KR20130139284A

KR20130139284A - 추간판 헤르니아 치료제

Info

Publication number: KR20130139284A
Application number: KR1020137012195A
Authority: KR
Inventors: 타이이치 시로가네; 타카오 무라야마; 마사푸미 야구치
Original assignee: 세이가가쿠 고교 가부시키가이샤
Priority date: 2010-12-13
Filing date: 2011-12-13
Publication date: 2013-12-20
Also published as: US9463225B2; JP5465791B2; US20170000863A1; RU2015135843A3; PT2653168E; WO2012081227A1; RU2015135843A; US20190224289A1; CN106975077A; KR101692517B1; DK2653168T3; US20150071896A1; RU2564001C2; CN110101852A; JPWO2012081227A1; CN103260636A; RU2019116210A; EP2653168A4; US11266725B2; CN111265472A

Abstract

본 발명은 부작용이 매우 낮고, 1회의 투여만으로 장기간 지속된 동통개선 효과가 수득되고, 임상에 있어서 높은 치료효과와 안전성을 발휘하는 추간판 헤르니아 치료제를 제공한다. 본 발명은 콘드로이티나아제 ABC를 유효성분으로 하고, 당해 성분이 인간의 추간판 내에 1추간판당 1∼8유닛 투여되도록 사용되는 것을 특징으로 하는 추간판 헤르니아 치료제에 관한 것이다.

Description

추간판 헤르니아 치료제{THERAPEUTIC AGENT FOR DISC HERNIATION}

본 발명은 콘드로이티나아제 ABC를 유효성분으로 하는 추간판 헤르니아 치료제에 관한 것이다.

추간판 헤르니아는 추간판 내에 존재하는 「수핵」이 그 주위에 존재하는 섬유륜을 파열하고, 추간판의 조직이 척주관 내로 돌출해서 척수 등의 신경을 압박하고, 이것에 의해 하지통ㆍ요통 등의 증상이 발생하는 질병이다. 그 치료의 원칙은 보존요법으로, 약 90%의 증례가 보존요법으로 치유된다고 보고되어 있다. 보존요법으로서는 안정, 와상, 약물치료(비스테로이드성 항염증약(NSAIDs), 부신피질 스테로이드약, 근이완약), 체간장구(코르셋), 견인요법, 온열요법, 경막외 블록, 신경근 블록, 운동요법 등 다양한 치료법이 실시되고 있다. 이들 보존요법으로 개선을 볼 수 없는 경우에는 수술 요법이 선택되며, 전요추 추간판 헤르니아 환자의 10∼30%가 수술적용이 되고 있다. 최근, 수술 요법에 의한 침습ㆍ부담을 저감시키기 위해서, 화학적 수핵 융해술이 고안되고 있다.

화학적 수핵 융해술은 추간판 내에 효소를 주입하고, 수핵을 융해해서 추간판의 내압을 감소시켜서, 척수 신경근으로의 압박을 감소시키는 방법이다.

지금까지, 추간판 내에 주입하는 효소로서 키모파파인을 사용하는 방법이 보고되어 있고, 1964년에 그 유효성이 보고되고 있다(비특허문헌 1). 그러나, 키모파파인은 수핵뿐만 아니라 척수 등을 포함하는 추간판의 주변조직에도 작용하고, 치명적인 신경학적 합병증(대마비, 횡단성 척수염, 뇌출혈, 지주막하 출혈, 사지마비 등)이 발견되었기 때문에, 현재는 의약으로서의 판매가 중지되어 있다(비특허문헌 2).

따라서 현재, 화학적 수핵 융해술을 위한 의약은 시판되고 있지 않고, 화학적 수핵 융해술을 안전하게 실시할 수 있는 의약의 개발이 소망되고 있다.

콘드로이티나아제 ABC는 수핵에 존재하는 프로테오글리칸의 글리코사미노글리칸쇄(콘드로이친황산쇄나 히알루론산쇄 등)을 분해하고, 프로테오글리칸의 높은 보수성을 감쇠시켜서 추간판의 내압을 감소시키고, 그 결과, 척수 신경근으로의 압박을 경감시키는 것으로 여겨지고 있다. 또, 키모파파인과는 달리, 추간판 주위의 신경조직 등으로의 상해도 거의 없고, 안전한 의약이 되는 것이 기대되고, 추간판 내에 주입하는 효소로서, 콘드로이티나아제 ABC를 사용하는 시도가 1985년에 보고되고 있다(특허문헌 1, 비특허문헌 3, 비특허문헌 4).

그러나, 추간판은 원래, 척추에 걸리는 체중을 지탱하는 쿠션으로서의 역할도 가지고 있기 때문에, 과잉으로 수핵을 제거해버리면, 그 추간판이 원래 가질 것이었던 쿠션으로서의 기능이 손상된다. 실제로, 수술요법에 의해 추간판 높이가 30% 이상 감소한 환자에서는 요통이 잔존할 가능성이 나타나 있다(비특허문헌 5). 따라서 콘드로이티나아제 ABC의 투여에 의한 화학적 수핵 융해술에서도 과잉으로 수핵이 융해되게 되면, 추간판이 원래 가질 것이었던 쿠션으로서의 기능이 손상되어 부작용을 초래할 가능성이 있다.

