KR20170136969A

KR20170136969A - 당류를 이용한 천연 추출물 제조 방법

Info

Publication number: KR20170136969A
Application number: KR1020170017697A
Authority: KR
Inventors: 김미림; 정의택; 임준만; 이상화
Original assignee: 주식회사 엘지생활건강
Priority date: 2016-06-02
Filing date: 2017-02-08
Publication date: 2017-12-12

Abstract

당류를 용매로 하여 식물을 추출하는 단계를 포함하는, 식물 추출물 제조방법에 관한 것이다. 보다 상세하게는 피부 미백, 피부 탄력 증진, 주름 개선 또는 보습 등의 우수한 효과를 가지는 식물 추출물 제조방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명의 제조방법을 이용한 화장료 조성물은 항염 효과가 우수하며, 멜라닌 총량 감소 효과를 나타내고 콜라겐 합성 촉진 효과, 및 보습 효과가 우수하여 피부 미백용, 탄력 증진용 또는 주름 개선용, 및 피부 보습용 화장료 조성물로서 사용할 수 있다.

Description

당류를 이용한 천연 추출물 제조 방법 {Method for preparing natural extract using sugars}

본 발명은 당류를 용매로 하여 식물을 추출하여 식물 추출물을 제조하는 단계를 포함하는, 식물 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 피부 미백, 피부 탄력 증진, 주름 개선, 피부 보습 및/또는 항염 효과 등의 우수한 효과를 가지는 화장료 조성물 제조방법에 관한 것이다.

일반적으로 알려진 미백 성분으로서, 코지산(Kojic acid) 또는 알부틴(Arbutin) 등과 같은 티로시나제 효소활성을 억제하는 물질, 하이드로퀴논(Hydroquinone), 비타민 C(L-Ascorbic acid) 또는 이들의 유도체와 각종 식물 추출물이 있다. 이들은 멜라닌 색소의 합성을 저해함으로써, 피부 톤을 밝게 하여 피부 미백을 실현할 수 있을 뿐만 아니라, 자외선, 호르몬 또는 유전에 기인한 기미나 주근깨 등의 피부 과색소 침착증의 개선이 가능하다. 그러나 피부 적용 시, 자극과 발적 등의 안전성의 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 실질적인 효과를 기대할 수 없는 문제점이 있다.

콜라겐은 피부의 섬유아세포(Fibroblast)에서 생성되는 주요 기질 단백질로서 세포 외 간질에 존재하고, 중요한 기능으로는 피부의 기계적 견고성, 결합조직의 저항력과 조직의 결합력, 세포접착의 지탱, 세포 분할과 분화(유기체의 성장 혹은 상처 치유 시)의 유도 등이 알려져 있다. 이러한 콜라겐은 연령 및 자외선 조사에 의한 광 노화에 의해 감소하며, 콜라겐을 분해하는 콜라게나제 효소 활성으로 콜라겐 감소가 촉진된다. 이는 피부의 주름 형성과 밀접한 연관이 있다고 알려져 있다.

아울러, 콜라겐은 진피층 내의 수분 보유에 중요한 역할을 하는 기질 단백질로 이러한 기질 단백질이 수분을 흡착하며, 이들이 이루는 구조 내부에 수분 보유력을 높여 피부가 적정 수분을 함유한 상태를 유지할 수 있도록 해주며, 이를 통해 피부의 탄력을 유지하는데 관여한다고 알려져 있다.

현재, 피부 탄력 증진 및 주름 개선 화장료로는 레티노이드, 아데노신, 동물태반유래 단백질, 클로렐라 추출물 등이 알려져 있다. 가장 잘 알려져 있는 레티놀은 콜라겐 합성을 촉진하는 물질이지만 불안정하며, 피부 적용 시 자극, 발적 등의 안전성 문제로 사용량의 제한이 있으며, 클로렐라 추출물 등은 효과가 미미하여 실질적으로 피부 탄력 증진 및 주름 개선 효과를 기대하기가 어렵다고 알려져 있다.

한편, 인체 내에서 대식세포는 병원체에 반응하여 종양 괴사 인자-α(tumor necrotic factor-α, TNF-α), 인터루킨-6(IL-6), 인터루킨-1β(IL-1β) 등과 같은 염증유발인자를 생성하고, 유도성 일산화질소 합성효소(inducible nitric oxide synthase, iNOS)와 사이클로옥시게나제-2(cyclooxygenase-2, COX-2)를 합성하여 일산화질소(NO) 및 프로스타글란딘(prostaglandin E2, PGE2)을 생성한다. 생리학적으로 NO는 세균과 종양을 제거하고 혈압을 조절하거나 신경 전달을 매개하는 등 다양한 역할을 한다. 그러나 염증 반응이 일어나게 되면 관련 세포들에서 iNOS의 발현이 증가하여 많은 양의 NO가 생성되고, 과도하게 생성된 NO는 조직의 손상, 유전자 변이, 신경 손상 등을 유발하며, 혈관 투과성을 증가시켜 부종 등의 염증 반응을 촉진시킨다.

