KR20200110653A - 섬유모세포 활성화 단백질의 억제제 - Google Patents

섬유모세포 활성화 단백질의 억제제 Download PDF

Info

Publication number
KR20200110653A
KR20200110653A KR1020207020364A KR20207020364A KR20200110653A KR 20200110653 A KR20200110653 A KR 20200110653A KR 1020207020364 A KR1020207020364 A KR 1020207020364A KR 20207020364 A KR20207020364 A KR 20207020364A KR 20200110653 A KR20200110653 A KR 20200110653A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound
optionally substituted
salt
aryl
alkyl
Prior art date
Application number
KR1020207020364A
Other languages
English (en)
Inventor
제니퍼 알파로
세바스찬 벨마
세바스찬 버네일스
브라맘 푸잘라
다야난드 판파틸
바와나 바트
Original Assignee
프락시스 바이오테크 엘엘씨
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 프락시스 바이오테크 엘엘씨 filed Critical 프락시스 바이오테크 엘엘씨
Publication of KR20200110653A publication Critical patent/KR20200110653A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C07D491/048—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being five-membered

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

섬유모세포 활성화 단백질(FAP)을 조절하기 위한 화합물 및 조성물이 기재된다. 상기 화합물 및 조성물은 과증식성 질환을 비롯한, 질환의 치료를 위한 치료제로서 사용될 수 있다.