거기에다, 콘드로이티나아제 ABC는 인간에 존재하지 않는 이종단백이기 때문에, 아나피락스 쇼크의 저지 등의 관점으로부터도, 복수 회의 투여가 아니라, 1회의 투여만으로 치료를 성공시키지 않으면 안된다. 1회의 투여만으로 치료를 완료시킨다는 것은 완치될 때 까지 복수 회 투여를 실시할 수 없기 때문, 1회의 투여로 유의한 치료효과를 나타내며, 또한 부작용이 적은 최적용량을 도출해 낼 필요가 있었다.

또, 동물모델에 있어서 추간판 변성에 관한 연구가 많이 이루어지고 있지만, 동물종간에서 추간판이 서로 다르기 때문에, 동물모델에서의 결과를 인간의 추간판 변성의 연구에 응용하기 위해서는, 더한층 주의와 연구노력이 필요했다(비특허문헌 6).

이상과 같은 1회 투여의 특수성 및 동물모델로부터 인간으로의 적용의 곤란함이, 콘드로이티나아제 ABC에 의한 화학적 수핵 융해술을 곤란한 것으로 하고, 실제로, 상기 1985년부터 25년 경과한 현재에 있어서도, 실용화에 이르지 않고 있다.

특허문헌 1에는 콘드로이티나아제 ABC를 추간판 내에 투여해서 수핵을 융해하고, 추간판 헤르니아를 치료하는 취지, 및, 콘드로이티나아제 ABC를 인간의 추간판 내에 1추간판당 100유닛 투여하고, 추간판 헤르니아의 치료효과가 수득된 취지가 기재되어 있지만, 그 효과는 충분하지 않고, 부작용에 대한 검토가 이루어지고 있지 않기 때문에, 유용한 투여량을 결정할 수 있기 까지는 이르지 않고 있다. 또, 비특허문헌 3에는 콘드로이티나아제 ABC를 인간의 추간판 내에 1추간판당 0.5유닛 투여하고, 추간판 헤르니아의 치료효과가 수득된 취지가 기재되어 있다. 비특허문헌 4에는 콘드로이티나아제 ABC를 개의 추간판 내에 1추간판당 0.5∼1, 2.5∼5 및 5∼10유닛 투여한 취지가 기재되어 있지만, 인간의 수핵 체적은 개의 약 70배이기 때문에, 이 투여량을 인간으로 환산하면, 약 35유닛 이상이라는 것이 된다. 그러나, 콘드로이티나아제 ABC 투여후의 상세한 부작용의 검토에 대해서는 이루어지지 않고 있다.

따라서 최대의 치료효과를 나타내며, 또한 부작용이 최소가 되는 콘드로이티나아제 ABC의 최적용량에 관해서는 개시도 시사도 되어 있지 않다.

미국특허 제4696816호 명세서

Smith L. Enzyme dissolution of the nucleus pulposus in humans. JAMA 1964(2);187:137-40. US Federal Register. Monday Jan 27, 2003;68(17):3886-7. 임상정형외과, 제42권, 제3권, 223∼228페이지, 2007년3월 SPINE, 1991;16(7):816-19 SPINE, 1996;21(13):1556-64 Eur Spine J, 2008;17:2-19

이상과 같이, 콘드로이티나아제 ABC는 화학적 수핵 융해술을 위한 의약의 유효성분으로서의 유용성이 보고되어 왔지만, 지나친 수핵의 융해에 의한 치명적인 부작용도 걱정되고 있고, 1회만의 투여에 의해 확실한 치료효과를 발현할 수 있으며, 또한 부작용이 없는 투여량이 존재하는 지의 여부도 알려져 있지 않고, 실용화에는 이르지 않고 있었다.

본 발명은 부작용이 매우 낮고, 1회의 투여만으로 장기간 지속되는 동통개선 효과가 수득되고, 임상에 있어서 높은 치료효과와 안전성을 발휘하는 추간판 헤르니아 치료제를 제공하는 것을 과제로 한다.

본 발명자들은 콘드로이티나아제 ABC에 의한 치료에 대해서 더욱 예의 연구를 수행한 결과, 의외로 특정량의 콘드로이티나아제 ABC를 투여하는 것에 의해서, 부작용을 저감시킬 수 있으며, 또한, 장기간 지속된 동통 개선효과ㆍ임상에 있어서의 높은 치료효과가 발휘되는 것을 발견하고, 본 발명을 완성했다.

