KR20140070545A - 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 공유 트레프로스티닐(treprostinil) 담체 접합체를 포함하는 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 상기 화합물을 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다. 상기 화합물은 특히, 트레프로스티닐에 의해 치료될 수 있는 질환 또는 장애, 예컨대, 폐 동맥 고혈압(PAH)을 위한 약제로서 사용될 수 있다.

Description

담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물{CARRIER-LINKED TREPROSTINIL PRODRUGS}
폐 동맥 고혈압(PAH)은 호흡곤란, 현기증, 기절 및 다른 증상(이들 모두 운동에 의해 악화됨)을 초래하는, 폐 동맥, 폐 정맥 또는 폐 모세혈관의 혈압 증가이다. PAH는 현저히 감소된 운동 내성 및 심장 기능상실을 갖는 중증 질환일 수 있다. 이 질환은 해마다 백만 명 당 약 2명 내지 3명의 발병률 및 백만 명 당 약 15명의 유병률을 갖는 희귀 질환이다. 치료되지 않은 PAH를 갖는 환자의 평균 생존은 진단 시기부터 2년 내지 3년의 범위 내에 있고, 사망 원인은 통상적으로 우심실 기능상실이다.
폐 동맥 고혈압은 폐와 연결된 혈관 및 폐 내에 있는 혈관의 혈관수축 또는 조임을 수반한다. 시간의 경과에 따라, 섬유증은 영향받은 혈관이 더 경직되고 더 두꺼워지게 하고, 이것은 폐 내의 혈압을 더 증가시키고 폐의 혈류를 손상시킨다. 추가로, 심장의 증가된 작업량은 궁극적으로 우심장 기능상실을 야기하는 우심실의 비대증을 야기한다. 폐를 통한 혈류가 감소되기 때문에, 심장의 좌측 면은 보다 적은 혈액을 제공받으므로, 산소 공급은 특히 물리적 활동 동안 요구되는 수준 미만이다.
다수의 약제들이 PAH의 치료를 위해 소개되었고, 이들 중 프로스타사이클린은 통상적으로 가장 효과적인 것으로 간주된다. 한 프로스타사이클린은 합성 프로스타사이클린이고 플로란(Flolan)®(글락소 스미쓰클라인(Glaxo SmithKline))으로서 시판되는 에포프로스테놀이다. 상기 프로스타사이클린은 연속 관주를 통해 환자에게 제공되고 패혈증 및 혈전증을 야기할 수 있는 반영구적 중추 정맥 카테터를 필요로 한다. 플로란®은 불안정하므로, 투여 동안 얼음 상에서 유지되어야 한다. 이것은 단지 3분 내지 5분의 반감기를 가지므로, 관주는 주야로 연속적이어야 하고, 임의의 중단은 치명적일 수 있다. 따라서, 플로란®을 사용한 PAH의 치료는 환자에게 큰 부담이다.
벤타비스(Ventavis)®(바이엘(Bayer))로서 시판되는 또 다른 프로스타사이클린인 일로프로스트(Iloprost)(일로메딘(Ilomedin))는 상표명 타이바소(TYVASO®(유나이티드 쎄라퓨틱스(United Therapeutics)) 하에 시판되는 트레프로스티닐(treprostinil)의 흡입 형태가 2009년 7월 FDA에 의해 승인을 받을 때까지 미국 및 유럽에서 사용 승인을 받은 프로스타사이클린의 유일한 흡입 형태이었다.
흡입 프로스타사이클린은 투약 기간 전체에 걸쳐 약물의 전체적으로 효과적인 혈장 수준을 제공하지 않아 중증 환자에서 흡입 치료를 덜 바람직하게 만든다는 결점을 갖는다.
따라서, 예를 들면, 미국 특허 제4306075A호 및 유럽 특허 제159784B1호에 기재된 바와 같이 다른 프로스타노이드를 개발할 필요가 있었다. 이러한 프로스타글란딘 중 하나는 상표명이 레모듈린(Remodulin)®(유나이티드 쎄라퓨틱스)인 트레프로스티닐이다. 트레프로스티닐의 반감기는 4시간이지만, 트레프로스티닐은 환자가 항상 착용해야 하는 관주 펌프를 통한 연속 피하 관주 또는 연속 정맥내 관주로서 투여될 것을 여전히 필요로 한다.
트레프로스티닐의 피하 관주는 환자가 통증을 견딜 수 없어 결과적으로 투여 방식이 정맥내 관주로 전환될 정도까지 종종 고통스럽다. 그러나, 정맥내 레모듈린에 의한 패혈증의 증가된 위험이 보고되어 있다. 피하 관주는 통증과 관련되어 있기 때문에, 감소된 통증률로 피하 투여에 의해 투여될 수 있는 프로스타사이클린을 개발할 필요가 있다. 이것은 자유 프로스타사이클린 분자에의 피하 노출이 최소화될 정도로 전구약물의 흡수가 충분히 빠르고 전구약물로부터의 프로스타사이클린의 방출이 충분히 느린 프로스타사이클린의 담체-연결된 전구약물을 투여함으로써 달성될 수 있다.
프로스타사이클린은 특히 보다 중증 환자에서 PAH의 표준 치료이다. 흡입 트레프로스티닐이 보다 편리하고 피하 관주된 트레프로스티닐과 종종 관련된 강력한 통증을 갖지 않지만, 흡입은 덜 효과적인 것으로 간주되므로 더 낮은 빈도로 처방된다.
트레프로스티닐은 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00001
따라서, 보다 효과적이고/이거나 보다 편한 트레프로스티닐 치료를 환자에게 제공할 필요가 존재한다.
이 목적은 하기 화학식 I의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염에 의해 달성된다:
Figure pct00002
상기 식에서,
T는 하기 화학식 i 내지 v로부터 각각 독립적으로 선택되고:
Figure pct00003
Figure pct00004
Figure pct00005
Figure pct00006
Figure pct00007
[상기 식에서, 파선(dashed line)은 X0에의 부착을 표시한다];
y는 1 내지 64, 바람직하게는 1 내지 16의 정수이고, 보다 바람직하게는 y는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 및 16으로부터 선택되고, 훨씬 더 바람직하게는 y는 4, 6 또는 8, 가장 바람직하게는 8이고;
X0은 각각 독립적으로 (X0A)m1-(X0B)m2이고;
m1 및 m2는 독립적으로 0 또는 1이고;
XOA는 T0이고;
XOB는 동일하거나 상이한 하나 이상의 R3으로 치환되거나 비치환된 분지된 또는 비분지된 또는 환형 C1 -15 알킬렌 기이고, 보다 바람직하게는 XOB는 동일하거나 상이한 하나 이상의 R3으로 치환되거나 비치환된 분지된 또는 비분지된 환형 C1 -15 알킬렌 기이고;
R3은 할로겐, C1-6 알킬, CN, C(0)R4, C(0)OR4, OR4, C(0)R4, C(0)N(R4R4a), S(0)2N(R4R4a), S(0)N(R4R4a), S(0)2R4, S(0)R4, N(R4)S(0)2N(R4aR4b), SR4, N(R4R4a), N02, OC(0)R4, N(R4)C(0)R4a, N(R4)S02R4a, N(R4)S(0)R4a, N(R4)C(0)N(R4aR4b), N(R4)C(0)OR4a, OC(0)N(R4R4a), 또는 T0이고;
R4, R4a 및 R4b는 H, T0, C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 이때 C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 R5로 치환되고;
R5는 할로겐, CN, C(0)R6, C(0)OR6, OR6, C(0)R6, C(0)N(R6R6a), S(0)2N(R6R6a), S(0)N(R6R6a), S(0)2R6, S(0)R6, N(R6)S(0)2N(R6aR6b), SR6, N(R6R6a), N02, OC(0)R6, N(R6)C(0)R6a, N(R6)S02R6a, N(R6)S(0)R6a, N(R6)C(0)N(R6aR6b), N(R6)C(0)OR6a 또는 OC(0)N(R6R6a)이고;
R6, R6a 및 R6b는 H, C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 이때 C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
T0은 페닐, 나프틸, 아줄레닐, 인데닐, 인다닐, C3-7 사이클로알킬, 3원 내지 7원 헤테로사이클릴 또는 8원 내지 11원 헤테로비사이클릴이고, 이때 T0은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 R7로 치환되고;
R7은 할로겐, CN, COOR8, OR8, C(0)R8, C(0)N(R8R8a), S(0)2N(R8R8a), S(0)N(R8R8a), S(0)2R8, S(0)R8, N(R8)S(0)2N(R8aR8b), SR8, N(R8R8a), N02, OC(0)R8, N(R8)C(0)R8a, N(R8)S(0)2R8a, N(R8)S(0)R8a, N(R8)C(0)OR8a, N(R8)C(0)N(R8aR8b), OC(0)N(R8R8a) 또는 옥소(=O)이고, 이때 고리는 적어도 부분적으로 포화되거나, C1-6 알킬, C2-6 알케닐 또는 C2-6 알키닐이고, 이때 C1-6 알킬, C2-6 알케닐 및 C2-6 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 R9로 치환되고;
R8, R8a 및 R8b는 H, C1-6 알킬, C2-6 알케닐 및 C2-6 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 이때 C1-6 알킬, C2-6 알케닐 및 C2-6 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 R10으로 치환되고;
R9 및 R10은 할로겐, CN, C(0)R11, C(0)OR11, OR11, C(0)R11, C(0)N(R11R11a), S(0)2N(R11R11a), S(0)N(R11R11a), S(0)2R11, S(0)R11, N(R11)S(0)2N(R11aR11b), SR11, N(R11R11a), N02, OC(0)R11, N(R11)C(0)R11a, N(R11)S02R11a, N(R11)S(0)R11a, N(R11)C(0)N(R11aR11b), N(R11)C(0)OR11a 및 OC(0)N(R11R11a)로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R11, R11a 및 R11b는 H, C1-6 알킬, C2-6 알케닐 및 C2-6 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 이때 C1-6 알킬, C2-6 알케닐 및 C2-6 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
Z1은 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함하는 담체이고, 이때 m1 및 m2 중 하나가 1인 경우 상기 담체는 모이어티(moiety) X0에 공유부착되고, m1 및 m2가 0인 경우 상기 담체는 T에 공유부착된다.
놀랍게도, 이러한 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 상기 언급된 단점들을 적어도 부분적으로 극복하는 트레프로스티닐의 투약 제형을 수득하는 데에 사용될 수 있다는 것을 발견하였다.
도 1은 총 트레프로스티닐 함량에 비해 방출된 % 트레프로스티닐로서 표현된, 상이한 시점에서 완충제 및 완충된 래트 혈장에서의 트레프로스티닐 방출을 보여준다(실시예 29 참조).
도 2는 피하 주사 후 원숭이에서 트레프로스티닐 접합체 25의 순환이 2주 초과의 기간 동안 연장 지속된다는 것을 보여준다(실시예 30 참조).
도 3은 화합물 25의 단회 투여량 정맥내 주사, 및 총 트레프로스티닐 및 담체 함량에 대한 후속 혈장 분석을 보여준다(실시예 30 참조).
도 4는 화합물 25의 단회 투여량 정맥내 주사, 및 자유 트레프로스티닐에 대한 후속 혈장 분석을 보여준다(실시예 32 참조).
도 5는 화합물 25의 단회 투여량 피하 주사, 및 자유 트레프로스티닐에 대한 후속 혈장 분석을 보여준다(실시예 32 참조).
본 발명 내에서 다음과 같은 의미를 갖는 용어들이 사용된다.
용어 "약물", "생물학적 활성 분자", "생물학적 활성 모이어티", "생물학적 활성 약제", "활성 약제", "활성 물질" 등은 바이러스, 세균, 진균, 식물, 동물 및 인간을 포함하나 이들로 한정되지 않는 생물학적 유기체의 임의의 물리적 또는 생화학적 성질에 영향을 미칠 수 있는 임의의 물질을 의미한다. 구체적으로, 본원에서 사용된 바와 같이, 상기 용어들은 유기체, 구체적으로 인간 또는 다른 동물에서 질환을 진단하거나, 치유하거나, 경감하거나, 치료하거나 예방하기 위한, 또는 유기체, 구체적으로 인간 또는 동물의 신체적 또는 정신적 복지를 다른 방식으로 향상시키기 위한 임의의 물질을 포함한다. 트레프로스티닐은 생물학적 활성 분자인 것으로 이해된다.
"생물학적 활성 모이어티 D"는 절단 후 공지된 생물학적 활성의 약물 D-OH 또는 D-H를 발생시키는 약물 연결제(linker) 접합체의 부분을 의미한다. 따라서, "생물학적 활성 모이어티 트레프로스티닐" 또는 ""트레프로스티닐 모이어티"는 절단 후 공지된 생물학적 활성의 약물 트레프로스티닐을 발생시키는 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 부분을 의미한다.
약물, 예컨대, 트레프로스티닐의 "자유 형태"는 그의 비변경된 약리학적 활성 형태, 예컨대, 담체-연결된 전구약물로부터 방출된 후의 약물을 지칭한다.
표적화 모이어티는 분자, 예를 들면, 전구약물에 존재할 때 이것이 투여된 유기체의 특정 표적 영역에서 이러한 보다 큰 분자의 우선적인 국소화를 가능하게 하는 모이어티이다. 이러한 특정 표적 영역은 장기, 일부 세포 유형 또는 아세포 구획일 것이다. "우선적인 국소화"는 환자에게 투여된 생물학적 활성 모이어티의 5% 이상, 10%, 바람직하게는 20% 이상, 보다 바람직하게는 30% 이상이 상기 특정 표적 영역에 도달한다는 것을 의미한다.
표적화 모이어티는 크기에 따라 3개의 클래스로 나누어질 수 있다:
- 소분자 표적화 모이어티, 예를 들면, C-글루큐로나이드, 코발라민, 비타민, 예컨대, 엽산(폴레이트) 및 유사체 및 유도체, 탄수화물, 비스포스포네이트, N-아세틸갈락토사민,
- 펩티드, 예를 들면, 봄베신, 소마토스타틴, LHRH, EGF, VEGF, hCG, 황체형성 호르몬(LH)의 단편, 옥트레오타이드, 바프레오타이드, 란레오타이드, RC-3940 시리즈, 데카펩틸, 루프론, 졸라덱스, 세트로렐릭스, NGR 또는 RGD 모티프를 함유하거나 이들 모티프들로부터 유도된 펩티드 또는 펩티도미메틱(peptidomimetic), 예컨대, CNGRC(선형), GNGRG(환형), ACDC RGD CFCG(환형), CDCRGDCFC, CNGRC(환형), CRGDCGG, CNGRC, 또는 다른 펩티드, 예컨대, ATWLPPR, 트롬보스폰딘(TSP)-1 미메틱, (RGD 펩티도미메틱), CTTHWGFTLC, CGNKRTRGC, 뉴로펩티드 물질 P, SSP, Sar9, 물질 P의 Met(02)11 유사체, 콜레사이스토키닌(CCK), 코르티코트로핀 방출 호르몬/인자(CRH/CRF), 데르모르핀, FGF-2 또는 염기성 섬유모세포 성장인자, 갈라닌, 멜라놉신, 뉴로텐션, 환형 RGDfK 및 환형 RGDyV; 바람직하게는 봄베신, 소마토스타틴, LHRH, EGF, VEGF, hCG, 황체형성 호르몬(LH)의 단편, 옥트레오타이드, 바프레오타이드, 란레오타이드, RC-3940 시리즈, 데카펩틸, 루프론, 졸라덱스, 세트로렐릭스, NGR 또는 RGD 모티프를 함유하거나 이들 모티프들로부터 유도된 펩티드 또는 펩티도미메틱, 예컨대, CNGRC(선형), GNGRG(선형), ACDC RGD CFCG(선형), CDCRGDCFC, CNGRC(선형), CRGDCGG, CNGRC, 또는 다른 펩티드, 예컨대, ATWLPPR, 트롬보스폰딘(TSP)-1 미메틱, (RGD 펩티도미메틱), CTTHWGFTLC, CGNKRTRGC, 뉴로펩티드 물질 P, SSP, Sar9, 물질 P의 Met(02)11 유사체, 콜레사이스토키닌(CCK), 코르티코트로핀 방출 호르몬/인자(CRH/CRF), 데르모르핀, FGF-2 또는 염기성 섬유모세포 성장인자, 갈라닌, 멜라놉신, 뉴로텐션, 및
- 단백질 또는 거대분자 표적화 모이어티, 예를 들면, IL-2, GM-CSF, TNF-a, 트랜스페린, 면역글로불린, 아세틸화된 LDL, 락토페린(Lf)(락토트랜스페린으로도 지칭됨) 및 락토페리신(Lcin), 갬보지산(Gambogic acid)(GA).
원칙적으로, 세포 표면 수용체의 임의의 리간드는 유리하게는 표적화 모이어티로서 사용될 수 있다. 예를 들면, ATWLPPR 펩티드는 VEGF의 강력한 길항제이고, 트롬보스폰딘-1(TSP-1)은 내피세포에서 아폽토시스를 유도하고, RGD 모티프 모방체(mimic)는 인테그린 수용체를 차단하고, NGR 함유 펩티드는 아미노펩티다제 N을 억제하고, HWGF의 서열을 함유하는 환형 펩티드는 MMP-2 및 MMP-9를 선택적으로 억제한다. LyP-1 펩티드는 종양 림프관에 특이적으로 결합한다. 예시적 다른 리간드는 라이브러리 스크린으로부터 확인된 펩티드 리간드, 종양 세포 특이적 펩티드, 종양 세포 특이적 앱타머(aptamer), 종양 세포 특이적 탄수화물, 종양 세포 특이적 단일클론 또는 다중클론 항체, 항체의 Fab 또는 scFv(즉, 단일 쇄 가변 영역) 단편, 예를 들면, 전이성 암세포 상에서 특이적으로 발현되거나 독특하게 접근가능한 EphA2 또는 다른 단백질에 대해 유도된 항체의 Fab 단편, 조합 라이브러리로부터 유래된 유기 소분자, 성장인자, 예컨대, EGF, FGF, 인슐린 및 인슐린 유사 성장인자, 및 상동성 폴리펩티드, 소마토스타틴 및 그의 유사체, 트랜스페린, 지단백질 복합체, 담즙염, 셀렉팅(selecting), 스테로이드 호르몬, Arg-Gly-Asp 함유 펩티드, 레티노이드, 다양한 갈렉틴, δ-오피오이드 수용체 리간드, 콜레사이스토키닌 A 수용체 리간드, 안지오텐신 AT1 또는 AT2 수용체에 대해 특이적인 리간드, 퍼록시좀 증식제-활성화된 수용체 λ 리간드, β-락탐 항생제, 예컨대, 페니실린, 항균 약물을 포함하는 유기 소분자, 및 종양 세포의 표면 또는 감염성 유기체 상에서 우선적으로 발현된 수용체에 특이적으로 결합하는 다른 분자, 수용체 또는 다른 세포 표면 단백질의 결정 구조를 기초로 특정 수용체의 결합 포켓에 피팅되도록 디자인된 항균 약물 및 다른 약물, 종양 항원 또는 종양 세포의 표면 상에서 우선적으로 발현된 다른 분자의 리간드, 또는 이들 분자들 중 임의의 분자의 단편을 포함한다. 표적화 모이어티로서 작용할 수 있는 종양 특이적 항원의 예로는 에프린(Ephrin) 계열의 단백질의 구성원, 예컨대, EphA2의 세포외 에피토프가 있다. EphA2 발현은 정상 세포에서 세포-세포 연접(junction)으로 제한되지만, EpbA2는 전이성 종양 세포에서 전체 세포 표면 상에 분포되어 있다. 따라서, 전이성 세포 상의 EpbA2는 예를 들면, 면역원에 접합된 항체의 Fab 단편과의 결합을 위해 접근될 수 있을 것인 반면, 상기 단백질은 정상 세포 상의 Fab 단편과의 결합을 위해 접근될 수 없을 것이므로, 전이성 암세포에 대해 특이적인 표적화 모이어티가 된다.
이러한 표적화 모이어티의 추가 예는 다음과 같다: FSH-33, 알라토스타틴 1, 간암종 표적화 펩티드, 펩티드 GFE, 항-EGFR 항체 및/또는 항체 단편, 구체적으로 세툭시맙, CendR, iRGD 펩티드(RGD-CendR 하이브리드 펩티드), 소분자, 암 특이적 에피토프, 예를 들면, CEA에 결합하는 항체 및/또는 항체 단편, 가스트린 방출 펩티드 수용체, 소마토스타틴 수용체, 갈라닌 수용체, 여포 자극 호르몬 수용체, p32 단백질, 섬유모세포 성장인자 수용체, HepG2, 표피 성장인자 수용체, 인테그린 ανβ6, 뉴로필린-1 수용체 및 VEGF 수용체.
어구 "결합된 형태", "에 연결된" 또는 "모이어티"는 보다 큰 분자의 부분인 하위구조를 지칭한다. 어구 "결합된 형태" 및 "에 연결된"은 당분야에서 잘 공지된 시약, 출발 물질 또는 가상 출발 물질을 열거하거나 나열함으로써 모이어티의 언급을 단순화하기 위해 사용되므로, "결합된 형태" 또는 "에 연결된"은 예를 들면, 시약 또는 출발 물질에 존재하는 하나 이상의 수소 라디칼(-H) 또는 하나 이상의 활성화 기 또는 보호기가 큰 분자의 부분일 때 모이어티에 존재하지 않는다는 것을 의미한다.
생체내 약물의 물리화학적 또는 약동학적 성질을 향상시키기 위해, 이러한 약물을 담체와 접합시킬 수 있다. 본 발명에서와 같이 약물, 예컨대, 트레프로스티닐이 담체 및/또는 연결제에 일시적으로 결합되어 있는 경우, 이러한 시스템은 통상적으로 "담체-연결된 전구약물"로서 배정된다. (2011년 3월 7일자로 접속되는 웹(http://www.chem.qmul.ac.uk/iupac/medchem/ah.html) 하에 제시된 바와 같은) IUPAC에 의해 제공된 정의에 따르면, 담체-연결된 전구약물은 개선된 물리화학적 또는 약동학적 성질을 생성하고 통상적으로 가수분해 절단에 의해 생체내에서 용이하게 제거될 수 있는 일시적 담체 기와 주어진 활성 물질의 일시적 연결을 함유하는 전구약물이다.
용어 "전구모이어티"는 약물이 아닌 전구약물 부분을 지칭하므로, 연결제 및 담체, 및/또는 임의의 임의적 스페이서 모이어티를 의미한다.
용어 "가역적 전구약물 연결제" 또는 "일시적 전구약물 연결제"는 예를 들면, 1시간 내지 3개월의 반감기를 가지면서 생리학적 조건(pH 7.4 및 37℃의 수성 완충제) 하에 비효소적 및 가수분해적으로 분해가능한, 즉 절단가능한 가역적 연결을 포함하는, 특히 이러한 가역적 연결로 구성된 연결제를 지칭한다. 다른 한편으로, 안정한 또는 영구적인 연결은 전형적으로 절단불가능한 영구적인 결합이고, 이것은 상기 연결이 생리학적 조건(pH 7.4 및 37℃의 수성 완충제) 하에 6개월 이상의 반감기를 갖는다는 것을 의미한다.
"잔류물 부재 전구약물 연결제"는 약물이 그의 자유 형태로 방출되는 전구약물 연결제를 지칭하고, 이것은 전구모이어티로부터의 방출 시 약물이 전구모이어티의 임의의 잔류물을 함유하지 않는다는 것을 의미한다.
용어 "중합체"는 합성 또는 생물학, 또는 이들 둘다의 조합으로부터 유래될 수 있는, 선형, 환형, 분지된, 가교연결된 또는 덴드리머 방식, 또는 이들의 조합으로 화학결합에 의해 연결된 반복 구조 유닛을 포함하는, 특히 이러한 반복 구조 유닛으로 구성된 분자를 기술한다. 전형적으로, 중합체는 500 Da 이상의 분자량을 갖는다. 중합체가 폴리펩티드인 경우, 폴리펩티드의 개별 아미노산들은 동일할 수 있거나 상이할 수 있다는 것이 이해된다.
용어 "중합체"는 하나 이상의 중합체를 포함하는 모이어티를 지칭한다.
용어 "폴리(에틸렌 글리콜)계(based) 중합체 쇄" 또는 "PEG계 중합체 쇄"는 20 중량% 이상의 에틸렌 글리콜 모이어티, 보다 바람직하게는 50 중량% 이상, 훨씬 더 바람직하게는 80 중량% 이상의 에틸렌 글리콜 모이어티를 포함하는 중합체를 지칭하고, 상기 쇄는 임의적으로 캡핑되고/되거나 임의적으로 하나 이상의 작용기, 예를 들면, 아민 기(들)를 추가로 포함한다. PEG계 중합체 쇄는 알킬 또는 아릴 기에 의해 종결될 수 있거나 단절될 수 있고 임의적으로 헤테로원자 및/또는 작용기로 치환될 수 있다는 것이 이해된다. PEG계 중합체 쇄에 적합한 캡핑 또는 종결 기는 예를 들면, CH3-, CH3-0- 및 CH3-CH2-이다. 따라서, PEG계 중합체는 20 중량% 이상의 에틸렌 글리콜 모이어티, 보다 바람직하게는 50 중량% 이상, 훨씬 더 바람직하게는 80 중량% 이상의 에틸렌 글리콜 모이어티를 포함하는 중합체이다.
용어 "하이드로겔"은 수성 매질에서 하이드로겔의 팽윤을 야기하는 다량의 물을 흡수할 수 있는 3차원적 친수성 또는 양친매성 중합체 네트워크로서 정의될 수 있다. 상기 네트워크는 단독중합체 또는 공중합체로 구성되고 공유 화학적 또는 물리적 (이온성, 소수성 상호작용, 얽힘) 가교연결의 존재로 인해 불용성을 나타낸다. 상기 가교연결은 네트워크 구조 및 물리적 무결성을 제공한다.
용어 "스페이서", "스페이서 기", "스페이서 분자" 및 "스페이서 모이어티"는 상호교환적으로 사용되고, 2개의 모이어티를 연결하기에 적합한 임의의 모이어티, 예컨대, C1-50 알킬, C2-50 알케닐 또는 C2-50 알키닐을 지칭하고, 이 단편은 임의적으로 -NH-, -N(C1 -4 알킬)-, -0-, -S-, -C(O)-, -C(0)NH-, -C(0)N(C1-4 알킬)-, -O-C(O)-, -S(O)-, -S(0)2-, -0-C(0)NH-, -0-(CO)N(C1 -4 알킬)-, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴, 페닐 및 나프틸로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재된다. 바람직하게는, 상기 용어들은 C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 또는 C2 -50 알키닐을 지칭하고, 이 단편은 임의적으로 -NH-, -N(C1 -4 알킬)-, -0-, -S-, -C(O)-, -C(0)NH-, -C(0)N(C1-4 알킬)-, -O-C(O)-, -S(O)-, -S(0)2-, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴, 페닐 및 나프틸로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재된다.
용어 "말단"은 탄소 원자 및/또는 헤테로원자의 직쇄 또는 분지쇄의 마지막 탄소 원자 또는 헤테로원자를 지칭한다. 즉, "말단"은 정확히 1개의 다른 탄소 또는 헤테로원자에 연결된 탄소 또는 헤테로원자를 지칭한다.
"말단/말단에서" 또는 "말단에서 연결된"은 모이어티가 또 다른 모이어티의 말단 또는 말단들에 연결된다는 것을 의미한다.
"약학 조성물" 또는 "조성물"은 하나 이상의 약물 또는 전구약물, 및 임의적으로 하나 이상의 부형제를 함유하는 조성물뿐만 아니라, 임의의 2개 이상의 부형제 및/또는 약물 또는 전구약물의 조합, 착물화 또는 응집으로부터, 또는 하나 이상의 부형제 및/또는 약물 및/또는 전구약물의 해리로부터, 또는 하나 이상의 부형제 및/또는 약물 및/또는 전구약물의 다른 유형의 반응 또는 상호작용으로부터 직접적으로 또는 간접적으로 발생되는 임의의 생성물도 의미한다. 따라서, 본 발명의 약학 조성물은 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 약학적으로 허용가능한 부형제와 혼합함으로써 수득될 수 있는 임의의 조성물을 포괄한다.
용어 "부형제"는 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물과 함께 투여되는 희석제, 보조제 또는 비히클을 지칭한다. 이러한 약학 부형제는 멸균 액체, 예컨대, 물 및 오일(땅콩유, 대두유, 광유, 참깨유 등을 포함하나 이들로 한정되지 않는 석유, 동물, 식물 또는 합성 유래의 오일을 포함함)일 수 있다. 물은 약학 조성물이 경구 투여될 때 바람직한 부형제이다. 식염수 및 수성 덱스트로스는 약학 조성물이 정맥내로 투여될 때 바람직한 부형제이다. 식염수 용액 및 수성 덱스트로스 및 글리세롤 용액은 바람직하게는 주사가능한 용액을 위한 액체 부형제로서 사용된다. 적합한 약학 부형제는 전분, 글루코스, 락토스, 수크로스, 만니톨, 트레할로스, 젤라틴, 맥아, 벼, 밀가루, 백악, 실리카 겔, 나트륨 스테아레이트, 글리세롤 모노스테아레이트, 탈크, 염화나트륨, 건조된 탈지유, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물, 에탄올 등을 포함한다. 조성물은 원하는 경우 소량의 습윤화제, 유화제, pH 완충제 등, 예를 들면, 아세트산염, 석신산염, 트리스, 탄산염, 인산염, 헤페스(HEPES)(4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라진에탄설폰산), MES(2-(N-모르폴리노)에탄설폰산)도 함유할 수 있거나, 세제, 예컨대, 트윈(Tween), 폴록사머, 폴록사민, CHAPS, 이게팔(Igepal), 또는 아미노산, 예를 들면, 글리신, 라이신 또는 히스티딘을 함유할 수 있다. 이들 조성물들은 용액, 현탁액, 유화액, 정제, 환제, 캡슐제, 산제, 지속 방출 제제 등의 형태를 취할 수 있다. 조성물은 전통적인 결합제 및 부형제, 예컨대, 트리글리세라이드를 갖는 좌약제로서 제제화될 수 있다. 경구 제제는 표준 부형제, 예컨대, 약학 등급의 만니톨, 락토스, 전분, 마그네슘 스테아레이트, 나트륨 사카린, 셀룰로스, 탄산마그네슘 등을 포함할 수 있다. 적합한 약학 부형제의 예는 문헌("Remington's Pharmaceutical Sciences" by E.W. Martin)에 기재되어 있다. 이러한 조성물은 환자에 적합한 투여를 위한 형태를 제공하도록 적합한 양의 부형제와 함께 하나 이상의 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 형태, 바람직하게는 정제된 형태로 치료 유효량의 트레프로스티닐을 함유할 것이다. 제제는 투여 방식에 적합해야 한다.
용어 "약학적으로 허용가능한"은 규제 관청, 예컨대, EMEA(유럽) 및/또는 FDA(미국), 및/또는 동물, 바람직하게는 인간에서의 사용에 대한 임의의 다른 국립 규제 관청에 의해 승인되었다는 것을 의미한다.
"건조된 조성물"은 본 발명에 따른 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 약학 조성물이 용기 내에 건조된 형태로 제공된다는 것을 의미한다. 적합한 건조 방법은 분무 건조 및 동결건조(동결-건조)이다. 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 이러한 건조된 조성물은 (칼 피셔(Karl Fischer)에 따라 측정된) 최대 10%, 바람직하게는 5% 미만, 보다 바람직하게는 2% 미만의 잔류 수분 함량을 갖는다. 바람직한 건조 방법은 동결건조이다. "동결건조된 조성물"은 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 약학 조성물이 먼저 동결된 후 감압에 의해 수분 감소 처리를 받았다는 것을 의미한다. 이 용어는 조성물을 최종 용기 내에 충전시키기 전에 제작 과정에서 일어날 수 있는 추가 건조 단계를 배제하지 않는다.
"동결건조"(동결-건조)는 조성물을 동결시킨 후 주변 압력을 감소시키고 임의적으로 열을 가하여 조성물 중의 동결된 물이 고체상으로부터 기체로 직접 승화되게 함을 특징으로 하는 탈수 과정이다. 전형적으로, 승화된 물은 탈승화에 의해 수집된다.
용어 "작용기"는 특징적인 화학 반응을 겪을 수 있는 분자 내의 특정 원자 군을 지칭한다. 작용기의 예는 하이드록실, 카보닐, 알데하이드, 카복실, 에스테르, 케탈, 헤미케탈, 아세탈, 헤미아세탈, 일차/이차/삼차 아민, 시아네이트, 디설파이드, 설프하이드릴, 설포닐, 포스페이트이다.
작용기가 또 다른 작용기에 커플링된 경우, 발생된 화학 구조는 "연결"로서 지칭된다. 예를 들면, 아민 작용기와 카복실 작용기의 반응은 아미드 연결을 발생시킨다. 연결의 추가 예는 에스테르, 에테르, 케탈, 아세탈, 일차/이차/삼차 아민, 카복스아미드, 설파이드 및 디설파이드이다.
"알킬"은 직쇄(선형, 비분지) 또는 분지쇄 탄소(비치환된 알킬)를 의미한다. 임의적으로, 알킬 탄소의 하나 이상의 수소 원자(들)는 본원에 표시된 치환기로 치환될 수 있고, 이것은 "치환된 알킬"로서 지칭될 것이다. 일반적으로, 바람직한 알킬은 C1-6 알킬이다.
"C1-4 알킬"은 1개 내지 4개의 탄소 원자를 갖는 알킬 쇄(비치환된 C1-4 알킬), 예를 들면, 분자의 말단에 존재하는 경우 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸 tert-부틸, 또는 예를 들면, 분자의 2개 모이어티들이 알킬 기(C1-4 알킬렌으로도 지칭됨)에 의해 연결될 때 -CH2-, -CH2-CH2-, -CH(CH3)-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(C2H5)-, -C(CH3)2-을 의미한다. 임의적으로, C1 -4 알킬 탄소의 하나 이상의 수소 원자(들)는 본원에 표시된 치환기로 치환될 수 있다. 따라서, "C1 -50 알킬"은 1개 내지 50개의 탄소 원자를 갖는 알킬 쇄를 의미한다.
"C1-6 알킬"은 1개 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 알킬 쇄, 예를 들면, 분자의 말단에 존재하는 경우 C1-4 알킬, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, n-펜틸, n-헥실, 또는 예를 들면, 분자의 2개 모이어티들이 알킬 기(C1-6 알킬렌으로도 지칭됨)에 의해 연결될 때 -CH2-, -CH2-CH2-, -CH(CH3)-, -C(CH2)-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(C2H5)-, -C(CH3)2-를 의미한다. C1-6 알킬 탄소의 하나 이상의 수소 원자(들)는 본원에 표시된 치환기로 치환될 수 있다. 이에 따라 용어 C1-15 알킬 또는 C1-15 알킬렌이 정의된다.
"C2-6 알케닐"은 2개 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 알케닐 쇄, 예를 들면, 분자의 말단에 존재하는 경우 -CH=CH2, -CH=CH-CH3, -CH2-CH=CH2, -CH=CH-CH2-CH3, -CH=CH-CH=CH2, 또는 분자의 2개 모이어티들이 알케닐 기에 의해 연결될 때 -CH=CH-를 의미한다.
C2-6 알케닐 탄소의 하나 이상의 수소 원자(들)는 본원에 표시된 치환기로 치환될 수 있다.
이에 따라 용어 C2-4 알케닐이 정의된다.
"C2-6 알키닐"은 2개 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 알키닐 쇄, 예를 들면, 분자의 말단에 존재하는 경우 -C≡CH, -CH2-C≡CH, CH2-CH2-C≡CH, CH2-C≡C-CH3, 또는 분자의 2개 모이어티들이 알키닐 기에 의해 연결될 때 -C≡C-를 의미한다. C2-6 알키닐 탄소의 하나 이상의 수소 원자(들)는 본원에 표시된 치환기로 치환될 수 있다. 이에 따라 용어 C2-4 알키닐이 정의된다.
"C2-50 알케닐"은 2개 내지 50개의 탄소 원자를 갖는 분지 또는 비분지 알케닐 쇄(비치환된 C2-50 알케닐), 예를 들면, 분자의 말단에 존재하는 경우 -CH=CH2, -CH=CH-CH3, -CH2-CH=CH2, -CH=CH-CH2-CH3, -CH=CH-CH=CH2, 또는 분자의 2개 모이어티들이 알케닐 기에 의해 연결될 때 -CH=CH-를 의미한다. 임의적으로, C2-50 알케닐 탄소의 하나 이상의 수소 원자(들)는 더 특정된 치환기로 치환될 수 있다. 따라서, 용어 "알케닐"은 하나 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 탄소쇄를 지칭한다. 임의적으로, 하나 이상의 삼중 결합이 일어날 수 있다. 이에 따라 용어 "C2 -15 알케닐"이 정의된다.
"C2-50 알키닐"은 2개 내지 50개의 탄소 원자를 갖는 분지 또는 비분지 알키닐 쇄(비치환된 C2-50 알키닐), 예를 들면, 분자의 말단에 존재하는 경우 -C≡CH, -CH2-C≡CH, CH2-CH2-C≡CH, CH2-C≡C-CH3, 또는 분자의 2개 모이어티들이 알키닐 기에 의해 연결될 때 -C≡C-를 의미한다. 임의적으로, C2-50 알키닐 탄소의 하나 이상의 수소 원자(들)는 더 특정된 치환기로 치환될 수 있다. 따라서, 용어 "알키닐"은 하나 이상의 탄소 삼중 결합을 갖는 탄소쇄를 지칭한다. 임의적으로, 하나 이상의 이중 결합이 일어날 수 있다. 이에 따라 용어 "C2 -15 알키닐"이 정의된다.
"C3-7 사이클로알킬" 또는 "C3-7 사이클로알킬 고리"는 적어도 부분적으로 포화되어 있는 탄소-탄소 이중 결합을 가질 수 있는, 3개 내지 7개의 탄소 원자를 갖는 환형 알킬 쇄(비치환된 C3-7 사이클로알킬), 예를 들면, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헥세닐, 사이클로헵틸을 의미한다. 임의적으로, 사이클로알킬 탄소의 하나 이상의 수소 원자(들)는 본원에 표시된 치환기로 치환될 수 있다. 용어 "C3 -7 사이클로알킬" 또는 "C3 -7 사이클로알킬 고리"는 가교된 이환, 예컨대, 노르보난(노르보나닐) 또는 노르보넨(노르보네닐)도 포함한다. 따라서, "C3-5 사이클로알킬"은 3개 내지 5개의 탄소 원자를 갖는 사이클로알킬을 의미한다. 따라서, "C3-10 사이클로알킬"은 3개 내지 10개의 탄소 원자를 갖는 사이클로알킬을 의미한다. 이에 따라 용어 "C5-6 사이클로알킬"이 정의된다.
"할로겐"은 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도를 의미한다. 일반적으로 할로겐이 플루오로 또는 클로로인 것이 바람직하다.
"4원 내지 7원 헤테로사이클릴" 또는 "4원 내지 7원 헤테로환"은 최대 수 이하의 이중 결합을 함유할 수 있는 4개, 5개, 6개 또는 7개의 고리 원자를 갖는 고리(전체적으로 포화된, 부분적으로 포화된 또는 불포화된 방향족 또는 비방향족 고리)를 의미하고, 이때 하나 이상의 고리 원자 내지 4개 이하의 고리 원자는 황(-S(O)-, -S(0)2-를 포함함), 산소 및 질소(=N(0)-를 포함함)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자로 치환되고, 상기 고리는 탄소 또는 질소 원자를 통해 분자의 나머지 부분에 연결되어 있다(비치환된 4원 내지 7원 헤테로사이클릴). 완전성을 위해, 본 발명의 몇몇 실시양태에서 4원 내지 7원 헤테로사이클릴은 추가 요건을 충족시켜야 한다는 것이 표시되어 있다. 4원 내지 7원 헤테로환의 예는 아제티딘, 옥세탄, 티에탄, 푸란, 티오펜, 피롤, 피롤린, 이미다졸, 이미다졸린, 피라졸, 피라졸린, 옥사졸, 옥사졸린, 이속사졸, 이속사졸린, 티아졸, 티아졸린, 이소티아졸, 이소티아졸린, 티아디아졸, 티아디아졸린, 테트라하이드로푸란, 테트라하이드로티오펜, 피롤리딘, 이미다졸리딘, 피라졸리딘, 옥사졸리딘, 이속사졸리딘, 티아졸리딘, 이소티아졸리딘, 티아디아졸리딘, 설폴란, 피란, 디하이드로피란, 테트라하이드로피란, 이미다졸리딘, 피리딘, 피리다진, 피라진, 피리미딘, 피페라진, 피페리딘, 모르폴린, 테트라졸, 트리아졸, 트리아졸리딘, 테트라졸리딘, 디아제판, 아제핀 또는 호모피페라진이다. 임의적으로, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴의 하나 이상의 수소 원자(들)는 치환기로 치환될 수 있다. 이에 따라 용어 "3원 내지 7원 헤테로사이클릴" 및 "5원 또는 6원 헤테로사이클릴"이 정의된다.
"8원 내지 11원 헤테로비사이클릴" 또는 "8원 내지 11원 헤테로이환"은 8개 내지 11개의 고리 원자를 갖고 최대 수 이하의 이중 결합을 함유할 수 있는 2개의 고리로 구성된 헤테로환형 시스템(전체적으로 포화된, 부분적으로 포화된 또는 불포화된 방향족 또는 비방향족 고리)을 의미하고, 이때 하나 이상의 고리 원자는 두 고리들에 의해 공유되고 하나 이상의 고리 원자 내지 6개 이하의 고리 원자는 황(-S(O)-, -S(0)2-를 포함함), 산소 및 질소(=N(0)-를 포함함)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자로 치환되고, 고리는 탄소 또는 질소 원자를 통해 분자의 나머지 부분에 연결된다(비치환된 8원 내지 11원 헤테로비사이클릴). 8원 내지 11원 헤테로이환의 예는 인돌, 인돌린, 벤조푸란, 벤조티오펜, 벤즈옥사졸, 벤즈이속사졸, 벤조티아졸, 벤즈이소티아졸, 벤즈이미다졸, 벤즈이미다졸린, 퀴놀린, 퀴나졸린, 디하이드로퀴나졸린, 퀴놀린, 디하이드로퀴놀린, 테트라하이드로퀴놀린, 데카하이드로퀴놀린, 이소퀴놀린, 데카하이드로이소퀴놀린, 테트라하이드로이소퀴놀린, 디하이드로이소퀴놀린, 벤즈아제핀, 푸린 또는 프테리딘이다. 용어 "8원 내지 11원 헤테로이환"은 2개의 고리로 구성된 스피로 구조, 예컨대, 1,4-디옥사-8-아자스피로[4.5]데칸 또는 가교된 헤테로환, 예컨대, 8-아자-비사이클로[3.2.1]옥탄도 포함한다. 이에 따라 용어 "9원 내지 11원 헤테로비사이클릴" 또는 "9원 내지 11원 헤테로이환"이 정의된다.
용어 "지방족"은 전체적으로 포화된 것을 의미한다.
용어 "개재된(interrupted)"은 기(예컨대, -O- 또는 -NH-)가 예를 들면, 연결기 또는 스페이서의 2개 탄소 원자들 사이에, 또는 각각의 탄소 원자와 수소 원자 사이의 탄소쇄의 각각의 말단에 삽입된다는 것을 의미한다.
일반적으로, 용어 "치환된"은 바람직하게는 동일하거나 상이하고 할로겐, CN, COORb9, ORb9, C(0)Rb9, C(0)N(Rb9Rb9a), S(0)2N(Rb9Rb9a), S(0)N(Rb9Rb9a), S(0)2Rb9, S(0)Rb9, N(Rb9)S(0)2N(Rb9aRb9b), SRb9, N(Rb9Rb9a), N02, OC(0)Rb9, N(Rb9)C(0)Rb9a, N(Rb9)S(0)2Rb9a, N(Rb9)S(0)Rb9a, N(Rb9)C(0)ORb9a, N(Rb9)C(0)N(Rb9aRb9b), OC(0)N(Rb9Rb9a), Tb, C1-50 알킬, C2-50 알케닐 및 C2-50 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택된 치환기를 지칭하고,
이때, Tb, C1-50 알킬, C2-50 알케닐 및 C2-50 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 Rb10으로 치환되고, C1-50 알킬, C2-50 알케닐 및 C2-50 알키닐은 임의적으로 Tb, -C(0)0-, -0-, -C(O)-, -C(0)N(Rb11)-, -S(0)2N(Rb11)-, -S(0)N(Rb11)-, -S(0)2-, -S(O)-, -N(Rb11)S(0)2N(Rb11a)-, -S-, -N(Rb11)-, -OC(0)Rb11, -N(Rb11)C(0)-, -N(Rb11)S(0)2-, -N(Rb11)S(0)-, -N(Rb11)C(0)0-, -N(Rb11)C(0)N(Rb11a)- 및 -OC(0)N(Rb11Rb11a)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고;
Rb9, Rb9a 및 Rb9b는 H, Tb, C1-50 알킬, C2-50 알케닐 및 C2-50 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고,
이때, Tb, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 Rb10으로 치환되고, 이때 C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 Tb, -C(0)0-, -0-, -C(O)-, -C(0)N(Rb11)-, -S(0)2N(Rb11)-, -S(0)N(Rb11)-, -S(0)2-, -S(O)-, -N(Rb11)S(0)2N(Rb11a)-, -S-, -N(Rb11)-, -OC(0)Rb11, -N(Rb11)C(0)-, -N(Rb11)S(0)2-, -N(Rb11)S(0)-, -N(Rb11)C(0)0-, -N(Rb11)C(0)N(Rb11a)- 및 -OC(0)N(Rb11Rb11a)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고;
Tb는 페닐, 나프틸, 인데닐, 인다닐, 테트랄리닐, C3-10 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 9원 내지 11원 헤테로비사이클릴로 구성된 군으로부터 선택되고, 이때 Tb는 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 Rb10으로 치환되고;
Rb10은 할로겐, CN, 옥소(=O), COORb12, ORb12, C(0)Rb12, C(0)N(Rb12Rb12a), S(0)2N(Rb12Rb12a), S(0)N(Rb12Rb12a), S(0)2Rb12, S(0)Rb12, N(Rb12)S(0)2N(Rb12aRb12b), SRb12, N(Rb12Rb12a), N02, OC(0)Rb12, N(Rb12)C(0)Rb12a, N(Rb12)S(0)2Rb12a, N(Rb12)S(0)Rb12a, N(Rb12)C(0)ORb12a, N(Rb12)C(0)N(Rb12aRb12b), OC(0)N(Rb12Rb12a) 또는 C1-6 알킬이고, 이때 C1-6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환된다.
Rb11, Rb11a, Rb12, Rb12a 및 Rb12b는 H 및 C1-6 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 이때 C1-6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환된다.
용어 "개재된"은 기가 2개의 탄소 사이에 또는 탄소와 수소 사이의 탄소쇄의 말단에 삽입된다는 것을 의미한다.
일반적으로, 한 모이어티와 또 다른 모이어티의 연결을 표시하는 데에 사용되는 용어 "파선"은 입체화학을 표시하는 데에 사용되는 파선 결합과 상이하다. 당업자는 이들 둘을 구별할 수 있을 것이다.
일반적으로, 용어 "포함한다" 또는 "포함하는"은 "로 구성된다" 또는 "로 구성되는"도 포괄한다.
"수용성 담체"에서와 같이 용어 "수용성"은 실온의 물에서 가용성을 나타내는 담체이다. 전형적으로, 수용성 담체의 용액은 여과 후 동일한 용액에 의해 투과되는 광의 약 75% 이상, 보다 바람직하게는 약 95% 이상의 광을 투과시킬 것이다. 수용성 담체 또는 그의 부분은 바람직하게는 중량을 기준으로 물에서 약 35 (중량)% 이상의 가용성, 보다 바람직하게는 물에서 약 50 (중량)% 이상의 가용성, 보다 바람직하게는 물에서 약 70 (중량)%의 가용성, 보다 바람직하게는 물에서 약 85 (중량)%의 가용성을 나타낼 것이다. 그러나, 수용성 담체 또는 그의 부분이 물에서 약 95 (중량)%의 가용성을 나타내거나 물에서 완전한 가용성을 나타내는 것이 가장 바람직하다.
본 발명에 따른 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 트레프로스티닐 모이어티를 포함한다. 트레프로스티닐은 그의 순수한 형태로 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염으로서 당업자에게 그 자체로 공지된 약물이다.
본원에서 사용된 바와 같이, 단일 트레프로스티닐 화합물 투여량은 mg으로 주어지고, 약학 조성물 중의 트레프로스티닐 화합물의 농도는 mg/㎖로 주어진다. 트레프로스티닐 화합물이 담체-연결된 전구약물이기 때문에, 상기 농도는 상기 전구약물로부터의 자유 트레프로스티닐의 정량적 방출을 기초로 한다. 트레프로스티닐 농도의 유의한 증가가 관찰되지 않고 방출된 트레프로스티닐의 총량이 측정될 때까지 조성물의 분취물이 당분야에서 잘 공지되어 있는 방법에 의해 트레프로스티닐 방출 조건(수성 완충제 pH 7.4, 37℃, 또는 상승된 pH에서 가속화된 조건)으로 처리된다.
본 발명에서, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염은 트레프로스티닐을 그의 자유 형태로 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염으로서 함유하지 않고 결합된 형태로 함유한다. 트레프로스티닐은 그의 작용기들 중 하나, 예를 들면, 하이드록실 또는 카복실을 통해 분자의 나머지 부분에 결합되고, 화학식 I의 모이어티 X0, 또는 m1 및 m2 둘다가 0인 경우 모이어티 Z1에 연결된 모이어티 T의 부분으로서 존재한다. 이것은 본 발명에 따른 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 트레프로스티닐을 생물학적 활성 모이어티로서 함유한다는 것을 의미한다. 트레프로스티닐은 이를 필요로 하는 환자에게 투여될 때 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물로부터의 생물학적 활성 모이어티의 절단으로 인해 그의 자유 형태로 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염으로서 방출된다. 즉, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 하나 이상의 모이어티 T를 함유하고, 모이어티 T는 모이어티 X0로 각각 치환되고(m1 및 m2 중 하나 이상이 1인 경우), 모이어티 X0은 담체 Z1에 공유결합된다. 상기 담체는 분자량이 500 달톤 이상인 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함한다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, 상기 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체의 분자량은 160 kDa 이하, 바람직하게는 약 100 kDa 이하, 훨씬 더 바람직하게는 약 50 kDa 이하이다.
바람직하게는, 모이어티 X0(m1 및 m2 중 하나 이상이 1인 경우) 및 모이어티 T는 카보네이트 또는 에스테르 연결을 통해 연결되고, 가장 바람직하게는 모이어티 X0 및 모이어티 T는 에스테르 연결을 통해 연결된다.
바람직하게는, 모이어티 X0은 비치환된다. 보다 바람직하게는, 각각의 모이어티 X0은 비치환된다.
한 바람직한 실시양태에서, m1은 0이고, m2는 1이다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, m1 및 m2 둘다가 0이다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, m1 및 m2 둘다가 1이다.
바람직하게는, 하위구조 X0-Z1은 C(R1R2)-CH2-Z1(이때, R1 및 R2는 H 및 C1 -4 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되되, R1 및 R2 중 하나 이상은 H가 아님) 또는 (CH2)n-Z1(이때, n은 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8임)이다.