Description

섬유모세포 활성화 단백질의 억제제
관련 출원의 상호 참조
본 출원은 미국 가특허 제62/599,630호(출원일: 2017년 12월 15일)의 우선권 이익을 주장하며, 이의 개시내용은 전문이 참조에 의해 원용된다.
기술분야
본 개시내용은 일반적으로 섬유모세포 활성화 단백질의 조절에 유용할 수 있는 치료제에 관한 것이다.
FAPα, 세프라제(Seprase) 또는 α2-항플라스민 전환 효소(antiplasmin converting enzyme)라고도 지칭되는 섬유모세포 활성화 단백질(fibroblast activation protein: FAP)은 DPPII, DPPIV, DPP8, DPP9 및 PREP 효소를 또한 포함하는 프롤릴 올리고펩티다제 패밀리 S9에 속하는 타입 II 내재성 막 세린 프로테아제이다. 이러한 패밀리는 엑소-다이펩티딜 펩티다제(exo-dipeptidyl peptidase)(DPP) 활성을 갖는 것을 특징으로 한다. FAP는 또한 엔도펩티다제 활성을 갖는 유일한 구성원이다(Aertgeerts, K., et al. J Biol Chem, 2005. 280(20): p. 19441-4). FAP는 DPPIV와 높은 정도의 동질성을 갖는다. 그것은 주로 세포 표면 동종이량체로서 발견되지만, 생체내에서 DPPIV와 이종이량체를 형성하는 것으로도 보고되어 있다(O'Brien, P., et al. Biochim Biophys Acta, 2008. 1784(9): p. 1130-45). FAP 엔도펩티다제 활성의 알려진 생리학적 기질은 α2-항플라스민, 타입 I 콜라겐, 젤라틴 및 섬유모세포 성장 인자 21(Fibroblast growth factor: FGF21)(Lee, K.N., et al., Biochemistry, 2009. 48(23): p. 5149-58)을 포함하고, 엑소펩티다제 활성의 경우 뉴로펩타이드 Y, B-형 나트륨뇨 펩타이드, 물질 P 및 펩타이드 YY(Brokopp, C.E., et al., Eur Heart J, 2011. 32(21): p. 2713-22; Coppage, A.L., et al., PLoS One, 2016. 11(3): p. e0151269; Dunshee, D.R., et al., J Biol Chem, 2016. 291(11): p. 5986-96; Lee, K.N., et al., J Thromb Haemost, 2011. 9(5): p. 987-96)를 포함한다.
FAP는 섬유증 질환, 상처 치유, 켈로이드 형성, 골관절염, 류마티스 관절염 및 연골 분해에 연관된 관련 장애, 아테롬성 동맥경화 질환 및 크론병을 포함하지만 이들로 제한되지 않는 증식, 조직 리모델링, 만성 염증 및/또는 섬유증에 연관된 질환에 연루되어 있다.
FAP 발현은 위암, 췌장 선암종 및 간세포 암종을 비롯한 몇몇 유형의 암에서 불량한 예후에 관련되며(Wen, X., et al., Oncol Res, 2016; Cohen, S.J., et al., Pancreas, 2008. 37(2): p. 154-8; Ju, M.J., et al., Am J Clin Pathol, 2009. 131(4): p. 498-510), 대장암에서, 증가된 FAP 발현은 보다 공격성인 질환과 연관되어 있다(Henry, L.R., et al., Clin Cancer Res, 2007. 13(6): p. 1736-41). 공지된 바와 같이, CAF 상의 FAPα는 종양-촉진 염증을 유도함으로써 항종양 면역 반응의 조절에서 중요한 역할을 갖는다(Chen, L., et al., Biochem Biophys Res Commun, 2017; Wen, X., et al., Oncol Res, 2016; Hugo, W., et al., Cell, 2016. 165(1): p. 35-44).
Val-boroPro(Talabostat, PT-100)가 임상 단계에 도달한 유일한 FAP 저해제이다. 이 화합물은 본래 DPPIV 저해제로서 개발되었고, 후속으로 선택성의 결여에 상관없이 FAP 저해제로서 평가되었다(Cunningham, C.C., Expert Opin Investig Drugs, 2007. 16(9): p. 1459-65). 이 작용제는 표준 세포독성 화학요법과 조합하여 다양한 암에서 II상에서 시험되었지만, 효능에 대한 종점이 충족되지 않았다(Eager, R.M., et al., BMC Cancer, 2009. 9: p. 263; Narra, K., et al., Cancer Biol Ther, 2007. 6(11): p. 1691-9; Eager, R.M., et al., Clin Oncol R Coll Radiol, 2009. 21(6): p. 464-72). 2개의 III상 시험이 조기에 종결되었는데, 그 이유는 아마도 안전성 및 효능 문제 둘 다로 인한 것이다(Jansen, K., et al., J Med Chem, 2014. 57(7): p. 3053-74). Val-boroPro는 pH 7.8에서의 정치 시 고리화로 인해서 프로테아제 저해 활성을 신속하게 잃어버리기 때문에, 더 높은 용량에서 이 작용제에서 인지되는 임상 독성을 고려할 때 환자에서 유효 농도를 달성하기 어려웠다(Narra, K., et al., Cancer Biol Ther, 2007. 6(11): p. 1691-9).
FAP 저해제 선택성 및 저해제의 특성을 개선시켜 생체내에서 안정성 및 효능을 개선시키는 범주가 있다.
본 명세서에는 화합물, 이의 염, 이의 약제학적 조성물 및 이의 제조 방법 및 사용 방법이 제공된다. 일 양상에서 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공된다:
Figure pct00001
식 중, R은 수소, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, 상기 R의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rd에 의해서 선택적으로 치환되고;
m은 0, 1, 2, 3 또는 4이며;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4이되,
m + n은 1, 2, 3 또는 4이며;
X는 -C(=O)-, -O-, -CH(OH)-, -S-, -S(=O) 또는 -S(=O)2-이고;
L은,
(a)
Figure pct00002
(식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고,
**은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내며,
Ra은 수소, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, Ra의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Re에 의해서 선택적으로 치환되고;
R1 및 R2는, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C1-C2 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R1 및 R2의 C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rf에 의해서 선택적으로 치환되거나, 또는 R1과 R2는 이들이 부착되는 탄소 원자 또는 원자들과 함께 취해져서 Rf에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하고,
q는 1, 2 또는 3이며,
R3 및 R4는, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R3 및 R4의 C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rg에 의해서 선택적으로 치환되거나, 또는 R3과 R4는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 Rg에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하고,
p는 0, 1 또는 2임);
(b)
Figure pct00003
(식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고,
**은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내며,
R5 및 R6은 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R5 및 R6의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rh에 의해서 선택적으로 치환되고,
Rb 및 Rc는 독립적으로 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, C6-C14 아릴 또는 -C(=O)OR17이되, Rb 및 Rc의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Ri에 의해서 선택적으로 치환되고,
r은 1, 2 또는 3임); 또는
(c)
Figure pct00004
(식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고,
**은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내며,
R7 및 R8은, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R7 및 R8의 C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rj에 의해서 선택적으로 치환되거나, 또는 R7과 R8은 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 Rj에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하고,
R9 및 R10은 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R9 및 R10의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rk에 의해서 선택적으로 치환되거나,
s는 1, 2 또는 3이고,
t는 1, 2 또는 3이되,
s + t는 2, 3 또는 4이고,
u는 0 또는 1이며
v는 0 또는 1임)이고;
Y는 R11에 의해서 선택적으로 치환된 C6-C9 아릴, R12에 의해서 선택적으로 치환된 6- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 R13에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이되, Y가 페닐 또는 나프틸인 경우, Y의 페닐 또는 나프틸은 적어도 하나의 R11에 의해서 치환되고, L이 *-NH-CH2-**이고, Y가 선택적으로 치환된 퀴놀린일인 경우, Y의 선택적으로 치환된 퀴놀린일은 2-, 3-, 5-, 6-, 7- 또는 8-위치에서 모 구조에 연결되며,
R11, R12 및 R13은, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C4-C8　사이클로알켄일, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, C6-C14　아릴, 할로겐, 사이아노, 옥소(oxo), -OR14, -NR15R16, -SR14, -NO2, -C=NH(OR14), -C(O)R14, -OC(O)R14, -C(O)OR14, -C(O)NR15R16, -NR14C(O)R15, -NR14C(O)OR15, -NR14C(O)NR15R16, -S(O)R14, -S(O)2R14, -NR14S(O)R15, -NR14S(O)2R15, -S(O)NR15R16, -S(O)2NR15R16, 또는 -P(O)(OR15)(OR16)이되, 각각의 R11 , R12 및 R13은 독립적으로 RL에 의해서 선택적으로 치환되고;
각각의 R14는 독립적으로 수소, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이되, R14의 C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴은 독립적으로 할로겐, -OH, 옥소, 사이아노, 또는 할로겐, -OH 또는 옥소에 의해서 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환되며;
R15 및 R16은, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이되, R15 및 R16의 C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴은 독립적으로 할로겐, -OH, 옥소, 사이아노, 또는 할로겐, -OH 또는 옥소에 의해서 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환되거나;
또는 R15와 R16은 이들이 부착되는 원자와 함께 취해져서 할로겐, 옥소, 사이아노, 또는 할로겐, -OH 또는 옥소에 의해서 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 6-원의 헤테로사이클릴을 형성하고;
Rd, Re, Rf, Rg, Rh, Ri, Rj 및 Rk는 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 할로겐, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, -OR14, -NR15R16, 사이아노 또는 나이트로이며;
각각의 RL은 독립적으로 할로겐, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, -OR14, -C(O)R14, -NR15R16, 사이아노, 옥소 또는 나이트로이다.
일 양상에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공되며, 여기서 화합물은 하기 특징부 중 임의의 하나 이상을 갖는다:
X는 -C(=O)-, -O- 또는 -CH(OH)-임;
L은,
(a) -NH-CR1R2-, 예컨대, -NH-CH2- 또는 -NH-CH(CH3)-(식 중, R1 과 R2는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌, 예컨대, 사이클로프로필렌을 형성함) 또는;
(b) -CR5R6-CH(NRbRc)-(R6, Rb 및 Rc가 각각 H이고, R5가 H 또는 C1-C6 알킬인 것을 포함하지만 이들로 제한되지 않음); 또는
(c)
Figure pct00005
(식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고, **은 분자의 나머지, 예컨대,
Figure pct00006
에 대한 부착점을 나타냄)임;
(iii) Y는,
(a) R11에 의해서 선택적으로 치환된 C6-C9 아릴, 예컨대, 비치환된 2,3-다이하이드로-1H-인덴-2-일 또는 적어도 하나의 R11에 의해서 치환된 페닐 또는 나프틸(각각의 R11이 할로겐, 트라이할로메틸, 사이아노 및 -C(=O)NH2로부터 독립적으로 선택되는 경우를 포함하지만 이들로 제한되지 않음);
(b) R12에 의해서 선택적으로 치환된 6- 내지 10-원의 헤테로아릴, 예컨대, 적어도 하나의 R12에 의해서 치환된 피리딘일 또는 피리미딘일; 또는
(c) R13에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 예컨대, 적어도 하나의 R13에 의해서 치환된 피페리딘일임.
또 다른 양상에서 -X-L- 모이어티가
Figure pct00007
Figure pct00008
Figure pct00009
로 이루어진 군으로부터 선택되되; *은 Y 모이어티에 대한 부착점을 나타내고, **은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내는, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염이 제공된다.
또한 화학식 (I)을 비롯한 본 명세서의 임의의 화학식의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.
또한 치료를 필요로 하는 개체에서 섬유모세포 활성화 단백질(FAP)에 의해서 매개된 질환 또는 장애를 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 개체에게 치료적 유효량의 화학식 (I)을 비롯한 본 명세서의 임의의 화학식의 화합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는 본 명세서에 상세하게 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 이러한 화합물 또는 염을 포함하는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 이러한 질환 또는 장애는 일 양상에서 증식, 조직 리모델링, 만성 염증, 비만, 글루코스 불내성(glucose intolerance) 또는 인슐린 불감증(insulin insensitivity)을 특징으로 한다. 일 양상에서, 질환 또는 장애는 유방암, 결장직장암, 난소암, 전립선암, 췌장암, 신장암, 폐암, 흑색종, 섬유육종, 골육종, 결합 조직 육종, 신장 세포 암종, 거대 세포 암종, 편평상피 세포 암종, 백혈병, 피부암, 연조직 암, 간암, 위장 암종 또는 선암종이다. 특정 양상에서, 질환 또는 장애는 전이성 신장암, 만성 림프구성 백혈병, 췌장 선암종, 또는 비-소세포 폐암이다. 추가 양상에서, 질환 또는 장애는 섬유증 질환, 상처 치유, 켈로이드 형성, 골관절염, 류마티스 관절염 및 연골 분해에 연관된 관련 장애, 아테롬성 동맥경화 질환, 크론병 또는 제II형 당뇨병이다. 또 다른 특정 양상에서 하기를 필요로 하는 개체에서 종양 성장, 종양 증식 또는 종양원성(tumorigenicity)을 감소시키는 방법에 제공되며, 이 방법은 개체에게 본 명세서에 상세하게 기재된 바와 같은 화합물, 예컨대, 화학식 (I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
도 1A는 rhFAP에 의한 시간에 따른 PRXS-AMC 분해를 도시한 도면. 도 1B는 rhFAP에 의한 시간에 따른 Z-Gly-Pro-AMC 분해를 도시한 도면.
도 2A는 rhPREP에 의한 시간에 따른 PRXS-AMC 분해를 도시한 도면. 도 2B는 rhPREP에 의한 시간에 따른 Z-Gly-Pro-AMC 분해를 도시한 도면.
도 3A는 rhDPPIV에 의한 시간에 따른 PRXS-AMC 분해를 도시한 도면. 도 3B는 rhDPP9에 의한 시간에 따른 PRXS-AMC 분해를 도시한 도면.
도 4는 다양한 시간 지점 투여 후 화합물 13이 투여된 마우스의 혈장에서 FAPα 활성도를 도시한 도면.
도 5는 다양한 시간 지점 투여 후 화합물 13이 투여된 마우스의 혈장에서 DPPIV 활성도를 도시한 도면.
도 6A는 다양한 시간 지점 투여 후 예시적인 화합물이 투여된 마우스의 혈장에서 FAP 활성을 도시한 도면. 도 6B는 다양한 시간 지점 투여 후 예시적인 화합물이 투여된 마우스의 혈장에서 DPPIV 활성도를 도시한 도면. 도 6C는 예시적인 화합물이 투여된 마우스의 혈장에서 측정된 바와 같은 시간 및 화합물 노출에 따른 FAP 활성의 비교를 도시한 도면.
도 7은 시험 화합물 24(50㎎/㎏, 1일 2회) 또는 비히클 대조군의 경구 투여 후(7일) C57/BL6 마우스에서 MC38 대장암 세포주-유래된 이종이식 종양의 부피를 도시한 도면. 도 8은 시험 화합물 24(50㎎/㎏, 1일 2회) 또는 비히클 대조군의 투여 후(7일) MC38 대장암 세포주-유래된 이종이식 종양을 갖는 C47/BL6 마우스에서 체중 증가를 도시한 도면. 도 9는 마우스가 시험 화합물 24 또는 대조군 비히클로 처리된 경우 종양 부피의 개별 기록을 도시한 도면. 도 10은 마우스가 시험 화합물 24 또는 대조군 비히클로 처리된 경우 종양 총 질량의 평균 및 평균의 표준오차(standard error of mean: SEM)를 도시한 도면.
도 11A는 비히클 또는 화합물 13(예시적인 화합물)이 투여된, B16-F10 종양을 보유하는 마우스의 혈장 및 종양에서의 예시적인 화합물의 농도를 도시한 도면. 도 11B는 비히클 또는 화합물 13(예시적인 화합물)이 투여된, B16-F10 종양을 보유하는 마우스의 혈장 및 종양에서의 FAP 활성을 도시한 도면.
도 12A는 비히클 또는 화합물 13(예시적인 화합물)이 투여된, MC38 종양을 보유하는 마우스의 혈장 및 종양에서의 예시적인 화합물의 농도를 도시한 도면. 도 12B는 비히클 또는 화합물 13(예시적인 화합물)이 투여된, MC38 종양을 보유하는 마우스의 혈장 및 종양에서의 FAP 활성을 도시한 도면.
도 13A는 rhFAP에 의한 rhFGF21의 분해를 입증하는 항-FGF21 웨스턴 블롯의 영상을 도시한 도면. 도 13B는 도 13A에 도시된 웨스턴 블롯의 덴시오메트리 분석을 도시한 도면. 도 13C는 rhFAP에 의한 rhFGF21의 분해의 화합물 13(예시적인 화합물)-매개된 저해를 입증하는 항-FGF21 웨스턴 블롯의 영상을 도시한 도면. 도 13D는 도 13C에 도시된 웨스턴 블롯의 덴시오메트리 분석을 도시한 도면.
도 14A는 용량-의존적인 방식의 rhFAP에 의한 rhFGF21의 분해의 화합물 13(예시적인 화합물)-매개된 저해를 입증하는 항-FGF21 웨스턴 블롯의 영상을 도시한 도면. 도 14B는 도 14A에 도시된 웨스턴 블롯의 덴시오메트리 분석 및 생성된 곡선으로부터 결정된 IC50을 도시한 도면.
도 15는 래트에게 비히클 또는 화합물 13(예시적인 화합물)을 경구 투여하고, 그 다음 rhFGF21을 정맥내 투여하기 위한 실험 프로토콜의 요약을 도시하고, 또한 시간에 따른 생성된 항-FGF21 웨스턴 블롯, FAP 활성 및 혈장 노출 수준을 도시한 도면.
도 16은 화합물 13(예시적인 화합물)의 정맥내 투여 후 햄스터에서 시간에 따른 FAP 활성 및 FGF21 수준을 도시한 도면.
본 명세서에는 하기 화학식 (I)에 따른 화합물 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 기재된다:
Figure pct00010
.
이 화합물은 섬유모세포 활성화 단백질(FAPα)의 저해에 유용할 수 있다. 특정 실시형태에서, 이 화합물은 개체에서 FAPα에 의해서 매개되는 질환 또는 장애를 치료하는데 사용된다. 이러한 질환 또는 장애는 증식, 조직 리모델링, 만성 염증, 비만, 글루코스 불내성 및/또는 인슐린 불감증을 포함할 수 있거나 이를 특징으로 할 수 있다. 일부 실시형태에서, 화합물은 암을 치료하는데 사용된다.
정의
본 명세서에서의 사용을 위해서, 달리 명확하게 제시되지 않는 한, 단수 표현의 사용은 하나 이상을 지칭한다.
본 명세서에서 "약"의 값 또는 파라미터에 대한 언급은 그 값 또는 파라미터 자체에 관한 실시형태를 포함한다(그리고 설명한다). 예를 들어, "약 X"에 관한 설명은 "X"의 설명을 포함한다.
"알킬"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 달리 제시되지 않는 한 지정된 탄소 원자의 수를 갖는(즉, C1-C10은 1 내지 10개의 탄소 원자를 의미함), 포화 선형(즉, 비분지형) 또는 분지형 1가 탄화수소 쇄 또는 이들의 조합물을 지칭하고, 포함한다. 특별한 알킬기는 1 내지 20개의 탄소 원자("C1-C20 알킬")를 갖는, 1 내지 10개의 탄소 원자("C1-C10 알킬")를 갖는, 6 내지 10개의 탄소 원자("C6-C10 알킬")를 갖는, 1 내지 6개의 탄소 원자("C1-C6 알킬")를 갖는, 2 내지 6개의 탄소 원자("C2-C6 알킬")를 갖는, 또는 1 내지 4개의 탄소 원자("C1-C4 알킬")를 갖는 것이다. 알킬기의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 아이소프로필, n-부틸, t-부틸, 아이소부틸, sec-부틸, n-펜틸, n-헥실, n-헵틸, n-옥틸, n-노닐, n-데실 등과 같은 기를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
"알킬렌"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 알킬과 동일하지만 2가를 갖는 잔기를 지칭한다. 특별한 알킬렌기는 1 내지 20개의 탄소 원자("C1-C20 알킬렌")를 갖는, 1 내지 10개의 탄소 원자("C1-C10 알킬렌")를 갖는, 6 내지 10개의 탄소 원자("C6-C10 알킬렌")를 갖는, 1 내지 6 탄소 원자("C1-C6 알킬렌")를 갖는, 1 내지 5개의 탄소 원자("C1-C5 알킬렌")를 갖는, 1 내지 4 탄소 원자("C1-C4 알킬렌")를 갖는 또는 1 내지 3 탄소 원자("C1-C3 알킬렌")를 갖는 것이다. 알킬렌의 예는 메틸렌(-CH2-), 에틸렌(-CH2CH2-), 프로필렌(-CH2CH2CH2-), 아이소프로필렌(-CH2CH(CH3)-), 부틸렌(-CH2(CH2)2CH2-), 아이소부틸렌(-CH2CH(CH3)CH2-), 펜틸렌(-CH2(CH2)3CH2-), 헥실렌(-CH2(CH2)4CH2-), 헵틸렌(-CH2(CH2)5CH2-), 옥틸렌(-CH2(CH2)6CH2-) 등과 같은 기를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
"알켄일"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 달리 제시되지 않는 한, 적어도 하나의 올레핀 불포화 부위를 갖고(즉, 화학식 C=C의 적어도 하나의 모이어티를 갖고), 지정된 탄소 원자의 수를 갖는(즉, C2-C10은 2 내지 10개의 탄소 원자를 의미함) 불포화 선형(즉, 비분지형) 또는 분지형 1가 탄화수소 쇄 또는 이들의 조합물을 지칭하고 포함한다. 알켄일기는 "시스" 또는 "트랜스" 입체구조(configuration)를 가질 수 있거나, 또는 대안적으로는 "E" 또는 "Z" 입체구조를 가질 수 있다. 특별한 알켄일기는 2 내지 20개의 탄소 원자("C2-C20 알켄일")를 갖는, 6 내지 10개의 탄소 원자("C6-C10 알켄일")를 갖는, 2 내지 8개의 탄소 원자("C2-C8 알켄일")를 갖는, 2 내지 6개의 탄소 원자("C2-C6 알켄일")를 갖는, 또는 2 내지 4개의 탄소 원자("C2-C4 알켄일")를 갖는 것이다. 알켄일기의 예는 에텐일(또는 바이닐), 프로프-1-엔일, 프로프-2-엔일(또는 알릴), 2-메틸프로프-1-엔일, 부트-1-엔일, 부트-2-엔일, 부트-3-엔일, 부타-1,3-다이엔일, 2-메틸부타-1,3-다이엔일, 펜트-1-엔일, 펜트-2-엔일, 헥스-1-엔일, 헥스-2-엔일, 헥스-3-엔일 등과 같은 기를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
"알킨일"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 달리 제시되지 않는 한, 적어도 하나의 아세틸렌 불포화 부위를 갖고(즉, 화학식 C=C의 적어도 하나의 모이어티를 갖고), 지정된 탄소 원자의 수를 갖는(즉, C2-C10은 2 내지 10개의 탄소 원자를 의미함) 불포화 선형(즉, 비분지형) 또는 분지형 1가 탄화수소 쇄 또는 이들의 조합물을 지칭하고 포함한다. 특별한 알킨일기는 2 내지 20개의 탄소 원자("C2-C20 알킨일")를 갖는, 6 내지 10개의 탄소 원자("C6-C10 알킨일")를 갖는, 2 내지 8개의 탄소 원자("C2-C8 알킨일")를 갖는, 2 내지 6개의 탄소 원자("C2-C6 알킨일")를 갖는, 또는 2 내지 4개의 탄소 원자("C2-C4 알킨일")를 갖는 것이다. 알킨일기의 예는 에틴일(또는 아세틸렌일), 프로프-1-인일, 프로프-2-인일(또는 프로파길), 부트-1-인일, 부트-2-인일, 부트-3-인일 등과 같은 기를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
"사이클로알킬"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 달리 제시되지 않는 한 지정된 탄소 원자의 수를 갖는(즉, C3-C10은 3 내지 10개의 탄소 원자를 의미함), 포화 환식 1가 탄화수소 구조를 지칭하고, 포함한다. 사이클로알킬은 1개의 고리, 예컨대, 사이클로헥실, 또는 다수의 고리, 예컨대, 아다만틸로 이루어질 수 있다. 하나 초과의 고리를 포함하는 사이클로알킬은 융합(즉, 축합)(fuse)될 수 있거나, 스피로일 수 있거나, 브리징될 수 있거나 또는 이들의 조합일 수 있다. 특별한 사이클로알킬기는 3 내지 12개의 환상 탄소 원자를 갖는 것이다. 바람직한 사이클로알킬은 3 내지 8개의 환상 탄소 원자("C3-C8 사이클로알킬")를 갖는, 3 내지 6개의 탄소 원자("C3-C6 사이클로알킬")를 갖는, 또는 3 내지 4개의 환상 탄소 원자("C3-C4 사이클로알킬")를 갖는 환식 탄화수소이다. 사이클로알킬의 예는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 노보닐 등을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
"사이클로알킬렌"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 사이클로알킬과 동일하지만 2가를 갖는 잔기를 지칭한다. 사이클로알킬렌은 융합될 수 있거나, 스피로일 수 있거나 브리징될 수 있거나 또는 이들의 조합일 수 있는 하나의 고리 또는 다수의 고리로 이루어질 수 있다. 특별한 사이클로알킬렌기는 3 내지 12개의 환상 탄소 원자를 갖는 것이다. 바람직한 사이클로알킬렌은 3 내지 8개의 환상 탄소 원자("C3-C8 사이클로알킬렌")를 갖는, 3 내지 6개의 탄소 원자("C3-C6 사이클로알킬렌")를 갖는, 또는 3 내지 4개의 환상 탄소 원자("C3-C4 사이클로알킬렌")를 갖는 환식 탄화수소이다. 사이클로알킬렌의 예는 사이클로프로필렌, 사이클로부틸렌, 사이클로펜틸렌, 사이클로헥실렌, 사이클로헵틸렌, 노보닐렌 등을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 사이클로알킬렌은 동일한 고리 탄소 원자 또는 상이한 고리 탄소 원자를 통해서 나머지 구조에 부착될 수 있다. 사이클로알킬렌이 2개의 상이한 고리 탄소 원자를 통해서 남아있는 구조에 부착되는 경우, 연결 결합은 서로에 시스- 또는 트랜스-일 수 있다. 예를 들어, 사이클로프로필렌은 1,1-사이클로프로필렌 및 1,2-사이클로프로필렌(예를 들어, 시스-1,2-사이클로프로필렌 또는 트랜스스-1,2-사이클로프로필렌) 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
"사이클로알켄일"은 달리 제시되지 않는 한 적어도 하나의 올레핀 불포화 부위를 갖고(즉, 화학식 C=C의 적어도 하나의 모이어티를 갖고), 지정된 탄소 원자의 수를 갖는(즉, C3-C10은 3 내지 10개의 탄소 원자를 의미함) 불포화 환식 비방향족 1가 탄화수소 구조를 지칭하고 포함한다. 사이클로알켄일은 1개의 고리, 예컨대, 사이클로헥센일, 또는 다수의 고리, 예컨대, 노보넨일로 이루어질 수 있다. 바람직한 사이클로알켄일은 3 내지 8개의 환상 탄소 원자를 갖는 불포화 환식 탄화수소("C3-C8 사이클로알켄일")이다. 사이클로알켄일기의 예는 사이클로프로펜일, 사이클로부텐일, 사이클로펜텐일, 사이클로헥센일, 노보넨일 등을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
"사이클로알켄일렌"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 사이클로알켄일과 동일하지만 2가를 갖는 잔기를 지칭한다.
"아릴" 또는 "Ar"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 단일 고리(예를 들어, 페닐) 또는 다수의 축합된 고리(예를 들어, 나프틸 또는 안트릴)(축합된 고리는 방향족일 수 있거나 방향족이 아닐 수 있음)를 갖는 불포화 방향족 탄소환식기를 지칭한다. 특별한 아릴기는 6 내지 14개의 환상 탄소 원자를 갖는 것("C6-C14 아릴")이다. 하나 초과의 고리를 갖는 아릴기(적어도 하나의 고리는 비방향족임)는 방향족 고리 위치 또는 비방향족 고리 위치에서 모 구조에 연결될 수 있다. 일 변경에서, 하나 초과의 고리를 갖는 아릴기(적어도 하나의 고리는 비방향족임)는 방향족 고리 위치에서 모 구조에 연결된다.
"아릴렌"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 아릴과 동일하지만 2가를 갖는 잔기를 지칭한다. 특별한 아릴렌기는 6 내지 14개의 환상 탄소 원자를 갖는 것("C6-C14 아릴렌")이다.
"헤테로아릴"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 1 내지 14개의 환상 탄소 원자 및 적어도 하나의 환상 헤테로원자(헤테로원자, 예컨대, 질소, 산소 및 황을 포함하지만 이들로 제한되지 않음)를 갖는 불포화 방향족 환식기를 지칭한다. 헤테로아릴기는 단일 고리(예를 들어, 피리딜, 퓨릴) 또는 다수의 축합된 고리(예를 들어, 인돌리진일, 벤조티엔일)를 가질 수 있고, 축합된 고리는 방향족일 수 있거나 방향족이 아닐 수 있다. 특별한 헤테로아릴기는 1 내지 12 환상 탄소 원자 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6개의 환상 헤테로원자를 갖는 5 내지 14-원의 고리, 1 내지 8개의 환상 탄소 원자 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4 환상 헤테로원자를 갖는 5 내지 10-원의 고리, 또는 1 내지 5 환상 탄소 원자 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4 환상 헤테로원자를 갖는 5, 6 또는 7-원의 고리이다. 일 변경에서, 특별한 헤테로아릴기는 1 내지 6개의 환상 탄소 원자 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 환상 헤테로원자를 갖는 단환식 방향족 5-, 6- 또는 7-원의 고리이다. 또 다른 변경에서, 특별한 헤테로아릴기는 1 내지 12개의 환상 탄소 원자 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6개의 환상 헤테로원자를 갖는 다환식 방향족 고리이다. 하나 초과의 고리를 갖는 헤테로아릴기(적어도 하나의 고리는 비방향족임)는 방향족 고리 위치 또는 비방향족 고리 위치에서 모 구조에 연결될 수 있다. 일 변경에서, 하나 초과의 고리를 갖는 헤테로아릴기(적어도 하나의 고리는 비방향족임)는 방향족 고리 위치에서 모 구조에 연결된다. 헤테로아릴기는 고리 탄소 원자 또는 고리 헤테로원자에서 모 구조에 연결될 수 있다.
적용되는 경우, 헤테로아릴기는 호변이성질체 형태로 도시될 수 있다. 이러한 화합물은 특정 호변이성질체 형태가 예를 들어, 헤테로사이클릴인 경우에도 헤테로아릴이라고 간주될 것이다. 예를 들어, 헤테로아릴기
Figure pct00011
는 헤테로환식 호변이성질체 형태
Figure pct00012
로 도시될 수 있다. 어느 호변이성질체가 도시되든 관계없이, 그 기는 헤테로아릴이라고 간주된다.
"헤테로사이클", "헤테로환식", 또는 "헤테로사이클릴"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 단일 고리 또는 다수의 축합된 고리를 갖고, 1 내지 14개의 환상 탄소 원자 및 1 내지 6 환상 헤테로원자, 예컨대, 질소, 황 또는 산소 등을 갖는 포화 또는 불포화 비방향족 환식기를 지칭한다. 하나 초과의 고리를 포함하는 헤테로사이클은 융합될 수 있거나, 브리징될 수 있거나 스피로일 수 있거나 또는 이들의 임의의 조합일 수 있지만, 헤테로아릴을 제외한다. 헤테로사이클릴기는 독립적으로 본 명세서에 기재된 하나 이상의 치환체로 선택적으로 치환될 수 있다. 특별한 헤테로사이클릴기는 1 내지 13 환상 탄소 원자 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6 환상 헤테로원자를 갖는 3 내지 14-원의 고리, 1 내지 11 환상 탄소 원자 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6 환상 헤테로원자를 갖는 3 내지 12-원의 고리, 1 내지 9 환상 탄소 원자 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4 환상 헤테로원자를 갖는 3 내지 10-원의 고리, 1 내지 7 환상 탄소 원자 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4 환상 헤테로원자를 갖는 3 내지 8-원의 고리, 또는 1 내지 5 환상 탄소 원자 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4 환상 헤테로원자를 갖는 3 내지 6-원의 고리이다. 일 변경에서, 헤테로사이클릴은 1 내지 2, 1 내지 3, 1 내지 4, 1 내지 5, 또는 1 내지 6개의 환상 탄소 원자 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2, 1 내지 3 또는 1 내지 4개의 환상 헤테로원자를 갖는 단환식 3-, 4-, 5-, 6- 또는 7-원의 고리를 포함한다. 또 다른 변경에서, 헤테로사이클릴은 1 내지 12 환상 탄소 원자 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6 환상 헤테로원자를 갖는 다환식 비방향족 고리를 포함한다.
"할로" 또는 "할로겐"은 원자 번호 9 내지 85를 갖는 17족 부류의 원소를 지칭한다. 바람직한 할로기는 플루오린, 염소, 브로민 및 아이오딘의 라디칼이다. 잔기가 하나 초과의 할로겐으로 치환되는 경우, 그것은 부착된 할로겐 모이어티의 수에 상응하는 접두사를 사용하여 지칭될 수 있고, 예를 들어, 다이할로아릴, 다이할로알킬, 트라이할로아릴 등은 2개("다이") 또는 3개("트라이") 할로기로 치환된 아릴 및 알킬을 지칭하고, 이것은 필수적으로 동일한 할로겐은 아닐 수 있고; 따라서 4-클로로-3-플루오로페닐은 다이할로아릴의 범주 내이다. 각각의 수소가 할로기로 대체된 알킬기는 "퍼할로알킬"이라고 지칭된다. 바람직한 퍼할로알킬기는 트라이플루오로메틸(-CF3)이다. 유사하게, "퍼할로알콕시"는 할로겐이 알콕시기의 알킬 모이어티를 구성하는 탄화수소에서 각각의 H를 대신하는 알콕시기를 지칭한다. 퍼할로알콕시기의 예는 트라이플루오로메톡시(-OCF3)이다.
"카보닐"은 기 C=O를 지칭한다.
"옥소"는 모이어티 =O를 지칭한다.
"선택적으로 치환된"은 달리 명시되지 않는 한, 비치환되거나, 기에 대해서 열거된 치환체 중 하나 이상(예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5개)에 의해서 치환될 수 있고, 여기서 치환체는 동일하거나 상이할 수 있다. 일 실시형태에서, 선택적으로 치환된 기는 1개의 치환체를 갖는다. 또 다른 실시형태에서, 선택적으로 치환된 기는 2개의 치환체를 갖는다. 또 다른 실시형태에서, 선택적으로 치환된 기는 3개의 치환체를 갖는다. 또 다른 실시형태에서, 선택적으로 치환된 기는 4개의 치환체를 갖는다. 일부 실시형태에서, 선택적으로 치환된 기는 1 내지 2, 1 내지 3, 1 내지 4, 1 내지 5, 2 내지 3, 2 내지 4, 또는 2 내지 5개의 치환체를 갖는다. 일 실시형태에서, 선택적으로 치환된 기는 비치환된다.
달리 명확하게 제시되지 않는 한, "개체"는 본 명세서에서 사용된 바와 같이 영장류, 인간, 소, 말, 고양이, 개 또는 설치류를 포함하지만 이들로 제한되지 않는 포유동물을 의도한다. 일 변경에서, 개체는 인간이다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, "치료" 또는 "치료하는"은 임상 결과를 포함하는 이로운 또는 목적하는 결과를 획득하기 위한 접근법이다. 이로운 또는 목적하는 결과는 하기 중 하나 이상을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다: 질환으로부터 야기한 하나 이상의 증상의 감소, 질환 정도의 감소, 질환의 안정화(예를 들어, 질환의 악화 예방 또는 지연), 질환 확산의 예방 또는 지연, 질환의 발생 또는 재발의 지연, 질환 진행의 지연 또는 둔화, 질환 상태의 개선, 질환의 차도(부분적이든 전체적이든) 제공, 질환을 치료하는데 필요한 1종 이상의 다른 의약의 용량 감소, 또 다른 의약의 효과 향상, 질환의 진행 지연, 삶의 질 증가 및/또는 생존 연장. 본 명세서에 기재된 방법은 이들 치료 양상 중 임의의 하나 이상을 고려한다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "유효량"은 주어진 치료 형태에 효과적일 본 발명의 화합물의 이러한 양을 의도한다. 당업계에 이해되는 바와 같이, 유효량은 1회 이상의 용량으로 존재할 수 있고, 즉, 단일 용량 또는 다회 용량이 목적하는 치료를 달성하기 위해서 필요할 수 있다. 유효량은 1종 이상의 치료제를 투여하는 것과 관련하여 고려될 수 있고, 단일 작용제는 1종 이상의 다른 작용제와 함께 목적하는 또는 이로운 결과가 달성될 수 있거나 달성되면 유효량으로 제공된다고 간주될 수 있다. 공동 투여되는 화합물 중 임의의 것의 적합한 용량은 선택적으로 화합물의 조합 작용(예를 들어, 상가적 효과 또는 상승작용적 효과)로 인해서 낮아질 수 있다.
"치료적 유효량"은 목적하는 치료 결과를 생성시키기에 충분한 화합물 또는 이의 염의 양을 지칭한다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, "단위 투여 형태"는 단위 투여량으로 적합한 물리적으로 구별되는 단위를 지칭되며, 각각의 단위는 요구되는 약제학적 담체와 회합하여 목적하는 치료 효과를 생성시키도록 계산된 활성 성분의 미리 결정된 양을 함유한다. 단위 투여 형태는 단일 요법 또는 병용 요법을 함유할 수 있다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, "약제학적으로 허용 가능한" 또는 "약리학적으로 허용 가능한"은, 생물학적이지 않거나 바람직한 물질을 의미하고, 예를 들어, 물질은 임의의 유의한 바람직하지 않은 생물학적 효과를 야기하지 않거나 함유된 조성물의 다른 성분 중 임의의 것과 유해한 방식으로 상호작용하지 않으면서 환자에게 투여되는 약제학적 조성물 내에 혼입될 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제는 바람직하게는 요구되는 독성 및 제조 시험 표준을 충족하고/하거나 미국 식품 의약국에 의해서 작성된 문헌[Inactive Ingredient Guide]에 포함된다.
"약제학적으로 허용 가능한 염"은 유리(비-염) 화합물의 생물학적 활성 중 적어도 일부를 보유하고, 개체에게 약물 또는 약제로서 투여될 수 있는 염이다. 이러한 염은 예를 들어, 하기를 포함한다: (1) 무기산, 예컨대, 염산, 브로민화수소산, 황산, 질산, 인산 등으로 형성된 산 부가염; 또는 유기산, 예컨대, 아세트산, 옥살산, 프로피온산, 석신산, 말레산, 타타르산 등으로 형성된 산 부가염; (2) 모 화합물에 존재하는 산성 양성자가 금속 이온, 예를 들어, 알칼리 금속 이온, 알칼리 토금속 이온 또는 알루미늄 이온에 의해서 대체될 때 형성되는 염; 또는 유기 염기와 배위될 때 형성되는 염. 허용 가능한 유기 염기는 에탄올아민, 다이에탄올아민, 트라이에탄올아민 등을 포함한다. 허용 가능한 무기 염기는 수산화알루미늄, 수산화칼슘, 수산화칼륨, 탄산나트륨, 수산화나트륨 등을 포함한다. 약제학적으로 허용 가능한 염은 제조 공정에서 동일계에서 제조될 수 있거나 또는 유리 산 또는 염기 형태의 본 발명의 정제된 화합물을 각각 적합한 유기 염기 또는 무기 염기와 별개로 반응시키고, 이렇게 형성된 염을 후속 정제 동안 단리시킴으로써 제조될 수 있다.
용어 "부형제"는 본 명세서에서 사용된 바와 같이 약물 또는 약제, 예컨대, 활성 성분으로서 본 발명의 화합물을 함유하는 정제의 제조에 사용될 수 있는 불활성 또는 비활성 물질을 의미한다. 다양한 물질이 결합제, 붕해제, 코팅, 압축/캡슐화 보조제, 크림 또는 로션, 윤활제, 비경구 투여를 위한 용액, 씹을 수 있는 정제용 물질, 감미료 또는 착향료, 현탁화제/겔화제 또는 습윤 과립화제로서 사용되는 임의의 물질을 포함하지만 이들로 제한되지 않는 용어 부형제에 포함될 수 있다. 결합제는 예를 들어, 카보머, 포비돈, 잔탄검 등을 포함하고; 코팅은 예를 들어, 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트, 에틸셀룰로스, 젤란 검, 말토덱스트린, 장용 코팅을 포함하고; 압축/캡슐화 보조제는 예를 들어, 탄산칼슘, 덱스트로스, 프룩토스dc(dc = "직접 압축성"), 꿀 dc, 락토스(무수물 또는 일수화물; 선택적으로 아스파탐, 셀룰로스 또는 미세결정질 셀룰로스와 조합하여), 전분 dc, 수크로스 등을 포함하고; 붕해제는 예를 들어, 크로스카멜로스 소듐, 젤란검, 소듐 전분 글리콜레이트 등을 포함하고; 크림 또는 로션은 예를 들어, 말토텍스트린, 카라기난 등을 포함하고; 윤활제는 예를 들어, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산, 소듐 스테아릴 퓨마레이트 등을 포함하고; 씹을 수 있는 정제용 물질은 예를 들어, 덱스트로스, 프룩토스 dc, 락토스(일수화물, 선택적으로 아스파탐 또는 셀룰로스와 조합하여) 등을 포함하고; 현탁화제/겔화제는 예를 들어, 카라기난, 소듐 전분 글리콜레이트, 잔탄검 등을 포함하고; 감미료는 예를 들어, 아스파탐, 덱스트로스, 프룩토스 dc, 솔비톨, 수크로스 등을 포함하고; 습윤 과립화제는 예를 들어, 탄산칼슘, 말토덱스트린, 미세결정질 셀룰로스 등을 포함한다.
"포함하는"으로서 본 명세서에 기재된 양상 및 실시형태는 실시형태로 "이루어진" 및 "본질적으로 이루어진"을 포함하는 것으로 이해된다.
조성물이 열거된 성분으로 "본질적으로 이루어진" 것으로 기재되는 경우, 조성물은 명확히 열거된 성분을 함유하고, 치료하고자 하는 질환 또는 병태에 실질적으로 영향을 미치지 않는 다른 성분, 예컨대 미량의 불순물을 함유할 수 있다.　 그러나, 조성물은 명확히 열거된 성분 이외에 치료하고자 하는 질환 또는 병태에 실질적으로 영향을 미치는 임의의 다른 성분을 함유하지 않거나; 또는, 조성물이 치료하고자 하는 질환 또는 병태에 실질적으로 영향을 미치는 것 이외의 추가 성분을 함유하는 경우, 그 조성물은 치료하고자 하는 질환 또는 병태에 실질적으로 영향을 미치기에 충분한 농도 또는 양의 추가 성분을 함유하지 않는다.　 방법이 열거된 단계로 "본질적으로 이루어진" 것으로 기재된 경우, 방법은 열거된 단계를 함유하고, 치료하고자 하는 질환 또는 병태에 실질적으로 영향을 미치지 않는 다른 단계를 함유할 수 있지만, 방법은 명확히 열거된 단계 이외에 치료하고자 하는 질환 또는 병태에 실질적으로 영향을 미치는 임의의 다른 단계를 함유하지 않는다.
모이어티가 "적어도 하나의" 치환체에 의해서 치환되는 것으로 제시된 경우, 이것은 정확히 하나의 치환체의 개시를 포함한다.
화합물
일 양상에서 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공된다:
Figure pct00013
식 중, R은 수소, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, 상기 R의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rd에 의해서 선택적으로 치환되고;
m은 0, 1, 2, 3 또는 4이며;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4이되,
m + n은 1, 2, 3 또는 4이며;
X는 -C(=O)-, -O-, -CH(OH)-, -S-, -S(=O) 또는 -S(=O)2-이고;
L은,
(a)
Figure pct00014
(식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고,
**은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내며,
Ra은 수소, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, Ra의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Re에 의해서 선택적으로 치환되고;
R1 및 R2는 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C1-C2 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R1 및 R2의 C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rf에 의해서 선택적으로 치환되거나,
또는 R1과 R2는 이들이 부착되는 탄소 원자 또는 원자들과 함께 취해져서 Rf에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하고,
q는 1, 2 또는 3이며,
R3 및 R4는 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R3 및 R4의 C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rg 의해서 선택적으로 치환되거나,
또는 R3과 R4는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 Rg에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하고,
p는 0, 1 또는 2임);
(b)
Figure pct00015
(식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고,
**은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내며,
R5 및 R6은 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R5 및 R6의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rh에 의해서 선택적으로 치환되고,
Rb 및 Rc는 독립적으로 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, C6-C14 아릴 또는 -C(=O)OR17이되, Rb 및 Rc의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Ri에 의해서 선택적으로 치환되고,
r은 1, 2 또는 3임); 또는
(c)
Figure pct00016
(식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고,
**은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내며,
R7 및 R8은 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R7 및 R8의 C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rj에 의해서 선택적으로 치환되거나,
또는 R7과 R8은 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 Rj에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하고,
R9 및 R10은 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R9 및 R10의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rk에 의해서 선택적으로 치환되거나,
s는 1, 2 또는 3이고,
t는 1, 2 또는 3이되,
s + t는 2, 3 또는 4이고,
u는 0 또는 1이며,
v는 0 또는 1임)이고;
Y는 R11에 의해서 선택적으로 치환된 C6-C9 아릴, R12에 의해서 선택적으로 치환된 6- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 R13에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이되, Y가 페닐 또는 나프틸인 경우, Y의 페닐 또는 나프틸은 적어도 하나의 R11에 의해서 치환되고, L이 *-NH-CH2-**이고, Y가 선택적으로 치환된 퀴놀린일인 경우, Y의 선택적으로 치환된 퀴놀린일은 2-, 3-, 5-, 6-, 7- 또는 8-위치에서 모 구조에 연결되며,
R11, R12 및 R13은, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C4-C8　사이클로알켄일, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, C6-C14　아릴, 할로겐, 사이아노, 옥소, -OR14, -NR15R16, -SR14, -NO2, -C=NH(OR14), -C(O)R14, -OC(O)R14, -C(O)OR14, -C(O)NR15R16, -NR14C(O)R15, -NR14C(O)OR15, -NR14C(O)NR15R16, -S(O)R14, -S(O)2R14, -NR14S(O)R15, -NR14S(O)2R15, -S(O)NR15R16, -S(O)2NR15R16, 또는 -P(O)(OR15)(OR16)이되, 각각의 R11 , R12 및 R13은 독립적으로 RL에 의해서 선택적으로 치환되고;
각각의 R14는 독립적으로 수소, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이되, R14의 C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴은 독립적으로 할로겐, -OH, 옥소, 사이아노, 또는 할로겐, -OH 또는 옥소에 의해서 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환되며;
R15 및 R16은, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이되, R15 및 R16의 C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴은 독립적으로 할로겐, -OH, 옥소, 사이아노, 또는 할로겐, -OH 또는 옥소에 의해서 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환되거나;
또는 R15와 R16은 이들이 부착되는 원자와 함께 취해져서 할로겐, 옥소, 사이아노, 또는 할로겐, -OH 또는 옥소에 의해서 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 6-원의 헤테로사이클릴을 형성하고;
Rd, Re, Rf, Rg, Rh, Ri, Rj 및 Rk는 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 할로겐, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, -OR14, -NR15R16, 사이아노 또는 나이트로이며;
각각의 RL은 독립적으로 할로겐, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, -OR14, -C(O)R14, -NR15R16, 사이아노, 옥소 또는 나이트로이다.
본 명세서의 설명에서, 모이어티의 모든 설명, 변경, 실시형태 또는 양상은 설명 각각 그리고 모든 조합이 구체적이고 개별적으로 열거된 것처럼 동일하게 다른 모이어티의 모든 설명, 변경, 실시형태 또는 양상과 조합될 수 있다고 이해된다. 예를 들어, 화학식 (I)의 R과 관련하여 본 명세서에 제공된 모든 설명, 변경, 실시형태 또는 양상은 각각 그리고 모든 조합이 구체적이고 개별적으로 열거된 것처럼 동일하게 Y, X, L, m 및/또는 n의 모든 설명, 변경, 실시형태 또는 양상과 조합될 수 있다. 또한 화학식 (I)의 모든 설명, 변경, 실시형태 또는 양상은 적용 가능한 경우 본 명세서에 상세하게 기재된 다른 화학식에 동일하게 적용되고, 각각의 그리고 모든 설명, 변경, 실시형태 또는 양상이 모든 화학식에 대해서 별개로 그리고 개별적으로 열거된 것처럼 동일하게 동일하게 기재된다고 이해된다. 예를 들어, 화학식 (I)의 모든 설명, 변경, 실시형태 또는 양상은 적용 가능한 경우 본 명세서에 상세하게 기재된 화학식 Ia, Ib, II, IIa, IIb, III, IIIa, IIIb, IV, IVa, IVb, V, Va, Vb, VI, VIa, VIb, VII, VIIa, VIIb, VIII, VIIIa 및 VIIIb 중 임의의 것에 동일하게 적용되고, 각각의 그리고 모든 설명, 변경, 실시형태 또는 양상이 모든 화학식에 대해서 별개로 그리고 개별적으로 열거된 것처럼 동일하게 동일하게 기재된다고 이해된다.
일부 실시형태에서, 화학식 (I)의 화합물은 하기 화학식 (Ia) 또는 이의 염이다:
Figure pct00017
식 중, Y, X, L, R, m 및 n은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 화학식 (I)의 화합물은 하기 화학식 (Ib) 또는 이의 염이다:
Figure pct00018
식 중, Y, X, L, R, m 및 n은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
화학식 (I)의 화합물의 일부 실시형태에서, m이 1이고, n이 1인 경우, 화합물은 하기 화학식 (II) 또는 이의 염이다:
Figure pct00019
식 중, Y, X, L 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 화학식 (II)의 화합물은 하기 화학식 (IIa) 또는 이의 염이다:
Figure pct00020
식 중, Y, X, L 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 화학식 (II)의 화합물은 하기 화학식 (IIb) 또는 이의 염이다:
Figure pct00021
식 중, Y, X, L 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 실시형태에서, L이 -NH-CH2-인 경우, 화합물은 하기 화학식 (III) 또는 이의 염이다:
Figure pct00022
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 화학식 (III)의 화합물은 하기 화학식 (IIIa) 또는 이의 염이다:
Figure pct00023
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 화학식 (III)의 화합물은 하기 화학식 (IIIb) 또는 이의 염이다:
Figure pct00024
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 화학식 (III)의 화합물은 하기 화학식 (III-1) 또는 이의 염이다:
Figure pct00025
식 중, Y 및 X 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 실시형태에서, L이 -NH-CH(CH3)-인 경우, 화합물은 하기 화학식 (IV) 또는 이의 염이다:
Figure pct00026
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다. 화학식 (IV)의 화합물일 양상에서, L의 메틸기를 보유하는 탄소는 S 입체구조이다. 화학식 (IV)의 화합물일 양상에서, L의 메틸기를 보유하는 탄소는 R 입체구조이다.
일부 실시형태에서, 화학식 (IV)의 화합물은 하기 화학식 (IVa) 또는 이의 염이다:
Figure pct00027
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다. 화학식 (IVa)의 화합물일 양상에서, L의 메틸기를 보유하는 탄소는 S 입체구조이다. 화학식 (IVa)의 화합물일 양상에서, L의 메틸기를 보유하는 탄소는 R 입체구조이다.
일부 실시형태에서, 화학식 (IV)의 화합물은 하기 화학식 (IVb) 또는 이의 염이다:
Figure pct00028
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다. 화학식 (IVb)의 화합물일 양상에서, L의 메틸기를 보유하는 탄소는 S 입체구조이다.
화학식 (IVb)의 화합물일 양상에서, L의 메틸기를 보유하는 탄소는 R 입체구조이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 실시형태에서, 화합물은 하기 화학식 (V) 또는 이의 염이다:
Figure pct00029
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 화학식 (V)의 화합물은 화학식 (Va) 또는 이의 염이다:
Figure pct00030
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 화학식 (V)의 화합물은 화학식 (Vb) 또는 이의 염이다:
Figure pct00031
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 실시형태에서, 화합물은 하기 화학식 (VI) 또는 이의 염이다:
Figure pct00032
식 중, Y, X 및 R 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 화학식 (VI)의 화합물은 하기 화학식 (VIa) 또는 이의 염이다:
Figure pct00033
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 화학식 (VI)의 화합물은 하기 화학식 (VIb) 또는 이의 염이다:
Figure pct00034
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 실시형태에서, L이 -CH2-CH(NH2)-인 경우, 화합물은 하기 화학식 (VII) 또는 이의 염이다:
Figure pct00035
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다. 화학식 (VII)의 화합물일 양상에서, L의 NH2기를 보유하는 탄소는 S 입체구조이다. 화학식 (VII)의 화합물일 양상에서, L의 NH2기를 보유하는 탄소는 R 입체구조이다.
일부 실시형태에서, 화학식 (VII)의 화합물은 하기 화학식 (VIIa) 또는 이의 염이다:
Figure pct00036
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다. 화학식 (VIIa)의 화합물일 양상에서, L의 NH2기를 보유하는 탄소는 S 입체구조이다. 화학식 (VIIa)의 화합물일 양상에서, L의 NH2기를 보유하는 탄소는 R 입체구조이다.
일부 실시형태에서, 화학식 (VII)의 화합물은 하기 화학식 (VIIb) 또는 이의 염이다:
Figure pct00037
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다. 화학식 (VIIb)의 화합물일 양상에서, L의 NH2기를 보유하는 탄소는 S 입체구조이다. 화학식 (VIIb)의 화합물일 양상에서, L의 NH2기를 보유하는 탄소는 R 입체구조이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 실시형태에서, L이 -CH(CH3)-CH(NH2)-인 경우, 화합물은 하기 화학식 (VIII) 또는 이의 염이다:
Figure pct00038
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다. 화학식 (VIII)의 화합물일 양상에서, L의 NH2기를 보유하는 탄소는 S 입체구조이다. 화학식 (VIII)의 화합물일 양상에서, L의 NH2기를 보유하는 탄소는 R 입체구조이다. 화학식 (VIII)의 화합물일 양상에서, L의 메틸기를 보유하는 탄소는 S 입체구조이다. 화학식 (VIII)의 화합물일 양상에서, L의 메틸기를 보유하는 탄소는 R 입체구조이다.
일부 실시형태에서, 화학식 (VIII)의 화합물은 하기 화학식 (VIIIa) 또는 이의 염이다:
Figure pct00039
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다. 화학식 (VIIIa)의 화합물일 양상에서, L의 NH2기를 보유하는 탄소는 S 입체구조이다. 화학식 (VIIIa)의 화합물일 양상에서, L의 NH2기를 보유하는 탄소는 R 입체구조이다. 화학식 (VIIIa)의 화합물일 양상에서, L의 메틸기를 보유하는 탄소는 S 입체구조이다. 화학식 (VIIIa)의 화합물일 양상에서, L의 메틸기를 보유하는 탄소는 R 입체구조이다.
일부 실시형태에서, 화학식 (VIIIb)의 화합물은 하기 화학식 (VIIIa) 또는 이의 염이다:
Figure pct00040
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다. 화학식 (VIIIb)의 화합물일 양상에서, L의 NH2기를 보유하는 탄소는 S 입체구조이다. 화학식 (VIIIb)의 화합물일 양상에서, L의 NH2기를 보유하는 탄소는 R 입체구조이다. 화학식 (VIIIb)의 화합물일 양상에서, L의 메틸기를 보유하는 탄소는 S 입체구조이다. 화학식 (VIIIb)의 화합물일 양상에서, L의 메틸기를 보유하는 탄소는 R 입체구조이다. 화학식 (II)의 화합물의 일부 실시형태에서, 화합물은 하기 화학식 (IX) 또는 이의 염이다:
Figure pct00041
식 중, Y, X 및 R 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다. 화학식 (IX)의 화합물의 일 양상에서, 1,3-사이클로부틸렌은 시스 이성질체이다. 화학식 (IX)의 화합물의 일 양상에서, 1,3-사이클로부틸렌은 트랜스 이성질체이다.
일부 실시형태에서, 화학식 (IX)의 화합물은 하기 화학식 (IXa) 또는 이의 염이다:
Figure pct00042
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다. 화학식 (IXa)의 화합물의 일 양상에서, 1,3-사이클로부틸렌은 시스 이성질체이다. 화학식 (IXa)의 화합물의 일 양상에서, 1,3-사이클로부틸렌은 트랜스 이성질체이다.
일부 실시형태에서, 화학식 (IX)의 화합물은 하기 화학식 (IXb) 또는 이의 염이다:
Figure pct00043
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다. 화학식 (IXb)의 화합물의 일 양상에서, 1,3-사이클로부틸렌은 시스 이성질체이다. 화학식 (IXb)의 화합물의 일 양상에서, 1,3-사이클로부틸렌은 트랜스 이성질체이다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 실시형태에서, L이 -NH-CH2-인 경우, 화합물은 하기 화학식 (X) 또는 이의 염이다:
Figure pct00044
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 화학식 (X)의 화합물은 하기 화학식 (Xa) 또는 이의 염이다:
Figure pct00045
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 화학식 (X)의 화합물은 하기 화학식 (Xb) 또는 이의 염이다:
Figure pct00046
식 중, Y, X 및 R은 화학식 (I)에 대해서 정의된 바와 같다.
일 변경에서 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염이 제공되며, 식 중, X는 -C(=O)-, -O- 또는 -CH(OH)-이다. 또 다른 변경에서 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염이 제공되며, 식 중, X는 -S-, -S(=O) 또는 -S(=O)2-이다. 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염의 일부 실시형태에서, X는 -C(=O)-이다. 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염의 다른 실시형태에서, X는 -O-이다. X의 모든 변경은 본 명세서에서 임의의 적용 가능한 화학식, 예컨대, 화학식 Ia, Ib, II, IIa, IIb, III, IIIa, IIIb, IV, IVa, IVb, V, Va, Vb, VI, VIa, VIb, VII, VIIa, VIIb, VIII, VIIIa 및 VIIIb에 동일하게 적용된다.
화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염의 일부 실시형태에서, L은
Figure pct00047
이다. 특별한 이러한 실시형태에서, Ra는 H이고, 존재하는 경우 R1, R2, R3 및 R4는 각각 H이다. 일 실시형태에서, L은
Figure pct00048
이고, X는 -C=O이다. 또 다른 실시형태에서, L은
Figure pct00049
이고, X는 -C=O이고, p는 0이다.
일부 실시형태에서, L은
Figure pct00050
이다. 특별한 일 변경에서, R1 및 R2는 동일한 탄소 원자에 부착된다. 또 다른 특별한 변경에서, R1 및 R2는 상이한 탄소 원자에 부착된다.
일부 실시형태에서, L은 -N(Ra)-CR1R2-이다(즉, p는 0이다). 특별한 일 변경에서, L은 -NH-CR1R2-이다. 또 다른 특별한 변경에서, L은 -NH-CH2-이다. 또 다른 특별한 변경에서, L은 -NH-CH(CH3)-이다. 또 다른 특별한 변경에서, L은 -NH-CR1R2-이고, 식 중, R1과 R2는 이들이 부착되는 탄소 원자 또는 원자들과 함께 취해져서 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌(예를 들어, 사이클로프로필렌)을 형성한다.
일부 실시형태에서, L은 -N(Ra)-(CR1R2)3-이다(즉, p는 0이다). 특별한 일 변경에서, L은 -NH-(CR1R2)3-이다. 또 다른 특별한 변경에서, L은 -NH-(CH2)3-이다. 또 다른 특별한 변경에서, L은 -NH-(CR1R2)3-이고, 식 중, 2개의 비-인접 탄소로부터의 R1과 R2는 이들이 부착되는 탄소 원자 및 사이 탄소와 함께 취해져서 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌(예를 들어, 1,3-사이클로부틸렌)을 형성한다.
화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염의 다른 실시형태에서, L은
Figure pct00051
이다. 이러한 일 실시형태에서, X는 -C=O이다. 또 다른 이러한 실시형태에서, X는 -O-이다. 추가 이러한 실시형태에서, X는 -CH(OH)-이다. 추가의 또 다른 이러한 실시형태에서, X는 -S-이다. 추가의 또 다른 이러한 실시형태에서, X는 -S(=O)-이다. 추가의 또 다른 이러한 실시형태에서, X는 -S(=O)2이다. 이러한 실시형태의 일 양상에서, r은 1이다. 이러한 실시형태의 또 다른 양상에서, r은 2이다. 이러한 실시형태의 추가의 또 다른 양상에서, r은 3이다. 제공된 임의의 실시형태에서, L이
Figure pct00052
인 경우, 일 변경에서, Rb 및 Rc는 둘 다 H이다. 제공된 임의의 실시형태에서, L이
Figure pct00053
인 경우, 또 다른 변경에서, Rb 및 Rc는 둘 다 H이고, r은 1이고, R5는 H이고, R6은 C1-C6 알킬, 예컨대, 메틸이다.
이들 실시형태 중 일부에서, L은 -CR5R6-CH(NRbRc)-이다(즉, r은 1이다). 특별한 일 변경에서, L은 -CH(R5)-CH(NH2)-이고, 이것은 R5가 수소 또는 C1-C6 알킬인 양상을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 특별한 일 변경에서, L은 -CH2-CH(NH2)-이다. 또 다른 특별한 변경에서, L은 -CH(CH3)-CH(NH2)-이다.
화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염의 일부 실시형태에서, L은
Figure pct00054
이다. 이러한 일 실시형태에서, X는 -C=O이다. 또 다른 이러한 실시형태에서, X는 -O-이다. 추가 이러한 실시형태에서, X는 -S-이다. 추가의 또 다른 이러한 실시형태에서, X는 -S(=O)-이다. 추가의 또 다른 이러한 실시형태에서, X는 -S(=O)2이다. 특별한 변경에서, L은
Figure pct00055
이고, u는 0이다. 또 다른 변경에서, L은
Figure pct00056
이고, u는 0이고, X는 -C=O, -O-, -S-, -S(=O)- 및 -S(=O)2로 이루어진 군으로부터 선택된다. 임의의 실시형태 또는 변경에서, L이
Figure pct00057
인 경우, 일 양상에서, s는 1이고, t는 1이다.
일 변경에서, L은
Figure pct00058
이다. 또 다른 특별한 변경에서, L은
Figure pct00059
이다. 일 변경에서, L은
Figure pct00060
이고, X는 -C=O, -O-, -S-, -S(=O)- 및 -S(=O)2로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일 변경에서, 본 명세서에는 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염이 제공되며, 식 중, -X-L- 모이어티는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:
Figure pct00061
Figure pct00062
식 중, *은 Y 모이어티에 대한 부착점을 나타내고, **은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타낸다.
또 다른 변경에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염이 제공되며, 식 중, -X-L- 모이어티는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:
Figure pct00063
식 중, *은 Y 모이어티에 대한 부착점을 나타내고, **은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타낸다.
일 양상에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공되며, 여기서 화합물은 하기 특징부 중 임의의 하나 이상을 갖는다:
(i) X는 -C(=O)-, -O- 또는 -CH(OH)-임;
(ii) L은,
(a) -NH-(CR1R2)q-(식 중, R1 및 R2는 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소 또는 C1-C2 알킬이거나, 또는 동일한 탄소 원자에 부착되는 R1과 R2기는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 3- 내지 5-원의 사이클로알킬렌을 형성하거나, 또는 2개의 상이한 탄소 원자에 부착되는 R1과 R2기는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 3- 내지 5-원의 사이클로알킬렌을 형성함(이러한 -NH-(CR1R2)q- 모이어티의 예는
Figure pct00064
Figure pct00065
를 포함함)
(b) -CR5R6-CH(NH2)-(식 중, R5 및 R6은 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로 수소 또는 C1-C2 알킬임(이러한 -CR5R6-CH(NH2)- 모이어티의 예는
Figure pct00066
및
Figure pct00067
를 포함함); 또는
(c)
Figure pct00068
(식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고, **은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타냄)임;
(iii) Y는,
(a) R11에 의해서 선택적으로 치환된 C6-C9 아릴, 예컨대, 비치환된 2,3-다이하이드로-1H-인덴-2-일 또는 적어도 하나의 R11에 의해서 치환된 페닐 또는 나프틸(각각의 R11이 할로겐, 트라이할로메틸, 사이아노 및 -C(=O)NH2로부터 독립적으로 선택되는 경우를 포함하지만 이들로 제한되지 않음);
(b) R12에 의해서 선택적으로 치환된 6- 내지 10-원의 헤테로아릴, 예컨대, R12에 의해서 선택적으로 치환된 피리딘일, 피리미딘일, 피리딘-2(1H)-온일, 퀴놀린-6-일(식 중, R12는 페닐 또는 -OH임); 또는
(c) R13에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 예컨대, 적어도 하나의 R13에 의해서 치환된 2H-피란-2-온일, 아이소인돌린일, 피페리딘-2-온일 및 피페리딘일임.
이러한 변경의 일 양상에서, (i), (ii)(a) 및 (iii)(a)가 적용된다. 또 다른 변경에서, (i), (ii)(a) 및 (iii)(b)가 적용된다. 또 다른 변경에서, (i), (ii)(a) 및 (iii)(c)가 적용된다. 또 다른 변경에서, (i), (ii)(b) 및 (iii)(a)가 적용된다. 또 다른 변경에서, (i), (ii)(b) 및 (iii)(b)가 적용된다. 또 다른 변경에서, (i), (ii)(b) 및 (iii)(c)가 적용된다. 또 다른 변경에서, (i), (ii)(c) 및 (iii)(a)가 적용된다. 또 다른 변경에서, (i), (ii)(c) 및 (iii)(b)가 적용된다. 또 다른 변경에서, (i), (ii)(c) 및 (iii)(c)가 적용된다.
L 또는 X와 L의 조합의 모든 변경은 본 명세서에서 임의의 적용 가능한 화학식, 예컨대, 화학식 Ia, Ib, II, IIa, IIb, III, IIIa, IIIb, IV, IVa, IVb, V, Va, Vb, VI, VIa, VIb, VII, VIIa, VIIb, VIII, VIIIa 및 VIIIb에 동일하게 적용된다.
일부 실시형태에서, Y는 R11에 의해서 선택적으로 치환된 C6-C9 아릴, R12에 의해서 선택적으로 치환된 6- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 R13에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이되, Y가 페닐 또는 나프틸인 경우, Y의 페닐 또는 나프틸은 적어도 하나의 R11에 의해서 치환되고, L이 *-NH-CH2-**이고, Y가 선택적으로 치환된 퀴놀린일인 경우, Y의 선택적으로 치환된 퀴놀린일은 2-, 3-, 5-, 6-, 7- 또는 8-위치에서 모 구조에 연결된다.
일부 실시형태에서, Y는 R11에 의해서 선택적으로 치환된 C6-C9 아릴이다. 일 양상에서, Y는 R11에 의해서 선택적으로 치환된 페닐이다. 일 변경에서, Y는 동일하거나 상이할 수 있는 1 내지 3개의 R11 모이어티로 치환된다. 일부 실시형태에서, Y는 할로겐, 트라이할로메틸, 사이아노 및 -C(=O)NH2로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 R11에 의해서 치환된 페닐이다. 또 다른 특정 실시형태에서, Y는 일치환된 페닐, 예컨대, R11에 의해서 C4 위치에서 치환된 페닐이다. 특별한 변경에서, Y는 C4 위치에서 사이아노 또는 -C(=O)NH2에 의해서 치환된 페닐이다. 또 다른 특정 실시형태에서, Y는 이치환된 페닐, 예컨대, C2 위치와 C4 위치 또는 C3 위치와 C4 위치에서 동일하거나 상이할 수 있는 2개의 R11기에 의해서 치환된 페닐이다. 일 양상에서, Y의 페닐은 사이아노, -C(=O)NH2, 할로겐 및 트라이할로메틸로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 또는 2개의 R11기로 치환된다. 또 다른 실시형태에서, Y는 선택적으로 치환된 2,3-다이하이드로-1H-인덴-2-일이다.
일부 실시형태에서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환된 6- 내지 10-원의 헤테로아릴이되, L이 *-NH-CH2-**이고, Y가 선택적으로 치환된 퀴놀린일인 경우, Y의 선택적으로 치환된 퀴놀린일은 2-, 3-, 5-, 6-, 7- 또는 8-위치에서 모 구조에 연결된다. 또 다른 실시형태에서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환된 퀴놀린-6-일이다. 또 다른 실시형태에서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환된 퀴놀린-4-일이고, L은 *-CH2-CH(NH2)-** 또는 *-CH(CH3)-CH(NH2)-**이다. 또 다른 실시형태에서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환된 피리딘-4-일이다. 또 다른 실시형태에서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환되고, C6-C14 아릴 또는 C5-C10 사이클로알킬에 선택적으로 융합된 피리미딘-4-일이되, C6-C14 아릴 또는 C5-C10 사이클로알킬은 R12에 의해서 선택적으로 치환된다.
일부 실시형태에서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환된 퀴놀린-6-일이되, R12는 -OH 또는 페닐이다.
일부 실시형태에서, Y는 R12에 의해서 치환된 피리딘-3-일이다. 일 변경에서, Y는 R12에 의해서 치환된 피리딘-3-일이되, R12는 선택적으로 치환된 C6-C14 아릴 또는 -OR14로부터 독립적으로 선택된다. 일 변경에서, Y는 C2 위치에서 R12에 의해서 치환된 피리딘-3-일이되, R12는 선택적으로 치환된 C6-C14 아릴이다. 일 변경에서, Y는 C6 위치에서 R12에 의해서 치환된 피리딘-3-일이되, R12는 -OR14이다. 일 변경에서, Y는 C2에서 선택적으로 치환된 C6-C14 아릴에 의해서 치환되고, C6 위치에서 -OR14에 의해서 치환된 피리딘-3-일이다.
일부 실시형태에서, Y는 C3 위치에서 R12에 의해서 치환된 피리딘-4-일이다. 일 변경에서, Y는 C3 위치에서 R12에 의해서 치환된 피리딘-4-일이되, R12는 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬, 선택적으로 치환된 C2-C6 알켄일, 선택적으로 치환된 C3-C8 사이클로알킬, 선택적으로 치환된 C4-C8 사이클로알켄일, OR14, NR15R16, 선택적으로 치환된 피리딘일, 선택적으로 치환된 퀴놀린일, 선택적으로 치환된 인돌릴, 선택적으로 치환된 인다졸릴, 선택적으로 치환된 피리딘-2(1H)-온일, 선택적으로 치환된 페닐 및 선택적으로 치환된 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴로부터 독립적으로 선택된다.
일부 실시형태에서, Y는 C3 위치에서 R12에 의해서 치환된 피리딘-4-일이되, R12는 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환된 피리딘일이다. 또 다른 실시형태에서, Y는 C3 위치에서 R12에 의해서 치환된 피리딘-4-일이되, R12는 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환된 인돌릴이다. 또 다른 실시형태에서, Y는 C3 위치에서 R12에 의해서 치환된 피리딘-4-일이되, R12는 C1-C6 알킬, 할로겐 또는 C1-C6 알콕시에 의해서 선택적으로 치환된 페닐이다. 또 다른 실시형태에서, Y는 C3 위치에서 R12에 의해서 치환된 피리딘-4-일이되, R12는 C1-C6 알킬 또는 -OR14에 의해서 선택적으로 치환된 사이클로프로필이다. 또 다른 실시형태에서, Y는 C3 위치에서 R12에 의해서 치환된 피리딘-4-일이되, R12는 -OR14이고, R14는 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬 또는 선택적으로 치환된 페닐이다.
일 변경에서, Y가 C1-C2 알킬에 의해서 치환된 6-원의 헤테로아릴(예를 들어, 피리딘-4-일)인 경우, C1-C2 알킬은 RL에 의해서 치환되고, RL은 할로겐, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, -OR14, -C(O)R14, 사이아노, 옥소 및 나이트로로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일 변경에서, Y가 C1-C2 알킬에 의해서 치환된 6-원의 헤테로아릴(예를 들어, 피리딘-4-일)인 경우, C1-C2 알킬은 RL에 의해서 치환되고, RL은 할로겐 및 C6-C14 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환되고, C6-C14 아릴 또는 C5-C10 사이클로알킬에 선택적으로 융합된 피리미딘-4-일이되, C6-C14 아릴 또는 C5-C10 사이클로알킬은 R12에 의해서 선택적으로 치환된다. 특정 실시형태에서, Y는 C6-C14 아릴에 융합된 피리미딘-4-일이되, C6-C14 아릴은 R12에 의해서 선택적으로 치환된다. 추가 실시형태에서 Y는 비치환된 퀴나졸린-4-일이다. 또 다른 특정 실시형태에서, Y는 C5-C10 사이클로알킬에 융합된 피리미딘-4-일이되, C5-C10 사이클로알킬은 R12에 의해서 선택적으로 치환된다. 추가 실시형태에서 Y는 6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[d]피리미딘-4-일이다.
일부 실시형태에서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환되고, C6-C14 아릴에 선택적으로 융합된 2H-피란-2-온일이고, C6-C14 아릴은 R12에 의해서 선택적으로 치환된다. 추가 실시형태에서 Y는 C6-C14 아릴에 융합된 2H-피란-2-온-5-일이되, 2H-피란-2-온일 또는 C6-C14 아릴은 R12에 의해서 선택적으로 치환된다. 추가의 또 다른 실시형태에서, Y는 할로겐에 의해서 선택적으로 치환된 1H-아이소크로멘-1-온-4-일이다.
일부 실시형태에서, Y는 B' 또는 이의 호변이성질체이다. 따라서, 일부 실시형태에서, Y는
Figure pct00069
이되, z는 0, 1, 2, 3,4 또는 5이고;
