KR20210070303A - 항-인간 cd45rc 항체 및 이의 용도 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 단리된 항-인간 CD45RC 항체 또는 이의 결합 단편, 이를 인코딩하는 핵산 및 발현 벡터, 이를 포함하는 조성물, 및 CD45RC고-관련 질환(자가 면역 질환, 원하지 않은 면역 반응, 단일유전자 질환 및 림프종 또는 암 포함)의 예방 및/또는 치료를 위한 것을 포함하는, 특히 이식편-대-숙주 질환(GVHD)을 예방하고/하거나 치료하는 데 사용하기 위한 의약으로서의 이의 용도에 관한 것이다.

Description

항-인간 CD45RC 항체 및 이의 용도
본 발명은 단리된 항-인간 CD45RC 항체 또는 이의 결합 단편(binding fragment), 이를 인코딩하는 핵산 및 발현 벡터, 이를 포함하는 조성물, 및 CD45RC고-관련 질환(자가 면역 질환(autoimmune diseases), 원하지 않은 면역 반응, 단일유전자 질환(monogenic diseases) 및 림프종(lymphoma) 또는 암(cancer) 포함)의 예방 및/또는 치료를 위한, 특히 이식편-대-숙주 질환(GVHD)을 예방하고/하거나 치료하는 데 사용하기 위한 의약으로서의 이의 용도에 관한 것이다.
CD45(백혈구 공통 항원(LCA), EC3.1.3.48, T200, Ly5 및 PTPRC로서 공지되기도 함)는 제1 및 원형 수용체 유사 단백질 티로신 포스파타제(RPTP)를 구성한다. 이의 발현은 모든 유핵 조혈 세포에 제한되고, 여기서 그것은 세포 표면의 거의 10%를 구성하는 가장 풍부한 세포 표면 당단백질 중 하나이고, 원형질 막에 약 25μM로 존재하는 것으로 추정된다(참조: Trowbridge & Thomas, 1994. Annu Rev Immunol. 12:85-116; Hermiston et al., 2003. Annu Rev Immunol. 21:107-37; Holmes, 2006. Immunology. 117(2):145-55).
CD45는 세포외 도메인, 단일 막 관통 도메인 및 큰 세포질 도메인을 포함한다. 막 관통 및 세포질 도메인은 종 중에서 매우 보존된다. 특히, CD45의 세포질 도메인은 2개의 탠덤 복제된 포스파타제 도메인을 포함하고, 이중 막 근위 도메인만이 효소 활성을 갖는다(참조: Desai et al., 1994. EMBO J. 13(17):4002-10). CD45에서 더 많은 C-말단의 제2 포스파타제 도메인의 기능은 그것이 제1 도메인을 안정화시킴으로써 간접적으로 CD45 활성에 기여할 수 있음을 시사하지만, 불확실하게 잔류한다. 이 세포질 도메인을 통해, CD45는 티로신 단백질 키나제의 Src 계열(예: T 세포에서 Lck; 또는 B 세포에서 Lyn, Fyn 및 Lck)의 활성을 조절함으로써 조혈 세포에서 포스포티로신 수준의 중심 조절자로 기능한다(참조: Palacios & Weiss, 2004. Oncogene. 23(48):7990-8000; Lowell, 2004. Mol Immunol. 41(6-7):631-43).
막 관통 및 세포질 도메인과는 대조적으로, CD45의 세포외 도메인은 상이한 백혈구 계통 중 더 높은 다형성을 나타낸다. 사실상, 이 세포외 도메인은 아주 많이 글리코실화되고, 모두 O-연결 글리코실화되고 시알릴화된 3개의 대안적으로 스플라이싱된 엑손(4, 5 및 6 - 이는 각각 A, B 및 C 결정자를 인코딩한다)을 함유한다(참조: Hermiston et al., 2003. Annu Rev Immunol. 21:107-37; Holmes, 2006. Immunology. 117(2):145-55). 따라서, 크기, 형상 및 전하가 상이한 CD45 이소폼은 백혈구 분화 및 세포 활성화 모두에서 동적으로 제어된 대안적인 스플라이싱에 의해 생성되어 분자의 세포외 도메인의 변화를 유도할 수 있다(참조: Hall et al., 1988. J Immunol. 141(8):2781-7; Lynch, 2004. Nat Rev Immunol. 4(12):931-40).
3개의 대안적으로 스플라이싱된 엑손을 모두 함유하는 가장 큰 CD45 이소폼인 CD45RABC는 약 235kDa인 반면, 3개의 엑손 모두가 결여된 최소 이소폼인 CD45RO는 약 180kDa이다. 중간에, 3개의 엑손 중 2개만(CD45RAB, CD45RAC, CD45RBC) 또는 하나만(CD45RA, CD45RB, CD45RC)을 포함하는 이소폼이 가능하다.
상이한 CD45 이소폼의 기능은 명확하지 않지만, 이러한 이소폼의 차별적 발현은 T 세포의 활성화 수준과 관련되고, 나이브 대 메모리 T 세포의 해리를 허용한다(참조: Birkeland et al., 1989. Proc Natl Acad Sci U S A. 86(17):6734-8). 예를 들어, CD45RA는 주변 나이브 성숙 CD4+ T 세포 상에 존재하고, CD45RO는 활성화된 메모리 CD4+ T 세포 상에서 발현된다. CD45RABC는 수지상 세포 및 다른 항원 제시 세포의 하위 그룹 상의 B 세포 및 그들의 전구체 상에서 발현된다. 말단 분화된 메모리 T 세포의 아형인 이펙터 메모리 RA T 세포(TEMRA)는 또한 나이브 T 세포 마커 CD45RA를 재발현시킨다(참조: Koch et al., 2008. Immun Ageing. 5:6). 중요하게, 이 패턴의 이소폼 발현은 기능적 역할과 중요성을 강조하는 종 전반에 걸쳐 고도로 보존된다(참조: Hermiston et al., 2003. Annu Rev Immunol. 21:107-37).
CD4+ 및 CD8+ T 세포 상의 CD45RC 이소폼의 발현 패턴은 증식 및 사이토카인 분비의 관점에서 상이하게 거동하는 기능적으로 뚜렷한 동종 반응성 T 세포 서브세트를 구별할 수 있게 한다. 예를 들어, 설치류에서, CD4+ 및 CD8+ T 세포 CD45RC고 모두가 이식 거부(transplant rejection) 및 기관 염증을 촉진할 수 있는 강력한 Th1 이펙터 세포인(참조: Spickett et al., 1983. J Exp Med. 158(3):795-810; Xystrakis et al., 2004. Eur J Immunol. 34(2):408-17) 반면, 감지할 수 없거나 낮은 수준의 CD45RC저/-를 발현하는 T 세포는 Th2 및 조절성 T 세포이고, 동종 이식 거부, 이식편-대-숙주 질환(GVHD) 및 세포 매개 자가 면역 질환을 억제한다(참조: Xystrakis et al., 2004. Blood. 104(10):3294-30; Guillonneau et al., 2007. J Clin Invest. 117(4):1096-106; Powrie & Mason, 1990. J Exp Med. 172(6):1701-8) 것이 제시되었다. 인간에서, 이식 전 CD45RC+ CD8+ T 세포의 높은 비율은 신장 이식 환자에서 이식편 생존율 감소와 상관 관계가 있다(참조: Ordonez et al., 2013. PLoS One. 8(7):e69791).
따라서, CD45RC고 T 세포 집단의 제거는 인간에서 면역 내성을 유도하고, 따라서 이식 거부(특히 GVHD) 및 자가 면역 질환을 예방하고, 감소시키고/시키거나 치료하기 위한 유망한 접근법을 나타낸다.
GVHD는 줄기 세포 이식 환자에서 이환율 및 사망률의 중요한 원인이다. 그것은 공여자 세포가 수령자 세포에 대해 반응하는 T 세포 매개 면역 반응성 공정이다. 현재, 코르티코스테로이드와 같은 면역 조절 약물에 의한 면역 억제는 GVHD 예방의 주류이다. 진전이 경시적으로 생존 결과의 개선에 의해 이루어졌지만, 코르티코스테로이드는 높은 비율의 환자(초기 질환 중증도에 따라 급성 GVHD 환자의 50% 미만 및 만성 GVHD 환자의 40-50% - Garnett et al., 2013. Ther Adv Hematol. 4(6):366-378)에서 GVHD를 예방하지 않고, 중요한 독성과 관련이 있으며, 현재 이용 가능한 많은 구제 요법은 증가된 면역 억제 및 전염성 합병증과 연관된다. 따라서, 장기간 이식 후 결과를 개선시키기 위해 GVHD에 대한 새로운 치료 전략의 개발에 대한 충족되지 않은 필요성이 잔류한다.
본 발명자들은 이전에 CD45RC고 T 세포의 고갈이 관용원성 조절 T 세포를 증가시키면서 공격적 이펙터 T 세포 및 B 세포를 감소시킴으로써 이식 거부를 예방하거나 감소시키는 데 있어서 가능한 새로운 요법을 나타낼 수 있다고 기재했다. 사실상, 일시적인 항-CD45RC mAb 치료는 메모리 면역을 보존하면서 빠른 CD45RC고 T 세포 아폽토시스(apoptosis)를 유발한다. 더욱이, 본 발명자들은 단기간 항-CD45RC 항체 치료가 만성 거부의 징후가 없는 영구적 동종 이식편 생존을 초래한다는 것을 보여주었다(참조: 국제 특허 WO2016016442; Picarda et al., 2017. JCI Insight. 2(3):e90088).
여기서, 본 발명자들은 인간 CD45RC에 대해 지시된 새로운 모노클로날 항체를 개발했다. 이 항체는 현재 시장에서 이용 가능한 항-인간 CD45RC 항체(예: MT2 클론)와 경쟁하지만, T 세포에 대한 현저하게 더 좋은 세포 독성 활성과 최저 농도에서 필적할 만한 반응성 패턴을 나타낸다. 사실상, 본 발명에 따르는 항-hCD45RC 항체는 현재 이용 가능한 다른 항체보다 우수한 친화도를 나타내고, 이로 인해 우수한 치료 효과를 갖는다.
흥미롭게도, 본 발명에 따르는 항체는 또한 면역 반응이 병리학에 포함되는 특정의 단일유전자 질환의 예방 또는 치료에 유용할 수 있다. 단일유전자 질환은 단일 유전자 결함으로 인한 것이다. 4000 이상의 인간 질환은 하나의 특정 유전자에 연결된 이러한 결함으로 인한 것이다. 지금까지, 대부분의 치료 옵션은 환자의 삶의 질을 향상시키기 위한 시도에서, 장애의 증상을 치료하는 것을 중심으로 다룬다. 유전자 요법은 이러한 유형의 질환의 내구성 치료에 대한 주요 희망이다. 그러나, 장애뿐만 아니라 유전자 도입 생성물 또는 벡터에 대한 면역 반응이 치료 효능을 제한한다는 사실에 의해 영향을 받은 적절한 세포에 유전자를 전달하기 위한 기술의 개발 동안 주요 장애물이 발생했다.
단일유전자 질환 중, 일부는 면역계에 포함된 유전자(예: T 및/또는 B 세포 원발성 면역결핍 및 다내분비병증 칸디다증-외배엽 이영양증(polyendocrinopathy candidiasis-ectodermal dystrophy[APECED]) 또는 면역 기능에 연관되지 않지만 이의 결핍이 염증 및/또는 면역 반응[예: 듀센형 근이영양증(Duchenne muscular dystrophy; DMD)]과 연관되는 유전자에 연결된다.
자기 면역 다선 증후군 유형 I(APS 1)로서 공지되기도 한 APECED는 수질 상피 흉선 세포(mTEC)에서 조직 제한 항원(TRA)의 발현 및 자동 반응성 T 세포 결실을 허용하는 전사 조절제인 AIRE 유전자의 돌연변이에 의해 야기되는 희귀한 다기관 상염색체 열성 자가 면역 질환이다. 인간에서, 1-9:1000000의 유병률(Orphanet, http://www.orpha.net)을 갖는 APECED를 유발하는 AIRE 유전자에서 100개 이상의 돌연변이가 기재되었다. APECED의 임상적 표현형은 일반적으로 부갑상선 기능 저하증(hypoparathyroidism), 부신기능부전(adrenal insufficiency)(애디슨병(Addison’s disease)) 및 만성 점막 피부 칸디다증(chronical muco-cutaneous candidiasis; CMC)의 3개의 주요 증상 중 2개의 존재에 의해 정의된다. 이 질환은 또한 다수의 자가 면역 및 외배엽 특징, 예를 들어, 유형 1 당뇨병(type 1 diabetes), 법랑질 발육부전(enamel hypoplasia), 백반증(vitiligo), 조기 난소 부전(premature ovarian failure), 각막염(keratitis), 악성 빈혈(pernicious anemia), 탈모증(alopecia), 외분비성 췌장염(exocrine pancreatitis), 간질성 폐 질환(interstitial lung disease), 신염(nephritis) 및 다른 장애와 연관된다.
DMD는 단일유전자 질환이고, 여기서 단백질 디스트로핀을 코딩하는 DMD 유전자의 돌연변이는 후기 단계에서 모든 자발적 근육 뿐만 아니라 심장 및 호흡근에 영향을 미치는 심각한 X-연결된 근이영양증을 유도한다. 면역 반응은 DMD 환자와 mdx 마우스 모두에서 질환의 병리 생리학에 관여한다(검토를 위해, 문헌(Rosenberg et al., 2015. Sci Transl Med. 7(299):299rv4)을 참조). DMD의 표준 치료는 코르티코이드, 예를 들어, 프레드니솔론이다. mdx 마우스에서, 이펙터 면역 반응 또는 염증을 감소시키는 치료, 예를 들어, 정맥내 면역글로블린, 트라닐라스트, 헴 옥시게나제-1 유도제, IL-l 수용체 길항제 및 IL-2를 또한 사용하여 조절성 T 세포(Treg)를 증폭시킨다(참조: Villalta et al., 2014. Sci Transl Med. 6(258):258ra142; Rosenberg et al., 2015. Sci Transl Med. 7(299):299rv4). 그러나, 최근의 유망한 새로운 치료에도 불구하고, DMD 환자의 평균 기대 수명은 여전히 심하게 감소된다.
놀랍게도, 본 발명자들은 항-CD45RC 항체에 의한 Dmd-/- 래트(Dmdmdx)의 치료가 특이적으로 CD45RC고 세포 완화 근육 강도를 고갈시킨다는 것을 입증했다(참조: Ouisse et al., 2019. Front Immunol. In press). 그들은 또한 Aire-/- 래트에 항-CD45RC 모노클로날 항체의 투여가 CD45RC고 T 세포의 강력한 고갈을 초래하고, APECED의 증상 특성을 제거함을 입증하였다(제조 중 사본; 국제 특허 출원 WO2019115791).
따라서, 본 발명에 따르는 항체는 단일유전자 질환, 예를 들어, DMD 및 APECED를 예방하고/하거나 치료하기 위한 유망한 접근법을 나타낸다.
본 발명은 단리된 항-인간 CD45RC 항체 또는 이의 결합 단편에 관한 것이고, 여기서 상기 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
(a) 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
(i) 서열번호 1의 서열의 VH-CDR1;
(ii) 서열번호 4, 5, 6, 8, 100, 116, 117, 118 및 119의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VH-CDR2; 및
(iii) 서열번호 3의 서열의 VH-CDR3; 및
(b) 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
(i) 서열번호 15(SASSSVS-X12-YMH) 및 18(RASSSVS-X12-YMH)의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VL-CDR1(여기서, X12는 부재이거나, Asn(N), Ser(S) 및 Gly(G)로부터 선택된다);
(ii) 서열번호 16의 서열의 VL-CDR2; 및
(iii) 서열번호 17의 서열의 VL-CDR3.
하나의 구현예에서, 상기 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
(a) 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
(i) 서열번호 1의 서열의 VH-CDR1;
(ii) 서열번호 4 및 5의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VH-CDR2; 및
(iii) 서열번호 3의 서열의 VH-CDR3; 및
(b) 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
(i) 서열번호 15의 서열의 VL-CDR1(여기서, X12는 부재이다);
(ii) 서열번호 16의 서열의 VL-CDR2; 및
(iii) 서열번호 17의 서열의 VL-CDR3.
하나의 구현예에서, 상기 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
(a) 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
(i) 서열번호 1의 서열의 VH-CDR1;
(ⅱ) 서열번호 4의 VH-CDR2; 및
(iii) 서열번호 3의 서열의 VH-CDR3; 및
(b) 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
(i) 서열번호 15의 서열의 VL-CDR1(여기서, X12는 부재이다);
(ii) 서열번호 16의 서열의 VL-CDR2; 및
(iii) 서열번호 17의 서열의 VL-CDR3.
하나의 구현예에서, 상기 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
*(a) 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
(i) 서열번호 1의 서열의 VH-CDR1;
(ii) 서열번호 4, 6 및 100의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VH-CDR2; 및
(iii) 서열번호 3의 서열의 VH-CDR3; 및
(b) 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
(i) 서열번호 15 및 18의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VL-CDR1(여기서, X12는 부재이다);
(ii) 서열번호 16의 서열의 VL-CDR2; 및
(iii) 서열번호 17의 서열의 VL-CDR3.
하나의 구현예에서, 상기 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
1) 서열번호 61의 서열의 HCVR 및 서열번호 81의 서열의 LCVR;
2) 서열번호 62의 서열의 HCVR 및 서열번호 82의 서열의 LCVR;
3) 서열번호 62의 서열의 HCVR 및 서열번호 83의 서열의 LCVR;
4) 서열번호 62의 서열의 HCVR 및 서열번호 84의 서열의 LCVR;
5) 서열번호 63의 서열의 HCVR 및 서열번호 82의 서열의 LCVR;
6) 서열번호 63의 서열의 HCVR 및 서열번호 83의 서열의 LCVR;
7) 서열번호 63의 서열의 HCVR 및 서열번호 84의 서열의 LCVR;
8) 서열번호 64의 서열의 HCVR 및 서열번호 82의 서열의 LCVR;
9) 서열번호 64의 서열의 HCVR 및 서열번호 83의 서열의 LCVR;
10) 서열번호 64의 서열의 HCVR 및 서열번호 84의 서열의 LCVR;
11) 서열번호 101의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
12) 서열번호 101의 서열의 HCVR 및 서열번호 103의 서열의 LCVR;
13) 서열번호 65의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
14) 서열번호 65의 서열의 HCVR 및 서열번호 103의 서열의 LCVR;
15) 서열번호 62의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
16) 서열번호 101의 서열의 HCVR 및 서열번호 82의 서열의 LCVR;
17) 서열번호 121의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
18) 서열번호 122의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
19) 서열번호 123의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
20) 서열번호 124의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
21) 서열번호 63의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
22) 서열번호 67의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
23) 서열번호 67의 서열의 HCVR 및 서열번호 103의 서열의 LCVR; 또는
24) 1) 내지 23) 중 어느 하나에 따르는 HCVR 및 LCVR의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%의 동일성(identity)을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하는 HCVR 및 LCVR.
하나의 구현예에서, 상기 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함하고:
(a) 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
(i) 서열번호 1의 서열의 VH-CDR1;
(ii) 서열번호 4, 5, 6, 8, 100, 116, 117, 118 및 119의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VH-CDR2; 및
(iii) 서열번호 3의 서열의 VH-CDR3; 및
(b) 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
(i) 서열번호 15 및 18의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VL-CDR1(여기서, 서열번호 15 및 18에서 X12는 Asn(N), Ser(S) 및 Gly(G)로부터 선택된다);
(ii) 서열번호 16의 서열의 VL-CDR2; 및
(iii) 서열번호 17의 서열의 VL-CDR3;
바람직하게는, 상기 LCVR의 카바트 위치(Kabat position) L71에서 상기 아미노산 잔기는 Phe(F)이다.
본 발명은 또한 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편을 인코딩하는 핵산에 관한 것이다.
본 발명은 또한 제7항에 따르는 핵산을 포함하는 발현 벡터에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명에 따르는 핵산 또는 본 발명에 따르는 발현 벡터를 포함하는 세포에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 본 발명에 따르는 핵산, 본 발명에 따르는 발현 벡터 또는 본 발명에 따르는 세포, 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 의약으로서 사용하기 위한, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 본 발명에 따르는 핵산, 본 발명에 따르는 발현 벡터, 본 발명에 따르는 세포 또는 본 발명에 따르는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한
- 이를 필요로 하는 대상체에서 면역 내성을 유도하고/하거나;
- 이식 거부를 예방하고/하거나 감소시키는 데 사용하기 위한, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 본 발명에 따르는 핵산, 본 발명에 따르는 발현 벡터, 본 발명에 따르는 세포 또는 본 발명에 따르는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 CD45RC고-관련 상태를 예방, 감소 및/또는 치료하는 데 사용하기 위한, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 본 발명에 따르는 핵산, 본 발명에 따르는 발현 벡터, 본 발명에 따르는 세포 또는 본 발명에 따르는 약제학적 조성물에 관한 것이고, 바람직하게는 상기 CD45RC고-관련 상태는 자가 면역 질환, 원하지 않은 면역 반응, 단일유전자 질환 및 림프종 또는 암을 포함하는 그룹으로부터 선택된다.
본 발명은 또한 이식편-대-숙주 질환(GVHD)을 예방하고/하거나 치료하는 데 사용하기 위한, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 본 발명에 따르는 핵산, 본 발명에 따르는 발현 벡터, 본 발명에 따르는 세포 또는 본 발명에 따르는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 샘플, 세포, 조직 또는 기관을 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편과 접촉시키는 단계를 포함하는, 샘플, 세포, 조직 또는 기관에서 hCD45RC를 검출하거나 정량화하기 위한 시험관내 방법에 관한 것이고, 임의로, 상기 단리된 항체 또는 이의 결합 단편은 표지화된다.
정의
"항체" 또는 "면역글로불린"
본원에 사용된 용어 "면역글로불린"은 임의의 관련 특정 면역반응성을 포함하는지 여부에 관계없이 2개의 중쇄와 2개의 경쇄의 조합을 갖는 단백질을 지칭한다. "항체"는 관심 있는 항원(예: 인간 CD45RC)에 대한 유의한 공지된 특정 면역반응성 활성을 갖는 이러한 조립체를 지칭한다. 용어 "항-hCD45RC 항체"는 인간 CD45RC 단백질에 대한 면역학적 특이성을 나타내는 항체를 지칭하기 위해 본원에 사용된다. 본원의 다른 곳에서 설명된 바와 같이, 인간 CD45RC에 대한 "특이성"은 hCD45RC의 종 동족체와의 교차 반응을 배제하지 않는다.
항체 및 면역글로불린은 그들 사이에 쇄간 공유 연결을 포함하거나 포함하지 않는 경쇄 및 중쇄를 포함한다. 척추동물 시스템의 기본적인 면역글로불린 구조는 비교적 잘 이해된다. 일반적인 용어 "면역글로불린"은 생화학적으로 구별될 수 있는 항체의 5개의 별개의 부류를 포함한다. 다음 논의는 일반적으로 면역글로불린 분자의 IgG 부류에 관한 것이지만, 항체의 5개 부류는 모두 본 발명의 범위내에 있다. IgG와 관련하여, 면역글로불린은 분자량이 약 23kDa인 2개의 동일한 경쇄 폴리펩티드와 분자량이 약 53-70kDa인 2개의 동일한 중쇄를 포함한다. 4개의 쇄는 "Y" 배열에서 디설파이드 결합에 의해 결합되고, 여기서 경쇄는 "Y"의 어귀에서 출발하고 가변 영역을 통해 계속되는 중쇄를 괄호로 묶는다. 항체의 경쇄는 카파(κ) 또는 람다(λ)로서 분류된다. 각각의 중쇄 부류는 κ 또는 λ 경쇄와 결합될 수 있다. 일반적으로, 경쇄 및 중쇄는 서로 공유 결합되고, 2개의 중쇄의 "꼬리" 영역은 면역글로불린이 하이브리도마, B 세포 또는 유전적으로 조작된 숙주 세포에 의해 생성될 때 공유 디설파이드 결합 또는 비공유 결합에 의해 서로 결합된다. 중쇄에서, 아미노산 서열은 Y 배열의 포크화 말단의 N-말단으로부터 각 쇄의 바닥의 C-말단까지 진행한다. 당업자는 중쇄가 그들 중 일부 하위부류(예: γ1-γ4)와 함께 감마(γ), 뮤우(μ), 알파(α), 델타(δ) 또는 엡실론(ε)으로서 분류된다는 것을 인식할 것이다. 그것은 항체의 "부류"를 각각 IgG, IgM, IgA, IgD 또는 IgE로서 결정하는 이 쇄의 특성이다. 면역글로불린 하위부류 또는 "아이소타입"(예: IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 등)은 잘 특성화되고, 기능적 특수화를 부여하는 것으로 공지되어 있다. 이러한 부류 및 아이소타입 각각의 변형된 버전은 본 개시 내용을 고려하여 당업자가 쉽게 인식 가능하며, 따라서 본 발명의 범위내에 있다. 상기 표시된 바와 같이, 항체의 가변 영역은 항체가 선택적으로 인식되고 항원 상의 에피토프에 특이적으로 결합하도록 한다. 즉, 항체의 경쇄 가변 도메인(VL 도메인) 및 중쇄 가변 도메인(VH 도메인)은 결합하여 3차원 항원 결합 부위를 규정하는 가변 영역을 형성한다. 이 4급 항체 구조는 "Y"의 각 암의 말단에 존재하는 항원 결합 부위를 형성한다. 보다 구체적으로, 항원 결합 부위는 VH 및 VL 쇄 각각의 3개의 상보성 결정 영역(CDR)에 의해 정의된다.
"상이한 아미노산에 의해 치환되는 [...] 아미노산을 갖는 것으로 특성화된다"
본원에 사용된 바와 같이, 소정의 서열과 관련하여 "상이한 아미노산에 의해 치환된 [...] 아미노산을 갖는 것으로 특성화된다"는 문구는 상기 서열에서 "보존적 아미노산 변형"의 발생을 지칭한다.
"보존적 아미노산 변형"
"보존적 아미노산 변형"은 아미노산 서열을 함유하는 항체 또는 이의 결합 단편의 결합 특성에 상당히 영향을 미치거나 이를 변경하지 않는 변형을 지칭한다. 이러한 보존적 변형은 아미노산 치환, 첨가 및 결실을 포함한다. 변형은 당업계에 공지된 표준 기술, 예를 들어, 부위 지시된 돌연변이발생 및 PCR-매개 돌연변이발생에 의해 항체 또는 이의 결합 단편에 도입될 수 있다.
보존적 아미노산 치환은 전형적으로 아미노산 잔기가 유사한 물리화학적 성질을 갖는 측쇄를 갖는 아미노산 잔기로 대체되는 것들이다. 특정 가변 영역 및 CDR 서열은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34개 또는 그 이상의 아미노산 삽입, 결실 및/또는 치환을 포함할 수 있다. 치환이 수행되는 경우, 바람직한 치환은 보존적 변형일 것이다. 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기의 계열은 당업계에서 정의된다. 이러한 계열은 염기성 측쇄(예: 리신, 아르기닌, 히스티딘), 산성 측쇄(예: 아스파르트산, 글루탐산), 비하전된 극성 측쇄(예: 글리신, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시스테인, 트립토판), 비극성 측쇄(예: 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌), β-분지된 측쇄(예: 트레오닌, 발린, 이소류신) 및 방향족 측쇄(예: 티로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘)를 갖는 아미노산을 포함한다. 따라서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 CDR 및/또는 가변 영역 내의 하나 이상의 아미노산 잔기는 동일한 측쇄 계열의 다른 아미노산 잔기로 대체될 수 있고, 변경된 항체는 본원에 기재된 검정을 사용하여 유지된 기능(즉, 예를 들어, hCD45RC에 대한 결합과 같은 본원에 제시된 특성)에 대해 테스트될 수 있다. 다른 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 CDR 및/또는 가변 영역 내의 아미노산의 스트링은 측쇄 계열 구성원의 순서 및/또는 조성이 다른 구조적으로 유사한 스트링으로 대체될 수 있다.
"CD45"
본원에 사용된 용어 "CD45"(CD45R 또는 PTPRC로서 공지되기도 함)는 상이한 이소폼으로 존재하는 막 관통 당단백질을 지칭한다. 이러한 CD45의 별개의 이소폼은 CD45 세포외 영역의 A, B 및 C 결정자 각각을 코딩하는 3개의 가변 엑손(엑손 4, 5 및 6)의 대안적인 스플라이싱으로부터 생성되는 그들의 세포외 도메인 구조가 상이하다. 제한된 에피토프와 반응성인 항체는 "CD45R"로서 클러스터링된다. 따라서, 항-CD45RA, 항-CD45RB 및 항-CD45RC 항체는 각각 A, B 및 C 결정자의 발현을 포함하는 CD45 이소폼을 인식한다. CD45의 다양한 이소폼은 상이한 세포외 도메인을 갖지만, 막에 근접한 동일한 세포외 서열뿐만 아니라 막 관통 도메인 및 약 300개의 잔기의 2개의 탠덤 상동성 매우 보존된 포스파타제 도메인을 함유하는 큰 세포질 꼬리 세그먼트를 갖는다. CD45 및 이의 이소폼은 T 및 B 림프구에서 림프구 포스파타제 관련 인단백질(LPAP)과 비공유적으로 결합한다. CD45는 CD1, CD2, CD3 및 CD4를 포함하여 몇개의 다른 세포 표면 항원과 연관되는 것으로 보고되었다. CD45는 신호전달 림프구 활성화에 관여한다. 문자 "h"가 선행되는 경우(예: hCD45), CD45가 인간 기원임을 암시한다.
"CD45RC"
본원에 사용된 용어 "CD45RC"는 당업자에게 익히 공지된 200-220kDa 단일 쇄 유형 I 막 당단백질을 지칭한다. CD45RC는 C 결정자를 인코딩하는 엑손 6을 포함하지만(따라서, 용어 CD45RC, 즉, C 결정자에 제한된 CD45(CD45 Restricted to C determinant)), A 및 B 결정자를 인코딩하는 각각 엑손 4 및 5가 결여된 CD45의 대안적인 스플라이싱 이소폼이다. 인간 CD45RC의 아미노산 서열은 UniProt 수탁번호 P08575-10(버전 10, 2018년 3월 28일 변형됨 - 검사 합계: F92C874C9A114890)에 상응하는 서열번호 104로 제시된다. 이 CD45RC 이소폼은 CD8+ 또는 CD4+ Treg, CD14+ 단핵구 또는 PMN 상에서가 아니라 B 세포, 및 CD8+ T 세포 및 CD4+ T 세포의 서브세트 상에서 발현된다(참조: Picarda et al., 2017. JCI Insight. 2(3):e90088). 일부 모노클로날 항체가 모든 상이한 이소폼에 공통적인 CD45의 부분에서 에피토프를 인식할 수 있는 반면(이들은 항-CD45 항체로서 칭명된다), 다른 모노클로날 항체는 그들이 어느 결정자를 인식하는지(A, B 또는 C)에 따라 소정의 이소폼에 대해 제한된 특이성을 갖는다. 문자"h"가 선행되는 경우(예: hCD45RC), CD45RC가 인간 기원임을 암시한다.
"CD45RC 고 세포 항원" 또는 "CD45RC 고 세포 표면 마커"
본원에 사용된 용어 "CD45RC고 세포 항원" 또는 "CD45RC고 세포 표면 마커"는 이에 결합하는 항-CD45RC 제제(예: 항체 또는 압타머)로 표적화될 수 있는 CD45RC고 세포(T 세포, B 세포 및 자연 살해(NK) 세포 포함)의 표면에서 발현되거나 표시되는 서열 서열번호 23의 항원 (또는 에피토프)을 지칭한다. 예시적인 CD45RC고 T 세포 표면 마커는 이전에 기재된 바와 같은 CD45RC 또는 상기 T 세포의 집단을 특성화하는 다른 항원을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 특별한 관심 대상인 CD45RC고 T 세포는 포유동물의 다른 비-CD45RC고 T 세포와 비교하여 CD45RC고 T 세포에서 우선적으로 발현된다.
이어서, 상기 기재된 바와 같은 CD45RC 세포 표면 마커에 대해 지시된 항체를 상승시킨 후, 당업자는 CD45RC고 세포에서 작용하고, 항체 의존 세포 매개된 세포독성(ADCC), 보체 의존성 세포독성(CDC), 또는 항체의 직접 결합 후 CD45RC저/- 세포사(예: 아폽토시스를 통해)가 아니라 CD45RC고의 유도를 통해 CD45RC고 세포를 고갈시키는 데 사용될 수 있는 것들을 쉽게 선택할 수 있다(참조: Picarda et al., 2017. JCI Insight. 2(3):e90088).
"CDR" 또는 "상보성 결정 영역"
본원에 사용된 용어 "CDR" 또는 "상보성 결정 영역"은 중쇄 및 경쇄 폴리펩티드 모두의 가변 영역 내에서 발견된 비인접 항원 결합 부위를 의미한다. CDR은 문헌[참조: Kabat et al., 1991. Sequences of proteins of immunological interest (5th ed.). Bethesda, MD: U.S. Dep. of Health and Human Services; 및 Chothia and Lesk, 1987. J Mol Biol. 196(4):901-17]으로부터 추론된 바와 같이, 표 1의 규칙에 따라 동정되었다:
Figure pct00001
"에피토프"
본원에 사용된 용어 "에피토프"는 항체 또는 이의 결합 단편dl 결합하는 단백질 또는 단백질들 상에 위치된 아미노산의 특정 배열을 지칭한다. 에피토프는 종종 아미노산 또는 당 측쇄와 같은 분자의 화학적 활성 표면 그룹화로 구성되고, 특정 3차원 구조 특성뿐만 아니라 특정 전하 특성을 갖는다. 에피토프는 선형 (또는 순차적) 또는 입체 배좌일 수 있다, 즉 반드시 인접할 수는 없는 항원의 다양한 영역에 아미노산의 2개 이상의 서열을 포함할 수 있다.
"프레임워크 영역" 또는 "FR" 또는 "비-CDR 영역"
본원에 사용된 용어 "프레임워크 영역", "FR" 또는 "비-CDR 영역"은 가변 영역의 일부이지만, CDR(예: CDR의 카바트/초티아 정의를 사용함)의 일부는 아닌 아미노산 잔기를 포함한다. 따라서, 가변 영역 프레임워크는 길이가 약 100-120개 아미노산 사이이지만, CDR의 외부 아미노산만을 포함한다.
HCVR의 특정 예 및 카바트/초티아에 의해 정의된 바와 같은 CDR의 경우:
- FR1은 초티아/AbM 정의에 따르는 아미노산 1-25 또는 카바트 정의에 따르는 나중 5개 잔기를 포함하는 가변 영역의 도메인에 상응할 수 있고;
- FR2는 아미노산 36-49를 포함하는 가변 영역의 도메인에 상응할 수 있고;
- FR3은 아미노산 67-98을 포함하는 가변 영역의 도메인에 상응할 수 있고;
- FR4는 아미노산 104-110으로부터 가변 영역의 말단에 이르는 가변 영역의 도메인에 상응할 수 있다.
경쇄를 위한 프레임워크 영역은 LCVR의 CDR 각각에 의해 유사하게 분리된다. 자연적으로 발생하는 항체에서, 각각의 단량체성 항체에 존재하는 6개의 CDR은 항체가 수성 환경에서 3차원 형태를 가정할 때 항원 결합 부위를 형성하도록 특이적으로 배치된 아미노산의 짧은 비연속 서열이다. 중쇄 및 경쇄 가변 도메인의 나머지는 아미노산 서열에서 더 적은 분자간 가변성을 나타내고, 프레임워크 영역이라고 칭명된다. 프레임워크 영역은 주로 β-시트 형태를 채택하고, CDR은 β-시트 구조를 연결하고, 일부 경우에, β-시트의 일부를 형성하는 루프를 형성한다. 따라서, 이러한 프레임워크 영역은 쇄간 비공유 상호작용에 의해 정확한 배향으로 6개의 CDR을 배치하는 것을 제공하는 스캐폴드를 형성하는 작용을 한다. 배치된 CDR에 의해 형성된 항원 결합 부위는 면역 반응성 항원 상의 에피토프에 대해 상보성인 표면을 규정한다. 이 상보성 표면은 면역 반응성 항원 에피토프에 대한 항체의 비공유 결합을 촉진한다. CDR의 위치는 당업자에 의해 쉽게 동정될 수 있다.
"중쇄 영역"
본원에 사용된 용어 "중쇄 영역"은 면역글로불린 중쇄의 불변 도메인으로부터 유도된 아미노산 서열을 포함한다. 중쇄 영역을 포함하는 단백질은 CH1 도메인, 힌지(hinge)(예: 상부, 중앙 및/또는 하부 힌지 영역) 도메인, CH2 도메인, CH3 도메인 또는 이의 변이체 또는 단편 중 적어도 하나를 포함한다. 하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 면역글로불린 중쇄(예: 힌지 부분, CH2 도메인 및 CH3 도메인)의 Fc 영역을 포함할 수 있다. 다른 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 불면 도메인의 영역(예: CH2 도메인 모두 또는 일부)이 결여된다. 특정 구현예에서, 적어도 하나의, 바람직하게는 모든 불변 도메인은 인간 면역글로불린 중쇄로부터 유래된다. 예를 들어, 하나의 바람직한 구현예에서, 중쇄 영역은 완전 인간 힌지 도메인을 포함한다. 다른 바람직한 구현예에서, 중쇄 영역은 완전 인간 Fc 영역(예: 인간 면역글로불린으로부터의 힌지, CH2 및 CH3 도메인 서열)을 포함한다. 특정 구현예에서, 중쇄 영역의 구성 요소 불변 도메인은 상이한 면역글로불린 분자로부터 유래된다. 예를 들어, 단백질의 중쇄 영역은 IgGl 분자로부터 유도된 CH2 도메인 및 IgG3 또는 IgG4 분자로부터 유도된 힌지 영역을 포함할 수 있다. 다른 구현예에서, 불변 도메인은 상이한 면역글로불린 분자의 영역을 포함하는 키메라 도메인이다. 예를 들어, 힌지는 IgGl 분자로부터의 제1 영역과 IgG3 또는 IgG4 분자로부터의 제2 영역을 포함할 수 있다. 상기 제시된 바와 같이, 중쇄 영역의 불변 도메인은 그들이 자연적으로 발생하는 (야생형) 면역글로불린 분자로부터의 아미노산 서열이 다양하도록 변형될 수 있음이 당업자에 의해 이해될 것이다. 즉, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 하나 이상의 중쇄 불변 도메인(CH1, 힌지, CH2 또는 CH3) 및/또는 경쇄 불변 도메인(CL)에 대한 변경 또는 변형을 포함할 수 있다. 예시적인 변경은 하나 이상의 도멘인에서 하나 이상의 아미노산의 추가, 결실 또는 치환을 포함한다.
