KR20130121600A

KR20130121600A - 탱자나무 속 식물의 과실 및/또는 치자 속 식물의 과실 추출물을 포함하는 항균용 조성물

Info

Publication number: KR20130121600A
Application number: KR1020120044961A
Authority: KR
Inventors: 김원용; 박희국; 백인혁; 김성근; 최우진
Original assignee: 중앙대학교 산학협력단
Priority date: 2012-04-27
Filing date: 2012-04-27
Publication date: 2013-11-06
Also published as: KR101399695B1

Abstract

본 발명은 항균 활성을 나타내는 탱자나무 속(Poncirus sp.) 식물의 과실 및 치자 속(Gardenia sp.) 식물의 과실에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 본 발명은 일반적인 병원성 세균에 대한 항균 활성뿐 아니라 탄저병균 및 항생제 내성균과 같은 슈퍼박테리아에 대해서도 항균 활성이 우수한 탱자나무 속 식물의 과실 및 치자 속 식물의 과실 추출물을 포함하는 항균용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 조성물은 치사율이 높은 것으로 알려진 탄저균 및 항생제 내성균에서도 우수한 항균 활성을 나타내므로 이와 관련된 감염질환의 예방 또는 치료에 매우 유용하게 사용될 수 있는 효과가 있으며, 화장품 또는 의약품 원료로도 유용하게 사용할 수 있는 효과가 있다.

Description

탱자나무 속 식물의 과실 및/또는 치자 속 식물의 과실 추출물을 포함하는 항균용 조성물{Extract of fruit of Poncirus sp. and/or Gardenia sp. having antimicrobial activity and composition comprising thereof}

본 발명은 항균 활성을 가지는 탱자나무 속(Poncirus sp.) 식물의 과실과 치자(Gardenia jasminoides) 과실 추출물 및 이를 포함하는 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 본 발명은 탄저균 및 항생제 내성 균주 등 다양한 유해 균에 대한 항균 활성을 나타내는 탱자나무 속 식물 과실과 치자 속 식물 과실의 추출물과 상기 추출물을 포함하는 항균용 조성물에 관한 것이다.

탱자나무 속(Poncirus sp.) 식물은 운향과(Rutaceas)에 속하는 낙엽활엽관목으로서 주로 과실을 사용하며 민간요법 및 한방에서 방향고미건위제로 널리 이용되어 왔다. 과실은 둥글고 누렇게 익으며 향기가 나며, 탱자가 덜 익었을 때 두세 조각으로 잘라서 말린 것을 지실이라 하고, 껍질만 말린 것을 지각이라 한다. 탱자나무 속 식물의 과실은 약용으로 사용되어 왔으며 지실은 습진 치료제로 쓰고, 지각은 설사 치료제 및 관장에 사용하였다. 이밖에도 건위제나 소화불량, 자궁하수, 내장이완 등에도 사용하였으며, 최근에는 아토피와 구강치료제로 사용되고 있다. 탱자열매의 주요성분으로는 flavonoid, hesperidin, neohesperidin, naringin 및 cumalin류 등으로 보고되었으며(Park and Chun, 1969; Oh et al ., 1989; Chung et al., 2004). 이러한 성분들과 생체기능과의 상관성에 대해 많은 연구가 수행되고 있다.(Patkar et al ., 1979, Fewtrell et al., 1982; Sagi-Eisenberg et al., 1985; Kanemoto et al., 1993; Lee et al., 1996; Lee et al., 2005).

그러나, 아직까지 탱자나무 속 식물 과실이 항균 효과가 있다는 내용에 대해서는 알려진 바가 없다.

치자 속(Gardenia sp.) 식물 치자(Gardenia jasminoides)는 꼭두서니과(Rubiaceae)에 속하는 상록활엽 관목으로 한방에서 해열, 이뇨, 지혈, 진정, 이담, 혈압강하제로 사용되어 왔다. 치자의 황금색 색소는 식용 및 염료로서 오랫동안 이용되어온 색소로 carotenoid계 crocetin의 COOH기에 여러 가지 당이 결합된 배당체로 구성되어 있으며, 그 중 crocetin digentiobioside인 crocin이 주성분인 것으로 알려져 있다. 또한, iridoid 화합물인 genipin, geniposide, geniposidic acid, gardenoside, gardoside, shanzhiside, methyl deacetyl asperuloside 등과 flavonoids 계열의 gardanin, 항염 활성성분인 quinic acid와 그 유도체, vanillic acid 4-O-β-D-(6'-sinapoyl) glucopyranoside, caffeic acid 등이 함유되어 있는 것으로 보고되었으며, 치자 추출물 genipin을 이용한 피부미백효과, monoamine oxidase(MAO) 저해 활성 등이 보고되어 있다. 특히, 치자의 geniposide는 혈청 triglyceride, 인지질, 지질과산화물, 간 triglyceride, 유리지방산 및 glutamic pyruvic transaminase(GPT) 값을 감소시키는 것으로 보고되어 있으며, 담즙 분비 촉진작용도 보고되어 있다. 그밖에 crocin이 pancreatic lipase의 활성을 차단하여 low density lipoprotein(LDL)과 very low density lipoprotein(VLDL)의 수치를 낮추고, 대장에서의 지방 배설을 촉진함으로서 혈중지질의 양을 감소시킨다는 내용도 보고된 바 있다.