Figure pct00070
는 A'와 B' 간의 호변이성질체 현상을 나타내고; R12와 R13은 임의의 호면이성질체 쌍에 대해서 동일하다고 이해된다. 일부 실시형태에서, Y는 D' 또는 이의 호변이성질체이다. 따라서, 일부 실시형태에서, Y는
Figure pct00071
이되, z는 0, 1, 2, 3,4 또는 5이고;
Figure pct00072
는 C'와 D' 간의 호변이성질체 현상을 나타내고; R12와 R13은 임의의 호면이성질체 쌍에 대해서 동일하다고 이해된다.
일 실시형태에서, Y는
Figure pct00073
로 이루어진 군으로부터 선택된다
일부 실시형태에서 Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환되고, C6-C14 아릴 또는 5- 내지 10-원의 헤테로사이클릴에 선택적으로 융합된 피리딘-2(1H)-온일이되, C6-C14 아릴 또는 5- 내지 10-원의 헤테로사이클릴은, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, R12에 의해서 선택적으로 치환된다. 추가 실시형태에서 Y는 C1-C6 알킬(예를 들어, 메틸) 또는 C6-C14 아릴(예를 들어, 페닐, 본 명세서에서 "Ph"이라고도 지칭됨))에 의해서 선택적으로 치환된 피리딘-2(1H)-온-5-일이다. 추가의 또 다른 실시형태에서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환되고, C6-C14 아릴에 선택적으로 융합된 피리딘-2(1H)-온-5-일이고, C6-C14 아릴은 R12에 의해서 선택적으로 치환된다. 추가 실시형태에서 Y는 R12, 예컨대, 할로겐(예를 들어, 플루오로), C1-C6 알킬(예를 들어, 메틸), C6-C14 아릴(예를 들어, 페닐) 또는 C3-C8 사이클로알킬(예를 들어, 사이클로프로필)에 의해서 선택적으로 치환된 아이소퀴놀린-1(2H)-온-4-일이다. 추가의 또 다른 실시형태에서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환되고, 5- 내지 10-원의 헤테로사이클릴에 선택적으로 융합된 피리딘-2(1H)-온-5-일이고, 5- 내지 10-원의 헤테로사이클릴은 R12에 의해서 선택적으로 치환된다. 추가 실시형태에서 Y는 비치환된 7,8,9,10-테트라하이드로피리도[1,2-a]아제핀-4(6H)-온-1-일이다.
일부 실시형태에서, Y는 R13에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이다. 특정 실시형태에서, Y는 비치환된 아이소인돌린-2-일이다. 또 다른 실시형태에서, Y는 R13, 예컨대, C1-C6 알킬(예를 들어, 에틸) 및 C6-C14 아릴(예를 들어, 페닐)에 의해서 선택적으로 치환된 피페리딘-2-온-5-일이다.
이들 실시형태 중 일부에서, Y는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:
Figure pct00074
Figure pct00075
Figure pct00076
이들 실시형태 중 일부에서, Y는
Figure pct00077
Figure pct00078
로 이루어진 군으로부터 선택된다.
Y의 모든 변경은 본 명세서에서 임의의 적용 가능한 화학식, 예컨대, 화학식 Ia, Ib, II, IIa, IIb, III, IIIa, IIIb, IV, IVa, IVb, V, Va, Vb, VI, VIa, VIb, VII, VIIa, VIIb, VIII, VIIIa 및 VIIIb에 동일하게 적용된다.
또한 본 명세서에서 지칭되는 화합물의 염, 예컨대, 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공된다. 본 발명은 또한 기재된 화합물의 임의의 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체 형태 및 임의의 호변이성질체 또는 다른 형태를 비롯한 입체화학 형태 중 임의의 것 또는 모두를 포함한다.
본 명세서에 기재된 화합물 중 일부는 호변이성질체 형태와 평형으로 존재한다. 예를 들어, 아마이드 A는 B의 호변이성질체 형태이고, 이미드산 B는 A의 호변이성질체 형태이다. 유사하게, 아마이드 C는 D의 호변이성질체 형태이고, 이미드산 D는 C의 호변이성질체 형태이다. 아마이드 A는 이미드산 B의 호변이성질체 형태와 평형으로 존재하고, 아마이드 C는 이미드산 D의 호변이성질체 형태와 평형으로 존재한다. 어느 호변이성질체 형태가 도시되든 간에, 당업자는 화합물이 아마이드 및 이미드산 호변이성질체 둘 다를 포함하는 것으로 이해한다.
Figure pct00079
본 명세서에 상세하게 기재된 바와 같은 화합물은 일 양상에서 정제된 형태로 존재할 수 있고, 정제된 형태의 화합물을 포함하는 조성물은 본 명세서에 상세하게 기재되어 있다. 본 명세서에 상세하게 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 염을 포함하는 조성물, 예컨대, 실질적으로 순수한 화합물의 조성물이 제공된다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 상세하게 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 염을 함유하는 조성물은 실질적으로 순수한 형태로 존재한다. 달리 언급되지 않는 한, "실질적으로 순수한"은 35% 이하의 불순물을 함유하는 조성물을 의도하며, 여기서 불순물은 조성물 또는 이의 염 대부분을 차지하는 화합물 이외의 화합물을 나타낸다. 일부 실시형태에서, 실질적으로 순수한 화합물 또는 이의 염의 조성물이 제공되며, 여기서 조성물은 25%, 20%, 15%, 10% 또는 5% 이하의 불순물을 함유한다. 일부 실시형태에서, 실질적으로 순수한 화합물 또는 이의 염의 조성물이 제공되며, 여기서 조성물은 3%, 2%, 1% 또는 0.5% 이하의 불순물을 함유한다.
대표적인 화합물을 표 1에 열거한다.
Figure pct00080
Figure pct00081
Figure pct00082
Figure pct00083
Figure pct00084
Figure pct00085
Figure pct00086
Figure pct00087
Figure pct00088
Figure pct00089
추가의 대표적인 화합물을 표 1-A에 열거한다.
[표 1-A]
Figure pct00090
Figure pct00091
표 1 또는 표 1-A에 도시된 특정 화합물은 호변이성질체로 존재한다. 어느 호변이성질체가 도시되든 관계없이, 모든 호변이성질체 형태가 의도된다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에는 표 1에 기재된 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 이들 중 임의의 것의 염 및 이들의 용도가 제공된다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에는 표 1에 기재된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공된다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에는 표 1-A에 기재된 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 이들 중 임의의 것의 염 및 이들의 용도가 제공된다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에는 표 1-A에 기재된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공된다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에는 표 1 또는 표 1-A에 기재된 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 이들 중 임의의 것의 염 및 이들의 용도가 제공된다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에는 표 1 또는 표 1-A에 기재된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에는 화합물 번호 1 내지129로부터 선택된 화합물 또는 이의 호변이성질체 또는 이들 중 임의의 것의 염 및 이들의 용도가 제공된다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에는 화합물 번호 1 내지 129로부터 선택된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.
일부 실시형태에서, 화합물 번호 1 내지 129로부터 선택된 화합물 또는 이의 입체이성질체(이의 2개 이상의 입체이성질체의 혼합물 포함) 또는 이의 염이 제공된다. 일부 실시형태에서, 화합물은 화합물 번호 1 내지 129 또는 이의 입체이성질체로부터 선택된 화합물의 염이다.
일 변경에서, 본 명세서에 상세하게 기재된 화합물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-사이클로프로필-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)퀴놀린-6-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[d]피리미딘-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2,3-다이하이드로-1H-인덴-2-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소인돌린-2-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-메틸-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-하이드록시퀴놀린-6-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)테레프탈아마이드;
4-사이아노-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(트라이플루오로메틸)벤즈아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-페닐아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-5-페닐-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드;
4-사이아노-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-플루오로벤즈아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드;
4-사이아노-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)벤즈아마이드;
4-사이아노-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-(트라이플루오로메틸)벤즈아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-4-페닐퀴놀린-6-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-에틸-6-옥소-2-페닐피페리딘-3-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-4-옥소-4,6,7,8,9,10-헥사하이드로피리도[1,2-a]아제핀-1-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-옥소-1H-아이소크로멘-4-카복스아마이드;
N-(1-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-카보닐)사이클로프로필)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-사이클로프로필아이소니코틴아마이드;
N-(1-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-1-옥소프로판-2-일)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-7-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-플루오로-1-옥소-1H-아이소크로멘-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-4-페닐-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-2-페닐-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-메틸-6-옥소-2-페닐-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드;
4,4-다이플루오로-1-(1-(1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카보닐)아제티딘-3-카보닐)피롤리딘-2-카보나이트릴;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(다이메틸아미노)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(다이에틸아미노)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(4-플루오로페녹시)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-메톡시아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(트라이플루오로메틸)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-아이소프로필아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-바이닐아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(피롤리딘-1-일)아이소니코틴아마이드;
N-[2-[2-사이아노-4,4-다이플루오로-피롤리딘-1-일]-2-옥소-에틸]-3-(1-피페리딜)피리딘-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(사이클로헥스-1-엔-1-일)아이소니코틴아마이드;
3-(벤조[d][1,3]다이옥솔-5-일)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(2,3-다이하이드로벤조[b][1,4]다이옥신-6-일)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(2,6-다이플루오로페닐)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(3,5-다이플루오로페닐)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2'-메틸-[3,4'-바이피리딘]-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-메틸-1H-인돌-5-일)아이소니코틴아마이드;
3-벤질-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(퀴놀린-4-일)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(4-플루오로페닐)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(2,4-다이플루오로페닐)아이소니코틴아마이드;
3-(5-클로로-2-플루오로페닐)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(2-메톡시페닐)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(3-메톡시페닐)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(4-메톡시페닐)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-[2,3'-바이피리딘]-4'-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-[3,3'-바이피리딘]-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-[3,4'-바이피리딘]-4-카복스아마이드;
3-(2-(tert-부틸)페닐)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(2-아이소프로필페닐)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(2-에틸페닐)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(o-톨릴)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1H-인돌-4-일)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-메틸-1H-인돌-4-일)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)퀴나졸린-4-카복스아마이드;
1-(2-아미노-4-하이드록시-4-(1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-일)부탄오일)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴;
4,4-다이플루오로-1-(O-(1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-일)세릴)피롤리딘-2-카보나이트릴;
1-(2-아미노-4-옥소-4-(퀴놀린-4-일)부탄오일)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴;
1-(2-아미노-4-하이드록시-4-(퀴놀린-4-일)부탄오일)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴;
4,4-다이플루오로-1-(O-(퀴놀린-4-일)세릴)피롤리딘-2-카보나이트릴;
1-(2-아미노-4-옥소-4-(1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-일)부탄오일)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴;
1-(2-아미노-4-하이드록시-3-메틸-4-(1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-일)부탄오일)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴;
4,4-다이플루오로-1-(O-(1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-일)트레오닐)피롤리딘-2-카보나이트릴;
1-(2-아미노-3-메틸-4-옥소-4-(퀴놀린-4-일)부탄오일)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴;
1-(2-아미노-4-하이드록시-3-메틸-4-(퀴놀린-4-일)부탄오일)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴;
4,4-다이플루오로-1-(O-(퀴놀린-4-일)트레오닐)피롤리딘-2-카보나이트릴;
1-(2-아미노-3-메틸-4-옥소-4-(1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-일)부탄오일)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-4-옥소-3,4,4a,8a-테트라하이드로프탈라진-1-카복스아마이드;
N-[2-[2-사이아노-4,4-다이플루오로-피롤리딘-1-일]-2-옥소-에틸]-3-메틸-4-옥소-프탈라진-1-카복스아마이드;
N-(4-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-4-옥소부틸)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-5-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)퓨로[2,3-c]피리딘-2-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)피라졸로[1,5-a]피리딘-5-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-메톡시-2-페닐니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-메틸-1H-인다졸-4-일)아이소니코틴아마이드;
N-[2-[2-사이아노-4,4-다이플루오로-피롤리딘-1-일]-2-옥소-에틸]-3-몰폴리노-피리딘-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-메틸사이클로프로필)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(2-하이드록시사이클로프로필)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(피페리딘-4-일)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[b]피리딘-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-5,6,7,8-테트라하이드로퀴놀린-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)피롤로[1,2-a]피리미딘-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(트라이플루오로메톡시)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-페녹시아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로-2-메틸피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6'-옥소-1',6'-다이하이드로-[3,3'-바이피리딘]-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-5-사이클로프로필-6-옥소-5,6-다이하이드로-1,5-나프티리딘-4-카복스아마이드;
N-(3-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-카보닐)사이클로부틸)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(페닐아미노)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(사이클로헥스-2-엔-1-일)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(인돌린-5-일)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1',2',3',6'-테트라하이드로-[3,4'-바이피리딘]-4-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(5-메틸퓨란-2-일)아이소니코틴아마이드;
6'-아미노-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-[3,3'-바이피리딘]-4-카복스아마이드;
3-(6-클로로나프탈렌-2-일)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-4-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(3,5-다이메틸아이속사졸-4-일)아이소니코틴아마이드;
3-(4-클로로-3-플루오로페닐)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드;
3-(3-(tert-부틸)페닐)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-에톡시아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-((4-플루오로페닐)아미노)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(페닐티오)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-4-(퀴놀린-4-일)-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(피리딘-3-일아미노)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(피페리딘-4-일아미노)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(퀴놀린-4-일아미노)아이소니코틴아마이드;
3-(4-아미노피페리딘-1-일)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드;
4-벤질-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-페닐바이닐)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-페닐에틸)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-스티릴아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-펜에틸아이소니코틴아마이드;
N-(1-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-1-옥소프로판-2-일)-3-페닐아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(2-페닐프로프-1-엔-1-일)아이소니코틴아마이드;
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(2-페닐알릴)아이소니코틴아마이드, 및
N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(2-페닐프로필)아이소니코틴아마이드.
당업자에게 널리 이해되는 바와 같이, 본 명세서에 도시된 화합물은, 염이 도시되지 않더라도 염으로 존재할 수 있고, 본 개시내용이 본 명세서에 도시된 화합물의 모든 염 및 용매화물, 뿐만 아니라 화합물의 비-염 및 비-용매화물 형태를 포함함이 이해된다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 화합물의 염은 약제학적으로 허용 가능한 염이다. 하나 이상의 3차 아민 모이어티가 화합물에 존재하는 경우, N-옥사이드가 또한 제공되고, 기재된다.
호변이성질체 형태가 본 명세서에 기재된 화합물 중 임의의 것에 대해서 존재할 수 있는 경우, 각각 및 모든 호변이성질체 형태는, 호변이성질체 형태 중 단지 하나 또는 일부가 명확하게 도시될 수 있다. 구체적으로 도시된 호변이성질체 형태는 용액 중에서 또는 본 명세서에 기재된 방법에 따라서 사용되는 경우 우세한 형태로 존재하거나 존재하지 않을 수 있다.
본 개시내용은 또한 기재된 화합물, 예컨대, 표 1의 화합물의 임의의 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체 형태를 비롯한 입체화학 형태 중 임의의 것 또는 모두를 포함한다. 구조 또는 명칭은 도시된 화합물의 모든 가능한 입체이성질체를 포함하도록 의도된다. 화합물의 모든 형태, 예컨대, 화합물의 결정 형태 또는 비결정 형태가 또한 본 발명에 포함된다. 본 발명의 화합물을 포함하는 조성물, 예컨대, 구체적인 입체화학 형태를 비롯한 실질적으로 순수한 화합물의 조성물 또는 예컨대, 라세미 또는 비-라세미 혼합물의 2종 이상의 입체화학 형태를 비롯한 임의의 비의 본 발명의 화합물의 혼합물을 포함하는 조성물이 또한 의도된다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 화합물의 동위원소-표지된 및/또는 동위원소-풍부한 형태를 의도한다. 본 명세서에서 화합물은 이러한 화합물을 구성하는 원자 중 하나 이상에서 비자연 비율의 원자 동위원소를 함유할 수 있다. 일부 실시형태에서, 화합물은 동위원소-표지되며, 예컨대, 본 명세서에 기재된 화학식 (I) 또는 이의 변경의 동위원소-표지된 화합물이며, 여기서 하나 이상의 원자의 분율은 동일한 원소의 동위원소에 의해서 대체된다. 본 발명의 화합물에 혼입될 수 있는 예시적인 동위원소는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 염소의 동위원소, 예컨대, 2H, 3H, 11C, 13C, 14C 13N, 15O, 17O, 32P, 35S, 18F, 36Cl을 포함한다. 특정 동위원소 표지된 화합물(예를 들어 3H 및 14C)이 화합물 또는 물질 조직 분포 연구에 유용하다. 더 무거운 동위원소, 예컨대, 중수소(2H)의 혼입은 더 큰 대사 안정성, 예를 들어, 생체내 반감기 증가 또는 투여량 요건 감소로부터 야기되는 특정 치료 이점을 제공할 수 있고, 따라서 일부 예에서 바람직할 수 있다.
본 발명의 동위원소-표지된 화합물은 일반적으로 당업계에 공지된 표준 방법 및 기술에 의해서 또는 상응하는 비-표지된 시약을 대신에서 적절한 동위원소-표지된 시약을 대체하는 첨부된 실시예에 기재된 것과 유사한 절차에 의해서 제조될 수 있다.
본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 염 또는 용매화물을 적합한 용기에 포함하는 제조 물품이 제공된다. 용기는 바이알, 자(jar), 앰플, 사전 충전(preloaded) 주사기, i.v. 백 등일 수 있다.
바람직하게는, 본 명세서에 상세하게 기재된 화합물은 경구에 의해서 생체 이용성이다. 그러나, 화합물은 또한 비경구(예를 들어, 정맥내) 투여를 위해서 제형화될 수 있다.
하나 또는 몇몇의 본 명세서에 기재된 화합물은 활성 성분으로서 화합물 또는 화합물들을 당업계에 공지된 약리학적으로 허용 가능한 담체와 조합함으로써 의약의 제조에 사용될 수 있다. 의약의 치료 형태에 따라서, 담체는 다양한 형태로 존재할 수 있다. 일 변경에서, 의약의 제조는 본 명세서에 개시된 방법 중 임의의 것에서, 예를 들어, 암의 치료를 위해서 사용하기 위한 것이다.
일반적인 합성 방법
본 발명의 화합물은 하기에 일반적으로 기재되고, 하기 실시예(예컨대, 하기 실시예에 제공된 반응식)에 보다 구체적으로 기재된 바와 같은 다수의 방법에 의해서 제조될 수 있다. 하기 방법 설명에서, 도시된 화학식에서 사용되는 경우 상징은 본 명세서에 기재된 화학식과 관련하여 상기에 기재된 것을 나타내도록 이해되어야 한다.
화합물의 특별한 거울상이성질체를 획득하는 것이 바람직한 경우, 이는 거울상이성질체를 분리 또는 분할하기 위한 임의의 적합한 종래의 절차를 사용하여 거울상이성질체의 상응하는 혼합물로부터 달성될 수 있다. 따라서, 예를 들어, 부분입체이성질체 유도체는 거울상이성질체의 혼합물, 예를 들어, 라세미체, 및 적절한 카이럴 화합물의 반응에 의해서 제조될 수 있다. 이어서, 부분입체이성질체를 임의의 편리한 수단에 의해서, 예를 들어, 결정화에 의해서 분리할 수 있고, 목적하는 거울상이성질체를 회수할 수 있다. 또 다른 분할 방법에서, 라세미체는 카이럴 고성능 액체 크로마토그래피를 사용하여 분리될 수 있다. 대안적으로, 바람직한 경우 특별한 거울상이성질체는 기재된 방법 중 하나에서 적절한 카이럴 중간체를 사용함으로써 획득될 수 있다.
화합물의 특별한 이성질체를 획득하거나 달리 반응 생성물을 정제시키는 것이 바람직한 경우 크로마토그래피, 재결정화 및 다른 종래의 분리 절차를 또한 중간체 또는 최종 생성물과 함께 사용할 수 있다.
본 명세서에 제공된 화합물의 용매화물 또는 이의 염이 또한 고려된다. 용매화물은 화학량론적 또는 비-화학량론적 양의 용매를 함유하며, 종종 결정화 방법 동안 형성된다. 수화물은 용매가 물인 경우 형성되며, 용매가 알코올인 경우 알코올화물이 형성된다.
화학식 (I-1)의 화합물은 하기 반응식 1에 따라서 제조될 수 있고, 여기서 R, R1, R2, Y, m, n 및 q는 화학식 (I) 또는 본 명세서에 상세하게 기재된 이의 임의의 변경에 대해서 본 명세서에 상세하게 기재된 바와 같고; Z 및 Z1은 이탈기이고; PG1은 아민 보호기이다.
반응식 1
Figure pct00092
화학식 (I-1a)의 화합물과 화학식 (I-1b)의 화합물을 커플링제(예를 들어, HATU, HOBt, 또는 PyBOP)의 존재 하에서 커플링시켜 화학식 (I-1c)의 화합물을 수득한다. 화학식 (I-1c)의 화합물의 아민을 산성 조건(예를 들어, HCl 또는 pTsOH) 하에서 탈보호시켜 화학식 (I-1d)의 화합물을 염으로서 제공하고, 이것을 커플링제(예를 들어, HATU, HOBt 또는 PyBOP)의 존재 하에서 카복실산과 커플링시켜 화학식 (1-1)의 화합물을 수득한다.
반응식 1의 제조 방법의 예시적인 실시형태를 반응식 1a에 도시한다.
반응식 1a
Figure pct00093
일부 실시형태에서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환된 6- 내지 10-원의 헤테로아릴이다. 추가 실시형태에서 Y는 3-위치에서 R12에 의해서 치환된 피리딘-4-일이고, 여기서
Figure pct00094
는 화학식 (II-1)의 화합물로 표현된다.
반응식 2
Figure pct00095
상기 반응식은 적절한 시약 및 출발 물질의 선택에 의해서 본 발명의 다양한 화합물에 도달하도록 변형될 수 있다. 보호기 및 이의 사용의 일반적인 설명에 대해서는, 문헌[P.G.M. Wuts and T.W. Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis 4th edition, Wiley-Interscience, New York, 2006]을 참고하기 바란다.
약제학적 조성물 및 제형
본 명세서에 상세하기 기재된 화합물 중 임의의 것의 약제학적 조성물이 본 발명에 포함된다. 따라서, 본 개시내용은 본 명세서에 상세하게 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 염 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 일 양상에서, 약제학적으로 허용 가능한 염은 산 부가염, 예컨대, 무기산 또는 유기산으로 형성된 염이다. 약제학적 조성물은 경구, 협측, 비경구, 비강, 국소 또는 직장 투여에 적합한 형태 또는 흡입에 의한 투여에 적합한 형태를 가질 수 있다.
본 명세서에 상세하게 기재된 바와 같은 화합물은 일 양상에서 정제된 형태로 존재할 수 있고, 정제된 형태의 화합물을 포함하는 조성물은 본 명세서에 상세하게 기재되어 있다. 본 명세서에 상세하게 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 염을 포함하는 조성물, 예컨대, 실질적으로 순수한 화합물의 조성물이 제공된다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 상세하게 기재된 바와 같은 화합물 또는 이의 염을 함유하는 조성물은 실질적으로 순수한 형태로 존재한다.
일 변경에서, 본 명세서에서 화합물은 개체에게 투여하기 위해서 제조된 합성 화합물이다. 또 다른 변경에서, 실질적으로 순수한 형태의 화합물을 함유하는 조성물이 제공된다. 또 다른 변경에서, 본 개시내용은 본 명세서에 상세하게 기재된 바와 같은 화합물 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 또 다른 변경에서, 화합물의 투여 방법이 제공된다. 정제된 형태, 약제학적 조성물 및 화합물의 투여 방법은 본 명세서에 상세하게 기재된 임의의 화합물 또는 이의 형태에 적합하다.
본 명세서에 상세하게 기재된 화합물 또는 이의 염은 임의의 사용 가능한 전달 경로, 예컨대, 경구, 점막(예를 들어, 비강, 설하, 질내, 협측 또는 직장), 비경구(예를 들어, 근육내, 피하 또는 정맥내), 국소 또는 경피 전달 형태를 위해서 제형화될 수 있다. 화합물 또는 이의 염은 정제, 당의정, 캡슐(예컨대, 경질 젤라틴 캡슐 또는 연질 탄성 젤라틴 캡슐), 샤쉐(cachet), 트로치(troche), 로젠지(lozenge), 검, 분산액, 좌제, 연고, 습포제(cataplasm)(찜질제), 페이스트, 분말, 드레싱, 크림, 용액, 패치, 에어로졸(예를 들어, 비강 스프레이 또는 흡입제), 젤, 현탁액(예를 들어, 수성 또는 비수성 액체 현탁액, 수중유 에멀션 또는 유중수 액체 에멀션), 용액 또는 엘릭시르를 포함하지만 이들로 제한되지 않는 전달 형태를 제공하기에 적합한 담체와 함께 제형화될 수 있다.
본 명세서에 기재된 하나의 또는 몇몇 화합물 또는 이의 염은 활성 성분으로서의 화합물 또는 화합물들 또는 이의 염을 약제학적으로 허용 가능한 담체, 예컨대, 상기에 언급된 것과 조합함으로써, 제형, 예컨대, 약제학적 제형의 제조에 사용될 수 있다. 시스템의 치료 형태(예를 들어, 경피 패치 대 경구 정제)에 따라서, 담체는 다양한 형태로 존재할 수 있다. 또한, 약제학적 제형은 보존제, 용해제, 안정화제, 재습윤제, 유화제(emulgator), 감미료, 염료, 조정제 및 삼투압의 조정을 위한 염, 완충제, 코팅제 또는 항산화제를 함유할 수 있다. 화합물을 포함하는 제형은 또한 유용한 치료 특성을 갖는 다른 물질을 함유할 수 있다. 약제학적 제형은 공지된 약제학적 방법에 의해서 제조될 수 있다. 적합한 제형은 본 명세서에 참조에 의해 포함된 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Comp임의의, Philadelphia, PA, 20th ed. (2000)]에서 찾아볼 수 있다.
본 명세서에 기재된 바와 같은 화합물은 일반적으로 허용되는 경구 조성물, 예컨대, 정제, 코팅 정제 및 연질 쉘 또는 경질 쉘 내의 겔 캡슐, 에멀션 또는 현탁액의 형태로 개체에게 투여될 수 있다. 이러한 조성물의 제조에 사용될 수 있는 담체의 예는 락토스, 옥수수 전분 또는 이의 유도체, 탤크, 스테아레이트 또는 이의 염 등이다. 연질 쉘을 갖는 겔 캡슐을 위한 허용 가능한 담체는 예를 들어, 식물유, 왁스, 지방, 반고체 및 액체 폴리올 등이다. 또한, 약제학적 제형은 보존제, 용해제, 안정화제, 재습윤제, 유화제, 감미료, 염료, 조정제 및 삼투압의 조정을 위한 염, 완충제, 코팅제 또는 항산화제를 함유할 수 있다.
본 명세서에 제공된 화합물을 포함하는 조성물이 또한 기재된다. 일 변경에서, 조성물은 화합물 또는 이의 염 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제를 포함한다. 또 다른 변경에서, 실질적으로 순수한 화합물의 조성물이 제공된다. 일부 실시형태에서, 조성물은 인간 또는 수의과 의약으로서 사용하기 위한 것이다. 일부 실시형태에서, 조성물은 본 명세서에 기재된 방법에서 사용하기 위한 것이다. 일부 실시형태에서, 조성물은 본 명세서에 기재된 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 것이다.
사용 방법 및 용도
본 명세서에 상세하게 기재된 화합물 및 조성물, 예컨대, 본 명세서에 제공된 임의의 화학식의 화합물 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물은 본 명세서에 제공된 바와 같은 투여 및 치료 방법에 사용될 수 있다. 화합물 및 조성물은 또한 시험관내 방법, 예컨대, 스크리닝 목적을 위해서 그리고/또는 품질 제어 검정을 수행하기 위해서 화합물 또는 조성물을 세포에 투여하는 시험관내 방법에서 사용될 수 있다.
본 명세서에는 치료를 필요로 하는 개체에서 질환 또는 장애를 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 본 명세서에 기재된 화합물 또는 임의의 실시형태, 이의 변경 또는 양상 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 화합물, 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 조성물은 본 명세서에 기재된 투여량 및/또는 투여 방법에 따라서 개체에게 투여된다.
본 명세서에 기재된 화합물 또는 이의 염 및 본 명세서에 기재된 조성물은 다양한 질환 및 장애의 치료에 효과적이라고 여겨진다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 화합물 또는 이의 염 또는 본 명세서에 기재된 조성물은 섬유모세포 활성화 단백질(FAP)에 의해서 매개되는 질환 또는 장애를 치료하는 방법에 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 질환 또는 장애는 증식, 조직 리모델링, 섬유증, 만성 염증, 과도한 알코올 섭취 또는 비정상적인 대사를 특징으로 한다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 화합물 또는 이의 염 또는 본 명세서에 기재된 조성물은 FAP 펩티다제 활성의 생리학적 기질에 의해서 매개되는 질환 또는 장애를 치료하는 방법에 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서 FAP 펩티다제 활성은 엔도펩티다제 활성이다. 일부 실시형태에서, FAP 엔도펩티다제 활성의 생리학적 기질은 α2-안티플라스민, 타입 I 콜라겐, 젤라틴 및 섬유모세포 성장 인자 21(FGF21)이다. 일부 실시형태에서 FAP 펩티다제 활성은 엑소펩티다제 활성이다. 일부 실시형태에서, FAP 엑소펩티다제 활성의 생리학적 기질은 뉴로펩타이드 Y, B-타입 나트륨뇨 펩타이드, 물질 P 및 펩타이드 YY이다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 화합물 또는 이의 염 또는 본 명세서에 기재된 조성물은 FGF21에 의해서 매개되는 질환 또는 장애를 치료하는 방법에 사용될 수 있다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 화합물 또는 염 또는 본 명세서에 기재된 조성물은 FGF21-연관된 장애, 예컨대, 비만, 제I형- 및 제II형 당뇨병, 췌장염, 이상지질혈증, 고지혈증 병태, 비-알코올성 지방간 질환(NAFLD), 비-알코올성 지방간염(NASH), 인슐린 저항성, 고인슐린혈증, 글루코스 불내성, 고혈당, 대사 증후군, 급성 심근경색증, 고혈압, 심혈관 질환, 죽상경화증, 말초 동맥 질환, 뇌졸중(apoplexy), 심부전, 관상 동맥 심장 질환, 신장 질환, 당뇨 합병증, 신경장애(neuropathy), 위마비(gastroparesis), 인슐린 수용체의 중증 불활성화 돌연변이와 연관된 장애 및 다른 대사 장애의 치료 방법에 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, FGF21-연관된 장애는 당뇨병, 비만, 이상지질혈증, 대사 증후군, 비-알코올성 지방간 질환, 비-알코올성 지방간염 또는 심혈관 질환이다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 화합물 또는 염 또는 본 명세서에 기재된 조성물은 증식, 조직 리모델링, 섬유증, 만성 염증, 과도한 알코올 섭취 또는 비정상적인 대사를 특징으로 하는 질환 또는 장애의 치료 방법에 사용될 수 있다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 화합물 또는 염 또는 본 명세서에 기재된 조성물은 암, 예컨대, 유방암, 결장직장암, 난소암, 전립선암, 췌장암, 신장암, 폐암, 흑색종, 섬유육종, 골육종, 결합 조직 육종, 신장 세포 암종, 거대 세포 암종, 편평상피 세포 암종, 백혈병, 피부암, 연조직 암, 간암, 위장 암종 또는 선암종의 치료에 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 화합물, 염 또는 조성물은 전이성 신장암, 만성 림프구성 백혈병, 췌장 선암종 또는 비-소세포 폐암의 치료에 사용될 수 있다.
일부 실시형태에서, 화합물, 염 또는 조성물의 투여는 개체에서 종양 성장, 종양 증식 또는 종양원성을 감소시킨다. 일부 실시형태에서, 화합물, 염 또는 조성물은 이를 필요로 하는 개체에서 종양 성장, 종양 증식 또는 종양원성을 감소시키는 방법에 사용될 수. 일부 실시형태에서, 종양 성장은 둔화되거나 중단된다. 일부 실시형태에서, 종양 성장은 적어도 약 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 그 초과만큼 저해된다. 일부 실시형태에서, 종양은 크기가 감소된다. 일부 실시형태에서, 종양 전이는 예방되거나 둔화된다. 일부 실시형태에서, 종양 성장, 종양 증식 또는 종양원성을 화합물, 염 또는 조성물을 투여하기 전 개체에서의 종양 성장, 종양 증식 또는 종양원성과 비교한다. 일부 실시형태에서, 종양 성장, 종양 증식 또는 종양원성을 유사한 개체 또는 개체의 군에서 종양 성장, 종양 증식 또는 종양원성과 비교한다. 종양 성장, 종양 증식 및 종양원성을 측정하는 방법은 당업계에 공지되어 있고, 예를 들어 개체의 반복적인 영상화에 의해서 수행된다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 화합물 또는 염 또는 본 명세서에 기재된 조성물은 섬유증 질환, 혈전증, 상처 치유, 켈로이드 형성, 골관절염, 류마티스 관절염 및 연골 분해에 연관된 관련 장애, 아테롬성 동맥경화 질환, 크론병, 간 경변증, 특발성 폐 섬유증, 심근 비대, 확장 기능장애(diastolic dysfunction), 비만, 글루코스 불내성, 인슐린 불감증 또는 진성 당뇨병의 치료 방법에 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 간 경변증은 바이러스 간염-유도된, 알코올-유도된 또는 담즙성 간경변이다. 일부 실시형태에서, 진성 당뇨병은 제II형 당뇨병이다. 일부 실시형태에서, 질환 또는 장애는 섬유증 간 변성이다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에는 FAP의 저해 방법이 제공된다. 본 명세서에 기재된 화합물 또는 이의 염 및 본 명세서에 기재된 조성물은 FAP의 저해에 효과적이라고 여겨진다.
일부 실시형태에서, FAP의 저해 방법은 세포에 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물을 투여 또는 전달함으로써 세포에서 FAP를 저해하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 세포는 FAP 발현을 갖는 다른 세포 중에서 섬유모세포, 예컨대, 근섬유모세포, 켈로이드 섬유모세포, 암 연관된 섬유모세포(CAF) 또는 반응성 기질 섬유모세포이다.
일부 실시형태에서, FAP의 저해 방법은 종양 또는 플라즈마에 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물을 투여 또는 전달함으로써 종양 또는 플라즈마에서 FAP를 저해하는 단계를 포함한다.
일부 실시형태에서, FAP의 저해는 FAP의 엔도펩티다제 및/또는 엑소펩티다제 활성을 저해하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, FAP는 적어도 약 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 98% 또는 그 초과만큼 저해된다. FAP의 저해는 당업계에 공지된 방법에 의해서 결정될 수 있다.
일부 실시형태에서, 화합물, 이의 염 또는 조성물은 약 1μM 미만, 예컨대, 약 750nM, 600nM, 500nM, 300nM, 200nM, 100nM, 80nM, 60nM, 40nM, 25nM 또는 그 미만보다 더 작은 IC50으로 FAP를 저해한다. 일부 실시형태에서, 화합물, 이의 염 또는 조성물은 약 7nM 내지 1μM, 약 10nM 내지 600nM, 15nM 내지 200nM 또는 20nM 내지 180nM의 IC50으로 FAP를 저해한다. 일부 양상에서, 반치 최대 저해 농도(half maximal inhibitory concentration)(IC50)는 구체적인 생물학적 또는 생화학적 기능을 저해하는데 있어서 물질의 효능의 척도이다. 일부 양상에서, IC50은, 주어진 생물학적 과정 또는 과정의 성분, 예컨대, 효소, 세포, 세포 수용체 또는 미생물 자체를 저해하는데 요구되는 저해제의 양을 나타내는 정량적 척도이다. 시험관내 및 생체내에서 IC50을 결정하는 방법은 당업계에 공지되어 있다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 화합물 또는 이의 염 및 본 명세서에 기재된 조성물은 DPPII, DPPIV, DPP8, DPP9 및/또는 PREP 활성이 저해되거나, 더 적은 정도로 저해되는 양으로 투여된다. 일부 실시형태에서, FAP의 저해는 DPPII, DPPIV, DPP8, DPP9, 및/또는 PREP 활성의 저해보다 적어도 또는 적어도 약 2배 더 크고, 예를 들어 적어도 또는 적어도 약 3배, 4배, 5배, 8배, 10배, 15배, 30배, 50배, 60배, 75배 또는 100배 더 크다.
본 명세서에는 개체에서 면역 반응을 향상시키는 방법이 제공되며, 이 방법은 개체에게 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 개체는 암이다. 일부 실시형태에서, 향상된 면역 반응은 종양 또는 암성 세포에 지향된다. 예로서 그리고 이론에 얽매이고자 함은 아니지만, FAP는 특히 암의 맥락에서 면역 반응을 억제함으로써, FAP를 억제하여 개체의 면역 반응을 향상시킬 수 있다고 여겨진다. 따라서, 본 명세서에는 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 개체에게 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 개체의 면역 반응이 증가된다.
본 명세서에는 개체에서 FGF21 발현 수준을 증가시키는 방법이 제공되며, 이 방법은 개체에게 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 또한 본 명세서에는 FGF21 또는 FGF21 유사체 수준을 증가시키는 방법이 제공되며, 이 방법은 개체에게 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 방법은 FGF21 또는 FGF21 유사체, 예컨대, 돌연변이된 FGF21, 페길화된 FGF21, PF-05231023 또는 LY2405319를 투여하는 단계를 추가로 포함한다.
FGF21은 간에 의해서 주로 분비되는 펩타이드 내분비 호르몬이다(Markan, K.R. et al. Semin Cell Dev Biol, 2016, 53: 85-93). 순환계에 도입될 때, FGF21은 탄수화물 및 지질 대사를 조절하는 특정 조직에 신호를 전달함으로써 기능한다(Kharitonenkov, A., et al., J Clin Invest, 2005, 115(6): 1627-35). FGF21은 지방세포에서 글루코스 흡수를 자극하고, 비만 및 인슐린 불감증에 대해서 보호한다고 여겨진다. 당뇨병 및 비만 동물 모델에게 FGF21를 약리학적으로 투여하는 것은 설치류에서 비만, 인슐린 저항성, 이상지질혈증, 지방간 및 고혈당을 상당히 개선시킨다(Markan, K.R. et al. Semin Cell Dev Biol, 2016, 53: 85-93). 소규모 임상 시험은, 제2형 당뇨병을 갖는 비만 개체에서 FGF21 유사체가 체중 감소를 유도하고, 고인슐린혈증, 이상지질혈증 및 저아디포넥틴증(hypoadiponectinemia)을 바로잡는데 효능이 있다는 것을 입증하였다(Gaich, G., et al., Cell Metab, 2013, 18(3): p. 333-40; Dong, J.Q., et al., Br J Clin Pharmacol, 2015, 80(5): 1051-63).
예로서 그리고 이론에 얽매이고자 함은 아니지만, FAP는 FGF21의 절단 및 불활성화에 책임이 있는 효소이므로; 따라서 FAP의 저해는 FGF21 발현 수준을 증가시킬 수 있고, 내인성 및/또는 외인성 FGF21의 작용을 증가시킬 수 있다고 여겨진다. FGF21은 N-말단을 통해서 FGFR1과 그리고 C-말단을 통해서 β-클로토(Klotho)와 상호작용한다. FGF21의 이러한 C-말단 영역은 수용체 복합체를 활성화시켜 신호전달을 개시하는데 필수적이다(Micanovic, R., et al., J Cell Physiol, 2009, 219(2): 227-34; Yie, J., et al., FEBS Lett, 2009, 583(1): 19-24). 최근, FAPα가 Pro171에서 C-말단 절단을 통해서 FGF21의 순환을 불활성화시키는데 책임이 있는 프로테아제인 것으로 식별되었다(Dunshee, D.R., et al., J Biol Chem, 2016, 291(11): 5986-96; Coppage, A.L., et al., PLoS One, 2016, 11(3): e0151269; Zhen, E.Y., et al., Biochem J, 2016, 473(5): 605-14). 설치류 및 영장류에서, 외인성으로 투여되는 인간 FGF21의 반감기는 FAP-매개된 효소 분해 및 신장 청소에 대한 민감성의 결과로 짧다(약 0.5 내지 2시간)(Hager, T., et al., Anal Chem, 2013, 85(5): 2731-8; Xu, J., et al., Am J Physiol Endocrinol Metab, 2009, 297(5): E1105-14; Kharitonenkov, A., et al., Endocrinology, 2007, 148(2): 774-81). 일반적인 반감기 연장 전략은 생체내에서 이들 FGF21 유사체의 PK 특성을 상당히 개선시켰지만; 이러한 유사체에서 단백질분해 처리는 여전히 지속된다(Hecht, R., et al., PLoS One, 2012, 7(11): e49345; Mu, J., et al., Diabetes, 2012, 61(2): 505-12; Camacho, R.C., et al., Eur J Pharmacol, 2013, 715(1-3): 41-5).
따라서, 본 명세서에는 치료를 필요로 하는 개체에서 진성 당뇨병, 인슐린 불감증, 및/또는 비만을 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 개체에게 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 방법은 FGF21 또는 FGF21 유사체를 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시형태에서, FGF21 유사체는 페길화된 FGF21, PF-05231023 또는 LY2405319이다. 또한, 본 명세서에는 치료를 필요로 하는 개체에서 진성 당뇨병, 인슐린 불감증, 및/또는 비만을 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 개체에게 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 FGF21 발현이 증가된다. 일부 실시형태에서, 진성 당뇨병은 제II형 당뇨병이다.
일부 실시형태에서, 개체는 포유동물이다. 일부 실시형태에서, 개체는 영장류, 소, 양, 돼지, 말, 개, 고양이, 토끼, 설치류이다. 일부 실시형태에서, 개체는 인간이다. 일부 실시형태에서, 개체는 본 명세서에 개시된 질환 또는 장애 중 임의의 것이다. 일부 실시형태에서, 개체는 본 명세서에 개시된 질환 또는 장애 중 임의의 것의 발달 위험이 있다.
일부 실시형태에서, 개체는 인간이다. 일부 실시형태에서, 인간은 적어도 약 21, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80 또는 85세, 또는 상기 연령 중 임의의 대략적인 연령이다. 일부 실시형태에서, 인간은 유아이다. 일부 실시형태에서, 인간은 약 21, 18, 15, 12, 10, 8, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1세 미만 또는 상기 연령 중 임의의 대략적인 연령이다.
본 명세서에는 또한 의약의 제조에서의 본 명세서에 기재된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물의 용도가 제공된다. 일부 실시형태에서, 의약의 제조는 본 명세서에 기재된 장애 또는 질환의 치료를 위한 것이다. 일부 실시형태에서, 의약의 제조는 FAP에 의해서 매개된 장애 또는 질환의 예방 및/또는 치료를 위한 것이다.
병용 요법
본 명세서에 제공된 바와 같이, 본 명세서에 기재된 화합물 또는 이의 염 및 본 명세서에 기재된 조성물은 본 명세서에 개시된 질환 및 장애 중 임의의 것을 치료하기 위해서 추가 작용제와 함께 투여될 수 있다.
일부 실시형태에서, (a) 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물 및 (b) 추가 작용제는 순차적으로 투여되거나, 동반하여(concurrently) 투여되거나 또는 동시에 투여된다. 특정 실시형태에서, (a) 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물 및 (b) 추가 작용제는 약 15분 이하, 예컨대, 약 10, 5 또는 1분 이하 중 임의의 시간의 시간 간격을 두고 투여된다. 특정 실시형태에서, (a) 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물 및 (b) 추가 작용제는 약 15분 이상, 예컨대, 약 20, 30, 40, 50, 60 또는 1분 이상 중 임의의 시간의 시간 간격을 두고 투여된다. (a) 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물 및 (b) 추가 작용제는 중 어느 것이 먼저 투여될 수 있다. 특정 실시형태에서, (a) 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물 및 (b) 추가 작용제는 동시에 투여된다.
일부 실시형태에서, 추가 작용제는 면역 관문 단백질을 표적으로 한다. 일부 실시형태에서, 추가 작용제는 면역 관문 단백질을 표적으로 하는 항체이다. 일부 실시형태에서, 추가 작용제는 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA4, TIM3, LAG3, CCR4, OX40, OX40L, IDO 및 A2AR을 표적으로 한다. 일부 실시형태에서, 추가 작용제는 항-PD-1 항체, 항-PD-L1 항체 또는 항-CTLA-4 항체이다.
일부 실시형태에서, 추가 작용제는 FGF21 발현의 유도제(inducer), 예컨대, PPARα 효능제이다. 일부 실시형태에서, PPARα 효능제는 피브레이트 또는 페노피브레이트이다. 일부 실시형태에서, 추가 작용제는 FGF-21 또는 FGF-21 유사체이다. 일부 실시형태에서, FGF-21 유사체는 돌연변이된 FGF21 및/또는 페길화된 FGF21이다. 일부 실시형태에서, FGF-21 유사체는 PF-05231023 또는 LY2405319이다.
일부 실시형태에서, 추가 작용제는 KLB/FGFR 복합체 효능제, DDPIV ant효능제, GLP-1 수용체 효능제 또는 글루카곤 수용체 효능제이다.
본 명세서에는 개체에서 면역 반응을 향상시키는 방법이 제공되며, 이 방법은 개체에게 (a) 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물 및 (b) 면역 관문 단백질을 표적으로 하는 작용제를 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 개체는 암이다. 일부 실시형태에서, 향상된 면역 반응은 종양 또는 암성 세포에 지향된다.
또한 본 명세서에는 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 개체에게 (a) 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물 및 (b) 면역 관문 단백질을 표적으로 하는 작용제를 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 개체의 면역 반응이 증가된다.
본 명세서에는 개체에서 FGF21 발현 수준을 증가시키는 방법이 제공되며, 이 방법은 개체에게 (a) 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물 및 (b) FGF21 발현을 유도하는 작용제를 투여하는 단계를 포함한다.
또한, 본 명세서에는 치료를 필요로 하는 개체에서 진성 당뇨병, 인슐린 불감증, 및/또는 비만을 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 개체에게 (a) 본 명세서에 기재된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 또는 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물 및 (b) FGF21 발현을 유도하는 작용제를 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 FGF21 발현이 증가된다. 일부 실시형태에서, 진성 당뇨병은 제II형 당뇨병이다.
본 명세서에 제공된 바와 같이, 본 명세서에 기재된 화합물 또는 이의 염 및 본 명세서에 기재된 조성물은 운동 요법, 예컨대, 근력 트레이닝(strength-training) 또는 심혈관 운동을 포함하는 치료 요법의 일부로서 복용된다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 화합물 또는 이의 염 및 본 명세서에 기재된 조성물은 추가 작용제와 함께, 그리고 운동 요법, 예컨대, 근력 트레이닝(strength-training) 또는 심혈관 운동을 포함하는 치료 요법의 일부로서 복용된다. 일부 실시형태에서, 운동 요법은 주당 적어도 1회, 예컨대, 주당 2회, 주당 3회, 주당 4회, 주당 5회, 주당 6회 또는 주당 7회 운동하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 운동 요법은 주당 적어도 1일, 예컨대, 주당 2일, 주당 3일, 주당 4일, 주당 5일, 주당 6일 또는 주당 7일 운동하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 운동 요법은 1일 1회, 1일 2회 또는 1일 3회 운동하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 운동 요법은 세션당 적어도 10분 동안, 예컨대, 적어도 15분, 20분, 25분, 30분, 35분, 40분, 45분, 50분, 55분, 1시간, 1.25시간 또는 1.5시간 시간 동안 운동하는 것을 포함한다.
투여 및 투여 방법
개체(예컨대, 인간)에게 투여되는 화합물의 용량은 특정 화합물 또는 이의 염, 투여 방법 및 치료하고자 하는 특정 질환, 예컨대, 암의 유형 및 병기에 따라서 달라질 수 있다. 일부 실시형태에서, 화합물 또는 이의 염의 양은 치료적 유효량이다.
화합물의 유효량은 일 양상에서 약 0.01 내지 약 100 ㎎/㎏의 용량일 수 있다. 본 발명의 화합물의 유효량 또는 용량은 일상적인 방법, 예컨대, 모델링, 용량 증가 또는 임상 시험에 의해서, 일상적인 인자, 예컨대, 투여 및 약물 전달의 모드 또는 경로, 작용제의 약동학, 치료하고자 하는 질환의 중증도, 대상체의 건간 상태, 병태 및 체중을 고려하여 밝혀낼 수 있다. 예시적인 용량은 대략적으로 1일 약 0.7㎎ 내지 7g, 또는 1일 약 7㎎ 내지 350㎎, 또는 1일 약 350㎎ 내지 1.75g 또는 1일 약 1.75 내지 7g의 범위이다.
본 명세서에 제공된 방법 중 임의의 것은 일 양상에서 개체에게 유효량의 본 명세서에 제공된 화합물 또는 이의 염 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명의 화합물 또는 조성물은 목적하는 시간 기간 또는 지속기간 동안, 예컨대, 적어도 약 1개월, 적어도 약 2개월, 적어도 약 3개월, 적어도 약 6개월 또는 적어도 약 12개월 이상 동안 효과적인 투여 요법에 따라서 개체에게 투여될 수 있고, 일부 변경에서 개체의 수명의 지속기간 동안일 수 있다. 일 변경에서, 화합물은 매일 또는 간헐적인 스케줄로 투여된다. 화합물은 일정 시간 기간에 걸쳐서 개체에게 연속적으로(예를 들어, 적어도 1일 1회) 투여될 수 있다. 투여 빈도는 또한 1일 1회보다 적을 수 있고, 예를 들어, 주 1회 투여일 수 있다. 투여 빈도는 예를 들어, 1일 1회 초과, 예를 들어, 1일 2 내지 3회일 수 있다. 투여 빈도는 또한 "약물 휴일"(예를 들어, 7일 동안 1일 1회 투여하고, 그 다음 7일 동안 투여하지 않고, 임의의 14일의 시간 기간, 예컨대, 약 2개월, 약 4개월, 약 6개월 이상 동안 반복함)을 포함하여 간헐적일 수 있다. 투여 빈도 중 임의의 것은 본 명세서에 기재된 투여량 중 임의의 것과 함께 본 명세서에 기재된 화합물 중 임의의 것을 사용할 수 있다.
제조 물품 및 키트
본 개시내용은 적합한 포장재 내에 본 명세서에 기재된 화합물 또는 이의 염, 본 명세서에 기재된 조성물 또는 하나 이상의 단위 투여량을 포함하는 제조 물품을 추가로 제공한다. 특정 실시형태에서, 제조 물품은 본 명세서에 기재된 방법 중 임의의 것에서의 사용을 위한 것이다. 적합한 포장재는 당업계에 공지되어 있고, 예를 들어, 바이알, 용기, 앰플, 병, 자, 가요성 포장재 등을 포함한다. 제조 물품은 추가로 멸균 및/또는 밀봉될 수 있다.
본 개시내용은 본 발명의 방법을 수행하기 위한 키트를 추가로 제공하며, 이것은 본 명세서에 기재된 1종 이상의 화합물 또는 본 명세서에 기재된 화합물을 포함하는 조성물을 포함한다. 키트는 본 명세서에 개시된 화합물 중 임의의 것을 포함할 수 있다. 일 변경에서, 키트는 본 명세서에 기재된 화합물 또는 이의 염을 사용한다. 키트는 본 명세서에 기재된 용도 중 임의의 하나 이상을 위해서 사용될 수 있고, 따라서 임의의 또는 본 명세서에 기재된 질환의 치료를 위한, 예를 들어, 암의 치료를 위한 설명서를 함유할 수 있다.
키트는 일반적으로 적합한 포장재를 포함한다. 키트는 본 명세서에 기재된 임의의 화합물을 포함하는 하나 이상의 용기를 포함할 수 있다. 각각의 성분(하나 초과의 성분이 존재하는 경우)은 별개의 용기에 포장될 수 있거나 일부 성분은 교차 반응성 및 저장 수명이 허용되는 하나의 용기 내에 조합될 수 있다.
키트는 단위 투여 형태, 벌크 포장재(예를 들어, 다회-용량 포장재) 또는 하위 단위 용량으로 존재할 수 잇다.　 예를 들어, 연장된 기간, 예컨대, 1주, 2주, 3주, 4주, 6주, 8주, 3개월, 4개월, 5개월, 7개월, 8개월, 9개월 또는 그 초과 중 임의의 기간 동안 개체에 효과적인 치료를 제공하기 위한 본 명세서에 개시된 바와 같은 화합물 및/또는 본 명세서에 상세하게 기재된 질환에 유용한 추가적인 약제학적 활성 화합물의 충분한 투여량을 함유하는 키트가 제공될 수 있다.　 키트는 또한 화합물의 다회 단위 용량 및 사용 설명서를 포함할 수 있고, 약국(예를 들어, 병원 약국 및 조제 약국(compounding pharmacies)에서의 저장 및 사용에 충분한 양으로 포장될 수 있다.
키트는 선택적으로 설명서 세트, 일반적으로 서면 설명서를 포함할 수 있지만, 설명서를 포함하는 전자 저장 매체(예를 들어, 자기 디스켓 또는 광학 디스크)가 또한 허용 가능하며, 이것은 본 발명의 방법의 성분(들)의 사용에 관련된다. 키트에 포함된 설명서는 일반적으로 성분 및 개체에 대한 투여에 관한 정보를 포함한다.
본 발명은 설명을 위해서 제공되며, 제한을 의미하지 않는 하기 실시예를 참고로 추가로 이해될 수 있다.
예컨대, 간행물, 특허, 특허 출원 및 공개된 특허 출원에 걸친 모든 참고 문헌이 전체적으로 본 명세서에 참조에 의해 포함된다.
열거된 실시형태
하기 열거된 실시형태가 본 발명의 일부 양상을 대표한다.
실시형태 1. 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:
Figure pct00096
식 중, R은 수소, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, 상기 R의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rd에 의해서 선택적으로 치환되고;
m은 0, 1, 2, 3 또는 4이며;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4이되,
m + n은 1, 2, 3 또는 4이며;
X는 -C(=O)-, -O-, -CH(OH)-, -S-, -S(=O) 또는 -S(=O)2-이고;
L은,
(a)
Figure pct00097
(식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고,
**은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내며,
Ra은 수소, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, Ra의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Re에 의해서 선택적으로 치환되고;
R1 및 R2는 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C1-C2 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R1 및 R2의 C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rf에 의해서 선택적으로 치환되거나,
또는 R1과 R2는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 Rf에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하고,
q는 1, 2 또는 3이며,
R3 및 R4는 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R3 및 R4의 C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rg 의해서 선택적으로 치환되거나,
또는 R3과 R4는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 Rg에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하고,
p는 0, 1 또는 2임);
(b)
Figure pct00098
(식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고,
**은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내며,
R5 및 R6은 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R5 및 R6의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rh에 의해서 선택적으로 치환되고,
Rb 및 Rc는 독립적으로 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, C6-C14 아릴 또는 -C(=O)OR17이되, Rb 및 Rc의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Ri에 의해서 선택적으로 치환되고,
r은 1, 2 또는 3임);
(c)
Figure pct00099
(식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고,
**은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내며,
R7 및 R8은 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R7 및 R8의 C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rj에 의해서 선택적으로 치환되거나,
또는 R7과 R8은 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 Rj에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하고,
R9 및 R10은 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, R9 및 R10의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rk에 의해서 선택적으로 치환되거나,
s는 1, 2 또는 3이고,
t는 1, 2 또는 3이되,
s + t는 2, 3 또는 4이고,
u는 0 또는 1이며,
v는 0 또는 1임)이고;
Y는 R11에 의해서 선택적으로 치환된 C6-C9 아릴, R12에 의해서 선택적으로 치환된 6- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 R13에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이되, Y가 페닐 또는 나프틸인 경우, Y의 페닐 또는 나프틸은 적어도 하나의 R11에 의해서 치환되고, L이 *-NH-CH2-**이고, Y가 선택적으로 치환된 퀴놀린일인 경우, Y의 선택적으로 치환된 퀴놀린일은 2-, 3-, 5-, 6-, 7- 또는 8-위치에서 모 구조에 연결되며,
R11, R12 및 R13은, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C4-C8　사이클로알켄일, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, C6-C14　아릴, 할로겐, 사이아노, 옥소, -OR14, -NR15R16, -SR14, -NO2, -C=NH(OR14), -C(O)R14, -OC(O)R14, -C(O)OR14, -C(O)NR15R16, -NR14C(O)R15, -NR14C(O)OR15, -NR14C(O)NR15R16, -S(O)R14, -S(O)2R14, -NR14S(O)R15, -NR14S(O)2R15, -S(O)NR15R16, -S(O)2NR15R16, 또는 -P(O)(OR15)(OR16)이되, 각각의 R11 , R12 및 R13은 독립적으로 RL에 의해서 선택적으로 치환되고;
각각의 R14는 독립적으로 수소, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이되, R14의 C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴은 독립적으로 할로겐, -OH, 옥소, 사이아노, 또는 할로겐, -OH 또는 옥소에 의해서 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환되며;
R15 및 R16은, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이되, R15 및 R16의 C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴은 독립적으로 할로겐, -OH, 옥소, 사이아노, 또는 할로겐, -OH 또는 옥소에 의해서 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환되거나;
또는 R15와 R16은 이들이 부착되는 원자와 함께 취해져서 할로겐, 옥소, 사이아노, 또는 할로겐, -OH 또는 옥소에 의해서 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 6-원의 헤테로사이클릴을 형성하고;
Rd, Re, Rf, Rg, Rh, Ri, Rj 및 Rk는 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 할로겐, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, -OR14, -NR15R16, 사이아노 또는 나이트로이며;
각각의 RL은 독립적으로 할로겐, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, -OR14, -C(O)R14, -NR15R16, 사이아노, 옥소 또는 나이트로이다.
실시형태 2. 실시형태 1에 있어서, X는 -C(=O)-인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 3. 실시형태 1에 있어서, X는 -O-인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 4. 실시형태 1에 있어서, X는 -CH(OH)-인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 5. 실시형태 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, L은 -NH-CR1R2-인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 6. 실시형태 5에 있어서, L은 -NH-CH2-인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 7. 실시형태 5에 있어서, L은 -NH-CH(CH3)-인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 8. 실시형태 5에 있어서, L은 -NH-CR1R2-이되, R1과 R2는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하는, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 9. 실시형태 8항에 있어서, R1과 R2는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 사이클로프로필렌을 형성하는, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 10. 실시형태 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, L은 -CR5R6-CH(NRbRc)-인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 11. 실시형태 10에 있어서, L은 -CR5R6-CH(NRbRc)-이되, R6, Rb 및 Rc는 H이고, R5는 H 또는 C1-C6 알킬인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 12. 실시형태 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, L은
Figure pct00100
이되, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고, **은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내는, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 13. 실시형태 12에 있어서, L은
Figure pct00101
이되, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고, **은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내는, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 14. 실시형태 1 내지 13 중 어느 하나에 있어서, Y는 R11에 의해서 선택적으로 치환된 C6-C9 아릴, R12에 의해서 선택적으로 치환된 6- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 R13에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 15. 실시형태 14에 있어서, Y는 R11에 의해서 선택적으로 치환된 C6-C9 아릴이되, Y가 페닐 또는 나프틸인 경우, Y의 페닐 또는 나프틸은 적어도 하나의 R11에 의해서 치환되는, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 16. 실시형태 15에 있어서, Y는 할로겐, 트라이할로메틸, 사이아노 및 -C(=O)NH2로부터 독립적으로 선택된, 1 내지 5개의 R11에 의해서 치환된 페닐인, 화합물.
실시형태 17. 실시형태 15에 있어서, Y는 비치환된 2,3-다이하이드로-1H-인덴-2-일인, 화합물.
실시형태 18. 실시형태 14에 있어서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환된 6- 내지 10-원의 헤테로아릴이되, L이 *-NH-CH2-**이고, Y가 선택적으로 치환된 퀴놀린일인 경우, Y의 선택적으로 치환된 퀴놀린일은 2-, 3-, 5-, 6-, 7- 또는 8-위치에서 모 구조에 연결되는, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 19. 실시형태 18에 있어서,
L은 *-CH2-CH(NH2)-** 또는 *-CH(CH3)-CH(NH2)-**이고, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환된 퀴놀린-4-일이거나, 또는
L은 *-NH-CH2-**이고, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환된 퀴놀린-6-일이되, R12는 -OH 및 페닐로부터 독립적으로 선택되는, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 20. 실시형태 18에 있어서, Y는 3-위치에서 R12에 의해서 치환된 피리딘-4-일인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 21. 실시형태 20에 있어서, R12는 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환된 피리딘일인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 22. 실시형태 20에 있어서, R12는 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환된 인돌릴인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 23. 실시형태 20에 있어서, R12는 C1-C6 알킬, 할로겐 또는 C1-C6 알콕시에 의해서 선택적으로 치환된 페닐인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 24. 실시형태 18에 있어서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환되고, C6-C14 아릴 또는 C5-C10 사이클로알킬에 선택적으로 융합된 피리미딘-4-일이되, C6-C14 아릴 및 C5-C는, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 24에 있어서, Y는 C6-C14 아릴에 융합된 피리미딘-4-일이되, C6-C14 아릴은 R12에 의해서 선택적으로 치환된, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 26. 실시형태 24에 있어서, Y는 선택적으로 치환된 피리딘-3-일, 비치환된 퀴나졸린-4-일 또는 비치환된 6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[d]피리미딘-4-일인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 27. 실시형태 18에 있어서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환되고, C6-C14 아릴에 선택적으로 축합된 2H-피란-2-온-5-일이되, C6-C14 아릴은 R12에 의해서 선택적으로 치환된, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 28. 실시형태 27에 있어서, Y는 할로겐에 의해서 선택적으로 치환된 1H-아이소크로멘-1-온-4-일인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 29. 실시형태 18에 있어서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환되고, C6-C14 아릴 또는 5- 내지 10-원의 헤테로사이클릴에 선택적으로 융합된 피리딘-2(1H)-온-5-일이되, C6-C14 아릴 또는 5- 내지 10-원의 헤테로사이클릴은, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, R12에 의해서 선택적으로 치환된, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 30. 실시형태 29에 있어서, Y는 C1-C6 알킬 또는 C6-C14 아릴에 의해서 선택적으로 치환된 피리딘-2(1H)-온-5-일인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 31. 실시형태 29에 있어서, Y는 비치환된 7,8,9,10-테트라하이드로피리도[1,2-a]아제핀-4(6H)-온-1-일인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 32. 실시형태 29에 있어서, Y는 할로겐, C1-C6 알킬, C6-C14 아릴 또는 C3-C8 사이클로알킬에 의해서 선택적으로 치환된 아이소퀴놀린-1(2H)-온-4-일인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 33. 실시형태 14에 있어서, Y는 R13에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 34. 실시형태 33에 있어서, Y는 비치환된 아이소인돌린-2-일인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 35. 실시형태 33에 있어서, Y는 C1-C6 알킬 또는 C6-C14 아릴에 의해서 선택적으로 치환된 피페리딘-2-온-5-일인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 36. 실시형태 1 내지 실시형태 35 중 어느 하나에 있어서, m = n = 1인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 37. 실시형태 1 내지 36 중 어느 하나에 있어서, R은 수소인, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 38. 실시형태 1에 있어서, 상기 -X-L- 모이어티는
