KR20200128014A - 입양 세포 요법 및 체크포인트 억제제를 이용한 병용 요법 - Google Patents

입양 세포 요법 및 체크포인트 억제제를 이용한 병용 요법 Download PDF

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스탠리 알. 프랭클
젠스 하스칼
올리버 맨즈케
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Abstract

질병 및 병태, 예컨대 특정 B 세포 악성 종양이 있는 대상체의 치료를 위해 면역 요법, 예컨대 입양 세포 요법, 예를 들어, T 세포 요법 및 체크포인트 억제제, 예컨대 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 사용을 포함하는 병용 요법의 방법, 조성물, 용도 및 제조 물품 및 관련 방법, 조성물, 용도 및 제조 물품이 제공된다. 세포는 일반적으로 키메라 항원 수용체(CAR)와 같은 재조합 수용체를 발현한다. 일부 구현예에서, 질병 또는 병태는 재발성 또는 불응성 NHL 또는 특정 NHL 하위 유형과 같은 비호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma, NHL)이다.

Description

입양 세포 요법 및 체크포인트 억제제를 이용한 병용 요법
본 개시는 일부 측면에서 질병 및 병태, 예컨대 특정 B 세포 악성 종양이 있는 대상체의 치료를 위해 면역 요법, 예컨대 입양 세포 요법, 예를 들어 T 세포 요법 및 체크포인트 억제제, 예컨대 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 사용을 포함하는 병용 요법 및 관련 방법, 조성물, 용도 및 제조 물품에 관한 것이다. 세포는 일반적으로 키메라 항원 수용체(chimeric antigen receptor, CAR)와 같은 재조합 수용체를 발현한다. 일부 구현예에서, 질병 또는 병태는 재발성 또는 불응성 NHL 또는 특정 NHL 하위 유형과 같은 비호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma, NHL)이다.
면역 요법, 예를 들어 입양 요법을 위해 조작된 T 세포를 투여하기 위한 다양한 전략이 이용 가능하다. 예를 들어, 유전자 조작 항원 수용체, 예컨대 CAR을 발현하는 T 세포를 조작하고 상기 세포를 함유하는 조성물을 대상체에 투여하기 위한 전략이 이용 가능하다. 세포의 효능 개선, 예를 들어 대상체에 투여 시 세포의 지속성, 활성 및/또는 증식을 개선하기 위한 개선된 전략이 필요하다. 상기 요구를 충족시키는 방법, 조성물, 키트 및 시스템이 제공된다.
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2018년 1월 31일에 출원된 미국 가출원 제62/624,802호(제목 "입양 세포 요법 및 항-PD-L1 항체를 이용한 병용 요법”)의 우선권을 주장하고, 이의 내용은 그 전문이 참조로 포함된다.
서열 목록의 참조 포함
본 출원은 전자 형식의 서열 목록과 함께 출원된다. 서열 목록은 2019년 1월 31일에 생성된 735042015640SeqList.txt라는 제목의 파일로 제공되며 이의 크기는 40 킬로바이트이다. 서열 목록의 전자 형식의 정보는 그 전체가 참고로 포함된다.
본 발명은 세포 요법, 예컨대 T 세포 요법을 수반한 면역 요법의 투여 및 후속적으로 체크포인트 억제제, 예컨대 면역 체크포인트 경로의 PD-1/PD-L1 축 억제제, 예컨대 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 투여하는 것을 수반한 병용 요법을 포함한 방법, 조성물, 용도, 제조 물품을 제공한다. 일부 측면에서, B 세포 악성 종양은 재발성 또는 불응성 NHL 또는 특정 NHL 하위 유형과 같은 비호지킨 림프종(NHL)이다. 일부 측면에서, 제공된 방법, 용도 및 제조 물품은 B 세포 악성 종양 세포와 관련되거나 이에 의해 발현되는 항원 또는 B 세포 상에 발현되는 항원에 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하는 CAR 발현 T 세포와 같은 T 세포 요법의 투여를 포함한다. 일부 측면에서, 항원은 CD19이다. 일부 측면에서, 제공된 방법, 용도 및 제조 물품은 2회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제의 투여를 포함하는, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제의 투여를 수반한다. 일부 측면에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 예를 들어 항-PD-L1 항체 또는 이의 단편과 같은 특정 체크포인트 억제제 투여를 위해 (약) 400 mg 내지 (약) 2000 mg, 예컨대 (약) 750 mg 내지 (약) 2000 mg 또는 (약) 400 mg 내지 (약) 600 mg의 총 투여량 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제의 개별 분량의 더 많은 횟수를 투여함으로써 수행된다. 일부 구현예에서, 첫번째 28일 주기의 항-PD-L1 항체 또는 이의 단편과 같은 체크포인트 억제제 투여는 세포 요법의 투여 개시 22일과 36일 사이의 시기에 개시된다.
본 발명은 (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(여기서 상기 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하고, 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); 및 (b) 이어서 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제를 대상체에 투여하는 단계(여기서 체크포인트 억제제의 총 투여량이 2회 이상의 투여 주기 각각에서 투여되고, 상기 2회 이상의 투여 주기 중 첫번째 주기의 체크포인트 억제제 총 투여량은 두번째 및/또는 후속 투여 주기에서 투여되는 총 투여량과 동일하거나 그 미만이고; 상기 첫번째 투여 주기의 과정을 통해 1 이상의 개별 분량으로 투여되며, 여기서 상기 개별 분량의 횟수는 두번째 및/또는 후속 투여 주기에서 투여되는 개별 분량의 횟수보다 더 많음);를 포함하는 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제의 투여를 포함하는 치료 방법을 제공하고, 상기 대상체에 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법이 투여되었고, 여기서 체크포인트 억제제의 총 투여량이 2회 이상의 투여 주기 각각에서 투여되고, 상기 2회 이상의 투여 주기 중 첫번째 주기의 체크포인트 억제제 총 투여량은 두번째 및/또는 후속 투여 주기에서 투여되는 총 투여량과 동일하거나 그 미만이고; 상기 첫번째 투여 주기의 과정을 통해 1 이상의 개별 분량으로 투여되며, 여기서 상기 개별 분량의 횟수는 두번째 및/또는 후속 투여 주기에서 투여되는 개별 분량의 횟수보다 더 많다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 투여 주기는 21일 주기이다. 상기 구현예 중 일부에서, 투여 주기는 28일 주기이다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 2회 이상의 투여 주기 중 첫번째 주기의 총 투여량은 2회 이상의 투여 주기 중 두번째 주기의 총 투여량과 동일하다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 2회 이상의 투여 주기 중 첫번째 주기는 2, 3, 4 이상의 개별 분량을 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 투여 주기는 28일 주기이며, 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기의 개별 분량은 각각 주 1회(Q1W) 4 분량, 2주 연속 각각 Q1W 분량으로 2 분량 또는 2주 연속 각각 Q1W 분량으로 2 분량 후 2주 후 1회(Q2W) 1 분량으로 투여된다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 상기 2회 이상의 투여 주기 각각은 체크포인트 억제제 (약) 400 mg 내지 (약) 2000 mg의 총 투여량을 독립적으로 투여하는 것을 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 체크포인트 억제제는 PD-L1, PD-L2, PD-1 및 CTLA-4 중에서 선택된 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 체크포인트 경로는 PD-1/PD-L1이고 체크포인트 억제제는 항-PD-1 항체이다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 체크포인트 억제제는 니볼루맙(nivolumab), 펨브롤리주맙(pembrolizumab) 또는 세미플리맙(cemiplimab)이다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 상기 2회 이상의 투여 주기 각각은 (약) 400 mg 내지 (약) 600 mg, 선택적으로 (약) 480 mg의 총 투여량을 독립적으로 투여하는 것을 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 체크포인트 경로는 PD-1/PD-L1이고 체크포인트 억제제는 항-PD-L1 항체이다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 상기 2회 이상의 투여 주기 각각은 750 mg 내지 2000 mg, 선택적으로 (약) 1500 mg의 총 투여량을 독립적으로 투여하는 것을 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 첫번째 투여 주기의 시작은 (i) 피크 또는 최대 수준의 T 세포 요법 세포가 대상체의 혈액에서 검출 가능하고/거나; (ii) 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 세포 수가 검출 가능하지 않거나 감소, 선택적으로 T 세포 요법 투여 후 선행 시점에 비해 감소되고/거나; (iii) 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 세포 수가 T 세포 요법의 투여 개시 후 대상체의 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상 감소되고/거나; (iv) 피크 또는 최대 수준의 T 세포 요법 세포가 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만이고/거나; (v) 대상체가 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 질병 진행을 나타내고/거나 재발하였고/거나; (iv) 대상체에서 체크포인트 억제제의 투여 개시 전 및 세포 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해 종양 부담이 증가한; 후 1 내지 3일 또는 1 내지 3일 후, 선택적으로 1 내지 3일 직후 또는 1 내지 3일 이내의 시기에 개시된다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 첫번째 투여 주기의 시작은 T 세포 요법의 투여 개시 후 29일, 36일, 43일 또는 50일에 또는 29일, 36일, 43일 또는 50일 이내에 개시된다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 첫번째 투여 주기의 시작은 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 22 일 내지 36 일에 개시된다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 첫번째 투여 주기의 시작은 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 29 일에 개시된다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 첫번째 투여 주기의 시작은 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 43 일에 개시된다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 첫번째 투여 주기의 시작 시기에, 대상체는 T 세포 요법의 투여 후 심각한 독성을 나타내지 않는다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 심각한 독성은 심각한 사이토카인 방출 증후군(cytokine release syndrome, CRS), 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 CRS이고/거나; 심각한 독성은 심각한 신경 독성, 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 신경 독성이다.
본 발명은 (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(여기서 상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하고, 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양 세포에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); 및 (b) 이어서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 대상체에 투여하는 단계(상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 여기서, 상기 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 28일 주기 중 연속 2주 동안 각각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 개별 분량 각각은 (약) 375 mg 양 이후 (약) 750 mg의 양으로 28일 주기 중 2주 후 1회(Q2W) 1 분량이고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양에 대해 매 4주(Q4W) 1 분량으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함);를 포함하는 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 치료 방법을 제공하고, 상기 대상체에 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법이 투여되었고, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하며, 상기 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 28일 주기 중 연속 2주 동안 각각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 개별 분량 각각은 (약) 375 mg 양 이후 (약) 750 mg의 양으로 28일 주기 중 2주 후 1회(Q2W) 1 분량이고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양에 대해 매 4주(Q4W) 1 분량으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다.
본 발명은 (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(여기서 상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하고, 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); 및 (b) 이어서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 대상체에 투여하는 단계(여기서 상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 28일 주기 동안 각각 주 1회(Q1W) 4 개별 분량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 4 분량은 각각 독립적으로 (약) 225 mg의 2 연속 Q1W 분량, 이후 각각 독립적으로 (약) 375 mg의 2 연속 Q1W 분량이고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기는 28일 주기 중 각각 매 2주(Q2W) 2 분량으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 여기서 각각의 Q2W 투여는 각각 독립적으로 (약) 750 mg의 양임);를 포함하는 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여를 포함하는 치료 방법을 제공하고, 상기 대상체에 B 세포 악성 종양에서 발현되는 표적 항원에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하였고, 여기서 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 28일 주기 동안 각각 주 1회(Q1W) 4 개별 분량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 4 개별 분량은 각각 독립적으로 (약) 225 mg의 2 연속 Q1W 분량 후, 각각 독립적으로 (약) 375 mg의 2 연속 Q1W 분량을 포함하고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기는 두번째 및/또는 후속 28일 주기 동안 매 2주(Q2W) 2 개별 분량으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 여기서 각각의 분량은 독립적으로 (약) 750 mg의 양이다.
본 발명은 (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(여기서 상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하고, 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현되는 표적 항원에 특이적으로 결합); 및 (b) 이어서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 대상체에 투여하는 단계(여기서 상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 각각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 2 분량 각각은 독립적으로 (약) 375 mg 양을 포함하고, 선택적으로 상기 2 분량은 연속적인 Q1W 분량이고, 선택적으로 상기 2 분량은 28일 주기에서 15일 및 22일에 투여되고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양으로 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서 1 분량에 대해 Q4W로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함);를 포함하는 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여를 포함하는 치료 방법을 제공하고, 상기 대상체에 B 세포 악성 종양에서 발현되는 표적 항원에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하였고, 여기서 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 각각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 2 분량 각각은 독립적으로 (약) 375 mg 양을 포함하고, 선택적으로 상기 2 분량은 연속적인 Q1W 분량이고, 선택적으로 상기 2 분량은 28일 주기에서 15일 및 22일에 투여되고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양으로 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서 1 분량에 대해 Q4W로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다.
본 발명은 (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(여기서 상기 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하고, 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); 및 (b) 이어서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 대상체에 투여하는 단계(여기서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고; 상기 2회 이상의 28일 주기 중 1회 이상에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 28일 주기 과정을 통해 1 이상의 개별 분량의 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행됨);를 포함하는 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여를 포함하는 치료 방법을 제공하고, 상기 대상체에 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하였고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하고, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고; 상기 2회 이상의 28일 주기 중 1회 이상에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 28일 주기 과정을 통해 1 이상의 개별 분량의 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행된다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서의 투여에 비해 항체 또는 단편의 개별 분량을 더 많이 투여함으로써 수행된다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 각각의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 750 mg 내지 (약) 1500 mg이다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 28일 주기 중 1회 이상에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 750 mg이다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 28일 주기 중 1회 이상에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1200 mg이다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 28일 주기 중 1회 이상에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg이다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 각각의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 1500 mg이다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 상기 2회 이상 중 2회 이상 및 선택적으로 상기 2회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 동일한 총 투여량이다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 상기 2회 이상의 28일 주기 중 각각에서 상이하거나 상기 2회 이상의 28일 주기 중 2회 이상에서 상이하다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 상기 2회 이상의 28일 주기의 두번째 및/또는 후속 주기보다 더 적다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서 총 투여량 투여는 2, 3 또는 4 개별 분량의 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편 투여를 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서 총 투여량 투여는 (i) 28일 주기 내, 선택적으로 28일 주기의 15일과 22일에 각각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량; (ii) 28일 주기 동안, 선택적으로 28일 주기의 1, 8, 15 및 22일에 각각 주 1회(Q1W) 4 개별 분량; (iii) 28일 주기 중 연속 2주 동안, 선택적으로 상기 주기의 1일과 8일에 각각 Q1W로 2 개별 분량 후, 28일 주기, 선택적으로 상기 주기의 15일에 2주 후 1회(Q2W) 1 분량; 또는 (iv) 28일 주기 동안, 선택적으로 28일 주기의 1일과 15일에 각각 매 2주(Q2W) 2 개별 분량; 중 선택된 투약 스케쥴에 따라 개별 분량으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 첫번째 28일 주기에 투여되는 각각의 Q1W 분량은 독립적으로 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 18% 내지 (약) 32%, 선택적으로 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 25%이고/거나; 첫번째 28일 주기에 투여되는 각각의 Q2W 분량은 독립적으로 첫번째 28일 주기에서의 총 투여량의 (약) 40% 내지 (약) 62.5%, 선택적으로 첫번째 28일 주기에서 투여된 총 투여량의 (약) 50%이다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 투약 스케쥴 (iii)에 따라 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함(여기서 연속 2주 동안 Q1W로 2 개별 분량 각각이 각각 독립적으로 (약) 375 mg의 양 이후, (약) 750 mg의 양으로 1회 Q2W 1 분량임)하거나; 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 (ii)에 제시된 투약 스케줄에 따라 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함(여기서 4 개별 분량 Q1W는 (약) 225 mg의 양으로 2 연속 Q1W 분량 후 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 Q1W 분량을 포함)하거나; 또는 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 (i)에 제시된 투약 스케줄에 따라 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함(여기서 2 개별 분량 Q1W 각각은 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 Q1W 분량에 대해 수행됨)한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서 총 투여량 투여는 (i) 28일 주기의 (약) 15일 및 (약) 22일에 2 개별 분량; (ii) 28일 주기의 (약) 1일, (약) 8일, (약) 15일 및 (약) 22일에 4 개별 분량; (iii) 28일 주기의 (약) 1일 및 (약) 8일에 2 개별 분량 후 상기 주기의 (약) 15일에 1 분량; 또는 (iv) 28일 주기의 (약) 1일 및 28일 주기의 (약) 15일에 2 분량; 중에서 선택된 투약 스케쥴에 따라 개별 분량을 투여하는 것을 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 투약 스케쥴 (iii)에 따라 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함(여기서 2 개별 분량 각각은 28일 주기의 (약) 1일 및 (약) 8일에 (약) 375 mg의 양, 이후 상기 주기의 (약) 15일에 (약) 750 mg의 양으로 1 분량을 포함)하거나; 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 (ii)에 제시된 투약 스케줄에 따라 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함(여기서 4 개별 분량은 28일 주기의 (약) 1일 및 (약) 8일에 (약) 225 mg의 양으로 2 연속 분량 후 28일 주기의 (약) 15일 및 (약) 22일에 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 분량을 포함)하거나; 또는 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 (i)에 제시된 투약 스케줄에 따라 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함(여기서 2 개별 분량 각각은 28일 주기의 (약) 15일 및 (약) 22일에 (약) 375 mg의 양으로 2 연속을 포함)한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서 총 투여량 투여는 독립적으로 1 또는 2 분량의 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편 투여를 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서 총 투여량 투여는, 독립적으로 (i) 두번째 및/또는 후속 28일 주기 동안, 선택적으로 두번째 및/또는 후속 주기의 1일 및 15일에 각각 매 2주(Q2W) 2 개별 분량; 또는 (ii) 두번째 및/또는 후속 28일 주기, 선택적으로 두번째 및/또는 후속 주기의 1일에 매 4주(Q4W) 1 분량; 중에서 선택된 투약 스케쥴을 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 각 Q2W 분량은 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 총 투여량의 (약) 50%이고/거나; 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 Q4W 분량은 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 (약) 총 투여량이다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 두번째 및/또는 후속 분량은 (약) 750 mg의 양으로 2 분량에 대해 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 Q2W로 투여하는 것을 포함하거나; 또는 두번째 및/또는 후속 분량은 (약) 1500 mg의 양으로 1 분량에 대해 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 Q4W로 투여하는 것을 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 2회 이상의 28일 주기는 세번째 28일 주기를 더 포함하고/거나 상기 후속 28일 주기는 세번째 28일 주기이다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 세번째 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 첫번째 및/또는 두번째 28일 주기에서 투여된 총 투여량과 동일하다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 세번째 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg이다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, (a) 세번째 28일 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 첫번째 및/또는 두번째 28일 주기에 비해 더 많은 개별 분량으로 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행되거나; 또는 (b) 세번째 28일 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 두번째 28일 주기와 비교하여 동일한 분량의 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행된다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 세번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 세번째 28일 주기 중 매 4주(Q4W), 선택적으로 세번째 28일 주기의 1일에 1 분량의 투여를 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 (a) T 세포 요법의 투여 개시로부터 22일과 36일 사이; 또는 (b) (i) 피크 또는 최대 수준의 T 세포 요법 세포가 대상체의 혈액에서 검출 가능하고/거나; (ii) 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 세포 수가 검출 가능하지 않거나 감소, 선택적으로 T 세포 요법 투여 후 선행 시점에 비해 감소되고/거나; (iii) 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 세포 수가, T 세포 요법의 투여 개시 후 대상체의 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상 감소되고/거나; (iv) 피크 또는 최대 수준의 T 세포 요법 세포가 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만이고/거나; (v) 대상체가 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 질병 진행을 나타내고/거나 재발하였고/거나; (iv) 대상체에서 항-PD-L1 항체의 투여 개시 전 및 세포 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해 종양 부담이 증가한; 후 1 내지 3일 또는 1 내지 3일 후, 선택적으로 1 내지 3일 직후 또는 1 내지 3일 이내;의 시기에 개시된다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 T 세포 요법의 투여 개시로부터 22일과 36일 사이의 시기에 개시된다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 2회 이상의 28일 주기는 3회 이상의 28일 주기를 포함하고, 선택적으로 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 (약) 22일과 (약) 36일 사이에 개시된다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 29일에 개시된다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 43일에 개시된다.
본 발명은 (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(여기서 상기 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하고, 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); 및 (b) 이어서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 대상체에 투여하는 단계(여기서 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 1 내지 3회 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 각각의 주기는 항체 또는 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고, 선택적으로 상기 1 내지 3회 28일 주기 중 첫번째 주기는 T 세포 요법 개시 후 (약) 22일과 (약) 36일 사이, 선택적으로 29일에 시작);를 포함하는 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 치료 방법을 제공하고, 상기 대상체는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하고, 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 1 내지 3회 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 각각의 주기는 항체 또는 단편을 900 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고, 선택적으로 상기 1 내지 3회 28일 주기 중 첫번째 주기는 T 세포 요법 개시 후 (약) 22일과 (약) 36일 사이, 선택적으로 29일에 시작된다.
본 발명은 (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(여기서 상기 세포 요법은 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함); 및 (b) 이어서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 대상체에 투여하는 단계(여기서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 독립적으로, 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고; 상기 2회 이상의 28일 주기 중 1회 이상에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 28일 주기 과정을 통해 1 이상의 개별 분량의 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행됨);를 포함하는 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 치료 방법을 제공하고, 상기 대상체에는 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하였고, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 독립적으로, 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고; 상기 2회 이상의 28일 주기 중 1회 이상에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 28일 주기 과정을 통해 1 이상의 개별 분량의 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행된다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서의 투여에 비해 항체 또는 단편을 보다 많은 수의 개별 분량으로 투여함으로써 수행된다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 각 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 750 mg 내지 (약) 1500 mg이다. 일부 구현예에서, 1회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 750 mg이다. 일부 구현예에서, 1회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1200 mg이다. 일부 구현예에서, 1회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg이다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 각 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 1500 mg이다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 상기 2회 이상 중 2회 이상 및 선택적으로 상기 2회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 동일한 총 투여량이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 상기 2회 이상의 28일 주기 중 각각에서 상이하거나 상기 2회 이상의 28일 주기 중 2회 이상에서 상이하다. 일부 구현예에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 상기 2회 이상의 28일 주기의 두번째 및/또는 후속 주기에서보다 더 적다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서 총 투여량 투여는 2, 3 또는 4 개별 분량의 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편 투여를 포함한다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서 총 투여량 투여는 (i) 선택적으로 28일 주기의 15일 및 22일에 2 개별 분량에 대해 주 1회(Q1W); (ii) 선택적으로 28일 주기의 1, 8, 15 및 22일에 4 개별 분량에 대해 주 1회(Q1W); (iii) 선택적으로 상기 주기의 1일 및 8일에 2 연속 분량에 대해 Q1W 후 선택적으로 상기 주기의 15일에 1 분량에 대해 매 2주(Q2W); 또는 (iv) 선택적으로 28일 주기의 1일 및 15일에 2 분량에 대해 매 2주(Q2W); 중에서 선택된 투약 스케쥴에 따라 개별 분량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 첫번째 28일 주기에서 투여되는 각각의 Q1W 분량은 독립적으로 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 18% 내지 (약) 32%, 선택적으로 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 25%이고/거나; 첫번째 28일 주기에 투여되는 각각의 Q2W 분량은 독립적으로 총 투여량의 (약) 40% 내지 (약) 62.5%, 선택적으로 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 50%이다. 일부 구현예에서, 첫번째 28일 주기의 총 투여량 투여는 각각 독립적으로 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 분량에 대해 Q1W 이후 (약) 750 mg의 양으로 1 분량에 대해 Q2W로 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하거나; 첫번째 28일 주기의 총 투여량 투여는 4 분량에 대해 Q1W로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하며, 상기 4 분량은 (약) 225 mg의 2 연속 분량 후 (약) 375 mg의 2 연속 분량을 포함하거나; 또는 첫번째 28일 주기의 총 투여량 투여는 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 분량에 대해 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 Q1W로 투여하는 것을 포함한다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서 총 투여량 투여는 독립적으로 1 또는 2 분량의 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편 투여를 포함한다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서 총 투여량 투여는 독립적으로 (i) 선택적으로 상기 주기의 1일과 15일에 2 분량에 대해 매 2주(Q2W); 또는 (ii) 선택적으로 상기 주기의 1일에 1 분량에 대해 매 4주(Q4W); 중에서 선택된 투약 스케쥴을 포함한다. 일부 구현예에서, 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 각 Q2W 분량은 총 투여량의 (약) 50%이고/거나; 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 Q4W 분량은 (약) 총 투여량이다. 일부 구현예에서, 두번째 및/또는 후속 분량은 (약) 750 mg의 양으로 2 분량에 대해 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 Q2W로 투여하는 것을 포함하거나; 또는 두번째 및/또는 후속 분량은 (약) 1500 mg의 양으로 1 분량에 대해 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 Q4W로 투여하는 것을 포함한다.
본 발명은 (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 T 세포 요법은 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함); 및 (b) 이어서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 대상체에 투여하는 단계(여기서 상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 375 mg 양으로 2 연속 분량에 대해 주 1회(Q1W) 이후 (약) 750 mg 양으로 1 분량에 대해 매 2주(Q2W) 투여하는 것을 포함하고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양으로 1 분량에 대해 Q4W로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함함);를 포함하는 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 치료 방법을 제공하고, 상기 대상체에 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하였고, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 독립적으로 (약) 375 mg 양으로 2 연속 분량에 대해 주 1회(Q1W) 이후 (약) 750 mg 양으로 1 분량에 대해 매 2주(Q2W) 투여하는 것을 포함하고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양으로 1 분량에 대해 매 4주(Q4W) 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다.
본 발명은 (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 T 세포 요법은 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함); 및 (b) 이어서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 대상체에 투여하는 단계(여기서 상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 4 분량에 대해 주 1회(Q1W) 투여하는 것을 포함하고, 상기 4 분량은 각각 독립적으로 (약) 225 mg의 2 연속 분량 이후 각각 독립적으로 (약) 375 mg의 2 연속 분량을 포함하고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 750 mg의 양으로 각각 독립적으로 2 분량에 대해 매 2주(Q2W) 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함);를 포함하는 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 치료 방법을 제공하고, 상기 대상체에 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하였고, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 4 분량에 대해 주 1회(Q1W) 투여하는 것을 포함하고, 상기 4 분량은 각각 독립적으로 (약) 225 mg의 2 연속 분량 이후 (약) 375 mg의 2 연속 분량을 포함하고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 750 mg의 양으로 2 분량에 대해 매 2주(Q2W) 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다.
본 발명은 (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 T 세포 요법은 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함); 및 (b) 이어서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 대상체에 투여하는 단계(여기서 상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 2 분량에 대해 주 1회(Q1W) 투여하는 것을 포함하고, 상기 2 분량 각각은 각각 독립적으로 (약) 375 mg의 양을 포함하고, 선택적으로 상기 2 분량은 연속 분량이며, 선택적으로 상기 2 분량은 28일 주기에서 15일과 22일에 투여되고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양으로 1 분량에 대해 Q4W로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함);를 포함하는 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 치료 방법을 제공하고, 상기 대상체에 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하였고, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 2 분량에 대해 주 1회(Q1W) 투여하는 것을 포함하고, 상기 2 분량 각각은 독립적으로 (약) 375 mg의 양을 포함하고, 선택적으로 상기 2 분량은 연속 분량이며, 선택적으로 상기 2 분량은 28일 주기에서 15일과 22일에 투여되고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양으로 1 분량에 대해 Q4W로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 2회 이상의 28일 주기는 세번째 28일 주기를 더 포함하고/거나 여기서 후속 28일 주기는 세번째 28일 주기이다. 일부 구현예에서, 세번째 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 제1 및/또는 두번째 28일 주기에서 투여된 총 투여량과 동일하다. 일부 구현예에서, 세번째 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg이다. 일부 구현예에서, (a) 세번째 28일 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 첫번째 및/또는 두번째 28일 주기에 비해 더 많은 개별 분량으로 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행되거나; 또는 (b) 세번째 28일 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 두번째 28일 주기와 비교하여 동일한 횟수의 분량으로 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행된다. 일부 구현예에서, 세번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 1 분량에 대해, 선택적으로 세번째 28일 주기의 1일에 매 4주(Q4W) 투여하는 것을 포함한다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 (a) T 세포 요법의 투여 개시로부터 22일과 36일 사이; 또는 (b) (i) 피크 또는 최대 수준의 T 세포 요법 세포가 대상체의 혈액에서 검출 가능하고/거나; (ii) 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 세포 수가 검출 가능하지 않거나 감소, 선택적으로 T 세포 요법 투여 후 선행 시점에 비해 감소되고/거나; (iii) 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 세포 수가 T 세포 요법의 투여 개시 후 대상체의 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상 감소되고/거나; (iv) 피크 또는 최대 수준의 T 세포 요법 세포가 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만이고 /거나; (v) 대상체가 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 질병 진행을 나타내고/거나 재발하였고/거나; (iv) 대상체에서 항-PD-L1 항체의 투여 개시 전 및 세포 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해 종양 부담이 증가한; 후 1 내지 3일 또는 1 내지 3일 후, 선택적으로 1 내지 3일 직후 또는 1 내지 3일 이내;의 시기에 개시된다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 2회 이상의 28일 주기는 3회 이상의 28일 주기를 포함하고, 선택적으로 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 T 세포 요법 투여 개시 후 (약) 22일과 (약) 36일 사이, 선택적으로 (약) 29일에 시작된다.
본 발명은 (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 T 세포 요법은 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함); 및 (b) 이어서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 대상체에 투여하는 단계(여기서 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 1 내지 3회 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 각각의 주기는 항체 또는 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고, 선택적으로 상기 1 내지 3회 28일 주기 중 첫번째 주기는 T 세포 요법 개시 후 (약) 22일과 (약) 36일 사이, 선택적으로 29일에 시작)를 포함하는 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 치료 방법을 제공하고, 상기 대상체에 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여하였고, 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 1 내지 3회 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 각각의 주기는 항체 또는 단편을 900 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고, 선택적으로 상기 1 내지 3회 28일 주기 중 첫번째 주기는 T 세포 요법 개시 후 (약) 22일과 (약) 36일 사이, 선택적으로 약 29일에 시작된다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 각 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 1200 mg 내지 1500 mg이다. 일부 구현예에서, 1회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1200 mg이다. 일부 구현예에서, 1회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg이다. 일부 구현예에서, 각각의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg이다. 일부 구현예에서, 각각의 28일 주기에서 총 투여량은 1, 2, 3 또는 4 분량의 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 각각의 28일 주기는 독립적으로 (i) 선택적으로 1, 8, 15 및 22일에 4 분량에 대해 주 1회(Q1W); (ii) 선택적으로 1일 및 8일에 연속 2 분량에 대해 Q1W 후 선택적으로 15일에 1 분량에 대해 매 2주(Q2W); (iii) 선택적으로 1일과 15일에 2 분량에 대해 매 2주(Q2W); 또는 (iv) 선택적으로 1일에 1 분량에 대해 매 4주(Q4W); 중에서 선택된 투약 스케쥴을 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 각각의 28일 주기는 (i) 선택적으로 28일 주기의 1, 8, 15 및 22일에 4 분량을 각각 주 1회(Q1W); (ii) 선택적으로 28일 주기의 1일 및 8일에 연속 2 분량 각각을 Q1W 후 선택적으로 28일 주기의 15일에 1 분량에 대해 2주 후 1회(Q2W) 1 분량; (iii) 선택적으로 28일 주기의 1일 및 15일에 각각 매 2주(Q2W) 2 분량; 또는 (iv) 선택적으로 28일 주기의 1일에 매 4주(Q4W) 1 분량; 중에서 선택된 투약 스케쥴을 독립적으로 포함한다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 첫번째 28일 주기의 1, 8 및 15일, 두번째 28일 주기의 1일 및 세번째 28일 주기의 1일에 투여된다. 여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 첫번째 28일 주기의 1, 8, 15 및 22일, 제2 28일 주기의 1일 및 15일 및 세번째 28일 주기의 1일에 투여된다. 여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 각 28일 주기의 1일에 투여된다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 대상체가 치료 후에 단지 부분 반응(partial response, PR)만을 나타내고/거나 T 세포 요법 및/또는 항-PD-L1 항체 또는 단편의 투여 개시 후 3개월에 PR만을 나타낼 경우 하나 이상의 추가 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 추가로 포함된다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 하나 이상의 추가 28일 주기 각각에서 900 mg 내지 2000 mg의 총 투여량, 선택적으로 (약) 1500 mg의 총 투여량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 하나 이상의 추가 28일 주기 각각에서 900 mg 내지 2000 mg의 총 투여량, 선택적으로 (약) 1500 mg으로 투여된다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 12개월 이내의 총 기간 동안 투여된다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 첫번째 28일 주기의 시작은 T 세포 요법의 투여 개시 후 21일 초과 후에 개시된다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 첫번째 28일 주기의 시작은 (i) 피크 또는 최대 수준의 T 세포 요법 세포가 대상체의 혈액에서 검출 가능하고/거나; (ii) 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 세포 수가 검출 가능하지 않거나 감소, 선택적으로 T 세포 요법 투여 후 선행 시점에 비해 감소되고/거나; (iii) 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 세포 수가 T 세포 요법의 투여 개시 후 대상체의 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상 감소되고/거나; (iv) 피크 또는 최대 수준의 T 세포 요법 세포가 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후의 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만이고/거나; (v) 대상체가 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 질병 진행을 나타내고/거나 재발하였고/거나; (iv) 대상체에서 항-PD-L1 항체의 투여 개시 전 및 세포 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해 종양 부담이 증가한; 후 1 내지 3일 또는 1 내지 3일 후, 선택적으로 1 내지 3일 직후 또는 1 내지 3일 이내의 시기에 개시된다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 첫번째 28일 주기의 시작은 T 세포 요법의 투여 개시 후 29 일, 36 일, 43 일 또는 50 일에 또는 29 일, 36 일, 43 일 또는 50 일 이내에 개시된다. 여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 첫번째 28일 주기의 시작은 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 22 일 내지 36 일에 개시된다. 여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 첫번째 28일 주기의 시작은 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 29 일에 개시된다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 첫번째 투여 주기의 시작은 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 43 일에 개시된다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 첫번째 28일 주기의 시작 시기에, 대상체는 T 세포 요법 투여 후 심각한 독성을 나타내지 않는다. 일부 구현예에서, 심각한 독성은 심각한 사이토카인 방출 증후군(cytokine release syndrome, CRS), 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 CRS이고/거나; 심각한 독성은 심각한 신경 독성, 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 신경 독성이다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 PD-L1의 세포 외 도메인에 특이적으로 결합한다. 여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙, durvalumab), MDPL3280A(아테졸리주맙, atezolizumab), YW243.55.S70, MDX-1105(BMS-936559), LY3300054 또는 MSB0010718C(아벨루맙, avelumab)이거나 상기 중 어느 하나의 항원 결합 단편 또는 영역이거나 이를 포함한다. 여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙, durvalumab)이거나 이의 항원 결합 단편 또는 영역이거나 이를 포함한다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙, durvalumab)이다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, B 세포 악성 종양은 비호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma, NHL)이다. 일부 구현예에서, T 세포 요법 투여 시기 또는 직전에, 대상체는 NHL에 대한 하나 이상의 선행 요법, 선택적으로 또 다른 분량의 CAR을 발현하는 세포 외의 하나 또는 2가지 선행 요법으로 치료 후 완화 후에 재발하였거나 이에 대해 불응성이 되었고, 선택적으로 상기 선행 요법은 CD20 표적화 제제 또는 안트라사이클린이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, NHL에는 공격적인 NHL, 미만성 거대 B 세포 림프종(diffuse large B cell lymphoma, DLBCL), 선택적으로 형질 전환된 무통성 DLBCL-NOS; EBV 양성 DLBCL-NOS; T 세포/조직구가 풍부한 거대 B 세포 림프종; 1차 종격동 거대 B 세포 림프종(primary mediastinal large B cell lymphoma, PMBCL); 여포성 림프종(follicular lymphoma, FL), 선택적으로 여포성 림프종 3B 등급(follicular lymphoma Grade 3B, FL3B); 및/또는 DLBCL 조직 구조(이중/삼중 히트)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종이 포함된다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, NHL에는 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL); DLBCL-NOS; 형질 전환된 무통성 DLBCL-NOS; 여포성 림프종 3B 등급(follicular lymphoma Grade 3B, FL3B); 및/또는 DLBCL 조직 구조(이중/삼중 히트)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종이 포함된다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 대상체는 1 이하의 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태를 갖는 것으로 확인되거나 확인되었다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 재조합 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합한다. 일부 구현예에서, 표적 항원은 B 세포 항원, 선택적으로 CD19이다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 표적 항원은 B 세포 항원이다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 표적 항원은 CD19이다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 키메라 항원 수용체(CAR)는 표적 항원에 특이적으로 결합하는 세포 외 항원 인식 도메인 및 ITAM을 포함하는 세포 내 신호 전달 도메인을 포함한다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 세포 내 신호 전달 도메인은 CD3-제타(CD3ζ) 사슬의 신호 전달 도메인을 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 키메라 항원 수용체(CAR)는 공자극 분자의 세포질 신호 전달 도메인을 포함하는 공자극 신호 전달 영역을 더 포함한다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 공자극 신호 전달 영역은 CD28 또는 4-1BB의 세포질 신호 전달 도메인을 포함한다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 공자극 도메인은 4-1BB의 세포질 신호 전달 도메인이거나 이를 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, CAR은 CD19에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인을 포함하고, 선택적으로 막관통 도메인과 scFv 사이에 스페이서를 더 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, CAR은 CD19에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인인 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, CAR은 CD19에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 스페이서는 (a) 면역글로불린 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되거나, 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나, (b) 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나, 이로 구성되고/거나 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나 (c) 길이가 (약) 12개의 아미노산이고/거나 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되는 폴리펩티드 스페이서이다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 스페이서는 화학식 X1PPX2P(서열 번호: 58, X1은 글리신, 시스테인 또는 아르기닌 및 X2는 시스테인 또는 트레오닌)를 포함하거나 이로 구성된다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 스페이서는 서열 번호: 2에 의해 암호화된 서열, 서열 번호: 1, 서열 번호: 30, 서열 번호: 31, 서열 번호: 32, 서열 번호: 33, 서열 번호: 34의 서열 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 상기 중 어느 하나의 변이체를 포함하거나 이로 구성된다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 스페이서는 서열 번호: 1의 서열을 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 공자극 분자의 세포질 신호 전달 도메인은 서열 번호: 12 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 이의 변이체를 포함한다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인은 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열 번호: 13 또는 14 또는 15를 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 RASQDISKYLN(서열 번호: 35)의 CDRL1 서열, SRLHSGV(서열 번호: 36)의 CDRL2 서열 및/또는 GNTLPYTFG(서열 번호: 37)의 CDRL3 서열 및 DYGVS(서열 번호: 38)의 CDRH1 서열, VIWGSETTYYNSALKS(서열 번호: 39)의 CDRH2 서열 및/또는 YAMDYWG(서열 번호: 40)의 CDRH3 서열을 포함한다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 FMC63의 CDRL1 서열, FMC63의 CDRL2 서열, FMC63의 CDRL3 서열, FMC63의 CDRH1 서열, FMC63의 CDRH2 서열 및 FMC63의 CDRH3 서열을 포함한다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 FMC63의 가변 중쇄 영역 및 FMC63의 가변 경쇄 영역을 포함한다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 서열 번호: 41에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 VH 영역을 포함한다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 서열 번호: 42에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 VL 영역을 포함한다.
임의의 상기 구현예 중 일부에서, 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 선택적으로 서열 번호: 41에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 VH, 선택적으로 서열 번호: 59를 포함하는 링커 및 선택적으로 서열 번호: 42에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 VL 순서로 포함하고/거나 상기 scFv는 가요성 링커를 포함하고/거나 서열 번호: 43에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 서열 번호: 43에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 재조합 수용체는 키메라 항원 수용체(CAR)이다. 일부 구현예에서, 키메라 항원 수용체(CAR)는 항원에 특이적으로 결합하는 세포 외 항원 인식 도메인 및 ITAM을 포함하는 세포 내 신호 전달 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 세포 내 신호 전달 도메인은 CD3-제타(CD3ζ) 사슬의 신호 전달 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 키메라 항원 수용체(CAR)는 공자극 신호 전달 영역을 더 포함한다. 일부 구현예에서, 공자극 신호 전달 영역은 CD28 또는 4-1BB의 신호 전달 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 공자극 도메인은 4-1BB의 도메인이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, CAR은 항원에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인을 포함하고, 선택적으로 막관통 도메인과 scFv 사이에 스페이서를 더 포함하거나; CAR은 항원에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인인 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함하거나; 또는 CAR은 항원에 특이적인 scFv, 스페이서, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인인 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함한다. 일부 구현예에서, 스페이서는 선택적으로 (a) 면역글로불린 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되거나, 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나, (b) 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나, 이로 구성되고/거나 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나 (c) 길이가 (약) 12개의 아미노산이고/거나 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되거나; (d) 서열 번호: 2에 의해 암호화된 서열, 서열 번호: 1, 서열 번호: 30, 서열 번호: 31, 서열 번호: 32, 서열 번호: 33, 서열 번호: 34의 서열 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 상기 중 어느 하나의 변이체를 갖거나 이로 구성되거나; (e) 화학식 X1PPX2P(여기서, X1은 글리신, 시스테인 또는 아르기닌 및 X2는 시스테인 또는 트레오닌)를 포함하거나 이로 구성되는 폴리펩티드 스페이서이고/거나; 공자극 도메인은 서열 번호: 12 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 이의 변이체를 포함하고/거나; 1차 신호 전달 도메인은 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열 번호: 13 또는 14 또는 15를 포함하고/거나; scFv는 RASQDISKYLN(서열 번호: 35)의 CDRL1 서열, SRLHSGV(서열 번호: 36)의 CDRL2 서열 및/또는 GNTLPYTFG(서열 번호: 37)의 CDRL3 서열 및/또는 DYGVS(서열 번호: 38)의 CDRH1 서열, VIWGSETTYYNSALKS(서열 번호: 39)의 CDRH2 서열 및/또는 YAMDYWG(서열 번호: 40)의 CDRH3 서열을 포함하거나 scFv는 FMC63의 가변 중쇄 영역 및 FMC63의 가변 경쇄 영역 및/또는 FMC63의 CDRL1 서열, FMC63의 CDRL2 서열, FMC63의 CDRL3 서열, FMC63의 CDRH1 서열, FMC63의 CDRH2 서열 및 FMC63의 CDRH3 서열을 포함하거나 상기 중 어느 하나와 결합을 두고 경쟁하거나 이와 동일한 에피토프에 결합하고 선택적으로 scFv는 VH, 선택적으로 서열 번호: 41을 포함하는 링커 및 VL 순서로 포함하고/거나 scFv는 가요성 링커를 포함하고/거나 서열 번호: 42에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 유전자 조작된 T 세포의 분량은 (약) 1 x 105 내지 5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 1 x 106 내지 2.5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 5 x 106 내지 1 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 1 x 107 내지 2.5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 5 x 107 내지 1 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포(각각의 수치 포함)를 포함한다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 유전자 조작된 T 세포의 분량은 1 x 105개 이상 또는 약 1 x 105개 이상의 CAR 발현 세포, 2.5 x 105개 이상 또는 약 2.5 x 105개 이상의 CAR 발현 세포, 5 x 105개 이상 또는 약 5 x 105개 이상의 CAR 발현 세포, 1 x 106개 이상 또는 약 1 x 106개 이상의 CAR 발현 세포, 2.5 x 106개 이상 또는 약 2.5 x 106개 이상의 CAR 발현 세포, 5 x 106개 이상 또는 약 5 x 106개 이상의 CAR 발현 세포, 1 x 107개 이상 또는 약 1 x 107개 이상의 CAR 발현 세포, 2.5 x 107개 이상 또는 약 2.5 x 107개 이상의 CAR 발현 세포, 5 x 107개 이상 또는 약 5 x 107개 이상의 CAR 발현 세포, 1 x 108개 이상 또는 약 1 x 108개 이상의 CAR 발현 세포, 2.5 x 108개 이상 또는 약 2.5 x 108개 이상의 CAR 발현 세포 또는 5 x 108개 이상 또는 약 5 x 108개 이상의 CAR 발현 세포를 포함한다. 여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 유전자 조작된 T 세포의 분량은 (약) 5 x 107개의 CAR-발현 세포를 포함한다. 여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 유전자 조작된 T 세포의 분량은 (약) 1 x 108개의 CAR-발현 세포를 포함한다. 임의의 상기 구현예 중 일부에서, 유전자 조작된 T 세포의 분량은 (약) 1.5 x 108개의 CAR-발현 세포를 포함한다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 분량의 세포가 비경구적으로, 선택적으로 정맥 주사로 투여된다. 일부 구현예에서, T 세포는 대상체로부터 수득된 1 차 T 세포이다. 여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, T 세포는 대상체에 대해 자가 조직이다. 여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, T 세포는 대상체에 대해 동종 이계이다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 유전자 조작된 T 세포의 분량은 CAR을 발현하는 CD4+ T 세포 및 CAR을 발현하는 CD8+ T 세포를 포함하고, 분량의 투여는 다수의 별도의 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 상기 다수의 별도의 조성물은 CD4+ T 세포 및 CD8+ T 세포 중 하나를 포함하는 제1 조성물 및 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포 중 다른 것을 포함하는 제2 조성물을 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 조성물 및 제2 조성물은 0 내지 12시간 간격, 0 내지 6시간 간격 또는 0 내지 2시간 간격으로 투여되거나, 제1 조성물의 투여 및 제2 조성물의 투여는 같은 날 수행되며, 약 0 내지 약 12시간 간격, 약 0 내지 약 6시간 간격 또는 약 0 내지 약 2시간 간격으로 수행되고/거나; 제1 조성물의 투여 개시 및 제2 조성물의 투여 개시는 약 1분 내지 1시간 간격 또는 약 5분 내지 약 30분 간격으로 수행된다. 일부 구현예에서, 제1 조성물 및 제2 조성물은 2시간 이내, 1시간 이내, 30분 이내, 15분 이내, 10분 이내 또는 5분 이내의 간격으로 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 조성물은 CD4+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 조성물은 CD8+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 조성물은 제2 조성물 전에 투여된다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 투여 전에, 대상체는 플루다라빈 및/또는 사이클로포스파미드의 투여를 포함하는 림프절 마비 요법으로 사전 조정되었다. 일부 구현예에서, 투여 직전에, 대상체에 림프절 마비 요법의 투여는 플루다라빈 및/또는 사이클로포스파미드의 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 림프절 마비 요법은 약 200-400 mg/m2, 선택적으로 (약) 300 mg/m2(수치 포함)의 사이클로포스파미드 및/또는 약 20-40 mg/m2, 선택적으로 30 mg/m2의 플루다라빈을 2-4일 동안, 선택적으로 3일 동안 매일 투여하는 것을 포함하거나, 림프절 마비 요법은 약 500 mg/m2의 사이클로포스파미드 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 림프절 마비 요법은 (약) 300 mg/m2의 사이클로포스파미드 및/또는 약 30 mg/m2의 플루다라빈을 3일 동안 매일 투여하는 것을 포함하고/거나; 림프절 마비 요법은 (약) 500 mg/m2의 사이클로포스파미드 및 약 30 mg/m2의 플루다라빈을 3일 동안 매일 투여하는 것을 포함한다.
여기에 제공된 방법 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 대상체는 인간이다.
본 발명은 (a) 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법(여기서, 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); (b) 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제(여기서, 선택적으로 이의 체크포인트 억제제는 하나 이상의 개별 분량으로 제형화됨); 및 (c) T 세포 요법 및/또는 체크포인트 억제제를 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 투여하기 위한 지침(여기서, 상기 지침은 본 명세서에 기재된 구현예 중 어느 하나에 따른 T 세포 요법 및/또는 체크포인트 억제제의 투여를 명시);을 포함하는 키트를 또한 제공한다.
본 발명은 (a) 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법(여기서, 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); 및 (b) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하기 위한 지침(여기서, 상기 지침에는 대상체에 T 세포 요법 투여 후에, 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제가 투여될 것이 명시되고, 상기 지침은 본 명세서에 기재된 구현예 중 어느 하나에 따른 T 세포 요법 및/또는 체크포인트 억제제의 투여를 명시);을 포함하는 키트를 또한 제공한다.
본 발명은 (a) 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제(여기서, 선택적으로 이의 체크포인트 억제제는 하나 이상의 개별 분량으로 제형화됨); 및 (b) 체크포인트 억제제를 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 투여하기 위한 지침(여기서, 상기 지침은 상기 체크포인트 억제제가 T 세포 요법의 투여 개시 후에 투여되고, 상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하며, 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합함을 명시하며, 상기 지침은 본 명세서에 기재된 구현예 중 어느 하나에 따른 T 세포 요법 및/또는 체크포인트 억제제의 투여를 명시);을 포함하는 키트를 또한 제공한다.
본 발명은 (a) 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법; (b) 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편(선택적으로, 여기서 항-PD-L1 항체 또는 이의 단편은 하나 이상의 분량 단위로 제형화됨); 및 (c) 유전자 조작된 세포 및/또는 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 투여하기 위한 지침(여기서 상기 지침은 (i) 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되고, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 독립적으로 항체 또는 항원 결합 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고; (ii) 상기 2회 이상의 28일 주기 중 적어도 첫번째 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행됨;에 대한 지침을 포함);을 포함하는 키트를 제공한다.
본 발명은 (a) 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법; 및 (b) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하기 위한 지침(여기서 상기 지침은 대상체에 T 세포 투여 후에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 투여될 것임이 명시되고, 상기 지침은 (i) 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되고, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 독립적으로 항체 또는 항원 결합 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고; (ii) 상기 2회 이상의 28일 주기 중 적어도 첫번째 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 항체 또는 단편의 투여로 수행됨;에 대한 지침을 포함);을 포함하는 치료 방법을 제공한다.
본 발명은 (a) 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편(선택적으로, 여기서 항-PD-L1 항체 또는 이의 단편은 하나 이상의 분량 단위로 제형화됨); 및 (b) 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 투여하기 위한 지침(여기서 상기 지침에는 항-PD-L1 항체 또는 단편이 T 세포 요법의 투여 개시 후에 투여되고, 상기 T 세포 요법은 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량이 포함됨이 명시되고, 상기 지침은 (i) 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되고, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 독립적으로 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고; (ii) 상기 2회 이상의 28일 주기 중 적어도 첫번째 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 항체 또는 단편의 투여로 수행됨;에 대한 지침을 포함);을 포함하는 치료 방법을 제공한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 상기 지침은 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 두번째 및/또는 후속 28일 주기에 비해 항체 또는 단편을 더 많은 횟수로 투여함으로써 수행됨을 추가로 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 225 mg 내지 2000 mg이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 750-1500 mg이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 2개 이상의 분량 단위로 제형화되며, 여기서 각 분량 단위는 (약) 225 mg 내지 2000 mg이다. 일부 구현예에서, 각 분량 단위는 (약) 225 mg 내지 1500 mg이다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 PD-L1의 세포 외 도메인에 특이적으로 결합한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙, durvalumab), MDPL3280A(아테졸리주맙, atezolizumab), YW243.55.S70, MDX-1105(BMS-936559), LY3300054 또는 MSB0010718C(아벨루맙, avelumab)이거나 이의 항원 결합 단편이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙, durvalumab)이거나 이의 항원 결합 단편이다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 재조합 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합한다. 일부 구현예에서, 표적 항원은 B 세포 항원, 선택적으로 CD19이다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 재조합 수용체는 키메라 항원 수용체(CAR)이다. 일부 구현예에서, 키메라 항원 수용체(CAR)는 항원에 특이적으로 결합하는 세포 외 항원 인식 도메인 및 ITAM을 포함하는 세포 내 신호 전달 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 세포 내 신호 전달 도메인은 CD3-제타(CD3ζ) 사슬의 세포 내 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 키메라 항원 수용체(CAR)는 공자극 신호 전달 영역을 더 포함한다. 일부 구현예에서, 공자극 신호 전달 영역은 CD28 또는 4-1BB의 신호 전달 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 공자극 도메인은 4-1BB의 도메인이다. 일부 구현예에서, CAR은 항원에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인을 포함하고, 선택적으로 막관통 도메인과 scFv 사이에 스페이서를 더 포함하거나; CAR은 항원에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인인 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함하거나; 또는 CAR은 항원에 특이적인 scFv, 스페이서, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인인 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함한다. 일부 구현예에서, 스페이서는 선택적으로 (a) 면역글로불린 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되거나, 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나, (b) 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나, 이로 구성되고/거나 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나 (c) 길이가 (약) 12개의 아미노산이고/거나 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되거나; (d) 서열 번호: 2에 의해 암호화된 서열, 서열 번호: 1, 서열 번호: 30, 서열 번호: 31, 서열 번호: 32, 서열 번호: 33, 서열 번호: 34의 서열 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 상기 중 어느 하나의 변이체를 갖거나 이로 구성되거나; (e) 화학식 X1PPX2P(여기서, X1은 글리신, 시스테인 또는 아르기닌 및 X2는 시스테인 또는 트레오닌)를 포함하거나 이로 구성되는 폴리펩티드 스페이서이고/거나; 공자극 도메인은 서열 번호: 12 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 이의 변이체를 포함하고/거나; 1차 신호 전달 도메인은 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열 번호: 13 또는 14 또는 15를 포함하고/거나; scFv는 RASQDISKYLN(서열 번호: 35)의 CDRL1 서열, SRLHSGV(서열 번호: 36)의 CDRL2 서열 및/또는 GNTLPYTFG(서열 번호: 37)의 CDRL3 서열 및/또는 DYGVS(서열 번호: 38)의 CDRH1 서열, VIWGSETTYYNSALKS(서열 번호: 39)의 CDRH2 서열 및/또는 YAMDYWG(서열 번호: 40)의 CDRH3 서열을 포함하거나 scFv는 FMC63의 가변 중쇄 영역 및 FMC63의 가변 경쇄 영역 및/또는 FMC63의 CDRL1 서열, FMC63의 CDRL2 서열, FMC63의 CDRL3 서열, FMC63의 CDRH1 서열, FMC63의 CDRH2 서열 및 FMC63의 CDRH3 서열을 포함하거나 상기 중 어느 하나와 결합을 두고 경쟁하거나 이와 동일한 에피토프에 결합하고 선택적으로 scFv는 VH, 선택적으로 서열 번호: 41을 포함하는 링커 및 VL 순서로 포함하고/거나 scFv는 가요성 링커를 포함하고/거나 서열 번호: 42에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, T 세포 요법은 (약) 1 x 105 내지 5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 1 x 106 내지 2.5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 5 x 106 내지 1 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 1 x 107 내지 2.5 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포, 5 x 107 내지 1 x 108개의 총 CAR-발현 T 세포(각각의 수치 포함)를 포함한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, T 세포 요법은 1 x 105개 이상 또는 약 1 x 105개 이상의 CAR 발현 세포, 2.5 x 105개 이상 또는 약 2.5 x 105개 이상의 CAR 발현 세포, 5 x 105개 이상 또는 약 5 x 105개 이상의 CAR 발현 세포, 1 x 106개 이상 또는 약 1 x 106개 이상의 CAR 발현 세포, 2.5 x 106개 이상 또는 약 2.5 x 106개 이상의 CAR 발현 세포, 5 x 106개 이상 또는 약 5 x 106개 이상의 CAR 발현 세포, 1 x 107개 이상 또는 약 1 x 107개 이상의 CAR 발현 세포, 2.5 x 107개 이상 또는 약 2.5 x 107개 이상의 CAR 발현 세포, 5 x 107개 이상 또는 약 5 x 107개 이상의 CAR 발현 세포, 1 x 108개 이상 또는 약 1 x 108개 이상의 CAR 발현 세포, 2.5 x 108개 이상 또는 약 2.5 x 108개 이상의 CAR 발현 세포 또는 5 x 108개 이상 또는 약 5 x 108개 이상의 CAR 발현 세포를 포함한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, T 세포 요법은 5 x 107개, 약 5 x 107개 또는 약 5 x 107개 이상의 CAR-발현 세포를 포함한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, T 세포 요법은 1 x 108개, 약 1 x 108개 또는 약 1 x 108개 이상의 CAR-발현 세포를 포함한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, T 세포 요법은 대상체로부터 수득된 1차 T 세포를 포함한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, T 세포 요법은 대상체에 대해 자가 조직인 세포를 포함한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, T 세포 요법은 대상체에 대해 동종 이계인 세포를 포함한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, T 세포 요법은 CAR을 발현하는 CD4+ T 세포 및 CAR을 발현하는 CD8+ T 세포를 포함하고, 투여는 다수의 별도의 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 상기 다수의 별도의 조성물은 CD4+ T 세포 및 CD8+ T 세포 중 하나를 포함하는 제1 조성물 및 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포 중 다른 것을 포함하는 제2 조성물을 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 조성물 및 제2 조성물은 0 내지 12시간 간격, 0 내지 6시간 간격 또는 0 내지 2시간 간격으로 투여되거나, 제1 조성물의 투여 및 제2 조성물의 투여는 동일한 날에 수행되고, 0 내지 12시간 간격, 0 내지 6시간 간격 또는 0 내지 2시간 간격으로 수행되고/거나; 제1 조성물의 투여 개시 및 제2 조성물의 투여 개시는 약 1분 내지 약 1시간 간격 또는 약 5분 내지 약 30분 간격으로 수행된다. 일부 구현예에서, 지침은 제1 조성물 및 제2 조성물이 2시간 이내, 1시간 이내, 30분 이내, 15분 이내, 10분 이내 또는 5분 이내의 간격으로 투여됨을 명시한다. 일부 구현예에서, 제1 조성물은 CD4+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 조성물은 CD8+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 지침은 제1 조성물이 제2 조성물 전에 투여됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 플루다라빈 및/또는 사이클로포스파미드를 포함하는 림프절 마비 요법을 추가로 포함한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 림프절 마비 요법이 T 세포 요법 및/또는 항-PD-L1 항체 또는 이의 단편을 투여하기 전에 투여됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 각 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 독립적으로 (약) 750 mg 내지 (약) 1500 mg 범위의 투여량이거나 투여량 범위임을 명시한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 1회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 (약) 750 mg임을 명시한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 1회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 (약) 1200 mg임을 명시한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 1회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 (약) 1500 mg임을 명시한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 각 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 (약) 1500 mg임을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 상기 2회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 동일함을 명시한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 상기 2회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 상이함을 명시한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 첫번째 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서 보다 더 적음을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 첫번째 28일 주기가 2, 3 또는 4 분량의 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하여 수행됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 첫번째 28일 주기가 (i) 선택적으로 15 및 22일에 2 분량에 대해 주 1회(Q1W); (ii) 선택적으로 1, 8, 15 및 22일에 4 분량에 대해 주 1회(Q1W); (iii) 선택적으로 1일 및 8일에 연속 2 분량에 대해 Q1W 후 선택적으로 15일에 1 분량에 대해 매 2주(Q2W); 또는 (iv) 선택적으로 1일 및 15일에 2 분량에 대해 매 2주(Q2W); 중에서 선택된 투약 스케쥴로 수행됨을 명시한다. 일부 구현예에서, 지침은 첫번째 28일 주기의 각 Q1W 분량이 독립적으로 총 투여량의 (약) 18% 내지 32%, 선택적으로 상기 주기에서 총 투여량의 (약) 25%이고/거나; 첫번째 28일 주기의 각 Q2W 분량이 독립적으로 총 투여량의 (약) 40% 내지 62.5%, 선택적으로 상기 주기에서 총 투여량의 (약) 50%임을 명시한다. 일부 구현예에서, 지침은 첫번째 28일 주기가 2 연속 분량에 대해 Q1W로 (약) 375 mg의 양 이후 (약) 750 mg의 양으로 1 분량에 대해 Q2W로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하여 수행되거나; 첫번째 28일 주기가 4 분량에 대해 Q1W로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하여 수행되며, 상기 4 분량은 (약) 225 mg의 2 연속 분량 후 (약) 375 mg의 2 연속 분량을 포함하거나; 또는 첫번째 28일 주기가 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 분량에 대해 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 Q1W로 투여하여 수행됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 두번째 및/또는 후속 28일 주기가 1 또는 2 분량의 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하여 수행됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 두번째 및/또는 후속 28일 주기가 (i) 선택적으로 1일 및 15일에 2 분량에 대해 매 2주(Q2W); 또는 (ii) 선택적으로 1일에 1 분량에 대해 매 4주(Q4W); 중에서 선택된 투약 스케쥴로 수행됨을 명시한다. 일부 구현예에서, 지침은 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 각 Q2W 분량이 총 투여량의 (약) 50%이고/거나; 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 Q4W 분량이 (약) 총 투여량임을 명시한다. 일부 구현예에서, 지침은 두번째 및/또는 후속 분량이 (약) 750 mg의 양으로 2 분량에 대해 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 Q2W로 투여하여 수행되거나; 또는 두번째 및/또는 후속 분량이 (약) 1500 mg의 양으로 1 분량에 대해 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 Q4W로 투여하여 수행됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 첫번째 28일 주기가 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 분량에 대해 주 1회(Q1W) 이후 (약) 750 mg의 양으로 1 분량에 대해 매 2주(Q2W) 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여함으로써 수행되고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기가 (약) 1500 mg의 양으로 1 분량에 대해 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 Q4W로 투여함으로써 수행됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 첫번째 28일 주기가 4 분량에 대해 주 1회(Q1W)로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하여 수행되며, 상기 4 분량은 (약) 225 mg의 2 연속 분량 이후 (약) 375 mg의 2 연속 분량을 갖고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기가 (약) 750 mg의 양으로 2 분량에 대해 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 매 2주(Q2W) 투여하여 수행됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 첫번째 28일 주기가 2 분량에 대해 주 1회(Q1W)로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하여 수행되며, 상기 분량 각각은 (약) 375 mg의 양이고, 선택적으로 상기 분량은 연속 분량이며, 선택적으로 상기 분량은 28일 주기에서 15일과 22일에 수행되고; 두번째 및/또는 후속 28일 주기가 (약) 1500 mg의 양으로 1 분량에 대해 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 Q4W로 투여하여 수행됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 3회 이상의 28일 주기로 수행됨을 명시한다. 일부 구현예에서, 지침은 세번째 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 첫번째 및/또는 두번째 28일 주기와 동일함을 명시한다. 일부 구현예에서, 지침은 세번째 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 (약) 1500 mg임을 명시한다. 일부 구현예에서, 지침은 세번째 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여가 첫번째 및/또는 두번째 28일 주기에 비해 항체 또는 단편을 더 많은 횟수로 투여하여 수행됨을 명시한다. 일부 구현예에서, 지침은 세번째 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여가 첫번째 및/또는 두번째 28일 주기와 항체 또는 단편을 동일한 횟수로 투여하여 수행됨을 명시한다. 일부 구현예에서, 지침은 세번째 28일 주기가 1 분량에 대해, 선택적으로 1일에 매 4주(Q4W) 투약 스케줄로 수행됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 T 세포 요법의 개시 후 3회 이내의 28일 주기로 수행됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 각각의 28일 주기가 (i) 선택적으로 1, 8, 15 및 22일에 4 분량에 대해 주 1회(Q1W); (ii) 선택적으로 1일 및 8일에 2 연속 분량에 대해 Q1W 후 선택적으로 15일에 1 분량에 대해 매 2주(Q2W); (iii) 선택적으로 1일 및 15일에 2 분량에 대해 매 2주(Q2W); 또는 (iv) 선택적으로 1일에 1 분량에 대해 매 4주(Q4W); 중에서 선택된 투약 스케쥴로 독립적으로 수행됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편이 첫번째 28일 주기에서 1, 8 및 15일, 두번째 28일 주기에서 1일 및 세번째 28일 주기에서 1일에 투여됨을 명시한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편이 첫번째 28일 주기에서 1, 8, 15 및 22일, 두번째 28일 주기에서 1 및 15일 및 세번째 28일 주기에서 1일에 투여됨을 명시한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편이 각 28일 주기에서 1일에 투여됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 대상체가 치료 후 부분 반응(PR)을 나타낼 경우, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 하나 이상의 추가 28일 주기로 수행됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 약 12 개월 또는 약 12 개월 미만의 총 기간 동안 수행됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 T 세포 요법의 투여 개시 후 21일 초과한 시기(예를 들어, 22-36일 내에, 약 29일)에 개시됨을 명시한다. 여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 T 세포 요법의 투여 개시 후 약 29일, 36일, 43일 또는 50일에 또는 29 일, 36 일, 43 일 또는 50 일 이내에 개시됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 대상체가 심각한 독성을 나타낼 경우, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편이 투여되어서는 안됨을 명시한다. 일부 구현예에서, 지침은 심각한 독성이 심각한 사이토카인 방출 증후군(cytokine release syndrome, CRS), 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 CRS이고/거나; 심각한 독성은 심각한 신경 독성, 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 신경 독성임을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 (i) 피크 또는 최대 수준의 T 세포 요법 세포가 대상체의 혈액에서 검출 가능하고/거나; (ii) 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 세포 수가 검출 가능하지 않거나 감소, 선택적으로 T 세포 요법 투여 후 선행 시점에 비해 감소되고/거나; (iii) 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 세포 수가 T 세포 요법의 투여 개시 후 대상체의 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상 감소되고/거나; (iv) 피크 또는 최대 수준의 T 세포 요법 세포가 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후의 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만이고 /거나; (v) 대상체가 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 질병 진행을 나타내고/거나 재발하였고/거나; (vi) 대상체에서 항-PD-L1 항체의 투여 개시 전 및 세포 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해 종양 부담이 증가한; 후 1 내지 3일 이내 또는 그 후, 선택적으로 직후 또는 1 내지 3일의 시기에 개시됨을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 대상체는 인간이다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 T 세포 요법 또는 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 비호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma, NHL)을 치료하기 위한 것임을 명시한다. 일부 구현예에서, 지침은 T 세포 요법 또는 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 대상체에서 비호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma, NHL)을 치료하기 위한 것이고, 상기 대상체는 NHL에 대한 하나 이상의 선행 요법, 선택적으로 또 다른 분량의 CAR을 발현하는 세포 외의 하나 또는 2가지 선행 요법으로 치료 후 완화 후에 재발하였거나 이에 대해 불응성이 되었고, 선택적으로 상기 선행 요법은 CD20 표적화 제제 또는 안트라사이클린이거나 이를 포함함을 명시한다. 일부 구현예에서, 지침은 공격적인 NHL, 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL), 선택적으로 형질 전환된 무통성 DLBCL-NOS; EBV 양성 DLBCL-NOS; T 세포/조직구가 풍부한 거대 B 세포 림프종; 1차 종격동 거대 B 세포 림프종(primary mediastinal large B cell lymphoma, PMBCL); 여포성 림프종(follicular lymphoma, FL), 선택적으로 여포성 림프종 3B 등급(follicular lymphoma Grade 3B, FL3B); 및/또는 DLBCL 조직 구조(이중/삼중 히트)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종 중 어느 하나로서의 NHL을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 지침은 상기 키트의 사용 대상이 되거나 사용 대상이 될 후보가 되기 위해 1 이하의 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태를 갖는 것으로 확인되어야 함을 명시한다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 세포는 비경구, 선택적으로 정맥 내 투여에 적합하다.
여기에 제공된 키트 중 어느 하나의 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 비경구, 선택적으로 정맥 내 투여에 적합하다.
도 1은 유세포 분석(flow cytometry)에 의해 검출된 바와 같이, 실시예 1에 기재된 바와 같이 FMO(fluorescence-minus-one) 대조군과 비교하여, 해동 직후(시간 0) 및 1.25:1의 이펙터:표적(E:T)의 비율로 K562.CD19 표적 세포와의 배양물에서 24 시간 동안 인큐베이션 후, 1) CD4 및 항-CD19 키메라 항원 수용체(CAR) 둘다의 양성 표면 발현을 위해 게이트된 T 세포 집단(왼쪽 참조) 또는 2) CD8 및 항-CD19 키메라 항원 수용체(CAR) 둘다의 양성 표면 발현을 위해 게이트된 T 세포 집단(오른쪽 참조) 상에서의 PD-1 표면 발현을 도시한다.
도 2는 유세포 분석에 의해 검출된 바와 같이, 실시예 1에 기재된 바와 같이, 해동 직후(시간 0, T0) 및 5:1, 2.5:1 또는 1.25:1의 이펙터:표적(E:T)의 3가지 상이한 비율로 K562.CD19 표적 세포와의 배양물에서 24 시간 동안 인큐베이션 후, 1) CD4 및 항-CD19 키메라 항원 수용체(CAR) 둘다의 양성 표면 발현을 위해 게이트된 T 세포 집단(상단 참조) 또는 2) CD8 및 항-CD19 키메라 항원 수용체(CAR) 둘다의 양성 표면 발현을 위해 게이트된 T 세포 집단(하단 참조) 상에서의 PD-1 표면 발현을 중간 형광 강도에 의해 도시한다.
도 3a는 실시예 1에 기재된 바와 같이, 2.5:1의 이펙터:표적(E:T)의 비율로 K562.CD19 표적 세포의 자극 후에 PD-1 표면 발현에 대해 양성이었던 3개의 도너로부터 CD4 양성 항-CD19 CAR 발현 세포(도 3a의 상단 참조) 또는 CD8 양성 항-CD19 CAR 발현 세포(도 3a의 하단 참조) 중 하나의 백분율을 도시한다. 도 3b는 실시예 1에 기재된 바와 같이, 2.5:1의 이펙터:표적(E:T)의 비율로 K562.CD19 표적 세포의 자극 후에 CD4 양성 항-CD19 CAR 발현 세포(도 3b의 상단 참조) 또는 CD8 양성 항-CD19 CAR 발현 세포(도 3b의 하단 참조) 중 하나에서 PD-1의 중간 형광 강도(mean fluorescence intensity, MFI)를 도시한다.
도 4a 내지 도 4c는 실시예 2a에 기재된 바와 같이, (1) 두르발루맙의 존재 하에 K562.CD19 표적 세포(검정 역삼각형 참조), (2) 아이소타입 대조군 존재 하에 K562.CD19 표적 세포(검정 원 참조), (3) 두르발루맙의 존재 하에 K562.CD19.PDL1 표적 세포(회색 역삼각형 참조) 또는 (4) 아이소타입 대조군의 존재 하에 K562.CD19.PDL1 표적 세포와 3개의 상이한 도너로부터의 항-CD19 CAR 발현 세포를 24 시간 동안 인큐베이션한 후 취한 상청액에서의 사이토카인(IFNγ, IL-2 및 TNF-a) 생성 수준을 도시한다.
도 5a 내지 도 5c는 실시예 2b에 기재된 바와 같이, (1) 두르발루맙의 존재 하에 K562.CD19 표적 세포(검정 역삼각형 참조), (2) 아이소타입 대조군 존재 하에 K562.CD19 표적 세포(검정 원 참조), (3) 두르발루맙의 존재 하에 K562.CD19.PDL1 표적 세포(회색 역삼각형 참조) 또는 (4) 아이소타입 대조군의 존재 하에 K562.CD19.PDL1 표적 세포와 세포를 24 시간 동안 별도로 공배양한 후 도너 1(도 5a 참조), 도너 2(도 5b 참조) 및 도너 3(도 5c 참조)으로부터의 CD4 양성 항-CD19 CAR 발현 세포 또는 CD8 양성 항-CD19 CAR 발현 세포 중 하나에서 CD25, CD69 및 PD-1의 표면 발현을 도시한다.
도 6은 실시예 3에 기재된 바와 같이, 특정 시점에서 측정된 화학요법 불응성 형질 전환 DLBCL을 갖는 대상체의 말초 혈액에서 CD3 양성 CAR 발현 T 세포, CD4 양성 CAR 발현 T 세포 및 CD8 양성 CAR 발현 T 세포의 수를 도시한다.
본 발명은 질병 또는 병태, 예를 들어 B 세포 악성 종양을 치료하기 위해 세포 요법, 예컨대 T 세포 요법 및 체크포인트 억제제, 예컨대 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여를 포함하는 병용 요법을 제공한다. 일부 측면에서, 체크포인트 억제제는 체크포인트 경로의 PD-1/PD-L1 축과 같은 면역 체크포인트 경로의 단백질 또는 성분을 억제하거나 차단할 수 있다. 일부 구현예에서, 예시적인 체크포인트 억제제는 항-PD-L1 항체 또는 항-PD-1 항체를 포함한다. 일부 측면에서, T 세포 요법은 질병 또는 장애, 예를 들어 B 세포 악성 종양과 같은 암 또는 증식성 질환, 예를 들어 비호지킨 림프종(NHL) 또는 이의 하위 유형과 관련된 항원을 특이적으로 인식 및/또는 표적화하는 T 세포를 포함하는 입양 T 세포 요법이다. 또한 T 세포 요법을 포함하는 조성물 및/또는 면역 조절 화합물을 포함하는 조성물을 함유하는 키트와 같은 제조 물품 및 조합물 및 상기 조성물의 용도 및 암을 포함한 질병, 병태 및 장애를 치료 또는 예방하기 위한 조합물이 제공된다.
T 세포 기반 요법과 같은 세포 요법, 예를 들어 입양 T 세포 요법(다른 입양 면역 세포 요법 및 입양 T 세포 요법뿐만 아니라 키메라 항원 수용체(CAR)와 같은 관심 질병 또는 장애에 특이적인 키메라 수용체 및/또는 다른 재조합 항원 수용체를 발현하는 세포의 투여를 수반하는 것을 포함)은 암 및 기타 질병 및 장애의 치료에 효과적일 수 있다. T 세포의 표면 상에 키메라 항원 수용체(CAR)와 같은 재조합 수용체의 조작된 발현은 T 세포 특이성의 방향 수정을 가능하게 한다. 임상 연구에서, CAR 발현 T 세포(CAR-T 세포), 예를 들어 항-CD19 CAR-T 세포는 백혈병과 림프종 환자 모두에서 지속적인, 완전한 반응을 생성했다(Porter et al. (2015) Sci Transl Med., 7:303ra139; Kochenderfer (2015) J. Clin. Oncol., 33: 540-9; Lee et al. (2015) Lancet, 385:517-28; Maude et al. (2014) N Engl J Med, 371:1507-17).
특정 상황에서, 입양 세포 요법에 대한 이용 가능한 접근이 항상 완전히 만족스럽지 않을 수 있다. 예를 들어, CAR T 세포 지속성이 림프종을 가진 많은 대상체에서 검출될 수 있다 하더라도, 급성 림프아구성 백혈병(acute lymphoblastic leukemia, ALL)을 가진 대상체에 비해 NHL을 가진 대상체에서 보다 소수의 완전한 반응(complete response, CR)이 관찰되었다. 보다 구체적으로, CAR T 세포 주입 후에 최대 80%의 전반적으로 보다 높은 반응률(47% 내지 60%의 CR 비율)이 보고되었지만, 일부 반응은 일시적이며 대상체는 지속적인 CAR T 세포의 존재 하에 재발하는 것으로 나타났다(Neelapu, 58th Annual Meeting of the American Society of Hematology (ASH): 2016; San Diego, CA, USA. Abstract No. LBA-6.2016; Abramson, Blood. 2016 Dec 01;128(22):4192). 다른 연구에서 40%의 장기간 CR 비율이 보고되었다(Schuster, Ann Hematol. 2016 Oct;95(11):1805-10).
일부 측면에서, 상기에 대한 설명은 CAR 발현 T 세포 순환의 면역학적 고갈 및/또는 T 림프구 집단의 변화이다. 이는 특정 상황에서, 최적의 효능이 활성화, 증폭 역량, 세포 독성 사멸 및 사이토카인과 같은 다양한 인자의 분비를 포함한 다양한 이펙터 기능을 발휘하는 역량, 특정 표현형 상태(예컨대 장기 기억, 덜분화된 및 이펙터 상태)로의 분화, 전환 또는 재프로그래밍에 관여하고 장기간을 포함한 지속 역량, 질병의 국소 미세 환경에서 면역 억제 상태를 피하거나 감소시키는 역량, 표적 리간드 또는 항원의 클리어런스 및 이에 대한 재노출 후에 효과적이고 강력한 리콜 반응 제공 역량, 고갈, 아네르기, 말단 내성, 말단 분화 및/또는 억제 상태로의 분화를 피하거나 감소시키는 역량을 갖는 투여된 세포의 능력에 따라 달라질 수 있기 때문이다.
일부 구현예에서, 조작된 세포의 노출 및 지속성은 대상체에 투여된 후 감소 또는 하락한다. 그러나, 일부 경우에, 관찰에 의하면 재조합 수용체를 발현하는(예를 들어, 증가된 세포 수 또는 시간에 따른 지속 기간) 투여된 세포가 생체 내에서 재증폭되어 입양 세포 요법의 효능 및 치료 결과를 향상시킬 수 있음을 나타낸다.
일부 측면에서, 제공된 구현예는 예를 들어 PD-1/PD-L1의 면역 체크포인트 축 억제제와 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체 또는 항-PD-1 항체를 투여함으로써 투여된 세포의 고갈 및/또는 억제를 감소 또는 방지하거나 상기 재증폭을 허용한다.
프로그램된 세포 사멸 1(Programmed cell death 1, PD-1)은 B 세포, NK 세포 및 T 세포에서 발현되는 면역 체크포인트 단백질이다(Shinohara et al., 1995, Genomics 23:704-6; Blank et al., 2007, Cancer Immunol Immunother 56:739-45; Finger et al., 1997, Gene 197:177-87; Pardoll (2012) Nature Reviews Cancer 12:252-264). PD-1의 주요 역할은 감염에 대한 반응으로 염증 동안 말초 조직에서 T 세포의 활성을 제한하는 것뿐만 아니라 자가 면역을 제한하는 것이다. PD-1 발현은 활성화된 T 세포에서 유도되고, 내인성 리간드 중 하나에 PD-1의 결합은 자극성 키나아제를 억제함으로써 T-세포 활성화를 억제하는 작용을 한다. PD-1은 또한 조절 T 세포(Treg 세포) 상에서 고도로 발현되고 리간드의 존재 하에 이의 증식을 증가시킬 수 있다(Pardoll (2012) Nature Reviews Cancer 12:252-264). 리간드에 의한 PD-1 결찰의 1차 결과는 T 세포 수용체(TCR)의 하류 신호 전달을 억제하는 것이다. PD-1 신호 전달은 TCR에 결합하는 주요 조직 적합성 복합체(major histocompatibility complex, MHC)에 의해 제시된 펩티드 항원에 가까이 근접하여 PD-1 리간드에 결합하는 것이 필요할 것으로 여겨진다(Freeman, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A, 105:10275-10276 (2008)). PD-L1은 T 세포에서 억제성 신호 전달을 야기하는 주요 PD-1 리간드이다. PD-L2는 T 세포 기능 또는 활성을 억제할 수있는 PD-1의 상이한 리간드이다.
PD-L1(프로그램된 세포 사멸 리간드-1; B7 상동체 1(B7-H7) 또는 CD274 유전자(CD274)에 의해 암호화된 분화 클러스터로도 공지)은 PD-1(프로그램된 세포 사멸 단백질 1)에 결합하고 면역 및 자기 내성을 포함한 면역 시스템 기능을 조절하는 역할을 한다. PD-L1은 T 세포, 예를 들어 조절 T 세포(Treg), 항원 제시 세포(APC, 예를 들어 수지상 세포(dentritic cell, DC)), 대식세포 및 B 세포)뿐만 아니라 췌장 섬 세포, 혈관 내피 세포(태반, 고환, 눈)를 포함한 비조혈 세포 및 종양에서 발현된다. PD-L1/PD-1 경로는 자가 반응성 T 세포의 약화, 유도성 Treg 세포의 발달, CD4+ 이펙터 T 세포 및 CD8+ T 세포의 억제에 관여한다. 따라서, PD-L1/PD-1 경로를 통한 억제 신호를 방해하는 것은 항종양 면역을 향상시키기 위한 치료 옵션이다.
일부 구현예에서, 활성화된 CD8+ 세포 독성 T 세포는 면역 시냅스의 형성 후 종양 세포 상에 제시된 이의 표적 항원을 인식하고 종양 세포 사멸을 개시할 수 있다. 일부 맥락에서, 종양 세포는 T 세포 상에서 PD-1에 결합하는 PD-L1 및/또는 PD-L2를 발현함으로써 T 세포 활성을 약화시킬 수 있으며, 이는 세포 독성을 감소시키고 T 세포 고갈로 이어지는 억제성 체크 포인트 신호 전달을 초래할 수 있다. PD-L1은 림프종, 종양 및 종양 미세 환경(tumor microenvironment, TME) 모두에서 발현되고, CAR T 세포의 종양 관련 면역 억제에서 역할을 할 수 있다(Andorsky, Clin. Cancer. Res. 2011 Jul 1;17(13):4232-44).
일부 상황에서, 면역 체크포인트를 방해하는 항체는 PD-L1/PD-1 면역 체크포인트를 방해함으로써 다수의 암에서 종양 퇴행을 생성한다. PD-1 차단 항체는 PD-L1 및 PD-L2와 PD-1의 상호 작용을 억제하는 반면, 항-PD-L1 항체는 PD-L1과 PD-1 사이의 상호 작용을 억제하고, 일부 맥락에서, 이는 향상된 T 세포 활성, 증가된 사이토카인 생성 및 종양 세포 지향 세포 독성을 초래한다. PD-1 및 PD-L1의 발현이 다양한 림프종에서 검출되었다. 높은 수준의 PD-L1은 T 세포 고갈을 촉진하고, PD-L1 봉쇄는 T 세포 기능을 소생시킨다.
일부 맥락에서, 종양 침윤성 림프구(tumor-infiltrating lymphocyte, TIL)는 PD-1을 발현하며, 예비 데이터는 또한 CAR T 세포가 CAR을 통한 자극시 PD-L2가 아니라 PD-1 및 PD-L1의 발현을 상향 조절함을 암시한다. 문헌[PCT 출원 공개 번호 WO2016196388]을 참조한다. 따라서, TIL 및 CAR 발현 T 세포 둘다는, 일부 경우에 PD-1/PD-L1에 의한 억제의 표적일 수 있다. 상기 데이터를 염두에두고, PD-1 경로를 통한 T 세포 억제를 차단하는 제제와 병용으로 제공된 CAR T 세포는 CAR T 세포의 개선된 증폭 및 CAR T 세포 지속성 및 기능의 연장된 지속으로 인해 항종양 활성을 향상시킬 수 있다. 일부 맥락에서, PD-L1은 인터페론-감마(IFNγ)에 반응하여 상향 조절된다(Chen, Immunobiology. 2012 Apr;217(4):385-93; Abiko, Br J Cancer. 2015 Apr 28;112(9):1501-9). 상기와 같이, PD-L1 발현은 활성화된 CAR T 세포에 의한 IFNγ의 분비로 인해 CAR T 세포 작용 부위에서 종양 세포 및 다른 침윤성 세포 상에서 유도되거나 추가로 상향 조절될 수 있다. 림프종 세포에 의한 PD-L1의 발현은 종양 미세 환경 내에서 종양 관련 면역 억제에서 역할을 할 수 있다.
