KR20150010802A

KR20150010802A - 프로테아좀 억제제

Info

Publication number: KR20150010802A
Application number: KR1020157000064A
Authority: KR
Inventors: 에드워드 제이. 올하바; 미헤라 디. 단카
Original assignee: 밀레니엄 파머슈티컬스 인코퍼레이티드
Priority date: 2007-08-06
Filing date: 2007-08-06
Publication date: 2015-01-28
Also published as: EP3210987A1; LUC00013I1; ECSP10010015A; UA97536C2; PH12014500053A1; CA2695082A1; IL242290A; GEP20125599B; PH12014500053B1; IL242290A0; LUC00013I2; IL242291A; KR101831674B1; EP2527347A1; PL2178888T3; TN2010000060A1; EA028622B1; HRP20120745T1; JP5261488B2; SI2178888T1

Description

프로테아좀 억제제 {PROTEASOME INHIBITORS}

본 발명은 프로테아좀 억제제로서 유용한 보론산 및 보론산 에스테르 화합물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 본 발명의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물 및 다양한 질환의 치료에 상기 조성물을 사용하는 방법을 제공한다.

보론산 및 에스테르 화합물은 다양한 약제학적으로 유용한 생물학적 활성을 나타낸다. 미국 특허 No. 4,499,082 (1985, Shenvi et al.)에는, 펩타이드 보론산이 어떤 단백질가수분해 효소의 억제제라는 것이 개시되어 있다. Kettner 및 Shenvi 의 미국 특허 No. 5,187,157 (1993), 미국 특허 No.5,242,904 (1993), 및 미국 특허 No. 5,250,720 (1993)에는, 펩타이드 보론산 부류가 트립신과 같은 프로테아제를 억제한다는 것이 개시되어 있다. 미국 특허 No. 5,169,841 (1992)에는, N-말단 개질된 펩타이드 보론산이 레닌(renin)의 작용을 억제한다는 것이 개시되어 있다. 미국 특허 No. 5,106,948 (1992, Kinder et al.)에는, 어떤 보론산 화합물이 암 세포의 성장을 억제한다는 것이 개시되어 있다. WO 07/0005991(Bachovchin et al.)에는, 섬유모세포 활성 단백질을 억제하는 펩타이드 보론산 화합물이 개시되어 있다.

보론산 및 에스테르 화합물은 대다수의 세포내 단백질 교체에 책임있는 다촉매 프로테아제인 프로테아좀의 억제제로서 특히 기대를 불러 모으고 있다. 미국 특허 No. 5,780,454 (1998, Adams et al.)는 프로테아좀 억제제로서 유용한 펩타이드 붕소 에스테르 및 산 화합물을 기재하고 있다. 상기 문헌은 근육 단백질 분해의 속를 감소시키고, 세포내 NF-κB의 활성을 감소시키고, 세포내 p53 단백질의 분해 속도를 감소시키고, 세포 내 사이클린(cyclin)를 억제하고, 암 세포의 성장을 억제하고, NF-κB 의존성 세포 부착을 억제하기 위한 붕소 에스테르 및 산 화합물의 사용을 기재하고 있다. WO 02/096933(Furet et al.), WO 05/016859(Chatterjee et al.), 및 WO 05/021558 및 WO 06/08660(Bemadini et al.)은 프로테아좀 억제 활성을 갖는 것으로 보고된 추가적인 붕소 에스테르 및 산 화합물을 개시하고 있다.

Ciechanover, Cell, 79: 13-21 (1994)에는, 프로테아좀이 유비퀴틴(ubiquitin)-프로테아좀 경로의 단백질가수분해 성분이고, 단백질은 유비퀴틴의 다중 분자에의 컨쥬게이션에 의한 분해의 표적이 된다는 것이 개시되어 있다. Ciechanover 는, 또한 유비퀴틴-프로테아좀 경로가 다양한 중요한 생리적 과정에서 중요한 역학을 하는 것을 기재하고 있다. Biochem. J. 291:1 (1993, Rivett et al.)는, 프로테아좀이 트립신, 키모트립신, 및 펩디딜굴루타밀 펩티다제 활성을 나타내는 것을 개시하고 있다. 26S 프로테아좀의 촉매 코아(core)를 구성하는 것은 20S 프로테아좀이다. Biochemistry 37:7792 (1998, McCormack et al.)는, 다양한 펩타이드 기질이 Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC, Z-Leu-Leu-Arg-AMC, 및 Z-Leu-Leu-Glu-2NA (여기서, Sue는 N-숙시닐, AMC는 7-아미노-4-메틸쿠마린, 2NA는 2-나프틸아민임)를 포함하는 다양한 펩타이드 기질이 2OS 프로테아좀에 의해 쪼개진다는 것을 가르치고 있다.

프로테아좀 억제는 암 치료에서 중요한 새로운 전략을 상징한다. Science 274:1652-1659 (1996, King et al.)는 세포 주기, 신생물 성장 및 전이를 조절할 때 유비퀴틴-프로테아좀 경로에 대한 본질적인 역할을 기재하고 있다. 저자는, 수많은 주요 조절 단백질(사이클린, 및 사이클린 의존적 키나제 p21 및 p27^KSF1 포함)은 유비퀴틴-프로테아좀 경로에 의해 세포 주기 동안에 일시적으로 분해된다는 것을 가르치고 있다. 이들 단백질의 정연한 분해는 세포 주기를 통해 진행하고 세포분열을 경험하는 세포에 대해 필요하다.

더욱이, 유비퀴틴-프로테아좀 경로는 전사적 조절에 대해 필요하다. Cell, 78:773 (1994, Palombella et al.)는, 전사 인자 NF-κB의 활성이 억제제 단백질 IKB의 프로테아좀-매개 분해에 의해 조절된다는 것을 가르치고 있다. 차례로, NF-κB 는 면역 및 염증 반응에 관련된 유전자의 조절에 중심적인 역할을 한다. Immunity 2:493-506 (1995, Read et al.)는, 유비퀴틴-프로테아좀 경로가 세포 부착 분자, 예컨대 E-셀렉틴, ICAM-1, 및 VCAM-1의 발현에 필요하다는 것을 가르치고 있다. Seminars in Cancer Biology 4:219-229 (1993, Zetter)는, 세포 부착 분자는 신체 내의 맥관구조로부터 먼 조직 부위에 종양 세포의 부착 및 일혈(extravastation)을 향하게 함으로써 인비보(in vivo) 종양 전이 및 혈관형성과 관련되어 있다는 것을 가르치고 있다. 더욱이, Science 274:782 (1996, Beg 및 Baltimore)는, NF-κB가 항아폽토시스(anti-apoptotic) 조절 인자이고, NF-κB 활성의 억제는 세포를 환경 스트레스 및 세포독성 치료제에 대해 세포를 더욱 민감하게 만든다는 것을 가르치고 있다.

프로테아좀 억제제 VELCADE®(보르테조밉; N-2-피라진카보닐-1-페닐알라닌-1-류신보론산)은 먼저 제한적 승인 달성하기 위한 프로테아좀 억제제이다. Current Drug Targets, 7:1341 (2006, Mitsiades et al.)는 적어도 1회의 이전 치료를 받은 다발성 골수종 환자의 치료에 대한 보르테주밉의 승인을 인도하는 임상 연구를 살피고 있다. J. CHn. Oncol., 30:4867 (Fisher et al.)은 경과 또는 불응성 여포성 림프종을 갖는 환자에서의 보르테주밉의 활성을 확인하는 international multi-center Phase Ⅱ study을 기재하고 있다. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry, 7:359 (2007, Ishii et al.), 및 Curr. Pharm. Biotech., 7:1341 (2006, Roccaro et al.)는 보르테주밉의 항암 활성에 기여할 수 있는 수많은 분자 메카니즘을 논의하고 있다.

상기 참고문헌들에 의해 증명된 바와 같이, 프로테아좀은 치료적 개입을 위한 중요한 표적을 나타낸다. 따라서 신규의 및/또는 개선된 프로테아좀 억제제에 대한 계속적인 필요성이 있다.

본 발명은 프로테아좀의 효과적인 억제제인 화합물을 제공한다. 이들 화합물은 생체 내외에서 프로테아좀 활성을 억제하는데 유용하고, 각종 세포 증식 질환의 치료에 특히 유용하다.

본 발명의 화합물은 하기 일반식 (I)의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 보론산 무수물이다:

[화학식 I]

(I)

상기 식에서,

* Z¹ 및 Z²는 각각 독립적으로 히드록시, 알콕시, 아릴옥시, 또는 아르알콕시이거나; Z¹ 및 Z²는 함께 보론산 착화제로부터 유도된 부분을 형성하고;

고리 A는 하기:

로 이루어진 군으로부터 선택된다.

