KR20180100177A - 지방산 치환기를 가진 egf(a) 유사체 - Google Patents
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Abstract
발명은 LDL-R의 EGF(A) 도메인으로부터 유래된 화합물, 특히 야생형 EGF(A) (LDL-R(293-332)) 서열의 펩타이드 유사체 및 적어도 하나의 지방산 기를 포함하는 적어도 하나의 치환기를 포함하는 화합물에 관련된다. 발명은 또한 그것의 제약학적 조성물 및 약으로서의 사용에도 관련된다. 발명의 신규한 EGF(A) 화합물들은 예컨대 콜레스테롤 저하, 이상지질혈증 및 심혈관 질환의 분야에서 치료제로서 유용하다.
Description
본 발명은 EGF(A) 유사체 및 그것의 유도체, 보다 구체적으로는 지방산 치환기를 가진 EGF(A) 펩타이드 유사체, 및 그것의 제약학적 사용에 관한 것이다.
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높은 LDL-C (저밀도 리포단백질 콜레스테롤) 수준 및 이상지질혈증은 심혈관 질환의 잘-인식된 구동요인이다.
스타틴은 25년 동안 이상지질혈증의 치료를 위해 승인되어 왔다. 이 부류는 허용되는 안전 프로파일로 심혈관 사건의 실질적으로 일관된 감소를 증명하였다. 가장 잘 판매되는 스타틴인 아트로바스타틴 (atorvastatin (LipitorTM))이 지금까지 세계적으로 가장 잘 판매되는 약물이었는데, 1996년부터 2012년까지 125억달러를 초과하여 판매되었다.
스타틴 및 다른 지질 저하제의 유용성 및 광범위한 사용에도 불구하고, 많은 환자들은 그들의 표적 LDL-C 수준에 도달하지 못하고 심혈관 질환이 발생할 위험이 높은 채로 남는다. PCSK9 (프로단백질 전환효소 서브틸리신/켁신(Kexin) 타입 9)는 간의 LDL-R (LDL 수용체) 분해를 촉진함으로써, 간의 LDL-R 표면 발현 및 결과적으로 LDL 입자의 클리어런스(clearance)를 촉진한다. 역으로, PCSK9 차단은 다른 아테롬 발생성 리포단백질뿐만 아니라 LDL-C의 클리어런스를 증가시킨다. 실제로, LDL 수용체는 LDL 이외의 아테롬 발생성 리포단백질, 예컨대 중간-밀도 리포단백질 및 나머지 입자들의 클리어런스에 기여한다. 증가된 중간-밀도 리포단백질 및 나머지 입자 클리어런스는 LDL 감소에 의해 제공된 것을 뛰어넘는 치료 유익을 나타낼 수 있다.
스타틴은 SREBP2 전사 인자를 통해 LDL-R 및 PCSK9 둘 다의 발현을 증가시킨다. PCSK9의 증가된 발현은 순환계로부터의 LDL-C 클리어런스에 대한 스타틴의 영향을 감소시킬 수 있다. LDL-R에의 PCSK9의 결합을 억제함으로써, 그로써 LDL-R 분해를 방지함으로써 스타틴의 효능이 향상된다. 이것들을 함께 취하면, PCSK9 억제는 지질 관리에 대한 신규한 접근법을 제공한다.
최근에 2개의 항-PCSK9 항체, 알리로쿠맙(alirocumab)/Praluent® 및 에볼로쿠맙(evolocumab)/Repatha®가 고 LDL-C 수준의 치료를 위해 승인되었다. 이것들은 2주마다 1 ml의 피하 주사에 의해 투여된다. 그러나, 피하 투여된 약물의 이 용량 처방을 준수하는 것은, 특히 무증상 상태에 대해 의심의 여지가 있다.
LDL-R의 EGF(A) (상피 성장 인자-유사 도메인 A) 서열 (40개의 아미노산) (LDL-R-(293-332))은 PCSK9 결합을 위한 부위로서 잘 인식된다. 분리된 야생형 EGF(A) 펩타이드는 낮은 μM 범위의 IC50으로 LDL-R에 대한 PCSK9의 결합을 억제하는 것으로 나타났다 (Biochemical and Biophysical Research Communications 375 (2008) 69-73). 이런 빈약한 효능은 EGF(A) 펩타이드의 실제적인 제약학적 사용을 방해할 것이다. 나아가, 그러한 펩타이드의 반감기는 치료적으로 사용하기에는 너무 짧은 것으로 예상될 것이다.
WO2012177741 및 J. Mol. Biol. (2012) 422, 685-696은 EGF(A)의 유사체 및 그것의 Fc-융합물을 개시한다.
환자 치료를, 예를 들어 효능의 관점에서, 또한 또는 다르게는 환자에 대한 편리성, 편안함, 예컨대 투여 방식의 편암함 및 편리성, 및 그로써 순응도의 관점에서 개선할 필요가 있다.
본 발명은 특히 콜레스테롤 저하, 이상지질혈증 및 심혈관 질환의 분야에서 개선된 환자 치료에 대한 가능성을 가지는 신규한 EGF(A) 화합물에 관한 것이다.
한 측면으로, 발명은 개선된 약물동역학 (PK) 특성을 가지는 화합물을 제공한다. 특히, 발명의 화합물은 긴 반감기를 가지며 LDL-R에 대한 결합에서 PCSK9를 억제하는 양호한 능력을 나타낸다.
또한 또는 다르게는, 다른 측면으로, 발명은 LDL-R에 대한 PCSK9 결합을 억제하는 개선된 능력을 가지는 EGF(A) 화합물을 제공하거나 또는 다르게는, 다른 측면으로, 발명은 PCSK9에 대한 개선된 결합 능력을 가지는 화합물을 제공한다. 또한 또는 다르게는, 다른 측면으로, 발명은 연장된 반감기를 가지는 EGF(A) 화합물을 제공한다. 또한 또는 다르게는, 다른 측면으로, 발명은 연장된 반감기를 가지며 LDL-R에 대한 PCSK9 결합을 억제하는 능력이 손실되지 않은 또는 실질적으로 손실되지 않은 EGF(A) 화합물을 제공한다. 또한 또는 다르게는, 다른 측면으로, 발명은 연장된 반감기 및 보존된 결합 용량을 가진 EGF(A) 화합물을 제공한다. 한 측면으로, 발명은 액체 제제에 적합한 높은 액체 용해도를 가진 EGF(A) 화합물을 제공한다. 한 측면으로, 발명은 높은 생체내 안정성을 가진 EGF(A) 화합물을 제공한다. 또한 또는 다르게는, 다른 측면으로, 발명은 경구 투여 가능성을 가진 EGF(A) 화합물을 제공한다. 또한 또는 다르게는, 다른 측면으로, 발명은 환자를 위한 보다 편리한 치료에 대한 가능성을 가진 EGF(A) 화합물을 제공한다. 또한 또는 다르게는, 다른 측면으로, 발명은 개선된 환자 순응성을 가진 화합물을 제공한다. 발명은 또한 예시의 구체예들의 개시로부터 명백해질 추가의 문제점들을 해결할 수 있다.
한 측면으로, 발명은 서열 SEQ ID NO: 1: Gly-Thr-Asn-Glu-Cys-Leu-Asp-Asn-Asn-Gly-Gly-Cys-Ser-His-Val-Cys-Asn-Asp-Leu-Lys-Ile-Gly-Tyr-Glu-Cys-Leu-Cys-Pro-Asp-Gly-Phe-Gln-Leu-Val-Ala-Gln-Arg-Arg-Cys-Glu에 의해 정의된 EGF(A) 펩타이드의 EGF(A) 펩타이드 유사체를 포함하는 화합물에 관련되며, 여기서 펩타이드 유사체는 301Leu를 포함한다.
한 측면으로, 발명은 301Leu 및 적어도 하나의 지방산 기를 포함하는 적어도 하나의 치환기를 포함하는 EGF(A) 펩타이드 유사체를 포함하는 EGF(A) 유도체에 관련된다.
한 구체예에서 EGF(A) 유도체는 EGF(A) 펩타이드 유사체를 포함하고, 여기서, 상기 기술된 것과 같이 아미노산 301은 Leu (L)인 한편, 펩타이드는 위치 295 (Asn/N), 296 (Glu/E), 298 (Leu/L), 302 (Gly/G) 및 310 (Asp/D) 중 하나 이상에서 야생형 잔기(들)을 추가로 포함한다.
추가의 구체예에서 EGF(A) 유도체의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.: 1과 비교하여 1 내지 15개의 아미노산 치환을 가진다.
추가의 구체예에서 EGF(A) 유도체의 치환기는 임의의 위치 295, 298, 301, 302, 307 및 310에서 아미노산 잔기를 통해 EGF(A) 펩타이드 유사체에 부착되지 않는다.
추가의 구체예에서 치환기는 위치 295, 298, 301, 302, 307 및 310 이외의 아미노산 잔기를 통해 EGF(A) 펩타이드 유사체에 부착된다.
한 측면으로 발명은 SEQ ID NO.: 1에 의해 정의된 LDL-R의 EGF(A) 도메인의 EGF(A) 펩타이드 유사체에 관련되며, 여기서 펩타이드 유사체는 301Leu 및 310Asp를 포함하고 펩타이드 유사체는 312Lys의 아미노산 치환을 가지거나 또는 펩타이드 유사체는 299Asp의 Glu, Val 또는 His로의 치환을 갖지 않는다.
추가의 구체예들에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 다음의 (야생형) 아미노산 잔기(들) 295Asn, 296Glu, 298Leu, 302Gly 및 310Asp/D) 중 1, 2, 3, 4 또는 5개 전부를 가진다.
추가의 구체예에서 상기 펩타이드 유사체는 위치 297Cys-308Cys, 304Cys-317Cys 및 319Cys-331Cys에 3개의 이황화 가교를 포함한다.
다른 측면으로, 발명은 발명에 따르는 화합물을 포함하는 제약학적 조성물에 관련된다.
다른 측면으로, 발명은 약으로서 사용하기 위한 발명에 따르는 화합물에 관련된다.
다른 측면으로, 발명은 발명에 따르는 화합물의 의학적 사용에 관련된다.
도 1은 개별적인 동물들에 대한 산포도로서 표시된, 웨스턴 블롯에 의해 측정된 마우스에서의 간 LDL-R 발현 수준을 도시한다.
도 2는 비히클로 또는 실시예 2의 장기간의 EGF(A) 화합물로 처리된 햄스터에서의 혈장 LDL 콜레스테롤을 도시한다.
도 3은 웨스턴 블롯에 의해 측정된, 비히클로 또는 실시예 2의 장기간의 EGF(A) 화합물로 처리된 햄스터이 간에서 간의 LDL-R 발현을 도시한다.
도 2는 비히클로 또는 실시예 2의 장기간의 EGF(A) 화합물로 처리된 햄스터에서의 혈장 LDL 콜레스테롤을 도시한다.
도 3은 웨스턴 블롯에 의해 측정된, 비히클로 또는 실시예 2의 장기간의 EGF(A) 화합물로 처리된 햄스터이 간에서 간의 LDL-R 발현을 도시한다.
서열 목록의 간단한 설명
야생형 EGF(A) (LDL-R(293-332))의 아미노산 서열은 SEQ ID NO: 1로서의 서열 목록에 포함된다. SEQ ID NO 2 내지 78은 발명의 특이적 EGF(A) 화합물의 EGF(A) 펩타이드의 아미노산 서열들이다.
설명
하기에서, 그리스 문자는 그것의 기호 또는 상응하는 쓰여진 이름에 의해 표시될 수 있는데, 예를 들어: α=알파; β=베타; ε=엡실론; γ=감마; δ=델타; ω=오메가; 등과 같다. 또한, μ의 그리스 문자는 "u"로 표시될 수 있는데, 예컨대 μl = ul, 또는 μM = uM과 같다.
하기에서, "한개"는 "하나 이상"을 의미한다. 명세서에서 표시되지 않는 한, 단일 형태로 표시된 용어는 또한 복수의 상황을 포함한다.
화학식에서 별표 (*)는 i) 부착점, ii) 라디칼, 및/또는 iii) 비공유 전자를 지정한다.
제 1 측면으로, 발명은 SEQ ID NO.: 1의 펩타이드 유사체, 및 적어도 하나의 지방산 기를 포함하는 적어도 하나의 치환기를 포함하는 화합물, 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염, 아미드 또는 에스테르에 관련된다.
제 2 측면으로, 발명은 SEQ ID NO.: 1의 펩타이드 유사체에 관련되며, 그것은 발명의 유도체의 제조를 위한 중간 생성물로 여겨질 수 있다.
제 3 측면으로, 발명은 발명의 화합물 및, 특히 경구 투여에 적합한 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 제약학적 조성물; 및 약으로서의 발명의 화합물의 사용에 관련된다. 발명의 추가의 측면들은 하기에서 기술된다.
구조적 특징
EGF(A) 화합물
용어 "EGF(A) 화합물"은 본원에서 일반적으로 SEQ ID NO: 1에 의해 정의된 wt-LDL-R(293-332) 및 그것의 유사체를 포함하는, EGF(A) 펩타이드를 포함하는 화합물을 나타내기 위해 본원에서 사용된다. 용어 EGF(A) 화합물은 EGF-(A) 펩타이드의 유도체 및 그것의 유사체, 즉 본원에서 기술된 것과 같은 치환기를 가지며 EGF(A) 화합물의 전형적인 예시인 EGF(A) 펩타이드 유사체를 포함한다.
EGF(A) 펩타이드
발명의 맥락에서 사용되는 것과 같은, 용어 "펩타이드"는 아미드 (또는 펩타이드) 결합에 의해 상호연결된 일련의 아미노산을 포함하는 화합물을 나타낸다. 특정 구체예에서 펩타이드는 펩타이드 결합에 의해 상호연결된 아미노산으로 구성된다.
발명의 펩타이드는 적어도 35, 예컨대 36, 37, 39, 39 또는 적어도 40개의 아미노산을 포함한다. 특정 구체예에서, 펩타이드는 36, 예컨대 38 또는 40개의 아미노산으로 구성된다. 추가의 특정 구체예에서, 펩타이드는 35, 36, 37, 38, 39 또는 40개의 아미노산으로 구성된다.
본원에서 N-말단 및 C-말단 연장으로 언급되는, 아미노산의 첨가가 있을 때, 발명의 펩타이드는 최대 140개의 아미노산을 포함할 수 있다. 한 구체예에서, 발명의 펩타이드는 41개의 아미노산 잔기를 포함하거나 그것으로 구성될 수 있다. 특정 구체예에서, 그것은 40 내지 140, 40 내지 120, 40 내지 100, 40 내지 80, 40 내지 60 또는 40 내지 50개의 아미노산을 포함한다.
용어 "LDL-R의 EGF(A) 도메인", "LDL-R (293-332)", "천연 LDL-R (293-332), "EGF(A) (293-332)", "야생형 EGF(A)", "wt-EGF(A)" 또는 "천연 EGF(A)"는 본원에서 서열 SEQ ID NO: 1로 구성되는 펩타이드를 나타낸다.
SEQ ID NO: 1은:
Gly-Thr-Asn-Glu-Cys-Leu-Asp-Asn-Asn-Gly-Gly-Cys-Ser-His-Val-Cys-Asn-Asp-Leu-Lys-Ile-Gly-Tyr-Glu-Cys-Leu-Cys-Pro-Asp-Gly-Phe-Gln-Leu-Val-Ala-Gln-Arg-Arg-Cys-Glu이다.
이 식에서 아미노산 잔기의 넘버링은 LDL-R (LDL-R-(293-332))의 EGF(A) 도메인에 대한 넘버링을 따르며, 여기서 첫 번째 (N-말단) 아미노산 잔기는 위치 번호 293으로 넘버링되거나 부여되며, 계속해서 C-말단을 향한 아미노산 잔기는 LDL-R의 EGF(A) 도메인의 마지막 (C-말단) 아미노산 잔기가 332번의 Glu가 될 때까지 294, 295, 296 등으로 넘버링된다.
넘버링은 서열 목록에서는 다르게 진행되는데, 서열 목록에서 SEQ ID NO: 1의 첫 번째 아미노산 잔기 (Gly)는 1번이 배정되고, 마지막 (Glu)는 40번이 배정된다. 서열 목록의 다른 서열들에도 동일하게 적용되는데, 즉 N-말단 아미노산은 293Gly 또는 LDL-R(293-332)를 참조한 293 치환 아미노산 잔기에 비해 그것의 위치와 무관하게 1번으로 배정된다. 그러나, 본원에서 아미노산 위치의 넘버링은 상기에서 설명된 것과 같이 LDL-R(293-332)를 참조로 한다.
본 발명은 SEQ ID NO:1로 확인된 EGF(A) 펩타이드의 유사체 및 SEQ ID NO: 1로 규정된 LDLR의 야생형 EGF(A) 도메인의 그러한 EGF(A) 펩타이드 유사체의 유도체에 관련된다.
용어 "유사체"는 일반적으로 참조 아미노산 서열과 비교할 때 그것의 서열이 하나 이상의 아미노산 변화를 가지는 펩타이드를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "발명의 유사체", "발명의 펩타이드 유사체", "LDL-R(293-332) 유사체", "EGF(A) 유사체" 또는 "SEQ ID NO: 1의 유사체"는 그것의 서열이 서열 SEQ ID NO: 1에 비해 아미노산 치환, 즉 아미노산 대체를 포함하는 펩타이드로서 언급될 수 있다. "유사체"는 또한 N-말단 및/또는 C-말단 위치에서의 아미노산 연장 및/또는 N-말단 및/또는 C-말단 위치에서의 절단(truncation)을 포함할 수 있다.
SEQ ID NO.:1에 대한 동일성 수준은 SEQ ID NO: 1에 비해 변화하지 않은 아미노산의 수를 측정함으로써 계산될 수 있다. SEQ ID NO: 1은 40개의 아미노산 잔기로 구성되고 만약 3개의 아미노산 치환이 도입되면 동일성 수준은 37/40%=92.5 %이다. 만약 5개의 아미노산 잔기가 변화되면 동일성 수준은 87.5%이다. 만약 펩타이드가 N-말단 또는 C-말단으로 신장되면 그 부분은 보통 비교에는 포함되지 않는 반면, 하나 이상의 아미노산의 결실은 비교기를 단축시킨다. 예를 들어, 상기 실례에서, 만약 N-말단 아미노산이 결실되면 동일성 수준은 각각 36/39X100% 및 34/39X100%로 약간 감소된다. 유도체의 백본 서열의 동일성을 논의할 때 치환기의 아미노산 잔기, 또한 치환기의 아미노산 잔기로 명명되는, 예컨대 치환기가 부착되는 잔기는 야생형 (wt) 또는 치환된 아미노산일 수 있다. 만약 치환기의 아미노산 잔기가 야생형 잔기, 예컨대 N-말단 Gly 또는 312K라면, 이 잔기는 동일성 수준의 계산에 포함되는 반면, 293 내지 332의 임의의 다른 위치에 있는 Lys는 아미노산 치환될 것이고 SEQ ID NO.:1에 대한 아미노산 동일성을 계산할 때 포함되지 않을 것이다.
한 구체예에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.: 1에 비교하여 1 내지 15개의 아미노산 치환을 가진다. 한 구체예에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.: 1에 비교하여 1 내지 10개의 아미노산 치환을 가진다. 한 구체예에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.: 1에 비교하여 1 내지 10개의 아미노산 치환을 가진다. 한 구체예에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.: 1에 비교하여 1 내지 8개, 예컨대 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개의 아미노산 치환을 가진다. 특정 구체예에서, EGF-1 펩타이드 유사체에 최대 7개의 아미노산 치환이 존재할 수 있는데, 예를 들어 최대 6, 5, 4, 3, 2 또는 1개의 아미노산 치환이 존재할 수 있다.
한 구체예에서 발명의 유사체는 절단이 없는 경우에 각각, SEQ ID NO.:1에 비해 최대 10, 8, 6, 4 및 2개의 아미노산 치환에 상응하여 적어도 75% 동일성, 예컨대 80%, 예컨대 85%, 예컨대 90% 또는 심지어 95% 동일성을 가진다.
발명의 펩타이드 유사체의 각각은 i) 변화된 아미노산 잔기에 상응하는 (즉, 천연 LDL-R(293-332) EGF(A)의 상응하는 위치) 천연 EGF(A) (LDL-R(293-332))의 아미노산 잔기의 수, 및 ii) 실제 변화를 참조로 기술될 수 있다.
달리 말하면, 발명의 펩타이드 유사체는 천연 LDL-R(293-332) EGF(A) 펩타이드를 참조로, 즉 아미노산 잔기의 수가 천연 LDL-R(293-332) EGF(A) (SEQ ID NO: 1)에 비교할 때 변화되어 있는 변종으로서 기술될 수 있다. 이 변화들은 독립적으로 하나 이상의 아미노산 치환을 나타낼 수 있다.
다음은 적합한 유사체 명명의 비-제한적인 예시이다:
본원의 실시예 2의 유도체에 포함된 EGF(A) 펩타이드는 다음의 LDL-R(293-332) EGF(A) 유사체: (301Leu, 309Arg) LDL-R(293-332) EGF(A), 또는 (Leu301, Arg309)-LDL-R(293-332) EGF(A) 또는 (301L,309R) LDL-R(293-332) 또는 (L301,R309) LDL-R(293-332)로서 언급될 수 있다. 이것은 이 유사체가 천연 LDL-R(293-332)와 배열될 때, 그것이 i) 배열에 따라, 천연 LDL-R(293-332) EGF(A)의 위치 301에 해당하는 유사체의 위치에 Leu, ii) 천연 LDL-R(293-332) EGF(A)의 위치 309에 해당하는 유사체의 위치에 Arg을 가지는 것을 의미한다.
특정한 명시된 변화를 "포함하는" 유사체는 SEQ ID NO: 1에 비교할 때 추가의 변화를 포함할 수 있다.
특정 구체예에서, 유사페는 명시된 변화를 "가진다" 또는 "포함한다". 특정 구체예에서, 유사체는 변화들로 "구성된다". 용어 "구성되다" 또는 "구성되는"이 유사체, 예컨대 명시된 아미노산 치환기로 구성되거나 구성되는 유사체와 관련하여 사용될 때, 명시된 아미노산 치환은 펩타이드 유사체의 유일한 아미노산 치환인 것으로 인지되어야 한다. 그에 반해 명시된 아미노산 치환기를 "포함하는" 유사체는 추가의 치환을 가질 수 있다.
상기 예시로부터 명백한 것과 같이, 아미노산 잔기들은 그것들의 전체 이름, 그것들의 한-문자 암호, 및/또는 그것들의 3-문자 암호에 의해 식별될 수 있다. 이 3가지 방법은 완전히 동등하다.
표현 "~에 동등한 위치" 또는 "상응하는 위치"는 참조 서열 천연 LDL-R(293-332) EGF(A) (SEQ ID NO: 1)을 참조로 하여 변종 LDL-R(293-332) EGF(A) 서열의 변화 부위를 특성화하기 위해 사용될 수 있다. 동등한 또는 상응하는 위치, 뿐만 아니라 변화의 수는 예컨대 간단한 수기 및 눈대중(eyeballing)에 의해 쉽게 추론되고; 및/또는 표준 단백질 또는 펩타이드 배열 프로그램, 예컨대 니들만-분쉬 알고리즘을 기반으로 한 "align""이 사용될 수 있다.
다음에, 화학식이 두 개의 다음의 화학기가 둘 다 "결합"이 되게 선택될 수 있도록 규정되는 것이 발생할 수 있다. 그런 경우에, 두 개의 다음의 화학기는 실제로 없을 것이고, 단지 하나의 결합만이 주변 화학기에 연결될 것이다.
아미노산은 아미노기 및 카르복실산기, 및 선택적으로, 종종 측쇄로 언급되는 하나 이상의 추가의 기를 함유하는 분자이다.
용어 "아미노산"은 단백질 생성 (또는 천연) 아미노산 (그 중에서도 20개의 표준 아미노산), 뿐만 아니라 비-단백질 생성 (또는 비-천연) 아미노산을 포함한다. 단백질 생성 아미노산은 단백질로 자연적으로 포함되는 것들이다. 표준 아미노산은 유전자 암호에 의해 암호화된 것들이다. 비-단백질생성 아미노산은 단백질에서 발견되지 않거나, 또는 표준 세포 기계에 의해 생성되지 않는다 (예컨대 그것들은 번역-후 변형이 수행되지 않을 수 있다). 비-단백질생성 아미노산의 비-제한적 예시는 Aib (a-아미노아이소부티르산, 또는 2-아미노아이소부티르산), 노르류신, 노르발린, 뿐만 아니라 단백질생성 아미노산의 D-이성질체이다.
다음에, 그것에 대한 광학 이성질체가 표시되지 않는 발명의 펩타이드의 각각의 아미노산은 (다르게 명시되지 않는 한) L-이성질체를 의미하는 것으로 인지되어야 한다.
발명의 펩타이드 유사체
발명의 한 측면은 SEQ ID NO: 1.의 펩타이드의 유사체에 관련된다.
발명의 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO: 1의 유사체인 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드로서 규정될 수 있다. 발며의 펩타이드 유사체는 PCSK9에 결합하는 능력을 가진다. 특정 구체예에서, 발명의 유사체는 예를 들어 천연 LDL-R(293-332) (천연 EGF-(A))에 대해 또는 다른 PCSK9-결합 화합물에 대한 개선된 결합 능력을 가진다.
발명의 펩타이드 유사체는 LDL-R에 대한 PCSK9 결합을 억제하는 능력을 가진다. 한 구체예에서 펩타이드는 PCSK9 억제자이다. 한 구체예에서 펩타이드는 인간 저밀도 리포단백질 수용체 (LDL-R)에 대한 PCSK9 결합을 억제한다. 그러한 결합은 본원의 실시예 D.1.1에서 기술된 검정을 사용하여 평가될 수 있다. 한 구체예에서 발명의 펩타이드 유사체 및 펩타이드 유도체는 PCSK9 억제자 펩타이드 또는 간단하게 PCSK9 억제자이다. 한 구체예에서 발명은 SEQ ID NO.:1의 펩타이드 유사체에 관련되고, 여기서 펩타이드 유사체는 인간 저밀도 리포단백질 수용체 (LDL-R)에 대한 PCSK9 결합을 억제할 수 있다.
한 구체예에서 발명의 펩타이드 유사체, 화합물 또는 PCSK9 억제자는 EGF(A), LDL-R(293-332) (SEQ ID 1)에 비교하여 PCSK9에 대해 개선된 결합 능력을 가진다.
한 구체예에서 발명의 펩타이드 유사체, 화합물 또는 PCSK9 억제자는 실시예 48 (SEQ ID 2)에 비교하여 PCSK9에 대해 개선된 결합 능력을 가진다.
한 구체예에서 본원에 기술된 펩타이드 유사체, 화합물 또는 PCSK9 억제자의 Ki는 PCSK9-LDL-R 결합 경쟁 ELISA 검정에서 측정되는 바 10 nM 아래, 예컨대 8 nM 아래 또는 예컨대 5 nM 아래이다.
EGF-(A) 유사체 및 그것의 유도체의 기능성은, 예컨대 본원의 실시예 D1.2에서 기술된 것과 같이, LDL 흡수를 개선시키는 그것의 능력에 의해 추가로 특성화될 수 있다. 한 구체예에서 발명의 펩타이드 유사체, 화합물 또는 PCSK9 억제자는 PCSK9의 존재하에 LDL 흡수를 증가시킨다. 한 구체예에서 발명의 펩타이드 유사체, 화합물 또는 PCSK9 억제자는 LDL 흡수의 PCSK9 매개 감소를 번전 또는 감소시킬 수 있다.
한 구체예에서 발명의 펩타이드 유사체, 화합물 또는 PCSK9 억제자는 LDL 흡수 검정에서 측정되는 바 1500 nM 아래, 예컨대 1000 nM 아래 또는 예컨대 500 nM 아래의 EC50을 가진다.
한 구체예에서, 발명의 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO: 1에 비교하여 적어도 하나의 아미노산 치환, 및 선택적으로 연장을 포함하는 것으로 규정될 수 있다. 한 구체예에서, 발명의 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO: 1에 비교하여 최대 15개, 최대 14개, 최대 13개, 최대 12개, 최대 11개, 최대 10개, 최대 9개, 최대 8개, 최대 7개, 최대 6개, 최대 5개, 최대 4개, 최대 3개, 최대 2개 또는 1개의 아미노산(들) 치환(들), 및 선택적으로 연장을 포함하는 것으로서 규정될 수 있다. 이것은 N-말단에 및/또는 C-말단에 연장을 포함하는 펩타이드가 상기 연장에 더불어 위치 293 내지 332에 최대 15개의 아미노산 치환을 포함할 수 있음을 의미한다.
아미노산 "연장"은 또한 "확장"으로서 언급될 수 있다. 한 구체예에서, 발명의 펩타이드 유사체는 연장을 포함할 수 있다. 상기 연장은 SEQ ID NO:1 또는 그것의 유사체의 위치 N-말단에 최대 50개의 아미노산 잔기가 첨가되는 것일 수 있고, 그것은 또한 N-말단 연장으로서 언급되며, 발명의 펩타이드가 위치 292로부터, 예를 들어 위치 242까지 아래쪽으로 최대 50개의 아미노산을 포함할 수 있음을 의미한다. 추가적으로 또는 다르게는, 상기 연장은 SEQ ID NO: 1 또는 그것의 유사체의 위치 C-말단에 최대 50개의 아미노산 잔기가 첨가되는 것일 수 있고, 그것은 또한 C-말단 연장으로서 언급되며, 발명의 펩타이드가 위치 333으로부터, 예를 들어 위치 383까지 위쪽으로 최대 50개의 아미노산을 포함할 수 있음을 의미한다.
상기 연장은 N-말단에, C-말단에, 또는 양쪽에 모두 존재할 수 있다. 상기 연장은 또한 각각의 쪽에서, 서로 무관하게 0 내지 50개의 아미노산의 임의의 길이의 것일 수 있다. 한 구체예에서, 발명의 펩타이드 유사체는 1 내지 50, 1 내지 40, 10 내지 40, 1 내지 30, 10 내지 30, 20 내지 30, 20 내지 40, 20 내지 50, 30 내지 50, 1 내지 10, 11 내지 20, 21 내지 30, 31 내지 40 또는 41 내지 50개의 아미노산 잔기의 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 또는 50개의 아미노산 잔기의 N-말단 연장을 포함한다. 더불어 또는 다르게는, 발명의 펩타이드 유사체는 1 내지 50, 1 내지 40, 10 내지 40, 1 내지 30, 10 내지 30, 20 내지 30, 20 내지 40, 20 내지 50, 30 내지 50, 1 내지 10, 11 내지 20, 21 내지 30, 31 내지 40 또는 41 내지 50개의 아미노산 잔기의 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 또는 50개의 아미노산 잔기의 C-말단 연장을 포함한다.
연장은 일부 상황에서는 새로운 아미노산 잔기, 예컨대 본원에서 예시된 292A, 292Lys 또는 333Lys가 도입되는 것과 같은 치환으로 언급될 수 있다.
EGF(A) 펩타이드의 N-말단 및/또는 C-말단에서의 소수의 절단이 EGF(A) 펩타이드 유사체에 존재할 수 있다.
한 구체예에서 EGF(A) 펩타이드는 적어도 35개의 아미노산 잔기, 예컨대 36개의 아미노산 잔기, 예컨대 37개의 아미노산 잔기, 예컨대 38개의 아미노산 잔기, 예컨대 39개의 아미노산 잔기를 포함한다. 한 구체예에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 따라서 1 내지 2개의 아미노산 잔기의 N-말단 절단을 포함한다. 한 구체예에서 하나 또는 두 개의 N-말단 아미노산 잔기가 결실된다. 추가의 구체예들에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 따라서 적어도 또는 특이적으로 아미노산 293Gly가 결실된 N-말단 절단을 포함한다.
추가의 구체예들에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 적어도 또는 특이적으로 293Gly-294Thr가 결실된 N-말단 절단을 포함한다.
한 구체예에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 1개의 아미노산 잔기의 C-말단 절단을 포함한다. 한 구체예에서 단일 C-말단 아미노산 잔기가 결실된다. 한 구체예에서 펩타이드 유사체는 특이적으로 아미노산 332Glu가 결실된 C-말단 절단을 포함한다.
더불어 또는 다르게는, 발명의 펩타이드 유사체는 예를 들어 위치 292 및/또는 333에서 N-말단 또는 C-말단에서 적어도 하나의 아미노산 연장을 포함할 수 있다.
발명의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 Asn301Leu 또는 간단하게 301Leu로도 기술되는, Asn으로부터 Leu로의 아미노산 잔기 301의 아미노산 치환을 포함한다. 특정 구체예에서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 치환 301Leu를 포함한다.
더불어 또는 다르게는 EGF(A) 펩타이드 유사체는 아미노산 잔기 297Cys, 304Cys, 308Cys, 317Cys, 319Cys 및 331Cys를 포함한다. 이런 Cys 잔기들은 이황화 가교, 예컨대 297Cys와 308Cys 사이, 304Cys와 317Cys 사이 및 319Cys와 331Cys 사이의 이황화 가교에 참여할 수 있는 야생형 잔기이다.
한 구체예에서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 상기 기술된 것과 같이, 301Leu 및 많은 추가의 아미노산 치환을 포함한다.
한 구체예에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 301Leu, 310Asp 및 312Lys의 아미노산 치환을 포함한다.
한 구체예에서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 301Leu 및 310Asp를 포함하고, 여기서 펩타이드 유사체는 299Asp의 Glu, Val 또는 His로의 치환을 갖지 않는다.
한 구체예에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 301Leu, 309Arg 및 312Glu를 포함한다.
한 구체예에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 301Leu 및 309Arg을 포함하며, 단 펩타이드 유사체는 310Asp의 310Lys로의 치환을 갖지 않는다.
한 구체예에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 301Leu 및 309Arg을 포함하며, 단 펩타이드 유사체는 299Asp의 Glu, Val 또는 His로의 치환을 갖지 않는다.
추가의 구체예에서 펩타이드 유사체는 치환 D310K, D310N, D310Q, D310Q, D310R 및 D310A 중 임의의 치환 또는 심지어 310Asp의 임의의 치환을 갖지 않는다.
한 구체예에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 295Asn, 296Glu, 298Leu 및 302Gly 중 1, 2, 3 또는 4개 전부의 야생형 잔기를 포함한다.
한 구체예에서 EGF(A) 펩타이드 유사체는 295Asn, 296Glu, 298Leu, 302Gly 및 310Asp 중 1, 2, 3, 4 또는 5개 전부의 야생형 잔기를 포함한다.
한 구체예에서 펩타이드는 295Asn을 가진다.
한 구체예에서 펩타이드 유사체는 296Glu를 가진다. 한 구체예에서 펩타이드 유사체는 298Leu를 가진다. 한 구체예에서 펩타이드 유사체는 302Gly를 가진다. 한 구체예에서 펩타이드 유사체는 310Asp를 가진다.
한 구체예에서 펩타이드 유사체는 310Asp, 295Asn 및 296Glu 중 2 이상을 가진다. 한 구체예에서 펩타이드 유사체는 310Asp, 295Asn 및 296Glu 중 3개 전부를 가진다.
EGF(A) 펩타이드 유사체는 본원에서 기술된 것과 같이 추가의 아미노산 치환을 포함할 수 있다. 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치: 293, 294, 296, 299, 300, 303, 305, 306, 309, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 318, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 328, 329, 330 및 332의 군으로부터 선택된 위치(들)에서 하나 이상의 아미노산 치환을 추가로 포함할 수 있다.