바람직하게는, 담체 Z1은 아미드 기를 통해 모이어티 X0에 공유부착된다.
바람직하게는, R3은 할로겐, CN, C(0)R4, C(0)OR4, OR4, C(0)R4, C(0)N(R4R4a), S(0)2N(R4R4a), S(0)N(R4R4a), S(0)2R4, S(0)R4, N(R4)S(0)2N(R4aR4b), SR4, N(R4R4a), N02, OC(0)R4, N(R4)C(0)R4a, N(R4)S02R4a, N(R4)S(0)R4a, N(R4)C(0)N(R4aR4b), N(R4)C(0)OR4a, OC(0)N(R4R4a) 또는 T0이다.
바람직하게는, R4, R4a 및 R4b는 H, T0, C1 -4 알킬, C2 -4 알케닐 및 C2 -4 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 이때 C1 -4 알킬, C2 -4 알케닐 및 C2 -4 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 R5로 치환된다.
보다 바람직하게는, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 하기 화학식 II의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염이다:
Figure pct00008
상기 식에서,
T는 하기 화학식 i 내지 v로부터 각각 독립적으로 선택되고(바람직하게는, 화학식 iii이고):
Figure pct00009
Figure pct00010
Figure pct00011
Figure pct00012
Figure pct00013
[상기 식에서, 파선은 분자의 나머지 부분에의 부착을 표시한다];
y는 1 내지 64, 바람직하게는 1 내지 16의 정수이고, 보다 바람직하게는 y는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 및 16으로부터 선택되고, 훨씬 더 바람직하게는 y는 4, 6, 8, 10 또는 12이고, 훨씬 더 바람직하게는 y는 4, 6 또는 8, 가장 바람직하게는 4이고;
Ra1은 비치환된 알킬, 치환된 알킬, 비치환된 페닐, 치환된 페닐, 비치환된 나프틸, 치환된 나프틸, 비치환된 인데닐, 치환된 인데닐, 비치환된 인다닐, 치환된 인다닐, 비치환된 테트랄리닐, 치환된 테트랄리닐, 비치환된 C3-10 사이클로알킬, 치환된 C3-10 사이클로알킬, 비치환된 4원 내지 7원 헤테로사이클릴, 치환된 4원 내지 7원 헤테로사이클릴, 비치환된 9원 내지 11원 헤테로비사이클릴, 및 치환된 9원 내지 11원 헤테로비사이클릴로 구성된 군으로부터 선택되고;
Ra2는 H, 비치환된 알킬 및 치환된 알킬로부터 선택되고;
Ra3 및 Ra4는 H, 비치환된 알킬 및 치환된 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;
n은 0 또는 1이고;
임의적으로, Ra1과 Ra3은 이들이 부착된 원자와 함께 연결되어 고리 A를 형성하고;
A는 페닐, 나프틸, 인데닐, 인다닐, 테트랄리닐, C3-10 사이클로알킬, 4원 내지 7원 지방족 헤테로사이클릴 및 9원 내지 11원 지방족 헤테로비사이클릴로부터 선택되고, 이때 A는 비치환되거나 치환되고;
바람직하게는, A는 C3-10 사이클로알킬, 4원 내지 7원 지방족 헤테로사이클릴 및 9원 내지 11원 지방족 헤테로비사이클릴로 구성된 군으로부터 선택되고, 이때 A는 비치환되거나 치환되고;
Q는 스페이서 모이어티이고;
Z1은 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함하는 담체이다.
바람직하게는, Ra1은 C1-6 알킬 또는 치환된 C1-6 알킬, 보다 바람직하게는 C1-4 알킬 또는 치환된 C1-4 알킬이다.
보다 바람직하게는, Ra1은 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, t-부틸 및 벤질로부터 선택된다.
바람직하게는, Ra2는 H이다.
바람직하게는, Ra3은 H, C1-6 알킬 또는 치환된 C1-6 알킬, 보다 바람직하게는 C1-4 알킬 또는 치환된 C1-4 알킬이다. 보다 바람직하게는, Ra3은 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, t-부틸 및 벤질로부터 선택된다.
보다 바람직하게는, Ra3은 H이다.
바람직하게는, Ra4는 H, C1-6 알킬 및 치환된 C1-6 알킬, 보다 바람직하게는 C1-4 알킬 및 치환된 C1-4 알킬로부터 선택된다. 보다 바람직하게는, Ra4는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, t-부틸 및 벤질로부터 선택된다.
보다 바람직하게는, Ra4는 H이다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, Ra1과 Ra3은 이들이 부착된 원자와 함께 연결되어 고리 A를 형성하고, 이때 A는 사이클로프로판, 사이클로부탄, 사이클로펜탄, 사이클로헥산 및 사이클로헵탄으로 구성된 군으로부터 선택된다. 사이클로헥산이 훨씬 더 바람직하다.
바람직하게는, 화학식 II에서 Q는 COORa9, ORa9, C(0)Ra9, C(0)N(Ra9Ra9a), S(0)2N(Ra9Ra9a), S(0)N(Ra9Ra9a), S(0)2Ra9, S(0)Ra9, N(Ra9)S(0)2N(Ra9aRa9b), SRa9, N(Ra9Ra9a), OC(0)Ra9, N(Ra9)C(0)Ra9a, N(Ra9)S(0)2Ra9a, N(Ra9)S(0)Ra9a, N(Ra9)C(0)ORa9a, N(Ra9)C(0)N(Ra9aRa9b), OC(0)N(Ra9Ra9a), W, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐로부터 선택되고, 이때 W, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 Ra10으로 치환되고,
이때, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 -W-, -C(0)0-, -0-, -C(O)-, -C(0)N(Ra11)-, -S(0)2N(Ra11)-, -S(0)N(Ra11)-, -S(0)2-, -S(O)-, -N(Ra11)S(0)2N(Ra11a)-, -S-, -N(Ra11)-, -OC(0)Ra11, -N(Ra11)C(0)-, -N(Ra11)S(0)2-, -N(Ra11)S(0)-, -N(Ra11)C(0)0-, -N(Ra11)C(0)N(Ra11a)- 및 -OC(0)N(Ra11Ra11a)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고,
Ra9, Ra9a 및 Ra9b는 H, W, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고,
이때, W, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 Ra10으로 치환되고,
이때, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 W, -C(0)0-, -0-, -C(O)-, -C(0)N(Ra11)-, -S(0)2N(Ra11)-, -S(0)N(Ra11)-, -S(0)2-, -S(O)-, -N(Ra11)S(0)2N(Ra11a)-, -S-, -N(Ra11)-, -OC(0)Ra11, -N(Ra11)C(0)-, -N(Ra11)S(0)2-, -N(Ra11)S(0)-, -N(Ra11)C(0)0-, -N(Ra11)C(0)N(Ra11a)- 및 -OC(0)N(Ra11Ra11a)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고,
W는 페닐, 나프틸, 인데닐, 인다닐, 테트랄리닐, C3 -10 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 9원 내지 11원 헤테로비사이클릴로 구성된 군으로부터 선택되고, 이때 W는 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 Ra10으로 치환되고;
Ra10은 할로겐, CN, 옥소(=O), COORa12, ORa12, C(0)Ra12, C(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2N(Ra12Ra12a), S(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2Ra12, S(0)Ra12, N(Ra12)S(0)2N(Ra12aRa12b), SRa12, N(Ra12Ra12a), N02, OC(0)Ra12, N(Ra12)C(0)Ra12a, N(Ra12)S(0)2Ra12a, N(Ra12)S(0)Ra12a, N(Ra12)C(0)ORa12a, N(Ra12)C(0)N(Ra12aRa12b), OC(0)N(Ra12Ra12a) 또는 C1 -6 알킬이고, 이때 C1-6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고,
Ra11, Ra11a, Ra12, Ra12a 및 Ra12b는 H 및 C1 -6 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 이때 C1 -6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환된다.
보다 바람직하게는, -Q-는 각각 독립적으로 -Q1a-Q1-*이고, 이때 별표(*)는 Z1과의 연결을 표시하고,
이때, Q1a는 결합, -C(0)0-, -0-, -C(O)-, -C(0)N(Ra9a)-, -S(0)2N(Ra9a)-, -S(0)N(Ra9a)-, -S(0)2-, -S(O)-, -N(Ra9a)S(0)2N(Ra9b)-, -S-, -N(Ra9a)-, -OC(O)-, -N(Ra9a)C(0)-, -N(Ra9a)S(0)2-, -N(Ra9a)S(0)-, -N(Ra9a)C(0)0-, -N(Ra9a)C(0)N(Ra9b)-, -OC(0)N(Ra9a)- 또는 -W-, 바람직하게는 -C(0)N(Ra9a)- 또는 -N(Ra9a)C(0)-이고;
Q1은 임의적으로 하나 이상의 Ra10으로 치환되는 C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2-50 알키닐로부터 선택되고, Q1이 C2 이상인 경우 임의적으로 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고:
Figure pct00014
,
이때, 상기 기 각각은 개별적으로 1회 이상 존재할 수 있고, 상기 C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 Z1에 연결된 말단에서 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로부터 선택된 기에 의해 종결될 수 있고:
Figure pct00015
;
Ra10은 할로겐, CN, 옥소(=O), COORa12, ORa12, C(0)Ra12, C(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2N(Ra12Ra12a), S(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2Ra12, S(0)Ra12, N(Ra12)S(0)2N(Ra12aRa12b), SRa12, N(Ra12Ra12a), N02, OC(0)Ra12, N(Ra12)C(0)Ra12a, N(Ra12)S(0)2Ra12a, N(Ra12)S(0)Ra12a, N(Ra12)C(0)ORa12a, N(Ra12)C(0)N(Ra12aRa12b), OC(0)N(Ra12Ra12a) 또는 C1 -6 알킬이고, 이때 C1-6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
Ra12, Ra12a 및 Ra12b는 H 및 C1 -6 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 이때 C1 -6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
R13 및 R13a는 H, C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로부터 독립적으로 선택되고; 바람직하게는, R13 및 R13a는 C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로부터 독립적으로 선택된다.
화학식 I에서, 모이어티 X0은 하기 화학식 IIa로 표시된다:
Figure pct00016
상기 식에서,
별표로 표시된 파선은 T에의 부착을 표시하고, 비표시된 파선은 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 나머지 부분에의 부착을 표시하고;
Q, Ra1, Ra2, Ra3 및 Ra4는 화학식 II에서 정의된 바와 같이 사용된다.
훨씬 더 바람직하게는, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 하기 화학식 II-A의 구조를 갖는다:
Figure pct00017
상기 식에서,
T는 하기 화학식 i 내지 v로부터 각각 독립적으로 선택되고:
Figure pct00018
Figure pct00019
Figure pct00020
Figure pct00021
Figure pct00022
[상기 식에서, 파선은 분자의 나머지 부분에의 부착을 표시한다];
y는 1 내지 64, 바람직하게는 1 내지 16의 정수이고, 보다 바람직하게는 y는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 및 16으로부터 선택되고, 훨씬 더 바람직하게는 y는 4, 6, 8, 10 또는 12, 가장 바람직하게는 4이고;
Ra2는 H, 비치환된 알킬 및 치환된 알킬로부터 선택되고;
Ra4는 H, 비치환된 알킬 및 치환된 알킬로 구성된 군으로부터 선택되고;
A는 페닐, 나프틸, 인데닐, 인다닐, 테트랄리닐, C3-10 사이클로알킬, 4원 내지 7원 지방족 헤테로사이클릴 및 9원 내지 11원 지방족 헤테로비사이클릴로부터 선택되고, 이때 A는 비치환되거나 치환되고;
Q는 스페이서 모이어티이고;
Z1은 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함하는 담체이다.
바람직하게는, 화학식 II-A의 Ra2는 H이다.
바람직하게는, 화학식 II-A의 Ra4는 H, C1-6 알킬 및 치환된 C1-6 알킬, 보다 바람직하게는 C1-4 알킬 및 치환된 C1-4 알킬로부터 선택된다. 보다 바람직하게는, Ra4는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, t-부틸 및 벤질로부터 선택된다.
보다 바람직하게는, 화학식 II-A의 Ra4는 H이다.
바람직하게는, 화학식 II-A에서 Q는 COORa9, ORa9, C(0)Ra9, C(0)N(Ra9Ra9a), S(0)2N(Ra9Ra9a), S(0)N(Ra9Ra9a), S(0)2Ra9, S(0)Ra9, N(Ra9)S(0)2N(Ra9aRa9b), SRa9, N(Ra9Ra9a), OC(0)Ra9, N(Ra9)C(0)Ra9a, N(Ra9)S(0)2Ra9a, N(Ra9)S(0)Ra9a, N(Ra9)C(0)ORa9a, N(Ra9)C(0)N(Ra9aRa9b), OC(0)N(Ra9Ra9a), W, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐로부터 선택되고, 이때 W, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 Ra10으로 치환되고,
이때, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 -W-, -C(0)0-, -0-, -C(O)-, -C(0)N(Ra11)-, -S(0)2N(Ra11)-, -S(0)N(Ra11)-, -S(0)2-, -S(O)-, -N(Ra11)S(0)2N(Ra11a)-, -S-, -N(Ra11)-, -OC(0)Ra11, -N(Ra11)C(0)-, -N(Ra11)S(0)2-, -N(Ra11)S(0)-, -N(Ra11)C(0)0-, -N(Ra11)C(0)N(Ra11a)- 및 -OC(0)N(Ra11Ra11a)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고,
Ra9, Ra9a 및 Ra9b는 H, W, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고,
이때, W, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 Ra10으로 치환되고,
이때, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 W, -C(0)0-, -0-, -C(O)-, -C(0)N(Ra11)-, -S(0)2N(Ra11)-, -S(0)N(Ra11)-, -S(0)2-, -S(O)-, -N(Ra11)S(0)2N(Ra11a)-, -S-, -N(Ra11)-, -OC(0)Ra11, -N(Ra11)C(0)-, -N(Ra11)S(0)2-, -N(Ra11)S(0)-, -N(Ra11)C(0)0-, -N(Ra11)C(0)N(Ra11a)- 및 -OC(0)N(Ra11Ra11a)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고,
W는 페닐, 나프틸, 인데닐, 인다닐, 테트랄리닐, C3-10 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 9원 내지 11원 헤테로비사이클릴로 구성된 군으로부터 선택되고, 이때 W는 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 Ra10으로 치환되고,
Ra10은 할로겐, CN, 옥소(=O), COORa12, ORa12, C(0)Ra12, C(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2N(Ra12Ra12a), S(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2Ra12, S(0)Ra12, N(Ra12)S(0)2N(Ra12aRa12b), SRa12, N(Ra12Ra12a), N02, OC(0)Ra12, N(Ra12)C(0)Ra12a, N(Ra12)S(0)2Ra12a, N(Ra12)S(0)Ra12a, N(Ra12)C(0)ORa12a, N(Ra12)C(0)N(Ra12aRa12b), OC(0)N(Ra12Ra12a) 또는 C1 -6 알킬이고, 이때 C1-6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고,
Ra11, Ra11a, Ra12, Ra12a 및 Ra12b는 H 및 C1 -6 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 이때 C1 -6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환된다.
보다 바람직하게는, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 하기 화학식 IIaa로 표시된다:
Figure pct00023
상기 식에서,
T는 하기 화학식 i 및 iii으로부터 각각 독립적으로 선택되고:
Figure pct00024
Figure pct00025
[상기 식에서, 파선은 분자의 나머지 부분에의 부착을 표시한다];
y는 1 내지 64, 바람직하게는 1 내지 16의 정수이고, 보다 바람직하게는 y는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 및 16으로부터 선택되고, 훨씬 더 바람직하게는 y는 4, 6, 8, 10 또는 12, 가장 바람직하게는 4이고;
Ra2는 H, 비치환된 알킬 및 치환된 알킬로부터 선택되고; 바람직하게는, Ra2는 H 및 치환된 또는 비치환된 C1 -6 알킬로부터 선택되고;
Ra4는 H, 비치환된 알킬, 및 치환된 알킬로 구성된 군으로부터 선택되고; 바람직하게는, Ra4는 H 및 치환된 또는 비치환된 C1-6 알킬로부터 선택되고;
고리 A1은 C3 -10 사이클로알킬, 4원 내지 7원 지방족 헤테로사이클릴 또는 9원 내지 11원 지방족 헤테로비사이클릴이고, 이때 A1은 비치환되거나 치환되고;
Q1은 임의적으로 하나 이상의 Ra10으로 치환되는 C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2-50 알키닐로부터 선택되고, Q1이 C2 이상인 경우 임의적으로 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고:
Figure pct00026
,
이때, 상기 기 각각은 개별적으로 1회 이상 존재할 수 있고, 상기 C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 Z1에 연결된 말단에서 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로부터 선택된 기에 의해 종결될 수 있고:
Figure pct00027
;
Ra10은 할로겐, CN, 옥소(=O), COORa12, ORa12, C(0)Ra12, C(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2N(Ra12Ra12a), S(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2Ra12, S(0)Ra12, N(Ra12)S(0)2N(Ra12aRa12b), SRa12, N(Ra12Ra12a), N02, OC(0)Ra12, N(Ra12)C(0)Ra12a, N(Ra12)S(0)2Ra12a, N(Ra12)S(0)Ra12a, N(Ra12)C(0)ORa12a, N(Ra12)C(0)N(Ra12aRa12b), OC(0)N(Ra12Ra12a) 또는 C1 -6 알킬이고, 이때 C1-6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
Ra12, Ra12a 및 Ra12b는 H 및 C1 -6 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 이때 C1 -6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
R13 및 R13a는 H, C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로부터 독립적으로 선택되고; 바람직하게는, R13 및 R13a는 C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로부터 독립적으로 선택되고;
Z1은 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함하는 담체이다.
화학식 IIaa의 Ra4 및 Ra2는 인접하여 존재한다는 것이 이해된다.
바람직하게는, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 하기 화학식 IIab로 표시된다:
Figure pct00028
상기 식에서,
T, Ra2, Ra4, A1, Q1, Z1 및 y는 화학식 IIaa에서 정의된 바와 같이 사용된다.
화학식 IIab의 Ra4 및 Ra2는 인접하여 존재한다는 것이 이해된다.
바람직하게는, 화학식 IIaa 또는 IIab의 A1은 사이클로펜탄, 사이클로헥산 및 사이클로헵탄으로부터 선택된다. 보다 바람직하게는, A1은 사이클로헥산이다.
바람직하게는, 화학식 IIaa 또는 IIab의 Ra2 및 Ra4는 둘다 H이다.
바람직하게는, 화학식 IIaa 또는 IIab의 Q1은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 Ra10으로 치환되는 C1-50 알킬로부터 선택되고, 이때 C1-50 알킬은 Q1이 C2 이상인 경우 임의적으로 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고:
Figure pct00029
,
이때, 상기 기 각각은 개별적으로 1회 이상 존재할 수 있고, 상기 C1 -50 알킬은 임의적으로 Z1에 연결된 말단에서 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로 구성된 군으로부터 선택된 기에 의해 종결될 수 있고:
Figure pct00030
,
이때 R13 및 R13a는 화학식 IIaa에 대해 정의된 바와 같이 사용되고,
바람직하게는, 화학식 IIaa 또는 IIab의 y는 4, 6 또는 8이다. 보다 바람직하게는, 화학식 IIaa 또는 IIab의 y는 4 또는 8이고, 가장 바람직하게는 화학식 IIaa 또는 IIab의 y는 4이다.
훨씬 더 바람직하게는, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 화학식 IIac 또는 IIad로 표시된다:
Figure pct00031
Figure pct00032
상기 식에서,
T, Z1 및 y는 화학식 IIaa에서 정의된 바와 같이 사용되고;
x는 2, 3, 4, 5, 6, 7 및 8로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 x는 3, 4, 5, 6, 7 및 8로부터 선택되고;
X1은 임의적으로 하나 이상의 Ra10으로 치환되는 C1-50 알킬, C2-50 알케닐 및 C2-50 알키닐로부터 선택되고, 상기 C1-50 알킬, C2-50 알케닐 및 C2-50 알키닐은 X1이 C2 이상인 경우 임의적으로 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고:
Figure pct00033
,
이때, 상기 기 각각은 개별적으로 1회 이상 존재할 수 있고, 상기 C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 Z1에 연결된 말단에서 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로 구성된 군으로부터 선택된 기에 의해 종결될 수 있고:
Figure pct00034
;
Ra10은 할로겐, CN, 옥소(=O), COORa12, ORa12, C(0)Ra12, C(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2N(Ra12Ra12a), S(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2Ra12, S(0)Ra12, N(Ra12)S(0)2N(Ra12aRa12b), SRa12, N(Ra12Ra12a), N02, OC(0)Ra12, N(Ra12)C(0)Ra12a, N(Ra12)S(0)2Ra12a, N(Ra12)S(0)Ra12a, N(Ra12)C(0)ORa12a, N(Ra12)C(0)N(Ra12aRa12b), OC(0)N(Ra12Ra12a) 또는 C1 -6 알킬이고, 이때 C1-6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
Ra12, Ra12a 및 Ra12b는 H 및 C1 -6 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 이때 C1 -6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
이때, R13 및 R13a는 화학식 IIaa에 대해 정의된 바와 같이 사용된다.
바람직하게는, 화학식 IIac 및 IIad의 X1은 임의적으로 C3-7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되거나 이러한 기가 개재된 C1 -15 알킬, C2 -15 알케닐 및 C2 -15 알키닐로부터 선택되고:
Figure pct00035
,
이때, R13 및 R13a는 H, C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로부터 독립적으로 선택된다.
보다 바람직하게는, 화학식 IIac 또는 IIad의 y는 4, 6 또는 8이고, 훨씬 더 바람직하게는 y는 4 또는 8이고, 가장 바람직하게는 y는 4이다.
보다 바람직하게는, 화학식 IIac 또는 IIad의 x는 4, 5 또는 6이고, 가장 바람직하게는 x는 6이다.
훨씬 더 바람직하게는, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 하기 화학식 IIb로 표시된다:
Figure pct00036
상기 식에서,
Z1은 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함하는 담체이고;
X1 및 y는 화학식 IIac 및 IIad에서 정의된 바와 같이 사용되고;
x는 2, 3, 4, 5, 6, 7 및 8로부터 선택된다.
보다 바람직하게는, 화학식 IIb의 y는 4, 6 또는 8이고, 훨씬 더 바람직하게는 y는 4 또는 8이고, 가장 바람직하게는 y는 4이다.
보다 바람직하게는, 화학식 IIb의 x는 4, 5 또는 6이고, 훨씬 더 바람직하게는 x는 5 또는 6이고, 가장 바람직하게는 x는 6이다.
가장 바람직하게는, 화학식 IIb에서 y는 4이고, 화학식 IIb에서 x는 6이다.
보다 바람직하게는, 화학식 IIb의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 하기 화학식 IIba의 구조를 갖는다:
Figure pct00037
상기 식에서,
Z1은 화학식 IIaa에서 정의된 바와 같이 사용되고, y는 화학식 IIac 및 IIad에서 정의된 바와 같이 사용된다.
바람직하게는, 화학식 IIba의 y는 4, 6 또는 8이다. 보다 바람직하게는, 화학식 IIba의 y는 4 또는 8이고, 가장 바람직하게는 화학식 IIba의 y는 4이다.
보다 바람직하게는, 화학식 IIac의 X1은
Figure pct00038
이고, 이때 q는 1 내지 4로부터 선택되고, 바람직하게는 q는 1이다.
보다 바람직하게는, 화학식 IIad의 X1은
Figure pct00039
또는
Figure pct00040
이고, 이때 q는 1, 2, 3 및 4로부터 선택되고, 바람직하게는 2이다.
바람직하게는, 화학식 I의 X0은 하기 화학식들로부터 선택된다:
Figure pct00041
상기 식에서,
별표로 표시된 파선은 T에의 부착을 표시하고;
비표시된 파선은 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 나머지 부분에의 부착을 표시한다.
바람직하게는, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac 및 IIad의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 모든 모이어티 T는 동일한 구조를 갖는다.
바람직하게는, 화학식 I의 모든 모이어티 T는 화학식 v, ii 또는 iii의 구조, 보다 바람직하게는 화학식 v의 구조를 갖는다.
바람직하게는, 화학식 II, IIaa, IIab, IIac 및 IIad의 모든 모이어티 T는 동일한 구조를 갖고 화학식 ii, iii 또는 iv로 표시된다. 보다 바람직하게는, 화학식 II, IIaa, IIab, IIac 및 IIad의 모든 모이어티 T는 동일한 구조를 갖고 화학식 ii 또는 iv로 표시된다.
화학식 I의 바람직한 하위구조 -X0-T는 하기 화학식들로부터 선택된다:
Figure pct00042
Figure pct00043
Figure pct00044
Figure pct00045
Figure pct00046
Figure pct00047
상기 식에서,
파선은 Z1에의 부착을 표시한다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 하기 화학식 IId의 구조를 갖는다:
Figure pct00048
상기 식에서,
파선은 화학식 I의 T에의 부착을 표시하고;
Yv는 -N(R1v)-이고;
Xv는 -C(R4v)(R4av)-, -N(R4v)-, -0-, -C(R4v)(R4av)-C(R5v)(R5av)-, -C(R4v)(R4av)-N(R6v)-, -N(R6v)-C(R4v)(R4av)-, -C(R4v)(R4av)-0-, -0-C(R4v)(R4av)-, -C(O)-N(R6v)- 또는 -N(R6v)-C(0)-이고;
X1v는
Figure pct00049
또는
Figure pct00050
이고;
X2v는 -C(R7v)(R7av)- 또는 -C(R7v)(R7av)-C(R8v)(R8av)-이고;
X3v는 =0, =S 또는 =N-CN이고;
R1v, R1av, R2v, R2av, R3v, R3av, R4v, R4av, R5v, R5av, R6v, R7v, R7av, R8v 및 R8av는 H, C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐, C2 -6 알키닐, C1 -20 헤테로알킬 및 Y1-Tv로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고; 독립적으로 R1av/R4av, R1av/R5av, R4av/R5av 및 R7av/R8av 쌍들 중 0개의 쌍 또는 하나 이상의 쌍들은 존재하지 않고, 이들이 부착된 상응하는 탄소 원자들은 시스 이중 결합을 형성하고;
Y1v는 화학 결합, C1-6 알킬, C2-6 알케닐 또는 C2-6 알키닐이고;
Tv는 페닐, 나프틸, 인데닐, 인다닐, 테트랄리닐, C3 -10 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 9원 내지 11원 헤테로비사이클릴로 구성된 군으로부터 선택되고, 이때 Tv는 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 R9로 치환되고;
R9v는 할로겐, -CN, 옥소(=O), -C(0)OH, -OH, -S(0)2NH2, -S(0)NH2, -S(0)2OH, -S(0)OH, -SH, -NH2, -N02, C1 -6 알킬 또는 C1 -10 헤테로알킬이고;
임의적으로, R1v/R1av, R1v/R4v, R1v/R6v, R1v/R5v, R2v/R2av, R2v/R3v, R4v/R4av, R4v/R5v, R5v/R5av, R7v/R7av, R7v/R8v 및 R8v/R8av 쌍들 중 하나 이상의 쌍들은 이들이 부착된 원자와 함께 연결되어 고리 T를 형성하고;
임의적으로, R3v/R3av는 이들이 부착된 질소 원자와 함께 연결되어 4원 내지 7원 헤테로환을 형성하고;
R1v, R1av, R2v, R2av, R3v, R3av, R4v, R4av, R5v, R5av, R6v, R7v, R7av, R8v 및 R8av 중 하나는 화학식 I의 Z0으로 치환된다.
화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 및 IIba의 담체 Z1은 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함한다.
바람직한 중합체는 2-메타크릴오일-옥시에틸 포스포일 콜린, 하이드로겔, PEG계 하이드로겔, 폴리(아크릴산), 폴리(아크릴레이트), 폴리(아크릴아미드), 폴리(알킬옥시) 중합체, 폴리(아미드), 폴리(아미도아민), 폴리(아미노산), 폴리(무수물), 폴리(아스파르트아미드), 폴리(부티르산), 폴리(글리콜산), 폴리부틸렌 테레프탈레이트, 폴리(카프로락톤), 폴리(카보네이트), 폴리(시아노아크릴레이트), 폴리(디메틸아크릴아미드), 폴리(에스테르), 폴리(에틸렌), 폴리(에틸렌글리콜), 폴리(에틸렌 옥사이드), 폴리(에틸 포스페이트), 폴리(에틸옥사졸린), 폴리(글리콜산), 폴리(하이드록시에틸 아크릴레이트), 폴리(하이드록시에틸옥사졸린), 폴리(하이드록시메타크릴레이트), 폴리(하이드록시프로필메타크릴아미드), 폴리(하이드록시프로필 메타크릴레이트), 폴리(하이드록시프로필옥사졸린), 폴리(이미노카보네이트), 폴리(락트산), 폴리(락트-코-글리콜산), 폴리(메타크릴아미드), 폴리(메타크릴레이트), 폴리(메틸옥사졸린), 폴리(오르가노포스파젠), 폴리(오르토 에스테르), 폴리(옥사졸린), 폴리(프로필렌 글리콜), 폴리(실록산), 폴리(우레탄), 폴리(비닐 알코올), 폴리(비닐 아민), 폴리(비닐메틸에테르), 폴리(비닐피롤리돈), 실리콘, 셀룰로스, 카보메틸 셀룰로스, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스, 키틴, 키토산, 덱스트란, 덱스트린, 젤라틴, 하이알루론산 및 유도체, 만난, 펙틴, 람노갈락투로난, 전분, 하이드록시알킬 전분, 하이드록시에틸 전분 및 다른 탄수화물계 중합체, 자일란, 및 이들의 공중합체로부터 선택된다.
바람직하게는, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 및 IIba의 담체 Z1은 폴리(옥사졸린) 또는 PEG계 중합체를 포함한다. 가장 바람직하게는, 담체 Z1은 PEG계 중합체를 포함한다.
한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 및 IIba의 담체 Z1은 당분야에서 공지되어 있는 (중합체에 대한 한 선택으로서) 하이드로겔일 수 있다. 적합한 하이드로겔은 국제 특허출원 공보 제WO-A 2006/003014호 또는 유럽 특허출원 공보 제1 625 856호에 기재되어 있다. 담체 Z1이 하이드로겔인 경우, 상기 담체는 본원에 참고로 도입되는 국제 특허출원 공보 제WO-A 2011/012715호에 개시된 PEG계 하이드로겔인 것이 바람직하다.
바람직하게는, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 및 IIba의 담체 Z1은 수용성 담체이다.
한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 및 IIba의 담체 Z1은 하기 화학식 III의 구조를 갖는다:
Figure pct00051
상기 식에서,
파선은 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 I의 화합물인 경우) X0에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) Q에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) Q1에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac, IIad 및 IIb의 화합물인 경우) X1에의 부착, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIba의 화합물인 경우) 분자의 나머지 부분에의 부착을 표시하고;
화학식 III의 m, n 및 p는 각각 독립적으로 5 내지 500의 정수이고;
화학식 III의 q는 2 내지 32이다.
한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad 및 IIb의 담체 Z1은 하기 화학식 IIIa의 구조를 갖는다:
Figure pct00052
상기 식에서,
파선은 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 I의 화합물인 경우) X0에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) Q에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) Q1에의 부착, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac, IIad 및 IIb의 화합물인 경우) X1에의 부착을 표시하고;
화학식 IIIa의 m, n 및 p는 각각 독립적으로 5 내지 500의 정수이고;
화학식 IIIa의 q는 2 내지 32이다.
바람직하게는, 화학식 III 및 IIIa에서 q는 2 내지 14의 정수이고, 보다 바람직하게는 화학식 III 및 IIIa의 q는 6이다.
바람직하게는, 화학식 III 및 IIIa에서 m, n 및 p는 각각 독립적으로 10 내지 250, 보다 바람직하게는 50 내지 150이다. 바람직하게는, 화학식 III 및 IIIa에서 m, n 및 p는 동일하다.
대안적 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 및 IIba의 담체 Z1은 하기 화학식 IV의 구조를 갖는다:
Figure pct00053
상기 식에서,
m1 및 m2 중 하나가 1인 경우 파선은 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 I의 화합물인 경우) X0에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) Q에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) Q1에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 화합물인 경우) X1에의 부착, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIba의 화합물인 경우) 분자의 나머지 부분에의 부착을 표시하고, m1 및 m2가 0인 경우 상기 담체는 T에 공유부착되고;
화학식 IV의 m, n 및 p는 각각 독립적으로 5 내지 500의 정수이고, 화학식 IV의 q는 0 내지 14이다.
바람직하게는, 화학식 IV에서 q는 2 내지 6의 정수이고, 보다 바람직하게는 화학식 IV의 q는 2이다.
바람직하게는, 화학식 IV에서 m, n 및 p는 각각 독립적으로 10 내지 250, 보다 바람직하게는 50 내지 150이다. 바람직하게는, 화학식 IV에서 m, n 및 p는 동일하다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 및 IIba의 Z1은 하기 화학식 V의 구조를 갖는다:
Hyp1 mx-POLx-Hyp2 (V)
상기 식에서,
POLx는 0.5 kDa 내지 160 kDa의 분자량을 갖는 중합체성 모이어티이고;
Hyp1 및 Hyp2는 독립적으로 과분지된 모이어티이고;
mx는 0 또는 1이다.
중합체성 모이어티 POLx는 0.5 kDa 내지 160 kDa, 바람직하게는 2 kDa 내지 80 kDa, 보다 바람직하게는 5 kDa 내지 40 kDa의 분자량을 갖는다.
POLx는 예를 들면, 폴리펩티드, 2-메타크릴오일-옥시에틸 포스포일 콜린, 수용성 하이드로겔, 수용성 PEG계 하이드로겔, 수용성 하이알루론산계 하이드로겔, 폴리(아크릴산), 폴리(아크릴레이트), 폴리(아크릴아미드), 폴리(알킬옥시) 중합체, 폴리(아미드), 폴리(아미도아민), 폴리(아미노산), 폴리(무수물), 폴리(아스파르트아미드), 폴리(부티르산), 폴리(글리콜산), 폴리부틸렌 테레프탈레이트, 폴리(카프로락톤), 폴리(카보네이트), 폴리(시아노아크릴레이트), 폴리(디메틸아크릴아미드), 폴리(에스테르), 폴리(에틸렌), 폴리(에틸렌글리콜), 폴리(에틸렌 옥사이드), 폴리(에틸 포스페이트), 폴리(에틸옥사졸린), 폴리(글리콜산), 폴리(하이드록시에틸 아크릴레이트), 폴리(하이드록시에틸옥사졸린), 폴리(하이드록시메타크릴레이트), 폴리(하이드록시프로필메타크릴아미드), 폴리(하이드록시프로필 메타크릴레이트), 폴리(하이드록시프로필옥사졸린), 폴리(이미노카보네이트), 폴리(락트산), 폴리(락트-코-글리콜산), 폴리(메타크릴아미드), 폴리(메타크릴레이트), 폴리(메틸옥사졸린), 폴리(오르가노포스파젠), 폴리(오르토 에스테르), 폴리(옥사졸린), 폴리(프로필렌 글리콜), 폴리(실록산), 폴리(우레탄), 폴리(비닐 알코올), 폴리(비닐 아민), 폴리(비닐메틸에테르), 폴리(비닐피롤리돈), 실리콘, 셀룰로스, 카보메틸 셀룰로스, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스, 키틴, 키토산, 덱스트란, 덱스트린, 젤라틴, 하이알루론산 및 유도체, 작용기화된 하이알루론산, 만난, 펙틴, 람노갈락투로난, 전분, 하이드록시알킬 전분, 하이드록시에틸 전분 및 다른 탄수화물계 중합체, 자일란, 및 이들의 공중합체로 구성된 중합체들로 구성된 군으로부터 선택될 수 있다.
화학식 V의 중합체성 모이어티 POLx는 직쇄 또는 분지쇄 중합체를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 화학식 V의 POLx는 직쇄 중합체를 포함한다(특히, 이러한 중합체로 구성된다).
한 바람직한 실시양태에서, 화학식 V의 POLx는 PEG계 중합체 또는 폴리(옥사졸린)계 중합체, 보다 바람직하게는 직쇄 PEG계 중합체를 포함한다(특히, 이러한 중합체로 구성된다). 훨씬 더 바람직하게는, 화학식 V의 POLx는 PEG계 직쇄 중합체로 구성된다.
화학식 V에서 m이 0인 경우, 화학식 V의 POLx는 화학식 X1-(OCH2CH2)p-0-(CH2)n-X2-의 구조를 포함하는, 바람직하게는 이러한 구조로 구성되는 것이 바람직하고, 이때 n은 2, 3 및 4로부터 선택되고; p는 5 내지 2000의 정수이고, 바람직하게는 p는 10 내지 1000의 정수이고, 보다 바람직하게는 p는 100 내지 1000의 정수이고; X2는 화학식 V의 POLx와 Hyp2를 공유연결하는 작용기이고; X1은 H, CH3 및 C2H5로부터 선택된다.
화학식 V에서 m이 1인 경우, 화학식 V의 POLx는 화학식 X3-(CH2)n1-(OCH2CH2)p-0-(CH2)n2-X2-의 구조를 포함하는, 바람직하게는 이러한 구조로 구성되는 것이 바람직하고, 이때 n1 및 n2는 2, 3 및 4로부터 독립적으로 선택되고; p는 5 내지 2000의 정수이고, 바람직하게는 p는 10 내지 1000의 정수이고, 보다 바람직하게는 p는 100 내지 1000의 정수이고; X2 및 X3은 화학식 V의 POLx를 각각 Hyp1 및 Hyp2에 공유연결하는 작용기이다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 V에서 mx는 0이다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, 화학식 V의 POLx는 폴리펩티드 (또는 단백질), 특히 후술된 비면역원성 폴리펩티드이다.
바람직하게는, 화학식 V의 중합체성 모이어티 POLx는 약 100개 이상의 아미노산 잔기를 포함하는, 특히 약 100개 이상의 아미노산 잔기로 구성된 폴리펩티드이다. 바람직한 실시양태에서, 알라닌, 세린 및/또는 프롤린 잔기로부터 선택된 아미노산이 존재하고, 특히 주로 존재하고, 상기 폴리펩티드 모이어티는 바람직하게는 생리학적 조건에서 랜덤 코일 입체구조를 갖는다. 화학식 V의 이러한 폴리펩티드 모이어티 POLx는 예를 들면, 동결건조물 또는 건조된 조성물에 존재할 때 랜덤 코일을 일시적으로 또는 임시로 형성하지 않을 수 있다는 것이 이해된다.
화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 최대 약 1000개의 아미노산 잔기, 바람직하게는 최대 약 900개의 아미노산 잔기, 보다 바람직하게는 최대 약 800개의 아미노산 잔기, 훨씬 더 바람직하게는 최대 약 700개의 아미노산 잔기, 특히 바람직하게는 최대 약 600개의 아미노산 잔기로 구성된 아미노산 서열을 갖는 랜덤 코일 입체구조를 가질 수 있다. 따라서, 랜덤 코일 입체구조를 형성하는 아미노산 서열은 최대 약 500개의 아미노산 잔기 또는 최대 약 450개의 아미노산 잔기로 구성될 수 있다.
랜덤 코일 입체구조를 형성하는 아미노산 서열은 최대 약 1200개 내지 약 1500개 이하의 아미노산 잔기로 구성될 수 있다는 것도 본원에서 예상된다. 따라서, 랜덤 코일 입체구조를 형성하는 아미노산 서열은 약 100개 내지 약 1500개의 아미노산 잔기로 구성될 수 있다.
구체적인 실시양태에서, 랜덤 코일 입체구조를 형성하는 상기 아미노산 서열은 본원에서 특징지어진 바와 같이, 즉 하기 정의된 바와 같이 알라닌, 세린 및/또는 프롤린을 주요 또는 독특한 잔기로서 포함하는 약 100개 내지 1000개의 아미노산 잔기로 구성된다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 주로 아미노산 잔기 알라닌, 세린 및 프롤린 중 1개, 2개 또는 3개의 아미노산 잔기로 구성되고, 이때 프롤린 잔기는 바람직하게는 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx의 약 4% 내지 약 40%를 차지한다. 알라닌 및 세린 잔기는 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx의 남은 60% 내지 96% 이상을 구성한다. 그러나, 하기 본원에 상세히 기재될 바와 같이, 화학식 V의 상기 폴리펩티드 모이어티 POLx는 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이한 추가 아미노산을 즉, 소수 성분으로서 포함할 수도 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "소수 성분"은 최대 10%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 10개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 바람직하게는 최대 8%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 8개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 보다 바람직하게는 최대 6%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 6개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 훨씬 더 바람직하게는 최대 5%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 5개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 특히 바람직하게는 최대 4%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 4개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 보다 특히 바람직하게는 최대 3%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 3개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 훨씬 더 특히 바람직하게는 최대 2%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 2개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 가장 바람직하게는 최대 1%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 1개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것을 의미한다. 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이한 상기 아미노산은 Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Thr, Trp, Tyr, Val, 셀레노시스테인, 셀레노메티오닌 및 하이드록시프롤린을 포함하는 천연 또는 단백질생성 아미노산들로 구성된 군으로부터 선택될 수 있다. 소수 성분은 비천연 발생 아미노산들로부터 선택될 수도 있다.