염증 반응시에는 다양한 염증유발인자와 더불어 다양한 자유기(free radical)가 생성된다. 정상적인 자유기는 세포의 항상성 유지에 관여하며, 세포의 분화, 성장, 생존, 노화에 영향을 준다. 이러한 자유기 중 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)은 세포 내의 미토콘드리아에서 호흡과 면역 반응에 의한 산소의 산화와 환원 과정을 통해 끊임없이 생성된다. 유해한 ROS는 일반적으로 슈퍼옥사이드 디스뮤타제(superoxide dismutase), 카탈라제(catalase), 글루타치온 퍼옥시다제(glutathione peroxidase), 글루타민 리덕타제(glutamine reductase), 비타민 C, 비타민 E, 요산, 빌리루빈(bilirubin)과 같은 항산화 체계의 작용으로 제거된다. 그러나 자유기의 생성과 소거의 균형이 무너지게 되면 산화적 스트레스(oxidative stress)가 발생하게 되어 염증, 노화 또는 암과 같은 다양한 병리학적인 변화를 일으킨다. 실제로 많은 임상 질환에서 산화적 스트레스가 증가되는 것이 확인되었으며, 이러한 산화적 스트레스를 줄이기 위해 새로운 항산화 물질에 대한 다양한 연구가 이루어지고 있다.

여러 가지 원인에 의한 환경으로부터의 자극, 스트레스, 화학적 시술 등으로부터 피부를 보호하고, 생태계 친화적이면서 환경과 인간에 무해한 성분에 관한 연구가 지속되고 있다.

상기와 같이, 전술한 화장료 조성물들은 사람들에게 경제적 부담 및 고통을 주거나 부작용을 유발하고, 효과가 일시적이거나 또는 단편적인 약리학적 기작만을 사용하는 등의 문제점을 가지고 있어서, 효과가 보다 탁월하고 지속적이며, 부작용이 없는 조성물들의 요구가 증대되고 있는 실정이다.

이러한 배경하에, 본 발명자들은 피부 미백, 피부 탄력 증진, 주름 개선, 피부 보습 및 항염 효과가 우수한 물질에 관하여 연구를 수행하였으며, 이에 당류를 용매로 하여 식물을 추출하여 식물 추출물을 제조하는 단계를 포함하는, 식물 추출물을 포함하는 화장료 조성물이 멜라닌 총량 감소, 콜라겐 합성 촉진, 보습 및 항염 효과가 증진됨을 규명하여, 이를 활용한 화장료 조성물 제조방법을 완성하기에 이르렀다.

한국공개특허공보 제10-2014-0006139호

본 발명의 목적은 당류를 용매로 하여 식물을 추출하여 식물 추출물을 제조하는 단계를 포함하는, 식물 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 제조방법으로 제조된, 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기 과제를 해결하기 위한 하나의 양태로서, 본 발명은 당류를 용매로 하여 식물을 추출하여 식물 추출물을 제조하는 단계를 포함하는, 식물 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다.

본 발명에서 식물 추출물의 제조는 (a) 식물에서 혼합할 부위를 분리하는 단계; (b) 상기 (a) 단계의 결과물에 당류를 혼합하는 단계; (c) 상기 (b) 단계의 결과물을 밀봉한 상태로 흔들어 고르게 믹스하는 단계; (d) 상기 (c) 단계의 결과물을 밀폐하여 숙성하는 단계; 및 (e) 상기 (d) 단계의 결과물을 필터를 이용하여 추출하는 단계를 포함할 수 있다.

상기 단계 (a)는 식물에서 혼합할 부위를 분리하는 단계이다. 본 발명에서 사용된 식물은 장미, 작약, 아이리스, 연꽃, 심비듐, 금련화, 푸른연꽃 및/또는 수련 중 선택되는 하나 이상의 식물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 구체적으로, 상기 식물추출물은 장미, 작약 및 아이리스의 조합이거나, 연꽃, 심비듐 및 금련화 조합이거나, 푸른연꽃 및 수련의 조합으로 이루어진 식물 추출물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 단계 (b)는 상기 (a) 단계의 결과물에 당류를 혼합하는 단계이다. 이를 위하여 당류는 꿀, 로얄젤리, 설탕, 과당, 당알콜류, 프락토올리고탕 등이 사용되나 이에 제한되지 않고 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 물질이라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 보다 구체적으로는 당류로서 꿀, 로얄젤리를 사용할 수 있다. 당류의 혼합 비율은 식물 중량비와 동일하게 할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 더 구체적으로, (b) 단계를 거치는 동안 식물은 당류와 혼합되어 숙성이 되면서 삼투압 등의 원리로 식물의 수분이 빠져나오면서 추출물의 형태로 바뀌는 것 일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 단계 (c)는 상기 (b) 단계의 결과물을 밀봉한 상태로 흔들어 고르게 믹스하는 단계이다. 이때 (b) 단계의 결과물이 공기 중에 노출되지 않도록 밀봉된 상태이어야 하며, 교반기 등을 사용하여 잘 섞이도록 하는 것이 바람직하다.

상기 단계 (d)는 상기 (c) 단계의 결과물을 밀폐하여 숙성하는 단계이며, 상온에서 실기압으로 일정기간 숙성기간을 거치는 것이 바람직하다. 구체적으로, (c) 단계의 믹스과정 및 (d) 단계의 숙성과정에서 밀봉 및 밀폐를 하지 않을 경우, 첨가한 당류 및 식물로부터 유래된 침출수를 이용하여 미생물이 번식하여 부패를 일으킬 우려가 있는바, 밀봉 및 밀폐를 하여 공기를 차단하는 것이 바람직하다.

