KR20210087134A - 블루라이트 차단용 화장료 조성물 - Google Patents

블루라이트 차단용 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 식물 복합 추출물을 함유하는 블루라이트 차단용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 한련 추출물, 케일잎 추출물, 서양민들레잎 추출물, 순무잎 추출물, 당근전초 추출물, 서양호박 추출물, 고구마뿌리 추출물, 수박 추출물, 및 울금뿌리줄기 추출물 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 블루라이트 차단용, 뿐만 아니라, 피부 세포 보호 및 피부 재생용, 항산화용, 피부의 염증 반응 억제 또는 예방용, 피부 주름 개선, 예방 또는 억제용, 피부 활성 증진용, 피부 온도 조절용, 피부 진정용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물 및 그 제조방법 관한 것이다.

Description

블루라이트 차단용 화장료 조성물{Cosmetic Composition for Blue Light Interception}
본 발명은 블루라이트 차단용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 식물 복합 추출물을 함유하는 블루라이트 차단용 화장료 조성물에 관한 것이다.
블루라이트란, 380∼500 나노미터 사이 존재하는 짧은 파장을 내는 가시광선의 한 종류로 파란색 계열의 빛을 말한다. TVㆍ컴퓨터ㆍ휴대폰 등 스마트기기의 디스플레이와 LED 조명기기에서 많이 방출되며, 물체를 선명하게 볼 수 있고 사람이 편안한 느낌을 받도록 한다. 그러나 일상에서 블루라이트에 장시간 노출되면 눈의 피로는 물론 안구건조증을 유발하며 심한 경우 눈 속의 망막이나 수정체 손상을 가져올 우려가 있다. 또한 밤늦게 블루라이트로 인해 수면유도 호르몬 분비가 저해돼 생체리듬에 오류가 생기고, 이는 숙면을 방해하여 낮 동안 손상된 피부를 재생시키는 데 어려움이 발생한다.
가시광선의 한 종류인 자외선 중 UVB가 표피 아래까지 침투하고, UVA가 진피층까지 침투하는데, 블루라이트는 진피층보다 더 깊은 피하 조직층까지 침투하기 때문에, 피부에 더 유해할 수 있다. 이러한 강도 높은 에너지를 가져 HEV (High-Energy Visible) 라이트라고 불리기도 한다. 따라서 직접적으로 오랜 기간 피부에 노출되면 멜라닌 생성을 촉진하고 검버섯, 기미 등 색소 침착을 유발할 뿐 아니라, 활성산소도 증가하여 산화 스트레스 발현으로 피부의 염증, 주름 증가, 탄력 저하 등의 조기 노화 증상이 나타날 수 있다.
최근 블루라이트의 과도한 노출로 인한 피부의 손상 및 노화의 가속화를 방지하기 위해, 피부의 유해 기작에 관한 연구가 진행 중이다. 화장품 분야에서의 블루라이트 차단 소재 및 관련 제형 연구는 아직 초기 단계에 있으며, 블루라이트 차단 측정과 관련된 시험법 또한 명확하게 정립되어 있지 않다. 블루라이트 차단을 위한 화장품 소재로 잇꽃씨오일(선행문헌 1), 식물성 플랑크톤 추출물(선행문헌 2) 등이 알려져 있다.
선행문헌 1 : 대한민국특허출원공개 10-2019-0006910 선행문헌 2: 대한민국등록특허 10-2031289
본 발명자들은, 블루라이트 차단을 위한 기능성을 가진 소재를 발굴하고자 예의 노력한 결과, 한련 추출물, 케일잎 추출물, 서양민들레잎 추출물, 순무잎 추출물, 당근전초 추출물, 서양호박 추출물, 고구마뿌리 추출물, 수박 추출물, 및 울금뿌리줄기 추출물 중 어느 하나 이상이 이러한 효과를 가짐을 밝히고, 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 한련 추출물, 케일잎 추출물, 서양민들레잎 추출물, 순무잎 추출물, 당근전초 추출물, 서양호박 추출물, 고구마뿌리 추출물, 수박 추출물, 및 울금뿌리줄기 추출물 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 블루라이트 차단용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.
본 발명의 다른 목적은, 한련 추출물, 케일잎 추출물, 서양민들레잎 추출물, 순무잎 추출물, 당근전초 추출물, 서양호박 추출물, 고구마뿌리 추출물, 수박 추출물, 및 울금뿌리줄기 추출물 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 블루라이트 차단용 화장료 조성물의 제조방법을 제공하는데 있다.
상기 과제를 해결하고자, 본 발명은 한련 추출물, 케일잎 추출물, 서양민들레잎 추출물, 순무잎 추출물, 당근전초 추출물, 서양호박 추출물, 고구마뿌리 추출물, 수박 추출물, 및 울금뿌리줄기 추출물 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 블루라이트 차단용 화장료 조성물을 제공한다.
이하, 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다.