용어 "약 100/150/200/250/300/300/350개(등) 이상의 아미노산 잔기"는 정확한 수의 아미노산 잔기로 한정되지 않고, 추가 10% 내지 20%의 잔기를 포함하거나 10% 내지 20%의 잔기를 덜 포함하는 아미노산 스트레치(stretch)도 포함한다. 예를 들면, "약 100개 이상의 아미노산 잔기"는 본 발명의 요지를 벗어나지 않으면서 80개 내지 100개의 아미노산 잔기 및 약 100개 내지 120개의 아미노산 잔기도 포괄할 수 있다.
한 실시양태에서, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 복수의 중합체 카세트를 포함하고, 이때 상기 중합체 카세트는 Ala, Ser 및 Pro으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개의 아미노산으로 구성되고, 6개 이하의 연속 아미노산 잔기는 동일하고, 상기 프롤린 잔기는 화학식 V의 상기 폴리펩티드 모이어티 POLx의 아미노산의 4% 초과 내지 40% 미만의 아미노산을 구성한다.
화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 복수의, 특히 2개, 3개, 4개 또는 5개 이상의 동일한 중합체 카세트 또는 복수의 동일하지 않은 중합체 카세트를 포함할 수 있다. Ala, Ser 및 Pro 잔기로 구성된 중합체 카세트의 비한정적 예는 하기 본원에 제공되어 있다(서열번호 9, 서열번호 10, 서열번호 11, 서열번호 12, 서열번호 13 및 서열번호 14, 또는 이들 서열들의 펩티드 단편 또는 다량체 참조). 중합체 카세트는 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 11개, 12개, 13개, 14개, 15개, 16개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 22개, 23개, 24개, 25개, 26개, 27개, 28개, 29개 또는 30개 이상의 아미노산 잔기로 구성될 수 있고, 이때 각각의 중합체 카세트는 Ala, Ser 및 Pro 잔기(들)를 포함한다.
한 실시양태에서, 본 발명에 따른 중합체 카세트는 100개 초과의 아미노산 잔기를 포함하지 않는다. 바람직하게는, 본원에서 정의된 중합체 카세트는 약 4% 초과, 바람직하게는 약 5% 초과, 훨씬 더 바람직하게는 약 6% 초과, 특히 바람직하게는 약 8% 초과, 보다 특히 바람직하게는 약 10% 초과, 훨씬 더 특히 바람직하게는 약 15% 초과, 가장 바람직하게는 약 20% 초과의 프롤린 잔기를 포함한다. 본원에서 정의된 이러한 중합체 카세트는 바람직하게는 약 40% 미만 또는 약 35% 미만의 프롤린 잔기를 포함한다.
한 바람직한 실시양태에서, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 본원에서 정의된 바와 같이 프롤린 잔기를 추가로 포함하는 하기 화학식 a를 포함한다(특히, 화학식 a로 구성된다):
Serx[AlaySerz]n (a)
상기 식에서,
x는 정수 0 내지 6으로부터 독립적으로 선택되고;
y는 1 내지 6의 정수로부터 각각 독립적으로 선택되고;
z는 1 내지 6의 정수로부터 각각 독립적으로 선택되고;
n은 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx가 약 100개 이상의 아미노산 잔기, 특히 약 100개 내지 약 3000개, 바람직하게는 약 2000개, 보다 바람직하게는 약 1000개 이상의 아미노산 잔기로 구성되도록 하는 임의의 정수이다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 5개 이하의 동일한 연속 아미노산 잔기, 보다 바람직하게는 4개 이하의 동일한 연속 아미노산 잔기, 가장 바람직하게는 3개 이하의 동일한 연속 아미노산 잔기를 포함한다.
상기 본원에 이미 표시된 바와 같이, 한 실시양태에서 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 프롤린 잔기를 포함하고, 이때 상기 프롤린 잔기는 화학식 V의 POLx의 약 4% 초과, 바람직하게는 약 5% 초과, 훨씬 더 바람직하게는 약 6% 초과, 특히 바람직하게는 약 8% 초과, 보다 특히 바람직하게는 약 10% 초과, 훨씬 더 특히 바람직하게는 약 15% 초과, 가장 바람직하게는 약 20% 초과의 아미노산을 구성한다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx를 구성하는 아미노산의 약 4% 초과 내지 약 50% 미만, 바람직하게는 약 10% 초과 내지 약 50% 미만, 가장 바람직하게는 약 20% 초과 내지 약 50% 미만의 알라닌 잔기를 포함한다.
추가 바람직한 실시양태에서, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx를 구성하는 아미노산의 약 4% 초과 내지 약 50% 미만, 바람직하게는 약 10% 초과 내지 약 50% 미만, 가장 바람직하게는 약 20% 초과 내지 약 50% 미만의 세린 잔기를 포함한다.
바람직하게는, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx를 구성하는 아미노산의 약 35% 프롤린 잔기, 약 50% 알라닌 잔기 및 약 15% 세린 잔기를 포함한다. 대안적으로, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx를 구성하는 아미노산의 약 35% 프롤린 잔기, 약 15% 알라닌 잔기 및 약 50% 세린 잔기를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 하기 알라닌-세린 중합체 카세트들 중 하나 이상을 포함한다:
서열번호 1
AAAASSASSASSSSSAAASA
서열번호 2
AASAAASSAAASAAAASASS
서열번호 3
ASASASASASASSAASAASA
서열번호 4
SAASSSASSSSAASSASAAA
서열번호 5
SSSSAASAASAAAAASSSAS
서열번호 6
SSASSSAASSSASSSSASAA
서열번호 7
SASASASASASAASSASSAS
서열번호 8
ASSAAASAAAASSAASASSS
이들 알라닌-세린 중합체 카세트의 다량체는 랜덤 코일 입체구조를 형성할 수 있고, 이 경우 발생된 아미노산 서열은 상기 본원에서 정의된 바와 같이 프롤린 잔기를 추가로 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 하기 중합체 카세트들 중 하나 이상의 중합체 카세트를 포함한다:
서열번호 9
ASPAAPAPASPAAPAPSAPA
서열번호 10
AAPASPAPAAPSAPAPAAPS
서열번호 11
APSSPSPSAPSSPSPASPSS
서열번호 15
SAPSSPSPSAPSSPSPASPS
서열번호 15는 원순열 형태의 본원에 제공된 서열번호 11에 상응하고, 이때 마지막 세린은 제거되었고, 또 다른 세린은 출발 아미노산으로서 추가되었다. 결과적으로, 이 변경된 서열의 다량체는 맨 처음 잔기 및 맨 마지막 잔기를 제외하고 비변경된 서열의 다량체와 본질적으로 동일한 내부 반복 유닛을 보유한다. 따라서, 서열번호 15는 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx를 위한 추가 중합체 카세트의 한 예로서 간주될 수 있다. 다른 중합체 카세트, 및 본원에 제공된 아미노산 중합체의 (보다 짧은) 펩티드 단편 또는 원순열 버전도 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx를 위한 중합체 카세트로서 사용될 수 있다는 것이 당업자에게 명확하다.
랜덤 코일 입체구조를 형성하는 추가 예시적 아미노산 중합체는 하기 서열들로 구성된 군으로부터 선택될 수 있는 아미노산 서열을 포함할 수 있다:
서열번호 12
SSPSAPSPSSPASPSPSSPA
서열번호 13
AASPAAPSAPPAAASPAAPSAPPA
서열번호 14
ASAAAPAAASAAASAPSAAA
따라서, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx를 위한 바람직한 중합체 카세트는 하기 서열들로부터 선택되거나, 이들 서열들의 전체 또는 부분으로서 이들 서열들의 원순열 버전 또는 다량체(들)이다:
ASPAAPAPASPAAPAPSAPA(서열번호 9),
AAPASPAPAAPSAPAPAAPS(서열번호 10),
APSSPSPSAPSSPSPASPSS(서열번호 11),
SSPSAPSPSSPASPSPSSPA(서열번호 12),
AASPAAPSAPPAAASPAAPSAPPA(서열번호 13), 및
ASAAAPAAASAAASAPSAAA(서열번호 14).
또한, 이들 서열들 및 상기 본원에 제공된 서열들의 펩티드 단편(들) 또는 다량체(들) 또는 원순열 버전도 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx를 위한 중합체 카세트로서 본 발명에서 사용될 수 있다. 당업자는 생리학적 조건 하에 랜덤 코일 입체구조를 형성하고 본원에서 정의된 바와 같이 주로 알라닌, 세린 및 프롤린으로 구성된 추가 아미노산 중합체 카세트를 용이하게 발생시킬 수 있다. 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx를 위해 사용될 아미노산 중합체 카세트를 형성하는 랜덤 코일 입체구조의 이러한 다른 추가 예는 특히, 상기 제시된 특정 중합체 카세트들의 조합물 및/또는 펩티드 단편 또는 원순열 버전을 포함할 수 있다.
따라서, 예시된 중합체 카세트는 새로 조합되어 추가 중합체 카세트를 형성할 수 있는 개별 펩티드 단편도 제공할 수 있다.
전술된 바에 따르면, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 상기 본원에 개시된 서열번호 9, 10, 11, 12, 13 또는 14를 갖는 아미노산 서열들 중 한 아미노산 서열로 구성된 서열의 다량체를 포함할 수 있거나, 아미노산 서열 서열번호 9, 10, 11, 12, 13 및 14 중 하나 초과의 아미노산 서열로 구성된 서열의 다량체를 포함할 수 있다. 나아가, 이들 예시된 서열들의 펩티드 단편 또는 원순열 버전도 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx의 추가 중합체 카세트를 구축하는 데에 사용될 수 있다는 것이 예상된다.
또 다른 실시양태에서, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 서열번호 9, 10, 11, 12, 13, 14 및 15로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열의 (원)순열로 구성된 서열의 다량체(들), 또는 이들 (원)순열 서열들의 다량체를 포함할 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx는 서열번호 9, 10, 12, 13, 14 및 15로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열의 펩티드 단편/부분으로 구성된 다량체, 또는 이들 예시된 중합체 카세트들의 다량체(들)를 포함할 수 있다.
화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx의 발생을 위해 사용될 이들 서열들의 펩티드 단편은 상기 서열번호 9, 10, 11, 12, 13 및 14로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열의 3개 이상, 바람직하게는 4개 이상, 보다 바람직하게는 5개 이상, 훨씬 더 바람직하게는 6개 이상, 훨씬 더 바람직하게는 8개 이상, 특히 바람직하게는 10개 이상, 보다 특히 바람직하게는 12개 이상, 훨씬 더 특히 바람직하게는 14개 이상, 바람직하게는 6개 이상, 훨씬 더 바람직하게는 8개 이상, 특히 바람직하게는 10개 이상, 보다 특히 바람직하게는 12개 이상, 훨씬 더 특히 바람직하게는 14개 이상, 훨씬 더 특히 바람직하게는 16개 이상, 가장 바람직하게는 18개 이상의 연속 아미노산으로 구성될 수 있다.
전체 분포, 및 알라닌, 세린 및 프롤린의 양에 대한 상기 확인된 규칙이 준수되는 한, 예를 들면, 본 발명의 중합체 카세트의 개별 펩티드 단편들은 추가 개별 중합체 카세트로 조합될 수 있다. 또한, 이들 중합체 카세트들은 최소 또는 소수 성분으로서만, 즉 개별 중합체 카세트의 최대 10%, 바람직하게는 최대 2%의 비율로 추가 아미노산 잔기도 포함할 수 있다. 본 발명의 한 실시양태에서, 중합체 카세트를 포함하는 화학식 V 모이어티의 POLx는 약 100개 이상의 아미노산 잔기로 구성된다. 개별 중합체 카세트는 보다 긴 랜덤 코일 형성 아미노산 중합체를 형성하기 위해 조합될 수 있고, 이때 화학식 V의 폴리펩티드 모이어티 POLx의 최대 길이는 약 3000개 아미노산이다.
바람직하게는, 화학식 V의 POLx는 특히, 영구적인 연결, 보다 바람직하게는 영구적인 아미드 연결에 의해 화학식 V의 Hyp1 및 Hyp2에 공유연결된다.
본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물에서, 화학식 V의 Hyp1 및 Hyp2의 작용기는 화학식 I의 모이어티 X0, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) 모이어티 Q, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) 모이어티 Q1, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 화합물인 경우) 모이어티 X1, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIba의 화합물인 경우) 분자의 나머지 부분에 연결된다.
화학식 V의 과다분지된 모이어티 Hyp1 및 Hyp2는 결합된 형태의 글리세롤, 펜타에리쓰리톨, 디펜타에리쓰리톨, 트리펜타에리쓰리톨, 헥사글리세린, 수크로스, 소르비톨, 프럭토스, 만니톨, 글루코스, 셀룰로스, 아밀로스, 전분, 하이드록시알킬 전분, 폴리비닐알코올, 덱스트란, 하이우알루로난, 디라이신, 트리라이신, 테트라라이신, 펜타라이신, 헥사라이신, 헵타라이신, 옥타라이신, 노나라이신, 데카라이신, 운데카라이신, 도데카라이신, 트리데카라이신, 테트라데카라이신, 펜타데카라이신, 헥사데카라이신, 헵타데카라이신, 옥타데카라이신, 노나데카라이신, 트리오르니틴, 테트라오르니틴, 펜타오르니틴, 헥사오르니틴, 헵타오르니틴, 옥타오르니틴, 노나오르니틴, 데카오르니틴, 운데카오르니틴, 도데카오르니틴, 트리데카오르니틴, 테트라데카오르니틴, 펜타데카오르니틴, 헥사데카오르니틴, 헵타데카오르니틴, 옥타데카오르니틴, 노나데카오르니틴, 트리디아미노부티르산, 테트라디아미노부티르산, 펜타디아미노부티르산, 헥사디아미노부티르산, 헵타디아미노부티르산, 옥타디아미노부티르산, 노나디아미노부티르산, 데카디아미노부티르산, 운데카디아미노부티르산, 도데카디아미노부티르산, 트리데카디아미노부티르산, 테트라데카디아미노부티르산, 펜타데카디아미노부티르산, 헥사데카디아미노부티르산, 헵타데카디아미노부티르산, 옥타데카디아미노부티르산, 노나데카디아미노부티르산, 디(글루탐산), 트리(글루탐산), 테트라(글루탐산), 펜타(글루탐산), 헥사(글루탐산), 헵타(글루탐산), 옥타(글루탐산), 노나(글루탐산), 데카(글루탐산), 운데카(글루탐산), 도데카(글루탐산), 트리데카(글루탐산), 테트라데카(글루탐산), 펜타데카(글루탐산), 헥사데카(글루탐산), 헵타데카(글루탐산), 옥타데카(글루탐산), 노나데카(글루탐산), 디(아스파르트산), 트리(아스파르트산), 테트라(아스파르트산), 펜타(아스파르트산), 헥사(아스파르트산), 헵타(아스파르트산), 옥타(아스파르트산), 노나(아스파르트산), 데카(아스파르트산), 운데카(아스파르트산), 도데카(아스파르트산), 트리데카(아스파르트산), 테트라데카(아스파르트산), 펜타데카(아스파르트산), 헥사데카(아스파르트산), 헵타데카(아스파르트산), 옥타데카(아스파르트산), 노나데카(아스파르트산), 폴리에틸렌이민 및 저분자량 PEI를 포함하는, 특히 이들로 구성된 군으로부터 각각 독립적으로 선택된다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 V의 과다분지된 모이어티 Hyp1 및 Hyp2는 결합된 형태의 디라이신, 트리라이신, 테트라라이신, 펜타라이신, 헥사라이신, 헵타라이신, 옥타라이신, 노나라이신, 데카라이신, 운데카라이신, 도데카라이신, 트리데카라이신, 테트라데카라이신, 펜타데카라이신, 헥사데카라이신, 헵타데카라이신, 옥타데카라이신, 노나데카라이신, 트리오르니틴, 테트라오르니틴, 펜타오르니틴, 헥사오르니틴, 헵타오르니틴, 옥타오르니틴, 노나오르니틴, 데카오르니틴, 운데카오르니틴, 도데카오르니틴, 트리데카오르니틴, 테트라데카오르니틴, 펜타데카오르니틴, 헥사데카오르니틴, 헵타데카오르니틴, 옥타데카오르니틴, 노나데카오르니틴, 트리디아미노부티르산, 테트라디아미노부티르산, 펜타디아미노부티르산, 헥사디아미노부티르산, 헵타디아미노부티르산, 옥타디아미노부티르산, 노나디아미노부티르산, 데카디아미노부티르산, 운데카디아미노부티르산, 도데카디아미노부티르산, 트리데카디아미노부티르산, 테트라데카디아미노부티르산, 펜타데카디아미노부티르산, 헥사데카디아미노부티르산, 헵타데카디아미노부티르산, 옥타데카디아미노부티르산, 노나데카디아미노부티르산, 디(글루탐산), 트리(글루탐산), 테트라(글루탐산), 펜타(글루탐산), 헥사(글루탐산), 헵타(글루탐산), 옥타(글루탐산), 노나(글루탐산), 데카(글루탐산), 운데카(글루탐산), 도데카(글루탐산), 트리데카(글루탐산), 테트라데카(글루탐산), 펜타데카(글루탐산), 헥사데카(글루탐산), 헵타데카(글루탐산), 옥타데카(글루탐산), 노나데카(글루탐산), 디(아스파르트산), 트리(아스파르트산), 테트라(아스파르트산), 펜타(아스파르트산), 헥사(아스파르트산), 헵타(아스파르트산), 옥타(아스파르트산), 노나(아스파르트산), 데카(아스파르트산), 운데카(아스파르트산), 도데카(아스파르트산), 트리데카(아스파르트산), 테트라데카(아스파르트산), 펜타데카(아스파르트산), 헥사데카(아스파르트산), 헵타데카(아스파르트산), 옥타데카(아스파르트산), 노나데카(아스파르트산), 폴리에틸렌이민, 및 저분자량 PEI를 포함하는, 특히 이들로 구성된 군으로부터 각각 독립적으로 선택된다.
보다 바람직하게는, 화학식 V의 과다분지된 모이어티 Hyp1 및 Hyp2는 결합된 형태의 트리라이신, 테트라라이신, 펜타라이신, 헥사라이신, 헵타라이신, 옥타라이신, 노나라이신, 데카라이신, 운데카라이신, 도데카라이신, 트리데카라이신, 테트라데카라이신, 펜타데카라이신, 헥사데카라이신 및 헵타데카라이신을 포함하는, 보다 바람직하게는 이들로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 훨씬 더 바람직하게는 Hyp1 및 Hyp2는 결합된 형태의 트리라이신, 헵타라이신 및 펜타데카라이신을 포함하는, 바람직하게는 이들로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택된다.
보다 바람직하게는, 화학식 V의 Hyp1 및 Hyp2는 하기 구조들 중 어느 하나로부터 독립적으로 선택된다:
Figure pct00054
Figure pct00055
Figure pct00056
Figure pct00057
상기 식에서,
별표로 표시된 파선은 화학식 V의 POLx에의 부착을 표시하고;
비표시된 파선은 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 I의 화합물인 경우) X0에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) Q에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) Q1에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 화합물인 경우) X1에의 부착, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIba의 화합물인 경우) 분자의 나머지 부분에의 부착을 표시하고;
qx는 0 내지 15, 바람직하게는 3 내지 7, 훨씬 더 바람직하게는 6의 정수이다.
바람직하게는, 화학식 V의 Hyp1 및 Hyp2는 각각 헵타라이시닐 기이고, 특히 화학식 V의 Hyp1 및 Hyp2는 상기 화학식 ii-x의 구조를 각각 갖는다.
바람직하게는, 화학식 V의 Hyp1 및 Hyp2는 동일한 구조를 갖는다.
화학식 V의 Hyp1 및 Hyp2의 작용기는 화학식 V의 Hyp1 및 Hyp2와 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 I의 화합물인 경우) X0, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) Q, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) Q1, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 화합물인 경우) X1, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIba의 화합물인 경우) 분자의 나머지 부분의 직접적인 연결을 위한 부착점으로서 작용한다. X0, Q, Q1 또는 X1 각각에 연결되지 않은 남은 작용기는 서로 독립적으로 적합한 캡핑 시약에 의해 캡핑될 수 있거나 임의적으로 특히 영구적인 연결을 통해 하나 이상의 표적화 모이어티에 연결될 수 있다.
따라서, 본 발명의 수용성 담체-연결된 전구약물에서, 화학식 V의 과다연결된 모이어티 Hyp1 및 Hyp2는 화학식 V의 POLx에 연결되고, 화학식 V의 Hyp1 및 Hyp2의 작용기는 화학식 I의 X0, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) Q, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) Q1, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 화합물인 경우) X1, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIba의 화합물인 경우) 분자의 나머지 부분, 영구적인 연결, 표적화 모이어티, 및/또는 캡핑 기에 연결된다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 V의 과다분지된 모이어티 Hyp1 및 Hyp2의 모든 작용기들은 화학식 I의 X0, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) Q, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) Q1, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 화합물인 경우) X1, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIba의 화합물인 경우) 분자의 나머지 부분에 연결된다.
바람직하게는, 화학식 V의 과다분지된 모이어티 Hyp1 및 Hyp2는 독립적으로 0.1 kDa 내지 4 kDa, 보다 바람직하게는 0.4 kDa 내지 2 kDa의 분자량을 갖는다. 바람직하게는, 화학식 V의 과다분지된 모이어티 Hyp1 및 Hyp2는 각각 독립적으로 3개 이상의 분지를 갖고 각각 독립적으로 4개 이상의 X0, Q, Q1, X1 또는 분자의 나머지 부분, 영구적인 연결, 및/또는 캡핑 기에 접합되고, 각각 독립적으로 63개 이하의 분지를 갖고 각각 독립적으로 64개 이하의 X0, Q, Q1, X1 또는 분자의 나머지 부분, 영구적인 연결, 및/또는 캡핑 기에 접합된다. 화학식 V의 과다분지된 모이어티 Hyp1 및 Hyp2는 각각 독립적으로 7개 이상의 분지를 갖고 각각 독립적으로 8개 이상의 X0, Q, Q1, X1 또는 분자의 나머지 부분, 영구적인 연결, 및/또는 캡핑 기에 접합되고, 각각 독립적으로 32개 이하의 분지를 갖고 각각 독립적으로 32개 이하의 X0, Q, Q1, X1 또는 분자의 나머지 부분, 영구적인 연결, 및/또는 캡핑 기에 접합된다.
바람직하게는, 화학식 V의 과다분지된 모이어티 Hyp1 및 Hyp2는 각각 독립적으로 과다분지된 폴리펩티드이다. 바람직하게는, 이러한 과다분지된 폴리펩티드는 결합된 형태로 라이신을 포함한다. 바람직하게는, 화학식 V의 과다분지된 모이어티 Hyp1 및 Hyp2는 각각 독립적으로 0.1 kDa 내지 4 kDa, 특히 0.4 kDa 내지 2 kDa의 분자량을 갖는다.
바람직하게는, mx는 0이고, 화학식 V의 POL-Hyp2-는 하기 구조들로부터 선택된다:
Figure pct00058
Figure pct00059
Figure pct00060
Figure pct00061
상기 식에서,
화학식 I의 m1 및 m2 중 하나가 1인 경우 파선은 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 I의 화합물인 경우) X0에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) Q에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) Q1에의 부착, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac 또는 IIad의 화합물인 경우) X1에의 부착을 표시하고, m1 및 m2가 0인 경우 상기 담체는 화학식 I의 T에 공유부착되고;
px는 5 내지 2000, 바람직하게는 10 내지 1000, 특히 100 내지 1000의 정수이고;
qx는 0 내지 15, 바람직하게는 3 내지 7의 정수이고, 보다 바람직하게는 qx는 6이다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 및 IIba의 Z1은 하기 화학식 VI의 구조를 갖는다:
Figure pct00062
상기 식에서,
B는 분지 코어이고;
A는 각각 독립적으로 폴리(에틸렌 글리콜)계 중합체 쇄이고;
Hypy는 각각 독립적으로 분지된 모이어티이고;
n은 3 내지 32의 정수이다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 분지 코어 B는 하기 폴리알코올 및 폴리아민으로부터 선택된 모이어티를 포함하거나, 바람직하게는 이러한 모이어티로 구성되고, 이때 폴리알코올 또는 폴리아민은 결합된 형태로 존재한다:
- 2개 이상의 하이드록실 기를 포함하는(바람직하게는 작용기, 바람직하게는 추가 아미노 기 또는 카복실산 기, 보다 바람직하게는 추가 카복실산 기를 추가로 포함하는) 폴리알코올(바람직하게는, B는 글리세롤, 펜타에리쓰리톨, 디펜타에리쓰리톨, 트리펜타에리쓰리톨, 헥사글리세린, 수크로스, 소르비톨, 프럭토스, 만니톨, 글루코스, 셀룰로스, 아밀로스, 전분, 하이드록시알킬 전분, 폴리비닐알코올, 덱스트란, 하이우알루로난, 에리쓰리톨, 트레이톨, 아라비톨, 자일리톨, 리비톨, 둘시톨 및 이디톨로부터; 보다 바람직하게는 글리세롤, 펜타에리쓰리톨, 디펜타에리쓰리톨, 트리펜타에리쓰리톨, 헥사글리세린, 수크로스, 소르비톨, 프럭토스, 만니톨, 글루코스, 셀룰로스, 아밀로스, 전분, 하이드록시알킬 전분, 폴리비닐알코올, 덱스트란 및 하이우알루로난으로부터 선택됨); 및
- 2개 이상의 아민 기를 포함하는(바람직하게는 작용기, 바람직하게는 추가 하이드록실 기 또는 카복실산 기, 보다 바람직하게는 카복실산 기를 추가로 포함하는) 폴리아민으로서, 바람직하게는 오르니틴, 디오르니틴, 트리오르니틴, 테트라오르니틴, 펜타오르니틴, 헥사오르니틴, 헵타오르니틴, 옥타오르니틴, 노나오르니틴, 데카오르니틴, 운데카오르니틴, 도데카오르니틴, 트리데카오르니틴, 테트라데카오르니틴, 펜타데카오르니틴, 헥사데카오르니틴, 헵타데카오르니틴, 옥타데카오르니틴, 노나데카오르니틴, 디아미노부티르산, 디(디아미노부티르산), 트리(디아미노부티르산), 테트라(디아미노부티르산), 펜타(디아미노부티르산), 헥사(디아미노부티르산), 헵타(디아미노부티르산), 옥타(디아미노부티르산), 노나(디아미노부티르산), 데카(디아미노부티르산), 운데카(디아미노부티르산), 도데카(디아미노부티르산), 트리데카(디아미노부티르산), 테트라데카(디아미노부티르산), 펜타데카(디아미노부티르산), 헥사데카(디아미노부티르산), 헵타데카(디아미노부티르산), 옥타데카(디아미노부티르산), 노나데카(디아미노부티르산), 라이신, 디라이신, 트리라이신, 테트라라이신, 펜타라이신, 헥사라이신, 헵타라이신, 옥타라이신, 노나라이신, 데카라이신, 운데카라이신, 도데카라이신, 트리데카라이신, 테트라데카라이신, 펜타데카라이신, 헥사데카라이신, 헵타데카라이신, 옥타데카라이신, 노나데카라이신, 올리고라이신, 폴리에틸렌이민 및 폴리비닐아민으로부터 선택된 폴리아민.
바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 분지 코어 B는 펜타에리쓰리톨을 포함한다(바람직하게는 펜타에리쓰리톨로 구성된다).
바람직하게는, 화학식 VI의 분지 코어 B에 연결된 폴리(에틸렌 글리콜)계 중합체 쇄 A는 직쇄 PEG로 구성되고, 이들 중 한 말단은 화학식 VI의 B에 연결되고, 나머지 말단은 화학식 VI의 Hypy에 연결된다. 화학식 VI의 PEG계 쇄 A는 분지쇄 PEG의 경우 임의적으로 종결될 수 있고/있거나 분지쇄 또는 직쇄 PEG의 경우 임의적으로 알킬 또는 아릴 기가 개재될 수 있고 임의적으로 헤테로원자 및/또는 작용기로 치환될 수 있다는 것이 이해된다.
화학식 VI의 분지 코어 B로부터 뻗어 나오는 화학식 VI의 각각의 하위구조 A-Hypy는 서로 독립적으로 동일하거나 상이한 하위구조 Hypy일 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 모든 하위구조 A-Hypy는 동일하다.
화학식 VI의 A 및 Hypy는 다른 모이어티 A 및 Hypy로부터 각각 독립적으로 선택될 수 있다. 바람직하게는, 화학식 VI의 B에 연결된 모든 하위구조 A-Hypy는 동일한 구조를 갖는다.
바람직하게는, 화학식 VI의 PEG계 중합체 쇄 A는 영구적인 연결을 통해 B에 연결된다.
화학식 VI의 n은 3 내지 32의 정수이다. 바람직하게는, n은 3 내지 16의 정수이고, 보다 바람직하게는 n은 4 내지 8의 정수이고, 가장 바람직하게는 n은 4이다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 n은 4이고 m은 2이다.
한 실시양태에서, 화학식 VI의 PEG계 중합체 쇄 A는 직쇄 또는 분지쇄 PEG계 중합체 쇄로부터 선택된다. 바람직하게는, A는 직쇄 PEG계 중합체 쇄이다.
바람직하게는, 화학식 VI의 A는 하기 화학식으로부터 각각 독립적으로 선택된다:
-X3-(CH2)n1-(OCH2CH2)p-0-(CH2)n2-X2-,
상기 식에서,
n1 및 n2는 1, 2, 3 및 4, 바람직하게는 1, 2 및 3으로부터 독립적으로 선택되고;
p는 5 내지 2000의 정수이고, 바람직하게는 p는 10 내지 1000의 정수이고, 보다 바람직하게는 p는 100 내지 1000의 정수이고;
X3 및 X2는 독립적으로 각각 B 또는 Hypy에 공유연결된 작용기이다.
바람직하게는, 화학식 VI의 모이어티 A와 모이어티 Hypy 사이의 연결은 영구적인 연결, 보다 바람직하게는 아민 기, 아미드 기, 카바메이트 기, 티오에테르 기 및 에테르 기로부터 선택된 기를 포함하는, 특히 이러한 기로 구성된 연결 기를 포함하는 영구적인 연결이고, 가장 바람직하게는 화학식 VI의 모이어티 A와 모이어티 Hypy 사이의 영구적인 연결은 아미드 연결이다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 하위구조
Figure pct00063
는 예를 들면, (2011년 3월 8일자로 웹(http://jenkemusa.net/pegproducts2.asp)으로부터 다운로드에 의해 접근되는) 젠켐 테크놀로지(JenKem Technology; 미국 소재)의 물질 목록에 상세히 기재된 다중-아암(multi-arm) PEG 유도체, 예컨대, 특히 펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암-PEG 유도체, 헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암-PEG 유도체, 및 트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암-PEG 유도체이다. 각각 결합된 형태의 하기 모이어티들로부터 선택된 모이어티를 포함하는, 특히 이러한 모이어티로 구성된 화학식 VI의 하위구조
Figure pct00064
가 가장 바람직하다:
펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암 PEG 아민:
Figure pct00065
(이때, n은 400 내지 2000이다);
펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암 PEG 카복실:
Figure pct00066
(이때, n은 400 내지 2000이다);
헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00067
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 헥사글리세린 코어 구조이다);
헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00068
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 헥사글리세린 코어 구조이다);
트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00069
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 트리펜타에리쓰리톨 코어 구조이다);
트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00070
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 트리펜타에리쓰리톨 코어 구조이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 아민:
Figure pct00071
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00072
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00073
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다); 및
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00074
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다).
각각 결합된 형태의 하기 화학식의 하위구조
Figure pct00075
도 바람직하다:
펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암 PEG 아민:
Figure pct00076
(이때, n은 400 내지 2000이다);
펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암 PEG 카복실:
Figure pct00077
(이때, n은 400 내지 2000이다);
헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00078
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 헥사글리세린 코어 구조이다);
헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00079
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 헥사글리세린 코어 구조이다);
트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00080
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 트리펜타에리쓰리톨 코어 구조이다);
트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00081
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 트리펜타에리쓰리톨 코어 구조이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 아민:
Figure pct00082
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 카복실:
Figure pct00083
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 아민:
Figure pct00084
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다); 및
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 카복실:
Figure pct00085
(이때, n은 400 내지 2000이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다).
각각 결합된 형태의 하기 모이어티들로부터 선택된 모이어티를 포함하는, 특히 이러한 모이어티로 구성된 화학식 VI의 하위구조
Figure pct00086
도 바람직하다:
펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암 PEG 아민:
Figure pct00087
(이때, n은 20 내지 500이다);
펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암 PEG 카복실:
Figure pct00088
(이때, n은 20 내지 500이다);
헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00089
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 헥사글리세린 코어 구조이다);
헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00090
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 헥사글리세린 코어 구조이다);
트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00091
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 트리펜타에리쓰리톨 코어 구조이다);
트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00092
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 트리펜타에리쓰리톨 코어 구조이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 아민:
Figure pct00093
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실
Figure pct00094
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00095
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다); 및
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00096
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다).
각각 결합된 형태의 하기 화학식의 하위구조
Figure pct00097
도 바람직하다:
펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암 PEG 아민:
Figure pct00098
(이때, n은 20 내지 500이다);
펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암 PEG 카복실:
Figure pct00099
(이때, n은 20 내지 500이다);
헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00100
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 헥사글리세린 코어 구조이다);
헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00101
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 헥사글리세린 코어 구조이다);
트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00102
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 트리펜타에리쓰리톨 코어 구조이다);
트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00103
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 트리펜타에리쓰리톨 코어 구조이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 아민:
Figure pct00104
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 카복실:
Figure pct00105
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 아민:
Figure pct00106
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다); 및
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 카복실:
Figure pct00107
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다).
바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 하위구조 B-(A)n의 분자량은 1 kDa 내지 80 kDa, 보다 바람직하게는 1 kDa 내지 40 kDa, 훨씬 더 바람직하게는 10 kDa 내지 40 kDa이다. 각각 말단 아민 기 또는 카복실 기는 화학식 VI의 모이어티 Hypy에의 접합을 위해 사용된다는 것이 이해된다.
화학식 VI의 모이어티 Hypy의 작용기는 화학식 I의 모이어티 X0, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) Q, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) Q1, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 화합물인 경우) X1, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIba의 화합물인 경우) 분자의 나머지 부분에 연결된다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 모이어티 Hypy는 아미드 기, 카바메이트 기, 에스테르 기, 에테르 기, 아민 기 및 티오에테르 기로부터 선택된 작용기를 통해 화학식 I의 모이어티 X0, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) Q, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) Q1, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 화합물인 경우) X1, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIba의 화합물인 경우) 분자의 나머지 부분에 연결된다. 바람직하게는, 화학식 VI의 모이어티 Hypy는 아미드 기, 티오에테르 기 및/또는 에테르 기를 통해, 훨씬 더 바람직하게는 아미드 기를 통해 화학식 I의 모이어티 X0, 화학식 II의 모이어티 Q, 화학식 IIaa 또는 IIab의 모이어티 Q1, 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 모이어티 X1, 또는 화학식 IIba의 분자의 나머지 부분에 연결된다.
임의적으로, 화학식 I의 모이어티 X0, 화학식 II의 모이어티 Q, 화학식 IIaa 또는 IIab의 모이어티 Q1, 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 모이어티 X1, 또는 화학식 IIba의 분자의 나머지 부분에 연결되지 않은 화학식 VI의 모이어티 Hypy의 작용기는 적합한 캡핑 시약으로 캡핑될 수 있고/있거나 임의적으로 특히 영구적인 연결을 통해 하나 이상의 표적화 모이어티에 연결될 수 있다. 따라서, 화학식 VI의 모이어티 Hypy는 화학식 I의 모이어티 X0, 화학식 II의 모이어티 Q, 화학식 IIaa 또는 IIab의 모이어티 Q1, 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 모이어티 X1, 또는 화학식 IIba의 분자의 나머지 부분, 캡핑 모이어티 및/또는 표적화 모이어티에 연결될 수 있다. 바람직하게는, 화학식 VI의 모이어티 Hypy의 작용기는 화학식 I의 모이어티 X0, 화학식 II의 모이어티 Q, 화학식 IIaa 또는 IIab의 모이어티 Q1, 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 모이어티 X1, 또는 화학식 IIba의 분자의 나머지 부분에 연결되고, 캡핑 모이어티 및/또는 표적화 모이어티에 연결되지 않는다. 표적화 모이어티는 존재하는 경우 직접적으로 또는 스페이서 모이어티를 통해 간접적으로 화학식 VI의 모이어티 Hypy에 접합될 수 있다.
적합한 캡핑 모이어티의 예는 직쇄, 분지쇄 또는 환형 C1-8 알킬 기이다.
한 실시양태에서, 화학식 VI의 각각의 분지된 모이어티 Hypy는 2개 이상의 화학식 I의 모이어티 X0, 2개 이상의 화학식 II의 모이어티 Q, 2개 이상의 화학식 IIaa 또는 IIab의 모이어티 Q1, 2개 이상의 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 모이어티 X1, 또는 화학식 IIba의 분자의 나머지 부분에 직접적으로 또는 간접적으로 연결된다. 보다 바람직하게는, 화학식 VI의 각각의 분지된 모이어티 Hypy는 3개 이상의 화학식 I의 모이어티 X0, 3개 이상의 화학식 II의 모이어티 Q, 3개 이상의 화학식 IIaa 또는 IIab의 모이어티 Q1, 3개 이상의 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 모이어티 X1, 또는 화학식 IIba의 분자의 나머지 부분에 직접적으로 또는 간접적으로 연결된다. 가장 바람직하게는, 화학식 VI의 각각의 분지된 모이어티 Hypy는 4개 이상의 화학식 I의 모이어티 X0, 4개 이상의 화학식 II의 모이어티 Q, 4개 이상의 화학식 IIaa 또는 IIab의 모이어티 Q1, 4개 이상의 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 모이어티 X1, 또는 화학식 IIba의 분자의 나머지 부분에 직접적으로 또는 간접적으로 연결된다.
화학식 VI의 분지된 모이어티 Hypy는 하기 모이어티들로부터 선택된, 결합된 형태의 모이어티를 포함한다(바람직하게는 이러한 모이어티로 구성된다):
- 2개 이상의 하이드록실 기를 포함하는(바람직하게는 작용기, 바람직하게는 추가 하이드록실 기 또는 카복실산 기, 보다 바람직하게는 추가 하이드록실 기를 추가로 포함하는) 결합된 형태의 폴리알코올로서, 바람직하게는 글리세롤, 펜타에리쓰리톨, 디펜타에리쓰리톨, 트리펜타에리쓰리톨, 헥사글리세린, 수크로스, 소르비톨, 프럭토스, 만니톨, 글루코스, 셀룰로스, 아밀로스, 전분, 하이드록시알킬 전분, 폴리비닐알코올, 덱스트란, 및 하이우알루로난, 에리쓰리톨, 트레이톨, 아라비톨, 자일리톨, 리비톨, 둘시톨 및 이디톨로부터; 보다 바람직하게는 글리세롤, 펜타에리쓰리톨, 디펜타에리쓰리톨, 트리펜타에리쓰리톨, 헥사글리세린, 수크로스, 소르비톨, 프럭토스, 만니톨, 글루코스, 셀룰로스, 아밀로스, 전분, 하이드록시알킬 전분, 폴리비닐알코올, 덱스트란, 및 하이우알루로난으로부터 선택된 폴리알코올;
- 2개 이상의 아민 기를 포함하는(바람직하게는 작용기, 바람직하게는 추가 아민 기 또는 카복실산 기, 보다 바람직하게는 카복실산 기를 추가로 포함하는) 결합된 형태의 폴리아민으로서, 바람직하게는 오르니틴, 디오르니틴, 트리오르니틴, 테트라오르니틴, 펜타오르니틴, 헥사오르니틴, 헵타오르니틴, 옥타오르니틴, 노나오르니틴, 데카오르니틴, 운데카오르니틴, 도데카오르니틴, 트리데카오르니틴, 테트라데카오르니틴, 펜타데카오르니틴, 헥사데카오르니틴, 헵타데카오르니틴, 옥타데카오르니틴, 노나데카오르니틴, 디아미노부티르산, 디(디아미노부티르산), 트리(디아미노부티르산), 테트라(디아미노부티르산), 펜타(디아미노부티르산), 헥사(디아미노부티르산), 헵타(디아미노부티르산), 옥타(디아미노부티르산), 노나(디아미노부티르산), 데카(디아미노부티르산), 운데카(디아미노부티르산), 도데카(디아미노부티르산), 트리데카(디아미노부티르산), 테트라데카(디아미노부티르산), 펜타데카(디아미노부티르산), 헥사데카(디아미노부티르산), 헵타데카(디아미노부티르산), 옥타데카(디아미노부티르산), 노나데카(디아미노부티르산), 라이신, 디라이신, 트리라이신, 테트라라이신, 펜타라이신, 헥사라이신, 헵타라이신, 옥타라이신, 노나라이신, 데카라이신, 운데카라이신, 도데카라이신, 트리데카라이신, 테트라데카라이신, 펜타데카라이신, 헥사데카라이신, 헵타데카라이신, 옥타데카라이신, 노나데카라이신, 올리고라이신, 트리오르니틴, 테트라오르니틴, 펜타오르니틴, 헥사오르니틴, 헵타오르니틴, 옥타오르니틴, 노나오르니틴, 데카오르니틴, 운데카오르니틴, 도데카오르니틴, 트리데카오르니틴, 테트라데카오르니틴, 펜타데카오르니틴, 헥사데카오르니틴, 헵타데카오르니틴, 옥타데카오르니틴, 노나데카오르니틴, 트리디아미노부티르산, 테트라디아미노부티르산, 펜타디아미노부티르산, 헥사디아미노부티르산, 헵타디아미노부티르산, 옥타디아미노부티르산, 노나디아미노부티르산, 데카디아미노부티르산, 운데카디아미노부티르산, 도데카디아미노부티르산, 트리데카디아미노부티르산, 테트라데카디아미노부티르산, 펜타데카디아미노부티르산, 헥사데카디아미노부티르산, 헵타데카디아미노부티르산, 옥타데카디아미노부티르산, 및 노나데카디아미노부티르산으로부터 선택된 폴리아민; 및
