KR20210061356A

KR20210061356A - 혈액암 치료를 위한 조합요법

Info

Publication number: KR20210061356A
Application number: KR1020217009727A
Authority: KR
Inventors: 자이후이 장; 샤오얀 지앙; 캐서리나 로테; 샤오지아 니우
Original assignee: 시그널켐 라이프사이언시즈 코포레이션
Priority date: 2018-09-18
Filing date: 2019-09-18
Publication date: 2021-05-27
Also published as: IL281439A; SG11202101955SA; CA3110901A1; EP3852766A1; AU2019343044A1; WO2020061216A1; US20220031685A1; MX2021003062A; BR112021005054A2; CN112739349A; CN112739349B; EP3852766B1; CA3110901C; JP7460639B2; JP2022501434A; TWI824010B; TW202023554A

Abstract

본원에서는 Axl 및 BCL-2를 동시적으로 표적화함으로써 혈액암, 특히 급성 골수성 백혈병을 치료하기 위한 조합요법이 제공된다.

Description

혈액암 치료를 위한 조합요법

관련 기술의 설명

급성 골수성 백혈병(AML)은 백혈병 줄기 세포(LSC) 및 골수성 전구체(모세포)의 클론 확장을 특징으로 하고 손상된 조혈 및 골수(BM) 부전을 초래한다(1-3). 그것은 매우 이질적이고, 최대 9 개의 개별 범주의 유전적 변경(1,2,4-6)이 있다. 최근 분자적 및 유전적 하위군을 식별하는 데 큰 진전이 있었지만, AML 요법 및 장기 환자 성과는 지난 40년 동안 크게 개선되지 않았다(3,4,7). 따라서, 5년 생존률은 60세 미만 환자의 경우 40% 미만, 더 높은 연령 환자의 경우 10-20%에 불과하다(1,8). 안트라사이클린 또는 사이토아라빈과 같은 표준 유도 화학요법은 대부분의 환자에서 골수성 모세포의 초기 감소를 유발하지만, 현재 이용가능한 치료 중 어느 것도 근치적 치료는 아니다. 약물 내성 및 재발은 치료 실패의 주요 원인으로 남아있어 보다 효과적인 요법의 필요성을 강조한다(9-11). 추가로, 인간 혈액암으로부터의 LSC 및 그의 전구세포는 현재 요법에 매우 내성이 있어서 많은 환자에서 재발 잠재성을 유지한다는 것이 입증되었다(12-17). 따라서, AML에는 개선된 요법이 시급히 필요하다.

본 개시물은 현재 이용가능한 요법의 성과에 비해 우수한 치료 성과를 제공하는 조합요법에 관한 것이다. 다양한 실시양태는 혈액암 치료를 필요로 하는 대상체에게 적어도 하나의 TAM 계열 키나제 억제제(예를 들어, Axl 억제제)를 적어도 하나의 BCL-2 계열 단백질 억제제와 조합하여 투여하는 것을 포함하는 혈액암 치료를 필요로 하는 대상체에서 혈액암(예를 들어, AML)을 치료하는 방법에 관한 것이다. 유리하게는, 본원에 개시된 조합요법은 별도로 투여되는 단일요법과 비교하여 부가적 효력을 넘는 효력 및 상승적 치료적 효과를 제공하는 것으로 입증된다.

한 실시양태에서, 조합요법에 사용되는 TAM 계열 키나제 억제제는 효력있는 Axl 억제제이다.

보다 구체적인 실시양태에서, Axl 억제제는 화학식(I):

화학식(I)

을 가지고, 여기서,

A, A¹ 및 A²가 동일하거나 또는 상이하고, 독립적으로 -N=, -CR⁵= 또는 -O-이고;

R¹이 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 할로알킬, 아릴, 아랄킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클릴알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로아릴알킬이고, 이것들은 각각 임의로 치환될 수 있고;

R²가 헤테로시클릴, 헤테로시클릴알킬, 시클로알킬, 알킬, 아랄킬, 시클로알킬알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 아릴이고, 이것들은 각각 임의로 치환될 수 있고;

각각의 R³ 및 R⁴가 동일하거나 또는 상이하고, 수소, 알킬, 아랄킬, 알케닐, 아랄케닐, 알키닐, 아랄키닐, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 할로 또는 할로알킬로부터 독립적으로 선택되며, 이것들은 각각 임의로 치환될 수 있고;

R⁵가 각 경우에서 수소, 알킬, 아랄킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 할로 또는 할로알킬이고, 이것들은 각각 임의로 치환될 수 있는 것인 화합물; 또는

그의 입체이성질체, 거울상이성질체 또는 호변이성질체, 그의 제약학상 허용되는 염, 또는 그의 제약 조성물이다.

바람직한 실시양태에서, Axl 억제제는 3-(5-(시클로프로필메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민(화합물 A):

화합물 A

이다.

또 다른 실시양태에서, BCL-2 계열 단백질 억제제는 화학식(II):

화학식(II)

를 가지고, 여기서

n이 0 또는 1이고;

R⁶가 임의로 치환된 헤테로시클릴알킬, 임의로 치환된 시클로알킬알킬 또는 임의로 치환된 헤테로알킬이고;

R⁷이 임의로 치환된 헤테로시클릴알킬이고;

R⁸이 임의로 치환된 헤테로아릴 또는 임의로 치환된 아릴이고;

Y¹이 전자 끄는 기인 화합물이다.

보다 구체적인 실시양태에서, BCL-2 억제제는 베네토클락스(VENCLEXTA^®, ABT-199라고도 알려짐) 또는 나비토클락스(ABT-263이라고도 알려짐):

베네토클락스(VenclextA^®)

나비토클락스

이다.

보다 구체적인 실시양태에서, 조합요법은 예를 들어 백혈병, 림프종 또는 골수종을 포함하는 혈액암을 치료하기 위한 Axl 억제제 및 BCL-2 계열 단백질 억제제의 동반적(concomitant) 투여를 포함한다. 보다 구체적인 실시양태에서, 혈액암은 AML이다.

추가 실시양태는 환자에서 혈액암, 예를 들어 AML을 예방, 치료 또는 관리하는 데 있어서 하나 이상의 화학요법제와 조합한 화학식 (I)의 화합물의 효과를 결정할 수 있는 생체내 분석을 제공한다.

도 1a 및 도 1b는 각각 Molm-13 및 MV4-11 AML 세포주에 대한 Axl/BCL-2 억제제 조합요법의 조합 지수 값을 보여준다.
도 2a 및 도 2b는 각각 CD34+ AML 및 줄기-강화 CD34+ CD38- AML에 대해 AML 환자 샘플 및 정상 골수(NBM) 공여자 세포에서의 Axl의 세포 표면 발현을 보여준다.
도 3a 및 3b는 각각 CD34+ AML 및 줄기-강화 CD34+ CD38- AML에 대해 AML 환자 샘플 및 NBM 공여자 세포에서의 Axl의 평균 세포 표면 발현을 나타낸다.
도 4a 및 도 4b는 Axl 억제제 단일요법, BCL-2 억제제 단일요법 및 Axl/BCL-2 억제제 조합요법을 사용한 치료 전(도 4a) 및 치료 후(도 4b) AML의 환자 유래 이종이식(PDX) 모델로부터의 마우스의 생물발광 영상을 나타낸다.
도 5는 각 환자 코호트에 대해 지시된 바와 같은 각 치료군으로부터의 AML의 PDX 모델로부터의 대표 안락사 마우스의 비장 크기 및 무게를 나타낸다.
도 6a 및 도 6b는 AML의 PDX 모델에서 각 치료군의 대표 안락사 마우스의 말초 혈액(PB)에서 형질도입된(GFP+) 및 형질도입되지 않은(GFP-) 인간 백혈병 세포의 생착에 대한 형광 활성화 세포 분류(FACS) 분석을 나타낸다.
도 6c 및 도 6d는 AML의 PDX 모델에서 각 치료군의 대표 안락사 마우스의 골수(BM)에서 형질도입된(GFP+) 및 형질도입되지 않은(GFP-) 인간 백혈병 세포의 생착에 대한 형광 활성화 세포 분류(FACS) 분석을 나타낸다.
도 7a 및 도 7b는 각각 치료군 코호트 1 및 코호트 2에 대해 AML의 PDX 모델에서 백혈병 마우스의 생존 곡선을 나타낸다.
도 8a 및 8b는 Axl 억제제 단일요법, BCL-2 억제제 단일요법 및 Axl/BCL-2 조합요법을 사용한 치료 전(도 8a) 및 치료 후(도 8B) AML의 MV4-11 세포주 이종이식 모델에서 마우스의 생물발광 영상을 나타낸다.
도 9a는 지시된 바와 같은 각 치료군으로부터의 AML의 MV4-11 세포주 이종이식 모델에서 대표 안락사 마우스의 비장 크기 및 무게를 나타낸다.
도 9b는 지시된 바와 같은 각 치료군으로부터의 AML의 MV4-11 세포주 이종이식 모델에서 대표 안락사 마우스의 해모톡실린 및 에오신 염색을 나타낸다.
도 10은 지시된 바와 같은 각 치료군으로부터의 AML의 MV4-11 세포주 이종이식 모델에서 대표 마우스의 PB, BM, 비장 및 간에서의 백혈병 세포 생착의 FACS 분석을 나타낸다.
도 11은 지시된 치료군에 대해 AML의 MV4-11 세포주 이종이식 모델에서 백혈병 마우스의 생존 곡선을 보여준다.

본 개시물의 다양한 실시양태는 혈액암, 특히 급성 골수성 백혈병(AML)을 치료하기 위해 TAM 계열 키나제 억제제(예를 들어, Axl 억제제)를 BCL-2 계열 단백질 억제제와 조합하여 사용하는 조합요법에 관한 것이다.

Axl 및 BCL-2 표적화의 상승적 효과

GAS6/Axl 신호전달은 AML의 발병기전 및 요법 내성에서 중요하다. AML 치료를 위한 한 가지 후보 표적은 수용체 티로신 키나제의 TAM(TRYO3, Axl 및 MER) 계열의 구성원인 Axl이다(18,19). 4 개의 추정 TAMR 리간드가 있다: 성장 정지 특이적 유전자 6(GAS6), 단백질 S, TUBBY 및 TUBBY 유사 단백질 1(TULP1)(18,20). 흥미롭게도, GAS6는 Axl에 대해 나노몰 이하의 친화성을 가지며 Axl에 대한 유일한 활성화 리간드이다. TAMR은 많은 고형 종양에서 과발현되며 생존률 및 세포자멸에 대한 내성을 향상시킨다(18,19). Axl은 암세포의 이동 및 침습을 매개하는 데 중요한 역할을 한다. 특히 BCL-2 및 CD34의 이상 발현 외에도 Axl 및 GAS6 발현이 일부 AML 및 만성 골수성 백혈병(CML) 환자에서 증가한다고 보고되었고, 이것은 더 나쁜 예후와 연관된다(18,21-23). 인간 백혈병에서 치료적 표적으로서의 그의 잠재적 역할이 또한 shRNA 또는 소분자 억제제를 통해 달성된 Axl 억제가 시험관내에서 및 생체내에서 AML/CML 세포주 및 환자 세포의 세포자멸을 증가시키고 증식을 억제한다는 것을 입증함으로써 보고되었다(21,23-25). AML 세포는 BM 유래 간질 세포를 자극해서 GAS6을 상향조절하여 AML 세포의 내화학성을 증가시킨다(21,23). 따라서, GAS6/Axl 활성을 표적화하는 것이 결과적으로 AML의 합리적 새로운 치료 전략이다. 고형 종양 및 AML/CML을 치료하기 위한 여러 Axl 및/또는 MER 억제제가 다양한 개발 단계에 있다(19). 그러나, 많은 것이 다중 키나제 억제제이고; 건강한 조혈 세포에 대한 표적이탈(off-target) 효과 및/또는 독성이 여전히 도전적이고, 대부분의 연구가 세포주 및 비정제된 또는 CD34+ 벌크 AML 세포로 수행되었다(19,21,26,27). GAS6/Axl 경로가 특정 염색체 이상 또는 돌연변이를 갖는 AML 환자의 하위군에서, 또는 가장 높은 수준의 Axl 및 다른 계열 구성원을 발현하고 따라서 Axl 억제에 가장 민감할 일부 하위집단(들)에서 특이적으로 활성화되는지 여부는 알려진 바가 거의 없다. AML 줄기 세포 및 전구세포가 현재의 항암 요법에 매우 내성이 있기 때문에, Axl 억제제가 AML 줄기 세포 및 전구세포를 화학요법 또는 표적 치료제에 감작시킬 수 있는지 여부도 알려져 있지 않다(12-14,17).