"힌지 영역"
*본원에 사용된 용어 "힌지 영역"은 CH1 도메인을 CH2 도메인에 결합하는 중쇄 분자의 영역을 포함한다. 이 힌지 영역은 대략 25개의 잔기를 포함하고, 가요성이며, 따라서 2개의 N-말단 항원 결합 영역이 독립적으로 움직일 수 있도록 한다. 힌지 영역은 3개의 별개의 도메인으로 소분류화될 수 있다: 상부, 중앙 및 하부 힌지 도메인(참조: Roux et al., 1998. J Immunol. 161(8):4083-90).
"초가변 루프"
초가변 루프(HV)는 구조를 기반으로 정의되는 반면, CDR은 서열 가변성을 기반으로 정의되고(참조: Kabat et al., 1991. Sequences of proteins of immunological interest (5th ed.). Bethesda, MD: U.S. Dep. of Health and Human Services), HV와 CDR의 한계가 일부 VH 및 VL 도메인에서 상이할 수 있기 때문에, 용어 "초가변 루프"는 엄밀히 상보성 결정 영역(CDR)과 동의어가 아니다. VL 및 VH 도메인의 CDR은 전형적으로 이미 상기 설명된 바와 같이 카바트/초티아 정의에 의해 정의될 수 있다.
"동일성" 또는 "동일한 "
본원에 사용된 용어 "동일성" 또는 "동일한 "은, 둘 이상의 아미노산 서열 또는 둘 이상의 핵산 서열의 서열 사이의 관계에 사용될 때, 둘 이상의 아미노산 잔기 또는 핵산 잔기의 스트링 사이의 일치 수에 의해 결정된 바와 같이, 아미노산 서열 또는 핵산 서열 사이의 서열 관련성의 정도를 지칭한다. "동일성"은 특정의 수학적 모델 또는 컴퓨터 프로그램(즉, "알고리즘")에 의해 어드레스된 갭 정렬(있는 경우)을 갖는 둘 이상의 서열 중 더 작은 것 사이의 동일한 일치 퍼센트를 측정한다.
관련된 아미노산 서열 또는 핵산 서열의 동일성은 공지된 방법에 의해 쉽게 계산될 수 있다. 이러한 방법은 문헌[참조: Lesk A. M. (1988). Computational molecular biology: Sources and methods for sequence analysis. New York, NY: Oxford University Press; Smith D. W. (1993). Biocomputing: Informatics and genome projects. San Diego, CA: Academic Press; Griffin A. M. & Griffin H. G. (1994). Computer analysis of sequence data, Part 1. Totowa, NJ: Humana Press; von Heijne G. (1987). Sequence analysis in molecular biology: treasure trove or trivial pursuit. San Diego, CA: Academic press; Gribskov M. R. & Devereux J. (1991). Sequence analysis primer. New York, NY: Stockton Press; Carillo et al., 1988. SIAM J Appl Math. 48(5):1073-82]에 기재된 것들을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
동일성을 결정하기 위한 바람직한 방법은 테스트된 서열 간의 가장 큰 일치를 제공하도록 설계된다. 동일성을 결정하는 방법은 공개적으로 이용 가능한 컴퓨터 프로그램으로 기재된다. 두 서열 사이의 동일성을 결정하기 위한 바람직한 컴퓨터 프로그램 방법은 GAP(참조: Genetics Computer Group, University of Wisconsin, Madison, WI; Devereux et al., 1984. Nucleic Acids Res. 12(1 Pt 1):387-95), BLASTP, BLASTN, 및 FASTA(참조: Altschul et al., 1990. J Mol Biol. 215(3):403-10)을 포함하는 GCG 프로그램 패키지를 포함한다. BLASTX 프로그램은 국립 생물 공학 정보 센터(NCBI) 및 다른 공급원(BLAST Manual, Altschul et al. NCB/NLM/NIH Bethesda, Md. 20894)으로부터 공개적으로 이용 가능하다. 익히 공지된 스미스-워터만 알고리즘(Smith Waterman algorithm)도 또한 동일성을 결정하기 위해 사용될 수 있다.
"면역 특이적", "~에 특이적" 또는 "특이적으로 결합하다"
본원에 사용된 바와 같이, 항체 또는 이의 결합 단편은 상기 항원(예: hCD45RC)과 검출 가능한 수준으로, 바람직하게는 약 106 M-1 이상, 바람직하게는 약 107 M-1, 108 M-1, 5x108 M-1, 109 M-1, 5x109 M-1 이상의 친화성 상수(KA)로 반응하는 경우 항원에 "면역특이적", "특이적" 또는 "특이적으로 결합한다"고 한다.
그의 동족 항원에 대한 항체 또는 이의 결합 단편의 친화성은 또한 일반적으로 평형 해리 상수(KD)로서 표현된다. 항체 또는 이의 결합 단편은 상기 항원(예: hCD45RC)과 검출 가능한 수준으로, 바람직하게는 약 10-6 M 이하, 바람직하게는 약 10-7 M, 5x10-8 M, 10-8 M, 5x10-9 M, 10-9 M 이하의 KD로 반응하는 경우 항원에 "면역특이적", "특이적" 또는 "특이적으로 결합한다"고 한다.
항체 또는 이의 결합 단편의 친화성은 통상적 기술, 예를 들어, 문헌[참조: Scatchard, 1949. Ann NY Acad Sci. 51:660-672]에 기재된 것들을 사용하여 쉽게 결정될 수 있다. 항원, 세포 또는 조직에 대한 항체 또는 이의 결합 단편의 결합 특성은, 예를 들어, ELISA, 면역형광 기반 검정, 예를 들어, 면역-조직화학(IHC) 및/또는 형광 활성화 세포 분류(FACS)를 포함하는 면역검출 방법을 사용하여 또는 표면 플라즈몬 공명(SPR, 예를 들어, BIAcore®를 사용함)에 의해 일반적으로 결정되고 평가될 수 있다.
"모노클로날 항체"
본원에 사용된 용어 "모노클로날 항체"는 실질적으로 균질한 항체의 집단으로부터 수득된 항체를 지칭하고, 즉 집단에 포함된 개별적 항체는 최소량으로 존재할 수 있는 가능한 자연적으로 발생하는 돌연변이를 제외하고 동일하다. 모노클로날 항체는 매우 특이적이며, 단일 항원 부위에 대해 지시된다. 또한, 상이한 결정자 (에피토프)에 대해 지시된 상이한 항체를 포함하는 폴리클로날 항체 제제와 대조적으로, 각각의 모노클로날 항체는 항원 상의 단일 결정자에 대해 지시된다. 그들의 특이성에 부가하여, 모노클로날 항체는 그들이 다른 항체에 의해 오염되지 않고 합성될 수 있다는 점에서 유리하다. 변형제 "모노클로날"은 임의의 특정 방법에 의해 항체의 생산을 요구하는 것으로 해석되어서는 안된다. 예를 들어, 본 발명에 따르는 모노클로날 항체 또는 이의 결합 단편은 먼저 문헌[참조: Kohler et al., 1975. Nature. 256(5517):495-7]에 기재된 하이브리도마 방법론에 의해 제조될 수 있거나, 박테리아, 진핵 동물 또는 식물 세포에서 재조합 DNA 방법을 사용하여 제조될 수 있다(특허 US4,816,567). "모노클로날 항체"는 또한, 예를 들어, 문헌[참조: Clackson et al., 1991. Nature. 352(6336):624-8 and Marks et al., 1991. J Mol Biol. 222(3):581-97]에 기재된 기술을 사용하여 파지 항체 라이브러리로부터 단리될 수 있다.
"예방하다" 또는 "예방하는 " 또는 "예방"
본원에 사용된 용어 "예방하다", "예방하는 " 및 "예방"은 예방적 및 예방 조치를 지칭하고, 여기서 목적은 대상체가 소정의 시간 동안 병리학적 상태 또는 장애를 발생시킬 기회를 감소시키는 것이다. 이러한 감소는, 예를 들어, 대상체에서 병리학적 상태 또는 장애의 적어도 하나의 증상의 지연된 개시로 반영될 수 있다.
"대상체"
본원에 사용된 용어 "대상체"는 포유동물, 바람직하게는 인간을 지칭한다. 하나의 구현예에서, 대상체는 의학적 치료의 수령을 기다리고 있거나 의학적 치료를 받고 있거나 의학적 절차의 대상이었거나/이거나/일 것이거나 질환의 발생에 대해 모니터링되는 "환자", 즉 온혈 동물, 보다 바람직하게는 인간일 수 있다. 본원에서 용어 "포유동물"은 인간, 가정용 및 농장 동물, 및 동물원, 스포츠 또는 애완 동물, 예를 들어, 개, 고양이, 소, 말, 양, 돼지, 염소, 토끼 등을 포함하는 임의의 포유동물을 지칭한다. 바람직하게는, 포유동물은 영장류, 더욱 바람직하게는 인간이다.
"가변 영역" 또는 "가변 도메인"
본원에 사용된 용어 "가변성"은 가변 도메인 VH 및 VL의 특정 영역이 항체 간의 서열에서 광범위하게 상이하고, 그 표적 항원에 대한 각각의 특정 항체의 결합 및 특이성에 사용된다는 사실을 지칭한다. 그러나, 가변성은 항체의 가변 도메인 전체에 걸쳐 고르게 분포되지 않는다. 그것은 항원 결합 부위의 일부를 형성하는 VL 도메인 및 VH 도메인 각각에서 "초가변 루프"로 칭명되는 3개의 세그멘트에 집중된다.
Vλ 경쇄 도메인의 제1, 제2 및 제3 초가변 루프는 본원에서 L1(λ), L2(λ) 및 L3(λ)으로서 지칭되고, VL 도메인에서 잔기 24-33(L1(λ), 9, 10 또는 11개 아미노산 잔기로 구성됨), 49-53(L2(λ), 3개의 잔기로 구성됨) 및 90-96(L3(λ), 6개 잔기로 구성됨)을 포함하는 것으로 규정될 수 있다(참조: Morea et al., 2000. Methods. 20(3):267-79).
Vκ 경쇄 도메인의 제1, 제2 및 제3 초가변 루프는 본원에서 L1(κ), L2(κ) 및 L3(κ)으로서 지칭되고, VL 도메인에서 잔기 25-33(L1(κ), 6, 7, 8, 11, 12 또는 13개의 잔기로 구성됨), 49-53(L2(κ), 3개의 잔기로 구성됨) 및 90-97(L3(κ), 6개 잔기로 구성됨)을 포함하는 것으로 규정될 수 있다(참조: Morea et al., 2000. Methods. 20(3):267-79).
VH 도메인의 제1, 제2 및 제3 초가변 루프는 본원에서 H1, H2 및 H3로서 지칭되고, VH 도메인에서 잔기 25-33(H1, 7, 8 또는 9개의 잔기로 구성됨), 52-56(H2, 3 또는 4개의 잔기로 구성됨) 및 91-105(H3, 길이가 매우 가변적)을 포함하는 것으로 규정될 수 있다(참조: Morea et al., 2000. Methods. 20(3):267-79).
달리 표시되지 않는 한, 용어 L1, L2 및 L3은 각각 VL 도메인의 제1, 제2 및 제3 초가변 루프를 지칭하고, Vκ 및 Vλ 아이소타입 둘 다로부터 수득된 초가변 루프를 포함한다. 용어 H1, H2 및 H3은 각각 VH 도메인의 제1, 제2 및 제3 초가변 루프를 지칭하고, 감마(γ), 뮤우(μ), 알파(α), 델타(δ) 또는 엡실론(ε)을 포함하여 임의의 공지된 중쇄 아이소타입으로부터 수득된 초가변 루프를 포함한다. 초가변 루프 L1, L2, L3, H1, H2 및 H3은 각각 상기 정의된 바와 같이 "상보성 결정 영역" 또는 "CDR"의 부분을 포함할 수 있다.
"치료하는 " 또는 "치료" 또는 "경감"
본원에 사용된 용어 "치료하는 " 또는 "치료" 또는 "경감"은 예방적 또는 예방 조치를 제외한 치료적 치료를 지칭하고, 여기서 목적은 표적화된 병리학적 상태 또는 장애를 늦추는(줄이는) 것이다. 치료를 필요로 하는 사람들에는 이미 장애를 갖고 있는 사람들뿐만 아니라 장애를 갖는 것으로 의심되는 사람들을 포함한다. 대상체는, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 치료량을 복용한 후 상기 대상체가 다음 중 하나 이상의 관찰 가능하고/하거나 측정 가능한 감소 또는 부재를 나타내는 경우, 표적화된 병리학적 상태 또는 장애가 성공적으로 "치료된다: CD45RC고 세포 수의 감소; CD45RC고인 전체 세포의 퍼센트 감소; 특정 질환 또는 상태와 관련된 하나 이상의 증상의 어느 정도까지의 경감; 감소된 이환율 및 사망률; 및/또는 삶의 질의 품질 향상. 질환에서 성공적 치료 및 개선을 평가하기 위한 상기 파라미터는 의사에게 친숙한 일상적인 절차에 의해 쉽게 측정 가능하다.
상세한 설명
본 발명은 인간 CD45RC(hCD45RC)에 결합하는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편에 관한 것이다.
본원에 사용된 "단리된 항체"는 상이한 항원 특이성을 갖는 다른 항체가 실질적으로 없는 항체(예: hCD45RC에 특이적으로 결합하는 단리된 항체는 hCD45RC 이외의 항원에 특이적으로 결합하는 항체가 실질적으로 없다)를 지칭하는 것을 의도한다. 그러나, hCD45RC에 특이적으로 결합하는 단리된 항체는 다른 종으로부터의 CD45RC 분자와 같은 다른 항원에 대한 교차 반응성을 가질 수 있다. 더욱이, 단리된 항체는 다른 세포 물질 및/또는 화학 물질, 특히, 제한 없이, 효소, 호르몬 및 다른 단백질성 또는 비단백질성 성분을 포함하는 항체의 진단적 또는 치료적 용도를 방해하는 것들이 실질적으로 없을 수 있다.
하나의 구현예에서, 단리된 항체 또는 이의 결합 단편은 정제된다.
하나의 구현예에서, 단리된 항체 또는 이의 결합 단편은 다음으로 정제된다:
(1) 로리법(Lowry method)에 의해 결정된 바와 같은 항체 또는 이의 결합 단편의 80중량%, 85중량%, 90중량%, 91중량%, 92중량%, 93중량%, 94중량%, 95중량% 이상, 가장 바람직하게는 96중량%, 97중량%, 98중량% 또는 99중량% 이상;
(2) 스피닝 컵 서열분석기를 사용하여 N-말단 또는 내부 아미노산 서열의 적어도 15개 잔기를 수득하기에 충분한 정도; 또는
(3) 환원 또는 비환원 조건하에 쿠마시 블루(Coomassie blue) 또는, 바람직하게는 은 염색을 사용하여 SDS-PAGE에 의해 제시된 바와 같은 균질성.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45RC의 세포외 도메인에 결합한다. 하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45RC의 세포외 도메인 상에 존재하는 적어도 하나의 에피토프에 결합한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45의 엑손 6에 의해 인코딩된 C 결정자에 결합한다. 하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45의 엑손 6에 의해 인코딩된 C 결정자 상의 적어도 하나의 에피토프에 결합한다.
하나의 구현예에서, hCD45의 엑손 6에 의해 인코딩된 C 결정자의 아미노산 서열은 서열번호 23을 포함하거나 이로 구성된다. 하나의 구현예에서, hCD45의 C 결정자를 인코딩하는 엑손 6의 핵산 서열은 서열번호 24를 포함하거나 이로 구성된다.
Figure pct00002
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 23 또는 이의 단편을 포함하거나 이로 구성되는 적어도 하나의 에피토프에 결합한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 23 또는 이의 단편과 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상 동일성을 공유하는 서열을 포함하거나 이로 구성되는 적어도 하나의 에피토프에 결합한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 24 또는 이의 단편을 포함하거나 이로 구성되는 핵산 서열에 의해 인코딩된 적어도 하나의 에피토프에 결합한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 24 또는 이의 단편과 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상 동일성을 공유하는 서열을 포함하거나 이로 구성되는 핵산 서열에 의해 인코딩된 적어도 하나의 에피토프에 결합한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 23 또는 이의 단편의 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46 또는 47개의 아미노산: 또는 서열번호 23 또는 이의 단편과 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상 동일성을 공유하는 서열을 포함하거나 이로 구성되는 적어도 하나의 에피토프에 결합한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 23 또는 이의 단편의 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46 또는 47개의 연속 아미노산: 또는 서열번호 23 또는 이의 단편과 적어도 약 70%, 바람직하게는 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상 동일성을 공유하는 서열을 포함하거나 이로 구성되는 적어도 하나의 에피토프에 결합한다.
하나의 구현예에서, 서열번호 23을 포함하거나 이로 구성되는 적어도 하나의 에피토프의 단편은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46 또는 47개의 아미노산 잔기를 포함하거나 이로 구성된다.
하나의 구현예에서, 서열번호 23을 포함하거나 이로 구성되는 적어도 하나의 에피토프의 단편은 서열번호 23을 포함하거나 이로 구성되는 서열의 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 410, 420, 430, 440, 450, 460, 470, 480, 490, 500, 510, 520, 530, 540, 550, 560, 570, 580, 590, 600, 610, 620, 630, 640, 650, 660, 670, 680, 690, 700, 710, 720, 730, 740, 750, 760, 770, 780, 790, 800, 810, 820, 830, 840, 850, 860, 870, 880, 890, 900 ,910, 920, 930, 940, 950, 960, 970, 980, 990, 1000, 1010, 1020, 1030, 1040, 1050, 1060, 1070, 1080, 1090, 1100개 이상의 연속 아미노산 잔기의 스팬에 걸쳐 확산되는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46 또는 47개의 아미노산 잔기를 포함하거나 이로 구성된다.
하나의 구현예에서, 서열번호 23을 포함하는 서열은 UniProt 수탁번호 P08575-3(버전 3, 2018년 3월 28일 변경됨 - 검사 합계: 6E942E2BF6B17AC5)에 상응하는 서열번호 99에 제시된 hCD45의 서열이다.
Figure pct00003
하나의 구현예에서, 서열번호 23을 포함하는 서열은 UniProt 수탁번호P08575-10(버전 10, 2018년 3월 28일 변경됨 - 검사 합계: F92C874C9A114890)에 상응하는 서열번호 104에 제시된 hCD45RC의 서열이다.
Figure pct00004
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45의 엑손 4에 의해 인코딩된 A 결정자에 결합하지 않는다. 하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45의 엑손 4에 의해 인코딩된 A 결정자 상의 적어도 하나의 에피토프에 결합하지 않는다.
하나의 구현예에서, hCD45의 엑손 4에 의해 인코딩된 A 결정자의 아미노산 서열은 서열번호 105를 포함하거나 이로 구성된다.
Figure pct00005
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45의 엑손 5에 의해 인코딩된 B 결정자에 결합하지 않는다. 하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45의 엑손 5에 의해 인코딩된 B 결정자 상의 적어도 하나의 에피토프에 결합하지 않는다.
하나의 구현예에서, hCD45의 엑손 5에 의해 인코딩된 B 결정자의 아미노산 서열은 서열번호 106을 포함하거나 이로 구성된다.
Figure pct00006
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45RA에 결합하지 않는다. 하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45RA의 적어도 하나의 에피토프에 결합하지 않는다.
하나의 구현예에서, hCD45RA의 아미노산 서열은 UniProt 수탁번호 P08575-8(버전 8, 2018년 3월 28일 변경됨 - 검사 합계: F42C1FEC9EDE4BC0)에 상응하는 서열번호 107을 포함하거나 이로 구성된다.
Figure pct00007
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45RB에 결합하지 않는다. 하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45RB의 적어도 하나의 에피토프에 결합하지 않는다.
하나의 구현예에서, hCD45RB의 아미노산 서열은 UniProt 수탁번호 P08575-9(버전 9, 2018년 3월 28일 변경됨 - 검사 합계: 745870037910C575)에 상응하는 서열번호 108을 포함하거나 이로 구성된다.
Figure pct00008
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45RAB에 결합하지 않는다. 하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45RAB의 적어도 하나의 에피토프에 결합하지 않는다.
하나의 구현예에서, hCD45RAB의 아미노산 서열은 UniProt 수탁번호 P08575-5(버전 5, 2018년 3월 28일 변경됨 - 검사 합계: EA40BE995CD98F7C)에 상응하는 서열번호 109를 포함하거나 이로 구성된다.
Figure pct00009
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45R0에 결합하지 않는다. 하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45R0의 적어도 하나의 에피토프에 결합하지 않는다.
하나의 구현예에서, hCD45R0의 아미노산 서열은 UniProt 수탁번호 P08575-4(버전 4, 2018년 3월 28일 변경됨 - 검사 합계: D3CB364EF4243384)에 상응하는 서열번호 110을 포함하거나 이로 구성된다.
Figure pct00010
하나의 구현예에서, 적어도 하나의 에피토프는 배좌 에피토프이다. 다른 구현예에서, 적어도 하나의 에피토프는 순차적 에피토프이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 약 5x10-7 M 이하, 바람직하게는 약 2.5x10-7 M 이하, 약 1x10-7 M 이하, 약 7.5x10-8 M 이하, 약 5x10-8 M 이하, 약 1x10-8 M 이하의 평형 해리 상수(Kd)로 hCD45RC에 결합한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 약 1x104 M-1sec-1 이상, 바람직하게는 약 5x104 M-1sec-1 이상, 약 1x105 M-1sec-1 이상, 약 2.5x105 M-1sec-1 이상, 약 5x105 M-1sec-1 이상의 결합률(Kon)로 hCD45RC에 결합한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 약 5x10-2 sec-1 이하, 바람직하게는 약 4x10-2 sec-1 이하, 약 3x10-2 sec-1 이하, 약 2x10-2 sec-1 이하, 약 1.5x10-2 sec-1 이하의 해리율(Koff)로 hCD45RC에 결합한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 중 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개로 hCD45RC에 결합한다:
- 약 5x10-7 M 이하, 바람직하게는 약 2.5x10-7 M 이하, 약 1x10-7 M 이하, 약 7.5x10-8 M 이하, 약 5x10-8 M 이하, 약 1x10-8 M 이하의 평형 해리 상수(Kd);
- 약 1x104 M-1sec-1 이상, 바람직하게는 약 5x104 M-1sec-1 이상, 약 1x105 M-1sec-1 이상, 약 2.5x105 M-1sec-1 이상, 약 5x105 M-1sec-1 이상의 결합률(Kon); 및
- 약 5x10-2 sec-1 이하, 바람직하게는 약 4x10-2 sec-1 이하, 약 3x10-2 sec-1 이하, 약 2x10-2 sec-1 이하, 약 1.5x10-2 sec-1 이하의 해리율(Koff).
이의 리간드에 대한 항체 또는 이의 결합 단편의 친화성을 결정하기 위한(예를 들어, Kd, k0ff 및 kon을 결정함을 포함) 방법은 당업계에 익히 공지되어 있고, 제한 없이, 표면 플라즈몬 공명(SPR), 형광 활성화 세포 분류(FACS), 효소-결합 면역 흡착 검정(ELISA), AlphaLISA 및 KinExA를 포함한다.
바람직한 방법은 BIAcore®이고, 이는 항체 또는 이의 결합 단편의 친화성을 결정하기 위해 고정된 CD45RC를 사용하는 SPR에 의존한다. 이 방법을 구현하는 방법은 실시예 섹션에서 추가로 예시될 것이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 폴리클로날 항체 또는 이의 결합 단편이다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 모노클로날 항체 또는 이의 결합 단편이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 전체 항체, 단일 쇄 항체, 이량체성 단일 쇄 항체, 단일 도메인 항체, Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab)'2, Fd, 탈푸코실화 항체, 이중특이적 항체, 디아바디, 트리아바디 및 테트라바디를 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터 선택된 분자이다.
본원에 사용된 용어 "결합 단편"은 전체 항체보다 더 적은 아미노산 잔기를 포함하는 본 발명에 따르는 항체의 부분 또는 영역을 지칭한다. "결합 단편"은 항원에 결합하고/하거나 그것이 유래되는 전체 항체와 항원 결합(예: 인간 CD45RC에 대한 특이적 결합)에 대해 경쟁한다. 항체 결합 단편은, 임의의 제한 없이, 단일 쇄 항체, Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab)'2, Fd, 탈푸코실화 항체, 디아바디, 트리아바디 및 테트라바디를 포함한다.
본원에 사용된 "단일 쇄 항체"는, 제한 없이, (1) 단일 쇄 Fv 분자(scFv); (2) 하나의 경쇄 가변 도메인만을 함유하는 단일 쇄 단백질, 또는 관련된 중쇄 잔기 없이 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR을 함유하는 이의 단편; 및 (3) 하나의 중쇄 가변 영역만을 함유하는 단일 쇄 단백질, 또는 관련된 경쇄 잔기 없이 중쇄 가변 영역의 3개의 CDR을 함유하는 이의 단편을 포함하는 연속 아미노산 잔기의 하나의 차단되지 않은 서열을 포함하거나 이로 구성되는 1차 구조를 갖는 단백질인 항체 또는 이의 단편을 지칭한다.
또한 "sFv" 또는 "scFv"로서 약칭된 "단일 쇄 Fv"는 단일 아미노산 쇄에 연결된 VH 및 VL 항체 도메인을 포함하는 항체 단편을 지칭한다. 바람직하게는, scFv 아미노산 서열은 추가로 scFv가 항원 결합을 위한 목적하는 구조를 형성할 수 있게 하는 VH 및 VL 도메인 사이에 펩티드 링커를 포함한다(참조: Pluckthun, 1994. Antibodies from Escherichia coli. In Rosenberg & Moore (Eds.), The pharmacology of monoclonal antibodies. Handbook of Experimental Pharmacology, 113:269-315. Springer: Berlin, Heidelberg).
본원에 사용된 "Fv"는 완전 항원-인식 및 -결합 부위를 함유하는 최소 항체 단편을 지칭한다. 이 단편은 단단한 비공유 결합으로 하나의 HCVR 및 하나의 LCVR의 이량체로 구성된다. 이러한 2개의 도메인의 중첩으로부터 항원 결합에 기여하고 항체에 항원 결합 특이성을 부여하는 6개의 초가변 루프(중쇄 및 경쇄로부터 각각 3개의 루프)를 발산한다. 그러나, 심지어 단일 가변 도메인 (또는 항원에 특이적인 3개의 CDR만을 포함하는 Fv의 절반)은 전체 결합 부위보다 더 낮은 친화성에서이지만 항원을 인식하고 결합하는 능력을 갖는다.
본원에 사용된 "디아바디"는 가변 도메인의 쇄내 페어링이 아니라 쇄간 페어링이 달성되어 2가 단편, 즉 2개의 항원 결합 부위를 갖는 단편을 초래하도록 HCVR와 LCVR 사이에 짧은 링커(약 5 내지 10개 잔기)를 갖는 scFv 단편을 작제함으로써 제조되는 작은 항체 단편을 지칭한다. 이중특이적 디아바디는 두 항체의 HCVR 및 LCVR이 상이한 폴리펩티드 쇄에 존재하는 2개의 "크로스오버" scFv 단편의 헤테로다이머이다. 디아바디는 문헌[참조: 특허 EP0404097, 특허 출원 WO1993011161; 및 Holliger et al., 1993. Proc Natl Acad Sci USA. 90(14):6444-8]에 보다 완전히 기재되어 있다.
항체 결합 단편은 표준 방법을 사용하여 수득될 수 있다. 예를 들어, Fab 또는 F(ab')2 단편은 통상의 기술에 따라 단리된 항체의 프로테아제 소화에 의해 생성될 수 있다.
또한, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편이 공지된 방법을 사용하여 변형될 수 있다는 것을 알게 될 것이다. 예를 들어, 생체내 클리어런스를 늦추고 더 바람직한 약동학적 프로파일을 수득하기 위해, 항체 또는 이의 결합 단편은 폴리에틸렌 글리콜(PEG)로 변형될 수 있다. 항체 또는 이의 결합 단편에 PEG를 결합하고 부위 특이적으로 접합시키기 위한 방법은, 예를 들어, 문헌[참조: Leong et al., 2001. Cytokine. 16(3):106-19; Delgado et al., 1996. Br J Cancer. 73(2):175-82]에 기재되어 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 유니바디, 도메인 항체, 및 나노바디를 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 분자이다.
"유니바디"는 당업계에 익히 공지되어 있고, IgG4 항체의 힌지 영역이 결여된 항체 단편을 지칭한다. 힌지 영역의 결실은 본질적으로 전통적인 IgG4 항체의 크기의 절반인 분자를 초래하고, IgG4 항체의 2가 결합 영역보다 1가 결합 영역을 갖는다.
"도메인 항체"는 당업계에 익히 공지되어 있고, 항체의 중쇄 또는 경쇄의 가변 영역에 상응하는 항체의 최소 기능적 결합 단위를 지칭한다.
"단일 도메인 항체"는 당업계에 익히 공지되어 있고, 자연 발생 중쇄 항체의 독특한 구조적 및 기능적 특성을 함유하는 항체 유도 단백질을 지칭한다(참조: (Muyldermans, 2013. Annu Rev Biochem. 82:775-97). 이러한 중쇄 항체는 단일 가변 도메인(VHH)- 하나의 이러한 예는 nanobodies®이다-, 또는 단일 가변 도메인(VHH) 및 2개의 불변 도메인(CH2 및 CH3) - 예를 들어, 카멜리드 항체-, 또는 단일 가변 도메인(VHH) 및 5개의 불변 도메인(CH1, CH2, CH3, CH4 및 CH5)- 예를 들어, 상어 항체를 함유할 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 아피바디, 아필린, 아피틴, 애드넥틴, 아트리머, 에바신, DARPin, 안티칼린, 아비머, 피노머, 베르사바디 및 듀오칼린을 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 모방체이다.
"아피바디"는 당업계에 익히 공지되어 있고, 스타필로코컬 단백질 A의 IgG 결합 도메인 중 하나로부터 유도된 58개 아미노산 잔기 단백질 도메인에 기초하는 친화성 단백질을 지칭한다(참조: Frejd & Kim, 2017. Exp Mol Med. 49(3):e306; 특허 US5,831,012).
"DARPins"(설계된 안키린 반복 단백질)은 당업계에 익히 공지되어 있고, 비-항체 단백질의 결합 능력을 이용하기 위해 개발된 항체 모방 DRP(설계된 반복 단백질) 기술을 지칭한다(참조: Binz et al., 2003. J Mol Biol. 332(2):489-503; Pluchthun, 2015. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 55:489-511).
"안티칼린"은 당업계에 익히 공지되어 있고, 다른 항체 모방 기술을 지칭하고, 여기서 결합 특이성은 리포칼린으로부터 유도된다(참조: Skerra, 2008. FEBS J. 275(ll):2677-83). 안티칼린은 또한 "듀오칼린"으로 칭명되는 이중 표적화 단백질로서 포맷화될 수 있다(참조: Schlehuber & Skerra, 2001. Biol Chem. 382(9):1335-42).
"아비머"는 당업계에 익히 공지되어 있고, 다른 항체 모방 기술을 지칭한다(참조: Silverman et al., 2005. Nat Biotechnol. 23(12):1556-61).
"베르사바디"는 당업계에 익히 공지되어 있고, 다른 항체 모방 기술을 지칭한다(참조: 특허 출원 US20070191272). 그들은 >15% 시스테인을 갖는 3-5 kDa의 작은 단백질이며, 이는 높은 디설파이드 밀도 스캐폴드를 형성하여 전형적인 단백질이 갖는 소수성 코어를 대체시킨다. 소수성 코어를 포함하는 다수의 소수성 아미노산을 소수의 디설파이드로 대체하면 대부분 MHC 제시에 기여하는 잔기가 소수성이기 때문에, 더 작고, 보다 친수성이며(덜 응집 및 비특이적 결합), 프로테아제 및 열에 더 내성이며, T 세포 에피토프의 더 낮은 밀도를 갖는 단백질을 초래한다. 이러한 특성 4개 모두는 면역원성에 영향을 미치는 것으로 익히 공지되어 있고, 그들은 함께 면역원성의 큰 감소를 일으킬 것으로 예상된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 또한 다중특이적 항체 또는 이의 결합 단편을 포함하고, 즉 하나 이상의, 예를 들어, 적어도 2개의 상이한 항원에 대해 면역특이적이고, 이중 하나는 본 발명에 따르는 hCD45RC이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 또한 동일하든 상이하든, 직접 또는 간접적으로 함께 공유결합되든 항체 또는 이의 결합 단편, 즉 1개 이상, 예를 들어, 적어도 2개의 항체 또는 이의 결합 단편의 중합체를 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 치료제에 추가로 접합된 상기 항체 또는 이의 결합 단편을 포함하는 면역접합체이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 이미징제에 추가로 접합된 상기 항체 또는 이의 결합 단편을 포함하는 접합체이다. 상기 접합체는, 예를 들어, 이미징 적용을 위해 사용될 수 있다.
다음에서, 그리고 달리 명시적으로 언급되지 않는 한, CDR 넘버링 및 정의는 카바트/초티아 정의에 따른다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 가변 영역(본원에서 HCVR 또는 VH로서 약칭됨)을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (식별번호 1);
V H -CDR2: X1-IF-X2-GG-X3-Y-X4-N-X5-X6-X7-X8-X9-X10-G (식별번호 2); 및
V H -CDR3: RNFDY (식별번호 3),
여기서,
X1은 Asp (D), Ile (I) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X2는 Pro (P) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X3은 Asp (D), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고;
X4는 Ala (A) 및 Thr (T)로부터 선택되고;
X5는 Ser (S) 및 Tyr (Y)로부터 선택되고;
X6은 Asn (N), Ala (A) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X7은 Glu (E), Asp (D), Pro (P) 및 Gln (Q)로부터 선택되고;
X8은 Lys (K) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X9는 Phe (F) 및 Val (V)로부터 선택되고;
X10은 Lys (K) 및 Gln (Q)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 DIFPGGDYANSNEKFKG와 함께 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: X1-IF-X2-GG-X3-Y-X4-N-X5-X6-X7-X8-X9-X10-G (서열번호 2); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3),
여기서,
X1은 Asp (D), Ile (I) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X2는 Pro (P) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X3은 Asp (D), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고;
X4는 Ala (A) 및 Thr (T)로부터 선택되고;
X5는 Ser (S) 및 Tyr (Y)로부터 선택되고;
X6은 Asn (N), Ala (A) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X7은 Glu (E), Asp (D), Pro (P) 및 Gln (Q)로부터 선택되고;
X8은 Lys (K) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X9는 Phe (F) 및 Val (V)로부터 선택되고;
X10은 Lys (K) 및 Gln (Q)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGDYANSNEKFKG (서열번호 4); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGDYANSNEKFKG (서열번호 4); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGDYANSNEKVKG (서열번호 5); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGDYANSNEKVKG (서열번호 5); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGGYTNYAEKFQG (서열번호 6); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGGYTNYAEKFQG (서열번호 6); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGSYTNYSESFQG (서열번호 7); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGSYTNYSESFQG (서열번호 7); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGSYTNYADSVKG (서열번호 8); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGSYTNYADSVKG (서열번호 8); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: RIFPGGGYTNYAQKFQG (서열번호 9); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: RIFPGGGYTNYAQKFQG (서열번호 9); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: IIFPGGSYTNYSPSFQG (서열번호 10); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: IIFPGGSYTNYSPSFQG (서열번호 10); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFSGGSYTNYADSVKG (서열번호 11); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
*하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFSGGSYTNYADSVKG (서열번호 11); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGDYTNYAEKFQG (서열번호 100); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGDYTNYAEKFQG (서열번호 100); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGGYANYAEKFQG (서열번호 116); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGGYANYAEKFQG (서열번호 116); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGGYTNYAEKFKG (서열번호 117); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGGYTNYAEKFKG (서열번호 117); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGGYTNYNEKFQG (서열번호 118); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGGYTNYNEKFQG (서열번호 118); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGGYTNSAEKFQG (서열번호 119); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: DIFPGGGYTNSAEKFQG (서열번호 119); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 경쇄 가변 영역(본원에서 LCVR 또는 VL로서 약칭됨)을 포함한다:
V L -CDR1: X11-ASSSVS-X12-YMH (서열번호 12);
*V L -CDR2: X13-TSN-X14-X15-X16 (서열번호 13); 및
V L -CDR3: X17-QRSSYPLTF (서열번호 14),
여기서,
X11은 Ser (S) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고;
X13은 Asn (N) 및 Ala (A)로부터 선택되거나; X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이고;
X14는 Leu (L), Ser (S) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X15는 Pro (P), Ala (A) 및 Gln (Q)로부터 선택되고;
X16은 Ser (S) 및 Thr (T)로부터 선택되고;
X17은 Gln (Q) 및 His (H)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: X11-ASSSVS-X12-YMH (서열번호 12);
V L -CDR2: X13-TSN-X14-X15-X16 (서열번호 13); 및
V L -CDR3: X17-QRSSYPLTF (서열번호 14),
여기서,
X11은 Ser (S) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고;
X13은 Asn (N) 및 Ala (A)로부터 선택되거나; X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이고;
X14는 Leu (L), Ser (S) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X15는 Pro (P), Ala (A) 및 Gln (Q)로부터 선택되고;
X16은 Ser (S) 및 Thr (T)로부터 선택되고;
X17은 Gln (Q) 및 His (H)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: X11-ASSSVS-X12-YMH (서열번호 12);
V L -CDR2: X13-TSN-X14-X15-X16 (서열번호 13); 및
V L -CDR3: X17-QRSSYPLTF (서열번호 14),
여기서,
X11은 Ser (S)이고;
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고;
X13은 Asn (N)이거나; X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이고;
X14는 Leu (L)이고;
X15는 Pro (P)이고;
X16은 Ser (S)이고;
X17은 Gln (Q)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: X11-ASSSVS-X12-YMH (서열번호 12);
V L -CDR2: X13-TSN-X14-X15-X16 (서열번호 13); 및
V L -CDR3: X17-QRSSYPLTF (서열번호 14),
여기서,
X11은 Ser (S)이고;
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고;
X13은 Asn (N)이거나; X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이고;
X14는 Leu (L)이고;
X15는 Pro (P)이고;
X16은 Ser (S)이고;
X17은 Gln (Q)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: SASSSVS-X12-YMH (서열번호 15);
V L -CDR2: NTSNLPS (서열번호 16); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: SASSSVS-X12-YMH (서열번호 15);
V L -CDR2: NTSNLPS (서열번호 16); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: SASSSVSYMH (서열번호 15);
V L -CDR2: NTSNLPS (서열번호 16); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: SASSSVSYMH (서열번호 15);
V L -CDR2: NTSNLPS (서열번호 16); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: SASSSVS-X12-YMH (서열번호 15);
V L -CDR2: NTSNLPS (서열번호 16); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12은 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: SASSSVS-X12-YMH (서열번호 15);
V L -CDR2: NTSNLPS (서열번호 16); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNLPS (서열번호 16); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNLPS (서열번호 16); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNLPS (서열번호 16); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNLPS (서열번호 16); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNLPS (서열번호 16); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNLPS (서열번호 16); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNSPS (서열번호 19); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNSPS (서열번호 19); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNSPS (서열번호 19); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNSPS (서열번호 19); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNSPS (서열번호 19); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNSPS (서열번호 19); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: ATSNLQS (서열번호 20); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: ATSNLQS (서열번호 20); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: ATSNLQS (서열번호 20); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: ATSNLQS (서열번호 20); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: ATSNLQS (서열번호 20); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: ATSNLQS (서열번호 20); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNSPS (서열번호 19); 및
V L -CDR3: HQRSSYPLTF (서열번호 21),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNSPS (서열번호 19); 및
V L -CDR3: HQRSSYPLTF (서열번호 21),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNSPS (서열번호 19); 및
V L -CDR3: HQRSSYPLTF (서열번호 21).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNSPS (서열번호 19); 및
V L -CDR3: HQRSSYPLTF (서열번호 21).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNSPS (서열번호 19); 및
V L -CDR3: HQRSSYPLTF (서열번호 21),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNSPS (서열번호 19); 및
V L -CDR3: HQRSSYPLTF (서열번호 21),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNRAT (서열번호 22); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNRAT (서열번호 22); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNRAT (서열번호 22); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNRAT (서열번호 22); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNRAT (서열번호 22); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: NTSNRAT (서열번호 22); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: ATSNLPS (서열번호 111); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: ATSNLPS (서열번호 111); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: ATSNLPS (서열번호 111); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: ATSNLPS (서열번호 111); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: ATSNLPS (서열번호 111); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: ATSNLPS (서열번호 111); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: SASSSVS-X12-YMH (서열번호 15);
V L -CDR2: NTANLPS (서열번호 120); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: SASSSVS-X12-YMH (서열번호 15);
V L -CDR2: NTANLPS (서열번호 120); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: SASSSVS-X12-YMH (서열번호 15);
V L -CDR2: NTANLPS (서열번호 120); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: SASSSVS-X12-YMH (서열번호 15);
V L -CDR2: NTANLPS (서열번호 120); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: SASSSVS-X12-YMH (서열번호 15);
V L -CDR2: NTANLPS (서열번호 120); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: SASSSVS-X12-YMH (서열번호 15);
V L -CDR2: NTANLPS (서열번호 120); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: X13-TSNLPS (서열번호 127); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고,
X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: X13-TSNLPS (서열번호 127); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고,
X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: X13-TSNLPS (서열번호 127); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
여기서,
X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVSYMH (서열번호 18);
V L -CDR2: X13-TSNLPS (서열번호 127); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17).