- 2개 이상의 카복실레이트 기를 포함하는(바람직하게는 작용기, 바람직하게는 추가 아미노 기 또는 카복실산 기, 보다 바람직하게는 추가 카복실산 기를 추가로 포함하는) 결합된 형태의 폴리카복실레이트로서, 바람직하게는 디(글루탐산), 트리(글루탐산), 테트라(글루탐산), 펜타(글루탐산), 헥사(글루탐산), 헵타(글루탐산), 옥타(글루탐산), 노나(글루탐산), 데카(글루탐산), 운데카(글루탐산), 도데카(글루탐산), 트리데카(글루탐산), 테트라데카(글루탐산), 펜타데카(글루탐산), 헥사데카(글루탐산), 헵타데카(글루탐산), 옥타데카(글루탐산), 노나데카(글루탐산), 디(아스파르트산), 트리(아스파르트산), 테트라(아스파르트산), 펜타(아스파르트산), 헥사(아스파르트산), 헵타(아스파르트산), 옥타(아스파르트산), 노나(아스파르트산), 데카(아스파르트산), 운데카(아스파르트산), 도데카(아스파르트산), 트리데카(아스파르트산), 테트라데카(아스파르트산), 펜타데카(아스파르트산), 헥사데카(아스파르트산), 헵타데카(아스파르트산), 옥타데카(아스파르트산), 노나데카(아스파르트산), 폴리에틸렌이민, 및 폴리비닐아민으로부터 선택된 폴리카복실레이트.
바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 모이어티 Hypy는 결합된 형태의 디라이신, 트리라이신, 테트라라이신, 펜타라이신, 헥사라이신, 헵타라이신, 옥타라이신, 노나라이신, 데카라이신, 운데카라이신, 도데카라이신, 트리데카라이신, 테트라데카라이신, 펜타데카라이신, 헥사데카라이신, 헵타데카라이신, 옥타데카라이신, 노나데카라이신, 트리오르니틴, 테트라오르니틴, 펜타오르니틴, 헥사오르니틴, 헵타오르니틴, 옥타오르니틴, 노나오르니틴, 데카오르니틴, 운데카오르니틴, 도데카오르니틴, 트리데카오르니틴, 테트라데카오르니틴, 펜타데카오르니틴, 헥사데카오르니틴, 헵타데카오르니틴, 옥타데카오르니틴, 노나데카오르니틴, 트리디아미노부티르산, 테트라디아미노부티르산, 펜타디아미노부티르산, 헥사디아미노부티르산, 헵타디아미노부티르산, 옥타디아미노부티르산, 노나디아미노부티르산, 데카디아미노부티르산, 운데카디아미노부티르산, 도데카디아미노부티르산, 트리데카디아미노부티르산, 테트라데카디아미노부티르산, 펜타데카디아미노부티르산, 헥사데카디아미노부티르산, 헵타데카디아미노부티르산, 옥타데카디아미노부티르산, 노나데카디아미노부티르산, 디(글루탐산), 트리(글루탐산), 테트라(글루탐산), 펜타(글루탐산), 헥사(글루탐산), 헵타(글루탐산), 옥타(글루탐산), 노나(글루탐산), 데카(글루탐산), 운데카(글루탐산), 도데카(글루탐산), 트리데카(글루탐산), 테트라데카(글루탐산), 펜타데카(글루탐산), 헥사데카(글루탐산), 헵타데카(글루탐산), 옥타데카(글루탐산), 노나데카(글루탐산), 디(아스파르트산), 트리(아스파르트산), 테트라(아스파르트산), 펜타(아스파르트산), 헥사(아스파르트산), 헵타(아스파르트산), 옥타(아스파르트산), 노나(아스파르트산), 데카(아스파르트산), 운데카(아스파르트산), 도데카(아스파르트산), 트리데카(아스파르트산), 테트라데카(아스파르트산), 펜타데카(아스파르트산), 헥사데카(아스파르트산), 헵타데카(아스파르트산), 옥타데카(아스파르트산), 노나데카(아스파르트산), 폴리에틸렌이민, 및 저분자량 PEI를 포함하는, 특히 이들로 구성된 군으로부터 선택된다.
보다 바람직하게는, 화학식 VI의 모이어티 Hypy는 결합된 형태의 트리라이신, 테트라라이신, 펜타라이신, 헥사라이신, 헵타라이신, 옥타라이신, 노나라이신, 데카라이신, 운데카라이신, 도데카라이신, 트리데카라이신, 테트라데카라이신, 펜타데카라이신, 헥사데카라이신, 및 헵타데카라이신을 포함하는, 보다 바람직하게는 이들로 구성된 군으로부터 선택되고, 훨씬 더 바람직하게는 화학식 VI의 모이어티 Hypy는 결합된 형태의 트리라이신, 헵타라이신 또는 펜타데카라이신을 포함한다(바람직하게는 이것으로 구성된다).
바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 모이어티 Hypy는 0.1 kDa 내지 4 kDa, 보다 바람직하게는 0.2 kDa 내지 2 kDa의 분자량을 갖는다.
추가 바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 각각의 분지된 모이어티 Hypy는 1개 이상의 분지를 갖고 2개 이상의 화학식 I의 모이어티 X0, 2개 이상의 화학식 II의모이어티 Q, 2개 이상의 화학식 IIaa 또는 IIab의 모이어티 Q1, 2개 이상의 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 모이어티 X1, 또는 화학식 IIba의 분자의 나머지 부분에 접합되고, 63개 이하의 분지를 갖고 64개 이하의 화학식 I의 모이어티 X0, 64개 이상의 화학식 II의 모이어티 Q, 64개 이상의 화학식 IIaa 또는 IIab의 모이어티 Q1, 64개 이상의 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 모이어티 X1, 또는 화학식 IIba의 분자의 나머지 부분에 접합되고, 보다 바람직하게는 화학식 VI의 각각의 분지된 모이어티 Hypy는 1개 이상의 분지를 갖고 2개 이상의 화학식 I의 모이어티 X0, 2개 이상의 화학식 II의 모이어티 Q, 2개 이상의 화학식 IIaa 또는 IIab의 모이어티 Q1, 2개 이상의 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 모이어티 X1, 또는 화학식 IIba의 분자의 나머지 부분에 접합되고, 31개 이하의 분지를 갖고 32개 이하의 화학식 I의 모이어티 X0, 32개 이상의 화학식 II의 모이어티 Q, 32개 이상의 화학식 IIaa 또는 IIab의 모이어티 Q1, 32개 이상의 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 모이어티 X1, 또는 화학식 IIba의 분자의 나머지 부분에 접합된다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 Z1은 4차 탄소, 특히 분지 코어 모이어티 B의 4차 탄소를 포함하고, 이때 화학식 VI의 B는 결합된 형태의 펜타에리쓰리톨이다. 바람직하게는, 화학식 VI의 A는 각각 독립적으로 영구적인 공유연결에 의해 분지 코어 모이어티 펜타에리쓰리톨의 -CH2-0- 모이어티를 통해 펜타에리쓰리톨의 4차 탄소에 말단 부착된 PEG계 중합체 쇄이고, PEG계 중합체 쇄의 원위 말단은 화학식 VI의 분지된 모이어티 Hypy에 공유결합되고, 화학식 VI의 분지된 모이어티 Hypy는 화학식 I의 모이어티 X0, 화학식 II의 모이어티 Q, 화학식 IIaa 또는 IIab의 모이어티 Q1, 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 모이어티 X1, 또는 화학식 IIba의 분자의 나머지 부분에 각각 접합된다.
한 바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 분지된 모이어티 Hypy는 2개 이상의 아민 기를 포함하는 분지된 폴리아민을 포함한다(바람직하게는 이러한 분지된 폴리아민으로 구성된다). 바람직하게는, 2개 이상의 아민 기를 포함하는 분지된 폴리아민은 결합된 형태로 하나 이상의 라이신 잔기를 포함한다. 바람직하게는, 화학식 VI의 각각의 분지된 모이어티 Hypy는 0.1 kDa 내지 4 kDa, 특히 0.2 kDa 내지 2 kDa의 분자량을 갖는다. 바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 모이어티
Figure pct00108
(이때, n은 4임)는 동일하거나 상이한 분지된 모이어티 Hypy로 구성되고, 모이어티 Hypy는 각각 독립적으로 선택될 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 모든 모이어티 Hypy는 동일하다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 모이어티 Hypy는 결합된 형태로 1개 내지 32개의 라이신, 바람직하게는 결합된 형태로 1개, 3개, 7개 또는 15개의 라이신, 보다 바람직하게는 결합된 형태로 1개, 3개 또는 7개의 라이신을 포함한다(특히, 이러한 라이신으로 구성된다). 가장 바람직하게는, 화학식 VI의 Hypy는 헵타라이시닐을 포함한다(특히, 헵타라이시닐로 구성된다).
바람직하게는, 화학식 VI의 모이어티
Figure pct00109
(이때, n은 바람직하게는 4임)는 1 kDa 내지 160 kDa, 보다 바람직하게는 1 kDa 내지 80 kDa, 훨씬 더 바람직하게는 10 kDa 내지 40 kDa의 분자량을 갖는다.
화학식 VI의 바람직한 모이어티
Figure pct00110
는 하기 화학식 i-y 내지 iii-y로부터 선택된다:
Figure pct00111
Figure pct00112
Figure pct00113
상기 식에서,
화학식 I의 m1 및 m2 중 하나가 1인 경우 파선은 화학식 I의 모이어티 X0에의 부착, 화학식 II의 모이어티 Q에의 부착, 화학식 IIaa 또는 IIab의 모이어티 Q1에의 부착, 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 모이어티 X1에의 부착, 또는 화학식 IIba의 분자의 나머지 부분에의 부착을 표시하고, m1 및 m2가 0인 경우 담체는 T에 공유부착되고;
p는 5 내지 2000, 바람직하게는 10 내지 1000, 보다 바람직하게는 10 내지 500, 가장 바람직하게는 100 내지 1000의 정수이고;
q는 1 또는 2이다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 VI의 B는 펜타에리쓰리톨이다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 Z1은 100개 이상의 아미노산 잔기의 아미노산 서열을 포함하는, 특히 이러한 아미노산 서열로 구성된 단백질 담체이다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 랜덤 코일 입체구조로 존재한다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 알라닌, 세린 및 프롤린 잔기를 포함한다(특히, 이러한 잔기로 구성된다).
바람직한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 100개 이상의 아미노산 잔기의 아미노산 서열을 포함하고(특히 이러한 아미노산 서열로 구성되고),
이때, 100개 이상의 아미노산 잔기의 아미노산 서열은 랜덤 코일 입체구조로 존재하고,
100개 이상의 아미노산 잔기의 아미노산 서열은 알라닌, 세린 및 프롤린 잔기를 포함한다.
바람직하게는, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 생리학적 조건에서 랜덤 코일 입체구조를 갖는, 알라닌, 세린 및 프롤린으로 구성된 약 100개 이상의 아미노산 잔기, 특히 100개 이상의 아미노산 잔기를 포함하는 아미노산 서열로 구성된다. 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 예를 들면, 동결건조물 또는 건조된 조성물에 존재할 때 일시적으로 또는 임시로 랜덤 코일을 형성하지 않을 수 있다는 것이 이해된다.
한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 최대 약 3000개의 아미노산 잔기, 바람직하게는 최대 약 1500개의 아미노산 잔기, 보다 바람직하게는 최대 약 900개의 아미노산 잔기, 훨씬 더 바람직하게는 최대 약 700개의 아미노산 잔기, 특히 바람직하게는 최대 약 600개의 아미노산 잔기의 아미노산 서열을 갖는 랜덤 코일 입체구조를 갖는다. 따라서, 랜덤 코일 입체구조를 형성하는 아미노산 서열은 길이에 있어서 최대 약 500개의 아미노산 잔기 또는 최대 약 450개의 아미노산 잔기를 갖는다.
따라서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1, 특히 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1의 랜덤 코일 입체구조를 형성하는 아미노산 서열은 길이에 있어서 약 100개 내지 약 3000개의 아미노산 잔기를 갖는다.
구체적인 실시양태에서, 약 100개 내지 1000개의 아미노산 잔기의 랜덤 코일 입체구조를 형성하는 상기 아미노산 서열은 본원에서 특징지어진 바와 같다(즉, 하기 정의된 바와 같이 알라닌, 세린 및 프롤린을 주요 또는 독특한 잔기로서 포함한다).
화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 모이어티 Z1은 주로 3개의 아미노산 잔기 알라닌, 세린 및 프롤린으로 구성되고, 이때 모든 3개의 아미노산은 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 모이어티 Z1에 존재하고, 이때 프롤린 잔기는 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1의 바람직하게는 약 4% 내지 약 40%를 차지한다. 알라닌 및 세린 잔기는 바람직하게는 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac 또는 IIad의 단백질 담체 Z1의 남은 60% 내지 96% 이상을 구성한다. 그러나, 본원에 상세히 후술되는 바와 같이, 화학식 I, II, IIaa, IIab 또는 IIac의 상기 단백질 담체 Z1은 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이한 추가 아미노산을 즉, 소수 성분으로서 포함할 수도 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "소수 성분"은 최대 10%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 10개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 바람직하게는 최대 8%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 8개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 보다 바람직하게는 최대 6%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 6개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 훨씬 더 바람직하게는 최대 5%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 5개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 특히 바람직하게는 최대 4%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 4개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 보다 특히 바람직하게는 최대 3%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 3개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 훨씬 더 특히 바람직하게는 최대 2%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 2개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것, 가장 바람직하게는 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac 또는 IIad의 단백질 담체 Z1을 코딩하는 최대 1%(즉, 100개의 아미노산 중 최대 1개의 아미노산)가 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이할 수 있다는 것을 의미한다. 알라닌, 세린 및 프롤린과 상이한 상기 아미노산은 Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Thr, Trp, Tyr 및 Val으로 구성된 천연 또는 단백질생성 아미노산들로 구성된 군으로부터 선택될 수 있다. 소수 성분은 비천연 발생 아미노산들, 예를 들면, 하이드록시프롤린 또는 셀레노메티오닌, 또는 다른 변경된 천연 아미노산들로부터 선택될 수도 있다.
용어 "약 100/150/200/250/300/300/350개(등) 이상의 아미노산 잔기"는 정확한 수의 아미노산 잔기로 한정되지 않고, 추가 10% 내지 20%의 잔기를 포함하거나 10% 내지 20%의 잔기를 덜 포함하는 아미노산 스트레치도 포함한다. 예를 들면, "약 100개 이상의 아미노산 잔기"는 80개 내지 100개의 아미노산 잔기 및 약 100개 내지 120개의 아미노산 잔기도 포함할 수 있다.
한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac 또는 IIad의 단백질 담체 Z1은 복수의 중합체 카세트를 포함하고, 이때 상기 중합체 카세트는 Ala, Ser 및/또는 Pro으로 구성되고, 바람직하게는 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac 또는 IIad의 단백질 담체 Z1의 중합체 카세트의 6개 이하의 연속 아미노산 잔기는 동일하고, 상기 프롤린 잔기는 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac 또는 IIad의 상기 단백질 담체 Z1의 아미노산의 4% 초과 내지 40% 미만의 아미노산을 구성한다.
한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab 또는 IIac의 단백질 담체 모이어티 Z1은 복수의 아미노산 반복부(repeat)를 포함하고(바람직하게는 이러한 아미노산 반복부로 구성되고), 이때 상기 반복부는 Ala, Ser 및 Pro 잔기로 구성되고, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 담체 모이어티 Z1의 6개 이하의 연속 아미노산 잔기는 동일하다.
바람직한 실시양태에서, 상기 프롤린 잔기는 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 모이어티 Z1의 아미노산의 4% 초과 내지 40% 미만의 아미노산을 구성한다.
추가 바람직한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 모이어티 Z1은 랜덤 코일 입체구조를 형성하는 약 100개 내지 3000개 아미노산 잔기의 아미노산 서열을 포함한다(특히, 이러한 아미노산 서열로 구성된다).
화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 복수의 동일한 중합체 카세트 또는 복수의 동일하지 않은 중합체 카세트를 포함할 수 있다. Ala, Ser 및/또는 Pro 잔기로 구성된 중합체 카세트의 비한정적 예는 하기 본원에 제공되어 있다(서열번호 9, 서열번호 10, 서열번호 11, 서열번호 12, 서열번호 13 및 서열번호 14, 또는 이들 서열들의 펩티드 단편 또는 다량체 참조). 중합체 카세트는 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 11개, 12개, 13개, 14개, 15개, 16개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 22개, 23개, 24개, 25개, 26개, 27개, 28개, 29개 또는 30개 이상의 아미노산 잔기로 구성될 수 있고, 이때 각각의 중합체 카세트는 Ala, Ser 및/또는 Pro 잔기(들), 바람직하게는 Ala, Ser 및 Pro 잔기(들)를 포함한다.
한 실시양태에서, 중합체 카세트는 100개 초과의 아미노산 잔기를 포함하지 않는다. 바람직하게는, 본원에서 정의된 중합체 카세트는 약 4% 초과, 바람직하게는 약 5% 초과, 훨씬 더 바람직하게는 약 6% 초과, 특히 바람직하게는 약 8% 초과, 보다 특히 바람직하게는 약 10% 초과, 훨씬 더 특히 바람직하게는 약 15% 초과, 가장 바람직하게는 약 20% 초과의 프롤린 잔기를 포함한다. 본원에서 정의된 이러한 중합체 카세트는 바람직하게는 약 40% 미만 또는 약 35% 미만의 프롤린 잔기를 포함한다.
한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 본원에서 정의된 바와 같이 프롤린 잔기를 추가로 포함하는 하기 화학식 b로 표시된다:
Serx[AlaySerz]v (b)
상기 식에서,
x는 0 내지 6의 정수로부터 독립적으로 선택되고,
y는 1 내지 6의 정수로부터 각각 독립적으로 선택되고,
z는 1 내지 6의 정수로부터 각각 독립적으로 선택되고,
v는 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1이 약 100개 이상의 아미노산 잔기, 특히 약 100개 내지 약 3000개, 바람직하게는 약 2000개, 보다 바람직하게는 약 1000개 이상의 아미노산 잔기로 구성되도록 하는 임의의 정수이다.
한 실시양태에서, 화학식 b의 v Alay Serz 단량체 모이어티들의 화학식 b의 모든 y 및 화학식 b의 z는 동일하다. 또 다른 실시양태에서, 화학식 b의 v Alay Serz 단량체 모이어티들의 화학식 b의 y 및 화학식 b의 z는 상이하다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 5개 이하의 동일한 연속 아미노산 잔기, 보다 바람직하게는 4개 이하의 동일한 연속 아미노산 잔기, 가장 바람직하게는 3개 이하의 동일한 연속 아미노산 잔기를 포함한다.
상기 본원에 이미 기재된 바와 같이, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 프롤린 잔기를 포함하고, 이때 상기 프롤린 잔기는 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1을 구성하는 아미노산의 약 4% 초과, 바람직하게는 약 5% 초과, 훨씬 더 바람직하게는 약 6% 초과, 특히 바람직하게는 약 8% 초과, 보다 특히 바람직하게는 약 10% 초과, 훨씬 더 특히 바람직하게는 약 15% 초과, 가장 바람직하게는 약 20% 초과의 아미노산을 구성한다. 이러한 프롤린 잔기는 화학식 b의 임의의 위치에서 도입될 수 있다. 바람직하게는, 프롤린 잔기는 하나 이상의 화학식 b의 v Alay Serz 단량체에 존재할 수 있고, 이들은 동일한 또는 상이한 위치에 존재할 수 있다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1을 구성하는 아미노산의 약 4% 초과 내지 약 50% 미만, 바람직하게는 약 10% 초과 내지 약 50% 미만, 가장 바람직하게는 약 20% 초과 내지 약 50% 미만의 알라닌 잔기를 포함한다.
추가 바람직한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1을 구성하는 아미노산의 약 4% 초과 내지 약 50% 미만, 바람직하게는 약 10% 초과 내지 약 50% 미만, 가장 바람직하게는 약 20% 초과 내지 약 50% 미만의 세린 잔기를 포함한다.
따라서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1을 구성하는 아미노산의 약 35% 프롤린 잔기, 약 50% 알라닌 잔기 및 약 15% 세린 잔기를 포함한다. 대안적으로, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1을 구성하는 아미노산의 약 35%의 프롤린 잔기, 약 15%의 알라닌 잔기 및 약 50%의 세린 잔기를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 하기 알라닌-세린 중합체 카세트들 중 하나 이상을 포함하되, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 본원에 기재된 바와 같이 프롤린 잔기를 추가로 포함한다:
서열번호 1
AAAASSASSASSSSSAAASA
서열번호 2
AASAAASSAAASAAAASASS
서열번호 3
ASASASASASASSAASAASA
서열번호 4
SAASSSASSSSAASSASAAA
서열번호 5
SSSSAASAASAAAAASSSAS
서열번호 6
SSASSSAASSSASSSSASAA
서열번호 7
SASASASASASAASSASSAS
서열번호 8
ASSAAASAAAASSAASASSS
이들 알라닌-세린 중합체 카세트들의 다량체들은 발생된 아미노산 서열이 상기 본원에서 정의된 바와 같이 프롤린 잔기를 추가로 포함하는 경우 랜덤 코일 입체구조를 형성할 수 있다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 하기 중합체 카세트들 중 하나 이상의 중합체 카세트를 포함한다(바람직하게는 이러한 중합체 카세트로 구성된다):
서열번호 9
ASPAAPAPASPAAPAPSAPA
서열번호 10
AAPASPAPAAPSAPAPAAPS
서열번호 11
APSSPSPSAPSSPSPASPSS
서열번호 15
SAPSSPSPSAPSSPSPASPS
서열번호 15는 원순열 형태의 본원에 제공된 서열번호 11에 상응하고, 이때 마지막 세린은 제거되었고, 또 다른 세린은 출발 아미노산으로서 추가되었다. 결과적으로, 이 변경된 서열의 다량체는 맨 처음 및 맨 마지막 잔기를 제외하고 비변경된 서열의 다량체와 본질적으로 동일한 내부 반복 유닛을 보유한다. 따라서, 서열번호 15는 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1을 위한 추가 중합체 카세트의 한 예로서 간주될 수 있다. 다른 중합체 카세트, 및 본원에 제공된 아미노산 중합체의 (보다 짧은) 펩티드 단편 또는 원순열 버전도 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1을 위한 중합체 카세트로서 사용될 수 있다는 것이 당업자에게 명확하다.
랜덤 코일 입체구조를 형성하는 추가 예시적 아미노산 중합체는 하기 아미노산 서열들로 구성된 군으로부터 선택될 수 있는 아미노산 서열을 포함할 수 있다:
서열번호 12
SSPSAPSPSSPASPSPSSPA,
서열번호 13
AASPAAPSAPPAAASPAAPSAPPA, 및
서열번호 14
ASAAAPAAASAAASAPSAAA.
따라서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 Z1을 위한 바람직한 중합체 카세트는 하기 서열들로부터 선택되거나, 이들 서열들의 전체 또는 일부로서 이들 서열들의 원순열 버전 또는 다량체(들)이다:
ASPAAPAPASPAAPAPSAPA(서열번호 9),
AAPASPAPAAPSAPAPAAPS(서열번호 10),
APSSPSPSAPSSPSPASPSS(서열번호 11),
SSPSAPSPSSPASPSPSSPA(서열번호 12),
AASPAAPSAPPAAASPAAPSAPPA(서열번호 13), 및
ASAAAPAAASAAASAPSAAA(서열번호 14).
한 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 모이어티 Z1은 하기 아미노산 서열들, 및 이들 서열들의 전체 또는 일부로서 이들 서열들의 원순열 버전 또는 다량체(들)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 서열을 포함한다:
ASPAAPAPASPAAPAPSAPA(서열번호 9),
AAPASPAPAAPSAPAPAAPS(서열번호 10),
APSSPSPSAPSSPSPASPSS(서열번호 11),
SSPSAPSPSSPASPSPSSPA(서열번호 12),
AASPAAPSAPPAAASPAAPSAPPA(서열번호 13), 및
ASAAAPAAASAAASAPSAAA(서열번호 14).
또한, 이들 서열들 및 상기 본원에 제공된 서열들의 펩티드 단편(들), 다량체(들) 또는 원순열 버전도 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1를 위한 중합체 카세트로서 사용될 수 있다.
따라서, 예시된 중합체 카세트는 새로 조합되어 추가 중합체 카세트를 형성할 수 있는 개별 펩티드 단편도 제공할 수 있다.
전술된 바에 따르면, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 상기 본원에 개시된 서열번호 9, 10, 11, 12, 13 또는 14를 갖는 아미노산 서열들 중 한 아미노산 서열로 구성된 다량체를 포함할 수 있거나 아미노산 서열 서열번호 9, 10, 11, 12, 13 및 14 중 하나 초과의 아미노산 서열로 구성된 다량체를 포함할 수 있다. 나아가, 이들 예시된 서열들의 펩티드 단편 또는 원순열 버전도 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1의 추가 중합체 카세트를 구축하는 데에 사용될 수 있다는 것이 예상된다.
또 다른 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 서열번호 9, 10, 11, 12, 13, 14 및 15로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열의 (원)순열을 포함하는, 바람직하게는 이러한 (원)순열로 구성된 다량체, 또는 이들 (원)순열 서열들의 다량체(들)를 포함할 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1은 서열번호 9, 10, 12, 13, 14 및 15로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열의 펩티드 단편/부분으로 구성된 다량체, 또는 이들 예시된 중합체 카세트들의 다량체(들)를 포함할 수 있다(바람직하게는 이러한 다량체로 구성될 수 있다).
화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1의 발생을 위해 사용될 이들 서열들의 펩티드 단편은 상기 서열번호 9, 10, 11, 12, 13 및 14로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열의 3개 이상, 바람직하게는 4개 이상, 보다 바람직하게는 5개 이상, 훨씬 더 바람직하게는 6개 이상, 훨씬 더 바람직하게는 8개 이상, 특히 바람직하게는 10개 이상, 보다 특히 바람직하게는 12개 이상, 훨씬 더 특히 바람직하게는 14개 이상, 바람직하게는 6개 이상, 훨씬 더 바람직하게는 8개 이상, 특히 바람직하게는 10개 이상, 보다 특히 바람직하게는 12개 이상, 훨씬 더 특히 바람직하게는 14개 이상, 훨씬 더 특히 바람직하게는 16개 이상, 가장 바람직하게는 18개 이상의 연속 아미노산으로 구성될 수 있다.
전체 분포, 및 알라닌, 세린 및 프롤린의 양에 대한 상기 확인된 규칙이 준수되는 한, 예를 들면, 중합체 카세트의 개별 펩티드 단편들은 추가 개별 중합체 카세트로 조합될 수 있다. 또한, 이들 중합체 카세트들은 최소 또는 소수 성분으로서만, 즉 개별 중합체 카세트의 최대 10%, 바람직하게는 최대 2%의 비율로 추가 아미노산 잔기도 포함할 수 있다. 상기 개별 중합체 카세트는 약 100개 이상의 아미노산 잔기로 구성된다. 개별 중합체 카세트는 보다 긴 랜덤 코일 형성 아미노산 중합체를 형성하기 위해 조합될 수 있고, 이때 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1의 최대 길이는 약 3000개 아미노산이다. 화학식 I, II, IIaa, IIab, IIac, IIad, IIb 또는 IIba의 단백질 담체 Z1의 바람직한 소수 성분은 라이신이다.
또 다른 실시양태에서, 담체 Z1은 포화된, 또는 부분적으로 또는 전체적으로 불포화된 C10-24 지방산, 즉 10개, 11개, 12개, 13개, 14개, 15개, 16개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 22개, 23개 또는 24개의 탄소 원자를 갖는 탄소 직쇄를 갖는 카복실산이다.
또 다른 실시양태에서, 담체 Z1은 하기 화학식 VII의 구조를 갖는다:
Figure pct00114
상기 식에서,
B는 분지 코어이고,
A는 폴리(에틸렌 글리콜)계 중합체 쇄이고,
n은 3 내지 32의 정수이다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 VII의 분지 코어 B는 하기 폴리알코올 및 폴리아민으로부터 선택된 모이어티를 포함하고(바람직하게는 이러한 모이어티로 구성되고), 이때 폴리알코올 또는 폴리아민은 결합된 형태로 존재한다:
- 2개 이상의 하이드록실 기를 포함하는(바람직하게는 작용기, 바람직하게는 추가 아미노 기 또는 카복실산 기, 보다 바람직하게는 추가 카복실산 기를 추가로 포함하는) 폴리알코올(바람직하게는, B는 글리세롤, 펜타에리쓰리톨, 디펜타에리쓰리톨, 트리펜타에리쓰리톨, 헥사글리세린, 수크로스, 소르비톨, 프럭토스, 만니톨, 글루코스, 셀룰로스, 아밀로스, 전분, 하이드록시알킬 전분, 폴리비닐알코올, 덱스트란, 하이우알루로난, 에리쓰리톨, 트레이톨, 아라비톨, 자일리톨, 리비톨, 둘시톨 및 이디톨로부터; 보다 바람직하게는 글리세롤, 펜타에리쓰리톨, 디펜타에리쓰리톨, 트리펜타에리쓰리톨, 헥사글리세린, 수크로스, 소르비톨, 프럭토스, 만니톨, 글루코스, 셀룰로스, 아밀로스, 전분, 하이드록시알킬 전분, 폴리비닐알코올, 덱스트란 및 하이우알루로난으로부터 선택됨); 및
- 2개 이상의 아민 기를 포함하는(바람직하게는 작용기, 바람직하게는 추가 하이드록실 기 또는 카복실산 기, 보다 바람직하게는 카복실산 기를 추가로 포함하는) 폴리아민으로서, 바람직하게는 오르니틴, 디오르니틴, 트리오르니틴, 테트라오르니틴, 펜타오르니틴, 헥사오르니틴, 헵타오르니틴, 옥타오르니틴, 노나오르니틴, 데카오르니틴, 운데카오르니틴, 도데카오르니틴, 트리데카오르니틴, 테트라데카오르니틴, 펜타데카오르니틴, 헥사데카오르니틴, 헵타데카오르니틴, 옥타데카오르니틴, 노나데카오르니틴, 디아미노부티르산, 디(디아미노부티르산), 트리(디아미노부티르산), 테트라(디아미노부티르산), 펜타(디아미노부티르산), 헥사(디아미노부티르산), 헵타(디아미노부티르산), 옥타(디아미노부티르산), 노나(디아미노부티르산), 데카(디아미노부티르산), 운데카(디아미노부티르산), 도데카(디아미노부티르산), 트리데카(디아미노부티르산), 테트라데카(디아미노부티르산), 펜타데카(디아미노부티르산), 헥사데카(디아미노부티르산), 헵타데카(디아미노부티르산), 옥타데카(디아미노부티르산), 노나데카(디아미노부티르산), 라이신, 디라이신, 트리라이신, 테트라라이신, 펜타라이신, 헥사라이신, 헵타라이신, 옥타라이신, 노나라이신, 데카라이신, 운데카라이신, 도데카라이신, 트리데카라이신, 테트라데카라이신, 펜타데카라이신, 헥사데카라이신, 헵타데카라이신, 옥타데카라이신, 노나데카라이신, 올리고라이신, 폴리에틸렌이민 및 폴리비닐아민으로부터 선택된 폴리아민.
바람직한 실시양태에서, 화학식 VII의 분지 코어 B는 펜타에리쓰리톨을 포함한다(바람직하게는 펜타에리쓰리톨로 구성된다).
바람직하게는, 화학식 VII의 분지 코어 B에 연결된 폴리(에틸렌 글리콜)계 중합체 쇄 A는 직쇄 PEG로 구성되고, 이들 중 한 말단은 화학식 VII의 B에 연결되고 나머지 말단은 화학식 I의 X0, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) Q, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) Q1, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 화합물인 경우) X1, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIba의 화합물인 경우) 분자의 나머지 부분에 연결된다.
화학식 VII의 PEG계 쇄 A는 분지쇄 PEG의 경우 임의적으로 종결될 수 있고/있거나 분지쇄 또는 직쇄 PEG의 경우 임의적으로 알킬 또는 아릴 기가 개재될 수 있고 임의적으로 헤테로원자 및/또는 작용기로 치환될 수 있다는 것이 이해된다.
바람직하게는, 화학식 VII의 담체 Z1은 예를 들면, (2011년 3월 8일자로 웹(http://jenkemusa.net/pegproducts2.asp)으로부터 다운로드에 의해 접근되는) 젠켐 테크놀로지(미국 소재)의 물질 목록에 상세히 기재된 다중-아암 PEG 유도체, 예컨대, 특히 펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암-PEG 유도체, 헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암-PEG 유도체, 및 트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암-PEG 유도체이다. 하기 모이어티들로부터 선택된 모이어티를 포함하는, 특히 이러한 모이어티로 구성된 화학식 VI의 하위구조
Figure pct00115
가 가장 바람직하다:
펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암 PEG 아민:
Figure pct00116
(이때, n은 20 내지 500이다);
펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암 PEG 카복실:
Figure pct00117
(이때, n은 20 내지 500이다);
헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00118
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 헥사글리세린 코어 구조이다);
헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00119
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 헥사글리세린 코어 구조이다);
트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00120
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 트리펜타에리쓰리톨 코어 구조이다);
트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00121
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 트리펜타에리쓰리톨 코어 구조이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 아민:
Figure pct00122
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 카복실:
Figure pct00123
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 아민:
Figure pct00124
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 카복실:
Figure pct00125
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨이다):
펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암 PEG 아민:
Figure pct00126
(이때, n은 20 내지 500이다);
펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 4-아암 PEG 카복실:
Figure pct00127
(이때, n은 20 내지 500이다);
헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00128
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 헥사글리세린 코어 구조이다);
헥사글리세린 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00129
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 헥사글리세린 코어 구조이다);
트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 아민:
Figure pct00130
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 트리펜타에리쓰리톨 코어 구조이다);
트리펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 8-아암 PEG 카복실:
Figure pct00131
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 트리펜타에리쓰리톨 코어 구조이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 아민:
Figure pct00132
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 카복실:
Figure pct00133
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어이다);
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 아민:
Figure pct00134
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어이다); 및
소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어를 포함하는 6-아암 PEG 카복실:
Figure pct00135
(이때, n은 20 내지 500이고, R은 소르비톨 또는 디펜타에리쓰리톨 코어이다).
상기 식들에서, 파선은 화학식 I의 X0에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) Q에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) Q1에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 화합물인 경우) X1에의 부착, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIba의 화합물인 경우) 분자의 나머지 부분에의 부착을 표시한다.
바람직한 실시양태에서, 화학식 VII의 담체 B-(A)n의 분자량은 1 kDa 내지 80 kDa, 보다 바람직하게는 1 kDa 내지 40 kDa, 훨씬 더 바람직하게는 10 kDa 내지 40 kDa이다.
보다 바람직하게는, 화학식 VII의 담체는 하기 화학식 VIIa의 구조를 갖는다:
Figure pct00136
상기 식에서,
t는 80 내지 160이고;
w는 2 내지 6이고;
파선은 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 나머지 부분, 즉 화학식 I의 모이어티 X0에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 II의 화합물인 경우) 모이어티 Q에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIaa 또는 IIab의 화합물인 경우) 모이어티 Q1에의 부착, (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIac, IIad 또는 IIb의 화합물인 경우) 모이어티 X1에의 부착, 또는 (담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 화학식 IIba의 화합물인 경우) 분자의 나머지 부분에의 부착을 표시한다.
바람직하게는, w는 2 또는 3이다.
가장 바람직하게는, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 하기 화학식 IIc의 구조를 갖는다:
Figure pct00137
상기 식에서,
y는 4이고, Z1은 하기 화학식 IIca의 모이어티를 나타낸다:
Figure pct00138
상기 식에서,
파선은 화학식 IIc의 구조의 나머지 부분에의 부착을 표시하고, t는 80 내지 160이고, w는 2 또는 3이다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 약학 조성물에 관한 것으로서, 이때 상기 약학 조성물은 프로스타사이클린 화합물이 혈장 비의존적 방식으로 프로스타사이클린을 방출하는 것을 특징으로 한다. 바람직하게는, 프로스타사이클린 화합물은 효소 비의존적 방식으로 프로스타사이클린을 방출한다.
용어 "혈장 비의존적"은 37℃에서 pH 7.4의 완충제 및 pH 7.4의 80% 완충된 혈장에서 독립적으로 측정된 프로스타사이클린 화합물로부터의 프로스타사이클린의 방출 반응속도가 50% 이하, 바람직하게는 40% 이하, 보다 바람직하게는 30% 이하, 훨씬 더 바람직하게는 20% 이하, 가장 바람직하게는 10% 이하만큼 변화한다는 것을 의미한다.
용어 "효소 비의존적"은 프로스타사이클린 화합물로부터의 프로스타사이클린의 방출이 효소의 존재를 필요로 하지 않는다는 것을 의미한다.
본 발명의 또 다른 양태는 임의적으로 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제와 함께 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약학 조성물이다.
상기 약학 조성물은 하기 단락들에 더 기재되어 있다.
본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 약학 조성물은 액체 조성물 또는 건조 조성물로서 제공될 수 있다. 적합한 건조 방법은 예를 들면, 분무 건조 및 동결건조(동결-건조)이다. 바람직한 건조 방법은 동결건조이다.
바람직하게는, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 한 적용에서 치료 유효량의 트레프로스티닐을 12시간 이상 동안 제공하도록 상기 조성물로 충분히 투약된다. 보다 바람직하게는, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 약학 조성물의 한 적용은 1일 이상, 예컨대, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일 또는 7일, 예컨대, 2주, 3주 또는 4주 동안 충분하다.
한 실시양태에서, 본 발명은 약학 조성물에 관한 것으로서,
이때, (i) 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 한 적용에서 치료 유효량의 트레프로스티닐을 12시간 이상 동안 제공하도록 상기 약학 조성물로 충분히 투약되고/되거나,
(ii) 상기 약학 조성물의 단회 투여량은 약 2 mg 내지 약 6 mg, 바람직하게는 약 4 mg의 트레프로스티닐을 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 본 발명의 액체 약학 조성물의 단회 투여량은 약 0.1 ㎖ 내지 약 10 ㎖, 바람직하게는 약 0.5 ㎖ 내지 약 5 ㎖, 훨씬 더 바람직하게는 약 0.5 ㎖ 내지 약 2 ㎖, 특히 약 1 ㎖의 부피를 갖는다.
본 발명에 따른 "약"은 실험 오차 범위, 특히 ±5% 또는 ±10%를 의미하는 것으로서 이해된다.
본 발명에 따른 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 약학 조성물은 임의적으로 하나 이상의 부형제를 포함한다.
부형제는 완충제, 등장성 변경제, 방부제, 안정화제, 항흡착제, 산화 보호제, 증점제/점도 향상제, 또는 다른 보조제로서 분류될 수 있다. 몇몇 경우, 이들 성분들은 이중 또는 삼중 기능을 가질 수 있다. 본 발명에 따른 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 약학 조성물은 하기 부형제들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 부형제를 함유한다:
(i) 완충제: pH를 원하는 범위 내에서 유지하기 위한 생리학적으로 허용되는 완충제, 예컨대, 인산나트륨, 중탄산염, 석신산염, 히스티딘, 시트르산염 및 아세트산염, 황산염, 질산염, 염화물, 피루브산염. 제산제, 예컨대, Mg(OH)2 또는 ZnC03도 사용될 수 있다. 완충 용량은 pH 안정성에 가장 민감한 조건에 일치하도록 조절될 수 있다.
(ii) 등장성 변경제: 주사 데포(depot)에서의 삼투압 차이로 인한 세포 손상으로부터 발생되는 통증을 최소화하기 위한 것이다. 글리세린 및 염화나트륨이 예이다. 효과적인 농도는 혈청의 경우 285 mOsmol/kg 내지 315 mOsmol/kg의 추정된 삼투질농도를 사용하는 삼투압측정에 의해 결정될 수 있다.
(iii) 방부제 및/또는 항균제: 다회용량 비경구 제제는 주사 시 환자가 감염될 위험을 최소화하기 위해 충분한 농도의 방부제의 첨가를 필요로 하고, 상응하는 규제 요건은 확립되어 있다. 전형적인 방부제는 m-크레졸, 페놀, 메틸파라벤, 에틸파라벤, 프로필파라벤, 부틸파라벤, 클로로부탄올, 벤질 알코올, 질산페닐수은, 티메로솔, 소르브산, 소르브산칼륨, 벤조산, 클로로크레졸 및 염화벤즈알코늄을 포함한다.
