KR20210091195A - 동물 세포 증식 촉진제, 동물 세포 배양용 배지 및 동물 세포 배양 장치 - Google Patents
동물 세포 증식 촉진제, 동물 세포 배양용 배지 및 동물 세포 배양 장치 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20210091195A KR20210091195A KR1020217016436A KR20217016436A KR20210091195A KR 20210091195 A KR20210091195 A KR 20210091195A KR 1020217016436 A KR1020217016436 A KR 1020217016436A KR 20217016436 A KR20217016436 A KR 20217016436A KR 20210091195 A KR20210091195 A KR 20210091195A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- medium
- cells
- culture
- cell culture
- animal
- Prior art date
Links
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 51
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 title claims abstract description 30
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 title claims description 22
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 45
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 claims abstract description 32
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 claims abstract description 31
- 241000270322 Lepidosauria Species 0.000 claims abstract description 11
- 241000271566 Aves Species 0.000 claims abstract description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 75
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 claims description 53
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 47
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 19
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 claims description 19
- 210000001325 yolk sac Anatomy 0.000 claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 claims description 7
- 210000003101 oviduct Anatomy 0.000 claims description 6
- 210000001691 amnion Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 4
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 claims description 2
- 241000938605 Crocodylia Species 0.000 claims 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 9
- 210000002151 serous membrane Anatomy 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 10
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 8
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 8
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 7
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 7
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 7
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 7
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 6
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 6
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 6
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 6
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 6
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 5
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 5
- 210000003278 egg shell Anatomy 0.000 description 5
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 5
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 5
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 4
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 4
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 3
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 3
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 3
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 210000003711 chorioallantoic membrane Anatomy 0.000 description 2
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 241000270722 Crocodylidae Species 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 108700037728 Glycine max beta-conglycinin Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 241000270666 Testudines Species 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 1
- 108010007093 dispase Proteins 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000012447 hatching Effects 0.000 description 1
- 210000002064 heart cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 210000002363 skeletal muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000025934 tissue morphogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/0018—Culture media for cell or tissue culture
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/58—Reaction vessels connected in series or in parallel
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
- C12M29/18—External loop; Means for reintroduction of fermented biomass or liquid percolate
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
- C12M29/26—Conditioning fluids entering or exiting the reaction vessel
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M39/00—Means for cleaning the apparatus or avoiding unwanted deposits of microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/44—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of volume or liquid level
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/46—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of cellular or enzymatic activity or functionality, e.g. cell viability
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/70—Undefined extracts
- C12N2500/80—Undefined extracts from animals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/70—Undefined extracts
- C12N2500/80—Undefined extracts from animals
- C12N2500/84—Undefined extracts from animals from mammals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
- C12N2502/02—Coculture with; Conditioned medium produced by embryonic cells
- C12N2502/025—Coculture with; Conditioned medium produced by embryonic cells extra-embryonic cells, e.g. amniotic epithelium, placental cells, Wharton's jelly
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2521/00—Culture process characterised by the use of hydrostatic pressure, flow or shear forces
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Clinical Laboratory Science (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
본 발명은, 신규한 동물 세포 증식 촉진제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 구체적으로는, 조류 또는 파충류 알의 배아막의 배양 상등액을 동물 세포 증식 촉진제로 사용한다. 예를 들어, 동물 세포 배양용 배지에 조류 또는 파충류 알의 배아막의 배양 상등액을 유효성분으로 함유하는 세포 증식제를 첨가함으로써. 동물 세포의 증식을 촉진할 수 있다.
Description
본 발명은, 동물 세포 증식 촉진제, 동물 세포 배양용 배지 및 동물 세포 배양 장치에 관한 것이다.
동물 세포 배양에서는 일반적으로 세포 증식을 유지하는 기능을 갖는 인자로서 배지에 우태아 혈청 등을 첨가한 혈청 배지나 혈청 대신 호르몬이나 증식 인자 등을 첨가한 무혈청 배지가 이용되고 있다.
이들 인자 이외에, 일본 특허 공개 2013-247927호 공보에는, 쌀겨 추출물이 배양 동물 세포에 대해 증식 촉진 작용을 갖는 것이 개시되어 있다. 또한, 일본 특허 공개 2011-182736호 공보에는, β-콘글리시닌 농축물의 가수분해물을 첨가한 배지에서 동물 세포를 배양하면 세포 증식률을 높일 수 있다는 것이 개시되어 있다. 또한, 일본 특허 공개 평7-188292호 공보에는, 인간 유래의 선유아세포의 배양 상등액에 포함되는 당 단백질이 인간 혈관 내피 세포 및 간 실질 세포의 증식을 촉진하는 것이 개시되어 있다. 또한, 일본 특허 공개 평5-301893호 공보에는, 인간 유래 신경 교종 세포주를 배양한 세포 배양 상등액에 포함되는 단백질이 신경교세포나 선유아세포에 대한 증식 촉진 효과를 갖는 것이 개시되어 있다.
본 발명은 신규한 동물 세포 증식 촉진제, 동물 세포 배양용 배지 및 동물 세포 배양 장치를 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명에 따른 일 실시양태는, 조류 또는 파충류 알의 배아막의 배양 상등액을 유효성분으로 함유하는 동물 세포 증식 촉진제이다. 상기 알이 닭의 알이어도 좋다. 상기 동물 세포 증식 촉진제가, 근육계 세포, 내장계 세포 또는 신경계 세포에 대한 세포 증식제여도 좋고, 간 세포, 췌장 세포, 수란관 세포에 대한 세포 증식제여도 좋다.
