 g, 0.35 mmol)를 8 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 2 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 3-(4-페녹시페닐)-1-(1-((3aR,3'aR,6aS,6'aS)-테트라데카하이드로-1H-[2,5'-바이(사이클로펜타[c]피롤)]-5-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(53b)(0.2 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 605.4 [M+1]+.
단계 3:
5-((3aR,3'aR,6aS,6'aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)도데카하이드로-1H-[2,5'-바이(사이클로펜타[c]피롤)]-2'(1'H)-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 53)
Figure pct00734
상기 조 생성물 3-(4-페녹시페닐)-1-(1-((3aR,3'aR,6aS,6'aS)-테트라데카하이드로-1H-[2,5'-바이(사이클로펜타[c]피롤)]-5-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(53b)(0.32 g)를 10 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(0.14 g, 1.67 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 DIPEA(0.13 g, 1.0 mmol) 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(0.12 g, 0.43 mmol)을 첨가하고, 90℃에서 4시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 에틸 아세테이트 및 50 mL의 물을 첨가하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-((3aR,3'aR,6aS,6'aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)도데카하이드로-1H-[2,5'-바이(사이클로펜타[c]피롤]]-2'(1'H)-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(화합물 53)(50 mg)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.56 (br.s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.67 - 7.60 (m, 3H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.20 - 7.04 (m, 5H), 6.95 (d, 1H), 6.69 (dd, 1H), 5.56 (br.s, 2H), 4.92 (dd, 1H), 4.84 - 4.70 (m, 1H), 3.62 - 3.52 (m, 2H), 3.43 - 3.35 (m, 2H), 3.26 - 3.13 (m, 2H), 2.94 - 2.37 (m, 15H), 2.37 - 1.93 (m, 13H).
LCMS m/z = 861.4 [M+1]+.
실시예 54:
5-(7-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 54)
Figure pct00735
단계 1:
tert-부틸 7-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(54a)
Figure pct00736
1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17b)(1.0 g, 2.26 mmol)을 30 mL의 DCE 중에 용해시키고, 및 tert-부틸 7-옥소-2-아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(0.82 g, 3.43 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.2 g, 5.66 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 시스템에 60 mL의 포화 중탄산나트륨 수용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 DCM(80 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 7-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(54a)(1.2 g, 수율: 80%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 665.3 [M+1]+.
단계 2:
1-(1-(1-(2-아자스피로[3.5]노난-7-일)아제티딘-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시-페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(54b)
Figure pct00737
tert-부틸 7-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(54a)(300 mg, 0.45 mmol)를 5 mL의 메탄올 중에 용해시키고, 10 mL의 2 mol/L 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-(1-(2-(아자스피로[3.5]노난-7-일)아제티딘-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(54b)(0.35 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 565.4 [M+1]+.
단계 3:
5-(7-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 54)
Figure pct00738
상기 조 생성물 1-(1-(1-(2-(아자스피로[3.5]노난-7-일)아제티딘-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(54b)(0.35 g)를 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(152 mg, 1.81 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(186 mg, 0.67 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 여과하였다. 고체를 수집하고, 물로 세척하고, 이것을 50 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(7-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 54)(95 mg, 화합물 54a로부터 계산된 2-단계 수율: 26%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.23 (br.s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.68 - 7.59 (m, 3H), 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.21 - 7.11 (m, 3H), 7.11 - 7.05 (m, 2H), 6.76 (d, 1H), 6.49 (dd, 1H), 5.64 (br.s, 2H), 4.93 (dd, 1H), 4.84 - 4.72 (m, 1H), 3.78 - 3.56 (m, 6H), 3.15 - 2.65 (m, 8H), 2.49 - 2.36 (m, 2H), 2.16 - 1.94 (m, 8H), 1.81 - 1.72 (m, 2H), 1.59 - 1.49 (m, 2H), 1.26 - 1.16 (m, 2H).
LCMS m/z = 821.4 [M+1]+.
실시예 55:
5-(7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2,2'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-2'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 55)
Figure pct00739
단계 1:
tert-부틸 7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(55a)
Figure pct00740
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015, 58, 9625-9638] 참조)(1.0 g, 2.59 mmol)을 35 mL의 DCE 중에 용해시키고, 및 tert-부틸 7-옥소-2-아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(0.93 g, 3.89 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(1.37 g, 6.46 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 30 mL의 포화 중탄산나트륨 수용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 DCM(30 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(55a)(1.4 g, 수율: 89%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 610.4 [M+1]+.
단계 2:
1-(1-(2-아자스피로[3.5]노난-7-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(55b)
Figure pct00741
tert-부틸 7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(55a)(1.4 g, 2.30 mmol)를 5 mL의 메탄올 중에 용해시고, 25 mL의 2 mol/L 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-(2-아자스피로[3.5]노난-7-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(55b)(1.5 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 510.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2,2'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-2'-카르복실레이트(55c)
Figure pct00742
상기 조 생성물 1-(1-(2-아자스피로[3.5]노난-7-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(55b)(0.8 g)를 40 mL의 DCE 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(330 mg, 3.93 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하고, tert-부틸 7-옥소-2-아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(0.47 g, 1.96 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.70 g, 3.30 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 시스템에 60 mL의 포화 중탄산나트륨 수용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 DCM(80 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2,2'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-2'-카르복실레이트(55c)(0.70 g, 화합물 55a로부터 계산된 2-단계 수율: 78%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 733.3 [M+1]+.
단계 4:
1-(1-(2,2'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-7-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(55d)
Figure pct00743
tert-부틸 7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2,2'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-2'-카르복실레이트(55c)(300 mg, 0.41 mmol)를 5 mL의 메탄올 중에 용해시키고, 15 mL의 2 mol/L 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-(2,2'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난-7-일]피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(55d)(0.32 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 633.5 [M+1]+.
단계 5:
5-(7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2,2'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-2'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 55)
Figure pct00744
상기 조 생성물 1-(1-(2,2'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난-7-일]피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(55d)(0.32 g)를 25 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(138 mg, 1.64 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(166 mg, 0.60 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 여과하였다. 고체를 수집하고, 물로 세척하고, 이것을 50 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2,2'-디아자[2,7'-바이스피로[3.5]노난]-2'-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 55)(70 mg, 화합물 55c로부터 계산된 2-단계 수율: 19%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.13 (br.s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.71 - 7.57 (m, 3H), 7.43 - 7.33 (m, 2H), 7.22 - 7.02 (m, 5H), 6.76 (d, 1H), 6.49 (dd, 1H), 5.62 (br.s, 2H), 4.97 - 4.88 (m, 1H), 4.83 - 4.68 (m, 1H), 3.76 - 3.60 (m, 4H), 3.40 - 2.60 (m, 9H), 2.50 - 2.26 (m, 5H), 2.19 - 1.92 (m, 8H), 1.88 - 1.70 (m, 4H), 1.58 - 1.41 (m, 4H), 1.35 - 1.23 (m, 4H).
LCMS m/z = 889.4 [M+1]+.
실시예 56:
5-(3-(7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 56)
Figure pct00745
단계 1:
tert-부틸 3-(7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-일)아제티딘-1-카르복실레이트(56a)
Figure pct00746
1-(1-(2-아자스피로[3.5]노난-7-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(55b)(0.6 g)를 40 mL의 DCE 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(247 mg, 2.94 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 이어서 tert-부틸 3-옥소아제티딘-1-카르복실레이트(337 mg, 1.97 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.52 g, 2.45 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 시스템에 60 mL의 포화 중탄산나트륨 수용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 DCM(80 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-(7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-일)아제티딘-1-카르복실레이트(56a)(0.44 g, 화합물 55a로부터 계산된 2-단계 수율: 72%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 665.4 [M+1]+.
