KR20160143793A - 산화 스트레스를 감소시키기 위한 조성물 및 방법 - Google Patents

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펜카녹 스리위리야논트
데비 엔가이
조쉬 그레고리오
스콧 더블유. 웬젤
레베카 울먼
승준 '제이슨' 이
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Abstract

산화 스트레스 및/또는 광손상으로부터 생긴 피부 노화를 감소시키기 위한 조성물이 본 명세서에 개시되어 있다. 이 조성물은 피부 주름, 가는 주름, 얇아진 피부, 처진 피부, 피부 건조 및 피부 가려움을 감소시키거나 예방하기 위해 피부 구역에 국소로 도포될 수 있다.

Description

산화 스트레스를 감소시키기 위한 조성물 및 방법{COMPOSITIONS AND METHODS FOR REDUCING OXIDATIVE STRESS}
본 개시내용은 일반적으로 산화 스트레스 및 광손상에 대한 세포 반응을 증대시키기 위한, 특히, 얼굴 및 몸의 피부 노화의 징후를 발생시킬 수 있는 진피 섬유아세포 및 표피 각질세포에서의 세포 반응을 증대시키기 위한 조성물 및 방법에 관한 것이다. 더 특히, 본 개시내용은 운다리아(Undaria) 추출물 및/또는 비덴스(Bidens) 추출물을 포함하는 조성물 및 산화 스트레스 및 UV 조사에 대한 세포 미토콘드리아 활성 및 항산화제 세포 반응을 증대시켜, 얼굴 및 몸의 노화의 증후를 감소시키기 위한 조성물을 국소로 도포하는 방법에 관한 것이다. 얼굴 및 몸의 피부에 영향을 미치는 노화의 징후는 예를 들어 주름, 가는 주름, 얇아진 피부, 처진 피부, 피부 건조 및 피부 가려움을 포함한다.
피부 노화와 관련하여, 소위 "내인성" 노화와 "외인성" 노화 사이가 구별되고, 후자에 대한 결정적인 인자는 외인성 영향, 특히 자외선(UV) 방사선("광노화")의 영향이다. 기계적으로, 반응성 산소 종(reactive oxygen species: ROS)이 정상 세포 대사의 과정에서 또는 생리학적 과정에 의해 생성되고, 특히 UV 방사선의 UVA 및 UVB 성분에 의해 생성되므로, 산화 스트레스는 피부의 내인성 및 외인성 노화 둘 다에서 주요한 역할을 한다. ROS는 형성 시 억제되지 않으면 피부의 UV 유도 노화와 관련하여 모든 세포 생물분자, 예컨대 DNA, 단백질 및 지질의 통합성에 지대하게 미치는 영향을 가진다. 특히, ROS의 과생성은 지질 과산화, 생물분자에 대한 손상 및 세포 생존능력에 대한 영향을 발생시킬 수 있다. 광노화에서 특히 중요한 즉각적인 결과는 기질 금속단백질분해효소의 ROS 유도이고, 이것은 콜라겐 단백질의 분해를 증가시켜서 콜라겐 합성과 분해 사이의 불균형을 생성하여서 피부가 얇아지게 한다. 지금까지, 광노화를 예방하기 위한 전략은 UV 노출의 감소, UV 노출로부터의 물리적 보호 및/또는 특정 비타민, 예컨대 비타민 C 또는 비타민 E의 적용으로 이루어진다.
특히, 얼굴 및 몸에서의 피부의 외관, 및 때때로 이의 구조를 미용상으로 개선할 수 있는 매우 다양한 크림 및 로션이 존재한다. 이러한 조성물은 피부 회춘을 조장하거나, 탄력을 증가시키거나, 그렇지 않으면 피부를 미용상으로 개선하는 레티노이드, 하이드록시산 및/또는 박피제(exfoliant)를 대개 이용한다. 많은 미용 제품은 수분을 제공하고, 염증을 야기하는 자극제를 사용하여 피부를 탱탱하게 함으로써 피부의 외관을 증대시킬 수 있다. 피부 강도 및 복원력을 제공하기 위해 섬유아세포에 의해 생성된 세포외 기질 단백질, 예컨대 엘라스틴 및 콜라겐을 표적화함으로써 회춘하게 하고 더 젊어 보이는 외관을 생성하도록 요구하는 다른 미용 제품이 이용 가능하다.
의학 시술, 예컨대 진피 주사 및 복원 수술은 노화의 징후를 감소시키기 위해 또한 이용 가능하다. 미용 수술은 피부의 외관을 심미적으로 증대시키기 위해 인기 하에 최근 성장하고 있다. 그러나, 시술이 비싸고 고통스럽고 매우 침습적일 수 있으므로, 이들 시술이 항상 바람직한 옵션은 아니다.
상기 기재된 미용 제품 및 의학 시술이 얼굴 및 몸의 노화된 피부를 치료하기에 적합하지만, 피부를 개선하기 위한 대안적인 조성물 및 방법이 요망된다. 따라서, 얼굴 및 몸의 피부 노화의 징후를 증가시킬 수 있는, 산화 스트레스를 예방하고/하거나 감소시키기 위한 대안적인 조성물 및 방법을 개발할 필요가 존재한다. 침습적이고 고통스럽고 비싼 의학 시술이 회피될 수 있도록 조성물 및 방법이 국소로 도포되는 경우 매우 유리할 것이시다.
본 개시내용은 일반적으로 피부 세포, 특히, 진피 섬유아세포 및 표피 각질세포의 UV 조사, 산화 스트레스 및 산화 스트레스 유도된 아폽토시스의 효과를 감소시키도록, 광노화 및 산화 스트레스에 대한 세포 반응을 증대시키기 위한 조성물 및 방법에 관한 것이다. 세포에 대한 이 부정적인 효과는 얼굴 및 몸에서 피부 노화의 징후를 증가시킬 수 있다.
일 양태에서, 본 개시내용은 세포의 산화 스트레스의 감소를 필요로 하는 개인에서 세포의 산화 스트레스를 감소시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 개인의 표적 피부 구역에 운다리아 추출물 및 비덴스 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 활성제, 및 친수성 캐리어를 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함한다.
또 다른 양태에서, 본 개시내용은 세포의 산화 스트레스 유도된 아폽토시스의 감소를 필요로 하는 개인에서 세포의 산화 스트레스 유도된 아폽토시스를 감소시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 개인의 표적 피부 구역에 운다리아 추출물 및 비덴스 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 활성제, 및 친수성 캐리어를 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함한다.
훨씬 또 다른 양태에서, 본 개시내용은 세포의 광손상의 감소를 필요로 하는 개인에서 세포의 광손상을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 개인의 표적 피부 구역에 운다리아 추출물 및 비덴스 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 활성제, 및 친수성 캐리어를 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함한다.
훨씬 또 다른 양태에서, 본 개시내용은 세포의 세포 글루타티온 농도의 유지를 필요로 하는 개인에서 세포의 세포 글루타티온 농도를 유지시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 개인의 표적 피부 구역에 운다리아 추출물 및 비덴스 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 활성제, 및 친수성 캐리어를 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함한다.
하기 상세한 설명을 고려할 때, 본 개시내용은 더 잘 이해될 것이고, 상기 기재된 것 이외의 특징, 양태 및 이점이 명확해질 것이다. 이러한 상세한 설명은 하기 도면을 참조하게 하고, 여기서,
도 1은, 실시예 1에서 기재된 바와 같이, 다양한 활성 성분에 의한 세포의 처리 후 생존능력을 보여주는 그래프 표시이다.
도 2는, 실시예 2에서 분석된 바와 같이, 산화 스트레스의 표시자로서 형광 방출을 도시하는 그래프이다.
도 3a 내지도 3d는, 실시예 3에서 측정된 바와 같이, 측면 산란(Side Scatter: SSC) 및 전방 산란(Forward Scatter: FSC)의 유세포측정기 판독이다. 도 3a는 대조군 섬유아세포를 나타내고; 도 3b는 1시간 동안 H2O2에 의해 처리된 섬유아세포를 나타내고; 도 3c는 12시간 동안 UNDARINE™에 의해 처리된 섬유아세포를 나타내고; 도 3d는 12시간 동안 UNDARINE™에 의해 처리된 후 1시간 동안 H2O2에 노출된 섬유아세포를 나타낸다.
도 4는, 실시예 4에서 분석된 바와 같이, 산화 스트레스의 표시자로서 형광 방출을 도시하는 그래프이다.
도 5는, 실시예 4에서 분석된 바와 같이, UV 광손상의 표시자로서 형광 방출을 도시하는 그래프이다.
도 6a 내지 도 6f는, 실시예 5에서 측정된 바와 같이, 측면 산란(SSC) 및 전방 산란(FSC)의 유세포측정기 판독이다. 도 6a는 대조군 섬유아세포를 나타내고; 도 6b는 1시간 동안 H2O2에 의해 처리된 섬유아세포를 나타내고; 도 6c는 12시간 동안 ECOBIDENS™에 의해 처리된 후 1시간 동안 H2O2에 노출된 섬유아세포를 나타내고; 도 6d는 12시간 동안 ECOBIDENS™에 의해 처리된 섬유아세포를 나타내고; 도 6e는 UV 조사에 노출된 섬유아세포를 나타내고; 도 6f는 12시간 동안 ECOBIDENS™에 의해 처리된 후 UV 조사에 노출된 섬유아세포를 나타낸다.
도 7은, 실시예 6에서 분석된 바와 같이, UV 조사 또는 H2O2 유도된 산화 스트레스로 인한 세포 GSH 농도의 감소를 나타내는 그래프이다.
도 8은, 실시예 7에서 분석된 바와 같이, H2O2의 농도에 대한 ECOBIDENS™의 활성을 도시하는 그래프이다.
도 9는, 실시예 8에서 분석된 바와 같이, H2O2 유도된 산화 스트레스의 표시자로서 형광 방출을 도시하는 그래프이다.
도 10은, 실시예 8에서 분석된 바와 같이, UV 노출의 표시자로서 형광 방출을 도시하는 그래프이다.
본 개시내용은 다양한 변형 및 대안적인 형태에 영향을 받지만, 이의 구체적인 실시형태는 도면에서 예의 방식으로 도시되고, 하기 본 명세서에서 자세히 기재되어 있다. 그러나, 구체적인 실시형태의 설명이, 첨부된 청구항에 의해 한정되는 바대로, 본 개시내용의 정신 및 범위 내에 해당하는 모든 변형, 등가물 및 대안을 포괄하기 위해, 본 개시내용을 제한하는 것으로 의도되지 않는 것으로 이해되어야 한다.
발명의 상세한 설명
달리 정의되지 않은 한, 본 명세서에 사용된 모든 기술 용어 및 과학 용어는 본 개시내용이 속하는 당해 분야의 당업자에 의해 흔히 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 본 명세서에 기재된 것과 유사하거나 동등한 임의의 방법 및 재료가 본 개시내용의 실행 또는 시험에서 사용될 수 있지만, 바람직한 방법 및 재료가 하기 기재되어 있다.
본 개시내용에 따라, 조성물 및 방법은 놀랍게도 피부 노화의 징후의 감소를 허용하는 것으로 발견되었다. 본 개시내용의 방법은, 세포 항산화제 반응(예를 들어, 감소한 글루타티온 농도의 증가)을 자극함으로써 UV 노출 및 ROS의 과도한 생성으로부터 세포를 보호하여서, 얼굴 및 몸의 노화된 피부의 더 젊어 보이는 외관을 발생시키면서, 광범위하고 상당한 영향을 가진다. 더 특히, 진피에서, 섬유아세포는 피부 강도 및 복원력을 을 제공하는 콜라겐 및 엘라스틴을 생성한다. 광손상 및 ROS 유도된 산화 스트레스는 섬유아세포 퇴행 및 사멸의 주요 원인 중 하나이고, 이에 의해 피부 노화의 과정 및 악화하는 피부 노화 증상, 예컨대 피부 얇아짐, 처짐, 외상 및 피부 복원력의 소실을 가속시킨다.
본 명세서에 사용되는 바대로, "몸"은 개인의 전체 몸을 의미하고, 특히, 얼굴의 구역(이마, 볼, 턱 및 눈꺼풀 포함), 목, 어깨, 유방, 가슴, 다리, 손, 발 및 외음부 부위, 예컨대 외음부 피부, 예를 들어 음문, 음순, 대음순, 소음순, 치구, 음문전정, 및 이들의 조합을 포함한다.
본 명세서에 사용되는 바대로, "아폽토시스"는 다세포 유기체에서 발생할 수 있는 프로그래밍된 세포사의 과정을 의미한다. 특히, 세포는 스트레스(예를 들어, UV 조사, ROS 과생성으로부터 생긴 산화 스트레스 등)에 반응하여 세포내 아폽토시스 신호전달을 개시시킨다.
