KR20200006508A - 색소가 제거된 치자 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 피부질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 색소가 제거된 치자 추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 피부 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 상기 색소가 제거된 치자 추출물이 색소가 제거되지 않은 치자 추출물에 비해 알레르기성 피부질환에 효과가 있으므로, 알레르기성 피부 질환 특히, 아토피 피부염에 매우 유용하게 사용될 수 있다.

Description

색소가 제거된 치자 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 피부질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물{Composition for preventing, ameliorating or treating allergic skin disease comprising pigment-removed Gardenia jasminoides extract as effective component}
본 발명은 색소가 제거된 치자 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 피부 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
알러지(allergy)는 면역 시스템의 오작동으로 보통 사람에게는 별 영향이 없는 물질이 어떤 사람에게는 두드러기, 가려움, 콧물 또는 기침 등의 이상 과민 반을 일으키는 것을 말하며, WHO에서는 이미 알러지 질환을 21세기에 가장 문제가 되는 제7대 질병으로 포함하였다. 주요한 알러지 질환으로는 아토피 피부염, 천식, 비염 등이 있다. 알러지는 현재까지 뚜렷한 치료제가 없을 정도로 현대의학의 난치병에 가까운 질환이다. 현재 알러지 질환 치료에 있어서 근본적인 치료제가 아닌 항히스타민제, 효과는 우수하나 부작용이 많은 스테로이드의 사용으로 질환은 더욱 악화되고 환자의 경제적 부담은 계속 증가하고 있다.
대체로, 아토피 증상이나 알러지 질환은 산업의 발달, 식생활의 서구화 및 인스턴트화, 심각한 환경오염 발생, 새집 증후군과 같은 신종 질병 등과 함께 동반되면서, 21세기에 접어들어 더욱 꾸준히 증가하고 있는 추세이다. 알러지 질환의 발병 추세는 국내뿐 아니라 서구 사회나, 심지어 개발이 진행되고 있는 여러 후진국에서조차도 심각하게 발생하고 있으므로, 이들 질환 치료제는 범세계적인 시장수요를 창출할 것으로 예상된다.
아토피성 피부염(atopic dermatitis)은 심한 소양감(가려움증), 습진성 피부질환 및 피부 건조증 등을 동반하는 만성의 재발성 염증 피부질환으로서 1930년대 Wise & Sulzberger에 의해 처음 알려졌다. 아토피성 피부염은 대부분 유아기나 소아 때 발생하여 호전과 악화를 반복하다가 보통은 성장하면서 자연스럽게 사라지는 것이 보통이나 간혹 성인기까지 병변이 지속되기도 한다. 현재 국내 아토피성 피부염 환자는 어린이에게서 10~30%의 유병률을 보이고 있으며 성인에게서는 1~3%의 유병률을 보이고 있다. 아토피성 피부염은 환경적인 요소와 유전적인 소인이 모두 관여하는 복합적인 질환으로 알려져 있는데, 최근 아토피성 피부염의 발생률의 증가에 미치는 요인으로는 대기오염, 핵가족화, 모유 수유의 감소, 가계 수입과 교육 수준의 증가, 항생제 사용의 증가로 인한 항원에 대한 노출의 증가, 주거환경 변화, 공업 발달로 인한 새로운 항원 물질의 등장 등 여러 요인들이 복합적으로 관여하는 것으로 여겨진다.
한편, 치자는 꼭두서니과(Rubiaceae) 식물인 치자나무(Gardenia jasminoides)의 열매를 말한다. 치자는 소염제, 이뇨제, 지혈제로 사용하거나 황달의 치료에 활용할 수 있다고 알려져 있고, 초나 재를 매염제로 이용해 헝겊이나 단무지를 노랗게 물들이고, 빈대떡이나 전을 노란색으로 물들일 때 사용된다.