단계 2:
1-(1-(2-(아제티딘-3-일)-2-아자스피로[3.5]노난-7-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(56b)
Figure pct00747
tert-부틸 3-(7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-일)아제티딘-1-카르복실레이트(56a)(250 mg, 0.38 mmol)를 5 mL의 메탄올 중에 용해시키고, 15 mL의 2 mol/L 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-(2-(아제티딘-3-일)-2-아자스피로[3.5]노난-7-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(56b)(0.28 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 565.1 [M+1]+.
단계 5:
5-(3-(7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 56)
Figure pct00748
1-(1-(2-(아제티딘-3-일)-2-아자스피로[3.5]노난-7-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(56b)(0.28 g)를 15 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(127 mg, 1.51 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 1.5 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(157 mg, 0.57 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 여과하였다. 고체를 수집하고, 물로 세척하고, 이것을 50 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-(7-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-2-아자스피로[3.5]노난-2-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 56)(110 mg, 화합물 56a로부터 계산된 2-단계 수율: 35%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.64 (br.s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.68 - 7.59 (m, 3H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.20 - 7.10 (m, 3H), 7.10 - 7.04 (m, 2H), 6.77 (d, 1H), 6.50 (dd, 1H), 5.75 (br.s, 2H), 4.92 (dd, 1H), 4.85 - 4.68 (m, 1H), 4.07 - 3.96 (m, 2H), 3.88 - 3.78 (m, 2H), 3.72 - 3.62 (m, 1H), 3.20 - 2.96 (m, 6H), 2.92 - 2.65 (m, 3H), 2.58 - 2.28 (m, 5H), 2.17 - 2.07 (m, 2H), 2.07 - 2.03 (m, 2H), 2.03 - 1.97 (m, 1H), 1.91 - 1.81 (m, 2H), 1.53 - 1.42 (m, 2H), 1.39 - 1.30 (m, 2H).
LCMS m/z = 821.2 [M+1]+.
실시예 57:
5-(3-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 57)
Figure pct00749
Figure pct00750
단계 1:
tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트(57a)
Figure pct00751
3-(4-페녹시페닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1a)(합성 방법에 대해서는 문헌[J. Med. Chem. 2015, 58, 9625-9638] 참조)(5.0 g, 12.94 mmol)을 85 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 3-옥소-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트(5.82 g, 25.83 mmol)를 첨가하고, 반응물을 55℃에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 실온까지 냉각시켰다. 트리아세톡시붕수소화나트륨(8.23 g, 38.83 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 100 mL의 포화 중탄산나트륨 수용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 DCM(120 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 150 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 20 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-(4-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트(57a)(0.4 g, 수율: 5%)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), 7.68 - 7.61 (m, 2H), 7.42 - 7.35 (m, 2H), 7.21 - 7.05 (m, 5H), 5.53 (br.s, 2H), 4.85 - 4.65 (m, 1H), 4.40 - 4.15 (m, 2H), 3.18 - 2.99 (m, 2H), 2.98 - 2.82 (m, 1H), 2.48 - 2.30 (m, 4H), 2.11 - 1.91 (m, 4H), 1.83 - 1.59 (m, 6H), 1.47 (s, 9H).
LCMS m/z = 596.4 [M+1]+.
단계 2:
1-(1-(8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(57b)
Figure pct00752
tert-부틸 3-(4-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트(57a)(0.38 g, 0.64 mmol)를 5 mL의 메탄올 중에 용해시키고, 25 mL의 2 mol/L 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완료 후에, 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-(8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(57b)(0.4 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 496.3 [M+1]+.
단계 3:
tert-부틸 3-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)아제티딘-1-카르복실레이트(57c)
Figure pct00753
상기 조 생성물 1-(1-(8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(57b)(0.17 g)를 20 mL의 DCE 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(96 mg, 1.14 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 이어서 N-Boc-아제티디논(96 mg, 0.56 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(0.18 g, 0.85 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 시스템에 20 mL의 포화 중탄산나트륨 수용액을 서서히 첨가하고, 혼합된 용액을 DCM(50 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)아제티딘-1-카르복실레이트(57c)(0.16 g, 화합물 57a로부터 계산된 2-단계 수율: 90%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 651.4 [M+1]+.
단계 4:
1-(1-(8-(아제티딘-3-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(57d)
Figure pct00754
tert-부틸 3-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)아제티딘-1-카르복실레이트(57c)(150 mg, 0.23 mmol)를 5 mL의 메탄올 중에 용해시키고, 15 mL의 2 mol/L 에틸 아세테이트 염화염 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 시스템을 직접 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-(8-(아제티딘-3-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(57d)(0.16 g)를 수득하였다.
LCMS m/z = 551.3 [M+1]+.
단계 5:
5-(3-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 57)
Figure pct00755
상기 조 생성물 1-(1-(8-(아제티딘-3-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(57d)(0.16 g)를 10 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(78 mg, 0.93 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 1.0 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(95 mg, 0.34 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 50 mL의 물을 첨가하고, 여과하였다. 고체를 수집하고, 물로 세척하고, 이것을 50 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 57)(80 mg, 화합물 57c로부터 계산된 2-단계 수율: 43%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.30 (br.s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.68 - 7.59 (m, 3H), 7.43 - 7.34 (m, 2H), 7.21 - 7.03 (m, 5H), 6.77 (d, 1H), 6.50 (dd, 1H), 5.68 (br.s, 2H), 4.92 (dd, 1H), 4.83 - 4.67 (m, 1H), 4.18 - 4.04 (m, 2H), 3.86 - 3.77 (m, 2H), 3.76 - 3.62 (m, 1H), 3.36 - 3.26 (m, 2H), 3.22 - 3.03 (m, 2H), 2.93 - 2.65 (m, 4H), 2.51 - 2.27 (m, 4H), 2.17 - 1.92 (m, 5H), 1.84 - 1.60 (m, 6H).
LCMS m/z = 807.1 [M+1]+.
실시예 58:
5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 58)
Figure pct00756
상기 조 생성물 1-(1-(8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 하이드로클로라이드(57b)(0.2 g)를 10 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 고체 중탄산나트륨(113 mg, 1.35 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 이어서 1.0 mL의 DIPEA 및 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(139 mg, 0.50 mmol)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 20 mL의 물을 첨가하고, 여과하였다. 고체를 수집하고, 물로 세척하고, 이것을 50 mL의 디클로로메탄으로 용해시키고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 58)(110 mg, 화합물 57a로부터 계산된 2-단계 수율: 46%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.06 (br.s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.70 - 7.64 (m, 1H), 7.64 - 7.58 (m, 2H), 7.41 - 7.33 (m, 2H), 7.19 - 7.03 (m, 6H), 6.92 (dd, 1H), 5.64 (br.s, 2H), 4.97 - 4.89 (m, 1H), 4.77 - 4.64 (m, 1H), 4.47 - 4.39 (m, 2H), 3.10 - 2.65 (m, 6H), 2.42 - 2.24 (m, 4H), 2.18 - 2.08 (m, 3H), 2.04 - 1.94 (m, 2H), 1.92 - 1.82 (m, 2H), 1.82 - 1.74 (m, 4H).