조성물
활성 성분/추출물
본 개시내용은 특정한 추출물이, 단독으로 또는 조합으로, 피부 노화의 징후를 감소시키기 위해 조성물에서 활성 성분으로서 개인의 피부에 국소로 도포될 수 있다는 것을 예상치 못하게 발견하였다. 특히, 이 조성물의 활성 성분이 콜라겐 및 엘라스틴을 자극하는 것으로 이전에 공지되었지만, 이 활성 성분이 외인성 피부 노화를 야기하는 인자로부터 피부를 보호하는 데 있어서, 그리고 특히 UV 조사에 대한 노출 및 ROS 유도 손상으로부터 진피 층을 보호하기 위해 효과적이라는 것이 본 발명에 이르러 예상치 못하게 발견되었다. 이 보호 효과가 세포 방어 기전, 특히, 세포 미토콘드리아 활성 및 항산화제 세포 반응을 증대시키는 활성제로 인한 것으로 생각된다. 이것은 사용자에게 더 탱탱하고, 더 풍만하고, 더 복원력이 있는 피부 및 더 젊어 보이고, 더 미끈한 피부 외관을 제공한다.
운다리아 추출물
일 양태에서, 본 개시내용은 얼굴 및 몸의 피부 노화의 징후를 감소시키기 위한 조성물에 관한 것이고; 이 조성물은 일반적으로 활성 성분으로서 운다리아 추출물을 포함한다. 본 명세서에 사용되는 바대로, "추출물"은 운다리아 식물로부터의 활성 고체 성분을 의미한다.
운다리아 추출물은 유. 크레나타(U. crenata), 유. 페테르세니아나(U. peterseniana), 유. 핀나티피다 및 유. 운다리오이데스(U. undarioides)를 포함하는 갈조류의 속인 운다리아로부터 얻은 추출물이다. 운다리아 추출물은 콜라겐 및 엘라스틴을 자극하는 것으로 공지되어 있고, 콜라겐 및 엘라스틴 생성에 연결된 14개의 유전자를 증가시키는 것으로 판매자 문헌에 이전에 기재되어 있다. 본 명세서에 개시된 바대로, 본 개시내용의 조성물에서 사용된 운다리아 추출물은 광손상 및 산화 스트레스로부터 세포, 특히, 진피 섬유아세포 및 표피 각질세포를 보호하는 것으로 추가로 놀랍게도 밝혀졌다.
본 명세서에 사용되는 바대로, 운다리아 추출물은 운다리아 식물로부터의 액체 추출물을 의미한다. 특히 적합한 실시형태에서, 운다리아 추출물은 후코이단 내용물에 추가로 보충/표준화되지 않는다. 특히, 이 적합한 실시형태에서 운다리아 추출물은 추가의 화학 처리 없이 물 중에/물 위로 운다리아 조류 식물을 침지 또는 통과시킴으로써 얻어진 추출물이다. 침지/통과는 추출 분야에 공지된 임의의 방법, 예를 들어 침출, 인퓨젼 담그기, 퍼컬레이션, 추출 등, 및 이들의 조합에 의해 달성될 수 있다. 몇몇 실시형태에서, 추출물을 추가로 얻기 위해 운다리아 식물을 온침할 수 있다. 추가적으로, 운다리아 추출물을 얻기 위해 이 공정에서 사용된 물을 가열할 수 있다.
운다리아 추출물을 얻기 위한 특히 적합한 일 방법은 동결건조된 운다리아 조류 식물로부터의 비료 기재의 침출이다. 본 명세서에 사용되는 바대로, "침출"은 고체(여기서, 운다리아)에 대해 다양한 깊이의 층으로 물을 천천히 통과시켜 가용성 재료를 추출하는 기법을 의미한다. 일반 기법은 FR 2693917(본 명세서에서 이와 일치하는 정도로 포함됨)에 기재되어 있고, 실온에서 수행된다. 추출물의 제거 후, 몇몇 실시형태에서, 추출물은 물, 글리세린, 프로판디올, 부틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜 및 이들의 조합을 포함하는 희석제에 의해 추가로 희석된다.
반대로, 후코이단 내용물이 보충/표준화된 운다리아 추출물은 통상적으로 약 0 내지 30℃, 바람직하게는 약 15 내지 25℃의 온도에서 0 내지 2, 바람직하게는 약 0 내지 1의 pH를 가지는 산/물 혼합물을 이용하는 추출 절차에 의해 얻어진다.
적합한 운다리아 추출물은 상업적으로 구입 가능한 공급원(예를 들어, Barnet Products Corp.(뉴저지주 앵글우드 클리프스); Changsha Organic Herb Inc.(중국 후난))으로부터 얻어질 수 있다. 운다리아 추출물을 포함하는 특히 적합한 상업적으로 구입 가능한 제제는 예를 들어 UNDARINE™일 수 있고, 이것은 글리세린, 물 및 유. 핀나티피다 추출물(Barnet Products Corp.(뉴저지주 앵글우드 클리프스)로부터 상업적으로 구입 가능)을 포함하는 제제이다.
또 다른 적합한 상업적으로 구입 가능한 운다리아 추출물은, 피부를 밝게 하고 노화 반점을 예방하기 위해 이전에 사용된 SOLIANCE(프랑스)로부터 상업적으로 구입 가능한, 예를 들어 . 핀나티피다 추출물 WAKAMINE®(INCI: 물 (및) 운다리아 핀나티피다 추출물)일 수 있다.
이 조성물에서 운다리아 추출물의 적합한 양은 약 0.01%(w/w) 내지 약 10%(w/w), 약 0.05%(w/w) 내지 약 7.5%(w/w), 약 0.1%(w/w) 내지 약 5%(w/w), 및 약 1%(w/w) 내지 약 5%(w/w)일 수 있다. 본 명세서에 사용되는 바대로, "w/w"는 "조성물의 중량 기준"의 성분의 양을 의미한다.
비덴스 추출물
또 다른 양태에서, 본 개시내용은 활성제로서 비덴스 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 본 명세서에 사용되는 바대로, "추출물"은 비덴스 식물로부터의 활성 고체 성분을 의미한다. 비덴스는 많은 종 구성원을 포함하는 아스테라세아에(Asteraceae) 과에서의 식물의 속이다. 비덴스는 콜라겐 및 엘라스틴 생성을 증가시키는 것으로 공지되어 있다.
적합한 비덴스 추출물은 비덴스 알바(Bidens alba), 비덴스 암플렉텐스(Bidens amplectens), 비덴스 암플리시마(Bidens amplissima), 비덴스 아리스토사(Bidens aristosa), 비덴스 아시메트리카(Bidens asymmetrica), 비덴스 아우레아(Bidens aurea), 비덴스 벡키(Bidens beckii), 비덴스 비덴토이데스(Bidens bidentoides), 비덴스 비겔로비(Bidens bigelovii), 비덴스 비피나타(Bidens bipinnata), 비덴스 비테르나타(Bidens biternata), 비덴스 캄필로테카(Bidens campylotheca), 비덴스 세르누아(Bidens cernua), 비덴스 세르비카타(Bidens cervicata), 비덴스 치피(Bidens chippii), 비덴스 컨전크타(Bidens conjuncta), 비덴스 콘나타(Bidens connata), 비덴스 코로나타(Bidens coronata), 비덴스 코스모이데스(Bidens cosmoides), 비덴스 시나피폴리아(Bidens cynapiifolia), 비덴스 디스코이데아(Bidens discoidea), 비덴스 에아토니(Bidens eatonii), 비덴스 페룰리폴리아(Bidens ferulifolia), 비덴스 포르베시(Bidens forbesii), 비덴스 프론도사(Bidens frondosa), 비덴스 가르드네리(Bidens gardneri), 비덴스 하와이엔시스(Bidens hawaiensis), 비덴스 헨리(Bidens henryi), 비덴스 헤테로독사(Bidens heterodoxa), 비덴스 헤테로스페르마(Bidens heterosperma), 비덴스 힐레브란디아나(Bidens hillebrandiana), 비덴스 하이페르보레안(Bidens hyperborean), 비덴스 라에비스(Bidens laevis), 비덴스 레모니(Bidens lemmonii), 비덴스 렙토세팔라(Bidens leptocephala), 비덴스 렙토필라(Bidens leptophylla), 비덴스 마크로카르파(Bidens macrocarpa), 비덴스 마니(Bidens mannii), 비덴스 마우이엔시스(Bidens mauiensis), 비덴스 막시모윅지아나(Bidens maximowicziana), 비덴스 멘지에시(Bidens menziesii), 비덴스 미크란타(Bidens micrantha), 비덴스 미티스(Bidens mitis), 비덴스 몰로카이엔시스(Bidens molokaiensis), 비덴스 x 멀티셉스(Bidens x multticeps), 비덴스 파르비플로라(Bidens parviflora), 비덴스 필로사(Bidens pilosa), 비덴스 폴리렙피스(Bidens polylepis), 비덴스 포풀리폴리아(Bidens populifolia), 비덴스 라디에이트(Bidens radiate), 비덴스 렙탄스(Bidens reptans), 비덴스 산드비센시스(Bidens sandvicensis), 비덴스 침페리(Bidens schimperi), 비덴스 심플리시폴리아(Bidens simplicifolia), 비덴스 소코렌시스(Bidens socorrensis), 비덴스 스쿼로사(Bidens squarrosa), 비덴스 수발테르난스(Bidens subalternans), 비덴스 테누이섹타(Bidens tenuisecta), 비덴스 토르타(Bidens torta), 비덴스 트리쵸스페르마(Bidens trichosperma), 비덴스 트리파르티타(Bidens tripartita), 비덴스 트리플리네르비아(Bidens triplinervia), 비덴스 발리다(Bidens valida), 비덴스 불가타(Bidens vulgata), 비덴스 위브케이(Bidens wiebkei), 및 이들의 조합의 추출물을 포함한다.
특히 적합한 비덴스 추출물은 예를 들어 비덴스 필로사 추출물, 비덴스 비피나타 추출물 및 비덴스 트리파르티타 추출물일 수 있다. 적합한 비덴스 추출물은 상업적으로 구입 가능한 공급원(예를 들어, Chemyunion Quimica Ltd.(브라질 상파울루); 및 Carrubba Inc.(코네티컷주 밀포드))으로부터 얻어질 수 있다. 적합한 비덴스 추출물은 친수성 캐리어, 예를 들어 물, 글리세린, 프로판디올, 부틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜 등 및 이들의 조합과의 비덴스 추출물 블렌드 및 소수성 캐리어, 예를 들어 천연 오일, 합성 오일 등 및 이들의 조합과의 비덴스 추출물 블렌드를 또한 포함할 수 있다. 특히 적합한 비덴스 추출물은 예를 들어 ECOBIDENS™(Chemyunion Quimica Ltd.(브라질 상파울루)로부터 상업적으로 구입 가능)일 수 있다. ECOBIDENS™는 비덴스 필로사 L.의 글리세린 추출물이다. 다른 상업적으로 구입 가능한 비덴스 추출물은 예를 들어 Provital Group(스페인)으로부터의 비. 트리파르티타 추출물인 Water Agrimony Extract H.G.; 비. 필로사 추출물인 비덴스 추출물 M9983-WS, 및 비. 비피나타 추출물인 비덴스 비피나타 추출물 N0061-WS(둘 다 Carrubba Inc.(코네티컷주 밀포드)로부터 구입 가능)를 포함한다.
국소 조성물에서의 비덴스 추출물의 적합한 양은 약 0.01%(w/w) 내지 약 10%(w/w), 약 0.05%(w/w) 내지 약 7.5%(w/w), 약 0.1%(w/w) 내지 약 5%(w/w), 및 약 1%(w/w) 내지 약 5%(w/w)일 수 있다.
운다리아 추출물 및 비덴스 추출물
몇몇 특히 적합한 양태에서, 본 개시내용은 운다리아 추출물 및 비덴스 추출물의 활성제의 조합을 포함하는 조성물에 관한 것이다.
조합으로 사용될 때, 이 조성물에서의 운다리아 추출물의 적합한 양은 약 0.01%(w/w) 내지 약 20%(w/w), 약 0.05%(w/w) 내지 약 15%(w/w), 및 약 0.1%(w/w) 내지 약 10%(w/w)일 수 있다. 이 조성물에서의 비덴스 추출물의 적합한 양은 약 0.01%(w/w) 내지 약 20%(w/w), 약 0.05%(w/w) 내지 약 15%(w/w), 및 약 0.1%(w/w) 내지 약 10%(w/w)일 수 있다.