Z¹ 및 Z² 각각이 히드록시인 화학식 (I)의 보론산 화합물은 하기 화학명으로 불린다:

프로테아좀 억제제

	화학명
I-1	[(1R)-1-({[(2,3-디플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-2	[(1R)-1-({[(5-클로로-2-플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-3	[(1R)-1-({[(3,5-디플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-4	[(1R)-1-({[(2,5-디플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-5	[(1R)-1-({[(2-브로모벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-6	[1R)-1-({[(2-플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-7	[(1R)-1-({[(2-클로로-5-플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-8	[(1R)-1-({[(4-플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-9	[(1R)-1-({[(3,4-플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-10	[(1R)-1-({[(3-클로로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-11	[(1R)-1-({[(2_,5-디클로로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-12	[(1R)-1-({[(3,4-디클로로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-13	[(1R)-1-({[(3-플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-14	[(1R)-1-({[(2-클로로-4-플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-15	[(1R)-1-({[(2,3-디클로로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-16	[(1R)-1-({[(2-클로로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-17	[(1R)-1-({[(2,4-디플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-18	[(1R)-1-({[(4-클로로-2-플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-19	[(1R)-1({[(4-클로로벤조일)아미노]아세틸)아미노]-3-메틸부틸]보론산
I-20	[(1R)-1-({[(2,4-디클로로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산
I-21	[(1R)-1-({[(3,5-디클로로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산

단독으로 또는 큰 부분의 일부로서 사용된 용어 "알킬"이란 1 내지 12개의 탄소원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 또는 환형 지방족 기를 의미한다. 용어 "알콕시"는 -O-알킬 라디칼을 의미한다.

단독으로 또는 큰 부분의 일부, 예를 들어, "아르알킬", "아르알콕시", 또는 "아릴옥시알킬"로서 사용된 용어 "아릴" 및 "아르-"란, 각각이 임의로 치환되는 1 내지 3개의 고리를 포함하는 C₆ 내지 C₁₄ 방향족 탄화수소를 의미한다. 바람직하게는, 아릴 기는 C₆ _-10 아릴 기이다. 아릴 기는 비제한적으로 페닐, 나프틸, 및 안트라세닐을 포함한다. "아르알킬" 또는 "아릴알킬"기란 알킬 기에 공유결합된 아릴 기를 포함하고, 그 중 하나는 독립적으로 임의로 치환된다. 바람직하게는, 아르알킬 기는 비제한적으로 벤질, 펜에틸, 및 나프틸메틸을 포함하는 C₆ _-10 아릴(C_1-6)알킬, C₆ _-10 아릴(C_1-6)알킬, 또는 C₆ _-10 아릴(C_1-3)알킬이다.

본 명세서에 사용된 용어 "치환된"이란, 지명된 부분의 수소 라디칼이 특정 치환기의 라디칼로 대체되고, 단 치환으로 인해 안정하거나 화학적으로 실행가능한 화합물이 된다는 것을 의미한다. 적합한 치환기의 비제한적인 예는 하기를 포함한다: C₁ _-6 알킬, C₃ _-8 시클로알킬, C₁ _-6 알킬(C_3-8)시클로알킬, C₂ _-8 알케닐, C₂ _-8 알키닐, 시아노, 아미노, C₁ _-6 알킬아미노, 디(C_1-6)알킬아미노, 벤질아미노, 디벤질아미노, 니트로, 카복시, 카보(C_1-6)알콕시, 트리플루오로메틸, 할로겐, C₁ _-6 알콕시, C₆ _-10 아릴, C₆ _-10 아릴(C_1-6)알킬, C₆ _-10 아릴(C_1-6)알콕시, 히드록시, C₁ _-6 알킬티오, C₁ _-6 알킬설피닐, C₁ _-6 알킬설포닐, C₆ _-10 아릴티오, C₆ _-10 아릴설피닐, C₆ _-10 아릴설포닐, C₆ _-10 아릴, C₁ _-6 알킬(C_6-10)아릴,

본 명세서에 사용된 문구 "하나 이상의 치환기"란 이용가능한 결합 부위의 수를 기준으로 가능한 치환기의 하나로부터 최대 수와 같은 수많은 치환기를 의미하는데, 단, 안정성 및 화학적 실행가능성의 상기 조건이 부합된다. 달리 지적하지 않으면, 임의 치환된 기는 기의 각 치환가능한 위치에서 치환기를 가질 수 있고, 치환기는 동일 또는 상이할 수 있다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "독립적으로 선택된"이란 동일 또는 상이한 값이 단일 화합물 중 주어진 변수의 다중 예에 대해 선택될 수 있다는 것을 의미한다.

용어 "약"은 '대략적으로', '~의 가까이에', '대충' 또는 '주위에'를 의미하는 것으로 사용된다. 용어 "약"이 수치 범위와 함께 사용될 때, 경계를 수치의 위 또는 아래로 확장하는 범위가 설정되는 것은 변경된다. 일반적으로, 용어 "약"은 언급된 값을 10% 편차까지 위 및 아래로 수치를 변경하는 것으로 사용된다.

본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "포함하는(comprise)"는 "포함하는(include)"을 의미하지만, 제한되지는 않는다.

달리 언급하지 않으면, 본 명세서에 묘사된 구조는 단지 하나 이상의 동위원소 풍부 원자들의 존재에서 상이한 화합물을 포함하는 것을 의미한다. 예를 들어, 수소의 중수소 또는 삼중수소에 의해 대체, 또는 탄소원자의 ¹³C 또는 ¹⁴C 풍부 탄소에 의한 대체를 제외한 본 구조를 갖는 화합물은 본 발명의 범위 내이다.

본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "보론산"이란 -B(OH)₂ 부분을 가지고 있는 화합물을 의미한다. 일부 구현예에서, 보론산 화합물은 보론산 부분의 탈수화에 의해 올리고머성 무수물을 형성할 수 있다. 예를 들어, Snyder et al., J. Am. Chem. Soc. 80:3611 (1958)는 올리고머성 아릴보론산을 보고하고 있다.

본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "보론산 무수물"은 하나 이상의 물 분자의 손실과 함께 보론산 화합물의 2이상의 분자의 결합에 의해 형성된 화합물을 의미한다. 물과 혼합될 때, 보론산 무수물 화합물은 수화되어 유리 보론산 화합물을 방출한다. 다양한 구현예에서, 보론산 무수물은 2개, 3개, 4개 또는 그 이상의 보론산 단위를 포함할 수 있고, 환형 또는 선형 배열을 가질 수 있다. 본 발명의 펩타이드 보론산의 올리고머성 보론산 무수물의 비제한적인 예는 하기에 실증되어 있다:

식 (1) 및 (2)에서, 변수 n 은 0 내지 약 10, 바람직하게는 0, 1, 2, 3, 또는 4의 정수이다. 일부 구현예에서, 보론산 무수물 화합물은 n 이 1인 화학식 (2) 의 환형 트리머 ("보록신(boroxine)")을 포함한다. 변수 W 는 하기 화학식 (3)을 갖는다:

여기서, 고리 A는 화학식 (I)에 대해 상기에서 정의한 값이다.

일부 구현예에서, 보론산 무수물 화합물에 존재하는 적어도 80%의 보론산은 단일 올리고머성 무수물 형태로 존재한다. 일부 구현예에서, 보론산 무수물 화합물에 존재하는 적어도 85%, 90%, 95%, 또는 99%의 보론산은 단일 올리고머성 무수물 형태로 존재한다. 어떤 바람직한 구현예에서, 보론산 무수물 화합물은 화학식 (3)을 갖는 보록신으로 이루어지고, 또는 본질적으로 이루어진다.

보론산 무수물 화합물은 바람직하게는 재결정화, 동결건조, 열에의 노출, 및/또는 건조제에의 노출을 포함하지만 이들로 한정되지 않는 탈수 조건에의 노출에 의해 상응하는 보론산으로부터 제조될 수 있다. 적당한 재결정화 용매의 비제한적인 예는 에틸 아세테이트, 디클로로메탄, 헥산, 에테르, 아세토니트릴, 에탄올, 및 이의 혼합물을 포함한다.

일부 구현예에서, Z¹ 및 Z²는 함께 보론산 착화제로부터 유도된 부분을 형성한다. 본 발명을 위해, 용어 "보론산 착화제"란, 각각이 붕소과의 공유결합을 형성할 수 있는 적어도 2개의 관능기를 갖는 어떤 화합물을 의미한다. 적당한 관능기의 비제한적인 예는 아미노 및 히드록실를 포함한다. 일부 구현예에서, 관능기의 적어도 하나는 히드록실 기이다. 용어 "보론산 착화제로부터 유도된 부분"이란 보론산 착화제의 2개의 관능화 기로부터 수소원자를 제거함으로써 형성된 부분을 의미한다.

본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "보로네이트 에스테르" 및 "보론산 에스테르"는 상호교환적으로 사용되고, -B(Z¹)(Z²) 부분을 함유하는 화합물을 의미하고, 여기서, Z¹ 또는 Z² 중 적어도 하나는 알콕시, 아르알콕시, 또는 아릴옥시이고; 또는 Z¹ 및 Z²는 적어도 하나의 히드록실 기를 갖는 보론산 착화제로부터 유도된 부분을 함께 형성한다.

