KR20200018507A - 세포 계수 및/또는 특징화를 위한 측정 큐벳 - Google Patents

Abstract

본 발명은 세포를 열거 및/또는 특징화하기 위한 측정 큐벳(1)에 관한 것으로, 측정 큐벳(1)은 베이스(11) 및 베이스(11)로부터 연장되어 베이스와 함께 광학 측정 챔버(13)를 형성하는 투명한 측면 인클로저(12)을 포함하며; 베이스(11)는 세포가 통과하는 30 내지 100㎛ 직경의 관통 오리피스(111)를 가지며, 상기 베이스(11) 및 투명한 측면 인클로저(12)는 임피던스 측정 및 광학 측정 모두에 적합한 일체형 큐벳(1)을 형성하는 것을 특징으로 한다. 본 발명은 또한 측정 큐벳(1)을 포함하는 세포를 특징화하기 위한 시스템에 관한 것이다.

Description

세포 계수 및/또는 특징화를 위한 측정 큐벳

본 발명은 유세포 분석 기술 분야, 특히 측정 큐벳과 같은 유세포 분석 부품 및 이런 측정 큐벳을 위한 지지체에 관한 것이다.

현재, 유세포 분석은 세포 특징 및 특성, 예를 들어 이의 크기, 세포 내 함량, DNA 함량 등을 결정할 수 있게 한다. 또한 세포 집단 내에서 이러한 특징의 변화 및 분포를 연구할 수 있게 하여, 궁극적으로 예를 들어 혈액을 구성하는 다양한 세포의 분화와 같은 세포들 사이의 소집단의 확인을 가능하게 한다.

또한, 유세포 분석은 빠른 방법이다. 일반적으로 분당 수천 개의 세포가 특징화된다. 따라서, 희귀 세포 소집단의 열거 및 특징화를 가능하게 한다. 이들 소집단의 희소성은, 특히 통계적으로 허용 가능한 이들 소집단에 대해 행해진 다수의 측정을 얻는 것이 불가능하기 때문에, 일반적으로 현미경에 의한 관찰 및 특징화를 가능하게 않게 한다.

또한, 최근에는 광학 센서의 개선 및 특히 점점 더 낮은 강도의 신호를 검출하는 능력으로 인해, 한편으로 임피던스 측정 및 다른 한편으로는 광학 측정에 의해 세포의 부피를 측정하고 세포 내용에 대한 정보를 얻을 수 있다.

유세포 분석은 세포의 크기에 비해 큰 단면의 액체 흐름에 개별적으로 세포를 통과시키는 것으로 본질적으로 구성된다. 이 액체 흐름은 2개 또는 복수의 세ㅍ의 시간에 따른 동시 또는 과도하게 답답한 통과를 방지하기 위한 크기의 오리피스를 노즐로 끝난다. 유량은 액체 흐름과 오리피스 사이에서 일정하며, 세포의 속도는 액체 흐름의 직경이 감소함에 따라 증가하고 노즐의 출구에서, 세포는 노즐의 직경을 갖는 액체 제트에서 초당 수천의 속도를 얻는다.

세포의 부피 측정은 노즐 오리피스의 어느 한쪽의 임피던스를 측정하여 수행된다. 실제로, 세포의 부피는 전도성 매체(쿨터 시스템)에서 세포의 통과에 의해 유도되는 임피던스의 변화와 상관관계가 있으며, 세포는 전기 절연성인 것으로 간주된다. 부피는 세포의 모양에 관계없이 절대적으로 결정된다.

더욱이, 노즐 오리피스를 통한 세포의 통과는 세포의 특정 유체 역학적 중심화 및 그들의 배향을 제공한다. 따라서, 노즐로부터 흘러나오고 세포를 함유하는 제트를 여기 소스에 의해 방출된 광선에 정확하게 위치시키는 것이 가능하다. 세포가 광선을 통과할 때, 세포는 세포 계측기에서 사용하기에 적합한 특정 개수의 광 신호를 확산시켜 세포의 특성을 결정한다. 이 광 신호는 다음을 포함한다:

- 액체와 세포 사이의 인덱스 차이뿐만 아니라 입사 광선의 일부의 반사에 의해 표현되는 세포의 다른 구성 요소 사이의 인덱스 차이로 인해 세포에 대한 광 반사;

- 세포로 들어오는 광선의 편차에 의해 표현된 세포에 대한 광 굴절; 및

- 본질적으로 몇도 내지 360도의 입체각 범위의 입체각 하에서 세포에 대한 광 회절.

이러한 모든 신호는 광학 수집 시스템에 의해 수집된 다음 광학 필터 시스템에 의해 파장(20-50nm 또는 30-40nm 사이의 중간 높이)에 따라 분리되어 다양한 광 센서에 최종적으로 도달한다. 이러한 다양한 센서는 다음에 적합할 수 있다:

- 세포의 전방 산란을 측정;

- 세포의 측면 산란을 측정;

- 세포의 흡광도를 측정; 및

- 세포의 형광을 측정.

전방 산란은 후자에 의해 세포막의 표면에 도달하는 입사광의 일부의 산란으로 인한 것이다. 산란 광의 일부는 입사광과 동일한 파장을 갖는다. 산란 광의 일부는 입사광의 축을 따라 감지된다. 산란 관의 일부는 세포의 크기 및 평균 굴절률에 대한 정보를 제공한다.

측면 산란은 세포 내 소기관에 의해 세포막을 통과한 입사광 일부의 모든 공간 방향에서의 산란 때문이다. 측면 산란은 광전자 증배관이나 애벌랜치 광다이오드에 의해 감지될 수 있다. 굴절 및 반사 특성을 작동시키면, 이것이 세포 내용물의 미세한 이질성에 대한 정보를 제공한다.

흡광도는 안정적인 여기 소스를 필요로 한다. 이것은 세포의 직경과 세포 내 소기관의 흡수 지수에 비례한다.