즉, 인간의 추간판 내에 1추간판당 콘드로이티나아제 ABC의 1∼8유닛의 투여량에 있어서는, 치료효과를 기대할 수 있을 뿐 아니라, 부작용의 발현을 저감시킬 수 있음을 발견하고, 콘드로이티나아제 ABC를 사용한 실용적이며, 또한 뛰어난 추간판 헤르니아 치료제를 제공할 수 있다는 것을 발견했다.

본 발명은 인간의 추간판 내에 1추간판당 1∼8유닛 투여되는 콘드로이티나아제 ABC를 유효성분으로 함유해서 이루어지는 추간판 헤르니아 치료제에 관한 것이다.

또, 본 발명은 콘드로이티나아제 ABC를 인간의 추간판 내에 1추간판당 1∼8유닛으로 투여하기 위한, 추간판 헤르니아 치료용의 투여제제에 관한 것이다.

또, 본 발명은 추간판 헤르니아의 환자에게, 유효투여량으로서 콘드로이티나아제 ABC를 1∼8유닛 함유해서 이루어지는 제제를 투여하는 것으로 이루어지는 추간판 헤르니아의 치료방법에 관한 것이다.

더 상세하게는, 본 발명은 이하와 같다.

(1) 콘드로이티나아제 ABC를 유효성분으로 하고, 당해 성분이 인간의 추간판 내에 1추간판당 1∼8유닛 투여되도록 사용되는 것을 특징으로 하는 추간판 헤르니아 치료제.

(2) 상기 (1)에서, 추간판 헤르니아가 요추 추간판 헤르니아인 치료제.

(3) 상기 (1) 또는 (2)에서, 콘드로이티나아제 ABC가 프로테우스 불가리스 유래인 것인 치료제.

(4) 콘드로이티나아제 ABC를 인간의 추간판 내에 1추간판당 1∼8유닛으로 투여하기 위한, 추간판 헤르니아 치료용의 콘드로이티나아제 ABC를 함유해서 이루어지는 제제.

(5) 상기 (4)에서, 제제가 단회 투여제제인 제제.

(6) 상기 (4) 또는 (5)에서, 제제가 주사제인 제제.

(7) 상기 (4) 내지 (6) 중 어느 하나에서, 추간판 헤르니아가 요추 추간판 헤르니아인 제제.

(8) 추간판 헤르니아의 환자에게, 유효투여량으로서 콘드로이티나아제 ABC를 인간의 추간판 내에 1추간판당 1∼8유닛 투여하는 것으로 이루어지는 추간판 헤르니아의 치료방법.

(9) 콘드로이티나아제 ABC를 인간의 추간판 내에 1추간판당 1∼8유닛으로 투여되도록 사용되는 것을 특징으로 하는 추간판 헤르니아 치료제로서 사용하기 위한 콘드로이티나아제 ABC.

본 발명에 의해, 부작용이 적고, 1회의 투여로 추간판 헤르니아 치료를 완료시킬 수 있고, 안전하며, 또한 치료효과가 높아 임상적 유용성이 높은 실용적인 추간판 헤르니아 치료제를 제공할 수 있다.

본 발명은 콘드로이티나아제 ABC에 의한 화학적 수핵 융해술에 있어서, 안전하며, 또한 치료효과가 높아 임상적 유용성이 있는 투여량이 존재하는 것을 처음으로 명핵하게 한 것이고, 그리고 그 투여량이 1∼8유닛, 바람직하게는 1∼5유닛이라는 한정적인 범위를 처음으로 명백하게 하고, 콘드로이티나아제 ABC의 투여에 의한 화학적 수핵 융해술의 실용화에 크게 공헌하는 것이다.

도 1은 치료제 투여후의 최악시 하지통(VAS)의 추이를 나타내는 도면이다.
도 2는 투여 유닛 그룹별 부작용의 발현율을 나타내는 도면이다.
도 3은 투여 유닛 그룹별 추간판 높이의 평균 감소율을 나타내는 도면이다.

이하, 본발명의 실시형태에 대해서 설명한다.

(1) 본 발명의 치료제의 유효성분

본 발명의 치료제의 유효성분으로 사용하는 콘드로이티나아제 ABC는 콘드로이티나아제 ABC의 작용을 가지는 효소인 한에 있어서 특별하게 한정되지 않는다. 그 유래도 특별하게 한정되지 않지만, 미생물 유래의 것이 바람직하고, 프로테우스 불가리스(Proteus vulgaris) 유래의 것이 바람직하다.

이러한 콘드로이티나아제 ABC의 제조방법 등도 특별하게 한정되지 않고, 예를 들면, 프로테우스 불가리스 등의 미생물을 배양해서 생산시킬 수도 있고, 콘드로이티나아제 ABC를 코딩하는 DNA 등을 사용해서 유전자 공학적 수법으로 생산시킬 수도 있다.

이러한 콘드로이티나아제 ABC는 의약으로서 사용할 수 있는 정도로 정제되고, 의약으로서 혼입이 허용되지 않는 물질을 함유하지 않는 것이 바람직하다.