일부 구현예에서, Z¹ 및 Z²는 사슬 또는 고리 내의 적어도 2개의 연결 원자에 의해 분리된 적어도 2개의 히드록실 기를 갖는 화합물로부터 유도된 부분을 함께 형성하고, 상기 사슬 또는 고리는 탄소원자, 및 임의의 헤테로원자 또는 헤테로원자들 (N, S, 또는 O)을 포함하고, 각 경우에 붕소에 부착된 원자는 산소원자이다.

본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "적어도 2개의 히드록실 기를 갖는 화합물"이란 2개 이상의 히드록실 기를 갖는 어떤 화합물을 의미한다. 본 발명을 위해, 2개의 히드록실 기는 바람직하게는 적어도 2개의 연결 원자, 바람직하게는 약 2 내지 약 5개의 연결 원자, 더욱 바람직하게는 2 또는 3개의 연결 원자에 의해 분리된다. 편의상, 용어 "디히드록시 화합물"은 상기에서 정의한 바와 같이 적어도 2개의 히드록실 기를 갖는 화합물을 참조하기 위해 사용될 수 있다. 따라서, 본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "디히드록시 화합물"은 2개의 히드록실 기를 갖는 화합물에 제한되는 것은 아니다. 적어도 2개의 히드록실 기를 갖는 화합물로부터 유도된 부분은 히드록실 기의 어떤 2개의 산소원자에 의해 붕소에 부착될 수 있다. 바람직하게는, 붕소 원자, 붕소에 부착된 산소원자, 및 2개의 산소원자를 연결하는 원자는 함께 5원 또는 6원 고리를 형성한다.

본 발명을 위해, 보론산 착화제는 바람직하게는 약제학적으로 허용가능한, 즉, 인간에 투여하기에 적당하다. 일부 바람직한 구현예에서, 보론산 착화제는 당(糖)이다. 용어 "당(糖)"은 단당류, 이당류, 다당류, 당 알콜 및 아미노 당을 포함하는 어떤 폴리히드록시 카보히드레이트 부분을 포함한다. 일부 구현예에서, 당은 단당류, 이당류, 당 알콜, 또는 아미노 당이다. 적당한 당의 비제한적인 예는 글루코스, 수크로스, 푸룩토스, 트레할로스, 만니톨, 소르비톨, 글루코스아민, 및 N-메틸글루코스아민을 포함한다. 어떤 구현예에서, 당은 만니톨 또는 소르비톨. 따라서, 구현예에서, 당은 만니톨 또는 소르비톨이고, Z¹ 및 Z²은 함께 화학식 C₆H₁₂O₆의 부분을 형성하고, 2개의 탈양자화 히드록실 기의 산소원자는 보로네이트 에스테르 화합물을 형성하기 위해 붕소와의 공유 부착을 형성한다. 어떤 특정 구현예에서, Z¹ 및 Z²는 함께 D-만니톨로부터 유도된 부분을 형성한다.

일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 WO 02/059131 (Plamondon et al.) 에 기재된 바와 같이 동결건조 분말로서 제형되고, 상기 문헌은 그의 전체가 참고로 본 명세서에 포함되어 있다. 일부 구현예에서, 동결건조 분말은 또한 유리 디히드록시 화합물을 포함한다. 바람직하게는, 유리 디히드록시 화합물 및 화학식 (I)의 화합물은 약 0.5:1 내지 약 100:1, 더욱 바람직하게는 약 5:1 내지 약 100:1 범위의 몰비로 혼합물 내에 존재한다. 다양한 구현예에서, 디히드록시 화합물은 만니톨이고, 동결건조 분말은 유리 만니톨 및 만니톨 보로네이트 에스테르를 약 10:1 내지 약 100:1, 약 20:1 내지 약 100:1, 또는 약 40:1 내지 약 100:1 범위의 몰비로 포함한다.

일부 구현예에서, 동결건조 분말은, 본질적으로 다른 성분이 없이 만니톨 및 화학식 (I)의 화합물을 포함한다. 그러나, 조성물은 하나 이상의 다른 약제학적으로 허용가능한 부형제, 담체, 희석제, 충전제, 염, 완충용액, 안정제, 가용화제, 및 선행기술에 공지된 다른 물질을 추가로 포함할 수 있다. 이들 물질을 함유하는 약제학적으로 허용가능한 제형의 제조는 예를 들어 하기에 기재되어 있다: Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed., ed. A. Gennaro, Lippincott Williams & Wilkins, 2000, or latest edition.

화학식 (I)의 화합물을 포함하는 동결건조 분말은 바람직하게는 WO 02/059131(Plamondon et al.)에 기재된 절차에 따라 제조된다. 따라서, 일부 구현예에서, 동결건조 분말을 제조하는 방법은 하기를 포함한다: (a) 펩타이드 보론산 및 디히드록시 화합물을 포함하는 수성 혼합물을 제조하는 단계; 및 (b) 혼합물을 동결건조하는 단계.

일반적인 합성 방법론

화학식 (I)의 화합물은 당업자에게 공지된 방법으로 제조될 수 있다. 참조, 예를 들어, Adams et. al, 미국 특허 No. 5,780,454; Pickersgill et al., International Patent Publication WO 2005/097809. 예시적인 합성 경로는 하기 반응식 1 에 나타나 있다

반응식 1:

화합물 (i)와 N-보호 글리신 (ii)의 커플링, 그 다음, N-말단 탈보호로, 화합물 ⅲ을 얻는다. 적당한 보호기(PG)의 예는 비제한적으로 아실 보호기, 예를 들어, 포르밀, 아세틸 (Ac), 숙시닐(Suc), 및 메톡시숙시닐; 및 메탄 보호기, 예를 들어, tert-부톡시카보닐 (Boc), 벤질옥시카보닐 (Cbz), 및 플루오레닐메톡시카보닐 (Fmoc)를 포함한다. 펩타이드 커플링 반응은 화합물 ⅱ의 카르복실산 부분의 활성 에스테르, 예를 들어, O-CN-히드록시숙신이미드) 에스테르로의 선행 전환, 화합물 i 에 의한 처리에 의해 수행된다. 대안적으로, 활성 에스테르는 카르복실산을 펩타이드 커플링 시약과 접촉시켜서 인시투(in situ) 산출될 수 있다. 적당한 펩타이드 커플링 시약의 예는 비제한적으로 하기를 포함한다: 카보디이미드 시약, 예를 들어, 디시클로헥실카보디이미드 (DCC) 또는 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카보디이미드 (EDC); 포스포늄 시약, 예를 들어, 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (BOP); 및 우라늄 시약, 예를 들어, O-(1H-벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TBTU).

그 다음, 화합물 ⅲ은 치환된 벤조산 (ArCO₂H)과 커플링되어 화합물 iv을 얻는다. 화합물 i 및 ⅱ의 커플링을 위한 상기에 기재된 펩타이드 커플링 조건은 화합물 ⅲ을 ArCO₂H 와 커플링하는 데 적합하다. 그 다음, 보론산 부분의 탈보호로 화합물 v를 얻는다. 탈보호 단계는 붕소 에스테르 화합물 iv, 유기 보론산 수용체, 저급 알칸올, C₅ _-8 탄화수소 용매, 및 수성 무기산을 포함하는 2염기 혼합물에서 에스테르교환반응에 의해 달성된다.

반응식 2:

대안적으로, 커플링 반응의 순서는 반응식 2에 보여진 바와 같이 반대로 될 수 있다. 따라서, O-탈보호된 글리신 (vi)는 먼저 치환된 벤조산 (ArCO₂H)과 커플링되고, 에스테르 가수분해되어 화합물 vii을 형성한다. 그 다음, 화합물 i과의 커플링 및 보론산 탈보호는 반응식 1에 대해 상기에 기재된 바와 같이 수행되어 화합물 v을 얻는다.

용도, 제형, 및 투여

본 발명은 프로테아좀의 강력한 억제제인 화합물을 제공한다. 화합물은 프로테아좀 조절에 의한 펩타이드 가수분해 또는 단백질 분해를 억제하기 위한 능력에 대해 인비트로(in vitro) 또는 인비보(in vivo)에서 분석될 수 있다.

따라서, 다른 측면에서, 본 발명은 세포 내에서 프로테아제의 하나 이상의 펩티다제 활성를 억제하는 방법을 제공하는데, 상기 방법은 프로테아좀 억제를 원하는 세포를 본 발명의 화합물, 또는 약제학적으로 허용가능한 염, 붕소 에스테르, 또는 그의 보론산 무수물을 접촉시킴을 포함한다.

본 발명은 또한 세포 증식을 억제하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 본 발명의 화합물로 억제를 원하는 세포를 본 발명의 화합물과 접촉시킴을 포함한다. 문구 "세포 증식을 억제하는"은 억제제와 접촉되지 않은 세포와 비교하여 접촉된 세포에서 세포 수 또는 세포 성장을 억제하기 위한 본 발명의 화합물의 능력을 나타내기 위해 사용된다. 세포 증식의 평가는 세포 카운터를 사용하여 세포를 카운팅하거나 세포 생존능력의 분석, 예를 들어 MTT 또는 WST 분석에 의해 행해질 수 있다. 세포가 고형 성장 (예를 들어, 고형 종양 또는 기관(器官))하는 경우에, 그와 같은 세포 증식의 평가는 예를 들어 캘리퍼(caliper)로 성장을 측정하고 접촉된 세포의 성장의 크기를 비접촉 세포와 비교함으로써 행해질 수 있다.