Figure pct00102
Figure pct00103
로 이루어진 군으로부터 선택되되; *은 Y 모이어티에 대한 부착점을 나타내고, **은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내는, 화합물 또는 이의 염.
실시형태 39. 실시형태 1 내지 실시형태 38 중 어느 하나의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는, 약제학적 조성물.
실시형태 40. 치료를 필요로 하는 개체에서 섬유모세포 활성화 단백질(FAP)에 의해서 매개된 질환 또는 장애를 치료하는 방법으로서, 상기 개체에게 치료적 유효량의 실시형태 1 내지 실시형태 38 중 어느 하나의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 실시형태 39의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
실시형태 41. 치료를 필요로 하는 개체에서 증식, 조직 리모델링, 만성 염증, 비만, 글루코스 불내성 또는 인슐린 불감증을 특징으로 하는 질환 또는 장애를 치료하는 방법으로서, 상기 개체에게 치료적 유효량의 실시형태 1 내지 38 중 어느 하나의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 실시형태 39의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
실시형태 42. 실시형태 40 또는 실시형태 41에 있어서, 상기 질환 또는 장애는 유방암, 결장직장암, 난소암, 전립선암, 췌장암, 신장암, 폐암, 흑색종, 섬유육종, 골육종, 결합 조직 육종, 신장 세포 암종, 거대 세포 암종, 편평상피 세포 암종, 백혈병, 피부암, 연조직암, 간암, 위장 암종 또는 선암종인, 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
실시형태 43. 실시형태 42에 있어서, 상기 질환 또는 장애는 전이성 신장암, 만성 림프구성 백혈병, 췌장 선암종 또는 비-소세포 폐암인, 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
실시형태 44. 실시형태 40 또는 41에 있어서, 상기 질환 또는 장애는 섬유증 질환, 상처 치유, 켈로이드 형성, 골관절염, 류마티스 관절염 및 연골 분해에 연관된 관련 장애, 아테롬성 동맥경화 질환, 크론병 또는 제II형 당뇨병인, 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
실시형태 45. 종양 성장, 종양 증식, 또는 종양원성의 감소를 필요로 하는 개체에서 종양 성장, 종양 증식, 또는 종양원성을 감소시키는 방법으로서, 상기 개체에게 실시형태 1 내지 38 중 어느 하나의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 실시형태 39의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 종양 성장, 종양 증식, 또는 종양원성을 감소시키는 방법.
실시형태 46. 개체에서 FAP를 저해하는 방법으로서, 상기 개체에게 실시형태 1 내지 38 중 어느 하나의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 실시형태 39의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 FAP를 저해하는 방법.
실시형태 47. 세포에서 FAP를 저해하는 방법으로서, 상기 세포에 실시형태 1 내지 38 중 어느 하나의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 실시형태 39의 약제학적 조성물 또는 이들의 대사산물을 투여 또는 전달하는 단계를 포함하는, 세포에서 FAP를 저해하는 방법.
실시형태 48. 실시형태 47에 있어서, 상기 세포는 섬유모세포인, 세포에서 FAP를 저해하는 방법.
실시형태 49. 실시형태 47 또는 48항 있어서, 상기 세포는 암 연관 섬유모세포(CAF) 또는 반응성 기질 섬유모세포인, 세포에서 FAP를 저해하는 방법.
실시형태 50. 종양에서 FAP를 저해하는 방법으로서, 상기 종양에 실시형태 1 내지 38 중 어느 하나의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 실시형태 39의 약제학적 조성물 또는 이들의 대사산물을 투여 또는 전달하는 단계를 포함하는, 종양에서 FAP를 저해하는 방법.
실시형태 51. 혈장에서 FAP를 저해하는 방법으로서, 상기 혈장에 실시형태 1 내지 38 중 어느 하나의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 실시형태 39의 약제학적 조성물 또는 이들의 대사산물을 투여 또는 전달하는 단계를 포함하는, 혈장에서 FAP를 저해하는 방법.
실시형태 52. 실시형태 46 내지 51 중 어느 하나에 있어서, FAP를 저해하는 것은 FAP의 엔도펩티다제 활성을 저해하는 것을 포함하는, 방법.
실시형태 53. 실시형태 46 내지 51 중 어느 하나에 있어서, FAP를 저해하는 것은 FAP의 엑소펩티다제 활성을 저해하는 것을 포함하는, 방법.
실시형태 54. 개체에서 면역 반응을 향상시키는 방법으로서, (a) 면역 관문 저해제(면역 관문 저해제) 및 (b) 실시형태 1 내지 38 중 어느 하나의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 실시형태 39의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 면역 반응을 향상시키는 방법.
실시형태 55. 개체에서 FGF21 발현 수준을 증가시키는 방법으로서, 상기 개체에게 실시형태 1 내지 38 중 어느 하나의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 실시형태 39의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, FGF21 발현 수준을 증가시키는 방법.
실시형태 56. 실시형태 55에 있어서, FGF21 발현의 유도제를 투여하는 단계를 더 포함하는, FGF21 발현 수준을 증가시키는 방법.
실시형태 57. 실시형태 56에 있어서, 상기 FGF21 발현의 유도제는 PPARα 효능제인, FGF21 발현 수준을 증가시키는 방법.
실시형태 58. 실시형태 57에 있어서, 상기 PPARα 효능제는 피브레이트 또는 페노피브레이트인, FGF21 발현 수준을 증가시키는 방법.
실시형태 59. 실시형태 39에 있어서, 인간 또는 수의과 의약으로서 사용하기 위한, 조성물.
실시형태 60. FAP에 의해서 매개되는 장애 또는 질환의 예방 및/또는 치료를 위한 의약의 제조에서의 실시형태 1 내지 38의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 실시형태 39의 약제학적 조성물의 용도.
실시예
합성 실시예
기재된 합성 실시예에서의 화학 반응은 본 발명의 다수의 다른 화합물을 제조하기 위해서 쉽게 개작될 수 있고, 본 발명의 화합물을 제조하는 대안의 방법은 본 발명의 범주인 것으로 간주된다. 예를 들어, 본 발명에 따른 예시되지 않은 화합물은 당업자에게 자명한 변형에 의해서, 예를 들어, 간섭기를 적절하게 보호함으로써, 기재된 것 이외의 당업계에 공지된 다른 적합한 시약을 사용함으로써, 또는 반응 조건을 일상적으로 변경시킴으로써 성공적으로 수행될 수 있다. 대안적으로, 본 명세서에 개시되거나 당업계에 공지된 다른 반응이 본 발명의 다른 화합물을 제조하기 위해서 적용 가능한 것으로 인지될 것이다.
실시예 1
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드의 합성
Figure pct00104
화합물 1a: DCM(15㎖) 중의 1-(tert-부틸) 2-메틸 (S)-4-옥소피롤리딘-1,2-다이카복실레이트(1.9g, 7.36m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, DAST(2.6㎖, 19.85m㏖, 2.6당량)를 0℃에서 적가로 30분의 기간에 걸쳐서 첨가하고, 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 반응의 진행을 NMR로 모니터링하였다. 물(50㎖) 반응 혼합물에 첨가하고, 5분 동안 교반하고, DCM으로 추출하였다(50㎖×3). 합한 유기층을 포화 중탄산나트륨 용액(100㎖), 염수(100㎖)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 1-(tert-부틸) 2-메틸 (S)-4,4-다이플루오로피롤리딘-1,2-다이카복실레이트(1.25g, 61% 수율)를 적색 오일로서 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.41 - 4.53 (m, 1H), 3.65 - 3.84 (m, 5H), 2.82 - 3.01 (m, 2H), 1.41 (s, 4H), 1.35 (s, 5H).
화합물 1b: MeOH(1.0㎖) 중의 1-(tert-부틸) 2-메틸 (S)-4,4-다이플루오로피롤리딘-1,2-다이카복실레이트(200㎎, 0.75m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에 메탄올(5.0㎖) 중의 암모니아 7.0M 용액을 0℃에서 적가로 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 12시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 NMR로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후 용매를 감압 하에서 증발시키고, 얻은 조 물질을 헥산 및 펜탄으로 결정화시켜 tert-부틸 (S)-2-카바모일-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-카복실레이트(185㎎, 98% 수율)를 회백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.48 (d, J = 15.16 Hz, 1H), 7.16 (br. s., 1H), 4.24 (dd, J = 5.87, 8.80 Hz, 1H), 3.58 - 3.83 (m, 2H), 2.77 (dd, J = 8.31, 13.69 Hz, 1H), 2.20 - 2.38 (m, 1H), 1.26 - 1.55 (m, 9H).
화합물 1c: DCM(5.0㎖) 중의 tert-부틸 (S)-2-카바모일-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-카복실레이트(100㎎, 0.4m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, 피리딘(0.36㎖, 0.48m㏖, 1.2당량)을 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 15분 동안 0℃에서 교반하였다. 트라이플루오로아세트산 무수물(54.72㎎, 0.48m㏖, 1.2당량)을 0℃에서 적가로 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 RT에서 교반하였다. 반응 진행을 NMR로 및 TLC모니터링하였고, 반응이 완결된 후, 물(20㎖)로 반응정지시키고,에틸 아세테이트(50㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기층을 포화 NaHCO3 용액(10㎖) 및 염수(20㎖)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 콤비-플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-30% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 tert-부틸 (S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-카복실레이트(70㎎, 76% 수율)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.96 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 3.65 - 3.89 (m, 2H), 2.82 - 3.03 (m, 1H), 2.75 (br. s., 1H), 1.35 - 1.56 (m, 9H).
화합물 1d: 아세토나이트릴(10㎖) 중의 tert-부틸 (S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-카복실레이트(250㎎, 1.07m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에 다이옥산 중의 4.0M HCl(0.5㎖)을 0℃에서 적가로 10분의 기간에 걸쳐서 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 RT에서 16시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 NMR로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 얻은 조물질을 에틸 아세테이트 및 헥산(1:1(20㎖))으로 세척하여 (S)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(70㎎, 38% 수율)을 회백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.56 - 4.67 (m, 1H), 3.27 - 3.50 (m, 2H), 2.54 - 2.75 (m, 2H).
화합물 1f: DMF(10㎖) 중의 (tert-부톡시카보닐) 글리신(921.8㎎, 5.26m㏖, 1.5당량) 및 HATU(2667㎎, 7.025m㏖, 2.0당량)의 교반되는 용액에 (S)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(590㎎, 3.51m㏖, 1.0당량)을 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. DIPEA(1.8㎖, 10.53m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 RT에서 16시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 NMR 및 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 차가운 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(25㎖×4)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조물질을 콤비 플래시 크로마토그래피로 정제시켜 tert-부틸 (S)-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)카바메이트(300㎎, 30% 수율)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.08 (t, J = 5.92 Hz, 1H), 4.98 - 5.16 (m, 1H), 4.09 - 4.24 (m, 1H), 3.93 - 4.09 (m, 1H), 3.77 (d, J = 6.14 Hz, 2H), 2.71 - 2.97 (m, 2H), 1.31 - 1.42 (m, 9H).
화합물 1g: 아세토나이트릴(10㎖) 중의 tert-부틸 (S)-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)카바메이트(300㎎, 1.03m㏖, 1.0당량)의 교반되 용액에 다이옥산 중의 4.0M HCl(2㎖)을 0℃에서 10분의 기간에 걸쳐서 적가로 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 16시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 NMR로 모니터링하였다. 용매를 감압 하에서 증발시켜 잔류물을 얻었고, 이것을 20㎖ 에틸 아세테이트 및 헥산(1:1)으로 세척하여, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(200㎎, 86% 수율)을 회백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (br. s., 2H), 5.18 (d, J = 7.89 Hz, 1H), 4.21 (d, J = 11.40 Hz, 1H), 3.97 - 4.10 (m, 1H), 3.94 (br. s., 1H), 3.82 (d, J = 12.28 Hz, 1H), 2.81 - 2.97 (m, 2H).
화합물 1: DMF(5㎖) 중의 1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복실산(315㎎, 1.6m㏖, 1.5당량) 및 HATU(843㎎, 2.22m㏖, 2.0당량)의 교반되는 용액에 (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(250㎎, 1.11m㏖, 1.0당량)을 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. DIPEA(429㎎, 3.33m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 혼합물을 RT에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 진행을 NMR 및 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 차가운 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(50㎖×3)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드(38㎎, 6% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 361 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.62 (br. s., 1H), 8.68 (t, J = 5.62 Hz, 1H), 8.25 (t, J = 8.31 Hz, 2H), 7.75 (t, J = 7.09 Hz, 1H), 7.47 - 7.62 (m, 2H), 5.03 - 5.18 (m, 1H), 4.22 - 4.36 (m, 1H), 3.99 - 4.20 (m, 3H), 2.77 - 2.98 (m, 2H).
실시예 2
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드의 합성
Figure pct00105
화합물 2a: DCM(10㎖) 중의 1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복실산(500㎎, 2.6m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, 페닐보론산(480㎎, 3.9m㏖, 1.5당량), 구리 아세테이트(2360㎎, 13m㏖, 5당량), 분자체 및 Et3N(4㎖, 26m㏖, 10당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 셀라이트® 층에 통과시키고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜 조물질을 얻었고, 이것을 물(100㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 수성층을 3N HCl(30㎖)을 사용하여 pH-3으로 산성화시키고, 에틸 아세테이트(100㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 얻었다. 1-옥소-2-페닐-1, 2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복실산(650㎎, 93%)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 266 [M+H]+
화합물 2: DMF(5㎖) 중의 1-옥소-2-페닐-1, 2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복실산(200㎎, 0.75m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, DIPEA(0.5㎖, 3m㏖, 4당량) 및 HATU(802㎎, 2.1m㏖, 2.8당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 30분 동안 질소 분위기 하에서 교반하였다. (S)-1-(2-아미노아세틸)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(204㎎, 0.905m㏖, 1.2당량)을 상기 혼합물에 첨가하고, 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(30㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(100㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 물(100㎖), 염수 용액(100㎖)으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 얻었고, 이것을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드(유리 염기)(25㎎, 7%)를 백색 고체 화합물로서 얻었다.
LCMS 437.3 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.78 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.35 - 8.27 (m, 2H), 7.82 (q, J = 5.3, 3.2 Hz, 2H), 7.66 - 7.54 (m, 5H), 7.51 (p, J = 4.6 Hz, 1H), 5.15 - 5.07 (m, 1H), 4.29 (ddd, J= 16.2, 11.9, 4.5 Hz, 1H), 4.14 (qd, J = 18.6, 17.9, 7.2 Hz, 2H), 3.29 (s, 1H), 2.99 - 2.73 (m, 2H).
실시예 3
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-사이클로프로필-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드의 합성
Figure pct00106
화합물 3a: DCM(15㎖) 중의 1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복실산(1000㎎, 5.2m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, 사이클로프로필보론산(683㎎, 7.9m㏖, 1.5당량), 구리 아세테이트(4732㎎, 26m㏖, 5당량), 분자체 및 Et3N(7.2㎖, 52m㏖, 10당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 셀라이트층에 통과시키고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜 조물질을 얻었고, 이것을 물(100㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 추출하였다. 수성층을 3N HCl(30㎖)을 사용하여 pH-3으로 산성화시키고, 에틸 아세테이트(100㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 2-사이클로프로필-1-옥소-1, 2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복실산(550㎎, 45%)을 밝은 갈색 고체 화합물로서 얻었다.
LCMS 230 [M+H]+
화합물 3: DMF(5㎖) 중의 2-사이클로프로필-1-옥소-1, 2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복실산(200㎎, 0.87m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, DIPEA(0.6㎖, 3.48m㏖, 4당량) 및 HATU(926㎎, 2.43m㏖, 2.8당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 질소 하에서 교반하였다. (S)-1-(2-아미노아세틸)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(236㎎, 1.04m㏖, 1.2당량)을 상기 혼합물에 첨가하고, 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(30㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(100㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 물(100㎖), 염수 용액(100㎖)으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 얻었고, 이것을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-사이클로프로필-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드(유리 염기)(60㎎, 17%)를 백색 고체 화합물로서 얻었다.
LCMS 437.3[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.75 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.24 (dd, J = 19.7, 8.1 Hz, 2H), 7.78 - 7.66(m, 2H), 7.55 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 5.14 (d, J = 9.2 Hz, 1H),4.37 - 4.24 (m, 1H), 4.14 (qd, J = 17.0, 16.5, 7.9 Hz, 3H), 3.35(s, 1H), 2.88 (dd, J = 40.5, 13.1 Hz, 2H),1.75 (s, 0H), 1.05 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 0.98 (s, 2H).
실시예 4
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)퀴놀린-6-카복스아마이드의 합성
Figure pct00107
DMF(15㎖) 중의 퀴놀린-6-카복실산(230㎎, 1.32m㏖, 1.0당량) 및 HATU(1003㎎, 2.64m㏖, 2.0당량)의 교반되는 용액에 (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(250㎎, 1.32m㏖, 1.0당량)을 첨가하고, 반응 혼합물 10분 동안 교반하였다. DIPEA(510㎎, 3.96m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 RT에서 16시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 NMR로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(25㎖×4)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조물질을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)퀴놀린-6-카복스아마이드(175㎎, 38% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 345 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.62 (br. s., 1H), 8.68 (t, J = 5.62 Hz, 1H), 8.25 (t, J = 8.31 Hz, 2H), 7.75 (t, J = 7.09 Hz, 1H), 7.47 - 7.62 (m, 2H), 5.03 - 5.18 (m, 1H), 4.22 - 4.36 (m, 1H), 3.99 - 4.20 (m, 3H), 2.77 - 2.98 (m, 2H).
실시예 5
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[d]피리미딘-4-카복스아마이드의 합성
Figure pct00108
DMF(3㎖) 중의 (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(100㎎, 0.44m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, 퀴놀린-4-카복실산(73㎎, 0.44m㏖, 1당량), Et3N(0.06㎖, 0.48m㏖, 1.1당량), HOBt(68㎎, 0.44m㏖, 1당량), DMAP(3㎎, 0.02m㏖, 0.05당량) 및 EDC.HCl(93㎎, 0.48m㏖, 1.1당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(30㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 물(50㎖), 염수 용액(50㎖)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 얻었고, 이것을 정상 콤비 플래시로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[d]피리미딘-4-카복스아마이드(40㎎, 27%)를 백색 고체 화합물로서 얻었다.
LCMS 336 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.02 (s, 1H), 5.09 - 5.01 (m, 1H), 4.33 - 3.92 (m, 4H), 3.24 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.97 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.93 - 2.70 (m, 2H), 2.06 (p, J = 7.7 Hz, 2H).
실시예 6
(S)-N-(2-(2-사이아노-4, 4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-1, 6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드의 합성
Figure pct00109
DMF(3㎖) 중의 6-옥소-1, 6-다이하이드로피리딘-3-카복실산(50㎎, 0.22m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, Et3N(0.03㎖, 0.24m㏖, 1.1당량), HOBt(34㎎, 0.22m㏖, 1당량), DMAP(1.3㎎, 0.01m㏖, 0.05당량) 및 EDC.HCl(47㎎, 0.24m㏖, 1.1당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(30㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 물(50㎖), 염수 용액(50㎖)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 얻었고, 이것을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4, 4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-1, 6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드(유리 염기)(50㎎, 58%)를 백색 고체 화합물로서 얻었다.
LCMS 311[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.78 (s, 1H), 8.60 (q, J = 7.8, 6.0 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 2.7 Hz, 1H),7.87 (dd, J = 9.6, 2.8 Hz, 1H), 6.37 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 9.3, 2.8Hz, 1H), 4.32 - 4.20 (m, 1H), 4.07 (qt, J = 16.8, 7.9 Hz, 3H), 2.97 - 2.71 (m, 2H).
실시예 7
(S)-N-(2-(2-사이아노-4, 4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2, 3-다이하이드로-1H-인덴-2-카복스아마이드의 합성
Figure pct00110
DMF(3㎖) 중의 2, 3-다이하이드로-1H-인덴-2-카복실산(100㎎, 0.617m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, DIPEA(0.4㎖, 2.46m㏖, 4당량) 및 HATU(657㎎, 1.72m㏖, 2.8당량)를 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하였다. (S)-1-(2-아미노아세틸)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(167㎎, 0.74m㏖, 1.2당량)을 상기 혼합물에 첨가하고, 생성된 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(30㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 물(50㎖), 염수 용액(50㎖)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 얻었고, 이것을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2,3-다이하이드로-1H-인덴-2-카복스아마이드(유리 염기)(100㎎, 49%)를 백색 고체 화합물로서 얻었다.
LCMS 334.1 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.29 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 7.19 (dt, J = 7.3, 3.6 Hz, 2H), 7.12 (dd, J =5.5, 3.2 Hz, 2H), 5.07 (dd, J = 9.3, 2.8 Hz, 1H), 4.22 (ddd, J = 15.8, 11.3, 4.5 Hz, 1H), 4.16 - 4.00 (m,1H), 3.97 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.29 (dd, J = 17.8, 9.2 Hz, 2H), 3.08 (t, J = 6.3 Hz,4H), 2.96 - 2.71 (m, 2H).
실시예 8
(S)-N-(2-(2-사이아노-4, 4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸) 아이소인돌린-2-카복스아마이드의 합성.
Figure pct00111
DCM(3㎖) 중의 (S)-1-(2-아미노아세틸)-4, 4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(50㎎, 0.22m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, Et3N(0.2㎖, 1.1m㏖, 5당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 15분 동안 질소 하에서 교반하였다. 아이소인돌린(26㎎, 0.22m㏖, 1.0당량)을 상기 혼합물에 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃까지 냉각시켰다. 포스젠(톨루엔 중의 20%)(0.6㎖)을 상기 혼합물에 적가로 첨가하였다. 온도를 RT까지 상승시키고, 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(30㎖)로 희석시키고, DCM(50㎖×2)으로 추출하였다. 유기층을 물(50㎖), 염수 용액(50㎖)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 얻었고, 이것을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4, 4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸) 아이소인돌린-2-카복스아마이드(유리 염기)(20㎎, 27%)를 백색 고체 화합물로서 얻었다.
LCMS 335.1 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.34 (dt, J = 7.1, 3.6 Hz, 2H), 7.31 - 7.25 (m, 2H), 6.70 (t, J = 5.8 Hz,1H), 5.07 (dd, J = 9.3, 2.9 Hz, 1H), 4.62 (s, 4H), 4.24 (ddd, J = 16.1, 11.5, 4.6 Hz, 1H), 4.15 - 4.01 (m,1H), 3.90 (t, J = 5.3 Hz, 2H), .97 - 2.71 (m, 2H).
실시예 9
(S)-N-(2-(2-사이아노-4, 4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-메틸-1-옥소-1, 2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드의 합성.
Figure pct00112
DMF(3㎖) 중의 (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(100㎎, 0.44m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, 2-메틸-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복실산(89㎎, 0.44m㏖, 1당량), Et3N(0.06㎖, 0.48m㏖, 1.1당량), HOBt(68㎎, 0.44m㏖, 1당량), DMAP(3㎎, 0.02m㏖, 0.05당량) 및 EDC.HCl(93㎎, 0.48m㏖, 1.1당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(30㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 물(50㎖), 염수 용액(50㎖)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 얻었고, 이것을 정상 콤비 플래시로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-메틸-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드(유리 염기)(80㎎, 48%)를 백색 고체 화합물로서 얻었다.
LCMS 375 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.69 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 8.2 Hz,1H), 7.83 (s, 1H), 7.79 - 7.70 (m, 1H), 7.56 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 9.5, 2.6 Hz, 1H), 4.29 - 3.99(m, 4H), 3.54 (s, 3H), 2.97 - 2.70 (m, 2H).
실시예 10
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-하이드록시퀴놀린-6-카복스아마이드의 합성
Figure pct00113
DMF(5㎖) 중의 2-하이드록시퀴놀린-6-카복실산(0.200g, 1.05m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.261g, 1.16m㏖, 1.1당량), HOBt(0.156g, 1.16m㏖, 1.1당량) 및 EDC.HCl(0.221g, 1.16m㏖, 1.1당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.73㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조물질을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-하이드록시퀴놀린-6-카복스아마이드(0.010g, ~ 5% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 361.2[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 11.97 (br. s., 1H), 8.80 (br. s., 1H), 8.23 (br. s., 1H), 7.89 - 8.04 (m, 2H), 7.35 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 7.45 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 10.96 Hz, 1H), 4.30 (br. s., 2H), 4.15 (d, J = 10.96 Hz, 2H), 2.85 (br. s., 1H), 2.80 (br. s., 1H).
실시예 11
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)테레프탈아마이드의 합성
Figure pct00114
DMF(10㎖) 중의 (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(136㎎, 0.606m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, 4-카바모일벤조산(100㎎, 0.606m㏖, 1당량), Et3N(0.2㎖, 1.818m㏖, 3당량), HOBT(90㎎, 0.666m㏖, 1.1당량), EDC.HCL(128㎎, 0.666m㏖, 1.1당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 물(20㎖×4)염수 용액(50㎖)으로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 얻었고, 이것을 정상 콤비 플래시로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)테레프탈아마이드(유리 염기)(25㎎, 12% 수율)를 회백색 고체 화합물로서 얻었다.
LCMS 337 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 2.79 - 3.00 (m, 3 H) 4.04 - 4.22 (m, 3 H) 4.24 - 4.41 (m, 1 H) 5.10 (d, J=7.02 Hz, 1 H) 7.51 (br. s., 1 H) 7.83 - 8.02 (m, 3 H) 8.09 (br. s., 1 H) 8.92 (d, J=5.70 Hz, 1 H).
실시예 12
(S)-4-사이아노-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(트라이플루오로메틸)벤즈아마이드의 합성
Figure pct00115
화합물 12a. 피리딘(8㎖) 및 물(2㎖) 중의 4-메틸-2-(트라이플루오로메틸)벤조nitrile(0.790g, 4.270m㏖, 1당량)의 용액에 KMnO4(0.675g, 4.270m㏖, 1.0당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 마이크로파 반응기에서 1시간 동안 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS(-ve 모드 질량)로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여과액을 1N HCl로 산성화시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-50% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 4-사이아노-3-(트라이플루오로메틸)벤조산(0.200g, 22% 수율)을 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 214.2(M-1)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (d, J = 4.38 Hz, 1H), 8.32 - 8.42 (m, 2H).
화합물 12. DMF(5㎖) 중의 4-사이아노-3-(트라이플루오로메틸)벤조산(0.200g, 0.930m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.210g, 0.930m㏖, 1.0당량), HOBt(0.151g, 1.116m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.212g, 1.116m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 RT에서 10분 동안 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.4㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(30㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-50% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 (S)-4-사이아노-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(트라이플루오로메틸)벤즈아마이드(0.060g, 17% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 387.1 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 9.35 (br. s., 1H), 8.41 (s, 1H), 8.35 (s, 2H), 5.10 (d, J = 7.89 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 11.62 Hz, 1H), 4.05 - 4.22 (m, 2H), 2.77 - 3.00 (m, 2H), 2.73 (s, 1H).
실시예 13
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-페닐아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00116
화합물 13a. THF(20㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(1.00g, 4.34m㏖, 1.당량)의 용액에 페닐보론산(0.584g, 4.78m㏖, 1.1당량), Na2CO3(0.922g, 8.68m㏖, 2.0당량), 그 다음 Pd(PPh3)2Cl2 (0.153g, 0.217m㏖. 0.05당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-30% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 에틸 3-페닐아이소니코틴에이트(0.300g, 31% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 228.2[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.68 - 8.76 (m, 2H), 7.67 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 7.41 - 7.51 (m, 3H), 7.37 (d, J = 6.14 Hz, 2H), 4.11 (q, J = 7.02 Hz, 2H), 0.98 (t, J = 7.24 Hz, 3H).
화합물 13b. THF(5㎖) 및 물(5㎖) 중의 에틸 3-페닐아이소니코틴에이트(0.250g, 1.10m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.053g, 2.20m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR 분광학으로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(15㎖)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-페닐아이소니코틴산(0.300g, 99% 수율)을 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 200.1[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 8.30 - 8.47 (m, 2H), 7.58 (d, J = 7.02 Hz, 2H), 7.26 - 7.45 (m, 3H), 7.13 (d, J = 4.82 Hz, 1H).
화합물 13. DMF(5㎖) 중의 3-페닐아이소니코틴산(0.200g, 1.00m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.224g, 1.00m㏖, 1.0당량), HOBt(0.163g, 1.206m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.230g, 1.206m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.7㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-50% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-페닐아이소니코틴아마이드(0.050g, 14% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 371.2[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.96 (t, J = 5.48 Hz, 1H), 8.62 - 8.70 (m, 1H), 7.54 (d, J = 6.58 Hz, 1H), 7.29 - 7.51 (m, 3H), 5.10 (d, J = 7.02 Hz, 1H), 4.21 (br. s., 1H), 3.93 - 4.12 (m, 2H), 2.80 (d, J = 13.59 Hz, 2H).
실시예 14
(S)-N-(2-(2-사이아노-4, 4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-5-페닐-1, 6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드의 합성
Figure pct00117
DMF(2㎖) 중의(S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(50㎎, 0.22m㏖, 1 당량)의 교반되는 용액에, 6-옥소-5-페닐-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실산(48㎎, 0.22m㏖, 1 당량), Et3N(0.03㎖, 0.24m㏖, 1.1 당량), HOBt(34㎎, 0.22m㏖, 1 당량), DMAP(2㎎, 0.01m㏖, 0.05 당량) 및 EDC.HCl(46㎎, 0.24m㏖, 1.1 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(30㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 물(50㎖), 염수 용액(50㎖)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 얻었고, 이것을 정상 콤비 플래시로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4, 4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-5-페닐-1, 6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드(유리 염기)(30㎎, 35%)를 회백색 고체 화합물로서 얻었다.
LCMS 387 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.22 (s, 1H), 8.72 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.04(s, 1H), 7.74 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.42 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.35 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 5.09 (dd,J = 9.4, 2.8 Hz, 1H), 4.29 (ddd, J = 15.9, 11.6, 4.6 Hz, 1H), 4.18 - 3.93 (m, 3H), 2.98- 2.70 (m, 2H).
실시예 15
(S)-4-사이아노-N-(2-(2-사이아노-4, 4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-플루오로벤즈아마이드의 합성
Figure pct00118
DMF(3㎖) 중의 (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(100㎎, 0.44m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, 4-사이아노-3-플루오로벤조산(73㎎, 0.44m㏖, 1당량), Et3N(0.06㎖, 0.48m㏖, 1.1당량), HOBt(67㎎, 0.44m㏖, 1당량), DMAP(3㎎, 0.02m㏖, 0.05당량) 및 EDC.HCl(92㎎, 0.48m㏖, 1.1당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(30㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 물(50㎖), 염수 용액(50㎖)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 얻었고, 이것을 정상 콤비 플래시로 정제시켜 (S)-4-사이아노-N-(2-(2-사이아노-4, 4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-플루오로벤즈아마이드(유리 염기)(45㎎, 30%)를 백색 고체 화합물로서 얻었다.
LCMS 337 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.18 (q, J = 8.4, 5.8 Hz, 1H), 8.10 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.91 (dd, J =18.9, 9.1 Hz, 2H), 5.10 (dd, J = 9.3, 2.8 Hz, 1H), 4.31 (ddt, J = 16.3, 11.9, 5.9 Hz, 1H), 4.25 - 4.00 (m,3H), 2.99 - 2.74 (m, 2H).
실시예 16
(S)-N-(2-(2-사이아노-4, 4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-메틸-6-옥소-1, 6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드의 합성
Figure pct00119
DMF(3㎖) 중의 (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(100㎎, 0.44m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, 1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실산(68㎎, 0.44m㏖, 1당량), Et3N(0.06㎖, 0.48m㏖, 1.1당량), HOBt(67㎎, 0.44m㏖, 1당량), DMAP(3㎎, 0.02m㏖, 0.05당량) 및 EDC.HCl(92㎎, 0.48m㏖, 1.1당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(30㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 물(50㎖), 염수 용액(50㎖)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 얻었고, 이것을 정상 콤비 플래시로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드(유리 염기)(30㎎, 21%)를 백색 고체 화합물로서 얻었다.
LCMS 325 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.33-8.66 (d, J = 2.6 Hz, 2H), 7.98 (dd, J = 9.4, 2.7 Hz, 1H), 6.68(d, J = 9.4 Hz, 1H), 5.14 (dd, J = 8.4, 4.4 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 12.1, 7.1 Hz,1H), 4.22 (s, 2H), 4.20 - 4.06 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.06 -2.82 (m, 2H).
실시예 17
(S)-4-사이아노-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)벤즈아마이드의 합성
Figure pct00120
DMF(3㎖) 중의 (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(100㎎, 0.44m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, 4-사이아노벤조산(68㎎, 0.44m㏖, 1당량), Et3N(0.06㎖, 0.48m㏖, 1.1당량), HOBt(67㎎, 0.44m㏖, 1당량), DMAP(3㎎, 0.02m㏖, 0.05당량) 및 EDC.HCl(92㎎, 0.48m㏖, 1.1당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(30㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 물(50㎖), 염수 용액(50㎖)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 얻었고, 이것을 정상 콤비 플래시로 정제시켜 (S)-4-사이아노-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)벤즈아마이드(유리 염기)(35㎎, 25%)를 백색 고체 화합물로서 얻었다.
LCMS 319 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.10 (q, J = 7.5, 5.8 Hz, 1H), 8.01 (q, J = 8.0 Hz, 5H), 5.10 (dd, J =9.4, 2.8 Hz, 1H), 4.30 (ddd, J = 16.1, 11.8, 4.8 Hz, 1H), 4.14 (qt, J = 17.2, 8.4 Hz, 3H), 17.9, 14.3, 9.9 Hz, 2H).
실시예 18
(S)-4-사이아노-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-(트라이플루오로메틸)벤즈아마이드의 합성
Figure pct00121
DMF(10㎖) 중의 3-페닐아이소니코틴산(0.100g, 0.46m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.104g, 0.46m㏖, 1.0당량), HOBt(0.068g, 0.50m㏖, 1.1당량) 및 EDC.HCl(0.96g, 0.50m㏖, 1.1당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.19㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-4-사이아노-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-2-(트라이플루오로메틸)벤즈아마이드(0.030g, 17% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 387.2 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.05 (br. s., 1H), 8.40 (s, 1H), 8.28 (d, J = 7.45 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 7.89 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 7.02 Hz, 1H), 4.27 (t, J = 15.13 Hz, 1H), 4.01 - 4.21 (m, 3H), 2.72 - 2.99 (m, 3H).
실시예 19
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-4-페닐퀴놀린-6-카복스아마이드의 합성
Figure pct00122
화합물 19a. 0℃에서 MeOH(10㎖) 중의 퀴놀린-6-카복실산(1.00g, 5.7m㏖, 1당량)의 용액에 SOCl2(2.06㎖, 17.30m㏖, 3.0당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 밤새 가열시켰다. 반응이 완결된 후(TLC) 혼합물을 포화 NaHCO3로 염기성화시키고, DCM(100㎖×2)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 메틸 퀴놀린-6-카복실레이트(1.00g, 98% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다.
LCMS 188.2 [M+H]+
화합물 19b. DCM(30㎖) 중의 메틸 퀴놀린-6-카복실레이트(1.00g, 5.3m㏖, 1당량)의 용액에 mCPBA(1.84g, 10.6m㏖, 2당량)를 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 반응이 완결된 후(TLC) 혼합물을 포화 NaHCO3(40㎖)로 희석시키고, DCM(100㎖×2)으로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 잔류물을 얻었고, 이것을 에틸 아세테이트 중에서 결정화시켜 6-(메톡시카보닐)퀴놀린 1-옥사이드(1.00g, 92% 수율)를 얻었다.
LCMS 204.2 [M+H]+
화합물 19c. 6-(메톡시카보닐)퀴놀린 1-옥사이드(0.900g, 4.4m㏖ 1당량)를 질소 분위기 하에서 50㎖ RB로 취하고, 이것에 POCl3(5㎖)를 첨가하고, 이어서 생성된 혼합물을 2시간 동안 질소 분위기 하에서 교반하였다. 반응이 완결된 후(TLC) 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 생성된 잔류물을 DCM(100㎖)에 용해시키고, 포화 NaHCO3(25㎖×3)로 세척하였다. 유기층을 분리시키고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조물질을 얻었고, 이것을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-20% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 4-클로로퀴놀린-6-카복실레이트(0.300g, 30% 수율)를 얻었다.
LCMS 222.1 [M+H]+
화합물 19d. 촉매량의THF(5㎖) 중의 메틸 4-클로로퀴놀린-6-카복실레이트(300㎎, 1.30m㏖, 1.0당량)의 용액에, 페닐보론산(198㎎, 1.60m㏖, 1.2당량), Na2CO3(287㎎, 2.70m㏖, 2.0당량) 및 촉매량의 Pd(PPh3)2Cl2 (47㎎, 0.069m㏖, 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응이 완결된 후 반응 혼합물을 물(30㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조물질을 얻었고, 이것을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-20% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 4-페닐퀴놀린-6-카복실레이트(0.300g, 84% 수율)를 얻었다.
LCMS 264.1 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.08 (d, J = 4.38 Hz, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.08 - 8.35 (m, 2H), 7.48 - 7.69 (m, 5H), 3.86 (s, 3H).
화합물 19e. THF(5㎖) 및 물(5㎖)중의 에틸 3-페닐아이소니코틴에이트(0.360g, 1.30m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.098g, 4.10m㏖, 3.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시켜 4-페닐퀴놀린-6-카복실산(0.420g, 100% 수율)을 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 249.9 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.88 (d, J = 4.38 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.27 (d, J = 8.77 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 8.77 Hz, 1H), 7.49 - 7.65 (m, 4H), 7.39 (d, J = 4.38 Hz, 1H).
화합물 19. DMF(5㎖) 중의 4-페닐퀴놀린-6-카복실산(0.200g, 0.80m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.180g, 0.80m㏖, 1.0당량), HOBt(0.118g, 0.88m㏖, 1.1당량) 및 EDC.HCl(0.168g, 0.88m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.4㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-4-페닐퀴놀린-6-카복스아마이드(0.030g, 9% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 421.2 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.04 (d, J = 4.38 Hz, 2H), 8.43 (s, 1H), 8.12 - 8.28 (m, 2H), 7.61 (s, 3H), 7.55 (d, J = 4.38 Hz, 2H), 5.09 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 4.29 (br. s., 1H), 4.04 - 4.23 (m, 2H), 2.90 (br. s., 2H), 2.81 (d, J = 17.54 Hz, 2H).
실시예 20
(2R,3R)-N-(2-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-에틸-6-옥소-2-페닐피페리딘-3-카복스아마이드의 합성
Figure pct00123
DMF(5㎖) 중의 (2R,3R)-1-에틸-6-옥소-2-페닐피페리딘-3-카복실산(0.200g, 0.809m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.200g, 0.890m㏖, 1.0당량), HOBt(0.163g, 1.21m㏖, 1.5당량) 및 EDC.HCl(0.230g, 1.21m㏖, 1.5당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.4㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (2R,3R)-N-(2-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-에틸-6-옥소-2-페닐피페리딘-3-카복스아마이드(0.040g, 12% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 419.3 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.26 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 7.17 - 7.43 (m, 4H), 5.07 (t, J = 9.65 Hz, 1H), 4.88 (d, J = 5.26 Hz, 1H), 4.17 (t, J = 12.06 Hz, 1H), 3.95 - 4.11 (m, 2H), 3.77 - 3.90 (m, 1H), 3.58 - 3.74 (m, 1H), 2.87 (dd, J = 5.26, 9.65 Hz, 1H), 2.72 - 2.83 (m, 2H), 2.27 - 2.46 (m, 3H), 1.84 (d, J = 6.58 Hz, 2H), 0.92 (t, J = 6.36 Hz, 3H).
실시예 21
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-4-옥소-4,6,7,8,9,10-헥사하이드로피리도[1,2-a]아제핀-1-카복스아마이드의 합성
Figure pct00124
DMF(2㎖) 중의 4-옥소-4,6,7,8,9,10-헥사하이드로피리도[1,2-a]아제핀-1-카복실산(0.050g, 0.241m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.060g, 0.265m㏖, 1.1당량), DMAP(0.002g, 0.0120m㏖, 0.05당량), HOBt(0.050g, 0.362m㏖, 1.5당량) 및 EDC.HCl(0.070g, 0.362m㏖, 1.5당량)을 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 10분 동안 교반하고, Et3N(0.1㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(25㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(10㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-4-옥소-4,6,7,8,9,10-헥사하이드로피리도[1,2-a]아제핀-1-카복스아마이드(0.015g, 17% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 379.3 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.51 (d, J = 5.70 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 9.21 Hz, 1H), 6.30 (d, J = 9.65 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 7.02 Hz, 1H), 4.34 (br. s., 2H), 4.17 - 4.31 (m, 2H), 3.96 - 4.15 (m, 3H), 3.09 (br. s., 2H), 2.72 - 2.92 (m, 2H), 1.69 (br. s., 3H), 1.59 (br. s., 2H).
실시예 22
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-옥소-1H-아이소크로멘-4-카복스아마이드의 합성
Figure pct00125
DMF(5㎖) 중의 1-옥소-1H-아이소크로멘-4-카복실산(0.200g, 1.04m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.235g, 1.04m㏖, 1.0당량), HOBt(0.168g, 1.24m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.235g, 1.24m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.5㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1-옥소-1H-아이소크로멘-4-카복스아마이드(0.030g, 15% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 362.2 [M+H] +
1H NMR 400 MHz, DMSO-d6) δ 8.90 (br. s., 1H), 8.22 (d, J = 7.02 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 7.89 Hz, 1H), 7.93 (s, 2H), 7.57 - 7.74 (m, 1H), 5.14 (d, J = 6.58 Hz, 1H), 4.01 - 4.22 (m, 2H), 2.83 (d, J = 17.98 Hz, 2H), 1.87 (s, 2H).
실시예 23
(S)-N-(1-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-카보닐)사이클로프로필)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드의 합성
Figure pct00126
화합물 23a. DMF(2㎖) 중의 1-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로프로판-1-카복실산(201㎎, 1.00m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, HATU(760㎎, 2.00m㏖, 2.0당량), 그 다음 (S)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(305㎎, 1.00m㏖, 1.0당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 RT에서 10분 동안 교반하였다. DIPEA(0.86㎖, 5.00m㏖, 5.0당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 1H NMR로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(25㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(25㎖×4)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-50% 에틸 아세테이트)로 농축시켜 tert-부틸 (S)-(1-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-카보닐)사이클로프로필)카바메이트(300㎎, 95% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 315.2 [M+H] +
화합물 23b. MeCN(5㎖) 중의 tert-부틸 (S)-(1-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-카보닐)사이클로프로필)카바메이트(468㎎, 1.48m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, pTsOH(383㎎, 2.22m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 NMR로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 용매를 감압 하에서 제거하여 (S)-1-(1-아미노사이클로프로판-1-카보닐)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 4-메틸벤젠설포네이트(898㎎, 정량)를 백색 고체 화합물로서 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (br. s., 1H), 7.42 - 7.54 (m, 2H), 7.09 - 7.20 (m, J = 7.89 Hz, 2H), 5.10 - 5.28 (m, 1H), 4.14 - 4.31 (m, 1H), 3.87 - 4.11 (m, 1H), 2.74 - 3.03 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 1.42 - 1.67 (m, 1H), 1.31 - 1.41 (m, 1H).
화합물 23. DMF(5㎖) 중의 1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복실산(0.398g, 2.10m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-1-(1-아미노사이클로프로판-1-카보닐)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 4-메틸벤젠설포네이트(0.816g, 2.10m㏖, 1.0당량), HOBt(0.311g, 2.31m㏖, 1.1당량) 및 EDC.HCl(0.441g, 2.31m㏖, 1.1당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.87㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(30㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 MeOH에서 결정화시켜 (S)-N-(1-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-카보닐)사이클로프로필)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드(0.140g, 17% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 387.2 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ11.79 (br. s., 1H), 10.72 (br. s., 1H), 8.24 (d, J = 7.89 Hz, 1H), 7.76 (t, J = 7.67 Hz, 1H), 7.54 (t, J = 7.45 Hz, 1H), 5.40 (br. s., 1H), 4.22 (d, J = 11.40 Hz, 1H), 3.68 (d, J = 11.84 Hz, 1H), 2.87 (br. s., 1H), 2.78 (d, J = 14.03 Hz, 1H), 1.65 (br. s., 1H), 1.40 (br. s., 1H), 1.15 - 1.23 (m, 1H), 1.12 (br. s., 1H).
실시예 24
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-사이클로프로필아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00127
화합물 24a. 톨루엔(30㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.5g, 2.32m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에 사이클로프로필보론산(0.398g, 4.63m㏖, 2.0당량), K2CO3(0.958g, 6.95m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4(0.133g, 0.116m㏖, 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트®층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-15% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-사이클로프로필아이소니코틴에이트(0.360g, 87.8% 수율)를 황색 액체로서 얻었다.
LCMS 178.2[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.51 (d, J = 5.26 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.56 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 2.35 (d, J = 14.03 Hz, 1H), 0.96 - 1.04 (m, 2H), 0.80 - 0.87 (m, 2H).
화합물 24b. THF(10㎖) 및 물(5㎖) 중의 메틸 3-사이클로프로필아이소니코틴에이트(0.420g, 2.37m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.170g, 7.11m㏖, 및 3.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR로 확인하였다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(15㎖)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-사이클로프로필아이소니코틴산(0.380g, 100% 수율)을 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 164.1 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ8.54 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.66 (d, J = 5.26 Hz, 1H), 2.42 - 2.46 (m, 1H), 0.99 - 1.07 (m, 2H), 0.78 - 0.94 (m, 2H).
화합물 24. DMF(5㎖) 중의 3-사이클로프로필아이소니코틴산(0.200g, 1.22m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.33g, 1.46m㏖, 1.2당량) 및 TBTU(0.587g, 1.83m㏖, 1.5당량)를 첨가하고, 혼합물을 RT에서 10분 동안 계속 교반하였다. N-메틸몰폴린(0.4㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-50% 에틸 아세테이트)로 정제시키고, 그 다음 역상으로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-사이클로프로필아이소니코틴아마이드(0.065g, 16% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 335.2[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.85 (br. s., 1H), 8.44 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.26 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 11.84 Hz, 1H), 4.05 - 4.17 (m, 2H), 2.90 (br. s., 1H), 2.81 (d, J = 17.10 Hz, 2H), 2.22 (d, J = 5.26 Hz, 1H), 0.97 (d, J = 8.33 Hz, 2H), 0.74 - 0.90 (m, 2H).
실시예 25
N-(1-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-1-옥소프로판-2-일)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드의 합성
Figure pct00128
화합물 25a. DMF(3㎖) 중의 (tert-부톡시카보닐)알라닌(140㎎, 0.73m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, HATU(555㎎, 1.46m㏖, 2.0당량), 그 다음(S)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(225㎎, 0.73m㏖, 1.0당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 RT에서 10분 동안 교반하였다. DIPEA(0.63㎖, 3.65m㏖, 5.0당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 1H NMR로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(25㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(25㎖×4)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-50% 에틸 아세테이트)로 농축시켜 tert-부틸 (1-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-1-옥소프로판-2-일)카바메이트(280㎎, 정량)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 304.2.2 [M+H] +
화합물 25b. ACN(5㎖) 중의 tert-부틸 (1-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-1-옥소프로판-2-일)카바메이트(500㎎, 1.65m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, PTSA(425㎎, 2.40m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 NMR로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 용매를 감압 하에서 제거하여 (2S)-1-알라닐-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 4-메틸벤젠설포네이트(630㎎, 정량)를 백색 고체 화합물로서 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ8.22 (br. s., 2H), 7.44 - 7.52 (m, 2H), 7.06 - 7.17 (m, J = 7.89 Hz, 2H), 5.12 (d, J = 9.21 Hz, 1H), 4.21 (br. s., 1H), 3.61 (d, J = 4.38 Hz, 1H), 3.07 - 3.26 (m, 1H), 2.77 - 2.96 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 1.20 - 1.26 (m, 3H).