이러한 콘드로이티나아제 ABC로서, 더 구체적으로는 270유닛/mg 단백 이상의 효소활성을 가지며, 또한, 엔도톡신, 핵산, 프로테아제 함량이 모두 검출한계 이하인 것이 바람직하다. 이러한 콘드로이티나아제 ABC는 예를 들면, 일본 공개특허공보 H06-153947호에 기재된 방법으로 얻을 수 있다.

또, 본 발명에 있어서, 콘드로이티나아제 ABC의 「1유닛」이란 콘드로이친황산C를 기질로 해서 효소를 작용시켰을 경우에, pH 8.0, 37℃의 조건 하에서, 1분간에 불포화 이당을 1마이크로몰(㎛) 유리시키는 효소량을 의미한다.

효소활성이 270유닛/mg 단백 이상인 콘드로이티나아제 ABC를 사용하는 것에 의해, 주사용 의약품으로서 생체 내에 투여했을 때에 주변조직에 영향을 끼치지 않고, 목적부위의 프로테오글리칸을 적절하게 분해할 수 있고, 안전성과 유효성이 높은 의약으로 할 수 있다.

(2) 대상질병

본 발명의 치료제의 대상질병은 추간판 헤르니아인 한에 있어서 한정되지 않지만, 요추 추간판 헤르니아가 바람직하고, 그 중에서도, 제4 요추와 제5 요추 사이의 추간판이나, 제5 요추와 제1 선골 사이의 추간판에 발생하는 요추 추간판 헤르니아가 특히 바람직하다.

(3) 투여 부위ㆍ방법ㆍ회수

본 발명의 치료제는 추간판 헤르니아가 발생하고 있는 추간판 내에 존재하는 수핵에 주입해서 사용한다. 주입의 회수는 1회이다.

이것에 의해 추간판의 수핵 중의 콘드로이친황산쇄나 히알루론산쇄가 분해되어, 프로테오글리칸이 가지는 높은 보수성이 감쇠하고, 추간판 내압이 저하하고, 그 결과, 추간판 헤르니아에 의한 척수 신경근의 압박이 경감되게 되고, 추간판 헤르니아가 개선되게 된다.

(4) 투여량

본 발명의 치료제는 1추간판당, 본 발명의 치료제의 유효성분인 콘드로이티나아제 ABC의 량으로서 1∼8유닛 투여되는 것이다. 그 중에서도, 1∼6유닛 투여되는 것이 바람직하고, 1∼5유닛 투여되는 것이 더 바람직하고, 1∼3유닛 투여되는 것이 더욱 바람직하고, 1∼2.5유닛 또는 1.25∼3유닛 투여되는 것이 더더욱 바람직하고, 1.25∼2.5유닛 투여되는 것이 특히 바람직하고, 1.25유닛 또는 2.5유닛 투여되는 것이 가장 바람직하다.

특히, 1.25유닛에서 5유닛의 투여량에 있어서, 치료효과는 거의 동등해서(도 1 참조), 부작용의 발현율(%)이 2.5유닛의 투여량에 있어서 극소가 되기(도 2 참조) 때문에, 1회의 투여에 의한 유효한 치료효과와 안전성을 확보하기 위해서는 1∼5유닛, 바람직하게는 1∼3유닛이다.

(5) 제형 등

본 발명의 치료제는 주사제로서 통상 채용되는 제형으로 제공할 수 있다. 예를 들면, 용액상, 동결상,또는 동결건조상의 어느 것일 수 있다. 이것을 앰플, 바이알, 주사용 시린지 등의 적당한 용기에 충전ㆍ밀봉하고, 주사제로 할 수 있다.

또, 앰플, 바이알, 주사용 시린지 등의 적당한 용기에 본 발명 치료제를 충전 혹은 밀봉할 때, 본 발명의 치료제의 화학반응, 특히 산화를 방지하기 위해서, 질소가스나 희가스(rare gas) 등의 불활성 가스를 함께 충전 혹은 밀봉할 수도 있다.

본 발명의 치료제를 충전ㆍ밀봉할 수 있는 앰플, 바이알, 주사용 시린지 등의 용기의 재질은 본 발명 치료제에 영향을 끼치지 않고, 제제학상 허용되는 재질이라면 특별하게 한정되지 않는다.

본 발명의 치료제의 제제화는 공지의 방법을 사용할 수 있다. 또 제제화에 즈음해서, 콘드로이티나아제 ABC 자체의 활성 등에 악영향을 끼치지 않으며, 또한 콘드로이티나아제 ABC의 작용에 악영향을 끼치지 않는 한에 있어서, 다른 의약활성성분이나, 관용의 부형제, 안정화제, 결합제, 유화제, 삼투압 조정제, 완충제, pH조정제, 등장화제, 보존제, 무통화제, 착색제 등, 통상 의약에 사용할 수 있는 성분을 사용할 수 있다.