바람직하게는, 억제제와 접촉된 세포의 성장은 비접촉 세포의 성장과 비교하여 적어도 50%까지 지체된다. 다양한 구현예에서, 접촉된 세포의 세포 증식은 비접촉 세포와 비교하여 적어도 약 75%, 적어도 약 90%, 또는 적어도 약 95%까지 억제된다. 일부 구현예에서, 문구 "세포 증식을 억제하는"은 비접촉 세포와 비교하여 접촉 세포의 수의 감소를 포함한다. 따라서, 접촉 세포에서 세포 증식을 억제하는 프로테아좀 억제제는, 접촉 세포가 성장 지체, 성장 저지, 프로그램된 세포사(즉, 아폽토시스) 또는 괴저성 세포사를 경험하도록 유도할 수 있다.

다른 측면에서, 본 발명은 화학식 (I)의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 보론산 무수물, 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염이 이들 조성물에 이용된다면, 염은 바람직하게는 무기 또는 유기 산 또는 염기로부터 유도된다. 적당한 염의 검토에 대해, 예를 들어 하기를 참조한다: Berge et al, J. Pharm. Sd. 66:1-19 (1977) and Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed., ed. A. Gennaro, Lippincott Williams & Wilkins, 2000.

적당한 산 부가 염의 비제한적인 예는 하기를 포함한다: 아세테이트, 아디페이트, 알기네이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 벤젠 설포네이트, 비설페이트 부티레이트, 시트레이트, 캄포레이트, 캄포 설포네이트, 시클로펜탄프로피오네이트, 디글루코네이트, 도데실설페이트 에탄설포네이트, 푸마레이트, luco헵타노에이트, 글리세로포스페이트, 헤미설페이트 헵타노에이트, 헥사노에이트, 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 히드로이오다이드, 2-히드록시에탄설포네이트, 락테이트, 말레에이트, 메탄설포네이트, 2-나프탈렌설포네이트, 니코티네이트, 옥살레이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트 3-페닐-프로피오네이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, 토실레이트 및 운데카노에이트.

적당한 염기 부가 염은 비제한적으로 하기를 포함한다: 암모늄 염, 알칼리 금속 염, 예컨대 리튬, 나트륨 및 칼륨 염; 알칼리 토 금속 염, 예컨대 칼슘 및 마그네슘 염; 다른 다가 금속 염, 예컨대 아연 염; 유기 염기를 갖는 염, 예컨대 디시클로헥실아민, N-메틸-D-글루카민, t-부틸아민, 에틸렌 디아민, 에탄올아민, 및 콜린; 및 아미노산을 갖는 염, 예컨대 아르기닌, 리신, 등. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용가능한 염은 화학식 (I) (Z¹ 및 Z² 모두는 히드록시임) 의 보론산 화합물의 염기 부가 염이고, 여기서 용어 "약제학적으로 허용가능한 담체"는 수령하는 대상체, 바람직하게는 포유동물, 더욱 바람직하게는 인간과 양립할 수 있고 제제의 활성의 종결없이 표적 부위에 활성제를 전달하기에 적당한 물질을 참조하기 위해 사용된다. 담체와 연관되어 있는 독성 및 역효과는, 있다면, 활성제의 목적 용도에 대해 정당한 위험/이점의 비와 균형이 잡혀 있다.

용어 "담체", "보조제", 또는 "비히클(vehicle)"는 본 명세서에서 상호교환적으로 사용되고, 목적하는 특정 투여 형태에 어울리도록 어떤 및 모든 용매, 희석제, 및 다른 액체 비히클(vehicle), 분산액 또는 현탁액 조제, 계면활성제, pH 조정제, 등장화제, 증점제 또는 에멀젼화제, 보존제, 고형 결합제, 윤활제 등을 포함한다. Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed., ed. A. Gennaro, Iippincott Williams & Wilkins, 2000 은 약제학적으로 허용가능한 조성물을 제형하는데 사용되는 각종 제형 및 그의 제조를 위한 공지 기술을 개시하고 있다.

어떤 종래의 담체 매체가 목적하지 않는 생물학적 효과를 산출하거나 그렇지 않으면 약제학적으로 허용가능한 조성물의 어떤 다른 성분(들)과 유해한 방법으로 상호작용함으로써 본 발명의 화합물과 양립할 수 없는 경우를 제외하고, 담체의 사용은 본 발명의 범위 내인 것으로 생각된다. 약제학적으로 허용가능한 담체로 쓰일 수 있는 물질의 일부 예는 하기를 포함하지만 이들로 한정되는 것은 아니다: 이온교환체, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 레시틴, 혈청 단백질, 예컨대 인간 혈청 알부민, 완충용액 물질, 예컨대 포스페이트, 카보네이트, 마그네슘 히드록시드 및 알루미늄 히드록시드, 글리신, 소르브산, 또는 칼륨 소르베이트, 포화 식물성 지방산의 부분 글리세라이트 혼합물, 물, 발열성물질 없는 물, 염 또는 전해질, 예컨대 프로타민 설페이트, 디나트륨 수소 포스페이트, 칼륨 수소 포스페이트, 염화나트륨, 및 아연 염, 콜로이달 실리카, 마그네슘 트리실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 폴리머, 양모지방(wool fat), 당, 예컨대 락토스, 글루코스, 수크로스, 및 만니톨, 전분, 예컨대 옥수수 전분 및 감자 전분, 셀룰로스 및 그의 유도체, 예컨대 나트륨 카복시메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스 및 셀룰로스 아세테이트, 분말화 트라가칸스; 맥아, 젤라틴, 탈크, 부형제 예컨대 코코아 버터 및 좌제 왁스, 오일, 예컨대 땅콩유, 목화씨유, 잇꽃유, 참깨유, 올리브유, 옥수수유 및 대두유, 글리콜, 예컨대 프로필렌 글리콜 및 폴리에틸렌 글리콜, 에스테르 예컨대 에틸 올리에이트 및 에틸 라우레이트, 한천, 알긴산, 등장성 염수, 링커(Ringer)액, 알콜 예컨대 에탄올, 이소프로필 알콜, 헥사데실 알콜, 및 글리세롤, 시클로덱스트린, 예컨대 히드록시프로필 β-시클로덱스트린 및 설포부틸에테르 β-시클로덱스트린, 윤활제 예컨대 나트륨 라우릴 셀페이트 및 마그네슘 스테아레이트, 석유 탄화수소, 예컨대 광물유 및 바셀린. 착색제, 방출제, 코팅제, 감미제, 조미제 및 방향제, 보존제 및 항산화제는 제형자의 판단에 따라 조성물에 존재할 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 다른 것 중에서 선행기술에 공지된 방법, 예컨대 종래의 과립화, 혼합, 용해, 캡슐화(encapsulating), 동결건조, 또는 에멀젼화 공정으로 제조될 수 있다. 조성물은 과립, 침전물, 또는 미립자, 분말 (동결 건조, 회전식 건조 또는 분무 건조 분말 포함), 비결정질 분말, 정제, 캡슐, 시럽, 좌제, 주사제, 에멀젼, 엘릭서(elixir), 서스펜션 또는 용액을 포함하는 다양한 형태로 조제될 수 있다.

바람직한 구현예에 따라, 본 발명의 조성물은 포유동물, 바람직하게는 인간에의 약제학적 투여를 위해 제형된다. 본 발명의 그와 같은 약제학적 조성물은 경구, 비경구, 흡입 분무, 국소, 직장, 비강, 구강, 질(膣), 또는 삽입 약물저장소를 통해 투여될 수 있다. 본 발명에 사용된 용어 "비경구"는 피하, 정맥내, 근육내, 관절내, 활액막내, 흉골내, 수강내, 간내, 병소내 및 두개강내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 바람직하게는, 조성물은 경구, 정맥내, 또는 피하로 투여된다. 본 발명의 제형은 단시간 작용, 신속 작용, 또는 장시간 작용되도록 디자인될 수 있다. 또한, 화합물은 종양 부위에 전신 수단보다는 국소 수단, 예컨대 투여 (예를 들어, 주사로)으로 투여될 수 있다.

경구 투여를 위한 액체 투여 형태는 약제학적으로 허용가능한 에멀젼, 마이크로에멀젼, 용액, 서스펜션, 시럽 및 엘릭서(elixir)를 포함하지만 이들로 한정되지는 않는다. 활성 화합물에 추가하여, 액체 투여 형태는 하기와 같은 종래기술에 통상 사용된 불활성 희석제를 함유할 수 있다: 예를 들어, 물 또는 다른 용매, 가용화제 및 에멀젼화제, 예컨대 에틸 알콜, 이소프로필 알콜, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 시클로덱스트린, 디메틸포름아미드, 오일류 (특히, 목화씨, 땅콩, 옥수수, 점(germ), 올리브, 캐스터(castor), 및 참깨 오일), 글리세롤, 테트라히드로푸르푸릴 알콜, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 및 이의 혼합물. 불활성 희석제 이외에, 경구 조성물은 또한 하기와 같은 보조제를 포함할 수 있다: 습윤제, 에멀젼화 및 현탁화제, 감미제, 조미제, 및 방향제.