세포가 하나 또는 복수의 플루오로크롬으로 표지화되는 경우, 플루오로크롬은 여기 동안 모든 공간 방향으로 여기 소스의 파장보다 큰 하나 또는 복수의 파장에서 형광을 방출한다. 간섭 필터는 광전 증폭관에 각각 보내진 다양한 형광 파장의 분리(일반적으로 20 내지 50nm 또는 30 내지 40nm의 중간 높이 폭 스펙트럼으로)를 가능하게 한다. 측정된 형광의 세기는 세포에 결합된 플루오로크롬 분자의 수에 의존한다. 예를 들어, 수동적으로 세포의 세포질 막을 통과하고 DNA와 특이적으로 결합하는 플루오로크롬인 DRACQ 5 마커를 사용하는 경우, 핵 형성된 세포에 대한 정보를 추출할 수 있다. DRACQ 5 마커는 622nm 및 676nm에서 2개의 흡수 피크를 갖고 240nm 및 314nm에서 자외선 범위에서 2개의 다른 피크를 갖는다. 이것은 665nm와 800nm 사이의 파장으로 적색 범위에서 형광을 방출한다. 일반적으로 사용되는 필터는 입사광의 90°에서 650nm 미만의 모든 스펙트럼 성분을 반사하고 650nm보다 큰 스펙트럼 성분을 투과시키는 이색성 유형의 필터이다. 광원의 정의를 고려하면, 제 1 필터는 50nm 정도의 대역폭으로 광원의 파장에 자연스럽게 집중된다. 따라서, 이 셋업에서, 각각의 입자에 대해 3개의 물리량을 측정할 수 있다: 즉 입자의 부피를 나타내는 전기 측정, 세포의 굴절과 관련된 소멸 측정, 및 최종적으로 분석된 세포의 핵산 함량과 관련된 형광 측정.

유세포 분석은 유리하게는 다양한 바이러스, 감염 및 기생충의 진단 및 치료 모니터링뿐만 아니라 건강한 세포의 기능적 연구를 가능하게 하는 혈액학 연구에 사용된다. 유세포 분석 덕분에, 다양한 유형의 혈액 세포를 계수하고 특징화할 수 있다.

예를 들어, 백혈구에 적용되는 유세포 분석은 이들의 총수를 확인하고 이들의 형태에 따라 분화하고 세포 부피의 임피던스 측정 및 흡수 측정을 통해 3개의 상이한 유형으로 분류할 수 있다.

첫 번째 유형은 큰 세포(직경 20 내지 40㎛)인 단핵구의 유형이다. 핵의 모양은 둥글거나, 타원형이거나, 신장형이거나, 완전히 불규칙적일 수 있다; 가장 빈번한 경우는 신장형이다. 이들의 염색질은 밀도가 낮고 울퉁불퉁하지 않으며 규칙적인 구조이다. 혈액 내 단핵구의 체류 시간은 조직 통과 전 2일이고, 골수 통과 시간은 1-2일이다. 단핵구가 활성화되면, 대식세포가 된다. 이들은 박테리아, 전체 세포뿐만 아니라 먼지와 같은 다양한 소위 오염 물질 입자를 포식할 수 있다.

두 번째 유형은 면역계에서 중요한 역할을 하는 림프구의 유형이다. 이들은 크기가 다른 두 그룹으로 나눌 수 있다:

- 둥글거나 타원형, 때로는 비 확장성, 가볍거나 약간 호염기성 세포질로 일반적으로 핵의 한쪽에 뻗어있는 신장형의 핵을 가진 작은 크기의 림프구(직경 7 내지 9㎛); 및

- 소형 림프구의 것보다 더 넓은 세포질을 가지고 중심핵이거나 약간 중심을 벗어난 핵을 가지고 완전히 핵을 둘러싸고 있는 중소 림프구(직경 9 내지 15㎛).

주요 기능이 감염으로부터 보호인 다핵 세포로도 알려진 과립구의 세 번째 유형은 세 가지 하위 범주로 구분될 수 있다.

첫째, 호중구는 가장 많은 과립구(약 96%)이다. 이들은 둥글고 12 내지 14㎛의 직경을 가진다. 이들은 다엽 모양(3 내지 5엽)의 핵을 특징으로 한다. 이들은 조직 통과 전 2일의 혈액 체류 시간 및 10 내지 14일의 과립 전구체의 골수 통과 시간을 갖는다. 호중구의 골수 예비 구획이 있다. 이들은 박테리아를 죽이는 데 매우 효과적이며 급성 유형의 염증 동안 우세하다. 이들의 필수 역할은 박테리아 및 효모와 같은 외부 미생물로부터 신체를 방어하는 것이다. 이들의 배설 기능은 국소 염증성 조직 반응을 촉진하고 이의 방어에 기여한다.

다음으로, 호염기구는 매우 드물며 백혈구의 단지 약 0.5%를 구성한다. 이들은 10 내지 14㎛의 직경을 가진다. 이들의 이중엽 핵은 상대적으로 많고 세포 전체에 분산되어 있는 특정 과립에 의해 가려진다. 혈액 체류 시간은 12 내지 24시간이며 알려진 조직 통과가 없다. 골수 통과 시간은 호중구의 시간과 동일하다. 호염기구의 중요한 기능은 호산구를 끌어들이는 것이다.

마지막으로, 호산구는 순환 백혈구의 약 2 내지 5%를 구성한다(대략 입방 밀리미터당 350개 요소). 이들은 이중엽 핵을 특징으로 하며 특히 구형(직경 (직경 0.5 내지 1.5㎛)인 과립의 모양을 특징으로 하는 12 내지 14㎛ 직경의 세포이다. 이들은 친유성 과립을 함유한다. 호산구성 다핵 세포는 알레르기성 염증 및 항 기생충 방어의 핵심 세포이다. 이들의 분포는 특히 유기체 조직이며, 순환하는 분획은 호산구의 총의 단지 1%를 구성한다. 이들의 혈액 통과 시간은 골수에서 나온 후 약 10일의 수명을 갖게 될 조직(특히 내장, 폐, 피부 및 자궁)에 침착될 때까지 3 내지 8시간이다.

추가의 예에서, 적혈구 및 혈소판의 총수를 결정하고, 형태에 따라 분화하고, 세포 부피의 임피던스 측정 및 흡수 측정에 의해 분류할 수 있다.

유세포 분석의 추가 적용은 망상 적혈구, 적혈구, 미성숙 세포 및 백혈구 전구체 세포와 같은 상이한 유형의 혈액 세포, 활성화된 림프구 또는 여전히 가교된 혈소판의 특징 및/또는 열거로 인한 명백한 진단적 관심을 나타낸다.