LCMS m/z = 752.3 [M+1]+.
실시예 59:
5-(3-((3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 59)
Figure pct00757
단계 1:
tert-부틸 3-((3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)아제티딘-1-카르복실레이트(59a)
Figure pct00758
상기 조 생성물 1-(1-((3aR,6aS)-옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 트리플루오로아세테이트(52b)(270 mg)를 6 mL의 DCE 중에 용해시키고, 1-Boc-3-아제티디논(188 mg, 1.10 mmol), 빙초산(0.08 mL) 및 무수 황산나트륨(400 mg)을 실온에서 연속적으로 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(400 mg, 1.89 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 물을 첨가하고, 수성 상의 pH를 2 mol/L 수산화나트륨 수용액을 사용하여 10으로 조정하고, 생성된 용액을 디클로로메탄(30 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 물(20 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1 내지 8 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-((3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)아제티딘-1-카르복실레이트(59a)(265 mg, 화합물 52a로부터 계산된 2-단계 수율: 96%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 651.4 [M+1]+.
단계 2:
1-(1-((3aR,6aS)-2-(아제티딘-3-일)옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(59b)
Figure pct00759
tert-부틸 3-((3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)아제티딘-1-카르복실레이트(59a)(210 mg, 0.32 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 1 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 반응시켰다. 반응 용액의 pH를 2 mol/L 수산화나트륨 수용액을 사용하여 10으로 조정하고, 수성 상을 디클로로메탄(10 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-((3aR,6aS)-2-(아제티딘-3-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(59b)(165 mg)을 수득하였다.
LCMS m/z = 551.4 [M+1]+.
단계 3:
5-(3-((3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 59)
Figure pct00760
상기 조 생성물 1-(1-((3aR,6aS)-2-(아제티딘-3-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(59b)(165 mg)을 5 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(82 mg, 0.30 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(194 mg, 1.50 mmol)을 실온에서 첨가하고, 혼합물을 80℃까지 가온하고, 4시간 동안 반응시켰다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 이어서 20 mL의 물에 붓고, 수성 상을 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1의 혼합 용매(30 mL x 3)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1 내지 8 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-((3aR,6aS)-5-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-아제티딘-1-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 59)(108 mg, 화합물 59a로부터 계산된 2-단계 수율: 42%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.68 - 7.58 (m, 3H), 7.43 - 7.33 (m, 2H), 7.22 - 7.02 (m, 5H), 6.77 (d, 1H), 6.50 (dd, 1H), 5.43 (br.s, 2H), 4.93 (dd, 1H), 4.82 - 4.68 (m, 1H), 4.11 - 4.03 (m, 2H), 3.94 - 3.83 (m, 2H), 3.51 - 3.42 (m, 1H), 3.23 - 3.11 (m, 2H), 2.94 - 2.63 (m, 4H), 2.62 - 2.30 (m, 8H), 2.28 - 2.16 (m, 3H), 2.16 - 2.08 (m, 1H), 2.06 - 1.95 (m, 2H), 1.44 - 1.22 (m, 3H).
LCMS m/z = 807.4 [M+1]+.
실시예 60:
5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3':1',3"-터아제티딘]-1"-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 60)
Figure pct00761
단계 1:
tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3':1',3"-터라제티딘]-1"-카르복실레이트(60a)
Figure pct00762
1-[1-[1-(아제티딘-3-일)아제티딘-3-일]-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17d)(496 mg, 1.00 mmol)을 10 mL의 DCE 중에 용해시키고, 1-Boc-3-아제티디논(342 mg, 2.00 mmol), 빙초산(0.15 mL) 및 무수 황산나트륨(800 mg)을 실온에서 연속적으로 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(726 mg, 3.43 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 물을 첨가하고, 수성 상의 pH를 2 N 수산화나트륨 수용액을 사용하여 10으로 조정하고, 생성된 용액을 디클로로메탄(30 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 물(20 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1 내지 8 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3':1',3"-터라제티딘]-1"-카르복실레이트(60a)(521 mg, 수율: 80%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 652.5 [M+1]+.
단계 2:
1-(1-([1,3':1',3"-터아제티딘]-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(60b)
Figure pct00763
tert-부틸 3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3':1',3"-터라제티딘]-1"-카르복실레이트(60a)(143 mg, 0.22 mmol)를 4 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 2 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 반응시켰다. 반응 용액의 pH를 2 mol/L 수산화나트륨 수용액을 사용하여 10으로 조정하고, 수성 상을 디클로로메탄(10 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-([1,3':1',3"-터아제티딘]-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(60b)(113 mg)을 수득하였다.
LCMS m/z = 552.4 [M+1]+.
단계 3:
5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3':1',3"-터아제티딘]-1"-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 60)
Figure pct00764
상기 조 생성물 1-(1-([1,3':1',3"-터아제티딘]-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(60b)(113 mg)을 5 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(55 mg, 0.20 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(129 mg, 1.00 mmol)을 실온에서 첨가하고, 혼합물을 80℃까지 가온하고, 3.5시간 동안 반응시켰다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 이어서 20 mL의 물에 붓고, 수성 상을 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1의 혼합 용매(30 mL x 3)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 40 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1 내지 8 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)-[1,3':1',3"-터아제티딘]-1"-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 60)(99 mg, 화합물 60a로부터 계산된 2-단계 수율: 56%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.37 (s, 1H), 7.68 - 7.59 (m, 3H), 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.21 - 7.11 (m, 3H), 7.11 - 7.05 (m, 2H), 6.76 (d, 1H), 6.49 (dd, 1H), 5.72 (br.s, 2H), 4.96 - 4.87 (m, 1H), 4.84 - 4.70 (m, 1H), 4.08 - 3.96 (m, 2H), 3.88 - 3.78 (m, 2H), 3.69 - 3.60 (m, 1H), 3.60 - 3.51 (m, 2H), 3.44 - 3.32 (m, 3H), 3.18 - 2.96 (m, 5H), 2.96 - 2.64 (m, 5H), 2.50 - 2.33 (m, 2H), 2.16 - 1.97 (m, 5H).
LCMS m/z = 808.4 [M+1]+.
실시예 61:
5-((3aR,6aS)-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 61)
Figure pct00765
단계 1:
tert-부틸 (3aR,6aS)-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-카르복실레이트(61a)
Figure pct00766
1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17b)(650 mg, 1.47 mmol)을 12 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 (3aR,6aS)-5-옥소 헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-카르복실레이트(451 mg, 2.00 mmol), 빙초산(0.14 mL) 및 무수 황산나트륨(700 mg)을 실온에서 연속적으로 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(636 mg, 3.00 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 물을 첨가하고, 수성 상의 pH를 2 mol/L 수산화나트륨 수용액을 사용하여 10으로 조정하고, 생성된 용액을 디클로로메탄(30 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 물(20 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1 내지 8 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 (3aR,6aS)-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-카르복실레이트(61a)(310 mg, 수율: 32%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 651.4 [M+1]+.