BCL-2 계열 단백질은 세포자멸 반응의 중요한 문지기로 알려져 있다. 이 구조적으로 관련된 단백질군은 서로 상호작용하는 세포자멸촉진 및 세포자멸억제 구성원을 포함한다. BCL-2 및 이 단백질 계열의 다른 구성원에 공통적인 아미노산의 짧은 서열은 BCL-2 호몰로지(homology)(BH) 모티프로 알려져 있다. 각 BCL-2 계열 구성원에는 하나 이상의 BH 모티프가 함유된다. 이러한 모티프는 부분적으로 각 구성원의 기능에 기여한다. BCL-2 계열 구성원은 세포자멸억제 단백질, 예컨대 BCL-2, 세포자멸촉진 효과인자, 및 세포자멸촉진 활성제의 3 가지 작용성 군으로 분류될 수 있다. 전임상 데이터는 단일 BH3 모티프만 함유하는 활성제가 DNA 손상과 같은 스트레스에 대한 세포 반응에서 중요한 매개체임을 암시한다. 효과인자는 미토콘드리아 막과 밀접하게 연관된 BCL-2 단백질이며, BH3 전용 활성제에 의해 자극을 받으면 미토콘드리아 막의 기공 형성을 촉진하여 세포자멸 프로그램을 개시한다. 종양 세포는 생존을 위해 BCL-2에 의존하게 될 수 있다. 종양 세포가 생존을 위해 단일 우성 유전자에 의존하는 종양유전자 중독과 유사하게, 종양 세포도 생존을 위해 BCL-2에 의존하게 될 수 있다. 스트레스 신호에 반응하여 악성 세포는 세포자멸촉진 활성제를 발현할 수 있다. 일부 암세포는 BCL-2를 과발현하여 이 세포자멸촉진 반응을 약화시킬 수 있다. 그 결과로 많은 경우에서 많은 세포자멸촉진 활성제가 BCL-2에 의해 결합되고 격리된다. 이 시나리오에서는, 세포자멸촉진 활성제가 BCL-2로부터 이동될 경우 프로그램된 세포 죽음을 유도하기에 충분한 양의 세포자멸촉진 활성제를 암세포가 함유할 수 있다는 점에서 암세포가 세포자멸을 대비하는 것으로 생각된다. 이러한 방식으로 생존을 위해 BCL-2에 의존하는 암은 BCL-2 조절에 민감할 가능성이 높다.

본 개시물은 혈액암, 특히 AML을 치료하기 위해 Axl 및 BCL-2를 동시적으로(concurrently) 표적화하는 하는 것의 상승적 효과를 기재한다. Axl 억제제 및 BCL-2 억제제를 필요로 하는 환자에게 동시적으로 투여함으로써, 조합요법은 Axl 억제제를 사용하는 단일요법 또는 다른 현재의 조합요법보다 우수한 치료적 성과를 제공한다.

특히, 그것은 급성 골수성 백혈병 모델에 대한 상승적 효과가 있음이 본원에서 입증된다. 실시예에 제시된 바와 같이, 상승적 효과는 시험관내 및 생체내 생물학적 분석 둘 모두를 포함하는 다수의 급성 골수성 백혈병 모델에서 및 다수의 AML 세포주에서 관찰되었다.

보다 구체적으로, Axl 억제제인 화합물 A와 BCL-2 억제제(ABT-199 또는 ABT-263)의 약물 조합을 Molm-13 및 MV4-11 AML 세포주를 사용하여 시험관내에서 시험하였다. BCL-2 민감성 세포주는 ABT-199 또는 ABT-263 단일요법에 비해 화합물 A와 조합될 때 ABT-199 및 ABT-263에 대해 증가된 민감성을 나타냈다. 그 데이터의 조합 지수(CI) 분석은 1 미만의 지수를 제공했으며, 이는 Axl 억제제 화합물 A와 BCL-2 억제제 ABT-199 또는 ABT-263 각각의 두 조합 모두가 AML 세포주 둘 모두에 대해 상승적 효과를 생성했음을 나타낸다. 예를 들어, 실시예 1을 참조한다.

추가로, Axl 억제제(화합물 A)와 BCL-2 억제제(ABT-199)의 약물 조합은 생체내 분석에서 화합물 A 단독보다 원시 백혈병 세포를 표적화하고/하거나 백혈병 발병을 예방하는 데 더 효과적이라는 것이 입증되었다. 간단히 말해서, GFP/루시페라제 렌티바이러스 리포터로 형질도입된 AML 환자의 정제된 CD34+ 줄기 세포 및 전구세포를 사용하여 마우스에서 환자 유래 이종이식 모델 분석을 개발하여 마우스의 비침습적 생체내 영상화(IVIS)가 백혈병 발병을 추적하는 것을 허용하였다. 놀랍게도, 화합물 A/ABT-199 조합은 초기 시점에서 백혈병 발병을 지연하고 제거하는 데 매우 효과적인 반면, 단일 약제 단일요법은 백혈병 진행을 나타냈다.

안락사 마우스를 형광 활성화 세포 분류(FACS) 분석을 통해 비장비대(확대된 비장) 및 말초 혈액(PB) 및 골수(BM)에서 백혈병 세포의 존재를 추가로 확인하였다. 조합요법군의 비장 크기 및 무게는 비백혈병 마우스의 것과 일치하였다. 대조적으로, 단일 약제 단일요법군은 비장에서 증가된 크기 및 무게를 보여주었다. 마찬가지로, 조합요법군은 단일요법을 받는 대상체에 비해 PB 및 BM에서 백혈병 세포의 감소된 존재를 입증하였다. 추가로, 대조군 및 치료군의 생존 곡선은 조합 및 단일요법 치료군 사이에 유의한 차이(P <0.05)를 입증하였다. 결론적으로, 화합물 A 및 ABT-199의 조합 치료는 일차 AML 환자 세포를 갖는 환자 유래 이종이식(PDX) 모델에서 백혈병 부담을 감소시키고 백혈병 마우스의 생존을 상당히 향상시킨다. 예를 들어, 실시예 3을 참조한다.

더욱이, Axl 억제제(화합물 A)와 BCL-2 억제제(ABT-199)의 약물 조합의 효능 및 안전성이 동물 모델에서 입증되었다. 특히, 조합은 화합물 A 단독 또는 ABT-199 단독을 사용한 단일요법과 비교할 때 생체내에서 인간 백혈병 세포를 제거하는 데 효과적인 것으로 나타났다. 간단히 말해서, GFP/루시페라제 렌티바이러스 벡터로 형질도입된 MV4-11 세포를 사용하여 세포주 기반 이종이식 마우스 연구를 수행하여 마우스에서 인간 백혈병 세포의 분류/분석 및 마우스의 비침습적 생체내 영상화(IVIS) 둘 모두가 백혈병 발병 및 백혈병 형성 부위를 추적하는 것을 허용하였다. 특히, 화합물 A/ABT-199 조합요법은 치료 후 관찰된 생물발광 신호가 검출 역치 미만이었기 때문에 백혈병 발병을 제거하는 데 매우 효과적이었다. 반대로, 화합물 A를 사용한 단일 약제 단일요법도 또한 생물발광 신호를 낮추었지만 그 정도는 덜하고, 한편 비히클 및 ABT-199 단일요법은 모두 공격적인 백혈병 진행을 나타냈다. 안락사 마우스를 추가로 비장(비장비대) 및 간 백혈병 세포 침윤에 대해 및 말초 혈액(PB), 골수(BM), 비장 및 간에서 백혈병 세포의 존재에 대해 형광 활성화 세포 분류(FACS) 분석을 통해 확인하였다. 조합요법군 뿐만 아니라 화합물 A 단일요법의 비장 크기 및 무게는 비백혈병 마우스의 비장 크기 및 무게와 일치하였다. 반대로, ABT-199 단일요법 및 비히클(대조)군은 비장의 증가된 크기 및 무게를 입증하였다. 유사하게, FACS 분석은 조합요법군이 단일요법을 받는 대상체에 비해 BM, PB, 비장 및 간에서 GFP 형질도입된 백혈병 세포의 존재를 극적으로 감소시켰음을 입증하였다. 추가로, 대조군 및 치료군의 생존 곡선은 조합 및 단일요법 치료군 사이에 유의한 차이(P <0.05)를 입증하였다. 요약하면, 화합물 A 치료만으로 이 MV4-11 동물 모델에서 생체내 백혈병 번식 활성을 감소시킬 수 있으며, 이 억제 효과는 ABT-199와의 조합 치료 후에 극적으로 향상되었다.

조합요법

따라서, 본원에서는 하나 이상의 Axl 억제제를 하나 이상의 BCL-2 계열 단백질 억제제("BCL-2 억제제")와 함께 동반적으로 투여하는 것을 포함하는 혈액암 치료를 필요로 하는 환자에서 혈액암을 치료하는 방법이 상세하게 기재된다. 결과적인 치료적 효과는 각 유형의 억제제를 단독으로 사용하는 단일요법의 단순한 부가적 효과보다 놀랍도록 더 크다. 이러한 상승적 조합은 또한 낮은 독성을 수반한다.

1. Axl 억제제

개시된 조합요법에 적합한 Axl 억제제는 TAM 계열 키나제 억제제로 알려진 아미노피리딘 유도체이다. 예를 들어, WO2015/081257을 참조한다. 특히, Axl 억제제는 화학식 (I):

화학식(I)

의 구조를 가지고, 여기서,

A, A¹ 및 A²는 동일하거나 또는 상이하고, 독립적으로 -N=, -CR⁵= 또는 -O-이고;

R¹은 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 할로알킬, 아릴, 아랄킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클릴알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로아릴알킬이고;

R²는 수소, 헤테로시클릴, 헤테로시클릴알킬, 시클로알킬, 알킬, 아랄킬, 시클로알킬알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 아릴이고;

각각의 R³ 및 R⁴는 동일하거나 또는 상이하고, 수소, 알킬, 아랄킬, 알케닐, 아랄케닐, 알키닐, 아랄키닐, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 할로 또는 할로알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R⁵는 각 경우에서 수소, 알킬, 아랄킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 할로 또는 할로알킬인 화합물; 또는

화학식 (I)의 화합물 중, 또 다른 실시양태는 화학식(Ia):

화학식(Ia)

의 화합물을 제공하고, 여기서, R¹, R², R³ 및 R⁴는 위에서 정의한 바와 같다.

화학식 (I)의 화합물 중, 또 다른 실시양태는 화학식(Ib):

화학식(Ib)

화학식 (I)의 화합물 중, 또 다른 실시양태는 화학식(Ic):

화학식(Ic)

화학식 (I)의 화합물 중, 한 실시양태는 화학식(Id):

화학식(Id)

의 화합물을 제공하고, 여기서 R¹ , R² , R³ 및 R⁴는 위에서 정의한 바와 같다.

