KR20200146018A - 해산물 알레르기의 진단 방법 및 제품 - Google Patents

해산물 알레르기의 진단 방법 및 제품 Download PDF

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Abstract

본 발명은 대상체로부터의 시료에서 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2 또는 이의 변이체를 포함하는 군으로부터 선택되는 폴리펩타이드에 항체를 특이적으로 포획하기 위한 수단을 포함하는 진단학적으로 유용한 담체, 대상체의 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2에 대한 항체의 존재 또는 부존재 및 본 발명에 따른 폴리펩타이드 또는 담체의 용도, 또는 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2에 대한 환자의 시료로부터의 IgE 항체에에 특이적으로 결합하는, 진단 키트, 바람직하게는 알레르기 진단용 키트 제조용 폴리펩타이드에 관한 것이다.

Description

해산물 알레르기의 진단 방법 및 제품{A method and products for the diagnosis of a seafood allergy}
본 발명은 대상체로부터의 시료에서 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2 또는 이의 변이체를 포함하는 군으로부터 선택되는 폴리펩타이드에 항체를 특이적으로 포획하기 위한 수단을 포함하는 진단학적으로 유용한 담체, 대상체의 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2에 대한 항체의 존재 또는 부존재 및 진단 키트, 바람직하게는 알레르기 진단용 진단 키트의 제조를 위한 본 발명에 따른 폴리펩타이드 또는 담체의 용도, 또는 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2에 대한 환자의 시료로부터의 IgE 항체에 특이적으로 결합하는 폴리펩타이드의 용도에 관한 것이다.
해산물에 대한 알레르기 반응은 심한 아나필락시스 반응(anaphylactic reactions)을 포함하여 경증에서 전신 반응까지 다양하다. 인식할 수 있는 해산물 제품을 섭취할 때의 알레르기 반응 외에도, 알레르기 항원은 그 성질과 알레르기 반응의 위험이 숨겨져 있는 다양한 식품에서 인식할 수 없는 성분이 될 수 있다.
해산물 알레르기가 많음에도 불구하고, 치료할 수 있는 옵션이 거의 없으며 피하는 것이 유일한 옵션이다. 물론, 이것은 환자가 반응하는 항원의 특성에 관한 정확한 정보를 요구한다.
특히 가장 널리 사용되는 해산물 성분, 특히 새우, 프론(prawn), 게, 랍스터 및 가재를 포함한 갑각류에 관한 다양한 테스트가 상용화되어 있다. 예를 들어, 근육 단백질 트로포미오신(tropomyosin)은 다양한 새우 종에서 주요 교차 반응 알레르겐으로 확인되었습니다.
해산물 알레르기에 대한 이러한 진단 테스트에는 알레르겐 공급원의 단백질과 관련하여 특이성이 있는 환자의 IgE 항체 검출이 포함된다. 그러나 양성 IgE 검사, 즉 IgE 감작이 항상 임상 증상과 관련이 있는 것은 아니다. 즉, 하나의 알레르겐에 대한 IgE가 검출되면, 이 관찰은 결정적인 진단을 제공하기에 충분하지 않다.
오히려, 테스트된 알레르겐 소스가 다른 알레르겐 소스와 관련이 있을 가능성이 더 높다는 것을 나타내는 첫 번째 징후이다. 임상 실습에서 의사의 알레르기 진단은 일반적으로 관련 알레르기원에 대한 긍정적인 IgE 민감성 및 이 알레르기 항원에 대한 알레르기 반응의 설득력있는 임상 이력에 근거한다. 또한, 환자의 피부에 특정 추출물의 국소 적용에 의해 수행되는 피부 찌름 검사(skin pick test; SPT)와 같은 상보적인 시험 결과가 최종 진단을 위해 고려 될 수 있다.
그러나, 지금까지 알려지지 않은 알레르겐에 반응하기 때문에 상당수의 환자를 결정적으로 진단할 수 없다.
특정 알레르겐에 대한 알레르기가 성공적으로 확인되면 치료가 뒤따를 수 있다. 항히스타민제는 치료를개선하기 위해 사용될 수 있지만, 알레르겐의 제어된 투여에 기초하여 특정 면역 요법으로 장기간 및 근치적 치료(curative treatment)를 수행할 수 있다. 정확한 메커니즘이 완전히 알려지지 않았지만, 면역계의 이러한 특정 활성화는 동일한 알레르기 항원에 대한 후속의 환경 노출시 증상을 완화시킬 수 있다. 다양한 식물 및 동물 알레르겐에 대한 성공적인 치료가 입증되었다.
Yadzir et al.은 백 오징어 추출물을 2D SDS PAGE를 포함한 단백질 분석에 이어 매스 스펙트로메트리 및 생물 정보 분석(Yadzir, ZHM, Misnan, R. and Murad, S. (2012), 2차원 이뮤노 블롯팅 및 매스 스펙트로메트리에 의해 백 오징어(Loligo edulis)의 주요 알레르겐인 트로포미오신의 확인(Southeast Asian J Trop Med Public Health, 43 (1), 185). 50개 이상의 상이한 단백질이 확인되었지만, 일관되게 반응성 단백질 스폿만이 트로포미오신에 할당되었다.
Tong, S. W. et al.은 다양한 종의 알레르겐으로 미오신 경쇄(myosin light chain)를개시하고 있지만, 오징어에서는 그렇지 않다(Tong, SW, Yuen, AWT, Wai, CYY, Leung, NYH, Chu, KH, Leung, PSC (2018), 어류 및 조개류 알레르기 진단, J 천식 및 알레르기, 11, 247-260).
US2015/0153358은 다양한 새우 알레르겐을 개시하고 있으며, 이들 중에서 새우 미오신 경쇄가 있다. 오징어 미오신 경쇄는 개시되어 있지 않다.
Miayazawa et al.은 오징어 알레르겐의 정제를개시하였다(Miyazawa, MT, Fukamachi, F., Inakagi, Q., Reese, G., Daul, CB, Lehrer, SC Inouye, S and Sakaguchi, M. (1996) J. Allergy Clin. Immunol) 98, 948-953). 오징어 트로포 미오신이 확인되었고, 알레르기 70~90kDa의 분자량을 가진 단백질도 발견되었으나, 이뮤노 블봇에서 오징어 미오신 경쇄의 분자량인 18kDa 주변의 반응성 밴드도 발견되지 않았으며, 항원은 물론 오징어 미오신 경쇄도개시되지 않았다.
따라서 해산물 알레르기 반응을 진단, 치료, 예방할 수 있는 시약과 방법을 제공해야 한다는 요구가 계속되고 있다.
본 발명이 해결하고자 하는 과제는 해산물 알레르기, 바람직하게는 연체동물 알레르기, 보다 바람직하게는 오징어 알레르기의 진단에 도움이 되는 새로운 시험과 관련 시약을 제공하는 것이다.
본 발명이 해결하고자 하는 또 다른 과제는 해산물 알레르기의 감별 진단(differential diagnosis) 또는 감별 진단에 대한 새로운 시험과 관련 시약을 제공하는 것이다. 여기서 오징어 알레르기는 다른 해산물 알레르기, 특히 새우 알레르기와 구별될 수 있다.
본 발명의 상기 과제는 첨부된 독립항 및 종속항에 의해 해결된다.
제1 양상에서는 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2 또는 이의 변이체를 포함하는 군으로부터의 폴리펩타이드에 항체 또는 대상체의 시료에서 그 항체를 특이적으로 포획(capture)하기 위한 수단을 포함하는 진단학적으로 유용한 담체에 의해 문제가 해결된다.
바람직한 구현예에서, 상기 담체는 비드, 테스트 스트립, 마이크로티터 플레이트, 마이크로어레이, 블롯, 바람직하게는 웨스턴 블롯, 라인 블롯 및 도트 블롯, 유리 표면, 셀룰로오스 유도체와 같은 폴리머, 슬라이드, 바이오칩 및 막을 포함하는 군으로부터 선택되며, 마이크로티터 플레이트 또는 라인 블롯이 가장 바람직하다.
바람직한 구현예에서, 상기 담체는 항체를 오징어 TM에 포획하는 수단을 추가 포함한다.
제2 양상에서, 상기 과제는 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 따른 진단학적으로 유용한 담체를 포함하는 키트에 의해 해결되며, 상기 키트는 바람직하게는 캘리브레이터를 포함하는 군으로부터 하나 이상, 바람직하게는 모두, 바람직하게는 교정기, 세척 완충제 및 IgE 또는 IgG, 바람직하게는 IgG4 항체, 바람직하게는 표지된 2차 항체를 검출하기 위한 수단을 추가적으로 포함한다..
제3 양상에서, 상기 문제는 대상체로부터 샘플을 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2에 대한 항체의 존재 또는 부존재를 검출하는 단계를 포함하는 방법에 의해 해결된다.
바람직한 구현예에서, 상기 방법은 시료에서 오징어 TM에 대한 항체의 존재 또는 부존재를 검출하는 단계를 추가적으로 포함한다.
제4 양상에서, 상기 과제는 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2 또는 그의 변이체, 바람직하게는 아쥬반트(adjuvants)를 추가적으로 포함하는 약학적 조성물에 의해 해결된다.
제5 양상에서, 상기 과제는 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2를 포함하는 폴리펩타이드 또는 그의 변이체에 의해 해결되며, 여기서 상기 폴리펩타이드는 단리되거나 고정화된다.
바람직한 구현예에서, 상기 폴리펩타이드는 상기 폴리펩타이드에 특이적으로 결합하는 항체, 바람직하게는 IgE 또는 IgG, 바람직하게는 IgG4 클래스 항체와 복합체를 이룬다.
바람직한 구현예에서, 상기 폴리펩타이드는 진핵 세포에서 발현된다.
제6 양상에서, 상기 과제는 알레르기 진단을 위해 본 발명에 따른 폴리펩타이드, 담체 또는 키트의 용도에 의해 해결된다.
제7 양상에서, 상기 과제는 본 발명에 따른 폴리펩타이드 또는 담체의 용도, 또는 IgE 또는 IgG, 바람직하게는 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2에 대한 환자의 시료부터의 IgG4 항체에 특이적으로 결합하는, 진단 키트, 바람직하게는 알레르기 진단용 키트 제조용 폴리펩타이드에 의해 해결된다.
바람직한 구현예에서, 상기 알레르기는 조개류 알레르기, 바람직하게는 오징어 알레르기이다.
바람직한 구현예에서, 상기 진단은 조개류 알레르기의 감별 진단이며, 바람직하게는 새우와 오징어 알레르기와 구별된다.
다른 바람직한 구현예에서, 상기 진단은 알레르기의 감별 진단이며, 여기서 곤충과 조개류 알레르기를 구별하는 것이 바람직하며, 곤충은 하우스 크리켓(house cricket) 및 플라우어 웜(flour worm)을 포함하는 군으로부터 보다 바람직하게 선택될 수 있다.
제8 양상에서, 상기 과제는 폴리펩타이드를 포함하는 의료 또는 진단 장치를 항체, 바람직하게는 폴리펩타이드에 대해 공지된 농도, 바람직하게는 폴리펩타이드에 대한 IgE 또는 lgG, 바람직하게는 lgG4 항체를 포함하는 용액과 접촉시키는 단계를 포함하고, 상기 폴리펩타이드는 오징어 MLC1 및 오징어 MLC2 또는 이의 변이체를 포함하는 군으로부터 선택되는 방법에 의해 해결된다.
제9 양상에서, 상기 과제는 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2에 특이적으로 결합하는 항체, 바람직하게는 IgE 또는 IgG, 바람직하게는 IgG4 클래스 항체에 의해 해결되며, 이 항체는 바람직하게는 단리된다. 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 단일 클론 항체이다.
본 발명은 오징어 미오신 경쇄 1(MLC1)과 미오신 경쇄 2(MLC2) 폴리펩타이드 가 알레르겐이며 오징어 알레르기를 앓고 있는 환자로부터의 시료에서 오징어 MLC1과 오징어 MLC2에 대한 항체가 검출될 수 있다는 발명가들의 놀라운 발견에 바탕을 두고 있다. 나아가 상기 항체의 검출과, 오징어 트로포미오신, 새우 MLC, 새우 트로포미오신(TM)을 포함하는 군에서 하나 이상의 항원에 대한 항체의 조합에 의해 진단 유용성이 증대된다. 게다가, 오징어에 대한 알레르기는 다른 해산물 알레르기, 특히 새우 알레르기와 구별될 수 있다.
바람직한 구현예에서, "스퀴드 MLC1"이라는 용어는 여기서 사용되는 서열번호 8 또는 그 변이체 또는 Uniprot 접근 번호 P05945(바람직하게는 서열번호 8 또는 그 변이체)를 가리킨다. 바람직한 구현예에서, 여기서 사용되는 "스퀴드 MLC2"라는 용어는 서열번호 10 또는 그 변이체를 가리킨다. 바람직한 구현예에서 "스퀴드 TM"이라는 용어는 여기서 사용되는 서열번호 6 또는 그 변이체를 가리킨다. 바람직한 구현예에서, 여기서 사용되는 "shrimp MLC"라는 용어는 서열번호 7 또는 그 변이체를 가리킨다. 바람직한 구현예에서 "shrimp TM"이라는 용어는 여기서 사용되는 서열번호 4 또는 억세션 넘버 Q3Y8M6, 바람직하게는 서열번호 4 또는 그 변이체를 가리킨다. 본 발명의 전체에 걸쳐 언급된 임의의 데이터베이스 코드는 본 발명의 출원일 또는 최우선일에 온라인으로 Uniprot와 같은 각각의 데이터베이스를 통해 이용 가능한 폴리펩타이드 서열을 지칭한다.
본 발명은 바람직하게는 상기 담체와 관련된 항체를 특이적으로 포획하기 위한 수단을 대상체, 바람직하게는 포유동물 대상체, 보다 바람직하게는 인간 대상체의 체액 시료와 접촉시키기 위한 고체 담체인 진단학적으로 유용한 담체에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, 담체는 항체를 특이적으로 포획하기 위한 하나 이상의 수단, 바람직하게는 하나 이상, 보다 바람직하게는 둘 이상, 보다 바람직하게는 3개 이상의 이러한 수단을 포함하며, 이들 각각은 상이한 항체를 특이적으로 포획할 수 있다. 가장 바람직한 구현예에서, 상기 담체는 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM을 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 항원에 대한 항체를 특이적으로 검출하기 위한 수단을 포함한다. 상기 수단은 바람직하게는 상기 담체에 고정되어 있다. 바람직한 구현예에서, 항체를 특이적으로 포획하기 위한 수단은 포획 또는 검출되는 항체가 결합하는 항원 또는 이의 변이체, 예컨대 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM을 포함하는 군으로부터의 폴리펩타이드 또는 이의 변이체를 포함하거나 이로 구성된 폴리펩타이드가다. 이의 변형. 폴리펩타이드는 선형 펩타이드 또는 접힌 폴리펩타이드일 수 있으며, 후자는 바람직하게는 CD 분광법에 의해 측정될 수 있는 천연 단백질과 본질적으로 동일한 접힘(fold)를 채택하는 변이체이다. 바람직한 구현예에서, 펩타이드 또는 폴리펩타이드는 적어도 7, 바람직하게는 10개, 보다 바람직하게는 15개 아미노산의 포획 또는 검출되는 항체에 대한 에피토프를 포함한다. 상기 항원은 그것이 부착된 불용성 담체와 함께 반응 혼합물로부터 분리될 수 있으며, 예를 들어 여과, 원심 분리 또는 디캔팅에 의해 간단한 방식으로 시료와 접촉된다.
본 발명에 따른 임의의 고정화는 가역적이거나 비가역적인 방식일 수 있다. 예를 들어, 고정화되는 폴리펩타이드가 이온성 상호 작용을 통해 담체와 상호 작용하는 경우, 고농도의 염의 첨가에 의해 마스킹될 수 있거나 폴리펩타이드가 절단 가능한 공유 결합을 통해 결합되는 경우, 고정화는 가역적이다. 대조적으로, 이러한 폴리펩타이드가 수용액에서 절단될 수 없는 공유 결합을 통해 담체에 테더링되면 고정화는 비가역적이다. 폴리펩타이드는 예를 들어 폴리펩타이드에 친화성을 갖는 항체 또는 다른 개체(entity)를 고정화시킨 후 폴리펩타이드의 첨가 및 폴리펩타이드-항체 복합체의 형성에 의해 간접적으로 고정화될 수 있다. 포획된 항체는 표지된 2차 항체 또는 검출되는 항체를 특이적으로 포획하기 위한 표지된 수단(labeled means)을 사용하여 검출될 수 있다. 고정화 방법은 Wong, S.S., Cemistry of Potein Conjugatino and Cross-Linking, 1991, CRC Press 및 Rosenberg, I.M., Protein Analysis and Purification, Second Edition, Springer, 2005에 설명되어 있다.
바람직한 구현예에서, 진단학적으로 유용한 담체는 블롯, 바람직하게는 라인 블롯이다(Raoult, D. 및 Dasch, GA (1989), The line blot: an immunoassay for monoclonal and other antibodies. Its application to the serotyping of gram-negative bacteria. J. Immunol. Methods, 125 (1-2), 57-65; WO2013041540). 바람직한 실시 양태에서, 본 발명에 사용된 용어 "라인 블롯"은 항체를 특이적으로 포획하기 위한 하나 이상의 수단으로 코팅된 테스트 스트립, 보다 바람직하게는 막 기반(membrane-based)을 지칭하며, 바람직하게는 이들 각각은 폴리펩타이드이다. 둘 이상의 수단이 사용되는 경우, 이들은 바람직하게는 담체상에서 공간적으로 분리된다. 바람직하게는, 밴드의 폭은 테스트 스트립의 폭의 적어도 30, 보다 바람직하게는 40, 50, 60, 70 또는 80%이다. 라인 블롯은 시료가 충분히 길고 적절한 조건 하에서, 특히 인간 혈청의 존재하에 또는 2차 항체와 각각 접촉되었음을 확인하기 위한 하나 이상의 대조군 밴드를 포함할 수 있다. 다양한 블롯이 예를 들어 van Oss, J.C. 및 Regenmortel, M.H.V., Immunochemistry, 1994, Marcell Dekker, 특히 35장에 기재되어 있다.
바람직한 구현예에서, 담체는 측면 유동면역 분석장치(lateral flow immunoassay device)일 수 있다. 측면 유동 장치는 시료 액체가 배치된 시료 패드를 포함하는 막, 검출되는 항체가 결합하는 항원을 포함하는 다운 스트림 위치상의 입자 접합체 및 콜로이드성 금과 같은 검출 가능한 표지, 검출되는 항체에 결합된 입자 접합체를 고정시키는 수단을 갖는 테스트 라인, 및 제어 라인을 포함할 수 있다. 양상 유동면역 분석은 Wong, R., Tse, H. Lateral Flow Immunoassay,Springer, 2009에 기재되어 있다
바람직한 구현예에서, 담체는 MLC1 및/또는 MLC2를 포함하는 폴리펩타이드 또는 이의 변이체가 고정화된 셀룰로오스 유도체이다. 이러한 유도체는 예를 들어 Adeleke, O. A. 약물 전달 작업에서 Int. J. Pharm. X, doi 10.1016 / j.ijpx. 2019.100023에 개시되어 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 2차 항체는 Ig(면역 글로불린) 클래스로부터의 모든 항체에 결합하는 항체일 수 있다. 바람직하게는 2차 항체는 하나 이상의 별개의 인간 항체 클래스 또는 클래스, 바람직하게는 IgE 및/또는 IgG 및/또는 IgM 항체, 바람직하게는 IgG 및/또는 IgE, 바람직하게는 IgE에 결합한다.
2차 항체는 전형적으로 상기 클래스의 불변 도메인을 인식한다. 광범위하게 상업적으로 이용 가능하다. 바람직한 구현예에서, IgM, IgG 및 IgE 클래스 항체에 결합하는 2차 항체는 IgM 클래스 항체에 결합하는 2차 항체, IgG 클래스 항체에 결합하는 2차 항체 및 IgE 클래스 항체에 결합하는 2차 항체를 포함하는 혼합물일 수 있다. 바람직한 구현예에서, IgE 및 IgG 클래스 항체에 결합하는 2차 항체는 IgE 클래스 항체에 결합하는 2차 항체 및 IgG 클래스 항체에 결합하는 2차 항체를 포함하는 혼합물일 수 있다. 2차 항체는 바람직하게는 표지된다. 적합한 2차 항체는 예를 들어 EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG (제품 EI 2606-9601-2 또는 2260-9601의 "컨쥬 게이트") 또는 Rockland Immunochemicals Inc. (Dylight 609-145-006)로부터 상업적으로 입수할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 진단학적으로 유용한 담체, 보다 바람직하게는 라인 블롯은 N 글리칸 상의 알파-1,3-푸코스(Altman F. (2016), Coping with cross-reactive carbohydrate determinants in allergy diagnosis, Allergo J Int 25 (4), 98-105) 와 같은 당 단백질 에피토프에 대한 IgE 또는 유사한 항체의 결합으로 인한 위양성(false positive) 결과의 확인을 허용하는 CCD 제어를 포함한다. 이것은 음성인 경우 다른 밴드에서 위음성 반응성이 없음을 나타내는 당 단백질 에피토프를 포함하는 라인 블롯의 추가적인 라인일 수 있다. 다수의 라인 블롯은 예를 들어 독일 뤼베크의 EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG로부터 상업적으로 입수할 수 있다. 바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 방법은 교차 반응성 탄수화물 에피토프에 결합하여 위양성 결과를 초래하는 항체의 존재 또는 부존재를 검출하는 단계를 포함한다. 다른 테스트 스트립에는 딥 스틱이 포함된다. 다양한 테스트 스트립 및 블롯 기반 담체는 당업계에, 예를 들어 Khare, R., Guide to Clinical and Diagnostic Virology, Wiley 2019, 특히 14장 및 Fischbach, FT, Barnett, M., A Manual of Laboratory and Diagnostics Tests, 8판, 특히 3장에 기재되어 있다.
다른 바람직한 구현예에서, 진단학적으로 유용한 담체는 비드이다. 주로 탄수화물, 예를 들어 세파로스 또는 아가로스, 또는 플라스틱을 기초로 하여 수많은 응용을 위한 다양한 비드가 상업적으로 이용 가능하다. 이들은 항체를 특이적으로 포획하기 위한 수단의 고정화에 이용될 수 있는 카르복실 또는 에스테르기와 같은 활성 또는 활성화 가능한 화학기를 함유한다. 바람직하게는, 비드는 평균 직경이 0.1㎛ 내지 10㎛, 0.5㎛ 내지 8㎛, 0.75㎛ 내지 7㎛ 또는 1㎛ 내지 6㎛인 비드이다. 비드는 직접적으로 또는 친화성 리간드, 예를 들어 비오틴 또는 글루타티온 및 스트렙타비딘을 통해 항체를 포획하기 위한 수단으로 코팅될 수 있으며, 각각 GST. 예를 들어, 비드는 비오틴 또는 글루타티온으로 코팅될 수 있고 항원은 각각 스트렙타비딘 또는 글루타티온-S-트랜스퍼라제 또는 이의 변이체와 융합될 수 있다. 바람직하게는, 비드는 10 내지 90%, 바람직하게는 20 내지 80%, 바람직하게는 30 내지 70%, 보다 바람직하게는 40 내지 60% (w/w)의 비드 함량을 갖는 수성 현탁액의 형태로 제공된다. 바람직한 구현예에서, 비드는 제1 검출 가능한 마커, 예를 들어 형광 염료로 코팅된다.
별개의 알레르겐이 코팅된 하나 이상의 유형의 비드가 사용되는 경우, 각각의 유형은 비드의 유형을 구별하기 위하여, 예를 들어 플로우 사이토메트리에서 비드의 유형 및 알레르겐의 동정을 위하여, 상이한 유형의 검출 가능한 마커를 가질 수 있다. 알레르겐에 대한 항체의 존재가 형광 표지를 사용하여 검출되는 경우, 제1 검출 가능한 표지, 또한 형광 표지인 경우, 예를 들어 녹색 및 적색 레이저와 같은 별도의 레이저를 사용하여 둘 모두를 구별할 수 있도록 선택된다.
특히 바람직한 구현예에서, 비드는 상자성 비드이고, 이는 자석의 도움으로 표면에 쉽게 농축될 수 있다. 이를 위해, 상업적 상자성 비드는 일반적으로 상자성 광물, 예를 들어 산화철을 함유한다. 다수의 적합한 상자성 비드가 상업적으로 이용 가능하다. 비드는 검출 가능한 라벨로 라벨링될 수 있다. 비드에 항원 또는 항체를 코팅하고 이를 진단 분석에 사용하는 기술은 당업계에 공지되어 있고 교과서에 기재되어 있으며, 예를 들어, Kontermann, RE, D
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bel, S., Antibody Engineering, Second Edition, Springer 2010 및 Wild, D. Immunoassay Handbook, 2005 년 3 판, Elsevier에 기재되어 있다.
다른 바람직한 구현예에서, 담체는 바람직하게는 ELISA에 사용될 수 있는 8개 이상의 웰을 포함하는 마이크로타이터 플레이트이다. 하나 이상의 웰은 직접적으로 또는 간접적으로 항체를 특이적으로 포획하기 위한 수단으로 코팅된다. 항원에 대한 항체, 바람직하게는 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM 또는 이의 변이체를 정의된 농도로 포함하는 군으로부터의 하나 이상의 항원에 대한 항체를 포함하는 3개 이상, 바람직하게는 4개, 보다 바람직하게는 5개의 캘리브레이터가 제공되어 사용될 수 있다. 반 정량 분석을 위한 검량선을 설정한다. 본 발명의 방법이 수행될 때, 캘리브레이터는 시료와 병렬로 처리 및 전개될 수 있다. 효소 활성, 화학 발광 또는 형광성 라벨과 같은 검출 가능한 라벨, 예를 들어 겨자무과산화효소(horse radish peroxidase) 활성 또는 알칼라인 포스파타제 활성을 갖는 라벨 또는 화학 발광할 수 있는 효소를 포함하는 2차 항체가 제공될 수 있다.
ELISA 분석을 수행하기 위한 프로토콜 및 코팅된 마이크로타이터 플레이트를 포함하는 시약의 제조는 당업계에 잘 알려져 있고, 예를 들어 Crowther, J. R., ELISA Guidebook, 2001, Humana Press, 특히 3 장에 기재되어 있다.
다른 바람직한 구현예에서, 담체는 마이크로어레이가다. 바람직한 구현예에서, 본 발명에 사용된 용어 "마이크로어레이"는 다양한 공간적으로 분리된 알레르겐, 바람직하게는 적어도 20, 바람직하게는 30, 40, 50, 80 또는 100으로 스팟팅 된 칩을 지칭한다. 이들은 추가의 연체 동물 알레르겐을 포함할 수 있다. 예를 들어 Tong, SW, Yuen, AWT, Wai, CYY, Leung, NYH, Chu, KH, Leung, PSC (2018) Diagnosis of fish and shellfish allergies, J. Asthma and Allergy, 11, 247-260; US2015/0153358 및 M.T., Fukamachi, F., Inakagi, Q., Reese, G., Daul, C. B., Lehrer, S.C. Inouye, S 및 Sakaguchi, M. (1996) J. Allergy Clin.. Immunol., 98, 948-953. 마이크로어레이는 당업계에 공지되어 있고, Schena, M., Protein Microarrays, 2005, Jones and Bartlett에 기재되어 있다.