한 구체예에서 발명의 유사체는 위치: 293, 294, 299, 300, 303, 305, 306, 309, 311, 312, 313, 314, 316, 318, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 328, 329, 330, 331 및 332의 군으로부터 선택된 위치(들)에서 하나 이상의 아미노산 치환(들)을 추가로 포함할 수 있다.
한 구체예에서 발명의 유사체는 294, 299, 300, 303, 309, 312, 313, 314, 316, 318, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 328, 329, 330 및 332로부터 선택된 위치(들)에서 하나 이상의 아미노산 치환(들)을 추가로 포함할 수 있다.
한 구체예에서 발명의 유사체는 299, 300, 309, 313, 316, 318, 321, 322, 323, 324, 326, 328, 329, 330 및 332로부터 선택된 위치(들)에서 하나 이상의 아미노산 치환(들)을 추가로 포함할 수 있다.
한 구체예에서 발명의 유사체는 위치: 309, 312, 313, 321, 324, 328 및 332의 군으로부터 선택된 위치(들)에서 하나 또는 추가의 아미노산 치환(들)을 추가로 포함할 수 있다.
추가의 구체예에서 펩타이드 유사체는 상기 본원에서 명시된 아미노산 잔기들에 더불어 특정한 특이적 위치에서 wt 아미노산 잔기 또는 상이한 잔기, 즉 아미노산 치환을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 293에서 아미노산 잔기 Gly(G) 또는 Asn(N)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 294에서 아미노산 잔기 Trp (W), Thr(T) 또는 Gly(G)를 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 299에서 아미노산 잔기 Asp(D), Gly(G), Pro(P), Arg(R), Lys(K), Ser(S), Thr(T), Asn(N), Gln(Q), Ala(A), Ile(I), Leu(L), Met(M), Phe(F), Tyr(Y) 또는 Trp(W)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 299에서 아미노산 잔기 Asp(D), Gly(G), Pro (P), Arg(R), Lys(K), Ser(S), Thr(T), Asn(N), Gln(Q), Ala(A), Met(M), Phe(F), Tyr(Y) 또는 Trp(W)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 299에서 아미노산 잔기 Asp(D), Ser (S), Arg(R), Leu (L), Ala (A), Lys(K) 또는 Tyr(Y)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 299에서 아미노산 잔기 Asp(D) 또는 Ala(A)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 300에서 아미노산 잔기 His(H) 또는 Asn(N)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 307에서 아미노산 잔기 Val(V), Ser(S), Thr (T) 또는 Ile (I)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 307에서 아미노산 잔기 Val(V) 또는 Ile (I)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 307에서 Ser (S), Thr (T) 또는 Ile (I)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 307에서 Ile (I)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 309에서 아미노산 잔기 Asn(N) , Glu (E), His (H,) Arg (R), Ser (S) 또는 Lys (K)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 309에서 아미노산 잔기 Asn(N) , Arg (R), Ser (S) 또는 Lys (K)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 309에서 아미노산 잔기 Asn(N) , Arg (R) 또는 Ser (S)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 309에서 아미노산 잔기 Asn(N) 또는 Arg (R)을 포함한다.
그런 한 구체예에서 발명의 유사체는 위치 309에서 아미노산 잔기 Lys(K) 또는 Arg (R)을 포함한다.
EGF(A) 펩타이드 유사체는 본원에 기술된 것과 같이, 여러 아미노산 치환, 예컨대 299Ala, 307Ile 및 321Glu의 군으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 포함할 수 있다.
추가의 구체예들에서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 위치 321에 아미노산 잔기 Asp(D), Lys (K) 또는 Glu(E)를 포함한다.
추가의 구체예들에서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 위치 321에 아미노산 잔기 Asp(D) 또는 Glu(E)를 포함한다.
추가의 구체예들에서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 위치 321에 아미노산 잔기 Glu(E)를 포함한다.
추가의 구체예들에서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 위치 324에 아미노산 잔기 Gln (Q) 또는 Gly (G)를 포함한다.
추가의 구체예들에서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 위치 329에 아미노산 잔기 Arg (R) 또는 His (H)을 포함한다.
추가의 구체예들에서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 300Asn(N)의 Pro(P)로의 치환을 갖지 않는다.
LDL-R의 EGF(A) 도메인은 본원에서 기술된 것과 같이 치환에 유용할 수 있는 위치 312에서 리신을 포함한다. 치환기의 312에의 부착이 바람직하지 않은 구체예에서 312Lys은 본원에서 기술되는 것과 같이 다른 아미노산에 의해 치환될 수 있다.
한 구체예에서, 위치 312의 Lys은 Gly, Pro, Asp, Glu, Arg, His, Ser, Thr, Asn, Gln, Ala, Val, Ile, Leu, Met, Phe 및 Tyr로부터 선택된 아미노산 잔기에 의해 치환된다. 한 구체예에서, 위치 312의 Lys은 Gly, Asp, Glu, Ser, Thr, Asn, Ala, Val, Ile, Leu, Phe 및 Tyr로부터 선택된 아미노산 잔기에 의해 치환된다. 한 구체예에서, 위치 312의 Lys은 Asp, Glu, Thr, Asn, Ile, Leu, Phe 및 Tyr로부터 선택된 아미노산 잔기에 의해 치환된다. 한 구체예에서, 312Lys은 312Asp, 312Glu, 312Thr, 312Asn, 312Ile 또는 312Phe에 의해 치환된다. 한 구체예에서, 312Lys은 312Glu, 312Asp, 312Gln 또는 312Arg에 의해 치환된다.
한 구체예에서, 312Lys은 312Glu, 312Thr, 312Asn, 312Ile, 312Phe 또는 312Tyr에 의해 치환된다. 한 구체예에서, 312Lys은 312Glu, 312Asn 또는 312Ile에 의해 치환된다.
한 구체예에서, 312Lys은 312Glu 또는 312Arg에 의해 치환된다. 한 구체예에서 312Lys은 312Arg에 의해 치환된다. 한 구체예에서, 312Lys은 312Glu에 의해 치환된다.
다양한 위치에서 치환기를 부착하기 위한 선택권을 포함하기 위하여 (자세한 것은 하기 참조), Lys은 292Lys 또는 333Lys와 같이, SEQ ID NO.: 1의 야생형 잔기의 아미노산 치환에 의해 또는 SEQ ID NO.: 1의 펩타이드 연장에 의해 도입될 수 있다.
하나 이상의 치환기가 바람직한 경우에 하나는 312Lys인 한편 두 번째는 SEQ ID NO.: 1에서 펩타이드 연장 또는 치환에 의해 도입된 Lys를 통한 것이다.
한 구체예에서 SEQ ID NO: 1의 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 296Lys, 299Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys의 군으로부터 선택된 위치에 적어도 하나의 Lys 잔기를 포함한다.
한 구체예에서 SEQ ID NO: 1의 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 299Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys의 군으로부터 선택된 위치에 적어도 하나의 Lys 잔기를 포함한다.
한 구체예에서 SEQ ID NO: 1의 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 316Lys, 318Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys의 군으로부터 선택된 위치에 적어도 하나의 Lys 잔기를 포함한다.
한 구체예에서 SEQ ID NO: 1의 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 316Lys, 318Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys의 군으로부터 선택된 위치에 적어도 하나의 Lys 잔기를 포함한다.
한 구체예에서 SEQ ID NO: 1의 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 316Lys, 318Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys의 군으로부터 선택된 위치에 적어도 하나의 Lys 잔기를 포함한다.
더불어 또는 다르게는, 발명의 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 295Lys, 296Lys, 298Lys, 299Lys, 301Lys, 302Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 307Lys, 309Lys, 310Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로부터 선택된 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함한다.
추가의 구체예에서, 발명의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 295Lys, 296Lys, 298Lys, 299Lys, 302Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 307Lys, 309Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로부터 선택된 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함한다.
추가의 구체예에서, 발명의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 295Lys, 296Lys, 298Lys, 299Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로부터 선택된 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함한다.
추가의 구체예에서, 발명의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 295Lys, 296Lys, 299Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로부터 선택된 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함한다.
추가의 구체예에서, 발명의 EGF(A) 유사체 펩타이드는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 296Lys, 299Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로부터 선택된 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함한다.
추가의 구체예에서, 발명의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 299Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로부터 선택된 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함한다.
추가의 구체예에서, 발명의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 299Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로부터 선택된 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함한다.
추가의 구체예에서, 발명의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 299Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 310Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로부터 선택된 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함한다.
추가의 구체예에서, 발명의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 299Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 310Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로부터 선택된 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함한다.
추가의 구체예에서, 발명의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 310Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로부터 선택된 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함한다. 한 구체예에서, 발명의 펩타이드 유사체는 다음의 치환: 296K, 298K, 301K, 302K 및 307K 중 임의의 치환을 포함하지 않는다.
한 구체예에서, 발명의 펩타이드 유사체는 다음의 치환: 296K, 298K, 301K, 302K, 307K 및 310K 중 임의의 치환을 포함하지 않는다.
한 구체예에서, 발명의 펩타이드 유사체는 다음의 치환: 296K, 298K, 301K, 302K, 307, 및 295K 중 임의의 치환을 포함하지 않는다.
한 구체예에서, 발명의 펩타이드 유사체는 다음의 치환: 296K, 298K, 301K, 302K, 307K 및 295D 중 임의의 치환을 포함하지 않는다.
특정 구체예에서, 발명의 펩타이드 유사체는 1 또는 2개의 그러한 Lys 치환을 포함한다.
더불어 또는 다르게는, 발명의 펩타이드는 312Lys을 포함할 수 있다.
한 구체예에서 발명의 펩타이드 유사체는 2개의 Lys 잔기를 포함한다. 한 구체예에서 발명의 펩타이드 유사체는 다음으로 구성되는 쌍으로부터 선택된 2개의 Lys 잔기를 포함한다:
상기 본원에서 알 수 있는 것과 같이 다양한 펩타이드 유사체가 본 발명에 의해 제공된다. 추가의 구체예에서 발명에 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.:1에 비교하여 하기 제시된 그룹 i 내지 xxiv 중 임의의 그룹에 의해 확인된 적어도 2개의 아미노산 치환을 포함한다.
또 추가의 구체예에서, 발명의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 하기 제시된 그룹 i 내지 xxiv 중 임의의 그룹에 의해 확인된 아미노산 치환으로 구성된다.
추가의 구체예에서 발명에 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.:1에 비교하여 하기 제시된 그룹 i 내지 xvi 중 임의의 그룹에 의해 확인된 적어도 2개의 아미노산 치환을 포함한다.
또 추가의 구체예에서, 발명의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 하기 제시된 그룹 i 내지 xvi 중 임의의 그룹에 의해 확인된 아미노산 치환으로 구성된다.
i. 301Leu 및 309Arg
ii. 301Leu, 309Arg, 312Glu
iii. 301Leu, 307Ile 및 309Arg
iv. 301Leu, 307Ile, 309Arg 및 312Glu
v. 301Leu, 309Arg 및 321Glu
vi. 301Leu, 309Arg, 321Glu 및 312Glu
vii. 301Leu, 307Ile, 309Arg 및 299Ala
viii. 301Leu, 307Ile, 309Arg, 299Ala 및 312Glu
ix. 301Leu 및 309Arg 및 적어도 하나의 Lys 치환
x. 301Leu, 309Arg, 312Glu 및 적어도 하나의 Lys 치환
xi. 301Leu, 307Ile 및 309Arg 및 적어도 하나의 Lys 치환
xii. 301Leu, 307Ile, 309Arg 및 312Glu 및 적어도 하나의 Lys 치환
xiii. 301Leu, 309Arg 및 321Glu 및 적어도 하나의 Lys 치환
xiv. 301Leu, 309Arg, 321Glu 및 312Glu 및 적어도 하나의 Lys 치환
xv. 301Leu, 307Ile, 309Arg 및 299Ala 및 적어도 하나의 Lys 치환 또는
xvi. 301Leu, 307Ile, 309Arg, 299Ala 및 312Glu 및 적어도 하나의 Lys 치환.
추가의 구체예에서 발명에 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.: 1에 비교하여 하기 제시된 그룹 xvii 내지 xx 중 임의의 그룹에 의해 확인된 적어도 2개의 아미노산 치환을 포함한다.
또 추가의 구체예에서, 발명의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 하기 제시된 그룹 xvii 내지 xx 중 임의의 그룹에 의해 확인된 아미노산 치환으로 구성된다.
xvii. 301Leu 및 309Lys
xviii. 301Leu, 309Lys 및 312Glu
xix. 301Leu 및 309Lys 및 적어도 하나의 추가의 Lys 치환
xx. 301Leu, 309Lys 및 312Glu 및 적어도 하나의 추가의 Lys 치환.
추가의 구체예에서 발명에 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.: 1에 비교하여 하기 제시된 그룹 xxi 내지 xxiv 중 임의의 그룹에 의해 확인된 적어도 2개의 아미노산 치환을 포함한다.
또 추가의 구체예에서, 발명의 EGF(A) 펩타이드 유사체는 하기 제시된 그룹 xxi 내지 xxiv 중 임의의 그룹에 의해 확인된 아미노산 치환으로 구성된다.
xxi. 301Leu 및 307Ile,
xxii. 301Leu, 307Ile 및 312Glu
xxiii. 301Leu 및 307Ile 및 적어도 하나의 추가의 Lys 치환 및
xxiv. 301Leu, 3307Ile 및 312Glu 및 적어도 하나의 추가의 Lys 치환.
추가의 특정 구체예에서 발명에 따르는 펩타이드 유사체 또는 화합물의 펩타이드 유사체는 SEQ ID 1 내지 106에 의해 확인된 아미노산 서열들 중 어느 것을 포함하거나 그것으로 구성된다.
한 구체예에서 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.: 2 내지 106에 의해 확인된 아미노산 서열들 중 어느 것을 포함하거나 그것으로 구성된다.
한 구체예에서 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.: 2 내지 47 및 49 내지 106에 의해 확인된 아미노산 서열들 중 어느 것을 포함하거나 그것으로 구성된다.
한 구체예에서 펩타이드 유사체는 아미노산 서열 SEQ ID NO.: 2 내지 44, 46, 47 및 49 내지 106 중 어느 것에 의해 확인된 아미노산 서열들 중 어느 것을 포함하거나 그것으로 구성된다.
한 구체예에서 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.: 2 내지 44, 46, 47, 49 내지 53, 55, 58 내지 106에 의해 확인된 아미노산 서열들 중 어느 것을 포함하거나 그것으로 구성된다.
한 구체예에서 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.: 2 내지 4, 6 내지 44, 46, 47, 49 내지 53, 55, 58 내지 106에 의해 확인된 아미노산 서열들 중 어느 것을 포함하거나 그것으로 구성된다.
한 구체예에서 펩타이드 유사체는 SEQ ID NO.: 2 내지 4, 6 내지 19, 21 내지 44, 46, 47, 49 내지 53, 55, 58 내지 106에 의해 확인된 아미노산 서열들 중 어느 것을 포함하거나 그것으로 구성된다..
중간체 화합물
본 발명은 또한 발명의 유도체에 통합될 수 있는 펩타이드 유사체에 관련된다. 그러한 펩타이드 유사체는 "중간체 생성물" 또는 "중간체 화합물"로서 언급될 수 있다. 그것들은 신규한 LDL-R(293-332) 유사체의 형태로 있고, 그것은 상기 기술된 발명의 EGF(A) 유도체에 하기에서 추가로 기술되는 것과 같이 통합될 수 있다. 그러한 펩타이드 유사체는 상기 섹션에서 규정된 바와 같다.
특히, 본 발명에 따르는 펩타이드 유사체, 또는 중간체 펩타이드는 서열 SEQ ID NO: 1의 펩타이드 유사체로서 언급될 수 있다.
한 측면으로 발명은 EGF(A) 화합물, 예컨대 EGF(A) 유도체의 제조에 사용하기 위한, 본원에서 기술된 EGF(A) 펩타이드 유사체에 관련된다.
발명의 펩타이드 유사체와 관련하여 본원에서 개시된 다른 특징, 정의, 측면 및 구체예들은 또한 발명의 중간체 생성물에도 적용될 수 있다.
EGF(A) 유도체
발명의 펩타이드 유사체는 추가로 치환기를 포함할 수 있고 그로서 유도체 화합물이 될 수 있다.
용어 "유도체"는 일반적으로 천연 펩타이드 또는 그것의 유사체로부터 화학적 변형에 의해, 특히 하나 또는 두 개의 치환기의 공유 부착에 의해 제조될 수 있는 화합물을 나타낸다.
용어 "발명의 유도체", "EGF(A) 유도체", "EGF(A) 유도체 또는 "LDL-R(293-332) 유도체" 또는 "LDL-R(293-332) 유사체의 유도체"는 본원에서 사용되는 바와 같이 하나 또는 두 개의 치환기가 부착되는 펩타이드를 나타낸다. 이것들의 각각은, 또한 또는 다르게는, 측쇄로서 언급될 수 있다. 달리 말하면, "발명의 유도체"는 본원에서 EGF(A) 펩타이드 유사체인 펩타이드, 즉 펩타이드 서열, 및 적어도 하나의, 예컨대 하나 또는 2개의 치환기(들)을 포함한다.
용어 "치환기"는 EGF(A) 펩타이드에 대해 공유적으로 결합하는 모이어티, 예컨대 치환기가 EGF(A) 펩타이드 자체의 일부가 아닌 모이어티인 것을 기술하기 위해 사용된다.
한 구체예에서 하나 이상의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드 유사체의 질소 원자에 부착된다. 한 구체예에서 하나 이상의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드 유사체의 아미노기에 부착된다. 한 구체예에서 하나 이상의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드 유사체의 N-말단 아미노산에 또는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 Lys 잔기에 부착된다. 한 구체예에서 하나 이상의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드 유사체의 N-말단 아미노산에 부착된다. 한 구체예에서 하나 이상의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드 유사체의 N-말단 아미노산 잔기의 알파-질소에 부착된다. 한 구체예에서 하나 이상의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드 유사체의 Lys 잔기에 부착된다. 한 구체예에서 하나 이상의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드 유사체의 Lys 잔기의 엡실론-질소에 부착된다.
치환기의 에시는 다양하며 하기에서 한층 더 기술된다.
한 측면으로, 발명은 EGF(A) 펩타이드 유사체 및 적어도 하나의 치환기를 포함하는 EGF(A) 유도체에 관련된다. 한 구체예에서 유도체의 치환기는 적어도 하나의 지방산 기를 포함한다. 모든 구체예에 대하여 용어 EGF(A) 유도체는 또한 임의의 제약학적으로 허용되는 염, 그것의 아미드, 또는 에스테르를 포함한다.
치환기
치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체에 부착된 모이어티이다. 발명에 따르면 모이어티, 예컨대 치환기는 EGF(A) 펩타이드의 기능성에 영향을 미치지 않거나 최소 영향을 나타내는 한편 경구 투약 후에 더 긴 반감기 및/또는 개선된 노출과 같은 다른 유익한 특성을 첨가하는 것이 바람직하다.
이어서 상기 기술된 발명의 유도체, 뿐만 아니라 유사체는 PCSK9에 대한 결합 능력을 가진다. PCSK9에 대한 그러한 결합은 LDL-R에 대한 PCSK9 결합을 억제하고, 그로써 LDL-R 분해를 방지하여 LDL-C의 클리어런스 및 아테롬 발생성 리포단백질을 증가시킨다.
특정 구체예에서, 발명의 유도체 및 유사체는 예를 들어 천연 LDL-R(293-332)에 또는 다른 PCSK9-결합 화합물에 비교하여 PCSK9에 대한 개선된 결합 능력을 가진다. 발명의 유사체 및 유도체는 예를 들어 본원의 실시예 D.1.1에서 기술된 검정을 사용하여 LDL-R에 대한 PCSK9 결합을 억제하는 그것들의 능력에 대해 테스트될 수 있다.
한 구체예에서 치환기는 펩타이드의 기능성을 개선시키는 것을 목적으로 한다.
한 구체예에서 치환기는 백본 펩타이드 및 치환기를 포함하는 유도체의 혈장 반감기가 실시예 1 및 48에서 예시된 것과 같은 백본 펩타이드의 반감기에 비교하여 증가된 반감기를 가지는 방식으로 펩타이드 유사체의 반감기를 증가시킨다 (섹션 D2, 표 7). 상이한 종에서 반감기를 측정하는 방법은 기술분야에 잘 알려져 있고 본원에서 마우스 및 개에 대해 예시된다 (섹션 D2 및 D5).
한 구체예에서 발명에 따르는 EGF(A) 유도체는 4시간이 넘는 반감기를 가진다.
한 구체예에서 발명에 따르는 EGF(A) 유도체는 피하 또는 정맥내로 투약한 후에 측정된 마우스에서 6시간이 넘는, 예컨대 8시간이 넘는 또는 예컨대 10시간이 넘는 반감기를 가진다.
한 구체예에서 발명에 따르는 EGF(A) 유도체는 개에서 25시간이 넘는 반감기를 가진다.
한 구체예에서 발명에 따르는 EGF(A) 유도체는 개에서 50시간이 넘는, 예컨대 100시간이 넘는 또는 예컨대 150시간이 넘는 반감기를 가진다.
한 구체예에서, 반감기를 연장시키는 치환기는 단백질 모이어티이다. 추가의 그런 구체예에서 단백질 모이어티는 인간 알부민, Fc-도메인 또는 비구조화된 단백질 연장을 포함할 수 있다. 추가의 구체예에서 단백질 모이어티는 펩타이드 유사체에 융합될 수 있다. 추가의 구체예에서, 단백질 모이어티는 Fc 도메인이고 Fc 도메인은 펩타이드 유사체에 융합된다. Fc 융합이 제조될 때 그 결과의 화합물은 두 개의 Fc-폴리펩타이드가 하나의 Fc-도메인을 형성할 것이기 때문에 보통 이가일 것이다.
한 구체예에서 치환기는 단백질 모이어티가 아니다. 한 구체예에서 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체에 융합된 단백질 모이어티가 아니다. 한 구체예에서 단백질 모이어티는 Fc 도메인이 아니다.
다른 구체예에서 치환기는 비-단백질 모이어티이다.
특정 구체예에서, 치환기는 알부민과 비-공유 복합체를 형성할 수 있음으로써, 혈류 내에서 유도체의 순환을 촉진하고, 또한 유도체의 작용시 체류기간 연장 효과를 가진다. 특정 구체예에서, 치환기는 그것의 PCSK9에 대한 결합 능력을 실질적으로 감소시키지 않으면서 의 작용시 체류시간을 연장시킬 수 있다.
한 구체예에서 EGF(A) 유도체는 반감기를 연장시키는 치환기를 포함한다. 다양한 반감기 연장 치환기가 기술분야에 잘 알려져 있고 특히 하기에서 추가로 기술되는 것과 같이 지방산기를 포함하는 알부민 결합제를 포함하며, 그러한 알부민 결합제는 비-단백질 치환기이다.
치환기는 적어도 하나의 지방산 기를 포함한다.
특정 구체예에서, 지방산 기는 적어도 8개의 연속적인 -CH2- 기를 함유하는 탄소 사슬을 포함한다. 한 구체예에서, 지방산 기는 적어도 10개의 연속적인 -CH2- 기, 예컨대 적어도 12개의 연속적인 -CH2- 기, 적어도 14개의 연속적인 -CH2- 기, 적어도 16개의 연속적인 -CH2- 기, 적어도 18개의 연속적인 -CH2- 기를 포함한다.
한 구체예에서 지방산 기는 8 내지 20 연속적인 -CH2- 기를 포함한다. 한 구체예에서 지방산 기는 10 내지 18개의 연속적인 -CH2- 기를 포함한다. 한 구체예에서 지방산 기는 12 내지 18개의 연속적인 -CH2- 기를 포함한다. 한 구체예에서 지방산 기는 14 내지 18개의 연속적인 -CH2- 기를 포함한다.
유도체가 2개의 치환기를 포함하는 상황에서, 증가된 반감기는 더 짧은 지방산 기로 얻어질 수 있고, 그러므로 유도체가 2개의 치환기를 포함하는 구체예에서 지방산 기는 적어도 8개의 연속적인 -CH2- 기, 예컨대 적어도 10개의 연속적인 -CH2- 기, 예컨대 적어도 12개의 연속적인 -CH2- 기, 적어도 14개의 연속적인 -CH2- 기, 적어도 16개의 연속적인 -CH2- 기를 포함할 수 있다.
유도체가 2개의 치환기를 포함하는 추가의 구체예에서, 치환기는 각각 8 내지 18개의 연속적인 -CH2- 기를 포함하는 지방산 기를 포함한다. 추가의 그런 구체예에서 지방산 기는 10 내지 18개의 연속적인 -CH2- 기, 예컨대 12 내지 18개의 연속적인 -CH2- 기, 예컨대 14 내지 18개의 연속적인 -CH2- 기를 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "지방산 기"는 pKa < 7인 브뢴스테드-로우리 산인 적어도 하나의 작용기를 포함하는 화학적 기로서 언급될 수 있다. 브뢴스테드-로우리산인 그러한 작용기의 비-제한적 예는 카르복실산 (또한 카르복시페녹시를 포함함), 설폰산, 테트라졸 모이어티를 포함한다.
한 구체예에서 상기 지방산 기는 카르복실산, 설폰산, 테트라졸 모이어티, 메틸설포닐카바모일아미노 (MSU) 모이어티 및 3-하이드록시-아이소옥사졸아이소옥사졸 모이어티로부터 선택된 작용기를 포함한다. 따라서 한 구체예에서 발명의 반감기 연장 치환기는 다음에 의해 규정되는 것과 같이 추가로 8 내지 20개의 연속적인 -CH2- 기를 포함하는 카르복실산, 설폰산, 테트라졸 모이어티, 메틸설포닐카바모일아미노 모이어티 또는 하이드록시-아이소옥사졸아이소옥사졸 모이어티를 포함한다:
Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-*, 식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이고, 이것은 또한 C(n+2) 이산으로서 또는 Chem. 1b: 
로서 언급될 수 있으며, 식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이다.
Chem. 2: 5-테트라졸릴-(CH2)n-CO-*, 식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이고, 이것은 또한 Chem. 2b: 
로서 언급될 수 있으며, 식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이다.
Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-*, 식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이고, 이것은 또한 Chem. 3b: 
로서 언급될 수 있으며, 식에서 카르복시기는 Chem. 3의 (C6H4) 기의 위치 2, 3 또는 4에 있고 m은 8 내지 11 범위의 정수이다.
Chem. 4: HO-S(O)2-(CH2)n-CO-*, 식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이고, 이것은 또한 Chem. 4b: 
로서 언급될 수 있으며, 식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이다.
Chem. 5: MeS(O)2NH(CO)NH-(CH2)n-CO-*, 식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이고, 이것은 또한 Chem. 5b: 
로서 언급될 수 있으며, 식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이다.
Chem. 6: 3-HO-아이소옥사졸-(CH2)n-CO-*, 식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이고, 이것은 또한 Chem. 6b: 
로서 언급될 수 있으며, 식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이다.
용어 작용기는 그것의 산성 형태에서 FG-H로서 언급되고 콘쥬게이트된 염기로서의 형태에서는 FG-로서 언급된다. 본원에서 사용되는 용어 "pKa < 7인 작용기"는 수용액 중의 그것의 메틸 유도체의 형태 (CH3-FG-H)에서 7 미만의 평형 pKa를 가지는 브뢴스테드-로우리 산으로서 언급될 수 있고, 여기서 pKa는 하기 제시된 평형의 평형 상수 (Ka)에 대한 -로그이다:
pKa를 측정하는 방법은 기술분야에 잘 알려져 있다. 그러한 방법은 예를 들어 Reijenga 등에 의해 Anal Chem Insights 2013 (2013; 8: 53-71)에 기술되었다.
한 구체예에서 발명에 따르는 치환기는 하나 이상의 링커 요소를 포함한다. 링커 요소는 아미드 결합에 의해 지방산 기에 결합될 수 있고 Z2 내지 Z10으로서 언급될 수 있다. 본원의 하기에서 추가로 규정되는 것과 같이 링커 요소의 수는 최대한 10일 수 있다.
특정 구체예에서, 치환기는 식 I의 것이다:
Z1-Z2-Z3-Z4-Z5-Z6-Z7-Z8-Z9-Z10- [I], 식에서
Z1은 다음으로부터 선택된다:
Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-* 또는
Chem. 1b: 
,
Chem. 2: 5-테트라졸릴-(CH2)n-CO-* 또는
Chem. 2b: 
,
Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* 또는
Chem. 3b: 
(식에서 카르복시기는 -(C6H4)-의 위치 2, 3 또는 4에 있음),
Chem. 4: HOS(O)2-(CH2)n-CO-* 또는
Chem. 4b: 
,
Chem. 5: MeS(O)2NH2N(CO)NHN-(CH2)n-CO-* 또는
Chem. 5b: 
및
Chem. 6: 3-HO-아이소옥사졸-(CH2)n-CO-* 또는
Chem. 6b: 
(식에서 n은 8 내지 20의 범위의 정수이고 m은 8 내지 11의 범위의 정수이다).
특정 구체예에서, Chem. 1 또는 1b에서 n은 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다. 특정 구체예에서, Chem. 2 또는 2b에서 n은 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다. 특정 구체예에서, Chem. 4 또는 4b에서 n은 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다. 특정 구체예에서, Chem. 3 또는 3b에서 m은 8, 9, 10 또는 11이다.
특정 구체예에서, Chem. 5 또는 5b에서 n은 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다.
특정 구체예에서, Chem. 6 또는 6b에서 n은 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다.
특정 구체예에서, 기호 *는 Z2의 질소에 대한 부착점을 나타낸다. Z2가 결합인 다른 구체예에서, 기호 *는 인접한 Z 요소의 질소에 대한 부착점을 나타낸다.
식 I의 맥락에서 사용된 용어 "결합"은 공유 결합을 의미한다. 식 I의 구성요소 (Z1-Z10)가 결합으로서 규정될 때, 그것은 상기 구성요소가 없는 식 I에 동등하다.
본원의 하기에서 Z2-Z10 중 임의의 것이 결합이라는 표시는 또한 Z2-Z10 중 임의의 것이 없는 것으로서 읽힐 수 있다. 논리적으로 "결합"은 "결합" 뒤에 올 수 없다. 그러므로 본원에서 "결합"이란 표시는 이전의 Z 요소가 "결합"이 아닌 (또는 없는) 다음 Z 요소에 공유 결합된 것을 의미한다.
링커 요소 Z2-Z10은 아미노산 유사 모이어티, 예컨대 Glu, γGlu (또한 감마 Glu 또는 gGlu로 명명되고 *-NH-CH-(COOH)-CH2-CH2-CO-*에 의해 규정됨), Gly, Ser, Ala, Thr, Ado, Aeep, Aeeep 및 TtdSuc 및 하기 규정된 추가의 모이어티를 포함하여, 아미드 결합을 형성할 수 있는 화학적 모이어티들로부터 선택된다.
Z2는
Chem. 7: *-NH-SO2-(CH2)3-CO-* 또는
Chem. 7b: 
,
Chem. 8: *-NH-CH2-(C6H10)-CO-* 또는
Chem. 8b: 
, 및
결합으로부터 선택된다.
Z3은 γGlu, Glu, 또는 결합으로부터 선택된다.
Z3은 Z2가 Chem. 7 또는 Chem. 7b일 때 γGlu, Glu, 또는 결합으로부터 선택된다.
Z3은 γGlu, Glu, 또는 결합으로부터 선택되고, 단 Z2가 Chem. 8일 때 Z3은 γGlu, Glu로부터 선택된다.
Z3은 Z2가 Chem. 8일 때 γGlu 및 Glu로부터 선택된다.
Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9는, 서로 독립적으로, Glu, γGlu, Gly, Ser, Ala, Thr, Ado, Aeep, Aeeep, TtdSuc 및 결합으로부터 선택된다.
Glu, Gly, Ser, Ala, Thr은 기술분야에 잘 알려져 있는 아미노산 잔기들이다.
γGlu는 식 Chem. 9: *-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-*의 것으로, Chem. 9b: 
와 동일하며 또한 gGlu로도 언급될 수 있다.
TtdSuc는 식 Chem. 10:
*-NH-(CH2)3-O-(CH2)2-O-(CH2)2O-(CH2)3-NHCO* 또는
*-NH-CH2CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2OCH2CH2CH2NHCO*의 것으로,
Chem. 10b: 
와 동일하다.
Ado는 8-아미노-3,6-다이옥사옥탄산으로도 언급될 수 있는 식 Chem. 11: *-NH-(CH2)2-O-(CH2)2-O-CH2-CO-*의 것으로,
Chem. 11b: 
와 동일하다.
Aeep는 식 Chem. 12: *NH-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2CO*의 것으로, 또한
Chem. 12b: 
로서 언급될 수 있다.
Aeep는 식 Chem. 13: *NH-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2OCH2CH2CO*의 것으로, 또한
Chem. 13b: 
로서 언급될 수 있다.
Z10은 결합, 및 Chem. 14: *-NH-CH2-(C6H4)-CH2-*로부터 선택되며, Chem. 14는 또한 Chem. 14b: 
로서 언급될 수 있다.
특정 구체예에서, Z10이 Chem. 14일 때, 치환기는 상기 펩타이드의 N-말단 아미노기에 부착된다.
다른 구체예에서, Z10이 결합일 때, 상기 치환기는 상기 펩타이드에 존재하는 Lys 잔기의 엡실론 위치에 또는 상기 펩타이드의 N-말단 아미노산 잔기에 부착된다.
한 구체예에서 유도체는 2개의 치환기를 포함한다. 그런 한 구체예에서 2개의 치환기는 동일하다. 그런 한 구체예에서 2개의 치환기는 상이하다. 한 구체예에서 2개의 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 질소 원자에 부착된다. 한 구체예에서 2개의 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 아미노기에 부착된다. 한 구체예에서 2개의 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 N-말단 아미노산 EGF(A) 및 Lys 잔기에 부착된다. 한 구체예에서 하나의 치환기가 EGF(A) 펩타이드 유사체의 N-말단 아미노산 잔기의 알파-질소에 부착되고 하나의 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 Lys 잔기에 부착된다. 한 구체예에서 2개의 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 N-말단 아미노산에 부착된다. 한 구체예에서 2개의 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 상이한 Lys 잔기에 부착된다. 한 구체예에서 2개의 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 상이한 Lys 잔기의 엡실론-질소에 부착된다.
2개의 치환기가 존재하는 한 구체예에서, 펩타이드 유사체의 N-말단 아미노기에 부착된 한 치환기에서 Z10은 Chem. 14이고 상기 펩타이드 유사체에 존재하는 Lys 잔기의 엡실론 위치에 부착된 다른 치환기에서 Z10은 결합이다.
2개의 치환기가 존재하는 다른 구체예에서, 펩타이드 유사체의 N-말단 아미노기에 부착된 한 치환기에서 Z10은 결합이고 상기 펩타이드 유사체에 존재하는 Lys 잔기의 엡실론 위치에 부착된 다른 치환기에서 Z10은 결합이다.
2개의 치환기가 존재하는 다른 구체예에서, Z10은 두 치환기에서 모두 결합이고 2개의 치환기는 각각 펩타이드 유사체에 존재하는 상이한 Lys 잔기의 엡실론 위치에 부착된다.
특정 구체예에서, 발명의 유도체는 하나 또는 2개의 치환기(들)의 공유 부착에 의하여 EGF(A) 펩타이드 유사체로부터 제조될 수 있다.
특정 구체예에서, 2개의 치환기는 식 I: Z1-Z2-Z3-Z4-Z5-Z6-Z7-Z8-Z9-Z10- [I]의 것이다. Z1 내지 Z10은 상기에서 규정된 것과 같다. 특정 구체예에서, 2개의 치환기는 식 I의 것이고 동일한데, 그것은 선택된 Z1 내지 Z10이 두 치환기에서 동일한 것을 의미한다. 다른 구체예에서, 2개의 치환기는 식 I의 것이고 상이한데, 그것은 선택된 Z1 내지 Z10 중 하나 이상이 한 치환기와 다른 치환기 사이에서 상이한 것을 의미한다.