본 발명에 따른 다른 일 실시양태는, 상기 어느 하나에 기재된 세포 증식 촉진제를 함유하는 세포 배양용 배지이다.
본 발명에 따른 다른 일 실시양태는, 조류 또는 파충류 알의 배아막 유래 세포를 배양하는 제 1 배양조와, 증식을 목적으로 하는 동물 세포를 배양하는 제 2 배양조와, 제 1 배양조에서 제 2 배양조로 배지를 흐르게 하는 제 1 유로와, 제 2 배양조에서 제 1 배양조로 배지를 흐르게 하는 제 2 유로와, 제 1 배양조, 제 1 유로, 제 2 배양조, 제 2 유로의 순서로 세포 배양용 배지를 환류시키고, 상기 동물 세포 및/또는 상기 세포 배양용 배지의 상태에 따라, 제 1 유로 및 제 2 유로에 있어서의 상기 세포 배양용 배지의 흐름을 제어하는 배지 유량 제어부를 구비하는 동물 세포 배양 장치이다. 또한, 상기 환류하는 상기 세포 배양용 배지에 신선한 세포 배양용 배지를 도입하기 위한 배지 도입로와, 상기 환류하는 상기 세포 배양용 배지로부터 배양 후의 세포 배양용 배지를 제거하기 위한 배지 제거로를 추가로 가지며, 상기 배지 유량 제어부는, 상기 동물 세포 및/또는 상기 세포 배양용 배지의 상태에 따라, 상기 배지 도입로로부터의 상기 신선한 세포 배양용 배지의 도입 및 상기 배지 제거로로부터의 상기 배양 후의 세포 배양용 배지의 제거를 제어하는 것이어도 좋다.
==관련 문헌과의 상호 참조==
본 출원은 2018년 11월 8일자로 출원한 일본 특허 출원 2018-210910에 기초하는 우선권을 주장하는 것이며, 해당 기초 출원을 인용함으로써 본 명세서에 포함하는 것으로 한다.
도 1은 본 발명의 일 실시형태에 있어서의 세포 증식 장치의 모식도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에서, 계란 장뇨막의 배양 상등액을 배지에 첨가한 경우에, 도에 나타낸 조직(위, 골격근, 심장, 담낭, 장, 뇌, 파브리시우스낭 및 뼈) 유래의 세포에서 세포 증식이 촉진되는 것을 나타내는 관찰 결과의 사진이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에서, 간, 췌장 및 수란관 유래의 세포에 대하여, 도 1의 결과를 정량적으로 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에서, 계란 난황낭의 배양 상등액을 배지에 첨가한 경우에, 도에 나타낸 조직(위, 근육, 심장, 간, 장, 뇌, 파브리시우스낭 및 뼈) 유래의 세포에서 세포 증식이 촉진되는 것을 나타내는 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에서, 계란 장뇨막의 배양 상등액을 배지에 첨가한 경우에, 도에 나타낸 조직(위, 골격근, 심장, 담낭, 장, 뇌, 파브리시우스낭 및 뼈) 유래의 세포에서 세포 증식이 촉진되는 것을 나타내는 관찰 결과의 사진이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에서, 간, 췌장 및 수란관 유래의 세포에 대하여, 도 1의 결과를 정량적으로 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에서, 계란 난황낭의 배양 상등액을 배지에 첨가한 경우에, 도에 나타낸 조직(위, 근육, 심장, 간, 장, 뇌, 파브리시우스낭 및 뼈) 유래의 세포에서 세포 증식이 촉진되는 것을 나타내는 그래프이다.
본 발명의 목적, 특징, 이점 및 그 아이디어는 본 명세서의 기재에 의해 당업자에게는 명백하며, 본 명세서의 기재로부터 당업자라면 용이하게 본 발명을 재현할 수 있다. 이하에 기재된 발명의 실시양태 및 구체적인 실시예 등은, 본 발명의 바람직한 실시형태를 나타내는 것이며, 예시 또는 설명을 위해 나타나 있는 것으로서, 본 발명을 그들에 한정하는 것은 아니다. 본 명세서에서 개시되어 있는 본 발명의 의도 및 범위 내에서, 본 명세서의 기재에 기초하여 다양한 개변 및 수식이 가능한 것은 당업자에게 명백하다.
==동물 세포 증식 촉진제==
본 개시의 동물 세포 증식 촉진제는 조류 또는 파충류 알의 배아막의 배양 상등액을 유효성분으로 함유한다.
배아막을 채취하는 알의 유래인 조류 또는 파충류는, 메추라기, 닭, 도마뱀, 뱀, 악어, 거북이 등을 예시할 수 있으나, 이들에 한정되지 않고, 알의 배아막을 갖는 조류 또는 파충류의 동물이면 된다.
여기서 배아막이란, 조류·파충류의 발생 과정에서 배아체 바깥에 형성되어, 배아의 보호·영양·호흡 등의 기능을 하고, 부화 또는 출생 후 몸의 구축에는 가해지지 않는 막 조직을 의미하며, 예를 들어, 배아의 가장 바깥쪽에 위치하는 장막, 배아체를 감싸는 양막, 뇨낭(尿囊)을 만드는 뇨막(尿膜), 장막과 뇨막이 부분적으로 유착한 장뇨막(chorioallantoic membrane : CAM), 난황을 감싸는 난황낭 등을 들 수 있다.