세포의 부피의 임피던스 측정은 큐벳을 포함하는 장치를 사용하며, 베이스는 약 50㎛의 직경이 액체 흐름에서 세포의 개별 통과를 가능하게 하는 오리피스를 가진다. 오리피스의 상류에서, 액체 흐름은 특징화될 세포를 포함하는 샘플 제트 및 샘플 제트를 둘러싸서 샘플 제트의 하이드로포커싱(hydrofocussing)을 가능하게 하는 시스(sheath) 제트(일반적으로 식염수)를 포함하는 샘플 제트로부터 형성된다. 전압계의 단자는 전극에 전기적으로 연결되어 있으며, 이 중 하나는 오리피스로부터 상류에 배치되고 다른 하나는 하류에 배치되며, O-링은 이런 높이에서 견고성을 보장할 것을 필요로 한다. 세포 통과시 관찰되는 전압 변화는 부피를 나타낸다.

큐벳의 베이스는 매우 고가의 합성 루비와 같은 보석으로 제조되는 일반적으로 지름이 몇 밀리미터이고 두께가 수 마이크론인 디스크로 제조된다. 관통 오리피스는 이 디스크에서 가공된 다음, 디스크가 노즐 끝에서 수동으로 주름이 형성된다. 크림핑 작업은 미세 균열이 나타날 수 있어 양극과 양극 사이에 저항의 변형을 일으켜 임피던스 측정을 왜곡함에 따라 위험이 없지 않다.

광학 측정과 관련하여, 후자는 중심에 80㎛의 직경이 액체 흐름에서 세포의 개별 통과를 가능하게 하는 오리피스를 갖는 평평한 베이스 및 베이스에 대해 가압된 투명한 인클로저(enclosure)로 형성된 큐벳을 포함하는 추가 장치를 사용한다. 인클로저와 베이스 사이에, 씰이 두 부품 사이의 견고성을 보장한다. 베이스 바로 근처에 있는 인클로저의 하부에 있는 2차 시스 입력은 샘플 흐름이 여기 소스에 의해 방출된 광선과 교차하는 400㎛의 길이에 걸쳐 샘플 흐름과 동행하도록 샘플 흐름을 시싱(sheathing)하는 시스 제트의 도착을 가능하게 한다. 제 2 씰은 큐벳 상단에 견고성을 보장하기 위해 필요하다.

체적 측정 및 광학 측정을 동시에 수행하기 위해, 체적 측정 장치의 베이스를 광학 측정 장치의 베이스로 사용하여 두 장치를 단일 장치로 결합하는 것이 가능하다. 그러나, 이러한 배치는 4개 씰의 사용을 필요로 한다. 더욱이, 다양한 요소들 사이의 누출 없음이 보장될 수 없다.

본 발명의 하나의 목적은 종래 기술의 단점 중 적어도 하나를 해결하는 것이다.

이를 위해, 본 발명은 세포, 특히 혈액 세포를 열거 및/또는 특징화하기 위한 측정 큐벳을 제공하며, 측정 큐벳은 베이스 및 베이스로부터 연장되어 베이스와 함께 광학 측정 챔버를 형성하는 투명한 측면 인클로저을 포함하며; 상기 베이스는 세포가 통과하는 30 내지 100㎛ 직경의 관통 오리피스를 가지며, 상기 베이스 및 투명한 측면 인클로저는 임피던스 측정 및 광학 측정 모두에 적합한 일체형 큐벳을 형성하는 것을 특징으로 한다.

이 일체형 측정 큐벳을 사용하면, 세포 부피 측정 및 광학 측정을 위한 측정 큐벳에 이전에 필요한 4개의 씰 중 3개 없이 가능하다. 실제로, 일체형 성질에 의해, 측정 큐벳은 관통 오리피스와 광학 측정 챔버 사이와 양극과 다양한 액체(시스 액체, 용해액 등)의 배출을 담당하는 부품 사이에 씰이 더 이상 필요하지 않다. 또한, 이 측정 큐벳은 몇 마이크로 초 간격으로 동일한 세포에 대한 부피의 임피던스 측정 및 광학 측정을 가능하게 한다.

추가의 선택적이고 비 제한적인 특징들이 이하에 기술된다.

베이스는 절두체의 측부 표면과 더 작은 반경의 표면의 조합인 상부 표면을 가질 수 있고, 관통 오리피스는 상부 표면의 더 작은 반경의 표면에 상응하는 부분에서 베이스를 횡단한다.

베이스는 절두체의 측부 표면과 더 작은 반경의 표면의 조합인 하부 표면을 가질 수 있고, 관통 오리피스는 하부 표면의 더 작은 반경의 표면에 상응하는 부분에서 베이스를 횡단한다.

베이스는 더 작은 반경의 표면에 상응하는 부분에서 40 내지 100㎛의 두께를 가질 수 있다.

큐벳은 흡입 오리피스가 측정 챔버 내로 개방된 유체 흡입구를 추가로 포함할 수 있으며, 흡입 오리피스는 관통 오리피스보다 낮다.

인클로저는 구형 외부 표면을 가질 수 있으며, 그 중심은 관통 오리피스의 출구 및 부근에 있다. 구형 외부 표면의 중심은 관통 오리피스의 출구로부터 200 내지 600㎛ 사이에 위치될 수 있다.

큐벳은 인클로저의 상부 표면상에 씰 하우징을 추가로 포함할 수 있다.

큐벳은 베이스 아래에 서브-베이스를 추가로 포함할 수 있으며, 서브-베이스는 베이스와 인클로저에 의해 일체형 큐벳을 형성하고; 서브-베이스는 V-형 중심 요소를 포함하는 측부 표면을 갖는다.

본 발명은 또한 상기한 바와 같은 측정 큐벳 및 큐벳 지지체를 포함하는 세포, 특히 혈액 세포를 특징화하기 위한 시스템을 제공한다. 큐벳 지지체는 교차점에서 교차하는 2개의 홈을 가질 수 있으며, 횡단 프로파일은 V이며, 교차점은 측정 큐벳용 시트를 형성한다.

본 발명의 내용 중에 포함되어 있다.