화합물 25. DMF(5㎖) 중의 1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복실산(0.100g, 0.53m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (2S)-1-알라닐-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 4-메틸벤젠설포네이트(0.200g, 0.53m㏖, 1.0당량), HOBt(0.078g, 0.58m㏖, 1.1당량) 및 EDC.HCl(0.111g, 0.58m㏖, 1.1당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.22㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 순수한 MeOH에서 결정화시켜 N-(1-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-1-옥소프로판-2-일)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드(0.120g, 60% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 375.3 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.64 (br. s., 1H), 8.77 (dd, J = 6.80, 18.20 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 7.89 Hz, 2H), 7.73 (br. s., 1H), 7.45 - 7.65 (m, 2H), 4.98 - 5.16 (m, 1H), 4.62 (d, J = 5.70 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 17.54 Hz, 2H), 2.92 (br. s., 1H), 2.85 (br. s., 1H), 1.26 - 1.44 (m, 3H).
실시예 26
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드의 합성
Figure pct00129
DMF(12㎖) 중의 6-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복실산(0.80g, 0.386m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.173g, 0.772m㏖, 2.0당량) 및 TBTU(0.136g, 0.425m㏖, 1.1당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. N-메틸몰폴린(0.3㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(15㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 0-5% 메탄올)로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드(0.015g, 10.3% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 379.2 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.74 (br. s., 1H), 8.72 (br. s., 1H), 8.29 (br. s., 1H), 8.07 (d, J = 13.16 Hz, 1H), 7.66 (br. s., 1H), 7.41 (d, J = 7.89 Hz, 1H), 5.13 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 4.28 (d, J = 16.22 Hz, 1H), 4.05 - 4.21 (m, 3H), 2.82 (d, J = 10.09 Hz, 2H).
실시예 27
N-[2-[(2S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로-피롤리딘-1-일]-2-옥소-에틸]-3-메톡시-피리딘-4-카복스아마이드의 합성
Figure pct00130
DMF(3㎖) 중의 교반되는 용액에 3-메톡시피리딘-4-카복실산(0.100g, 0.65m㏖, 1.0당량), (2S)-1-(2-아미노아세틸)-4,4-다이플루오로-피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.146g, 0.65m㏖, 1.0당량), HOBt(0.105g, 0.78m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.149g, 0.78m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.3㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(40㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(15㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 헥산으로 세척하고, 다이에틸 에터로 결정화시켜 N-[2-[(2S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로-피롤리딘-1-일]-2-옥소-에틸]-3-메톡시-피리딘-4-카복스아마이드(0.060g, 28% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 325.2 [M+H] +
1H NMR (DMSO-d6 ,400MHz): δ= 8.66 - 8.72 (m, 1 H), 8.59 (s, 1 H), 8.35 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 7.66 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 5.12 (dd, J=9.0, 2.4 Hz, 1 H), 4.15 - 4.34 (m, 2 H), 4.11 (d, J=11.8 Hz, 2 H), 3.99 (s, 3 H), 2.89 (d, J=3.1 Hz, 1 H), 2.82 ppm (d, J=8.8 Hz, 1 H).
실시예 28
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(트라이플루오로메틸)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00131
DMF(7㎖) 중의 3-(트라이플루오로메틸)아이소니코틴산(0.100g, 0.523m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 4-메틸벤젠설포네이트(0.226g, 0.627m㏖, 1.2당량) 및 TBTU(0.201g, 0.627m㏖, 1.2당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. N-메틸몰폴린(0.2㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(25㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(25㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 헥산 중의 20% DCM으로 재결정화시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(트라이플루오로메틸)아이소니코틴아마이드(0.070g, 37% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS 363.2 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ9.09 (br. s., 1H), 9.04 (s, 1H), 8.98 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 5.13 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 4.26 (d, J = 15.79 Hz, 1H), 4.18 (br. s., 1H), 4.11 (d, J = 11.84 Hz, 2H), 2.82 (d, J = 15.35 Hz, 1H), 2.73 (s, 1H).
실시예 29
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-바이닐아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00132
화합물 40a. 다이옥산:물(1:1)(12㎖) 중의 3-브로모아이소니코틴산(0.300g, 1.49m㏖, 1.0당량)의 용액에 화합물 4,4,5,5-테트라메틸-2-바이닐-1,3,2-다이옥사보롤란(0.34g, 2.21m㏖, 2.0당량), K2CO3(0.31g, 2.23m㏖, 1.5당량)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4(0.086g, 0.074m㏖. 0.05당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결 건조시켜 3-바이닐아이소니코틴산(정량 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 150.2 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.65 (s, 1H), 8.29 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 7.26 - 7.39 (m, 1H), 7.23 (d, J = 4.38 Hz, 1H), 5.74 (d, J = 17.98 Hz, 1H), 5.19 (d, J = 10.96 Hz, 1H).
화합물 40. DMF(15㎖) 중의 화합물 3-바이닐아이소니코틴산(0.200g, 1.342m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.453g, 2.013m㏖, 1.5당량) 및 TBTU(0.646g, 2.013m㏖, 1.5당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. N-메틸몰폴린(0.5㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×6)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시키고, 그 다음 역상 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-바이닐아이소니코틴아마이드(0.012g, 3% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 320.2 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.85 - 9.00 (m, 1H), 8.56 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 4.82Hz, 1H), 7.02 (dd, J = 11.40, 17.54 Hz, 1H), 6.01 (d, J = 17.54 Hz, 1H), 5.43 (d, J = 10.96 Hz, 1H), 5.14 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 4.28 (br. s., 1H), 3.99 - 4.21 (m, 3H), 2.91 (br. s., 1H), 2.82 (d, J = 17.54 Hz, 1H), 2.67 (br. s., 1H).
실시예 30
N-[2-[(2S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로-피롤리딘-1-일]-2-옥소-에틸]-3-(1-피페리딜)피리딘-4-카복스아마이드의 합성
Figure pct00133
DMF(3㎖) 중의 3-(1-피페리딜)피리딘-4-카복실산(0.100g, 0.49m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (2S)-1-(2-아미노아세틸)-4,4-다이플루오로-피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.110g, 0.49m㏖, 1.0당량), HOBt(0.078g, 0.58m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.110g, 0.58m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.21㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(40㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(15㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피(DCM 중의 2% MeOH)로 정제시켜 N-[2-[(2S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로-피롤리딘-1-일]-2-옥소-에틸]-3-(1-피페리딜)피리딘-4-카복스아마이드(0.050g, 27.32% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 378.3 [M+H] +
1H NMR (DMSO-d6 ,400MHz) δ 9.78 (br. s., 1 H), 8.58 (br. s., 1 H), 8.40 (br. s., 1 H), 7.64 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 5.14 (d, J=9.2 Hz, 1 H), 4.17 - 4.37 (m, 2 H), 4.01 - 4.17 (m, 1 H), 2.94 - 3.07 (m, 3 H), 2.90 (br. s., 1 H), 2.82 (d, J=9.6 Hz, 1 H), 1.72 (br. s., 3 H), 1.53 ppm (br. s., 2 H).
실시예 31
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(3,5-다이플루오로페닐)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00134
화합물 47a. 톨루엔(15㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.25g, 1.16m㏖, 1.0당량)의 용액에 (3,5-다이플루오로페닐)보론산(0.366g, 2.315m㏖, 2.0당량), K2CO3 (0.48g, 3.472m㏖, 3.0당량)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4(0.69g, 0.058m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-10% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-(3,5-다이플루오로페닐)아이소니코틴에이트(0.34g, 정량)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 250.2[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ8.80 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.77 (d, J = 5.26 Hz, 1H), 7.27 - 7.45 (m, 1H), 7.16 (d, J = 6.58 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H).
화합물 47b. THF(10㎖) 및 물(5㎖) 중의 메틸 3-(3,5-다이플루오로페닐)아이소니코틴에이트(0.34g, 1.364m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.98g, 4.08m㏖, 3.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR 분광학으로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(15㎖)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(3,5-다이플루오로페닐)아이소니코틴산(0.340g, 정량 회백색 고체로서)을 얻었다.
LCMS 236.2 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ8.45 (s, 1H), 8.41 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 7.02 Hz, 2H), 7.05 - 7.22 (m, 2H).
화합물 47. DMF(10㎖) 중의 3-(3,5-다이플루오로페닐)아이소니코틴산(0.200g, 0.845m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.38g, 1.46m㏖, 2.0당량) 및 TBTU(0.587g, 1.83m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. N-메틸몰폴린 (0.4㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-50% 에틸 아세테이트)로 정제시켜, 그 다음 역상 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(3,5-다이플루오로페닐)아이소니코틴아마이드(0.020g, 5.8% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 407.3 [M+H]+
1H NMR (DMSO-d6 ,400MHz) δ 9.01 (br. s., 1 H), 8.65 - 8.74 (m, 1 H), 7.49 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 7.22 - 7.33 (m, 1 H), 5.08 (d, J=7.0 Hz, 1 H), 4.15 - 4.33 (m, 1 H), 3.92 - 4.15 (m, 3 H), 2.89 (br. s., 1 H), 2.79 ppm (d, J=13.2 Hz, 1 H).
실시예 32
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(4-플루오로페닐)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00135
화합물 52a. 톨루엔(15㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.2g, 0.93m㏖, 1.0당량)의 용액에 (4-플루오로페닐)보론산(0.21g, 1.85m㏖, 2.0당량), K2CO3 (0.38g, 2.78m㏖, 3.0당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4(0.054g, 0.046m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-20% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-(4-플루오로페닐)아이소니코틴에이트(0.185g, 83.3%)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 232.2 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.74 (d, J = 5.26 Hz, 1H), 8.70 (s, 1H), 7.70 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 7.42 (dd, J = 5.70, 8.33 Hz, 2H), 7.31 (t, J = 8.77 Hz, 2H), 3.68 (s, 3H).
화합물 52b. THF(20㎖) 및 물(10㎖) 중의 메틸 3-(4-플루오로페닐)아이소니코틴에이트(0.37g, 1.601m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.192g, 8.01m㏖, 5.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR 분광학으로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(15㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결 건조시켜 3-(4-플루오로페닐)아이소니코틴산(정량 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 218.2 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (s, 1H), 8.36 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 5.92, 8.11 Hz, 2H), 7.18 (t, J = 8.77 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 4.82 Hz, 1H).
화합물 52. DMF(20㎖) 중의 3-(4-플루오로페닐)아이소니코틴산(0.200g, 0.92m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.228g, 1.014m㏖, 1.1당량) 및 TBTU(0.325g, 1.014m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. N-메틸몰폴린 (0.3㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시키고, 그 다음 역상 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(4-플루오로페닐)아이소니코틴아마이드(0.005g, 2% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 389.3 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.97 (br. s., 1H), 8.65 (br. s., 2H), 7.57 (br. s., 2H), 7.45 (br. s., 1H), 7.23 (br. s., 2H), 5.08 (br. s., 1H), 4.20 (br. s., 1H), 4.05 (br. s., 2H), 2.87 (br. s., 1H), 2.81 (br. s., 2H).
실시예 33
(S)-3-(5-클로로-2-플루오로페닐)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00136
화합물 54a. 톨루엔(15㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.25g, 1.16m㏖, 1.0당량)의 용액에 (5-클로로-2-플루오로페닐)보론산(0.403g, 2.315m㏖, 2.0당량), K2CO3(0.48g, 3.472m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4(0.69g, 0.058m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-10% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-(5-클로로-2-플루오로페닐)아이소니코틴에이트(0.400g, 정량, 회백색 고체로서)를 얻었다.
LCMS 266.2[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.84 (d, J = 5.26 Hz, 1H), 8.73 (s, 1H), 7.83 (d, J = 5.26 Hz, 1H), 7.49 - 7.68 (m, 2H), 7.29 - 7.41 (m, 2H), 3.72 (s, 3H).
화합물 54b. THF(20㎖) 및 물(10㎖) 중의 화합물 메틸 3-(5-클로로-2-플루오로페닐)아이소니코틴에이트(0.4g, 1.504m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.108g, 4.51m㏖, 3.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR 분광학으로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(15㎖)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(5-클로로-2-플루오로페닐)아이소니코틴산(0.400 정량, 백색 고체로서)을 얻었다.
LCMS 252.2 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ8.46 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.32 - 7.52 (m, 3H), 7.24 (t, J = 9.21 Hz, 1H).
화합물 54. DMF(20㎖) 중의 화합물 3-(5-클로로-2-플루오로페닐)아이소니코틴산(0.200g, 0.796m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.358g, 1.59m㏖, 2.0당량) 및 TBTU(0.383g, 1.19m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. N-메틸몰폴린 (0.3㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-50% 에틸 아세테이트)로 정제시키고, 그 다음 역상 정제시켜 (S)-3-(5-클로로-2-플루오로페닐)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드(0.055g, 16.41% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 423.2 [M+H]+
1H NMR 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ8.92 (br. s., 1H), 8.78 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 8.64 (s, 1H), 7.61 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 7.02 Hz, 2H), 7.31 (s, 1H), 5.07 (d, J = 9.21 Hz, 1H), 3.93 - 4.09 (m, 2H), 2.80 (br. s., 2H).
실시예 34
N-(2-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-4-옥소-3,4,4a,8a-테트라하이드로프탈라진-1-카복스아마이드의 합성
Figure pct00137
DMF(5㎖) 중의 4-옥소-3,4,4a,8a-테트라하이드로프탈라진-1-카복실산(0.200g, 1.05m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 4-메틸벤젠설포네이트(0.380g, 1.05m㏖, 1.0당량), HOBt(0.170g, 1.26m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.240g, 1.26m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.3㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 N-(2-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-4-옥소-3,4,4a,8a-테트라하이드로프탈라진-1-카복스아마이드(0.110g, 29% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 363 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ13.04 (s, 1H), 8.84 (br. s., 1H), 8.61 (d, J = 7.45 Hz, 1H), 8.30 (d, J = 7.89 Hz, 1H), 7.94 - 7.99 (m, 1H), 7.90 (d, J = 7.02 Hz, 1H), 5.14 (d, J = 6.58 Hz, 1H), 4.30 (br. s., 1H), 4.12 - 4.23 (m, 2H), 4.08 (d, J = 11.84 Hz, 1H), 2.91 (br. s., 1H), 2.83 (d, J = 17.98 Hz, 1H).
실시예 35
N-[2-[(2S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로-피롤리딘-1-일]-2-옥소-에틸]-3-메틸-4-옥소-프탈라진-1-카복스아마이드의 합성
Figure pct00138
DMF(3㎖) 중의 3-메틸-4-옥소-프탈라진-1-카복실산(0.100g, 0.49m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (2S)-1-(2-아미노아세틸)-4,4-다이플루오로-피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.110g, 0.49m㏖, 1.0당량), HOBt(0.080g, 0.59m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.113g, 0.59m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.21㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(30㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(15㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 헥산으로 세척하고, 다이에틸 에터로 결정화시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-메틸-4-옥소-3,4-다이하이드로프탈라진-1-카복스아마이드(0.040g, 21.7% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 376.3 [M+H] +
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ= 8.93 (t, J=5.7 Hz, 1 H), 8.66 (d, J=7.9 Hz, 1 H), 8.33 (d, J=7.9 Hz, 1 H), 7.86 - 8.03 (m, 2 H), 5.14 (d, J=7.0 Hz, 1 H), 4.31 (br. s., 1 H), 4.07 - 4.24 (m, 3 H), 2.92 (br. s., 1 H), 2.83 ppm (d, J=17.1 Hz, 1 H).
실시예 36
(S)-N-(4-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-4-옥소부틸)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드의 합성
Figure pct00139
화합물 82a. DMF(4㎖) 중의 4-((tert-부톡시카보닐)아미노)부탄산(200㎎, 0.98m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, HATU(745㎎, 1.96m㏖, 2.0당량), 그 다음 (S)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(599㎎, 1.97m㏖, 2.0당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 RT에서 10분 동안 교반하였다. DIPEA(0.8㎖, 4.7m㏖, 5.0당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(25㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(25㎖×4)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-50% 에틸 아세테이트)로 농축시켜 tert-부틸 (S)-(4-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-4-옥소부틸)카바메이트(267㎎, 85% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 318.3 [M+H] +
화합물 82b. ACN(3㎖) 중의 tert-부틸 (S)-(4-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-4-옥소부틸)카바메이트(267㎎, 0.84m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, PTSA(217㎎, 1.26m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 NMR로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 용매를 감압 하에서 제거하여 (S)-1-(4-아미노부탄오일)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 4-메틸벤젠설포네이트(425㎎, 정량)를 백색 고체 화합물로서 얻었다.
1H NMR (DMSO-d6 ,400MHz) δ 7.68 (br. s., 2 H), 7.48 (d, J=8.3 Hz, 2 H), 7.12 (d, J=7.9 Hz, 2 H), 5.04 (d, J=9.2 Hz, 1 H), 4.07 (d, J=15.8 Hz, 1 H), 3.91 - 4.02 (m, 1 H), 2.77 - 2.93 (m, 2 H), 2.38 - 2.44 (m, 1 H), 2.29 (s, 4 H), 1.99 - 2.12 (m, 2 H), 1.69 - 1.86 ppm (m, 3 H).
화합물 82. DMF(3㎖) 중의 1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복실산(206㎎, 1.09m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-1-(4-아미노부탄오일)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 4-메틸벤젠설포네이트(425㎎, 1.09m㏖, 1.0당량), HOBt(160㎎, 1.19m㏖, 1.1당량) 및 EDC.HCl(229㎎, 1.19m㏖, 1.1당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.4㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 순수한 MeOH에서 결정화시켜 (S)-N-(4-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-4-옥소부틸)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-4-카복스아마이드(17㎎, 4% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 389.3 [M+H] +
1H NMR (DMSO-d6 ,400MHz) δ 11.57 (br. s., 1 H), 8.34 (br. s., 1 H), 8.22 (d, J=7.9 Hz, 2 H), 7.73 (t, J=7.5 Hz, 1 H), 7.42 - 7.60 (m, 2 H), 5.05 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 3.90 - 4.20 (m, 4 H), 3.22 - 3.29 (m, 2 H), 2.86 (br. s., 1 H), 2.78 (d, J=12.3 Hz, 1 H), 2.20 - 2.40 (m, 2 H), 1.69 - 1.86 ppm (m, 2 H).
실시예 37
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-5-카복스아마이드의 합성
Figure pct00140
DMF(10㎖) 중의 1H-인다졸-5-카복실산(0.200g, 1.2m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 PTSA (0.444g, 1.2m㏖, 1.0당량), HOBt(0.198g, 1.46m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.280g, 1.46m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.4㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1H-인다졸-5-카복스아마이드(0.020g, 10% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 334 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.29 (br. s., 1H), 8.79 (br. s., 1H), 8.38 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.77 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.77 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 8.77 Hz, 1H), 4.31 (br. s., 1H), 4.04 - 4.21 (m, 3H), 2.90-2.81 (m, 2H).
실시예 38
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)퓨로[2,3-c]피리딘-2-카복스아마이드의 합성
Figure pct00141
DMF(10㎖) 중의 퓨로[2,3-c]피리딘-2-카복실산(0.050g, 0.30m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 4-메틸벤젠설포네이트(0.110g, 0.30m㏖, 1.0당량), HOBt(0.049g, 0.36m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.069g, 0.36m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.1㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)퓨로[2,3-c]피리딘-2-카복스아마이드(0.020g, 19% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 335 [M+H] +
1H NMR (DMSO-d6 ,400MHz) δ (br. s., 1 H), 9.09 (s, 1 H), 8.49 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.84 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.69 (s, 1 H), 5.11 (d, J=9.6 Hz, 1 H), 4.25 - 4.39 (m, 1 H), 4.04 - 4.22 (m, 3 H), 2.72 - 3.00 ppm (m, 3 H).
실시예 39
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)피라졸로[1,5-a]피리딘-5-카복스아마이드의 합성
Figure pct00142
DMF(2㎖) 중의 피라졸로[1,5-a]피리딘-5-카복실산(0.100g, 0.61m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 4-메틸벤젠설포네이트(0.222g, 0.61m㏖, 1.0당량), HOBt(0.93g, 0.67m㏖, 1.1당량) 및 EDC.HCl(0.129g, 0.67m㏖, 1.1당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.2㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)피라졸로[1,5-a]피리딘-5-카복스아마이드(0.030g, 15% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 334.2 [M+H] +
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.02 (br. s., 1 H), 8.78 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 8.29 (br. s., 1 H), 8.11 (s, 1 H), 7.30 (d, J = 7.0 Hz, 1 H), 6.85 (br. s., 1 H), 5.11 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 4.42 - 4.23 (m, 1 H), 4.23 - 4.05 (m, 3 H), 3.01 - 2.72 (m, 3 H).
실시예 40
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-메톡시-2-페닐니코틴아마이드의 합성
Figure pct00143
화합물 86a. MeOH(50㎖) 중의 2,6-다이클로로니코틴산(2.0g, 10.41m㏖, 1.0당량)의 용액에 화합물 칼륨 tert-부톡사이드(4.7g, 41.66m㏖, 4.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응의 완결 후, 반응 혼합물을 농축시키고, 물(50㎖)로 희석시켰다. 수성층을 에틸 아세테이트(30㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수(50㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시켜 2-클로로-6-메톡시니코틴산(1.8g, 96.4%)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 188 [M+H]+
1H NMR 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.33 (br. s., 1H), 8.06 - 8.24 (m, 1H), 6.92 (d, J = 8.77 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H).
화합물 86b. 다이옥산(10㎖) 중의 2-클로로-6-메톡시니코틴산(0.200g, 1.07m㏖, 1.0당량)의 용액에 페닐보론산(0.195g, 1.604m㏖, 1.5당량), Na2CO3(0.23g, 2.14m㏖, 2.0당량)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4(0.062g, 0.054m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 0-2% MeOH)로 정제시켜 6-메톡시-2-페닐니코틴산(0.07g, 28.6%)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 230 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.89 (br. s., 1H), 8.17 (d, J = 6.58 Hz, 3H), 7.67 (d, J = 7.45 Hz, 1H), 7.38 - 7.60 (m, 3H), 4.04 (s, 3H).
화합물 86. DMF(5㎖) 중의 6-메톡시-2-페닐니코틴산(0.050g, 0.218m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.073g, 0.327m㏖, 1.5당량) 및 TBTU(0.104g, 0.327m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. N-메틸몰폴린 (0.1㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(10㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시키고, 그 다음 역상 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-메톡시-2-페닐니코틴아마이드(0.015g, 17.2% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 401.2 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.76 (br. s., 1H), 8.48 (s, 2H), 7.79 (d, J = 8.33 Hz, 2H), 7.39 (br.s., 2H), 6.86 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 7.45 Hz, 1H), 4.23 (br. s., 1H), 3.98 - 4.12 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.90 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 2.70 - 2.86 (m, 1H), 2.67 (br. s., 1H).
실시예 41
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-메틸-1H-인다졸-4-일)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00144
화합물 87a. 톨루엔(15㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.2g, 0.93m㏖, 1.0당량)의 용액에 (1-메틸-1H-인다졸-4-일)보론산(0.325g, 1.85m㏖, 2.0당량), K2CO3(0.38g, 2.78m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4(0.054g, 0.046m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-30% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-(1-메틸-1H-인다졸-4-일)아이소니코틴에이트(0.150g, 60.7%)를 갈색 액체로서 얻었다.
LCMS 268.2 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.72 - 8.87 (m, 2H), 7.79 (d, J = 5.26 Hz, 1H), 7.64 - 7.76 (m, 2H), 7.49 (s, 1H), 7.07 (d, J = 7.02 Hz, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.53 (s, 3H).
화합물 87b. THF(10㎖) 및 물(10㎖) 중의 메틸 3-(1-메틸-1H-인다졸-4-일)아이소니코틴에이트(0.27g, 1.011m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.072g, 3.03m㏖, 3.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR 분광학으로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(15㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결 건조시켜 3-(1-메틸-1H-인다졸-4-일)아이소니코틴산(정량 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 254.2 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.34 - 8.52 (m, 2H), 7.90 (s, 1H), 7.56 (d, J = 8.77 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.16 - 7.31 (m, 2H), 4.06 (s, 3H).
화합물 87. DMF(5㎖) 중의 3-(1-메틸-1H-인다졸-4-일)아이소니코틴산(0.100g, 0.395m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.088g, 0.395m㏖, 1.0당량), EDC.HCl(0.075g, 0.395m㏖, 1.0당량), HOBt(0.060g, 0.395m㏖, 1.0당량) 및 DMAP(0.003g, 0.019m㏖, 0.05당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. TEA(0.5㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시키고, 그 다음 역상 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-메틸-1H-인다졸-4-일)아이소니코틴아마이드(0.010g, 6% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 425.3 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.92 (br. s., 1H), 8.62 - 8.80 (m, 2H), 7.86 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 4.82 Hz, 1H), 7.35 - 7.45 (m, 1H), 7.18 (d, J = 7.02 Hz, 1H), 5.05 (d, J = 6.58 Hz, 1H), 4.13 (br. s., 1H), 4.06 (s, 3H), 3.83 - 3.99 (m, 3H), 2.75 (d, J = 11.84 Hz, 2H), 2.65 (br. s., 1H).
실시예 42
N-[2-[(2S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로-피롤리딘-1-일]-2-옥소-에틸]-3-몰폴리노-피리딘-4-카복스아마이드의 합성
Figure pct00145
화합물 88a. 25㎖ 병에, 3-플루오로피리딘-4-카복실산(0.500g, 3.54m㏖, 1.0당량) 및 몰폴린(0.616g, 7.08m㏖, 2.0당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 120℃에서 1시간 동안 가열시켰다. 반응 진행을 NMR 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 조 화합물을 정상 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 2-10% MeOH)로 정제시켜 3-몰폴리노피리딘-4-카복실산(100㎎, 13% 수율)을 황색 고체로서 얻었다.
LCMS 209.3 [M+H] +
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 14.16 (br. s., 1 H), 8.55 (s, 1 H), 8.34 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.53 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 3.82 - 3.63 (m, 4 H), 3.19 - 3.01 (m, 4 H).
화합물 88. DMF(3㎖) 중의 3-몰폴리노피리딘-4-카복실산(0.100g, 0.48m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (2S)-1-(2-아미노아세틸)-4,4-다이플루오로-피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.108g, 0.48m㏖, 1.0당량), HOBt(0.078g, 0.58m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.111g, 0.58m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.21㎖)을 첨가하고, 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(40㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(15㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-몰폴리노아이소니코틴아마이드(0.020g, 11% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 380.5 [M+H] +
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.48 (br. s., 1 H), 8.55 (s, 1 H), 8.40 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.57 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 4.37 - 4.09 (m, 4 H), 3.78 (br. s., 4 H), 3.08 (br. s., 4 H), 2.90 (br. s., 2 H), 2.08 (s, 1 H).
실시예 43
(S)-3-벤질-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00146
화합물 50a. 다이옥산(6㎖) 및 물(12㎖) 중의 3-브로모아이소니코틴산(0.5g, 2.475m㏖, 1.0당량)의 용액에 2-벤질-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란(1.1g, 4.95m㏖, 2.0당량), K2CO3(1.1g, 7.45m㏖, 3.0당량)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하였다. Pd(PPh3)4(0.143g, 0.124m㏖. 0.05당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 반응 혼합물을 농축시키고, 물(10㎖)로 희석시켰다. 수성층을 EtOAc(10㎖×2)로 세척하고, 6N HCl(pH ~ 3.0)로 산성화시키고, EtOAc(10㎖x3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(30㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 0-10% 메탄올)로 정제시켜 3-벤질아이소니코틴산(0.100g, 19%)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 214.2 [M+H]+
화합물 50. DMF(8㎖) 중의 3-벤질아이소니코틴산(0.100g, 0.467m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.105g, 0.467m㏖, 1.0당량) 및 TBTU(0.164g, 0.514m㏖, 1.1당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. N-메틸몰폴린 (0.4㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(20㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시키고, 그 다음 역상 정제시켜 (S)-3-벤질-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드(0.025g, 14% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 385.2 [M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.94 (br. s., 1 H), 8.61 - 8.42 (m, 2 H), 7.34 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.30 - 7.21 (m, 3 H), 7.18 (d, J = 7.0 Hz, 2 H), 5.13 (d, J = 7.0 Hz, 1 H), 4.27 (d, J = 15.3 Hz, 2 H), 4.23 - 4.01 (m, 4 H), 2.90 (br. s., 1 H), 2.82 (d, J = 17.5 Hz, 1 H).
실시예 44
N-(2-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(사이클로헥스-1-엔-1-일)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00147
화합물 43a. 톨루엔(20㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.4g, 1.85m㏖, 1.0당량)의 용액에 2-(사이클로헥스-1-엔-1-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란(0.58g, 2.77m㏖, 1.5당량), K2CO3(0.51g, 3.78m㏖, 2.0당량)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4(0.065g, 0.093m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 반응 혼합물을 셀라이트®층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-10% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-(사이클로헥스-1-엔-1-일)아이소니코틴에이트(0.170g, 42.4%)를 무색 오일로서 얻었다.
LCMS 218.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.60 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 8.52 (s, 1 H), 7.56 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 5.62 (br. s., 1 H), 2.24 - 2.06 (m, 4 H), 1.77 - 1.54 (m, 4 H).
화합물 43b. THF(5㎖) 및 물(5㎖) 중의 메틸 3-(사이클로헥스-1-엔-1-일)아이소니코틴에이트(0.17g, 0.779m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.037g, 1.56m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(15㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조시켜 3-(사이클로헥스-1-엔-1-일)아이소니코틴산(정량 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 204.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.25 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 7.10 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 5.66 (br. s., 1 H), 2.29 (br. s., 2 H), 2.12 - 2.05 (m, 2 H), 1.72 - 1.53 (m, 4 H).
화합물 43. DMF(5㎖) 중의 3-(사이클로헥스-1-엔-1-일)아이소니코틴산(0.100g, 0.493m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.110g, 0.493m㏖, 1.0당량), TBTU (0.174g, 0.542m㏖, 1.1당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. N-메틸몰폴린 (0.4㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(20㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시키고, 그 다음 역상 정제시켜 N-(2-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(사이클로헥스-1-엔-1-일)아이소니코틴아마이드(0.004g, 2.4% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 375.3[M+H]+
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.69 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.33 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 5.79 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 5.10 (dd, J = 9.3, 2.7 Hz, 1H), 4.33 - 4.23 (m, 1H), 4.15 -4.03 (m, 3H), 2.95 - 2.74 (m, 2H), 2.25 (s, 2H), 2.12 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.70 - 1.61 (m, 2H), 1.58 (q, J = 6.0, 5.5 Hz, 2H).
실시예 45
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-메틸-1H-인돌-4-일)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00148
화합물 66a. 톨루엔(16㎖)과 물(4㎖)의 혼합물 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.2g, 0.93m㏖, 1.0당량)의 용액에 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-인돌(0.48g, 1.85m㏖, 2.0당량), K2CO3(0.382g, 2.78m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)2Cl2 (0.033g, 0.046m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-20% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-(1-메틸-1H-인돌-4-일)아이소니코틴에이트(0.180g, 73.4%)를 황색 오일로서 얻었다.
LCMS 267.2 [M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.74 (s, 1 H), 8.67 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.67 - 7.49 (m, 3 H), 7.40 (d, J = 3.1 Hz, 1 H), 7.12 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 6.49 (d, J = 3.1 Hz, 1 H), 3.92 (s, 3 H), 3.63 (s, 3 H).
화합물 66b. THF(5㎖) 및 물(5㎖)중의 메틸-1H-인돌-4-일)아이소니코틴에이트(0.18g, 0.67m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.085g, 2.63m㏖, 3.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(15㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조시켜 3-(1-메틸-1H-인돌-4-일)아이소니코틴산(정량 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 253.2 [M+H]+
화합물 66. DMF(2㎖) 중의 3-(1-메틸-1H-인돌-4-일)아이소니코틴산(0.050g, 0.198m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.044g, 0.198m㏖, 1.0당량), EDCI.HCl(0.057g, 0.297m㏖, 1.5당량), HOBt(0.04g, 0.297m㏖, 1.5당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. Et3N(0.2㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(10㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-메틸-1H-인돌-4-일)아이소니코틴아마이드(0.013g, 15.5% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 424.3[M+H]+
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.91 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.61 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.19 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.49 - 7.40 (m, 2H), 7.40 - 7.29 (m, 2H), 6.47 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 5.08 (ddd, J = 15.6, 9.3, 2.8 Hz, 2H), 4.18 (t, J = 13.4 Hz, 2H), 4.10 - 3.89 (m, 6H), 3.81 (s, 4H), 2.91 - 2.72 (m, 4H), 1.88 (s, 2H), 1.32 - 1.21 (m, 5H), 0.84 (q, J = 10.7, 8.5 Hz, 1H).
실시예 46
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(인돌린-5-일)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00149
화합물 104a. 톨루엔 (8㎖) 및 물(2㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.2g, 0.922m㏖, 1.0당량)의 용액에 tert-부틸 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)인돌린-1-카복실레이트(0.381g, 1.106m㏖, 1.2당량), K2CO3(0.38g, 2.764m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4(0.033g, 0.046m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트®층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-20% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 화합물 tert-부틸 5-(4-(메톡시카보닐)피리딘-3-일)인돌린-1-카복실레이트(0.200g, 61.34%)를 황색 오일로서 얻었다.
LCMS 355.4 [M+H]+
화합물 104b. THF(8㎖) 및 물(8㎖) 중의 화합물 tert-부틸 5-(4-(메톡시카보닐)피리딘-3-일)인돌린-1-카복실레이트(0.200g, 0.565m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.028g, 1.29m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 화합물 3-(1-(tert-부톡시카보닐)인돌린-5-일)아이소니코틴산(정량 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 341.4[M+H]+
화합물 104c. DMF(3㎖) 중의 화합물 3-(1-(tert-부톡시카보닐)인돌린-5-일)아이소니코틴산(0.050g, 0.147m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.034g, 0.147m㏖, 1.0당량), EDCI.HCl(0.042g, 0.225m㏖, 1.5당량), HOBT(0.03g, 0.225m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 30분 동안 교반하였다. 트라이에틸아민(0.2㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(0 1㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(10㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 tert-부틸 (S)-5-(4-((2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)카바모일)피리딘-3-일)인돌린-1-카복실레이트(0.035g, 46% 수율)를 황색 고체로서 얻었다.
LCMS 512.4 [M+H]+
화합물 104. DCM(5㎖) 중의 tert-부틸 (S)-5-(4-((2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)카바모일)피리딘-3-일)인돌린-1-카복실레이트(0.07g, 0.14m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, 트라이플루오로아세트산(0.5㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물 농축시키고, 조물질을 역상 정제로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(인돌린-5-일)아이소니코틴아마이드(0.022g, 40% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 512.3[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.83 (br. s., 1 H), 8.58 (s, 1 H), 8.52 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.33 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.26 (s, 1 H), 7.08 (d, J = 6.6 Hz, 1 H), 6.50 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 5.68 (br. s., 1 H), 5.09 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 4.21 (br. s., 1 H), 4.06 (br. s., 1 H), 4.00 (br. s., 3 H), 3.45 (t, J = 8.6 Hz, 2 H), 2.96 (d, J = 9.2 Hz, 2 H), 2.80 (d, J = 17.5 Hz, 1 H).
실시예 47
(S)-3-(6-클로로나프탈렌-2-일)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00150
화합물 108a. 다이옥산(4㎖) 중의 메틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.150g, 0.694m㏖, 1.0당량)의 용액에 2-(6-클로로나프탈렌-2-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란 (0.300g, 1.04m㏖, 1.5당량), K2CO3(0.192g, 1.38m㏖, 2.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)Cl2(0.024g, 0.0347m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-20% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-(6-클로로나프탈렌-2-일)아이소니코틴에이트(0.200g, 97.43% 수율)를 황색 고체로서 얻었다.
LCMS 298.1 [M+H]+
화합물 108b. THF(4㎖) 및 물(4㎖) 중의 메틸 3-(6-클로로나프탈렌-2-일)아이소니코틴에이트(0.200g, 0.673m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.043g, 1.011m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR 분광학으로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(6-클로로나프탈렌-2-일)아이소니코틴산(정량 수율)를 황색 고체로서 얻었다.
LCMS 284.2 [M+H]+
화합물 108. DMF(5㎖) 중의 3-(6-클로로나프탈렌-2-일)아이소니코틴산(0.130g, 0.459m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.103g, 0.459m㏖, 1.0당량), EDCI.HCl(0.133g, 0.688m㏖, 1.5당량) 및 HOBt(0.094g, 0.688m㏖, 1.5당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. TEA(0.3㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(20㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시켜 (S)-3-(6-클로로나프탈렌-2-일)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드(0.100g, 48% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 455.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.12 (t, J = 5.9 Hz, 1 H), 8.82 (s, 1 H), 8.72 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 8.23 (s, 1 H), 8.12 - 8.00 (m, 2 H), 7.95 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.75 (dd, J = 1.8, 8.3 Hz, 1 H), 7.61 - 7.45 (m, 2 H), 5.12 (dd, J = 2.9, 9.0 Hz, 1 H), 4.27 - 3.97 (m, 3 H), 2.95 - 2.76 (m, 2 H).
실시예 48
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-하이드록시-2-페닐니코틴아마이드의 합성
Figure pct00151
화합물 30a. MeOH(50㎖) 중의 2,6-다이클로로니코틴산(2.0g, 10.41m㏖, 1.0당량)의 용액에 화합물 칼륨 tert-부톡사이드(4.7g, 41.66m㏖, 4.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응의 완결 후, 반응 혼합물을 최대로 농축시키고, 물(50㎖)로 희석시켰다. 수성층을 에틸 아세테이트(30㎖×3)로 추출하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 합한 유기 추출물을 염수(50㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시켜 2-클로로-6-메톡시니코틴산(1.8g, 96.4%)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 188[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.33 (br. s., 1H), 8.06 - 8.24 (m, 1H), 6.92 (d, J = 8.77 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H).
화합물 30b. 다이옥산(10㎖) 중의 2-클로로-6-메톡시니코틴산(0.200g, 1.07m㏖, 1.0당량)의 용액에 화합물(0.195g, 1.604m㏖, 1.5당량), Na2CO3(0.23g, 2.14m㏖, 2.0당량)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4(0.062g, 0.054m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 0-2% MeOH)로 정제시켜 6-메톡시-2-페닐니코틴산(0.07g, 28.6% 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 230[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.89 (br. s., 1H), 8.17 (d, J = 6.58 Hz, 3H), 7.67 (d, J = 7.45 Hz, 1H), 7.38 - 7.60 (m, 3H), 4.04 (s, 3H).
화합물 30c. DMF(5㎖) 중의 6-메톡시-2-페닐니코틴산(0.050g, 0.218m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.073g, 0.327m㏖, 1.5당량) 및 TBTU(0.104g, 0.327m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. N-메틸몰폴린(0.1㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(10㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시키고, 그 다음 역상 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-메톡시-2-페닐니코틴아마이드(0.015g, 17.2% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 401.2[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.76 (br. s., 1H), 8.48 (s, 2H), 7.79 (d, J = 8.33 Hz, 2H), 7.39 (br.s., 2H), 6.86 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 7.45 Hz, 1H), 4.23 (br. s., 1H), 3.98 - 4.12 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.90 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 2.70 - 2.86 (m, 1H), 2.67 (br. s., 1H).
화합물 30. DCM(5㎖) 중의 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-메톡시-2 페닐니코틴아마이드(0.035g, 0.087m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, DCM(5㎖)에 용해된 TMSI(1㎖)를 적가로 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하고, 이어서 50℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 건조될 때까지 농축시키고, 잔기를 에틸 아세테이트(15㎖)로 희석시키고, 물(10㎖×2)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 정제로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-하이드록시-2-페닐니코틴아마이드(0.003g, 8.9% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 387.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 10.18 (s, 1 H), 8.37 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.82 (br. s., 2 H), 7.54 (br. s., 2 H), 6.81 (d, J = 7.0 Hz, 1 H), 5.12 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 4.37 - 4.18 (m, 2 H), 4.18 - 3.95 (m, 1 H), 2.89 (s, 1 H), 2.81 (d, J = 8.8 Hz, 2 H).
실시예 49
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(o-톨릴)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00152
화합물 64a. 톨루엔(15㎖) 및 물(2㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.3g, 1.38m㏖, 1.0당량)의 용액에 o-톨릴보론산(0.288g, 1.66m㏖, 1.2당량), K2CO3(0.571g, 4.14m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4(0.08g, 0.007m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-20% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-(o-톨릴)아이소니코틴에이트(0.300g, 95%)를 황색 액체로서 얻었다.
LCMS 228.3[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.76 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 8.55 (s, 1 H), 7.77 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.39 - 7.14 (m, 3 H), 7.08 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 3.33 (s, 3 H), 2.02 (s, 3 H)
화합물 64b. THF(5㎖) 및 물(5㎖) 중의 메틸 3-(o-톨릴)아이소니코틴에이트(0.4g, 1.762m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.148g, 3.524m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(o-톨릴)아이소니코틴산(정량 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 214.2[M+H]+
화합물 64. DMF(4㎖) 중의 3-(o-톨릴)아이소니코틴산 (0.100g, 0.469m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.105g, 0.469m㏖, 1.0당량), EDCI.HCl(0.135g, 0.704m㏖, 1.5당량) 및 HOBt(0.096g, 0.704m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸아민(0.5㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(20㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 3% MeOH)로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(o-톨릴)아이소니코틴아마이드(0.1g, 55.5% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 315.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.79 - 8.62 (m, 2 H), 8.46 (s, 1 H), 7.52 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 7.25 (br. s., 2 H), 7.22 - 7.03 (m, 2 H), 5.06 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 4.14 (d, J = 12.7 Hz, 1 H), 4.03 - 3.83 (m, 2 H), 2.87 (d, J = 16.7 Hz, 1 H), 2.81 - 2.69 (m, 2 H), 2.09 (s, 3 H).
실시예 50
(R)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-사이클로프로필아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00153
화합물 37. DMF(05㎖) 중의 3-사이클로프로필아이소니코틴산(0.100g, 060m㏖, 1.0 eq)의 교반되는 용액에, (R)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴.HCl(0.138g, 0.60m㏖, 1.0 eq), HOBt(0.098g, 0.72m㏖, 1.2eq) 및 EDC.HCl(0.138g, 0.72m㏖, 1.2 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.2㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (R)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-사이클로프로필아이소니코틴아마이드(0.005g, 03% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 335 [M+H] +
1H NMR (400MHz, DMSO-δ 8.85 (br. s., 1 H), 8.44 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 8.24 (s, 1 H), 7.26 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 5.12 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 4.27 (d, J = 12.3 Hz, 2 H), 4.21 - 3.99 (m, 2 H), 2.98 - 2.86 (m, 1 H), 2.81 (d, J = 17.1 Hz, 1 H), 2.73 (s, 1 H), 2.21 (br. s., 2 H), 1.24 (br. s., 2 H).
실시예 51
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-4-페닐-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드의 합성
Figure pct00154
화합물 29a. 다이옥산(4㎖) 및 물(1㎖) 중의 메틸 4-클로로-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(0.200g, 1.07m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, Na2CO3(0.227g, 2.14m㏖, 2당량) 및 페닐보론산(0.196g, 1.61m㏖, 1.5당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 15분 동안 통기시켰다. Pd(PPh3)2Cl2(0.078g, 0.11m㏖, 0.1당량)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 다시 질소 기체로 15분 동안 통기시켰다. 반응 혼합물을 16시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응의 진행을 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(25㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수(25㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 메틸 6-옥소-4-페닐-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(0.170g, 69% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 230.3 [M+H] +