그러나, 아직까지 치자 속 식물 과실이 항균 효과가 있다는 내용에 대해서는 알려진 바가 없다.

한편, 항생제(antibiotics)는 미생물이 생산하는 대사산물로 소량으로 다른 미생물의 발육을 억제하거나 사멸시키는 물질로서, 병원균에 의한 감염증을 치료하는 약물로서 감염 증세에 뛰어난 효능을 보이기 때문에 전 세계적으로 사용되고 있다. 항생제의 분류를 살펴보면, 일반적으로 곰팡이류에서 추출된 항생물질인 페니실린(penicillin)계, 세팔로스포린(cephalosporin)계 등의 항균성 항생제, 및 그리세오풀빈(griseofulvin), 푸시딘(fucidin)과 같은 항진균성 항생제가 있으며, 세균류에서 추출한 항생물질인 매크로라이드(macrolide), 아미노글리코시드(aminoglycoside), 테트라사이클린(tetracycline) 류 및 클로람페니콜(chloramphenicol) 등의 마이신 류가 존재한다. 페니실린의 경우 다른 항생제에 비하여 부작용이 적으나 어떤 세균은 페니실린을 분해하는 효소를 생산하기도 하여 인공적으로 합성한 메티실린(methicillin)이나 옥사실린(oxacillin)등이 함께 사용되고 있다.

현재까지 개발된 항생제 가운데 세계에서 가장 강력한 항생제는 반코마이신(vancomycin)으로, 페니실린의 대체약인 메티실린(methicillin)에 내성이 생긴 황색포도상구균이 퍼지자 1950년대에 개발하여 황색 포도상구균의 중증 감염증을 치료하는 데 사용해 왔다. 그러나 항생제의 남용으로 인하여 병원균 스스로가 항생제에 저항할 수 있는 힘을 기르게 되고 그 내성이 점차로 강해져 어떤 항생제에도 저항할 수 있게 된 일명 슈퍼박테리아(super bacteria)가 1996년 일본에서 처음 등장함에 따라 항생제의 효과적인 사용에 대한 문제가 발생하였다. 세균은 항생제를 극복할 수 있는 자연적인 돌연변이체가 될 수 있으며, 이 내성균들은 내성 유전자를 다른 세균들에게 전달함으로써 내성균의 확대가 신속하게 이루어질 수 있다. 슈퍼박테리아의 대표적인 예로는 MRSA(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus), 더욱 강력한 항생제 저항성을 가지는 VRSA(Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus) 및 VRE(Vancomycin-resistant Enterococci)를 들 수 있으며, 미국에서만 한 해 약 1만9000명이 슈퍼박테리아라는 항생제 내성균에 의해 사망하고 있는 등 슈퍼박테리아에 대한 연구의 필요성이 증대되고 있다.

또한, 슈퍼박테리아의 경우 병원체가 신체 한 부분의 1차 병소로부터 2차적으로 혈액 속으로 이동하는 증세인 균혈증에 의한 감염질환의 확대 또는 패혈증 등의 중증감염질환으로 악화될 수 있는 문제점을 가지고 있다. 현재 슈퍼박테리아 항생제로는 자이복스(Zyvox)등이 시판되고 있으나, 자이복스(Zyvox)등의 슈퍼박테리아 항생제는 부작용을 가지고 있으며 MRSA(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus) 균이 이에 대한 내성이 생기기 시작하면서 약효가 급격히 떨어지고 있는 현실이며, 반코마이신, 페니실린, 메티실린 내성 균주 등 슈퍼박테리아에 대해 두루 효과를 가지는 슈퍼박테리아 항생제의 개발이 시급한 실정이다.

이에 더하여, 현재 사용되고 있는 대부분의 항균제는 화학합성을 통해 제조된 것으로서 고비용이 소요되며 부작용을 유발하는 등 많은 한계를 가지고 있다. 따라서, 최근에는 천연물로부터 새로운 항균물질을 분리하고자 하는 연구가 활발하게 이루어지고 있는데, 천연물로부터 새로운 항균물질을 분리하기 위해서는 항균 스펙트럼이 광범위하고 장기간 투여하여도 부작용이 없이 안전한 물질이어야 한다는 점 등을 고려해야 한다.

이에 본 발명자들은 생체에 부작용이 없으면서 슈퍼박테리아에도 항균 활성을 나타내는 우수한 천연물질을 찾고자 모색하던 중, 탱자나무 속(Poncirus sp.) 식물의 과실 및 치자 속(Gardenia sp.) 식물의 과실이 우수한 항균 활성을 나타낸다는 사실을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서 본 발명의 목적은 탱자나무 속 식물 추출물 및/또는 치자 속 식물 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물을 제공하는 것이다.