추가적인 임의의 성분
본 명세서에 기재된 조성물은 추가적인 성분 및 임의의 성분을 추가로 포함할 수 있다.
일반적으로, 이 조성물은 활성 성분(들)과 함께 캐리어를 포함한다.
일 실시형태에서, 예를 들어 이 조성물은 활성 성분(들) 및 친수성 캐리어, 친수성 증점제 및/또는 침투 증대제를 포함한다. 적합한 친수성 캐리어는 예를 들어 물, 알콜, 글리세린, 글리세린 유도체, 글리콜, 수용성 유연제(emollient), 및 이들의 조합일 수 있다. 알콜의 적합한 예는 에탄올 및 이소프로필 알콜을 포함할 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 글리세린 유도체의 적합한 예는 PEG-7 글리세릴 코코에이트를 포함할 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 적합한 글리콜은 프로필렌 글리콜, 부틸렌 글리콜, 펜틸렌 글리콜, 에톡시디글리콜, 디플로필렌 글리콜, 프로판디올 및 PEG-8을 포함할 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 수용성 유연제의 적합한 예는 PEG-6 Caprylic Capric Glycerides, Hydrolyzed Jojoba Esters, 및 PEG-10 Sunflower Glycerides를 포함할 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.
특히 적합한 실시형태에서, 국소 조성물은 캐리어로서 바람직하게는 물을 함유하는 액체 조성물이다. 물의 적합한 양은 조성물의 약 0.1중량% 내지 조성물의 약 99.9중량%일 수 있다. 더 통상적으로, 물의 양은 조성물의 약 40중량% 내지 조성물의 약 99.9중량%일 수 있다. 바람직하게는, 물의 양은 조성물의 약 60중량% 내지 조성물의 약 99.9중량%일 수 있다.
또 다른 실시형태에서, 조성물은 활성 성분(들) 및 소수성 캐리어를 포함한다. 적합한 소수성 캐리어는 예를 들어 천연 오일, 합성 오일 및 이들의 조합일 수 있다.
본 명세서에 기재된 국소 조성물은 피부 침투 증대제 또는 피부 침투 증대제의 혼합물을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 피부 침투 증대제의 예는 무엇보다도 설폭사이드, 알콜, 지방산, 지방산 에스테르, 폴리올, 아미드, 계면활성제, 테르펜, 알카논 및 유기 산을 포함한다. 적합한 설폭사이드의 구체적인 예는 무엇보다도 디메틸설폭사이드(DMSO) 및 데실메틸설폭사이드를 포함한다. 적합한 알콜은 알칸올, 예컨대 에탄올, 프로판올, 부탄올, 펜탄올, 헥산올, 옥탄올, n-옥탄올, 노난올, 데칸올, 2-부탄올, 2-펜탄올, 및 벤질 알콜; 지방 알콜, 예컨대 카프릴 알콜, 데실 알콜, 라우릴 알콜, 2-라우릴 알콜, 미리스틸 알콜, 세틸 알콜, 스테아릴 알콜, 올레일 알콜, 리놀레일 알콜, 및 리놀레닐 알콜; 및 이소프로필 알콜을 포함한다. 적합한 지방산의 예는 선형 지방산, 예컨대 발레르산, 헵탄산, 펠라곤산, 카프로산, 카프르산, 라우르산, 미리스트산, 스테아르산, 올레산 및 카프릴산; 및 분지형 지방산, 예컨대 이소발레르산, 네오펜탄산, 네오헵탄산, 네오노난산, 트리메틸 헥산산, 네오데칸산 및 이소스테아르산을 포함한다. 적합한 지방산 에스테르의 예는 지방족 지방산 에스테르, 예컨대 이소프로필 n-부티레이트, 이소프로필 n-헥사노에이트, 이소프로필 n-데카노에이트, 이소프로필 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트 및 옥틸도데실 미리스테이트; 알킬 지방산 에스테르, 예컨대 에틸 아세테이트, 부틸 아세테이트, 메틸 아세테이트, 메틸발러레이트, 메틸프로피오네이트, 디에틸 세바케이트 및 에틸 올레에이트; 및 디이소프로필 아디페이트 및 디메틸 이소소르비드를 포함한다. 적합한 폴리올의 예는 프로필렌 글리콜, 부틸렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 에틸렌 글리콜, 디에틸렌 글리콜, 트리에틸렌 글리콜, 디플로필렌 글리콜, 에톡시디글리콜, 펜틸렌 글리콜, 글리세롤, 프로판디올, 부탄디올, 펜탄디올, 헥산트리올 및 글리세린을 포함한다. 적합한 아미드의 예는 우레아, 디메틸아세트아미드, 디에틸톨루아미드, 디메틸포름아미드(DMF), 디메틸옥타미드, 디메틸데카미드, 생분해성 사이클릭 우레아(예를 들어, 1-알킬-4-이미다졸린-2-온), 피롤리돈 유도체, 생분해성 피롤리돈 유도체(예를 들어, N-(2-하이드록시에틸)-2-피롤리돈의 지방산 에스테르), 사이클릭 아미드, 헥사메틸렌라우르아미드 및 이의 유도체, 디에탄올아민 및 트리에탄올아민을 포함한다. 피롤리돈 유도체의 예는 1-메틸-2-피롤리돈, 2-피롤리돈, 1-라우릴-2-피롤리돈, 1-메틸-4-카복시-2-피롤리돈, 1-헥실-4-카복시-2-피롤리돈, 1-라우릴-4-카복시-2-피롤리돈, 1-메틸-4-메톡시카보닐-2-피롤리돈, 1-헥실-4-메톡시카보닐-2-피롤리돈, 1-라우릴-4-메톡시카보닐-2-피롤리돈, N-사이클로헥실피롤리돈, N-디메틸아미노프로필피롤리돈, N-코코알킬피롤리돈, N-탤로우알킬피롤리돈 및 N-메틸피롤리돈을 포함한다. 사이클릭 아미드의 예는 1-도데실아자사이클로헵탄-2-온(예를 들어, Azone®), 1-게라닐아자사이클로헵탄-2-온, 1-파르네실아자사이클로헵탄-2-온, 1-게라닐게라닐아자사이클로헵탄-2-온, 1-(3,7-di메틸옥틸)아자사이클로헵탄-2-온, 1-(3,7,11-트리메틸도데실)아자사이클로합탄-2-온, 1-게라닐아자사이클로헥산-2-온, 1-게라닐아자사이클로펜탄-2,5-디온 및 1-파르네실아자사이클로펜탄-2-온을 포함한다.
통상적으로, 본 개시내용의 조성물은 (조성물의 중량 기준으로) 약 0.01% 내지 (조성물의 중량 기준으로) 약 25%의 피부 침투 증대제, 예컨대 (조성물의 중량 기준으로) 약 1% 내지 (조성물의 중량 기준으로) 약 15%의 피부 침투 증대제, 및 예컨대 (조성물의 중량 기준으로) 약 2% 내지 (조성물의 중량 기준으로) 약 10%의 피부 침투 증대제를 포함한다.
임의로, 운다리아 및/또는 비덴스 함유 국소 조성물은 피부로의 운다리아비덴스의 침투성을 추가로 증가시키기 위해 극성 조용매와 제제화될 수 있다. 바람직하게는, 극성 조용매는 조성물에서 완전 혼화성이고, 각질층에서 세포내 공간에 대한 높은 친화도를 가진다. 임의의 특정한 이론에 구속되고자 하지 않으면서, 이러한 특징을 가지는 극성 조용매가 삼투에 의해 각질층에서 세포내 공간으로 추진되어, 각질층이 팽윤되게 한다고 생각된다. 이러한 팽윤 상태에서, 세포내 공간은 더 액체 유사이고 무질서하고, 이는 운다리아 및/또는 비덴스 추출물이 각질층을 통해 더 쉽게 확산하게 한다.
본 개시내용의 조성물에 포함되기에 적합한 극성 조용매의 예는 글리세린, 프로판디올, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 부탄올, 이소프로판올, 프로판올, 디메틸 이소소르비드, 부틸렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 디플로필렌 글리콜, 에톡시디글리콜, 펜틸렌 글리콜, 및 이들의 조합을 포함한다.
통상적으로, 본 개시내용의 조성물은 (조성물의 중량 기준으로) 약 1% 내지 (조성물의 중량 기준으로) 약 99%의 극성 조용매, 예컨대 (조성물의 중량 기준으로) 약 1% 내지 (조성물의 중량 기준으로) 약 75%의 극성 조용매, 예컨대 (조성물의 중량 기준으로) 약 1% 내지 (조성물의 중량 기준으로) 약 50%의 극성 조용매, 예컨대 (조성물의 중량 기준으로) 약 1.5% 내지 (조성물의 중량 기준으로) 약 25%의 극성 조용매, 예컨대 (조성물의 중량 기준으로) 약 2% 내지 (조성물의 중량 기준으로) 약 15%의 극성 조용매, 및 예컨대 (조성물의 중량 기준으로) 약 2.5% 내지 (조성물의 중량 기준으로) 약 10%의 극성 조용매를 포함한다.
몇몇 실시형태에서, 이 조성물은 베타-시토스테롤을 추가로 포함할 수 있다. 베타-시토스테롤의 적합한 양은 조성물의 약 0.001중량% 내지 조성물의 약 10.0중량%일 수 있다. 더 통상적으로, 베타-시토스테롤의 양은 조성물의 약 0.005중량% 내지 조성물의 약 7.5중량%일 수 있다. 베타-시토스테롤의 훨씬 더 적합한 양은 조성물의 약 0.01중량% 내지 조성물의 약 5.0중량%일 수 있다.
이 조성물은 다른 공지된 콜라겐, 엘라스틴 및 세포외 기질 자극 성분을 추가로 포함할 수 있다. 콜라겐은 피부의 연결 조직 및 몸의 다른 조직에서 발견되는 단백질이다. 적합한 콜라겐 증대제는 예를 들어 비타민, 예컨대 아스코르브산 및 이의 유도체, 펩타이드, 예컨대 팔미토일 트리펩타이드-5, 식물 추출물, 예컨대 석류 또는 버섯, 및 광물, 예컨대 적철석일 수 있다.
엘라스틴은 피부의 연결 조직 및 몸의 다른 조직에서 발견되는 단백질이다. 적합한 엘라스틴 증대제는 예를 들어 비타민, 예컨대 아스코르브산 및 이의 유도체, 펩타이드, 예컨대 팔미토일 헥사펩타이드-12, 식물 추출물, 예컨대 칡, 쇠뜨기, 쌀, 딜 및 로즈마리, 및 광물, 예컨대 아연 및 구리일 수 있다.
이 조성물은 혈관확장제를 추가로 포함할 수 있다. 혈관확장제는 피부 내의 혈류를 증가시킬 수 있다. 적합한 혈관확장제는 예를 들어 글리세릴 트리니트레이트, 레스베라트롤, 카페인, 생강 추출물, 인삼 및 다른 식물 추출물, 예를 들어 산사나무, 민트, 아이비, 커피 및 차 등일 수 있다.
이 조성물은 피부 진정제를 추가로 포함할 수 있다. 본 명세서에 사용되는 바대로, "피부 진정제"는 피부 자극을 감소시키거나 예방하는 화합물을 의미한다. 피부 자극은 수분의 소실, pH의 변화, 땀, 향수, 파우더, 의복으로부터의 세탁 세제로부터의 접촉 피부염, 및 다른 화합물로부터 생길 수 있다. 피부 진정제는 자극제를 중화시키고/시키거나, 피부에서 염증성 캐스케이드를 하향조절하고/하거나, 피부에서 보호층을 제공함으로써 자극을 감소시킬 수 있다. 적합한 피부 진정제는 예를 들어 식물 추출물, 예컨대 카렌듈라, 케모마일, 알로에, 컴프리, 콘플라워(coneflower); 활성 물질, 예컨대 알란토인, 비스아볼롤, 판테놀, 베타-글루칸, 콜로이드성 오트밀, 및 성분 블렌드, 예컨대 심칼민(SYMCALMIN)(INCI: 부틸렌 글리콜, 펜틸렌 글리콜, 하이드록시페닐 프로파미도벤조산; Symrise(Holzmiden(독일))로부터 상업적으로 구입 가능) 및 SEPICALM(INCI: 나트륨 팔미토일 프롤린, 님파에아 알바(nymphaea alba) 꽃 추출물; Seppic(뉴저지주 페어필드)으로부터 상업적으로 구입 가능)일 수 있다.
이 조성물은 보습제를 추가로 포함할 수 있다. 보습제는 피부, 특히 표피 및 진피의 수화를 증대시킬 수 있다. 적합한 보습제는 예를 들어 글리세롤, 글리세린, 락트산, 우레아, 알로에 베라, 베타인, 히알우론산, 프로판디올, 프로필렌 글리콜, 부틸렌 글리콜, 및 이들의 조합일 수 있다.
이 조성물은 유화제, 및 특히, 액체 결정질 네트워크 또는 리포솜 네트워크를 생성하는 유화제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 비제한적인 예시적인 유화제는 예를 들어 OLIVEM® 1000(INCI: 세테아릴 올리베이트 (및) 소르비탄 올리베이트; HallStar Company(일리노이주 시카고)로부터 상업적으로 구입 가능), Arlacel™ LC(INCI: 소르비탄 스테아레이트 (및) 소르비티 라우레이트; Croda(뉴저지주 에디슨)로부터 상업적으로 구입 가능), CRYSTALCAST® MM(INCI: Beta Sitosterol (및) Sucrose Stearate (및) Sucrose Distearate (및) Cetyl Alcohol (및) Stearyl Alcohol; MMP Inc.(뉴저지주 사우쓰 플레인필드)로부터 상업적으로 구입 가능), UNIOX CRISTAL(INCI: Cetearyl Alcohol (및) Polysorbate 60 (및) Cetearyl Glucoside; Chemyunion(브라질 상파울로)로부터 상업적으로 구입 가능)을 포함한다. 다른 적합한 유화제는 레시틴, 수소화 레시틴, 라이소레시틴, 포스파티딜콜린, 인지질, 및 이들의 조합을 포함한다.
이 조성물은 안정성을 보전하기 위해 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 보존제는 이 조성물에서 미생물 유기체의 성장을 또한 방지할 수 있다. 적합한 보존제는 당해 분야에 공지되어 있고, 예를 들어 메틸파라벤, 페녹시에탄올, 카프릴 글리콜, 글리세릴 카프릴레이트, 벤조산, 소르브산, 갈산, 프로필파라벤 및 이들의 조합을 포함한다.
이 조성물은 피부 pH의 범위 내에 조성물의 pH를 제어/유지시키기 위해 pH 조정제를 추가로 포함할 수 있다. 이 조성물의 적합한 pH 범위는 약 3.5 내지 약 6일 수 있다.
이 조성물은 향료, 향, 염료, 계면활성제, 레올로지 개질제, 필름 형성제 및 개인 관리 제제에서 유용한 것으로 공지된 다른 성분을 추가로 포함할 수 있다.
사용 방법
또 다른 양태에서, 본 개시내용은 개인의 얼굴 및 몸의 피부 노화를 감소시키기 위해 국소 조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다.
따라서, 일 양태에서, 본 개시내용은 세포, 및 특히 진피 섬유아세포 및 표피 각질세포의 산화 스트레스를 감소시켜서, 얼굴 및 몸의 피부 노화의 징후의 감소를 필요로 하는 개인에서 얼굴 및 몸의 피부 노화의 징후를 감소시키는 방법에 관한 것이다. 본 명세서에 사용되는 바대로, "피부 노화"는 피부 주름생김의 증가, 가는 주름의 외관의 증가, 얇아진 피부, 처진 피부, 피부 건조 및 피부 가려움을 의미한다. 세포의 산화 스트레스는 세포사와 세포 증식 사이의 균형을 변경시키고, 추가로 조직 재생을 손상시킬 수 있다. 통상적으로, 산화 스트레스는 내부 및 외부 미토콘드리아 막을 손상시키고 미토콘드리아 투과성 전이 기공을 열어서 아폽토시스를 유도하는 반응성 산소 종(ROS)의 과생성의 결과이다. 상기 방법은 개인의 표적 피부 구역에 운다리아 추출물을 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함한다. 표적 피부 구역은 예를 들어 얼굴 피부, 목 피부, 유방 피부, 어깨 피부, 가슴 피부, 다리 피부, 손 피부, 발 피부, 및 이들의 조합일 수 있다. 표적 피부 구역은 또한 예를 들어 외음부 피부, 예를 들어 음문, 음순, 대음순, 소음순, 치구, 음문전정 및 이들의 조합일 수 있다.
또 다른 양태에서, 본 개시내용은 산화 스트레스 유도된 아폽토시스의 감소를 필요로 하는 개인에서 세포, 및 특히 진피 섬유아세포 및 표피 각질세포의 산화 스트레스 유도된 아폽토시스를 감소시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 개인의 표적 피부 구역에 운다리아 추출물을 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함한다. 표적 피부 구역은 예를 들어 얼굴 피부, 목 피부, 유방 피부, 어깨 피부, 가슴 피부, 다리 피부, 손 피부, 발 피부, 및 이들의 조합일 수 있다. 표적 피부 구역은 또한 예를 들어 외음부 피부, 예를 들어 음문, 음순, 대음순, 소음순, 치구, 음문전정 및 이들의 조합일 수 있다.
훨씬 또 다른 양태에서, 본 개시내용은 광손상의 감소를 필요로 하는 개인에서 세포, 및 특히 진피 섬유아세포 및 표피 각질세포의 광손상을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 본 명세서에 사용되는 바대로, "광손상"은 UV 조사에 대한 노출의 결과로서 피부, 및 특히, 진피 섬유아세포에 생긴 손상을 의미한다. 상기 방법은 개인의 표적 피부 구역에 운다리아 추출물을 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함한다. 표적 피부 구역은 예를 들어 얼굴 피부, 목 피부, 유방 피부, 어깨 피부, 가슴 피부, 다리 피부, 손 피부, 발 피부, 및 이들의 조합일 수 있다. 표적 피부 구역은 또한 예를 들어 외음부 피부, 예를 들어 음문, 음순, 대음순, 소음순, 치구, 음문전정 및 이들의 조합일 수 있다.
훨씬 또 다른 양태에서, 본 개시내용은 세포내 감소한 글루타티온 농도의 유지를 필요로 하는 개인에서 세포, 및 특히 진피 섬유아세포 및 표피 각질세포의 세포내 감소한 글루타티온 농도를 유지시키는 방법에 관한 것이다. 특히, 상기 방법은 산화 스트레스 및/또는 UV 조사 조건 하에 진피 섬유아세포의 세포내 감소한 글루타티온 농도를 유지시키는 것에 관한 것이다. 상기 방법은 개인의 표적 피부 구역에 운다리아 추출물 및 친수성 캐리어를 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함한다. 표적 피부 구역은 예를 들어 얼굴 피부, 목 피부, 유방 피부, 어깨 피부, 가슴 피부, 다리 피부, 손 피부, 발 피부, 외음부 피부, 예를 들어 음문, 음순, 대음순, 소음순, 치구 및 음문전정, 및 이들의 조합일 수 있다.
본 개시내용의 훨씬 다른 실시형태, 상기 방법은 세포, 및 특히 진피 섬유아세포 및 표피 각질세포의 산화 스트레스를 감소시키기 위해 개인의 표적 피부 구역에 비덴스 추출물을 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함한다. 표적 피부 구역은 예를 들어 얼굴 피부, 목 피부, 유방 피부, 어깨 피부, 가슴 피부, 다리 피부, 손 피부, 발 피부, 및 이들의 조합일 수 있다. 표적 피부 구역은 또한 예를 들어 외음부 피부, 예를 들어 음문, 음순, 대음순, 소음순, 치구, 음문전정 및 이들의 조합일 수 있다.
또 다른 양태에서, 본 개시내용은 산화 스트레스 유도된 아폽토시스의 감소를 필요로 하는 개인에서 세포, 및 특히 진피 섬유아세포 및 표피 각질세포의 산화 스트레스 유도된 아폽토시스를 감소시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 개인의 표적 피부 구역에 비덴스 추출물을 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함한다. 표적 피부 구역은 예를 들어 얼굴 피부, 목 피부, 유방 피부, 어깨 피부, 가슴 피부, 다리 피부, 손 피부, 발 피부, 및 이들의 조합일 수 있다. 표적 피부 구역은 또한 예를 들어 외음부 피부, 예를 들어 음문, 음순, 대음순, 소음순, 치구, 음문전정 및 이들의 조합일 수 있다.
훨씬 또 다른 양태에서, 본 개시내용은 광손상의 감소를 필요로 하는 개인에서 세포, 및 특히 진피 섬유아세포 및 표피 각질세포의 광손상을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 개인의 표적 피부 구역에 비덴스 추출물을 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함한다. 표적 피부 구역은 예를 들어 얼굴 피부, 목 피부, 유방 피부, 어깨 피부, 가슴 피부, 다리 피부, 손 피부, 발 피부, 및 이들의 조합일 수 있다. 표적 피부 구역은 또한 예를 들어 외음부 피부, 예를 들어 음문, 음순, 대음순, 소음순, 치구, 음문전정 및 이들의 조합일 수 있다.
훨씬 또 다른 양태에서, 본 개시내용은 세포내 감소한 글루타티온 농도의 유지를 필요로 하는 개인에서 세포, 및 특히 진피 섬유아세포 및 표피 각질세포의 세포내 감소한 글루타티온 농도를 유지시키는 방법에 관한 것이다. 특히, 상기 방법은 산화 스트레스 및/또는 UV 조사 조건 하에 진피 섬유아세포의 세포내 감소한 글루타티온 농도를 유지시키는 것에 관한 것이다. 상기 방법은 개인의 표적 피부 구역에 비덴스 추출물 및 친수성 캐리어를 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함한다. 표적 피부 구역은 예를 들어 얼굴 피부, 목 피부, 유방 피부, 어깨 피부, 가슴 피부, 다리 피부, 손 피부, 발 피부, 외음부 피부, 예를 들어 음문, 음순, 대음순, 소음순, 치구 및 음문전정, 및 이들의 조합일 수 있다.
본 명세서에 사용되는 바대로, "필요로 하는 개인"은 세포, 및 특히, 진피 섬유아세포 및 표피 각질세포의 외인성 병증, 특히, 산화 스트레스 및/또는 광손상으로 인해 피부 노화의 증가된 눈에 보이는 징후, 예를 들어 주름, 가는 주름, 얇아진 피부, 처진 피부, 피부 건조, 피부 가려움, 피부 외상, 피부 열상, 피부 톤의 소실, 피부 풍만함의 소실, 피부 탱탱함의 소실, 및 이들의 조합 등을 나타내는 개인을 의미한다. 몇몇 실시형태에서, 필요로 하는 개인은 진피 섬유아세포의 세포 글루타티온 농도가 산화 스트레스 및/또는 UV 조사의 결과로서 감소한 개인이다. 그러므로, 몇몇 실시형태에서, 본 명세서에 개시된 방법은 일반적인 집단의 하위집단에 관한 것이어서, 이들 실시형태에서, 일반적인 집단의 모두가 이 방법으로부터 이익을 받을 수 있는 것은 아니다. 상기에 기초하여, 본 개시내용의 몇몇 방법 실시형태가 확인된 개인의 구체적인 하위집단 또는 하위종류(즉, 본 명세서에서 기재된 하나 이상의 구체적인 병증을 해소하는 데 도움을 "필요로 하는" 개인의 하위집단 또는 하위종류)에 관한 것이므로, 모든 개인이 본 명세서에 기재된 바대로 개인의 하위집단 또는 하위종류 내에 해당하지는 않을 것이다.
본 명세서에 사용되는 바대로, 용어 "개인"은 남성 인간 또는 여성 인간을 의미한다. 소정의 실시형태에서, 개인은 폐경후 여성 인간이다.
본 명세서에 기재된 방법에서 사용되는 조성물은 본 명세서에서 기재된 바와 같은 추가적인 성분 및 개인 관리 제제에서 유용한 것으로 공지된 다른 성분을 추가로 포함할 수 있다.
이 조성물은 임의의 적합한 전달 비히클에 의해 표적 피부 구역에 도포될 수 있다. 예를 들어, 이 조성물은 로션으로서, 세척액(wash)으로서, 겔로서, 고약(salve)으로서, 연고로서, 크림으로서, 고체 스틱으로서 및 폼(foam)으로서 도포될 수 있다. 추가적으로, 이 조성물은 와이프(wipe)에 의해, 장갑 및 글러브에 의해, 에어로졸 분배기를 사용하여, 펌프 스프레이를 사용하여, 트리거 스프레이를 사용하여 및 스퀴즈 병을 사용하여 도포될 수 있다.
이 조성물은 요망되는 바대로 매일, 격일, 이틀에 한번, 매주, 매달 및 매년 도포될 수 있다. 이 조성물은 매일 수회, 매주 수회 및/또는 매달 수회 도포될 수 있다.