(iv) 안정화제: 안정화는 단백질 안정화 힘의 강화, 변성된 상태의 탈안정화, 또는 부형제와 단백질의 직접적인 결합에 의해 달성된다. 안정화제는 아미노산, 예컨대, 알라닌, 아르기닌, 아스파르트산, 글리신, 히스티딘, 라이신, 프롤린, 당, 예컨대, 글루코스, 수크로스, 트레할로스, 폴리올, 예컨대, 글리세롤, 만니톨, 소르비톨, 염, 예컨대, 인산칼륨, 황산나트륨, 킬레이팅제, 예컨대, EDTA, 헥사포스페이트, 리간드, 예컨대, 2가 금속 이온(아연, 칼슘 등), 다른 염 또는 유기 분자, 예컨대, 페놀 유도체일 수 있다. 또한, 올리고머 또는 중합체, 예컨대, 사이클로덱스트린, 덱스트란, 덴드리머, PEG 또는 PVP 또는 프로타민 또는 HSA가 사용될 수 있다.
(v) 항흡착제: 주로 이온성 또는 비이온성 계면활성제 또는 다른 단백질 또는 가용성 중합체가 조성물 또는 조성물 용기의 내면을 경쟁적으로 코팅하거나 흡착하는 데에 사용된다. 적합한 계면활성제는 예를 들면, 다음과 같다: 알킬 설페이트, 예컨대, 암모늄 라우릴 설페이트 및 나트륨 라우릴 설페이트; 알킬 에테르 설페이트, 예컨대, 나트륨 라우레쓰 설페이트 및 나트륨 마이레쓰 설페이트; 설포네이트, 예컨대, 디옥틸 나트륨 설포석시네이트, 퍼플루오로옥탄설포네이트, 퍼플루오로부탄설포네이트, 알킬 벤젠 설포네이트; 포스페이트, 예컨대, 알킬 아릴 에테르 포스페이트 및 알킬 에테르 포스페이트; 카복실레이트, 예컨대, 지방산 염(비누) 또는 나트륨 스테아레이트, 나트륨 라우로일 사르코시네이트, 퍼플루오로노나노에이트, 퍼플루오로옥타노에이트; 옥테니딘 디하이드로클로라이드; 4차 암모늄 양이온, 예컨대, 세틸 트리메틸암모늄 브로마이드, 세틸 트리메틸암모늄 클로라이드, 세틸피리디늄 클로라이드, 폴리에톡실화된 탤로우(tallow) 아민, 염화벤즈알코늄, 염화벤즈에토늄, 5-브로모-5-니트로-1,3-디옥산, 디메틸디옥타데실암모늄 클로라이드, 디옥타데실디메틸암모늄 브로마이드; 양쪽성이온, 예컨대, 3-[(3-콜아미도프로필)디메틸암모니오]-1-프로판설포네이트, 코카미도프로필 하이드록시설테인, 아미노산, 이미노산, 코카미도프로필 베타인, 레시틴; 지방 알코올, 예컨대, 세틸 알코올, 스테아릴 알코올, 세토스테아릴 알코올, 올레일 알코올; 폴리옥시에틸렌 글리콜 알킬 에테르, 예컨대, 옥타에틸렌 글리콜 모노도데실 에테르, 펜타에틸렌 글리콜 모노도데실 에테르; 폴리옥시프로필렌 글리콜 알킬 에테르; 글루코사이드 알킬 에테르, 예컨대, 데실 글루코사이드, 라우릴 글루코사이드, 옥틸 글루코사이드; 폴리옥시에틸렌 글리콜 옥틸페놀 에테르, 예컨대, 트리톤 X-100; 폴리옥시에틸렌 글리콜 알킬페놀 에테르, 예컨대, 논옥시놀-9; 글리세롤 알킬 에스테르, 예컨대, 글리세릴 라우레이트; 폴리옥시에틸렌 글리콜 소르비탄 알킬 에스테르, 예컨대, 폴리소르베이트; 소르비탄 알킬 에스테르; 코카미드 MEA 및 코카미드 DEA; 도데실 디메틸아민 옥사이드; 폴리에틸렌 글리콜과 폴리프로필렌 글리콜의 블록 공중합체, 예컨대, 폴록사머(플루로닉 F-68), PEG 도데실 에테르(Brij 35), 폴리소르베이트 20 및 80; 다른 항흡착제, 예컨대, 덱스트란, 폴리에틸렌 글리콜, PEG-폴리히스티딘, BSA 및 HSA 및 젤라틴. 부형제의 선택된 농도 및 유형은 방지되어야 할 효과에 의해 좌우되지만, 전형적으로 계면활성제의 단일층이 CMC 값 바로 위에서 계면에서 형성된다.
(vi) 동결보호제 및/또는 냉동보호제: 동결 또는 분무 건조 동안 부형제는 수소결합 파괴 및 물 제거에 의해 야기되는 탈안정화 효과를 없앨 수 있다. 이 목적을 위해, 당 및 폴리올이 사용될 수 있지만, 계면활성제, 아미노산, 비수성 용매 및 다른 펩티드의 경우 상응하는 긍정적 효과도 관찰되었다. 트레할로스는 수분에 의해 유도된 응집을 감소시키는 데에 특히 효율적이고, 단백질 소수성 기가 물에 노출됨에 의해 잠재적으로 야기되는 열적 안정성도 개선한다. 만니톨 및 수크로스도 단독 동결/냉동보호제로서 사용될 수 있거나, 만니톨:수크로스의 보다 높은 비가 동결건조된 케이크의 물리적 안정성을 향상시키는 것으로 공지되어 있는 경우 서로 함께 사용될 수 있다. 만니톨은 트레할로스와도 병용될 수 있다. 트레할로스는 소르비톨과도 병용될 수 있거나, 소르비톨은 단독 보호제로서 사용될 수 있다. 전분 또는 전분 유도체도 사용될 수 있다.
(vii) 산화 보호제: 항산화제, 예컨대, 아스코르브산, 엑토인, 메티오닌, 글루타티온, 모노티오글리세롤, 모린, 폴리에틸렌이민(PEI), 프로필 갈레이트, 비타민 E, 킬레이팅제, 예컨대, 시트르산, EDTA, 헥사포스페이트, 티오글리콜산.
(viii) 전착제 또는 분산제: 간질 공간 내의 세포외 매트릭스의 성분의 가수분해를 통해 결합 조직의 투과성을 변경시키는 물질, 예컨대, 결합 조직의 세포내 공간에서 발견되는 하이알루론산 및 폴리사카라이드(그러나, 이들로 한정되지 않음). 전착제, 예컨대, 하이알루로니다제(그러나, 이것으로 한정되지 않음)는 세포외 매트릭스의 점성을 일시적으로 감소시키고 주사된 약물의 확산을 촉진한다.
(ix) 다른 보조제: 예컨대, 습윤화제, 점도 변경제, 항생제, 하이알루로니다제. 산 및 염기, 예컨대, 염산 및 수산화나트륨은 제조 동안 pH 조절을 위해 필요한 보조제이다.
일반적인 실시양태에서, 건조된 또는 액체 형태의 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 약학 조성물은 단회 또는 다회 투여량 조성물로서 제공될 수 있다.
본 발명의 한 실시양태에서, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 액체 또는 건조된 약학 조성물은 이를 공급하는 용기가 1회 약학 투여량을 함유한다는 것을 의미하는 단회 투여량으로서 제공된다.
대안적으로, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 액체 또는 건조된 약학 조성물은 이를 공급하는 용기가 1회 초과의 치료 투여량을 함유한다는 것, 즉 다회 투여량 조성물이 2회 이상의 투여량을 함유한다는 것을 의미하는 다회 투여량 조성물이다. 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 이러한 다회 투여량 조성물은 그를 필요로 하는 상이한 환자들을 위해 사용될 수 있거나 한 환자를 위해 사용될 수 있고, 이때 남은 투여량은 필요할 때까지 제1 투여량의 적용 후 저장된다.
본 발명의 또 다른 양태에서, 약학 조성물은 용기 내에 있다. 액체 또는 건조된 조성물에 적합한 용기는 예를 들면, 주사기, 바이알, 마개 및 밀폐제를 갖는 바이알, 앰플, 및 카트리지이다. 특히, 본 발명에 따른 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 액체 또는 건조된 조성물은 주사기 내에 제공된다. 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 약학 조성물이 건조된 약학 조성물인 경우, 용기는 바람직하게는 이중 챔버 주사기이다. 이러한 실시양태에서, 상기 건조된 약학 조성물은 이중 챔버 주사기의 제1 챔버 내에 제공되고, 재구성 용액은 이중 챔버 주사기의 제2 챔버 내에 제공된다.
담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 건조된 조성물을 그를 필요로 하는 환자에게 적용하기 전, 상기 건조된 조성물은 재구성된다. 재구성은 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 건조된 조성물을 제공하는 용기, 예컨대, 바이알, 주사기, 이중 챔버 주사기, 앰플, 및 카트리지 내에서 일어날 수 있다. 재구성은 예정된 양의 재구성 용액을 건조된 조성물에 첨가함으로써 수행된다. 재구성 용액은 추가 첨가제, 예컨대, 방부제 및/또는 항균제, 예를 들면, 벤질 알코올 및 크레졸을 함유할 수 있는 멸균 액체, 예컨대, 물 또는 완충제이다. 바람직하게는, 재구성 용액은 멸균수이다. 건조된 조성물이 재구성되는 경우, 이 조성물은 "재구성된(reconstituted) 약학 조성물" 또는 "재구성된 조성물"로서 지칭된다.
본 발명의 추가 양태는 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 재구성된 또는 액체 약학 조성물의 투여 방법에 관한 것이다. 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 약학 조성물은 피내, 피하, 근육내, 정맥내, 골내 및 복강내를 포함하는 흡입, 주사 또는 관주 방법에 의해 투여될 수 있다. 바람직하게는, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 약학 조성물은 피하 투여된다.
본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 건조된 약학 조성물을 위한 바람직한 투여 방법은 흡입을 통한 투여이다.
따라서, 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 국소, 장 투여, 비경구 투여, 흡입, 주사 또는 관주, 관절내, 피내, 피하, 근육내, 정맥내, 골내 및 복강내, 경막내, 피막내, 안와내, 심장내, 경기관, 표피하, 관절내, 피막하, 지주막하, 척수내, 심실내 또는 흉골내 투여를 위한, 바람직하게는 피하 투여를 위한 약제로서 사용될 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 본 발명의 약학 조성물에 관한 것이다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 제1 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 제1 투여 방법을 통해 투여되고, 본 발명의 제2 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 동시에 또는 연속적으로 제2 투여 방법을 통해 투여된다. 상기 제1 투여 방법 및 제2 투여 방법은 국소, 장 투여, 비경구 투여, 흡입, 주사 또는 관주, 관절내, 피내, 피하, 근육내, 정맥내, 골내 및 복강내, 경막내, 피막내, 안와내, 심장내, 경기관, 표피하, 관절내, 피막하, 지주막하, 척수내, 심실내 또는 흉골내 투여의 임의의 조합일 수 있다.
따라서, 또 다른 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 본 발명의 약학 조성물에 관한 것이고, 이때 이러한 수용성 담체-연결된 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 약학 조성물은 관절내, 피내, 피하, 근육내, 정맥내, 골내 및 복강내, 경막내, 피막내, 안와내, 심장내, 경기관, 표피하, 관절내, 피막하, 지주막하, 척수내, 심실내 및 흉골내 적용을 포함하는 외용, 흡입, 주사 또는 관주 방법에 의해 국소, 장 또는 비경구 투여를 통해, 바람직하게는 피하 투여를 통해 환자에게 투여되기에 적합하다.
추가 양태는 치료 유효량의 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 및 임의적으로 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 재구성된 조성물을 제조하는 방법으로서, 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 포함하는 약학 조성물을 재구성 용액과 접촉시키는 단계를 포함하는 방법이다.
또 다른 양태는 치료 유효량의 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 및 임의적으로 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 재구성된 약학 조성물이다.
본 발명의 또 다른 양태는 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 건조된 조성물을 제조하는 방법이다. 한 실시양태에서, 이러한 건조된 조성물은
(i) 상기 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 하나 이상의 부형제와 혼합하는 단계,
(ii) 단회 또는 다회 투여량과 동등한 양을 적합한 용기 내로 전달하는 단계,
(iii) 상기 용기 내의 조성물을 건조하는 단계, 및
(iv) 상기 용기를 밀폐하는 단계
에 의해 제조된다.
적합한 용기는 바이알, 주사기, 이중 챔버 주사기, 앰플 및 카트리지이다.
본 발명의 또 다른 양태는 성분 키트(kit of parts)이다.
투여 장치가 단순히 피하 주사기인 경우, 상기 키트는 주사기, 바늘, 및 주사기와 함께 사용될 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 건조된 약학 조성물을 포함하는 용기, 및 재구성 용액을 포함하는 제2 용기를 포함할 수 있다.
약학 조성물이 액체 조성물인 경우, 상기 키트는 주사기, 바늘, 및 주사기와 함께 사용될 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 액체 조성물을 포함하는 용기를 포함할 수 있다.
보다 바람직한 실시양태에서, 주사 장치는 단순한 피하 주사기 이외의 주사 장치이므로, 재구성된 또는 액체 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 갖는 별도의 용기는 사용 시 용기 내의 액체 조성물이 주사 장치의 출구와 유체 연결 상태에 있도록 주사 장치와 맞물리게 개조되어 있다. 투여 장치의 예로는 피하 주사기 및 펜 주사기 장치가 있으나 이들로 한정되지 않는다. 특히 바람직한 주사 장치는 펜 주사기이고, 이 경우 용기는 카트리지, 바람직하게는 일회용 카트리지이다. 임의적으로, 성분 키트는 손상을 방지하기 위해 사용 후 바늘을 캡핑하거나 덮는 데에 사용될 수 있는 바늘용 안전 장치를 포함한다.
바람직한 성분 키트는 바늘; 및 본 발명에 따른 조성물을 함유하고 임의적으로 재구성 용액을 추가로 함유하는 용기를 포함하고, 상기 용기는 상기 바늘과 함께 사용되도록 개조되어 있다. 바람직하게는, 상기 용기는 이중 챔버 주사기이다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 펜 주사기 장치와 함께 사용될, 상기 본원에 기재된 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 약학 조성물을 포함하는 카트리지를 제공한다. 상기 카트리지는 단회 투여량 또는 다회 투여량의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 함유할 수 있다.
본 발명의 또 다른 양태는 약제로서 사용될 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 본 발명의 약학 조성물이다.
본 발명에 따른 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 하나 이상의 산성 또는 염기성 기를 함유하는 경우, 본 발명은 그들의 상응하는 약학적으로 또는 독성학적으로 허용가능한 염, 특히 그들의 약학적으로 사용가능한 염도 포함한다. 따라서, 산성 기를 함유하는 본 발명에 따른 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 예를 들면, 알칼리 금속 염, 알칼리성 토금속 염 또는 암모늄 염으로서 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 이러한 염의 보다 정확한 예로는 나트륨 염, 칼륨 염, 칼슘 염, 마그네슘 염, 또는 암모니아 또는 유기 아민, 예를 들면, 에틸아민, 에탄올아민, 트리에탄올아민 또는 아미노산 부가 염이 있으나 이들로 한정되지 않는다. 하나 이상의 염기성 기, 즉 양성자화될 수 있는 기를 함유하는 본 발명에 따른 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 존재할 수 있고 그들의 무기 또는 유기 산 부가염의 형태로 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 적합한 산의 예로는 염화수소, 브롬화수소, 인산, 황산, 질산, 메탄설폰산, p-톨루엔설폰산, 나프탈렌디설폰산, 옥살산, 아세트산, 주석산, 젖산, 살리실산, 벤조산, 포름산, 프로피온산, 피발산, 디에틸아세트산, 말론산, 석신산, 피멜산, 푸마르산, 말레산, 말산, 설파민산, 페닐프로피온산, 글루콘산, 아스코르브산, 이소니코틴산, 시트르산, 아디프산, 및 당업자에게 공지된 다른 산이 있다. 본 발명에 따른 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 분자 내에 산성 기 및 염기성 기를 동시에 함유하는 경우, 본 발명은 상기 언급된 염 형태들 이외에 내염 또는 베타인(양쪽성이온)도 포함한다. 각각의 염은 당업자에게 공지된 통상적인 방법에 의해, 예를 들면, 용매 또는 분산제에서 이들을 유기 또는 무기 산 또는 염기와 접촉시킴으로써, 또는 다른 염을 사용한 음이온 교환 또는 양이온 교환에 의해 수득될 수 있다. 본 발명은 낮은 생리학적 상용성으로 인해 약제에서 사용되기에 직접적으로 적합하지 않지만, 예를 들면, 화학반응을 위한 또는 약리학적으로 허용가능한 염의 제조를 위한 중간체로서 사용될 수 있는 상기 전구약물의 모든 염들도 포함한다.
본 발명의 또 다른 양태는 하나 이상의 병태, 질환 또는 장애의 치료를 필요로 하는 포유동물 환자, 바람직하게는 인간에서 치료하거나, 조절하거나, 지연시키거나 예방하는 방법으로서, 치료 유효량의 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물, 또는 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약학 조성물을 상기 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 방법이다.
본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물에 의해 예방될 수 있고/있거나 치료될 수 있는 상기 병태, 질환 또는 장애는 예를 들면, 폐 고혈압, 허혈성 질환(예를 들면, 말초 동맥 질환을 포함하는 말초 혈관 질환, 레이나우드병 및 레이나우드 증후군을 포함하는 레이나우드 현상, 전신 경화증을 포함하는 피부경화증, 심근 허혈, 허혈성 뇌졸중, 신장 기능부전), 디지털 궤양을 포함하는 허혈성 궤양, (울혈성 심장 기능상실을 포함하는) 심장 기능상실, 문맥폐 고혈압, 간질 폐 질환, 특발성 폐 섬유증, 항응고를 필요로 하는 병태(예를 들면, MI 후, 심장 수술 후), 혈전미세혈관병증, 체외순환, 중추 망막 정맥 폐쇄, 죽상동맥경화증, 염증 질환(예를 들면, COPD, 건선), 고혈압(예를 들면, 자간전증), 생식 및 분만, 암 또는 다른 비조절된 세포 생장 병태, 세포/조직 보존, 및 프로스타사이클린 치료가 유리한 역할을 수행하는 것으로 보이는 다른 새로 출현한 치료 영역, 바람직하게는 폐 동맥 고혈압이다.
한 실시양태에서, 본 발명은 트레프로스티닐에 의해 치료될 수 있고/있거나 예방될 수 있는 질환 또는 장애를 치료하거나 예방하는 방법에서 사용될 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 약학 조성물에 관한 것이다.
바람직한 실시양태에서, 상기 질환 또는 장애는 폐 동맥 고혈압이다.
추가 실시양태에서, 본 발명은 트레프로스티닐에 의해 치료될 수 있고/있거나 예방될 수 있는 질환 또는 장애의 치료 및/또는 예방을 위한 약제의 제조를 위한 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 약학 조성물의 용도에 관한 것이다.
바람직한 실시양태에서, 상기 질환 또는 장애는 폐 동맥 고혈압이다.
한 실시양태에서, 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 동일한 환자에게 상이한 투여 경로, 예를 들면, 피하 주사 및 흡입(그러나, 이들로 한정되지 않음)에 의해 투여될 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 그들의 자유 형태(들)로 또는 전구약물(들)로서 하나 이상의 추가 약물(들) 또는 생물학적 활성 모이어티/모이어티들과 함께 투여될 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 이러한 하나 이상의 추가 약물(들)은 동일하거나 상이한 투여 경로(들)의 사용을 통해 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물과 함께 투여된다. 본 발명의 하나 이상의 추가 약물(들) 및 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 고정된 투여량 조합으로 투여되는 것이 바람직하다.
따라서, 이러한 하나 이상의 추가 활성 물질은 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물과 별도로 투여될 수 있다. 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물과 함께 투여될 수 있는 구체적인 추가 약물 또는 생물학적 활성 모이어티는 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 투여될 수 있는 치료되거나 예방될 구체적인 질환 또는 병태에 의해 좌우될 수 있다. 몇몇 경우, 추가 약물/생물학적 활성 모이어티는 심혈관 물질, 예컨대, 프로스타사이클린 화합물, NO 활성의 매개제, 칼슘 채널 차단제, 포스포디에스터라제 억제제, 이뇨제, 내피 길항제, 또는 항혈소판 물질일 수 있다.
본 발명의 또 다른 목적에서, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 흡입된 프로스타사이클린과 함께 투여될 수 있다.
본 발명의 또 다른 대상은 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염의 합성 방법이다. 본 발명에 따른 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 이러한 전구약물의 전구체는 공지된 방법에 의해, 또는 후술된 반응 순서에 따라 제조될 수 있다. 본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 전구체의 제조(합성)에서 사용되는 출발 물질은 공지되어 있거나 상업적으로 입수될 수 있거나, 공지된 방법에 의해 또는 후술된 바와 같이 제조될 수 있다.
전구체를 포함하는 본 발명에 따른 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 합성을 위한 모든 반응들은 당업자에게 그 자체로 잘 공지되어 있고, 표준 유기화학 문헌에 기재된 절차에 따라 또는 이 절차와 유사하게 표준 조건 하에 수행될 수 있다. 개별 경우의 환경에 따라, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 전구체의 합성 동안 부반응을 방지하기 위해, 보호기를 도입하여 작용기를 일시적으로 차단하고 합성의 후기 단계에서 상기 작용기를 탈보하거나, 후기 반응 단계에서 원하는 작용기로 전환되는 전구체 기의 형태로 작용기를 도입하는 것이 필요하거나 유리할 수 있다. 개별 경우에서 적합한 이러한 합성 방법, 보호기 및 전구체 기는 당업자에게 공지되어 있다. 원하는 경우, 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 전구체는 통상적인 정제 절차, 예를 들면, 재결정화 또는 크로마토그래피에 의해 정제될 수 있다.
한 실시양태에서, 본 발명에 따른 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물(또는 그의 약학적으로 허용가능한 염)은 트레프로스티닐의 카복실산을 생물학적 활성 모이어티 시약 D-Y(이때, Y는 이탈기임)로 전환시키는 단계, 및 그 후 상기 시약 D-Y를 하이드록실 기 함유 가역적 전구약물 연결제 시약 X0-OH와 반응시킴으로써, 카복실산 에스테르 연결을 형성하여 생물학적 활성 모이어티-가역적 전구약물 연결제 접합체 T-X0을 발생시키는 단계를 포함하는 방법에 의해 제조될 수 있다. 그 후, T-X0을 담체 모이어티 Z1에 결합시켜, 본 발명에 따른 카복실산 기를 포함하는 생물학적 활성 모이어티의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물을 수득할 수 있다. 대안적으로, 담체 모이어티 Z1은 X0-OH에 이미 결합되어 있을 수 있다.
본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 합성에 관여하지 않는 트레프로스티닐의 작용기는 당업자에게 공지된 적합한 보호기에 의해 보호될 수 있다는 것이 이해된다.
Y는 이탈기이다. 적합한 이탈기는 당업자에게 공지되어 있다. 바람직하게는, Y는 D에 부착된 경우 염화물, 브롬화물, 불화물, 니트로페녹시, 이미다졸릴, N-하이드록시석신이미딜, N-하이드록시벤조트리아졸릴, N-하이드록시아조벤조트리아졸릴, 펜타플루오로페녹시, 2-티오옥소-티아졸리디닐 또는 N-하이드록시설포석신이미딜이다.
본 발명의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물은 당업자에게 공지된 편리한 방법에 의해 중합체로부터 출발하여 제조될 수 있다. 여러 경로들이 존재한다는 것이 당업자에게 명확하다. 예를 들면, 모이어티 T-X0은 담체 모이어티 POL의 중합체의 반응성 작용기와 반응할 수 있다. 대안적으로, 모이어티 Z1-X0을 포함하는 시약은 우선적으로 활성화된 생물학적 활성 산 D-Y와의 후속 반응을 위해 제조될 수 있다. D가 트레프로스티닐이라는 것이 이해된다.
재료, 방법 및 분석:
생성물 정제
바이오타지(Biotage) KP-실(Sil) 실리카 카트리지를 사용하여 바이오타지 "이솔레라 원(Isolera one)" 정제 시스템(바이오타지 아베(Biotage AB), 스웨덴 소재) 상에서 순상 정제를 수행하였다. 헵탄/에틸 아세테이트 또는 디클로로메탄/메탄올의 구배를 이용하였다. 생성물을 254 nm 및 280 nm에서 검출하고 수집하였다.
분취 RP-HPLC를 위해, 워터스 엑스브리지(Waters XBridge)™ BEH300 Prep C18(5 ㎛, 150 x 10 mm, 유속 6 ㎖/분), 또는 워터스 엑스브리지™ BEH300 Prep C18(10 ㎛, 150 x 30 mm, 유속 40 ㎖/분)을 갖춘 워터스 600 조절기 및 2487 이중 흡광도 검출기를 이용하였다. 용출제 A(0.05% TFA(부피/부피) 또는 0.01% HCl(부피/부피)을 함유하는 물) 및 B(0.05% TFA(부피/부피) 또는 0.01% HCl(부피/부피)을 함유하는 아세토니트릴)의 구배를 이용하였다.
달리 언급되지 않은 경우 생성물을 함유하는 HPLC 분획을 풀링하고 동결건조하였다.
자동화된 플래쉬 크로마토그래피
바이오타지 KP-실 실리카 카트리지를 사용하여 바이오타지 "이솔레라 원" 정제 시스템(바이오타지 아베, 스웨덴 소재) 상에서 자동화된 플래쉬 크로마토그래피를 수행하였다. 생성물을 254 nm 및 280 nm에서 검출하고 수집하였다.
LC/MS 분석
2695 샘플 관리기, 2487 이중 흡광도 검출기, 및 5 ㎛ 레프로실(Reprosil) Pur 300 Å ODS-3 컬럼(75 x 1.5 mm)((Dr. Maisch, Ammerbuch, 독일; 유속: 350 ㎕/분, 전형적인 구배: 5분에 걸쳐 물 중의 10% 내지 90% MeCN, 0.05% TFA)을 갖춘 ZQ 4000 ESI 기계로 구성된 워터스 장치 상에서, 또는 워터스 액퀴티(Acquity) UPLC BEH300 C18 RP 컬럼(2.1 x 50 mm, 300 Å, 1.7 ㎛, 유속: 0.25 ㎖/분; 용매 A: UP-H20 + 0.04% TFA, 용매 B: UP-아세토니트릴 + 0.05% TFA)을 갖춘 써모 LTQ 오비트랩 디스커버리(Orbitrap Discovery) 고해상/고정확성 질량 분광계에 커플링된 액퀴티 PDA 검출기를 갖는 워터스 액퀴티 UPLC 상에서 분석 RP-HPLC/ESI-MS를 수행하였다.
액퀴티 UPLC® BEH300 C18 RP 컬럼(워터스 코포레이션(Waters Corporation), 2.1 x 50 mm, 300 Å, 1.7 ㎛, 유속: 0.25 ㎖/분; 용매 A: UP-H20 + 0.04% TFA, 용매 B: UP-MeCN + 0.05% TFA)을 갖춘 써모 LTQ 오비트랩 디스커버리 고해상/고정확성 질량 분광계에 커플링된 액퀴티 PDA 검출기를 갖는 워터스 액퀴티 UPLC로 구성된 워터스/써모 장치 상에서 RP-UPLC/ESI-MS를 수행하였다. 일시적으로 접합된(TransCon) 5 kDa PEG 연결제 트레프로스티닐로부터 방출된 트레프로스티닐의 측정을 위한 전형적인 구배는 다음과 같다: 0.25 ㎖ 유속, 구배: 10분에 걸쳐 30% 내지 50% B.
RP - HPLC 정제:
분취 RP-HPLC를 위해, 하기 컬럼들을 갖춘 워터스 600 조절기 및 2487 이중 흡광도 검출기를 이용하였다: 워터스 엑스브리지™ BEH300 Prep C18 5 ㎛, 150 x 10 mm, 유속 6 ㎖/분, 또는 워터스 엑스브리지™ BEH300 Prep C18 10 ㎛, 150 x 30 mm, 유속 40 ㎖/분. 용매 시스템 A(0.05% TFA(부피/부피) 또는 0.01% HCl(부피/부피)을 함유하는 물) 및 용매 시스템 B(0.05% TFA(부피/부피) 또는 0.01% HCl(부피/부피)을 함유하는 아세토니트릴)의 선형 구배.
정제 절차를 위한 전형적인 구배는 다음과 같다:
- 6 ㎖/분 유속, 용매 A: H20 + 0.05% TFA, 용매 B: MeCN + 0.05% TFA, 전형적인 구배: 14분에 걸쳐 1% 내지 95% B
- 6 ㎖/분 유속, 용매 A: H20 + 0.05% TFA, 용매 B: MeCN + 0.05% TFA, 전형적인 구배: 14분에 걸쳐 10% 내지 80% B
- 40 ㎖/분 유속, 용매 A: H20 + 0.05% TFA, 용매 B: MeCN + 0.05% TFA, 전형적인 구배: 14분에 걸쳐 40% 내지 95% B
달리 언급되지 않은 경우 생성물을 함유하는 HPLC 분획을 풀링하고 동결건조하였다.
화학물질 및 약물:
상하이 테크웰 바이오파마슈티칼 컴파니 리미티드(Shanghai Techwell Biopharmaceutical Co., Ltd.)(중국 상하이 소재) 또는 치로게이트 인터네셔날 인코포레이티드(Chirogate International Inc.)(대만 양메이 소재)로부터 트레프로스티닐산을 구입하였다. 6-(S-트리틸머캡토)헥산산을 폴리펩티드(Polypeptide)(프랑스 스트라스보우르그 소재)로부터 구입하였다. 시스-사이클로헥산디카복실산 무수물을 알파 애사르 게엠베하 앤드 컴파니 카게(Alfa Aesar GmbH & Co KG)(독일 칼스루에 소재)로부터 구입하였다. 2-클로로트리틸 클로라이드 수지(1%, 노바바이오켐(Novabiochem)® DVB)를 머크 바이오사이언시스 게엠베하(Merck Biosciences GmbH)(독일 소재)로부터 입수하였다. 6-(S-트리틸설파닐)-헥산아민을 국제 특허출원 공보 제WO-A 2009/133137호에 따라 합성하였다. 이 작업에서 사용된 PEG를 엔오에프 유럽 엔.브이.(NOF Europe N.V.)(벨기에 그로벤돈크 소재)로부터 획득하였다. 모든 다른 화학물질들을 시그마 알드리치 게엠베하(Sigma Aldrich GmbH)(독일 타우프키르헨 소재)로부터 구입하였다. 분석 RP-HPLC용 물 및 아세토니트릴을 바이오솔브 비.브이.(Biosolve B.V.)로부터 구입하였고, TFA를 써모 사이언티픽(Thermo scientific)으로부터 구입하였다.
실시예 1 :
3- 하이드록시부탄산 (화합물 1)의 벤질 보호:
Figure pct00139
3-하이드록시부탄산(화합물 1)(434 mg, 4.17 mmol)을 THF(10 ㎖)에 용해시키고, BnBr(700 ㎕, 5.89 mmol) 및 Cs2CO3(2.5 g, 7.67 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밀봉된 튜브에서 4시간 내지 6시간 동안 환류시켰다. 실온까지 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 여과하고, 잔사를 EtOAc로 수회 세척하였다. 유기 용매를 제거하고, 생성물을 실리카 상의 자동화된 플래쉬 크로마토그래피로 한번에 정제하여 출발 물질을 제거하고 황색 오일로서 원하는 벤질 보호된 3-하이드록시부탄산(화합물 2)을 수득하였다.
수율: 361 mg(45%)
MS: m/z 217.1 = [M+Na]+(계산된 MW+Na = 217.2).
실시예 2 :
벤질화된 3- 하이드록시부탄산(화합물 2)과 트레프로스티닐의 커플링 반응:
Figure pct00140
트레프로스티닐산(10.5 mg, 0.0268 mmol)을 DCM(4.5 ㎖)에 용해시키고, DCC(9.4 mg, 0.0455 mmol), HOBT(7.5 mg, 0.0489 mmol) 및 DMAP(7.5 mg, 0.0613 mmol)를 용액에 첨가하였다. 그 다음, 벤질화된 3-하이드록시부탄산(화합물 2)(15 mg, 0.0772 mmol)을 DCM(0.5 ㎖)에 용해시키고 반응 혼합물을 첨가하였다. 소모가 완료될 때까지(분석 RP-HPLC) 혼합물을 실온에서 교반하였다. 휘발성 용매를 진공 중에서 제거하고, 잔사를 작은 실리카 컬럼(3 ㎖ 실리카, DCM/MeOH(100:0) - DCM/MeOH(95:5) 상에서 정제하여 황색 오일로서 원하는 연결제 트레프로스티닐(화합물 3)을 수득하였다.
수율: 8 mg(50%)
MS: m/z 589.3 = [M+Na]+(계산된 MW+Na = 589.7)
실시예 3 :
벤질에스테르 (화합물 3)의 수소화 반응:
Figure pct00141
벤질에스테르(화합물 3)(13 mg, 0.0229 mmol)를 EtOAc(4 Å MS, 2 ㎖)에 용해시키고 차콜 상의 5% 팔라듐(5% Pd, 15 mg)을 첨가하였다. 수소를 30분 동안 용액을 통해 버블링시켰다. 소모가 완료될 때까지(분석 RP-HPLC) 반응 혼합물을 수소 대기 하에 추가 12.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 상에서 여과하고 EtOAc로 수회 세척하였다. 유기 용매를 진공 중에서 제거하고, RP-HPLC(용매 A: 0.05% TFA를 함유하는 H2O, 용매 B: 0.05% TFA를 함유하는 MeCN, 구배: 20분에 걸쳐 1% 내지 95% B, 유속: 6 ㎖/분)를 이용하여 잔사를 정제하였다. 생성물 함유 분획을 풀링하고 동결건조시켜 백색 고체로서 화합물 4를 수득하였다.
수율: 1.9 mg(29%).
MS: m/z 499.3 = [M+Na]+(계산된 MW+Na = 499.6).
실시예 4 :
직쇄 PEG 5 kDa 아민과 연결제 트레프로스티닐(화합물 4)의 커플링 반응:
Figure pct00142
연결제 트레프로스티닐(화합물 4)(1.9 mg, 3.98 μmol) 및 직쇄 PEG 5 kDa 아민(86 mg, 17.2 μmol)을 THF/MeCN(4 Å MS; 1.5 ㎖ : 0.5 ㎖)에 용해시키고, Et3N(40 ㎕), 촉매량의 DMAP 및 T3P(EtOAc 중의 50%, 50 ㎕, 73.2 μmol)를 연속적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 20 ㎕의 H20로 희석하고, 휘발성 용매를 진공 중에서 제거하였다. RP-HPLC(용매 A: 0.05% TFA를 함유하는 H2O, 용매 B: 0.05% TFA를 함유하는 MeCN, 구배: 20분에 걸쳐 10% 내지 80%, 유속: 6 ㎖/분)를 이용하여 잔사를 정제하였다. 생성물 함유 분획을 풀링하고 동결건조하여 백색 고체로서 일시적으로 접합된 PEG 연결제 트레프로스티닐(화합물 5)을 수득하였다.
수율: 12.5 mg(58%).
MS: m/z 1378.6 = 중합체 분포에서 1개의 대표적인 피크에 대한 [M+4H]4+(계산치 = 1378.9)
실시예 5 :
일시적으로 접합된 PEG 연결제 트레프로스티닐 (화합물 5)의 트레프로스티닐 방출 반응속도:
일시적으로 접합된 PEG 연결제 트레프로스티닐(화합물 5)(0.5 mg 내지 1.5 mg)을 37℃에서 pH 7.4의 가수분해 완충제(60 mM 인산나트륨, 3 mM EDTA, 0.05% 트윈-20, 1 ㎖)에서 항온처리하고, 분취물을 방출된 트레프로스티닐에 대해 다양한 시점에서 UPLC로 분석하였다.
일시적으로 접합된 PEG 연결제 트레프로스티닐(화합물 5)의 가수분해 반응속도의 반감기 측정:
RP-UPLC 크로마토그램에서 상응하는 피크(방출된 물질 대 접합체)를 적분하여, 주어진 시간 동안 pH 7.4 및 37℃에서 항온처리된 후 방출된 트레프로스티닐의 백분율을 측정하였다. 그 후, 표 1에 나타낸 데이터를 시간별로 작도하였다. 일차 반응속도 피트를 이용하여 화합물 5로부터의 트레프로스티닐 방출에 대한 4.20일의 반감기를 수득하였다.
Figure pct00143
실시예 6 :
중간체 6a/6b의 합성:
Figure pct00144
6-(S-트리틸설파닐)-헥산아민(합성에 대해서는 국제 특허출원 공보 제WO-A 2009/133137호 참조)(507 mg, 1.35 mmol)을 DCM(4 ㎖)에 용해시키고, 시스-1,2-사이클로헥산디카복실산 무수물(251 mg, 1.63 mmol)을 실온에서 반응 혼합물에 첨가하였다. DIPEA(0.70 ㎖, 4.06 mmol)를 첨가하고, 6-(S-트리틸설파닐)-헥산아민의 완전한 소모까지(LC/MS) 혼합물을 실온에서 교반하였다. 휘발성 용매를 진공 중에서 제거하고, 잔사를 H20/MeCN(6:1, 18 ㎖)에 용해시키고, 생성물을 RP-HPLC(용매 A: 0.05% TFA를 함유하는 H2O, 용매 B: 0.05% TFA를 함유하는 MeCN, 구배: 16분에 걸쳐 40% 내지 95%, 유속: 40 ㎖/분)로 정제하였다. 풀링된 분획을 포화된 NaHC03 용액(pH 대략 6)으로 중화하고, 유기 용매를 진공 중에서 제거하였다. 남은 수층을 DCM으로 2회 추출하였다. 모은 유기층을 MgS04으로 건조하고 용매를 진공 중에서 제거하여 라세미체 혼합물로서 중간체 6a/6b를 수득하였다.
수율: 580 mg(81%).
MS: m/z 552.23 = [M+Na]+(계산된 MW+Na = 552.62 g/mol).
실시예 7 :
중간체 7a/7b의 합성:
Figure pct00145
N-Boc-1,6-헥산디아민(270 mg, 1.25 mmol)을 DMF(2 ㎖)에 용해시키고, 시스-1,2-사이클로헥산디카복실산 무수물(231 mg, 1.50 mmol)을 실온에서 반응 혼합물에 첨가하였다. DIPEA(0.65 ㎖, 3.76 mmol)를 첨가하고, N-Boc-1,6-헥산디아민의 소모가 완결될 때까지(LC/MS) 혼합물을 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 H20/MeCN(9:1)으로 희석하고, 생성물을 RP-HPLC(용매 A: 0.05% TFA를 함유하는 H2O, 용매 B: 0.05% TFA를 함유하는 MeCN, 구배: 16분에 걸쳐 10% 내지 80% B, 유속: 40 ㎖/분)로 정제하였다. 풀링된 분획을 포화된 NaHC03 용액(pH 대략 6)으로 중화하고, 유기 용매를 진공 중에서 제거하였다. 남은 수층을 DCM으로 수회 추출하였다. 유기층을 MgS04으로 건조하고, 용매를 진공 중에서 제거하여 라세미체 혼합물로서 중간체 7a/7b를 수득하였다.
수율: 410 mg(88%).
MS: m/z 371.39 = [M+H]+(계산된 MW+H = 371.27 g/mol).
실시예 8 :
Dmob 보호된 트레프로스티닐 (화합물 8)의 합성:
Figure pct00146
트레프로스티닐(61 mg, 0.156 mmol)을 톨루엔(무수, 분자체, 2.5 ㎖)에 용해시키고, 실릴화 시약 BSA(0.6 ㎖, 0.245 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 휘발성 용매를 진공 중에서 제거하고, TMS 보호된 트레프로스티닐을 추가 정제 없이 사용하였다.
TMS 보호된 트레프로스티닐을 DCM(2.5 ㎖) 및 H20(60 ㎕)에 용해시켰다. DCM(1 ㎖)에 용해된 DMAP(76 mg, 0.624 mmol), EDCㆍHCl(119 mg, 0.624 mmol) 및 Dmob-알코올(105 mg, 0.624 mmol)을 첨가하였다. 반응이 완결될 때까지(LC/MS) 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다. 용액을 DCM으로 희석하고, NaCl로 포화된 0.1 N HCl 용액을 첨가하여 켄칭하였다. 수층을 DCM으로 수회 추출하였다. 모은 유기층을 MgS04으로 건조하고, 용매를 진공 중에서 제거하여 미정제 생성물(화합물 8)을 수득하였다. RP-HPLC(용매 A: 0.05% TFA를 함유하는 H2O, 용매 B: 0.05% TFA를 함유하는 MeCN, 구배: 16분에 걸쳐 35% 내지 85% B, 유속: 40 ㎖/분)를 이용하여 미정제 생성물을 정제하였다. 포화된 NaHCO3 용액을 첨가하여 모은 HPLC 분획을 대략 7의 pH로 조절하였다. MeCN을 진공 중에서 제거하였다. 남은 H2O 층을 DCM으로 수회 추출하고, 모은 유기층을 MgS04으로 건조하고 여과하고, 용매를 진공 중에서 제거하여 무색 고체로서 생성물(화합물 8)을 수득하였다.
수율: 69 mg(82%).
MS: m/z 563.20 g/mol= [M+Na]+(계산된 MW+Na = 563.67 g/mol).
실시예 9 :
트레프로스티닐 연결제 티올의 합성
Figure pct00147
카복실산(화합물 6a/6b)(147 mg, 0.277 mmol), EDCㆍHCl(53 mg, 0.277 mmol) 및 DMAP(34 mg, 0.277 mmol)를 0.5 ㎖의 DCM에 용해시켰다. Dmob 보호된 트레프로스티닐(화합물 8)(43 mg, 0.08 mmol)을 0.5 ㎖의 DCM에 용해시키고 반응 혼합물에 첨가하였다. 화합물 8의 소모가 완결될 때까지(하룻밤 동안, LC/MS) 혼합물을 실온에서 교반하였다. 휘발성 용매를 진공 중에서 제거하였다. 잔사를 HFIP(2 ㎖), TFA(100 ㎕) 및 TES(50 ㎕)에 용해시키고 실온에서 30분 동안 교반하였다(LC/MS). 휘발성 물질을 진공 중에서 제거하였다. 잔사를 H20/MeCN(9/1, 0.05% TFA, 2 ㎖)에 용해시키고, 4개의 가능한 이성질체들의 혼합물을 RP-HPLC(용매 A: 0.05% TFA를 함유하는 H2O, 용매 B: 0.05% TFA를 함유하는 MeCN, 구배: 16분에 걸쳐 60% 내지 85% B, 유속: 6 ㎖/분)로 정제하였다. 생성물 이성질체는 3개의 분리가능한 피크로서 용출되었다. 가장 짧은 용출 시간을 갖는 피크를 함유하는 분획(화합물 "9x")을 풀링하고 추가 프로세싱 없이 PEG화 단계에서 사용하였다. 가능한 이성질체 9a, 9b, 9c 또는 9d로의 화합물 9x의 구조 배정은 이 실험에서 수행되지 않았다. 엘만(Ellman) 시험을 이용하여 화합물 9x의 수율을 측정하였다.
수율: 8.1 mg(26%)
MS: m/z 682.21 g/mol = [M+Na]+(계산된 MW+Na = 682.40 g/mol).
실시예 10 :
트레프로스티닐 연결제 아민의 합성
Figure pct00148
Figure pct00149
카복실산(화합물 7a/7b)(50 mg, 0.134 mmol), EDCㆍHCl(26 mg, 0.134 mmol) 및 DMAP(16 mg, 0.134 mmol)를 DCM(0.3 ㎖)에 용해시켰다. Dmob 보호된 트레프로스티닐(화합물 8)(36 mg, 0.066 mmol)을 DCM(0.5 ㎖)에 용해시키고 반응 혼합물에 첨가하였다. 소모가 완결될 때까지(LC/MS) 혼합물을 실온에서 교반하였다. 휘발성 용매를 진공 중에서 제거하였다. 잔사를 H20/MeCN(9/1, 0.05% TFA, 2 ㎖)에 용해시키고, RP-HPLC(써모 피셔 하이퍼실 골드(Hypersil Gold) PFP 컬럼, 150 x 10 mm, 용매 A: 0.05% TFA를 함유하는 H2O, 용매 B: 0.05% TFA를 함유하는 MeCN, 구배: 16분에 걸쳐 35% 내지 55% B, 유속: 6 ㎖/분)로 단일 커플링 생성물(1개의 화합물 7a/7b 분자에 커플링된 트레프로스티닐)을 이중 커플링 생성물(2개의 화합물 7a/7b 분자에 커플링된 트레프로스티닐)로부터 분리하였다. 단일 커플링 생성물을 함유하는 HPLC 분획을 풀링하고 동결건조하였다. 동결건조물을 HFIP(0.9 ㎖), DCM(0.1 ㎖), TFA(100 ㎕) 및 TES(20 ㎕)에 용해시키고 실온에서 10분 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공 중에서 제거하고, 잔사를 H20/MeCN(9/1, 0.05% TFA, 2 ㎖)에 용해시키고, 4개의 가능한 이성질체들의 혼합물을 RP-HPLC(용매 A: 0.05% TFA를 함유하는 H2O, 용매 B: 0.05% TFA를 함유하는 MeCN, 구배: 16분에 걸쳐 35% 내지 55% B, 유속: 6 ㎖/분)로 정제하였다. 생성물 이성질체는 3개의 분리가능한 피크로서 용출되었다. 가장 짧은 용출 시간을 갖는 피크를 함유하는 분획(화합물 "10x")을 풀링하고 추가 프로세싱 없이 PEG화 단계에서 사용하였다. 가능한 이성질체 10a, 10b, 10c 또는 10d로의 화합물 10x의 구조 배정은 이 실험에서 수행되지 않았다. 트레프로스티닐 보정 곡선(280 nm)을 이용하여 HPLC로 화합물 10x의 수율을 평가하였다.
수율: 3.0 mg
MS: m/z 643.28 g/mol = [M+Na]+(계산된 MW+Na = 643.45 g/mol).
실시예 11 :
트레프로스티닐 연결제 아민과 직쇄 PEG 5 kDa NHS 의 PEG 화 반응
Figure pct00150
Figure pct00151
직쇄 PEG 5 kDa NHS(23 mg, 4.6 μmol)를 트레프로스티닐 연결제 아민(화합물 10x)(0.6 mg, 용액 중의 1 μmol, MeCN/H20, 0.05% TFA, 5 ㎖)에 첨가하였다. 0.5 M pH 7.4 완충제(0.5 M 인산염, 0.6 ㎖)를 첨가하여 용액을 중화하였다. 투명한 용액을 수득하기 위해 H20(1 ㎖)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 항온처리하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 RP-HPLC(용매 A: 0.01% HCl을 함유하는 H2O, 용매 B: 0.01% HCl을 함유하는 MeCN, 구배: 16분에 걸쳐 10% 내지 70% B, 유속: 6 ㎖/분)로 정제하여 동결건조 후 일시적으로 접합된 직쇄 5 kDa PEG 트레프로스티닐(화합물 11)을 수득하였다.
수율: 3 mg
실시예 12 :
트레프로스티닐 연결제 티올과 직쇄 PEG 40 kDa 말레이미드의 PEG 화 반응
Figure pct00152
직쇄 PEG 40 kDa 말레이미드(463 mg, 11.3 μmol)를 MeCN/H20(0.05% TFA, 87 ㎖) 중의 트레프로스티닐 연결제 티올(화합물 9x)(6.2 mg, 9.42 μmol) 용액에 첨가하였다. pH 7.4 완충제(0.5 M 인산염, 4.4 ㎖)를 첨가하여 상기 용액을 중화하였다. 1시간 동안 항온처리한 후, 직쇄 40 kDa Mal-PEG(73 mg, 178 μmol) 및 H20(5 ㎖)을 다시 한번 첨가하고, 반응 용액을 다시 1.5시간 동안 항온처리하였다. 반응 혼합물을 RP-HPLC(용매 A: 0.01% HCl을 함유하는 H2O, 용매 B: 0.01% HCl을 함유하는 MeCN, 구배: 16분에 걸쳐 30% 내지 50% B, 유속: 40 ㎖/분)로 정제하여 동결건조 후 일시적으로 접합된 직쇄 40 kDa PEG 트레프로스티닐(화합물 12)을 수득하였다.
수율: 321 mg(82%)
실시예 13 :
트레프로스티닐 연결제 티올과 4-아암 PEG 20 kDa 말레이미드의 PEG화 반응
Figure pct00153
4-아암 PEG 20 kDa 말레이미드(21 mg, 0.98 μmol)를 MeCN/H20(0.05% TFA, 5.7 ㎖) 중의 트레프로스티닐 연결제 티올(화합물 9x)(2.54 mg, 3.84 μmol) 용액에 첨가하였다. pH 7.4의 완충제(0.5 M 인산염, 3.0 ㎖)를 첨가하여 상기 용액을 중화하였다. 반응 혼합물이 다시 투명한 용액이 될 때까지 H20(3 ㎖)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 항온처리한 후, RP-HPLC(용매 A: 0.01% HCl을 함유하는 H2O, 용매 B: 0.01% HCl을 함유하는 MeCN, 구배: 16분에 걸쳐 45% 내지 85% B, 유속: 40 ㎖/분)로 정제하여 동결건조 후 일시적으로 접합된 4-아암 PEG 20 kDa 트레프로스티닐(화합물 13)을 수득하였다.
수율: 14 mg(66%).
실시예 14 :
일시적으로 접합된 PEG 연결제 트레프로스티닐 화합물 11 및 12의 트레프로스티닐 방출 반응속도:
방출 반응속도를 실시예 5에 따라 측정하였다. 화합물 11 및 12에 대해 4.3일(±0.7일)의 트레프로스티닐 방출 반감기를 수득하였다.
실시예 15 :
일시적으로 접합된 PEG 연결제 트레프로스티닐 화합물 13의 트레프로스티닐 방출 반응속도:
일시적으로 접합된 PEG 연결제 트레프로스티닐(화합물 13)(2.5 mg)을 37℃에서 pH 7.4의 가수분해 완충제(60 mM 인산나트륨, 3 mM EDTA, 0.05% 트윈-20, 1 ㎖)에서 항온처리하고, 분취물을 방출된 트레프로스티닐에 대해 다양한 시점에서 UPLC로 분석하였다. 방출된 트레프로스티닐의 백분율을 분취물의 총 가수분해 후 트레프로스티닐의 면적과 관련하여 측정하였다(50 ㎕의 가수분해 용액과 25 ㎕의 5 N NaOH를 20분 동안 혼합하였다. 25 ㎕의 AcOH를 첨가하고, 발생된 용액을 LCMS로 분석하였다).
일차 반응속도 피트를 이용함으로써 화합물 13으로부터의 트레프로스티닐 방출에 대한 5일의 반감기를 수득하였다.
실시예 16 :
빌딩 블록 14의 합성
빌딩 블록 14를 하기 반응식에 따라 합성하였다:
Figure pct00154
