KR101695781B1 - 층꽃나무 추출물을 함유하는 항산화, 미백 및 주름 개선을 위한 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 층꽃나무 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 층꽃나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 DPPH 자유 라디칼 소거활성이 우수하여 항산화 효과가 있으며, 티로시나아제 저해효과를 가져 미백효과를 가질 뿐만 아니라 엘라스타아제 활성을 저해시킴으로써 주름 개선효과를 가진다. 또한 본 발명의 층꽃나무 추출물은 세포 독성 및 피부 부작용이 없어 화장료, 약학적 및 식품 조성물에 안전하게 사용할 수 있다.

Description

층꽃나무 추출물을 함유하는 항산화, 미백 및 주름 개선을 위한 조성물{A COMPOSITION FOR ANTIOXIDATING, WHITENING AND IMPROVING WRINKLE COMPRISING EXTRACTS OF NURSERY SPIRAEA}
본 발명은 층꽃나무(Caryopteris incana (Thunb.) Miq) 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 층꽃나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화, 미백 및 주름 개선을 위한 화장료, 약학적 조성물 및 식품 조성물에 관한 것이다.
사람의 피부는 각질층을 포함하는 표피와 진피, 그리고 결합조직으로 구성되어 있는데, 그 중 각질층은 표피(epidermis)의 기저세포인 케라티노사이트(keratinocyte)의 분화과정을 통해 형성되는 죽은 세포층으로 구성되어 있고 인체를 외부환경의 영향으로부터 보호해주는 역할을 담당하고 있다. 이러한 피부에서의 노화의 원인에 대해서는 크게 두 가지로 연구되고 있는데, 하나는 "내적 노화"로서 연령의 증가에 따른 피부의 구성단위인 세포의 기능변화에 기인한 것이고, 다른 하나는 "외적 노화"로서 외부 환경 즉 자외선, 공해, 스트레스 등에 의한 것으로 나눌 수 있다.
피부의 세포는 생체 내에서 필요한 에너지 공급을 위해 인간의 생체 내에서 필요한 에너지 공급을 위해 끊임없이 일어나는 생화학 반응에서 발생하는 활성산소종에 의해 산화적 스트레스가 가해지게 되면, 세포 구성 성분들인 지질, 단백질, 탄수화물과 DNA 산화적 손상 및 효소활성을 변화시켜 피부암 등의 각종 질병을 일으키는 원인이 되며, 노화를 촉진시킨다. 아울러 외적 노화의 원인 중에서 가장 큰 부분을 차지하고 있는 것은 자외선에 의한 광노화로서 UV에 지속적인 노출을 통해 피부암 등의 급성 및 만성적인 피부의 상해가 유발된다.
피부 진피층 기질을 이루는 중요한 성분의 하나인 콜라겐의 생합성과 분해는 피부 노화 억제에 핵심이 되고 있는데, 상기 활성산소종은 피부 섬유아세포에서 MMPs(matrix metalloproteinases)의 발현을 촉진하며, 자외선에 의한 콜라게나제의 합성을 촉진시킴으로써 피부 노화를 유발한다.
또한, 엘라스틴(elastin) 섬유는 콜라겐과 가교 결합을 형성하며 피부 탄력에 관여하고 있는 주름 생성에 중요한 피부 구성성분이다. 엘라스틴 섬유의 결핍과 응집, 엘라스틴 분해 효소인 엘라스타아제(elastase)의 활성도의 현격한 증가는 피부 주름생성 요인 중의 하나로 밝혀지고 있다. 엘라스타아제는 엘라스틴을 분해할 수 있는 유일한 효소로서 이에 대한 저해는 피부 주름 개선을 근본적으로 줄여줄 수 있다고 알려져 있다.