실시예

이하, 실시예에 의해 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하지만, 이것들은 본 발명의 예시이며, 본 발명의 범위는 이것들에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1 : 본 발명의 치료제의 제조

(1) 콘드로이티나아제 ABC의 제조

콘드로이티나아제 ABC는 일본 공개특허공보 H06-153947호에 기재된 방법으로, 프로테우스 불가리스를 배양하고, 그 배양 상청액으로부터 정제하는 것에 의해 제조했다.

제조된 콘드로이티나아제 ABC의 효소활성은, 모두 270∼480유닛/mg 단백의 범위 내이었다. 또, 모두 엔도톡신, 핵산, 프로테아제 함량은 검출한계 이하였다.

(2) 제제화

통상의 방법에 의해, 이하의 각 유닛의 상기 콘드로이티나아제 ABC와, 이하의 제제성분을 함유하는 이하의 (A)∼ (C)의 3종의 동결건조 주사제를 제조했다.

(A) 5유닛의 상기 콘드로이티나아제 ABC

(B) 10유닛의 상기 콘드로이티나아제 ABC

(C) 20유닛의 상기 콘드로이티나아제 ABC

제제성분:

인산수소 나트륨 수화물 1.125mg

인산 2수소 나트륨 0.3mg

정제 백당 5mg

폴리에틸렌글리콜3350 10mg

(주: 폴리에틸렌글리콜 3350은 일본약전의 마크로골 4000에 적합하는 것이다.)

또, 플라세보로서는 상기의 제제성분만(콘드로이티나아제 ABC 비함유)을, 동일하게 동결건조 주사제로 한 것을 사용했다.

(3) 투여전의 용해

상기의 (A)∼(C)의 각 제제(플라세보를 포함한다)에, 사용 전에, 이하의 조성의 사용 용해액 4㎖을 첨가해서 용해시켜서, 각각 1.25유닛/㎖투여용 제제, 2.5유닛/㎖ 투여용 제제, 및 5유닛/㎖ 투여용 제제를 조제했다. 플라세보에 관해서도 동일하게 조제했다.

사용 용해액:

인산수소 나트륨 수화물 3.375mg

인산 2수소 나트륨 0.9mg

정제 백당 15mg

폴리에틸렌글리콜3350

(일본약전의 마크로골4000에 적합) 30mg

염화나트륨 36mg

주사 용수 4㎖

실시예 2: 추간판 헤르니아 환자에 대한 시험

1. 피험자

20세 이상 70세 이하의 일본인 가운데, 이하의 요추 추간판 헤르니아의 환자(계 194예)를 피험자로 했다;

MRI로 제4 요추와 제5 요추 사이의 추간판 또는 제5 요추와 제1 선골 사이의 추간판 중 어느 하나에 요추 추간판 헤르니아가 확인되어, 장애가 되고 있는 신경근의 위치와 임상증상과가 일치한 팽융형 또는 후종인대 하탈출형(후종인대를 파열하지 않고 있지 않음.)의 요추 추간판 헤르니아 환자.

제6 요추가 인정되는 경우에는, 제5 요추 신경근 또는 제1 선골 신경근이 장애가 되어, 임상증상이 일치하는 환자.

상기 피험자를 플라세보 투여(47명), 1.25유닛 투여(49명), 2.5유닛 투여(49명) 및 5유닛 투여(49명)의 각 그룹으로 나누고, 각각, 대응하는 상기 투여용 제제를 투여했다.

2. 본 발명의 치료제의 투여방법

실시예 1에 기재의 각 투여용 제제(4㎖) 중, 1㎖을 투여에 사용했다. 따라서 투여되게 되는 효소량은 1.25유닛 투여용 제제에 관해서는 1.25유닛/㎖, 2.5유닛 투여용 제제에 관해서는 2.5유닛/㎖, 5유닛 투여용 제제에 관해서는 5유닛/㎖이 된다. 이것을 사용해서, 이하와 같이 추간판 수핵 내에 각 1㎖을 단회 주사했다.

3.평가

(1) 약효평가

가. 피험자에 의한 동통평가(Visual Analog Scale: VAS)

상기 투여용 제제의 투여후 1주째, 2주째, 3주째, 4주째, 5주째, 6주째, 13주째, 26주째, 39주째 및 52주째의 각 시점에서, 피험자 자신이 평가한 「과거 24시간의 최악시 하지통(VAS평가)」에 관한 측정(VAS값측정)을 실시했다.

피험자에 의한 VAS평가는 취침전에 실시했다. 100mm의 직선과 함께, 당해 직선의 좌단에 「통증없음」, 우단에 「지금까지에 느낀 최대의 통증」이라고 기재된 「통증 평가 시트」 상의 직선 상에, 피험자 자신이 그 동통의 정도를 포인트로 표시했다.

동직선의 좌단에서, 피험자가 표시한 포인트까지의 거리(mm)를 측정하고, 동통의 정도를 평가했다. 이 평가 결과에 대해서, 플라세보 그룹을 대조로 한 Dunnett형 다중비교를 실시했다.