본 발명을 실시하는데 사용된 대상체로부터의 시료는 면역 글로불린으로도 지칭되는 항체를 포함한다. 전형적으로 시료는 대상체의 면역 글로불린 전체의 대표적인 세트를 포함하는 체액이다. 그러나, 일단 제공되면, 시료는 면역 글로불린 또는 대상체의 면역 글로불린 또는 전체의 면역 글로불린 클래스 전체, 바람직하게는 IgE 또는 IgG, 바람직하게는 IgG4의 분획화, 원심 분리, 농축 또는 단리를 포함할 수 있는 추가 처리를 받을 수 있으며, 이는 상대적 분포에 영향을 줄 수 있다. 다양한 부류의 면역 글로불린 시료는 전혈, 혈청, 혈장, 뇌척수액 및 타액을 포함하는 군에서 선택될 수 있으며, 바람직하게는 혈청이다. 가장 바람직한 구현예에서, 시료는 IgE 클래스 항체를 포함한다. 보다 바람직한 실시 양태에서, 시료는 클래스 IgA, IgG 및 IgE, 바람직하게는 IgG 및 IgE, 보다 바람직하게는 IgG1, IgG4 및 IgE로부터의 대상체 항체의 대표적인 세트를 포함하며, 가장 바람직하게는 상이한 항원에 대한 항체의 비는 대상체로부터 얻은 시료, 특히 IgE 클래스 항체의 비율과 비교하여 본질적으로 변경되지 않는다. 시료는 항원에 노출시 항체를 생성할 수 있는 동물 또는 인간으로부터 유래될 수 있으며, 바람직하게는 포유동물, 보다 바람직하게는 영장류, 가장 바람직하게는 인간 대상체이다. 상기 대상체는 바람직하게는 마우스, 랫트, 토끼, 햄스터, 닭, 염소, 영장류 또는 말을 포함하는 군으로부터의 실험용 동물일 수 있으며, 보다 바람직하게는 설치류이다. 상기 방법 및 시약은 예를 들어 백신 또는 약물 후보 물질을개발할 목적으로 또는 항혈청 생산을 위해 실험 동물이 성공적으로 면역화되었는지를 테스트하는데 사용될 수 있다.
도 1은 예시적인 스트립에 기초한 다양한 새우 및 오징어 단백질에 의한 EUROLINE 시험의 레이아웃을 도시한다.
도 2는 이 실시예에서 설명된 바와 같이, 배양된 펩타이드 칩의 예를 보여준다. 칩은 8개의 패널을 포함하고, 녹색 정규 패널은 제어 펩타이드를 나타낸다. IgE 반응은 녹색으로 표시되고, IgG4 반응은 적색으로 표시된다.
도 3은 실시예 2에서 논의된 바와 같이, 서열번호 10에 기초한 펩타이드에 대한 4명의 알레르기성 및 2명의 내성 환자에 기초한 혈청에서의 항체 반응성의 검출을 나타낸다. Y 축은 C 스코어를 나타내고, X 축은 개별 펩타이드를 나타낸다. 검은 선은 컷오프를 표시하고, 녹색 컬럼은 IGE 반응성을 나타내며, 빨간색 컬럼은 IgG4 반응성을 나타낸다.
도 4는 서열번호 10에 기초한 중첩 펩타이드에 대한 IgE 및 IgG4 혈청 반응성의 열 지도(heat map)를 나타낸다.
본 발명의 교시는 본 발명에서 언급된 정확한 서열을 갖는 폴리펩타이드, 예를 들어 기능, 명칭, 서열 또는 수탁 번호에 의해 또는 암시적으로 뿐만 아니라 이러한 폴리펩타이드의 변이체를 사용하여 수행될 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 사용된 용어 "변이체"는 전장 서열에 대해 언급된 전장 서열의 하나 이상의 단편, 보다 구체적으로 하나 이상의 아미노산 또는 핵산 서열을 지칭할 수 있다 하나 이상의 아미노산에 의해 하나 또는 둘 모두의 말단에서 절단된다. 이러한 단편은 원래 서열의 6, 7, 8, 9, 10, 15, 25, 50, 75, 100, 110, 120 또는 130개 이상의 연속 아미노산 또는 이의 변이체를 갖는 펩타이드를 포함하거나 암호화한다. 변이체의 총 길이는 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200 또는 250개 이상의 아미노산 일 수 있다.
다른 바람직한 구현예에서, 용어 "변이체"는 하나 이상의 단편뿐만 아니라 아미노산 서열, 바람직하게는 25개 이상, 보다 바람직하게는 50개, 보다 바람직하게는 100개의 연속 아미노산을 포함하는 폴리펩타이드 또는 이의 단편에 관한 것이다. 즉, 언급된 참조 아미노산 서열 또는 이의 단편과 적어도 40, 50, 60, 70, 75, 80, 85, 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98 또는 99% 동일하고, 여기서 생물학적 활성에 필수적인 것 이외의 아미노산, 예를 들어, 관심 항체에 특이적으로 결합하는 능력, 또는 폴리펩타이드의 접힘 또는 구조는 결실 또는 치환되고/되거나 하나 이상의 이러한 필수 아미노산은 보존적 방식 및/또는 아미노산은 폴리펩타이드의 생물학적 활성이 적어도 부분적으로 보존되도록 첨가되거나 결실된다. 최신 기술은 주어진 두 핵산 또는 아미노산 서열을 정렬하고 동일성을 계산하기 위해 사용될 수 있는 다양한 방법을 포함한다. 예를 들어 Arthur Lesk (2008), Introduction to bioinformatics, Oxford University Press, 2008, 제3판. 바람직한 구현예에서, ClustalW software(Larkin, MA, Blackshields, G., Brown, NP, Chenna, R., McGettigan, PA, McWilliam, H., Valentin, F., Wallace, IM, Wilm, A., Lopez, R., Thompson, JD, Gibson, TJ, Higgins, DG (2007) : Clustal W 및 Clustal X version 2.0. Bioinformatics, 23, 2947-2948)이 기본 설정을 적용하는데 사용된다.
바람직한 구현예에서, 변이체는 또한 화학적 변이체, 예를 들어 동위 원소 라벨 또는 검출 가능한 라벨과 같은 라벨 또는 글리코실화, 인산화, 아세틸화, 탈 카르복실화, 시트룰화, 하이드록실화 등과 같은 공유 수식(covalent modifications)를 포함할 수 있다. 통상의 기술자는 폴리펩타이드의 변이체 방법에 익숙하다. 또한, 다른 공지된 폴리펩타이드 또는 이의 변이체, 예를 들어 인공 링커, 바람직하게는 플라스모듐 폴리펩타이드로부터 유도되지 않은 인공 링커, 친화성 태그, 다른 항원 등과의 융합에 의해 변이체가 생성될 수도 있다.
본 발명에 따르면, 진단학적으로 유용한 담체와 같은 의료 또는 진단 장치는 선택적으로 진핵 생물 또는 원핵 세포와 같은 세포에서 선택적으로 프로테아제 절단 부위를 포함할 수 있는 인공 링커를 갖는 친화성 태그를 포함하는 재조합 변이체를 발현시키고, 상기 발현된 변이체를 친화성 태그에 특이적으로 결합하는 리간드와 접촉시키며, 상기 리간드는 고체상에 고정화되고, 세포로부터 비특이적으로 결합된 물질이 제거되며, 고체상에서 상기 발현된 변이체를 용출, 바람직하게는 과량의 고정화되지 않은 리간드를 첨가함으로써 제조될 수 있다. 그런 다음 상기 변이체가 장치에 고정될 수 있다. 선택적으로, 친화성 태그는 고정화하기 전에 변이체를 프로테아제, 바람직하게는 프로테아제 절단 부위를 인식하는 프로테아제와 접촉시킴으로써 제거될 수 있다. 친화성 태그는 18A, ACP, 알데히드, Avi, BCCP, 칼 모둘 린, 키틴 결합 단백질, E-태그, ELK16, FLAG, 플래시, 폴리 글루타메이트, 폴리 아스파 테이트, GST, GFP, HA, Isope, 말토오스 결합 단백질, myc, nus, NE, ProtA, ProtC, Tho1d4, S-Tag, SnoopTag, SpyTag, SofTag, Streptavidin, Strep-tag II, T7 Epitope Tag, TAP, TC, Thioredoxin, Ty, V5, VSV Xpress 태그. 유용한 프로테아제는 TEV, 트롬빈, Faktor Xa 또는 엔테로펩티다제를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
바람직한 구현예에서, 진핵 세포는 곤충 또는 포유동물 세포, 보다 바람직하게는 포유동물 세포, 가장 바람직하게는 인간 세포이다. 불멸화된 인공 세포주는 임의의 단백질, 예를 들어 CHO 또는 HEK293의 생산에 사용될 수 있다.
폴리펩타이드의 변이체는 생물학적 활성을 갖는다. 바람직한 구현예에서, 이러한 생물학적 활성은 각각의 항체에 결합하는 능력이다. 바람직한 구현예에서, 이는 각각의 항체, 바람직하게는 해산물 알레르기, 보다 바람직하게는 오징어 알레르기를 앓고 있는 환자로부터의 시료로부터 항체에 결합하기 위해 항체 결합에 특이적으로 결합하거나 특이적으로 포획하는 능력을 갖는 에피토프를 포함하고, 보다 바람직하게는 상기 에피토프는 항원, 바람직하게는 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM을 포함하는 군으로부터 선택되는 항원으로부터의 적어도 5, 6, 7 또는 8개의 아미노산 잔기를 포함하는 서열을 포함한다. 보다 구체적으로는, 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM의 변이체는 해산물 알레르기, 보다 바람직하게는 오징어 알레르기를 앓고 있는 환자로부터의 시료로부터 항체에 결합하기 위해 항체 결합에 특이적으로 결합하거나 특이적으로 포획하는 능력을 갖는다.
바람직한 구현예에서, 진단학적으로 유용한 담체는 폴리펩타이드, 보다 바람직하게는 갑각류 MLC, 갑각류 사코플라스믹 칼슘 결합 단백질, 갑각류 TM, 갑각류 트로포닌 C, 갑각류 아르기닌 키나제, 트리오스인산 이성화효소, 집먼지 진드기 알레르겐을 포함하는 군, 바람직하게는 Der f 1, Der f 2, Der f 3, Der f 4, Der f 6, Der f 7, Der f 8, Der f 10, Der f 11, Der f 13, Der f 14, Der f 15, Der f 16, Der f 17, Der f 18, Der f 20, Der f 21, Der f 22, Der f 23, Der f 24, Der f 25, Der f 26, Der f 27, Der f 28, Der f 29, Der f 30, Der f 31, Der f 32, Der f 33, Der f 34, Der f 35, Der f 36, Der f 37, Der f 38, Der f 39, Der m 1, Der p 1, Der p 2, Der p 3, Der p 4, Der p 6, Der p 7, Der p 8, Der p 10, Der p 11, Der p 13, Der p 14, Der p 15, Der p 18, Der p 20, Der p 21, Der p 23, Der p 24, Der p 25, Der p 36, Der p 37, Der p 38, Der p 39, Eur m 1, Eur m 2, Eur m 3, Eur m 4, Eur m 14, a cockroach allergen, preferably from the group comprising Bla g 1, Bla g 2, Bla g 3, Bla g 4, Bla g 5, Bla g 6, Bla g 7, Bla g 8, Bla g 9, Bla g 11, Per a 1, Per a 2, Per a 3, Per a 5, Per a 6, Per a 7, Per a 9, Per a 10, Per a 11, Per a 12, Per a 13을 포함하는 군으로부터 선택되는 폴리펩타이드에 대한 항체를 특이적으로 포착하기 위한 하나 이상의 수단을 포함하고, 상기 갑각류 단백질은 바람직하게는 새우 단백질이며, 가장 바람직하게는 Pen m 1(트로포미오신), Pen m 2(아르기닌 키나제), Pen m 3(미오신 경쇄), Pen m 4(사코플라스믹 칼슘 결합 단백질), Cra c 6(트로포 닌 c) 및 Cra c 8 (트리오스포스페이트 이성질화효소)를 포함하는 군에서 선택되는다.
새우 알레르기 항원에 대한 에피토프를 포함한 포괄적인 정보는 본 발명에 참고문헌으로 포함되는 Pascal, M., Grishina, G., Yang, AC, Sanchez-Garcia, S., Lin, J., Towle, D., Ibanez, MD, Sastre, J. , Sampson, HA 및 Ayuso, R. (2015) Molecular Diagnosis of Shrimp Allergy: Efficiency of Several Allergens to Predict Clinical Reactivity, J. Allergy Clin. Immunol. Pract., 521-529e10에서 발견할 수 있다.
MLC 알레르겐의 에피토프는 Zhang et al. (Zhang, YX, Chen, HL, Maleki, SJ, Cao, MJ, Zhang, LJ, Su, WJ 및 Liu, GM (2015) Purification, Charaterization and Analysis of the Allergenic Properties of Myosin Light Chain in Procambarus clarkii (2015) ) J. Agr. Food Chem., 63, 6271-6282)에서 연구되었다. 서열 X의 변이체가 필요한 경우, 통상의 기술자는 서열 X로부터 출발하여 생물학적 할성을 갖는 변이체를 설계하고, 점 돌연변이, 절단 등과 같은 변형을 도입한 후 상기 변이체가 이러한 시료로부터의 항체에 결합하는지 여부를 테스트함으로써 상기 변이체가 여전히 생물학적인 활성을 가짐을 확인하는 것이 가능하다.
통상의 기술자는 오징어 MLC1 항원으로부터의 에피토프가 GGTKKMGE(서열번호 18), SSKDTGTA(서열번호 19) 및 DREGQ(서열번호 20) 및 그의 변이체를 포함할 수 있음을 고려할 수 있다.
서열 GGTKMKMGEKAYKEILEILPIYEMSSKDTTAADEFKTFDREGQ(서열번호 21) 및 그 변이체 또한 고항원성이다.
통상의 기술자는 오징어 MLC2 항원으로부터의 에피토프가 ALRNAFSMFD(서열번호 30), 보다 바람직하게는 NAFSMF(서열번호 31), FIPEDYLKDL(서열번호 42), 보다 바람직하게는 IPEDYLKDL(서열번호 43) 및 FSKEEIKNVWKD(서열번호 51)을 포함한다는 것을 고려할 수 있다.
새우 MLC 알레르겐의 에피토프는 Pascal et al., 2015에 기재되어 있다. 통상의 기술자는 오징어 TM의 에피토프가 DESERGRKVLENRSQGDEER(서열번호 26), IDLLEKQLEEAKWIAEDADR(서열번호 27), KFDEAARKLAITEVDLERAEARLE(서열번호 27), KEVDRLEDELLAEKERYKTISDELDQTFAELAGY (서열번호 29) 및 이들의 변이체를 포함한다는 것을 고려할 수 있다.
따라서, 본 발명에 따른 변이체는 이러한 에피토프를 포함하는 폴리펩타이드 및 펩타이드를 포함한다. 바람직한 구현예에서, 서열번호 10으로 표시되는 MLC2의 변이체는 서열번호 30, 서열번호 42 및 서열번호 51을 포함하는 군으로부터 하나 이상, 바람직하게는 모두를 포함하고, 바람직하게는 서열번호 43 및 서열번호 31을 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 또는 둘을 포함하는 펩타이드 또는 폴리펩타이드를 포함한다. 보다 바람직한 구현체 예에서, 변이체는 서열번호 10의 적어도 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12 또는 15개 아미노산의 스트레치를 포함하는 아미노산 서열을 포함하고, 상기 스트레치는 하나 이상, 바람직하게는 서열번호 30, 서열번호 42, 서열번호 51을 포함하는 군으로부터 모두 선택되고, 바람직하게는는 서열번호 43 및 서열번호 31을 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 또는 둘을 포함한다. 실시예 2에 기재된 결과는 MLC2의 변이체를 설계할 때 통상의 기술자에게 안내하는데 도움이 될 것이다.
바람직한 실시 양태에서, 바람직하게는 실시예에 기재된 바와 같이 항체를 특이적으로 포획하기 위한 수단으로서 변이체를 포함하는 라인 블롯 검정을 사용하여 변이체가 이러한 활성을 갖는지 여부를 시험할 수 있다. 변이체는 또한 이들이 항원성 서열 부분에 대한 특이적 결합 활성을 갖지 않거나 및/또는 다른 서열 부분에 결합하지 않는 한, N-말단 및/또는 C-말단 펩타이드 또는 폴리펩타이드 융합체를 포함할 수 있으며, 따라서 항원성 서열을 차폐시킨다. 이의 결합 특성은 상당히 변경되고/되거나 더 이상 항체에 결합할 수 없다.
폴리펩타이드는 내인성 형태의 상기 폴리펩타이드를 포함하는 조직, 유체 또는 내인성 형태의 세포, 보다 바람직하게는 폴리펩타이드, 쿠루드 또는 농축된 용해물을 과발현하는 세포로부터 본질적으로 순수한 폴리펩타이드를 정제 및/또는 단리될 수 있는 임의의 형태 및 임의의 정제 수준으로 제공될 수 있다. 바람직한 구현예에서, 폴리펩타이드는 천연 폴리펩타이드이며, 본 발명에 사용된 용어 "천연 폴리펩타이드"는 접힌 폴리펩타이드, 보다 바람직하게는 세포, 보다 바람직하게는 원핵 또는 진핵, 바람직하게는 포유동물 세포로부터 정제된 접힌 폴리펩타이드를 지칭한다. 폴리펩타이드의 글리실화된 형태가 사용될 수 있다.
본 발명에 따르면, 폴리펩타이드는 재조합 단백질일 수 있으며, 본 발명에 사용된 용어 "재조합"은 생산 공정의 임의 단계에서, 예를 들어 핵산 인코딩을 융합함으로써 유전자 조작 접근법을 사용하여 생성된 폴리펩타이드를 지칭한다. 세포 또는 조직에서의 과발현을 위해 또는 폴리펩타이드 자체의 서열을 조작함으로써 폴리펩타이드를 강력한 프로모터에 제공한다. 통상의 기술자는 인코딩된 핵산 및 폴리펩타이드를 엔지니어링하는 방법에 익숙하다(예를 들어, Sambrook, J., Fritsch, EF 및 Maniatis, T. (1989), Molecular Cloning, CSH 또는 Brown TA (1986)), Gene Cloning-an introduction, Chapman & Hall) 및 고유 또는 재조합 폴리펩타이드(예 : GE Healthcare Life Sciences에서 출판한 핸드북 "단백질 정제 전략", "항체 정제"및 RR, Burgess, Deutscher, MP (2009) : 단백질 정제 가이드). 또 다른 바람직한 구현예에서, 폴리펩타이드는 단리된 폴리펩타이드이며, 여기서 "단리된"이라는 용어는 폴리펩타이드가 생명공학 또는 합성 접근법을 사용하여 생산시 상태와 비교하여 농축되었고, 바람직하게는 순수한, 즉 적어도 60, 70, 80임을 의미한다. 각각의 액체 중의 폴리펩타이드의 90, 95 또는 99%는 SDS 폴리아크릴아미드겔 전기영동에 의해 판 된 Coomassie blue 염색 및 육안 검사에 의해 판단된 상기 폴리펩타이드로 구성된다. 바람직하게는 항체를 포획하기 위한 수단으로서 사용된 담체상의 임의의 폴리펩타이드는 순수하다.
본 발명의 교시는 바람직하게는 해산물 알레르기를 진단하기 위한 키트를 제공한다. 이러한 키트는 선택적으로 본 발명의 방법을 실시하기 위해 요구되는 하나 이상의 용액 또는 시약에 추가하여, 바람직하게는 본 발명의 방법을 실시하는데 필요한 특정 시약, 특히 본 발명에 따른 진단학적으로 유용한 담체를 포함하는 용기이다. 검출 가능한 표지를 포함할 수 있는 2차 항체와 같은 임의의 특이적으로 포획된 항체를 검출하기 위한 수단 또는 시약을 포함하는 시료 희석 완충액, 세척 완충액 및 완충액을 포함하는 군으로부터 선택될 수 있고, 임의로는 후자를 검출하는 수단을 포함한다. 또한, 키트 사용 방법을 자세히 설명하는 지시 사항을 포함할 수 있다. 본 발명의 폴리펩타이드를 대상체, 바람직하게는 인간 대상체, 예를 들어 라인 블롯으로부터의 체액 시료와 접촉시키기 위한 진단학적으로 유용한 담체를 포함 할 수 있다. 또한, 키트는 양성 대조군, 예를 들어 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM 및 그의 변이체 및 음성 대조군, 예를 들어 소 혈청 알부민과 같은 오징어 MLC1 또는 MLC2 또는 TM에 대해 검출 가능한 친화력을 갖지 않는 단백질을 포함하는 군으로부터 하나 이상에 결합하는 것으로 공지된 재조합 또는 폴리클로날 항체를 포함할 수 있다.
양성 대조군은 오징어 MLC1, MLC2 및/또는 TM에 대한 항체, 바람직하게는 IgE 또는 IgG, 예컨대 IgG4를 포함하는 환자로부터 희석된 시료일 수 있다. 마지막으로, 이러한 키트는 오징어 MLC1에 결합하는 항체, 오징어 MLC2에 결합하는 항체 및 오징어 TM에 결합하는 항체를 포함하는 군으로부터의 하나 이상의 항체를 포함하는 하나 이상의 표준 용액(캘리브레이터라고도 함)을 포함할 수 있다. 키트에 함유된 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM 또는 이의 변이체를 포함하는 군으로부터의 항원을 포함하는 폴리펩타이드에 대한 항체 결합, 예를 들어, 교정 곡선을 제조하기 위한 진단학적으로 유용한 담체 상에 고정화되고, 여기서 절대 또는 상대 각각의 표준 용액에서 항체의 농도는 바람직하게 공지되어 있다. 표준 용액의 농도는 농도 범위가 보정 곡선에 포함되도록 다를 수 있다. 예를 들어, 2개의 표준 용액에서 항체의 상대 농도는 1:2, 1:5, 1:10, 1:20, 1:50 또는 1:100 이상일 수 있다. 보다 바람직한 실시 양태에서, 항체는 검출되는 항체와 같은 2차 항체에 대한 불변 영역 또는 변이체 또는 2차 항체에 대한 결합 친화도 및/또는 검출에 사용되는 임의의 2차 항체가 상기 항체 및 검출되는 항체에 결합한다. 항체는 모노클로 날 항체, 바람직하게는 인간 IgE 또는 IgG, 바람직하게는 IgG4, 보다 바람직하게는 IgE 불변 영역 또는 이의 IgE 또는 IgG에 결합하는 2차 항체에 결합하는 변이체, 바람직하게는 IgG4, 보다 바람직하게는 IgE 클래스 항체일 수 있는 하이브리드 일 수 있다. 키트는 본 발명에 따른 폴리펩타이드 또는 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM 또는 그의 변이체를 포함하는 군으로부터의 항원을 포함하는 정제된 폴리펩타이드를 포함할 수 있으며, 이러한 폴리펩타이드는 임의로 검출 가능한 표지를 포함할 수 있다. 키트는 또한 세척 용액을 포함할 수 있다. 키트는 반응 완충액과 같은 다른 액체의 존재 하에서 진단학적으로 유용한 담체를 샘플과 접촉시키기에 적합한 방수 용기를 포함할 수 있다. 예를 들어, 라인 블롯이 배양 트레이와 함께 또는 배양 트레이와 함께 제공되거나. 마이크로타이터 플레이트가 제공될 수 있다. 적합한 용기는 최신 기술, 예를 들어 EP3025780 또는 EP3025779에 기재되어 있다. 키트는 본 발명에 따른 방법, 예를 들어 제8 양상에 따른 방법을 구현하기 위한 시약을 함유할 수 있다. 캘리브레이터와 그 사용은 David Im, Elsevier 2005, 특히 Chaper 9의 Immunoassay Hanbook 제3판에 설명되어 있다.
본 발명에 따르면, 포획된 항체를 검출하기 위한 수단 또는 시약 또는 폴리펩타이드는 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM을 포함하는 군으로부터 하나 이상의 포획된 항체를 검출하기 위해 제공되거나 사용될 수 있다. 이는 수단 또는 시약 또는 폴리펩타이드가 관심 클래스의 항체의 불변 영역에 결합하는 2차 항체 또는 이의 단편 또는 변이체일 수 있다. 예를 들어, 포획된 인간 IgE 또는 IgG, 예컨대 IgG4 클래스 항체가 검출되는 경우, 인간 IgE의 불변 영역 또는 IgG, 예를 들어 IgG4 클래스 항체에 각각 특이적으로 결합하는 항체가 사용될 수 있다. 항체, 바람직하게는 이러한 부류의 불변 영역에 특이적으로 결합하는 단일 클론 항체이며, 가변 영역에 의해 결정되는 결합 특이성에 관계없이 용액에서 그 부류의 모든 항체를 포획하는데 사용될 수 있으며, 예를 들어 Berlina, AN, Taranova, NA, Zherdev, AV, Sankov, MN, Andreev, IV, Martynov, A. I 및 Dzantiev, BB (2013) 인간 혈청의 총 IgE에 대한 양자점 기반 면역 크로마토 그래피 분석. PLoS ONE 8 (10) : e77485. doi : 10.1371 / journal.pone.0077485에 기재된 소스로부터 상업적으로 입수 가능하다. 상기 수단 또는 시약은 직접 또는 간접적으로 라벨링될 수 있다.
바람직한 구현예에서, 수단 또는 시약 또는 항체의 임의의 결합 또는 검출 또는 포획, 바람직하게는 검출되는 항체의 MLC1 또는 MLC2, 바람직하게는 MLC2에 대한 항원에의 결합은 이것이 특이적으로 결합하는 것을 의미하며, 이는 예를 들어 수단과 포획된 항체 사이의 결합 반응이 pH 7의 PBS 완충액에서, 25℃에서 Biacore 장비를 사용하여 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정시, 1 x 10-5 M, 보다 바람직하게는 1 x 10-7 M,보다 바람직하게는 1 x 10-8 M, 보다 바람직하게는 1 x 10-9 M,보다 바람직하게는 1 x 10-10 M, 더욱 바람직하게는 1 x 10-11 M, 더욱 바람직하게는 1 x 10-12 M의 해리 상수를 특징으로 하는 결합 반응보다 강함을 의미한다.
본 발명에 따른 방법 또는 제품은 알레르기, 바람직하게는 해산물 알레르기, 보다 바람직하게는 오징어 알레르기를 진단하는데 사용될 수 있다. 바람직한 구현예에서, 본 발명에 사용된 용어 "진단"은 하기를 목표로 하는 임의의 종류의 절차를 지칭한다. 환자가 평균 또는 비교 대상보다 고통을 받거나 또는 가능성이 높거나 가능성이 높은지 평가하는데 유용한 정보를 얻는다. 후자는 바람직하게는 유사한 증상을 보이며 과거에, 진단 시점 또는 미래에 알레르기로 고통받거나, 또는 알레르기가 진행되고 있거나 앞으로 진행될 가능성을 알아 보거나, 치료 또는 알레르기를 앓고 있는 대상체의 치료에서 화합물의 효능을 측정하는 것과 관련하여 환자의 반응성을 평가하는 것을 지칭한다.
다시 말해서, 용어 "진단"은 질병의 진단뿐만 아니라, 질병 또는 장애의 진행을 예후 및/또는 모니터링하는 것을 포함한다. 본 발명에 따른 대상체로부터의 시료에서 검출되는 폴리펩타이드에 대한 항체의 검출에 의해 나타난 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM을 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 항원에 대한 항체가 검출되는 경우, 대상체는 알레르기를 겪을 가능성이 있거나 더 높을 것이다.
따라서, 용어 "진단"은 바람직하게는 본 발명에 따른 진단 방법 또는 제품은파라미터은 물론이고 단일 시험에 기초하여 진단을 확정하기에 결정적이고 충분하다는 것을 암시하지 않지만, "감별 진단(differential diagnosis)", 즉 다양한 진단 파라미터의 범위에 기초하여 가능한 조건 범위의 가능성을 고려한 체계적인 진단 절차로 지칭된다. 바람직한 구현예에서, 용어 "진단"은 방법 또는 제품 또는 용도가 알레르기 진단을 보조하거나 알레르기로 고통받는 개체를 식별하는데 사용될 수 있음을 의미한다. 용어 "진단"은 또한 환자에게 가장 유망한 치료 요법을 선택하는데 사용되는 방법 또는 제제를 지칭할 수 있다. 알레르기는 해산물 알레르기 일 수 있으며, 여기서 사용되는 용어 "해산물"은 바람직하게는 갑각류 및 연체동물, 바람직하게는 연체동물, 바람직하게는 오징어를 지칭한다. 본 발명에 따르면, 갑각류, 바람직하게는 새우에 대한 알레르기는 연체동물, 바람직하게는 오징어에 대한 알레르기와 구별될 수 있다.
본 발명은 액체, 예를 들어 대상체로부터의 시료에서, 오징어 MLC1에 대한 항체, 오징어 MLC2에 대한 항체 및 오징어 TM에 대한 항체를 포함하는 군으로부터 선택되는 항체의 존재 또는 부존재를 검출하는 단계를 포함하는 방법에 관한 것이다. 이러한 방법은 a) 액체를 제공하는 단계, b) 진단학적으로 유용한 담체 및 항체, 보다 구체적으로는, 폴리펩타이드 및 항체를 포함하는 복합체의 형성에 적합한 조건 하에서 상기 액체를 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM을 포함하는 군으로부터의 폴리펩타이드와 접촉시키는 단계, c) 임의로, 상기 복합체를 분리, 예를 들면, 액체를 제거하는 단계, d) 임의로 상기 복합체를 세척하는 단계, 및 e) 임의로, 경쟁적 분석 포맷의 경우에 표지될 수 있는 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM을 포함하는 군으로부터 선택되는 각각의 항원과 접촉한 후에 상기 복합체를 검출하는 단계를 포함할 수 있다. 상기 방법은 바람직하게는 시험관내 방법이다.
본 발명에 따른 예후, 진단, 방법 또는 키트에 대한 항체 또는 복합체의 검출은 면역 확산 기술, 면역 전기영동 기술, 광산란 면역 분석, 응집 기술, 표지된 면역 분석, 예컨대 방사성 표지된 면역 분석, 효소 면역 분석, 예컨대 비색 분석, 화학 발광 면역 분석 및 면역 형광 기술을 포함하는 군으로부터 선택되는 면역 분석법을 포함하는 군으로부터 선택되는 방법의 사용을 포함한다. 통상의 기술자는 이들 방법에 익숙하고, 예를 들어, Zane, HD (2001): ): Immunology - Theoretical & Practical Concepts in Laboratory Medicine, WB Saunders Company, 특히 제14장에 기재되어 있다. 바람직한 구현예에서, 본 발명에 사용된 항체의 "존재"라는 용어는 이러한 방법, 바람직하게는 효소 면역 분석, 보다 바람직하게는 비색 분석 또는 화학 발광 면역 분석, 가장 바람직하게는 실시예에 기재된 바와 같은 알칼라인 포스파타제 활성을 사용한 검출 및 라인 블롯에 기초한 비색 분석법을 포함하는 군으로부터 선택되는 방법을 사용하여 항체를 검출 할 수 있음을 의미한다.
많은 경우 검출, 바람직하게는 항체의 존재 또는 존재를 검출하는 것을 의미하고, 임의로 항체의 농도가 바람직하게는 액체에서 ELISA를 사용한 측정에 의해 설정된 바와 같이 특정 임계값을 초과하는지 여부를 결정하는 것은 진단에 충분하다. 하나 이상의 항체, 바람직하게는 오징어 MLC1에 대한 항체, 오징어 MLC2에 대한 항체 및 오징어 TM에 대한 항체를 포함하는 군으로부터의 항체가 검출될 수 있는 경우, 이는 임상 진단을 위한 정보 수단이 될 것이며, 환자가 알레르기로 고통받을 가능성이 증가함을 나타낸다. 바람직한 구현예에서, 평균적으로 건강한 대상체에서 발견될 수 있는 수준과 비교하여 혈청 중 항체의 상대 농도가 결정될 수 있다. 또한, 오징어 항원에 대한 하나 이상의 항체, 바람직하게는 오징어 MLC1, MLC2 및/또는 TM의 상대 농도가 새우 알레르겐, 바람직하게는 새우 MLC1, MLC2 및/또는TM에 대한 하나 이상의 항체의 상대 농도보다 높은 경우 TM, 이것은 환자가 새우 알레르기보다 오징어 알레르기로 고통받을 가능성이 더 높음을 나타낼 수 있다. 바람직한 구현예에서, 본 명세서에서 사용되는 "존재의 검출"이라는 용어는 임의의 배경 레벨을 충분히 초과하는 신호가 적절한 복합체 검출 방법을 사용하여 검출될 수 있는지 여부를 확인하는 것으로 충분하다는 것을 의미한다.
이는 관심 대상의 항체가 존재하거나 건강한 대상체에서보다 더 많은 관심의 항체가 존재함을 나타낸다.
바람직한 구현예에서, 오징어 MLC1에 대한 항체, 오징어 MLC2에 대한 항체 및 오징어 TM에 대한 항체를 포함하는 군으로부터 선택되는 2개 이상의 항체의 존재 또는 부존재가 동시에, 즉 동시에 검출된다.
바람직한 구현예에서, 오징어 MLC1에 대한 항체, 오징어 MLC2에 대한 항체 및 오징어 TM에 대한 항체를 포함하는 군으로부터 선택되는 2 이상의 항체의 부존재 또는 존재는 공간적으로 분리된 반응에서, 보다 바람직하게는 별도 용기의 상이한 반응 혼합물에서 검출된다.
바람직한 구현예에서, 오징어 MLC1에 대한 항체, 오징어 MLC2에 대한 항체 및 오징어 TM에 대한 항체를 포함하는 군으로부터 선택되는 둘 이상의 항체가 검출된다. 보다 바람직한 구현예에서, 이는 이들 항체 중 하나 이상이 존재하는지 뿐만 아니라 이들 항체 중 어느 하나가 존재하는지 검출되는 것을 의미한다. 즉, 이들 항체 중 어느 것이 시료에 존재하는지 구별될 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명은 오징어 MLC1에 대한 항체, 오징어 MLC2에 대한 항체 및 오징어 TM에 대한 항체 또는 이러한 항체 또는 항체, 또는 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2 또는 오징어 TM 또는 이의 변이체를 암호화하는 핵산 또는 엄격한 조건 하에서 상기 핵산에 특이적으로 하이브리드화되는 핵산 또는 알레르기 진단을 위한 키트의 제조를 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 항체의 검출을 위한 시약 또는 수단 또는 폴리펩타이드의 용도를 제공한다. 바람직한 구현예에서, 상기 벡터를 포함하는 세포가 제공되고, 핵산의 발현을 허용하는 조건 하에서 배양된 후, 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2 또는 오징어 TM 또는 이의 변이체일 수 있는 발현 생성물을 단리한 다음, 본 발명에 따른 방법 또는 생성물에서 항체를 특이적으로 포획하기 위한 수단으로서 발현 생성물이 사용된다.
다른 바람직한 구현예에서, 상기 방법은 항체 검출 검정의 신뢰성을 확인하기 위한 것일 수 있으며, 환자의 시료는 아니지만 용액을 포함하는 것으로 알려진 용액에서 오징어 MLC1에 대한 항체, 오징어 MLC2에 대한 항체 및 오징어 TM에 대한 항체를 포함하는 군으로부터 오징어 알레르겐에 대한 항체를 검출하는 것을 포함할 수 있다. 바람직하게는 알려진 농도의 오징어 알레르겐에 대한 항체. 대안적으로, 상기 용액은 배경을 확인하기 위해 항체를 포함하지 않는 음성 대조군일 수 있다. 이러한 방법은 진단 방법과 동시에 또는 진단 방법과 병행하여 실행될 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명은 알레르기 가능성 증가를 나타내는 하나 이상의 항체를 검출하기 위해 환자로부터의 시료를 분석하기 위한 장치를 제공하며, 여기서 상기 항체는 바람직하게는 항체를 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM을 포함하는 군으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 상기 군으로부터의 모든 항체이며, 상기 장치는
a. 시료가 담체와 접촉할 때 시료로부터 하나 이상의 항체를 포획하기 위한 수단을 함유하는 담체;
b. 검출 가능한 수단이 담체와 접촉할 때 담체에 의해 포획된 항체에 결합할 수 있는 검출 가능한 수단, 특히 상기 검출 가능한 수단은 담체에 포획된 항체에 결합할 수 있는 표지된 2차 항체인 검출 가능한 수단;
c. 임의로, 바람직하게는 세척에 의해 담체 및 검출 가능한 수단으로부터 임의의 시료를 제거하기 위한 수단;
d. 검출 가능한 수단의 존재를 검출하고, 그 결과를 전기 신호로 변환하는 검출 장치; 및
e. 임의로, 백그라운드에서 검출된 신호 또는 건강한 대상체로부터의 시료로 얻은 입력 기준값과 비교하여, 검출 장치로부터 전자 신호를 수신하고 신호의 수준이 오징어 알레르기의 가능성 증가, 특히 새우 알레르기보다 오징어의 더 높은 가능성을 나타내는지 여부를 결정하기 위한 수단을 포함한다.
본 발명은 임의로 하나 이상의 추가적인 해산물 항원과 함께 오징어 MLC1, 오징어 MLC2 및 오징어 TM 또는 이의 변이체를 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 항원을 포함하는 약학 조성물, 바람직하게는 백신을 제공하며, 상기 조성물은 바람직하게는 대상체에의 투여, 바람직하게는 포유동물 대상체, 보다 바람직하게는 인간에의 투여에 적합하다. 이러한 제약 조성물은 약학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 약학 조성물은, 예를 들어, 경구, 비경구, 흡입 스프레이, 국소, 점안제, 직장, 비강, 협측, 질, 또는 이식된 저장소를 통해 투여될 수 있으며, 여기서 본 발명에 사용된 용어 "비경구"는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 활액내, 흉골내, 척수강내, 병변내 및 두개내 주사 또는 주입 기술ㄹ 투여될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 적합한 투여 형태, 예를 들어 캡슐, 정제 및 수성 현탁액 및 용액, 바람직하게는 멸균 형태로 제공될 수 있다. 이는 유효량의 본 발명의 폴리펩타이드를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 질환, 바람직하게는 알레르기의 치료 방법에 사용될 수 있다. 항원의 저자극성 변이체가 사용될 수 있다. 통상의 기술자는 공지된 알레르겐의 저자극성 변이체를 생성하는 방법에 익숙하다. 약학 조성물은 예를 들어, 주사용 일 수 있는 PBS에 기초한 멸균된 액체 용액일 수 있다. 이러한 역학 조성물 및 변이체의 생성은, 예를 들어 Curin et al. (2018) Next-Generation of Allergen-Specific Immunotherapies: Molecular Approaches, Curr. Allergy and Asthma Rep. 18, 39 (2018). https :// doi . org /10.1007/s11882-018-0790-x or in Vaccines against Allergies by Valenta and Coffman, Springer 2011에 기재되어 있다.
본 발명에 따르면, 바람직하게는 단리된 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2 또는 이의 변이체를 포함하는 폴리펩타이드에 특이적으로 결합하는 항체가 제공될 수 있다. 이러한 항체는 양성 대조군 또는 캘리브레이터로서 사용될 수 있을 뿐만 아니라, 항체 분석을 위한 경쟁 분석 또는 샌드위치 분석과 같은 다양한 분석 형식으로 사용될 수 있으며, 검출되는 항체를 포함하는 복합체는 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2 또는 이의 변이체 및 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2를 포함하는 폴리펩타이드에 특이적으로 결합하는 항체가 검출된다. 보다 바람직하게는 제공된 항체는 ALRNAFSMFD(서열번호 30), 보다 바람직하게는 NAFSMF(서열번호 31), FIPEDYLKDL(서열번호 42), 보다 바람직하게는 IPEDYLKDL(서열번호 43) 및 FSKEEIKNVWKD(서열번호 51)를 포함하는 군으로부터의 서열에 대한 항체이다. 보다 바람직하게는, 항체는 ALRNAFSMFD(서열번호 30), 보다 바람직하게는 NAFSMF(서열번호 31), FIPEDYLKDL(서열번호 42), 보다 바람직하게는 IPEDYLKDL(서열번호 43) 및 FSKEEIKNVWKD (서열번호 51)을 포함하는 군으로부터 선택되는 서열을 포함하는 MLC2로부터의 에피토프에 대한 항체이다. 대안적으로, 항체는 ALRNAFSMFD(서열번호 30), 보다 바람직하게는 NAFSMF(서열번호 31), FIPEDYLKDL(서열번호 42)를 포함하는 군으로부터의 서열 또는 서열을 포함하는 에피토프 이외의 MLC2 상의 결합 부위에 결합하는 항체일 수 있다. 예를 들어, 경쟁 분석을 위해 MLC2 또는 이의 변이체를 포함하는 폴리펩타이드를 고정시키기 위해(서열번호 42), 보다 바람직하게는 IPEDYLKDL(서열번호 43) 및 FSKEEIKNVWKD(서열번호 51)를 포함한다. 항체는 단일클론 항체일 수 있다. 항체는 폴리클로날 항체일 수 있다. 항체는 마우스, 랫트, 토끼, 햄스터, 닭, 염소, 영장류 또는 말을 포함하는 군으로부터 선택되는 동물로부터의 항체일 수 있다. 이 분석법 및 기타 분석법은 Elsevier 2005 David Wild의 Immunoassay Handbook, 제3 판, 특히 제1장과 제2장에 설명되어 있다.
본 발명에 따르면, 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2를 포함하는 군으로부터의 폴리펩타이드 또는 이의 변이체는 폴리클로날 항체 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2 또는 이의 변이체를 제조하는데 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 시약 및 방법은 항체, 바람직하게는 IgE 또는 IgG, 바람직하게는 IgG4 클래스 항체의 생산 또는 백신의 생산 또는 약물 또는 백신의 효용성 또는 화자에게 투여되는 백신 후보 약물을 결정하는데 사용될 수 있다. 예를 들어, 후보 약물의 투여 후에 생성된 항체의 수준이 감소하면, 이는 약물이 효과적임을 나타낸다. 모노클로날 및 폴리클로날 항체의 생산은 이들에 기재되어 있으며, 다른 분석법은 David Wild, Elsevier 2005, Immunoassay Handbook, 제3판, 특히 제8장에 기재되어 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 제품, 예를 들어 담체, 장치, 폴리펩타이드, 항체, 캘리브레이터 등은 소 혈청 알부민과 같은 안정화제 또는 아지드(azie)와 같은 보존제를 포함하는 조성물 또는 조합물로 사용될 수 있다.
시퀀스:
본 발명은 다양한 신규 핵산 및 폴리펩타이드 서열을 포함하고, 보다 구체적으로는,
서열번호 1 : 실시예에서 사용된 N-말단 His 태그를 갖는 Tod p MLC1을 암호화하는 뉴클레오티드 서열
ATGAGCCATCATCATCATCATCATCATCATTTGGAAGTGCTGTTTCAGGGTCCATCCATGTCTCAACTGACCAAAGACGAAATTGAGGAAGTCCGTGAAGTGTTTGACCTCTTCGACTTTTGGGATGGTCGTGATGGTGATGTTGACGCTGCGAAAGTTGGCGATCTGTTACGCTGTTTAGGGATGAATCCAACCGAAGCTCAGGTACACCAACATGGAGGCACGAAGAAAATGGGCGAGAAAGCGTATAAACTGGAAGAGATTCTGCCGATTTATGAGGAAATGAGCTCCAAAGATACTGGCACAGCAGCGGACGAATTCATGGAAGCCTTCAAAACGTTTGATCGTGAAGGTCAGGGTTTGATCAGTTCAGCCGAAATTCGGAATGTGCTGAAAATGCTTGGCGAACGCATTACCGAGGATCAGTGCAACGATATCTTCACCTTTTGCGACATTCGCGAAGATATCGATGGGAACATCAAATACGAGGATCTGATGAAGAAGGTGATGGCAGGACCTTTTCCGGACAAATCGGATTAA
서열번호 2 : 실시예에서 사용된 N-말단 His 태그를 갖는 Tod p MLC2를 암호화하는 뉴클레오티드 서열
ATGAGCCATCATCATCATCATCATCATCATTTGGAAGTGCTGTTTCAGGGTCCATCCATGGCGGAAGAAGCTCCTCGTCGCGTGAAACTGTCACAACGCCAGATGCAGGAGCTGAAAGAAGCGTTTACCATGATTGATCAGGACCGTGATGGGTTCATTGGCATGGAAGATCTGAAAGACATGTTCAGCTCTTTAGGACGGGTACCACCCGATGACGAACTGAATGCCATGCTGAAAGAATGCCCGGGTCAACTCAATTTCACGGCTTTTCTGACCTTGTTTGGGGAGAAAGTGAGTGGTACTGACCCGGAAGATGCACTTCGCAATGCCTTTTCGATGTTCGACGAAGATGGTCAGGGCTTTATCCCGGAAGATTATCTGAAAGACTTGCTGGAAAATATGGGCGATAACTTTTCCAAAGAGGAGATTAAGAACGTCTGGAAAGATGCACCGTTAAAGAACAAACAGTTCAACTACAACAAGATGGTTGACATCAAAGGCAAAGCGGAGGATGAAGATTAA
서열번호 3 : 실시예에 사용된 N-말단 His 태그를 갖는 펜 a 1.0101 ( Penaeus aztecus Tropomyosin)을 암호화하는 폴리펩타이드 서열
MSHHHHHHHHLEVLFQGPSMDAIKKKMQAMKLEKDNAMDRADTLEQQNKEANNRAEKSEEEVHNLQKRMQQLENDLDQVQESLLKANIQLVEKDKALSNAEGEVAALNRRIQLLEEDLERSEERLNTATTKLAEASQAADESERMRKVLENRSLSDEERMDALENQLKEARFLAEEADRKYDEVARKLAMVEADLERAEERAETGESKIVELEEELRVVGNNLKSLEVSEEKANQREEAYKEQIKTLTNKLKAAEARAEFAERSVQKLQKEVDRLEDELVNEKEKYKSITDELDQTFSELSGY
서열번호 4 : 펜 a 1.0101( Penaeus aztecus Tropomyosin )을 암호화하는 폴리펩타이드 서열; 수탁 번호 Q3Y8M6
MDAIKKKMQAMKLEKDNAMDRADTLEQQNKEANNRAEKSEEEVHNLQKRMQQLENDLDQVQESLLKANIQLVEKDKALSNAEGEVAALNRRIQLLEEDLERSEERLNTATTKLAEASQAADESERMRKVLENRSLSDEERMDALENQLKEARFLAEEADRKYDEVARKLAMVEADLERAEERAETGESKIVELEEELRVVGNNLKSLEVSEEKANQREEAYKEQIKTLTNKLKAAEARAEFAERSVQKLQKEVDRLEDELVNEKEKYKSITDELDQTFSELSGY
서열번호 5 : 실시예에 사용된 N- 말단 His 태그를 사용하여 Sep I1.0101( Sepioteuthis lessoniana Tropomyosin)을 암호화하는 폴리펩타이드 서열
MSHHHHHHHHLEVLFQGPSMDAIKKKMLAMKMEKEVATDKAEQTEQSLRDLEDAKNKIEEDLSTLQKKYANLENDFDNANEQLTAANTNLEASEKRVAECESEIQGLNRRIQLLEEDLERSEERFSSAQSKLEDASKAADESERGRKVLENRSQGDEERIDLLEKQLEEAKWIAEDADRKFDEAARKLAITEVDLERAEARLEAAEAKIVELEEELKVVGNNMKSLEISEQEASQREDSYEETIRDLTHRLKEAENRAAEAERTVSKLQKEVDRLEDELLAEKERYKTISDELDQTFAELAGY
서열번호 6 : Sep 1.0101을 암호화하는 폴리펩타이드 서열( Sepioteuthis lessoniana Tropomyosin)
MDAIKKKMLAMKMEKEVATDKAEQTEQSLRDLEDAKNKIEEDLSTLQKKYANLENDFDNANEQLTAANTNLEASEKRVAECESEIQGLNRRIQLLEEDLERSEERFSSAQSKLEDASKAADESERGRKVLENRSQGDEERIDLLEKQLEEAKWIAEDADRKFDEAARKLAITEVDLERAEARLEAAEAKIVELEEELKVVGNNMKSLEISEQEASQREDSYEETIRDLTHRLKEAENRAAEAERTVSKLQKEVDRLEDELLAEKERYKTISDELDQTFAELAGY
서열번호 7: Lit v 3.0101을 암호화하는 폴리펩티드 서열( Litopenaeus vannamei Myosin 경쇄 2) [His-태그된 버전은 서열번호 17]
MSRKSGSRSSSKRSKKSGGGSNVFDMFTQRQVAEFKEGFQLMDRDKDGVIGKTDLRGTFDEIGRIATDQELDEMLADAPAPINFTMLLNMFAERQTGESDDDDVVAKAFLAFADEEGNIDCDTFRHALMTWGDKFSSQEADDALDQMDIDDGGKIDVQGVIQMLTAGGGDDAAAEEA
서열번호 8: Tod p MLC1 (미오신 경쇄 1) Todarodes pacificus 를 암호화하는 폴리펩티드 서열; 억세션 넘버 P05945에서 파생됨
SQLTKDEIEEVREVFDLFDFWDGRDGDVDAAKVGDLLRCLGMNPTEAQVHQHGGTKKMGEKAYKLEEILPIYEEMSSKDTGTAADEFMEAFKTFDREGQGLISSAEIRNVLKMLGERITEDQCNDIFTFCDIREDIDGNIKYEDLMKKVMAGPFPDKSD
서열번호 9: 실시예에 사용된 N-말단 His 태그를 갖는 Tod p MLC1 ( Todarodes pacificus 미오신 경쇄 1)을 암호화하는 폴리펩티드 서열
MSHHHHHHHHLEVLFQGPSMSQLTKDEIEEVREVFDLFDFWDGRDGDVDAAKVGDLLRCLGMNPTEAQVHQHGGTKKMGEKAYKLEEILPIYEEMSSKDTGTAADEFMEAFKTFDREGQGLISSAEIRNVLKMLGERITEDQCNDIFTFCDIREDIDGNIKYEDLMKKVMAGPFPDKSD
서열번호 10: Tod p MLC2를 암호화하는 폴리펩티드 서열( Todarodes pacificus 미오신 경쇄 2)
AEEAPRRVKLSQRQMQELKEAFTMIDQDRDGFIGMEDLKDMFSSLGRVPPDDELNAMLKECPGQLNFTAFLTLFGEKVSGTDPEDALRNAFSMFDEDGQGFIPEDYLKDLLENMGDNFSKEEIKNVWKDAPLKNKQFNYNKMVDIKGKAEDED
SEQ ID 11: 실시예에 사용된 N-말단 His 태그를 갖는 Tod p MLC2 ( Todarodes pacificus 미오신 경쇄 2)를 암호화하는 폴리펩티드 서열
MSHHHHHHHHLEVLFQGPSMAEEAPRRVKLSQRQMQELKEAFTMIDQDRDGFIGMEDLKDMFSSLGRVPPDDELNAMLKECPGQLNFTAFLTLFGEKVSGTDPEDALRNAFSMFDEDGQGFIPEDYLKDLLENMGDNFSKEEIKNVWKDAPLKNKQFNYNKMVDIKGKAEDED
서열번호 12: Lit v 3.0101을 암호화하는 서열을 포함하는 벡터 pET24d -Lit v3.0101-(PSc)-His의 핵산 서열(미오신 경쇄 2)
GGGGAATTGTGAGCGGATAACAATTCCCCTCTAGAAATAATTTTGTTTAACTTTAAGAAGGAGATATACCATGTCTCGCAAAAGTGGCTCACGTTCCAGCTCCAAACGCAGCAAGAAATCGGGTGGTGGCTCGAATGTCTTTGACATGTTCACGCAACGCCAAGTTGCGGAGTTCAAAGAAGGGTTTCAGCTGATGGATCGCGACAAAGATGGGGTGATTGGCAAAACCGATCTGCGTGGTACCTTTGACGAGATTGGCCGCATTGCGACCGATCAGGAACTGGATGAGATGCTTGCAGATGCCCCAGCACCGATCAATTTCACGATGCTCCTGAACATGTTTGCGGAACGTCAGACTGGCGAATCTGACGACGATGACGTGGTTGCCAAAGCGTTCTTAGCCTTTGCCGATGAAGAGGGAAACATCGATTGCGATACCTTTCGGCATGCTCTGATGACTTGGGGCGACAAGTTCAGCAGTCAAGAAGCGGATGATGCCTTGGATCAGATGGACATTGATGACGGCGGGAAAATCGACGTACAGGGTGTGATTCAGATGCTGACAGCTGGTGGAGGTGATGATGCAGCAGCGGAAGAAGCTCTCGAGGTCCTGTTCCAAGGACCCCACCACCATCACCATCACTGATCGAGCACCACCACCACCACCACTGAGATCCGGCTGCTAACAAAGCCCGAAAGGAAGCTGAGTTGGCTGCTGCCACCGCTGAGCAATAACTAGCATAACCCCTTGGGGCCTCTAAACGGGTCTTGAGGGGTTTTTTGCTGAAAGGAGGAACTATATCCGGATTGGCGAATGGGACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTAGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTGGTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTAACGTTTACAATTTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAATTAATTCTTAGAAAAACTCATCGAGCATCAAATGAAACTGCAATTTATTCATATCAGGATTATCAATACCATATTTTTGAAAAAGCCGTTTCTGTAATGAAGGAGAAAACTCACCGAGGCAGTTCCATAGGATGGCAAGATCCTGGTATCGGTCTGCGATTCCGACTCGTCCAACATCAATACAACCTATTAATTTCCCCTCGTCAAAAATAAGGTTATCAAGTGAGAAATCACCATGAGTGACGACTGAATCCGGTGAGAATGGCAAAAGTTTATGCATTTCTTTCCAGACTTGTTCAACAGGCCAGCCATTACGCTCGTCATCAAAATCACTCGCATCAACCAAACCGTTATTCATTCGTGATTGCGCCTGAGCGAGACGAAATACGCGATCGCTGTTAAAAGGACAATTACAAACAGGAATCGAATGCAACCGGCGCAGGAACACTGCCAGCGCATCAACAATATTTTCACCTGAATCAGGATATTCTTCTAATACCTGGAATGCTGTTTTCCCGGGGATCGCAGTGGTGAGTAACCATGCATCATCAGGAGTACGGATAAAATGCTTGATGGTCGGAAGAGGCATAAATTCCGTCAGCCAGTTTAGTCTGACCATCTCATCTGTAACATCATTGGCAACGCTACCTTTGCCATGTTTCAGAAACAACTCTGGCGCATCGGGCTTCCCATACAATCGATAGATTGTCGCACCTGATTGCCCGACATTATCGCGAGCCCATTTATACCCATATAAATCAGCATCCATGTTGGAATTTAATCGCGGCCTAGAGCAAGACGTTTCCCGTTGAATATGGCTCATAACACCCCTTGTATTACTGTTTATGTAAGCAGACAGTTTTATTGTTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGTATACACTCCGCTATCGCTACGTGACTGGGTCATGGCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGAGGCAGCTGCGGTAAAGCTCATCAGCGTGGTCGTGAAGCGATTCACAGATGTCTGCCTGTTCATCCGCGTCCAGCTCGTTGAGTTTCTCCAGAAGCGTTAATGTCTGGCTTCTGATAAAGCGGGCCATGTTAAGGGCGGTTTTTTCCTGTTTGGTCACTGATGCCTCCGTGTAAGGGGGATTTCTGTTCATGGGGGTAATGATACCGATGAAACGAGAGAGGATGCTCACGATACGGGTTACTGATGATGAACATGCCCGGTTACTGGAACGTTGTGAGGGTAAACAACTGGCGGTATGGATGCGGCGGGACCAGAGAAAAATCACTCAGGGTCAATGCCAGCGCTTCGTTAATACAGATGTAGGTGTTCCACAGGGTAGCCAGCAGCATCCTGCGATGCAGATCCGGAACATAATGGTGCAGGGCGCTGACTTCCGCGTTTCCAGACTTTACGAAACACGGAAACCGAAGACCATTCATGTTGTTGCTCAGGTCGCAGACGTTTTGCAGCAGCAGTCGCTTCACGTTCGCTCGCGTATCGGTGATTCATTCTGCTAACCAGTAAGGCAACCCCGCCAGCCTAGCCGGGTCCTCAACGACAGGAGCACGATCATGCGCACCCGTGGGGCCGCCATGCCGGCGATAATGGCCTGCTTCTCGCCGAAACGTTTGGTGGCGGGACCAGTGACGAAGGCTTGAGCGAGGGCGTGCAAGATTCCGAATACCGCAAGCGACAGGCCGATCATCGTCGCGCTCCAGCGAAAGCGGTCCTCGCCGAAAATGACCCAGAGCGCTGCCGGCACCTGTCCTACGAGTTGCATGATAAAGAAGACAGTCATAAGTGCGGCGACGATAGTCATGCCCCGCGCCCACCGGAAGGAGCTGACTGGGTTGAAGGCTCTCAAGGGCATCGGTCGAGATCCCGGTGCCTAATGAGTGAGCTAACTTACATTAATTGCGTTGCGCTCACTGCCCGCTTTCCAGTCGGGAAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCAACGCGCGGGGAGAGGCGGTTTGCGTATTGGGCGCCAGGGTGGTTTTTCTTTTCACCAGTGAGACGGGCAACAGCTGATTGCCCTTCACCGCCTGGCCCTGAGAGAGTTGCAGCAAGCGGTCCACGCTGGTTTGCCCCAGCAGGCGAAAATCCTGTTTGATGGTGGTTAACGGCGGGATATAACATGAGCTGTCTTCGGTATCGTCGTATCCCACTACCGAGATATCCGCACCAACGCGCAGCCCGGACTCGGTAATGGCGCGCATTGCGCCCAGCGCCATCTGATCGTTGGCAACCAGCATCGCAGTGGGAACGATGCCCTCATTCAGCATTTGCATGGTTTGTTGAAAACCGGACATGGCACTCCAGTCGCCTTCCCGTTCCGCTATCGGCTGAATTTGATTGCGAGTGAGATATTTATGCCAGCCAGCCAGACGCAGACGCGCCGAGACAGAACTTAATGGGCCCGCTAACAGCGCGATTTGCTGGTGACCCAATGCGACCAGATGCTCCACGCCCAGTCGCGTACCGTCTTCATGGGAGAAAATAATACTGTTGATGGGTGTCTGGTCAGAGACATCAAGAAATAACGCCGGAACATTAGTGCAGGCAGCTTCCACAGCAATGGCATCCTGGTCATCCAGCGGATAGTTAATGATCAGCCCACTGACGCGTTGCGCGAGAAGATTGTGCACCGCCGCTTTACAGGCTTCGACGCCGCTTCGTTCTACCATCGACACCACCACGCTGGCACCCAGTTGATCGGCGCGAGATTTAATCGCCGCGACAATTTGCGACGGCGCGTGCAGGGCCAGACTGGAGGTGGCAACGCCAATCAGCAACGACTGTTTGCCCGCCAGTTGTTGTGCCACGCGGTTGGGAATGTAATTCAGCTCCGCCATCGCCGCTTCCACTTTTTCCCGCGTTTTCGCAGAAACGTGGCTGGCCTGGTTCACCACGCGGGAAACGGTCTGATAAGAGACACCGGCATACTCTGCGACATCGTATAACGTTACTGGTTTCACATTCACCACCCTGAATTGACTCTCTTCCGGGCGCTATCATGCCATACCGCGAAAGGTTTTGCGCCATTCGATGGTGTCCGGGATCTCGACGCTCTCCCTTATGCGACTCCTGCATTAGGAAGCAGCCCAGTAGTAGGTTGAGGCCGTTGAGCACCGCCGCCGCAAGGAATGGTGCATGCAAGGAGATGGCGCCCAACAGTCCCCCGGCCACGGGGCCTGCCACCATACCCACGCCGAAACAAGCGCTCATGAGCCCGAAGTGGCGAGCCCGATCTTCCCCATCGGTGATGTCGGCGATATAGGCGCCAGCAACCGCACCTGTGGCGCCGGTGATGCCGGCCACGATGCGTCCGGCGTAGAGGATCGAGATCTCGATCCCGCGAAATTAATACGACTCACTATA