PD-1 또는 PD-L1에 대한 단클론성 차단 항체는 다양한 암을 가진 대상체에서 안전하고 효과적인 것으로 나타 났으며, CAR T 세포로 처리된 대상체에서 PD-L1 매개 면역 억제를 역전시키는데 유용할 수 있다. PD-1/PD-L1 축의 봉쇄가 NHL에서 탐색되었다(Lesokhin, J Clin Oncol. 2016 Aug 10; 34(23): 2698-704). NHL에서 PD-1 길항제 단클론성 항체 니볼루맙의 1 상 연구 결과는 PD-1 억제가 고형 종양의 치료에 사용된 유사한 분량 수준(1 및 3 mg/kg)에서 허용 가능한 안전성 프로파일을 가짐을 나타냈다. B-세포 NHL을 가진 31 명의 치료 대상체 중 71 %가 폐렴의 심각한 부작용(serious adverse event, SAE)을 갖는 2 명의 대상체(7 %)를 포함하여 약물 관련 부작용(adverse event, AE)을 경험했다. 임상 연구는 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL)을 갖는 11 명의 대상체를 포함하였고, 임상 활성의 증거가 관찰되었다. 2 명의 대상체는 CR을 달성했고 2 명의 추가 대상체는 PR을 달성했다. DLBCL을 가진 대상체의 코호트에 대해 무 진행 생존(progression-free survival, PFS)의 중앙값은 6 주(6 내지 29 범위)였다. B-세포 악성 종양에서 두르발루맙의 활성을 평가하는 연구가 현재 진행되고 있다.
DLBCL에서 또 다른 CD19 지향 CAR T 세포 생산물 CTL019(Schuster, Blood. 2016 Dec 01; 128(22):3026)를 조사하는 임상 시험의 예비 결과, 하나의 가능한 저항 메커니즘으로 CAR T 세포 주입 전에 림프종에서 PD-L1의 높은 발현이 확인되었다. PD-1 차단 항체로 CAR T 세포 요법에 반응하지 않는 대상체의 치료는 임상적으로 중요한 항 종양 반응 및 CAR T 세포의 증폭을 초래하였다(Chong, Blood. 2017 Feb 23; 129 (8): 1039-41).
특정 구현예에서, 세포 요법 투여 후 대상체의 혈액에서 세포 요법의 약동학(pharmacokinetic, PK)은 세포 요법에 대해 반응하지 않는(예를 들어, PD를 나타냄) 대상체 대 반응하는(예를 들어, CR 또는 객관적인 반응(objective response, OR)을 나타냄) 대상체 사이에 유사하거나 실질적으로 상이하지 않음이 발견된다. 일부 구현예에서, 상기 관찰은 세포 요법이 대상체에서 증폭했거나 증폭하고 있으나 최적의 효능을 나타내지 않을 수 있음을 나타낸다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)가 세포 요법에 반응하지 않는(예를 들어, 진행성 질환(progressive disease, PD)을 나타냄) 대상체 또는 세포 요법이 최적의 효능을 나타내지 않았던 대상체에 투여된다.
일부 맥락에서, 세포 요법의 최적 효능은 투여된 세포가 표적, 예를 들어 표적 항원을 인식하고 결합하는 능력, 대상체, 종양 및 이의 환경 내에서 적절한 부위로 왕래, 국소화 및 성공적으로 진입하는 능력에 따라 달라질 수 있다. 일부 맥락에서, 최적 효능은 활성화, 증폭되고, 세포 독성 사멸 및 사이토카인과 같은 다양한 인자의 분비를 포함한 다양한 이펙터 기능을 발휘하고, 장기간을 포함하여 지속되고, 특정 표현형 상태(예컨대 장기 기억, 덜분화된 및 이펙터 상태)로의 분화, 전환 또는 재프로그래밍에 관여하고, 질병의 국소 미세 환경에서 면역 억제 상태를 감소시키거나 피하고, 표적 리간드 또는 항원의 클리어런스 및 이에 대한 재노출 후에 효과적이고 강력한 리콜 반응을 제공하고, 고갈, 아네르기, 말초 내성, 말단 분화 및/또는 억제 상태로의 분화를 피하거나 감소시키는, 투여된 세포의 능력에 따라 달라질 수 있다.
일부 측면에서, 세포 요법, 예를 들어 T 세포 요법의 효능은 질병이나 장애, 예를 들어 TME의 국소 미세 환경에 존재하는 면역 억제 활성 또는 인자에 의해 제한될 수 있다. 일부 측면에서, TME는 T 세포 요법을 위해 투여된 T 세포의 활성, 기능, 증식, 생존 및/또는 지속성을 억제할 수 있는 인자 또는 조건을 함유하거나 생산한다. 이론에 구속되지 않고, 제공된 방법 및 용도는 세포 요법, 예를 들어 CAR 발현 세포 요법은 림프종 종양 미세 환경에서 조우하게 되는 PD-L1과 같은 면역 체크포인트 경로 성분에 의해 기능적으로 억제될 수 있고, 대상체는 세포 요법 및 체크포인트 억제제 예컨대 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)을 포함하는 병용 요법의 도움을 유도하여 상기 면역 억제 신호와 조우할 때 세포 요법, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 이펙터 기능을 연장시킬 수 있다는 가정에 기초한다.
일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예컨대 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 후에 세포 요법, 예를 들어 T 세포(예를 들어, CAR+ T 세포) 분량의 투여 개시는 세포 요법의 활성, 효능 및/또는 지속성의 개선 및/또는 처리된 대상체의 반응 개선을 초래할 수 있다. 일부 구현예에서, 병용 요법은 세포 요법, 예를 들어 CAR+ T 세포와 같은 조작된 T 세포 요법의 효능 및/또는 치료 효과의 안전성을 향상, 부양 및/또는 촉진한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)와 같은 체크포인트 억제제는 투여된 세포, 예를 들어 재조합 수용체, 예를 들어 CAR을 발현하는 세포의 효능, 생존 또는 지속성을 향상시키거나 개선시킨다.
일부 구현예에서, 제공된 구현예는 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체와 같은 체크포인트 억제제의 투여 후에 분획화된 투약 스케쥴과 함께 및 세포 요법(예를 들어 CAR+ T 세포)의 투여 개시는 일반적으로 안전했고 특정 대상체에서 약동학 프로파일, 전반적인 반응 및 연장된 반응의 개선과 관련되어 있다는 관찰에 기초한다. 일부 측면에서, 분획화된 투약 스케쥴은, 첫번째 주기가 두번째 또는 후속 주기에서의 개별 분량 횟수에 비해 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체의 개별 분량을 더 많은 횟수로 투여하여 수행되는, 다수의 투여 주기(예를 들어 2회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체와 같은 체크포인트 억제제의 투여)를 포함하는 용량 요법을 포함한다. 특히, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체의 투여 후, 심지어는 CAR+ T 세포의 초기 감소가 관찰된 시점 후에 특정 대상체에서 CAR+ T 세포의 증폭 및 연장된 완전 반응과 같은 연장된 반응에서의 개선이 관찰되었다. 일부 측면에서, 상기 관찰은 투여된 CAR+ T 세포의 억제 감소 및/또는 고갈 감소 또는 재증폭과 일치한다. 예시적인 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체 두르발루맙(durvalumab)에 대해 나타난 바와 같은 결과는 제공된 투약 요법이 CAR+ T 세포 요법과 병행하여 안전하고, 특히 체크포인트 억제제의 투여 후 CAR+ T 세포의 약동학 프로파일의 개선 및/또는 재증폭을 달성할 수 있는 환자에서 연장된 완화를 포함한, 환자에서 임상 반응을 초래할 수 있음을 지지한다. 일부 측면에서, 상기 결과는 CAR+ T 세포와 항-PD-L1 항체 또는 항-PD-1 항체와 같은 PD-1/PD-L1 경로를 표적화하는 억제제와 같은 체크포인트 억제제의 병용 요법을 지지하여 처리된 대상체의 반응을 개선하고/거나 세포 요법의 활성, 유효성, 증폭 및/또는 지속성의 개선을 달성한다.
일부 측면에서, 제공된 방법 및 용도는 특정 대안적인 방법, 예를 들어 본 명세서에 기재된 바와 같은 병용 요법으로 함께 투여하지 않거나 단일 요법으로 항-PD-L1 항체와 같은 체크포인트 억제제 또는 T 세포 요법 투여를 포함하는 방법에 비해 예컨대 특정 투약 방법 또는 요법에 기초하거나 치료된 특정 그룹의 대상체에서 개선되거나 보다 지속적인 반응 또는 효능을 달성하거나 제공한다. 일부 구현예에서, 본 방법은 예를 들어, T 세포 요법(예를 들어 CAR 발현 T 세포)과 같은 입양 세포 요법을 위한 세포를 포함하는 조성물과 같은 T 세포 요법과 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)와 같은 체크포인트 억제제를 투여함으로써 유리하다.
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본 명세서에 사용된 섹션 제목은 단지 조직화를 위한 목적이며 기재된 주제를 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다.
I. 병용 요법
일반적으로 특정 B 세포 악성 종양과 같은 암 또는 종양이거나 이를 포함하는 질병 또는 병태를 갖는 대상체의 치료를 위해, T 세포(예를 들어, CAR-T 세포)와 같은 조작된 세포 및 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)와 같은 면역 체크포인트 경로의 PD-1/PD-L1 축 억제제와 같은 체크포인트 억제제 및 이의 조성물의 용도 및 방법이 제공된다. 일부 측면에서, 방법은 비호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma, NHL)과 같은 백혈병 또는 림프종을 치료하기 위한 것이다. 일부 측면에서, 본 방법과 용도는 특정 대안적인 방법에 비해 예를 들어 처리된 특정 그룹의 대상체에서 개선된 반응 및/또는 보다 지속적인 반응 또는 효능을 제공하거나 달성한다. 예를 들어, 여기에 제공된 방법에 사용하기 위한 세포를 함유하는 T 세포 요법 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 함유하는 제조 물품 및 키트가 또한 제공된다. 일부 구현예에서, 제조 물품 및 키트는 선택적으로 여기에 제공된 방법에 따라, 사용하기 위한 지침을 함유한다.
조작된 세포 및 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체 또는 항-PD-1 항체 또는 이의 단편은 다양한 치료, 진단 및 예방적 조치에 유용하다. 예를 들어, 조작된 세포 또는 조작된 세포를 포함하는 조성물 및 체크포인트 억제제는 대상체에서 다양한 질병 및 장애를 치료하는데 유용하다. 상기 방법 및 용도는 예를 들어, 조작된 세포 및 체크포인트 억제제 또는 동일한 것을 함유하는 조성물을 종양 또는 암과 같은 질병, 병태 또는 장애를 갖는 대상체에 투여하는 것을 수반한 치료 방법 및 용도를 포함한다. 일부 구현예에서, 조작된 세포 또는 동일한 것을 포함하는 조성물 및 체크포인트 억제제를 질병 또는 장애의 효과적인 치료를 위해 효과적인 양으로 투여한다. 용도는 상기 방법 및 치료에서 및 상기 치료 방법을 수행하기 위한 약제의 제조에서 조작된 세포 또는 조성물 및 체크 포인트 억제제의 용도를 포함한다. 일부 구현예에서, 본 방법은 조작된 세포 또는 동일한 것을 포함하는 조성물 및 체크포인트 억제제를 질병 또는 병태를 갖거나 갖는 것으로 의심되는 대상체에 개별적으로 또는 같이 투여함으로써 수행된다. 일부 구현예에서, 본 방법은 대상체에서 질병 또는 병태 또는 장애를 이로써 치료한다.
일부 구현예에서, 본 방법 및 용도는 1) 백혈병 또는 림프종(예를 들어 NHL)과 같은 B 세포 악성 종양에 특이적이고/거나 이것이 유래된 세포 유형에 의해 발현되거나 이와 관련된 항원을 인식하는 일반적으로 키메라 항원 수용체(CAR)와 같은 키메라 수용체인 유전자 조작된(재조합) 세포 표면 수용체를 발현하는 세포를 포함한 T 세포 요법을 대상체에 투여하는 단계; 및 2) 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)를 대상체에 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 또는 이의 항원 결합 단편은 T 세포 요법을 투여한 후(후속적으로) 투여된다. 일부 경우에, 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 T 세포 요법의 투여를 받았던 대상체에 투여된다. 방법은 일반적으로 1 이상의 분량의 세포 및 1 이상의 분량의 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)을 대상체에 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 병용 요법은 치료될 특정 질병 또는 병태를 갖는 대상체에 투여된다. 치료되는 질병 또는 병태는 항원의 발현이 예를 들어 질병, 병태 또는 장애의 원인, 악화 또는 그렇지 않으면 이에 수반되며, 상기 질병, 병태 또는 장애의 병인과 관련되고/거나 병인에 수반되는 임의의 것일 수 있다. 예시적인 질병 및 병태는 세포의 악성 종양 또는 형질 전환(예를 들어 암)과 관련된 질병 또는 병태를 포함할 수 있다. 치료될 수 있는 다양한 질병 및 병태와 관련된 항원을 포함하는 예시적인 항원들이 상기에 기재되어 있다. 특정 구현예에서, 키메라 항원 수용체 또는 전이 유전자 TCR은 질병 또는 병태와 관련된 항원에 특이적으로 결합한다. 일부 구현예에서, 수용체에 의해 표적화되는 항원은 다수의 공지된 B 세포 마커 중 어느 하나와 같은 B 세포 악성 종양과 관련되고/거나 이에 의해 발현되는 항원을 포함한다. 일부 구현예에서, 수용체에 의해 표적화되는 항원은 CD20, CD19, CD22, ROR1, CD45, CD21, CD5, CD33, Ig카파, Ig람다, CD79a, CD79b 또는 CD30이다. 일부 측면에서, B 세포 악성종양에 의해 발현되거나 이와 관련된 항원은 CD19이다.
제공된 구현예 중에 B 세포 악성 종양을 치료하는 방법이 있다. 일부 구현예에서, 치료될 질병 또는 장애에는 백혈병 및 림프종, 예를 들어, 급성 골수성(또는 골수형성) 백혈병(acute myeloid (or myelogenous) leukemia, AML), 만성 골수성(또는 골수형성) 백혈병(chronic myeloid (or myelogenous) leukemia, CML), 급성 림프구성(또는 림프아구성) 백혈병(acute lymphocytic (or lymphoblastic) leukemia, ALL), 만성 림프구성 백혈병(chronic lymphocytic leukemia, CLL), 모발 세포 백혈병(hairy cell leukemia, HCL), 작은 림프구성 림프종(small lymphocytic lymphoma, SLL), 맨틀 세포 림프종(Mantle cell lymphoma, MCL), 변연부 림프종(Marginal zone lymphoma, MZL), 버키트 림프종(Burkitt lymphoma, BL), 호지킨 림프종(Hodgkin lymphoma, HL), 비호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma, NHL), 역형성 거대 세포 림프종(Anaplastic large cell lymphoma, ALCL), 여포성 림프종, 불응성 여포성 림프종, 미만성 거대 B 세포 림프종(diffuse large B-cell lymphoma, DLBCL) 및 다발성 골수종(multiple myeloma, MM)이 포함된다. 일부 구현예에서, 질병 또는 병태는 급성 림프아구성 백혈병(acute lymphoblastic leukemia, ALL), 성인 ALL, 만성 림프아구성 백혈병(chronic lymphoblastic leukemia, CLL), 비호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma, NHL) 및 미만성 거대 B세포 림프종(Diffuse Large B-Cell Lymphoma, DLBCL)에서 선택된 B 세포 악성 종양이다. 일부 구현예에서, 질병 또는 병태는 NHL이고 상기 NHL은 공격적인 NHL, NOS(드 노보(de novo) 및 비활동성으로부터 형질 전환) 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL), 1차 종격동 거대 B 세포 림프종(primary mediastinal large B cell lymphoma, PMBCL), T 세포/조직세포 풍부 거대 B 세포 림프종(T cell/histocyte-rich large B cell lymphoma, TCHRBCL), 버키트 림프종, 맨틀 세포 림프종(MCL) 및/또는 여포성 림프종(FL), 선택적으로, 여포성 림프종 3B 등급(follicular lymphoma Grade 3B, FL3B)으로 이루어진 그룹에서 선택된다.
일부 구현예에서, 방법은 분량의 항원 수용체 발현 세포(예를 들어 CAR 발현 세포) 및 후속적인 분량의 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)으로 비호지킨 림프종(NHL)과 같은 림프종 또는 백혈병을 갖는 대상체를 치료하는 것을 포함한다.
일부 구현예에서, NHL은 Lugano 분류에 기초한 단계일 수 있다(예를 들어 Cheson et al., (2014) JCO 32(27):3059-3067; Cheson, B.D. (2015) Chin Clin Oncol 4(1):5 참조). 일부 경우에, 단계는 로마 숫자 I부터 IV(1-4)로 기재되고 림프 시스템 외부 장기(림프절외 장기)에 영향을 미치는 제한된 단계(I 또는 II) 림프종은 "E"로 표시된다. I 단계는 하나의 노드 또는 인접한 노드 그룹 또는 노드 관여없는 단일 림프절외 병변(IE)의 관여를 나타낸다. 2 단계는 횡격막의 같은 쪽에 있는 2 이상의 노드 그룹 또는 제한된 인접하는 림프절외 관여(IIE)를 갖는 노드 규모에 의한 I 또는 II 단계의 관여를 나타낸다. III 단계는 비장 관여와 함께 횡경막 위의 노드 또는 횡경막 양쪽에 있는 노드의 관여를 나타낸다. IV 단계는 추가의 비인접한 림프절 외 개입의 관여를 나타낸다. 또한, "부피가 큰 질병(bulky disease)"은 특히 II 단계에 관한 가슴의 거대 종양을 설명하는데 사용될 수 있다. 질병의 정도는 열성 림프종에 대해서는 양전자 방출 단층 촬영(positron emission tomography, PET)-컴퓨터 단층 촬영(computed tomography, CT) 및 비열성 조직 구조에 대해서는 CT에 의해 결정된다.
일부 구현예에서, 동부 종양학 그룹 협회(Eastern Cooperative Oncology Group, ECOG) 수행 상태 지표는 치료를 위한 대상체, 예를 들어 선행 요법으로부터 수행이 좋지 않았던 대상체를 평가하거나 선택하기 위해 사용될 수 있다(예를 들어, Oken et al. (1982) Am J Clin Oncol. 5:649-655 참조). 일부 구현예에서, 대상체는 1 이하의 ECOG 상태를 갖는다. ECOG 척도의 수행 상태는 스스로를 돌보는 능력, 일상적인 활동 및 신체 능력(예를 들어 걷기, 일하기 등)의 관점에서 환자의 기능 수준을 설명한다. 일부 구현예에서, ECOG 수행 상태 0은 대상체가 정상적인 활동을 수행할 수 있음을 나타낸다. 일부 측면에서, ECOG 수행 상태 1을 갖는 대상체는 신체 활동에 일부 제한을 보이나 대상체는 완전히 걸을 수 있다. 일부 측면에서, ECOG 수행 상태 2를 갖는 환자는 50% 이상 걸을 수 있다. 일부 경우에, ECOG 수행 상태 2를 갖는 대상체는 스스로를 돌볼 수도 있다; 예를 들어, 문헌[Sørensen et al., (1993) Br J Cancer 67(4) 773-775]을 참조한다. ECOG 수행 상태를 반영하는 기준이 하기 표 1에 기재되어 있다.
[표 1]
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일부 구현예에서, 대상체는 이중/삼중 히트 림프종 또는 이중/삼중 히트 분자 하위 유형의 림프종을 갖는 것으로 확인되거나 확인되었다. 일부 구현예에서, 림프종은 MYC(골수 세포증 종양 유전자), BCL2(B-세포 림프종 2) 및/또는 BCL6(B-세포 림프종 6) 유전자 재배열(예를 들어 전좌)의 존재를 특징으로 하는 이중 히트 림프종이다. 일부 구현예에서, 상기 유전자 재배열은 다른 유전자 재배열과 조합하여 MYC/8q24 유전자좌에 영향을 미친다. 예를 들어, 다른 유전자 재배열은 BCL2를 포함하는 t(14;18)(q32;q21)를 포함한다. 일부 구현예에서, 유전자 재배열은 BCL6/3q27과 조합하여 MYC/8q24 유전자좌에 영향을 미친다. 일부 구현예에서, 림프종은 MYC, BCL2 및 BCL6 유전자 재배열의 존재를 특징으로 하는 삼중 히트 림프종이다; 예를 들어, 문헌[Aukema et al., (2011) Blood 117:2319-2331]을 참조한다. 상기 구현예의 일부 측면에서, 대상체는 ECOG 0-1이거나 MZL 또는 CLL로부터 형질 전환된 DLBCL을 갖지 않거나 갖는 것으로 의심되지 않거나 특성화되지 않는다. 측면에서, 요법은 상기 대상체에 대해 표시되고/거나 지침은 상기 집단 내의 대상체에 대한 투여를 나타낸다. 일부 구현예에서, 2016년 WHO 기준(Swerdlow et al., (2016) Blood 127(20):2375-2390)에 기초하여, 이중/삼중 히트 림프종은 DLBCL 조직 구조(이중/삼중 히트)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종으로 간주될 수 있다.
일부 구현예에서, 병용 요법은 세포 요법, 예를 들어 T 세포(예를 들어 CAR+ T 세포)의 분량으로의 치료에 대해 특정 시기 내에 및/또는 특정한 정도로 반응하지 않거나 반응하지 않을 것으로 예상되는 대상체 및/또는 반응하지 않고, 반응하지 않을 가능성이 있고/거나 불량한 반응자로 예상되거나 불량한 반응자일 가능성이 있거나 불량한 반응자인 대상체에 투여된다. 일부 구현예에서, 병용 요법은 세포 요법의 투여 개시 후 예컨대 1개월 이내, 2개월 이내 또는 3개월 이내에 완전한 반응 또는 전반적인 반응을 나타낼 것으로 예측되지 않거나 나타낼 가능성이 없거나 나타내지 않는 대상체에 투여된다. 일부 구현예에서, 병용 요법은 세포 요법의 투여 후 예컨대 1개월 이내, 2개월 이내 또는 3개월 이내에 진행성 질병(progressive disease, PD)을 나타낼 것으로 예측되거나 나타낼 가능성이 있거나 나타내는 대상체에 투여된다. 일부 구현예에서, 대상체는 세포 요법으로 치료되거나 이전에 치료되었기 때문에 유사한 입장에 있는 다수의 대상체에 기초한 반응 또는 특정 반응을 나타내지 않을 것으로 예측되거나 나타내지 않을 가능성이 있다.
일부 구현예에서, 제공된 방법은 특정 그룹 또는 하위 세트의 대상체, 예를 들어, 고위험 질병, 예를 들어 고위험 NHL을 갖는 것으로 확인된 대상체를 치료하는 것을 포함한다. 일부 측면에서, 방법은 표준 치료에 대해 재발했거나 표준 치료에 불응성(R/R)이거나 불량한 예후를 갖는 NHL과 같은 공격적이고/거나 불량한 예후의 B 세포 비호지킨 림프종(NHL)의 형태를 갖는 대상체를 치료한다. 일부 경우에, 요법이 표시된 질병 및/또는 환자 집단을 위한 이용 가능한 요법, 치료의 표준 또는 기준 요법에 대한 전반적인 반응률(overall response rate, ORR)은 40 % 미만이고/거나 완전한 반응(CR)은 20 % 미만이다. 일부 구현예에서, 화학 요법 불응성(chemorefractory) DLBCL에서, 기준 또는 이용 가능한 치료 또는 표준 치료 요법에서의 ORR은 약 26 %이고 CR은 약 8 %이다(Crump et al. Outcomes in refractory aggressive diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL): Results from the international SCHOLAR study. ASCO 2016 [Abstract 7516]). 일부 측면에서, 제공된 방법, 조성물, 용도 및 제조 물품은 이용 가능한 요법에 대한 개선되고 우수한 반응을 달성한다.
일부 구현예에서, 방법, 용도 및 제조 물품은 예를 들어 특정 유형의 질병, 진단 기준, 선행 치료 및/또는 선행 치료에 대한 반응에 기초하여 특정 그룹 또는 특정 하위 세트의 대상체를 선택하거나 확인하는 것을 포함한 대상체의 치료를 위해 사용되거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 하나 이상의 선행 요법으로 치료 후 완화 후에 재발했거나 이에 대해 불응성이 된 대상체; 또는 하나 이상의 선행 요법, 예를 들어 하나 이상의 표준 요법 방식에 대해 재발하였거나 불응성(R/R)인 대상체;를 치료하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 달리 명시되지 않은(not otherwise specified, NOS; 드 노보 및 무통성으로부터 형질 전환) 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL), 1 차 종격동(흉선) 거대 B 세포 림프종(PMBCL) 또는 여포성 림프종 3B 등급(FL3B), 엡스타인-바 바이러스(Epstein-Barr virus, EBV) 양성 DLBCL 또는 EBV 양성 NOS를 갖는 대상체를 치료하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 1 미만, 예컨대 0-1의 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태를 갖는 대상체를 치료하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 하나 이상, 예컨대 2 또는 3의 염색체 전위(예컨대 “이중-히트(double-hit)” 또는 “삼중-히트(triple-hit)”로 명명되고, 이는 DLBCL 조직 구조를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종이고; 보통 t (14; 18) (q32; q21) bcl-2 유전자 및/또는 BCL6/3q27 염색체 전위와 조합으로 MYC/8q24 유전자좌 전위를 가짐; 예를 들어 문헌[Xu et al. (2013) Int J Clin Exp Pathol. 6(4): 788-794] 참조)를 갖고/거나 자가 줄기 세포 이식(autologous stem cell transplant, ASCT) 투여 후 재발, 선택적으로 12개월 내에 재발하였고/거나 화학 요법 불응성으로 간주되어온 집단과 같이 요법 또는 특정 기준 요법에 대해 일반적으로 불량하게 반응하는 불량한 예후 집단 또는 DLBCL 환자 또는 이의 대상체 집단을 치료한다.
일부 구현예에서, 항원 수용체(예를 들어 CAR)는 질병 또는 병태와 관련된, 예컨대 NHL과 관련된 표적 항원에 특이적으로 결합한다. 일부 구현예에서, 질병 또는 장애와 관련된 항원은 CD20, CD19, CD22, ROR1, CD45, CD21, CD5, CD33, Ig카파, Ig람다, CD79a, CD79b 또는 CD30 중에서 선택된다.
일부 구현예에서, 방법은 질병, 병태 또는 장애를 갖는 것으로 의심되거나 가질 위험이 있는 대상체에 세포 요법 및 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 대상체는 성인 대상체이다. 일부 구현예에서, 대상체는 30, 40, 50, 60 또는 70세가 넘거나 약 30, 40, 50, 60 또는 70세이다.
일부 구현예에서, 방법은 NHL의 특정 예후 또는 위험을 갖는 것으로 선택되거나 확인된 대상체에 세포의 투여를 포함한다. 비호지킨 림프종(NHL)은 가변적인 질환일 수 있다. NHL을 가진 일부 대상체는 다른 대상체가 즉각적인 개입이 필요할 수 있는 반면, 치료하지 않고 살아남을 수 있다. 일부 경우에, NHL을 가진 대상체는 질병 예후 및/또는 권장되는 치료 전략을 알려줄 수 있는 그룹으로 분류될 수 있다. 일부 경우에, 상기 그룹은 "낮은 위험(low risk)", "중간 위험(intermediate risk)", “높은 위험(high risk)” 및/또는 "매우 높은 위험(very high risk)"일 수 있고, 환자는 유전적 이상 및/또는 형태학적 또는 물리적 특성을 포함하나 이에 국한되지 않는 여러 요인에 따라 분류될 수 있다. 일부 구현예에서, 방법 및/또는 제조 물품 또는 조성물에 부합되게 치료된 대상체는 NHL 위험을 기초로 분류되거나 확인된다. 일부 구현예에서, 대상체는 고위험 NHL을 가진 대상체이다.
일부 구현예에서, 대상체는 재조합 수용체를 발현하는 세포의 투여 전에 질병 또는 병태, 예를 들어 NHL을 표적으로 하는 요법 또는 치료제로 앞서 치료되었다. 일부 구현예에서, 대상체는 조혈 줄기 세포 이식(hematopoietic stem cell transplantation, HSCT), 예를 들어, 동종 HSCT 또는 자가 HSCT로 앞서 치료되었다. 일부 구현예에서, 대상체는 표준 요법으로 치료 후 예후가 좋지 않았고/거나 선행 요법 중 하나 이상의 방식에 실패하였다. 일부 구현예에서, 대상체는 림프절 마비 요법 외 NHL을 치료하기 위해 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7가지 이상 또는 약 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7가지 이상 또는 약 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7가지의 다른 요법을 앞서 받았거나 상기로 치료받았다. 일부 구현예에서, 대상체는 화학요법 또는 방사선 요법으로 앞서 치료되었다. 일부 측면에서, 대상체는 다른 요법 또는 치료제에 대해 불응성이거나 반응적이지 않다. 일부 구현예에서, 대상체는 예를 들어, 화학요법 또는 방사선을 포함한 다른 요법 또는 치료적 개입으로 치료 후, 질병이 지속되거나 재발하였다.
일부 구현예에서, 방법은 고위험 NHL을 갖는 것으로 선택되거나 확인된 대상체에 세포의 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 대상체는 예컨대 고위험 NHL과 관련된 하나 이상의 세포유전학적 이상을 나타낸다. 일부 구현예에서, 대상체는 공격적인 NHL, 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL), 1차 종격동 거대 B 세포 림프종(PMBCL), T 세포/조직세포 풍부 거대 B 세포 림프종(TCHRBCL), 버키트 림프종, 맨틀 세포 림프종(MCL) 및/또는 여포성 림프종(FL)으로 특징지어지거나 결정된 질병 또는 병태를 갖는 것에 기초하여 선택되거나 확인된다. 특정 구현예에서, 여기에 제공된 방법을 사용하여 치료될 대상체는 공격적인 NHL, 특히 달리 명시되지 않은(NOS; 드 노보 및 무통성으로부터 형질 전환) 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL), 1 차 종격동(흉선) 거대 B 세포 림프종(PMBCL) 또는 여포성 림프종 3B 등급(FL3B), 엡스타인-바 바이러스(Epstein-Barr virus, EBV) 양성 DLBCL 또는 EBV 양성 NOS 또는 DLBCL 조직 구조(“이중-히트(double-hit)” 또는 “삼중-히트(triple-hit)” 림프종)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종을 갖는 대상체를 포함한다. 일부 구현예에서, 대상체는 수행 상태가 좋지 않다. 일부 측면에서, 치료될 집단은 0-2 중 임의의 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태를 갖는 대상체를 포함한다. 임의의 구현예 중 다른 측면에서, 치료될 대상체는 ECOG 0-1을 포함하거나 ECOG 2 대상체를 포함하지 않는다. 임의의 구현예 중 일부 측면에서, 치료될 대상체는 2 이상의 선행 요법에 실패했다. 일부 구현예에서, 대상체는 변연부 림프종(MZL) 및 만성 림프구성 백혈병(CLL; Richter’s)으로부터 형질 전환된 DLBCL을 갖지 않는다. 일부 구현예에서, CLL이 있는 대상체는 공격적인 림프종, 가장 일반적으로 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL)으로 CLL이 형질 전환된 것으로 정의되는 리히터 증후군(Richter’s syndrome, RS)을 나타낼 수 있다(예를 들어, Parikh et al. Blood 2014 123:1647-1657 참조). 일부 구현예에서, 대상체는 맨틀 세포 림프종(MCL)을 가진다. 일부 구현예에서, 대상체는 전반적으로 좋지 못한 생존과 연관성이 있는 특징을 가진다. 일부 구현예에서, 대상체는 완전한 반응(CR)을 달성한 적이 없으며, 자가 줄기 세포 이식(ASCT)을 받은 적이 없고, 1 이상의 제2 방식 요법에 대해 불응성이고, 1차 불응성 질병을 갖고/거나 ECOG 수행 점수 2를 가진다.
일부 구현예에서, 치료될 대상체는 공격적인 NHL, 특히 달리 명시되지 않은(NOS; 드 노보 및 무통성으로부터 형질 전환) 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL), 1 차 종격동(흉선) 거대 B 세포 림프종(PMBCL) 또는 여포성 림프종 3B 등급(FL3B), 엡스타인-바 바이러스(Epstein-Barr virus, EBV) 양성 DLBCL 또는 EBV 양성 NOS 또는 DLBCL 조직 구조(“이중-히트(double-hit)” 또는 “삼중-히트(triple-hit)” 림프종)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종를 갖는 대상체 그룹을 포함한다. 일부 구현예에서, 대상체의 질병은 2개 이상의 선행 요법 방식에 대해 불응성이거나 재발하였다. 일부 구현예에서, 선행 요법은 CD20 표적 제제 및/또는 안트라사이클린을 포함한다. 일부 구현예에서, 대상체는 스크리닝시 0-2 또는 0-1의 ECOG 점수를 가진다. 일부 구현예에서, 대상체는 루가노 분류(Lugano Classification)에 따라 양전자 방출 단층 촬영(PET)-양성 질병을 가진다(Cheson, 2014). 일부 구현예에서, 대상체는 선택적으로 동종 줄기 세포 이식(stem cell transplantation, SCT)으로 앞서 치료되었을 수 있다.
일부 구현예에서, 대상체는 병용 요법을 투여받을 때(예를 들어, 세포 요법을 투여받을 때) 40세 이상이다. 일부 구현예에서, 대상체는 병용 요법을 투여받을 때(예를 들어, 세포 요법을 투여받을 때) 40세 미만이다. 일부 구현예에서, 대상체는 병용 요법을 투여받을 때(예를 들어, 세포 요법을 투여받을 때) 약 40-65세이다. 일부 구현예에서, 대상체는 병용 요법을 투여받을 때(예를 들어, 세포 요법을 투여받을 때) 65세 이상이다.
일부 구현예에서, 대상체는 남성이다. 일부 구현예에서, 대상체는 여성이다.
일부 구현예에서, 대상체는 마지막 선행 요법에 대해 불응성이다. 일부 구현예에서, 대상체는 마지막 선행 요법에 대해 재발했다. 대상체가 마지막 선행 요법에 대해 부분 미만의 반응을 달성한 경우 상태는 불응성이다. 일부 구현예에서, 대상체는 선행 화학 요법을 받았다. 일부 구현예에서, 대상체는 선행 화학 요법에 대해 화학 요법 불응성이다. 일부 구현예에서, 대상체는 선행 요법에 대해 화학 민감성이다. 상태는 화학 요법 불응성이고 대상체는 자가 줄기 세포 이식 후 12개월 미만에 재발했거나 마지막 화학 요법 함유 요법에 대해 안정적 질병(stable disease, SD) 또는 진행성 질병(progressive disease, PD)을 달성했다. 그렇지 않으면 상태는 화학 민감성이다.
일부 구현예에서, 방법, 세포 및 조성물은 부작용 또는 독성의 위험이 감소한 불량한 예후를 가진 고위험 환자에게 높은 비율의 지속적인 반응을 제공할 수 있다. 일부 구현예에서, 방법 및 용도는 신경독성(NT) 또는 사이토카인 방출 증후군(CRS)과 같은 세포 요법을 포함하는 병용 요법과 관련될 수 있는 독성 또는 기타 부작용의 위험 감소 및/또는 보다 지속적인 반응 또는 효능 및/또는 보다 높은 반응 비율을 제공하거나 달성한다.
일부 구현예에서, 제공된 방법에 따라 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물로 치료된 대상체 중 35% 이상, 40% 이상, 50% 이상, 55% 이상, 60% 이상, 65% 이상, 70% 이상 또는 적어도 75% 이상이 CR을 달성한다. 일부 구현예에서, 제공된 방법에 따라 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물로 치료된 대상체 중 50% 이상, 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상 또는 90% 이상이 부분 반응(PR)의 객관적인 반응을 달성한다. 일부 구현예에서, 제공된 방법에 따라 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물로 치료된 대상체 중 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 적어도 95% 이상이 1개월, 2개월 또는 3개월까지 CR 또는 PR을 달성한다.
일부 구현예에서, 제공된 방법에 따라 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물로 치료된 대상체 중 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 적어도 95% 이상이 세포 요법 투여 개시 후 3개월, 4개월, 5개월, 6개월 이상까지 CR 또는 OR과 같은 반응을 유지한다. 일부 구현예에서, CR 또는 OR과 같은 상기 반응은 1개월 또는 3개월까지 CR을 달성한 상기 대상체에서 또는 예컨대 제공된 방법에 따라 치료된 대상체 중 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 적어도 95% 이상 또는 약 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 적어도 95% 이상에서, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월 또는 9개월 이상 동안 지속 가능하다. 일부 구현예에서, 1개월 또는 3개월까지 CR을 달성한 상기 대상체 또는 제공된 방법에 따라 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물로 치료된 대상체 중 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 적어도 95% 이상이 (약) 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월 또는 9개월보다 더 오랫동안 생존하거나 진행없이 생존한다.
일부 측면에서, 제공된 방법은 높은 또는 특정 비율의 반응(예컨대 3개월 또는 6개월과 같은 투여 후 특정 기간 후에 평가된 바와 같은 집단 중 반응 비율), 예를 들어, 75% 또는 80% 또는 81%, 82%, 83%, 84% 또는 85% 이상의 ORR(예컨대 6개월 또는 3개월 ORR) 및 50% 이상, 55% 이상, 60% 이상, 65% 이상, 70% 이상, 71%, 72%, 73% 이상 또는 대략 75% 이상의 CR 비율(예컨대 6개월 또는 3개월 CR 비율)을 달성할 수 있고, 이는 또한 예컨대 특정 기간 또는 특정 기간 이상 동안 지속가능하고, 예를 들어, 요법 개시 후 1, 3 또는 6개월 이상 또는 9개월 이상 동안 지속된다. 일부 구현예에서, 상기 반응 비율 속도 및 지속성은 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10회 투여 또는 분량 후에 인정된다.
A. 세포 요법의 투여
입양 세포 요법을 위한 세포의 투여 방법이 공지되어 있으며 제공된 방법, 조성물 및 제조 물품 및 키트와 관련하여 사용될 수 있다. 예를 들어, 입양 T 세포 요법 방법은 예를 들어 문헌[미국 특허 출원 공개 번호 2003/0170238(Gruenberg et al); 미국 특허 번호 4,690,915(Rosenberg); Rosenberg (2011) Nat Rev Clin Oncol. 8(10):577-85)]에 기재되어 있다. 예를 들어, 문헌[Themeli et al. (2013) Nat Biotechnol. 31(10): 928-933; Tsukahara et al. (2013) Biochem Biophys Res Commun 438(1): 84-9; Davila et al. (2013) PLoS ONE 8(4): e61338]을 참조한다.
일부 구현예에서, 제공된 방법과 관련하여 사용 또는 투여되는 세포는 조작된 수용체, 예를 들어 키메라 항원 수용체(CAR)와 같은 조작된 항원 수용체 또는 T 세포 수용체(TCR)를 함유하거나 함유하도록 조작된다. 조성물 중에는 예컨대 입양 세포 요법을 위한 약학 조성물 및 투여용 제형이 있다. 제공된 방법 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물과 부합되게 대상체, 예를 들어 환자에게 세포 및 조성물을 투여하기 위한 치료 방법이 또한 제공된다.
세포는 일반적으로 기능적인 비-TCR 항원 수용체, 예를 들어, 전이유전자 T 세포 수용체(TCR)와 같은 키메라 항원 수용체(CAR) 및 다른 항원 결합 수용체를 포함하는 항원 수용체와 같은 재조합 수용체를 발현한다. 또한 수용체 중에는 다른 키메라 수용체가 있다. 제공된 방법에서 세포 요법으로서 투여하기 위한 예시적인 조작된 세포는 섹션 II에 기재된다.
일부 구현예에서, 세포 요법, 예를 들어, 입양 T 세포 요법은 자가 전달에 의해 수행되며, 상기 세포는 단리되고/거나 달리 세포 요법을 받을 대상체 또는 상기 대상체로부터 유래된 샘플로부터 제조된다. 따라서, 일부 측면에서, 세포는 치료가 필요한 대상체, 예를 들어 환자로부터 유래되고, 세포는 단리 및 가공 후에 동일한 대상체에 투여된다.
일부 구현예에서, 세포 요법, 예를 들어, 입양 T 세포 요법은 동종 이계 전달에 의해 수행되며, 상기 세포는 단리되고/거나 달리 세포 요법을 받을 예정이거나 최종적으로 받은 대상체, 예를 들어 제1 대상체외의 대상체로부터 제조된다. 상기 구현예에서, 이어서 세포는 상이한 대상체, 예를 들어, 같은 종의 제2 대상체에 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 및 제2 대상체는 유전적으로 동일하다. 일부 구현예에서, 제1 및 제2 대상체는 유전적으로 유사하다. 일부 구현예에서, 제2 대상체는 제1 대상체와 동일한 HLA 클래스(HLA class) 또는 수퍼타입(supertype)을 발현한다.
T 세포 요법의 세포는 투여를 위해 제형화된 조성물 또는 대안적으로 별도의 투여를 위해 제형화된 하나 이상의 조성물(예를 들어, 2개의 조성물)로 투여될 수 있다. 분량(들)의 세포는 특정 수 또는 상대적인 수의 세포 또는 조작된 세포의 특정 수 또는 상대적인 수 및/또는 CD4 대 CD8 T 세포와 같은 조성물 내에 2개 이상의 하위 유형의 정의된 비율 또는 조성물을 포함할 수 있다.
세포는, 임의의 적합한 수단, 예를 들어 볼루스 주입, 주사, 예를 들어 정맥내 또는 피하 주사, 안구내(intraocular) 주사, 안구주위(periocular) 주사, 망막하(subretinal) 주사, 유리체내(intravitreal) 주사, 중격경유성(trans-septal) 주사, 공막하(subscleral) 주사, 맥락막내(intrachoroidal) 주사, 전방내(intracameral) 주사, 결막하 주사(subconjectval injection, subconjuntival injection), 서브 테논(sub-Tenon) 주사, 안구뒤(retrobulbar) 주사, 안구주위(peribulbar) 주사 또는 후부 점막 주사(posterior juxtascleral) 전달에 의해 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 이는 비경구, 폐내 및 비강내 및 국소 치료가 바람직한 경우 병변내 투여에 의해 투여된다. 비경구 주입은 근육내, 정맥내, 동맥내, 복강내 또는 피하 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 주어진 분량은 세포의 단일 볼루스 투여에 의해 투여된다. 일부 구현예에서, 이는 예를 들어, 3일 이내의 기간에 걸쳐 세포의 다중 볼루스 투여에 의해 또는 세포의 지속적인 주입 투여에 의해 투여된다. 일부 구현예에서, 세포 분량의 투여 또는 임의의 추가 요법, 예를 들어 림프절 마비 요법, 중재 요법 및/또는 병용 요법은 외래 환자 전달을 통해 수행된다.
질병의 치료를 위해, 적절한 투여량은 치료될 질병의 유형, 세포 또는 재조합 수용체의 유형, 질병의 중증도 및 진행 과정, 선행 요법, 대상체의 임상 이력 및 세포에 대한 반응 및 주치의의 판단에 따라 달라질 수 있다. 일부 구현예에서 조성물 및 세포는 한 번에 또는 일련의 치료에 걸쳐 대상체에 적합하게 투여된다.
일부 측면에서, 면역 고갈(예를 들어, 림프절 마비) 요법으로 대상체를 사전 조절하는 것은 입양 세포 요법(ACT)의 효과를 개선할 수 있다.
따라서, 일부 구현예에서, 방법은 세포 요법의 개시 전에 대상체에 사이클로포스파미드, 플루다라빈 또는 이의 조합물과 같은 림프절 마비 또는 화학요법제와 같은 사전 조절제를 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 대상체에 세포 요법의 개시 적어도 2일 전, 예컨대 적어도 3, 4, 5, 6 또는 7일 전에 사전 조절제를 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 대상체에 세포 요법의 개시 7일 이내 전, 예컨대 6, 5, 4, 3 또는 2일 이내 전에 사전 조절제가 투여된다.
일부 구현예에서, 대상체는 (약) 20 mg/kg 내지 100 mg/kg, 예컨대 (약) 40 mg/kg 내지 80 mg/kg의 분량에서 사이클로포스파미드로 사전 조절된다. 일부 측면에서, 대상체는 (약) 60 mg/kg의 사이클로포스파미드로 사전 조절된다. 일부 구현예에서, 사이클로포스파미드는 단일 분량으로 투여될 수 있거나, 예컨대 매일, 격일 또는 3일마다 주어진 다수의 분량으로 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 사이클로포스파미드는 1일 또는 2일 동안 매일 1회 투여된다. 일부 구현예에서, 림프절 마비제가 사이클로포스파미드를 포함하는 경우, 대상체에 (약) 100 mg/m2 내지 500 mg/m2, 예컨대 (약) 200 mg/m2 내지 400 mg/m2 또는 250 mg/m2 내지 350 mg/m2(수치 포함)의 분량으로 사이클로포스파미드가 투여된다. 일부 경우에, 대상체에 약 300 mg/m2의 사이클로포스파미드를 투여한다. 일부 구현예에서, 사이클로포스파미드는 단일 분량으로 투여될 수 있거나, 예컨대 매일, 격일 또는 3일마다 주어진 다수의 분량으로 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 사이클로포스파미드는 예컨대 1-5일 동안, 예를 들어 3 내지 5일 동안 매일 투여된다. 일부 경우에, 대상체에 세포 요법의 개시 전 3일 동안 매일 약 300 mg/m2의 사이클로포스파미드가 투여된다.
일부 구현예에서, 림프절 마비제가 플루다라빈을 포함하는 경우, 대상체에 (약) 1 mg/m2 내지 100 mg/m2, 예컨대 (약) 10 mg/m2 내지 75 mg/m2, 15 mg/m2 내지 50 mg/m2, 20 mg/m2 내지 40 mg/m2 또는 24 mg/m2 내지 35 mg/m2(수치 포함)의 분량으로 플루다라빈이 투여된다. 일부 경우에, 대상체에 약 30 mg/m2의 플루다라빈이 투여된다. 일부 구현예에서, 플루다라빈은 단일 분량으로 투여될 수 있거나, 예컨대 매일, 격일 또는 3일마다 주어진 다수의 분량으로 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 플루다라빈은 예컨대 1-5일 동안, 예를 들어 3 내지 5일 동안 매일 투여된다. 일부 경우에, 대상체에 세포 요법의 개시 전 3일 동안 매일 약 30 mg/m2의 플루다라빈이 투여된다.
일부 구현예에서, 림프절 마비제는 사이클로포스파미드 및 플루다라빈의 조합과 같은 제제의 조합물을 포함한다. 따라서, 제제의 조합물은 상기 기재된 바와 같은 임의의 분량 또는 투여 스케줄에서의 사이클로포스파미드 및 상기 기재된 바와 같은 임의의 분량 또는 투여 스케줄에서의 플루다라빈을 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 측면에서, 대상체에 제1 또는 후속 분량 전에 60 mg/kg(~2 g/m2)의 사이클로포스파미드 및 3 내지 5 분량의 25 mg/m2 플루다라빈이 투여된다.
세포 투여 후에, 일부 구현예에서 조작된 세포 집단의 생물학적 활성이 예를 들어, 공지된 다수의 방법 중 하나에 의해 측정된다. 평가 파라미터는 생체 내에서, 예를 들어 영상화에 의해 또는 생체 외에서, 예를 들어 ELISA 또는 유세포 분석에 의해 항원에 대한 조작된 또는 천연 T 세포 또는 다른 면역 세포의 특이적 결합을 포함한다. 특정 구현예에서, 조작된 세포가 표적 세포를 파괴하는 능력은 예를 들어 문헌[Kochenderfer et al., J. Immunotherapy, 32(7): 689-702 (2009) 및 Herman et al. J. Immunological Methods, 285(1): 25-40 (2004)]에 기재된 세포 독성 평가와 같은 공지된 임의의 적합한 방법을 사용하여 측정될 수 있다. 특정 구현예에서, 세포의 생물학적 활성은 하나 이상의 사이토카인, 예컨대 CD107a, IFNγ, IL-2 및 TNF의 발현 및/또는 분비를 평가함으로써 측정된다. 일부 측면에서, 생물학적 활성은 종양 부담 또는 부하 감소와 같은 임상 결과를 평가함으로써 측정된다.
1. 조성물 및 제형
일부 구현예에서, 재조합 항원 수용체, 예를 들어, CAR 또는 TCR로 조작된 세포를 포함하는 T 세포 요법과 같은 세포 요법의 분량의 세포는 약학 조성물 또는 제형와 같은 조성물 또는 제형으로 제공된다. 상기 조성물은 예컨대 질병, 병태 및 장애의 치료에서 제공된 방법 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물과 부합되게 사용될 수 있다.
용어 "약제학적 제형(pharmaceutical formulation)"은 그 안에 함유된 활성 성분의 생물학적 활성이 효과적일 수 있도록 하는 형태이고, 상기 제형이 투여되는 대상체에 허용 가능하지않게 독성인 추가 성분을 함유하지 않는 제제를 지칭한다.
"약학적으로 허용 가능한 담체(pharmaceutically acceptable carrier)"는 활성 성분외의 약학 제형 안에 있는 성분을 지칭하고, 이는 대상체에 무독성이다. 약학적으로 허용 가능한 담체는 완충제, 부형제, 안정제 또는 방부제를 포함하나 이에 국한되지 않는다.
일부 구현예에서, 조작된 T 세포(예를 들어 CAR T 세포)와 같은 세포 요법은 약학적으로 허용 가능한 담체와 함께 제형화된다. 일부 측면에서, 담체의 선택은 특정 세포 또는 제제 및/또는 투여 방법에 의해 부분적으로 결정된다. 따라서, 다양한 적합한 제형이 존재한다. 예를 들어, 약학 조성물은 방부제를 함유할 수 있다. 적합한 방부제는 예를 들어, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 벤조산 나트륨 및 염화 벤잘코늄을 포함할 수 있다. 일부 측면에서, 2개 이상의 방부제가 혼합되어 사용된다. 방부제 또는 이의 혼합물은 전형적으로 전체 조성물의 약 0.0001% 내지 약 2 중량%의 양으로 존재한다. 담체는 예를 들어, 문헌[Remington’s Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)]에 기재되어 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체는 일반적으로 사용된 투여량 및 농도에서 수용체에게 무독성이며, 인산염, 구연산염 및 기타 유기산과 같은 완충제; 아스코르브산 및 메티오닌을 포함한 항산화제; 방부제(예컨대 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤잘코늄 클로라이드; 벤제토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알코올; 메틸 또는 프로필 파라벤과 같은 알킬 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 시클로헥사놀; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10 잔기 미만) 폴리펩티드; 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역 글로불린과 같은 단백질; 폴리비닐피롤리돈과 같은 친수성 중합체; 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신과 같은 아미노산; 글루코오스, 만노오스 또는 덱스트린을 포함하는 단당류, 이당류 및 다른 탄수화물; EDTA와 같은 킬레이팅제; 수크로오스, 만니톨, 트레할로스 또는 솔비톨과 같은 설탕; 나트륨과 같은 염 형성 카운터 이온; 금속 착물(예를 들어 Zn-단백질 복합체); 및/또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)과 같은 비이온 계면활성제를 포함하나 이에 국한되지 않는다.
일부 측면에서 완충제는 조성물에 포함된다. 적합한 완충제는 예를 들어, 구연산, 구연산 나트륨, 인산, 인산 칼륨 및 다양한 다른 산 및 염을 포함한다. 일부 측면에서, 2개 이상의 완충제 혼합물이 사용된다. 완충제 또는 이의 혼합물은 전형적으로 전체 조성물의 약 0.001% 내지 약 4 중량%의 양으로 존재한다. 투여 가능한 약학 조성물의 제조 방법이 공지되어 있다. 예시적인 방법이 예를 들어, 문헌[Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott Williams & Wilkins; 21st ed. (May 1, 2005)]에 보다 상세하게 기재되어 있다.
제형에는 수용액이 포함될 수 있다. 제형 또는 조성물은 또한 세포 또는 제제로 치료될 특정 징후, 질병 또는 병태에 유용한 하나 이상의 활성 성분을 함유할 수 있으며, 여기서 각각의 활성이 서로 악영향을 미치지 않는다. 상기 활성 성분은 의도된 목적에 효과적인 양으로 조합하여 적절히 존재한다. 따라서, 일부 구현예에서, 약학 조성물은 화학 요법제, 예를 들어 아스파라기나제, 부술판, 카보플라틴, 시스플라틴, 다우노루비신, 독소루비신, 플루오로우라실, 젬시타빈, 히드록시우레아, 메토트렉세이트, 파클리탁셀, 리툭시맙, 빈블라스틴, 빈크리스틴 등과 같은 다른 약학적 활성제 또는 약물을 추가로 포함한다.
일부 구현예에서, 약학 조성물은 치료적 유효량 또는 예방적 유효량과 같이 질병 또는 병태를 치료하기에 효과적인 양으로 세포를 함유한다. 일부 구현예에서, 치료 효능은 치료된 대상체의 주기적인 평가에 의해 모니터링된다. 병태에 따라 며칠 또는 그 이상에 걸쳐 반복 투여되는 경우, 질병 증상의 원하는 억제가 발생할 때까지 치료가 반복된다. 그러나, 다른 투여량 요법이 유용할 수 있고 결정될 수 있다. 원하는 투여량은 조성물의 단일 볼루스 투여, 조성물의 다중 볼루스 투여 또는 조성물의 지속적인 주입 투여에 의해 전달될 수 있다.
세포는 표준 투여 기술, 제형 및/또는 디바이스를 사용하여 투여될 수 있다. 조성물의 저장 및 투여를 위한 주사기 및 바이알과 같은 제형 및 디바이스가 제공된다. 세포에 관하여, 투여는 자가 조직 또는 이종 기원일 수 있다. 예를 들어, 면역 반응성 세포 또는 전구체는 하나의 대상체로부터 수득될 수 있고, 동일한 대상체 또는 상이하고, 양립 가능한 대상체에 투여될 수 있다. 말초 혈액 유래 면역 반응성 세포 또는 이의 자손(예를 들어, 생체 내, 생체 외 또는 시험관 내 유래)은 카테터 투여, 전신 주사, 국소 주사, 정맥 주사 또는 비경구 투여를 포함하는 국소 주사를 통해 투여될 수 있다. 치료 조성물(예를 들어, 유전자 변형 면역 반응성 세포를 함유하는 약학 조성물)을 투여할 때, 일반적으로 이는 주사 가능한 단위 투여량 형태(용액, 현탁액, 에멀젼)로 제형화될 것이다.
제형에는 경구, 정맥내, 복강내, 피하, 폐, 경피, 근육내, 비강내, 볼, 설하 또는 좌약 투여를 위한 것이 포함된다. 일부 구현예에서, 제제 또는 세포 집단은 비경구적으로 투여된다. 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "비경구(parenteral)"는 정맥내, 근육내, 피하, 직장, 질 및 복강내 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 제제 또는 세포 집단은 정맥내, 복강내 또는 피하 주사에 의한 말초 전신 전달을 사용하여 대상체에 투여된다.
일부 구현예에서, 조성물은 멸균 액체 제제, 예를 들어, 등장성 수용액, 현탁액, 에멀젼, 분산액 또는 점성 조성물로서 제공되며, 이는 일부 측면에서 선택된 pH로 완충될 수 있다. 액체 제제는 일반적으로 겔, 다른 점성 조성물 및 고체 조성물보다 제조가 보다 용이하다. 또한, 액체 조성물은 특히 주사에 의해 투여하기가 다소 더 편리하다. 반면에, 점성 조성물은 적절한 점도 범위 내에서 제형화되어 특정 조직과의 보다 긴 접촉 기간을 제공할 수 있다. 액체 또는 점성 조성물은 예를 들어, 물, 식염수, 인산 완충 식염수, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 액상 폴리에틸렌 글리콜) 및 이의 적합한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있는 담체를 포함할 수 있다.
멸균 주사용 용액은 적합한 담체, 희석제 또는 멸균수, 생리 식염수, 포도당, 덱스트로스 등과 같은 부형제와의 혼화물과 같은 용매에 세포를 통합시킴으로써 제조될 수 있다.
생체 내 투여에 사용될 제형은 일반적으로 멸균된다. 멸균은 예를 들어, 멸균 여과 막을 통한 여과에 의해 용이하게 달성될 수 있다.
2. 투약
일부 구현예에서, 분량의 세포는 제공된 방법 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물과 부합되게 대상체에 투여된다. 일부 구현예에서, 분량의 크기 또는 시기는 대상체의 특정 질병 또는 병태의 기능으로서 결정된다. 일부 경우에, 제공된 기재의 관점에서 특정 질병에 대한 분량의 크기 또는 시기는 경험적으로 결정될 수 있다.
일부 구현예에서, 분량의 세포는 (약) 2 x 105개의 세포/kg 내지 (약) 2 x 106개의 세포/kg, 예컨대 (약) 4 x 105개의 세포/kg 내지 (약) 1 x 106개의 세포/kg 또는 (약) 6 x 105개의 세포/kg 내지 (약) 8 x 105개의 세포/kg를 포함한다. 일부 구현예에서, 분량의 세포는 대상체의 체중 1 킬로그램 당 2 x 105 이내의 세포(세포/kg)(예를 들어 항원 발현, 예컨대 CAR 발현 세포), 예컨대 (약) 3 x 105 이내의 세포/kg, (약) 4 x 105 이내의 세포/kg, (약) 5 x 105 이내의 세포/kg, (약) 6 x 105 이내의 세포/kg, (약) 7 x 105 이내의 세포/kg, (약) 8 x 105 이내의 세포/kg, (약) 9 x 105 이내의 세포/kg, (약) 1 x 106 이내의 세포/kg 또는 (약) 2 x 106 이내의 세포/kg를 포함한다. 일부 구현예에서, 분량의 세포는 대상체의 체중 1 킬로그램 당 2 x 105 이상 또는 약 2 x 105 이상 또는 (약) 2 x 105개의 세포(세포/kg)(예를 들어 항원 발현, 예컨대 CAR 발현 세포), 예컨대 3 x 105 이상 또는 약 3 x 105 이상 또는 (약) 3 x 105개의 세포/kg, 4 x 105 이상 또는 약 4 x 105 이상 또는 (약) 4 x 105개의 세포/kg, 5 x 105 이상 또는 약 5 x 105 이상 또는 (약) 5 x 105개의 세포/kg, 6 x 105 이상 또는 약 6 x 105 이상 또는 (약) 6 x 105개의 세포/kg, 7 x 105 이상 또는 약 7 x 105 이상 또는 (약) 7 x 105개의 세포/kg, 8 x 105 이상 또는 약 8 x 105 이상 또는 (약) 8 x 105개의 세포/kg, 9 x 105 이상 또는 약 9 x 105 이상 또는 (약) 9 x 105개의 세포/kg, 1 x 106 이상 또는 약 1 x 106 이상 또는 (약) 1 x 106개의 세포/kg 또는 2 x 106 이상 또는 약 2 x 106 이상 또는 (약) 2 x 106개의 세포/kg를 포함한다.
특정 구현예에서, 세포 또는 개별 집단의 하위 유형의 세포가 약 1백만 내지 약 1000억 세포의 범위로 및/또는 체중 1 킬로그램당 상기 세포의 양으로, 예컨대, 예를 들어, (약) 1백만 내지 (약) 500억 세포(예를 들어, (약) 5백만 세포, (약) 25백만 세포, (약) 500백만 세포, (약) 10억 세포, (약) 50억 세포, (약) 200억 세포, (약) 300억 세포, (약) 400억 세포 또는 전술한 수치 중 임의의 2개에 의해 정의된 범위), 예컨대 약 10백만 내지 (약) 1000억 세포 (예를 들어, (약) 20백만 세포, (약) 30백만 세포, (약) 40백만 세포, (약) 60백만 세포, (약) 70백만 세포, (약) 80백만 세포, (약) 90백만 세포, (약) 100억 세포, (약) 250억 세포, (약) 500억 세포, (약) 750억 세포, (약) 900억 세포 또는 전술한 수치 중 임의의 2개에 의해 정의된 범위) 및 일부 경우에 (약) 100백만 세포 내지 (약) 500억 세포 (예를 들어, (약) 120백만 세포, (약) 250백만 세포, (약) 350백만 세포, (약) 450백만 세포, (약) 650백만 세포, (약) 800백만 세포, (약) 900백만 세포, (약) 30억 세포, (약) 300억 세포, (약) 450억 세포) 또는 상기 범위 사이에 있는 임의의 수치 및/또는 체중 1 킬로그램당 대상체에 투여된다. 투여량은 질병 또는 장애 및/또는 환자 및/또는 다른 치료에 특수한 속성에 따라 달라질 수 있다.
일부 구현예에서, 분량의 세포는 편평한 분량의 세포 또는 고정된 분량의 세포여서 분량의 세포는 대상체의 체표면적 또는 체중에 기초하거나 이와 결부되지 않는다.
일부 구현예에서, 분량의 유전자 조작된 세포는 (약) 1 x 105 내지 5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 105 내지 2.5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 105 내지 1 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 105 내지 5 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 105 내지 2.5 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 105 내지 1 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 105 내지 5 x 106 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 105 내지 2.5 x 106 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 105 내지 1 x 106 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 106 내지 5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 106 내지 2.5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 106 내지 1 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 106 내지 5 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 106 내지 2.5 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 106 내지 1 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 106 내지 5 x 106 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 106 내지 2.5 x 106 개의 총 CAR 발현 T 세포, 2.5 x 106 내지 5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 2.5 x 106 내지 2.5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 2.5 x 106 내지 1 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 2.5 x 106 내지 5 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 2.5 x 106 내지 2.5 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 2.5 x 106 내지 1 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 2.5 x 106 내지 5 x 106 개의 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 106 내지 5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 106 내지 2.5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 106 내지 1 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 106 내지 5 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 106 내지 2.5 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 106 내지 1 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 107 내지 5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 107 내지 2.5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 107 내지 1 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 107 내지 5 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 107 내지 2.5 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 2.5 x 107 내지 5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 2.5 x 107 내지 2.5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 2.5 x 107 내지 1 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 2.5 x 107 내지 5 x 107 개의 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 107 내지 5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 107 내지 2.5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 107 내지 1 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 108 내지 5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 108 내지 2.5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포 또는 2.5 x 108 내지 5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포를 포함한다.
일부 구현예에서, 분량의 유전자 조작된 세포는 1 x 105개 이상 또는 약 1 x 105개 이상의 CAR 발현 세포, 2.5 x 105개 이상 또는 약 2.5 x 105개 이상의 CAR 발현 세포, 5 x 105개 이상 또는 약 5 x 105개 이상의 CAR 발현 세포, 1 x 106개 이상 또는 약 1 x 106개 이상의 CAR 발현 세포, 2.5 x 106개 이상 또는 약 2.5 x 106개 이상의 CAR 발현 세포, 5 x 106개 이상 또는 약 5 x 106개 이상의 CAR 발현 세포, 1 x 107개 이상 또는 약 1 x 107개 이상의 CAR 발현 세포, 2.5 x 107개 이상 또는 약 2.5 x 107개 이상의 CAR 발현 세포, 5 x 107개 이상 또는 약 5 x 107개 이상의 CAR 발현 세포, 1 x 108개 이상 또는 약 1 x 108개 이상의 CAR 발현 세포, 2.5 x 108개 이상 또는 약 2.5 x 108개 이상의 CAR 발현 세포 또는 5 x 108개 이상 또는 약 5 x 108개 이상의 CAR 발현 세포를 포함한다.
일부 구현예에서, 세포 요법은 (약) 1 x 105 내지 5 x 108개의 총 재조합 수용체 발현 세포, 총 T 세포 또는 총 말초 혈액 단핵 세포(PBMC), (약) 5 x 105 내지 1 x 107개의 총 재조합 수용체 발현 세포, 총 T 세포 또는 총 말초 혈액 단핵 세포(PBMC) 또는 (약) 1 x 106 내지 1 x 107개의 총 재조합 수용체 발현 세포, 총 T 세포 또는 총 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)(각각의 수치 포함)의 세포 수를 포함하는 분량의 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 세포 요법은 1 x 105개 이상 또는 약 1 x 105개 이상의 총 재조합 수용체 발현 세포, 총 T 세포 또는 총 말초 혈액 단핵 세포(PBMC), 예컨대 1 x 106개 이상 또는 약 1 x 106개 이상, 1 x 107개 이상 또는 약 1 x 107개 이상, 1 x 108개 이상 또는 약 1 x 108개 이상의 상기 세포의 세포 수를 포함하는 분량의 세포 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 숫자는 CD3+ 또는 CD8+, 일부 경우에 또한 재조합 수용체 발현(예를 들어 CAR+) 세포의 총 수를 기준으로 한다. 일부 구현예에서, 세포 요법은 (약) 1 x 105 내지 5 x 108개의 CD3+ 또는 CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ 또는 CD8+ 재조합 수용체 발현 세포, (약) 5 x 105 내지 1 x 107개의 CD3+ 또는 CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ 또는 CD8+ 재조합 수용체 발현 세포 또는 (약) 1 x 106 내지 1 x 107개의 CD3+ 또는 CD8+ 총 T 세포 또는 CD3+ 또는 CD8+ 재조합 수용체 발현 세포(각각의 수치 포함)의 세포 수를 포함하는 분량의 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 세포 요법은 (약) 1 x 105 내지 5 x 108개의 총 CD3+/CAR+ 또는 CD8+/CAR+ 세포, (약) 5 x 105 내지 1 x 107개의 총 CD3+/CAR+ 또는 CD8+/CAR+ 세포 또는 (약) 1 x 106 내지 1 x 107개의 총 CD3+/CAR+ 또는 CD8+/CAR+ 세포(각각의 수치 포함)의 세포 수를 포함하는 분량의 투여를 포함한다.
일부 구현예에서, 분량의 T 세포는 (약) 5 x 107 재조합 수용체 발현 T 세포 또는 (약) 2.5 x 107 재조합 수용체 발현 CD8+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 분량의 T 세포는 (약) 1 x 108 재조합 수용체 발현 T 세포 또는 (약) 5 x 107 재조합 수용체 발현 CD8+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 분량의 T 세포는 (약) 1.5 x 108 재조합 수용체 발현 T 세포 또는 (약) 0.75 x 108 재조합 수용체 발현 CD8+ T 세포를 포함한다.
일부 구현예에서, 예를 들어, 대상체가 인간인 경우, 분량은 약 5 x 108개보다 더 적은 총 재조합 수용체(예를 들어 CAR) 발현 세포, T 세포 또는 말초 혈액 단핵세포(PBMC), 예를 들어, 약 1 x 106 내지 5 x 108개의 상기 세포, 예컨대 2 x 106, 5 x 106, 1 x 107, 5 x 107, 1 x 108, 2 x 108, 3 x 108 또는 4 x 108개의 상기 총 세포의 범위 또는 전술한 수치 중 임의의 2개 사이 범위를 포함한다. 일부 구현예에서, 대상체가 인간인 경우, 분량은 약 1 x 106 내지 3 x 108 총 재조합 수용체(예를 들어, CAR) 발현 세포, 예를 들어, 약 1 x 107 내지 2 x 108 개의 상기 세포의 범위, 예컨대 1 x 107, 5 x 107, 1 x 108 또는 1.5 x 108 개의 총 상기 세포 또는 전술한 수치 중 임의의 2개 사이 범위를 포함한다. 일부 구현예에서, 환자는 다중 분량으로 투여되고, 각각의 분량 또는 총 분량은 전술한 수치 중 어느 하나 내에 있을 수 있다. 일부 구현예에서, 분량의 세포는 (약) 1 x 105 내지 5 x 108 개의 총 재조합 수용체(예를 들어 CAR) 발현 T 세포 또는 총 T 세포, 1 x 105 내지 1.5 x 108 개의 총 재조합 수용체(예를 들어 CAR) 발현 T 세포 또는 총 T 세포, 1 x 105 내지 1 x 108 개의 총 재조합 수용체(예를 들어 CAR) 발현 T 세포 또는 총 T 세포, (약) 5 x 105 내지 1 x 107 개의 총 재조합 수용체(예를 들어 CAR)r 발현 T 세포 또는 총 T 세포 또는 (약) 1 x 106 내지 1 x 107 개의 총 재조합 수용체(예를 들어 CAR) 발현 T 세포 또는 총 T 세포(각각의 수치 포함)의 투여를 포함한다.
일부 구현예에서, 분량의 T 세포는 CD4+ T 세포, CD8+ T 세포 또는 CD4+ 및 CD8+ T 세포를 포함한다.
일부 구현예에서, 예를 들어, 대상체가 인간인 경우, CD4+ 및 CD8+ T 세포를 포함하는 분량 안에 포함된, 분량의 CD8+ T 세포는 약 1 x 106 내지 1 x 108 개의 총 재조합 수용체(예를 들어, CAR) 발현 CD8+ 세포, 예를 들어, 약 5 x 106 내지 1 x 108 개의 상기 세포의 범위, 1 x 107, 2.5 x 107, 5 x 107, 7.5 x 107 또는 1 x 108 개의 총 상기 세포 또는 전술한 수치 중 임의의 2개 사이 범위를 포함한다. 일부 구현예에서, 환자는 다중 분량으로 투여되고, 각각의 분량 또는 총 분량은 전술한 수치 중 어느 하나 내에 있을 수 있다. 일부 구현예에서, 분량의 세포는 (약) 1 x 107 내지 0.75 x 108 개의 총 재조합 수용체 발현 CD8+ T 세포, 1 x 107 내지 2.5 x 107 개의 총 재조합 수용체 발현 CD8+ T 세포, (약) 1 x 107 내지 0.75 x 108 개의 총 재조합 수용체 발현 CD8+ T 세포(각각의 수치 포함)의 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 분량의 세포는 (약) 1 x 107, 2.5 x 107, 5 x 107, 7.5 x 107 또는 1 x 108 개의 총 재조합 수용체 발현 CD8+ T 세포의 투여를 포함한다.
일부 구현예에서, 예를 들어, 대상체가 인간인 경우, CD4+ 및 CD8+ T 세포를 포함하는 분량 안에 포함된, 분량의 CD4+ T 세포는 약 1 x 106 내지 1 x 108 개의 총 재조합 수용체(예를 들어, CAR) 발현 CD4+ 세포, 예를 들어, 약 5 x 106 내지 1 x 108 개의 상기 세포의 범위, 예컨대 1 x 107, 2.5 x 107, 5 x 107, 7.5 x 107 또는 1 x 108 개의 총 상기 세포 또는 전술한 수치 중 임의의 2개 사이 범위를 포함한다. 일부 구현예에서, 환자는 다중 분량으로 투여되고, 각각의 분량 또는 총 분량은 전술한 수치 중 어느 하나 내에 있을 수 있다. 일부 구현예에서, 분량의 세포는 (약) 1 x 107 내지 0.75 x 108 개의 총 재조합 수용체 발현 CD4+ T 세포, 1 x 107 내지 2.5 x 107 개의 총 재조합 수용체 발현 CD4+ T 세포, (약) 1 x 107 내지 0.75 x 108 개의 총 재조합 수용체 발현 CD4+ T 세포(각각의 수치 포함)의 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 분량의 세포는 (약) 1 x 107, 2.5 x 107, 5 x 107, 7.5 x 107 또는 1 x 108 개의 총 재조합 수용체 발현 CD4+ T 세포의 투여를 포함한다.
일부 구현예에서, 분량의 세포, 예를 들어 재조합 수용체 발현 T 세포는 단일 분량으로 대상체에 투여되거나 2주, 1개월, 3개월, 6개월, 1년 이상의 기간 내에 1회만 투여된다.
입양 세포 요법의 맥락에서, 주어진 "분량(dose)"의 투여는 단일 조성물 및/또는 단일 비중단 투여, 예를 들어 단일 주사 또는 연속 주입으로서 주어진 세포의 양 또는 수의 투여를 포괄하며 또한 다중 개별 조성물 또는 주입으로 제공된 경우 명시된 기간에 걸쳐, 예컨대 3일 이내에 걸쳐 분할된 분량 또는 다수의 조성물로서 주어진 세포의 양 또는 수의 투여를 포괄한다. 따라서, 일부 맥락에서, 분량은 단일 시점에서 주어된 또는 개시된, 명시된 세포 수의 단일 또는 연속 투여이다. 그러나, 일부 맥락에서, 분량은 3 일 동안 또는 2 일 동안 하루에 한 번 또는 하루의 기간에 걸쳐 다중 주입에 의한 것과 같이 3 일 이내의 기간에 걸쳐 다중 주사 또는 주입으로 투여된다.
따라서, 일부 측면에서, 분량의 세포는 단일 약학 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 분량의 세포는 분량의 세포를 집단적으로 함유하는 다수의 조성물로 투여된다.
일부 구현예에서, 용어 "분할 분량(split dose)"은 1일 이상에 걸쳐 투여되도록 분할된 분량을 지칭한다. 상기 유형의 투약은 본 방법에 포괄되고 단일 분량으로 간주된다.
따라서, 분량의 세포는 분할 분량, 예를 들어, 시간에 걸쳐 투여되는 분할 분량으로 투여될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 분량은 2일 또는 3일에 걸쳐 대상체에 투여될 수 있다. 분할 투약에 대한 예시적인 방법은 첫 날에 분량의 25%를 투여하고 두 번째 날에 분량의 나머지 75%를 투여하는 것을 포함한다. 다른 구현예에서, 분량의 33%가 첫 날에 투여되고 두 번째 날에 나머지 67%가 투여될 수 있다. 일부 측면에서, 분량의 10%가 첫 날에 투여되고, 분량의 30%가 두 번째 날에 투여되며, 분량의 60%가 셋째 날에 투여된다. 일부 구현예에서, 분할 분량은 3일 이상에 걸쳐 확대되지 않는다.
일부 구현예에서, 분량의 세포는 다수의 조성물 또는 용액, 예컨대 첫번째 및 두번째, 선택적으로 그 이상의 투여로 투여될 수 있고, 각각은 분량의 세포를 일부 함유한다. 일부 측면에서, 각각이 상이한 세포 집단 및/또는 하위 유형의 세포를 함유하는 다수의 조성물이 선택적으로 특정 기간 내에 별도로 또는 독립적으로 투여된다. 예를 들어, 세포 집단 또는 하위 유형의 세포는 각각 CD8+ 및 CD4+ T 세포 및/또는 각각 CD8+ 농축 및 CD4+ 농축 집단, 예를 들어 CD4+ 및/또는 CD8+ T 세포를 포함할 수 있고, 각각은 재조합 수용체를 발현하도록 유전적으로 조작된 세포를 개별적으로 포함한다. 일부 구현예에서, 분량의 투여는 CD8+ T 세포 분량 또는 CD4+ T 세포 분량을 포함하는 제1 조성물의 투여 및 CD4+ T 세포 및 CD8+ T 세포의 다른 분량을 포함하는 제2 조성물의 투여를 포함한다.
일부 구현예에서, 투여될 세포를 함유하는 조성물 또는 투여될 분량의 세포 또는 세포 집단, 예컨대 조작된 T 세포 조성물, 집단 또는 분량은, 특정 하위 유형의 세포의 특정 백분율 또는 비율 이상을 함유하거나 이에 대해 농축된다. 일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 CD8+ 및/또는 CD4+ T 세포의 특정 백분율 또는 비율 이상을 함유하거나 이에 대해 농축된다.
일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 CD8+ T 세포의 특정 백분율 또는 비율 이상을 함유하거나 이에 대해 농축된다. 일부 임의의 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 (약) 50%, (약) 60%, (약) 70%, (약) 80%, (약) 90%, (약) 91%, (약) 92%, (약) 93%, (약) 94%, (약) 95%, (약) 96%, (약) 97%, (약) 98% 또는 (약) 99% 이상의 CD8+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 (약) 95% 이상의 CD8+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 (약) 96% 이상의 CD8+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 (약) 97% 이상의 CD8+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 (약) 98% 이상의 CD8+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 (약) 99% 이상의 CD8+ T 세포를 포함한다.
일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 CD4+ T 세포의 특정 백분율 또는 비율 이상을 함유하거나 이에 대해 농축된다. 일부 임의의 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 (약) 50%, (약) 60%, (약) 70%, (약) 80%, (약) 90%, (약) 91%, (약) 92%, (약) 93%, (약) 94%, (약) 95%, (약) 96%, (약) 97%, (약) 98% 또는 (약) 99% 이상의 CD4+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 (약) 95% 이상의 CD4+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 (약) 96% 이상의 CD4+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 (약) 97% 이상의 CD4+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 (약) 98% 이상의 CD4+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 (약) 99% 이상의 CD4+ T 세포를 포함한다.
일부 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단은 CD8+ 및 CD4+ T 세포의 특정 조합 백분율 또는 비율 이상을 함유하거나 이에 대해 농축된다. 일부 임의의 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단에서, CD8+ T 세포 및 CD4+ T 세포의 공동 백분율 또는 비율은 (약) 50%, (약) 60%, (약) 70%, (약) 80%, (약) 90%, (약) 91%, (약) 92%, (약) 93%, (약) 94%, (약) 95%, (약) 96%, (약) 97%, (약) 98% 또는 (약) 99% 이상이다. 일부 임의의 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단에서, CD8+ T 세포 및 CD4+ T 세포의 공동 백분율 또는 비율은 (약) 95% 이상이다. 일부 임의의 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단에서, CD8+ T 세포 및 CD4+ T 세포의 공동 백분율 또는 비율은 (약) 96% 이상이다. 일부 임의의 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단에서, CD8+ T 세포 및 CD4+ T 세포의 공동 백분율 또는 비율은 (약) 97% 이상이다. 일부 임의의 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단에서, CD8+ T 세포 및 CD4+ T 세포의 공동 백분율 또는 비율은 (약) 98% 이상이다. 일부 임의의 구현예에서, 투여를 위한 세포 조성물 또는 세포 집단에서, CD8+ T 세포 및 CD4+ T 세포의 공동 백분율 또는 비율은 (약) 99% 이상이다.
일부 구현예에서, 조성물 또는 분량의 투여, 예를 들어, 다수의 세포 조성물의 투여는 별도로 세포 조성물의 투여를 수반한다. 일부 측면에서, 별도의 투여는 동시든 순차적이든 임의의 순서로 수행된다. 일부 구현예에서, 분량은 제1 조성물 및 제2 조성물을 포함하고, 제1 조성물 및 제2 조성물은 서로 48시간 내에, 예컨대 서로 36시간 이내 또는 서로 24시간을 넘지 않게 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 조성물 및 제2 조성물은 0 내지 12시간 간격, 0 내지 6시간 간격 또는 0 내지 2시간 간격으로 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 조성물의 투여 개시 및 제2 조성물의 투여 개시는 2시간 이내, 1시간 이내 또는 30분 이내의 간격, 15분 이내, 10분 이내 또는 5분 이내의 간격으로 수행된다. 일부 구현예에서, 제1 조성물의 투여 개시 및/또는 완료 및 제2 조성물의 투여 개시 및/또는 완료는 2시간 이내, 1시간 이내 또는 30분 이내의 간격, 15분 이내, 10분 이내 또는 5분 이내의 간격으로 수행된다.
일부 구현예에서, 제1 조성물 및 제2 조성물은 대상체에 투여되기 전에 혼합된다. 일부 구현예에서, 제1 조성물 및 제2 조성물은 투여 전 바로(예를 들어, 6시간, 5시간, 4시간, 3시간, 2시간, 1.5시간, 1시간 또는 0.5시간 내에) 혼합된다. 일부 구현예에서, 제1 조성물 및 제2 조성물은 투여 직전에 혼합된다.
일부 조성물에서, 제1 조성물, 예를 들어, 분량의 제1 조성물은 CD4+ T 세포를 포함한다. 일부 조성물에서, 제1 조성물, 예를 들어, 분량의 제1 조성물은 CD8+ T 세포를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 조성물은 제2 조성물 전에 투여된다.
일부 구현예에서, 분량의 세포 또는 세포 조성물은 CD4+ 세포 발현 재조합 수용체 대 CD8+ 세포 발현 재조합 수용체 및/또는 CD4+ 세포 대 CD8+ 세포의 정의된 비율 또는 표적 비율을 포함하고, 상기 비율은 선택적으로 대략 1:1이거나 대략 1:3 내지 대략 3:1, 예컨대 대략 1:1이다. 일부 측면에서, 표적 또는 원하는 비율의 상이한 세포 집단(예컨대 CD4+:CD8+ 비율 또는 CAR+CD4+:CAR+CD8+ 비율, 예를 들어, 1:1)을 갖는 조성물 또는 분량의 투여는 집단 중 하나를 함유하는 세포 조성물의 투여 후 다른 집단을 포함하는 별도의 세포 조성물의 투여를 수반하고, 상기 투여는 표적 또는 원하는 비율이거나 대략적인 표적 또는 원하는 비율로 수행된다. 일부 측면에서, 정의된 비율로 분량의 세포 또는 세포 조성물의 투여는 T 세포 요법의 증폭, 지속성 및/또는 항종양 활성의 개선으로 이어진다.
일부 구현예에서, 대상체는 다중 분량, 예를 들어 2 이상의 분량 또는 다중 연속 분량의 세포를 받는다. 일부 구현예에서, 2 분량이 대상체에 투여된다. 일부 구현예에서, 대상체는 연속 분량을 받고, 예를 들어 제2 분량은 제1 분량 후 약 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 또는 21일에 투여된다. 일부 구현예에서, 다중 연속 분량은 제1 분량 후에 투여되어 추가적인 분량 또는 분량들은 연속 분량의 투여 후에 투여된다. 일부 측면에서, 추가 분량으로 대상체에 투여되는 세포의 수는 제1 분량 및/또는 연속 분량과 동일하거나 이와 유사하다. 일부 구현예에서, 추가 분량 또는 분량들은 선행 분량들보다 더 크다.