또, 동통의 변화율(VAS 변화율)을 평가했다. VAS 변화율은 상기 투여 제제의 투여전의 VAS값으로부터 상기 투여 제제의 투여후 13주째에 있어서의 VAS값을 뺌으로써 VAS 변화량으로 하고, 이어서, 그 VAS 변화량을 상기 투여 제제의 투여전의 VAS값으로 나눔으로써 산출했다. 이 VAS 변화율에 대해서, 플라세보 그룹을 대조로 한 공분산 분석(p<0.05)을 실시했다.

나. 신경학적 검사

추간판 헤르니아에 의한 신경자극 증상을 조사하기 위해서, 상기 투여용 제제의 투여후 13주째에, 하지 신전 거상 테스트(SLR테스트(Straight Leg Raising Test))를 실시했다.

SLR테스트는 요추 추간판 헤르니아의 신경학적 검사의 하나로, 신전시킨 하지를 거상하고, 좌골 신경통에 의해 거상 각도가 70° 이하의 경우를 양성이라고 판정하고, 70°를 넘었을 경우를 음성으로 한다. 본 시험의 투여전은 전원이 양성이었다.

SLR테스트의 양성ㆍ음성에 대해서 그룹별로 빈도집계를 실시하고, SLR테스트의 소극적인 비율에 대해서, 플라세보 그룹을 대조로 한 Steel형의 다중비교로 검토했다.

또, 약효평가는 피험자 193예를 대상으로 실시했다.

(2) 안전성 평가

안전성 평가는 194예의 피험자를 대상으로 실시했다.

부작용의 발현 수 및 발현율을 산출했다. 평가는 상기 투여용 제제의 투여후 13주째까지 실시했다. 단, 부작용 중, 이하의 (가) 및 (나)의 항목에 대해서는, 투여후 52주째까지 평가했다 ;

상기 투여용 제제의 투여전의 값과 비교해서, 동 투여후의 (가)추간판 높이의 감소율이 30% 이상이 된 것, 및, (나)추체의 후방 열림 각도가 5° 이상이 된 것.

또, (나) 추체의 후방 열림 각도가 5° 이상으로 하는 안전성 평가는 미국식품 의약품국 (FDA)가 정한 추간판의 불안정성에 관한 지표이다.

상기 투여용 제제의 투여후 13주째에 있어서의 각 유닛 투여그룹의 추간판 높이의 평균 감소율을 산출했다.

4. 결과

(1) 약효평가

가. VAS

상기 투여용 제제의 투여후의 최악시 하지통(VAS)의 추이를 도 1에 나타낸다. 도 1의 횡축은 투여후의 시간(주)을 나타내고, 종축은 VAS의 값(mm)을 나타낸다. 그래프 중의 마름모형 표시(◆)는 플라세보 그룹의 결과를 나타내고, 둥근 표시(●)는 1.25유닛 투여그룹의 결과를 나타내고, 사각 표시(■)는 2.5유닛 투여그룹의 결과를 나타내고, 삼각표시(▲)는 5유닛 투여그룹의 결과를 나타낸다.

상기 투여용 제제의 어느 쪽의 투여그룹에 있어서도 1주째부터 동통억제 효과가 관찰되었다. 특히, 상기 투여용 제제의 1.25유닛 투여그룹, 및 5유닛 투여그룹에 있어서는, 1주째부터 플라세보에 비해서 유의한 동통억제 효과(p<0.05)가 나타났다. 또, 투여후 39주째, 52주째에는, 모든 투여그룹에 있어서 플라세보에 비해서 유의한 동통억제 효과(p<0.01 또는 p<0.001)가 나타났다. 그 동통억제 효과는 1.25유닛 투여그룹, 2.5유닛 투여그룹, 5유닛 투여그룹에서 거의 동등하고, 1년(52주)에 걸쳐 유효하다는 것이 밝혀졌다. 이에 따라 상기 투여용 제제가 1회의 투여로, 유의한 동통억제 효과를 나타내는 것이 밝혀졌다.

또, 투여후 13주째에 있어서의 VAS 변화율에서는 1.25유닛 투여그룹으로 66%, 2.5유닛 투여그룹으로 61%, 5유닛 그룹으로 69%이고, 어느 쪽의 유닛 투여그룹에 있어서도 플라세보 투여그룹의 VAS 변화율(45%)과 비교해서 유의한 감소를 확인할 수 있었다.

나. 신경학적 검사(SLR테스트)

플라세보 그룹에서는 음성화율은 50% 정도이었지만, 투여그룹에서는 모두 60% 이상이 되었다.특히, 1.25유닛 투여그룹에서는 80% 이상에 달했다.

어느 쪽의 투여그룹에 있어서도, 소극적인 비율이 증가했다. 특히 1.25유닛 투여그룹에 있어서는 플라세보에 비해서 유의(p<0.01)하게 소극적인 비율이 증가했다.

