KR20210053637A - 케피어 유래 프로바이오틱 효모 클루이베로미세스 막시아누스 a5 및 이의 용도 - Google Patents

케피어 유래 프로바이오틱 효모 클루이베로미세스 막시아누스 a5 및 이의 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스(Kluyveromyces marxianus) A5 균주 및 이의 용도로서, 상기 균주 및 이의 배양액은 살모넬라 속 균주에 대한 항균 활성을 가지고 있어, 항균용 조성물, 생균제, 사료 첨가제 및 식중독의 예방 또는 치료용 약학 조성물로 활용할 수 있다.

Description

케피어 유래 프로바이오틱 효모 클루이베로미세스 막시아누스 A5 및 이의 용도{Probiotic yeast Kluyveromyces marxianus A5 from kefir and uses thereof}
본 발명은 케피어 유래 클루이베로미세스 막시아누스(Kluyveromyces marxianus) A5 균주 및 이의 용도에 관한 것이다.
살모넬라는 장내세균과에 속하는 그람 음성 간균의 미생물로 동물에서 위장관계 감염 질환의 원인체가 될 뿐만 아니라, 사람에서 세균성 식중독을 일으키는 대표적 세균이다. 살모넬라는 동물의 장 내에서 존재하다가 불완전 조리로 인해 사람이 섭취하는 음식에 잔류하여 식중독을 일으키게 된다. 살모넬라 보균할 수 있는 동물은 소, 돼지 등의 포유동물과 닭 등 조류, 그리고 파충류 및 어류 등으로 매우 다양하며, 특히 이 중에서도 닭과 계란을 통한 식중독의 발생 사례가 주를 이루고 있다.
이에 따라, 사람에서 식중독 사고를 미연에 방지하고 동물들의 잠재적 감염 질환의 가능성을 최소화하기 위해서는 보균 동물들에서 살모넬라 감염을 저감화시키는 것이 중요하다고 할 수 있으나, 아직까지 이를 실현할 수 있는 방법이 개발되어 있지 않은 실정이다. 과거에는 항생제의 사료 첨가를 통한 장내미생물총 조절로 인해 살모넬라를 비롯한 다양한 장내세균들이 저감화 되었으나, 이마저도 항생제의 만성적 사용으로 인한 내성균 발생 때문에 오늘날에는 사료의 항생제 첨가가 금지되었다. 따라서, 닭의 장관 내에서 살모넬라 정착을 방해할 수 있는 대체 소재의 필요성이 대두되고 있다.
한국공개특허 제10-2017-0024967호
본 발명의 목적은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 생균제를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 사료 첨가제를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 식중독의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 시료에 처리하는 단계를 포함하는 살모넬라 속 균주의 저감화 방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주를 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 균주는 케피어(Kefir)에서 분리된 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 균주는 항균 활성을 가지는 것일 수 있고, 바람직하게는 살모넬라 속(Salmonella spp.) 균주에 대한 항균 활성을 가지는 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 살모넬라 속(Salmonella spp.) 균주에 대한 항균활성을 가지는 것일 수 있고, 상기 살모넬라 속 균주는 살모넬라 엔테리카(Salmonella enterica), 살모넬라 봉고리(Salmonella bongori), 살모넬라 엔테리티디스(Salmonella Enteritidis) 및 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhymurium)으로 이루어진 군에서 선택되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 생균제를 제공한다.
또한, 본 발명은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 사료 첨가제를 제공한다.
또한, 본 발명은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 식중독의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 식중독은 살모넬라 속 균주에 의하여 유발되는 것일 수 있고, 상기 균주는 살모넬라 속 균주에 대한 항균 활성을 가지는 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 시료에 처리하는 단계를 포함하는 살모넬라 속 균주의 저감화 방법을 제공한다.
본 발명에 따른 기탁번호 KCCM 12598P의 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주는 살모넬라 엔테리카(Salmonella enterica), 살모넬라 봉고리(Salmonella bongori), 살모넬라 엔테리티디스(Salmonella Enteritidis) 및 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhymurium)와 같은 살모넬라 속 균주에 대한 항균 활성을 가지고 있어, 이를 항균용 조성물, 생균제 또는 사료 첨가제 등으로 활용할 수 있다.
본 발명은 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스(Kluyveromyces marxianus) A5 균주를 제공한다.