특이적 치환기
상기에서 알 수 있는 것과 같이 다양한 치환기들은 기술분야의 숙련된 사람들에 의해 제조될 수 있다. 그러므로 본 출원에 포함된 치환기는 발명을 제한하는 것으로 여겨지지 않는다.
한 구체예에서 하나 또는 2개의 치환기(들)은 다음으로 구성되는 치환기의 군으로부터 선택된다:
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-* (n은 16임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 Chem. 14: *-NH-CH2-(C6H4)-CH2-*인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-* (n은 16임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-* (n은 14 또는 16임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9는 모두 결합이며; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-* (n은 16 또는 18임)이고; Z2는 Chem 8 (Trx)이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 2: 테트라졸릴-(CH2)n-CO- * (n은 15임)이고; Z2는 Chem 7 (설폰이미드)이며; Z3은 결합이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 Chem. 14: *-NH-CH2-(C6H4)-CH2-*인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 2: 테트라졸릴-(CH2)n-CO- * (n은 15임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 2: 테트라졸릴-(CH2)n-CO- * (n은 12임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 결합이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9는 모두 결합이며; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9는 모두 결합이며; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 하나는 γGlu이며 나머지 5개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 하나는 γGlu이며 2개는 Ado이고 나머지 3개는 결합이며; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 3개는 Gly이며 나머지 3개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 3개는 Ado이며 나머지 3개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 4개는 Ado이며 나머지 2개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 하나는 TtdSuc이며 나머지 5개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 Chem 8 (Trx)이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 9임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 하나는 TtdSuc이며 나머지 5개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 4: HO-S(O)2-(CH2)n-CO- * (n은 15임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 4: HO-S(O)2-(CH2)n-CO- * (n은 15임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 Chem. 14: *-NH-CH2-(C6H4)-CH2-*인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 5: MeS(O)2NH(CO)NH-(CH2)n-CO-* (n은 12임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
한 구체예에서, 치환기는 Z1이 Chem. 6: 3-OH-아이소옥사졸-(CH2)12-CO-* (n은 12임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이다.
특이적 치환기 조합:
한 구체예에서, 발명의 화합물은 Z1이 Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-* (n은 16임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 2개의 치환기를 포함하거나 가진다.
한 구체예에서, 발명의 화합물은 Z1이 Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-* (n은 14임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 2개의 치환기를 포함하거나 가진다.
한 구체예에서, 발명의 화합물은 Z1이 Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-* (n은 14임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9는 모두 결합이며; Z10은 결합인 식 I의 2개의 치환기를 포함하거나 가진다.
한 구체예에서, 발명의 화합물은 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8 및 Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 2개의 치환기를 포함하거나 가진다.
한 구체예에서, 발명의 화합물은, 하나는 Z1이 Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-* (n은 16임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 Chem. 14: *-NH-CH2-(C6H4)-CH2-*인 식 I의 것이고; 다른 치환기는 Z1이 Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-* (n은 16임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것인, 2개의 치환기를 포함하거나 가진다.
한 구체예에서, 발명의 화합물은 하나는 Z1이 Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-* (n은 16임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 Chem. 14: *-NH-CH2-(C6H4)-CH2-*인 식 I의 것이고; 다른 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (n은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것인, 2개의 치환기를 포함하거나 가진다.
한 구체예에서, 발명의 화합물은 하나는 Z1이 Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-* (n은 16임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이고; 다른 치환기는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (n은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것인, 2개의 치환기를 포함하거나 가진다.
한 구체예에서, 발명의 화합물은 하나는 Z1이 Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-* (n은 16임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이고; 다른 치환기는 Z1이 Chem. 4: HOS(O)2-(CH2)n-CO-* (m은 15임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 Chem. 14: *-NH-CH2-(C6H4)-CH2-*인 식 I의 것인, 2개의 치환기를 포함하거나 가진다.
한 구체예에서, 발명의 화합물은 하나는 Z1이 Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-* (m은 10임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 결합인 식 I의 것이고; 다른 치환기는 Z1이 Chem. 4: HOS(O)2-(CH2)n-CO-* (m은 15임)이고; Z2는 결합이며; Z3은 γGlu이고; Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 중 2개는 Ado이며 나머지 4개는 결합이고; Z10은 Chem. 14: *-NH-CH2-(C6H4)-CH2-*인 식 I의 것인, 2개의 치환기를 포함하거나 가진다.
펩타이드 및 부착 지점
발명에 따르는 EGF(A) 유도체 또는 화합물은 SEQ ID NO.: 1에 의해 규정된 LDL-R의 EGF(A) 도메인의 EGF(A) 펩타이드 유사체를 포함한다. 그러한 펩타이드 서열은 본원의 상기에서 상세하게 기술되었고 발명의 유도체 또는 화합물의 펩타이드는 동일한 용어에 의해 기술되고 규정될 수 있다. EGF(A) 유도체 또는 화합물은 펩타이드 서열에 결합되는 본원의 상기에서 기술된 적어도 하나의 치환기를 추가로 가진다.
발명의 화합물에서, 치환기는 펩타이드, 즉 펩타이드 서열의 아미노산 잔기에 공유 부착된다.
한 구체예에서 발명의 EGF(A) 유도체는, 다음의 위치: 295, 296, 298, 301, 302 및 307 중 임의의 한 위치에 부착되지 않는 치환기를 포함한다. 추가의 구체예에서 치환기는 다음의 위치: 295, 296, 298, 301, 302, 307 및 310 중 임의의 한 위치에 부착되지 않는다. 추가의 그런 구체예에서, 치환기는 또한 다음의 위치: 299 및 320 중 임의의 한 위치에 부착되지 않는다.
특정 구체예에서 치환기는 위치 297, 304, 308, 317, 319 및 331 중 임의의 위치를 제외한 292 내지 333의 임의의 위치를 통해 부착된다.
특정 구체예에서 치환기는 위치 297, 298, 301, 302, 304, 307, 308, 317, 319 및 331 중 임의의 위치를 제외한 292 내지 333의 임의의 위치를 통해 부착된다.
특정 구체예에서 치환기는 위치 295, 296, 297, 298, 301, 302, 304, 307, 308, 317, 319 및 331 중 임의의 위치를 제외한 292 내지 333의 임의의 위치를 통해 부착된다. 특정 구체예에서 치환기는 위치 295, 296, 297, 298, 301, 302, 304, 307, 308, 310, 317, 319, 320 및 331 중 임의의 위치를 제외한 292 내지 333의 임의의 위치를 통해 부착된다. 특정 구체예에서 치환기는 위치 295, 296, 297, 298, 301, 302, 304, 307, 308, 309, 310, 317, 319, 320 및 331 중 임의의 위치를 제외한 292 내지 333의 임의의 위치를 통해 부착된다.
한 구체예에서, 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드 유사체의 위치 292, 293, 294, 299, 300, 303, 305, 306, 309, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 318, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 332 및 333 중 임의의 하나 또는 2개의 위치에 부착된다.
한 구체예에서, 치환(들)은 EGF(A) 펩타이드 유사체의 위치 292, 293, 294, 300, 303, 305, 306, 309, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 318, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 332 및 333 중 임의의 하나 또는 2개의 위치에 부착된다.
한 구체예에서, 치환(들)은 EGF(A) 펩타이드 유사체의 위치 292, 293, 294, 300, 303, 305, 306, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 318, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 332 및 333 중 임의의 하나 또는 2개의 위치에 부착된다.
한 구체예에서, 치환기는 펩타이드 서열의 N-말단 아미노산에 부착된다. 특정 구체예에서, N-말단 아미노산은 Gly이다. 특정 구체예에서, N-말단 아미노산은 293Gly이다. 특정 구체예에서, N-말단 아미노산은 293Lys이다. 특정 구체예에서, N-말단 아미노산은 292Lys이다. 그것은 또한 293이거나 N-말단으로부터 한층 더 아래쪽의 임의의 위치, 예컨대 294Thr, 294Gly 또는 294Lys 또는 295Asn일 수 있는 N-말단 위치의 Lys 또는 Gly 또는 다른 아미노산 잔기일 수 있다. 특정 구체예에서, 치환기는 펩타이드 유사체의 N-말단 아미노산 잔기의 알파-질소에 부착된다. 다른 구체예에서, 만약 N-말단 아미노산 잔기가 Lys이면, 치환기는 리신 잔기의 알파-질소 또는 엡실론 아미노기에 공유 결합될 수 있다.
특정 구체예에서, 치환기는 펩타이드에 존재하는 Lys 잔기의 ε-아미노기에 부착된다.
다른 구체예에서, 치환기는 332, 333 또는 추가로 C-말단을 향한 임의의 위치일 수 있는 C-말단 위치의 Lys에 부착된다.
발명의 펩타이드가 연장을 포함하는 구체예에서, N-말단 또는 C-말단의 어느 한 쪽에서, 치환기(들)은 상기 연장(들)의 아미노산 잔기에 부착될 수 있다. N-말단 연장이 존재할 때, 치환기는 상기 연장의 N-말단 아미노산에 또는 연장 서열 내에 존재하는 Lys에 부착될 수 있다. C-말단 연장의 존재시에, 치환기는 C-말단 위치의 Lys 잔기에 또는 연장 서열 내에 존재하는 Lys에 부착될 수 있다.
또 다른 구체예에서, 치환기는 펩타이드 서열에 존재하는 아미노산에 부착된다. 특정 구체예에서, 치환기는 펩타이드에 존재하는 리신 잔기에 부착된다. 특정 구체예에서, 치환기는 펩타이드에 존재하는 리신 잔기의 엡실론 아미노기에 부착된다. 치환기가 결합될 수 있는 리신 잔기는 펩타이드의 N-말단 위치 또는 C-말단 위치, 존재한다면 N-말단 연장 내의 임의의 위치 또는 N-말단 단부의 잔기, 존재한다면 C-말단 연장 내의 임의의 위치 또는 C-말단 단부 잔기를 포함하여, LDL-R(293-332) EGF(A) 유사체의 임의의 위치에 위치할 수 있다.
본원의 상기에서 기술된 것과 같이 EGF(A) 펩타이드 유사체는 하나 이상의 Lys 잔기; 및 치환기의 부착에 유용한 잔기들을 가질 수 있다.
특정 구체예에서, 치환기(들)이 결합되는 리신(들)은 292Lys, 293Lys, 294Lys, 299Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys의 군으로부터 선택된다.
특정 구체예에서, 치환기(들)이 결합되는 리신(들)은 93Lys, 294Lys, 295Lys, 296Lys, 298Lys, 299Lys, 301Lys, 302Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 307Lys, 309Lys, 310Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys으로부터 선택된다.
특정 구체예에서, 치환기(들)이 결합되는 리신(들)은 293Lys, 294Lys, 300Lys, 303Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys으로부터 선택된다.
다른 구체예에서, 치환기(들)이 결합되는 리신(들)은 293Lys, 294Lys, 298Lys, 299Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys으로부터 선택된다.
다른 구체예에서, 치환기(들)이 결합되는 리신(들)은 292Lys, 293Lys, 294Lys, 299Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys으로부터 선택된다.
다른 구체예에서, 치환기(들)이 결합되는 리신(들)은 292Lys, 293Lys, 294Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 316Lys, 318Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys으로부터 선택된다.
다른 구체예에서, 치환기(들)이 결합되는 리신(들)은 293Lys, 294Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 316Lys, 318Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys으로부터 선택된다.
다른 구체예에서, 치환기(들)이 결합되는 리신(들)은 293Lys, 294Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 316Lys, 318Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys으로부터 선택된다.
치환기가 C-말단 연장에 부착되는 구체예에서, 치환기가 결합되는 리신은 333Lys 내지 242Lys 위치 중 어느 위치 및/또는 333Lys 내지 383Lys 위치 중 어느 위치로부터 선택될 수 있다.
발명의 화합물이 2개의 치환기를 가지는 구체예에서, 치환기는 상기에서 규정된 것과 같이 서로 독립적으로 결합될 수 있고, 그것은 어느 하나가 펩타이드의 N-말단 아미노산에, 펩타이드의 C-말단 아미노산에, 또는 펩타이드의 아미노산 서열 내의 아미노산에 부착될 수 있음을 의미한다.
Lys가 N-말단 위치에 존재하는 구체예에서, 2개의 치환기는 둘 다 펩타이드의 N-말단에 결합될 수 있다. 하나는 상기 Lys의 N-말단 알파-아민에 결합될 수 있는 한편 다른 것은 상기 Lys의 엡실론 질소에 결합될 수 있다. 2개의 치환기가 존재할 때, 하나는 펩타이드의 N-말단 아미노산에 결합될 수 있는 한편 다른 치환기는 펩타이드 내의 아미노산, 예컨대 Lys에 결합될 수 있다. 다르게는, 한 치환기는 펩타이드의 위치 C-말단의 Lys에 결합될 수 있는 한편 다른 치환기는 펩타이드의 아미노산, 예컨대 Lys에 결합된다. 다르게는, 한 치환기는 연자을 포함하여, 펩타이드 내의 아미노산 잔기, 예컨대 Lys에 결합될 수 있고, 다른 치환기는 연장을 포함하여 펩타이드 내의 다른 아미노산 잔기, 예컨대 Lys에 결합된다.
한 구체예에서, 발명의 화합물은 하나의 치환기를 가지며, 상기 치환기는 N-말단에서 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 292Lys의 펩타이드에 결합되거나 ; 또는 상기 치환기는 위치 293Lys의 펩타이드에 결합되거나, 또는 상기 치환기는 위치 299Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 300Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 309Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 311Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 312Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 313Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 314Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 315Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 316Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 318Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 320Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 321Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 322Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 323Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 324Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 325Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 326Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 328Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 329Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 330Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 332Lys의 펩타이드에 결합되거나; 또는 상기 치환기는 위치 333Lys의 펩타이드에 결합돤다.
발명의 유도체가 2개의 치환기를 가지는 구체예에서, 상기 치환기들은 N-말단 및 상기 언급된 Lys 위치들 중 임의의 위치, 예컨대 293Lys, 309Lys, 313Lys, 324Lys, 328Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys을 통해 펩타이드에 결합될 수 있다.
유도체가 2개의 치환기를 포함하는 추가의 구체예들에서, 그것들은 2개의 상이한 Lys 잔기, 예컨대 다음의 Lys 잔기 쌍에 결합될 수 있다.
한 구체예에서 2개의 치환기는 333Lys 및 293Lys, 309Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 321Lys, 324Lys, 328Lys, 330Lys 및 332Lys으로부터 선택된 Lys을 통해 부착된다..
한 구체예에서 2개의 치환기는 333Lys 및 312Lys, 313Lys, 314Lys, 321Lys, 324Lys, 328Lys 및 330Lys으로부터 선택된 Lys을 통해 부착된다.
한 구체예에서 2개의 치환기는 333Lys 및 313Lys, 324Lys 및 328Lys으로부터 선택된 Lys을 통해 부착된다.
상기에서 기술된 것과 같이 펩타이드는 본원에서 기술된 것과 같이 특정 위치에서 특이적 아미노산 잔기들과 조합될 수 있는 하나 이상의 아미노산 치환을 가질 수 있다. 그러한 특이적 아미노산 잔기는 유지되어야 하는 wt 아미노산 잔기, 예컨대 펩타이드 유사체에 존재하는, 본원에 기술돤 다른 특징들과 조합하여 일련의 바람직한 구체예에서 있을 수 있는 시스테인일 수 있다. 그러한 구체예에서, 펩타이드 유사체는 위치 297Cys-308Cys, 304Cys-317Cys 및 319Cys-331Cys에 3개의 이황화 가교를 포함한다. 그러한 구체예의 추가의 예시에서 펩타이드 유도체의 펩타이드 유사체는 위치 297Cys-308Cys, 304Cys-317Cys 및 319Cys-331Cys에 3개의 이황화 가교 및 적어도 하나의 치환기를 포함하고, 여기서 치환기(들)은 상기 펩타이드 유사체의 295, 296, 298, 301, 302 및 307로부터 선택된 위치에 부착되지 않는다. 숙련자들은 펩타이드 서열 정보의 조합이 본 발명의 다양한 특정 구체예들을 규정하기 위하여 치환기의 위치및 정체성에 대한 정보와 조합될 수 있다는 것을 인지할 것이다.
구체예에서, 펩타이드 유사체는 치환기가 결합되는 위치 이외의 위치에서 Lys을 포함하지 않는다.
구체예에서, 발명의 화합물은 하나의 치환기를 가지는데, 상기 치환기는 위치 N-말단에서 또는 임의의 위치의 Lys에 결합되며, 펩타이드 유사체는 모든 다른 위치에서는 Lys을 포함하지 않는다. 구체예에서, 발명의 화합물은 하나의 치환기를 가지며, 상기 치환기는 312 이외의 임의의 위치의 Lys에 결합되고, 펩타이드 유사체는 위치 312Arg에 Arg을 포함한다.
구체예에서, 발명의 화합물은 2개의 치환기를 가지며, 펩타이드 유사체는 그 치환기가 결하되는 위치 이외의 위치에서 Lys을 포함하지 않는다.
한 구체예에서 발명에 따르는 EGF(A) 유도체는 실시예 1 내지 47, 51 내지 102 및 106 내지 159로 구성되는 EGF(A) 유도체의 군으로부터 선택된다.
추가의 구체예들에서 발명에 따르는 EGF(A) 유도체는 실시예 1 내지 47, 51 내지 102 및 106 내지 159로 구성되는 EGF(A) 유도체의 군으로부터 개별적으로 선택된다.
한 구체예에서 발명에 따르는 EGF(A) 유도체는 실시예 1 내지 44, 46 내지 47, 51 내지 55, 57, 60 내지 64, 66 내지 69, 71 내지 102 및 106 내지 159로 구성되는 EGF(A) 유도체의 군으로부터 선택된다.
한 구체예에서 발명에 따르는 EGF(A) 유도체는 실시예 31, 95, 128, 133, 143, 144, 150, 151, 152 및 153으로 구성되는 EGF(A) 유도체의 군으로부터 선택된다.
제약학적 조성물
발명은 또한 예컨대 발명의 펩타이드 유사체를 포함하여, 발명의 화합물, 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염, 아미드, 또는 에스테르, 및 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 제약학적 조성물에 관련된다. 그러한 조성물은 기술분야에 공지된 대로 제조될 수 있다.
용어 "부형제"는 광범위하게는 활성 치료 성분(들) 이외의 임의의 성분을 나타낸다. 부형제는 불활성 물질, 비활성 물질, 및/또는 의학적으로 활성이 아닌 물질일 수 있다. 부형제는 다양한 목적으로, 예컨대 담체, 비히클, 희석제, 정제 보조제로서, 및/또는 활성 물질의 투여, 및/또는 흡수를 개선하기 위하여 작용할 수 있다. 부형제의 비-제한적인 예시는 용매, 희석제, 완충제, 보존제, 등장성 조절제, 킬레이트화제, 및 안정화제이다. 제약학적으로 활성 성분을 다양한 부형제와 제제화하는 것은 기술분야에서 공지되어 있다. 예컨대 Remington: The Science and Practice of Pharmacy (예컨대 19판 (1995), 및 임의의 후기 편집본들) 참조.
발명의 조성물은 액체 제제의 형태로, 즉 물을 포함하는 수성 제제로 있을 수 있다. 액체 제제는 용액, 또는 현탁액일 수 있다. 다르게는, 고체 제제, 예컨대 냉동-건조된 또는 분무-건조된 조성물일 수 있다.
발명의 제약학적 조성물은 조합 치료의 경우에 투여를 단순화시킬 수 있는 제 2 활성 성분, 예컨대 치료제를 추가로 포함할 수 있다.
발명의 조성물은 경구용 조성물일 수 있고, 투여 경로는 경구에 대한 것이다. 발명의 화합물 및 특히 장기간 지속되는 화합물, 즉 유도체 화합물이 경구 투여에 적합하다. 발명에 따르는 발명의 펩타이드 및 화합물은 경구 투여에 맞고 적합한 수준의 생체이용률을 제공할 수 있는 경구용 제제, 즉 조성물에 포함될 수 있다. 기술분야에 알려져 있는 경구 제제 기술이 사용될 수 있다. 이것은 N-(8-(2-하이드록시벤조일)아미노)카프릴산의 염, 특히 WO96/30036 및 WO2008/028859에 기술된 것과 같은 소듐 N-(8-(2-하이드록시벤조일)아미노)카프릴레이트 (SNAC) 및 EP1154761 및 US 8053429에 기술된 것과 같은 카프르산 나트륨을 포함하여 GIPET 제제의 사용을 포함한다.
경구 조성물을 우한 화합물을 제공하기 위하여, 본 발명자들은 발명에 따르는 EGF(A) 펩타이드 유도체가 래트에서 위장 흡수를 나타내는 것을 확인하였다 (표 10).
다르게는, 발명의 조성물은, 예컨대 피하, 근육내, 복막내, 또는 정맥내 주입에 의해 수행되는 비경구 투여를 위한 것일 수 있다. 자연적으로, 피하 투여를 목적으로 하는 화합물은 위장 흡수를 나타낼 필요가 없을 수 있는 한편 액체 제제 중에서의 고안정성과 같은 다른 특징들이 바람직할 수 있다.
조합 치료
본 발명에 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 그것의 유도체로의 치료는 또한 하나 이상의 약물학적으로 활성인 물질, 예컨대 항-당뇨제, 항-비만제, 식욕 조절제, 항고혈압제, 당뇨병으로부터 유발된 또는 당뇨병과 관련된 합병증의 치료 및/또는 예방을 위한 작용제 및 비만으로부터 유발된 또는 비만과 관련된 합병증 및 장애의 치료 및/또는 예방을 위한 작용제로부터 선택된 물질과 조합될 수 있다.
이런 약물학적으로 활성인 물질의 예는 GLP-1 수용체 작용물질, 인슐린, DPP-IV (다이펩티딜 펩티다제-IV) 억제자, 아밀린 작용물질 및 렙틴 수용체 작용물질이다. 그러한 활성 물질들의 특별한 예는 GLP-1 수용체 작용물질 리라글루티드(liraglutide) 및 세마글루티드(semaglutide) 및 인슐린 데글루덱(insulin degludec)이다.
제약학적 적응증
한 측면으로 발명은 약의 제조에 사용하기 위한 본원에 기술된 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체의 사용에 관련된다.
발명은 또한 약으로서 또는 약의 제조에 사용하기 위한 발명의 화합물, 예컨대 발명에 따르는 펩타이드 유사체 또는 유도체, 또는 그것의 제약학적 조성물에 관련된다.
구체예에서, 발명의 화합물 또는 그것의 조성물은 (i) 지질 파라미터를 개선하기 위하여, 예컨대 이상지질혈증의 예방 및/또는 치료, 총 혈청 지질의 저하; LDL-C의 저하, HDL의 증가; 작고 조밀한 LDL의 저하; VLDL의 저하; 트라이글리세라이드의 저하; 콜레스테롤의 저하; 리포단백질 a (Lp(a))의 혈장 수준의 저하; 아포리포단백질 A (apo(A))의 생성의 억제를 위하여; (ii) 심혈관 질환, 예컨대 심장 증후군 X, 아테롬성 동맥경화증, 심근 경색, 관상 심장 질환, 재관류 손상, 뇌졸중, 뇌 허혈증, 초기 심장 또는 초기 심혈관 질환, 좌심실 비대증, 관상 동맥 질환, 고혈압, 본태성 고혈압, 응급 급성 고혈압, 심근증, 심장 부전, 운동 불내성, 급성 및/또는 만성 심부전, 부정맥, 심장 부정맥, 신코피(syncopy), 협심증, 심장 우회 및/또는 스텐트 재폐색, 간헐성 파행 (폐쇄성 아테롬성 동맥경화증), 이완성 심부전 및/또는 수축성 심부전의 예방 및/또는 치료; 및/또는 혈압의 감소, 예컨대 수축기 혈압의 감소; 심혈관 질환의 치료를 위하여 사용될 수 있다.
발명은 또한 (i) 지질 파라미터를 개선하기 위한, 예컨대 이상지질혈증의 예방 및/또는 치료, 총 혈청 지질의 저하; HDL-C의 증가; LDL-C의 저하, 작고 조밀한 LDL의 저하; VLDL-C의 저하; 트라이글리세라이드의 저하; 콜레스테롤의 저하; 리포단백질 a (Lp(a))의 혈장 수준의 저하; 아포리포단백질 A (apo(A))의 생성의 억제를 위한; (ii) 심혈관 질환, 예컨대 심장 증후군 X, 아테롬성 동맥경화증, 심근 경색, 관상 심장 질환, 재관류 손상, 뇌졸중, 뇌 허혈증, 초기 심장 또는 초기 심혈관 질환, 좌심실 비대증, 관상 동맥 질환, 고혈압, 본태성 고혈압, 응급 급성 고혈압, 심근증, 심장 부전, 운동 불내성, 급성 및/또는 만성 심부전, 부정맥, 심장 부정맥, 신코피, 협심증, 심장 우회 및/또는 스텐트 재폐색, 간헐성 파행 (폐쇄성 아테롬성 동맥경화증), 이완성 심부전 및/또는 수축성 심부전의 예방 및/또는 치료; 및/또는 혈압의 감소, 예컨대 수축기 혈압의 감소; 심혈관 질환의 치료를 위한 방법에 관련되며; 여기서 제약학적으로 활성인 양의 발명에 따르는 화합물, 예컨대 발명에 다르는 펩타이드 유사체 또는 유도체가 투여된다.
발명의 특정 특징들이 본원에서 예시되고 기술된 한편, 많은 변형, 치환, 변화 및 동등물이 이제 기술분야의 숙련자들에게 발생할 거이다. 그러므로, 첨부된 구체예들은 모든 그러한 변형 및 변화가 발명의 진정한 사상 내에 속하는 것으로 의도되는 것이 인지되어야 한다.
구체예
1. SEQ ID NO: 1에 의해 규정된 LDL-R의 EGF(A) 도메인의 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 301Leu을 포함한다.
2. 구체예 1에 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 야생형 cys 잔기 297Cys, 304Cys, 308Cys, 317Cys, 319Cys 및 331Cys를 포함한다.
3. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 (야생형) 아미노산 잔기s 295Asn, 296Glu, 298Leu, 302Gly 및 310Asp 중 하나 이상을 포함한다.
4. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 295에서 잔기 Asn(N)을 포함한다.
5. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 296에서 Glu(E)를 포함한다.
6. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 298에서 잔기 Leu(L)을 포함한다.
7. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서,
펩타이드 유사체는 위치 302에서 잔기 Gly(G)를 포함한다.
8. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 310에서 잔기 Asp(D)를 포함한다.
9. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 295 (Asn/N) 및 310 (Asp/D)에서 야생형 잔기를 포함한다.
10. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드는 SEQ ID NO.: 1에 비교하여 1 내지 15개의 아미노산 치환(들)을 가진다.
11. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치: 293, 294, 296, 299, 300, 303, 305, 306, 309, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 318, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 328, 329, 330, 332의 군으로부터 선택된 위치(들)에서 하나 이상의 아미노산 치환(들)을 포함한다.
12. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치: 294, 299, 300, 303, 309, 312, 313, 314, 316, 318, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 328, 329, 330, 332의 군으로부터 선택된 위치(들)에서 하나 이상의 아미노산 치환(들)을 포함한다.
13. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치: 309, 312, 313, 321, 324, 328, 332의 군으로부터 선택된 위치(들)에서 하나 이상의 아미노산 치환(들)을 포함한다.
14. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 293에 아미노산 잔기 Gly(G) 또는 Asn(N)을 포함한다.
15. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 294에 아미노산 잔기 Thr(T) 또는 Gly(G)를 포함한다.
16. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 299에 아미노산 잔기 Asp(D), Gly(G), Pro(P), Arg(R), Lys(K), Ser(S), Thr(T), Asn(N), Gln(Q), Ala(A), Ile(I), Leu(L), Met(M), Phe(F), Tyr(Y) 또는 Trp(W)을 포함한다.
17. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 299에 아미노산 잔기 Asp(D), Gly(G), Pro (P), Arg(R), Lys(K), Ser(S), Thr(T), Asn(N), Gln(Q), Ala(A), Ile(I), Leu(L), Met(M), Phe(F), Tyr(Y) 또는 Trp(W)을 포함한다.
18. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 200에 아미노산 잔기 Asp(D), Ser (S), Arg(R), Leu (L), Ala (A), Lys(K) 또는 Tyr(Y)을 포함한다.
19. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 299에 아미노산 잔기 Asp(D) 또는 Ala(A)을 포함한다.
20. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 300에 아미노산 잔기 His(H) 또는 Asn(N)을 포함한다.
21. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 307에 아미노산 잔기 Val(V), Ser(S), Thr (T) 또는 Ile (I)을 포함한다.
22. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 307에 아미노산 잔기 Val(V) 또는 Ile (I)을 포함한다.
23. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 307에 Ser(S), Thr (T) 또는 Ile (I)을 포함한다.
24. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 307에 Ile (I)을 포함한다.
25. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 309에 아미노산 잔기 Asn(N) , Glu (E), His (H,) Arg (R), Ser (S) 또는 Lys (K)를 포함한다.
26. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 309에 아미노산 잔기 Asn(N), Arg (R), Ser (S) 또는 Lys (K)를 포함한다.
27. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 309에 아미노산 잔기 Asn(N), Arg (R) 또는 Ser (S)을 포함한다.
28. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 309에 아미노산 잔기 Asn(N) 또는 Arg (R)을 포함한다.
29. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 309에 아미노산 잔기 Lys(K) 또는 Arg (R)을 포함한다.
30. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 309에 아미노산 잔기 Arg (R)을 포함한다.
31. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 312에 아미노산 잔기 Lys(K), Glu(E), Asp(D), Gln(Q) 또는 Arg (R)을 포함한다.
32. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 312에 Lys(K)의 아미노산 치환을 포함한다.
33. 구체예 32를 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 312Lys는 312Gly, 312Pro, 312Asp, 312Glu, 312Arg, 312His, 312Ser, 312Thr, 312Asn, 312Gln, 312Ala, 312Val, 312Ile, 312Leu, 312Met, 312Phe 및 312Tyr로 구성되는 군으로부터 선택된 아미노산에 의해 치환된다.
34. 구체예 32를 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 312Lys는 312Asp, 312Glu, 312Thr, 312Asn, 312Ile, 312Phe 및 312Tyr로 구성되는 군으로부터 선택된 아미노산에 의해 치환된다.
35. 구체예 32를 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 312Lys는 312Asp, 312Glu, 312Thr, 312Asn, 312Ile 및 312Phe로 구성되는 군으로부터 선택된 아미노산에 의해 치환된다.
36. 구체예 32를 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 312Lys는 312Glu, 312Asp, 312Gln 및 312Arg로 구성되는 군으로부터 선택된 아미노산에 의해 치환된다.
37. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 321에 아미노산 잔기 Asp(D), Lys (K) 또는 Glu(E)를 포함한다.
38. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 321에 아미노산 잔기 Asp(D) 또는 Glu(E)를 포함한다.
39. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 321에 아미노산 잔기 Glu(E)를 포함한다.
40. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 324에 아미노산 잔기 Gln (Q) 또는 Gly (G)를 포함한다.
41. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 320에 아미노산 잔기 Arg (R) 또는 His (H)를 포함한다.
42. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드는 299Asp(D)의 Glu(E), Val(V) 또는 His (H)으로의 치환을 갖지 않는다.
43. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드는 300Asn(N)의 Pro(P)로의 치환을 갖지 않는다.
44. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 적어도 하나의 Lys 아미노산 잔기를 포함한다.
45. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 Lys 치환을 포함한다.
46. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 Lys 치환 및 위치 312에서 wt Lys을 포함한다.
47. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 Lys 치환 및 위치 312에서 비 Lys 아미노산 잔기를 포함한다.
48. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 Lys 치환 및 위치 312에 Glu (E), Asp (D), Gln (Q) 또는 Arg (R)을 포함한다.
49. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 Lys 치환 및 위치 312에 Glu(E)를 포함한다.
50. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 하나 이상의 Lys 치환(들)을 포함한다.
51. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 상기 펩타이드는 다음을 포함하는 및/또는 다음으로 구성되는 적어도 2개의 아미노산 치환을 가진다:
i. 301Leu 및 309Arg
ii. 301Leu, 309Arg, 312Glu
iii. 301Leu, 307Ile 및 309Arg
iv. 301Leu, 307Ile, 309Arg 및 312Glu
v. 301Leu, 309Arg 및 321Glu
vi. 301Leu, 309Arg, 321Glu 및 312Glu
vii. 301Leu, 307Ile, 309Arg 및 299Ala
viii. 301Leu, 307Ile, 309Arg, 299Ala 및 312Glu
ix. 301Leu 및 309Arg 및 적어도 하나의 Lys 치환
x. 301Leu, 309Arg, 312Glu 및 적어도 하나의 Lys 치환
xi. 301Leu, 307Ile 및 309Arg 및 적어도 하나의 Lys 치환
xii. 301Leu, 307Ile, 309Arg 및 312Glu 및 적어도 하나의 Lys 치환
xiii. 301Leu, 309Arg 및 321Glu 및 적어도 하나의 Lys 치환
xiv. 301Leu, 309Arg, 321Glu 및 312Glu 및 적어도 하나의 Lys 치환
xv. 301Leu, 307Ile, 309Arg 및 299Ala 및 적어도 하나의 Lys 치환 또는
xvi. 301Leu, 307Ile, 309Arg, 299Ala 및 312Glu 및 적어도 하나의 Lys 치환.
52. 전술한 구체예 1 내지 50 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 상기 펩타이드는 다음을 포함하는 및/또는 다음으로 구성되는 적어도 2개의 아미노산 치환을 가진다:
xvii. 301Leu 및 309Lys
xviii. 301Leu, 309Lys 및 312Glu
xix. 301Leu 및 309Lys 및 적어도 하나의 추가의 Lys 치환 또는
xx. 301Leu, 309Lys 및 312Glu 및 적어도 하나의 추가의 Lys 치환.
53. 전술한 구체예 1 내지 50 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 상기 펩타이드는 다음을 포함하는 및/또는 그것으로 구성되는 적어도 2개의 아미노산 치환을 가진다:
xxi. 301Leu 및 307Ile,
xxii. 301Leu, 307Ile 및 312Glu
xxiii. 301Leu 및 307Ile 및 적어도 하나의 추가의 Lys 치환 또는
xxiv. 301Leu, 3307Ile 및 312Glu 및 적어도 하나의 추가의 Lys 치환.
54. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 N-말단 및/또는 C-말단 연장을 포함한다.
55. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 1 내지 10개의 아미노산 잔기의 N-말단 연장을 포함한다.
56. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 292에 아미노산 잔기, 예컨대 292 Ala (A) 또는 292 (K)를 포함하는 N-말단 연장을 포함한다.
57. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 1 내지 10개의 아미노산 잔기의 C-말단 연장을 포함한다.
58. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 위치 333에 아미노산 잔기, 예컨대 333 Ala (A) 또는 333 (K)를 포함하는 C-말단 연장을 포함한다.
59. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 296Lys, 299Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 Lys 잔기를 포함한다.
60. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 299Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 Lys 잔기를 포함한다.
61. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 316Lys, 318Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 Lys 잔기를 포함한다.
62. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, , 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 316Lys, 318Lys,, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 Lys 잔기를 포함한다.
63. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 316Lys, 318Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 Lys 잔기를 포함한다.
64. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 313Lys, 324Lys, 328Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 Lys 잔기를 포함한다.
65. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 구체예 59 내지 65에서 규정된 군 중 임의의 것으로부터 선택된 2개의 Lys 잔기를 포함한다.
66. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 다음으로 구성되는 쌍으로부터 선택된 2개의 Lys 잔기를 포함한다:
67. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 N-말단 또는 C-말단 절단을 포함한다.
68. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 1 내지 10개의 아미노산 잔기의 N-말단 절단을 포함한다.
69. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 적어도 또는 특이적으로 아미노산 293Gly가 결실된 N-말단 절단을 포함한다.
70. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 1 내지 2개의 아미노산 잔기의 C-말단 절단을 포함한다.
71. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 펩타이드 유사체는 적어도 또는 특이적으로 아미노산 332Glu가 결실된 C-말단 절단을 포함한다.
72. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 상기 펩타이드 서열은 SEQ ID 2 내지 106 중 어느 하나에 의해 확인된다.
73. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 상기 펩타이드 서열은 SEQ ID NO.: 2 내지 47 및 49 내지 106 중 어느 하나에 의해 확인된다.
74. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 상기 펩타이드 서열은 SEQ ID NO.: 2 내지 44, 46, 47 및 49 내지 106 중 어느 하나에 의해 확인된다.
75. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 상기 펩타이드 서열은 SEQ ID NO.: 2 내지 44, 46, 47, 49 내지 53, 55, 58 내지 106 중 어느 하나에 의해 확인된다.
76. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 상기 펩타이드 서열은 SEQ ID NO.: 2 내지 4, 6 내지 44, 46, 47, 49 내지 53, 55, 58 내지 106 중 어느 하나에 의해 확인된다.
77. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 상기 펩타이드 서열은 SEQ ID NO.: 2 내지 4, 6 내지 19, 21 내지 44, 46, 47, 49 내지 53, 55, 58 내지 106 중 어느 하나에 의해 확인된다.
78. EGF(A) 펩타이드 유사체 및 치환기를 포함하는 EGF(A) 유도체.
79. 구체예 78에 따르는 EGF(A) 유도체로서, EGF(A) 유도체는 적어도 하나의 치환기를 포함한다.
80. 구체예 78 또는 79에 따르는 EGF(A) 유도체로서, 치환기는 반감기 연장 치환기이다.
81. 구체예 78 또는 80에 따르는 EGF(A) 유도체로서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 상기 구체예 1 내지 77 중 어느 것에서와 같이 규정된다.
82. 구체예 78 내지 81 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 또는 2개의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드 유사체의 질소 원자에 부착된다.
83. 구체예 78 내지 81 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 또는 2개의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드의 아미노기에 부착된다.
84. 구체예 78 내지 81 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 이상의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드의 N-말단 아미노산에 또는 EGF(A) 펩타이드의 Lys 잔기에 부착된다.
85. 구체예 78 내지 81 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 또는 2개의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드의 N-말단 아미노산에 부착된다.
86. 구체예 78 내지 81 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 또는 2개의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드의 N-말단 아미노산 잔기의 알파-질소에 부착된다.
87. 구체예 78 내지 81 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 또는 2개의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드의 Lys 잔기에 부착된다.
88. 구체예 78 내지 81 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 또는 2개의 치환기(들)은 EGF(A) 펩타이드의 Lys 잔기의 엡실론-질소에 부착된다.
89. 구체예 78 내지 81 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, EGF(A) 유도체는 2개의 치환기를 포함한다.
90. 구체예 89에 따르는 EGF(A) 유도체로서, 2개의 치환기는 동일하다.
91. 구체예 89에 따르는 EGF(A) 유도체로서, 2개의 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 질소 원자에 부착된다.
92. 구체예 89에 따르는 EGF(A) 유도체로서, 2개의 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 아미노기에 부착된다.
93. 구체예 89에 따르는 EGF(A) 유도체로서, 2개의 치환기는 EGF(A) 펩타이드의 N-말단 아미노산에 및 EGF(A) 펩타이드 유사체의 Lys 잔기에 부착된다.
94. 구체예 89에 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나의 치환기는 EGF(A) 펩타이드의 N-말단 아미노산 잔기의 알파-질소에 부착되고 한 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 Lys 잔기에 부착된다.
95. 구체예 89에 따르는 EGF(A) 유도체로서, 2개의 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 N-말단 아미노산에 부착된다.
96. 구체예 89에 따르는 EGF(A) 유도체로서, 2개의 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 Lys 잔기에 부착된다.
97. 구체예 89에 따르는 EGF(A) 유도체로서, 2개의 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 Lys 잔기의 엡실론-질소에 부착된다.
98. 구체예 78 내지 97 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 이상의 치환기(들)은 292Lys, 293Lys, 294Lys, 296Lys, 299Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 EGF(A) 펩타이드 유사체의 Lys 잔기에 부착된다.
99. 구체예 78 내지 97 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 이상의 치환기(들)은 292Lys, 293Lys, 294Lys, 299Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 EGF(A) 펩타이드 유사체의 Lys 잔기에 부착된다.
100. 구체예 78 내지 97 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 이상의 치환기(들)은 292Lys, 293Lys, 294Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 316Lys, 318Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 EGF(A) 펩타이드 유사체의 Lys 잔기에 부착된다.
101. 구체예 78 내지 100 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 312K에 부착된다.
102. 구체예 78 내지 100 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 치환기는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 치환된 Lys 잔기에 부착된다.
103. 구체예 100을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 유도체는 2개의 치환기를 포함하고 하나는 EGF(A) 펩타이드 유사체의 치환된 Lys 잔기에 부착되며 하나는 312K에 부착된다.
104. 구체예 102 및 103 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 유도체는 2개의 치환기를 포함하고 둘 다 EGF(A) 펩타이드 유사체의 치환된 Lys 잔기에 부착된다.
105. 구체예 102 내지 104 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 또는 2개의 치환기는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 296Lys, 299Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 EGF(A) 펩타이드 유사체의 치환된 Lys 잔기에 부착된다.
106. 구체예 102 내지 104 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 또는 2개의 치환기는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 299Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 EGF(A) 펩타이드 유사체의 치환된 Lys 잔기에 부착된다.
107. 구체예 102 내지 104 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 또는 2개의 치환기는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 316Lys, 318Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 EGF(A) 펩타이드 유사체의 치환된 Lys 잔기에 부착된다.
108. 구체예 102 내지 104 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 하나 또는 2개의 치환기는 313Lys, 324Lys, 328Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 EGF(A) 펩타이드 유사체의 치환된 Lys 잔기에 부착된다.
109. 구체예 78 내지 107 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 치환기는 위치 295, 298, 301, 302, 307 및 310 중 임의의 위치의 아미노산 잔기를 통하여 EGF(A) 펩타이드 유사체에 부착되지 않는다.
110. 구체예 78 내지 107 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 치환기는 위치 295, 296, 298, 301, 302, 307, 310 중 임의의 위치의 아미노산 잔기를 통하여 EGF(A) 펩타이드 유사체에 부착되지 않는다.
111. 구체예 78 내지 110 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 치환기는 Fc 도메인이 아니다.
112. 구체예 78 내지 110 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 치환기는 EGF (A) 펩타이드와 융합되지 않는다.
113. 구체예 78 내지 112 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 치환기는 적어도 하나의 지방산 기를 포함한다.
114. 구체예 113을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 상기 지방산 기는 pKa < 7인 적어도 하나의 작용기 및 적어도 8개의 연속적인 기를 함유하는 탄소 사슬을 포함하는 화학적 기이다.
115. 구체예 113을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 상기 지방산 기는 카르복실산, 설폰산, 테트라졸 모이어티, 메틸설포닐카바모일아미노 모이어티 또는 3-하이드록시-아이소옥사졸 모이어티로부터 선택된 작용기를 포함한다.
116. 구체예 113을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 상기 치환기는 8 내지 20개의 연속적인 -CH2-기를 포함하는 카르복실산, 설폰산, 테트라졸 모이어티, 메틸설포닐카바모일아미노 모이어티 또는 하이드록시아이소옥사졸3-하이드록시아이소옥사졸 모이어티를 포함한다.
117. 구체예 113을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 상기 치환기는 식 I을 가진다:
Z1-Z2-Z3-Z4-Z5-Z6-Z7-Z8-Z9-Z10- [I]
식에서
Z1은
Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-*,
Chem. 2: 테트라졸릴-(CH2)n-CO-*,
Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-*,
Chem. 4: HOS(O)2-(CH2)n-CO-*,
Chem. 5: MeS(O)2NH(CO)NH-(CH2)n-CO-* 및
Chem. 6: 3-HO-아이소옥사졸-(CH2)n-CO-*로부터 선택되며,
여기서
n은 8 내지 20 범위의 정수이고,
m은 8 내지 11 범위의 정수이며,
Chem. 3에서 -COOH 기는 페닐 고리의 위치 2, 3 또는 4에 부착될 수 있고,
기호 *는 Z2의 질소에 대한 부착점, 또는 만약 Z2가 결합이면, 인접한 Z 요소의 질소에 대한 부착점을 나타내며;
Z2는
Chem. 7: *-NH-SO2-(CH2)3-CO-*,
Chem. 8: *-NH-CH2-(C6H10)-CO-* 및
결합으로부터 선택되고;
Z3은
γGlu, Glu 및 결합으로부터 선택되며;
Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9는 서로 독립적으로,
Glu, γGlu, Gly, Ser, Ala, Thr, Ado, Aeep, Aeeep, TtdSuc 및 결합으로부터 선택되고;
Z10은
Chem. 7: *-NH-CH2-(C6H4)-CH2-* 및 결합으로부터 선택된다.
118. 구체예 117을 따르는 EGF(A) 유도체로서,
γGlu는 식 Chem. 9: *NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-*의 것이고,
TtdSuc는 식 Chem. 10: *NH-CH2CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2OCH2CH2CH2NHCO*의 것이며,
Ado는 식 Chem. 11: *NH-(CH2)2-O-(CH2)2-O-CH2-CO-*의 것이고,
Aeep는 식 Chem. 12 *NH-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2CO*의 것이며, 및
Aeeep는 식 Chem. 13 *NH-CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2OCH2CH2CO*의 것이다.
119. 구체예 117을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 상기 치환기는 식 I을 가진다:
Z1-Z2-Z3-Z4-Z5-Z6-Z7-Z8-Z9-Z10- [I]
식에서
Z1은
Chem. 1b: 
,
Chem. 2b: 
,
Chem. 3b: 
,
Chem. 4b: 
,
Chem. 5b: 
, 및
Chem. 6b: 
로부터 선택되고,
여기서
n은 Chem. 1b, 2b, 4b, 5b 또는 6b에서 8 내지 20 범위의 정수이며,
m은 Chem. 3b에서 8 내지 11 범위의 정수이고, Chem. 3b의 -COOH 기는 페닐 고리의 위치 2, 3 또는 4에 부착될 수 있으며,
기호 *는 Z2의 질소에 대한 부착점, 또는 만약 Z2가 결합이면, 인접한 Z 요소의 질소에 대한 부착점을 나타내고;
Z2는
Chem. 7b: 
,
Chem. 8b: 
및
결합으로부터 선택되며,
Z3은
γGlu, Glu, 및 결합으로부터 선택되고;
Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9는 서로 독립적으로,
Glu, γGlu, Gly, Ser, Ala, Thr, Ado, TtdSuc 및 결합으로부터 선택되며;
Z10은
Chem. 14b 
및 결합으로부터 선택되고,
단,
Z10이 Chem. 14b일 때, 상기 치환기는 상기 펩타이드의 N-말단 아미노기의 알파-질소에 부착되며; 및
Z10이 결합일 때, 상기 치환기는 상기 펩타이드에 존재하는 Lys 잔기의 엡실론 위치에 또는 상기 펩타이드의 N-말단 아미노산 잔기의 알파-질소에 부착된다.
120. 구체예 117을 따르는 EGF(A) 유도체로서, Z1은 식
Chem. 1b: 
이고
식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이다.
121. 구체예 117을 따르는 화합물로서, Z1은 식
Chem. 2b: 
이고
식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이다.
122. 구체예 117을 따르는 EGF(A) 유도체로서, Z1은 식
Chem. 4b: 
이고
식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이다.
123. 구체예 117을 따르는 EGF(A) 유도체로서, Z1은 식
Chem. 5b: 
이고
식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이다.
124. 구체예 117을 따르는 EGF(A) 유도체로서, Z1은 식
Chem. 6b: 
이고
식에서 n은 8 내지 20 범위의 정수이다.
125. 구체예 117을 따르는 EGF(A) 유도체로서, Z1은 식
Chem. 3b: 
이고
식에서 m은 8 내지 11 범위의 정수이다.
126. 구체예 125를 따르는 EGF(A) 유도체로서, m은 8, 9, 10 또는 11이다.
127. 구체예 125를 따르는 EGF(A) 유도체로서, m은 10 또는 11이다.
128. 구체예 120 내지 124 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, n은 10 내지 18, 10 내지 14, 15 내지 18, 8 내지 15 또는 16 내지 20의 범위에 있다.
129. 구체예 120 내지 124 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, n은 8, 9, 10, 11 또는 12이다.
130. 구체예 120 내지 124 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, n은 13, 14, 15 또는 16이다.
131. 구체예 120 내지 124 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, n은 14, 15, 16, 17 또는 18이다.
132. 구체예 120 내지 124 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, n은 17, 18, 19 또는 20이다.
133. 구체예 117 및 132 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, Z2는 Chem. 7 또는 Chem. 7b이고 Z3은 γGlu, Glu 및 결합으로부터 선택된다.
134. 구체예 117 및 132 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, Z2는 Chem. 8 또는 Chem. 8b이고 Z3은 γGlu 및 결합으로부터 선택된다.
135. 구체예 117 및 132 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 유도체는 다음으로 구성되는 군으로부터 선택된 하나 또는 2개의 치환기를 가진다:
136. 구체예 78에 따르는 EGF(A) 유도체로서, EGF(A) 유도체는 실시예 화합물 1 내지 47, 51 내지 102 및 106 내지 159로 구성되는 EGF(A) 유도체의 군으로부터 선택된다.
137. 구체예 78에 따르는 EGF(A) 유도체로서, EGF(A) 유도체는 실시예 화합물 1 내지 44, 46 내지 47, 51 내지 55, 57, 60 내지 64, 66 내지 69, 71 내지 102 및 106 내지 159로 구성되는 EGF(A) 유도체의 군으로부터 선택된다.
138. 구체예 78에 따르는 EGF(A) 유도체로서, EGF(A) 유도체는 실시예 화합물 31, 95, 128, 133, 143, 144, 150, 151, 152 및 153로 구성되는 EGF(A) 유도체의 군으로부터 선택된다.
139. 구체예 78에 따르는 EGF(A) 유도체로서, EGF(A) 유도체는 실시예 1 내지 47, 51 내지 102 및 106 내지 159로 구성되는 EGF(A) 유도체의 군으로부터 개별적으로 선택된다.
140. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체로서, 펩타이드 또는 유도체는 PCSK9 억제자이다.
141. 구체예 135를 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체로서, PCSK9 억제자는 인간 저밀도 리포단백질 수용체 (LDL-R)에 대한 PCSK9 결합을 억제할 수 있다.
142. 구체예 135를 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체로서, PCSK9 억제자는 인간 저밀도 리포단백질 수용체 (LDL-R)에 대한 PCSK9 결합을 감소시킨다.
143. 구체예 135를 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체로서, PCSK9 억제자는 경쟁 ELISA에 의해 측정되는 바 10 nM 아래, 예컨대 8 nM, 6 nM, 5 nM, 4 nM, 3 nM 아래 또는 예컨대 2 nM 아래의 외관 결합 친화도 (Ki)를 가진다.
144. 구체예 135를 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체로서, PCSK9 억제자는 D1.1에서 기술된 경쟁 ELISA에 의해 측정되는 바 10 nM 아래, 예컨대 8 nM, 6 nM, 5 nM, 4 nM, 3 nM 아래 또는 예컨대 2 nM 아래의 외관 결합 친화도 (Ki)를 가진다.
145. 상기 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 유도체는 마우스에서 6시간을 초과하는, 예컨대 8시간 또는 예컨대 10시간의 반감기를 가진다. 상기 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 유도체로서, 유도체는 개에서 50시간을 초과하는, 예컨대 100시간 또는 예컨대 150시간의 반감기를 가진다.
146. 약으로서 사용하기 위한 전술한 구체예 1 내지 145 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체.
147. 치료 방법에 사용하기 위한 전술한 구체예 1 내지 145 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체.
148. 심혈관 질환의 예방 또는 치료 방법에 사용하기 위한 전술한 구체예 1 내지 145 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체.
149. 지질 파라미터의 개선 방법에 사용하기 위한 전술한 구체예 1 내지 145 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체.
150. 다음을 치료하는 방법에 사용하기 위한, 전술한 구체예 1 내지 145 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체:
i. 지질 파라미터의 개선, 예컨대 이상지질혈증의 예방 및/또는 치료, 총 혈청 지질의 저하, HDL-C의 증가, LDL-C의 저하, 작고 조밀한 LDL-C의 저하, VLDL-C의 저하, 트라이글리세라이드의 저하, 콜레스테롤의 저하, 리포단백질 a (Lp(a))의 혈장 수준의 저하 또는 아포리포단백질 A (apo(A))의 생성의 억제;
ii. 심혈관 질환, 예컨대 심장 증후군 X, 아테롬성 동맥경화증, 심근 경색, 관상 심장 질환, 재관류 손상, 뇌졸중, 뇌 허혈증, 초기 심장 또는 초기 심혈관 질환, 좌심실 비대증, 관상 동맥 질환, 고혈압, 본태성 고혈압, 응급 급성 고혈압, 심근증, 심장 부전, 운동 불내성, 급성 및/또는 만성 심부전, 부정맥, 심장 부정맥, 신코피, 협심증, 심장 우회 및/또는 스텐트 재폐색, 간헐성 파행 (폐쇄성 아테롬성 동맥경화증), 이완성 심부전 및/또는 수축성 심부전의 예방 및/또는 치료; 및/또는 혈압의 감소, 예컨대 수축기 혈압의 감소; 심혈관 질환의 치료.
151. 다음을 위한, 전술한 구체예 1 내지 145 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체의 사용:
i. 지질 파라미터의 개선, 예컨대 이상지질혈증의 예방 및/또는 치료, 총 혈청 지질의 저하, HDL-C의 증가, LDL-C의 저하, 작고 조밀한 LDL-C의 저하, VLDL-C의 저하, 트라이글리세라이드의 저하, 콜레스테롤의 저하, 리포단백질 a (Lp(a))의 혈장 수준의 저하 또는 아포리포단백질 A (apo(A))의 생성의 억제;
ii. 심혈관 질환, 예컨대 심장 증후군 X, 아테롬성 동맥경화증, 심근 경색, 관상 심장 질환, 재관류 손상, 뇌졸중, 뇌 허혈증, 초기 심장 또는 초기 심혈관 질환, 좌심실 비대증, 관상 동맥 질환, 고혈압, 본태성 고혈압, 응급 급성 고혈압, 심근증, 심장 부전, 운동 불내성, 급성 및/또는 만성 심부전, 부정맥, 심장 부정맥, 신코피, 협심증, 심장 우회 및/또는 스텐트 재폐색, 간헐성 파행 (폐쇄성 아테롬성 동맥경화증), 이완성 심부전 및/또는 수축성 심부전의 예방 및/또는 치료; 및/또는 혈압의 감소, 예컨대 수축기 혈압의 감소; 심혈관 질환의 치료.
152. 전술한 구체예들 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체, 및 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 제약학적 조성물.
153. 피하 투여를 위한 구체예 152를 따르는 제약학적 조성물.
154. 경구 투여를 위한 구체예 152를 따르는 제약학적 조성물.
155. 전술한 구체예 1 내지 145 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체의 제약학적으로 활성인 양을 투여하는 단계를 포함하는, 지질 파라미터의 개선 방법.
156. 전술한 구체예 1 내지 145 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체의 제약학적으로 활성인 양을 투여하는 단계를 포함하는 지질 파라미터의 개선 방법으로서, 지질 파라미터의 개선은 예컨대 이상지질혈증의 예방 및/또는 치료, 총 혈청 지질의 저하; HDL의 증가; LDL-C의 저하; 작고 조밀한 LDL-C의 저하; VLDL-C의 저하; 비-HDL-C; 트라이글리세라이드의 저하; 콜레스테롤의 저하; 리포단백질 a (Lp(a))의 혈장 수준의 저하; 아포리포단백질 A (apo(A))의 생성의 억제이다.
157. 전술한 구체예 1 내지 145 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체의 제약학적으로 활성인 양을 투여하는 단계를 포함하는 심혈관 질환의 예방 및/또는 치료 방법.
158. 전술한 구체예 1 내지 145 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체의 제약학적으로 활성인 양을 투여하는 단계를 포함하는 심혈관 질환의 예방 및/또는 치료 방법으로서, 심혈관 질환은 예컨대 심장 증후군 X, 아테롬성 동맥경화증, 심근 경색, 관상 심장 질환, 재관류 손상, 뇌졸중, 뇌 허혈증, 초기 심장 또는 초기 심혈관 질환, 좌심실 비대증, 관상 동맥 질환, 고혈압, 본태성 고혈압, 응급 급성 고혈압, 심근증, 심장 부전, 운동 불내성, 급성 및/또는 만성 심부전, 부정맥, 심장 부정맥, 신코피, 협심증, 심장 우회 및/또는 스텐트 재폐색, 간헐성 파행 (폐쇄성 아테롬성 동맥경화증), 이완성 심부전 및/또는 수축성 심부전; 및/또는 혈압의 감소, 예컨대 수축기 혈압의 감소이다.
159. 전술한 구체예 1 내지 145 중 어느 것을 따르는 EGF(A) 펩타이드 유사체 또는 EGF(A) 유도체의 제조 방법으로서, EGF(A) 펩타이드는 재조합에 의해 제조되고 선택적으로 치환기와 공유 결합된다.
실시예
이 실험 섹션은 약어 목록으로 시작하고, 이어서 발명의 유사체 및 유도체를 합성하기 위한 일반적인 방법 및 특성화 방법을 포함하는 부분이 이어진다. 다음에 유사체 및 유도체를 포함하여, 발명의 특정 EGF(A) 화합물의 제조와 관련된 많은 실시예가 이어지고, 그 끝에는 이 화합물들의 활성 및 특성에 관련된 많은 실시예가 포함되었다 (약물학적 방법이란 제목의 섹션).
실시예는 발명을 예시하기 위해 작용한다.
약어 목록
AcOH: 아세트산
Ado: 8-아미노-3,6-다이옥사옥탄산
Aeep: 9-아미노-4,7-다이옥사노난산
Aeeep: 12-아미노-4,7,10-트라이옥사-도데칸산
Alloc: 알릴옥시카르보닐
API: 활성의 제약학적 성분
AUC: 곡선 아래의 면적
BG: 혈당
Boc: t-부틸옥시카르보닐
BSA: 소 혈청 알부민
Clt: 2-클로로트라이틸
콜리딘: 2,4,6-트라이메틸피리딘
DCM: 다이클로로메탄
Dde: 1-(4,4-다이메틸-2,6--다이옥소사이클로헥실리덴)에틸
DIC: 다이아이소프로필카르보다이이미드
DIPEA: 다이아이소프로필에틸아민
DMAP: 4-다이메틸아미노피리딘
EGF: 상피 성장 인자-유사
EGF(A): 상피 성장 인자-유사 도메인 A
F (표 5): 생체 이용률
Fmoc: 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐
HDL: 고밀도 리포단백질
HEPES: 4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라진에탄설폰산
HFIP: 1,1,1,3,3,3-헥사플루오로-2-프로판올 또는 헥사플루오로아이소프로판올
HOAt: 1-하이드록시-7-아자벤조트라이아졸
HOBt: 1-하이드록시벤조트라이아졸
hPCKS9: 인간 PCSK9
HPLC: 고성능 액체 크로마토그래피
HSA: 인간 혈청 알부민
IC50: 절반 최대 억제 농도
Inp: 아이소니페코트산
i.v.: 정맥내로
ivDde: 1-(4,4-다이메틸-2,6--다이옥소사이클로헥실리덴)-3-메틸부틸
LCMS: 액체 크로마토그래피 질량 분광분석
LDL-R 또는 LDLr: LDL 수용체
LDL: 저밀도 리포단백질
LDL-C: LDL 콜레스테롤
MeOH: 메탄올
Mmt: 4-메톡시트라이틸
Mtt: 4-메틸트라이틸
MRT: 평균 체류 시간
MSU: 메틸설포닐카바모일아미노
NMP: N-메틸 피롤리돈
OBz: 벤조일 에스테르
Ado: 8-아미노-3,6-다이옥사옥탄산
OSu: O-석신이미딜 에스테르 (하이드록시석신이미드 에스테르)
OtBu: tert 부틸 에스테르
Oxyma Pure®: 시아노-하이드록시이미노-아세트산 에틸 에스테르
Pbf: 2,2,4,6,7-펜타메틸다이하이드로벤조퓨란-5-설포닐
PBS: 포스페이트 완충 식염수
PD: 약역학적
PK: 약물동역학적
QC: 품질 관리
RP: 역상
RP-HPLC: 역상 고성능 액체 크로마토그래피
RT: 실온
Rt: 보유 시간
s.c.: 피하로
SD: 표준 편차
SEM: 평균의 표준 오류
SPPS: 고상 펩타이드 합성
tBu: tert. 부틸
TFA: 트라이플루오로아세트산
TIS 또는 TIPS: 트라이아이소프로필실란
Tmax: Cmax에 도달하는 시간
Tris: 트리스(하이드록시메틸)아미노메탄 또는 2-아미노-2-하이드록시메틸-프로판-1,3-다이올
Trt: 트라이페닐메틸 (트라이틸)
Trx: 트라넥사민산
UPLC: 초성능 액체 크로마토그래피
TBS-T: Tris 완충 식염수
화학적 방법
이 섹션은 3개로 나누어진다: 발명의 화합물의 제조의 일반적 방법에 관련된 섹션 A, 발명의 많은 특이적 화합물의 제조에 관련된 섹션 B, 및 발명의 화합물의 검출 및 특성화 방법 및 많은 특이적 예시 화합물에 대한 결과에 관련된 섹션 C.
A. 제조 방법
발명의 화합물은 하기 기술된 방법에 의해 제조될 수 있다.
펩타이드, 즉 SEQ ID NO: 1의 EGF(A) 펩타이드 또는 그것의 유사체의 제조: SPPS 일반 방법:
사용될 Fmoc-보호된 아미노산은 표준 권장된 것일 수 있다: Anaspec, Bachem, Iris Biotech 또는 NovabioChem으로부터 공급된 Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Asp(OtBu)-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-His(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Lys(BOC)-OH, Fmoc-Met-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Thr(tBu)-OH, Fmoc-Trp(BOC)-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-Val-OH 및 Fmoc-Lys(Mtt)-OH 또는 Fmoc-Lys(Alloc)-OH. SPPS를 Protein Technologies (Tucson, AZ 85714 U.S.A.)로부터의 Prelude 고상 펩타이드 합성기에서 Fmoc 기반 화학을 사용하여 수행할 수 있다. C-말단 카르복실산의 제조를 위해 적합한 수지는 Fmoc-Glu(tBu)-Wang 수지와 같은 아미노산으로 사전 로딩된 Wang 수지이다 (저 로드, 0.35 mmol/g). 치환기가 C-말단 리신에 부착되는 경우에, 적합한 수지는 사전 로딩된 Fmoc-Lys(Mtt)-Wang이다. C-말단 펩타이드 아미드의 제조에 적합한 수지는 H-링크 아미드-ChemMatrix 수지 (예컨대 0.52 nmol/g 로딩) 또는 링크 아미드 AM 폴리스티렌 수지 (Novabiochem, 예컨대 0.62 mmol/g 로딩) 등이다. Fmoc-탈보호는 NMP 중의 20% 피페리딘으로 이루어진다. 펩타이드 결합은 사전활성화가 있거나 없는 콜리딘이 있거나 없이 DIC/HOAt/콜리딘 또는 DIC/Oxyma Pure를 사용하여 또는 결합 중에 예컨대 His의 에피머화(epimization)의 억제를 위해 DEPBt (3-(다이에톡시포스포릴옥시)-1,2,3-벤조트라이아진-4(3H)-온)/DIPEA를 사용하여 수행한다. 아미노산/HOAt 또는 아미노산/Oxyma Pure 용액 (3 내지 10배의 몰 과잉에서 NMP 중의 0.3 M/0.3 M)을 수지에 첨가하고 이어서 동일 몰 당량의 DIC (NMP 중의 3 M)와 이어서 콜리딘 (NMP 중의 3 M)을 첨가한다. 예를 들어, 다음의 스케일 반응을 위해 결합당 0.3 M 아미노산/HOAt 용액의 다음의 양을 사용할 수 있다: 스케일/mL, 0.05 mmol/1.5 mL, 0.10 mmol/3.0 mL, 0.25 mmol/7.5 mL.
만약 Fmoc-Lys(Mtt)-OH를 사용하면, Mtt 기는 수지를 HFIP/DCM (75:25) (2 x 2분)으로 세척함으로써 제거할 수 있고, DCM으로 세척하고 수지를 HFIP/DCM (75:25)(2 x 20분)에 현탁한 후 계속해서 세척 후에 치환기를 리신 모이어티의 엡실론-위치에 도입할 수 있다.
만약 Fmoc-Lys(Alloc)-OH를 사용하면, Alloc 기는 수지를 조합된 하나 이상의 스캐빈저, 예컨대 모르폴린 (6.0 당량) 및/또는 다이메틸 보란 착체 (18.0 당량)의 존재하에 Pd(PPh3)4 (0.02 당량)으로 처리함 (30분)으로써 제거할 수 있다. 수지는 그런 다음 MeOH, NMP 또는 DMF 및 IPA (아이소프로필 알코올)로 각각 세척한 후, 치환기를 리신 모이어티의 엡실론-위치에 도입할 수 있다.
치환기의 부착 (아실화)
치환기를 상기 기술된 Prelude 펩타이드 합성기에 의해 적합하게 보호된 빌딩 블록, 예컨대 상기 기술된 표준 아미노산, Fmoc-8-아미노-3,6-다이옥사옥탄산 또는 Fmoc-Glu-OtBu를 사용하여 단계식 과정으로 도입할 수 있다. 치환기의 도입은 빌딩 블록, 예컨대, 한정하는 것은 아니지만, 옥타데칸산 모노-tert-부틸-에스테르를 사용하여 이루어질 수 있다. 각각의 결합 단계 후에, 미반응 펩타이드 중간체를 아세트산 무수물 및 과량의 콜리딘 (> 10 eq.)을 사용하여 캡핑할 수 있다.
리신의 엡실론-질소에 치환기의 도입은 Mtt (Fmoc-Lys(Mtt)-OH), Alloc (Fmoc-Lys(Alloc)-OH) 또는 ivDde 기 (Fmoc-Lys(ivDde)-OH)로 보호된 리신을 사용하여 이루어진다. 치환기에 γGlu 모이어티의 통합은 아미노산 Fmoc-Glu-OtBu와의 결합에 의해 이루어질 수 있다.
치환기에 각 모이어티의 도입은 연장된 결합 시간 (1 x 6시간)을 사용한 후 아세트산 무수물 또는 다르게는 아세트산/DIC/HOAt/콜리딘으로 캡핑함으로써 이루어질 수 있다.
수지로부터의 절단
합성 후에 수지를 DCM으로 세척하고, 펩타이드를 2-3 시간 동안 TFA/TIPS/물 (95/2.5/2.5) 또는 TFA/EDT (1,2-에탄다이티올)/물 (90/5/5)로 처리하고 이어서 Et2O (다이에틸 에테르)로 침전시킴으로써 수지로부터 절단한다. 침전물을 Et2O로 세척한다.
산화성 접힘
상기 단계로부터의 침전물을 DMSO에 용해시키고 다음으로 구성되는 용액에 첨가한다:
MQ 물, pH 8 내지 8.8 중에
50 mM TRIS
5 mM CaCl2
3 mM 시스테인
0.3 mM 시스틴.
반응 혼합물을 실온에서 밤새 유지하거나 LCMS가 완전한 반응을 보일 때까지 유지한다.
정제 및 정량
미정제 펩타이드 (유도체)를 TFA로 pH 2 내지 3으로 산성화하고 역상 예비 HPLC (물s Deltaprep 4000 또는 Gilson)에 의해 C8- 또는 C18-실리카겔을 포함하는 칼럼 상에서 정제한다. 용출을 0.1% TFA를 포함하는 물 중의 증가하는 구배의 MeCN으로 수행한다. 관련 분획을 분석용 HPLC 또는 UPLC에 의해 조사한다. 순수한 표적 펩타이드 유도체를 포함하는 분획들을 혼합한다. 추가의 정제 단계를 다른 구배, 예컨대 0.05M NH4HCO3을 함유하는 구배를 사용하여 도입할 수 있다. 그 결과의 용액을 분석하고 (HPLC, LCMS) 생성물 (즉 유도체)을 화학발광 질소 특이적 HPLC 검출기 (Antek 8060 HPLC-CLND)를 사용하여 또는 280 nm에서의 UV-흡광도를 측정함으로써 정량한다. 생성물을 유리 바이알에 분배한다. 바이알을 Millipore 유리섬유 프리필터로 캡핑한다. 이것을 동결-건조하여 펩타이드 트라이플루오로아세테이트를 백색 고체로서 얻는다.
치환기의 부착 (환원성 알킬화)
정제된 펩타이드 유사체에 알데하이드 기능성을 가지도록 유도체화된 적합한 알부민 결합 치환기를 사용하여 환원성 알킬화를 수행할 수 있다.
펩타이드 유사체를 시트르산 pH = 5.5에 용해시키고 적합한 알데하이드를 용해도를 증가시키기 위하여 사이클로덱스트린을 함유할 수 있는 물에 용해시킨다. MeOH에 용해된 보란 피리딘 착체와 같은 환원제를 첨가하고 그 혼합물을 밤새 부드럽게 흔들어준다. 계속해서 최적의 수율을 위해 과량의 알데하이드 및 환원제의 첨가가 필요할 수 있다. 혼합물을 상기 기술한 과정을 사용하여 정제한다.
B. 발명의 화합물의 합성
발명의 화합물을 하기 기술된 일반 방법과 본질적으로 다르지 않은 방법에 의해 제조하였다.
방법 A
LDL-R(293-332) 펩타이드 유사체 (치환기 없음)의 합성
사용한 Fmoc-보호된 아미노산은 표준 권장된 것이었다: 예컨대 Anaspec, Bachem, Iris Biotech 또는 NovabioChem으로부터 공급된 Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Asp(OtBu)-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-His(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Lys(BOC)-OH, BOC-Lys(Fmoc)-OH Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Thr(tBu)-OH, Fmoc-Trp(BOC)-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-Val-OH 및 Fmoc-Lys(Mtt)-OH. SPPS를 Protein Technologies (Tucson, AZ 85714 U.S.A.)로부터의 Prelude 고상 펩타이드 합성기에서 Fmoc 기반 화학을 사용하여 수행하였다. Fmoc-Glu(tBu)-Wang 수지 (저 로드, 0.35 mmol/g) 등과 같은 아미노산으로 사전 로딩된 Wang 수지를 사용하였다. Fmoc-탈보호를 NMP 중의 20% 피페리딘으로 이루었다. 펩타이드 결합을 콜리딘을 포함한 DIC/Oxyma Pure를 사용하여 수행하였다. 아미노산/Oxyma Pure 용액 (DMF 중의 0.3 M/0.3 M, 3 내지 10배의 몰 과잉에서)을 수지에 첨가한 후 동일 몰 당량의 DIC (NMP 중의 3 M)와 이어서 콜리딘 (NMP 중의 3 M)을 첨가하였다.