일부 측면에서, 제1 및/또는 연속 분량의 크기는 하나 이상의 기준, 예컨대 선행 요법, 예를 들어 화학요법에 대한 대상체의 반응, 대상체에서 질병 부담, 예컨대 종양 부하, 부피, 크기 또는 전이의 등급, 정도 또는 유형, 단계 및/또는 대상체가 독성 결과, 예를 들어 CRS, 대식세포 활성화 증후군, 종양 용해 증후군, 신경 독성을 발달시킬 가능성 또는 발생률 및/또는 투여될 세포 및/또는 재조합 수용체에 대한 숙주 면역 반응에 기초하여 결정된다.
일부 측면에서, 제1 분량의 투여와 연속 분량의 투여 사이의 시간은 약 9 내지 약 35일, 약 14일 내지 약 28일 또는 15 내지 27일이다. 일부 구현예에서, 연속 분량의 투여는 제1 분량의 투여 후 약 14 일 이상 및 약 28 일 미만의 시점에 있다. 일부 측면에서, 제1 분량 및 연속 분량 사이 시간은 약 21 일이다. 일부 구현예에서, 추가 분량 또는 분량들, 예를 들어, 연속 분량들은 연속 분량 투여 후에 투여된다. 일부 측면에서, 추가 연속 분량 또는 분량들은 선행 분량 투여 후 약 14일 이상 및 약 28일 미만에 투여된다. 일부 구현예에서, 추가 분량은 선행 분량 후 약 14일 미만, 예를 들어, 선행 분량 후 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 또는 13일에 투여된다. 일부 구현예에서, 선행 분량 후 약 14일 미만 및/또는 선행 분량 후 약 28일 이상에는 어떤 분량도 투여되지 않는다.
일부 구현예에서, 세포, 예를 들어 재조합 수용체 발현 세포의 분량은 제1 분량의 T 세포 및 연속 분량의 T 세포를 포함한 2 분량(예를 들어, 2배 분량)을 포함하며, 여기서 제1 분량 및 제2 분량 중 하나 또는 둘 다는 T 세포의 분할 분량 투여를 포함한다.
일부 구현예에서, 분량의 세포는 일반적으로 질병 부담을 감소시키는데 효과적일 만큼 충분히 크다.
일부 구현예에서, 세포는 원하는 투여량으로 투여되며, 이는 일부 측면에서 원하는 분량 또는 세포 수 또는 세포 유형(들) 및/또는 원하는 비율의 세포 유형을 포함한다. 따라서, 일부 구현예에서 세포의 투여량은 세포의 총 수(또는 체중 1kg 당 수) 및 개별 집단 또는 하위 유형의 원하는 비율, 예컨대 CD4+ 대 CD8+ 비율에 기초한다. 일부 구현예에서, 세포의 투여량은 개별 집단의 세포 또는 개별 세포 유형의 원하는 총 수(또는 체중 1kg당 수)에 기초한다. 일부 구현예에서, 투여량은 개별 집단에서 원하는 총 세포 수, 원하는 비율 및 총 세포의 원하는 수와 같은 상기 특성의 조합에 기초한다.
일부 구현예에서, 세포 집단 또는 하위 유형의 세포, 예컨대 CD8+ 및 CD4+ T 세포는 원하는 분량의 T 세포와 같은 원하는 분량의 총 세포의 허용된 차이로 또는 허용된 차이 내에서 투여된다. 일부 측면에서, 원하는 분량은 원하는 세포 수 또는 세포가 투여되는 대상체의 체중 단위 당 원하는 세포 수, 예를 들어 세포/kg이다. 일부 측면에서, 원하는 분량은 최소 세포 수 또는 최소 세포 수 이상 또는 체중 단위 당 최소 세포 수이다. 일부 측면에서, 원하는 분량으로 투여되는 총 세포 중, 개별 집단 또는 하위 유형은 원하는 산출 비율(예컨대 CD4+ 대 CD8+ 비율)로 또는 부근의 비율로, 예를 들어 상기 비율의 특정 허용된 차이 또는 오류 내에 존재한다.
일부 구현예에서, 세포는 CD4+ 세포의 원하는 분량 및/또는 CD8+ 세포의 원하는 분량과 같은 하나 이상의 개별 세포 집단 또는 하위 유형의 세포의 원하는 분량의 허용된 차이 또는 차이 내에서 투여된다. 일부 측면에서, 원하는 분량은 하위 유형 또는 집단의 원하는 세포 수 또는 상기 세포가 투여되는 대상체의 체중 단위 당 상기 세포의 원하는 수, 예를 들어 세포/kg이다. 일부 측면에서, 원하는 분량은 집단 또는 하위 유형의 최소 세포 수 또는 그 이상 또는 체중 단위당 집단 또는 하위 유형의 최소 세포 수이다.
따라서, 일부 구현예에서, 투여량은 총 세포의 원하는 고정 분량 및 원하는 비율에 기초하고/거나 하나 이상, 예를 들어 개별 하위 유형 또는 하위 집단 각각의 원하는 고정 분량에 기초한다. 따라서, 일부 구현예에서, 투여량은 T 세포의 원하는 고정 또는 최소 분량 및 CD4+ 대 CD8+ 세포의 원하는 비율에 기초하고/거나 CD4+ 및/또는 CD8+ 세포의 원하는 고정 또는 최소 분량에 기초한다.
일부 구현예에서, 세포는 CD4+ 및 CD8+ 세포 또는 하위 유형과 같은 다중 세포 집단 또는 하위 유형의 원하는 산출 비율의 허용된 범위에서 또는 범위 내에서 투여된다. 일부 측면에서, 원하는 비율은 특정 비율일 수 있거나 비율의 범위일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 원하는 비율(예를 들어, CD4+ 대 CD8+ 세포의 비율)은 (약) 5:1 내지 (약) 5:1(또는 약 1:5 초과 내지 약 5:1 미만) 또는 (약) 1:3 내지 (약) 3:1(또는 약 1:3 초과 내지 약 3:1 미만), 예컨대 (약) 2:1 내지 (약) 1:5(또는 약 1:5 초과 내지 약 2:1 미만), 예컨대 (약) 5:1, 4.5:1, 4:1, 3.5:1, 3:1, 2.5:1, 2:1, 1.9:1, 1.8:1, 1.7:1, 1.6:1, 1.5:1, 1.4:1, 1.3:1, 1.2:1, 1.1:1, 1:1, 1:1.1, 1:1.2, 1:1.3, 1:1.4, 1:1.5, 1:1.6, 1:1.7, 1:1.8, 1:1.9: 1:2, 1:2.5, 1:3, 1:3.5, 1:4, 1:4.5 또는 1:5이다. 일부 측면에서, 허용된 차이는 원하는 비율의 약 1%, 약 2%, 약 3%, 약 4% 약 5%, 약 10%, 약 15%, 약 20%, 약 25%, 약 30%, 약 35%, 약 40%, 약 45%, 약 50%(상기 범위 사이의 임의의 수치 포함) 이내이다.
특정 구현예에서, 세포의 수 및/또는 농도는 재조합 수용체(예를 들어, CAR) 발현 세포의 수를 지칭한다. 다른 구현예에서, 세포의 수 및/또는 농도는 투여된 모든 세포, T 세포 또는 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 수 또는 농도를 지칭한다.
일부 측면에서, 분량의 크기는 하나 이상의 기준, 예컨대 선행 요법, 예를 들어 화학요법에 대한 대상체의 반응, 대상체에서 질병 부담, 예컨대 종양 부하, 부피, 크기 또는 전이의 등급, 정도 또는 유형, 단계 및/또는 대상체가 독성 결과, 예를 들어 CRS, 대식세포 활성화 증후군, 종양 용해 증후군, 신경 독성을 발달시킬 가능성 또는 발생률 및/또는 투여될 세포 및/또는 재조합 수용체에 대한 숙주 면역 반응에 기초하여 결정된다.
일부 구현예에서, 방법은 또한 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 하나 이상의 추가 분량의 세포의 투여 및/또는 림프절 마비 요법을 포함하고/거나 방법 중 하나 이상의 단계가 반복된다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 추가 분량은 초기 분량과 동일하다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 추가 분량은 초기 분량과 상이하며, 예를 들어, 초기 분량보다 2 배, 3 배, 4 배, 5 배, 6 배, 7 배, 8 배, 9 배 또는 10 배 이상과 같이 더 높거나, 초기 분량보다 예를 들어 2 배, 3 배, 4 배, 5 배, 6 배, 7 배, 8 배, 9 배 또는 10 배 이상과 같이 더 낮다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 추가 분량의 투여는 초기 치료 또는 임의의 선행 치료에 대한 대상체의 반응, 대상체에서 질병 부담, 예컨대 종양 부하, 부피, 크기 또는 전이의 등급, 정도 또는 유형, 단계 및/또는 대상체가 독성 결과, 예를 들어 CRS, 대식세포 활성화 증후군, 종양 용해 증후군, 신경 독성을 발달시킬 가능성 또는 발생률 및/또는 투여될 세포 및/또는 재조합 수용체에 대한 숙주 면역 반응에 기초하여 결정된다.
B. 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체 또는 이의 단편의 투여
여기에 제공된 방법, 조성물, 조합, 키트 또는 제조 물품의 일부 구현예에서, 병용 요법은 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 상기 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)을 함유하는 약학 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 일부 측면에서, 체크포인트 억제제는 체크포인트 경로의 PD-1/PD-L1 축과 같은 면역 체크포인트 경로의 단백질 또는 성분을 억제하거나 차단할 수 있다. 일부 구현예에서, 예시적인 체크포인트 억제제는 항-PD-L1 항체 또는 항-PD-1 항체를 포함한다.
1. 항-PD-L1 항체 또는 이의 단편
여기에 제공된 방법, 조성물, 조합, 키트 또는 제조 물품의 일부 구현예에서, 병용 요법은 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편), 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)을 함유하는 약학 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 일부 임의의 구현예에서, 체크포인트 억제제는 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체는 PD-L1, 예컨대 PD-L1의 세포 외 영역에 특이적으로 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)은 약 5, 4, 3, 2.5, 2 또는 1 나노몰(nM) 미만의 결합 친화도(KD)로 PD-L1에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 5 nM 내지 약 1 nM; 또는 약 5 nM 내지 약 2 nM; 또는 약 5 nM 내지 약 3 nM; 또는 약 5 nM 내지 약 4 nM; 또는 약 3 nM 내지 약 1 nM; 또는 약 2 nM 내지 약 1 nM;의 결합 친화도(KD)로 표적(즉, PD-L1)에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 950 피코몰(pM) 미만의 결합 친화도(KD)로 표적(즉, PD-L1)에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 900, 800, 700, 600, 500, 400, 300, 200 또는 100 pM 미만의 결합 친화도(KD)로 표적(즉, PD-L1)에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 900 pM 내지 약 100 pM; 또는 약 900 pM 내지 약 200 pM; 또는 약 900 pM 내지 약 300 pM; 또는 약 900 pM 내지 약 400 pM; 또는 약 900 pM 내지 약 500 pM; 또는 약 900 pM 내지 약 600 pM; 또는 약 900 pM 내지 약 700 pM; 또는 약 200 pM 내지 약 100 pM; 또는 약 300 pM 내지 약 200 pM; 또는 약 400 pM 내지 약 300 pM;의 결합 친화도(KD)로 표적(즉, PD-L1)에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 90 pM, 80 pM, 70 pM, 60 pM, 55 pM 또는 50 pM 미만의 결합 친화도(KD)로 표적(즉, PD-L1)에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 100 pM 내지 약 50 pM; 또는 약 100 pM 내지 약 70 pM; 또는 약 100 pM 내지 약 80 pM; 또는 약 100 pM 내지 약 90 pM; 또는 약 70 pM 내지 약 50 pM; 또는 약 60 pM 내지 약 50 pM; 또는 약 55 pM 내지 약 50 pM;의 결합 친화도(KD)로 표적(즉, PD-L1)에 결합한다. KD는 당업자에게 공지된 방법(예를 들어, BIAcore 평가, ELISA)을 사용하여 평가될 수 있다(Biacore International AB, Uppsala, Sweden).
일부 구현예에서, PD-L1 결합에 관하여 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 결합 특성은 해리 속도 또는 결합 속도(각각 koff 및 kon)를 참조하여 또한 측정될 수 있다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 104 M-1s-1 이상, 약 5×104 M-1 s-1 이상, 약 105 M-1 s-1 이상, 약 2×105 M-1 s-1 이상, 약 5×105 M-1 s-1 이상, 약 106 M-1 s-1 이상, 약 5×106 M-1 s-1 이상, 약 107 M-1 s-1 이상, 약 5×107 M-1 s-1 이상 또는 약 108 M-1 s1 이상의 kon 속도(항체(Ab)+항원(Ag)kon →AbAg)를 갖는다. 일부 구현예에서, kon 속도는 BIAcore 평가로 측정된다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 결합 특성은 약 5×10-1 s-1 미만, 약 10-1 s-1 미만, 약 5×10-2 s-1 미만, 약 10-2 s-1 미만, 약 5×10-3 s-1 미만, 약 10-3 s-1 미만, 약 5×10-4 s-1 미만, 약 10-4 s-1 미만, 약 5×10-5 s-1 미만, 약 10-5 s-1 미만, 약 5×10-6 s-1 미만, 약 10-6 s-1 미만, 약 5×10-7 s-1 미만, 약 10-7 s-1 미만, 약 5×10-8 s-1 미만, 약 10-8 s-1 미만, 약 5×10-9 s-1 미만, 약 10-9 s-1 미만 또는 약 10-10 s-1 미만의 koff 속도(항체 (Ab)+항원 (Ag)koff →AbAg)를 갖는다. 일부 구현예에서, koff 속도는 BIAcore 평가로 측정된다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 PD-L2에 결합하지 않는다. 일부 구현예에서, PD-L2는 인간 PD-L2이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(이의 또는 항원 결합 단편)는 B7-H2(예를 들어, 인간 B7-H2)에 결합하지 않는다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 B7-H3(예를 들어, 인간 B7-H3)에 결합하지 않는다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 CD28(예를 들어, 인간 CD28)에 결합하지 않는다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 CTLA-4(예를 들어, 인간 CTLA-4)에 결합하지 않는다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 PD-1(예를 들어, 인간 PD-1)에 결합하지 않는다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 인간 외 종으로부터의 PD-L1과 교차 반응한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 시노몰구스 원숭이 PD-L1과 교차 반응한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 마우스 PD-L1, 예를 들어 2.7A4와 교차 반응한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 시노몰구스 원숭이 PD-L1 및 마우스 PD-L1, 예를 들어 2.7A4 둘다와 교차 반응한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 시노몰구스 원숭이 PD-L1과 교차 반응하나 마우스 PD-L1, 예를 들어 2.9D10 및 2.14H9와는 교차 반응하지 않는다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 단클론성 항체이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 완전한 인간 단클론성 항체 또는 이의 단편이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 조작된 항체이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 키메라 또는 인간화된 항체이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 Fc 영역에 하나 이상의 돌연변이를 포함한다.
본 명세서에서 용어 "항체(antibody)"는 가장 넓은 의미로 사용되며, 온전한 항체 및 기능성(항원-결합) 항체 단편을 포함하는 다클론성 및 단클론성 항체를 포함하며, 항원에 특이적으로 결합할 수 있는 단편 항원 결합(Fab) 단편, F(ab’)2 단편, Fab’ 단편, Fv 단편, 재조합 IgG(rIgG) 단편, 중쇄 가변(VH) 영역, 단일 사슬 가변 단편(scFv)을 포함한 단일 사슬 항체 단편 및 단일 도메인 항체(예를 들어, sdAb, sdFv, 나노바디(nanobody)) 단편을 포함한다. 상기 용어는 유전자 조작되고/거나 달리 변형된 형태의 면역 글로불린, 예컨대 인트라바디(intrabodies), 펩티바디(peptibodies), 키메라 항체, 완전한 인간 항체, 인간화된 항체 및 이종 접합 항체, 다중 특이적, 예를 들어 이중 특이적 또는 삼중 특이적 항체, 디아바디(diabodies), 트리아바디(triabodies) 및 테트라바디(tetrabodies), 탠덤 디-scFv, 탠덤 트리-scFv를 포괄한다. 달리 언급되지 않는 한, 용어 "항체"는 본 명세서에서 "항원 결합 단편(antigen-binding fragment)"으로도 지칭되는 이의 기능성 항체 단편을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 상기 용어는 또한 IgG 및 이의 하위 클래스, IgM, IgE, IgA 및 IgD를 포함하는 임의의 클래스 또는 하위 클래스의 항체를 포함하는 온전한 또는 전장 항체를 포함한다.
용어 "초가변 영역(hypervariable region)" 또는 "HVR"과 동의어인 "상보성 결정 영역(complementarity determining region)" 및 "CDR"은 항원 특이성 및/또는 결합 친화도를 부여하는 항체 가변 영역 내의 비인접 아미노산 서열을 지칭하는 것으로 당업계에 공지되어 있다. 일반적으로, 각각의 중쇄 가변 영역에는 3 개의 CDR(CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3)이 있고 각각의 경쇄 가변 영역에는 3 개의 CDR(CDR-L1, CDR-L2, CDR-L3)이 있다. "프레임워크 영역(Framework region)" 및 "FR"은 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 비-CDR 부분을 지칭하는 것으로 당업계에 공지되어 있다. 일반적으로, 각각의 전장 중쇄 가변 영역에는 4개의 FR(FR-H1, FR-H2, FR-H3 및 FR-H4)이 있고, 각각의 전장 경쇄 가변 영역에는 4개의 FR(FR-L1, FR-L2, FR-L3 및 FR-L4)이 있다.
주어진 CDR 또는 FR의 정확한 아미노산 서열 경계는 문헌[Kabat et al. (1991), “Sequences of Proteins of Immunological Interest,” 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (“Kabat” 넘버링 체계); Al-Lazikani et al., (1997) JMB 273,927-948 (“Chothia” 넘버링 체계); MacCallum et al., J. Mol. Biol. 262:732-745 (1996), “Antibody-antigen interactions: Contact analysis and binding site topography,” J. Mol. Biol. 262, 732-745.” (“Contact” 넘버링 체계); Lefranc MP et al., “IMGT unique numbering for immunoglobulin and T cell receptor variable domains and Ig superfamily V-like domains,” Dev Comp Immunol, 2003 Jan;27(1):55-77 (“IMGT” 넘버링 체계); Honegger A and Plukthun A, “Yet another numbering scheme for immunoglobulin variable domains: an automatic modeling and analysis tool,” J Mol Biol, 2001 Jun 8;309(3):657-70, (“Aho” 넘버링 체계); 및 Martin et al., “Modeling antibody hypervariable loops: a combined algorithm,” PNAS, 1989, 86(23):9268-9272, (“AbM” 넘버링 체계)]에 기재된 것을 포함한 다수의 잘 알려진 체계 중 어느 하나를 사용하여 용이하게 결정될 수 있다.
주어진 CDR 또는 FR의 경계는 식별에 사용된 체계에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, Kabat 체계는 구조적 정렬을 기반으로 하는 반면 Chothia 체계는 구조 정보를 기반으로 한다. Kabat 및 Chothia 체계 모두에 대한 넘버링은 삽입 문자, 예를 들어 "30a"에 의해 제공된 삽입 및 일부 항체에서 나타나는 결실을 갖는 가장 일반적인 항체 영역 서열 길이에 기초한다. 두 가지 체계는 상이한 위치에 특정 삽입 및 결실(“인델(indel)”)을 배치하여 차별적인 넘버링을 초래한다. Contact 체계는 복잡한 결정 구조의 분석에 기초하며 여러 측면에서 Chothia 넘버링 체계와 유사하다. AbM 체계는 Oxford Molecular’s AbM 항체 모델링 소프트웨어에서 사용된 것에 기초한 Kabat와 Chothia 정의 사이의 절충안이다.
하기 표 2는 Kabat, Chothia, AbM 및 Contact 체계에 의해 각각 확인된 바와 같은 CDR-L1, CDR-L2, CDR-L3 및 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3의 예시적인 위치 경계를 열거한다. CDR-H1의 경우, Kabat 및 Chothia 넘버링 체계 둘 다를 사용하여 잔기 넘버링이 나열된다. FR은 예를 들어 CDR-L1 앞에 위치한 FR-L1, CDR-L1과 CDR-L2 사이에 위치한 FR-L2, CDR-L2와 CDR-L3 사이에 위치한 FR-L3과 같은 식으로 CDR 사이에 위치한다. 도시된 Kabat 넘버링 체계는 H35A 및 H35B에 삽입을 배치하기 때문에, 도시된 Kabat 넘버링 관례를 사용하여 넘버링될 때 Chothia CDR-H1 루프의 끝은 루프의 길이에 따라 H32와 H34 사이에서 변한다.
[표 2]
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따라서, 달리 명시되지 않는 한, 주어진 항체 또는 이의 영역, 예컨대 이의 가변 영역의 "CDR" 또는 "상보성 결정 영역(complementary determining region)" 또는 개별 지정 CDR(예를 들어, CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3)은 상기 언급된 체계 중 어느 하나에 의해 정의된 바와 같은 (또는 특정) 상보성 결정 영역을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 예를 들어, 특정 CDR(예를 들어, CDR-H3)이 주어진 VH 또는 VL 영역 아미노산 서열에 있는 해당 CDR의 아미노산 서열을 함유한다고 언급될 경우, 상기 CDR은 상기 언급된 체계 중 어느 하나에 의해 정의된 바와 같은 가변 영역 내의 해당 CDR(예를 들어, CDR-H3)의 서열을 갖는다고 이해된다. 일부 구현예에서, 특정 CDR 서열이 명시된다.
마찬가지로, 달리 명시되지 않는 한, 주어진 항체 또는 이의 영역, 예컨대 이의 가변 영역의 FR 또는 개별 지정 FR(들)(예를 들어, FR-H1, FR-H2, FR-H3, FR-H4)은 공지된 체계 중 어느 하나에 의해 정의된 바와 같은 (또는 특정) 프레임워크 영역을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 일부 경우에, 특정 CDR, FR 또는 FR들 또는 CDR들의 식별을 위한 체계는 Kabat, Chothia, AbM 또는 Contact 방법에 의해 정의된 바와 같이 CDR과 같이 명시된다. 다른 경우에, CDR 또는 FR의 특정 아미노산 서열이 제공된다.
용어 "가변 영역(variable region)" 또는 "가변 도메인(ariable domain)"은 항체가 항원에 결합하는데 관여하는 항체의 중쇄 또는 경쇄 도메인을 지칭한다. 천연 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역(각각 VH 및 VL )은 일반적으로 유사한 구조를 가지며, 각각의 도메인은 4 개의 보존된 프레임워크 영역(FR) 및 3 개의 CDR을 포함한다. (예를 들어, 문헌[Kindt et al. Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co., 91 페이지 (2007)]을 참조한다). 단일 VH 또는 VL 도메인은 항원 결합 특이성을 부여하기에 충분할 수 있다. 또한, 특정 항원에 결합하는 항체는 항원에 결합하는 항체로부터의 VH 또는 VL 도메인을 사용하여 단리되어 상보적 VL 또는 VH 도메인 라이브러리를 각각 스크리닝할 수 있다. 예를 들어, 문헌[Portolano et al., J. Immunol. 150:880-887 (1993); Clarkson et al., Nature 352:624-628 (1991)]을 참조한다.
제공된 항체 중에는 항체 단편이 있다. "항체 단편(antibody fragment)" 또는 "항원 결합 단편(antigen-binding fragment)"은 온전한 항체가 결합하는 항원에 결합하는 온전한 항체의 일부를 포함하는 온전한 항체 이외의 분자를 지칭한다. 항체 단편의 예는 Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2; 디아바디; 선형 항체; 중쇄 가변(VH) 영역, scFv와 같은 단일 사슬 항체 분자 및 VH 영역만을 포함하는 단일 도메인 항체; 및 항체 단편으로부터 형성된 다중 특이적 항체;를 포함하나 이에 국한되지 않는다. 특정 구현예에서, 항체는 scFv와 같은 중쇄 가변(VH) 영역 및/또는 경쇄 가변(VL) 영역을 포함하는 단일 사슬 항체 단편이다.
단일 도메인 항체(Single-domain antibody, sdAb)는 항체의 중쇄 가변 영역의 전부 또는 일부 또는 경쇄 가변 영역의 전부 또는 일부를 포함하는 항체 단편이다. 특정 구현예에서, 단일 도메인 항체는 인간 단일 도메인 항체이다.
항체 단편은 온전한 항체의 단백질 분해 소화 및 재조합 숙주 세포에 의한 생산을 포함하나 이에 국한되지 않는 다양한 기술에 의해 제조될 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 합성 링커, 예를 들어 펩티드 링커에 의해 연결된 2 이상의 항체 영역 또는 사슬을 갖는 것과 같이 자연적으로 발생하지 않고/거나 자연적으로 발생하는 온전한 항체의 효소 소화에 의해 생성되지 않을 수 있는 배열을 포함하는 단편과 같은 재조합으로 생성된 단편이다. 일부 측면에서, 항체 단편은 scFv이다.
"인간화된(humanized)" 항체는 모든 또는 실질적으로 모든 CDR 아미노산 잔기가 비인간 CDR로부터 유래되고 모든 또는 실질적으로 모든 FR 아미노산 잔기가 인간 FR로부터 유래된 항체이다. 인간화된 항체는 선택적으로 인간 항체로부터 유래된 항체 불변 영역의 적어도 일부를 포함할 수 있다. 비인간 항체의 "인간화된 형태(humanized form)"는 모체 비인간 항체의 특이성 및 친화도를 유지하면서, 전형적으로 인간에 대한 면역원성을 감소시키기 위해 인간화를 거친 비인간 항체의 변이체를 지칭한다. 일부 구현예에서, 인간화된 항체의 일부 FR 잔기는 비인간 항체(예를 들어, CDR 잔기가 유래된 항체)로부터의 해당 잔기로 치환되어 예를 들어, 항체 특이성 또는 친화도가 회복되거나 개선된다.
제공된 구현예에 부합되는 항-PD-L1 항체 중에는 인간 항체가 있다. "인간 항체(human antibody)"는 인간 또는 인간 세포 또는 인간 항체 라이브러리를 포함하는 인간 항체 레퍼토리 또는 다른 인간 항체-암호화 서열을 이용하는 비인간 공급원에 의해 생성된 항체의 아미노산 서열에 상응하는 아미노산 서열을 갖는 항체이다. 상기 용어는 모든 또는 실질적으로 모든 CDR이 비인간인 것과 같은 비인간 항원 결합 영역을 포함하는 비인간 항체의 인간화된 형태를 배제한다. 상기 용어는 인간 항체의 항원-결합 단편을 포함한다.
인간 항체는 항원의 도전에 대한 반응으로 인간 가변 영역을 가진 손상되지 않은 인간 항체 또는 손상되지 않은 항체를 생성하도록 변형된 전이 유전자 동물에 면역원을 투여함으로써 제조될 수 있다. 상기 동물은 전형적으로 내인성 면역글로불린 유전자 좌를 대체하거나 또는 동물의 염색체 내로 무작위 통합되거나 염색체 외에 존재하는 인간 면역글로불린 유전자 좌의 전부 또는 일부를 함유한다. 상기 전이 유전자 동물에서, 내인성 면역글로불린 유전자 좌가 일반적으로 불활성화되었다. 인간 항체는 또한 인간 레퍼토리로부터 유래된 항체 암호화 서열을 함유하는 파지 디스플레이 및 무세포 라이브러리를 포함한, 인간 항체 라이브러리로부터 유래될 수 있다.
제공된 항체 중에는 단클론성 항체 단편을 포함하는 단클론성 항체가 있다. 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "단클론성 항체(monoclonal antibody)"는 실질적으로 균질한 항체의 집단 내에서 또는 이로부터 수득된 항체를 지칭한다, 즉, 단클론성 항체 제제의 생산 동안 발생하거나 자연적으로 발생하는 돌연변이를 함유하는 가능한 변이체(상기 변이체는 일반적으로 미미한 양으로 존재)를 제외하고 집단을 포함한 개별 항체는 동일하다. 전형적으로 상이한 에피토프에 대하여 유도되는 상이한 항체를 포함하는 다클론성 항체 제제와는 대조적으로, 단클론성 항체 제제의 각 단클론성 항체는 항원 상의 단일 에피토프에 대해 유도된다. 상기 용어는 임의의 특정 방법에 의한 항체의 생산을 요구하는 것으로 해석되어서는 안된다. 단클론성 항체는 하이브리도마, 재조합 DNA 방법, 파지 디스플레이 및 기타 항체 디스플레이 방법으로부터의 생성을 포함하되 이에 국한되지 않는 다양한 기술에 의해 제조될 수 있다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgG 아이소타입이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 아이소타입이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 아이소타입의 변이체이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgG2 아이소타입이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 이펙터 기능을 유발할 가능성이 감소되었다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgG1 아이소타입의 완전한 인간 단클론성 항체이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 항체 유도 세포 매개 세포 독성(Antibody Directed Cell-mediated Cytotoxicity, ADCC)을 유발할 가능성이 증가하였다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 z, za 또는 f 알로타입이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgG 항체 또는 이의 단편이 아니다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgM 또는 IgD 항체 또는 이의 단편이거나, IgM 또는 IgD 항체 또는 이의 단편의 변이체이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 단일 사슬 가변 단편(single chain variable fragment, scFv)이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 비-IgG 유사 단편(예를 들어, 나노바디, DARPin)이다.
예시적인 PD-L1 항체에는 문헌[미국 특허 번호 8,217,149; Ser. 번호 12/633,339; 미국 특허 번호 8,383,796; Ser. 번호 13/091,936; 미국 특허 번호 8,552,154; Ser. 번호 13/120,406; 미국 특허 출원 공개 번호 20110280877; Ser. 번호 13/068,337; 미국 특허 출원 공개 번호 20130309250; Ser. 번호 13/892,671; 국제 출원 공개 번호 WO2013019906; 국제 출원 공개 번호 WO2013079174; 국제 출원 번호 PCT/US10/58007(2010년 출원)의 미국 국내 단계인 미국 출원 Ser. 번호 13/511,538(2012년 8월 7일 출원); 및 미국 출원 Ser. 번호 13/478,511(2012년 5월 23일 출원)]에 개시된 것이 포함된다.
예시적인 항-PD-L1 항체에는 MDX-1105(Medarex), MEDI4736(Durvalumab, Medimmune, 미국8,779.108 참조) MPDL3280A(Genentech), AMP224(GlaxoSmithKline), MSB0010718C(Avelumab, Pfizer) 및 BMS-935559(Bristol-Myers Squibb)가 포함된다. MEDI4736(Durvalumab)은 PD-L1에 결합하고 PD-1과 리간드의 상호 작용을 억제하는 인간 단클론성 항체이다. MDPL3280A(Genentech/Roche)는 PD-L1에 결합하는 인간 Fc 최적화된 IgG1 단클론성 항체이다. PD-L1에 대한 MDPL3280A 및 다른 인간 단클론성 항체는 문헌[미국 특허 번호 7,943,743 및 미국 출원 공개 번호 20120039906]에 기재되어 있다. 다른 항-PD-L1 결합제에는 YW243.55.S70(국제 출원 WO2010/077634 참조) 및 MDX-1105(BMS-936559로도 지칭 및 예를 들어, 국제 출원 WO2007/005874에 기재된 항-PD-L1 결합제) 또는 상기 중 어느 하나의 항원 결합 단편이 포함된다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 문헌[미국 US8,779,108]에 개시된 항체(또는 이의 항원 결합 단편)이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 문헌[미국 US8,799,108]에 개시된 항체 또는 표적 결합제의 CDR 서열을 포함하는 항체 또는 이의 단편이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 문헌[미국 US8,799,108]에 개시된 항체 또는 표적 결합제의 VH/VL 서열을 포함하는 항체 또는 이의 단편이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 서열 번호: 60-61에 제시된 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 MEDI4736(Durvalumab)이다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 본 명세서에 기재된 임의의 항체의 CDR을 포함하는 항체 또는 이의 단편이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 본 명세서에 기재된 임의의 항체와 경쟁하는 항체 또는 이의 단편이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 본 명세서에 기재된 임의의 항체가 결합하는 동일한 에피토프에 결합하는 항체 또는 이의 단편이다.
2. 항-PD-1 항체 또는 이의 단편
여기에 제공된 방법, 조성물, 조합, 키트 또는 제조 물품의 일부 구현예에서, 병용 요법은 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편), 예를 들어 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)를 함유하는 약학 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 일부 임의의 구현예에서, 체크포인트 억제제는 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 항-PD-1 항체는 PD-1, 예컨대 PD-1의 세포 외 영역에 특이적으로 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 5, 4, 3, 2.5, 2 또는 1 나노몰(nM) 미만의 결합 친화도(KD)로 PD-1에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 5 nM 내지 약 1 nM; 또는 약 5 nM 내지 약 2 nM; 또는 약 5 nM 내지 약 3 nM; 또는 약 5 nM 내지 약 4 nM; 또는 약 3 nM 내지 약 1 nM; 또는 약 2 nM 내지 약 1 nM;의 결합 친화도(KD)로 표적(즉 , PD-1)에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 950 피코몰(pM) 미만의 결합 친화도(KD)로 표적(즉, PD-1)에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 900, 800, 700, 600, 500, 400, 300, 200 또는 100 pM 미만의 결합 친화도(KD)로 표적(즉, PD-1)에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 900 pM 내지 약 100 pM; 또는 약 900 pM 내지 약 200 pM; 또는 약 900 pM 내지 약 300 pM; 또는 약 900 pM 내지 약 400 pM; 또는 약 900 pM 내지 약 500 pM; 또는 약 900 pM 내지 약 600 pM; 또는 약 900 pM 내지 약 700 pM; 또는 약 200 pM 내지 약 100 pM; 또는 약 300 pM 내지 약 200 pM; 또는 약 400 pM 내지 약 300 pM;의 결합 친화도(KD)로 표적(즉, PD-1)에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 90 pM, 80 pM, 70 pM, 60 pM, 55 pM 또는 50 pM 미만의 결합 친화도(KD)로 표적(즉, PD-1)에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 100 pM 내지 약 50 pM; 또는 약 100 pM 내지 약 70 pM; 또는 약 100 pM 내지 약 80 pM; 또는 약 100 pM 내지 약 90 pM; 또는 약 70 pM 내지 약 50 pM; 또는 약 60 pM 내지 약 50 pM; 또는 약 55 pM 내지 약 50 pM;의 결합 친화도(KD)로 표적(즉, PD-1)에 결합한다. KD는 당업자에게 공지된 방법(예를 들어, BIAcore 평가, ELISA)을 사용하여 평가될 수 있다(Biacore International AB, Uppsala, Sweden).
일부 구현예에서, PD-1 결합에 관하여 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 결합 특성은 해리 속도 또는 결합 속도(각각 koff 및 kon)를 참조하여 또한 측정될 수 있다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 약 104 M-1s-1 이상, 약 5×104 M-1 s-1 이상, 약 105 M-1 s-1 이상, 약 2×105 M-1 s-1 이상, 약 5×105 M-1 s-1 이상, 약 106 M-1 s-1 이상, 약 5×106 M-1 s-1 이상, 약 107 M-1 s-1 이상, 약 5×107 M-1 s-1 이상 또는 약 108 M-1 s1 이상의 kon 속도(항체(Ab)+항원(Ag)kon →AbAg)를 갖는다. 일부 구현예에서, kon 속도는 BIAcore 평가로 측정된다.
일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 결합 특성은 약 5×10-1 s-1 미만, 약 10-1 s-1 미만, 약 5×10-2 s-1 미만, 약 10-2 s-1 미만, 약 5×10-3 s-1 미만, 약 10-3 s-1 미만, 약 5×10-4 s-1 미만, 약 10-4 s-1 미만, 약 5×10-5 s-1 미만, 약 10-5 s-1 미만, 약 5×10-6 s-1 미만, 약 10-6 s-1 미만, 약 5×10-7 s-1 미만, 약 10-7 s-1 미만, 약 5×10-8 s-1 미만, 약 10-8 s-1 미만, 약 5×10-9 s-1 미만, 약 10-9 s-1 미만 또는 약 10-10 s-1 미만의 koff 속도(항체 (Ab)+항원 (Ag)koff →AbAg)를 갖는다. 일부 구현예에서, koff 속도는 BIAcore 평가로 측정된다.
일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 단클론성 항체이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 완전한 인간 단클론성 항체 또는 이의 단편이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 조작된 항체이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 키메라 또는 인간화된 항체이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 Fc 영역에 하나 이상의 돌연변이를 포함한다.
일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgG 아이소타입이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 아이소타입이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 아이소타입의 변이체이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgG2 아이소타입이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 이펙터 기능을 유발할 가능성이 감소되었다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgG1 아이소타입의 완전한 인간 단클론성 항체이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 항체 유도 세포 매개 세포 독성(Antibody Directed Cell-mediated Cytotoxicity, ADCC)을 유발할 가능성이 증가하였다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 z, za 또는 f 알로타입이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgG 항체 또는 이의 단편이 아니다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 IgM 또는 IgD 항체 또는 이의 단편이거나, IgM 또는 IgD 항체 또는 이의 단편의 변이체이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 단일 사슬 가변 단편(single chain variable fragment, scFv)이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 비-IgG 유사 단편(예를 들어, 나노바디, DARPin)이다.
프로그램된 세포 사멸 1(Programmed cell death 1, PD-1)은 B 세포, NK 세포 및 T 세포에서 발현되는 면역 체크포인트 단백질이다(Shinohara et al., 1995, Genomics 23:704-6; Blank et al., 2007, Cancer Immunol Immunother 56:739-45; Finger et al., 1997, Gene 197:177-87; Pardoll (2012) Nature Reviews Cancer 12:252-264). PD-1의 주요 역할은 감염에 대한 반응으로 염증 동안 말초 조직에서 T 세포의 활성을 제한하는 것뿐만 아니라 자가 면역을 제한하는 것이다. PD-1 발현은 활성화된 T 세포에서 유도되고, 내인성 리간드 중 하나에 PD-1의 결합은 자극성 키나아제를 억제함으로써 T-세포 활성화를 억제하는 작용을 한다. PD-1은 또한 TCR "정지 신호(stop signal)"를 억제하는 작용을 한다. PD-1은 Treg 세포 상에서 고도로 발현되고 리간드의 존재 하에서 이의 증식을 증가시킬 수 있다(Pardoll (2012) Nature Reviews Cancer 12:252-264). 항-PD 1 항체는 흑색종, 비-소세포 폐암, 방광암, 전립선암, 결장 직장암, 두경부암, 삼중-음성 유방암, 백혈병, 림프종 및 신장 세포암의 치료에 사용되어 왔다(Topalian et al., 2012, N Engl J Med 366:2443-54; Lipson et al., 2013, Clin Cancer Res 19:462-8; Berger et al., 2008, Clin Cancer Res 14:3044-51; Gildener-Leapman et al., 2013, Oral Oncol 49:1089-96; Menzies & Long, 2013, Ther Adv Med Oncol 5:278-85). 예시적인 항-PD-1 항체에는 니볼루맙(Opdivo by BMS), 펨브롤리주맙(Keytruda by Merck), 피딜리주맙(CT-011 by Cure Tech), 람브롤리주맙(MK-3475 by Merck) 및 AMP-224(Merck)가 포함되고, 니볼루맙(Opdivo, BMS-936558 또는 MDX1106으로도 지칭; Bristol-Myers Squibb)은 PD-1을 특이적으로 차단하는 완전한 인간 IgG4 단클론성 항체이다. PD-1에 특이적으로 결합하는 니볼루맙(클론 5C4) 및 다른 인간 단클론성 항체는 문헌[미국 출원 US 8,008,449 및 국제 출원 WO2006/121168]에 기재되어 있다. 피딜리주맙(CT-011; Cure Tech)은 PD-1에 결합하는 인간화된 IgG1k 단클론성 항체이다. 피딜리주맙(Pidilizumab) 및 다른 인간화된 항-PD-1 단클론성 항체는 문헌[국제 출원 WO2009/101611]에 기재되어 있다. 펨브롤리주맙(이전에 람브롤리주맙(lambrolizumab)으로 공지되었고, 키트루다(Keytruda), MK03475로도 지칭; Merck)은 PD-1에 결합하는 인간화된 IgG4 단클론성 항체이다. 펨브롤리주맙(Pembrolizumab) 및 다른 인간화된 항-PD-1 항체는 문헌[미국 출원 US 8,354,509 및 국제 출원 WO2009/114335]에 기재되어 있다. 다른 항-PD-1 항체는 다른 것들, 예를 들어 문헌[미국 출원 US 8,609,089, US 2010028330, US 20120114649 및/또는 US 20150210769]에 기재된 항-PD-1 항체들 중에서 AMP 514(Amplimmune)를 포함한다. AMP-224(B7-DCIg; Amplimmune; 예를 들어, 문헌[국제 출원 WO2010/027827 및 WO2011/066342]에 기재)는 PD-1과 B7-H1 사이의 상호 작용을 차단하는 PD-L2 Fc 융합 가용성 수용체이다.
일부 임의의 구현예에서, 체크포인트 억제제는 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙 또는 세미플리맙(cemiplimab) 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 항-PD-1 항체이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제는 니볼루맙이다.
3. 다른 면역 체크포인트 억제제
본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "면역 체크포인트 억제제(immune checkpoint inhibitor)"는 하나 이상의 체크포인트 단백질을 전체적으로 또는 부분적으로 감소, 억제, 방해 또는 조절하는 분자를 지칭한다. 체크포인트 단백질은 T-세포 활성화 또는 기능을 조절한다. 상기 단백질은 T-세포 반응의 공자극 또는 억제성 상호 작용을 담당한다. 면역 체크포인트 단백질은 생리적 면역 반응의 자기 내성 및 지속 및 진폭을 조절하고 유지한다. 일부 구현예에서, 대상체에 본 명세서에 기재된 임의의 것과 같은 질병 또는 병태, 예를 들어 암에 대해, 면역 반응, 예를 들어 여기에 제공된 결합 분자(예를 들어, BCMA 결합 분자), 재조합 수용체, 세포 및/또는 조성물에 의해 영향을 받는 면역 반응을 향상시키거나 증진시킬 수 있는 추가 제제를 투여할 수 있다.
면역 체크포인트 억제제에는 면역계의 억제 경로를 통계적으로 유의한 방식으로 차단 또는 억제하는 임의의 제제가 포함된다. 상기 억제제에는 소분자 억제제가 포함될 수 있거나, 면역 체크포인트 수용체, 리간드 및/또는 수용체-리간드 상호 작용에 결합하고 이를 차단하거나 억제하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 포함될 수 있다. 일부 구현예에서, 특정 수용체의 조절, 향상 및/또는 자극은 면역 체크포인트 경로 성분을 극복할 수 있다. 차단, 억제, 조절, 향상 및/또는 자극에 대해 표적화될 수 있는 예시적인 면역 체크포인트 분자에는 PD-1(CD279), PD-L1(CD274, B7-H1), PDL2(CD273, B7-DC), CTLA-4, LAG-3(CD223), TIM-3, 4-1BB(CD137), 4-1BBL(CD137L), GITR(TNFRSF18, AITR), CD40, OX40(CD134, TNFRSF4), CXCR2, 종양 관련 항원(tumor associated antigens, TAA), B7-H3, B7-H4, BTLA, HVEM, GAL9, B7H3, B7H4, VISTA, KIR, 2B4(CD2 분자 패밀리에 속하고 모든 NK, γδ 및 메모리 CD8+(αβ) T 세포 상에서 발현), CD160(또한 BY55로 지칭), CGEN-15049, CEACAM(예를 들어, CEACAM-1, CEACAM-3 및/또는 CEACAM-5), TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4, CD80 , CD86, B7-H3(CD276), B7-H4(VTCN1), HVEM(TNFRSF14 또는 CD270), KIR, A2aR, MHC 클래스 I, MHC 클래스 II, GAL9, 아데노신 및 형질 전환 성장 인자 수용체(transforming growth factor receptor, TGFR; 예를 들어, TGFR 베타)가 포함되나, 이에 국한되지 않는다. 면역 체크포인트 억제제에는 임의의 상기 분자 중 하나 이상의 활성을 결합하여 차단 또는 억제 및/또는 향상 또는 자극하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편 또는 다른 결합 단백질이 포함된다.
예시적인 면역 체크포인트 억제제에는 트레멜리무맙(CTLA-4 차단 항체, 티실리무맙, CP-675,206으로도 공지), 항 OX40, PD-L1 단클론성 항체(항 B7-H1; MEDI4736), MK-3475(PD-1 차단제), 니볼루맙(항-PD-1 항체), CT-011(항-PD-1 항체), BY55 단클론성 항체, AMP224(항-PD-L1 항체), BMS-936559(항-PD-L1 항체), MPLDL3280A(항-PD-L1 항체), MSB0010718C(항-PD-L1 항체) 및 이필리무맙(항 CTLA-4 항체, Yervoy®, MDX-010 및 MDX-101로도 공지)이 포함된다. 예시적인 면역 조절 항체에는 다클리주맙(Zenapax), 베바시주맙(Avastin®), 바실리시맙(Basiliximab), 이필리무맙(Ipilimumab), 니볼루맙(Nivolumab), 펨브롤리주맙(pembrolizumab), MPDL3280A, 피딜리주맙(CT-011), MK-3475, BMS-936559, MPDL3280A(아테졸리주맙(Atezolizumab)), 트레멜리무맙(tremelimumab), IMP321, BMS-986016, LAG525, 우렐루맙(urelumab), PF-05082566, TRX518, MK-4166, 다세투주맙(SGN-40), 루카투무맙(HCD122), SEA-CD40, CP-870, CP-893, MEDI6469, MEDI6383, MOXR0916, AMP-224, MSB0010718C(아벨루맙(Avelumab)), MEDI4736, PDR001, rHIgM12B7, 울로쿠플루맙(Ulocuplumab), BKT140, 발리루맙(CDX-1127), ARGX-110, MGA271, 릴리루맙(BMS-986015, IPH2101), IPH2201, ARGX-115, 에막투주맙(Emactuzumab), CC-90002 및 MNRP1685A 또는 이의 항체-결합 단편이 포함되나 이에 국한되지 않는다. 다른 예시적인 면역조절제에는, 예를 들어, 아푸투주맙(Roche®로부터 이용 가능); 페그필그라스팀(Neulasta®); 레날리도마이드(CC-5013, Revlimid®); 탈리도마이드(Thalomid®), 액티미드(CC4047); 및 IRX-2(인터루킨 1, 인터루킨 2 및 인터페론 감마, IRX Therapeutics으로부터 이용 가능한 CAS 951209-71-5를 포함하는 인간 사이토카인 혼합물);가 포함된다.
CD152로도 공지된 세포 독성 T-림프구 관련 항원(Cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen, CTLA-4)은 T-세포 활성화를 조절하는 기능을 하는 공동-억제 분자이다. CTLA-4는 T-세포 상에서 독점적으로 발현되는 면역글로불린 상과(superfamily)의 멤버이다. CTLA-4는 T-세포 활성화를 억제하는 역할을 하며, 헬퍼 T-세포 활성을 억제하고 조절 T-세포 면역 억제 활성을 향상시키는 것으로 보고되어 있다. CTLA-4의 정확한 작용 기전은 여전히 연구 중이지만, CD80 및 CD86에 결합하는데 CD28을 능가하고 T 세포에 억제제 신호를 능동적으로 전달함으로써 T 세포 활성화를 억제하는 것으로 제안되었다(Pardoll (2012) Nature Reviews Cancer 12:252-264). 항 CTLA-4 항체는 흑색종, 전립선암, 소 세포 폐암, 비-소 세포 폐암의 치료를 위한 임상 시험에서 사용되어 왔다(Robert & Ghiringhelli, 2009, Oncologist 14:848-61; Ott et al., 2013, Clin Cancer Res 19:5300; Weber, 2007, Oncologist 12:864-72; Wada et al., 2013, J Transl Med 11:89). 항 CTLA-4의 중요한 특징은 항 종양 효과의 동역학으로, 생리적 반응에 필요한 초기 치료 후 최대 6 개월의 지연 기간이 있다. 일부 경우에, 치료 개시 후 감소가 보이기 전에 종양 크기가 실제로 증가할 수 있다(Pardoll (2012) Nature Reviews Cancer 12:252-264). 예시적인 항 CTLA-4 항체에는 이필리무맙(Bristol-Myers Squibb) 및 트레멜리무맙(Pfizer)이 포함된다. 이필리무맙(ipilimumab)은 최근 전이성 흑색종 치료에 대한 FDA 승인을 받았다(Wada et al., 2013, J Transl Med 11:89).
CD223으로도 공지된, 림프구 활성화 유전자-3(Lymphocyte activation gene-3, LAG-3)은 또 다른 면역 체크포인트 단백질이다. LAG-3은 림프구 활성의 억제 및 일부 경우에 림프구 아네르기(anergy)의 유도와 관련되어 있다. LAG-3은 B 세포, NK 세포 및 수지상 세포(dendritic cell)를 포함한 면역계의 다양한 세포 상에서 발현된다. LAG-3은 MHC 클래스 II 수용체에 대한 천연 리간드이며, 이는 강력한 면역 억제 활성이 부여된 세포를 포함하여 흑색종 침윤성 T 세포 상에서 실질적으로 발현된다. 예시적인 항 LAG-3 항체에는 LAG-3을 표적화하는 단클론성 항체인 BMS-986016(Bristol-Myers Squib)이 포함된다. IMP701(Immutep)은 LAG-3 항체 길항제이고 IMP731(Immutep and GlaxoSmithKline)은 LAG-3 항체를 고갈시킨다. 다른 LAG-3 억제제에는 MHC 클래스 II 분자에 결합하고 항원 제시 세포(antigen presenting cell, APC)를 활성화시키는 LAG-3의 가용성 부분 및 Ig의 재조합 융합 단백질인 IMP321(Immutep)이 포함된다. 다른 항체는 예를 들어, 문헌[국제 출원 WO2010/019570 및 미국 출원 US2015/0259420]에 기재되어 있다.
활성화된 Th1 세포 상에서 초기에 확인된 T-세포 면역 글로불린 도메인 및 뮤신 도메인-3(T-cell immunoglobulin domain and mucin domain-3, TIM-3)은 면역 반응의 음성 조절자인 것으로 나타났다. TIM-3의 봉쇄는 T-세포 매개 항 종양 면역을 촉진하고 다양한 마우스 종양 모델에서 항 종양 활성을 갖는다. 다른 면역 치료제, 예컨대 TSR-042, 항 CD137 항체 및 기타와 TIM-3 봉쇄의 조합은 항 종양 효과를 증가시키는데 부가적이거나 상승적일 수 있다. TIM-3 발현은 흑색종, NSCLC 및 신장암을 포함하는 다수의 상이한 종양 유형과 관련이 있으며, 또한 종양 내 TIM-3의 발현은 NSCLC, 자궁 경부암 및 위암을 포함하는 다양한 종양 유형에 걸친 나쁜 예후와 상관 관계가 있는 것으로 나타났다. TIM-3의 봉쇄는 또한, 다수의 만성 바이러스성 질병에 대한 면역 증가를 촉진시키는데 관심이 있다. TIM-3은 또한 갈렉틴-9(galectin-9), 포스파티딜세린(phosphatidylserine) 및 HMGB1을 포함하는 다수의 리간드와 상호 작용하는 것으로 나타났지만, 상기 중 어느 것이(있다 하더라도) 항 종양 반응의 조절과 관련이 있는지는 현재 명확하지 않다. 일부 구현예에서, TIM-3을 표적화하는 항체, 항체 단편, 소분자 또는 펩티드 억제제는 TIM-3의 IgV 도메인에 결합하여 이의 리간드와의 상호 작용을 억제할 수 있다. TIM-3을 억제하는 예시적인 항체 및 펩티드는 문헌[미국 출원 US 2015/0218274, 국제 출원 WO2013/006490 및 미국 출원 US 2010/0247521]에 기재되어 있다. 다른 항 TIM-3 항체에는 인간화된 버전의 RMT3-23(Ngiow et al., 2011, Cancer Res, 71:3540-3551) 및 클론 8B.2C12(Monney et al., 2002, Nature, 415:536-541)가 포함된다. TIM-3 및 PD-1을 억제하는 이중 특이적 항체가 문헌[미국 출원 US 2013/0156774]에 기재되어 있다.
일부 구현예에서, 추가 제제는 CEACAM 억제제(예를 들어, CEACAM-1, CEACAM-3 및/또는 CEACAM-5 억제제)이다. 일부 구현예에서, CEACAM의 억제제는 항 CEACAM 항체 분자이다. 예시적인 항 CEACAM-1 항체, 예를 들어 단클론성 항체 34B1, 26H7 및 5F4는 문헌[국제 출원 WO 2010/125571, WO 2013/082366, WO 2014/059251 및 WO 2014/022332]에 기재되어 있으며; 또는 이의 재조합 형태는 예를 들어 문헌[미국 출원 US 2004/0047858, US 7,132,255 및 국제 출원 WO 99/052552]에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 항 CEACAM 항체는, 예를 들어 문헌[Zheng et al. PLoS One. (2011) 6(6): e21146]에 기재된 바와 같이 CEACAM-5에 결합하거나, 예를 들어, 문헌[국제 출원 WO 2013/054331 및 미국 출원 US 2014/0271618]에 기재된 바와 같이 CEACAM-1 및 CEACAM-5와 교차 반응한다.
4. 조성물 및 제형
여기에 제공된 병용 요법 방법, 조성물, 조합, 키트 및 용도의 일부 구현예에서, 병용 요법은 하나 이상의 조성물, 예를 들어 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편) 또는 이의 수화물의 약학적으로 허용 가능한 염을 함유하는 약학 조성물로 투여될 수 있다.
일부 구현예에서, 조성물, 예를 들어 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편) 또는 이의 수화물의 약학적으로 허용 가능한 염을 함유하는 약학 조성물은 예컨대 희석제, 보조제, 부형제와 같은 담체 또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편) 또는 이의 수화물의 약학적으로 허용 가능한 염 및/또는 세포가 투여되는 비히클을 포함할 수 있다. 적합한 약학적 담체의 예가 문헌[“Remington’s Pharmaceutical Sciences” by E. W. Martin]에 기재되어 있다. 상기 조성물은 환자에 적절한 투여를 위한 형태를 제공하기 위해 적합한 양의 담체와 함께 일반적으로 정제된 형태로, 치료적 유효량의 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편) 또는 이의 수화물의 약학적으로 허용 가능한 염을 함유할 것이다. 상기 약학적 담체는 땅콩유, 대두유, 광유 및 참기름과 같은 석유, 동물, 식물 또는 합성 기원의 것을 포함한 오일 및 물과 같은 멸균 액체일 수 있다. 식염수 용액 및 수성 덱스트로오스 및 글리세롤 용액이 액체 담체로, 특히 주사용 용액으로 또한 이용될 수 있다. 약학 조성물은 희석제(들), 보조제(들), 항점착제(들), 결합제(들), 코팅제(들), 충진제(들), 풍미제(들), 착색제(들), 윤활제(들), 활공제(들), 방부제(들), 세정제(들), 흡착제(들), 유화제(들), 약학적 부형제(들), pH 완충제(들) 또는 감미료(들) 및 이의 조합물 중 어느 하나 이상을 함유할 수 있다. 일부 구현예에서, 약학 조성물은 액체, 고체, 동결 분말, 겔 형태 및/또는 이의 조합일 수 있다. 일부 측면에서, 담체의 선택은 특정 억제제 및/또는 투여 방법에 의해 부분적으로 결정된다.
약학적으로 허용 가능한 담체는 일반적으로 사용된 투여량 및 농도에서 수용체에게 무독성이며, 인산염, 구연산염 및 기타 유기산과 같은 완충제; 아스코르브산 및 메티오닌을 포함한 항산화제; 방부제(예컨대 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤잘코늄 클로라이드; 벤제토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알코올; 메틸 또는 프로필 파라벤과 같은 알킬 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 시클로헥사놀; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10 잔기 미만) 폴리펩티드; 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역 글로불린과 같은 단백질; 폴리비닐피롤리돈과 같은 친수성 중합체; 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신과 같은 아미노산; 글루코오스, 만노오스 또는 덱스트린을 포함하는 단당류, 이당류 및 기타 탄수화물; EDTA와 같은 킬레이팅제; 수크로오스, 만니톨, 트레할로스 또는 솔비톨과 같은 설탕; 나트륨과 같은 염 형성 카운터 이온; 금속 착물(예를 들어 Zn-단백질 복합체); 및/또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)과 같은 비이온성 계면활성제, 안정화제 및/또는 방부제를 포함하나 이에 국한되지 않는다. 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편) 또는 이의 수화물의 약학적으로 허용 가능한 염을 함유하는 조성물은 또한 동결 건조될 수 있다.
일부 구현예에서, 약학 조성물은 근육내, 정맥내, 피하내, 병변내, 복강내 주사, 피하, 종양내, 경막외, 비강, 구강, 질, 직장, 국소, 국부, 귀, 흡입, 볼(예를 들어, 설하) 및 경피 투여 또는 임의의 경로를 포함하여 당업자에게 공지된 임의의 경로에 의한 투여를 위해 제형화될 수 있다. 일부 구현예에서, 다른 투여 방식이 또한 고려된다. 일부 구현예에서, 투여는 볼루스 주입, 주사, 예를 들어 정맥내 또는 피하 주사, 안구내(intraocular) 주사, 안구주위(periocular) 주사, 망막하(subretinal) 주사, 유리체내(intravitreal) 주사, 중격경유성(trans-septal) 주사, 공막하(subscleral) 주사, 맥락막내(intrachoroidal) 주사, 전방내(intracameral) 주사, 결막하 주사(subconjectval injection, subconjuntival injection), 서브 테논(sub-Tenon) 주사, 안구뒤(retrobulbar) 주사, 안구주위(peribulbar) 주사 또는 후부 점막 주사(posterior juxtascleral) 전달에 의한다. 일부 구현예에서, 투여는 비경구, 폐내 및 비강내 및 국소 치료가 바람직한 경우 병변내 투여에 의한다. 비경구 주입은 근육내, 정맥내, 동맥내, 복강내 또는 피하 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 주어진 분량은 단일 볼루스 투여에 의해 투여된다. 일부 구현예에서, 이는 예를 들어, 3일 이내의 기간에 걸쳐 다중 볼루스 투여에 의해 또는 지속적인 주입 투여에 의해 투여된다.
일부 구현예에서, 투여는 치료 위치에 따라 국부, 국소 또는 전신일 수 있다. 일부 구현예에서 치료가 필요한 영역에 대한 국부 투여는 예를 들어 비제한적으로, 예를 들어, 주사, 카테터, 좌약 또는 이식에 의해 수술 후 상처 드레싱과 함께 국소 적용, 수술 중 국부 주입에 의해 달성될 수 있다. 일부 구현예에서, 조성물은 또한 다른 생물학적 활성제와 함께 순차적으로, 간헐적으로 또는 동일한 조성물에서 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 투여는 또한 펌프에 의한 것과 같은 제어 방출 디바이스 및 제어 방출 제형을 포함한 제어 방출 시스템을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 투여는 경구이다.
일부 구현예에서, 약학적 및 치료적 활성 화합물 및 이의 유도체는 전형적으로 단위 투여량 형태 또는 다중 투여량 형태로 제형화되고 투여된다. 각 분량 단위는 필요한 약학적 담체, 비히클 또는 희석제와 함께 원하는 치료 효과를 생성하기에 충분한 미리 결정된 양의 치료적 활성 화합물을 함유한다. 일부 구현예에서, 단위 투여량 형태는 정제, 캡슐, 환약, 분말, 과립, 멸균 비경구 용액 또는 현탁액 및 경구 용액 또는 현탁액 및 적합한 양의 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 이의 유도체를 함유하는 오일 물 에멀젼을 포함하나 이에 국한되지 않는다. 분량 단위 형태는 앰플 및 주사기 또는 개별 포장된 정제 또는 캡슐에 함유될 수 있다. 분량 단위 형태는 분획 또는 이의 다수로 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 다중 분량 형태는 분리된 분량 단위 형태로 투여되도록 단일 용기에 포장된 다수의 동일한 단위 투여량 형태이다. 다중 분량 형태의 예에는 바이알, 정제 또는 캡슐 병 또는 파인트 또는 갤런 병이 포함된다.
5. 투약
일부 구현예에서, 제공된 병용 요법 방법은 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙(durvalumab) 및 T 세포(예를 들어 CAR 발현 T 세포) 요법과 같은 세포 요법을 대상체에 투여하는 것을 포함한다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙(durvalumab)의 투여는 T 세포(예를 들어 CAR 발현 T 세포) 요법과 같은 세포 요법의 투여 전에, 후에, 중에, 과정 중에, 동시에, 거의 동시에, 연속적으로 및/또는 간헐적으로 개시된다. 일부 구현예에서, 방법은 T 세포 요법 투여 후에(후속적으로) 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제의 투여 개시를 포함한다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙은 세포 요법 투여 개시 후 (약) 21 초과하여 투여된다. 특정 측면에서, 제공된 병용 요법에서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙의 투여 개시는 T 세포 요법 투여 개시 후 (약) 22 일 내지 50 일, 예를 들어 T 세포 요법 투여 개시 후 (약) 22 일, 23 일, 24 일, 25 일, 26 일, 27 일, 28 일, 29 일, 30 일, 31 일, 32 일, 33 일, 34 일, 35 일, 36 일, 37 일, 38 일, 39 일, 40 일, 41 일, 42 일, 43 일, 44 일, 45 일, 46 일, 47 일, 48 일, 49 일 또는 50 일이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙의 투여 개시는 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 22 일 내지 43 일, 예컨대 (약) 22 일 내지 36 일이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙의 투여 개시는 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 29일이다.
특정 측면에서, 제공된 방법은 T 세포 요법에 대한 피크 반응이 관찰되었으나 상기 반응, 예를 들어 T 세포의 존재 및/또는 종양 부담의 감소가 감소되었거나 더 이상 검출 가능하지 않은 대상체에서 T 세포 요법을 향상, 증가 또는 강화할 수 있다. 일부 경우에, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙의 투여 개시는 (i) 피크 또는 최대 수준의 T 세포 요법 세포가 대상체의 혈액에서 검출 가능하고/거나; (ii) 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 세포 수가 검출 가능하지 않거나 감소, 선택적으로 T 세포 요법 투여 후 선행 시점에 비해 감소되고/거나; (iii) 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 세포 수가 T 세포 요법의 투여 개시 후 대상체의 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상 감소되고/거나; (iv) 피크 또는 최대 수준의 T 세포 요법 세포가 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 이후의 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만이고/거나; (v) 대상체가 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 질병 진행을 나타내고/거나 재발하였고/거나; (vi) 대상체가 항-PD-L1 항체와 같은 체크포인트 억제제의 투여 개시 전 및 세포 투여 전 또는 후 시기에서의 종양 부담에 비해 종양 부담의 증가를 나타낸; 후 1, 2 또는 3일 이내와 같이 1 주일 이내 또는 1주일째에 수행된다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙이 대상체에 처음으로 투여된 시기 및/또는 투여 개시 후 임의의 후속 시기에, 상기 대상체는 심각한 사이토카인 방출 증후군(CRS) 또는 심각한 독성과 같은 심각한 독성의 신호나 징후를 나타내지 않는다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙의 투여는 대상체가 심각한 CRS의 신호나 징후를 나타내지 않고/거나 연장된 3급 CRS 또는 4급 또는 5급 CRS와 같이 3급 이상의 CRS를 나타내지 않는 시기에 이루어진다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙의 투여는 대상체가 심각한 신경 독성의 신호나 징후를 나타내지 않고/거나 연장된 3급 신경 독성 또는 4급 또는 5급 신경 독성과 같이 3급 이상의 신경 독성을 나타내지 않는 시기에 이루어진다. 일부 측면에서, T 세포 요법의 투여 개시의 시기와 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙 투여의 시기 사이에 대상체는 심각한 CRS를 나타낸 적이 없고/거나 연장된 3급 CRS 또는 4급 또는 5급 CRS와 같이 3급 이상의 CRS를 나타낸 적이 없다. 일부 경우에, T 세포 요법의 투여 개시의 시기와 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙 투여의 시기 사이에, 대상체는 심각한 신경 독성을 나타낸 적이 없고/거나 연장된 3급 신경 독성 또는 4급 또는 5급 신경 독성과 같이 3급 이상의 신경 독성을 나타내지 않는다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙은 치료적 유효량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙은 (약) 750 mg 내지 (약) 2000 mg, 예컨대 (약) 1200 mg 내지 (약) 1500 mg의 양, 예를 들어 총 투여량으로 한 주기에서 투여된다. 일부 경우에, 상기 양은 750 mg, 800 mg, 900 mg, 1000 mg, 1100 mg, 1200 mg, 1300 mg, 1400 mg, 1500 mg, 1600 mg, 1700 mg, 1800 mg, 1900 mg 또는 2000 mg이거나, 750 mg, 800 mg, 900 mg, 1000 mg, 1100 mg, 1200 mg, 1300 mg, 1400 mg, 1500 mg, 1600 mg, 1700 mg, 1800 mg, 1900 mg 또는 2000 mg 이상이거나 또는 약 750 mg, 800 mg, 900 mg, 1000 mg, 1100 mg, 1200 mg, 1300 mg, 1400 mg, 1500 mg, 1600 mg, 1700 mg, 1800 mg, 1900 mg 또는 2000 mg 이상이다. 일부 경우에, 상기 양은 1500 mg이거나, 1500 mg 이상이거나 또는 약 1500 mg 이상이다. 일부 측면에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 두르발루맙이다.
일부 구현예에서, 상기 양은 대상체의 체중 1 킬로그램당 투여된다. 일부 구현예에서, 기준 투여량이 대상체의 mg/kg에 기초할 경우, 인간 대상체의 평균은 약 70 kg-75 kg, 예컨대 (약) 75 kg의 질량을 갖는 것으로 간주된다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙은 대상체 질량 1 킬로그램당 (약) 0.5 mg 내지 (약) 30 mg, 예컨대 (약) 1 mg/kg 내지 (약) 20 mg/kg의 양, 예를 들어 총 투여량으로 한 주기에서 투여된다. 일부 경우에, 상기 양은 0.5 mg/kg, 1 mg/kg, 2 mg/kg, 3 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg, 9 mg/kg, 10 mg/kg, 11 mg/kg, 12 mg/kg, 13 mg/kg, 14 mg/kg, 15 mg/kg, 16 mg/kg, 17 mg/kg, 18 mg/kg, 19 mg/kg 또는 20 mg/kg이거나, 0.5 mg/kg, 1 mg/kg, 2 mg/kg, 3 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg, 9 mg/kg, 10 mg/kg, 11 mg/kg, 12 mg/kg, 13 mg/kg, 14 mg/kg, 15 mg/kg, 16 mg/kg, 17 mg/kg, 18 mg/kg, 19 mg/kg 또는 20 mg/kg 이상이거나 또는 약 0.5 mg/kg, 1 mg/kg, 2 mg/kg, 3 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg, 9 mg/kg, 10 mg/kg, 11 mg/kg, 12 mg/kg, 13 mg/kg, 14 mg/kg, 15 mg/kg, 16 mg/kg, 17 mg/kg, 18 mg/kg, 19 mg/kg 또는 20 mg/kg 이상이다.
일부 구현예에서, 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 예를 들어 니볼루맙은 치료적 유효량으로 투여된다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙은 (약) 200 mg 내지 (약) 2000 mg, 예컨대 (약) 400 mg 내지 (약) 1000 mg 또는 (약) 400 mg 내지 (약) 600 mg의 양, 예를 들어 총 투여량으로 한 주기에서 투여된다. 일부 경우에, 상기 양은 200 mg, 225 mg, 240 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 450 mg, 480 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg, 800 mg, 900 mg, 1000 mg, 1600 mg, 1700 mg, 1800 mg, 1900 mg 또는 2000 mg이거나, 200 mg, 225 mg, 240 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 450 mg, 480 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg, 800 mg, 900 mg, 1000 mg, 1600 mg, 1700 mg, 1800 mg, 1900 mg 또는 2000 mg 이상이거나 또는 약 200 mg, 225 mg, 240 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 450 mg, 480 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg, 800 mg, 900 mg, 1000 mg, 1600 mg, 1700 mg, 1800 mg, 1900 mg 또는 2000 mg 이상이다. 일부 경우에, 상기 양은 480 mg이거나, 480 mg 이상이거나 또는 약 480 mg 이상이다. 일부 측면에서, 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 니볼루맙이다.
일부 구현예에서, 상기 양은 대상체의 체중 1 킬로그램당 투여된다. 일부 구현예에서, 기준 투여량이 대상체의 mg/kg에 기초할 경우, 인간 대상체의 평균은 약 70 kg-75 kg, 예컨대 (약) 75 kg의 질량을 갖는 것으로 간주된다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 니볼루맙은 대상체 질량 1 킬로그램당 (약) 0.1 mg 내지 (약) 10 mg, 예컨대 (약) 1 mg/kg 내지 (약) 5 mg/kg의 양, 예를 들어 총 투여량으로 한 주기에서 투여된다. 일부 경우에, 상기 양은 0.1 mg/kg, 0.5 mg/kg, 1 mg/kg, 2 mg/kg, 3 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg, 9 mg/kg 또는 10 mg/kg이거나, 0.1 mg/kg, 0.5 mg/kg, 1 mg/kg, 2 mg/kg, 3 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg, 9 mg/kg 또는 10 mg/kg 이상이거나 또는 약 0.1 mg/kg, 0.5 mg/kg, 1 mg/kg, 2 mg/kg, 3 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg, 9 mg/kg 또는 10 mg/kg 이상이다. 일부 구현예에서, 제공된 방법은 세포 요법 투여 개시 후, 예컨대 정기적인 간격으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙의 지속적인 투여를 포함한다.
투여는 본 명세서에 기재된 바와 같이 순환적인 투여를 이용하여 수행될 수 있다. 일부 구현예에서, 순환 요법은 기간 동안 활성제의 투여 후에, 선택적으로 기간 동안 휴식 및 상기 순차적 투여의 반복을 포함한다. 순환 요법은 규정된 지속 시간에 걸쳐 각 활성제(예를 들어, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제)에 대해 독립적으로 수행될 수 있다. 일부 구현예에서, 제공된 방법은 28일 주기로 수행된다. 일부 구현예에서, 28일 주기와 같은 주기는 다수회 반복된다. 특정 구현예에서, 주기는 예컨대 연속 주기에서 (약) 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 회 이상까지 반복된다. 일부 구현예에서, 연속 주기의 총 지속 기간은 12개월을 초과하지 않거나, 12개월 이하의 총 지속 기간 동안 수행된다.
일부 구현예에서, 예컨대 1 이상의 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙의 투여는, 예를 들어 제1, 제2 또는 제3 투여 주기 후에 대상체가 질병 진행을 나타낼 경우 중단된다. 일부 구현예에서, 병용 요법은 대상체가 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙의 추가 투여에 대해 재평가된 시기에, 세포 요법 개시 후 3개월, 예를 들어 3회의 28일 주기 동안 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제의 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제, 예를 들어 두르발루맙의 3회까지 28일 주기로 제공된 병용 요법을 받은 후에 부분 반응(PR)을 나타내는 대상체는, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제의 하나 이상의 추가 주기, 예를 들어 28일 주기를 받을 수 있다.
일부 구현예에서, 한 주기에서의 양, 예를 들어, 총 투여량은 예컨대 투여 주기의 과정 동안 1 분량으로 투여되거나 1 이상의 분량, 예를 들어 2, 3, 4 이상의 분량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 투여 빈도는 약 1일 1회 분량 내지 약 매달 1회 분량의 범위이다. 특정 구현예에서, 투여는 1일 1회, 1일 2회, 1일 3회, 1일 4회, 격일로 1회, 주 2회, 매주 1회, 매 2주 1회, 매 3주 1회 또는 매 4주 1회이다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제는 주 1회(Q1W), 예를 들어 1달에 4회 또는 매주 투여된다. 다른 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제는 매 2주 1회(Q2W), 예를 들어 1달에 2회 투여된다. 다른 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제는 매 4주 1회(Q4W), 예를 들어 1달에 1회 투여된다.
특정 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 28일 주기에서 1, 8, 15 및 22일에 투여된다. 특정 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 28일 주기에서 15 및 22일에 투여된다. 특정 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 28일 주기에서 1 및 15일에 투여된다. 특정 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 28일 주기에서 1일에 투여된다.
일부 구현예에서, 2회 이상의 주기에서 제1 또는 선행 주기의 총 투여량 투여는 두번째 또는 후속 주기에서보다 더 낮은 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙의 총 투여량 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 보다 낮은 투여량은 두번째 또는 후속 주기에서의 총 투여량의 50% 내지 95%이다. 일부 구현예에서, 첫번째 또는 선행 주기의 투여에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙의 총 투여량은 두번째 또는 후속 주기의 투여에서와 동일하거나 유사하다.
일부 구현예에서, 2회 이상의 주기, 예를 들어 28일 주기 중 첫번째 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙의 총 투여량 투여는 상기 주기에서 1회 이상, 예를 들어 2, 3, 4일 이상 동안, 예컨대 첫번째 주기의 1, 8, 15 및 22일 또는 15 및 22일에 수행된다. 일부 구현예에서, 2회 이상 또는 3회 이상의 주기, 예를 들어 28일 주기 중 적어도 처음 2회의 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙의 총 투여량 투여는 처음 2회 주기 각각에서 1회 이상, 예를 들어 적어도 처음 2회의 주기 각각에서 독립적으로 2, 3 또는 4회, 예컨대 처음 2회의 주기 중 적어도 1회에서 독립적으로 1, 8, 15 및 22일에 및/또는 처음 2회의 주기 중 적어도 1회에서 15 및 22일에 수행된다. 일부 구현예에서, 2회 이상의 주기에서 제1 또는 선행 주기의 총 투여량 투여는 두번째 또는 후속 주기, 예를 들어 28일 주기에 비해 제1 또는 선행 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙을 더 많은 횟수로 투여함으로써 수행된다.
상기 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙의 보다 낮은 투여량은 예를 들어 두번째 또는 후속 주기에 비해 제1 또는 선행 주기에서 보다 낮은 총 투여량 및/또는 보다 많은 횟수이나 동일하거나 유사한 총 투여량으로 주어진 경우 한 주기에서 각각의 투여로 투여된다. 일부 구현예에서, 제1 또는 선행 주기에서 보다 적은 투여량을 보다 많은 횟수로 투여하는 것은 유사한 총 투여량이 상기 주기에서 보다 적은 횟수로 투여되는 주기에 비해 보다 적은 분량에서 보다 짧은 반감기이나 동일하거나 유사한 생물학적 PD-L1 점유율을 초래할 수 있음이 고려된다. 일부 구현예에서, 보다 짧은 반감기를 갖는 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편과 같은 체크포인트 억제제를 제공하는 투약 요법은 병용 요법 후에 독성을 발달시킬 위험을 감소시킬 수 있다.
일부 구현예에서, 병용 요법은 28일 주기에서, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 첫번째 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙을, (i) 선택적으로 15 및 22일에 2 분량에 대해 주 1회(Q1W); (ii) 선택적으로 1, 8, 15 및 22일에 4 분량에 대해 주 1회(Q1W); (iii) 선택적으로 1일 및 8일에 연속 2 분량에 대해 Q1W 후 선택적으로 15일에 1 분량에 대해 매 2주(Q2W); 또는 (iv) 선택적으로 1일 및 15일에 2 분량에 대해 매 2주(Q2W); 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 매주(Q1W) 또는 격주(Q2W) 분량은 주기, 예를 들어 28일 주기에서 투여되는 총 투여량의 분획 또는 일부이다. 일부 구현예에서, 첫번째 28일 주기의 각 Q1W 분량은 독립적으로 총 투여량의 (약) 18% 내지 32%, 예컨대 상기 주기에서 총 투여량의 (약) 25%이다. 일부 구현예에서, 첫번째 28일 주기의 각 Q2W 분량은 독립적으로 총 투여량의 (약) 40% 내지 62.5%, 선택적으로 상기 주기에서 총 투여량의 (약) 50%이다.
일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 첫번째 28일 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙은 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 분량에 대해 주 1회(Q1W) 후 (약) 750 mg의 양으로 1 분량에 대해 매 2주 1회(Q2W) 투여된다. 일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 첫번째 28일 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙은 4 분량에 대해 주 1회(Q1W) 투여된다. 일부 구현예에서, 상기 4 분량은 (약) 225 mg의 2 연속 분량 후 (약) 375 mg의 2 연속 분량의 투여를 포함한다.
일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 첫번째 28일 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙은 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 분량에 대해 주 1회(Q1W) 투여된다.
일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 두번째 또는 후속 28일 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙은 상기 주기에서 1 또는 2 분량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 두번째 또는 후속 28일 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙은, (i) 선택적으로 1일 및 15일에 2 분량에 대해 매 2주 1회(Q2W); 또는 선택적으로 1일에 1 분량에 대해 매 4주 1회(Q4W); 투여된다. 일부 구현예에서, 상기 28일 주기의 각 Q2W 분량은 독립적으로 상기 주기에서 총 투여량의 (약) 50%이다. 일부 구현예에서, 상기 28일 주기의 각 Q4W 분량은 독립적으로 총 투여량의 (약) 100%이다.
일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 두번째 또는 후속 28일 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙은 (약) 750 mg의 양으로 2 분량에 대해 매 2주(Q2W) 투여된다.
일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 두번째 또는 후속 28일 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 두르발루맙은 (약) 1500 mg의 양으로 1 분량에 대해 매달 1회(Q4W) 투여된다.
일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 2회 이상의 28일 주기 각각은 (약) 750 mg 내지 (약) 2000 mg, 예컨대 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 2회 이상의 28일 주기 중 적어도 첫번째 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여함으로써 수행되고, 항체 또는 단편을 1회 이상 투여함으로써 수행된다. 일부 구현예에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 두번째 및/또는 후속 28일 주기에 비해 항체 또는 단편을 보다 많은 횟수로 투여함으로써 수행된다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여는 세포 요법의 투여 개시 후 21일 초과하여(예를 들어, 22-50일) 개시된다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여 시기에, 대상체는 세포 요법 투여 후 심각한 독성을 나타내지 않는다. 일부 구현예에서, 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 두르발루맙이다.
일부 임의의 구현예에서, 체크포인트 억제제는 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙 또는 세미플리맙(cemiplimab) 또는 이의 항원 결합 단편과 같은 항-PD-1 항체이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제는 니볼루맙이다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체는, 예를 들어 각 투여 주기에 대해 (약) 400 mg 내지 (약) 600 mg, 예컨대 400 mg 내지 600 mg4의 총 투여량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체는 예를 들어 각 투여 주기에 대해, 선택적으로 (약) 480 mg이다.
일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 첫번째 28일 주기에서, 항-PD-1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 니볼루맙은 (약) 120 mg의 양으로 2 연속 분량에 대해 주 1회(Q1W) 후 (약) 240 mg의 양으로 1 분량에 대해 매 2주 1회(Q2W) 투여된다. 일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 첫번째 28일 주기에서, 항-PD-1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 니볼루맙은 4 분량에 대해 주 1회(Q1W) 투여된다. 일부 구현예에서, 4 분량은 (약) 225 mg의 2 연속 분량 후 (약) 120 mg의 2 연속 분량의 투여를 포함한다.
일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 첫번째 28일 주기에서, 항-PD-1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 니볼루맙은 (약) 120 mg의 양으로 2 연속 분량에 대해 주 1회(Q1W) 투여된다.
일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 두번째 또는 후속 28일 주기에서, 항-PD-1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 니볼루맙은 상기 주기에서 1 또는 2 분량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 두번째 또는 후속 28일 주기에서, 항-PD-1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 니볼루맙은, (i) 선택적으로 1일 및 15일에 2 분량에 대해 매 2주 1회(Q2W); 또는 선택적으로 1일에 1 분량에 대해 매 4주 1회(Q4W); 투여된다. 일부 구현예에서, 상기 28일 주기의 각 Q2W 분량은 독립적으로 상기 주기에서 총 투여량의 (약) 50%이다. 일부 구현예에서, 상기 28일 주기의 각 Q4W 분량은 독립적으로 총 투여량의 (약) 100%이다.
일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 두번째 또는 후속 28일 주기에서, 항-PD-1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 니볼루맙은 (약) 240 mg의 양으로 2 분량에 대해 매 2주(Q2W)로 투여된다.
일부 구현예에서, 28일 주기, 예컨대 2회 이상의 28일 주기를 포함하는 치료 요법의 두번째 또는 후속 28일 주기에서, 항-PD-1 항체 또는 항원 결합 단편, 예를 들어 니볼루맙은 (약) 480 mg의 양으로 1 분량에 대해 매달 1회(Q4W) 투여된다.
일부 구현예에서, 항-PD-1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여는 2회 이상의 28일 주기의 수행을 포함한다. 일부 구현예에서, 2회 이상의 28일 주기 각각은 (약) 240 mg 내지 (약) 1000 mg의 총 투여량으로 항-PD-1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 2회 이상의 28일 주기 중 적어도 첫번째 주기에서, 항-PD-1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여함으로써 수행되고, 항체 또는 단편을 1회 이상 투여함으로써 수행된다. 일부 구현예에서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서, 항-PD-1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 두번째 및/또는 후속 28일 주기에 비해 항체 또는 단편을 보다 많은 횟수로 투여함으로써 수행된다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여는 세포 요법의 투여 개시 후 21일을 초과하여(예를 들어, 22-50일) 개시된다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여 시기에, 대상체는 세포 요법 투여 후 심각한 독성을 나타내지 않는다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 니볼루맙이다.
일부 구현예에서, B 세포 악성종양은 재발성/불응성 공격적인 NHL과 같은 NHL이다. 일부 구현예에서, CAR 발현 T 세포와 같은 세포 요법은 B 세포 항원에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 포함한다. 일부 구현예에서, B 세포 항원과 같은 B 세포 악성종양에 의해 발현되는 항원은 CD19이다.