본 발명자들은 케피어(Kefir)에서 분리된 균주를 동정하였고, 살모넬라에 대하여 현저한 항균 활성을 가지는 균주로서 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주를 확인하고 이를 한국미생물보존센터에 2019년 10월 02일자로 기탁하여 기탁번호 KCCM 12598P를 부여받았다.
또한, 본 발명은 상기 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물을 제공한다.
상기 조성물은 살모넬라 속(Salmonella spp.) 균주에 대한 항균 활성을 가지는 것일 수 있고, 상기 살모넬라 속 균주는 살모넬라 엔테리카(Salmonella enterica), 살모넬라 봉고리(Salmonella bongori), 살모넬라 엔테리티디스(Salmonella Enteritidis) 및 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhymurium)으로 이루어진 군에서 선택되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 용어, "항균" 또는 "항균 활성"은 세균이나 곰팡이와 같은 미생물에 대해 저항하는 성질을 의미하며, 보다 상세하게는 세균의 성장 또는 증식을 억제하거나 세균 자체를 사멸시키는 특성을 의미한다. 본 발명에서, 상기 항균 또는 항균 활성은 살모넬라 속 균주의 성장 또는 증식을 억제하거나 사멸시키는 특성으로서 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 생균제를 제공한다.
상기 용어, "생균제"는 동물이 섭취했을 때 위장관에 머물러 생존할 수 있는 미생물로서, 특정 병리 상태를 예방하거나 치료할 수 있는 효과가 있는 미생물 제제를 말한다. 일반적으로 생균제는 장내 세균총의 이상 발효에 의하여 야기되는 제반 증상을 치료하고 개선하는 효과가 있으며, 체내에 투여되면 장내의 소화관 벽에 밀집, 정착하여 유해 미생물이 정착하지 못하게 하는 작용을 하고, 유산을 생성하여 장내 pH를 낮추어서 유해 미생물의 증식을 억제한다. 또한, 투여된 생균제는 영양분의 흡수를 담당하는 장융모의 활동을 도와주는 역할을 수행한다.
또한, 본 발명은 상기 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 사료 첨가제를 제공한다.
상기 사료첨가제는 항균 활성을 가지고 있어, 가금류 또는 가축 등에게 꾸준히 섭취하게 함으로써 세균성 질환을 예방할 수 있고, 이미 발생한 세균성 질환을 개선시킬 수 있다. 사료는 영양가, 주성분, 유통, 수분 함량 배합상태 및 가공형태 등에 따라 여러 가지로 분류할 수 있으며, 사료는 조사료, 농후사료, 보충사료, 단백질사료, 녹말사료, 지방질사료 또는 섬유질사료가 사용가능하다.
상기 사료 첨가제는 추가적으로 허용되는 담체를 함유할 수 있으며, 예를 들어, 상기 사료 첨가제를 그대로 또는 공지의 담체, 안정제 등을 가할 수 있다. 또한, 필요에 따라 비타민, 아미노산류, 미네랄 등의 각종 양분, 항산화제, 항생물질, 항균제 및 기타의 첨가제 등을 가할 수도 있으며, 그 형상으로서는 분체, 과립, 펠릿, 현탁액 등의 적당한 상태일 수 있다. 본 발명의 사료첨가제는 단독으로 또는 사료에 혼합하여 공급할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 식중독의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 식중독은 살모넬라 속 균주에 의하여 유발되는 것일 수 있고, 본 발명의 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주 또는 이의 배양액은 살모넬라 속 균주에 대한 항균 활성을 가지는 것일 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명에서 용어, "약학적으로 허용가능한"이란 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다. 상기 담체는 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장제, 안정화제, 기제, 부형제, 윤활제 등 당업계에 공지된 것이라면 제한없이 사용할 수 있다.
또한, 본 발명의 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 나아가, 연고제, 로션제, 스프레이제, 패취제, 크림제, 산제, 현탁제, 겔제 또는 젤의 형태의 피부 외용제의 형태로 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 싸이코트리아 루브라 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명의 용어 "투여"란 적절한 방법으로 개체에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미하며 상기 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구 투여, 국소 투여, 비내 투여, 폐내 투여, 직장내 투여될 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.
상기 용어, "개체"란 인간을 포함한 쥐, 생쥐, 가축 등의 모든 동물을 의미한다. 바람직하게는, 인간을 포함한 포유동물일 수 있다.