몇몇 실시형태에서, 본 개시내용의 조성물은 피부 관리 섭생의 일부로서 추가적인 피부 관리 조성물과 사용될 수 있다. 예를 들어, 얼굴 치료 및 관리에서, 사용자는 얼굴의 피부를 세정하고 토닝하고 치료하기 위한 다수의 제품을 통상적으로 사용한다. 따라서, 제1 제품은 사용자에게 제1 이익을 통상적으로 제공할 수 있는 제1 조성물을 포함하고, 제2 제품은 사용자에게 제2 이익을 통상적으로 제공할 수 있는 제2 조성물을 포함한다. 본 개시내용에서, 섭생의 제품 중 적어도 하나가 본 개시내용의 국소 조성물을 포함하여서, 산화 스트레스 및/또는 광손상에 대한 세포 반응을 증대시키는 것의 이익의 이익을 제공하는 것으로 이해되어야 한다. 몇몇 실시형태에서, 당해 분야의 당업자에 의해, 제1 제품 및 제2 제품이 각각의 특정한 다중제품 관리 섭생에서 특정한 관리 섭생의 분야에 공지된 임의의 이익을 독립적으로 제공할 수 있지만, 제1 제품 및 제2 제품이 상이한 조성물을 포함하고, 따라서 사용자에게 상이한 이익을 제공할 수 있는 것으로 이해되어야 한다.
더욱이, 관리 섭생의 제1 제품 및 제2 제품에서처럼, 2개 초과의 제품이 다중제품 관리 섭생, 예컨대 제3, 제4 및/또는 제5 제품(및 5개 초과의 제품이 요망되는 경우 더 많은 제품)에서 사용되는 경우, 추가적인 제품이 활성 성분을 포함해야 하는 것으로 인식되어야 하고, 각각은 독립적으로 사용자에게 추가적인 이익을 제공할 수 있다.
대안적인 실시형태에서, 다중제품 관리 섭생은 2개 초과의 제품을 포함할 수 있고, 수일 섭생을 제공하도록 구성될 수 있다. 제한이 아니면서, 일 예에서, 다중제품 관리 섭생은 수일 동안 피부 관리를 제공하고, 그러므로 제1 제품은 예를 들어 세정 조성물을 포함하고, 제2 제품은 본 개시내용의 피부 노화방지 조성물을 포함하고, 제3 제품은 제1 제품과 동일한 세정 조성물을 포함하고, 제4 제품은 제2 제품과 동일한 피부 노화방지 조성물을 포함한다.
제한이 아니면서, 본 개시내용의 피부 노화방지 조성물 이외에 피부 관리 이익을 제공하는 추가적인 조성물의 예는 세정, 토닝, 치료, 모이스쳐라이징, 보호, 마무리 등을 위한 조성물을 포함할 수 있다.
추가적인 조성물이 세정 조성물일 때, 세정 조성물은 예를 들어 손 비누, 몸 비누, 바디 워시, 샴푸, 표면 세정제, 주방용 비누, 얼굴 세정제, 손 세척액 등과 같은 당해 분야에 공지된 임의의 형태일 수 있다. 이러한 유형의 세정 조성물은 통상적으로 적어도 1종의 포밍제, 예컨대 계면활성제를 포함한다. 주로 계면활성제의 용어로 본 명세서에서 기재되어 있지만, 세정 조성물이 다른 세정제를 포함할 수 있고, 계면활성제를 포함할 필요가 없는 것으로 이해되어야 한다. 예를 들어, 소정의 실시형태에서, 조성물은 증점제, 팽윤성 점토, 포밍제(계면활성제(예를 들어, 에톡실화 피부 컨디셔닝제, 가용화제 및 유도체화된 실리콘 중합체)를 포함하거나 포함하지 않을 수 있음), 및 임의로 용매 또는 다른 캐리어를 포함할 수 있다. 이러한 조성물의 예는 예를 들어 로션, 크림, 항균성 조성물 등을 포함한다.
세정 조성물에서 사용하기에 적합한 계면활성제는 음이온성 계면활성제, 양쪽성 계면활성제, 양이온성 계면활성제, 양성 계면활성제, 비이온성 계면활성제, 및 이들의 조합을 포함한다.
적합한 음이온성 계면활성제는 예를 들어 알킬 설페이트, 알킬 에테르 설페이트, 알킬 아릴 설포네이트, 알파-올레핀 설포네이트, 알킬 설페이트의 알칼리 금속염 또는 암모늄염, 알킬 에테르 설페이트의 알칼리 금속염 또는 암모늄염, 알킬 포스페이트, 실리콘 포스페이트, 알킬 글리세릴 설포네이트, 알킬 설포숙시네이트, 알킬 타우레이트, 아실 타우레이트, 알킬 사르코시네이트, 아실 사르코시네이트, 설포아세테이트, 알킬 포스페이트 에스테르, 모노 알킬 숙시네이트, 모노알킬 말레에이트, 설포아세테이트, 아실 이세티오네이트, 알킬 카복실레이트, 포스페이트 에스테르, 설포숙시네이트(예를 들어, 나트륨 디옥틸설포숙시네이트), 및 이들의 조합을 포함한다. 음이온성 계면활성제의 구체적인 예는 나트륨 라우릴 설페이트, 나트륨 라우릴 에테르 설페이트, 암모늄 라우릴 설포숙시네이트, 암모늄 라우릴 설페이트, 암모늄 라우릴 에테르 설페이트, 나트륨 도데실벤젠 설포네이트, 트리에탄올아민 도데실벤젠 설포네이트, 나트륨 코코일 이세티오네이트, 나트륨 라우로일 이세티오네이트, 나트륨 N-라우릴 사르코시네이트, 및 이들의 조합을 포함한다.
적합한 양이온성 계면활성제는 예를 들어 알킬 암모늄염, 중합체 암모늄염, 알킬 피리디늄염, 아릴 암모늄염, 알킬 아릴 암모늄염, 실리콘 4차 암모늄 화합물, 및 이들의 조합을 포함한다. 양이온성 계면활성제의 구체적인 예는 베헤닐트리모늄 클로라이드, 스테아르코늄 클로라이드, 디스테아랄코늄 클로라이드, 클로로헥시딘 디글루타메이트, 폴리헥사메틸렌 비구아나이드(PHMB), 세틸 피리디늄 클로라이드, 벤즈암모늄 클로라이드, 벤즈알코늄 클로라이드, 및 이들의 조합을 포함한다.
적합한 양쪽성 계면활성제는 예를 들어 베타인, 알킬아미도 베타인, 설포베타인, N-알킬 베타인, 설타인, 암포아세테이트, 암포디아세테이트, 이미다졸린 카복실레이트, 사르코시네이트, 아실암포글리시네이트, 예컨대 코캄포카복시글리시네이트 및 아실암포프로피오네이트, 및 이들의 조합을 포함한다. 양쪽성 계면활성제의 구체적인 예는 코카미도프로필 베타인, 라우르아미도프로필 베타인, 매도우폼아미도프로필 베타인, 나트륨 코코일 사르코시네이트, 나트륨 코캄포아세테이트, 이나트륨 코코암포디아세테이트, 암모늄 코코일 사르코시네이트, 나트륨 코코암포프로피오네이트, 및 이들의 조합을 포함한다.
적합한 양성 계면활성제는 예를 들어 알킬 아민 옥사이드, 실리콘 아민 옥사이드, 및 이들의 조합을 포함한다. 적합한 양성 계면활성제의 구체적인 예는 예를 들어 4-[[N,N-디(2-하이드록시에틸)-N-옥타데실암모니오]-부탄-1-카복실레이트, S-[[S-3-하이드록시프로필-S-헥사데실설포니오]-3-하이드록시펜탄-1-설페이트, 3-[[P,P-디에틸-P-3,6,9-트리옥사테트라덱소프실포스포니오]-2-하이드록시프로판-1-포스페이트, 3-[[N,N-디플로필-N-3-도데콕시-2-하이드록시프로필암모니오]-프로판-1-포스포네이트, 3-(N,N-디메틸-N-헥사데실암모니오)프로판-1-설포네이트, 3-(N,N-디메틸-N-헥사데실암모니오)-2-하이드록시프로판-1-설포네이트, 4-[[N,N-디(2-하이드록시에틸)-N-(2-하이드록시도데실)암모니오]-부탄-1-카복실레이트, 3-[[S-에틸-S-(3-도데콕시-2-하이드록시프로필)설포니오]-프로판-1-포스페이트, 3-[[P,P-디메틸-P-도데실포스포니오]-프로판-1-포스포네이트, 5-[[N,N-디(3-하이드록시프로필)-N-헥사데실암모니오]-2-하이드록시-펜탄-1-설페이트, 및 이들의 조합을 포함한다.
적합한 비이온성 계면활성제는 예를 들어 모노- 및 디-알칸올아미드, 예를 들어 코카미드 MEA 및 코카미드 DEA, 아민 옥사이드, 알킬 폴리글루코사이드, 에톡실화 실리콘, 에톡실화 알콜, 에톡실화 카복실산, 에톡실화 아민, 에톡실화 아미드, 에톡실화 알킬올아미드, 에톡실화 알킬페놀, 에톡실화 글리세릴 에스테르, 에톡실화 소르비탄 에스테르, 에톡실화 포스페이트 에스테르, 글리콜 스테아레이트, 글리세릴 스테아레이트, 및 이들의 조합을 포함한다. 본 명세서에 기재된 많은 비이온성 계면활성제가 다중제품 관리 시스템의 세정 조성물의 포밍 특성을 개선하도록 작용할 수 있고, 더 치밀하고 감소한 버블 크기 또는 크림이 많이 든 폼을 제공할 수 있다는 것이 당해 분야의 당업자에 의해 인식될 것이다.
세정 조성물은 세정 제제의 점도를 증점시키거나 증가시키도록 작용하는 증점제를 또한 포함할 수 있다. 다양한 증점제는 본 명세서에 기재된 세정 조성물에서 사용될 수 있다. 일 실시형태에서, 증점제는 셀룰로스 증점제 또는 검일 수 있다. 적합한 셀룰로스 또는 검 증점제의 예는 잔탄 검, 한천, 알기네이트, 카라기난, 푸르셀라란, 구아, 양이온성 구아, 검 아라비아, 검 트라가칸스, 카라야 검, 로커스트 콩 검, 덱스트란, 전분, 변형 전분, 겔란 검, 카복시메틸셀룰로스, 하이드록시프로필셀룰로스, 하이드록시에틸셀룰로스, 프로필렌 글리콜 알기네이트, 하이드록시프로필 구아, 아밀로펙틴, 셀룰로스 검, 키토산, 변형 키토산, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스, 미결정질 셀룰로스, 실리카, 퓸드 실리카, 콜로이드성 실리카, 데하이드록산탄 검, 비아크릴산 기반 카보머, 및 이들의 조합을 포함한다.
대안적으로 또는 또한, 증점제는 아크릴산 기반 중합체일 수 있다. 적합한 아크릴산 기반 중합체 증점제의 비제한적인 예는 아크릴레이트/C10-C30 알킬 아크릴레이트 가교중합체, 소정의 카보머, 아크릴레이트 공중합체, 아미노아크릴레이트 공중합체, 및 이들의 조합을 포함한다. 상업적으로 구입 가능한 아크릴산 기반 중합체 증점제의 예는 Structure® Plus(Akzo Nobel(캘리포니아주 파사데나))(아크릴레이트/아미노아크릴레이트/C10-30 알킬 PEG-20 이타코네이트 공중합체임), Carbopol® Aqua SF-1 중합체(Lubrizol Advanced Materials(오하이오주 클레브랜드))(아크릴레이트 공중합체임), PEMULEN® TR-1 및 TR-2 및 Carbopol® ETD 2020(Lubrizol Advanced Materials로부터 구입 가능)(아크릴레이트/C10-30 알킬 아크릴레이트 가교중합체임), 및 중합체의 Carbopol® Ultrez 시리즈(Lubrizol Advanced Materials로부터 구입 가능)(카보머임)를 포함한다.
세정 조성물에서 사용하기 위한 추가적인 적합한 물질은 보습제, 보존제, 향료, 킬레이트화제, 및 이들의 조합을 포함할 수 있다.
피부 관리 섭생은 토닝 조성물을 추가로 포함할 수 있다. 토닝 조성물은 사용자의 피부의 모공을 닫고, 피부의 자연 pH(통상적으로, 약 5.0 내지 약 5.5의 pH)를 복구하고, 피부 불순물(예를 들어, 먼지, 오일, 피지, 메이크업, 오염물질 등)을 제거하고, 피부를 수화시키고, 일반적으로 치료 조성물, 예컨대 본 개시내용의 노화방지 조성물 및/또는 하기 기재된 바와 같은 추가적인 치료 조성물을 사용하여 치료에 대해 피부를 준비시키면서 이러한 이익을 제공한다.