수지로부터의 절단
합성 후 수지를 DCM으로 세척하고, 펩타이드를 TFA/TIPS/DTT/물 (92.5/2.5/2.5/2.5)로 2-3 시간 처리한 후 다이에틸 에테르로 침전시킴으로써 수지로부터 절단하였다. 침전물을 계속해서 다이에틸 에테르로 세척하였다.
산화성 접힘
상기 단계로부터의 침전물을 DMSO에 용해시키고 다음으로 구성되는 용액에 첨가하였다:
MQ 물, pH 8 내지 8.8 중에
50 mM TRIS
5 mM CaCl2
3 mM 시스테인
0.3 mM 시스틴.
반응 혼합물을 실온에서 밤새 유지하거나 LCMS가 완전한 반응을 보일 때까지 유지하였다.
정제 및 정량
미정제 펩타이드를 TFA로 pH 2 내지 3으로 산성화하고 역상 예비 HPLC (Waters Deltaprep 4000 또는 Gilson)에 의해 C8- 또는 C18-실리카겔을 포함하는 칼럼 상에서 정제하였다. 용출을 0.1% TFA를 포함하는 물 중의 증가하는 구배의 MeCN으로 수행하였다. 관련 분획을 UPLC를 사용하여 분석하였다. 그 결과의 용액을 분석하고 (HPLC, LCMS) 펩타이드 유도체를 화학발광 질소 특이적 HPLC 검출기 (Antek 8060 HPLC-CLND)를 사용하여 또는 280 nm에서의 UV-흡광도를 측정함으로써 정량하였다. 생성물을 유리 바이알에 분배하였다. 바이알을 Millipore 유리섬유 프리필터로 캡핑하였다. 이것을 동결-건조하여 펩타이드의 트라이플루오로아세테이트 염을 백색 고체로서 얻었다.
방법 B
LDL-R(293-332) EGF(A) 유사체 (치환기 포함)의 유도체의 합성 (수지에서)
수지 결합된 EGF(A) 펩타이드의 합성을 상기 기술한 것과 같이 진행하였다.
서열의 N-말단에서 리신의 엡실론-질소상에 치환기의 도입은 Boc-Lys(Fmoc)-OH를 사용하여 이루었다. N-말단 아미노산의 알파-위치에서의 치환기의 도입을 표준 Fmoc-보호된 아미노산, 즉 Fmoc-Gly-OH를 사용하여 완성하였다.
다른 위치에서 리신의 엡실론-질소 상에 치환기를 도입하기 위하여, Fmoc-Lys(Mtt)-OH를 사용하였다. Mtt 기를 HFIP/DCM (75:25) (2 x 2분)로 처리한 후, DCM으로 세척함으로써 제거하였다. 그런 다음 수지를 HFIP/DCM (75:25)(2x20분 또는 2x30분)에 재현탁하고 계속해서 DCM으로 세척한 후 치환기를 리신 모이어티의 엡실론-위치에 도입하였다.
치환기의 모이어티를 방법 A에서 기술한 것과 같이, Prelude 펩타이드 합성기에 의해, 적합하게 보호된 빌딩 블록, 에컨대 방법 A에서 기술한 표준 Fmoc-보호된 아미노산, Fmoc-8-아미노-3,6-다이옥사옥탄산 또는 Fmoc-Glu-OtBu를 사용하여 단계식 과정으로 도입하였다. 지방산 기의 도입은 적합한 빌딩 블록, 예컨대 한정하는 것은 아니지만, 옥타데칸산 모노-tert-부틸-에스테르를 사용하여 이루었다. 일부 경우에 결합 시간은 증가되었거나 또는 각 빌딩 블록에 대한 결합 단계를 반복하였다.
절단, 산화성 접힘, 정제 및 정량을 방법 A에서 기술한 것과 같이 수행하였다.
방법 C
용액에서 치환기의 부착 (환원성 알킬화를 통한)
방법 A로부터 얻어진 정제된 펩타이드에 알데하이드 기능성을 가지도록 유도체화된 적합한 치환기를 사용하여 환원성 알킬화를 수행하였다.
동결-건조된 펩타이드 분말을 시트르산 완충액 (40 mM, pH 5.55; 펩타이드 농도: 4 mg/mL)에 용해시켰다. 40% (w/v) 수성 사이클로덱스트린 중에 선택된 치환기 (10 eq., 10 mg/mL)를 포함한 용액을 펩타이드 용액에 첨가하고 반응 바이알을 도치(inversion)시킴으로써 부드럽게 혼합하였다. 이 용액에 보란 피리딘 착체 (100 eq., MeOH 중의 80 mg/mL 용액)를 소량으로 첨가하고, 이어서 반응 바이알을 부드럽게 도치시켰다. 반응 용액을 실온에서 부드럽게 흔들어 주었다. 반응의 진행을 LC-MS에 의해 모니터링하였다. 모니터링 후에, 반응 용액을 TFA를 사용하여 pH 2-3으로 산성화하고 상기 방법 A에서 기술된 과정을 사용하여 정제하였다.
방법 D
치환기의 부착 (용액에서 접혀진 펩타이드의 N-말단 아실화)
동결-건조된 펩타이드 분말을 5 mg/mL의 표적 농도로 K2HPO4 완충액 (20 mM, pH 8.15)에 용해시켰다. DMSO 중의 18-[[(1S)-1-카르복시-4-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2,5--다이옥소피롤리딘-1-일)옥시-2-옥소-에톡시]에톡시]에틸아미노]-2-옥소-에톡시]에톡시]에틸아미노]-4-옥소-부틸]아미노]-18-옥소-옥타데칸산 용액 (4 eq.; 4 mg/mL)을 4 부분 표본액으로 나누어 첨가하였다. 각각의 부분 표본액을 첨가한 후에 펩타이드 용액을 반응 바이알의 도치에 의해 부드럽게 혼합하였다. 계속해서, 반응 용액의 pH 값을 측정하고 소량의 N,N-다이아이소프로필에틸아민의 첨가에 의해 pH 8.0 내지 8.3으로 조정한 후, 용액을 실온에 세워두었다. 반응의 진행을 LC-MS로 추적하였다. 3시간 후에 용액을 TFA로 pH 5.9로 산성화하고 상기 기술한 과정을 사용하여 정제하였다.
B.1. 프로트랙터(프로트랙터) 및 링커 요소의 합성
옥타데칸산 모노-tert-부틸 에스테르의 합성에 대해: 특허 출원 WO 2010102886 참조. C14-, C16- 및 C20 이산의 상응하는 모노-tert-부틸 에스테르를 따라서 제조할 수 있다. 14-설포-헥사데칸산 또는 16-설포-헥사데칸산 설폰의 합성에 대해 WO2015071355 참조. 16-(1H-테트라졸-5-일)헥사데칸산 및 13-(1H-테트라졸-5-일)헥사데칸산의 합성에 대해 WO2006005667 참조.
13-(메틸설포닐카바모일아미노)트라이데칸산.
Chem. 6-OH (n=12):
이 분자를 Luckhurst et al. Tetrahedron Letters Volume 48, Issue 50, 2007, Pages 8878-8882 http://dx.doi.org/10.1016/j.tetlet.2007.10.046으로부터의 변형 과정을 사용하여 제조하였다.
트라이에틸아민 (4.46 mL, 32.0 mmol) 및 에틸 클로로포르메이트(3.05 mL, 32.0 mmol)를 계속해서 0℃의 아세톤 (176 mL) 중의 14-(tert-부톡시)-14-옥소테트라데칸산 (1, C14(OtBu)-OH, 6.29 g, 20.0 mmol)의 용액에 첨가하였다. 0℃에서 30분 후에, 물 (12 mL) 중의 소듐 아지드 (2.60 g, 40.0 mmol)의 용액을 첨가하고 그 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공에서 (30℃에서)농축하고 물에 얼음과 함께 부었다 (300 mL). 그 결과의 혼합물을 에틸 아세테이트 (3 x 250 mL)로 추출하고; 유기 추출물을 조합하여 물 (200 mL), 탄산수소 나트륨의 10% 수용액 (200 mL) 및 물 (200 mL)로 세척하고; 무수 황산 마그네슘 상에서 건조시킨 후 건조상태로 증발시켜서 tert-부틸 14-아지도-14-옥소테트라데카노에이트 및 tert-부틸 14-아이소시아나토-14-옥소테트라데카노에이트의 혼합물을 담황색 오일로서 얻었다.
메탄설폰아미드 (1.52 g, 16.0 mmol), 탄산 칼륨 (6.63 g, 48.0 mmol)을 건조 톨루엔 (50 mL) 중의 tert-부틸 14-아지도-14-옥소테트라데카노에이트 및 tert-부틸 14-아이소시아나토-14-옥소테트라데카노에이트 (5.43 g, 16.0 mmol)의 혼합물의 용액에 첨가하였다. 그 반응 혼합물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 물 (100 mL)을 첨가하고 이어서 1 M 수성 염산 (pH를 pH=4로 조정함)을 첨가하였다. 혼합물을 다이에틸 에테르 (4 x 150 mL)로 추출하고, 무수 황산 마그네슘 상에서 건조시키고 진공에서 증발시켜서 tert-부틸 13-(3-(메틸설포닐)우레이도)트라이데카노에이트를 얻었다.
1H NMR 스펙트럼 (300 MHz, DMSO, dH): 10.01 (s, 1 H); 6.42 (t, J=4.7 Hz, 1 H); 3.20 (s, 3 H); 3.02 (q, J=6.7 Hz, 2 H); 2.16 (t, J=7.3 Hz, 2 H); 1.52-1.33 (m, 13 H); 1.30-1.11 (m, 16 H).
트라이플루오로아세트산 (21.0 mL) 및 물 (2.50 mL)을 다이클로로메탄 (30 mL) 중의 tert-부틸 13-(3-(메틸설포닐)우레이도)트라이데카노에이트 (3, 6.30 g, 15.5 mmol) 용액에 적가 방식으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시켜서 13-(3-(메틸설포닐)우레이도)트라이데칸산을 얻었다.
1H NMR 스펙트럼 (300 MHz, DMSO, dH): 10.02 (s, 1 H); 6.43 (t, J=4.5 Hz, 1 H); 3.20 (s, 3 H); 3.02 (q, J=6.6 Hz, 2 H); 2.18 (t, J=7.3 Hz, 2 H); 1.56-1.33 (m, 4 H); 1.24 (s, 16 H).
13-(3-하이드록시아이소옥사졸-5-일)트라이데칸산
Chem. 5-OH (n=12):
이 분자를 Sørensen et al. J. Org. Chem., 2000, 65 (4), pp 1003-1007. DOI: 10.1021/jo991409d로부터의 변형 과정을 사용하여 제조하였다.
14-(tert-부톡시)-14-옥소테트라데칸산 (1, 30.0 g, 95.4 mmol), N,N'-다이사이클로헥실카르보다이이미드 (43.3 g, 209 mmol) 및 4-다이메틸아미노피리딘 (25.6 g, 20.9 mmol)을 무수 다이클로로메탄 (700 mL)에 용해시키고 2,2-다이메틸-1,3-다이옥산-4,6-다이온 (2, 20.6 g, 143 mmol)을 그 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 그런 다음 휘발물질을 증발시키고 혼합물을 다이에틸 에테르 (500 mL)로 희석하고 생성된 백색 침전물을 여과하였다. 여과물을 감압하에 농축하고, 다이에틸 에테르 (300 mL)로 희석하고 1 M 수성 염산 (3 x 100 mL) 및 식염수 (1 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 부분을 황상 나트륨으로 건조시키고 감압하에 증발시켜서 tert-부틸 14-(2,2-다이메틸-4,6-다이옥소-1,3-다이옥산-5-일)-14-옥소테트라데카노에이트를 황색 오일로서 얻었다. 미정제 생성물을 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
1H NMR 스펙트럼 (300 MHz, CDCl3, dH): 3.07 (t, J=7.5 Hz, 2 H); 2.20 (t, J=7.5 Hz, 2 H); 1.74 (s, 6 H); 1.71-1.51 (m, 4 H); 1.45 (s, 9 H); 1.36-1.23 (m, 16 H).
상기로부터의 미정제 생성물을 에탄올 (300 mL)에 용해시키고 그 결과의 용액을 80℃에서 3시간 동안 교반한 후 밤새 실온에서 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하고 잔류물을 플래시 칼럼 크로마토그래피 (실리카겔 60, 0.040-0.063 mm; 용출액: 사이클로헥산/에틸 아세테이트 9:1)에 의해 정제하여 1-에틸 16-메틸 3-옥소헥사데칸다이오에이트를 무색 오일로서 얻었다.
1H NMR 스펙트럼 (300 MHz, CDCl3, dH): 4.21 (q, J=7.2 Hz, 2 H); 3.44 (s, 2 H); 2.54 (t, J=7.5 Hz, 2 H); 2.21 (t, J=7.5 Hz, 2 H); 1.67-1.51 (m, 4 H); 1.45 (s, 9 H); 1.38-1.21 (m, 19 H).
수산화 나트륨 (1.09 g, 27.3 mmol)을 메탄올 (40.0 mL) 및 물 (10.0 mL)에 -30℃에서 아르곤 분위기하에 용해시켰다. 상기 에스테르 (4, 10.0 g, 26.0 mmol)를 메탄올 (40 mL) 및 다이메톡시에탄 (50 mL)에 용해시키고 반응 혼합물에 -30℃에서 적가 방식으로 첨가하였다. 20분 후에, 다이메톡시에탄 (10 mL) 및 물 (10.0 mL) 중의 하이드록실아민 염산염 (3.61 g, 52.0 mmol) 및 수산화 나트륨 (2.18 g, 54.6 mmol)의 용액을 적가 방식으로 첨가하고 그 반응 혼합물을 3시간 동안 -30℃에서 교반하였다. 그런 다음 혼합물을 아세톤 (5 mL)으로 퀀칭하고 5분 후 농축 염산 (70 mL)에 한꺼번에 붓고 80℃로 70분 동안 가열하였다. 그런 다음 모든 휘발 물질을 감압하에 제거하고, 고체를 다이클로로메탄 (400 mL)으로 용해시키고 증류된 물 (100 mL) 및 식염수 (70 mL)로 추출하였다. 유기 부분을 황산 나트륨으로 건조시켰다. 미정제 생성물을 플래시 칼럼 크로마토그래피 (실리카겔 60, 0.040-0.063 mm; 용출액: 사이클로헥산/에틸 아세테이트 3:1)에 의해 정제하여 메틸 13-(3-하이드록시아이소옥사졸-5-일)트라이데카노에이트를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR 스펙트럼 (300 MHz, CDCl3, dH): 5.66 (s, 1 H); 3.67 (s, 3 H); 2.63 (t, J=7.6 Hz, 2 H); 2.31 (t, J=7.6 Hz, 1 H); 1.72-1.55 (m, 4 H); 1.40-1.19 (m, 16 H).
메틸 13-(3-하이드록시아이소옥사졸-5-일)트라이데카노에이트 (5, 6.20 g, 19.9 mmol)를 메탄올 (60.0 mL) 및 물 (20.0 mL)에 용해시키고, 수산화 리튬 1수화물 (4.04 g, 96.3 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 다음에 휘발 물질을 감압하에 제거하고 물 (50.0 mL)을 첨가하고 이어서 1 M 수성 염산 (50.0 mL)을 첨가하였다. 생성된 침전물을 여과하고 물 (2 x 100 mL)로 세척한 후 감압하에 건조시켜서 13-(3-하이드록시아이소옥사졸-5-일)트라이데칸산을 베이지색 고체로서 얻었다.
1H NMR 스펙트럼 (300 MHz, DMSO-d6, dH): 5.74 (s, 1 H); 2.57 (t, J=7.5 Hz, 2 H); 2.18 (t, J=7.5 Hz, 2 H); 1.63-1.41 (m, 4 H); 1.34-1.14 (m, 16 H).
B.2 환원성 알킬화를 위한 중간체 치환기 전구물질의 합성
18-[[(1S)-1-카르복시-4-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[(4-포르밀페닐)메틸아미노]-2-옥소-에톡시]에톡시]에틸아미노]-2-옥소-에톡시]에톡시]에틸아미노]-4-옥소-부틸]아미노]-18-옥소-옥타데칸산
2-클로로트라이틸 수지 100-200 메시 (42.6 g, 42.6 mmol)를 건조 다이클로로메탄 (205 mL)에서 팽윤되도록 20분 동안 놓아두었다. 건조 다이클로로메탄 (30 mL) 중의 {2-[2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-에톡시]-에톡시}-아세트산 (13.7 g, 35.5 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (23.5 mL, 135 mmol) 용액을 수지에 첨가하고 그 혼합물을 3시간 동안 흔들어주었다. 수지를 여과하고 메탄올/다이클로로메탄 혼합물 (4:1, 250 mL, 2 x 5분) 중의 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (12.4 mL, 70.9 mmol) 용액으로 처리하였다. 그런 다음 수지를 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 150 mL), 다이클로로메탄 (3 x 150 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL)로 세척하였다. Fmoc 기를 다이메틸포름아미드 중의 20% 피페리딘으로의 처리 (1 x 5분, 1 x 30분, 2 x 150 mL)에 의해 제거하였다. 수지를 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL), 2-프로판올 (2 x 150 mL) 및 다이클로로메탄 (200 mL, 2 x 150 mL)로 세척하였다. N,N-다이메틸포름아미드 (100 mL) 및 다이클로로메탄 (50 mL) 중의 {2-[2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-에톡시]-에톡시}-아세트산 (20.5 g, 53.2 mmol), O-(6-클로로-벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TCTU, 18.9 g, 53.2 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (16.7 mL, 95.7 mmol)의 용액을 수지에 첨가하고 그 혼합물을 1시간 동안 흔들어 주었다. 수지를 여과하고 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 150 mL), 다이클로로메탄 (3 x 150 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드 (155 mL)로 세척하였다. Fmoc 기를 다이메틸포름아미드 (1 x 5분, 1 x 30분, 2 x 150 mL) 중의 20% 피페리딘으로의 처리에 의해 제거하였다. 수지를 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL), 2-프로판올 (2 x 150 mL) 및 다이클로로메탄 (200 mL, 2 x 150 mL)으로 세척하였다. N,N-다이메틸포름아미드 (155 mL) 중의 Fmoc-Glu-OtBu (22.6 g, 53.2 mmol), O-(6-클로로-벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TCTU, 18.9 g, 53.2 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (16.7 mL, 95.7 mmol)의 용액을 수지에 첨가하고 그 혼합물을 1시간 동안 흔들어 주었다. 수지를 여과하고 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 150 mL), 다이클로로메탄 (2 x 150 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드 (150 mL)로 세척하였다. Fmoc 기를 다이메틸포름아미드 (1 x 5분, 1 x 30분, 2 x 150 mL) 중의 20% 피페리딘으로의 처리에 의하여 제거하였다. 수지를 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL), 2-프로판올 (2 x 150 mL) 및 다이클로로메탄 (200 mL, 2 x 150 mL)으로 세척하였다. N,N-다이메틸포름아미드/다이클로로메탄 혼합물 (1:4, 200 mL) 중의 옥타데칸산 모노-tert-부틸 에스테르 (19.7 g, 53.2 mmol), O-(6-클로로-벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TCTU, 18.9 g, 53.2 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (16.7 mL, 95.7 mmol)의 용액을 수지에 첨가하였다. 수지를 2시간 동안 흔들어 주고, 여과하고 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL), 다이클로로메탄 (2 x 150 mL), 메탄올 (2 x 150 mL) 및 다이클로로메탄 (300 mL, 6 x 150 mL)로 세척하였다. 생성물을 19시간 동안 2,2,2-트라이플루오로에탄올 (200 mL)로의 처리에 의해 수지로부터 절단하였다. 수지를 여과하고 다이클로로메탄 (2 x 150 mL), 2-프로판올/다이클로로메탄 혼합물 (1:1, 2 x 150 mL), 2-프로판올 (150 mL) 및 다이클로로메탄 (2 x 150 mL)으로 세척하였다. 용액들을 조합하였다; 용매를 증발시키고 미정제 생성물을 플래시 칼럼 크로마토그래피 (실리카겔 60, 0.040-0.060 mm; 용출액: 다이클로로메탄/메탄올 1:0-9:1)에 의해 정제하였다. 순수한 생성물을 진공 건조시켰고 황색 오일로서 얻었다.
17-{(S)-1-tert-부톡시카르보닐-3-[2-(2-{[2-(2-카르복시메톡시-에톡시)-에틸카바모일]-메톡시}-에톡시)-에틸카바모일]-프로필카바모일}-헵타데칸산 tert-부틸 에스테르의 수율: 25.85 g (86%).
RF (SiO2, 클로로포름/메탄올 85:15): 0.25.
1H NMR 스펙트럼 (300 MHz, CDCl3, dH): 7.38 (bs, 1 H); 7.08 (bs, 1 H); 6.61 (d, J=7.5 Hz, 1 H); 4.43 (m, 1 H); 4.15 (s, 2 H); 4.01 (s, 2 H); 3.78-3.39 (m, 16 H); 2.31 (t, J=6.9 Hz, 2 H); 2.27-2.09 (m, 5 H); 2.01-1.84 (m, 1 H); 1.69-1.50 (m, 4 H); 1.46 (s, 9 H); 1.43 (s, 9 H); 1.24 (bs, 24 H).
LC-MS m/z: 846.6 (M+H)+.
(4-포르밀-벤질)-카르밤산 tert-부틸 에스테르 (Boc-아미노메틸벤즈알데하이드, 1.54 g, 6.60 mmol)를 다이클로로메탄 (50 mL)에 용해시키고 다이옥산 (3.8 M, 20 mL, 76 mmol) 중의 염산 용액을 첨가하였다. 그 혼합물을 16시간 동안 교반하고 용액으로부터 고체 물질을 침전시켰다. 모든 용매를 증발에 의해 제거하였다. 17-{(S)-1-tert-부톡시카르보닐-3-[2-(2-{[2-(2-카르복시메톡시-에톡시)-에틸카바모일]-메톡시}-에톡시)-에틸카바모일]-프로필카바모일}-헵타데칸산 tert-부틸 에스테르 (5.08 g, 6.00 mmol), 에틸-(N',N'-다이메틸아미노)프로필카르보다이이미드 염산염 (EDC, 1.73 g, 9.00 mmol), N,N-다이메틸아미노피리딘 (DMAP, 0.037 g, 0.30 mmol) 및 다이클로로메탄 (50 mL)을 첨가하였다. 그 혼합물을 교반하고 다이아이소프로필에틸아민 (2 mL, 11.6 mmol)을 3 부분으로 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하고 용매를 증발시켰다. 잔류물을 다이클로로메탄 (10 mL)에 용해시키고 염산 용액을 pH가 5 미만이 될 때가지 적가 방식으로 첨가하였다. 용액에 칼럼 크로마토그래피 (실리카겔 60, 0.040-0.060 mm; 용출액: 다이클로로메탄/메탄올 95:5)를 수행하여 치환기를 황색 오일로서 제공하였다.
수율: 3.15 g (54%).
1H NMR 스펙트럼 (300 MHz, CDCl3, dH): 9.99 (s, 1 H); 7.85 (d, J=7.9 Hz, 2 H); 7.54-7.43 (m, 3 H); 7.06 (t, J=5.5 Hz, 1 H); 6.86 (t, J=5.6 Hz, 1 H); 6.48 (d, J=7.7 Hz, 1 H); 4.58 (d, J=6.2 Hz, 2 H); 4.45-4.36 (m, 1 H); 4.09 (s, 2 H); 3.94 (s, 2 H); 3.73-3.37 (m, 16 H); 2.32-2.05 (m, 7 H); 1.99-1.80 (m, 1 H); 1.69-1.51 (m, 4 H); 1.45 (s, 9 H); 1.44 (s, 9 H); 1.33-1.20 (m, 24 H).
LC-MS m/z: 963.5 (M+H)+.
(2S)-5-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[(4-포르밀페닐)메틸아미노]-2-옥소-에톡시]에톡시]에틸아미노]-2-옥소-에톡시]에톡시]에틸아미노]-5-옥소-2-(16-설포헥사데카노일아미노)펜탄산
2-클로로트라이틸 수지 100-200 메시 1.8 mmol/g (1, 8.40 g, 14.3 mmol)을 건조 다이클로로메탄 (150 mL)에 30분 동안 팽윤되도록 놓아두었다. 건조 다이클로로메탄 (~150 mL) 중의 Fmoc-Ado-OH (2.82 g, 9.50 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (6.30 mL, 36.1 mmol)의 용액을 수지에 첨가하고 그 혼합물을 24시간 동안 흔들어 주었다. 수지를 여과하고 메탄올/다이클로로메탄 혼합물 (4:1, 2 x 150 mL, 2 x 5분) 중의 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (3.30 mL, 19.0 mmol) 용액으로 처리하였다. 그런 다음 수지를 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL), 다이클로로메탄 (3 x 150 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL)로 세척하였다. Fmoc 기를 N,N-다이메틸포름아미드 (1 x 5분, 1 x 30분, 2 x 150 mL) 중의 20% 피페리딘으로의 처리에 의해 제거하였다. 수지를 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL), 2-프로판올 (3 x 150 mL) 및 다이클로로메탄 (3 x 150 mL)으로 세척하였다. N,N-다이메틸포름아미드 (150 mL) 중의 {2-[2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-에톡시]-에톡시}-아세트산 (Fmoc-Ado-OH, 4.80 g, 16.2 mmol), O-(6-클로로-벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TCTU, 5.74 g, 16.2 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (4.47 mL, 25.7 mmol)의 용액을 수지에 첨가하고 그 혼합물을 2시간 동안 흔들어 주었다. 수지를 여과하고 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL), 다이클로로메탄 (3 x 150 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL)로 세척하였다. Fmoc 기를 N,N-다이메틸포름아미드 (1 x 5분, 1 x 30분, 2 x 150 mL) 중의 20% 피페리딘으로의 처리에 의해 제거하였다. 수지를 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL), 2-프로판올 (3 x 150 mL) 및 다이클로로메탄 (3 x 150 mL)으로 세척하였다. N,N-다이메틸포름아미드 (150 mL) 중의 (S)-2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-펜탄다이오산 1-tert-부틸 에스테르 (Fmoc-Glu-OtBu, 6.87 g, 16.2 mmol), O-(6-클로로-벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TCTU, 5.74 g, 16.2 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (4.47 mL, 25.7 mmol)의 용액을 수지에 첨가하고 그 혼합물을 2시간 동안 흔들어 주었다. 수지를 여과하고 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL), 다이클로로메탄 (3 x 150 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL)로 세척하였다. Fmoc 기를 N,N-다이메틸포름아미드 (1 x 5분, 1 x 30분, 2 x 150 mL) 중의 20% 피페리딘으로의 처리에 의해 제거하였다. 수지를 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL), 2-프로판올 (3 x 150 mL) 및 다이클로로메탄 (3 x 150 mL)으로 세척하였다. N,N-다이메틸포름아미드/다이클로로메탄 혼합물 (1/1, 150 mL) 중의 16-((4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-2,2-다이메틸부톡시)설포닐)헥사데칸산 (6.62 g, 12.4 mmol), O-(6-클로로-벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TCTU, 4.39 g, 12.4 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (4.47 mL, 25.7 mmol)의 용액을 수지에 첨가하고 혼합물을 2시간 동안 흔들어 주었다. 수지를 여과하고 N,N-다이메틸포름아미드 (3 x 150 mL), 메탄올 (5 x 150 mL) 및 다이클로로메탄 (10 x 150 mL)으로 세척하였다. 생성물을 2,2,2-트라이플루오로에탄올 (150 mL)로 24시간 동안의 처리에 의해 수지로부터 절단하였다. 수지를 여과하고 다이클로로메탄 (3 x 150 mL)으로 세척하였다. 용액들을 조합하고, 용매를 증발시키고 미정제 생성물 (7.80 g)을 플래시 칼럼 크로마토그래피 (실리카겔 60, 0.040-0.060 mm; 용출액: 다이클로로메탄/메탄올 100:2 내지 다이클로로메탄/메탄올 100:10)에 의해 정제하여 중간체 화합물을 백색 고체로서 얻었다.
수율: 4.00 g (42%).
RF (SiO2, 다이클로로메탄/메탄올 8:1): 0.50.
1H NMR 스펙트럼 (300 MHz, CDCl3, dH): 7.79-7.65 (m, 1 H); 7.36-7.20 (m, 1 H); 6.86 (d, J=7.5 Hz, 1 H); 4.49-4.63 (m, 1 H); 4.44-4.29 (m, 1 H); 4.07-3.93 (m, 4 H); 3.90 (s, 2 H); 3.77-3.35 (m, 16 H); 3.25-3.02 (m, 4 H); 2.44-1.75 (m, 8 H); 1.72-1.38 (m, 22 H); 1.38-1.18 (m, 22 H); 1.00 (m, 6 H).
LC-MS m/z: 1012.3 (M+H)+.
상기로부터의 중간체 화합물 (3.77 g, 3.73 mmol), N,N-다이아이소프로필에틸아민 (1.75 mL, 10.1 mmol), [1,2,3]트라이아졸로[4,5-b]피리딘-1-올 (HOAt, 0.51 g, 3.73 mmol), N-(3-다이메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보다이이미드 염산염 (EDC·HCl, 1.43 g, 7.46 mmol)을 다이클로로메탄 (120 mL)에 용해시켰다. 여기에 4-포르밀-벤질-암모늄 클로라이드 (5, 0.77 g, 4.48 mmol)를 첨가하였다. 그 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 그 다음에 반응 혼합물을 증발시키고, 에틸 아세테이트 (300 mL)에 용해시키고 0.5 M 염산 수용액 (200 mL)으로 세척하였다. 유기상을 분리하고, 물 (200 mL)로 세척한 후 황산 마그네슘 상에서 건조시켰다. 에틸 아세테이트를 증발시키고 미정제 혼합물을 플래시 칼럼 크로마토그래피 (실리카겔 60, 0.040-0.060 mm; 용출액: 다이클로로메탄 내지 다이클로로메탄/메탄올 100:5)에 의해 정제하여 보호된 알데하이드를 백색 고체로서 얻었다.
수율: 3.00 g (71%).
RF (SiO2, 다이클로로메탄/메탄올 10:1): 0.70.
1H NMR 스펙트럼 (300 MHz, CDCl3, dH): 9.99 (s, 1 H); 7.85 (d, J=8.1 Hz, 2 H); 7.64-7.38 (m, 3 H); 7.14-6.97 (m, 1 H); 6.91-6.76 (m, 1 H); 6.54-6.43 (m, 1 H); 4.58 (d, J=6.2 Hz, 2 H); 4.47-4.32 (m, 1 H); 4.09 (s, 2 H); 3.88 (s, 2 H); 3.81-3.30 (m, 16 H); 3.22-3.02 (m, 4 H); 2.38-2.08 (m, 4 H); 1.96-1.71 (m, 5 H); 1.71-1.16 (m, 41 H); 0.99 (m, 6 H).
LC-MS m/z: 1129.5 (M+H)+.
상기로부터의 보호된 알데하이드 (3.00 g, 2.66 mmol)를 트라이플루오로아세트산 (15 mL) 및 물 (1 mL) 혼합물과 함께 3시간 동안 교반하였다. 이 시간 후에 혼합물을 다이클로로메탄으로 여러 번 톨루엔 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 물/아세토니트릴 혼합물 (1/1, 15 mL)에 부었다. pH를 인산 3나트륨의 포화 수용액으로 8.0으로 조정하고 그 결과의 용액을 20분 동안 50℃에서 교반하였다. pH를 황산 수소 칼륨의 포화 수용액으로 6.0으로 조정하였다. 잔류물을 역상 크로마토그래피 (DeltaPak, C18, 15 mm 50 mm x 500 mm, 아세토니트릴/물 5-15%/15분., 5-55%/180분. + 0.05% TFA)에 의해 탈염시켰다. 용매를 동결-건조에 의해 제거하여 치환기를 백색 분말로서 얻었다.
수율: 0.66 g (28%).
H NMR 스펙트럼 (300 MHz, D2O, dH): 9.81 (s, 1 H); 7.79 (d, J=7.7 Hz, 2 H); 7.41 (d, J=7.9 Hz, 2 H); 4.44 (s, 2 H); 4.32-4.19 (m, 1 H); 4.05 (s, 2 H); 3.90 (s, 2 H); 3.74-3.43 (m, 12 H); 3.38-3.18 (m, 4 H); 2.83-2.60 (m, 2 H); 2.37-1.76 (m, 6 H); 1.76-1.37 (m, 4 H); 1.34-0.91 (m, 22 H).
LC-MS m/z: 873.8 (M+H)+.
N-((1-(4-포르밀페닐)-3,12,21-트라이옥소-5,8,14,17-테트라옥사-2,11,20-트라이아자테트라코산-24-일)설포닐)-16-(1H-테트라졸-5-일)헥사데칸아미드
반응 계획:
Wang 수지 0.68 mmol/g (20.5 g, 13.9 mmol)를 테트라하이드로퓨란 (200 mL)에 팽윤되도록 20분 동안 놓아두었다. 테트라하이드로퓨란 (200 mL) 중의 {2-[2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-에톡시]-에톡시}-아세트산 (Fmoc-Ado-OH, 16.1 g, 41.8 mmol) 및 4-다이메틸아미노피리딘 (DMAP, 0.17 g, 1.39 mmol) 및 N,N'-다이아이소프로필카르보다이이미드 (DIC, 6.47 mL, 41.8 mmol)의 용액을 수지에 첨가하고 그 혼합물을 18시간 동안 흔들어 주었다. 그런 다음 수지를 여과하고 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 180 mL), 다이클로로메탄 (2 x 180 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 180 mL)로 세척하였다. 수지를 N,N-다이메틸포름아미드 (180 mL) 중의 아세트산 무수물 (13.2 mL, 139 mmol) 및 피리딘 (11.3 mL, 139 mmol)의 용액으로 처리하였다. 그런 다음 수지를 여과하고 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 180 mL), 다이클로로메탄 (2 x 180 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 180 mL)로 세척하였다. Fmoc 기를 N,N-다이메틸포름아미드 (1 x 5분, 1 x 30분, 2 x 180 mL) 중의 20% 피페리딘으로의 처리에 의해 제거하였다. 수지를 여과하고 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 180 mL), 다이클로로메탄 (2 x 180 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 180 mL)로 세척하였다. N,N-다이메틸포름아미드 (180 mL) 중의 {2-[2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐아미노)-에톡시]-에톡시}-아세트산 (Fmoc-Ado-OH, 10.8 g, 27.9 mmol), 5-클로로-1-((다이메틸아미노)(다이메틸이미니오)메틸)-1H-벤조[d][1,2,3]트라이아졸 3-옥사이드 테트라플루오로보레이트 (TCTU, 9.91 g, 27.9 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (7.28 mL, 41. 8 mmol)의 용액을 수지에 첨가하고 그 혼합물을 2시간 동안 흔들어 주었다. 그런 다음 수지를 여과하고 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 180 mL), 다이클로로메탄 (2 x 180 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 180 mL)로 세척하였다. Fmoc 기를 N,N-다이메틸포름아미드 (1 x 5분, 1 x 30분, 2 x 180 mL) 중의 20% 피페리딘으로의 처리에 의해 제거하였다. 수지를 여과하고 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 180 mL), 다이클로로메탄 (2 x 180 mL) 및 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 180 mL)로 세척하였다. N,N-다이메틸포름아미드 (90 mL) 및 다이클로로메탄 (90 mL)의 혼합물 중의 4-(N-(16-(1H-테트라졸-5-일)헥사데카노일)설파모일)부탄산 (THA-SBA-OH, 8.91 g, 18.8 mmol), 1-((다이메틸아미노)(다이메틸이미니오)메틸)-1H-[1,2,3]트라이아졸로[4,5-b]피리딘 3-옥사이드 헥사플루오로포스페이트 (HATU, 7.16 g, 18.8 mmol) 및 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (5.71 mL, 32.8 mmol)의 용액을 수지에 첨가하고 혼합물을 18시간 동안 흔들어 주었다.