(2) 안전성 평가

부작용의 발현율을 도 2에 나타낸다. 도 2의 횡축은 각 투여그룹을 나타내고, 종축은 부작용의 발현율(％)을 나타낸다. 5유닛 투여그룹에서는 발현율은 61.2%이었지만, 2.5유닛 투여그룹에서의 발현율은 44.9%이고, 1.25유닛 투여그룹에서는 발현율은 46.9%이었다. 이것으로, 부작용의 발현율의 극소값이 1추간판당 2.5유닛 투여그룹의 부근에 있음이 나타나고, 부작용을 극소로 할 수 있는 투여량의 존재가 밝혀졌다.

다음에, 추간판의 불안정성에 관한 부작용인 (가) 추체의 후방 열림 각도가 5° 이상이 된 것, 및 (나) 추간판 높이의 감소율이 30% 이상이 된 것에 대해서 검토했다. 결과를 다음의 표 1에 나타낸다.

이 결과, 5유닛 투여그룹에서, 추체의 후방 열림 각도가 5°이상이 된 것은 1례(발현율 2%) 볼 수 있었다. 한편, 1.25유닛 투여그룹, 및 2.5유닛 투여그룹에서는 추체의 후방 열림 각도가 5° 이상이 된 것은 전무했다. 또, 비교예로서 들고 있는 10유닛 투여그룹에서는 2예(발현율 33.3%)로 추간판의 불안정성에 관한 부작용이 고율로 발생하고, 실용성이 없는 것이 나타났다.

추간판 높이의 감소율이 30% 이상이 된 것은 5유닛 투여그룹에서는 7예(발현율 14.3%)이었지만, 1.25유닛 투여그룹 및 2.5유닛 투여그룹에서는 각각 4예(발현율 8.2%)로 부작용의 발현이 급격하게 감소하는 것을 알았다.

다음에, 각 유닛 투여그룹의 추간판 높이의 평균 감소율을 도 3에 나타낸다. 도 3의 횡축은 각 투여그룹을 나타내고, 종축은 추간판 높이의 감소율(％)을 나타낸다.

이 결과, 추간판 높이의 평균 감소율은 5유닛 투여그룹, 2.5유닛 투여그룹, 및 1.25유닛 투여그룹에서는, 어느 것이나 30% 미만이 되는 것을 알았다. 이것들의 투여그룹에서는, 어느 것이나 플라세보 그룹에 비해서 큰 감소율이 되고 있어, 치료효과를 볼 수 있었던 것임이 나타났다. 또, 비교예의 10유닛 투여그룹에서는 감소율은 30% 이상이 되어 있었다.

또, 2.5유닛 투여그룹에서는 1례, 5유닛 투여그룹에서는 1례, 부작용인 콘드로이티나아제 ABC에 대한 IgG 항체값의 상승이 인정되었다. 이 항체값의 상승은 1.25유닛 투여그룹에서는 인정되지 않았다.

(비교예) 10유닛 투여에 있어서의 안전성 평가

요추 추간판 헤르니아 환자(6명)에 대해서, 상기와 동일한 방법으로 1추간판당 10유닛의 콘드로이티나아제 ABC를 투여했다. 안전성 평가로서, (가)투여후 12주째에 있어서의 추간판 높이의 감소율, 및 (나)추체의 후방 열림 각도가 5° 이상이 된 것의 발현수 및 발현율을 산출했다.

투여후 12주째에 있어서의 추간판 높이의 감소율을 도 3에 나타낸다. 그 결과, 추간판 높이의 평균 감소율은 45.4%로 안전성에 문제가 발생할 가능성이 있는 수치(30%)를 크게 넘고 있었다.

또, 추체의 후방 열림 각도가 5° 이상이었던 결과를, 표 1에 함께 나타냈다. 표 1에 나타나 있는 바와 같이, 10유닛 투여그룹에서는 후방 열림 각도가 5° 이상이 된 것이 33.3% 인정되었다. 이 결과로, 10유닛 투여에서는 척추의 불안정성에 관한 리스크가 높다고 생각된다.

비특허문헌 4에 기재되어 있는, 개에 대한 콘드로이티나아제 ABC의 투여량으로부터, 인간에 대해서 유효한 콘드로이티나아제 ABC의 투여량을 추정하기 위해서, MRI를 사용해서 인간 및 개의 수핵체적을 측정했다.

(참고예) MRI를 사용한 수핵 체적의 비교

9명의 건강 자원봉사자(남성 6명, 여성 3명), 및 개의 적출표본(6예)에 대해서, 제4 요추와 제5 요추 사이의 추간판 MRI에 의한 Ｔ2 강조화상으로 촬영하고, 수핵 관상단 화상의 단경, 장경, 면적 및 시상단 화상의 단경을 측정했다. 수핵 체적은 MRI화상의 계측값으로부터 산출(관상단 면적×시상단 단경)했다. 결과를 다음의 표 2에 나타낸다.