화학식 (I)의 화합물 중, 또 다른 실시양태는 화학식(Ie):

화학식(Ie)

화학식 (I)의 화합물 중, 또 다른 실시양태는 화학식(If):

화학식(If)

보다 구체적인 실시양태에서, Axl 억제제는 위에 제시된 화학식 (I), (Ia), (Ib), (Ic), (Id), (Ie) 또는 (If)의 화합물이고, 여기서 화합물은

tert-부틸-4-(4-(6-아미노-5-(5-페닐옥사졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트;

3-(5-페닐옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

tert-부틸 4-(4-(6-아미노-5-(5-(4-클로로페닐)옥사졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트; 3-(5-(4-클로로페닐)옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

1-(4-(4-(6-아미노-5-(5-(4-클로로페닐)옥사졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에타논;

(4-(4-(6-아미노-5-(5-(4-클로로페닐)옥사졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메타논;

3-(5-(3-클로로페닐)옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

1-(4-(4-(6-아미노-5-(5-(3-클로로페닐)옥사졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에타논;

3-(5-(3-클로로페닐)옥사졸-2-일)-5-(1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

(4-(4-(6-아미노-5-(5-(3-클로로페닐)옥사졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메타논;

(4-(4-(6-아미노-5-(5-(3-클로로페닐)옥사졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(페닐)메타논;

1-(4-(4-(6-아미노-5-(5-(3-클로로페닐)옥사졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2-페닐에타논;

(4-(4-(6-아미노-5-(5-(4-클로로페닐)옥사졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(페닐)메타논;

1-(4-(4-(6-아미노-5-(5-(4-클로로페닐)옥사졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2-페닐에타논;

3-(5-(4-클로로페닐)옥사졸-2-일)-5-(1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

1-(4-(4-(6-아미노-5-(5-(3-클로로페닐)옥사졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2,2-디메틸프로판-1-온;

(4-(4-(6-아미노-5-(5-(3-클로로페닐)옥사졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(4-플루오로페닐)메타논;

5-(1-(1-에틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(5-페닐옥사졸-2-일)피리딘-2-아민;

3-(5-페닐옥사졸-2-일)-5-(1-(테트라히드로-2-피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(5-(4-클로로페닐)옥사졸-2-일)-5-(1-(테트라히드로-2-피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(5-(3-클로로페닐)옥사졸-2-일)-5-(1-시클로헥실-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(5-(4-클로로페닐)옥사졸-2-일)-5-(1-시클로헥실-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

5-(1-시클로헥실-1H-피라졸-4-일)-3-(5-페닐옥사졸-2-일)피리딘-2-아민;

5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(5-(피리딘-3-일)옥사졸-2-일)피리딘-2-아민;

5-(1-시클로헥실-1H-피라졸-4-일)-3-(5-페닐이속사졸-3-일)피리딘-2-아민;

3-(5-페닐이속사졸-3-일)-5-(1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민; 3-(5-페닐이속사졸-3-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

5-(1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(5-페닐이속사졸-3-일)피리딘-2-아민;

3-(5-페닐푸란-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

5-(1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(5-페닐푸란-2-일)피리딘-2-아민; 5-(1-시클로헥실-1H-피라졸-4-일)-3-(5-페닐푸란-2-일)피리딘-2-아민;

3-(5-페닐푸란-2-일)-5-(1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

tert-부틸 4-(4-(6-아미노-5-(5-페닐-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트;

3-(5-페닐-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민; 3-(5-(2,6-디클로로-3-플루오로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(5-(4-(tert-부틸)페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

tert-부틸 4-(4-(6-아미노-5-(5-(4-(tert-부틸)페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트;

3-(5-(2,5-디플루오로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘- 2-아민; 3-(5-(2,6-디클로로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

tert-부틸 4-(4-(6-아미노-5-(5-(2,6-디클로로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트;

3-(5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민; tert-부틸 4-(4-(6-아미노-5-(5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트;

1-(4-(4-(6-아미노-5-(5-(2,6-디클로로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에타논; 3-(5-(2,6-디클로로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

1-(4-(4-(6-아미노-5-(5-(2,6-디클로로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-4-메틸펜탄-1-온;

(4-(4-(6-아미노-5-(5-(2,6-디클로로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메타논;

(4-(4-(6-아미노-5-(5-(2,6-디클로로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(페닐)메타논;

1-(4-(4-(6-아미노-5-(5-(2,6-디클로로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2-페닐에타논;

3-(5-(2,6-디클로로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(1-에틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(5-(2,6-디클로로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(1-도데실피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

tert-부틸 4-(4-(6-아미노-5-(5-(피라진-2-일)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트; tert-부틸 4-(4-(6-아미노-5-(5-(피리딘-2-일)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트; 5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(5-(피라진-2-일)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-2-아민;

5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(5-(피리딘-2-일)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-2-아민;

tert-부틸 4-(4-(6-아미노-5-(5-(티아졸-2-일)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트;

5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(5-(티아졸-2-일)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-2-아민;

5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(5-(피리딘-3-일)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-2-아민;

tert-부틸 4-(4-(6-아미노-5-(5-(피리딘-3-일)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트;

tert-부틸 4-(4-(6-아미노-5-(5-(4-(트리플루오로메틸)-티아졸-2-일)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트;

5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(5-(4-(트리플루오로메틸)티아졸-2-일)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-2-아민; tert-부틸 4-(4-(6-아미노-5-(5-(시클로프로필메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트;

3-(5-(시클로프로필메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

tert-부틸 4-(4-(6-아미노-5-(5-벤질-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트;

3-(5-벤질-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(5-(2,6-디클로로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민; 3-(5-페닐-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(5-(4-(tert-부틸)페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민; 3-(5-(2,5-디플루오로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민; 5-(1-시클로헥실-1H-피라졸-4-일)-3-(5-(2,6-디클로로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-2-아민;

5-(1-시클로헥실-1H-피라졸-4-일)-3-(5-페닐-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피리딘-2-아민;

3-(5-(2,6-디클로로페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(테트라히드로-2H- 피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(5-페닐-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민; 3-(3-페닐-1,2,4-옥사디아졸-5-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

1-(4-(4-(6-아미노-5-(3-페닐-1,2,4-옥사디아졸-5-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에타논;

(4-(4-(6-아미노-5-(3-페닐-1,2,4-옥사디아졸-5-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메타논;

5-(1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(3-페닐-1,2,4-옥사디아졸-5-일)피리딘-2-아민;

(4-(4-(6-아미노-5-(3-페닐-1,2,4-옥사디아졸-5-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(페닐)메타논;

1-(4-(4-(6-아미노-5-(3-페닐-1,2,4-옥사디아졸-5-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2-페닐에타논;

3-(3-(2,6-디클로로페닐)-1,2,4-옥사디아졸-5-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(3-(2,6-디클로로페닐)-1,2,4-옥사디아졸-5-일)-5-(1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(3-(2,6-디클로로페닐)-1,2,4-옥사디아졸-5-일)-5-(1-(1-에틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

5-(1-(1-에틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(3-페닐-1,2,4-옥사디아졸-5-일)피리딘-2-아민;

3-(3-(2,6-디클로로페닐)-1,2,4-옥사디아졸-5-일)-5-(1-(1-도데실피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

5-(1-시클로헥실-1H-피라졸-4-일)-3-(3-페닐-1,2,4-옥사디아졸-5-일)피리딘-2-아민;

5-(1-시클로헥실-1H-피라졸-4-일)-3-(3-(2,6-디클로로페닐)-1,2,4-옥사디아졸-5-일)피리딘-2-아민;

3-(3-페닐-1,2,4-옥사디아졸-5-일)-5-(1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(3-(2,6-디클로로페닐)-1,2,4-옥사디아졸-5-일)-5-(1-(테트라히드로-2H- 피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(3-페닐-1,2,4-옥사디아졸-5-일)-5-(1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

5-(1-시클로헥실-1H-피라졸-4-일)-3-(5-페닐-1,2,4-옥사디아졸-3-일)피리딘-2-아민;

3-(5-페닐-1,2,4-옥사디아졸-3-일)-5-(1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3-(5-페닐-1,2,4-옥사디아졸-3-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

5-(1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(5-페닐-1,2,4-옥사디아졸-3-일)피리딘-2-아민;

3-(5-(2,5-디클로로페닐)-1,2,4-옥사디아졸-3-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민; 또는

3-(5-페닐-1,2,4-옥사디아졸-3-일)-5-(1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민

으로 이루어지는 군으로부터 선택된다.

바람직한 실시양태에서, 조합요법은 화학식 (Ia)로 나타내는 구조를 갖는 Axl 억제제를 사용한다.

더 바람직한 실시양태에서, Axl 억제제는 3-(5-(시클로프로필메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민이다.

본원에 기재된 Axl 억제제는 그 전체가 본원에 참고로 포함되는 WO2015/081257에 개시된 방법에 따라 제조될 수 있다.

2. BCL-2 계열 단백질 억제제

다양한 실시양태에 따르면, 조합요법에 적합한 BCL-2 억제제는 화학식 (II):

화학식 (II)

를 가지고, 여기서

n이 0 또는 1이고;

R⁷이 임의로 치환된 헤테로시클릴알킬이고;

Y¹이 전자 끄는 기(electron-withdrawing group)인 화합물,

보다 구체적인 실시양태에서, BCL-2 억제제는 R⁶가 헤테로알킬 또는 헤테로시클릴알킬인 화학식 (II)의 화합물이다.

보다 구체적인 실시양태에서, R⁶는 다음 구조:

를 가지고, 여기서

Z가 -O-, -S- 또는 -NH이고;

Z¹이 헤테로시클릴인 헤테로알킬이다. 보다 구체적인 실시양태에서, Z¹은 아제판-1-일, 모르폴린-1-일, 1,4-옥사제판-4-일, 피롤리딘-1-일, -N(CH₃)₂, -N(CH₃)(CH(CH₃)₂), 7-아자비시클로[2.2.1]헵탄-1-일 또는 2-옥사-5-아자비시클로[2.2.1]헵트-5-일이다.

구체적인 실시양태에서, R⁷은

이고, 여기서

X¹은 H, F, Cl, Br, 또는 I이고;

X² 및 X³는 독립적으로 수소 또는 알킬이고;

X⁴는 -O-, -C(R⁹)₂- 또는 -CH₂CH₂-이고;

R⁹은 수소 또는 알킬이다.

보다 구체적인 실시양태에서, BCL-2 억제제는 화학식 (IIa) 또는 화학식 (IIb):

화학식 (IIa)

화학식 (IIb)

의 구조를 가지고, 여기서, R⁶, R⁸, X¹, X², X³, X⁴, Y¹, Z 및 Z¹은 위에서 정의한 바와 같다.

다양한 실시양태에서, R⁸은 알킬, NH₂, 및 할로로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체로 임의로 치환된 헤테로아릴이다.

보다 구체적인 실시양태에서, R⁸은 1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-일이다.

다양한 실시양태에서, Y¹은 -CN, -NO₂ , -SO₂C(X⁵)₃, -CF₃, F, Cl 또는 Br이고; 여기서 각각의 X⁵는 각 경우에서 독립적으로 H, F 또는 Cl이다.

보다 구체적인 실시양태에서, Y¹은 -NO₂, 또는 -SO₂CF₃이다.

위에서 제시한 바와 같은 화학식 (II), (IIa) 및 (IIb)의 BCL-2 억제제는 미국 특허 번호 7,390,799 및 공개된 미국 특허 번호 9,345,702에 개시된 방법에 따라 제조될 수 있으며, 이 문헌들은 그 전체가 참고로 포함된다.

바람직한 실시양태에서 하나 이상의 BCL-2 억제제는 베네토클락스(VENCLEXTA^®/ABT-199) 또는 나비토클락스(ABT-263):

베네토클락스(ABT-199)

나비토클락스(ABT-263)

이다.

본 명세서에서 명명된 특정 화학 기는 지시된 화학 기에서 발견되는 총 탄소 원자 수를 나타내는 약식 표기가 선행된다. 예를 들어, C_7-C₁₂ 알킬은 총 7 내지 12 개의 탄소 원자를 갖는 아래에 정의된 바와 같은 알킬기를 기술하고, C_4-C₁₂ 시클로알킬알킬은 총 4 내지 12 개의 탄소 원자를 갖는 아래에 정의된 바와 같은 시클로알킬알킬기를 기술한다. 약식 표기에서 총 탄소 수는 기술된 기의 치환체에 존재할 수 있는 탄소를 포함하지 않는다.

따라서, 명세서 및 첨부된 청구범위에서 사용된 바와 같이, 달리 명시되지 않는 한, 다음 용어는 지시된 의미를 갖는다:

"아미노"는 -NH₂ 라디칼을 지칭한다.

"메톡시"는 -OCH₃ 라디칼을 지칭한다.

"시아노"는 -CN 라디칼을 지칭한다.

"니트로"는 -NO₂ 라디칼을 지칭한다.

"트리플루오로메틸"은 -CF₃ 라디칼을 지칭한다.

"옥소"는 =O를 지칭한다.

"티옥소"는 =S를 지칭한다.

"아실"은 -C(O)R¹⁴ 라디칼을 지칭하고, 여기서 R¹⁴는 수소, 알킬, 할로알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴, 아랄킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클릴알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬이다.

"알킬"은 치환되지 않은 경우 탄소 및 수소 원자로만 이루어지고, 불포화를 함유하지 않고, 1 내지 12 개의 탄소 원자, 바람직하게는 1 내지 8 개의 탄소 원자 또는 1 내지 6 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 사슬 라디칼을 지칭하고, 이것은 단일 결합에 의해 분자의 나머지에 부착되고, 예를 들어 메틸, 에틸, n-프로필, 1-메틸에틸(iso-프로필), n-부틸, n-펜틸, 1,1-디메틸에틸(t-부틸) 등이다. 명세서에서 구체적으로 달리 언급되지 않는 한, 알킬기는 본원에 정의된 바와 같이 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환될 수 있다. "알케닐"은 치환되지 않은 경우 탄소 및 수소 원자로만 이루어지고, 적어도 하나의 이중 결합을 함유하고, 2 내지 12 개의 탄소 원자, 바람직하게는 1 내지 8 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 사슬 라디칼 기를 지칭하고, 이것은 단일 결합에 의해 분자의 나머지에 부착되고, 예를 들어 에테닐, 프로프-1-에닐, 부트-1-에닐, 펜트-1-에닐, 펜타-1,4-디에닐 등이다. 명세서에서 구체적으로 달리 언급되지 않는 한, 알케닐기는 본원에 정의된 바와 같은 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환될 수 있다.