주사가능 제제, 예를 들어, 살균 주사가능 수성 또는 유성 서스펜션은 적당한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용하여 공지 기술에 따라 제형될 수 있다. 살균 주사가능 제제는 예를 들어 1,3-부탄디올 중 용액으로서 비독성의 비경구로 허용가능한 희석제 또는 용매 중 살균 주사가능 용액, 서스펜션 또는 에멀젼일 수 있다. 허용가능한 비히클(vehicle) 및 용매 중에서, 물, 링커(Ringer)액, U.S,P. 및 등장 염화나트륨 용액이 사용될 수 있다. 또한, 살균의 고정유(fixed oil)는 용매 또는 현탁화 매체로서 전통적으로 이용된다. 이러한 목적으로, 합성 모노- 또는 디글리세라이드를 포함하는 어떤 브랜드(bland) 고정유가 이용될 수 있다. 또한, 지방산, 예컨대 올레산은 주사가능한 제제로 사용된다. 주사가능 제형은 박테리아 보유 필터를 통한 여과에 의해, 또는 사용전에 살균수 또는 다른 주사가능 매체에 용해 또는 분산될 수 있는 살균의 고형 조성물의 형태로 살균제를 혼입하여 살균될 수 있다. 비경구 투여를 위해 제형된 조성물은 볼러스 주사(bolus injection) 또는 타임드푸시(timed push)에 의해 주사될 수 있거나, 연속 주사에 의해 주사될 수 있다.

경구 투여를 위한 고체 투여 형태는 캡슐, 정제, 알약, 분말, 및 과립을 포함한다. 그와 같은 고체 투여 형태에서, 활성 화합물은 하기와 혼합된다: 적어도 하나의 적어도 불활성의 약제학적으로 허용가능한 부형제 또는 담체 예컨대 나트륨 시트레이트 또는 디칼슘 포스페이트 및/또는 a) 충전제 또는 증량제 예컨대 전분, 락토스, 수크로스, 글루코스, 만니톨, 및 규산, b) 결합제 예컨대, 예를 들어, 카복시메틸셀룰로스, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈, 수크로스, 및 아카시아, c) 휴멕턴트(humectant) 예컨대 글리세롤, d) 붕해제 예컨대 한천, 칼슘 카보네이트, 감자 또는 타피오카(tapioca) 전분, 알긴산, 어떤 실리케이트, 및 나트륨 카보네이트, e) 용매 지연제 예컨대 파라핀, f) 흡수 촉진제 예컨대 4차 암모늄 화합물, g) 습윤제 예컨대, 예를 들어, 세틸 알콜 및 글리세롤 모노스테아레이트, h) 흡수제s 예컨대 카올린 및 벤토나이트클레이, 및 i) 윤활제 예컨대 탈크, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 고형 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 라우릴 설페이트 및 이의 혼합물. 캡슐, 정제 및 알약의 경우에, 투여 형태는 또한 완충제 예컨대 포스페이트 또는 카보네이트를 포함할 수 있다.

유사한 타입의 고형 조성물은 고분자량 폴리에틸렌 글리콜 등뿐만 아니라 락토스 또는 밀크 당(sugar)과 같은 부형제를 사용하여 연질 및 경질 충전 젤라틴 캡슐 중 충전제로서 사용될 수 있다. 정제, 당의정(dragee), 캡슐, 알약, 및 과립의 고체 투여 형태는 코팅정 및 셸락(shell) 예컨대 장용정, 및 약제학적 제형 기술에 공지된 다른 코팅정으로 제조될 수 있다. 임의로 불투명화제를 함유할 수 있고, 또한 활성 성분만을 우선적으로 장관의 어떤 부분에, 임의로 지연 방식으로 방출하는 조성물일 수 있다. 사용될 수 있는 임베딩(embedding) 조성물의 예는 폴리머성 물질 및 왁스를 포함한다. 유사한 타입의 고형 조성물은 고분자량 폴리에틸렌 글리콜 등뿐만 아니라 락토스 또는 밀크 당과 같은 부형제를 사용하여 연질 및 경질 충전 젤라틴 캡슐 중 충전제로서 사용될 수 있다.

활성 화합물은 또한 상기에서 언급한 바와 같이 하나 이상의 부형체를 갖는 마이크로캡슐화 형태일 수 있다. 정제, 당의정, 캡슐, 알약, 및 과립의 고체 투여 형태는 코팅정 및 셸락(shell) 예컨대 장용정, 및 약제학적 제형 기술에 공지된 다른 코팅정으로 제조될 수 있다. 그와 같은 고체 투여 형태에서, 활성 화합물은 적어도 하나의 불활성 희석제 예컨대 수크로스, 락토스 또는 전분과 혼합될 수 있다. 그와 같은 투여 형태는 또한, 정상 실시에서와 같이 불활성 희석제 이외의 부가 물질, 예를 들어, 정제 윤활제, 및 마그네슘 스테아레이트 및 미결정 셀룰로오스와 같은 다른 정제 보조제를 포함할 수 있다. 캡슐, 정제 및 알약의 경우에, 투여 형태는 또한 완충제를 포함할 수 있다. 임의로 불투명화제를 함유할 수 있고, 또한 활성 성분만을 우선적으로 장관의 어떤 부분에, 임의로 지연 방식으로 방출하는 조성물일 수 있다. 사용될 수 있는 임베딩(embedding) 조성물의 예는 폴리머성 물질 및 왁스를 포함한다.

본 발명의 화합물의 국소 또는 경피 투여를 위한 투여 형태는 연고, 페이스트(paste), 크림, 로션, 겔, 분말, 용액, 스프레이, 흡입기 또는 패치(patch)를 포함한다. 활성 성분은 살균 조건 하에서 약제학적으로 허용가능한 담체와 혼합되고 어떤 필요 보존제 또는 완충용액이 필요할 수 있다. 안과 제형, 귀 점적약(點滴藥), 및 눈 점적약(點滴藥) 은 또한 본 발명의 범위 내에서 고려된다. 추가적으로, 본 발명은 화합물의 신체에의 조절된 전달을 제공하는 추가 이점을 갖는 경피 패치의 사용을 고려한다. 그와 같은 투여 형태는 적당한 매체에서 화합물을 용해 또는 분산시킴으로써 제조될 수 있다. 흡수 촉진제는 또한 피부 전체에 화합물의 흐름을 증가시키기 위해 사용될 수 있다. 속도는 또한 속도 조절 멤브레인을 제공하거나 폴리머 매트릭스 또는 겔에 화합물을 분산시킴으로써 조절될 수 있다.

일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 정맥내에 투여된다. 그와 같은 구현예에서, Z¹ 및 Z²가 함께 보론산 착화제로부터 유도된 부분을 형성하는 화학식 (I)의 화합물은 상기에 기재된 바와 같이 동결건조 분말의 형태로 제조될 수 있다. 동결건조 분말은 바람직하게는 약제학적 투여에 적합한 수성 용매를 첨가함으로써 재구성된다. 적당한 재구성 용매의 예는 비제한적으로 물, 염수, 및 포스페이트 식염 완충액(PBS)을 포함한다. 바람직하게는, 동결건조 분말은 보통(0.9%) 염수로 재구성된다. 재구성시, 평형은 보로네이트 에스테르 화합물 및 대응하는 유리 보론산 화합물 사이에 확립된다. 일부 구현예에서, 평형은 수성 매체의 추가 후 빨리, 예를 들어 10 내지 15분 내에 도달된다. 평형에 존재하는 보로네이트 에스테르 및 보론산의 상대 농도는 파라미터, 예를 들어, 용액의 pH, 온도, 보론산 착화제의 성질, 및 동결건조 분말에 존재하는 보론산 착화제 대 보로네이트 에스테르 화합물의 비에 의존한다.

본 발명의 약제학적 조성물은 바람직하게는 프로테아좀-매개 장애의 재발이 있거나, 발전 또는 경험할 위험이 있는 환자에 투여하기 위해 제형된다. 용어 "환자", 본 명세서에 사용된 바와 같이, 동물, 바람직하게는 포유동물, 더욱 바람직하게는 인간을 의미한다. 본 발명의 바람직한 약제학적 조성물은 경구, 정맥내, 또는 피하 투여용으로 제형된 것이다. 그러나, 본 발명의 화합물을 치료적 유효량으로 함유하는 상기의 어떤 투여 형태는 충분히 경로 실험의 범위 내에 있고, 따라서, 본 발명의 범위 내에 있다. 일부 구현예에서, 본 발명의 약제학적 조성물은 다른 치료제를 추가로 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 그와 같은 다른 치료제는 치료될 질환 또는 상태에 있는 환자에 보통 투여되는 것이다.