Mmt-클로라이드(3 g, 9.71 mmol)를 DCM(20 ㎖)에 용해시키고 DCM(20 ㎖) 중의 에틸렌디아민(6.5 ㎖, 97.1 mmol) 용액에 적가하였다. 2시간 후, 상기 용액을 디에틸 에테르(300 ㎖)에 붓고 30/1(부피/부피)의 염수/0.1 M NaOH 용액(각각 50 ㎖)으로 3회 세척하고 염수(50 ㎖)로 1회 세척하였다. 유기층을 Na2S04 상에서 건조하고, 휘발성 물질을 감압 하에 제거하였다. Mmt-보호된 아민(3.18 g, 9.56 mmol)을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
Mmt-보호된 아민(3.18 g, 9.56 mmol)을 무수 DCM(30 ㎖)에 용해시켰다. 6-(S-트리틸머캡토)헥산산(4.48 g, 11.47 mmol), PyBOP(5.96 g, 11.47 mmol) 및 DIPEA(5.0 ㎖, 28.68 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 상기 용액을 디에틸 에테르(250 ㎖)로 희석하고 30/1(부피/부피)의 염수/0.1 M NaOH 용액(각각 50 ㎖)으로 3회 세척하고 염수(50 ㎖)로 1회 세척하였다. 유기층을 Na2S04 상에서 건조하고, 휘발성 물질을 감압 하에 제거하였다. 0.02%(부피/부피)의 디에틸메틸아민을 함유하는 헵탄/에틸 아세테이트로 용출하는 플래쉬 크로마토그래피로 아미드를 정제하였다.
수율: 5.69 g(8.07 mmol).
MS: m/z 705.4 = [M+H]+(MW = 705.0).
아미드(3.19 g, 4.53 mmol)를 무수 THF(50 ㎖)에 용해시키고, BH3ㆍTHF(1 M 용액, 8.5 ㎖, 8.5 mmol)를 첨가하였다. 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 추가 BH3ㆍTHF(1 M 용액, 14 ㎖, 14 mmol)를 첨가하고 실온에서 추가 16시간 동안 교반하였다. 메탄올(8.5 ㎖)을 첨가하여 반응을 켄칭하였다. N,N-디메틸-에틸렌디아민(3 ㎖, 27.2 mmol)을 첨가하고, 용액을 가열하여 환류시키고 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시킨 후, 에틸 아세테이트(300 ㎖)로 희석하고, 포화된 Na2C03 수용액(2 x 100 ㎖) 및 포화된 NaHC03 수용액(2 x 100 ㎖)으로 세척하였다. 유기층을 Na2S04 상에서 건조하고, 휘발성 물질을 감압 하에 제거하여 미정제 아민 중간체(3.22 g)를 수득하였다.
아민 중간체(3.22 g)를 DCM(5 ㎖)에 용해시켰다. DCM(5 ㎖)에 용해된 Boc20(2.97 g, 13.69 mmol) 및 DIPEA(3.95 ㎖, 22.65 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. Boc-보호된 및 Mmt-보호된 중간체를 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다.
수율: 3.00 g(3.79 mmol).
MS: m/z 791.4 = [M+H]+, 519.3 = [M-Mmt+H]+(계산된 MW = 791.1).
0.4 M 수성 HCl(48 ㎖)을 아세토니트릴(45 ㎖) 중의 Boc-보호된 및 Mmt-보호된 중간체 용액에 첨가하였다. 혼합물을 아세토니트릴(10 ㎖)로 희석하고 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 5 M NaOH 수용액을 첨가하여 반응 혼합물의 pH 값을 5.5로 조절하였다. 아세토니트릴을 감압 하에 제거하고, 수용액을 DCM(4 x 100 ㎖)으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2S04 상에서 건조하고, 휘발성 물질을 감압 하에 제거하였다. 미정제 아민(화합물 14)을 추가 정제 없이 사용하였다.
수율: 2.52 g(3.19 mmol). 미정제 아민(화합물 14)의 791.1 g/mol의 MW가 추정되었다.
MS: m/z 519.3 = [M+H]+(계산된 MW = 519.8 g/mol).
실시예 17 :
연결제 빌딩 블록 15a, 15b 및 15c의 합성
연결제 빌딩 블록 15a를 하기 반응식에 따라 합성하였다:
아민(화합물 14)(503 mg, 0.635 mmol, 미정제 화합물 1의 791.1 g/mol의 추정 MW)을 4 ㎖의 DMF(무수, 분자체)에 용해시켰다. Fmoc-N-Me-Ala-OH(310 mg, 0.953 mmol), COMU(408 mg, 0.953 mmol) 및 DIPEA(332 ㎕, 1.906 mmol)를 첨가하고, 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 150 ㎕의 피페리딘 및 150 ㎕의 DBU를 혼합물에 첨가하고, 교반을 추가 60분 동안 계속 수행하였다. 400 ㎕의 아세트산을 첨가하고, 생성물을 HPLC로 정제하였다. 생성물(화합물 15a)을 함유하는 HPLC 분획을 포화된 NaHC03 용액으로 중화하고 DCM으로 2회 추출하였다. 모은 유기층을 Na2S04 상에서 건조하고 휘발성 물질을 감압 하에 제거하였다.
수율: 203 mg(0.336 mmol).
MS: m/z 604.1 = [M+H]+(계산된 MW = 603.9 g/mol).
연결제 빌딩 블록 15b
Figure pct00156
Fmoc-N-Me-Ala-OH 대신에 Fmoc-Aib-OH를 사용하였다는 점을 제외하고 연결제 빌딩 블록 15b를 연결제 빌딩 블록 15a에 대해 기재된 바와 같이 합성하였다.
수율: 95 mg(0.161 mmol).
MS: m/z 604.2 = [M+H]+(계산된 MW = 603.9 g/mol).
연결제 빌딩 블록 15c
Figure pct00157
Fmoc-N-Me-Ala-OH 대신에 Fmoc-N-Me-Aib-OH를 사용하였다는 점을 제외하고 연결제 빌딩 블록 15c를 연결제 빌딩 블록 15a에 대해 기재된 바와 같이 합성하였다.
수율: 149 mg(0.241 mmol).
MS: m/z 619.0 = [M+H]+(계산된 MW = 617.9 g/mol).
실시예 18:
트레프로스티닐-연결제 티올 16a, 16b, 16c, 16d, 16e 및 16f의 합성
트레프로스티닐-연결제 티올 16a/16b를 하기 반응식에 따라 합성하였다:
Figure pct00158
Figure pct00159
PE 프릿(frit)을 갖춘 10 ㎖ 일회용 주사기 반응기를 2-클로로트리틸 클로라이드(TCP) 수지(153 mg, 적재 1.22 mmol/g, 0.186 mmol)로 적재하였다. DCM(무수, 분자체) 중의 트레프로스티닐(54 mg, 0.138 mmol) 및 DIPEA(60 ㎕, 0.346 mmol)의 용액을 반응기 내로 흡인하였다. 반응기를 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 200 ㎕의 메탄올을 첨가하고 반응기를 추가 10분 동안 교반하였다. 용액을 버리고, 수지를 DCM(5x), DMF(5x) 및 DCM(10x)으로 세척하였다. 수지를 진공(1 mbar) 하에 건조하였다. 중량을 기초로 0.72 mmol/g TCP 수지의 트레프로스티닐 적재를 수득하였다.
900 ㎕ THF(무수, 분자체) 및 300 ㎕ THF 중의 1 M LiOEt 용액(300 μmol)을, PE 프릿을 갖춘 일회용 2 ㎖ 주사기 반응기에서 30 mg의 트레프로스티닐 적재된 TCP 수지(21.6 μmol) 내로 흡인하였다. 반응기를 실온에서 40분 동안 교반하였다. 용액을 버리고 수지를 THF(2x)로 세척하였다. 1 ㎖ THF 중의 비스(펜타플루오로페닐)카보네이트(100 mg, 254 μmol) 용액을 실온에서 90분 동안 교반된 주사기 내로 흡인하였다. 용액을 버리고, 수지를 THF(5x) 및 DMF(5x)로 세척하였다. 300 ㎕ DMF(무수, 분자체) 중의 연결제 빌딩 블록 15a(50 mg, 83 μmol), DIPEA(50 ㎕, 287 μmol) 및 DMAP(1 mg, 8 μmol)의 용액을 주사기 내로 흡인하였다. 주사기를 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 용액을 버리고, 수지를 DMF(10x) 및 DCM(10x)으로 세척하였다. 500 ㎕의 절단 칵테일 HFIP/DCM/TES 90/10/2(부피/부피/부피)와 함께 10분 동안 항온처리하여(3x) 수지로부터 생성물을 절단하였다. 수지를 500 ㎕의 DCM(2x)으로 세척하였다.
TFA(250 ㎕)를 조합된 절단 및 세척 용액에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 항온처리하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 제거하였다. 잔사를 HPLC로 정제하여 2개의 위치이성질체들의 혼합물로서 티올 16a/16b를 수득하였다. HPLC 용출물을 추가 프로세싱 없이 다음 단계에서 사용하였다.
MS: m/z 678.1 = [M+H]+(계산된 MW = 678.0 g/mol).
트레프로스티닐 연결제 티올 16c/16d
Figure pct00160
연결제 빌딩 블록 15a 대신에 연결제 빌딩 블록 15b를 사용하였다는 점을 제외하고 트레프로스티닐 연결제 티올 16c/16d를 트레프로스티닐 연결제 티올 16a/16b에 대해 기재된 바와 같이 합성하였다. 티올 16c/16d를 이성질체들의 혼합물로서 수득하였다. HPLC 용출물을 추가 프로세싱 없이 다음 단계에서 사용하였다.
MS: m/z 678.1 = [M+H]+(계산된 MW = 678.0 g/mol).
트레프로스티닐 연결제 티올 16e 및 16f
Figure pct00161
연결제 빌딩 블록 15a 대신에 연결제 빌딩 블록 15c를 사용하였다는 점을 제외하고 트레프로스티닐 연결제 티올 16e 및 16f를 트레프로스티닐 연결제 티올 16a/16b에 대해 기재된 바와 같이 합성하였다. 구조 16e 및 16f로 배정된 2개의 이성질체들을 HPLC로 분리하였다. HPLC 용출물을 추가 프로세싱 없이 다음 단계에서 사용하였다.
15e MS: m/z 693.0 = [M+H]+(계산된 MW = 692.0 g/mol).
15f MS: m/z 693.0 = [M+H]+(계산된 MW = 692.0 g/mol).
실시예 19 :
연결제 빌딩 블록 17a 및 17b의 합성
연결제 빌딩 블록 17a 및 17b를 하기 반응식에 따라 합성하였다:
Figure pct00162
L-Fmoc-Dpr(Boc)-OH(100 mg, 0.234 mmol)를 0.5 ㎖의 DMF(무수, 분자체)에 용해시켰다. 6-(S-트리틸설파닐)-헥산아민(71 mg, 0.189 mmol), COMU(97 mg, 0.227 mmol) 및 DIPEA(66 ㎕, 0.378 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 피페리딘(50 ㎕, 0.505 mmol) 및 DBU(40 ㎕, 0.336 mmol)를 첨가하고, 교반을 10시간 동안 계속 수행하였다. 시스-사이클로헥산디카복실산 무수물(600 mg, 3.89 mmol)을 첨가하고, 교반을 1시간 동안 계속 수행하였다. 용액을 물/아세토니트릴로 켄칭하고 아세트산으로 산성화하였다. 빌딩 블록을 RP-HPLC로 정제하였다. 초기 용출 부분입체이성질체 17a 및 후기 용출 부분입체이성질체 17b의 구조 배정은 임의로 수행되었고 역전되었을 수도 있었다.
수율: 17a 30 mg(0.042 mmol), 17b 42 mg(0.059 mmol)
MS: m/z 716.2 = [M+H]+(계산된 MW = 716.0 g/mol).
실시예 20 :
트레프로스티닐 연결제 티올 18a/18b의 합성
Figure pct00163
연결제 빌딩 블록 17a(11 mg, 12 μmol), EDCㆍHCl(7.4 mg, 38.5 μmol) 및 DMAP(4.7 mg, 38.5 μmol)를 300 ㎕의 DCM(무수, 분자체)에 용해시켰다. 용액을, 프릿을 갖춘 일회용 2 ㎖ 주사기 반응기 내의 15 mg 트레프로스티닐 적재된 TCP 수지(10.8 μmol, 0.72 mmol/g, 실시예 3 참조) 내로 흡인하였다. 반응기를 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 용액을 버리고, 수지를 DCM(10x)으로 세척하였다. 수지를 500 ㎕의 HFIP/DCM 30/70(부피/부피)과 함께 10분 동안 항온처리하여(3x) 생성물을 절단하였다. 수지를 500 ㎕의 DCM(2x)으로 세척하였다. 250 ㎕의 TFA를 조합된 절단 및 세척 용액에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 항온처리하였다. 휘발성 물질을 감압 하에 제거하였다. 잔사를 RP-HPLC로 정제하여 2개의 위치이성질체들의 혼합물로서 티올 18a/18b를 수득하였다. HPLC 용출물을 추가 프로세싱 없이 다음 단계에서 사용하였다.
수율: 18a/18b 1.5 mg(2 μmol)(엘만 시험에 의한 티올 정량에 의해 측정됨).
MS: m/z 746.2 = [M+H]+(계산된 MW = 746.0 g/mol).
실시예 21 :
PEG - 연결제 -약물 접합체 19a/b, 19c/6d, 19e, 19f 및 19g/19h의 합성
PEG-연결제-약물 접합체를 하기 반응식에 따라 제조하였다:
Figure pct00164
과량의 직쇄 PEG 5 kDa 말레이미드를 트레프로스티닐 연결제 티올 16a/16b, 16c/16d, 16e, 16f 및 18a/18b의 HPLC 용출물에 첨가하였다. pH 7.4의 완충제(0.5 M 인산염)를 첨가하여 혼합물을 중화하고 실온에서 항온처리하였다. 티올의 완전한 소모(대략 1시간) 후, 혼합물을 아세트산으로 산성화하고 RP-HPLC로 과량의 PEG-말레이미드로부터 분리하였다. HPLC 용출물을 동결건조하여 각각 PEG-연결제-약물 접합체 19a/b, 19c/19d, 19e, 19f 및 19g/19h를 수득하였다.
실시예 22 :
PEG 접합체 19a/b, 19c/19d, 19e, 19f 및 19g/19h로부터의 약물 방출 반감기의 측정:
Figure pct00165
PEG-연결제-약물 접합체 19a/b, 19c/19d, 19e, 19f 및 19g/19h를 pH 7.4의 완충제(60 mM 인산나트륨, 3 mM EDTA, 0.05% 트윈-20, 1 ㎖)에 용해시키고 37℃에서 항온처리하였다. 다양한 시점에서 분취물을 UPLC로 분석하여 시간별로 작도된 방출된 트레프로스티닐의 양을 측정하였다. 약물 방출은 일차 반응속도를 따른다는 것을 발견하였다. 곡선 피팅 소프트웨어를 이용하여 각각의 접합체로부터의 약물 방출의 반감기를 측정하였다(표 1).
Figure pct00166
실시예 23 :
중간체 20의 합성:
Figure pct00167
6-(S-트리틸설파닐)-헥산아민의 아미노 기는 88 ㎖ 메탄올/DCM 1/1(부피/부피) 중의 2,4,6-트리메톡시벤즈알데하이드(4.22 g, 21.51 mmol) 용액을 44 ㎖ 메탄올 중의 6-(S-트리틸설파닐)-헥산아민(6.74 g, 17.95 mmol) 및 나트륨 시아노보로하이드라이드(1.58 g, 25.14 mmol)에 적가함으로써 보호된 Tmob (2,4,6-트리메톡시벤질)이었다. 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하고 95 ㎖의 0.4 N HCl 수용액으로 켄칭하였다. 실온에서 30분 동안 추가 교반한 후, 혼합물을 에틸 아세테이트(4x)로 추출하였다. 모은 유기층을 포화된 NaHC03 수용액(2x) 및 염수로 세척하였다. 유기층을 Na2S04 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하였다.
0.1%(부피/부피)의 트리에틸아민을 함유하는 DCM/메탄올로 용출하는 플래쉬 크로마토그래피로 Tmob 보호된 아민(화합물 20)을 정제하였다.
수율: 5.88 g(55%).
MS: m/z 556.3 = [M+H]+(계산된 MW = 555.79 g/mol).
실시예 24 :
중간체 21의 합성:
Figure pct00168
(1R,2S-사이클로헥산디카복실산 1-메틸 에스테르(CAS 번호 88335-92-6)(합성에 대해서는 문헌(R. Manzano et al. J. Org. Chem. 2010, 75(15), 5417-5420) 참조)(506 mg, 2.72 mmol)를 톨루엔(11 ㎖, 무수)에 용해시켰다. 염화티오닐(1.09 ㎖, 15.0 mmol)을 첨가하고 혼합물을 60℃에서 압력 튜브 내에서 1시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 진공 중에서 제거하였다. DCM(30 ㎖, 무수) 중의 Tmob 보호된 아민(화합물 20)(1.66 g, 2.99 mmol) 및 DIPEA(1.12 ㎖, 6.43 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트를 첨가하고, 유기층을 0.1 N 수성 HCl(2x)로 세척하였다. 유기층을 Na2S04 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하였다. 에틸 아세테이트/헵탄으로 용출하는 플래쉬 크로마토그래피로 메틸 에스테르(화합물 21)를 정제하였다.
수율: 1.55 g(79%).
MS: m/z 746.1 = [M+Na]+(계산된 MW = 723.98 g/mol).
실시예 25 :
중간체 22의 합성:
Figure pct00169
메틸 에스테르(화합물 21)(3.12 g, 4.31 mmol)를 이소프로판올(10 ㎖)에 용해시켰다. 35 ㎖의 1 M LiOH 수용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 5일 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트를 첨가하고, 유기층을 0.05 N 수성 HCl(2x) 및 염수로 세척하였다. 유기층을 Na2S04 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 0.1% 포름산(부피/부피)을 함유하는 에틸 아세테이트/헵탄으로 용출하는 플래쉬 크로마토그래피로 중간체 22를 정제하였다.
수율: 2.41 g(79%).
MS: m/z 710.1 = [M+H]+(계산된 MW = 709.95 g/mol).
실시예 26 :
중간체 6a의 합성:
Figure pct00170
화합물 22(1.23 g, 1.74 mmol)를 DCM(18 ㎖)에 용해시켰다. TFA(2 ㎖) 및 TES(600 ㎕)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 40분 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공 중에서 제거하였다. 잔사를 DCM(20 ㎖)에 용해시키고, 염화트리틸(728 mg, 2.61 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. DCM을 감압 하에 제거하였다. 0.1% 포름산(부피/부피)을 함유하는 에틸 아세테이트/헵탄을 용출제로서 사용하는 플래쉬 크로마토그래피로 정제한 후 RP-HPLC로 정제하여 카복실산(중간체 6a)을 정제하였다.
수율: 615 mg(67%).
MS: m/z 552.2 = [M+Na]+(계산된 MW = 529.75 g/mol).
실시예 27 :
트레프로스티닐 연결제 티올 24a의 합성:
Figure pct00171
Dmob 보호된 트레프로스티닐(화합물 8)(100 mg, 0.185 mmol), 카복실산(중간체 6a)(195 mg, 0.368 mmol), EDCㆍHCl(72 mg, 0.376 mmol) 및 DMAP(43 mg, 0.352 mmol)를 DCM(1.8 ㎖, 무수, 분자체)에 용해시켰다. 혼합물을 실온에서 1일 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트를 첨가하고, 유기층을 0.1 N 수성 HCl(3x) 및 염수로 세척하였다. 유기층을 Na2S04 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하였다.
잔사를 HFIP(5 ㎖), TFA(250 ㎕) 및 TES(250 ㎕)에 용해시키고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 침전물을 여과하고 여과액을 진공 중에서 증발시켰다.
UPLC 분석은 위치이성질체 24a와 24b의 4/1 비를 보여주었다(컬럼: 키네텍스(Kinetex) 100 x 2.1 mm, 1.7 ㎛ XB-C18 실리카, 공극 크기 100 Å, 페노모넥스 리미티드(Phenomonex Ltd), 독일 아샤펜부르그 소재; 유속 0.25 ㎖/분; 용매 A: 물 + 0.05% TFA(부피/부피), 용매 B: 아세토니트릴 + 0.04% TFA; 구배: 30% 내지 58% B(10분), 58% B 등용매(10분), 58% 내지 80% B(5분), 80% 내지 99%(5분), 파장 280 nm). 이성질체 24a는 화합물 9x와 동일한 것으로 판명되었다.
잔사를 아세토니트릴/물에 용해시키고, 이성질체 24a를 RP-HPLC(용매 A: H20 + 0.01% HCl, 용매 B: MeCN + 0.01% HCl, 구배: 16분에 걸쳐 60% 내지 85% B)로 정제하였다. 이성질체 24a가 먼저 용출된 후, 이성질체 24b가 용출되었다. 순수한 이성질체 24a를 함유하는 분획을 모아 동결건조하였다. 이성질체 24a 및 24b를 함유하는 혼합된 분획을 다시 정제하였다.
수율 24a: 29.5 mg(24%)
MS: m/z 660.3 = [M+H]+(계산된 MW = 659.9 g/mol).
1H-NMR(CDCl3, δ[ppm]): 7.07 (t, 1H), 6.80 (d, 1H), 6.71 (d, 1H), 5.86 (bs, 1H), 4.78-4.63 (m, 3H), 3.53 (bs, 1H), 3.14-3.03 (m, 1H), 3.03-2.83 (m, 2H), 2.82-2.66 (m, 2H), 2.66-2.58 (m, 1H), 2.58-2.46 (m, 4H), 2.46-2.31 (m, 1H), 2.31-2.13 (m, 1H), 2.13-1.92 (m, 2H), 1.92-1.81 (m, 1H), 1.75-1.51 (m, 7H), 1.51-1.21 (m, 21H), 1.21-1.08 (m, 1H), 0.90 (t, 3H).
13C-NMR (126 MHz, CDC13, δ[ppm]): 174.7, 174.2, 171.7, 155.2, 140.6, 127.5, 126.3, 121.8, 109.71, 78.8, 72.4, 65.8, 48.3, 43.9, 42.5, 40.4, 39.7, 37.4, 37.3, 35.4, 34.00, 33.0, 32.9, 32.1, 29.3, 28.4, 28.1, 27.0, 26.4, 25.5, 24.6, 24.2, 23.2, 22.8, 14.2.
실시예 28 :
트레프로스티닐 연결제 티올 24a와 4-아암 PEG 20 kDa 말레이미드의 PEG화 반응
Figure pct00172
2 ㎖ 아세토니트릴/물 9/1(부피/부피) 중의 트레프로스티닐 연결제 티올 24a(7.5 mg, 11.3 μmol) 용액을 2 ㎖ 아세토니트릴/물 1/1(부피/부피) 중의 4-아암 PEG 20 kDa 말레이미드(53.5 mg, 2.54 μmol) 용액과 혼합하였다. pH 7.4의 완충제(50 mM 인산염, 0.8 ㎖)를 첨가하여 pH를 7.0으로 조절하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반한 후, RP-HPLC(용매 A: 0.01% HCl을 함유하는 H2O, 용매 B: 0.01% HCl을 함유하는 MeCN, 구배: 16분에 걸쳐 45% 내지 85% B)로 정제하였다. 생성물 함유 분획을 풀링하고, 아세토니트릴을 감압 하에 제거하였다. pH 7.4의 완충제(인산염, 0.5 M)를 첨가하여 용액을 중화하였다. 용액을 농축하고, 한외여과(비바스핀(Vivaspin) 원심분리 농축기, 10 kDa 컷 오프를 갖는 PES 막)를 이용하여 완충제를, 46 g/ℓ의 만니톨을 함유하는 10 mM의 pH 7.0 인산염으로 교체하함으로써 8.5 ㎖의 화합물 25의 최종 용액을 수득하였다. UPLC 및 SEC 분석은 불균질한 물질을 보여주었다. 염기성 가수분해 후 트레프로스티닐 함량의 정량으로 농도를 측정하였다: 30 ㎕의 분취물을 35 ㎕의 0.5 M NaOH로 처리하였다. 실온에서 30분 동안 항온처리한 후, 35 ㎕의 아세트산을 첨가하였다. 트레프로스티닐 보정 곡선을 이용하여 UPLC로 트레프로스티닐 함량을 측정하였다. 30 mg의 화합물 25에 상응하는 2.0 mg의 총 트레프로스티닐 함량이 발견되었다. 수율: PEG 출발 물질을 기초로 하였을 때 50%.
실시예 29 :
일시적으로 접합된 PEG 연결제 트레프로스티닐 화합물 25의 트레프로스티닐 방출 반응속도
화합물 25로부터의 트레프로스티닐 방출 반응속도를 실시예 15에 기재된 바와 같이 측정하고 화합물 13으로부터 수득된 결과와 비교하였다. 반감기(5일)의 차이는 관찰되지 않았다.
실시예 30 :
래트 혈장에서의 일시적으로 접합된 PEG 연결제 트레프로스티닐 화합물 13의 트레프로스티닐 방출 반응속도
150 ㎕의 pH 7.5 HEPES 완충제(1 M HEPES, 3 mM EDTA)를 1.2 ㎖의 래트 혈장(위스타(WISTAR) 래트 헤파린 혈장, 이노베이티브 리서치(Innovative Research; 미국 미시간주 노비 소재)과 혼합하였다. 150 ㎕의 일시적으로 접합된 PEG 연결제 트레프로스티닐(화합물 13) 용액(1.5 ㎖의 10 mM 인산염 및 46 g/ℓ 만니톨 완충제(pH 7.0) 중의 0.15 mg 화합물 13)을 첨가하였다. 혼합물의 pH 7.4를 pH 전극으로 확인하였다. 혼합물을 37℃에서 항온처리하였다. 주어진 시점에서 100 ㎕의 분취물을 회수하였다. 100 ㎕의 분취물을 방출된 트레프로스티닐 함량 및 총 트레프로스티닐 함량에 대해 분석하였다.
방출된 트레프로스티닐의 분석을 위해, 100 ㎕의 분취물을 20 ㎕의 내부 표준물(메탄올/물 1/1(부피/부피) 중의 2.8 ㎍/㎖ 톨부타미드)과 혼합하고 오스트로(Ostro) 96웰 플레이트(워터스 게엠베하, 독일 에슈보른 소재)로 옮겼다. 1% 포름산을 함유하는 3배 부피의 미리 냉각된(0℃ 내지 5℃) 아세토니트릴을 첨가하여 혈장 단백질을 침전시켰다. 양의 압력(4 bar, 워터스 포지티브 프레셔-96 프로세서(Waters Positive Pressure-96 Processor))을 인가하고, 용출물을 동결건조하였다. 동결건조물을 40 ㎕의 10 mM 포름산암모늄(pH 4.0)/아세토니트릴 7/3(부피/부피)에 용해시켰다. 용액을 원심분리하고 상청액을 방출된 트레프로스티닐에 대해 UPLC-MS/MS로 분석하였다.
총 트레프로스티닐 함량(방출된 트레프로스티닐과 담체 결합된 트레프로스티닐의 합계)의 분석을 위해, 100 ㎕의 분취물을 20 ㎕의 내부 표준물(메탄올/물 1/1(부피/부피) 중의 2.8 ㎍/㎖ 톨부타미드)과 혼합하고 50 ㎕의 0.5 M LiOH을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 진탕기 내에서 2시간 동안 항온처리하였다. 25 ㎕의 1 M HCl를 첨가한 후, 혼합물을 오스트로 96웰 플레이트(워터스 게엠베하, 독일 에슈보른 소재)로 옮겼다. 1% 포름산을 함유하는 3배 부피의 미리 냉각된(0℃ 내지 5℃) 아세토니트릴을 첨가하여 혈장 단백질을 침전시켰다. 양의 압력(4 bar, 워터스 포지티브 프레셔-96 프로세서)을 인가하고, 용출물을 동결건조하였다. 동결건조물을 100 ㎕의 10 mM 포름산암모늄(pH 4.0)/아세토니트릴 7/3(부피/부피)에 용해시켰다. 용액을 원심분리하고 상청액을 총 트레프로스티닐 함량에 대해 UPLC-MS/MS로 분석하였다.
트레프로스티닐 함량의 측정을 위한 UPLC-MS/MS 방법:
ESI 프로브를 통해 써모 LTQ 오비트랩 디스커버리 질량 분광계에 커플링되어 있고 분석 컬럼(이동상 A: 10 mM 포름산암모늄 pH 4.6, 이동상 B: 메탄올, T = 22℃)으로서 워터스 BEH C18(50 x 2.1 mm I.D., 1.7 ㎛ 입자 크기)을 갖는 워터스 액퀴티 UPLC를 이용하여 혈장 트레프로스티닐 농도의 정량을 수행하였다. 구배 시스템은 4분 이내에 0.1% B부터 95% B까지의 선형 구배, 95% B(0.5분)를 사용한 등용매 세척 단계, 및 0.25 ㎖/분의 유속을 이용한 재컨디셔닝 단계(2.4분)를 포함하였다. 전이 쌍, 즉 트레프로스티닐의 경우 m/z 331.2 생성물 이온으로의 m/z 389.2 전구체 이온의 전이 및 내부 표준물(IS) 톨부타미드의 경우 m/z 170.0 생성물 이온으로의 m/z 269.1 전구체 이온의 전이를 모니터링하는 선택된 반응 모니터링(SRM, 음 이온화) 모드에서 이온의 검출을 수행하였다.
추출된 피크 면적 비 면적트레프로스티닐/면적톨부타미드를 공칭 트레프로스티닐 농도의 보정 표준물과 비교하여 작도함으로써 보정 곡선을 획득하였다. 표준 소프트웨어를 이용하여 결과를 선형 회귀에 피팅하였다.
상이한 시점에서 정량 실험의 추출된 피크 면적 비 면적트레프로스티닐/면적톨부타미드를 이용하여 보정 곡선에 따라 트레프로스티닐 함량을 계산하였다.
다양한 시점에서의 트레프로스티닐 방출은 총 트레프로스티닐 함량에 비해 % 트레프로스티닐 방출로서 표현되었다(도 1 참조). 일차 반응속도 피트를 이용함으로써 37℃에서 완충된 래트 혈장에서 화합물 25로부터의 트레프로스티닐의 방출 반응속도에 대한 4.5일의 반감기를 수득하였는데, 이 반감기는 37℃에서 pH 7.4의 완충제에서의 방출 반응속도와 잘 일치한다(실시예 15).
실시예 31
원숭이에서 PEG 트레프로스티닐 접합체 25의 PK
접합체 25(10 mM pH 7.0 인산염 및 46 g/ℓ 만니톨 중의 3 mg/㎖)를 각각 3마리의 수컷 시아노몰구스 원숭이에게 피하 및 정맥내 주사로 단회 투여량으로서 0.5 mg/kg의 투여량 수준으로 투여하였다. 혈액 샘플을 2주에 걸쳐 주어진 시점에서 수집하였다. 혈장을 PEG 함량 및 총 트레프로스티닐 함량(방출된 트레프로스티닐과 담체 결합된 트레프로스티닐의 합계)에 대해 분석하였다. 담체 결합된 트레프로스티닐에 비해 자유 트레프로스티닐의 빠른 제거로 인해, 트레프로스티닐 혈장 수준은 자유 트레프로스티닐 수준보다 오히려 트레프로스티닐 접합체의 존재를 반영한다.
총 트레프로스티닐 함량의 분석을 위해, 시아노몰구스 원숭이 혈장에서 100 ㎕의 혈장 샘플 및 트레프로스티닐 표준물을 20 ㎕의 내부 표준물(메탄올/물 1/1(부피/부피) 중의 2.8 ㎍/㎖ 톨부타미드)과 혼합하고, 50 ㎕의 0.5 M LiOH을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 진탕기 내에서 2.5시간 동안 항온처리하였다. 25 ㎕의 1 M HCl을 첨가한 후, 혼합물을 오스트로 96웰 플레이트(워터스 게엠베하, 독일 에슈보른 소재)로 옮겼다. 1% 포름산을 함유하는 3배 부피의 미리 냉각된(0℃ 내지 5℃) 아세토니트릴을 첨가하여 혈장 단백질을 침전시켰다. 양의 압력(4 bar, 워터스 포지티브 프레셔-96 프로세서)을 인가하고, 용출물을 동결건조하였다. 동결건조물을 100 ㎕의 10 mM 포름산암모늄(pH 4.0)/아세토니트릴 7/3(부피/부피)에 용해시켰다. 용액을 원심분리하고 상청액을 총 트레프로스티닐 함량에 대해 UPLC-MS/MS로 분석하였다.
트레프로스티닐 함량의 측정을 위한 UPLC-MS/MS 방법:
ESI 프로브를 통해 써모 LTQ 오비트랩 디스커버리 질량 분광계에 커플링되어 있고 분석 컬럼(이동상 A: 10 mM 포름산암모늄 pH 4.6, 이동상 B: 메탄올, T = 22℃)으로서 워터스 BEH C18(50 x 2.1 mm I.D., 1.7 ㎛ 입자 크기)을 갖는 워터스 액퀴티 UPLC를 이용하여 혈장 트레프로스티닐 농도의 정량을 수행하였다. 구배 시스템은 4분 이내에 0.1% B부터 95% B까지의 선형 구배, 95% B(0.5분)를 사용한 등용매 세척 단계, 및 0.25 ㎖/분의 유속을 이용한 재컨디셔닝 단계(2.4분)를 포함하였다. 전이 쌍, 즉 트레프로스티닐의 경우 m/z 331.2 생성물 이온으로의 m/z 389.2 전구체 이온의 전이 및 내부 표준물(IS) 톨부타미드의 경우 m/z 170.0 생성물 이온으로의 m/z 269.1 전구체 이온의 전이를 모니터링하는 선택된 반응 모니터링(SRM, 음 이온화) 모드에서 이온의 검출을 수행하였다.
추출된 피크 면적 비 면적트레프로스티닐/면적톨부타미드를 시아노몰구스 원숭이 혈장에서 제조된 공칭 트레프로스티닐 농도의 보정 표준물과 비교하여 작도함으로써 보정 곡선을 획득하였다. 표준 소프트웨어를 이용하여 결과를 선형 회귀에 피팅하였다.
상이한 시점에서 정량 실험의 추출된 피크 면적 비 면적트레프로스티닐/면적톨부타미드를 이용하여 보정 곡선에 따라 트레프로스티닐 함량을 계산하였다.
총 PEG 함량의 분석을 위해, 혈장 샘플을 염기성 예항온처리하여 접합체 25로부터 균질한 PEG 물질을 발생시켰다. 이것은 접합체 25의 주사 후 시간의 경과에 따라 4개의 트레프로스티닐이 담체 분자로부터 순차적으로 방출되기 때문에 상이한 트레프로스티닐 담체 종이 발생된다는 사실을 기초로 하였다.
시아노몰구스 원숭이 혈장에서 50 ㎕의 혈장 샘플 및 25 PEG 트레프로스티닐 접합체 표준물을 50 ㎕의 200 mM HEPES 용액(pH 7.5)으로 희석하고, 50 ㎕의 0.5 M LiOH을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 진탕기 내에서 2시간 동안 항온처리하였다. 50 ㎕의 1 M HCl을 첨가한 후, 라이프 디아그노스틱스 인코포레이티드(Life Diagnostics Inc.; 미국 펜실베니아주 웨스트 체스터 소재)의 고민감성 PEG ELISA 키트 P-0003을 제조자의 설명서에 따라 사용하여 혼합물을 분석하였다.
450 nm에서의 흡광도 값을 공칭 PEG 농도의 보정 표준물과 비교하여 작도함으로써 보정 곡선을 획득하였다. 표준 소프트웨어를 이용하여 결과를 S자형 곡선에 피팅하였다.
상이한 시점에서 정량 실험의 450 nm에서의 흡광도 값을 이용하여 보정 곡선에 따라 PEG 함량을 계산하였다.
결과: 접합체 25의 단회 투여량 피하 주사 후 총 트레프로스티닐 함량 분석은 원숭이에서 트레프로스티닐 접합체의 순환이 2주 초과의 기간 동안 연장 지속된다는 것을 보여준다(도 2).
접합체 25의 단회 투여량 정맥내 주사 및 총 트레프로스티닐 함량에 대한 혈장 분석은 유사한 순환 지속을 보여주었다(도 3). 표준 소프트웨어를 이용하여 2.9일의 겉보기 일차 총 트레프로스티닐 제거 반감기(속도 상수 k겉보기: 0.239일-1)를 수득하였다.
대조적으로, PEG 담체 함량에 대한 혈장 분석은 훨씬 더 느린 제거를 보여주었다(도 3). 표준 소프트웨어를 이용하여 일차 반응속도로서 피팅함으로써 6.6일의 PEG 담체 제거 반감기(속도 상수 kPEG 제거: 0.105일-1)를 수득하였다.
예를 들면, PEG 담체로부터의 1개 내지 4개 상이한 트레프로스티닐의 순차적인 연결제 가수분해/방출에 의해 발생된 상이한 트레프로스티닐 담체 종들의 동등한 제거 속도 상수를 추정하였다.
PEG 담체에 비해 총 트레프로스티닐의 보다 빠른 겉보기 제거 반감기는 연결제 가수분해에 의한 PEG 담체 제거와 트레프로스티닐 방출의 조합을 기초로 한다. k겉보기(0.239일-1) 및 kPEG 제거(0.105일-1)의 측정된 속도 상수 값으로부터 연결제 절단에 의한 일차 트레프로스티닐 방출 속도 상수 k연결제를 계산할 수 있다: exp(-k겉보기 t) = exp(-kPEG 제거 t) * exp(-k연결제 t) = exp(-t[kPEG 제거+k연결제]).
대수화 및 재배열 후, k연결제를 하기 식에 따라 계산할 수 있다:
k연결제 = k겉보기 - kPEG제거; k연결제 = 0.239일-1 - 0.105일-1 = 0.134일-1
방정식 t반감기 = ln(2)/k를 이용하여, 연결제 가수분해에 의한 트레프로스티닐 방출의 반감기를 5.2일로서 계산하였는데, 이 반감기는 시험관내에서 측정된 5일의 연결제 트레프로스티닐 방출 반감기와 잘 일치한다.
실시예 32
래트에서 PEG 트레프로스티닐 접합체 25 및 자유 트레프로스티닐의 PK
접합체 25(3 mg/㎖ 완충제(10 mM pH 7.0 인산염, 46 g/ℓ 만니톨)를 각각의 수컷 위스타 래트에게 단회 투여량으로서 5.5 mg/kg의 투여량 수준으로 주사하였다. 3마리의 동물들은 피하 주사를 제공받았고, 3마리의 동물들은 정맥내 주사를 제공받았다. 혈액 샘플을 2주에 걸쳐 주어진 시점에서 수집하였다. 혈액 샘플(250 ㎕)을, 50 ㎕의 산성 시트르산염 완충제(0.5 M 시트르산나트륨, pH 4.0)를 함유하는 수집 튜브 내에 직접적으로 넣었다. 혈장을 자유 트레프로스티닐 함량 및 총 트레프로스티닐 함량(자유 트레프로스티닐과 담체 결합된 트레프로스티닐의 합계)에 대해 분석하였다.
자유 트레프로스티닐의 분석을 위해, 50 ㎕의 혈장을 얼음 상에서 해동하고 5 ㎕의 산성 시트르산염 완충제 및 10 ㎕의 내부 표준물(메탄올/물 1/1(부피/부피) 중의 0.28 ㎍/㎖ 톨부타미드)과 혼합하였다. 샘플을 오스트로 96웰 플레이트(워터스 겜베하, 독일 에슈보른 소재)로 옮기고, 1% 포름산을 함유하는 400 ㎕의 미리 냉각된(0℃ 내지 5℃) 아세토니트릴을 빠르게 첨가하여 혈장 단백질을 침전시켰다. 양의 압력(4 bar, 워터스 포지티브 프레셔-96 프로세서)을 인가하고, 용출물을 수집하였다. 그 후, 상기 웰 플레이트를 1 부피%의 포름산을 함유하는 100 ㎕의 빙냉 아세토니트릴로 2회 세정하였다. 용출물을 (10℃에서) 에펜도르프 써모믹서(Eppendorf Thermomixer) 내에 놓여진 2 ㎖ 바이알 내로 옮기고, 용출물을 약한 질소 스트림 하에 45분에 걸쳐 60 ㎕ 내지 80 ㎕의 최종 부피까지 농축하였다. 30 ㎕의 용매 혼합물(포름산/아세토니트릴 7/3(부피/부피)에 의해 pH 4.0으로 조절된 10 mM 수성 포름산암모늄)을 각각의 바이알에 첨가하고, 용액을 UHPLC-MS/MS로 분석하였다.
보정 표준물의 제조를 위해, 블랭크 혈장 샘플을 트레프로스티닐과 혼합하고 유사하게 처리하였다.
자유 트레프로스티닐 함량의 측정을 위한 UHPLC-MS/MS 방법:
아질런트 트리플레쿠아드(Agilent Triplequad) 6460 시스템(매스헌터 엑스칼리버(MassHunter Xcalibur) 소프트웨어)에 커플링된 아질런트 1290 UHPLC를 ES 모드로 이용하여 혈장 트레프로스티닐 농도의 정량을 수행하였다. 분석 컬럼으로서 워터스 BEH C18을 사용하였다(50 x 2.1 mm I.D., 1.7 ㎛ 입자 크기. 이동상 A: 10 mM 포름산암모늄 pH 5.7, 이동상 B: 메탄올). 구배 시스템은 8분 이내에 35% B부터 99% B까지의 선형 구배, 99% B(0.9분)를 사용한 등용매 세척 단계, 및 0.200 ㎖/분의 유속(T = 40℃)을 사용한 재컨디셔닝 단계(3분)를 포함하였다.
전이 쌍, 즉 트레프로스티닐의 경우 m/z 331.1 생성물 이온으로의 m/z 389.1 전구체 이온의 전이 및 내부 표준물(IS) 톨부타미드의 경우 m/z 169.9 생성물 이온으로의 m/z 269.0 전구체 이온의 전이를 모니터링하는 SRM 모드로 이온의 검출을 수행하였다.
추출된 피크 면적 비 면적트레프로스티닐/면적톨부타미드를 공칭 트레프로스티닐 농도의 보정 표준물과 비교하여 작도함으로써 보정 곡선을 획득하였다. 표준 소프트웨어를 이용하여 결과를 선형 회귀에 피팅하였다.
상이한 시점에서 정량 실험의 추출된 피크 면적 비 면적트레프로스티닐/면적톨부타미드를 이용하여 보정 곡선에 따라 트레프로스티닐 함량을 계산하였다.
총 트레프로스티닐 혈장 함량을 실시예 31에 제공된 바와 같이 측정하였다.
결과: 접합체 25의 단회 투여량 피하 주사 후 자유 트레프로스티닐 및 총 트레프로스티닐 함량 분석은 정맥내(도 4) 또는 피하(도 5) 주사 후 래트에서 4일 초과의 기간 동안 트레프로스티닐 접합체의 연장된 순환 및 자유 트레프로스티닐의 무손상 방출을 보여준다.
실시예 33
라세미체 혼합물 6a/6b의 거울상분리에 의한 중간체 6a의 단리
아세토니트릴/아세트산 1000/1(부피/부피)을 용출제로서 사용하여 라세미체 혼합물 6a/6b(107 g)를 키랄팍(Chiralpak) IA 컬럼(250 x 76 mm, 20 ㎛, 유속 270 ㎖/분) 상에서 분리하였다. 두 번째로 용출되는 거울상이성질체(6a)의 모은 용출물을 5 부피%의 물과 혼합하고 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 DCM(500 ㎖)에 용해시키고 0.1 M HCl(500 ㎖, 2x) 및 염수(500 ㎖)로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하였다.
수율: 28.9 g(27%).
MS: m/z 552.2 = [M+Na]+(계산된 MW = 529.75 g/mol).
키랄팍 IC 컬럼(4.5 x 250 mm, 5 ㎛, 용출제 아세토니트릴/아세트산 1000/1(부피/부피), 유속 1 ㎖/분, 230 nm)에 의해 측정된 거울상이성질체 6a/6b의 거울상이성질체 비: 97.5/2.5.
실시예 34 :
트레프로스티닐 연결제 티올 24a의 개선된 합성
Figure pct00173
Figure pct00174
Dmob 보호된 트레프로스티닐(화합물 8)(200 mg, 0.370 mmol), 카복실산(화합물 23)(294 mg, 0.555 mmol), EDCㆍHCl(248 mg, 1.295 mmol) 및 DMAP(158 mg, 1.295 mmol)를 DCM(2.9 ㎖, 무수, 분자체)에 용해시켰다. 혼합물을 실온에서 1일 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트를 첨가하고, 유기층을 0.1 N 수성 HCl(3x) 및 염수로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하였다.
잔사를 HFIP(8 ㎖)에 용해시켰다. TFA(200 ㎕) 및 TES(200 ㎕)를 첨가한 후, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 용액을 헵탄(16 ㎖, 6x)으로 추출하고 DCM(16 ㎖)으로 희석하였다. 용액을 물(16 ㎖, 3x)로 추출하였다. 모은 수층을 DCM(8 ㎖)으로 역추출하였다. 모은 DCM 층을 감압 하에 증발시켰다.
UPLC 분석은 위치이성질체 24a와 24b의 9/1 비를 보여주었다(컬럼: 키네텍스 100 x 2.1 mm, 1.7 ㎛ XB-C18 실리카, 공극 크기 100 Å, 페노모넥스 리미티드, 독일 아샤펜부르그 소재; 유속 0.25 ㎖/분; 용매 A: 물 + 0.05% TFA(부피/부피), 용매 B: 아세토니트릴 + 0.04% TFA; 구배: 30% 내지 58% B(10분), 58% B 등용매(10분), 58% 내지 80% B(5분), 80% 내지 99%(5분), 파장 280 nm).
잔사를 아세토니트릴/물에 용해시키고, 위치이성질체 24a를 RP-HPLC(용매 A: H20 + 0.01% HCl, 용매 B: MeCN + 0.01% HCl, 구배: 15분에 걸쳐 57% 내지 62% B)로 단리하였다. 혼합된 분획을 다시 정제하였다. 순수한 위치이성질체 24a를 함유하는 분획을 모아 동결건조하였다.
수율 24a: 98 mg(39%)
MS: m/z 660.3 = [M+H]+(계산된 MW = 659.9 g/mol).
약어
AcOH 아세트산
AIB 2-아미노이소부티르산
BnBr 브롬화벤질
Boc tert-부톡시보닐-
BSA N,O-비스-(트리메틸실릴)-아세트아미드
COMU (1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸렌아미노옥시)디메틸아미노-모르폴리노-카베늄 헥사플루오로포스페이트
d 일
DIPEA 디이소프로필에틸아민
DCM 디클로로메탄
DMAP 4-(디메틸아미노)피리딘
DMF N,N-디메틸포름아미드
Dmob 2,4-디메톡시벤질
DMSO 디메틸 설폭사이드
Dpr 2,3-디아미노프로피온산
EDC N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카보디이미드
EDTA 에틸렌디아민 테트라아세트산 이나트륨 염 이수화물
EtOAc 에틸 아세테이트
eq 당량
h 시간
HFIP 1,1,1,3,3,3-헥사플루오로이소프로판올
HPLC 고성능 액체 크로마토그래피
LC/MS 질량 분광측정-커플링된 액체 크로마토그래피
Mal 말레이미도
MeOH 메탄올
MeCN 아세토니트릴
min 분
Mmt 4-메톡시트리페닐메틸
mol. 분자
m/z 질량/전하
NaOH 수산화나트륨
NHS N-하이드록시석신이미드
PEG 폴리에틸렌 글리콜
Pfp 펜타플루오로페닐
PyBOB 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트
PP 폴리프로필렌
RT 실온
RP 역상
sat. 포화된
soln. 용액
T 온도
T3P 프로필 포스폰산 무수물
TCP 2-클로로트리틸 클로라이드 수지
TES 트리에틸실란
Trt 트리틸
Tmob 2,4,6-트리메톡시벤질
TMS 트리메틸실릴
TransCon 일시적으로 접합된
THF 테트라하이드로푸란
TFA 트리플루오로아세트산
UPLC 초성능 액체 크로마토그래피
UV 자외선
SEQUENCE LISTING <110> Ascendis Pharma A/S <120> Carrier-linked treprostinil prodrugs <130> CPX67816PC <160> 15 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 1 Ala Ala Ala Ala Ser Ser Ala Ser Ser Ala Ser Ser Ser Ser Ser Ala 1 5 10 15 Ala Ala Ser Ala 20 <210> 2 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 2 Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ser Ser Ala Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala 1 5 10 15 Ser Ala Ser Ser 20 <210> 3 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 3 Ala Ser Ala Ser Ala Ser Ala Ser Ala Ser Ala Ser Ser Ala Ala Ser 1 5 10 15 Ala Ala Ser Ala 20 <210> 4 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 4 Ser Ala Ala Ser Ser Ser Ala Ser Ser Ser Ser Ala Ala Ser Ser Ala 1 5 10 15 Ser Ala Ala Ala 20 <210> 5 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 5 Ser Ser Ser Ser Ala Ala Ser Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala Ala Ser 1 5 10 15 Ser Ser Ala Ser 20 <210> 6 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 6 Ser Ser Ala Ser Ser Ser Ala Ala Ser Ser Ser Ala Ser Ser Ser Ser 1 5 10 15 Ala Ser Ala Ala 20 <210> 7 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 7 Ser Ala Ser Ala Ser Ala Ser Ala Ser Ala Ser Ala Ala Ser Ser Ala 1 5 10 15 Ser Ser Ala Ser 20 <210> 8 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 8 Ala Ser Ser Ala Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala Ser Ser Ala Ala Ser 1 5 10 15 Ala Ser Ser Ser 20 <210> 9 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 9 Ala Ser Pro Ala Ala Pro Ala Pro Ala Ser Pro Ala Ala Pro Ala Pro 1 5 10 15 Ser Ala Pro Ala 20 <210> 10 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 10 Ala Ala Pro Ala Ser Pro Ala Pro Ala Ala Pro Ser Ala Pro Ala Pro 1 5 10 15 Ala Ala Pro Ser 20 <210> 11 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 11 Ala Pro Ser Ser Pro Ser Pro Ser Ala Pro Ser Ser Pro Ser Pro Ala 1 5 10 15 Ser Pro Ser Ser 20 <210> 12 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 12 Ser Ser Pro Ser Ala Pro Ser Pro Ser Ser Pro Ala Ser Pro Ser Pro 1 5 10 15 Ser Ser Pro Ala 20 <210> 13 <211> 24 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 13 Ala Ala Ser Pro Ala Ala Pro Ser Ala Pro Pro Ala Ala Ala Ser Pro 1 5 10 15 Ala Ala Pro Ser Ala Pro Pro Ala 20 <210> 14 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 14 Ala Ser Ala Ala Ala Pro Ala Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ser Ala Pro 1 5 10 15 Ser Ala Ala Ala 20 <210> 15 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polymer cassette <400> 15 Ser Ala Pro Ser Ser Pro Ser Pro Ser Ala Pro Ser Ser Pro Ser Pro 1 5 10 15 Ala Ser Pro Ser 20