한편, 사람의 피부색은 피부 내부의 멜라닌(melanin) 농도와 분포에 따라 결정되는데, 유전적인 요인 외에도, 태양 자외선이나 피로, 스트레스 등의 환경적 또는 생리적 조건에 의해서도 영향을 받는다. 멜라닌은 피부 표피층에 있는 멜라노사이트에서 합성되는데, 멜라노사이트 내 소기관인 멜라노좀(melanosome)에서 아미노산의 일종인 티로신(tyrosine)에 티로시나제(tyrosinase)라는 효소가 작용하여 도파(DOPA), 도파퀴논(dopaquinone)으로 바뀐 후 비효소적인 산화반응을 거쳐 만들어진다. 이와 같은 멜라닌의 합성이 피부 내에서 과도하게 일어나면, 피부 톤을 어둡게 하고, 기미, 주근깨 등을 발생시킨다. 따라서, 피부 내의 티로시나제 활성을 저해하여 멜라닌 색소의 합성을 저해시키면, 피부 톤을 밝게 하여 피부 미백을 실현할 수 있을 뿐만 아니라 자외선, 호르몬 및 유전적인 원인에 기인하여 발생하는 기미, 주근깨 등의 피부 과색소 침착증을 개선시킬 수 있다.
따라서, 화장품 분야에서는 항산화, 미백 및 주름 개선효과를 가지는 기능성 화장품에 대한 연구 및 개발이 활발하게 진행되고 있으며, 특히 피부에 독성이나 자극을 주지 않기 위하여 천연 물질을 이용한 연구가 계속되고 있다.
한편, 층꽃나무(Caryopteris incana (Thunb.) Miq, 이명: 층꽃풀, 난향초, 영명: Nursery Spiraea)는 아시아, 한국, 중국, 일본에 분포하는 식물로 쌍떡잎식물강, 꿀풀목, 마편초과, 층꽃나무속에 속하며, 크기 약 30cm~60cm이고 털이 많다. 잎은 마주나며 달걀꼴이고 큰 톱니가 있다. 7~8월에 자주색, 분홍색, 백색의 꽃이 잎겨드랑이에 모여 달려 층을 이루며, 꽃은 7~8월에 남보라색 꽃이 피고 열매는 꽃받침 속에 5개의 열매가 들어있고 검은 색으로 익어 9~11월 중순에 익는다. 어린 새순은 나물로 먹고 뿌리는 한약재로 쓰이기도 한다. 전초 또는 뿌리를 약용하는데 생약명은 난향초(蘭香草)라 한다. 맛이 맵고 약성이 따뜻함과 독성이 전혀 없다. 이러한 층꽃나무의 전초에는 flavonoid 배당체, alkaloid, phenol류, steroid, aminoacid, 유기산, tannin을 함유하며, 수렴(收斂)작용과 항균작용, 기침 가래 기관지염 신경통 종기 월경불순 어혈 타박상 습진, 피부가려움증 등을 치료한다. 황색포도상구균, 디프테리아균, 적리균에 대한 항균작용이 알려져 있다.
그러나, 아직까지 층꽃나무의 항산화, 미백효과 및 주름개선 효과에 관해서는 보고된 바가 없다.
이에 본 발명자들은 항산화, 미백효과 및 주름개선 효과를 가지면서 인체 부작용이 적은 새로운 천연물질을 개발하기 위해 계속 연구를 진행한 결과, 층꽃 나무 추출물이 세포 독성이 없으면서도 항산화, 미백효과 뿐만 아니라 주름 개선효과를 나타낸다는 사실을 발견함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명에서 해결하고자 하는 기술적 과제는 항산화, 미백효과 및 주름개선 효과를 가지면서 인체 안정성이 우수한 물질을 제공하기 위한 것이다.
상기한 기술적 과제를 해결하기 위하여, 본 발명에서는 층꽃나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항산화, 미백 및 주름 개선을 위한 조성물을 제공한다.
바람직하게, 본 발명에서 층꽃나무 추출물을 포함하는 조성물은 화장료 조성물, 약학적 조성물 또는 식품 조성물일 수 있다.
본 발명의 용어 "추출물(extract)"은 생약을 적절한 침출액으로 짜내고 침출액을 증발시켜 농축한 제제를 의미하는 것으로, 이에 제한되지는 않으나, 추출처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 이들의 조정제물 또는 정제물일 수 있다.