단계 2:
1-(1-((3aR,6aS)-2-(아제티딘-3-일)옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(61b)
Figure pct00767
tert-부틸 (3aR,6aS)-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-카르복실레이트(61a)(310 mg, 0.48 mmol)를 3 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 2 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 반응시켰다. 반응 용액의 pH를 2 mol/L 수산화나트륨 수용액을 사용하여 10으로 조정하고, 수성 상을 디클로로메탄(10 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 조 생성물 1-(1-((3aR,6aS)-2-(아제티딘-3-일)옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(61b)(255 mg)을 수득하였다.
LCMS m/z = 551.4 [M+1]+.
단계 3:
5-((3aR,6aS)-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 61)
Figure pct00768
상기 조 생성물 1-(1-((3aR,6aS)-2-(아제티딘-3-일)옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(61b)(200 mg)을 8 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(99 mg, 0.36 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(233 mg, 1.80 mmol)을 실온에서 첨가하고, 혼합물을 80℃까지 가온하고, 4시간 동안 반응시켰다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 이어서 20 mL의 물에 붓고, 수성 상을 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1의 혼합 용매(30 mL x 3)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1 내지 8 : 1)로 분리하고 정제하여 5-((3aR,6aS)-5-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)헥사하이드로사이클로펜타[c]피롤-2(1H)-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 61)(148 mg, 화합물 61a로부터 계산된 2-단계 수율: 49%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.52 (br.s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.69 - 7.60 (m, 3H), 7.44 - 7.34 (m, 2H), 7.24 - 7.02 (m, 5H), 6.96 (d, 1H), 6.67 (dd, 1H), 5.48 (br.s, 2H), 4.92 (dd, 1H), 4.83 - 4.70 (m, 1H), 3.70 - 3.43 (m, 4H), 3.42 - 3.30 (m, 2H), 3.10 - 2.65 (m, 10H), 2.49 - 2.32 (m, 2H), 2.16 - 1.94 (m, 6H), 1.52 - 1.20 (m, 4H).
LCMS m/z = 807.4 [M+1]+.
실시예 62:
5-(2-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 62)
Figure pct00769
단계 1:
tert-부틸 2-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(62a)
Figure pct00770
1-[1-(아제티딘-3-일)-4-피페리딜]-3-(4-페녹시페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(17b)(650 mg, 1.47 mmol)을 12 mL의 DCE 중에 용해시키고, tert-부틸 2-옥소-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(479 mg, 2.00 mmol), 빙초산(0.14 mL) 및 무수 황산나트륨(700 mg)을 실온에서 연속적으로 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 트리아세톡시붕수소화나트륨(636 mg, 3.00 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 용액에 50 mL의 물을 첨가하고, 수성 상의 pH를 2 mol/L 수산화나트륨 수용액을 사용하여 10으로 조정하고, 생성된 용액을 디클로로메탄(30 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 물(20 mL x 2)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1 내지 8 : 1)로 분리하고 정제하여 tert-부틸 2-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(62a)(404 mg, 수율: 41%)를 수득하였다.
LCMS m/z = 665.4 [M+1]+.
단계 2:
1-(1-(1-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)아제티딘-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(62b)
Figure pct00771
tert-부틸 2-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(62a)(200 mg, 0.30 mmol)를 2 mL의 디클로로메탄 중에 용해시키고, 1 mL의 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 반응 용액의 pH를 2 mol/L 수산화나트륨 수용액을 사용하여 10으로 조정하고, 수성 상을 디클로로메탄(10 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물 1-(1-(1-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)아제티딘-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(62b)(161 mg)을 수득하였다.
LCMS m/z = 565.4 [M+1]+.
단계 3:
5-(2-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 62)
Figure pct00772
상기 조 생성물 1-(1-(1-(7-아자스피로[3.5]노난-2-일)아제티딘-3-일)피페리딘-4-일)-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(62b)(161 mg)을 6 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-5-플루오로이소인돌린-1,3-디온(합성 방법에 대해서는 WO 2017197056 참조)(80 mg, 0.29 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(188 mg, 1.45 mmol)을 실온에서 첨가하고, 혼합물을 80℃까지 가온하고, 4시간 동안 반응시켰다. 반응 용액을 실온까지 냉각시키고, 이어서 20 mL의 물에 붓고, 수성 상을 디클로로메탄/메탄올(v/v) = 10 : 1의 혼합 용매(30 mL x 3)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, 50 mL의 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시키고, 이어서 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄/메탄올(v/v) = 15 : 1 내지 8 : 1)로 분리하고 정제하여 5-(2-(3-(4-(4-아미노-3-(4-페녹시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피페리딘-1-일)아제티딘-1-일)-7-아자스피로[3.5]노난-7-일)-2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)이소인돌린-1,3-디온(화합물 62)(128 mg, 화합물 62a로부터 계산된 2-단계 수율: 52%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.34 (br.s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.70 - 7.60 (m, 3H), 7.43 - 7.33 (m, 2H), 7.27 - 7.24 (m, 1H), 7.20 - 6.99 (m, 6H), 5.82 (br.s, 2H), 5.00 - 4.89 (m, 1H), 4.85 - 4.71 (m, 1H), 3.67 - 3.51 (m, 2H), 3.46 - 3.21 (m, 5H), 3.16 - 2.66 (m, 8H), 2.50 - 2.33 (m, 2H), 2.20 - 1.92 (m, 7H), 1.87 - 1.61 (m, 6H).
LCMS m/z = 821.4 [M+1]+.
시험예
1. 세포 증식 억제에 대한 실험
RPMI1640 + 10% FBS의 배양 배지 중에서 SU-DHL-4, Mino, 및 SU-DHL-6 세포를 5% CO2 하에서 37℃에서 인큐베이터 내에서 배양하였다. 세포를 96웰 플레이트 내에서 플레이팅하였다. 구체적으로는, SU-DHL-4 세포는 20000개/웰로 플레이팅하고, Mino 및 SU-DHL-6 세포는 5000개/웰로 플레이팅하였으며, 이때 90 μL/웰이었다. 상이한 농도의 화합물 10 μL를 각각의 웰에 첨가하였다. 각각의 농도에 대해 3개의 반복시험 웰이 있었으며, DMSO가 첨가된 마지막 열은 비히클 대조군으로서 사용하였다. 5% CO2 하에서 37℃에서 72시간 동안 배양을 계속하였다. 72시간 후에, 100 μL의 검출 시약(Cell Viability Assay, Promega, G7573)을 각각의 웰에 첨가하고, 배양물을 2분 동안 균일하게 혼합하고, 실온에서 10분 동안 인큐베이션하였다. 마이크로플레이트 판독기(PHERAstar FSX)를 사용하여 형광 신호 값을 측정하였다. 세포 증식 억제에 대한 화합물의 IC50 값을 Origin 9.2 소프트웨어를 사용하여 계산하였으며, 화합물의 최고 농도에서의 억제율(Max inhi. %)을 식 1에 따라 계산하였다.