그러나, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위해서, 본 발명은 탱자나무 속(Poncirus sp.) 식물 추출물, 치자 속(Gardenia sp.) 식물 추출물, 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 항균용 조성물을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 탱자나무 속 식물 추출물 또는 치자 속 식물 추출물은 유기용매를 첨가하여 가용 추출한 용매추출물이다.

본 발명의 다른 실시예에 있어서, 상기 유기용매는 물, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트, 및 메틸렌클로라이드로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이다.

본 발명의 또 다른 실시예에 있어서, 상기 항균용 조성물은 바실러스 안트라시스(Bacillus anthracis) 또는 항생제 내성 균주에 대하여 항균 활성을 나타내는 것이다.

본 발명의 또 다른 실시예에 있어서, 상기 항생제는 반코마이신(Vancomycin), 페니실린(Penicillin), 메티실린(Methicillin), 세팔로신(Cephalothin), 에리스로마이신(Erythromycin), 노플로삭신(Norfloxacin), 옥사실린(Oxacillin), 겐타마이신(Gentamicin), 클로람페니콜(Chloramphenicol), 설폰아마이드(Sulfonamides), 스트렙토마이신(Streptomycin), 카바페넴(carbapenem), 및 테트라사이클린(Tetracyclin)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이다.

본 발명의 또 다른 실시예에 있어서, 상기 균주는 엔테로코커스 속(Enterococcus sp.), 스타필로코커스 속(Staphylococcus sp.), 대장균(Escherichia coli), 클렙시엘라 속(Klebsiella sp.), 아시네토박터 속(Acinetobacter sp.), 스트렙토코커스 속(Streptococcus sp.) 및 살모넬라 속(Salmonella sp.)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이다.

또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 감염질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 감염질환은 탄저병, 요로감염, 여드름, 아토피 피부염, 지루피부염, 모낭염, 화농증, 염증, 치주질환, 위질환, 식중독, 패혈증, 패혈성 쇼크, 심장 내막염, 장염, 뇌수막염, 골수염, 척추 카리에스, 폐렴, 골수염, 임균 감염, 및 수막구균 감염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이다.

또한, 본 발명은 탱자나무 속 식물 추출물, 치자 속 식물 추출물, 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 피부 외용제 조성물을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 바디에센스, 메이크업 베이스, 파운데이션, 염모제, 샴푸, 린스 및 바디 세정제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 제품에 포함되는 것이다.

본 발명의 다른 실시예에 있어서, 상기 조성물은 연고 겔, 크림, 패취 및 분무제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 제형을 가지는 것이다.

본 발명에 따른 탱자나무 속(Poncirus sp.) 식물의 과실 및/또는 치자 속(Gardenia sp.) 식물의 과실 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 항균 활성이 매우 우수하며, 특히, 요로감염 유발균, 탄저균, MRSA 균 및 VRE 균에 대하여 항균 활성을 나타내는 특징이 있으므로, 병원성 세균에 의한 탄저병, 항생제 내성균으로 인한 요로 감염 등의 감염증의 예방 또는 치료에 매우 유용하게 사용될 수 있는 효과가 있다. 또한, 본 발명의 탱자나무 속 식물의 과실 및/또는 치자 속 식물의 과실 추출물은 항균 효과가 우수하므로 화장품, 의약품 등의 원료로도 유용하게 사용될 수 있는 효과가 있다.

도 1은 병원성 세균에 대한 탱자나무 과실 추출물의 항균 활성 측정 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 병원성 세균에 대한 치자 과실 추출물의 항균 활성 측정 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 탱자나무 과실 추출물 및 치자 과실 추출물 혼합물의 병원성 세균에 대한 항균 활성을 측정한 결과를 나타낸 것이다.

본 발명은 탱자나무 속(Poncirus sp.) 식물 추출물, 치자 속(Gardenia sp.) 식물 추출물, 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 항균용 조성물을 제공함에 그 특징이 있다.

본 발명에서는 항균 활성이 우수한 조성물을 제공하기 위한 주원료로서 탱자나무 식물의 과실 추출물 및 치자 과실 추출물을 사용하였는데, 본 발명에서 사용할 수 있는 탱자나무 식물의 과실 추출물 및 치자 과실 추출물은 자연에서 채취하거나 상업적 판매소 등에서 구입하여 사용할 수 있고, 원산지에 상관없이 시중에서 구할 수 있는 것이라면 모두 사용가능하며. 본 발명의 일실시예에서는 경동시장 약재상가에서 국내산(탱자: 경북 영천, 치자: 전남 고흥)을 구입하여 사용하였다.