상기 단계 (e)는 상기 (d) 단계의 결과물을 필터를 이용하여 추출하는 단계이다.

본 발명에서 사용된 식물은 장미, 작약, 아이리스, 연꽃, 심비듐, 금련화, 푸른연꽃 및/또는 수련 중 선택되는 하나 이상의 식물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 구체적으로, 상기 식물추출물은 장미, 작약 및 아이리스의 조합이거나, 연꽃, 심비듐 및 금련화 조합이거나, 푸른연꽃 및 수련의 조합으로 이루어진 식물 추출물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명에서 사용되는 용어 "장미(Rosa hybrida)"는 온대성의 상록관목으로서 햇빛을 좋아하는 식물이다. 18세기 말에 아시아의 각 원종이 유럽에 도입되고 이들 유럽과 아시아 원종간의 교배가 이루어져 화색이나 화형은 물론 사계성이나 개화성 등 생태적으로 변화가 많은 품종들이 만들어졌다. 일반적으로 흰색, 붉은색, 노란색, 분홍색 등의 색을 띠나 품종에 따라 그 형태·모양·색이 매우 다양하다. 꽃의 피는 시기와 기간 역시 품종에 따라 차이가 크다. 장미는 혈액순환을 잘되게 하며 이뇨, 해독, 월경불순, 월경통, 변비, 위장염 등에 효능이 있는 것으로 알려져 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "작약(Paeonia lactiflora)"은 작약과에 속하는 여러해살이 쌍떡잎식물로, 산지에서 자란다. 꽃이 아름다워 원예용으로 쓰인다. 중국에서는 진과 명시대에 이미 관상용으로 재배되어 그 재배 역사는 오래되었다. 뿌리는 진통, 복통, 월경통, 무월경, 토혈, 빈혈, 타막상 등에 효능이 있다 하여 한방에서 약재로 많이 사용하고 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "아이리스(Iris)"은 외떡잎식물 백합목의 붓꽃과 식물로 북반구의 온대지방에 200여 종이 자라고 한국에 14종이 있다. 여러 품종이 있으나, 영국 붓꽃, 저먼아이리스, 스페인붓꽃, 더치아이리스 4계통으로 나눈다. 뿌리줄기를 약재로 쓰는데 소화불량, 타박상, 치질 등에 효능을 지니고 있는 것으로 알려져 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "연꽃(Nelumbo nucifera Gaertn)"은 황실 귀족들은 남녀노소를 불문하고 배를 타고 호수에서 연꽃을 감상하는 '연꽃 관상 풍조' 가 존재 할 정도로 황실의 사랑을 받던 꽃이다. 연은 한의학에서도 매우 유용한 한약재로 사용하고 있는데, 열매에서부터 잎, 꽃, 연밥, 연의 암술, 뿌리에 이르기까지 연의 대부분을 활용하고 있다. 가장 많이 사용하는 부분은 열매로 기력을 돕고 오장을 보호해주며 갈증과 설사를 없애준다. 특히 마음을 안정시키는 효능이 있어 신경이 예민한 현대인들에게 유용한 약재다. 달면서도 쓴맛이 있는 잎은 혈액순환을 좋게 하고 어혈을 풀어주는 데 좋으며 타박상으로 인한 울혈을 치료하고, 상처에 찧어 붙이면 지혈효과가 크다. 또한, 피부 미용과 아름다움의 비서라고 할 수 있는 '백별단방대전'에 피부를 관리하고 가꿀 수 있는 최고의 꽃으로 기재되어 있을 정도로, 예부터 피부 미용에 좋은 꽃으로 알려져 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "심비듐(Cymbidium)"은 2000년간 군자의 상징으로 여겨지던 난꽃이다. 또한 강한 향기를 가지고 아름다워 예로부터 아껴지는 지생란의 하나이다. '귀족 꽃'이라 불릴 만큼 맑고 기품 있는 꽃의 형태와 향기를 가지고 있으며, 전통적으로 미용 효과를 인정받은 난 꽃을 이용해 우린 물을 피부를 부드럽고 윤택하게 만들기 위해 사용하였으며, 특히 결혼을 앞둔 귀족 여성들의 미용을 위한 비법으로 사용된 것으로 알려져 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "금련화(Tropaeolum majus L.)"은 연잎을 닮았으나 땅에서 자라는 금빛의 연꽃이라 불리우며, '금련화' 중 꽃이 가장 아름다운 것은 Majus이다. 16세기 영국에서는 금련화가 보물 중 하나로 여겨졌으며, 스페인 정복자들이 페루의 잉카 인들로부터 금과 함께 유럽으로 가지고 왔던 귀하게 여겼던 보물 중 하나이다. 유럽 왕가의 건강을 위한 재료로 사용되던 귀한 원료로 알려져 있다. 성질이 차고 맛은 쓰고 독은 없는 것으로 알려져 있다. 열을 내리는 효능이 있으며, 급성 결막염에도 효능이 있는 것으로 알려져 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "푸른연꽃(Nelumbo nucifera Gaertn)"은 물 속에서 가련한 꽃을 피우는 수련과 연꽃은 물의 요정이라 일컬어진다. 이집트 신화에서 태초의 물에서 솟아오른 연꽃으로 기록되어 있다. 고대 이집트에서는 옛날부터 특히 하늘색 련을 귀중하게 여겼는데, 꽃잎이 태양의 햇살처럼 퍼지고 아침에 피었다가 저녁에 오므라들며, 토지와 생물에 생명을 주는 나일강에서 자라 더욱 귀중한 것으로 생각하였다. 푸른 연꽃의 꽃잎, 씨앗 등은 마음을 안정시키는 효능이 있는 것으로 알려져 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "수련(Cymbidium)"은 물속에서 가련한 꽃을 피우는 수련과 연꽃은 물의 요정이라 일컬어진다. 'White Water Rose(물에서 자라는 백장미)라고 불릴 만큼 대단히 아름다워 널리 사랑 받고 있다. ‘Water lily with white flowers (하얀 꽃을 피우는 물에서 피는 백합)'으로도 불리며, 백합 같은 고고하고 고아한 아름다움을 지니는 것으로 알려져 있다. 냉랭한 지역에서도 잘 피어나며, 오전 중에 피어나 해지기 전 오므라드는 특성이 있다. 연은 한의학에서도 매우 유용한 한약재로 사용하고 있는데, 열매에서부터 잎, 꽃, 연밥, 연의 암술, 뿌리에 이르기까지 연의 대부분을 활용하고 있다. 가장 많이 사용하는 부분은 열매로 기력을 돕고 오장을 보호해주며 갈증과 설사를 없애준다. 특히 마음을 안정시키는 효능이 있어 신경이 예민한 현대인들에게 유용한 약재다.