II. 세포 요법 및 세포 조작
일부 구현예에서, 제공된 병용 요법 방법에 부합하는 용도를 위한 세포 요법(예를 들어, T 세포 요법)은 질병 또는 병태과 관련된 분자를 인식하고/거나 이에 특이적으로 결합하고 상기 분자에 결합 시 상기 분자에 대한 면역 반응과 같은 반응을 초래하도록 설계된 재조합 수용체를 발현하는 조작된 세포를 투여하는 것을 포함한다. 수용체는 키메라 수용체, 예를 들어, 키메라 항원 수용체(CAR) 및 전이 유전자 T 세포 수용체(TCR)를 포함한 기타 전이 유전자 항원 수용체를 포함할 수 있다. 상기 세포의 집단, 상기 세포를 함유하는 조성물 및/또는 상기 세포에 대해 농축된, 예컨대 T 세포 또는 CD8+ 또는 CD4+ 세포와 같은 특정 유형의 세포가 농축되거나 선택된 조성물이 또한 제공된다.
일부 구현예에서, 세포는 조작된 수용체, 예를 들어 키메라 항원 수용체(CAR)와 같은 조작된 항원 수용체 또는 T 세포 수용체(TCR)를 함유하거나 함유하도록 조작된다. 상기 세포의 집단, 상기 세포를 함유하는 조성물 및/또는 상기 세포에 대해 농축된, 예컨대 T 세포 또는 CD8+ 또는 CD4+ 세포와 같은 특정 유형의 세포가 농축되거나 선택된 조성물이 또한 제공된다. 조성물 중에는 예컨대 입양 세포 요법을 위한 약학 조성물 및 투여용 제형이 있다. 대상체, 예를 들어 환자에게 세포 및 조성물을 투여하기 위한 치료 방법이 또한 제공된다.
일부 구현예에서, 세포는 유전자 조작을 통해 도입된 하나 이상의 핵산을 포함하고 이로써 상기 핵산의 재조합 또는 유전자 조작된 생성물을 발현한다. 일부 구현예에서, 유전자 전달은 예를 들어, 사이토카인 또는 활성화 마커의 발현에 의해 측정된 바와 같이, 예컨대 증식, 생존 및/또는 활성화와 같은 반응을 유도하는 자극과 조합함으로써 세포를 먼저 자극하고, 이어서 활성화된 세포의 형질 도입 및 임상 적용에 충분한 수로 배양에서 증폭함으로써 달성된다.
A. 재조합 수용체
일부 구현예에서, 재조합 수용체를 발현하는 T 세포와 같은 면역 세포와 같은 조작된 세포가 제공된다. 수용체 중에는 항원 수용체 및 하나 이상의 이의 성분을 함유하는 수용체가 있다. 재조합 수용체는 리간드 결합 도메인 또는 이의 결합 단편 및 세포 내 신호 전달 도메인 또는 영역, 기능성 비-TCR 항원 수용체, 키메라 항원 수용체(CAR) 및 재조합 또는 전이 유전자 TCR과 같은 T 세포 수용체(TCR), 키메라 자가 항체 수용체(chimeric autoantibody receptor, CAAR) 및 상기 중 어느 하나의 성분을 함유하는 것과 같은 키메라 수용체를 포함할 수 있다. CAR과 같은 재조합 수용체는 일반적으로 하나 이상의 세포 내 신호 전달 성분에, 일부 측면에서 링커 및/또는 막관통 도메인(들)을 통해 연결된 세포외 항원(또는 리간드) 결합 도메인을 포함한다.
특정 구현예에서, 조작된 세포는 이들의 치료적 또는 예방적 효능이 증가하도록 임의의 다수의 방법으로 추가 변형된다. 예를 들어, 집단에 의해 발현된 조작된 CAR 또는 TCR은 표적화 모이어티에 링커를 통해 직접적으로든 간접적으로든 접합될 수 있다. 재조합 수용체, 예를 들어, CAR 또는 TCR과 같은 분자를 표적화 모이어티에 접합시키는 실시는 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌[Wadwa et al., J. Drug Targeting 3: 1 1 1 (1995) 및 미국 특허 5,087,616]을 참조한다.
1. 키메라 항원 수용체(CAR)
일부 구현예에서, 특정 세포 유형의 표면 상에 발현된 항원과 같은 특정 항원(또는 마커 또는 리간드)에 대한 특이성을 갖는 CAR을 발현하는 T 세포와 같은 조작된 세포가 제공된다. 일부 구현예에서, 항원은 폴리펩티드이다. 일부 구현예에서, 이는 탄수화물 또는 다른 분자이다. 일부 구현예에서, 항원은 정상 또는 비 표적화 세포 또는 조직과 비교하여 질병 또는 병태의 세포, 예를 들어 종양 또는 병원성 세포 상에서 선택적으로 발현되거나 과발현된다. 다른 구현예에서, 항원은 정상 세포 상에서 발현되고/거나 조작된 세포 상에서 발현된다.
특정 구현예에서, 키메라 수용체와 같은 재조합 수용체는 T 세포에서 1 차 활성화 신호를 유도할 수 있는 세포질(세포 내) 영역과 같은 세포질 신호 전달 도메인 또는 영역(상호 교환적으로 세포 내 신호 전달 도메인 또는 영역으로도 명명), 예를 들어 T 세포 수용체(TCR) 성분의 세포질 신호 전달 도메인 또는 영역(예를 들어, CD3-제타(CD3ζ) 사슬의 제타 사슬의 세포질 신호 전달 도메인 또는 영역 또는 이의 신호 전달 부분의 기능적 변이체)을 포함하고/거나 면역 수용체 티로신 기반 활성화 모티프(immunoreceptor tyrosine-based activation motif, ITAM)를 포함하는 세포 내 신호 전달 영역을 함유한다.
일부 구현예에서, 키메라 수용체는 리간드(예를 들어, 항원) 항원에 특이적으로 결합하는 세포 외 리간드 결합 도메인을 더 함유한다. 일부 구현예에서, 키메라 수용체는 항원에 특이적으로 결합하는 세포 외 항원 인식 도메인을 함유하는 CAR이다. 일부 구현예에서, 리간드, 예컨대 항원은 세포 표면 상에 발현된 단백질이다. 일부 구현예에서, CAR은 TCR 유사 CAR이고 항원은 가공된 펩티드 항원, 예컨대 TCR과 마찬가지로 주요 조직 적합성 복합체(major histocompatibility complex, MHC) 분자의 맥락에서 세포 표면 상에서 인식되는 세포 내 단백질의 펩티드 항원이다.
CAR을 포함하는 예시적 항원 수용체 및 상기 수용체를 조작하고 세포 내로 도입하는 방법은 예를 들어 문헌[국제 특허 출원 WO200014257, WO2013126726, WO2012/129514, WO2014031687, WO2013/166321, WO2013/071154, WO2013/123061, 미국 특허 출원 공개 번호 US2002131960, US2013287748, US20130149337, 미국 특허 번호 6,451,995, 7,446,190, 8,252,592, 8,339,645, 8,398,282, 7,446,179, 6,410,319, 7,070,995, 7,265,209, 7,354,762, 7,446,191, 8,324,353 및 8,479,118 및 유럽 특허 출원 번호 EP2537416]에 기재된 것들 및/또는 문헌[Sadelain et al., Cancer Discov. 2013 April; 3(4): 388-398; Davila et al. (2013) PLoS ONE 8(4): e61338; Turtle et al., Curr. Opin. Immunol., 2012 October; 24(5): 633-39; Wu et al., Cancer, 2012 March 18(2): 160-75]에 기재된 것들을 포함한다. 일부 측면에서, 항원 수용체는 문헌[미국 특허 번호 제7,446,190호]에 기재된 바와 같은 CAR 및 문헌[국제 특허 출원 공개 번호 WO/2014055668 A1]에 기재된 것을 포함한다. CAR의 예로는 전술한 간행물 중 어느 하나, 예컨대 문헌[국제 출원 WO2014031687, 미국 출원 US 8,339,645, US 7,446,179, US 2013/0149337, 미국 특허 번호 7,446,190, 미국 특허 번호 8,389,282, Kochenderfer et al., 2013, Nature Reviews Clinical Oncology, 10, 267-276 (2013); Wang et al. (2012) J. Immunother. 35(9): 689-701; 및 Brentjens et al., Sci Transl Med. 2013 5(177)]에 개시된 바와 같은 CAR이 포함된다. 또한 문헌[국제 출원 WO2014031687, 미국 출원 US 8,339,645, US 7,446,179, US 2013/0149337, 미국 특허 번호 7,446,190 및 미국 특허 번호 8,389,282]을 참조한다.
일부 구현예에서, 특정 항원(또는 마커 또는 리간드), 예컨대 입양 요법에 의해 표적화될 특정 세포 유형에서 발현되는 항원, 예를 들어 암 마커 및/또는 감쇠 반응을 유도하도록 의도된 항원, 예컨대 정상 또는 비질병 세포 유형에서 발현된 항원에 대한 특이성을 갖는 CAR이 작제된다. 따라서, CAR은 전형적으로 하나 이상의 항원 결합 분자, 예컨대 하나 이상의 항원 결합 단편, 도메인 또는 부분 또는 하나 이상의 항체 가변 도메인 및/또는 항체 분자를 세포외 부분에 포함한다. 일부 구현예에서, CAR은 항체 분자의 항원 결합 부분 또는 부분들, 예컨대 단클론성 항체(monoclonal antibody, mAb)의 가변 중쇄(VH) 및 가변 경쇄(VL)로부터 유래된 단일 사슬 항체 단편(single-chain antibody fragment, scFv)을 포함한다.
일부 구현예에서, 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 항원 수용체와 같은 재조합 수용체의 일부로서 세포 상에 발현된다. 항원 수용체 중에는 기능성 비-TCR 항원 수용체, 예컨대 키메라 항원 수용체(chimeric antigen receptor, CAR)가 있다. 일반적으로, 펩티드 MHC 복합체에 대하여 유도된 TCR 유사 특이성을 나타내는 항체 또는 항원 결합 단편을 함유하는 CAR은 또한 TCR 유사 CAR로 지칭될 수 있다. 일부 구현예에서, TCR 유사 CAR의 MHC-펩티드 복합체에 특이적인 세포 외 항원 결합 도메인은 일부 측면에서 링커 및/또는 막관통 도메인(들)을 통해 하나 이상의 세포 내 신호 전달 성분에 연결된다. 일부 구현예에서, 상기 분자는 전형적으로 TCR과 같은 천연 항원 수용체를 통한 신호 및 선택적으로 공자극 수용체와 조합하여 상기 수용체를 통한 신호를 모방하거나 이와 유사할 수 있다.
일부 구현예에서, 키메라 수용체(예를 들어, CAR)와 같은 재조합 수용체는 항원(또는 리간드)에 특이적으로 결합하는 것과 같이 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함한다. 키메라 수용체에 의해 표적화되는 항원 중에는 입양 세포 요법을 통해 표적화될 질병, 병태 또는 세포 유형의 맥락에서 발현되는 것이 있다. 질병 및 병태 중에는 혈액학적 암, 면역계 암, 예컨대 림프종, 백혈병 및/또는 골수종, 예컨대 B, T 및 골수성 백혈병, 림프종 및 다발성 골수종을 포함한 암 및 종양을 포함한 증식성, 신생물성 및 악성 질병 및 장애가 있다.
일부 구현예에서, 항원(또는 리간드)은 폴리펩티드이다. 일부 구현예에서, 이는 탄수화물 또는 다른 분자이다. 일부 구현예에서, 항원(또는 리간드)은 정상 또는 비 표적화 세포 또는 조직과 비교하여 질병 또는 병태의 세포, 예를 들어 종양 또는 병원성 세포 상에서 선택적으로 발현되거나 과발현된다. 다른 구현예에서, 항원은 정상 세포 상에서 발현되고/거나 조작된 세포 상에서 발현된다.
일부 구현예에서, CAR은 세포 표면 상에 발현된 온전한 항원과 같은 항원을 특이적으로 인식하는 항체 또는 항원 결합 단편(예를 들어 scFv)을 함유한다.
일부 구현예에서, 수용체에 의해 표적화되는 항원은 다수의 공지된 B 세포 마커 중 어느 하나와 같은 B 세포 악성 종양과 관련된 항원을 포함한다. 일부 구현예에서, 항원은 CD20, CD19, CD22, ROR1, CD45, CD21, CD5, CD33, Ig카파, Ig람다, CD79a, CD79b 또는 CD30이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 항원은 병원체 특이적 또는 병원체 발현 항원이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 항원은 바이러스성 항원(예컨대 HIV, HCV, HBV 등으로부터의 바이러스 항원), 세균성 항원 및/또는 기생 항원이다.
일부 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편(예를 들어 scFv)은 CD19와 같은 항원을 특이적으로 인식한다.
일부 구현예에서, 항원은 CD19이다. 일부 구현예에서, scFv는 CD19에 특이적인 항체 또는 항체 단편으로부터 유래된 VH 및 VL을 함유한다. 일부 구현예에서, CD19에 결합하는 항체 또는 항체 단편은 FMC63 및 SJ25C1과 같은 마우스 유래 항체이다. 일부 구현예에서, 항체 또는 항체 단편은 예를 들어, 문헌[미국 특허 공개 번호 US 2016/0152723]에 기재된 바와 같은 인간 항체이다.
일부 구현예에서 scFv 및/또는 VH는 FMC63으로부터 유래된다. FMC63은 일반적으로 인간 기원의 CD19를 발현하는 Nalm-1 및 -16 세포에 대하여 발생된 마우스 단클론성 IgG1 항체를 지칭한다(Ling, N. R., et al. (1987). Leucocyte typing III. 302). 일부 구현예에서, FMC63 항체는 서열 번호: 38 및 39에 각각 제시된 CDR-H1 및 CDR-H2 및 서열 번호: 40 또는 54에 제시된 CDR-H3; 및 서열 번호: 35에 제시된 CDR-L1 및 서열 번호: 36 또는 55에 제시된 CDR-L2 및 서열 번호: 37 또는 34에 제시된 CDR-L3;을 포함한다. 일부 구현예에서, FMC63 항체는 서열 번호: 41의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH) 및 서열 번호: 42의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다.
일부 구현예에서, scFv는 서열 번호: 35의 CDR-L1 서열, 서열 번호: 36의 CDR-L2 서열 및 서열 번호: 37의 CDR-L3 서열을 함유하는 가변 경쇄 및/또는 서열 번호: 38의 CDR-H1 서열, 서열 번호: 39의 CDR-H2 서열 및 서열 번호: 40의 CDR-H3 서열을 함유하는 가변 중쇄를 포함한다. 일부 구현예에서, scFv는 서열 번호: 41에 제시된 가변 중쇄 영역 및 서열 번호: 42에 제시된 가변 경쇄 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 가변 중쇄 및 가변 경쇄는 링커에 의해 연결된다. 일부 구현예에서, 링커는 서열 번호: 56에 제시된다. 일부 구현예에서, scFv는 VH, 링커 및 VL 순서로 포함한다. 일부 구현예에서, scFv는 VL, 링커 및 VH 순서로 포함한다. 일부 구현예에서, scFv는 서열 번호: 57에 제시된 뉴클레오티드 서열 또는 서열 번호: 57에 대해 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 이상의 서열 동일성을 나타내는 서열에 의해 암호화된다. 일부 구현예에서, scFv는 서열 번호: 43에 제시된 아미노산 서열 또는 서열 번호: 43에 대해 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 이상의 서열 동일성을 나타내는 서열을 포함한다.
일부 구현예에서, scFv는 SJ25C1로부터 유래된다. SJ25C1은 인간 기원의 CD19를 발현하는 Nalm-1 및 -16 세포에 대하여 발생된 마우스 단클론성 IgG1 항체이다(Ling, N. R., et al. (1987). Leucocyte typing III. 302). 일부 구현예에서, SJ25C1 항체는 서열 번호: 47-49에 각각 제시된 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3 및 서열 번호: 44-46에 각각 제시된 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, SJ25C1 항체는 서열 번호: 50의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH) 및 서열 번호: 51의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다.
일부 구현예에서, scFv는 서열 번호: 44의 CDR-L1 서열, 서열 번호: 45의 CDR-L2 서열 및 서열 번호: 46의 CDR-L3 서열을 함유하는 가변 경쇄 및/또는 서열 번호: 47의 CDR-H1 서열, 서열 번호: 48의 CDR-H2 서열 및 서열 번호: 49의 CDR-H3 서열을 함유하는 가변 중쇄를 포함한다. 일부 구현예에서, scFv는 서열 번호: 50에 제시된 가변 중쇄 영역 및 서열 번호: 51에 제시된 가변 경쇄 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 가변 중쇄 및 가변 경쇄는 링커에 의해 연결된다. 일부 구현예에서, 링커는 서열 번호: 52에 제시된다. 일부 구현예에서, scFv는 VH, 링커 및 VL 순서로 포함한다. 일부 구현예에서, scFv는 VL, 링커 및 VH 순서로 포함한다. 일부 구현예에서, scFv는 서열 번호: 53에 제시된 아미노산 서열 또는 서열 번호: 53에 대해 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 이상의 서열 동일성을 나타내는 서열을 포함한다.
일부 구현예에서, 항원은 CD20이다. 일부 구현예에서, scFv는 CD20에 특이적인 항체 또는 항체 단편으로부터 유래된 VH 및 VL을 함유한다. 일부 구현예에서, CD20에 결합하는 항체 또는 항체 단편은 리툭시맙 scFv와 같은 리툭시맙이거나 이로부터 유래된 항체이다.
일부 구현예에서, 항원은 CD22이다. 일부 구현예에서, scFv는 CD22에 특이적인 항체 또는 항체 단편으로부터 유래된 VH 및 VL을 함유한다. 일부 구현예에서, CD22에 결합하는 항체 또는 항체 단편은 m971 scFv와 같은 m971이거나 이로부터 유래된 항체이다.
일부 구현예에서, CAR은 MHC 펩티드 복합체로서 세포 표면 상에 제시된 종양 관련 항원과 같은 세포 내 항원을 특이적으로 인식하는 항체 또는 항원 결합 단편(예를 들어 scFv)과 같은 TCR 유사 항체를 함유한다. 일부 구현예에서, MHC 펩티드 복합체를 인식하는 항체 또는 이의 항원 결합부는 항원 수용체와 같은 재조합 수용체의 일부로 세포 상에서 발현될 수 있다. 항원 수용체 중에는 기능성 비-TCR 항원 수용체, 예컨대 키메라 항원 수용체(chimeric antigen receptor, CAR)가 있다. 일반적으로, 펩티드 MHC 복합체에 대하여 유도된 TCR 유사 특이성을 나타내는 항체 또는 항원 결합 단편을 함유하는 CAR은 또한 TCR 유사 CAR로 지칭될 수 있다.
"주요 조직 적합성 복합체(Major histocompatibility complex, MHC)"에 대한 언급은 일부 경우에, 세포 기구에 의해 가공된 펩티드 항원을 포함하여 폴리펩티드의 펩티드 항원과 복합체를 형성할 수 있는 다형성 펩티드 결합 부위 또는 결합 그루브(groove)를 함유하는 단백질, 일반적으로 당단백질을 지칭한다. 일부 경우에, MHC 분자는 TCR 또는 TCR 유사 항체와 같은 T 세포 상의 항원 수용체에 의해 인식 가능한 형태로 항원 제시를 위해 펩티드와의 복합체로, 즉 MHC 펩티드 복합체를 포함하여 세포 표면 상에 제시되거나 발현될 수 있다. 일반적으로, MHC 클래스 I 분자는 일부 경우에, 3개의 α 도메인 및 비공유 결합된 β2 마이크로글로불린을 갖는, 막에 걸쳐있는 α 사슬을 갖는 이종 이량체이다. 일반적으로 MHC 클래스 II 분자는 두 개의 막관통 당단백질, α 및 β로 구성되며, 둘 다 전형적으로 막에 걸쳐 있다. MHC 분자는 펩티드에 결합하기 위한 항원 결합 부위 또는 부위들 및 적절한 항원 수용체에 의한 인식에 필요한 서열을 함유하는 MHC의 유효 부분을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, MHC 클래스 I 분자는 시토졸에서 유래한 펩티드를 세포 표면으로 전달하고, 여기서 MHC 펩티드 복합체는 일반적으로 CD8+ T 세포이나, 일부 경우에 CD4+ T 세포와 같은 T 세포에 의해 인식된다. 일부 구현예에서, MHC 클래스 II 분자는 소포 시스템에서 유래한 펩티드를 세포 표면으로 전달하며, 이는 전형적으로 CD4+ T 세포에 의해 인식된다. 일반적으로, MHC 분자는 인간에서 인간 백혈구 항원(human leukocyte antigen, HLA) 및 마우스에서 H-2라고 통칭되는 연관된 유전자좌(loci) 그룹에 의해 암호화된다. 따라서, 전형적으로 인간 MHC는 인간 백혈구 항원(HLA)으로도 지칭될 수 있다.
용어 "MHC 펩티드 복합체(MHC-peptide complex)" 또는 "펩티드 MHC 복합체(peptide-MHC complex)" 또는 이의 변형은 예컨대 일반적으로 MHC 분자의 결합 그루브(groove) 또는 틈에서 펩티드의 비공유 상호작용에 의한 펩티드 항원 및 MHC 분자의 복합체 또는 회합을 지칭한다. 일부 구현예에서, MHC 펩티드 복합체는 세포의 표면 상에 존재하거나 제시된다. 일부 구현예에서, MHC 펩티드 복합체는 TCR, TCR 유사 CAR 또는 이의 항원 결합부와 같은 항원 수용체에 의해 특이적으로 인식될 수 있다.
일부 구현예에서, 폴리펩타이드의 펩티드, 예컨대 펩티드 항원 또는 에피토프는 예컨대 항원 수용체에 의한 인식을 위해 MHC 분자와 회합할 수 있다. 일반적으로, 펩티드는 폴리펩티드 또는 단백질과 같은 보다 긴 생물학적 분자의 단편으로부터 유래되거나 이를 기초로 한다. 일부 구현예에서, 펩티드는 전형적으로 약 8 내지 약 24 개의 아미노산 길이이다. 일부 구현예에서, 펩티드는 MHC 클래스 II 복합체에서 인식을 위해 (약) 9 내지 22개의 아미노산 길이를 갖는다. 일부 구현예에서, 펩티드는 MHC 클래스 I 복합체에서 인식을 위해 (약) 8 내지 13개의 아미노산 길이를 갖는다. 일부 구현예에서, MHC 펩티드 복합체와 같은 MHC 분자의 맥락에서 펩티드 인식시, 항원 수용체, 예컨대 TCR 또는 TCR 유사 CAR은 T 세포 반응, 예컨대 T 세포 증식, 사이토카인 생성, 세포 독성 T 세포 반응 또는 기타 반응을 유도하는 T 세포에 대한 활성화 신호를 생성하거나 유발시킨다.
일부 구현예에서, TCR 유사 항체 또는 항원 결합부는 공지되어 있거나, 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다(예를 들어, 미국 공개 출원 번호 US 2002/0150914; US 2003/0223994; US 2004/0191260; US 2006/0034850; US 2007/00992530; US20090226474; US20090304679; 및 국제 PCT 공개 번호 WO 03/068201 참조).
일부 구현예에서, MHC 펩티드 복합체에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합부는 특정 MHC 펩티드 복합체를 함유하는 유효량의 면역원으로 숙주를 면역화함으로써 제조될 수 있다. 일부 경우에, MHC 펩티드 복합체의 펩티드는 종양 항원, 예를 들어 하기 기재된 바와 같은 범용 종양 항원, 골수종 항원 또는 기타 항원과 같이 MHC에 결합할 수 있는 항원의 에피토프이다. 일부 구현예에서, 이어서 유효량의 면역원이 면역 반응을 유도하기 위해 숙주에 투여되고, 여기서 면역원은 MHC 분자의 결합 그루브에서 펩티드의 3차원 제시에 대하여 면역 반응을 유도하기에 충분한 기간 동안 이의 3차원 형태를 유지한다. 이어서 숙주로부터 수집된 혈청을 분석하여 MHC 분자의 결합 그루브에서 펩티드의 3차원 제시를 인식하는 원하는 항체가 생성되고 있는지 여부를 결정한다. 일부 구현예에서, 생성된 항체를 분석하여 상기 항체가 MHC 펩티드 복합체와 MHC 분자 단독, 관심 펩티드 단독 및 MHC 및 무관한 펩티드의 복합체를 식별할 수 있는지 확인할 수 있다. 이어서 원하는 항체를 단리할 수 있다.
일부 구현예에서, MHC 펩티드 복합체에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합부가 파지 항체 라이브러리와 같은 항체 라이브러리 디스플레이 방법을 채택함으로써 생성될 수 있다. 일부 구현예에서, 예를 들어 라이브러리의 멤버가 CDR 또는 CDR들의 하나 이상의 잔기에서 돌연변이되는 돌연변이 Fab, scFv 또는 기타 항체 형태의 파지 디스플레이 라이브러리가 생성될 수 있다. 예를 들어 문헌[미국 출원 공개 번호 US20020150914, US2014/0294841; 및 Cohen CJ. et al. (2003) J Mol. Recogn. 16:324-332]을 참조한다.
본 명세서에서 용어 "항체(antibody)"는 가장 넓은 의미로 사용되며, 온전한 항체 및 기능성(항원-결합) 항체 단편을 포함하는 다클론성 및 단클론성 항체를 포함하며, 항원에 특이적으로 결합할 수 있는 단편 항원 결합(Fab) 단편, F(ab’)2 단편, Fab’ 단편, Fv 단편, 재조합 IgG(rIgG) 단편, 가변 중쇄(VH) 영역, 단일 사슬 가변 단편(scFv)을 포함한 단일 사슬 항체 단편 및 단일 도메인 항체(예를 들어, sdAb, sdFv, 나노바디(nanobody)) 단편을 포함한다. 상기 용어는 유전자 조작되고/거나 달리 변형된 형태의 면역 글로불린, 예컨대 인트라바디(intrabodies), 펩티바디(peptibodies), 키메라 항체, 완전한 인간 항체, 인간화된 항체 및 이종 접합 항체, 다중 특이적, 예를 들어, 이중 특이적 항체, 디아바디(diabodies), 트리아바디(triabodies) 및 테트라바디(tetrabodies), 탠덤 디-scFv, 탠덤 트리-scFv를 포괄한다. 달리 명시되지 않는 한, 용어 "항체"는 이의 기능적 항체 단편을 포괄하는 것으로 이해되어야 한다. 상기 용어는 또한 IgG 및 이의 하위 클래스, IgM, IgE, IgA 및 IgD를 포함하는 임의의 클래스 또는 하위 클래스의 항체를 포함하는 온전한 또는 전장 항체를 포함한다.
일부 구현예에서, 항원 결합 단백질, 항체 및 이의 항원 결합 단편은 전장 항체의 항원을 특이적으로 인식한다. 일부 구현예에서, 항체의 중쇄 및 경쇄는 전장일 수 있거나 또는 항원 결합 부분(Fab, F(ab')2, Fv 또는 단일 사슬 FV 단편(scFv))일 수 있다. 다른 구현예에서, 항체 중쇄 불변 영역은 예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD 및 IgE로부터 선택되고, 특히 예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4로부터 선택되고, 보다 특히, IgG1(예를 들어, 인간 IgG1)으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, 항체 경쇄 불변 영역은 예를 들어, 카파 또는 람다, 특히 카파에서 선택된다.
제공된 항체 중에는 항체 단편이 있다. "항체 단편(antibody fragment)"은 온전한 항체가 결합하는 항원에 결합하는 온전한 항체의 일부를 포함하는 온전한 항체 이외의 분자를 지칭한다. 항체 단편의 예는 Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2; 디아바디; 선형 항체; 가변 중쇄(VH) 영역, scFv와 같은 단일 사슬 항체 분자 및 단일 도메인 VH 단일 항체; 및 항체 단편으로 형성된 다중 특이적 항체;를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 특정 구현예에서, 항체는 scFv와 같은 가변 중쇄 영역 및/또는 가변 경쇄 영역을 포함하는 단일 사슬 항체 단편이다.
용어 "가변 영역(variable region)" 또는 "가변 도메인(ariable domain)"은 항체를 항원에 결합시키는데 관여하는 항체 중쇄 또는 경쇄의 도메인을 지칭한다. 천연 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 도메인(각각 VH 및 VL )은 일반적으로 유사한 구조를 가지며, 각각의 도메인은 4개의 보존된 프레임워크 영역(framework region, FR) 및 3개의 CDR을 포함한다. (예를 들어, 문헌[Kindt et al. Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co., 91 페이지 (2007)]을 참조한다). 단일 VH 또는 VL 도메인은 항원 결합 특이성을 부여하기에 충분할 수 있다. 또한, 특정 항원에 결합하는 항체는 항원에 결합하는 항체로부터의 VH 또는 VL 도메인을 사용하여 단리되어 상보적인 VL 또는 VH 도메인 라이브러리를 각각 스크리닝할 수 있다. 예를 들어, 문헌[Portolano et al., J. Immunol. 150:880-887 (1993); Clarkson et al., Nature 352:624-628 (1991)]을 참조한다.
단일 도메인 항체는 항체의 중쇄 가변 도메인의 전부 또는 일부 또는 경쇄 가변 도메인의 전부 또는 일부를 포함하는 항체 단편이다. 특정 구현예에서, 단일 도메인 항체는 인간 단일 도메인 항체이다. 일부 구현예에서, CAR은 항원, 예컨대 표적화될 세포 또는 질병의 암 마커 또는 세포 표면 항원, 예컨대 종양 세포 또는 암세포, 예컨대 본 명세서에 기재되거나 공지된 표적 항원 중 어느 하나에 특이적으로 결합하는 항체 중쇄 도메인을 포함한다.
항체 단편은 온전한 항체의 단백질 분해 소화 및 재조합 숙주 세포에 의한 생산을 포함하나 이에 국한되지 않는 다양한 기술에 의해 제조될 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 합성 링커, 예를 들어 펩티드 링커에 의해 연결된 2 이상의 항체 영역 또는 사슬을 갖는 것과 같이 자연적으로 발생하지 않고/거나 자연적으로 발생하는 온전한 항체의 효소 소화에 의해 생성되지 않을 수 있는 배열을 포함하는 단편과 같은 재조합으로 생성된 단편이다. 일부 구현예에서, 항체 단편은 scFv이다.
"인간화된(humanized)" 항체는 모든 또는 실질적으로 모든 CDR 아미노산 잔기가 비인간 CDR로부터 유래되고 모든 또는 실질적으로 모든 FR 아미노산 잔기가 인간 FR로부터 유래된 항체이다. 인간화된 항체는 선택적으로 인간 항체로부터 유래된 항체 불변 영역의 적어도 일부를 포함할 수 있다. 비인간 항체의 "인간화된 형태(humanized form)"는 모체 비인간 항체의 특이성 및 친화도를 유지하면서, 전형적으로 인간에 대한 면역원성을 감소시키기 위해 인간화를 거친 비인간 항체의 변이체를 지칭한다. 일부 구현예에서, 인간화된 항체의 일부 FR 잔기는 비인간 항체(예를 들어, CDR 잔기가 유래된 항체)로부터의 해당 잔기로 치환되어 예를 들어, 항체 특이성 또는 친화도가 회복되거나 개선된다.
따라서, 일부 구현예에서, TCR 유사 CAR을 포함하는 키메라 항원 수용체는 항체 또는 항체 단편을 함유하는 세포 외 부분을 포함한다. 일부 구현예에서, 항체 또는 단편은 scFv를 포함한다. 일부 측면에서, 키메라 항원 수용체는 항체 또는 단편을 함유하는 세포 외 부분 및 세포 내 신호 전달 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 세포 내 신호 전달 영역은 세포 내 신호 전달 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 세포 내 신호 전달 도메인은 1차 신호 전달 도메인, T 세포에서 1차 활성화 신호를 유도할 수 있는 신호 전달 도메인, T 세포 수용체(TCR) 성분의 신호 전달 도메인 및/또는 면역수용체 티로신 기반 활성화 모티프(immunoreceptor tyrosine-based activation motif, ITAM)를 포함하는 신호 전달 도메인이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 재조합 수용체, 예컨대 CAR, 예컨대 이의 항체 부분은, 면역 글로불린 불변 영역의 적어도 일부 또는 이의 변이체 또는 변형된 버전, 예컨대 힌지 영역, 예를 들어 IgG4 힌지 영역 및/또는 CH1/CL 및/또는 Fc 영역이거나 이를 포함할 수 있는 스페이서를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 재조합 수용체는 스페이서 및/또는 힌지 영역을 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 불변 영역 또는 일부는 IgG4 또는 IgG1과 같은 인간 IgG의 것이다. 일부 측면에서, 불변 영역의 일부는 항원 인식 성분, 예를 들어, scFv와 막 관통 도메인 사이에서 스페이서 영역으로 기능한다. 스페이서는 스페이서의 부재와 비교하여 항원 결합 후에 세포의 반응성 증가를 제공하는 길이일 수 있다. 일부 예에서, 스페이서는 12 개 또는 약 12 개 아미노산 길이이거나 또는 12 개 이내의 아미노산 길이이다. 예시적인 스페이서는 약 10 내지 229 개 아미노산, 약 10 내지 200 개 아미노산, 약 10 내지 175 개 아미노산, 약 10 내지 150 개 아미노산, 약 10 내지 125 개 아미노산, 약 10 내지 100 개 아미노산, 약 10 내지 75 개 아미노산, 약 10 내지 50 개 아미노산, 약 10 내지 40 개 아미노산, 약 10 내지 30 개 아미노산, 약 10 내지 20 개 아미노산, 약 10 내지 15 개 이상의 아미노산을 갖는 것을 포함하고, 열거된 범위 중 어느 하나의 종점 사이 임의의 정수를 포함한다. 일부 구현예에서, 스페이서 영역은 약 12 개 이하의 아미노산, 약 119 개 이하의 아미노산 또는 약 229 개 이하의 아미노산을 갖는다. 예시적인 스페이서는 IgG4 힌지 단독, CH2 및 CH3 도메인에 연결된 IgG4 힌지 또는 CH3 도메인에 연결된 IgG4 힌지를 포함한다. 예시적인 스페이서는 문헌[Hudecek et al. (2013) Clin. Cancer Res., 19:3153, Hudecek et al. (2015) Cancer Immunol. Res., 3(2):125-135 또는 국제 특허 출원 공개 번호 WO2014031687]에 기재된 것을 포함하나 이에 국한되지 않는다. 일부 구현예에서, 스페이서는 서열 번호: 1에 제시된 서열을 가지며, 서열 번호: 2에 제시된 서열에 의해 암호화된다. 일부 구현예에서, 스페이서는 서열 번호: 3에 제시된 서열을 갖는다. 일부 구현예에서, 스페이서는 서열 번호: 4에 제시된 서열을 갖는다.
일부 측면에서, 스페이서는 (a) 면역 글로불린 힌지의 전부 또는 일부 또는 이의 변형된 버전을 포함하거나 이로 구성되거나, 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나; (b) 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 힌지의 전부 또는 일부 또는 이의 변형된 버전을 포함하거나, 이로 구성되고/거나 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나; (c) (약) 12개의 아미노산 길이이고/거나 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4의 전부 또는 일부 또는 이의 변형된 버전를 포함하거나 이로 구성되거나; (d) 서열 번호: 1, 3-5, 27-34 또는 58에 제시된 아미노산 서열 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 상기 중 어느 하나의 변이체로 구성되거나 이를 포함하거나; 또는 (e) 화학식 X1PPX2P(여기서 X1은 글리신, 시스테인 또는 아르기닌이고 X2는 시스테인 또는 트레오닌)을 포함하거나 이로 구성되는; 폴리펩티드 스페이서이다.
일부 구현예에서, 불변 영역 또는 부분은 IgD의 것이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 서열 번호: 5에 제시된 서열을 갖는다. 일부 구현예에서, 스페이서는 서열 번호: 1, 3, 4 및 5 중 어느 하나에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상 또는 적어도 약 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 갖는다.
항원 인식 도메인은 일반적으로 CAR의 경우에 TCR 복합체와 같은 항원 수용체 복합체를 통한 활성화 및/또는 다른 세포 표면 수용체를 통한 신호를 모방하는 신호 전달 성분과 같은 하나 이상의 세포 내 신호 전달 성분에 연결된다. 따라서, 일부 구현예에서, 항원 결합 성분(예를 들어, 항체)은 하나 이상의 막관통 영역 및 세포 내 신호 전달 영역에 연결된다. 일부 구현예에서, 막관통 도메인은 세포 외 도메인에 융합된다. 일 구현예에서, 수용체, 예를 들어 CAR에 있는 도메인 중 하나와 자연적으로 회합되는 막 관통 도메인이 사용된다. 일부 경우에, 막관통 도메인은 동일하거나 상이한 표면 막 단백질의 막관통 도메인에 대한 상기 도메인의 결합을 피하도록 아미노산 치환에 의해 변형되거나 선택되어 수용체 복합체의 다른 멤버와의 상호 작용이 최소화된다.
일부 구현예에서, 막 관통 도메인은 천연 또는 합성 공급원으로부터 유래된다. 천연 공급원인 경우, 일부 측면에서, 도메인은 임의의 막-결합 또는 막 관통 단백질로부터 유래된다. 막 관통 영역은 T 세포 수용체의 알파, 베타 또는 제타 사슬, CD28, CD3 입실론, CD45, CD4, CD5, CD8, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137, CD154로부터 유래된 것을 포함한다(즉 적어도 이들의 막 관통 영역(들)을 포함한다). 대안적으로 일부 구현예에서, 막관통 도메인은 합성이다. 일부 측면에서, 합성 막관통 도메인은 주로 류신 및 발린과 같은 소수성 잔기를 포함한다. 일부 측면에서, 페닐알라닌, 트립토판 및 발린의 트리플릿(triplet)이 합성 막관통 도메인의 각 말단에서 발견될 것이다. 일부 구현예에서, 연결은 링커, 스페이서 및/또는 막관통 도메인(들)에 의한다.
세포 내 신호 전달 영역 중에는 천연 항원 수용체를 통한 신호, 공자극 수용체와 조합으로 상기 수용체를 통한 신호 및/또는 공자극 수용체 단독을 통한 신호를 모방하거나 이와 유사한 것이 있다. 일부 구현예에서, 짧은 올리고- 또는 폴리펩티드 링커, 예를 들어 글리신 및 세린, 예를 들어 글리신-세린 더블릿(doublet)을 함유하는 것과 같은 2 내지 10개 아미노산 길이의 링커가 CAR의 막관통 도메인과 세포질 신호 전달 도메인 사이에 존재하고 연결을 형성한다.
수용체, 예를 들어 CAR은 일반적으로 하나 이상의 세포 내 신호 전달 성분 또는 성분들을 포함한다. 일부 구현예에서, 수용체는 T 세포 활성화 및 세포 독성을 매개하는 TCR CD3 사슬과 같은 TCR 복합체의 세포 내 성분, 예를 들어 CD3 제타 사슬을 포함한다. 따라서, 일부 측면에서, 항원 결합 또는 항원 인식 도메인은 하나 이상의 세포 신호 모듈에 연결된다. 일부 구현예에서, 세포 신호 전달 모듈은 CD3 막관통 도메인, CD3 세포 내 신호 전달 도메인 및/또는 기타 CD 막관통 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 수용체, 예를 들어 CAR은 Fc 수용체 γ, CD8, CD4, CD25 또는 CD16과 같은 하나 이상의 추가 분자의 일부를 더 포함한다. 예를 들어, 일부 측면에서, CAR은 CD3-제타(CD3-ζ) 또는 Fc 수용체 γ와 CD8, CD4, CD25 또는 CD16 사이의 키메라 분자를 포함한다.
일부 구현예에서, CAR의 결찰시, CAR의 세포질 도메인 또는 세포 내 신호 전달 영역은 면역 세포, 예를 들어 CAR을 발현하도록 조작된 T 세포의 정상적인 이펙터 기능 또는 반응 중 하나 이상을 활성화시킨다. 예를 들어, 일부 맥락에서, CAR은 T 세포의 기능, 예컨대 세포용해 활성 또는 T-헬퍼 활성, 예컨대 사이토카인 또는 기타 인자의 분비를 유도한다. 일부 구현예에서, 항원 수용체 성분 또는 공자극 분자의 세포 내 신호 전달 영역의 절단 부분은 예를 들어 그것이 이펙터 기능 신호를 전달할 경우 온전한 면역 자극 사슬 대신에 사용된다. 일부 구현예에서, 예를 들어 세포 내 도메인 또는 도메인들을 포함하는 세포 내 신호 전달 영역은 T 세포 수용체(TCR)의 세포질 서열 및 일부 측면에서 천연 맥락에서 항원 수용체 결합 후에 신호 전달을 개시하기 위해 상기 수용체와 협력하여 작용하는 공-수용체 및/또는 상기 분자의 임의의 유도체 또는 변이체 서열 및/또는 동일한 기능적 능력을 갖는 임의의 합성 서열도 포함한다.
천연 TCR의 맥락에서, 완전한 활성화는 일반적으로 TCR을 통한 신호 전달뿐만 아니라 공자극 신호를 필요로 한다. 따라서, 일부 구현예에서, 완전한 활성화를 촉진하기 위해, 2 차 또는 공자극 신호를 생성하기 위한 성분이 CAR에 또한 포함된다. 다른 구현예에서, CAR은 공자극 신호를 생성하기 위한 성분을 포함하지 않는다. 일부 측면에서, 추가의 CAR이 동일한 세포에서 발현되고 2 차 또는 공자극 신호를 생성하기 위한 성분을 제공한다.
일부 측면에서, T 세포 활성화는 두 종류의 세포질 신호 전달 서열, 즉 TCR을 통한 항원 의존적 일차 활성화를 개시하는 서열(1 차 세포질 신호 전달 서열) 및 항원 비의존적 방식으로 작용하여 2 차 또는 공자극 신호를 제공하는 서열(2 차 세포질 신호 전달서열)에 의해 매개되는 것으로 설명된다. 일부 측면에서, CAR은 상기 신호 전달 성분 중 하나 또는 둘 다를 포함한다.
일부 측면에서, CAR은 TCR 복합체의 1차 활성화를 조절하는 1차 세포질 신호 전달 서열을 포함한다. 자극 방식으로 작용하는 1 차 세포질 신호 전달 서열은 면역 수용체 티로신-기반 활성화 모티프 또는 ITAM으로 공지된 신호 전달 모티프를 함유할 수 있다. 1 차 세포질 신호 전달 서열을 함유하는 ITAM의 예에는 TCR 또는 CD3 제타, FcR 감마 또는 FcR 베타로부터 유래된 것이 포함된다. 일부 구현예에서, CAR의 세포질 신호 전달 분자(들)은 CD3 제타로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인, 이의 일부 또는 서열을 함유한다.
일부 구현예에서, CAR은 공자극 수용체, 예컨대 CD28, 4-1BB, OX40, DAP10 및 ICOS의 신호 전달 영역 및/또는 막관통 부분을 포함한다. 일부 측면에서, 동일한 CAR은 신호 전달 영역 및 공자극 성분 둘 다를 포함한다.
일부 구현예에서, 신호 전달 영역은 하나의 CAR 내에 포함되는 반면, 공자극 성분은 다른 항원을 인식하는 다른 CAR에 의해 제공된다. 일부 구현예에서, CAR은 활성화 또는 자극성 CAR 및 공자극 CAR을 포함하며, 둘 다 동일한 세포 상에서 발현된다(국제 출원 WO2014/055668 참조).
특정 구현예에서, 세포 내 신호 전달 영역은 CD3(예를 들어, CD3-제타) 세포 내 도메인에 연결된 CD28 막관통 및 신호 전달 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 세포 내 신호 전달 영역은 CD3 제타 세포 내 도메인에 연결된 키메라 CD28 및 CD137(4-1BB, TNFRSF9) 공자극 도메인을 포함한다.
일부 구현예에서, CAR은 세포질 부분에서 1개 이상, 예를 들어 2개 이상의 공자극 도메인 및 활성화 도메인, 예를 들어 1차 활성화 도메인을 포함한다. 예시적인 CAR에는 CD3-제타, CD28 및 4-1BB의 세포 내 성분이 포함된다.
일부 경우에, CAR은 제1, 제2 및/또는 제3 세대 CAR로 지칭된다. 일부 측면에서, 제1 세대 CAR은 항원 결합 시 CD3 사슬 유도 신호만을 제공하는 것이고; 일부 측면에서, 제2 세대 CAR은 상기 신호 및 CD28 또는 CD137과 같은 공자극 수용체로부터 세포 내 신호 전달 도메인을 포함하는 것과 같은 공자극 신호를 제공하는 것이고; 일부 측면에서, 제3 세대 CAR은 일부 측면에서 상이한 공자극 수용체의 다중 공자극 도메인을 포함하는 것이다.
일부 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 본 명세서에 기재된 항체 또는 단편을 함유하는 세포 외 부분을 포함한다. 일부 측면에서, 키메라 항원 수용체는 본 명세서에 기재된 항체 또는 단편을 함유하는 세포 외 부분 및 세포 내 신호 전달 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 항체 또는 단편은 scFv 또는 단일 도메인 VH 항체를 포함하고, 세포 내 도메인은 ITAM을 함유한다. 일부 측면에서, 세포 내 신호 전달 도메인은 CD3-제타(CD3ζ) 사슬의 제타 사슬의 신호 전달 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 세포 외 도메인과 세포 내 신호 전달 영역 사이에 배치된 막관통 도메인을 포함한다.
일부 측면에서, 막관통 도메인은 CD28의 막관통 부분을 함유한다. 세포 외 도메인과 막관통은 직접 또는 간접적으로 연결될 수 있다. 일부 구현예에서, 세포 외 도메인 및 막관통은 본 명세서에 기재된 어느 하나와 같은 스페이서에 의해 연결된다. 일부 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 예컨대 막관통 도메인과 세포 내 신호 전달 도메인 사이에서 T 세포 공자극 분자의 세포 내 도메인을 함유한다. 일부 측면에서, T 세포 공자극 분자는 CD28 또는 41BB이다.
일부 구현예에서, CAR은 항체, 예를 들어, 항체 단편, CD28의 막관통 부분이거나 이를 함유하는 막관통 도메인 또는 이의 기능적 변이체 및 CD28의 신호 전달 부분을 함유하는 세포 내 신호 전달 도메인 또는 이의 기능적 변이체 및 CD3 제타의 신호 전달 부분 또는 이의 기능적 변이체를 함유한다. 일부 구현예에서, CAR은 항체, 예를 들어, 항체 단편, CD28의 막관통 부분이거나 이를 함유하는 막관통 도메인 또는 이의 기능적 변이체 및 4-1BB의 신호 전달 부분을 함유하는 세포 내 신호 전달 도메인 또는 이의 기능적 변이체 및 CD3 제타의 신호 전달 부분 또는 이의 기능적 변이체를 함유한다. 일부 상기 구현예에서, 수용체는 Ig 분자, 예컨대 인간 Ig 분자의 일부, 예컨대 Ig 힌지, 예를 들어 IgG4 힌지, 예컨대 힌지 단독 스페이서를 함유하는 스페이서를 더 포함한다.
일부 구현예에서, 수용체, 예를 들어 CAR의 막관통 도메인은 인간 CD28의 막관통 도메인 또는 이의 변이체 예를 들어, 인간 CD28의 27-아미노산 막관통 도메인(수탁 번호: P10747.1)이거나 또는 서열 번호: 8에 제시된 아미노산 서열 또는 서열 번호: 8에 대해 (약) 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 포함하는 막관통 도메인이며; 일부 구현예에서, 재조합 수용체의 일부를 함유하는 막관통 도메인은 서열 번호: 9에 제시된 아미노산 서열 또는 이에 대해 (약) 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 T 세포 공자극 분자의 세포내 도메인을 함유한다. 일부 측면에서, T 세포 공자극 분자는 CD28 또는 41BB이다.
일부 구현예에서, 세포내 신호 전달 영역은 인간 CD28의 세포 내 공자극 신호 전달 도메인 또는 이의 기능적 변이체 또는 이의 일부, 예컨대 이의 41개의 아미노산 도메인 및/또는 천연 CD28 단백질의 186-187 위치에서 LL의 GG로의 치환을 갖는 상기 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 세포 내 신호 전달 도메인은 서열 번호: 10 또는 11에 제시된 아미노산 서열 또는 서열 번호: 10 또는 11에 대해 (약) 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 세포내 영역은 4-1BB의 세포 내 공자극 신호 전달 도메인 또는 이의 기능성 변이체 또는 이의 일부, 예컨대 인간 4-1BB의 42-아미노산 세포질 도메인(수탁 번호: Q07011.1) 또는 이의 기능성 변이체 또는 이의 일부, 예컨대 서열 번호: 12에 제시된 아미노산 서열 또는 서열 번호: 12에 대해 (약) 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 구현예에서, 세포내 신호 전달 영역은 인간 CD3 사슬, 선택적으로 CD3 제타 자극성 신호 전달 도메인 또는 이의 기능성 변이체, 예컨대 인간 CD3ζ의 동형 단백질 3의 112 AA 세포질 도메인(수탁 번호: P20963.2) 또는 문헌[미국 특허 번호 7,446,190 또는 미국 특허 번호 8,911,993]에 기재된 바와 같은 CD3 제타 신호 전달 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 세포 내 신호 전달 영역은 서열 번호: 13, 14 또는 15에 제시된 아미노산 서열 또는 서열 번호: 13, 14 또는 15에 대해 (약) 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 측면에서, 스페이서는 IgG의 힌지 영역 단독, 예컨대 IgG4 또는 IgG1의 힌지 단독, 예컨대 서열 번호: 1에 제시된 힌지 단독 스페이서를 함유한다. 다른 구현예에서, 스페이서는 CH2 및/또는 CH3 도메인에 연결된 Ig 힌지, 예를 들어 IgG4 힌지이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 서열 번호: 3에 제시된 바와 같은 CH2 및 CH3 도메인에 연결된 Ig 힌지, 예를 들어 IgG4 힌지이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 서열 번호: 4에 제시된 바와 같은 CH3 도메인에만 연결된 Ig 힌지, 예를 들어 IgG4 힌지이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 글리신-세린 풍부 서열 또는 공지된 가요성 링커와 같은 다른 가요성 링커이거나 이를 포함한다.
2. T 세포 수용체(TCR)
일부 구현예에서, 종양, 바이러스 또는 자가 면역 단백질의 항원과 같은 표적 폴리펩티드의 펩티드 에피토프 또는 T 세포 에피토프를 인식하는 T 세포 수용체(TCR) 또는 이의 항원 결합 부분을 발현하는 T 세포와 같은 조작된 세포가 제공된다.
일부 구현예에서, "T 세포 수용체(T cell receptor)"또는 "TCR"은 가변 α 및 β 사슬(각각 TCRα 및 TCRβ로도 공지) 또는 가변 γ 및 δ 사슬(각각 TCRα 및 TCRβ로도 공지) 또는 이의 항원 결합 부분을 함유하는 분자이고 이는 MHC 분자에 결합된 펩티드에 특이적으로 결합할 수 있다. 일부 구현예에서, TCR은 αβ 형태이다. 전형적으로, αβ 및 γδ 형태로 존재하는 TCR은 일반적으로 구조적으로 유사하지만, 이를 발현하는 T 세포는 별개의 해부학적 위치 또는 기능을 가질 수 있다. TCR은 세포 표면 상에서 또는 가용성 형태로 발견될 수 있다. 일반적으로 TCR은 T 세포(또는 T 림프구)의 표면 상에서 발견되며, 이는 일반적으로 주요 조직 적합성 복합체(MHC) 분자에 결합된 항원의 인식을 담당한다.
달리 언급되지 않는 한, 용어 "TCR"은 완전한 TCR뿐만 아니라 이의 항원 결합 부분 또는 항원 결합 단편을 포괄하는 것으로 이해되어야 한다. 일부 구현예에서, TCR은 αβ 형태 또는 γδ 형태의 TCR을 포함하는 온전한 또는 전장 TCR이다. 일부 구현예에서, TCR은 전장 미만의 TCR이지만 MHC 펩티드 복합체에 결합하는 것과 같이 MHC 분자에 결합된 특정 펩티드에 결합하는 항원 결합 부분이다. 일부 경우에, TCR의 항원 결합 부분 또는 단편은 전장 또는 온전한 TCR의 구조적 도메인의 일부만을 함유할 수 있으나, 그럼에도 완전한 TCR이 결합하는 MHC 펩티드 복합체와 같은 펩티드 에피토프에 결합할 수 있다. 일부 경우에, 항원 결합 부분은 특정 MHC 펩티드 복합체에 결합하기 위한 결합 부위를 형성하기에 충분한 TCR의 가변 도메인, 예컨대 TCR의 가변 α 사슬 및 가변 β 사슬을 함유한다. 일반적으로, TCR의 가변 사슬은 펩티드, MHC 및/또는 MHC 펩티드 복합체의 인식에 관여하는 상보성 결정 영역을 함유한다.
일부 구현예에서, TCR의 가변 도메인은 초 가변 루프 또는 상보성 결정 영역(complementarity determining region, CDR)을 함유하며, 이는 일반적으로 항원 인식 및 결합 능력 및 특이성에 대한 1차 기여자이다. 일부 구현예에서, TCR의 CDR 또는 이의 조합은 주어진 TCR 분자의 항원 결합 부위의 전부 또는 실질적으로 전부를 형성한다. TCR 사슬의 가변 영역 내의 다양한 CDR은 일반적으로 CDR에 비해 TCR 분자 중에서 일반적으로 가변성을 덜 나타내는 프레임워크 영역(FR)에 의해 분리된다(예를 들어 Jores et al., Proc. Nat’l Acad. Sci. U.S.A. 87:9138, 1990; Chothia et al., EMBO J. 7:3745, 1988 참조; 또한 Lefranc et al., Dev. Comp. Immunol. 27:55, 2003 참조). 일부 구현예에서, CDR3은 항원 결합 또는 특이성을 담당하는 주요 CDR이거나, 항원 인식 및/또는 펩티드 MHC 복합체의 가공된 펩티드 부분과의 상호 작용을 위한 주어진 TCR 가변 영역에서 3개의 CDR 중 가장 중요하다. 일부 맥락에서, 알파 사슬의 CDR1은 특정 항원 펩티드의 N 단말 부분과 상호 작용할 수 있다. 일부 맥락에서, 베타 사슬의 CDR1은 펩티드의 C-말단 부분과 상호 작용할 수 있다. 일부 맥락에서, CDR2는 MHC 펩티드 복합체의 MHC 부분과의 상호 작용 또는 이의 인식을 담당하는 1차 CDR이거나 이에 가장 강력하게 기여한다. 일부 구현예에서, β 사슬의 가변 영역은 초 가변 영역(CDR4 또는 HVR4)을 더 함유할 수 있으며, 이는 일반적으로 항원 인식이 아닌 초 항원 결합에 관여한다(Kotb (1995) Clinical Microbiology Reviews, 8:411-426).
일부 구현예에서, TCR은 또한 불변 도메인, 막관통 도메인 및/또는 짧은 세포질 꼬리를 함유할 수 있다(예를 들어, Janeway et al., Immunobiology: The Immune System in Health and Disease, 3rd Ed., Current Biology Publications, p. 4:33, 1997 참조). 일부 측면에서, TCR 각 사슬은 1개의 N 말단 면역 글로불린 가변 도메인, 1개의 면역 글로불린 불변 도메인, 막관통 영역 및 C 말단 끝에 짧은 세포질 꼬리를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, TCR은 신호 전달 매개에 관여하는 CD3 복합체의 불변 단백질과 회합한다.
일부 구현예에서, TCR 사슬은 하나 이상의 불변 도메인을 함유한다. 예를 들어, 주어진 TCR 사슬(예를 들어, α-사슬 또는 β-사슬)의 세포 외 부분은 세포막에 인접한 2개의 면역 글로불린 유사 도메인, 예컨대 가변 도메인(예를 들어, Vα 또는 Vβ; 전형적으로 Kabat 넘버링(Kabat et al., “Sequences of Proteins of Immunological Interest, US Dept. Health and Human Services, Public Health Service National Institutes of Health, 1991, 5th ed.)에 기초한 1 내지 116 아미노산) 및 불변 도메인(예를 들어, α 사슬 불변 도메인 즉 Cα, 전형적으로 Kabat 넘버링에 기초한 사슬의 117 내지 259 위치 또는 β사슬 불변 도메인 즉 Cβ, 전형적으로 Kabat에 기초한 사슬의 117 내지 295 위치)을 함유할 수 있다. 예를 들어, 일부 경우에, 2개의 사슬에 의해 형성된 TCR의 세포외 부분은 2개의 막 근위 불변 도메인과 2개의 막 원위 가변 도메인을 함유하고, 상기 가변 도메인 각각은 CDR을 함유한다. TCR의 불변 도메인은 시스테인 잔기가 이황화물 결합을 형성하는 짧은 연결 서열을 함유하여, 이로써 2개의 TCR 사슬을 연결할 수 있다. 일부 구현예에서, TCR은 각각의 α 및 β 사슬에 추가 시스테인 잔기를 가질 수 있어서, TCR은 불변 도메인에서 2개의 이황화물 결합을 함유한다.
일부 구현예에서, TCR 사슬은 막관통 도메인을 함유한다. 일부 구현예에서, 막관통 도메인은 양으로 하전된다. 일부 경우에, TCR 사슬은 세포질 꼬리를 함유한다. 일부 경우에, 구조는 TCR이 CD3 및 이의 하위 단위와 같은 다른 분자와 회합하도록 한다. 예를 들어, 막관통 영역을 가진 불변 도메인을 함유하는 TCR은 세포막에 단백질을 고정하고 CD3 신호 전달 장치 또는 복합체의 불변 하위 단위와 회합할 수 있다. CD3 신호 전달 하위 단위(예를 들어 CD3γ, CD3δ, CD3ε 및 CD3ζ 사슬)의 세포 내 꼬리는 TCR 복합체의 신호 전달 용량에 관여하는 하나 이상의 면역수용체 티로신 기반 활성화 모티프 즉 ITAM을 함유한다.
일부 구현예에서, TCR은 2개의 사슬 α 및 β(또는 선택적으로 γ 및 δ)의 이종이량체일 수 있거나 단일 사슬 TCR 작제물일 수 있다. 일부 구현예에서, TCR은 예컨대 이황화물 결합 또는 이황화물 결합들에 의해 연결되는 2개의 별개의 사슬(α 및 β 사슬 또는 γ 및 δ 사슬)을 함유하는 이종이량체이다.
일부 구현예에서, TCR은 Vα, β 사슬의 서열과 같은 공지된 TCR 서열(들)로부터 생성될 수 있으며, 이에 대해 실질적으로 전장 코딩 서열이 용이하게 이용가능하다. V 사슬 서열을 포함한 전장 TCR 서열을 세포 공급원으로부터 수득하는 방법이 잘 알려져 있다. 일부 구현예에서, TCR을 암호화하는 핵산은 예컨대 주어진 세포 또는 세포들 내의 또는 이로부터 단리된 TCR 암호화 핵산의 중합효소 연쇄 반응(PCR) 증폭에 의해 또는 공개적으로 이용 가능한 TCR DNA 서열의 합성에 의해 다양한 공급원으로부터 수득될 수 있다.
일부 구현예에서, TCR은 생물학적 공급원, 예컨대 세포, 예컨대 T 세포(예를 들어, 세포 독성 T 세포), T 세포 하이브리도마 또는 기타 공개적으로 이용 가능한 공급원으로부터 수득된다. 일부 구현예에서, T 세포는 생체내에서 단리된 세포로부터 수득될 수 있다. 일부 구현예에서, TCR은 흉선에서 선택된 TCR이다. 일부 구현예에서, TCR은 네오에피토프 제한(neoepitope-restricted) TCR이다. 일부 구현예에서, T 세포는 배양된 T 세포 하이브리도마(hybridoma) 또는 클론일 수 있다. 일부 구현예에서, TCR 또는 이의 항원 결합 부분 또는 이의 항원 결합 단편은 TCR 서열에 대한 지식으로 합성하여 생성될 수 있다.
일부 구현예에서, TCR은 표적 폴리펩티드 항원또는 이의 표적 T 세포 에피토프에 대한 후보 TCR의 라이브러리를 스크리닝하여 확인되거나 선택된 TCR로부터 생성된다. TCR 라이브러리는 PBMC, 비장 또는 기타 림프구 기관에 존재하는 세포를 포함하여 대상체로부터 단리된 T 세포로부터의 Vα 및 Vβ 레퍼토리를 증폭하여 생성될 수 있다. 일부 경우에, T 세포는 종양 침윤성 림프구(tumor-infiltrating lymphocyte, TIL)로부터 증폭될 수 있다. 일부 구현예에서, TCR 라이브러리는 CD4+ 또는 CD8+ 세포로부터 생성될 수 있다. 일부 구현예에서, TCR는 정상적인 건강한 대상체의 T 세포 공급원, 즉 정상적인 TCR 라이브러리로부터 증폭될 수 있다. 일부 구현예에서, TCR는 유병 대상체의 T 세포 공급원, 즉 유병자 TCR 라이브러리로부터 증폭될 수 있다. 일부 구현예에서, 인간으로부터 수득된 T 세포와 같은 샘플에서 예컨대 RT-PCR에 의해 Vα 및 Vβ의 유전자 레퍼토리를 증폭시키기 위해 퇴화(degenerate) 프라이머가 사용된다. 일부 구현예에서, scTv 라이브러리는 증폭된 생성물이 클로닝되거나 조립되어 링커에 의해 분리될 나이브(naive) Vα 및 Vβ 라이브러리로부터 조립될 수 있다. 대상체와 세포의 출처에 따라, 라이브러리는 HLA 대립유전자 특이적일 수 있다. 대안적으로, 일부 구현예에서, TCR 라이브러리는 모 또는 스캐폴드 TCR 분자의 돌연변이 발생 또는 다양화에 의해 생성될 수 있다. 일부 측면에서, TCR은 예를 들어, α 또는 β 사슬의 예컨대 돌연변이 유발에 의해 유도된 진화에 노출된다. 일부 측면에서, TCR의 CDR 내 특정 잔기가 변경된다. 일부 구현예에서, 선택된 TCR은 친화도 성숙에 의해 변형될 수 있다. 일부 구현예에서, 항원 특이적 T 세포는 예컨대, 스크리닝에 의해 선택되어 펩티드에 대한 CTL 활성을 평가할 수 있다. 일부 측면에서, 예를 들어 항원 특이적 T 세포에 존재하는 TCR은 예컨대 결합 활성, 예를 들어 항원에 대한 특정 친화도 또는 친화력에 의해 선택될 수 있다.
일부 구현예에서, 유전자 조작된 항원 수용체는 재조합 T 세포 수용체(TCR) 및/또는 자연적으로 발생하는 T 세포로부터 클로닝된 TCR을 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 항원(예를 들어, 암 항원)에 대한 높은 친화도 T 세포 클론이 확인되고, 환자로부터 단리되고, 세포 내로 도입된다. 일부 구현예에서, 표적 항원에 대한 TCR 클론이 인간 면역 계통 유전자(예를 들어, 인간 백혈구 항원 시스템 즉 HLA)로 조작된 전이 유전자 마우스에서 생성되었다. 예를 들어, 종양 항원(예를 들어, Parkhurst et al. (2009) Clin Cancer Res. 15:169-180 및 Cohen et al. (2005) J Immunol. 175:5799-5808 참조)을 참조한다. 일부 구현예에서, 표적 항원에 대한 TCR을 단리하기 위해 파지 디스플레이가 사용된다(예를 들어, Varela-Rohena et al. (2008) Nat Med. 14:1390-1395 및 Li (2005) Nat Biotechnol. 23:349-354 참조).
일부 구현예에서, TCR 또는 이의 항원 결합 부분은 변형되었거나 조작된 것이다. 일부 구현예에서, 예컨대 특정 MHC 펩티드 복합체에 대한 보다 높은 친화도을 갖는 변경된 특성을 가진 TCR을 생성하기 위해 유도 진화 방법이 사용된다. 일부 구현예에서, 유도 진화는 효모 디스플레이(Holler et al. (2003) Nat Immunol, 4, 55-62; Holler et al. (2000) Proc Natl Acad Sci U S A, 97, 5387-92), 파지 디스플레이(Li et al. (2005) Nat Biotechnol, 23, 349-54) 또는 T 세포 디스플레이(Chervin et al. (2008) J Immunol Methods, 339, 175-84)를 포함하되 이에 국한되지 않는 디스플레이 방법에 의해 달성된다. 일부 구현예에서, 디스플레이 접근 방식은 공지된 모 또는 기준 TCR을 조작 또는 변형하는 것을 포함한다. 예를 들어, 일부 경우에, 하나 이상의 CDR 잔기에서 돌연변이된 돌연변이를 일으킨 TCR을 생성하기 위한 템플릿으로 야생형 TCR이 사용될 수 있고, 원하는 변경된 특성, 예컨대 원하는 표적 항원에 대한 보다 높은 친화도를 갖는 돌연변이가 선택된다.
일부 구현예에서, 관심 TCR의 제조 또는 생성에 사용하기 위한 표적 폴리펩티드의 펩티드는 공지되어 있거나 당업자에 의해 용이하게 확인될 수 있다. 일부 구현예에서, TCR 또는 항원 결합 부분을 생성하는데 사용하기에 적합한 펩티드는 하기 기재된 표적 폴리펩티드와 같은 관심 표적 폴리펩티드에서 HLA 제한 모티프의 존재에 기초하여 결정될 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드는 이용 가능한 컴퓨터 예측 모델을 사용하여 식별된다. 일부 구현예에서, MHC 클래스 I 결합 부위를 예측하기 위해, 상기 모델은 ProPred1(Singh and Raghava (2001) Bioinformatics 17(12):1236-1237) 및 SYFPEITHI(Schuler et al. (2007) Immunoinformatics Methods in Molecular Biology, 409(1): 75-93 2007 참조)를 포함하되 이에 국한되지 않는다. 일부 구현예에서, MHC 제한 에피토프는 HLA-A0201이며, 이는 모든 백인의 약 39-46%에서 발현되고 따라서, TCR 또는 다른 MHC 펩티드 결합 분자를 제조하는데 사용하기 위한 MHC 항원의 적합한 선택을 나타낸다.
컴퓨터 예측 모델을 사용한 프로테아좀 및 면역 프로테아좀에 대한 HLA-A0201 결합 모티프 및 절단 부위가 공지되어 있다. MHC 클래스 I 결합 부위를 예측하기 위해, 상기 모델은 ProPred1(문헌[Singh and Raghava, ProPred: prediction of HLA-DR binding sites. BIOINFORMATICS 17(12):1236-1237 2001]에 보다 상세하게 기재됨) 및 SYFPEITHI(Schuler et al. SYFPEITHI, Database for Searching and T-Cell Epitope Prediction. in Immunoinformatics Methods in Molecular Biology, vol 409(1): 75-93 2007 참조)을 포함하나 이에 국한되지 않는다.
일부 구현예에서, TCR 또는 이의 항원 결합 부분은 결합 특성과 같은 하나 이상의 특질이 변경된 재조합으로 생산된 천연 단백질 또는 이의 돌연변이 형태일 수 있다. 일부 구현예에서, TCR은 인간, 마우스, 래트 또는 기타 포유동물과 같은 다양한 동물 종 중 하나에서 유래될 수 있다. TCR은 세포 결합 또는 가용성 형태일 수 있다. 일부 구현예에서, 제공된 방법의 목적을 위해, TCR은 세포의 표면 상에 발현된 세포 결합 형태이다.
일부 구현예에서, TCR은 전장 TCR이다. 일부 구현예에서, TCR은 항원 결합 부분이다. 일부 구현예에서, TCR은 2량체 TCR(dimeric TCR, dTCR)이다. 일부 구현예에서, TCR은 단일 사슬 TCR(single-chain TCR, sc-TCR)이다. 일부 구현예에서, dTCR 또는 scTCR은 문헌[국제 출원 WO 03/020763, WO 04/033685, WO2011/044186]에 기재된 바와 같은 구조를 가지고 있다.
일부 구현예에서, TCR은 막관통 서열에 해당하는 서열을 함유한다. 일부 구현예에서, TCR은 세포질 서열에 해당하는 서열을 함유한다. 일부 구현예에서, TCR은 CD3과 TCR 복합체를 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, dTCR 또는 scTCR을 포함하는 임의의 TCR은 T 세포 표면 상에 활성 TCR을 생성하는 신호 전달 도메인에 연결될 수 있다. 일부 구현예에서, TCR은 세포의 표면 상에 발현된다.
일부 구현예에서 dTCR은 TCR α 사슬 가변 영역 서열에 해당하는 서열이 TCR α 사슬 불변 영역 세포 외 서열에 해당하는 서열의 N 말단에 융합된 제1 폴리펩티드 및 TCR β 사슬 가변 영역 서열에 해당하는 서열이 TCR β 사슬 불변 영역 세포 외 서열에 해당하는 N 말단 서열에 융합된 제2 폴리펩티드를 함유하고, 제1 및 제2 폴리펩티드는 이황화물 결합에 의해 연결되어 있다. 일부 구현예에서, 결합은 천연 이량체 αβ TCR에 존재하는 천연 사슬 간 이황화물 결합에 해당할 수 있다. 일부 구현예에서, 사슬 간 이황화물 결합은 천연 TCR에 존재하지 않는다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 하나 이상의 시스테인이 dTCR 폴리펩티드 쌍의 불변 영역 세포 외 서열에 통합될 수 있다. 일부 경우에, 천연 및 비천연 이황화물 결합이 모두 바람직할 수 있다. 일부 구현예에서, TCR은 막에 고정하는 막관통 서열을 함유한다.
일부 구현예에서, dTCR은 가변 α 도메인, 불변 α 도메인 및 불변 α 도메인의 C-말단에 부착된 제1 2량체화 모티프를 함유하는 TCR α 사슬 및 가변 β 도메인, 불변 β 도메인 및 불변 β 도메인의 C-말단에 부착된 제1 2량체화 모티프를 포함하는 TCR β 사슬을 함유하고, 여기서 제1 및 제2 2량체화 모티프는 용이하게 상호 작용하여 TCR α 사슬과 TCR β 사슬을 서로 연결하는 제1 2량체화 모티프에 있는 아미노산과 제2 2량체화 모티프에 있는 아미노산 사이에서 공유 결합을 형성한다.
일부 구현예에서, TCR은 scTCR이다. 전형적으로, scTCR은 공지된 방법을 사용하여 생성될 수 있다(예를 들어, Soo Hoo, W. F. et al. PNAS (USA) 89, 4759 (1992); W
Figure pct00003
lfing, C. and Pl
Figure pct00004
ckthun, A., J. Mol. Biol. 242, 655 (1994); Kurucz, I. et al. PNAS (USA) 90 3830 (1993); 국제 출원 공개 번호 WO 96/13593, WO 96/18105, WO99/60120, WO99/18129, WO 03/020763, WO2011/044186; 및 Schlueter, C. J. et al. J. Mol. Biol. 256, 859 (1996) 참조). 일부 구현예에서, scTCR은 도입된 비천연 사슬 간 이황화물 결합을 함유하여 TCR 사슬의 회합을 용이하게한다(예를 들어, 국제 출원 공개 번호 WO 03/020763 참조). 일부 구현예에서, scTCR은 이의 C-말단에 융합된 이종 루신 지퍼(leucine zipper)가 사슬 회합을 촉진하는 비이황화물 연결 절단형 TCR이다(예를 들어, 국제 출원 공개 번호 WO99/60120 참조). 일부 구현예에서, scTCR은 펩티드 링커를 통해 TCRβ 가변 도메인에 공유적으로 연결된 TCRα 가변 도메인을 함유한다(예를 들어, 국제 출원 공개 번호 WO99/18129 참조).
일부 구현예에서, scTCR은 TCR α 사슬 가변 영역에 해당하는 아미노산 서열로 구성된 제1 세그먼트, TCR β 사슬 불변 도메인 세포 외 서열에 해당하는 아미노산 서열의 N 말단에 융합된 TCR β 사슬 가변 영역 서열에 해당하는 아미노산 서열로 구성된 제2 세그먼트 및 제2 세그먼트의 N 말단에 제1 세그먼트의 C 말단을 연결하는 링커 서열을 함유한다.
일부 구현예에서, scTCR은 α 사슬 세포 외 불변 도메인 서열의 N 말단에 융합된 α 사슬 가변 영역 서열로 구성된 제1 세그먼트 및 β 사슬 세포 외 불변 서열의 N 말단에 융합된 β 사슬 가변 영역 서열로 구성된 제2 세그먼트 및 막관통 서열 및 선택적으로 제2 세그먼트의 N 말단에 제1 세그먼트의 C 말단을 연결하는 링커 서열을 함유한다.
일부 구현예에서, scTCR은 β 사슬 세포 외 불변 도메인 서열의 N 말단에 융합된 TCRβ 사슬 가변 영역 서열로 구성된 제1 세그먼트 및 α 사슬 세포 외 불변 서열의 N 말단에 융합된 α 사슬 가변 영역 서열로 구성된 제2 세그먼트 및 막관통 서열 및 선택적으로 제2 세그먼트의 N 말단에 제1 세그먼트의 C 말단을 연결하는 링커 서열을 함유한다.
일부 구현예에서, 제1 및 제2 TCR 세그먼트를 연결하는 scTCR의 링커는 TCR 결합 특이성을 유지하면서 단일 폴리펩티드 가닥을 형성할 수 있는 임의의 링커일 수 있다. 일부 구현예에서, 링커 서열은 예를 들어, 화학식 -P-AA-P-를 가질 수 있고, 여기서 P는 프롤린이고 AA는 아미노산 서열을 나타내며 여기서 아미노산은 글리신과 세린이다. 일부 구현예에서, 제1 및 제2 세그먼트는 이의 가변 영역 서열이 상기 결합을 위해 배향되도록 쌍을 이룬다. 따라서, 일부 경우에, 링커는 제1 세그먼트의 C 말단과 제2 세그먼트의 N 말단(또는 그 반대) 사이의 거리에 걸친 충분한 길이를 가지나 표적 리간드에 대한 scTCR의 결합을 차단하거나 감소 시킬 정도로 너무 길지 않다. 일부 구현예에서, 링커는 (약) 10 내지 45개의 아미노산, 예컨대 10 내지 30개의 아미노산 또는 26 내지 41개의 아미노산 잔기, 예를 들어 29, 30, 31 또는 32개의 아미노산을 함유할 수 있다. 일부 구현예에서, 링커는 화학식 -PGGG-(SGGGG)5-P-을 갖고, 여기서 P는 프롤린이고, G는 글리신이고 S는 세린이다(서열 번호: 22). 일부 구현예에서, 링커는 서열 GSADDAKKDAAKKDGKS(서열 번호: 23)을 갖는다.
일부 구현예에서, scTCR은 β 사슬의 불변 도메인의 면역글로불린 영역의 잔기에 α 사슬의 불변 도메인의 면역글로불린 영역의 잔기를 연결하는 공유 이황화물 결합을 함유한다. 일부 구현예에서, 천연 TCR에서 사슬 간 이황화물 결합은 존재하지 않는다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 하나 이상의 시스테인이 scTCR 폴리펩티드의 제1 및 제2 세그먼트의 불변 영역 세포 외 서열로 통합될 수 있다. 일부 경우에, 천연 및 비천연 이황화물 결합이 모두 바람직할 수 있다.
도입된 사슬 간 이황화물 결합을 함유하는 dTCR 또는 scTCR의 일부 구현예에서, 천연 이황화물 결합은 존재하지 않는다. 일부 구현예에서, 천연 사슬 간 이황화물 결합을 형성하는 천연 시스테인 중 하나 이상이 다른 잔기, 예컨대 세린 또는 알라닌으로 치환된다. 일부 구현예에서, 도입된 이황화물 결합은 제1 및 제2 세그먼트에 있는 비시스테인 잔기를 시스테인으로 돌연변이시킴으로써 형성될 수 있다. TCR의 예시적인 비천연 이황화물 결합은 문헌[국제 출원 공개 번호 WO2006/000830]에 기재되어 있다.
일부 구현예에서, TCR 또는 이의 항원 결합 단편은 표적 항원에 대해 (약) 10-5 내지 10-12 M 및 그 안의 모든 개별 수치 및 범위의 평형 결합 상수를 갖는 친화도를 나타낸다. 일부 구현예에서, 표적 항원은 MHC 펩티드 복합체 또는 리간드이다.
일부 구현예에서, α 및 β 사슬과 같은 TCR을 암호화하는 핵산 또는 핵산들은 PCR, 클로닝 또는 기타 적합한 수단에 의해 증폭될 수 있고 적합한 발현 벡터 또는 벡터들로 클로닝될 수 있다. 발현 벡터는 임의의 적합한 재조합 발현 벡터일 수 있으며, 임의의 적합한 숙주를 형질 전환하거나 형질 감염시키는데 사용될 수 있다. 적합한 벡터는 플라스미드 및 바이러스와 같이 번식 및 증폭 또는 발현 또는 둘 다를 위해 설계된 것을 포함한다.
일부 구현예에서, 벡터는 pUC 시리즈(Fermentas Life Sciences), pBluescript 시리즈(Stratagene, LaJolla, Calif.), pET 시리즈(Novagen, Madison, Wis.), pGEX 시리즈(Pharmacia Biotech, Uppsala, Sweden) 또는 pEX 시리즈(Clontech, Palo Alto, Calif.)의 벡터일 수 있다. 일부 경우에, λG10, λGT11, λZapII(Stratagene), λEMBL4 및 λNM1149와 같은 박테리오파지 벡터도 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 식물 발현 벡터가 사용될 수 있고, pBI01, pBI101.2, pBI101.3, pBI121 및 pBIN19(Clontech)가 포함될 수 있다. 일부 구현예에서, 동물 발현 벡터에는 pEUK-Cl, pMAM 및 pMAMneo(Clontech)가 포함된다. 일부 구현예에서, 레트로바이러스 벡터와 같은 바이러스 벡터가 사용된다.
일부 구현예에서, 재조합 발현 벡터는 표준 재조합 DNA 기술을 사용하여 제조될 수 있다. 일부 구현예에서 벡터는 조절 서열, 예컨대 벡터가 도입될 숙주 유형(예를 들어, 박테리아, 곰팡이, 식물 또는 동물)에 특이적인 전사 및 번역 개시 및 종결 코돈을, 벡터가 DNA 또는 RNA 기반인지 고려하여 적절한 것으로 함유할 수 있다. 일부 구현예에서, 벡터는 TCR 또는 항원 결합 부분(또는 다른 MHC 펩티드 결합 분자)를 암호화하는 뉴클레오티드 서열에 작동 가능하게 연결된 비천연 프로모터를 함유할 수 있다. 일부 구현예에서, 프로모터는 비바이러스 프로모터 또는 바이러스 프로모터, 예컨대 시토메갈로바이러스(cytomegalovirus, CMV) 프로모터, SV40 프로모터, RSV 프로모터 및 뮤린 줄기 세포 바이러스의 긴 말단 반복에서 발견되는 프로모터일 수 있다. 기타 공지된 프로모터도 고려된다.
일부 구현예에서, T 세포 클론이 수득된 후, TCR 알파 및 베타 사슬이 단리되고 유전자 발현 벡터로 클로닝된다. 일부 구현예에서, TCR 알파 및 베타 유전자는 두 사슬이 공발현되도록 피코르나바이러스 2A 리보솜 건너뛰기 펩티드를 통해 연결된다. 일부 구현예에서, TCR의 유전자 전달은 레트로바이러스 또는 렌티바이러스 벡터를 통해 또는 트랜스포손을 통해 달성된다(예를 들어, Baum et al. (2006) Molecular Therapy: The Journal of the American Society of Gene Therapy. 13:1050-1063; Frecha et al. (2010) Molecular Therapy: The Journal of the American Society of Gene Therapy. 18:1748-1757; 및 Hackett et al. (2010) Molecular Therapy: The Journal of the American Society of Gene Therapy. 18:674-683 참조).
일부 구현예에서, TCR을 암호화하는 벡터를 생성하기 위해, α 및 β 사슬은 관심 TCR을 발현하는 T 세포 클론으로부터 단리된 총 cDNA로부터 PCR 증폭되고 발현 벡터로 클로닝된다. 일부 구현예에서, α 및 β 사슬은 동일한 벡터로 클로닝된다. 일부 구현예에서, α 및 β 사슬은 상이한 벡터로 클로닝된다. 일부 구현예에서, 생성된 α 및 β 사슬은 레트로바이러스, 예를 들어 렌티바이러스 벡터로 통합된다.
3. 다중 표적화
일부 구현예에서, 세포 및 방법은 세포 상에 2개 이상의 유전자 조작 수용체의 발현과 같은 다중 표적화 전략을 포함하며, 각각은 상이한 항원 중 동일한 것을 인식하고 전형적으로 각각은 상이한 세포 내 신호 전달 성분을 포함한다. 상기 다중 표적화 전략은 예를 들어, 문헌[국제 특허 출원 공개 번호 WO 2014055668 A1(예를 들어, 표적 외, 예를 들어 정상 세포 상에 개별적으로 존재하나 치료될 질병 또는 병태의 세포 상에만 함께 존재하는 2개의 상이한 항원을 표적화하는 활성화 및 공자극 CAR의 조합을 기재) 및 Fedorov et al., Sci. Transl. Medicine, 5(215) (December, 2013)(활성화 CAR이 정상 또는 비질병 세포 및 치료될 질병 또는 병태의 세포 둘 다에서 발현된 하나의 항원에 결합하고, 억제성 CAR이 치료가 바람직하지 않은 세포 또는 정상 세포 상에서만 발현되는 다른 항원에 결합하는 것과 같은 활성화 및 억제성 CAR을 발현하는 세포를 기재)]에 기재되어 있다.
예를 들어, 일부 구현예에서, 세포는 일반적으로 제1 수용체에 의해 인식되는 항원, 예를 들어 제1 항원에 특이적인 결합시 세포에 대한 활성화 또는 자극 신호를 유도할 수 있는 제1 유전자 조작 항원 수용체(예를 들어, CAR 또는 TCR)를 발현하는 수용체를 포함한다. 일부 구현예에서, 세포는 일반적으로 제2 수용체에 의해 인식되는 제2 항원에 특이적인 결합 시 면역 세포에 대해 공자극 신호를 유도할 수 있는 제2 유전자 조작 항원 수용체(예를 들어, CAR 또는 TCR), 예를 들어, 키메라 공자극 수용체를 더 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 항원 및 제2 항원은 동일하다. 일부 구현예에서, 제1 항원 및 제2 항원은 상이하다.