또한, 본 발명에 따른 탱자나무 식물의 과실 추출물 및 치자 과실 추출물은 당 업계에 공지된 일반적인 천연으로부터 추출물을 수득하는 방법에 의해 제조될 수 있으며, 바람직하게는 각종 유기용매를 이용한 용매추출 방법을 통해 수득할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 따른 탱자나무 식물의 과실 및 치자 과실은 그 건체를 사용할 수 있고, 추출 효율을 증대시키기 위해 분쇄기로 분쇄하여 사용할 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. 과실의 건체를 사용하기 위한 건조 방법으로는 양건, 음건, 열풍건조, 동결건조, 또는 자연건조 방법 등을 모두 사용할 수 있으나, 바람직하게는 열풍건조 또는 동결건조 하여 사용할 수 있다. 또한, 건조된 탱자나무 식물의 과실 및 치자 과실은 분쇄기로 분쇄한 다음 물 또는 유기용매 등의 추출용매로 추출, 여과, 농축하는 단계를 거쳐 제조하거나 추출용매를 첨가하여 2시간 이상 가온할 수 있다. 상기 유기용매는 이에 제한되지는 않으나 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트, 또는 메틸렌클로라이드로 이루어진 군으로부터 선택된 것일 수 있고, 바람직하게 C1~C5의 아세톤일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 99.5% 아세톤일 수 있다. 침출시킨 탱자나무 식물의 과실 및 치자 과실은 감압 흡입 여과기를 이용하여 여액만 취한 후, 여과하여 얻어진 여액을 진공농축기로 농축함으로써 추출물을 수득할 수 있으며, 제조된 추출물은 진공 건조를 추가로 수행하여 분말 형태로 제조할 수도 있다.

본 발명의 일실시예에서는 아세톤에 탱자나무 식물의 과실 및 치자 과실을 첨가하고 실온에 방치하여 추출한 후 여과지로 여과하였으며, 아세톤을 제거하기 위해 여액을 농축기로 농축함으로써 추출물을 제조하였다(실시예 1 참조). 이때, 상기 추출 과정은 에탄올 50 내지 10,000ml에 탱자나무 식물의 과실 및 치자 과실을 각각 50 내지 5,000g 혼합한 후 22 내지 25℃의 온도에서 12 내지 72시간 동안 방치하는 과정일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기와 같이 제조된 탱자나무 식물의 과실 추출물 및 치자 과실 추출물은 천연물로써 세포에 대한 독성을 나타내지 않는 특징이 있으므로 의약품, 화장품, 식품 등의 다양한 분야에 폭넓게 적용되어 활용될 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 탱자나무 식물의 과실 추출물 및 치자 과실 추출물은 바실러스 안트라시스(Bacillus anthracis) 또는 항생제 내성 균주에 대한 항균 효과가 우수한 특징이 있다.

항생제 내성 균주 중 하나인 메티실린-내성 스타필로코커스 아우레우스(Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus, MRSA)는 메티실린에 대해 감수성을 상실하여 내성 또는 매우 높은 수준의 저항성을 가지는 균주로써, 메티실린 이외에도 옥사실린 등의 페니실린계 항생제, β-락탐(β-lactam) 계열의 항생제, 아미노글리코사이드(aminoglycoside), 및 마크로리데스(macrolides) 같은 여러 종류의 항생제에도 광범위하게 내성을 나타내는 것으로 알려져 있으며, 원내감염의 가장 주요한 원인이 되고 있다.

또한, 반코마이신-내성 엔테로코커스 균(Vancomycin-Resistant enterococcus, VRE)은 반코마이신에 대해 감수성을 상실하여 내성 또는 매우 높은 수준의 저항성을 가지는 균주로써, 반코마이신 내성에 관계된 유전자(vanA, vanB)는 반코마이신에 내성이 아닌 다른 엔테로코커스 균주나 다른 종류의 세균으로 전파될 수 있으며, 반코마이신-내성 엔테로코커스 균은 정상적으로도 회음부나 장내에 서식하므로 반코마이신 내성균 환자나 보균자는 배뇨, 배변 시 주변을 오염시킬 가능성이 있다.

바실러스 안트라시스(Bacillus anthracis)는 인수공통전염병인 탄저병을 일으키는 원인균으로서, 대부분의 척추동물에 감염되는데 소나 염소에의 발병률이 특히 높은 것으로 알려져 있다. 사람의 경우, 대부분이 감염된 동물이나 그 동물의 부산물에 노출되었을 때 감염되며, 탄저균에 감염되면 감염 후 초기 24시간 내지 48시간 내에 항생제가 투여되지 않으면 95% 이상이 치사하게 된다.

아시네토박테 바우마니(Acinetobacter baumannii)는 다제 내성균으로 카바페넴에 대한 감수성을 상실하여 내성 또는 매우 높은 수준의 저항성을 가지는 균주로써, 아시네토박터 속의 종들 중 절반 이상이 카바페넴에 내성을 보이는 것으로 알려져 있다.