상기 용어, "약학적으로 유효한 양"이란 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 성별, 연령, 체중, 건강 상태, 질병의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로, 및 배출 비율, 치료 기간, 배합 또는 동시에 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 투여는 상기 권장 투여량을 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다.
이하, 본 발명을 실시예를 통하여 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 효모주의 분리 및 동정
본 발명에 사용된 효모주는 천연 복합 발효유인 케피어로부터 분리하였다. 간단히, 케피어를 멸균 생리식염수로 희석한 뒤, 이를 potato dextrose agar에 도말하여 얻은 콜로니를 ITS sequencing 을 통하여 확인 동정하였다.
그 결과, 10주의 효모주를 분리하였고, 분리된 효모주는 다음과 같다: Kluyveromyces marxianus A1, Kluyveromyces marxianus A2, Kluyveromyces marxianus A5, Kluyveromyces marxianus AGB, Kluyveromyces marxianus K5, Kluyveromyces marxianus D2, Saccharomyces unisporus 26S1, Saccharomyces unisporus 2603, Saccharomyces unisporus 2604 및 Saccharomyces unisporus 3701.
실시예 2. 분리된 효모주의 항살모넬라능 기반 선별 결과
본 발명자들은 케피어에서 분리된 10주의 효모주를 대상으로 항살모넬라능 검사를 실시하였다. 항살모넬라능 검사는 성장곡선 분석(growth curve analysis) 기법을 이용하여 수행하였다. 효모 배양액과 살모넬라 엔테리티디스 RR-SE (rifampicin resistant Salmonella Enteritidis) 균주의 균액을 96-well microplate에 각각 100 μL 씩 총 200 μL가 되도록 섞어준 후, 24 시간 동안 37 ℃에서 배양하며 살모넬라의 성장을 관찰하였다. 효모주가 살모넬라의 성장을 완전히 억제하고 사멸까지 유발하면 (+++)로 표시하였고, 성장을 완전히 억제하면 (++)로 표시하였으며, 성장을 부분적으로 억제하면 (+)로 표시하였고, 살모넬라의 성장을 억제하지 못하면 (-)로 표시하여 결과를 판정하였다.
그 결과, 표 1에 나타낸 바와 같이, 케피어에서 분리된 10개 효모주 중에서 클루이베로미세스 막시아누스 A5 (Kluyveromyces marxianus A5)가 살모넬라의 성장을 완전히 억제하고 사멸까지 유도하여 가장 우수한 항살모넬라능을 나타내는 것으로 확인되었다. 나머지 효모들에서는 살모넬라의 성장을 억제할 수는 있으나 사멸시키지 못하거나, 살모넬라의 성장에 영향을 주지 않는 것으로 확인되었다.
효모명 항살모넬라능
Kluyveromyces marxianus A1 ++
Kluyveromyces marxianus A2 +
Kluyveromyces marxianus A5 +++
Kluyveromyces marxianus AGB +
Kluyveromyces marxianus K5 ++
Kluyveromyces marxianus D2 ++
Saccharomyces unisporus 26S1 +
Saccharomyces unisporus 2603 +
Saccharomyces unisporus 2604 +
Saccharomyces unisporus 3701 -
실시예 3. 선별된 효모주를 이용한 생체 내( in vivo ) 살모넬라 저감화 효과 검증
본 발명자들은 가장 우수한 항살모넬라능이 확인된 클루이베로미세스 막시아누스 A5를 이용하여 닭에서 살모넬라 저감화 효과 여부를 확인하기 위하여 두 가지의 실험을 수행하였다. 간단히, 첫 번째 실험은 부화 직후 살모넬라 방어효과를 확인하기 위하여 1일령 병아리에서 실시되었다. 실험은 음성대조군, 양성대조군 및 클루이베로미세스 막시아누스 A5 투여군인 총 3개의 실험군으로 수행되었고, 각 군별로 총 6 마리의 병아리로 실시되었다. 클루이베로미세스 막시아누스 A5 투여군은 1일령 병아리에 1.23x106 cfu의 효모 균주를 경구 투여한 후, 다음 날(2일령) 살모넬라 균을 공격접종하였고, 음성대조군은 saline 만을 접종하였으며, 양성대조군은 3.2x107 cfu의 살모넬라 균(rifampicin resistant Salmonella Enteritidis)을 공격접종하였다. 이후, 모든 실험군은 살모넬라를 공격접종한 다음 날, 부검을 통해 병아리의 맹장에서 살모네라를 계수하였다.