치자 관련 선행기술로는 한국등록특허 제1089637호에 치자 추출물에 β-글루코시다제를 처리하는 단계를 포함하는 항염증 활성이 증가된 치자 추출물의 제조 방법이 개시되어 있고, 한국등록특허 제165716호에 치자(Gardenia jasminoides) 추출물의 분획물을 유효성분으로 함유하는 알러지 질환의 예방 또는 치료용 조성물이 개시되어 있으나, 본 발명의 색소가 제거된 치자 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 피부질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것은 개시되어 있지 않다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명은 색소가 제거된 치자 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 피부질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공하고, 본 발명의 유효성분인 색소가 제거된 치자 추출물이 아토피 피부염 동물모델에서 긁는 횟수가 줄고, 염증세포 및 비만세포가 감소한 것을 확인하였으며, 특히 색소를 제거하지 않은 치자 추출물에 비해서도 긁는 횟수, 염증세포 및 비만세포 수가 통계적으로 유의미하게 더 감소한 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 색소가 제거된 치자(Gardenia jasminoides) 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 색소가 제거된 치자(Gardenia jasminoides) 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 질환의 예방 또는 개선용 의약외품을 제공한다.
또한, 본 발명은 색소가 제거된 치자(Gardenia jasminoides) 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능성식품 조성물을 제공한다.
본 발명은 색소가 제거된 치자 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 피부 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 상기 색소가 제거된 치자 추출물이 색소가 제거되지 않은 치자 추출물에 비해 알러지성 피부질환에 효과가 있으므로, 알러지성 피부 질환 특히, 아토피 피부염에 매우 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 색소를 제거하지 않은 치자 추출물(A)과 본 발명에 따른 색소가 제거된 치자 추출물(B)의 사진이다.
도 2는 알러지성 아토피 피부염 질환 동물모델에서 정상군(Normal), 대조군(Control), 치자 추출물 투여군(GJE 1%), 치자 탈색 추출물 투여군(GJE-CR 1%), 양성대조군(Tacrolimus)의 육안평가 결과이다.
도 3은 알러지성 아토피 피부염 질환 동물모델에서 정상군(Normal), 대조군(Control), 치자 추출물 투여군(GJE 1%), 치자 탈색 추출물 투여군(GJE-CR 1%), 양성대조군(Tacrolimus)의 긁는 횟수(가려움 횟수)를 나타낸 결과이다. ***는 정상군(Normal) 대비 대조군(Control)의 긁는 횟수가 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, p<0.001이고, ###는 대조군(Control) 대비, 치자 추출물 투여군(GJE 1%), 치자 탈색 추출물 투여군(GJE-CR 1%), 양성대조군(Tacrolimus)의 긁는 횟수가 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, p<0.001이다. $$$는 본 발명의 치자 탈색 추출물 투여군(GJE-CR 1%)이 치자 추출물 투여군(GJE 1%)에 대비하여 통계적으로 유의미하게 긁는 횟수가 감소하였다는 것으로, p<0.001을 의미한다.
도 4는 알러지성 아토피 피부염 질환 동물모델에서 정상군(Normal), 대조군(Control), 치자 추출물 투여군(GJE 1%), 치자 탈색 추출물 투여군(GJE-CR 1%), 양성대조군(Tacrolimus)의 염증세포를 등(A), 귀(B)에서 확인한 결과이다. **는 정상군(Normal) 대비 대조군(Control)에서 염증세포가 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, p<0.01이고, ##, ###는 대조군(Control) 대비, 치자 추출물 투여군(GJE 1%), 치자 탈색 추출물 투여군(GJE-CR 1%), 양성대조군(Tacrolimus)의 비만세포가 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것이며, ##는 p<0.01이고, ###는 p<0.001이다. $, $$는 본 발명의 치자 탈색 추출물 투여군(GJE-CR 1%)이 치자 추출물 투여군(GJE 1%)에 대비하여 통계적으로 유의미하게 염증세포가 감소하였다는 것으로, ##는 p<0.01이고, ###는 p<0.001을 의미한다.
도 5는 알러지성 아토피 피부염 질환 동물모델에서 정상군(Normal), 대조군(Control), 치자 추출물 투여군(GJE 1%), 치자 탈색 추출물 투여군(GJE-CR 1%), 양성대조군(Tacrolimus)의 비만세포(mast cells)를 등(A), 귀(B)에서 확인한 것이다. **는 정상군(Normal) 대비 대조군(Control)에서 비만세포가 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, p<0.01이고, ##, ###는 대조군(Control) 대비, 치자 추출물 투여군(GJE 1%), 치자 탈색 추출물 투여군(GJE-CR 1%), 양성대조군(Tacrolimus)의 비만세포가 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것이며, ##는 p<0.01이고, ###은 p<0.001이다. $$는 본 발명의 치자 탈색 추출물 투여군(GJE-CR 1%)이 치자 추출물 투여군(GJE 1%)에 대비하여 통계적으로 유의미하게 비만세포가 감소하였다는 것으로, p<0.01을 의미한다.
도 6은 알러지성 아토피 피부염 질환 동물모델에서 정상군(Normal), 대조군(Control), 치자 추출물 투여군(GJE), 치자 탈색 추출물 투여군(GJE-CR), 양성대조군인 프레드니솔론(prednisolone)의 긁는 횟수(가려움 횟수)를 일자별로 나타낸 결과로, (A)은 100mg/kg의 약물을 투여한 것이고, (B)는 200mg/kg의 약물을 투여한 것이다. ***는 정상군(Normal) 대비 대조군(Control)의 긁는 횟수가 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, p<0.001이고, #, ##, ###는 대조군(Control) 대비, 치자 추출물 투여군, 치자 탈색 추출물 투여군, 프레드니솔론(prednisolone)의 긁는 횟수가 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, #은 p<0.05이고, ##은 p<0.01이며, ###은 p<0.001이다. $는 본 발명의 치자 탈색 추출물 투여군(GJE-CR)이 치자 추출물 투여군(GJE)에 대비하여 통계적으로 유의미하게 긁는 횟수가 감소하였다는 것으로, p<0.05임을 의미한다.
본 발명은 색소가 제거된 치자(Gardenia jasminoides) 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
상기 알러지성 질환은 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 알러지성 피부염(allergic dermatitis), 접촉성 피부염, 두드러기, 가려움증, 곤충 알러지, 식품 알러지, 약품 알러지, 부종, 과민증(anaphylaxis), 알러지성 비염(allergic rhinitis), 천식(asthma) 및 알러지성 결막염(allergic conjunctivitis) 중에서 선택된 어느 하나인 것이 바람직하지만 이에 한정하는 것은 아니다.
상기 색소는 크로신(Crocin)인 것이 바람직하나, 치자 추출물에 포함된 색소라면 특별히 한정되지 않는다.
본 발명의 색소가 제거된 치자 추출물은 하기의 제조방법으로 제조하는 것이 바람직하지만 이에 한정하는 것은 아니다.
(1) 치자에 추출용매를 가하여 1차 추출하고, 여과하여 1차 여액을 획득하는 단계;
(2) 상기 단계 (1)에서 1차 여액을 획득하고 남은 잔사에 추출용매를 가하여 2차 여액을 획득하는 단계;
(3) 상기 단계 (1) 및 단계 (2)에서 획득한 1차 여액과 2차 여액을 혼합한 후, 활성탄을 첨가하여 치자 추출물의 색소를 활성탄에 흡착시키는 단계; 및
(4) 상기 단계 (3) 이후, 상기 활성탄을 제거한 후, 여과, 농축 및 건조하여 색소가 제거된 치자 추출물을 획득하는 단계.
상기 단계 (3)에서 활성탄은 특별히 제한하는 것은 아니지만, 과립형 또는 세립형인 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 세립형(가루 또는 분말 형태)이다.
상기 추출용매는 물, C1~C4의 저급알코올 또는 이들의 혼합물인 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 물 또는 에탄올이지만 이에 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물에 포함되는 약학적으로 허용되는 담체는 제제 시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로즈 용액, 말토덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 상기 성분들 이외에 항산화제, 완충액, 정균제, 희석제, 계면활성제, 결합제, 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제 또는 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여는 주사 또는 피부에 도포하는 방법으로 투여할 수 있는 것이다. 상기 피부에 도포하는 경우는 연고제, 첩부제 또는 분무제의 제형으로 제조된 것을 이용하는 것이 람직하다. 본 발명의 약학 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다.
또한, 본 발명은 색소가 제거된 치자(Gardenia jasminoides) 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 질환의 예방 또는 개선용 의약외품에 관한 것이다.
상기 의약외품은 피부외용제인 것이 바람직하지만 이에 한정하는 것은 아니다.
본 발명에서 용어, '의약외품'은 사람이나 동물의 질병을 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적을 사용되는 것, 인체에 대한 작용이 약하거나 인체에 직접 작용하지 아니하며, 기구 또는 기계가 아닌 것과 이와 유사한 것, 감염형 예방을 위하여 살균, 살충 및 이와 유사한 용도로 사용되는 제제 중 하나에 해당하는 물품으로서, 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 의미한다. 또한 상기 의약외품은 피부외용제 및 개인 위생용품을 포함한다.
본 발명의 색소가 제거된 치자(Gardenia jasminoides) 추출물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 상기 피부외용제는 특별히 이에 제한되지 않으나, 바람직하게는 연고제, 로션제, 스프레이제, 패취제, 크림제, 산제, 현탁제, 겔제 또는 젤의 형태로 제조되어 사용될 수 있다. 상기 개인위생용품에는 특별히 이에 제한되지 않으나, 바람직하게는 비누, 화장품, 물티슈, 휴지, 샴푸, 피부 크림, 얼굴 크림, 치약, 립스틱, 향수, 메이크업, 파운데이션, 볼터치, 마스카라, 아이섀도우, 선스크린 로션, 모발 손질 제품, 에어프레쉬너 겔 또는 세정 겔일 수 있다. 또한, 본 발명의 의약외품 조성물의 또 다른 예로 소독청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 또는 필터 충진제가 있다.
또한, 본 발명은 색소가 제거된 치자(Gardenia jasminoides) 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능성식품 조성물에 관한 것이다.
상기 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것이 바람직하지만, 이에 한정하지 않는다.
본 발명의 건강기능식품 조성물은 색소가 제거된 치자 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 혼합하여 제조될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 제조될 수 있다. 상기 색소가 제거된 치자 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 카라멜, 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 수프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 중에서 선택된 어느 하나의 형태일 수 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다. 즉, 상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 건강기능식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 및 천연 풍미제, 착색제 및 증진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 또한, 천연 과일 주스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 상기의 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 또한, 본 발명의 건강기능식품 조성물은 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있으며, 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 단당류, 말토스, 슈크로스와 같은 이당류, 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 다당류, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 크게 중요하지 않지만, 본 발명의 조성물 100g에 대하여, 0.01~0.04g인 것이 바람직하고, 더욱 바람직하게는 0.02~0.03g을 포함하는 것이지만 이에 한정하지 않는다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다.
이하, 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.
실시예 1. 색소가 제거된 치자 추출물의 제조
치자의 색소가 피부에 잔류하는 문제점을 해소하기 위해 활성탄으로 치자 색소를 흡착함으로써 치자 고유의 색소인 크로신(Crocin)이 제거된 치자 추출물을 제조하였다.
(1) 색소가 제거된 치자 에탄올 추출물의 제조
① 1차 치자 추출액 제조: 100g의 치자를 70%(v/v) 에탄올 1,000㎖에 넣어(10배량) 2시간 동안 55℃ 수욕상에서 추출한 후 여과하여 1차 추출액을 획득하였다.
② 2차 치자 추출액 제조: 상기 여액을 제외한 잔사에, 다시 70%(v/v) 에탄올 1,000㎖을 넣어 1차 치자 추출액과 동일한 조건으로 추출 후, 여과하여 2차 추출액을 획득하였다.
③ 색소제거: 우선적으로 과립 형태(carbon activated granular) 및 세립 형태(carbon activated powder)의 활성탄 2가지를 선택하여 비교하였다.
상기 1, 2차 추출액을 혼합한 치자 70%(v/v) 에탄올 추출물 150㎖에 대하여, 5g의 과립 형태의 활성탄과 세립 형태의 활성탄을 각각 첨가하고 20시간 동안 교반하여 색소를 제거하였다. 그 결과, 세립 형태의 활성탄으로 사용한 경우 지표성분인 geniposide 함량이 높아, 본 발명의 실시예에서 사용한 색소가 제거된 치자 추출물은 세립형 활성탄으로 색소를 제거한 것을 채택하였다.
④ 여과, 농축 및 건조: 상기 색소가 제거된 치자 추출물은 여과하고, 원심분리하여 농축(60℃ 이하) 후 건조하여 약 25g의 치자 추출물을 획득하였다(도 1).
(2) 색소가 제거된 치자 물 추출물의 제조
① 1차 치자 추출액 제조: 100g의 치자를 물 1,000㎖에 넣어(10배량) 2시간 동안 55℃ 수욕상에서 추출한 후 여과하여 1차 추출액을 획득하였다.
② 2차 치자 추출액 제조: 상기 여액을 제외한 잔사에, 다시 물 1,000㎖을 넣어 1차 치자 추출액과 동일한 조건으로 추출 후, 여과하여 2차 추출액을 획득하였다.