배아막의 배양 상등액이란, 배아막을 단리하여 배양한 배지이다. 배양하는 배아막은, 상술한 장막, 양막, 뇨막, 뇨장막, 난황낭 등의 막 중, 한 종류를 배양하여도, 여러 종류를 혼합하여 배양하여도 좋다.
배아막은 공지의 방법으로 알에서 채취할 수 있다(예를 들어, 이치지마 에이지 : 화학과 생물, 13권 8호, p489-497(1975) 등을 참조). 예를 들어, 구체적으로는, 이하와 같은 방법으로 배아막을 단리할 수 있다. 먼저, 유정란을 소정 기간 인공 부화에 적합한 조건에서 인큐베이트한 후, 난각(卵殼)을 깨서, (1) 뇨막은, 배아의 소화관 뒷부분의 복측(腹側)에서 발생한 부푼 막을 취출함으로써 얻을 수 있고, (2) 양막은, 태아 주위에 존재하는 혈관이 주행하고 있지 않은 투명한 막 조직을 취출함으로써 얻을 수 있고, (3) 난황낭은, 난황을 감싸고 있는 막 조직을 취출함으로써 얻을 수 있고, (4) 장막은, 알 내의 모든 요소를 둘러싼 가장 바깥쪽에 있는 막 조직을 취출함으로써 얻을 수 있다. 또한, 인큐베이트하는 시간을 길게 하면 장막과 뇨막은 부분적으로 융합하여 장뇨막이 된다. 이 시기에 장뇨막은 난각과 접해 있어 혈관이 주행하고 있는 막 조직을 취출함으로써 얻을 수 있다. 인큐베이트하는 기간은 각 동물에 따라, 또한 목적의 막 조직에 따라 최적 기간을 적절하게 결정하면 좋고, 예를 들어, 계란의 경우, 4일 내지 21일이 바람직하고, 10일 내지 18일이 보다 바람직하고, 13일 내지 15일이 더욱 바람직하다. 이러한 배아막을 배양할 때, 막상(膜狀) 그대로 배양하여도 좋지만, 물리적으로 막을 파쇄하거나 프로테아제(예를 들어, 콜라게나제, 엘라스타제, 디스파제, 파파인 등)로 효소 처리를 실시하거나 함으로써, 배아막으로부터 배아막 유래의 세포를 단리하여 배양하여도 좋다.
배아막의 배양에는 일반적인 동물 세포 배양에 이용하는 배지를 사용할 수 있으며, 예를 들어, DMEM, F12 등을 예시할 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다. 이 배지에는 배지 첨가제로서 통상 배합되고 있는 서플리먼트를 첨가하여도 좋다. 배양조건도 통상의 동물 세포 배양에 사용되는 조건을 사용할 수 있으며, 전형적으로는 탄산 버퍼계의 배지를 사용하여, 5% CO2, 37℃에서 배양하지만, 배양조건은 이에 한정되지 않으며, 당업자가 적절하게 선택할 수 있다. 배양 시간은 특별히 한정되지 않지만, 1일 내지 7일이 바람직하고, 2일 내지 6일이 보다 바람직하다. 배양 후는, 상등액을 회수하고 그대로 세포 배양용 배지에 첨가해도 좋지만, 여과나 원심 분리 등으로 세포 잔사 등의 고형물을 제거하여 얻어지는 배지를 첨가하여도 좋다. 세포 배양용 배지로의 배양 상등액의 첨가량은 배양 세포의 증식 효과가 인정되는 유효량이면 특별히 제한되지 않지만, 배지 중 최종 농도는 20% 이상이 바람직하고, 35% 이상이 보다 바람직하며, 50% 이상이 더욱 바람직하다.
이 배양 상등액을 첨가한 세포 배양용 배지에서 배양하는 동물 세포의 종류는 특별히 한정되지 않고, 평활근 세포, 심근 세포, 골격근 세포 등의 근육계 세포, 심장 세포, 간 세포, 위 유래 세포, 장 유래 세포 등의 내장계 세포 또는 신경 세포나 신경교세포 등의 신경계 세포를 예시할 수 있다. 세포가 유래하는 동물 종류도 특별히 한정되지 않으며, 인간, 마우스, 랫트, 원숭이, 돼지 등을 예시할 수 있다.
이와 같이, 배아막 유래의 세포를 배양하여 얻어진 배양 상등액을 동물 세포 배양용 배지에 첨가함으로써, 배양하고 있는 동물 세포의 증식을 촉진시킬 수 있다. 따라서, 이 배양 상등액을 동물 세포 증식 촉진제로 사용할 수 있다.
또한, 배아막 유래 세포의 배양 상등액을 동물 세포 증식 촉진제로 사용하는 경우, 동시에 다른 세포 증식 인자를 사용해도 상관 없다.
==세포 증식 장치==
본 발명의 세포 증식 장치는, 조류 또는 파충류 알의 배아막 유래 세포를 배양하는 제 1 배양조와, 증식을 목적으로 하는 동물 세포를 배양하는 제 2 배양조와, 제 1 배양조에서 제 2 배양조로 배지를 흐르게 하는 제 1 유로와, 제 2 배양조에서 제 1 배양조로 배지를 흐르게 하는 제 2 유로와, 제 1 배양조, 제 1 유로, 제 2 배양조, 제 2 유로의 순서로 세포 배양용 배지를 환류시키고, 상기 동물 세포 및/또는 상기 세포 배양용 배지의 상태에 따라, 제 1 유로 및 제 2 유로에 있어서의 상기 세포 배양용 배지의 흐름을 제어하는 배지 유량 제어부를 구비한다.