본 발명은 일 관점에서, 한련 추출물, 케일잎 추출물, 서양민들레잎 추출물, 순무잎 추출물, 당근전초 추출물, 서양호박 추출물, 고구마뿌리 추출물, 수박 추출물, 및 울금뿌리줄기 추출물 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 블루라이트 차단용 화장료 조성물에 관한 것이다. 구체적으로는, 상기 추출물은 그 함량에 제한없으나, 조성물의 총 중량에 대하여 0.1 내지 10 중량%로 함유할 수 있다.
본 발명에 있어서, 유효성분이 되는 각 식물세포들의 각각의 식물에 대한 설명은 다음과 같다.
1. 한련추출물 (Tropaeolum Majus Extract): 한련은 멕시코와 남아메리카 원산지로, 그리스어 ‘tropaion(트로피)’란 뜻의 둥근 방패 같은 잎 모양과 투구 같은 꽃의 형태에서 유래했다. 꽃은 6월에 피고 잎겨드랑이에서 1개의 대가 나와서 끝에 1개의 꽃이 달린다. 꽃색은 홍색·주황색·황색 등이고 만첩꽃도 있다. 유럽에서는 승전화(勝戰花)라고 하며 화분과 화단에 심는다. 꽃은 높은 농도의 인산을 함유하기 때문에 한 여름에는 섬광을 방출한다. 한련화는 주로 관상용이나 방향제로 사용하는데 철과 비타민 C를 다량 함유하고 있어 그 잎과 꽃, 열매는 강장효과와 혈액 정화, 소독 효과가 있다. 잎이나 꽃을 타박상이나 피부염에 바르기도 하고, 잎을 달여서 기관지염이나 비뇨생식기의 감염증 치료에 사용하기도 한다.
2. 케일잎추출물(Brassica Oleracea Acephala Leaf Extract): 지중해가 원산지인 케일은 다양한 영양성분을 갖고 있어 대표적인 슈퍼 푸드로 애용되고 있다. 녹황색 채소 중 베타카로틴의 함량이 가장 높은 채소로, 눈 건강에 좋은 루테인도 매우 풍부하게 함유되어 있다. 또한 케일은 혈액 응고와 뼈 건강에 도움을 주는 비타민 K를 가장 많이 섭취할 수 있는 식재 중 하나이며, 칼슘과 마그네슘 역시 풍부하여 골다공증 예방에 좋다. 키가 작은 것은 30~60㎝, 큰 것은 120㎝ 정도이며, 충분한 수분만 있으면 어느 땅에서나 잘 자란다. 잎은 담뱃잎처럼 넓고 길고 두껍게 자라면서 태양빛을 듬뿍 받아 짙은 녹색을 띤다.
3. 서양민들레잎추출물(Taraxacum Officinale (Dandelion) Leaf Extract): 유럽이 원산으로 100여 년 전 우리나라에 들어와 토착화된 귀화식물로 각 지역에서 흔히 볼 수 있으며, 쓴맛이 나는 것이 특징으로 오래 전부터 식용하였던 식물이다. 페르시아어로 ‘Tarashqun’의 맛이 쓰고, 삶아 먹는 채소란 뜻에서 유래했다. 유럽에서는 잎을 샐러드로, 뿌리를 커피 대용으로 섭취 할 뿐만 아니라 비타민과 무기질 등 기능성 성분들을 다량 함유하고 있어 약으로 많이 이용되어 오고 있는 식물이다. 꽃은 2~3월에 노란색으로 여러개의 낱꽃으로 모여 피는 겹꽃이며 씨앗은 긴 타원형으로 털이 붙어 있고, 이 씨앗들이 모여 솜털처럼 보송보송한 열매가 된다.
4. 순무잎추출물(Brassica Rapa (Turnip) Leaf Extract): 지중해 연안의 남부유럽이 원산지로, 수분 함량이 90% 이상인 순무는 뿌리채소로, 뿌리와 잎에 많은 영양분을 함유한 채소이다. 비타민이 풍부하고, 엽록소와 베타카로틴, 카로티노이드 색소를 많이 함유하고 있어 항암 및 노화 방지에 도움을 준다. 순무의 잎에는 무기질, 비타민류가 많으나 뿌리에는 트립토판과 리진이 많다. 뿌리의 크기나 모양 또한 품종에 따라 다르지만 대개 팽이 모양의 둥근형이다. 그냥 무와 확연히 다른 점은 뿌리의 색인데, 색이 그냥 무와 달리 자줏빛을 띄고 있다. 맛은 매콤한듯하나 고소하며 겨자향의 인삼맛이 난다. 일반 무와 달리 단맛이 난다 하여 ‘과일 무’라고도 불린다.
5. 당근전초추출물(Daucus Carota Sativa (Carrot) Extract): 당근은 아프가니스탄이 속한 히말라야가 원산지로, 홍당무라고도 하며 높이는 1m 내외이다. 원뿔 형태의 모양에 주홍빛 색을 가진 당근은 ‘비타민 A의 황제’라고 불릴 만큼, 채소 중 비타민 A의 함량이 높아 시력 보호에 좋은 식품으로 알려져 있다. 베타카로틴, 루테인, 리코펜 성분이 풍부하여 항산화 효과를 내고, 노화 방지 및 면역력 향상과 암, 고혈압, 동맥 경화 등 예방에 도움을 준다. 국내에서는 사계절 재배가 가능하여 언제든지 쉽게 만나볼 수 있고, 특유의 향과 색으로 널리 활용된다.