이와 관련하여 본 발명의 일실시예에 따르면, 탱자나무 식물의 과실 추출물, 치자 과실 추출물, 또는 이들의 혼합물을 이용하여 탄저병균인 바실러스 속균(Bacillus sp.), 요로감염 유발균인 아시네토박터 바우마니(Acinetobacter Baumannii), 메티실린-내성 스타필로코커스 균(Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus, MRSA), 및 반코마이신-내성 엔테로코커스 균(Vancomycin-Resistant enterococcus)과 같은 병원성 세균에 대한 항균 활성을 알아보기 위해, MIC(minimum inhibitory concentration) 테스트를 수행한 결과, 모든 균에 대한 항균 활성이 우수한 것으로 나타났으며, 특히, 탱자나무 식물의 과실 추출물 및 치자 과실 추출물을 혼합할 경우, 보다 우수한 항균활성을 나타내는 것을 확인하였다(실시예 2 참조).

따라서, 본 발명은 탱자나무 식물의 과실 추출물, 치자 과실 추출물, 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 함유하는 항균용 조성물을 제공할 수 있으며, 상기 항균용 조성물은 이에 제한되지는 않으나 바실러스 안트라시스(Bacillus anthracis) 또는 항생제 내성 균주에 대하여 항균 활성을 나타내는 것일 수 있다.

상기 항생제 내성 균주는 반코마이신(Vancomycin), 페니실린(Penicillin), 메티실린(Methicillin), 세팔로신(Cephalothin), 에리스로마이신(Erythromycin), 노플로삭신(Norfloxacin), 옥사실린(Oxacillin), 겐타마이신(Gentamicin), 클로람페니콜(Chloramphenicol), 설폰아마이드(Sulfonamides), 스트렙토마이신(Streptomycin), 카바페넴(carbapenem), 및 테트라사이클린(Tetracyclin)과 같은 항생제에 대한 내성을 가진 균주일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

또한, 상기 항생제에 대한 내성을 가지는 균주는 그람음성균 또는 그람양성균일 수 있으며, 구체적으로 상기 균주는, 엔테로코커스 속(Enterococcus sp.), 스타필로코커스 속(Staphylococcus sp.), 대장균(Escherichia coli), 클렙시엘라 속(Klebsiella sp.), 아시네토박터 속(Acinetobacter sp.), 스트렙토코커스 속(Streptococcus sp.) 및 살모넬라 속(Salmonella sp.)일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

나아가, 본 발명의 탱자나무 식물의 과실 추출물, 치자 과실 추출물, 또는 이들의 혼합물을 포함하는 항균용 조성물은 병원성 세균의 생육을 억제하거나 사멸시키기 위해 사용될 수 있으므로, 본 발명은 탱자나무 식물의 과실 추출물, 치자 과실 추출물, 또는 이들의 혼합물을 포함하는 조성물은 바실러스 안트라시스(Bacillus anthracis) 또는 항생제 내성 균주로 인한 감염질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 상기 조성물이 예방 또는 치료할 수 있는 감염질환은 일반적인 감염질환들을 모두 포함하며, 이에 제한되지는 않으나 바람직하게는 탄저병, 요로감염, 여드름, 아토피 피부염, 지루피부염, 모낭염, 화농증, 염증, 치주질환, 위질환, 식중독, 패혈증, 패혈성 쇼크, 심장 내막염, 장염, 뇌수막염, 골수염, 척추 카리에스, 폐렴, 골수염, 임균 감염, 및 수막구균 감염일 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 “예방”이란 본 발명의 조성물의 투여에 의해 감염질환을 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미하며, “치료”란 본 발명의 조성물을 투여함으로써 감염질환에 의한 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에 따른 상기 약학적 조성물을 제제화할 경우, 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조된다.

경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환자, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 본 발명로 표시되는 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.

비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다.

비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구투여(예를 들어, 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)할 수 있으며, 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 시간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.

본 발명에 따른 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 상기 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

구체적으로, 본 발명에 따른 화합물의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 1 ㎏당 0.1 내지 100 mg, 바람직하게는 0.5 내지 10 mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

또한, 본 발명은 체내에 안전한 천연물인 탱자나무 속(Poncirus sp.) 식물 추출물, 치자 속(Gardenia sp.) 식물 추출물, 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 피부 외용제 조성물을 제공한다.

상기 조성물은 화장료 조성물로 이용되어 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 바디에센스, 메이크업 베이스, 파운데이션, 염모제, 샴푸, 린스 또는 바디 세정제 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

또한 상기 조성물은 의약용 조성물로 이용되어 연고 겔, 크림, 패취, 또는 분무제 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 화장료 조성물로 사용 시, 화장료의 제형에 맞게 물질을 더 첨가할 수 있다. 이에 한정되는 것은 아니나 예를 들어, 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있고, 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있으며, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다. 또한 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되는데, 바람직하게는 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있으며, 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

나아가, 본 발명에 따른 상기 탱자나무 속 식물 추출물, 치자 속 식물 추출물, 또는 이들의 혼합물은 그 외 다양한 형태로 제제화될 수 있으며, 상기 제제로는 예를 들면, 이에 한정되지는 않으나 소독제, 살균 세정제 또는 식품 보존제가 포함된다.