추가의 목적, 특징 및 장점은 첨부된 도면을 참조하여 제한이 아니라 예시로서 주어진 다음의 설명을 읽음으로써 명백해질 것이다.
도 1은 본 발명에 따른 측정 큐벳의 3/4 도면이다.
도 2는 도 1의 측정 큐벳의 평면 P를 따른 단면도이다.
도 3은 도 2에 도시된 관통 오리피스의 확대도이다.
도 4는 도 2의 측정 큐벳으로 이어지는 프리폼의 평면 P를 따른 단면도이다.
도 5는 큐벳 지지대에 대한 도 1의 측정 큐벳의 3/4 도면이다.
도 6은 도 5의 측정 큐벳과 큐벳 지지대뿐만 아니라 광학 측정에 필요한 다양한 광학 장치를 포함하는 측정 시스템의 3/4 도면이다.
도 7은 도 6에 도시되고 측정 시스템의 광학 중심을 통과하는 평면 P를 따른 단면도이다.
도 8은 도 1의 측정 큐벳을 생산하는 방법의 단계들을 보여주는 차트이다.

본 발명 전체에서, 공간적 용어는 정상 작동 위치에서 측정 큐벳과 관련하여 결정된다.

측정 큐벳 . 본 발명에 따른 세포를 열거 및/또는 특징화하기 위한 측정 큐벳 (1)은 도 1 내지 4를 참조하여 이하에 설명될 것이다.

측정 큐벳(1)은 베이스(11) 및 베이스(11)로부터 연장되어 베이스와 함께 광학 측정 챔버(13)를 형성되는 투명한 측면 인클로저(12)를 포함하며; 베이스는 세포가 통과하는 30 내지 100㎛ 직경의 관통 오리피스(11)를 가진다. 베이스(11)와 인클로저(12)는 임피던스 측정 및 광학 측정에 적합한 일체형 큐벳을 형성한다.

관통 오리피스(111)는 유리하게는 40 내지 80㎛, 또는 50 내지 60㎛의 평균 직경을 가진다. 관통 오리피스(111)는 유리하게는 원형 베이스를 갖는 원통형이다. 후자의 형상은 측정을 방해하지 않는 장점이 있다. 실제로, 상업용 레이저를 사용하여 미세 가공함으로써 얻어진 오리피스는 레이저에 의해 방출된 빔의 가우스 에너지 프로파일로 인해 자연적인 원추형을 갖는다. 그러나, 테이퍼형 오리피스는 세포가 특히 펄스 폭을 수정함으로써 테이퍼형 오리피스를 통과할 때 세포에 의해 생성된 펄스의 형태를 때때로 변화시킨다.

베이스(11)는 또한 절두체, 바람직하게는 오른쪽 원형 원추라고도 알려진 회전 절두체의 측부 표면(1121) 및 더 작은 반경의 표면(1122)의 조합인 상부 표면(112)을 가질 수 있다. 상응하는 원추 꼭지점 각도는 바람직하게는 20°내지 60°이다. 더 작은 반경은 0.5 내지 1.5mm, 바람직하게는 약 1mm 일 수 있다. 관통 오리피스(111)는 상부 표면(112)의 더 작은 반경(1122)의 표면에 상응하는 부분에서 베이스(11)를 통해 연장된다. 따라서, 베이스(11)의 상부 표면(112)은 광학 측정 챔버(13)를 관통한다. 광학 측정 챔버(13) 속으로 베이스(11)의 상부 표면(112)의 침투는 큐벳과 달리 개방 공간에서 측정이 가능하며, 여기서 측정은 관통 오리피스의 단면에 상응하는 한정된 공간에서 이루어진다. 열린 공간에서 측정을 수행하면 헹굼으로 측정 영역을 쉽게 청소할 수 있다는 장점을 가진다. 절두체의 경사는 관통 오리피스(111)의 출구를 가능한 한 여기 소스에 의해 방출된 광선의 초점에 가깝게 하면서 광학 개구에 적응할 수 있게 한다(아래 참조).

추가로 또는 대안적으로, 베이스(11)는 절두체, 바람직하게는 회전 절두체의 측부 표면(1113)과 보다 작은 반경의 표면(1132)의 조합인 하부 표면(113)을 가질 수 있다. 상응하는 원추 꼭지점 각도는 20°내지 60°이다. 이 경우, 관통 오리피스(111)는 하부 표면(113)의 더 작은 반경의 표면(1131)에 상응하는 부분에서 베이스(11)를 통해 연장된다. 따라서, 베이스(11)의 하부 표면(113)은 절두체의 더 큰 반경의 베이스로 나타낸 입구로부터 관통 오리피스(111)까지 수렴하는 챔버(114)를 정의한다. 이런 구성은 열거 및/또는 특징화되고 더 작은 반경(1132)의 표면에 대해 측면으로 주입된 시스 흐름에 의해 관통 오리피스(111) 쪽으로 중앙으로 향하는 세포를 포함하는 샘플 흐름의 시싱을 가능하게 하여 샘플 제트의 정확한 유체역학적 중심화를 보장한다. 이런 구성은 "하이드로포커싱"이라고도 알려져 있다.

베이스(11)가 상기한 바와 같이 상부 표면(112) 및 하부 표면(113)을 모두 갖는 경우, 이들은 서로에 대해 중심이 맞춰져서 하부 표면(113) 상의 관통 오리피스(111)의 입구 및 관통 오리피스(111)의 출구가 공통 세로 축 상에 위치된다.

바람직하게는, 베이스(11)는, 관통 오리피스(111) 부근에서, 특히 상부 표면 (112) 및 하부 표면(113)의 더 작은 반경(1122, 1132)의 표면에 상응하는 부분에서 40 내지 100㎛의 두께를 갖는다. 유리하게는, 이 두께는 50 내지 80㎛, 55 내지 70㎛, 또는 약 60㎛이다.

인클로저(12)는 내부 표면(121)을 가질 수 있으며, 이의 형상은 정사각형 우측 실린더의 측부 표면의 형상이다. 측부 표면의 베이스를 형성하는 정사각형의 측면은 우선적으로 3 내지 7mm, 또는 4 내지 6mm, 또는 4.5 내지 5.5mm, 바람직하게는 약 5mm에서 선택된다. 원형, 삼각형 등과 같은 베이스에 대한 추가 형상이 선택될 수 있다. 바람직하게는, 베이스의 형상은, 즉 적어도 하나의 대칭 요소, 바람직하게는 대칭 중심 또는 대칭 축을 갖는 규칙적인 기하학적 도형이다.

부가적으로 또는 대안적으로, 인클로저(12)는 구형 외부 표면(122)을 가지며, 여기서 상응하는 구의 중심은 출구 및 관통 오리피스(111) 부근에 위치된다.

구형 외부 표면(122)과 정사각형 우측 원통형 내부 표면(121)의 조합은 각각 내부 표면(121)의 면에 상응하는 3개 또는 4개의 수렴 렌즈(123)를 형성하며 이의 초점은 구형 외부 표면(122)에 상응하는 구의 중심이다. 따라서, 측정 큐벳(1)은 사용자가 한편으론 측정 큐벳 및 다른 한편으론 여기 소스와 센서 사이의 일회용 수렴 렌즈를 갖는 것과 상응하는 조절을 수행하는 것을 하지 않게 함으로써 측정 시스템의 전체 비용을 낮추는 것을 돕는다. 또한, 이러한 구조는 측정 시스템의 구면 수차를 크게 줄여 측정 지점에서 최대 전력을 보장한다. 또한, 상용 장치와 달리 렌즈를 사용하지 않고 약 0.5의 개구수(numerical aperture)를 얻을 수 있다.

더욱이, 관통 오리피스(111)의 출구 및 근방에서 렌즈(123)의 초점의 배열은 단지 관통 오리피스(111)로부터 나오고 샘플 흐름의 중심화가 최적일 때 세포에 대한 광학 측정을 가능하게 한다. 실제로, 관통 오리피스의 출구로부터 멀어 질수록, 세포의 위치가 보다 불확실하고 샘플 제트와 관련하여 중심에서 벗어날 위험이 더 커진다.

따라서, 구형 외부 표면(122)의 중심은 베이스의 상부 표면 및 하부 표면이 회전 절두체의 측부 표면 및 더 작은 반경의 표면의 조합에 상응할 때 베이스(11)의 상부 표면(112) 및 하부 표면(113)의 세로 축과 평행한 샘플 흐름의 방향에서 관통 오리피스(111)의 출구로부터 바람직하게는 200 내지 600㎛, 또는 300 내지 500㎛, 또는 350 내지 450㎛, 바람직하게는 약 400㎛에 위치된다.

더욱이, 인클로저(12)는 이의 상부 표면(124) 상에, 씰, 바람직하게는 O-링을 수용하기 위한 씰 하우징(15)을 포함할 수 있다.

측정 큐벳(11)은 측정 챔버(13) 내에 흡입 오리피스 개구부를 갖는 유체 입구(16)를 추가로 포함할 수 있다. 흡입 오리피스는 관통 오리피스(111)보다 낮게 배치된다. 이 유체 입구는 관통 오리피스(111)의 출구에서 샘플 흐름의 제 2 시싱을 가능하게 한다. 또한, 이 유체 흡입구는 영역을 가로질러 쓸어내어 재순환 체적의 형성을 막을 수 있고, 샘플 제트 하류로부터 세포가 유출되는 것을 방지하고 및 시스가 덜 효과적인 관통 오리피스(111)의 출구로부터 일정 거리에서, 세포가 고리로 재순환하는 것을 방지하여, 후속 세포에 대해 이루어진 광학 측정을 방해하는 것을 방지한다. 더욱이, 절두체의 측부 표면(1112)과 더 작은 반경의 표면(1122)의 조합에 상응하는 유체 흡입구(16)와 베이스(11)의 상부 표면(112) 사이의 조합은 제 2 시스 유체를 관통 오리피스(111)의 출구쪽으로 안내하는 장점을 갖는다.

측정 큐벳(1)은 베이스(11) 아래에 서브 베이스(14)를 추가로 포함할 수 있다. 서브 베이스(14)는 베이스(11) 및 인클로저(12)와 일체형 큐벳을 형성한다. 서브 베이스(14)는 수렴 챔버(114) 상으로 개방되는 구멍(143)을 갖는다. 구멍의 외부 면(1431) 상에, 숄더(142)가 O-링을 수용하기 위해 제공될 수 있다.

외부 면(1431)상의 구멍(143)의 직경은 베이스(11)의 하부 표면(113)의 절두체의 베이스를 형성하는 원의 직경보다 클 수 있으며, 예를 들어 400 내지 700㎛, 450 내지 650㎛, 500 내지 600㎛, 바람직하게는 약 550㎛일 수 있다. 구멍(143)의 직경은 베이스(11)의 하부 표면(113)의 절두체의 베이스를 형성하는 원의 직경과 동일할 때까지 점진적으로 감소한다.

또한, 서브-베이스(14)는 V-형 중심 요소(141)를 포함하는 측부 표면을 갖는다. 이들 V-형 중심 요소(141)는 후술하는 큐벳 지지체의 홈과 맞물린다. 바람직하게는, 서브 베이스의 측부 표면은 2개의 V-형 중심 요소(141)를 포함하고, 이의 평균 평면은 바람직하게는 수직으로 서로 교차한다. 유리하게는, 서브 베이스의 측부 표면은 2쌍의 V-형 중심 요소(141)를 포함한다. 동일한 쌍의 2개의 V-형 중심 요소의 평균 평면은 평행한 반면, 상이한 쌍의 2개의 V-형 중심 요소의 평균 평면은 평행하다 쌍은 바람직하게는 수직으로 서로 교차한다. 유리하게는, 한 쌍의 V-형 중심 요소(141)의 평균 평면은 정사각형 우측 원통형 내부 표면(121)의 2개의 대향면과 평행하다.

이들 V-형 중심 요소(141)는 V의 선단이 아래쪽으로, 즉 인클로저로부터 서브 베이스를 향한 방향으로 향하는 돌출 요소이다. 바람직하게는, V의 선단은 아래로 강하된다. V의 선단을 강하시키면 측정 큐벳(1)의 제조 동안 선단의 잠재적인 끝말림(burr)으로 인해 측정 큐벳(1)의 위치가 잘못되는 것을 방지할 수 있다.

유리하게는, 일체형 큐벳은 바람직하게는 1.4 내지 1.6의 굴절률을 갖는다. 또한, 플라스틱은 바람직하게는 낮은 복굴절률 및 낮은 열 왜곡의 90% 초과 작동 파장의 투과율을 갖도록 우선적으로 선택된다.

더욱이, 일체형 큐벳의 재료는 유리하게는 낮은 수분 흡수 저항성(예를 들어 0.01% 미만)을 갖도록 선택된다. 또한, 재료는 바람직하게는 관통 오리피스의 어느 한쪽의 전극들 사이에서 만족스러운 전기 절연을 보장하기 위해 3MHz 미만 또는 1MHz 미만의 주파수에서 낮은 유전 상수(예를 들어, 최대 3 F/m)를 갖는다.