제 1 배양조에서는, 상술한 바와 같은 동물 세포 증식 촉진제를 조제할 때에 실시하는 배아막 유래 세포의 배양 방법에 준한 배양을 실시한다. 제 2 배양조에서는, 상술한 바와 같은 동물 세포 증식 촉진제를 첨가한 배지에서 동물 세포를 배양하는 배양 방법에 준한 배양을 실시한다.
제 1 배양조와 제 2 배양조는, 제 1 유로와 제 2 유로로 유체 접속되어 있다. 예를 들어, 도 1(A)와 같이, 제 1 배양조 (11)와 제 2 배양조 (12)가 제 1 유로 (21)와 제 2 유로 (22)로 직접 접속되어 있어도 좋다. 제 1 배양조 (11)와 제 2 배양조 (12)가 유체 접속되어 있는 한, 하나 또는 복수의 다른 배양조를 설치하여도 좋고, 다른 배양조와, 제 1 배양조 (11) 또는 제 2 배양조 (12)와의 접속도 다양한 구성이 생각될 수 있다. 예를 들어, 도 1(B)와 같이, 제 1 유로 (21)의 도중에 제 3 배양조 (13)를 설치하고, 유로가 제 1 배양조 (11)에서 제 3 배양조 (13)를 통해 제 2 배양조 (12)에 접속되어 있어도 좋다. 또는, 도 1(C)와 같이, 제 2 배양조 (12)와는 독립적으로 제 3 배양조 (13)를 설치하고, 유로도 제 1 유로 (21)와 제 2 유로 (22)와는 별도로, 제 1 배양조 (11)와 제 3 배양조 (13)를 유체 접속하는 제 3 유로 (31)와 제 4 유로 (32)를 설치하여도 좋다. (B)나 (C)의 경우, 제 3 배양조 (13)에서 배양하는 세포를 적당히 선택함으로써, 그 세포가 제 1 배양조 (11)에서의 배양이나 제 2 배양조 (12)에서의 배양으로부터 영향을 받거나, 그들 배양에 영향을 미치거나 하는 것이 가능하다.
여기서, 제 1 배양조 (11)에서의 배양이나 제 2 배양조 (12) 이외의 배양조에서의 배양이, 제 1 배양조에서의 배양이나 제 2 배양조에서의 배양으로부터 받는 영향이나, 제 1 배양조에서의 배양이나 제 2 배양조에서의 배양에 미치는 영향은 여러 가지의 것을 생각할 수 있으며, 예를 들어, 세포의 증식, 세포의 분화, 조직의 형태 형성, 배지의 pH 조제, 배지로의 세균 혼입 예방 등을 예시할 수 있다.
예를 들어, 구체적으로는, 제 3 배양조 (13)에, 제 2 배양조 (12)와는 다른 세포로서, 배아막 유래의 세포를 배양한 배지에서 증식할 수 있는 세포를 넣어 둠으로써, 제 2 배양조 (12)와 제 3 배양조 (13)에서 동시에 세포를 증식시킬 수 있다. 또는 제 3 배양조 (13)에서, 제 1 배양조 (11)와는 다른 배아막 유래의 세포를 배양함으로써, 제 2 배양조 (12)에서 배양하고 있는 세포의 증식을 더욱 촉진시킬 수 있다. 또는 제 3 배양조 (13)에서 배양하는 세포가, 배아막 유래의 세포를 배양한 배지에서 증식할 수 있고, 또한 제 2 배양조 (12)에서 배양하는 세포를 증식시키는 인자를 분비하는 세포여도 좋다.
조와 조 사이는 관으로 접속되고, 그 관이 유로를 형성하여도 좋다. 또한, 이들 관에는 밸브가 설치되어 있어도 좋다. 배지 유량 제어부가, 배양하고 있는 세포 및/또는 세포 배양용 배지의 상태를 모니터하고, 그 상태에 따라 이 밸브를 통해 각 유로에 있어서의 세포 배양용 배지의 흐름(예를 들어, 유속, 유량 등)을 제어하여도 좋다.
밸브의 구조는 특별히 한정되지 않고, 플랜지 형, 스크류 형 등의 공지의 구조이면 좋고, 밸브의 조정 방법도 특별히 한정되지 않고, 공기구동식, 전자식, 전동식, 유압식 등의 공지의 조정 방법이면 좋다. 또한, 세포 배양용 배지의 관내에서의 역류를 방지하기 위해 관에 역지 밸브를 구비하고 있어도 좋다.
배지 유량 제어부가 모니터하는 세포 및/또는 세포 배양용 배지의 상태란, 예를 들어, 세포 증식의 양상이나, 세포 분화의 양상, 배지의 pH 등을 예시할 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다. 세포 증식의 양상은, 예를 들어, 단위 면적당 세포수를 세거나, 플레이트의 바닥 면적에 대한 세포가 차지하는 면적의 비율 등을 측정하는 것으로 판단할 수 있다. 세포 분화의 양상은, 예를 들어, 분화하면 발현하여 형광 발광하는 마커 유전자를 세포에 도입해 둠으로써, 형광을 측정하는 것으로 판단할 수 있다. 배지의 pH는, 예를 들어, 직접 pH를 측정하여도 좋고, 또는 pH에 의해 변화하는 색소를 배지에 첨가해 두고, 그 색으로 판단하여도 좋다.