수지를 여과하고 N,N-다이메틸포름아미드 (2 x 180 mL), 다이클로로메탄 (2 x 180 mL), 2-프로판올 (2 x 180 mL) 및 다이클로로메탄 (10 x 180 mL)으로 세척하였다. 생성물을 트라이플루오로아세트산 (150 mL) 및 물 (7.5 mL)의 혼합물로의 1시간 동안의 처리에 의해 수지로부터 절단하였다. 수지를 여과하고 다이클로로메탄 (2 x 150 mL)으로 세척하였다. 용매를 감압하에 제거하고 잔류물을 다이에틸 에테르 (100 mL)로 첨가하였다. 테트라하이드로퓨란 (100 mL) 중의 중간체 (7.90 g, 10.3 mmol)의 용액에 물 (100 mL) 중의 수산화 리튬 1수화물 (1.74 g, 41.4 mmol)을 첨가하였다. 용액을 18시간 동안 교반하였다. 용액을 pH=3이 이루어질 때까지 황산 수소 칼륨의 10% 수용액에 의해 산성화하고, 이어서 염화 나트륨으로 포화시켰다. 유기 상을 제거하고, 수성 상을 에틸 아세테이트 (1 x 300 mL)에 의해 추출하였다. 유기 상을 조합하여 무수 황산 나트륨 상에서 건조시켰다. 용매를 감압하에 제거하여 중간체를 백색 분말로서 얻었다.
수율: 5.50 g (52%).
1H NMR 스펙트럼 (300 MHz, AcOD-d4, dH): 4.22 (s, 2 H); 4.12 (s, 2 H); 3.83-3.61 (m, 12 H); 3.59-3.43 (m, 6 H); 3.02 (t, J=7.4 Hz, 2 H); 2.49 (t, J=7.3 Hz, 2 H); 2.41 (t, J=7.5 Hz, 2 H); 2.22-2.09 (m, 2 H); 1.89-1.75 (m, 2 H); 1.74-1.60 (m, 2 H); 1.47-1.26 (m, 22 H).
건조 다이클로로메탄 (100 mL) 중의 상기 화합물 (2.90 g, 3.80 mmol), 4-아미노메틸벤즈알데하이드 염산염 (0.78 g, 4.56 mmol), N,N'-다이사이클로헥실카르보다이이미드 (DCC, 0.78 g, 3.80 mmol) 및 4-다이메틸아미노피리딘 (DMAP, 1.02 g, 8.35 mmol)의 용액을 18시간 동안 교반하였다. 침전물을 여과하고 용액을 황산 수소 칼륨의 10% 수용액으로 세척하였다 (2 x 100 mL). 용매를 감압하에 제거하고 잔류물을 테트라하이드로퓨란 (30 mL)으로부터 결정화하였다. 플래시 칼럼 크로마토그래피 (실리카겔 60, 0.040-0.063 mm; 용출액: 다이클로로메탄/메탄올, 20:1-5:1)에 의한 정제로 최종 생성물을 담황색 분말로서 얻었다.
수율: 1.51 g (45%).
1H NMR 스펙트럼 (300 MHz, AcOD-d4, dH): 9.96 (s, 1H); 7.91 (d, J=7.9 Hz, 2 H); 7.92 (d, J=7.9 Hz, 2 H); 4.63 (s, 2 H); 4.21 (s, 2 H); 4.08 (s, 2 H); 3.81-3.57 (m, 12 H); 3.54-3.41 (m, 6 H); 3.02 (t, J=7.4 Hz, 2 H); 2.47 (t, J=7.3 Hz, 2 H); 2.38 (t, J=7.4 Hz, 2 H); 2.19-2.07 (m, 2 H); 1.86-1.72 (m, 2 H); 1.70-1.57 (m, 2 H); 1.43-1.23 (m, 22 H).
LC-MS purity: 100%.
LC-MS Rt (Kinetex 4.6 mm x 50 mm, 아세토니트릴/물 20:50 내지 100:0 + 0.1% FA): 3.58분.
LC-MS m/z: 882.0 (M+H)+.
총 29개의 치환기를 제조하였고 하기에 개별 치환기의 Z1-Z10 요소를 명시하여 열거한다.
검출 및 특성화 방법
LCMS 방법
| 시스템 | LC-시스템: Waters Acquity UPLC 칼럼: Waters Acquity UPLC BEH, C-18, 1.7μm, 2.1mm x 50mm 검출기: Waters (Micromass) LCT Premier XE |
| 검출기 구성 | 이온화 방법: ES 주사 범위: 500 - 2000 amu 작동 방식 : W 방식 포지티브/네거티브 : 포지티브 방식 원뿔형 전압: 50 V 주사 시간 1 인터스캔 딜레이: 0,0 |
| 조건 | 선형 구배: 5 % 내지 95 % B 구배 작동-시간: 4.0분 총 작동-시간 : 7.0분 유량: 0.4 ml/분 칼럼 온도: 40℃ |
| 용출액 | 용매 A: 99,90 % MQ-물, 0.1% 포름산 용매 B: 99.90 % 아세토니트릴, 0.1 % 포름산 용매 C: NA |
| 결과 명세 및 확인 |
실측된 질량은 화합물의 발견된 질량이다 실측된 M/z는 화합물의 발견된 분자량 ((M+z)/z)이다 계산된 질량은 원하는 화합물의 분자량이다 계산된 M/z는 원하는 화합물의 분자량 (M+z)/z이다 순도: 분석물 피크의 총 이온 전류 (TIC) AUC, 시스템 소프트웨어에 의해 기록되는, 총 AUC excl 용매 피크의 %로 표시. 정체성: 최고값으로부터 최저값까지 m/z로서 표시된 각 분석물 질량 피크의 질량. 주사 범위는 사용된 방법에서 주사된 범위이다. 검출 방법은 예컨대 선형 반사기이다. |
LCMS027 (표 2 참조)
| 시스템 | 시스템:Agilent 1290 인피니티 시리즈 UPLC 칼럼: Eclipse C18+ 2.1x50 mm 1.8u 검출기: Agilent Technologies LC/MSD TOF 6230 (G6230A) |
| 검출기 구성 | 이온화 방법: Agilent 제트 스트림 공급원 주사 범위: m/z분. 100, m/z max. 3200 선형 반사기 방식 포지티브 방식 |
| 조건 | 선형 구배: 5 % 내지 95 % B 구배 작동-시간: 6분 0-4.5분 5-95% B, 4.5-5 95% B , 5-5.5 95-5% B 5.5-6 5% B 유량: 0.40 ml/분 고정 칼럼 온도: 40℃ |
| 용출액 | 용매 A: 99.90 % H2O, 0.02% TFA용매 B: 99.90 % CH3CN, 0.02% TFA 용매 C: NA |
| 결과 명세 및 확인 |
실측된 질량은 m<4000의 화합물에 대한 화합물의 m/z ((m+z)/z) 또는 Masshunter Workstation 소프트웨어 버전 B.05.00 Build 5.0.519.13 SP1 (Agilent)을 사용하는 디콘볼루션의 결과로서의 질량 (평균)이다. 계산된 질량은 원하는 화합물의 평균 분자량이다. 계산된 m/z는 원하는 화합물의 분자량 (m+z)/z이다. |
LCMS029 (표 3 참조)
| 시스템 | 시스템: Waters Acquity UPLC 시스템 칼럼: ACQUITY UPLC BEH C18, 1.7um, 2.1 mm x 50 mm 칼럼 검출기: Waters Acquity TUV 검출기 |
| 검출기 구성 | 214nm 또는 254nm |
| 조건 | 단계 구배: 구배 run 0.0 - 0.5분 5 - 15 %B 0.5 - 4.0분 15 - 35 %B 4.0 - 4.5분 35 - 100 %B 4.5 - 5.0분 100 - 100 %B 5.0 - 5.5분 100 - 5 %B 5.5 - 6.0분 5 - 5 %B 총 작동-시간: 6.0분 유량: 0.45 ml/분 고정 칼럼 온도: 40℃ |
| 용출액 | 용매 A: 99.95% 물, 0.05% 트라이플루오로아세트산 용매 B: 99.95% 아세토니트릴, 0.05% 트라이플루오로아세트산 |
| 결과 명세 및 확인 |
순도는 각 UV 파장에 대해 시스템 소프트웨어에 의해 보고된 총 AUC excl 용매 피크 (%)와 관련하여 피크 AUC로서 규정됨. 분석물 피크의 기준선 분리에 2.8 내지 4.2분의 보유 시간이 필요하였다. 피크 AU 값은 0.5 내지 1.5 사이이다. 업로드된 결과는 214 nm를 기준으로 한다. |
C. 실시예 화합물
C.1. 실시예 화합물의 제조
실시예 1
N{293}-[4-[[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]메틸]페닐]메틸-[Ala299,Leu301,Ile307,Arg309,Lys310]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 2이다.
일반 방법 A 및 C에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/3 = 1743.9; 실측된 m/4 = 1308.1; 실측된 m/5 = 1046.7; 계산된 질량 = 5229.1; 실측된 질량 = 5229.6
실시예 2
N{293}-[4-[[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]메틸]페닐]메틸-[Leu301,Arg309]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 3이다.
일반 방법 A 및 C에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/3 = 1749.5; 실측된 m/4 = 1312.4; 실측된 m/5 = 1050.1; 계산된 질량 = 5246.0; 실측된 질량 = 5246.4
실시예 3
N{알파}([Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 4이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1314.6; 실측된 m/5 = 1052.1; 계산된 질량 = 5255.9
실시예 4
N{엡실론-312}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 3이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1282.3; 실측된 m/5 = 1026.3; 계산된 질량 = 5126.8
실시예 5
N{293}-[4-[[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]메틸]페닐]메틸-[Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 6이다.
일반 방법 A 및 C에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 계산된 질량 = 5246.92; 실측된 질량 = 5247.37
실시예 6
N{엡실론-299}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Lys299,Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 7이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1714.2; 실측된 m/4 = 1286.1; 계산된 질량 = 5140.85
실시예 7
N{엡실론-330}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys330]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 8이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1700.8; 실측된 m/4 = 1275.8; 실측된 m/5 = 1020.9, 계산된 질량 5099,7; 실측된 질량 = 5099.75
실시예 8
N{293}-[4-[[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(16-설포헥사데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]메틸]페닐]메틸-[Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
23:펩타이드는 SEQ ID NO: 6이다.
일반 방법 A 및 C에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/3 = 1757.1; 실측된 m/4 = 1318.04; 계산된 질량 = 5268.95; 실측된 질량 = 5269.39
실시예 9
N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-330}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys330]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
24:펩타이드는 SEQ ID NO: 8이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/3 = 1939.2; 실측된 m/4 = 1454.2; 계산된 질량 = 5815.6; 실측된 질량 = 5816.1
실시예 10
N{엡실론-332}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys332]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 11이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1282.6; 실측된 m/5 = 1026.3; 계산된 질량 = 5126.8
실시예 11
N{엡실론-293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Lys293,Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 12이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1300.6; 실측된 m/5 = 1040.5; 계산된 질량 = 5198.9
실시예 12
N{알파}(N{엡실론-293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Lys293,Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 13이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/2 = 3022.4; 실측된 m/3 = 2015.3; 실측된 m/4 = 1511.8; 실측된 m/5 = 1209.6; 실측된 질량 = 6043.6; 계산된 질량 = 6042.9
실시예 13
N{알파}(N{엡실론-293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Lys293,Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 13이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/2 = 3030.4; 실측된 m/3 = 2020.7; 실측된 m/4 = 1515.7; 실측된 m/5 = 1212.8; 실측된 질량 = 6059.7; 계산된 질량 = 6058.8
실시예 14
N{알파}(N{엡실론-332}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys332]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 15이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1497.4; 실측된 m/5 = 1198.3; 계산된 질량 = 5986.7
실시예 15
N{알파}(N{엡실론-330}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys330]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 16이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1987.7; 실측된 m/4 = 1491.0; 실측된 m/5 = 1193.0; 계산된 질량 = 5959.7
실시예 16
N{알파}(N{엡실론-321}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 17이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1500.9; 실측된 m/5 = 1201.2; 계산된 질량 = 6000.8
실시예 17
N{알파}(N{엡실론-312}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 18이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1498.2; 실측된 m/5 = 1198.7; 계산된 질량 = 5986.7
실시예 18
N{알파}([Leu301,Arg309,Glu312,Glu321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 19이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS027: 실측된 m/2 = 2635.7; 실측된 m/3 = 1757.5; 실측된 m/4 = 1318.4; 실측된 m/5 = 1054.9; 계산된 질량 = 5270.0 ; 실측된 질량 = 5270.5
실시예 19
N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 6이다.
일반 방법 A 및 D에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/1 = 5127.8; 실측된 m/3 = 1710.0; 실측된 m/4 = 1282.3; 실측된 m/5 = 1026.5; 계산된 질량 = 5127.8
실시예 20
N{엡실론-321}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys321]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 21이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1286.1; 실측된 m/5 = 1029.1; 계산된 질량 = 5140.9
실시예 21
N{엡실론-324}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys324]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 22이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1282.9; 실측된 m/5 = 1026.5; 계산된 질량 = 5127.8
실시예 22
N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Gln312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 23이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/3 = 1709.8; 실측된 m/4 = 1282.6; 계산된 질량 = 5126.8; 실측된 질량 = 5127.3
실시예 23
N{엡실론-332}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Glu321,Lys332]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 24이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/2 = 2571.2; 실측된 m/3 = 1714.5; 실측된 m/4 = 1286.1; 실측된 m/z = 5141.4; 계산된 질량 = 5140.9
실시예 24
N{엡실론-293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Lys293,Leu301,Arg309,Glu312,Glu321]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 25이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/2 = 2607.2; 실측된 m/3 = 1738.5; 실측된 m/4 = 1304.1; 실측된 질량 = 5213.5; 계산된 질량 = 5212.9
실시예 25
N{알파-293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Lys293,Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 26이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/4 = 1479.7; 계산된 질량 = 5914.8 Da; 실측된 질량 = 5914.3
실시예 26
N{엡실론-300}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Lys300,Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 27이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1286.9; 실측된 m/5 = 1029.7; 계산된 질량 = 5141.8
실시예 27
N{엡실론-293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-294}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Lys293,Lys294,Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 28이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/1 = 5957.6; 실측된 m/4 = 1490.4; 실측된 m/5 = 1192.3; 계산값 m/1 = 5957.7
실시예 28
N{엡실론-293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-312}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Lys293,Leu301,Arg309]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 29이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/1 = 5929.4; 실측된 m/4 = 1483.3; 실측된 m/5 = 1186.8; 계산값 m/1 = 5929.7
실시예 29
N{엡실론-309}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Lys309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 30이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1700.8; 실측된 m/4 = 1275.8; 실측된 m/5 = 1020.9; 계산된 질량 = 5099.8 (1A)
실시예 30
N{엡실론-318}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys318]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 31이다.
LCMS01: 실측된 m/4 = 1286.5; 실측된 m/5 = 1029.5; 계산된 질량 = 5142.8
실시예 31
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 32이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/1 = 6002.8; 실측된 m/4 = 1501.6; 실측된 m/5 = 1201.5; 계산값 m/1 = 6002.7
실시예 32
N{엡실론-326}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys326]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 33이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1719.8; 실측된 m/4 = 1290.1; 실측된 m/5 = 1032.3; 계산된 질량 = 5156.8
실시예 33
N{엡실론-325}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys325]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 34이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1715.1; 실측된 m/4 = 1286.6; 실측된 m/5 = 1029.5; 계산된 질량 = 5142.8
실시예 34
N{엡실론-323}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys323]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 35이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/1 = 5108.8; 실측된 m/3 = 1703.8; 실측된 m/4 = 1278.1; 실측된 m/5 = 1022.5
실시예 35
N{엡실론-322}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys322]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 36이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/1 = 5198.9; 실측된 m/3 = 1733.8; 실측된 m/4 = 1300.6; 실측된 m/5 = 1040.7
실시예 36
N{엡실론-320}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys320]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 37이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1720.4; 실측된 m/4 = 1290.3; 실측된 m/5 = 1032.5; 계산된 질량 = 5158.8
실시예 37
N{엡실론-329}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys329]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 38이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/2 = 2550.7; 실측된 m/3 = 1700.8; 실측된 m/4 = 1275.9; 계산된 질량 = 5099.8; 실측된 질량 = 5100.5
실시예 38
N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 39이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/1 = 5143.0; 실측된 m/4 = 1286.0; 실측된 m/5 = 1029.0; 계산값 m/1 = 5142.8
실시예 39
N{엡실론-328}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys328]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 40이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/2 = 2564.7; 실측된 m/3 = 1710.2; 실측된 m/4 = 1282.9; 실측된 5127.8; 계산된 질량 = 5128.5
실시예 40
N{엡실론-316}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys316]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 41이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1709.7; 실측된 m/4 = 1282.3; 실측된 m/5 = 1026.1; 계산된 질량 = 5126.8
실시예 41
N{엡실론-315}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys315]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 42이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1698.3; 실측된 m/4 = 1273.8; 실측된 m/5 = 1019.3; 계산된 m/1 = 5092,8
실시예 42
N{알파}([His300,Leu301,Arg309,Arg312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 43이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/1 = 5306.3; 실측된 m/3 = 1768.7; 실측된 m/4 = 1327.1; 실측된 m/5 = 1061.7
실시예 43
N{엡실론-314}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys314]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 44이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1300.2; 실측된 m/5 = 1040.2; 계산된 질량 = 5198.9
실시예 44
N{엡실론-311}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Lys311,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 45이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1714.9; 실측된 m/4 = 1286.2; 실측된 m/5 = 1029.2; 계산된 질량 = 5142.8
실시예 45
N{엡실론-307}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Lys307,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 46이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1919.8; 실측된 m/4 = 1290.1; 실측된 m/5 = 1032.3; 계산된 질량 = 5156.8
실시예 46
N{알파}([Leu301,Ser309,Arg312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 47이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1738.8; 실측된 m/4 = 1304.1; 실측된 m/5 = 1043.5; 실측된 질량 = 5214.3
실시예 47
N{알파}([Leu301,Ser309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 48이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/1 = 5187.2; 실측된 m/3 = 1729.7; 실측된 m/4 = 1297.2; 실측된 m/5 = 1038.4; 계산된 m/1 = 5186.8
실시예 48
Ala299,Leu301,Ile307,Arg309,Lys310]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 2이다.
일반 방법 A에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1465.3; 실측된 m/4 = 1099.3; 실측된 m/5 = 879.6; 계산값 = 4391.0
실시예 49
[Leu301,Arg309]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 3이다.
일반 방법 A에 의해 제조된 화합물.
LCMS01: 실측된 m/3 = 1470.3; 실측된 m/4 = 1103.0; 실측된 m/5 = 882.6; 계산값 = 4407.9
실시예 50
[Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 6이다.
일반 방법 A에 의해 제조된 화합물.
LCMS01: 실측된 m/3 = 1471.3; 실측된 m/4 = 1103.7; 실측된 m/5 = 883.2; 계산값 = 4411.9
실시예 51
N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Tyr306,Ser309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 49이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/3 = 1695.8; 계산된 질량 = 5085.1
실시예 52
N{알파-293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Asn293,Leu301,Ser309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 50이다.
LCMS29: 실측된 m/3 = 1706.1, 계산된 질량 = 5115.7
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
실시예 53
N{엡실론-306}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Lys306,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 51이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1707.0; 실측된 m/4 = 1280.3; 실측된 m/5 = 1024.4; 계산된 질량 = 5118.8
실시예 54
N{엡실론-305}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Lys305,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 52이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1723.8 ; 실측된 m/4 = 1292.8; 실측된 m/5 = 1034.4; 계산된 질량 = 5168.8
실시예 55
N{엡실론-303}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Lys303,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 53이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1733.7; 실측된 m/4 = 1300.3; 실측된 m/5 = 1040.5; 계산된 질량 = 5198.9
실시예 56
N{엡실론-302}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Lys302,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 54이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1733.7; 실측된 m/4 = 1300.3; 실측된 m/5 = 1040.5; 계산된 질량 = 5198.9
실시예 57
N{알파}([Asn293,His300,Leu301,Arg309,Arg312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys;
펩타이드는 SEQ ID NO: 55이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1341.5; 실측된 m/5 = 1073.3; 계산된 질량 = 5363
실시예 58
N{엡실론-301}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Lys301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 56이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1715.2; 실측된 m/4 = 1286.6; 실측된 m/5 = 1029.5; 계산된 질량 = 5142.8
실시예 59
N{엡실론-298}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Lys298,Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 57이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1715.1; 실측된 m/4 = 1286.3; 실측된 m/5 = 1029.3; 계산된 m/z = 5142.8
실시예 60
N{알파}([Asn293,Leu301,Arg309,Arg312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 58이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1780.7; 실측된 m/4 = 1335.5; 실측된 m/5 = 1068.4; 계산된 질량 = 5340.1
실시예 61
N{엡실론-332}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Ile307,Lys332]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 59이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1700.0; 실측된 m/4 = 1275.1; 실측된 m/5 = 1020.3; 계산된 질량 = 5097.8
실시예 62
N{엡실론-332}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Tyr306,Glu312,Lys332]-LDL-R-(293-332)-펩타이드;
펩타이드는 SEQ ID NO: 60이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1704.3; 실측된 m/4 = 1278.5; 실측된 m/5 = 1030.4; 계산된 m/z = 5110.8
실시예 63
N{엡실론-332}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Ile307,Glu312,Lys332]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 61이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1700.3; 실측된 m/4 = 1275.2; 실측된 m/5 = 계산된 질량 = 5098.8
실시예 64
N{293}-[4-[[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]메틸]페닐]메틸-[His300,Leu301,Arg309]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 62이다.
일반 방법 A + C에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1757.1; 실측된 m/4 = 1318.1; 실측된 m/5 = 1054.2; 계산된 질량 = 5269.0
실시예 65
N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Pro300,Leu301,Ile307,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 5이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/3 = 1709.1; 계산된 질량 = 5124.8
실시예 66
N{알파}([Asn293,Leu301,Ile307,Arg309,Asp312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 9이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/4 = 1329.1; 계산된 질량 = 5313.0
실시예 67
N{알파}([Asn293,Leu301,Arg309,Asp312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 10이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/4 = 1325.6; 계산된 질량 = 5299.0
실시예 68
N{293}-[4-[[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[4-[16-(1H-테트라졸-5-일)헥사데카노일sulfamoyl]부타노일아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]메틸]페닐]메틸-[Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 6이다.
일반 방법 C에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/4 = 1320.1; 계산된 질량 = 5276.98
실시예 69
N{엡실론-328}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys328,His329]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 6이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/4 = 1278.09; 계산된 질량 = 5108.8 Da
실시예 70
N{엡실론-332}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Asp295,Leu301,Arg309,Glu312,Lys332]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 20이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/4 = 1282.84; 계산된 질량 = 5127.8 Da
실시예 71
N{엡실론-312}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[His300,Leu301,Arg309]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 62이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1717.5 실측된 m/4 = 1288.2 실측된 m/5 = 1030.4 - 계산된 질량 = 5149.9 -
실시예 72
N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[His300,Leu301,Ile307,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 26이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/4 = 1292.1; 계산된 질량 = 5164.8 Da
실시예 73
N{엡실론-296}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Lys296,Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 63이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1709.9; 실측된 m/4 = 1282.6; 계산된 질량 5126.8
실시예 74
N{엡실론-294}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Lys294,Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 64이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1289.7; 실측된 m/5 = 1031.7; 계산된 질량 = 5154.8
실시예 75
N{엡실론}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys[Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 65이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1752.9; 실측된 m/4 = 1315.0; 계산된 질량 = 5255.9
실시예 76
N{엡실론-328}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Gly294,Leu301,Arg309,Glu312,Lys328],des-Gly293-LDL-R-(294-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 66이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1676.6 실측된 m/4 = 1257.7 실측된 m/5 = 1006) -계산된 질량 = 5026.7
실시예 77
N{알파}([Leu301,Asp306,Arg309,Glu312,Gly324]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 67이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/3 = 1721.8; 계산된 질량 = 5162.8 Da
실시예 78
N{알파}(N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Asp306,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 68이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS029: 실측된 m/3 = 1528.7; 계산된 질량 = 6110.8 Da
실시예 79
N{알파}(N{엡실론-321}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[10-(4-카르복시페녹시)데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[10-(4-카르복시페녹시)데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 17이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1493.9; 실측된 m/5 = 1195.5; 계산된 질량 = 5972.7
실시예 80
N{알파}([Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 4이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1743.6; 실측된 m/4 = 1307.9; 실측된 m/5 = 1046.4 계산된 질량 = 5227.9
실시예 81
N{알파}([Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(19-카르복시노나데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 4이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1762.3; 실측된 m/4 = 1321.7; 실측된 m/5 = 1057.8; 계산된 질량 = 5284.0
실시예 82
N{알파}([Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 4이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1656.2; 실측된 m/4 = 1242.4; 실측된 m/5 = 994.0; 계산된 질량 = 4965.6
실시예 83
N{알파}(N{엡실론-321}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(13-카르복시트라이데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(13-카르복시트라이데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 17이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1958.5; 실측된 m/4 = 1468.9; 실측된 m/5 = 1175.3; 계산된 질량 = 5872.7
실시예 84
N{알파}(N{엡실론-321}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 17이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1483.1; 실측된 m/5 = 1186.6; 계산된 질량 = 5928.8
실시예 85
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[10-(4-카르복시페녹시)데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[His300,Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[10-(4-카르복시페녹시)데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 69이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1500.1 실측된 m/5 = 1200.3 실측된 m/z = 1000. 계산된 질량 = 5997.7
실시예 86
N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-328}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Lys328]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 70이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1469.3; 실측된 m/5 = 1175.8; 계산된 질량 = 5874.6
실시예 87
N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-324}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Lys324]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO:71이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1469.1; 실측된 m/5 = 1175.5; 계산된 질량 = 5874.6
실시예 88
N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 39이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1469.3; 실측된 m/5 = 1175.7; 계산된 질량 = 5874.5
실시예 89
N{알파}(N{엡실론-324}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys324]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO:72이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1497.6; 실측된 m/5 = 1198.3; 계산된 질량 = 5987.7
실시예 90
N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-321}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Lys321]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 73이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1472.6; 실측된 m/5 = 1178.3; 계산된 질량 = 5887.6
실시예 91
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[10-(4-카르복시페녹시)데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[His300,Leu301,Arg309,Glu312,Lys313],des-Gly293-LDL-R-(294-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[10-(4-카르복시페녹시)데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 74이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LC-MS: 실측된 m/3 = 1981, m/4 = 1486: 계산된 질량 = 5940,6
실시예 92
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[His300,Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 39이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1507.3 실측된 m/5 = 1205.9 계산된 질량 = 6025.7
실시예 93
N{292}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-Ala[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 75이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1487.1; 실측된 m/5 = 1190.0; 계산된 질량 = 5945.6
실시예 94
N{294}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313],des-Gly293-LDL-R-(294-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 76이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1455.1; 계산된 질량 = 5817.5
실시예 95
N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313],des-Gly293-LDL-R-(294-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 76이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1272.4 ; 실측된 m/5 = 1017.9; 계산된 질량 = 5085.7
실시예 96
N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-332}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Lys332]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 77이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1469.1; 실측된 m/5 = 1175.5; 계산된 질량 = 5873.6
실시예 97
N{알파}(N{엡실론-328}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys328]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 78이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS28: 실측된 m/3 = 1996.9; 실측된 m/4 = 1497.9; 계산된 질량 = 5987.7
실시예 98
N{알파}(N{엡실론-313}-[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO:32이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1808.1; 실측된 m/4 = 1356.4; 실측된 m/5 = 1085.3; 계산된 질량 = 5422.1
실시예 99
N{알파}(N{엡실론-313}-[(4S)-4-카르복시-4-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]부타노일]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[(4S)-4-카르복시-4-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]부타노일]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 32이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1894.2; 실측된 m/4 = 1420.9; 실측된 m/5 = 1136.9; 계산된 질량 = 5680.3
실시예 100
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[[2-[[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]아세틸]아미노]아세틸]아미노]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[[2-[[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]아세틸]아미노]아세틸]아미노]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 32이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1922.2; 실측된 m/4 = 1441.9; 실측된 m/5 = 1153.7; 계산된 질량 = 5764.4
실시예 101
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 32이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1566.2; 실측된 m/5 = 1252.9; 계산된 질량 = 6260.9
실시예 102
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[10-(3-카르복시페녹시)데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[10-(3-카르복시페녹시)데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드는 SEQ ID NO: 32이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4=1494.6; m/5= 1195.9 계산된 질량 = 5974.6
실시예 103
Ala299,Leu301,Ile307,Arg309-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 79이다.
일반 방법 A에 의해 제조된 화합물.
LCMS01: 실측된 m/2 = 2191.4; 실측된 m/3 = 1461.0; 계산값 = 4381.0
실시예 104
Leu301,Arg309,Lys310-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 80이다.
일반 방법 A에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1475.3; 실측된 m/4 = 1107.0; 계산값 = 4424.0
실시예 105
Leu301-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드는 SEQ ID NO: 81이다.
일반 방법 A에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/3 = 1456.3; 실측된 m/4 = 1217.0; 계산값 = 4368.9
실시예 106
N{알파}([His300,Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO:82이다.