일부 구현예에서, 제1 및/또는 제2 유전자 조작 항원 수용체(예를 들어, CAR 또는 TCR)은 세포에 대한 활성화 또는 자극 신호를 유도할 수 있다. 일부 구현예에서, 수용체는 ITAM 또는 ITAM 유사 모티브를 함유하는 세포내 신호 전달 성분을 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 수용체에 의해 유도된 활성화는 면역 반응의 개시, 예컨대 ITAM 인산화 및/또는 ITAM 매개 신호 전달 캐스케이드의 개시, 면역학적 시냅스의 형성 및/또는 결합된 수용체(예를 들어, CD4 또는 CD8 등) 근처 분자의 클러스터링, 하나 이상의 전사 인자, 예컨대 NF-κB 및/또는 AP-1의 활성화 및/또는 사이토카인과 같은 인자의 유전자 발현, 증식 및/또는 생존의 유도를 초래하는 세포에서의 신호 전달 또는 단백질 발현의 변화를 수반한다.
일부 구현예에서, 제1 및/또는 제2 수용체는 CD28, CD137(4-1BB), OX40 및/또는 ICOS와 같은 공자극 수용체의 세포 내 신호 전달 도메인을 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 및 제2 수용체는 상이한 공자극 수용체의 세포 내 신호 전달 도메인을 포함한다. 일 구현예에서, 제1 수용체는 CD28 공자극 신호 전달 영역을 함유하고 제2 수용체는 4-1BB 공자극 신호 전달 영역을 함유(또는 그 반대)한다.
일부 구현예에서, 제1 및/또는 제2 수용체는 ITAM 또는 ITAM 유사 모티브를 함유하는 세포 내 신호 전달 도메인 및 공자극 수용체의 세포 내 신호 전달 도메인 둘 다를 포함한다.
일부 구현예에서, 제1 수용체는 ITAM 또는 ITAM 유사 모티브를 함유하는 세포 내 신호 전달 도메인을 함유하고 제2 수용체는 공자극 수용체의 세포 내 신호 전달 도메인을 함유한다. 동일한 세포에서 유도된 활성화 또는 자극 신호와 조합한 공자극 신호는 면역 반응, 예컨대 강력하고 지속적인 면역 반응, 예컨대 유전자 발현의 증가, 사이토카인 및 기타 인자의 분비 및 T 세포 매개 이펙터 기능, 예컨대 세포 사멸을 초래하는 것이다.
일부 구현예에서, 제 1 수용체 단독의 결찰 또는 제 2 수용체 단독의 결찰은 모두 강력한 면역 반응을 유도하지 못한다. 일부 측면에서, 하나의 수용체만 결찰되는 경우에, 세포는 항원에 내성화되거나 반응하지 않게 되거나 억제되고/거나 증식 또는 인자 분비 또는 이펙터 기능을 수행하도록 유도되지 않는다. 그러나, 일부 상기 구현예에서, 다수의 수용체가 결찰된 경우 예컨대 제1 및 제2 항원을 발현하는 세포와의 조우 시, 예를 들어, 하나 이상의 사이토카인 분비, 증식, 지속성 및/또는 표적 세포의 세포 독성 사멸과 같은 면역 이펙터 기능의 수행에 의해 나타난 바와 같이 완전한 면역 활성화 또는 자극과 같은 원하는 반응이 달성된다.
일부 구현예에서, 2개의 수용체는 각각 세포에 활성화 및 억제 신호를 유도하여, 항원에 수용체 중 하나에 의한 결합은 세포를 활성화하거나 반응을 유도하지만, 항원에 제2 억제 수용체에 의한 결합은 반응을 억제하거나 약화시키는 신호를 유도한다. 활성화 CAR 및 억제성 CAR 즉 iCAR을 조합하는 예가 있다. 예를 들어, 활성화 CAR이 질병 또는 병태에서 발현되나 정상 세포에서도 발현되는 항원에 결합하고, 억제성 수용체는 정상 세포에서 발현되나 질병 또는 병태의 세포에서는 발현되지 않는 별개의 항원에 결합하는 것과 같은 전략이 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 다중 표적화 전략은 특정 질병 또는 병태와 관련된 항원이 비질환 세포에서 발현되고/거나 조작된 세포 자체에서 일시적으로(예를 들어, 유전자 조작과 관련된 자극시) 또는 영구적으로 발현되는 경우에 이용된다. 상기 경우에, 2개의 별도의 및 개별적으로 특이적인 항원 수용체의 결찰을 요구함으로써, 특이성, 선택성 및/또는 효능이 향상될 수 있다.
일부 구현예에서, 다수의 항원, 예를 들어, 제1 및 제2 항원이 암세포 상과 같은 표적화될 세포, 조직 또는 질병 또는 병태에서 발현된다. 일부 측면에서, 세포, 조직, 질병 또는 병태는 다발성 골수종 또는 다발성 골수종 세포이다. 일부 구현예에서, 다수의 항원 중 하나 이상은 일반적으로 정상 또는 비질병 세포 또는 조직 및/또는 조작된 세포 자체와 같은 세포 요법으로 표적화하는 것이 바람직하지 않은 세포 상에서도 발현된다. 상기 구현예에서, 세포의 반응을 달성하기 위해 다중 수용체의 결찰을 요구함으로써, 특이성 및/또는 효능이 달성된다.
B. 유전자 조작을 위한 방법, 벡터 및 핵산
일부 구현예에서, 세포, 예를 들어, T 세포는 재조합 수용체를 발현하도록 유전자 조작된다. 일부 구현예에서, 조작은 재조합 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 도입함으로써 수행된다. 재조합 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오티드 및 상기 핵산 및/또는 폴리뉴클레오티드를 함유하는 벡터 또는 작제물이 또한 제공된다.
일부 경우에, 재조합 수용체를 암호화하는 핵산 서열은 신호 펩티드를 암호화하는 신호 서열을 함유한다. 일부 측면에서, 신호 서열은 천연 폴리펩티드로부터 유래된 신호 펩티드를 암호화할 수 있다. 다른 측면에서, 신호 서열은 서열 번호: 24에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화되고 서열 번호: 25에 제시된 GMCSFR 알파 사슬의 예시적인 신호 펩티드와 같은 이종 또는 비천연 신호 펩티드를 암호화할 수 있다. 일부 경우에, 재조합 수용체, 예를 들어, 키메라 항원 수용체(CAR)를 암호화하는 핵산 서열은 신호 펩티드를 암호화하는 신호 서열을 함유한다. 신호 펩티드의 비제한적인 예시적인 예에는 예를 들어, 서열 번호: 24에 제시된 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화되고 서열 번호: 25에 제시된 GMCSFR 알파 사슬 신호 펩티드 또는 서열 번호: 26에 제시된 CD8 알파 신호 펩티드가 포함된다.
일부 구현예에서, 재조합 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오티드는 재조합 수용체의 발현을 제어하도록 작동 가능하게 연결된 하나 이상의 프로모터를 함유한다. 일부 예에서, 폴리뉴클레오티드는 재조합 수용체의 발현을 제어하도록 작동 가능하게 연결된 2개, 3개 이상의 프로모터를 함유한다.
핵산 분자가 두 개 이상의 상이한 폴리펩티드 사슬, 예를 들어, 재조합 수용체 및 마커를 암호화하는 특정 경우에, 각각의 폴리펩티드 사슬은 별도의 핵산 분자에 의해 암호화될 수 있다. 예를 들어, 2개의 별도의 핵산이 제공되고, 각각은 세포 내 발현을 위해 세포로 개별적으로 전달되거나 도입될 수 있다. 일부 구현예에서, 재조합 수용체를 암호화하는 핵산 및 마커를 암호화하는 핵산은 동일한 프로모터에 작동 가능하게 연결되고 선택적으로 내부 리보솜 진입 부위(internal ribosome entry site, IRES) 또는 자가 절단 펩티드 또는 선택적으로 T2A, P2A, E2A 또는 F2A인 리보솜 건너뛰기를 야기하는 펩티드를 암호화하는 핵산에 의해 분리되어 있다. 일부 구현예에서, 재조합 수용체를 암호화하는 핵산 및 마커를 암호화하는 핵산은 2개의 상이한 프로모터에 작동 가능하게 연결된다. 일부 구현예에서, 재조합 수용체를 암호화하는 핵산 및 마커를 암호화하는 핵산은 세포의 게놈 내의 상이한 위치에 존재하거나 이에 삽입된다. 일부 구현예에서, 재조합 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오티드는 예컨대 레트로바이러스 형질 도입, 형질 감염 또는 형질 전환에 의해 배양된 세포를 함유하는 조성물로 도입된다.
일부 구현예에서, 폴리뉴클레오티드가 제1 및 제2 핵산 서열을 함유하는 것과 같이 각각의 상이한 폴리펩티드 사슬을 암호화하는 코딩 서열은 동일하거나 상이할 수 있는 프로모터에 작동 가능하게 연결될 수 있다. 일부 구현예에서, 핵산 분자는 2개 이상의 상이한 폴리펩티드 사슬의 발현을 구동하는 프로모터를 함유할 수 있다. 일부 구현예에서, 상기 핵산 분자는 다중시스트론(이중시스트론 또는 삼중시스트론, 예를 들어, 미국 특허 번호 6,060,273 참조)일 수 있다. 일부 구현예에서, 전사 단위는 단일 프로모터로부터의 메시지에 의해 유전자 산물(예를 들어 마커 암호화 및 재조합 수용체 암호화)의 공발현을 허용하는 IRES(internal ribosome entry site, 내부 리보솜 진입 부위)를 함유하는 이중시스트론 단위로 조작될 수 있다. 대안적으로, 일부 경우에, 단일 프로모터는 단일 오픈 리딩 프레임(open reading frame, ORF)에 자가-절단 펩티드(예를 들어, 2A 서열) 또는 프로테아제 인식 부위(예를 들어, 푸린)를 암호화하는 서열에 의해 서로 분리된, 2 개 또는 3 개의 유전자(예를 들어, 마커 암호화 및 재조합 수용체 암호화)를 함유하는 RNA의 발현을 지시할 수 있다. 따라서, ORF는 번역 동안(2A의 경우) 또는 번역 후에 개별 단백질로 프로세싱되는 단일 폴리펩티드를 암호화한다. 일부 경우에, T2A와 같은 펩티드는 리보솜이 2A 요소의 C-말단에서 펩티드 결합의 합성을 건너뛰도록(리보솜 건너뛰기) 유발하여, 2A 서열의 말단과 다음 펩티드 하류 사이의 분리로 이어질 수 있다(예를 들어, de Felipe, Genetic Vaccines and Ther. 2:13 (2004) 및 de Felipe et al. Traffic 5:616-626 (2004) 참조). 다양한 2A 요소가 공지되어 있다. 본 명세서에 개시된 방법 및 시스템에 사용될 수 있는 2A 서열의 예에는, 이에 제한되는 것은 아니나, 문헌[미국 특허 공개 번호 20070116690]에 개시된 바와 같은 구제역 바이러스(F2A, 예를 들어, 서열번호: 21), 말 비염 A 바이러스(E2A, 예를 들어, 서열번호: 20), 토세아 아시그나 바이러스(T2A, 예를 들어, 서열번호: 6 또는 17) 및 돼지 테스코 바이러스-1(P2A, 예를 들어, 서열번호: 18 또는 19)이 있다.
본 명세서에 기재된 재조합 수용체 중 어느 하나는 재조합 수용체를 암호화하는 하나 이상의 핵산 서열을 임의의 조합 또는 배열로 함유하는 폴리뉴클레오티드에 의해 암호화될 수 있다. 예를 들어, 1개, 2개, 3개 이상의 폴리뉴클레오티드는 1개, 2개, 3개 이상의 상이한 폴리펩티드, 예를 들어, 재조합 수용체를 암호화할 수 있다. 일부 구현예에서, 하나의 벡터 또는 작제물은 마커를 암호화하는 핵산 서열을 함유하고, 별도의 벡터 또는 작제물은 재조합 수용체, 예를 들어, CAR을 암호화하는 핵산 서열을 함유한다. 일부 구현예에서, 재조합 수용체를 암호화하는 핵산 및 마커를 암호화하는 핵산은 2개의 상이한 프로모터에 작동 가능하게 연결된다. 일부 구현예에서, 재조합 수용체를 암호화하는 핵산은 마커를 암호화하는 핵산의 하류에 존재한다.
일부 구현예에서, 벡터 백본은 하나 이상의 마커(들)를 암호화하는 핵산 서열을 함유한다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 마커(들)는 형질 도입 마커, 대리 마커 및/또는 선택 마커이다.
일부 구현예에서, 마커는 형질 도입 마커 또는 대리 마커이다. 형질 도입 마커 또는 대리 마커는 폴리뉴클레오티드, 예를 들어, 재조합 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 도입된 세포를 검출하는데 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 형질 도입 마커는 세포의 변형을 나타내거나 확인할 수 있다. 일부 구현예에서, 대리 마커는 재조합 수용체, 예를 들어 CAR과 함께 세포 표면 상에 공발현되도록 제조된 단백질이다. 특정 구현예에서, 상기 대리 마커는 거의 또는 전혀 활성을 갖지 않도록 변형된 표면 단백질이다. 특정 구현예에서, 대리 마커는 재조합 수용체를 암호화하는 동일한 폴리뉴클레오티드 상에 암호화된다. 일부 구현예에서, 재조합 수용체를 암호화하는 핵산 서열은 마커를 암호화하는 핵산 서열에 작동 가능하게 연결되며, 선택적으로 내부 리보솜 진입 부위(IRES) 또는 자가 절단 펩티드 또는 2A 서열, 예컨대 T2A, P2A, E2A 또는 F2A와 같은 리보솜 건너뛰기를 야기하는 펩티드를 암호화하는 핵산에 의해 분리되어 있다. 외인성 마커 유전자는 일부 경우에 세포의 검출 또는 선택을 허용하도록 조작된 세포와 관련하여 사용될 수 있고, 일부 경우에 세포의 자살을 촉진하도록 조작된 세포와 관련하여 또한 사용될 수 있다.
예시적인 대리 마커는 세포 표면 폴리펩티드의 절단 형태, 예컨대 비기능적이며 신호 또는 일반적으로 전장 형태의 세포 표면 폴리펩티드에 의해 전달되는 신호를 전달할 수 없거나 전달하지 않고/거나 내재화될 수 없거나 내재화되지 않는 절단 형태를 포함할 수 있다. 예시적인 절단형 세포 표면 폴리펩티드에는 성장 인자 또는 다른 수용체의 절단 형태, 예컨대 절단된 인간 표피 성장 인자 수용체 2(truncated human epidermal growth factor receptor 2, tHER2), 절단된 표피 성장 인자 수용체(tEGFR, 서열 번호: 7 또는 16에 제시된 예시적인 tEGFR 서열) 또는 전립선 특이적 막 항원(prostate-specific membrane antigen, PSMA) 또는 이의 변형된 형태가 포함된다. tEGFR은 항체 세툭시맙(Erbitux®) 또는 다른 치료용 항-EGFR 항체 또는 결합 분자에 의해 인식되는 에피토프를 함유할 수 있으며, 이는 tEGFR 작제물 및 암호화된 외인성 단백질로 조작된 세포를 확인 또는 선택하기 위해 및/또는 암호화된 외인성 단백질을 발현하는 세포를 제거 또는 분리하기 위해 사용될 수 있다. 문헌[미국 특허 번호 8,802,374 및 Liu et al., Nature Biotech. 2016 April; 34(4): 430-434]을 참조한다. 일부 측면에서, 마커, 예를 들어 대리 마커에는 CD34의 전부 또는 일부(예를 들어, 절단 형태), NGFR, CD19 또는 절단된 CD19, 예를 들어 절단된 비-인간 CD19 또는 표피 성장 인자 수용체(예를 들어, tEGFR)가 포함된다.
일부 구현예에서, 마커를 암호화하는 핵산은 링커 서열, 예컨대 절단 가능한 링커 서열, 예를 들어 T2A를 암호화하는 폴리뉴클레오티드에 작동 가능하게 연결된다. 예를 들어, 마커 및 선택적으로 링커 서열은 문헌[국제 출원 공개 번호 WO2014031687]에 개시된 바와 같은 어느 하나일 수 있다. 예를 들어, 마커는 링커 서열, 예컨대 T2A 절단 가능한 링커 서열에 선택적으로 연결된 절단형 EGFR(tEGFR)일 수 있다. 절단형 EGFR(예를 들어, tEGFR)에 대한 예시적인 폴리펩티드는 서열 번호: 7 또는 16에 제시된 아미노산 서열 또는 서열 번호: 7 또는 16에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 나타내는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 구현예에서, 마커는 형광 단백질, 예컨대 그린 형광 단백질(green fluorescent protein, GFP), 강화된 그린 형광 단백질(enhanced green fluorescent protein, EGFP), 예컨대 슈퍼-폴드 GFP(super-fold GFP, sfGFP), 레드 형광 단백질(red fluorescent protein, RFP), 예컨대 tdTomato, mCherry, mStrawberry, AsRed2, DsRed 또는 DsRed2, 시안 형광 단백질(cyan fluorescent protein, CFP), 블루 그린 형광 단백질(blue green fluorescent protein, BFP), 강화된 블루 형광 단백질(enhanced blue fluorescent protein, EBFP) 및 옐로우 형광 단백질(yellow fluorescent protein, YFP) 및 형광 단백질의 종 변이체, 단량체 변이체 및 코돈-최적화된 및/또는 강화된 변이체를 포함한 이의 변이체이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 마커는 효소, 예컨대 루시퍼라제, 대장균 유래 lacZ 유전자, 알칼리 포스파타제, 분비 배아 알칼리 포스파타제(secreted embryonic alkaline phosphatase, SEAP), 클로람페니콜 아세틸 트랜스퍼라제(chloramphenicol acetyl transferase, CAT)이거나 이를 포함한다. 예시적인 발광 리포터 유전자에는 루시퍼라제(luciferase, luc), β-갈락토시다제, 클로람페니콜 아세틸트랜스퍼라제(CAT), β-글루쿠로니다제(β-glucuronidase, GUS) 또는 이의 변이체가 포함된다.
일부 구현예에서, 마커는 선택 마커이다. 일부 구현예에서, 선택 마커는 외인성 제제 또는 약물에 대한 내성을 부여하는 폴리펩티드이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 선택 마커는 항생제 내성 유전자이다. 일부 구현예에서, 선택 마커는 포유류 세포에 대한 항생제 내성을 부여하는 항생제 내성 유전자이다. 일부 구현예에서, 선택 마커는 퓨로마이신 내성 유전자, 히그로마이신 내성 유전자, 블라스티사이딘 내성 유전자, 네오마이신 내성 유전자, 게네티신 내성 유전자 또는 제오신 내성 유전자 또는 이의 변형된 형태이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 재조합 핵산은 예를 들어, 시미안 바이러스 40(SV40), 아데노바이러스, 아데노-관련 바이러스(adeno-associated virus, AAV)로부터 유래된 벡터와 같은 재조합 감염성 바이러스 입자를 사용하여 세포내로 전달된다. 일부 구현예에서, 재조합 핵산은 재조합 렌티바이러스 벡터 또는 레트로바이러스 벡터, 예컨대 감마-레트로바이러스 벡터를 사용하여 T 세포 내로 전달된다(예를 들어, Koste et al. (2014) Gene Therapy 2014 Apr 3. doi: 10.1038/gt.2014.25; Carlens et al. (2000) Exp Hematol 28(10): 1137-46; Alonso-Camino et al. (2013) Mol Ther Nucl Acids 2, e93; Park et al., Trends Biotechnol. 2011 November 29(11): 550-557 참조).
일부 구현예에서, 레트로바이러스 벡터는 긴 말단 반복 서열(long terminal repeat sequence, LTR), 예를 들어 몰로니 뮤린 백혈병 바이러스(Moloney murine leukemia virus, MoMLV), 골수 증식육종 바이러스(myeloproliferative sarcoma virus, MPSV), 뮤린 배아 줄기 세포 바이러스(murine embryonic stem cell virus, MESV), 뮤린 줄기 세포 바이러스(murine stem cell virus, MSCV) 또는 비장 초점 형성 바이러스(spleen focus forming virus, SFFV)로부터 유래된 레트로바이러스 벡터를 갖는다. 대부분의 레트로바이러스 벡터는 뮤린 레트로바이러스로부터 유래된다. 일부 구현예에서, 레트로바이러스는 임의의 조류 또는 포유류 세포 공급원으로부터 유래된 것을 포함한다. 레트로바이러스는 전형적으로 인간을 포함하여 몇몇 종의 숙주 세포를 감염시킬 수 있음을 의미하는, 암포트로픽(amphotropic)이다. 일 구현예에서, 발현될 유전자는 레트로바이러스의 gag, pol 및/또는 env 서열을 대체한다. 다수의 예시적인 레트로바이러스 시스템이 문헌[예를 들어, 미국 특허 번호 5,219,740; 6,207,453; 5,219,740; Miller and Rosman (1989) BioTechniques 7:980-990; Miller, A. D. (1990) Human Gene Therapy 1:5-14; Scarpa et al. (1991) Virology 180:849-852; Burns et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:8033-8037; 및 Boris-Lawrie and Temin (1993) Cur. Opin. Genet. Develop. 3:102-109]에 기재되어 있다.
렌티바이러스 형질 도입 방법이 공지되어 있다. 예시적인 방법이 문헌[예를 들어 Wang et al. (2012) J. Immunother. 35(9): 689-701; Cooper et al. (2003) Blood. 101:1637-1644; Verhoeyen et al. (2009) Methods Mol Biol. 506: 97-114; 및 Cavalieri et al. (2003) Blood. 102(2): 497-505]에 기재된다.
일부 구현예에서, 재조합 핵산은 전기 천공을 통해 T 세포로 전달된다(예를 들어, 문헌[Chicaybam et al, (2013) PLoS ONE 8(3): e60298 및 Van Tedeloo et al. (2000) Gene Therapy 7(16): 1431-1437] 참조). 일부 구현예에서, 재조합 핵산은 전위를 통해 T 세포로 전달된다(예를 들어, 문헌[Manuri et al. (2010) Hum Gene Ther 21(4): 427-437; Sharma et al. (2013) Molec Ther Nucl Acids 2, e74; 및 Huang et al. (2009) Methods Mol Biol 506: 115-126] 참조). 면역 세포에서 유전 물질을 도입하고 발현시키는 다른 방법에는 인산칼슘 형질 감염(예를 들어, 문헌[Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York. N.Y.]에 기재된 바와 같음), 원형질체 융합, 양이온성 리포좀-매개 형질 감염; 텅스텐 입자 촉진 미세 입자 충격(Johnston, Nature, 346: 776-777 (1990)); 및 스트론튬 포스페이트 DNA 공침전(Brash et al., Mol. Cell Biol., 7: 2031-2034 (1987));이 포함된다.
재조합 생성물을 암호화하는 핵산 전달을 위한 다른 접근법 및 벡터는 예를 들어, 문헌[국제 특허 출원 공개 번호 WO2014055668 및 미국 특허 번호 제7,446,190호]에 기재된 것이다.
일부 구현예에서, 세포, 예를 들어, T 세포는 증폭 중 또는 증폭 후에 예를 들어, T 세포 수용체(TCR) 또는 키메라 항원 수용체(CAR)로 형질 감염될 수 있다. 원하는 수용체의 유전자 도입을 위한 상기 형질 감염은 예를 들어 임의의 적합한 레트로바이러스 벡터로 수행될 수 있다. 이어서 유전자 변형 세포 집단은 초기 자극(예를 들어, 항-CD3/항-CD28 자극)으로부터 유리될 수 있으며, 후속적으로 제2 유형의 자극, 예를 들어 새로이 도입된 수용체를 통해 자극될 수 있다. 상기 제2 유형의 자극에는 새로운 수용체의 프레임워크 내에서 직접 결합하는(예를 들어 수용체 내의 불변 영역을 인지함으로써) 임의의 리간드(예컨대 항체), 유전자 도입된 수용체(예를 들어 CAR의 천연 리간드)의 동종(교차 결합) 리간드 또는 펩티드/MHC 분자 형태의 항원 자극이 포함될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Cheadle et al, “Chimeric antigen receptors for T-cell based therapy” Methods Mol Biol. 2012; 907:645-66 또는 Barrett et al., Chimeric Antigen Receptor Therapy for Cancer Annual Review of Medicine Vol. 65: 333-347 (2014)]을 참조한다.
일부 경우에, 세포, 예를 들어, T 세포가 활성화되는 것이 필요하지 않은 벡터가 사용될 수 있다. 일부 상기의 경우에, 세포는 활성화되기 전에 선택 및/또는 형질 도입될 수 있다. 따라서, 세포는 세포 배양 이전에 또는 후속적으로 조작될 수 있고, 일부 경우에는 배양의 적어도 일부와 동시에 또는 그 동안에 조작될 수 있다.
추가 핵산 중에서, 예를 들어 도입을 위한 유전자는, 예컨대 전달된 세포의 생존력 및/또는 기능을 촉진함으로써 요법의 효능을 개선하기 위한 유전자; 예컨대 생체 내에서 생존 또는 국소화를 평가하기 위한 세포의 평가 및/또는 선택을 위한 유전자 마커를 제공하기 위한 유전자; 문헌[Lupton S. D. et al., Mol. and Cell Biol., 11:6 (1991); 및 Riddell et al., Human Gene Therapy 3:319-338 (1992)]에 기재된 바와 같이 예를 들어 생체 내에서 음성 선택에 세포를 예민하게 만들어 안정성을 개선하기 위한 유전자가 있고; 또한 우성 양성 선택 가능한 마커를 음성 선택 가능한 마커와 융합시켜 유래된 2작용성 선택 가능한 융합 유전자의 용도를 기술하는 문헌[국제 출원 공보 PCT/US91/08442 및 PCT/US94/05601 by Lupton et al.]을 참조한다. 예를 들어, 문헌[Riddell et al., 미국 특허 번호 6,040,177, 14-17 열]을 참조한다.
C. 유전자 조작을 위한 세포 및 세포 제조
일부 구현예에서, 핵산은 이종 기원이다, 즉 예를 들어, 조작되고 있는 세포 및/또는 상기 세포가 유래된 유기체에서 보통 발견되지 않는, 다른 유기체 또는 세포로부터 수득된 것과 같은 세포 또는 세포로부터 수득된 샘플에는 정상적으로 존재하지 않는다. 일부 구현예에서, 핵산은 천연 발생이 아니고, 예컨대 다수의 상이한 세포 유형으로부터 다양한 도메인을 암호화하는 핵산의 키메라 조합을 포함하는 것을 포함한, 자연계에서 발견되지 않는 핵산이다.
세포는 일반적으로 포유류 세포와 같은 진핵 세포이며, 전형적으로 인간 세포이다. 일부 구현예에서, 세포는 혈액, 골수, 림프 또는 림프성 기관으로부터 유래되며, 선천적 또는 적응성 면역 세포와 같은 면역 계통의 세포, 예를 들어 림프구, 전형적으로 T 세포 및/또는 NK 세포를 포함한 골수성 또는 림프성 세포이다. 다른 예시적인 세포에는 유도된 다능성 줄기 세포(induced pluripotent stem cell, iPSC)를 포함한, 다능성 및 다분화능 줄기 세포와 같은 줄기 세포가 포함된다. 세포는 전형적으로 대상체로부터 직접 단리되고/거나 대상체로부터 단리되고 동결된 세포와 같은 1차 세포이다. 일부 구현예에서, 세포에는 T 세포 또는 다른 세포 유형의 하나 이상의 서브세트, 예컨대 전체 T 세포 집단, CD4+ 세포, CD8+ 세포 및 이의 하위 집단, 예컨대 기능, 활성화 상태, 성숙도, 분화 가능성, 증폭, 재순환, 국소화 및/또는 지속성 용량, 항원 특이성, 항원 수용체 유형, 특정 기관 또는 구획에의 존재, 마커 또는 사이토카인 분비 프로필 및/또는 분화 정도에 의해 정의되는 것이 포함된다. 치료될 대상체와 관련하여, 세포는 동종 이계 및/또는 자가 조직일 수 있다. 상기 방법 중에는 기성품 방법이 포함된다. 일부 측면에서, 예컨대 기성품 기술에 대해, 세포는 다능성 및/또는 다분화능, 예컨대 줄기 세포, 예컨대 유도된 다능성 줄기 세포(iPSC)이다. 일부 구현예에서, 방법은 대상체로부터 세포를 단리하고, 세포를 제조, 가공, 배양 및/또는 조작하고, 동결 보존 전 또는 후에 동일한 대상체에 세포를 재도입하는 것을 포함한다.
T 세포 및/또는 CD4+ 및/또는 CD8+ T 세포의 하위 유형 및 하위 집단 중에는 나이브 T(na
Figure pct00005
ve T, TN) 세포, 이펙터 T 세포(effector T cell, TEFF), 기억 T 세포 및 이의 하위-유형, 예컨대 줄기 세포 기억 T(stem cell memory T, TSCM), 중앙 기억 T(central memory T, TCM), 이펙터 기억 T(effector memory T, TEM) 또는 말단 분화된 이펙터 기억 T 세포, 종양 침윤성 림프구(tumor-infiltrating lymphocytes, TIL), 미성숙 T 세포, 성숙 T 세포, 헬퍼 T 세포, 세포 독성 T 세포, 점막 관련 불변 T(mucosa-associated invariant T, MAIT) 세포, 천연 발생 및 적응성 조절 T(regulatory T, Treg) 세포, 헬퍼 T 세포, 예컨대 TH1 세포, TH2 세포, TH3 세포, TH17 세포, TH9 세포, TH22 세포, 여포성 헬퍼 T 세포, 알파/베타 T 세포 및 델타/감마 T 세포가 있다.
일부 구현예에서, 세포는 자연 살해(natural killer, NK) 세포이다. 일부 구현예에서, 세포는 단핵구 또는 과립구, 예를 들어 골수성 세포, 대식 세포, 호중구, 수지상 세포, 비만 세포, 호산구 및/또는 호염기구이다.
일부 구현예에서, 세포는 유전자 조작을 통해 도입된 하나 이상의 핵산을 포함하고 이로써 상기 핵산의 재조합 또는 유전자 조작된 생성물을 발현한다. 일부 구현예에서, 핵산은 이종 기원이다, 즉 예를 들어, 조작되고 있는 세포 및/또는 상기 세포가 유래된 유기체에서 보통 발견되지 않는, 다른 유기체 또는 세포로부터 수득된 것과 같은 세포 또는 세포로부터 수득된 샘플에는 정상적으로 존재하지 않는다. 일부 구현예에서, 핵산은 천연 발생이 아니고, 예컨대 다수의 상이한 세포 유형으로부터 다양한 도메인을 암호화하는 핵산의 키메라 조합을 포함하는 것을 포함한, 자연계에서 발견되지 않는 핵산이다.
일부 구현예에서, 조작된 세포의 제조는 하나 이상의 배양 및/또는 제조 단계를 포함한다. CAR과 같은 전이 유전자 수용체를 암호화하는 핵산의 도입을 위한 세포는, 생물학적 샘플, 예를 들어 대상체로부터 수득되거나 이로부터 유래된 것과 같은 샘플로부터 단리될 수 있다. 일부 구현예에서, 세포가 단리되는 대상체는 질병 또는 병태를 갖거나 세포 요법이 필요하거나 또는 세포 요법이 투여될 대상체이다. 일부 구현예에서, 대상체는 세포가 단리, 가공 및/또는 조작되고 있는 입양 세포 요법과 같은 특정한 치료적 개입이 필요한 인간이다.
따라서, 일부 구현예에서 세포는 일차 세포, 예를 들어 1차 인간 세포이다. 샘플에는 대상체로부터 직접 채취한 조직, 유체 및 기타 샘플뿐만 아니라 분리, 원심분리, 유전적 조작(예를 들어 바이러스 벡터로 형질 도입), 세척 및/또는 배양과 같은 하나 이상의 가공 단계에서 생성된 샘플이 포함된다. 생물학적 샘플은 생물학적 공급원으로부터 직접 수득된 샘플 또는 가공된 샘플일 수 있다. 생물학적 샘플에는 체액, 예컨대 혈액, 혈장, 혈청, 뇌척수액, 활액, 소변 및 땀, 조직 및 기관 샘플 (이로부터 유래된 가공 샘플 포함)이 포함되나, 이에 국한되지 않는다.
일부 측면에서, 세포가 유래되거나 단리된 샘플은 혈액 또는 혈액 유래 샘플이거나, 성분 채집술 또는 백혈구 성분 채집술 생성물이거나 이로부터 유래된다. 예시적인 샘플에는 전혈, 말초 혈액 단핵 세포(peripheral blood mononuclear cell, PBMC), 백혈구, 골수, 흉선, 조직 생검, 종양, 백혈병, 림프종, 림프절, 장 관련 림프 조직, 점막 관련 림프 조직, 비장, 기타 림프 조직, 간, 폐, 위, 내장, 결장, 신장, 췌장, 유방, 뼈, 전립선, 자궁 경부, 고환, 난소, 편도선 또는 기타 기관 및/또는 이로부터 유래된 세포가 포함된다. 샘플에는 세포 요법, 예를 들어, 입양 세포 요법의 맥락에서 자가 및 동종이계 공급원으로부터의 샘플이 포함된다.
일부 구현예에서, 세포는 세포주, 예를 들어 T 세포주로부터 유래된다. 일부 구현예에서, 세포는 이종성 공급원, 예를 들어 마우스, 랫트, 비인간 영장류 또는 돼지로부터 수득된다.
일부 구현예에서, 세포의 단리는 하나 이상의 제조 및/또는 비친화도 기반 세포 분리 단계를 포함한다. 일부 예에서, 세포는 하나 이상의 시약의 존재 하에 세척, 원심 분리 및/또는 배양되어, 예를 들어 원치 않는 성분의 제거, 원하는 성분의 농축, 특정 시약에 민감한 세포를 용해하거나 제거한다. 일부 예에서, 세포는 하나 이상의 특성, 예컨대 밀도, 부착 특성, 크기, 특정 성분에 대한 민감성 및/또는 내성에 기초하여 분리된다.
일부 예에서, 대상체의 순환 혈액으로부터의 세포는 예를 들어, 성분 채집술 또는 백혈구 성분 채집술에 의해 수득된다. 일부 측면에서, 샘플은 T 세포, 단핵구, 과립구, B 세포, 기타 핵 형성 백혈구를 포함한 림프구, 적혈구 및/또는 혈소판을 함유하고, 일부 측면에서 적혈구 및 혈소판외의 세포를 함유한다.
일부 구현예에서, 대상체로부터 수집된 혈액 세포는 세척되어, 예를 들어 혈장 분획을 제거하고 후속 가공 단계를 위한 적절한 완충제 또는 배지에 세포를 배치한다. 일부 구현예에서, 세포는 인산 완충 식염수(phosphate buffered saline, PBS)로 세척된다. 일부 구현예에서, 세척 용액은 칼슘 및/또는 마그네슘 및/또는 많은 또는 모든 2가 양이온이 결여되어 있다. 일부 측면에서, 세척 단계는 제조업체의 지침에 따라 반자동 "플로우-쓰루(flow-through)" 원심 분리기(예를 들어, Cobe 2991 세포 프로세서, Baxter)로 달성된다. 일부 측면에서, 세척 단계는 제조업체의 지침에 따라 접선 흐름 여과(tangential flow filtration, TFF)에 의해 달성된다. 일부 구현예에서, 세포는 세척 후 다양한 생체 적합성 완충액, 예를 들어 Ca++/Mg++이 없는 PBS에 재현탁된다. 특정 구현예에서, 혈액 세포 샘플의 성분이 제거되고 세포는 배양 배지에서 직접 재현탁된다.
일부 구현예에서, 방법은 밀도 기반 세포 분리 방법, 예컨대 적혈구를 용해시켜 말초 혈액으로부터 백혈구의 제조 및 Percoll 또는 Ficoll 구배를 통한 원심 분리를 포함한다.
일부 구현예에서, 단리 방법은 표면 마커, 예를 들어, 표면 단백질, 세포 내 마커 또는 핵산과 같은 하나 이상의 특정 분자의 세포에서의 발현 또는 존재에 기초한 상이한 세포 유형의 분리를 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 마커에 기초한 분리를 위한 임의의 공지된 방법이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 분리는 친화도- 또는 면역친화도 기반 분리이다. 예를 들어, 일부 측면에서 단리에는 하나 이상의 마커, 전형적으로 세포 표면 마커의 세포의 발현 또는 발현 수준에 기초하여, 예를 들어 상기 마커에 특이적으로 결합하는 항체 또는 결합 파트너와의 인큐베이션 후 일반적으로 세척 단계 및 항체 또는 결합 파트너와 결합하지 않은 세포로부터 항체 또는 결합 파트너와 결합한 세포의 분리에 의한 세포 및 세포 집단의 분리가 포함된다.
상기 분리 단계는 시약에 결합된 세포가 추가 사용을 위해 보유되는 양성 선택 및/또는 항체 또는 결합 파트너에 결합하지 않은 세포가 보유되는 음성 선택에 기초할 수 있다. 일부 예에서, 두 분획 모두 추가 사용을 위해 보유된다. 일부 측면에서, 음성 선택은 이종 집단에서 세포 유형을 특이하게 식별하는 항체가 이용 가능하지 않은 경우에 특히 유용할 수 있어서, 분리는 원하는 집단 이외의 세포에 의해 발현된 마커에 기초하여 가장 잘 수행된다.
분리는 특정 마커를 발현하는 특정 세포 집단 또는 세포의 100% 농축 또는 제거를 초래할 필요가 없다. 예를 들어, 마커를 발현하는 것과 같은 특정 유형의 세포에 대한 양성 선택 또는 농축은 상기 세포의 수 또는 백분율을 증가시키는 것을 지칭하나, 마커를 발현하지 않는 세포의 완전한 부재를 초래할 필요는 없다. 마찬가지로, 마커를 발현하는 것과 같은 특정 유형의 세포의 음성 선택, 제거 또는 고갈은 상기 세포의 수 또는 백분율을 감소시키는 것을 지칭하나, 상기 모든 세포의 완전한 제거를 초래할 필요는 없다.
일부 예에서, 다수의 라운드의 분리 단계가 수행되고, 여기서 한 단계에서 양성 또는 음성 선택된 분획은 후속 양성 또는 음성 선택과 같은 또 다른 분리 단계를 거친다. 일부 예에서, 단일 분리 단계는 예컨대 다수의 항체 또는 결합 파트너와 세포를 배양함으로써 동시에 다수의 마커를 발현하는 세포를 고갈시킬 수 있으며, 각각은 음성 선택을 위해 표적화된 마커에 대해 특이적이다. 마찬가지로, 다수의 세포 유형이 다양한 세포 유형에서 발현되는 다수의 항체 또는 결합 파트너와 세포를 인큐베이션함으로써 동시에 양성 선택될 수 있다.
예를 들어, 일부 측면에서, T 세포의 특정 하위 집단, 예컨대 하나 이상의 표면 마커, 예를 들어 CD28+, CD62L+, CCR7+, CD27+, CD127+, CD4+, CD8+, CD45RA+ 및/또는 CD45RO+ T 세포를 높은 수준으로 발현하거나 이에 양성인 세포가 양성 또는 음성 선택 기술에 의해 단리된다.
예를 들어, CD3+, CD28+ T 세포는 항-CD3/항-CD28 접합 자성 비드(예를 들어, DYNABEADS® M-450 CD3/CD28 T Cell Expander)를 사용하여 양성 선택될 수 있다.
일부 구현예에서, 단리는 양성 선택에 의한 특정 세포 집단에 대한 농축 또는 음성 선택에 의한 특정 세포 집단의 고갈에 의해 수행된다. 일부 구현예에서, 양성 또는 음성 선택은 각각 양성 또는 음성 선택된 세포 상에서 발현(마커+)되거나 상대적으로 보다 높은 수준으로 발현(마커high)된 하나 이상의 표면 마커에 특이적으로 결합하는 하나 이상의 항체 또는 다른 결합제와 세포를 인큐베이션함으로써 달성된다.
일부 구현예에서, T 세포는 B 세포, 단핵구 또는 CD14와 같은 다른 백혈구와 같은 비-T 세포 상에서 발현되는 마커의 음성 선택에 의해 PBMC 샘플로부터 분리된다. 일부 측면에서, CD4+ 또는 CD8+ 선택 단계는 CD4+ 헬퍼 및 CD8+ 세포독성 T 세포를 분리하기 위해 사용된다. 상기 CD4+ 및 CD8+ 집단은, 하나 이상의 나이브(naive), 기억 및/또는 이펙터 T 세포 하위 집단에서 발현되거나 상대적으로 보다 높은 정도로 발현된 마커에 대해 양성 또는 음성 선택에 의해 하위 집단으로 추가 분류될 수 있다.
일부 구현예에서, CD8+ 세포는 예컨대 각각의 하위 집단과 관련된 표면 항원에 기초한 양성 또는 음성 선택에 의해 나이브, 중앙 기억, 이펙터 기억 및/또는 중앙 기억 줄기 세포에 대해 추가로 농축되거나 고갈된다. 일부 구현예에서, 중앙 기억 T(TCM) 세포에 대한 농축은 효능을 증가시키기 위해, 예컨대 투여 후의 장기간 생존, 증폭 및/또는 생착을 개선하기 위해 수행되며, 이는 일부 측면에서 상기 하위 집단에서 특히 견고하다. 문헌[Terakura et al. (2012) Blood, 1:72-82; Wang et al. (2012) J Immunother. 35(9):689-701]을 참조한다. 일부 구현예에서, TCM-농축 CD8+ T 세포 및 CD4+ T 세포의 조합은 효능을 더욱 향상시킨다.
일부 구현예에서, 기억 T 세포는 CD8+ 말초 혈액 림프구의 CD62L+ 및 CD62L- 서브세트 모두에 존재한다. PBMC는 예컨대 항-CD8 및 항-CD62L 항체를 사용하여 CD62L-CD8+ 및/또는 CD62L+CD8+ 분획에 대해 농축되거나 고갈될 수 있다.
일부 구현예에서, 중앙 기억 T(TCM) 세포의 농축은 CD45RO, CD62L, CCR7, CD28, CD3 및/또는 CD127의 양성 또는 고도의 표면 발현에 기초하고; 일부 측면에서, 이는 CD45RA 및/또는 그랜자임 B를 발현하거나 고도로 발현하는 세포에 대한 음성 선택에 기초한다. 일부 측면에서, TCM 세포에 대해 농축된 CD8+ 집단의 단리는 CD4, CD14, CD45RA를 발현하는 세포의 고갈 및 CD62L을 발현하는 세포에 대한 양성 선택 또는 농축에 의해 수행된다. 일 측면에서, 중앙 기억 T(TCM) 세포에 대한 농축은 CD4 발현에 기초하여 선택된 세포의 음성 분획으로 시작하여 수행되며, 이는 CD14 및 CD45RA의 발현에 기초한 음성 선택 및 CD62L에 기초한 양성 선택에 노출된다. 일부 측면에서, 상기 선택은 동시에 수행되며 다른 측면에서, 순차적으로, 어떠한 순서로든 수행된다. 일부 측면에서, CD8+ 세포 집단 또는 하위 집단을 제조하는데 사용된 동일한 CD4 발현 기반 선택 단계가 CD4+ 세포 집단 또는 하위 집단을 생성하는데 또한 사용되어, CD4 기반 분리로부터의 양성 및 음성 분획 모두가 보유되고, 선택적으로 하나 이상의 추가적인 양성 또는 음성 선택 단계 후에 방법의 후속 단계에서 사용된다.
특정 예에서, PBMC 샘플 또는 다른 백혈구 샘플은, 음성 및 양성 분획 모두가 보유되는 CD4+ 세포의 선택을 거친다. 이어서 음성 분획은 CD14 및 CD45RA 또는 CD19의 발현에 기초한 음성 선택 및 CD62L 또는 CCR7과 같은 중앙 기억 T 세포에 특징적인 마커에 기초한 양성 선택에 노출되고, 여기서 양성 및 음성 선택은 어느 순서로든 수행된다.
CD4+ T 헬퍼 세포는 세포 표면 항원을 갖는 세포 집단을 확인해서 나이브, 중앙 기억 및 이펙터 세포로 분류된다. CD4+ 림프구는 표준 방법으로 수득될 수 있다. 일부 구현예에서, 나이브 CD4+ T 림프구는 CD45RO-, CD45RA+, CD62L+, CD4+ T 세포이다. 일부 구현예에서, 중앙 기억 CD4+ 세포는 CD62L+ 및 CD45RO+이다. 일부 구현예에서, 이펙터 CD4+ 세포는 CD62L- 및 CD45RO-이다.
일 예에서, 음성 선택에 의해 CD4+ 세포를 농축하기 위해, 단클론성 항체 칵테일은 전형적으로 CD14, CD20, CD11b, CD16, HLA-DR 및 CD8에 대한 항체를 포함한다. 일부 구현예에서, 항체 또는 결합 파트너는 양성 및/또는 음성 선택을 위한 세포의 분리가 가능하도록 자성 비드 또는 상자성 비드와 같은 고체 지지체 또는 매트릭스에 결합된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 세포 및 세포 집단은 면역자성(또는 자성친화도) 분리 기술을 사용하여 분리되거나 단리된다(문헌[Methods in Molecular Medicine, vol. 58: Metastasis Research Protocols, Vol. 2: Cell Behavior In vitro and In vivo, p 17-25 Edited by: S. A. Brooks and U. Schumacher ⓒ Humana Press Inc., Totowa, NJ]에서 검토됨).
일부 측면에서, 분리될 세포 샘플 또는 세포 조성물은 작고, 자화 가능 또는 자성 반응 물질, 예컨대 자성 반응 입자 또는 미세입자, 예컨대 상자성 비드(예를 들어, Dynalbeads 또는 MACS 비드)와 함께 인큐베이션된다. 자성 반응 물질, 예를 들어 입자는 일반적으로 분리가 바람직한, 예를 들어 음성 또는 양성 선택이 바람직한 세포, 세포들 또는 세포 집단에 존재하는 분자, 예를 들어 표면 마커에 특이적으로 결합하는 결합 파트너, 예를 들어 항체에 직접 또는 간접적으로 부착된다.
일부 구현예에서, 자성 입자 또는 비드는 항체 또는 다른 결합 파트너와 같은 특정 결합 부재에 결합된 자성 반응 물질을 포함한다. 자성 분리 방법에 사용되는 잘 알려진 많은 자성 반응 물질이 있다. 적합한 자성 입자에는 문헌[본 명세서에 참조로 통합된 Molday, 미국 특허 번호 4,452,773 및 유럽 특허 명세서 EP 452342 B]에 기재된 것이 포함된다. 콜로이드 크기의 입자, 예컨대 문헌[Owen 미국 특허 번호 4,795,698 및 Liberti et al., 미국 특허 번호 5,200,084]에 기재된 것이 다른 예이다.
항체 또는 결합 파트너 또는 분자, 예컨대 자성 입자 또는 비드에 부착된 상기 항체 또는 결합 파트너에 특이적으로 결합하는 2차 항체 또는 다른 시약이 샘플 내의 세포 상에 존재하는 경우 세포 표면 분자에 특이적으로 결합하는 조건하에서 인큐베이션이 일반적으로 수행된다.
일부 측면에서, 샘플은 자기장에 배치되고, 이에 부착된 자성 반응 또는 자화 가능 입자를 갖는 상기 세포는 자석에 끌리고 표지되지 않은 세포로부터 분리될 것이다. 양성 선택의 경우, 자석에 끌린 세포가 보유되고; 음성 선택의 경우, 끌리지 않은 세포(비표지 세포)가 보유된다. 일부 측면에서, 양성 및 음성 선택의 조합이 동일한 선택 단계 동안 수행되며, 상기 양성 및 음성 분획은 보유되고 추가적으로 가공되거나 추가적인 분리 단계에 노출된다.
특정 구현예에서, 자성 반응 입자는 1차 항체 또는 다른 결합 파트너, 2차 항체, 렉틴, 효소 또는 스트렙타비딘으로 코팅된다. 특정 구현예에서, 자성 입자는 하나 이상의 마커에 특이적인 1차 항체의 코팅을 통해 세포에 부착된다. 특정 구현예에서, 비드보다는 세포가 1차 항체 또는 결합 파트너로 표지되고, 이어서 세포 유형 특이적 이차 항체- 또는 다른 결합 파트너(예를 들어, 스트렙타비딘)-코팅된 자성 입자가 첨가된다. 특정 구현예에서, 스트렙타비딘 코팅된 자성 입자는 비오티닐화된 1차 또는 2차 항체와 함께 사용된다.
일부 구현예에서, 자성 반응 입자는 후속적인 인큐베이션, 배양 및/또는 조작될 세포에 부착되어 남아있고; 일부 측면에서, 상기 입자는 환자에게 투여하기 위한 세포에 부착되어 남아있다. 일부 구현예에서, 자화 가능 또는 자성 반응 입자는 세포로부터 제거된다. 세포에서 자화 가능 입자를 제거하는 방법은 공지되어 있고, 예를 들어 경쟁 비-표지 항체 및 절단 가능한 링커에 접합된 자화 가능 입자 또는 항체 등의 사용을 포함한다. 일부 구현예에서, 자화 가능 입자는 생분해성이다.
일부 구현예에서, 친화도 기반 선택은 자성 활성화 세포 분류(magnetic-activated cell sorting, MACS, Miltenyi Biotec, Auburn, CA)를 통한 것이다. 자성 활성화 세포 분류(MACS) 시스템은 이에 부착된 자화된 입자를 갖는 세포를 고순도로 선택할 수 있다. 특정 구현예에서, MACS는 외부 자기장의 적용 후에 비 표적 종 및 표적 종이 순차적으로 용리되는 방식으로 작동한다. 즉, 자화된 입자에 부착된 세포는 부착되지 않은 종이 용리되는 반면, 제자리에 유지된다. 이어서, 상기 제1 용리 단계가 완료된 후, 자기장에 포획되고 용리되는 것이 방지된 종은 이들이 용리 및 회수될 수 있도록 상당한 방식으로 해제된다. 특정 구현예에서, 비 표적 세포는 표지되고 이종 세포 집단으로부터 고갈된다.
특정 구현예에서, 단리 또는 분리는 본 방법의 단리, 세포 제조, 분리, 가공, 인큐베이션, 배양 및/또는 제형화 단계 중 하나 이상을 수행하는 시스템, 디바이스 또는 장치를 사용하여 수행된다. 일부 측면에서, 상기 시스템은 예를 들어 오류, 사용자 취급 및/또는 오염을 최소화하기 위해 폐쇄 또는 멸균 환경에서 상기 단계 각각을 수행하는데 사용된다. 일 예에서, 시스템은 문헌[국제 특허 출원 공개 번호 WO2009/072003 또는 미국 출원 20110003380 A1]에 기재된 바와 같은 시스템이다.
일부 구현예에서, 시스템 또는 장치는 통합되거나 독립적인 시스템 및/또는 자동화되거나 프로그램 가능한 방식으로 단리, 가공, 조작 및 제형화 단계 중 하나 이상, 예를 들어 모두를 수행한다. 일부 측면에서, 시스템 또는 장치는 사용자가 가공, 단리, 조작 및 제형화 단계의 결과를 프로그램, 제어, 평가하고/거나 가공, 단리, 조작 및 제형화 단계의 다양한 측면을 조정할 수 있게 하는 상기 시스템 또는 장치와 통신하는 컴퓨터 및/또는 컴퓨터 프로그램을 포함한다.
일부 측면에서, 분리 및/또는 다른 단계는 예를 들어 폐쇄 및 멸균 시스템에서 임상 규모 수준으로 세포의 자동 분리를 위해 CliniMACS 시스템(Miltenyi Biotec)을 사용하여 수행된다. 구성 요소에는 통합 마이크로 컴퓨터, 자기 분리 유닛, 연동 펌프 및 다양한 핀치 밸브가 포함될 수 있다. 일부 측면에서, 통합 컴퓨터는 기기의 모든 구성 요소를 제어하고 시스템이 표준화된 순서로 반복된 절차를 수행하도록 지시한다. 일부 측면에서, 자성 분리 유닛은 이동 가능한 영구 자석 및 선택 칼럼을 위한 홀더를 포함한다. 연동 펌프는 튜빙 세트 전체의 유량을 제어하고, 핀치 밸브와 함께 시스템을 통한 완충액의 흐름 제어와 세포의 지속적인 현탁을 보장한다.
일부 측면에서, CliniMACS 시스템은 멸균, 비발열성 용액으로 공급되는 항체 결합 자화 가능 입자를 사용한다. 일부 구현예에서, 자성 입자로 세포를 표지한 후 세포를 세척하여 과량의 입자를 제거한다. 이어서, 세포 제조 백은 튜빙 세트에 연결되고, 이는 차례로 완충액을 함유하는 백 및 세포 수집 백에 연결된다. 튜브 세트는 사전 컬럼 및 분리 컬럼을 포함한 사전 조립된 멸균 튜브로 구성되며 일회용이다. 분리 프로그램이 시작된 후, 시스템은 세포 샘플을 분리 컬럼에 자동으로 적용한다. 표지된 세포는 컬럼 내에 보유되는 반면, 표지되지 않은 세포는 일련의 세척 단계에 의해 제거된다. 일부 구현예에서, 본 명세서에 기재된 방법과 함께 사용하기 위한 세포 집단은 표지되지 않고 칼럼에 보유되지 않는다. 일부 구현예에서, 본 명세서에 기재된 방법과 함께 사용하기 위한 세포 집단은 표지되고 칼럼에 보유된다. 일부 구현예에서, 본 명세서에 기재된 방법과 함께 사용하기 위한 세포 집단은 자기장을 제거한 후 칼럼으로부터 용리되고, 세포 수집 백 내에 수집된다.
특정 구현예에서, 분리 및/또는 다른 단계는 CliniMACS Prodigy 시스템(Miltenyi Biotec)을 사용하여 수행된다. 일부 측면에서, CliniMACS Prodigy 시스템에는 원심 분리에 의한 세포의 자동 세척 및 세포의 분획화를 가능하게 하는 세포 가공 유닛이 구비되어 있다. CliniMACS Prodigy 시스템에는 공급원 세포 생성물의 거시적인 층을 식별하여 최적의 세포 분획화 종점을 결정하는 온보드 카메라 및 이미지 인식 소프트웨어도 포함될 수 있다. 예를 들어, 말초 혈액은 적혈구, 백혈구 및 혈장 층으로 자동 분리된다. CliniMACS Prodigy 시스템에는 또한 예를 들어, 세포 분화 및 증폭, 항원 로딩 및 장기 세포 배양과 같은 세포 배양 프로토콜을 달성하는 통합 세포 배양 챔버가 포함될 수 있다. 입력 포트는 배지의 멸균 제거 및 보충을 가능하게 할 수 있고 통합 현미경을 사용하여 세포를 모니터링할 수 있다. 예를 들어, 문헌[Klebanoff et al. (2012) J Immunother. 35(9): 651-660, Terakura et al. (2012) Blood.1:72-82 및 Wang et al. (2012) J Immunother. 35(9):689-701]을 참조한다.
일부 구현예에서, 본 명세서에 기재된 세포 집단은 유동 세포 분석법을 통해 수집 및 농축(또는 고갈)되고, 여기서 다수의 세포 표면 마커에 대해 염색된 세포는 유체 스트림으로 운반된다. 일부 구현예에서, 본 명세서에 기재된 세포 집단은 분취 규모(FACS) 분류를 통해 수집 및 농축(또는 고갈)된다. 특정 구현예에서, 본 명세서에 기재된 세포 집단은 FACS 기반 검출 시스템과 함께 미세전자기계 시스템(microelectromechanical system, MEMS) 칩을 사용하여 수집 및 농축(또는 고갈)된다(예를 들어, 문헌[국제 출원 WO 2010/033140), Cho et al. (2010) Lab Chip 10, 1567-1573; 및 Godin et al. (2008) J Biophoton. 1(5):355-376] 참조). 두 경우 모두에서, 세포는 고순도로 잘 정의된 T 세포 서브세트의 단리를 가능하게 하는 다수의 마커로 표지될 수 있다.
일부 구현예에서, 항체 또는 결합 파트너는 하나 이상의 검출 가능한 마커로 표지되어, 양성 및/또는 음성 선택을 위한 분리를 용이하게 한다. 예를 들어, 분리는 형광 표지된 항체에 대한 결합에 기초할 수 있다. 일부 예에서, 하나 이상의 세포 표면 마커에 특이적인 항체 또는 다른 결합 파트너의 결합에 기초한 세포의 분리는, 예를 들어 유동 세포 분석 검출 시스템과 함께 예컨대 분취 규모(FACS) 및/또는 미세전자기계 시스템(MEMS) 칩을 포함하는 형광 활성화 세포 분류(fluorescence-activated cell sorting, FACS)에 의해 유체 스트림에서 수행된다. 상기 방법은 다수의 마커에 기초하여 양성 및 음성 선택을 동시에 가능하게 한다.
일부 구현예에서, 제조 방법은 단리, 인큐베이션 및/또는 조작 전이든 후이든 세포를 동결, 예를 들어, 동결 보존하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 동결 및 후속 해동 단계는 세포 집단에서 과립구 및 어느 정도 단핵구를 제거한다. 일부 구현예에서, 세포는 예를 들어, 혈장 및 혈소판을 제거하기 위한 세척 단계 후에 동결 용액에 현탁된다. 일부 측면에서, 공지된 다양한 동결 용액 및 파라미터 중 어느 하나가 사용될 수 있다. 일 예는 20% DMSO 및 8% 인간 혈청 알부민(human serum albumin, HSA) 또는 다른 적합한 세포 동결 배지를 함유하는 PBS의 사용을 포함한다. 이어서, 상기를 DMSO 및 HSA의 최종 농도가 각각 10% 및 4%가 되도록 배지로 1:1로 희석시킨다. 이어서 세포를 일반적으로 분당 1 ℃의 속도로 -80 ℃까지 동결시키고 액체 질소 저장 탱크의 기상에서 저장한다.
일부 구현예에서, 세포는 유전자 조작과 관련하여 또는 그 전에 인큐베이션 및/또는 배양된다. 인큐베이션 단계는 배양, 사육, 자극, 활성화 및/또는 번식을 포함할 수 있다. 인큐베이션 및/또는 조작은 배양 용기, 예컨대 유닛, 챔버, 웰, 컬럼, 튜브, 튜브 세트, 밸브, 바이알, 배양 접시, 백 또는 세포 배양 또는 배양을 위한 다른 컨테이너에서 수행될 수 있다. 일부 구현예에서, 조성물 또는 세포는 자극 조건 또는 자극제의 존재 하에 인큐베이션된다. 상기 조건에는 집단에서 세포의 증식, 증폭, 활성화 및/또는 생존을 유도하고, 항원 노출을 모방하고/거나 재조합 항원 수용체의 도입과 같은 유전자 조작을 위해 세포를 프라이밍하도록 설계된 것이 포함된다.
조건에는 특정 배지, 온도, 산소 함량, 이산화탄소 함량, 시간, 제제(agents), 예를 들어, 영양소, 아미노산, 항생제, 이온 및/또는 자극 인자, 예컨대 사이토카인, 케모카인(chemokines), 항원, 결합 파트너, 융합 단백질, 재조합 가용성 수용체 및 세포를 활성화시키도록 설계된 임의의 기타 제제 중 하나 이상이 포함될 수 있다.
일부 구현예에서, 자극 조건 또는 제제에는 TCR 복합체의 세포 내 신호 전달 도메인을 자극 또는 활성화시킬 수 있는 하나 이상의 제제, 예를 들어 리간드가 포함된다. 일부 측면에서, 상기 제제는 T 세포에서 TCR/CD3 세포 내 신호 전달 캐스케이드를 켜거나 개시한다. 상기 제제는 항체, 예컨대 TCR에 특이적인 것, 예를 들어 항-CD3을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 자극 조건은 공자극 수용체, 예를 들어 항-CD28을 자극할 수 있는 하나 이상의 제제, 예를 들어 리간드를 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 제제 및/또는 리간드는 고체 지지체, 예컨대 비드 및/또는 하나 이상의 사이토카인에 결합될 수 있다. 선택적으로, 증폭 방법은 배양 배지에 항-CD3 및/또는 항-CD28 항체를 (예를 들어, 약 0.5 ng/ml 이상의 농도로) 첨가하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 자극 제제는 IL-2, IL-15 및/또는 IL-7을 포함한다. 일부 측면에서, IL-2 농도는 약 10 단위/mL 이상이다.
일부 측면에서, 인큐베이션은 문헌[미국 특허 번호 6,040,1 77(Riddell et al.), Klebanoff et al.(2012) J Immunother. 35(9): 651-660, Terakura et al. (2012) Blood.1:72-82 및/또는 Wang et al. (2012) J Immunother. 35(9):689-701]에 기재된 바과 같은 기술에 부합되게 수행된다.
일부 구현예에서, T 세포를 배양 개시 조성물 배양보조(feeder) 세포, 예컨대 비분할 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)에 (예를 들어, 생성된 세포 집단이 증폭될 초기 집단 중 각각의 T 림프구에 대해 적어도 약 5, 10, 20 또는 40 이상의 PBMC 배양보조 세포를 함유하도록) 첨가하고; 상기 배양물을 (예를 들어, T 세포 수를 증폭하기에 충분한 시간 동안) 인큐베이션하여 증폭한다. 일부 측면에서, 비분할 배양보조 세포는 감마-조사된 PBMC 배양보조 세포를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, PBMC에 약 3000 내지 3600 라드(rad) 범위의 감마선을 조사하여 세포 분열을 방지한다. 일부 측면에서, 배양보조 세포는 T 세포 집단에 첨가하기 전에 배양 배지에 첨가된다.
일부 구현예에서, 자극 조건은 인간 T 림프구의 성장에 적합한 온도, 예를 들어, 섭씨 약 25도 이상, 일반적으로 섭씨 약 30도 이상 및 일반적으로 섭씨 37도 또는 약 37도를 포함한다. 선택적으로, 인큐베이션은 배양보조 세포로서 비분할 EBV-형질 전환 림프모구 세포(LCL)를 첨가하는 것을 추가로 포함할 수 있다. LCL은 약 6000 내지 10,000 라드 범위의 감마선으로 조사될 수 있다. 일부 측면에서, LCL 배양보조 세포는 임의의 적합한 양, 예컨대 약 10:1 이상의 LCL 배양보조 세포 대 초기 T 림프구의 비율로 제공된다.
구현예에서, 항원 특이적 T 세포, 예컨대 항원 특이적 CD4+ 및/또는 CD8+ T 세포는 항원으로 나이브 또는 항원 특이적 T 림프구를 자극하여 수득된다. 예를 들어, 항원 특이적 T 세포주 또는 클론은 감염된 대상체로부터 T 세포를 단리하고 사이토메갈로바이러스 항원으로 시험관 내에서 세포를 자극함으로써 같은 항원에 대해 생성될 수 있다.
Ⅲ. 예시적인 치료 결과 및 상기를 평가하기 위한 방법
여기에 제공된 방법, 조성물, 조합, 용도, 키트 및 제조 물품의 일부 구현예에서, 제공된 병용 요법은 하기 기재된 바와 같이 요법 또는 치료와 관련된 하나 이상의 임의의 파라미터와 관련된 특징과 같은 하나 이상의 치료 결과를 초래한다. 일부 구현예에서, 방법은 T 세포, 예를 들어, T 세포 기반 요법을 위해 투여된 T 세포의 노출, 지속성 및 증식의 평가를 포함한다. 일부 구현예에서, 여기에 제공된 방법에서 세포, 예를 들어 면역 요법을 위해 투여된 세포, 예를 들어 T 세포 요법의 기능적 활성 또는 세포 표현형에 있어서의 변화 및/또는 세포의 노출 또는 장기 증폭 및/또는 지속성은 시험관 내 또는 생체 외에서 T 세포의 특성을 평가하여 측정할 수 있다. 일부 구현예에서, 상기 평가는 여기에 제공된 병용 요법의 투여 전, 중 또는 후에 T 세포, 예를 들어 T 세포 요법의 기능을 결정하거나 확인하기 위해 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 병용 요법은 병용 요법 및/또는 지속적인 병용 요법으로 치료를 위한 대상체 확인을 위한 하나 이상의 선별 단계 및/또는 치료 결과의 평가 및/또는 치료 결과의 모니터링을 위한 단계를 더 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 치료 결과의 평가를 위한 단계는 치료를 평가 및/또는 모니터링 및/또는 요법의 추가 또는 잔여 단계의 투여 및/또는 반복 요법을 위해 대상체를 확인하기 위한 단계를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 치료 결과의 평가 및/또는 선별 단계는 여기에 제공된 병용 요법의 분량, 빈도, 지속 기간, 타이밍 및/또는 순서를 결정하는데 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 명세서에 기재된 치료 결과의 평가 및/또는 임의의 선별 단계는 제공된 병용 요법, 예를 들어 T 세포 요법의 투여(예를 들어 CAR 발현 T 세포) 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 하나 이상의 단계 중 투여 전, 중, 투여 과정 중 또는 투여 후에 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 여기에 제공된 방법 중 어느 하나를 수행하기 전, 중, 수행 과정 중 또는 수행 후에 평가가 이루어진다. 일부 구현예에서, 평가는 여기에 제공된 방법을 수행하기 전에 이루어진다. 일부 구현예에서, 평가는 여기에 제공된 방법의 하나 이상의 단계를 수행한 후에 이루어진다. 일부 구현예에서, 평가는 예를 들어, 병용 요법을 받기에 적합하고/거나 민감한 환자를 선별 및 확인하기 위해 제공된 병용 요법의 하나 이상의 단계의 투여 전에 수행된다. 일부 구현예에서, 예를 들어, 중간 또는 최종 치료 결과를 평가하기 위해, 예를 들어, 치료의 효능을 결정하고/거나 치료를 계속하거나 반복할지 여부를 결정하고/거나 병용 요법의 나머지 단계를 투여할지 여부를 결정하기 위해, 제공된 병용 요법의 하나 이상의 단계의 투여 중, 투여 과정 중 또는 투여 후에 평가가 수행된다.
일부 구현예에서, 치료 결과는 면역 기능, 예를 들어 세포 기반 요법을 위해 투여된 T 세포 및/또는 체내 내인성 T 세포의 면역 기능의 개선을 포함한다. 일부 구현예에서, 예시적인 치료 결과는, 대상체에 투여된 조작된 T 세포, 예를 들어 CAR-T 세포와 관련된 특징과 같은 향상된 T 세포 증식, 향상된 T 세포 기능 활성, 면역 세포 표현형 마커 발현의 변화를 포함하나 이에 국한되지 않는다. 일부 구현예에서, 예시적인 치료 결과는 감소된 질병 부담, 예를 들어, 종양 부담, 개선된 임상 결과 및/또는 치료 효능의 향상을 포함한다.
일부 구현예에서, 치료 결과의 평가 및/또는 선별 단계는 세포 기반 요법을 위해 투여된 T 세포의 생존 및/또는 기능을 평가하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 치료 결과의 평가 및/또는 선별 단계는 사이토카인 또는 성장 인자의 수준을 평가하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 치료 결과의 평가 및/또는 선별 단계는 질병 부담 및/또는 개선을 평가하는 것, 예를 들어 종양 부담 및/또는 임상 결과를 평가하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 치료 결과의 평가 및/또는 선별 단계 중 어느 하나는 임의의 평가 방법 및/또는 본 명세서에 기재되고/거나 당업계에 공지된 평가를 포함할 수 있고, 예를 들어 병용 요법의 하나 이상의 단계의 투여 전, 중, 투여 과정 중 또는 투여 후에 1회 이상 수행될 수 있다. 여기에 제공된 방법의 일부 구현예에서 평가될 수 있는 치료 결과와 관련된 파라미터의 예시적인 세트는 말초 혈액 면역 세포 집단 프로파일 및/또는 종양 부담을 포함한다.
일부 구현예에서, 방법은 대상체에서 세포 요법의 효능에 영향을 미친다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)를 투여한 방법에서 분량의 세포 투여 후에 대상체에서 재조합 수용체 발현, 예를 들어 CAR 발현 세포의 지속성, 증폭 및/또는 존재는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)를 투여하지 않는 방법을 통해 달성된 것에 비해 보다 크다. T 세포 요법(예를 들어 CAR 발현 T 세포)과 같은 여기에 제공된 면역요법 방법의 일부 구현예에서, 대상체에서 면역요법, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 T 세포의 증폭 및/또는 지속성을, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 부재하에 면역요법이 대상체에 투여되는 방법과 비교하여 평가하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 본 방법은, T 세포 요법이 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 부재하에 대상체에 투여되는 방법과 비교하여, 대상체에서 증가되거나 연장된 증폭 및/또는 지속성을 나타내는 투여된 T 세포를 초래한다.
일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여는, 재조합 수용체를 발현하는 분량의 세포가 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 부재하에 대상체에 투여되는 방법과 비교하여, 대상체에서 질병 부담, 예를 들어, 종양 부담을 감소시킨다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여는, 재조합 수용체를 발현하는 분량의 세포가 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 부재하에 대상체에 투여되는 방법과 비교하여, 대상체에서 아골수를 감소시킨다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여는, 재조합 수용체를 발현하는 분량의 세포가 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 부재하에 대상체에 투여되는 방법과 비교하여, 임상 결과, 예를 들어 객관적인 반응율(objective response rate, ORR), 무진행 생존(progression-free survival, PFS) 및 전반적인 생존(OS)의 개선을 초래한다.
일부 구현예에서, 대상체는 병용 요법의 하나 이상의 단계의 투여 전에 선별될 수 있다. 예를 들어, 대상체는 병용 요법의 투여 전에, 병용 요법 투여에 대한 적합성, 반응성 및/또는 민감도를 결정하기 위해 질병의 특성 및/또는 질병 부담, 예를 들어, 종양 부담에 대해 선별될 수 있다. 일부 구현예에서, 치료 결과의 평가 및/또는 선별 단계는 여기에 제공된 병용 요법의 분량, 빈도, 지속 기간, 타이밍 및/또는 순서를 결정하는데 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 대상체는 병용 요법의 나머지 단계를 받을 대상체를 결정하고 확인하고/거나 요법의 효능을 모니터링하기 위해 병용 요법의 단계 중 하나의 투여 후에 선별될 수 있다. 일부 구현예에서, 투여된 T 세포의 수, 수준 또는 양 및/또는 투여된 T 세포의 증폭 및/또는 활성은 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 전 및/또는 투여 후에 평가된다.
일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 세포 요법 투여 후에 투여된다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 하나 이상의 주기(예를 들어, 28일 주기)는 세포 요법 투여 후 약 22 내지 50일 이상까지 투여되지 않는다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 첫번째 주기는 세포 요법 투여 후 약 22 내지 50일 이상까지 투여되지 않는다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 하나 이상의 주기(예를 들어, 첫번째 주기)는 세포 요법 투여 후 약 22 내지 50일 시점에 투여된다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)는 주기에서 1회 이상 투여된다. 일부 구현예에서, 주기는 28일 주기이다.
일부 구현예에서, 상이한 평가 시점, 상이한 조건, 기준 점 및/또는 상이한 대상체에서의 동일한 파라미터 또는 결과의 수준, 수치 또는 측정치에 비해 파라미터 또는 결과의 수준, 수치 또는 측정치에 있어서 변화 및/또는 변경, 예를 들어 증가, 상승, 감소 또는 삭감이 결정되거나 평가된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 상이한 조건에서, 예를 들어 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 전 동일한 파라미터에 비해 특정 파라미터, 예를 들어 샘플에서 조작된 T 세포 수에서의 배수 변화, 예를 들어, 증가 또는 감소가 결정될 수 있다. 일부 구현예에서, 2 이상의 파라미터의 수준, 수치 또는 측정치가 결정되고 상대적 수준이 비교된다. 일부 구현예에서, 파라미터의 결정된 수준, 수치 또는 측정치는 대조군 샘플 또는 처리되지 않은 샘플로부터의 수준, 수치 또는 측정치와 비교된다. 일부 구현예에서, 파라미터의 결정된 수준, 수치 또는 측정치는 동일한 대상체이나 상이한 시점에서의 샘플의 수준과 비교된다. 개별 파라미터의 정량화에서 수득된 수치는 다중 파라미터 분석을 사용하여 파라미터의 수준, 수치 또는 측정치에 산술적 또는 논리적 연산을 형성함으로써 질병 평가의 목적을 위해 조합될 수 있다. 일부 구현예에서, 2 이상의 특정 파라미터의 비율을 계산할 수 있다.
A. T 세포 노출, 지속성 및 증식
일부 구현예에서, 선별 단계 및/또는 치료 결과의 평가 및/또는 치료 결과의 모니터링을 위해 평가될 수 있는 파라미터를 포함한, 요법 또는 치료 결과와 관련된 파라미터는, T 세포, 예를 들어, T 세포 기반 요법을 위해 투여된 T 세포의 노출, 지속성 및 증식의 평가이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 여기에 제공된 방법에서 세포, 예를 들어 면역 요법을 위해 투여된 세포, 예를 들어 T 세포 요법의 기능적 활성 또는 세포 표현형에 있어서의 변화 및/또는 세포의 노출 증가 또는 장기 증폭 및/또는 지속성은 시험관 내 또는 생체 외에서 T 세포의 특성을 평가함으로써 측정할 수 있다. 일부 구현예에서, 상기 평가는 여기에 제공된 병용 요법의 하나 이상의 단계 투여 전 또는 후에 면역 요법, 예를 들어 T 세포 요법에 사용된 T 세포의 기능을 결정하거나 확인하기 위해 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여는 예컨대 시간에 따른 증폭 및/또는 지속성을 촉진함으로써 세포, 예를 들어, T 세포 기반 요법을 위해 투여된 T 세포에 대한 대상체의 노출을 촉진하도록 설계된다. 일부 구현예에서, T 세포 요법은, T 세포 요법이 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 부재하에 대상체에 투여되는 방법과 비교하여, 대상체에서 증가되거나 연장된 증폭 및/또는 지속성을 나타낸다.
일부 구현예에서, 제공된 방법은 투여된 세포에 대한 대상체의 노출을 증가(예를 들어, 시간에 따른 세포 수 또는 지속 기간의 증가)시키고/거나 면역 요법, 예를 들어 T 세포 요법의 효능 및 치료 결과를 개선시킨다. 일부 측면에서, 방법은 재조합 수용체, 예를 들어 CAR 발현 세포를 발현하는 세포에 대한 보다 많은 및/또는 보다 오랜 정도의 노출은 다른 방법에 비해 치료 결과를 개선시킨다는 점에서 유리하다. 상기 결과는 심각한 종양 부담을 가진 개인에서조차 환자 생존 및 완화를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여는, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 부재하에 T 세포 단독 투여에 비해 대상체에서 세포, 예를 들어 T 세포 기반 요법을 위해 투여된 T 세포에 대한 노출의 지속 기간 및/또는 최대, 총 노출을 증가시킬 수 있다. 일부 측면에서, 높은 질병 부담(및 따라서 보다 많은 양의 항원) 및/또는 보다 공격적이거나 내성이 있는 암의 맥락에서 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여는, 세포의 증폭 및/또는 지속성을 방해할 수 있는 면역 억제, 아네르기 및/또는 고갈을 초래할 수 있는 동일한 맥락에서 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 부재 하에 T 세포 단독 투여와 비교하여 효능을 향상시킨다.
일부 구현예에서, T 세포 투여 후 및 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 전, 중 및/또는 후에 대상체에서 재조합 수용체(예를 들어, T 세포 기반 요법을 위해 투여된 CAR 발현 세포)를 발현하는 세포의 존재 및/또는 양이 검출된다. 일부 측면에서, 정량적 PCR(qPCR)은 대상체의 혈액 또는 혈청 또는 기관 또는 조직 샘플(예를 들어, 질병 부위, 예를 들어, 종양 샘플)에서 재조합 수용체(예를 들어, T 세포 기반 요법을 위해 투여된 CAR 발현 세포)를 발현하는 세포의 양을 분석하기 위해 사용된다. 일부 측면에서, 지속성은 DNA 마이크로그램당 수용체, 예를 들어, CAR을 암호화하는 DNA 또는 플라스미드의 카피수 또는 샘플, 예를 들어 혈액 또는 혈청 마이크로리터당 수용체 발현, 예를 들어, CAR 발현 세포 수 또는 샘플 마이크로리터당 말초 혈액 단핵 세포(PBMC) 또는 백혈구 또는 T 세포의 총 수당 정량화된다.
일부 구현예에서, 세포는 T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포의 투여 후, 4, 7, 10, 14, 18, 21, 24, 27 또는 28 일 또는 4, 7, 10, 14, 18, 21, 24, 27 또는 28 일 이상 후에 대상체에서 검출된다. 일부 측면에서, 세포는 T 세포 투여 후 2, 4 또는 6주 또는 2, 4 또는 6주 이상 후 또는 3, 6 또는 12, 18 또는 24 또는 30 또는 36개월 후 또는 1, 2, 3, 4, 5년 이상 후에 검출된다.
일부 구현예에서, T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 후 본 방법에 의한 대상체에서 수용체 발현 세포(예를 들어 CAR 발현 세포)의 지속성은, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 부재 하에 면역 요법 단독 투여, 예를 들어 T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 투여를 포함하는 것과 같은 대안적인 방법에 의해 달성되는 것에 비해 더 좋다.
증폭 및/또는 지속성을 나타내는 노출, 예를 들어, 세포, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 T 세포 수는, 대상체가 노출된 최대 세포 수, 특정 수 또는 백분율 이상에서 검출 가능한 세포 또는 세포들의 지속 기간, 시간에 따른 세포 수에 대한 곡선 하 면적 및/또는 이의 조합 및 이의 지표의 관점에서 명시된다. 특정 샘플, 예를 들어 혈액, 혈청, 혈장 또는 조직, 예컨대 종양 샘플에서 핵산 또는 DNA의 총 양에 비해 재조합 수용체를 암호화하는 핵산의 카피 수를 검출하기 위해 qPCR과 같은 공지된 방법 및/또는 일반적으로 수용체에 특이적인 항체를 이용하여 수용체 발현 세포를 검출하는 유동 세포 분석법을 이용하여 상기 결과를 평가할 수 있다. 세포 기반 분석은 수용체에 의해 인식되는 항원을 발현하거나 질병 또는 병태의 세포에 대해 반응, 예를 들어 세포 독성 반응을 유도하고/거나 중화하고/거나 이에 결합할 수 있는 세포와 같은 기능성 세포의 수 또는 백분율을 검출하기 위해 또한 사용될 수 있다.
일부 측면에서, 세포에 대한 대상체의 노출 증가는 세포의 증가된 증폭을 포함한다. 일부 구현예에서, 세포, 예를 들어 CAR 발현 세포를 발현하는 수용체는 T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 투여 후에 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 후에 대상체에서 증폭된다. 일부 측면에서, 방법은 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편) 투여의 부재 하에 T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 투여를 포함하는 것과 같은 다른 방법에 비해 세포의 보다 많은 증폭을 초래한다.
일부 측면에서, 방법은 예를 들어, 유동 세포 분석에 의해 측정된 바와 같이 생체 내에서 투여된 세포의 고도의 증식을 초래한다. 일부 측면에서, 세포의 높은 피크 비율이 검출된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 후에 피크 또는 최대 수준에서, 대상체의 혈액 또는 질병 부위 또는 이의 백혈구 분획, 예를 들어 PBMC 분획 또는 T 세포 분획에서, 약 10% 이상, 약 20% 이상, 약 30% 이상, 약 40% 이상, 약 50% 이상, 약 60% 이상, 약 70% 이상, 약 80% 이상 또는 약 90% 이상의 세포가 재조합 수용체, 예를 들어 CAR을 발현한다.
일부 구현예에서, 방법은 대상체의 혈액 또는 혈청 또는 다른 체액 또는 기관 또는 조직에서, DNA 마이크로그램당 수용체, 예를 들어 CAR을 암호화하는 100, 500, 1000, 1500, 2000, 5000, 10,000 또는 15,000 카피 이상의 핵산 또는 말초 혈액 단핵 세포(PBMC) 전체 수당, 단핵 세포 전체 수당, T 세포 전체 수당 또는 마이크로리터 중 전체 수당 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8 또는 0.9 이상의 수용체 발현, 예를 들어 CAR 발현 세포의 최대 농도를 초래한다. 일부 구현예에서, 수용체를 발현하는 세포는, T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 36, 48 또는 52주 이상 동안 또는 상기 투여 후 1, 2, 3, 4 또는 5년 이상 동안 대상체의 혈액에서 전체 PBMC의 10, 20, 30, 40, 50 또는 60% 이상 및/또는 상기 수준으로 검출된다.
일부 측면에서, 방법은 예를 들어, 대상체의 혈청, 혈장, 혈액 또는 조직, 예를 들어, 종양 샘플에서 DNA 마이크로그램당 재조합 수용체, 예를 들어, CAR을 암호화하는 핵산의 카피수에 있어서 2배 이상, 4배 이상, 10배 이상 또는 20배 이상 증가를 초래한다.
일부 구현예에서, 수용체를 발현하는 세포는, T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 투여 후 또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 후 적어도 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59 또는 60일 이상, T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 후 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24주 이상 동안 또는 약 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24주 이상 동안 예를 들어, qPCR 또는 유동 세포 분석 기반 검출 방법과 같은 명시된 방법에 의해 대상체의 혈청, 혈장, 혈액 또는 조직, 예를 들어, 종양 샘플에서 검출 가능하다.
일부 측면에서, 약 1 x 102 이상, 약 1 x 103 이상, 약 1 x 104 이상, 약 1 x 105 이상 또는 약 1 x 106 이상 또는 약 5 x 106 이상 또는 약 1 x 107 이상 또는 약 5 x 107 이상 또는 약 1 x 108개 이상의 재조합 수용체 발현, 예를 들어, CAR 발현 세포 및/또는 마이크로리터당 10, 25, 50, 100, 200, 300, 400 또는 500 또는 1000개 이상의 수용체 발현 세포, 예를 들어 마이크로리터당 10개 이상이 대상체 또는 유체, 혈장, 혈청, 조직 또는 이의 구획, 예컨대 혈액, 예를 들어 말초 혈액 또는 이의 질병 부위, 예를 들어 종양에 존재하거나 검출 가능하다. 일부 구현예에서, 세포의 상기 수 또는 농도가 T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 투여 후 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 후 약 20 일 이상, 약 40 일 이상 또는 약 60 일 이상 또는 약 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개월 이상 또는 2 또는 3년 이상 동안 대상체에서 검출 가능하다. 상기 세포 수는 유동 세포 분석 기반 또는 정량적 PCR 기반 방법 및 공지된 방법을 이용한 총 세포 수에 대한 추정에 의해 검출될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Brentjens et al., Sci Transl Med. 2013 5(177), Park et al, Molecular Therapy 15(4):825-833 (2007), Savoldo et al., JCI 121(5):1822-1826 (2011), Davila et al., (2013) PLoS ONE 8(4):e61338, Davila et al., Oncoimmunology 1(9):1577-1583 (2012), Lamers, Blood 2011 117:72-82, Jensen et al., Biol Blood Marrow Transplant 2010 September; 16(9): 1245-1256, Brentjens et al., Blood 2011 118(18):4817-4828]을 참조한다.