일반적으로, 피부 관리를 위한 토닝 조성물은 아스트리젠트, 보습제, 캐리어, 및 이들의 조합을 포함한다. 적합한 아스트리젠트는 예를 들어 에탄올, 위치 헤이즐, 로즈 워터, 명반, 오트밀, 야로우, 베이베리(bayberry), 차가운 물, 마찰 알콜, 아스트리젠트 제제, 예컨대 질산은, 산화아연, 황산아연, 부로우 액제, 벤조인의 팅크쳐, 및 식물성 물질, 예컨대 타닌산 및 갈산, 및 이들의 조합을 포함한다. 본 명세서에 사용되는 바대로, 용어 "차가운 물"은 실온(대략 25℃(77℉)) 이하의 온도를 가지는 물을 의미한다.
적합한 보습제는 예를 들어 글리세린, 글리세린 유도체, 나트륨 히알우로네이트, 베타인, 아미노산, 글리코사미노글리칸, 꿀, 소르비톨, 글리콜, 폴리올, 당, 수소화 전분 가수분해물, PCA의 염, 락트산, 락테이트, 및 우레아를 포함한다. 특히 바람직한 보습제는 글리세린이다.
토닝 조성물을 위한 캐리어는 연고, 로션, 크림, 고약, 에어로졸, 겔, 현탁액, 스프레이, 폼 등에 대한 기초로서 미용 및 의학 분야에 통상적으로 공지된 임의의 캐리어 재료일 수 있고, 이의 분야 확립된 수준에서 사용될 수 있다. 특정한 하나의 실시형태에서, 캐리어는 수성 캐리어이다. 또 다른 실시형태에서, 캐리어는 알콜 캐리어이다. 알콜 캐리어는 임의의 적합한 알콜일 수 있다. 특히 하나의 바람직한 알콜은 에탄올이다.
다른 적합한 캐리어는 토닝 조성물에서 또한 사용될 수 있다. 소정의 실시형태에서, 캐리어 자체는 피부 관리 이익을 제공할 수 있다. 적합한 캐리어의 비제한적인 예는 유연제, 스테롤 또는 스테롤 유도체, 천연 및 합성 지방 또는 오일, 폴리올, 계면활성제, 에스테르, 실리콘, 및 다른 약학적으로 허용되는 캐리어 재료를 포함한다.
몇몇 실시형태에서, 피부 관리 섭생은 본 개시내용의 조성물에 의해 제공된 이익 이외에 피부를 치료하기 위해 치료 조성물을 포함한다. 추가적인 치료 조성물을 위한 예시적인 활성제는 피부에서 치료 효과, 예컨대 피부 톤의 균등의 개선 및 여드름 감소를 가지는 것으로 공지된 활성제를 포함할 수 있다. 더 구체적으로, 치료제는 외관 변형제(예를 들어, 박피제, 피부 퍼밍제, 무감각방지제(anti-callous agent), 여드름방지제, 상처 관리제, 효소 물질, 흉터 보수제, 보습제), 치료제, 의약품(예를 들어, 약물, 항산화제, 경피 약물 전달 물질, 식물 추출물, 비타민, 자석, 자기 금속 및 식품), 생체이물, 피부 착색제(예를 들어, 태닝제, 라이트닝제(lightening agent), 및 브라이트닝제(brightening agent), 광택 조절제 및 약물), 광택 조절제, 착색제, 표면 컨디셔닝제(예를 들어, pH 조정제, 모이스춰라이저, 피부 컨디셔너, 박피제, 면도용 윤활제, 무감각방지제, 여드름방지제, 노화방지제, 상처 관리제, 피부 지질, 효소, 흉터 관리제, 보습제, 파우더, 식물 추출물 및 약물), 외부 진통제, 항염증제(예를 들어, 자극방지제, 알레르기방지제, 상처 관리제, 경피 약물 전달 및 약물), 향료, 냄새 중화제, 수딩제(soothing agent), 진정제, 식물 추출물(예를 들어, 페퍼민트 오일, 유칼립톨, 유칼립투스 오일, 캄퍼 및 티트리 오일), 펩타이드, 천연 및 합성 지방 또는 오일, 수분 흡수제, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
일 실시형태에서, 상기 기재된 조성물 이외에, 피부 관리 섭생은 마무리 조성물을 포함한다. 다른 조성물에서처럼, 본 명세서에 기재된 다양한 활성 성분이 본 개시내용의 범위로부터 벗어나지 않으면서 다중제품 관리 섭생의 임의의 제품에서 사용될 수 있는 것으로 이해되어야 한다.
포함될 때, 마무리 조성물은 수분공급, 피부 보호, 또는 사용자에게 수분의 실링을 위한 수분 장벽을 통상적으로 전달하는 마무리제를 포함한다. 구체적으로, 마무리제는 당해 분야에 공지된 임의의 모이스춰라이징제, 피부 보호제 및/또는 수분 장벽 증대 물질일 수 있다.
추가적으로, 마무리제는 심미적 이익, 예컨대 피부 매끄러움 또는 분을 바른 느낌을 제공할 수 있다. 추가적인 적합한 마무리제의 예는 피부 컨디셔닝제(예를 들어, pH 조정제, 모이스춰라이저, 피부 컨디셔너, 박피제, 면도용 윤활제, 피부 퍼밍제, 무감각방지제, 여드름방지제, 노화방지제, 주름방지제, 비듬방지제, 상처 관리제, 피부 지질, 효소, 흉터 관리제, 보습제, 파우더, 식물 추출물 및 약물), 향료, 식물 추출물, 파우더, 및 이들의 조합을 포함한다.
다양한 활성 성분이 본 개시내용의 범위로부터 벗어나지 않으면서 다중제품 관리 섭생의 임의의 제품에서 사용될 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 다양한 제품의 구체적인 활성 성분은 원하는 매일의 섭생에 따라 달라질 것이다.
피부 관리 시스템이 본 명세서에서 기재되어 있지만, 본 개시내용의 조성물을 사용한 섭생이 피부를 세정하고 치료하고 수분공급하고 보호하는 단계를 포함하는 다양한 다른 매일의 섭생에 사용될 수 있는 것으로 당업자에 의해 이해되어야 한다. 피부 관리 섭생은 피부에 원하는 이익을 제공하도록 이들 단계의 모두, 이들 단계 중 일부를 조합할 수 있거나, 동일한 단계의 다수의 반복을 가질 수 있는 것으로 이해된다.
이 기재된 설명은 최고의 방식을 포함하는 본 발명을 개시하고, 조성물을 만들고 사용하는 것 및 임의의 포함된 방법을 실행하는 것을 포함하여 당해 분야의 당업자가 또한 본 발명을 실행하게 하도록 실시예를 사용한다. 본 개시내용의 특허 가능한 범위는 청구항에 의해 한정되고, 당해 분야의 당업자에게 생기는 다른 예를 포함할 수 있다. 그런 다른 실시예는 그것들이 청구범위의 문헌적 언어와 상이하지 않는 구조적 요소를 가지거나 청구범위의 문헌적 언어와 실질적으로 다르지 않으면서 동등한 구조적 요소를 포함한다면 청구범위의 범주 내에 있는 것으로 의도된다.
본 개시내용은 하기 비제한적인 실시예의 고려 시 더 완전히 이해될 것이다.
실시예 1
세포 생존능력
이 예에서, 세포 생존능력 시험을 수행하여 세포독성을 시험하였다.
원발성 인간 진피 섬유아세포를 5% CO2 분위기 하에 37℃에서 성장 배지(DMEM + 10% FBS)에서 포화상태(confluence)까지 성장시켰다. 이후, 세포의 샘플(n=3)을 전체 1 또는 24시간 동안 성장 배지(DMEM(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드)) + 2% 소 태아 혈청(FBS)(Life Technologies) + 1X 항생제/항진균제(AA))에서 증가하는 농도의 UNDARINE™ 또는 ECOBIDENS™에 의해 처리하였다. 처리 후, 세포를 PBS 중에 2회 세척하고, 5% CO2 분위기에서 37℃에서 12시간 동안 성장 배지(DMEM + 10% FBS)에서 회복하게 두고, 이후 5% CO2 분위기에서 37℃에서 2시간 동안 ALAMARBLUE®(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드))와 항온처리하였다. ALAMARBLUE® 검정은 대사 활성의 검출에 기초한 형광분석/비색 성장 검출기를 포함한다. 구체적으로, 이 시스템은 세포 성장으로부터 생긴 성장 배지의 화학적 감소에 반응하여 형광하면서 색상이 변하는 산화-환원(레독스) 표시자를 포함한다.
카보닐 시아나이드 3-클로로페닐하이드라존(CCCP)(Sigma-Aldrich(미조리주 세인트 루이스))로부터 상업적으로 구입 가능)인 미토콘드리아 비커플링 약물을 세포독성에 대한 양성 대조군으로서 사용하였다. 추가로, 비처리된 세포의 샘플을 음성 대조군으로서 사용하였다.
형광 방출의 강도를 585 nm에서 SpectraMax® M5(Molecular Devices(캘리포니아주 써니베일))를 사용하여 기록하였다. 생존능력을 하기와 같이 결정하였다:
생존능력(%) = ((처리된 샘플의 585 nm에서의 형광 강도)/(비처리된 샘플의 585 nm에서의 형광 강도)) X 100.
도 1에 입증된 바대로, 시험된 활성제는 1% 또는 3%의 농도에서 세포 생존능력을 상당히 감소시키지 않았다.
실시예 2
이 실시예에서, 산화 스트레스에 대해 섬유아세포를 보호하는 능력에 대해 운다리아 추출물을 분석하였다.
51세 여성의 복부 외식편으로부터의 원발성 섬유아세포를 성장 배지(DMEM + 10% FBS + 1X 항생제/항진균제(AA))에서 포화상태로 성장시키고 이후 성장 배지(DMEM(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드)) + 2% 소 태아 혈청(FBS)(Life Technologies) + 1X 항생제/항진균제(AA))에서 3% v/v UNDARINE™에 의해 20시간 동안 처리하였다. 세포를 세척하고 이후 세포의 샘플(n=4)을 37℃에서 1시간 동안 200 μM H2O2에 의해 추가로 처리하였다. 세포의 제2 샘플(n=4)을 UNDARINE™에 의해 처리하지 않지만, H2O2에 의해 처리하였다. H2O2를 제거한 후, 세포를 5% CO2 분위기에서 37℃에서 배지에서 회복하게 하였다. 비처리된 세포의 샘플(n=4)을 대조군으로서 사용하였다. 12시간 후, 세포를 5% CO2에서 37℃에서 1시간 PBS + 10% ALAMARBLUE®(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드)) 중에 항온처리하고, 형광 방출을 SpectraMax® M5(Molecular Devices(캘리포니아주 써니베일))(560EX nm/590 nm)를 사용하여 측정하였다. 그 결과가 도 2에 도시되어 있다.
도 2에 도시된 바대로, UNDARINE™은 H2O2 노출로부터 세포를 보호하였다.
실시예 3
이 예에서, H2O2 유도된 아폽토시스에 대해 섬유아세포를 보호하는 능력에 대해 운다리아 추출물을 분석하였다.
인간 진피 섬유아세포를 성장 배지(DMEM + 10% FBS)에서 포화상태로 성장시키고 이후 성장 배지(DMEM(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드)) + 2% 소 태아 혈청(FBS)(Life Technologies) + 1X 항생제/항진균제(AA))에서 3% v/v UNDARINE™에 의해 12시간 동안 처리하였다. 세포를 PBS에 의해 2회 세척하고 이후 세포의 샘플(n=4)을 37℃에서 1시간 동안 200 μM H2O2에 의해 추가로 처리하였다. 세포의 제2 샘플(n=4)을 UNDARINE™에 의해 처리하지 않지만, H2O2에 의해 처리하였다. 비처리된 세포의 샘플(n=4)을 대조군으로서 사용하였다. PBS에 의해 추가로 세척한 후, 세포를 5% CO2 분위기에서 37℃에서 배지에서 회복하게 하였다. 12시간 후, 세포를 아폽토시스 마커 Annexin V - Alexa Fluor 488(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드))(Annexin으로서 보고된 형광 방출)에 의해 염색하였다. Annexin V는 초기 아폽토시스의 마커로서 산업 표준품으로서 사용된다. 특히, 이의 발현을 감소시키는 조성물 및/또는 화합물은 피부 기능 및 외관을 개선하는 데 있어서 매우 양호한/효과적인 것으로 생각될 것이다. 그 결과가 도 3a 내지 3d에 도시되어 있다.
도 3a 내지 3d에 도시된 바대로, UNDARINE™은 H2O2 공격에 의해 생긴 초기 아폽토시스 마커의 증가를 방지하였다. 또한, FSC 및 HSC 값(크기 및 입도)은 UNDARINE™ 처리 샘플에서 아폽토시스 세포의 백분율의 감소를 나타낸다.