6. 서양호박추출물(Cucurbita Maxima Fruit Extract): 주키니호박, 돼지호박이라고도 불리는 서양호박은 아메리카 대륙이 원산으로 미주나 유럽에서 가장 인기가 있는 여름철 호박이다. 노란색이나 녹색, 연둣빛을 띠고, 애호박, 오이와 외형이 많이 닮았으며 일부 재배종은 둥근 호리병 모양으로 난다. 대부분의 서양호박은 껍질이 부드럽고, 작은 식용 씨앗과 많은 수분을 지닌 아삭아삭하고 부드러운 과육을 지니고 있다. 아주 낮은 열량의 야채 중 하나로, 껍질은 변비를 줄여주고 결장암을 예방하는 식이성 섬유가 많이 들어 있다. 게다가, 카로틴, 루테인과 제아잔틴과 같은 폴리페놀릭 항산화물질이 풍부하게 들어있다. 중요한 세포 내 전해질의 하나인 칼륨의 훌륭한 공급원이기도 하는데, 칼륨은 심장에 좋은 전해질이며, 나트륨의 압력효과에 대응하여 혈압과 심박동을 낮추어 준다.
7. 고구마뿌리추출물(Ipomoea Batatas Root Extract): 고구마의 원산지는 열대아메리카로 우리나라에는 일본을 통하여 전래되어, 구황작물로 재배되어 왔다. 지면을 따라 뻗으면서 뿌리를 내리는 덩굴식물로, 고구마는 뿌리에 영양분이 축적되어 둥그렇게 크기가 커지며, 우리가 먹는 부분이 바로 이 뿌리를 나타낸다. 이런 종류의 뿌리를 덩이뿌리라고 부르며, 고구마는 겉은 자줏빛을 띤 갈색이며, 속은 흰빛이 돌고 조직이 치밀하다. 고구마에는 특히 베타카로틴, 비타민 A와 같은 플라보노이드 페놀화합물의 함량이 뿌리채소 가운데 가장 풍부하다. 피부미용에 탁월한 효능이 있어 하루에 한 개씩 섭취하면 건강한 피부를 가질 수 있다. 또한, 풍부한 비타민 E는 강력한 항산화제로 활성산소로부터 세포를 보호하므로 피부 노화를 늦춘다.
8. 수박추출물(Citrullus Lanatus (Watermelon) Fruit Extract): 수박은 아프리카 원산으로 고대 이집트 시대부터 재배되었다고 하며, 각지에 분포된 것은 약 500년 전이라고 한다. 박과에 속하는 식물의 열매로 구형 또는 타원형에 껍질은 진한 녹색을 띠고 있으며 무게는 3~5kg 정도이다. 분홍색의 살은 다소 농담의 차이가 있으며 아주 청량하고 약간의 단맛이 있으나 특별한 맛은 없다. 살에는 납작하고 검은 씨들이 박혀있다. 여름철에 먹는 대표적인 과일로, 수분 함량이 매우 높고 칼로리가 낮아 수분 배출이 많고, 항산화 효과가 뛰어난 라이코펜 성분을 다량 함유하고 있다. 또한 시트룰린이라고 하는 아미노산을 함유하여 이뇨효과가 높고, 신장염에 좋다고 하며 열매즙을 바짝 졸여서 엿처럼 만든 수박당을 약용에 쓰이기도 한다.
9. 울금뿌리줄기추출물(Curcuma Longa (Turmeric) Rhizome Extract): 울금은 열대 아시아가 원산으로, 생강과 쿠르쿠마속에 속하는 식물이며, 노란 빛의 속살이 특징으로 기원전 1500년, 야곱의 아들이 이집트를 떠날 때, 비상약으로 지참했다는 이야기가 있을 만큼 그 역사가 오래 됐다. 카레 성분인 강황이 강황의 근경을 건조한 것이라면 울금은 강황의 덩이뿌리를 건조한 것이다. 울금에는 항산화물질인 플라보노이드, 칼슘, 칼륨 그리고 기타 다양한 비타민과 무기질이 포함돼 ‘신이 내린 식재료'라고 불리기도 한다. 특히 주성분인 커큐민은 울금의 노란 빛깔을 만드는 성분으로 당뇨, 고혈압과 같은 심혈관 질환과 치매 예방에 효과적이다. 염증이나 종양 성장을 억제시키는 항염, 항암 작용이 뛰어나 최근에는 피부 미용에도 큰 도움이 될 뿐 아니라, 항암 치료에도 사용되고 있다. 또한 몸 안의 안 좋은 성분들을 몸 밖으로 배출하는 효능을 가지고 있어 간 기능 개선에도 도움이 된다고 알려져 있다.
본 발명에 있어서, 상기 블루라이트 차단용 조성물은, 블루라이트 차단용 이외에도, 이로인해 또는 이와는 별도로, 피부 세포 보호 및 피부 재생용, 항산화용, 피부의 염증 반응 억제 또는 예방용, 피부 주름 개선, 예방 또는 억제용, 피부 활성 증진용, 피부 온도 조절용, 피부 진정용 등 다양한 피부 활성 개선 기능을 포함한다.