상기 소독제는 본 발명의 탱자나무 속 식물 추출물, 치자 속 식물 추출물, 또는 이들의 혼합물을 그대로 사용하거나 적합한 농도가 되도록 피부학적 및 약리학적으로 허용되는 희석제 또는 용매로 희석하여 제조할 수 있다. 상기 소독제는 생물체의 표면 바람직하게는, 포유동물의 피부 가장 바람직하게는 인간의 피부에 사용될 수 있다. 또한, 상기 소독제는 무생물체의 표면 예를 들면, 나무, 금속, 유리, 세라믹, 플라스틱, 종이 및 천의 표면에 사용될 수 있다. 상기 소독제는 침지, 면봉, 분무 및 브러싱을 포함하는 방법을 사용하여 상기 생물체 또는 무생물체의 표면에 처리할 수 있다. 바람직하게는, 상기 소독제는 상처표면, 수술 전 피부소독, 수술기구의 소독, 도관 소독 등의 용도로 병원과 일반 가정에서 사용할 수 있다.

또한, 상기 살균 세정제의 경우에는 본 발명에 따른 탱자나무 속 식물 추출물, 치자 속 식물 추출물, 또는 이들의 혼합물 외에 세정제의 제조 분야에서 일반적으로 사용되는 하나 이상의 부형제 및 첨가제를 포함하여 당 분야의 공지의 방법에 따라 용이하게 제조될 수 있다. 상기 살균 세정제는 주방용 또는 식품용으로 사용될 수 있으며, 주방용 살균 세정제에는 탱자나무 속 식물 추출물, 치자 속 식물 추출물, 또는 이들의 혼합물 외에 음이온계 계면활성제, 비이온계 계면활성제, 양쪽성 계면활성제 등을 추가로 포함할 수 있다. 음이온계 계면활제의 예로는 알킬벤젠설포네이트, 알파올레핀설페이트, 소듐 또는 암모늄라우릴에테르설페이트 등이 있으며, 비온온계 계면활성제의 예로는 지방산 아미드, 알킬폴리글루코시드, 에톡시화 지방알콜계, 에톡시화 노닐 페놀계 등이 있다. 양쪽성 계면활성제의 예로는 베타인계 계면활성제, 아민 옥사이드 등이 있다. 상기 계면활성제 외에 향, 색소 및 물과 같은 희석제를 선택적으로 첨가할 수 있다.

식품용 살균 세정제의 경우에는 본 발명에 따른 탱자나무 속 식물 추출물, 치자 속 식물 추출물, 또는 이들의 혼합물에 식품학적으로 허용되는 용매 또는 희석제를 추가로 첨가하여 적절한 농도로 희석함으로써 제조할 수 있다. 상기 식품용 살균 세정제는 예를 들어, 과일류, 어류 및 육류 등의 살균 및 세척에 사용될 수 있다.

식품 보존제는 식품류의 보존성을 증강시키기기 위한 목적으로 본 발명의 따른 탱자나무 속 식물 추출물, 치자 속 식물 추출물, 또는 이들의 혼합물에 식품학적으로 허용되는 용매 또는 희석제를 추가로 첨가하여 제조할 수 있다. 본 발명의 식품 보존제는 식품의 제조 공정시 원료와 함께 배합하거나 별도의 수용성 현탁액으로 제조하여 첨가할 수도 있다. 또한, 상기 본 발명에 따른 식품 보존제를 사용하여 대상 식품을 침지시키거나 본 발명의 식품 보존제를 대상 식품에 분무할 수 있다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.

탱자나무( Poncirus trifoliata ) 과실 및 치자( Gardenia jasminoides ) 과실의 아세톤 추출물 제조

탱자나무 과실 및 치자 과실의 아세톤 추출물을 제조하기 위해, 경동시장 약재상가에서 탱자나무 과실 및 치자 과실을 구입하여 준비하였다. 건조하여 약재의 형태로 세절된 탱자나무 과실과 치자 과실 각각 100g을 99.5% 아세톤 1000ml과 혼합한 후 24℃에서 24시간 동안 방치하여 추출하였다. 추출물은 감압 흡입 여과기를 이용하여 슬러지와 용액으로 분리하고 용액만 취하였다. 이후 분리한 용액에서 아세톤을 제거하기 위해 농축기(Evaporator, Heidolph vv 2000)를 이용하여 42℃에서 4배 농축함으로써 탱자나무 과실 추출물 및 치자 과실 추출물을 각각 수득하였다.

탱자나무 과실 추출물 및 치자 과실 추출물의 항균 활성 측정

상기 실시예 1에서 수득한 탱자나무 과실 추출물 및 치자 과실 추출물의 항균활성을 측정하기 위해 MIC(minimum inhibitory concentration) 테스트를 수행하였다. 실험에는 공지의 기탁기관 ATCC(American Type Culture Collection)와 중앙대학교 병원 호흡기 내과로부터 스타필로코커스 속 세균(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA), 바실러스 속 세균(Bacillus anthracis ATCC 1457), 아시네토박터 속 세균(Acinetobacter baumannii), 엔테로코커스 속 세균(vancomycin-resistant enterococci, VRE)을 분양받아 사용하였다.

<2-1> 탱자나무 과실 추출물의 항균 활성 측정

탱자나무 과실 추출물의 항균 활성을 측정하기 위해, 우선 분양받은 균주들은 단일 콜로니를 각각 10ml의 영양배지(Nutrient broth) 배양액이 들어 있는 200ml 플라스크에 접종하고, 37℃에서 12시간 동안 교반하면서 배양하였다. 이후 10ml의 영양배지가 들어 있는 200ml 플라스크에 초기 흡광도(OD: Optical Density) 값이 0.1이 되도록 상기 배양액을 접종하여 7시간 동안 계대 배양하였다. 이와 같은 방법으로 활성화된 각각의 시험 균주 배양액을 배양접시 당 균수가 2 X 108이 되도록 조절하여 60℃의 굳지 않은 영양한천배지 13ml와 함께 100μl 페트리배양접시에 부은 뒤 잘 굳혔다. 그리고 56℃ 배양기에서 24시간 동안 건조시켜 습기를 완전히 제거한 10mm 페이퍼 디스크(Toyo Roshi Kaisha, Ltd, Japan)를 상기 페트리배양접시 위에 올려놓고, 준비해둔 탱자나무 과실 추출물을 각각의 디스크에 100μl 씩 주입한 다음 37℃ 배양기에서 12시간 동안 배양하였다. 배양 후 생성된 세균의 생육저지대, 즉, 투명환(Clear zone)을 확인하고 베니어 캘리퍼스(Vernier calipers)를 사용하여 직경을 측정하였다.

탱자나무 과실 추출물의 항균 활성

세균	추출물 농도
세균	121.5	60.8	30.4	15.2	7.6	3.8
Bacillus anthracis	20^a	17	14	N.D.^b	N.D.	N.D.
MRSA	15	12	N.D.	N.D.	N.D.	N.D.
VRE	15	13	N.D.	N.D.	N.D.	N.D.
Acinetobacterbaumannii	15	14	N.D.	N.D.	N.D.	N.D.
^a페이퍼디스크(10mm)의 직경을 포함하는 저해환 ^bNot Detected (농도 단위: g/ml, 활성 단위: mm)

그 결과, 표 1 및 도 1에 나타난 바와 같이, 탱자나무 과실 추출물이 실험에 사용된 모든 병원성 균주에 대해 항균 효과를 나타내는 것을 알 수 있으며, 특히, 탄저균인 바실러스 안트라시스 (B. anthracis)에 대한 활성이 가장 우수하고, 다음으로 메티실린-내성 스타필로코커스균 (Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus, MRSA)에 대한 항균 활성도 우수한 것으로 나타났다.

상기로부터 본 발명의 탱자나무 과실 추출물은 우수한 항균활성을 나타내는 특징이 있으므로 항균용 조성물로 사용될 수 있음을 알 수 있다.

<2-2> 치자 과실 추출물의 항균 활성 측정

치자 과실 추출물의 항균 활성을 알아보기 위해, 상기 실시예 <2-1>과 같은 방법으로 각각의 균주에 대한 페트리배양접시를 준비하고, 준비해둔 치자 과실 추출물을 각각의 디스크에 100μl 씩 주입한 다음 37℃ 배양기에서 12시간 동안 배양하였다. 배양 후 생성된 세균의 생육저지대, 즉, 투명환(Clear zone)을 확인하고 베니어 캘리퍼스(Vernier calipers)를 사용하여 직경을 측정하였다.

치자 과실 추출물의 항균 활성

세균	추출물 농도
세균	111.0	55.5	27.8	13.9	6.9	3.5
Bacillus anthracis	20 ^a	15	14	14	11	N.D. ^b
MRSA	13	12	N.D.	N.D.	N.D.	N.D.
VRE	12	N.D.	N.D.	N.D.	N.D.	N.D.
Acinetobacterbaumannii	12	N.D.	N.D.	N.D.	N.D.	N.D.
^a페이퍼디스크(10mm)의 직경을 포함하는 저해환 ^bNot Detected (농도 단위: g/ml, 활성 단위: mm)

그 결과, 표 2 및 도 2에 나타난 바와 같이, 치자 과실 추출물이 실험에 사용된 모든 병원성 균주에 대해 항균 효과를 나타내는 것을 알 수 있으며, 특히, 탄저균인 바실러스 안트라시스 (B. anthracis)에 대한 활성이 가장 우수하고, 다음으로 반코마이신-내성 엔테로코커스(Vancomycin-Resistant enterococcus)에 대한 항균 활성도 우수한 것으로 나타났다.