본 발명의 층꽃나무 추출물은 당업계에 공지된 일반적인 추출방법, 분리 및 정제방법을 이용하여 제조할 수 있다. 상기 추출방법으로는 열탕 추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 방법을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 실시양태에 따르면, 층꽃나무 추출물은 층꽃나무를 분쇄한 후 추출용매, 예컨대 물, 탄소수 1~3개의 무수 또는 함수 저급 알콜 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 용매를 추출용매로 사용하여 추출할 수 있으며, 상기 추출 용매의 양은 생약 건조 중량의 2 내지 20 중량배, 바람직하게는 5 내지 15 중량배로 할 수 있다.
본 발명의 하나의 구체적인 실시태양에서는, 층꽃나무 추출물은 물과 부틸렌글리콜의 혼합용액, 바람직하게는 5:5 내지 8:2의 부피비의 혼합용액을 사용하여 30 내지 70℃, 바람직하게는 40 내지 60℃의 온도에서 10 내지 35시간, 바람직하게는 20 내지 30시간 동안 진탕하여 추출한 다음, 여과지로 여과하여 층꽃나무 추출물을 수득할 수 있다.
본 발명에서 층꽃나무의 사용부위는 잎, 꽃, 뿌리, 종자 모두 사용가능하나, 바람직학 일 양태로, 층꽃나무의 종자(seed)를 사용하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 조성물에는 층꽃나무 추출물이 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 0.005 내지 50 중량%, 보다 바람직하게는 0.01 내지 30 중량%, 가장 바람직하게는 0.1 내지 10 중량%로 포함할 수 있다. 이 때 층꽃나무 추출물의 함량이 0.005 중량% 미만일 경우 본 발명의 목적효과인 항산화, 미백 및 주름 개선효과를 수득할 수 없으며, 50 중량%를 초과할 경우 함량의 증가에 따라 효과가 비례적이지 않아 비효율적일 수 있으며 제형상의 안정성이 확보되지 않는 문제점이 있다.
본 발명의 층꽃나무 추출물을 함유하는 조성물은 항산화 효과, 미백효과 및 주름 개선효과를 나타내며, 천연 물질로서 세포독성이 거의 없다.
본 발명의 하나의 실시양태에 따르면, 층꽃나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 하나의 실시양태에 따른 화장료 조성물에는 유효성분으로서의 층꽃나무 추출물 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 첨가되는 성분, 예컨대 항산화제, 안정화제, 가용화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 및 담체를 추가로 첨가할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 영양 크림, 수렴 화장수, 유연 화장수, 로션, 에센스, 영양젤 또는 마사지 크림의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트 검, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 가용화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 검등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 하나의 실시양태에 따른 약학적 조성물은 층꽃나무 추출물 이외에 약학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본 발명의 약학적 조성물에 포함되는 약학적으로 허용되는 담체는 제제 시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 바람직하게는 비경구 투여, 보다 바람직하게는 도포에 의한 국부 투여(topical application) 방식으로 적용된다.
본 발명의 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성별, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 성인 기준으로 0.001-100 ㎎/kg 범위 내이다. 또한 외용제인 경우에는 성인 기준으로 1.0 내지 3.0 ml의 양으로 1일 1회 내지 5회 도포하여 1개월 이상 계속 하는 것이 좋다. 다만, 상기 투여량은 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.
본 발명의 약학적 조성물은 당분야의 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이 때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액, 시럽제 또는 유화액 형태이거나 엑시르제, 산제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 하나의 실시양태에 따른 식품 조성물에는 유효성분으로서 층꽃나무 추출물뿐만 아니라 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 추가로 포함할 수 있다.
상기 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.
예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제로 제조되는 경우에는 본 발명의 층꽃나무 추출물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 두충 추출액, 대추 추출액, 감초 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.
한편, 본 발명의 층꽃나무 추출물은 천연물질로서 인체에 무해하며, 독성 및 부작용이 거의 없으므로 장기간 사용시에도 안심하고 사용할 수 있으며, 특히 상기한 바와 같은 화장료, 약학적 및 식품 조성물에 안전하게 적용할 수 있다.