"치료적 유효량"이란 프로테아좀-매개 장애의 프로테아좀 활성 또는 심각도의 탐지가능한 감소를 야기하는데 충분한 양이다. 필요한 프로테아좀 억제제의 양은 주어진 세포 유형에 대한 억제제의 유효성 및 장애를 치료하는데 필요한 시간에 좌우될 것이다. 어떤 특정 환자에 대한 구체적인 투여량 및 치료 계획은 이용된 특정 화합물의 활성, 환자의 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별, 및 다이어트, 투여 시간, 배출 속도, 약물 조합, 치료 의사의 판단, 및 치료될 특정 질환의 심각도를 포함하는 다양한 인자에 좌우된다는 것을 이해해야 한다. 본 발명의 조성물에 존재하는 추가 치료제의 양은 유일한 활성제로서 치료제를 포함하는 조성물 내에 보통 투여되는 양보다 적을 것이다. 바람직하게는, 추가 치료제의 양은 유일한 치료적 활성제로서 제제를 포함하는 조성물에 보통 존재하는 양의 약 50% 내지 약 100%의 범위일 것이다.

다른 측면에서, 본 발명은 프로테아좀-매개 장애의 재발이 있거나, 발전 또는 경험할 위험이 있는 환자를 치료하는 방법을 제공한다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "프로테아좀-매개 장애" 는 프로테아좀 발현 또는 활성의 증가에 의해 야기되거나 특징으로 하고, 또는 프로테아좀 활성을 필요로 하는 어떤 장애, 질환 또는 상태를 포함한다. 용어 "프로테아좀-매개 장애"는 또한 프로테아좀 활성의 억제가 유익한 어떤 장애, 질환 또는 상태를 포함한다.

예를 들어, 화합물 및 본 발명의 약제학적 조성물은 프로테아좀 활성에 의해 조절되는, 단백질(예를 들어, NFκB, p27^Kip, p21^WAF ^/ ^CIP1, p53)을 통해 매개된 장애의 치료에 유용하다. 관련 장애는 하기를 포함한다: 염증성 장애 (예를 들어, 류마티스성 관절염, 염증성 장질환, 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 골관절염, 피부병 (예를 들어, 아토피 피부염, 건선)), 혈관 증식성 장애 (예를 들어, 죽상동맥경화증, 재협착), 증식성 안구 장애 (예를 들어, 당뇨성 망막증), 양성 증식성 장애 (예를 들어, 혈관종), 자기면역성 질환 (예를 들어, 다발성 경화증, 조직 및 기관(器官) 거부반응), 및 감염 관련 염증 (예를 들어, 면역반응), 퇴행성신경 장애 (예를 들어, 알츠하이머병, 파킨슨병, 운동신경원성 질환, 신경병증성 통증, 삼중 반복 장애, 성상세포종, 및 알콜성 간 질환의 결과로서 신경퇴화), 허혈손상 (예를 들어, 발작), 및 악액질 (예를 들어, 다양한 생리적 및 병리적 상태 (예를 들어, 신경 손상, 단식, 열병, 산과다증, IDV 감염, 암 고통, 및 어떤 내분비계 질환)을 수반하는 근육 단백질 가속분해).

화합물 및 본 발명의 약제학적 조성물은 암의 치료에 특히 유용하다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "암"은 비(非)억제 또는 비(非)조절 세포 증식, 감소된 세포 분화, 주위 조직에 침입하기 위한 부적당한 능력, 및/또는 이소성 부위에서 신규 성장을 확립하기 위한 능력을 특징으로 하는 세포 장애를 의미한다. 용어 "암"은 비제한적으로 고형 종양 및 혈액성 종양을 포함한다. 용어 "암"은 피부, 조직, 기관(器官), 뼈, 연골, 혈액, 및 관(管)의 질환을 포함한다. 용어 "암"은 또한 원발성 암 및 전이 암을 포함한다.

개시된 프로테아좀 억제제로 치료될 수 있는 고형 종양의 비제한적인 예는 하기를 포함한다: 췌장 암; 방광 암; 직장 암; 유방 암 (전이성 유방 암 포함); 전립선 암, (안드로겐 의존적 및 안드로겐 독립적 전립선 암 포함); 신장 암(예를 들어, 전이성 신장 세포 암종 포함); 간세포 암; 폐암 (예를 들어, 비소세포 폐암(NSCLC), 세기관지 암종 (BAC), 및 폐의 선암 포함); 난소 암 (예를 들어, 진행성 상피암 또는 원발성 복막암 포함); 자궁경부 암; 위암; 식도 암; 두경부암 (예를 들어, 두경부의 편평상피 세포 암종 포함); 흑색종; 내경내분비 암(전이성 내경내분비 종양 포함); 뇌 종양 (예를 들어, 신경교종, 성희돌기교세포종, 성인 다형교모세포종, 및 성인 역형성 성상세포종 포함); 골수암; 및 염부조직육종.

개시된 프로테아좀 억제제로 치료될 수 있는 혈액 종양의 비제한적인 예는 하기를 포함한다: 급성 골수성 백혈병 (AML); 만성 골수성 백혈병 (CML) (가속 CML 및 CML 급성기 (CML-BP) 포함); 급성 림프구성 백혈병 (ALL); 만성 림프성 백혈병 (CLL); 호지킨(Hodgkin)병 (HD); 비(非)호지킨병 림프종 (NHL) (모낭 림프종 및 여포성 림프종 포함); B-세포 림프종; T-세포 림프종; 다발성 골수종 (MM); 왈덴스트룀 마크로글로불린혈증(Waldenstrom's macroglobulinemia); 골수이형성 증후군 (MDS)(불응성 빈혈 (RA), 고리모양 모세포 불응성 빈혈 (RARS), (과다 모세포 불응성 빈혈(RAEB), 및 변형 중 과다 모세포 불응성 빈혈(RAEB-T) 포함); 및 골수증식성 증후군.

일부 구현예에서, 본 발명의 화합물 또는 조성물은 다발성 골수종 및 여포성 림프종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 암의 재발이 있거나, 발전 또는 경험할 위험이 있는 환자를 치료하기 위해 사용된다.

일부 구현예에서, 본 발명의 프로테아좀 억제제는 다른 치료제와 함께 투여된다. 다른 치료제는 또한 프로테아좀을 억제할 수 있고, 또는 상이한 메카니즘에 의해 작용할 수 있다. 일부 구현예에서, 다른 치료제는 치료될 질환 또는 상태에 있는 환자에 보통 투여되는 것이다. 본 발명의 프로테아좀 억제제는 단일 투여 형태로 또는 개별적인 투형 형태로서 다른 치료제와 함께 투여될 수 있다. 개별 투형 형태로 투여될 때, 다른 치료제는 본 발명의 프로테아좀 억제제보다 전에, 동시에 또는 그 다음에 투여될 수 있다.

일부 구현예에서, 화학식 (I)의 프로테아좀 억제제는 항암제와 함께 투여된다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "항암제"는 암을 치료하기 위한 목적으로 암이 있는 대상체에 투여되는 어떤 제제를 의미한다.

DNA 손상 화학요법제의 비제한적인 예는 하기를 포함한다: 토포아이소머라제 I 억제제 (예를 들어, 이리노테칸, 토포테칸, 캄포테신 및 그의 유사물 또는 대사산물, 및 독소루비신); 토포아이소머라제 Ⅱ 억제제 (예를 들어, 에토포사이드, 테니소사이드, 및 다우노루비신); 알킬화제 (예를 들어, 멜파란, 클로람부실, 부술판, 티오테파, 이포스파마이드, 카르무스틴, 로무스틴, 메무스틴, 트르렙토조신, 데카르바진, 메토트렉세이트, 미토마이신 C, 및 시클로포르파마이드); DNA 인터칼레이터(intercalator) (예를 들어, 시스플라틴, 옥살리플라틴, 및 카보플라틴); DNA 인터칼레이터 및 유리 라디칼 제너레이터 (generator) 예컨대 블레오마이신; 및 뉴클레오시드 유사체 (예를 들어, 5-플루오로우라실, 카페시티빈, 젬시타빈, 플루다라빈, 시타라빈, 머캅토퓨린, 티오구아닌, 펜토스타틴, 및 히드록시우레아).

세포 복제를 못하게 하는 화학요법제는 하기를 포함한다: 파클리탁셀,도세탁셀, 및 관련 유사물; 빈크리스틴, 빈블라스틴, 및 관련 유사물; 탈리도마이드, 레날리도마이드, 및 관련 유사물 (예를 들어, CC-5013 및 CC-4047); 단백질 티로신 키나제 억제제 (예를 들어, 이마티닙 메실레이트 및 제피티닙); 프로테아좀 억제제 (예를 들어, 보르테조밉); NF-KB 억제제 (IKB 키나제의 억제제 포함; 암에서 과발현된 단백질에 결합되어 세포 복제를 하향조절하는 항체(예를 들어, 트라스투주맙, 리북시맙, 세툭시맙, 및 베바시주맙); 및 암에서 상향조절, 과발현 또는 활성화되는 것으로 공지된 단백질 또는 효소의 다른 억제제, 그의 억제는 세포 복제를 하향조절함.

본 발명을 더 완전히 이해하기 위해서, 하기 제조예 및 시험예를 기재했다. 이들 실시예는 특정 화합물을 어떻게 만들거나 시험하는 지를 설명하고, 어떤 식으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다.