실시예
(1) 장뇨막 또는 난황낭의 단리 방법
시험에 사용하는 장뇨막 또는 난황낭은, 이하의 방법에 의해 각각 단리하였다.
닭의 유정란을 37℃에서 인큐베이트하고, 14일 후 난각을 깨서, 난각과 접해있으며 혈관이 주행하고 있는 막 조직을 장뇨막으로서 취출함과 동시에, 한편으로 난황을 감싸고 있는 막 조직을 난황낭으로서 취출해, 이들의 막 조직을 HBSS(Hank 's Balanced Salt Solution) 중에 각각 침지하였다. 이들의 막 조직을 핀셋 등으로 물리적으로 잘게 재단한 후, 원심 분리를 실시하여 상등액을 제거하였다.
단리한 각 막 조직에 콜라게나제 용액(200 IU/mL)을 가하여 37℃에서 1 시간 유지한 후, 다시 원심 분리를 실시하여 그 상등액을 제거하였다. 이 콜라게나제 처리한 각 막 조직에 HBSS를 가하여, 40 μm의 필터로 여과하고, 얻어진 여액을 원심 분리하여 상등액을 제거함으로써 장뇨막 유래 세포 또는 난황낭 유래 세포를 회수하였다. 또한, 장뇨막 유래 세포 또는 난황낭 유래 세포를 보존하는 경우에는, 이를 세포 동결액(10% DMSO 용액)에 현탁하고, -80℃까지 서서히 냉각함으로써 동결하고, -80℃에서 보존하였다.
(2) 장뇨막 또는 난황낭의 배양 방법
(1)에서 얻어진 장뇨막 유래 세포 또는 난황낭 유래 세포를 10% 우태아 혈청 (FBS) 및 1% 페니실린·스트렙토마이신(PS) 용액을 함유한 DMEM(이하 FBS·PS 함유 DMEM이라고 칭함)에 가하여, 4 × 106 cells/dish의 농도로 세포 배양용 디쉬(직경 10 cm)에 파종하고, 37℃, 5% CO2 환경 하에서 2일 내지 4일간 배양하였다.
(3) 배양 상등액의 회수 방법
(2)에서 나타낸 배양 방법에 의해 조제한 장뇨막 배양액 또는 난황낭 배양액을 0.22 μm 필터를 이용하여 여과하고, 얻어진 여액을 동물 세포 증식 촉진제로서 동물 세포 배양에 사용하였다. 또한, 조제한 배양 상등액을 보존하는 경우에는, -20℃에서 동결하여 보존하였다.
(4) 동물 세포 배양
(4-1) 각 조직으로부터의 세포 단리 방법
배양에 사용하는 닭 세포는 이하의 방법에 의해 단리하였다.
먼저 닭의 유정란을 37℃에서 인큐베이트하고, 14일 후 난각을 깨서 닭의 배아를 취출하였다. 이 닭 14일 배아로부터 위, 골격근, 심장, 담낭, 장, 뇌, 파브리시우스낭 및 뼈를 단리하고, 각각 HBSS 용액에 침지하였다. 그 후, (1)과 같은 방법으로 각 조직 유래의 세포를 단리하였다.
(4-2) 각 조직으로부터의 세포 배양 방법
각 조직 유래의 세포는 FBS·PS 함유 DMEM에 (3)에서 조제한 장뇨막 배양 상등액 또는 난황낭 배양 상등액을 등량 첨가한 배양용 배지를 이용하여, (2)와 동일한 방법으로 배양을 실시하였다. 또한, 대조군으로서, 장뇨막 배양 상등액 또는 난황낭 배양 상등액을 첨가하지 않고 FBS·PS 함유 DMEM만의 배지를 사용한 것 이외에는 동일한 조건에서 배양한 세포를 사용하였다.
(4-3) 각 배양에 있어서의 세포수의 측정 방법
(4-2)의 결과를, 간, 췌장, 수란관, 위, 근육, 심장, 장, 뇌, 파브리시우스낭 및 뼈 유래의 세포에 대해 정량적으로 평가하였다. 여기서 각 조직 유래의 세포수는 이하의 방법에 의해 측정하였다.
먼저 각 조직 유래 세포의 배양액을 디쉬로부터 제거하고, PBS를 가하여 세포를 각각 세척하였다. PBS를 제거한 후, 트립신-EDTA 용액을 가하고, 37℃에서 1분 내지 2분간 인큐베이트하여 세포를 박리시킨 후, FBS·PS 함유 DMEM을 가하여 반응을 정지시켰다. 박리된 세포를 포함하는 용액을 모두 회수하고, 이를 원심 분리함으로써 세포를 얻었다. 또한, 이 세포에 FBS·PS를 가하여 현탁하고, 세포 현탁액 20 μL와 트리판블루 용액 20 μL를 혼합하였다. 이 세포 현탁액 중에서, 트리판블루로 염색되지 않은 살아있는 세포의 수를 현미경하에서 혈구 계산반을 이용하여 계측하였다.
(4-4) 결과
먼저, 장뇨막 배양 상등액을 첨가한 배지에서 약 3일 내지 5일간 배양하였을 때의 세포를 위상차 현미경으로 관찰하였다. 도 2에 그 세포의 사진을 나타내지만, 어떤 세포를 배양한 경우에도 (3)에서 조제한 장뇨막 배양 상등액을 첨가한 경우 쪽이 장뇨막 배양 상등액을 첨가하지 않는 경우보다 세포수가 많았다. 이는, 첨가한 장뇨막 배양 상등액에 의해 세포의 증식이 촉진된 것을 나타내고 있다.