이와 같이, 본 발명의 층꽃나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 DPPH 자유 라디칼 소거활성이 우수하여 항산화 효과가 있으며, 티로시나아제 저해효과를 가져 미백효과를 가질 뿐만 아니라 엘라스타아제 활성을 저해시킴으로써 주름 개선효과를 가진다. 또한 본 발명의 층꽃나무 추출물은 세포 독성 및 피부 부작용이 없어 화장료, 약학적 및 식품 조성물에 안전하게 사용할 수 있다.
본 명세서에 첨부되는 다음의 도면들은 본 발명의 바람직한 실시예를 예시하는 것이며, 전술한 발명의 내용과 함께 본 발명의 기술사상을 더욱 이해시키는 역할을 하는 것이므로, 본 발명은 그러한 도면에 기재된 사항에만 한정되어 해석되어서는 아니 된다.
도 1은 본 발명의 층꽃나무 추출물의 DPPH 자유 라디칼 소거활성 측정을 위한 시험과정 중 DPPH 첨가 전후의 색차를 보여주는 사진이다.
도 2는 본 발명의 층꽃나무 추출물의 DPPH 자유 라디칼 소거활성 측정결과를 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 층꽃나무 추출물의 티로시나아제 저해활성 측정결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 층꽃나무 추출물의 엘라스타아제 저해활성 측정결과를 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
<실시예 1> 층꽃나무 추출물의 제조
층꽃나무 종자(seed)를 입수하여 세척하고 믹서를 이용하여 분쇄하였다.
정제수와 부틸렌글리콜을 7:3의 부피비로 혼합한 다음 상기 분쇄된 층꽃나무 종자를 10 중량%의 양으로 가하여 침지시켰다.
이어서, 50℃에서 24시간 동안 추출한 다음 여과지로 여과하여 층꽃나무 추출물을 수득하였다.
<시험예 1> 층꽃나무 추출물의 DPPH 자유 라디칼 소거활성 측정
층꽃나무 추출물의 항산화 활성 측정을 위한 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH) 자유 라디칼 소거활성은 DPPH에 대한 전자공여 활성으로 확인하였다. 자유라디칼 소거능을 측정하는 방법으로 DPPH는 항산화 물질로부터 전자나 수소를 받아 비가역적으로 안정한 분자를 형성하므로 전자공여능으로부터 항산화 활성을 측정할 수 있는데, 항산화 활성이 있는 물질과 만나면 자유 라디칼(free radical)이 소거되며 이때의 DPPH 고유의 청남색이 엷어지는 특성이 있고, 이 색차를 비색 정량하여 전자공여능력을 측정한다(Jeon et al., J. Kor. Soc. Food sic. Nutr. 38(1): 1-8, 2009).
96 well plate에 다양한 농도(0, 2, 4, 8, 16, 32 및 64 ul/ml)로 희석된 상기 실시예 1의 시료 추출물 70 ul와 DPPH 용액(5 mg/100 ml methanol) 100 ul을 혼합한 다음 실온에서 20분간 반응시키고(도 1 참조), 520 nm에서 흡광도를 측정하여 하기 수학식 1에 따라 DPPH 자유 라디칼 소거활성(%)을 산술하였다. 그 결과는 하기 표 1 및 도 2에 나타내었다. 양성대조군으로서 비타민 C 400 ug/ml을 사용하였다.
Figure 112014125514861-pat00001
Figure 112014125514861-pat00002
상기 표 1에서 보듯이, DPPH 자유 라디칼 소거 효과는 층꽃나무 추출물의 농도에 의존적임을 확인하였고, 특히 8 ul/ml 이상 농도의 층꽃나무 추출물의 DPPH 자유라디칼 소거 능력은 양성대조군인 비타민 C와 거의 유사함을 확인하였다(도 2).
<시험예 2> 층꽃나무 추출물의 티로시나아제(Tyrosinase) 저해 활성 측정
층꽃나무 추출물의 미백효과를 다음과 같이 티로시나아제 저해활성을 측정함으로써 평가하였다.
실시예 1에서 수득된 층꽃나무 추출물 시료 100 ul에 0.2M 인산나트륨 완충액(pH 6.8) 50 ul, 2 mM L-티로신 50 ul, mushroom tyrosinase (1000 U/ml) 10 ul를 혼합하여 37 ℃에서 20분간 반응시킨 후 490 nm에서 흡광도를 측정하여 하기 수학식 2에 따라 티로시나아제 저해 활성(%)을 산술하였다. 그 결과는 하기 표 2 및 도 3에 나타내었다.
Figure 112014125514861-pat00003
Figure 112014125514861-pat00004
상기 표 2에서 보듯이, 티로시나아제 저해활성이 층꽃나무 추출물의 농도에 의존적임을 확인할 수 있었다(도 3).
<시험예 3> 층꽃나무 추출물의 엘라스타아제(Elastase) 저해 활성 측정
층꽃나무 추출물의 추출물의 주름 개선효과는 다음과 같은 엘라스타아제 저해활성 측정으로 평가하였다.
실시예 1에서 수득된 층꽃나무 추출물 시료를 0.2 M Tris-Cl 완충액 (pH 8.0)으로 농도 별로 희석하여 사용하였고, 0.2 M Tris-Cl 완충액 (pH8.0) 1 ml에 엘라스타아제 기질 N-succinyl-(Ala)3-p-nitroanilide 4 mg을 넣어 8.8 mM로 만들었다(기질용액). Porcine pancreatic elastase (PPE)를 0.2 M Tris-Cl 완충액 (pH 8.0)로 10 ug/ml 농도로 만들어 사용하였다(효소용액).
농도 별로 희석된 추출물 시료 60 ul, 기질용액 20 ul, 효소용액 20 ul를 혼합 하고 25 ℃에서 15분간 반응시킨 후, 405 nm에서 흡광도를 측정하여 하기 수학식 3에 따라 엘라스타아제 저해 활성(%)을 산술하였다. 대조군은 시료 대신 증류수를 첨가한 공시험군을 사용하였으며, 양성대조군으로 아데노신(adenosine) 1mg/ml를 사용하였다. 그 결과는 하기 표 3 및 도 4에 나타내었다.
Figure 112014125514861-pat00005
상기 식에서,
A는 시료 대신 증류수를 넣고 효소를 첨가하여 반응한 후의 흡광도이고,
B는 효소를 첨가하여 반응한 후의 시료의 흡광도이고,
C는 효소 대신 증류수를 첨가하여 반응한 후의 시료의 흡광도이고,
D는 시료와 효소 대신 각각 증류수를 첨가하여 반응한 후의 흡광도이다.
Figure 112014125514861-pat00006
상기 표 3에서 보듯이, 엘라스타아제 저해활성이 층꽃나무 추출물의 농도에 의존적임을 확인할 수 있었으며, 특히 모든 농도의 층꽃나무 추출물의 엘라스타아제 저해활성이 양성대조군인 아데노신 보다 우수함을 확인하였다(도 4).
이와 같이, 본 발명의 층꽃나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 DPPH 자유 라디칼 소거활성이 우수하여 항산화 효과가 있으며, 티로시나아제 저해효과를 가져 미백효과를 가질 뿐만 아니라 엘라스타아제 활성을 저해시킴으로써 주름 개선효과를 가진다. 또한 본 발명의 층꽃나무 추출물은 세포 독성 및 피부 부작용이 없어 화장료, 약학적 및 식품 조성물에 안전하게 사용할 수 있다.

Claims (6)

  1. 층꽃나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 미백 또는 주름 개선을 위한 화장료 조성물.
  2. 삭제
  3. 층꽃나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 미백 또는 주름 개선을 위한 식품 조성물.
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 층꽃나무 추출물이 층꽃나무를 분쇄한 후 물, 탄소수 1~3개의 무수 또는 함수 저급 알콜 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 추출용매를 사용하여 추출한 다음, 여과하여 수득된 것임을 특징으로 하는 조성물.
  5. 제 1 항에 있어서,
    상기 층꽃나무가 층꽃나무 종자(seed)인 것을 특징으로 하는 조성물.
  6. 제 1 항에 있어서,
    상기 층꽃나무 추출물이 조성물 총 중량을 기준으로 하여 0.005 내지 50 중량%의 양으로 포함된 것을 특징으로 하는 조성물.
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