화합물 29b. EtOH 및 물(1:1)(6㎖) 중의 메틸 6-옥소-4-페닐-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(0.170g, 0.74m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, NaOH(0.059g, 1.48m㏖, 2당량)를 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응의 진행을 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 1M HCl(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(20㎖X3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수(25㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 0-10% MeOH)로 정제시켜 6-옥소-4-페닐-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실산(0.090g, 56% 수율)을 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 216.2 [M+H]+
화합물 29. DMF(3㎖) 중의 6-옥소-4-페닐-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실산(0.080g, 0.37m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.083g, 0.37m㏖, 1.0당량), HOBt(0.059g, 0.44m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.085g, 0.44m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸아민(0.112g, 1.11m㏖, 3.0당량)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(40㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(15㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 정상 콤비-플래시 크로마토그래피로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-4-페닐-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드(0.045g, 31.25% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 387.3 [M+H] +
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.39 - 11.70 (m, 1H), 8.66 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.44 - 7.32 (m, 5H), 6.29 (s, 1H), 5.08 (dd, J = 9.3, 2.9 Hz, 1H), 4.20 (ddd, J = 16.0, 11.6, 4.4 Hz, 1H), 4.01 (dd, J = 19.7, 8.6 Hz, 3H), 2.96 - 2.70 (m, 2H), 1.38 - 1.21 (m, 3H), 1.16 (s, 1H).
실시예 52
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-페녹시아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00155
화합물 97a. DMF(10㎖) 중의 메틸 3-브로모아이소니코틴에이트(1.0g, 4.65m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, 페놀(0.437g, 4.65m㏖, 1당량), CuI(1.762g, 9.3m㏖, 2당량) 및 Cs2CO3(3.03g, 10.0m㏖, 2당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃에서 18시간 동안 가열시켰다. 반응 진행을 LCMS로 체크하였다. 반응 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, pH가 약산성이 될 때까지 증류 HCl을 몇 방울 첨가하였다. 수성층을 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수(50㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에서 농축시켜 3-페녹시아이소니코틴산(0.200g, 20% 수율)을 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS: 216.1 [M+H] +
화합물 97. DMF(3㎖) 중의 3-페녹시아이소니코틴산(0.140g, 0.65m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.146g, 0.65m㏖, 1.0당량), HOBt(0.105g, 0.78m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.149g, 0.78m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.197g, 1.95m㏖, 3당량)을 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(40㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(25㎖×5)로 세척하였다. 유기 추출물을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물을 얻었다. 얻은 조 생성물을 정상 콤비-플래시 크로마토그래피로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-페녹시아이소니코틴아마이드(0.050g, 19.9% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 387.2 [M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.80 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.67(d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.43 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.21 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.10 (dd, J= 9.3, 3.0 Hz, 1H), 4.29 - 3.98 (m, 4H), 2.93 - 2.73 (m, 2H), 1.23 (d, J = 3.6 Hz, 1H).
실시예 53
N-(2-((2R)-2-사이아노-4,4-다이플루오로사이클로펜틸)-2-옥소에틸)-3-(페닐아미노)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00156
화합물 102a. 톨루엔(6㎖) 중의 메틸 3-브로모아이소니코틴에이트(1.0g, 4.65m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, 알라닌(0.476g, 5.12m㏖, 1.1당량), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(0.431 g, 0.47m㏖, 0.1당량), 잔트포스(xantphos)(0.539g, 0.93m㏖, 0.2당량) 및 Cs2CO3(2.28g, 6.98m㏖, 1.5당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 190℃에서 1시간 동안 마이크로파로 가열시켰다. 반응 진행을 LCMS로 체크하였다. 반응 혼합물을 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(30㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수(30㎖)로 세척하고, 유기 추출물을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 화합물을 정상 콤비-플래시 크로마토그래피로 정제시켜 메틸-3-(페닐아미노)아이소니코틴에이트(0.300g, 28% 수율)를 황색 반고체로서 얻었다.
LCMS: 229.2 [M+H] +
화합물 102b. THF 및 물(1:1)(4㎖) 중의 메틸-3-(페닐아미노)아이소니코틴에이트(0.300g, 1.31m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.083g, 1.97m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 수성층을 감압 하에서 농축시키고, 동결건조시켜 3-(페닐아미노)아이소니코틴산(0.260 g.)을 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 215.2 [M+H] +
화합물 102. DMF(3㎖) 중의 3-(페닐아미노)아이소니코틴산(0.260g, 1.21m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, (1R)-4,4-다이플루오로-2-글리실사이클로펜탄-1-카보나이트릴 염산염(0.272g, 1.21m㏖, 1.0당량), HOBt(0.196g, 1.45m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.278 g,1.45m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 그리고 트라이에틸 아민(0.366g, 3.63m㏖, 3당량)을 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(40㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(25㎖×5)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물을 얻었고, 이것을 역상 HPLC로 정제시켜 N-(2-((2R)-2-사이아노-4,4-다이플루오로사이클로펜틸)-2-옥소에틸)-3-(페닐아미노)아이소니코틴아마이드(0.004g, 0.8% 수율)을 얻었다.
LCMS 386.2 [M+H] +
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.22 - 9.07 (m, 2H), 8.64 (s, 1H), 8.12 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.58 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 7.34 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.22 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.03 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 5.13 (dd, J = 9.4, 2.9 Hz, 1H), 4.36 - 4.25 (m, 1H), 4.25 - 4.04 (m, 3H), 3.00 - 2.74 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.24 (s, 1H).
실시예 54
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1',2',3',6'-테트라하이드로-[3,4'-바이피리딘]-4-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트의 합성
Figure pct00157
화합물 105a. 톨루엔 (8㎖) 및 물(2㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.2g, 0.925m㏖, 1.0당량)의 용액에 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-3,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(0.429g, 1.39m㏖, 1.5당량), K2CO3(0.255g, 1.85m㏖, 2.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh2)Cl2 (0.033g, 0.046m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-20% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 1'-(tert-부틸) 4-메틸 3',6'-다이하이드로-[3,4'-바이피리딘]-1',4(2'H)-다이카복실레이트(0.130g, 44.4% 수율)를 황색 오일로서 얻었다.
LCMS 319.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.65 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 8.59 - 8.52 (m, 1 H), 7.63 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 5.68 (br. s., 1 H), 3.96 (br. s., 2 H), 3.87 - 3.69 (m, 3 H), 3.52 (br. s., 2 H), 2.27 (br. s., 2 H), 1.53 - 1.25 (m, 9 H), 1.07 (s, 3 H).
화합물 105b. THF(5㎖) 및 물(5㎖) 중의 1'-(tert-부틸) 4-메틸 3',6'-다이하이드로-[3,4'-바이피리딘]-1',4(2'H)-다이카복실레이트(0.13g, 0.408m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.020g, 0.817m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR 분광학으로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(15㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 1'-(tert-부톡시카보닐)-1',2',3',6'-테트라하이드로-[3,4'-바이피리딘]-4-카복실산(정량 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 305.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (d, J = 4.8 Hz, 2 H), 8.22 (s, 1 H), 7.17 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 3.92 (br. s., 2 H), 2.38 (br. s., 2 H), 2.06 (s, 1 H), 2.04 - 1.92 (m, 1 H), 1.43 (s, 9 H), 1.06 (s, 2 H)
화합물 105c. DMF(5㎖) 중의 1'-(tert-부톡시카보닐)-1',2',3',6'-테트라하이드로-[3,4'-바이피리딘]-4-카복실산(0.100g, 0.32m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.074g, 0.32m㏖, 1.0당량), EDCI.HCl(0.092g, 0.48m㏖, 1.5당량) 및 HOBt(0.065g, 0.48m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸아민(0.5㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(20㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시키고, 그 다음 역상 정제시켜 tert-부틸 (S)-4-((2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)카바모일)-3',6'-다이하이드로-[3,4'-바이피리딘]-1'(2'H)-카복실레이트(0.020g, 13.15% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 476.3[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.83 (br. s., 1 H), 8.57 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 8.52 (s, 1 H), 7.36 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 5.83 (br. s., 1 H), 5.09 (br. s., 1 H), 4.25 (d, J = 13.6 Hz, 2 H), 4.11 (d, J = 5.3 Hz, 2 H), 3.94 (br. s., 2 H), 3.48 (br. s., 2 H), 2.81 (d, J = 17.5 Hz, 3 H), 2.67 (br. s., 2 H), 2.35 (d, J = 14.5 Hz, 3 H), 1.43 (s, 9H).
화합물 105·TFA. DCM(2㎖) 중의 N-(2-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(사이클로헥스-2-엔-1-일)아이소니코틴아마이드(0.020g, 0.042m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, TFA(0.02㎖, 0.126m㏖, 3.0당량)를 실온에서 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물 건조될 때까지 농축시키고, 조물질을 얻었다. 얻은 조 생성물을 역상 정제로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-1',2',3',6'-테트라하이드로-[3,4'-바이피리딘]-4-카복스아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트(0.005g, 31.72% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 376.3[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.71 (br. s., 1 H), 8.54 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 8.47 (s, 1 H), 7.33 (d, J = 4.4 Hz, 2 H), 5.85 (br. s., 1 H), 5.11 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 4.26 (d, J = 12.3 Hz, 1 H), 4.15 - 4.00 (m, 2 H), 3.31 (br. s., 4 H), 2.98 - 2.82 (m, 3 H), 2.79 (br. s., 1 H), 2.24 (br. s., 2 H), 1.80 (br. s., 3 H), 1.75 (s, 2 H).
실시예 55
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(5-메틸퓨란-2-일)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00158
화합물 106a. 다이옥산(5㎖) 및 물(5㎖) 중의 메틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.300g, 1.4m㏖, 1.0당량)교반되는 용액에, (5-메틸퓨란-2-일)보론산 (0.212g, 1.68m㏖, 1.2당량), Na2CO3(0.297g, 2.8m㏖, 2.0당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 질소로 15분 동안 통기시키고, 다이클로로비스(트라이페닐포스핀)팔라듐(II)(0.098g, 0.14m㏖, 0.1당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 다시 질소로 15분 동안 통기시켰다. 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(20㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(5-메틸퓨란-2-일)아이소니코틴산(0.250g)을 얻었다.
LCMS 204.2 [M+H] +
화합물 106. DMF(3㎖) 중의 3-(5-메틸퓨란-2-일)아이소니코틴산(0.100g, 0.5m㏖, 1.0당량)교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.112g, 0.5m㏖, 1.0당량), HOBt(0.081g, 0.6m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.115g, 0.6m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.151g, 1.5m㏖, 3.0당량)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(40㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(25㎖×6)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(5-메틸퓨란-2-일)아이소니코틴아마이드(0.010g, 5.04% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 375.3 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.97 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.52 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.21 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 5.13 (dd, J = 9.3, 2.8 Hz, 1H), 4.29 (ddd, J = 16.0, 11.2, 4.1 Hz, 1H), 4.16 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.12 - 4.03 (m, 1H), 2.97 - 2.74 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 1.24 (s, 1H).
실시예 56
(S)-6'-아미노-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-[3,3'-바이피리딘]-4-카복스아마이드 폼에이트의 합성
Figure pct00159
화합물 107a. 다이옥산(5㎖) 및 물(5㎖) 중의 3-브로모아이소니코틴산(0.500g, 2.34m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, Na2CO3(0.496g, 4.68m㏖, 2당량) 및 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민(0.618g, 2.81m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 기체로 15분 동안 통기시켰다. 비스(트라이페닐포스핀)팔라듐 클로라이드(0.164g, 0.234m㏖, 0.1당량)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 다시 질소 기체로 15분 동안 통기시켰다. 반응 혼합물을 120℃에서 16시간 동안 가열시켰다. 반응의 진행을 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(35㎖)로 희석시켰다. 수성상을 에틸 아세테이트(20㎖×2)로 세척하고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 6'-아미노-[3,3'-바이피리딘]-4-카복실산(0.600g, 정량 수율)을 얻었다.
LCMS 216.2 [M+H] +
화합물 107. DMF(4㎖) 중의 6'-아미노-[3,3'-바이피리딘]-4-카복실산(0.200g, 0.93m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.208g, 0.93m㏖, 1.0당량), HOBt(0.151g, 1.12m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.214g, 1.12m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸아민(0.282g, 2.79m㏖, 3.0당량)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 에틸 아세테이트(40㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(15㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-6'-아미노-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-[3,3'-바이피리딘]-4-카복스아마이드 폼에이트(0.003g, 0.8% 수율)를 얻었다.
LCMS 387.3 [M+H] +
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.88 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 8.64 - 8.55 (m, 2H), 8.18 (s, 1H), 8.03 (s,1H), 7.55 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.11 (s, 2H), 5.13 - 5.03 (m, 1H), 4.30 - 4.17 (m, 1H), 4.05 (dt, J = 21.0, 8.8 Hz, 3H), 3.95 - 3.80 (m, 1H), 3.26 (s, 3H), 2.94 -2.72 (m, 2H), 2.13 (d, J = 16.6 Hz, 1H), 1.23 (s, 1H), 1.12 (d, J = 16.9 Hz, 1H).
실시예 57
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(퀴놀린-4-일)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00160
화합물 51a. 톨루엔(15㎖) 및 물(2㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.3g, 1.38m㏖, 1.0당량)의 용액에 퀴놀린-4-일보론산(0.288g, 1.66m㏖, 1.2당량), K3PO4.3H2O(0.887g, 4.14m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(OAc) (0.032g, 0.139m㏖. 0.1당량) 및 트라이사이클로헥실포스핀(0.053g, 0.139m㏖. 0.1당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서100% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-(퀴놀린-4-일)아이소니코틴에이트(0.230g, 62.7% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 265.3[M+H]+
화합물 51b. THF(7㎖) 및 물(7㎖) 중의 메틸 3-(퀴놀린-4-일)아이소니코틴에이트(0.21g, 0.795m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.067g, 1.59m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(퀴놀린-4-일)아이소니코틴산(정량 수율) 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 251.2[M+H]+
화합물 51. DMF(5㎖) 중의 3-(퀴놀린-4-일)아이소니코틴산 (0.12g, 0.48m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.108g, 0.48m㏖, 1.0당량), EDCI.HCl(0.138g, 0.72m㏖, 1.5당량) 및 HOBt(0.097g, 0.72m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸아민(1㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(20㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(퀴놀린-4-일)아이소니코틴아마이드(0.040g, 19.8% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 422.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.00 (br. s., 1 H), 8.92 - 8.81 (m, 2 H), 8.65 (s, 1 H), 8.08 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.78 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.70 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.55 (br. s., 2 H), 7.47 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 5.03 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 4.11 (br. s., 1 H), 3.96 - 3.74 (m, 3 H), 2.82 (br. s., 1 H), 2.74 (d, J = 9.2 Hz, 1 H)
실시예 58
(S)-N-(2-(2-사이아노-4, 4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-4-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1, 6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드의 합성
Figure pct00161
화합물 109a. 다이옥산(30㎖):물(10㎖) 중의 메틸 4-클로로-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(1g, 5.3191m㏖, 1.0당량)의 용액에 화합물 4-플루오로페닐)보론산(0.82g, 5.8510m㏖, 1.1당량), Na2CO3(1.12g, 10.63m㏖, 2.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)2Cl2(0.187g, 0.2659m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 물로 희석시키고, EtOAc(3×50㎖)로 추출하고, 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-50% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 화합물 메틸 4-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(1.2g, 81.34%)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 247.8 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.22 (br. s., 1 H), 8.05 (s, 1 H), 7.65 - 7.58 (m, 1 H), 7.56 (d, J = 6.6 Hz, 1 H), 7.35 - 7.26 (m, 1 H), 7.22 - 7.14 (m, 1 H), 6.21 (s, 1 H), 3.61 - 3.52 (m, 3 H)
화합물 109b. THF(30㎖) 및 물(10㎖) 중의 화합물 메틸 4-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(1.2g, 4.8582m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.225g, 9.7165m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 80℃C에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(30㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 화합물 4-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실산(1gm, 88%)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS: 234.0[M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ11.07 (s, 1H) 7.63 (s, 1 H), 7.34 (dd, J = 5.7, 8.3 Hz, 2 H), 7.11 (t, J = 9.0 Hz, 2 H), 6.03 (s, 1 H), 3.53 (s, 1 H).
화합물 109. DMF(10㎖) 중의 4-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실산(0.4gm, 1.7167m㏖, 1.0당량), HATU(0.278gm, 2.064m㏖, 1.2당량)의 교반되는 용액에 10분 후 (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.464gm, 2.06m㏖, 1.2당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 10분 동안 교반하고, 그 다음 적가로 Et3N(0.5㎖, 3.4334m㏖, 3당량)을 첨가하고, 반응을 16시간 동안 rt에서 교반하였다. 반응 진행을 LCMS 및 TLC로 모니터링하고, 차가운 물(50㎖)를 반응 물질에 첨가하여 후처리를 완료하였고, 에틸 아세테이트(3×50㎖)로 추출하고, 모든 유기층을 수집하고, 물로 3회 세척하고 중탄산나트륨으로 1회 세척하고, 염수 용액으로 1회 세척하였다. 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감암 하에서 농축시키고, 조물질을 역상 크로마토그래피로 정제시켜 목적하는 생성물 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-4-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드(100㎎, 20%)를 수득하였다.
LCMS: 405.2[M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ11.93 (br. s., 1 H), 8.69 (br. s., 1 H), 7.64 (s, 1H), 7.44 (br. s., 2 H), 7.17 (t, J = 8.8 Hz, 2 H), 6.30 (s, 1 H), 5.08 (br. s., 1 H), 4.20 (d, J = 11.0 Hz, 2 H), 3.99 - 3.89 (m, 2 H), 2.80 (d, J = 13.6 Hz, 2 H).
실시예 59
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(3,5-다이메틸아이속사졸-4-일)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00162
화합물 110a. 톨루엔(5㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.1g, 0.463m㏖, 1.0당량)의 용액에 3,5-다이메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)아이속사졸(0.126g, 0.926m㏖, 2당량), K2CO3(0.192 g,1.39m㏖, 3.0당량)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4(0.027g, 0.023m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-30% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-(3,5-다이메틸아이속사졸-4-일)아이소니코틴에이트(0.105g, 97.2% 수율)를 황색 액체로서 얻었다.
LCMS 233.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.81 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 8.65 (s, 1 H), 7.85 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 3.32 (s, 3 H), 2.23 (s, 3 H), 2.09 - 1.90 (m, 3 H).
화합물 110b. THF(5㎖) 및 물(5㎖) 중의 3-(3,5-다이메틸아이속사졸-4-일)아이소니코틴에이트(0.120g, 0.518m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH.2H2O(0.043g, 1.034m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(3,5-다이메틸아이속사졸-4-일)아이소니코틴산(정량 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 219.2[M+H]+
화합물 110. DMF(4㎖) 중의 3-(3,5-다이메틸아이속사졸-4-일)아이소니코틴산 (0.1g, 0.46m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.103g, 0.46m㏖, 1.0당량), EDCI.HCl(0.132g, 0.69m㏖, 1.5당량) 및 HOBt(0.093g, 0.69m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸아민(0.5㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(50㎖×5)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(3,5-다이메틸아이속사졸-4-일)아이소니코틴아마이드(0.055g, 30.7% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 390.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.85 (d, J = 5.7 Hz, 1 H), 8.75 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 8.56 (s, 1 H), 7.56 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 5.10 - 4.98 (m, 1 H), 4.27 - 4.18 (m, 1 H), 4.11 - 3.95 (m, 2 H), 2.95 - 2.74 (m, 3 H), 2.25 (s, 3 H), 2.06 (s, 3 H).
실시예 60
(S)-3-(4-클로로-3-플루오로페닐)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00163
화합물 111a. 톨루엔(10㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(1) (0.2g, 0.926m㏖, 1.0당량)의 용액에, 3,5-다이메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)아이속사졸(2)(0.242g, 1.39m㏖, 1.5당량), K2CO3(0.383g, 2.79m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4 (0.053g, 0.046m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-20% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-(3,5-다이메틸아이속사졸-4-일)아이소니코틴에이트(3) (0.250g, 98% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 266.1[M+H]+
화합물 111b. THF(8㎖) 및 물(8㎖) 중의 메틸 3-(4-클로로-3-플루오로페닐)아이소니코틴산(0.25g, 0.94m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.080g, 1.89m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(4-클로로-3-플루오로페닐)아이소니코틴산(정량 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 252.1[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ8.47 - 8.35 (m, 2 H), 7.67 - 7.51 (m, 2 H), 7.42 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.19 (d, J = 4.8 Hz, 1 H).
화합물 111. DMF(5㎖) 중의 3-(4-클로로-3-플루오로페닐)아이소니코틴산 (0.12g, 0.48m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.108g, 0.48m㏖, 1.0당량), EDCI.HCl(0.138g, 0.717m㏖, 1.5당량) 및 HOBt(0.097g, 0.717m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸아민(1㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(50㎖×5)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시켜 (S)-3-(4-클로로-3-플루오로페닐)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드(0.120g, 59.1% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 423.5[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.04 (t, J = 5.9 Hz, 1 H), 8.76 - 8.63 (m, 2 H), 7.65 - 7.54 (m, 2 H), 7.49 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.41 (d, J = 7.0 Hz, 1 H), 5.09 (br. s., 1 H), 4.22 (d, J = 11.8 Hz, 1 H), 4.12 - 3.96 (m, 2 H), 3.92 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 2.97 - 2.76 (m, 2 H).
실시예 61
(S)-3-(3-(tert-부틸)페닐)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00164
화합물 112a. DMSO(10㎖) 중의 1-브로모-3-(tert-부틸)벤젠(0.2g, 0.938m㏖, 1.0당량)의 용액에 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(0.356g, 1.41m㏖, 1.5당량), KOAc(0.184g, 1.876m㏖, 2.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4(0.055g, 0.047m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산)로 정제시켜 2-(3-(tert-부틸)페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란(0.230g, 94.26% 수율)을 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 261.3[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ7.67 (s, 1 H), 7.57 - 7.45 (m, 2 H), 7.32 (t, J = 7.5 Hz, 1 H), 1.44 (d, J = 6.6 Hz, 1 H), 1.39 - 1.23 (m, 9 H), 1.23 - 1.04 (m, 12 H)
화합물 112b. 톨루엔(15㎖) 중의 2-(3-(tert-부틸)페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란(0.216g, 0.833m㏖, 1.2당량)의 용액에 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.150g, 0.649m㏖, 1.0당량), K2CO3(0.287g, 2.08m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)4 (0.040g, 0.035m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-20% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-(3-(tert-부틸)페닐) 아이소니코틴에이트(0.150g, 80.6%)를 황색 반고체로서 얻었다.
LCMS 270.5[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.75 - 8.66 (m, 2 H), 7.74 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.66 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.51 - 7.39 (m, 2 H), 7.24 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 3.66 (s, 3 H), 1.30 (s, 9 H).
화합물 112c. THF(4㎖) 및 물(4㎖) 중의 메틸 3-(3-(tert-부틸)페닐)아이소니코틴에이트(0.150g, 0.555m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.047g, 1.11m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(3-(tert-부틸)페닐)아이소니코틴산(정량 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 256.3[M+H]+
화합물 112. DMF(5㎖) 중의 3-(3-(tert-부틸)페닐)아이소니코틴산(0.1g, 0.392m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.89g, 0.392m㏖, 1.0당량), EDCI.HCl(0.113g, 0.59m㏖, 1.5당량) 및 HOBt(0.080g, 0.59m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸아민(0.5㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(50㎖×5)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시키고, 그 다음 정제용 정제기(prep purification)로 정제시켜 (S)-3-(3-(tert-부틸)페닐)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드(0.028g, 16.86% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 427.3[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.92 (br. s., 1 H), 8.76 - 8.56 (m, 2 H), 7.50 (s, 1 H), 7.48 - 7.40 (m, 2 H), 7.40 - 7.29 (m, 2 H), 5.14 - 5.04 (m, 1 H), 4.21 (br. s., 1 H), 4.03 (d, J = 2.6 Hz, 2 H), 2.87 (br. s., 1 H), 2.79 (d, J = 14.5 Hz, 1 H), 2.67 (br. s., 1 H).
실시예 62
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-에톡시아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00165
화합물 113. DMF(3㎖) 중의 3-에톡시아이소니코틴산(0.05g, 0.299m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.067g, 0.299m㏖, 1.0당량), EDCI.HCl(0.086g, 0.488m㏖, 1.5당량) 및 HOBt(0.06g, 0.488m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸아민(0.5㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(50㎖×5)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-에톡시아이소니코틴아마이드(0.07g, 30.7% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 339.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.71 (br. s., 1 H), 8.59 (s, 1 H), 8.34 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.70 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 5.15 (dd, J = 2.9, 9.0 Hz, 1 H), 4.36 (q, J = 7.0 Hz, 2 H), 4.30 - 4.12 (m, 3 H), 4.12 - 3.98 (m, 1 H), 2.90 - 2.68 (m, 2 H), 1.46 (t, J = 6.8 Hz, 3 H).
실시예 63
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-((4-플루오로페닐)아미노)아이소니코틴아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트의 합성
Figure pct00166
화합물 114a. 톨루엔(3㎖) 중의 메틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.200g, 0.93m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, 4-플루오로아닐린 (0.103g, 0.93m㏖, 1.0당량), 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(0.043 g,0.046m㏖, 0.05당량), 잔트포스(0.053g, 0.093m㏖, 0.1당량) 및 Cs2CO3(0.456g, 1.4m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 190℃에서 1시간 동안 마이크로파로 가열시켰다. 반응 진행을 LCMS로 체크하였다. 반응 혼합물을 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(30㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수(30㎖)로 세척하고, 유기 추출물을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 화합물을 정상 콤비-플래시 크로마토그래피로 정제시켜 메틸 3-((4-플루오로페닐)아미노)아이소니코틴에이트(0.120g, 53% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS: 246.8 [M+H] +
화합물 114b. THF 및 물(1:1)(6㎖) 중의 메틸 3-((4-플루오로페닐)아미노)아이소니코틴에이트(0.350g, 1.4m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.089g, 2.1m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 수성층을 감압 하에서 농축시키고, 동결건조시켜 3-((4-플루오로페닐)아미노)아이소니코틴산(0.350 g. 정량 수율)을 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 233.2 [M+H]+
화합물 114. DMF(4㎖) 중의 3-((4-플루오로페닐)아미노)아이소니코틴산(0.350g, 1.5m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, (1R)-4,4-다이플루오로-2-글리실사이클로펜탄-1-카보나이트릴 염산염(0.337g, 1.5m㏖, 1.0당량), HOBt(0.243g, 1.8m㏖, 1.2당량), EDC.HCl(0.343 g,1.8m㏖, 1.2당량) 및 트라이에틸 아민(0.455g, 4.5m㏖, 3당량)을 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(40㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(25㎖×5)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물을 얻었고, 이것을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-((4-플루오로페닐)아미노)아이소니코틴아마이드를 TFA 염(0.003g, 0.5% 수율)으로서 얻었다.
LCMS 404.2 [M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.22 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.50 (q, J = 15.7 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.68 - 7.63 (m, 1H), 7.32 - 7.14 (m, 4H), 5.12 (dd, J = 9.3, 2.9 Hz, 1H), 4.30 (ddd, J = 15.9, 11.5, 4.6 Hz, 1H), 4.20 - 4.06 (m, 3H), 2.92 - 2.73 (m, 2H), 2.33 - 2.25 (m, 1H), 1.56 - 1.49 (m, 1H), 1.23 (s, 1H), 0.87 (d, J = 12.4 Hz, 1H).
실시예 64
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(4-플루오로페녹시)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00167
화합물 35a. DMF(10㎖) 중의 3-브로모피리딘-4-카복실산(1.0g, 5.0m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, 4-플루오로페놀(0.560g, 5.0m㏖, 1당량), CuI(1.90g, 10.0m㏖, 2당량) 및 Cs2CO3(3.260g, 10.0m㏖, 2당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃에서 18시간 동안 가열시켰다. 반응 진행을 LCMS로 체크하였다. 반응 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, pH가 약산성이 될 때까지 증류 HCl을 몇 방울 첨가하였다. 수성층을 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수(50㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에서 농축시켜 3-(4-플루오로페녹시)피리딘-4-카복실산(0.200g, 18% 수율)을 얻었다
LCMS: 234.2 [M+H] +
화합물 35. DMF(3㎖) 중의 3-(4-플루오로페녹시)피리딘-4-카복실산(0.200g, 0.86m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.194g, 0.86m㏖, 1.0당량), HOBt(0.140g, 1.03m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.197g, 1.03m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.260g, 2.58m㏖, 3당량)을 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(40㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(25㎖×5)로 세척하였다. 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 생성물을 얻었다. 얻은 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(4-플루오로페녹시)아이소니코틴아마이드(0.040g, 11.5% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 405.2 [M+H] +
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.80 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.65(d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.26 (t, J = 8.7 Hz, 2H), 7.18 (dd, J = 9.0, 4.5 Hz, 2H), 5.10 (dd, J = 8.9, 3.0 Hz, 1H),4.30 - 3.98 (m, 4H), 2.93 - 2.72 (m, 2H).
실시예 65
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(페닐티오)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00168
화합물 115a. 다이옥산(10㎖) 중의 메틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.2g, 0.93m㏖, 1.0당량)의 용액에 벤젠티올(0.204g, 1.85m㏖, 2.0당량), KOAc(0.184g, 1.876m㏖, 2.0당량)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd2(dba)3(0.042g, 0.046m㏖. 0.05당량), 잔트포스(Xanthphose)(0.026g, 0.046m㏖, 0.05당량) 및 생성된 반응 혼합물을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(20% 에틸 아세테이트 용리액으로서 헥산)로 정제시켜 메틸 3-(페닐티오)아이소니코틴에이트(0.100g, 44.4% 수율)를 황색 오일로서 얻었다.
LCMS 246.1[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.92 (br. s., 1 H), 8.76 - 8.56 (m, 2 H), 7.50 (s, 1 H), 7.48 - 7.40 (m, 2 H), 7.40 - 7.29 (m, 2 H), 5.14 - 5.04 (m, 1 H), 4.21 (br. s., 1 H), 4.03 (d, J = 2.6 Hz, 2 H), 2.87 (br. s., 1 H), 2.79 (d, J = 14.5 Hz, 1 H), 2.67 (br. s., 1 H).
화합물 115b. THF(5㎖) 및 물(5㎖) 중의 얻은 메틸 3-(페닐티오)아이소니코틴에이트(0.150g, 0.614m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.052g, 1.23m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(페닐티오)아이소니코틴에이트(정량 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 232.3[M+H]+
화합물 115. DMF(5㎖) 중의 3-(페닐티오)아이소니코틴에이트(0.15g, 0.65m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.146g, 0.65m㏖, 1.0당량), EDCI.HCl(0.190g, 0.97m㏖, 1.5당량) 및 HOBt(0.132g, 0.97m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸아민(0.3㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(50㎖×5)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% MeOH)로 정제시키고, 그 다음 정제용 정제기로 정제시켜, (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(페닐티오)아이소니코틴아마이드(0.010g, 3.8% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 403.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.03 (br. s., 1 H), 8.52 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 8.18 (s, 1 H), 7.56 - 7.32 (m, 6 H), 5.13 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 4.29 (br. s., 1 H), 4.24 - 4.05 (m, 2 H), 2.82 (d, J = 14.9 Hz, 3 H).
실시예 66
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-4-(퀴놀린-4-일)-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드의 합성
Figure pct00169
화합물 116a. 다이옥산(10㎖) 중의 메틸 4-클로로-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(0.2g, 1.07m㏖, 1.0당량)의 용액에 퀴놀린-4-일보론산(0.22g, 1.26m㏖, 2.0당량), K3PO4.3H2O(0.455g, 2.14m㏖, 2.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd2(dba)3 (0.024g, 0.11m㏖. 0.1당량), 트라이사이클로헥실포스핀(0.030g, 0.11m㏖, 0.1당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 140℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, DCM 중의 10% 메탄올(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% 메탄올)로 정제시켜 메틸 6-옥소-4-(퀴놀린-4-일)-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(3)(0.058g, 19.4%)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 281.3[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.47 (br. s., 1 H), 8.91 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 8.23 (s, 1 H), 8.11 - 7.96 (m, 1 H), 7.84 - 7.70 (m, 1 H), 7.64 - 7.43 (m, 2 H), 7.35 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 6.30 (s, 1 H), 3.35 (s, 3 H).
화합물 116b. THF(4㎖) 및 물(4㎖) 중의 얻은 메틸 6-옥소-4-(퀴놀린-4-일)-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(0.115g, 0.412m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.026g, 0.616m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 6-옥소-4-(퀴놀린-4-일)-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(정량 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 267.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (d, J = 17.1 Hz, 1 H), 8.80 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 8.05 - 7.86 (m, 2 H), 7.67 (t, J = 7.2 Hz, 1 H), 7.58 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.21 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 5.98 (s, 1 H)
화합물 116. DMF(5㎖) 중의 6-옥소-4-(퀴놀린-4-일)-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(0.1g, 0.38m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.085g, 0.38m㏖, 1.0당량), HATU(0.286g, 0.754m㏖, 2.0당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. DIPEA(0.3㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(50㎖×5)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 정제용 정제기로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-4-(퀴놀린-4-일)-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드(0.045g, 27.12% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 438.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.24 (br. s., 1 H), 8.86 (br. s., 1 H), 8.59 (br. s., 1 H), 8.03 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.94 (br. s., 1 H), 7.74 (br. s., 1 H), 7.67 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.60 - 7.45 (m, 1 H), 7.33 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 6.29 (br. s., 1 H), 4.98 (br. s., 1 H), 4.05 (d, J = 14.9 Hz, 1 H), 3.89 - 3.73 (m, 2 H), 2.83 - 2.60 (m, 3 H).
실시예 67
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(피리딘-3-일아미노)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00170
화합물 117a. 다이옥산(10㎖) 중의 메틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.5g, 2.315m㏖, 1.0당량)의 용액에 피리딘-3-아민(0.218 g,2.315m㏖, 1.0당량), Cs2CO3(1.5g, 4.63m㏖, 2.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd2(dba)3 (0.106g, 0.116m㏖. 0.05당량), 잔트포스(0.134g, 0.232m㏖, 0.1당량) 및 생성된 반응 혼합물을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 120℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 3% 메탄올)로 정제시켜 메틸 3-(피리딘-3-일아미노)아이소니코틴에이트(0.170g, 32.07%)를 어두운 갈색 액체로서 얻었다.
LCMS 230.1[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.88 (s, 1 H), 8.57 - 8.44 (m, 2 H), 8.29 (d, J = 3.5 Hz, 1 H), 8.13 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.79 - 7.62 (m, 2 H), 7.39 - 7.29 (m, 1 H), 3.88 (s, 3 H).
화합물 117b. THF(4㎖) 및 물(4㎖) 중의 얻은 메틸 3-(피리딘-3-일아미노)아이소니코틴에이트(0.170g, 0.742m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.048g, 1.114m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(피리딘-3-일아미노)아이소니코틴에이트(정량 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 216.1[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11.84 (s, 1 H), 8.55 (s, 1 H), 8.39 (d, J = 2.6 Hz, 1 H), 8.10 (d, J = 3.9 Hz, 1 H), 7.96 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.70 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.65 - 7.55 (m, 1 H), 7.28 (dd, J = 4.8, 8.3 Hz, 1 H).
화합물 117. DMF(5㎖) 중의 3-(피리딘-3-일아미노)아이소니코틴에이트(0.10g, 0.465m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.104g, 0.465m㏖, 1.0당량), HATU(0.353g, 0.93m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. DIPEA(0.35㎖)를 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(50㎖×5)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 10% MeOH)로 정제시키고, 그 다음 정제용 정제기로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(피리딘-3-일아미노)아이소니코틴아마이드(0.072g, 40% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 387.2[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.17 (br. s., 1 H), 9.09 (s, 1 H), 8.62 (s, 1 H), 8.45 (br. s., 1 H), 8.19 (br. s., 2 H), 7.64 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.58 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.38 - 7.22 (m, 1 H), 5.12 (d, J = 7.0 Hz, 1 H), 4.31 (d, J = 11.4 Hz, 1 H), 4.18 - 3.98 (m, 2 H), 2.90 (br. s., 1 H), 2.82 (d, J = 15.3 Hz, 2 H).
실시예 68
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(피페리딘-4-일아미노)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00171
화합물 118a. 다이옥산(15㎖) 중의 메틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.500gm, 2.3148m㏖, 1당량) 및 tert-부틸 4-아미노피페리딘-1-카복실레이트(0.463gm, 2.3148m㏖, 1당량) 및 CS2CO3(1.5gm, 4.6296m㏖, 2당량)의 교반되는 용액에. 생성된 혼합물에 질소를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd2(dba)3(0.106gm, 0.1157m㏖, 0.05당량) 및 잔트포스(0.134gm, 0.2314m㏖, 0.1당량)를 첨가하고, 다시 질소를 10분 동안 퍼징하였다. 반응 혼합물을 120℃에서 밤새 가열시켰다. 반응의 진행을 LCMS로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 물(30㎖)로 희석시키고, EtOAc(2×50㎖)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(30㎖), 염수(30㎖)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조물질을 수득하였고, 이것을 플래시 크로마토그래피로 정제시켜 메틸 3-((1-(tert-부톡시카보닐)피페리딘-4-일)아미노)아이소니코틴에이트(400㎎, 51.49%)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS: 336.3[M+H] +`
1H NMR: (400MHz, DMSO-d6) δ8.41 (s, 1 H), 7.60 - 7.51 (m, 2 H), 7.27 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 3.00 (m., 4 H), 2.04 - 1.88 (s, 3 H), 1.44 - 1.35 (s, 9 H), 1.31 - 1.12 (m, 4 H).
화합물 118b. THF(8㎖) 및 물(4㎖) 중의 화합물 메틸 3-((1-(tert-부톡시카보닐)피페리딘-4-일)아미노)아이소니코틴에이트(0.400gm, 1.1904m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.058gm, 2.3809m㏖, 2당량)를 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 화합물 3-((1-(tert-부톡시카보닐)피페리딘-4-일)아미노)아이소니코틴산(330㎎, 78% 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS: 322.2[M+H] +
1H NMR: (400MHz, DMSO-d6) δ 11.70(s, 1H), 8.41 (s, 1 H), 7.60 - 7.51 (m, 2 H), 7.27 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 3.00 (m., 4 H), 1.44 - 1.35 (s, 9 H), 1.31 - 1.12 (m, 4 H).
화합물 118c. DMF(10㎖) 중의 3-((1-(tert-부톡시카보닐)피페리딘-4-일)아미노)아이소니코틴산(0.200gm, 0.6211m㏖, 1당량), HATU(0354gm, 0.9316m㏖, 1.5당량)의 교반되는 용액에 10분 후에 (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.168gm, 0.7453m㏖, 1.2당량)를 첨가하고, 반응 혼합물 10분 동안 교반하고, 그 다음 적가로 DIPEA(0.2㎖, 0.9316m㏖, 1.5당량)를 첨가하고, 반응을 16시간 동안 교반하였다. 반응 진행을 LCMS 및 TLC로 모니터링하고, 물(30㎖)을 첨가하여 후처리를 완료하고, 에틸 아세테이트(3×50㎖)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(4×20㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 tert-부틸 (S)-4-((4-((2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)카바모일)피리딘-3-일)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(220㎎, 71.89% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다.
LCMS: 493.3[M+H] +
1H NMR: (400MHz, DMSO-d6) δ 8.95 (br. s., 1 H), 8.28 (s, 1 H), 7.86 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.51 - 7.38 (m, 2 H), 5.76 (s, 1 H), 4.12 - 4.02 (m, 4 H), 3.81 (d, J = 13.2 Hz, 2 H), 3.50(m, 1H), 2.05 - 1.93 (m, 4 H), 1.40 (s, 9 H), 1.28 - 1.10 (m, 4 H).
화합물 118. DCM(5㎖) 중의 tert-부틸 (S)-4-((4-((2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)카바모일)피리딘-3-일)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(0.190gm, 0.3861m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, 트라이플루오로아세트산(1.5㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물 농축시키고, 조물질을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(피페리딘-4-일아미노)아이소니코틴아마이드(60㎎, 39.73% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS: 393.3[M+H]+
1H NMR: (400MHz, DMSO-d6) δ= 8.95 (br. s., 1 H), 8.28 (s, 1 H), 7.86 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.51 - 7.38 (m, 2 H), 5.76 (s, 1 H), 4.12 - 4.02 (m, 4 H), 3.81 (d, J = 13.2 Hz, 2 H), 3.50(m, 1H), 2.05 - 1.93 (m, 4 H), 1.28 - 1.10 (m, 4 H).
실시예 69
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(퀴놀린-4-일아미노)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00172
화합물 119a. 다이옥산(10㎖) 중의 메틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.5g, 2.315m㏖, 1.0당량)의 용액에 피리딘-3-아민(0.334g, 2.315m㏖, 1.0당량), Cs2CO3(1.5g, 4.63m㏖, 2.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd2(dba)3(0.106g, 0.116m㏖. 0.05당량), 잔트포스(0.134g, 0.232m㏖, 0.1당량) 및 생성된 반응 혼합물을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 120℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 물(30㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(퀴놀린-4-일아미노)아이소니코틴산(정량 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 266.1[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 13.66 (s, 1 H), 8.93 (s, 1 H), 8.58 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 8.28 - 8.18 (m, 1 H), 8.14 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.91 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.79 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.72 (t, J = 7.0 Hz, 1 H), 7.58 (t, J = 7.2 Hz, 1 H), 7.45 - 7.33 (m, 1 H), 6.76 (br. s., 1 H).
화합물 119. DMF(5㎖) 중의 3-(퀴놀린-4-일아미노)아이소니코틴산(0.10g, 0.377m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.085g, 0.377m㏖, 1.0당량), HATU(0.286g, 0.754m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. DIPEA(0.2㎖)를 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×3)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(50㎖×5)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 정제용 정제기로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(퀴놀린-4-일아미노)아이소니코틴아마이드(0.004g, 2.4% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 437.2[M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.76 (br. s., 1H), 8.48 (s, 2H), 7.79 (d, J = 8.33 Hz, 2H), 7.39 (br.s., 2H), 6.86 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 7.45 Hz, 1H), 4.23 (br. s., 1H), 3.98 - 4.12 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.90 (d, J = 8.33 Hz, 1H), 2.70 - 2.86 (m, 1H), 2.67 (br. s., 1H).
실시예 70
(S)-3-(4-아미노피페리딘-1-일)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트의 합성
Figure pct00173
화합물 120a. 다이옥산(5㎖) 중의 메틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.200gm, 0.925m㏖, 1.0당량) 및 tert-부틸 피페리딘-4-일카바메이트(0.185gm, 0.925m㏖, 1.0당량) 및 CS2CO3(0.601gm, 1.85m㏖, 2.0당량)의 교반되는 용액에. 생성된 혼합물에 질소를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd2(dba)3(0.042gm, 0.046m㏖, 0.05당량) 및 잔트포스(0.053gm, 0.092m㏖, 0.1당량)를 첨가하고, 다시 질소를 10분 동안 퍼징하였다. 반응 혼합물을 120℃에서 밤새 가열시켰다. 반응의 진행을 LCMS로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 물(30㎖)로 희석시키고, EtOAc(2×50㎖)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(30㎖), 염수(30㎖)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 물질을 얻었고, 이것을 칼럼 크로마토그래피로 정제시켜 메틸 3-(4-((tert-부톡시카보닐)아미노)피페리딘-1-일)아이소니코틴에이트(0.120g, 38% 수율)를 황색 반고체로서 얻었다.
LCMS: 336.5[M+H] +`
화합물 120b. THF(3㎖) 및 물(2㎖) 중의 화합물 메틸 3-(4-((tert-부톡시카보닐)아미노)피페리딘-1-일)아이소니코틴에이트(0.100gm, 0.298m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.014gm, 0.597m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(4-((tert-부톡시카보닐)아미노)피페리딘-1-일)아이소니코틴산, 리튬염(0.120g, 정량 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
LCMS: 322.2[M+H] +
화합물 120c. DMF(3㎖) 중의 3-(4-((tert-부톡시카보닐)아미노)피페리딘-1-일)아이소니코틴산, 리튬 염(0.070gm, 0.213m㏖, 1.0당량), HATU(0.162gm, 0.426m㏖, 2.0당량)의 교반되는 용액에 10분 후에 (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.048gm, 0.213m㏖, 1.0당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 10분 동안 교반하고, 그 다음 적가로 DIPEA(0.082g, 0.640m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 반응을 16시간 동안 RT에서 교반하였다. 반응 진행을 LCMS 및 TLC로 모니터링하고, 물(30㎖)을 첨가하여 후처리를 완료하고, 에틸 아세테이트(2×50㎖)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(4×20㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 (S)-(1-(4-((2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)카바모일)피리딘-3-일)피페리딘-4-일)카바메이트(0.110g)를 조 생성물로서 얻었고, 이것을 직접 다음 단계를 위해서 사용하였다.
LCMS: 493.3[M+H] +