서열번호 13: Pen a 1.0101을 암호화하는 서열을 포함하는 벡터 pET24d -N- (PSc)-Pen_a 1.0101의 핵산 서열
GGGGAATTGTGAGCGGATAACAATTCCCCTCTAGAAATAATTTTGTTTAACTTTAAGAAGGAGATATACCATGAGCCATCATCATCATCATCATCATCATTTGGAAGTGCTGTTTCAGGGTCCATCCATGGATGCCATCAAGAAGAAGATGCAGGCCATGAAACTGGAGAAAGACAACGCCATGGATCGTGCGGATACACTGGAACAGCAGAACAAAGAAGCGAATAATCGTGCGGAAAAGTCTGAAGAAGAAGTGCATAATCTGCAGAAACGCATGCAACAGTTGGAAAACGATCTGGATCAAGTGCAGGAAAGTCTCCTGAAAGCGAACATTCAGCTGGTAGAGAAAGACAAAGCGCTTTCGAATGCAGAAGGCGAAGTTGCCGCCTTGAATCGTCGCATTCAACTGTTGGAAGAAGATCTGGAACGCTCAGAAGAGCGGTTAAATACCGCCACCACCAAATTAGCTGAAGCAAGCCAAGCAGCCGACGAATCTGAACGTATGCGCAAAGTGCTGGAGAATCGCTCACTCTCGGATGAAGAACGCATGGACGCGTTAGAGAACCAGCTGAAAGAGGCTCGTTTTCTCGCGGAGGAAGCTGACCGGAAATACGATGAAGTGGCGCGCAAACTGGCCATGGTTGAGGCCGACCTTGAGCGCGCTGAAGAACGCGCAGAGACTGGTGAGAGCAAAATCGTAGAACTGGAAGAGGAGTTACGTGTCGTTGGCAATAACCTGAAATCCCTGGAAGTTTCCGAGGAGAAAGCTAACCAGCGCGAAGAAGCGTATAAAGAACAGATCAAGACTCTGACGAACAAACTGAAAGCGGCAGAGGCACGTGCGGAATTTGCAGAACGTAGCGTGCAAAAGCTGCAGAAAGAAGTCGATCGCTTGGAAGATGAACTGGTCAACGAGAAAGAAAAGTACAAATCGATTACCGATGAACTCGACCAAACGTTCAGCGAACTTAGTGGGTATTAATCGAGTAAGTCGAGCACCACCACCACCACCACTGAGATCCGGCTGCTAACAAAGCCCGAAAGGAAGCTGAGTTGGCTGCTGCCACCGCTGAGCAATAACTAGCATAACCCCTTGGGGCCTCTAAACGGGTCTTGAGGGGTTTTTTGCTGAAAGGAGGAACTATATCCGGATTGGCGAATGGGACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTAGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTGGTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTAACGTTTACAATTTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAATTAATTCTTAGAAAAACTCATCGAGCATCAAATGAAACTGCAATTTATTCATATCAGGATTATCAATACCATATTTTTGAAAAAGCCGTTTCTGTAATGAAGGAGAAAACTCACCGAGGCAGTTCCATAGGATGGCAAGATCCTGGTATCGGTCTGCGATTCCGACTCGTCCAACATCAATACAACCTATTAATTTCCCCTCGTCAAAAATAAGGTTATCAAGTGAGAAATCACCATGAGTGACGACTGAATCCGGTGAGAATGGCAAAAGTTTATGCATTTCTTTCCAGACTTGTTCAACAGGCCAGCCATTACGCTCGTCATCAAAATCACTCGCATCAACCAAACCGTTATTCATTCGTGATTGCGCCTGAGCGAGACGAAATACGCGATCGCTGTTAAAAGGACAATTACAAACAGGAATCGAATGCAACCGGCGCAGGAACACTGCCAGCGCATCAACAATATTTTCACCTGAATCAGGATATTCTTCTAATACCTGGAATGCTGTTTTCCCGGGGATCGCAGTGGTGAGTAACCATGCATCATCAGGAGTACGGATAAAATGCTTGATGGTCGGAAGAGGCATAAATTCCGTCAGCCAGTTTAGTCTGACCATCTCATCTGTAACATCATTGGCAACGCTACCTTTGCCATGTTTCAGAAACAACTCTGGCGCATCGGGCTTCCCATACAATCGATAGATTGTCGCACCTGATTGCCCGACATTATCGCGAGCCCATTTATACCCATATAAATCAGCATCCATGTTGGAATTTAATCGCGGCCTAGAGCAAGACGTTTCCCGTTGAATATGGCTCATAACACCCCTTGTATTACTGTTTATGTAAGCAGACAGTTTTATTGTTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGTATACACTCCGCTATCGCTACGTGACTGGGTCATGGCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGAGGCAGCTGCGGTAAAGCTCATCAGCGTGGTCGTGAAGCGATTCACAGATGTCTGCCTGTTCATCCGCGTCCAGCTCGTTGAGTTTCTCCAGAAGCGTTAATGTCTGGCTTCTGATAAAGCGGGCCATGTTAAGGGCGGTTTTTTCCTGTTTGGTCACTGATGCCTCCGTGTAAGGGGGATTTCTGTTCATGGGGGTAATGATACCGATGAAACGAGAGAGGATGCTCACGATACGGGTTACTGATGATGAACATGCCCGGTTACTGGAACGTTGTGAGGGTAAACAACTGGCGGTATGGATGCGGCGGGACCAGAGAAAAATCACTCAGGGTCAATGCCAGCGCTTCGTTAATACAGATGTAGGTGTTCCACAGGGTAGCCAGCAGCATCCTGCGATGCAGATCCGGAACATAATGGTGCAGGGCGCTGACTTCCGCGTTTCCAGACTTTACGAAACACGGAAACCGAAGACCATTCATGTTGTTGCTCAGGTCGCAGACGTTTTGCAGCAGCAGTCGCTTCACGTTCGCTCGCGTATCGGTGATTCATTCTGCTAACCAGTAAGGCAACCCCGCCAGCCTAGCCGGGTCCTCAACGACAGGAGCACGATCATGCGCACCCGTGGGGCCGCCATGCCGGCGATAATGGCCTGCTTCTCGCCGAAACGTTTGGTGGCGGGACCAGTGACGAAGGCTTGAGCGAGGGCGTGCAAGATTCCGAATACCGCAAGCGACAGGCCGATCATCGTCGCGCTCCAGCGAAAGCGGTCCTCGCCGAAAATGACCCAGAGCGCTGCCGGCACCTGTCCTACGAGTTGCATGATAAAGAAGACAGTCATAAGTGCGGCGACGATAGTCATGCCCCGCGCCCACCGGAAGGAGCTGACTGGGTTGAAGGCTCTCAAGGGCATCGGTCGAGATCCCGGTGCCTAATGAGTGAGCTAACTTACATTAATTGCGTTGCGCTCACTGCCCGCTTTCCAGTCGGGAAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCAACGCGCGGGGAGAGGCGGTTTGCGTATTGGGCGCCAGGGTGGTTTTTCTTTTCACCAGTGAGACGGGCAACAGCTGATTGCCCTTCACCGCCTGGCCCTGAGAGAGTTGCAGCAAGCGGTCCACGCTGGTTTGCCCCAGCAGGCGAAAATCCTGTTTGATGGTGGTTAACGGCGGGATATAACATGAGCTGTCTTCGGTATCGTCGTATCCCACTACCGAGATATCCGCACCAACGCGCAGCCCGGACTCGGTAATGGCGCGCATTGCGCCCAGCGCCATCTGATCGTTGGCAACCAGCATCGCAGTGGGAACGATGCCCTCATTCAGCATTTGCATGGTTTGTTGAAAACCGGACATGGCACTCCAGTCGCCTTCCCGTTCCGCTATCGGCTGAATTTGATTGCGAGTGAGATATTTATGCCAGCCAGCCAGACGCAGACGCGCCGAGACAGAACTTAATGGGCCCGCTAACAGCGCGATTTGCTGGTGACCCAATGCGACCAGATGCTCCACGCCCAGTCGCGTACCGTCTTCATGGGAGAAAATAATACTGTTGATGGGTGTCTGGTCAGAGACATCAAGAAATAACGCCGGAACATTAGTGCAGGCAGCTTCCACAGCAATGGCATCCTGGTCATCCAGCGGATAGTTAATGATCAGCCCACTGACGCGTTGCGCGAGAAGATTGTGCACCGCCGCTTTACAGGCTTCGACGCCGCTTCGTTCTACCATCGACACCACCACGCTGGCACCCAGTTGATCGGCGCGAGATTTAATCGCCGCGACAATTTGCGACGGCGCGTGCAGGGCCAGACTGGAGGTGGCAACGCCAATCAGCAACGACTGTTTGCCCGCCAGTTGTTGTGCCACGCGGTTGGGAATGTAATTCAGCTCCGCCATCGCCGCTTCCACTTTTTCCCGCGTTTTCGCAGAAACGTGGCTGGCCTGGTTCACCACGCGGGAAACGGTCTGATAAGAGACACCGGCATACTCTGCGACATCGTATAACGTTACTGGTTTCACATTCACCACCCTGAATTGACTCTCTTCCGGGCGCTATCATGCCATACCGCGAAAGGTTTTGCGCCATTCGATGGTGTCCGGGATCTCGACGCTCTCCCTTATGCGACTCCTGCATTAGGAAGCAGCCCAGTAGTAGGTTGAGGCCGTTGAGCACCGCCGCCGCAAGGAATGGTGCATGCAAGGAGATGGCGCCCAACAGTCCCCCGGCCACGGGGCCTGCCACCATACCCACGCCGAAACAAGCGCTCATGAGCCCGAAGTGGCGAGCCCGATCTTCCCCATCGGTGATGTCGGCGATATAGGCGCCAGCAACCGCACCTGTGGCGCCGGTGATGCCGGCCACGATGCGTCCGGCGTAGAGGATCGAGATCTCGATCCCGCGAAATTAATACGACTCACTATA
서열번호 14: Sep l1.0101을 암호화하는 서열을 포함하는 벡터 pET24d -N-(PSc)-Sep 11.0101의 핵산 서열
GGGGAATTGTGAGCGGATAACAATTCCCCTCTAGAAATAATTTTGTTTAACTTTAAGAAGGAGATATACCATGAGCCATCATCATCATCATCATCATCATTTGGAAGTGCTGTTTCAGGGTCCATCCATGGATGCCATCAAGAAGAAAATGCTGGCTATGAAAATGGAGAAAGAGGTTGCAACCGACAAAGCGGAGCAAACCGAACAGTCACTGCGTGATCTGGAAGATGCGAAGAACAAAATCGAAGAAGATCTGAGCACATTGCAGAAGAAATATGCCAACCTCGAAAACGATTTCGACAATGCGAATGAACAGCTGACTGCAGCGAACACGAACTTAGAAGCGTCCGAGAAACGTGTCGCAGAATGCGAATCGGAGATTCAAGGCCTTAATCGGCGCATTCAGCTGCTTGAAGAGGACTTAGAGCGTAGTGAAGAACGCTTTTCTAGCGCTCAGAGCAAACTGGAAGATGCCTCGAAAGCCGCTGATGAATCCGAACGTGGTCGCAAAGTGCTGGAGAATCGCAGTCAAGGGGACGAAGAACGCATTGATCTGCTCGAGAAACAGTTGGAAGAAGCGAAATGGATTGCCGAAGATGCGGATCGCAAATTCGACGAAGCTGCGCGTAAACTGGCCATTACCGAAGTCGATCTCGAACGTGCGGAAGCACGTTTGGAAGCAGCTGAGGCGAAAATCGTGGAACTGGAGGAGGAACTGAAAGTAGTTGGCAACAACATGAAATCGCTGGAAATCTCAGAGCAGGAAGCTTCTCAACGTGAGGACAGCTATGAGGAAACCATTCGCGATCTTACTCATCGCCTGAAAGAGGCCGAAAATCGGGCAGCAGAAGCCGAACGCACAGTGTCCAAACTGCAGAAAGAGGTTGATCGCTTAGAGGACGAACTGCTGGCCGAAAAGGAACGCTACAAGACCATCAGTGACGAATTGGATCAGACGTTTGCGGAATTAGCGGGTTATTAATGATCGAGTAAGTCGAGCACCACCACCACCACCACTGAGATCCGGCTGCTAACAAAGCCCGAAAGGAAGCTGAGTTGGCTGCTGCCACCGCTGAGCAATAACTAGCATAACCCCTTGGGGCCTCTAAACGGGTCTTGAGGGGTTTTTTGCTGAAAGGAGGAACTATATCCGGATTGGCGAATGGGACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTAGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTGGTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTAACGTTTACAATTTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAATTAATTCTTAGAAAAACTCATCGAGCATCAAATGAAACTGCAATTTATTCATATCAGGATTATCAATACCATATTTTTGAAAAAGCCGTTTCTGTAATGAAGGAGAAAACTCACCGAGGCAGTTCCATAGGATGGCAAGATCCTGGTATCGGTCTGCGATTCCGACTCGTCCAACATCAATACAACCTATTAATTTCCCCTCGTCAAAAATAAGGTTATCAAGTGAGAAATCACCATGAGTGACGACTGAATCCGGTGAGAATGGCAAAAGTTTATGCATTTCTTTCCAGACTTGTTCAACAGGCCAGCCATTACGCTCGTCATCAAAATCACTCGCATCAACCAAACCGTTATTCATTCGTGATTGCGCCTGAGCGAGACGAAATACGCGATCGCTGTTAAAAGGACAATTACAAACAGGAATCGAATGCAACCGGCGCAGGAACACTGCCAGCGCATCAACAATATTTTCACCTGAATCAGGATATTCTTCTAATACCTGGAATGCTGTTTTCCCGGGGATCGCAGTGGTGAGTAACCATGCATCATCAGGAGTACGGATAAAATGCTTGATGGTCGGAAGAGGCATAAATTCCGTCAGCCAGTTTAGTCTGACCATCTCATCTGTAACATCATTGGCAACGCTACCTTTGCCATGTTTCAGAAACAACTCTGGCGCATCGGGCTTCCCATACAATCGATAGATTGTCGCACCTGATTGCCCGACATTATCGCGAGCCCATTTATACCCATATAAATCAGCATCCATGTTGGAATTTAATCGCGGCCTAGAGCAAGACGTTTCCCGTTGAATATGGCTCATAACACCCCTTGTATTACTGTTTATGTAAGCAGACAGTTTTATTGTTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGTATACACTCCGCTATCGCTACGTGACTGGGTCATGGCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGAGGCAGCTGCGGTAAAGCTCATCAGCGTGGTCGTGAAGCGATTCACAGATGTCTGCCTGTTCATCCGCGTCCAGCTCGTTGAGTTTCTCCAGAAGCGTTAATGTCTGGCTTCTGATAAAGCGGGCCATGTTAAGGGCGGTTTTTTCCTGTTTGGTCACTGATGCCTCCGTGTAAGGGGGATTTCTGTTCATGGGGGTAATGATACCGATGAAACGAGAGAGGATGCTCACGATACGGGTTACTGATGATGAACATGCCCGGTTACTGGAACGTTGTGAGGGTAAACAACTGGCGGTATGGATGCGGCGGGACCAGAGAAAAATCACTCAGGGTCAATGCCAGCGCTTCGTTAATACAGATGTAGGTGTTCCACAGGGTAGCCAGCAGCATCCTGCGATGCAGATCCGGAACATAATGGTGCAGGGCGCTGACTTCCGCGTTTCCAGACTTTACGAAACACGGAAACCGAAGACCATTCATGTTGTTGCTCAGGTCGCAGACGTTTTGCAGCAGCAGTCGCTTCACGTTCGCTCGCGTATCGGTGATTCATTCTGCTAACCAGTAAGGCAACCCCGCCAGCCTAGCCGGGTCCTCAACGACAGGAGCACGATCATGCGCACCCGTGGGGCCGCCATGCCGGCGATAATGGCCTGCTTCTCGCCGAAACGTTTGGTGGCGGGACCAGTGACGAAGGCTTGAGCGAGGGCGTGCAAGATTCCGAATACCGCAAGCGACAGGCCGATCATCGTCGCGCTCCAGCGAAAGCGGTCCTCGCCGAAAATGACCCAGAGCGCTGCCGGCACCTGTCCTACGAGTTGCATGATAAAGAAGACAGTCATAAGTGCGGCGACGATAGTCATGCCCCGCGCCCACCGGAAGGAGCTGACTGGGTTGAAGGCTCTCAAGGGCATCGGTCGAGATCCCGGTGCCTAATGAGTGAGCTAACTTACATTAATTGCGTTGCGCTCACTGCCCGCTTTCCAGTCGGGAAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCAACGCGCGGGGAGAGGCGGTTTGCGTATTGGGCGCCAGGGTGGTTTTTCTTTTCACCAGTGAGACGGGCAACAGCTGATTGCCCTTCACCGCCTGGCCCTGAGAGAGTTGCAGCAAGCGGTCCACGCTGGTTTGCCCCAGCAGGCGAAAATCCTGTTTGATGGTGGTTAACGGCGGGATATAACATGAGCTGTCTTCGGTATCGTCGTATCCCACTACCGAGATATCCGCACCAACGCGCAGCCCGGACTCGGTAATGGCGCGCATTGCGCC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서열번호 15: Tod p MLC1(경쇄 1)을 암호화하는 서열을 포함하는 벡터 pET24d-N-(PSc)-Tod p MLC1의 핵산 서열
GGGGAATTGTGAGCGGATAACAATTCCCCTCTAGAAATAATTTTGTTTAACTTTAAGAAGGAGATATACCATGAGCCATCATCATCATCATCATCATCATTTGGAAGTGCTGTTTCAGGGTCCATCCATGTCTCAACTGACCAAAGACGAAATTGAGGAAGTCCGTGAAGTGTTTGACCTCTTCGACTTTTGGGATGGTCGTGATGGTGATGTTGACGCTGCGAAAGTTGGCGATCTGTTACGCTGTTTAGGGATGAATCCAACCGAAGCTCAGGTACACCAACATGGAGGCACGAAGAAAATGGGCGAGAAAGCGTATAAACTGGAAGAGATTCTGCCGATTTATGAGGAAATGAGCTCCAAAGATACTGGCACAGCAGCGGACGAATTCATGGAAGCCTTCAAAACGTTTGATCGTGAAGGTCAGGGTTTGATCAGTTCAGCCGAAATTCGGAATGTGCTGAAAATGCTTGGCGAACGCATTACCGAGGATCAGTGCAACGATATCTTCACCTTTTGCGACATTCGCGAAGATATCGATGGGAACATCAAATACGAGGATCTGATGAAGAAGGTGATGGCAGGACCTTTTCCGGACAAATCGGATTAATGATCGAGTAAGTCGAGCACCACCACCACCACCACTGAGATCCGGCTGCTAACAAAGCCCGAAAGGAAGCTGAGTTGGCTGCTGCCACCGCTGAGCAATAACTAGCATAACCCCTTGGGGCCTCTAAACGGGTCTTGAGGGGTTTTTTGCTGAAAGGAGGAACTATATCCGGATTGGCGAATGGGACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTAGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTGGTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTAACGTTTACAATTTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAATTAATTCTTAGAAAAACTCATCGAGCATCAAATGAAACTGCAATTTATTCATATCAGGATTATCAATACCATATTTTTGAAAAAGCCGTTTCTGTAATGAAGGAGAAAACTCACCGAGGCAGTTCCATAGGATGGCAAGATCCTGGTATCGGTCTGCGATTCCGACTCGTCCAACATCAATACAACCTATTAATTTCCCCTCGTCAAAAATAAGGTTATCAAGTGAGAAATCACCATGAGTGACGACTGAATCCGGTGAGAATGGCAAAAGTTTATGCATTTCTTTCCAGACTTGTTCAACAGGCCAGCCATTACGCTCGTCATCAAAATCACTCGCATCAACCAAACCGTTATTCATTCGTGATTGCGCCTGAGCGAGACGAAATACGCGATCGCTGTTAAAAGGACAATTACAAACAGGAATCGAATGCAACCGGCGCAGGAACACTGCCAGCGCATCAACAATATTTTCACCTGAATCAGGATATTCTTCTAATACCTGGAATGCTGTTTTCCCGGGGATCGCAGTGGTGAGTAACCATGCATCATCAGGAGTACGGATAAAATGCTTGATGGTCGGAAGAGGCATAAATTCCGTCAGCCAGTTTAGTCTGACCATCTCATCTGTAACATCATTGGCAACGCTACCTTTGCCATGTTTCAGAAACAACTCTGGCGCATCGGGCTTCCCATACAATCGATAGATTGTCGCACCTGATTGCCCGACATTATCGCGAGCCCATTTATACCCATATAAATCAGCATCCATGTTGGAATTTAATCGCGGCCTAGAGCAAGACGTTTCCCGTTGAATATGGCTCATAACACCCCTTGTATTACTGTTTATGTAAGCAGACAGTTTTATTGTTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGTATACACTCCGCTATCGCTACGTGACTGGGTCATGGCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGAGGCAGCTGCGGTAAAGCTCATCAGCGTGGTCGTGAAGCGATTCACAGATGTCTGCCTGTTCATCCGCGTCCAGCTCGTTGAGTTTCTCCAGAAGCGTTAATGTCTGGCTTCTGATAAAGCGGGCCATGTTAAGGGCGGTTTTTTCCTGTTTGGTCACTGATGCCTCCGTGTAAGGGGGATTTCTGTTCATGGGGGTAATGATACCGATGAAACGAGAGAGGATGCTCACGATACGGGTTACTGATGATGAACATGCCCGGTTACTGGAACGTTGTGAGGGTAAACAACTGGCGGTATGGATGCGGCGGGACCAGAGAAAAATCACTCAGGGTCAATGCCAGCGCTTCGTTAATACAGATGTAGGTGTTCCACAGGGTAGCCAGCAGCATCCTGCGATGCAGATCCGGAACATAATGGTGCAGGGCGCTGACTTCCGCGTTTCCAGACTTTACGAAACACGGAAACCGAAGACCATTCATGTTGTTGCTCAGGTCGCAGACGTTTTGCAGCAGCAGTCGCTTCACGTTCGCTCGCGTATCGGTGATTCATTCTGCTAACCAGTAAGGCAACCCCGCCAGCCTAGCCGGGTCCTCAACGACAGGAGCACGATCATGCGCACCCGTGGGGCCGCCATGCCGGCGATAATGGCCTGCTTCTCGCCGAAACGTTTGGTGGCGGGACCAGTGACGAAGGCTTGAGCGAGGGCGTGCAAGATTCCGAATACCGCAAGCGACAGGCCGATCATCGTCGCGCTCCAGCGAAAGCGGTCCTCGCCGAAAATGACCCAGAGCGCTGCCGGCACCTGTCCTACGAGTTGCATGATAAAGAAGACAGTCATAAGTGCGGCGACGATAGTCATGCCCCGCGCCCACCGGAAGGAGCTGACTGGGTTGAAGGCTCTCAAGGGCATCGGTCGAGATCCCGGTGCCTAATGAGTGAGCTAACTTACATTAATTGCGTTGCGCTCACTGCCCGCTTTCCAGTCGGGAAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCAACGCGCGGGGAGAGGCGGTTTGCGTATTGGGCGCCAGGGTGGTTTTTCTTTTCACCAGTGAGACGGGCAACAGCTGATTGCCCTTCACCGCCTGGCCCTGAGAGAGTTGCAGCAAGCGGTCCACGCTGGTTTGCCCCAGCAGGCGAAAATCCTGTTTGATGGTGGTTAACGGCGGGATATAACATGAGCTGTCTTCGGTATCGTCGTATCCCACTACCGAGATATCCGCACCAACGCGCAGCCCGGACTCGGTAATGGCGCGCATTGCGCCCAGCGCCATCTGATCGTTGGCAACCAGCATCGCAGTGGGAACGATGCCCTCATTCAGCATTTGCATGGTTTGTTGAAAACCGGACATGGCACTCCAGTCGCCTTCCCGTTCCGCTATCGGCTGAATTTGATTGCGAGTGAGATATTTATGCCAGCCAGCCAGACGCAGACGCGCCGAGACAGAACTTAATGGGCCCGCTAACAGCGCGATTTGCTGGTGACCCAATGCGACCAGATGCTCCACGCCCAGTCGCGTACCGTCTTCATGGGAGAAAATAATACTGTTGATGGGTGTCTGGTCAGAGACATCAAGAAATAACGCCGGAACATTAGTGCAGGCAGCTTCCACAGCAATGGCATCCTGGTCATCCAGCGGATAGTTAATGATCAGCCCACTGACGCGTTGCGCGAGAAGATTGTGCACCGCCGCTTTACAGGCTTCGACGCCGCTTCGTTCTACCATCGACACCACCACGCTGGCACCCAGTTGATCGGCGCGAGATTTAATCGCCGCGACAATTTGCGACGGCGCGTGCAGGGCCAGACTGGAGGTGGCAACGCCAATCAGCAACGACTGTTTGCCCGCCAGTTGTTGTGCCACGCGGTTGGGAATGTAATTCAGCTCCGCCATCGCCGCTTCCACTTTTTCCCGCGTTTTCGCAGAAACGTGGCTGGCCTGGTTCACCACGCGGGAAACGGTCTGATAAGAGACACCGGCATACTCTGCGACATCGTATAACGTTACTGGTTTCACATTCACCACCCTGAATTGACTCTCTTCCGGGCGCTATCATGCCATACCGCGAAAGGTTTTGCGCCATTCGATGGTGTCCGGGATCTCGACGCTCTCCCTTATGCGACTCCTGCATTAGGAAGCAGCCCAGTAGTAGGTTGAGGCCGTTGAGCACCGCCGCCGCAAGGAATGGTGCATGCAAGGAGATGGCGCCCAACAGTCCCCCGGCCACGGGGCCTGCCACCATACCCACGCCGAAACAAGCGCTCATGAGCCCGAAGTGGCGAGCCCGATCTTCCCCATCGGTGATGTCGGCGATATAGGCGCCAGCAACCGCACCTGTGGCGCCGGTGATGCCGGCCACGATGCGTCCGGCGTAGAGGATCGAGATCTCGATCCCGCGAAATTAATACGACTCACTATA
서열번호 16: Tod p MLC2를 암호화하는 서열을 포함하는 pEt24d -유도된 벡터 pET24d-N-(PSc)-Tod p MLC2의 핵산 서열(경쇄 2)
GGGGAATTGTGAGCGGATAACAATTCCCCTCTAGAAATAATTTTGTTTAACTTTAAGAAGGAGATATACCATGAGCCATCATCATCATCATCATCATCATTTGGAAGTGCTGTTTCAGGGTCCATCCATGGCGGAAGAAGCTCCTCGTCGCGTGAAACTGTCACAACGCCAGATGCAGGAGCTGAAAGAAGCGTTTACCATGATTGATCAGGACCGTGATGGGTTCATTGGCATGGAAGATCTGAAAGACATGTTCAGCTCTTTAGGACGGGTACCACCCGATGACGAACTGAATGCCATGCTGAAAGAATGCCCGGGTCAACTCAATTTCACGGCTTTTCTGACCTTGTTTGGGGAGAAAGTGAGTGGTACTGACCCGGAAGATGCACTTCGCAATGCCTTTTCGATGTTCGACGAAGATGGTCAGGGCTTTATCCCGGAAGATTATCTGAAAGACTTGCTGGAAAATATGGGCGATAACTTTTCCAAAGAGGAGATTAAGAACGTCTGGAAAGATGCACCGTTAAAGAACAAACAGTTCAACTACAACAAGATGGTTGACATCAAAGGCAAAGCGGAGGATGAAGATTAATGATCGAGTAAGTCGAGCACCACCACCACCACCACTGAGATCCGGCTGCTAACAAAGCCCGAAAGGAAGCTGAGTTGGCTGCTGCCACCGCTGAGCAATAACTAGCATAACCCCTTGGGGCCTCTAAACGGGTCTTGAGGGGTTTTTTGCTGAAAGGAGGAACTATATCCGGATTGGCGAATGGGACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTAGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTGGTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTAACGTTTACAATTTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAATTAATTCTTAGAAAAACTCATCGAGCATCAAATGAAACTGCAATTTATTCATATCAGGATTATCAATACCATATTTTTGAAAAAGCCGTTTCTGTAATGAAGGAGAAAACTCACCGAGGCAGTTCCATAGGATGGCAAGATCCTGGTATCGGTCTGCGATTCCGACTCGTCCAACATCAATACAACCTATTAATTTCCCCTCGTCAAAAATAAGGTTATCAAGTGAGAAATCACCATGAGTGACGACTGAATCCGGTGAGAATGGCAAAAGTTTATGCATTTCTTTCCAGACTTGTTCAACAGGCCAGCCATTACGCTCGTCATCAAAATCACTCGCATCAACCAAACCGTTATTCATTCGTGATTGCGCCTGAGCGAGACGAAATACGCGATCGCTGTTAAAAGGACAATTACAAACAGGAATCGAATGCAACCGGCGCAGGAACACTGCCAGCGCATCAACAATATTTTCACCTGAATCAGGATATTCTTCTAATACCTGGAATGCTGTTTTCCCGGGGATCGCAGTGGTGAGTAACCATGCATCATCAGGAGTACGGATAAAATGCTTGATGGTCGGAAGAGGCATAAATTCCGTCAGCCAGTTTAGTCTGACCATCTCATCTGTAACATCATTGGCAACGCTACCTTTGCCATGTTTCAGAAACAACTCTGGCGCATCGGGCTTCCCATACAATCGATAGATTGTCGCACCTGATTGCCCGACATTATCGCGAGCCCATTTATACCCATATAAATCAGCATCCATGTTGGAATTTAATCGCGGCCTAGAGCAAGACGTTTCCCGTTGAATATGGCTCATAACACCCCTTGTATTACTGTTTATGTAAGCAGACAGTTTTATTGTTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGTATACACTCCGCTATCGCTACGTGACTGGGTCATGGCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGAGGCAGCTGCGGTAAAGCTCATCAGCGTGGTCGTGAAGCGATTCACAGATGTCTGCCTGTTCATCCGCGTCCAGCTCGTTGAGTTTCTCCAGAAGCGTTAATGTCTGGCTTCTGATAAAGCGGGCCATGTTAAGGGCGGTTTTTTCCTGTTTGGTCACTGATGCCTCCGTGTAAGGGGGATTTCTGTTCATGGGGGTAATGATACCGATGAAACGAGAGAGGATGCTCACGATACGGGTTACTGATGATGAACATGCCCGGTTACTGGAACGTTGTGAGGGTAAACAACTGGCGGTATGGATGCGGCGGGACCAGAGAAAAATCACTCAGGGTCAATGCCAGCGCTTCGTTAATACAGATGTAGGTGTTCCACAGGGTAGCCAGCAGCATCCTGCGATGCAGATCCGGAACATAATGGTGCAGGGCGCTGACTTCCGCGTTTCCAGACTTTACGAAACACGGAAACCGAAGACCATTCATGTTGTTGCTCAGGTCGCAGACGTTTTGCAGCAGCAGTCGCTTCACGTTCGCTCGCGTATCGGTGATTCATTCTGCTAACCAGTAAGGCAACCCCGCCAGCCTAGCCGGGTCCTCAACGACAGGAGCACGATCATGCGCACCCGTGGGGCCGCCATGCCGGCGATAATGGCCTGCTTCTCGCCGAAACGTTTGGTGGCGGGACCAGTGACGAAGGCTTGAGCGAGGGCGTGCAAGATTCCGAATACCGCAAGCGACAGGCCGATCATCGTCGCGCTCCAGCGAAAGCGGTCCTCGCCGAAAATGACCCAGAGCGCTGCCGGCACCTGTCCTACGAGTTGCATGATAAAGAAGACAGTCATAAGTGCGGCGACGATAGTCATGCCCCGCGCCCACCGGAAGGAGCTGACTGGGTTGAAGGCTCTCAAGGGCATCGGTCGAGATCCCGGTGCCTAATGAGTGAGCTAACTTACATTAATTGCGTTGCGCTCACTGCCCGCTTTCCAGTCGGGAAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCAACGCGCGGGGAGAGGCGGTTTGCGTATTGGGCGCCAGGGTGGTTTTTCTTTTCACCAGTGAGACGGGCAACAGCTGATTGCCCTTCACCGCCTGGCCCTGAGAGAGTTGCAGCAAGCGGTCCACGCTGGTTTGCCCCAGCAGGCGAAAATCCTGTTTGATGGTGGTTAACGGCGGGATATAACATGAGCTGTCTTCGGTATCGTCGTATCCCACTACCGAGATATCCGCACCAACGCGCAGCCCGGACTCGGTAATGGCGCGCATTGCGCCCAGCGCCATCTGATCGTTGGCAACCAGCATCGCAGTGGGAACGATGCCCTCATTCAGCATTTGCATGGTTTGTTGAAAACCGGACATGGCACTCCAGTCGCCTTCCCGTTCCGCTATCGGCTGAATTTGATTGCGAGTGAGATATTTATGCCAGCCAGCCAGACGCAGACGCGCCGAGACAGAACTTAATGGGCCCGCTAACAGCGCGATTTGCTGGTGACCCAATGCGACCAGATGCTCCACGCCCAGTCGCGTACCGTCTTCATGGGAGAAAATAATACTGTTGATGGGTGTCTGGTCAGAGACATCAAGAAATAACGCCGGAACATTAGTGCAGGCAGCTTCCACAGCAATGGCATCCTGGTCATCCAGCGGATAGTTAATGATCAGCCCACTGACGCGTTGCGCGAGAAGATTGTGCACCGCCGCTTTACAGGCTTCGACGCCGCTTCGTTCTACCATCGACACCACCACGCTGGCACCCAGTTGATCGGCGCGAGATTTAATCGCCGCGACAATTTGCGACGGCGCGTGCAGGGCCAGACTGGAGGTGGCAACGCCAATCAGCAACGACTGTTTGCCCGCCAGTTGTTGTGCCACGCGGTTGGGAATGTAATTCAGCTCCGCCATCGCCGCTTCCACTTTTTCCCGCGTTTTCGCAGAAACGTGGCTGGCCTGGTTCACCACGCGGGAAACGGTCTGATAAGAGACACCGGCATACTCTGCGACATCGTATAACGTTACTGGTTTCACATTCACCACCCTGAATTGACTCTCTTCCGGGCGCTATCATGCCATACCGCGAAAGGTTTTGCGCCATTCGATGGTGTCCGGGATCTCGACGCTCTCCCTTATGCGACTCCTGCATTAGGAAGCAGCCCAGTAGTAGGTTGAGGCCGTTGAGCACCGCCGCCGCAAGGAATGGTGCATGCAAGGAGATGGCGCCCAACAGTCCCCCGGCCACGGGGCCTGCCACCATACCCACGCCGAAACAAGCGCTCATGAGCCCGAAGTGGCGAGCCCGATCTTCCCCATCGGTGATGTCGGCGATATAGGCGCCAGCAACCGCACCTGTGGCGCCGGTGATGCCGGCCACGATGCGTCCGGCGTAGAGGATCGAGATCTCGATCCCGCGAAATTAATACGACTCACTATA
서열번호 17: 실시예에서 사용된 C-말단 His 태그를 갖는 Lit v 3.0101 ( Litopenaeus vannamei 미오신 경쇄 2)을 암호화하는 폴리펩티드 서열
MSRKSGSRSSSKRSKKSGGGSNVFDMFTQRQVAEFKEGFQLMDRDKDGVIGKTDLRGTFDEIGRIATDQELDEMLADAPAPINFTMLLNMFAERQTGESDDDDVVAKAFLAFADEEGNIDCDTFRHALMTWGDKFSSQEADDALDQMDIDDGGKIDVQGVIQMLTAGGGDDAAAEEALEVLFQGPHHHHHH
서열번호 18: Tod MLC1의 에피토프 서열
GGTKKMGE
서열번호 19: Tod MLC1의 에피토프 서열
SSKDTGTA
서열번호 20: Tod MLC1의 에피토프 서열
DREGQ
서열번호 21: Tod MLC1의 에피토프 서열
GGTKKMGEKAYKLEEILPIYEEMSSKDTGTAADEFMEAFKTFDREGQ
서열번호 22: Tod MLC2의 에피토프 서열
QGPSMA
서열번호 23: Tod MLC2의 에피토프 서열
KVSGTDPE
서열번호 24: Tod MLC2의 에피토프 서열
DREGQ
서열번호 25: Tod MLC2의 에피토프 서열
QELKEAFTMIDQDRDGFIGMEDLKDMFSSLGRVPPDDELNAMLKECPGQLNFT
서열번호 26: Tod TM의 에피토프 서열
DESERGRKVLENRSQGDEER
서열번호 27: Tod TM의 에피토프 서열
IDLLEKQLEEAKWIAEDADR
서열번호 28: Tod TM의 에피토프 서열
KFDEAARKLAITEVDLERAEARLE
서열번호 29: Tod TM의 에피토프 서열
KEVDRLEDELLAEKERYKTISDELDQTFAELAGY
서열번호 30: MLC2의 에피토프 서열
ALRNAFSMFD
서열번호 31: MLC2의 더 짧은 에피토프 서열 1
NAFSMF
서열번호 32: MLC2의 에피토프 서열 1 동정용 마이크로어레이 펩타이드 1
GTDPEDALRNAFSMF
서열번호 33: MLC2의 에피토프 서열 1 동정용 마이크로어레이 펩타이드 2
TDPEDALRNAFSMFD
서열번호 34: MLC2의 에피토프 서열 1 동정용 마이크로어레이 펩타이드 3
DPEDALRNAFSMFDE
서열번호 35: MLC2의 에피토프 서열 1 동정용 마이크로어레이 펩타이드 4
PEDALRNAFSMFDED
서열번호 36: MLC2의 에피토프 서열 1 동정용 마이크로어레이 펩타이드 5
EDALRNAFSMFDEDG
서열번호 37: MLC2의 에피토프 서열 1 동정용 마이크로어레이 펩타이드 6
DALRNAFSMFDEDGQ
서열번호 38: MLC2의 에피토프 서열 1 동정용 마이크로어레이 펩타이드 7
ALRNAFSMFDEDGQG
서열번호 39: MLC2의 에피토프 서열 1 동정용 마이크로어레이 펩타이드 8
LRNAFSMFDEDGQGF
서열번호 40: MLC2의 에피토프 서열 1 동정용 마이크로어레이 펩타이드 9
RNAFSMFDEDGQGFI
서열번호 41: MLC2의 에피토프 서열 1 동정용 마이크로어레이 펩타이드 20
NAFSMFDEDGQGFIP
서열번호 42: MLC2의 에피토프 서열 2
FIPEDYLKDL
서열번호 43: MLC2의 더 짧은 에피토프 서열 2
IPEDYLKDL
서열번호 44: MLC2의 에피토프 서열 2 동정용 마이크로어레이 펩타이드 1
EDGQGFIPEDYLKDL
서열번호 45: MLC2의 에피토프 서열 2 동정용 마이크로어레이 펩타이드 2
DGQGFIPEDYLKDLL
서열번호 46: MLC2의 에피토프 서열 2 동정용 마이크로어레이 펩타이드 3
GQGFIPEDYLKDLLE
서열번호 47: MLC2의 에피토프 서열 2 동정용 마이크로어레이 펩타이드 4
QGFIPEDYLKDLLEN
서열번호 48: MLC2의 에피토프 서열 2 동정용 마이크로어레이 펩타이드 5
GFIPEDYLKDLLENM
서열번호 49: MLC2의 에피토프 서열 2 동정용 마이크로어레이 펩타이드 6
FIPEDYLKDLLENMG
서열번호 50: MLC2의 에피토프 서열 2 동정용 마이크로어레이 펩타이드 7
IPEDYLKDLLENMGD
서열번호 51: MLC2의 에피토프 서열 3
FSKEEIKNVWKD
서열번호 52: MLC2의 에피토프 서열 3 동정용 마이크로어레이 펩타이드 1
GDNFSKEEIKNVWKD
서열번호 53: MLC2의 에피토프 서열 3 동정용 마이크로어레이 펩타이드 1
DNFSKEEIKNVWKDA
서열번호 54: MLC2의 에피토프 서열 3 동정용 마이크로어레이 펩타이드 2
NFSKEEIKNVWKDAP
서열번호 55: MLC2의 에피토프 서열 3 동정용 마이크로어레이 펩타이드 3
FSKEEIKNVWKDAPL
서열번호 56: 마이크로어레이 펩타이드 8
GSGSGSGAEEAPRRV
서열번호 57: 마이크로어레이 펩타이드 9
SGSGSGAEEAPRRVK
서열번호 58: 마이크로어레이 펩타이드 10
GSGSGAEEAPRRVKL
서열번호 59: 마이크로어레이 펩타이드 11
SGSGAEEAPRRVKLS
서열번호 60: 마이크로어레이 펩타이드 12
GSGAEEAPRRVKLSQ
서열번호 61: 마이크로어레이 펩타이드 13
SGAEEAPRRVKLSQR
서열번호 62: 마이크로어레이 펩타이드 14
GAEEAPRRVKLSQRQ
서열번호 63: 마이크로어레이 펩타이드 15
AEEAPRRVKLSQRQM
서열번호 64: 마이크로어레이 펩타이드 16
EEAPRRVKLSQRQMQ
서열번호 65: 마이크로어레이 펩타이드 17
EAPRRVKLSQRQMQE
서열번호 66: 마이크로어레이 펩타이드 18
APRRVKLSQRQMQEL
서열번호 67: 마이크로어레이 펩타이드 19
PRRVKLSQRQMQELK
서열번호 68: 마이크로어레이 펩타이드 20
RRVKLSQRQMQELKE
서열번호 69: 마이크로어레이 펩타이드 21
RVKLSQRQMQELKEA
서열번호 70: 마이크로어레이 펩타이드 22
VKLSQRQMQELKEAF
서열번호 71: 마이크로어레이 펩타이드 23
KLSQRQMQELKEAFT
서열번호 72: 마이크로어레이 펩타이드 24
LSQRQMQELKEAFTM
서열번호 73: 마이크로어레이 펩타이드 25
SQRQMQELKEAFTMI
서열번호 74: 마이크로어레이 펩타이드 26
QRQMQELKEAFTMID
서열번호 75: 마이크로어레이 펩타이드 27
RQMQELKEAFTMIDQ
서열번호 76: 마이크로어레이 펩타이드 28
QMQELKEAFTMIDQD
서열번호 77: 마이크로어레이 펩타이드 29
MQELKEAFTMIDQDR
서열번호 78: 마이크로어레이 펩타이드 30
QELKEAFTMIDQDRD
서열번호 79: 마이크로어레이 펩타이드 31
ELKEAFTMIDQDRDG
서열번호 80: 마이크로어레이 펩타이드 32
LKEAFTMIDQDRDGF
서열번호 81: 마이크로어레이 펩타이드 33
KEAFTMIDQDRDGFI
서열번호 82: 마이크로어레이 펩타이드 34
EAFTMIDQDRDGFIG
서열번호 83: 마이크로어레이 펩타이드 35
AFTMIDQDRDGFIGM
서열번호 84: 마이크로어레이 펩타이드 36
FTMIDQDRDGFIGME
서열번호 85: 마이크로어레이 펩타이드 37
TMIDQDRDGFIGMED
서열번호 86: 마이크로어레이 펩타이드 38
MIDQDRDGFIGMEDL
서열번호 87: 마이크로어레이 펩타이드 39
IDQDRDGFIGMEDLK
서열번호 88: 마이크로어레이 펩타이드 40
DQDRDGFIGMEDLKD
서열번호 89: 마이크로어레이 펩타이드 41
QDRDGFIGMEDLKDM
서열번호 90: 마이크로어레이 펩타이드 42
DRDGFIGMEDLKDMF
서열번호 91: 마이크로어레이 펩타이드 43
RDGFIGMEDLKDMFS
서열번호 92: 마이크로어레이 펩타이드 44
DGFIGMEDLKDMFSS
서열번호 93: 마이크로어레이 펩타이드 45
GFIGMEDLKDMFSSL
서열번호 94: 마이크로어레이 펩타이드 46
FIGMEDLKDMFSSLG
서열번호 95: 마이크로어레이 펩타이드 47
IGMEDLKDMFSSLGR
서열번호 96: 마이크로어레이 펩타이드 48
GMEDLKDMFSSLGRV
서열번호 97: 마이크로어레이 펩타이드 49
MEDLKDMFSSLGRVP
서열번호 98: 마이크로어레이 펩타이드 50
EDLKDMFSSLGRVPP
서열번호 99: 마이크로어레이 펩타이드 51
DLKDMFSSLGRVPPD
서열번호 100: 마이크로어레이 펩타이드 52
LKDMFSSLGRVPPDD
서열번호 101: 마이크로어레이 펩타이드 53
KDMFSSLGRVPPDDE
서열번호 102: 마이크로어레이 펩타이드 54
DMFSSLGRVPPDDEL
서열번호 103: 마이크로어레이 펩타이드 55
MFSSLGRVPPDDELN
서열번호 104: 마이크로어레이 펩타이드 56
FSSLGRVPPDDELNA
서열번호 105: 마이크로어레이 펩타이드 57
SSLGRVPPDDELNAM
서열번호 106: 마이크로어레이 펩타이드 58
SLGRVPPDDELNAML
서열번호 107: 마이크로어레이 펩타이드 59
LGRVPPDDELNAMLK
서열번호 108: 마이크로어레이 펩타이드 60
GRVPPDDELNAMLKE
서열번호 109: 마이크로어레이 펩타이드 61
RVPPDDELNAMLKEC
서열번호 110: 마이크로어레이 펩타이드 62
VPPDDELNAMLKECP
서열번호 111: 마이크로어레이 펩타이드 63
PPDDELNAMLKECPG
서열번호 112: 마이크로어레이 펩타이드 64
PDDELNAMLKECPGQ
서열번호 113: 마이크로어레이 펩타이드 65
DDELNAMLKECPGQL
서열번호 114: 마이크로어레이 펩타이드 66
DELNAMLKECPGQLN
서열번호 115: 마이크로어레이 펩타이드 67
ELNAMLKECPGQLNF
서열번호 116: 마이크로어레이 펩타이드 68
LNAMLKECPGQLNFT
서열번호 117: 마이크로어레이 펩타이드 69
NAMLKECPGQLNFTA
서열번호 118: 마이크로어레이 펩타이드 70
AMLKECPGQLNFTAF
서열번호 119: 마이크로어레이 펩타이드 71
MLKECPGQLNFTAFL
서열번호 120: 마이크로어레이 펩타이드 72
LKECPGQLNFTAFLT
서열번호 121: 마이크로어레이 펩타이드 73
KECPGQLNFTAFLTL
서열번호 122: 마이크로어레이 펩타이드 74
ECPGQLNFTAFLTLF
서열번호 123: 마이크로어레이 펩타이드 75
CPGQLNFTAFLTLFG
서열번호 124: 마이크로어레이 펩타이드 76
PGQLNFTAFLTLFGE
서열번호 125: 마이크로어레이 펩타이드 77
GQLNFTAFLTLFGEK
서열번호 126: 마이크로어레이 펩타이드 78
QLNFTAFLTLFGEKV
서열번호 127: 마이크로어레이 펩타이드 79
LNFTAFLTLFGEKVS
서열번호 128: 마이크로어레이 펩타이드 80
NFTAFLTLFGEKVSG
서열번호 129: 마이크로어레이 펩타이드 81
FTAFLTLFGEKVSGT
서열번호 130: 마이크로어레이 펩타이드 82
TAFLTLFGEKVSGTD
서열번호 131: 마이크로어레이 펩타이드 83
AFLTLFGEKVSGTDP
서열번호 132: 마이크로어레이 펩타이드 84
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서열번호 133: 마이크로어레이 펩타이드 85
LTLFGEKVSGTDPED
서열번호 134: 마이크로어레이 펩타이드 86
TLFGEKVSGTDPEDA
서열번호 135: 마이크로어레이 펩타이드 87
LFGEKVSGTDPEDAL
서열번호 136: 마이크로어레이 펩타이드 88
FGEKVSGTDPEDALR
서열번호 137: 마이크로어레이 펩타이드 89
GEKVSGTDPEDALRN
서열번호 138: 마이크로어레이 펩타이드 90
EKVSGTDPEDALRNA
서열번호 139: 마이크로어레이 펩타이드 91
KVSGTDPEDALRNAF
서열번호 140: 마이크로어레이 펩타이드 92
VSGTDPEDALRNAFS
서열번호 141: 마이크로어레이 펩타이드 93
SGTDPEDALRNAFSM
서열번호 142: 마이크로어레이 펩타이드 94
GTDPEDALRNAFSMF
서열번호 143: 마이크로어레이 펩타이드 95
TDPEDALRNAFSMFD
서열번호 144: 마이크로어레이 펩타이드 96
DPEDALRNAFSMFDE
서열번호 145: 마이크로어레이 펩타이드 97
PEDALRNAFSMFDED
서열번호 146: 마이크로어레이 펩타이드 98
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서열번호 147: 마이크로어레이 펩타이드 99
DALRNAFSMFDEDGQ
서열번호 148: 마이크로어레이 펩타이드 100
ALRNAFSMFDEDGQG
서열번호 149: 마이크로어레이 펩타이드 101
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서열번호 150: 마이크로어레이 펩타이드 102
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서열번호 151: 마이크로어레이 펩타이드 103
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서열번호 152: 마이크로어레이 펩타이드 104
AFSMFDEDGQGFIPE
서열번호 153: 마이크로어레이 펩타이드 105
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서열번호 154: 마이크로어레이 펩타이드 106
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서열번호 155: 마이크로어레이 펩타이드 107
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서열번호 156: 마이크로어레이 펩타이드 108
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서열번호 157: 마이크로어레이 펩타이드 109
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서열번호 158: 마이크로어레이 펩타이드 110
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서열번호 159: 마이크로어레이 펩타이드 111
DGQGFIPEDYLKDLL
서열번호 160: 마이크로어레이 펩타이드 112
GQGFIPEDYLKDLLE
서열번호 161: 마이크로어레이 펩타이드 113
QGFIPEDYLKDLLEN
서열번호 162: 마이크로어레이 펩타이드 114
GFIPEDYLKDLLENM
서열번호 163: 마이크로어레이 펩타이드 115
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서열번호 164: 마이크로어레이 펩타이드 116
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서열번호 165: 마이크로어레이 펩타이드 117
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서열번호 166: 마이크로어레이 펩타이드 118
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서열번호 167: 마이크로어레이 펩타이드 119
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서열번호 168: 마이크로어레이 펩타이드 120
YLKDLLENMGDNFSK
서열번호 169: 마이크로어레이 펩타이드 121
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서열번호 170: 마이크로어레이 펩타이드 122
KDLLENMGDNFSKEE
서열번호 171: 마이크로어레이 펩타이드 123
DLLENMGDNFSKEEI
서열번호 172: 마이크로어레이 펩타이드 124
LLENMGDNFSKEEIK
서열번호 173: 마이크로어레이 펩타이드 125
LENMGDNFSKEEIKN
서열번호 174: 마이크로어레이 펩타이드 126
ENMGDNFSKEEIKNV
서열번호 175: 마이크로어레이 펩타이드 127
NMGDNFSKEEIKNVW
서열번호 176: 마이크로어레이 펩타이드 128
MGDNFSKEEIKNVWK
서열번호 177: 마이크로어레이 펩타이드 129
GDNFSKEEIKNVWKD
서열번호 178: 마이크로어레이 펩타이드 130
DNFSKEEIKNVWKDA
서열번호 179: 마이크로어레이 펩타이드 131
NFSKEEIKNVWKDAP
서열번호 180: 마이크로어레이 펩타이드 132
FSKEEIKNVWKDAPL
서열번호 181: 마이크로어레이 펩타이드 133
SKEEIKNVWKDAPLK
서열번호 182: 마이크로어레이 펩타이드 134
KEEIKNVWKDAPLKN
서열번호 183: 마이크로어레이 펩타이드 135
EEIKNVWKDAPLKNK
서열번호 184: 마이크로어레이 펩타이드 136
EIKNVWKDAPLKNKQ
서열번호 185: 마이크로어레이 펩타이드 137
IKNVWKDAPLKNKQF
서열번호 186: 마이크로어레이 펩타이드 138
KNVWKDAPLKNKQFN
서열번호 187: 마이크로어레이 펩타이드 139
NVWKDAPLKNKQFNY
서열번호 188: 마이크로어레이 펩타이드 140
VWKDAPLKNKQFNYN
서열번호 189: 마이크로어레이 펩타이드 141
WKDAPLKNKQFNYNK
서열번호 190: 마이크로어레이 펩타이드 142
KDAPLKNKQFNYNKM
서열번호 191: 마이크로어레이 펩타이드 143
DAPLKNKQFNYNKMV
서열번호 192: 마이크로어레이 펩타이드 144
APLKNKQFNYNKMVD
서열번호 193: 마이크로어레이 펩타이드 145
PLKNKQFNYNKMVDI
서열번호 194: 마이크로어레이 펩타이드 146
LKNKQFNYNKMVDIK
서열번호 195: 마이크로어레이 펩타이드 147
KNKQFNYNKMVDIKG
서열번호 196: 마이크로어레이 펩타이드 148
NKQFNYNKMVDIKGK
서열번호 197: 마이크로어레이 펩타이드 149
KQFNYNKMVDIKGKA
서열번호 198: 마이크로어레이 펩타이드 150
QFNYNKMVDIKGKAE
서열번호 199: 마이크로어레이 펩타이드 151
FNYNKMVDIKGKAED
서열번호 200: 마이크로어레이 펩타이드 152
NYNKMVDIKGKAEDE
서열번호 201: 마이크로어레이 펩타이드 153
YNKMVDIKGKAEDED
서열번호 202: 마이크로어레이 펩타이드 154
NKMVDIKGKAEDEDG
서열번호 203: 마이크로어레이 펩타이드 155
KMVDIKGKAEDEDGS
서열번호 204: 마이크로어레이 펩타이드 156
MVDIKGKAEDEDGSG
서열번호 205: 마이크로어레이 펩타이드 157
VDIKGKAEDEDGSGS
서열번호 206: 마이크로어레이 펩타이드 158
DIKGKAEDEDGSGSG
서열번호 207: 마이크로어레이 펩타이드 159
IKGKAEDEDGSGSGS
서열번호 208 : 마이크로어레이 펩타이드 NO 160 :
KGKAEDEDGSGSGSG
본 발명은 본 발명의 추가적인 특징, 구현예, 양상 및 장점을 취할 수 있는 하기의 비제한적인 실시예에 의해 추가적으로 설명된다.