여기서,
X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: X13-TSNLPS (서열번호 127); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고,
X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -CDR1: RASSSVS-X12-YMH (서열번호 18);
V L -CDR2: X13-TSNLPS (서열번호 127); 및
V L -CDR3: QQRSSYPLTF (서열번호 17),
여기서,
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고,
X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
* V H -CDR2: X1-IF-X2-GG-X3-Y-X4-N-X5-X6-X7-X8-X9-X10-G (서열번호 2); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3); 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
V L -CDR1: X11-ASSSVS-X12-YMH (서열번호 12);
V L -CDR2: X13-TSN-X14-X15-X16 (서열번호 13); 및
V L -CDR3: X17-QRSSYPLTF (서열번호 14),
여기서,
X1은 Asp (D), Ile (I) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X2는 Pro (P) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X3은 Asp (D), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고;
X4는 Ala (A) 및 Thr (T)로부터 선택되고;
X5는 Ser (S) 및 Tyr (Y)로부터 선택되고;
X6은 Asn (N), Ala (A) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X7은 Glu (E), Asp (D), Pro (P) 및 Gln (Q)로부터 선택되고;
X8은 Lys (K) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X9는 Phe (F) 및 Val (V)로부터 선택되고;
X10은 Lys (K) 및 Gln (Q)로부터 선택되고;
*X11은 Ser (S) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고;
X13은 Asn (N) 및 Ala (A)로부터 선택되거나; X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이고;
X14는 Leu (L), Ser (S) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X15는 Pro (P), Ala (A) 및 Gln (Q)로부터 선택되고;
X16은 Ser (S) 및 Thr (T)로부터 선택되고;
X17은 Gln (Q) 및 His (H)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
V H -CDR1: NYYIG (서열번호 1);
V H -CDR2: X1-IF-X2-GG-X3-Y-X4-N-X5-X6-X7-X8-X9-X10-G (서열번호 2); 및
V H -CDR3: RNFDY (서열번호 3); 및
- 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
V L -CDR1: X11-ASSSVS-X12-YMH (서열번호 12);
V L -CDR2: X13-TSN-X14-X15-X16 (서열번호 13); 및
V L -CDR3: X17-QRSSYPLTF (서열번호 14),
여기서,
X1은 Asp (D), Ile (I) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X2는 Pro (P) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
*X3은 Asp (D), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고;
X4는 Ala (A) 및 Thr (T)로부터 선택되고;
X5는 Ser (S) 및 Tyr (Y)로부터 선택되고;
X6은 Asn (N), Ala (A) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X7은 Glu (E), Asp (D), Pro (P) 및 Gln (Q)로부터 선택되고;
X8은 Lys (K) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X9는 Phe (F) 및 Val (V)로부터 선택되고;
X10은 Lys (K) 및 Gln (Q)로부터 선택되고;
X11은 Ser (S) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고;
X13은 Asn (N) 및 Ala (A)로부터 선택되거나; X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이고;
X14는 Leu (L), Ser (S) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X15는 Pro (P), Ala (A) 및 Gln (Q)로부터 선택되고;
X16은 Ser (S) 및 Thr (T)로부터 선택되고;
X17은 Gln (Q) 및 His (H)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같다.
Figure pct00011
Figure pct00012
Figure pct00013
하나의 구현예에서, 상기 정의된 바와 같은 임의의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3, VL-CDR1, VL-CDR2 및/또는 VL-CDR3은 상이한 아미노산에 의해 치환되는 1, 2, 3, 4, 5개 이상의 아미노산을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 상기 정의된 바와 같은 임의의 VH-CDR1, VH-CDR2, VH-CDR3, VL-CDR1, VL-CDR2 및/또는 VL-CDR3은 상기 정의된 바와 같은 특정 CDR 또는 CDR의 세트와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 아미노산 서열을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #1, #2, #7, #14, #20, #26, #49, #50, #63, #65, #72, #79, #86 및 #92로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #1, #2, #7, #14, #20, #26, #49, #50, #63, #65, #72, #79, #86 및 #92로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
서열번호 1의 서열의 V H -CDR1;
서열번호 4, 5, 6, 7, 8, 100, 116, 117, 118 및 119의 서열을 포함하거나 이들로 구성되는 그룹으로부터 선택된 V H -CDR2; 및
서열번호 3의 서열의 V H -CDR3; 및
- 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
서열번호 15 및 18의 서열을 포함하거나 이들로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 V L -CDR1(여기서, X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다);
서열번호 16, 111 및 120의 서열을 포함하거나 이들로 구성되는 그룹으로부터 선택된 V L -CDR2; 및
서열번호 17의 서열의 V L -CDR3.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
서열번호 1의 서열의 V H -CDR1;
서열번호 4 및 5의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 V H -CDR2; 및
서열번호 3의 서열의 V H -CDR3; 및
- 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
서열번호 15의 서열의 V L -CDR1(여기서, X12는 부재이거나 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다);
서열번호 16의 서열의 V L -CDR2; 및
서열번호 17의 서열의 V L -CDR3.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
서열번호 1의 서열의 V H -CDR1;
서열번호 4, 5, 6 및 100의 서열을 포함하거나 이들로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 V H -CDR2; 및
서열번호 3의 서열의 V H -CDR3; 및
- 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
서열번호 15 및 18의 서열을 포함하거나 이들로 구성되는 그룹으로부터 선택되는의 V L -CDR1(여기서, X12는 부재이거나 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다);
서열번호 16의 서열의 V L -CDR2; 및
서열번호 17의 서열의 V L -CDR3.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
서열번호 1의 서열의 V H -CDR1;
서열번호 4, 6 및 100의 서열을 포함하거나 이들로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 V H -CDR2; 및
서열번호 3의 서열의 V H -CDR3; 및
- 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
서열번호 15 및 18의 서열을 포함하거나 이들로 구성되는 그룹으로부터 선택되는의 V L -CDR1(여기서, X12는 부재이거나 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다);
서열번호 16의 서열의 V L -CDR2; 및
서열번호 17의 서열의 V L -CDR3.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #1이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #1이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 4 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 15, 16 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 15에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #2이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #2이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 4 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 18, 16 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 18에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #7이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #7이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 5 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 15, 16 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 15에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #14이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #14이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 6 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 18, 16 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 18에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #20이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #20이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 7 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 18, 16 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 18에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #26이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #26이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 8 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 18, 16 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 18에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #49이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #49이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 100 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 15, 16 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 15에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #50이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #50이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 100 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 18, 16 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 18에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #63이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #63이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 100 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 18, 111 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 18에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #65이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #65이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 116 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 18, 16 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 18에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #72이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #72이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 117 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 18, 16 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 18에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #79이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #79이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 118 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 18, 16 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 18에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #86이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #86이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 119 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 18, 16 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 18에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #92이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 정의된 바와 같은 조합 #92이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 서열번호 1, 4 및 3으로서 제시된 3개의 HCVR의 CDR; 및 (ii) 서열번호 15, 120 및 17로서 제시된 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 여기서 서열번호 15에서 X12는 부재이거나, Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, 바람직하게는 X12는 부재이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 프레임워크 영역(FR)을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: QVQLQQSGAELVRPGTSVKMSCKAAGYTFT (서열번호 25);
V H -FR2: WVKQRPGHGLEWIG (서열번호 26);
V H -FR3: KATLTADTSSSTAYMQLSSLTSEDSAIYYCVR (서열번호 27);
V H -FR4: WGQGTTLTVSS (서열번호 28).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: QVQLQQSGAELVRPGTSVKMSCKAAGYTFT (서열번호 25);
V H -FR2: WVKQRPGHGLEWIG (서열번호 26);
V H -FR3: KATLTADTSSSTAYMQLSSLTSEDSAIYYCVR (서열번호 27);
V H -FR4: WGQGTTLTVSS (서열번호 28).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFT (서열번호 29);
V H -FR2: WVRQAPGQGLEWIG (서열번호 30);
V H -FR3: RVTLTADTSISTAYMELSRLRSDDTVVYYCVR (서열번호 31);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFT (서열번호 29);
V H -FR2: WVRQAPGQGLEWIG (서열번호 30);
V H -FR3: RVTLTADTSISTAYMELSRLRSDDTVVYYCVR (서열번호 31);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKASGYTFT (서열번호 33);
V H -FR2: WVRQMPGKGLEWIG (서열번호 34);
V H -FR3: QVTLSADKSISTAYLQLSSLKASDTAMYYCVR (서열번호 35);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKASGYTFT (서열번호 33);
V H -FR2: WVRQMPGKGLEWIG (서열번호 34);
V H -FR3: QVTLSADKSISTAYLQLSSLKASDTAMYYCVR (서열번호 35);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: QVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGYTFT (서열번호 36);
V H -FR2: WIRQAPGKGLEWIG (서열번호 37);
V H -FR3: RFTLSADTAKNSAYLQMNSLRAEDTAVYYCVR (서열번호 38);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: QVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGYTFT (서열번호 36);
V H -FR2: WIRQAPGKGLEWIG (서열번호 37);
V H -FR3: RFTLSADTAKNSAYLQMNSLRAEDTAVYYCVR (서열번호 38);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYTFT (서열번호 39);
V H -FR2: WVRQMPGKGLEWIG (서열번호 34);
V H -FR3: QVTLSADKSISTAYLQLSSLKASDTAMYYCVR (서열번호 35);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYTFT (서열번호 39);
V H -FR2: WVRQMPGKGLEWIG (서열번호 34);
V H -FR3: QVTLSADKSISTAYLQLSSLKASDTAMYYCVR (서열번호 35);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: QVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS (서열번호 40);
V H -FR2: WIRQAPGKGLEWIG (서열번호 37);
V H -FR3: RFTLSADTAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCVR (서열번호 41);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: QVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS (서열번호 40);
V H -FR2: WIRQAPGKGLEWIG (서열번호 37);
V H -FR3: RFTLSADTAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCVR (서열번호 41);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYSFT (서열번호 42);
V H -FR2: WVRQMPGKGLEWIG (서열번호 34);
V H -FR3: QVTLSADKSISTAYLQLSSLKASDTAMYYCVR (서열번호 35);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYSFT (서열번호 42);
V H -FR2: WVRQMPGKGLEWIG (서열번호 34);
V H -FR3: QVTLSADKSISTAYLQLSSLKASDTAMYYCVR (서열번호 35);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: QVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS (서열번호 40);
V H -FR2: WIRQAPGKGLEWVG (서열번호 43);
V H -FR3: RFTLSADTAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCVR (서열번호 41);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR을 포함한다:
V H -FR1: QVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS (서열번호 40);
V H -FR2: WIRQAPGKGLEWVG (서열번호 43);
V H -FR3: RFTLSADTAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCVR (서열번호 41);
V H -FR4: WGQGTLVTVSS (서열번호 32).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: QIVLTQSPTIMSASPGEKVTITC (서열번호 44);
V L -FR2: WFQQKTGTSPRLWIY (서열번호 45);
V L -FR3: GVPARFSGSGSGTS-X18-SLTISRMEAEDAATYYC (서열번호 46);
V L -FR4: GAGTKLELK (서열번호 47),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Tyr (Y)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: QIVLTQSPTIMSASPGEKVTITC (서열번호 44);
V L -FR2: WFQQKTGTSPRLWIY (서열번호 45);
V L -FR3: GVPARFSGSGSGTS-X18-SLTISRMEAEDAATYYC (서열번호 46);
V L -FR4: GAGTKLELK (서열번호 47)
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Tyr (Y)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITC (서열번호 48);
V L -FR2: WFQQKPGKAPKLWIY (서열번호 49);
V L -FR3: GVPSRFSGSGSGTE-X18-TLTISSLQPEDFATYYC (서열번호 50);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Tyr (Y)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITC (서열번호 48);
V L -FR2: WFQQKPGKAPKLWIY (서열번호 49);
V L -FR3: GVPSRFSGSGSGTE-X18-TLTISSLQPEDFATYYC (서열번호 50);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Tyr (Y)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITC (서열번호 52);
V L -FR2: WFQQKPDQSPKLWIY (서열번호 53);
V L -FR3: GVPSRFSGSGSGTD-X18-TLTINSLEAEDAATYYC (서열번호 54);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Tyr (Y)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITC (서열번호 52);
V L -FR2: WFQQKPDQSPKLWIY (서열번호 53);
V L -FR3: GVPSRFSGSGSGTD-X18-TLTINSLEAEDAATYYC (서열번호 54);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Tyr (Y)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: EIVLTQSPATLSLSPGERATLSC (서열번호 55);
V L -FR2: WFQQKPGQAPRLWIY (서열번호 56);
V L -FR3: GIPARFSGSGSGTD-X18-TLTISSLEPEDFAVYYC (서열번호 57);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Tyr (Y)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: EIVLTQSPATLSLSPGERATLSC (서열번호 55);
V L -FR2: WFQQKPGQAPRLWIY (서열번호 56);
V L -FR3: GIPARFSGSGSGTD-X18-TLTISSLEPEDFAVYYC (서열번호 57);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Tyr (Y)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITC (서열번호 48);
V L -FR2: WYQQKPGKAPKLWIY (서열번호 58);
V L -FR3: GVPSRFSGSGSGTE-X18-TLTISSLQPEDFATYYC (서열번호 50);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Tyr (Y)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITC (서열번호 48);
V L -FR2: WYQQKPGKAPKLWIY (서열번호 58);
V L -FR3: GVPSRFSGSGSGTE-X18-TLTISSLQPEDFATYYC (서열번호 50);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Tyr (Y)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITC (서열번호 48);
V L -FR2: WYQQKPGKAPKLWIY (서열번호 58);
V L -FR3: GVPSRFSGSGSGTE-X18-TLTISSLQPEDFATYYC (서열번호 50);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Phe (F)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITC (서열번호 48);
V L -FR2: WYQQKPGKAPKLWIY (서열번호 58);
V L -FR3: GVPSRFSGSGSGTE-X18-TLTISSLQPEDFATYYC (서열번호 50);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Phe (F)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITC (서열번호 52);
V L -FR2: WYQQKPDQSPKLWIY (서열번호 59);
V L -FR3: GVPSRFSGSGSGTD-X18-TLTINSLEAEDAATYYC (서열번호 54);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Phe (F)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITC (서열번호 52);
V L -FR2: WYQQKPDQSPKLWIY (서열번호 59);
V L -FR3: GVPSRFSGSGSGTD-X18-TLTINSLEAEDAATYYC (서열번호 54);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Phe (F)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: EIVLTQSPATLSLSPGERATLSC (서열번호 55);
V L -FR2: WYQQKPGQAPRLWIY (서열번호 60);
V L -FR3: GIPARFSGSGSGTD-X18-TLTISSLEPEDFAVYYC (서열번호 57);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Phe (F)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: EIVLTQSPATLSLSPGERATLSC (서열번호 55);
V L -FR2: WYQQKPGQAPRLWIY (서열번호 60);
V L -FR3: GIPARFSGSGSGTD-X18-TLTISSLEPEDFAVYYC (서열번호 57);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Phe (F)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITC (서열번호 48);
V L -FR2: WFQQKPGKAPKLWIY (서열번호 49);
V L -FR3: GVPSRFSGSGSGTE-X18-TLTISSLQPEDFATYYC (서열번호 50);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Phe (F)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR을 포함한다:
V L -FR1: DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITC (서열번호 48);
V L -FR2: WFQQKPGKAPKLWIY (서열번호 49);
V L -FR3: GVPSRFSGSGSGTE-X18-TLTISSLQPEDFATYYC (서열번호 50);
V L -FR4: GGGTKVEIK (서열번호 51),
여기서,
X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택되고, 바람직하게는 X18은 Phe (F)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 HCVR의 FR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 LCVR의 FR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 3에 정의된 바와 같다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 4개의 HCVR의 FR 및 (ii) 4개의 LCVR의 FR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 3에 정의된 바와 같다.
Figure pct00014
Figure pct00015
하나의 구현예에서, 상기 정의된 바와 같은 임의의 VH-FR1, VH-FR2, VH-FR3, VH-FR4, VL-FR1, VL-FR2, VL-FR3 및/또는 VL-FR4는 상이한 아미노산으로 치환되는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 이상의 아미노산을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 상기 정의된 바와 같은 임의의 VH-FR1, VH-FR2, VH-FR3, VH-FR4, VL-FR1, VL-FR2, VL-FR3 및/또는 VL-FR4는 상기 정의된 바와 같은 특정 FR 또는 FR의 세트와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 아미노산 서열을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다:
- 상기 정의된 바와 같은 VH-FR1,
- 상기 정의된 바와 같은 VH-CDR1,
- 상기 정의된 바와 같은 VH-FR2,
- 상기 정의된 바와 같은 VH-CDR2,
- 상기 정의된 바와 같은 VH-FR3,
- 상기 정의된 바와 같은 VH-CDR3, 및
- 상기 정의된 바와 같은 VH-FR4.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다:
- 서열번호 25, 29, 33, 36, 39, 40 및 42로부터 선택되는 VH-FR1;
- 서열번호 1로부터 선택되는 VH-CDR1;
- 서열번호 26, 30, 34, 37 및 43으로부터 선택되는 VH-FR2;
- 서열번호 2로부터 선택되는 VH-CDR2;
- 서열번호 27, 31, 35, 38 및 41로부터 선택되는 VH-FR3;
- 서열번호 3으로부터 선택되는 VH-CDR3; 및
- 서열번호 28 및 32로부터 선택되는 VH-FR4.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다:
- 서열번호 25, 29, 33, 36, 39, 40 및 42로부터 선택되는 VH-FR1;
- 서열번호 1로부터 선택되는 VH-CDR1;
- 서열번호 26, 30, 34, 37 및 43으로부터 선택되는 VH-FR2;
- 서열번호 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 100, 116, 117, 118 및 119로부터 선택되는 VH-CDR2;
- 서열번호 27, 31, 35, 38 및 41로부터 선택되는 VH-FR3;
- 서열번호 3으로부터 선택되는 VH-CDR3; 및
- 서열번호 28 및 32로부터 선택되는 VH-FR4.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 VH-FR1, VH-CDR1, VH-FR2, VH-CDR2, VH-FR3, VH-CDR3 및 VH-FR4의 조합을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함하고, 상기 조합은 표 4에 정의된 바와 같다.
Figure pct00016
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 61의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00017
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 62의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00018
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 63의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00019
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 64의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00020
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 65의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00021
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 66의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00022
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 67의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00023
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 68의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00024
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 69의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00025
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 70의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00026
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 101의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00027
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 121의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00028
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 122의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00029
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 123의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00030
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 또는 서열번호 124의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR을 포함한다.
Figure pct00031
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함하거나 이들로 구성되는 LCVR을 포함한다:
- 상기 기재된 바와 같은 VL-FR1,
- 상기 기재된 바와 같은 VL-CDR1,
- 상기 기재된 바와 같은 VL-FR2,
*- 상기 기재된 바와 같은 VL-CDR2,
- 상기 기재된 바와 같은 VL-FR3,
- 상기 기재된 바와 같은 VL-CDR3, 및
- 상기 기재된 바와 같은 VL-FR4.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함하거나 이들로 구성되는 HCVR을 포함한다:
- 서열번호 44, 48, 52 및 55로부터 선택된 VL-FR1;
- 서열번호 12로부터 선택된 VL-CDR1;
- 서열번호 45, 49, 53, 56, 58, 59 및 60으로부터 선택된 VL-FR2;
- 서열번호 13으로부터 선택된 VL-CDR2;
- 서열번호 46, 50, 54 및 57로부터 선택된 VL-FR3;
- 서열번호 14로부터 선택된 VL-CDR3; 및
- 서열번호 47 및 51로부터 선택된 VL-FR4.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함하거나 이들로 구성되는 HCVR을 포함한다:
- 서열번호 44, 48, 52 및 55로부터 선택된 VL-FR1;
- 서열번호 15 및 18로부터 선택된 VL-CDR1;
- 서열번호 45, 49, 53, 56, 58, 59 및 60으로부터 선택된 VL-FR2;
- 서열번호 16, 19, 20, 22, 111 및 120으로부터 선택된 VL-CDR2;
*- 서열번호 46, 50, 54 및 57로부터 선택된 VL-FR3;
- 서열번호 17 및 21로부터 선택된 VL-CDR3; 및
- 서열번호 47 및 51로부터 선택된 VL-FR4.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 VL-FR1, VL-CDR1, VL-FR2, VL-CDR2, VL-FR3, VL-CDR3 및 VL-FR4의 조합을 포함하거나 이로 구성된 LCVR을 포함하고, 상기 조합은 표 5에 정의된 바와 같다.
Figure pct00032
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 상기 정의된 바와 같은 VL-FR1, VL-CDR1, VL-FR2, VL-CDR2, VL-FR3, VL-CDR3 및 VL-FR4의 조합을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함하고, 여기서 X12가 부재가 아닌 경우(즉, X12가 임의의 Asn (N), Ser (S) 또는 Gly (G)인 경우), X18은 Phe (F)이다. 하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 상기 정의된 바와 같은 VL-FR1, VL-CDR1, VL-FR2, VL-CDR2, VL-FR3, VL-CDR3 및 VL-FR4의 조합을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함하고, 여기서 X12가 부재인 경우, X18은 Tyr (Y) 및 Phe (F)로부터 선택된다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되는 서열번호 71의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 71의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00033
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되는 서열번호 72의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 72의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00034
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되는 서열번호 73의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 73의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00035
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되는 서열번호 74의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 74의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00036
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되는 서열번호 75의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 75의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00037
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되는 서열번호 76의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 76의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00038
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되는 서열번호 77의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 77의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00039
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되는 서열번호 78의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 78의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00040
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되는 서열번호 79의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 79의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00041
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되는 서열번호 80의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 80의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00042
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되는 서열번호 102의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 102의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00043
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되는 서열번호 112의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 112의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00044
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되는 서열번호 125의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 125의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00045
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, X13이 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)인 서열번호 128의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 128의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00046
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 71-80, 102, 112, 125 또는 128의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 부재이다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 81의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 81의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00047
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 82의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 82의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00048
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 83의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 83의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00049
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 84의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 84의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00050
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 85의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 85의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00051
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 86의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 86의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00052
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 87의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 87의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00053
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 88의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 88의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00054
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 89의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 89의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00055
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 90의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 90의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00056
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 103의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 103의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00057
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 113의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 113의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00058
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 126의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 126의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00059
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 X13이 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)인 서열번호 129의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR; 또는 서열번호 129의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR을 포함한다.
Figure pct00060
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 상기 정의된 바와 같은 HCVR; 및
- 상기 정의된 바와 같은 LCVR.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 서열번호 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 101, 121, 122, 123 및 124로부터 선택된 HCVR; 또는 서열번호 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 101, 121, 122, 123 또는 124의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 및
- X12가 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, X13이 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)인 서열번호 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 102, 112, 125 및 128로부터 선택된 LCVR; 또는 서열번호 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 102, 112, 125 또는 128의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 서열번호 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 101, 121, 122, 123 및 124로부터 선택된 HCVR; 또는 서열번호 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 101, 121, 122, 123 또는 124의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCVR; 및
- X13이 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)인 서열번호 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 103, 113, 126 및 129로부터 선택된 LCVR; 또는 서열번호 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 103, 113, 126 또는 129의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCVR.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호61의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호61의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호61의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호61의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호61의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호61의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호61의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호61의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호61의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호61의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호61의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호61의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호61의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호62의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호62의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호62의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호62의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호62의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호62의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호62의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호62의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호62의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호62의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호62의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호62의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호62의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호63의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호63의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호63의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호63의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호63의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호63의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호63의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호63의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호63의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호63의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호63의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호63의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호63의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호64의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호64의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호64의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호64의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호64의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호64의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호64의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호64의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호64의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호64의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호64의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호64의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호64의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호65의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호65의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호65의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호65의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호65의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호65의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호65의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호65의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호65의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호65의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호65의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호65의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호65의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호66의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호66의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호66의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호66의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호66의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호66의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호66의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호66의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호66의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호66의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호66의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호66의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호66의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호67의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호67의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호67의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호67의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호67의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호67의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호67의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호67의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호67의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호67의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호67의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호67의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호67의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호68의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호68의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호68의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호68의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호68의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호68의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호68의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호68의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호68의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호68의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호68의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호68의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호68의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호69의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호69의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호69의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호69의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호69의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호69의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호69의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호69의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호69의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호69의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호69의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호69의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호69의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호70의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호70의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호70의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호70의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호70의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호70의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호70의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호70의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호70의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호70의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호70의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호70의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호70의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호101의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호101의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호101의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호101의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호101의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호101의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호101의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호101의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호101의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호101의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호101의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호101의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호101의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호121의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호121의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호121의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호121의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호121의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호121의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호121의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호121의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호121의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호121의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호121의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호121의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호121의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호122의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호122의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호122의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호122의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호122의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호122의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호122의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호122의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호122의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호122의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호122의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호122의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호122의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호123의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호123의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호123의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호123의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호123의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호123의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호123의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호123의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호123의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호123의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호123의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호123의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호123의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호124의 HCVR 및 서열번호 71의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호124의 HCVR 및 서열번호 72의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호124의 HCVR 및 서열번호 73의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호124의 HCVR 및 서열번호 74의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호124의 HCVR 및 서열번호 75의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호124의 HCVR 및 서열번호 76의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호124의 HCVR 및 서열번호 77의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호124의 HCVR 및 서열번호 78의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호124의 HCVR 및 서열번호 79의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호124의 HCVR 및 서열번호 80의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호124의 HCVR 및 서열번호 102의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호124의 HCVR 및 서열번호 112의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호124의 HCVR 및 서열번호 125의 LCVR을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 gly (G)로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 61의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 62의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 63의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 64의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 65의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 66의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 67의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 68의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 69의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 70의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 101의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 121의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 122의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 123의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 HCVR 및 서열번호 81의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 HCVR 및 서열번호 82의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 HCVR 및 서열번호 83의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 HCVR 및 서열번호 84의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 HCVR 및 서열번호 85의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 HCVR 및 서열번호 86의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 HCVR 및 서열번호 87의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 HCVR 및 서열번호 88의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 HCVR 및 서열번호 89의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 HCVR 및 서열번호 90의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 HCVR 및 서열번호 103의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 HCVR 및 서열번호 113의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 124의 HCVR 및 서열번호 126의 LCVR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 상기 정의된 바와 같은 임의의 HCVR 및/또는 LCVR은 상이한 아미노산에 의해 치환되는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35개 이상의 아미노산을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 상기 정의된 바와 같은 임의의 HCVR 및/또는 LCVR의 비-CDR 영역의 서열은 상이한 아미노산에 의해 치환되는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35개 이상의 아미노산을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 상기 정의된 바와 같은 임의의 HCVR 및/또는 LCVR은 상기 정의된 바와 같은 특정 HCVR 및/또는 LCVR과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 아미노산 서열을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 상기 정의된 바와 같은 임의의 HCVR 및/또는 LCVR의 비-CDR 영역의 서열은 상기 정의된 바와 같은 특정 HCVR 및/또는 LCVR의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 아미노산 서열을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 완전 또는 실질적으로 완전 인간 중쇄 불변 영역(본원에서 HCCR 또는 CH로서 약칭됨) 및/또는 경쇄 불변 영역(본원에서 LCCR 또는 CL로서 약칭됨)을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 91의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCCR을 포함한다.
Figure pct00061
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 114의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCCR을 포함한다.
Figure pct00062
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 115의 서열을를 포함하거나 이로 구성되는 HCCR을 포함한다.
Figure pct00063
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 92의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCCR을 포함한다.
Figure pct00064
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 서열번호 91, 114 또는 115의 서열을 포함하거나 이들로 구성되는 HCCR; 및
- 서열번호 92의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCCR.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 서열번호 91의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCCR; 및
- 서열번호 92의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCCR.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 서열번호 114의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCCR; 및
- 서열번호 92의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCCR.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 서열번호 115의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCCR; 및
- 서열번호 92의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCCR.
하나의 구현예에서, 서열번호 91, 114 또는 115를 갖는 HCCR은 상이한 아미노산에 의해 치환되는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99개 이상의 아미노산을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 서열번호 92를 갖는 LCCR은 상이한 아미노산에 의해 치환되는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32개 이상의 아미노산을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 서열번호 91, 114 또는 115를 갖는 HCCR 및/또는 서열번호 92를 갖는 LCCR은 상이한 아미노산에 의해 치환되는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99개 이상의 아미노산을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 서열번호 91, 114 또는 115를 갖는 HCCR은 각각 서열번호 91, 114 또는 115와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 아미노산 서열을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 서열번호 92를 갖는 LCCR은 서열번호 92와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 아미노산 서열을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 서열번호 91, 114 또는 115를 갖는 HCCR 및/또는 서열번호 92를 갖는 LCCR은 각각 서열번호 91, 114 또는 115 및/또는 서열번호 92와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 아미노산 서열을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 각각 서열번호 91, 114 또는 115 및/또는 서열번호 92의 아미노산 서열에 상동성인 아미노산 서열을 포함하는 HCCR 및 LCCR을 포함하고, 여기서 상기 항체 또는 이의 결합 단편은 목적하는 기능적 특성을 유지한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 상기 항체 또는 이의 결합 단편은 완전 또는 실질적으로 완전 뮤린 HCCR 및/또는 LCCR을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 93의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCCR을 포함한다.
Figure pct00065
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 94의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCCR을 포함한다.
Figure pct00066
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 서열번호 93의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 HCCR; 및
- 서열번호 94의 서열을 포함하거나 이로 구성되는 LCCR.
하나의 구현예에서, 서열번호 93을 갖는 HCCR은 상이한 아미노산에 의해 치환되는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97개 이상의 아미노산을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 서열번호 94를 갖는 LCCR은 상이한 아미노산에 의해 치환되는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32개 이상의 아미노산을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 서열번호 93을 갖는 HCCR 및/또는 서열번호 94를 갖는 LCCR은 상이한 아미노산에 의해 치환되는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97개 이상의 아미노산을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 서열번호 93을 갖는 HCCR은 서열번호 93과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 아미노산 서열을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 서열번호 94를 갖는 LCCR은 서열번호 94와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 아미노산 서열을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 서열번호 93을 갖는 HCCR 및/또는 서열번호 94를 갖는 LCCR은 각각 서열번호 93 및/또는 서열번호 94와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 아미노산 서열을 갖는 것으로 특성화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 각각 서열번호 93 및 서열번호 94의 아미노산 서열에 상동성인 아미노산 서열을 포함하는 HCCR 및 LCCR을 포함하고, 여기서 상기 항체 또는 이의 결합 단편은 목적하는 기능적 특성을 유지한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 단편이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 뮤린 항체 또는 이의 단편이다.
본원에 사용된 "뮤린 항체 또는 이의 결합 단편"은 가변 영역(CDR 및 FR을 포함함) 및 불변 영역이 마우스로부터 유래되는 항체 및 이의 결합 단편을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 뮤린 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 1, 2 및 3에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR; 및/또는 서열번호 12, 13 및 14에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR을 포함하고, 여기서, 적용 가능한 경우, X12는 부재이다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 뮤린 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 1, 4 및 3에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR; 및/또는 서열번호 15, 16 및 17에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR을 포함하고, 여기서, 적용 가능한 경우, X12는 부재이다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 뮤린 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 25, 26, 27 및 28에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 HCVR의 FR; 및/또는 서열번호 44, 45, 46 및 47에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 LCVR의 FR을 추가로 포함할 수 있고, 여기서, 적용 가능한 경우, X18은 Tyr (Y)이다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 뮤린 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 61에 제시된 HCVR; 및/또는 서열번호 71 또는 81에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 뮤린 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 93에 제시된 HCCR; 및/또는 서열번호 94에 제시된 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 뮤린 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 61에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 93에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 뮤린 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 71 또는 81에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 94에 제시된 불변 영역을 포함하는 경쇄를 포함할 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 키메라 항체 또는 이의 결합 단편이다.
본원에 사용된 바와 같이, "키메라 항체 또는 이의 결합 단편"은 광범위하게 자연에서 자연적으로 연결되지 않는 제2 아미노산 서열에 연결된 제1 아미노산 서열을 포함하는 항체 또는 이의 결합 단편을 지칭한다. 아미노산 서열은 일반적으로 융합 단백질에서 함께 가져온 별개의 단백질로서 존재할 수 있거나, 그들은 일반적으로 동일한 단백질에 존재할 수 있지만, 융합 단백질에서 새로운 배열로 배치된다. 키메라 단백질은, 예를 들어, 화학적 합성에 의해 또는 펩티드 영역이 목적하는 관계로 인코딩되는 폴리뉴클레오티드를 생성하고 번역함으로써 생성될 수 있다. 용어 "키메라 항체 또는 이의 결합 단편"은 본원에서
(a) 불변 영역 또는 이의 일부가, 가변 영역이 상이한 또는 변경된 부류, 이펙터 기능 및/또는 종, 또는 키메라 항체, 예를 들어, 효소, 독소, 호르몬, 성장 인자, 약물 등에 새로운 특성을 부여하는 완전히 상이한 분자의 불변 영역에 연결되도록 변경, 대체되거나 교환되고; 또는
(b) 가변 영역 또는 이의 일부가 상이하거나 변경된 항원 특이성을 갖는 가변 영역 또는 이의 일부로, 또는 다른 종 또는 다른 항체 부류 또는 하위부류로부터 상응하는 서열로 변경, 대체되거나 교환되는 항체 또는 이의 결합 단편을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 인간 불변 영역 및 뮤린 가변 영역(뮤린 CDR 및 뮤린 FR 포함)을 포함하는 중쇄 및/또는 경쇄를 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 인간 중쇄와 뮤린 경쇄; 또는 뮤린 중쇄와 인간 경쇄를 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 1, 2 및 3에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR; 및/또는 서열번호 12, 13 및 14에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR을 포함한다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 1, 4 및 3에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR; 및/또는 서열번호 15, 16 및 17에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR을 포함한다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 1, 4 및 3에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR; 및/또는 각각 서열번호 18, 111 또는 120, 및 17에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR을 포함한다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 25, 26, 27 및 28에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 HCVR의 FR; 및/또는 서열번호 44, 45, 46 및 47에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 LCVR의 FR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 25, 26, 27 및 28에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 HCVR의 FR; 및/또는 서열번호 48, 58, 50 및 51에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 LCVR의 FR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 61에 제시된 HCVR; 및/또는 서열번호 71 또는 81에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 61에 제시된 HCVR; 및/또는 서열번호 112, 113, 125, 126, 128 또는 129에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 91, 114 또는 115에 제시된 인간 HCCR; 및/또는 서열번호 92에 제시된 인간 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 91에 제시된 인간 HCCR; 및/또는 서열번호 92에 제시된 인간 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 114에 제시된 인간 HCCR; 및/또는 서열번호 92에 제시된 인간 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 115에 제시된 인간 HCCR; 및/또는 서열번호 92에 제시된 인간 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 91, 114 또는 115에 제시된 인간 HCCR; 및/또는 서열번호 94에 제시된 뮤린 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 91에 제시된 인간 HCCR; 및/또는 서열번호 94에 제시된 뮤린 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 114에 제시된 인간 HCCR; 및/또는 서열번호 94에 제시된 뮤린 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 115에 제시된 인간 HCCR; 및/또는 서열번호 94에 제시된 뮤린 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 93에 제시된 뮤린 HCCR; 및/또는 서열번호 92에 제시된 인간 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 61에 제시된 바와 같은 가변 영역; 및/또는 서열번호 91, 114 또는 115에 제시된 바와 같은 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 61에 제시된 바와 같은 가변 영역; 및/또는 서열번호 91에 제시된 바와 같은 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 61에 제시된 바와 같은 가변 영역; 및/또는 서열번호 114에 제시된 바와 같은 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 61에 제시된 바와 같은 가변 영역; 및/또는 서열번호 115에 제시된 바와 같은 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 71 또는 81에 제시된 바와 같은 가변 영역; 및/또는 서열번호 92에 제시된 바와 같은 불변 영역을 포함하는 경쇄를 포함할 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 인간화 항체 또는 이의 결합 단편이다.
본원에 사용된 바와 같이, "인간화 항체 또는 이의 결합 단편"은 비인간 면역글로불린으로부터 유도된 최소 서열을 함유하는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편을 지칭한다. 그것은, 예를 들어, 인간 생식세포계열 면역글로불린 서열에서 발견된 아미노산을 포함하기 위해 비인간 항체 아미노산 서열을 변경함으로써 인간 세포에 의해 제조되는 항체를 보다 근접하게 닮도록 변경된 가변 및 불변 영역을 갖는 비인간 세포에 의해 제조된 항체를 포함한다. 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은, 예를 들어, CDR에서 인간 생식세포계열 면역글로불린 서열(예: 시험관내 무작위 또는 부위 특이적 돌연변이발생 또는 생체내 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)에 의해 인코딩되지 않은 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 용어 "인간화 항체 또는 이의 결합 단편"은 또한 다른 포유류 종, 예를 들어, 마우스의 생식세포계열로부터 유도된 CDR 서열이 인간 프레임워크 서열 상에 그래프트되는 항체 또는 이의 결합 단편을 포함한다. 즉, 용어 "인간화 항체 또는 이의 결합 단편"은 수령자 인간 항체의 CDR이 공여자 비인간 항체, 예를 들어, 마우스 항체의 CDR로 대체된 항체 또는 이의 결합 단편을 지칭한다. 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 또한 프레임워크 서열에서 공여자 기원의 잔기를 포함할 수 있다. 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 또한 인간 면역글로불린 불변 영역의 적어도 일부를 포함할 수 있다. 인간화 항체 및 이의 결합 단편은 또한 수령자 항체에서도 수입된 CDR 또는 FR 서열에서도 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있다. 인간화는 "초인간화(superhumanizing)" 항체(예를 들어, Tan et al., 2002. J Immunol. 169(2):1119-25) 및 "재표면화(resurfacing)"(예를 들어, Staelens et al., 2006. Mol Immunol. 43(8):1243-57; Roguska et al., 1994. Proc Natl Acad Sci USA. 91(3):969-73)와 같은 기술을 포함하여 당업계에 공지된 방법을 사용하여 수행될 수 있다(예를 들어, Jones et al., 1986. Nature. 321(6069):522-5; Riechmann et al., 1988. Nature. 332(6162):323-7; Verhoeyen et al., 1988. Science. 239(4847):1534-6; Presta, 1992. Curr Opin Biotechnol. 3(4):394-8; 특허 US4,816,567).
본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편을 인간화하기 위한 방법은 당업계에 익히 공지되어 있고, 아래 실시예 섹션에서 추가로 상세화될 것이다. 인간화 항체 또는 이의 결합 단편을 제조하는 데 사용되는 인간 가변 도메인 경쇄 및 중쇄 모두의 선택은 항원성을 감소시키기 위해 매우 중요하다. 소위 "최적 적합" 방법에 따라, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 가변 도메인의 서열은 공지된 인간 가변 도메인 서열의 전체 라이브러리에 대해 스크리닝된다. 이어서, 마우스 서열에 가장 근접한 인간 서열은 인간화 항체를 위한 인간 프레임워크(FR)로서 수용된다(참조: Sims et al., 1993. J Immunol. 151(4):2296-308; Chothia & Lesk, 1987. J Mol Biol. 196(4):901-17).
본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편을 인간화하기 위한 다른 방법은 경쇄 또는 중쇄의 특정 서브그룹의 모든 인간 항체의 컨센서스 서열로부터 특정 FR을 사용한다. 동일한 프레임워크가 여러 상이한 인간화 항체에 대해 사용될 수 있다(참조: Carter et al., 1992. Proc Natl Acad Sci USA. 89(10):4285-9; Presta et al., 1993. J Immunol. 151(5):2623-32). 항체가 hCD45RC 및 다른 유리한 생물학적 특성에 대한 높은 친화성을 유지하면서 인간화되는 것은 추가로 중요하다. 이 목표를 달성하기 위해, 바람직한 방법에 따라, 인간화 항체 및 이의 결합 단편은 부모 및 인간화 서열의 3차원 모델을 사용하여 부모 서열과 다양한 개념적 인간화 생성물의 분석 공정에 의해 제조된다. 3차원 면역글로불린 모델은 일반적으로 이용 가능하고, 당업자에게 친숙하다. 선택된 후보 면역글로불린 서열의 가능한 3 차원 구조를 예시하고 나타내는 컴퓨터 프로그램이 이용 가능하다. 이러한 디스플레이의 검사는 후보 면역글로불린 서열의 기능화에서 잔기의 가능한 역할의 분석, 즉 이의 에피토프에 결합하는 후보 면역글로불린 서열의 능력에 영향을 미치는 잔기의 분석을 허용한다. 이러한 방식으로, CDR 잔기는 목적하는 항체 특성, 예를 들어, hCD45RC에 대한 증가된 친화성이 달성되도록 컨센서스 및 수입 서열로부터 선택되고 결합될 수 있다. 일반적으로, CDR 잔기는 항원 결합에 영향을 미치는 데 직접적으로 그리고 가장 실질적으로 관련된다.
본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편을 인간화하기 위한 다른 방법은 면역화를 위한 인간 면역계의 일부를 동반하는 유전자도입 또는 트랜스염색체 동물을 사용하는 것이다. 숙주로서, 이러한 동물은 기능적 인간 면역글로불린 유전자에 의해 대체된 그들의 면역글로불린 유전자를 갖고 있다. 따라서, 이러한 동물에 의해 또는 이러한 동물의 B 세포로부터 제조된 하이브리도마에서 생성된 항체는 이미 인간화되어 있다. 이러한 유전자도입 또는 트랜스염색체 동물의 예는, 제한 없이, 다음을 포함한다:
- 특허 US5,939,598, US6,075,18l, US6,1l4,598, US6,150,584 및 US6,162,963에 기재된 제노마우스(Abgenix, Fremont, CA);
- 문헌{참조: Lonberg et al., 1994. Nature. 368(6474):856-859; Lonberg & Huszar, 1995. Int Rev Immunol. 13(1):65-93; Harding & Lonberg, 1995. Ann N Y Acad Sci. 764:536-46; Taylor et al., 1992. Nucleic Acids Res. 20(23):6287-95; Chen et al., 1993. Int Immunol. 5(6):647-56; Tuaillon et al., 1993. Proc Natl Acad Sci USA. 90(8):3720-4; Choi et al., 1993. Nat Genet. 4(2):117-23; Chen et al., 1993. EMBO J. 12(3):821-30; Tuaillon et al., 1994. J Immunol. 152(6):2912-20; Taylor et al., 1994. Int Immunol. 6(4):579-91; Fishwild et al., 1996. Nat Biotechnol. 14(7):845-51]에 기재된 HuMab Mouse®(Medarex, Inc.);
- 특허 출원 W02002043478에 기재된 KM Mouse®;
- 문헌[참조: Tomizuka et al., 2000. Proc Natl Acad Sci USA. 97(2):722-7]에 기재된 TC 마우스; 및
- 문헌[참조: 특허 출원 W02008151081; Geurts et al., 2009. Science. 325(5939):433; Menoret et al., 2010. Eur J Immunol. 40(10):2932-41; Osborn et al., 2013. J Immunol. 190(4):1481-90]에 기재된 OmniRatTM(OMT, Inc.).
인간화 항체 및 이의 결합 단편은 또한 다양한 다른 기술에 따라, 예를 들어, 인간 항체 레퍼토리(참조: Jakobovitz et al., 1993. Nature. 362(6417):255-8)를 발현하도록 조작된 다른 유전자도입 동물을 면역화용으로 사용하거나, 파지 디스플레이 방법을 사용하는 항체 레파토리의 선택에 의해 생성될 수 있다. 이러한 기술은 당업자에게 공지되어 있고, 본 출원에 개시되어 있는 모노클로날 항체 또는 이의 결합 단편으로부터 출발하여 구현될 수 있다.
일부 구현예에서, HCVR 및 LCVR (또는 이의 CDR)을 포함하는 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편은 제1 불변 도메인(CH1 및/또는 CL)을 포함할 수 있고, 이의 아미노산 서열은 완전히 또는 실질적으로 인간이다.
일부 구현예에서, 특히 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편이 인간 치료 용도로 의도될 경우, 완전히 또는 실질적으로 인간 아미노산 서열을 갖는 전체 불변 영역, 또는 적어도 이의 일부에 전형적이다. 따라서, 하나 이상의, 또는 임의의 조합의 CH1 도메인, 힌지 영역, CH2 도메인, CH3 도메인 및 CL 도메인 (및 존재하는 경우 CH4 도메인)은 이의 아미노산 서열에 대해 완전히 또는 실질적으로 인간일 수 있다. 유리하게는, CH1 도메인, 힌지 영역, CH2 도메인, CH3 도메인 및 CL 도메인 (및 존재하는 경우 CH4 도메인)은 모두 완전히 또는 실질적으로 인간 아미노산 서열을 가질 수 있다.
인간화 또는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편의 불변 영역의 맥락에서, 용어 "실질적으로 인간"은 인간 불변 영역과 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 아미노산 서열 동일성을 지칭한다.
이러한 맥락에서, 용어 "인간 아미노산 서열"은 생식세포계열, 재배열 및 체세포 돌연변이된 유전자를 포함하는 인간 면역글로불린 유전자에 의해 인코딩되는 아미노산 서열을 지칭한다. 본 발명은 또한 "완전 인간 힌지 영역"의 존재가 명백하게 필요한 구현예를 제외하고, 인간 서열에 대한 하나 이상의 아미노산 첨가, 결실 또는 치환에 의해 변경된 "인간" 서열의 불변 도메인을 포함하는 단백질을 고려한다.
본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편에서 "완전 인간 힌지 영역"의 존재는 면역원성을 최소화하고 항체의 안정성을 최적화하는 데 모두 유리할 수 있다. 하나 이상의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실이 중쇄 및/또는 경쇄의 불변 영역 내, 특히 Fc 영역 내에서 이루어질 수 있다고 고려된다. 아미노산 치환은 상이한 자연 발생 아미노산, 또는 비천연 또는 변형된 아미노산으로 치환된 아미노산을 대체시킬 수 있다. 예를 들어, 글리코실화 패턴의 변화(예: N- 또는 O-연결된 글리코실화 부위의 추가 또는 결실에 의해)와 같은 다른 구조적 변형도 또한 허용된다. 항체 또는 이의 결합 단편의 의도된 용도에 따라, Fc 수용체에 대한 결합 특성과 관련하여 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편을 변형시키는 것, 예를 들어, 이펙터 기능을 조절하는 것이 바람직할 수 있다. 예를 들어, 시스테인 잔기(들)는 Fc 영역에 도입될 수 있고, 이에 의해 이 영역에서 쇄간 디설파이드 결합 형성을 가능하게 한다. 이렇게 생성된 호모다이머 항체는 향상된 이펙터 기능을 가질 수 있다(참조: Caron et al., 1992. J Exp Med. 176(4):1191-5; Shopes, 1992. J Immunol. 148(9):2918-22).
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 1, 2 및 3에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR; 및/또는 서열번호 12, 13 및 14에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR을 포함하고, 여기서 적용 가능한 경우, X12는 부재이거나 Ser (S)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 표 2에 제시된 바와 같은 조합으로 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및/또는 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR을 포함하고, 여기서 적용 가능한 경우, X12는 부재이거나 Ser (S)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
서열번호 1의 VH-CDR1;
서열번호 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 100, 116, 117, 118, 및 119로부터 선택되는 VH-CDR2; 및
서열번호 3의 VH-CDR3; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
서열번호 15 및 18로부터 선택되는 VL-CDR1(여기서, X12는 부재이거나 Ser (S)이다);
서열번호 16, 19, 20, 22, 111 및 120으로부터 선택되는 VL-CDR2; 및
서열번호 17 및 21로부터 선택되는 VL-CDR3.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
서열번호 1의 VH-CDR1;
서열번호 4 및 5로부터 선택되는 VH-CDR2; 및
서열번호 3의 VH-CDR3; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
서열번호 15의 VL-CDR1(여기서, X12는 부재이다);
서열번호 16의 VL-CDR2; 및
서열번호 17의 VL-CDR3.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
서열번호 1의 VH-CDR1;
서열번호 6, 7 및 8로부터 선택되는 VH-CDR2; 및
서열번호 3의 VH-CDR3; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
서열번호 18의 VL-CDR1(여기서, X12는 부재이다);
서열번호 16 및 19로부터 선택되는 VL-CDR2; 및
서열번호 17의 VL-CDR3.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
서열번호 1의 VH-CDR1;
서열번호 9, 10 및 11로부터 선택되는 VH-CDR2; 및
서열번호 3의 VH-CDR3; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
서열번호 18의 VL-CDR1(여기서, X12는 부재이다);
서열번호 19, 20 및 22로부터 선택되는 VL-CDR2; 및
서열번호 17 및 21로부터 선택되는 VL-CDR3.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
서열번호 1의 VH-CDR1;
서열번호 100의 VH-CDR2; 및
서열번호 3의 VH-CDR3; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
서열번호 18의 VL-CDR1(여기서, X12는 Ser (S)이다);
서열번호 16의 VL-CDR2; 및
서열번호 17의 VL-CDR3.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
서열번호 1의 VH-CDR1;
서열번호 6, 7, 8 및 100으로부터 선택되는 VH-CDR2; 및
서열번호 3의 VH-CDR3; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
서열번호 18의 VL-CDR1(여기서, X12는 부재이거나 Ser (S)이다);
서열번호 16 및 19로부터 선택되는 VL-CDR2; 및
서열번호 17의 VL-CDR3.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 제시된 조합 #1, #7, #14, #26 및 #50으로부터 선택되고, 여기서 적용 가능한 경우, X12는 부재이거나 Ser (S)이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 표 3에 제시된 바와 같이, 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 HCVR의 FR 및/또는 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 LCVR의 FR을 추가로 포함할 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 추가로 포함할 수 있다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR:
서열번호 29, 33, 36, 39, 40 및 42로부터 선택되는 VH-FR1;
서열번호 30, 34, 37 및 43으로부터 선택되는 VH-FR2;
서열번호 31, 35, 38 및 41로부터 선택되는 VH-FR3; 및
서열번호 32의 VH-FR4; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR:
서열번호 48, 52 및 55로부터 선택되는 VL-FR1;
서열번호 49, 53, 56, 58, 59 및 60으로부터 선택되는 VL-FR2;
서열번호 50, 54 및 57로부터 선택되는 VL-FR3; 및
서열번호 51의 VL-FR4.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 HCVR의 FR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 LCVR의 FR의 조합을 추가로 포함할 수 있고, 상기 조합은 표 3에 제시된 조합 #9, #10, #11, #12, #13, #14, #16, #17, #18, #19, #20, #21, #23, #24, #25, #26, #27, #28, #30, #31, #32, #33, #34, #35, #37, #38, #39, #40, #41, #42, #44, #45, #46, #47, #48, #49, #51, #52, #53, #54, #55 및 #56으로부터 선택된다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 추가로 포함할 수 있다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR:
* 서열번호 29, 33 및 36으로부터 선택되는 VH-FR1;
서열번호 30, 34 및 37로부터 선택되는 VH-FR2;
서열번호 31, 35 및 38로부터 선택되는 VH-FR3; 및
서열번호 32의 VH-FR4; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR:
서열번호 48, 52 및 55로부터 선택되는 VL-FR1;
서열번호 49, 53 및 56으로부터 선택되는 VL-FR2;
서열번호 50, 54 및 57로부터 선택되는 VL-FR3; 및
서열번호 51의 VL-FR4.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 HCVR의 FR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 LCVR의 FR의 조합을 추가로 포함할 수 있고, 상기 조합은 표 3에 제시된 조합 #9, #10, #11, #16, #17, #18, #23, #24 및 #25로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 다음을 포함할 수 있다:
- 서열번호 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 101, 121, 122, 123 및 124로부터 선택된 HCVR; 및/또는
- 서열번호 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 103, 113, 126 및 129로부터 선택된 LCVR.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 상기 상세화된 바와 같이, 서열번호 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 101, 121, 122, 123 및 124로부터 선택된 HCVR, 및 서열번호 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 103, 113, 126 및 129로부터 선택된 LCVR의 임의의 조합을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 다음을 포함할 수 있다:
- 서열번호 62, 63 및 64로부터 선택된 HCVR; 및/또는
- 서열번호 82, 83 및 84로부터 선택된 LCVR.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 상기 상세화된 바와 같이, 서열번호 62, 63 및 64로부터 선택된 HCVR 및 서열번호 82, 83 및 84로부터 선택된 LCVR의 임의의 조합을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 다음을 포함할 수 있다:
- 서열번호 62, 63, 64, 65, 67 및 101로부터 선택된 HCVR; 및/또는
- 서열번호 82, 83, 84, 85 및 103으로부터 선택된 LCVR.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 상기 상세화된 바와 같이, 서열번호 62, 63, 64, 65, 67 및 101로부터 선택된 HCVR 및 서열번호 82, 83, 84, 85 및 103으로부터 선택된 LCVR의 임의의 조합을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62에 제시된 HCVR 및 서열번호 82에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62에 제시된 HCVR 및 서열번호 83에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62에 제시된 HCVR 및 서열번호 84에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 63에 제시된 HCVR 및 서열번호 82에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 63에 제시된 HCVR 및 서열번호 83에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 63에 제시된 HCVR 및 서열번호 84에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 64에 제시된 HCVR 및 서열번호 82에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 64에 제시된 HCVR 및 서열번호 83에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 64에 제시된 HCVR 및 서열번호 84에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 101에 제시된 HCVR 및 서열번호 85에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 101에 제시된 HCVR 및 서열번호 103에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 65에 제시된 HCVR 및 서열번호 85에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 65에 제시된 HCVR 및 서열번호 103에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62에 제시된 HCVR 및 서열번호 85에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 101에 제시된 HCVR 및 서열번호 82에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 121에 제시된 HCVR 및 서열번호 85에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 122에 제시된 HCVR 및 서열번호 85에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 123에 제시된 HCVR 및 서열번호 85에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 124에 제시된 HCVR 및 서열번호 85에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 63에 제시된 HCVR 및 서열번호 85에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 67에 제시된 HCVR 및 서열번호 85에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 67에 제시된 HCVR 및 서열번호 103에 제시된 LCVR을 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 91, 114 또는 115에 제시된 HCCR; 및/또는 서열번호 92에 제시된 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 91에 제시된 HCCR; 및/또는 서열번호 92에 제시된 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 114에 제시된 HCCR; 및/또는 서열번호 92에 제시된 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 115에 제시된 HCCR; 및/또는 서열번호 92에 제시된 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70 또는 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 91, 114 또는 115에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70 또는 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 91에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70 또는 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 114에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70 또는 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 115에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63 또는 64에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 91, 114 또는 115에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63 또는 64에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 91에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63 또는 64에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 114에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63 또는 64에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 115에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63, 64, 65, 67 및 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 91, 114 또는 115에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63, 64, 65, 67 및 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 91에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63, 64, 65, 67 및 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 114에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63, 64, 65, 67 및 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 115에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 114에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 115에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90 또는 103에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 92에 제시된 불변 영역을 포함하는 경쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 82, 83 또는 84에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 92에 제시된 불변 영역을 포함하는 경쇄를 포함할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 82, 83, 84, 85 또는 103에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 92에 제시된 불변 영역을 포함하는 경쇄를 포함할 수 있다.
특정 구현예에 따라서, 상기 이미 정의된 바와 같은 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 단편은 서열번호 12에 제시된 (바람직하게는 서열번호 15 또는 18에 제시된, 가장 바람직하게는 서열번호 15에 제시된) LCVR의 CDR1을 포함하고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다. 이 구현예에서, X12가 부재가 아닌 경우, LCVR의 카바트 위치 L71에서의 아미노산 잔기는 바람직하게는 Phe (F)이고; 즉, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 단편은 바람직하게는 서열번호 46, 50, 54 또는 57에 제시된 LCVR의 FR3을 포함하고, 여기서 X18은 Phe (F)이다. 이러한 특징의 만족시(즉, X12가 부재가 아니고, 바람직하게는 카바트 위치 L71(즉, X18)이 Phe (F)이다), 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편에 관한 임의의 상기 구현예가 적용된다.
따라서, 이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 1, 2 및 3에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR; 및/또는 서열번호 12, 13 및 14에 제시된 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR을 포함하고, 여기서 적용 가능한 경우, X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및/또는 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR을 표 2에 제시된 조합으로 포함하고, 여기서 적용 가능한 경우, X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
서열번호 1의 VH-CDR1;
서열번호 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 및 100으로부터 선택된 VH-CDR2; 및
서열번호 3의 VH-CDR3; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
서열번호 15 및 18로부터 선택되는 VL-CDR1(여기서, X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다);
서열번호 16, 19, 20, 22, 111 및 120으로부터 선택되는 VL-CDR2; 및
서열번호 17 및 21로부터 선택되는 VL-CDR3.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
서열번호 1의 VH-CDR1;
서열번호 4, 5, 6, 8, 100, 116, 117, 118 및 119로부터 선택되는 VH-CDR2; 및
서열번호 3의 VH-CDR3; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
서열번호 15 및 18로부터 선택되는 VL-CDR1(여기서, X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다);
서열번호 16, 111 및 120으로부터 선택되는 VL-CDR2; 및
서열번호 17의 VL-CDR3.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
서열번호 1의 VH-CDR1;
서열번호 4 및 5로부터 선택되는 VH-CDR2; 및
서열번호 3의 VH-CDR3; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
서열번호 15의 VL-CDR1(여기서, X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다);
서열번호 16의 VL-CDR2; 및
서열번호 17의 VL-CDR3.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 HCVR의 CDR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 3개의 LCVR의 CDR의 조합을 포함하고, 상기 조합은 표 2에 제시된 조합 #1, #7, #14, #26 및 #50으로부터 선택되고, 여기서 적용 가능한 경우, X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 표 3에 제시된 바와 같이, 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 HCVR의 FR 및/또는 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 LCVR의 FR을 추가로 포함할 수 있고, 여기서 적용 가능한 경우, X18은 Phe (F)이다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 추가로 포함할 수 있다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR:
서열번호 25, 29, 33, 36, 39, 40 및 42로부터 선택되는 VH-FR1;
서열번호 26, 30, 34, 37 및 43으로부터 선택되는 VH-FR2;
서열번호 27, 31, 35, 38 및 41로부터 선택되는 VH-FR3; 및
서열번호 28 및 32로부터 선택되는 VH-FR4; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR:
서열번호 44, 48, 52 및 55로부터 선택되는 VL-FR1;
서열번호 45, 49, 53, 56, 58, 59 및 60으로부터 선택되는 VL-FR2;
서열번호 46, 50, 54 및 57로부터 선택되는 VL-FR3(여기서, X18은 Phe (F)이다); 및
서열번호 47 및 51로부터 선택되는 VL-FR4.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 HCVR의 FR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 LCVR의 FR의 조합을 추가로 포함할 수 있고, 상기 조합은 표 3에 제시된 임의의 조합으로부터 선택되고, 여기서 적용 가능한 경우, X18은 Phe (F)이다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 추가로 포함할 수 있다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR:
서열번호 29, 33, 36, 39, 40 및 42로부터 선택되는 VH-FR1;
서열번호 30, 34, 37 및 43으로부터 선택되는 VH-FR2;
서열번호 31, 35, 38 및 41로부터 선택되는 VH-FR3; 및
서열번호 32의 VH-FR4; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR:
서열번호 48, 52 및 55로부터 선택되는 VL-FR1;
서열번호 49, 53, 56, 58, 59 및 60으로부터 선택되는 VL-FR2;
서열번호 50, 54 및 57로부터 선택되는 VL-FR3(여기서 X18은 Phe (F)이다); 및
서열번호 51의 VL-FR4.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 HCVR의 FR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 LCVR의 FR의 조합을 추가로 포함할 수 있고, 상기 조합은 표 3에 제시된 조합 #9, #10, #11, #12, #13, #14, #16, #17, #18, #19, #20, #21, #23, #24, #25, #26, #27, #28, #30, #31, #32, #33, #34, #35, #37, #38, #39, #40, #41, #42, #44, #45, #46, #47, #48, #49, #51, #52, #53, #54, #55 및 #56으로부터 선택되고, 여기서 적용 가능한 경우, X18은 Phe (F)이다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 추가로 포함할 수 있다:
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 HCVR:
서열번호 29, 33 및 36으로부터 선택되는 VH-FR1;
서열번호 30, 34 및 37로부터 선택되는 VH-FR2;
서열번호 31, 35 및 38로부터 선택되는 VH-FR3; 및
서열번호 32의 VH-FR4; 및
- 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 다음 FR을 포함하는 LCVR:
서열번호 48, 52 및 55로부터 선택되는 VL-FR1;
서열번호 49, 53 및 56으로부터 선택되는 VL-FR2;
서열번호 50, 54 및 57로부터 선택되는 VL-FR3(여기서, X18은 Phe (F)이다); 및
서열번호 51의 VL-FR4.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 (i) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 HCVR의 FR 및 (ii) 적어도 하나, 바람직하게는 적어도 2개, 더욱 바람직하게는 적어도 3개, 더욱 더 바람직하게는 4개의 LCVR의 FR의 조합을 추가로 포함할 수 있고, 상기 조합은 표 3에 제시된 조합 #9, #10, #11, #16, #17, #18, #23, #24 및 #25로부터 선택되고, 여기서 적용 가능한 경우, X18은 Phe (F)이다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 다음을 포함할 수 있다:
- 서열번호 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 101, 121, 122, 123 및 124로부터 선택된 HCVR; 및/또는
- 서열번호 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 102, 112, 125 및 128로부터 선택된 LCVR(여기서, X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고, X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이다).
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 상기 상세화된 바와 같이, 서열번호 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 101, 121, 122, 123 및 124로부터 선택된 HCVR, 및 서열번호 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 102, 112, 125 및 128로부터 선택된 LCVR의 임의의 조합을 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 다음을 포함할 수 있다:
- 서열번호 61로부터 선택된 HCVR; 및/또는
- 서열번호 71로부터 선택된 LCVR(여기서, X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다).
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 상기 상세화된 바와 같이, 서열번호 61로부터 선택된 HCVR 및 서열번호 71로부터 선택된 LCVR의 임의의 조합을 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 다음을 포함할 수 있다:
- 서열번호 62, 63 및 64로부터 선택된 HCVR; 및/또는
- 서열번호 72, 73 및 74로부터 선택된 LCVR(여기서, X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다).
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 상기 상세화된 바와 같이, 서열번호 62, 63 및 64로부터 선택된 HCVR 및 서열번호 72, 73 및 74로부터 선택된 LCVR의 임의의 조합을 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 다음을 포함할 수 있다:
- 서열번호 62, 63, 64, 65, 67, 101, 121, 122, 123 및 124로부터 선택된 HCVR; 및/또는
*- 서열번호 72, 73, 74, 75 및 102로부터 선택된 LCVR.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 상기 상세화된 바와 같이, 서열번호 62, 63, 64, 65, 67 및 101로부터 선택된 HCVR 및 서열번호 72, 73, 74, 75 및 102로부터 선택된 LCVR의 임의의 조합을 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 91, 93, 114 또는 115에 제시된 HCCR; 및/또는 서열번호 92 또는 94에 제시된 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 91 또는 93에 제시된 HCCR; 및/또는 서열번호 92 또는 94에 제시된 LCCR을 추가로 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70 또는 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 91, 93, 114 또는 115에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70 또는 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 91 또는 93에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63 또는 64에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 91, 93, 114 또는 115에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63 또는 64에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 91 또는 93에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63, 64, 65, 67 및 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 91, 93, 114 또는 115에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 62, 63, 64, 65, 67 및 101에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 91 또는 93에 제시된 불변 영역을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 103 또는 113에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 92 또는 94에 제시된 불변 영역을 포함하는 경쇄를 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 82, 83 또는 84에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 92에 제시된 불변 영역을 포함하는 경쇄를 포함할 수 있다.
이 특정 구현예에 따라서, 본 발명에 따르는 뮤린, 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편은 따라서 서열번호 82, 83, 84, 85 또는 103에 제시된 가변 영역; 및/또는 서열번호 92에 제시된 불변 영역을 포함하는 경쇄를 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 목적은 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합되는 항체 또는 이의 결합 단편을 인코딩하는 단리된 핵산이다.
본원에 사용된 "단리된 핵산"은 자연적으로 천연 서열을 동반하는 리보솜 및 폴리머라제와 같은 단백질 또는 복합체뿐만 아니라 다른 게놈 DNA 서열로부터 실질적으로 분리된 핵산을 지칭하는 것으로 의도된다. 상기 용어는 그의 자연적으로 발생하는 환경으로부터 제거된 핵산 서열을 포함하고, 제조합 또는 클로닝된 DNA 단리물 및 이종성 시스템에 의해 생물학적으로 합성된 화학적으로 합성된 유사체 또는 유사체들을 포함한다. 실질적으로 순수한 핵산은 핵산의 단리된 형태를 포함한다. 물론, 이는 원래 단리된 핵산을 지칭하고, 사람의 손에 의해 단리된 핵산에 나중에 첨가된 유전자 또는 서열을 배제하지 않는다.
하나의 구현예에서, 단리된 핵산은 정제된다.
하나의 구현예에서, 단리된 핵산은 다음으로 정제된다:
(1) 흡광도 방법 또는 형광 방법에 의해(예를 들어, 260 및 280nm에서 흡광도의 비율(A260/280)을 측정하여) 결정된 바와 같이 핵산의 80중량%, 85중량%, 90중량%, 91중량%, 92중량%, 93중량%, 94중량%, 95중량% 이상, 가장 바람직하게는 96중량%, 97중량%, 98중량% 또는 99중량% 이상; 또는
(2) 아가로스 겔 전기영동에 의해, 삽입제, 예를 들어, 브롬화에티듐, SYBR 그린, GelGreen 또는 등을 사용하여 제시된 균질성.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 핵산은 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 HCVR을 인코딩하는 서열을 포함하거나 이로 구성된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 핵산은 서열번호 61을 갖는 뮤린 또는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편의 HCVR을 인코딩하는, 서열번호 95의 서열 또는 서열번호 95와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열을 포함하거나 이로 구성된다.
Figure pct00067
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 핵산은 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 LCVR을 인코딩하는 서열을 포함하거나 이로 구성된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 핵산은 서열번호 81을 갖는 뮤린 또는 키메라 항체 또는 이의 결합 단편의 LCVR을 인코딩하는, 서열번호 96의 서열 또는 서열번호 96과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열을 포함하거나 이로 구성된다.
Figure pct00068
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 핵산은 다음을 포함하거나 이로 구성된다:
- 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 HCVR을 인코딩하는 서열, 및
- 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 LCVR을 인코딩하는 서열.
*하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 핵산은 다음을 포함하거나 이로 구성된다:
- 서열번호 95의 서열 또는 서열번호 95와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열 및
- 서열번호 96의 서열 또는 서열번호 96과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열.
당업자가 특히 본 발명에 따르는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편에 대해 본원에 개시된 다른 HCVR 및 LCVR 모두를 인코딩하는 핵산 서열을 설계할 수 있음이 쉽게 이해될 것이다.
당업자는, 예를 들어, 코돈 최적화에 의해서와 같은 재조합 생산 속도를 개선하기 위해 핵산 서열을 변형시키는 것을 목적으로 하는 분자 생물학 방법에 친숙하다는 것이 추가로 이해된다. 궁극적으로, 본 출원은 본원에 개시된 바와 같은 임의의 HCVR 및/또는 LCVR을 인코딩하는 임의의 핵산을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 핵산은 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 완전 또는 실질적으로 완전 인간 HCCR을 인코딩하는 서열을 포함하거나 이로 구성된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 핵산은 서열번호 91을 갖는 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편의 HCCR을 인코딩하는 서열번호 97의 서열 또는 서열번호 97과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열을 포함하거나 이로 구성된다.
Figure pct00069
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 핵산은 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 완전 또는 실질적으로 완전 인간 LCCR을 인코딩하는 서열을 포함하거나 이로 구성된다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 핵산은 서열번호 92를 갖는 키메라 또는 인간화 항체 또는 이의 결합 단편의 HCCR을 인코딩하는 서열번호 98의 서열 또는 서열번호 98과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열을 포함하거나 이로 구성된다.
Figure pct00070
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 핵산은 다음을 포함하거나 이로 구성된다:
- 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 완전 또는 실질적으로 완전 인간 HCCR을 인코딩하는 서열, 및
- 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 완전 또는 실질적으로 완전 인간 LCCR을 인코딩하는 서열.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 핵산은 다음을 포함하거나 이로 구성된다:
- 서열번호 97의 서열 또는 서열번호 97과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열 및
- 서열번호 98의 서열 또는 서열번호 98과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열.
본 발명의 다른 목적은 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합된 항체 또는 이의 결합 단편을 인코딩하는 핵산을 포함하는 발현 벡터이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 HCVR을 인코딩하는 서열을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된 서열번호 95의 서열 또는 서열번호 95와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 LCVR을 인코딩하는 서열을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된 서열번호 96의 서열 또는 서열번호 96과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 다음을 포함한다:
- 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 HCVR을 인코딩하는 서열, 및
- 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 LCVR을 인코딩하는 서열.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 다음을 포함한다:
- 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된 서열번호 95의 서열 또는 서열번호 95와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열, 및
- 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된 서열번호 96의 서열 또는 서열번호 96과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 HCCR을 인코딩하는 서열을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된 서열번호 97의 서열 또는 서열번호 97과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 LCCR을 인코딩하는 서열을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된 서열번호 98의 서열 또는 서열번호 98과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 다음을 포함한다:
- 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 HCCR을 인코딩하는 서열, 및
- 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 LCCR을 인코딩하는 서열.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 다음을 포함한다:
- 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된 서열번호 97의 서열 또는 서열번호 97과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열, 및
- 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된 서열번호 98의 서열 또는 서열번호 98과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성을 공유하는 임의의 서열.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 중쇄를 인코딩하는 서열을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 경쇄를 인코딩하는 서열을 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 다음을 포함한다:
- 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 중쇄를 인코딩하는 서열, 및
- 바람직하게는 조절 요소에 작동 가능하게 연결된, 본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편의 경쇄를 인코딩하는 서열.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 모노시스트론성이다.
"모노시스트론성"이란, 단일 단백질을 인코딩하는 단일 핵산이 단일 발현 벡터로 발현된다는 것을 의미한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 발현 벡터는 폴리시스트론성이다.
"폴리시스트론성"이란, 각각 단일 단백질을 인코딩하는 적어도 둘 이상의 핵산이 단일 발현 벡터로 발현된다는 것을 의미한다.
본 발명의 다른 목적은 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합하는 항체 또는 이의 결합 단편을 인코딩하는 핵산, 또는 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합하는 항체 또는 이의 결합 단편을 인코딩하는 핵산을 포함하는 발현 벡터를 포함하는 세포이다.
본 발명의 다른 목적은 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합하는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편을 생산하고 정제하는 방법이다.
하나의 구현예에서, 상기 방법은 다음을 포함한다:
- 형질전환된 숙주 세포를 본 발명에 따르는 핵산 또는 발현 벡터와 함께 항체 또는 이의 결합 단편의 발현에 적합한 조건하에 배양하는 단계, 및
- 발현된 항체 또는 이의 결합 단편을 회수하는 단계.
이 재조합 공정은 시험관내, 생체외 및/또는 생체내 치료적 및/또는 진단적 용도로 의도된 모노클로날 항체를 포함하여 항체 또는 이의 결합 단편의 대규모 생산용으로 사용될 수 있다.
이러한 공정은 당업계에 익히 공지되어 있다(참조: Subramanian (Ed.), 2004. Antibodies (1st ed., Vol. 1: Production and Purification). New York, NY: Springer US).
한 구현예에서, 발현된 항체 또는 이의 결합 단편은 추가로 정제된다.
본 발명에 따르는 항체 또는 이의 결합 단편을 정제하기 위한 방법은 당업계에 익히 공지되어 있고(참조: Subramanian (Ed.), 2004. Antibodies (1st ed., Vol. 1: Production and Purification). New York, NY: Springer US), 제한 없이, 크로마토그래피, 바람직하게는 친화성 크로마토그래피, 더욱 바람직하게는 단백질 L 아가로스 상의 친화성 크로마토그래피를 포함한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 항체 의존성 세포 매개 세포독성(ADCC), 보체 의존성 세포독성(CDC) 및/또는 항체 의존성 식균 작용을 증강시키기 위해 변형될 수 있다. 이러한 변형은 당업계에 익히 공지되어 있다.
예를 들어, 푸코스 함량이 낮은 항체는 FcγRIII 수용체(국제 특허 공보 WO2014140322)를 통해 ADCC 반응을 증강시키는 것으로 공지되어 있다. 따라서, 본 발명에 따르는 항체는 낮은 푸코스 함량을 포함할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "푸코스 함량"은 각 항체의 각 중쇄의 Fc 단편의 N297 잔기에 부착된 N-글리칸 내의 푸코실화 형태의 백분율을 지칭한다(서열번호 91 또는 서열번호 114의 N180; 또는 서열번호 93의 N174에 상응함).
본원에 사용된 용어 "낮은 푸코스 함량"은 65% 이하의 푸코스 함량을 지칭한다. 유리하게는, 푸코스 함량은 65% 이하, 바람직하게는 60%, 55% 또는 50% 이하, 또는 심지어 45%, 40%, 35%, 30%, 25% 또는 20% 이하이다. 그러나, 푸코스 함량이 0일 필요는 없고, 예를 들어, 5%, 10%, 15% 또는 20% 이상일 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 상이한 유형의 글리코실화(바이안테나형 복합체 유형의 N-클리칸의 경우에 N-아세틸글루코사민(GlcNAc) 잔기 또는 갈락토스 잔기를 양분하는 가변 비율을 갖는 올리고만노스 또는 바이안테나형 복합체 유형의 N-글리칸)를 추가로 포함할 수 있고, 단 그들은 낮은 푸코실 함량을 갖는다(국제 특허 공보 W02007048077). 예를 들어, 약간 푸코실화된 N-글리칸을 갖는 항체는 유럽 특허 공보 EP1176195 또는 국제 특허 공보 WO2001077181 또는 WO2012041768에 기재된 바와 같이 수득될 수 있다.
올리고만노스 유형의 N-글리칸은 바이안테나형 복합체 유형의 N-글리칸과 비교하여 감소된 생체내 반감기를 갖는다. 결과적으로, 유리하게는, 본 발명에 따르는 항체는 Fc 단편의 N-글리코실화 부위에 상기 정의된 바와 같이 낮은 푸코스 함량을 갖는 바이안테나형 복합체 유형의 글리칸 구조를 갖는다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 치료적 부분, 즉 약물에 접합된다. 하나의 구현예에서, 치료적 부분은 세포독소, 화학요법제, 사이토킨, 면역억제제, 면역 자극제, 용해 펩티드 및 방사성 동위 원소로부터 선택된다. 이러한 접합체는 본원에서 "항체 약물 접합체" 또는 "ADC"로서 지칭된다.
일부 구현예에서, 본 발명의 항체는 세포독성 부분에 접합된다. 하나의 구현예에서, 세포독성 부분은 탁솔; 사이토칼라신 B; 그라미시딘 D; 브롬화에티듐; 에메틴; 미토마이신; 에토포사이드; 테노포사이드; 빈크리스틴; 빈블라스틴; 콜키신; 독소루비신; 다우노루비신; 디하이드록시안트라신 디온; 투불린 억제제(예: 예를 들어, 메이탄신 또는 이의 유사체 또는 유도체); 유사 분열 억제제(예: 예를 들어, 모노메틸 아우리스타틴 E 또는 F 또는 이의 유사체 또는 유도체); 돌라스타틴 또는 이의 유사체; 이리노테칸 또는 이의 유사체; 미토크산트론; 미트라마이신; 악티노마이신 D; 1-데하이드로테스토스테론; 글루코코티코이드; 프로카인; 테트라카인; 리도카인; 프로프라놀롤; 퓨로마이신; 칼리케아미신 또는 이의 유사체 또는 유도체; 항대사물질(예: 예를 들어, 메토트렉세이트, 머캅토퓨린, 6-티오구아닌, 시타라빈, 플루다라빈, 5-플루오로우라실, 데카바진, 하이드록시우레아, 아스파라기나제, 젬시타빈, 또는 클라드리빈); 알킬화제(예: 예를 들어, 메클로레타민, 티오에파, 클로람부실, 멜팔란, 카르무스틴, 로무스틴, 사이클로포스파미드, 부설판, 디브로모만니톨, 스트렙토조토신, 다카르바진, 프로카르바진 또는 미토마이신 C); 백금 유도체(예: 예를 들어, 시스플라틴 또는 카르보플라틴); 듀오카르마이신 A, 듀오카르마이신 SA, 라켈마이신 또는 이의 유사체 또는 유도체; 항생물질(예: 예를 들어, 닥티노마이신, 블레오마이신, 다우노루비신, 독소루비신, 이다루비신, 미트라마이신, 미토마이신, 미토크산트론, 플리카마이신 또는 안트라마이신); 피롤로[2,1-c][1,4]-벤조디아제핀(예: 예를 들어, 안트라마이신); 디프테리아 독소 및 관련 분자(예: 예를 들어, 디프테리아 A 쇄 및 이의 활성 단편 및 하이브리드 분자, 리신 독소, 예를 들어, 리신 A 또는 탈글리코실화 리신 A 쇄 독소, 콜레라 독소, 시가 유사(Shiga-like) 독소, 예를 들어, SLT I, SLT II, SLT IIV, LT 독소, C3 독소, 시가 독소, 백일해 독소, 파상풍 독소, 대두 바우만-버크(Bowman-Birk) 프로테아제 억제제, 슈도모나스(Pseudomonas) 외독소, 알로린, 사포린, 모데신, 젤라닌, 아브린 A 쇄, 모데신 A 쇄, 알파사르신, 알레우라이트 포르디이(Aleurites fordii) 단백질, 디안틴 단백질, 피톨라카 아메리카나(Phytolacca americana) 단백질, 예를 들어, PAPI, PAPII 및 PAP-S, 모모르디카 카란티아(momordica charantia) 억제제, 쿠르신, 크로틴, 사파오나리아 오피시날리스(sapaonaria officinalis) 억제제, 겔로닌, 미토겔린, 레스트릭토신, 페노마이신 및 에노마이신 독소); 리보뉴클레아제; DNase I; 스타필로코칼 엔테로톡신 A; 미국자리공(pokeweed) 항바이러스성 단백질; 디프테린 독소; 및 슈도모나스(Pseudomonas) 내독소로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 아우리스타틴 또는 이의 펩티드 유사체, 유도체 또는 프로드럭(prodrug)에 접합된다. 아우리스타틴은 미세소관 역학, GTP 가수분해 및 핵 및 세포 분열을 방해하는 것으로 나타났고(참조: Woyke et al., 2001. Antimicrob Agents Chemother. 46(12):3802-8), 항암(참조: 미국 특허 제5,663,149) 및 항진균 활성(참조: Pettit et al., 1998. Antimicrob Agents Chemother. 42(11):2961-5)을 갖는다. 예를 들어, 아우리스타틴 E는 각각 AEB 및 AEVB를 생산하기 위해 파라-아세틸 벤조산 또는 벤조일발레르산과 반응할 수 있다. 다른 전형적인 아우리스타틴 유도체는 AFP, MMAF(모노메틸 아우리스타틴 F) 및 MMAE(모노메틸 아우리스타틴 E)를 포함한다. 항체에 대한 아우리스타틴의 접합에 적합한 링커뿐만 아니라 적합한 아우리스타틴 및 아우리스타틴 유사체, 유도체 및 프로드럭은, 예를 들어, 미국 특허 제5,635,483호, 제5,780,588호 및 제6,214,345호 및 국제 특허 공보 W02002088172, W02004010957, W02005081711, W02005084390, W02006132670, W02003026577, W0200700860, W02007011968 및 W02005082023에 기재되어 있다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 피롤로[2,1-c][1,4]-벤조디아제핀(PDB)(예: 예를 들어, 안트라마이신) 또는 이의 유사체, 유도체 또는 프로드럭에 접합된다. 적합한 PDB 및 PDB 유도체, 및 관련 기술은 당업계에 기재되어 있다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 안트라사이클린, 메이탄신, 칼리케아마이신, 듀오카르마이신, 라켈마이신(CC-1065), 돌라스타틴 10, 돌라스타틴 15, 이리노테칸, 모노메틸 아우리스타틴 E, 모노메틸 아우리스타틴 F, PDB, 또는 임의의 이의 유사체, 유도체 또는 프로드럭으로부터 선택된 세포독성 부분에 접합된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 안트라사이클린 또는 이의 유사체, 유도체 또는 프로드럭에 접합된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 메이탄신 또는 이의 유사체, 유도체 또는 프로드럭에 접합된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 칼리케아마이신 또는 이의 유사체, 유도체 또는 프로드럭에 접합된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 듀오카르마이신 또는 이의 유사체, 유도체 또는 프로드럭에 접합된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 라켈마이신(CC-1065) 또는 이의 유사체, 유도체 또는 프로드럭에 접합된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 돌라스타틴 또는 이의 유사체, 유도체 또는 프로드럭에 접합된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 모노메틸 아우리스타틴 E 또는 이의 유사체, 유도체 또는 프로드럭에 접합된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 모노메틸 아우리스타틴 F 또는 이의 유사체, 유도체 또는 프로드럭에 접합된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 이리노테칸 또는 이의 유사체, 유도체 또는 프로드럭에 접합된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 항체는 표지화된다.
"표지화된"이란, 단리된 항체 또는 이의 결합 단편이 이에 접합되거나 부착된 적어도 하나의 요소, 동위 원소 또는 화학적 화합물을 가져, 예를 들어, 상기 단리된 항체 또는 이의 결합 단편의 검출을 가능하게 한다는 것을 의미한다.
표지의 예는 발광성 염료(또한 형광단 또는 광검출 가능한 표지로서 지칭됨), 동위 원소 표지(또한 방사성 표지, 방사성표지 또는 중질 동위 원소로서 지칭됨), 조영제, 자기 표지, 전기 표지, 열 표지, 및 착색 표지를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
발광성 염료의 예는 Alexa Fluor® 염료, BODIPY® 염료, 플루오레세인, 5-카복시플루오레신, 5-(4,6-디클로로트리아진-2-일)아미노플루오레세인, 2',7'-디메톡시-4',5'-디클로로-6-카복시플루오레세인, 플루오레세인 이소티오시아네이트(FITC), QFITC, Oregon Green® 488, Oregon Green® 514, 로다민 및 이의 유도체(예: 예를 들어, 로다민 그린, 로다민 그린-X, 로다민 레드-X, X-로다민, 6-카복시-X-로다민(ROX), 6-카복시로다민(R6G), N,N,N',N'-테트라메틸-6-카복시로다민(TAMRA), 리싸민 로디민 B, 로다민 123, 로다민 X 이소티오시아네이트, 설포로다민 B, 설포로다민 101(텍사스 레드), 테트라메틸 로다민, 테트라메틸 로다민 이소티오시아네이트(TRITC)), 에오신, 에오신 이소티오시아네이트, 에리트로신, 에리트로신 B, 에리트로신 이소티오시아네이트, Texas Red®, Texas Red®-X, 나프토플루오레세인, 말라카이트 그린, 말라카이트 그린 이소티오시아네이트, 쿠마린 유도체, 퍼시픽 오렌지, 캐스케이드 블루, 캐스케이드 옐로우, 댄실 클로라이드, 다폭실 염료, 1-디메틸아민-N(2-아지도-에틸)나프탈렌-5-설폰아미드, 6-(6-아미노-2-(2-아지도에틸)-1,3-디옥소-1H-벤조(de)-2(3H)이소퀴놀린, 6-(6-아미노-2-(2-프로피닐)-1,3-디옥소-1H-벤조(de)-2(3H)이소퀴놀린, 8-(4-아지도에틸옥시페닐)-2,6-디에틸- 1,3,5,7-테트라메틸-4,4-디플루오로-4-보라-3a,4a-디아자-s-인다센, 8-(4-프로피니옥시페닐)-2,6-디에틸-1,3,5,7-테트라메틸-4,4-디플루오로-4-보라-3a,4a-디아자-s-인다센, 1-(3-아지도-프로폭시)-7-메틸아미노-페녹사진-3-온, 1-(2-프로피닐)-7-메틸아미노-페녹사짐-3-온, N-(5-(3-아지도프로필아미노)-9H-벤조(a)-페녹사-2-인-9-일리덴)-N-메틸-메탄아미늄 클로라이드, N-(5-(3-프로피닐-아미노)-9H-벤조(a)-페녹사진-9-일렌)-N-메틸-메탄아미늄 클로라이드, (9-(3-아지도-프로폭시)-7-피페리딘-1-일-페녹사진-3-일리덴)-디메틸-암모늄 퍼클로레이트, 4-아세토아미도-4'-이소티오시아네이토스틸벤-2,2'-디설폰산, 아크리딘, 아크리딘 이소티오시아네이트, 5-(2'-아미노에틸)아미노나프탈렌-1-설폰산, 4-아미노-N-[3-비닐설포닐)페닐]나프탈이미드-3,5 디설포네이트, N-(4-아닐리노-1-나프틸)말레이미드, 안트라닐아미드, 브릴리언트 옐로우, 쿠마린, 쿠마린 유도체, 7-아미노-4-메틸쿠마린, 7-아미노-트리플로오로메틸쿨루아린, 시아노신, 4',6-디아미니디노-2-페닐인돌, 5',5''-디브로모피로갈롤-설포네프탈레인, 7-디에틸아미노-3-(4'-이소티오시아네이토페닐)-4-메틸쿠마린-4,4'-디이소티오시아네이토디하이드로-스틸벤-2,2'-디설폰산, 4,4'-디이소티오시아네이토스틸벤-2,2'-디설폰산, 에티듐, IR144, IR1446, 4-메틸움벨리페론, o-크레졸프탈레인, 니트로티로신, 파라로사닐린, 페놀 레드, B-피코에리트린, o-프탈디알데히드, 피렌, 피렌 부티레이트, 석신이미딜 1-피렌 부티레이트, 반응성 레드 4, 리보플라빈, 로졸산, 란타나이드 킬레이트, 양자점, 시아닌, 피렐륨 염료 및 스쿠아레인을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
동위 원소 표지의 예는 99mTc 화합물(예: 엑사메타짐, 메드론산, 거대응집 알부민, 세스타미비, 테트로포스민, 엑사메타짐, 술레소맙, 틸마노셉트, 아르시투모맙, 보투무맙, hynic-옥트레오티드 등); 123I, 125I 또는 131I 화합물(예: 아이오플루판, 아이오페타민, 아이오마제닐, 나트륨 요오도힙푸레이트, 아이오벤구안, 요오도콜레스테롤, 민레투모맙, 토시투모맙 등); 18F 화합물(예: 플루오르베타피르, 플루테메타몰, 플루시클로빈, 플루데옥시글루코스, 플루오로에틸티로신, 불소화나트륨 등); 64Cu 화합물(예: Cu-ETS2 등); 75Se 화합물(예: SeHCAT); 111In 화합물(예: 임시로맙, 카프로맙 펜데티드, 사투모맙 펜데티드 등); 82Rb 화합물(예: 염화루비듐); 153Sm 화합물(예: 렉시드로남 등); 89Sr 화합물(예: 스트론튬-89 클로라이드 등); 90Y 화합물(예: 이브리투모맙 티욱세탄 등); 223Ra 화합물(예: 라듐-223 클로라이드 등); 177Lu 화합물(예: 옥소도트레오티드 등); 및 적어도 하나의 2H, 3H, 11C, 13N, 14C, 15O, 18F, 22Na, 24Na, 32P, 47Ca, 51Cr, 57Co, 58Co, 59Fe, 64Cu, 67Ga, 68Ga, 75Se, 81mKr, 82Rb, 89Sr, 90Y, 99mTc, 111In, 123I, 125I, 131I, 133Xe, 153Sm, 165Dy, 169Er, 177Lu, 186Re, 198Au, 201Tl 및/또는 223Ra 원자를 포함하는 임의의 화합물을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
조영제의 예는 디아트리조산, 메트리조산, 아이오다미드, 아이오탈람산, 아이옥시탈람산, 아이오글릭산, 아세트리조산, 이오카름산, 메티오달, 디오돈, 메트리자미드, 아이오헥솔, 아이옥사글산, 아이오파미돌, 아이오프로미드, 아이오트롤란, 아이오베르솔, 아이오펜톨, 아이오딕사놀, 아이오메프롤, 아이오비트리돌, 아이옥실란, 요오독삼산, 아이오트록산, 아이오글리캄산, 아디피오돈, 아이오벤잠산, 아이오파노산, 아이오세탐산, 나트륨 아이오포데이트, 티로파노산, 칼슘 아이오포데이트, 아이오피돌, 프로필리오돈, 아이오펜딜레이트, 리피오돌, 황산바륨, 가도벤산, 가도부트롤, 가도디아미드, 가도포스베세트, 가돌리늄, 가도펜테트산, 가도테르산, 가도테리돌, 가도베르세타미드, 가독세트산, 제2철 암모늄 시트레이트, 만가포디피르, 페루목실, 페리스텐, 페르풀루브론, 인간 알부민의 미소구, 갈락토스의 미세입자, 퍼플레나펜트, 인지질의 미소구, 육불소화황 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 추가의 목적은 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합하는 항체 또는 이의 결합 단편을 포함하는 조성물이다.
본 발명의 추가의 목적은 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합하는 항체 또는 이의 결합 단편을 인코딩하는 적어도 하나의 핵산을 포함하는 조성물이다.
본 발명의 추가의 목적은 다른 목적이 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합하는 항체 또는 이의 결합 단편을 인코딩하는 적어도 하나의 핵산을 포함하는 적어도 하나의 발현 벡터를 포함하는 조성물이다.
본 발명의 추가의 목적은 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합하는 항체 또는 이의 결합 단편; 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물이다.
본 발명의 추가의 목적은 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합하는 항체 또는 이의 결합 단편을 인코딩하는 적어도 하나의 핵산; 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물이다.
본 발명의 추가의 목적은 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합하는 항체 또는 이의 결합 단편을 인코딩하는 적어도 하나의 핵산을 포함하는 적어도 하나의 발현 벡터; 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제 또는 비히클을 포함하는 약제학적 조성물이다.
용어 "약제학적으로 허용되는 부형제"는 임의의 및 모든 용매, 분산 매체, 코팅제, 항균제 및 항진균제, 등장성 및 흡수 지연 제제 등을 포함한다. 상기 부형제는 동물, 바람직하게는 인간에게 투여될 때 부작용, 알레르기 또는 다른 부적당한 반응을 생성하지 않는다. 인간 투여를 위해, 제제는, 예를 들어, FDA 사무실 또는 EMA와 같은 규제 사무실에 의해 요구되는 무균성, 발열성 및 일반적 안전성 및 순도 표준을 충족시켜야 한다.
이러한 조성물에 사용될 수 있는 약제학적으로 허용되는 부형제는 이온 교환제, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 레시틴, 혈청 단백질, 예를 들어, 인간 혈청 알부민, 완충 물질, 예를 들어, 포스페이트, 글리신, 소르브산, 칼륨 소르베이트, 포화된 식물성 지방산, 물, 염 또는 전해질의 부분 글리세라이드 혼합물, 예를 들어, 프로타민 설페이트, 인산수소이나트륨, 인산수소칼륨, 염화나트륨, 아연 염, 콜로이드성 실리카, 삼규산마그네슘, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로스 기반 물질(예: 나트륨 카복시메틸셀룰로스), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 중합체, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모지를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 약제학적 조성물은 대상체에게 주입될 수 있는 제형에 약제학적으로 허용되는 비히클을 포함한다. 이들은 특히 등장성, 무균성, 식염수 용액(인산일나트륨 또는 인산이나트륨, 염화나트륨, 염화칼륨, 염화칼슘 또는 염화마그네슘 등 또는 이러한 염의 혼합물), 또는 경우에 따라 멸균수 또는 생리 식염수의 첨가시 주사 가능한 용액의 구성을 허용하는 건조, 특히 동결건조된 조성물일 수 있다.
본 발명의 추가의 목적은 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합하는 항체 또는 이의 결합 단편을 포함하는 의약이다.
본 발명의 추가의 목적은 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합하는 항체 또는 이의 결합 단편을 인코딩하는 적어도 하나의 핵산을 포함하는 의약이다.
본 발명의 추가의 목적은 본 발명에 따르는 hCD45RC에 결합하는 항체 또는 이의 결합 단편을 인코딩하는 적어도 하나의 핵산을 포함하는 적어도 하나의 발현 벡터를 포함하는 의약이다.
본 발명은 추가로 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약을 투여하여 이를 필요로 하는 대상체에서 면역 내성을 유발하는 방법에 관한 것이다. 그것은 또한 이를 필요로 하는 대상체에서 면역 내성을 유도하는 데 사용하기 위한 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약에 관한 것이다.
본원에 사용된 용어 "면역 내성"은 다른 물질 또는 조직에 대한 면역 반응을 보존하면서 면역 반응을 유발하는 능력을 갖는 특정 물질 또는 조직에 대한 면역계의 무반응 상태에 관한 것이다.
본원에 사용된 용어 "면역 반응"은 T 세포 매개 및/또는 B 세포 매개 면역 반응을 포함한다. 예시적 면역 반응은 T 세포 반응(예: 사이토카인 생산 및 세포상 세포독성) 뿐만 아니라 T 세포 활성화(예: 대식세포)에 의해 간접적으로 영향을 받은 면역 반응을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 면역 반응에 포함되는 면역 세포는 림프구(예: CD4+, CD8+, Th1 및 Th2 세포를 포함하는 B 세포 및 T 세포), 항원 제시 세포(예: 전문적인 항원 제시 세포, 예를 들어, 수지상 세포), 자연 살해 세포, 골수 세포(예: 대식세포, 호산구, 비만 세포, 호염기구 및 과립구)를 포함한다.
본 발명은 추가로 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약을 투여하여 이를 필요로 하는 대상체에서 CD45RC고 세포를 고갈시키는 방법에 관한 것이다. 그것은 또한 이를 필요로 하는 대상체에서 CD45RC고 세포를 고갈시키는 데 사용하기 위한 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약에 관한 것이다.
hCD45RC의 상대적 발현 수준은 세포 계측(cytometry)을 사용하여 측정된다. 3개 유형의 세포가 구별될 수 있다: 높은, 중간 또는 음성 수준의 hCD45RC 발현을 나타내는 세포.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 CD45RC고 T 세포를 고갈시킨다. "CD45RC 고 T 세포"는 상기 정의된 바와 같이, 높은 수준으로 CD45RC 마커를 발현하는 T 세포이다. CD45RC고 T 세포를 고갈시키는 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약이 또한 다른 유형의 CD45RC고 세포, 예를 들어, CD45RC고 NK 세포 또는 CD45RC고 B 세포를 고갈시킬 수 있음을 당업자가 쉽게 이해한다.
CD45RC를 발현하는 세포와 관련하여 본원에 사용된 용어 "고갈시키다" 또는 "고갈시키는 "은 대상체의 세포 수의 측정가능한 감소를 지칭한다. 감소는 적어도 약 10%, 예를 들어, 적어도 약 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상일 수 있다. 일부 구현예에서, 상기 용어는 대상체 또는 샘플에서 CD45RC고 세포의 수가 검출가능한 한계 이하의 양으로 감소함을 지칭한다. 본 발명에 따라서, 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 CD45RC를 강하게 발현하는 이펙터 세포, 특히 CD45RC고 Teff로서 설계된 것들의 고갈을 특이적으로 매개한다.
특히, 본 발명에 따르는 상기 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 hCD45RC에 결합하고 프로아폽토틱 신호를 형질도입하고/하거나 항체 의존적 세포 매개 세포독성(ADCC), 보체 의존성 세포독성(CDC) 또는 항체 의존성 식균 작용을 활성화함으로써 CD45RC고 T 세포를 고갈시킨다.
본원에 사용된 용어 "항체-의존 세포 매개 세포독성" 또는 "ADCC"는 특정 세포독성 세포(예: NK 세포, 호중구, 단핵구 및 대식세포)에 존재하는 Fc 수용체(FcR) 상에 결합된 분비된 항체가 이들 세포독성 이펙터 세포가 항원 보유 표적 세포에 특이적으로 결합하고 이어서 표적 세포를 사멸시키도록 하는 세포독성의 형태를 지칭한다. 관심 있는 분자의 ADCC 활성을 평가하기 위해, 시험관내 ADCC 검정, 예를 들어, 특허 US5,500,362 또는 US5,82l,337에 기재된 것들이 수행될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 보체 의존성 세포 독성을 매개한다.
용어 "보체 의존성 세포 독성" 또는 "CDC"는 보체의 존재하의 표적 세포의 용해를 지칭한다. 고전적인 보체 경로의 활성화는 동족체 항원에 결합된 항체에 대한 보체 시스템의 제1 성분의 결합에 의해 개시된다. 보체 활성화를 평가하기 위해, CDC 검정, 예를 들어, 문헌(참조: Gazzano-Santoro et al., 1997. J Immunol Methods. 202(2):163-71)에 기재된 것이 수행될 수 있다.
특정 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편은 세포 독성제 또는 성장 억제제에 접합될 수 있다.
본 발명은 추가로 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약을 투여하여 이를 필요로 하는 대상체에서 조절성 T 세포를 확장시키고/시키거나 강화하는 방법에 관한 것이다. 그것은 또한 이를 필요로 하는 대상체에서 조절성 T 세포를 확장시키고/시키거나 강화하는 데 사용하기 위한 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약에 관한 것이다.
본원에 사용된 용어 "확장하다"는 소정의 세포 집단(예: 면역 세포, 예를 들어, Treg)을 변환시키고/시키거나 증폭시키는 과정을 지칭한다. 세포 집단의 확장은 생체내, 시험관내 또는 생체외에서 발생할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "강화하다"는 소정의 세포 집단의 기능을 증가시키는(예: Treg 세포의 억제 용량을 증가시키는) 과정을 지칭한다. 세포 집단의 강화는 생체내, 시험관내 또는 생체외에서 발생할 수 있다.
"조절성 T 세포" 또는 "Treg"는 비정상적 또는 과도한 면역 반응을 억제하고 면역 내성에서 역할을 하는 T 세포이다. Treg는 전형적으로 "포크헤드 박스 P3 (Foxp3+) 조절성 T 세포" 및/또는 "CD45RC저/- 세포"이다.
본원에 사용된 용어 "포크헤드 박스 P3 (Foxp3 + ) 조절성 T 세포" 및/또는 "CD45RC 저/- 세포"는 특징적인 마커가 전사 인자 Foxp3인 인간 및 설치류에서 0.1 내지 10%의 CD4+ 및/또는 CD8+ T 세포를 지칭한다.
하나의 구현예에서, 상기 방법 및 용도는 Foxp3+ 및/또는 CD45RC저/- Treg를 확장하고/하거나 강화시키기 위한 것이다.
하나의 구현예에서, CD45RC저/- Treg는 자극에 의해 확장된다. 하나의 구현예에서, CD45RC저/- Treg는 IF-2 및 IF-15의 존재하에 자극에 의해 확장된다. 하나의 구현예에서, CD45RC저/- Treg는 항-CD3/항-CD28 항체 및/또는 동종이계 항원-제시 세포(APC) 및/또는 특정 항원에 의한 자극에 의해 확장된다.
추가로 또는 대안적으로, 본 발명은 CD45RC저/- Treg를 정제하는 시험관내 또는 생체외 방법에 관한 것이다.
하나의 구현예에서, CD45RC저/- Treg는 CD8+/CD4+ T 세포이다. 하나의 구현예에서, CD45RC저/- Treg는 CD8+/CD4- T 세포이다. 하나의 구현예에서, CD45RC저/- Treg는 CD8-/CD4+ T 세포이다.
하나의 구현예에서, 정제된 CD45RC저/- Treg는 이를 필요로 하는 대상체에게 투여 전, 투여와 동시에 또는 투여 후에 추가로 확장되고/되거나 강화될 수 있다.
본 발명은 추가로 이를 필요로 하는 대상체에게 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약을 투여하여 이식 거부를 예방하고/하거나 감소시키는 방법에 관한 것이다. 그것은 또한 이를 필요로 하는 대상체에서 이식 거부를 예방하고/하거나 감소시키는 데 사용하기 위한 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약에 관한 것이다.
용어 "이식 거부를 예방하는 " 및 "이식 거부를 감소시키는 "은 면역 이식 거부의 예방 또는 억제뿐만 아니라 면역 이식 거부의 발생 또는 진행을 지연시킴을 포함하는 것을 의미한다. 상기 용어는 또한 대상체에서 이식체의 생존을 연장시키거나 대상체에서 이식의 실패를 역전시킴을 포함하는 것을 의미한다. 또한, 상기 용어는, 예를 들어, 면역 거부와 관련된 면역학적 합병증, 예를 들어, 간질성 섬유증(interstitial fibrosis), 만성 이식 동맥경화증(chronic graft arteriosclerosis) 또는 혈관염(vasculitis)을 개선시킴을 포함하여 면역 이식 거부 증상을 개선시킴을 포함하는 것을 의미한다.
용어 "이식" 및 이의 변형은 이식이 동종(공여자 및 수령자가 유전적으로 동일한 경우), 동종 이계(공여자 및 수령자가 상이한 유전적 기원이지만 동일한 종인 경우) 또는 이종 이계(공여자 및 수령자가 상이한 종으로부터 유래되는 경우)이든 수령자에게 이식체(또한 이식편이라 칭명됨)의 삽입을 지칭한다. 따라서, 전형적인 시나리오에서, 숙주는 인간이고, 이식편은 동일하거나 상이한 유전적 기원의 인간으로부터 유래된 동종이식편이다. 다른 시나리오에서, 이식편은 계통학적으로 널리 분리된 종의 동물을 포함하여 그것이 이식된 것과 상이한 종으로부터 유래되고, 예를 들어, 인간 숙주에 이식된 비비 심장이다.
본원에 사용된 용어 "이식 거부"는 급성 및 만성 이식 거부 모두를 포함한다.
"급성 거부"는 이식된 조직이 면역학적으로 이물인 경우 조직 이식체-수령자의 면역계에 의한 거부이다. 급성 거부는 이펙터 기능을 수행하고 이식 조직을 파괴하는 수령자의 면역 세포에 의한 이식 조직의 침윤을 특징으로 한다. 급성 거부의 발생은 빠르고, 일반적으로 이식 수술 후 수주 내에 인간에서 발생한다. 일반적으로, 급성 거부는 면역억제 약물, 예를 들어, 라파마이신, 사이클로스포린, 항-CD40L 모노클로날 항체 등으로 억제 또는 억압될 수 있다.
"만성 거부"는 일반적으로 급성 거부의 성공적인 면역 억제의 존재하에서도 생착 후 수 개월 내지 수 년 내에 인간에서 발생한다. 섬유증은 모든 종류의 기관 이식의 만성 거부에서 공통 인자이다
하나의 구현예에서, 이식 거부는 동종이계 이식 거부이다. 따라서, 하나의 구현예에서, 이식의 공여자는 인간이다. 이식의 공여자는 살아있는 공여자 또는 사망한 공여자, 즉 사체 공여자일 수 있다.
하나의 구현예에서, 이식체는 기관, 조직 또는 세포이다.
본원에 사용된 용어 "기관"은 유기체 내에서 특정 기능 또는 기능의 그룹을 수행하는 고형 혈관화 기관을 지칭한다. 용어 기관은 심장, 폐, 신장, 간, 췌장, 피부, 자궁, 골, 연골, 소장 또는 대장, 방광, 뇌, 유방, 혈관, 식도, 나팔관, 담낭, 난소, 췌장, 전립선, 태반, 척수, 상부 및 하부 포함 사지, 비장, 위, 고환, 흉선, 갑상선, 기관, 수뇨관, 요도, 자궁을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본원에 사용된 용어 "조직"은 인간 또는 동물에서 임의 유형의 조직을 지칭하고, 혈관 조직, 피부 조직, 간 조직, 췌장 조직, 신경 조직, 비뇨생식기 조직, 위장 조직, 골 및 연골을 포함하는 골격 조직, 지방 조직, 힘줄 및 인대를 포함하는 결합 조직, 양막 조직, 융모막 조직, 두라, 심막, 근육 조직, 선상 조직, 안면 조직, 안구 조직을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본원에 사용된 용어 "세포"는 관심 있는 세포가 풍부한 조성물, 바람직하게는 상기 세포를 적어도 30%, 바람직하게는 적어도 50%, 더욱 더 바람직하게는 적어도 65%를 포함하는 조성물을 지칭한다.
하나의 구현예에서, "세포"는 골수, 말초 혈액 또는 제대혈로부터 유도된 다분화능 조혈 줄기 세포; 또는 다능성(즉, 배아 줄기 세포[ES] 또는 유도된 다능성 줄기 세포[iPS]) 또는 심장 근육 세포, β-췌장 세포, 간세포, 뉴런 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는 상이한 세포 계통의 다분화능 줄기 세포 유래 분화 세포를 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터 선택된다.
이식이 동종 이계 조혈 줄기 세포 이식(HSCT)인 하나의 구현예에서, "세포"는 일반적으로 골수, 말초 혈액 또는 제대혈로부터 유래된 다분화능 조혈 줄기 세포를 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터 선택된다.
"HSCT" 또는 "조혈 줄기 세포 이식"은 백혈병 및 림프종(제한 없이, 급성 골수성 백혈병(acute myeloid leukemia; AML), 급성 림프구성 백혈병(acute lymphoid leukemia; ALL), 만성 골수성 백혈병(chronic myeloid leukemia; CML), 골수이형성 증후군(myelodysplasia syndrome; MDS), 골수증식성 증후군(myeloproliferative syndrome), 호지킨 림프종(Hodgkin lymphoma), 비-호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma), 만성 림프성 백혈병(chronic lymphatic leukemia; CLL) 및 다발성 골수종(multiple myeloma)을 포함)으로 영향을 받은 환자에 대해 치료력이 있을 수 있는 이식 요법이다. 그러나, 동종 이계 HSCT의 중요한 제한은 이식편-대-숙주 질환(GVHD)의 발생이며, 이는 이 요법을 받는 인간의 약 30 내지 50%에서 중증 형태로 발생한다.
따라서, 하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 GVHD를 예방하고/하거나 감소시키는 데 사용된다.
추가의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 백혈병 및/또는 림프종(제한 없이, 급성 골수성 백혈병(AML), 급성 림프구성 백혈병(ALL), 만성 골수성 백혈병(CML), 골수이형성 증후군(MDS), 골수증식성 증후군, 호지킨 림프종, 비-호지킨 림프종, 만성 림프성 백혈병(CLL) 및 다발성 골수종을 포함)을 예방하고/하거나 치료하기 위해 다분화능 조혈 줄기 세포와 조합하여 사용될 수 있다.
추가로 또는 대안적으로, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 이식편 조작용으로 사용될 수 있다.
하나의 구현예에서, 이식될 이식체는 CD45RC고 세포를 고갈시키기 위해 이식 전에 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약으로 처리된다.
바람직한 구현예에서, 이식체는 골수이고, CD45RC고 세포를 고갈시키기 위해 이식 전에 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약으로 처리된다. 하나의 구현예에서, 골수는 CD45RC고 T 세포 및 CD45RC저/- T 세포를 함유하는 CD34+ 세포를 포함한다.
본 발명은 추가로 이를 필요로 하는 대상체에게 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약을 투여하여 CD45RC고-관련 질환, 장애 또는 상태를 예방하고, 감소시키고/시키거나 치료하는 방법에 관한 것이다. 그것은 또한 CD45RC고-관련 질환, 장애 또는 상태를 예방하고/하거나 치료하는 데 사용하기 위한 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약에 관한 것이다.
본원에 사용된 용어 "CD45RC 고 -관련 질환, 장애 또는 상태"는 대상체에서 hCD45RC 세포를 발현하는 세포의 증가된 비율에 의해 및/또는 대상체의 세포에서 hCD45RC의 발현의 증가된 수준에 의해 유발되거나 가능하게 되는 질환, 장애 또는 상태를 지칭한다.
"대상체에서 CD45RC 고 세포의 증가된 비율"이란, 예를 들어, 실질적으로 건강한 대상체에서 CD45RC고 세포의 수와 같은 참조와 비교하여 소정의 대상체에서 CD45RC(즉, CD45RC고 세포)를 발현하는 세포의 수의 약 5%, 바람직하게는 약 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100% 이상의 증가를 의미한다.
"대상체의 세포에서 hCD45RC의 발현의 증가된 수준"이란, 예를 들어, 실질적으로 건강한 대상체의 세포에서 hCD45RC의 발현 수준과 같은 참조와 비교하여 소정의 대상체의 세포에서 mRNA 수준이든 단백질 수준이든 hCD45RC의 발현 수준의 약 5%, 바람직하게는 약 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100% 이상의 증가를 의미한다.
하나의 구현예에서, hCD45RC고-관련 질환, 장애 또는 상태는 자가 면역 질환, 원하지 않은 면역 반응, 단일유전자 질환 및 림프종 또는 암을 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, hCD45RC고-관련 질환, 장애 또는 상태는 자가 면역 질환, 원하지 않은 면역 반응 및 단일유전자 질환을 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터 선택된다.
본원에 사용된 용어 "자가 면역 질환"은 면역계가 조직에 대한 결과적인 손상과 함께 정상 숙주의 일부인 항원(즉, 자가-항원)에 대해 면역 반응(예: B 세포 또는 T 세포 반응)을 생성하는 질환을 지칭한다. 자가 면역 질환에서, 숙주의 면역계는 "자기"로서 특정 항원을 인식하지 못하고, 항원을 발현하는 숙주 조직에 대해 면역 반응이 장착된다.
본 발명에서 고려되는 예시적 자가 면역 질환은 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis), 청소년 소수관절염(juvenile oligoarthritis), 콜라겐-유발 관절염(collagen-induced arthritis), 보조제 유도 관절염(adjuvant-induced arthritis), 쇼그렌 증후군(Sjogren’s syndrome), 다발성 경화증(multiple sclerosis), 실험용 자가 면역 뇌척수염(experimental autoimmune encephalomyelitis), 염증성 장 질환(inflammatory bowel disease)(크론병(Crohn’s disease) 및 궤양성 대장염(ulcerative colitis) 포함), 자가 면역 위 위축(autoimmune gastric atrophy), 심상성 천포창(pemphigus vulgaris), 건선(psoriasis), 백반증(vitiligo), 유형 1 당뇨병(type 1 diabetes), 비비만형 당뇨병(non-obese diabetes), 중증 근무력증(myasthenia gravis), 그레이브스병(Grave’s disease), 하시모토의 갑상선염(Hashimoto’s thyroiditis), 경화성 담관염(sclerosing cholangitis), 경화성 타액선염(sclerosing sialadenitis), 전신 홍반성 낭창(systemic lupus erythematosis), 자가 면역 혈소판 감소성 자반증(autoimmune thrombocytopenia purpura), 굿파스쳐 증후군(Goodpasture's syndrome), 애디슨병(Addison's disease), 전신 경화증(systemic sclerosis), 다발성근염(polymyositis), 피부근염(dermatomyositis), 후천적 혈우병(acquired hemophilia), 혈전성 혈소판 감소성 자반증(thrombotic thrombocytopenic purpura), 포도막염(uveitis), IgG4-관련 자가 면역 질환(예: 예를 들어, 문헌(참조: Kleger et al., 2015. Dtsch Arztebl Int. 112(8):128-135)의 표 1에 나열된 질환, 이 표는 참조로 포함된다) 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
바람직한 구현예에서, 자가 면역 질환은 전신 홍반성 낭창이다.
바람직한 구현예에서, 자가면역 질환은 크론병 및 궤양성 대장염을 포함하는 염증성 장 질환이다. 바람직한 구현예에서, 자가 면역 질환은 크론병이다. 바람직한 구현예에서, 자가 면역 질환은 궤양성 대장염이다.
본원에 사용된 용어 "원하지 않은 면역 반응"은 임의의 불필요한 면역 반응, 바람직하게는 (i) 유전자 요법 도중에 발현된 단백질, (ii) 유전자 요법 도중에 사용된 벡터(예: 바이러스 벡터) 및/또는 치료 단백질에 지시된 임의의 불필요한 면역 반응을 지칭한다. 이러한 단백질은, 예를 들어, 인자 VIII(혈우병 A) 및 다른 응고 인자, 효소 대체 요법, 모노클로날 항체(예: 나탈리주맙, 리툭시맙, 인플릭시맙), 폴리클로날 항체, 효소 및 사이토카인(예: IFNβ)을 포함한다. 용어 "원하지 않는 면역 반응"은 또한 알레르기 및 알레르기 반응을 지칭한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 면역 반응을 억제하기 위해, 특히 그들의 발현이 상응하는 유전적 결핍을 갖는 대상체에서 유전자 요법에 의해 복원될 때 특정 단백질에 대한 면역 반응을 예방하기 위해 대상체에게 투여될 수 있다. 따라서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 보통 돌연변이로 인해 대상체에서 부재인 단백질에 대한 면역 반응성을 방지하기 위해 사용될 수 있는 반면, 그들의 재구성은 유전자 요법에 의해 달성된다. 더욱이, 단백질 요법은 더 널리 보급되고 있는 의학적 혁신의 영역이고, 치료 생성물로서 대상체에게 효소, 항체 또는 사이토카인과 같은 단백질의 직접 적용을 포함한다. 이러한 의약의 전달에서 주요 장애물 중 하나는 치료 단백질 자체에 대해 지시된 면역 반응을 포함한다. 단백질 기반 치료제의 투여는 종종 단백질의 더 긴 수명 및 따라서 유기체의 세포 및 조직으로 단백질의 증가된 흡수를 촉진시키기 위해 사용된 면역 억제제의 투여에 의해 동반된다. 그러나, 일반적인 면역 억제제는 수행되어 환자에서 불필요한 부작용을 초래하는 면역 억제의 비특이적 특성으로 인해 불리할 수 있다. 따라서, 이 접근법은 치료 항체, 사이토카인, 효소 또는 환자에게 투여된 임의의 다른 단백질과 같은 치료 단백질 및 펩티드에 대한 면역 반응을 억제하기 위해 적용될 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 면역 반응을 억제하기 위해, 특히 유전자 요법에 사용된 벡터, 특히 유전자 요법에 사용된 바이러스 벡터에 대한 면역 반응을 방지하기 위해 대상체에게 투여될 수 있다. 이러한 바이러스 벡터는, 예를 들어, 아데노 관련 바이러스(AAV) 벡터, 아데노바이러스(Ad) 벡터, 렌티 바이러스 벡터 등을 포함한다. 검토를 위해, 문헌(참조: Nayak & Herzog, 2010. Gene Ther. 17(3):295-304)을 참조한다.
본원에 사용된 용어 "알레르기" 또는 "알레르기들"은 면역계의 부적절한 반응을 지칭한다. 알레르기 반응은 알레르겐으로서 공지된 통상의 무해한 환경 물질에 일어나고; 이러한 반응이 후천적이고, 예측 가능하며 빠르다. 엄밀하게, 알레르기는 4가지 형태의 과민증 중 하나이며, 유형 I (또는 즉각적인) 과민증이라 칭명된다. 그것은 IgE로서 공지된 항체의 유형에 의해 비만 세포 및 호염기구로서 칭명되는 특정 백혈구의 과도한 활성화로 극한의 염증 반응을 초래함을 특징으로 한다. 통상의 알레르기 반응은 습진, 두드러기, 건초 열, 천식, 식품 알레르기, 및 말벌 및 꿀벌과 같은 찌르는 곤충의 독에 대한 반응을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "단일유전자 질환"은 다음 유전자 중에서 선택된 단일 유전자의 돌연변이로부터 생성되는 질환을 지칭한다:
(i) 면역 기능과 관련되지 않지만, 이의 결핍이 염증 및/또는 면역 반응과 관련되는 유전자, 예를 들어, 다음 질환에서 결핍된 유전자: 뒤센형 근이영양증(Duchenne muscular dystrophy; DMD), 낭성 섬유증(cystic fibrosis), 리소좀 질환(lysosomal diseases) 및 α1-항-트립신 결핍; 및
(ii) 면역계에 관련되고 이의 결핍이 염증 및/또는 자가면역 반응을 생성하는 유전자, 예를 들어, 다음 질환에서 결핍된 유전자: T 세포 원발성 면역결핍, 예를 들어, IPEX(면역 조절 장애 다발성 내분비병증 장질환 X-연관 증후군(immunodysregulation polyendocrinopathy enteropathy X-linked syndrome)), APECED(자가 면역 다발성 내분비병증-칸디다증-외배엽 이영양증(polyendocrinopathy-candidiasis-ectodermal dystrophy)), B 세포 원발성 면역결핍, 머크-웰스 증후군(Muckle-Wells syndrome), 혼합된 자가 염증성 및 자기 면역 증후군, NLRPl2-관련 유전성 주기적 발열 증후군 및 종양 괴사 인자 수용체 1 관련 주기적 증후군.
바람직한 구현예에서, 자가 면역 질환은 APECED(자가 면역 다발성 내분비병증-칸디다증-외배엽 이영양증)이다.
바람직한 구현예에서, 자가 면역 질환은 뒤셴형 근이영양증(DMD)이다.
본원에 사용된 용어 "림프종 또는 암"은 CD45RC고 세포와 관련된 림프종 또는 암을 포함한다. CD45RC고 세포와 관련된 예시적인 림프종 또는 암은 급성 골수성 백혈병(AML), 급성 림프구성 백혈병(ALL), 만성 골수성 백혈병(CML), 골수이형성 증후군(MDS)/골수증식성 증후군, 림프종(예: 호지킨 및 비호지킨 림프종), 만성 림프성 백혈병(CLL) 및 다발성 골수종을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
따라서, 본 발명은 이를 필요로 하는 대상체에서 CD45RC고 세포를 고갈시키고, 이로써 조절성 T 세포, 바람직하게는 Foxp3+ 및/또는 CD45RC저 Treg를 확장하고/하거나 강화시키고, 이에 의해 이식 거부를 예방하고/하거나 감소시키거나; 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약을 투여하여 hCD45RC고-관련 질환, 장애 또는 상태를 예방하고, 감소시키고/시키거나 치료하는 방법에 관한 것이다.
바람직한 구현예에서, hCD45RC고-관련 질환, 장애 또는 상태는 전신 홍반성 낭창, 염증성 장 질환(크론병 및 궤양성 대장염 포함), APECED(자가 면역 다발성 내분비병증-칸디다증-외배엽 이영양증) 또는 뒤셴형 근이영양증(DMD)이다.
바람직한 구현예에서, hCD45RC고-관련 질환, 장애 또는 상태는 전신 홍반성 낭창, 염증성 장 질환(크론병 및 궤양성 대장염 포함) 또는 APECED(자가 면역 다발성 내분비병증-칸디다증-외배엽 이영양증)이다.
그것은 또한 이를 필요로 하는 대상체에서 hCD45RC고 세포를 고갈시키고, 이에 의해 조절성 T 세포, 바람직하게는 Foxp3+ 및/또는 CD45RC저 Treg를 확장하고/하거나 강화시키고, 이에 의해 이식 거부를 예방하고/하거나 감소시키거나; hCD45RC고-관련 질환, 장애 또는 상태를 예방하고, 감소시키고/시키거나 치료하는 데 사용하기 위한 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약에 관한 것이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 대상체에게 투여용으로 제형화될 것이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 전신 또는 국소 투여되어야 한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 주사, 경구, 국소, 비강내, 협측, 직장내, 질내, 기관내, 내시경 검사, 경점막 또는 경피 투여로 투여되어야 한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 주사되어야 하고, 바람직하게는 전신 주사되어야 한다.
주사에 적합한 제형의 예는 용액, 예를 들어, 멸균 수용액, 겔, 분산액, 유제, 현탁액, 사용 직전 액체 첨가시 용액 또는 현탁액을 제조하는데 사용하기에 적합한 고체 형태, 예를 들어, 분말, 리포좀 형태 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
전신 주사의 예는 정맥내(iv), 피하, 근육내(im), 피내(id), 복강내(ip) 주사 및 관류를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
하나의 구현예에서, 주사될 때, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 무균성이다. 무균 조성물을 수득하는 방법은 GMP 합성(여기서, GMP는 "우수 의약품 제조 및 품질관리 기준(Good manufacturing practice)"을 나타낸다)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
조성물의 무균 주사 가능한 형태는 수성 또는 유성 현탁액일 수 있다. 이러한 현탁액은 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용하여 당업계에 공지된 기술에 따라 제형화될 수 있다. 무균 주사 가능한 제제는 또한 비경구로 허용되는 비독성 희석제 또는 용매 중 무균 주사 가능한 용액 또는 현탁액일 수 있다. 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액,및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 무균 비휘발성 오일은 통상적으로 용매 또는 현탁화 매질로서 사용된다. 이 목적을 위해, 합성 모노- 또는 디글리세라이드를 포함하는 임의의 블렌드 비휘발성 오일이 사용될 수 있다. 특히 그들의 폴리옥시에틸화 버전으로 올리브 오일 또는 피마자유와 같은 천연의 약제학적으로 허용되는 오일과 같이, 지방산, 예를 들어, 올레산 및 이의 글리세라이드 유도체는 주사 가능물의 제조에 유용하다. 이러한 오일 용액 또는 현탁액은 또한 유제 및 현탁액을 포함하는 약제학적으로 허용되는 투여 형태의 제형에 통상적으로 사용되는 장쇄 알콜 희석제 또는 분산제, 예를 들어, 카복시메틸 셀룰로스 또는 유사한 분산제를 함유할 수 있다. 약제학적으로 허용되는 고체, 액체 또는 다른 투여 형태의 제조에 통상적으로 사용되는 다른 통상적으로 사용되는 계면활성제, 예를 들어, Tweens, Spans 및 다른 유화제 또는 생체 이용률 향상제도 또한 제형화 목적으로 사용될 수 있다
투여의 다른 적합한 경로가 또한 본 발명에서 고려되고, 투여 방식은 건전한 의학적 판단 범위 내에서 주치의에 의해 최종적으로 결정될 것으로 이해될 것이다. 주사에 의한 투여(iv, ip, im 등) 이외에, 다른 경로, 예를 들어, 분무화(참조: Respaud et al., 2014. MAbs. 6(5):1347-55; Guilleminault et al., 2014. J Control Release. 196:344-54; Respaud et al., 2015. Expert Opin Drug Deliv. 12(6):1027-39) 또는 피하 투여(참조: Jackisch et al., 2014. Geburtshilfe Frauenheilkd. 74(4):343-349; Solal-Celigny, 2015. Expert Rev Hematol. 8(2):147-53)가 이용 가능하다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 이를 필요로 하는 대상체에게 치료적 유효량으로 투여되어야 한다.
본원에 사용된 용어 "치료적 유효량"은 필요한 용량 및 시간 동안 목적하는 예방적 및/또는 치료적 결과를 달성하기에 효과적인 양을 지칭한다.
그러나, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 총 1일 사용량은 건전한 의학적 판단 범위 내에서 주치의에 의해 결정될 것으로 이해될 것이다. 임의의 특정 환자를 위한 특정의 치료적으로 유효한 투여량 수준은 치료될 질환 및 질환의 중증도; 사용되는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 활성; 대상체의 나이, 체중, 일반적 건강 상태, 성별 및 식이; 사용되는 특정의 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 투여 시기, 투여 경로 및 배설 비율; 치료의 지속 기간; 사용되는 특정의 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약과 조합하여 또는 동시에 사용된 약물; 및 의학 분야에 익히 공지된 유사 인자를 포함하는 다양한 인자에 좌우된다. 예를 들어, 목적하는 치료 효과를 달성하는데 필요한 것보다 낮은 수준에서 화합물의 투여량을 개시하고, 목적하는 효과가 달성될 때까지 용량을 점차적으로 증가시키는 것은 당업자의 기술 내에 있다. 각 치료에 필요한 총 투여량은 다수의 투여량 또는 단일 투여량으로 투여될 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 치료적 유효량은 약 0.1mg/kg 내지 약 5mg/kg, 약 0.2mg/kg 내지 약 4mg/kg, 약 0.3mg/kg 내지 약 3mg/kg, 약 0.4mg/kg 내지 약 2.5mg/kg, 약 0.5mg/kg 내지 약 2mg/kg의 범위이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 치료적 유효량은 약 10㎍/kg 내지 약 400㎍/kg, 약 20㎍/kg 내지 약 300㎍/kg, 약 30㎍/kg 내지 약 250㎍/kg, 약 35㎍/kg 내지 약 200㎍/kg, 약 40㎍/kg 내지 약 160㎍/kg 범위이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 치료적 유효량은 1일 1회, 1일 2회, 1일 3회 또는 그 이상으로 투여되어야 한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 치료적 유효량은 매일, 2일 마다, 3일 마다, 4일 마다, 5일 마다, 6일 마다 투여되어야 한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 치료적 유효량은 매주, 2주 마다, 3주 마다 투여되어야 한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 치료적 유효량은 매월, 2개월 마다, 3개월 마다, 4개월 마다, 5개월 마다, 6개월 마다 투여되어야 한다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 치료적 유효량은 12시간 마다, 24시간 마다, 36시간 마다, 48시간 마다, 60시간 마다, 72시간 마다, 96시간 마다 투여되어야 한다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 치료적 유효량은 60시간 마다 투여되어야 한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 급성 투여를 위한 것이다. 하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 만성 투여를 위한 것이다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 치료적 유효량은 약 5일, 7일, 10일, 14일, 21일, 28일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 1년 또는 그 이상 동안 투여되어야 한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 치료적 유효량은 약 1주 내지 약 8주, 약 2주 내지 약 7주, 약 2주 내지 약 6주, 약 2주 내지 약 5주 범위의 기간 동안 투여되어야 한다..
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 치료적 유효량은 약 10일 내지 약 40일, 약 15일 내지 약 35일, 약 20일 내지 약 30일 범위의 기간 동안 투여되어야 한다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약은 치료 약물 전에, 동시에 또는 후에 투여되어야 한다.
본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약과 공동 투여에 적합한 치료 약물의 일부 예는, 제한 없이, 면역억제제, 세포 독소, 화학요법제, 사이토카인, 면역 자극제, 용해 펩티드 및 방사성 동위 원소를 포함한다.
본원에 인용된 것들 중에서 선택될 수 있지만, 이에 제한되지 않는 특정 치료 약물과 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 조성물, 약제학적 조성물 또는 의약의 공동-투여는 예방되고/되거나 치료될 질환 또는 상태에 의존할 것임이 당업자에게 의해 이해될 것이다.
면역억제제의 예는, 제한 없이, mTOR 억제제, 예를 들어, 시롤리무스, 에베롤리무스, 리다포롤리무스, 템시롤리무스, 우미롤리무스 및 조타롤리무스; IL-1 수용체 길항제, 예를 들어, 아나킨라; 항대사물질, 예를 들어, 아자티오프린, 레플루노미드, 메토트렉세이트, 미코페놀산 및 테리플루노미드; IMiD, 예를 들어, 아프레밀라스트, 레날리도마이드, 포말리도마이드 및 탈리도마이드; 및 항체, 예를 들어, 에쿨리주맙, 아달리무맙, 아펠리모맙, 세르톨리주맙 페골, 골리무맙, 인플릭시맙, 네렐리모맙, 메폴리주맙, 오말리주맙, 파랄리모맙, 엘실리모맙, 레브리키주맙, 우스테키누맙, 세쿠키누맙, 무로모납-CD3, 오텔릭시주맙, 테플리주맙, 비실리주맙, 클레놀릭시맙, 켈릭시맙, 자놀리무맙, 에팔리주맙, 에를리주맙, 오비누투주맙, 리툭시맙, 오크렐리주맙, 파스콜리주맙, 고밀릭시맙, 루밀릭시맙, 테넬릭시맙, 토랄리주맙, 아셀리주맙, 갈릭시맙, 가빌리모맙, 루플리주맙, 벨리무맙, 블리시비모드, 이필리무맙, 트레멜리무맙, 베르틸리무맙, 레르델리무맙, 메텔리무맙, 나탈리주맙, 토실리주맙, 오둘리모맙, 바실릭시맙, 다클리주맙, 이놀리모맙, 졸리모맙 아리톡스, 아토롤리무맙, 세델리주맙, 펜톨리주맙, 마슬리모맙, 모롤리무맙, 펙셀리주맙, 레슬리주맙, 로벨리주맙, 시플리주맙, 탈리주맙, 텔리모맙 아리톡스, 바팔릭시맙, 베팔리모맙, 아바타셉트, 벨라타셉트, 에타네르셉트, 페그수네르셉트, 아플리베르셉트, 알레파셉트 및 릴로나셉트를 포함한다.
세포 독소의 예는, 제한 없이, 방사성 핵종(예: 35S, 14C, 32P, 125I, 131I, 90Y, 89Zr, 201Tl, 186Re, 188Re, 57Cu, 213Bi, 및 211At), 접합된 방사성 핵종, 및 화학요법제를 포함한다. 세포 독소의 추가의 예는 항대사물질(예: 5-플루오로우리실(5-FU), 메토트렉세이트(MTX), 플루다라빈 등), 항미소관제(예: 빈크리스틴, 빈블라스틴, 콜키신, 탁산(예: 파클리탁셀 및 도세탁셀) 등), 알킬화제(예: 사이클로파스파미드, 멜팔란, 비스클로로에틸니트로스우레아(BCNU) 등), 백금 제제(예: 시스플라틴(또한, cDDP로 칭명됨), 카보플라틴, 옥살리플라틴, JM-216, CI-973 등), 안트라사이클린(예: 독소루비신, 다우노루비신 등), 항생제(예: 미토마이신-C), 토포아이소머라제 억제제(예: 에토포사이드, 테노포사이드 및 캄프토테신) 또는 다른 세포 독성제, 예를 들어, 리신, 디프테리아 독소(DT), 슈도모나스 외독소(PE) A, 아브린, 사포린, 미국자리공 바이러스 단백질, 브롬화에티듐, 글로코코르티코이드, 탄저병 독소 및 기타를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
화학요법제의 예는, 제한 없이, 백금 배위 화합물(예: 예를 들어, 시스플라틴, 카보플라틴 또는 옥살리플라틴); 탁산 화합물(예: 예를 들어, 파클리탁셀 또는 도세탁셀); 토포아이소머라제 I 억제제(예: 예를 들어, 이리노테칸 또는 토포테칸); 토포아이소머라제 II 억제제(예: 예를 들어, 에토포사이드 또는 테니포사이드); 빈카 알칼로이드(예: 예를 들어, 빈블라스틴, 빈크리스틴 또는 비노렐빈); 항종양 뉴클레오사이드 유도체(예: 예를 들어, 5-플루오로우라실, 젬시타빈 또는 카페시타빈); 알킬화제(예: 예를 들어, 질소 머스타드 또는 니트로소우레아, 사이클로포스파미드, 클로람부실, 카르무스틴 또는 로무스틴; 항종양 안트라사이클린 유도체(예: 예를 들어, 다우노루비신, 독소루비신, 아이다루비신 또는 미토크산트론); 항-HER2 항체(예: 예를 들어, 트라스투주맙); 에스트로겐 수용체 길항제 또는 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(예: 예를 들어, 타목시펜, 토레미펜, 드롤록시펜, 파슬로덱스 또는 랄록시펜); 아로마타제 억제제(예: 예를 들어, 엑세메스탄, 아나스트로졸, 레트라졸 또는 보로졸); 분화제(예: 예를 들어, 레티노이드, 비타민 D 및 레티노산 대사 차단제[RAMBA], 예를 들어, 아큐탄); DNA 메틸 트랜스퍼라제 억제제(예: 예를 들어, 아자시티딘); 키나제 억제제(예: 예를 들어, 플라보페리돌, 이마티닙 메실레이트 또는 게피티닙); 파르네실트랜스퍼라제 억제제; 및 HDAC 억제제를 포함한다.
사이토카인의 예는, 제한 없이, 케모카인(예: 예를 들어, CCL1, CCL2/MCP1, CCL3/MIP1α, CCL4/MIP1β, CCL5/RANTES, CCL6, CCL7, CCL8, CCL9, CCL11, CCL12, CCL13, CCL14, CCL15, CCL16, CCL17, CCL18/PARC/DCCK1/AMAC1/MIP4, CCL19, CCL20, CCL21, CCL22, CCL23, CCL24, CCL25, CCL26, CCL27, CCL28, CXCL1/KC, CXCL2, CXCL3, CXCL4, CXCL5, CXCL6, CXCL7, CXCL8/IL8, CXCL9, CXCL10, CXCL11, CXCL12, CXCL13, CXCL14, CXCL15, CXCL16, CXCL17, CX3CL1, XCL1 및 XCL2), 종양 괴사 인자(예: 예를 들어, TNFA, 림포톡신, TNFSF4, TNFSF5/CD40LG, TNFSF6, TNFSF7, TNFSF8, TNFSF9, TNFSF10, TNFSF11, TNFSF13, TNFSF13B 및 EDA) 및 인터류킨(예: 예를 들어, IL-1α, IL-1β, IL-1Ra, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, IL-19, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-24, IL-25, IL-26, IL-27, IL-28, IL-29, IL-30, IL-31, IL-32, IL-33, IL-34, IL-35, IL-36α, IL-36β, IL-36γ, IL-36Ra, IL-37, IL-38, IFNα, IFNβ, IFNκ, IFNω 및 GM-CSF)을 포함한다.
면역 자극제의 예는, 제한 없이, 필그라스팀, 페그필그라스팀, 레노그라스팀, 몰그라모스팀, 사르그라모스팀, 안세스팀, 알빈테르페론, 인터페론 알파, 페그인터페론 알파, 인터페론 베타, 페그인터페론 베타, 인터페론 감마, 알데스류킨, 오프렐베킨, 성장 호르몬, 이뮤노시아닌, 페가데마제, 프롤락틴, 타소네르민, 히스타민 디하이드로클로라이드, 폴리 ICLC, 비타민 D, 렌티난, 플레릭사포르, 로퀴니멕스, 미파무르티드, 글라티라머 아세테이트, 티모펜틴, 티모신 αl, 티물린, 폴리이노신산:폴리시티딜산, 피도티모드, 바실루스 칼메트-게랭(Bacillus Calmette-Guerin) 백신, 흑색종 백신 및 시풀류셀-T 백신을 포함한다.
용해 펩티드의 예는, 제한 없이, 독소(예: 디프테리아 독소 또는 슈도모나스 외독소)를 포함한다.
방사성 동위 원소의 예는, 제한 없이, 테크네튬(예: Tc-99 및 Tc-97), 칼륨(예: K-40), 루비듐(예: Rb-82), 요오드(예: I-123, I-124, I-125, I-129, I-131), 세슘(예: Cs-135, Cs-137), 코발트(예: Co-60), 팔라듐(예: Pd-103, Pd-107), 카드뮴(예: Cd-113), 스트론튬(예: Sr-89, Sr-90), 유로퓸(예: Eu-55), 주석(예: Sn-121, Sn-126), 인(예: P-32, P-33), 탈륨(예: Tl-201), 인듐(예: In-111), 갈륨(예: Ga-67, Ga-68), 이트륨(예: Y-90), 이리듐(예: Ir-192), 비스무트(예: Bi-213), 라듐(예: Ra-223, Ra-225), 및 루테늄(예: Ru-l06)의 방사성 핵종을 포함한다.
본 발명은 추가로 샘플, 세포, 조직 또는 기관에서 hCD45RC를 검출하거나 정량화하기 위한 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편의 용도; 및 상기 샘플, 세포, 조직 또는 기관을 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편과 접촉시키는 단계를 포함하는, 샘플, 세포, 조직 또는 기관에서 hCD45RC를 검출하거나 정량화하기 위한 방법에 관한 것이다.
하나의 구현예에서, hCD45RC를 검출하거나 정량화하기 위한 용도 및 방법은 시험관내 또는 생체내에서 일 수 있다.
하나의 구현예에서, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편은, 상기 기재된 바와 같이, 검출 또는 진단 목적을 위해 표지된다.
본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편을 사용하여 hCD45RC를 검출하거나 정량화하기에 적합한 검정은 당업계에 익히 공지되어 있고, 제한 없이, ELISA, 샌드위치 ELISA, RIA, FACS, 조직 면역조직화학, 웨스턴-블롯 및 면역침전을 포함한다.
하나의 구현예에서, 샘플은 생물학적 샘플이다. 생물학적 샘플의 예는 체액(바람직하게는 혈액, 더욱 바람직하게는 혈액 혈청), 혈장, 활액, 기관지 폐포 세척액, 가래, 림프, 복수, 소변, 양수, 복막액, 뇌척수액, 흉막액, 심장막액 및 폐포 대식세포, 조직 용해물, 생검 및 병든 조직으로부터 제조된 추출물을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
하나의 구현예에서, 샘플은 임의의 분석 이전에 대상체로부터 취해지거나 검색된다. 따라서, 이 구현예에서, hCD45RC를 검출하거나 정량화하기 위한 용도 및 방법은 시험관내 용도 및 방법이다.
본 발명은 추가로 대상체에서 hCD45RC-관련 질환을 진단하기 위한, 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편의 용도; 및 상기 대상체의 샘플을 본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편과 접촉시키는 단계를 포함하는, 대상체에서 hCD45RC-관련 질환을 진단하기 위한 방법에 관한 것이다.
본 발명에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편을 사용하는 hCD45RC를 검출하거나 정량화하는 적합한 검정은 당업계에 익히 공지되어 있고, 제한 없이, ELISA, 샌드위치 ELISA, RIA, FACS, 조직 면역조직화학, 웨스턴 블롯 및 면역침전을 포함한다.
하나의 구현예에서, 샘플은 생물학적 샘플이다. 생물학적 샘플의 예는 체액(바람직하게는 혈액, 더욱 바람직하게는 혈액 혈청), 혈장, 활액, 기관지 폐포 세척액, 가래, 림프, 복수, 소변, 양수, 복막액, 뇌척수액, 흉막액, 심장막액 및 폐포 대식세포, 조직 용해물, 생검 및 병든 조직으로부터 제조된 추출물을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
하나의 구현예에서, 샘플은 임의의 분석 이전에 대상체로부터 취해지거나 검색된다. 따라서, 이 구현예에서, hCD45RC-관련 질환을 진단하기 위한 용도 및 방법은 시험관내 용도 및 방법이다.
하나의 구현예에서, hCD45RC-관련 질환은 상기 정의된 바와 같이, hCD45RC고-관련 질환이다. 이 구현예에 따라서, 대상체는 hCD45RC가 참조 대상체(예: 실질적으로 건간한 대상체 또는 hCD45RC-관련 질환으로 영향을 받거나 고통받지 않는 것으로 공지된 대상체)에서보다 더 높은 수준, 양 또는 농도에서 상기 대상체의 샘플에서 검출되는 경우, hCD45RC-관련 질환으로 영향을 받았거나 고통받고 있는 것으로 진단될 수 있다.
하나의 구현예에서, hCD45RC-관련 질환을 진단하기 위한 용도 및 방법은 상기 대상체가 hCD45RC-관련 질환으로 영향을 받았거나 고통받고 있는 것으로 진단된 경우, 대상체를 치료하는 단계를 추가로 포함한다.
본 출원은 단리된 항-인간 CD45RC 항체 또는 이의 결합 단편을 개시하며, 여기서 상기 항체 또는 이의 결합 단편은 다음으로 인간 CD45RC에 결합하고:
(i) 5x10-7 M 이하의 평형 해리 상수(KD);
(ii) 1x1O4 M-1sec-1 이상의 결합률(Kon); 및/또는
(iii) 5x10-2 sec-1 이하의 해리율(Koff);
바람직하게는, 상기 KD, Kon 및/또는 Koff는 표면 플라즈몬 공명에 의해 결정된다.
항체 또는 이의 결합 단편은 hCD45RC의 C 결정자에 표시되는 적어도 하나의 에피토프에 결합한다.
항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 23의 적어도 5개의 아미노산 또는 이의 단편; 또는 서열번호 23과 적어도 약 70% 동일성을 공유하는 서열 또는 이의 단편을 포함하는 적어도 하나의 에피토프에 결합한다.
항체는 모노클로날이다.
항체는 뮤린, 키메라 또는 인간화된다.
a) 항체 또는 이의 결합 단편의 중쇄(HCVR)의 가변 영역은 다음 3개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다:
- VH-CDR1: NYYIG (서열번호 1);
- VH-CDR2: X1-IF-X2-GG-X3-Y-X4-N-X5-X6-X7-X8-X9-X10-G (서열번호 2); 및
- VH-CDR3: RNFDY (서열번호 3), 및
b) 상기 항체 또는 이의 결합 단편의 경쇄(LCVR)의 가변 영역은 다음 3개의 CDR을 포함한다:
- VL-CDR1: X11-ASSSVS-X12-YMH (서열번호 12);
- VL-CDR2: X13-TSN-X14-X15-X16 (서열번호 13); 및
- VL-CDR3: X17-QRSSYPLTF (서열번호 14);
여기서,
X1은 Asp (D), Ile (I) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X2는 Pro (P) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X3은 Asp (D), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택되고;
X4는 Thr (T) 및 Ala (A)로부터 선택되고;
X5는 Tyr (Y) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X6은 Ala (A), Asn (N) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X7은 Glu (E), Asp (D), Pro (P) 및 Gln (Q)로부터 선택되고;
X8은 Lys (K) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X9는 Phe (F) 및 Val (V)로부터 선택되고;
X10은 Lys (K) 및 Gln (Q)로부터 선택되고;
X11은 Arg (R) 및 Ser (S)로부터 선택되고;
X12는 Asn (N), Ser (S), Gly (G) 및 빈 위치로부터 선택되고;
X13은 Asn (N) 및 Ala (A)로부터 선택되거나; X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이고;
X14는 Leu (L), Ser (S) 및 Arg (R)로부터 선택되고;
X15는 Pro (P), Ala (A) 및 Gln (Q)로부터 선택되고;
X16은 Ser (S) 및 Thr (T)로부터 선택되고;
X17는 Gln (Q) 및 His (H)로부터 선택된다.
항체 또는 이의 결합 단편은 표 2에 제시된 CDR의 조합을 포함한다.
항체 또는 이의 결합 단편은 다음을 포함한다:
a) 서열번호 61-70으로부터 선택된 HCVR; 및
b) 서열번호 71-90으로부터 선택된 LCVR.
항체 또는 이의 결합 단편은
서열번호 61 및 71; 서열번호 61 및 81; 서열번호 62 및 72;
서열번호 62 및 73; 서열번호 62 및 74; 서열번호 62 및 82;
서열번호 62 및 83; 서열번호 62 및 84; 서열번호 63 및 72;
서열번호 63 및 73; 서열번호 63 및 74; 서열번호 63 및 82;
서열번호 63 및 83; 서열번호 63 및 84; 서열번호 64 및 72;
서열번호 64 및 73; 서열번호 64 및 74; 서열번호 64 및 82;
서열번호 64 및 83; 및 서열번호 64 및 84로부터 선택된 HCVR 및 LCVR의 조합을 포함하고,
여기서, 서열번호 71-74 중 X12는 Asn (N), Ser (S) 및 Gly (G)로부터 선택된다.
본 출원은 또한 상기 기재된 단리된 항체 또는 이의 결합 단편을 인코딩하는 핵산을 개시한다.
본 출원은 또한 상기 기재된 핵산을 포함하는 발현 벡터를 개시한다.
본 출원은 또한 상기 기재된 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 상기 기재된 핵산, 또는 상기 기재된 발현 벡터를 포함하는 조성물을 개시한다.
본 출원은 또한 상기 기재된 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 상기 기재된 핵산, 또는 상기 기재된 발현 벡터, 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 개시한다.
본 출원은 또한 의약으로 사용하기 위한 상기 기재된 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 상기 기재된 핵산, 상기 기재된 발현 벡터, 상기 기재된 조성물 또는 상기 기재된 약제학적 조성물을 개시한다.
상기 기재된 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 상기 기재된 핵산, 상기 기재된 발현 벡터, 상기 기재된 조성물 또는 상기 기재된 약제학적 조성물은
- 이를 필요로 하는 대상체에서 면역 내성을 유도하고;
*- 이식 거부를 예방하고/하거나 감소시키고/시키거나;
- 바람직하게는 자가 면역 질환, 원하지 않은 면역 반응, 단일유전자 질환 및 림프종 또는 암으로부터 선택된 CD45RC고-관련 상태를 예방하고, 감소시키고/시키거나 치료하는 데 사용하기 위한 것이다.
상기 기재된 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 상기 기재된 핵산, 상기 기재된 발현 벡터, 상기 기재된 조성물 또는 상기 기재된 약제학적 조성물은 이식편-대-숙주 질환(GVHD)을 예방하고/하거나 치료하는 데 사용하기 위한 것이다.
도 1은 인간 혈액에서 상이한 백혈구 유형 상에서 (ABIS-45RC에 의해 또는 시판되는 MT2 항체에 의해 검출된 바와 같은) CD45RC의 발현 수준을 도시한다. ABIS-45RC 또는 MT2에 의한 염색은 건강한 자원자의 총 혈액(EDTA)에서 상이한 세포 유형에서 실현되었다. 이어서, 적혈구를 세포 계측기(cytometer) 분석(Navios, Beckman Coulter) 전에 용해시켰다(Versalyse, Beckman Coulter). 세포를 먼저 형태, 이중 세포 및 살아있는 세포 상에 게이팅했다. (A(1) 내지 A(3)) 상이한 백혈구 유형에 대해 분석된 3명의 건강한 자원자 중 한명의 ABIS-45RC 또는 MT2에 의해 검출된 CD45RC 발현의 대표하는 도트 플롯(dot plot) 분석. ABIS-45RC는 좌측 패널에 제시되고, MT2는 우측 패널에 제시된다. x-축은 지시된 바와 같은 백혈구의 각 유형에 대한 세포 계통 마커 표지화의 형광 강도를 나타내고; y-축은 항-CD45RC 항체 표지화의 형광 강도를 나타낸다. 수평선은 상부 좌측 도트 플롯에서 지시된 바와 같은 CD45RC 발현의 고, 중간/저 및 음성 수준을 갖는 세포를 규정하고, 숫자는 각 카테고리에서 세포의 백분율을 나타낸다. (B(1) 및 B(2)) ABIS-45RC(B(1)) 또는 MT2(B(2))로 표지된 3명의 공여자의 상이한 백혈구 유형 상의 CD45RC고, CD45RC저 및 CD45RC-의 평균 발현 +/- SEM.
도 2는 ABIS-45RC와 상업적 항-CD45RC MT2 항체는 모두 동일한 에피토프에 대해 경쟁한다는 것을 보여준다. PBMC는 건강한 자원자의 혈액으로부터 단리되었고, T 세포는 키메라 ABIS-45RC(지시된 농도로) 및 1.33mg/mL에서 표지된 항-CD45RC(마우스 클론 MT2)-FITC와 함께 항-CD3 표지된 Mab로 표지되었다. ABIS-45RC 반응성은 비오틴 당나귀 항-인간 IgG + Strepta PercpCy 5.5 2차 항체를 사용하여 나타냈다. 상부 열의 도트 플롯의 윈도우에서 숫자는 두 항체에 의해 공동 표지된 세포의 백분율을 나타낸다.
도 3은 ABIS-45RC에 의해 유도된 세포독성이 상업적 항-CD45RC MT2와 비교하여 더 높다는 것을 보여준다. 건강한 자원자(n=3)의 PBMC를 37℃에서 배지, 아이소타입 음성 대조군(2.5 또는 10mg/mL), ABIS-CD45RC(2.5 또는 10mg/mL) 또는 양성 대조군으로서 덱사메타손(10mg/mL)과 함께 지시된 시점 동안 배양한 다음, 세포를 아넥신-V-PE로 표지화하여 항-CD3-FITC 마우스 항체 및 아폽토틱 세포로 표지화했다. (a-e) 그래프는 지시된 세포 집단에서 아넥신 V+ 세포의 %를 표시한다. (f) 아넥신 V+(초기 아폽토틱) 및 DAPI+(후기 아폽토틱) 세포의 대표적인 도트 플롯. 숫자는 각 카테고리에서 세포의 백분율을 표시한다.
도 4는 면역 인간화 NSG 면역결핍 마우스에서 GVHD를 치료하기 위해 ABIS-45RC의 사용을 도시한다. (a) 건강한 공여자 자원자의 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)가 이미(-1일째) 아치사적으로(2Gy) 조사된 NSG 면역결핍 마우스에게 정맥내(iv) 주입되었음(0일째)을 보여주는 실험 절차. ABIS-45RC는 0 내지 20일째 사이에 표시된 프로토콜로 복강내(ip) 투여했다. 아이소타입 대조군은 인간 IgG(IVIg 제제)였고, ABIS-45RC와 동일한 프로토콜을 사용하여 투여했다. (b-c) NSG 마우스에 대한 생존 곡선 및 통계는 카플란-마이어 분석(Kaplan-Meier analysis)(* p<0.0l, ** p<0.00l)을 사용하여 분석했다.
도 5는 2개의 농도(좌측 패널에서 2㎍/mL, 우측 패널에서 1㎍/mL)에서 인간화된 ABIS-45RC 항체 변이체 및 뮤린 ABIS-45RC 항체의 인간 T 세포에 대한 반응성을 나타내는 유세포 계측법 도트 플롯의 조합이다. (a) 인간화된 ABIS-45RC 변이체 A; (b) 인간화된 ABIS-45RC 변이체 B; (c) 인간화된 ABIS-45RC 변이체 C; (d) 인간화된 ABIS-45RC 변이체 D; (e) 인간화된 ABIS-45RC 변이체 E; (f) 인간화된 ABIS-45RC 변이체 F; (g) 인간화된 ABIS-45RC 변이체 G; (h) 인간화된 ABIS-45RC 변이체 H; (i) 인간화된 ABIS-45RC 변이체 I; (j) 뮤린 ABIS-45RC.
도 6은 ABIS-45RC(좌측 패널) 및 조작된 Asn/Phe ABIS-45RC(우측 패널) 모두가 인간 T 세포에 대한 동등한 패턴의 반응성을 갖는다는 것을 보여주는 유세포 계측법의 2개의 도트 플롯을 도시한다.
도 7은 3명의 건강한 자원자의 인간 혈액에서 CD3+ 백혈구 상의 CD45RC의 발현 수준을 도시한다. 세포를 먼저 형태, 이중 세포 및 살아있는 세포 상에 게이팅했다. (a) 분석된 3명의 건강한 자원자 중 한명으로부터 뮤린 ABIS-45RC에 의해 검출된 CD45RC 발현의 대표적인 도트 플롯 분석; (b) 분석된 3명의 건강한 자원자 중 하나로부터 인간화된 ABIS-45RC 변이체 Al에 의해 검출된 CD45RC 발현의 대표적인 도트 플롯 분석; (c) 분석된 3명의 건강한 자원자 중 한명으로부터 인간화된 ABIS-45RC 변이체 A3에 의해 검출된 CD45RC 발현의 대표적인 도트 플롯 분석. x-축은 FSC를 나타내고; y-축은 항-CD45RC 항체 표지화의 형광 강도를 나타낸다. 정사각형은 지시된 바와 같은 CD45RC 발현의 고, 중간/저 및 음성 수준의 세포를 규정하고, 숫자는 각 카테고리에서 세포의 백분율을 나타낸다.
도 8은 ABIS-45RC에 의해 또는 인간화된 변이체 Al 및 A3에 의해 유도된 세포 독성이 필적할 만하다는 것을 보여준다. 건강한 자원자의 PBMC를 지시된 시점 동안 37℃에서 아이소타입 음성 대조군(10㎍/mL), 뮤린 ABIS-CD45RC(10㎍/mL), 인간화 변이체 Al(10㎍/mL) 및 인간화 변이체 A3(10㎍/mL)와 함께 배양한 다음, 세포를 아넥신-V-PE로 표지화함으로써 항-CD3 및 항-CD45RA 항체 및 아폽토틱 세포로 표지화했다. 그래프는 아이소타입 대조군 조건과 비교하여 CD3+CD45RAhi 세포(a) 및 CD3- 세포(b)에서 중첩 아폽토시스를 표시한다.
도 9는 마카크 혈액 중 CD3+ 세포(a) 및 CD3- 세포(b) 상에서 (ABIS-45RC 또는 인간화된 변이체 A, Al 및 A3에 의해 검출된 바와 같은) CD45RC의 발현 수준을 도시한다. 세포는 먼저 형태, 이중 세포 및 살아있는 세포에 게이팅했다. ABIS-45RC 또는 ABIS-45RC 인간화된 변이체 A, A1 및 A3에 의해 검출된 CD45RC 발현의 대표적인 도트 플롯 분석. x-축은 FSC를 나타내고; y-축은 항-CD45RC 항체 표지화의 형광 강도를 나타낸다. 정사각형은 지시된 바와 같은 CD45RC 발현의 양성 수준을 갖는 세포를 규정하고, 숫자는 세포의 백분율을 나타낸다.
도 10은 항-인간 CD45RC 치료로 처리된 인간화 마우스의 피부 이식편 생존을 보여준다. 인간 피부 거부를 유도하기 위해 전체 인간 PBMC로 전이된 NSG 마우스는 라파마이신(Rapa)과 함께, 뮤린 ABIS-45RC 또는 인간화된 변이체 A1로 처리되었다. 결과는 피부 이식편 생존 스코어로 표현된다.
실시예
본 발명은 다음 실시예에 의해 추가로 예시된다.
실시예 전반에 걸쳐, 다음 명명법이 적용된다:
"ABIS-45RC": 다음을 포함하는 본 발명의 뮤린 항-hCD45RC 항체:
- 서열번호 61의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 93의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 81의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 94의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 A": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 62의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 82의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 B": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 62의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 83의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 C": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 62의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 84의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 D": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 63의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 82의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 E": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 63의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 83의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 F": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 63의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 84의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 G": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 64의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 83의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 H": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 64의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 84의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 I": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 64의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 82의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 A1": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 101의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 85의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 A2": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 101의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 103의 경쇄 가변 영역; 및
*- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 A3": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 65의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 85의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 A4": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 65의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 103의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 A5": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 62의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 85의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 A6": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 101의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 82의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 A7": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 121의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 85의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"항-45RC 변이체 A8": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 122의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 85의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
*"항-45RC 변이체 A9": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 123의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 85의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
*"항-45RC 변이체 A10": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 124의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 85의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
*"항-45RC 변이체 D1": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 63의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 85의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
*"항-45RC 변이체 I1": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 67의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 85의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
*"항-45RC 변이체 I2": 다음을 포함하는 ABIS-45RC의 인간화된 변이체:
- 서열번호 67의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 91의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 103의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"MT2": Ref. AM39022PU-N하에 OriGene에서 시판되는 뮤린 항-hCD45RC 항체.
*"조작된 Asn/Phe ABIS-45RC": CDR1에 하나의 잔기의 삽입 및 FR3에서 하나의 잔기의 치환(실시예 8에 기재된 바와 같이)에 의해 이의 LCVR을 조작함으로써 키메라화된 뮤린 ABIS-45RC. 조작된 Asn/Phe ABIS-45RC는 다음을 포함한다:
- 서열번호 61의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 93의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 71의 경쇄 가변 영역(여기서, X12는 Asn(N)이다); 및
- 서열번호 94의 경쇄 불변 영역.
"조작된 Ser/Phe ABIS-45RC": CDR1에 하나의 잔기의 삽입 및 FR3에서 하나의 잔기의 치환(실시예 8에 기재된 바와 같이)에 의해 이의 LCVR을 조작함으로써 키메라화된 뮤린 ABIS-45RC. 조작된 Ser/Phe ABIS-45RC는 다음을 포함한다:
- 서열번호 61의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 93의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 71의 경쇄 가변 영역(여기서, X12는 Ser (S)이다); 및
- 서열번호 94의 경쇄 불변 영역.
"조작된 Gly/Phe ABIS-45RC": CDR1에 하나의 잔기의 삽입 및 FR3에서 하나의 잔기의 치환(실시예 8에 기재된 바와 같이)에 의해 이의 LCVR을 조작함으로써 키메라화된 뮤린 ABIS-45RC. 조작된 Gly/Phe ABIS-45RC는 다음을 포함한다:
- 서열번호 61의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 93의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 71의 경쇄 가변 영역(여기서, X12는 Gly (G)이다); 및
- 서열번호 94의 경쇄 불변 영역.
"키메라 N50A ABIS-45RC": 뮤린 ABIS-45RC 경쇄 및 인간화된 중쇄를 포함하는 뮤린 ABIS-45RC의 키메라 변이체. 키메라 N50A ABIS-45RC는 다음을 포함한다:
- 서열번호 61의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 93의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 113의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"키메라 S52A ABIS-45RC": 뮤린 ABIS-45RC 경쇄 및 인간화된 중쇄를 포함하는 뮤린 ABIS-45RC의 키메라 변이체. 키메라 S52A ABIS-45RC는 다음을 포함한다:
- 서열번호 61의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 93의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 126의 경쇄 가변 영역; 및
- 서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
"키메라 N50X ABIS-45RC": 뮤린 ABIS-45RC 경쇄 및 인간화된 중쇄를 포함하는 뮤린 ABIS-45RC의 키메라 변이체. 키메라 N50X ABIS-45RC는 다음을 포함한다:
- 서열번호 61의 중쇄 가변 영역;
- 서열번호 93의 중쇄 불변 영역;
- 서열번호 129의 경쇄 가변 영역(여기서, X13은 임의의 아미노산이지만, Ala (A) 또는 Asn (N)이다); 및
서열번호 92의 경쇄 불변 영역.
실시예 1:
ABIS-45RC의 반응성
재료 및 방법
PBMC 염색 및 데이터 획득
50μL 또는 100μL의 신선한 EDTA 전혈은 적절한 모노클로날 항체(AB)의 조합에 이어, 적혈구 용해(versalyse, Beckman Coulter)로 염색했다. 세척 후, 세포는 Navios 유세포 계측기 상에서 분석하고, 데이터는 Kaluza 소프트웨어(Beckman Coulter, Marseille, France) 및 FlowJo 소프트웨어(Tree Star Inc)를 사용하여 분석했다.
항체 및 유세포 계측법
Figure pct00071
결과
제1 스크리닝으로서, ABIS-45RC는 상업적 항-CD45RC mAb MT2 클론을 사용하여 정렬된 CD45RC-세포에 대해 반응하지 않고, ABIS45RC가 CD45RC를 인식할 수 있음을 시사한다(데이터는 도시되지 않음).
ABIS-45RC를 추가로 특성화하기 위해, 본 발명자들은 인간 PBMC와 이의 반응성을 분석했다. 도 1a 및 b에 도시된 바와 같이, T CD4+ 및 T CD8+ 세포의 분획은 ABIS-45RC고인 반면, 나머지는 ABIS-45RC저 또는 ABIS-45RC-이다. 대부분의 B 및 NK 세포뿐만 아니라 pDC는 ABIS-45RC고였다. 대부분의 NKT, iNKT MAIT, ILC2, ILC3 및 대부분의 CD14intCD16+ 단핵구는 ABIS-45RC고 또는 ABIS-45RC저였다. CD14고CD16- 단핵구, mDC, 호염기구 및 호중구는 주로 ABIS-45RC-였다. CD4+ Treg 및 CD8+Foxp3+ Treg는 주로 ABIS-45RC저/-였다.
주요 PBMC 집단의 분석은 ABIS-45RC가 상업적 항-CD45RC 마우스 MT2 항체에 필적할 만한 반응성 패턴을 가졌음을 보여주었다(도 1 및 Picarda et al., 2017. JCI Insight. 2(3):e90088).
실시예 2:
ABIS-45RC와 상업적 항-CD45RC 항체 "MT2"의 비교
재료 및 방법
PBMC 단리
혈액 건강한 자원자를 수집하고, 말초 혈액 단핵구 세포(PBMC)는 과립구, 혈소판 및 리밍 적혈구 세포 오염물질과 같은 혈액 생성물의 불필요한 분획의 제거를 가능하게 하는 피콜(Ficoll) 구배 원심분리로 단리시켰다.
항체 및 유세포 계측법
인간 PBMC는 ABIS-45RC 항체(지시된 농도에서), 항-CD3 항체 및 1.33mg/mL에서 표지된 항-CD45RC(마우스 클론 MT2, Biolegend)-FITC로 표지화했다. ABIS-45RC 반응성은 비오틴 당나귀 항-인간 IgG+ 스트렙타비딘 PercpCy 5.5 2차 항체를 사용하여 나타냈다.
Canto II 세포 계측기(BD Biosciences)를 사용하여 형광 강도를 측정하였고, 데이터는 FLOWJO 소프트웨어(Tree Star Inc.)를 사용하여 분석했다. 세포는 먼저 그들의 형태에 의해 게이팅하였고, 죽은 세포는 DAPI-음성 세포를 선택함으로써 배제시켰다.
세포독성 분석
인간 PBMC는 10분 내지 18시간 동안 2.5 또는 10㎍/ml에서 37℃에서 배지, 아이소타입 대조군 항체(Ms IgG1, 클론 107.3, 10㎍/ml), ABIS-45RC 또는 항-CD45RC(마우스 클론 MT2)와 함께 배양했다. 이어서, 세포를 항-CD3(클론 SK7, BD Biosciences), 아넥신-V, 및 DAPI로 염색했다. 아폽토시스의 백분율은 유세포 계측법에 의해 T 또는 비-T 세포 사이에서 아넥신 V+ 및 DAPI+ 상에 게이팅함으로써 수득되었다.
결과
ABIS-45RC 및 상업적 항-CD45RC MT2 항체는 모두 동일한 에피토프에 대해 경쟁한다
도 2에 도시된 바와 같이, 상업적 항-CD45RC MT2 클론과의 공동-표지화는 두 항체가 경쟁되고, 따라서 인간 CD45RC의 동일하거나 근접한 에피토프를 인식했음을 보여주었다.
ABIS-45RC에 의해 유도된 세포독성은 상업적 항-CD45RC와 비교하여 더 높다
도 3에 도시된 바와 같이, ABIS-45RC는 비-T 세포에 대해서가 아니라 T 세포에 대해 세포독성이었다. 더욱이, T 세포 세포독성은 CD45RC 발현 수준과 직접적으로 상관되었고, 중요하게는, ABIS-45RC는 10㎍/mL에서 MT2 클론과 비교하여 2.5㎍/mL에서 더 잘 수행되었다.
실시예 3:
ABIS-45RC의 친화도
재료 및 방법
간략하게, 플라스미드 형질감염 후 CD45RC를 발현하는 1x1O7 CD45RC고 PBMC 또는 CHO 세포를 Mem-PER 막 단리 키트(Thermofisher)를 사용하여 가용화시켰다. ABIS-45RC는 바이오칩 CM5 상에 고정시키고, 세포 막을 25℃에서 배양하여 BIAcore 3000 및 BIAcore T200 상에서 단일 사이클 동역학 및 교정 유리 농도 분석을 사용하여 친화성 상수를 측정했다.
결과
CD45RC 항체의 친화성의 측정은 항체 항원 상호 작용을 특성화하기 위한 기술인 표면 플라즈몬 공명(SPR)에 의해 평가하였고, 2.91x105 M-1.sec-1의 Kon 및 1.44x10-2 sec-1의 Koff와 함께 5x10-8 M의 친화성(KD)을 나타냈다.
실시예 4:
ABIS-45RC에 의한 이식편-대-숙주 질환(GVHD)의 치료
재료 및 방법
PBMC 단리
혈액은 건강한 개인의
Figure pct00072
tablissement Fran
Figure pct00073
ais du Sang(Nantes, France)에서 수집하였다. 제도적 지침에 따라 서면 사전 동의가 제공되었다. PBMC는 피콜-파크(Ficoll-Paque) 밀도-구배 원심분리(Eurobio, Courtaboeuf, France)에 의해 단리시켰다. 나머지 적혈구 및 혈소판은 저장성 용액 및 원심분리로 제거되었다.
동물
8- 내지 12주령 NOD/SCID/IL2Rγ-/- (NSG) 마우스는 SPF 조건(승인 번호 C44-278)에서 본 발명자 자신의 동물 시설에서 사육시켰다.
*GVHD 모델
성체 NSG 면역 결핍 마우스는 GVHD의 발달을 선호하는 조직에서 병변을 유도하기 위해 전신 아치사적으로 조사했다(-1일째에 2Gy의 조사 선량). 다음 날(0일째), 건강한 자원자의 1.5x107 PBMC(CD45RC고 및 CD45RC저/- T 세포를 포함함)를 이러한 마우스에 정맥내 주입했다. 인간 PBMC, 특히 T 세포는 병변을 유도하는 마우스 조직에 대해 반응하고 공격한다. 간, 장, 폐 및 피부에서 관찰된 이러한 T 세포 및 병변은 공여자 및 수령자로서 설치류를 사용하는 인간 또는 다른 GVHD 실험 시스템에서 골수 이식 후 관찰된 GVHD를 모방한다. 특히, 이러한 조직 병변은 전형적으로 PBMC의 주사 후 약 13일째에 - 주입된 PBMC의 수 및 본 실험 시스템에 따라 - 시작하는 체중 감소를 유도한다. 체중 감소는 매일 모니터링되며, 불필요한 고통을 피하기 위해 원래 체중의 20%로 떨어지면 동물을 희생시킨다.
치료
NSG 마우스를 0일째로부터 20일 동안 2.5일 마다 0.8mg/kg에서 정제된 ABIS-45RC, MT2 항-CD45RC 항체 또는 무관한 대조군(인간 정제된 IgG를 포함하고 주로 IgG1 항체를 함유하는 임상적으로 사용된 IVIg 제제)으로 복강내 치료했다.
ABIS-45RC 또는 대조군 항체로 치료된 NSG 마우스는 0일째부터 10일째까지 0.4mg/일의 차선 투여량으로 라파마이신을 복강내 복용했다.
실험적 절차는 도 4a에 요약된다.
결과
PBMC에 의한 치료는 도 4에 도시된 바와 같이 약 14일째에 개시된 체중 감소만을 유도했고, 33일까지 모든 마우스가 사망했다(평균 생존율: 11일(도 4b) 내지 15일(도 4c)).
대조군 항체 및 라파마이신에 의한 치료는 통계적 유의성에 도달하지 않고 생존만을 연장시켰다(평균 생존율: 21일(도 4c)).
MT2에 의한 치료는 마우스의 생존을 상당히 연장시킨 반면(평균 생존율: 19일(도 4b)), ABIS-45RC에 의한 치료는 마우스의 이러한 생존 연장을 최대 72일까지 상당히 증가시켰다(평균 생존율: 35일(도 4b)).
마지막으로, 라파마이신과 ABIS-45RC의 조합 투여는 GVHD의 결과로서 사망을 완전히 방지했다(100% 생존, 도 4c).
실시예 5:
ABIS-45RC의 인간화
CDR을 인간 생식세포계열 항체 서열로 그래프팅함으로써 ABIS-45RC의 인간화를 위한 설계가 착수되었다. ABIS-45RC는 LCVR로부터 3개의 CDR(서열번호 15, 16 및 17을 가짐)을 가능한 한 ABIS-45RC의 LCVR에 상동성인 인간 생식계열세포로 그래프팅하여 인간화되었다. 유사하게, HCVR로부터 3개의 CDR(식별번호 1, 4 및 3을 가짐)을 가능한 한 ABIS-45RC의 HCVR에 상동성인 인간 생식세포계열 HCVR로 그래프팅했다.
또한, 선택된 인간 생식세포계열 가변 영역의 프레임워크 영역(FR) 중 몇몇 아미노산 잔기는 뮤린 가변 영역에 존재한 아미노산 잔기로 변경했다(소위 역-돌연변이). 면역글로불린 가변 영역의 구조에 대한 정보에 기초하고 ABIS-45RC의 Fv의 상동성 분자 모델의 지침에 따라, FR 중 이러한 몇몇 잔기는 정확한 형태 또는 HCVR/LCVR 패킹으로 CDR을 유지시키는데 중추적인 역할을 하는 것으로 동정되었고, 따라서 그들은 제1 인간화된 버전(버전 A)으로 유지되거나, 가능한 경우, 후속적 인간화된 버전(버전 B 및 C)으로 그들의 인간 생식세포계열 대응물로 치환되었다. 상동성 분자 모델의 지침하에, 버전 B 및 C에서, 가능하다고 판단된 경우, CDR 잔기는 또한 그들의 인간 생식세포계열 대응물로 치환되었다.
상동성 모델 구축
ABIS-45RC의 모델은 확립된 프로토콜에 따라 작제되었다(참조: Ramos, 2012. Methods Mol Biol. 907:39-55).
경쇄
이 섹션에서, 달리 특정되지 않는 한, 아미노산 넘버링은 서열번호 81에 기초한다.
LCVR의 프레임워크 잔기를 사용하여 단백질 BLAST를 통해 해독된 항체 구조의 서열을 검색했다. 상부 히트는 ABIS-45RC의 LCVR의 것들과 동일한 89개의 FR 잔기 중 83개, 유사한 89개의 FR 중 85개를 갖는 단백질 데이터 뱅크(PDB) ID: 4NCC(2.50Å 해상도), 및 ABIS-45RC의 LCVR의 것들과 동일한 87개 프레임워크 잔기 중 83개, 및 유사한 87개 중 84개를 갖는 PDB ID: 1QOK(2.40Å 해상도)였다.
이러한 2개의 구조의 서열은 모두 치환 T9A, T39P, R44K, N49S 및 P54A를 갖는 ABIS-45RC의 LCVR(서열번호 81을 가짐)의 서열과 상이했다. 또한, PDB ID: 4NCC는 치환 L95F, A99G 및 L105I를 갖는 ABIS-45RC의 LCVR과 서열이 상이했다.
두 구조의 비교는 높은 상동성을 나타냈다. 그러나, 탄소 쇄는 영역 A13-E17 및 E104-K106에서 약간 상이한 형태를 채택했다.
후속적 CDR 검색 결과 및 2개의 N-말단 잔기의 존재에 기초하여, PDB ID: 4NCC의 구조의 LCVR이 LCVR 프레임워크 주형으로서 선택되었고, L105I의 로타머 형태가 PDB ID: 1QOK를 참조하여 선택되었다(PyMol에서).
후속적으로, 각 말단에 2개의 잔기를 첨가한 ABIS-45RC LCVR의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 서열을 사용하여 단백질 BLAST를 통해 해독된 항체 구조의 서열을 검색했다.
CDR1의 경우, 상부 히트는 9개의 동일한 잔기 중 9개를 갖는 서열의 클러스터로 구성되었다. 이들 중에는 PDB ID: 4NCC 및 PDB ID: 1QOK가 있었다. 따라서, PDB ID: 4NCC 구조가 CDR1의 주형으로서 채택되었다.
CDR2의 경우, 상부 히트는 7개의 동일한 잔기 중 6개를 갖는 서열의 클러스터로 구성되었다. 이들 중에는 PDB ID: 4NCC 및 PDB ID: 1QOK가 또한 있었다. 따라서, PDB ID: 4NCC 구조가 또한 CDR2의 주형으로서 채택되었다.
CDR3의 경우, 갭을 함유하지 않는 상부 히트는 13개의 동일한 잔기 중 13개를 갖는 PDB ID: 1QOK였다. 그러나, PDB ID: 4NCC는 13개의 동일한 잔기 중 12개를 갖는 근접한 두 번째였다. 두 구조의 비교는 L95F 치환을 제외하고는 본질적으로 동일한 형태를 나타냈다. 따라서, PDB ID: 4NCC 구조가 CDR3의 주형으로서 채택되었고, L95F의 로타머 형태는 PDB ID: 1QOK를 참조하여 선택되었다(PyMol에서).
따라서, PDB ID: 4NCC가 모든 LCVR의 CDR의 1차 주형으로서 선택되었기 때문에, LCVR 프레임워크 주형에 임의의 CDR 주형을 맞출 필요는 없었다.
마지막으로, LCVR 부분 모델은 ABIS-45RCLCVR 서열과 일치시키기 위해, 최적 로타머를 선택하여 8개 위치에서 돌연변이유발에 수동으로 적용했다(PyMol에서).
중쇄
이 섹션에서, 달리 특정되지 않는 한, 아미노산 넘버링은 서열번호 61에 기초한다.
다음으로, HCVR의 프레임워크 잔기를 사용하여 단백질 BLAST를 통해 해독된 항체 구조의 서열을 검색했다. 상부 히트는 ABIS-45RC의 HCVR의 것들과 동일한 90개 프레임워크 잔기 중 84개, 유사한 90개 중 85개를 갖는 PDB ID: 3OPZ(3.40Å 해상도)였다.
PDB ID: 30PZ는 N 말단 잔기를 누락했고, 상당히 불량한 해상도로 분해되었기 때문에, 최고 동일성/유사성 스코어를 갖는 추가의 히트가 또한 조사되었다. 이들 중 상부는 ABIS-45RC의 HCVR의 것들과 동일한 91개 프레임워크 잔기 중 78개, 유사한 91개 중 87개를 갖는 PDB ID: 4CAD(2.50Å 해상도); 및 ABIS-45RC의 HCVR의 것들과 동일한 91개 프레임워크 잔기 중 75개, 유사한 91개 중 87개를 갖는 PDB ID: 1RUR(1.50Å 해상도)이었다.
PDB ID: 30PZ 및 PDB ID: 4CAD 구조의 비교는 주요한 차이인 대안적인 잔기 로타머와 함께 높은 상동성을 나타냈다.
PDB ID: 30PZ 및 PDB ID: 1RUR 구조의 비교는 유사하게 높은 상동성을 나타냈지만; PDB ID: 30PZ 및 PDB ID: 4CAD 구조에 비해 VH-FR2 루프 L45-G49에서 유의한 형태적 변화가 있었다.
또한, 서열에 기초하여, ABIS-45RC의 HCVR 및 PDB ID: 4CAD는 위치 6에 글루타민의 존재 때문에 N-말단 가닥 5-12의 오네게르 유형 III(참조: Honegger & Pluckthun, 2001. J Mol Biol. 309(3):687-99) 형태를 나타내는 것으로 예측되었다. 그러나, PDB ID: 1RUR은 위치 6에서 글루탐산의 존재로 인해 오네게르 유형 I 형태를 나타내는 것으로 예측되었다. 그럼에도 불구하고, 3개의 구조는 5-12 가닥의 동일한 형태를 나타냈다. 또한, ABIS-45RC의 HCVR, PDB ID: 4CAD 및 PDB ID: 1RUR의 서열은 HCVR의 CDR3에 대한 개정된 시라이(Shirai) 규칙에 의해 규정된 K-형태(뒤틀린 염기 형태)를 채택하는 것으로 예측되었다(참조: Kuroda et al., 2008. Proteins. 73(3):608-20).
후속적 CDR 검색, 높은 전체 서열 유사성, PDB ID: 30PZ와의 구조적 일치, 및 높은 실험적 해상도 결과에 기초하여, 구조 PDB ID: 1RUR의 HCVR이 HCVR 프레임워크 주형으로서 선택되었지만; PDB ID: 4CAD의 45-49 루프(PDB ID: 30PZ의 것과 동일한 형태를 가짐)가 프레임워크 주형에 루프 주형 단편을 고정시키기 위해 45-49 말단에 2개의 잔기 N 및 C-말단 오버행을 사용하여 HCVR 주형에서 PDB ID: 1RUR 의 것으로 치환되었다.
후속적으로, 각 말단에 2개의 잔기를 첨가한 HCVR의 CDR1, CDR2 및 CDR3의 서열을 사용하여 단백질 BLAST를 통해 해독된 항체 구조의 서열을 검색했다.
CDR1의 경우, 12개의 동일한 잔기 중 9개를 갖는 서열 히트의 클러스터가 있었다. 이들 중에는 PDB ID: 1RUR이 있었다. 따라서, PDB ID: 1RUR 구조가 CDR1의 주형으로서 선택되었다.
CDR2의 경우, 상부 히트는 ABIS-45RC의 HCVR의 것들과 동일한 12개 잔기 중 8개, 유사한 12개 중 9개를 갖는 PDB ID: 3NTC(1.55Å 해상도)였다. 그러나, PDB ID: 1RUR은 ABIS-45RC의 HCVR의 것들과 동일한 12개 잔기 중 7개, 유사한 12개 중 9개를 갖는 근접한 두 번째였다. 두 구조의 비교는 본질적으로 동일한 형태를 나타냈고, PDB ID: 3NTC의 더 높은 동일성은 BLAST 검색 목적을 위해 CDR2 서열에 추가된 2개의 C 말단 잔기 때문이다. 따라서, PDB ID: 1RUR 구조가 CDR2의 주형으로서 바람직했다.
CDR3의 경우, 갭을 함유하지 않는 상부 두 히트는 모두 ABIS-45RC의 HCVR의 것들과 동일한 11개 잔기 중 8개, 유사한 11개 중 9개를 갖는 PDB ID: 1NGY(2.20Å 해상도)와 PDB ID: 1NGZ(1.60Å 해상도)였다. 두 구조의 비교는 현저하게 상이한 주쇄 형태를 나타냈다. 이론에 결부시키지 않고, 본 발명자들은 이 차이가 위치 101의 잔기로 인한 것일 수 있다고 가정했다. PDB ID: 1NGY에서, 더 큰 메티오닌은 이의 측쇄를 단백질의 코어로 지시하는 PDB ID: 1NGZ의 더 작은 세린의 방향을 채택할 수 없다. ABIS-45RC의 HCVR 서열과 일치시키기 위한 목적하는 치환이 F101이기 때문에, PDB ID: 1NGY 구조가 CDR3의 주형으로서 채택되었다. 다음으로, HCVR 부분 모델을 완성하기 위해, CDR3 주형은 프레임워크 주형(Pymol에서)에 CDR 주형 단편을 고정시키기 위해, 이의 말단에 2개의 잔기 오버행을 사용하여 변형된 PDB ID: 1RUR HCVR 주형에 그래프팅했다.
마지막으로, ABIS-45RC의 HCVR 서열을 일치시키기 위해, 최적 로타머를 선택하면서 HCVR 부분 모델을 23 위치에서 돌연변이유발에 수동으로 적용했다(PyMol에서).
최종 모델 조립
후속적으로, HCVR 및 LCVR 부분 모델의 최상의 3차 배열을 선택하여 최종 모델을 조립하였다. HCVR 및 LCVR 주형 서열은 패킹 각도 예측 서버(PAPS)(참조: (Abhinandan & Martin, 2010. Protein Eng Des Sel. 23(9):689-97)에 제출하여 예측된 가장 적합한 3차 배열을 찾았다. PAPS 서버는 상대적 패킹 각도 -45.6°를 갖는 해독된 항체 구조 PDB ID: 1MNU가 HCVR 및 LCVR의 최상의 3차 배열을 제공한다고 예측했다. 따라서, 최종 모델은 HCVR 및 LCVR 부분 모델의 보존된 앵커 세그먼트의 백본 좌표를 PDB ID: 1MNU에 맞춤으로써 조립되었다(PyMol에서).
마지막으로, 이 최종 모델의 좌표를 GROMOS96 역장(참조: Scott et al., 1999. J Phys Chem A. 103(19):3596-3607)을 갖는 GROMACS(참조: Van der Spoel et al., 2005. J Comput Chem. 26(16):1701-18)를 사용하는 에너지 최소화 라운드에 적용했다.
인간 생식세포계열
ABIS-45RC의 HCVR 및 LCVR의 CDR-그래프트된 버전의 설계를 위해, 3개의 인간 생식세포계열이 2회 선택되었다:
- HCVR을 위해, IGHV1-2*01, IGHV5-51*0l 및 IGHV3-11*05; 및
- LCVR을 위해, IGKV1-9*01, IGKV6-21*02 및 IGKV3-11*0l.
인간화된 HCVR 및 LCVR의 설계
HCVR 및 LCVR 모두를 위한 인간화된 버전 A는 CDR 잔기의 변경을 명시적으로 최소화하고/하거나 회피하는 보존적 버전이다. 따라서, 이러한 버전은 키메라 항체(인간 불변 영역[서열번호 91 및 92]에 융합된 ABIS-45RC의 HCVR[서열번호 61] 및 LCVR[서열번호 81])와 유사하거나 더 양호한 결합 및/또는 효능 활성을 제공할 것으로 예상된다.
HCVR 및 LCVR 모두를 위한 인간화된 버전 B는 가장 근접한 인간 생식세포계열과 적어도 85%의 서열 동일성 백분율에 도달하도록 설계된다. 이는 FR 및/또는 CDR 아미노산 잔기를 생식세포계열화함으로써(즉, 상응하는 인간 생식세포계열 잔기로 마우스 잔기를 치환함으로써) 달성될 수 있다. 85%는 항체 국제 비선형 명칭(INN)에 대한 2014년 세계 보건 기구(WHO) 지침에 따라 "인간화된" 디노미네이션에 대한 서브스텀 -zu-를 수득하는데 필요한 컷-오프 백분율 동일성이다.
HCVR 및 LCVR 모두를 위한 인간화된 버전 C는 최고도의 인간성(즉, 상응하는 인간 생식세포계열과 최고도의 서열 동일성)에 도달하도록 설계된다. 상동성 분자 모델의 검사 후, 잔기의 수는 생식세포계열화의 후보로 동정되었다. 따라서, 합리적으로 생식세포계열화될 수 있는 모든 잔기가 고려되었다.
IGHV1-2 * 01을 사용하는 HCVR
IGHV1-2*01로부터 인간화 HCVR 버전 A를 설계하기 위해, 뮤린 CDR(서열번호 1, 4 및 3을 가짐)을 IGHV1-2*01에 그래프팅하고, FR2 및 FR3에서 4개의 잔기를 부모 뮤린 잔기로 역돌연변이시켜 항체의 완전 활성을 유지시켰다. 이러한 잔기는 서열번호 61에서 I48, L70, A72 및 V97이다. 생성되는 HCVR은 서열번호 62에 제시된 바와 같고, IGHV1-2*0l 인간 생식세포계열과 81.6% 서열 동일성을 공유한다.
버전 A 이외에, IGHV1-2*01로부터 인간화된 HCVR 버전 B를 설계하기 위해, CDR2 중 5개의 아미노산 잔기는 추가로 생식세포계열화했다(즉, 상응하는 IGHV1-2*0l 인간 생식세포계열 잔기로 치환되었다). 이러한 잔기는 서열번호 61에서 D56G, A58T, S60Y, N61A 및 K65Q이다. 생성되는 HCVR은 서열번호 65에 제시된 바와 같고, IGHV1-2*01 인간 생식세포계열과 86.7% 서열 동일성을 공유한다.
버전 B 이외에, IGHV1-2*01로부터 인간화된 HCVR 버전 C를 설계하기 위해, CDR2 중 2개의 아미노산 잔기는 추가로 생식세포계열화했다. 이러한 잔기는 서열번호 61에서 D50R 및 E62Q이다. 생성되는 HCVR은 서열번호 68에 제시된 바와 같고, IGHV1-2*01 인간 생식세포계열과 88.8% 서열 동일성을 공유한다.
IGHV1-2*01로부터 HCVR의 다양한 다른 인간화된 버전이 버전 B로부터 출발하여 추가로 설계되었다. 실제로, 충분히 인간화된 모노클로날 항체를 수득하기 위해, 85%는 충분한 것으로 가정된다(IGHV1-2*01로부터의 버전 B는 IGHV1-2*01 인간 생식세포계열과 86.7% 서열 동일성을 공유한다). 돌연변이를 도입할 위험을 감소시키기 위해, 따라서 버전 D, E, F, G 및 H는 85%에 도달하고 그 이상 도달하지 않도록 설계되었다.
IGHV1-2*01로부터 생성되는 HCVR 버전 D, E, F, G 및 H는 각각 서열번호 101, 121, 122, 123 및 124에 제시된 바와 같고, 모두 IGHV1-2*01 인간 생식세포계열과 85.7% 서열 동일성을 공유한다.
IGHV5-51*01을 사용하는 HCVR
IGHV5-51*01로부터 인간화된 HCVR 버전 A를 설계하기 위해, 뮤린 CDR(서열번호 1, 4 및 3을 가짐)을 IGHV5-51*01에 그래프팅하고, FR1, FR2 및 FR3에서 6개의 잔기를 부모 뮤린 잔기로 역돌연변이시켜 항체의 완전 활성을 유지시켰다. 이러한 잔기는 서열번호 61에서 A24, T28, I48, L70, L83 및 V97이다. 생성되는 HCVR은 서열번호 63에 제시된 바와 같고, IGHV5-51*01 인간 생식세포계열과 79.6% 서열 동일성을 공유한다.
버전 A 이외에, IGHV5-51*01로부터 인간화된 HCVR 버전 B를 설계하기 위해, FR1 중 1개의 아미노산 잔기 및 CDR2 중 6개의 아미노산 잔기를 추가로 생식세포계열화했다. 이러한 잔기는 서열번호 61에서 A24G, D56S, A58T, S60Y, N61S, K63S 및 K65Q이다. 생성되는 HCVR은 서열번호 66에 제시된 바와 같고, IGHV5-51*01 인간 생식세포계열과 86.7% 서열 동일성을 공유한다.
버전 B 이외에, IGHV5-51*01로부터 인간화된 HCVR 버전 C를 설계하기 위해, FR1 중 1개의 아미노산 잔기 및 CDR2 중 2개의 아미노산 잔기를 추가로 생식세포계열화했다. 이러한 잔기는 서열번호 61에서 T28S, D50I 및 E62P이다. 생성되는 HCVR은 서열번호 69에 제시된 바와 같고, IGHV5-51*01 인간 생식세포계열과 89.8% 서열 동일성을 공유한다.
IGHV3-11 * 05를 사용하는 HCVR
*IGHV3-11*05로부터 인간화된 HCVR 버전 A를 설계하기 위해, 뮤린 CDR(서열번호 1, 4 및 3을 가짐)을 IGHV3-11*05에 그래프팅하고, FR1, FR2 및 FR3에서 9개의 잔기를 부모 뮤린 잔기로 역돌연변이시켜 항체의 완전 활성을 유지시켰다. 이러한 잔기는 서열번호 61에서 Y27, T30, I48, G49, L70, A72, T74, A79 및 V97이다. 생성되는 HCVR은 서열번호 64에 제시된 바와 같고, IGHV3-11*05 인간 생식세포계열과 76.5% 서열 동일성을 공유한다.
버전 A 이외에, IGHV3-11*05로부터 인간화된 HCVR 버전 B를 설계하기 위해, FR1 중 2개의 아미노산 잔기, CDR2 중 6개의 아미노산 잔기 및 FR3 중 1개의 아미노산 잔기를 추가로 생식세포계열화했다. 이러한 잔기는 서열번호 61에서 Y27F, T30S, D56S, A58T, S60Y, N61A, E62D, K63S 및 A79L이다. 생성되는 HCVR은 서열번호 67에 제시된 바와 같고, IGHV3-11*05 인간 생식세포계열과 89.8% 서열 동일성을 공유한다.
버전 B 이외에, IGHV3-11*05로부터 인간화된 HCVR 버전 C를 설계하기 위해, FR2 중 1개의 아미노산 잔기 및 CDR2 중 1개의 아미노산 잔기를 추가로 생식세포계열화했다. 이러한 잔기는 서열번호 61에서 I48V 및 P53S이다. 생성되는 HCVR은 서열번호 70에 제시된 바와 같고, IGHV3-11*05 인간 생식세포계열과 87.8% 서열 동일성을 공유한다.
IGKV1-9 * 01을 사용하는 LCVR
IGKV1-9*01로부터 인간화된 LCVR 버전 A를 설계하기 위해, 뮤린 CDR(서열번호 15, 16 및 17을 가짐, 여기서 X12는 부재이다)을 IGKV1-9*01에 그래프팅하고, FR2 및 FR3에서 3개의 잔기를 부모 뮤린 잔기로 역돌연변이시켜 항체의 완전 활성을 유지시켰다. 이러한 잔기는 서열번호 81에서 F35, W46 및 Y70이다. 생성되는 LCVR은 서열번호 82에 제시된 바와 같고, IGKV1-9*01 인간 생식세포계열과 83.2% 서열 동일성을 공유한다.
버전 A 이외에, IGKV1-9*01로부터 인간화된 LCVR 버전 B를 설계하기 위해, CDR1 중 1개의 아미노산 잔기 및 FR2 중 1개의 아미노산 잔기를 추가로 생식세포계열화했다. 이러한 잔기는 서열번호 81에서 S24R 및 F35Y이다. 생성되는 LCVR은 서열번호 85에 제시된 바와 같고, IGKV1-9*01 인간 생식세포계열과 85.3% 서열 동일성을 공유한다.
버전 B 이외에, IGKV1-9*01로부터 인간화된 LCVR 버전 C를 설계하기 위해, CDR2 중 2개의 아미노산 잔기 및 FR3 중 1개의 아미노산 잔기를 추가로 생식세포계열화했다. 이러한 잔기는 서열번호 81에서 N49A, P54Q 및 Y70F이다. 생성되는 LCVR은 서열번호 88에 제시된 바와 같고, IGKV1-9*01 인간 생식세포계열과 88.4% 서열 동일성을 공유한다.
IGKV1-9*01로부터의 LCVR 버전 D는 인간 생식세포계열 IGKV1-9*01에서 발견된 CDR1에 여분의 잔기(Ser; S)를 도입하기 위해 추가로 설계되었다. CDR1 루프에 여분의 잔기의 도입은 결합 활성이 보존되었다는 것을 나타냈다(데이터는 도시되지 않음). 버전 B의 CDR1에 세린 잔기의 도입은 서열 동일성이 86.3%로 이르게 하고, 따라서 돌연변이를 도입할 위험을 감소시키기 위하여, 카바트 잔기 L36이 원래 마우스 잔기 Phe (F)로 복귀된 버전 D를 설계했다. 생성되는 LCVR은 서열번호 103에 제시된 바와 같다.
IGKV6-21 * 02를 사용하는 LCVR
IGKV6-21*02로부터 인간화된 LCVR 버전 A를 설계하기 위해, 뮤린 CDR(서열번호 15, 16 및 17을 가짐, 여기서 X12는 부재이다)을 IGKV6-21*02에 그래프팅하고, FR2 및 FR3에서 4개의 잔기를 부모 뮤린 잔기로 역돌연변이시켜 항체의 완전 활성을 유지시켰다. 이러한 잔기는 서열번호 81에서 F35, W46, Y48 및 Y70이다. 생성되는 LCVR은 서열번호 83에 제시된 바와 같고, IGKV6-21*02 인간 생식세포계열과 81.1% 서열 동일성을 공유한다.
버전 A 이외에, IGKV6-21*02로부터 인간화된 LCVR 버전 B를 설계하기 위해, CDR1 중 1개의 아미노산 잔기, FR2 중 1개의 아미노산 잔기, CDR2 중 1개의 아미노산 잔기 및 FR3 중 1개의 아미노산 잔기를 추가로 생식세포계열화했다. 이러한 잔기는 서열번호 81에서 S24R, F35Y, L53S 및 Y70F이다. 생성되는 LCVR은 서열번호 86에 제시된 바와 같고, IGKV6-21*02 인간 생식세포계열과 85.3% 서열 동일성을 공유한다.
버전 B 이외에, IGKV6-21*02로부터 인간화된 LCVR 버전 C를 설계하기 위해, CDR3 중 1개의 아미노산 잔기를 추가로 생식세포계열화했다. 이 잔기는 서열번호 81에서 Q88H이다. 생성되는 LCVR은 서열번호 89에 제시된 바와 같고, IGKV6-21*02 인간 생식세포계열과 86.3% 서열 동일성을 공유한다.
IGKV3-11 * 01을 사용하는 LCVR
IGKV3-11*01로부터 인간화된 LCVR 버전 A를 설계하기 위해, 뮤린 CDR(서열번호 15, 16 및 17을 가짐, 여기서 X12는 부재이다)을 IGKV3-11*01에 그래프팅하고, FR2 및 FR3에서 3개의 잔기를 부모 뮤린 잔기로 역돌연변이시켜 항체의 완전 활성을 유지시켰다. 이러한 잔기는 서열번호 81에서 F35, W46 및 Y70이다. 생성되는 LCVR은 서열번호 84에 제시된 바와 같고, IGKV3-11*01 인간 생식세포계열과 84.2% 서열 동일성을 공유한다.
버전 A 이외에, IGKV3-11*01로부터 인간화된 LCVR 버전 B를 설계하기 위해, CDR1 중 1개의 아미노산 잔기를 추가로 생식세포계열화했다. 이 잔기는 서열번호 81에서 S24R이다. 생성되는 LCVR은 서열번호 87에 제시된 바와 같고, IGKV3-11*01 인간 생식세포계열과 85.3% 서열 동일성을 공유한다.
버전 B 이외에, IGKV3-11*01로부터 인간화된 LCVR 버전 C를 설계하기 위해, FR2 중 1개의 아미노산 잔기, CDR2 중 3개의 아미노산 잔기 및 FR3 중 1개의 아미노산 잔기를 추가로 생식세포계열화했다. 이들 잔기는 서열번호 81에서 F35Y, L53R, P54A, S55 및 Y70F이다. 생성되는 LCVR은 서열번호 90에 제시된 바와 같고, IGKV3-11*01 인간 생식세포계열과 90.5% 서열 동일성을 공유한다.
실시예 6:
인간화된 항-45RC 항체의 생산, 정제 및 특성화
분석적 크기 배제 크로마토그래피(SEC-HPLC) 및 시차 주사 열량계(DSC)를 사용하여 9개의 인간화된 항-45RC 변이체 A 내지 I의 각각의 프로파일 및 열 안정성을 비교했다. 이러한 변이체는 실시예 5에 기재된 "버전 A" HCVR 및 LCVR을 포함하는 항체에 상응한다. 분석적 크기 배제 크로마토그래피(SEC-HPLC) 및 시차 주사 열량계(DSC)를 또한 사용하여 4개의 다른 인간화된 항-45RC 변이체 Al, A2, I1 및 I2의 각각의 프로파일 및 열 안정성을 비교했다.
재료 및 방법
SEC-HPLC
Superdex 200 Increase 5/150　GL 컬럼(GE Healthcare)이 장착된 시마즈 프로미넌스 HPLC 시스템이 사용되었다. 컬럼은 샘플 분석 동안(GE Healthcare의 분자량 SEC 교정 키트 사용, PBS 1X 중, 0.25mL/분, 컬럼 오븐은 30℃로 설정함) 사용된 동일한 완충제 및 조건에서 이미 교정되었다.
모든 샘플을 원심분리하고(20.000g, 5분, 4℃), SEC 분석 전에 IgG 분석 프로그램이 장착된 Nanodrop ND-1000 분광 광도계에 의해 정량화된 단백질 함량을 가졌다.
등용매 프로그램은 18분 동안 0.25mL/분에서, 각 샘플의 약 15㎍을 주입하도록 설정하였다. SEC 분석 후, 280nm 크로마토그램을 미가공 데이터로부터 추출하고, 피크 통합으로 분석했다.
DSC
MicrocalTM VP-모세관 DSC 시스템을 사용하여 시차 주사 열량계 실험을 수행했다.
*1x PBS 완충액 중 샘플을 원심분리하였고(20.000g, 5분, 4℃), DSC 분석 이전에, IgG 분석 프로그램을 갖는 Nanodrop ND-1000 분광 광도계로 정량화된 단백질 함량을 가졌다. 이어서, 샘플을 1mg/mL의 최종 농도로 PBS로 희석시켰다.
사전 평형 시간은 3분이었고, 이어지는 써모그램은 60℃/시간의 주사 속도, 25초의 여과 기간 및 배지 피드백과 함께 20 내지 110℃에서 획득되었다.
샘플 분석 이전에, 5개의 완충제/완충제 스캔을 측정하여 장비를 안정화시키고, 각 단백질/완충제 스캔 사이에서 완충제/완충제 스캔이 수행되었다.
데이터는 비-2-상태 비중첩 모델에 적합화되었고, 전이 전후 조정된 기준선을 공제했다. 열량 측정 엔탈피(△H)는 전이 피크하의 면적으로 결정된 반면, 반트 호프(van't Hoff) 엔탈피(△Hv)는 사용된 모델로부터 결정된다.
결과
SEC-HPLC
SEC 파라미터의 요약은 이하 표 7에 제시된다.
Figure pct00074
상기 표 7은 단량체성 비침전된 및 비해리된 항체에 대해 예상된 RT 및 계산된 MW와 함께 항-CD45RC 항체에 상응하는 피크를 볼드체로 나타냈다(변이체 A 내지 H, I1 및 I2 각각에 대해 피크 3; 변이체 I, A1 및 A2 각각에 대해 피크 2).
DSC
DSC 파라미터의 요약은 이하 표 8에 제시된다.
Figure pct00075
실시예 7:
인간화된 ABIS-45RC 변이체 A-I의 반응성
재료 및 방법
PBMC 단리
혈액 건강한 자원자를 수집하고, 말초 혈액 단핵구 세포(PBMC)를 과립구, 혈소판 및 리밍 적혈구 오염물질과 같은 혈액 생성물의 불필요한 분획의 제거를 가능하게 하는 피콜 구배 원심분리로 단리시켰다.
항체 및 유세포 계측법
인간 PBMC를 뮤린 ABIS-45RC 항체 또는 각각의 인간화된 ABIS-45RC 항체 변이체 A-I(2㎍/mL 및 1㎍/mL); 및 항-CD3 항체로 표지화했다. 뮤린 및 인간화된 ABIS-45RC 항체 반응성은 비오틴 당나귀 항-인간 IgG+ 스트렙타비딘 PercpCy 5.5 2차 항체를 사용하여 나타냈다.
칸토 II 세포 계측기(BD Biosciences)를 사용하여 형광 강도를 측정하고, 데이터는 FLOWJO 소프트웨어(Tree Star Inc.)를 사용하여 분석했다. 세포를 먼저 그들의 형태에 의해 게이팅하고, 죽은 세포는 DAPI-음성 세포를 선택함으로써 배제시켰다.
결과
ABIS-45RC 및 상업적 항-CD45RC MT2 항체는 모두 동일한 에피토프에 대해 경쟁한다
인간화된 ABIS-45RC 항체 (변이체 A, 도 5a; 변이체 B, 도 5b; 변이체 C, 도 5c; 변이체 D, 도 5d; 변이체 E, 도 5e; 변이체 F, 도 5f; 변이체 G, 도 5g; 변이체 H, 도 5h; 변이체 I, 도 5i) 또는 뮤린 ABIS-45RC(도 5j) 중 어느 하나에 의한 표지화는 항체가 유사한 방식으로 인간 CD45RC를 인식했음을 보여준다.
실시예 8:
조작된 항체
ABIS-45RC의 LCVR의 CDR1은 마우스 항체에 독특한 표준 구조를 갖고, 10개의 아미노산 잔기의 길이(서열번호 15, 여기서 X12는 부재이다, 즉 SASSSVSYMH이다)를 갖는다.
실시예 5에 기재된 LCVR의 인간화된 버전 A, B 및 C의 설계를 위해, 이 10-아미노산 잔기 CDR1은 임의의 잔기의 첨가 또는 결실 없이 역돌연변이 및/또는 생식세포계열화로 인간 생식세포계열에 그래프팅했다. 그러나, 인간 생식세포계열에서, LCVR의 CDR1은 11개 아미노산 잔기의 최소 길이를 갖는다.
따라서, 인간화된 항체의 인간성을 증가시키기 위해, 본 발명자들은 하나의 여분의 잔기로 이를 연장시키기 위해 ABIS-45RC VL-CDR1 "SASSSVSYMH"를 조작하고자 했다. 하나의 후보 위치는 서열번호 15의 위치 8(X12로서 지정됨), 즉 서열번호 81에서 S30과 Y31 사이이다. 인간화 설계를 위한 후보 생식세포계열 모두에서, 이 위치는 Asn (N), Ser (S) 또는 Gly (G)가 차지하는 반면, 뮤린 생식세포계열에서, 이 위치는 비어 있다.
이러한 삽입의 구조적 관련성과 안정성을 조사하기 위하여, ABIS-45RC VL-CDR1이 아스파라긴, 즉 X12가 Asn (N)인 서열번호 15, 즉 SASSSVS N YMH의 삽입으로 확장되었다. 이어서, 단백질 BLAST를 통해 해독된 항체 구조의 서열의 검색이 수행되었다. 상부 히트는 구조 PDB ID: 5CMA의 LCVR CDR1이었다. 후속적으로, 이 구조적 세그먼트를 모델에 CDR 주형 단편을 고정시키기 위해 이의 말단에 2개 잔기 오버행을 사용하여 ABIS-45RC 모델에 그래프팅했다. 추가 잔기를 수용하기 위해, 인접 잔기를 이동시키고, 이로 인해 Y70을 갖는 약간의 입체 충돌을 제시하는 형태 변화가 있었음이 관찰되었다. 그러나, 모든 인간 생식세포계열에서, 이 잔기는 더 수용되는 페닐알라닌이다.
조작된 마우스 항체
상기에 기초하여, 본 발명자들은 아스파라긴 잔기(Asn, n)를 VL-CDR1에 삽입하고, 추가로 서열번호 81의 Y70을 페닐알라닌(Phe, F)으로 돌연변이시켜 ABIS-RC45 항체를 조작했다. 생성되는 "조작된 Asn/Phe ABIS-RC45" LCVR은 서열번호 71에 제시되어 있고, 여기서 X12는 Asn (N)이다.
2개의 다른 마우스 항체는 또한 세린 잔기(Ser, S) 또는 글리신 잔기(Gly, G)를 VL-CDR1에 삽입하고, 추가로 서열번호 81의 Y70을 페닐알라닌(Phe, F)으로 돌연변이시킴으로써 동일한 기준으로 생성되었다. 2개의 생성되는 "조작된 Ser/Phe ABIS-RC45”및 "조작된 Gly/Phe ABIS-RC45” LCVR은 서열번호 71에 제시되어 있고, 여기서 X12는 각각 Ser (S) 또는 Gly (G)이다.
조작된 인간화 항체
상기에 기초하여, 조작된 인간화된 LCVR 버전 A, B 및 C(실시예 5에 기재된 바와 같음)는 서열번호 72 내지 80에 제시된 바와 같이 추가로 설계되고, 여기서 X12는 Asn (N), Ser (S) 또는 Gly (G)이고, 위치 70의 잔기는 Phe (F)이다.
실시예 9:
조작된 Asn/Phe ABIS-45RC의 반응성
재료 및 방법
건강한 자원자로부터 혈액을 수집하고, 말초 혈액 단핵구 세포(PBMC)를 과립구, 혈소판 및 리밍 적혈구 오염물질과 같은 혈액 생성물의 불필요한 분획의 제거를 가능하게 하는 피콜 구배 원심분리로 단리시켰다.
인간 PBMC를 ABIS-45RC 또는 조작된 Asn/Phe ABIS-45RC 및 항-CD3 항체로 표지화했다. 반응성은 비오틴 당나귀 항-인간 IgG+ 스트렙타비딘 PercpCy 5.5 2차 항체를 사용하여 나타냈다.
칸토 II 세포 계측기(BD Biosciences)를 사용하여 형광 강도를 측정하고, 데이터는 FLOWJO 소프트웨어(Tree Star Inc.)를 사용하여 분석했다. 세포를 먼저 그들의 형태에 의해 게이팅하고, 죽은 세포는 DAPI-음성 세포를 선택함으로써 배제시켰다.
결과
도 6에 도시된 바와 같이, ABIS-45RC(좌측 패널) 또는 조작된 Asn/Phe ABIS-45RC(우측 패널) 중 하나에 의한 표지화는 두 항체가 유사한 방식으로 인간 CD45RC를 인식했음을 보여준다.
실시예 10:
인간화된 ABIS-45RC의 반응성
재료 및 방법
건강한 자원자로부터 혈액을 수집하고, 말초 혈액 단핵구 세포(PBMC)를 과립구, 혈소판 및 리밍 적혈구 오염물질과 같은 혈액 생성물의 불필요한 분획의 제거를 가능하게 하는 피콜 구배 원심분리로 단리시켰다.
인간 PBMC를 ABIS-45RC 또는 20, 5, 1.25 또는 0.3㎍/mL의 인간화된 ABIS-45RC 및 항-CD3 항체로 표지화했다. 반응성은 비오틴 당나귀 항-인간 IgG+ 스트렙타비딘 PercpCy 5.5 2차 항체를 사용하여 나타냈다.
칸토 II 세포 계측기(BD Biosciences)를 사용하여 형광 강도를 측정하고, 데이터는 FLOWJO 소프트웨어(Tree Star Inc.)를 사용하여 분석했다. 세포를 먼저 그들의 형태에 의해 게이팅하고, 죽은 세포는 DAPI-음성 세포를 선택함으로써 배제시켰다.
결과
다양한 농도로 뮤린 ABIS-45RC(도 7a) 또는 인간화된 ABIS-45RC 변이체 A1(도 7b) 또는 변이체 A3(도 7c) 중 하나에 의한 표지화는 두 항체가 유사한 방식으로 인간 CD45RC를 인식했음을 보여준다.
실시예 11:
인간화된 ABIS-45RC 변이체에 의한 세포사 유도
재료 및 방법
인간 PBMC는 배지, 아이소타입 대조군 Ab 또는 항-CD45RC 변이체(10㎍/mL)와 6시간 동안 함께 배양했다. 이어서, 세포를 항-CD3 및 항-CD45RA, 아넥신 V 및 DAPI로 염색했다. 총 아폽토시스의 백분율은 유세포 계측법에 의해 T 또는 비-T 세포 중에서 DAPI+ 아넥신 V+ + DAPI- 아넥신 V+ 세포 상에 게이팅하여 수득하였다.
결과
ABIS-45RC 또는 인간화된 변이체 Al 또는 A3은 CD3- 세포(도 8b)가 아니라 CD3+ 세포(도 8a)의 세포사를 효율적으로 유도했다.
실시예 12:
인간화된 ABIS-45RC와 영장류의 교차-반응성
재료 및 방법
시노몰구스 마카크로부터 혈액을 수집하고, 말초 혈액 단핵구 세포(PBMC)를 피콜 구배 원심분리로 단리시켰다. PBMC를 ABIS-45RC 또는 10㎍/mL의 인간화된 ABIS-45RC 및 항-CD3 항체로 표지화했다. 반응성은 비오틴 당나귀 항-인간 IgG+ 스트렙타비딘 PercpCy 5.5 2차 항체를 사용하여 나타냈다.
칸토 II 세포 계측기(BD Biosciences)를 사용하여 형광 강도를 측정하고, 데이터는 FLOWJO 소프트웨어(Tree Star Inc.)를 사용하여 분석했다. 세포를 먼저 그들의 형태에 의해 게이팅하고, 죽은 세포는 DAPI-음성 세포를 선택함으로써 배제시켰다.
결과
ABIS-45RC 또는 인간화된 변이체 A, A1 또는 A3에 의한 표지화는 모든 항체가 CD3+ 세포(도 9a) 및 CD3- 세포(도 9b)에서 유사한 방식으로 마카크 CD45RC를 인식했음을 보여주었다.
실시예 13:
ABIS-45RC 및 인간화된 변이체 A1에 의한 인간 피부 거부의 치료
재료 및 방법
PBMC 단리
혈액은 건강한 개인의
Figure pct00076
tablissement Fran
Figure pct00077
ais du Sang(Nantes, France)에서 수집하였다. 제도적 지침에 따라 서면 사전 동의가 제공되었다. PBMC는 피콜-파크 밀도-구배 원심분리(Eurobio, Courtaboeuf, France)에 의해 단리시켰다. 나머지 적혈구 및 혈소판은 저장성 용액 및 원심분리로 제거되었다.
동물
8- 내지 12주령 NOD/SCID/IL2Rγ-/- (NSG) 마우스는 SPF 조건(승인 번호 C44-278)에서 본 발명자 자신의 동물 시설에서 사육시켰다.
인간 피부 이식 모델
인간 피부는 건강한 자원자로부터 복강 형성술 수술로 수득하였고, 이전에 기재된 바와 같이 이식을 수행했다(참조: Bezie et al., 2018. Front Immunol. 8:2014). 1개월 후, 동종 이계의 건강한 자원자의 5x106 PBMC를 항체를 사용하거나 사용하지 않고 정맥내 주입했다.
이식 거부는 현미경 관찰로 건조도(스코어 1), 강성(스코어 2), 딱지(스코어 3), 부분 손실(스코어 4) 및 피부의 완전 손실(스코어 5)에 기초하여 0 내지 5로 스코어화했다.
인간 PBMC 생착은 유세포 계측법에 의해 혈액에서 모니터링했다.
치료
NSG 마우스는, 0일째부터 10일째까지 0.4mg/일의 차선 투여량으로 라파마이신의 복강내 투여와 함께 0일째로부터 20일 동안 2.5일 마다 0.8mg/kg에서 정제된 ABIS-45RC 또는 인간화된 변이체 A1 항체로 복강내 치료했다.
결과
PBMC에 의한 치료는 도 10에 도시된 바와 같이 약 14일째에 개시된 체중 감소만을 유도했고, 33일까지 모든 마우스가 사망했다.
본 발명자들은 라파마이신 단독에 의한 치료가 생존율을 연장시키지 않았음을 보여주었다(평균 생존율: 21일(Bezie et al., 2018. Front Immunol. 8:2014)). 여기서, ABIS-45RC 또는 인간화된 변이체 A1에 의한 치료는 피부 이식 거부를 완전히 폐기했다.
SEQUENCE LISTING <110> INSERM UNIVERSITE DE NANTES CENTRE HOSPITALIER UNIVERSITAIRE DE NANTES GUILLONNEAU Carole ANEGON Ignacio <120> ANTI-HUMAN CD45RC ANTIBODIES AND USES THEREOF <130> IPA210307-FR <150> EP 18306230.6 <151> 2018-09-21 <160> 129 <170> BiSSAP 1.3.6 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR1 <400> 1 Asn Tyr Tyr Ile Gly 1 5 <210> 2 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> SITE <222> 1 <223> Xaa is selected from Asp (D), Ile (I) and Arg (R) <220> <223> VH-CDR2 <220> <221> SITE <222> 4 <223> Xaa is selected from Pro and Ser (S) <220> <221> SITE <222> 7 <223> Xaa is selected from Asp (D), Ser (S) and Gly (G) <220> <221> SITE <222> 9 <223> Xaa is selected from Ala (A) and Thr (T) <220> <221> SITE <222> 11 <223> Xaa is selected from Ser (S) and Tyr (Y) <220> <221> SITE <222> 12 <223> Xaa is selected from Asn (N), Ala (A) and Ser (S) <220> <221> SITE <222> 13 <223> Xaa is selected from Glu (E), Asp (D), Pro (P) and Gln (Q) <220> <221> SITE <222> 14 <223> Xaa is selected from Lys (K) and Ser (S) <220> <221> SITE <222> 15 <223> Xaa is selected from Phe (F) and Val (V) <220> <221> SITE <222> 16 <223> Xaa is selected from Lys (K) and Gln (Q) <400> 2 Xaa Ile Phe Xaa Gly Gly Xaa Tyr Xaa Asn Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5 10 15 Gly <210> 3 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR3 <400> 3 Arg Asn Phe Asp Tyr 1 5 <210> 4 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR2 <400> 4 Asp Ile Phe Pro Gly Gly Asp Tyr Ala Asn Ser Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 5 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR2 <400> 5 Asp Ile Phe Pro Gly Gly Asp Tyr Ala Asn Ser Asn Glu Lys Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 6 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR2 <400> 6 Asp Ile Phe Pro Gly Gly Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 7 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR2 <400> 7 Asp Ile Phe Pro Gly Gly Ser Tyr Thr Asn Tyr Ser Glu Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 8 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR2 <400> 8 Asp Ile Phe Pro Gly Gly Ser Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 9 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR2 <400> 9 Arg Ile Phe Pro Gly Gly Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 10 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR2 <400> 10 Ile Ile Phe Pro Gly Gly Ser Tyr Thr Asn Tyr Ser Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 11 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR2 <400> 11 Asp Ile Phe Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 12 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> SITE <222> 1 <223> Xaa is selected from Ser (S) and Arg (R) <220> <223> VL-CDR1 <220> <221> SITE <222> 8 <223> Xaa is absent, or is selected from Asn (N), Ser (S) and Gly (G) <400> 12 Xaa Ala Ser Ser Ser Val Ser Xaa Tyr Met His 1 5 10 <210> 13 <211> 7 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Asp Gly Phe Lys Glu Pro Arg Lys 545 550 555 560 Tyr Ile Ala Ala Gln Gly Pro Arg Asp Glu Thr Val Asp Asp Phe Trp 565 570 575 Arg Met Ile Trp Glu Gln Lys Ala Thr Val Ile Val Met Val Thr Arg 580 585 590 Cys Glu Glu Gly Asn Arg Asn Lys Cys Ala Glu Tyr Trp Pro Ser Met 595 600 605 Glu Glu Gly Thr Arg Ala Phe Gly Asp Val Val Val Lys Ile Asn Gln 610 615 620 His Lys Arg Cys Pro Asp Tyr Ile Ile Gln Lys Leu Asn Ile Val Asn 625 630 635 640 Lys Lys Glu Lys Ala Thr Gly Arg Glu Val Thr His Ile Gln Phe Thr 645 650 655 Ser Trp Pro Asp His Gly Val Pro Glu Asp Pro His Leu Leu Leu Lys 660 665 670 Leu Arg Arg Arg Val Asn Ala Phe Ser Asn Phe Phe Ser Gly Pro Ile 675 680 685 Val Val His Cys Ser Ala Gly Val Gly Arg Thr Gly Thr Tyr Ile Gly 690 695 700 Ile Asp Ala Met Leu Glu Gly Leu Glu Ala Glu Asn Lys Val Asp Val 705 710 715 720 Tyr Gly Tyr Val Val Lys Leu Arg Arg Gln Arg Cys Leu Met Val Gln 725 730 735 Val Glu Ala Gln Tyr Ile Leu Ile His Gln Ala Leu Val Glu Tyr Asn 740 745 750 Gln Phe Gly Glu Thr Glu Val Asn Leu Ser Glu Leu His Pro Tyr Leu 755 760 765 His Asn Met Lys Lys Arg Asp Pro Pro Ser Glu Pro Ser Pro Leu Glu 770 775 780 Ala Glu Phe Gln Arg Leu Pro Ser Tyr Arg Ser Trp Arg Thr Gln His 785 790 795 800 Ile Gly Asn Gln Glu Glu Asn Lys Ser Lys Asn Arg Asn Ser Asn Val 805 810 815 Ile Pro Tyr Asp Tyr Asn Arg Val Pro Leu Lys His Glu Leu Glu Met 820 825 830 Ser Lys Glu Ser Glu His Asp Ser Asp Glu Ser Ser Asp Asp Asp Ser 835 840 845 Asp Ser Glu Glu Pro Ser Lys Tyr Ile Asn Ala Ser Phe Ile Met Ser 850 855 860 Tyr Trp Lys Pro Glu Val Met Ile Ala Ala Gln Gly Pro Leu Lys Glu 865 870 875 880 Thr Ile Gly Asp Phe Trp Gln Met Ile Phe Gln Arg Lys Val Lys Val 885 890 895 Ile Val Met Leu Thr Glu Leu Lys His Gly Asp Gln Glu Ile Cys Ala 900 905 910 Gln Tyr Trp Gly Glu Gly Lys Gln Thr Tyr Gly Asp Ile Glu Val Asp 915 920 925 Leu Lys Asp Thr Asp Lys Ser Ser Thr Tyr Thr Leu Arg Val Phe Glu 930 935 940 Leu Arg His Ser Lys Arg Lys Asp Ser Arg Thr Val Tyr Gln Tyr Gln 945 950 955 960 Tyr Thr Asn Trp Ser Val Glu Gln Leu Pro Ala Glu Pro Lys Glu Leu 965 970 975 Ile Ser Met Ile Gln Val Val Lys Gln Lys Leu Pro Gln Lys Asn Ser 980 985 990 Ser Glu Gly Asn Lys His His Lys Ser Thr Pro Leu Leu Ile His Cys 995 1000 1005 Arg Asp Gly Ser Gln Gln Thr Gly Ile Phe Cys Ala Leu Leu Asn Leu 1010 1015 1020 Leu Glu Ser Ala Glu Thr Glu Glu Val Val Asp Ile Phe Gln Val Val 1025 1030 1035 1040 Lys Ala Leu Arg Lys Ala Arg Pro Gly Met Val Ser Thr Phe Glu Gln 1045 1050 1055 Tyr Gln Phe Leu Tyr Asp Val Ile Ala Ser Thr Tyr Pro Ala Gln Asn 1060 1065 1070 Gly Gln Val Lys Lys Asn Asn His Gln Glu Asp Lys Ile Glu Phe Asp 1075 1080 1085 Asn Glu Val Asp Lys Val Lys Gln Asp Ala Asn Cys Val Asn Pro Leu 1090 1095 1100 Gly Ala Pro Glu Lys Leu Pro Glu Ala Lys Glu Gln Ala Glu Gly Ser 1105 1110 1115 1120 Glu Pro Thr Ser Gly Thr Glu Gly Pro Glu His Ser Val Asn Gly Pro 1125 1130 1135 Ala Ser Pro Ala Leu Asn Gln Gly Ser 1140 1145 <210> 111 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VL-CDR2 <400> 111 Ala Thr Ser Asn Leu Pro Ser 1 5 <210> 112 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized LCVR <220> <221> SITE <222> 31 <223> Xaa is selected from Asn (N), Ser (S) and Gly (G) <400> 112 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Xaa Tyr 20 25 30 Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile 35 40 45 Tyr Ala Thr Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 113 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized LCVR <400> 113 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Ala Thr Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 114 <211> 330 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Human HCCR <400> 114 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 100 105 110 Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 115 120 125 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 130 135 140 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 145 150 155 160 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 165 170 175 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 180 185 190 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 195 200 205 Lys Ala Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 210 215 220 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 225 230 235 240 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 245 250 255 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 260 265 270 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 275 280 285 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 290 295 300 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 305 310 315 320 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325 330 <210> 115 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Human HCCR <400> 115 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Val Ala Ala Ala His His His His His 100 105 110 His <210> 116 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR2 <400> 116 Asp Ile Phe Pro Gly Gly Gly Tyr Ala Asn Tyr Ala Glu Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 117 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR2 <400> 117 Asp Ile Phe Pro Gly Gly Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 118 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR2 <400> 118 Asp Ile Phe Pro Gly Gly Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 119 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH-CDR2 <400> 119 Asp Ile Phe Pro Gly Gly Gly Tyr Thr Asn Ser Ala Glu Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 120 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VL-CDR2 <400> 120 Asn Thr Ala Asn Leu Pro Ser 1 5 <210> 121 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized HCVR <400> 121 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Tyr Ile Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Asp Ile Phe Pro Gly Gly Gly Tyr Ala Asn Tyr Ala Glu Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Val Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg Arg Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 122 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized HCVR <400> 122 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Tyr Ile Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Asp Ile Phe Pro Gly Gly Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Val Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg Arg Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 123 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized HCVR <400> 123 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Tyr Ile Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Asp Ile Phe Pro Gly Gly Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Val Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg Arg Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 124 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized HCVR <400> 124 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Tyr Ile Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Asp Ile Phe Pro Gly Gly Gly Tyr Thr Asn Ser Ala Glu Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Val Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg Arg Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 125 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized LCVR <220> <221> SITE <222> 31 <223> Xaa is selected from Asn (N), Ser (S) and Gly (G) <400> 125 Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Thr Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Xaa Tyr 20 25 30 Met His Trp Phe Gln Gln Lys Thr Gly Thr Ser Pro Arg Leu Trp Ile 35 40 45 Tyr Asn Thr Ala Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Ser Phe Ser Leu Thr Ile Ser Arg Met Glu Ala 65 70 75 80 Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 <210> 126 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized LCVR <400> 126 Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Thr Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Phe Gln Gln Lys Thr Gly Thr Ser Pro Arg Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Asn Thr Ala Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Met Glu Ala Glu 65 70 75 80 Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 <210> 127 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> SITE <222> 1 <223> Xaa is any amino acid but Ala (A) or Asn (N) <220> <223> VL-CDR2 <400> 127 Xaa Thr Ser Asn Leu Pro Ser 1 5 <210> 128 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized LCVR <220> <221> SITE <222> 31 <223> Xaa is selected from Asn (N), Ser (S) and Gly (G) <220> <221> SITE <222> 50 <223> Xaa is any amino acid but Ala (A) or Asn (N) <400> 128 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Xaa Tyr 20 25 30 Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile 35 40 45 Tyr Xaa Thr Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 129 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized LCVR <220> <221> SITE <222> 49 <223> Xaa is any amino acid but Ala (A) or Asn (N) <400> 129 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Trp Ile Tyr 35 40 45 Xaa Thr Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105

Claims (15)

  1. 단리된 항-인간 CD45RC 항체 또는 이의 결합 단편(binding fragment)으로서, 상기 항체 또는 이의 결합 단편이 다음을 포함하는, 단리된 항-인간 CD45RC 항체 또는 이의 결합 단편:
    (a) 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
    (i) 서열번호 1의 서열의 VH-CDR1;
    (ii) 서열번호 4, 5, 6, 8, 100, 116, 117, 118 및 119의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VH-CDR2; 및
    (iii) 서열번호 3의 서열의 VH-CDR3; 및
    (b) 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
    (i) 서열번호 15(SASSSVS-X12-YMH) 및 18(RASSSVS-X12-YMH)의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VL-CDR1(여기서, X12는 부재이거나, Asn(N), Ser(S) 및 Gly(G)로부터 선택된다);
    (ii) 서열번호 16의 서열의 VL-CDR2; 및
    (iii) 서열번호 17의 서열의 VL-CDR3.
  2. 제1항에 있어서, 상기 항체 또는 이의 결합 단편이 다음을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 결합 단편:
    (a) 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
    (i) 서열번호 1의 서열의 VH-CDR1;
    (ii) 서열번호 4 및 5의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VH-CDR2; 및
    (iii) 서열번호 3의 서열의 VH-CDR3; 및
    (b) 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
    (i) 서열번호 15의 서열의 VL-CDR1(여기서, X12는 부재이다);
    (ii) 서열번호 16의 서열의 VL-CDR2; 및
    (iii) 서열번호 17의 서열의 VL-CDR3.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항체 또는 이의 결합 단편이 다음을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 결합 단편:
    (a) 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
    (i) 서열번호 1의 서열의 VH-CDR1;
    (ⅱ) 서열번호 4의 VH-CDR2; 및
    (iii) 서열번호 3의 서열의 VH-CDR3; 및
    (b) 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
    (i) 서열번호 15의 서열의 VL-CDR1(여기서, X12는 부재이다);
    (ii) 서열번호 16의 서열의 VL-CDR2; 및
    (iii) 서열번호 17의 서열의 VL-CDR3.
  4. 제1항에 있어서, 상기 항체 또는 이의 결합 단편이 다음을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 결합 단편:
    (a) 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
    (i) 서열번호 1의 서열의 VH-CDR1;
    (ii) 서열번호 4, 6 및 100의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VH-CDR2; 및
    (iii) 서열번호 3의 서열의 VH-CDR3; 및
    (b) 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
    (i) 서열번호 15 및 18의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VL-CDR1(여기서, X12는 부재이다);
    (ii) 서열번호 16의 서열의 VL-CDR2; 및
    (iii) 서열번호 17의 서열의 VL-CDR3.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 또는 이의 결합 단편이 다음을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 결합 단편:
    1) 서열번호 61의 서열의 HCVR 및 서열번호 81의 서열의 LCVR;
    2) 서열번호 62의 서열의 HCVR 및 서열번호 82의 서열의 LCVR;
    3) 서열번호 62의 서열의 HCVR 및 서열번호 83의 서열의 LCVR;
    4) 서열번호 62의 서열의 HCVR 및 서열번호 84의 서열의 LCVR;
    5) 서열번호 63의 서열의 HCVR 및 서열번호 82의 서열의 LCVR;
    6) 서열번호 63의 서열의 HCVR 및 서열번호 83의 서열의 LCVR;
    7) 서열번호 63의 서열의 HCVR 및 서열번호 84의 서열의 LCVR;
    8) 서열번호 64의 서열의 HCVR 및 서열번호 82의 서열의 LCVR;
    9) 서열번호 64의 서열의 HCVR 및 서열번호 83의 서열의 LCVR;
    10) 서열번호 64의 서열의 HCVR 및 서열번호 84의 서열의 LCVR;
    11) 서열번호 101의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
    12) 서열번호 101의 서열의 HCVR 및 서열번호 103의 서열의 LCVR;
    13) 서열번호 65의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
    14) 서열번호 65의 서열의 HCVR 및 서열번호 103의 서열의 LCVR;
    15) 서열번호 62의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
    16) 서열번호 101의 서열의 HCVR 및 서열번호 82의 서열의 LCVR;
    17) 서열번호 121의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
    18) 서열번호 122의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
    19) 서열번호 123의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
    20) 서열번호 124의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
    21) 서열번호 63의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
    22) 서열번호 67의 서열의 HCVR 및 서열번호 85의 서열의 LCVR;
    23) 서열번호 67의 서열의 HCVR 및 서열번호 103의 서열의 LCVR; 또는
    24) 1) 내지 23) 중 어느 하나에 따르는 HCVR 및 LCVR의 비-CDR 영역의 서열과 적어도 70%의 동일성(identity)을 공유하는 비-CDR 영역의 서열을 포함하는 HCVR 및 LCVR.
  6. 제1항에 있어서, 상기 항체 또는 이의 결합 단편이 다음을 포함하고:
    (a) 다음 3개의 CDR을 포함하는 HCVR:
    (i) 서열번호 1의 서열의 VH-CDR1;
    (ii) 서열번호 4, 5, 6, 8, 100, 116, 117, 118 및 119의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VH-CDR2; 및
    (iii) 서열번호 3의 서열의 VH-CDR3; 및
    (b) 다음 3개의 CDR을 포함하는 LCVR:
    (i) 서열번호 15 및 18의 서열을 포함하는 그룹으로부터 선택된 서열을 갖는 VL-CDR1(여기서, 서열번호 15 및 18에서 X12는 Asn(N), Ser(S) 및 Gly(G)로부터 선택된다);
    (ii) 서열번호 16의 서열의 VL-CDR2; 및
    (iii) 서열번호 17의 서열의 VL-CDR3;
    바람직하게는, 상기 LCVR의 카바트 위치(Kabat position) L71에서의 상기 아미노산 잔기가 Phe(F)인, 단리된 항체 또는 이의 결합 단편.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편을 인코딩하는 핵산.
  8. 제7항에 따르는 핵산을 포함하는 발현 벡터.
  9. 제7항에 따르는 핵산 또는 제8항에 따르는 발현 벡터를 포함하는 세포.
  10. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 제7항에 따르는 핵산, 제8항에 따르는 발현 벡터 또는 제9항에 따르는 세포, 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물.
  11. 의약으로 사용하기 위한, 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 제7항에 따르는 핵산, 제8항에 따르는 발현 벡터, 제9항에 따르는 세포 또는 제10항에 따르는 약제학적 조성물.
  12. - 이를 필요로 하는 대상체에서 면역 내성을 유도하고/하거나,
    - 이식 거부(transplant rejection)를 예방하고/하거나 감소시키는 데 사용하기 위한, 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 제7항에 따르는 핵산, 제8항에 따르는 발현 벡터, 제9항에 따르는 세포 또는 제10항에 따르는 약제학적 조성물.
  13. CD45RC고-관련 상태를 예방, 감소 및/또는 치료하는 데 사용하기 위한, 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 제7항에 따르는 핵산, 제8항에 따르는 발현 벡터, 제9항에 따르는 세포 또는 제10항에 따르는 약제학적 조성물로서, 바람직하게는, CD45RC고-관련 상태가 자가 면역 질환(autoimmune diseases), 원하지 않은 면역 반응, 단일유전자 질환(monogenic diseases) 및 림프종(lymphoma) 또는 암(cancer)을 포함하는 그룹으로부터 선택되는, 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 핵산, 발현 벡터, 세포 또는 약제학적 조성물.
  14. 이식편-대-숙주 질환(graft-versus-host disease; GVHD)을 예방하고/하거나 치료하는 데 사용하기 위한, 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편, 제7항에 따르는 핵산, 제8항에 따르는 발현 벡터, 제9항에 따르는 조성물 또는 제10항에 따르는 약제학적 조성물.
  15. 샘플, 세포, 조직 또는 기관에서 hCD45RC를 검출 또는 정량화(quantifying)하기 위한 시험관내 방법으로서, 상기 샘플, 세포, 조직 또는 기관을 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따르는 단리된 항체 또는 이의 결합 단편과 접촉시키는 단계를 포함하고, 임의로, 단리된 항체 또는 이의 결합 단편이 표지되는, 시험관내 방법.
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