실시예 4
이 예에서, 인간 진피 섬유아세포에서의 H2O2 또는 UV 유도 광손상에 대한 비덴스 추출물의 효과를 분석하였다.
32세 코카시안종 여성의 복부 피부 외식편으로부터 원발성 섬유아세포를 단리하였다. 섬유아세포를 100%까지의 포화상태로 성장 배지(DMEM(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드)) + 2% 소 태아 혈청(FBS)(Life Technologies) + 1X 항생제/항진균제(AA))를 포함하는 24웰 플레이트에서 5% CO2 분위기에서 37℃에서 배양하였다.
100% 포화상태로 배양한 후, 세포를 성장 배지에서 3% v/v ECOBIDENS™에 의해 20시간 동안 처리하였다. 이후, 세포를 PBS에 의해 2회 세척하고, 5% CO2 분위기에서 37℃에서 1시간 동안 성장 배지에서 200 μM H2O2(n=4)에 의해 처리하거나, 0.5 ㎖의 PBS 중에 액침시키고 100 mJ UV/cm2(n=4)에 노출시켰다.
PBS에 의해 2회 세척한 후, 세포를 이후 5% CO2 분위기에서 37℃에서 배지에서 대략 12시간 동안 회복되게 하였다. 이후, 배지를 수집하고 추가의 사이토카인 분석을 위해 -80℃에서 저장하고, 이것을 PBS + 10% ALAMARBLUE®(Life Technologies)에 의해 대체하였다. 5% CO2 분위기에서 37℃에서 1시간 동안 항온처리한 후, 형광 방출을 SpectraMax® M5(Molecular Devices(캘리포니아주 써니베일))(560EX nm/590 nm)를 사용하여 측정하였다. 그 결과가 도 4 및 도 5에 도시되어 있다.
형광 방출을 이용하여, 비처리된 대조군 세포에 대한 처리된 세포의 형광 방출의 비율을 비교함으로써 세포의 생존능력의 변화를 계산할 수 있다. 결과에 의해 보이는 것처럼, ECOBIDENS™에 의해 처리된 세포는 예비 처리되지 않은 대조군 세포보다 특히 더 높은 생존능력을 나타냈다.
실시예 5
이 예에서, UV 또는 H2O2 유도된 아폽토시스에 대해 섬유아세포를 보호하는 능력에 대해 비덴스 추출물을 분석하였다.
인간 진피 섬유아세포를 성장 배지(DMEM + 10% FBS)에서 포화상태로 성장시키고 이후 성장 배지(DMEM(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드)) + 2% 소 태아 혈청(FBS)(Life Technologies) + 1X 항생제/항진균제(AA))에서 3% v/v ECOBIDENS™에 의해 12시간 동안 처리하였다. 세포를 PBS에 의해 세척하고 이후 세포의 샘플을 37℃에서 1시간 동안 200 μM H2O2에 의해 추가로 처리하거나 100 mJ UV/cm2에 의해 조사하였다. 비처리된 세포의 샘플을 대조군으로서 사용하였다. 세포의 또 다른 샘플을 ECOBIDENS™에 의해 처리하지 않지만, H2O2 또는 UV(n=4)에 의해 처리하였다. PBS에 의해 추가로 세척한 후, 세포를 5% CO2 분위기에서 37℃에서 배지에서 회복하게 하였다. 12시간 후, 세포를 아폽토시스 마커 Annexin V - Alexa Fluor 488(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드))(Annexin으로서 보고된 형광 방출)에 의해 염색하였다. 그 결과가 도 6a 내지 도 6f에 도시되어 있다. 결과는 판독마다 10,000개의 세포를 분석하는 2개의 독립 실험을 나타낸다.
도 6a 내지 도 6f에 도시된 바대로, ECOBIDENS™는 UV 및/또는 H2O2 공격에 의해 생긴 초기 아폽토시스 마커의 증가를 방지하였다. 또한, FSC 및 HSC 값(크기 및 입도)은 ECOBIDENS™ 처리 샘플에서 아폽토시스 세포의 백분율의 감소를 나타낸다.
실시예 6
이 예에서, UV 조사 또는 H2O2 유도된 스트레스로 인한 세포 글루타티온(GSH) 농도의 감소를 최소화시키기 능력에 대해 비덴스 추출물을 분석하였다.
인간 진피 섬유아세포를 성장 배지(DMEM + 10% FBS)에서 포화상태로 성장시키고 이후 성장 배지(DMEM(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드)) + 2% 소 태아 혈청(FBS)(Life Technologies) + 1X 항생제/항진균제(AA))에서 3% v/v ECOBIDENS™에 의해 24시간 동안 처리하였다. 세포를 PBS에 의해 세척하고 이후 세포의 샘플을 37℃에서 1시간 동안 200 μM H2O2에 의해 추가로 처리하거나(n=4) 100 mJ UV/cm2에 의해 조사하였다(n=4). 비처리된 세포의 샘플(n=4)을 대조군으로서 사용하였다. 세포의 또 다른 샘플을 ECOBIDENS™에 의해 처리하지 않지만, H2O2 또는 UV (n=4/처리)에 의해 처리하였다. 세포를 PBS에 의해 3회 추가로 세척한 후, 세포를 5% CO2 분위기에서 37℃에서 배지(DMEM + 10% FBS)에서 대략 20시간 동안 회복하게 하였다.
세포를 트립신처리에 의해 수확하고, 1500 rpm에서 4℃에서 5분 동안 1.5 ㎖의 관에서 원심분리하여 세포를 펠렛화하였다. 상청액을 버리고, 세포를 PBS 중에 재현탁시켰다. 이후, 세포를 액체 질소 중에 침지시켜 급속 동결시키고 37℃ 물 욕조에서 빨리 해동시켰다. 동결-해동의 4회 사이클을 수행하였다. 관을 10,000 X g에서 4℃에서 15분 동안 원심분리하였다. 상청액을 새로운 1.5 ㎖의 관에 옮기고, SENSOLYTE® Glutathione Cellular Assay Kit(AnaSpec, Inc.(캘리포니아주 프레몬트))를 사용한 감소한 글루타티온(GSH) 분석을 위해 -80℃에서 저장하였다. GSH 분석의 결과가 도 7에 도시되어 있다.
도 7에 도시된 바대로, UV 및 H2O2 공격 둘 다는 세포 GSH 수준을 감소시켰다. 그러나, GSH 수준에 대한 H2O2 및 UV 공격의 영향은 ECOBIDENS™에 의해 처리된 샘플 세포에서 최소화되었다.
실시예 7
이 예에서, H2O2 농도에 대한 비덴스 추출물의 활성을 분석하였다.
원발성 인간 진피 섬유아세포를 성장 배지(DMEM + 10% FBS)에서 포화상태로 성장시키고 이후 성장 배지(DMEM(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드)) + 2% 소 태아 혈청(FBS)(Life Technologies) + 1X 항생제/항진균제(AA))에서 3% v/v ECOBIDENS™에 의해 12시간 동안 처리하였다. 이 대조군 샘플을 비처리로 두었다. 각각의 처리 및 비처리 샘플에 대해 N=4. 이후, 모든 샘플의 세포를 PBS에 의해 2회 세척하였다. 하나의 대조군 샘플을 200 μM H2O2에 의해 37℃에서 처리하고; 하나의 대조군 샘플을 200 μM H2O2 및 카탈라제(제조사의 지시(Cayman Chemicals Company(미시건주 안 아르보))에 따라 사용된 Hydrogen Peroxide Cell-Based Assay Kit(과산화수소 세포 기반 검정 키트)로서 이용 가능)에 의해 37℃에서 처리하였다. ECOBIDENS™ 처리 샘플을 200 μM H2O2에 의해 37℃ 에서 또한 처리하였다. H2O2에 의한 1시간 처리 후, 샘플 내의 H2O2 농도를 과산화수소 세포 기반 검정 키트(Cayman Chemicals Company(미시건주 안 아르보))에 의해 측정하였다. 더 특히, 키트는 H2O2 농도에 비례하는 것으로 형광 방출을 측정하였다.
도 8에 도시된 바대로, 비덴스 추출물에 의한 예비 처리는 샘플 내의 H2O2의 농도를 감소시키지 않았다. 즉, 비덴스 추출물이 H2O2에 의한 처리 전에 세척되면서, 추출물의 잔류하는 양이 H2O2를 감소시키지 않는다는 것이 이제 밝혀졌다. 반대로, 추출물이 H2O2의 농도를 감소시키기 위해 세포 자체의 방어 기전을 증대시키는 것으로 생각된다.
실시예 8
이 예에서, UV 조사 및/또는 산화 스트레스에 대한 세포 복원력을 증대시키는 능력에 대해 추출물을 분석하였다.
원발성 인간 각질세포를, EpiLife® 한정 성장 보충제(EDGS)(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드)) 및 1 x 항생제/항진균제가 보충된, 성장 배지(EpiLife® 배지(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드))와 60 μM 칼슘(Gibco®, Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드)))에서 포화상태로 성장시키고 이후 3%, 6%, 또는 9% v/v의 UNDARINE™ 또는 ECOBIDENS™에 의해 12시간 동안 처리하였다. 각각의 처리 및 비처리 샘플에 대해 N=4. 하나의 대조군 샘플을 비처리로 두고, 또 다른 대조군 샘플을 5 μM의 로테논에 의해 처리하였다. 세포를 세척하고 이후 세포의 샘플을 37℃에서 1시간 동안 200 μM H2O2에 의해 추가로 처리하거나 100 mJ/cm2 UV에 의해 조사하였다. 세포를 5% CO2 분위기에서 37℃에서 배지(DMEM + 10% FBS)에서 회복하게 하였다. 16시간 후, 세포를 5% CO2에서 37℃에서 1시간 PBS + 10% ALAMARBLUE®(Life Technologies(뉴욕 그랜드 아일랜드)) 중에 항온처리하고, 형광 방출을 SpectraMax® M5(Molecular Devices(캘리포니아주 써니베일))(560EX nm/590 nm)를 사용하여 측정하였다. 그 결과가 도 9 및 도 10에 도시되어 있다.
상기 실시예는 운다리아비덴스 추출물 둘 다가 광손상 및 산화 스트레스로부터 세포를 보호하는 데 있어서 효과적이라는 것을 보여준다. 따라서, 이 추출물을 포함하는 조성물은 UV 노출 및 ROS의 과도한 생성으로부터 세포를 보호하도록 국소로 도포될 수 있어서, 얼굴 및 몸의 노화된 피부의 더 젊어 보이는 외관을 생성시킨다. 이 보호 효과가 세포 방어 기전, 특히, 세포 미토콘드리아 활성 및 항산화제 세포 반응을 증대시켜서 세포 퇴행 및 세포사를 최소화할 수 있는 운다리아비덴스로 인한 것으로 생각된다. 이 효과는 피부 노화의 과정 및 이의 증상(예를 들어, 피부 얇아짐, 처짐, 주름생김, 외상성 및 피부 복원력의 소실)을 느리게 하고/하거나 감소시키는 것으로 입증되었다.

Claims (20)

  1. 세포의 산화 스트레스의 감소를 필요로 하는 개인에서 세포의 산화 스트레스를 감소시키는 방법으로서,
    개인의 표적 피부 구역에 운다리아 추출물 및 비덴스 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 활성제, 및 친수성 캐리어를 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함하는, 방법.
  2. 제1항에 있어서, 표적 피부 구역은 얼굴 피부, 목 피부, 유방 피부, 어깨 피부, 가슴 피부, 다리 피부, 손 피부, 발 피부, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
  3. 제1항에 있어서, 활성제는 운다리아 추출물이고, 운다리아 추출물은 조성물 중에 약 0.01%(v/v) 내지 약 10%(v/v)의 양으로 존재하는, 방법.
  4. 제3항에 있어서, 운다리아 추출물은 운다리아 크레나타(Undaria crenata), 운다리아 페테르세니아나(Undaria peterseniana), 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida), 운다리아 운다리오이데스(Undaria undarioides), 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
  5. 제1항에 있어서, 활성제는 비덴스 추출물이고, 비덴스 추출물은 조성물 중에 약 0.01%(v/v) 내지 약 10%(v/v)의 양으로 존재하는, 방법.