③ 색소제거: 상기 1, 2차 추출액을 혼합한 치자 물 추출물 150㎖에 대하여, 5g의 세립 형태의 활성탄을 첨가하고, 20시간 동안 교반하여 색소를 제거하였다.
④ 여과, 농축 및 건조: 상기 색소가 제거된 치자 물 추출물은 여과하고, 원심분리하여 농축(60℃ 이하) 후 건조하여 치자 물 추출물을 획득하였다.
이후, 본 실시예 1에서 획득한 색소를 제거한 치자 추출물을 이용하여 알러지성 아토피 피부염 효능을 평가하였으며, 비교예로서 색소를 제거하지 않은 치자 추출물을 사용하였다.
실시예 2. 색소가 제거된 치자 에탄올 추출물을 도포한 알러지성 아토피 피부염 동물모델에서 아토피 피부염의 효과 확인
알러지성 아토피 유발 항원인 천연 집먼지 진드기 유래 성분을 포함하는 연고(AD Biostir, 일본) 100mg을 8주령 NC/Nga 마우스 피부에 3~4일 간격으로 21일 동안 6회 도포하여 알러지성 아토피 피부염을 유발하였다. 알러지성 아토피 피부염 유발 7일 후, 1mg/㎖의 약물(치자 추출물(GJE 1%), 색소가 제거된 치자 추출물(GJE-CR 1%) 및 타크로리무스(tarolimus))을 14일 동안 1일 1회 도포하였다.
이후, 알러지 피부염이 유발된 마우스에 주 1회 20분 동안 귀와 등의 가려움 횟수 및 피부손상 정도를 평가하였다. 모든 측정 결과는 평균(mean)과 표준편차(standard deviation; SD)로 나타내었으며, 실험군 간의 차이는 one-way ANOVA를 사용하여 통계학적 분석을 수행하였으며, p<0.05 값인 경우에 통계적으로 유의성이 있는 것으로 판정하였다.
그 결과, 도 2에 개시한 바와 같이 알러지성 피부염이 유발된 마우스의 피부 상태가 본 발명의 색소가 제거된 치자 에탄올 추출물을 처리한 경우 매우 호전된 것을 확인하였고, 긁는 횟수(가려움 횟수)가 알러지성 아토피 피부염이 유발된 대조군(Control)에 비해 현저하게 감소하였을 뿐만 아니라, 색소를 제거하지 않은 치자 추출물에 비해서도 통계적으로 유의미하게 감소한 것을 확인하였다(도 3).
실시예 3. 색소가 제거된 치자 에탄올 추출물을 도포한 알러지성 아토피 피부염 동물에서 염증세포의 변화 분석
알러지 피부염이 유발된 마우스의 귀와 등 피부 조직을 적출하여 H&E(hematoxylin and eosin) 염색을 통해 이미지 측정 프로그램(Solution FL ver 9.1)을 이용하여 염증세포 침윤 변화를 측정하였다. 모든 측정 결과는 평균(mean)과 표준편차(standard deviation; SD)로 나타내었으며, 실험군 간의 차이는 one-way ANOVA를 사용하여 통계학적 분석을 수행하였으며, p<0.05 값인 경우에 통계적으로 유의성이 있는 것으로 나타났다.
그 결과, 도 4에 개시한 바와 같이 본 발명의 색소가 제거된 치자 에탄올 추출물을 처리한 동물모델의 귀 및 등 피부조직에서 측정한 염증세포 수가 알러지성 아토피 피부염군(Control) 염증세포 수에 비해 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것을 확인하였으며, 특히, 색소를 제거하지 않은 치자 추출물에 비해서도 염증세포의 감소가 통계적으로 차이를 보였다.
실시예 4. 색소가 제거된 치자 에탄올 추출물을 처리한 알러지성 아토피 피부염 동물에서 비만세포(mast cell) 수 분석
알러지 피부염 마우스의 귀와 등 피부 조직을 적출하여 Toluidine blue (TB) 염색을 통해 이미지측정프로그램(iSolution FL ver 9.1)을 이용하여 비만세포 수를 측정하였다. 모든 측정 결과는 평균(mean)과 표준편차(standard deviation; SD)로 나타내었으며, 실험군 간의 차이는 one-way ANOVA를 사용하여 통계학적 분석을 수행하였으며, p<0.05 값인 경우에 통계적으로 유의성이 있는 것으로 판정하였다.
그 결과 도 5에 개시한 바와 같이, 본 발명의 색소가 제거된 치자 추출물을 처리한 동물모델에서의 등 및 귀의 조직에서 비만세포의 수가 알러지성 아토피 피부염 질환 동물 모델로부터 측정한 비만세포의 수에 비해 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것을 확인하였으며, 특히, 색소를 제거하지 않은 치자 추출물에 비해서도 비만세포 수의 감소가 통계적으로 차이를 보였다.
실시예 5. 색소가 제거된 치자 물 추출물을 경구투여한 알러지성 아토피 피부염 동물모델에서 가려움 횟수 측정
알러지성 아토피 피부염은 8주령 NC/Nga 마우스의 피부에 알러지성 아토피 유발 항원인 천연 집먼지 진드기 유래 성분을 포함하는 연고(AD Biostir, 일본) 100mg을, 3~4일 간격으로 21일 동안 6회 도포하여 유발하였다. 실험시작일에 4% SDS 150㎕를 도포하고, 1시간 방치한 후, 집먼지 진드기 항원 100mg을 등과 양쪽 귀에 각각 적용하였다. 알러지성 아토피 피부염 유발 7일 후, 100mg/kg 또는 200mg/kg의 약물(치자 추출물, 색소가 제거된 치자 추출물)을 14일 동안 1일 1회 경구투여하였다.
알러지 피부염이 유발된 동물모델에서, 약물의 투여에 따른 효과를 비교하기 위하여, 주 1회 20분 동안 귀와 등의 가려움 횟수를 평가하였다. 모든 측정 결과는 평균(mean)과 표준편차(standard deviation; SD)로 나타냈으며, 실험군 간의 차이는 one-way ANOVA를 사용하여 통계학적 분석을 수행하였고, p<0.05 값인 경우에 통계적으로 유의성이 있는 것으로 판정하였다.
그 결과, 도 6에 개시한 바와 같이 알러지성 피부염이 유발된 마우스는 알러지 피부염 유발 7일 후부터 긁는 횟수가 정상군에 대비하여 통계적으로 유의미하게 증가하였다. 알러지성 피부염이 유발된 군(Control)에 비해 치자 추출물, 색소가 제거된 치자 추출물 및 양성대조군을 경구투여한 군은 통계적으로 유의미하게 긁는 횟수가 감소하였다. 특히, 본원 발명의 색소가 제거된 치자 물 추출물을 투여한 경우, 치자 추출물에 비해 긁는 횟수가 통계적으로 유의미하게 더 감소하였다는 것을 확인하였다.

Claims (7)

  1. 색소가 제거된 치자(Gardenia jasminoides) 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 알러지성 질환은 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 알러지성 피부염(allergic dermatitis), 접촉성 피부염, 두드러기, 가려움증, 곤충 알러지, 식품 알러지, 약품 알러지, 부종, 과민증(anaphylaxis), 알러지성 비염(allergic rhinitis), 천식(asthma) 및 알러지성 결막염(allergic conjunctivitis) 중에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 알러지성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 색소는 크로신(Crocin)인 것을 특징으로 하는 알러지성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 색소가 제거된 치자 추출물은 하기의 제조방법으로 제조하는 것을 특징으로 하는 알러지성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물:
    (1) 치자에 추출용매를 가하여 1차 추출하고, 여과하여 1차 여액을 획득하는 단계;
    (2) 상기 단계 (1)에서 1차 여액을 획득하고 남은 잔사에 추출용매를 가하여 2차 여액을 획득하는 단계;
    (3) 상기 단계 (1) 및 단계 (2)에서 획득한 1차 여액과 2차 여액을 혼합한 후, 활성탄을 첨가하여 치자 추출물의 색소를 활성탄에 흡착시키는 단계; 및
    (4) 상기 단계 (3) 이후, 상기 활성탄을 제거한 후, 여과, 농축 및 건조하여 색소가 제거된 치자 추출물을 획득하는 단계.
  5. 색소가 제거된 치자(Gardenia jasminoides) 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 질환의 예방 또는 개선용 의약외품.
  6. 제5항에 있어서, 상기 의약외품은 피부외용제인 것을 특징으로 하는 의약외품.
  7. 색소가 제거된 치자(Gardenia jasminoides) 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능성식품 조성물.
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