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS027: 실측된 m/3 = 1760.5; 실측된 m/4 = 1320.6; 실측된 m/5 = 1056.7; 계산된 질량 = 5279.0
실시예 107
N{알파}(N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 4이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 1996.9; 실측된 m/4 = 1497.9; 실측된 m/5 = 1198.6; 계산된 질량 = 5987.7
실시예 108
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[10-(4-카르복시페녹시)데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[His300,Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(295-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[10-(4-카르복시페녹시)데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 83이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1460.8; 실측된 m/5 = 1168.7; 계산된 질량 = 5839.5
실시예 109
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[13-(3-하이드록시-1,2-옥사졸-5-일)트라이데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[His300,Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[13-(3-하이드록시-1,2-옥사졸-5-일)트라이데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 69이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1495.0; 실측된 m/5 = 1196.0; 계산된 질량 = 5975.7
실시예 110
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[13-(3-하이드록시-1,2-옥사졸-5-일)트라이데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[13-(3-하이드록시-1,2-옥사졸-5-일)트라이데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 32이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1489.0; 실측된 m/5 = 1191.0; 계산된 질량 = 5952.7
실시예 111
N{알파}(N{엡실론-309}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Lys309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO:84이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 1987.6; 실측된 m/4 = 1490.9; 실측된 m/5 = 1193.0; 계산된 질량 = 5959.7
실시예 112
N{알파}(N{엡실론-324}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Tyr306,Glu312,Lys324]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 85이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 1991.6; 실측된 m/4 = 1493.9; 실측된 m/5 = 1195.1; 계산된 질량 = 5971.7
실시예 113
N{알파}(N{엡실론-314}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[His300,Leu301,Arg309,Glu312,Lys314]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 86이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 2028.3; 실측된 m/4 = 1521.5; 계산된 질량 = 6081.8
실시예 114
N{알파}(N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Trp294,Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 87이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 2025.3; 실측된 m/4 = 1519.2; 실측된 m/5 = 1215.6; 계산된 질량 = 6072.8
실시예 115
N{엡실론-309}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-328}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Lys309,Glu312,Lys328]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 88이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS27: 실측된 m/2 = 2916.7; 실측된 m/3 = 1944.9; 실측된 m/4 = 1458.9; 계산된 질량 = 5831.5
실시예 116
N{엡실론-309}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Lys309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 89이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/2 = 2924.1; 실측된 m/3 = 1949.6 실측된 m/4 = 1462.4; 계산된 질량 = 5846.5
실시예 117
N{알파}(N{294}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312],des-Gly293-LDL-R-(294-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 90이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 1977.6; 실측된 m/4 = 1483.5; 실측된 m/5 = 1187.2; 계산된 질량 = 5930.6
실시예 118
N{엡실론-324}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-328}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys324,Lys328]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 91이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS27: 실측된 m/2 = 2930.4; 실측된 m/3 = 1953.9; 실측된 m/4 = 1465.7; 계산된 질량 = 5859.6
실시예 119
N{알파}(N{292}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-Ala[Leu301,Arg309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 92이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 2020.6; 실측된 m/4 = 1515.7; 실측된 m/5 = 1212.8; 계산된 질량 = 6058.8
실시예 120
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Tyr306,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 93이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 2010.2; 실측된 m/4 = 1508.2; 실측된 m/5 = 1206.8; 계산된 질량 = 6028.7
실시예 121
N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-332}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys332]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 11이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS27: 실측된 m/2 = 2930.3; 실측된 m/3 = 1953.7; 실측된 m/4 = 1465.8; 계산된 질량 = 5858.6
실시예 122
N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-328}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys328]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 40이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS27: 실측된 m/2 = 2930.1; 실측된 m/3 = 1953.9; 실측된 m/4 = 1465.7; 계산된 질량 = 5859.6
실시예 123
N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-324}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys324]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 22이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/2 = 2930.9; 실측된 m/3 = 1954.3; 실측된 m/4 = 1465.9; 계산된 질량 = 5859.6
실시예 124
N{엡실론-309}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-332}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Lys309,Glu312,Lys332]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 94이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/2 = 2916.1; 실측된 m/3 = 1944.2; 실측된 m/4 = 1458.4; 계산된 질량 = 5830.6
실시예 125
N{엡실론-309}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-324}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Lys309,Glu312,Lys324]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 106이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/2 = 2916.6; 실측된 m/3 = 1944.5; 실측된 m/4 = 1458.9; 계산된 질량 = 5831.5
실시예 126
N{293}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-309}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Lys309,Glu312]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 30이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/2 = 2916.7; 실측된 m/3 = 1944.6; 실측된 m/4 = 1458.7; 계산된 질량 = 5831.5
실시예 127
N{엡실론-321}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-332}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys321,Lys332]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 95이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 1958.3; 실측된 m/4 = 1469.0; 계산된 질량 = 5871.6
실시예 128
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 32
화합물 prepared by 일반 방법 B
LCMS29: 실측된 m/2 = 2966.28; 실측된 m/3 = 1978.0; 실측된 m/4 = 1483.5; 계산된 질량 = 5930.7
실시예 129
N{알파}(N{엡실론-313}-[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 32이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/2 = 2676.0; 실측된 m/3 = 1784.2; 실측된 m/4 = 1338.4; 계산된 질량 = 5330.1
실시예 130
N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-332}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[His300,Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Lys332]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 96이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 1966.7; 실측된 m/4 = 1475.0; 계산된 질량 = 5896.6
실시예 131
N{알파}(N{엡실론-313}-[4-[3-[2-[2-[3-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]프로폭시]에톡시]에톡시]프로필아미노]-4-옥소부타노일]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[4-[3-[2-[2-[3-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]프로폭시]에톡시]에톡시]프로필아미노]-4-옥소부타노일]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 32이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 2009.9; 실측된 m/4 = 1507.7; 계산된 질량 = 6026.8
실시예 132
N{엡실론-313}-[4-[3-[2-[2-[3-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]프로폭시]에톡시]에톡시]프로필아미노]-4-옥소부타노일],N{엡실론-332}-[4-[3-[2-[2-[3-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]프로폭시]에톡시]에톡시]프로필아미노]-4-옥소부타노일]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Glu321,Lys332]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 97이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 1971.3; 실측된 m/4 = 1478.9; 계산된 질량 = 5911.7
실시예 133
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Glu321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 98이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1505.0; 실측된 m/5 = 1204.3; 계산된 질량 = 6016.7
실시예 134
N{알파}([Leu301,Arg309,Glu312,Glu321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(19-카르복시노나데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 19이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1766.7; 실측된 m/5 = 1325.3; 계산된 질량 = 5258.0
실시예 135
N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-314}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Lys314]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 99이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1487.3; 실측된 m/5 = 1190.0; 계산된 질량 =5945.6
실시예 136
N{엡실론-312}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 100이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1469.3; 실측된 m/5 = 1175.5; 계산된 질량 =5873.6
실시예 137
N{엡실론-312}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-314}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Lys314]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 101이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1483.3; 실측된 m/5 = 1186.8; 계산된 질량 =5929.7
실시예 138
N{엡실론-311}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Lys311,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 102이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1473.0; 실측된 m/5 = 1178.6; 계산된 질량 =5889.5
실시예 139
N{알파}(N{엡실론-313}-11-(4-카르복시페녹시)운데카노일-[His300,Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}11-(4-카르복시페녹시)운데카노일Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 69이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1297.4; 실측된 m/5 = 1038.2; 계산된 질량 = 5186.9
실시예 140
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[13-(1H-테트라졸-5-일)트라이데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[13-(1H-테트라졸-5-일)트라이데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 32이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1481.6; 실측된 m/5 = 1185.3; 계산된 질량 = 5922.7
실시예 141
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(14-설포테트라데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(14-설포테트라데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 32이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS027: 실측된 m/3 = 1992.6; 실측된 m/4 = 1494.7; 실측된 m/5 = 1196.0; 계산된 질량 = 5974.8
실시예 142
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[13-(메틸설포닐카바모일아미노)트라이데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[13-(메틸설포닐카바모일아미노)트라이데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 32이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS027: 실측된 m/3 = 2020.7; 실측된 m/4 = 1515.8; 실측된 m/5 = 1212.8; 계산된 질량 = 6058.8
실시예 143
N{알파}(N{엡실론-313}-[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Glu321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 98이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/2 = 2719.0; 실측된 m/3 = 1812.8; 실측된 m/4 = 1359.8; 계산된 질량 = 5436.1
실시예 144
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Glu321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 98이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 1982.2; 실측된 m/4 = 1486.9; 실측된 m/5 = 1189.7; 계산된 질량 = 5944.7
실시예 145
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[16-(1H-테트라졸-5-일)헥사데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[16-(1H-테트라졸-5-일)헥사데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 32이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 2003.3; 실측된 m/4 = 1502.7; 실측된 m/5 = 1202.2; 계산된 질량 = 6006.8
실시예 146
N{알파}(N{엡실론-313}-[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Glu321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 98이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/3 = 1788.8; 실측된 m/4 = 1341.9; 실측된 m/5 = 1073.7; 계산된 질량 = 5364.1
실시예 147
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[His300,Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Glu321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 103이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS29: 실측된 m/2 = 3020.8; 실측된 m/3 = 2014.3; 실측된 m/4 = 1510.9; 계산된 질량 = 6039.8
실시예 148
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 32이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS027: 실측된 m/3 = 2195.5; 실측된 m/4 = 1646.9; 실측된 m/5 = 1317.7; 계산된 질량 = 6583.3
실시예 149
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[His300,Leu301,Arg309,Glu312,Lys313],des-Gly293-LDL-R-(294-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 74이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
CMS027: 실측된 m/3 = 1990.6; 실측된 m/4 = 1493.2; 실측된 m/5 = 1191.1; 계산된 질량 = 5968.7
실시예 150
N{알파}(N{엡실론-328}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys328]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 78이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS27: 실측된 m/2 = 2958.7; 실측된 m/3 = 1973.0; 실측된 m/4 = 1480.0; 계산된 질량 = 5915.7
실시예 151
N{알파}(N{엡실론-328}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Glu321,Lys328]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 104이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1483.2; 실측된 m/5 = 1186.8; 계산된 질량 = 5930.0
실시예 152
N{알파}(N{엡실론-324}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys324]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 72이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS34: 실측된 m/4 = 1974.6; 실측된 m/5 = 1183.9; 계산된 질량 = 5915.7
실시예 153
N{알파}(N{엡실론-324}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Glu321,Lys324]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 105이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1483.3 실측된 m/5 = 1186.8 계산된 질량 = 5929.8
실시예 154
N{알파}(N{엡실론-328}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Glu321,Lys328]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(17-카르복시헵타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 104이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1497.3; 실측된 m/5 = 1198.2; 계산된 질량 = 5985.9
실시예 155
N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸],N{엡실론-321}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-(15-카르복시펜타데카노일아미노)부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Lys321]-LDL-R-(293-332)-펩타이드
펩타이드 골격은 SEQ ID NO:72이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS01: 실측된 m/4 = 1454.7; 실측된 m/5 = 1164.0 계산된 질량 = 5815.6
실시예 156
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[[4-[[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]메틸]사이클로헥산카르보닐]아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[[4-[[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]메틸]사이클로헥산카르보닐]아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 32이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS27: 실측된 m/3 = 2094.6; 실측된 m/4 = 1571.2; 계산된 질량 = 6281.1
실시예 157
N{알파}(N{엡실론-313}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[[4-[[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]메틸]사이클로헥산카르보닐]아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]-[Leu301,Arg309,Glu312,Lys313,Glu321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[[4-[[11-(4-카르복시페녹시)운데카노일아미노]메틸]사이클로헥산카르보닐]아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 98이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS27: 실측된 m/3 = 2099.3; 실측된 m/4 = 1574.7; 계산된 질량 = 6295.1
실시예 158
N{알파}([Leu301,Arg309,Glu312,Glu321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[[4-[(19-카르복시노나데카노일아미노)메틸]사이클로헥산카르보닐]아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 19이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS27: 실측된 m/3 = 1813.2; 실측된 m/4 = 1360.2; 실측된 m/5 = 1088.3; 계산된 질량 = 5437.2
실시예 159
N{알파}([Leu301,Arg309,Glu312,Glu321]-LDL-R-(293-332)-펩타이딜)-N{엡실론}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-카르복시-4-[[4-[(17-카르복시헵타데카노일아미노)메틸]사이클로헥산카르보닐]아미노]부타노일]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]Lys
펩타이드 골격은 SEQ ID NO: 19이다
일반 방법 B에 의해 제조된 화합물
LCMS27: 실측된 m/3 = 1803.9; 실측된 m/4 = 1353.1; 실측된 m/5 = 1082.7; 계산된 질량 = 5409.2
|
실시예
번호 |
서열 변형 | 치환기 | 부착 지점 |
| 1 | 299A, 301L, 307I, 309R, 310K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO-NH-CH2-(C6H4)-CH2- | N-말단 |
| 2 | 301L, 309R | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO-NH-CH2-(C6H4)-CH2- | N-말단 |
| 3 | 301L, 309R, 312E, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 4 | 301L, 309R | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 312K |
| 5 | 301L, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO-NH-CH2-(C6H4)-CH2- | N-말단 |
| 6 | 299K, 301L, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 299K |
| 7 | 301L, 309R, 312E, 330K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 330K |
| 8 | 301L, 309R, 312E | HOS(O)2-(CH2)15-CO-gGlu-2xADO-NH-CH2-(C6H4)-CH2- | N-말단 |
| 9 | 301L, 309R, 312E, 330K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 330K |
| 10 | 301L, 309R, 312E, 332K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 332K |
| 11 | 293K, 301L, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 293K |
| 12 | 293K, 301L, 309R, 312E, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 293K, 333K |
| 13 | 293K, 301L, 309R, 312E, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 293K, 333K |
| 14 | 301L, 309R, 312E, 332K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 332K, 333K |
| 15 | 301L, 309R, 312E, 330K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 330K, 333K |
| 16 | 301L, 309R, 312E, 321K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 321K, 333K |
| 17 | 301L, 309R, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 312K, 333K |
| 18 | 301L, 309R, 312E, 321E, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 19 | 301L, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | N-말단 |
| 20 | 301L, 309R, 312E, 321K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 321K |
| 21 | 301L, 309R, 312E, 324K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 324K |
| 22 | 301L, 309R, 312Q | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | N-말단 |
| 23 | 301L, 309R, 312E, 321E, 332K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 332K |
| 24 | 293K, 301L, 309R, 312E, 321E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 293K |
| 25 | 293K, 301L, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 293K |
| 26 | 300K, 301L, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 300K |
| 27 | 293K, 294K, 301L, 309R, 312E | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 293K, 294K |
| 28 | 293K, 301L, 309R | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 293K, 312K |
| 29 | 301L, 309K, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 309K |
| 30 | 301L, 309R, 312E, 318K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 318K |
| 31 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 32 | 301L, 309R, 312E, 326K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 326K |
| 33 | 301L, 309R, 312E, 325K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 325K |
| 34 | 301L, 309R, 312E, 323K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 323K |
| 35 | 301L, 309R, 312E, 322K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 322K |
| 36 | 301L, 309R, 312E, 320K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 320K |
| 37 | 301L, 309R, 312E, 329K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 329K |
| 38 | 301L, 309R, 312E, 313K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 313K |
| 39 | 301L, 309R, 312E, 328K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 328K |
| 40 | 301L, 309R, 312E, 316K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 316K |
| 41 | 301L, 309R, 312E, 315K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 315K |
| 42 | 300H, 301L, 309R, 312R, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 43 | 301L, 309R, 312E, 314K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 314K |
| 44 | 301L, 309R, 311K, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 311K |
| 45 | 301L, 307K, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 307K |
| 46 | 301L, 309S, 312R, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 47 | 301L, 309S, 312E, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 48 | 299A, 301L, 307I, 309R, 310K | ||
| 49 | 301L, 309R | ||
| 50 | 301L, 309R, 312E | ||
| 51 | 301L, 306Y, 309S, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | N-말단 |
| 52 | 293N, 301L, 309S, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | N-말단 |
| 53 | 301L, 306K, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 306K |
| 54 | 301L, 305K, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 305K |
| 55 | 301L, 303K, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 303K |
| 56 | 301L, 302K, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 302K |
| 57 | 293N, 300H, 301L, 309R, 312R, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 58 | 301K, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 301K |
| 59 | 298K, 301L, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 298K |
| 60 | 293N, 301L, 309R, 312R, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 61 | 301L, 307I, 332K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 332K |
| 62 | 301L, 306Y, 312E, 332K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 332K |
| 63 | 301L, 307I, 312E, 332K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 332K |
| 64 | 300H, 301L, 309R | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO-NH-CH2-(C6H4)-CH2- | N-말단 |
| 65 | 300P, 301L, 307I, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | N-말단 |
| 66 | 293N, 301L, 307I, 309R, 312D, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 67 | 293N, 301L, 309R, 312D, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 68 | 301L, 309R, 312E | 테트라졸릴-(CH2)15-CO-NH-SO2-(CH2)3-CO-ADO-ADO-NH-CH2-(C6H4)-CH2- | N-말단 |
| 69 | 301L, 309R, 312E, 328K, 329H | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 328K |
| 70 | 295D, 301L, 309R, 312E, 332K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 332K |
| 71 | 300H, 301L, 309R | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 312K |
| 72 | 300H, 301L, 307I, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | N-말단 |
| 73 | 296K, 301L, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 296K |
| 74 | 294K, 301L, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 294K |
| 75 | 292K, 301L, 309R, 312E | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 292K |
| 76 | des293, 294G, 301L, 309R, 312E, 328K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 328K |
| 77 | 301L, 306D, 309R, 312E, 324G, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 78 | 301L, 306D, 309R, 312E, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-3xADO 및 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 333K |
| 79 | 301L, 309R, 312E, 321K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)9-CO-gGlu-2xADO | 321K, 333K |
| 80 | 301L, 309R, 312E, 333K | HOOC-(CH2)14-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 81 | 301L, 309R, 312E, 333K | HOOC-(CH2)18-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 82 | 301L, 309R, 312E, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu | 333K |
| 83 | 301L, 309R, 312E, 321K, 333K | HOOC-(CH2)12-CO-gGlu-2xADO | 321K, 333K |
| 84 | 301L, 309R, 312E, 321K, 333K | HOOC-(CH2)14-CO-gGlu-2xADO | 321K, 333K |
| 85 | 300H, 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)9-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 86 | 301L, 309R, 312E, 313K, 328K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 313K, 328K |
| 87 | 301L, 309R, 312E, 313K, 24K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 313K, 324K |
| 88 | 301L, 309R, 312E, 313K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 313K |
| 89 | 301L, 309R, 312E, 324K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 324K, 333K |
| 90 | 301L, 309R, 312E, 313K, 321K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 313K, 321K |
| 91 | des293, 300H, 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)9-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 92 | 300H, 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 93 | 292A, 301L, 309R, 312E, 313K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 313K |
| 94 | des293, 301L, 309R, 312E, 313K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 313K |
| 95 | des293, 301L, 309R, 312E, 313K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 313K |
| 96 | 301L, 309R, 312E, 313K, 332K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 313K, 332K |
| 97 | 301L, 309R, 312E, 328K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 328K, 333K |
| 98 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu | 313K, 333K |
| 99 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-2xgGlu | 313K, 333K |
| 100 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-3xGly | 313K, 333K |
| 101 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-2xgGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 102 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 3-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)9-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 103 | 299A, 301L, 307I, 309R | ||
| 104 | 301L, 309R, 310K | ||
| 105 | 301L | ||
| 106 | 300H, 301L, 309R, 312E, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 107 | 301L, 309R, 312E, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 333K |
| 108 | des293-294, 300H, 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)9-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 109 | 300H, 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 3-HO-아이소옥사졸-(CH2)12-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 110 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 3-HO-아이소옥사졸-(CH2)12-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 111 | 301L, 309K, 312E, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 309K, 333K |
| 112 | 301L, 306Y, 312E, 324K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 324K, 333K |
| 113 | 300H, 301L, 309R, 312E, 314K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 314K, 333K |
| 114 | 294W, 301L, 309R, 312E, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 333K |
| 115 | 301L, 309K, 312E, 328K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 309K, 328K |
| 116 | 301L, 309K, 312E, 313K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 309K, 313K |
| 117 | des293, 301L, 309R, 312E, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 333K |
| 118 | 301L, 309R, 312E, 324K, 328K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 324K, 328K |
| 119 | 292A, 301L, 309R, 312E, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 333K |
| 120 | 301L, 306Y, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 121 | 301L, 309R, 312E, 332K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 332K |
| 122 | 301L, 309R, 312E, 328K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 328K |
| 123 | 301L, 309R, 312E, 324K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 324K |
| 124 | 301L, 309K, 312E, 332K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 309K, 332K |
| 125 | 301L, 309K, 312E, 324K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 309K, 324K |
| 126 | 301L, 309K, 312E | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | N-말단, 309K |
| 127 | 301L, 309R, 312E, 321K, 332K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 321K, 332K |
| 128 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | HOOC-(CH2)14-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 129 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | HOOC-(CH2)14-CO-gGlu | 313K, 333K |
| 130 | 300H, 301L, 309R, 312E, 313K, 332K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 313K, 332K |
| 131 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-TtdSuc | 313K, 333K |
| 132 | 301L, 309R, 312E, 313K, 321E, 332K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-TtdSuc | 313K, 332K |
| 133 | 301L, 309R, 312E, 313K, 321E, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 134 | 301L, 309R, 312E, 321E, 333K | HOOC-(CH2)18-CO-gGlu-2xADO | 333K |
| 135 | 301L, 309R, 312E, 313K, 314K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 313K, 314K |
| 136 | 301L, 309R, 313K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 312K, 313K |
| 137 | 301L, 309R, 314K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 312K, 314K |
| 138 | 301L, 309R, 311K, 312E, 313K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 311K, 313K |
| 139 | 300H, 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)9-CO | 313K, 333K |
| 140 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 테트라졸릴-(CH2)12-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 141 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | HOS(O)2-(CH2)13-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 142 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | MeS(O)2NH(CO)NH-(CH2)12-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 143 | 301L, 309R, 312E, 313K, 321E, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu | 313K, 333K |
| 144 | 301L, 309R, 312E, 313K, 321E, 333K | HOOC-(CH2)14-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 145 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 테트라졸릴-(CH2)15-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 146 | 301L, 309R, 312E, 313K, 321E, 333K | HOOC-(CH2)14-CO-gGlu | 313K, 333K |
| 147 | 300H, 301L, 309R, 312E, 313K, 321E, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 148 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-4xADO | 313K, 333K |
| 149 | des293, 300H, 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 150 | 301L, 309R, 312E, 328K, 333K | HOOC-(CH2)14-CO-gGlu-2xADO | 328K, 333K |
| 151 | 301L, 309R, 312E, 321E, 328K, 333K | HOOC-(CH2)14-CO-gGlu-2xADO | 328K, 333K |
| 152 | 301L, 309R, 312E, 324K, 333K | HOOC-(CH2)14-CO-gGlu-2xADO | 324K, 333K |
| 153 | 301L, 309R, 312E, 321E, 324K, 333K | HOOC-(CH2)14-CO-gGlu-2xADO | 324K, 333K |
| 154 | 301L, 309R, 312E, 321E, 328K, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-gGlu-2xADO | 328K, 333K |
| 155 | 301L, 309R, 312E, 313K, 321K | HOOC-(CH2)14-CO-gGlu-2xADO | 313K, 321K |
| 156 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-Trx-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 157 | 301L, 309R, 312E, 313K, 321E, 333K | 4-HOOC-(C6H4)-O-(CH2)10-CO-Trx-gGlu-2xADO | 313K, 333K |
| 158 | 301L, 309R, 312E, 321E, 333K | HOOC-(CH2)18-CO-Trx-gGlu-2xADO | 333K |
| 159 | 301L, 309R, 312E, 321E, 333K | HOOC-(CH2)16-CO-Trx-gGlu-2xADO | 333K |
D. 특성화를 위한 일반적 방법
D.1.1 PCSK9-LDL-R 결합 경쟁 (ELISA)
이 검정의 목적은 PCSK9에 대한 EGF(A) 화합물의 외관 결합 친화도를 측정하는 것이다.
PCSK9의 LDL-R과의 상호작용을 억제하는 능력으로 인해, 발명의 화합물들은 PCSK9 억제자로서도 언급될 수 있다.
실험 전날, 재조합 인간 저밀도 리포단백질 수용체 (rhLDL-R; NSO-derived; R & D systems # 2148-LD)를 50 mM 탄산 나트륨, pH 9.6에 1 μg/ml로 용해시킨 후, 100 μl의 용액을 검정 플레이트 (Maxisorp 96, NUNC # 439454)의 각 웰에 첨가하고 4℃에서 밤새 코팅하였다. 실험하는 날에, 비오티닐화된 PCSK9를 함유하는 EGF(A) 화합물들 (0.5 ug/ml, BioSite/BPSBioscience cat#71304)의 8개의 점 농도 곡선을 이중으로 만들었다. EGF(A) 화합물 및 비오티닐화된 PCSK9 혼합물을 1시간 동안 실온에서 25 mM Hepes, pH 7,2 (15630-056, 100 ml, 1M), 150 mM NaCl (Emsure 1.06404.1000) 1% HSA (Sigma A1887-25G) 0,05% Tween 20(Calbiochem 655205) 2 mM CaCl2 (Sigma 223506-500G)를 함유하는 검정 완충액에서 인큐베이션하였다. 코팅된 검정 플레이트를 그런 다음 200μl 검정 완충액으로 4회 세척한 후, EGF(A) 화합물 및 비오티닐화된 PCSK9의 혼합물의 100 μl를 플레이트에 첨가하고 2시간 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 플레이트를 200μl 검정 완충액으로 4회 세척한 후 스트렙트아비딘-HRP (25ng/ml; VWR # 14-30-00)과 함께 1시간 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 반응을 50 μl TMB-on (KEM-EN-TEC)을 첨가하고 10분 동안 어두운 곳에서 인큐베이션함으로써 검출한다. 그런 다음 반응을 50 μl 4 M H3PO4를 혼합물에 전자 다중 피펫팅에 의해 첨가함으로써 중단시켰다. 그런 다음 플레이트를 450 및 620 nm에서 1시간 이내에 Spectramax에서 판독하였다. 620 nm 판독을 바탕값 공제에 사용하였다. IC50 값을 Graphpad Prism을 사용하여, 비선형 회귀 로그(억제자) 대비 반응-가변 기울기 (4개의 파라미터)에 의해 계산하고, 다음 식을 사용하여 Ki 값으로 전환하였다: Ki=IC50/(1+(Biotin-PCSK9)/(kd(Biotin-PCSK9))), 식에서 비오틴-PCSK9의 Kd는 1.096727714 μg/ml이고 [Biotin-PCSK9] = 0,5 (μg/ml)이다.
결과를 하기 표 5.1 내지 5.5에 나타낸다. 더 높은 Ki 값은 PCSK9에 대한 더 낮은 외관 결합 친화도를 반영하고, 그 역도 같다. 화합물 중 소수는 EGF66에 대해 측정된 값보다 실질적으로 더 높은 Ki, 예컨대 500 nM을 초과하는 값을 나타내고, 그것은 관찰된 결합이 특이적이지 않음을 가리킨다는 것이 주지된다. 펩타이드의 아미노산 치환 및/또는 하나 이상의 측쇄 유도체화는 둘 다 LDL-R에 대한 결합의 손실에 기여할 수 있다. 일반적으로 테스트된 EGF(A) 화합물들의 다수가 hLDL-R에 대한 결합에서 PCSK9를 억제하는 능력을 나타냈다.
PCSK9 억제자 특성
처음에 다양한 아미노산 치환을 포함한 펩타이드 그룹을 섹션 D.1.1에서 기술한 것과 같이 테스트하였고 그 결과를 하기 표 5.1에 나타낸다.
WO 2012177741에서 가장 강력한 펩타이드 변종으로서 확인된 EGF66은 5개의 돌연변이를 가진다. 상기에서 알 수 있는 것과 같이, 본 발명자들은 이들 돌연변이 중 여러 개가 D.1.1에서 기술한 검정으로 측정된 EC50 값에 대해서 크게 중요하지 않았음을 발견하였다. 특히 본 발명자들은 위치 310에 야생형 잔기 Asp (D)를 포함한 화합물들이 310K를 가진 화합물들보다 더 높은 효능을 나타냈음을 발견하였다. 또한 핵심적인 아미노 치환은 바람직하게 309R과 조합된 301L인 것으로 나타난다. 마지막으로 307I 및 299A는 펩타이드들의 친화도에 단지 중간 정도로 기여하였다.
치환기의 N-말단 부착
후속되는 실험에서 반감기 프로트랙터, 예컨대 치환기의 펩타이드에의 부착이 D.1.1에서 기술된 검정에 의해 측정된 EC50에 영향을 미치는지의 여부를 테스트하였다. 본원에서 기술한 것과 같이 치환기는 상이한 기술에 의해 부착될 수 있고 본 발명자들은 처음에 펩타이드의 N-말단 아미노산을 사용하여 질소 원자를 통한 부착을 적용하기로 결정하였다. 이것은 섹션 B에서 기술한 것과 같이 아실화 (용액에서 또는 수지 상에서) 및 알킬화에 의해 이루어졌다.
하기 표 5.2에서 알 수 있는 것과 같이, 테스트된 화합물들은 3.0 미만의 Ki 값을 나타내는데, 그것은 다양한 프로트랙터 및 링커 요소들이 잘 허용되었음을 시사한다. 이것은 GLP-1과 같은 펩티드에 대해 이전에 관찰된 것처럼 효능이 보통 측쇄의 부착에 의해 부정적으로 영향을 미치기 때문에 흔한 것은 아니었다.
치환기의 Lys 부착
PCSK9 억제자 펩타이드에 대한 치환기의 결합에 대한 대체 위치를 평가하기 위하여 일련의 화합물을 제조하였다. 3개의 아미노산 치환: N301L, N309R 및 K312E를 포함하는 골격 펩타이드를 실시예 58, 29 및 4를 제외하고, 다양한 위치에서의 Lys 치환과 조합하여 사용하였다. 테스트한 모든 화합물은 보통 시스테인 이황화 가교에 참여하는 위치 297, 304, 308, 317, 319, 331에서 6개의 시스테인 아미노산을 포함하였다. 312E는 wt 312K에 대한 부착이 얻어지는 실시예 4를 제외하고 부위 특이적 치환을 확보하기 위하여 포함시켰다. 하나의 Lys을 가진 펩타이드의 연장을 또한 테스트한다 (실시예 75 및 3). C18 이산 프로트랙터 및 gGlu-2xAdo 링커를 포함하는 상기 기술된 것과 같은 치환기를 모든 화합물에 사용하였고 아실화를 통해 부착시켰다. 그 결과를 하기 표 5.3에 포함시킨다.
분석 결과 대부분의 PCSK9 억제자 펩타이드가 기능성을 유지하는 것으로 나타났다. 예외적인 것은 비-기능성 펩타이드에 대해 발생한 위치 298, 301, 302 및 307 중 어느 하나에서의 Lys 치환 및 유도체화였다. 또한 위치 296, 299,315 및 320K에서의 Lys 도입 및 치환은 외관 친화도를 감소시킨 것으로 관찰되었다.
그러므로 데이터는 또한 Leu (L)에 대한 Asn(N) 301의 아미노산 치환이 결합에 필수적인 것을 나타내는 표 5.1로부터의 결과를 확인해준다.
위치 295 및 310에서의 Lys 도입 및 치환에 대한 데이터는 관찰되지 않았다. 상기에서 기술된 것과 같이, 310에서의 Asp의 유지가 310K 치환보다 바람직한 것으로 앞서 밝혀졌다. 하기에서 알 수 있는 것과 같이 또한 결합은 위치 295에 Asp (D)의 도입에 의해 제거되는 것으로 나타났다 (실시예 70).
요약하면 PCSK9 펩타이드의 위치 295, 298, 302, 307 및 310 중 임의의 위치 또는 위치 295, 296, 298, 299, 302, 307, 310, 315 및 320 중 임의의 위치에서 부착된 치환기를 포함하지 않는 화합물이 일반적으로 기능적인 것으로 결론지어졌다. 추가로 위치 295, 298, 302, 및 310 중 임의의 위치에서의 아미노산 치환은 일반적으로 매력적이지 않은 것으로 결론지어졌다. 표 5.1 및 5.2로부터 알 수 있는 것과 같이 V307I 돌연변이는 어느 것도 310Leu와의 조합에서 허용되는 것처럼 보이지 않거나 매력적이지 않다.
추가로 위치 295, 296, 298, 302, 310 중 하나에서의 아미노산 치환을 가지는 펩타이드들은 더 낮은 기능성을 가지는 것으로 보이는 한편, 299, 315 및 320에서의 치환은 기능성을 단지 약간 저하시키는 것으로 보인다. 다른 한편으로 이것은 또한 Lys 치환 및 측쇄의 부착이 대부분의 다른 아미노산 치환만큼이나 펩타이드들에 영향을 미칠 것이기 때문에 고도의 가요성이 나머지 아미노산 잔기들에 대해 존재할 수 있음을 시사한다.
2개의 치환기를 가지는 PCSK9 억제자
2개의 치환기를 가지는 일련의 화합물을 제조하였다. 이중 치환은 아실화, 알킬화 또는 N-말단에서 또는 Lys (K) 잔기에서의 조합에 의해 얻어질 수 있다. 다시, N-말단은 아미노산 293G 또는 292A, 293G, 293K 및 294T (293G가 결실된 경우에)와 같은 변종 아미노산 잔기일 수 있다. 화합물을 상이한 치환기로 제조하였지만, 개별 화합물 상의 2개의 치환기는 동일하다. 이 연구에서 사용된 골격은 다시 N309R과 조합하여 N301L 아미노산 치환 및 특이적 아실화/알킬화를 얻기 위해 필요한 다양한 N-말단 및/또는 Lys 치환을 포함하였다.
다시, 발명자들은 치환기들이 다양한 위치 및 조합으로 매우 잘 허용되었다고 결론내렸다.
추가의 PCSK9 억제자 유도체
PCSK9 펩타이드에서 다양한 아미노산의 추가의 역할을 탐구하기 위하여, 추가의 화합물들을 제조하였고 표 5.5에서 나타낸 것과 같이 테스트하였다. 모든 화합물은 아미노산 치환 또는 333K로의 연장에 의해 도입된 Lys 잔기를 통해 부착되는 하나의 치환기를 포함한다. 골격 펩타이드는 모두 N301L 아미노산 치환 및 N309R 및 I312E 중 선택적으로 하나 이상을 포함한다. 치환기는 모두 16 내지 20개의 탄소 원자 및 gGlu 단독인 또는 Ado-Ado 및/또는 트라넥사민산 (Trx) 모이어티로 연장된 링커를 포함하는 지방 이산을 포함한다.
상기 표 5.5의 결과는 위치 312의 내부 wt 리신이 Glu (E)뿐만 아니라 Gln (Q), Arg (R) 또는 Asp (D)로 치환될 수 있음을 나타낸다. 이런 변화를 기반으로, 광범위한 아미노산 잔기가 펩타이드의 억제 기능을 간섭하지 않으면서 위치 312에서 허용될 것이라고 예상된다.
G293N, T294G, D299A, N300H, H306Y, H306D, N309S, Q324G 및 R329H를 포함하여 여러 다른 아미노산 치환이 또한 잘 허용되는 것으로 증명된 한편, 상기 언급된 것과 같이 N295D 및 N300P는 매력적인 아미노산 치환이 아니다.
D.1.2 HepG2 세포에서 LDL 흡수 검정
HepG2 세포에서 LDL의 흡수를 측정하는 PCSK9 펩타이드 및 그것의 유도체의 억제 효능을 측정하기 위한 대체 검정을 하기에서 기술한다.
검정 원리: LDL 흡수는 주로 내인적으로 발현된 hLDLR에 의해 매개되므로, LDL 흡수 용량은 LDLR 발현의 간접적인 척도이다. hLDLR은 용량 의존적 양상으로 외인성 PCSK9과의 인큐베이션에 의해 하향-조절될 수 있다. 그러므로 PCSK9 인큐베이션은 세포가 LDL 분자를 흡수하는 능력을 감소시킬 것이다. 이런 LDL 흡수의 하향-조절은 다음에 PCSK9/LDLR 결합을 중화하는 또는 억제하는 화합물의 첨가에 의해 길항될 수 있다. 따라서 PCSK9 억제자는 PCSK9의 존재하에 LDL 흡수를 증가시키고 예컨대 PCSK9 매개된 hLDLR 하향-조절을 반대로 작용하는 능력을 기반으로 특성화될 수 있다.
검정은 10% 리포단백질 결핍 Foetal 소 혈청 (Sigma Aldrich #S5394)에서 성장된 HepG2 세포 (Sigma Aldrich ECACC: Acc no. 85011430)를 사용하여 수행하고 세포가 BODIPY 형광 표지된 LDL 입자 (Life technologies Europe BV #L3483)를 흡수하는 능력을 측정한다.
검정 프로토콜: 96 웰 플레이트 (Perkin Elmer, ViewPlate-96 Black #60005182)를 폴리-D-리신 (10mg/L, PBSGibco #14190-094에 용해된 Sigma Aldrich #P6407)으로 1시간 동안 37℃에서 인큐베이터에서 코팅하였다. 그런 다음 플레이트를 2 x 100 μl PBS (Gibco #14190-094)로 세척하였다. EGF(A) 화합물의 8개의 점 농도 곡선에 대한 테스트 조성물을 모두 검정 배지 (DMEM (Gibco #31966-021)로 희석된 PCSK9 (10 ug/ml), 10% 리포단백질 결핍 Foetal 소 혈청 (Sigma Aldrich #S5394) 및 1% Pen Strep (Cambrex #DE17-602E))을 함유하도록 제조하였고, 50 ul/웰의 부피로 플레이트에 첨가하였다.
30 내지 60분 후에 검정 배지에 희석한 50,000개의 HepG2 세포 (Sigma-Aldrich: ECACC: Atcc no. 85011430 lot: 13B023)를 50 ul/웰의 부피로 첨가하였고, 플레이트를 20시간 동안 (37℃, 5% CO2에서) CO2 투과성 플라스틱 주머니 (Antalis Team, LDPE bag 120/35x300x0,025mm #281604)에서 인큐베이션하였다. 그 후에, 플레이트를 비우고 즉시 그 후에 검정 배지 중의 10 μg/ml의 농도로 50 μl의 FL-LDL (Life technologies Europe BV #L3483)을 각 웰에 첨가하고, 플레이트를 2시간 동안 (37℃, 5% CO2에서) CO2 투과성 플라스틱 주머니에서, 빛으로부터 보호하기 위해 뚜껑에 검은색 커버를 사용하여 인큐베이션하였다. 플레이트를 비우고 100 μl의 PBS (Gibco #14190-094)를 첨가하고 그런 후 15분 이내에 플레이트를 SpecktraMax M4 (Molecular Probes, Invitrogen Detection Technologies) 상에서 다음의 필터 Ex (515 nm)/Em (520 nm)를 사용하여 판독하였다 (바닥 판독).
마지막으로, EC50 값을 GraphPad Prism, 비선형 회귀 곡선 피트, 사인모양 용량-반응 (가변 기울기)를 사용하여 계산하였다.
그 결과를 하기 표 6에 나타낸다. 더 낮은 EC50 값은 LDL 흡수의 PCSK9 매개된 하향-조절을 반전시키는 더 높은 용량을 반영하고, 역으로 높은 EC50 값은 LDL 흡수의 PCSK9 매개된 하향-조절을 억제하는 저용량을 가진 화합물을 나타낸다.
알 수 있는 것과 같이 대부분의 화합물은 LDL 흡수 검정에서 LDL 흡수의 PCSK9 매개된 하향-조절을 반전시키는 고용량을 가진 화합물을 나타내는, 100 내지 500 nM의 EC50을 나타낸다.
|
실시예
번호 |
LDL 흡수
EC 50 (nM) |
실시예
번호 |
LDL 흡수
EC 50 (nM) |
실시예
번호 |
LDL 흡수
EC 50 (nM) |
| 1. | ND | 55. | ND | 109. | 572 |
| 2. | 255 | 56. | ND | 110. | 465 |
| 3. | 168 | 57. | 438 | 111. | 316 |
| 4. | 302 | 58. | ND | 112. | 539 |
| 5. | 220 | 59. | ND | 113. | 1383 |
| 6. | 413 | 60. | 261 | 114. | 739 |
| 7. | 304 | 61. | 347 | 115. | 247 |
| 8. | 130 | 62. | 411 | 116. | 330 |
| 9. | ND | 63. | 197 | 117. | 316 |
| 10. | 199 | 64. | 590 | 118. | 191 |
| 11. | 401 | 65. | 10000 | 119. | 327 |
| 12. | ND | 66. | 248 | 120. | 300 |
| 13. | 280 | 67. | 384 | 121. | 201 |
| 14. | 161 | 68. | 124 | 122. | 241 |
| 15. | 211 | 69. | 311 | 123. | 351 |
| 16. | 144 | 70. | ND | 124. | 264 |
| 17. | 199 | 71. | 217 | 125. | 334 |
| 18. | 172 | 72. | 222 | 126. | 489 |
| 19. | 206 | 73. | ND | 127. | 245 |
| 20. | 198 | 74. | 123 | 128. | 351 |
| 21. | 174 | 75. | 239 | 129. | 892 |
| 22. | 357 | 76. | 272 | 130. | 259 |
| 23. | 143 | 77. | 2044 | 131. | 218 |
| 24. | 160 | 78. | 546 | 132. | 195 |
| 25. | ND | 79. | ND | 133. | 220 |
| 26. | 358 | 80. | 248 | 134. | 180 |
| 27. | ND | 81. | 617 | 135. | 1505 |
| 28. | ND | 82. | 203 | 136. | 455 |
| 29. | 163 | 83. | 165 | 137. | 2070 |
| 30. | 182 | 84. | 337 | 138. | 480 |
| 31. | 170 | 85. | 157 | 139. | 546 |
| 32. | 224 | 86. | 248 | 140. | 226 |
| 33. | 245 | 87. | 185 | 141. | 210 |
| 34. | 232 | 88. | 298 | 142. | 126 |
| 35. | 252 | 89. | 139 | 143. | 299 |
| 36. | ND | 90. | 380 | 144. | 484 |
| 37. | 188 | 91. | 114 | 145. | 329 |
| 38. | 149 | 92. | 147 | 146. | 718 |
| 39. | 156 | 93. | 267 | 147. | 246 |
| 40. | 231 | 94. | 375 | 148. | 204 |
| 41. | ND | 95. | 257 | 149. | 233 |
| 42. | 324 | 96. | 261 | 150. | ND |
| 43. | 499 | 97. | 138 | 151. | ND |
| 44. | 237 | 98. | 203 | 152. | ND |
| 45. | ND | 99. | 167 | 153. | ND |
| 46. | ND | 100. | 174 | 154. | 148 |
| 47. | 1102 | 101. | 129 | 155. | 391 |
| 48. | 1278 | 102. | 112 | 156. | 167 |
| 49. | 398 | 103. | ND | 157. | ND |
| 50. | 164 | 104. | ND | 158. | 303 |
| 51. | ND | 105. | ND | 159. | 178 |
| 52. | ND | 106. | 195 | ||
| 53. | ND | 107. | 486 | ||
| 54. | 526 | 108. | 2555 |
D.2. 마우스에서의 PK
이 연구의 목적은 상기 확인된 PCSK9 억제자의 PK 프로파일을 측정하는 것이었다.