이 결과를 정량적으로 나타내기 위해, 간, 췌장, 수란관 유래의 세포에 대해 장뇨막 배양 상등액을 이용하여 3개의 샬레에서 실험한 경우의 세포수의 평균과 표준 오차를 도 3에 나타냈지만, 간, 췌장, 수란관 유래의 세포 중의 어느 경우도 장뇨막 배양 상등액을 첨가한 쪽이 장뇨막 배양 상등액을 첨가하지 않는 경우에 비해 약 2.5배 내지 4배로 세포가 증식하였다.
다음으로 난황낭 배양 상등액을 첨가한 배지를 사용하여, 위, 근육, 심장, 간, 장, 뇌, 파브리시우스낭 및 뼈 유래의 세포에 대한 증식 촉진 효과에 대해서도 마찬가지로 조사한 결과(n = 2), 도 4에 나타낸 바와 같이, 어느 경우도 난황낭 배양 상등액을 첨가한 경우 쪽이 장뇨막 배양 상등액을 첨가하지 않는 경우보다 세포수가 많았다. 이는, 첨가한 난황낭 배양 상등액에 의해 세포의 증식이 촉진된 것을 나타내고 있다.
본 발명에 의해, 신규한 동물 세포 증식 촉진제, 동물 세포 배양용 배지 및 동물 세포 배양 장치를 제공할 수 있게 되었다.
Claims (8)
- 새 또는 파충류의 유정란 유래 배아막의 배양 상등액을 유효성분으로 함유하는 동물 세포 배양 증식 촉진제.
- 제1항에 있어서, 상기 배아막이, 양막, 장뇨막 및 난황낭으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1종인, 동물 세포 증식 촉진제.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 알이 계란인, 동물 세포 증식 촉진제.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 근육계 세포, 내장계 세포 또는 신경계 세포에 대한 세포 증식제인, 동물 세포 증식 촉진제.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 간 세포, 췌장 세포, 수란관 세포에 대한 세포 증식제인, 동물 세포 증식 촉진제.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 기재된 세포 증식 촉진제를 함유하는 세포 배양용 배지.
- 조류 또는 파충류 알의 배아막 유래의 세포를 배양하는 제 1 배양조와,
증식을 목적으로 하는 동물 세포를 배양하는 제 2 배양조와,
제 1 배양조에서 제 2 배양조로 배지를 흐르게 하는 제 1 유로와,
제 2 배양조에서 제 1 배양조로 배지를 흐르게 하는 제 2 유로와,
제 1 배양조, 제 1 유로, 제 2 배양조, 제 2 유로의 순서로 세포 배양용 배지를 환류시키고, 상기 동물 세포 및/또는 상기 세포 배양용 배지의 상태에 따라, 제 1 유로 및 제 2 유로에 있어서의 상기 세포 배양용 배지의 흐름을 제어하는 배지 유량 제어부를 구비하는 동물 세포 배양 장치. - 제7항에 있어서, 상기 환류하는 상기 세포 배양용 배지에 신선한 세포 배양용 배지를 도입하기 위한 배지 도입로와,
상기 환류하는 상기 세포 배양용 배지로부터 배양 후의 세포 배양용 배지를 제거하기 위한 배지 제거로를, 추가로 가지며,
상기 배지 유량 제어부는, 상기 동물 세포 및/또는 상기 세포 배양용 배지의 상태에 따라, 상기 배지 도입로로부터의 상기 신선한 세포 배양용 배지의 도입 및 상기 배지 제거로로부터의 상기 배양 후의 세포 배양용 배지의 제거를 제어하는, 동물 세포 배양 장치.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020247023865A KR20240116562A (ko) | 2018-11-08 | 2019-11-07 | 동물 세포 증식 촉진제, 동물 세포 배양용 배지 및 동물 세포 배양 장치 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JPJP-P-2018-210910 | 2018-11-08 | ||
| JP2018210910 | 2018-11-08 | ||
| PCT/JP2019/043713 WO2020096004A1 (ja) | 2018-11-08 | 2019-11-07 | 動物細胞増殖促進剤、動物細胞培養用培地及び動物細胞培養装置 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020247023865A Division KR20240116562A (ko) | 2018-11-08 | 2019-11-07 | 동물 세포 증식 촉진제, 동물 세포 배양용 배지 및 동물 세포 배양 장치 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20210091195A true KR20210091195A (ko) | 2021-07-21 |
| KR102686837B1 KR102686837B1 (ko) | 2024-07-22 |
Family
ID=70612097
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020217016436A KR102686837B1 (ko) | 2018-11-08 | 2019-11-07 | 동물 세포 증식 촉진제, 동물 세포 배양용 배지 및 동물 세포 배양 장치 |
| KR1020247023865A KR20240116562A (ko) | 2018-11-08 | 2019-11-07 | 동물 세포 증식 촉진제, 동물 세포 배양용 배지 및 동물 세포 배양 장치 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020247023865A KR20240116562A (ko) | 2018-11-08 | 2019-11-07 | 동물 세포 증식 촉진제, 동물 세포 배양용 배지 및 동물 세포 배양 장치 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20210395678A1 (ko) |
| JP (2) | JP7488571B2 (ko) |
| KR (2) | KR102686837B1 (ko) |
| CN (1) | CN113015789A (ko) |
| SG (1) | SG11202104775SA (ko) |
| WO (1) | WO2020096004A1 (ko) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN118510887A (zh) * | 2022-01-07 | 2024-08-16 | 整合培育株式会社 | 来自肝脏的细胞的培养方法和包含来自肝脏的细胞的培养体系 |
| WO2023149408A1 (ja) * | 2022-02-02 | 2023-08-10 | 株式会社ユーグレナ | 化粧料組成物、表皮角化細胞増殖用化粧料組成物、表皮角化細胞増殖剤、抗酸化剤、毛乳頭細胞増殖用化粧料組成物、毛乳頭細胞増殖剤、育毛剤、ロリクリン遺伝子発現促進剤、ヘムオキシゲナーゼ－１遺伝子発現促進剤及びコーニファイドエンベロープ形成促進剤 |
| WO2023229039A1 (ja) * | 2022-05-27 | 2023-11-30 | 学校法人東京女子医科大学 | 細胞培養方法 |