실시예 1 : Tod p MLC1 및 Tod p MLC2의 진단 신뢰성 평가
Tod p MLC1 및 Tod p MLC2의 클로닝 , 재조합 발현 및 정제
상기에 나타낸 링커 및 His 태그 서열에 융합된 단백질 코딩 DNA 서열은 유전자 합성(Eurofins Genomics GmbH)에 의해 생성되고, 폴리머라제 연쇄 반응에 의해 증폭되며, pBAD/TOPO® ThioFusion™ 발현 키트(Invitrogen)를 사용하여 재조합 벡터 pEt24d에 서브 클로닝되었다. 상기에서 얻은 서열번호 12(새우 MLC에 대한 인서트 인코딩을 포함함, Lit v 3.0101), 서열번호 13(새우 TM에 대한 인서트 인코딩을 포함함, Pen a 1.0101), 서열번호 14(오징어 TM에 대한 인서트 인코딩을 포함함, Sep l1.0101), 서열번호 15(오징어 MLC1에 대한 삽입 인코딩을 포함함) 및 서열번호 16(오징어 MLC2에 대한 삽입 인코딩을 포함함)을 사용하였다. 융합 단백질은 제조사에 의해 기술된 바와 같이 대장균에서 발현되었고, 니켈 매트릭스(IMAC)상의 친화성 크로마토그래피에 의해 분리되었다.
멀티 파라미터 라인 블롯(EUROLINE)의 준비
EUROLINE 라인 블롯은 정밀 디스펜서(제타 코포레이션에서 시판)를 사용하여 니트로셀룰로스 멤브레인(왓트 맨에서 시판) 상에 단리된 단일 융합 단백질 서열번호 3(히스 태그를 갖는 새우 TM Pen a 1.0101), 서열번호 5(Sep I 1.0101, 히스 태그를 갖는 오징어 TM), 서열번호 17(Lit v 3.0101, 히스 태그를 갖는 새우 MLC2), 서열번호 9(히스 태그를 갖는 오징어 MLC1 및 서열번호 11(히스 태그를 갖는 오징어 MLC2)을 코팅하여 제조하였다. 제조업체의 지침에서 권장하는 대로 블로킹 및 세척한 후, 단일 단백질이 포함된 멤브레인을 정렬하고 3mm 스트립으로 절단하여 멀티 파라미터 테스트를 수행하였다. 최종 레이아웃은 도 1에 나타내었다.
EUROLINE 라인 분석을 사용한 시료의 평가
EUROLINE 스트립을 제조사(독일 뤼베크 소재의 EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG)의 지침서(제품 번호 DP 3110-1601 E)에서 권장하는 대로 배양하였다. 상세하게는, 스트립을 세척 완충액에서 1/11 (v/v)로 희석된 환자의 시료(25 오징어-알레르기 및 42 오징어-내성 환자) 1 ml를 실온에서 16시간 동안 배양하였다. 환자의 시료를 폐기한 후, 스트립을 스트립 당 1 ml 세척 완충액으로 5분 동안 3회 세척한 후, AP와 접합된 항-인간-IgE 항체 1 ml과 함께 1시간 동안 배양하였다. 이후 스트립을 세척 완충액으로 다시 5회 세척한 다음 BCIP/NBT 기질과 함께 10분 동안 배양하였다. 스캐너 및 EUROLINEScan® 프로그램(EUROIMMUN AG, Lubeck, Germany)을 사용하여 결과를 평가하였다. 반정량 분석(semiquantitative analysis)은 WHO 표준(75/502)의 IgE 보정 곡선을 사용하여 실현할 수 있다.
통계 분석
분석수행 통계(assay performance statistics)는 다음의 정의를 갖는 환자의 식품유발 결과(food challenge outcome)에 기초하여 계산되었다; TP: 진양성 검사 결과의 백분율, TN: 진음성 시험 결과의 백분율, FP: 위양성 검사 결과의 백분율, FN: 위음성 검사 결과의 백분율.
결과
다양한 새우 및 오징어 단백질을 함유하는 EUROLINE 멀티 파라미터 스트립을 25명의 오징어 알레르기 및 42명의 오징어 내성 어린이의 시료과 함께 배양하여 단일 알레르겐 성분에 대한 오징어 알레르기 기반 감작의 예측이 가능한지를 확인하였다.
분석수행 통계는 하기 표 1에 나타내었다. 오징어와 새우 TM은 높은 감도와 중간 정도의 특이도를 보여 각각 57%와 59%의 PPV를 나타낸다. TM은 높은 교차 반응성을 갖는 절지동물의 췌장 항원으로 널리 받아 들여지기 때문에, 이 결과는 놀라운 것은 아니며, 수행된 분석의 타당성을 확인시켜 준다.
대조적으로, 오징어 MLC2는 유사한 특이도(86% 대 95%)로 새우 MLC2(44% vs. 16%)에 비해 더 높은 민감도를 나타내어, PPV(65% vs. 67%) 및 NPV(72% vs. 66%) 값으로 이어진다. 전반적으로, 오징어 MLC2는 시험에 사용된 모든 단백질 중 최고의 효율을 보인다.
MLC1(8%)의 민감도는 제한되어 있지만, 특이도(100%)은 뛰어나다.
요약하면, 제시된 결과는 청구된 오징어 MLC2가 현재 이용 가능한 모든 오징어 알레르기 시험 시스템과 비교하여 오징어 알레르기의 예측에 진단학적인 이점을 제공한다는 것을 명확하게 나타낸다.
Figure pat00002
상기 표 1에서, TM은 트로포미오신, MLC는 미오신 경쇄, PPV는 양성 예측값, NPV는 음성 예측값을 의미한다.
실시예 2 : Tod pMLC2 _V2의 비교 에피토프 맵핑
서열번호 10을 나타내는 15개의 아미노산 서열의 중첩 펩타이드를 포함하는 펩타이드 마이크로어레이 칩을 제조하고, Ehlers et al. (Ehlers, AM, Klinge, M., Suer, W., Weimann, Y., Knulst, AC, Besa, F., Le, TM, Otten, HG (2019) Ara h 7 isoforms share many linear epitopes: Are 3D epitopes crucial to elucidate divergent abilities, Clin Exp Allergy 49(11), 1512-1519)에 기재된 대로 배양하였다. 하나의 오프셋(off set)을 선택하고, 3반복으로 측정을 하였다. 사용된 펩타이드는 서열번호 56 내지 서열번호 208을 포함한다. 각각의 펩타이드는 15개의 아미노산을 포함하고, 오프셋은 1이었다. 측정은 3반복으로 수행되었다.
환자 코호트는 오징어에 알레르기가 있는 환자의 혈청 11개 및 감작되었지만 내성인 환자의 시료 8개 및 건강한 공여자의 혈청 2개를 포함하였다.
결과는 다음의 예외사항과 함께, Ehlers et al.에 기재된 대로 평가되었다: 컷오프가 3으로 증가되어 결과의 중요성이 증가하였다. 안티-히스 태그 모노클로 날 항체 3D5에 대해 기재된 바와 같이(Lindner, P., Bauer, K., Krebber, A., Nieba, L., Kremmer, E., Krebber, C., Honegger, A., Klinger, B., Mocikat, R., Pl
Figure pat00003
ckthun, A. (1997) Specific detection of his-tagged proteins with recombinant anti-His tag scFv-phosphatase or scFv-phage fusions, Biotechniques 22(1), 140-9), 4개의 연속하는 펩타이드의 스크레치가 인식되면, 에피토프는 적어도 4개의 아미노산의 에피토프 길이에 상응하는 것으로 간주되었다.
도 2는 이 예에서 설명된 바와 같이, 배양된 펩타이드 칩의 예를 보여준다. 칩은 8개의 패널을 포함하고, 녹색 정규 패널은 제어 펩타이드를 나타낸다. IgE 반응은 녹색으로 표시되고, IgG4 반응은 적색으로 표시된다.
도 3은 실시예 2에서 논의된 바와 같이, 서열번호 10에 기초한 펩타이드에 대한 4명의 알레르기성 및 2명의 내성 환자에 기초한 혈청에서의 항체 반응성의 검출을 나타낸다. Y 축은 C 스코어를 나타내고, X 축은 개별 펩타이드를 나타낸다. 검은 선은 컷오프를 표시하고, 녹색 컬럼은 IGE 반응성을 나타내며, 빨간색 컬럼은 IgG4 반응성을 나타낸다.
도 4는 서열번호 10에 기초한 중첩 펩타이드에 대한 IgE 및 IgG4 혈청 반응성의 열지도를 보여준다.
첫 번째 컬럼에는 환자 혈청의 명칭이 표시되어 있다. 왼쪽 컬럼은 사용된 펩타이드를 나타낸다. 세트 점수가 3 이상인 반응은 긍정적인 것으로 간주되었다. 적어도 3개의 후속 펩타이드가 인식된다면 에피토프는 유효한 것으로 간주되었다. 녹색 신호는 상응하는 펩타이드와의 IGG 반응성을 나타낸다. 적색 신호는 IGG4 반응성을 나타낸다. 색상이 강할수록 신호가 더 높다.
결과
알레르기 환자의 혈청과 내성 환자의 혈청의 반응성 사이에 분명한 차이가 나타날 수 있다.
내성 환자로부터의 9개 혈청 중 2개의 혈청이 서열번호 10의 n- 말단 영역을 나타내는 펩타이드와 반응하는 동안, 알레르기 환자에 특이적인 반응은 하기 서열을 포함하는 펩타이드에 대해서 나타날 수 있다: ALRNAFSMFD(서열번호 30), NAFSMF(서열번호 31), FIPEDYLKDL(서열번호 42), IPEDYLKDL(서열번호 43) 및 FSKEEIKNVWKD(서열번호 51).
전반적으로, 서열번호 31, 서열번호 43 및 서열번호 51을 포함하는 에피토프 및 이를 포함하는 펩타이드 또는 단백질은 알레르기 환자의 항체에 의해 특이적으로 인식된다고 결론을 내릴 수 있다. 이들 에피토프는 내약성 환자 중 어느 것도 항체에 의해 인식되지 않았으며, 이들에 결합하는 항원 또는 이들에 결합하는 항체를 면역 분석을 위한 시약으로서 설계하거나 결합하지 않는 항체를 설계하는데 사용될 수 있다.
<110> EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG <120> A method and products for the diagnosis of a seafood allergy <130> 18PP121EP (1.6) <160> 208 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 540 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleotide sequence encoding Tod p MLC1 with a N-terminal His tag, as used in the Examples <400> 1 atgagccatc atcatcatca tcatcatcat ttggaagtgc tgtttcaggg tccatccatg 60 tctcaactga ccaaagacga aattgaggaa gtccgtgaag tgtttgacct cttcgacttt 120 tgggatggtc gtgatggtga tgttgacgct gcgaaagttg gcgatctgtt acgctgttta 180 gggatgaatc caaccgaagc tcaggtacac caacatggag gcacgaagaa aatgggcgag 240 aaagcgtata aactggaaga gattctgccg atttatgagg aaatgagctc caaagatact 300 ggcacagcag cggacgaatt catggaagcc ttcaaaacgt ttgatcgtga aggtcagggt 360 ttgatcagtt cagccgaaat tcggaatgtg ctgaaaatgc ttggcgaacg cattaccgag 420 gatcagtgca acgatatctt caccttttgc gacattcgcg aagatatcga tgggaacatc 480 aaatacgagg atctgatgaa gaaggtgatg gcaggacctt ttccggacaa atcggattaa 540 540 <210> 2 <211> 522 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleotide sequence encoding Tod p MLC2 with a N-terminal His tag, as used in the Examples <400> 2 atgagccatc atcatcatca tcatcatcat ttggaagtgc tgtttcaggg tccatccatg 60 gcggaagaag ctcctcgtcg cgtgaaactg tcacaacgcc agatgcagga gctgaaagaa 120 gcgtttacca tgattgatca ggaccgtgat gggttcattg gcatggaaga tctgaaagac 180 atgttcagct ctttaggacg ggtaccaccc gatgacgaac tgaatgccat gctgaaagaa 240 tgcccgggtc aactcaattt cacggctttt ctgaccttgt ttggggagaa agtgagtggt 300 actgacccgg aagatgcact tcgcaatgcc ttttcgatgt tcgacgaaga tggtcagggc 360 tttatcccgg aagattatct gaaagacttg ctggaaaata tgggcgataa cttttccaaa 420 gaggagatta agaacgtctg gaaagatgca ccgttaaaga acaaacagtt caactacaac 480 aagatggttg acatcaaagg caaagcggag gatgaagatt aa 522 <210> 3 <211> 303 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Polypeptide sequence encoding Pen a 1.0101 (Penaeus aztecus Tropomyosin) with a N-terminal His tag, as used in the Examples <400> 3 Met Ser His His His His His His His His Leu Glu Val Leu Phe Gln 1 5 10 15 Gly Pro Ser Met Asp Ala Ile Lys Lys Lys Met Gln Ala Met Lys Leu 20 25 30 Glu Lys Asp Asn Ala Met Asp Arg Ala Asp Thr Leu Glu Gln Gln Asn 35 40 45 Lys Glu Ala Asn Asn Arg Ala Glu Lys Ser Glu Glu Glu Val His Asn 50 55 60 Leu Gln Lys Arg Met Gln Gln Leu Glu Asn Asp Leu Asp Gln Val Gln 65 70 75 80 Glu Ser Leu Leu Lys Ala Asn Ile Gln Leu Val Glu Lys Asp Lys Ala 85 90 95 Leu Ser Asn Ala Glu Gly Glu Val Ala Ala Leu Asn Arg Arg Ile Gln 100 105 110 Leu Leu Glu Glu Asp Leu Glu Arg Ser Glu Glu Arg Leu Asn Thr Ala 115 120 125 Thr Thr Lys Leu Ala Glu Ala Ser Gln Ala Ala Asp Glu Ser Glu Arg 130 135 140 Met Arg Lys Val Leu Glu Asn Arg Ser Leu Ser Asp Glu Glu Arg Met 145 150 155 160 Asp Ala Leu Glu Asn Gln Leu Lys Glu Ala Arg Phe Leu Ala Glu Glu 165 170 175 Ala Asp Arg Lys Tyr Asp Glu Val Ala Arg Lys Leu Ala Met Val Glu 180 185 190 Ala Asp Leu Glu Arg Ala Glu Glu Arg Ala Glu Thr Gly Glu Ser Lys 195 200 205 Ile Val Glu Leu Glu Glu Glu Leu Arg Val Val Gly Asn Asn Leu Lys 210 215 220 Ser Leu Glu Val Ser Glu Glu Lys Ala Asn Gln Arg Glu Glu Ala Tyr 225 230 235 240 Lys Glu Gln Ile Lys Thr Leu Thr Asn Lys Leu Lys Ala Ala Glu Ala 245 250 255 Arg Ala Glu Phe Ala Glu Arg Ser Val Gln Lys Leu Gln Lys Glu Val 260 265 270 Asp Arg Leu Glu Asp Glu Leu Val Asn Glu Lys Glu Lys Tyr Lys Ser 275 280 285 Ile Thr Asp Glu Leu Asp Gln Thr Phe Ser Glu Leu Ser Gly Tyr 290 295 300 <210> 4 <211> 284 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Polypeptide sequence encoding Pen a 1.0101 (Penaeus aztecus Tropomyosin); Accession number Q3Y8M6 <400> 4 Met Asp Ala Ile Lys Lys Lys Met Gln Ala Met Lys Leu Glu Lys Asp 1 5 10 15 Asn Ala Met Asp Arg Ala Asp Thr Leu Glu Gln Gln Asn Lys Glu Ala 20 25 30 Asn Asn Arg Ala Glu Lys Ser Glu Glu Glu Val His Asn Leu Gln Lys 35 40 45 Arg Met Gln Gln Leu Glu Asn Asp Leu Asp Gln Val Gln Glu Ser Leu 50 55 60 Leu Lys Ala Asn Ile Gln Leu Val Glu Lys Asp Lys Ala Leu Ser Asn 65 70 75 80 Ala Glu Gly Glu Val Ala Ala Leu Asn Arg Arg Ile Gln Leu Leu Glu 85 90 95 Glu Asp Leu Glu Arg Ser Glu Glu Arg Leu Asn Thr Ala Thr Thr Lys 100 105 110 Leu Ala Glu Ala Ser Gln Ala Ala Asp Glu Ser Glu Arg Met Arg Lys 115 120 125 Val Leu Glu Asn Arg Ser Leu Ser Asp Glu Glu Arg Met Asp Ala Leu 130 135 140 Glu Asn Gln Leu Lys Glu Ala Arg Phe Leu Ala Glu Glu Ala Asp Arg 145 150 155 160 Lys Tyr Asp Glu Val Ala Arg Lys Leu Ala Met Val Glu Ala Asp Leu 165 170 175 Glu Arg Ala Glu Glu Arg Ala Glu Thr Gly Glu Ser Lys Ile Val Glu 180 185 190 Leu Glu Glu Glu Leu Arg Val Val Gly Asn Asn Leu Lys Ser Leu Glu 195 200 205 Val Ser Glu Glu Lys Ala Asn Gln Arg Glu Glu Ala Tyr Lys Glu Gln 210 215 220 Ile Lys Thr Leu Thr Asn Lys Leu Lys Ala Ala Glu Ala Arg Ala Glu 225 230 235 240 Phe Ala Glu Arg Ser Val Gln Lys Leu Gln Lys Glu Val Asp Arg Leu 245 250 255 Glu Asp Glu Leu Val Asn Glu Lys Glu Lys Tyr Lys Ser Ile Thr Asp 260 265 270 Glu Leu Asp Gln Thr Phe Ser Glu Leu Ser Gly Tyr 275 280 <210> 5 <211> 303 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Polypeptide sequence encoding Sep l 1.0101 (Sepioteuthis lessoniana Tropomyosin) with a N-terminal His tag, as used in the Examples <400> 5 Met Ser His His His His His His His His Leu Glu Val Leu Phe Gln 1 5 10 15 Gly Pro Ser Met Asp Ala Ile Lys Lys Lys Met Leu Ala Met Lys Met 20 25 30 Glu Lys Glu Val Ala Thr Asp Lys Ala Glu Gln Thr Glu Gln Ser Leu 35 40 45 Arg Asp Leu Glu Asp Ala Lys Asn Lys Ile Glu Glu Asp Leu Ser Thr 50 55 60 Leu Gln Lys Lys Tyr Ala Asn Leu Glu Asn Asp Phe Asp Asn Ala Asn 65 70 75 80 Glu Gln Leu Thr Ala Ala Asn Thr Asn Leu Glu Ala Ser Glu Lys Arg 85 90 95 Val Ala Glu Cys Glu Ser Glu Ile Gln Gly Leu Asn Arg Arg Ile Gln 100 105 110 Leu Leu Glu Glu Asp Leu Glu Arg Ser Glu Glu Arg Phe Ser Ser Ala 115 120 125 Gln Ser Lys Leu Glu Asp Ala Ser Lys Ala Ala Asp Glu Ser Glu Arg 130 135 140 Gly Arg Lys Val Leu Glu Asn Arg Ser Gln Gly Asp Glu Glu Arg Ile 145 150 155 160 Asp Leu Leu Glu Lys Gln Leu Glu Glu Ala Lys Trp Ile Ala Glu Asp 165 170 175 Ala Asp Arg Lys Phe Asp Glu Ala Ala Arg Lys Leu Ala Ile Thr Glu 180 185 190 Val Asp Leu Glu Arg Ala Glu Ala Arg Leu Glu Ala Ala Glu Ala Lys 195 200 205 Ile Val Glu Leu Glu Glu Glu Leu Lys Val Val Gly Asn Asn Met Lys 210 215 220 Ser Leu Glu Ile Ser Glu Gln Glu Ala Ser Gln Arg Glu Asp Ser Tyr 225 230 235 240 Glu Glu Thr Ile Arg Asp Leu Thr His Arg Leu Lys Glu Ala Glu Asn 245 250 255 Arg Ala Ala Glu Ala Glu Arg Thr Val Ser Lys Leu Gln Lys Glu Val 260 265 270 Asp Arg Leu Glu Asp Glu Leu Leu Ala Glu Lys Glu Arg Tyr Lys Thr 275 280 285 Ile Ser Asp Glu Leu Asp Gln Thr Phe Ala Glu Leu Ala Gly Tyr 290 295 300 <210> 6 <211> 284 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Polypeptide sequence encoding Sep l 1.0101 (Sepioteuthis lessoniana Tropomyosin) <400> 6 Met Asp Ala Ile Lys Lys Lys Met Leu Ala Met Lys Met Glu Lys Glu 1 5 10 15 Val Ala Thr Asp Lys Ala Glu Gln Thr Glu Gln Ser Leu Arg Asp Leu 20 25 30 Glu Asp Ala Lys Asn Lys Ile Glu Glu Asp Leu Ser Thr Leu Gln Lys 35 40 45 Lys Tyr Ala Asn Leu Glu Asn Asp Phe Asp Asn Ala Asn Glu Gln Leu 50 55 60 Thr Ala Ala Asn Thr Asn Leu Glu Ala Ser Glu Lys Arg Val Ala Glu 65 70 75 80 Cys Glu Ser Glu Ile Gln Gly Leu Asn Arg Arg Ile Gln Leu Leu Glu 85 90 95 Glu Asp Leu Glu Arg Ser Glu Glu Arg Phe Ser Ser Ala Gln Ser Lys 100 105 110 Leu Glu Asp Ala Ser Lys Ala Ala Asp Glu Ser Glu Arg Gly Arg Lys 115 120 125 Val Leu Glu Asn Arg Ser Gln Gly Asp Glu Glu Arg Ile Asp Leu Leu 130 135 140 Glu Lys Gln Leu Glu Glu Ala Lys Trp Ile Ala Glu Asp Ala Asp Arg 145 150 155 160 Lys Phe Asp Glu Ala Ala Arg Lys Leu Ala Ile Thr Glu Val Asp Leu 165 170 175 Glu Arg Ala Glu Ala Arg Leu Glu Ala Ala Glu Ala Lys Ile Val Glu 180 185 190 Leu Glu Glu Glu Leu Lys Val Val Gly Asn Asn Met Lys Ser Leu Glu 195 200 205 Ile Ser Glu Gln Glu Ala Ser Gln Arg Glu Asp Ser Tyr Glu Glu Thr 210 215 220 Ile Arg Asp Leu Thr His Arg Leu Lys Glu Ala Glu Asn Arg Ala Ala 225 230 235 240 Glu Ala Glu Arg Thr Val Ser Lys Leu Gln Lys Glu Val Asp Arg Leu 245 250 255 Glu Asp Glu Leu Leu Ala Glu Lys Glu Arg Tyr Lys Thr Ile Ser Asp 260 265 270 Glu Leu Asp Gln Thr Phe Ala Glu Leu Ala Gly Tyr 275 280 <210> 7 <211> 177 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Polypeptide sequence encoding Lit v 3.0101 (Litopenaeus vannamei Myosin Light Chain 2) [His-tagged version is SEQ ID NO:17] <400> 7 Met Ser Arg Lys Ser Gly Ser Arg Ser Ser Ser Lys Arg Ser Lys Lys 1 5 10 15 Ser Gly Gly Gly Ser Asn Val Phe Asp Met Phe Thr Gln Arg Gln Val 20 25 30 Ala Glu Phe Lys Glu Gly Phe Gln Leu Met Asp Arg Asp Lys Asp Gly 35 40 45 Val Ile Gly Lys Thr Asp Leu Arg Gly Thr Phe Asp Glu Ile Gly Arg 50 55 60 Ile Ala Thr Asp Gln Glu Leu Asp Glu Met Leu Ala Asp Ala Pro Ala 65 70 75 80 Pro Ile Asn Phe Thr Met Leu Leu Asn Met Phe Ala Glu Arg Gln Thr 85 90 95 Gly Glu Ser Asp Asp Asp Asp Val Val Ala Lys Ala Phe Leu Ala Phe 100 105 110 Ala Asp Glu Glu Gly Asn Ile Asp Cys Asp Thr Phe Arg His Ala Leu 115 120 125 Met Thr Trp Gly Asp Lys Phe Ser Ser Gln Glu Ala Asp Asp Ala Leu 130 135 140 Asp Gln Met Asp Ile Asp Asp Gly Gly Lys Ile Asp Val Gln Gly Val 145 150 155 160 Ile Gln Met Leu Thr Ala Gly Gly Gly Asp Asp Ala Ala Ala Glu Glu 165 170 175 Ala <210> 8 <211> 159 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Polypeptide sequence encoding Tod p MLC1 (Myosin Light Chain 1) Todarodes pacificus; Accession number P05945 <400> 8 Ser Gln Leu Thr Lys Asp Glu Ile Glu Glu Val Arg Glu Val Phe Asp 1 5 10 15 Leu Phe Asp Phe Trp Asp Gly Arg Asp Gly Asp Val Asp Ala Ala Lys 20 25 30 Val Gly Asp Leu Leu Arg Cys Leu Gly Met Asn Pro Thr Glu Ala Gln 35 40 45 Val His Gln His Gly Gly Thr Lys Lys Met Gly Glu Lys Ala Tyr Lys 50 55 60 Leu Glu Glu Ile Leu Pro Ile Tyr Glu Glu Met Ser Ser Lys Asp Thr 65 70 75 80 Gly Thr Ala Ala Asp Glu Phe Met Glu Ala Phe Lys Thr Phe Asp Arg 85 90 95 Glu Gly Gln Gly Leu Ile Ser Ser Ala Glu Ile Arg Asn Val Leu Lys 100 105 110 Met Leu Gly Glu Arg Ile Thr Glu Asp Gln Cys Asn Asp Ile Phe Thr 115 120 125 Phe Cys Asp Ile Arg Glu Asp Ile Asp Gly Asn Ile Lys Tyr Glu Asp 130 135 140 Leu Met Lys Lys Val Met Ala Gly Pro Phe Pro Asp Lys Ser Asp 145 150 155 <210> 9 <211> 179 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Polypeptide sequence encoding Tod p MLC1 (Todarodes pacificus Myosin Light Chain 1) with a N-terminal His tag, as used in the Examples <400> 9 Met Ser His His His His His His His His Leu Glu Val Leu Phe Gln 1 5 10 15 Gly Pro Ser Met Ser Gln Leu Thr Lys Asp Glu Ile Glu Glu Val Arg 20 25 30 Glu Val Phe Asp Leu Phe Asp Phe Trp Asp Gly Arg Asp Gly Asp Val 35 40 45 Asp Ala Ala Lys Val Gly Asp Leu Leu Arg Cys Leu Gly Met Asn Pro 50 55 60 Thr Glu Ala Gln Val His Gln His Gly Gly Thr Lys Lys Met Gly Glu 65 70 75 80 Lys Ala Tyr Lys Leu Glu Glu Ile Leu Pro Ile Tyr Glu Glu Met Ser 85 90 95 Ser Lys Asp Thr Gly Thr Ala Ala Asp Glu Phe Met Glu Ala Phe Lys 100 105 110 Thr Phe Asp Arg Glu Gly Gln Gly Leu Ile Ser Ser Ala Glu Ile Arg 115 120 125 Asn Val Leu Lys Met Leu Gly Glu Arg Ile Thr Glu Asp Gln Cys Asn 130 135 140 Asp Ile Phe Thr Phe Cys Asp Ile Arg Glu Asp Ile Asp Gly Asn Ile 145 150 155 160 Lys Tyr Glu Asp Leu Met Lys Lys Val Met Ala Gly 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sequence encoding Tod p MLC2 (Todarodes pacificus Myosin Light Chain 2) with a N-terminal His tag, as used in the Examples <400> 11 Met Ser His His His His His His His His Leu Glu Val Leu Phe Gln 1 5 10 15 Gly Pro Ser Met Ala Glu Glu Ala Pro Arg Arg Val Lys Leu Ser Gln 20 25 30 Arg Gln Met Gln Glu Leu Lys Glu Ala Phe Thr Met Ile Asp Gln Asp 35 40 45 Arg Asp Gly Phe Ile Gly Met Glu Asp Leu Lys Asp Met Phe Ser Ser 50 55 60 Leu Gly Arg Val Pro Pro Asp Asp Glu Leu Asn Ala Met Leu Lys Glu 65 70 75 80 Cys Pro Gly Gln Leu Asn Phe Thr Ala Phe Leu Thr Leu Phe Gly Glu 85 90 95 Lys Val Ser Gly Thr Asp Pro Glu Asp Ala Leu Arg Asn Ala Phe Ser 100 105 110 Met Phe Asp Glu Asp Gly Gln Gly Phe Ile Pro Glu Asp Tyr Leu Lys 115 120 125 Asp Leu Leu Glu Asn Met Gly Asp Asn Phe Ser Lys Glu Glu Ile Lys 130 135 140 Asn Val Trp Lys Asp Ala Pro Leu Lys Asn Lys Gln Phe Asn Tyr Asn 145 150 155 160 Lys Met Val Asp Ile Lys Gly Lys Ala Glu Asp Glu Asp 165 170 <210> 12 <211> 5808 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleic acid sequence of vector pET24d-Lit v3.0101-(PSc)-His comprising a sequence encoding for Lit v 3.0101 (Myosin Light Chain 2) <400> 12 ggggaattgt gagcggataa caattcccct ctagaaataa ttttgtttaa ctttaagaag 60 gagatatacc atgtctcgca aaagtggctc acgttccagc tccaaacgca gcaagaaatc 120 gggtggtggc tcgaatgtct ttgacatgtt cacgcaacgc caagttgcgg agttcaaaga 180 agggtttcag ctgatggatc gcgacaaaga tggggtgatt ggcaaaaccg atctgcgtgg 240 tacctttgac gagattggcc gcattgcgac cgatcaggaa ctggatgaga tgcttgcaga 300 tgccccagca ccgatcaatt tcacgatgct cctgaacatg tttgcggaac gtcagactgg 360 cgaatctgac gacgatgacg tggttgccaa agcgttctta gcctttgccg atgaagaggg 420 aaacatcgat tgcgatacct ttcggcatgc tctgatgact tggggcgaca agttcagcag 480 tcaagaagcg gatgatgcct tggatcagat ggacattgat gacggcggga aaatcgacgt 540 acagggtgtg attcagatgc tgacagctgg tggaggtgat gatgcagcag cggaagaagc 600 tctcgaggtc ctgttccaag gaccccacca ccatcaccat cactgatcga gcaccaccac 660 caccaccact