본 발명에 따른 블루라이트 차단용 화장료 조성물의 제조방법은 다음의 단계를 포함한다:
(a) 한련 추출물, 케일잎 추출물, 서양민들레잎 추출물, 순무잎 추출물, 당근전초 추출물, 서양호박 추출물, 고구마뿌리 추출물, 수박 추출물, 및 울금뿌리줄기 추출물 중 어느 하나 이상을 준비하는 단계; 및 (b) 상기 (a)단계에서 준비된 추출물을 함유하는 조성물을 제조하는 단계.
본 발명에 있어서, 상기 (b)단계는, (a)단계에서 얻어진 각각의 추출물을 함유하는 조성물을 제조하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 (a)단계에서, 한련, 케일잎, 서양민들레잎, 순무잎, 당근전초, 서양호박, 고구마뿌리, 수박 및 울금뿌리를 혼합하여 추출물을 제조할 수 있다.
예를 들어, 각각의 비율이 14 ~ 17 중량부(g) : 54 ~ 66 중량부(g) : 14 ~ 17 중량부(g): 54 ~ 66 중량부(g): 54 ~ 66 중량부(g): 9 ~ 11 중량부(g): 9 ~ 11 중량부(g): 54 ~ 66 중량부(g): 3 ~ 5 중량부(g) 의 중량비 일 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 (a)단계는, 초음파 추출 또는 열수 추출하여 추출물을 제조하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, "추출물"은 식물 조직을 냉수추출법, 열수추출법, 에탄올 추출법 등 종래 알려진 다양한 추출법에 의해 수득한 추출물을 의미한다. 이와 같은 추출물을 준비할 경우, 상기 제시된 다양한 식물의 조직을 이용할 수 있으며, 그 부위 또한 잎, 뿌리, 줄기,열매, 또는 전초 등 제한됨이 없다.
본 발명에서 추출 방법은 특별히 제한되지 않고, 예를 들어 냉침 추출, 초음파 추출, 환류 추출, 열수 추출 등이 있다. 여기서, 열수추출의 경우, 열탕증류기에서 8~48시간동안, 80~100℃ 로 가열하여 열수 추출물을 얻는다.
냉수 추출의 경우, 예컨대, 냉수 (15-25℃)에 상기 식물 조직 자체 또는 그것의 건조된 분말을 혼합하여 3일동안 추출하여 냉수추출물을 얻는다.
또는, 물, 유기 용매, 또는 이의 혼합 용매를 사용하여 추출하는 방법으로 제조될 수 있다. 추출한 액은 바로 사용하거나 또는 농축 및/또는 건조하여 사용할 수 있다. 유기용매를 사용하여 추출하는 경우, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, N, N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합용매인 유기용매를 사용하며 생약의 유효 성분이 파괴되지 않거나 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출할 수 있다. 추출하는 유기용매에 따라 약제의 유효성분의 추출정도와 손실정도가 차이가 날 수 있으므로, 알맞은 유기용매를 선택하여 사용하도록 한다.
본 발명에 있어서, 상기 추출물은 농축, 또는 희석하여 사용할 수 있고, 추출물의 증류액을 사용할 수도 있다.
본 발명에 있어서, "유효성분으로 함유하는"의 의미는, 화장료 조성물로써 블루라이트 차단용, 뿐만 아니라, 이와 관련된 또는 별도로, 피부 세포 보호 및 피부 재생용, 항산화용, 피부의 염증 반응 억제 또는 예방용, 피부 주름 개선, 예방 또는 억제용, 피부 활성 증진용, 피부 온도 조절용, 피부 진정용 등의 기능성을 나타낼 수 있는 정도의 유효량을 함유하는 것을 의미한다.
상기 화장료 조성물에 있어서는, 화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체를 포함할 수 있다. 여기서, "화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체"란 화장품 제제에 포함될 수 있는 이미 공지되어 사용되고 있는 화합물 또는 조성물이거나 앞으로 개발될 화합물 또는 조성물로서 피부와의 접촉시 인체가 적응 가능한 이상의 독성, 불안정성 또는 자극성이 없는 것을 말한다.
상기 담체는 본 발명의 화장료 조성물에 그것의 전체 중량에 대하여 약 1 중량 % 내지 약 99.99 중량 %, 바람직하게는 조성물의 중량의 약 90 중량% 내지 약 99.99 중량 %로 포함될 수 있다. 그러나 상기 비율은 본 발명의 화장료 조성물이 제조되는 후술한 바의 제형에 따라 또 그것의 구체적인 적용 부위(얼굴, 목 등)나 그것의 바람직한 적용량 등에 따라 달라지는 것이기 때문에, 상기 비율은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안 된다.
상기 담체로서는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선산란제, 자외선흡수제, 발색제, 향료 등이 예시될 수 있다. 상기 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선산란제, 자외선흡수제, 발색제, 향료로 사용될 수 있는 화합물/조성물 등은 이미 당업계에 공지되어 있기 때문에 당업자라면 적절한 해당 물질/조성물을 선택하여 사용할 수 있다.