| WO2024024857A1 (ja) * | 2022-07-27 | 2024-02-01 | インテグリカルチャー株式会社 | 細胞状態推定システム |
| WO2024147330A1 (ja) * | 2023-01-06 | 2024-07-11 | インテグリカルチャー株式会社 | 筋肉由来の細胞の培養方法および筋肉由来の細胞を含む培養装置 |
| JP7323966B1 (ja) * | 2023-03-10 | 2023-08-09 | ダイバースファーム株式会社 | 培養用組成物を製造する方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006280234A (ja) * | 2005-03-31 | 2006-10-19 | Hitachi Medical Corp | 細胞の増殖又は分化方法 |
| US20070178586A1 (en) * | 2005-11-09 | 2007-08-02 | The Ohio State University Research Foundation | Methods and apparatuses for growing cells |
| US20080057783A1 (en) * | 2006-09-01 | 2008-03-06 | Sharp Kabushiki Kaisha | Coaxial cable connecting board, converter, and high frequency apparatus |
Family Cites Families (24)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61209585A (ja) * | 1985-03-14 | 1986-09-17 | Q P Corp | 細胞用培地 |
| JPS62166883A (ja) * | 1986-01-20 | 1987-07-23 | Q P Corp | 動物細胞用培地 |
| JP3385040B2 (ja) | 1991-02-14 | 2003-03-10 | 武田薬品工業株式会社 | グリア活性化因子およびその製造法 |
| WO1993002182A1 (en) * | 1991-07-15 | 1993-02-04 | Edison Animal Biotechnology Center, Ohio University | Yolk sac stem cells |
| JP2747979B2 (ja) | 1994-08-19 | 1998-05-06 | 雪印乳業株式会社 | ヒト由来の糖蛋白質からなる生理活性因子を有効成分とする医薬 |
| KR100834731B1 (ko) * | 2003-01-07 | 2008-06-13 | 주식회사 바이오랜드 | 세포 배양에 대한 기질 또는 기저막으로서 양막의 이용과이를 이용한 세포 치료제로서의 제조 방법 및 이의 용도 |
| JP5869342B2 (ja) * | 2008-11-19 | 2016-02-24 | アンスロジェネシス コーポレーション | 羊膜由来接着細胞 |
| CN101497874B (zh) * | 2009-03-04 | 2012-05-23 | 中山大学中山眼科中心 | 一种促进体细胞增殖的方法 |
| CN201626960U (zh) * | 2010-02-01 | 2010-11-10 | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 | 用于干细胞培养的灌流装置 |
| JP5712490B2 (ja) | 2010-03-10 | 2015-05-07 | 不二製油株式会社 | 動物細胞培養用培地 |
| CN102329771A (zh) * | 2011-10-12 | 2012-01-25 | 佛山科学技术学院 | 长期传代培养鸡胚胎干细胞的方法及其专用培养基 |
| JP2013247927A (ja) | 2012-06-01 | 2013-12-12 | Univ Of Fukui | 米糠由来の細胞増殖促進剤 |
| US20140255447A1 (en) * | 2013-03-05 | 2014-09-11 | Biomune Company | Production of avian embryo cells |
| CN104099294A (zh) * | 2013-04-03 | 2014-10-15 | 北京京蒙高科干细胞技术有限公司 | 基于干细胞分泌因子的培养基及其制备和使用方法 |
| CN103289952A (zh) * | 2013-06-04 | 2013-09-11 | 厦门大学 | 一种细胞或组织的培养方法 |
| CN104818244B (zh) * | 2015-05-21 | 2017-12-29 | 天晴干细胞股份有限公司 | 一种羊膜上皮细胞分离、培养的方法 |
| WO2017079646A1 (en) * | 2015-11-05 | 2017-05-11 | Baylor College Of Medicine | An efficient, scalable patient-derived xenograft system based on a chick chorioallantoic membrane (cam) in vivo model |
| CN105316309A (zh) * | 2015-12-04 | 2016-02-10 | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 | 一种消化酶组合物及成纤维细胞和饲养层细胞的制备方法 |
| JP6111510B1 (ja) * | 2016-05-02 | 2017-04-12 | インテグリカルチャー株式会社 | 成長誘導システム、成長誘導制御装置、成長誘導制御方法、および、成長誘導制御プログラム |
| WO2017191691A1 (ja) * | 2016-05-02 | 2017-11-09 | インテグリカルチャー株式会社 | 成長誘導システム、成長誘導制御装置、成長誘導制御方法、および、成長誘導制御プログラム |
| US11292999B2 (en) * | 2016-08-30 | 2022-04-05 | Finesse Solutions, Inc. | Bioreactor with multiple coupled vessels |
| CN107058217A (zh) * | 2017-01-22 | 2017-08-18 | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 | 一种软骨细胞的增殖培养基及增殖培养方法 |
| KR102121042B1 (ko) * | 2017-12-06 | 2020-06-09 | 이정복 | 조류의 에그로부터 분리한 세포인 배반엽 전분화능세포, 신경줄기세포, 배아섬유아세포 컨디션드 배지를 유효성분으로 하는 세포 증식, 피부재생 및 주름 개선용 배지 조성물 |
| CN108373995B (zh) * | 2018-02-14 | 2020-11-17 | 浙江生创精准医疗科技有限公司 | 一种干细胞条件培养基、其制备方法和用途 |
-
2019
- 2019-11-07 JP JP2020555593A patent/JP7488571B2/ja active Active