"알키닐"은 치환되지 않은 경우 탄소 및 수소 원자로만 이루어지고, 하나 이상의 삼중 결합을 함유하고, 임의로 하나 이상의 이중 결합을 함유하고, 2 내지 12 개의 탄소 원자, 바람직하게는 1 내지 8 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 사슬 라디칼기를 지칭하고, 이것은 단일 결합에 의해 분자의 나머지에 부착되고, 예를 들어, 에티닐, 프로피닐, 부티닐, 펜티닐, 헥시닐 등이다. 명세서에서 구체적으로 달리 언급되지 않는 한, 알키닐기는 본원에 정의된 바와 같은 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환될 수 있다. "알킬렌" 및 "알킬렌 사슬"은 분자의 나머지와 라디칼기를 연결하고, 탄소 및 수소로만 이루어지고, 불포화를 함유하지 않고, 1 내지 12 개의 탄소 원자, 바람직하게는 1 내지 8 개의 탄소를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 2가 탄화수소 사슬, 예를 들어 메틸렌, 에틸렌, 프로필렌, n-부틸렌 등을 지칭한다. 알킬렌 사슬은 사슬 내의 하나의 탄소를 통해 또는 사슬 내의 임의의 2 개의 탄소를 통해 분자의 나머지에 및 라디칼 기에 부착될 수 있다.

"알케닐렌" 및 "알케닐렌 사슬"은 분자의 나머지와 라디칼기를 연결하고, 탄소 및 수소로만 이루어지고, 적어도 1 개의 이중 결합을 함유하고, 2 내지 12 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 2가 탄화수소 사슬, 예를 들어, 에테닐렌, 프로페닐렌, n-부테닐렌 등을 지칭한다. 알케닐렌 사슬은 단일 결합을 통해 분자의 나머지에, 이중 결합 또는 단일 결합을 통해 라디칼기에 부착된다. 분자의 나머지에 및 라디칼기에 알케닐렌 사슬의 부착 지점은 사슬 내의 1 개 탄소 또는 임의의 2 개 탄소를 통할 수 있다.

"알콕시"는 화학식 -OR_a의 라디칼을 지칭하며, 여기서 R_a는 위에서 정의된 바와 같은 알킬 라디칼이다. 알콕시 라디칼의 알킬 부분은 알킬 라디칼에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

"아릴"은 치환되지 않은 경우 수소 및 탄소로만 이루어지고, 6 내지 19 개의 탄소 원자, 바람직하게는 6 내지 10 개의 탄소 원자를 함유하는 방향족 모노시클릭 또는 멀티시클릭 탄화수소 고리 시스템을 지칭하며, 여기서 고리 시스템은 부분적으로 또는 완전히 포화될 수 있다. 아릴기는 플루오레닐, 페닐 및 나프틸과 같은 기를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 명세서에서 구체적으로 달리 언급되지 않는 한, 용어 "아릴" 또는 접두사 "아르-"(예컨대, "아랄킬"에서)는 본원에 정의된 바와 같이 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환된 아릴 라디칼을 포함하는 것을 의도한다. "아랄킬"은 R_a가 위에서 정의된 바와 같은 알킬 라디칼이고 R_b가 위에서 정의된 바와 같은 하나 이상의 아릴 라디칼인 화학식 -R_aR_b의 라디칼, 예를 들어 벤질, 디페닐메틸 등을 지칭한다. 아랄킬 라디칼의 아릴 부분은 아릴기에 대해 위에서 기재된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 아랄킬 라디칼의 알킬 부분은 알킬기에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

"아랄케닐"은 R_c가 위에서 정의된 바와 같은 알케닐 라디칼이고 R_b가 위에서 정의된 바와 같은 하나 이상의 아릴 라디칼인 화학식 -R_cR_b의 라디칼을 지칭하고, 이것은 위에서 기재된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 아랄케닐 라디칼의 아릴 부분은 아릴기에 대해 위에서 기재된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 아랄케닐 라디칼의 알케닐 부분은 알케닐기에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

"아랄키닐"은 R_d가 위에서 정의된 바와 같은 알키닐 라디칼이고 R_b가 위에서 정의된 바와 같은 하나 이상의 아릴 라디칼인 화학식 -R_dR_b의 라디칼을 지칭한다. 아랄키닐 라디칼의 아릴 부분은 아릴기에 대해 위에서 기재된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 아랄키닐 라디칼의 알키닐 부분은 알키닐기에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

"시클로알킬"은 치환되지 않은 경우 탄소 및 수소 원자로만 이루어지고, 3 내지 15 개의 탄소 원자, 바람직하게는 3 내지 12 개의 탄소 원자를 가지며, 포화되거나 또는 불포화되고, 분자의 나머지에 단일 결합에 의해 부착되는 안정한 비방향족 모노시클릭 또는 바이시클릭 탄화수소 라디칼, 예를 들어, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 데칼리닐 등을 지칭한다. 명세서에서 구체적으로 달리 언급되지 않는 한, 용어 "시클로알킬"은 본원에 정의된 바와 같이 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환된 시클로알킬 라디칼을 포함하는 것을 의도한다. "시클로알킬알킬"은 R_a가 위에서 정의된 바와 같은 알킬 라디칼이고 R_d가 위에서 정의된 바와 같은 시클로알킬 라디칼인 화학식 -R_aR_d의 라디칼을 지칭한다. 시클로알킬 라디칼의 시클로알킬 부분은 시클로알킬 라디칼에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 시클로알킬 라디칼의 알킬 부분은 알킬 라디칼에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

"전자 끄는 기(electron-withdrawing group)"는 그것이 부착된 모이어티의 전자 밀도를 (그 치환체가 없는 모이어티의 밀도에 비해) 감소시키는 기를 지칭한다. 이러한 기는 예를 들어 -F, -Cl, -Br, -I, -CN, -CF₃, -NO₂, -C(O)H, -C(O)알킬, -C(O)O알킬, -C(O)OH, -C(O)Cl 및 -S(O)₂R(여기서, R은 알킬, 할로알킬, OH, NH₂ 등임)을 포함한다.

"할로"는 브로모, 클로로, 플루오로 또는 아이오도를 지칭한다.

"할로알킬"은 위에서 정의된 바와 같은 하나 이상의 할로 라디칼에 의해 치환된 위에서 정의된 바와 같은 알킬 라디칼을 지칭한다. 알킬 라디칼의 하나 이상의 탄소는 하나 이상의 할로 라디칼로 치환될 수 있다. 할로알킬의 예는 트리플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리클로로메틸, 2,2,2-트리플루오로에틸, 1-플루오로메틸-2-플루오로에틸, 3-브로모-2-플루오로-프로필, 1-브로모메틸-2-브로모에틸 등을 포함한다. 할로알킬 라디칼의 알킬 부분은 알킬기에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

"할로알케닐"은 위에서 정의된 바와 같은 하나 이상의 할로 라디칼에 의해 치환된 위에서 정의된 바와 같은 알케닐 라디칼, 예를 들어 2-브로모에테닐, 3-브로모프로프-1-에닐을 지칭한다. 할로알케닐 라디칼의 알케닐 부분은 알킬기에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

"헤테로알킬"은 하나 이상의 탄소 원자 및 하나 이상의 헤테로 원자(예를 들어, O, N, P, Si 및 S로 이루어진 군으로부터 선택됨)를 포함하는 안정한 직쇄 또는 분지쇄, 또는 이들의 조합을 지칭하고, 여기서 질소 및 황 원자는 임의로 산화될 수 있고, 질소 헤테로원자는 임의로 사차화될 수 있다. 헤테로 원자(들)(예를 들어, O, N, P, S, B, As 및 Si)는 헤테로알킬기의 임의의 내부 위치에 또는 알킬기가 분자의 나머지에 부착되는 위치에 배치될 수 있다. 예는 -CH_2-CH_2-O-CH_3-, -CH₂-CH₂-N-CH_3,-CH₂-CH₂-S-CH₃, -CH₂-CH₂-S(O)₂-CH₃, -CH=CH-O-CH₃, -Si(CH₃)₃, -CH₂-CH=N-OCH₃, -CH=CH-N(CH₃)-CH₃, -O-CH₃ 및-CN을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 최대 2 개 또는 3 개의 헤테로 원자가 연속적일 수 있고, 예컨대 예를 들어, -CH₂-O-Si(CH₃)₃이다. 헤테로알킬 사슬은 비-시클릭이지만, 그것은 예를 들어 아릴(예를 들어, 페닐), 헤테로시클릴(예를 들어, 모르폴린-1-일), 헤테로아릴, 시클로알킬 등을 포함하는 시클릭 모이어티에 의해 추가로 치환될 수 있다.

"헤테로시클릴"은 고리 원자로서 적어도 1 개의 탄소 원자 및 1 내지 5 개의 질소, 산소 및 황으로 이루어진 군으로부터 선택된 헤테로 원자를 포함하는 안정한 3원 내지 18원 비방향족 고리 라디칼을 지칭한다. 본 개시물의 목적을 위해, 헤테로시클릴 라디칼은 융합 또는 가교 고리 시스템을 포함할 수 있는 모노시클릭, 바이시클릭, 트리시클릭 또는 테트라시클릭 고리 시스템일 수 있고; 헤테로시클릴 라디칼의 질소, 탄소 또는 황 원자는 임의로 산화될 수 있으며; 질소 원자는 임의로 사차화될 수 있으며; 헤테로시클릴 라디칼은 부분적으로 또는 완전히 포화될 수 있다. 이러한 헤테로시클릴 라디칼의 예는 디옥솔라닐, 데카히드로이소퀴놀릴, 이미다졸리닐, 이미다졸리디닐, 이소티아졸리디닐, 이속사졸리디닐, 모르폴리닐, 옥타히드로인돌릴, 옥타히드로이소인돌릴, 2-옥소피페라지닐, 2-옥소피페리디닐, 2-옥소피롤리디닐, 옥사졸리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 4-피페리도닐, 피롤리디닐, 피라졸리디닐, 티아졸리디닐, 테트라히드로푸릴, 트리티아닐, 테트라히드로피라닐, 티오모르폴리닐, 티아모르폴리닐, 1-옥소-티오모르폴리닐 및 1,1-디옥소-티오모르폴리닐을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 명세서에서 구체적으로 달리 언급되지 않는 한, 용어 "헤테로시클릴"은 본원에 정의된 바와 같은 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환된 위에서 정의된 바와 같은 헤테로시클릴 라디칼을 포함하는 것을 의도한다.