  6. 제5항에 있어서, 비덴스 추출물은 비덴스 알바(Bidens alba), 비덴스 암플렉텐스(Bidens amplectens), 비덴스 암플리시마(Bidens amplissima), 비덴스 아리스토사(Bidens aristosa), 비덴스 아시메트리카(Bidens asymmetrica), 비덴스 아우레아(Bidens aurea), 비덴스 벡키(Bidens beckii), 비덴스 비덴토이데스(Bidens bidentoides), 비덴스 비겔로비(Bidens bigelovii), 비덴스 비피나타(Bidens bipinnata), 비덴스 비테르나타(Bidens biternata), 비덴스 캄필로테카(Bidens campylotheca), 비덴스 세르누아(Bidens cernua), 비덴스 세르비카타(Bidens cervicata), 비덴스 치피(Bidens chippii), 비덴스 컨전크타(Bidens conjuncta), 비덴스 콘나타(Bidens connata), 비덴스 코로나타(Bidens coronata), 비덴스 코스모이데스(Bidens cosmoides), 비덴스 시나피폴리아(Bidens cynapiifolia), 비덴스 디스코이데아(Bidens discoidea), 비덴스 에아토니(Bidens eatonii), 비덴스 페룰리폴리아(Bidens ferulifolia), 비덴스 포르베시(Bidens forbesii), 비덴스 프론도사(Bidens frondosa), 비덴스 가르드네리(Bidens gardneri), 비덴스 하와이엔시스(Bidens hawaiensis), 비덴스 헨리(Bidens henryi), 비덴스 헤테로독사(Bidens heterodoxa), 비덴스 헤테로스페르마(Bidens heterosperma), 비덴스 힐레브란디아나(Bidens hillebrandiana), 비덴스 하이페르보레안(Bidens hyperborean), 비덴스 라에비스(Bidens laevis), 비덴스 레모니(Bidens lemmonii), 비덴스 렙토세팔라(Bidens leptocephala), 비덴스 렙토필라(Bidens leptophylla), 비덴스 마크로카르파(Bidens macrocarpa), 비덴스 마니(Bidens mannii), 비덴스 마우이엔시스(Bidens mauiensis), 비덴스 막시모윅지아나(Bidens maximowicziana), 비덴스 멘지에시(Bidens menziesii), 비덴스 미크란타(Bidens micrantha), 비덴스 미티스(Bidens mitis), 비덴스 몰로카이엔시스(Bidens molokaiensis), 비덴스 x 멀티셉스(Bidens x multticeps), 비덴스 파르비플로라(Bidens parviflora), 비덴스 필로사(Bidens pilosa), 비덴스 폴리렙피스(Bidens polylepis), 비덴스 포풀리폴리아(Bidens populifolia), 비덴스 라디에이트(Bidens radiate), 비덴스 렙탄스(Bidens reptans), 비덴스 산드비센시스(Bidens sandvicensis), 비덴스 침페리(Bidens schimperi), 비덴스 심플리시폴리아(Bidens simplicifolia), 비덴스 소코렌시스(Bidens socorrensis), 비덴스 스쿼로사(Bidens squarrosa), 비덴스 수발테르난스(Bidens subalternans), 비덴스 테누이섹타(Bidens tenuisecta), 비덴스 토르타(Bidens torta), 비덴스 트리쵸스페르마(Bidens trichosperma), 비덴스 트리파르티타(Bidens tripartita), 비덴스 트리플리네르비아(Bidens triplinervia), 비덴스 발리다(Bidens valida), 비덴스 불가타(Bidens vulgata), 비덴스 위브케이(Bidens wiebkei), 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
  7. 제1항에 있어서, 세포는 진피 섬유아세포, 표피 각질세포, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
  8. 세포의 산화 스트레스 유도된 아폽토시스의 감소를 필요로 하는 개인에서 세포의 산화 스트레스 유도된 아폽토시스를 감소시키는 방법으로서,
    개인의 표적 피부 구역에 운다리아 추출물 및 비덴스 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 활성제, 및 친수성 캐리어를 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함하는, 방법.
  9. 제8항에 있어서, 표적 피부 구역은 얼굴 피부, 목 피부, 유방 피부, 어깨 피부, 가슴 피부, 다리 피부, 손 피부, 발 피부, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
  10. 제8항에 있어서, 활성제는 운다리아 추출물이고, 운다리아 추출물은 조성물 중에 약 0.01%(v/v) 내지 약 10%(v/v)의 양으로 존재하는, 방법.
  11. 제10항에 있어서, 운다리아 추출물은 운다리아 크레나타(Undaria crenata), 운다리아 페테르세니아나(Undaria peterseniana), 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida), 운다리아 운다리오이데스(Undaria undarioides), 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
  12. 제8항에 있어서, 활성제는 비덴스 추출물이고, 비덴스 추출물은 조성물 중에 약 0.01%(v/v) 내지 약 10%(v/v)의 양으로 존재하는, 방법.
  13. 제12항에 있어서, 비덴스 추출물은 비덴스 알바(Bidens alba), 비덴스 암플렉텐스(Bidens amplectens), 비덴스 암플리시마(Bidens amplissima), 비덴스 아리스토사(Bidens aristosa), 비덴스 아시메트리카(Bidens asymmetrica), 비덴스 아우레아(Bidens aurea), 비덴스 벡키(Bidens beckii), 비덴스 비덴토이데스(Bidens bidentoides), 비덴스 비겔로비(Bidens bigelovii), 비덴스 비피나타(Bidens bipinnata), 비덴스 비테르나타(Bidens biternata), 비덴스 캄필로테카(Bidens campylotheca), 비덴스 세르누아(Bidens cernua), 비덴스 세르비카타(Bidens cervicata), 비덴스 치피(Bidens chippii), 비덴스 컨전크타(Bidens conjuncta), 비덴스 콘나타(Bidens connata), 비덴스 코로나타(Bidens coronata), 비덴스 코스모이데스(Bidens cosmoides), 비덴스 시나피폴리아(Bidens cynapiifolia), 비덴스 디스코이데아(Bidens discoidea), 비덴스 에아토니(Bidens eatonii), 비덴스 페룰리폴리아(Bidens ferulifolia), 비덴스 포르베시(Bidens forbesii), 비덴스 프론도사(Bidens frondosa), 비덴스 가르드네리(Bidens gardneri), 비덴스 하와이엔시스(Bidens hawaiensis), 비덴스 헨리(Bidens henryi), 비덴스 헤테로독사(Bidens heterodoxa), 비덴스 헤테로스페르마(Bidens heterosperma), 비덴스 힐레브란디아나(Bidens hillebrandiana), 비덴스 하이페르보레안(Bidens hyperborean), 비덴스 라에비스(Bidens laevis), 비덴스 레모니(Bidens lemmonii), 비덴스 렙토세팔라(Bidens leptocephala), 비덴스 렙토필라(Bidens leptophylla), 비덴스 마크로카르파(Bidens macrocarpa), 비덴스 마니(Bidens mannii), 비덴스 마우이엔시스(Bidens mauiensis), 비덴스 막시모윅지아나(Bidens maximowicziana), 비덴스 멘지에시(Bidens menziesii), 비덴스 미크란타(Bidens micrantha), 비덴스 미티스(Bidens mitis), 비덴스 몰로카이엔시스(Bidens molokaiensis), 비덴스 x 멀티셉스(Bidens x multticeps), 비덴스 파르비플로라(Bidens parviflora), 비덴스 필로사(Bidens pilosa), 비덴스 폴리렙피스(Bidens polylepis), 비덴스 포풀리폴리아(Bidens populifolia), 비덴스 라디에이트(Bidens radiate), 비덴스 렙탄스(Bidens reptans), 비덴스 산드비센시스(Bidens sandvicensis), 비덴스 침페리(Bidens schimperi), 비덴스 심플리시폴리아(Bidens simplicifolia), 비덴스 소코렌시스(Bidens socorrensis), 비덴스 스쿼로사(Bidens squarrosa), 비덴스 수발테르난스(Bidens subalternans), 비덴스 테누이섹타(Bidens tenuisecta), 비덴스 토르타(Bidens torta), 비덴스 트리쵸스페르마(Bidens trichosperma), 비덴스 트리파르티타(Bidens tripartita), 비덴스 트리플리네르비아(Bidens triplinervia), 비덴스 발리다(Bidens valida), 비덴스 불가타(Bidens vulgata), 비덴스 위브케이(Bidens wiebkei), 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
  14. 제8항에 있어서, 세포는 진피 섬유아세포, 표피 각질세포, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
  15. 세포의 광손상의 감소를 필요로 하는 개인에서 세포의 광손상을 감소시키는 방법으로서,
    개인의 표적 피부 구역에 운다리아 추출물 및 비덴스 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 활성제, 및 친수성 캐리어를 포함하는 조성물을 국소로 도포하는 단계를 포함하는, 방법.
  16. 제15항에 있어서, 활성제는 운다리아 추출물이고, 운다리아 추출물은 조성물 중에 약 0.01%(v/v) 내지 약 10%(v/v)의 양으로 존재하는, 방법.
  17. 제16항에 있어서, 운다리아 추출물은 운다리아 크레나타, 운다리아 페테르세니아나, 운다리아 핀나티피다, 운다리아 운다리오이데스, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
  18. 제15항에 있어서, 활성제는 비덴스 추출물이고, 비덴스 추출물은 조성물 중에 약 0.01%(v/v) 내지 약 10%(v/v)의 양으로 존재하는, 방법.
  19. 제18항에 있어서, 비덴스 추출물은 비덴스 알바(Bidens alba), 비덴스 암플렉텐스(Bidens amplectens), 비덴스 암플리시마(Bidens amplissima), 비덴스 아리스토사(Bidens aristosa), 비덴스 아시메트리카(Bidens asymmetrica), 비덴스 아우레아(Bidens aurea), 비덴스 벡키(Bidens beckii), 비덴스 비덴토이데스(Bidens bidentoides), 비덴스 비겔로비(Bidens bigelovii), 비덴스 비피나타(Bidens bipinnata), 비덴스 비테르나타(Bidens biternata), 비덴스 캄필로테카(Bidens campylotheca), 비덴스 세르누아(Bidens cernua), 비덴스 세르비카타(Bidens cervicata), 비덴스 치피(Bidens chippii), 비덴스 컨전크타(Bidens conjuncta), 비덴스 콘나타(Bidens connata), 비덴스 코로나타(Bidens coronata), 비덴스 코스모이데스(Bidens cosmoides), 비덴스 시나피폴리아(Bidens cynapiifolia), 비덴스 디스코이데아(Bidens discoidea), 비덴스 에아토니(Bidens eatonii), 비덴스 페룰리폴리아(Bidens ferulifolia), 비덴스 포르베시(Bidens forbesii), 비덴스 프론도사(Bidens frondosa), 비덴스 가르드네리(Bidens gardneri), 비덴스 하와이엔시스(Bidens hawaiensis), 비덴스 헨리(Bidens henryi), 비덴스 헤테로독사(Bidens heterodoxa), 비덴스 헤테로스페르마(Bidens heterosperma), 비덴스 힐레브란디아나(Bidens hillebrandiana), 비덴스 하이페르보레안(Bidens hyperborean), 비덴스 라에비스(Bidens laevis), 비덴스 레모니(Bidens lemmonii), 비덴스 렙토세팔라(Bidens leptocephala), 비덴스 렙토필라(Bidens leptophylla), 비덴스 마크로카르파(Bidens macrocarpa), 비덴스 마니(Bidens mannii), 비덴스 마우이엔시스(Bidens mauiensis), 비덴스 막시모윅지아나(Bidens maximowicziana), 비덴스 멘지에시(Bidens menziesii), 비덴스 미크란타(Bidens micrantha), 비덴스 미티스(Bidens mitis), 비덴스 몰로카이엔시스(Bidens molokaiensis), 비덴스 x 멀티셉스(Bidens x multticeps), 비덴스 파르비플로라(Bidens parviflora), 비덴스 필로사(Bidens pilosa), 비덴스 폴리렙피스(Bidens polylepis), 비덴스 포풀리폴리아(Bidens populifolia), 비덴스 라디에이트(Bidens radiate), 비덴스 렙탄스(Bidens reptans), 비덴스 산드비센시스(Bidens sandvicensis), 비덴스 침페리(Bidens schimperi), 비덴스 심플리시폴리아(Bidens simplicifolia), 비덴스 소코렌시스(Bidens socorrensis), 비덴스 스쿼로사(Bidens squarrosa), 비덴스 수발테르난스(Bidens subalternans), 비덴스 테누이섹타(Bidens tenuisecta), 비덴스 토르타(Bidens torta), 비덴스 트리쵸스페르마(Bidens trichosperma), 비덴스 트리파르티타(Bidens tripartita), 비덴스 트리플리네르비아(Bidens triplinervia), 비덴스 발리다(Bidens valida), 비덴스 불가타(Bidens vulgata), 비덴스 위브케이(Bidens wiebkei), 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
  20. 제15항에 있어서, 세포는 진피 섬유아세포, 표피 각질세포, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
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