[식 1]
Max inhi. % = (1 - T72 투여/T72 비히클) x 100
RPMI1640 + 10% FBS의 배양 배지 중에서 OCI-LY10 및 TMD-8 세포를 5% CO2 하에서 37℃에서 인큐베이터 내에서 배양하였다. 세포를 96웰 플레이트 내에서 플레이팅하였다. 구체적으로는, OCI-LY10 세포는 10000개/웰로 플레이팅하고, TMD-8 세포는 8000개/웰로 플레이팅하였으며, 이때 90 μL/웰이었다. 이들 세포는 5% CO2 하에서 37℃에서 하룻밤 배양하였다. 다음날, 상이한 농도의 화합물 10 μL를 각각의 웰에 첨가하였다. 각각의 농도에 대해 3개의 반복시험 웰이 있었으며, DMSO가 첨가된 마지막 열은 비히클 대조군으로서 사용하였다. 5% CO2 하에서 37에서 72시간 동안 배양을 계속하였다. 72시간 후에, 50 μL의 검출 시약(Cell Viability Assay, Promega, G7573)을 각각의 웰에 첨가하고, 배양물을 2분 동안 균일하게 혼합하고, 실온에서 10분 동안 인큐베이션하였다. Envision2104 플레이트 판독기(PerkinElmer)를 사용하여 형광 신호 값을 측정하였다. 식 2를 사용하여 억제율을 계산하였는데, 여기서 RLU화합물은 약물 처리군의 판독치였고, RLU대조군은 비히클 대조군의 평균값이었으며, RLU블랭크는 세포-무함유 웰의 평균값이었다. IC50 값을 GraphPad Prism 소프트웨어를 사용하여 계산하였다.
[식 2]
IR (%) = (1 - (RLU화합물 - RLU블랭크)/(RLU대조군 - RLU블랭크)) * 100%
Mino 세포의 증식 억제에 대한 IC50 값에 대한 결과가 표 1에 나타나 있다.
[표 1]
Figure pct00773
*주: 이의 트리플루오로아세테이트를 나타냄.
Mino 세포의 증식 억제에 대한 Max inhi. % 값에 대한 결과가 표 1-1에 나타나 있다.
[표 1-1]
Figure pct00774
SU-DHL-4 세포의 증식 억제에 대한 IC50 값에 대한 결과가 표 2에 나타나 있다.
[표 2]
Figure pct00775
*주: 이의 트리플루오로아세테이트를 나타냄.
SU-DHL-4 세포의 증식 억제에 대한 Max inhi. % 값에 대한 결과가 표 2-1에 나타나 있다.
[표 2-1]
Figure pct00776
SU-DHL-6 세포의 증식 억제에 대한 IC50 값에 대한 결과가 표 2-2에 나타나 있다.
[표 2-2]
Figure pct00777
*주: 이의 트리플루오로아세테이트를 나타냄.
OCI-LY10 세포의 증식 억제에 대한 IC50 값에 대한 결과가 표 2-3에 나타나 있다.
[표 2-3]
Figure pct00778
*주: 이의 트리플루오로아세테이트를 나타냄.
TMD-8 세포의 증식 억제에 대한 IC50 값에 대한 결과가 표 2-4에 나타나 있다.
[표 2-4]
Figure pct00779
*주: 이의 트리플루오로아세테이트를 나타냄.
결론: 본 발명의 기법을 사용함으로써 합성된 화합물은 SU-DHL-4 세포 및 SU-DHL-6 세포(인간 B 림프종 세포), Mino 세포(외투 세포 림프종 세포), 및 OCI-LY10 세포(미만성 대 B 세포 림프종 세포) 및 TMD-8 세포(인간 미만성 대 B 림프종 세포)의 증식에 대해 유의한 억제 효과를 갖는다.
2. 래트에서의 약동학적 실험
목적: 이 실험에서는, 각각의 시험 화합물의 단회 용량을 SD 래트에 정맥내 및 위내 투여하고, 래트의 혈장 중 시험 화합물의 농도를 측정하고, 래트에서의 시험 화합물의 약동학적 특성 및 생체이용률을 평가하였다.
실험 동물: 수컷 SD 래트, 200 내지 250 g, 6 내지 8주령, 6 마리의 래트/시험 화합물. 실험 동물을 CHENGDU DOSSY EXPERIMENTAL ANIMALS CO., LTD로부터 구매하였다.
실험 방법: 실험 당일에, 6 마리의 SD 래트를 그들의 체중에 따라 무작위 군 분류를 실시하였다. 시험 화합물을 투여하기 하루 전에 12 내지 14시간 동안 물을 이용가능하게 하면서 동물들을 절식시키고, 동물들에게 투여 후 4시간째에 급식하였다. 투여 정보는 표 3에 제시되어 있다.
[표 3]
Figure pct00780
*투여량은 유리 염기에 기초하여 계산된다.
샘플링: 투여 전과 후에, 0.1 ml의 혈액을 이소플루란 마취 하에서 래트의 안와로부터 채취하고, EDTAK2 원심분리 튜브 내에 넣었다. 4℃에서 10분 동안 5000 rpm으로 원심분리를 수행하고, 혈장을 수집하였다.
G1 군에서의 혈장 수집의 시점은 다음과 같았다: 0, 5분, 15분, 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 및 24시간.
G2 군에서의 혈장 수집의 시점은 다음과 같았다: 0, 15분, 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 및 24시간.
분석 및 검출 전에, 모든 샘플을 -80℃에서 저장하였다. 샘플을 LC-MS/MS에 의해 정량적으로 분석하였다. 결과가 표 4에 제시되어 있다.
[표 4]
Figure pct00781
*주: 화합물의 i.g.(위내) 투여.
**주: 이의 트리플루오로아세테이트를 나타냄;
#주: 각각의 검출점에서의 농도는 정량 하한(lower limit of quantification)보다 0.5 ng/mL만큼 더 낮았다.
결론: 본 발명의 기법을 사용함으로써 합성된 화합물은 래트에서 특정 경구 생체이용률을 가졌다.
3. 마우스에서의 약동학적 실험
목적: 이 실험에서는, 각각의 시험 화합물의 단회 용량을 ICR 마우스에 정맥내 및 위내 투여하고, 마우스의 혈장 중 시험 화합물의 농도를 측정하고, 마우스에서의 시험 화합물의 약동학적 특성 및 생체이용률을 평가하였다.
실험 동물: 수컷 ICR 마우스, 20 내지 25 g, 6 내지 8주령, 24 마리의 마우스/화합물. 실험 동물을 CHENGDU DOSSY EXPERIMENTAL ANIMALS CO., LTD로부터 구매하였다.
실험 방법: 실험 당일에, 24 마리의 ICR 마우스를 그들의 체중에 따라 무작위 군 분류를 실시하였다. 시험 화합물을 투여하기 하루 전에 12 내지 14시간 동안 물을 이용가능하게 하면서 동물들을 절식시키고, 동물들에게 투여 후 4시간째에 급식하였다. 투여 정보는 표 5에 제시되어 있다.
[표 5]
Figure pct00782
*투여량은 유리 염기에 기초하여 계산된다.
샘플링: 투여 전과 후에, 0.06 ml의 혈액을 이소플루란 마취 하에서 마우스의 안와로부터 채취하고, EDTAK2 원심분리 튜브 내에 넣었다. 4℃에서 10분 동안 5000 rpm으로 원심분리를 수행하고, 혈장을 수집하였다.
G1 군에서의 혈장 수집의 시점은 다음과 같았다: 0, 5분, 15분, 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 및 24시간.
G2 군에서의 혈장 수집의 시점은 다음과 같았다: 0, 15분, 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 및 24시간.
분석 및 검출 전에, 모든 샘플을 -80에서 저장하였다. 샘플을 LC-MS/MS에 의해 정량적으로 분석하였다. 결과가 표 6에 제시되어 있다.
[표 6]
Figure pct00783
*주: 화합물의 i.g.(위내) 투여.