일부 측면에서, 예를 들어 말초 혈액 또는 골수 또는 다른 구획에서, 면역 조직 화학, PCR 및/또는 유동 세포 분석에 의해 측정된 바와 같이, 100개의 세포당 재조합 수용체를 암호화하는 핵산의 카피 수, 예를 들어, 벡터 카피 수는, 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 후 0.01 이상, 0.1 이상, 1 이상 또는 10 이상, 약 1주, 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 5주 또는 약 6주 이상 또는 약 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8. 9, 10, 11 또는 12개월 이상 또는 2 또는 3년 이상이다. 일부 구현예에서, 게놈 DNA의 마이크로그램당 수용체, 예를 들어 CAR을 발현하는 벡터의 카피 수는, T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 후 약 1주, 약 2주, 약 3주 또는 약 4주 이상의 시기에 100 이상, 1000 이상, 5000 이상 또는 10,000 이상 또는 15,000 이상 또는 20,000개 이상이거나 상기 투여 후 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개월 이상 또는 2 또는 3년 이상이다.
일부 측면에서, 세포에 의해 발현된 수용체, 예를 들어 CAR은, 세포 투여 후, 예를 들어 T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 개시 후 약 3개월 이상, 약 6개월 이상, 약 12개월 이상, 약 1년 이상, 약 2년 이상, 적어도 약 3년 또는 3년 이상의 시기에, 대상체, 혈장, 혈청, 혈액, 조직 및/또는 이의 질병 부위, 예를 들어 종양 부위에서 정량적 PCR(qPCR) 또는 유동 세포 분석에 의해 검출 가능하다.
일부 구현예에서, T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 후 시간에 따른 대상체의 유체, 혈장, 혈청, 혈액, 조직, 기관 및/또는 질병 부위, 예를 들어 종양 부위에서 수용체(예를 들어 CAR) 발현 세포의 농도에 대한 곡선 하 면적(area under the curve, AUC)은, 대상체에 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 부재 하에 T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포를 투여하는 대안 용량 요법에 의해 달성된 것에 비해 보다 크다.
일부 측면에서, 방법은 예를 들어, 유동 세포 분석에 의해 측정된 바와 같이 생체 내에서 투여된 세포의 고도의 증식을 초래한다. 일부 측면에서, 세포의 높은 피크 비율이 검출된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, T 세포, 예를 들어 CAR 발현 T 세포 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 후 피크 또는 최대 수준에서, 대상체의 혈액, 혈장, 혈청, 조직 또는 질병 부위 또는 이의 백혈구 분획, 예를 들어 PBMC 분획 또는 T 세포 분획에서, 약 10% 이상, 약 20% 이상, 약 30% 이상, 약 40% 이상, 약 50% 이상, 약 60% 이상, 약 70% 이상, 약 80% 이상 또는 약 90% 이상의 세포가 재조합 수용체, 예를 들어 CAR을 발현한다.
일부 측면에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)가 투여된 대상체에서 분량의 세포의 증가되거나 연장된 증폭 및/또는 지속성은 대상체의 종양 관련 결과에서의 이점과 관련된다. 일부 구현예에서, 종양 관련 결과에는 대상체의 종양 부담 감소 또는 아골수의 감소가 포함된다. 일부 구현예에서, 종양 부담은 본 방법 투여 후 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 이상 또는 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 감소된다. 일부 구현예에서, 질병 부담, 종양 크기, 종양 부피, 종양 질량 및/또는 종양 부하 또는 규모는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여를 수반하지 않는 방법으로 치료된 대상체에 비해 분량의 세포 투여 후에 적어도 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 이상 또는 약 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 이상 감소된다.
B. T 세포 기능적 활성
일부 구현예에서, 선별 단계 및/또는 치료 결과의 평가 및/또는 치료 결과의 모니터링을 위해 평가될 수 있는 파라미터를 포함한, 요법 또는 치료 결과와 관련된 파라미터에는, T 세포의 하나 이상의 활성, 표현형, 증식 또는 기능이 포함된다. 일부 구현예에서, T 세포, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 T 세포의 활성, 표현형, 증식 및/또는 기능을 평가하기 위해 당업계에 공지된 임의의 분석을 이용할 수 있다. 일부 구현예에서, 세포 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 전 및/또는 후에, 조작된 세포 집단의 생물학적 활성이, 예를 들어 다수의 공지된 임의의 방법으로 측정된다. 평가 파라미터에는 생체 내에서, 예를 들어 영상화에 의해 또는 생체 외에서, 예를 들어 ELISA 또는 유동 세포 분석에 의해, 항원에 대한 조작된 또는 천연 T 세포 또는 다른 면역 세포의 특이적 결합이 포함된다. 특정 구현예에서, 조작된 세포가 표적 세포를 파괴하는 능력은, 예를 들어 문헌[Kochenderfer et al., J. Immunotherapy, 32(7): 689-702 (2009) 및 Herman et al. J. Immunological Methods, 285(1): 25-40 (2004)]에 기재된 세포 독성 평가와 같은 당업계에 공지된 임의의 적합한 방법을 사용하여 측정될 수 있다. 특정 구현예에서, 세포의 생물학적 활성은 하나 이상의 사이토카인, 예컨대 CD107a, IFNγ, IL-2, GM-CSF 및 TNFα의 발현 및/또는 분비를 평가하고/거나 세포 독성 활성을 평가함으로써 측정된다.
일부 구현예에서, T 세포, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 T 세포의 활성, 표현형, 증식 및/또는 기능에 대한 평가에는 ELISPOT, ELISA, 세포 증식, 세포 독성 림프구(cytotoxic lymphocyte, CTL) 분석, T 세포 에피토프, 항원 또는 리간드에 대한 결합 또는 세포 내 사이토카인 염색, 증식 평가, 림포카인(lymphokine) 분비 평가, 직접적인 세포 독성 평가 및 제한 희석 평가가 포함되나 이에 국한되지 않는다. 일부 구현예에서, T 세포의 증식 반응은 예를 들어, 이의 DNA로 3H-티미딘, BrdU(5-브로모-2’-데옥시우리딘) 또는 2’-데옥시-5-에티닐우리딘(EdU)의 통합 또는 카복시플루오레세인 디아세테이트 숙신이미딜 에스테르(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFSE), 세포 추적 바이올렛(CellTrace Violet) 또는 막 염료 PKH26과 같은 염료를 이용한 염료 희석 평가에 의해 측정될 수 있다.
일부 구현예에서, T 세포, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 T 세포의 활성, 표현형, 증식 및/또는 기능의 평가에는 T 세포로부터 사이토카인 생성의 측정 및/또는 대상체로부터의 생물학적 샘플, 예를 들어 혈장, 혈청, 혈액 및/또는 조직 샘플, 예를 들어 종양 샘플에서 사이토카인의 생성을 측정하는 것이 포함된다. 일부 경우에, 상기 측정된 사이토카인에는 인터레쿠킨-2(interlekukin-2, IL-2), 인터페론-감마(IFNg), 인터루킨-4(IL-4), TNF-알파(TNFα), 인터루킨-6(IL-6), 인터루킨-10(IL-10), 인터루킨-12(IL-12), 과립구 대식세포 콜로니 자극 인자(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF), CD107a 및/또는 TGF-베타(TGFβ)가 포함될 수 있으나 이에 국한되지 않는다. 사이토카인 측정 분석법은 당업계에 널리 공지되어 있으며, ELISA, 세포 내 사이토카인 염색, 세포 계량 비드 어레이, RT-PCR, ELISPOT, 유동 세포 분석 및 관련 사이토카인에 대해 반응하는 세포가 테스트 샘플의 존재 하에 반응성(예를 들어 증식)이 테스트되는 생체 분석을 포함하나 이에 국한되지 않는다.
일부 구현예에서, T 세포, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 T 세포의 활성, 표현형, 증식 및/또는 기능의 평가에는 세포 표현형, 예를 들어 특정 세포 표면 마커의 발현을 평가하는 것이 포함된다. 일부 구현예에서, T 세포, 예를 들어 T 세포 요법을 위해 투여된 T 세포는 T 세포 활성화 마커, T 세포 고갈 마커 및/또는 T 세포 분화 마커의 발현에 대해 평가된다. 일부 구현예에서, 세포 표현형은 투여 전에 평가된다. 일부 구현예에서, 세포 표현형은 세포 요법 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 중 또는 투여 후에 평가된다. 평가를 위한 T 세포 활성화 마커, T 세포 고갈 마커 및/또는 T 세포 분화 마커에는 특정 서브세트의 T 세포, 예를 들어 CD25, CD38, 인간 백혈구 항원-DR(human leukocyte antigen-DR, HLA-DR), CD69, CD44, CD137, KLRG1, CD62Llow, CCR7low, CD71, CD2, CD54, CD58, CD244, CD160, 프로그램된 세포 사멸 단백질 1(programmed cell death protein 1, PD-1), 림프구 활성화 유전자 3 단백질(lymphocyte activation gene 3 protein, LAG-3), T 세포 면역글로불린 도메인 및 뮤신 도메인 단백질 3(T-cell immunoglobulin domain and mucin domain protein 3, TIM-3), 세포 독성 T 림프구 항원 4(cytotoxic T lymphocyte antigen-4, CTLA-4), 밴드 T 림프구 감쇠기(band T lymphocyte attenuator, BTLA) 및/또는 T 세포 면역글로불린 및 면역수용체 티로신 기반 억제성 모티프 도메인(T-cell immunoglobulin and immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif domain, TIGIT)에 대해 당업계에 공지된 임의의 마커가 포함된다. 일부 구현예에서, 평가된 세포 표면 마커는 CD25, PD-1 및/또는 TIM-3이다. 일부 구현예에서, 평가된 세포 표면 마커는 CD25이다.
일부 측면에서, 발현 수준의 검출에는 시험관 내 평가 수행이 포함된다. 일부 구현예에서, 시험관 내 평가에는 면역평가, 앱타머(aptamer) 기반 평가, 조직학적 또는 세포학적 평가 또는 mRNA 발현 수준 평가가 있다. 일부 구현예에서, 각각의 하나 이상의 인자, 이펙터, 효소 및/또는 표면 마커 중 하나 이상에 대한 파라미터(들)는 ELISA(enzyme linked immunosorbent assay), 면역블롯팅, 면역침강법, RIA(radioimmunoassay), 면역염색, 유동 세포 분석, SPR(surface plasmon resonance), 화학 발광 분석, 측면 유동 면역 분석(lateral flow immunoassay), 억제 분석 또는 친화도 분석에 의해 검출된다. 일부 구현예에서, 사이토카인 및/또는 표면 마커의 검출은 하나 이상의 바이오마커에 특이적으로 결합하는 결합하는 결합 시약을 사용하여 결정된다. 일부 경우에, 결합 시약은 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 앱타머(aptamer) 또는 핵산 프로브이다.
일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여는 순환하는 CAR T 세포의 수준을 증가시킨다.
C. 반응, 효능 및 생존
일부 구현예에서, 선별 단계 및/또는 치료 결과의 평가 및/또는 치료 결과의 모니터링을 위해 평가될 수 있는 파라미터를 포함한, 요법 또는 치료 결과와 관련된 파라미터에는 종양 또는 질병 부담이 포함된다. T 세포 요법(예를 들어 CAR 발현 T 세포) 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)와 같은 면역 요법의 투여는 대상체에서 질병 또는 병태의 확대 또는 부담을 감소시키거나 방지할 수 있다. 예를 들어, 질병 또는 병태가 종양인 경우, 방법은 일반적으로 골수 또는 분자 검출 가능한 암에서 종양 크기, 규모, 전이, 아형의 비율을 감소시키고/거나 예후 또는 생존 또는 종양 부담과 관련된 다른 증상을 개선한다.
일부 측면에서, 제공된 방법 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물에 부합하는 투여는 일반적으로 대상체에서 질병 또는 병태의 확대 또는 부담을 감소시키거나 방지한다. 예를 들어, 질병 또는 병태가 종양인 경우, 방법은 일반적으로 골수 또는 분자 검출 가능한 암에서 종양 크기, 규모, 전이, 아형의 비율을 감소시키고/거나 예후 또는 생존 또는 종양 부담과 관련된 다른 증상을 개선한다.
일부 구현예에서, 제공된 방법은 T 세포 요법(예를 들어 CAR 발현 T 세포)과 같은 면역 요법이 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여없이 제공된 대안적인 방법에 비해 치료된 대상체에서 종양 부담의 감소를 초래한다. 실제로 병용 요법을 받는 모든 대상체에서 종양 부담이 감소될 필요는 없으나, 예컨대 상기 병용 요법으로 치료받은 대상체의 대다수가 종양 부담의 감소를 나타내고, 예컨대 병용 요법으로 치료받은 대상체의 적어도 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% 이상이 종양 부담의 감소를 나타내는 임상 데이터에 근거하여, 치료받은 대상체에서 종양 부담은 평균적으로 감소된다.
질병 부담은 종양 또는 예를 들어, 전이를 나타내는 다른 위치의 기관 또는 조직과 같은 대상체 또는 대상체의 기관, 조직 또는 체액에서 질병의 총 세포 수를 포함할 수 있다. 예를 들어, 종양 세포는 특정 혈액학적 악성 종양의 맥락에서 혈액, 림프 또는 골수에서 검출 및/또는 정량화될 수 있다. 일부 구현예에서, 질병 부담은 종양의 질량, 전이의 수 또는 범위 및/또는 골수에 존재하는 아세포의 백분율을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 대상체는 골수종, 림프종 또는 백혈병을 가지고 있다. 질병 부담의 정도는 혈액 또는 골수에 있는 잔류 백혈병의 평가에 의해 결정될 수 있다. 일부 구현예에서, 대상체는 비호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma, NHL), 급성 림프아구성 백혈병(acute lymphoblastic leukemia, ALL), 만성 림프구성 백혈병(chronic lymphocytic leukemia, CLL), 미만성 거대 B 세포 림프종(Diffuse Large B-Cell Lymphoma, DLBCL) 또는 골수종, 예를 들어 다발성 골수종(multiple myeloma, MM)을 갖는다. 일부 구현예에서, 대상체는 MM 또는 DBCBL을 갖는다.
일부 측면에서, NHL을 갖는 대상체와 같은 대상체의 반응 속도는 루가노 기준(Lugano criteria)에 기초한다(Cheson et al., (2014) JCO., 32(27):3059-3067; Johnson et al., (2015) Radiology 2:323-338; Cheson, B.D. (2015) Chin. Clin. Oncol. 4(1):5). 일부 측면에서, 반응 평가는 임상적, 혈액학적 및/또는 분자적 방법 중 어느 하나를 활용한다. 일부 측면에서, 루가노 기준을 사용하여 평가된 반응은 적절한 것으로 양전자 방출 단층 촬영(positron emission tomography, PET)-컴퓨터 단층 촬영(computed tomography, CT) 및/또는 CT의 사용을 수반한다. PET-CT 평가는 FDG-친화성 림프종(FDG-avid lymphoma)에 대한 플루오로데옥시글루코스(fluorodeoxyglucose, FDG)의 사용을 더 포함할 수 있다. 일부 측면에서, PET-CT가 FDG-친화성 조직 구조에서 반응을 평가하는데 사용될 경우, 5점 척도를 사용할 수 있다. 어떤 면에서, 5점 척도는: 1, 바탕을 상회하는 흡수 없음; 2, 흡수 ≤ 종경막; 3, 흡수 > 종경막이나 ≤ 간; 4, 중간 정도로 흡수 > 간; 5, 간 및/또는 새로운 병변에서보다 현저히 많은 흡수; X, 림프종과 관련이 있을 것 같지 않은 새로운 영역 흡수;의 기준을 포함한다.
일부 측면에서, 루가노 기준을 사용하여 기재된 바와 같은 완전한 반응은 다양한 측정 가능한 부위에서의 완전한 대사 반응 및 완전한 방사선 반응을 포함한다. 일부 측면에서, 상기 부위는 림프절 및 림프 외 부위를 포함하며, 여기서 CR은 PET-CT가 사용될 경우 5점 척도에서 잔류 질량을 갖거나 갖지 않는 1, 2 또는 3의 점수로 기재된다. 일부 측면에서, 생리학적 흡수가 많거나 비장 또는 골수 내 활성화(예를 들어, 화학 요법 또는 골수성 콜로니 자극 인자 사용)가 있는 왈데이어 고리(Waldeyer’s ring) 또는 결절 외 부위에서, 흡수가 정상 종격막 및/또는 간에서보다 더 많을 수 있다. 상기 상황에서, 조직이 많은 생리적 흡수를 하더라도 초기 관여 부위에서의 흡수가 주변 정상 조직보다 더 많지 않으면 완전한 대사 반응이 유추될 수 있다. 일부 측면에서, 반응은 CT를 사용하여 림프절에서 평가되며, 여기서 CR은 질병 및 표적 결절/결절의 집합체의 림프 외 부위가 병변의 가장 긴 횡방향 직경(LDi)에서 ≤ 1.5 cm까지 퇴화해서는 안되는 것으로 설명된다. 추가 평가 부위는 골수를 포함하며, 여기서 PET-CT 기반 평가는 골수에서 FDG-친화성 질병의 증거가 부족함을 나타내야 하고, CT 기반 평가는 정상적인 형태를 나타내야 하며, 불명확한 경우 IHC 음성이어야 한다. 추가 부위는 정상으로 회귀해야 하는 기관 확대의 평가를 포함할 수 있다. 일부 측면에서, CR의 경우 없어야 하는 비측정 병변 및 새로운 병변이 평가된다(Cheson et al., (2014) JCO., 32(27):3059-3067; Johnson et al., (2015) Radiology 2:323-338; Cheson, B.D. (2015) Chin. Clin. Oncol. 4(1):5).
일부 측면에서, 루가노 기준을 사용하여 기재된 바와 같은 부분 반응(PR)은 다양한 측정 가능한 부위에서의 부분적인 대사 반응 및/또는 방사선 반응을 포함한다. 일부 측면에서, 상기 부위는 림프절 및 림프 외 부위를 포함하며, 여기서 PR은 PET-CT가 사용될 경우 기준선 및 잔류 질량(들)의 임의의 크기와 비교하여 섭취가 감소된 4 또는 5의 점수로 기재된다. 잠정적으로, 상기 발견은 반응하는 질병을 나타낼 수 있다. 치료 말기에, 상기 발견은 잔류 질병을 나타낼 수 있다. 일부 측면에서, 반응은 CT를 사용하여 림프절에서 평가되며, 여기서 PR은 최대 6개의 측정 가능한 표적 결절 및 결절 외 부위의 SPD에서 ≥50% 감소로 설명된다. 병변이 CT에서 측정하기에 너무 작은 경우, 5 mm × 5 mm가 기본 값으로 할당되고; 병변이 더 이상 보이지 않는 경우, 상기 값은 0 mm × 0 mm이며; 결절이 >5 mm × 5 mm이나 정상보다 더 작은 경우, 실제 측정치가 계산에 사용된다. 추가 평가 부위는 골수를 포함하며, 여기서 PET-CT 기반 평가는 기준선(허용된 화학 요법으로부터의 반응 변화와 양립 가능한 확산 흡수)과 비교하여 감소되나 정상 골수에서의 흡수보다 더 많은 잔류 흡수를 나타내야 한다. 일부 측면에서, 결절 반응의 맥락에서 골수에서 지속적인 병소의 변화가 있는 경우, MRI 또는 생검법 또는 간격 검사로 추가 평가를 하는 것이 고려되어야 한다. 일부 측면에서, 추가 부위는 기관 확대의 평가를 포함할 수 있으며, 비장은 길이에 있어 정상 이상으로 >50%까지 퇴화되었어야 한다. 일부 측면에서, 비측정 병변 및 새로운 병변이 평가되고, PR의 경우 부재/정상, 퇴화되어야 하나 증가해서는 안된다. 어떤 반응성/안정성 질병(stable disease, SD) 또는 진행성 질병(progressive disease, PD)도 PET-CT 및/또는 CT 기반 평가를 사용하여 측정될 수 없다(Cheson et al., (2014) JCO., 32(27):3059-3067; Johnson et al., (2015) Radiology 2:323-338; Cheson, B.D. (2015) Chin. Clin. Oncol., 4(1):5).
일부 측면에서, 무진행성 생존(progression-free survival, PFS)은 대상체가 질병을 갖고 살지만 악화되지 않는 암과 같은 질병의 치료 중 및 치료 후의 시간 길이로 설명된다. 일부 측면에서, 객관적인 반응(objective response, OR)은 측정 가능한 반응으로 설명된다. 일부 측면에서, 객관적인 반응율(objective response rate, ORR)은 CR 또는 PR을 달성한 환자의 비율로 설명된다. 일부 측면에서, 전반적인 생존(overall survival, OS)은 질병으로 진단된 대상체가 여전히 살아 있는, 암과 같은 질병에 대한 치료 시작 또는 진단일 중 하나로부터의 시간 길이로 설명된다. 일부 측면에서, 이벤트 없는 생존(event-free survival, EFS)은 치료가 방해 또는 지연되도록 의도된 특정 합병증 또는 이벤트 없는 채로 대상체가 존속하는 치료 후 암 말기 동안 시간의 길이로 설명된다. 상기 이벤트는 뼈에까지 퍼지는 암으로부터의 뼈 통증과 같은 특정 증상의 개시 또는 암의 재발 또는 죽음을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 반응 기간(duration of response, DOR)의 측정은 종양 반응의 문서화에서 질병 진행까지의 시간을 포함한다. 일부 구현예에서, 반응을 평가하기 위한 파라미터에는 지속적인 반응, 예를 들어, 요법 개시로부터 기간 후에 지속되는 반응이 포함될 수 있다. 일부 구현예에서, 지속적인 반응은 요법 개시 후 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 18 또는 24개월에서의 반응율로 표시된다. 일부 구현예에서, 반응은 3개월 또는 6개월보다 더 오랫동안 지속된다.
일부 측면에서, RECIST 기준은 객관적인 종양 반응을 결정하기 위해 이용된다(Eisenhauer et al., European Journal of Cancer 45 (2009) 228-247). 일부 측면에서, RECIST 기준은 표적 병변을 위한 객관적인 종양 반응을 결정하기 위해 이용된다. 일부 측면에서, RECIST 기준을 사용하여 결정된 바와 같은 완전한 반응은 모든 표적 병변의 소멸로 설명되고, 임의의 병리적 림프절(표적이건 비표적이건)이 단축에서 <10 mm까지 축소되어야 한다. 다른 측면에서, RECIST 기준을 사용하여 결정된 바와 같은 부분 반응은 기준선 합계 직경을 기준으로 하여, 표적 병변의 직경의 합계에서 30% 이상의 감소로 설명된다. 다른 측면에서, 진행성 질병(PD)은 연구 중 가장 작은 합계를 기준으로 하여(이는 상기 값이 연구 중 가장 작은 경우 기준선 합계를 포함함) 표적 병변의 직경의 합계에서 20% 이상의 증가로 설명된다. 20%의 상대적 증가 외에, 합계는 5mm 이상의 절대적인 증가를 또한 입증해야 한다(일부 측면에서, 하나 이상의 새로운 병변의 출현도 진행성으로 간주된다). 다른 측면에서, 안정된 질병(stable disease, SD)은 연구 중인 가장 작은 합계 직경을 기준으로 하여, PR에 적격인 충분한 축소도 없고, PD에 적격인 충분한 증가도 없는 것으로 설명된다.
MM의 경우, 질병 부담의 정도를 평가하는 예시적인 파라미터는 클론성 혈장 세포의 수(예를 들어, 골수 생검에서 >10% 또는 다른 조직; 형질세포종으로부터의 생검에서 임의의 양), 혈청 또는 소변 중 하나에서 단클론성 단백질(파라단백질)의 존재, 혈장 세포 장애와 관련된 것으로 여겨지는 말단 기관 손상의 증거(예를 들어, 고칼슘혈증(교정 칼슘 >2.75 mmol/l); 골수종에 기인하는 신장의 기능 부전; 빈혈(헤모글로빈 <10 g/dl); 및/또는 뼈 병변(압박 골절을 동반한 용해성 병변 또는 골다공증);)와 같은 파라미터를 포함한다.
DLBCL의 경우, 질병 부담의 정도를 평가하는 예시적인 파라미터는 세포 형태(예를 들어, 중심아세포, 면역아세포 및 역형성 세포), 유전자 발현, miRNA 발현 및 단백질 발현(예를 들어, BCL2, BCL6, MUM1, LMO2, MYC 및 p21의 발현)과 같은 파라미터를 포함한다.
일부 측면에서, CLL을 갖는 대상체와 같은 대상체에서의 반응율은 만성 림프구성 백혈병 반응 기준에 대한 국제 워크숍(International Workshop on Chronic Lymphocytic Leukemia, IWCLL)에 기초한다(Hallek, et al., Blood 2008, Jun 15; 111(12): 5446-5456). 일부 측면에서, 상기 기준은, 일부 측면에서 면역 표현형에 의한 말초 혈액 클론성 림프구의 부재, 림프샘 장애(lymphadenopathy)의 부재, 간 비대 또는 비장 비대의 부재, 전신 증상의 부재 및 충분한 혈액 수를 요구하는, 완전한 진정(complete remission, CR); 일부 측면에서 상기 CR과 같이 설명되나 정상적인 혈액 수를 갖지 않는, 불완전한 골수 회복을 갖는 완전한 진정(complete remission with incomplete marrow recovery, CRi); 일부 측면에서 말초 혈액 수에서의 개선과 함께, 림프구 수에서 ≥ 50%에 속하고, 림프샘 장애에서 ≥ 50% 감소 또는 간 또는 비장에서 ≥ 50%의 감소로 기술되는, 부분적인 진정(partial remission, PR); 일부 측면에서 림프구 수에 있어서 > 5 x109/L까지의 ≥ 50% 상승, 림프샘 장애에 있어서 ≥ 50% 증가, 간 또는 비장 크기에 있어서 ≥ 50% 증가, 리히터의 형질전환(Richter’s transformation) 또는 CLL로 인한 새로운 혈구 감소증(cytopenia)으로 기술되는 진행성 질병(progressive disease, PD); 일부 측면에서 CR, CRi, PR 또는 PD에 대한 기준을 충족하지 않는 것으로 기술되는 안정적인 질병;으로 기술된다.
일부 구현예에서, 대상체는 분량의 세포 투여 후 1개월 이내에, 대상체의 림프절 크기가 (약) 20mm 미만, (약) 10mm 미만이거나 (약) 10mm 미만인 경우 CR 또는 OR을 나타낸다.
일부 구현예에서, CLL의 지표 클론은 대상체의 골수(또는 본 방법에 따라 치료된 대상체의 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 이상을 초과한 골수)에서 검출되지 않는다. 일부 구현예에서, CLL의 지표 클론은 IgH 심층 시퀀싱에 의해 평가된다. 일부 구현예에서, 지표 클론은 세포의 투여 후 (약) 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12, 18 또는 24개월 또는 (약) 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12, 18 또는 24개월 이상의 시기에 검출되지 않는다.
일부 구현예에서, 대상체는, 예를 들어 광학 현미경에 의해 검출된 바와 같이, 골수에서 5% 이상의 아세포, 예컨대 골수에서 10% 이상의 아세포, 골수에서 20% 이상의 아세포, 골수에서 30% 이상의 아세포, 골수에서 40% 이상의 아세포 또는 골수에서 50% 이상의 아세포가 존재할 경우 형태학적 질병을 나타낸다. 일부 구현예에서, 골수에 5% 미만의 아세포가 존재하는 경우, 대상체는 완전한 또는 임상적 진정을 나타낸다.
일부 구현예에서, 대상체는 완전한 진정을 나타낼 수 있으나, 형태학적으로 검출 불가능한(광학 현미경 기술에 의함) 작은 비율의 잔류 백혈병 세포가 존재한다. 대상체가 골수에서 5% 미만의 아세포를 나타내고 분자적으로 검출 가능한 암을 나타내는 경우 최소 잔류 질병(minimum residual disease, MRD)을 나타낸다고 한다. 일부 구현예에서, 분자적으로 검출 가능한 암은 소수의 세포의 민감한 검출을 허용하는 다양한 임의의 분자 기술을 사용하여 평가될 수 있다. 일부 측면에서, 상기 기술은 염색체 전좌에 의해 생성된 융합 전사물 또는 독특한 Ig/T 세포 수용체 유전자 재배열을 결정할 수 있는 PCR 평가를 포함한다. 일부 구현예에서, 유동 세포 분석은 백혈병 특이적 면역 표현형에 기초한 암 세포 확인에 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 암의 분자 검출은 100,000개의 정상 세포에서 1개의 백혈병 세포만큼 검출할 수 있다. 일부 구현예에서, 대상체는 예컨대 PCR 또는 유동 세포 분석에 의해 100,000개의 세포에서 1개 이상 또는 1개 넘게 백혈병 세포가 검출될 경우 분자적으로 검출 가능한 MRD를 나타낸다. 일부 구현예에서, 대상체의 질병 부담이 분자적으로 검출 가능하지 않거나 MRD-여서, 일부 경우에 PCR 또는 유동 세포 분석 기술을 사용하여 대상체에서 어떤 백혈병 세포도 검출되지 않을 수 있다.
백혈병의 경우, 질병 부담의 정도는 혈액 또는 골수에 있는 잔류 백혈병의 평가에 의해 결정될 수 있다. 일부 구현예에서, 대상체는 예를 들어, 광학 현미경 검사법에 의해 검출된 바와 같이, 골수에 5% 이상의 아세포가 존재할 경우, 형태학적 질병을 나타낸다. 일부 구현예에서, 골수에 5% 미만의 아세포가 존재하는 경우, 대상체는 완전한 또는 임상적 진정을 나타낸다.
일부 구현예에서, 백혈병의 경우, 대상체는 완전한 진정을 나타낼 수 있으나, (광학 현미경 기술에 의해) 형태학적으로 검출할 수 없는 소량의 잔류 백혈병 세포가 존재한다. 대상체가 골수에서 5% 미만의 아세포를 나타내고 분자적으로 검출 가능한 암을 나타내는 경우 최소 잔류 질병(minimum residual disease, MRD)을 나타낸다고 한다. 일부 구현예에서, 분자적으로 검출 가능한 암은 소수의 세포의 민감한 검출을 허용하는 다양한 분자 기술 중 어느 하나를 사용하여 평가될 수 있다. 일부 측면에서, 상기 기술은 염색체 전좌에 의해 생성된 융합 전사물 또는 독특한 Ig/T 세포 수용체 유전자 재배열을 결정할 수 있는 PCR 평가를 포함한다. 일부 구현예에서, 유동 세포 분석은 백혈병 특이적 면역 표현형에 기초한 암 세포 확인에 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 암의 분자 검출은 100,000개의 정상 세포에서 1개의 백혈병 세포만큼 검출할 수 있다. 일부 구현예에서, 대상체는 예컨대 PCR 또는 유동 세포 분석에 의해 100,000개의 세포에서 1개 이상 또는 1개 넘게 백혈병 세포가 검출될 경우 분자적으로 검출 가능한 MRD를 나타낸다. 일부 구현예에서, 대상체의 질병 부담이 분자적으로 검출 가능하지 않거나 MRD-여서, 일부 경우에 PCR 또는 유동 세포 분석 기술을 사용하여 대상체에서 어떤 백혈병 세포도 검출되지 않을 수 있다.
일부 구현예에서, T 세포(예를 들어, CAR 발현 T 세포) 요법과 같은 세포 요법 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 및/또는 방법은 면역요법 예를 들어, T 세포 요법 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 직전 시기의 질병 부담과 비교하여 질병 부담을 감소시킨다.
일부 측면에서, 면역 요법, 예를 들어, T 세포 요법 및/또는 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여는 질병 부담의 증가를 방지할 수 있으며, 이는 질병 부담의 변화가 없는 것으로 입증될 수 있다.
일부 구현예에서, 방법은 대상체가 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)를 투여하지 않고 면역 요법, 예를 들어, T 세포 요법만을 받는 것과 같은 대체 요법을 이용한 비교 가능한 방법으로 관찰된 감소에 비해, 보다 높은 정도 및/또는 보다 긴 기간 동안 질병 또는 병태의 부담, 예를 들어, 종양 세포의 수, 종양의 크기, 환자의 생존 또는 이벤트 없는 생존의 지속 기간을 감소시킨다. 일부 구현예에서, 각 제제의 단독 투여, 예를 들어, 면역 요법, 예를 들어, T 세포 요법을 받지 않은 대상체에 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)를 투여하거나; 또는 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)를 받지 않은 대상체에 면역 요법, 예를 들어, T 세포 요법을 투여함으로써 달성되는 감소에 비해, 면역 요법, 예를 들어, T 세포 요법 및 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)를 투여하는 병용 요법 후에 질병 부담이 보다 높은 정도로 또는 보다 긴 지속 기간 동안 감소된다.
일부 구현예에서, 대상체의 질병 또는 병태의 부담이 검출, 평가 또는 측정된다. 일부 측면에서, 질병 부담은 대상체 또는 혈액 또는 혈청과 같은 대상체의 기관, 조직 또는 체액에서 질병 또는 질병 관련 세포, 예를 들어, 종양 세포의 총 수를 검출함으로써 검출될 수 있다. 일부 구현예에서, 질병 부담, 예를 들어, 종양 부담은 전이의 수 또는 범위를 측정하여 평가된다. 일부 측면에서, 대상체의 생존, 특정 기간 내의 생존, 생존 정도, 이벤트 없는 또는 무증상 생존의 존재 또는 지속 기간 또는 무 재발 생존이 평가된다. 일부 구현예에서, 질병 또는 병태의 임의의 증상이 평가된다. 일부 구현예에서, 질병 또는 병태 부담의 측정이 명시된다. 일부 구현예에서, 결정을 위한 예시적인 파라미터에는 질병 또는 병태, 예를 들어 종양에서의 개선 또는 향상을 나타내는 특정 임상 결과가 포함된다. 상기 파라미터에는 완전 반응(complete response， CR), 부분 반응(partial response， PR) 또는 안정성 질병(stable disease， SD)을 포함한 질병 통제의 지속 기간(예를 들어, 고형 종양에서의 반응 평가 기준(Response Evaluation Criteria In Solid Tumors， RECIST) 지침 참조), 객관적인 반응 속도(objective response rate，ORR), 무진행성 생존(progression-free survival， PFS) 및 전반적인 생존(overall survival， OS)이 포함된다. 파라미터에 대한 특정 임계값은 여기에 제공된 병용 요법 방법의 효능을 결정하기 위해 설정될 수 있다.
일부 측면에서, 질병 부담은 면역 요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 전, 면역 요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후이나 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여 전 및/또는 면역 요법, 예를 들어, T 세포 요법 및 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편) 둘 다의 투여 후에 측정되거나 검출된다. 병용 요법의 하나 이상의 단계의 다중 투여의 맥락에서, 일부 구현예에서의 질병 부담은 임의의 단계, 분량 및/또는 투여 주기의 투여 전 또는 후 또는 임의의 단계, 분량 및/또는 투여 주기의 투여 사이 시기에 측정될 수 있다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)의 투여는 2일 이상의 주기(예를 들어, 28일 주기)로 수행되고, 질병 부담은 각 주기 전, 중 및/또는 후에 측정되거나 검출된다.
일부 구현예에서, 부담은 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편) 및 면역 요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 직전에 비해 제공된 방법에 의해 (약) 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 이상 또는 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 감소한다. 일부 구현예에서, 질병 부담, 종양 크기, 종양 부피, 종양의 양 및/또는 종양 부하 또는 용적은 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편) 및/또는 면역 요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 직전에 비해, 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편) 및 면역 요법, 예를 들어, T 세포 요법의 투여 후에 (약) 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 또는 100% 이상 감소한다.
일부 구현예에서, 방법에 의한 질병 부담의 감소에는 병용 요법 투여 후, 예를 들어, 병용 요법의 개시 후 예를 들어, 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월 또는 6개월 이상에 평가된 바와 같이 완전한 형태학적 진정의 유도가 포함된다.
일부 측면에서, 예를 들어 다중 파라미터 유동 세포 분석에 의해 측정된 바와 같이, 최소 잔류 질병에 대한 평가가 음성이거나 최소 잔류 질병의 수준이 약 0.3% 미만, 약 0.2% 미만, 약 0.1% 미만 또는 약 0.05% 미만이다.
일부 구현예에서, 다른 방법과 비교하여, 대상체의 무이벤트 생존율 또는 전반적인 생존율이 본 방법에 의해 개선된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 여기에 제공된 병용 요법의 방법 후 6개월에 상기 방법에 의해 치료된 대상체에 대한 무이벤트 생존율 또는 생존 확률은 약 40% 초과, 약 50% 초과, 약 60% 초과, 약 70% 초과, 약 80% 초과, 약 90% 초과 또는 약 95% 초과이다. 일부 측면에서， 전반적인 생존율은 약 40% 초과, 약 50% 초과, 약 60% 초과, 약 70% 초과, 약 80% 초과, 약 90% 초과 또는 약 95% 초과이다. 일부 구현예에서, 본 방법으로 치료된 대상체는 무이벤트성 생존, 무재발성 생존 또는 6 개월 이상 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10년 이상까지의 생존을 나타낸다. 일부 구현예에서, (약) 6개월 초과 또는 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10년 이상의 진행까지의 시간과 같이 진행까지의 시간이 개선된다.
일부 구현예에서, 본 방법에 의한 치료 후에, 재발 확률은 다른 방법에 비해 감소한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 병용 요법 방법 후 6개월에 재발 확률은 약 80% 미만, 약 70% 미만, 약 60% 미만, 약 50% 미만, 약 40% 미만, 약 30% 미만, 약 20% 미만 또는 약 10% 미만이다.
일부 경우에, 투여된 세포， 예를 들어, 입양적으로 전달된 세포의 약동학을 결정하여 투여된 세포의 가용성, 예를 들어, 생체 이용율을 평가한다. 입양적으로 전달된 세포의 약동학을 결정하는 방법은 조작된 세포가 투여된 대상체로부터 말초 혈액을 뽑는 것과 말초 혈액에서 조작된 세포의 수 또는 비율을 결정하는 것을 포함할 수 있다. 세포를 선택 및/또는 단리하기 위한 접근법에는 키메라 항원 수용체(CAR) 특이적 항체(예를 들어, Brentjens et al., Sci. Transl. Med. 2013 Mar; 5(177): 177ra38)， 단백질 L(Zheng et al., J. Transl. Med. 2012 Feb; 10:29), CAR의 특정 부위에 직접 도입되고 이로써 Strep-Tag에 대한 결합 시약을 사용하여 CAR을 직접 평가하는 Strep-Tag 서열과 같은 에피토프 태그(Liu et al. (2016) Nature Biotechnology, 34:430; 국제 특허 출원 공개 번호 WO2015095895) 및 CAR 폴리펩티드에 특이적으로 결합하는 단클론성 항체(국제 특허 출원 공개 번호 WO2014190273 참조)의 사용이 포함될 수 있다． 외인성 마커 유전자가 일부 경우에는 세포의 검출 또는 선택이 가능하도록 및 일부 경우에는 세포 자살을 또한 촉진하도록 조작된 세포 요법과 관련하여 사용될 수 있다． 일부 경우에， 절단형 표피 성장 인자 수용체(truncated epidermal growth factor receptor， EGFRt)가 형질 도입된 세포에서 관심 전이 유전자(CAR 또는 TCR)와 함께 발현될 수 있다(예를 들어， 미국 특허 번호 제8,802,374호 참조). EGFRt는 항체 세툭시맙(cetuximab， Erbitux®) 또는 다른 치료적 항-EGFR 항체 또는 결합 분자에 의해 인식되는 에피토프를 함유할 수 있고, 이는 EGFRt 작제물 및 키메라 항원 수용체(CAR)와 같은 다른 재조합 수용체로 조작된 세포를 확인 또는 선택 및／또는 상기 수용체를 발현하는 세포를 제거 또는 분리하는데 사용될 수 있다． 문헌［미국 특허 번호 제8,802,374호 및 Liu et al., Nature Biotech. 2016 April; 34(4): 430－434］을 참조한다．
일부 구현예에서, 환자로부터 수득된 생물학적 샘플， 예를 들어, 혈액에서 CAR+ T 세포의 수를 세포 요법 투여 후의 기간에 결정하여 예를 들어 세포의 약동학을 결정할 수 있다． 일부 구현예에서, 본 방법에 의해 치료된 대부분의 대상체에서 또는 대상체의 혈액에서 검출 가능한 CAR+ T 세포， 선택적으로 CAR+ CD8+ T 세포 및／또는 CAR+ CD4+ T 세포의 수는 μL 당 １개 초과의 세포， μL 당 ５개 초과의 세포 또는 μL 당 １０개 초과의 세포이다．
Ⅸ. 독성
제공된 방법의 구현예에서, 대상체는 독성， 예를 들어， 세포 요법(예를 들어， Ｔ 세포 요법)을 투여받은 대상체에서 사이토카인 방출 증후군(cytokine release syndrome， CRS) 또는 신경 독성(neurotoxicity， NT)의 발달에 대해 모니터링된다． 일부 구현예에서, 제공된 방법이 수행되어 독성 결과 또는 증상의 위험， 독성 증진 프로파일， 인자 또는 특성 예컨대 중증 사이토카인 방출 증후군(CRS) 또는 중증 신경 독성을 나타내거나 이와 관련된 증상 또는 결과가 감소한다．
일부 구현예에서, 제공된 방법은 예컨대 다른 특정 세포 요법에 비해， 높은 비율 또는 확률의 독성 또는 독성 결과를 초래하지 않거나 중증 신경 독성(NT) 또는 중증 사이토카인 방출 증후군(CRS)과 같은 독성 또는 독성 결과의 비율 또는 확률을 감소시킨다． 일부 구현예에서, 방법은 중증 NT(severe NT， sNT), 중증 CRS(severe CRS， sCRS), 대식세포 활성화 증후군, 종양 용해 증후군, 3 일 이상 동안 섭씨 (약) 38도 이상의 발열 및 (약) 20 mg/dL 이상의 혈장 CRP 수준을 초래하지 않거나 이의 위험을 증가시키지 않는다. 일부 구현예에서, 제공된 방법에 따라 치료된 (약) 30%, 35%, 40%, 50%, 55%, 60% 이상을 초과한 대상체가 임의의 등급의 CRS 또는 임의의 등급의 신경 독성을 나타내지 않는다. 일부 구현예에서， 치료된 대상체 중 50% 이상(예를 들어， 치료된 대상체의 60% 이상，７0% 이상， ８0% 이상， 적어도 ９0% 이상)이 ２등급 초과의 사이토카인 방출 증후군(ＣＲＳ) 및／또는 ２ 등급 초과의 신경 독성을 나타내지 않는다． 일부 구현예에서， 본 방법에 따라 치료된 대상체 중 50% 이상(예를 들어， 치료된 대상체의 60% 이상，７0% 이상， ８0% 이상， 적어도 ９0% 이상)이 중증 독성 결과(예를 들어 중증 ＣＲＳ 또는 중증 신경 독성)를 나타내지 않고， 예컨대 ３급 이상의 신경 독성을 나타내지 않고／거나 증증 ＣＲＳ를 나타내지 않거나 치료 후 특정 기간 내에， 예컨대 세포 투여 후 １주일， ２주일 또는 １개월 이내에 나타내지 않는다． 일부 구현예에서， 특정 독성을 결정하기 위해 평가되는 파라미터에는 부작용(adverse event， ＡＥ)， 분량 제한 독성(dose-limiting toxicities，DLT)， CRS 및 NT가 포함된다．
일부 측면에서, 독성 결과는 사이토카인 방출 증후군(CRS) 또는 중증 CRS(sCRS)이거나 이와 연관되거나 이를 나타낸다. 일부 경우에， CRS, 예를 들어, sCRS는 입양 T 세포 요법 및 다른 생물학적 산물의 대상체 투여 후에 발생할 수 있다. 문헌［Davila et al., Sci Transl Med 6, 224ra25 (2014); Brentjens et al., Sci. Transl. Med. 5, 177ra38 (2013); Grupp et al., N. Engl. J. Med. 368, 1509-1518 (2013); 및 Kochenderfer et al., Blood 119, 2709-2720 (2012); Xu et al., Cancer Letters 343 (2014) 172-78］을 참조한다．
전형적으로， CRS는 예를 들어 T 세포, B 세포, NK 세포, 단핵구 및/또는 대식세포에 의해 매개되는 과장된 전신 면역 반응에 의해 야기된다. 상기 세포는 사이토카인 및 케모카인과 같은 다량의 염증 매개체를 방출할 수 있다. 사이토카인은 급성 염증 반응을 유발하고／거나 내피 기관 손상을 유도할 수 있고， 이는 미세 혈관 누출, 심부전 또는 사망을 초래할 수 있다. 생명을 위협하는 중증 CRS는 폐 침윤 및 폐 손상, 신부전 또는 산재성 혈관 내 응고로 이어질 수 있다. 기타 생명을 위협하는 중증 독성에는 심장 독성, 호흡 곤란, 신경학적 독성 및/또는 간부전이 포함될 수 있다. CRS는 항 염증 요법, 예컨대 항-IL-6 요법, 예를들어， 항-IL-6 항체, 예를들어, 토실리주맙 또는 기재된 바와 같은 항체 또는 다른 제제를 사용하여 치료될 수 있다.
CRS의 결과, 징후 및 증상이 공지되어 있으며 본 명세서에 기재된 것을 포함한다. 일부 구현예에서， 특정 투여 요법 또는 투여가 주어진 CRS 관련 결과, 징후 또는 증상에 영향을 미치거나 영향을 미치지 않는 경우, 특정 결과, 징후 및 증상 및/또는 이의 양 또는 정도가 명시될 수 있다.
CAR 발현 세포 투여의 맥락에서, CRS는 일반적으로 CAR을 발현하는 세포 주입 후 6-20일 후에 발생한다. 문헌［Xu et al., Cancer Letters 343 (2014) 172-78］을 참조한다． 일부 경우에， CRS는 CAR T 세포 주입 후 6일 미만 또는 20일 이상에 발생한다. CRS의 발병률과 시기는 주입시의 기준 사이토카인 수준 또는 종양 부담과 관련이 있을 수 있다. 일반적으로 CRS는 인터페론(IFN)-γ, 종양 괴사 인자(tumor necrosis factor， TNF)-α 및/또는 인터루킨(IL)-2의 높은 혈청 수준을 포함한다. CRS에서 급속히 유도될 수 있는 다른 사이토카인은 IL-1β, IL-6, IL-8 및 IL-10이다.
CRS와 관련된 예시적인 결과에는 발열, 오한(rigors), 오한(chills), 저혈압, 호흡 곤란, 급성 호흡 곤란 증후군(acute respiratory distress syndrome， ARDS), 뇌병증, ALT/AST 증가, 신부전, 심장 장애, 저산소증, 신경학적 장애 및 죽음이 포함된다. 신경학적 합병증에는 정신 착란, 발작 같은 행동, 혼란, 단어 찾기 어려움, 실어증 및/또는 둔화가 포함된다. 기타 CRS 관련 결과에는 피로, 구역질, 두통, 발작, 빈맥, 근육통, 발진, 급성 혈관 누출 증후군, 간 기능 손상 및 신부전이 포함된다. 일부 측면에서， CRS는 혈청 페리틴, d-２량체(d-dimer), 아미노트랜스퍼라제, 젖산 탈수소효소 및 트리글리세라이드 또는 저섬유소혈증(hypofibrinogenemia) 또는 간비장비대(hepatosplenomegaly)와 같은 하나 이상의 요인 증가와 관련된다.
일부 구현예에서， CRS와 관련된 결과에는 ２일 이상， 예를 들어 ３일 이상， 예를 들어 ４일 이상 동안 또는 ３일 이상 동안 연속하여 지속적인 발열, 예를 들어， 명시된 온도의 발열, 예를 들어, (약) 섭씨 38도 초과의 발열; (약) 섭씨 38도 초과의 발열; 사이토카인의 증가， 예컨대 ２ 이상의 사이토카인(예를 들어, 인터페론 감마(IFNγ)， GM-CSF, IL-6, IL-10, Flt-3L, 프랙탈킨(fracktalkine) 및 IL-5 및／또는 종양 괴사 인자 알파(tumor necrosis factor alpha， TNFα)로 이루어진 그룹 중 ２ 이상)의 전처리 수준에 비해 예를 들어 (약) ７５배 이상의 최대 배수 변화 또는 상기 사이토카인 중 하나 이상의 예를 들어 (약) 250배 이상의 최대 배수 변화； 및／또는 하나 이상의 임상적 독성 징후 예컨대 저혈압(예를 들어 하나 이상의 정맥 혈관 활성 혈압 상승제로 측정)； 저산소증(예를 들어, (약) 90% 미만의 혈장 산소(PO2) 수준)； 및/또는 하나 이상의 신경학적 장애(정신 상태 변화, 둔화 및 발작 포함)； 중 하나 이상이 포함된다.
예시적인 CRS 관련 결과에는 사이토카인 및 케모카인 및 CRS 관련 기타 요인을 포함하여 하나 이상의 요인의 증가 또는 높은 혈청 수준이 포함된다. 예시적인 결과에는 상기 요인 중 하나 이상의 합성 또는 분비 증가가 더 포함된다. 상기 합성 또는 분비는 T 세포 또는 선천성 면역 세포 또는 B 세포와 같은 T 세포와 상호 작용하는 세포에 의한 것일 수 있다.
일부 구현예에서, CRS-관련 혈청 인자 또는 CRS 관련 결과에는 인터페론 감마(IFN-γ), TNF-a, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8，IL-10, IL-12, sIL-2Ra, 과립구 대식세포 콜로니 자극 인자(granulocyte macrophage colony stimulating factor， GM-CSF), 대식세포 염증성 단백질(macrophage inflammatory protein， MIP)-1, 종양 괴사 인자 알파(TNFα), IL-6 및 IL-10, IL-1β, IL-8, IL-2, MIP-1, Flt-3L, 프락탈킨(fracktalkine) 및／또는 IL-5를 포함한 염증성 사이토카인 및/또는 케모카인이 포함된다． 일부 구현예에서, 인자 또는 결과에는 C 반응성 단백질(C reactive protein， CRP)이 포함된다. CRS에 대한 초기 및 용이하게 측정 가능한 위험 인자일뿐만 아니라 CRP는 세포 증폭에 대한 마커이기도하다. 일부 구현예에서, 높은 수준의 CRP, 예컨대 ≥ 15 mg/dL을 갖는 것으로 측정된 대상체는 CRS를 갖는다. 일부 구현예에서, 높은 수준의 CRP를 갖는 것으로 측정된 대상체는 CRS를 갖지 않는다. 일부 구현예에서, CRS의 측정에는 CRP 및 CRS를 나타내는 다른 인자의 측정이 포함된다.
일부 구현예에서, 하나 이상의 염증성 사이토카인 또는 케모카인은 CAR 치료 전, 동안 또는 후에 모니터링된다. 일부 측면에서, 하나 이상의 사이토카인 또는 케모카인에는 IFN-γ, TNF-α, IL-2, IL-1β, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12, sIL- 2Rα, 과립구 대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF) 또는 대식세포 염증성 단백질(MIP)이 포함된다. 일부 구현예에서， IFN-γ, TNF-α 및 IL-6이 모니터링된다.
어떤 환자가 sCRS를 발달시킬 위험에 처할 가능성이 더 높은지 예측하기 위하여 CRS의 개시와 상관관계가 있는 것처럼 보이는 CRS 기준이 개발되었다(Davilla et al. Science translational medicine. 2014;6(224):224ra25 참조). 요인에는 발열, 저산소증, 저혈압, 신경학적 변화, 염증성 사이토카인， 예컨대 ７개의 사이토카인 (IFNγ, IL-5, IL-6, IL-10, Flt-3L, 프락탈킨 및 GM-CSF) 세트의 높은 혈청 수준이 포함되고， 이의 처리 유도 증가는 종양 부담 및 sCRS 증상 둘 다의 사전 치료와 잘 연관될 수 있다. CRS의 진단 및 관리에 대한 다른 지침이 공지되어 있다(예를 들어, 문헌[Lee et al, Blood. 2014;124(2):188-95] 참조). 일부 구현예에서， CRS 등급을 반영하는 기준이 하기 표 3에 상세히 기재된다．
［표 ３］
Figure pct00006
일부 구현예에서, 투여후 대상체가 (1) ３일 이상 동안 섭씨 ３８도 이상의 발열； (2) (a) 투여 직후 수준에 비해 ７개의 사이토카인 그룹(인터페론 감마(IFNγ), GM-CSF, IL-6, IL-10, Flt-3L, 프락탈킨 및 IL-5) 중 ２개 이상에 대해 ７５배 이상의 최대 배수 변화; 및／또는 (b) 투여 직후 수준에 비해 ７개의 사이토카인 그룹(인터페론 감마(IFNγ), GM-CSF, IL-6, IL-10, Flt-3L, 프락탈킨 및 IL-5) 중 １개 이상에 대해 ２５０배 이상의 최대 배수 변화； 및 (c) 저혈압(하나 이상의 정맥 혈관 활성 승압제 필요) 또는 저산소증(PO2 < 90%) 또는 하나 이상의 신경학적 장애(들)(정신 상태 변화， 둔화 및／또는 발작 포함)과 같은 하나 이상의 임상적 독성 징후；를 나타낼 경우， 대상체는 세포 요법 또는 이의 분량의 세포 투여에 대해 이차적 또는 이에 대한 반응으로 ＂중증 CRS(severe CRS， “sCRS＂)”를 발달시킬 것으로 여겨진다． 일부 구현예에서, 중증 CRS에는 표 3에 제시된 바와 같은 3 급 이상의 CRS가 포함된다.
일부 구현예에서, 중증 CRS 또는 3 등급 이상 CRS， 예컨대 ４ 등급 이상 CRS와 관련된 결과에는 ２일 이상， 예를 들어 ３일 이상， 예를 들어 ４일 이상 동안 또는 ３일 이상 동안 연속하여 지속적인 발열, 예를 들어， 명시된 온도의 발열, 예를 들어, (약) 섭씨 38도 초과의 발열; (약) 섭씨 38도 초과의 발열; 사이토카인의 증가， 예컨대 ２ 이상의 사이토카인(예를 들어, 인터페론 감마(IFNγ)， GM-CSF, IL-6, IL-10, Flt-3L, 프랙탈킨 및 IL-5 및／또는 종양 괴사 인자 알파(TNFα)로 이루어진 그룹 중 ２ 이상)의 전처리 수준에 비해 예를 들어， (약) ７５배 이상의 최대 배수 변화 또는 상기 사이토카인 중 하나 이상의 예를 들어， (약) 250배 이상의 최대 배수 변화； 및／또는 하나 이상의 임상적 독성 징후， 예컨대 저혈압(예를 들어， 하나 이상의 정맥 혈관 활성 승압제로 측정)； 저산소증(예를 들어, (약) 90% 미만의 혈장 산소(PO2) 수준)； 및/또는 하나 이상의 신경학적 장애(정신 상태 변화, 둔화 및 발작 포함)； 중 하나 이상이 포함된다. 일부 구현예에서, 중증 CRS에는 중환자실(intensive care unit， ICU)에서 관리 또는 간호가 필요한 CRS가 포함된다.
일부 구현예에서, 중증 CRS와 같은 CRS에는 (1) 지속적인 발열(３일 이상 동안 섭씨 38도 이상의 발열) 및 (2) (약) 20 mg/dL 이상의 CRP 혈청 수준의 조합이 포함된다. 일부 구현예에서, CRS에는 기계적 환기가 필요한 호흡 부전 또는 ２개 이상의 승압제 사용이 필요한 저혈압이 포함된다. 일부 구현예에서, 승압제(vasopressor)의 투여량은 제２ 또는 후속 투여에서 증가된다.
일부 구현예에서, 중증 CRS 또는 3 등급 CRS에는 알라닌 아미노트랜스퍼라제의 증가, 아스파테이트 아미노트랜스퍼라제의 증가, 오한, 발열성 호중구 감소증, 두통, 좌심실 기능 장애, 뇌병증, 뇌수종 및/또는 떨림이 포함된다.
다양한 결과를 측정하거나 검출하는 방법이 명시될 수 있다.
일부 측면에서, 세포 요법과 같은 요법의 독성 결과는 신경 독성 또는 중증 신경 독성이거나 이와 관련되거나 이를 나타낸다． 일부 구현예에서, 신경 독성의 임상적 위험과 관련된 증상에는 혼란, 정신 착란, 표현 실어증, 둔감, 간대성 근경련(myoclonus), 혼수, 변경된 정신 상태, 경련, 발작과 같은 행동, 발작(선택적으로 뇌전도[electroencephalogram， EEG]에 의해 확인된 바와 같음), 베타 아밀로이드(Aβ)의 높은 수준, 글루탐산의 높은 수준 및 산소 라디칼의 높은 수준이 포함된다. 일부 구현예에서， 신경 독성은 중증도(예를 들어, 1-5 척도의 등급 사용)에 기초하여 등급이 나뉜다(예를 들어， 문헌[Guido Cavaletti & Paola Marmiroli Nature Reviews Neurology 6, 657-666 (December 2010); National Cancer Institute－Common Toxicity Criteria version 4.03 (NCI-CTCAE v4.03)] 참조)．
일부 경우에, 신경학적 증상이 sCRS의 가장 초기 증상일 수 있다. 일부 구현예에서 신경학적 증상은 세포 요법 주입 후 5 내지 7일에 시작되는 것으로 보인다. 일부 구현예에서, 신경학적 변화의 지속 기간은 3일 내지 19일 범위일 수 있다． 일부 경우에, 신경학적 변화의 회복은 sCRS의 다른 증상이 해결된 후에 발생한다. 일부 구현예에서, 신경학적 변화의 해결 시간 또는 정도는 항 IL-6 및/또는 스테로이드(들)로의 치료로 앞당겨지지 않는다.
일부 구현예에서, 투여후 대상체가 1) 말초 운동 신경의 염증 또는 퇴화를 포함한， 말초 운동 신경병 증상； 2) 말초 감각 신경의 염증 또는 퇴화， 감각 장애， 예컨대 비정상적이고 불쾌한 감각을 초래하는 감각 지각의 왜곡， 신경통， 예컨대 신경 또는 신경 그룹을 따라 강렬한 고통스러운 감각 및／또는 국부 마비， 예컨대 자극 부재 시의 자통， 마비， 압력， 한기 및 온기의 비정상적인 피부 감각을 초래하는 감각 뉴런의 기능 방해를 포함한 말초 감각 신경병 증상； 중에서 자기 관리(예를 들어， 목욕， 옷 입고 벗기， 음식 섭취， 화장실 이용， 약 복용)를 제한하는 증상을 나타낼 경우， 대상체는 세포 요법 또는 이의 분량의 세포 투여에 대해 이차적 또는 이에 대한 반응으로 ＂중증 신경 독성(severe neurotoxicity)＂을 발달시킬 것으로 여겨진다． 일부 구현예에서, 중증 신경 독성에는 표 4에 제시된 바와 같은 3 등급 이상의 신경 독성이 포함된다. 일부 구현예에서, 중증 신경독성은 3 등급 신경독성 또는 증상이 10일 이상 동안 지속될 경우， 장기 3 등급으로 간주된다.
［표 4］
Figure pct00007
일부 구현예에서, 방법은 다른 방법에 비해 CRS 또는 신경 독성과 관련된 증상을 감소시킨다. 일부 측면에서, 제공된 방법은 다른 방법에 비해 중증 CRS 또는 3 등급 이상 CRS와 관련된 증상, 결과 또는 요인을 포함하여 CRS와 관련된 증상, 결과 또는 요인을 감소시킨다. 예를 들어, 본 방법에 따라 치료된 대상체는 검출 가능하지 않을 수 있고／거나 예를 들어 표 ３에 제시된 임의의 기재된 바와 같은 CRS， 예를 들어 중증 CRS 또는 3 등급 이상 CRS의 증상, 결과 또는 요인을 감소시켰다． 일부 구현예에서, 본 방법에 따라 치료된 대상체는 다른 방법에 의해 치료된 대상체에 비해，사지 약화 또는 마비, 기억, 시력 및/또는 지성의 상실, 통제할 수 없는 강박적 및／또는 강박 관념에 사로잡힌 행동, 망상, 두통, 운동 조절의 상실을 포함한 인지 및 행동 문제, 인지 저하 및 자율 신경계 기능 장애 및 성 기능 장애와 같은 신경 독성의 증상이 감소되었을 수 있다． 일부 구현예에서, 본 방법에 따라 치료된 대상체는 말초 운동 신경증, 말초 감각 신경증, 감각 이상, 신경통 또는 국부 마비와 관련된 증상이 감소되었을 수 있다.
일부 구현예에서, 방법은 뉴런의 사멸과 같은 신경계 및／또는 뇌에 대한 손상을 포함하여 신경 독성과 관련된 결과를 감소시킨다. 일부 측면에서, 방법은 베타 아밀로이드(Aβ), 글루탐산 및 산소 라디칼과 같은 신경 독성과 관련된 요인의 수준을 감소시킨다.
일부 구현예에서, 독성 결과는 용량 제한 독성(dose-limiting toxicity， DLT)이다. 일부 구현예에서, 독성 결과는 용량 제한 독성의 부재이다. 일부 구현예에서, 분량 제한 독성(DLT)은 국가 암 연구소(National Cancer Institute，NCI)의 부작용에 대한 일반적인 용어 기준(Common Terminology Criteria for Adverse Events， CTCAE) 버전 4.0을 포함하고 상기 기재된 임의의 것과 같은 특정 독성을 평가하기 위한 공지되거나 공개된 지침에 의해 설명또는 평가된 바와 같은 ３ 등급 이상의 임의의 독성으로 정의된다．
일부 구현예에서, 제공된 구현예는 제공된 병용 요법 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물에 부합하는 분량의 T 세포 투여로 관찰된 바와 같이 독성， 예를 들어， CRS 또는 신경 독성 또는 중증 CRS 또는 신경 독성， 예를 들어， ３ 등급 이상의 CRS 또는 신경 독성을 발달시킬 비율을 낮추거나 위험을 낮춘다． 일부 경우에，외래 환자를 대상으로 한 세포 요법의 투여가 가능하다. 일부 구현예에서, 제공된 방법 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물에 부합하는 세포 요법, 예를 들어， 분량의 T 세포(예를 들어， CAR+ T 세포)의 투여는 외래 환자를 대상으로 수행되거나 하룻밤 숙박이 필요한 병원 입원과 같은 대상체의 병원 입원이 필요하지 않다.
일부 측면에서, 외래 환자를 대상으로 치료된 대상체를 포함하여， 제공된 방법 및/또는 제공된 제조 물품 또는 조성물에 부합하는 세포 요법, 예를 들어， 분량의 T 세포(예를 들어， CAR+ T 세포)를 투여받은 대상체에， 대상체가 신경 독성 또는 CRS와 같은 독성 징후 또는 증상을 나타내지 않는 한 또는 나타낼 때까지， 분량의 세포 투여 전 또는 투여와 함께 임의의 독성을 치료하기 위한 개입 투여가 시행되지 않는다．
일부 구현예에서, 외래 환자 대상으로 치료받은 대상체를 포함하여 세포 요법, 예를 들어 분량의 T 세포(예를 들어 CAR+ T 세포)를 투여받은 대상체가 발열을 나타낼 경우, 상기 대상체는 발열을 감소시키기 위한 치료를 받거나 투여되거나 또는 치료를 받거나 투여되도록 지시된다. 일부 구현예에서, 대상체의 발열은 특정 임계값 온도 또는 수준인 또는 그 이상인 (또는 측정된) 대상체의 체온으로 특징지어진다. 일부 측면에서, 임계값 온도는 낮은 등급 이상의 발열, 중간 이상의 발열 및/또는 높은 등급 이상의 발열과 관련된다. 일부 구현예에서, 임계 온도는 특정 온도 또는 범위이다. 예를 들어, 임계 온도는 섭씨 (약) 38, 39, 40, 41 또는 42도이거나 섭씨 (약) 38, 39, 40, 41 또는 42도 이상일 수 있고/거나 섭씨 (약) 38도 내지 섭씨 (약) 39도의 범위, 섭씨 (약) 39도 내지 섭씨 (약) 40도의 범위, 섭씨 (약) 40도 내지 섭씨 (약) 41도의 범위 또는 섭씨 (약) 41도 내지 섭씨 (약) 42도의 범위일 수 있다.
일부 구현예에서, 발열을 감소시키기 위한 치료에는 해열제로의 치료가 포함된다. 해열제(antipyretic)에는 발열을 감소시키는 임의의 제제, 예를 들어, 화합물, 조성물 또는 성분, 예컨대 해열 효과를 갖는 것으로 공지된 다수의 제제 중 하나, 예컨대 NSAID(예컨대 이부프로펜, 나프록센, 케토프로펜 및 니메술리드(nimesulide)), 살리실산염 예컨데 아스피린, 살리실산 콜린, 살리실산 마그네슘 및 살리실산 나트륨, 파라세타몰(paracetamol), 아세트아미노펜(acetaminophen), 메타미졸(Metamizole), 나부메톤(Nabumetone), 페낙손(Phenaxone), 안티피린(antipyrine), 해열제(febrifuges)가 포함된다. 일부 구현예에서, 해열제는 아세트아미노펜이다. 일부 구현예에서, 아세트아미노펜은 최대 4시간마다 12.5 mg/kg의 분량으로 구강 또는 정맥 내 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 해열제는 이부프로펜 또는 아스피린이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 발열이 지속적인 발열인 경우, 대상체에 독성을 치료하기 위한 대안적인 치료가 투여된다. 외래 환자 대상으로 치료된 대상체의 경우, 상기 대상체가 지속적인 발열을 갖고/거나 지속적인 발열로 결정되거나 지속적인 발열을 갖는 것으로 결정된 경우, 상기 대상체는 병원으로 돌아가도록 지시된다. 일부 구현예에서, 대상체가 관련 임계 온도 또는 그 이상으로 발열을 나타낼 경우 지속적인 발열을 갖고/거나 지속적인 발열을 갖는 것으로 결정되거나 간주되며, 여기서 상기 대상체의 발열 또는 체온은 해열제, 예를 들어 NSAID 또는 살리실산염, 예를 들어, 이부프로펜, 아세트아미노펜 또는 아스피린으로의 치료와 같은 열을 내리기 위한 치료와 같은 명시적인 치료 후에 감소하지 않거나, 명시된 양(예를 들어, 1 ℃ 이상 및 일반적으로 약 0.5 ℃, 0.4 ℃, 0.3 ℃ 또는 0.2 ℃ (이상)으로 변하지 않음)까지 감소하지 않거나 그 이상으로 감소하지 않는다. 예를 들어, 대상체가 아세트아미노펜과 같은 해열제로의 치료 후조차 6시간의 기간에 걸쳐, 8시간의 기간에 걸쳐 또는 12시간의 기간에 걸쳐 또는 24시간의 기간에 걸쳐, 감소하지 않거나, (약) 0.5 ℃, 0.4 ℃, 0.3 ℃ 또는 0.2 ℃ 이상 또는 (약) 1%, 2%, 3%, 4% 또는 5%까지 감소하지 않는 섭씨 (약) 38 또는 39도 이상의 발열을 나타내거나 발열을 나타내는 것으로 결정된 경우, 대상체는 지속적인 발열을 갖는 것으로 간주된다. 일부 구현예에서, 해열제의 투여량은 발열 또는 특정 유형의 발열, 예컨대 세균 또는 바이러스 감염, 예를 들어, 국소적인 또는 전신 감염과 관련된 발열을 감소시키기에 예컨대 대상체에서 일반적으로 유효한 투여량이다.
일부 구현예에서, 대상체가 관련 임계 온도 또는 그 이상으로 발열을 나타낼 경우 지속적인 발열을 갖고/거나 지속적인 발열을 갖는 것으로 결정되거나 간주되며, 여기서 상기 대상체의 발열 또는 체온은 약 1 ℃ (이상)으로 변하지 않고 일반적으로 약 0.5 ℃, 0.4 ℃, 0.3 ℃ 또는 0.2 ℃ (이상)으로 변하지 않는다. 상기 특정 양 또는 그 이상으로의 변동 부재는 일반적으로 주어진 기간에 걸쳐(예컨대 지시된 임계값 이상의 제1 온도 또는 발열의 제1 징후로부터 측정될 수 있는 24 시간, 12 시간, 8 시간, 6 시간, 3 시간 또는 1 시간의 기간에 걸쳐) 측정된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 대상체가 6시간의 기간에 걸쳐, 8시간의 기간에 걸쳐 또는 12시간의 기간에 걸쳐 또는 24시간의 기간에 걸쳐, (약) 0.5 ℃, 0.4 ℃, 0.3 ℃ 또는 0.2 ℃ 이상으로 온도에 있어 변하지 않는 섭씨 38 또는 39도 이상 또는 섭씨 약 38 또는 39도 또는 섭씨 (약) 38 또는 39도 이상의 발열을 나타낼 경우, 대상체는 지속적인 발열을 나타내는 것으로 간주되거나 결정된다.
일부 구현예에서, 발열은 지속적인 발열이고; 일부 측면에서, 대상체가 독성을 유발할 가능성을 갖는 초기 요법, 예컨대 분량의 T 세포, 예를 들어 CAR+ T 세포와 같은 세포 요법 후에, 지속적인 발열을 갖는 것으로 결정된 시기, 예컨대 상기 결정 또는 상기 제1 결정의 1, 2, 3, 4, 5, 6 시간 이하 내에 대상체는 치료된다.
일부 구현예에서, 독성 표적화 요법과 같은 독성을 치료하기 위한 하나 이상의 개입 또는 제제는, 대상체가 예를 들어, 상기 기재된 구현예 중 어느 하나에 따라 측정된 바와 같이 지속적인 발열을 나타내는 것으로 결정되거나 확인된(예컨대 처음으로 결정되거나 확인된) 직후 또는 이의 시기에 투여된다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 독성 표적화 요법은 상기 확인 또는 결정의 특정 기간 내, 예컨대 이의 30 분, 1 시간, 2 시간, 3 시간, 4 시간, 6 시간 또는 8 시간 이내에 투여된다.
Ⅴ. 제조 물품 및 키트
체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편) 및 면역 요법, 예를 들어, 항체 또는 이의 항원 결합 단편 또는 T 세포 요법, 예를 들어 조작된 세포를 위한 성분을 함유한 제조 물품 및/또는 이의 조성물이 또한 제공된다. 제조 물품은 컨테이너 및 컨테이너 상에 또는 컨테이너와 관련된 라벨 또는 패키지 삽입물을 포함할 수 있다. 적합한 컨테이너에는 예를 들어, 병, 바이알, 주사기, IV 용액 백 등이 포함된다. 컨테이너는 유리 또는 플라스틱과 같은 다양한 재료로 형성될 수 있다. 일부 구현예에서, 컨테이너는 그 자체로 또는 병태를 치료, 예방 및/또는 진단하는데 효과적인 다른 조성물과 조합하여 조성물을 보유한다. 일부 구현예에서, 컨테이너는 멸균 접근 포트를 갖는다. 예시적인 컨테이너에는 주사용 바늘에 의해 천공될 수 있는 마개가 있는 것 또는 경구 투여 제제를 위한 병 또는 바이알을 포함한 정맥내 용액 백, 바이알이 포함된다. 라벨 또는 패키지 삽입물은 조성물이 질병 또는 병태를 치료하는데 사용되는 것을 나타낼 수 있다.
제조의 물품은 (a) 그 안에 함유된 조성물을 가진 제1 컨테이너(여기서 조성물은 면역 요법, 예를 들어 T 세포 요법에 사용되는 조작된 세포를 포함); 및 (b) 그 안에 함유된 조성물을 가진 제2 컨테이너(여기서 조성물은 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체(또는 이의 항원 결합 단편)를 포함)를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 제1 컨테이너는 제1 조성물 및 제2 조성물을 포함하며, 여기서 제1 조성물은 면역 요법, 예를 들어 CD4+ T 세포 요법에 사용되는 조작된 세포의 제1 집단을 포함하고, 제2 조성물은 조작된 세포의 제2 집단을 포함하며, 여기서 제2 집단은 제1 집단, 예를 들어 CD8+ T 세포 요법과 별개로 조작될 수 있다. 일부 구현예에서, 제1 및 제2 세포 조성물은 조작된 세포, 예를 들어, CD4+ 및 CD8+ 세포의 정의된 비율(예를 들어 1:1 비율의 CD4+:CD8+ CAR+ T 세포)을 함유한다. 제조 물품은 조성물이 특정 병태를 치료하는데 사용될 수 있음을 나타내는 패키지 삽입물을 더 포함할 수 있다. 대안적으로 또는 추가적으로, 제조 물품은 약학적으로 허용 가능한 완충액을 포함하는 다른 또는 동일한 컨테이너를 더 포함할 수 있다. 이는 다른 완충액, 희석액, 필터, 바늘 및/또는 주사기와 같은 다른 물질을 더 포함할 수 있다.
Ⅵ. 정의
달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에 사용된 모든 기술 용어, 표기법 및 다른 기술 및 과학 용어 또는 전문 용어는 청구된 주제가 속하는 기술 분야의 당업자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는 것으로 의도된다. 일부 경우에, 일반적으로 이해되는 의미를 갖는 용어는 명확성 및/또는 용이한 참조를 위해 본 명세서에서 정의되며, 본 명세서에서의 상기 정의의 포함은 당업계에서 일반적으로 이해되는 것과 실질적인 차이를 나타내는 것으로 반드시 해석되는 것은 아니다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "대상체(subject)"는 인간 또는 다른 동물과 같은 포유동물이며, 전형적으로 인간이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 조작된 세포 또는 조성물이 투여되는 대상체, 예를 들어, 환자는 포유동물, 전형적으로 인간과 같은 영장류이다. 일부 구현예에서, 영장류는 원숭이(monkey) 또는 오랑우탄(ape)이다. 대상체는 수컷 또는 암컷일 수 있으며, 유아, 소아, 청소년, 성인 및 노인 대상체를 포함한 임의의 적합한 연령일 수 있다. 일부 구현예에서, 대상체는 설치류와 같은 비영장류 포유동물이다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 "치료(treatment)"(및 "치료(treat)" 또는 "치료하는(treating)"과 같은 이의 문법적 변형)는 질병 또는 병태 또는 장애 또는 이와 관련된 증상, 불리한 효과 또는 결과 또는 표현형의 완전한 또는 부분적인 개선 또는 감소를 지칭한다. 치료의 바람직한 효과는 질병의 발생 또는 재발의 예방, 증상의 완화, 질병의 임의의 직접 또는 간접적인 병리적 결과의 감소, 전이 방지, 질병 진행의 속도 감소, 질병 상태의 개선 또는 완화 및 진정 또는 향상된 예후를 포함하나 이에 국한되지 않는다. 상기 용어는 질병의 완전한 치료 또는 모든 증상이나 결과에 있어 임의의 증상이나 결과(들)의 완전한 제거를 내포하지 않는다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, "질병의 발달 지연(delaying development of a disease)"은 질병(예컨대 암)의 발달을 연기, 방해, 완만, 지연, 안정화, 억제 및/또는 미루는 것을 의미한다. 상기 지연은 질병의 내력 및/또는 치료되는 개인에 따라, 시간의 길이가 다양할 수 있다. 명백한 바와 같이, 개인이 질병을 발달시키 않는다는 점에서 충분하거나 상당한 지연은 사실상 예방을 포함할 수 있다. 예를 들어, 전이의 발달과 같은 말기 암이 지연될 수 있다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 "예방(preventing)"은 질병에 걸릴 성향을 가질 수 있으나 아직 질병으로 진단되지 않은 대상체에서 질병의 발생 또는 재발에 관하여 예방을 제공하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 제공된 세포 및 조성물은 질병의 발달을 지연시키거나 질병의 진행을 늦추기 위해 사용된다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, 기능 또는 활성을 "억제(suppress)"하는 것은 관심 조건 또는 파라미터를 제외하고 달리 동일한 조건과 비교할 때 또는 대안적으로 다른 조건과 비교하여 기능 또는 활성을 감소시키는 것이다. 예를 들어, 종양 성장을 억제하는 세포는, 세포의 부재 시의 종양의 성장 속도에 비해 종양의 성장 속도를 감소시킨다.
투여의 맥락에서, 제제, 예를 들어 조작된 세포, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 또는 항원 결합 단편 또는 이의 약학 제형 또는 조성물의 "유효량(effective amount)"은 치료 또는 예방 결과와 같은 바람직한 결과를 달성하기 위해, 투여량/양 및 필요한 기간 동안 효과적인 양을 지칭한다.
제제, 예를 들어 조작된 세포, 체크포인트 억제제, 예를 들어 항-PD-L1 또는 항원 결합 단편 또는 이의 약학 제형 또는 조성물의 "치료적 유효량(therapeutically effective amount)"은 예컨대 질병, 병태 또는 장애의 치료를 위해 바람직한 치료적 결과 및/또는 치료의 약동학 또는 약력학적 효과를 달성하기 위해, 투여량 및 필요한 기간 동안 효과적인 양을 지칭한다. 치료적 유효량은 대상체의 질병 상태, 나이, 성별 및 체중 및 투여된 면역 조절 폴리펩티드 또는 조작된 세포와 같은 요인에 따라 달라질 수 있다. 일부 구현예에서, 제공된 방법은 체크포인트 억제제, 예를 들어, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편, 조작된 세포(예를 들어 세포 요법) 또는 조성물을 유효량, 예를 들어 치료적 유효량으로 투여하는 것을 수반한다.
"예방적 유효량(prophylactically effective amount)"은 바람직한 예방적 결과를 달성하기 위해 투여량에서와 필요한 기간 동안 효과적인 양을 지칭한다. 반드시는 아니나 전형적으로, 예방 분량이 질병 이전 또는 초기 단계의 대상체에 사용되기 때문에, 예방적 유효량은 치료적 유효량보다 적을 것이다.
용어 "약학 제형(pharmaceutical formulation)"은 그 안에 함유된 활성 성분의 생물학적 활성이 유효하도록 허용하는 형태이고 제형이 투여될 대상체에게 허용 가능하지 않게 독성인 추가 성분을 함유하지 않는 제제(preparation)를 지칭한다.
"약학적으로 허용 가능한 담체(pharmaceutically acceptable carrier)"는 활성 성분외의 약학 제형 안에 있는 성분을 지칭하고, 이는 대상체에 무독성이다. 약학적으로 허용 가능한 담체는 완충제, 부형제, 안정제 또는 방부제를 포함하나 이에 국한되지 않는다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, 단수 형태("a", "an" 및 "the")는 문맥상 명백하게 다르게 지시하지 않는 한 복수의 지시 대상을 포함한다. 예를 들어, 하나("a" 또는 "an")는 "적어도 하나(at least one)" 또는 "하나 이상(one or more)"을 의미한다. 본 명세서에 기재된 측면 및 변형은 측면 및 변형을 “구성하는(consisting)” 및/또는 "본질적으로 구성하는(consisting essentially of)"을 포함하는 것으로 이해된다.
본 개시를 통해, 청구된 주제의 다양한 측면이 범위 형식으로 제시된다. 범위 형식의 기재는 단지 편의 및 간결성을 위한 것이며 청구된 주제의 범위에 대한 융통성 없는 제한으로 해석되어서는 안된다는 것을 이해해야 한다. 따라서, 범위의 기재는 모든 가능한 하위 범위 및 상기 범위 내의 개별 수치를 구체적으로 개시한 것으로 간주되어야 한다. 예를 들어, 수치의 범위가 제공되는 경우, 상기 범위의 상한 내지 하한 사이 각각의 사이에 오는 수치와 상기 언급된 범위에서 임의의 다른 언급되거나 사이에 오는 수치가 청구된 주제 내에 포함되는 것으로 이해된다. 상기 더 작은 범위의 상한 내지 하한은 독립적으로 더 작은 범위에 포함될 수 있고, 또한 언급된 범위에서 임의의 구체적으로 배제된 한도를 조건으로 청구된 주제 내에 포함된다. 언급된 범위가 한계 중 하나 또는 둘 다를 포함하는 경우, 상기 포함된 한계 중 하나 또는 둘 다를 제외한 범위도 청구된 주제에 포함된다. 이는 범위의 폭에 관계없이 적용된다.
본 명세서에 사용된 바와 같이 용어 "약(about)"은 본 기술 분야의 당업자에게 용이하게 알려진 각각의 수치에 대한 일반적인 오차 범위를 지칭한다. 본 명세서에서 "약"의 수치 또는 파라미터에 대한 언급은 상기 수치 또는 파라미터 자체에 관한 구현예를 포함(및 설명)한다. 예를 들어, "약 X(about X)”를 지칭하는 기재에는 "X"의 기재가 포함된다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, 뉴클레오티드 또는 아미노산 위치가 서열 목록에 제시된 것과 같은 개시된 서열의 뉴클레오티드 또는 아미노산 위치에 "해당(correspond to)"한다는 설명은 GAP 알고리즘과 같은 표준 정렬 알고리즘을 사용하여 동일성을 극대화하기 위해 개시된 서열과 정렬시 확인된 뉴클레오티드 또는 아미노산 위치를 지칭한다. 서열을 정렬함으로써, 당업자는 예를 들어 보존되고 동일한 아미노산 잔기를 가이드로 사용하여 해당 잔기를 확인할 수 있다. 일반적으로 해당 위치를 확인하기 위해, 가장 높은 순서의 매치가 얻어지도록 아미노산 서열을 정렬한다(예를 들어, 문헌[Computational Molecular Biology, Lesk, A.M., ed., Oxford University Press, New York, 1988; Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D.W., ed., Academic Press, New York, 1993; Computer Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin, A.M., and Griffin, H.G., eds., Humana Press, New.Jersey, 1994; Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987; and Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M Stockton Press, New York, 1991; Carrillo et al. (1988) SIAM J Applied Math 48: 1073] 참조).