본 발명의 일 구현예로써, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 유효성분인 추출물 이외에 글리세린, 부틸렌글리콜, 프로필렌글키롤, 폴리옥시에틸렌 경화피마자유, 에탄올, 트리에탄올아민 등을 포함할 수 있으며, 방부제, 항료, 착색료, 정제수 등을 필요에 따라 미량 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은, 다양한 형태로 제조될 수 있는데, 예컨대, 화장수, 에센스, 젤, 에멀젼, 로션, 크림(수중유적형, 유중수적형, 다중상), 용액, 현탁액(무수 및 수계), 무수 생성물(오일 및 글리콜계), 젤, 마스크, 팩, 분말, 또는 젤라틴 등의 피막이 있는 캅셀 (소프트 캅셀, 하드 캅셀) 제형 등의 형태로 제조될 수 있다.
본 발명에 있어서의 피부는 얼굴 뿐만 아니라, 두피, 전신도 포함되는 개념으로, 이러한 두피에 적용될 수 있는 화장료 조성물로써, 샴푸, 린스, 트리트먼트, 발모제 등이 있고, 전신에 적용될 수 있는 바디클렌져 등의 용도로써 다양한 형태로 제조될 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 제조방법은 전술한 제조방법에 한정되는 것은 아니며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기 제조방법을 일부 변형시킨 방법으로도 제조할 수 있다.
화장료 조성물로 제조될 경우, 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연화장수가 있다. 또한, 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소적용 또는 전신적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.
또한, 적합한 화장품의 제형으로는, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일,염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 그리고, 상기의 성분들은 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
본 발명에 따른 블루라이트 차단용 화장료 조성물은 효과적으로 블루라이트를 차단할 수 있는 천연 소재로써, 이와 관련된 항염, 피부 재생, 피부 진정, 피부 열감 조절, 피부 주름 개선 등 다양한 기능성을 가지고 있다.
도 1은 본 발명에 따른 조성물의 피부세포 배양 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명에 따른 조성물의 블루라이트로부터의 피부세포 사멸 보호 및 재생 효과를 확인한 결과이다.
도 3은 본 발명에 따른 조성물의 블루라이트로부터의 CAT 활성 증가 여부를 확인한 결과이다.
도 4는 본 발명에 따른 조성물의 항염 효과를 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 본 발명에 따른 조성물의 세포 손상 보호를 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 본 발명에 따른 조성물의 항주름 효과를 확인한 결과이다.
도 7은 본 발명에 따른 조성물의 세포 에너지 활성 증진 효과를 확인한 결과이다.
다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다. 이하 실시예에서 언급된 %는 부피% 또는 중량%로 이해된다.
실시예 1: 본 발명에 따른 블루라이트 차단용 화장료 조성물 제조
20 L의 정제수에 깨끗하게 수세한 16 g 한련, 60 g 케일잎, 16 g 서양민들레잎, 60 g 순무잎, 60 g 당근전초, 10 g 서양호박, 10 g 고구마뿌리, 60 g 수박, 4 g 울금뿌리줄기를 넣고 8~48시간 정도, 80∼100 ℃로 가열하며 열수추출을 진행하였다. 추출 후, mesh로 여과하여 고형분을 제거하고, 복합 추출물을 얻었다.
실험예 1: 피부세포 배양을 통한 무자극 및 세포 증식에 의한 재생 효과 확인 시험
본 발명의 조성물이 피부 세포에서 독성을 일으켜 피부자극이 유발되는지 알아보기 위해, MTT assay를 진행하였다. HaCaT 세포(human keratinocyte, 각질형성세포), Detroit 세포(human fibroblast, 섬유아세포, Detroit 551)를 10 % FBS(Fetal Bovine Serum)가 함유된 DMEM(Dubelcco's Modified Eagle's Medium) 배지와 함께 96-well plate에 분주하고 5% CO2, 37℃의 조건인 항온기에서 24시간 배양하였다. 이후 정제수를 첨가한 대조군과 본 발명 조성물을 최종 0.1, 1, 5, 10, 20 %인 농도가 되도록 세포에 처리하고, 24시간 동안 추가 배양하였다. 이어 5 mg/mL MTT(3-(4, 5-dimethyl-2-thiazolyl)-2, 5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) 용액을 각 well에 4 μL씩 첨가하고, 4시간 동안 배양하였다. 배양액을 제거한 다음 DMSO(Dimethyl sulfoxide) 용액 100 μL씩 첨가하여 세포를 용해시킨 후, spectrophotometer를 사용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, 본 발명의 조성물은 0.1 ~ 20 % 처리 농도에서 피부세포 내 독성을 보이지 않아 자극이 없음을 확인하였다. 따라서 상기 조성물은 피부 자극 유발 가능성이 낮고 안전한 물질임을 의미한다.