결론: 본 발명의 기법을 사용함으로써 합성된 화합물은 마우스에서 특정 경구 생체이용률을 가졌다.
4. 래트에서의 약동학적 실험
목적: 이 실험에서는, 각각의 시험 화합물의 단회 용량을 SD 래트에 정맥내 및 위내 투여하고, 래트의 혈장 중 시험 화합물의 농도를 측정하고, 래트에서의 시험 화합물의 약동학적 특성 및 생체이용률을 평가하였다.
실험 동물: 수컷 SD 래트, 200 내지 250 g, 6 내지 8주령, 6 마리의 래트/화합물. 실험 동물을 CHENGDU DOSSY EXPERIMENTAL ANIMALS CO., LTD로부터 구매하였다.
실험 방법: 실험 당일에, 6 마리의 SD 래트를 그들의 체중에 따라 무작위 군 분류를 실시하였다. 시험 화합물을 투여하기 하루 전에 12 내지 14시간 동안 물을 이용가능하게 하면서 동물들을 절식시키고, 동물들에게 투여 후 4시간째에 급식하였다. 투여 정보는 표 7에 제시되어 있다.
[표 7]
Figure pct00784
*투여량은 유리 염기에 기초하여 계산된다.
샘플링: 투여 전과 후에, 0.1 mL의 혈액을 이소플루란 마취 하에서 래트의 안와로부터 채취하고, EDTAK2 원심분리 튜브 내에 넣었다. 4℃에서 10분 동안 5000 rpm으로 원심분리를 수행하고, 혈장을 수집하였다.
G1 군에서의 혈장 수집의 시점은 다음과 같았다: 0, 5분, 15분, 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 및 24시간.
G2 군에서의 혈장 수집의 시점은 다음과 같았다: 0, 15분, 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 및 24시간.
분석 및 검출 전에, 모든 샘플을 -80℃에서 저장하였다. 샘플을 LC-MS/MS에 의해 정량적으로 분석하였다. 결과가 표 8에 제시되어 있다.
[표 8]
Figure pct00785
*주: 화합물의 i.g.(위내) 투여;
**주: 유리 형태;
#주: 각각의 검출점에서의 농도는 정량 하한보다 0.5 ng/mL만큼 더 낮았다.
결론: 본 발명의 기법을 사용함으로써 합성된 화합물은 래트에서 특정 경구 생체이용률을 가졌다.
5. Mino 세포에서의 BTK 분해의 검출
Mino 인간 외투 세포 림프종 세포주를 ATCC로부터 구매하고, 하기 조건 하에서 배양하였다: 5% CO2 하에서 37℃에서 인큐베이터 내에서 RPMI-1640 + 15% FBS + 1% 이중 항체 중에서. 세포를 5 x 105개의 세포/웰로 6웰 플레이트 내에서 플레이팅하였다. 플레이팅 후에, 상이한 농도의 화합물을 첨가하고, 5% CO2 하에서 37℃에서 48시간 동안 인큐베이터 내에서 배양하였다. 배양 후에, 세포를 수집하고, RIPA 용해 완충액(Beyotime, Cat. P0013B)을 첨가하였다. 세포를 15분 동안 얼음 상에서 용해시키고, 4℃에서 10분 동안 12000 rpm으로 원심분리시켰다. 상층액의 단백질 샘플을 수집하고, BCA 키트(Beyotime, Cat. P0009)를 사용함으로써 단백질을 정량화하고, 이어서 단백질을 0.25 mg/mL로 희석시켰다. BTK(CST, Cat. 8547S) 및 내부 참조물 β-액틴(CST, Cat. 3700S)의 발현을 키트(Protein Simple, Cat. SM-W004)와 함께 완전 자동화 웨스턴 블롯 정량적 분석기(Proteinsimple)를 사용하여 검출하였다. 내부 참조물 대비 BTK의 발현 수준을 Compass 소프트웨어를 사용하여 계산하였으며, Origen9.2 소프트웨어를 사용하여 식 3에 따라 DC50 값을 계산하였다. 구체적으로는, BTK투여는 상이한 용량의 투여군에서의 BTK의 발현 수준을 나타내고, BTK비히클은 비히클 대조군에서의 BTK의 발현 수준을 나타내었다. 결과가 표 9에 제시되어 있다.
[식 3]
BTK % = BTK투여/BTK비히클 x 100
[표 9]
Figure pct00786
결론: 본 발명의 기법을 사용함으로써 합성된 화합물은 Mino 세포에서 BTK에 대한 유의한 분해 효과를 가졌다.
6. 마우스의 비장에서의 BTK 단백질 분해의 검출
6 내지 8주령된 암컷 ICR 마우스를 BEIJING VITAL RIVER LABORATORY ANIMAL TECHNOLOGY CO., LTD로부터 구매하고, 3일의 적응화 후에 실험을 시작하였다. 연속 3일 동안 상이한 용량의 화합물의 위내 투여 후에, 마우스의 비장을 적출하고, 비장 세포를 수집하고, RIPA 용해 완충액(Beyotime, Cat. P0013B)을 첨가하였다. 세포를 15분 동안 얼음 상에서 용해시키고, 4℃에서 10분 동안 12000 rpm으로 원심분리시켰다. 상층액의 단백질 샘플을 수집하고, BCA 키트(Beyotime, Cat. P0009)를 사용함으로써 단백질을 정량화하고, 이어서 단백질을 0.25 mg/mL로 희석시켰다. BTK(CST, Cat. 8547S) 및 내부 참조물 β-액틴(CST, Cat. 3700S)의 발현을 완전 자동화 웨스턴 블롯 정량적 분석기(Proteinsimple)를 사용하여 검출하였다. 내부 참조물 대비 BTK의 발현 수준을 Compass 소프트웨어를 사용하여 계산하였으며, Origen9.2 소프트웨어를 사용하여 식 4에 따라 DD50 값을 계산하였다. 구체적으로는, BTK투여는 상이한 용량의 투여군에서의 BTK의 발현 수준을 나타내고, BTK비히클은 비히클 대조군에서의 BTK의 발현 수준을 나타내었다. 결과가 표 10에 제시되어 있다.
[식 4]
BTK % = BTK투여/BTK비히클 x 100
[표 10]
Figure pct00787
결론: 본 발명의 기법을 사용함으로써 합성된 화합물은 마우스의 비장에서 BTK 단백질에 대한 유의한 분해 효과를 가졌다.
7. 시험관내 키나제 분해
각각, 키나제 BTK wt(Carna, Cat. No 08-180) 및 BTK C481S(Carna, Cat. No 08-547)를 2.5x 키나제 용액이 되게 준비하고, 기질 FAM-P2(GL Biochem, Cat. No. 112394) 및 ATP((Sigma, Cat. No. A7699-1G)를 2.5x 기질 용액이 되게 준비하였다. 상이한 농도의 화합물 5 μL를 384웰 플레이트에 첨가하고, 10 μL의 2.5x 키나제 용액을 첨가하고, 배양물을 실온에서 10분 동안 인큐베이션하였다. 10 μL의 2.5x 기질 용액을 첨가하고, 혼합물을 적절한 기간 동안 28℃에서 인큐베이션하였다. 30 μL의 정지 용액을 첨가함으로써 반응을 정지시키고, Caliper EZ Reader2 기기를 사용하여 검출을 수행하였다. XLFit Excel Add-In 버전 5.4.0.8 소프트웨어를 사용하여 IC50 값을 계산하였다. 억제율의 계산식이 식 5에 나타나 있으며, 여기서 max는 DMSO 대조군의 판독치를 나타내고, min은 음성 대조군의 판독치를 나타내고, conversion은 화합물의 판독치를 나타내었다:
[식 5]
억제율 % = (max - conversion)/(max - min) * 100
결과가 표 11에 제시되어 있다:
[표 11]
Figure pct00788
결론: 본 발명의 기법을 사용함으로써 합성된 화합물은 BTKwt/C481S 키나제에 대한 유의한 억제 효과를 가졌다.