상기로부터 본 발명의 치자 과실 추출물은 우수한 항균활성을 나타내는 특징이 있으므로 항균용 조성물로 사용될 수 있음을 알 수 있다.

<2-2> 탱자나무 과실 추출물 및 치자 과실 추출물 혼합물의 항균 활성 측정

본 발명자들은 항균활성이 우수한 것으로 확인된 탱자나무 과실 추출물 및 치자 과실 추출물을 혼합할 경우, 혼합에 따른 항균 활성 상승효과가 있는지 알아보았다. 이를 위해, 상기 실시예 <2-1>과 같은 방법으로 각각의 균주에 대한 페트리배양접시를 준비하고, 탱자나무 과실 추출물 및 치자 과실 추출물을 9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 5:5, 4:6, 3:7, 2:8, 및 1:9의 비율로 혼합하여 각각의 디스크에 100μl 씩 주입한 다음 37℃ 배양기에서 12시간 동안 배양하였다. 배양 후 생성된 세균의 생육저지대, 즉, 투명환(Clear zone)을 확인하고 베니어 캘리퍼스(Vernier calipers)를 사용하여 직경을 측정하였다.

탱자나무 과실 추출물 및 치자 과실 추출물 혼합물의 항균 활성

세균	혼합비
세균	탱자열매	9:1	치자
Bacillus anthracis	17 ^a	18	15
MRSA	14	15	13
VRE	14	15	13
Acinetobacter baumannii	13	14	12
(활성 단위: mm)

그 결과, 표 3 및 도 3에 나타난 바와 같이, 탱자나무 과실 추출물 및 치자 과실 추출물을 혼합한 경우 각각의 추출물에서보다 우수한 항균 효과를 나타내는 것을 알 수 있다. 모든 실험 균주에서 보다 우수한 저해환을 형성하는 것으로 나타났으며, 특히, 반코마이신-내성 엔테로코커스(Vancomycin-Resistant enterococcus)에 대한 항균 활성이 가장 우수한 것으로 나타났다.

상기로부터 탱자나무 과실 추출물과 치자 과실 추출물을 혼합할 경우 각각의 추출물에서 나타낸 항균 활성보다 우수한 항균 활성을 나타내는 특징이 있음을 알 수 있다.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해되어야 한다.

Claims

탱자나무 속(Poncirus sp.) 식물 추출물, 치자 속(Gardenia sp.) 식물 추출물, 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 항균용 조성물.
제1항에 있어서,
상기 탱자나무 속 식물 추출물 또는 치자 속 식물 추출물은 유기용매를 첨가하여 가용 추출한 용매추출물인 것을 특징으로 하는, 조성물.
제2항에 있어서,
상기 유기용매는 물, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트, 및 메틸렌클로라이드로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 조성물.
제1항에 있어서,
상기 항균용 조성물은 바실러스 안트라시스(Bacillus anthracis) 또는 항생제 내성 균주에 대하여 항균 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는, 조성물.
제4항에 있어서,
상기 항생제는 반코마이신(Vancomycin), 페니실린(Penicillin), 메티실린(Methicillin), 세팔로신(Cephalothin), 에리스로마이신(Erythromycin), 노플로삭신(Norfloxacin), 옥사실린(Oxacillin), 겐타마이신(Gentamicin), 클로람페니콜(Chloramphenicol), 설폰아마이드(Sulfonamides), 스트렙토마이신(Streptomycin), 카바페넴(carbapenem), 및 테트라사이클린(Tetracyclin)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 조성물.
제4항에 있어서,
상기 균주는 엔테로코커스 속(Enterococcus sp.), 스타필로코커스 속(Staphylococcus sp.), 대장균(Escherichia coli), 클렙시엘라 속(Klebsiella sp.), 아시네토박터 속(Acinetobacter sp.), 스트렙토코커스 속(Streptococcus sp.) 및 살모넬라 속(Salmonella sp.)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 조성물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 포함하는 감염질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제7항에 있어서,
상기 감염질환은 탄저병, 요로감염, 여드름, 아토피 피부염, 지루피부염, 모낭염, 화농증, 염증, 치주질환, 위질환, 식중독, 패혈증, 패혈성 쇼크, 심장 내막염, 장염, 뇌수막염, 골수염, 척추 카리에스, 폐렴, 골수염, 임균 감염, 및 수막구균 감염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 조성물.
탱자나무 속(Poncirus sp.) 식물 추출물, 치자 속(Gardenia sp.) 식물 추출물, 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 피부 외용제 조성물.
제9항에 있어서,
상기 조성물은 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 바디에센스, 메이크업 베이스, 파운데이션, 염모제, 샴푸, 린스 및 바디 세정제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 제품에 포함되는 것을 특징으로 하는, 조성물.
제9항에 있어서,
상기 조성물은 연고 겔, 크림, 패취 및 분무제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 제형을 가지는 것을 특징으로 하는, 조성물.