그 결과, 표 2에 나타낸 바와 같이, 부화 직후 1일령 병아리에 클루이베로미세스 막시아누스 A5를 경구투여한 경우 살모넬라 공격접종 1일 후에는 맹장 내의 살모넬라 균의 수가 양성대조군에 비하여 현저하게 감소되었음을 확인하였다.
부검 시점 맹장 내 살모넬라 수의 평균값 (cfu/g)
음성대조군 양성대조군 Kluyveromyces marxianus A5 투여군
살모넬라 공격접종
1일 후		 검출되지 않음 94.10 X 105 4.00 X 105
살모넬라 공격접종
6일 후		 검출되지 않음 8.00 X 105 6.09 X 105
살모넬라 공격접종
10일 후		 검출되지 않음 4.06 X 105 1.88 X 105
또한, 두 번째 실험은 부화 10일 후의 살모넬라 방어효과를 확인하기 위해 실시되었다. 실험은 음성대조군, 양성대조군 및 클루이베로미세스 막시아누스 A5 투여군인 총 3개의 실험군으로 수행되었고, 각 군별로 총 6 마리의 병아리로 실시되었다. 클루이베로미세스 막시아누스 A5 투여군은 10일령 병아리에 1.23x106 cfu의 효모 균주를 경구 투여한 후, 다음 날(11일령) 살모넬라 균을 공격접종하였고, 음성대조군은 saline 만을 접종하였고, 양성대조군은 3.2x107 cfu의 살모넬라 균(rifampicin resistant Salmonella Enteritidis)을 공격접종하였다. 이후, 모든 실험군은 살모넬라를 공격접종한 다음 날, 부검을 통해 병아리의 맹장에서 살모네라를 계수하였다.
그 결과, 표 3에 나타낸 바와 같이, 부화 10일 후 병아리에 클루이베로미세스 막시아누스 A5를 경구투여한 경우 맹장 내의 살모넬라 균의 수가 양성대조군에 비하여 현저하게 감소되었음을 확인하였다.
부검 시점 맹장 내 살모넬라 수의 평균값 (cfu/g)
음성대조군 양성대조군 Kluyveromyces marxianus A5 투여군
살모넬라 공격접종
1일 후		 검출되지 않음 95.50 X 104 25.70 X 104
상기 결과로부터, 본 발명자들은 케피어(Kefir)에서 분리된 기탁번호 KCCM 12598P의 클루이베로미세스 막시아누스 A5 균주가 살모넬라 속(Salmonella spp.) 균주에 대한 항균 활성을 가지며, 상기 활성에 의해 항균용 조성물, 생균제, 동물의 사료 첨가제에 활용할 수 있고, 살모넬라 속(Salmonella spp.) 균주의 저감화를 통해 식중독의 예방 또는 치료용 조성물로 사용될 수 있음을 확인하였다.
한국미생물보존센터(국외) KCCM12598P 20191002

Claims (11)

  1. 기탁번호 KCCM 12598P로 수탁된 클루이베로미세스 막시아누스(Kluyveromyces marxianus) A5 균주.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 균주는 케피어(Kefir)에서 분리된 것을 특징으로 하는 균주.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 균주는 항균 활성을 가지는 것을 특징으로 하는 균주.
  4. 제 1 항의 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물.
  5. 제 4 항에 있어서,
    상기 조성물은 살모넬라 속(Salmonella spp.) 균주에 대한 항균 활성을 가지는 것을 특징으로 하는 조성물.
  6. 제 5 항에 있어서,
    상기 살모넬라 속 균주는 살모넬라 엔테리카(Salmonella enterica), 살모넬라 봉고리(Salmonella bongori), 살모넬라 엔테리티디스(Salmonella Enteritidis) 및 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhymurium)으로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  7. 제 1 항의 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 생균제.
  8. 제 1 항의 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 사료 첨가제.
  9. 제 1 항의 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 식중독의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  10. 제 9 항에 있어서,
    상기 식중독은 살모넬라 속 균주에 의하여 유발되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  11. 제 1 항의 균주 또는 이의 배양액을 시료에 처리하는 단계를 포함하는 살모넬라 속 균주의 저감화 방법.
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