gagatccggc tgctaacaaa gcccgaaagg aagctgagtt ggctgctgcc 720 accgctgagc aataactagc ataacccctt ggggcctcta aacgggtctt gaggggtttt 780 ttgctgaaag gaggaactat atccggattg gcgaatggga cgcgccctgt agcggcgcat 840 taagcgcggc gggtgtggtg gttacgcgca gcgtgaccgc tacacttgcc agcgccctag 900 cgcccgctcc tttcgctttc ttcccttcct ttctcgccac gttcgccggc tttccccgtc 960 aagctctaaa tcgggggctc cctttagggt tccgatttag tgctttacgg cacctcgacc 1020 ccaaaaaact tgattagggt gatggttcac gtagtgggcc atcgccctga tagacggttt 1080 ttcgcccttt gacgttggag tccacgttct ttaatagtgg actcttgttc caaactggaa 1140 caacactcaa ccctatctcg gtctattctt ttgatttata agggattttg ccgatttcgg 1200 cctattggtt aaaaaatgag ctgatttaac aaaaatttaa cgcgaatttt aacaaaatat 1260 taacgtttac aatttcaggt ggcacttttc ggggaaatgt gcgcggaacc cctatttgtt 1320 tatttttcta aatacattca aatatgtatc cgctcatgaa ttaattctta gaaaaactca 1380 tcgagcatca aatgaaactg caatttattc atatcaggat tatcaatacc atatttttga 1440 aaaagccgtt tctgtaatga aggagaaaac tcaccgaggc agttccatag gatggcaaga 1500 tcctggtatc ggtctgcgat tccgactcgt ccaacatcaa tacaacctat taatttcccc 1560 tcgtcaaaaa taaggttatc aagtgagaaa tcaccatgag tgacgactga atccggtgag 1620 aatggcaaaa gtttatgcat ttctttccag acttgttcaa caggccagcc attacgctcg 1680 tcatcaaaat cactcgcatc aaccaaaccg ttattcattc gtgattgcgc ctgagcgaga 1740 cgaaatacgc gatcgctgtt aaaaggacaa ttacaaacag gaatcgaatg caaccggcgc 1800 aggaacactg ccagcgcatc aacaatattt tcacctgaat caggatattc ttctaatacc 1860 tggaatgctg ttttcccggg gatcgcagtg gtgagtaacc atgcatcatc aggagtacgg 1920 ataaaatgct tgatggtcgg aagaggcata aattccgtca gccagtttag tctgaccatc 1980 tcatctgtaa catcattggc aacgctacct ttgccatgtt tcagaaacaa ctctggcgca 2040 tcgggcttcc catacaatcg atagattgtc gcacctgatt gcccgacatt atcgcgagcc 2100 catttatacc catataaatc agcatccatg ttggaattta atcgcggcct agagcaagac 2160 gtttcccgtt gaatatggct cataacaccc cttgtattac tgtttatgta agcagacagt 2220 tttattgttc atgaccaaaa tcccttaacg tgagttttcg ttccactgag cgtcagaccc 2280 cgtagaaaag atcaaaggat cttcttgaga tccttttttt ctgcgcgtaa tctgctgctt 2340 gcaaacaaaa aaaccaccgc taccagcggt ggtttgtttg ccggatcaag agctaccaac 2400 tctttttccg 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caggccgatc atcgtcgcgc tccagcgaaa gcggtcctcg ccgaaaatga 4140 cccagagcgc tgccggcacc tgtcctacga gttgcatgat aaagaagaca gtcataagtg 4200 cggcgacgat agtcatgccc cgcgcccacc ggaaggagct gactgggttg aaggctctca 4260 agggcatcgg tcgagatccc ggtgcctaat gagtgagcta acttacatta attgcgttgc 4320 gctcactgcc cgctttccag tcgggaaacc tgtcgtgcca gctgcattaa tgaatcggcc 4380 aacgcgcggg gagaggcggt ttgcgtattg ggcgccaggg tggtttttct tttcaccagt 4440 gagacgggca acagctgatt gcccttcacc gcctggccct gagagagttg cagcaagcgg 4500 tccacgctgg tttgccccag caggcgaaaa tcctgtttga tggtggttaa cggcgggata 4560 taacatgagc tgtcttcggt atcgtcgtat cccactaccg agatatccgc accaacgcgc 4620 agcccggact cggtaatggc gcgcattgcg cccagcgcca tctgatcgtt ggcaaccagc 4680 atcgcagtgg gaacgatgcc ctcattcagc atttgcatgg tttgttgaaa accggacatg 4740 gcactccagt cgccttcccg ttccgctatc ggctgaattt gattgcgagt gagatattta 4800 tgccagccag ccagacgcag acgcgccgag acagaactta atgggcccgc taacagcgcg 4860 atttgctggt gacccaatgc gaccagatgc tccacgccca gtcgcgtacc gtcttcatgg 4920 gagaaaataa 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cgctgaagaa cgcgcagaga ctggtgagag caaaatcgta gaactggaag aggagttacg 720 tgtcgttggc aataacctga aatccctgga agtttccgag gagaaagcta accagcgcga 780 agaagcgtat aaagaacaga tcaagactct gacgaacaaa ctgaaagcgg cagaggcacg 840 tgcggaattt gcagaacgta gcgtgcaaaa gctgcagaaa gaagtcgatc gcttggaaga 900 tgaactggtc aacgagaaag aaaagtacaa atcgattacc gatgaactcg accaaacgtt 960 cagcgaactt agtgggtatt aatcgagtaa gtcgagcacc accaccacca ccactgagat 1020 ccggctgcta acaaagcccg aaaggaagct gagttggctg ctgccaccgc tgagcaataa 1080 ctagcataac cccttggggc ctctaaacgg gtcttgaggg gttttttgct gaaaggagga 1140 actatatccg gattggcgaa tgggacgcgc cctgtagcgg cgcattaagc gcggcgggtg 1200 tggtggttac gcgcagcgtg accgctacac ttgccagcgc cctagcgccc gctcctttcg 1260 ctttcttccc ttcctttctc gccacgttcg ccggctttcc ccgtcaagct ctaaatcggg 1320 ggctcccttt agggttccga tttagtgctt tacggcacct cgaccccaaa aaacttgatt 1380 agggtgatgg ttcacgtagt gggccatcgc cctgatagac ggtttttcgc cctttgacgt 1440 tggagtccac gttctttaat agtggactct tgttccaaac tggaacaaca ctcaacccta 1500 tctcggtcta ttcttttgat ttataaggga ttttgccgat ttcggcctat tggttaaaaa 1560 atgagctgat ttaacaaaaa tttaacgcga attttaacaa aatattaacg tttacaattt 1620 caggtggcac ttttcgggga aatgtgcgcg gaacccctat ttgtttattt ttctaaatac 1680 attcaaatat gtatccgctc atgaattaat tcttagaaaa actcatcgag catcaaatga 1740 aactgcaatt tattcatatc aggattatca ataccatatt tttgaaaaag ccgtttctgt 1800 aatgaaggag aaaactcacc gaggcagttc cataggatgg caagatcctg gtatcggtct 1860 gcgattccga ctcgtccaac atcaatacaa cctattaatt tcccctcgtc aaaaataagg 1920 ttatcaagtg agaaatcacc atgagtgacg actgaatccg gtgagaatgg caaaagttta 1980 tgcatttctt tccagacttg ttcaacaggc cagccattac gctcgtcatc aaaatcactc 2040 gcatcaacca aaccgttatt cattcgtgat tgcgcctgag cgagacgaaa tacgcgatcg 2100 ctgttaaaag gacaattaca aacaggaatc gaatgcaacc ggcgcaggaa cactgccagc 2160 gcatcaacaa tattttcacc tgaatcagga tattcttcta atacctggaa tgctgttttc 2220 ccggggatcg cagtggtgag taaccatgca tcatcaggag tacggataaa atgcttgatg 2280 gtcggaagag gcataaattc cgtcagccag tttagtctga ccatctcatc tgtaacatca 2340 ttggcaacgc 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gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg gggcggagcc tatggaaaaa 3240 cgccagcaac gcggcctttt tacggttcct ggccttttgc tggccttttg ctcacatgtt 3300 ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt accgcctttg agtgagctga 3360 taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca gtgagcgagg aagcggaaga 3420 gcgcctgatg cggtattttc tccttacgca tctgtgcggt atttcacacc gcatatatgg 3480 tgcactctca gtacaatctg ctctgatgcc gcatagttaa gccagtatac actccgctat 3540 cgctacgtga ctgggtcatg gctgcgcccc gacacccgcc aacacccgct gacgcgccct 3600 gacgggcttg tctgctcccg gcatccgctt acagacaagc tgtgaccgtc tccgggagct 3660 gcatgtgtca gaggttttca ccgtcatcac cgaaacgcgc gaggcagctg cggtaaagct 3720 catcagcgtg gtcgtgaagc gattcacaga tgtctgcctg ttcatccgcg tccagctcgt 3780 tgagtttctc cagaagcgtt aatgtctggc ttctgataaa gcgggccatg ttaagggcgg 3840 ttttttcctg tttggtcact gatgcctccg tgtaaggggg atttctgttc atgggggtaa 3900 tgataccgat gaaacgagag aggatgctca cgatacgggt tactgatgat gaacatgccc 3960 ggttactgga acgttgtgag ggtaaacaac tggcggtatg gatgcggcgg gaccagagaa 4020 aaatcactca gggtcaatgc cagcgcttcg ttaatacaga tgtaggtgtt ccacagggta 4080 gccagcagca tcctgcgatg cagatccgga acataatggt gcagggcgct gacttccgcg 4140 tttccagact ttacgaaaca cggaaaccga agaccattca tgttgttgct caggtcgcag 4200 acgttttgca gcagcagtcg cttcacgttc gctcgcgtat cggtgattca ttctgctaac 4260 cagtaaggca accccgccag cctagccggg tcctcaacga caggagcacg atcatgcgca 4320 cccgtggggc cgccatgccg gcgataatgg cctgcttctc gccgaaacgt ttggtggcgg 4380 gaccagtgac gaaggcttga gcgagggcgt gcaagattcc gaataccgca agcgacaggc 4440 cgatcatcgt cgcgctccag cgaaagcggt cctcgccgaa aatgacccag agcgctgccg 4500 gcacctgtcc tacgagttgc atgataaaga agacagtcat aagtgcggcg acgatagtca 4560 tgccccgcgc ccaccggaag gagctgactg ggttgaaggc tctcaagggc atcggtcgag 4620 atcccggtgc ctaatgagtg agctaactta cattaattgc gttgcgctca ctgcccgctt 4680 tccagtcggg aaacctgtcg tgccagctgc attaatgaat cggccaacgc gcggggagag 4740 gcggtttgcg tattgggcgc cagggtggtt tttcttttca ccagtgagac gggcaacagc 4800 tgattgccct tcaccgcctg gccctgagag agttgcagca agcggtccac gctggtttgc 4860 cccagcaggc 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tgcaagattc cgaataccgc aagcgacagg ccgatcatcg 4080 tcgcgctcca gcgaaagcgg tcctcgccga aaatgaccca gagcgctgcc ggcacctgtc 4140 ctacgagttg catgataaag aagacagtca taagtgcggc gacgatagtc atgccccgcg 4200 cccaccggaa ggagctgact gggttgaagg ctctcaaggg catcggtcga gatcccggtg 4260 cctaatgagt gagctaactt acattaattg cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg 4320 gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga ggcggtttgc 4380 gtattgggcg ccagggtggt ttttcttttc accagtgaga cgggcaacag ctgattgccc 4440 ttcaccgcct ggccctgaga gagttgcagc aagcggtcca cgctggtttg ccccagcagg 4500 cgaaaatcct gtttgatggt ggttaacggc gggatataac atgagctgtc ttcggtatcg 4560 tcgtatccca ctaccgagat atccgcacca acgcgcagcc cggactcggt aatggcgcgc 4620 attgcgccca gcgccatctg atcgttggca accagcatcg cagtgggaac gatgccctca 4680 ttcagcattt gcatggtttg ttgaaaaccg gacatggcac tccagtcgcc ttcccgttcc 4740 gctatcggct gaatttgatt gcgagtgaga tatttatgcc agccagccag acgcagacgc 4800 gccgagacag aacttaatgg gcccgctaac agcgcgattt gctggtgacc caatgcgacc 4860 agatgctcca cgcccagtcg cgtaccgtct tcatgggaga aaataatact gttgatgggt 4920 gtctggtcag agacatcaag aaataacgcc ggaacattag tgcaggcagc ttccacagca 4980 atggcatcct ggtcatccag cggatagtta atgatcagcc cactgacgcg ttgcgcgaga 5040 agattgtgca ccgccgcttt acaggcttcg acgccgcttc gttctaccat cgacaccacc 5100 acgctggcac ccagttgatc ggcgcgagat ttaatcgccg cgacaatttg cgacggcgcg 5160 tgcagggcca gactggaggt ggcaacgcca atcagcaacg actgtttgcc cgccagttgt 5220 tgtgccacgc ggttgggaat gtaattcagc tccgccatcg ccgcttccac tttttcccgc 5280 gttttcgcag aaacgtggct ggcctggttc accacgcggg aaacggtctg ataagagaca 5340 ccggcatact ctgcgacatc gtataacgtt actggtttca cattcaccac cctgaattga 5400 ctctcttccg ggcgctatca tgccataccg cgaaaggttt tgcgccattc gatggtgtcc 5460 gggatctcga cgctctccct tatgcgactc ctgcattagg aagcagccca gtagtaggtt 5520 gaggccgttg agcaccgccg ccgcaaggaa tggtgcatgc aaggagatgg cgcccaacag 5580 tcccccggcc acggggcctg ccaccatacc cacgccgaaa caagcgctca tgagcccgaa 5640 gtggcgagcc cgatcttccc catcggtgat gtcggcgata taggcgccag caaccgcacc 5700 tgtggcgccg gtgatgccgg ccacgatgcg tccggcgtag aggatcgaga tctcgatccc 5760 gcgaaattaa tacgactcac tata 5784 <210> 16 <211> 5766 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleic acid sequence of pEt24d-derived vector pET24d-N-(PSc)-Tod p MLC2 comprising a sequence encoding for Tod p MLC2 (Light Chain 2) <400> 16 ggggaattgt gagcggataa caattcccct ctagaaataa ttttgtttaa ctttaagaag 60 gagatatacc atgagccatc atcatcatca tcatcatcat ttggaagtgc tgtttcaggg 120 tccatccatg gcggaagaag ctcctcgtcg cgtgaaactg tcacaacgcc agatgcagga 180 gctgaaagaa gcgtttacca tgattgatca ggaccgtgat gggttcattg gcatggaaga 240 tctgaaagac atgttcagct ctttaggacg ggtaccaccc gatgacgaac tgaatgccat 300 gctgaaagaa tgcccgggtc aactcaattt cacggctttt ctgaccttgt ttggggagaa 360 agtgagtggt actgacccgg aagatgcact tcgcaatgcc ttttcgatgt tcgacgaaga 420 tggtcagggc tttatcccgg aagattatct gaaagacttg ctggaaaata tgggcgataa 480 cttttccaaa gaggagatta agaacgtctg gaaagatgca ccgttaaaga acaaacagtt 540 caactacaac aagatggttg acatcaaagg caaagcggag gatgaagatt aatgatcgag 600 taagtcgagc accaccacca ccaccactga gatccggctg ctaacaaagc ccgaaaggaa 660 gctgagttgg ctgctgccac cgctgagcaa taactagcat aaccccttgg ggcctctaaa 720 cgggtcttga ggggtttttt gctgaaagga ggaactatat ccggattggc gaatgggacg 780 cgccctgtag cggcgcatta agcgcggcgg gtgtggtggt tacgcgcagc gtgaccgcta 840 cacttgccag cgccctagcg cccgctcctt tcgctttctt cccttccttt ctcgccacgt 900 tcgccggctt tccccgtcaa gctctaaatc gggggctccc tttagggttc cgatttagtg 960 ctttacggca cctcgacccc aaaaaacttg attagggtga tggttcacgt agtgggccat 1020 cgccctgata gacggttttt cgccctttga cgttggagtc cacgttcttt aatagtggac 1080 tcttgttcca aactggaaca acactcaacc ctatctcggt ctattctttt gatttataag 1140 ggattttgcc gatttcggcc tattggttaa aaaatgagct gatttaacaa aaatttaacg 1200 cgaattttaa caaaatatta acgtttacaa tttcaggtgg cacttttcgg ggaaatgtgc 1260 gcggaacccc tatttgttta tttttctaaa tacattcaaa tatgtatccg ctcatgaatt 1320 aattcttaga aaaactcatc gagcatcaaa tgaaactgca atttattcat atcaggatta 1380 tcaataccat atttttgaaa aagccgtttc tgtaatgaag gagaaaactc accgaggcag 1440 ttccatagga tggcaagatc ctggtatcgg tctgcgattc cgactcgtcc aacatcaata 1500 caacctatta atttcccctc gtcaaaaata aggttatcaa gtgagaaatc accatgagtg 1560 acgactgaat ccggtgagaa tggcaaaagt ttatgcattt ctttccagac ttgttcaaca 1620 ggccagccat tacgctcgtc atcaaaatca ctcgcatcaa ccaaaccgtt attcattcgt 1680 gattgcgcct gagcgagacg aaatacgcga tcgctgttaa aaggacaatt acaaacagga 1740 atcgaatgca accggcgcag gaacactgcc agcgcatcaa caatattttc acctgaatca 1800 ggatattctt ctaatacctg gaatgctgtt ttcccgggga tcgcagtggt gagtaaccat 1860 gcatcatcag gagtacggat aaaatgcttg atggtcggaa gaggcataaa ttccgtcagc 1920 cagtttagtc tgaccatctc atctgtaaca tcattggcaa cgctaccttt gccatgtttc 1980 agaaacaact ctggcgcatc gggcttccca tacaatcgat agattgtcgc acctgattgc 2040 ccgacattat cgcgagccca tttataccca tataaatcag catccatgtt ggaatttaat 2100 cgcggcctag agcaagacgt ttcccgttga atatggctca taacacccct tgtattactg 2160 tttatgtaag cagacagttt tattgttcat gaccaaaatc ccttaacgtg agttttcgtt 2220 ccactgagcg tcagaccccg tagaaaagat caaaggatct tcttgagatc ctttttttct 2280 gcgcgtaatc tgctgcttgc aaacaaaaaa accaccgcta ccagcggtgg tttgtttgcc 2340 ggatcaagag ctaccaactc tttttccgaa ggtaactggc ttcagcagag cgcagatacc 2400 aaatactgtc cttctagtgt agccgtagtt aggccaccac ttcaagaact ctgtagcacc 2460 gcctacatac ctcgctctgc taatcctgtt accagtggct gctgccagtg gcgataagtc 2520 gtgtcttacc gggttggact caagacgata gttaccggat aaggcgcagc ggtcgggctg 2580 aacggggggt tcgtgcacac agcccagctt ggagcgaacg acctacaccg aactgagata 2640 cctacagcgt gagctatgag aaagcgccac gcttcccgaa gggagaaagg cggacaggta 2700 tccggtaagc ggcagggtcg gaacaggaga gcgcacgagg gagcttccag ggggaaacgc 2760 ctggtatctt tatagtcctg tcgggtttcg ccacctctga cttgagcgtc gatttttgtg 2820 atgctcgtca ggggggcgga gcctatggaa aaacgccagc aacgcggcct ttttacggtt 2880 cctggccttt tgctggcctt ttgctcacat gttctttcct gcgttatccc ctgattctgt 2940 ggataaccgt attaccgcct ttgagtgagc tgataccgct cgccgcagcc gaacgaccga 3000 gcgcagcgag tcagtgagcg aggaagcgga agagcgcctg atgcggtatt ttctccttac 3060 gcatctgtgc ggtatttcac accgcatata tggtgcactc tcagtacaat ctgctctgat 3120 gccgcatagt taagccagta tacactccgc tatcgctacg tgactgggtc atggctgcgc 3180 cccgacaccc gccaacaccc gctgacgcgc cctgacgggc ttgtctgctc ccggcatccg 3240 cttacagaca agctgtgacc gtctccggga gctgcatgtg tcagaggttt tcaccgtcat 3300 caccgaaacg cgcgaggcag ctgcggtaaa gctcatcagc gtggtcgtga agcgattcac 3360 agatgtctgc ctgttcatcc gcgtccagct cgttgagttt ctccagaagc gttaatgtct 3420 ggcttctgat aaagcgggcc atgttaaggg cggttttttc ctgtttggtc actgatgcct 3480 ccgtgtaagg gggatttctg ttcatggggg taatgatacc gatgaaacga gagaggatgc 3540 tcacgatacg ggttactgat gatgaacatg cccggttact ggaacgttgt gagggtaaac 3600 aactggcggt atggatgcgg cgggaccaga gaaaaatcac tcagggtcaa tgccagcgct 3660 tcgttaatac agatgtaggt gttccacagg gtagccagca gcatcctgcg atgcagatcc 3720 ggaacataat ggtgcagggc gctgacttcc gcgtttccag actttacgaa acacggaaac 3780 cgaagaccat tcatgttgtt gctcaggtcg cagacgtttt gcagcagcag tcgcttcacg 3840 ttcgctcgcg tatcggtgat tcattctgct aaccagtaag gcaaccccgc cagcctagcc 3900 gggtcctcaa cgacaggagc acgatcatgc gcacccgtgg ggccgccatg ccggcgataa 3960 tggcctgctt ctcgccgaaa cgtttggtgg cgggaccagt gacgaaggct tgagcgaggg 4020 cgtgcaagat tccgaatacc gcaagcgaca ggccgatcat cgtcgcgctc cagcgaaagc 4080 ggtcctcgcc gaaaatgacc cagagcgctg ccggcacctg tcctacgagt tgcatgataa 4140 agaagacagt cataagtgcg gcgacgatag tcatgccccg cgcccaccgg aaggagctga 4200 ctgggttgaa ggctctcaag ggcatcggtc gagatcccgg tgcctaatga gtgagctaac 4260 ttacattaat tgcgttgcgc tcactgcccg ctttccagtc gggaaacctg tcgtgccagc 4320 tgcattaatg aatcggccaa cgcgcgggga gaggcggttt gcgtattggg cgccagggtg 4380 gtttttcttt tcaccagtga gacgggcaac agctgattgc ccttcaccgc ctggccctga 4440 gagagttgca gcaagcggtc cacgctggtt tgccccagca ggcgaaaatc ctgtttgatg 4500 gtggttaacg gcgggatata acatgagctg tcttcggtat cgtcgtatcc cactaccgag 4560 atatccgcac caacgcgcag cccggactcg gtaatggcgc gcattgcgcc cagcgccatc 4620 tgatcgttgg caaccagcat cgcagtggga acgatgccct cattcagcat ttgcatggtt 4680 tgttgaaaac cggacatggc actccagtcg ccttcccgtt ccgctatcgg ctgaatttga 4740 ttgcgagtga gatatttatg ccagccagcc agacgcagac gcgccgagac agaacttaat 4800 gggcccgcta acagcgcgat ttgctggtga cccaatgcga ccagatgctc cacgcccagt 4860 cgcgtaccgt cttcatggga gaaaataata ctgttgatgg gtgtctggtc agagacatca 4920 agaaataacg ccggaacatt agtgcaggca gcttccacag caatggcatc ctggtcatcc 4980 agcggatagt taatgatcag cccactgacg cgttgcgcga gaagattgtg caccgccgct 5040 ttacaggctt cgacgccgct tcgttctacc atcgacacca ccacgctggc acccagttga 5100 tcggcgcgag atttaatcgc cgcgacaatt tgcgacggcg cgtgcagggc cagactggag 5160 gtggcaacgc caatcagcaa cgactgtttg cccgccagtt gttgtgccac gcggttggga 5220 atgtaattca gctccgccat cgccgcttcc actttttccc gcgttttcgc agaaacgtgg 5280 ctggcctggt tcaccacgcg ggaaacggtc tgataagaga caccggcata ctctgcgaca 5340 tcgtataacg ttactggttt cacattcacc accctgaatt gactctcttc cgggcgctat 5400 catgccatac cgcgaaaggt tttgcgccat tcgatggtgt ccgggatctc gacgctctcc 5460 cttatgcgac tcctgcatta ggaagcagcc cagtagtagg ttgaggccgt tgagcaccgc 5520 cgccgcaagg aatggtgcat gcaaggagat ggcgcccaac agtcccccgg ccacggggcc 5580 tgccaccata cccacgccga aacaagcgct catgagcccg aagtggcgag cccgatcttc 5640 cccatcggtg atgtcggcga tataggcgcc agcaaccgca cctgtggcgc cggtgatgcc 5700 ggccacgatg cgtccggcgt agaggatcga gatctcgatc ccgcgaaatt aatacgactc 5760 actata 5766 <210> 17 <211> 191 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Polypeptide sequence encoding Lit v 3.0101 (Litopenaeus vannamei Myosin Light Chain 2), with a C-terminal His tag, as used in the Examples <400> 17 Met Ser Arg Lys Ser Gly Ser Arg Ser Ser Ser Lys Arg Ser Lys Lys 1 5 10 15 Ser Gly Gly Gly Ser Asn Val Phe Asp Met Phe Thr Gln Arg Gln Val 20 25 30 Ala Glu Phe Lys Glu Gly Phe Gln Leu Met Asp Arg Asp Lys Asp Gly 35 40 45 Val Ile Gly Lys Thr Asp Leu Arg Gly Thr Phe Asp Glu Ile Gly Arg 50 55 60 Ile Ala Thr Asp Gln Glu Leu Asp Glu Met Leu Ala Asp Ala Pro Ala 65 70 75 80 Pro Ile Asn Phe Thr Met Leu Leu Asn Met Phe Ala Glu Arg Gln Thr 85 90 95 Gly Glu Ser Asp Asp Asp Asp Val Val Ala Lys Ala Phe Leu Ala Phe 100 105 110 Ala Asp Glu Glu Gly Asn Ile Asp Cys Asp Thr Phe Arg His Ala Leu 115 120 125 Met Thr Trp Gly Asp Lys Phe Ser Ser Gln Glu Ala Asp Asp Ala Leu 130 135 140 Asp Gln Met Asp Ile Asp Asp Gly Gly Lys Ile Asp Val Gln Gly Val 145 150 155 160 Ile Gln Met Leu Thr Ala Gly Gly Gly Asp Asp Ala Ala Ala Glu Glu 165 170 175 Ala Leu Glu Val Leu Phe Gln Gly Pro His His His His His His 180 185 190 <210> 18 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope sequence of Tod MLC1 <400> 18 Gly Gly Thr Lys Lys Met Gly Glu 1 5 <210> 19 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope sequence of Tod MLC1 <400> 19 Ser Ser Lys Asp Thr Gly Thr Ala 1 5 <210> 20 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope sequence of Tod MLC1 <400> 20 Asp Arg Glu Gly Gln 1 5 <210> 21 <211> 47 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope sequence of Tod MLC1 <400> 21 Gly Gly Thr Lys Lys Met Gly Glu Lys Ala Tyr Lys Leu Glu Glu Ile 1 5 10 15 Leu Pro Ile Tyr Glu Glu Met Ser Ser Lys Asp Thr Gly Thr Ala Ala 20 25 30 Asp Glu Phe Met Glu Ala Phe Lys Thr Phe Asp Arg Glu Gly Gln 35 40 45 <210> 22 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope sequence of Tod MLC2 <400> 22 Gln Gly Pro Ser Met Ala 1 5 <210> 23 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope sequence of Tod MLC2 <400> 23 Lys Val Ser Gly Thr Asp Pro Glu 1 5 <210> 24 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope sequence of Tod MLC2 <400> 24 Asp Arg Glu Gly Gln 1 5 <210> 25 <211> 53 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope sequence of Tod MLC2 <400> 25 Gln Glu Leu Lys Glu Ala Phe Thr Met Ile Asp Gln Asp Arg Asp Gly 1 5 10 15 Phe Ile Gly Met Glu Asp Leu Lys Asp Met Phe Ser Ser Leu Gly Arg 20 25 30 Val Pro Pro Asp Asp Glu Leu Asn Ala Met Leu Lys Glu Cys Pro Gly 35 40 45 Gln Leu Asn Phe Thr 50 <210> 26 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope sequence of Tod TM <400> 26 Asp Glu Ser Glu Arg Gly Arg Lys Val Leu Glu Asn Arg Ser Gln Gly 1 5 10 15 Asp Glu Glu Arg 20 <210> 27 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope sequence of Tod TM <400> 27 Ile Asp Leu Leu Glu Lys Gln Leu Glu Glu Ala Lys Trp Ile Ala Glu 1 5 10 15 Asp Ala Asp Arg 20 <210> 28 <211> 24 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope sequence of Tod TM <400> 28 Lys Phe Asp Glu Ala Ala Arg Lys Leu Ala Ile Thr Glu Val Asp Leu 1 5 10 15 Glu Arg Ala Glu Ala Arg Leu Glu 20 <210> 29 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope sequence of Tod TM <400> 29 Lys Glu Val Asp Arg Leu Glu Asp Glu Leu Leu Ala Glu Lys Glu Arg 1 5 10 15 Tyr Lys Thr Ile Ser Asp Glu Leu Asp Gln Thr Phe Ala Glu Leu Ala 20 25 30 Gly Tyr <210> 30 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> epitope sequence 1 of MLC2 <400> 30 Ala Leu Arg Asn Ala Phe Ser Met Phe Asp 1 5 10 <210> 31 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> shorter epitope sequence 1 of MLC2 <400> 31 Asn Ala Phe Ser Met Phe 1 5 <210> 32 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 1 for identification of epitope sequence 1 of MLC2 <400> 32 Gly Thr Asp Pro Glu Asp Ala Leu Arg Asn Ala Phe Ser Met Phe 1 5 10 15 <210> 33 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 2 for identification of epitope sequence 1 of MLC2 <400> 33 Thr Asp Pro Glu Asp Ala Leu Arg Asn Ala Phe Ser Met Phe Asp 1 5 10 15 <210> 34 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 3 for identification of epitope sequence 1 of MLC2 <400> 34 Asp Pro Glu Asp Ala Leu Arg Asn Ala Phe Ser Met Phe Asp Glu 1 5 10 15 <210> 35 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 4 for identification of epitope sequence 1 of MLC2 <400> 35 Pro Glu Asp Ala Leu Arg Asn Ala Phe Ser Met Phe Asp Glu Asp 1 5 10 15 <210> 36 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 5 for identification of epitope sequence 1 of MLC2 <400> 36 Glu Asp Ala Leu Arg Asn Ala Phe Ser Met Phe Asp Glu Asp Gly 1 5 10 15 <210> 37 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 6 for identification of epitope sequence 1 of MLC2 <400> 37 Asp Ala Leu Arg Asn Ala Phe Ser Met Phe Asp Glu Asp Gly Gln 1 5 10 15 <210> 38 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 7 for identification of epitope sequence 1 of MLC2 <400> 38 Ala Leu Arg Asn Ala Phe Ser Met Phe Asp Glu Asp Gly Gln Gly 1 5 10 15 <210> 39 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 8 for identification of epitope sequence 1 of MLC2 <400> 39 Leu Arg Asn Ala Phe Ser Met Phe Asp Glu Asp Gly Gln Gly Phe 1 5 10 15 <210> 40 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 9 for identification of epitope sequence 1 of MLC2 <400> 40 Arg Asn Ala Phe Ser Met Phe Asp Glu Asp Gly Gln Gly Phe Ile 1 5 10 15 <210> 41 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 20 for identification of epitope sequence 1 of MLC2 <400> 41 Asn Ala Phe Ser Met Phe Asp Glu Asp Gly Gln Gly Phe Ile Pro 1 5 10 15 <210> 42 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> epitope sequence 2 of MLC2 <400> 42 Phe Ile Pro Glu Asp Tyr Leu Lys Asp Leu 1 5 10 <210> 43 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> shorter epitope sequence 2 of MLC2 <400> 43 Ile Pro Glu Asp Tyr Leu Lys Asp Leu 1 5 <210> 44 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 1 for identification of epitope sequence 2 of MLC2 <400> 44 Glu Asp Gly Gln Gly Phe Ile Pro Glu Asp Tyr Leu Lys Asp Leu 1 5 10 15 <210> 45 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 2 for identification of epitope sequence 2 of MLC2 <400> 45 Asp Gly Gln Gly Phe Ile Pro Glu Asp Tyr Leu Lys Asp Leu Leu 1 5 10 15 <210> 46 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 3 for identification of epitope sequence 2 of MLC2 <400> 46 Gly Gln Gly Phe Ile Pro Glu Asp Tyr Leu Lys Asp Leu Leu Glu 1 5 10 15 <210> 47 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 4 for identification of epitope sequence 2 of MLC2 <400> 47 Gln Gly Phe Ile Pro Glu Asp Tyr Leu Lys Asp Leu Leu Glu Asn 1 5 10 15 <210> 48 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 5 for identification of epitope sequence 2 of MLC2 <400> 48 Gly Phe Ile Pro Glu Asp Tyr Leu Lys Asp Leu Leu Glu Asn Met 1 5 10 15 <210> 49 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 6 for identification of epitope sequence 2 of MLC2 <400> 49 Phe Ile Pro Glu Asp Tyr Leu Lys Asp Leu Leu Glu Asn Met Gly 1 5 10 15 <210> 50 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 7 for identification of epitope sequence 2 of MLC2 <400> 50 Ile Pro Glu Asp Tyr Leu Lys Asp Leu Leu Glu Asn Met Gly Asp 1 5 10 15 <210> 51 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> epitope sequence 3 of MLC2 <400> 51 Phe Ser Lys Glu Glu Ile Lys Asn Val Trp Lys Asp 1 5 10 <210> 52 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 1 for identification of epitope sequence 3 of MLC2 <400> 52 Gly Asp Asn Phe Ser Lys Glu Glu Ile Lys Asn Val Trp Lys Asp 1 5 10 15 <210> 53 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 1 for identification of epitope sequence 3 of MLC2 <400> 53 Asp Asn Phe Ser Lys Glu Glu Ile Lys Asn Val Trp Lys Asp Ala 1 5 10 15 <210> 54 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 2 for identification of epitope sequence 3 of MLC2 <400> 54 Asn Phe Ser Lys Glu Glu Ile Lys Asn Val Trp Lys Asp Ala Pro 1 5 10 15 <210> 55 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide 3 for identification of epitope sequence 3 of MLC2 <400> 55 Phe Ser Lys Glu Glu Ile Lys Asn Val Trp Lys Asp Ala Pro Leu 1 5 10 15 <210> 56 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 8 <400> 56 Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ala Glu Glu Ala Pro Arg Arg Val 1 5 10 15 <210> 57 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 9 <400> 57 Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ala Glu Glu Ala Pro Arg Arg Val Lys 1 5 10 15 <210> 58 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 10 <400> 58 Gly Ser Gly Ser Gly Ala Glu Glu Ala Pro Arg Arg Val Lys Leu 1 5 10 15 <210> 59 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 11 <400> 59 Ser Gly Ser Gly Ala Glu Glu Ala Pro Arg Arg Val Lys Leu Ser 1 5 10 15 <210> 60 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 12 <400> 60 Gly Ser Gly Ala Glu Glu Ala Pro Arg Arg Val Lys Leu Ser Gln 1 5 10 15 <210> 61 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 13 <400> 61 Ser Gly Ala Glu Glu Ala Pro Arg Arg Val Lys Leu Ser Gln Arg 1 5 10 15 <210> 62 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 14 <400> 62 Gly Ala Glu Glu Ala Pro Arg Arg Val Lys Leu Ser Gln Arg Gln 1 5 10 15 <210> 63 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 15 <400> 63 Ala Glu Glu Ala Pro Arg Arg Val Lys Leu Ser Gln Arg Gln Met 1 5 10 15 <210> 64 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 16 <400> 64 Glu Glu Ala Pro Arg Arg Val Lys Leu Ser Gln Arg Gln Met Gln 1 5 10 15 <210> 65 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 17 <400> 65 Glu Ala Pro Arg Arg Val Lys Leu Ser Gln Arg Gln Met Gln Glu 1 5 10 15 <210> 66 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 18 <400> 66 Ala Pro Arg Arg Val Lys Leu Ser Gln Arg Gln Met Gln Glu Leu 1 5 10 15 <210> 67 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 19 <400> 67 Pro Arg Arg Val Lys Leu Ser Gln Arg Gln Met Gln Glu Leu Lys 1 5 10 15 <210> 68 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 20 <400> 68 Arg Arg 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microarray peptide NO 32 <400> 80 Leu Lys Glu Ala Phe Thr Met Ile Asp Gln Asp Arg Asp Gly Phe 1 5 10 15 <210> 81 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 33 <400> 81 Lys Glu Ala Phe Thr Met Ile Asp Gln Asp Arg Asp Gly Phe Ile 1 5 10 15 <210> 82 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 34 <400> 82 Glu Ala Phe Thr Met Ile Asp Gln Asp Arg Asp Gly Phe Ile Gly 1 5 10 15 <210> 83 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 35 <400> 83 Ala Phe Thr Met Ile Asp Gln Asp Arg Asp Gly Phe Ile Gly Met 1 5 10 15 <210> 84 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 36 <400> 84 Phe Thr Met Ile Asp Gln Asp Arg Asp Gly Phe Ile Gly Met Glu 1 5 10 15 <210> 85 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 37 <400> 85 Thr Met Ile Asp Gln Asp Arg Asp Gly Phe Ile Gly Met Glu Asp 1 5 10 15 <210> 86 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 38 <400> 86 Met Ile Asp Gln Asp Arg Asp Gly Phe Ile Gly Met Glu Asp Leu 1 5 10 15 <210> 87 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 39 <400> 87 Ile Asp Gln Asp Arg Asp Gly Phe Ile Gly Met Glu Asp Leu Lys 1 5 10 15 <210> 88 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 40 <400> 88 Asp Gln Asp Arg Asp Gly Phe Ile Gly Met Glu Asp Leu Lys Asp 1 5 10 15 <210> 89 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 41 <400> 89 Gln Asp Arg Asp Gly Phe Ile Gly Met Glu Asp Leu Lys Asp Met 1 5 10 15 <210> 90 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 42 <400> 90 Asp Arg Asp Gly Phe Ile Gly Met Glu Asp Leu Lys Asp Met Phe 1 5 10 15 <210> 91 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 43 <400> 91 Arg Asp Gly Phe Ile Gly Met Glu Asp Leu Lys Asp Met Phe Ser 1 5 10 15 <210> 92 <211> 15 <212> 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peptide NO 67 <400> 115 Glu Leu Asn Ala Met Leu Lys Glu Cys Pro Gly Gln Leu Asn Phe 1 5 10 15 <210> 116 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 68 <400> 116 Leu Asn Ala Met Leu Lys Glu Cys Pro Gly Gln Leu Asn Phe Thr 1 5 10 15 <210> 117 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 69 <400> 117 Asn Ala Met Leu Lys Glu Cys Pro Gly Gln Leu Asn Phe Thr Ala 1 5 10 15 <210> 118 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 70 <400> 118 Ala Met Leu Lys Glu Cys Pro Gly Gln Leu Asn Phe Thr Ala Phe 1 5 10 15 <210> 119 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 71 <400> 119 Met Leu Lys Glu Cys Pro Gly Gln Leu Asn Phe Thr Ala Phe Leu 1 5 10 15 <210> 120 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 72 <400> 120 Leu Lys Glu Cys Pro Gly Gln Leu Asn Phe Thr Ala Phe Leu Thr 1 5 10 15 <210> 121 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 73 <400> 121 Lys Glu Cys Pro Gly Gln Leu Asn Phe Thr Ala Phe Leu Thr Leu 1 5 10 15 <210> 122 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 74 <400> 122 Glu Cys Pro Gly Gln Leu Asn Phe Thr Ala Phe Leu Thr Leu Phe 1 5 10 15 <210> 123 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 75 <400> 123 Cys Pro Gly Gln Leu Asn Phe Thr Ala Phe Leu Thr Leu Phe Gly 1 5 10 15 <210> 124 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 76 <400> 124 Pro Gly Gln Leu Asn Phe Thr Ala Phe Leu Thr Leu Phe Gly Glu 1 5 10 15 <210> 125 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 77 <400> 125 Gly Gln Leu Asn Phe Thr Ala Phe Leu Thr Leu Phe Gly Glu Lys 1 5 10 15 <210> 126 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 78 <400> 126 Gln Leu Asn Phe Thr Ala Phe Leu Thr Leu Phe Gly Glu Lys Val 1 5 10 15 <210> 127 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Sequence <220> <223> microarray peptide NO 102 <400> 150 Arg Asn Ala Phe Ser Met Phe Asp Glu Asp Gly Gln Gly Phe Ile 1 5 10 15 <210> 151 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 103 <400> 151 Asn Ala Phe Ser Met Phe Asp Glu Asp Gly Gln Gly Phe Ile Pro 1 5 10 15 <210> 152 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 104 <400> 152 Ala Phe Ser Met Phe Asp Glu Asp Gly Gln Gly Phe Ile Pro Glu 1 5 10 15 <210> 153 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 105 <400> 153 Phe Ser Met Phe Asp Glu Asp Gly Gln Gly Phe Ile Pro Glu Asp 1 5 10 15 <210> 154 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 106 <400> 154 Ser Met Phe Asp Glu Asp Gly Gln Gly Phe Ile Pro Glu Asp Tyr 1 5 10 15 <210> 155 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 107 <400> 155 Met Phe Asp Glu Asp Gly Gln Gly Phe Ile Pro Glu Asp Tyr Leu 1 5 10 15 <210> 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peptide NO 148 <400> 196 Asn Lys Gln Phe Asn Tyr Asn Lys Met Val Asp Ile Lys Gly Lys 1 5 10 15 <210> 197 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 149 <400> 197 Lys Gln Phe Asn Tyr Asn Lys Met Val Asp Ile Lys Gly Lys Ala 1 5 10 15 <210> 198 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 150 <400> 198 Gln Phe Asn Tyr Asn Lys Met Val Asp Ile Lys Gly Lys Ala Glu 1 5 10 15 <210> 199 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 151 <400> 199 Phe Asn Tyr Asn Lys Met Val Asp Ile Lys Gly Lys Ala Glu Asp 1 5 10 15 <210> 200 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 152 <400> 200 Asn Tyr Asn Lys Met Val Asp Ile Lys Gly Lys Ala Glu Asp Glu 1 5 10 15 <210> 201 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 153 <400> 201 Tyr Asn Lys Met Val Asp Ile Lys Gly Lys Ala Glu Asp Glu Asp 1 5 10 15 <210> 202 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 154 <400> 202 Asn Lys Met Val Asp Ile Lys Gly Lys Ala Glu Asp Glu Asp Gly 1 5 10 15 <210> 203 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 155 <400> 203 Lys Met Val Asp Ile Lys Gly Lys Ala Glu Asp Glu Asp Gly Ser 1 5 10 15 <210> 204 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 156 <400> 204 Met Val Asp Ile Lys Gly Lys Ala Glu Asp Glu Asp Gly Ser Gly 1 5 10 15 <210> 205 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 157 <400> 205 Val Asp Ile Lys Gly Lys Ala Glu Asp Glu Asp Gly Ser Gly Ser 1 5 10 15 <210> 206 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 158 <400> 206 Asp Ile Lys Gly Lys Ala Glu Asp Glu Asp Gly Ser Gly Ser Gly 1 5 10 15 <210> 207 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 159 <400> 207 Ile Lys Gly Lys Ala Glu Asp Glu Asp Gly Ser Gly Ser Gly Ser 1 5 10 15 <210> 208 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> microarray peptide NO 160 <400> 208 Lys Gly Lys Ala Glu Asp Glu Asp Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly 1 5 10 15

Claims (16)

  1. 대상체로부터의 시료에서 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2 또는 이의 변이체를 포함하는 군으로부터 선택되는 폴리펩타이드에 항체를 특이적으로 포획하기 위한 수단을 포함하는 진단학적으로 유용한 담체.
  2. 제1항에 있어서, 상기 담체는 비드, 테스트 스트립, 마이크로타이터 플레이트, 마이크로어레이, 블롯, 바람직하게는 웨스턴 블롯, 라인 블롯, 도트 블롯, 유리 표면, 슬라이드, 바이오칩 및 막을 포함하는 군에서 선택되고, 가장 바람직하게는 마이크로타이터 플레이트 또는 라인 블롯인 것을 특징으로 하는 담체.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 담체는 항체를 오징어 TM에 포획하기 위한 수단을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 담체.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 진단학적으로 유용한 담체를 포함하는 키트로서, 상기 키트는 바람직하게는 교정기, 바람직하게는 일련의 교정기, 세척 완충제 및 IgE 항체를 검출하기 위한 수단, 바람직하게는 표지된 2차 항체를 포함하는 군으로부터 하나 이상, 바람직하게는 모두를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 키트.
  5. 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2에 대한 항체의 존재 또는 부존재를 대상체로부터의 시료에서 검출하는 단계를 포함하는 방법.
  6. 제5항에 있어서, 오징어 TM에 대한 항체의 존재 또는 부존재를 시료에서 검출하는 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  7. 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2 또는 이의 변이체, 바람직하게는 아쥬반트를 추가적으로 포함하는 약학적 조성물.
  8. 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2 또는 이의 변이체를 포함하는 폴리펩타이드로서, 상기 폴리펩타이드는 단리되거나 고정화된 폴리펩타이드.
  9. 제8항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 상기 폴리펩타이드에 특이적으로 결합하는 항체, 바람직하게는 IgE 클래스 항체와 복합체를 이룬 것을 특징으로 하는 폴리펩타이드.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 담체, 키트, 방법, 조성물 또는 폴리펩타이드로서, 상기 폴리펩타이드는 진핵 세포에서 발현된 폴리펩타이드인 담체, 키트, 방법, 조성물 또는 폴리펩타이드.
  11. 알레르기 진단을 위한 제8항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩타이드, 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 담체 또는 제4항에 따른 키트의 용도.
  12. 진단 키트, 바람직하게는 알레르기 진단용 진단 키트의 제조를 위한 제8항 내지 제11항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩타이드, 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 담체, 또는 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2에 대한 환자의 시료로부터의 IgE 항체에 특이적으로 결합하는 폴리펩타이드의 용도
  13. 제11항에 있어서, 상기 알레르기가 조개류 알레르기, 바람직하게는 오징어 알레르기인 것을 특징으로 하는 용도.
  14. 제12항 또는 제13항에 있어서, 상기 진단이 조개류 알레르기의 감별 진단이고, 바람직하게는 새우와 오징어 알레르기와 구별되는 용도.
  15. 폴리펩타이드를 포함하는 의료 또는 진단 장치를 항체, 바람직하게는 폴리펩타이드에 대해 공지된 농도, 바람직하게는 폴리펩타이드에 대한 IgE 항체를 포함하는 용액과 접촉시키는 단계를 포함하고, 상기 폴리펩타이드는 오징어 MLC1 및 오징어 MLC2 또는 이의 변이체를 포함하는 군으로부터 선택되는 방법.
  16. 오징어 MLC1 또는 오징어 MLC2 또는 이의 변이체를 포함하는 폴리펩타이드에 특이적으로 결합하는 항체, 바람직하게는 IgE 클래스 항체로서, 상기 항체는 바람직하게는 분리되는 항체.
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