Claims (39)

  1. 하기 화학식 (II)의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학 염:
    Figure pct00175

    상기 식에서,
    T는 하기 화학식 (i) 내지 (v)로부터 각각 독립적으로 선택되고:
    Figure pct00176

    Figure pct00177

    Figure pct00178

    Figure pct00179

    Figure pct00180

    여기서, 파선(dashed line)은 분자의 나머지 부분에의 부착을 표시하고;
    y는 1 내지 64, 바람직하게는 1 내지 16 범위의 정수이고, 보다 바람직하게는 y는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 및 16으로부터 선택되고, 훨씬 더 바람직하게는 y는 8이고;
    Ra1은 비치환된 알킬, 치환된 알킬, 비치환된 페닐, 치환된 페닐, 비치환된 나프틸, 치환된 나프틸, 비치환된 인데닐, 치환된 인데닐, 비치환된 인다닐, 치환된 인다닐, 비치환된 테트랄리닐, 치환된 테트랄리닐, 비치환된 C3-10 사이클로알킬, 치환된 C3-10 사이클로알킬, 비치환된 4원 내지 7원 헤테로사이클릴, 치환된 4원 내지 7원 헤테로사이클릴, 비치환된 9원 내지 11원 헤테로비사이클릴, 및 치환된 9원 내지 11원 헤테로비사이클릴의 군으로부터 선택되고;
    Ra2는 H, 비치환된 알킬, 및 치환된 알킬로부터 선택되고;
    Ra3 및 Ra4는 H, 비치환된 알킬, 및 치환된 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    n은 0 또는 1이고;
    Q는 스페이서 모이어티(moiety)이고;
    임의적으로, Ra1과 Ra3은 이들이 부착된 원자와 함께 연결되어 고리 A를 형성하고;
    A는 페닐, 나프틸, 인데닐, 인다닐, 테트랄리닐, C3-10 사이클로알킬, 4원 내지 7원 지방족 헤테로사이클릴, 및 9원 내지 11원 지방족 헤테로비사이클릴로부터 선택되고, 여기서 A는 비치환되거나 치환되고;
    Z1은 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함하는 담체이다.
  2. 제1항에 있어서, Ra2는 H인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, Ra4는 H, C1 -6 알킬 및 치환된 C1 -6 알킬로부터 선택되고, 바람직하게는 Ra4는 H인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, Ra1과 Ra3은 이들이 부착된 원자와 함께 연결되어 고리 A를 형성하고, 여기서 A는 페닐, 나프틸, 인데닐, 인다닐, 테트랄리닐, C3 -10 사이클로알킬, 4원 내지 7원 지방족 헤테로사이클릴, 및 9원 내지 11원 지방족 헤테로비사이클릴로부터 선택되고, A는 비치환되거나 치환되고; 보다 바람직하게는 고리 A는 사이클로프로판, 사이클로부탄, 사이클로펜탄, 사이클로헥산, 및 사이클로헵탄으로 구성된 군으로부터 선택되고, 훨씬 더 바람직하게는 고리 A는 사이클로헥산인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, T는 화학식 (iii)으로부터 선택되는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, y는 4, 6, 8, 10 또는 12, 바람직하게는, 4, 6 또는 8이고, 보다 바람직하게는 y는 4인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 하기 화학식 (II-A)의 구조를 갖는 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물:
    Figure pct00181