본 발명에서 상기 식물은 하기에서 설명될 피부미백, 피부탄력증진, 피부보습 및/또는 항염증에 효과가 있다.

본 발명에서의, "추출물(extract)"은, 목적하는 물질을 당류 용매에 침지한 다음, 상온, 저온 또는 가온 상태에서 일정시간 동안 추출하여 수득한 액상성분, 상기 액상성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다. 뿐만 아니라, 상기 결과물에 더하여, 상기 결과물의 희석액, 이들의 농축액, 이들의 조정제물, 정제물 등을 모두 포함하는 것으로 포괄적으로 해석될 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 추출물은 식물 추출물을 의미한다. 구체적으로, 식물 추출물은 천연, 잡종, 변종식물의 다양한 기관으로부터 추출될 수 있고, 예를 들어 뿌리, 지상부, 줄기, 잎, 꽃, 열매의 몸통, 열매의 껍질뿐만 아니라 식물 조직으로부터 추출 가능하다. 상기 추출물은 당류를 용매로하여 수득할 수 있다. 더 구체적으로, 상기 추출물은 식물이 당류와 혼합되어 숙성이 되면서 삼투압 등의 원리로 식물의 수분이 빠져나오면서 추출물의 형태로 바뀌는 것 일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

이때, 사용되는 당류는 꿀, 로얄젤리, 설탕, 과당, 당알콜류 및/또는 프락토올리고탕 등이 사용될 수 있으며, 구체적으로는 꿀 및/또는 로얄젤리가 사용될 수 있으나 이에 제한되지 않는다.

본 발명에서 당류를 용매로 한 식물 추출물은 각각의 식물을 물을 용매로 하여 추출한 추출물보다 피부 미백, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선, 피부 보습, 피부 노화 방지 및/또는 피부 염증 개선에 효과적임을 확인하였는바, 당류를 용매로 하여 식물을 추출하는 과정에서 당류가 식물과 우수한 시너지 작용을 하는 것을 알 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "꿀"은 벌이 꽃의 꿀샘에서 채집하여 먹이로 저장해 둔 것을 의미한다. 꿀은 벌의 종류에 따라 토종꿀과 양봉꿀로 나누어지고, 꽃에 따라 아카시아꿀, 싸리꿀, 유채꿀, 밤꿀, 메밀꿀 등으로 불리며, 꽃의 종류에 따라 빛깔과 맛이 달라진다. 꿀은 약 80％ 가량이 탄수화물로 과당이 36~38％, 포도당이 34~36％, 설탕과 덱스트린이 2~3％이다. 그 밖에는 단백질 0.2~0.3％, 회분 0.05~0.2％, 비타민 B 복합체인 B1, B2, B6, 판토텐산 등과 개미산, 젖산, 사과산, 색소, 고무질, 왁스, 효소 등이 함유되어 있다. 우리나라에서 꿀은 식용과 약용으로 널리 이용되며, 감미료로 사용되기도 한다.

본 발명에서 사용되는 용어 "로얄젤리"는 일벌들이‘왕에게 바치는 선물'로, 여왕벌의 먹이를 의미한다. 로얄젤리는 단백질, 지방, 탄수화물 및 각종 미량원소를 고루 함유한 신비의 영양 물질과 아직도 밝혀지지 않은 R이라는 성분을 함유하여 다양한 효능을 가지는 것으로 알려져 있다. 또한 로얄젤리의 성분자체가 영양만점에 피부 미용에도 효과적인 것으로 알려져 있다.

본 발명에서 상기 제조방법으로 얻어진 화장료 조성물은 피부 미백, 피부 탄력증진 및 주름 개선, 피부 보습, 및/또는 항염증 등의 효과를 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명에 있어서, "피부 미백"이라 함은 멜라닌 색소의 합성을 저해함으로써 피부 톤을 밝게 할 뿐만 아니라, 자외선, 호르몬 또는 유전에 기인한 기미나 주근깨 등의 피부 과색소 침착을 개선하는 것을 말한다.

구체적인 일실시예에 따르면, 본 발명의 당류를 용매로 하여 추출한 식물 추출물을 처리한 멜라노마 세포에서 멜라닌의 총량을 측정한 결과, 당류를 이용한 식물 추출물이 물을 이용한 식물 추출물들과 비교할 때 멜라노마 세포에 대하여 더 우수한 멜라닌 생성 억제 효과가 있음을 나타내므로 피부 미백 용도로 사용할 수 있음을 확인하였다(표 4).

이를 통해, 당류를 용매로 한 식물 추출물이 물을 용매로 한 식물 추출물에 비하여 제조과정에서 식물과 시너지 작용을 일으켜, 피부 미백에 더 우수한 효과를 가짐을 알 수 있었다.

본 발명에 있어서, "피부 탄력 증진"이란 피부가 쳐지거나 늘어지는 정도를 완화시켜주는 것으로, 엘라스틴으로 구성된 탄력섬유가 콜라겐(collagen)이라고 하는 교원섬유와 함께 존재하는데, 엘라스틴과 콜라겐이 충분히 존재하는 상태에서 피부 탄력이 유지되는 것을 말한다. 본 발명에 있어서, "주름 개선"이란 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 것을 말한다.

구체적인 일실시예에 따르면, 본 발명의 당류를 용매로 한 식물 추출물을 처리한 HF 세포를 배양하여 키트 (procollagen type-1 C-peptide EIA kit, Takara, Japan)를 사용하여 프로 콜라겐의 합성을 측정한 결과, 콜라겐 합성 효과가 물을 용매로 한 식물 추출물 보다 당류를 용매로 하여 얻어진 식물 추출물에서 우수함을 확인하였다(표 2).

이를 통해, 당류를 용매로 한 식물 추출물이 물을 용매로 한 식물 추출물에 비하여 제조과정에서 식물과 시너지 작용을 일으켜, 피부 탄력 증진에 더 우수한 효과를 가짐을 알 수 있었다.

또한, 본 발명의 일 실시예에 따르면, 당류를 이용한 추출시 숙성 기간에 따른 효과를 확인하기 위하여 숙성기간별에 따른 콜라겐 합성 증진 효과를 확인한 결과, 추출(숙성) 기간이 증가할 수록 더욱 우수한 콜라겐 합성 증가 효과가 있음을 확인하였다(표 3).

이를 통해 당류를 이용한 추출물이 물을 이용한 추출물과 달리 추출 기간이 증가할 수록 더욱 우수한 탄력 증진, 피부 노화 방지 또는 개선, 및 피부 주름 개선 효과를 나타낼 수 있음을 알 수 있었다.

일반적으로 추출물에 당류를 첨가한 경우에는 일시적으로 상기와 같은 효과가 나타날 수 있으나, 본 발명과 같이 당류를 용매로 하여 식물을 추출한 뒤 숙성시킨 결과물을 이용하는 경우 상기와 같은 효과가 증대되어 지속적으로 나타남을 알 수 있다.

본 발명에 있어서, "피부 보습"이란 피부에 수분감을 증가시켜주고, 촉촉한 상태를 유지시키는 것을 의미한다. 피부 보습 효과는 피부의 주름개선, 탄력도 증가에 도움을 줄 수 있다.

구체적인 일실시예에 따르면, 본 발명의 당류를 용매로 하여 추출한 장미, 작약, 아이리스, 연꽃, 심비듐, 금련화, 푸른연꽃 및 수련의 식물 추출물을 처리한 각질형성세포(HaCaT, Human keratinocyte)을 배양하고, HAS3 mRNA양을 비교하여 보습 실험한 결과, 상기 당류를 이용한 식물 추출물에서 물을 이용한 추출물에 비하여 HAS3 mRNA 발현이 증가됨을 확인하였다(표 5).

이러한 결과를 통해 당류를 이용하여 추출한 식물 추출물이 피부 보습 효과를 나타낼 수 있음을 알 수 있었다.

또한, 이를 통해, 당류를 용매로 한 식물 추출물이 물을 용매로 한 식물 추출물에 비하여 제조과정에서 식물과 시너지 작용을 일으켜, 피부 보습에 더 우수한 효과를 가짐을 알 수 있었다.

본 발명에서의 "항염증"은 염증을 억제하는 작용을 의미하는 것으로, 염증반응의 조절은 대단히 복잡한 것으로 알려져 있는데, 이는 생체 내 복구체계의 증강 및 손상을 감소시키기 위한 것으로 알려져 있다. 그러나 반복되는 조직의 손상이나 재생에 의해 염증반응이 지속되면, 염증관련 세포에서 ROS와 RNS가 과다 생성되고 그 결과로 영구적인 유전자의 변형이 야기된다. 이처럼 ROS와 RNS는 생체 내 여러 가지 세포의 작용을 조절하는 염증 반응과 깊이 관련되어 있다. 염증 과정 중에는 많은 양의 염증유도 사이토카인(proinflammatory cytokines), 아질산(nitric oxide, NO) 그리고 프로스타글란딘(prostaglandin E2, PGE2)이 유도성 일산화질소 합성효소(inducible nitric oxide synthase, iNOS)와 사이클로옥시게나아제(cyclooxygenase-2, COX-2)에 의해 생성된다. 염증은 다양한 염증성 질환을 유발하는 원인으로써, 본 발명의 장미, 작약 및 아이리스의 혼합 추출물을 포함하는 조성물은 항염증 작용을 통해 다양한 염증성 질환에 대한 예방 및 개선 효과를 가질 수 있다.

구체적인 일 실시예에 따르면, 본 발명의 당류를 이용한 식물 추출물의 NO 생성 억제 효과를 분석한 결과, 물을 이용하여 추출한 식물 추출물에 비하여 동일 농도로 처리시 더욱 높은 NO 생성 억제능을 확인하였는 바, 상기 혼합 추출물이 강한 항염증 효과를 갖는 것을 확인하였다(표 6).

이를 통해, 당류를 용매로 한 식물 추출물이 물을 용매로 한 식물 추출물에 비하여 제조과정에서 식물과 시너지 작용을 일으켜, 항염증에 더 우수한 효과를 가짐을 알 수 있었다.

본 발명은 다른 하나의 양태로서, 상기 제조방법으로 제조된, 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.

본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "보습제"는, 당해 기술분야에서 통상적인 방법에 의해 사용되는 보습제를 의미한다.

상기 화장료 조성물은 보습제를 더 포함하고, 상기 복합체 조성물은, 상기 보습제의 첨가량에 대하여 0.01 내지 0.5배의 비율로 포함될 수 있다. 상기 화장료 조성물 총 중량에 대하여 상기 보습제는 0.01 내지 20 중량%, 구체적으로는 0.001 내지 10 중량%를 포함할 수 있다. 상기 보습제는 글리세린, 1,3 butylene glycol, 디라우로일글루타민산리신 또는 그의 무독성 염을 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 상기 제조방법에 의해 얻어진 식물 추출물 뿐만아니라, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 보조제 예컨대 친수성 또는 친지성 겔화제, 친수성 또는 친지성 활성제, 보존제, 항산화제, 용매, 방향제, 충전제, 차단제, 안료, 흡취제 및 염료 등을 함유할 수 있다.

본 발명은 당류를 용매로 하여 식물을 추출하여 식물 추출물을 제조하는 단계를 포함하는, 식물 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 피부 미백, 피부 탄력 증진, 주름 개선, 피부 보습 및 또는 항염증 등의 우수한 효과를 가지는 화장료 조성물 제조방법으로 사용할 수 있다.

이하 본 발명을 하기 예에 의해 상세히 설명한다. 다만, 하기 예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 하기 예에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.

제조예 1. 당류를 용매로 하여 추출한 혼합 추출물의 제조

식물 추출물들의 각각의 식물의 플라보노이드 뿐만 아니라 협업작용을 할 수 있는 성분까지 함께 추출된 추출물을 제조하기 위해, 상온에서 효능 성분 파괴 없이 추출하였다.

구체적으로, 장미, 작약, 아이리스, 연꽃, 심비듐, 금련화, 푸른연꽃 및/또는 수련을 물로 세척하고, 세척된 장미, 작약, 아이리스, 연꽃, 심비듐, 금련화, 푸른연꽃 및/또는 수련을 각각 추출 용기에 투입 후, 꿀, 로얄젤리 등의 당류를 용매로 추가로 혼합하였다. 이 후, 상기 혼합물이 공기 중에 노출되지 않도록 밀봉하고, 고르게 섞이도록 흔들어서 믹스하였다. 밀봉한 혼합물을 숙성한 뒤, 필터를 이용하여 원물을 여과하고 상온에서 천천히 추출하여 추출액만을 얻었다. 상기의 추출법을 바탕으로 완성된 실시예 4 내지 6 추출물과 비교하기 위한 일반 수(水)추출물 실시예 1 내지 3를 제조하였다. 식물 추출물의 제조 비율 예는 표 1에 나타내었다.

성분	실시예1 ( % )	실시예2 ( % )	실시예3 ( % )	실시예4 ( % )	실시예5 ( % )	실시예6 ( % )
미네랄워터	50	50	50	-	-	-
당류	-	-	-	50	50	50
장미, 작약, 아이리스	50	-	-	50	-	-
연꽃, 심비듐, 금련화	-	50	-	-	50	-
푸른연꽃, 수련	-	-	50	-	-	50

실시예 1 내지 6의 경우, 각 추출물들이 대등한 비율로 혼합되어 협업작용으로 시너지 효과를 낼 수 있도록 최대 함량비를 조절한 것이다.

실험예 1. 콜라겐 합성 증진 효과

제조예 1에서 당류를 이용한 추출물 실시예 4 내지 6과 물을 이용한 추출물 실시예 1 내지 3에 대하여 다음과 같이 배양된 세포를 이용하여 콜라겐 합성 증진 효과를 측정하였다.

키트 (procollagen type-1 C-peptide EIA kit, Takara, Japan)를 사용하여 프로 콜라겐의 합성을 측정하였다. HF 세포를 5 × 10⁴세포/㎖의 밀도로 24 웰 플레이트에 무첨가, 제조예 1에서 제조된 추출물, 실시예 1 내지 6에 배지를 0.01 중량%를 넣고 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 48시간 동안 배양하였다. 항-PIP 항체가 코팅된 (anti-PIP antibody-coated) 96 웰 플레이트에 항체-POD가 결합된 용액 (antibody-POD conjugate sol'n) 100 ㎕를 넣고 무첨가, 제조예 1에서 제조된 혼합 추출물 각각 혹은 혼합 배지와 표준액 20 ㎕를 첨가하고 알루미늄 호일로 차광시킨 후 3시간 동안 37 ℃에서 배양하였다.

배양액을 제거하고 PBS로 4회 세척 후 말끔히 제거하고 기질용액 100 ㎕를 첨가한 후 실온에서 15분간 둔 후, H₂SO₄ 100 ㎕를 첨가하여 가볍게 흔든 후 450 nm에서 측정 흡광도를 측정하였다. 실험 결과는 표 2에 나타내었다. 모든 결과값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차(SD)로 나타내었다.

콜라겐 발현 증가량(%) (n=3)

구분	콜라겐 합성 증가율 (%)
무첨가	0
실시예 1	8.06
실시예 2	18.6
실시예 3	17.6
실시예 4	25.8
실시예 5	27.35
실시예 6	21.3

그 결과, 상기 표 2에서 나타나듯이, 당류를 이용한 혼합 추출물이 물을 이용한 혼합 추출물보다 더욱 우수한 콜라겐 합성 증가 효과 있음을 확인하였다.

실험예 2. 추출(숙성) 기간에 따른 추출물의 효과

제조예 1에서 당류를 이용한 추출 시, 추출(숙성) 기간에 따른 효과의 변화를 확인하기 위해 대표적으로 당류를 이용하여 제조된 실시예 4와 5를 이용하여 추출 기간에 따른 주차별 효과(대표 항목: 콜라겐 증진 효과)를 비교하여 측정하였다.

제조 후, 1-4주차까지의 추출물을 각각 주차별로 얻어 실시예 1과 동일한 실험을 진행하였다. 실험 결과는 표 3에 나타내었다. 모든 결과값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차(SD)로 나타내었다.

콜라겐 발현 증가량(%) (n=3)

구분		콜라겐 합성 증가율 (%)
무첨가		0
실시예 4	1주차	1.8
	2주차	3.2
	3주차	4.7
	4주차	25.8
실시예 5	1주차	6.4
	2주차	8.7
	3주차	12.0
	4주차	27.35

그 결과, 상기 표 3에서 나타나듯이, 제조예 1의 방법을 통해 제조된 실시예 4, 5의 주차별 원료 처리 시, 추출(숙성) 기간이 증가할 수록 더욱 우수한 콜라겐 합성 증가 효과가 있음을 확인하였다.

실험예 3. 멜라닌 생성 억제 효과

제조예 1에서 당류를 이용한 추출물 실시예 4 내지 6과 물을 이용한 추출물 실시예 1 내지 3에 대하여 미백 효과를 확인하기 위하여, 다음과 같이 배양된 세포를 이용하여 멜라닌 억제 효과를 측정하였다.

구체적으로, 상기 시료의 미백 효능은 melanocyte 내에 존재하는 멜라닌색소의 양이 감소하는 정도를 측정하여 평가하였다. 상기 시료를 0.01 중량%로 희석하여 B16 melanocyte에 처리하고 48시간 배양한 후, 멜라닌을 정량하여 미백 효능을 평가하였다. 멜라닌 함량은 총 단백질량 대비로 계산한 후, DMSO 대조군 기준 %로 구하였다. 양성 대조군은 Arbutin 100 ppm (Lim YJ et al., 2009, Arch Pharm Res.)을 사용하였다.

그 결과를 하기 표 4에 나타내었다. 모든 결과값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차(SD)로 나타내었다.

멜라닌 생성량 (%) (n=3)

시료	멜라닌생성량 (%)
무첨가	100
Arbutin	55
실시예 1	79
실시예 2	59
실시예 3	78
실시예 4	51
실시예 5	40
실시예 6	68

그 결과, 상기 표 4에서 나타나듯이, 당류를 이용한 혼합 추출물이 물을 이용한 혼합 추출물보다 더욱 우수한 멜라닌 생성 억제 효과가 있음을 확인하였다.

실험예 4. 보습 인자 합성 요소 증진 효과

제조예 1에서 당류를 이용한 추출물 실시예 4 내지 6과 물을 이용한 추출물 실시예 1 내지 3에 대하여 보습 인자 합성 요소 증진 효과를 확인하기 위하여, 다음과 같이 배양된 세포를 이용하여 피부 보습 효과를 측정하였다.

구체적으로, 37 ℃, 5% CO₂의 조건에서 10% FBS(Gibco), 스트렙토마이신(streptomycin) 100 ㎍/㎖, 페니실린 100 U/㎖, 암포테리신B (amphotericin B) 0.25 ㎍/mL가 첨가된 DMEM 배지를 사용하여 각질형성세포(HaCaT, Human keratinocyte)를 증식시킨다. 형성된 각질형성세포 (HaCaT, Human keratinocyte)를 6웰에 5X10⁵ cell/well의 밀도로 3ml의 배지와 함께 분주한 뒤, 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 24시간 배양한다. 배양된 상기 배지는 PBS로 씻어 FBS를 제거하였다. FBS가 제거된 배지에 무처리, 제조예 1에서 제조된 물을 이용한 추출물, 당류를 이용한 추출물을 실시예 1 내지 6에 0.01 중량%로 각각 3ml씩 처리한 후 다시 배양하고, HAS3 mRNA양을 비교하였다. RNA는 RNA추출kit (RNeasy Mini Kit, Qiagen, USA) 를 사용하였고, cDNA는 SuperScript II reverse transcriptase (Invitrogen, USA)를 이용하여 합성하였으며, Platinum PCR supermix (Invitrogen, USA)와 제작된 프라이머(primer)를 사용하여 PCR을 수행하였다. cDNA 합성은 1㎍의 총 RNA(total RNA)로 50℃에서 1시간, 85℃에서 5분 동안 열을 가한 후, 반응을 중지시켰다. PCR 증폭은 94℃에서 50초 동안 변성 (denaturation)시키고 60℃에서 50초 동안 어닐링 (annealing)하고 72℃에서 50초 동안 익스텐션 (extension) 시켰다. 이를 26 싸이클(cycle) 반복하고 마지막 익스텐션은 72℃에서 5분간 수행하였고, 증폭된 결과물은 2% 아가로스 겔(agarose gel)에서 전기영동하여 유전자 발현을 Fusion Fx5 detection system(VilberLourmat, Germany)으로 확인하였다.

그 결과를 하기 표 5에 나타내었다. 모든 결과값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차(SD)로 나타내었다.

HAS 발현 증가 (%) (n=3)

구분	HAS mRNA 발현 ( % )
무첨가	100
실시예 1	108
실시예 2	125
실시예 3	109
실시예 4	140
실시예 5	147
실시예 6	132

그 결과, 상기 표 5에서 나타나듯이, 당류를 이용한 혼합 추출물이 물을 이용한 혼합 추출물보다 HAS 발현이 더욱 증가함을 확인하였으며, 그에 따라 보습효과가 더 우수함을 알 수 있었다.

실험예 5. 항염 효과

제조예 1에서 당류를 이용한 추출물 실시예 4 내지 6과 물을 이용한 추출물 실시예 1 내지 3에 대하여 항염 효과를 확인하기 위하여, 다음과 같이 배양된 세포를 이용하여 피부 항염 효과를 측정하였다.

구체적으로, Raw 264.7 cell을 이용하여 동일한 농도의 제조예 1에서 당류를 이용한 추출물 실시예 4 내지 6과 물을 이용한 추출물 실시예 1 내지 3에 대하여 NO 생성 억제 효과를 측정하였다. 양성 대조군으로는 20mg/ml L-NMMA1 (NOS 억제제)를 사용했으며 상기 시료를 0.01 중량% 농도로 희석하여 30분 전 처리 후, 1 μg/ml LPS를 처리하고 24시간 배양한 후 NO 정량 Kit를 이용하여 NO 생성 억제능을 아래와 같이 평가하였다.

NO 생성 억제 효과 (%) (n=3)

구분	NO 생성 억제 효과 ( % )
양성대조군	42
실시예 1	26
실시예 2	39
실시예 3	25.7
실시예 4	45
실시예 5	44
실시예 6	31

그 결과, 상기 표 6에 나타나듯이, 물을 이용한 추출물에 비하여, 이와 동일한 농도로 처리된 당류를 이용한 추출물의 경우, 더욱 높은 NO 생성 억제능을 나타내어, 더 우수한 항염 활성을 보임을 알 수 있었다.

본 발명에 따른 당류을 이용한 식물 추출물은 물을 이용한 식물 추출물보다 우수한 시너지 작용을 한 것을 알 수 있으며, 이러한 결과를 통해 상기 식물 추출물이 피부 미백, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선, 피부 보습, 피부 노화 방지, 피부 보습 및/또는 피부 염증 개선 효과에 매우 효과적임을 알 수 있다.

이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims

당류를 용매로 하여 식물을 추출하여 식물 추출물을 제조하는 단계를 포함하는, 식물 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법.
제1항에 있어서,
상기 식물 추출물의 제조는 하기와 같은 단계를 포함하는, 제조방법:
(a) 식물에서 혼합할 부위를 분리하는 단계;
(b) 상기 (a) 단계의 결과물에 당류를 혼합하는 단계;
(c) 상기 (b) 단계의 결과물을 밀봉한 상태로 흔들어 고르게 믹스하는 단계;
(d) 상기 (c) 단계의 결과물을 밀폐하여 숙성하는 단계; 및
(e) 상기 (d) 단계의 결과물을 필터를 이용하여 추출하는 단계.
제1항 및 제2항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 식물은 장미, 작약, 아이리스, 연꽃, 심비듐, 금련화, 푸른연꽃 및 수련 중 선택되는 하나 이상의 식물인 것인, 제조방법.
제1항 및 제2항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 식물추출물은 장미, 작약 및 아이리스의 혼합 추출물인 것인, 제조방법.
제1항 및 제2항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 식물추출물은 연꽃, 심비듐 및 금련화의 혼합 추출물인 것인, 제조방법.
제1항 및 제2항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 식물추출물은 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물인 것인, 제조방법.
제1항 및 제2항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 당류는 꿀 또는 로얄젤리인 것인, 제조방법.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 하기 중 하나 이상의 효과를 갖는 것인, 제조방법:
a) 피부미백;
b) 피부 탄력 증진 또는 주름 개선;
c) 피부 보습; 및
c) 항염.
제1항의 제조방법으로 제조된, 화장료 조성물.