"헤테로시클릴알킬"은 화학식 -R_aR_e의 라디칼을 지칭하며, 여기서 R_a는 위에서 정의된 바와 같은 알킬 라디칼이고 R_e는 위에서 정의된 바와 같은 헤테로시클릴 라디칼이고, 헤테로시클릴이 질소 함유 헤테로시클릴인 경우, 헤테로시클릴은 질소 원자에서 알킬 라디칼에 부착될 수 있다. 헤테로시클릴알킬 라디칼의 알킬 부분은 알킬기에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 헤테로시클릴알킬 라디칼의 헤테로시클릴 부분은 헤테로시클릴기에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

"헤테로아릴"은 고리 원자로서 적어도 1 개의 탄소 원자 및 1 내지 5 개의 질소, 산소 및 황으로 이루어진 군으로부터 선택된 헤테로 원자를 포함하는 5 원 내지 18 원 방향족 고리 라디칼을 지칭한다. 본 개시물의 목적을 위해, 헤테로아릴 라디칼은 융합 또는 가교 고리 시스템을 포함할 수 있는 모노시클릭, 바이시클릭, 트리시클릭 또는 테트라시클릭 고리 시스템일 수 있고; 헤테로아릴 라디칼에서 질소, 탄소 또는 황 원자는 임의로 산화될 수 있으며; 질소 원자는 임의로 사차화될 수 있다. 예로는 아제피닐, 아크리디닐, 벤즈이미다졸릴, 벤즈티아졸릴, 벤즈인돌릴, 벤조티아디아졸릴, 벤조나프토푸라닐, 벤족사졸릴, 벤조디옥솔릴, 벤조디옥시닐, 벤조피라닐, 벤조피라노닐, 벤조푸라닐, 벤조푸라노닐, 벤조티에닐(벤조티오페닐), 벤조트리아졸릴, 벤조[4,6]이미다조[1,2-a]피리디닐, 카르바졸릴, 신놀리닐, 디벤조푸라닐, 푸라닐, 푸라노닐, 이소티아졸릴, 이미다졸릴, 인돌릴, 인다졸릴, 이소인돌릴, 인돌리닐, 이소인돌리닐, 인돌리지닐, 이속사졸릴, 나프티리디닐, 옥사디아졸릴, 2-옥소아제피닐, 옥사졸릴, 옥시라닐, 페나지닐, 페노티아지닐, 페녹사지닐, 프탈라지닐, 프테리디닐, 푸리닐, 피롤릴, 피롤로[2,3-b]피리디닐, 피라졸릴, 피리디닐, 피라지닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 퀴놀리닐, 퀴누클리디닐, 이소퀴놀리닐, 티아졸릴, 티아디아졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 트리아지닐 및 티오페닐을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 명세서에서 구체적으로 달리 언급되지 않는 한, 용어 "헤테로아릴"은 본원에 정의된 바와 같은 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환된 위에서 정의된 바와 같은 헤테로아릴 라디칼을 포함하는 것을 의도한다. 본원에 정의된 바와 같은 헤테로아릴은 1가 또는 2가일 수 있다. 헤테로아릴이 다른 모이어티의 치환체일 때, 헤테로아릴은 1가이며, 이는 헤테로아릴이 단일 고리 원자에 의해 다른 모이어티에 연결됨을 의미한다. 1가 헤테로아릴의 예는 알킬기가 헤테로아릴기로 치환된 헤테로아릴알킬의 라디칼에서 찾을 수 있다.

"헤테로아릴알킬"은 화학식 -R_aR_f의 라디칼을 지칭하며, 여기서 R_a는 위에서 정의된 바와 같은 알킬 라디칼이고 R_f는 위에서 정의된 바와 같은 헤테로아릴 라디칼이다. 헤테로아릴알킬 라디칼의 헤테로아릴 부분은 헤테로아릴기에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 헤테로아릴알킬 라디칼의 알킬 부분은 알킬기에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

"헤테로아릴알케닐"은 화학식 -R_cR_g의 라디칼을 지칭하며, 여기서 R_c는 위에서 정의된 바와 같은 알케닐 라디칼이고 R_g는 위에서 정의된 바와 같은 헤테로아릴 라디칼이다. 헤테로아릴알케닐 라디칼의 헤테로아릴 부분은 헤테로아릴기에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 헤테로아릴알케닐 라디칼의 알케닐 부분은 알케닐기에 대해 위에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

"N-헤테로아릴"은 헤테로아릴의 하위집합이고, 하나 이상의 질소 고리 원자를 갖는 헤테로아릴을 지칭한다. 헤테로아릴은 그 밖에는 본원에서 정의된 바와 같다. N-헤테로아릴의 예는 제한없이 벤즈이미다졸릴, 벤즈인돌릴, 벤조트리아졸릴, 벤조[4,6]이미다조[1,2-a]피리디닐, 카르바졸릴, 신놀리닐, 이미다졸릴, 인돌릴, 인다졸릴, 이소인돌릴, 인돌리닐, 이소인돌리닐, 인돌리지닐, 이속사졸릴, 나프티리디닐, 옥사디아졸릴, 2-옥소아제피닐, 옥사졸릴, 페나지닐, 페노티아지닐, 페녹사지닐, 프탈라지닐, 프테리디닐, 푸리닐, 피롤릴, 피라졸릴, 피리디닐, 피라지닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 퀴놀리닐, 퀴누클리디닐, 이소퀴놀리닐, 티아졸릴, 티아디아졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴 및 트리아지닐을 포함한다.

"치환체"는 다른 분자에 결합되는 또는 결합될 수 있는 라디칼(단일 비수소 원자 또는 작용기)을 지칭한다. 따라서 치환체는 다음 라디칼: 알킬, 알케닐, 아미노, 할로, 할로알킬, 할로알케닐, 시아노, 옥소, 티옥소, 니트로, 아릴, 아랄킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, -OR¹⁴, -OC(O)R¹⁴, -N(R¹⁴)₂, -C(O)R¹⁴, -C(O)OR¹⁴, -C(O)N(R¹⁴)₂, -N(R¹⁴)C(O)OR¹⁶, -N(R¹⁴)C(O)R¹⁶, -N(R¹⁴)(S(O)_tR¹⁶)(여기서 t는 1 내지 2임), -S(O)_tOR¹⁶(여기서 t는 1 내지 2임), -S(O)_tR¹⁶(여기서 t는 0 내지 2임), 및 -S(O)_tN(R¹⁴)₂(여기서 t는 1 내지 2임) 중 임의의 하나이고, 여기서 각각의 R¹⁴은 독립적으로 수소, 알킬, 할로알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴(하나 이상의 할로기로 임의로 치환됨), 아랄킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클릴알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬이고; 각각의 R¹⁶은 알킬, 할로알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴, 아랄킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클릴알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴알킬이고, 여기서 상기 치환체 각각은 달리 지시되지 않는 한 비치환된다.

"전구약물"은 생리학적 조건 하에서 또는 용매분해에 의해 화학식 (I) 또는 (II) 또는 각각의 하위구조 중 어느 하나의 생물학적 활성 화합물로 전환될 수 있는 화합물을 지칭한다. 따라서, 용어 "전구약물"은 제약학상 허용되는 화학식 (I) 또는 (II) 또는 각각의 하위구조 중 임의의 하나의 화합물의 대사 전구체를 지칭하고; 후자는 또한 "모 화합물"이라고도 한다. 전구약물은 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 때는 비활성일 수 있지만, 생체내에서 활성 화합물, 즉 모 화합물로 전환된다. 전구약물은 대표적으로 생체내에서 예를 들어 혈액에서 가수분해에 의해 빠르게 변환되어 모 화합물을 생성한다.

용어 "전구약물"은 또한 그러한 전구약물이 포유동물 대상체에게 투여될 때 생체내에서 본 개시물의 활성 화합물을 방출하는 임의의 공유결합된 담체를 포함하는 것을 의도한다. 본 개시물의 화합물의 전구약물은 변형이 일상적인 조작으로 또는 생체내에서 절단되어 모 화합물이 되도록 하는 방식으로 화학식 (I) 또는 하위구조 중 어느 하나의 화합물에 존재하는 작용기를 변형시킴으로써 제조될 수 있다. 전구약물은 히드록시, 아미노 또는 메르캅토기가 포유동물 대상체에게 전구약물 개시물이 투여될 때 절단되어 각각 유리 히드록시, 유리 아미노 또는 유리 메르캅토기를 복원시키는 임의의 기에 결합된 본 개시물의 화합물을 포함한다. 전구약물의 예는 화학식 (I), (II) 또는 하위구조 중 어느 하나의 화합물에서의 알콜 또는 아민 작용기의 아세테이트, 포르메이트 및 벤조에이트, 및 포스페이트 유도체를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

"포유동물" 또는 "포유류 대상체"는 인간 및 가축, 예컨대 고양이, 개, 돼지, 소, 양, 염소, 말, 토끼를 포함한다.

"임의적" 또는 "임의로"는 이후에 기재되는 상황 이벤트가 발생할 수 있거나 발생하지 않을 수 있음을 의미하며, 그 기재는 상기 이벤트 또는 상황이 발생하는 경우 및 발생하지 않는 경우를 포함한다. 예를 들어, "임의로 치환된 아릴"은 아릴 라디칼이 치환될 수 있거나 또는 치환되지 않을 수 있으며, 그 기재는 치환된 아릴 라디칼 및 치환이 없는 아릴 라디칼 둘 모두를 포함함을 의미한다.

"제약학상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제"는 미국 식품 의약국(FDA)에서 인간 또는 가축에 사용하는 것을 허용하는 것으로 승인된 임의의 보조제, 담체, 부형제, 활택제, 감미제, 희석제, 방부제, 염료/착색제, 향미 증진제, 계면활성제, 습윤제, 분산제, 현탁제, 안정제, 등장제, 용매 또는 유화제를 제한없이 포함한다.

"제약학상 허용되는 산 부가 염"은 생물학적으로 또는 다른 점에서 바람직하지 않지 않은 유리 염기의 생물학적 효과 및 특성을 보유하고, 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 하지만 이에 제한되지 않는 무기산, 및 아세트산, 2,2-디클로로아세트산, 아디프산, 알긴산, 아스코르브산, 아스파르트산, 벤젠설폰산, 벤조산, 4- 아세트아미도벤조산, 캄포르산, 캄포르-10-설폰산, 카프르산, 카프로산, 카프릴산, 탄산, 신남산, 시트르산, 시클람산, 도데실황산, 에탄-1,2-디설폰산, 에탄설폰산, 2-히드록시에탄설폰산, 포름산, 푸마르산, 갈락타르산, 겐티스산, 글루코헵톤산, 글루콘산, 글루쿠론산, 글루탐산, 글루타르산, 2-옥소-글루타르산, 글리세로인산, 글리콜산, 히푸르산, 이소부티르산, 락트산, 락토비온산, 라우르산, 말레산, 말산, 말론산, 만델산, 메탄술폰산, 무스산, 나프탈렌-1,5-디설폰산, 나프탈렌-2-설폰산, 1-히드록시-2-나프토산, 니코틴산, 올레산, 오로트산, 옥살산, 팔미트산, 파모산, 프로피온산, 피로글루탐산, 피루브산, 살리실산, 4-아미노살리실산, 세바스산, 스테아르산, 숙신산, 타르타르산, 티오시안산, p-톨루엔설폰산, 트리플루오로아세트산, 운데실렌산 등과 같은 하지만 이에 제한되지 않는 유기산과 함께 형성된다.

"제약학상 허용되는 염기 부가 염"은 생물학적으로 또는 다른 점에서 바람직하지 않지 않은 유리 산의 생물학적 효과 및 특성을 보유하는 염을 지칭한다. 이들 염은 무기 염기 또는 유기 염기를 유리 산에 첨가하여 제조된다. 무기 염기로부터 유도된 염은 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망간, 알루미늄 염 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 바람직한 무기 염은 암모늄, 나트륨, 칼륨, 칼슘 및 마그네슘 염이다. 유기 염기로부터 유도된 염은 1차, 2차 및 3차 아민의 염, 천연 발생 치환된 아민을 포함한 치환된 아민, 시클릭 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예컨대 암모니아, 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 디에탄올아민, 에탄올아민, 데아놀, 2-디메틸아미노에탄올, 2-디에틸아미노에탄올, 디시클로헥실아민, 리신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 히드라바민, 콜린, 베타인, 베네타민, 벤자틴, 에틸렌디아민, 글루코사민, 메틸글루카민, 테오브로민, 티에탄올아민, 트로메타민, 푸린, 피페라진, 피페리딘, N-에틸피페리딘, 폴리아민 수지 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 특히 바람직한 유기 염기는 이소프로필아민, 디에틸아민, 에탄올아민, 트리메틸아민, 디시클로헥실아민, 콜린 및 카페인이다.

종종 결정화는 본 개시물의 화합물의 용매화물을 생성한다. 본원에 사용된 용어 "용매화물"은 하나 이상의 용매 분자와 함께 본 개시물의 화합물의 하나 이상의 분자를 포함하는 응집체를 지칭한다. 용매는 물일 수 있으며, 이 경우 용매화물은 수화물일 수 있다. 대안적으로, 용매는 유기 용매일 수 있다. 따라서, 본 개시물의 화합물은 일수화물, 이수화물, 반수화물, 세스퀴수화물, 삼수화물, 사수화물 등을 포함하는 수화물 뿐만 아니라 상응하는 용매화된 형태로 존재할 수 있다. 본 개시물의 화합물은 진정한 용매화물일 수 있는 반면, 다른 경우에 본 개시물의 화합물은 단순히 외래성 물을 보유할 수 있거나 또는 물과 일부 외래성 용매의 혼합물일 수 있다.

"제약 조성물"은 본 개시물의 화합물 및 생물학적 활성 화합물을 포유동물, 예를 들어 인간에게 전달하기 위해 관련 분야에서 일반적으로 허용되는 매질의 제제를 지칭한다. 이러한 매질은 모든 제약학상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함한다.

"치료적 유효량"은 포유동물, 바람직하게는 인간에게 투여될 때 포유동물, 바람직하게는 인간의 질환 또는 병태의 아래에 정의된 바와 같은 치료를 달성하기에 충분한 본 개시물의 화합물의 양을 지칭한다. "치료적 유효량"을 구성하는 본 개시물의 화합물의 양은 화합물, 병태 및 그의 심도 및 치료받을 포유동물의 연령에 의존해서 달라질 것이지만, 관련 분야의 통상의 기술을 가진 자에 의해 그 자신의 지식 및 본 개시물을 고려하여 일상적으로 결정될 수 있다.

본원에 사용된 "치료하는" 또는 "치료"는 관심 질환 또는 장애를 갖는 포유동물, 바람직하게는 인간에서 관심 질환 또는 병태의 치료를 포함하며, 다음을 포함한다:

(i) 특히 그러한 포유동물이 병태에 걸리기 쉽지만 아직 그것을 갖는 것으로 진단되지 않은 경우, 질환 또는 병태가 포유동물에서 발생하는 것을 예방하거나;

(ii) 질병 또는 병태를 억제하거나, 즉 그의 발병을 정지시키거나 또는 그의 진행을 역전시키거나; 또는

(iii) 질병 또는 병태를 완화하고, 즉 질병 또는 병태의 퇴행을 유발한다.

본 개시물의 화합물 또는 그의 제약학상 허용되는 염은 하나 이상의 비대칭 중심을 함유할 수 있고, 따라서 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 및 절대 입체화학으로 (R)- 또는 (S)-로, 또는 아미노산의 경우 (D)- 또는 (L)-로 정의될 수 있는 다른 입체이성질체 형태를 생기게 할 수 있다. 본 개시물이 이러한 모든 가능한 이성질체뿐만 아니라 그의 라세미 및 광학적으로 순수한 형태를 포함하는 것을 의도한다. 광학적 활성 (+) 및 (-), (R)- 및 (S)-, 또는 (D)- 및 (L)-이성질체는 키랄 신톤(syhthon) 또는 키랄 시약을 사용하여 제조할 수 있거나, 또는 키랄 컬럼을 사용하여 HPLC와 같은 통상적인 기술을 사용하여 분해할 수 있다.

"입체이성질체"는 동일한 결합에 의해 결합된 동일한 원자로 구성되지만 호환될 수 없는 상이한 3 차원 구조를 갖는 화합물을 지칭한다. 본 개시물은 다양한 입체이성질체 및 이들의 혼합물을 고려하고, 분자들이 서로 중첩되지 않는 거울 상인 2 개의 입체이성질체를 지칭하는 "거울상이성질체"를 포함한다.

"호변이성질체"는 분자의 한 원자로부터 동일 분자의 다른 원자로의 양성자 이동을 지칭한다. 본 개시물은 임의의 상기 화합물의 호변이성질체를 포함한다.

결합을 점선(---)으로 나타낸 경우에는, 그 위치가 이중 결합의 가능성을 허용하는 것으로 이해한다. 예를 들어, 링커 "A"-고리 모이어티의 구조는

으로 나타내고, 여기서 각 점선 결합은 이중 결합의 존재를 나타낼 수 있지만 반드시 그러하지는 않다. 예를 들어, A가 -NH=일 때, A는 2 개의 인접한 탄소 원자에 각각 단일 결합 및 이중 결합으로 연결된다. 다른 한편, A가 -O-로 정의되면, A는 2 개의 인접한 탄소 원자에 각각 단일 결합으로 연결된다. 주어진 "A"-고리 구조에서 이중 결합의 위치 및 수는 관련 분야의 숙련된 자에 의해 인식되는 바와 같이 원자가 요건을 충족해야 한다.

조합요법 투여

다양한 실시양태에 따르면, 하나 이상의 Axl 억제제, 바람직하게는 화학식 (I) 또는 화학식 (Ia)-(If)로 나타내는 하위구조 중 임의의 하나의 화합물은 하나 이상의 BCL-2 억제제, 바람직하게는 화학식 (II), 또는 화학식 (IIa)-(IIb)로 나타내는 하위구조 중 어느 하나의 화합물과 조합하여 활성 성분으로 사용된다. 조합요법은 하나 이상의 혈액암을 예방, 치료 또는 관리하는 데 효과적이다.

본원에 사용된 바와 같이, 혈액암은 세 가지 주요 유형의 혈액암, 즉 백혈병, 림프종 및 골수종 중 어느 하나를 지칭한다. 조합요법은 AML에 특히 효과적이다.

유리하게는, 이러한 조합요법은 개별적으로 투여되는 각 요법과 비교할 때 부가적 효과보다 더 크게, 즉 상승적 효과를 발휘한다. 따라서, 본원에 사용된 "조합요법"은 하나 이상의 BCL-2 억제제의 투여와 조합하여 하나 이상의 Axl 억제제(예를 들어, 화학식 (I)의 화합물)의 투여를 지칭한다. 달리 언급되지 않는 한, "조합요법"은 임의의 투여 형태로 임의의 순서로 Axl 억제제 및 BCL-2 억제제의 동시 또는 순차 투여를 포함할 수 있다.

본 발명의 조합요법은 하나 이상의 혈액암, 특히 백혈병을 예방, 치료 또는 관리하는 데 유용하다. 백혈병의 예는 급성 백혈병, 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수구성 백혈병, 예컨대 골수모세포, 전골수구, 골수단핵구, 단핵구, 적혈구 백혈병 및 골수이형성 증후군, 만성 골수성(과립구) 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 털세포 백혈병 같은 하지만 이에 제한되지 않는 만성 백혈병을 포함한다.

본 발명의 조합요법의 항증식 효과는 조합요법의 활성 성분을 배양된 종양 세포주에 투여함으로써 평가될 수 있다. 시험관내 분석의 맥락에서, 활성 성분의 투여는 배양 중인 세포를 세포 증식을 억제하는 데 효과적인 양으로 활성 성분과 접촉시킴으로써 간단하게 달성될 수 있다. 대안적으로, 본 발명의 조합요법의 항증식 효과는 세포 증식을 위해 승인된 생체내 모델에서 동물에게 조합요법의 활성 성분을 투여함으로써 평가될 수 있다.

본 발명의 조합요법은 Molm-13, MV4-11, HeLa, MDA-MB-231, SK-OV-3, OVCAR-8, DU145, H1299, ACHN, A498 및 Caki-1을 포함하지만 이에 제한되지 않는 인간 Axl-발현 암 세포주를 사용하는 SCID 마우스 모델의 이종이식에서 조합요법을 시험함으로써 백혈병 및 림프종의 치료에 대해 시험될 수 있다. 추가로, 조합요법은 인간 Axl-발현 AML 및 CML 백혈병 세포주를 사용하는 SCID 또는 nu/nu 마우스 모델의 이종이식에서 백혈병을 치료함에 있어서의 그의 사용에 대해 시험될 수 있다.

본 발명의 조합요법에 사용되는 활성 성분의 바람직한 예방적 또는 치료적 유효 투여량의 선택은 사용되는 특정 화합물의 활성; 화합물의 대사 안정성 및 작용 기간; 환자의 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 성별 및 식이; 투여 방식 및 시점; 배설 속도; 약물 조합; 및 전이성 암의 심도를 포함하는 여러 인자의 고려에 기초하여 숙련된 기술자에 의해 (예를 들어, 임상 시험에 의해) 결정될 수 있다.

본 발명의 조합요법에 사용되는 Axl 억제제 또는 하나 이상의 BCL-2 억제제의 정확한 투여량은 또한 투여 경로 및 백혈병의 심각성에 의존할 것이고, 주치의의 판단 및 각 환자의 상황에 따라서 결정되어야 한다. 유효 투여량은 시험관내 또는 동물 모델 시험 시스템으로부터 유래된 투여량-반응 곡선으로부터 외삽될 수 있다.

예를 들어, Axl 억제제 또는 BCL-2 억제제에 대한 치료적 유효 일일 투여량은 70 kg 포유동물의 경우 약 0.001 mg/kg(즉, 0.07 mg) 내지 약 300 mg/kg(즉, 21.0 gm)일 수 있고; 바람직하게는 치료적 유효 투여량은 약 0.01 mg/kg(즉, 0.7 mg) 내지 약 100 mg/kg(즉, 7.0 gm)이고; 보다 바람직하게는 치료적 유효 투여량은 약 0.1 mg/kg(즉, 7 mg) 내지 약 50 mg/kg(즉, 3.5 gm)이고; 보다 바람직하게는 치료적 유효 투여량은 약 0.5 mg/kg(즉, 35 mg) 내지 약 25 mg/kg(즉, 1.75 gm)이다.

바람직하게는, 본 발명은 본 발명의 조합요법에 사용되는 하나 이상의 BCL-2 억제제를 혈액암의 예방, 치료 및 관리에 효과적인 것으로 이전에 알려진 것보다 더 낮은 투여량으로 투여하는 임의의 방법을 제공한다. 더욱 더 바람직하게는, 본 발명의 조합요법으로는 더 낮은 투여량의 하나 이상의 BCL-2 억제제가 `더 낮은 투여량의 Axl 억제제와 함께 투여된다.

본 발명의 조합요법에서, Axl 억제제는 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 BCL-2 억제제의 투여와 동시에, 투여 전 또는 후에 동일한 투여 경로 또는 상이한 경로에 의해 투여된다. 이러한 조합요법은 Axl 억제제 및 하나 이상의 추가 화학요법제를 함유하는 단일 제약 투여 제제의 투여, 뿐만 아니라 Axl 억제제 및 각각의 BCL-2 억제제를 그 자체의 개별 제약 투여 제제로 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, Axl 억제제 및 다른 하나 이상의 BCL-2 억제제는 정제 또는 캡슐과 같은 단일 경구 투여 조성물로 함께 환자에게 투여될 수 있거나, 또는 각각의 약제가 개별 경구 투여 제제로 투여될 수 있다. 개별 투여 제제가 사용되는 경우, Axl 억제제 및 하나 이상의 BCL-2 억제제는 본질적으로 동일한 시점에, 즉 동시적으로 또는 개별적으로 시차를 둔 시점에, 즉 순차적으로 환자에게 투여될 수 있다. 이러한 모든 투여 조합은 본 발명의 조합요법에 포함된다.

본 발명의 조합요법의 특정 실시양태에서, Axl 억제제는 암 치료에 유용한 하나 이상의 BCL-2 억제제와 동반적으로 환자에게 투여된다. 용어 "동반적으로" 또는 "동시적으로"는 활성 성분(즉, Axl 억제제 및 하나 이상의 BCL-2 억제제)을 정확히 동일한 시점에 투여하는 것으로 제한되지 않고, 오히려 Axl 억제제 및 BCL-2 억제제(들)는 TAM 억제제가 BCL-2 억제제(들)와 함께 작용하여 그들이 다른 방식으로 투여되는 경우보다 상승적 이익을 제공할 수 있도록 하는 순서 및 시간 간격으로 환자에게 투여되는 것을 의미한다. 예를 들어, 본 발명의 조합요법의 각 활성 성분은 동일한 시점에 또는 다른 시점에서 임의의 순서로 순차적으로 투여될 수 있고; 그러나, 동일한 시점에 투여하지 않는 경우에는, 원하는 치료 또는 예방 효과를 제공하기에 충분히 가까운 시간 내에 투여해야 한다. 예를 들어, 화학요법제는 주 1회 투여될 수 있고, Axl 억제제는 매일 투여될 수 있다. 다시 말해서, 비록 활성 성분이 동시에 또는 동일한 환자 방문에서 투여되지 않을지라도, 활성 성분의 투여 레지멘은 동시적으로 수행된다.

특정 실시양태에서, 본 발명의 활성 성분은 환자에게 순환적으로 투여된다. 순환 요법은 Axl 억제제와 같은 제1 활성 성분을 일정 기간 동안 투여한 후 제2 및/또는 제3 활성 성분을 일정 기간 동안 투여하고, 이 순차 투여를 반복하는 것을 포함한다. 순환 요법은 하나 이상의 요법에 대한 내성의 발달을 감소시키고/거나, 요법 중 하나의 부작용을 피하거나 또는 감소시키고/거나, 치료의 효능을 개선할 수 있다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명의 조합요법의 활성 성분은 연장된 휴식 기간 없이 연속 주입 또는 빈번한 투여에 의해 메트로놈(metronomic) 투여 요법으로 투여된다. 그러한 메트로놈 투여는 휴식 기간 없이 일정한 간격으로 투여하는 것을 포함할 수 있다. 대표적으로 화학요법제, 특히 세포독성제는 더 낮은 투여량으로 사용된다. 이러한 투여 레지멘은 장기간 동안 상대적으로 낮은 투여량의 만성 일일 투여를 포함한다. 한 실시양태에서, 더 낮은 투여량의 화학요법제의 사용은 독성 부작용을 최소화하고 휴식 기간을 제거할 수 있다. 특정 실시양태에서, 활성 성분은 약 24 시간 내지 약 2 일, 약 1 주, 약 2 주, 약 3 주 약 1 개월 약 2 개월, 약 3 개월, 약 4 개월, 약 5 개월, 약 6 개월의 범위에서 만성 저투여량 또는 연속 주입에 의해 투여된다. 이러한 투여량 레지멘의 일정은 숙련된 종양전문의에 의해 최적화될 수 있다.

바람직한 실시양태에서는, Axl 억제제가 환자에게 24 시간마다 투여되고, 하나 이상의 BCL-2 억제제가 24 시간 투여된다.

관련 분야의 숙련된 자는 또한 투여 방법(경구, 정맥내, 흡입, 피하 등), 투여 형태, 적합한 제약학상 부형제 및 화합물을 필요로 하는 대상체에게 화합물을 전달하는 것과 관련된 다른 문제를 결정하는 것에 정통하다.

본 개시물의 화합물 또는 그의 제약학상 허용되는 염을 순수한 형태로 또는 적절한 제약 조성물로 투여하는 것은 유사한 효용을 제공하기 위한 약제의 임의의 허용된 투여 방식을 통해 수행될 수 있다. 본 개시물의 제약 조성물은 본 개시물의 화합물을 적절한 제약학상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제와 조합하여 제조될 수 있고, 고체, 반고체, 액체 또는 기체 형태 조제물, 예컨대 정제, 캡슐, 분말, 과립, 연고, 용액, 좌약, 주사제, 흡입제, 겔, 미소구 및 에어로졸로 제제화될 수 있다. 이러한 제약 조성물의 전형적인 투여 경로는 제한없이 경구, 국소, 경피, 흡입, 비경구, 설하, 협측, 직장, 질 및 비내를 포함한다. 본원에서 사용되는 용어 비경구는 피하 주사, 정맥내, 근육내, 흉골내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 본 개시물의 제약 조성물은 조성물을 환자에게 투여할 때 그 안에 함유된 활성 성분이 생체이용가능하도록 제제화된다. 대상체 또는 환자에게 투여될 조성물은 하나 이상의 투여 단위의 형태를 취하며, 여기서 예를 들어 정제는 단일 투여 단위일 수 있고, 에어로졸 형태의 본 개시물의 화합물의 용기는 다수의 투여 단위를 담을 수 있다. 이러한 투여 형태를 제조하는 실제 방법은 관련 분야의 숙련된 자에게 공지되어 있거나 또는 명백할 것이며; 예를 들어, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition(Philadelphia College of Pharmacy and Science, 2000)를 참조한다. 투여될 조성물은 어떤 경우이든 본 개시물의 교시에 따라 관심 질환 또는 병태의 치료를 위한 치료적 유효량의 본 개시물의 화합물 또는 그의 제약학상 허용되는 염을 함유할 것이다.

본 개시물의 제약 조성물은 고체 또는 액체 형태일 수 있다. 한 측면에서, 담체(들)는 미립자이고, 따라서 조성물은 예를 들어 정제, 캡슐 또는 분말 형태이다. 담체(들)는 액체일 수 있고, 이 경우 조성물은 예를 들어 경구 오일, 주사가능한 액체 또는 예를 들어 흡입 투여에 유용한 에어로졸이다.

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실시예

다음 조합요법 실시예는 제한이 아닌 예시로 제공된다. 다음 조합요법 실시예에서, 화학식 (I)의 화합물이고 다음 실시예 및 도 1 내지 11에서 "화합물 A" 또는 "Cmpd A"라고 명명하는 3-(5-(시클로프로필메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민을 단독으로 또는 BCL-2 계열 단백질 억제제와 조합하여 전이성 암을 예방, 치료 또는 관리하는 능력에 대해 분석하였다.

실시예 1

세포 기반 분석에서 조합 지수 결정

세포, 배양 조건 및 시약:

AML 세포주 Molm-13 및 MV4-11을 DSMZ에서 입수하였다. 세포를 37 ℃/5 % CO₂에서 10% 열-불활성화된 혈청을 함유하는 RPMI-1640을 사용하는 배양물에서 유지하였다. 달리 명시하지 않는 한, 모든 실험에 대해 위에서 언급한 배양 조건을 사용하였다. BCL-2 억제제 베네토클락스(ABT-199) 및 나비토클락스(ABT-263)를 Chemietek에서 구입하였다. Axl 억제제 3-(5-(시클로프로필메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민(화합물 A)을 WO2015/081257에 개시된 방법에 따라 합성하였다.

화합물 투여량 반응 분석 및 CompuSyn 분석:

AML 세포 Molm-13 및 MV4-11을 24-웰 플레이트에 5 x 10⁴ 세포/mL로 플레이팅하였고, 그 다음날 단일 약물 또는 약물의 조합을 사용하여 투여하였고, 대조군에는 비히클(DMSO)만 투여하였다. 각 세포 처리를 2 회 수행하였다. 약물 치료 후 48 또는 72 시간에 세포를 수집하고, 트리판 블루와 1:1 혼합하였고, 혈구계를 사용하여 수동으로 계수하였다. 각 샘플에 대해 (적어도) 총 100 개의 세포를 계수하였다. 생존률(%)을 계산하고, 비히클 치료 대조군으로 정규화하였다. 각 화합물의 개별 IC₅₀을 각 세포주에서 투여량 증가를 이용하여 결정하였다. 조합 연구를 수행하기 위해 각 세포주에 대한 각 화합물의 IC₅₀보다 적은 4 가지 투여량을 선택하였다. IC₅₀ 값은 Prism 버전 5.01을 사용하여 계산하였다. CompuSyn 소프트웨어 버전 1.0을 사용하여 조합 지수를 계산하였다.

결과:

BCL-2 억제제와 Axl 억제제 사이의 잠재 상승적 효과를 확인하기 위해서, 연구를 위해 BCL-2 억제제 베네토클락스 및 나비토클락스에 민감한 AML 세포주 Molm-13 및 MV4-11을 선택하였다. 이 세포주 둘 모두가 시험된 BCL-2 억제제에 대해 낮은 나노몰 IC₅₀을 갖는 것으로 입증되었다. 베네토클락스 민감성 세포주인 Molm-13 및 MV4-11에서, 베네토클락스 단일 약제 IC₅₀ 값은 각각 55.91 nM 및 20.53 nM인 것으로 밝혀졌다. 이들 IC₅₀ 값은 화합물 A 존재 하에서는 상당히 감소되었다. 화합물 A가 존재할 때 ABT-199의 IC₅₀ 값은 Molm-13에서는 9.9 nM로, MV4-11에서는 0.99 nM로 감소하였다. ABT-263의 IC₅₀ 값은 Molm-13 및 MV4-11에 대해 각각 358.4 nM 및 93.47 nM인 것으로 결정되었다. ABT-199의 상황과 유사하게, ABT-263의 IC₅₀ 값도 또한 화합물 A 존재 하에서는 Molm-13 및 MV4-11에서 각각 116 nM 및 36.75 nM로 감소하였다. 이러한 결과를 표 1에 요약한다.

표 1

조합 연구의 경우, 평가된 화합물 조합의 상승효과를 확립하기 위해 각 단일 화합물 농도가 단일 약제 IC₅₀보다 낮도록 4 가지 농도를 선택하였다. 조합 지수(CI)가 1보다 작다면, 그것은 두 화합물이 조합하면 상승적 효과를 가질 것임을 나타낸다. 도 1a 및 1b는 조합 지수가 두 세포주 모두에 대해 1 미만임을 보여준다. 그 결과는 Axl 억제제 화합물 A와 BCL-2 억제제 ABT-199 또는 ABT-263의 조합이 둘 모두 AML 세포주 Molm-13 및 MV4-11에서 상승적 효과를 생성했음을 입증한다. 동일한 투여량에서 영향을 받은 분율(fraction affected)(FA)은 단일 화합물군에 비해 화합물 조합군에서 훨씬 더 높았다.

실시예 2

AXL 표면 염색

방법/실험 설계:

어떤 AML 환자 샘플이 Axl의 높은 단백질 수준을 발현하는지 연구하기 위해 Axl-APC 항체를 사용하여 다양한 상이한 AML 샘플(혼합 직계성 백혈병(MLL) 융합이 있는 경우 및 MLL 융합이 없는 경우)의 표면 염색을 수행하였다. CD34⁺ AML 줄기 세포/전구세포 및 줄기-강화 CD34⁺ CD38^- AML 집단을 포함시켰고, 이것은 후자가 일부 AML 환자에서 높은 수준의 Axl 발현을 갖는 것으로 보고되었기 때문이다.

도 2a 및 2b가 입증하는 바와 같이, AML 환자 샘플은 정상 골수(NBM) 공여자 세포보다 표면에서 더 높은 수준의 Axl을 발현한다. 도 2a는 CD34+ AML 및 NBM 세포에 대한 Axl-APC 항체로 Axl의 표면 염색의 요약(위) 및 각 샘플의 세부사항(아래)이다. 도 2b는 줄기-강화 CD34+ CD38- AML 및 NBM 집단에 대한 Axl의 표면 염색의 요약(위) 및 각 샘플의 세부 사항(아래)이다.

도 3a 및 3b는 MLL AML 환자 샘플이 표면에서 높은 수준의 Axl을 발현한다는 것을 추가로 입증한다. 도 3a는 CD34+ AML 및 NBM 세포에 대한 Axl-APC 항체로 Axl의 표면 염색의 요약이다. 도 3b는 줄기-강화 CD34+ CD38- AML 및 NBM 집단에 대한 Axl의 표면 염색의 요약이다.

결과:

결과는 Axl 단백질이 건강한 CD34⁺ NBM 세포와 비교하여 CD34⁺ AML 환자 세포에서 상당히 더 높은 수준으로 발현되며(도 2a), 일부 MLL AML 샘플은 가장 높은 Axl 수준을 발현한다는 것을 나타낸다(도 2a 및 도 3a). 흥미롭게도, CD34⁺ CD38^- 줄기-강화 AML 환자 샘플은 정상 대응물보다 약간 더 높은 단백질 수준의 Axl 및 상당히 더 많은 Axl을 발현하고(도 2b), MLL AML 샘플은 평균적으로 더 높은 Axl 단백질 수준을 발현한다(도 3b). AML 샘플 #2 및 #14가 높은 수준의 Axl을 발현하고, 생체내 PDX 모델에 사용되었다.

실시예 3

환자 유래 이종이식(PDX) 모델에서 화합물 A 및 ABT-199의 조합요법

방법/실험 설계:

원시 백혈병 세포를 표적화하고/하거나 백혈병 발병을 예방하기 위한 화합물 A 및 화합물 A와 ABT-199의 조합의 상대적 효과를 생체내 분석으로 연구하였다. 먼저, 2 명의 상이한 AML 환자(높은 Axl 및 GAS6 발현을 가짐; 코호트 1 = AML 환자 #2, 코호트 2 = AML 환자 #14, 실시예 2에서 결정됨)로부터의 고도로 정제된 CD34+ 줄기 세포 및 전구세포에 GFP/루시페라제 렌티바이러스 리포터를 형질도입하여 마우스의 비침습적 생체내 영상화(IVIS)가 백혈병 발병을 추적할 수 있도록 하였다. 그 다음, 조사된(irradiated) 암컷 면역저하 NRG-3GS 마우스(인간 IL-3, GMC-SF 및 스틸 인자(Steel factor)를 생성함)에 마우스 당 50,000 개 세포의 최적화된 세포 수를 정맥내 주사한 다음, 세포 주사 후 제1 일 및 제2 일에 복강내 항디프테리아 독소를 주사하여 잠재적으로 마우스를 죽일 수 있는 잔류 T-세포를 제거하였다. 3 주 후, 모든 마우스에서 백혈병 개시를 확인하기 위해 IVIS를 수행하였다. 그 후, 비히클(대조군), 50 mg/kg 화합물 A 단독 QD, 50 mg/kg ABT-199 단독 QD 또는 화합물 A(50 mg/kg, QD) 및 ABT-199 50 mg/kg의 조합을 사용한 치료를 4 주 동안(총 20 회 투여) 경구 위관영양에 의해 개시한 후에 치료의 효과를 평가하기 위해 IVIS를 한 차례 더 수행하였다.

도 4a 및 4b는 각각 지시된 치료를 사용한 경구 위관영양 전후의 대표 마우스의 생물발광 영상화를 보여준다. 어두워진 영역은 GFP/루시페라제 백혈병 세포의 존재로 인해 관찰된 생물발광 부위를 나타낸다.

또한, 한 세트의 안락사 마우스(각각 두 코호트의 각 치료군으로부터 1 마리 마우스)의 말초 혈액(PB), 골수(BM) 및 비장에서 백혈병 세포 부담을 측정하였고, 생착된 세포의 면역표현형을 형광 표지된 CD45, CD34, CD38, CD33, CD15, CD14, CD19 표면 표지자로 결정하였다. 비장의 크기 및 무게로 비장비대를 평가하였다(도 5). 도 6은 각 환자 코호트에 대해 지시된 바와 같은 각 치료군의 대표 안락사 마우스의 PB 및 BM에서 형질도입된(GFP+) 및 형질도입되지 않은(GFP-) 인간 백혈병 세포의 생착에 대한 형광-활성화된 세포 분류(FACS) 분석을 보여준다.

나머지 모든 마우스에 대해 질병 발병 증상(체중 감소, 무기력 등) 및 비교되는 치료군 간의 생존을 모니터링하였다. 도 7a 및 7b는 두 환자 코호트 모두에 대해 지시된 치료군에 대한 백혈병 마우스의 생존 곡선을 보여준다. 각 치료군의 중앙 생존률을 괄호 안에 일수로 표시한다. P-값은 로그-랭크(Log-rank)(Mantel-Cox) 시험으로 계산하였고, 군 간에 유의한 차이를 나타낸다.

결과:

화합물 A와 ABT-199의 조합은 초기 시점에서 백혈병 발병을 지연시킬 뿐만 아니라 제거하는 데 매우 효과적이었지만, 반면에 단일 약제 및 특히 비히클 대조군은 백혈병 진행을 나타냈다. 예를 들어, AML 치료 전(도 4a) 및 치료 후(도 4b)의 PDX 모델을 참조한다.

게다가, Axl 및 BCL-2를 동시에 표적화하는 조합 접근법은 비장비대를 예방할 수 있었다. 도 5는 건강한 비백혈병 마우스(세포 없음), 비히클 대조군(치료 없음), 화합물 A 단독의 단일요법, ABT-199 단독의 단일요법 및 화합물 A 및 ABT-199의 조합요법의 크기 및 무게를 보여준다. 나타낸 바와 같이, 건강한 비백혈병 마우스와 비교했을 때 비히클 대조군 및 단일요법군에서 비장이 상당히 확대된 반면, 조합요법을 받은 마우스는 비장 확대의 징후를 보이지 않았다.

도 6a-6d는 PB(도 6a 및 도 6b) 및 BM(도 6c 및 도 6d)에서 인간 백혈병 세포의 생착 감소 및 비장 내로 백혈병 세포의 침윤을 추가로 입증한다. 그 결과, 두 환자 코호트 모두에서 단일 약제 또는 비히클로 치료된 마우스와 비교하여 조합요법군에서 상당한 생존 이득을 나타냈다(도 7a 및 도 7b, P < 0.025). 대표 백혈병 마우스의 BM에 대한 상세한 분석은 동시적 Axl 및 BCL-2 억제가 생착된 줄기 세포, 전구세포 및 분화된 모세포뿐만 아니라 골수 세포 및 골수성 모세포를 제거하는 데 매우 효과적이라는 것을 밝혔다. 결론적으로, 화합물 A 및 ABT-199을 사용한 조합된 치료는 백혈병 부담을 감소시키고, 일차 AML 환자 세포를 갖는 환자 유래 이종이식(PDX) 모델에서 백혈병 마우스의 생존을 상당히 향상시킨다.

실시예 4

MV4-11 세포주 이종이식 모델에서 화합물 A 및 ABT-199의 조합요법

방법/실험 설계:

동물에서 인간 백혈병 세포를 제거하기 위한 화합물 A 단일요법 및 ABT-199와의 조합요법의 안전성 및 효과를 연구하기 위해 세포주 기반 이종이식 마우스 연구를 수행하였다. 먼저, MV4-11 세포를 GFP/루시페라제 렌티바이러스 벡터로 형질도입하여 마우스에서 인간 백혈병 세포를 분류/분석하고 마우스의 비침습적 생체내 영상화 시스템(IVIS)을 사용하여 백혈병 발병 및 백혈병 형성 부위를 추적하였다. 그 후, 마우스 당 250만 개의 GFP 양성 MV4-11 세포를 조사된 수컷 NRG 마우스에 정맥내 주사하였다. 주사 2 주 후, IVIS 영상화를 수행하여 각 마우스에서 백혈병 형성 및 일관된 수준의 백혈병 부담을 확인하였다. 그 후, 마우스는 비히클(대조군), 50 mg/kg 화합물 A 단독 QD, 50 mg/kg ABT-199 단독 QD 또는 화합물 A (50 mg/kg, QD) 및 ABT-199(50 mg/kg, QD)의 조합으로 3 주(총 15회 투여)의 경구 치료를 받았다.

치료 기간 후, 치료 효과를 평가하기 위해 IVIS 영상화를 한 차례 더 수행하였다. 도 8a 및 도 8b는 각각 치료 전 및 지시된 치료로 경구 위관영양 후의 대표 마우스의 생물발광 영상화를 나타낸다. 어두워진 영역은 GFP/루시페라제 백혈병 세포의 존재로 인해 관찰된 생물발광 부위를 나타낸다. 비교를 위해, 형질도입된 백혈병 세포가 없는 건강한 마우스("세포 없음")도 나타낸다.

그 후, 대표 마우스군을 희생시켜 각 치료군의 말초 혈액(PB), 골수(BM), 비장 및 간에서 백혈병 세포의 생착을 비교하였다. 비장 및 간과 같은 조혈 기관으로의 백혈병 세포의 침윤을 무게 및 조직병리학적 분석에 의해 평가하였다. 도 9a 및 9b는 각각 지시된 바와 같은 각 치료군으로부터의 대표 마우스의 비장 크기 및 무게, 및 해모톡실린 및 에오신 염색을 나타낸다. 도 10은 지시된 바와 같은 각 치료군으로부터의 대표 마우스의 BM, PB, 비장 및 간에서의 백혈병 세포 생착의 FACS 분석을 나타낸다.

나머지 마우스를 치료군 간의 생존에 대해 모니터링하였다. 도 11은 지시된 치료군에 대해서 백혈병 마우스의 생존 곡선을 나타낸다. 각 치료군의 중앙 생존율을 괄호 안에 일수로 나타낸다. P-값은 로그-랭크(Mantel-Cox) 시험으로 계산하였고, 군 간에 유의한 차이를 나타낸다.

결과:

3 주의 경구 위관영양 후, 화합물 A로 치료된 마우스는 비히클 및 ABT-199 로 치료된 마우스에 비해 극적으로 낮은 강도의 생물발광 신호를 가졌고, 조합 치료된 마우스의 신호는 검출 역치보다 훨씬 낮았다(도 8b). 이 관찰은 비히클 대조군 및 ABT-199로 치료된 마우스와 비교하여 화합물 A로 또는 ABT-199와의 조합으로 치료된 마우스에서는 비장비대의 징후가 없음에 의해 추가로 확증되었다(도 9a). 조직학적 분석은 조합 치료가 비장에서 백혈병 세포의 침윤을 방지했음을 추가로 확인하였다(도 9b). 형광 활성화 세포 분류(FACS) 분석은 조합요법이 PB, BM, 비장 및 간에서 인간 백혈병 세포의 생착을 감소시켜(도 10), 단일 약제 또는 비히클로 치료된 마우스에 비해 상당한 연장된 생존을 초래함을 보여주었다(도 11, P <0.007). 요약하면, 화합물 A 치료 단독이 이 MV4-11 동물 모델에서 생체내 백혈병 번식 활성을 감소시킬 수 있으며, 이 억제 효과는 ABT-199와의 조합 치료 후에 극적으로 향상되었다.

본 명세서에 언급되고/거나 출원 데이터 시트에 열거된 모든 미국 특허, 미국 특허 출원 공개, 미국 특허 출원, 외국 특허, 외국 특허 출원 및 비특허 간행물은 그 전체가 본원에 참고로 포함된다.

전술한 바로부터, 본 개시물의 구체적인 실시양태가 예시의 목적으로 본원에 기재되었지만, 본 개시물의 사상 및 범위를 벗어나지 않고 다양한 수정이 이루어질 수 있다는 것을 이해할 것이다. 따라서, 본 개시물은 첨부된 청구 범위에 의한 경우를 제외하고는 제한되지 않는다.

Claims

혈액암 치료에 동반적으로 사용하기 위한 Axl 억제제와 BCL-2 계열 단백질 억제제의 조합으로서, 상기 Axl 억제제는, 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 거울상이성질체 또는 호변이성질체, 그의 제약학상 허용되는 염, 또는 그의 제약 조성물이되,

화학식(I)
여기서
A, A¹ 및 A²가 동일하거나 또는 상이하고, 독립적으로 -N=, -CR⁵= 또는 -O-이고;
R¹이 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 할로알킬, 아릴, 아랄킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클릴알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로아릴알킬이고, 이것들은 각각 임의로 치환될 수 있고;
R²가 헤테로시클릴, 헤테로시클릴알킬, 시클로알킬, 알킬, 아랄킬, 시클로알킬알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 아릴이고, 이것들은 각각 임의로 치환될 수 있고;
각각의 R³ 및 R⁴가 동일하거나 또는 상이하고, 수소, 알킬, 아랄킬, 알케닐, 아랄케닐, 알키닐, 아랄키닐, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 할로 또는 할로알킬로부터 독립적으로 선택되며, 이것들은 각각 임의로 치환될 수 있고;
R⁵가 각 경우에서 수소, 알킬, 아랄킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 할로 또는 할로알킬이고, 이것들은 각각 임의로 치환될 수 있는 것인 화합물; 또는
이고; 그리고
상기 BCL-2 계열 단백질 억제제는 하기 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 입체이성질체, 거울상이성질체 또는 호변이성질체, 그의 제약학상 허용되는 염, 또는 그의 제약 조성물이되,

화학식(II)
여기서
n이 0 또는 1이고;
R⁶가 임의로 치환된 헤테로시클릴알킬, 임의로 치환된 시클로알킬알킬 또는 임의로 치환된 헤테로알킬이고;
R⁷이 임의로 치환된 헤테로시클릴알킬이고;
R⁸이 임의로 치환된 헤테로아릴 또는 임의로 치환된 아릴이고;
Y¹이 전자 끄는 기(electron-withdrawing group)인 조합.
제1항에 있어서, 상기 Axl 억제제가

화학식 (Ia); 화학식 (Ib); 화학식 (Ic);

화학식 (Id); 화학식 (Ie); 또는 화학식 (If)
의 화합물인 조합.
제1항에 있어서, 상기 Axl 억제제가 3-(5-(시클로프로필메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민인 조합.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 BCL-2 계열 단백질 억제제가 하기 화학식 (IIa) 또는 (IIb)의 화합물이되,

화학식(IIa)

화학식(IIb)
여기서
X¹은 H, F, Cl, Br, 또는 I이고;
X² 및 X³는 독립적으로 수소 또는 알킬이고;
X⁴는 -O-, -C(R⁹)₂- 또는 -CH₂CH₂-이고;
Y¹은 -CN, -NO₂, -SO₂C(X⁵)₃, -CF₃, F, Cl, 또는 Br이고, 여기서 각 X⁵는 각 경우에서 독립적으로 H, F 또는 Cl이고;
R⁹은 수소 또는 알킬인 조합.
제4항에 있어서, Y¹이 -NO₂, 또는-SO₂CF₃인 방법.
제5항에 있어서, 상기 BCL-2 계열 단백질 억제제가

베네토클락스; 또는

나비토클락스
인 조합.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Axl 억제제가 3-(5-(시클로프로필메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민이고; 상기 BCL-2 계열 단백질 억제제가 베네토클락스인 조합.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Axl 억제제가 3-(5-(시클로프로필메틸)-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민이고; 상기 BCL-2 계열 단백질 억제제가 나비토클락스인 조합.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 혈액암이 급성 골수성 백혈병(AML)인 조합.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Axl 억제제가 동일한 Axl 억제제를 사용하는 단일요법보다 더 낮은 투여량으로 투여되는 것인 조합.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 BCL-2 계열 단백질 억제제가 동일한 BCL-2 계열 단백질 억제제를 사용하는 단일요법보다 더 낮은 투여량으로 투여되는 것인 조합.