- 2019-11-07 KR KR1020217016436A patent/KR102686837B1/ko active IP Right Grant
- 2019-11-07 US US17/292,131 patent/US20210395678A1/en active Pending
- 2019-11-07 KR KR1020247023865A patent/KR20240116562A/ko active Application Filing
- 2019-11-07 WO PCT/JP2019/043713 patent/WO2020096004A1/ja unknown
- 2019-11-07 CN CN201980074375.3A patent/CN113015789A/zh active Pending
- 2019-11-07 SG SG11202104775SA patent/SG11202104775SA/en unknown
-
2023
- 2023-12-07 JP JP2023207262A patent/JP2024028914A/ja active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006280234A (ja) * | 2005-03-31 | 2006-10-19 | Hitachi Medical Corp | 細胞の増殖又は分化方法 |
| US20070178586A1 (en) * | 2005-11-09 | 2007-08-02 | The Ohio State University Research Foundation | Methods and apparatuses for growing cells |
| US20080057783A1 (en) * | 2006-09-01 | 2008-03-06 | Sharp Kabushiki Kaisha | Coaxial cable connecting board, converter, and high frequency apparatus |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20240116562A (ko) | 2024-07-29 |
| JP7488571B2 (ja) | 2024-05-22 |
| KR102686837B1 (ko) | 2024-07-22 |
| EP3878941A1 (en) | 2021-09-15 |
| WO2020096004A1 (ja) | 2020-05-14 |
| CN113015789A (zh) | 2021-06-22 |
| JP2024028914A (ja) | 2024-03-05 |
| SG11202104775SA (en) | 2021-06-29 |
| JPWO2020096004A1 (ja) | 2021-09-24 |
| US20210395678A1 (en) | 2021-12-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR20210091195A (ko) | 동물 세포 증식 촉진제, 동물 세포 배양용 배지 및 동물 세포 배양 장치 | |
| Nomura et al. | Developmental expression of 2ar (osteopontin) and SPARC (osteonectin) RNA as revealed by in situ hybridization | |
| AU2004278634B2 (en) | Method of inducing the differentiation of stem cells into cardiomyocytes | |
| JP2021100428A (ja) | 単離した腎細胞およびその使用 | |
| JP4669968B2 (ja) | 造血及び血管生成の調節方法 | |
| Loughna et al. | A molecular and genetic analysis of renalglomerular capillary development | |
| Ros et al. | Recombinant limbs as a model to study homeobox gene regulation during limb development | |
| US20200239841A1 (en) | Establishing topographic organization in three-dimensional tissue culture | |
| Hatazawa et al. | Reduced Dnmt3a increases Gdf5 expression with suppressed satellite cell differentiation and impaired skeletal muscle regeneration | |
| CN102459576A (zh) | 用于调节干细胞的组合物和方法及其应用 | |
| KR102034496B1 (ko) | 인공 근위세뇨관 시스템 및 사용 방법 | |
| Edwards et al. | Genetic manipulation of mammary epithelium by transplantation | |
| CN109294994A (zh) | 有效修复地中海贫血Westmead突变的方法及应用 | |
| CN103571793B (zh) | 一种调控诱导产生的视网膜前体细胞的方法 | |
| JP4267689B2 (ja) | 鳥類由来の細胞の培養方法および該培養方法によって得られた細胞系 | |
| Callebaut et al. | In the absence of Rauber's sickle material, no blood islands are formed in the avian blastoderm | |
| CN110101863A (zh) | 抑制hipk1基因表达的应用 | |
| WO2024147330A1 (ja) | 筋肉由来の細胞の培養方法および筋肉由来の細胞を含む培養装置 | |
| Panella et al. | Chemically Defined Xeno-and Serum-Free Cell Culture Medium to Grow Human Adipose Stem Cells. Cells 2021, 10, 466 | |
| KR101131744B1 (ko) | 조류 골수세포를 이용한 생식세포를 제조하는 방법 및 그 골수세포를 이용한 형질전환 조류 생산 방법 및 조류 생식선 카이메라 | |
| CN114807017A (zh) | 生长因子pdgf-c在维持干细胞多能性的应用和促进干细胞多能性的培养方法及应用 | |
| WO2023180530A1 (en) | Heart tissue models, method of producing heart tissue models and uses of heart tissue models | |
| CN118581031A (zh) | 一种鹅肾脏类器官及其培养方法、应用 | |
| CN115838766A (zh) | 一种慢病毒载体介导血管显微注射制备转基因鸡的方法 | |
| Rodgers | Mechanisms of cardiovascular development |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant |