KR20190114971A - 벤조이미다졸 유도체, 제조 방법 및 그것의 용도 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 단백질 키나아제-관련 장애를 치료하는데 유용한 벤조이미다졸 화합물에 관한 것이다. 암 또는 이식 거부의 하나 이상의 증상을 치료 또는 예방하는데 유용한 화합물에 대한 필요성이 또한 존재한다. 또한, 본 명세서에 개시된 화합물을 사용하여, CDK4 및/또는 CDK6과 같은, 단백질 키나아제의 활성을 조정하기 위한 방법에 대한 필요성이 존재한다.
Figure pct00105

(식 I)

Description

벤조이미다졸 유도체, 제조 방법 및 그것의 용도
본 발명은 사이클린-의존성 키아나제를 저해하는데 유용한 벤조이미다졸 화합물에 관한 것이다. 더 구체적으로, 본 발명은 CDK4/6 저해제로서 사용되는 화합물과 그것의 제약학적 조성물, 및 암과 같은 CDK4/6에 의해 매개되는 질환의 치료 방법을 제공한다.
사이클린-의존성 키나아제(CDKs)는 세포 주기 진행을 매개하며, G1에서 S 기로의 전이와 G2에서 M 기로의 전이를 조절한다. CDK 활성은 전사 후 변형뿐만 아니라 사이클린 및 CDK 저해제의 발현에 의해 세포 주기 동안 내내 엄격히 제어된다. 4 가지의 증식성 CDK가 있는데, 그 중 CDK1은 G2에서 M 기로의 전이를 우선적으로 조절하고, CDK2/4/6은 G1에서 S 기로의 전이를 조절한다. 세포 주기 진행은 고도로 조절되는 과정이다. 적절한 성장 신호의 부재시 망막모세포종 단백질(pRb)을 포함하는 포켓 단백질 패밀리는 세포가 DNA 복제기(S 기)로 들어가는 것을 막는다. 복제 주기는 미토겐이 신호 전달 경로를 촉발할 때 시작되고, 이로써 D-사이클린의 세포 수준이 증가한다. D-사이클린은 차례로 사이클린 의존성 키나아제 4/6(CDK4/6)를 활성화하며, 이것은 pRb를 인산화하고 비활성화한다.
제어되지 않는 세포 증식은 암의 홀마커 중 하나이고, pRb 비활성화는 종양 세포가 점검되지 않는 세포 주기로 진행하게 되는 핵심 이벤트이다. 일부 종양은 pRb 유전자 자체를 결실하지만, 대부분은 기능적 pRb를 유지하며 대신 CDK4/6 키나아제를 활성화한다. CDK4/6 키나아제 활성의 억제는 HR+ 유방암, 맨틀 세포 림프종, 교모세포종 및 편평세포 폐암과 같은 많은 암의 완벽한 종양 성장 저해를 가져왔다. 또한, 정상 섬유아세포 세포는 CDK1에 의한 보상에 의해 CDK4/6의 부재를 극복하는 것으로 나타났다. 종합하면, CDK4/6의 선택적 저해제가 광범위-CDK 저해제보다 더 넓은 치료창을 가질 수 있다는 것을 알 수 있다.
직접적인 항신생물 효과에 더하여, CDK4/6 저해제는 염증 질환, 골 질환, 대사 질환, 신경 및 신경변성 질환, 심혈관 질환, 알레르기 및 천식, 알츠하이머병, 및 호르몬 관련 질환을 치료하는 것으로 밝혀졌다. 따라서, 의약화학 분야에서 치료제로서 효과적인 CDK4/6 저해제를 찾기 위한 실질적인 노력이 있었다.
CDK1은 유사분열 진행의 핵심 결정인자이며, 단지 CDK1 만이 유사분열을 개시할 수 있다. 마우스 녹아웃 실험은 포유류 세포 증식에 CDK1이 필요하다는 것을 나타냈다.[1] CDK1가 세포 증식에 중요하므로, CDK1의 저해에 의해 야기된 독성은 치료 수준을 달성하는 능력을 제한할 것이다. 따라서, 약물 표적 CDK4/6에 대한 CDK1의 선택성을 확보하는 것이 필수적이다.
CDK2는 CDK1과 구조 및 기능적으로 관련된다. CDK2는 CDK4 및 CDK6보다 상당히 더 광범한 기질 프로파일을 가지며, 여러 과정들 중에서도, 세포 주기 진행(예를 들어, p27KIP1 및 RB), DNA 복제(예를 들어, 복제 인자 A 및 C), 히스톤 합성(예를 들어, NPAT), 중심체 중복(예를 들어, 뉴클레오포스민(NPM))에 수반된 수많은 단백질을 인산화한다. CDK4 및 CDK6과 달리, CDK2는 INK4 단백질에 의해서는 조절되지 않고, CDK 저해제의 CDK-상호작용 단백질/키나아제 저해 단백질(CIP/KIP) 부류에 의해 조절되며, 이것은 CDK2-사이클린 복합체에 결합하여 이들을 비활성화한다.[1] 암에 대한 약물로서 CDK4/6 저해제를 설계할 때는 CDK2에 대한 선택성을 확보하는 것이 보다 중요하다.
세포 주기 진행을 직접 촉진하는 CDK(예를 들어, CDK4, CDK6, CDK2 및 CDK1)에 더하여, 전사를 조절하는 CDK 패밀리가 확인되었고, 이것은 CDK7, CDK8 및 CDK9를 포함한다. CDK7은 전사의 개시에 기여하는 RNA 중합효소 II 카복시 말단 도메인의 인산화에서 일반적인 역할을 하고, CDK9는 또한 RNA 중합효소 II를 인산화하며, 이로써 전사의 연장을 촉진한다.[1] 1 세대 CDK 저해제는 광범위-CDK 저해제이며 다루기 힘든 독성으로 인해 성공적이지 못했다. 예를 들어, 플라보피리돌이 지금까지 가장 광범하게 연구된 CDK 저해제이다. 플라보피리돌은 G1 및 G2 기에서 세포 주기 중단을 유도할 수 있지만, 또한 세포독성 반응을 유도하며, 이것은 전사의 억제를 가져오는 CDK7 및 CDK9 저해의 결과인 것으로 추정된다.[2] 따라서, CDK4/6 표적화 약물을 설계하는 경우 CDK7/9와의 관련성을 피하는 것이 필수적이다.
지금까지 다양한 CDK 저해제가 전임상 및 임상 평가되었다. 상술된 증거를 고려하면, 많은 연구 그룹이 CDK4/6 선택적 저해제의 발견에 힘써왔으며, 팔보시클립(PD-0332991), 리보시클립(LEE-011) 및 아베마시클립(LY2835219)은 충분히 문서로 입증되었다. 그러나, 암과 같은 세포 증식 장애의 치료에서 사용될 수 있는 더 효능 있는, 선택적이고 안전한 CDK4/6 저해제를 제공해야 할 필요성은 여전하다.
참고자료:
[1] Uzma Asghar, Agnieszka K. Witkiewicz, Nicholas C. Turner, Et al. Nat Rev Drug Discov. 2015, 14(2): 130-146.
[2] Prithviraj Bose, Gary L Simmons, Steven Grant. Expert Opin Investig Drugs. 2013, 22(6): 723-738.
본 발명은 CDK4/6 저해제로서 사용되며 CDK4/6에 의해 매개된 질환의 치료를 위해 사용되는 벤조이미다졸 화합물에 관한 것이다. 본 발명의 화합물은 식 I의 일반 구조를 가진다. 본 발명은 식 I의 화합물, 또는 그것의 입체이성질체, 호변체, 다형체, 용매화합물, 제약학적으로 허용되는 염, 또는 전구약물을 제공한다:
Figure pct00001
(식 I)
상기 식에서,
고리 A는 아릴 또는 헤테로아릴이고;
Z는 CH2, NH, O 및 S로 구성되는 군으로부터 선택되고;
R1은 독립적으로 수소, 할로겐, CN, NO2, OH, NH2, C1- 8알킬, C1- 8알콕시, C3- 8사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-(CH2)m-, 아릴-C1- 6알킬-, 헤테로아릴-C1- 6알킬-, -NR12R13, -NR12-C1-6알킬렌-NR12R13, 및 헤테로사이클릴-C(O)-로 구성되는 군으로부터 선택되며, 여기서 C1- 8알킬, C1- 8알콕시, C3- 8사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-(CH2)m-, 아릴-C1- 6알킬-, 헤테로아릴-C1- 6알킬-, 또는 헤테로사이클릴-C(O)-은 각각 치환되지 않거나 또는 할로겐, 하이드록실, C1- 8알킬, C3- 8사이클로알킬, 헤테로사이클릴, -NR12R13, 또는 -(CH2)t-OH로부터 선택된 적어도 하나의 치환체로 치환되고;
R2 및 R3은 각각 독립적으로 H, OH, CN, NO2, NH2, 할로겐, C1- 8알킬, C1- 8알콕시, C3- 8사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴로부터 선택되며; 여기서 C1-8알킬, C1- 8알콕시, C3- 8사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴은 각각 치환되지 않거나 또는 할로겐, 하이드록실, C1- 8알킬, C3- 8사이클로알킬, 또는 헤테로사이클릴로부터 선택된 적어도 하나의 치환체로 치환되고;
R12 및 R13은 각각 독립적으로 H, C1- 8알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 또는 C3- 8사이클로알킬로부터 선택되며; 여기서 C1- 8알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 또는 C3- 8사이클로알킬은 각각 치환되지 않거나 또는 할로겐, 하이드록실, C1- 8알킬, C3- 8사이클로알킬, 또는 헤테로사이클릴로부터 선택된 적어도 하나의 치환체로 치환되고;
m은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
t는 0, 1, 2, 3 또는 4이다.
식 I의 일부 구체예에서, Z는 CH2이다.
식 I의 일부 구체예에서, Z는 O이다.
식 I의 일부 구체예에서, 고리 A는 N의 하나 또는 2개의 헤테로 원자를 포함하는 6-원 헤테로아릴, 예를 들어, 피리딜, 피리미딘일, 피리다진일 등이다.
식 I의 다른 구체예에서, 고리 A는
Figure pct00002
또는
Figure pct00003
이다.
식 I의 일부 구체예에서, R1은 헤테로사이클릴-(CH2)m- 또는 C1- 8알킬, NR12R13, 4 내지 6-원 헤테로사이클릴, C3- 6사이클로알킬 또는 -(CH2)t-OH로 치환된 헤테로사이클릴-(CH2)m-이다.
식 I의 다른 구체예에서, R1은 5 내지 6-원 헤테로사이클릴-CH2-, 또는 C1- 3알킬, -N(CH3)2, -N(CH2CH2OH)CH3,
Figure pct00004
-CH2OH, -CH2CH2OH 또는 -OH로 치환된 5 내지 6-원 헤테로사이클릴-CH2-이다.
식 I의 다른 구체예에서, R1은 6-원 헤테로사이클릴-CH2-, 또는 메틸 또는 에틸로 치환된 6-원 헤테로사이클릴-CH2-이다.
식 I의 일부 구체예에서, R1은 헤테로사이클릴, 또는 C1- 8알킬, NR12R13, 4 내지 6-헤테로사이클릴, C3- 6사이클로알킬, 또는 -(CH2)t-OH로 치환된 헤테로사이클릴이다.
식 I의 다른 구체예에서, R1은 5 내지 6-원 헤테로사이클릴, 또는 C1- 3알킬, -N(CH3)2, -N(CH2CH2OH)CH3,
Figure pct00005
-CH2OH, -CH2CH2OH 또는 OH로 치환된 5 내지 6-원 헤테로사이클릴이다.
식 I의 다른 구체예에서, R1은 6-원 헤테로사이클릴, 또는 메틸 또는 에틸로 치환된 6-원 헤테로사이클릴이다.
식 I의 일부 구체예에서, R1은 6-원 헤테로사이클릴-C(O)- 또는 C1- 3알킬로 치환된 6-원 헤테로사이클릴-C(O)-이다.
식 I의 다른 구체예에서, R1은 메틸로 치환된 6-원 헤테로사이클릴-C(O)-이다.
식 I의 일부 구체예에서, 헤테로사이클릴은 고리 원자로서 N 또는 O의 하나 또는 2개의 헤테로 원자를 포함한다.
식 I의 일부 구체예에서, 헤테로사이클릴은 고리 원자로서 N의 하나 또는 2개의 헤테로 원자를 포함한다.
식 I의 일부 구체예에서, R1은 -NR12-C1- 3알킬렌-NR12R13이다.
식 I의 일부 구체예에서, R12 및 R13은 각각 독립적으로 H, -(CH2)t-OH 또는 C1-3알킬이다.
바람직하게, R12 및 R13은 각각 독립적으로 OH, CH2CH2OH, 메틸 또는 에틸이다.
식 I의 일부 구체예에서, R1은
Figure pct00006
또는
Figure pct00007
이다.
식 I의 일부 구체예에서, m은 1이다.
식 I의 일부 구체예에서, n은 1이다.
식 I의 일부 구체예에서, t는 0, 1, 또는 2이다.
식 I의 일부 구체예에서, R2 및 R3은 각각 독립적으로 H, OH, 할로겐, C1- 6알킬, 할로겐으로 치환된 C1-6알킬, Cl-6알콕시, 할로겐으로 치환된 Cl-6알콕시이다.
식 I의 다른 구체예에서, R2 및 R3은 각각 독립적으로 H, OH, F, Cl, CH3, CH2CH3, CF3, -OCH3, 또는 -OCF3이다.
식 I의 다른 구체예에서, R2 및 R3은 둘 다 F이다.
본 발명은 또한 식 I의 화합물과 관련하여 일부 바람직한 기술적 해결책을 제공하며, 이 화합물은 다음과 같다:
1) 4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민;
2) N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민;
3) 5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민;
4) 5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(6-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-3-일)피리미딘-2-아민;
5) 5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(5-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리미딘-2-일)피리미딘-2-아민;
6) N-(5-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민;
7) N-(5-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민;
8) N-(5-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민;
9) (2-((5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-일)아미노)피리미딘-5-일)(4-메틸피페라진-1-일)메탄온;
10) (6-((5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)(4-메틸피페라진-1-일)메탄온;
11) N5-(2-(디에틸아미노)에틸)-N2-(5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-일)-N5-메틸피리딘-2,5-디아민;
12) N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4,4a,5-헥사하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-아민;
13) N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4,4a,5-헥사하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-5-메틸피리미딘-2-아민;
14) 5-클로로-N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민;
15) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민;
16) N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민；
17) N-(5-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민；
18) N-(5-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민；
19) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민；
20) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-(피페라진-1-일메틸)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민；
21) N-(5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)-6-(4-메틸피페라진-1-일)피리다진-3-아민；
22) 6-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)-N-(5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)피리다진-3-아민；
23) (1-(6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)피롤리딘-3-일)메탄올；
24) (1-((6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)메틸)피롤리딘-3-일)메탄올；
25) N-(5-(4-사이클로프로필피페라진-1-일)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민；
26) N-(5-((4-사이클로프로필피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민；
27) 2-((1-((6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)메틸)피페리딘-4-일)(메틸)아미노)에탄-1-올；
28) 1-(6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)-3-메틸피롤리딘-3-올；
29) 1-((6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)메틸)-3-메틸피롤리딘-3-올；
30) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-((4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민；
31) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민；
32) N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피라진-7-일)피리미딘-2-아민；
33) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-((4'-메틸-[1,1'-바이피페라진]-4-일)메틸)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민；
34) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-((4-(1-메틸피페리딘-4-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민.
놀랍게도, 식 I의 화합물의 고도로 정제된 (-) 거울상이성질체는 생물학적 활성이 (+) 거울상이성질체에 비해 유익하다. 예를 들어, 화합물 2(N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민)의 광학적으로 순수한 (-) 거울상이성질체는 그것의 (+) 거울상이성질체보다 효능이 더 있다. 특별한 언급이 없다면, 본 발명에서 "(-)"는 광학 회전이 음의 값임을 의미하고 "(+)"는 광학 회전이 양의 값임을 의미한다. 본 명세서에 개시된 본 발명의 화합물은 화합물의 (-) 이성질체 및/또는 화합물의 (+) 이성질체일 수 있다.
본 발명은 또한 치료적 유효량의 식 I의 화합물 또는 그것의 치료적으로 허용되는 염 및 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 제약학적 조성물을 제공한다.
일부 구체예에서, 상기 부형제에 대한 상기 화합물의 중량비는 약 0.001 내지 약 10의 범위 내이다.
본 발명은 또한 의약의 제조를 위한 본 발명의 화합물, 그것의 제약학적으로 허용되는 염 또는 상기 언급된 제약학적 조성물을 제공한다.
일부 구체예에서, 의약은 결장암, 직장암, 맨틀 세포 림프종, 다발성 골수종, 유방암, 전립선암, 교모세포종, 편평세포 식도암, 지방육종, T-세포 림프종, 흑색종, 췌장암, 뇌암 또는 폐암과 같은 암의 치료를 위해 사용된다.
일부 구체예에서, 의약은 CDK, 바람직하게 CDK4 및/또는 CDK6의 저해제로서 사용된다.
본 발명은 본 발명의 화합물, 그것의 제약학적으로 허용되는 염 또는 상기 언급된 제약학적 조성물의 치료적 유효량을 필요한 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상의 암을 치료하는 방법을 제공한다. 특히, 암은 결장암, 직장암, 맨틀 세포 림프종, 다발성 골수종, 유방암, 전립선암, 교모세포종, 편평세포 식도암, 지방육종, T-세포 림프종, 흑색종, 췌장암, 뇌암 또는 폐암으로 구성되는 군으로부터 선택된다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물, 그것의 제약학적으로 허용되는 염 또는 상기 언급된 제약학적 조성물의 치료적 유효량을 필요한 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상의 CDK, CDK4 및/또는 CDK6에 의해 매개된 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
상기 식에서 사용된 일반적인 화학용어들은 통상의 의미를 가진다. 예를 들어, 본 명세서에 사용된 용어 "할로겐"은, 특별한 언급이 없다면, 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도를 의미한다. 바람직한 할로겐 기는 F, Cl 및 Br을 포함한다.
특별한 언급이 없다면, 본 명세서에서 사용된 용어 알킬은 직쇄, 또는 분지쇄 부분을 가진 포화 1가 탄화수소 라디칼을 포함한다. 예를 들어, 알킬 라디칼은 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, t-부틸, n-펜틸, 3-(2-메틸)부틸, 2-펜틸, 2-메틸부틸, 네오펜틸, n-헥실, 2-헥실, 2-메틸펜틸 등을 포함한다. 유사하게, C1- 8알킬에서 C1- 8는 그 기가 선형 또는 분지형 배열로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 탄소 원자를 가지는 것으로 해석된다.
알켄일 및 알킨일 기는 직쇄, 또는 분지쇄 알켄 및 알킨을 포함한다. 마찬가지로, "C2- 8알켄일" 및 "C2- 8알킨일"은 선형 또는 분지형 배열로 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 탄소 원자를 가진 알켄일 또는 알킨일 라디칼을 의미한다.
알콕시는 앞서 설명된 직쇄, 또는 분지쇄 알킬 기로부터 형성된 산소 에테르이며, 즉 -O- 알킬이다.
본 명세서에서 사용된 "하나", "상기", "적어도 하나의" 및 "하나 이상의"는 상호 교환하여 사용된다. 따라서, 예를 들어 "하나의" 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 조성물은 그 조성물이 "하나 이상의" 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함함을 의미하는 것으로 해석된다.
본 명세서에서 사용된 용어 "아릴"은, 특별한 언급이 없다면, 탄소 고리 원자를 함유하는 치환되지 않거나 또는 치환된 단환 또는 다환 고리 시스템을 말한다. 바람직한 아릴은 단환 또는 2환 6-10-원 방향족 고리 시스템이다. 페닐 및 나프틸이 바람직한 아릴이다. 가장 바람직한 아릴은 페닐이다.
본 명세서에서 사용된 용어 "헤테로사이클릴"은, 특별한 언급이 없다면, 탄소 원자 및 N, O 또는 S로부터 선택된 하나 내지 3개의 헤테로 원자로 구성된 치환되지 않거나 또는 치환된 안정한 3 내지 8-원 단환 포화 고리 시스템을 나타내며, 여기서 질소 또는 황 헤테로 원자는 선택적으로 산화될 수 있고, 질소 헤테로 원자는 선택적으로 4차화될 수 있다. 헤테로사이클릴 기는 안정한 구조를 생성하는 임의의 헤테로 원자 또는 탄소 원자에 부착될 수 있다. 이러한 헤테로사이클릴 기의 예들은, 제한은 아니지만, 아제티딘일, 피롤리딘일, 피페리딘일, 피페라진일, 옥소피페라진일, 옥소피페리딘일, 테트라하이드로푸란일, 디옥솔란일, 테트라하이드로이미다졸일, 테트라하이드로티아졸일, 테트라하이드로옥사졸일, 테트라하이드로피라닐, 몰폴린일, 티오몰폴린일, 티아몰폴린일 설폭사이드, 티아몰폴린일 설폰 및 테트라하이드로옥사디아졸일을 포함한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "헤테로아릴"은, 특별한 언급이 없다면, 탄소 원자 및 N, O 또는 S로부터 선택된 하나 또는 4개의 헤테로 원자로 구성된 치환되지 않거나 또는 치환된 안정한 5 또는 6-원 단환 방향족 고리 시스템 또는 치환되지 않거나 또는 치환된 9 또는 10-원 벤조-융합 헤테로방향족 고리 시스템 또는 2환 헤테로방향족 고리 시스템을 나타내며, 여기서 질소 또는 황 헤테로 원자는 선택적으로 산화될 수 있고, 질소 헤테로 원자는 선택적으로 4차화될 수 있다. 헤테로아릴 기는 안정한 구조를 생성하는 임의의 헤테로 원자 또는 탄소 원자에 부착될 수 있다. 헤테로아릴 기의 예들은, 제한은 아니지만, 티에닐, 푸라닐, 이미다졸일, 이소옥사졸일, 옥사졸일, 피라졸일, 피롤일, 티아졸일, 티아디아졸일, 트리아졸일, 피리딜, 피리다진일, 인돌일, 아자인돌일, 인다졸일, 벤조이미다졸일, 벤조푸라닐, 벤조티에닐, 벤조이소옥사졸일, 벤조옥사졸일, 벤조피라졸일, 벤조티아졸일, 벤조티아디아졸일, 벤조트리아졸일 아데닌일, 퀴놀린일 또는 이소퀴놀린일을 포함한다.
용어 "사이클로알킬"은 3 내지 12개 탄소 원자를 가진 환형 포화 알킬 사슬을 말하며, 예를 들어 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 또는 사이클로헥실이다.
용어 "치환된"은 하나 이상의 수소 원자가 각각 독립적으로 동일한 또는 상이한 치환체(들)로 대체된 기를 말한다. 전형적인 치환체는, 제한은 아니지만, 할로겐(F, Cl, Br 또는 I), C1-8 알킬, C3-12 사이클로알킬, -OR1, SR1, =O, =S, -C(O)R1, -C(S)R1, =NR1, -C(O)OR1, -C(S)OR1, -NR1R2, -C(O)NR1R2, 시아노, 니트로, -S(O)2R1, -OS(O2)OR1, -OS(O)2R1, -OP(O)(OR1)(OR2)를 포함하며, 여기서 R1 및 R2는 독립적으로 -H, C1-6 알킬 및 C1-6 할로알킬로부터 선택된다. 일부 구체예에서, 치환체(들)는 독립적으로 -F, -Cl, -Br, -I, -OH, 트리플루오로메톡시, 에톡시, 프로필옥시, 이소-프로필옥시, n-부틸옥시, 이소부틸옥시, t-부틸옥시, -SCH3, -SC2H5, 포름알데하이드 기, -C(OCH3), 시아노, 니트로, CF3,-OCF3, 아미노, 디메틸아미노, 메틸티오, 설포닐 및 아세틸로 구성되는 군으로부터 선택된다
치환된 알킬 기의 예들은, 제한은 아니지만, 2-아미노에틸, 2-하이드록시에틸, 펜타클로로에틸, 트리플루오로메틸, 메톡시메틸, 펜타플루오로에틸 및 피페라진일메틸을 포함한다.
치환된 알콕시 기의 예들은, 제한은 아니지만, 아미노메톡시, 트리플루오로메톡시, 2-디에틸아미노에톡시, 2-에톡시카보닐에톡시 및 3-하이드록시프로폭시를 포함한다.
용어 "제약학적으로 허용되는 염"은 제약학적으로 허용되는 비-독성 염기 또는 산으로부터 제조된 염을 말한다. 본 발명의 화합물이 산성일 때 그것의 상응하는 염은 무기 염기 및 유기 염기를 포함하는 제약학적으로 허용되는 비-독성 염기로부터 쉽게 제조될 수 있다. 이러한 무기 염기로부터 유래된 염은 알루미늄, 암모늄, 칼슘, 구리(제2 및 제1), 제2철, 제1철, 리튬, 마그네슘, 망간(제2 및 제1), 칼슘, 나트륨, 아연 등의 염을 포함한다. 특히 바람직한 염은 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 칼륨 및 나트륨 염이다. 제약학적으로 허용되는 유기 비-독성 염기로부터 유래된 염은 1차, 2차 및 3차 아민뿐만 아니라 환형 아민 및 치환된 아민, 예컨대 자연 발생 및 합성된 치환된 아민의 염을 포함한다. 염이 형성될 수 있는 다른 제약학적으로 허용되는 유기 비-독성 염기는 이온 교환 수지, 예컨대 아르기닌, 베타인, 카페인, 콜린, N',N'-디벤질에틸렌디아민, 디에틸아민, 2-디에틸아미노에탄올, 2-디메틸아미노에탄올, 에탄올아민, 에틸렌디아민, N-에틸몰폴린, N-에틸피페리딘, 글루카민, 글루코사민, 히스티딘, 하이드라바민, 이소프로필아민, 리신, 메틸글루카민, 몰폴린, 피페라진, 피페리딘, 폴리아민 수지, 프로카인, 퓨린, 테오브로민, 트리에틸아민, 트리메틸아민, 트리프로필아민, 트로메타민 등을 포함한다.
본 발명의 화합물이 염기성일 때 그것의 상응하는 염은 무기 및 유기 산을 포함하는 제약학적으로 허용되는 비-독성 산으로부터 쉽게 제조될 수 있다. 이러한 산은, 예를 들어 아세트산, 벤젠설폰산, 벤조산, 캄포설폰산, 시트르산, 에탄설폰산, 포름산, 푸마르산, 글루콘산, 글루탐산, 브롬화수소산, 염산, 이세티온산, 락트산, 말레산, 말산, 만델산, 메탄설폰산, 점액산, 질산, 팜산, 판토텐산, 인산, 석신산, 황산, 타르타르산, p-톨루엔설폰산 등을 포함한다. 바람직한 산은 시트르산, 브롬화수소산, 포름산, 염산, 말레산, 인산, 황산 및 타르타르산이고, 특히 바람직한 산은 포름산 및 염산이다. 식 I의 화합물은 제약학적 사용이 의도되므로 이들은 바람직하게 실질적으로 순수한 형태로, 예를 들어 적어도 60% 순수한 형태, 더 적합하게는 적어도 75% 순수한 형태, 특히 적어도 98% 순수한 형태로 제공된다(%는 중량 기준의 중량에 대한 것이다).
본 발명의 화합물은 또한 제약학적으로 허용되는 염의 형태로 존재할 수 있다. 의약에 사용하기 위한 본 발명의 화합물의 염은 비-독성의 "제약학적으로 허용되는 염"을 말한다. 제약학적으로 허용되는 염 형태는 제약학적으로 허용되는 산성/음이온성 또는 염기성/양이온성 염을 포함한다. 제약학적으로 허용되는 산성/음이온성 염은 일반적으로 염기성 질소가 무기 또는 유기 산으로 양성자화된 형태를 취한다. 대표적인 유기 또는 무기 산은 염산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 과염소산, 황산, 질산, 인산, 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 락트산, 석신산, 말레산, 푸마르산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 만델산, 메탄설폰산, 하이드록시에탄설폰산, 벤젠설폰산, 옥살산, 팜산, 2-나프탈렌설폰산, p-톨루엔설폰산, 사이클로헥산설팜산, 살리실산, 사카린산 또는 트리플루오로아세트산을 포함한다. 제약학적으로 허용되는 염기성/양이온성 염은, 제한은 아니지만, 알루미늄, 칼슘, 클로로프로카인, 콜린, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, 리튬, 마그네슘, 칼륨, 나트륨 및 아연을 포함한다.
본 발명은 본 발명의 화합물의 전구약물을 포함한다. 일반적으로, 이러한 전구약물은 생체내에서 필요한 화합물로 쉽게 전환되는 화합물의 기능적 유도체일 것이다. 예를 들어, 본 출원의 화합물의 임의의 제약학적으로 허용되는 염, 에스테르, 에스테르 염 또는 다른 유도체는, 레시피언트에게 투여시, 본 출원의 화합물 또는 제약학적으로 활성인 대사물질 또는 잔류물을 직접 또는 간접적으로 제공할 수 있다. 특히 바람직한 유도체 또는 전구약물은 환자에게 투여되었을 때 본 출원의 화합물의 생체이용률을 증가시킬 수 있는 화합물(예를 들어, 이것은 경구 투여된 화합물이 혈액으로 더 쉽게 흡수될 수 있다), 또는 생물학적 유기체에 모 화합물의 송달을 촉진하는 것들이나 작용 부위(예를 들어, 뇌 또는 림프계)까지 송달되는 것들이다. 따라서, 본 발명의 치료 방법에서, 용어 "투여"는 구체적으로 개시된 화합물 또는 구체적으로 개시되지는 않았을 수 있지만 대상에 투여 후 생체내에서 명시된 화합물로 전환되는 화합물을 이용하여 다양한 장애를 치료하는 것을 포함해야 한다. 적합한 전구약물 유도체의 선택 및 제조를 위한 종래의 과정은, 예를 들어 "Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985를 참조한다.
분자의 특정 위치에 있는 임의의 치환체 또는 변이체에 대한 정의는 해당 분자의 다른 곳에서의 그것에 대한 정의와 독립적이어야 한다. 본 발명의 화합물에 대한 치환체 및 치환 패턴은 화학적으로 안정적이며 본 명세서에 제시된 방법 및 본 분야에 공지된 기술에 의해 쉽게 합성될 수 있는 화합물을 제공하도록 당업자에 의해 선택될 수 있다.
본 발명은 하나 이상의 비대칭 중심을 함유할 수 있는 본 명세서에 개시된 화합물을 포함하며, 따라서 부분입체이성질체 및 광학 거울상이성질체를 발생시킬 수 있다. 본 발명은 이러한 부분입체이성질체뿐만 아니라 이들의 라세미 혼합물, 이들의 실질적으로 순수한 분해된 거울상이성질체, 가능한 모든 기하 거울상이성질체, 및 이들의 제약학적으로 허용되는 염을 포함한다.
본 발명의 화합물의 광학적으로 순수한 (-) 거울상이성질체가 더 효능 있는 CDK4/6 저해제임을 확인하였다. 본 발명은 대상의 CDK4/6에 의해 매개된 질환을 치료하는 방법을 포함하며, 이것은 (+) 거울상이성질체가 실질적으로 없는, (-) 거울상이성질체 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염의 양을 상기 대상에 투여하는 단계를 포함하며, 상기 양은 질환을 완화시키기에 충분하지만 부작용은 야기하지 않는 양이다.
본 명세서에서 사용된 용어 "(+) 거울상이성질체가 실질적으로 없는"은 조성물이 (+) 거울상이성질체에 대하여 (-) 거울상이성질체를 더 많은 비율이나 퍼센트로 함유함을 의미하며, 상기 퍼센트는 혼합물의 총량을 기준으로 한다. 한 구체예에서, 용어 "(+) 거울상이성질체가 실질적으로 없는"은 조성물이 적어도 60중량%의 (-) 거울상이성질체, 및 40중량% 이하의 (+) 거울상이성질체를 함유한다는 것을 의미한다. 바람직한 구체예에서, 용어 "(+) 거울상이성질체가 실질적으로 없는"은 조성물이 적어도 70중량%의 (-) 거울상이성질체, 및 30중량% 이하의 (+) 거울상이성질체를 함유한다는 것을 의미한다. 다른 구체예에서, 용어 "(+) 거울상이성질체가 실질적으로 없는"은 조성물이 적어도 80중량%의 (-) 거울상이성질체, 및 20중량% 이하의 (+) 거울상이성질체를 함유한다는 것을 의미한다. 또한, 용어 "(+) 거울상이성질체가 실질적으로 없는"은 조성물이 적어도 90중량%의 (-) 거울상이성질체, 및 10중량% 이하의 (+) 거울상이성질체를 함유한다는 것을 의미한다. 또한, 용어 "(+) 거울상이성질체가 실질적으로 없는"은 조성물이 적어도 95중량%의 (-) 거울상이성질체, 및 5중량% 이하의 (+) 거울상이성질체를 함유한다는 것을 의미한다. 심지어, 용어 "(+) 거울상이성질체가 실질적으로 없는"은 조성물이 적어도 99중량%의 (-) 거울상이성질체, 및 1중량% 이하의 (+) 거울상이성질체를 함유한다는 것을 의미한다.
상기 식 I은 특정 위치에서의 확정적 입체화학 없이 도시된다. 본 발명은 식 I의 모든 입체이성질체 및 그것의 제약학적으로 허용되는 염을 포함한다. 또한, 입체이성질체들의 혼합물뿐만 아니라 분리된 특정한 입체이성질체도 또한 포함된다. 이러한 화합물을 제조하는데 사용된 합성 과정 동안, 또는 당업자에게 공지된 라세미화 또는 에피머화 과정을 사용하는 중에, 이러한 과정의 생성물이 입체이성질체의 혼합물일 수 있다.
식 I의 화합물의 호변체가 존재하는 경우, 구체적으로 특별한 언급이 있는 경우를 제외하면, 본 발명은 임의의 가능한 호변체 및 그것의 제약학적으로 허용되는 염, 및 이들의 혼합물을 포함한다.
식 I의 화합물 및 그것의 제약학적으로 허용되는 염이 용매화합물 형태 또는 다형성 형태로 존재하는 경우, 본 발명의 임의의 가능한 용매화합물 및 다형성 형태를 포함한다. 용매화합물을 형성하는 용매의 종류는 그 용매가 약학적으로 허용되는 한 특별히 제한되지 않는다. 예를 들어, 물, 에탄올, 프로판올, 아세톤 등이 사용될 수 있다.
용어 "조성물"은 본 명세서에 명시된 성분들을 명시된 양으로 포함하는 제품, 뿐만 아니라 명시된 성분들의 명시된 조합으로부터 직접 또는 간접적으로 생성된 임의의 제품을 포함한다. 따라서, 활성 성분으로서 본 발명의 화합물을 함유하는 제약학적 조성물 및 본 발명의 화합물을 제조하는 방법이 또한 본 발명의 일부이다. 또한, 화합물의 결정질 형태의 일부는 다형체로서 존재할 수 있고, 이러한 다형체는 본 발명에 포함된다. 또한, 화합물의 일부는 물(예를 들어, 수화물) 또는 통상의 유기 용매와 용매화합물을 형성할 수 있고, 이러한 용매화합물도 역시 본 발명의 범위에 들어간다.
본 발명의 제약학적 조성물은 활성 성분으로서 식 I로 표시된 화합물(또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염), 제약학적으로 허용되는 캐리어 및 선택적으로 다른 치료 성분 또는 애쥬번트를 포함한다. 조성물은 경구, 직장, 국소, 및 비경구(피하, 근육내 및 정맥내를 포함) 투여에 적합한 조성물을 포함하며, 임의의 주어진 사례에서 가장 적합한 경로는 특정 숙주, 및 활성 성분이 투여될 상태의 성격 및 심각도에 의존할 것이다. 제약학적 조성물은 단위 제형으로 편리하게 제시되고 약학 분야에 잘 공지된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다.
실제로, 본 발명의 식 I로 표시된 화합물, 전구약물, 대사물질, 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염은 종래의 제약학적 화합 기술에 따라서 제약학적 캐리어와 긴밀하게 혼합된 상태로 활성 성분으로서 조합될 수 있다. 캐리어는 투여, 예를 들어 경구 또는 비경구(정맥내 투여를 포함) 투여에 바람직한 제조물 형태에 따라 광범위한 형태를 취할 수 있다. 따라서, 본 발명의 제약학적 조성물은, 각각 정해진 양의 활성 성분을 함유하는 캡슐, 캐쉬(cachet) 또는 정제와 같은 경구 투여에 적합한 분리된 단위로서 제시될 수 있다. 또한, 조성물은 분말, 과립, 용액, 수성 액체 중의 현탁액, 비-수성 액체, 수중유 에멀젼, 또는 유중수 액체 에멀전으로서 제시될 수 있다. 상기 제시된 통상의 제형에 더하여, 식 I로 표시된 화합물, 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염은 또한 제어 방출 수단 및/또는 송달 장치에 의해 투여될 수 있다. 조성물은 약학 분야의 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 일반적으로, 이러한 방법은 하나 이상의 필수 성분을 구성하는 캐리어와 활성 성분의 회합을 가져오는 단계를 포함한다. 일반적으로, 조성물은 활성 성분을 액체 캐리어 또는 미분 고체 캐리어 또는 둘 다와 균일하고 긴밀하게 혼합함으로써 제조된다. 다음에, 제조된 제품은 원하는 외형으로 편리하게 성형될 수 있다.
따라서, 본 발명의 제약학적 조성물은 제약학적으로 허용되는 캐리어 및 식 I의 화합물, 입체이성질체, 호변체, 다형체, 용매화합물, 제약학적으로 허용되는 염, 또는 전구약물을 포함할 수 있다. 식 I의 화합물 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염은 또한 하나 이상의 다른 치료적으로 활성인 화합물과 조합하여 제약학적 조성물에 포함될 수 있다.
이용된 제약학적 캐리어는, 예를 들어 고체, 액체 또는 기체일 수 있다. 고체 캐리어의 예들은 락토오스, 테라 알바, 수크로오스, 활석, 젤라틴, 아가, 펙틴, 아카시아, 마그네슘 스테아레이트 및 스테아르산을 포함한다. 액체 캐리어의 예들은 당 시럽, 피넛 오일, 올리브 오일 및 물을 포함한다. 기체상 캐리어의 예들은 이산화탄소 및 질소를 포함한다. 경구 제형을 위한 조성물을 제조할 때 임의의 편리한 제약학적 매질이 이용될 수 있다. 예를 들어, 물, 글리콜, 오일, 알코올, 향미제, 보존제, 착색제 등이 현탁액, 엘릭시르 및 용액과 같은 경구 액체 제조물을 형성하기 위해 사용될 수 있다. 한편, 녹말, 당, 미세결정질 셀룰로오스, 희석제, 과립화제, 윤활제, 바인더, 붕해제 등과 같은 캐리어는 분말, 캡슐 및 정제와 같은 경구 고체 제조물을 형성하기 위해 사용될 수 있다. 투여의 용이성 때문에 정제 및 캡슐이 바람직한 경구 투약 단위이며, 여기에는 고체 제약학적 캐리어가 이용된다. 선택적으로, 정제는 표준 수성 또는 비수성 기술에 의해 코팅될 수 있다.
본 발명의 조성물을 함유하는 정제는 선택적으로 하나 이상의 보조 성분이나 애쥬번트와 함께 압축 또는 성형함으로써 제조될 수 있다. 압축된 정제는 적합한 기계에서 자유 유동 형태의 활성 성분을, 선택적으로 바인더, 윤활제, 비활성 희석제, 표면활성제 또는 분산제와 혼합된, 분말이나 과립으로 압축함으로써 제조될 수 있다. 성형된 정제는 적합한 기계에서 수분을 가한 분말 화합물과 비활성 액체 희석제의 혼합물을 성형함으로써 제조될 수 있다. 각 정제는 바람직하게 약 0.05mg 내지 약 5g의 활성 성분을 함유하고, 각 캐쉬 또는 캡슐은 바람직하게 약 0.05mg 내지 약 5g의 활성 성분을 함유한다. 예를 들어, 사람에게 경구 투여하기 위한 제제는 총 조성물의 약 5 내지 약 95 퍼센트에서 가변적일 수 있는 캐리어 물질의 적절하며 편리한 양과 화합된, 약 0.5mg 내지 약 5g의 활성제를 함유할 수 있다. 단위 제형은 일반적으로 약 1mg 내지 약 2g의 활성 성분, 전형적으로 25mg, 50mg, l00mg, 200mg, 300mg, 400mg, 500mg, 600mg, 800mg 또는 l000mg을 함유할 것이다.
비경구 투여에 적합한 본 발명의 제약학적 조성물은 물 중의 활성 화합물의 용액 또는 현탁액으로서 제조될 수 있다. 적합한 계면활성제, 예컨대 하이드록시프로필셀룰로오스가 포함될 수 있다. 분산물은 또한 글리세롤, 액체 폴리에틸렌 글리콜 및 오일 중의 이들의 혼합물에 제조될 수 있다. 또한, 미생물의 유해한 성장을 방지하기 위해 보존제가 포함될 수 있다.
주사 용도에 적합한 본 발명의 제약학적 조성물은 멸균 수성 용액 또는 분산물을 포함한다. 또한, 이 조성물은 이러한 멸균 주사 용액 또는 분산물의 즉석 제조를 위한 멸균 분말의 형태일 수 있다. 모든 경우 최종 주사 형태는 멸균되어야 하며, 용이한 주사기사용을 위해 효과적으로 유동해야 한다. 제약학적 조성물은 제조 및 보관 조건에서 안정해야 한다. 따라서, 바람직하게 세균 및 진균과 같은 미생물의 오염 작용에 대해 보존되어야 한다. 캐리어는, 예를 들어 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜), 식물유 및 이들의 적합한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다.
본 발명의 제약학적 조성물은 국소 사용에 적합한 형태, 예컨대 에어로졸, 크림, 연고, 로션, 산포 분말 등일 수 있다. 또한, 조성물은 경피 장치에 사용하기 적합한 형태일 수 있다. 이들 제제는 종래의 가공 방법을 통해서, 본 발명의 식 I로 표시된 화합물 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염을 이용하여 제조될 수 있다. 예로서, 크림 또는 연고는 친수성 재료와 물을 약 5wt% 내지 약 10wt%의 화합물과 함께 혼합함으로써 제조되며, 이로써 원하는 컨시스턴시를 가진 크림 또는 연고가 생성된다.
본 발명의 제약학적 조성물은 직장 투여에 적합한 형태일 수 있고, 이 경우 캐리어는 고체이다. 혼합물이 단위 용량 좌약을 형성하는 것이 바람직하다. 적합한 캐리어는 코코아 버터 및 본 분야에서 통상 사용되는 다른 재료들을 포함한다. 좌약은 조성물을 연화되거나 용융된 캐리어(들)과 먼저 혼합한 후 냉각시켜 몰드에서 성형함으로써 쉽게 형성될 수 있다.
전술된 캐리어 성분에 더하여, 상기 개시된 제약학적 제제는 하나 이상의 추가의 캐리어 성분, 예컨대 희석제, 버퍼, 향미제, 바인더, 표면활성제, 증점제, 윤활제, 보존제(항산화제를 포함) 등을 포함할 수 있다. 또한, 제제를 의도된 수혈자의 혈액과 등장성으로 만들기 위한 다른 애쥬번트가 포함될 수 있다. 식 I의 화합물 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염을 함유하는 조성물은 또한 분말 또는 액체 농축물 형태로 제조될 수 있다.
일반적으로, 하루 약 0.01mg/kg 내지 약 150mg/kg 체중 정도의 투약량 수준이 상기 질환의 치료에서 유용하며, 또는 약 0.5mg 내지 약 7g/환자/1일의 투약량이 사용된다. 예를 들어, 결장암, 직장암, 맨틀 세포 림프종, 다발성 골수종, 유방암, 전립선암, 교모세포종, 편평 세포 식도암, 지방육종, T-세포 림프종, 흑색종, 췌장암, 교모세포종 또는 폐암은 매일 체중 kg 당 약 0.01 내지 50mg의 화합물의 투여에 의해, 또는 약 0.5mg 내지 약 3.5g/환자/1일의 투여에 의해 효과적으로 치료될 수 있다.
그러나, 상기 제시된 것들보다 더 적거나 또는 더 많은 용량이 필요할 수 있다. 임의의 특정 대상에 대한 구체적인 용량 수준 및 치료 섭생은 이용된 특정 화합물의 활성, 나이, 체중, 일반적인 건강, 성별, 식이, 투여 시간, 투여 경로, 배설률, 약물 조합, 심각도, 치료중인 특정 질환의 경과, 질환에 대한 대상의 기질 및 치료 주치의의 판단을 포함하는 여러 가지 요인들에 의존할 것이다.
이들 및 다른 양태들이 아래에 기술된 본 발명의 설명으로부터 명백해질 것이다.
실시예
전술한 일반적인 설명과 아래의 상세한 설명은 예시이며 설명일 뿐이고 청구된 주제를 제한하지 않는다는 것이 이해되어야 한다. 달리 명백히 언급되지 않는 한 모든 부 및 퍼센트는 중량 기준이고 모든 온도는 섭씨 온도이다. 본 명세서에 제시된 화합물은 상업적 공급원으로부터 얻어질 수 있거나, 또는 상업적으로 이용가능한 출발 물질과 시약을 사용하여 아래 나타낸 것과 같은 종래의 방법에 의해 합성될 수 있다. 아래의 약어가 실시예에서 사용되었다:
ATP: 아데노신 트리포스페이트;
Boc2O: 디-tert-부틸 디카보네이트;
con-H2SO4: 농 황산;
Crk: CT10(닭 종양 레트로바이러스 10);
DCM: 디클로로메탄;
DEA: 디에틸아민;
DEAD: 디에틸아조디카복실레이트;
DIEA: N,N-디이소프로필에틸아민;
DMEM: 듈베코스 변형 이글 배지;
DMF: N,N-디메틸포름아미드;
DMA: N,N-디메틸아세트아미드;
DMAP: 4-N,N-디메틸아미노피리딘;
DMSO: 디메틸 설폭사이드;
DTT: DL-디티오트레이톨;
EA: 에틸 아세테이트;
EDC: 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드;
EDTA: 에틸렌디아민테트라아세트산;
EtOH: 에틸 알코올;
FBS: 태아 소 혈청;
GSR: 글루타티온-S-트랜스페라아제;
HATU: O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 헥사플루오로포스페이트;
HEPES: 4-(2-하이드록시에틸）피페라진-1-에탄설폰산;
Hex: n-헥산;
h 또는 hr: 시간;
IPA: 이소프로판올;
KOAc: 칼륨 아세테이트;
KTB: 칼륨 tert-부톡사이드;
MeOH: 메탄올;
min: 분;
MsCl: 염화메틸설포닐;
MTS:3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-5-(3-카복시메톡시페닐)-2-(4-설포페닐)-2H-테트라졸륨;
NaBH4: 수소화 붕소 나트륨;
NaBH(OAc)3: 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드;
P(Cy)3: 트리사이클로헥실 포스핀;
Pd2(dba)3: 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐
Pd(dppf)Cl2: [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐;
Pd(OAc)2: 팔라듐 아세테이트;
PE: 석유 에테르;
PMS: 페나진 메토설페이트;
POCl3: 옥시염화인;
P/S: 페니실린/스트렙토마이신 용액;
RT 또는 rt: 실온;
SDS: 나트륨 도데실 설페이트;
SDS-PAGE: 나트륨 도데실 설페이트 폴리아크릴아미드 전기영동 겔;
TBAB: 테트라부틸 암모늄 브로마이드;
TEA: 트리에틸아민;
THF: 테트라하이드로푸란;
TLC: 박층 크로마토그래피;
Tol: 톨루엔.
제조예 1: 5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-아민(중간체 M1)
Figure pct00008
DMSO(20mL) 중의 5-브로모-2-니트로피리딘(2.010g)의 용액에 1-메틸피페라진(1.180g)과 K2CO3(2.720g)를 연속하여 첨가한다. 오일 배스에서 5hr 동안 82℃에서 반응물을 교반한다. 물(50mL)을 첨가하고 DCM(20mLx8)로 추출하고, 조합된 유기상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고 감압하에 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=10/1)로 정제하여 1-메틸-4-(6-니트로피리딘-3-일)피페라진 1.940g을 얻는다.
RT에서 2hr 동안 수소하에 THF(25mL) 중의 1-메틸-4-(6-니트로피리딘-3-일)피페라진(1.940g)의 용액에 Pd/C(0.194g)를 첨가한다. 여과하여 여과액을 수집한 다음 농축하여 5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-아민 1.480g을 얻는다.
MS(ES+): m/z=193.1(M+H)+.
상응하는 피페라진 유도체를 사용하여 5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-아민(중간체 M1으로 개시)에 대해 설명된 대로 아래의 중간체(표 1에 제시)를 제조한다.
중간체 화합물 구조 물리 데이터(MS)(M+H)+
M2 5-(피페라진-1-일)피리딘-2-아민
Figure pct00009
 179.1
M3 2-(4-(6-아미노피리딘-3-일)피페라진-1-일)에탄-1-올
Figure pct00010
 223.1
제조예 4: 6 -((4- 메틸피페라진 -1-일) 메틸 )피리딘-3- 아민 (중간체 M4)
Figure pct00011
0℃의 아이스배스에서 MeOH(30mL) 중의 5-브로모피콜린알데하이드(2.010g)의 용액에 NaBH4(1.220g)를 첨가하고, NaBH4의 첨가가 완료된 후 아이스 배스를 제거하고 자연적으로 실온으로 가온한다. RT에서 2hr 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 0℃에서 물(50mL)로 퀀칭했다. EA(50mLx2)로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하여 (5-브로모피리딘-2-일)메탄올 1.940g을 얻었다.
THF(20mL) 중의 (5-브로모피리딘-2-일)메탄올(1.940g)의 용액을 아이스 배스에서 0℃로 냉각한 다음 이 용액에 염화메틸설포닐(1.780g)을 적가한다. 염화메틸설포닐의 첨가가 완료된 후 아이스 배스를 제거하고 자연적으로 실온으로 가온한다. RT에서 2hr 교반한 후, 반응 혼합물을 물(50mL)로 퀀칭한다. EA(50mLx2)로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액(50mL)으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하여 조 생성물 (5-브로모피리딘-2-일)메틸메탄설포네이트 2.750g을 얻었다.
아세토니트릴(30mL) 중의 (5-브로모피리딘-2-일)메틸메탄설포네이트(2.750g)의 용액에 K2CO3(2.870g)과 1-메틸피페라진(1.560g)을 연속하여 첨가하고, 오일 배스에서 50℃로 가열하고 2hr 동안 반응시킨다. 이어서, 실온으로 냉각하고 물을 첨가하고 EA(50mLx3)로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액(50mL)으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=10/1)로 정제하여 1-((5-브로모피리딘-2-일)메틸)-4-메틸피페라진 2.010g을 얻었다.
-78℃에서 암모니아하에 100mL 시일된 튜브에 MeOH(20mL)를 넣은 다음, 1-((5-브로모피리딘-2-일)메틸)-4-메틸피페라진(1.000g)과 산화제1구리(0.532g)를 용액 부피가 30mL로 될 때까지 연속하여 첨가한다. 외부 배스를 제거하고 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 70℃로 가열하고 12hr 동안 반응시킨다. 여과하여 여과액을 수집하고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=15/1)로 정제하여 6-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-3-아민 0.730g을 얻었다.
MS(ES+): m/z=207.2(M+H)+.
상응하는 피페라진 유도체를 사용하여 6-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-3-아민(중간체 M4로 개시)에 대해 설명된 대로 아래의 중간체(표 2에 제시)를 제조한다.
중간체 화합물 구조 물리 데이터(MS)(M+H)+
M5 5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-아민
Figure pct00012
 221.2
M6 5-(피페라진-1-일메틸)피리딘-2-아민
Figure pct00013
 193.1
제조예 7: 5 -((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일) 메틸 )피리딘-2- 아민( 중간체 M7)
Figure pct00014
0℃의 아이스배스에서 THF(20mL) 중의 2-브로모-5-포름일피리딘(2.010g)의 용액에 NaBH4(1.640g)를 첨가하고, NaBH4의 첨가가 완료된 후 아이스 배스를 제거하고 자연적으로 실온으로 가온한다. RT에서 2hr 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 물(50mL)로 퀀칭하고 EA(50mLx2)로 추출하고, 조합된 유기상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(PE/EA=5/1)로 정제하여 (6-브로모피리딘-3-일)메탄올 1.900g을 얻었다.
DCM(10mL) 중의 (6-브로모피리딘-3-일)메탄올(1.000g)의 용액을 아이스 배스에서 0℃로 냉각하고 염화티오닐(1.260g)을 적가하고, 첨가가 완료된 후 아이스 배스를 제거하고, 용액을 2hr 동안 교반하면서 자연적으로 실온으로 가온한 다음 직접 농축하여 2-브로모-5-(클로로메틸)피리딘 1.050g을 얻는다.
아세토니트릴(10mL) 중의 2-브로모-5-(클로로메틸)피리딘(0.853g)의 용액에 N,N-디메틸피페리딘-4-아민(0.586g)과 K2CO3(1.160g)을 첨가한다. 물(30mL)을 첨가하고 EA(50mLx3)로 추출하고, 조합된 유기상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=10/1)로 정제하여 1-((6-브로모피리딘-3-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아민 0.730g을 얻었다.
-78℃에서 암모니아하에 100mL 시일된 튜브에 MeOH(20mL)를 넣은 다음, 1-((6-브로모피리딘-3-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아민(0.35mg)과 산화제1구리(0.168g)를 용액 부피가 30mL로 될 때까지 연속하여 첨가한다. 외부 배스를 제거하고 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 70℃로 가열하고 12hr 동안 반응시킨다. 여과하여 여과액을 수집하고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=10/1)로 정제하여 5-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리딘-2-아민 0.260g을 얻었다.
MS(ES+): m/z=235.2(M+H)+.
상응하는 피페리딘 유도체를 사용하여 5-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리딘-2-아민(중간체 M7로 개시)에 대해 설명된 대로 아래의 중간체(표 3에 제시)를 제조한다.
중간체 화합물 구조 물리 데이터(MS)(M+H)+
M8 5-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)피리딘-2-아민
Figure pct00015
 221.3
M9 2-((1-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-4-일)(메틸)아미노)에탄-1-올
Figure pct00016
 251.2
M10 2-((1-((6-아미노피리딘-3-일)메틸)피페리딘-4-일)(메틸)아미노)에탄-1-올
Figure pct00017
 265.2
제조예 11: 5 -((4- 메틸피페라진 -1-일) 메틸 )피리미딘-2- 아민 염산염(중간체 M11)
Figure pct00018
THF(50mL) 중의 2-클로로피리미딘-5-카보알데하이드(0.500g)의 용액에 수성 암모니아(25%)(1.200g)를 첨가하고 12hr 동안 교반한다. 물(80mL)을 첨가하고 DCM (80mLx8)로 추출하고, 조합된 유기상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하여 조 생성물 2-아미노피리미딘-5-카보알데하이드 0.540g을 얻었다.
THF(30mL) 중의 2-아미노피리미딘-5-카보알데하이드(0.540g)의 용액에 Boc2O (2.817g), 트리에틸아민(1.310g) 및 DMAP(0.054g)를 연속하여 첨가하고 2hr 동안 교반한다. 물을 첨가하고 EA(50mLx2)로 추출하고, 조합된 유기상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(PE/EA=5/1)로 정제하여 화합물 MH2-12 0.514g을 얻었다.
DCM(10mL) 중의 화합물 MH2-12(0.290g)의 용액에 1-메틸피페라진(0.109g)과 무수 황산마그네슘(0.216g)을 연속하여 첨가하고 2hr 동안 교반한 다음, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드를 첨가한 후 RT에서 3hr 동안 반응시키고, 반응 혼합물을 물(20mL)로 퀀칭하고 DCM(20mLx3)로 추출하고, 조합된 유기상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=10/1)로 정제하여 화합물 MH2-13 0.350g을 얻었다.
DCM 중의 화합물 MH2-13(0.350g)의 용액을 RT에서 염산 가스하에 2hr 동안 반응시키고, 반응 혼합물을 농축하여 5-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리미딘-2-아민 염산염 0.210g을 얻었다.
MS(ES+): m/z=244.1(M+H)+.
피페라진 유도체 대신 상응하는 피페리딘 유도체를 사용하여 5-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리미딘-2-아민(중간체 M11로 개시)에 대해 설명된 대로 아래의 중간체(표 4에 제시)를 제조한다.
중간체 화합물 구조 물리 데이터(MS)(M+H)+
M12 5-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2-아민
Figure pct00019
 236.2
제조예 13:(2- 아미노피리미딘 -5-일)(4- 메틸피페라진 -1-일) 메탄온( 중간체 M13)
Figure pct00020
아세톤(10mL)과 물(3mL) 중의 화합물 MH2-12(0.315g)의 혼합물에 옥손(1.810 g)을 첨가하고 RT에서 2hr 동안 교반한다. 물(20mL)을 첨가하고 DCM(25mLx3)으로 추출하고, 조합된 유기상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하여 화합물 MH8-01 0.290g을 얻었다.
DCM(10mL) 중의 화합물 MH8-01(0.290g)의 용액에 HATU(0.488g)와 DIEA(0.221 g)를 연속하여 첨가하고 RT에서 1h 동안 교반하고, RT에서 1-메틸피페라진(0.105g)을 첨가한 후 용액을 2hr 동안 반응시킨다. 물(20mL)을 첨가하고 DCM(20mLx3)으로 추출하고, 조합된 유기상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=50/1)로 정제하여 화합물 MH8-02 0.250g을 얻었다.
DCM(10mL) 중의 화합물 MH8-02(0.150g)의 용액을 RT에서 염산 가스하에 2hr 동안 반응시키고 물(10mL)을 첨가한 다음 Na2CO3로 pH를 8~9로 조정하고, 얻어진 수성 용액을 혼합 용매(DCM/MeOH=10/1)(20mLx5)로 추출했다. 조합된 유기상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하여 (2-아미노피리미딘-5-일)(4-메틸피페라진-1-일)메탄온 0.060g을 얻었다.
MS(ES+): m/z=223.1(M+H)+.
피리미딘 유도체 대신 상응하는 피리딘 유도체를 사용하여 (2-아미노피리미딘-5-일)-(4-메틸피페라진-1-일)메탄온(중간체 M13으로 개시)에 대해 설명된 대로 아래의 중간체(표 5에 제시)를 제조한다.
중간체 화합물 구조 물리 데이터(MS)(M+H)+
M14 (6-아미노피리딘-3-일)(4-메틸피페라진-1-일)메탄온
Figure pct00021
 221.1
제조예 15: N 5 -(2-( 디에틸아미노 )에틸)- N 5 - 메틸피리딘 -2,5- 디아민( 중간체 M15)
Figure pct00022
아세토니트릴(10mL) 중의 2-니트로-5-브로모피리딘(0.500g)의 용액에 N,N-디에틸-N'-메틸에틸렌디아민(0.305g)과 K2CO3(0.679g)을 연속하여 첨가한다. 오일 배스에서 5hr 동안 82℃에서 반응물을 교반한다. 물(50mL)을 첨가하고 DCM(80mLx3)으로 추출하고, 조합된 유기상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=10/1)로 정제하여 1-메틸-4-(6-니트로피리딘-3-일)-피페라진 0.400g을 얻었다.
수소 가스하에 RT에서 2hr 동안 교반하면서 THF(15mL) 중의 1-메틸-4-(6-니트로피리딘-3-일)피페라진의 용액에 Pd/C(0.040g)를 첨가한다. 여과하여 여과액을 수집한 다음 농축하여 N 5 -(2-(디에틸아미노)에틸)-N 5 -메틸피리딘-2,5-디아민 0.350g을 얻었다.
MS(ES+): m/z=223.2(M+H)+.
N,N-디에틸-N'-메틸에틸렌디아민 대신 N 1 ,N 1 -디에틸-N 2 ,N 2 -디메틸에탄-1,2-디아민을 사용하여 N 5 -(2-(디에틸아미노)에틸)-N 5 -메틸피리딘-2,5-디아민(중간체 M15로 개시)에 대해 설명된 대로 아래의 중간체(표 6에 제시)를 제조한다.
중간체 화합물 구조 물리 데이터(MS)(M+H)+
M16 N 5 -(2-(디에틸아미노)에틸)-N 5 -메틸피리딘-2,5-디아민
Figure pct00023
 223.2
제조예 17: 6 -((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일) 메틸 ) 피리다진 -3- 아민( 중간체 M17)
Figure pct00024
CHCl3(10mL) 중의 3-클로로-6-메틸피리다진(0.208g)의 용액에 트리클로로이소시아누르산(0.189g)을 첨가하고 오일 배스에서 2hr 동안 60℃로 가열한다. 실온으로 냉각하고 여과하여 여과액을 수집하고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(PE/EA =10/1)로 정제하여 3-클로로-6-(클로로메틸)피리다진 0.201g을 얻었다.
DMF(15mL) 중의 3-클로로-6-(클로로메틸)피리다진(0.340g)의 용액에 연속하여 K2CO3(0.578g), KI(0.070g) 및 N,N-디메틸피페리딘-4-아민(0.322g)을 첨가하고 오일 배스에서 1hr 동안 50℃로 가열한다. 실온으로 냉각하고 DCM(50mL)을 첨가하고, 조합된 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=10/1)로 정제하여 1-((6-클로로피리다진-3-일)메틸)-N,N-디메틸피페리딘-4-아민 0.370g을 얻었다.
-78℃에서 암모니아하에 100mL 시일된 튜브에 MeOH(20mL)를 넣은 다음, 1-((6-클로로피리다진-3-일)메틸)-N,N-di메틸피페리딘-4-아민(0.370g)과 산화제1구리(0.532g)를 용액 부피가 30mL로 될 때까지 연속하여 첨가한다. 외부 배스를 제거하고 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 70℃로 가열하고 12hr 동안 반응시킨다. 여과하여 여과액을 수집하고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=15/1)로 정제하여 6-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리다진-3-아민 0.230g을 얻었다.
MS(ES+): m/z=236.2(M+H)+.
피페리딘 유도체 대신 피페라진 유도체를 사용하여 6-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리다진-3-아민(중간체 M17로 개시)에 대해 설명된 대로 아래의 중간체(표 7에 제시)를 제조한다.
중간체 화합물 구조 물리 데이터(MS)(M+H)+
M18 6-(4-메틸피페라진-1-일)피리다진-3-아민
Figure pct00025
 194.1
실시예 1: 화합물 1의 합성
Figure pct00026
1. 화합물 1-01
오일 배스에서 무수 에탄올(70mL) 중의 2-메틸사이클로펜타논(5.200g), 하이드록실아민 염산염(9.200g) 및 트리에틸아민(16.080g)의 혼합물을 하룻밤 85℃에서 교반했다. 이어서, 반응 용액을 농축했다. 잔류물을 EA로 세척했다. 여과하여 여과액을 수집한 다음 농축하여 조 화합물 1-01(5.820g)을 얻었다.
2. 화합물 1-02
조 화합물 1-01(5.820g)을 황산 용액(농-H2SO4:H2O = 20mL:5mL)에 용해하고, 얻어진 혼합물을 90min 동안 오일 배스에서 90℃에서 교반하고, 물(10mL)을 첨가한 다음 Na2CO3으로 pH를 8~9로 조정하고, 얻어진 수성 용액을 DCM(20mLx5)으로 추출하고, 조합된 유기상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고, 감압하에 농축하여 조 화합물 1-02(4.110g)을 얻었다.
3. 화합물 1-03
메틸벤젠(40mL) 중의 조 화합물 1-02(4.110g)와 4-브로모-2,6-디플루오로아닐린(3.780g)의 혼합물에 POCl3(4.180g)을 첨가하고 오일 배스에서 가열했다. 온도가 110℃로 상승했을 때 TEA(2.770g)를 첨가하고, 얻어진 혼합물을 20min 동안 110℃에서 반응시켰다. 메틸벤젠의 일부를 제거한 다음, Na2CO3으로 pH를 8~9로 조정하고, EC로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고, 감압하에 농축하여 조 화합물 1-03(6.550g)을 얻었다.
4. 화합물 1-04
오일 배스에서 DMF(60mL) 중의 조 화합물 1-03(6.100g) 및 칼륨 tert-부톡사이드(4.520g)의 혼합물을 100℃에서 20min 동안 교반한 다음 300mL EA로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액(20mLx3)으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축한 다음, 칼럼 크로마토그래피(PE/EA=1/5)로 정제하여 화합물 1-04-A(0.705g) 및 조 화합물 1-04-C(1.500g)을 얻었다.
5. 화합물 1-05
오일 배스에서 질소하에 DMSO(20mL) 중의 조 화합물 1-04-C(0.957g), 비스(피나콜레이토)디보론(1.290g), 트리사이클로헥실 포스핀(0.047g), 팔라듐 아세테이트(0.038g)의 혼합물을 90℃에서 1h 동안 교반했다. 얻어진 혼합물을 EA(60mL)로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액(30mLx3)으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고, 감압하에 농축하여 조 화합물 1-05(2.290g)을 얻었다.
6. 화합물 1-06
1,4-디옥산(30mL)과 물(3mL) 중의 조 화합물 1-05(2.290g), 2,4-디클로로피리미딘(0.755g), K2CO3(1.400g) 및 Pd(dppf)Cl2·DCM(0.138g)의 혼합물을 오일 배스에서 질소하에 60℃에서 2h 동안 교반했다. 얻어진 혼합물을 EA(30mLx2)로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액(30mLx1)으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축한 다음, 칼럼 크로마토그래피(PE/EA=1/1)로 정제하여 화합물 1-06(0.927g)을 얻었다.
7. 화합물 1
오일 배스에서 질소하에 1,4-디옥산(12mL) 중의 화합물 1-06(0.400g), 중간체 M1(0.291g), Cs2CO3(0.822g), Xanphos(0.017g) 및 Pd2(dba)3(0.027g)의 혼합물을 110℃에서 1h 동안 교반하고 110℃에서 0.5h 동안 마이크로파하에 반응을 계속했다. 얻어진 혼합물을 물(10mL)에 첨가한 다음 DCM(20mLx3)으로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액(30mLx1)으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축한 다음, 칼럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=20/1)로 정제하고, 수득한 고체를 메틸 tert-부틸에테르(10mL) 및 n-헥산(10mL)으로 세척하여 화합물 1(290mg)을 얻었다.
MS(ES+): m/z=473.2(M+H)+.
H-NMR(CDCl3): δ 8.498-8.511 (d, 1H, CH), 8.373-8.396 (d, 1H, CH), 8.167 (s, 1H, CH), 8.040-8.047 (d, 1H, CH), 7.963 (s, 1H, CH), 7.631-7.660 (d, 1H, CH), 7.346-7.660 (dd, 1H, CH), 7.177-7.190 (d, 1H, CH), 4.687-4.719 (m, 1H, CH), 3.190-3.10 (m, 4H, CH2), 2.651-2.675 (m, 4H, CH2), 2.999-3.024 (m, 1H, CH2), 2.403 (s, 3H, CH3), 2.337-2.356 (m, 1H, CH2), 2.267-2.357 (m, 1H, CH2), 2.219-2.248 (m, 1H, CH2), 2.010-2.056 (m, 2H, CH2), 1.602-1.618 (d, 3H, CH3).
실시예 1-1: 화합물 1-06의 키랄 분리
이성질체, 예를 들어 거울상이성질체의 분리에 유용한 기술은 문헌(Eliel, E.L.; Wilen, S.H.; Mander, L.N. stereochemistry of Organic Compounds, Wiley Interscience, NY, 1994)을 참조한다. 예를 들어, 화합물 1, 2 또는 15는 키랄 칼럼을 사용하는 고성능 액체 크로마토그래피를 통해 고 순도의 거울상이성질체(예를 들어, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99% 또는 그 이상)로 분리될 수 있다. 일부 구체예에서, 실시예 1의 조 화합물 1-06을 키랄 칼럼에서 직접 정제함으로써 거울상이성질체 화합물을 수득할 수 있다.
키랄 HPLC 조건:
Figure pct00027
실시예 1-2: 화합물 1a 및 화합물 1b의 합성
조 화합물 1-06을 상기 조건하에 키랄 칼럼에 의해 정제하여 화합물 1-06-A 및 화합물 1-06-B를 얻는다.
화합물 1-06-A 및 화합물 1-06-B를 각각 사용하여 실시예 1의 단계 7에 대해 설명된 대로 화합물 1a 및 화합물 1b를 제조한다.
또한, Rudolf 편광계에서 아래 나타낸 대로 각 화합물에 대해 광학 회전을 3번 측정했다.
조건:
Figure pct00028
결과:
Figure pct00029
실시예 2: 화합물 2의 합성
Figure pct00030
1. 화합물 1-01
오일 배스에서 무수 에탄올(70mL) 중의 2-메틸사이클로펜타논(5.200g), 하이드록실아민 염산염(9.200g) 및 트리에틸아민(16.080g)의 혼합물을 하룻밤 85℃에서 교반했다. 이어서, 반응 용액을 농축했다. 잔류물을 EA로 세척했다. 여과하여 여과액을 수집한 다음 농축하여 조 화합물 1-01(5.820g)을 얻었다.
2. 화합물 1-02
조 화합물 1-01(5.820g)을 황산 용액(농-H2SO4:H2O = 20mL:5mL)에 용해하고, 얻어진 혼합물을 90min 동안 오일 배스에서 90℃에서 교반하고, 물(10mL)을 첨가한 다음 Na2CO3으로 pH를 8~9로 조정하고, 얻어진 수성 용액을 DCM(20mLx5)으로 추출하고, 조합된 유기상을 무수 Na2SO4에서 건조시키고, 감압하에 농축하여 조 화합물 1-02(4.110g)을 얻었다.
3. 화합물 1-03
메틸벤젠(40mL) 중의 조 화합물 1-02(4.110g)와 4-브로모-2,6-디플루오로아닐린(3.780g)의 혼합물에 POCl3(4.180g)을 첨가하고 오일 배스에서 가열했다. 온도가 110℃로 상승했을 때 TEA(2.770g)를 첨가하고, 얻어진 혼합물을 20min 동안 110℃에서 반응시켰다. 메틸벤젠의 일부를 제거한 다음, Na2CO3으로 pH를 8~9로 조정하고, EC로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고, 감압하에 농축하여 조 화합물 1-03(6.550g)을 얻었다.
4. 화합물 1-04
오일 배스에서 DMF(60mL) 중의 조 화합물 1-03(6.100g) 및 칼륨 tert-부톡사이드(4.520g)의 혼합물을 100℃에서 20min 동안 교반한 다음 300mL EA로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액(20mLx3)으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축한 다음, 칼럼 크로마토그래피(PE/EA=1/5)로 정제하여 화합물 1-04-A(0.705g) 및 조 화합물 1-04-C(1.500g)을 얻었다.
5. 화합물 1-05
오일 배스에서 질소하에 DMSO(5mL) 중의 조 화합물 1-04-C(0.200g), 비스(피나콜레이토)디보론(0.270g), 트리사이클로헥실 포스핀(0.039g) 및 팔라듐 아세테이트(0.031g)의 혼합물을 90℃에서 1h 동안 교반했다. 얻어진 혼합물을 EA(50mL)로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액(20mLx3)으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고, 감압하에 농축하여 조 화합물 1-05(0.398g)을 얻었다.
6. 화합물 2-01
1,4-디옥산(10mL)과 물(1mL) 중의 조 화합물 1-05(0.398g), 2,4-디클로로피리미딘(0.304g), K2CO3(0.502g) 및 Pd(dppf)Cl2·DCM(0.050g)의 혼합물을 오일 배스에서 질소하에 60℃에서 80min 동안 교반했다. 얻어진 혼합물에 물(10mL)을 첨가한 다음 EA(20mLx2)로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액(20mLx1)으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축한 다음, 칼럼 크로마토그래피(PE/EA=1/1)로 정제하여 화합물 2-01(0.165g)을 얻었다.
7. 화합물 2
오일 배스에서 질소하에 1,4-디옥산(2mL) 중의 화합물 2-01(0.030g), 중간체 M5(0.025g), Cs2CO3(0.067g), Xanphos(0.005g) 및 Pd2(dba)3(0.005g)의 혼합물을 110℃에서 3.5hr 동안 교반했다. 얻어진 혼합물에 용매 혼합물(DCM/MeOH=10/1) 20mL를 첨가한 다음 여과하고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=8/1)로 정제하고, 수득한 고체를 1,4-디옥산(5mL)로 세척하여 화합물 2(0.024g)를 얻었다.
MS(ES+): m/z=519.3(M+H)+.
H-NMR(CDCl3): δ 8.587 (s, 1H, NH), 8.448-8.457 (d, 1H, CH), 8.383-8.405 (d, 1H, CH), 8.280-8.286 (d, 1H, CH), 8.009-8.013 (d, 1H, CH), 7.804-7.837 (dd, 1H, CH), 7.686-7.714 (dd, 1H, CH), 4.681-4.728 (m, 1H, CH), 3.532 (s, 2H, CH2), 3.189-3.256 (m, 1H, CH2), 3.008-3.091 (m, 1H, CH2), 2.654 (s, 8H, CH2), 2.571-2.608 (m, 2H, CH2), 2.226-2.299 (m, 1H, CH2), 2.111-2.15 (m, 1H, CH2), 2.012-2.053 (m, 2H, CH2), 1.596-1.612 (d, 3H, CH3), 1.174-1.210 (t, 3H, CH3).
실시예 2-1: 화합물 2-01의 키랄 분리
이 구체예에서, 실시예 2의 조 화합물 2-01을 아래의 조건하에 키랄 칼럼에서 직접 정제하여 화합물 2-01-A 및 화합물 2-01-B를 얻었다.
키랄 HPLC 조건:
Figure pct00031
실시예 2-2: 화합물 2a 및 화합물 2b의 합성
조 화합물 2-01을 상기 조건하에 키랄 칼럼에 의해 정제하여 화합물 2-01-A 및 화합물 2-01-B를 얻는다.
화합물 2-01-A 및 화합물 2-01-B를 각각 사용하여 실시예 2의 단계 7에 대해 설명된 대로 화합물 2a 및 화합물 2b를 제조한다.
또한, Rudolf 편광계에서 아래 나타낸 대로 각 화합물에 대해 광학 회전을 3번 측정했다.
조건:
Figure pct00032
결과:
Figure pct00033
상응하는 중간체를 사용하여 실시예 2에서 설명된 대로 아래의 실시예(표 8에 제시)를 제조한다. 여기서 각 화합물의 2개의 거울상이성질체가 키랄 칼럼에서 분리되며, 이들의 광학 회전을 본질적으로 실시예 2-2에서 설명된 대로 각각 시험한다.
실시예 No. 화학명 구조 물리 데이터(MS)(M+H)+ 거울상이성질체
(광학 회전)
1 4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00034
 473.2 1a(+)
1b(-)
2 N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00035
 519.3 2a(+)
2b(-)
3 5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00036
 491.2 3a(+)
3b(-)
4 5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(6-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-3-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00037
 505.3 4a(+)
4b(-)
5 5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(5-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리미딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00038
 506.3 5a(+)
5b(-)
6 N-(5-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00039
 534.3 6a(+)
6b(-)
7 N-(5-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00040
 533.3 7a(+)
7b(-)
8 N-(5-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00041
 519.3 8a(+)
8b(-)
9 (2-((5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-일)아미노)피리미딘-5-일)(4-메틸피페라진-1-일)메탄온
Figure pct00042
 520.2 9a(+)
9b(-)
10 (6-((5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)(4-메틸피페라진-1-일)메탄온
Figure pct00043
 519.2 10a(+)
10b(-)
11 N5-(2-(디에틸아미노)에틸)-N2-(5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-일)-N5-메틸피리딘-2,5-디아민
Figure pct00044
 521.3 11a(+)
11b(-)
12 N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4,4a,5-헥사하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-아민
Figure pct00045
 571.3 12a(+)
12b(-)
13 N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4,4a,5-헥사하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-5-메틸피리미딘-2-아민
Figure pct00046
 517.3 13a(+)
13b(-)
14 5-클로로-N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00047
 535.2 14a(+)
14b(-)
실시예 15: 화합물 15b의 합성
Figure pct00048
1. 화합물 15-01
메틸벤젠(20mL) 중의 5-메틸몰폴린-3-온(0.200g)의 (-) 거울상이성질체와 4-브로모-2,6-디플루오로아닐린(0.210g)의 혼합물에 POCl3(0.510g)를 첨가하고 오일 배스에서 가열했다. 온도가 110℃로 상승했을 때 TEA(0.210g)를 첨가하고, 얻어진 혼합물을 40min동안 110℃에서 반응시켰다. 메틸벤젠의 일부를 제거하고 물(10mL)을 첨가한 후 Na2CO3으로 pH를 8~9로 조정했다. 이어서, EA(20mLx2)로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl(20mLx1) 용액으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고, 농축하여 화합물 15-01(0.280g)을 얻었다.
2. 화합물 15-02
DMF(5mL) 중의 화합물 15-01(0.275g)의 혼합물에 칼륨 t-부톡사이드(0.482g)를 첨가한 다음 오일 배스에서 70℃에서 30min 동안 교반했다. 얻어진 혼합물을 EA(20mLx3)로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액(30mLx4)으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축하고, 칼럼 크로마토그래피(PE/EA=5/1)로 정제하여 화합물 15-02(0.260g)을 얻었다.
3. 화합물 15-03
DMSO(6mL) 중의 화합물 15-02(0.260g), 비스(피나콜레이토)디보론(0.320g), 트리사이클로헥실 포스핀(0.050g) 및 팔라듐 아세테이트(0.040g)의 혼합물을 오일 배스에서 90℃에서 50min 동안 질소 하에 교반했다. 얻어진 혼합물을 EA(20mLx2)로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액(10mLx3)으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고, 농축하여 화합물 15-03(0.258g)을 얻었다.
4. 화합물 15-04
1,4-디옥산(10mL) 중의 화합물 15-03(0.120g), 2,4-디클로로-5-플루오로피리미딘(0.060g), K2CO3(0.099g) 및 Pd(dppf)Cl2·DCM(0.012g)의 혼합물을 60℃의 오일배스에서 1h 동안 질소 하에 교반했다. 얻어진 혼합물을 EA(20mLx2)로 추출하고, 조합된 유기상을 포화 NaCl 용액(20mLx1)으로 세척하고 무수 Na2SO4에서 건조시키고 농축한 다음, 예비 HPLC(DCM/MeOH=30/1)로 정제하여 화합물 15-04의 (-) 거울상이성질체(0.052g)을 얻었다.
5. 화합물 15b
1,4-디옥산(2mL) 중의 화합물 15-04의 (-) 거울상이성질체(20mg), 중간체 M1 (0.017g), Cs2CO3(0.056g), Xanphos(0.005g) 및 Pd2(dba)3(0.005g)을 질소 스트림을 통해서 5hr 동안 110℃에서 마이크로파하에 반응시켰다. 얻어진 혼합물에 혼합 용매(DCM/MeOH=10/1) 20mL 를 첨가하고, 여과하여 여과액을 수집한 다음 농축하고, 예비 HPLC(DCM/MeOH=20/1)로 정제하고, 얻어진 고체를 n-헥산(10mL)으로 세척하여 화합물 15b(0.014g)을 얻었다.
MS(ES+): m/z=493.2(M+H)+.
H-NMR(CDCl3): δ 8.409-8.418 (d, 1H, CH), 8.211-8.288 (m, 2H, CH), 8.070-8.077 (d, 1H, CH), 8.019-8.023 (d, 1H, CH), 7.833-7.868(m, 1H, CH), 5.118-5.158 (d, 1H, CH2), 4.912-5.002 (d, 1H, CH2), 4.522-4.584 (m, 1H, CH), 4.111-4.168 (m, 1H, CH2), 4.039-4.075 (m, 1H, CH2), 3.249-3.275 (m, 4H, CH2), 2.724-2.748 (m, 4H, CH2), 2.462 (s, 3H, CH3), 1.662-1.678 (d, 3H, CH3).
실시예 15-1: 화합물 15a 및 화합물 15의 합성
화합물 15a 및 화합물 15b는 거울상이성질체이다. 출발 물질로서 5-메틸몰폴린-3-온의 (+) 거울상이성질체를 사용하여 실시예 15에서 설명된 대로 화합물 15a를 제조한다.
다른 구체예에서, 조 5-메틸몰폴린-3-온이 출발 물질로서 사용된다. 화합물 15a 및 화합물 15b를 포함하는 조 화합물 15가 최종적으로 얻어진다.
또한, Rudolf 편광계에서 아래 나타낸 대로 각 화합물에 대해 광학 회전을 3번 측정했다.
조건:
Figure pct00049
결과:
Figure pct00050
상응하는 중간체를 사용하고, 출발 물질로서 5-메틸몰폴린-3-온의 (+) 및/또는 (-) 거울상이성질체를 사용하여 실시예 15에서 설명된 대로 아래의 실시예(표 9에 제시)를 제조한다. 이들의 광학 회전을 실시예 15-1에서 설명된 대로 시험한다.
실시예 No. 화학명 구조 물리 데이터(MS) (M+H)+ 거울상이성질체(광학 회전)
15 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00051
 493.2 15a(+)
15b(-)
16 N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00052
 521.3 16a(+)
16b(-)
17 N-(5-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00053
 521.3 17a(+)
17b(-)
18 N-(5-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00054
 535.3 18a(+)
18b(-)
19 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00055
 479.2 19a(+)
19b(-)
20 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-(피페라진-1-일메틸)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00056
 493.2 20a(+)
20b(-)
21 N-(5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)-6-(4-메틸피페라진-1-일)피리다진-3-아민
Figure pct00057
 494.2 21a(+)
21b(-)
22 6-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)-N-(5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)피리다진-3-아민
Figure pct00058
 522.2 22a(+)
22b(-)
23 (1-(6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)피롤리딘-3-일)메탄올
Figure pct00059
 494.2 23a(+)
23b(-)
24 (1-((6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)메틸)피롤리딘-3-일)메탄올
Figure pct00060
 508.2 24a(+)
24b(-)
25 N-(5-(4-사이클로프로필피페라진-1-일)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00061
 519.2 25a(+)
25b(-)
26 N-(5-((4-사이클로프로필피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00062
 533.3 26a(+)
26b(-)
27 2-((1-((6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)메틸)피페리딘-4-일)(메틸)아미노)에탄-1-ol
Figure pct00063
 565.3 27a(+)
27b(-)
28 1-(6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)-3-메틸피롤리딘-3-ol
Figure pct00064
 494.2 28a(+)
28b(-)
29 1-((6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)메틸)-3-메틸피롤리딘-3-ol
Figure pct00065
 508.2 29a(+)
29b(-)
30 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-((4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00066
 549.2 30a(+)
30b(-)
31 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00067
 535.2 31a(+)
31b(-)
32 N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피라진-7-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00068
 520.3 32a(+)
32b(-)
33 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-((4'-메틸-[1,1'-바이피페라진]-4-일)메틸)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00069
 591.3 33a(+)
33b(-)
34 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-((4-(1-메틸피페리딘-4-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00070
 590.3 34a(+)
34b(-)
비교예
상응하는 중간체 또는 출발 물질을 사용하여 실시예 1, 2 또는 15에서 설명된 대로 다음의 비교예를 제조한다. 예를 들어,
Figure pct00071
대신
Figure pct00072
를 사용하여 실시예 2에서 설명된 대로 아래의 비교예 8, 9 및 10(표 10에 제시)을 제조한다. 그리고,
Figure pct00073
대신
Figure pct00074
를 사용하여 실시예 1에서 설명된 대로 아래의 비교예 7을 제조한다.
비교예 No. 화학명 구조 물리 데이터(MS)(M+H)+
1 5-플루오로-4-(6-플루오로-3,4-디하이드로-2H-스피로[벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-1,1'-사이클로프로판]-8-일)-N-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00075
 503.2
2 5-플루오로-4-(6-플루오로-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00076
 476.2
3b (R)-N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-이소프로필-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00077
 548.3
4b (R)-4-(4-에틸-9-플루오로-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로피리미딘-2-아민
Figure pct00078
 534.3
5 5-플루오로-4-(6-플루오로-1,1-di메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00079
 546.3
6 5-플루오로-4-(6-플루오로-1,1-di메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(5-(피페라진-1-일메틸)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00080
 504.3
7 4-(6-플루오로-4-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00081
 473.3
8 N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-2-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00082
 519.3
9 N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-3-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00083
 519.3
10 N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-4-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민
Figure pct00084
 519.3
상기 표에서, 비교예 3b 및 4b는 실시예 15에서 설명된 대로 합성한 다음, 실시예 15-1에서 설명된 대로 광학 회전에 대해 각각 시험한다. 비교예 3b 및 4b는 둘 다 음의 광학 회전을 나타낸다.
제약학적 시험
아래의 분석 결과는 본 명세서에 제시된 화합물이 특정한 CDK4/6 저해제 및 항암제로서 유용하다는 것을 증명한다. 본 명세서에서 사용된 "IC50"은 제제에 대해 가능한 최대 저해 반응의 50%를 생성하는 제제의 농도를 말한다.
편리한 예시를 위해 다음의 일반 구조식을 아래 제시한다. 놀랍게도, 우리는 "R"이 생물학적 활성, 선택성 및 안전성에 중요한 영향을 미친다는 것을 발견했다.
Figure pct00085
시험 1: 세포 증식 분석에 의한 상이한 치환체의 비교
시험관내 증식에 대한 시험 화합물의 효과를 MTS 세포 생육성 분석에 의해 측정했다.
세포 배양
사람 결직장암 세포(colo-205)를 배양해서 확장시킨다(colo-205를 12% FBS, 1% P/S 및 1% L-글루타민를 가진 DMEM 배지에서 성장시킨다).
MTS 세포 생육성 분석:
1. 96-웰 플레이트의 웰 당 4 x 103 세포의 밀도로 세포를 파종하고 24h 성장시킨다.
2. 세포에 다양한 농도의 시험 화합물을 첨가한다.
3. 7일 동안 노출하여 인큐베이션한다.
4. 세포 증식 분석 키트(Promega)의 설명서에 따라 시약을 준비한다.
5. 최종 부피 100㎕/웰의 혈청-무함유 배지로 교환한다. 바탕값 차감을 위해 단지 배지만을 가진 일련의 웰을 준비한다.
6. 각 웰에 PMS를 함유하는 20㎕ MTS 용액을 첨가한다(MTS의 최종 농도는 0.33mg/mL이다).
7. 가습된, 5% CO2 분위기에서 37℃에서 1 내지 4h 인큐베이션한다;
8. VICTOR™ x 5 플레이트 리더(PerkinElmer)를 사용하여 490nm에서 흡광도를 기록한다.
모든 실험 포인트는 3개 웰에서 설정했고 모든 실험은 적어도 3회 반복했다. 소프트웨어를 사용하여 용량-반응 곡선으로부터 IC50 값을 계산하고, 결과를 표 11에 나타낸다.
샘플 IC50（colo-205)/μM
LY2835219 0.136
실시예 1 0.078
실시예 2 0.053
비교예 1 6.644
비교예 2 8.897
상기 예시된 화합물은 표 11에 나타낸 대로 이 모델에서 항종양 활성을 나타내며, 따라서 본 발명의 예시된 화합물이 Rb+ 종양에 대해 더 효능 있는 생체내 활성을 가진다는 것이 증명된다. 공지된 화합물 LY2835219(아베마시클립)과 비교하여, 본 발명의 화합물, 예를 들어 실시예 1 또는 2의 화합물은 Rb+ 종양에 대해 더 효능 있는 저해를 나타낸다. 비교예 1(R은 스피로) 및 비교예 2(R은 H)와 비교하여, 본 발명의 화합물, 예를 들어 실시예 1 또는 2의 화합물(R은 메틸)은 Rb+ 종양에 대해 훨씬 더 효능 있는 저해를 나타낸다.
또한, 상기 예시된 화합물과 관련하여 R이 메틸이고 H나 스피로가 아닌 것이 이 모델에서 훨씬 더 효능 있는 생물학적 활성을 가진다는 것을 나타낸다. 상기 결과로부터, 치환체의 종류가 Rb+ 종양의 저해에 대해 중요한 영향을 미친다는 것을 알 수 있다.
시험 2: 안전성 시험에 의한 상이한 치환체의 비교
상기 설명된 대로 제조된 화합물을 체중 변화 및 사망률 발생 여부에 따라서 안전성에 대해 평가했으며, 그 과정을 설명한다. 시험 화합물을 적절한 부형제 중에 제조하여 경구 위관 영양에 의해 BALB/c 마우스(22-23g)에 투여한다. 체중 및 사망률은 일반 독성 측정으로서 취급된다. 치료 과정 동안 치료군과 부형제 대조군을 비교함으로써 매주 2번 체중 손실(체중 변화 %)을 계산한다. 화합물 2 및 16은 200mg/kg(qd)의 용량이었을 때 이들 모델에서 체중 손실을 거의 나타내지 않는다. 그러나, 동일한 용량에서, 비교예, 예를 들어 비교예 3b 및 비교예 4b는 훨씬 더 많은 체중 손실을 야기할 수 있고, 심지어 높은 사망률을 야기할 수 있는데, 2주 동안 치료한 후 각 그룹(6마리 마우스)에서 4 및 5마리의 마우스가 사망했다.
이 결과는 표 12에 제시되었다. "*"는 "5% 미만의 체중 손실"을 나타내고, "**"는 "5% 초과 10% 미만의 체중 손실"을 나타내며, "***"는 "10% 초과 30% 미만의 체중 손실을 나타내며, "****"는 "30% 초과의 체중 손실을 나타낸다. "+"는 "사망률 발생"을 나타내고, "-"는 "사망률 미발생"을 나타낸다.
샘플 체중 관찰
LY2835219 * -
실시예 2b * -
실시예 16b * -
비교예 3b *** +
비교예 4b *** +
놀랍게도, 비교예 3b(R은 이소프로필) 또는 비교예 4b(R은 에틸)는 더 많은 부작용 및 독성을 갖는 것으로 밝혀졌다. 그러나, 본 발명의 예시된 화합물, 예를 들어 화합물 2b 또는 16b(R은 메틸)는 훨씬 더 안전하다. 따라서, 치환체의 종류가 안전성에 중요한 영향을 미친다는 것이 증명된다.
시험 3: CDK 키나아제 분석에 의한 치환체 수의 효과
화합물이 CDK 키나아제들(CDK2/CycA2, CDK4/CycD3, CDK6/cycD3)에 대해 친화성을 나타낸다는 것을 증명하기 위해 CDK 키나아제 분석을 수행했다.
반응 버퍼를 다음과 같이 제조했다: CDK2, 6에 대한 키나아제 베이스 버퍼(50mM HEPES, pH 7.5; 0.0015% Brij-35; 10mM MgCl2; 2mM DTT); CDK4에 대한 키나아제 베이스 버퍼(20mM HEPES, pH 7.5; 0.01% 트리톤 X-100; 10mM MgCl2; 2mM DTT); 중단 버퍼(100mM HEPES, pH 7.5; 0.015% Brij-35; 0.2% 코팅 시약 #3; 50mM EDTA).
효소 반응 프로토콜:
1) 100% DMSO에 의한 반응에서 최종적으로 원하는 최고 농도의 50x로 화합물을 희석한다. 이 화합물의 희석액 100㎕를 96-웰 플레이트의 웰에 넣는다. 이어서, 총 10개의 농도로 100% DMSO 30㎕ 내지 60㎕를 이웃하는 웰 등에 넣어서 화합물을 연속 희석한다. 동일한 96-웰 플레이트에서 화합물 없는 대조군 및 효소 없는 대조군을 위해 2개의 빈 웰에 100% DMSO 100㎕를 가한다. 이 플레이트를 소스 플레이트로 표시한다.
2) 소스 플레이트로부터 화합물 10㎕를 중간 플레이트로서 키나아제 버퍼 90㎕를 함유하는 새로운 96-웰 플레이트로 옮겨서 중간 플레이트를 제조한다.
3) 96-웰 중간 플레이트로부터 화합물 5㎕를 348-웰 플레이트로 옮겨 복제물을 만든다.
4) 348-웰 분석 플레이트의 각 웰에 2.5x 효소 용액 10㎕를 가한다.
5) 10min 동안 실온에서 인큐베이션한다.
6) 키나아제 베이스 버퍼 중의 FAM-표지된 펩타이드 및 ATP를 첨가함으로써 제조된 2.5x 기질 용액 10㎕를 가한다. 효소 및 기질에 대한 반응 농도는 다음의 표와 같다(표 13):
효소 효소(nM) ATP(μM) 펩타이드 펩타이드 농도(μM)
CDK2 10 30 P18 3
CDK4 10 280 P8 3
CDK6 15 800 P8 3
7) 명시된 시간 동안 28℃에서 인큐베이션한다.
8) 중단 버퍼를 25㎕를 첨가하여 반응을 중단시킨다.
9) 캘리퍼로 데이터를 수집한다. 이어서, 전환 값을 저해 값으로 전환한다.
저해 퍼센트 = (최대-전환)/(최대-최소) x 100
"최대"는 DMSO 대조군을 나타내고, "최소"는 낮은 대조군을 나타낸다.
10) XLFit 엑셀 애드-인 버전 4.3.1에서 저해 퍼센트를 사용하여 커브 핏팅해서 IC50 값을 얻는다. 사용된 식은 Y = Bottom + (Top-Bottom) / (1+(IC50/X) ^ HillSlope)이다. 여기서 Y는 저해 퍼센트(%)이고, X는 시험 화합물의 농도이다.
결과는 IC50 값으로 표시되며 표 14에 제시된다.
샘플 IC50(CDK2)/μM IC50(CDK4)/μM IC50(CDK6)/μM
LY2835219 0.039 0.002 0.022
실시예 1 >0.3 0.002 0.023
실시예 2 >0.3 0.002 0.031
실시예 16b >0.3 0.003 0.040
비교예 5 0.040 0.003 0.017
비교예 6 0.040 0.007 0.014
상기 표에 나타낸 대로, 메틸의 수가 선택성에 매우 중요한 영향을 미친다는 것을 알 수 있다. 놀랍게도, 본 발명의 예시된 화합물은 표 14에 나타낸 대로 상기 CDK2 키나아제 저해 분석에서 >0.3μM의 IC50을 나타내고, 상기 CDK4/6 키나아제 저해 분석에서는 ≤0.04μM의 IC50을 나타낸다. 이것은 본 발명의 예시된 화합물이 CDK4/6 키나아제 활성의 더 선택적인 저해제인 것을 증명한다. 따라서, 예시된 화합물은 공지된 화합물 LY2835219 및 비교예, 예를 들어 비교예 5 또는 비교예 6(R은 2개의 메틸)과 비교하여, CDK4/6의 더 특이적 저해제인 것을 보여준다.
시험 4: 치환체 자리의 효과
상기 설명된 대로 제조된 화합물을 생물학적 과정에 따라서 분석했다. 결과는 아래 표에 나타냈다.
샘플 구조 IC50(CDK4)/μM IC50(CDK6)/μM
실시예 1
Figure pct00086
 0.002 0.023
비교예 7
Figure pct00087
 0.057 0.110
또한, 실시예 2와 비교예 8, 9 또는 10의 직접 대면 비교를 아래의 표에 나타냈다. 이 결과는 표 16에 제시된다. "++++"는 "0.2μM 미만의 IC50 값"을 나타내고, "+++"는 "0.2μM 초과 1.0μM 미만의 IC50 값"을 표시하고, "++"는 "1.0μM 초과 2.0μM 미만의 IC50 값"을 표시하고, "+"는 "2.0μM 초과의 IC50 값"을 표시한다.
샘플 구조 IC50(colo-205)/μM
실시예 2
Figure pct00088
 ++++
비교예 8
Figure pct00089
 ++
비교예 9
Figure pct00090
 ++
비교예 10
Figure pct00091
 ++
상기 표 15 및 16에 나타낸 대로, 치환체 자리가 또한 생물학적 활성에 중요한 역할을 한다는 것을 알 수 있다. 치환체의 자리 변화로 인한 생물학적 활성에 대한 효과는 상당히 예상 외이다. 상기 제시된 결과에 나타낸 대로, 6-원 헤테로환 고리의 "R"은 생물학적 활성, 선택성 및 안전성에 결정적인 영향을 미친다는 것을 알 수 있다. 놀랍게도, 상기 6-원 헤테로환 고리에 하나이며 유일한 것인 메틸이 있을 때 적어도 다음과 같은 효과가 얻어진다:
① 개선된 생물학적 활성;
② 양호한 선택성; 및
③ 적은 부작용.
시험 5: 광학성의 효과
상기 설명된 대로 제조된 화합물을 시험 3(CDK 키나아제 분석)에서 설명된 생물학적 과정에 따라서 분석했다. 그 결과를 아래 표에 나타냈다.
실시예 IC50(CDK4)/nM IC50(CDK6)/nM 실시예 IC50(CDK4)/nM IC50(CDK6)/nM
LY2835219 2 22
화합물 1a 3.0 121 화합물 1b 1.7 23
화합물 2a 4.1 108 화합물 2b 1.9 22
화합물 15a 6.7 230 화합물 15b 1.8 23
화합물 16a 17.6 >300 화합물 16b 3.4 45
상기 표에 나타낸 대로, 화합물 1b, 2b, 15b, 16b는 각각 CDK4/6를 억제하는데 있어서 화합물 1a, 2a, 15a, 16a보다 더 효능 있는 것을 알 수 있으며, 따라서 본 발명의 화합물의 (-) 거울상이성질체가 (+) 거울상이성질체에 비해 유익하다는 것이 증명된다.
일부 예에서, 하나의 거울상이성질체[예를 들어, (-) 거울상이성질체 또는 (+) 거울상이성질체]가 과량으로 존재하는 본 명세서에 개시된 화합물이 투여된다. 하나의 예에서, 음의 광학 회전, 예를 들어 -35.394°(c= 3.0 mg/mL, EtOH)를 가진 거울상이성질체(화합물 1b)는 양의 광학 회전, 예를 들어 +30.325°(c= 3.0mg/mL, EtOH)를 가진 거울상이성질체(화합물 1a)보다 CDK4/6 효소에 대해 더 큰 활성을 가진다. 다른 예에서, 음의 광학 회전, 예를 들어 -32.036°(c= 4.0 mg/mL, DMC)를 가진 거울상이성질체(화합물 2b)는 양의 광학 회전, 예를 들어 +38.088°(c= 4.0mg/mL, DMC)를 가진 거울상이성질체(화합물 2a)보다 CDK4/6 효소에 대해 더 큰 활성을 가진다. 다른 예에서, 음의 광학 회전, 예를 들어 -28.929°(c= 4.6mg/mL, DCM/MeOH = 1:1)를 가진 거울상이성질체(화합물 15b)는 양의 광학 회전, 예를 들어 +32.829°(c= 4.6mg/mL, DCM/MeOH = 1:1)를 가진 거울상이성질체(화합물 15a)보다 CDK4/6 효소에 대해 더 큰 활성을 가진다.
시험 6: 분자 수준에서의 CDK 키나아제의 다른 아형들에 대한 저해 활성 및 선택성 시험
본 발명의 대표적인 화합물 2b를 시험 화합물로서 사용했고, 양성 대조군 약물 LY2835219(아베마시클립)과 비교하여 이들 사이의 CDK 키나아제 저해 활성 및 선택 특이성을 비교했다.
이 방법의 메커니즘은 식 (II)에 제시된다. 이 반응 시스템에서 키나아제는 단백질 기질의 인산화를 촉매하여 단백질 기질에 33P-표지된 ATP(γ-33P-ATP)의 33P를 표지한다. 반응 시스템을 P81 이온-교환 막에 스폿팅하고 막을 0.75% 포스페이트 버퍼로 광범하게 세척했다. 방사성 활성-인산화 기질을 막 위에 두고, 기질 단백질 방사성 표지의 강도를 기록하여 키나아제 활성을 반영했다.
기질 + [γ-33P]-ATP 효소 33P-기질+ADP
------->
식 (II)
데이터를 Prism 4 소프트웨어(GraphPad)로 처리했으며, 커브 핏팅 식은 아래와 같았다:
Y = Bottom + (Top-Bottom) / (1 + 10 ^ ((LogIC50-X) * HillSlope)).
여기서 Y는 저해 퍼센트(%)이고, X는 저해제 농도의 로그이다.
결과: 다양한 CDK 키나아제의 스크리닝을 통해서 대표적인 화합물 2, 2a 및 2b가 CDK1/2/7/9를 억제하는데 있어서 0.4μM를 초과하는 IC50을 가진다는 것이 밝혀졌으며, 이것은 CDK4/6에 대한 것보다 10 내지 1000배 더 높은 값이다(표 18 참조).
CDK 키나아제 저해 활성
키나아제 IC50(nM)
LY2835219 화합물 2 화합물 2a 화합물 2b
CDK1/사이클린 B 308 2350 3573 1683
CDK2/사이클린 E 90 474 596 441
CDK7/사이클린 H 2071 1050 2370 664
CDK9/사이클린 T1 111 572 779 649
결론: 분자 수준에서, 본 발명의 대표적인 화합물 2 및 화합물 2b는 CDK4/6에 대해 강한 저해 효과 및 CDK1/2/7/9에 대해 약한 저해 효과를 나타냈으며, 이것은 화합물 2 및 화합물 2b가 뛰어난 선택성을 가진 CDK4/6 키나아제 저해제임을 시시한다. 화합물 2a는 CDK4에 대해 강한 저해 효과, CDK6에 대해 약한 저해 효과 및 CDK1/2/7/9에 대해 매우 약한 저해 효과를 나타냈으며, 이것은 화합물 2a가 매우 우수한 선택성을 가진 CDK4 키나아제 저해재이며 양호한 선택성을 가진 CDK6 키나아제 저해제임을 시사한다. 또한, CDK1/2/9와 CDK4/6에 대한 본 발명의 대표적인 화합물의 선택성은 LY2835219(아베마시클립)보다 유의하게 더 높았다.
시험 7: JeKo-1 이종이식편 동물 모델에 대한 종양 퇴행 효과
JeKo-1 세포를 20% 태아 소 혈청을 함유하는 RPMI 1640 배지에서 배양했다. 지수 성장한 JeKo-1 세포를 수집하고, NOD/SCID 마우스 피하 종양 접종을 위해 적합한 농도로 PBS에 재현탁했다. 70마리의 암컷 마우스에 PBS와 매트리겔(1:1)에 재현탁된, 5Х106 JeKo-1 세포를 우측에 피하 접종했다. 평균 종양 부피가 134mm3가 되었을 때 종양 크기에 따라서 마우스를 무작위로 그룹화하고 투여했다. 48마리의 마우스를 실험 그룹으로 나누었고, 나머지 22마리의 마우스는 실험에 사용하지 않았다. 종양 부피는 '장경 x 단경2/2'로 계산한다. 시험은 용매 대조군, 시험 약물 대표 화합물 2b(10mg/kg), 시험 약물 대표 화합물 2b(25mg/kg), 시험 약물 대표 화합물 2b(50mg/kg) 및 시험 약물 대표 화합물 2b(100mg/kg)으로 나누었고, 각 8마리씩 총 6개 그룹으로 나누었으며, 마우스에 하루 한 번 위관 영양에 의해 경구 투여했고 이후 19일 동안 연속 투여했다. TGI의 상대적 종양 성장 저해율에 따라서 효능을 평가한다.
계산 식은 다음과 같다: TGI(%) = (C-T)/C x 100%(C 및 T는 각각 용매 대조군의 평균 종양 중량 및 치료군의 평균 종양 중량이다). TGI(%) 값이 높을수록 효능은 더 좋은 것이며, 반대로 그 값이 낮을수록 효능은 좋지 않은 것임을 나타낸다.
결과: 화합물 2b는 뛰어난 항종양 활성을 나타낸다.
JeKo-1 이종이식편 모델에 대한 대표 화합물 2b의 항종양 효능 평가
그룹 용량(mg/kg) 상대적 종양 성장 저해율 (TGI(%)) p 값a
용매 대조군 -- -- --
화합물 2b 10 42.7 0.087
화합물 2b 25 73.8 0.003
화합물 2b 50 98.3 0.001
화합물 2b 100 104.5 0.001
a: p 값은 치료군 및 용매 대조군에 대한 종양 부피의 비교 분석이다.
따라서, 일부 예에서, 질환을 치료하기 위해 음의 광학 회전을 가진 거울상이성질체를 과량으로 가진 본 발명의 화합물 1, 2 또는 15를 투여하는 것이 유익하다. 제한은 아니지만 화합물 1b, 2b 또는 15b를 포함하는, 본 발명의 광학적으로 순수한 (-) 거울상이성질체가 대상의 CDK4/6에 의해 매개되는 질환을 치료하는데 더 효능 있는 약물이었다.
본 발명의 많은 구체예가 설명되었다. 그러나, 본 발명의 정신 및 범위를 벗어나지 않고 다양한 변형이 이루어질 수 있다. 다른 구체예들은 청구항에 제시된다.

Claims (41)

  1. 식 I의 화합물 또는 그것의 입체이성질체, 호변체, 다형체, 용매화합물, 제약학적으로 허용되는 염 또는 전구약물.
    Figure pct00092

    (식 I)
    상기 식에서,
    고리 A는 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Z는 CH2, NH, O 및 S로 구성되는 군으로부터 선택되고;
    R1은 독립적으로 수소, 할로겐, CN, NO2, OH, NH2, C1- 8알킬, C1- 8알콕시, C3- 8사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-(CH2)m-, 아릴-C1-6알킬-, 헤테로아릴-C1- 6알킬-, -NR12R13, -NR12-C1- 6알킬렌-NR12R13 및 헤테로사이클릴-C(O)-로 구성되는 군으로부터 선택되며, 여기서 C1- 8알킬, C1- 8알콕시, C3- 8사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-(CH2)m-, 아릴-C1- 6알킬-, 헤테로아릴-C1-6알킬- 또는 헤테로사이클릴-C(O)-는 각각 치환되지 않거나 또는 할로겐, 하이드록실, C1- 8알킬, C3- 8사이클로알킬, 헤테로사이클릴, -NR12R13 또는 -(CH2)t-OH로부터 선택된 적어도 하나의 치환체로 치환되고;
    R2 및 R3은 각각 독립적으로 H, OH, CN, NO2, NH2, 할로겐, C1-8알킬, C1- 8알콕시, C3- 8사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴로부터 선택되며, 여기서 C1- 8알킬, C1- 8알콕시, C3- 8사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴은 각각 치환되지 않거나 또는 할로겐, 하이드록실, C1- 8알킬, C3- 8사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴로부터 선택된 적어도 하나의 치환체로 치환되고;
    R12 및 R13은 각각 독립적으로 H, C1- 8알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴 또는 C3- 8사이클로알킬로부터 선택되며, 여기서 C1- 8알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클릴 또는 C3- 8사이클로알킬은 각각 치환되지 않거나 또는 할로겐, 하이드록실, C1- 8알킬, C3- 8사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴로부터 선택된 적어도 하나의 치환체로 치환되고;
    m은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    t는 0, 1, 2, 3 또는 4이다.
  2. 제 1 항에 있어서, Z는 CH2인 것을 특징으로 하는 화합물.
  3. 제 1 항에 있어서, Z는 O인 것을 특징으로 하는 화합물.
  4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 고리 A는 N의 하나 또는 2개의 헤테로 원자를 포함하는 6-원 헤테로아릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
  5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 고리 A는 피리딜, 피리미딘일 또는 피리다진일인 것을 특징으로 하는 화합물.
  6. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 고리 A는
    Figure pct00093
    또는
    Figure pct00094

    인 것을 특징으로 하는 화합물.
  7. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 헤테로사이클릴-(CH2)m-, 또는 C1- 8알킬, NR12R13, 4 내지 6-원 헤테로사이클릴, C3- 6사이클로알킬 또는 (CH2)t-OH로 치환된 헤테로사이클릴-(CH2)m-인 것을 특징으로 하는 화합물.
  8. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 5 내지 6-원 헤테로사이클릴-CH2-, 또는 C1- 3알킬, -N(CH3)2, -N(CH2CH2OH)CH3,
    Figure pct00095
    ,
    Figure pct00096
    ,
    Figure pct00097
    ,
    Figure pct00098
    , -CH2OH, -CH2CH2OH 또는 OH로 치환된 5 내지 6-원 헤테로사이클릴-CH2-인 것을 특징으로 하는 화합물.
  9. 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 6-원 헤테로사이클릴-CH2-, 또는 메틸 또는 에틸로 치환된 6-원 헤테로사이클릴-CH2-인 것을 특징으로 하는 화합물.
  10. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 헤테로사이클릴, 또는 C1- 8알킬, NR12R13, 4 내지 6-헤테로사이클릴, C3-6사이클로알킬 또는 (CH2)t-OH로 치환된 헤테로사이클릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
  11. 제 1 항 내지 제 6 항 또는 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 5 내지 6-원 헤테로사이클릴, 또는 C1- 3알킬, -N(CH3)2, -N(CH2CH2OH)CH3,
    Figure pct00099
    ,
    Figure pct00100
    ,
    Figure pct00101
    ,
    Figure pct00102
    , -CH2OH, -CH2CH2OH 또는 OH로 치환된 5 내지 6-원 헤테로사이클릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
  12. 제 1 항 내지 제 6 항, 제 10 항 또는 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 6-원 헤테로사이클릴, 또는 메틸 또는 에틸로 치환된 6-원 헤테로사이클릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
  13. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 6-원 헤테로사이클릴-C(O)- 또는 C1- 3알킬로 치환된 6-원 헤테로사이클릴-C(O)-인 것을 특징으로 하는 화합물.
  14. 제 1 항 내지 제 6 항 또는 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 메틸로 치환된 6-원 헤테로사이클릴-C(O)-인 것을 특징으로 하는 화합물.
  15. 제 1 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항에 있어서, 헤테로사이클릴은 고리 원자로서 N 또는 O의 하나 또는 2개의 헤테로 원자를 포함하는 것을 특징으로 하는 화합물.
  16. 제 1 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항에 있어서, 헤테로사이클릴은 고리 원자로서 N의 하나 또는 2개의 헤테로 원자를 포함하는 것을 특징으로 하는 화합물.
  17. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 -NR12-C1- 3알킬렌-NR12R13인 것을 특징으로 하는 화합물.
  18. 제 1 항 내지 제 17 항 중 어느 한 항에 있어서, R12 및 R13은 각각 독립적으로 H, (CH2)t-OH 또는 C1- 3알킬인 것을 특징으로 하는 화합물.
  19. 제 1 항 내지 제 18 항 중 어느 한 항에 있어서, R12 및 R13은 각각 독립적으로 OH, CH2CH2OH, 메틸 또는 에틸인 것을 특징으로 하는 화합물.
  20. 제 1 항에 있어서, R1은
    Figure pct00103

    또는
    Figure pct00104

    인 것을 특징으로 하는 화합물.
  21. 제 1 항 내지 제 20 항 중 어느 한 항에 있어서, m은 1인 것을 특징으로 하는 화합물.
  22. 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서, n은 1인 것을 특징으로 하는 화합물.
  23. 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서, t는 0, 1 또는 2인 것을 특징으로 하는 화합물.
  24. 제 1 항 내지 제 23 항 중 어느 한 항에 있어서, R2 및 R3은 각각 독립적으로 H, OH, 할로겐, C1- 6알킬, 할로겐으로 치환된 C1- 6알킬, Cl- 6알콕시 또는 할로겐으로 치환된 Cl- 6알콕시인 것을 특징으로 하는 화합물.
  25. 제 1 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 있어서, R2 및 R3은 각각 독립적으로 H, OH, F, Cl, CH3, CH2CH3, CF3, OCH3 또는 OCF3인 것을 특징으로 하는 화합물.
  26. 제 1 항 내지 제 25 항 중 어느 한 항에 있어서, R2 및 R3 은 둘 다 F인 것을 특징으로 하는 화합물.
  27. 제 1 항에 있어서, 화합물은 다음의 화합물인 것을 특징으로 하는 화합물:
    1) 4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민;
    2) N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민;
    3) 5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민;
    4) 5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(6-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-3-일)피리미딘-2-아민;
    5) 5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-N-(5-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리미딘-2-일)피리미딘-2-아민;
    6) N-(5-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민;
    7) N-(5-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민;
    8) N-(5-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민;
    9) (2-((5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-일)아미노)피리미딘-5-일)(4-메틸피페라진-1-일)메탄온;
    10) (6-((5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)(4-메틸피페라진-1-일)메탄온;
    11) N5-(2-(디에틸아미노)에틸)-N2-(5-플루오로-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-일)-N5-메틸피리딘-2,5-디아민;
    12) N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4,4a,5-헥사하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-아민;
    13) N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4,4a,5-헥사하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)-5-메틸피리미딘-2-아민;
    14) 5-클로로-N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-4-(6-플루오로-1-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피리딘-8-일)피리미딘-2-아민;
    15) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민;
    16) N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민；
    17) N-(5-(4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민；
    18) N-(5-((4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민；
    19) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-(피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민；
    20) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-(피페라진-1-일메틸)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민；
    21) N-(5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)-6-(4-메틸피페라진-1-일)피리다진-3-아민；
    22) 6-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)-N-(5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)피리다진-3-아민；
    23) (1-(6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)피롤리딘-3-일)메탄올；
    24) (1-((6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)메틸)피롤리딘-3-일)메탄올；
    25) N-(5-(4-사이클로프로필피페라진-1-일)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민；
    26) N-(5-((4-사이클로프로필피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-아민；
    27) 2-((1-((6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)메틸)피페리딘-4-일)(메틸)아미노)에탄-1-올；
    28) 1-(6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)-3-메틸피롤리딘-3-올；
    29) 1-((6-((5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리미딘-2-일)아미노)피리딘-3-일)메틸)-3-메틸피롤리딘-3-올；
    30) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-((4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민；
    31) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-(4-(옥세탄-3-일)피페라진-1-일)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민；
    32) N-(5-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)-5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[4,5]이미다조[1,2-a]피라진-7-일)피리미딘-2-아민；
    33) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-((4'-메틸-[1,1'-바이피페라진]-4-일)메틸)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민； 또는
    34) 5-플루오로-4-(9-플루오로-4-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[4,5]이미다조[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)-N-(5-((4-(1-메틸피페리딘-4-일)피페라진-1-일)메틸)피리딘-2-일)피리미딘-2-아민.
  28. 제 1 항 내지 제 27 항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물의 (-) 거울상이성질체인 것을 특징으로 하는 화합물.
  29. 제 1 항 내지 제 27 항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물의 (+) 거울상이성질체인 것을 특징으로 하는 화합물.
  30. 치료적 유효량의 제 1 항 내지 제 29 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 및 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 제약학적 조성물.
  31. 제 30 항에 있어서, 상기 부형제에 대한 상기 화합물의 중량비는 약 0.001 내지 약 10의 범위 내인 것을 특징으로 하는 제약학적 조성물.
  32. 의약의 제조를 위한, 제 30 항 또는 제 31 항의 제약학적 조성물 또는 제 1 항 내지 제 29 항 중 어느 한 항의 화합물의 용도.
  33. 제 32 항에 있어서, 의약은 암의 치료 또는 예방을 위해 사용되는 것임을 특징으로 하는 용도.
  34. 제 33 항에 있어서, 암은 결장암, 직장암, 맨틀 세포 림프종, 다발성 골수종, 유방암, 전립선암, 교모세포종, 편평 세포 식도암, 지방육종, T-세포 림프종, 흑색종, 췌장암, 뇌암 또는 폐암인 것을 특징으로 하는 용도.
  35. 제 32 항에 있어서, 의약은 CDK의 저해제로서 사용되는 것임을 특징으로 하는 용도.
  36. 제 35 항에 있어서, 의약은 CDK4 및/또는 CDK6의 저해제로서 사용되는 것임을 특징으로 하는 용도.
  37. 제 1 항 내지 제 29 항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제 30 항 또는 제 31 항의 제약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 대상의 CDK에 의해 매개된 질환을 치료하는 방법.
  38. 제 37 항에 있어서, CDK는 CDK4 및/또는 CDK6을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  39. 제 37 항 또는 제 38 항에 있어서, CDK에 의해 매개된 질환은 암인 것을 특징으로 하는 방법.
  40. 제 39 항에 있어서, 암은 결장암, 직장암, 맨틀 세포 림프종, 다발성 골수종, 유방암, 전립선암, 교모세포종, 편평 세포 식도암, 지방육종, T-세포 림프종, 흑색종, 췌장암, 뇌암 또는 폐암인 것을 특징으로 하는 방법.
  41. 제 37 항 내지 제 40 항 중 어느 한 항에 있어서, 대상은 사람인 것을 특징으로 하는 방법.
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