실험예 2: 피부세포 보호 및 재생 효과 확인 시험
본 발명에 따른 조성물이 블루라이트 조사로부터 피부세포 보호 및 재생에 관여하는지 알아보기 위해, MTT assay를 진행하였다. 이를 위하여 HaCaT 세포, Detroit 세포를 10 % FBS(Fetal Bovine Serum)가 함유된 DMEM(Dubelcco's Modified Eagle's Medium) 배지와 함께 96-well plate에 분주하고 5 % CO2, 37 ℃의 조건인 항온기에서 24시간 배양하였다. 이후 정제수를 첨가한 대조군과 시험 물질인 조성물을 최종 0.1, 1, 5, 10 %인 농도가 되도록 세포에 처리하고, 2시간 후 Topview 5450 VRI SMD LED (입수처: ITSWELL, Part no. IWS-L5056-VRI-K3)를 이용하여 블루라이트를 조사(114 mW/cm2, 30분)하였다. 이후 24시간 동안 세포를 추가 배양하였다. 이어 5 mg/mL MTT(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H- tetrazolium bromide) 용액을 각 well에 4 μL씩 첨가하고, 4시간 동안 배양하였다. 배양액을 제거한 다음 DMSO(Dimethyl sulfoxide) 용액 100 μL씩 첨가하여 세포를 용해시킨 후, spectrophotometer를 사용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 도 2에 나타난 바와 같이, 본 발명의 조성물은 0.1 ~ 10 % 처리 농도에서 블루라이트로부터 피부세포의 사멸을 보호하고 재생 효과가 있음을 확인하였다.
실험예 3: 블루라이트 차단 활성 평가
본 발명의 조성물의 블루라이트 차단 효과를 평가하기 위해 각 시료의 블루라이트 파장대 (380 내지 500 nm) 흡수율을 측정하였다. 대조군 및 본 발명의 조성물을 정제수에 최종농도 1 %로 희석하여 spectrophotometer로 380 내지 500 nm의 스펙트럼을 분석하였다.
본 발명의 조성물 (%) 블루라이트 흡수율 (%)
1 0 41.8
2 0.1 51.4
3 1 85.8
4 5 91.7
5 10 88.2
6 20 61.2
그 결과, 상기 표 1에 나타난 바와 같이, 본 발명에 의한 조성물의 농도가 5 % 까지 높아질수록 대조군과 비교하여 블루라이트 흡수율이 현저히 높아졌고, 5 % 이상의 농도에서는 블루라이트 흡수율이 점차 감소함을 확인하였다. 블루라이트 흡수율이 높을수록 블루라이트 차단 효과가 높은 것을 의미한다.
실험예 4: CAT 활성에 의한 항산화 효과 확인 시험
본 발명의 조성물의 항산화 활성 효능을 살펴보기 위하여, 일반적으로 호기성 물질대사에서 생성되는 독성물질인 H2O2나 활성산소종(ROS)의 분해 작용에 관여하는 것으로 알려져 있는 CAT(Catalase)의 활성을 조사하기 위해 CAT assay를 진행하였다.
이를 위하여 HaCaT 세포를 12-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 정제수를 첨가한 대조군과 시험 물질인 조성물을 최종 0.1, 1, 5, 10 %인 농도가 되도록 세포에 처리하고, 2시간 후 Topview 5450 VRI SMD LED (입수처: ITSWELL, Part no. IWS-L5056-VRI-K3)를 이용하여 블루라이트를 조사(114 mW/cm2, 30분)하였다. 이후 24시간 동안 세포를 추가 배양하였다. 상기 과정을 통해 배양한 세포의 용해물을 희석한 일부 25 μL를 취해 CAT assay kit(Dogenbio, Cat. DG-CAT400) 내 CAT 표준물질 25 μL와 함께 각각 96-well plate에 넣고 40 μM H2O2 용액도 25 μL씩 첨가하였다. 37 ℃에서 3시간 동안 반응시킨 후, Oxi-Probe/HRP working solution을 반응이 완료된 각 well에 50 μL씩 넣어주었다. 이후 차광한 상태에서 30분간 37 ℃에서 반응시키고, 560 nm에서 흡광도를 측정하였다. 560 nm에서 흡광도를 측정한 후 CAT 표준농도곡선을 작성하여 시료 내 CAT 양을 산정하였다.
그 결과, 도 3에 나타난 바와 같이, 본 발명의 조성물은 0.1 ~ 10 % 처리 농도에서 블루라이트로부터 CAT의 활성을 증가시켜 항산화 효과가 있음을 확인하였다.
실험예 5: 염증 유전자 활성화의 억제 효과 확인 시험
본 발명의 조성물의 피부 염증 억제 효능을 살펴보기 위하여, 염증 반응에 관여하는 COX-2(Cyclooxygenase-2), iNOS(Inducible nitric oxide synthase)의 유전자 발현양 변화를 조사하였다.
이를 위하여 HaCaT 세포를 96-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 정제수를 첨가한 대조군과 시험 물질인 조성물을 최종 0.1, 1, 5, 10 %인 농도가 되도록 세포에 처리하고, 2시간 후 Topview 5450 VRI SMD LED (입수처: ITSWELL, Part no. IWS-L5056-VRI-K3)를 이용하여 블루라이트를 조사(114 mW/cm2, 30분)하였다. 이후 24시간 동안 세포를 추가 배양하였다. COX-2, iNOS의 유전자 수준에서 확인하기 위해 Real-time PCR 법을 수행하였으며, 그 시험 순서는 다음과 같다.