Claims (19)

  1. 일반 화학식 I로 나타낸 화합물 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정:
    [화학식 I]
    B-L-K
    (L은 -Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-로부터 선택되고;
    Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 및 Ak5는 각각 독립적으로 CH2, O 또는 결합으로부터 선택되고;
    Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 각각 독립적으로 3원 내지 12원 헤테로사이클릭 고리, 3원 내지 12원 사이클로알킬, 6원 내지 10원 아릴 또는 결합으로부터 선택되며, 여기서 헤테로사이클릭 고리, 사이클로알킬 또는 아릴은 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0 내지 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고, 헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고;
    Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 모두 결합일 수는 없고;
    Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 O일 때, 이들은 B에 직접 연결될 수 없고;
    Ak1, Ak2, Ak3, Ak4 또는 Ak5가 결합이 아닐 때, 이들은 서로 직접 연결될 수 없고;
    Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 3개가 결합일 때, Ak1, Ak2, Ak3, Ak4, 및 Ak5 중 적어도 하나는 CH2로부터 선택되고 B에 연결되고;
    Ak1, Cy1, Ak2, Cy2, Ak3, Cy3, Ak4, Cy4 및 Ak5 중 4개 이상이 결합이 아닐 때, Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4 중 적어도 하나는 피페리딜, 피페라지닐, 피리미디닐 또는 피리딜이 아니고;
    B는 B1-W1-B2-B3-B4-로부터 선택되고;
    B1은 6원 헤테로아릴 고리 또는 페닐로부터 선택되며, 여기서 헤테로아릴 고리 또는 페닐은 0 내지 4개의 Rb1로 선택적으로 추가로 치환되고, 헤테로아릴 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고;
    W1은 -O-, -S-, -NH-, -NHCO- 또는 -CONH-로부터 선택되고;
    B2는 6원 헤테로아릴 고리 또는 페닐로부터 선택되며, 여기서 헤테로아릴 고리 또는 페닐은 0 내지 4개의 Rb2로 선택적으로 추가로 치환되고, 헤테로아릴 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고;
    B3은 8원 내지 10원 융합 헤테로사이클릭 고리로부터 선택되며, 여기서 융합 헤테로사이클릭 고리는 0 내지 4개의 Rb3으로 선택적으로 추가로 치환되고, 융합 헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고;
    B4는 5원 또는 6원 포화 헤테로사이클릭 고리로부터 선택되며, 여기서 포화 헤테로사이클릭 고리는 0 내지 4개의 Rb4로 선택적으로 추가로 치환되고, 포화 헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 함유하고;
    Rb1, Rb2, Rb3 또는 Rb4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되며, 여기서 알킬 및 알콕시는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0 내지 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
    K는
    Figure pct00789
    로부터 선택되고;
    Rk2는 CH2, C=O, S=O, 또는 SO2로부터 선택되고;
    Rk1, Rk3 또는 Rk4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, COOH, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되고;
    Rk5는 C=O 또는
    Figure pct00790
    로부터 선택되고; p1 또는 p2는 각각 독립적으로 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택됨).
  2. 제1항에 있어서,
    Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 각각 독립적으로 결합, 4원 내지 7원 모노-헤테로사이클릭 고리, 5원 내지 10원 융합 헤테로사이클릭 고리, 6원 내지 12원 스피로-헤테로사이클릭 고리, 7원 내지 10원 가교-헤테로사이클릭 고리, 4원 내지 7원 모노사이클로알킬, 5원 내지 10원 융합 사이클로알킬, 6원 내지 12원 스피로 사이클로알킬, 7원 내지 10원 가교 사이클로알킬 또는 6원 내지 10원 아릴로부터 선택되며, 여기서 아릴, 사이클로알킬, 모노-헤테로사이클릭 고리, 융합 헤테로사이클릭 고리, 스피로-헤테로사이클릭 고리 또는 가교-헤테로사이클릭 고리는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0 내지 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고, 모노-헤테로사이클릭 고리, 융합 헤테로사이클릭 고리, 스피로-헤테로사이클릭 고리 또는 가교-헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고;
    B1은 페닐 또는 피리딜로부터 선택되며, 여기서 페닐 또는 피리딜은 0 내지 4개의 Rb1로 선택적으로 추가로 치환되고, 헤테로아릴 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고;
    W1은 -O-, -NHCO- 또는 -CONH-로부터 선택되고;
    B2는 페닐 또는 피리딜로부터 선택되며, 여기서 페닐 또는 피리딜은 0 내지 4개의 Rb2로 선택적으로 추가로 치환되고, 헤테로아릴 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고;
    B3은 치환 또는 비치환된 이미다조피리미딘, 피라졸로피리미딘, 이미다조피라진, 피라졸로피라진, 이미다조테트라하이드로피리미딘, 또는 피라졸로테트라하이드로피리미딘으로부터 선택되며, 이들은 치환될 때, 0 내지 4개의 Rb3으로 선택적으로 추가로 치환되고, 융합 헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고;
    B4는 치환 또는 비치환된 아자사이클로펜틸, 피페리딘 또는 피페라진으로부터 선택되며, 여기서 아자사이클로펜틸, 피페리딘 또는 피페라진은 0 내지 4개의 Rb4로 선택적으로 추가로 치환되고, 포화 헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 함유하는 것인,
    화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정.