방법:
Taconic (Ry, Denmark)으로부터의 암컷 C57bl/J 마우스를 사용하였다.
화합물의 투약: 화합물을 피하로 (s.c., 500 nmol/kg) 또는 정맥내로 (i.v., 250 nmol/kg) 체중 g당 5μL의 부피로 투약하였다.
혈액 샘플링: 혈액을 2분, 15분, 30분, 60분, 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 18시간, 24시간, 30시간 및 48시간에 희박 샘플링하였다. 혈액 (200μL)을 혀밑 정맥으로부터 취하여 EDTA-코팅된 튜브(Microvette® VetMed 200 K3E, Sarstedt nr 09.1293.100)로 옮겼다. 혈장을 분리하여 항-PCSK9 펩타이드의 정량에 사용하였다.
정량: 혈장 샘플을 LC-MS를 사용하여 PCSK9 억제자의 정량에 사용하였다.
샘플링 및 분석:
혈장을 드라이아이스에서 마이크로닉 (Micronic) 튜브로 피펫팅하고, LC-MS를 사용하여 각각의 PCSK9 억제자의 혈장 농도에 대해 분석할 때까지 -20℃에서 유지하였다. 혈장 샘플 (표준 곡선 및 미지의 것의 정량에 대해 사용되고 0.5 내지 1000 nM의 농도 범위의 PCSK9 억제자로 스파이크된 블랭크 혈장으로부터 제조된 QC 샘플을 포함하여)을 1% 포름산을 포함한 100% 메탄올 또는 아세토니트릴의 3부피를 사용하여 단백질을 침전시키고 (항-PCSK9 펩타이드에 따라) 원심분리하였다 (16000 x g, 4℃, 20분). 상층액을 초기 터보플로우 사이클론(Turboflow Cyclone) 정제 칼럼 0.5 x 50 mm (Thermo Fischer Scientific) 및 60℃에서 유지되는 용출용 Aeris 펩타이드 3.6μm XB - C18 칼럼 2.1 x 50 mm (Phenomenex)로 구성된 크로마토그래피 시스템 (TurboFlow Transcend 1250 & 10 valve VIM, Thermo Fisher Scientific)에 주입하였다. 항-PCSK9 펩타이드를 0.1% 또는 1% 포름산 (EGF(A) 유사체 또는 유도체에 따라)을 포함하는 물과 아세토니트릴의 혼합물로 구성되는 이동상을 포함한 크로마토그래피 구배를 사용하여 용출하였다. 항-PCSK9 펩타이드를 LC 흐름의 LTQ OrbiTrap 또는 포지티브 방식, ESI+로 작동된 전기분무 인터페이스가 장착된 Q 이그잭티브 질량 분석계 (Thermo Fischer Scientific)에의 온-라인 주입 후 검출 및 정량하였다.
PK 특성의 계산:
혈장 농도-시간 프로파일을 소프트웨어 Phoenix WinNonlin 6.4를 사용하여 비-구획 약물동역학 분석에 의해 분석하였다. I.V. 및 S.C. 데이터 둘 다에 대한 계산을 선형 사다리꼴 선형 내삽을 사용하여, 1/Y＾Y의 무게를 측정하면서 수행하였다. 생체이용률을 S.C. 프로파일에 대한 AUC/용량을 I.V. 프로파일에 대한 AUC/용량으로 나눔으로써 계산하였다.
결과:
결과를 표 7에 나타낸다. 표 7에서, Tmax는 테스트된 EGF(A) 유사체 또는 유도체의 최대 혈장 농도에 이르는 시간을 가리킨다. T½은 EGF(A) 유사체 또는 유도체의 반감기이다. MRT는 평균 체류 시간이다. F (s.c.)는 피하 주입 후의 EGF(A) 유사체 또는 유도체의 생체이용률이다. 더 높은 T½ 값은 테스트한 화합물의 더 긴 반감기를 반영한다.
결과는 발명의 PCSK9 억제자, 특히 지방산 치환기로 치환된 LDL-R(293-332) 유사체가 연장된 반감기를 나타내는 것을 보여준다.
| 치환기 | Tmax (시간) |
i.v. T½ (시간) | s.c. T½ (시간) | MRT (시간) | F (s.c.) (%) | |
| 실시예 1 | 있음 (N-말단) | 2 | 16 | 12 | 15 | 99 |
| 실시예 48 | 없음 | 0.3 | 0.2 | 0.4 | 0.2 | 76 |
| 실시예 2 | 있음 (N-말단) | 2 | 14 | 14 | 19 | 100 |
| 실시예 3 | 있음 (333K를 통해) | 4 | 14 | 14 | 19 | 87 |
| 실시예 5 | 있음 (N-말단) | 4 | 13 | 17 | 17 | 94 |
| 실시예 6 | 있음 (299K를 통해) | 6 | 11 | 11 | 16 | 100 |
| 실시예 13 | 있음 (293K 및 333K를 통해) | 2 | 6 | 7.5 | 11 | 96 |
| 실시예 19 | 있음 (N-말단) | 2 | 13 | 14 | 18 | 100 |
| 실시예 4 | 있음 (312K를 통해) | 8 | 14.3 | 12.8 | 20.3 | 54 |
D.3. hPCSK9 도전 모델
이 연구의 목적은 항-PCSK9 펩타이드로 정맥내 주입된 hPCSK9의 작용을 억제하는 것에 대한 반응으로 마우스 간에서 LDL 수용체 발현 수준의 변화를 보기 위한 것이었다.
방법
건강한 수컷 BalBC 또는 NMRI 마우스 (Charles River, Germany)에게 hPCSK9 (Sino Biologicals, China)를 0.4 mg/kg의 용량으로 꼬리 정맥에 정맥내 주입하기 15분 내지 120분 전에 s.c. 또는 i.v.로 항-PCSK9 펩타이드를 주입하였다. hPCSK9의 주입 후 60분 후에, 동물을 아이소플루란으로 마취시키고 경부 탈구에 의해 안락사시켰다. 그런 다음 간을 빠르게 절제하고 액체 질소에 순간 냉동시킨다. 간을 -80℃에서 분석할 때까지 유지한다.
LDL-R 웨스턴 블롯팅:
간 조직 샘플 (100 mg)을 포스파타제 억제 칵테일; PhosStop (Roche, 04 906 837 001) 및 프로테아제 억제 칵테일; 컴펠레이트(compelate)(Roche, 04 693 159 001)를 함유하는 500 μl 용해 완충액 (Life Technology, FNN0011)에서 균등화하였다. 1개의 강철 비드를 첨가한 후에 조직을 2.5분 동안 30 Hz에서 균등화하였다. 그것을 5000xg에서 5분 동안 원심분리한 후, 총 단백질 함량을 BCA 단백질 검정 키트 (Pierce, 23225)를 사용하여 측정하였다. 샘플 완충액 (Life Technology, NP0007) 중의 동일량의 단백질 (60 μg)을 10분 동안 끓인 후 2분 동안 14000 rpm에서 회전시킨 후 Criterion XT 3-8 % Tris-아세테이트 겔 (BioRad#345-0131) 상에 로딩하고 SDS-PAGE를 수행하였다. 단백질을 니트로셀룰로오스 막 (iBlot 2 NC Regular stacks, novex # IB23001)으로 제조자의 설명 (Life Technology)을 따라 옮겼다. 동일한 단백질 전달을 막의 Ponceau S (Sigma, P7170) 염색에 의해 확인하였고 막을 추가로 차단 완충액 (TBS-T, 2% Tween)에서 차단하였다. LDL-r 단백질을 일차 토끼 항 LDLr 항체 (Cayman Chemical Company #10012422)로 검출한 한편, 베타-액틴 단백질을 일차 토끼 항 베타-액틴 항체 (abcam # ab6276)를 사용하여 검출하였다. 두 단백질 모두 추가로 과산화효소-콘쥬게이트된 염소 항-토끼 이차 항체 (Biorad #170-6516)로 웨스턴 브라이트 퀀텀 (Western Bright Quantum) 화학발광 (Advansta # K-12042-D10)을 사용하여 시각화하고 CCD 카메라 (LAS3000, FujiFilm)를 사용하여 영상화하였다. 웨스턴 블롯으로부터의 화학발광 신호의 정량적 분석을 멀티게이지 소프트웨어 (Fujifilm)로 시행하였다.
결과
도 1은 개별적인 동물들에 대한 산포도로서 표시된, 웨스턴 블롯에 의해 측정된 간 LDL-R 발현 수준을 도시한다 (n=3 내지 6). "비히클-비히클"은 건강한 대조군의 그룹이고 (기준선 수준), "비히클-hPCSK9"은 hPCSK9 단독으로 주입된 그룹이다.
결과는 hPCSK9가 LDL-R의 발현 수준을 감소시키고 이 효과는 테스트된 PCSK9 억제자에 의해 억제되는 것을 보여준다.
표 8에서, 데이터는 건강한 대조군 동물에서의 기준선 수준 (100%로 설정함)과 hPCSK9 단독에 의해 하향 조절 후의 수준 (0%로 설정함) 사이의 윈도우에 관련하여 백분율 변화로서 제공된다.
6개의 모든 테스트된 예시는 LDL-R 발현 수준에 대한 hPCSK9의 작용을 억제할 수 있고, 관찰된 억제 수준은 대조군 분자 알리로쿠맙을 사용하여 관찰된 억제 수준과 유사하다.
| 그룹/실시예 | 기준선의 백분율 (%) | 억제자 용량 (nmol/kg) |
| 비히클-비히클 | 100 | 0 |
| 비히클-hPCSK9 | 0 | 0 |
| 실시예 2-hPCSK9 | 110 | 300 |
| 실시예 3-hPCSK9 | 113 | 300 |
| 실시예 5-hPCSK9 | 123 | 300 |
| 실시예 6-hPCSK9 | 96 | 300 |
| 실시예 13-hPCSK9 | 175 | 300 |
| 실시예 19-hPCSK9 | 190 | 300 |
| 알리로쿠맙-hPCSK9 | 157 | 22 |
결론
예시된 여러 화합물은 hPCSK9에 의한 LDL-R 발현 수준의 하향-조절을 억제하는 데 효능을 나타냈다.
D.4. 햄스터에서 LDL-콜레스테롤 감소
이 연구의 목적은 표준 식사 식단이 공급된 골든 시리안 (Golden Syrian) 햄스터에서 LDL-C에 대한 PC나 억제자의 영향을 평가하는 것이었다.
방법
생후 6주가 된 (91 내지 100 g) 수컷 골든 시리안 햄스터 (Janvier Elevage, Saint Isle, France)를 연구에 사용하였다. 적응한지 1주 후에, 4-시간 금식한 햄스터 (아침 8시경에 금식을 시작함)의 무게를 측정하고 정오 쯤에 아이소플루란 마취 하에 안구뒤 출혈에 의해 채혈 (100μL/EDTA)하여 총 콜레스테롤, LDL-콜레스테롤 및 HDL-콜레스테롤을 측정하였다. 햄스터를 무작위로 그것들의 1) LDL-콜레스테롤, 2) HDL-콜레스테롤 및 3) 총 콜레스테롤에 따라 5개의 균일한 그룹 (n=10마리/그룹)으로 나누었다. 무작위 배정 후에, 햄스터를 1일에 1회 5일 동안 피하 주입에 의해 치료하였다. 치료 기간 동안 체중을 매일 측정하였다.
치료의 3일째에, 4-시간 금식한 햄스터들의 무게를 측정하고 아침 투약 후 ~1시간 후 (정오 쯤)에 아이소플루란 마취 하에 안구뒤 출혈에 의해 채혈 (100μL/EDTA)하여 총 콜레스테롤, LDL-콜레스테롤 및 HDL-콜레스테롤을 측정하였다.
치료의 5일 째에, 4-시간 금식한 햄스터들의 무게를 측정하고 아침 투약 후 ~1시간 후 (정오 쯤)에 아이소플루란 마취 하에 안구뒤 출혈에 의해 채혈하였다 (최대 혈액 부피/EDTA).
혈장을 즉시 분리하였다. 각 개체에 대해, ~15 μL의 혈장 부피를 유지하여 총 콜레스테롤, LDL-콜레스테롤 및 HDL-콜레스테롤을 측정하였다. 그런 다음 각 개체의 다른 혈장 부피 (~50μL)를 사용하여 FPLC 총 콜레스테롤 프로파일에 대한 각 치료 그룹에 대한 혈장 풀을 제조하였다 (즉 그룹당 ~500 μL의 1개의 풀, 5개의 풀). 그런 다음 햄스터를 아이소플루란 마취 하에 경부 탈구에 의해 희생시키고 방혈시켰다. 간을 수득하고, 무게를 측정하고 2개의 간 샘플 (~50 mg 및 ~100 mg, 무게를 기록하지 않음)을 액체 질소 중에 순간 냉동한 후 -80℃에서 저장하였다.
~50 mg 샘플을 사용하여 간의 LDL-수용체 및 팬-카데린(pan-cadherin) (로딩 대조군) 단백질 발현을 웨스턴 블롯 및 밀도계 분석 (Image J software)에 의해 평가하였다. 데이터를 평균 +/- SEM으로서 제시한다. 단일 또는 이원 변량분석 w/Dunnett 또는 본페로니 후-테스트 각각을 통계학적 분석에 사용하였다. p<0.05를 유의미한 것으로 간주하였다.
결과
도 2는 비히클 또는 실시예 2의 10 nmol/kg, 30 nmol/kg, 100 nmol/kg 또는 300 nmol/kg로 5일 동안 매일 1회 피하 주입에 의해 처리된 햄스터에서 치료 기간 동안 혈장 LDL-콜레스테롤을 도시한다. (**p<0.01 및 ***p<0.001 대비 테스트 비히클, 이원 변량분석, Dunnetts 사후 검정 분석).
도 3은 5일 동안 매일 1회 비히클로 또는 실시예 2 10 nmol/kg, 실시예 2 30 nmol/kg, 실시예 2 100 nmol/kg 또는 실시예 2 300 nmol/kg으로 피하 주입에 의해 치료된 햄스터의 간 샘플로부터의 로딩 대조군 팬-카데린에 대한 간의 LDL-R 발현을 도시한다. (*p<0.05, **p<0.01 및 ***p<0.001 대비 비히클, 일원 변량 분석, Dunnetts 사후 검정 분석).
비히클 체중과 체중 증가를 비교하면 임의의 치료에서 영향을 받지 않았다 (데이터는 제시되지 않음). 모든 용량은 LDL-콜레스테롤을 감소시켰다 (도 2 참조). 이런 효과는 실시예 2의 최저 용량에 대해서는 유의미하지 않지만, 더 높은 용량 100 및 300 nmol/kg은 LDL-콜레스테롤 수준을 5일째에 35% 감소시켰다. 이런 경향은 추가로 FPLC 분석에 의해 확인되었는데, 그것은 햄스터를 테스트 항목 실시예 2로 처리했을 때 LDL 및 HDL에 상응하는 분획에서의 총 콜레스테롤 수준의 실질적인 감소를 보였다 (데이터는 제시하지 않음). 간의 LDL-R 발현 수준의 부수적인 용량-의존적 증가가 또한 입증되었다 (도 2 및 도 3 참조).
결론
용량 반응 연구는 정상 식사시 골든 시리안 햄스터에서 3 및 5일 투약 후 30 nmol/kg의 용량으로 적어도 LDL 콜레스테롤에 대해 유의미한 효과를 얻는 것이 가능한 것을 증명한다. LDL 콜레스테롤에 대한 효과는 유의미하게 더 높은 간의 LDL-수용체 발현 수준에 부수적인 것이다.
D.5 개의 i.v. PK 연구
개의 i.v. PK 프로파일 측정을 위해, 3-4 마리의 비글 개 (수컷, 10 내지 16 kg)에 70 mM 염화 나트륨; 50 mM 포스페이트, 70 ppm 폴리소르베이트 20; pH=7.4 중의 단일 또는 다중 PCSK9 유사체로 i.v. (2 nmol/kg, 0.1 ml/kg) 투약하였다. 투약 전에, 개를 수돗물에 자유롭게 접근할 수 있게 하면서 밤새 금식시켰다. 유사체를 복재 정맥 또는 머리 정맥을 통해 바늘 (20 G)을 통한 단일 주입에 의해 또는 삽입된 벤플론 (venflon)을 통해 순차적인 투약에 의해 투약하였다. 0.8 ml의 혈액 샘플을 각각의 EDTA-코팅된 튜브에 투약 후 0, 0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.5, 2, 4, 6, 8, 10, 24, 48, 72, 120, 144, 168, 192, 216, 240, 288시간 후에 수집할 것이다. 처음 4시간 샘플링에 대해, 혈액을 개가 플랫폼에서 구속되었을 때 삽입된 벤플론을 통해 수집하였다. 4시간 후의 나머지 샘플링 지점은 경정맥을 통해 단일 바늘 펀치 (20 G)에 의해 수집하였다. 혈액 수집 직후에, 각 샘플을 3-4회 부드럽게 도치시키고 혈장 제조 전에 빠르게 아이스 박스에 옮겼다 (10분, 4℃, 4000 rpm). 혈장 샘플을 생체분석 전에 -20℃에서 유지하였다. 혈액 샘플링에 대한 최대 편차는 투약 후 120-분까지는 투약 일에 대해 1분이고, 4- 내지 10-시간 지점에 대해서는 5분이며, 나머지 날들에 대해서는 1시간 이내이다.
혈장 분석:
공동-투약 연구로부터의 혈장을 드라이아이스상에서 마이크로닉 튜브에 피펫팅하고, 액체 크로마토그래피 질량 분석 (LC-MS)을 사용하여 각각의 PCSK9 유도체의 혈장 농도에 대해 분석할 때까지 -20℃에서 유지하였다. 혈장 샘플 (표준 곡선 및 미지의 것의 정량에 대해 사용되고 0.5 내지 500 nM의 공칭 농도 범위의 PCSK9 유도체로 스파이크된 블랭크 혈장으로부터 제조된 QC 샘플을 포함하여)을 3부피의 메탄올 (내부 표준으로서 실시예 4를 포함하여)로 단백질을 침전시키고 원심분리하였다 (16000 x g, 4℃, 30분). 상층액을 초기 터보플로우 사이클론 정제 칼럼 0.5 x 50 mm (Thermo Fischer Scientific) 및 60℃에서 유지되는 용출용 Aeris 펩타이드 3.6μm XB - C18 칼럼 2.1 x 50 mm (Phenomenex)로 구성된 크로마토그래피 시스템 (TurboFlow Transcend 1250 & 10 valve VIM, Thermo Fisher Scientific)에 주입하였다. PCSK9 유도체를 1 v/v% 포름산을 포함하는 물과 아세토니트릴/메탄올 50/50 v/v%의 혼합물로 구성되는 이동상을 포함한 크로마토그래피 구배를 사용하여 용출하였다. PCSK9 유도체를 포지티브 방식, ESI+로 작동된 전기분무 인터페이스가 장착된 Q 이그잭티브 질량 분석계 (Thermo Fischer Scientific)로의 LC 흐름의 온-라인 주입 후에 검출 및 정량하였다. 혈장 샘플의 생체분석 중에, 달라지는 이성질체화 정도를 상이한 PCSK9 유도체에 대해 관찰하였다. 이성질체는 모두 동일한 단일 동위원소성 질량을 가지며 함께 정량된다.
각각의 테스트된 유사체의 PK 파라미터 (예컨대 T1/2)를 비-구획 분석 (NCA)에 의해 Phoenix WinNonlin 소프트웨어를 사용하여 분석하였고, 반감기 계산은 동일한 분자 질량을 가지는 모든 이성질체 전체의 노출 수준을 기준으로 한다.
| 실시예 번호 | 펩타이드 변종 | 개 iv PK 공동-투약 T1/2 (h) |
| 실시예 3 | 301L, 309R, 312E, 333K | 122 |
| 실시예 31 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 117 |
| 실시예 81 | 301L, 309R, 312E, 333K | 209 |
| 실시예 91 | des293, 300H, 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 34 |
| 실시예 95 | des293, 301L, 309R, 312E, 313K | 116 |
| 실시예 128 | 301L, 309R, 312E, 313K, 333K | 190 |
| 실시예 133 | 301L, 309R, 312E, 313K, 321E, 333K | 115 |
| 실시예 143 | 301L, 309R, 312E, 313K, 321E, 333K | 89 |
| 실시예 144 | 301L, 309R, 312E, 313K, 321E, 333K | 193 |
D.6 래트에서 경구 흡수 연구
본 연구는 건강한 래트에 경구로 투약된 공동-제제화된 펩타이드의 위장 흡수를 조사하였다.
동물:
Taconic (Denmark)으로부터의 수컷 스프래그 다우리 래트는 도착시 250 g이었다. 래트들은 연구 전에 Animal Unit (Novo Nordisk A/S)에서 적어도 한 주간 적응시켰다. 연구를 시작할 때 체중은 대략 280 내지 300 g이었다. 래트들을 투약 전에 계속 18시간 동안 금식시켰다.
펩타이드의 공동-제제
생체내 (래트)에서 PCSK9i 유사체의 경구 공동-투약을 위한 액체 제제의 제조를 하기 기술한 것과 같이 수행하였다.
표적 EGF(A) 펩타이드 농도는 각 유사체의 200 μM이었고, 55 mg/ml 소듐 데카노에이트 및 물의 표적 농도로 제제화하였다. 5 내지 6개의 상이한 펩타이드 유사체를 동일한 제제로 함께 제제화하였다.
간단히 설명하면, 소듐 데카노에이트의 스톡 용액 (110 mg/mL)을 초고순도의 물을 사용하여 제조하고 용액의 pH를 HCl을 사용하여 9.0으로 조정하였다.
API를 20 mL의 유리 바이알에 옮기고 5 g의 초고순도 물을 첨가하고 (1 mg/mL 밀도로 가정함) API를 실온에서 롤러 혼합기상에서 용해되도록 두었다. 용액의 pH를 pH가 안정화될 때까지 계속해서 NaOH로 8.0으로 조정한 후, 6.5 g의 소듐 데카노에이트 스톡 (최종 농도 55 mg/mL)을 첨가하고 이어서 pH를 pH 8.0으로 조정하였다. 그런 다음 용액을 실온에서 롤러 혼합기 상에서 밤새 유지하였다 (빛으로부터 보호함). 다음날 필요하다면 NaOH를 사용하여 pH 8.0으로 최종 pH 조정을 수행하였다.
최종 제제 중량을 초고순도 물을 사용하여 13 g으로 설정하고, 계속해서 0.02 μm 필터를 통해 여과하였다. 정확학 투약을 확보하기 위하여 API 및 소듐 데카노에이트 함량을 최종 제제에 대해 측정하였다. 제제를 나중에 사용할 때까지 4℃에서 저장하였다.
액체 제제에서 각각의 API의 농도를 215 nm에서의 UV 흡광도에 의해 측정하였다. LC 방법을 각각의 병용-투약 API가 서로 별도로 용출되는 것을 확보하기 위해 개발하였다. 각 API에 대한 공지 농도 (CLND에 의해 측정됨)의 표준들을 함께 혼합하고, 총 5개의 표준 농도를 보정 곡선 생성에 사용하였다. 최종 측정된 농도는 3개의 샘플로부터 취해진 평균이었고, 각각 2회 실험을 반복하였다. 액체 제제 중의 카프레이트 농도를 유사한 양상으로, 표준의 3개 농도로 구성된 보정 곡선을 사용하여 측정하였다.
투약:
동물들에 각 펩타이드의 1000 nmol/kg 및 5 ml/kg의 부피의 표적 용량을 시간 =O에 위관영양법에 의해 경구로 투약하였다.
혈액 샘플링 및 혈장 분리
혈액 샘플을 투약 후 15, 30, 60 및 120분에 채혈하였다. 혈액 샘플 (200μl)을 의식이 있는 래트에서 혀 정맥을 천공함으로써 EDTA-코팅된 튜브에 수집하였다. 샘플을 5분 동안 8000 G에서 4℃에서 원심분리하였다. 혈장 (60 내지 75μl)을 분리하고 마이크로닉 튜브 (75 μl)에 피펫팅한 후 즉시 -20℃에서 냉동시켰다.
혈장 분석:
공동-투약으로부터의 혈장을 드라이아이스상에서 마이크로닉 튜브에 피펫팅하고, 액체 크로마토그래피 질량 분석 (LC-MS)을 사용하여 각각의 PCSK9 유도체의 혈장 농도에 대해 분석할 때까지 -20℃에서 유지하였다. 혈장 샘플 (표준 곡선 및 미지의 것의 정량에 대해 사용되고 0.5 내지 500 nM의 공칭 농도 범위의 PCSK9 유도체로 스파이크된 블랭크 혈장으로부터 제조된 QC 샘플을 포함하여)을 3부피의 메탄올 또는 1 v/v% 포름산을 포함하는 아세토니트릴 (내부 표준으로서 실시예 4를 포함하여)을 사용하여 단백질을 침전시키고 원심분리하였다 (16000 x g, 4℃, 30분). 상층액을 초기 터보플로우 사이클론 정제 칼럼 0.5 x 50 mm (Thermo Fischer Scientific) 및 60℃에서 유지되는 용출용 Aeris 펩타이드 3.6μm XB - C18 칼럼 2.1 x 50 mm (Phenomenex)로 구성된 크로마토그래피 시스템 (TurboFlow Transcend 1250 & 10 valve VIM, Thermo Fisher Scientific)에 주입하였다. PCSK9 유도체를 1 v/v% 포름산을 포함하는 물과 아세토니트릴/메탄올 50/50 v/v%의 혼합물로 구성되는 이동상을 포함한 크로마토그래피 구배를 사용하여 용출하였다. PCSK9 유도체를 포지티브 방식, ESI+로 작동된 전기분무 인터페이스가 장착된 Q 이그잭티브 또는 LTQ OrbiTrap Discovery 질량 분석계 (Thermo Fischer Scientific)로의 LC 흐름의 온-라인 주입 후에 검출 및 정량하였다. 혈장 샘플의 생체분석 중에, 달라지는 이성질체화 정도를 상이한 PCSK9 유도체에 대해 관찰하였다. 이성질체는 모두 동일한 단일 동위원소성 질량을 가지며 함께 정량된다.
데이터 계산:
LC-MS에 의해 측정돈 혈장 농도로부터, 각각의 래트에서 각각의 펩타이드에 대해 최대 혈장 농도 (Cmax)를 얻고, Cmax/용량을 n=6 내지 8마리의 래트에 대해 평균값 ± SD로서 계산하였다. 용량을 주입 부피로서 계산하고, 체중에 대해 조정하고, 펩타이드의 실제 농도로 곱하였고, 단위는 pmol/kg이다.
각각의 공동-제제 그룹에 참조 펩타이드 (실시예 3)를 포함시켰다. 하기 표에서, Cmax/용량 (kg/l)을 참조 펩타이드 (실시예 3)에 대한 Cmax/용량 (kg/l)과 함께 8개의 상이한 펩타이드에 대해 열거한다. Cmax 계산을 동일한 분자 질량을 가지는 모든 이성질체 전체의 노출 수준을 기준으로 한다. 그 결과는 EGF(A) 유도체가 일반적으로 잘 흡수됨을 보여준다.
| 실시예 번호 | Cmax/용량 (kg/l) | 참조예 3에 대한 Cmax/용량 (kg/l) |
| 실시예 31 | 0.108 ± 0.086 | 0.053 ± 0.050 |
| 실시예 81 | 0.024 ± 0.005 | 0.079 ± 0.013 |
| 실시예 91 | 0.116 ± 0.032 | 0.083 ± 0.023 |
| 실시예 95 | 0.106 ± 0.029 | 0.087 ± 0.023 |
| 실시예 128 | 0.130 ± 0.013 | 0.087 ± 0.019 |
| 실시예 133 | 0.071 ± 0.017 | 0.057 ± 0.015 |
| 실시예 143 | 0.151 ± 0.038 | 0.096 ± 0.029 |
| 실시예 144 | 0.100 ± 0.025 | 0.057 ± 0.015 |
발명의 특정 특징들이 본원에서 예시되고 기술된 한편, 많은 변형, 치환, 변화, 및 동등물이 기술분야의 숙련된 사람들에게 일어날 것이다. 그러므로, 첨부된 청구범위는 모든 그러한 변형 및 변화들이 발명의 진정한 사상 내에 속하는 것으로서 의도된 것임이 인지되어야 한다.
SEQUENCE LISTING
<110> Novo Nordisk A/S
<120> EGF(A) ANALOGUES WITH FATTY ACID SUBSTITUENTS
<130> 150089
<160> 106
<170> PatentIn version 3.5
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35 40
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Lys Asp Leu Glu Ile Gly Tyr Glu Cys Leu Cys Pro Asp Gly Phe Lys
20 25 30
Leu Val Ala Gln Arg Arg Cys Glu
35 40
Claims (15)
- SEQ ID NO 1에 의해 규정된 LDL-R의 EGF(A) 도메인의 EGF(A) 펩타이드 유사체를 포함하는 EGF(A) 유도체로서, 301Leu 및 적어도 하나의 지방산 기를 포함하는 치환기를 포함하는 EGF(A) 유도체.
- 제 1 항에 있어서, 상기 치환기는 카르복실산, 설폰산, 테트라졸 모이어티, 메틸설포닐카바모일아미노 모이어티 또는 3-하이드록시-아이소옥사졸 모이어티 및 8 내지 20개의 연속적인 -CH2- 기를 포함하는 것을 특징으로 하는 EGF(A) 유도체.
- 제 1 항에 있어서, 상기 치환기는 아래의 식 I을 가지는 것을 특징으로 하는 EGF(A) 유도체:
Z1-Z2-Z3-Z4-Z5-Z6-Z7-Z8-Z9-Z10- [I], 식에서
Z1은
Chem. 1: HOOC-(CH2)n-CO-*,
Chem. 2: 테트라졸릴-(CH2)n-CO-*,
Chem. 3: HOOC-(C6H4)-O-(CH2)m-CO-*,
Chem. 4: HOS(O)2-(CH2)n-CO-*,
Chem. 5: MeS(O)2NH(CO)N-(CH2)n-CO-* 및
Chem. 6: 3-HO-아이소옥사졸-(CH2)n-CO-*로부터 선택되고,
여기서
n은 8 내지 20 범위의 정수이며,
m은 8 내지 11 범위의 정수이고,
Chem. 3에서 -COOH 기는 페닐 고리에서 위치 2, 3 또는 4에 부착될 수 있으며, 기호 *는 Z2에서 질소에 대한 부착점, 또는 Z2가 결합이라면 인접하는 Z 요소 상의 질소에 대한 부착점을 나타내고;
Z2은
Chem. 7: *-NH-SO2-(CH2)3-CO-*,
Chem. 8: *-NH-CH2-(C6H10)-CO-* 및
결합으로부터 선택되며;
Z3은
γGlu, Glu 및 결합으로부터 선택되고;
Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9는 서로 독립적으로,
Glu, γGlu, Gly, Ser, Ala, Thr, Ado, Aeep, Aeeep,TtdSuc 및 결합으로부터 선택되며;
Z10은
Chem. 14: *-NH-CH2-(C6H4)-CH2-* 및 결합으로부터 선택된다. - 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, EGF(A) 유도체는 다음으로 구성되는 군으로부터 선택된 하나 또는 2개의 치환기(들)을 포함하는 것을 특징으로 하는 EGF(A) 유도체:
- 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 다음의 (야생형) 아미노산 잔기(들): 295Asn, 296Glu, 298Leu, 302Gly 및 310Asp 중에서 1, 2, 3, 4 또는 5개 전부를 포함하는 것을 특징으로 하는 EGF(A) 유도체.
- 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 야생형 잔기 310Asp를 포함하는 것을 특징으로 하는 EGF(A) 유도체.
- 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 야생형 잔기 295Asn을 포함하는 것을 특징으로 하는 EGF(A) 유도체.
- 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 하나의 치환기는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 296Lys, 299Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 312Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 EGF(A) 펩타이드 유사체의 Lys 잔기에 부착되는 것을 특징으로 하는 EGF(A) 유도체.
- 제 1 항에 있어서, EGF(A) 유도체는 실시예 화합물 1 내지 44, 46 내지 47, 51 내지 55, 57, 60 내지 64, 66 내지 69, 71 내지 102 및 106 내지 159로 구성되는 EGF(A) 유도체의 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 EGF(A) 유도체.
- SEQ ID NO 1에 의해 규정된 LDL-R의 EGF(A) 도메인의 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 301Leu, 310Asp, 및 312Lys의 아미노산 치환을 포함하는 EGF(A) 펩타이드 유사체.
- SEQ ID NO 1에 의해 규정된 LDL-R의 EGF(A) 도메인의 EGF(A) 펩타이드 유사체로서, 301Leu 및 310Asp를 포함하고 펩타이드는 299Asp의 Glu, Val 또는 His로의 치환을 갖지 않는 EGF(A) 펩타이드 유사체.
- 제 10 항 또는 제 11 항에 있어서, EGF(A) 펩타이드 유사체는 Cys 잔기 297Cys, 304Cys, 308Cys, 317Cys, 319Cys 및 331Cys를 포함하는 것을 특징으로 하는 EGF(A) 펩타이드 유사체.
- 제 10 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서, 다음의 (야생형) 아미노산 잔기(들): 295Asn, 296Glu, 298Leu, 302Gly 및 310Asp 중에서 1, 2, 3, 4 또는 5개 전부를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 EGF(A) 펩타이드 유사체.
- 제 10 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서, EGF(A)는 292Lys, 293Lys, 294Lys, 296Lys, 299Lys, 300Lys, 303Lys, 305Lys, 306Lys, 309Lys, 311Lys, 313Lys, 314Lys, 315Lys, 316Lys, 318Lys, 320Lys, 321Lys, 322Lys, 323Lys, 324Lys, 325Lys, 326Lys, 327Lys, 328Lys, 329Lys, 330Lys, 332Lys 및 333Lys로 구성되는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 Lys 치환을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 EGF(A) 펩타이드 유사체.
- 제 10 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 펩타이드 서열은 SEQ ID NO.: 2 내지 47 및 49 내지 106으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 EGF(A) 펩타이드 유사체.
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Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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Patent Citations (1)
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