[실시예]

약어

*DCM 메틸렌 클로라이드

DIEA 디이소프로필에틸 아민

EDCI N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카보디이미드 히드로클로라이드

EtOAc 에틸 아세테이트

h 시

HPLC 고성능 액체 크로마토그래피

TBTU o-벤조트리아졸-1-일-N,N,N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트

HOBt 1-히드록시벤즈트리아졸 히드레이트

LCMS 액체 크로마토그래피 질량 스펙트럼

min 분

tr 다이오드 어레이 스펙트럼으로부터의 체류시간

분석 LC - MS 방법

스펙트럼을, 하기 구배를 사용하여 Symmetry C18 - 3.5 μm - 4.6 × 50 mm 칼럼 상에서 수행한다:

용매 A: 2% 이소프로필 알콜, 98% 물, 1OmM NH₄OAc

용매 B: 75% 아세토니트릴, 25% 메탄올, 1OmM NH₄OAc

시간 [분]	유속 [ mL / min ]	용매 B 의 %
0.0	1.0	5.0
3.5	1.0	100.0
4.9	1.0	100.0
5.0	1.0	5.0

실시예 1: [(1R)-1-({[(2 _, 3- 디플루오로벤조일 )아미노]아세틸}아미노)-3- 메틸부틸]보론산·20D-만니톨(I-1)의 합성

단계 1: 메틸[(2,3- 디플루오로벤조일 )아미노]아세테이트

테트라히드로푸란 (5 mL) 중 2,3-디플루오로벤조산 (0.190 g, 1.2 mmol)의 용액에 글리신 메틸 에스테르 히드로클로라이드 (0.150 g, 1.2 mmol), HOBt (0.162 g, 1.2 mmol), DIEA (0.209 mL, 1.2 mmol) 및 EDCI (0.252 g, 1.3 mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 밤새 교반했다. 반응 혼합물을 중탄산나트륨의 포화 용액으로 급랭시키고, 생성물을 DCM 으로 분할했다. 유기 층을 분리한 다음, 용매를 제거하여 메틸 [(2,3-디플루오로벤조일)아미노]아세테이트를 얻었는데, 이는 정제없이 다음 단계에 사용되었다.

단계 2: [(2,3- 디플루오로벤조일 )아미노]아세트산

메탄올 (7 mL) 중 메틸 [(2,3-디플루오로벤조일)아미노]아세테이트 (0.250 g, 1.1 mmol)의 용액에 리튬 히드록시드 (0.053 g, 2.2 mmol) 및 물 (3 mL)을 첨가했다. 반응 혼합물을 밤새 교반했다. 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고, 1N HCl (5 mL)로 산성화했다. 생성물을 DCM/메탄올 (4:1)으로 분할했다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조하고, 용매를 제거하여 [(2,3-디플루오로벤조일)아미노]아세트산을 얻었는데, 이는 다음 단계에서 정제없이 사용되었다.

단계 3: 2,3- 디플루오로 -N-[2-({(1R)-3- 메틸 -1-[((3 aR ,4R,6R,7 aS )-3a,5,5- 트리메틸헥사히드로-4,6-메타노-1,3,2-벤조디옥사보롤-2-일]부틸}아미노)-2-옥소에틸]벤즈아미드

디메틸포름아미드 (10 mL) 중 [(2,3-디플루오로벤조일)아미노]아세트산 (0.205 g, 0.95 mmol)의 용액에 TBTU (0.337 g, 1.0 mmol) 및 (1R)-3-메틸-1-[(3aS,4S,6S,7aR)-3a,5,5-트리메틸헥사히드로-4,6-메타노-1,3,2-벤조디옥사보롤-2-일]부탄-1-아민을 트리플루오로아세테이트 염 (0.362 g, 0.95 mmol)으로서 첨가했다. 혼합물을 0 ℃ 로 냉각하고 및 DIEA (0.498 mL, 2.9 mmol)을 적가했다. 반응 혼합물을 실온으로 따뜻하게 하고, 밤새 교반했다. 반응물을 물 (100 mL)로 급랭시키고, 생성물을 DCM 으로 분할했다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조하고, 용매를 제거하여 2,3-디플루오로-N-[2-(([(1R)-3-메틸-1-[(3aR,4R,6R,7aS)-3a,5,5-트리메틸헥사히드로-4,6-메타노-1,3,2-벤조디옥사보롤-2-일]부틸)아미노)-2-옥소에틸]벤즈아미드를 얻었다.

단계 4: [(1R)-1-({(2,3- 디플루오로벤조일 )아미노]아세틸}아미노)-3- 메틸부틸]보론산

메탄올/1N HCl (1:1) (1.5 mL) 중 2,3-디플루오로-N-[2-({(1R)-3-메틸-1-[(3aR,4R,6R,7aS)-3a,5,5-트리메틸헥사히드로-4,6-메타노-1,3,2-벤조디옥사보롤-2-일]부틸)아미노)-2-옥소에틸]벤즈아미드 (0.536 g, 1.2 mmol)의 용액에 헵탄올 (1 mL) 및 이소부틸 보로네이트 (0.207 g, 2.0 mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 밤새 교반했다. 헵탄올 층을 분리하고 메탄올/HCl 층을 농축했다. 조 생성물을 역상 HPLC 로 정제하여 [(1R)-1-({[(2,3-디플루오로벤조일)아미노]아세틸 )아미노)-3-메틸부틸]보론산을 얻었다.

단계 5: [(1R)-1-({[(2,3- 디플루오로벤조일 )아미노]아세틸}아미노)-3- 메틸부틸]보론산·20D-만니톨(I-1)의 합성

t-부틸 알콜 (2 mL) 및 물 (5 mL) 중 [(1R)-1-({[(2,3-디플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산 (0.085 g, 0.26 mmol)의 용액에 D-만니톨 (0.943 g, 5.2 mmol)을 첨가했다. 용액을 따뜻하게 하고, 모두가 용해될 때까지 교반했다. 그 다음, 용액을 냉동시키고, 용매를 동결건조로 제거하여 [(1R)-1-({[(2,3-디플루오로벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산·20D-만니톨(I-1) (0.98 g, 97 %)을 얻었다.

실시예 2: [(1R)-1-({[(2- 브로모벤조일 )아미노]아세틸)아미노)-3- 메틸부틸 ]보론산·20D-만니톨(I-5)의 합성

단계 1: tert -부틸 [2-({( lR )-3- 메틸 -1-[3 aS ,4S,6S,7 aR )-3a,5,5- 트리메틸헥사히드로-4,6-메타노-1,3,2-벤조디옥사보롤-2-일]부틸}아미노)-2-옥소에틸]카바메이트

DCM (100 mL) 중 트리플루오로아세테이트 염 (4.9 g, 10.8 mmol)으로서의 (1R)-3-메틸-1-[(3aS,4S,6S,7aR)-3a_,5_,5-트리메틸헥사히드로-4_,6-메타노-1,3,2-벤조디옥사보롤-2-일]부탄-1-아민, N-·-(tert-부톡시카보닐)글리신 (1.98 g, 11.3 mmol) 및 TBTU (3.81 g, 11.9 mmol)의 혼합물에 DCM (25 mL) 중 DIEA (5.64 mL, 32.4 mmol)의 용액을 15분에 걸쳐 적가했다. 반응 혼합물을 밤새 교반하고, 농축했다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 [2-({(1R)-3-메틸-1-[(3aS_,4S_,6S_,7aR)-3a,5,5-트리메틸헥사히드로-4,6-메타노-1_,3_,2-벤조디옥사보롤-2-일]부틸}아미노)-2-옥소에틸]카바메이트 (2.5 g, 55 %)를 얻었다.

단계 2: 2-아미노-N-{(1R)-3- 메틸 -1-[(3 aS ,4S,6S,7 aR )-3a,5,5- 트리메틸헥사히드로-4,6-메타노-1,3,2-벤조디옥사보롤-2-일]부틸}아세트아미드

DCM (15 mL) 중 tert-부틸 [2-({(1)-3-메틸-1-[(SaS,4S,6S,7aR)-3a,5,5-트리메틸헥사히드로-4,6-메타노-1,3,2-벤조디옥사보롤-2-일]부틸}아미노)-2-옥소에틸]카바메이트 (2.5 g, 5.9 mmol)의 용액에 디옥산 (5.9 mL) 중 4M HCl을 첨가했다. 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하고 농축하여 2-아미노-N-{(lR)-3-메틸-1-[(3aS,4S_,6S_,7aR)-3a,5,5-트리메틸헥사히드로-4_,6-메타노-1,3,2-벤조디옥사보롤-2-일]부틸}아세트아미드를 얻었는데, 이는 다음 단계에서 정제없이 사용되었다.