  3. 제2항에 있어서,
    Cy1, Cy2, Cy3 및 Cy4는 각각 독립적으로 결합, 페닐, 나프틸, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로부틸-융합-사이클로부틸, 사이클로부틸-융합-사이클로펜틸, 사이클로부틸-융합-사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-사이클로펜틸, 사이클로펜틸-융합-사이클로헥실, 사이클로헥실-융합-사이클로헥실, 사이클로프로필-융합-사이클로부틸, 사이클로프로필-융합-사이클로펜틸, 사이클로프로필-융합-사이클로헥실, 사이클로부틸-스피로-사이클로부틸, 사이클로부틸-스피로-사이클로펜틸, 사이클로부틸-스피로-사이클로헥실, 사이클로펜틸-스피로-사이클로펜틸, 사이클로펜틸-스피로-사이클로헥실, 사이클로헥실-스피로-사이클로헥실, 사이클로프로필-스피로-사이클로부틸, 사이클로프로필-스피로-사이클로펜틸, 사이클로프로필-스피로-사이클로헥실, 아제티디닐, 아자사이클로펜틸, 피페리딜, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 사이클로프로필-융합-아제티디닐, 사이클로프로필-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로프로필-융합-아자사이클로헥실, 사이클로프로필-융합-피페리딜, 사이클로부틸-융합-아제티디닐, 사이클로부틸-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로부틸-융합-아자사이클로헥실, 사이클로부틸-융합-피페리딜, 사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-융합-피페리딜, 사이클로헥실-융합-아제티디닐, 사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 사이클로헥실-융합-아자사이클로헥실, 사이클로헥실-융합-피페리딜, 아제티디닐-융합-아제티디닐, 아제티디닐-융합-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-융합-아자사이클로헥실, 아제티디닐-융합-피페리딜, 아자사이클로펜틸-융합-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-융합-피페리딜, 아자사이클로헥실-융합-아제티디닐, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-융합-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-융합-피페리딜, 사이클로부틸-스피로-아제티디닐, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로부틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 아제티디닐-스피로-아제티디닐, 아제티디닐-스피로-아자사이클로펜틸, 아제티디닐-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로펜틸-스피로-아제티디닐, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로펜틸-스피로-아자사이클로헥실, 아자사이클로헥실-스피로-아제티디닐, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로펜틸, 아자사이클로헥실-스피로-아자사이클로헥실, 사이클로부틸-스피로-피페리딜, 사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 사이클로헥실-스피로-피페리딜, 아제티디닐-스피로-피페리딜, 아자사이클로펜틸-스피로-피페리딜, 아자사이클로헥실-스피로-피페리딜,
    Figure pct00791
    Figure pct00792
    의 치환 또는 비치환된 기 중 하나로부터 선택되며, 이들은 치환될 때, H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0 내지 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
    B는
    Figure pct00793
    또는
    Figure pct00794
    로부터 선택되고;
    Rb1, Rb2, Rb3 또는 Rb4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, CONH2, 메틸 또는 메톡시로부터 선택되며, 여기서 메틸 또는 메톡시는 H, F, Cl, Br 또는 I로부터 선택되는 0 내지 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고;
    n1, n2, n3, n4, n5, n6, n7, n8, n9, n10, n11, 및 n12는 각각 독립적으로 0, 1, 2, 3 또는 4로부터 선택되고;
    K는
    Figure pct00795
    또는
    Figure pct00796
    로부터 선택되고;
    Rk2는 CH2 또는 C=O로부터 선택되고;
    Rk1, Rk3 또는 Rk4는 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, OH 또는 NH2로부터 선택되고;
    p1 또는 p2는 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로부터 선택되는 것인,
    화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정.
  4. 제3항에 있어서,
    L은
    Figure pct00797
    Figure pct00798
    Figure pct00799
    Figure pct00800
    로부터 선택되거나,
    L은
    Figure pct00801
    Figure pct00802
    또는
    Figure pct00803
    로부터 선택될 수 있거나,
    L은
    Figure pct00804
    Figure pct00805
    Figure pct00806
    Figure pct00807
    또는
    Figure pct00808
    로부터 선택될 수 있거나,
    L은 좌측으로 B에 연결되고, 우측으로 K에 연결되고;
    B는
    Figure pct00809
    Figure pct00810
    또는
    Figure pct00811
    로부터 선택되거나,
    B는
    Figure pct00812
    Figure pct00813
    Figure pct00814
    Figure pct00815
    또는
    Figure pct00816
    로부터 선택될 수 있고;
    K는
    Figure pct00817
    또는
    Figure pct00818
    로부터 선택되거나,
    K는
    Figure pct00819
    로부터 선택될 수 있는 것인,
    화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정.
  5. 제4항에 있어서,
    K는
    Figure pct00820
    Figure pct00821
    Figure pct00822
    또는
    Figure pct00823
    로부터 선택되는 것인,
    화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정.
  6. 제4항에 있어서,
    K는
    Figure pct00824
    Figure pct00825
    Figure pct00826
    또는
    Figure pct00827
    로부터 선택되는 것인,
    화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정.
  7. 제4항에 있어서,
    B는
    Figure pct00828
    로부터 선택되거나,
    B는
    Figure pct00829
    Figure pct00830
    Figure pct00831
    또는
    Figure pct00832
    로부터 선택될 수 있는 것인,
    화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정.
  8. 제4항에 있어서,
    B는
    Figure pct00833
    로부터 선택되거나,
    B는
    Figure pct00834
    로부터 선택될 수 있는 것인,
    화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정.
  9. 제4항에 있어서,
    B는
    Figure pct00835
    로부터 선택되거나,
    B는
    Figure pct00836
    로부터 선택될 수 있는 것인,
    화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정.
  10. 제4항에 있어서,
    B는
    Figure pct00837
    로부터 선택되거나,
    B는
    Figure pct00838
    로부터 선택될 수 있는 것인,
    화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정.
  11. 제2항에 있어서, 상기 화합물은 일반 화학식 Ia 또는 일반 화학식 Ib로 나타낸 화합물로부터 선택되는 것인, 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정:
    [화학식 Ia]
    B-Cy1-Cy2-K
    [화학식 Ib]
    B-Cy1-Cy2-Cy3-K
    (B는
    Figure pct00839
    Figure pct00840
    또는
    Figure pct00841
    Figure pct00842
    Figure pct00843
    또는
    Figure pct00844
    로부터 선택되고;
    Cy1, Cy2, 및 Cy3은 각각 독립적으로 4원 내지 6원 질소-함유 모노-헤테로사이클릭 고리, 5원 내지 10원 질소-함유 융합 헤테로사이클릭 고리, 6원 내지 10원 질소-함유 스피로-헤테로사이클릭 고리, 4원 내지 6원 모노사이클로알킬 또는 페닐의 치환 또는 비치환된 기 중 하나로부터 선택되며, 여기서 페닐, 사이클로알킬, 모노-헤테로사이클릭 고리, 융합 헤테로사이클릭 고리 또는 스피로-헤테로사이클릭 고리는 H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, 옥소, C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시로부터 선택되는 0 내지 4개의 치환체로 선택적으로 추가로 치환되고, 모노-헤테로사이클릭 고리, 융합 헤테로사이클릭 고리 또는 스피로-헤테로사이클릭 고리는 O, S 또는 N으로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고;
    K는
    Figure pct00845
    또는
    Figure pct00846
    로부터 선택됨).
  12. 제11항에 있어서,
    Cy1, Cy2, 및 Cy3은 각각 독립적으로
    Figure pct00847
    Figure pct00848

    Figure pct00849
    또는
    Figure pct00850
    의 치환 또는 비치환된 기 중 하나로부터 선택되고;
    K는
    Figure pct00851
    Figure pct00852
    Figure pct00853
    또는
    Figure pct00854
    로부터 선택되는 것인,
    화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정.
  13. 하기 중 하나로부터 선택되는 구조를 갖는 화합물 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정:
    Figure pct00855

    Figure pct00856

    Figure pct00857

    Figure pct00858

    Figure pct00859

    Figure pct00860

    Figure pct00861
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 염은 트리플루오로아세테이트로부터 선택되는 것인, 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물.
  16. BTK 활성 또는 발현 수준과 관련된 질병을 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서의 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정의 용도.
  17. BTK의 억제 또는 분해와 관련된 질병을 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서의 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 용매화물, 전구약물, 대사물, 약제학적으로 허용되는 염 또는 공결정의 용도.
  18. 제16항 또는 제17항에 있어서, 상기 질병은 종양 또는 자가면역 질병으로부터 선택되는 것인, 용도.
  19. 제18항에 있어서, 상기 종양은 비호지킨 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 외투 세포 림프종, 또는 B 세포 림프종으로부터 선택되고; 상기 자가면역 질병은 류마티스성 관절염 또는 건선으로부터 선택되는 것인, 용도.
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