RNA isolation과 cDNA합성을 위해 SuperPrep cell lysis & RT kit for qPCR (TOYOBO, Cat. SCQ-101)을 사용하였다. 배지를 제거한 세포를 PBS로 한 번 세척하고, 50 μL cell lysis mixture (gDNA remover 포함)를 넣고 5분간 반응시킨 후, stop solution을 첨가하였다. RT reaction mixture 32 μL에 추출한 mRNA 8 μL를 첨가하고 PCR을 이용하여 37 ℃ 15분, 50 ℃ 5분, 95 ℃ 5분 조건에서 cDNA를 합성하였다. 유전자의 발현을 비교·분석하기 위하여 상기에서 합성한 cDNA를 template로 하고, Thunderbird SYBR qPCR Mix (TOYOBO, Cat. QPS-201)를 이용하여 Real-time PCR 분석을 진행하였다. 실험에 사용한 primer는 Qiagen사의 QuantiTect primer assays (GAPDH; Cat. QT01192646, COX-2; Cat. QT00040586, iNOS; Cat. QT01323189)이며 시료의 COX-2, iNOS의 mRNA 발현량은 GADPH로 정량화 되어 비교하였다. Real-time qPCR 조건은 먼저 95 ℃ 15분 반응 후, 1 사이클 당 94 ℃ 15초, 60 ℃ 30초, 72 ℃ 30초로 하여 총 40 사이클로 진행하였다.
그 결과, 도 4에 나타난 바와 같이, 본 발명의 조성물은 0.1 ~ 10 % 처리 농도에서 블루라이트로부터 염증 반응 관련 유전자인 COX-2, iNOS의 발현률을 감소시켜 항염 효과가 있음을 확인하였다.
실험예 6: 항스트레스 단백질 활성화 효과 확인 시험
본 발명의 조성물이 세포 내 블루라이트 스트레스에 의한 방어 효능이 있는지 알아보고자 LEA(Late embryogenesis abundant) 단백질의 활성 정도를 조사하였다. LEA는 발현 정도가 높을수록 스트레스에 대한 내성이 증가하여 세포 손상으로부터 보호하는 것으로 알려졌다.
이를 위하여 HaCaT 세포를 6-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 정제수를 첨가한 대조군과 시험 물질인 조성물을 최종 0.1, 1, 5, 10 %인 농도가 되도록 세포에 처리하고, 2시간 후 Topview 5450 VRI SMD LED (입수처: ITSWELL, Part no. IWS-L5056-VRI-K3)를 이용하여 블루라이트를 조사(114 mW/cm2, 30분)하였다. 이후 24시간 동안 세포를 추가 배양하고, LEA 단백질 발현량을 측정하기 위해 In-Cell ELISA Colorimetric Detection kit를 사용하였다.
배양이 끝난 세포의 배지를 제거하고, 100 μL fixing solution으로 15분간 상온에서 배양하여 세포를 고정시켰다. 이후 PBS로 세척하고, 100 μL의 Permeabilization solution을 넣고 15분간 상온에서 반응 시켰다. 이후 PBS로 세척하고, 100 μL Quenching solution을 넣고 20분간 상온에서 반응 시켰다. 이후 PBS로 세척하고, 100 μL Blocking solution을 넣고 30분간 상온에서 반응 시켰다. 용액을 제거하고 LEA 1차 항체 50 μL를 첨가하여 4 ℃에서 24시간 반응시켰다. 항체 제거 후 PBS로 세척하고, HRP conjugated 2차 항체 50 μL를 첨가하여 1시간 동안 반응시켰다. 이후 항체 제거하여 PBS로 세척을 한 뒤, 100 μL의 TMB substrate solution을 첨가하고 차광한 상태에서 15분간 실온에서 반응시켰다. 이후 100 μL stop solution (1 N H2SO4)을 첨가하고, 450 nm에서의 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 도 5에 나타난 바와 같이, 본 발명의 조성물은 0.1 ~ 10 % 처리 농도에서 블루라이트로부터 LEA 단백질의 발현양을 증가시켜 세포 손상을 보호함을 확인하였다.
실험예 7: 콜라겐 증진에 의한 항주름 효과 확인 시험
본 발명의 조성물이 주름 개선과 관련된 콜라겐 생성양을 증진시키는지 알아보고자 PIP assay를 진행하였다.