5. 정리

추체의 후방 열림 각도가 5° 이상이 되는 것은, 10유닛 투여에서는 33.3%이었던 것에 대해, 투여량을 반 정도의 5유닛으로 함으로써, 발현율을 2%까지 현저하게 경감할 수 있는 것을 발견했다.

또, 10유닛 투여에서는 추간판 높이의 평균 감소율은 45.4%에나 달하고 있었던 것에 대해, 5유닛 투여그룹에서는 추간판 높이의 감소율이 17.6%이었던 것으로부터, 투여량을 10유닛으로부터 반 정도의 5유닛으로 하는 것에 의해서, 추간판 높이의 감소도 현저하게 억제할 수 있음이 나타났다.

비특허문헌 3에서는 콘드로이티나아제 ABC를 인간의 추간판 내에 1추간판당 0.5유닛 투여했을 때, 신속한 하지통 개선이 발생하지 않은 것으로부터, 투여량이 적었던 취지가 기재되어 있지만, 부작용에 관한 상세한 검토는 이루어지고 있지 않고, 임상상 유효한 투여량은 불분명했다.

본 발명에 의해, 1추간판당 1∼8유닛, 바람직하게는 1∼5유닛의 범위로 투여 함으로써, 1회의 투여만으로 유의한 동통개선 효과를 발휘하면서, 부작용을 저감시킬 수 있고, 추가로 1∼3유닛의 범위에서의 투여를 선택함으로써, 더 높은 용량(5U)과 동등한 동통개선 효과를 발휘하면서, 부작용도 더욱 저감시킬 수 있다는 것을 발견했다.

한편, 비특허문헌 4에서는, 개의 추간판 내에 1추간판당 0.5∼1유닛 투여했을 때라도, 신속한 수핵의 축소가 일어나지 않은 것으로부터, 투여량이 과소했던 취지가 기재되어 있다. 또, 비특허문헌 6에는 추간판의 거동은 추간판의 크기에 의존하기 때문에, 동물모델의 실험결과의 분석에는 확대 축소 척도의 설정(스케일링: scaling)이 필요한 취지가 기재되어 있다. 그리고 상기 참고예에서, 인간의 수핵 체적은 개에 비해서 70배의 크기인 것을 확인할 수 있었다. 이것들 비특허문헌 4 및 비특허문헌 6의 기재, 및 인간의 수핵 체적이 개의 수핵 체적보다도 훨씬 크다는 것을 감안하면, 인간에서는 0.5∼1유닛의 70배인 35∼70유닛을 투여한 경우에도, 투여량이 모자란 것으로 추정되었다.

이렇게, 비특허문헌 4에 기재된 개의 실험 결과로부터 추정된 인간에 대한 투여량은 본 발명에서 발견해 낸 투여량과 전혀 달라서, 인간에 대해서 유효한 투여량을 예측하는 것은 매우 곤란했다.

이상에서, 콘드로이티나아제 ABC를 인간의 추간판 내에 1추간판당 1∼8유닛 투여함으로써, 부작용을 적게 하며, 또한 1회의 투여로 추간판 헤르니아를 치료할 수 있다는 사실이 발견되었다.

(산업상의 이용 가능성)

본 발명은 부작용이 적고, 1회의 투여만으로 장기간 지속된 동통개선 효과가 수득되고, 임상에 있어서 높은 치료효과와 안전성을 발휘하는 추간판 헤르니아 치료제를 제공할 수 있다.

Claims

콘드로이티나아제 ABC를 유효성분으로 하고, 상기 성분이 인간의 추간판 내에 1추간판당 1∼8유닛 투여되도록 사용되는 것을 특징으로 하는 추간판 헤르니아 치료제.
제1 항에 있어서, 추간판 헤르니아가 요추 추간판 헤르니아인 치료제.
제1 항 또는 제2 항에 있어서, 콘드로이티나아제 ABC가 프로테우스 불가리스 유래의 것인 치료제.
콘드로이티나아제 ABC를 인간의 추간판 내에 1추간판당 1∼8유닛으로 투여하기 위한, 추간판 헤르니아 치료용의 콘드로이티나아제 ABC를 함유해서 이루어지는 제제.
제4 항에 있어서, 제제가 단회 투여제제인 제제.
제4 항 또는 제5 항에 있어서, 제제가 주사제인 제제.
제4 항 내지 제6 항 중 어느 한 항에 있어서, 추간판 헤르니아가 요추 추간판 헤르니아인 제제.
추간판 헤르니아의 환자에게, 유효투여량으로서 콘드로이티나아제 ABC를 인간의 추간판 내에 1추간판당 1∼8유닛 투여하는 것으로 이루어지는 추간판 헤르니아의 치료방법.
콘드로이티나아제 ABC를 인간의 추간판 내에 1추간판당 1∼8유닛으로 투여되도록 사용되는 것을 특징으로 하는 추간판 헤르니아 치료제로서 사용하기 위한 콘드로이티나아제 ABC.