본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "벡터(vector)"는 이에 연결된 다른 핵산을 번식시킬 수 있는 핵산 분자를 지칭한다. 상기 용어는 자가-복제 핵산 구조로서의 벡터 및 이것이 도입된 숙주 세포의 게놈에 통합된 벡터를 포함한다. 특정 벡터는 이들이 작동 가능하게 연결된 핵산의 발현을 지시할 수 있다. 상기 벡터는 본 명세서에서 "발현 벡터(expression vector)"로 지칭된다. 벡터 중에는 레트로바이러스, 예를 들어, 감마레트로바이러스 및 렌티바이러스 벡터와 같은 바이러스 벡터가 있다.
용어 "숙주 세포(host cell)", "숙주 세포주(host cell line)" 및 "숙주 세포 배양물(host cell culture)"은 상호 교환적으로 사용되며, 상기 세포의 자손을 포함하여 외인성 핵산이 도입된 세포를 지칭한다. 숙주 세포는 "형질 전환체(transformants)" 및 "형질 전환된 세포(transformed cells)"를 포함하고, 이는 1 차 형질 전환 세포 및 계대 수에 관계없이 이로부터 유래된 자손을 포함한다. 자손은 핵산 함량에서 모세포와 완전히 동일하지 않을 수 있으나 돌연변이를 함유할 수 있다. 원래 형질 전환된 세포에 대해 선별되거나 선택된 것과 동일한 기능 또는 생물학적 활성을 갖는 돌연변이 자손이 본 명세서에 포함된다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, 세포 또는 세포 집단이 특정 마커에 대해 "양성(positive)"이라는 진술은 특정 마커, 전형적으로 표면 마커가 세포 상에 또는 세포 내에 검출 가능하게 존재함을 지칭한다. 표면 마커를 언급할 때, 상기 용어는 예를 들어 마커에 특이적으로 결합하는 항체로 염색하고 상기 항체를 검출함으로써, 유세포 분석에 의해 검출된 바와 같은 표면 발현의 존재를 지칭하며, 여기서 상기 염색은 달리 동일한 조건 하에서 아이소타이프-매칭된 대조군으로 같은 절차를 수행하여 검출된 염색보다 실질적으로 상위 수준에서 및/또는 마커에 대해 양성인 것으로 공지된 세포에 대한 것과 실질적으로 유사한 수준에서 및/또는 마커에 대해 음성인 것으로 공지된 세포에 대한 것보다 실질적으로 더 높은 수준에서 유세포 분석에 의해 검출 가능하다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, 세포 또는 세포 집단이 특정 마커에 대해 "음성(negative)"이라는 진술은 특정 마커, 전형적으로 표면 마커가 세포 상에 또는 세포 내에 실질적으로 검출 가능하게 존재하지 않음을 지칭한다. 표면 마커를 언급할 때, 상기 용어는 예를 들어 마커에 특이적으로 결합하는 항체로 염색하고 상기 항체를 검출함으로써, 유세포 분석에 의해 검출된 바와 같은 표면 발현의 부재를 지칭하며, 여기서 상기 염색은 달리 동일한 조건 하에서 아이소타이프-매칭된 대조군으로 같은 절차를 수행하여 검출된 염색보다 실질적으로 상위 수준에서 및/또는 마커에 대해 양성인 것으로 공지된 세포에 대한 것보다 실질적으로 더 낮은 수준에서 및/또는 마커에 대해 음성인 것으로 공지된 세포에 대한 것과 비교하여 실질적으로 유사한 수준에서 유세포 분석에 의해 검출되지 않는다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, 아미노산 서열(참조 폴리펩티드 서열)에 관하여 사용될 경우, "아미노산 서열 동일성 백분율(percent (%) amino acid sequence identity)” 및 “동일성 백분율(percent identity)”은 서열 동일성의 일부로서 임의의 보존적 치환을 고려하지 않고 최대 서열 동일성 백분율을 달성하도록 필요하다면 서열 및 도입 갭을 정렬한 후 참조 폴리펩티드 서열의 아미노산 잔기와 동일한 후보 서열(예를 들어 대상 항체 또는 단편)의 아미노산 잔기 백분율로서 정의된다. 아미노산 서열 동일성 백분율을 결정하기 위한 정렬은 예를 들어 공개적으로 이용 가능한 컴퓨터 소프트웨어 예컨대 BLAST, BLAST-2, ALIGN 또는 Megalign(DNASTAR) 소프트웨어를 사용하여 당업계 기술 범위 내에서 다양한 방법으로 달성될 수 있다. 당업자는 비교될 서열의 전장에 대해 최대 정렬을 달성하는데 필요한 임의의 알고리즘을 포함하여 서열을 정렬하기 위한 적절한 파라미터를 결정할 수 있다.
아미노산 치환은 폴리펩티드에서 하나의 아미노산을 다른 아미노산으로 대체하는 것을 포함할 수 있다. 치환은 보존적 아미노산 치환 또는 비보존적 아미노산 치환일 수 있다. 아미노산 치환이 관심 결합 분자, 예를 들어 항체 및 원하는 활성, 예를 들어 유지/개선된 항원 결합, 감소된 면역원성 또는 개선된 ADCC 또는 CDC에 대해 선별된 생성물로 도입될 수 있다.
아미노산은 일반적으로 하기와 같은 공통적인 측쇄 특성에 따라 그룹화될 수 있다.
(1) 소수성: 노르루신(Norleucine), Met, Ala, Val, Leu, Ile;
(2) 중성 친수성: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln;
(3) 산성: Asp, Glu;
(4) 염기성: His, Lys, Arg;
(5) 사슬 배향에 영향을 미치는 잔기: Gly, Pro;
(6) 방향족: Trp, Tyr, Phe.
일부 구현예에서, 보존적 치환은 상기 클래스 중 하나의 멤머를 동일한 클래스의 다른 멤버로의 교환을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 비보존적 아미노산 치환은 상기 클래스 중 하나의 멤버를 다른 클래스로 교환하는 것을 포함할 수 있다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, 조성물은 세포를 포함하여 둘 이상의 생성물, 물질 또는 화합물의 임의의 혼합물을 지칭한다. 이는 용액, 현탁액, 액체, 분말, 페이스트, 수성, 비수성 또는 이들의 임의의 조합물일 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "대상체(subject)"는 인간 또는 다른 동물과 같은 포유동물이며, 전형적으로 인간이다.
Ⅶ. 예시적인 구현예
제공된 구현예 중에는 하기가 있다.
1. 치료 방법으로서, 상기 방법은
(a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 세포 요법은 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함); 및
(b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계(여기서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 항체 또는 항원 결합 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고;
상기 2회 이상의 28일 주기 중 1회 이상에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 28일 주기의 과정에 걸쳐 1 이상의 개별 분량의 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행됨);
를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
2. 치료 방법으로서, 상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고,
여기서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 독립적으로 상기 항체 또는 항원 결합 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고;
상기 2회 이상의 28일 주기 중 1회 이상에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 28일 주기의 과정에 걸쳐 1 이상의 개별 분량의 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
3. 구현예 1 또는 구현예 2에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서의 투여에 비해 항체 또는 단편을 보다 많은 수의 개별 분량으로 투여함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
4. 구현예 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 각각의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 750 mg 내지 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
5. 구현예 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 1회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 750 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
6. 구현예 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 1회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1200 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
7. 구현예 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 1회 이상의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
8. 구현예 1 내지 4 및 7 중 어느 하나에 있어서, 각각의 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
9. 구현예 1 내지 8 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상 및 선택적으로 상기 2회 이상의 28일 주기 중 2회 이상에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 동일한 총 투여량인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
10. 구현예 1 내지 8 중 어느 하나에 있어서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 상기 2회 이상의 28일 주기 중 2회 이상에서 상이하거나, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각에서 상이한 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
11. 구현예 2 내지 8 및 10 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서의 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 상기 2회 이상의 28일 주기 중 두번째 주기 및/또는 후속 주기에서보다 더 낮은 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
12. 구현예 1 내지 11 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서 총 투여량 투여는 2, 3 또는 4 개별 분량의 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편 투여를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
13. 구현예 1 내지 12 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서 총 투여량 투여는, (i) 선택적으로 28일 주기 중 15일 및 22일에 2 개별 분량에 대해 주 1 회(Q1W); (ii) 선택적으로 28일 주기 중 1일, 8일, 15일 및 22일에 4 개별 분량에 대해 주 1 회(Q1W); (iii) 선택적으로 상기 주기의 1일 및 8일에 2 연속 분량에 대해 Q1W 후, 선택적으로 상기 주기의 15 일에 1 분량에 대해 매 2주(Q2W); 또는 (iv) 선택적으로 28일 주기의 1일 및 15일에 2 분량에 대해 매 2주(Q2W); 중에서 선택된 투약 스케쥴에 따라 개별 분량을 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
14. 구현예 13에 있어서, 상기 첫번째 28일 주기에 투여된 각각의 Q1W 분량은 독립적으로 상기 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 18% 내지 (약) 32%이고, 선택적으로 상기 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 25%이고/거나;
첫번째 28일 주기에 투여된 각각의 Q2W 분량은 독립적으로 총 투여량의 (약) 40% 내지 (약) 62.5%이고, 선택적으로 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 50%인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
15. 구현예 13 또는 구현예 14에 있어서, 첫번째 28일 주기에서의 총 투여량 투여는 각각 독립적으로 (약) 375 mg 양으로 2 연속 분량에 대해 Q1W 후, (약) 750 mg의 양으로 1 분량에 대해 Q2W로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하거나;
첫번째 28일 주기에서의 총 투여량 투여는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 4 분량에 대해 Q1W로 투여하는 것을 포함(상기 4 분량은 (약) 225 mg의 2 연속 분량 후 (약) 375 mg의 2 연속 분량을 포함)하거나;
첫번째 28일 주기에서의 총 투여량 투여는 (약) 375 mg 양으로 2 연속 분량에 대해 Q1W로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
16. 구현예 3 내지 15 중 어느 하나에 있어서, 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서의 총 투여량 투여는 독립적으로 1 또는 2 분량의 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
17. 구현예 3 내지 16 중 어느 하나에 있어서, 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서의 총 투여량 투여는 (i) 선택적으로 상기 주기의 1일 및 15일에 2 분량에 대해 매 2주(Q2W); 또는 (ii) 선택적으로 상기 주기의 1일에 1 분량에 대해 매 4주(Q4W); 중에서 선택된 투약 스케쥴을 독립적으로 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
18. 구현예 17에 있어서, 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 Q2W 분량 각각은 총 투여량의 (약) 50%이고/거나;
두번째 및/또는 후속 28일 주기의 Q4W 분량은 총 투여량이거나 약 총 투여량인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
19. 구현예 17 또는 구현예 18에 있어서, 상기 두번째 및/또는 후속 분량은 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 750 mg 양으로 2 분량에 대해 Q2W로 투여하는 것을 포함하거나;
상기 두번째 및/또는 후속 분량은 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 1500 mg 양으로 1 분량에 대해 Q4W로 투여하는 것을 포함하는 치료 방법.
20. 치료 방법으로서, 상기 방법은 (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 T 세포 요법은 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함); 및
(b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계(여기서 상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고,
여기서 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 분량에 대해 주 1회(Q1W) 후 (약) 750 mg의 양으로 1 분량에 대해 매 2주(Q2W) 투여하는 것을 포함하고;
두번째 및/또는 후속 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 1500 mg 양으로 1 분량에 대해 Q4W로 투여하는 것을 포함);
를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
21. 치료 방법으로서, 상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고,
여기서 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 375 mg의 양으로 독립적으로 2 연속 분량에 대해 주 1회(Q1W) 후 (약) 750 mg의 양으로 1 분량에 대해 매 2주(Q2W) 투여하는 것을 포함하고;
두번째 및/또는 후속 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 1500 mg 양으로 1 분량에 대해 매 4주(Q4W)로 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
22. 치료 방법으로서, 상기 방법은
(a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 T 세포 요법은 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함); 및
(b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계(상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고,
여기서, 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 4 분량에 대해 주 1회(Q1W)로 투여하는 것을 포함하고, 상기 4 분량은 각각 독립적으로 (약) 225 mg의 2 연속 분량 후 각각 독립적으로 (약) 375 mg의 2 연속 분량을 포함하고;
두번째 및/또는 후속 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 각각 독립적으로 (약) 750 mg 양으로 2 분량에 대해 매 2주(Q2W) 투여하는 것을 포함);
를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
23. 치료 방법으로서, 상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 여기서,
첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 4 분량에 대해 주 1회(Q1W) 투여하는 것을 포함하고, 상기 4 분량은 각각 독립적으로 (약) 225 mg의 2 연속 분량 후 (약) 375 mg의 2 연속 분량을 포함하고;
두번째 및/또는 후속 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 750 mg 양으로 2 분량에 대해 매 2주(Q2W) 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
24. 치료 방법으로서, 상기 방법은
(a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 T 세포 요법은 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함); 및
(b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계(상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 여기서,
첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 2 분량에 대해 주 1회(Q1W) 투여하는 것을 포함하고, 상기 2 분량 각각은 각각 독립적으로 (약) 375 mg의 양을 포함하고, 선택적으로 상기 2 분량은 연속 분량이고, 선택적으로 상기 2 분량은 28일 주기의 15일 및 22일에 투여되며;
두번째 및/또는 후속 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 1500 mg 양으로 1 분량에 대해 Q4W로 투여하는 것을 포함);
를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
25. 치료 방법으로서, 상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고,
여기서, 첫번째 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 2 분량에 대해 주 1회(Q1W) 투여하는 것을 포함하고, 상기 2 분량 각각은 독립적으로 (약) 375 mg의 양을 포함하고, 선택적으로 상기 2 분량은 연속 분량이고, 선택적으로 상기 2 분량은 28일 주기의 15일 및 22일에 투여되고;
두번째 및/또는 후속 28일 주기는 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 1500 mg 양으로 1 분량에 대해 Q4W로 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
26. 구현예 1 내지 25 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기는 세번째 28일 주기를 더 포함하고/거나 상기 후속 28일 주기는 세번째 28일 주기인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
27. 구현예 26에 있어서, 상기 세번째 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 첫번째 및/또는 두번째 28일 주기에서 투여된 총 투여량과 동일한 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
28. 구현예 26 또는 구현예 27에 있어서, 상기 세번째 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
29. 구현예 26 내지 28 중 어느 하나에 있어서, (a) 상기 세번째 28일 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 상기 첫번째 및/또는 상기 두번째 28일 주기에 비해 보다 많은 수의 개별 분량으로 상기 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행되거나;
(b) 상기 세번째 28일 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 상기 항체 또는 단편을 상기 두번째 28일 주기와 동일한 수의 분량으로 투여함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
30. 구현예 26 내지 29 중 어느 하나에 있어서, 상기 세번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 선택적으로 상기 세번째 28일 주기의 1일에 1 분량에 대해 매 4주(Q4W) 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
31. 구현예 1 내지 30 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기의 시작 또는 1일은,
(a) T 세포 요법의 투여 개시로부터 22일 및 36일 사이; 또는
(b) (i) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 후;
(ii) 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포의 수가 검출할 수 없거나 감소되고, 선택적으로 상기 T 세포 요법의 투여 후 선행 시점에 비해 감소된 후;
(iii) 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포 수가 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상으로 감소된 후;
(iv) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법의 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후의 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 상기 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만인 후;
(v) 상기 대상체가 상기 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 질병 진행을 나타내고/거나 재발한 후; 및/또는
(iv) 상기 대상체가 상기 항-PD-L1 항체의 투여 개시 전 및 상기 세포의 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해 종양 부담의 증가를 나타낸 후;
1 내지 3일 또는 1 내지 3일 후, 선택적으로 1 내지 3일 직후 또는 1 내지 3일 이내;
의 시기에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
32. 구현예 1 내지 31 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기는 3회 이상의 28일 주기를 포함하고, 선택적으로 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 T 세포 요법 투여 개시 후 (약) 22일 및 (약) 36일 사이, 선택적으로 (약) 29일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
33. 치료 방법으로서, 상기 방법은
(a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 T 세포 요법은 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함); 및
(b) 이어서 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 대상체에 투여하는 단계(여기서 상기 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 1 내지 3회 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 각각의 주기는 항체 또는 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고, 선택적으로 상기 1 내지 3회 28일 주기 중 첫번째 주기는 T 세포 요법 개시 후 (약) 22일 및 (약) 36일 사이, 선택적으로 29일에 시작);
를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법
34. 치료 방법으로서, 상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 상기 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 1 내지 3회 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 각각의 주기는 항체 또는 단편을 900 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고, 선택적으로 상기 1 내지 3회 28일 주기 중 첫번째 주기는 T 세포 요법 개시 후 (약) 22일과 (약) 36일 사이, 선택적으로 약 29일에 시작되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
35. 구현예 33 또는 구현예 34에 있어서, 각 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 1200 mg 내지 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
36. 구현예 33 내지 35 중 어느 하나에 있어서, 1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1200 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
37. 구현예 33 내지 35 중 어느 하나에 있어서, 1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
38. 구현예 33 내지 35 및 37 중 어느 하나에 있어서, 각각의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
39. 구현예 33 내지 38 중 어느 하나에 있어서, 각각의 28일 주기에서 총 투여량은 1, 2, 3 또는 4 분량의 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
40. 구현예 33 내지 39 중 어느 하나에 있어서, 각각의 28일 주기는 (i) 선택적으로 1, 8, 15 및 22일에 4 분량에 대해 주 1회(Q1W); (ii) 선택적으로 1일 및 8일에 2 연속 분량에 대해 Q1W 후 선택적으로 15일에 1 분량에 대해 매 2주(Q2W); (iii) 선택적으로 1일 및 15일에 2 분량에 대해 매 2주(Q2W); 또는 (iv) 선택적으로 1일에 1 분량에 대해 매 4주(Q4W); 중에서 선택된 투약 스케쥴을 독립적으로 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
41. 구현예 33 내지 40 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 첫번째 28일 주기의 1, 8 및 15일, 두번째 28일 주기의 1일 및 세번째 28일 주기의 1일에 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
42. 구현예 33 내지 40 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 첫번째 28일 주기의 1, 8, 15 및 22일, 제2 28일 주기의 1 및 15일 및 세번째 28일 주기의 1일에 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
43. 구현예 33 내지 40 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 각 28일 주기의 1일에 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
44. 구현예 32 내지 43 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 치료 후에 단지 부분 반응(partial response, PR)만을 나타내고/거나 T 세포 요법 및/또는 항-PD-L1 항체 또는 단편의 투여 개시 후 3개월에 PR만을 나타낼 경우 1회 이상의 추가 28일 주기에서 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 더 포함하는, 치료 방법.
45. 구현예 44에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 1회 이상의 추가 28일 주기 각각에서 900 mg 내지 2000 mg, 선택적으로 (약) 1500 mg의 총 투여량으로 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
46. 구현예 1 내지 45 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 12개월 이내의 총 기간 동안 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
47. 구현예 1 내지 46 중 어느 하나에 있어서, 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 첫번째 28일 주기의 시작은 T 세포 요법의 투여 개시 후 21일을 초과하여 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
48. 구현예 1 내지 47 중 어느 하나에 있어서,
상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 첫번째 28일 주기의 시작은,
(i) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 후;
(ii) 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포의 수가 검출할 수 없거나 감소되고, 선택적으로 상기 T 세포 요법의 투여 후 선행 시점에 비해 감소된 후;
(iii) 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 세포 수가 T 세포 요법의 투여 개시 후 대상체의 혈액에서 검출 가능한 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상으로 감소된 후;
(iv) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법의 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후의 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 상기 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만인 후;
(v) 상기 대상체가 상기 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 질병 진행을 나타내고/거나 재발한 후; 및/또는
(iv) 상기 대상체가 상기 항-PD-L1 항체의 투여 개시 전 및 상기 세포의 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해 종양 부담의 증가를 나타낸 후;
1 내지 3일 또는 1 내지 3일 후, 선택적으로 1 내지 3일 직후 또는 1 내지 3일 이내의 시기에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
49. 구현예 1 내지 48 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 29 일, 36 일, 43 일 또는 50 일에 또는 29 일, 36 일, 43 일 또는 50 일 이내에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
50. 구현예 1 내지 49 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 22 일 내지 36 일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
51. 구현예 1 내지 50 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 29 일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
52. 구현예 1 내지 51 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작 시기에, 대상체는 상기 T 세포 요법 투여 후 심각한 독성을 나타내지 않는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
53. 구현예 52에 있어서, 상기 중증 독성이 중증 사이토카인 방출 증후군(cytokine release syndrome, CRS), 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 CRS이고/거나;
상기 중증 독성이 중증 신경 독성, 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 신경 독성인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
54. 구현예 1 내지 53 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 PD-L1의 세포 외 도메인에 특이적으로 결합하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
55. 구현예 1 내지 54 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙, durvalumab), MDPL3280A(아테졸리주맙, atezolizumab), YW243.55.S70, MDX-1105(BMS-936559), LY3300054 또는 MSB0010718C(아벨루맙, avelumab)이거나 상기 중 어느 하나의 항원 결합 단편 또는 영역이거나 이를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
56. 구현예 1 내지 55 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙)이거나 이의 항원 결합 단편 또는 영역이거나 이를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
57. 구현예 1 내지 56 중 어느 하나에 있어서, 상기 B 세포 악성종양은 비호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma, NHL)인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
58. 구현예 57에 있어서, 상기 T 세포 요법 투여 시기 또는 직전에, 대상체는 NHL에 대한 하나 이상의 선행 요법, 선택적으로 CAR을 발현하는 다른 분량의 세포외 1 또는 2가지 선행 요법으로 치료 후 완화 후에 재발하였거나 이에 대해 불응성이 되었고, 선택적으로 상기 선행 요법은 CD20 표적화 제제 또는 안트라사이클린이거나 이를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
59. 구현예 57 또는 구현예 58에 있어서, 상기 NHL에는 공격적인 NHL, 미만성 거대 B 세포 림프종(diffuse large B cell lymphoma, DLBCL), 선택적으로 형질 전환된 무통성 DLBCL-NOS; EBV 양성 DLBCL-NOS; T 세포/조직구가 풍부한 거대 B 세포 림프종; 1차 종격동 거대 B 세포 림프종(primary mediastinal large B cell lymphoma, PMBCL); 여포성 림프종(follicular lymphoma, FL), 선택적으로 여포성 림프종 3B 등급(follicular lymphoma Grade 3B, FL3B); 및/또는 DLBCL 조직 구조(이중/삼중 히트)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종;이 포함되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
60. 구현예 1 내지 59 중 어느 하나에 있어서, 상기 대상체는 1 이하의 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태를 갖는 것으로 확인되거나 확인되었던 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
61. 구현예 1 내지 60 중 어느 하나에 있어서, 상기 재조합 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
62. 구현예 61에 있어서, 상기 표적 항원은 B 세포 항원, 선택적으로 CD19인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
63. 구현예 1 내지 62 중 어느 하나에 있어서, 상기 재조합 수용체는 키메라 항원 수용체(chimeric antigen receptor, CAR)인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
64. 구현예 63에 있어서, 상기 키메라 항원 수용체(CAR)는 항원에 특이적으로 결합하는 세포 외 항원 인식 도메인 및 ITAM을 포함하는 세포 내 신호 전달 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
65. 구현예 64에 있어서, 상기 세포 내 신호 전달 도메인은 CD3-제타(CD3ζ) 사슬의 신호 전달 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
66. 구현예 64 또는 구현예 65에 있어서, 상기 키메라 항원 수용체(CAR)는 공자극 신호 전달 영역을 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
67. 구현예 66에 있어서, 상기 공자극 신호 전달 영역은 CD28 또는 4-1BB의 신호 전달 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
68. 구현예 66 또는 구현예 67에 있어서, 상기 공자극 도메인은 4-1BB의 도메인이거나 이를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
69. 구현예 63 내지 68 중 어느 하나에 있어서,
상기 CAR은 항원에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인을 포함하고, 선택적으로 상기 막관통 도메인과 상기 scFv 사이에 스페이서를 더 포함하거나;
상기 CAR은 항원에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인인 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함하거나; 또는
상기 CAR은 항원에 특이적인 scFv, 스페이서, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인인 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
70. 구현예 69에 있어서,
상기 스페이서는 선택적으로 (a) 면역글로불린 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되거나, 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나; (b) 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나, 이로 구성되고/거나 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나; (c) 길이가 (약) 12개의 아미노산이고/거나 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되거나; (d) 서열 번호: 2에 의해 암호화된 서열, 서열 번호: 1, 서열 번호: 30, 서열 번호: 31, 서열 번호: 32, 서열 번호: 33, 서열 번호: 34의 서열 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 상기 중 어느 하나의 변이체를 갖거나 이로 구성되거나; 또는 (e) 화학식 X1PPX2P(여기서, X1은 글리신, 시스테인 또는 아르기닌 및 X2는 시스테인 또는 트레오닌)를 포함하거나 이로 구성되는; 폴리펩티드 스페이서이고/거나;
상기 공자극 도메인은 서열 번호: 12 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 이의 변이체를 포함하고/거나;
상기 1차 신호 전달 도메인은 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열 번호: 13 또는 14 또는 15를 포함하고/거나;
상기 scFv는 RASQDISKYLN(서열 번호: 35)의 CDRL1 서열, SRLHSGV(서열 번호: 36)의 CDRL2 서열 및/또는 GNTLPYTFG(서열 번호: 37)의 CDRL3 서열 및/또는 DYGVS(서열 번호: 38)의 CDRH1 서열, VIWGSETTYYNSALKS(서열 번호: 39)의 CDRH2 서열 및/또는 YAMDYWG(서열 번호: 40)의 CDRH3 서열을 포함하거나, 여기서 상기 scFv는 FMC63의 가변 중쇄 영역 및 FMC63의 가변 경쇄 영역 및/또는 FMC63의 CDRL1 서열, FMC63의 CDRL2 서열, FMC63의 CDRL3 서열, FMC63의 CDRH1 서열, FMC63의 CDRH2 서열 및 FMC63의 CDRH3 서열을 포함하거나, 상기 중 어느 하나와 결합을 두고 경쟁하거나 이와 동일한 에피토프에 결합하고, 선택적으로 여기서 상기 scFv는 선택적으로 서열 번호: 41을 포함하는 VH, 링커 및 VL 순서로 포함하고/거나 상기 scFv는 가요성 링커를 포함하고/거나 서열 번호: 42에 제시된 아미노산 서열을 포함하는;
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
71. 구현예 1 내지 70 중 어느 하나에 있어서, 상기 유전자 조작된 T 세포 단위용량은 (약) 1 x 105 내지 5 x 108 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 106 내지 2.5 x 108 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 106 내지 1 x 108 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 107 내지 2.5 x 108 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 107 내지 1 x 108 총 CAR 발현 T 세포(각각의 수치 포함)를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
72. 구현예 1 내지 71 중 어느 하나에 있어서, 상기 유전자 조작된 T 세포 단위용량은 (약) 1 x 105 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 105 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 5 x 105 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 1 x 106 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 106 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 5 x 106 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 1 x 107 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 107 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 5 x 107 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 1 x 108 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 108 개 이상의 CAR 발현 세포 또는 (약) 5 x 108 개 이상의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
73. 구현예 1 내지 72 중 어느 하나에 있어서, 상기 유전자 조작된 T 세포 단위용량은 (약) 5 x 107 개의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
74. 구현예 1 내지 72 중 어느 하나에 있어서, 상기 유전자 조작된 T 세포 단위용량은 (약) 1 x 108 개의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
75. 구현예 1 내지 74 중 어느 하나에 있어서, 상기 분량의 세포는 비경구적으로, 선택적으로 정맥 내로 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
76. 구현예 75에 있어서, 상기 T 세포는 대상체로부터 수득된 1 차 T 세포인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
77. 구현예 1 내지 76 중 어느 하나에 있어서, 상기 T 세포는 대상체의 자기 유래인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
78. 구현예 1 내지 77 중 어느 하나에 있어서, 상기 T 세포는 대상체에 대해 동종 이계인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
79. 구현예 1 내지 78 중 어느 하나에 있어서, 상기 유전자 조작된 T 세포의 분량은 CAR을 발현하는 CD4+ T 세포 및 CAR을 발현하는 CD8+ T 세포를 포함하고, 상기 분량의 투여는 다수의 별도 조성물로 투여하는 것을 포함하고, 상기 다수의 별도 조성물은 CD4+ T 세포 및 CD8+ T 세포 중 하나를 포함하는 제1 조성물 및 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포 중 다른 하나를 포함하는 제2 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
80. 구현예 79에 있어서,
상기 제1 조성물 및 제2 조성물은 0 내지 12시간 간격, 0 내지 6시간 간격 또는 0 내지 2시간 간격으로 투여되거나, 여기서 상기 제1 조성물의 투여 및 제2 조성물의 투여는 동일한 날에 수행되고, 약 0 내지 약 12시간 간격, 약 0 내지 약 6시간 간격 또는 약 0 내지 2시간 간격으로 수행되고/거나;
상기 제1 조성물의 투여 개시 및 상기 제2 조성물의 투여 개시는 약 1분 내지 약 1시간 간격으로 또는 약 5분 내지 약 30분 간격으로 수행되는;
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
81. 구현예 79 또는 구현예 80에 있어서, 상기 제1 조성물 및 제2 조성물은 2시간 이내, 1시간 이내, 30분 이내, 15분 이내, 10분 이내 또는 5분 이내의 간격으로 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
82. 구현예 79 내지 81 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 조성물은 CD4+ T 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
83. 구현예 79 내지 82 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 조성물은 CD8+ T 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
84. 구현예 79 내지 83 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 조성물은 상기 제2 조성물 전에 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
85. 구현예 1 내지 84 중 어느 하나에 있어서, 상기 투여 전에, 상기 대상체는 플루다라빈(fludarabine) 및/또는 사이클로포스파미드(cyclophosphamide)의 투여를 포함한 림프절 마비(lymphodepleting) 요법으로 사전 조정되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
86. 구현예 1 내지 85 중 어느 하나에 있어서, 상기 투여 직전에, 상기 대상체에 플루다라빈 및/또는 사이클로포스파미드의 투여를 포함한 림프절 마비 요법을 투여하는 것을 더 포함하는, 치료 방법.
87. 구현예 85 또는 구현예 86에 있어서, 상기 림프절 마비 요법은 2-4일 동안, 선택적으로 3일 동안 매일, 약 200-400 mg/m2, 선택적으로 (약) 300 mg/m2(수치 포함)의 사이클로포스파미드 및/또는 약 20-40 mg/m2, 선택적으로 30 mg/m2의 플루다라빈을 투여하는 것을 포함하거나, 상기 림프절 마비 요법은 약 500 mg/m2의 사이클로포스파미드 투여를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
88. 구현예 85 내지 87 중 어느 하나에 있어서,
상기 림프절 마비 요법은 3일 동안 매일 (약) 300 mg/m2의 사이클로포스파미드 및 약 30 mg/m2의 플루다라빈을 투여하는 것을 포함하고/거나;
상기 림프절 마비 요법은 3일 동안 매일 (약) 500 mg/m2의 사이클로포스파미드 및 약 30 mg/m2의 플루다라빈을 투여하는 것을 포함하는 치료 방법.
89. 구현예 1 내지 88 중 어느 하나에 있어서, 상기 대상체는 인간인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
90. 키트로서,
(a) 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법;
(b) 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편(선택적으로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 단편은 1 이상의 분량 단위로 제형화됨); 및
(c) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 유전자 조작된 세포 및/또는 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하기위한 지침(여기서 상기 지침은,
(i) 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기 동안 수행되어야 하며, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 상기 항체 또는 항원 결합 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고;
(ii) 상기 2회 이상의 28일 주기 중 적어도 첫번째 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 상기 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행됨;을 명시);
을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
91. 키트로서,
(a) 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법; 및
(b) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하기 위한 지침(여기서 상기 지침은 T 세포 투여 후에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 상기 대상체에 투여되어야함을 명시하며, 상기 지침은,
(i) 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기 동안 수행되어야 하며, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 상기 항체 또는 항원 결합 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고;
(ii) 상기 2회 이상의 28일 주기 중 적어도 첫번째 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 상기 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행됨;을 명시);
을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
92. 키트로서,
(a) 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편(선택적으로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 단편은 1 이상의 분량 단위로 제형화됨); 및
(b) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하기 위한 지침(여기서 상기 지침은 T 세포 요법의 투여 개시 후 상기 항-PD-L1 항체 또는 단편을 투여하도록 명시하고, 상기 T 세포 요법은 재조합 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하며, 상기 지침은,
(i) 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되어야 하며, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고;
(ii) 상기 2회 이상의 28일 주기 중 적어도 첫번째 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 상기 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행됨;을 명시);
을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
93. 구현예 90 내지 92 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 두번째 및/또는 후속 28일 주기에 비해 상기 항체 또는 단편을 더 많은 횟수로 투여함으로써 수행됨을 더 명시한, 키트.
94. 구현예 90, 92 및 93 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 전체 양은 (약) 225 mg 내지 2000 mg인 것을 특징으로 하는, 키트.
95. 구현예 94에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 전체 양은 (약) 750 mg 내지 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 키트.
96. 구현예 94 또는 구현예 95에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 2 이상의 분량 단위로 제형화되며, 여기서 각 분량 단위는 (약) 225 mg 내지 2000 mg인 것을 특징으로 하는, 키트.
97. 구현예 96에 있어서, 각 분량 단위는 (약) 225 mg 내지 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 키트.
98. 구현예 90 내지 97 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 PD-L1의 세포 외 도메인에 특이적으로 결합하는 것을 특징으로 하는, 키트.
99. 구현예 90 내지 98 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙), MDPL3280A(아테졸리주맙), YW243.55.S70, MDX-1105(BMS-936559), LY3300054 또는 MSB0010718C(아벨루맙)이거나 이의 항원 결합 단편인 것을 특징으로 하는, 키트.
100. 구현예 99에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙)이거나 이의 항원 결합 단편인 것을 특징으로 하는, 키트.
101. 구현예 90 내지 100 중 어느 하나에 있어서, 상기 재조합 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 것을 특징으로 하는, 키트.
102. 구현예 101에 있어서, 상기 표적 항원은 B 세포 항원, 선택적으로 CD19인 것을 특징으로 하는, 키트.
103. 구현예 90 내지 102 중 어느 하나에 있어서, 상기 재조합 수용체는 키메라 항원 수용체(CAR)인 것을 특징으로 하는, 키트.
104. 구현예 103에 있어서, 상기 키메라 항원 수용체(CAR)는 항원에 특이적으로 결합하는 세포 외 항원 인식 도메인 및 ITAM을 포함하는 세포 내 신호 전달 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
105. 구현예 104에 있어서, 상기 세포 내 신호 전달 도메인은 CD3-제타(CD3ζ) 사슬의 세포 내 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
106. 구현예 103 또는 구현예 104에 있어서, 상기 키메라 항원 수용체(CAR)는 공자극 신호 전달 영역을 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
107. 구현예 106에 있어서, 상기 공자극 신호 전달 영역은 CD28 또는 4-1BB의 신호 전달 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
108. 구현예 106 또는 구현예 107에 있어서, 상기 공자극 도메인은 4-1BB의 도메인인 것을 특징으로 하는, 키트.
109. 구현예 103 내지 108 중 어느 하나에 있어서,
상기 CAR은 항원에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인을 포함하고, 선택적으로 상기 막관통 도메인과 상기 scFv 사이에 스페이서를 더 포함하거나;
상기 CAR은 항원에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인인 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함하거나; 또는
상기 CAR은 항원에 특이적인 scFv, 스페이서, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인인 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함하는;
것을 특징으로 하는, 키트.
110. 구현예 109에 있어서,
상기 스페이서는 선택적으로 (a) 면역글로불린 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되거나, 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나; (b) 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나, 이로 구성되고/거나 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나; (c) 길이가 (약) 12개의 아미노산이고/거나 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되거나; (d) 서열 번호: 2에 의해 암호화된 서열, 서열 번호: 1, 서열 번호: 30, 서열 번호: 31, 서열 번호: 32, 서열 번호: 33, 서열 번호: 34의 서열 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 상기 중 어느 하나의 변이체를 갖거나 이로 구성되거나; (e) 화학식 X1PPX2P(여기서, X1은 글리신, 시스테인 또는 아르기닌이고, X2는 시스테인 또는 트레오닌)를 포함하거나 이로 구성되는; 폴리펩티드 스페이서이고/거나;
상기 공자극 도메인은 서열 번호: 12 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 이의 변이체를 포함하고/거나;
상기 1차 신호 전달 도메인은 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열 번호: 13 또는 14 또는 15를 포함하고/거나;
상기 scFv는 RASQDISKYLN(서열 번호: 35)의 CDRL1 서열, SRLHSGV(서열 번호: 36)의 CDRL2 서열 및/또는 GNTLPYTFG(서열 번호: 37)의 CDRL3 서열 및/또는 DYGVS(서열 번호: 38)의 CDRH1 서열, VIWGSETTYYNSALKS(서열 번호: 39)의 CDRH2 서열 및/또는 YAMDYWG(서열 번호: 40)의 CDRH3 서열을 포함하거나, 여기서 상기 scFv는 FMC63의 가변 중쇄 영역 및 FMC63의 가변 경쇄 영역 및/또는 FMC63의 CDRL1 서열, FMC63의 CDRL2 서열, FMC63의 CDRL3 서열, FMC63의 CDRH1 서열, FMC63의 CDRH2 서열 및 FMC63의 CDRH3 서열을 포함하거나, 상기 중 어느 하나와 결합을 두고 경쟁하거나 이와 동일한 에피토프에 결합하고, 선택적으로 여기서 상기 scFv는 선택적으로 서열 번호: 41을 포함하는 VH, 링커 및 VL 순서로 포함하고/거나 상기 scFv는 가요성 링커를 포함하고/거나 서열 번호: 42에 제시된 아미노산 서열을 포함하는;
것을 특징으로 하는, 키트.
111. 구현예 90 내지 110 중 어느 하나에 있어서, 상기 T 세포 요법은 (약) 1 x 105 내지 5 x 108 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 106 내지 2.5 x 108 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 106 내지 1 x 108 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 107 내지 2.5 x 108 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 107 내지 1 x 108 총 CAR 발현 T 세포(각각의 수치 포함)를 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
112. 구현예 90 내지 111 중 어느 하나에 있어서, 상기 T 세포 요법은 (약) 1 x 105 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 105 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 5 x 105 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 1 x 106 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 106 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 5 x 106 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 1 x 107 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 107 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 5 x 107 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 1 x 108 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 108 개 이상의 CAR 발현 세포 또는 (약) 5 x 108 개 이상의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
113. 구현예 90 내지 112 중 어느 하나에 있어서, 상기 T 세포 요법은 (약) 5 x 107 개의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
114. 구현예 90 내지 113 중 어느 하나에 있어서, 상기 T 세포 요법은 (약) 1 x 108 개의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
115. 구현예 90 내지 114 중 어느 하나에 있어서, 상기 T 세포 요법은 상기 대상체로부터 수득된 1차 T 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
116. 구현예 90 내지 115 중 어느 하나에 있어서, 상기 T 세포 요법은 상기 대상체의 자기 유래 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
117. 구현예 90 내지 116 중 어느 하나에 있어서, 상기 T 세포 요법은 상기 대상체에 대해 동종 이계인 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
118. 구현예 90 내지 117 중 어느 하나에 있어서, 상기 T 세포 요법은 CAR을 발현하는 CD4+ T 세포 및 CAR을 발현하는 CD8+ T 세포를 포함하고, 상기 투여는 다수의 별도의 조성물로 투여하는 것을 포함하고, 상기 다수의 별도 조성물은 CD4+ T 세포 및 CD8+ T 세포 중 하나를 포함하는 제1 조성물 및 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포 중 다른 하나를 포함하는 제2 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
119. 구현예 118에 있어서,
상기 제1 조성물 및 제2 조성물은 0 내지 12시간 간격, 0 내지 6시간 간격 또는 0 내지 2시간 간격으로 투여되거나, 여기서 상기 제1 조성물의 투여 및 제2 조성물의 투여는 동일한 날에 수행되고, 약 0 내지 약 12시간 간격, 약 0 내지 약 6시간 간격 또는 약 0 내지 2시간 간격으로 수행되고/거나;
상기 제1 조성물의 투여 개시 및 상기 제2 조성물의 투여 개시는 약 1분 내지 약 1시간 간격으로 또는 약 5분 내지 약 30분 간격으로 수행되는;
것을 특징으로 하는, 키트.
120. 구현예 118 또는 구현예 119 있어서, 상기 지침은 상기 제1 조성물 및 제2 조성물이 2시간 이내, 1시간 이내, 30분 이내, 15분 이내, 10분 이내 또는 5분 이내의 간격으로 투여되도록 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
121. 구현예 118 내지 120 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 조성물은 CD4+ T 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
122. 구현예 118 내지 121 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 조성물은 CD8+ T 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
123. 구현예 118 내지 122 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 제1 조성물이 상기 제2 조성물 전에 투여되도록 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
124. 구현예 90 내지 123 중 어느 하나에 있어서, 플루다라빈 및/또는 사이클로포스파미드를 포함하는 림프절 마비 요법을 투여하기 위한 지침을 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
125. 구현예 90 내지 124 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 림프절 마비 요법이 T 세포 요법 및/또는 항-PD-L1 항체 또는 이의 단편을 투여하기 전에 투여되도록 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
126. 구현예 90 내지 125 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 각 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 독립적으로 약 750 mg 내지 약 1500 mg 범위의 투여량이거나 투여량 범위임을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
127. 구현예 90 내지 126 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 (약) 750 mg임을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
128. 구현예 90 내지 126 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 (약) 1200 mg임을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
129. 구현예 90 내지 126 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 (약) 1500 mg임을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
130. 구현예 90 내지 126 및 구현예 129 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 각 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 (약) 1500 mg임을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
131. 구현예 90 내지 130 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 2회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 동일함을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
132. 구현예 90 내지 130 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 2회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 상이함을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
133. 구현예 90 내지 130 및 구현예 132 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 첫번째 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서보다 더 적음을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
134. 구현예 90 내지 133 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 첫번째 28일 주기가 2, 3 또는 4 분량의 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여함으로써 수행되도록 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
135. 구현예 90 내지 134 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 첫번째 28일 주기가 (i) 선택적으로 15 및 22일에 2 분량에 대해 주 1회(Q1W); (ii) 선택적으로 1, 8, 15 및 22일에 4 분량에 대해 주 1회(Q1W); (iii) 선택적으로 1일 및 8일에 2 연속 분량에 대해 Q1W 후 선택적으로 15일에 1 분량에 대해 매 2주(Q2W); 또는 (iv) 선택적으로 1일 및 15일에 2 분량에 대해 매 2주(Q2W); 중에서 선택된 투약 스케쥴로 수행되도록 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
136. 구현예 135에 있어서, 상기 지침은,
상기 첫번째 28일 주기의 각 Q1W 분량은 독립적으로 총 투여량의 (약) 18% 내지 32%, 선택적으로 상기 주기에서 총 투여량의 (약) 25%이고/거나;
상기 첫번째 28일 주기의 각 Q2W 분량은 독립적으로 총 투여량의 (약) 40% 내지 62.5%, 선택적으로 상기 주기에서 총 투여량의 (약) 50%임을;
명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
137. 구현예 135 또는 구현예 136에 있어서, 상기 지침은,
상기 첫번째 28일 주기가 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 분량에 대해 Q1W 후 (약) 750 mg의 양으로 1 분량에 대해 Q2W로 투여하여 수행되거나;
상기 첫번째 28일 주기가 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 4 분량에 대해 Q1W로 투여하여 수행되거나(상기 4 분량은 (약) 225 mg의 2 연속 분량 후 (약) 375 mg의 2 연속 분량을 포함); 또는
상기 첫번째 28일 주기가 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 375 mg 양으로 2 연속 분량에 대해 Q1W로 투여하여 수행됨;
을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
138. 구현예 90 내지 137 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 두번째 및/또는 후속 28일 주기가 1 또는 2 분량의 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하여 수행됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
139. 구현예 90 내지 138 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 두번째 및/또는 후속 28일 주기가 (i) 선택적으로 1일 및 15일에 2 분량에 대해 매 2주(Q2W); 또는 (ii) 선택적으로 1일에 1 분량에 대해 매 4주(Q4W); 중에서 선택된 투약 스케쥴로 수행됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
140. 구현예 139에 있어서, 상기 지침은,
상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 Q2W 분량 각각이 총 투여량의 (약) 50%이고/거나;
상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 Q4W 분량이 총 투여량이거나 약 총 투여량임을;
명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
141. 구현예 139 또는 구현예 140에 있어서, 상기 지침은,
상기 두번째 및/또는 후속 분량이 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 750 mg 양으로 2 분량에 대해 Q2W로 투여하여 수행되거나; 또는
상기 두번째 및/또는 후속 분량이 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 1500 mg 양으로 1 분량에 대해 Q4W로 투여하여 수행됨;
을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
142. 구현예 90 내지 141 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은,
상기 첫번째 28일 주기가 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 분량에 대해 주 1회(Q1W) 후 (약) 750 mg의 양으로 1 분량에 대해 매 2주(Q2W) 투여하여 수행되고;
상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기가 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 1500 mg 양으로 1 분량에 대해 Q4W로 투여하여 수행됨;
을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
143. 구현예 90 내지 141 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은,
상기 첫번째 28일 주기가 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 4 분량에 대해 주 1회(Q1W) 투여하여 수행되고(상기 4 분량은 (약) 225 mg의 2 연속 분량 후 (약) 375 mg의 2 연속 분량을 가짐); 및
상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기가 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 750 mg 양으로 2 분량에 대해 매 2주(Q2W) 투여하여 수행됨;
을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
144. 구현예 90 내지 141 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은,
상기 첫번째 28일 주기가 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 2 분량에 대해 주 1회(Q1W) 투여하여 수행되고(상기 분량 각각은 (약) 375 mg의 양이고, 선택적으로 상기 분량은 연속 분량이고, 선택적으로 상기 분량은 28일 주기의 15일 및 22일에 수행됨); 및
상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기가 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 1500 mg 양으로 1 분량에 대해 Q4W로 투여하여 수행됨;
을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
145. 구현예 90 내지 144 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 3회 이상의 28일 주기로 수행됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
146. 구현예 145에 있어서, 상기 지침은 상기 세번째 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 상기 첫번째 및/또는 두번째 28일 주기와 동일함을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
147. 구현예 145 또는 146에 있어서, 상기 지침은 상기 세번째 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량이 (약) 1500 mg임을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
148. 구현예 145 내지 147 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 세번째 28일 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여가 상기 첫번째 및/또는 두번째 28일 주기에 비해 상기 항체 또는 단편을 보다 많은 횟수로 투여하여 수행됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
149. 구현예 145 내지 148 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 세번째 28일 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여가 상기 두번째 28일 주기에 비해 상기 항체 또는 단편을 동일한 횟수로 투여하여 수행됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
150. 구현예 145 내지 149 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 세번째 28일 주기가 1 분량에 대해, 선택적으로 1일에 매 4주(Q4W)의 투약 스케줄로 수행됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
151. 구현예 90 내지 150 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 T 세포 요법의 개시 후 3회 이내의 28일 주기로 수행됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
152. 구현예 90 내지 151 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 각각의 28일 주기가 (i) 선택적으로 1, 8, 15 및 22일에 4 분량에 대해 주 1회(Q1W); (ii) 선택적으로 1일 및 8일에 2 연속 분량에 대해 Q1W 후 선택적으로 15일에 1 분량에 대해 매 2주(Q2W); (iii) 선택적으로 1일 및 15일에 2 분량에 대해 매 2주(Q2W); 또는 (iv) 1 분량에 대해, 선택적으로 1일에 매 4주(Q4W); 중에서 선택된 투약 스케쥴로 독립적으로 수행됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
153. 구현예 90 내지 152 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편이 첫번째 28일 주기에서 1, 8 및 15일, 두번째 28일 주기에서 1일 및 세번째 28일 주기에서 1일에 투여됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
154. 구현예 90 내지 152 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편이 첫번째 28일 주기에서 1, 8, 15 및 22일, 두번째 28일 주기에서 1 및 15일 및 세번째 28일 주기에서 1일에 투여됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
155. 구현예 90 내지 152 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편이 각 28일 주기의 1일에 투여됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
156. 구현예 90 내지 155 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 대상체가 치료 후 부분 반응(PR)을 나타낼 경우, 1회 이상의 추가 28일 주기로 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 수행됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
157. 구현예 90 내지 156 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 약 12 개월 또는 약 12 개월 미만의 총 기간 동안 수행됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
158. 구현예 90 내지 157 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 21일을 초과한 시기(예를 들어, 22-36일 이내, 약 29일)에 개시됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
159. 구현예 90 내지 157 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침은 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 약 29일, 36일, 43일 또는 50일에 또는 약 29일, 36일, 43일 또는 50일 이내에 개시됨을 명시한 것을 특징으로 하는, 키트.
160. 구현예 90 내지 159 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침에는 대상체가 중증 독성을 나타낼 경우, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편이 투여되어서는 안됨이 명시된 것을 특징으로 하는, 키트.
161. 구현예 160에 있어서, 상기 지침에는,
상기 중증 독성이 중증 사이토카인 방출 증후군(cytokine release syndrome, CRS), 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 CRS이고/거나;
상기 중증 독성이 중증 신경 독성, 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 신경 독성인;
것을 특징으로 하는, 키트.
162. 구현예 90 내지 161 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침에는,
상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가,
(i) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 후;
(ii) 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포의 수가 검출할 수 없거나 감소되고, 선택적으로 상기 T 세포 요법의 투여 후 선행 시점에 비해 감소된 후;
(iii) 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포 수가 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상으로 감소된 후;
(iv) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법의 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후의 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 상기 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만인 후;
(v) 상기 대상체가 상기 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 질병 진행을 나타내고/거나 재발한 후; 및/또는
(iv) 상기 대상체가 상기 항-PD-L1 항체의 투여 개시 전 및 상기 세포의 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해 종양 부담의 증가를 나타낸 후;
1 내지 3일 또는 1 내지 3일 후, 선택적으로 1 내지 3일 직후 또는 1 내지 3일 이내의 시기에 개시되는 것을 특징으로 하는, 키트.
163. 구현예 90 내지 162 중 어느 하나에 있어서, 상기 대상체는 인간인 것을 특징으로 하는, 키트.
164. 구현예 90 내지 163 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침에는 상기 T 세포 요법 또는 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 비호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma, NHL)을 치료하기 위한 것임이 명시된 것을 특징으로 하는, 키트.
165. 구현예 164에 있어서, 상기 지침에는 상기 T 세포 요법 또는 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여가 대상체에서 비호지킨 림프종(NHL)을 치료하기 위한 것이고, 상기 대상체는 NHL에 대한 하나 이상의 선행 요법, 선택적으로 다른 분량의 CAR을 발현하는 세포 이외의 1 또는 2가지 선행 요법으로 치료 후 완화 후에 재발하였거나 이에 대해 불응성이 되었고, 선택적으로 상기 선행 요법은 CD20 표적화 제제 또는 안트라사이클린이거나 이를 포함함이 명시된 것을 특징으로 하는, 키트.
166. 구현예 164 또는 구현예 165에 있어서, 상기 지침에는 공격적인 NHL, 미만성 거대 B 세포 림프종(diffuse large B cell lymphoma, DLBCL), 선택적으로 형질 전환된 무통성 DLBCL-NOS; EBV 양성 DLBCL-NOS; T 세포/조직구가 풍부한 거대 B 세포 림프종; 1차 종격동 거대 B 세포 림프종(primary mediastinal large B cell lymphoma, PMBCL); 여포성 림프종(follicular lymphoma, FL), 선택적으로 여포성 림프종 3B 등급(follicular lymphoma Grade 3B, FL3B); 및/또는 DLBCL 조직 구조(이중/삼중 히트)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종; 중 어느 하나로서의 NHL이 명시된 것을 특징으로 하는, 키트.
167. 구현예 90 내지 166 중 어느 하나에 있어서, 상기 지침에는 상기 키트의 사용 대상이 되거나 사용 대상이 될 후보가 되기 위해 상기 대상체가 1 이하의 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태를 갖는 것으로 확인되어야 함이 명시된 것을 특징으로 하는, 키트.
168. 구현예 90 및 92 내지 167 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포는 비경구적으로, 선택적으로 정맥 내로 투여되는 것이 적합한 것을 특징으로 하는, 키트.
169. 구현예 90, 91 및 93 내지 168 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 비경구적으로, 선택적으로 정맥 내로 투여되는 것이 적합한 것을 특징으로 하는, 키트.
171. 치료 방법으로서, 상기 방법은
(a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 상기 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); 및
(b) 후속적으로 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제를 대상체에 투여하는 단계(여기서 상기 체크포인트 억제제의 총 투여량이 2회 이상의 투여 주기 각각에서 투여되고, 상기 2회 이상의 투여 주기 중 첫번째 주기에서의 상기 체크포인트 억제제의 총 투여량은,
두번째 및/또는 후속 투여 주기에서 투여된 총 투여량과 동일하거나 그 미만이고;
상기 첫번째 투여 주기의 과정을 통해 1 이상의 개별 분량으로 투여되며, 여기서 상기 개별 분량의 수는 상기 두번째 및/또는 후속 투여 주기에서 투여되는 개별 분량의 수보다 더 큼);
를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
172. 치료 방법으로서, 상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제의 투여를 포함하고, 상기 대상체는 상기 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 상기 체크포인트 억제제의 총 투여량은 2회 이상의 투여 주기 각각에서 투여되고, 상기 2회 이상의 투여 주기 중 첫번째 주기에서 상기 체크포인트 억제제의 총 투여량은,
두번째 및/또는 후속 투여 주기에서 투여된 총 투여량과 동일하거나 그 미만이고;
상기 첫번째 투여 주기의 과정을 통해 1 이상의 개별 분량으로 투여되며, 여기서 상기 개별 분량의 수는 상기 두번째 및/또는 후속 투여 주기에서 투여되는 개별 분량의 수보다 더 큰 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
173. 구현예 171 또는 구현예 172에 있어서, 상기 투여 주기는 21일 주기인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
174. 구현예 171 또는 구현예 172에 있어서, 상기 투여 주기는 28일 주기인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
175. 구현예 171 내지 174 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 투여 주기 중 첫번째 주기의 총 투여량은 상기 2회 이상의 투여 주기 중 두번째 주기의 총 투여량과 동일한 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
176. 구현예 171 내지 175 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 투여 주기 중 첫번째 주기는 2, 3, 4 이상의 개별 분량을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
177. 구현예 176에 있어서, 상기 투여 주기는 28일 주기이며, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기의 개별 분량은 각 주 1회(Q1W) 4 분량, 2주 연속 각 Q1W 분량으로 2 분량 또는 2주 연속 각 Q1W 분량으로 2 분량 및 이후 2주 후 1회(Q2W) 1 분량으로 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
178. 구현예 171 내지 177 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 투여 주기 각각은 (약) 400 mg 내지 (약) 2000 mg의 총 투여량으로 상기 체크포인트 억제제를 독립적으로 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
179. 구현예 171 내지 178 중 어느 하나에 있어서, 상기 체크포인트 억제제는 PD-L1, PD-L2, PD-1 및 CTLA-4 중에서 선택된 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
180. 구현예 171 내지 179 중 어느 하나에 있어서, 상기 체크포인트 경로는 PD-1/PD-L1이고 상기 체크포인트 억제제는 항-PD-1 항체인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
181. 구현예 180에 있어서, 상기 체크포인트 억제제는 니볼루맙(nivolumab), 펨브롤리주맙(pembrolizumab) 또는 세미플리맙(cemiplimab)인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
182. 구현예 171 내지 181 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 투여 주기 각각은 (약) 400 mg 내지 (약) 600 mg, 선택적으로 (약) 480 mg의 총 투여량을 독립적으로 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
183. 구현예 171 내지 179 중 어느 하나에 있어서, 상기 체크포인트 경로는 PD-1/PD-L1이고 상기 체크포인트 억제제는 항-PD-L1 항체인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
184. 구현예 171 내지 181 및 183 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 투여 주기 각각은 750 mg 내지 2000 mg, 선택적으로 (약) 1500 mg의 총 투여량을 독립적으로 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
185. 구현예 171 내지 184 중 어느 하나에 있어서, 상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 첫번째 투여 주기의 시작은,
(i) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 후;
(ii) 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포의 수가 검출할 수 없거나 감소되고, 선택적으로 상기 T 세포 요법의 투여 후 선행 시점에 비해 감소된 후;
(iii) 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포 수가 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상으로 감소된 후;
(iv) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법의 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후의 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 상기 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만인 후;
(v) 상기 대상체가 상기 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 질병 진행을 나타내고/거나 재발한 후; 및/또는
(iv) 상기 대상체가 상기 체크포인트 억제제의 투여 개시 전 및 상기 세포의 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해 종양 부담의 증가를 나타낸 후;
1 내지 3일 또는 1 내지 3일 후, 선택적으로 1 내지 3일 직후 또는 1 내지 3일 이내의 시기에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
186. 구현예 171 내지 185 중 어느 하나에 있어서, 상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 첫번째 투여 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 29일, 36일, 43일 또는 50일에 또는 29일, 36일, 43일 또는 50일 이내에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
187. 구현예 171 내지 186 중 어느 하나에 있어서, 상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 첫번째 투여 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 22 일 내지 36 일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
188. 구현예 171 내지 187 중 어느 하나에 있어서, 상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 첫번째 투여 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 29 일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
189. 구현예 171 내지 188 중 어느 하나에 있어서, 상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 첫번째 투여 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 43 일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
190. 구현예 171 내지 189 중 어느 하나에 있어서, 상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 첫번째 투여 주기의 시작 시기에, 대상체는 상기 T 세포 요법 투여 후 중증 독성을 나타내지 않는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
191. 구현예 190에 있어서,
상기 중증 독성이 중증 사이토카인 방출 증후군(cytokine release syndrome, CRS), 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 CRS이고/거나;
상기 중증 독성이 중증 신경 독성, 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 신경 독성인;
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
192. 치료 방법으로서, 상기 방법은
(a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 상기 B 세포 악성 종양 세포에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); 및
(b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계(여기서 상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고,
첫번째 28일 주기는 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 28일 주기 중 2주 연속 각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량, 상기 개별 분량 각각은 (약) 375 mg 양 이후 (약) 750 mg의 양으로 28일 주기 중 2주 후 1회(Q2W) 1 분량으로 투여하는 것을 포함하고;
두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양에 대해 매 4주(Q4W) 1 분량으로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함;);
를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
193. 치료 방법으로서, 상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 여기서,
첫번째 28일 주기는 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 28일 주기 중 2주 연속 각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 개별 분량 각각은 (약) 375 mg 양 이후 (약) 750 mg의 양으로 28일 주기 중 2주 후 1회(Q2W) 1 분량이고;
두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양에 대해 매 4주(Q4W) 1 분량으로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여를 포함하는;
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
194. 치료 방법으로서, 상기 방법은
(a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); 및
(b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계(상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 여기서,
첫번째 28일 주기는 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 28일 주기 동안 각 주 1회(Q1W) 4 개별 분량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 4 분량은 각각 독립적으로 (약) 225 mg의 2 연속 Q1W 분량 이후, 각각 독립적으로 (약) 375 mg의 2 연속 Q1W 분량을 포함하고;
두번째 및/또는 후속 28일 주기는 28일 주기 중 각각 매 2주(Q2W) 2 분량으로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 여기서 각 Q2W 투여는 각각 독립적으로 (약) 750 mg의 양임;);
를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
195. 치료 방법으로서, 상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 B 세포 악성 종양에서 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 여기서,
첫번째 28일 주기는 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 28일 주기 동안 각각 주 1회(Q1W) 4 개별 분량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 4 개별 분량은 각각 독립적으로 (약) 225 mg의 2 연속 Q1W 분량 이후, 각각 독립적으로 (약) 375 mg의 2 연속 Q1W 분량을 포함하고;
두번째 및/또는 후속 28일 주기는 두번째 및/또는 후속 28일 주기 동안 매 2주(Q2W) 2 개별 분량으로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 여기서 각 분량은 독립적으로 (약) 750 mg의 양인;
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
196. 치료 방법으로서, 상기 방법은
(a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); 및
(b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계(상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 여기서,
첫번째 28일 주기는 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량으로 투여하는 것을 포함하고, 여기서 상기 2 분량 각각은 독립적으로 (약) 375 mg 양을 포함하고, 선택적으로 상기 2 분량은 연속적인 Q1W 분량이고, 선택적으로 상기 2 분량은 28일 주기에서 15일 및 22일에 투여되고;
두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양으로 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서 1 분량에 대해 Q4W로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함;);
를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
197. 치료 방법으로서, 상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 B 세포 악성 종양에서 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 여기서,
첫번째 28일 주기는 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량으로 투여하는 것을 포함하고, 상기 2 분량 각각은 독립적으로 (약) 375 mg 양을 포함하고, 선택적으로 상기 2 분량은 연속적인 Q1W 분량이고, 선택적으로 상기 2 분량은 28일 주기에서 15일 및 22일에 투여되고;
두번째 및/또는 후속 28일 주기는 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서 (약) 1500 mg의 양으로 1 분량에 대해 Q4W로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여를 포함하는;
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
198. 치료 방법으로서, 상기 방법은
(a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); 및
(b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계(여기서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 상기 항체 또는 항원 결합 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고;
상기 2회 이상의 28일 주기 중 1회 이상에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 28일 주기의 과정에 걸쳐 1 이상의 개별 분량의 상기 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행됨;);
를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
199. 치료 방법으로서, 상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하며, 여기서,
상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 독립적으로 상기 항체 또는 항원 결합 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고;
상기 2회 이상의 28일 주기 중 1회 이상에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 28일 주기의 과정에 걸쳐 1 이상의 개별 분량의 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행되는;
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
200. 구현예 198 또는 구현예 199에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서의 투여에 비해 보다 많은 수의 개별 분량의 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
201. 구현예 198 내지 200 중 어느 하나에 있어서, 각각의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 750 mg 내지 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
202. 구현예 198 내지 201 중 어느 하나에 있어서, 1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 750 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
203. 구현예 198 내지 202 중 어느 하나에 있어서, 1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1200 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
204. 구현예 198 내지 201 중 어느 하나에 있어서, 1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
205. 구현예 198 내지 201 및 204 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 각각의 28일 주기에서 독립적으로 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
206. 구현예 198 내지 205 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상 중 2회 이상에서 및 선택적으로 상기 2회 이상의 28일 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 동일한 총 투여량인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
207. 구현예 198 내지 205 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 상기 2회 이상의 28일 주기 중 2회 이상에서 상이하거나, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각에서 상이한 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
208. 구현예 198 내지 205 및 207 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서의 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 상기 2회 이상의 28일 주기 중 두번째 주기 및/또는 후속 주기에서보다 더 적은 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
209. 구현예 198 내지 208 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서 총 투여량 투여는 2, 3 또는 4 개별 분량의 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편 투여를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
210. 구현예 198 내지 209 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서 총 투여량 투여는 (i) 28일 주기 내, 선택적으로 28일 주기의 15일 및 22일에, 각각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량; (ii) 28일 주기 동안, 선택적으로 28일 주기의 1, 8, 15 및 22일에 각각 주 1회(Q1W) 4 개별 분량; (iii) 28일 주기 중 연속 2주 동안, 선택적으로 상기 주기의 1일 및 8일에 각각 Q1W로 2 개별 분량 후, 28일 주기 중 선택적으로, 상기 주기의 15일에 2주 후 1회(Q2W) 1 분량; 또는 (iv) 28일 주기 동안, 선택적으로 28일 주기의 1일 및 15일에 각각 매 2주(Q2W) 2 개별 분량; 중에서 선택된 투약 스케쥴에 따라 개별 분량으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
211. 구현예 210에 있어서,
상기 첫번째 28일 주기에 투여된 각각의 Q1W 분량은 독립적으로 상기 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 18% 내지 (약) 32%이고, 선택적으로 상기 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 25%이고/거나;
상기 첫번째 28일 주기에 투여된 각각의 Q2W 분량은 독립적으로 상기 첫번째 28일 주기의 총 투여량의 (약) 40% 내지 (약) 62.5%이고, 선택적으로 상기 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 50%인;
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
212. 구현예 210 또는 구현예 211에 있어서,
상기 첫번째 28일 주기에서의 총 투여량 투여는 투약 스케쥴 (iii)에 따라 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하거나(여기서 연속 2주 동안 Q1W로 2 개별 분량 각각은 각각 독립적으로 (약) 375 mg 양 이후, (약) 750 mg의 양으로 1 분량 1회 Q2W);
상기 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 (ii)에 제시된 투약 스케줄에 따라 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하거나(여기서 상기 4 개별 분량 Q1W는 (약) 225 mg의 양으로 2 연속 Q1W 분량 후 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 Q1W 분량을 포함); 또는
상기 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 (i)에 제시된 투약 스케줄에 따라 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는(여기서 각각의 2 개별 분량 Q1W는 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 Q1W 분량에 대해 수행됨);
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
213. 구현예 198 내지 210 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기의 첫번째 주기에서 총 투여량 투여는 (i) 28일 주기의 (약) 15일 및 (약) 22일에 2 개별 분량; (ii) 28일 주기의 (약) 1일, (약) 8일, (약) 15일 및 (약) 22일에 4 개별 분량; (iii) 28일 주기의 (약) 1일 및 (약) 8일에 2 개별 분량 후 상기 주기의 (약) 15일에 1 분량; 또는 (iv) 28일 주기의 (약) 1일 및 28일 주기의 (약) 15일에 2 분량; 중에서 선택된 투약 스케쥴에 따라 개별 분량을 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
214. 구현예 198 내지 213 중 어느 하나에 있어서,
상기 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 투약 스케쥴 (iii)에 따라 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하거나(여기서 상기 각각의 2 개별 분량은 28일 주기의 (약) 1일 및 (약) 8일에 (약) 375 mg의 양, 이후 상기 주기의 (약) 15일에 (약) 750 mg의 양으로 1 분량을 포함);
상기 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 (ii)에 제시된 투약 스케줄에 따라 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하거나(여기서 상기 4 개별 분량은 28일 주기의 (약) 1일 및 (약) 8일에 (약) 225 mg의 양으로 2 연속 분량 후, 28일 주기의 (약) 15일 및 (약) 22일에 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 분량을 포함); 또는
상기 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 (i)에 제시된 투약 스케줄에 따라 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는(여기서 각각의 2 개별 분량은 28일 주기의 (약) 15일 및 (약) 22일에 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 포함);
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
215. 구현예 200 내지 214 중 어느 하나에 있어서, 상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서의 총 투여량 투여는 독립적으로 1 또는 2 분량의 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
216. 구현예 200 내지 215 중 어느 하나에 있어서, 상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서의 총 투여량 투여는, 독립적으로 (i) 상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기 동안, 선택적으로 상기 두번째 및/또는 후속 주기의 1일 및 15일에 각각 매 2주(Q2W) 2 개별 분량; 또는 (ii) 상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기, 선택적으로 상기 두번째 및/또는 후속 주기의 1일에 매 4주(Q4W) 1 분량; 중에서 선택된 투약 스케쥴을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
217. 구현예 216에 있어서,
상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 상기 각 Q2W 분량은 상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 총 투여량의 (약) 50%이고/거나;
상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 상기 Q4W 분량은 상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 (약) 총 투여량인;
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
218. 구현예 216 또는 구현예 217에 있어서,
상기 두번째 및/또는 후속 분량은 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 750 mg 양으로 2 분량에 대해 Q2W로 투여하는 것을 포함하거나;
상기 두번째 및/또는 후속 분량은 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 1500 mg 양으로 1 분량에 대해 Q4W로 투여하는 것을 포함하는 치료 방법.
219. 구현예 1 내지 25 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기는 세번째 28일 주기를 더 포함하고/거나 상기 후속 28일 주기는 세번째 28일 주기인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
220. 구현예 219에 있어서, 상기 세번째 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 상기 첫번째 및/또는 두번째 28일 주기에서 투여된 총 투여량과 동일한 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
221. 구현예 219 또는 구현예 220에 있어서, 상기 세번째 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
222. 구현예 219 내지 221 중 어느 하나에 있어서,
(a) 상기 세번째 28일 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 상기 첫번째 및/또는 상기 두번째 28일 주기에 비해 보다 많은 수의 개별 분량으로 상기 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행되거나;
(b) 상기 세번째 28일 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 상기 항체 또는 단편을 상기 두번째 28일 주기와 동일한 수의 분량으로 투여함으로써 수행되는;
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
223. 구현예 219 내지 222 중 어느 하나에 있어서, 상기 세번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 상기 세번째 28일 주기, 선택적으로 상기 세번째 28일 주기의 1일에 매 4주(Q4W) 1 분량의 투여를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
224. 구현예 192 내지 223 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는,
(a) 상기 T 세포 요법의 투여 개시로부터 22일과 36일 사이; 또는
(b) (i) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 후;
(ii) 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포의 수가 검출할 수 없거나 감소되고, 선택적으로 상기 T 세포 요법의 투여 후 선행 시점에 비해 감소된 후;
(iii) 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포 수가 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상으로 감소된 후;
(iv) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법의 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후의 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 상기 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만인 후;
(v) 상기 대상체가 상기 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 질병 진행을 나타내고/거나 재발한 후; 및/또는
(iv) 상기 대상체가 상기 항-PD-L1 항체의 투여 개시 전 및 상기 세포의 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해 종양 부담의 증가를 나타낸 후;
1 내지 3일 또는 1 내지 3일 후, 선택적으로 1 내지 3일 직후 또는 1 내지 3일 이내;
의 시기에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
225. 구현예 192 내지 224 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 상기 T 세포 요법의 투여 개시로부터 22일과 36일 사이의 시기에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
226. 구현예 192 내지 225 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기는 3회 이내의 28일 주기를 포함하고, 선택적으로 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 (약) 22일과 (약) 36일 사이에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
227. 구현예 192 내지 226 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 29일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
228. 구현예 192 내지 227 중 어느 하나에 있어서, 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 43일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
229. 치료 방법으로서, 상기 방법은
(a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계(상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); 및
(b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계(여기서 상기 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 1 내지 3회 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 각각의 주기는 상기 항체 또는 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고, 선택적으로 여기서 상기 1 내지 3회 28일 주기 중 첫번째 주기는 상기 T 세포 요법 개시 후 (약) 22일과 (약) 36일 사이, 선택적으로 29일에 시작함);
를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
230. 치료 방법으로서, 상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하고, 여기서 상기 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 1 내지 3회 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 각각의 주기는 상기 항체 또는 단편을 900 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고, 선택적으로 여기서 상기 1 내지 3회 28일 주기 중 첫번째 주기는 상기 T 세포 요법 개시 후 (약) 22일과 (약) 36일 사이, 선택적으로 약 29일에 시작하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
231. 구현예 229 또는 구현예 230에 있어서, 각 28일 주기에서 상기 항-PD-L28 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 1200 mg 내지 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
232. 구현예 229 내지 231 중 어느 하나에 있어서, 1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1200 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
233. 구현예 229 내지 231 중 어느 하나에 있어서, 1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
234. 구현예 229 내지 231 및 233 중 어느 하나에 있어서, 각각의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
235. 구현예 229 내지 234 중 어느 하나에 있어서, 각각의 28일 주기에서 총 투여량은 1, 2, 3 또는 4 분량의 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
236. 구현예 229 내지 235 중 어느 하나에 있어서, 각각의 28일 주기는 (i) 선택적으로 28일 주기의 1, 8, 15 및 22일에 각각 주 1회(Q1W) 4 분량; (ii) 선택적으로 28일 주기의 1일 및 8일에 각각 Q1W로 2 연속 분량 후 선택적으로 28일 주기의 15일에 1 분량에 대해 2주 후 1회(Q2W) 1 분량; (iii) 선택적으로 28일 주기의 1일 및 15일에 각각 매 2주(Q2W) 2 분량; 또는 (iv) 선택적으로 28일 주기의 1일에 매 4주(Q4W) 1 분량; 중에서 선택된 투약 스케쥴을 독립적으로 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
237. 구현예 229 내지 236 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 첫번째 28일 주기의 1, 8 및 15일, 두번째 28일 주기의 1일 및 세번째 28일 주기의 1일에 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
238. 구현예 229 내지 237 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 첫번째 28일 주기의 1, 8, 15 및 22일, 두번째 28일 주기의 1 및 15일 및 세번째 28일 주기의 1일에 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
239. 구현예 229 내지 238 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 각 28일 주기의 1일에 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
240. 구현예 229 내지 239 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 치료 후에 단지 부분 반응(PR)만을 나타내고/거나 상기 T 세포 요법 및/또는 상기 항-PD-L1 항체 또는 단편의 투여 개시 후 3개월에 PR만을 나타낼 경우 1회 이상의 추가 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 더 포함하는, 치료 방법.
241. 구현예 240에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 1회 이상의 추가 28일 주기 각각에서 900 mg 내지 2000 mg의 총 투여량, 선택적으로 (약) 1500 mg의 총 투여량으로 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
242. 구현예 183 내지 241 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 12개월 이내의 총 기간 동안 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
243. 구현예 183 내지 242 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 21일을 초과하여 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
244. 구현예 173 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작은,
(i) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 후;
(ii) 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포의 수가 검출할 수 없거나 감소되고, 선택적으로 상기 T 세포 요법의 투여 후 선행 시점에 비해 감소된 후;
(iii) 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포 수가 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상으로 감소된 후;
(iv) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법의 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후의 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 상기 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만인 후;
(v) 상기 대상체가 상기 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 질병 진행을 나타내고/거나 재발한 후; 및/또는
(iv) 상기 대상체가 상기 항-PD-L1 항체의 투여 개시 전 및 상기 세포의 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해 종양 부담의 증가를 나타낸 후;
1 내지 3일 또는 1 내지 3일 후, 선택적으로 1 내지 3일 직후 또는 1 내지 3일 이내의 시기에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
245. 구현예 183 내지 244 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 29 일, 36 일, 43 일 또는 50 일에 또는 29 일, 36 일, 43 일 또는 50 일 이내에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
246. 구현예 183 내지 245 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 22 일 내지 36 일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
247. 구현예 183 내지 246 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 29 일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
248. 구현예 183 내지 247 중 어느 하나에 있어서, 상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 상기 첫번째 투여 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 43 일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
249. 구현예 183 내지 248 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작 시기에, 상기 대상체는 상기 T 세포 요법 투여 후 중증 독성을 나타내지 않는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
250. 구현예 249에 있어서,
상기 중증 독성이 중증 사이토카인 방출 증후군(cytokine release syndrome, CRS), 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 CRS이고/거나;
상기 중증 독성이 중증 신경 독성, 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 신경 독성인;
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
251. 구현예 183 내지 250 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 PD-L1의 세포 외 도메인에 특이적으로 결합하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
252. 구현예 183 내지 251 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙, durvalumab), MDPL3280A(아테졸리주맙, atezolizumab), YW243.55.S70, MDX-1105(BMS-936559), LY3300054 또는 MSB0010718C(아벨루맙, avelumab)이거나 상기 중 어느 하나의 항원 결합 단편 또는 영역이거나 이를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
253. 구현예 183 내지 252 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙)이거나 이의 항원 결합 단편 또는 영역이거나 이를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
254. 구현예 183 내지 253 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙)인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
255. 구현예 171 내지 254 중 어느 하나에 있어서, 상기 B 세포 악성종양은 비호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma, NHL)인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
256. 구현예 255에 있어서, 상기 T 세포 요법 투여 시기 또는 직전에, 상기 대상체는 NHL에 대한 하나 이상의 선행 요법, 선택적으로 또 다른 분량의 CAR을 발현하는 세포 이외의 1 또는 2가지 선행 요법으로 치료 후 완화 후에 재발하였거나 이에 대해 불응성이 되었고, 선택적으로 상기 하나 이상의 선행 요법은 CD20 표적화 제제 또는 안트라사이클린이거나 이를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
257. 구현예 255 또는 구현예 256에 있어서, 상기 NHL에는 공격적인 NHL, 미만성 거대 B 세포 림프종(diffuse large B cell lymphoma, DLBCL), 선택적으로 형질 전환된 무통성 DLBCL-NOS; EBV 양성 DLBCL-NOS; T 세포/조직구가 풍부한 거대 B 세포 림프종; 1차 종격동 거대 B 세포 림프종(primary mediastinal large B cell lymphoma, PMBCL); 여포성 림프종(follicular lymphoma, FL), 선택적으로 여포성 림프종 3B 등급(follicular lymphoma Grade 3B, FL3B); 및/또는 DLBCL 조직 구조(이중/삼중 히트)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종;이 포함되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
258. 구현예 255 내지 257 중 어느 하나에 있어서, 상기 NHL에는 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL); DLBCL-NOS; 형질 전환된 무통성 DLBCL-NOS; 여포성 림프종 3B 등급(FL3B); 및/또는 DLBCL 조직 구조(이중/삼중 히트)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종;이 포함되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
259. 구현예 171 내지 258 중 어느 하나에 있어서, 상기 대상체는 1 이하의 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태를 갖는 것으로 확인되거나 확인된 적이 있는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
260. 구현예 171 내지 199 중 어느 하나에 있어서, 상기 표적 항원은 B 세포 항원인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
261. 구현예 171 내지 260 중 어느 하나에 있어서, 상기 표적 항원은 CD19인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
262. 구현예 261에 있어서, 상기 키메라 항원 수용체(CAR)는 표적 항원에 특이적으로 결합하는 세포 외 항원 인식 도메인 및 ITAM을 포함하는 세포 내 신호 전달 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
263. 구현예 262에 있어서, 상기 세포 내 신호 전달 도메인은 CD3-제타(CD3ζ) 사슬의 신호 전달 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
264. 구현예 262 또는 구현예 263에 있어서, 상기 키메라 항원 수용체(CAR)는 공자극 분자의 세포질 신호 전달 도메인을 포함하는 공자극 신호 전달 영역을 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
265. 구현예 264에 있어서, 상기 공자극 신호 전달 영역은 CD28 또는 4-1BB의 세포질 신호 전달 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
266. 구현예 264 또는 구현예 265에 있어서, 상기 공자극 도메인은 4-1BB의 세포질 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
267. 구현예 171 내지 266 중 어느 하나에 있어서,
상기 CAR은 CD19에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인을 포함하고, 선택적으로 상기 막관통 도메인과 상기 scFv 사이에 스페이서를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
268. 구현예 171 내지 266 중 어느 하나에 있어서, 상기 CAR은 CD19에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인인 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
269. 구현예 171 내지 266 중 어느 하나에 있어서, 상기 CAR은 CD19에 특이적인 scFv, 스페이서, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인인 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인인 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
270. 구현예 267 또는 구현예 269에 있어서,
상기 스페이서는 (a) 면역글로불린 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되거나, 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나; (b) 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나, 이로 구성되고/거나 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나; 또는 (c) 길이가 (약) 12개의 아미노산이고/거나 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되는; 폴리펩티드 스페이서인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
271. 구현예 267, 269 및 270 중 어느 하나에 있어서, 상기 스페이서는 화학식 X1PPX2P(서열 번호: 58, X1은 글리신, 시스테인 또는 아르기닌 및 X2는 시스테인 또는 트레오닌)를 포함하거나 이로 구성되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
272. 구현예 267 및 269 내지 271 중 어느 하나에 있어서, 상기 스페이서는 서열 번호: 2에 의해 암호화된 서열, 서열 번호: 1, 서열 번호: 30, 서열 번호: 31, 서열 번호: 32, 서열 번호: 33, 서열 번호: 34의 서열 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 상기 중 어느 하나의 변이체를 포함하거나 이로 구성되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
273. 구현예 267 및 269 내지 272 중 어느 하나에 있어서, 상기 스페이서는 서열 번호: 1의 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
274. 구현예 264 내지 273 중 어느 하나에 있어서, 상기 공자극 분자의 세포질 신호 전달 도메인은 서열 번호: 182 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 이의 변이체를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
275. 구현예 262 내지 274 중 어느 하나에 있어서, 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 상기 세포질 신호 전달 도메인은 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열 번호: 13 또는 14 또는 15를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
276. 구현예 262 내지 275 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 RASQDISKYLN(서열 번호: 35)의 CDRL1 서열, SRLHSGV(서열 번호: 36)의 CDRL2 서열 및/또는 GNTLPYTFG(서열 번호: 37)의 CDRL3 서열 및 DYGVS(서열 번호: 38)의 CDRH1 서열, VIWGSETTYYNSALKS(서열 번호: 39)의 CDRH2 서열 및/또는 YAMDYWG(서열 번호: 40)의 CDRH3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
277. 구현예 262 내지 276 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 FMC63의 CDRL1 서열, FMC63의 CDRL2 서열, FMC63의 CDRL3 서열, FMC63의 CDRH1 서열, FMC63의 CDRH2 서열 및 FMC63의 CDRH3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
278. 구현예 262 내지 277 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 FMC63의 가변 중쇄 영역 및 FMC63의 가변 경쇄 영역을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
279. 구현예 262 내지 278 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 서열 번호: 41에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 VH 영역을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
280. 구현예 262 내지 279 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 서열 번호: 42에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 VL 영역을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
281. 구현예 262 내지 270 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 선택적으로 서열 번호: 41에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 VH, 선택적으로 서열 번호: 59를 포함하는 링커 및 선택적으로 서열 번호: 42에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 VL 순서로 포함하고/거나 상기 scFv는 가요성 링커를 포함하고/거나 서열 번호: 43에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
282. 구현예 262 내지 281 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 서열 번호: 43에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
283. 구현예 171 내지 282 중 어느 하나에 있어서, 상기 유전자 조작된 T 세포 단위용량은 (약) 1 x 105 내지 5 x 108 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 106 내지 2.5 x 108 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 106 내지 1 x 108 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 107 내지 2.5 x 108 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 107 내지 1 x 108 총 CAR 발현 T 세포(각각의 수치 포함)를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
284. 구현예 171 내지 283 중 어느 하나에 있어서, 상기 유전자 조작된 T 세포 단위용량은 (약) 1 x 105 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 105 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 5 x 105 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 1 x 106 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 106 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 5 x 106 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 1 x 107 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 107 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 5 x 107 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 1 x 108 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 108 개 이상의 CAR 발현 세포 또는 (약) 5 x 108 개 이상의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
285. 구현예 171 내지 284 중 어느 하나에 있어서, 상기 유전자 조작된 T 세포 단위용량은 (약) 5 x 107 개의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
286. 구현예 171 내지 284 중 어느 하나에 있어서, 상기 유전자 조작된 T 세포 단위용량은 (약) 1 x 108 개의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
287. 구현예 171 내지 284 중 어느 하나에 있어서, 상기 유전자 조작된 T 세포 단위용량은 (약) 1.5 x 108 개의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
288. 구현예 171 내지 287 중 어느 하나에 있어서, 상기 유전자 조작된 T 세포 단위용량은 비경구적으로 선택적으로 정맥 내로 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
289. 구현예 288에 있어서, 상기 T 세포는 대상체로부터 수득된 1 차 T 세포인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
290. 구현예 171 내지 289 중 어느 하나에 있어서, 상기 T 세포는 대상체의 자기 유래인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
291. 구현예 171 내지 289 중 어느 하나에 있어서, 상기 T 세포는 대상체에 대해 동종 이계인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
292. 구현예 171 내지 291 중 어느 하나에 있어서, 상기 유전자 조작된 T 세포의 분량은 CAR을 발현하는 CD4+ T 세포 및 CAR을 발현하는 CD8+ T 세포를 포함하고, 상기 분량의 투여는 다수의 별도 조성물로 투여하는 것을 포함하고, 상기 다수의 별도 조성물은 CD4+ T 세포 및 CD8+ T 세포 중 하나를 포함하는 제1 조성물 및 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포 중 다른 하나를 포함하는 제2 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
293. 구현예 292에 있어서,
상기 제1 조성물 및 제2 조성물은 0 내지 12시간 간격, 0 내지 6시간 간격 또는 0 내지 2시간 간격으로 투여되거나, 여기서 상기 제1 조성물의 투여 및 제2 조성물의 투여는 동일한 날에 수행되고, 약 0 내지 약 12시간 간격, 약 0 내지 약 6시간 간격 또는 약 0 내지 2시간 간격으로 수행되고/거나;
상기 제1 조성물의 투여 개시 및 상기 제2 조성물의 투여 개시는 약 1분 내지 약 1시간 간격으로 또는 약 5분 내지 약 30분 간격으로 수행되는;
것을 특징으로 하는, 치료 방법.