이를 위하여 Detroit 세포를 48-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 정제수를 첨가한 대조군과 시험 물질인 조성물을 최종 0.1, 1, 5, 10 %인 농도가 되도록 세포에 처리하고, 2시간 후 Topview 5450 VRI SMD LED (입수처: ITSWELL, Part no. IWS-L5056-VRI-K3)를 이용하여 블루라이트를 조사(114 mW/cm2, 30분)하였다. 이후 24시간 동안 세포를 추가 배양하였다. 상기 과정을 통해 배양한 배지의 상층액을 희석한 일부 20 μL를 취해 PIP EIA kit(Takara, Cat. MK101) 내 PIP 표준물질 20 μL와 함께 각각 antibody coated microtiter plate에 넣고 100 μL의 peroxidase 표식 antibody solution을 또한 각 well에 첨가하여, 37 ℃에서 3시간 동안 반응시켰다. 배지를 제거하여 200 μL의 PBS로 4회 세척한 후, 각 well에 100 μL의 substrate solution을 첨가하고 차광한 상태에서 15분간 실온에서 반응시켰다. 이후 100 μL stop solution (1 N H2SO4)을 첨가하고, 450 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 450 nm에서 흡광도를 측정한 후 PIP 표준농도곡선을 작성하여 시료 내 PIP 양을 산정하였다.
그 결과, 도 6에 나타난 바와 같이, 본 발명의 조성물은 0.1 ~ 10 % 처리 농도에서 블루라이트로부터 PIP 발현양을 증가시켜 콜라겐 증식이 있음을 확인하였다.
실험예 8: 세포의 에너지 증진 효과 시험
본 발명의 조성물의 세포 에너지 증진 효과를 살펴보기 위하여, 세포가 대사과정에서 방출하는 ATP의 활성 정도를 측정하였다.
이를 위하여 Detroit 세포를 12-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 정제수를 첨가한 대조군과 시험 물질인 조성물을 최종 0.1, 1, 5, 10 %인 농도가 되도록 세포에 처리하고, 2시간 후 Topview 5450 VRI SMD LED를 이용하여 블루라이트를 조사(114 mW/cm2, 30분)하였다. 이후 24시간 동안 세포를 추가 배양하였다. 상기 과정을 통해 배양한 세포의 용해물을 희석한 일부 50 μL를 취해 ATP assay kit(Abcam, Cat. ab83355) 내 ATP 표준물질 50 μL와 함께 각각 96-well plate에 넣고 50 μL의 ATP reaction mix 용액을 또한 각 well에 첨가하여 차광한 상태에서 30분간 실온 반응시켰다. 이후 570 nm에서 흡광도를 측정한 후 ATP 표준농도곡선을 작성하여 시료 내 ATP 양을 산정하였다.
그 결과, 도 7에 나타난 바와 같이, 본 발명의 조성물은 0.1 ~ 10 % 처리 농도에서 블루라이트로부터 ATP 양이 증가하여 에너지 활성 증진 효과가 있음을 확인하였다.
실험예 9: 피부 진정 효과 평가 (피부 온도 감소율)
본 발명의 조성물에 의한 열노화 방지 효과를 평가하였다. 즉, 본 발명에 의한 조성물을 농도별로 포함되도록 화장수 제형화한 후 피부에 적용하여 열노화 방지 효과를 확인하였다. 20 ~ 30대 건강한 피험자 25명의 전완부에 실시하였으며, 시험 전 20분간 피험자의 실험 부위(전완부)를 직사광선에 노출시켰다. 시험 시료와 대조 시료를 전완부의 선정된 시험부위 (2 cm * 2 cm)에 Micro Pipette을 사용하여 각각 50 μL 양으로 도포하였으며, 시료 도포 전, 도포 직후, 도포 5분 후, 도포 20분 후의 온도를 측정하였다. 열노화 방지 효능 비교를 위한 음성 대조군으로 물을 사용하였고, 측정 후 각 시료의 온도 감소율은 아래의 수학식에 따라 도출하였다.
열 감소율 (%) = (1 - 시료 적용 부위의 온도/ 시료 비적용 부위의 온도) * 100
열감소율 (%)
본 발명의 조성물 (%) 적용 직후 5분 후 20분 후
0 6.1 2.1 0
0.1 7.0 3.5 0.8
0.5 9.2 4.5 1.5
1 17.3 8.4 2.8
5 18.1 8.8 2.9
10 19.5 10.4 4.1
그 결과, 대조군의 경우 시간이 흐름에 따라 온도 감소율이 급격히 감소하였으나, 본 발명의 조성물을 포함하는 시료는 20분 후에도 농도 의존적으로 20분 후에도 지속적인 열 감소율이 유지됨을 확인하였다.

Claims (9)

  1. 한련 추출물, 케일잎 추출물, 서양민들레잎 추출물, 순무잎 추출물, 당근전초 추출물, 서양호박 추출물, 고구마뿌리 추출물, 수박 추출물, 및 울금뿌리줄기 추출물 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 블루라이트 차단용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 세포 보호 및 피부 재생용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 항산화용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부의 염증 반응 억제 또는 예방용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 주름 개선, 예방 또는 억제용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 활성 증진용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 온도 조절용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  8. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 진정용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  9. 한련 추출물, 케일잎 추출물, 서양민들레잎 추출물, 순무잎 추출물, 당근전초 추출물, 서양호박 추출물, 고구마뿌리 추출물, 수박 추출물, 및 울금뿌리줄기 추출물 중 어느 하나 이상을 함유한 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 화장료 조성물의 제조방법.
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