    상기 식에서,
    T는 하기 화학식 (i) 내지 (v)로부터 각각 독립적으로 선택되고:
    Figure pct00182

    Figure pct00183

    Figure pct00184

    Figure pct00185

    Figure pct00186

    여기서, 파선은 분자의 나머지 부분에의 부착을 표시하고;
    y는 1 내지 64, 바람직하게는 1 내지 16 범위의 정수이고, 보다 바람직하게는 y는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 및 16으로부터 선택되고, 훨씬 더 바람직하게는 y는 4, 6, 8, 10 또는 12, 가장 바람직하게는 4이고;
    Ra2는 H, 비치환된 알킬, 및 치환된 알킬로부터 선택되고;
    Ra4는 H, 비치환된 알킬, 및 치환된 알킬로 구성된 군으로부터 선택되고;
    A는 페닐, 나프틸, 인데닐, 인다닐, 테트랄리닐, C3-10 사이클로알킬, 4원 내지 7원 지방족 헤테로사이클릴, 및 9원 내지 11원 지방족 헤테로비사이클릴로부터 선택되고, 여기서 A는 비치환되거나 치환되고;
    Q는 스페이서 모이어티이고;
    Z1은 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함하는 담체이다.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 화학식 (II)에서 Q는 COORa9, ORa9, C(0)Ra9, C(0)N(Ra9Ra9a), S(0)2N(Ra9Ra9a), S(0)N(Ra9Ra9a), S(0)2Ra9, S(0)Ra9, N(Ra9)S(0)2N(Ra9aRa9b), SRa9, N(Ra9Ra9a), OC(0)Ra9, N(Ra9)C(0)Ra9a, N(Ra9)S(0)2Ra9a, N(Ra9)S(0)Ra9a, N(Ra9)C(0)ORa9a, N(Ra9)C(0)N(Ra9aRa9b), OC(0)N(Ra9Ra9a), W, C1-50 알킬, C2-50 알케닐 및 C2 -50 알키닐로부터 선택되고, 여기서 W, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2-50 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 Ra10으로 치환되고, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 -W-, -C(0)0-, -0-, -C(O)-, -C(0)N(Ra11)-, -S(0)2N(Ra11)-, -S(0)N(Ra11)-, -S(0)2-, -S(O)-, -N(Ra11)S(0)2N(Ra11a)-, -S-, -N(Ra11)-, -OC(0)Ra11, -N(Ra11)C(0)-, -N(Ra11)S(0)2-, -N(Ra11)S(0)-, -N(Ra11)C(0)0-, -N(Ra11)C(0)N(Ra11a)- 및 -OC(0)N(Ra11Ra11a)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고;
    Ra9, Ra9a 및 Ra9b는 H, W, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 W, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 Ra10으로 치환되고, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 W, -C(0)0-, -0-, -C(O)-, -C(0)N(Ra11)-, -S(0)2N(Ra11)-, -S(0)N(Ra11)-, -S(0)2-, -S(O)-, -N(Ra11)S(0)2N(Ra11a)-, -S-, -N(Ra11)-, -OC(0)Ra11, -N(Ra11)C(0)-, -N(Ra11)S(0)2-, -N(Ra11)S(0)-, -N(Ra11)C(0)0-, -N(Ra11)C(0)N(Ra11a)- 및 -OC(0)N(Ra11Ra11a)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고;
    W는 페닐, 나프틸, 인데닐, 인다닐, 테트랄리닐, C3 -10 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴, 및 9원 내지 11원 헤테로비사이클릴로 구성된 군으로부터 선택되고, 여기서 W는 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 Ra10으로 치환되고;
    Ra10은 할로겐, CN, 옥소(=O), COORa12, ORa12, C(0)Ra12, C(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2N(Ra12Ra12a), S(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2Ra12, S(0)Ra12, N(Ra12)S(0)2N(Ra12aRa12b), SRa12, N(Ra12Ra12a), N02, OC(0)Ra12, N(Ra12)C(0)Ra12a, N(Ra12)S(0)2Ra12a, N(Ra12)S(0)Ra12a, N(Ra12)C(0)ORa12a, N(Ra12)C(0)N(Ra12aRa12b), OC(0)N(Ra12Ra12a) 또는 C1 -6 알킬이고, 여기서 C1 -6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
    Ra11, Ra11a, Ra12, Ra12a 및 Ra12b는 H 및 C1 -6 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 C1 -6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물.
  9. 제8항에 있어서, -Q-는 각각 독립적으로 -Q1a-Q1-*이고, 여기서 별표(*)는 Z1과의 연결을 표시하고,
    Q1a는 결합, -C(0)0-, -0-, -C(O)-, -C(0)N(Ra9a)-, -S(0)2N(Ra9a)-, -S(0)N(Ra9a)-, -S(0)2-, -S(O)-, -N(Ra9a)S(0)2N(Ra9b)-, -S-, -N(Ra9a)-, -OC(O)-, -N(Ra9a)C(0)-, -N(Ra9a)S(0)2-, -N(Ra9a)S(0)-, -N(Ra9a)C(0)0-, -N(Ra9a)C(0)N(Ra9b)-, -OC(0)N(Ra9a)- 또는 -W-, 바람직하게는 -C(0)N(Ra9a)- 또는 -N(Ra9a)C(0)-이고;
    Q1은 임의적으로 하나 이상의 Ra10으로 치환되는 C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2-50 알키닐로부터 선택되고, Q1이 C2 이상인 경우 임의적으로 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고:
    Figure pct00187
    ,
    상기 기 각각은 개별적으로 1회 이상 존재할 수 있고, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 Z1에 연결된 말단에서 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로부터 선택된 기에 의해 종결될 수 있고:
    Figure pct00188
    ;
    Ra10은 할로겐, CN, 옥소(=O), COORa12, ORa12, C(0)Ra12, C(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2N(Ra12Ra12a), S(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2Ra12, S(0)Ra12, N(Ra12)S(0)2N(Ra12aRa12b), SRa12, N(Ra12Ra12a), N02, OC(0)Ra12, N(Ra12)C(0)Ra12a, N(Ra12)S(0)2Ra12a, N(Ra12)S(0)Ra12a, N(Ra12)C(0)ORa12a, N(Ra12)C(0)N(Ra12aRa12b), OC(0)N(Ra12Ra12a) 또는 C1 -6 알킬이고, 여기서 C1 -6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
    Ra12, Ra12a 및 Ra12b는 H 및 C1 -6 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 C1 -6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
    R13 및 R13a는 H, C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로부터 독립적으로 선택되고; 바람직하게는, R13 및 R13a는 C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로부터 독립적으로 선택되는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 하기 화학식 (IIaa)로 표시되는 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물:
    Figure pct00189

    상기 식에서,
    T는 하기 화학식 (i) 및 (iii)으로부터 각각 독립적으로 선택되고:
    Figure pct00190

    Figure pct00191

    여기서, 파선은 분자의 나머지 부분에의 부착을 표시하고;
    y는 1 내지 64 범위의 정수이고;
    Ra2는 H, 비치환된 알킬, 및 치환된 알킬로부터 선택되고;
    Ra4는 H, 비치환된 알킬, 및 치환된 알킬로부터 선택되고;
    고리 A1은 C3 -10 사이클로알킬, 4원 내지 7원 지방족 헤테로사이클릴, 또는 9원 내지 11원 지방족 헤테로비사이클릴이고, 여기서 A1은 비치환되거나 치환되고;
    Q1은 임의적으로 하나 이상의 Ra10으로 치환되는 C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2-50 알키닐로부터 선택되고, Q1이 C2 이상인 경우 임의적으로 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기가 개재되고:
    Figure pct00192
    ,
    상기 기 각각은 개별적으로 1회 이상 존재할 수 있고, C1 -50 알킬, C2 -50 알케닐 및 C2 -50 알키닐은 임의적으로 Z1에 연결된 말단에서 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로부터 선택된 기에 의해 종결될 수 있고:
    Figure pct00193
    ;
    Ra10은 할로겐, CN, 옥소(=O), COORa12, ORa12, C(0)Ra12, C(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2N(Ra12Ra12a), S(0)N(Ra12Ra12a), S(0)2Ra12, S(0)Ra12, N(Ra12)S(0)2N(Ra12aRa12b), SRa12, N(Ra12Ra12a), N02, OC(0)Ra12, N(Ra12)C(0)Ra12a, N(Ra12)S(0)2Ra12a, N(Ra12)S(0)Ra12a, N(Ra12)C(0)ORa12a, N(Ra12)C(0)N(Ra12aRa12b), OC(0)N(Ra12Ra12a) 또는 C1 -6 알킬이고, 여기서 C1 -6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
    Ra12, Ra12a 및 Ra12b는 H 및 C1 -6 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 C1 -6 알킬은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
    R13 및 R13a는 H, C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로부터 독립적으로 선택되고; 바람직하게는, R13 및 R13a는 C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로부터 독립적으로 선택되고;
    Z1은 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함하는 담체이다.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 하기 화학식 (IIab)로 표시되는 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물:
    Figure pct00194

    상기 식에서,
    T, Ra2, Ra4, A1, Q1, Z1 및 y는 제10항에서 정의된 바와 같이 사용된다.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 하기 화학식 (IIac) 또는 (IIad)로 표시되는 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물:
    Figure pct00195

    Figure pct00196

    상기 식에서,
    T는 하기 화학식 (i) 및 (iii)으로부터 각각 독립적으로 선택되고:
    Figure pct00197

    Figure pct00198
    ;
    Z1은 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함하는 담체이고;
    y는 1 내지 64 범위의 정수이고;
    x는 2, 3, 4, 5, 6, 7 및 8로부터 선택되고;
    X1은 임의적으로 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되거나 이러한 기가 개재된 C1 -15 알킬, C2 -15 알케닐 및 C2 -15 알키닐로부터 선택되고:
    Figure pct00199

    여기서, R13 및 R13a는 H, C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로부터 독립적으로 선택된다.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 하기 화학식 (IIb)로 표시되는 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물:
    Figure pct00200

    상기 식에서,
    X1은 임의적으로 C3 -7 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클릴 및 하기 기들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되거나 이러한 기가 개재된 C1 -15 알킬, C2 -15 알케닐 및 C2 -15 알키닐로부터 선택되고:
    Figure pct00201

    여기서, R13 및 R13a는 H, C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로부터 독립적으로 선택되고;
    y는 1 내지 64 범위의 정수이고;
    x는 2, 3, 4, 5, 6, 7 및 8로부터 선택되고;
    Z1은 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함하는 담체이다.
  14. 제12항 또는 제13항에 있어서, x가 6인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 하기 화학식 (IIba)의 구조를 갖는 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물:
    Figure pct00202

    상기 식에서,
    y는 1 내지 64 범위의 정수이고;
    Z1은 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함하는 담체이다.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 담체 Z1은 하기 화학식 (VII)의 구조를 갖는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물:
    Figure pct00203
    (VII)
    상기 식에서,
    B는 분지 코어이고;
    A는 폴리(에틸렌 글리콜)계 중합체 쇄이고;
    n은 3 내지 32의 정수이다.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, Z1은 하기 화학식 (IIca)의 모이어티를 나타내는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물:
    Figure pct00204

    상기 식에서,
    t는 80 내지 160 범위이고;
    w는 2 내지 6 범위이고;
    파선은 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물의 나머지 부분에의 부착을 표시한다.
  18. 제17항에 있어서, w가 2 또는 3인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 하기 화학식 (IIc)의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00205

    상기 식에서,
    y는 4이고, Z1은 하기 화학식 (IIca)의 모이어티를 나타내고:
    Figure pct00206

    여기서, 파선은 화학식 (IIc)의 구조의 나머지 부분에의 부착을 표시하고, t는 80 내지 160 범위이고, w는 2 또는 3이다.
  20. 제1항에 있어서, Ra1은 C1 -6 알킬 또는 치환된 C1 -6 알킬인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물.
  21. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, Ra3은 H, C1 -6 알킬 또는 치환된 C1-6 알킬인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물.
  22. 하기 화학식 (I)의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00207

    상기 식에서,
    T는 하기 화학식 (i) 내지 (v)로부터 각각 독립적으로 선택되고:
    Figure pct00208

    Figure pct00209

    Figure pct00210

    Figure pct00211

    Figure pct00212

    여기서, 파선은 X0에의 부착을 표시하고;
    y는 1 내지 64, 바람직하게는 1 내지 16 범위의 정수이고, 보다 바람직하게는 y는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 및 16으로부터 선택되고, 훨씬 더 바람직하게는 y는 8이고;
    X0은 각각 독립적으로 (X0A)m1-(X0B)m2이고;
    m1 및 m2는 독립적으로 0 또는 1이고;
    XOA는 T0이고;
    XOB는 동일하거나 상이한 하나 이상의 R3으로 치환되거나 비치환된 분지된 또는 비분지된 C1 -15 알킬렌 기이고;
    R3은 할로겐, C1-6 알킬, CN, C(0)R4, C(0)OR4, OR4, C(0)R4, C(0)N(R4R4a), S(0)2N(R4R4a), S(0)N(R4R4a), S(0)2R4, S(0)R4, N(R4)S(0)2N(R4aR4b), SR4, N(R4R4a), N02, OC(0)R4, N(R4)C(0)R4a, N(R4)S02R4a, N(R4)S(0)R4a, N(R4)C(0)N(R4aR4b), N(R4)C(0)OR4a, OC(0)N(R4R4a) 또는 T0이고;
    R4, R4a 및 R4b는 H, T0, C1-6 알킬, C2-6 알케닐 및 C2-6 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 R5로 치환되고;
    R5는 할로겐, CN, C(0)R6, C(0)OR6, OR6, C(0)R6, C(0)N(R6R6a), S(0)2N(R6R6a), S(0)N(R6R6a), S(0)2R6, S(0)R6, N(R6)S(0)2N(R6aR6b), SR6, N(R6R6a), N02, OC(0)R6, N(R6)C(0)R6a, N(R6)S02R6a, N(R6)S(0)R6a, N(R6)C(0)N(R6aR6b), N(R6)C(0)OR6a 또는 OC(0)N(R6R6a)이고;
    R6, R6a 및 R6b는 H, C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
    T0은 페닐, 나프틸, 아줄레닐, 인데닐, 인다닐, C3-7 사이클로알킬, 3원 내지 7원 헤테로사이클릴, 또는 8원 내지 11원 헤테로비사이클릴이고, 여기서 T0은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 R7로 치환되고;
    R7은 할로겐, CN, COOR8, OR8, C(0)R8, C(0)N(R8R8a), S(0)2N(R8R8a), S(0)N(R8R8a), S(0)2R8, S(0)R8, N(R8)S(0)2N(R8aR8b), SR8, N(R8R8a), N02, OC(0)R8, N(R8)C(0)R8a, N(R8)S(0)2R8a, N(R8)S(0)R8a, N(R8)C(0)OR8a, N(R8)C(0)N(R8aR8b), OC(0)N(R8R8a) 또는 옥소(=O)이고, 여기서 고리는 적어도 부분적으로 포화되거나, C1-6 알킬, C2 -6 알케닐 또는 C2 -6 알키닐이고, C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 R9로 치환되고;
    R8, R8a 및 R8b는 H, C1-6 알킬, C2-6 알케닐 및 C2-6 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 R10으로 치환되고;
    R9 및 R10은 할로겐, CN, C(0)R11, C(0)OR11, OR11, C(0)R11, C(0)N(R11R11a), S(0)2N(R11R11a), S(0)N(R11R11a), S(0)2R11, S(0)R11, N(R11)S(0)2N(R11aR11b), SR11, N(R11R11a), N02, OC(0)R11, N(R11)C(0)R11a, N(R11)S02R11a, N(R11)S(0)R11a, N(R11)C(0)N(R11aR11b), N(R11)C(0)OR11a 및 OC(0)N(R11R11a)로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    R11, R11a 및 R11b는 H, C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 C1 -6 알킬, C2 -6 알케닐 및 C2 -6 알키닐은 임의적으로 동일하거나 상이한 하나 이상의 할로겐으로 치환되고;
    Z1은 공유결합된 중합체, 바람직하게는 약학적으로 허용가능한 중합체를 포함하는 담체이고, 여기서 m1 및 m2 중 하나가 1인 경우 상기 담체는 모이어티 X0에 공유부착되고, m1 및 m2가 0인 경우 상기 담체는 T에 공유부착된다.
  23. 제22항에 있어서, Z1이 PEG계 중합체를 포함하는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  24. 제22항 또는 제23항에 있어서, Z1이 수용성 중합체를 포함하는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  25. 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, y가 4 내지 16의 정수이고, 바람직하게는 y가 8인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  26. 제1항 내지 제15항 및 제20항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, Z1이 하기 화학식 (III)의 구조를 갖는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00213

    상기 식에서,
    m1 및 m2 중 하나가 1인 경우 파선은 X0에의 부착을 표시하고, m1 및 m2가 0인 경우 담체는 T에 공유부착되고;
    m, n 및 p는 각각 독립적으로 5 내지 500 범위의 정수이고;
    q는 2 내지 32 범위이다.
  27. 제1항 내지 제15항 및 제20항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, Z1이 하기 화학식 (VI)으로 표시되는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00214

    상기 식에서,
    B는 분지 코어이고;
    A는 각각 독립적으로 폴리(에틸렌 글리콜)계 중합체 쇄이고;
    Hypy는 각각 독립적으로 분지된 모이어티이고;
    n은 3 내지 32의 정수이다.
  28. 제27항에 있어서, Z1이 하기 화학식 (i-y) 내지 (iii-y)로부터 선택되는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00215

    Figure pct00216

    Figure pct00217

    상기 식에서,
    m1 및 m2 중 하나가 1인 경우 파선은 화학식 (I)의 X0에의 부착을 표시하고, m1 및 m2가 0인 경우 담체는 T에 공유부착되고;
    p는 5 내지 2000, 바람직하게는 10 내지 1000, 보다 바람직하게는 10 내지 500, 가장 바람직하게는 100 내지 1000의 정수이고;
    q는 1 또는 2이다.
  29. 제1항 내지 제15항 및 제20항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, Z1이 하기 화학식 (V)의 구조를 갖는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Hyp1 mx-POLx-Hyp2 (V)
    상기 식에서,
    POLx는 0.5 kDa 내지 160 kDa 범위의 분자량을 갖는 중합체성 모이어티이고;
    Hyp1 및 Hyp2는 독립적으로 과분지된 모이어티이고;
    mx는 0 또는 1이다.
  30. 제29항에 있어서, mx가 0이고, POLx-Hyp2가 하기 화학식들로부터 선택되는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00218

    Figure pct00219

    Figure pct00220

    Figure pct00221

    상기 식에서,
    m1 및 m2 중 하나가 1인 경우 파선은 모이어티 X0에의 부착을 표시하고, m1 및 m2가 0인 경우 담체는 T에 공유부착되고;
    px는 5 내지 2000, 바람직하게는 10 내지 1000, 특히 100 내지 1000의 정수이고;
    qx는 0 내지 15, 바람직하게는 3 내지 7의 정수이고, 보다 바람직하게는 qx는 6이다.
  31. 제1항 내지 제15항 및 제20항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, Z1이 100개 이상의 아미노산 잔기의 아미노산 서열을 포함하고,
    100개 이상의 아미노산 잔기의 아미노산 서열은 랜덤 코일 입체구조(random coil conformation)로 존재하고,
    100개 이상의 아미노산 잔기의 아미노산 서열은 알라닌, 세린 및 프롤린 잔기를 포함하는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  32. 제22항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 X0이 비치환되는 것인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  33. 임의적으로 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제와 함께 제1항 내지 제32항 중 어느 한 항의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약학 조성물.
  34. 제33항에 있어서,
    (i) 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물이 한 적용에서 치료 유효량의 트레프로스티닐을 12시간 이상 동안 제공하도록 약학 조성물로 충분히 투약되고/되거나,
    (ii) 약학 조성물의 단회 투여량이 약 2 mg 내지 약 6 mg, 바람직하게는 약 4 mg의 트레프로스티닐을 포함하는 것인 약학 조성물.
  35. 약제로서 사용되는, 제1항 내지 제32항 중 어느 한 항의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 제33항 또는 제34항의 약학 조성물.
  36. 트레프로스티닐에 의해 치료될 수 있고/있거나 예방될 수 있는 질환 또는 장애를 치료하거나 예방하는 방법에서 사용되는, 제1항 내지 제32항 중 어느 한 항의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 제33항 또는 제34항의 약학 조성물.
  37. 제36항에 있어서, 질환 또는 장애가 폐 동맥 고혈압인 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 약학 조성물.
  38. 하나 이상의 병태의 치료를 필요로 하는 포유동물 환자에서 치료하거나, 조절하거나, 지연시키거나 예방하는 방법으로서, 진단 및/또는 치료 유효량의 제1항 내지 제32항 중 어느 한 항의 담체-연결된 트레프로스티닐 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 제33항 또는 제34항의 약학 조성물을 상기 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  39. 국소, 장 투여, 비경구 투여, 흡입, 주사, 또는 관주, 관절내, 피내, 피하, 근육내, 정맥내, 골내, 및 복강내, 경막내, 피막내, 안와내, 심장내, 경기관, 표피하, 관절내, 피막하, 지주막하, 척수내, 심실내 또는 흉골내 투여용 약제로서 사용되는, 제1항 내지 제32항 중 어느 한 항의 수용성 담체-연결된 전구약물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 제33항 또는 제34항의 약학 조성물.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11866402B2 (en) 2015-06-17 2024-01-09 Corsair Pharma, Inc. Treprostinil derivatives and compositions and uses thereof

Families Citing this family (58)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103857413A (zh) * 2011-08-12 2014-06-11 阿森迪斯药物股份有限公司 载体连接的曲罗尼尔前药
CA2868925C (en) * 2012-04-25 2020-01-21 Ascendis Pharma A/S Prodrugs of hydroxyl-comprising drugs
CN104884093A (zh) 2012-12-07 2015-09-02 阿森迪斯药物股份有限公司 载体连接型前列腺素类前药
US9505737B2 (en) 2013-01-11 2016-11-29 Corsair Pharma, Inc. Treprostinil derivative compounds and methods of using same
EP3712142B1 (en) 2013-01-11 2022-07-06 Corsair Pharma, Inc. Prodrugs of treprostinil
EP2978313B1 (en) * 2013-03-25 2018-02-21 United Therapeutics Corporation Process of making prostacyclin compounds with linker thiol and pegylated forms
WO2014179295A1 (en) * 2013-04-30 2014-11-06 United Therapeutics Corporation Controlled release pharmaceutical formulations
WO2015061720A2 (en) 2013-10-25 2015-04-30 Insmed Incorporated Prostacyclin compounds, compositions and methods of use thereof
TWI685348B (zh) * 2014-05-08 2020-02-21 美國禮來大藥廠 速效胰島素組合物
CN106573066A (zh) * 2014-06-13 2017-04-19 联合治疗学有限公司 曲前列环素制剂
EP3169660A1 (en) * 2014-07-16 2017-05-24 Corsair Pharma, Inc. Treprostinil derivative compounds and methods of using same
JP6866043B2 (ja) 2014-11-18 2021-04-28 インスメッド インコーポレイテッド トレプロスチニルプロドラッグおよびトレプロスチニル誘導体プロドラッグの製造方法
TWI540121B (zh) 2014-12-01 2016-07-01 臺灣永光化學工業股份有限公司 曲前列環素二乙醇胺之合成方法及新穎中間體
CA2967899C (en) * 2014-12-03 2023-09-19 Steadymed Ltd Preservative-free treprostinil formulations and methods and devices for use with same
US9394227B1 (en) 2015-06-17 2016-07-19 Corsair Pharma, Inc. Treprostinil derivatives and compositions and uses thereof
AU2017205273C1 (en) 2016-01-08 2022-12-01 Ascendis Pharma Growth Disorders A/S Controlled-release CNP agonists with reduced side-effects
PL3400019T3 (pl) 2016-01-08 2023-01-23 Ascendis Pharma Growth Disorders A/S Proleki cnp z przyłączeniem nośnika w ugrupowaniu pierścieniowy
EP3400020A1 (en) 2016-01-08 2018-11-14 Ascendis Pharma Growth Disorders A/S Cnp prodrugs with large carrier moieties
SG11201805026SA (en) 2016-01-08 2018-07-30 Ascendis Pharma Growth Disorders As Controlled-release cnp agonists with low npr-c binding
NZ743488A (en) 2016-01-08 2023-02-24 Ascendis Pharma Growth Disorders As Controlled-release cnp agonists with low initial npr-b activity
WO2017118700A1 (en) 2016-01-08 2017-07-13 Ascendis Pharma Growth Disorders A/S Controlled-release cnp agonists with increased nep stability
EP3423103A1 (en) 2016-03-01 2019-01-09 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Pth prodrugs
WO2018011266A1 (en) 2016-07-13 2018-01-18 Ascendis Pharma A/S Conjugation method for carrier-linked prodrugs
DK3512495T3 (da) * 2016-09-15 2022-12-05 Camurus Ab Formuleringer af prostacyklinanaloger
CN109789189B (zh) 2016-09-29 2024-01-23 阿森迪斯药物骨疾病股份有限公司 控释pth化合物的剂量方案
CN109843295B (zh) 2016-09-29 2022-04-05 阿森迪斯药物生长障碍股份有限公司 控释cnp激动剂的组合疗法
CN117257922A (zh) 2016-09-29 2023-12-22 阿森迪斯药物骨疾病股份有限公司 具有低峰-谷比的pth化合物
JP7039574B2 (ja) 2016-09-29 2022-03-22 アセンディス ファーマ ボーン ディジージズ エー／エス 放出制御ｐｔｈ化合物の漸増用量設定
EP3498283A1 (en) 2017-12-14 2019-06-19 Ipsol AG Glycosidic derivatives of treprostinil
KR20210013584A (ko) 2018-05-18 2021-02-04 아센디스 파마 본 디지즈 에이/에스 Pth 접합체의 개시 용량
AU2019350376A1 (en) 2018-09-26 2021-03-18 Ascendis Pharma A/S Treatment of infections
SG11202101982RA (en) 2018-09-26 2021-03-30 Ascendis Pharma As Degradable hyaluronic acid hydrogels
CA3114329A1 (en) 2018-09-26 2020-04-02 Ascendis Pharma A/S Novel hydrogel conjugates
US20220054478A1 (en) 2019-01-04 2022-02-24 Ascendis Pharma Oncology Division A/S Minimization of systemic inflammation
US20220054477A1 (en) 2019-01-04 2022-02-24 Ascendis Pharma Oncology Division A/S Induction of sustained local inflammation
JP2022516314A (ja) 2019-01-04 2022-02-25 アセンディス ファーマ オンコロジー ディヴィジョン エー／エス 自然免疫アゴニストのための持続性局所性薬物レベル
JP2022516308A (ja) 2019-01-04 2022-02-25 アセンディス ファーマ オンコロジー ディヴィジョン エー／エス パターン認識受容体アゴニストのコンジュゲート
US20220088149A1 (en) 2019-02-11 2022-03-24 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Liquid Pharmaceutical Formulations of PTH Conjugates
EP3923906A1 (en) 2019-02-11 2021-12-22 Ascendis Pharma Growth Disorders A/S Dry pharmaceutical formulations of cnp conjugates
WO2020223237A1 (en) 2019-04-29 2020-11-05 Insmed Incorporated Dry powder compositions of treprostinil prodrugs and methods of use thereof
WO2020254611A1 (en) 2019-06-21 2020-12-24 Ascendis Pharma Oncology Division A/S Anti-ctla4 conjugates
WO2020254607A1 (en) 2019-06-21 2020-12-24 Ascendis Pharma Oncology Division A/S Anti-ctla4 compounds with localized pd properties
WO2020254617A1 (en) 2019-06-21 2020-12-24 Ascendis Pharma Oncology Division A/S Anti-ctla4 compounds with localized pk properties
WO2020254612A1 (en) 2019-06-21 2020-12-24 Ascendis Pharma Oncology Division A/S Controlled-release tyrosine kinase inhibitor compounds with localized pd properties
US20230102309A1 (en) 2019-06-21 2023-03-30 Ascendis Pharma Oncology Division A/S Tyrosine kinase inhibitor conjugates
WO2020254613A1 (en) 2019-06-21 2020-12-24 Ascendis Pharma Oncology Division A/S Controlled-release tyrosine kinase inhibitor compounds with localized pk properties
JP2020011957A (ja) * 2019-07-22 2020-01-23 コルセア ファーマ インコーポレイテッド トレプロスチニル誘導体化合物およびその使用方法
WO2021144249A1 (en) 2020-01-13 2021-07-22 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Hypoparathyroidism treatment
EP4146281A1 (en) 2020-05-04 2023-03-15 Ascendis Pharma A/S Hydrogel irradiation
US11793780B2 (en) 2020-06-09 2023-10-24 United Therapeutics Corporation Prodrugs of treprosiinil
IL301411A (en) 2020-09-28 2023-05-01 Ascendis Pharma Bone Diseases As Improving the physical and mental condition of patients with hypoparathyroidism
JP7138685B2 (ja) * 2020-10-26 2022-09-16 コルセア ファーマ インコーポレイテッド トレプロスチニル誘導体化合物およびその使用方法
WO2022194195A1 (zh) * 2021-03-16 2022-09-22 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种曲前列环素衍生物及其用途
AU2022350937A1 (en) 2021-09-22 2024-03-21 Ascendis Pharma Bone Diseases A/S Long-acting pth compound treatments
WO2023110727A2 (en) 2021-12-13 2023-06-22 Ascendis Pharma Oncology Division A/S Novel cancer treatments with tlr7/8 agonists
WO2023110758A1 (en) 2021-12-13 2023-06-22 Ascendis Pharma Growth Disorders A/S Effective doses of cnp conjugates
CN116444377A (zh) * 2022-01-07 2023-07-18 广州楷石医药有限公司 一种氧化氮供体型曲前列尼尔类衍生物及其药物组合物和用途
WO2023227505A1 (en) 2022-05-23 2023-11-30 Ascendis Pharma Growth Disorders A/S Liquid pharmaceutical formulations of cnp compounds

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020012169A (ko) * 1999-03-31 2002-02-15 유나이티드 쎄러퓨틱스 코포레이션 프로스타글란딘 화합물, 조성물 및 말초혈관질병 및폐고혈압증의 치료방법
JP2010518122A (ja) * 2007-02-09 2010-05-27 ユナイテッド セラピューティクス コーポレーション 間質性肺疾患および喘息のためのトレプロスチニル処置
WO2011012715A1 (en) * 2009-07-31 2011-02-03 Ascendis Pharma As Biodegradable polyethylene glycol based water-insoluble hydrogels
KR20110052648A (ko) * 2008-08-11 2011-05-18 넥타르 테라퓨틱스 다분지형 중합체 알카노에이트 컨쥬게이트

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4306075A (en) 1980-03-28 1981-12-15 The Upjohn Company Composition and process
CA1241324A (en) 1984-03-08 1988-08-30 Paul A. Aristoff Interphenylene carbacyclin derivatives
CA2843439A1 (en) * 2003-04-08 2004-10-21 Yeda Research And Development Co. Ltd Reversible pegylated drugs
CN1917883B (zh) * 2003-12-16 2011-05-11 联合治疗公司 曲前列环素在制备改善肾功能的药物中的用途
US7968085B2 (en) 2004-07-05 2011-06-28 Ascendis Pharma A/S Hydrogel formulations
EP1625856A1 (en) 2004-08-13 2006-02-15 Complex Biosystems GmbH Hydrogel polymeric conjugates of a prodrug
CN101970678B (zh) * 2007-06-21 2014-08-20 慕尼黑科技大学 具有增加的体内和/或体外稳定性的生物学活性蛋白
US9272048B2 (en) 2008-04-29 2016-03-01 Ascendis Pharma Growth Disorders Division A/S PEGylated recombinant human growth hormone compounds
WO2010014258A2 (en) 2008-08-01 2010-02-04 Nektar Therapeutics Al, Corporation Conjugates having a releasable linkage
WO2010033240A2 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Carbohydrate-based drug delivery polymers and conjugates thereof
US9289388B2 (en) 2008-12-10 2016-03-22 Paka Pulmonary Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for delivery of medicaments to the lungs
PT2440228T (pt) 2009-06-08 2018-12-24 Amunix Operating Inc Polipéptidos de regulação da glicose e métodos de preparação e utilização dos mesmos
EP2485767A1 (en) 2009-10-06 2012-08-15 Ascendis Pharma A/S Carrier linked paliperidone prodrugs
CN103857413A (zh) * 2011-08-12 2014-06-11 阿森迪斯药物股份有限公司 载体连接的曲罗尼尔前药

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020012169A (ko) * 1999-03-31 2002-02-15 유나이티드 쎄러퓨틱스 코포레이션 프로스타글란딘 화합물, 조성물 및 말초혈관질병 및폐고혈압증의 치료방법
JP2010518122A (ja) * 2007-02-09 2010-05-27 ユナイテッド セラピューティクス コーポレーション 間質性肺疾患および喘息のためのトレプロスチニル処置
KR20110052648A (ko) * 2008-08-11 2011-05-18 넥타르 테라퓨틱스 다분지형 중합체 알카노에이트 컨쥬게이트
WO2011012715A1 (en) * 2009-07-31 2011-02-03 Ascendis Pharma As Biodegradable polyethylene glycol based water-insoluble hydrogels
KR20120090039A (ko) * 2009-07-31 2012-08-16 아센디스 파마 에이에스 폴리에틸렌 글리콜 기반의 생분해성 수불용성 하이드로겔

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11866402B2 (en) 2015-06-17 2024-01-09 Corsair Pharma, Inc. Treprostinil derivatives and compositions and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
EP2741781A1 (en) 2014-06-18
IN2014CN00989A (ko) 2015-04-10
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US10729778B2 (en) 2020-08-04
IL230712A (en) 2017-08-31
AU2012296954A1 (en) 2014-02-20
JP6092867B2 (ja) 2017-03-08
HK1198359A1 (en) 2015-04-10
US9561287B2 (en) 2017-02-07
MX2014001497A (es) 2014-04-25
JP2014527050A (ja) 2014-10-09
US20190105400A1 (en) 2019-04-11

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