294. 구현예 292 또는 구현예 293에 있어서, 상기 제1 조성물 및 제2 조성물은 2시간 이내, 1시간 이내, 30분 이내, 15분 이내, 10분 이내 또는 5분 이내의 간격으로 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
295. 구현예 122 내지 294 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 조성물은 CD4+ T 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
296. 구현예 122 내지 294 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 조성물은 CD8+ T 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
297. 구현예 122 내지 296 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 조성물은 상기 제2 조성물 전에 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
299. 구현예 171 내지 297 중 어느 하나에 있어서, 상기 투여 전에, 상기 대상체는 플루다라빈(fludarabine) 및/또는 사이클로포스파미드(cyclophosphamide)의 투여를 포함한 림프절 마비(lymphodepleting) 요법으로 사전 조정된 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
300. 구현예 171 내지 299 중 어느 하나에 있어서, 상기 투여 직전에, 상기 대상체에 플루다라빈 및/또는 사이클로포스파미드의 투여를 포함한 림프절 마비 요법을 투여하는 것을 더 포함하는, 치료 방법.
301. 구현예 299 또는 구현예 300에 있어서, 상기 림프절 마비 요법은 2-4일 동안, 선택적으로 3일 동안 매일, 약 200-400 mg/m2, 선택적으로 (약) 300 mg/m2(수치 포함)의 사이클로포스파미드 및/또는 약 20-40 mg/m2, 선택적으로 30 mg/m2의 플루다라빈을 투여하는 것을 포함하거나, 상기 림프절 마비 요법은 약 500 mg/m2의 사이클로포스파미드 투여를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
302. 구현예 299 내지 301 중 어느 하나에 있어서,
상기 림프절 마비 요법은 3일 동안 매일 (약) 300 mg/m2의 사이클로포스파미드 및 약 30 mg/m2의 플루다라빈을 투여하는 것을 포함하고/거나;
상기 림프절 마비 요법은 3일 동안 매일 (약) 500 mg/m2의 사이클로포스파미드 및 약 30 mg/m2의 플루다라빈을 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
303. 구현예 171 내지 302 중 어느 하나에 있어서, 상기 대상체는 인간인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
304. 키트로서,
(a) 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법(여기서 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합);
(b) 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제(선택적으로, 여기서 상기 이의 체크포인트 억제제는 1 이상의 개별 분량으로 제형화됨); 및
(c) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 상기 T 세포 요법 및/또는 상기 체크포인트 억제제 투여를 위한 지침(여기서 상기 지침은 구현예 171 내지 303 중 어느 하나의 방법에 따른 상기 T 세포 요법 및/또는 상기 체크포인트 억제제 투여를 명시);
을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
305. 키트로서,
(a) 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법(여기서 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합); 및
(b) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하기 위한 지침(여기서, 상기 지침에는 상기 T 세포 요법 투여 후에, 상기 대상체에 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제가 투여될 것이 명시되고, 여기서 상기 지침은 구현예 171 내지 303 중 어느 하나의 방법에 따른 상기 T 세포 요법 및/또는 상기 체크포인트 억제제 투여를 명시);
을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
306. 키트로서,
(b) 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제(선택적으로, 여기서 상기 이의 체크포인트 억제제는 1 이상의 개별 분량으로 제형화됨); 및
(b) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 체크포인트 억제제를 투여하기 위한 지침(여기서, 상기 지침은 상기 체크포인트 억제제가 T 세포 요법의 투여 개시 후에 투여되고, 상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하며, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합함을 명시하며, 여기서 상기 지침은 구현예 171 내지 303 중 어느 하나의 방법에 따른 상기 T 세포 요법 및/또는 상기 체크포인트 억제제의 투여를 명시);
을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
Ⅷ. 실시예
하기 실시예는 예시적인 목적으로만 포함되며 본 발명의 범위를 한정하려는 의도는 아니다.
실시예 1 PD-L1 발현 세포의 존재 하에 CAR 발현 T 세포에서 PD-1 발현의 항원 특이적 자극의 평가
키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하도록 조작된 T 세포를 함유하는 T 세포 조성물을 자극 조건의 존재 하에서 인큐베이션 후 PD-1의 발현에 대해 평가하였다.
항-CD19 CAR 발현 T 세포를 함유하는 T 세포 조성물이 CD4+ 및 CD8+ T 세포에 대한 농축을 위해, 샘플에서 T 세포(CD4+ 및 CD8+ 세포를 포함)의 면역 친화도 기반 선택을 포함한 공정으로 3명의 건강한 성인 인간 도너로부터의 백혈구 성분 채집술 샘플로부터 생성되었으며, CD8+ 및 CD4+ 세포에 대해 각각 농축된 2개의 조성물이 결과적으로 생성되었다.
농축된 CD4+ 및 CD8+ 조성물의 세포는 항-CD3/항-CD28 비드로 별도로 활성화되었고, 항-CD19 CAR을 암호화하는 벡터로 렌티바이러스 형질 도입에 노출되었다. 상기 항-CD19 CAR은 뮤린 항체(FMC63으로부터 유래된 가변 영역)로부터 유래된 항-CD19 scFv, 면역글로불린 유래 스페이서, CD28로부터 유래된 막관통 도메인, 4-1BB로부터 유래된 공자극 영역 및 CD3-제타 세포 내 신호 전달 도메인을 함유했다. 바이러스 벡터에서의 발현 작제물은 CAR 발현에 대한 대리 마커로 작용하고; T2A 리보솜 건너뛰기 서열에 의해 CAR 서열과 분리된; 절단형 수용체를 암호화하는 서열을 더 함유했다. 이어서 형질 도입된 집단은 세포 증폭을 위한 자극 시약의 존재 하에 별도로 인큐베이션되었다. 증폭된 CD8+ 및 CD4+ 세포는 제형화되었고 별도로 동결 보존 및 저장되었다.
각각의 도너로부터 동결 보존된 CD4+ 및 CD8+ 항-CD19 CAR 발현 세포를 해동하여, 약 1:1 CAR+ CD4+:CD8+ 비율로 조합하였고, 생성된 CAR+ T 세포 조성물 중 5×104 개의 세포를 96웰 평평한 바닥 플레이트에 플레이팅하였다. 인간 CD19로 형질 도입된 표적 K562 세포(K562.CD19)를 5:1(1×104 세포), 2.5:1(2×104 세포) 및 1.25:1(4×104 세포)의 3가지 상이한 이펙터 대 표적(E:T) 비율로 CAR+ T 세포 조성물과 함께 37℃, 5% CO2에서 밤새 공배양하였다.
인큐베이션 후, 모든 조건으로부터의 CAR+ T 세포를 CD3, CD4, CD8 및 PD-1에 특이적인 항체 및 형질 도입된 세포를 인식하는 항체를 사용하여 CAR 발현에 대해 유동 세포 측정으로 분석하였다. 상기 분석에 의해 (형질 도입된) CAR+로 간주되는 T 세포의 백분율은 도너 간 및 CD4+와 CD8+ T 세포 간에 다양했다. CD4+ T 세포는 70.4 내지 80.5% CAR+ 범위였고, CD8+ T 세포는 47.5 내지 52.9% CAR+ 범위였다. 해동 직후, CD3+CD4+ 및 CD3+CD8+ 항-CD19 CAR 발현 세포는 PD-1의 세포 표면 발현을 입증하였고(시간 0), 이는 K562.CD19 세포에 노출되는 방법으로 24시간 항원 노출 후 상향 조절되었다(도 1). K562.CD19 세포와의 배양에 대한 반응으로 CD4+ 및 CD8+ 항-CD19 CAR 발현 세포 둘 다에 있어서의 PD-1 상향 조절의 크기는 5:1의 이펙터 대 표적 비율에 비해 1.25:1의 이펙터 대 표적 비율에 대해 PD-1 발현의 증가(양성 세포의 MFI)로 입증된 바와 같이(도 2), 배양 중에 존재하는 표적 세포의 상대적인 숫자와 관련이 있는 것으로 관찰되었다.
또한, 2.5:1 E:T(CAR-T:K562.CD19) 비율의 세포 배양물을 자극 후 4일 동안 매일 PD-1 발현에 대해 분석하여 PD-1 발현의 동역학을 모니터링하였다. 도 3a에 도시된 바와 같이, PD-1 발현에 양성인 항-CD19 CAR 발현 세포의 백분율은 항원 발현(K562.CD19) 세포로 단일 자극 후 4일의 기간에 걸쳐 안정적이었다. 그러나, PD-1 염색에 대한 평균 형광 강도에 의해 결정된 바와 같이 CD4+ 및 CD8+ 세포 둘 다의 표면에 발현된 PD-1의 양은 자극 후 하루 후에 급격히 감소하였고, 표면 발현 수준은 4일까지 기준선으로 돌아갔다(도 3b).
실시예 2 항-CD19 CAR 발현 세포의 활성에 대한 항-PD-L1 항체의 존재 또는 부재의 평가
PD-1/PD-L1 관여가 항-CD19 CAR 발현 세포 활성을 나타내는 다양한 판독을 억제했는지 여부 및 예시적인 항-PD-L1 항체, 두르발루맙의 존재 하에서 상기 효과가 차단될 수 있는지 여부를 평가하기 위한 연구가 수행되었다. K562.CD19 세포 또는 인간 CD19 및 PD-L1을 발현하도록 형질 도입된 K562 세포(K562.CD19.PDL1) 중 하나와 표적 세포를 24시간 동안 실시예 1에 기재된 바와 같이 본질적으로 공배양한 후, 건강한 3명의 도너로부터 생성된 항-CD19 CAR 발현 T 세포 조성물에서 사이토카인 생성 및 T 세포 활성화 마커의 발현을 평가하였다. 상기 인큐베이션은 두르발루맙(20 μg/mL)의 존재 또는 부재 하에 수행되었다. 대조군으로 아이소타입 대조군을 사용하였다.
A. 사이토카인 생성
인큐베이션에 후에, 각 조건으로부터의 상청액을 수확하고 사이토카인 생성에 대해 분석하였다.
도 4a 내지 4c에 도시된 바와 같이, 3개의 모든 항-CD19 CAR 발현 도너 세포 제조에 걸쳐 5:1의 E:T 비율부터 1.25:1의 E:T 비율에서 PD-L1 발현이 결여된 K562.CD19 세포에 비해 K562.CD19.PDL1 세포의 존재 하에서 IFNγ, IL-2 및 TNF-α 사이토카인 생성이 감소하였다. 두르발루맙의 존재로 상이한 도너로부터 유래된 세포 조성물에 걸쳐 사이토카인 생성 수준이 회복되는 것으로 관찰되었고(도 4a, 4b 및 4c), 이는 항원 유도된 IFN-γ, IL-2 및 TNF-α 생성에 대한 PD-L1 매개 억제 효과가 두르발루맙의 존재 하에 회복되었음을 나타낸다.
B. T 세포 활성화 마커의 발현
두르발루맙의 존재 또는 부재 하에, CD19+ 표적 세포(K562.CD19 및 K562.CD19.PDL1)와 함께 24시간 동안 인큐베이션한 CD4+ 및 CD8+ 항-CD19 CAR 발현 세포에서 유동 세포 측정에 의해 PD-1 및 T 세포 활성화 마커 CD25 및 CD69의 발현을 평가하였다. 항원 발현 K562.CD19 세포와 함께 24시간 동안 배양된 CAR 발현 세포에 대해 관찰된 PD-1 발현의 증가가, 표적 세포가 PD-L1(K562.CD19.PDL1 표적 세포)을 발현하는 배양물에서 관찰되지 않은 경우, 이는 항-CD19 CAR 발현 세포에서 항원 유도된 PD-1 발현의 증가가 표적 세포(K562.CD19.PDL1) 상의 PD-L1 존재에 의해 억제되었음을 나타낸다. 도 5a 내지 5c를 참조한다. 도시된 바와 같이, 두르발루맙의 첨가는 PD-L1 발현(K562.CD19.PDL1) 표적 세포와 공배양 시, 항-CD19 CAR 발현 세포에서 PD-1 발현 수준의 증가를 초래하는 것으로 관찰되었다. 일부 구현예에서, PD-L1 발현 표적 세포의 존재 하에 PD-1 발현의 감소(또는 증가 억제)는 리간드와의 결합시 수용체의 활성화 반응 및/또는 쉐딩(shedding) 또는 내재화의 PD-L1 매개 억제에 기인하거나 이와 관련이 있을 수 있다.
항-CD19 CAR 발현 세포가 PD-L1을 발현하지 않는 K562.CD19 표적 세포와의 공배양에 비해 PD-L1 발현(K562.CD19.PDL1) 표적 세포와 공배양되었을 때, 항-CD19 CAR 발현 세포에서 CD25 발현이 증가하는 것으로 관찰되었다. CD8+는 아니나, CD4+ 항-CD19 CAR 발현 T 세포는, PD-L1을 발현하지 않는 K562.CD19 표적 세포와의 공배양에 비해 K562.CD19.PDL1 표적 세포와 인큐베이션될 때 특히 1.25:1 E:T 비율에서 초기 T 세포 활성화 마커, CD69의 발현 감소를 나타냈다. K562.CD19.PDL1과 항-CD19 CAR 발현 세포의 공배양 중 두르발루맙의 존재는 PD-L1 발현 표적 세포의 존재 하에 관찰된 CD69 발현 감소를 역전시키는 것으로 관찰되었다. 상기 데이터는 활성화 마커의 표면 발현에 대한 PD-L1의 효과가 항-PD-L1 항체를 사용하는 것과 같이 PD-L1을 중화함으로써 차단될 수 있음을 나타낸다.
실시예 3 생체 내에서 항-CD19 CAR 발현 세포의 재증폭
항-CD19 CAR 발현 세포 조성물이 실시예 1에 기재된 바와 같이 실질적으로 생산되었고 비호지킨 림프종(NHL)을 가진 대상체에게 투여되었다. CAR 발현 T 세포의 투여 전에(d=0), 대상체를 3일 동안 매일 30 mg/m2의 플루다라빈 및 3일 동안 매일 300 mg/m2의 사이클로포스파미드로 치료하였다. 동결 보존된 세포 조성물을 정맥 내 투여 전에 해동하였다. 치료적 T 세포 분량은 약 1:1의 표적 비율로 투여된 제형화된 CD4+ CAR 발현 세포 집단 및 제형화된 CD8+ CAR 발현 집단을 투여함으로써 정의된 세포 조성물로서 투여되었다.
d=0에서, 화학요법 불응성 형질 전환된 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL, MYC 및 BCL6 다중 카피 및 BCL2 재배열을 갖는 배아 중심 아형)을 갖는 대상체의 치료가 정맥 내 주입에 의한 단일 분량 스케쥴로 개시되었다. 투여된 각 분량에는 5 x 107개의 CAR 발현 T 세포(표적 1:1 CD4+:CD8+ 비율)가 포함되었다. 특정 시점에서 측정된 말초 혈액에서의 CD3+/CAR+, CD4+/CAR+, CD8+/CAR+ T 세포의 숫자가 도 6에 도시된다. 분량 조정된 빈크리스틴 및 프레드니손 플러스 리툭시맙과 함께 에토포사이드, 독소루비신 및 사이클로포스파미드(DA-EPOCH-R) 및 8/8 HLA 매칭된 비연관 도너로부터의 중간 강도 동종 이계 줄기 세포 이식을 포함한, 5가지 유형의 선행 요법으로 대상체는 이전에 치료를 받았고 이에 대해 불응성이었다. 동종 이계 줄기 세포 이식 후 및 항-CD19 CAR 발현 T 세포를 받기 전에, 대상체는 모든 혈액 계통에서 100% 도너 키메라 현상을 나타내었으며, 면역 억제 요법을 중단했고, 이식편 대 숙주 질환(graft versus host disease, GVHD)을 갖지 않았다. 항-CD19 CAR 발현 T 세포 투여 전에, 대상체는 양전자 방출 단층 촬영 및 컴퓨터 단층 촬영(positron-emission tomography and computed tomography, PET-CT)에 의해 관찰되고 자기 공명 영상화(magnetic resonance imaging, MRI)에 의해 확인된 귀 주위 종괴 및 우측 측두엽 뇌 병변을 가졌다.
항-CD19 CAR 발현 T 세포 치료를 받은 후에, 대상체는 관찰된 신경 독성 또는 CRS의 징후없이 PET-CT 및 두뇌 MRI에 의해 나타난 바와 같이, 주입 후 28일에 완전한 반응(complete response, CR)을 달성했다. CAR 발현 T 세포의 주입 후 3개월에, 귀 주위 종괴의 재발이 대상체에서 관찰되었고, 절개 생검이 수행되었다. 생검 후에, 가시적인 종양은 추가 요법없이 약해졌다. 도 6에 도시된 바와 같이, 약동학 분석은 말초 혈액에서 CAR-T 세포의 뚜렷한 재증폭을 나타냈고(관찰된 초기 증폭보다 더 높은 수준이고, 피크 수준은 주입 후 약 113일에 관찰됨), 이는 종양 퇴화와 일치하였다. 이어서 대상체는 생검 1 개월 후에 PET-CT를 재수행함으로써 확인된 바와 같이 제2 CR을 달성하였고, CAR 발현 T 세포 주입 후 6 개월째 CR에 남아 있었다. 대상체의 추가 평가는 CNS 반응이 지속되고 대상체는 12 개월에 CR에 남아 있음을 나타냈다.
상기 결과는 기능적 또는 활성 CAR+ T 세포의 감소 또는 손실 후 및/또는 CAR-T 세포 요법에 대한 항 종양 반응 후 재발 후에 CAR 발현 T 세포의 재증폭 및 활성화가 생체 내에서 개시될 수 있다는 결론과 일치한다. 또한, 초기 CAR+ T 세포 주입 후 생체 내에서 늦게 재증폭 후, CAR+ T 세포는 항 종양 활성을 다시 나타낼 수 있다. 상기 결과는 CAR+ T 세포 재증폭 및 활성화가 생체 내에서 유발될 수 있으며 CAR+ T 세포를 재활성화하거나 부스팅하는 방법이 이의 효능을 더욱 증대시킬 수 있음을 뒷받침한다.
실시예 4 항-CD19 CAR 발현 세포로 치료 후 생검 샘플에서 PD-L1 발현의 평가
PD-L1의 발현이 CAR 발현 세포의 투여 전 및/또는 투여 후에 대상체로부터 수집된 종양 생검에서 평가되었다.
항-CD19 CAR 발현 세포 조성물이 실시예 1에 기재된 바와 같이 실질적으로 생산되었다. 치료적 CAR 발현 T 세포 조성물을 갖는 재발성 또는 불응성(relapsed or refractory, R/R) 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL) 또는 맨틀 세포 림프종(MCL)이 있는 선택된 대상체로부터 종양 생검을 수집했다. CAR 발현 T 세포의 투여 전(치료 전) 및 투여 후 7 내지 20 일(치료 후)에 종양 생검을 수득하였다. 총 28명의 대상체(25명의 DLBCL 및 3명의 MCL)로부터 43개의 생검(치료 전 26개; 치료 후 17개 및 매치된 쌍 15개)의 결과를 조사했다.
종양 생검에서 CAR 발현 T 세포의 침윤이 항-CD19 CAR을 암호화하는 mRNA에 특이적인 현장 혼성화(in situ hybridization, ISH) 프로브를 사용하여 정량화되었다. CAR 발현 T 세포, 비-CAR T 세포 및 B 세포를 CAR 발현 세포 및 CD4, CD8, CD19, CD20 및 PD-L1에 대한 세포 표면 대리 마커를 검출하는 다중 면역 형광(immunofluorescence, IF) 분석을 사용하여 세었다. 종양 생검 절편을 헤마톡실린 및 에오신(hematoxylin and eosin, H&E)으로 염색하고 조직의 질과 종양 확인을 위해 평가했다. 면역 형광 이미지를 이미지 분석 소프트웨어를 사용하여 분석하였다.
CD4+ 및 CD8+ CAR T 세포 모두 치료 후 시점(투여 후 7 내지 20 일)에 종양 영역에 침투한 것으로 관찰되었다.
PD-L1의 발현은 치료 전(0.16 %; 0-56 %)) 및 치료 후 (3.3 %; 0-65 %)) 대상체 사이에서 다양했다. 매칭된 생검에서 CD8+ 세포의 치료 후 증가는 PD-L1 발현의 치료 후 증가(R2 = 0.61)와 관련이 있는 것으로 관찰되었다. 상기 결과는 평가 당시 CD8+ CAR+ 세포의 침윤이 상기 세포의 존재 및/또는 활성이 종양 미세 환경(tumor microenvironment, TME) 인자의 상향 조절을 초래할 수 있음을 나타낼 수 있다는 결론과 일치한다. 일부 구현예에서, 상기 인자를 표적화하는 요법, 예를 들어 CAR-T 세포의 투여 시점 또는 이후에 투여된 것과 같은 PD-L1을 표적화하는 요법은 CAR+ T 세포 투여 후 하나 이상의 치료 결과 또는 이의 지속 기간을 향상시킬 수 있다.
실시예 5 재발성 및 불응성 비호지킨 림프종(NHL)이 있는 대상체에 면역 체크포인트 억제제(예를 들어, 항-PD-L1 항체)와 병용으로 항-CD19 CAR 발현 세포의 투여
항-CD19 CAR 발현 T 세포 조성물이 실시예 1에 기재된 바와 같이 실질적으로 생성되었고, 재발성/불응성(R/R) B 세포 비호지킨 림프종(NHL)이 있는 대상체에 투여되었다. 일부 측면에서, 상기 조성물은 항-PD-L1 항체와 병용으로 상기 대상체에게 투여되고, CAR 발현 T 세포 조성물의 투여에 후속하여 투여된다. 치료를 위해 선택된 대상체 그룹에는 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL); 드 노보 또는 무통성 림프종에서 형질 전환(NOS); DLBCL 조직 구조(이중/삼중 히트)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종; 여포성 림프종 3b 등급(FLG3B); T 세포/조직구가 풍부한 거대 B 세포 림프종; 엡스타인 바 바이러스(Epstein-Barr virus, EBV) 양성 DLBCL, NOS; 및 1차 종격동(흉선) 거대 B 세포 림프종(PMBCL);을 갖는 대상체가 포함된다. 치료받은 대상체는 CD20 표적화 제제 및 안트라사이클린을 포함하여 2개 이상의 선행 요법 방식 후에 재발했거나 이에 대해 불응성이고, 스크리닝 시에 1 이하의 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 점수를 갖는다.
CAR+ T 세포 주입 전에, 대상체는 플루다라빈(flu, 30 mg/m2) 및 사이클로포스파미드(Cy, 300 mg/m2)로 3일 동안 림프절 마비 화학 요법을 받는다. 대상체는 림프절 마비 요법 2-7 일 후에 CAR 발현 T 세포를 받는다. 대상체에게 단일 분량의 5 x 107 총 CAR 발현 T 세포(DL1) 또는 단일 분량의 1 x 108 CAR 발현 T 세포(DL2)와 같은 분량의 CAR 발현 T 세포(CD4+ CAR 발현 T 세포 및 CD8+ CAR 발현 T 세포 각각의 1:1 비율로 별도의 주입을 통한 각각의 단일 분량)가 투여된다.
예시적인 항-PD-L1 항체 두르발루맙은 1회 이상의 28 일 주기를 포함하는 투약 스케쥴로 정맥 내(IV) 주입으로서 CAR-T 세포 주입 후 대상체에게 투여되어, 예컨대 정상 상태 곡선 하 면적에 기초하여 1500 mg Q4W(예컨대 10 mg/kg Q2W 또는 20 mg/kg Q4W)의 분량으로 두르발루맙을 투여하여 달성된 것과 동일하거나 유사한 노출 수준을 초래한다. 28일 주기에서 매주(Q1W) 375mg의 분량은 5mg/kg Q1W의 분량과 동일할 것으로 예상되며, 상기 분량과 매 2주(Q2W) 750mg의 분량이 10 mg/kg Q2W 및 20 mg/kg Q4W의 분량과 유사한 것으로 결정되었다. 구체적으로, 1회 이상의 28일 주기 동안 보다 낮은 분량을 보다 자주 제공하는 투약 접근법(예컨대 1500 mg Q4W의 2 분량에 비해 2주 동안 375mg Q1W의 1 분량, 750 mg Q2W의 1 분량 및 1500 mg Q4W의 1 분량)이 보다 짧은 반감기이나 유사한 생물학적 PD-L1 이용을 초래하는 것으로 관찰되었다. 이론에 구속되기를 원하지 않고, 일부 구현예에서, 상기 보다 짧은 반감기는 투여 후 독성과 같은 불리하거나 원치않는 효과의 위험이 보다 낮아지는 결과를 초래할 수 있다.
DL1 또는 DL2 중 하나의 항-CD19 CAR+ T 세포를 받은 일부 대상체에서, 두르발루맙은 CAR-T 세포 주입 후 29일(± 7 일)에 시작하여 2주 동안(예를 들어 29일 및 36일에) 375 mg Q1W로 1 분량, 이어서 750 mg Q2W로 1 분량(예를 들어 43일에), 이후 2 분량에 대해 1500 mg Q4W(예를 들어 57일 및 85일에)로 투여된다.
일부 경우에, 보다 낮은 분량 및/또는 지연된 분량으로 두르발루맙의 투여를 수반한 대안적인 투약 요법이 예를 들어 DL1으로 항-CD19 CAR+ T 세포를 받은 대상체에 제공된다. 예시적인 두르발루맙의 보다 낮은 투약 스케쥴은 CAR-T 세포 주입 후 29일(± 7일)에 시작하여 2주 동안(예를 들어 29일 및 36일에) 225 mg Q1W로 1 분량, 이어서 2주 동안(예를 들어 43일 및 50일에) 375 mg Q1W로, 이어서 750 mg Q2W로 2 분량(예를 들어 57일 및 71일에), 이후 1 분량에 대해 1500 mg Q4W(예를 들어 85일에)로 투여하는 것을 포함한다. 예시적인 두르발루맙의 지연된 투약 스케쥴은 CAR-T 세포 주입 후 43일(± 7일)에 시작하여 2주 동안(예를 들어 43일 및 50일에) 375 mg Q1W로 1 분량, 이어서 750 mg Q2W로 2 분량(예를 들어 57일 및 71일에), 이후 1 분량에 대해 1500 mg Q4W(예를 들어 85일에)로 투여하는 것을 포함한다.
치료에 대한 반응은 치료 후 다양한 시기에 및 치료 전 기준선에서 양전자 방출 단층 촬영(PET) 및/또는 컴퓨터 단층 촬영(CT) 또는 자기 공명 영상화(MRI) 스캔에 의한 방사선 촬영 종양 평가에 기초하여 평가된다(예를 들어 루가노 분류에 기초, 예를 들어, 문헌[Cheson et al., (2014) JCO 32(27):3059-3067]을 참조한다). 치료 후 치료-응급 부작용(treatment-emergent adverse events, TEAE)의 존재 또는 부재가 또한 평가된다. 대상체는 또한 국립 암 연구소-일반적인 독성 기준(CTCAE) 척도, 버전 4.03(NCI-CTCAE v4.03)에 따라 1-5 척도로 등급이 나뉜 신경 독성(혼란, 실어증, 뇌질환, 근간대성 발작, 경련, 혼수 및/또는 변경된 정신 상태 증상을 포함한 신경학적 합병증)에 대해 평가되고 모니터링된다. 일반적인 독성 기준(CTCAE) 척도, 버전 4.03(NCI-CTCAE v4.03). 문헌[Common Terminology for Adverse Events (CTCAE) Version 4, U.S. Department of Health and Human Services, Published: May 28, 2009 (v4.03: June 14, 2010); 및 Guido Cavaletti & Paola Marmiroli Nature Reviews Neurology 6, 657-666 (December 2010)]을 참조한다. 사이토카인 방출 증후군(CRS)이 또한 중증도에 따라 등급이 매겨지고, 결정되고 모니터링된다. 문헌[Lee et al, Blood. 2014;124(2):188-95]을 참조한다. 대상체는 또한 두르발루맙으로 치료 전 및 후 항-CD19 CAR+ T 세포의 PK 및 두르발루맙의 PK에 대해 평가된다.
대상체가 부분 반응(PR)을 달성하지 못할 경우 두르발루맙의 투약은 3회 28일 주기 후(예를 들어, 3개월 후)에 중단되고, 이 경우 두르발루맙의 추가 주기가 최대 12개월의 총 지속 기간 동안 질병 진행까지 계속될 수 있다.
실시예 6 면역 체크포인트 억제제(예를 들어, 항-PD-L1 항체)와 병용으로 항-CD19 CAR 발현 세포의 투여 후에 재발성 및 불응성 비호지킨 림프종(NHL)이 있는 대상체에서 반응, 안정성 및 약동학의 평가
CD19에 특이적인 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 자가 T 세포를 함유하는 치료적 CAR+ T 세포 조성물 및 예시적인 항-PD-L1 항체 두르발루맙을 상기 실시예 5에 기재된 바와 같이 일반적으로 재발성/불응성(R/R) B 세포 비호지킨 림프종(NHL)이 있는 대상체에 투여하였다. R/R NHL이 있는 대상체에 상기 병용 요법을 투여하는 지속적인 임상 연구에서 특정 시점을 통한 결과가 설명된다.
A. 대상체 및 치료
1 이하의 ECOG 점수를 갖고 CD20 표적화 제제 및 안트라사이클린을 포함한 2 이상의 선행 요법 방식 후에 재발하였거나 이에 대해 불응성인, 양전자 방출 단층 촬영(PET)으로 관찰된 바와 같은 형질 전환된 무통성 NHL을 포함한 DLBCL NOS; DLBCL 조직 구조(이중/삼중 히트 림프종)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종; FLG3B; T 세포/조직구가 풍부한 거대 B 세포 림프종; EBV 양성 DLBCL, NOS; 또는 PMBCL이 있는 대상체를 포함한 성인 대상체가 본 연구에 포함되었다. 본 연구에 등록한 대상체 중에서, 일부는 DLBCL, NOS를 가졌고; 일부는 재발된 질병이 있었다. HSCT(hematopoietic stem cell transplant)가 백혈구 성분 채집술보다 90일 이상 전에 발생한 경우 선행 동종 이계 조혈 줄기 세포 이식(HSCT)을 근거로 또는 선행 CD19 표적화 CAR+ T 세포 요법 또는 항-PD-L1 항체를 받은 것을 근거로 대상체를 제외하지 않았다.
대상체는 3일 동안 플루다라빈 및 사이클로포스파미드로 림프절 마비 화학 요법을 받은 후에, 단일 분량의 5 x 107 개의 총 CAR+ T 세포(DL1; CD4+ CAR+ T 세포 및 CD8+ CAR+ T 세포 각각 1:1 비율로 별개의 투여를 통한 각각의 단일 분량) 또는 단일 분량의 1 x 108 개의 CAR+ T 세포(DL2)를 투여받았다. 43일에 제1 분량의 두르발루맙을 받은 1명의 대상체 및 마지막 1500 mg 분량이 8, 9 또는 44일까지 연기되었던 3명의 대상체를 제외하고, 대상체에 CAR+ T 세포 투여 후 29일(± 7일, 예를 들어 29 및 36일)에 시작하여 2 분량에 대해 375 mg Q1W로 1 분량, 이어서 750 mg Q2W로 1 분량(예를 들어 43일에), 이후 2 분량에 대해 1500 mg Q4W(예를 들어 57일 및 85일에)로 두르발루맙을 투여했다. 반응, 치료-응급 부작용(TEAE) 및 사이토카인 방출 증후군(CRS) 또는 신경학적 이벤트(neurological event, NE) 발병률을 상기 실시예 5에 기재된 바와 같이 평가하였다. 말초 혈액에서 CAR+ T 세포의 수에 기초한 약동학 파라미터를 유동 세포 측정에 의해 CAR+ T 세포의 투여 후 다양한 시점(예를 들어, 1, 2, 4, 8, 11, 15, 22, 29, 36, 43, 50, 57, 71, 85, 180, 270 또는 365일)에 평가하였다.
분석 시점에서, 총 11명의 대상체가 CAR+ T 세포 및 1 분량 이상의 두르발루맙을 받았다. 8명의 대상체가 DL1의 CAR+ T 세포를 받았고, 상기 대상체 중 6명이 5 분량의 두르발루맙을 모두 받았고; 3명의 대상체가 DL2의 CAR+ T 세포를 받았고 상기 대상체 중 2명이 5 분량의 두르발루맙을 모두 받았다.
B. 반응 및 안전성
분석 시점에서, CAR+ T 세포 단독으로 또는 두르발루맙과 병용 투여 후에 분량 제한 독성이 관찰되지 않았다.
CAR+ T 세포 투여 후 1개월째에((약) 두르발루맙의 제1 투여 시기에), 전체 응답률(overall response rate, ORR)은 91%(10/11; DL1, 7/8 및 DL2, 3/3)였고 64%의 대상체(7/11)가 완전 반응(complete response, CR)에 도달했다(DL1, 5/8; DL2, 2/3). CAR+ T 세포 투여 후 3개월째에, 1개월째에 PR이었던 1명의 대상체가 3개월째에 CR로 전환되었다. 치료받은 대상체 중에서, 6명의 대상체가 CAR+ T 세포 투여 후 6개월째에 평가되었고, 상기 대상체 중 4명이 6개월째에 완전 반응을 달성했다. 상기 대상체 중 1명이 1개월 및 3개월에 PR을 보였으나 6개월에 CR로 전환되었다.
C. 약동학 평가 및 반응
CAR+ T 세포의 투여 후 다양한 시점에서 측정된 대상체의 말초 혈액내 CAR+ T 세포의 수를 근거로 약동학을 평가하였다. 3명의 예시적인 대상체에서, 혈액에 있는 CAR+ T 세포의 수는 57일경에 초기 증폭으로부터 감소하는 것이 관찰되었으나, 첫 번째 1500 mg 분량의 두르발루맙(예를 들어, 약 57일과 85일 사이) 후에 증가하는 것이 관찰되었다. 3명의 대상체 중 한 명에서, 혈액의 CAR+ T 세포 수는 57일째에 검출할 수 없었으나, 85일째에 증가하여 상기 대상체에서 8일 또는 22일째의 혈액 내 CAR+ T 세포 수를 초과했다. 3명의 대상체 중 또 다른 한 명에서, CAR+ T 세포 증폭이 6개월까지 관찰되었고(상기 대상체에서, 최종 1500 mg 분량의 두르발루맙은 129일까지 지연됨), 이 시점에서의 세포 수는 2개월(예를 들어, 57일)째의 세포 수보다 10배 이상 더 많았다. 상이한 예시적인 대상체에서, 많은 수의 CAR+ T 세포가 22일에 시작하여, 57일 전후에 실질적인 감소없이 관찰되었고, 상기 많은 수는 일반적으로 85일째에 유지되었다. 두르발루맙 최종 분량 후에 많은 CAR+ T 세포의 유지 또는 혈액에서 CAR+ T 세포의 증가를 나타내었던 상기 4명의 예시적인 대상체는 3개월째에 적어도 부분 반응을 갖는 것으로 관찰되었고, 상기 대상체는 PR에서 CR로 전환되었던 대상체를 포함하여 6개월째에 완전 반응을 달성했던 4명의 대상체였다.
D. 결론
진행 중인 연구의 상기 시점에서, 기재된 바와 같은 CD19 특이적 CAR+ T 세포와 함께 예시적인 면역 체크포인트 억제제, 항-PD-L1 항체 두르발루맙의 투여는 3등급 이상의 CRS 및 신경학적 이벤트의 낮은 발병률을 갖는 안전성 프로파일 및 유리한 반응 결과를 나타내는 것으로 관찰되었다. 일부 대상체에서, 개선된 약동학 프로파일이 두르발루맙의 투여 후에 관찰되었고, 상기 개선은 또한 연장된 CR과 관련이 있었다. 상기 결과는 항-CD19 CAR+ T 세포와 병용한 예시적인 면역 체크포인트 억제제, 항-PD-L1 항체 두르발루맙의 특정 투약 스케줄의 허용 가능한 안정성 프로파일과 일치했다. 상기 결과는 또한 상기 대상체 그룹에서 나타낸 바와 같이 세포의 연장된 지속성 및 임상 반응을 포함하여 CAR+ T 세포의 개선된 약동학과 일치했다.
본 발명은, 예를 들어 본 발명의 다양한 측면을 설명하기 위해 제공된 특정 개시된 구현예로 범위를 제한하려는 것이 아니다. 기재된 조성물 및 방법에 대한 다양한 변형은 본 명세서의 기재 및 교시로부터 명백해질 것이다. 상기 변형은 본 공개의 진정한 범위와 정신에서 벗어나지 않고 실행될 수 있으며, 본 개시의 범위에 속하도록 의도된다.
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Figure pct00011
Figure pct00012
SEQUENCE LISTING <110> Celgene Corporation FRANKEL, Stanley HASSKARL, Jens MANZKE, Oliver <120> COMBINATION THERAPY USING ADOPTIVE CELL THERAPY AND CHECKPOINT INHIBITOR <130> 735042015640 <140> PCT/US2019/016190 <141> 2019-01-31 <150> 62/624,802 <151> 2018-01-31 <160> 61 <170> FastSEQ for Windows Version 4.0 <210> 1 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> Spacer (IgG4hinge) <400> 1 Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro 1 5 10 <210> 2 <211> 36 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <223> Spacer (IgG4hinge) <400> 2 gaatctaagt acggaccgcc ctgcccccct tgccct 36 <210> 3 <211> 119 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> Hinge-CH3 spacer <400> 3 Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Gly Gln Pro Arg 1 5 10 15 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 20 25 30 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 35 40 45 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 50 55 60 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 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Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala 145 150 155 160 Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr 165 170 175 Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu 180 185 190 Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 195 200 205 Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser 210 215 220 Leu Ser Leu Gly Lys 225 <210> 5 <211> 282 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> IgD-hinge-Fc <400> 5 Arg Trp Pro Glu Ser Pro Lys Ala Gln Ala Ser Ser Val Pro Thr Ala 1 5 10 15 Gln Pro Gln Ala Glu Gly Ser Leu Ala Lys Ala Thr Thr Ala Pro Ala 20 25 30 Thr Thr Arg Asn Thr Gly Arg Gly Gly Glu Glu Lys Lys Lys Glu Lys 35 40 45 Glu Lys Glu Glu Gln Glu Glu Arg Glu Thr Lys Thr Pro Glu Cys Pro 50 55 60 Ser His Thr Gln Pro Leu Gly Val Tyr Leu Leu Thr Pro Ala Val Gln 65 70 75 80 Asp Leu Trp Leu Arg Asp Lys Ala Thr Phe Thr Cys Phe Val Val Gly 85 90 95 Ser Asp Leu Lys Asp Ala His Leu Thr Trp Glu Val Ala Gly Lys Val 100 105 110 Pro Thr Gly Gly Val 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Ser Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 52 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Linker <400> 52 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 10 15 <210> 53 <211> 245 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> scFv <400> 53 Glu Val Lys Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Gln Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Gln Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Gly Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Lys Thr Ile Ser Ser Val Val Asp Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Glu Leu Thr Gln Ser 130 135 140 Pro Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Val Thr Cys 145 150 155 160 Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Asn Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys 165 170 175 Pro Gly Gln Ser Pro Lys Pro Leu Ile Tyr Ser Ala Thr Tyr Arg Asn 180 185 190 Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 195 200 205 Thr Leu Thr Ile Thr Asn Val Gln Ser Lys Asp Leu Ala Asp Tyr Phe 210 215 220 Cys Gln Gln Tyr Asn Arg Tyr Pro Tyr Thr Ser Gly Gly Gly Thr Lys 225 230 235 240 Leu Glu Ile Lys Arg 245 <210> 54 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR H3 <400> 54 His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 55 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR L2 <400> 55 His Thr Ser Arg Leu His Ser 1 5 <210> 56 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDR L3 <400> 56 Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr 1 5 <210> 57 <211> 735 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence encoding scFv <400> 57 gacatccaga tgacccagac cacctccagc ctgagcgcca gcctgggcga ccgggtgacc 60 atcagctgcc gggccagcca ggacatcagc aagtacctga actggtatca gcagaagccc 120 gacggcaccg tcaagctgct gatctaccac accagccggc tgcacagcgg cgtgcccagc 180 cggtttagcg gcagcggctc cggcaccgac tacagcctga ccatctccaa cctggaacag 240 gaagatatcg ccacctactt ttgccagcag ggcaacacac tgccctacac ctttggcggc 300 ggaacaaagc tggaaatcac cggcagcacc tccggcagcg gcaagcctgg cagcggcgag 360 ggcagcacca agggcgaggt gaagctgcag gaaagcggcc ctggcctggt ggcccccagc 420 cagagcctga gcgtgacctg caccgtgagc ggcgtgagcc tgcccgacta cggcgtgagc 480 tggatccggc agccccccag gaagggcctg gaatggctgg gcgtgatctg gggcagcgag 540 accacctact acaacagcgc cctgaagagc cggctgacca tcatcaagga caacagcaag 600 agccaggtgt tcctgaagat gaacagcctg cagaccgacg acaccgccat ctactactgc 660 gccaagcact actactacgg cggcagctac gccatggact actggggcca gggcaccagc 720 gtgaccgtga gcagc 735 <210> 58 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Hinge <220> <221> VARIANT <222> (1)...(1) <223> Xaa = Gly, Cys or Arg <220> <221> VARIANT <222> (4)...(4) <223> Xaa = Cys or Thr <400> 58 Xaa Pro Pro Xaa 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Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215

Claims (135)

  1. 치료 방법으로서, 상기 방법은:
    (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계, 여기서 상기 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 하나의 분량(a dose)을 포함하고, 상기 키메라 항원 수용체는 상기 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합함; 및
    (b) 후속적으로 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제를 상기 대상체에 투여하는 단계;
    를 포함하고,
    여기서, 상기 체크포인트 억제제의 총 투여량이 2회 이상의 투여 주기 각각에서 투여되고,
    상기 2회 이상의 투여 주기 중 첫번째 주기에서의 상기 체크포인트 억제제의 총 투여량은,
    두번째 및/또는 후속 투여 주기에서 투여된 총 투여량과 동일하거나 그 미만이고;
    상기 첫번째 투여 주기의 과정 동안 1 이상의 개별 분량(individual dose)으로 투여되며;
    여기서, 상기 개별 분량의 수는 상기 두번째 및/또는 후속 투여 주기에서 투여되는 개별 분량의 수보다 더 큰 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  2. 치료 방법으로서,
    상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제의 투여를 포함하고, 상기 대상체는 상기 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 상기 체크포인트 억제제의 총 투여량은 2회 이상의 투여 주기 각각에서 투여되고, 상기 2회 이상의 투여 주기 중 첫번째 주기에서 상기 체크포인트 억제제의 총 투여량은,
    두번째 및/또는 후속 투여 주기에서 투여된 상기 총 투여량과 동일하거나 그 미만이고;
    상기 첫번째 투여 주기의 과정 동안 1 이상의 개별 분량으로 투여되며, 여기서 상기 개별 분량의 수는 상기 두번째 및/또는 후속 투여 주기에서 투여되는 개별 분량의 수보다 더 큰 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
    상기 투여 주기는 21일 주기인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  4. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
    상기 투여 주기는 28일 주기인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 투여 주기 중 첫번째 주기의 총 투여량은 상기 2회 이상의 투여 주기 중 두번째 주기의 총 투여량과 동일한 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  6. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 투여 주기 중 첫번째 주기는 2, 3, 4 이상의 개별 분량을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  7. 제 6 항에 있어서,
    상기 투여 주기는 28일 주기이며, 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기의 개별 분량은 각 주 1회(Q1W) 4 분량, 2주 연속 Q1W 분량으로 각각 2 분량, 또는 2주 연속 Q1W 분량으로 각각 2 분량 및 이후 2주 1회(Q2W) 1 분량으로 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  8. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 투여 주기 각각은 (약) 400 mg 내지 (약) 2000 mg의 총 투여량으로 상기 체크포인트 억제제를 독립적으로 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
  9. 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 체크포인트 억제제는 PD-L1, PD-L2, PD-1 및 CTLA-4 중에서 선택된 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  10. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 체크포인트 경로는 PD-1/PD-L1이고, 상기 체크포인트 억제제는 항-PD-1 항체인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  11. 제 10 항에 있어서,
    상기 체크포인트 억제제는 니볼루맙(nivolumab), 펨브롤리주맙(pembrolizumab) 또는 세미플리맙(cemiplimab)인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  12. 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 투여 주기 각각은 (약) 400 mg 내지 (약) 600 mg, 선택적으로 (약) 480 mg의 총 투여량을 독립적으로 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
  13. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 체크포인트 경로는 PD-1/PD-L1이고, 상기 체크포인트 억제제는 항-PD-L1 항체인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  14. 제 1 항 내지 제 11 항 및 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 투여 주기 각각은 750 mg 내지 2000 mg, 선택적으로 (약) 1500 mg의 총 투여량을 독립적으로 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
  15. 제 1 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 상기 첫번째 투여 주기의 시작은:
    (i) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 후;
    (ii) 상기 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 상기 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포 수가 검출할 수 없거나 감소되고, 선택적으로 상기 T 세포 요법의 투여 후 선행 시점에 비해 감소된 후;
    (iii) 상기 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포 수가 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 상기 대상체의 상기 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상으로 감소된 후;
    (iv) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법의 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후의 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 상기 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 상기 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만이 된 후;
    (v) 상기 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에, 상기 대상체가 질병 진행을 나타내고/거나 재발한 후; 및/또는
    (iv) 상기 체크포인트 억제제의 투여 개시 전 및 상기 세포의 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해, 상기 대상체가 종양 부담의 증가를 나타낸 후;
    1 내지 3일 또는 1 내지 3일 후, 선택적으로 1 내지 3일 직후 또는 1 내지 3일 이내의 시기에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  16. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 상기 첫번째 투여 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 29일, 36일, 43일 또는 50일에 또는 29일, 36일, 43일 또는 50일 이내에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  17. 제 1 항 내지 제 16 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 상기 첫번째 투여 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 22일 내지 36일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  18. 제 1 항 내지 제 17 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 상기 첫번째 투여 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 29일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  19. 제 1 항 내지 제 18 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 상기 첫번째 투여 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 43일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  20. 제 1 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 상기 첫번째 투여 주기의 시작 시기에, 상기 대상체는 상기 T 세포 요법의 투여 후 중증 독성을 나타내지 않는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  21. 제 20 항에 있어서,
    상기 중증 독성이 중증 사이토카인 방출 증후군(cytokine release syndrome, CRS), 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 CRS이고/거나;
    상기 중증 독성이 중증 신경 독성, 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 신경 독성인;
    것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  22. 치료 방법으로서, 상기 방법은
    (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계, 여기서 상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 하나의 분량을 포함하고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 상기 B 세포 악성 종양 세포에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합함; 및
    (b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계, 여기서 상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행됨을 포함함;
    을 포함하고,
    여기서, 첫번째 28일 주기는 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 28일 주기 중 2주 연속(Q1W)동안 각 주 1회 2 개별 분량, 상기 개별 분량 각각은 (약) (약) 375 mg 양이고, 이후 28일 주기 중 2주(Q2W) 동안 (약) 750 mg의 양으로 1회 1 분량으로 투여하는 것을 포함하고;
    두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양으로 매 4주(Q4W) 1 분량으로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  23. 치료 방법으로서,
    상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 상기 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고,
    여기서,
    첫번째 28일 주기는 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 28일 주기 중 2주 연속 동안 각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량, 상기 개별 분량 각각은 (약) 375 mg 양 이후 (약) 750 mg의 양으로 28일 주기 중 2주 후 1회(Q2W) 1 분량으로 투여하는 것을 포함하고;
    두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양에 대해 매 4주(Q4W) 1 분량으로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
  24. 치료 방법으로서,
    상기 방법은:
    (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계, 여기서 상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 상기 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합함; 및
    (b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계, 여기서 상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함함;
    을 포함하고,
    여기서, 첫번째 28일 주기는 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 28일 주기 동안 각 주 1회(Q1W) 4 개별 분량, 상기 4 분량은 각각 독립적으로 (약) 225 mg의 2 연속 Q1W 분량 이후, 각각 독립적으로 (약) 375 mg의 2 연속 Q1W 분량으로 투여하는 것을 포함하고;
    두번째 및/또는 후속 28일 주기는 28일 주기 중 각 매 2주(Q2W) 2 분량, 여기서 각 Q2W 투여는 각각 독립적으로 (약) 750 mg의 양으로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  25. 치료 방법으로서,
    상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 상기 B 세포 악성 종양에서 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고,
    여기서,
    첫번째 28일 주기는 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 28일 주기 동안 각 주 1회(Q1W) 4 개별 분량, 상기 4 개별 분량은 각각 독립적으로 (약) 225 mg의 2 연속 Q1W 분량 이후, 각각 독립적으로 (약) 375 mg의 2 연속 Q1W 분량으로 투여하는 것을 포함하고;
    두번째 및/또는 후속 28일 주기는 두번째 및/또는 후속 28일 주기 동안 매 2주(Q2W) 2 개별 분량, 여기서 각 분량은 독립적으로 (약) 750 mg의 양으로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
  26. 치료 방법으로서,
    상기 방법은
    (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계, 여기서 상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 상기 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합함; 및
    (b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계, 여기서 상기 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함함;
    을 포함하고,
    여기서, 첫번째 28일 주기는 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량, 여기서 상기 2 분량 각각은 독립적으로 (약) 375 mg 양을 포함하고, 선택적으로 상기 2 분량은 연속적인 Q1W 분량이고, 선택적으로 상기 2 분량은 28일 주기에서 15일 및 22일에 투여되는 것을 포함하고;
    두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양으로 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서 1 분량에 대해 Q4W로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  27. 치료 방법으로서,
    상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 상기 B 세포 악성 종양에서 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고,
    여기서,
    첫번째 28일 주기는 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량, 여기서 상기 2 분량 각각은 독립적으로 (약) 375 mg 양을 포함하고, 선택적으로 상기 2 분량은 연속적인 Q1W 분량이고, 선택적으로 상기 2 분량은 28일 주기에서 15일 및 22일에 투여하는 것을 포함하고;
    두번째 및/또는 후속 28일 주기는 (약) 1500 mg의 양으로 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서 1 분량에 대해 Q4W로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
  28. 치료 방법으로서,
    상기 방법은
    (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계, 여기서 상기 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 상기 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하고;
    (b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계, 여기서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 상기 항체 또는 항원 결합 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고;
    상기 2회 이상의 28일 주기 중 1회 이상에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 28일 주기의 과정에 걸쳐 1 이상의 개별 분량의 상기 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  29. 치료 방법으로서,
    상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 상기 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하며,
    여기서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 2회 이상의 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각은 독립적으로 상기 항체 또는 항원 결합 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고;
    상기 2회 이상의 28일 주기 중 1회 이상에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 1회 이상의 28일 주기의 과정에 걸쳐 1 이상의 개별 분량의 상기 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  30. 제 28 항 또는 제 29 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량의 투여는 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서의 투여에 비해 보다 많은 수의 개별 분량의 상기 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  31. 제 28 항 내지 제 30 항 중 어느 한 항에 있어서,
    각각의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 750 mg 내지 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  32. 제 28 항 내지 제 31 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 750 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  33. 제 28 항 내지 제 32 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1200 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  34. 제 28 항 내지 제 31 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  35. 제 28 항 내지 제 31 항 및 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,
    각각의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  36. 제 28 항 내지 제 35 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상 중 2회 이상 및 선택적으로 상기 2회 이상의 28일 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 동일한 총 투여량인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  37. 제 28 항 내지 제 35 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 상기 2회 이상의 28일 주기 중 2회 이상에서 상이하거나, 상기 2회 이상의 28일 주기 각각에서 상이한 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  38. 제 28 항 내지 제 35 항 및 제 37 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서의 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 상기 2회 이상의 28일 주기 중 두번째 주기 및/또는 후속 주기에서보다 더 적은 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  39. 제 28 항 내지 제 38 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서의 총 투여량 투여는 2, 3 또는 4 개별 분량의 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편 투여를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  40. 제 28 항 내지 제 39 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서 상기 총 투여량 투여는 (i) 상기 28일 주기 내, 선택적으로 상기 28일 주기의 15일 및 22일에, 각각 주 1회(Q1W) 2 개별 분량; (ii) 상기 28일 주기 동안, 선택적으로 상기 28일 주기의 1일, 8일, 15일 및 22일에 각각 주 1회(Q1W) 4 개별 분량; (iii) 상기 28일 주기 중 연속 2주 동안, 선택적으로 상기 주기의 1일 및 8일에 각각 Q1W로 2 개별 분량 후, 상기 28일 주기 중 선택적으로 상기 주기의 15일에 2주 후 1회(Q2W) 1 분량; 또는 (iv) 상기 28일 주기 동안, 선택적으로 상기 28일 주기의 1일 및 15일에 각각 매 2주(Q2W) 2 개별 분량; 중에서 선택된 투약 스케쥴에 따라 개별 분량으로 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
  41. 제 40 항에 있어서,
    상기 첫번째 28일 주기에 투여된 각각의 Q1W 분량은 독립적으로 상기 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 18% 내지 (약) 32%이고, 선택적으로 상기 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 25%이고/거나;
    상기 첫번째 28일 주기에 투여된 각각의 Q2W 분량은 독립적으로 상기 첫번째 28일 주기의 총 투여량의 (약) 40% 내지 (약) 62.5%이고, 선택적으로 상기 첫번째 28일 주기에 투여된 총 투여량의 (약) 50%인;
    것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  42. 제 40 항 또는 제 41 항에 있어서,
    상기 첫번째 28일 주기에서의 총 투여량 투여는 투약 스케쥴 (iii)에 따라 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하거나, 여기서 연속 2주 동안 상기 2 개별 분량 Q1W 각각은 각각 독립적으로 (약) 375 mg 양이고, 이후 1 분량 1회 Q2W는 (약) 750 mg 양임;
    상기 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 (ii)에 제시된 투약 스케줄에 따라, 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하거나, 여기서 상기 4 개별 분량 Q1W는 (약) 225 mg의 양으로 2 연속 Q1W 분량 후, (약) 375 mg의 양으로 2 연속 Q1W 분량을 포함함; 또는
    상기 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 (i)에 제시된 투약 스케줄에 따라, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함함, 여기서 상기 2 개별 분량 Q1W 각각은 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 Q1W 분량으로 수행됨;
    을 특징으로 하는, 치료 방법.
  43. 제 28 항 내지 제 40 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기에서 총 투여량 투여는 (i) 28일 주기의 (약) 15일 및 (약) 22일에 2 개별 분량; (ii) 28일 주기의 (약) 1일, (약) 8일, (약) 15일 및 (약) 22일에 4 개별 분량; (iii) 28일 주기의 (약) 1일 및 (약) 8일에 2 개별 분량 후 상기 주기의 (약) 15일에 1 분량; 또는 (iv) 28일 주기의 (약) 1일 및 28일 주기의 (약) 15일에 2 분량; 중에서 선택된 투약 스케쥴에 따라 개별 분량을 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
  44. 제 28 항 내지 제 43 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 투약 스케쥴 (iii)에 따라, 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하거나, 여기서 상기 2 개별 분량 각각은 28일 주기의 (약) 1일 및 (약) 8일에 (약) 375 mg의 양 이후, 상기 주기의 (약) 15일에 (약) 750 mg의 양으로 1 분량을 포함함;
    상기 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 (ii)에 제시된 투약 스케줄에 따라, 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하거나, 여기서 상기 4 개별 분량은 28일 주기의 (약) 1일 및 (약) 8일에 (약) 225 mg의 양으로 2 연속 분량 후, 28일 주기의 (약) 15일 및 (약) 22일에 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 분량을 포함함; 또는
    상기 첫번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 (i)에 제시된 투약 스케줄에 따라, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함함, 여기서 상기 2 개별 분량 각각은 28일 주기의 (약) 15일 및 (약) 22일에 (약) 375 mg의 양으로 2 연속 포함함;
    을 특징으로 하는, 치료 방법.
  45. 제 30 항 내지 제 44 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서의 총 투여량 투여는 독립적으로 1 또는 2 분량의 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 투여를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  46. 제 30 항 내지 제 45 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기에서의 총 투여량 투여는, 독립적으로 (i) 상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기 동안, 선택적으로 상기 두번째 및/또는 후속 주기의 1일 및 15일에 각각 매 2주(Q2W) 2 개별 분량; 또는 (ii) 상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기, 선택적으로 상기 두번째 및/또는 후속 주기의 1일에 매 4주(Q4W) 1 분량; 중에서 선택된 투약 스케쥴을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  47. 제 46 항에 있어서,
    상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 상기 Q2W 분량 각각은 상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 총 투여량의 (약) 50%이고/거나;
    상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 상기 Q4W 분량은 상기 두번째 및/또는 후속 28일 주기의 (약) 총 투여량인;
    것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  48. 제 46 항 또는 제 47 항에 있어서,
    상기 두번째 및/또는 후속 분량은 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 750 mg 양으로 2 분량으로 Q2W로 투여하는 것을 포함하거나;
    상기 두번째 및/또는 후속 분량은 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 (약) 1500 mg 양으로 1 분량으로 Q4W로 투여하는 것을 포함하는;
    치료 방법.
  49. 제 4 항 내지 제 48 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 28일 주기는 세번째 28일 주기를 더 포함하고/거나, 여기서 상기 후속 28일 주기는 세번째 28일 주기인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  50. 제 49 항에 있어서,
    상기 세번째 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 상기 첫번째 및/또는 상기 두번째 28일 주기에서 투여된 총 투여량과 동일한 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  51. 제 49 항 또는 제 50 항에 있어서,
    상기 세번째 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  52. 제 49 항 내지 제 51 항 중 어느 한 항에 있어서,
    (a) 상기 세번째 28일 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 상기 첫번째 및/또는 상기 두번째 28일 주기에 비해 보다 많은 수의 개별 분량으로 상기 항체 또는 단편을 투여함으로써 수행되거나;
    (b) 상기 세번째 28일 주기에서, 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량 투여는 상기 항체 또는 단편을 상기 두번째 28일 주기와 동일한 수의 분량으로 투여함으로써 수행되는;
    것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  53. 제 49 항 내지 제 52 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세번째 28일 주기에서 총 투여량 투여는 상기 세번째 28일 주기, 선택적으로 상기 세번째 28일 주기의 1일에 매 4주(Q4W) 1 분량의 투여를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  54. 제 22 항 내지 제 53 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는,
    (a) 상기 T 세포 요법의 투여 개시로부터 22일과 36일 사이; 또는
    (b)
    (i) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 후;
    (ii) 상기 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 상기 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포의 수가 검출할 수 없거나 감소되고, 선택적으로 상기 T 세포 요법의 투여 후 선행 시점에 비해 감소된 후;
    (iii) 상기 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포 수가 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 상기 대상체의 상기 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상으로 감소된 후;
    (iv) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법의 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후의 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 상기 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 상기 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만이 된 후;
    (v) 상기 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 상기 대상체가 질병 진행을 나타내고/거나 재발한 후; 및/또는
    (iv) 상기 항-PD-L1 항체의 투여 개시 전 및 상기 세포의 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해 상기 대상체가 종양 부담의 증가를 나타낸 후;
    1 내지 3일 또는 1 내지 3일 후, 선택적으로 1 내지 3일 직후 또는 1 내지 3일 이내;
    의 시기에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  55. 제 22 항 내지 제 54 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 상기 T 세포 요법의 투여 개시로부터 22일과 36일 사이의 시기에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  56. 제 22 항 내지 제 55 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 28일 주기는 3회 이내의 28일 주기를 포함하고, 선택적으로 상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 (약) 22일과 (약) 36일 사이에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  57. 제 22 항 내지 제 56 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 29일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  58. 제 22 항 내지 제 57 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 2회 이상의 28일 주기 중 첫번째 주기는 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 43일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  59. 치료 방법으로서,
    상기 방법은
    (a) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 T 세포 요법을 투여하는 단계, 여기서 상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 상기 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합함; 및
    (b) 후속적으로 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 상기 대상체에 투여하는 단계, 여기서 상기 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 1 내지 3회 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 각각의 주기는 상기 항체 또는 단편을 750 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고, 선택적으로 여기서 상기 1 내지 3회 28일 주기 중 첫번째 주기는 상기 T 세포 요법 개시 후 (약) 22일과 (약) 36일 사이, 선택적으로 29일에 시작하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  60. 치료 방법으로서,
    상기 방법은 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하고, 상기 대상체는 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하는 T 세포 요법을 투여받았고, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 상기 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합하고, 여기서 상기 항체 또는 항원 결합 단편의 투여는 1 내지 3회 28일 주기로 수행되는 것을 포함하고, 각각의 주기는 상기 항체 또는 단편을 900 mg 내지 2000 mg의 총 투여량으로 투여하는 것을 포함하고, 선택적으로 여기서 상기 1 내지 3회 28일 주기 중 첫번째 주기는 상기 T 세포 요법 개시 후 (약) 22일과 (약) 36일 사이, 선택적으로 약 29일에 시작하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  61. 제 59 항 또는 제 60 항에 있어서,
    각 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 독립적으로 (약) 1200 mg 내지 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  62. 제 59 항 내지 제 61 항 중 어느 한 항에 있어서,
    1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1200 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  63. 제 59 항 내지 제 61 항 중 어느 한 항에 있어서,
    1회 이상의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  64. 제 59 항 내지 제 61 항 및 제 63 항 중 어느 한 항에 있어서,
    각각의 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 총 투여량은 (약) 1500 mg인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  65. 제 59 항 내지 제 64 항 중 어느 한 항에 있어서,
    각 28일 주기의 총 투여량은 1, 2, 3 또는 4 분량의 상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법.
  66. 제 59 항 내지 제 65 항 중 어느 한 항에 있어서,
    각각의 28일 주기는 (i) 선택적으로 28일 주기의 1일, 8일, 15일 및 22일에 각각 주 1회(Q1W) 4 분량; (ii) 선택적으로 28일 주기의 1일 및 8일에 연속 2 분량을 각각 Q1W 후 선택적으로 28일 주기의 15일에 1 분량에 대해 2주 후 1회(Q2W) 1 분량; (iii) 선택적으로 28일 주기의 1일 및 15일에 각각 매 2주(Q2W) 2 분량; 또는 (iv) 선택적으로 28일 주기의 1일에 매 4주(Q4W) 1 분량; 중에서 선택된 투약 스케쥴을 독립적으로 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  67. 제 59 항 내지 제 66 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 첫번째 28일 주기의 1일, 8일 및 15일, 두번째 28일 주기의 1일 및 세번째 28일 주기의 1일에 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  68. 제 59 항 내지 제 67 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 첫번째 28일 주기의 1일, 8일, 15일 및 22일, 두번째 28일 주기의 1일 및 15일 및 세번째 28일 주기의 1일에 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  69. 제 59 항 내지 제 68 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 각 28일 주기의 1일에 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  70. 제 59 항 내지 제 69 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체가 치료 후에 단지 부분 반응(partial response, PR)만을 나타내고/거나 상기 T 세포 요법 및/또는 상기 항-PD-L1 항체 또는 단편의 투여 개시 후 3개월에 PR만을 나타낼 경우, 1회 이상의 추가 28일 주기에서 상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 것을 더 포함하는, 치료 방법.
  71. 제 70 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 1회 이상의 추가 28일 주기 각각에서 900 mg 내지 2000 mg의 총 투여량, 선택적으로 (약) 1500 mg의 총 투여량으로 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  72. 제 13 항 내지 제 71 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편은 12개월 이내의 총 지속 기간 동안 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  73. 제 13 항 내지 제 72 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 21일을 초과하여 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  74. 제 13 항 내지 제 73 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작은,
    (i) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 후;
    (ii) 상기 혈액에서 검출 가능해진 뒤, 상기 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포 수가 검출할 수 없거나 감소되고, 선택적으로 상기 T 세포 요법의 투여 후 선행 시점에 비해 감소된 후;
    (iii) 상기 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 세포 수가, 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 상기 대상체의 상기 혈액에서 검출 가능한 상기 T 세포 요법의 피크 또는 최대 세포 수의 1.5 배, 2.0 배, 3.0 배, 4.0 배, 5.0 배, 10 배 이상 또는 그 이상으로 감소된 후;
    (iv) 피크 또는 최대 수준의 상기 T 세포 요법의 세포가 상기 대상체의 혈액에서 검출 가능한 이후의 시기에, 상기 대상체 유래의 상기 혈액에서 검출 가능한 상기 세포 또는 이로부터 유래된 세포의 수가 상기 대상체의 혈액 중 전체 말초 혈액 단핵세포(PBMC)의 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만 또는 0.1% 미만이 된 후;
    (v) 상기 T 세포 요법으로 치료 후 완화 후에 상기 대상체가 질병 진행을 나타내고/거나 재발한 후; 및/또는
    (iv) 상기 항-PD-L1 항체의 투여 개시 전 및 상기 세포의 투여 전 또는 후 시기의 종양 부담에 비해 상기 대상체가 종양 부담의 증가를 나타낸 후;
    1 내지 3일 또는 1 내지 3일 후, 선택적으로 1 내지 3일 직후 또는 1 내지 3일 이내의 시기에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  75. 제 13 항 내지 제 74 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 29일, 36일, 43일 또는 50일에 또는 29일, 36일, 43일 또는 50일 이내에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  76. 제 13 항 내지 제 75 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 22 일 내지 36 일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  77. 제 13 항 내지 제 76 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 29 일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  78. 제 13 항 내지 제 77 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 체크포인트 억제제의 투여 및/또는 상기 첫번째 투여 주기의 시작은 상기 T 세포 요법의 투여 개시 후 (약) 43일에 개시되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  79. 제 13 항 내지 제 78 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편의 투여 및/또는 상기 첫번째 28일 주기의 시작 시기에, 상기 대상체는 상기 T 세포 요법 투여 후 중증 독성을 나타내지 않는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  80. 제 79 항에 있어서,
    상기 중증 독성이 중증 사이토카인 방출 증후군(cytokine release syndrome, CRS), 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 CRS이고/거나;
    상기 중증 독성이 중증 신경 독성, 선택적으로 3 등급 이상, 장기간 3 등급 이상 또는 4 등급 또는 5 등급 신경 독성인;
    것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  81. 제 13 항 내지 제 80 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 PD-L1의 세포 외 도메인에 특이적으로 결합하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  82. 제 13 항 내지 제 81 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙, durvalumab), MDPL3280A(아테졸리주맙, atezolizumab), YW243.55.S70, MDX-1105(BMS-936559), LY3300054 또는 MSB0010718C(아벨루맙, avelumab)이거나 상기 중 어느 하나의 항원 결합 단편 또는 영역이거나 이를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  83. 제 13 항 내지 제 82 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙)이거나 이의 항원 결합 단편 또는 영역이거나 이를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  84. 제 13 항 내지 제 83 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-L1 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 MEDI4736(두르발루맙)인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  85. 제 1 항 내지 제 84 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 B 세포 악성종양은 비호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma, NHL)인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  86. 제 85 항에 있어서,
    상기 T 세포 요법 투여 시기 또는 직전에, 상기 대상체는 NHL에 대한 하나 이상의 선행 요법, 선택적으로 또 다른 분량의 CAR을 발현하는 세포 이외의 1 또는 2가지 선행 요법으로 치료 후 완화 후에 재발하였거나 이에 대해 불응성이 되었고, 선택적으로 여기서 상기 하나 이상의 선행 요법은 CD20 표적화 제제 또는 안트라사이클린이거나 이를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  87. 제 85 항 또는 제 86 항에 있어서,
    상기 NHL에는 공격적인 NHL; 미만성 거대 B 세포 림프종(diffuse large B cell lymphoma, DLBCL); 선택적으로 형질 전환된 무통성 DLBCL-NOS; EBV 양성 DLBCL-NOS; T 세포/조직구가 풍부한 거대 B 세포 림프종; 1차 종격동 거대 B 세포 림프종(primary mediastinal large B cell lymphoma, PMBCL); 여포성 림프종(follicular lymphoma, FL), 선택적으로 여포성 림프종 3B 등급(follicular lymphoma Grade 3B, FL3B); 및/또는 DLBCL 조직 구조(이중/삼중 히트)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종;
    이 포함되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  88. 제 85 항 내지 제 87 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 NHL에는 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL); DLBCL-NOS; 형질 전환된 무통성 DLBCL-NOS; 여포성 림프종 3B 등급(FL3B); 및/또는 DLBCL 조직 구조(이중/삼중 히트)를 갖는 MYC 및 BCL2 및/또는 BCL6 재배열을 갖는 고급 B 세포 림프종;
    이 포함되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  89. 제 1 항 내지 제 88 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 1 이하의 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태를 갖는 것으로 확인되거나 확인된 적이 있는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  90. 제 1 항 내지 제 89 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 표적 항원은 B 세포 항원인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  91. 제 1 항 내지 제 90 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 표적 항원은 CD19인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  92. 제 91 항에 있어서,
    상기 키메라 항원 수용체(chimeric antigen receptor, CAR)는 표적 항원에 특이적으로 결합하는 세포 외 항원 인식 도메인 및 ITAM을 포함하는 세포 내 신호 전달 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  93. 제 92 항에 있어서,
    상기 세포 내 신호 전달 도메인은 CD3-제타(CD3ζ) 사슬의 신호 전달 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  94. 제 92 항 또는 제 93 항에 있어서,
    상기 키메라 항원 수용체(CAR)는 공자극 분자의 세포질 신호 전달 도메인을 포함하는 공자극 신호 전달 영역을 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  95. 제 94 항에 있어서,
    상기 공자극 신호 전달 영역은 CD28 또는 4-1BB의 세포질 신호 전달 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  96. 제 94 항 또는 제 95 항에 있어서,
    상기 공자극 도메인은 4-1BB의 세포질 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  97. 제 1 항 내지 제 96 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 CAR은 CD19에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인을 포함하고, 선택적으로 상기 막관통 도메인과 상기 scFv 사이에 스페이서를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  98. 제 1 항 내지 제 96 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 CAR은 CD19에 특이적인 scFv, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인인 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  99. 제 1 항 내지 제 96 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 CAR은 CD19에 특이적인 scFv, 스페이서, 막관통 도메인, 선택적으로 4-1BB 신호 전달 도메인인 공자극 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 및 선택적으로 CD3제타 신호 전달 도메인이거나 이를 포함하는 1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 세포질 신호 전달 도메인 순서로 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  100. 제 97 항 또는 제 99 항에 있어서,
    상기 스페이서는 (a) 면역글로불린 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되거나, 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나, (b) 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 힌지 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나, 이로 구성되고/거나 약 15개 이하의 아미노산을 포함하고, CD28 세포 외 영역 또는 CD8 세포 외 영역을 포함하지 않거나 또는 (c) 길이가 (약) 12개의 아미노산이고/거나 면역글로불린 힌지, 선택적으로 IgG4 또는 이의 변형된 버전의 전부 또는 일부를 포함하거나 이로 구성되는 폴리펩티드 스페이서인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  101. 제 97 항, 제 99 항 및 제 100 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 스페이서는 일반식 X1PPX2P(서열 번호: 58, X1은 글리신, 시스테인 또는 아르기닌 및 X2는 시스테인 또는 트레오닌)을 포함하거나 이로 구성되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  102. 제 97 항 및 제 99 항 내지 제 101 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 스페이서는 서열 번호: 1의 서열, 서열 번호: 2에 의해 암호화된 서열, 서열 번호: 30, 서열 번호: 31, 서열 번호: 32, 서열 번호: 33, 서열 번호: 34의 서열 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 상기 중 어느 하나의 변이체를 포함하거나 이로 구성되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  103. 제 97 항 및 제 99 항 내지 제 102 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 스페이서는 서열 번호: 1의 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  104. 제 94 항 내지 제 103 항 중 어느 한 항에 있어서,
    공자극 분자의 상기 세포질 신호 전달 도메인은 서열 번호: 12 또는 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 이의 변이체를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  105. 제 92 항 내지 제 104 항 중 어느 한 항에 있어서,
    1차 신호 전달 ITAM 함유 분자로부터 유래된 상기 세포질 신호 전달 도메인은 이에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열 번호: 13 또는 14 또는 15를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  106. 제 92 항 내지 제 105 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 RASQDISKYLN(서열 번호: 35)의 CDRL1 서열, SRLHSGV(서열 번호: 36)의 CDRL2 서열 및/또는 GNTLPYTFG(서열 번호: 37)의 CDRL3 서열 및 DYGVS(서열 번호: 38)의 CDRH1 서열, VIWGSETTYYNSALKS(서열 번호: 39)의 CDRH2 서열 및/또는 YAMDYWG(서열 번호: 40)의 CDRH3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  107. 제 92 항 내지 제 106 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 FMC63의 CDRL1 서열, FMC63의 CDRL2 서열, FMC63의 CDRL3 서열, FMC63의 CDRH1 서열, FMC63의 CDRH2 서열 및 FMC63의 CDRH3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  108. 제 92 항 내지 제 107 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 FMC63의 가변 중쇄 영역 및 FMC63의 가변 경쇄 영역을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  109. 제 92 항 내지 제 108 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 서열 번호: 41에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 VH 영역을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  110. 제 92 항 내지 제 109 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 서열 번호: 42에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 VL 영역을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  111. 제 92 항 내지 제 110 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 순서대로 선택적으로 서열 번호: 41에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 VH, 선택적으로 서열 번호: 59를 포함하는 링커 및 선택적으로 서열 번호: 42에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 VL 을 포함하고/거나 상기 scFv는 가요성 링커를 포함하고/거나 서열 번호: 43에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  112. 제 92 항 내지 제 111 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포 외 항원 인식 도메인은 scFv이고 상기 scFv는 서열 번호: 43에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  113. 제 1 항 내지 제 112 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 유전자 조작된 T 세포 분량은 (약) 1 x 105 내지 5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 106 내지 2.5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 106 내지 1 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 1 x 107 내지 2.5 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포, 5 x 107 내지 1 x 108 개의 총 CAR 발현 T 세포(각각의 수치 포함)를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  114. 제 1 항 내지 제 113 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 유전자 조작된 T 세포 분량은 (약) 1 x 105 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 105 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 5 x 105 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 1 x 106 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 106 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 5 x 106 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 1 x 107 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 107 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 5 x 107 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 1 x 108 개 이상의 CAR 발현 세포, (약) 2.5 x 108 개 이상의 CAR 발현 세포 또는 (약) 5 x 108 개 이상의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  115. 제 1 항 내지 제 114 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 유전자 조작된 T 세포 분량은 (약) 5 x 107 개의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  116. 제 1 항 내지 제 114 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 유전자 조작된 T 세포 분량은 (약) 1 x 108 개의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  117. 제 1 항 내지 제 114 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 유전자 조작된 T 세포 분량은 (약) 1.5 x 108 개의 CAR 발현 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  118. 제 1 항 내지 제 117 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 유전자 조작된 T 세포 분량은 비경구적으로, 선택적으로 정맥 내로 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  119. 제 118 항에 있어서,
    상기 T 세포는 대상체로부터 수득된 1 차 T 세포인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  120. 제 1 항 내지 제 119 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 T 세포는 상기 대상체의 자기 유래인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  121. 제 1 항 내지 제 119 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 T 세포는 상기 대상체에 대해 동종 이계인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  122. 제 1 항 내지 제 121 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 유전자 조작된 T 세포의 분량은 CAR을 발현하는 CD4+ T 세포 및 CAR을 발현하는 CD8+ T 세포를 포함하고, 상기 분량의 투여는 다수의 별도 조성물로 투여하는 것을 포함하고, 상기 다수의 별도 조성물은 CD4+ T 세포 및 CD8+ T 세포 중 하나를 포함하는 제1 조성물 및 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포 중 다른 하나를 포함하는 제2 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  123. 제 122 항에 있어서,
    상기 제1 조성물 및 제2 조성물은 0 내지 12시간 간격, 0 내지 6시간 간격 또는 0 내지 2시간 간격으로 투여되거나, 여기서 상기 제1 조성물의 투여 및 상기 제2 조성물의 투여는 동일한 날에 수행되고, 약 0 내지 약 12시간 간격, 약 0 내지 약 6시간 간격 또는 약 0 내지 2시간 간격으로 수행되고/거나;
    상기 제1 조성물의 투여 개시 및 상기 제2 조성물의 투여 개시는 약 1분 내지 약 1시간 간격으로 또는 약 5분 내지 약 30분 간격으로 수행되는;
    것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  124. 제 122 항 또는 제 123 항에 있어서,
    상기 제1 조성물 및 제2 조성물은 2시간 이내, 1시간 이내, 30분 이내, 15분 이내, 10분 이내 또는 5분 이내의 간격으로 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  125. 제 122 항 내지 제 124 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 제1 조성물은 상기 CD4+ T 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  126. 제 122 항 내지 제 124 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 제1 조성물은 상기 CD8+ T 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  127. 제 122 항 내지 제 126 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 제1 조성물은 상기 제2 조성물 전에 투여되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  128. 제 1 항 내지 제 127 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 투여 전에, 상기 대상체는 플루다라빈(fludarabine) 및/또는 사이클로포스파미드(cyclophosphamide)의 투여를 포함한 림프절 마비(lymphodepleting) 요법으로 사전 조정된 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  129. 제 1 항 내지 제 129 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 투여 직전에, 상기 대상체에 플루다라빈 및/또는 사이클로포스파미드의 투여를 포함한 림프절 마비 요법을 투여하는 것을 더 포함하는, 치료 방법.
  130. 제 129 항 또는 제 130 항에 있어서,
    상기 림프절 마비 요법은 2-4일 동안, 선택적으로 3일 동안 매일, 약 200-400 mg/m2, 선택적으로 (약) 300 mg/m2(수치 포함)의 사이클로포스파미드 및/또는 약 20-40 mg/m2, 선택적으로 30 mg/m2의 플루다라빈을 투여하는 것을 포함하거나, 상기 림프절 마비 요법은 약 500 mg/m2의 사이클로포스파미드 투여를 포함하는 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  131. 제 129 항 내지 제 131 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 림프절 마비 요법은 3일 동안 매일 (약) 300 mg/m2의 사이클로포스파미드 및 약 30 mg/m2의 플루다라빈 투여를 포함하고/거나;
    상기 림프절 마비 요법은 3일 동안 매일 (약) 500 mg/m2의 사이클로포스파미드 및 약 30 mg/m2의 플루다라빈 투여를 포함하는;
    것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  132. 제 1 항 내지 제 132 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 인간인 것을 특징으로 하는, 치료 방법.
  133. 키트로서,
    (a) 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합함;
    (b) 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제, 선택적으로, 여기서 상기 이의 체크포인트 억제제는 1 이상의 개별 분량으로 제형화됨; 및
    (c) 상기 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 상기 T 세포 요법 및/또는 상기 체크포인트 억제제 투여를 위한 지침, 여기서 상기 지침은 제 1 항 내지 제 133 항 중 어느 한 항의 방법에 따른 상기 T 세포 요법 및/또는 상기 체크포인트 억제제 투여를 명시함;
    을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
  134. 키트로서,
    (a) 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포 분량을 포함하는 T 세포 요법, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합함; 및
    (b) 상기 B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 상기 T 세포 요법을 투여하기 위한 지침, 여기서, 상기 지침에는 상기 대상체에 상기 T 세포 요법 투여 후에, 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제가 투여될 것이 명시되고, 상기 지침에는 제 1 항 내지 제 133 항 중 어느 한 항의 방법에 따른 상기 T 세포 요법 및/또는 상기 체크포인트 억제제의 투여가 명시됨;
    을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
  135. 키트로서,
    (a) 면역 체크포인트 경로 단백질을 차단할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 체크포인트 억제제, 선택적으로, 여기서 상기 이의 체크포인트 억제제는 1 이상의 개별 분량으로 제형화됨; 및
    (b) B 세포 악성 종양이 있는 대상체에 상기 체크포인트 억제제를 투여하기 위한 지침, 여기서, 상기 지침에는 상기 체크포인트 억제제가 T 세포 요법의 투여 개시 후에 투여되고, 상기 T 세포 요법은 키메라 항원 수용체를 발현하는 유전자 조작된 T 세포의 분량을 포함하며, 여기서 상기 키메라 항원 수용체는 상기 B 세포 악성 종양에 의해 발현된 표적 항원에 특이적으로 결합함이 명시되며, 여기서 상기 지침에는 제 1 항 내지 제 133 항 중 어느 한 항의 방법에 따른 상기 T 세포 요법 및/또는 상기 체크포인트 억제제의 투여가 명시됨;
    을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트.
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