단계 3: 2- 브로모 -N-[2-({( lR )-3- 메틸 -1-f(3 aS ,4S,6S,7 aR )-3a,5,5- 트리메틸헥사히드로-4,6-메타노-1,3,2-벤조디옥사보롤-2-일]}아미노)-2-옥소에틸]벤즈아미드

DCM (2.25 mL) 중 2-브로모벤조산 (0.124 g, 0.62 mmol)의 용액에 EDCI (0.119 g, 0.62 mmol), HOBt (0.084 g, 0.62 mmol), N-메틸 모르폴린 (0.185 mL, 1.68 mmol) 및 2-아미노-N-{(1R)-3-메틸-1-[(3aS,4S,6S_,7aR)-3a,5,5-트리메틸헥사히드로-4,6-메타노-1,3,2-벤조디옥사보롤-2-일]부틸}아세트아미드 (0.2 g, 0.56 mmol)을 첨가했다. 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하고, 농축했다. 잔류물을 물로 희석하고, EtOAc로 추출했다. 유기 용액을 조합하고, 염수로 세정하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 농축했다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-N-[2-({(1R)-3-메틸-1-[(3aS,4S,6S,7aR)-3a,5,5-트리메틸헥사히드로-4,6-메타노-1,3_,2-벤조디옥사보롤-2-일]부틸}아미노)-2-옥소에틸]벤즈아미드 (0.22 g, 78 %)를 얻었다.

단계 4: [(1R)-1-({[(2- 브로모벤조일 )아미노]아세틸}아미노)-3- 메틸부틸 ] 보론산

메탄올/헥산 (1:1) (2.2 mL) 중 2-브로모-N-[2-({(1R)-3-메틸-1-[(3aS,4S,6S,7aR)-3aA5-트리메틸헥사히드로-4,6-메타노-1,3,2-벤조디옥사보롤-2-일]부틸}아미노)-2-옥소에틸]벤즈아미드 (0.220 g, 0.44 mmol)의 용액에 1N HCl (1 mL, 1.0 mmol) 및 이소부틸 보로네이트 (0.078 g, 0.76 mmol)을 첨가했다. 반응 혼합물을 밤새 교반했다. 반응 혼합물을 농축하고 역상 HPLC 로 정제하여 [(1R)-1-({[(2-브로모벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산 (0.119 g, 73 %)을 얻었다.

단계 5: [(1R)-1-({[2- 브로모벤조일 )아미노]아세틸}아미노)-3- 메틸부틸 ] 보론산·20D-만니톨(I-5)의 제조

tert-부틸 알콜 (9 mL) 및 물 (15 mL) 중 [(1R)-1-({[(2-브로모벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산 (0.103 g, 0.28 mmol)의 용액에 D-만니톨 (1.01 g, 5.5 mmol)을 첨가했다. 용액을 따뜻하게 하고, 모두가 용해될 때까지 교반했다. 그 다음, 용액을 냉동시키고, 용매를 동결건조로 제거하여 [(1R)-1-({[(2-브로모벤조일)아미노]아세틸}아미노)-3-메틸부틸]보론산·20D-만니톨(I-5) (0.92 g, 84 %)을 얻었다.

하기 표의 화합물을, 실시예 1 또는 2와 유사한 방법으로 적당한 개시 물질로부터 제조했다.

실시예 2: 2 OS 프로테아좀 분석

DMSO 에 용해된 1 ㎕의 테스트 화합물에, 384-웰백 마이크로티터 플레이트(well black microtiter plate)에서 Ac-WLA-AMC (β5 선택절 기질) (15 μM 최종)을 갖는 인간 PA28 활성제 (Boston Biochem, 12 nM 최종)를 37℃에서 함유하는 25 ㎕의 분석 완충용액를 첨가하고, 그 다음, 37℃에서 인간 20S 프로테아좀 (Boston Biochem, 0.25 nM 최종)을 함유하는 25 ㎕의 분석 완충용액을 첨가했다. 분석 완충용액은 20 mM HEPK, 0.5 mM EDTA 및 0.01% BSA (pH 7.4)로 구성된다. 반응은 BMG Galaxy 플레이트 리더 (37℃, 여기 380 nm, 방출 460 nm, 증폭률 20) 상에서 수행된다. 억제율 %는 0% 억제율 (DMSO) 및 100% 억제율 (10 μM 보르테조밉(bortezomib)) 대조군에 대해 계산된다.

이러한 분석에서 테스트될 때, 화합물 I-1 내지 I-21 모두는 5O nM 미만의 IC₅₀ 값을 보여주었다.

실시예 3: 항증식 분석

10% 소태아 혈청 (Invitrogen)이 보충된 100 ㎕의 알맞은 세포 배양 매질(McCoy's 5A for HCT-116, Invitrogen) 중 HCT-116 (1000) 또는 다른 종양 세포를 96-웰 세포 배양판의 웰에서 시드(seed)하고, 37℃에서 밤새 배양했다. 테스트 화합물을 상기 웰에 첨가하고, 플레이트를 37℃에서 96시간 동안 배양했다. MTT 또는 WST 시약 (10μL, Roche)을, 제조자에 의해 기재된 바대로 각 웰에 첨가하고, 37℃에서 4시간 동안 배양했다. MTT에 대해서 대사화 염료를 제조자의 지침(Roche)에 따라 밤새 가용화한다. 각 웰에 대한 광학 밀도는 분광광도계 (Molecular Devices)를 사용하여 MTT에 대해서 595 nm (최초) 및 690 nm (참조)를 나타내고, WST에 대해서 450 nm 를 나타낸다. MTT 참조에 대해서, 광학 밀도 값은 최초 파장의 값으로부터 감한다. 억제율 %는 100% 로 설정된 DMSO 대조군으로부터의 값을 사용하여 계산된다.

실시예 4: 생체내 ( In vivo ) 종양 효능 모델

100 ㎕ 의 RPMI-1640 매질 (Sigma-Aldrich) 중 새롭게 분리된 HCT-116 (2-5×10⁶) 또는 다른 종양 세포를, 1 mL 26 3/8-ga 니들 (Becton Dickinson Ref#309625)을 사용하여 암컷 CD-I 누드 마우스(nude mouse) (5 내지 8 주령, Charles River)의 우측 등쪽 옆구리에 있는 피하 공간에 무균 주사했다. 대안적으로, 어떤 이종이식 모델은 종양 절편의 일련의 통과를 필요로 한다. 이 경우에, 종양 조직의 작은 절편(약 1 mm³)은 13-ga 투관침(套管針) (Popper & Sons 7927)을 통해 마취(3-5% 이소플로란/산소 혼합물)된 C.B-17/SCID 마우스 (5-8주령, Charles River)의 우측 등쪽 옆구리에 피하로 이식된다. 주사 후 7일에서 시작하여, 종양은 버니어캘리퍼(vernier caliper)를 사용하여 1주에 2회 측정된다. 종양 부피는 일반 절차(0.5 × (길이 × 폭²))로 계산된다. 종양이 약 200 mm³의 부피에 도달할 때, 마우스를 무작위로 치료 그룹에 포함시키고 약물 치료를 시작한다. 투여 및 스케줄은 약물역학/약력학 및 최대 내량(tolerated dose) 연구로부터 얻은 이전 결과를 근거로 한 각 실험에 대해 결정된다. 대조군 그룹은 어떤 약물없이 비히클(vehicle)을 받을 것이다. 전형적으로, 테스트 화합물 (100 내지 200 μL)은 다양한 투여량 및 스케줄로 정맥(27-ga 니들), 경구 (20-ga 위관영양 니들) 또는 피하 (27-ga 니들) 경로로 투여된다. 종양 크기 및 체중은 1주에 2회 측정되고, 연구는 대조군 종양이 약 2000 mm³에 도달할 때 종료된다.

상기 발명은 명확 및 이해를 위해서 일부 상세히 기재되었지만, 이들 특정 구현예는 설명하기 위한 것이지 제한하는 것은 아니다. 유형 및 세부사항에서의 다양한 변화는 특정 구현예에 의해보다 부가된 특허청구범위에 의해 정의되는 본 발명의 진정한 범위를 벗어나지 않으면서 행해질 수 있음을 상세한 설명으로부터 당업자는 인식할 것이다.

본 명세서에 참조된 특허 및 과학 문헌은 당업자가 이용할 수 있는 지식을 확립한다. 달리 정의되지 않으면, 본 명세서에 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 당업자가 통상적으로 이해하고 있는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본 명세서에 인용된 발행된 특허, 응용물 및 참조문헌은, 각각이 참고로 포함되는 것으로 구체적이고 개별적으로 나타낼지라도 동일한 정도로 참조로 본 명세서에 포함되어 있다. 불일치한 경우에, 정의를 포함하는 본 상세한 설명은 제어될 것이다.

Claims

하기 화학식 (iii)의 화합물:

상기 식에서,
PG는 보호기이다.
하기 화학식 (iiia)의 화합물:

.
하기 화힉식 (iv)의 화합물:

상기 식에서,
고리 A는 하기:

로 이루어진 군으로부터 선택된다.
제 3항에 있어서, 고리 A가
인 화합물.
하기 화학식 (vii)의 화합물:

상기 식에서,
PG는 보호기이고;
고리 A는 하기:

로 이루어진 군으로부터 선택된다.
제 5항에 있어서, 고리 A가
인 화합물.
하기 화학식 (viia)의 화합물:

상기 식에서,
고리 A는 하기:

로 이루어진 군으로부터 선택된다.
제 7항에 있어서, 고리 A가
인 화합물.