일체형 큐벳의 재료는 유리하게는 플라스틱이다. 따라서, 일체형 큐벳은 종래 기술의 측정 큐벳과 비교하여 측정 큐벳의 비용을 대폭 감소시킬 수 있도록 성형함으로써 얻어진다. 일체형 큐벳의 재료는 본질적으로 폴리사이클로올레핀 수지, 특히 이 수지의 95중량% 초과, 또는 이 수지의 99.5중량% 초과를 포함할 수 있다. 이런 수지의 예는 Zeon®의 Zeonex E48R(2015)이다. 이런 수지는 매우 낮은 튜브 싱킹으로 매우 높은 압력으로 주입하기에 적합하고 일체형 큐벳의 치수 및 광학 품질의 표면 거칠기를 정확하게 제어하기에 적합한 용융된 형태의 액체이다.

측정 시스템. 본 발명에 따른 세포를 열거 및/또는 특징화하기 위한 측정 시스템이 도 5 내지 7을 참조하여 이하에 기술된다.

측정 시스템(10)은 상기한 바와 같이 측정 탱크(1)를 포함한다.

또한, 측정 시스템(10)은 측정 큐벳(1)을 수용하고 측정 동안 이를 고정하기위한 큐벳 지지체(2)를 포함한다. 큐벳 지지체(2)는 유리하게는, 측정 큐벳(1)이 V-형 중심 요소(141)를 가질 때, 교차점에서 서로 바람직하게는 수직으로 교차하는 2개의 홈(21, 22)을 가질 수 있으며, 횡단 윤곽은 측정 큐벳(1)의 V-형 중심 요소(141)의 형상에 상응하는 V이다. 교차점은 측정 큐벳(1)을 위한 시트를 형성한다. 두 홈(21, 22) 사이의 교차 각은 V-형 중심 요소(141)의 평균 평면의 교차 각에 상응한다.

또한, 큐벳 지지체(2)는 시스 제트 및 샘플 제트를 수용하기 위한 오리피스(23)를 교차점에 갖는다. 이 오리피스(23)는 측정 큐벳(1)이 큐벳 지지체(2) 상에 배치될 때 수렴 챔버(114)와 유체 연통하기에 적합하다. 또한, 측정 시스템(10)은 측정 큐벳(1)과 큐벳 지지체(1) 사이에 배치될 O-링(3)을 포함할 수 있다.

측정 시스템(10)은 임피던스 측정을 위한 양극 및 음극을 포함하는 임피던스 측정 조립체를 추가로 포함할 수 있다.

측정 시스템(10)은 측정 큐벳(1)을 향해 광을 방출하기 위한 여기 소스(4)를 포함하는 광학 측정 조립체를 추가로 포함할 수 있다. 광축(A)은 방출된 광선(41)의 평균 방향으로서 여기 소스(4)로부터 정의된다. 여기 소스(4)의 배치는 측정 큐벳(1)이 제자리에 있을 때 광축(A)이 인클로저(12)의 구형 외부 표면(122)의 중심(O)을 통과하도록 선택된다.

여기 소스(4)는 바람직하게는 비간섭성 소스(incoherent source)이다. 따라서, 광선(41)의 쉐이핑(shaping)은 레이저를 필요로 하는 종래의 시스템과 비교하여 용이하고 비용이 든다. 실제로, 샘플 흐름은 수 마이크로미터의 폭을 갖는다. 샘플 흐름의 폭보다 작은 직경의 세포는 이 폭을 따라 어디에나 위치될 수있 다. 저 간섭성 여기 소스(4)의 사용은 샘플 흐름의 폭을 포함하는 인클로저(12)의 구형 외부 표면(122)의 중심(O)인 측정 지점에서 균일하게 조명된 영역의 형성을 가능하게 한다. 따라서 센서에 도달하는 광학 신호는 샘플 흐름에서 세포의 위치에 관계없이 동일할 것이다.

여기 소스(4)는 발광 다이오드 및 백열 전구로부터 선택될 수 있다. 여기 소스는 620 내지 680nm, 635 내지 665nm, 바람직하게는 약 650nm의 파장을 중심으로하는 방출 스펙트럼을 갖는다.

광학 측정 조립체는 광축(A) 상에 입력 쉐이핑(shaping) 광학 장치(5)를 추가로 포함할 수 있다. 이들 입력 쉐이핑 광학 장치(5)는 여기 소스(4)와 측정 큐벳(1) 사이에 배치되어야 한다. 쉐이핑 광학 장치(5)는 여기 소스(4)에 대해 방사상으로 방출되고 광축(A)과 평행한 광선으로 제 1 쉐이핑 광학 장치(5)에 도달하는 광선(41)을 변환하는 것을 가능하게 한다. 이를 위해, 이는 수렴 렌즈로서 작용하는 제 1 광학 그룹(51)을 포함한다. 인클로저(12)의 구형 외부 표면(122)의 중심(O)에서 광선의 초점을 개선시키기 위해, 수렴 렌즈로서 작용하는 제 2 광학 그룹(52)이 또한 인클로저의 구형 외부 표면(122)의 중심을 향하여 광선의 제 1 수렴을 수행하기 위해 제공될 수 있다. 큐벳(1)의 제 2 광학 그룹(52)과 수렴 렌즈(123)의 조합은 인클로저(12)의 구형 외부 표면(122)의 중심(O)에서 최소의 구면 수차, 이 지점(O)에서 최대 전력 및 최대 개구수를 보장할 수 있게 한다. 측정 큐벳(1)에 렌즈(123)의 통합은 비용 절약에 도움이 되고; 이 렌즈(123)가 없다면, 성형 광학 그룹에 이를 통합할 필요가 있었을 것이다. 제 1 광학 그룹(51) 및 적용 가능한 경우 제 2 광학 그룹(52)은 큐벳 지지체(2)의 홈(21) 상에 높이 및 각도 위치 설정을 용이하게 하기 위해 원형 베이스를 갖는 일반적인 원통형의 케이싱(53)에 포함되는 것이 바람직하다.

입력 쉐이핑 광학 장치(5)는 또한 측정 큐벳(1)이 제 위치에 있을 때 관통 오리피스(111)의 출구 부근에 십자선의 이미지를 형성하는 데 적합하다. 적용 가능한 경우, 십자선의 이미지는 인클로저(12)의 구형 외부 표면(122)의 중심(O)을 포함하는 평면상에 형성된다. 이를 위해, 광학 측정 조립체는 여기 소스(41)와 입력 쉐이핑 광학 장치(5) 사이에 직사각형 십자선을 추가로 포함한다. 바람직하게는, 종횡비(폭에 대한 길이의 비율)는 3 이하이다. 입력 쉐이핑 광학 장치는 예를 들어 길이가 약 100㎛이고 폭이 약 30㎛인 직사각형 십자선을 형성하는 데 적합하다.

바람직하게는, 입력 쉐이핑 광학 장치(5)는 수렴 광선(41)이, 예를 들어 30°내지 50°의 입체각을 형성하도록 구성된다. 특히 측정 큐벳(1)의 베이스의 상부 표면(112)의 절두체 형상에 의해 가능한 이러한 큰 개구부로 인해, 출구에서 최대 광을 수집하는 것이 가능하다.

광학 측정 조립체는 측정 큐벳(1)을 통과하고 제 1 리시빙(receiving) 광학 장치(6)에 도달하는 광선을 센서에 수렴하도록 하기 위해 세포의 흡광도를 측정하는 데 적합한 센서 및 제 1 출력 리시빙 광학 장치(6)를 포함하는 흡광도 측정 모듈을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 센서 및 제 1 리시빙 광학 장치(6)는 측정 큐벳(1)과 관련하여 여기 소스(41)의 반대측 상의 광축(A) 상에 배치되고, 제 1 리시빙 광학 장치(6)는 측정 큐벳(1)과 센서 사이에 배치되어야 한다. 일부 경우에, 센서 및 제 1 리시빙 광학 장치(6)는 광축(A)의 외부에 배치될 수 있으며, 이 경우 배플은 광축(A) 상에 그리고 측정 큐벳(1)과 제 1 리시빙 광학 장치(6) 사이의 광선(41)의 경로 중 하나에 배치된다. 센서는 우선적으로 애벌랜치 광다이오드이다.

필수적이진 않지만, 바람직하게는, 제 1 리시빙 광학 장치(6)는 시스템을 대칭시킴으로써 비용을 최소화하기 위해 입력 쉐이핑 광학 장치(5)와 동일한 개구부를 갖는다.

광학 측정 조립체는 큐벳에 의해 산란되어 제 2 리시빙 광학 장치(7)에 도달하는 광선(41)을 센서에 수렴시키기 위해 세포의 측면 산란을 측정하는 데 적합한 센서 및 제 2 출력 리시빙 광학 장치(7)를 포함하는 산란 측정 모듈을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 센서 및 제 2 리시빙 광학 장치(7)는 큐벳 지지체와 평행하고 측정 큐벳(1)이 제 위치에 있을 때 인클로저(12)의 구형 외부 표면(122)의 중심(O)을 통과하는 광축(A)에 수직인 축 상에 배치된다. 일부 경우에, 센서 및 제 2 리시빙 광학 장치(7)는 광축에 대한 수직 축 외부에 배치될 수 있으며, 이 경우 배플은 광축(A)에 수직인 축 상 및 측정 큐벳(1)과 제 2 리시빙 광학 장치(7) 사이의 광선(41)의 경로 상에 배치된다. 센서는 우선적으로 애벌랜치 광다이오드이다.

광학 측정 조립체는 큐벳에 의해 산란되고 제 3 리시빙 광학 장치에 도달하는 광선을 센서에 수렴시키기 위해 세포의 형광을 측정하는 데 적합한 센서 및 제 3 출력 리시빙 광학 장치(도시되지 않음)를 포함하는 형광 측정 모듈을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 센서 및 제 3 리시빙 광학 장치는 큐벳 지지체와 평행하고 측정 큐벳이 제 위치에 있을 때 인클로저의 구형 외부 표면의 중심을 통과하는 광축에 수직인 축 상에 배치된다. 일부 경우에, 센서 및 제 3 리시빙 광학 장치는 광축에 수직인 축 외부에 배치될 수 있으며, 이 경우 배플은 광축에 수직인 축 상 및 큐벳 지지체와 제 3 리시빙 광학 장치 사이의 광선의 경로 상에 배치된다. 센서는 우선적으로 애벌랜치 광다이오드이다.

광학 측정 조립체가 측면 산란 측정 모듈 및 형광 측정 모듈을 모두 포함하는 경우, 하나는 광축에 수직인 축 상에 있고 다른 하나는 외부에 있을 수 있다. 이 경우, 상응하는 배플은 이색성 거울이다.

대안적으로, 2개의 모듈은 광축에 수직인 축 외부에 있을 수 있다. 이 경우, 큐벳 지지체에 가장 가까운 배플은 이색성 거울이다. 가장 먼 배플은 반 반사 거울 또는 실제 거울일 수 있다.

또한 대안적으로, 측정 시스템(10)의 동일한 구성 요소를 사용하는 동안 하나 또는 복수의 형광의 측정을 가능하게 하기 위해 이색성 거울이 측면 산란 측정 모듈에 추가될 수 있다. 이색성 거울은 큐벳 지지체와 제 2 리시빙 광학 장치 사이에 배치된다. 또한, 이색성 광학 필터는 일반적으로 20 내지 50nm, 또는 30 내지 40nm의 중간 높이 폭 스펙트럼에서 상이한 파장의 광학 형광 신호를 분리하기 위해 제공될 수 있다. 이 경우, 이색성 광학 필터는 이색성 거울과 형광 센서 사이에 배치된다.

본 발명 전체에서, 용어 "쉐이핑 광학 장치" 및 "리시빙 광학 장치"는 광선의 방향을 변경하기 위한 렌즈 또는 렌즈 세트를 나타내는 것으로 이해되어야 한다. 바람직하게는, 모든 쉐이핑 및 리시빙 광학계가 동일하다. 즉, 이들은 모두 제 1 광학 그룹 및 제 2 광학 그룹을 포함하고; 후자는 제 1 광학 그룹보다 측정 큐벳 1에 더 가깝게 배치된다.

바람직하게는, 리시빙 광학 장치(6, 7)의 각각은 큐벳 지지체(2) 상에서 높이 및 각도 위치 설정을 위해 쉐이핑 광학 장치(5)와 같은 원형 베이스를 갖는 원통 형상의 케이싱을 갖는다. V-형 중심 요소는 측정 큐벳(1)의 위치 설정에 사용된 것과 동일할 수 있는 큐벳 지지체(2)의 상응하는 홈(21, 22)과 맞물리도록 고려될 수 있다.

측정 큐벳(1) 및/또는 큐벳 지지체(2)는 인클로저의 정사각형 우측 원통형 내부 표면의 면이 광축에 수직이 되도록 유리하게 구성된다. 이 경우, 쉐이핑 광학 장치는 광축 상에 또는 이에 수직이고 측정 큐벳이 제 위치에 있을 때 인클로저의 구형 외부 표면의 중심을 통과하는 축 상에 배치된다.

측정 큐벳을 제조하는 방법. 측정 큐벳을 제조하는 방법은 도 2, 4 및 8을 참조하여 이하에 기술된다.

상기 방법은 프리폼을 성형하는 단계를 포함하며, 그 형태는 일반적으로 베이스를 제외한 측정 큐벳의 형태이다(도 4 참조). 특히, 관통 오리피스는 아직 형성되지 않았고, 제 1 관통 오리피스 근처의 베이스 구역의 두께는 아직 원하는 두께에 도달하지 않았다. 근처 두께는 400 내지 600㎛, 또는 450 내지 550㎛, 또는 475 내지 525㎛, 바람직하게는 약 500㎛이다.

상기 방법은 또한 40 내지 100㎛, 50 내지 80㎛, 55 내지 70㎛, 또는 약 60㎛의 두께를 남기도록 충분한 깊이에 걸쳐 장래의 관통 오리피스 근처의 베이스 영역을 삭마하는 단계를 포함하며, 삭마하는 단계는 초단 펄스를 사용하여 수행된다. 유리하게는, 장래의 관통 오리피스 근처 베이스의 구역을 삭마하는 단계는 레이저를 사용하여 수행되며, 레이저 빔은 바람직하게는 베이스의 하부 표면을 향한다. 바람직하게는, 삭마는 0.6 내지 1.4mm의 직경의 삭마 원을 생성한다. 이 영역의 두께(관통 오리피스 근처의 두께)의 제어는 질적 저항 측정을 보장하기 위해 치수 관점에서 중요하다. 실제로, 관통 오리피스의 두께는 상기 세포가 관통 오리피스를 통과할 때 세포에 의해 생성된 펄스의 폭에 직접 연관된다. 두께가 과도하고 제어되지 않으면, 복수의 세포가 동시에 관통 오리피스를 통과하여 선형성에 측정 인공물을 생성할 위험이 있다.

이 방법은 예를 들어 WO 2017/029210에 기술된 방법에 따라 레이저 마이크로 머시닝으로 관통 오리피스를 형성하는 단계를 포함하여, 임피던스 측정을 위한 완벽하게 원통인 오리피스를 얻을 수 있게 한다.

상기 방법은 선택적으로 성형 단계와 삭마 단계 사이에 위치 설정 도구 상의 프리폼을 위치 설정하는 단계를 포함할 수 있으며, 따라서 관통 오리피스를 삭마하여 형성하는 동안 프리폼을 고정하는 것을 가능하게 한다. 위치 설정 도구는 특히 이의 상부 표면상에 홈을 갖는 위치 설정 지지체를 포함할 수 있으며, 이의 형상은 큐벳의 형상과 상보적이다.

Claims (11)

1. 세포, 특히 혈액 세포를 열거 및/또는 특징화하기 위한 측정 큐벳(1)으로서, 측정 큐벳(1)은 베이스(11) 및 베이스(11)로부터 연장되어 베이스와 함께 광학 측정 챔버(13)를 형성하는 투명한 측면 인클로저(12)을 포함하며; 베이스(11)는 세포가 통과하는 30 내지 100㎛ 직경의 관통 오리피스(111)를 가지며,
   상기 베이스(11) 및 투명한 측면 인클로저(12)는 임피던스 측정 및 광학 측정 모두에 적합한 일체형 큐벳(1)을 형성하는 것을 특징으로 하는 측정 큐벳(1).
2. 제 1 항에 있어서,
   베이스(11)는 절두체의 측부 표면(1121)과 더 작은 반경의 표면(1122)의 조합인 상부 표면(112)을 가지며, 관통 오리피스(111)는 상부 표면(112)의 더 작은 반경의 표면(1122)에 상응하는 부분에서 베이스(11)를 횡단하는 측정 큐벳(1).
3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
   베이스(11)는 절두체의 측부 표면(1131)과 더 작은 반경의 표면(1132)의 조합인 하부 표면(113)을 가지며, 관통 오리피스(111)는 하부 표면(113)의 더 작은 반경의 표면(1132)에 상응하는 부분에서 베이스(11)를 횡단하는 측정 큐벳(1).
4. 제 2 항 또는 제 3 항에 있어서,
   베이스(11)는 더 작은 반경의 표면(1122, 1132)에 상응하는 부분에서 40 내지 100㎛의 두께를 가지는 측정 큐벳(1).
5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
   흡입 오리피스가 측정 챔버(13) 내로 개방된 유체 흡입구(16)를 추가로 포함하며, 흡입 오리피스는 관통 오리피스(111)보다 낮은 측정 큐벳(1).
6. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,
   인클로저(12)는 구형 외부 표면(122)을 가지며, 그 중심은 관통 오리피스(111)의 출구 및 부근에 있는 측정 큐벳(1).
7. 제 6 항에 있어서,
   구형 외부 표면(122)의 중심은 관통 오리피스(111)의 출구로부터 200 내지 600㎛ 사이에 위치되는 측정 큐벳(1).
8. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
   인클로저의 상부 표면(124)상에 씰 하우징(15)을 추가로 포함하는 측정 큐벳(1).
9. 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서,
   베이스(11) 아래에 서브-베이스(14)를 추가로 포함하며, 서브-베이스(14)는 베이스(11)와 인클로저(12)에 의해 일체형 큐벳(1)을 형성하고; 서브-베이스(14)는 V-형 중심 요소(141)를 포함하는 측부 표면을 가지는 측정 큐벳(1).
10. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 따른 측정 큐벳(1) 및 큐벳 지지체(2)를 포함하는 세포를 특징화하기 위한 시스템(10).
11. 제 10 항에 있어서,
    측정 큐벳(1)은 제 9 항에 따르며, 큐벳 지지체(2)는 교차점에서 교차하는 2개의 홈(21, 22)을 가지며, 횡단 프로파일은 V이며, 교차점은 측정 큐벳(1)용 시트를 형성하는 시스템(10).

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