화합물 120·TFA. DCM(3㎖) 중의 (S)-(1-(4-((2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)카바모일)피리딘-3-일)피페리딘-4-일)카바메이트(0.110gm, 0.223m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, 트라이플루오로아세트산(1.0㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 조물질을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-3-(4-아미노피페리딘-1-일)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아이소니코틴아마이드 2,2,2-트라이플루오로아세테이트(0.015g)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS: 393.3[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ9.25 (d, J = 5.7 Hz, 1 H), 8.50 (br. s., 1 H), 8.34 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.93 (br. s., 2 H), 7.49 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.11 (s, 1 H), 5.10 (d, J = 6.6 Hz, 1 H), 4.22 - 4.11 (m, 2 H), 3.51 - 3.35 (m, 3 H), 3.19 (br. s., 1 H), 3.04 - 2.75 (m, 4 H), 1.97 (d, J = 11.8 Hz, 2 H), 1.71 (d, J = 11.4 Hz, 2 H), 1.55 (br. s., 1 H), 0.94 - 0.77 (m, 2 H)
실시예 71
(S)-4-벤질-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드의 합성
Figure pct00174
화합물 121a. 다이옥산(4㎖) 및 물(4㎖) 중의 메틸 4-클로로-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(0.250g, 1.34m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에 Na2CO3(0.284g, 2.68m㏖, 2.0당량), 2-벤질-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란(0.584g, 2.68m㏖, 2.0당량) 및 Pd(dppf)Cl2.DCM 착물(0.058g, 0.07m㏖, 0.05당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 150℃에서 70분 동안 마이크로파로 가열시켰다. 생성물 형성을 TLC 및 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(20㎖X3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(30㎖)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 화합물을 정상 콤비-플래시 크로마토그래피로 정제시켜 메틸 4-벤질-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(0.030g)를 얻었다.
LCMS 244.0 [M+H] +
화합물 121b. THF 및 물(1:1)(6㎖) 중의 메틸 4-벤질-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실레이트(0.300g, 1.23m㏖, 1당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.104g, 2.47m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(25㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(20㎖)로 추출하고, 수성층을 감압 하에서 농축시키고, 동결건조시켜 4-벤질-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실산(0.260g)을 얻었다.
LCMS 230.0 [M+H] +
화합물 121. DMF(17㎖) 중의 4-벤질-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복실산(0.500g, 2.18m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에 (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.590g, 2.62m㏖, 1.2당량), EDC.HCl(0.503g, 2.62m㏖, 1.2당량), HOBT(0.354g, 2.62m㏖, 1.2당량), DMAP(0.001g)를 첨가하고, 반응 혼합물을 RT에서 10분 동안 교반하고, 그 다음 TEA(0.661g, 6.54m㏖, 3.0당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 RT에서 16시간 동안 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(35㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(60㎖X3)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(40㎖ X 6) 및 염수(60㎖)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 화합물을 역상 HPLC로 정제시켜 순수한 (S)-4-벤질-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-카복스아마이드(0.070g 8.5%)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 401.1 [M+H] +
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.74 (s, 1H), 8.55 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.33 - 7.15 (m, 5H), 6.05 (s, 1H), 5.09 (dd, J = 9.1, 2.8 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 14.5, 9.9 Hz, 1H), 4.16 - 3.95 (m, 5H), 2.98 - 2.72 (m, 2H).
실시예 72
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-페닐바이닐)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00175
화합물 122a. 톨루엔(10㎖) 중의 메틸 3-브로모아이소니코틴에이트(1.0g, 4.6m㏖, 1.0당량)의 용액에 4,4,5,5-테트라메틸-2-(1-페닐바이닐)-1,3,2-다이옥사보롤란(1.06g, 4.6m㏖, 1.0당량), K3O4P(1.96g, 9.2m㏖, 2.0당량)를 첨가하고, 그 다음 팔라듐(II) 아세테이트(0.104g, 0.46m㏖. 0.1당량) 및 트라이사이클로헥실포스핀(0.130g, 0.46m㏖. 0.1당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(200㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(150㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×2)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-20% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 3-(1-페닐바이닐)아이소니코틴에이트(0.560g, 50% 수율)를 갈색 반고체로서 얻었다.
LCMS 240[M+H]+
화합물 122b. THF(5㎖) 및 물(5㎖) 중의 메틸 3-(1-페닐바이닐)아이소니코틴에이트(0.100g, 0.41m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.020g, 0.82m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR 분광학으로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(15㎖)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(1-페닐바이닐)아이소니코틴산(0.140g, 정량 수율)을 갈색 고체로서 얻었다.
LCMS 225.9[M+H]+
화합물 122. DMF(5㎖) 중의 3-(1-페닐바이닐)아이소니코틴산(0.140g, 0.44m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.100g, 0.44m㏖, 1.0당량), HOBt(0.072g, 0.53m㏖, 1.2당량) 및 EDC.HCl(0.102g, 0.53m㏖, 1.2당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸 아민(0.2㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 역상 HPLC로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-페닐바이닐)아이소니코틴아마이드(0.010g, 07% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 397[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ8.66 (t, J = 5.9 Hz, 2 H), 8.43 (s, 1 H), 7.46 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.29 (br. s., 2 H), 7.25 (br. s., 2 H), 5.77 (s, 1 H), 5.38 (s, 1 H), 5.07 (d, J = 6.6 Hz, 1 H), 4.16 (br. s., 1 H), 3.97 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 3.86 (br. s., 2 H), 2.78 (d, J = 10.5 Hz, 2 H), 2.67 (br. s., 1 H).
실시예 73
N-(2-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-페닐에틸)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00176
화합물 123a. 질소 하에서 THF:메탄올(10:04㎖) 중의 메틸 3-(1-페닐바이닐)아이소니코틴에이트(0.200g, 0.83m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에 TEA(0.425g, 4.16m㏖, 5.0당량)를 첨가하고, 탄소 상 팔라듐[Pd/C](0.045g, 0.41m㏖, 0.5당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물에 H2 기체를 1시간 동안 퍼징하였다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 반응 혼합물을 셀라이트층에 여과시키고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜 메틸 3-(1-페닐에틸)아이소니코틴에이트(0.180g, 89% 수율)를 갈색 반고체로서 얻었다.
LCMS 241.28 [M+H]+
화합물 123b. THF(15㎖) 및 물(10㎖) 중의 메틸 3-(1-페닐에틸)아이소니코틴에이트(0.180g, 0.74m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH(0.036g, 1.48m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR 분광학으로 확인하였다. 반응 혼합물을 물(15㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(15㎖)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-(1-페닐에틸)아이소니코틴산(0.210g, 정량 수율)을 갈색 고체로서 얻었다.
LCMS 227.9[M+H]+
화합물 123. DMF(5㎖) 중의 3-(1-페닐에틸)아이소니코틴산(0.100g, 0.43m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, DIPEA(0.3㎖, 1.29m㏖, 3.0당량) 및 HATU(0.327g, 0.86m㏖, 2.0당량)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 질소 분위기 하에서 교반하였다. (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.099g, 0.43m㏖, 1.0당량)을 상기 혼합물에 첨가하고, 밤새 RT에서 교반하였다. 반응의 진행을 TLC 및 LCMS로 모니터링하였다. 반응이 완결된 후, 반응 혼합물을 물(30㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(100㎖×2)로 추출하였다. 유기층을 물(100㎖), 염수 용액(100㎖)으로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 조 화합물을 얻었고, 이것을 역상 HPLC로 정제시켜 N-(2-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-(1-페닐에틸)아이소니코틴아마이드(유리 염기)(0.005g, 03% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 399[M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.97 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 8.56 - 8.38 (m, 2 H), 7.46 - 7.33 (m, 2 H), 7.29 (t, J = 7.2 Hz, 3 H), 7.18 (t, J = 7.0 Hz, 1 H), 5.14 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 4.69 - 4.59 (m, 1 H), 4.29 (br. s., 1 H), 4.22 - 3.99 (m, 3 H), 2.82 (d, J = 18.4 Hz, 2 H), 1.63 (t, J = 7.0 Hz, 3 H).
실시예 74
N-(2-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-((R)-1-페닐에틸)아이소니코틴아마이드 및 N-(2-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-((S)-1-페닐에틸)아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00177
카이럴 분할 방법: 거울상이성질체를 카이럴 SFC(Chiralpak-IC, 250×20mm, 5μ)으로 분리시켰다. 헥산 및 아이소프로필 알코올 중의 HPLC 등급 0.2% DEA와 함께 분석 등급 이산화탄소를 사용하는 등용매 프로그램.
LCMS 399.3 [M+H]+
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.97 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 8.56 - 8.38 (m, 2 H), 7.46 - 7.33 (m, 2 H), 7.29 (t, J = 7.2 Hz, 3 H), 7.18 (t, J = 7.0 Hz, 1 H), 5.14 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 4.69 - 4.59 (m, 1 H), 4.29 (br. s., 1 H), 4.22 - 3.99 (m, 3 H), 2.82 (d, J = 18.4 Hz, 2 H), 1.63 (t, J = 7.0 Hz, 3 H).
실시예 75
(S,E)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-스티릴아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00178
화합물 124a. 다이옥산(10㎖) 및 물(1㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.2g, 0.925m㏖, 1.0당량)의 용액에 (E)-4,4,5,5-테트라메틸-2-스티릴-1,3,2-다이옥사보롤란 (0.319g, 1.39m㏖, 1.5당량), K2CO3(0.26g, 1.852m㏖, 2.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)Cl2 (0.033g, 0.046m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 120℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-30% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 (E)-3-스티릴아이소니코틴에이트(0.150g, 67.87% 수율)를 연황색 고체로서 얻었다.
LCMS 240.1[M+H]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ 9.12 (s, 1 H), 8.63 (d, J=5.4 Hz, 1 H), 7.65 - 7.77 (m, 2 H), 7.61 (d, J=7.3 Hz, 2 H), 7.38 - 7.49 (m, 2 H), 7.26 - 7.38 (m, 2 H), 3.83 - 3.96 ppm (m, 3 H).
화합물 124b. THF(2㎖) 및 물(2㎖) 중의 메틸 (E)-3-스티릴아이소니코틴에이트(0.1g, 0.418m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.021g, 0.0.502m㏖, 1.2당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR 분광학으로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 (E)-3-스티릴아이소니코틴산(정량 수율)을 회백색 고체 얻었다.
LCMS 226.2[M+H]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ 8.83 (s, 1 H), 8.30 (d, J=4.9 Hz, 1 H), 7.86 (d, J=17.1 Hz, 1 H), 7.52 (d, J=7.3 Hz, 2 H), 7.38 (t, J=7.6 Hz, 2 H), 7.20 - 7.29 (m, 2 H), 7.18 ppm (s, 1 H).
화합물 124. DMF(2㎖) 중의 (E)-3-스티릴아이소니코틴산(0.06g, 0.266m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.06g, 0.266m㏖, 1.0당량), EDCI.HCl(0.077g, 0.39m㏖, 1.5당량) 및 HOBt(0.054g, 0.39m㏖, 1.5당량)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸아민(0.2㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(20㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% 메탄올)로 정제시켜 (S,E)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-스티릴아이소니코틴아마이드(0.046g, 43.8% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS 397.2[M+H]+
1H NMR (DMSO-d6 ,400MHz) δ 9.14 (s, 1 H), 8.99 (t, J=5.9 Hz, 1 H), 8.53 (d, J=4.4 Hz, 1 H), 7.69 (d, J=7.3 Hz, 2 H), 7.63 (s, 1 H), 7.47 (d, J=16.1 Hz, 1 H), 7.33 - 7.44 (m, 3 H), 7.24 - 7.33 (m, 1 H), 5.10 - 5.24 (m, 1 H), 4.32 (br. s., 1 H), 4.05 - 4.23 (m, 3 H), 2.94 (br. s., 1 H), 2.80 - 2.91 ppm (m, 1 H).
실시예 76
(S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-펜에틸아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00179
화합물 125a. 다이옥산(10㎖) 및 물(1㎖) 중의 에틸 3-브로모아이소니코틴에이트(0.2g, 0.925m㏖, 1.0당량)의 용액에 (E)-4,4,5,5-테트라메틸-2-스티릴-1,3,2-다이옥사보롤란 (0.319g, 1.39m㏖, 1.5당량), K2CO3(0.26g, 1.852m㏖, 2.0당량)를 첨가하고, 생성된 반응 혼합물에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd(PPh3)Cl2 (0.033g, 0.046m㏖. 0.05당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 120℃에서 밤새 가열시켰다. 생성물 형성을 LCMS로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 헥산 중의 0-30% 에틸 아세테이트)로 정제시켜 메틸 (E)-3-스티릴아이소니코틴에이트(0.150g, 67.87% 수율)를 연황색 고체로서 얻었다.
LCMS 240.1[M+H]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ 9.12 (s, 1 H), 8.63 (d, J=5.4 Hz, 1 H), 7.65 - 7.77 (m, 2 H), 7.61 (d, J=7.3 Hz, 2 H), 7.38 - 7.49 (m, 2 H), 7.26 - 7.38 (m, 2 H), 3.83 - 3.96 ppm (m, 3 H).
화합물 125b. 메탄올(9㎖) 중의 메틸 (E)-3-스티릴아이소니코틴에이트(0.13g, 0.544m㏖, 1.0당량)의 용액에 N2 기체를 10분 동안 퍼징하고, 그 다음 Pd/C(0.065g)를 첨가하였다. 이어서, 생성된 반응 혼합물에 H2 기체를 6시간 동안 퍼징하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 NMR로 확인하였다. 반응의 완결 후, 혼합물을 셀라이트층으로 여과시키고, 메탄올(30㎖)로 세척하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시켜 메틸 3-펜에틸아이소니코틴에이트(0.1g, 76.33% 수율)를 투명한 오일로서 얻었다.
LCMS 242.2[M+H]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ 8.57 (s, 2 H), 7.27 (d, J=6.8 Hz, 1 H), 7.19 (d, J=6.8 Hz, 2 H), 3.88 (s, 3 H), 3.15 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 2.83 ppm (br. s., 2 H).
화합물 125c. THF(4㎖) 및 물(4㎖) 중의 메틸 3-펜에틸아이소니코틴에이트(0.1g, 0.415m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, LiOH.H2O(0.021g, 0.5m㏖ 및 1.2당량)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 1H NMR 분광학으로 확인하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(10㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 세척하였다. 수성층을 분리시키고, 동결건조기 상에서 동결 건조시켜 3-펜에틸아이소니코틴산(정량 수율)을 회백색 고체 얻었다.
LCMS 228.2[M+H]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ 8.22 (d, J=4.9 Hz, 1 H), 7.18 - 7.33 (m, 5 H), 7.08 - 7.18 (m, 1 H), 2.96 - 3.11 (m, 2 H), 2.74 - 2.87 ppm (m, 2 H).
화합물 125. DMF(3㎖) 중의 (E)-3-스티릴아이소니코틴산(0.05g, 0.22m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에, (S)-4,4-다이플루오로-1-글리실피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.05g, 0.22m㏖, 1.0당량), EDCI.HCl(0.063g, 0.33m㏖, 1.5당량) 및 HOBt(0.046g, 0.33m㏖, 1.5당량)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 RT에서 교반하였다. 트라이에틸아민(0.2㎖)을 첨가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 생성물 형성을 LCMS 및 TLC로 확인하였다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 물(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(20㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(20㎖×4)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(용리액으로서 DCM 중의 5% 메탄올)로 정제시켜 (S)-N-(2-(2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)-3-펜에틸아이소니코틴아마이드(0.050g, 57.12% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
LCMS 399.2[M+H]+
1H NMR (DMSO-d6 ,400MHz) δ 8.92 (br. s., 1 H), 8.40 - 8.53 (m, 2 H), 7.34 (d, J=4.4 Hz, 1 H), 7.21 - 7.29 (m, 4 H), 7.17 (d, J=6.4 Hz, 1 H), 5.12 (d, J=7.3 Hz, 1 H), 4.31 (br. s., 1 H), 4.02 - 4.22 (m, 3 H), 2.96 - 3.08 (m, 2 H), 2.77 - 2.95 ppm (m, 4 H).
실시예 77
N-(1-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-1-옥소프로판-2-일)-3-페닐아이소니코틴아마이드의 합성
Figure pct00180
화합물 126a. ACN(20㎖) 중의 알라닌(2.0g, 22.2m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에 다이-tert-부틸다이카보네이트(5.35g, 24.4m㏖, 1.1당량)를 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. 0.5M NaOH 용액(20㎖)을 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응 진행을 NMR로 모니터링하였다. 반응을 묽은 HCl(PH=2.5)로 산성화시키고, 에틸 아세테이트(100㎖)로 추출하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 (tert-부톡시카보닐)알라닌을 얻었다(2.100g, 백색 고체).
화합물 126b. DMF(05㎖) 중의 (tert-부톡시카보닐)알라닌(0.623g, 3.2m㏖, 1.1당량) 및 HATU(2.20g, 5.8m㏖, 2.0당량)의 교반되는 용액에 (S)-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.500g, 2.9m㏖, 1.0당량)을 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. DIPEA(1.5㎖, 8.7m㏖, 3.0당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 RT에서 교반하였다. 반응 진행을 NMR 및 TLC로 모니터링하였다. 반응을 차가운 물(200㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(200㎖×2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(200㎖×3)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켜 tert-부틸 (1-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-1-옥소프로판-2-일)카바메이트(0.700g, 갈색 고체로서)를 얻었다.
화합물 126c. 아세토나이트릴(10㎖) 중의 tert-부틸 (1-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-1-옥소프로판-2-일)카바메이트(0.700g, 2.31m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에 0℃에서 다이옥산 중의 4.0M HCl(5.0㎖)을 10분의 기간에 걸쳐서 적가하였다. 혼합물을 RT에서 밤새 교반하였다. 반응 진행을 NMR로 모니터링하였다. 용매를 감압 하에서 증발시켜 잔류물을 얻었고, 이것을 20㎖ 에틸 아세테이트 및 헥산(1:1)으로 세척하여 (2S)-1-알라닐-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.900g)을 황색 반고체로서 얻었다.
화합물 126. DMF(5㎖) 중의 3-페닐아이소니코틴산(0.753g, 3.7m㏖, 1.0당량)의 교반되는 용액에 (2S)-1-알라닐-4,4-다이플루오로피롤리딘-2-카보나이트릴 염산염(0.900g, 3.7m㏖, 1.0당량), HOBT(0.594g, 4.4m㏖, 1.2당량), EDC.HCl(0.848g, 4.4m㏖, 1.2당량)을 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. TEA(1.0㎖, 7.4m㏖, 2.0당량)를 첨가하고, 혼합물을 RT에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 진행을 NMR 및 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 차가운 물(50㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(150×2㎖)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물(50㎖×4)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 얻은 조 생성물을 역상 크로마토그래피로 정제시켜 N-(1-((S)-2-사이아노-4,4-다이플루오로피롤리딘-1-일)-1-옥소프로판-2-일)-3-페닐아이소니코틴아마이드(35㎎, 03% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다.
LCMS 385 [M+H]+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.06 (d, J=7.45 Hz, 1 H) 8.66 (br. s., 2 H) 7.32 - 7.52 (m, 5 H) 5.05 (d, J=7.02 Hz, 1 H) 4.56 (br. s., 1 H) 4.07 (d, J=9.21 Hz, 1 H) 4.01 (br. s., 1 H) 2.82 (br. s., 2 H) 1.09 - 1.20 (m, 3 H).
생물학적 실시예
실시예 B1
시험 화합물에 의한 FAPα의 저해를 시험관내 효소 활성 검정으로 평가하였다.
FAPα 효소 엑소펩티다제(다이펩티다제) 활성 검정. 검정 기준선 FAPα 효소 엑소펩티다제 활성도를 검정하기 위해서, 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108)에서 광으로부터 보호하면서 40ng의 재조합 인간 FAPα(rhFAPα, 알앤에스 시스템사(R&S system), #3715-SE) 또는 40ng의 재조합 마우스 FAPα(rmFAPα, 알앤에스 시스템사, #8647-SE)를 FAPα 검정 완충제(50mM Tris pH 7.4, 100mM NaCl, 0.1㎎/㎖ 소 혈청 알부민)에서 100μM의 Z-Gly-Pro-AMC 펩타이드(바켐사, #L-1145)와 함께 1시간 동안 37℃에서 인큐베이션시켰다. 시험 화합물에 의한 FAPα 효소 엑소펩티다제 활성 저해를 검정하기 위해서, 모든 시험 화합물을 효소와 함께 15분 동안 37℃에서 사전 인큐베이션시키고, 그 후 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108)에 기질을 첨가하여 반응을 시작하였다. 다기능 마이크로플레이트 판독기(Multifunction Microplate Reader)(Synergy 4, 바이오테크사)를 사용하여 Ex/Em 380/460㎚에서 형광을 측정함으로써 7-아미노-4-메틸쿠마린(AMC) 방출을 검출하였다. 모든 측정을 2회 수행하였다. Val-boroPro, 비특이적 프롤릴 펩티다제 저해제를 양성 대조군으로 사용하였다. 1μM에서 rmFAPα 또는 rhFAPα 효소 엑소펩티다제 활성의 저해 백분율을 표 2에 기재된 바와 같이 특정 화합물에 대해서 결정하였다. 계산을 위해서, 효소 없이 비히클 및 기질만 함유한 반응으로부터의 평균 측정치를 블랭크로서 사용하고, 나머지 측정치로부터 뺄셈하였다. 최대 효소 활성으로서 비히클, 효소 및 기질을 함유하는 반응으로부터의 평균 측정치를 사용하여 저해 백분율을 계산하였다. 추가로, 특정 화합물의 rmFAPα 또는 rhFAPα 효소 엑소펩티다제 활성에 대한 IC50을 또한 표 2에 나타낸다. 측정을 단일 지점으로서 수행하였다.
FAPα 효소 엔도펩티다제(콜라게나제) 활성 검정. 기준선 FAPα 효소 엑소펩티다제 활성도를 검정하기 위해서, FAPα 검정 완충제(50mM Tris pH 7.4, 100mM NaCl, 0.1 ㎎/㎖ 소 혈청 알부민)에 용리시킨 50ng의 재조합 인간 FAPα(rhFAPα)(알앤에스 시스템사, #3715-SE)를 384-웰 옵티플레이트(optiplate)(퍼킨 엘머사(Perkin Elmer), #384-F)에서 광으로부터 보호하면서 5㎍의 기질 DQ 콜라겐 용액(Molecular Probes #D-12060)과 함께 5시간 동안 37℃에서 인큐베이션시켰다. 시험 화합물에 의한 FAPα 효소 엔도펩티다제 활성 저해를 검정하기 위해서, 모든 시험 화합물을 효소와 함께 30분 동안 37℃에서 사전 인큐베이션시키고, 그 후 384-웰 옵티플레이트(퍼킨 엘머사, #384-F)에 기질을 첨가함으로써 반응을 시작하였다. 다기능 마이크로플레이트 판독기(Synergy 4, 바이오테크사)를 사용하여 Ex/Em 495/515㎚에서 형광을 측정함으로써 콜라겐 가수분해를 결정하였다. 모든 측정을 단일 지점으로서 수행하였다. Val-boroPro, 비특이적 프롤릴 펩티다제 저해제를 양성 대조군으로 사용하였다. 특정 화합물의 rhFAPα 효소 엔도펩티다제 활성에 대한 IC50(콜라게나제 검정에 의해서 측정된 바와 같음)을 또한 표 2에 나타낸다.
Figure pct00181
Figure pct00182
Figure pct00183
실시예 B2
시험 화합물에 의한 FAPα의 저해의 선택성을 다른 프롤릴 올리고펩티다제 패밀리 S9 구성원: DPPIV, PREP 및 DPP9와 비교하여 평가하였다.
DPPIV 효소 활성 검정
기준선 다이펩티틸 펩티다제-4(DPPIV) 활성도를 검정하기 위해서, 40ng의 재조합 인간 DPPIV(rhDPPIV)(알앤에스 시스템사, #1180-SE) 또는 40ng의 재조합 마우스 DPPIV(rmDPPIV)(알앤에스 시스템사, #954-SE)를 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108)에서 광으로부터 보호하면서 400μM의 H-Gly-Pro-pNA 기질(바켐사, #L-1880)과 함께 DPPIV 검정 완충제(25mM Tris, pH 8.3)에서 30분 동안 37℃에서 인큐베이션시켰다. 시험 화합물에 의한 DPPIV 저해를 검정하기 위해서, 모든 시험 화합물을 효소와 함께 15분 동안 37℃에서 사전 인큐베이션시키고, 그 후 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108)에 기질을 첨가하여 반응을 시작하였다. 다기능 마이크로플레이트 판독기(Synergy 4, 바이오테크사)를 사용하여 405㎚에서 흡광도를 측정함으로써 파라-나이트로아닐린(pNA) 방출을 검출하였다. 모든 측정을 3회 수행하였다. Val-boroPro, 비특이적 프롤릴 펩티다제 저해제를 양성 대조군으로 사용하였다.
PREP 효소 활성 검정
기준선 프롤릴 엔도펩티다제(PREP) 활성도를 검정하기 위해서, 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108) 내에서 광으로부터 보호하면서 20ng의 재조합 인간 PREP(rhPREP)(알앤에스 시스템사, #4308-SE) 또는 20ng의 재조합 마우스 PREP(rmPREP)(알앤에스 시스템사, #6339-SE)를 100μM의 Z-Gly-Pro-AMC 펩타이드(바켐사, #L-1145)와 함께 PREP 검정 완충제(25mM Tris, 250mM NaCl, 10mM DTT, pH 7.5) 중에서 30분 동안 37℃에서 인큐베이션시켰다. 시험 화합물에 의한 PREP 활성 저해를 검정하기 위해서, 모든 시험 화합물을 효소와 함께 15분 동안 37℃에서 사전 인큐베이션시키고, 그 후 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108)에 기질을 첨가하여 반응을 시작하였다. 다기능 마이크로플레이트 판독기(Synergy 4, Biotek)를 사용하여 Ex/Em 380/460㎚에서 형광을 측정함으로써 7-아미노-4-메틸쿠마린(AMC) 방출을 검출하였다. 모든 측정을 3회 수행하였다. Val-boroPro, 비특이적 프롤릴 펩티다제 저해제를 양성 대조군으로 사용하였다.
DPP9 효소 활성 검정
기준선 다이펩티틸 펩티다제 9(DPP9) 활성도를 검정하기 위해서, 40ng의 재조합 인간 DPP9 (rhDPP9)(알앤에스 시스템사, #5419-SE)를 100μM의 H-Gly-Pro-AMC 펩타이드(바켐사, #L-1215)와 함께 DDP9 검정 완충제(50mM HEPES, pH 8)에서 30분 동안 37℃에서 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108) 내에서 인큐베이션시켰다. 시험 화합물에 의한 rhDPP9 활성 저해를 검정하기 위해서, 모든 시험 화합물을 효소와 함께 15분 동안 37℃에서 사전 인큐베이션시키고, 그 후 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108)에 기질을 첨가하여 반응을 시작하였다. 다기능 마이크로플레이트 판독기(Synergy 4, Biotek)를 사용하여 Ex/Em 380/460㎚에서 형광을 측정함으로써 7-아미노-4-메틸쿠마린(AMC) 방출을 검출하였다. 모든 측정을 3회 수행하였다. Val-boroPro, 비특이적 프롤릴 펩티다제 저해제를 양성 대조군으로 사용하였다.
새로운 FAPα 저해제가 선택성이었는지 또는 그것이 또한 다른 프롤릴 펩티다제를 저해하였는지를 결정하기 위해서, 특정 시험 화합물, 참조 화합물(문헌[Jansen, K., et al., J Med Chem, 2014. 57(7): p. 3053-74]에 기재된 바와 같은 화합물 60) 및 Val-boroPro의 rmDPPIV, rhDPPIV, rmPREP 및/또는 DPP9에 대한 IC50을 표 3에 나타낸 바와 같이 결정하였다.
Figure pct00184
Figure pct00185
Figure pct00186
실시예 B3
FAPα 활성도 측정에 대한 선택적인 PRXS-AMC 기질의 검증
화학 켄칭된 염료, 예컨대, Ala-Pro-7-아미노-4-트라이플루오로메틸-쿠마린(AFC)에 부착된 펩타이드 기질 또는 공통 Gly-Pro 다이펩타이드를 함유하는 기질, 예컨대, Z-Gly-Pro-AMC를 사용하여 다이펩티틸-펩티다제에 대한 일반적인 형광 강도 검정에 의해서 FAPα 활성도를 측정할 수 있다(Levy, M.T., et al., Hepatology, 1999, 29(6): 1768-78; Santos, A.M., et al., J Clin Invest, 2009, 119(12): 3613-25; Park, J.E., et al., J Biol Chem, 1999, 274(51): 36505-12; Niedermeyer, J., et al., Mol Cell Biol, 2000, 20(3): 1089-94; Narra, K., et al., Cancer Biol Ther, 2007, 6(11): 1691-9; Lee, K.N., et al., J Thromb Haemost, 2011, 9(5): 987-96; Li, J., et al., Bioconjug Chem, 2012, 23(8): 1704-11). 이들 기질은 또한 아마도 반응에 존재할 수 있는 다른 순환하는 프롤린-특이적 엔도펩티다제, 예컨대, PREP에 의해서 표적화된다. 이에 반해서, PRXS-AMC라는 명칭의 소유권이 있는 기질 시약은 FAPα 활성을 특이적으로 모니터링할 수 있다.
이러한 소유권이 있는 기질의 높은 선택성을 검증하기 위해서, 실시예 B1 및 B2에 기재된 바와 같이 Z-Gly-Pro-AMC 또는 PRXS-AMC를 사용하여 FAP, DPPIV, PREP 및 DPP9에 대한 효소 활성 검정을 수행하였다.
FAPα, DPPIV, DPP9 및 PREP 효소 활성도를 검정하기 위해서, 인간 재조합 효소를 각각 5, 2.5, 2.5 및 5nM 최종 농도로 사용하였다. Z-Gly-Pro-AMC 또는 PRXS-AMC를 25, 50, 100 및 200μM 최종 농도로 사용하였다. 광으로부터 보호하면서 반응을 60분 동안 37℃에서 수행하였다. 카이네틱 모드로 다기능 마이크로플레이트 판독기를 사용하여 Ex/Em 380/460㎚에서 형광을 측정함으로써 AMC 방출을 검출하였다. 측정을 단일 지점으로서 수행하였다. rhFAPα의 존재 하에서 PRXS-AMC 및 Z-gly-pro-AMC에 대해서 시간에 따라서 생성된 형광을 각각 도 1A 및 도 1B에 도시하고; rhPREP의 존재 하에서 PRXS-AMC 및 Z-gly-pro-AMC에 대해서 시간에 따라서 생성된 형광을 각각 도 2A 및 도 2B에 도시하고; rhDPPIV 또는 rhDPP9의 존재 하에서 PRXS-AMC에 대해서 시간에 따라서 생성된 형광을 각각 도 3A 및 도 3B에 도시한다.
PRXS-AMC는 유사한 농도에서 밀접하게 관련된 프롤릴 올리고펩티다제 PREP에 의해서 Z-Gly-Pro-AMC보다 더 적은 정도로 처리된다(도 2A 및 도 2B 참고). PRXS-AMC는 DPPIV 또는 DPP9에 의해서 처리되지 않는다(도 3A 및 도 3B 참고). 또한, PRXS-AMC는 수성 완충제 중에서 개선된 용해도를 나타내었다.
실시예 B4
혈장에서의 효소 활성도
마우스 혈장에서의 FAPα 효소 활성도
1마리의 C57BL/6 마우스로부터의 대략 500㎕의 전혈을 말단 심장 천자를 통해서 BD Microtainer® 튜브(K2) EDTA(#365974, 벡톤 디킨슨사(Becton Dickinson and Co.))에 수거하였다. 혈액 샘플을 대략 9000g에서 4℃에서 5분 동안 즉시 원심분리시켰다. 혈장을 분리시키고, -80℃에서 300㎕의 분취물로 수거하였다. 기준선 FAPα 효소 엑소펩티다제 활성도를 검정하기 위해서, 5㎕의 해동된 혈장을 cFAP 완충제(100mM Tris-HCl, 400mM NaCl, 50mM 살리실산, 1mM EDTA, pH 7.5)(1:5)로 희석시키고, 35㎕의 동일한 완충제와 혼합하고, 그 다음 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108) 내에서 상이한 농도의 10㎕의 시험 화합물 또는 DMSO 비히클과 15분 동안 37℃에서 사전 인큐베이션시켰다. 사전 인큐베이션 후, 50㎕의 200μM 다이펩타이드 기질 Z-Gly-Pro-AMC(바켐사(Bachem), #L-1145) 또는 PRXS-AMC를 혼합물에 첨가하였다. 광으로부터 보호하면서 검정을 1시간 동안 37℃에서 수행하였다. 다기능 마이크로플레이트 판독기(Synergy 4, 바이오테크사)를 사용하여 380㎚의 여기 파장 및 460㎚의 방출 파장에서 형광을 측정하여 7-아미노-4-메틸쿠마린(AMC) 방출을 검출하였다. 모든 측정을 적어도 단일 지점으로서 수행하였다. 결과를 표 4에 도시한다.
마우스 혈장에서의 DPPIV 효소 활성도
1마리의 C57BL/6 마우스로부터의 대략 500㎕의 전혈을 말단 심장 천자를 통해서 BD Microtainer® 튜브(K2) EDTA(#365974, 벡톤 디킨슨사)에 수거하였다. 혈액 샘플을 대략 9000g에서 4℃에서 5분 동안 즉시 원심분리시켰다. 혈장을 분리시키고, -80℃에서 300㎕의 분취물로 수거하였다. 기준선 DPPIV 효소 엑소펩티다제 활성도를 검정하기 위해서, 5㎕의 해동된 마우스 혈장을 완충제(100mM Tris-HCl, 400mM NaCl, 50mM 살리실산, 1mM EDTA, pH 7.5)(1:5)에서 희석시키고, 35㎕의 동일한 완충제와 혼합하고, 그 다음 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108) 내에서 상이한 농도의 10㎕의 시험 화합물 또는 DMSO 비히클과 15분 동안 37℃에서 사전 인큐베이션시켰다. 사전 인큐베이션 후, 50㎕의 200μM 다이펩타이드 기질 H-Gly-Pro-AMC(바켐사, #L-1225)을 혼합물에 첨가하였다. 검정을 1시간 동안 37℃에서 수행하였다. 다기능 마이크로플레이트 판독기(Synergy 4, 바이오테크사)를 사용하여 360㎚의 여기 파장 및 460㎚의 방출 파장에서 형광을 측정하여 7-아미노-4-메틸쿠마린(AMC) 방출을 검출하였다. 모든 측정을 적어도 2회 수행하였다. 결과를 표 4에 도시한다.
Figure pct00187
Figure pct00188
실시예 B5
인간 혈장에서 FAPα 효소 활성도
인간 혈장을 PBS에서 1/10으로 희석시킨다. 기준선 FAPα 효소 엑소펩티다제 활성도를 검정하기 위해서, 희석된 혈장을 100μM Z-Gly-Pro-AMC 펩타이드(바켐사, #L-1145)와 함께 1시간 동안 37℃에서 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108) 내에서 인큐베이션시킨다. 시험 화합물을 희석된 혈장과 함께 15분 동안 37℃에서 사전 인큐베이션시키고, 그 후 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108)에 기질을 첨가하여 반응을 시작한다. 다기능 마이크로플레이트 판독기(Synergy 4, Biotek)를 사용하여 Ex/Em 380/460㎚에서 형광을 측정함으로써 7-아미노-4-메틸쿠마린(AMC) 방출을 검출한다. 모든 측정을 3회 수행한다.
실시예 B6
상이한 종의 혈장으로부터의 순환하는 FAPα 활성도의 생체외 저해
인간 혈장
인간 혈액을 건강한 젊은 지원자로부터 입수하였다. 혈액 샘플을 정맥천자 방법에 의해서 EDTA-K2가 코팅된 튜브에 수집하고, 약하게 혼합하고, 이어서 얼음 상에 유지시키고, 2,500×g로 15분 동안 4℃에서 원심분리시켰다. 혈장 분리 후, 샘플을 -80℃에서 300㎕의 분취물로 저장하였다.
인간 혈장으로부터의 순환하는 FAPα 활성도에 대한 예시적인 시험 화합물의 저해 효력을 결정하기 위해서, 20 ㎕의 해동된 혈장을 20㎕의 cFAP 완충제(100mM Tris-HCl, 400mM NaCl, 50mM 살리실산, 1mM EDTA, pH 7.5) 및 10㎕의 상이한 농도의 예시적인 시험 화합물 또는 비히클(DMSO)과 혼합하였다.
예시적인 화합물을 15분 동안 37℃에서 효소와 상호작용하게 하였다. 사전 인큐베이션 후, 50㎕의 200μM PRXS-AMC 기질을 모든 혼합물에 첨가하였다. 광으로부터 보호하면서 모든 반응을 1시간 동안 37℃에서 수행하였다. 다기능 마이크로플레이트 판독기를 사용하여 380/460㎚의 여기/방출 파장에서 형광을 측정함으로써 AMC 방출을 검출하였다. 모든 측정을 단일 지점으로서 수행하였다.
인간으로부터의 순환하는 FAPα에 대한 예시적인 시험 화합물의 IC50 결과를 표 5에 도시한다.
햄스터 혈장
수컷 골든 시리안(Golden Syrian) 햄스터를 타이완의 국립 실험 동물 센터(National Laboratory Animal Center: NLAC)에서 제공받았다. 동물을 12시간 광/암 사이클로 제어된 온도(20 내지 24℃) 및 습도(50% 내지 80%) 하에서 위생적인 환경에서 유지시켰다. 표준 실험실 식이[MFG(오리엔탈 이스트사(Oriental Yeast Co., Ltd.) 일본 소재)] 및 고압 멸균된(autoclaved) 수돗물에 자유롭게 접근하게 하였다. 동물의 주거, 실험 및 처리를 포함한 이러한 작업의 모든 양상은 일반적으로 문헌["Guide for the Care and Use of Laboratory Animals: Eighth Edition" (National Academies Press, Washington, D.C., 2011)]에 따라서 일반적으로 수행하였다. 또한, 동물 관리 및 사용 프로토콜은 파마콜로지 디스커버리 서비스즈 타이완사(Pharmacology Discovery Services Taiwan, Ltd.)의 IACUC에 의해 검토 및 승인되었다.
햄스터를 희생시킨 직 후에, 혈액 샘플을 말단 심장 천자를 통해서 EDTA-K2로 코팅된 튜브에 수집하였고, 약하게 혼합하고, 이어서 얼음 상에 유지시키고, 2,500×g로 15분 동안 4℃에서 원심분리시켰다. 혈장 분리 후, 샘플을 -80℃에서 300㎕의 분취물로 저장하였다.
햄스터 혈장에서 예시적인 화합물을 검정하기 위해서, 인간 혈장에 대해서 기재된 것과 유사한 프로토콜을 수행하여 cFAP 완충제 중에 해동된 혈장을 1:2로 희석시켰다. 96-웰 블랙 플레이트에서, 5㎕의 희석된 햄스터 혈장을 35㎕의 동일한 완충제 및 상이한 농도의 10㎕의 예시적인 시험 화합물 또는 비히클(DMSO)과 혼합하였다.
예시적인 시험 화합물을 15분 동안 37℃에서 효소와 상호작용하게 하였다. 사전 인큐베이션 후, 50㎕의 200μM PRXS-AMC 기질을 모든 혼합물에 첨가하였다. 광으로부터 보호하면서 모든 반응을 1시간 동안 37℃에서 수행하였다. 다기능 마이크로플레이트 판독기를 사용하여 380/460㎚의 여기/방출 파장에서 형광을 측정함으로써 AMC 방출을 검출하였다. 모든 측정을 단일 지점으로서 수행하였다.
햄스터 혈장으로부터의 순환하는 FAPα에 대한 예시적인 시험 화합물의 IC50 결과를 표 5에 도시한다.
Figure pct00189
실시예 B7
정맥내 및 경구 생체이용률
마우스에서 정맥내(IV) 2㎎/㎏ 또는 경구(PO) 10㎎/㎏ 단일 용량의 투여 후 예시적인 시험 화합물의 약동학 특성을 검정하였다. 예시적인 시험 화합물을 각각 정맥내 및 경구 투여를 위한 투여 용액으로서 폴리-에틸렌 글리콜 200(PEG200; 카탈로그 번호 # P3015, 시그마 알드리치사(Sigma Aldrich)) 및 증류수(dH2O)(50/50, v/v)를 함유하는 비히클 중에 0.4 및 1㎎/㎖로 제형화하였다.
대략 8 내지 10주령의 C57BL/6j 및 Balb/c 마우스를 사육장(펀더시온 시엔시아 앤드 비다 칠레사(Fundacion Ciencia & Vida Chile)(칠레 산티아고 소재))로부터 입수하였고, 음식 및 물에 자유롭게 접근하게 하면서 12/12시간 광/암 스케줄로 실온-제어된 공간에 유지시켰다. 시험 시설에 도착하자마자 동물을 최소 4일 동안 적응시켰다.
연구일에, 마우스의 체중을 재고, 지정을 위해서 비-독성 영구 마커를 사용하여 꼬리에 번호를 적어서 실험군으로 식별하였다(군당 n=3). IV 투여군의 각각의 마우스에게 미정맥을 통해서 2㎎/㎏ 투여 용액의 전신 볼러스(systemic bolus)를 제공하였다. PO 투여군의 각각의 마우스에게 공급 튜브 20G(카탈로그 번호: FTP-2038; 인스테크 살로몬사(Instech Salomon Inc.))를 통해서 10 ㎎/㎏의 위내 볼러스를 제공하였다.
투여 후 5, 10, 15, 30, 60, 120, 240, 360 및 480분에 말단 심장 천자에 의해서 혈액 샘플을 수거하였다. 비투여 마우스를 사용하여 0시간 지점의 샘플을 수집하였다. 전혈을 (K2) EDTA(카탈로그 번호 #365974, 벡톤 디킨슨사)를 함유한 마이크로테이너(microtainer) 튜브에 수집하였다. 혈액 샘플을 즉시 9,000g로 4℃에서 5분 동안 원심분리시키고, 혈장을 분리하였다. 혈장 샘플을 개별적으로 표지된 냉동바이알(카탈로그 번호 #366656, 써모 피셔 사이언티픽사)에 넣고, LC/MS/MS 생물분석 시까지 -80℃에서 저장하였다.
혈장 샘플을 QTRAP 4500 삼중 사중극 질량 분석계(어플라이드 바이오시스템즈사(Applied Biosystems) SCIEX)로 시험 화합물에 따라서 양상 또는 음성 이온 모드로 분석하고, ekspert ultraLC 100-XL UPLC System(eksigent)와 인터페이싱시켜 예시적인 시험 화합물의 농도를 결정하였다. 3배 부피의 얼음 냉각된 내부 표준 용액(20μM의 테오필린을 함유하는 아세토나이트릴)으로 침전시킴으로써 마우스 혈장 연구 샘플(60㎕)과 병행하여 교정 표준품(0.001 내지 10μM) 및 QC(0.02, 0.2 및 2μM)를 미경험 마우스 혈장으로부터 제조하였다. 침전된 샘플을 6,100g로 30분 동안 4℃에서 원심분리시켰다. 원심분리 후, 각각의 상청액의 분취물을 깨끗한 샘플 바이알로 옮기고, 2배 부피의 수성 이동상(물 중의 0.2% 폼산)으로 희석시켰다. 샘플을 역상 분석 칼럼(YMC Triart C18; 2.0×50mm; 1.9㎛; YMC CO)에 주입하고, 아세토나이트릴 중의 0.1 또는 0.2% 폼산의 구배로 용리시켰다. 시험 화합물 및 내부 표준품을 Analyst 소프트웨어(v1.6.2, 어플라이드 바이오시스템즈사 SCIEX)를 사용하여 다중 반응 모니터링(MRM) 실험에 의해서 모니터링하였다. MultiQuant 소프트웨어(v2.1, 어플라이드 바이오시스템즈사 SCIEX)를 사용하여 정량을 수행하고, 생성된 보정 곡선을 선형 또는 2차 회귀(quadratic regression)로 피팅하고, 1/x 가중시켰다. 정량 하한은 0.003 내지 0.01μM이었다.
비구획 분석에 의해서 Phoenix WinNonlin 소프트웨어(v6.4, 서타라사(Certara), 미국 뉴저지주 프린스톤 소재)를 사용하여 농도-시간 데이터로부터 IV 및 PO PK 파라미터를 계산하였다. 투여 시간에서부터 마지막 측정 가능한 농도까지 log-선형 사다리꼴 방법을 사용하여 농도-시간 곡선 하 면적(AUClast)을 예측하였다. 마우스 혈장에서 예시적인 화합물의 AUC에 대한 결과를 표 6에 제시한다.
Figure pct00190
실시예 B8
시험 화합물 13의 생체내 약동학 및 약력학
시험 화합물 13의 용액을 경구 투여를 위해서 증류수에 50% 폴리에틸렌 글리콜 200(PEG200, #P3015-1KG: 시그마-알드리치사)을 함유하는 비히클에서 1㎎/㎖로 제조하였다.
사육장(펀더시온 시엔시아 앤드 비다 칠레사)으로부터 입수한 암컷 C57BL/6 마우스(대략 9 내지 10주령; 20 내지 21그램)의 체중을 재고, 표 7에 기재된 코호트로 나누었다.
Figure pct00191
100㎕의 전혈을 투여 24시간 전에 각각의 마우스의 꼬리 정맥으로부터 샘플링하였다. 투여일에, 공급 니들(#FTP-2038/050312, 인스테크 래보러토리즈사(Instech Laboratories, Inc.))을 사용하여 모든 코호트의 마우스에게 단일 용량(10㎎/㎏)의 시험 화합물 13을 제공하였다.
각각의 코호트에 따라서, 각각의 마우스로부터의 대략 500㎕의 전혈을 수거 시간 지점에 말단 심장 천자를 통해서 BD Microtainer® 튜브(K2) EDTA(#365974, 벡톤 디킨슨사)에 수집하였다(표 5). 혈액 샘플을 대략 9000g에서 4℃에서 5분 동안 즉시 원심분리시켰다. 혈장을 분리시키고, 개별적으로 표지된 냉동튜브 바이알(#366656; 써모 피셔 사이언티픽사)에 넣고, -80℃에 저장하고, 그 다음 효소 활성 또는 LC/MS/MS 분석에 대해서 검정하였다.
모든 혈장 샘플을 해동시키고, 검정 완충제(5부의 완충제에 대해서 1부의 혈장)로 희석시켰다. 검정 완충제는 100mM Tris-HCl, 400mM NaCl, 50mM 살리실산, 1mM EDTA, pH 7.5를 함유하였다. 모든 혈장을 FAP 및 DPPIV 활성도에 대해서 검정하였다. FAPα 또는 DPPIV 효소 활성도에 대해서 혈장을 검정하기 위해서, 5㎕의 각각의 희석된 혈장 샘플을, 45㎕의 추가 검정 완충제를 함유한 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108)의 웰에 로딩하였다. 플레이트를 37℃로 15분 동안 가온시키고, 그 후 검정을 시작하였다. 검정을 시작하기 위해서, 50㎕의 200μM 다이펩타이드 기질 Z-Gly-Pro-AMC(바켐사, #L-1145)(FAPα 효소 활성 검정) 또는 50㎕의 200μM 다이펩타이드 기질 H-Gly-Pro-AMC(Bachem, #L 1225)(DPPIV 효소 활성 검정)을 각각의 웰에 첨가하였다. 다기능 마이크로플레이트 판독기(Synergy 4, 바이오테크사)를 사용하여 360㎚의 여기 파장 및 460㎚의 방출 파장에서 형광을 측정하여 7-아미노-4-메틸쿠마린(AMC) 방출을 검출하였다. 모든 측정을 적어도 2회 수행하였다.
화합물 13이 경구 투여된 각각의 동물에 대해서, 투여 후 수집된 혈장 샘플에서 발견된 FAP 및 DPPIV의 활성도를 혈정 샘플 투여 후에 발견된 각각의 활성도에 대한 백분율로서 정규화시켰다. 화합물 13이 경구 투여된 마우스의 혈장에서 발견된 FAP 활성도의 백분율을 도 4에 요약한다. DPPIV 활성도의 백분율을 도 5에 요약한다.
실시예 B9
마우스에서 경구 약동학(PK) 및 약력학(PD) 연구
예시적인 시험 화합물의 PK/PD를 결정하기 위해서, 마우스의 군에게 화합물 13(예시적인 화합물)을 경구 투여하고, 이어서 상이한 시간 지점에 수집된 혈장 샘플을 화합물의 농도 및 FAP 활성도에 대한 생물 분석에 적용하였다.
사육장(펀더시온 시엔시아 앤드 비다 칠레사)으로부터 입수된 암컷 c57BL/6 마우스, 대략 8 내지 10주령(19 내지 21gr)를 시험 시설에 도착하자마자 동물을 최소 4일 동안 적응시켰다. 연구일에, 동물의 체중을 재고, 지정을 위해서 비-독성 영구 마커를 사용하여 꼬리에 번호를 적어서 표 8에 기재된 치료군으로 식별하였다.
Figure pct00192
화합물 13(예시적인 화합물)을 경구 투여를 위한 경구 용액으로서 폴리-에틸렌 글리콜 200(PEG200; 카탈로그 번호 # P3015, 시그마 알드리치사) 및 증류수(dH2O)(50/50, v/v)를 함유하는 비히클에서 5㎎/㎖로 제형화하였다.
경구 투여를 위해서, 최대 6마리 중 1마리로부터의 마우스에게 10㎖/㎏의 비히클 PEG200/dH2O(50/50, v/v)의 단일 경구 용량을 제공하였다. 군 7 내지 12로부터의 마우스에게 비히클에 5㎎/㎖로 새로 제형화된 단일 경구 용량의 화합물 13(예시적인 화합물)을 제공하였다.
전혈을 비히클 또는 화합물 13(예시적인 화합물)의 투여 1, 4, 8, 12, 16 및 24시간 후 심장 천자를 통해서 수집하였다. 군 13으로부터의 마우스에게는 투여하지 않았고, 이를 사용하여 0시간 지점의 샘플을 수집하였다. 혈액 샘플을 대략 9000g에서 4℃에서 5분 동안 즉시 원심분리시켰다. 혈장을 분리시키고, 개별적으로 표지된 냉동튜브 바이알에 넣고, -80℃에 저장하고, 그 다음 효소 활성 또는 생물분석에 대해서 검정하였다.
모든 혈장 샘플을 해동시키고, 검정 완충제(100mM Tris-HCl, 400mM NaCl, 50mM 살리실산, 1mM EDTA, pH 7.5)로 1:5로 희석시켰다. 모든 혈장을 FAP 및 DPPIV 활성도에 대해서 검정하였다. FAPα 또는 DPPIV 효소 활성도에 대해서 혈장을 검정하기 위해서, 5㎕의 각각의 희석된 혈장 샘플을, 45㎕의 추가 검정 완충제를 함유한 96-웰 블랙 플레이트의 웰에 로딩하였다. 플레이트를 37℃로 15분 동안 가온시키고, 그 후 검정을 시작하였다. 반응을 시작하기 위해서, 검정 완충제에 희석된 50㎕의 400μM 다이펩타이드 기질 Z-Gly-Pro-AMC(FAPα 효소 활성 검정) 또는 50㎕의 200μM 다이펩타이드 기질 H-Gly-Pro-AMC(DPPIV 효소 활성 검정)을 각각의 웰에 첨가하였다. 다기능 마이크로플레이트 판독기를 사용하여 360㎚의 여기 파장 및 460㎚의 방출 파장에서 형광을 측정하여 AMC 방출을 검출하였다. 모든 측정을 적어도 2회 수행하였다.
기질 및 검정 완충제만을 함유하는 블랭크 반응으로부터 평균 형광을 뺄셈함으로써 모든 형광 측정치를 보정하였다. 비히클 또는 화합물 13(예시적인 화합물)이 투여된 마우스로부터의 혈장에 남아있는 FAP 및 DPPIV를 계산하기 위해서, 모든 형광 측정치를, 각각의 검정에 대한 활성의 100%로서 추정된 비투여군의 샘플로부터의 형광에 대해서 정규화시켰다. 비히클 또는 화합물 13(예시적인 화합물)이 경구로 투여된 마우스의 혈장에서 발견된 남아있는 FAP 활성도의 백분율을 도 6A에 도시한다. DPPIV 활성도의 백분율을 도 6B에 요약한다. 시간에 따른 화합물의 FAPα 활성도 및 PK/PD의 비교를 도 6C에 도시한다.
실시예 B10
생체내에서 종양 저해
펀더시온 시엔시아 앤드 비다사(칠레 산티아고 소재)의 사육장으로부터 입수된 암컷 C57/BL6 마우스(대략 8 내지 9주령; 20 내지 21gr)를 음식 및 물에 자유롭게 접근하게 하면서 12/12시간 광/암 스케줄로 실온-제어된 공간에 유지시켰다. 시험 시설에 도착하자마자 마우스를 최소 4일 동안 적응시켰다.
5% CO2를 함유한 분위기에서 37℃에서 MC38 마우스 대장암 세포주를 10% 소태아 혈청(카탈로그 번호: 16000, 킵코사(Gibco)) 및 페니실린/스트렙토마이신(카탈로그 번호: 15140122, 깁코사)이 보충된 DMEM-F12(카탈로그 번호: SH30023.01, 하이클론사(Hyclone))에서 단층 배양물로 유지시켰다. 세포를 3일마다 일상적으로 계대배양시켜 지수기의 성장을 유지시켰다. 지수 성장기로 성장하는 종양 세포를 0.05% 트립신-EDTA(카탈로그 번호: 15400054, 깁코사)를 함유하는 1×　PBS를 사용하여 수거하고, 그 다음 실온에서 원심분리기에서 330gx3으로 원심분리시켰다. 그 다음 상청액을 흡입에 의해서 제거하였다. 세포 펠릿을 대략 10× 부피의 세포 배양 배지 중에 재현탁시키고, 계수하였다. 세포 생존율은 트리판 블루 염색에 의해서 95% 초과인 것으로 결정되었다.
접종일에, 암컷 C57/Bl6 마우스(총 n=15)의 체중을 제고, 비-독성 영구 마커를 사용하여 꼬리에 번호를 적어서 식별하였다. 마우스 우측 하부 옆구리(배측 넓적다리 영역 부근)에 1× PBS에 대략 2x106개의 MC38 세포를 함유하는 단일 부피의 0.1㎖ 세포 현탁액을 피하로 접종하였다. 종양을 디지털 캘리퍼로 주 3회 측정하고, ㎣ 단위로 표현되는 종양 부피를 하기 화학식으로 계산하였다:
종양 부피(mm 3 ) = (a x b 2 )/2
식 중, "b"는 가장 작은 직경이고, "a"는 최대 수직 직경이다.
접종 7일 후, 평균 종양 부피는 약 100㎣였다. 마우스의 체중을 재고, 2개의 실험군(n = 5 내지 6마리 마우스)으로 무작위화하고, 종결 시까지 1일 2회 경구 투여되는 하기 치료를 제공하였다: 1) 비히클(물 중의 PEG200 50%); 또는 2) PEG200 50%/물 중의 50㎎/㎏ 시험 화합물 24. 마우스의 체중 및 종양 부피를 총 22일 동안 주당 2 또는 3회 기록하였다. 22일에, 마우스를 희생시키고, 모든 종양 덩어리의 무게를 쟀다.
종양 부피를 도 7에 평균의 표준오차(SEM)와 함께 평균으로 나타낸다. 마우스 체중 증가를 도 8에 평균의 표준오차(SEM)와 함께 평균으로 나타낸다. 종양 부피의 개별 기록을 도 9에 나타낸다. 종양 덩어리 중량을 도 10에 평균의 표준오차(SEM)와 함께 평균으로 나타낸다. 도면에 도시된 바와 같이, 시험 화합물 24로 치료된 마우스는 비히클 단독으로의 치료보다 더 작은 종양 부피를 가졌다. 이들 연구에서 통계학적 유의성은 관찰되지 않았다.
실시예 B11
뮤린 종양에서의 FAPα 효소 활성도
마우스 종양 단백질을 용해 완충제(Tris HCl 50mM pH 7.6, EDTA 1mM, 글리세롤 10%, 프로테아제/포스파타제 저해제 칵테일) 중에서 20분 동안 울트라 Turrax(IKA, #3737000)를 사용하여 추출한다. 종양 추출물에서 기준선 FAPα 효소 엑소펩티다제 활성도를 검정하기 위해서, 10㎍의 종양 추출물 샘플을 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108) 내에서 100μM Z-Gly-Pro-AMC 펩타이드(바켐사, #L-1145)과 함께 PBS 1× 중에서 1시간 동안 37℃에서 인큐베이션시킨다. 저해제를 종양 추출물과 함께 15분 동안 37℃에서 사전 인큐베이션시키고, 그 후 96-웰 블랙 플레이트(Nunc, #237108)에 기질을 첨가하여 반응을 시작한다. 다기능 마이크로플레이트 판독기(Synergy 4, Biotek)를 사용하여 Ex/Em 380/460㎚에서 형광을 측정함으로써 7-아미노-4-메틸쿠마린(AMC) 방출을 검출한다. 모든 측정을 3회 수행한다.
실시예 B12
뮤린 암 모델의 종양에서 PK/PD 연구
B16-F10 뮤린 흑색종 모델
수컷 C57B1/6 마우스에게 100㎕의 멸균 PBS 1×(0일) 중에 현탁된 1×106개의 B16-F10 뮤린 흑색종을 피부내에 이식하였다. 이식 2일 후에, 동물군(n=3)에게 15일까지 주 2회(BID) 경구(PO)로 50㎎/㎏의 비히클 PEG200/dH2O(50/50 v/v) 또는 화합물 13(예시적인 화합물)을 투여하였다.
종결일에, 모든 마우스를 희생시키고, 즉시 종양 및 혈장 샘플을 수집하고, -80℃에서 저장하고, 그 후 FAPα 효소 활성 또는 생물분석을 위해서 검정하였다.
뮤린 암 종양의 단백질을 용해 완충제(Tris HCl 50mM pH 7.6, EDTA 1mM, 글리세롤 10%, 프로테아제/포스파타제 저해제 칵테일) 중에서 울트라 Turrax 균질화기(IKA, #3737000)를 사용하여 추출하였다. 균질액을 원심분리 21,000g로 20분 동안 4℃에서 정화시켰다. 상청액을 수집하고, 단백질을 BCA 단백질 검정 키트(카탈로그 번호 #23225, 써모 사이언티픽사)를 사용하여 정량하였다. 모든 단백질 샘플을 용해 완충제를 사용하여 2㎍/㎕로 조정하고, 이어서 -80℃에서의 저장을 위해서 분취하였다.
종양 균질액에서의 FAPα 활성도의 평가를 위해서, 10㎍의 각각의 종양 추출물을 96-웰 블랙 플레이트 내에서 cFAP 완충제 검정으로 50㎕의 최종 부피로 희석시키고, 이어서 100μM PRXS-AMC 펩타이드와 혼합하였다. 반응을 1시간 동안 37℃에서 수행하였다. 다기능 마이크로플레이트 판독기를 사용하여 Ex/Em 380/460㎚에서 형광을 측정하여 AMC 방출을 검출하고, 상대 형광 단위(RFU)로 표현하였다. 모든 측정을 단일 지점으로서 수행한다.
화합물 13(예시적인 화합물)의 농도를 도 11A에 도시한다. B16-F10 뮤린 흑색종 종양을 보유하는 동물로부터의 혈장 및 종양에서 FAPα 활성도를 도 11B에 도시한다.
MC38 뮤린 흑색종 모델:
암컷 C57B1/6 마우스에게 100㎕의 멸균 PBS 1×(0일) 중에 현탁된 2×106개의 MC38 마우스 직장암 세포를 피하로 이식하였다. 이식 12일 후에, 종양 부피에 기초하여 마우스를 평균 종양 부피 약 160㎣를 갖는 2개의 실험군(n = 6)으로 무작위화하였다. 동물군에 비히클 PEG200/dH2O(50/50 v/v) 또는 화합물 13(예시적인 화합물) 50㎎/㎏을 PO bid로 24일까지 제공하였다.
B16-F10 뮤린 흑색종 모델에 기재된 바와 같이, 종결일에, 모든 마우스를 희생시키고, 즉시 종양 및 혈장 샘플을 수집하고, -80℃에서 저장하고, 그 후 FAPα 효소 활성 또는 생물분석을 위해서 검정하였다.
화합물 13(예시적인 화합물)의 농도를 도 12A에 도시한다. MC38 뮤린 흑색종 종양을 보유하는 동물로부터의 혈장 및 종양에서 FAPα 활성도를 도 12B에 도시한다.
실시예 B13
시험관내에서 FGF21 검정의 FAP-매개된 단백질분해 절단.
당뇨병 및 비만 동물 모델에게 FGF21를 약리학적으로 투여하는 것은 설치류에서 비만, 인슐린 저항성, 이상지질혈증, 지방간 및 고혈당을 상당히 개선시키고(Markan, K.R. et al. Semin Cell Dev Biol, 2016, 53: 85-93), 제2형 당뇨병을 갖는 비만인 인간에서 FGF21 유사체는 체중 감소를 유도하고, 고인슐린혈증, 이상지질혈증 및 저아디포넥틴증을 바로잡는데 효능이 있었다(Gaich, G., et al., Cell Metab, 2013, 18(3): 333-40; Dong, J.Q., et al., Br J Clin Pharmacol, 2015, 80(5): 1051-63). 그러나, 설치류 및 영장류에서, 외인성으로 투여되는 인간 FGF21의 반감기는 FAP-매개된 효소 분해 및 신장 청소에 대한 민감성의 결과로 짧다(약 0.5 내지 2시간)(Hager, T., et al., Anal Chem, 2013, 85(5): 2731-8; Xu, J., et al., Am J Physiol Endocrinol Metab, 2009, 297(5): E1105-14; Kharitonenkov, A., et al., Endocrinology, 2007, 148(2): 774-81). 일반적인 반감기 연장 전략은 생체내에서 이들 FGF21 유사체의 PK 특성을 상당히 개선시켰지만; 이러한 유사체에서 단백질분해 처리는 여전히 지속된다(Hecht, R., et al., PLoS One, 2012, 7(11): e49345; Mu, J., et al., Diabetes, 2012, 61(2): 505-12; Camacho, R.C., et al., Eur J Pharmacol, 2013, 715(1-3): 41-5). 본 명세서에 기재된 FAP 저해제 화합물이 FGF-21 절단을 저해할 수 있고, 내인성 및/또는 외인성 FGF21 작용을 증가시키기 위한 경구 요법을 제공할 수 있는지를 결정하기 위해서, 예시적인 FAP 저해제 화합물의 존재 및 부재 하에서 FGF21의 FAP-매개된 소화를 비교하였다.
시험관내에서 FGF21의 FAP-매개된 소화
재조합 인간 FGF21(rhFGF21; 카탈로그 번호 #2539-FG-025/CF, 알앤디 시스템즈사)을 밤새(16시간) 37℃에서 재조합 인간 FAP(rhFAP; 카탈로그 번호 #3715-SE-010, 알앤디 시스템즈사)와 함께 소화 완충제(50mM Tris pH 7.4, 100mM NaCl, 0.1㎎/㎖ 소 혈청 알부민) 중에 인큐베이션시켰다. 100㎕의 부피에서 1000ng/㎖ hFGF21 및 400, 800 또는 1200ng/㎖ rhFAP의 최종 농도에서 반응을 수행하였다. SDS-PAGE 분석을 위해서, 인큐베이션 후에 각각의 샘플에 0.1㎖ β-머캅토에탄올/10㎖ 분취물이 보충된 4× Laem㎖i 단백질 샘플 완충제(카탈로그 번호 #161-0747, 바이오라드사(Bio-Rad))를 즉시 제공하고, 이어서 95℃에서 10분 동안 비등시켰다. 이어서 각각의 샘플 15㎕ 분취물을 환원 20% Tris-Tricine SDS-PAGE 겔에 로딩하였다. 면역블롯 분석을 위해서, 단백질을 SDS-PAGE 겔에서 분리시키고, PVDF 막(카탈로그 번호 #1620177, 바이오라드사)으로 옮겼다. 면역검출을 위해서, 항-FGF21(카탈로그 번호 #RD181108100, 바이오벤더사) 및 HRP 접합된 항-토끼(카탈로그 번호 #611-1322, 락랜드사(Rockland))를 각각 1차 항체 및 2차 항체로 사용하였다. 단백질을 ECL 웨스턴 블로팅 기질(카탈로그 번호 #32106, 써모 피셔 사이언티픽사)을 사용하여 검출하고, ChemiDocTM Imaging System(바이오라드사) 및 Image lab software v5.2.1 build 11을 사용하여 가시화하였다.
rhFGF21의 무손상 형태 및 rhFAP-절단된 형태의 면역검출을 도 13A에 도시하고, 덴시오메트리 분석을 도 13B에 도시한다. 면역블로팅 영상 및 덴시오메트리 분석에 나타낸 바와 같이, rhFGF21의 절단된 형태는 rhFAP 용량-의존적인 방식으로 증가한다.
시험관내에서 FGF21의 FAP-매개된 소화의 저해
rhFGF21의 rhFAP-매개된 단백질분해 처리를 저해하기 위한 효능을 비교하기 위해서, 예시적인 화합물 및 상업적인 비-선택성 DDP 저해제 Val-boroPro를 시험관내에서 FGF21 절단 검정으로 낮은 농도에서 시험하였다.
시험 화합물 및 Val-boroPro를 분말로부터 DMSO 중의 10mM 스톡 용액으로서 제조하고, N2 중성 분위기의 존재 하에서 - 80℃에서 저장하였다. 스톡 용액을 DMSO 중에 미리 용해시켜 1 및 0.1mM의 희석된 분취물을 얻었다. 이러한 분취물을 다시 소화 완충제에 10배 희석시키고, 이어서, 이러한 희석물 10㎕를 50㎕의 rhFAP에 첨가하였다. 효소-저해제 혼합물을 30분 동안 37℃에서 상호작용하게 하고, 이어서 40㎕의 rhFGF21을 첨가하여 반응을 시작하였다. 1000ng/㎖ hFGF21 및 1200ng/㎖ rhFAP의 최종 농도로 16시간 동안 37℃에서 반응을 수행하였다. 접종 후, 샘플을 Laem㎖i 단백질 샘플 완충제 중에서 즉시 비등시키고, 이어서 단백질을 환원 20% Tris-Tricine SDS-PAGE 겔에서 분할시켰다. rhFGF21의 무손상 형태 및 rhFAP-절단된 형태의 면역검출을 상기에 기재된 바와 같이 수행하였다.
시험관내에서 rhFAP에 의한 rhFGF21의 단백질분해 처리를 저해하는 것에 대한 100 및 1000nM의 화합물 13(예시적인 화합물)과 Val-boroPro 간의 효능 비교를 도 13C에 도시하고, 덴시오메트리 분석을 도 13D에 도시한다. 면역블로팅 영상 및 덴시오메트리 분석에 의해서 나타난 바와 같이, rhFGF21의 무손상 형태는 낮은 농도에서도 화합물 13(예시적인 화합물)의 존재 하에서 보존된다.
추가로, FGF21의 FAP-매개된 단백질분해 절단에 대한 IC50을 화합물 13(예시적인 화합물)의 연속 희석을 사용하여 결정하였다. 도 14A에 도시된 바와 같이, 예시적인 화합물은 시험관내에서 용량 의존적인 방식으로 FGF21의 rhFAP-매개된 단백질분해 처리를 저해하였다. 도 14B에서의 덴시오메트리 분석으로 도시된 바와 같이, 예시적인 화합물은 FGF21 검정의 FAP-매개된 단백질분해 절단에서 나노몰 범위의 IC50을 나타내었다.
실시예 B14
생체내에서 FAP 저해와 관련한 rhFGF21 투여.
예시적인 본 발명의 화합물이 생체내에서 hFGF21의 반감기를 연장시키는데 기여할 수 있는지를 결정하기 위해서, 래트에게 비히클 또는 화합물 13(예시적인 화합물), 그 다음 치료 용량 미만의 rhFGF21을 경구로 투여하였다.
수컷 스프라그 돌리 래트(Sprague Dawley rat), 대략 7 내지 8주령(약 250g)를 유니버시다드 카토리카 드 칠레(Universidad Catolica de Chile)(칠레 산티아고 소재)의 사육장으로부터 획득하였다. 시험 시설에 도착하자마자 동물을 최소 4일 동안 적응시켰다. 시험일에, 2마리의 래트를 세보플루란을 사용하여 마취시키고, 경동맥 및 경정맥 내에 카테터를 수술로 이식하였다. 카테터 플러그를 카테터의 외부 단부에 고정시키고, 0.9% NaCl Apiroflex(프레세누스 카비사(Fresenius Kabi), 래보러토리오 샌더슨사(Laboratorio Sanderson)) 중에 25U/㎖ 헤파린(프레세누스 카비사, 래보러토리오 샌더슨사)을 함유하는 항-응고제 헤파린 처리된 염수 용액을 사용하여 유지시켰다. 수술적 회수 후에, 래트의 체중을 재고, 비-독성 영구 마커를 사용하여 표 9에 기재된 처리 지정에 대해서 꼬리에 번호를 적어서 식별하였다.
Figure pct00193
화합물 13(예시적인 화합물)을 경구 투여를 위해서 비히클 PEG200/dH2O(50/50, v/v) 중에서 5㎎/㎖로 제형화하고, rhFGF21을 100㎍/㎖로 0.9% NaCl Apiroflex 중에 제형화하였다.
전혈 샘플을 삽관된 경동맥 카테터를 통해서 두 동물(시간 지점 = -15분)로부터 수집하고, 직후에 제1 용량을 각각 Rat#1 및 #2에게 공급 튜브(15게이지)를 통해서 50㎎/㎏ 비히클 또는 화합물 13의 단일 경구 용량을 투여하였다. 15분 후, 두 번째 전혈 샘플을 수집하고(시간 지점 = 0분), 직후에 제2 용량을 투여하였다(이식된 경정맥 카테터를 통해서 rhFGF21 90㎍/㎏의 단일 정맥내 용량). 이어서 제2 투여 후 시간 지점: 5, 15, 30, 60, 120, 240 및 480분에서 전혈 샘플을 수집하였다. 혈액 샘플을 대략 9000g에서 4℃에서 5분 동안 즉시 원심분리시켰다. 혈장을 분리시키고, 개별적으로 표지된 냉동튜브 바이알에 넣고, -80℃에 저장하고, 그 다음 웨스턴 블롯 기술, PRXS-AMC 또는 이전 실시예에 상기에 기재된 바와 같은 생물분석에 의해서 FAPα 활성 검정에 의해서 rhFGF21의 면역검출에 대해서 검정하였다.
면역검정의 경우, 해동시킨 혈장 샘플을 2,000g로 15분 동안 4℃에서 원심분리시키고, 이어서 상청액을 깨끗한 에펜도르프 튜브로 옮겼다. 1.5㎕의 각각의 혈장 샘플을 11.25㎕의 4× Laem㎖i 단백질 샘플 완충제 및 32.25㎕의 dH2O와 혼합하였다. 단백질을 비등시키고, 이어서 15㎕의 각각의 샘플을 환원 20% Tris-Tricine SDS-PAGE 겔에서 분할시키고, 이어서 상기에 기재된 바와 같이 FGF21의 검출을 위해서 면역블로팅하였다.
결과를 도 15에 요약한다. 50㎎/㎏의 경구 단일 용량으로 화합물 13을 투여하는 것은 혈장 FAP 활성을 강력하게 억제하였다. 예시적인 화합물로의 사전 처리는 혈장에서 전체 시간에서 검출되는 rhFGF21의 양을 증가시켰다.
실시예 B15
햄스터에서 경구 PK/PD 연구.
hFAP는 P2의 글리신(Gly) 및 P1의 프롤린(Pro) 둘 다를 갖는 펩타이드를 가수분해시킨다. 인간 FGF21에서 위치 170 내지 171의 Gly-Pro FAP 공통 잔기는 사용 가능한 FGF21 서열(예측된 서열 포함)을 갖는 대부분의 포유동물종에서 보존된다. 그러나, 래트 및 마우스에서 발현된 FGF21은 추정 FAP 절단 부위에 보존된 Gly-Pro 대신에 Glu-Pro를 보유한다. hFAP는 뮤린 서열을 함유하는 FGF21을 처리하지 않는다고 보고되어 있다(Dunshee, D.R., et al., J Biol Chem, 2016, 291(11): 5986-96). 흥미롭게도, P1' 위치에 Leu을 갖는 시리안 햄스터 FGF21로부터의 상응하는 펩타이드는 hFAP에 의한 상당한 가수분해를 나타내었다(Dunshee, D.R., et al., J Biol Chem, 2016, 291(11): 5986-96).
내인성으로 생산되는 FGF21의 절단에 대한 예시적인 화합물에 의한 FAP 저해의 효과를 평가하기 위해서, 생체내 PK/PD 연구를 예시적인 화합물의 단일 정맥내 투여 및 경구 투여 후에 수컷 골든 시리안 햄스터에서 수행하였다.
수컷 골든 시리안(Golden Syrian) 햄스터를 타이완의 국립 실험 동물 센터(National Laboratory Animal Center: NLAC)에서 제공받았다. 동물을 12시간 광/암 사이클로 제어된 온도(20 내지 24℃) 및 습도(50% 내지 80%) 하에서 위생적인 환경에서 유지시켰다. 표준 실험실 식이[MFG(오리엔탈 이스트사(Oriental Yeast Co., Ltd.) 일본 소재)] 및 고압 멸균된(autoclaved) 수돗물에 자유롭게 접근하게 하였다. 동물의 주거, 실험 및 처리를 포함한 이러한 작업의 모든 양상은 일반적으로 수의사의 감독 하에 문헌["Guide for the Care and Use of Laboratory Animals: Eighth Edition" (National Academies Press, Washington, D.C., 2011)]에 따라서 수행하였다. 또한, 동물 관리 및 사용 프로토콜은 파마콜로지 디스커버리 서비스즈 타이완사(Pharmacology Discovery Services Taiwan, Ltd.)의 IACUC에 의해 검토 및 승인되었다.
화합물 13(예시적인 화합물)을 IV 주사를 위해서 다이메틸 설폭사이드(DMSO)/Solutol® HS15(바스프사(BASF), 독일 소재)/인산염 완충 염수(PBS, 시그마사(Sigma), 미국 소재)(5/5/90, v/v/v) 중에서 0.2㎎/㎖로, 그리고 PO 투여를 위해서 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 200(시그마사, 미국 소재)/주사용수(WFI; Tai-Yu, 타이완 소재)(50/50, v/v) 중에서 1㎎/㎖로 제형화하였다. 투여 부피는 IV의 경우는 5㎖/㎏이었고, PO의 경우는 10㎖/㎏이었다.
연구일에, 햄스터를 마취시키고, 경정맥 내에 카테터를 수술로 이식하였다. 카테터 플러그를 카테터의 외부 단부에 고정시키고 항-응고제 헤파린 처리된 염수 용액을 사용하여 유지시켰다. 수술적 회수 후에, 햄스터의 체중을 재고, 비-독성 영구 마커를 사용하여 표 10에 기재된 IV군 또는 PO군(n=3)에 대한 지정에 대해서 꼬리에 번호를 적어서 식별하였다.
Figure pct00194
1㎎/㎏의 화합물 13(예시적인 화합물)의 경정맥을 통한 정맥내 볼러스를 군 1로부터의 햄스터에게 제공하였다. 다른 한편, 군 2로부터의 햄스터에게 공급 니들을 사용하여 10㎎/㎏의 화합물 13(예시적인 화합물)의 위내 볼러스를 제공하였다.
혈장 샘플을 IV군 및 PO군 둘 다에서 투여 후 5, 10, 15, 30, 60, 120, 240, 360, 480 및 1440분에 수집하였다. 군 3으로부터의 햄스터에게는 투여하지 않았고, 이를 사용하여 0시간 지점의 샘플을 수집하고, FAP 활성도 및 내인성 FGF21의 기준선 수준을 수집하였다.
혈액 분취물(100 내지 150㎕)을 경정맥 삽관된 햄스터로부터 EDTA-K2로 코팅된 튜브에 수집하고, 약하게 혼합하고, 이어서 얼음에 유지시키고, 수집 1시간 이내에 2,500×g로 15분 동안 4℃에서 원심분리시켰다. 혈장 샘플을 개별적으로 표지된 냉동튜브 바이알에 넣고, -80℃에서 저장하고, 그 다음 FAPα 활성 검정(Z-Gly-Pro-AMC 기질) 및 이전 실시예에서 상기에 기재된 생물분석을 위해서 검정하였다.
혈장 샘플에서 내인성 햄스터 FGF21의 수준을 제조사의 설명서에 따라서 ELISA 키트(카탈로그 번호 # EZRMFGF21-26K, 밀리포어사(Millipore))를 사용함으로써 정량하였다. 검출 한계는 44.85pg/㎖였다. 비-투여된 동물의 혈장 샘플을 혈장의 풀로서 분석하였다. 모든 샘플을 단일 지점으로서 검정하였다. 결과를 도 16에 도시한다.
정맥내 및 경구 투여를 위한 화합물 13(예시적인 화합물)의 AUC마지막은 각각 255 및 350hr.ng/㎖였다. 기준선 수준과 비교할 때, FAP 활성은 화합물 13(예시적인 화합물)의 투여 후에 신속하게 감소하였고, FGF21의 기준선 수준은 개체 간에 상이하였기 때문에, 총 FGF21의 수준은 대부분의 햄스터에서 증가하였다. 중요하게는, 이러한 증분의 시간 경과는 혈장에서 내인성 FAP의 활성 저해와 밀접하게 상관관계가 있었다. 따라서, 생체내에서 예시적인 화합물의 투여에 의한 FAP의 저해는 내인성 혈청 FGF21을 증가시켰는데, 이는 FAP에 의한 절단으로부터의 보호를 시사한다.
실시예 B16
햄스터에서 식이 유도된 비만(DIO) 모델에 대한 효능
체중이 90±10g인 10마리의 수컷 골든 시리안 햄스터의 군에게 실험 전체에서 고지방 식이(high fat diet: HFD)(g/100g: 옥수수유, 5; 코코넛유, 5; 콜레스테롤, 0.2; 표준 사료, 89.8)를 공급하였다. 식이 시작 7일 후, 비히클, 에제티미브(ezetimibe)(양성 대조군) 또는 예시적인 시험 화합물을 경구 위관 영양법으로 28일의 연속일(1일) 동안 매일 투여하였다(PO, QD). 추가의 미처리 동물군(군 5)에게 정상 식이를 공급하였다(대조군). 체중(BW)을 측정하고, 주 2회 기록한다.
밤새 공복을 유지시킨 후, 1, 8, 15, 22 및 29일에 매일 투여하기 5분 전에 그리고 0, 7, 14, 21 및 28일에 투여한 후에 각각의 동물의 눈 뒤 시너스(retro-orbital sinus)로부터 혈액을 얻는다.
각각의 햄스터로부터 얻은 혈청을 공복 글루코스, 총 콜레스테롤(총), 저밀도 지방단백질(LDL), 고밀도 지방단백질(HDL) 및 트라이글리세리드(TG)에 대해서 검정한다. 치료 후 값을 치료 전 값의 백분율로서 계산한다. 비히클 대조군에 대해서 치료된 백분율 변화를 또한 결정한다.
29일에 종결 시, 모든 동물을 희생시키고, 최대 부피의 혈액 샘플을 수집하기 위해서 즉시 심장 천자시켰다. 혈액 샘플의 절반을 혈청에 대해서 처리하고, 이를 사용하여 ELISA 방법에 의해서 종결 아디포넥틴 및 인슐린에 대해서 검정한다. 혈액 샘플의 다른 절반을 혈장에 대해서 처리한다. 혈장 샘플을 개별적으로 표지된 냉동튜브 바이알에 넣고, -80℃에서 저장하고, 그 다음 이전 실시예에서 상기에 기재된 바와 같이 예시적인 화합물의 FAPα 활성 검정, ELISA에 의한 FGF21 수준의 정량 및 생물분석을 수행한다.
추가로, 조직, 예컨대, 뇌, 간, 견갑골 사이(interscapular) BAT, 정소상체 WAT, 췌장 및 비복근 근육을 FGF21 표적 유전자 및 단백질의 분자 및 생화학 평가를 위해서 수거한다. 간의 일부를 또한 비-고정된 동결된 샘플로서 수집하고, Oil Red-O 염색으로 염색하거나, H&E 염색 및 조직병리학적 분석을 위해서 샘플을 폼알린-고정시키고, 파라핀-포매시켰다.
예컨대, 간행물, 특허, 특허 출원 및 공개된 특허 출원에 걸친 모든 참고 문헌이 전체적으로 본 명세서에 참조에 의해 포함된다.

Claims (60)

  1. 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00195

    식 중, R은 수소, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, 상기 R의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rd에 의해서 선택적으로 치환되고;
    m은 0, 1, 2, 3 또는 4이며;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4이되,
    m + n은 1, 2, 3 또는 4이며;
    X는 -C(=O)-, -O-, -CH(OH)-, -S-, -S(=O) 또는 -S(=O)2-이고;
    L은,
    (a)
    Figure pct00196

    (식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고,
    **은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내며,
    Ra은 수소, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, 상기 Ra의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Re에 의해서 선택적으로 치환되고;
    R1 및 R2는 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C1-C2 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, 상기 R1 및 R2의 C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rf에 의해서 선택적으로 치환되거나,
    또는 R1과 R2는 이들이 부착되는 탄소 원자 또는 원자들과 함께 취해져서 Rf에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하고,
    q는 1, 2 또는 3이며,
    R3 및 R4는 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, 상기 R3 및 R4의 C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rg에 의해서 선택적으로 치환되거나,
    또는 R3과 R4는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 Rg에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하고,
    p는 0, 1 또는 2임);
    (b)
    Figure pct00197

    (식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고,
    **은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내며,
    R5 및 R6은 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, 상기 R5 및 R6의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rh에 의해서 선택적으로 치환되고,
    Rb 및 Rc는 독립적으로 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, C6-C14 아릴 또는 -C(=O)OR17이되, 상기 Rb 및 Rc의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Ri에 의해서 선택적으로 치환되고,
    r은 1, 2 또는 3임); 또는
    (c)
    Figure pct00198

    (식 중, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고,
    **은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내며,
    R7 및 R8은 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, 상기 R7 및 R8의 C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rj에 의해서 선택적으로 치환되거나,
    또는 R7과 R8은 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 Rj에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하고,
    R9 및 R10은 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 C6-C14 아릴이되, 상기 R9 및 R10의 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 C6-C14 아릴은 독립적으로 Rk에 의해서 선택적으로 치환되거나,
    s는 1, 2 또는 3이고,
    t는 1, 2 또는 3이되,
    s + t는 2, 3 또는 4이고,
    u는 0 또는 1이며
    v는 0 또는 1임)이고;
    Y는 R11에 의해서 선택적으로 치환된 C6-C9 아릴, R12에 의해서 선택적으로 치환된 6- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 R13에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이되, Y가 페닐 또는 나프틸인 경우, 상기 Y의 페닐 또는 나프틸은 적어도 하나의 R11에 의해서 치환되고, L이 *-NH-CH2-**이고, Y가 선택적으로 치환된 퀴놀린일인 경우, 상기 Y의 선택적으로 치환된 퀴놀린일은 2-, 3-, 5-, 6-, 7- 또는 8-위치에서 모 구조에 연결되며,
    R11, R12 및 R13은, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C4-C8　사이클로알켄일, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, C6-C14　아릴, 할로겐, 사이아노, 옥소(oxo), -OR14, -NR15R16, -SR14, -NO2, -C=NH(OR14), -C(O)R14, -OC(O)R14, -C(O)OR14, -C(O)NR15R16, -NR14C(O)R15, -NR14C(O)OR15, -NR14C(O)NR15R16, -S(O)R14, -S(O)2R14, -NR14S(O)R15, -NR14S(O)2R15, -S(O)NR15R16, -S(O)2NR15R16, 또는 -P(O)(OR15)(OR16)이되, 각각의 R11 , R12 및 R13은 독립적으로 RL에 의해서 선택적으로 치환되고;
    각각의 R14는 독립적으로 수소, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이되, 상기 R14의 C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴은 독립적으로 할로겐, -OH, 옥소, 사이아노, 또는 할로겐, -OH 또는 옥소에 의해서 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환되며;
    R15 및 R16은, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 수소, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴이되, 상기 R15 및 R16의 C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴 및 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴은 독립적으로 할로겐, -OH, 옥소, 사이아노, 또는 할로겐, -OH 또는 옥소에 의해서 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환되거나;
    또는 R15와 R16은 이들이 부착되는 원자와 함께 취해져서 할로겐, 옥소, 사이아노, 또는 할로겐, -OH 또는 옥소에 의해서 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 6-원의 헤테로사이클릴을 형성하고;
    Rd, Re, Rf, Rg, Rh, Ri, Rj 및 Rk는 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, 할로겐, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, -OR14, -NR15R16, 사이아노 또는 나이트로이며;
    각각의 RL은 독립적으로 할로겐, C1-C6 알킬, C2-C6 알켄일, C2-C6 알킨일, C3-C8　사이클로알킬, C6-C14 아릴, 5- 내지 10-원의 헤테로아릴, 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴, -OR14, -C(O)R14, -NR15R16, 사이아노, 옥소 또는 나이트로이다.
  2. 제1항에 있어서, X는 -C(=O)-인, 화합물 또는 이의 염.
  3. 제1항에 있어서, X는 -O-인, 화합물 또는 이의 염.
  4. 제1항에 있어서, X는 -CH(OH)-인, 화합물 또는 이의 염.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, L은 -NH-CR1R2-인, 화합물 또는 이의 염.
  6. 제5항에 있어서, L은 -NH-CH2-인, 화합물 또는 이의 염.
  7. 제5항에 있어서, L은 -NH-CH(CH3)-인, 화합물 또는 이의 염.
  8. 제5항에 있어서, L은 -NH-CR1R2-이되, R1과 R2는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 3- 내지 8-원의 사이클로알킬렌을 형성하는, 화합물 또는 이의 염.
  9. 제8항에 있어서, R1과 R2는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께 취해져서 사이클로프로필렌을 형성하는, 화합물 또는 이의 염.
  10. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, L은 -CR5R6-CH(NRbRc)-인, 화합물 또는 이의 염.
  11. 제10항에 있어서, L은 -CR5R6-CH(NRbRc)-이되, R6, Rb 및 Rc는 H이고, R5는 H 또는 C1-C6 알킬인, 화합물 또는 이의 염.
  12. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, L은
    Figure pct00199
    이되, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고, **은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내는, 화합물 또는 이의 염.
  13. 제12항에 있어서, L은
    Figure pct00200
    이되, *은 Y-X- 모이어티에 대한 부착점을 나타내고, **은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내는, 화합물 또는 이의 염.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환된 6- 내지 10-원의 헤테로아릴 또는 R13에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴인, 화합물 또는 이의 염.
  15. 제1항에 있어서, Y는 R11에 의해서 선택적으로 치환된 C6-C9 아릴이되, Y가 페닐 또는 나프틸인 경우, 상기 Y의 페닐 또는 나프틸은 적어도 하나의 R11에 의해서 치환되는, 화합물 또는 이의 염.
  16. 제15항에 있어서, Y는 할로겐, 트라이할로메틸, 사이아노 및 -C(=O)NH2로부터 독립적으로 선택된, 1 내지 5개의 R11에 의해서 치환된 페닐인, 화합물.
  17. 제15항에 있어서, Y는 비치환된 2,3-다이하이드로-1H-인덴-2-일인, 화합물.
  18. 제14항에 있어서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환된 6- 내지 10-원의 헤테로아릴이되, L이 *-NH-CH2-**이고, Y가 선택적으로 치환된 퀴놀린일인 경우, 상기 Y의 선택적으로 치환된 퀴놀린일은 2-, 3-, 5-, 6-, 7- 또는 8-위치에서 모 구조에 연결되는, 화합물 또는 이의 염.
  19. 제18항에 있어서,
    (a) L은 *-CH2-CH(NH2)-** 또는 *-CH(CH3)-CH(NH2)-**이고, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환된 퀴놀린-4-일이거나, 또는
    (b) L은 *-NH-CH2-**이고, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환된 퀴놀린-6-일이되, R12는 -OH 및 페닐로부터 독립적으로 선택되는, 화합물 또는 이의 염.
  20. 제18항에 있어서, Y는 3-위치에서 R12에 의해서 치환된 피리딘-4-일인, 화합물 또는 이의 염.
  21. 제20항에 있어서, R12는 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환된 피리딘일인, 화합물 또는 이의 염.
  22. 제20항에 있어서, R12는 C1-C6 알킬에 의해서 선택적으로 치환된 인돌릴인, 화합물 또는 이의 염.
  23. 제20항에 있어서, R12는 C1-C6 알킬, 할로겐 또는 C1-C6 알콕시에 의해서 선택적으로 치환된 페닐인, 화합물 또는 이의 염.
  24. 제18항에 있어서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환되고, C6-C14 아릴 또는 C5-C10 사이클로알킬에 선택적으로 융합된 피리미딘-4-일이되, C6-C14 아릴 및 C5-C10 사이클로알킬은 R12에 의해서 선택적으로 치환된, 화합물 또는 이의 염.
  25. 제24항에 있어서, Y는 C6-C14 아릴에 융합된 피리미딘-4-일이되, C6-C14 아릴은 R12에 의해서 선택적으로 치환된, 화합물 또는 이의 염.
  26. 제24항에 있어서, Y는 선택적으로 치환된 피리딘-3-일, 비치환된 퀴나졸린-4-일 또는 비치환된 6,7-다이하이드로-5H-사이클로펜타[d]피리미딘-4-일인, 화합물 또는 이의 염.
  27. 제18항에 있어서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환되고, C6-C14 아릴에 선택적으로 축합된 2H-피란-2-온-5-일이되, C6-C14 아릴은 R12에 의해서 선택적으로 치환된, 화합물 또는 이의 염.
  28. 제27항에 있어서, Y는 할로겐에 의해서 선택적으로 치환된 1H-아이소크로멘-1-온-4-일인, 화합물 또는 이의 염.
  29. 제18항에 있어서, Y는 R12에 의해서 선택적으로 치환되고, C6-C14 아릴 또는 5- 내지 10-원의 헤테로사이클릴에 선택적으로 융합된 피리딘-2(1H)-온-5-일이되, C6-C14 아릴 또는 5- 내지 10-원의 헤테로사이클릴은, 서로 독립적으로 그리고 각각의 경우에 독립적으로, R12에 의해서 선택적으로 치환된, 화합물 또는 이의 염.
  30. 제29항에 있어서, Y는 C1-C6 알킬 또는 C6-C14 아릴에 의해서 선택적으로 치환된 피리딘-2(1H)-온-5-일인, 화합물 또는 이의 염.
  31. 제29항에 있어서, Y는 비치환된 7,8,9,10-테트라하이드로피리도[1,2-a]아제핀-4(6H)-온-1-일인, 화합물 또는 이의 염.
  32. 제29항에 있어서, Y는 할로겐, C1-C6 알킬, C6-C14 아릴 또는 C3-C8 사이클로알킬에 의해서 선택적으로 치환된 아이소퀴놀린-1(2H)-온-4-일인, 화합물 또는 이의 염.
  33. 제14항에 있어서, Y는 R13에 의해서 선택적으로 치환된 3- 내지 12-원의 헤테로사이클릴인, 화합물 또는 이의 염.
  34. 제33항에 있어서, Y는 비치환된 아이소인돌린-2-일인, 화합물 또는 이의 염.
  35. 제33항에 있어서, Y는 C1-C6 알킬 또는 C6-C14 아릴에 의해서 선택적으로 치환된 피페리딘-2-온-5-일인, 화합물 또는 이의 염.
  36. 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, m = n = 1인, 화합물 또는 이의 염.
  37. 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, R은 수소인, 화합물 또는 이의 염.
  38. 제1항에 있어서, 상기 -X-L- 모이어티는
    Figure pct00201
    Figure pct00202
    Figure pct00203
    로 이루어진 군으로부터 선택되되; *은 Y 모이어티에 대한 부착점을 나타내고, **은 분자의 나머지에 대한 부착점을 나타내는, 화합물 또는 이의 염.
  39. 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는, 약제학적 조성물.
  40. 치료를 필요로 하는 개체에서 섬유모세포 활성화 단백질(fibroblast activation protein: FAP)에 의해서 매개된 질환 또는 장애를 치료하는 방법으로서, 상기 개체에게 치료적 유효량의 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 제39항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
  41. 치료를 필요로 하는 개체에서 증식, 조직 리모델링, 만성 염증, 비만, 글루코스 불내성(glucose intolerance) 또는 인슐린 불감증(insulin insensitivity)을 특징으로 하는 질환 또는 장애를 치료하는 방법으로서, 상기 개체에게 치료적 유효량의 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 제39항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
  42. 제40항 또는 제41항에 있어서, 상기 질환 또는 장애는 유방암, 결장직장암, 난소암, 전립선암, 췌장암, 신장암, 폐암, 흑색종, 섬유육종, 골육종, 결합 조직 육종, 신장 세포 암종, 거대 세포 암종, 편평상피 세포 암종, 백혈병, 피부암, 연조직암, 간암, 위장 암종 또는 선암종인, 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
  43. 제42항에 있어서, 상기 질환 또는 장애는 전이성 신장암, 만성 림프구성 백혈병, 췌장 선암종 또는 비-소세포 폐암인, 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
  44. 제40항 또는 제41항에 있어서, 상기 질환 또는 장애는 섬유증 질환, 상처 치유, 켈로이드 형성, 골관절염, 류마티스 관절염 및 연골 분해에 연관된 관련 장애, 아테롬성 동맥경화 질환, 크론병 또는 제II형 당뇨병인, 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
  45. 종양 성장, 종양 증식, 또는 종양원성(tumorigenicity)의 감소를 필요로 하는 개체에서 종양 성장, 종양 증식, 또는 종양원성을 감소시키는 방법으로서, 상기 개체에게 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 제39항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 종양 성장, 종양 증식, 또는 종양원성을 감소시키는 방법.
  46. 개체에서 FAP를 저해하는 방법으로서, 상기 개체에게 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 제39항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 FAP를 저해하는 방법.
  47. 세포에서 FAP를 저해하는 방법으로서, 상기 세포에 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 제39항의 약제학적 조성물 또는 이들의 대사산물을 투여 또는 전달하는 단계를 포함하는, 세포에서 FAP를 저해하는 방법.
  48. 제47항에 있어서, 상기 세포는 섬유모세포인, 세포에서 FAP를 저해하는 방법.
  49. 제47항 또는 제48항에 있어서, 상기 세포는 암 연관 섬유모세포(cancer associated fibroblast: CAF) 또는 반응성 기질 섬유모세포인, 세포에서 FAP를 저해하는 방법.
  50. 종양에서 FAP를 저해하는 방법으로서, 상기 종양에 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 제39항의 약제학적 조성물 또는 이들의 대사산물을 투여 또는 전달하는 단계를 포함하는, 종양에서 FAP를 저해하는 방법.
  51. 혈장에서 FAP를 저해하는 방법으로서, 상기 혈장에 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 제39항의 약제학적 조성물 또는 이들의 대사산물을 투여 또는 전달하는 단계를 포함하는, 혈장에서 FAP를 저해하는 방법.
  52. 제46항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, FAP를 저해하는 것은 FAP의 엔도펩티다제 활성을 저해하는 것을 포함하는, 방법.
  53. 제46항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, FAP를 저해하는 것은 FAP의 엑소펩티다제 활성을 저해하는 것을 포함하는, 방법.
  54. 개체에서 면역 반응을 향상시키는 방법으로서, (a) 면역 관문 저해제(immune checkpoint inhibitor) 및 (b) 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 제39항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 면역 반응을 향상시키는 방법.
  55. 개체에서 FGF21 발현 수준을 증가시키는 방법으로서, 상기 개체에게 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 제39항의 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, FGF21 발현 수준을 증가시키는 방법.
  56. 제55항에 있어서, FGF21 발현의 유도제(inducer)를 투여하는 단계를 더 포함하는, FGF21 발현 수준을 증가시키는 방법.
  57. 제56항에 있어서, 상기 FGF21 발현의 유도제는 PPARα 효능제인, FGF21 발현 수준을 증가시키는 방법.
  58. 제57항에 있어서, 상기 PPARα 효능제는 피브레이트 또는 페노피브레이트인, FGF21 발현 수준을 증가시키는 방법.
  59. 제39항에 있어서, 인간 또는 수의과 의약으로서 사용하기 위한, 조성물.
  60. FAP에 의해서 매개되는 장애 또는 질환의 예방 및/또는 치료를 위한 의약의 제조에서의 제1항 내지 제38항의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 제39항의 약제학적 조성물의 용도.
KR1020207020364A 2017-12-15 2018-12-14 섬유모세포 활성화 단백질의 억제제 KR20200110653A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762599630P 2017-12-15 2017-12-15
US62/599,630 2017-12-15
PCT/US2018/065859 WO2019118932A1 (en) 2017-12-15 2018-12-14 Inhibitors of fibroblast activation protein

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20200110653A true KR20200110653A (ko) 2020-09-24

Family

ID=66815562

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020207020364A KR20200110653A (ko) 2017-12-15 2018-12-14 섬유모세포 활성화 단백질의 억제제

Country Status (13)

Country Link
US (1) US11780821B2 (ko)
EP (1) EP3723753A4 (ko)
JP (1) JP2021506972A (ko)
KR (1) KR20200110653A (ko)
CN (1) CN112105354A (ko)
AU (1) AU2018386298B2 (ko)
BR (1) BR112020011862A2 (ko)
CA (1) CA3085803A1 (ko)
IL (1) IL275333B2 (ko)
MX (1) MX2020006128A (ko)
RU (1) RU2020122712A (ko)
SG (1) SG11202005563YA (ko)
WO (1) WO2019118932A1 (ko)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116474108A (zh) 2016-12-14 2023-07-25 普渡研究基金会 成纤维细胞活化蛋白(fap)-靶向成像和治疗
AU2018386298B2 (en) 2017-12-15 2023-09-07 Praxis Biotech LLC Inhibitors of fibroblast activation protein
EP3898654A4 (en) * 2018-12-21 2022-10-26 Praxis Biotech LLC FIBROBLAST ACTIVATION PROTEIN INHIBITORS
EP3906024A4 (en) * 2019-01-04 2022-10-26 Praxis Biotech LLC FIBROBLAST ACTIVATING PROTEIN INHIBITORS
MX2022009931A (es) * 2020-02-12 2022-09-12 Philochem Ag Ligandos de proteina de activacion de fibroblastos para aplicaciones de administracion dirigida.
DK3891138T3 (da) 2020-02-12 2022-04-04 Philochem Ag Fibroblastaktiveringsproteinligander til målrettede indgivelsesanvendelser
US20230348392A1 (en) * 2020-05-06 2023-11-02 Bayer Aktiengesellschaft Pyridine (thio)amides as fungicidal compounds
JP2023525082A (ja) 2020-05-07 2023-06-14 アンスティテュ・クリー 免疫抑制線維芽細胞集団のバイオマーカーとしてのａｎｔｘｒ１及び免疫療法に対する応答を予測するためのその使用
JP2023529643A (ja) * 2020-06-04 2023-07-11 バイエル、アクチエンゲゼルシャフト 新規殺真菌剤としてのヘテロシクリルピリジン
US20240101549A1 (en) 2020-12-17 2024-03-28 Astrazeneca Ab N-(2-(4-cyanothiazolidin-3-yl)-2-oxoethyl)-quinoline-4-carboxamides
CN114790195B (zh) * 2020-12-21 2024-05-17 苏州药明博锐生物科技有限公司 成纤维细胞活化蛋白抑制剂
CN114790194B (zh) * 2020-12-21 2024-03-26 苏州药明博锐生物科技有限公司 成纤维细胞活化蛋白抑制剂
CA3207999A1 (en) 2021-02-12 2022-08-18 Samuele CAZZAMALLI Bivalent fibroblast activation protein ligands for targeted delivery applications
EP4043452A1 (en) 2021-02-12 2022-08-17 Philochem AG Bivalent fibroblast activation protein ligands for targeted delivery applications
CN113105432B (zh) * 2021-03-30 2022-03-04 上海交通大学医学院附属仁济医院 一种碳-11（11c）放射性药物及其制备方法和应用
TW202320805A (zh) * 2021-08-18 2023-06-01 美商杜夫特學院信託管理公司 用於pet造影之選擇性靶向纖維母細胞活化蛋白之放射性氟標誌試劑
CN117460826A (zh) * 2021-09-14 2024-01-26 菲柏生物医学技术（广州）有限公司 靶向FAP阳性细胞的siRNA缀合物及其药物组合物和应用
IL311694A (en) 2021-10-04 2024-05-01 Philochem Ag A radiolabeled fibroblast activation protein ligand
CN113861111B (zh) * 2021-11-23 2023-05-26 浙江工业大学 N-芳基-4-硫(硒)乙基多元环并[c]-1-吡啶酮衍生物及其合成方法和应用
WO2023144379A1 (en) 2022-01-30 2023-08-03 Philochem Ag High-affinity ligands of fibroblast activation protein for targeted delivery applications
CN115304582B (zh) * 2022-07-20 2023-05-12 北京法伯新天医药科技有限公司 FAP-α特异性肿瘤诊断显像剂
WO2024052333A1 (en) 2022-09-06 2024-03-14 Philochem Ag Multivalent fibroblast activation protein ligands for targeted delivery applications

Family Cites Families (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0010188D0 (en) 2000-04-26 2000-06-14 Ferring Bv Inhibitors of dipeptidyl peptidase IV
TW583185B (en) 2000-06-13 2004-04-11 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-2-cyanopyrrolidines and pharmaceutical composition for inhibiting dipeptidyl peptidase-IV (DPP-IV) or for the prevention or treatment of diseases or conditions associated with elevated levels of DPP-IV comprising the same
GB0115517D0 (en) 2001-06-25 2001-08-15 Ferring Bv Novel antidiabetic agents
EP1399433B1 (en) 2001-06-27 2007-08-22 Smithkline Beecham Corporation Fluoropyrrolidines as dipeptidyl peptidase inhibitors
US6861440B2 (en) 2001-10-26 2005-03-01 Hoffmann-La Roche Inc. DPP IV inhibitors
HUP0200849A2 (hu) 2002-03-06 2004-08-30 Sanofi-Synthelabo N-aminoacetil-2-ciano-pirrolidin-származékok, e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás előállításukra
CA2484551A1 (en) 2002-04-30 2003-11-13 Trustees Of Tufts College Smart pro-drugs of serine protease inhibitors
WO2004071454A2 (en) 2003-02-13 2004-08-26 Guilford Pharmaceuticals Inc. Substituted azetidine compounds as inhibitors of dipeptidyl peptidase iv
WO2006125227A2 (en) * 2005-05-19 2006-11-23 Genentech, Inc. Fibroblast activation protein inhibitor compounds and methods
BRPI0614732A2 (pt) * 2005-08-11 2011-04-12 Hoffmann La Roche composição farmacêutica que compreende um inibidor de dpp-iv, uso de um inibidor de dpp-iv e método para o tratamento de enfermidades associadas com nìveis de glicose sanguìnea elevados
EP1760076A1 (en) * 2005-09-02 2007-03-07 Ferring B.V. FAP Inhibitors
CN101230058A (zh) 2007-01-23 2008-07-30 上海恒瑞医药有限公司 双环氮杂烷类衍生物、其制备方法及其在医药上的用途
WO2009037719A1 (en) * 2007-09-21 2009-03-26 Lupin Limited Novel compounds as dipeptidyl peptidase iv (dpp iv) inhibitors
MX2010007593A (es) 2008-01-10 2010-10-13 Sun Pharma Advanced Res Co Ltd Derivados novedosos de acil cianopirrolidinas.
EP2389176A4 (en) 2009-01-23 2012-08-01 Univ Sydney NEW THERAPY FOR METABOLIC DISEASE
WO2013107820A1 (en) * 2012-01-17 2013-07-25 Universiteit Antwerpen Novel fap inhibitors
EP2730571A1 (en) 2012-11-12 2014-05-14 Universitat De Barcelona 1-[1-(benzoyl)-pyrrolidine-2-carbonyl]-pyrrolidine-2-carbonitrile derivatives
MX2018000619A (es) * 2015-07-16 2019-03-06 Bioxcel Therapeutics Inc Nuevo enfoque para tratar el cancer mediante el uso de la inmunomodulacion.
WO2017189569A1 (en) * 2016-04-25 2017-11-02 Trustees Of Tufts College Multimediator dpp4 and fap inhibitors, and uses related thereto
CN116474108A (zh) * 2016-12-14 2023-07-25 普渡研究基金会 成纤维细胞活化蛋白(fap)-靶向成像和治疗
CA3045891A1 (en) 2016-12-14 2018-06-21 Medimmune, Llc Embedded multiple-part sensor within a plunger rod to capture and transmit injection information
EA202090776A1 (ru) 2017-10-23 2020-07-27 Дзе Джонс Хопкинс Юниверсити Визуализирующие и радиотерапевтические агенты, нацеленные на фибробласт-активирующий белок-альфа (fapalpha)
AU2018386298B2 (en) 2017-12-15 2023-09-07 Praxis Biotech LLC Inhibitors of fibroblast activation protein
SG11202007180QA (en) 2018-02-06 2020-08-28 Univ Heidelberg Fap inhibitor
EP3898654A4 (en) 2018-12-21 2022-10-26 Praxis Biotech LLC FIBROBLAST ACTIVATION PROTEIN INHIBITORS
EP3906024A4 (en) 2019-01-04 2022-10-26 Praxis Biotech LLC FIBROBLAST ACTIVATING PROTEIN INHIBITORS
US20200223840A1 (en) 2019-01-11 2020-07-16 Gruenenthal Gmbh Substituted pyrrolidine amides iii

Also Published As

Publication number Publication date
RU2020122712A (ru) 2022-01-18
AU2018386298A1 (en) 2020-07-30
MX2020006128A (es) 2020-09-21
EP3723753A4 (en) 2022-01-26
WO2019118932A1 (en) 2019-06-20
AU2018386298B2 (en) 2023-09-07
CN112105354A (zh) 2020-12-18
IL275333A (en) 2020-07-30
SG11202005563YA (en) 2020-07-29
US20190185451A1 (en) 2019-06-20
RU2020122712A3 (ko) 2022-01-18
CA3085803A1 (en) 2019-06-20
EP3723753A1 (en) 2020-10-21
US11780821B2 (en) 2023-10-10
IL275333B1 (en) 2023-05-01
IL275333B2 (en) 2023-09-01
JP2021506972A (ja) 2021-02-22
BR112020011862A2 (pt) 2020-11-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20200110653A (ko) 섬유모세포 활성화 단백질의 억제제
JP7178532B2 (ja) アンドロゲン受容体の標的分解のための化合物および方法
JP2023175957A (ja) セレブロンリガンドおよび同リガンドを含む二機能性化合物
JP2019532995A (ja) タウタンパク質標的化ｐｒｏｔａｃ、および関連使用方法
JP2020505327A (ja) Ｅｇｆｒタンパク質分解標的化キメラ分子およびその関連する使用方法
KR20210113634A (ko) 섬유모세포 활성화 단백질의 억제제
WO2016038581A1 (en) Compounds and compositions as raf kinase inhibitors
EP3898654A2 (en) Inhibitors of fibroblast activation protein
JP7034512B2 (ja) キナーゼ阻害剤としてのヘテロアリール化合物
JP2013545781A (ja) 二量体ｉａｐ阻害剤
KR20150090044A (ko) 아자퀴나졸린 카복사미드 유도체
JP2022536540A (ja) アミノピリミジンアミドオートファジー阻害剤およびその使用方法
WO2023130012A1 (en) Compounds for mutant kras protein degradation and uses thereof
RU2802426C2 (ru) Ингибиторы белка активации фибробластов
WO2023185864A1 (en) Compounds for Targeted Degradation of KRAS
RU2791904C2 (ru) Соединения и способы для направленной деградации андрогенного рецептора
WO2024074848A1 (en) Protacs useful against the main protease sars-cov-2

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal