KR20120083448A

KR20120083448A - 항염증성 블렌드를 포함하는 조성물

Info

Publication number: KR20120083448A
Application number: KR1020127011431A
Authority: KR
Inventors: 시마르나 카우르; 마이클 사우설; 사만다 디. 터커-사마라스; 클로드 살리우; 칼리드 마흐무드
Original assignee: 존슨 앤드 존슨 컨수머 캄파니즈, 인코포레이티드
Priority date: 2009-10-02
Filing date: 2010-10-01
Publication date: 2012-07-25
Also published as: ES2674569T3; KR101750296B1; CN102573820A; US20110081433A1; CA2774026A1; EP2482809B1; EP2482809A1; BR112012007512A2; US8318217B2; CN102573820B; RU2012117746A; WO2011041648A1; CA2774026C; HK1171954A1; IN2012DN02441A; RU2554766C2

Abstract

본 발명은 NFκB-억제제 및 항염증성 화합물을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 항염증성 화합물은 NFκB-억제제 이외의 것이며 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하이다.

Description

항염증성 블렌드를 포함하는 조성물{COMPOSITIONS COMPRISING AN ANTI-INFLAMMATORY BLEND}

항염증성 화합물들의 블렌드를 포함하는 조성물이 제공된다. 조성물은 예컨대 피부에 국소 도포하기에 유용하다.

항염증성 화합물은 공지되어 있다. 본 발명자는 향상된 능력을 제공하는 항염증성 화합물들의 새로운 배합물을 확인할 필요가 있음을 인식하였다.

본 발명자는 NFκB-억제제로 공지된 항염증성 화합물이 NFκB-경로를 통한 면역 반응을 감소시킬 수 있으면서 때로 염증성 사이토카인 IL-1의 방출을 촉진함을 밝혀냈다. 또한 본 발명자는 T-세포 수용체(T-cell receptor; TCR) 활성화제 피토헤마글루티닌으로 자극된 인간 림프구에 의한 사이토카인의 생성을 감소시키는 강한 능력을 갖는 항염증성 화합물, 특히 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 것이 면역 반응을 감소시킬 수 있지만 때로 염증성 사이토카인 IL-8의 방출을 촉진하는 경향이 있음을 밝혀냈다.

따라서, NFκB-억제제와 IC50이 낮은, 특히 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 항염증성 화합물의 배합물이 피부 및 기타 조직으로부터의 염증성 사이토카인 IL-1 및 IL-8 둘 모두의 방출을 놀랄 만큼 감소시키고 또한 일반적으로 피부 및 기타 조직에서 바람직한 NFκB-억제를 제공하는 조성물을 제공함이 지금에 와서야 발견되었다.

일 태양에서, 본 발명은 NFκB-억제제 및 항염증성 화합물을 포함하는 조성물을 제공한다. 항염증성 화합물은 NFκB-억제제 이외의 것이며, 본 명세서에 기재된 항염증 분석법에 따라 시험할 때 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하이다.

다른 태양에 따르면, 본 발명은 피부 노화의 징후를 치료하는 방법을 제공하며, 이는 이러한 치료를 필요로 하는 피부에 NFκB-억제제 및 항염증성 화합물을 포함하는 조성물을 국소적으로 도포하는 단계를 포함한다. 항염증성 화합물은 NFκB-억제제 이외의 것이며, 항염증 분석법에 따라 시험할 때 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하이다.

본 발명의 다른 특징 및 이점은 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용 및 특허청구범위로부터 명백할 것이다.

당업자는 본 명세서의 설명에 기초하여, 본 발명을 가장 완전한 범위까지 이용할 수 있을 것으로 여겨진다. 하기의 구체적인 실시 형태는 단지 예시적인 것으로 이해되어야 하며, 어떤 방식으로도 본 개시문헌의 나머지를 제한하는 것으로 이해되어서는 안된다.

달리 정의되지 않는다면, 본 명세서에서 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 숙련자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 또한, 본 명세서에서 언급된 모든 간행물, 특허 출원, 특허, 및 기타 참고 문헌이 참고로 포함된다. 달리 표시되지 않으면, 백분율은 중량 기준 백분율(즉, %(W/W))을 말한다. 달리 기술되지 않으면, 모든 범위는 종점을 포함하며, 예를 들어, "4 내지 9"는 종점 4 및 9를 포함한다.

본 명세서에 기재된 제품은 임의로 완성된 포장 형태일 수 있다. 일 실시 형태에 있어서, 패키지는 조성물을 함유하는 컨테이너, 이를 테면 플라스틱, 금속 또는 유리 튜브 또는 병 (jar)이다. 제품은 이러한 컨테이너를 보관하기 위한 플라스틱 또는 마분지 상자와 같은 추가의 패키징을 추가로 포함할 수 있다. 일 실시 형태에서, 제품은 본 발명의 조성물을 포함하며, 피부 노화의 징후를 치료하기 위해 조성물을 피부 또는 모발에 도포하는 것을 사용자에게 지시하는 설명서를 포함한다. 그러한 설명서는 컨테이너 상에, 라벨 삽입물에, 또는 임의의 추가의 패키징에 인쇄될 수 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "국소 도포"는 외피부, 두피, 또는 모발 상에 예를 들어 손 또는 어플리케이터, 예를 들어 와이프, 롤러 또는 스프레이의 사용에 의해 직접적으로 놓거나 또는 펴바름을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "화장용으로 허용가능한"은 이 용어가 설명하는 성분들이 과도한 독성, 불상용성, 불안정성, 자극, 알러지 반응 등이 없이 조직 (예를 들어, 피부 또는 모발)과의 접촉에 사용하기에 적합함을 의미한다.

특정 실시 형태에 있어서, 본 발명의 조성물은 피부 노화의 징후를 치료하는 데 적합하다. 본 명세서에 사용되는 "피부 노화의 징후"는 주름(line) 및 주름살의 존재, 탄력 감소, 불균일한 피부 (uneven skin) 및 얼룩덜룩함 (blotchiness)을 포함한다. 특히 바람직한 실시 형태에서, 노화 징후로는 주름 및 주름살의 존재 및/또는 탄력 상실이 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부 노화의 징후를 치료하는"은 상술된 피부 노화의 존재 또는 징후를 완화시키거나, 줄이거나, 예방하거나, 개선하거나, 또는 제거하는 것을 말한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "주름살"은 잔주름, 잔주름살, 또는 굵은 주름살을 포함한다. 주름살의 예에는 눈 주위의 잔주름 (예를 들어, "눈가 주름(crow s feet)"), 이마 및 뺨 주름살, 미간 주름(frown-line), 및 입 주위의 웃어서 생기는 주름(laugh-line)이 포함되지만 이에 한정되지 않는다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "탄력 상실"은 처지고, 이완되고, 느슨한 조직을 포함하지만 이에 한정되지 않는, 피부 또는 조직의 탄력 또는 구조적 완전성의 상실을 포함한다. 탄력 또는 조직 구조 완전성의 감소는 질환, 노화, 호르몬 변화, 기계적 외상, 환경적 손상을 포함하지만 이로 한정되지 않는 많은 인자의 결과, 또는 화장품 또는 약제와 같은 제품을 조직에 도포한 결과일 수 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "불균일한 피부"는 염증후 과다색소침착과 같이 과다색소침착으로 분류될 수 있는 퍼지거나 반점이 있는 색소침착과 관련된 피부 상태를 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "반점"은 홍조 또는 홍반과 관련된 피부 상태를 의미한다.

본원에서 사용되는 바와 같이, "화장품"은 신체 미(bodily beauty)의 외양을 보존, 복구, 부여, 시뮬레이션, 또는 증진시키거나 미 또는 젊음을 증진시키는 것으로 보이는 미적 성분 또는 제제를 말하며, 구체적으로는 조직 또는 피부의 외양에 관한 것이다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "화장용으로 유효한 양"은 하나 이상의 피부 노화의 징후를 치료하기에 충분하지만 심각한 부작용을 피하기에 충분히 낮은 생리학적 활성 화합물 또는 조성물의 양을 의미한다. 화합물 또는 조성물의 화장용으로 효과적인 양은 치료되는 특정 상태, 최종 사용자의 연령 및 신체적 상태, 치료/예방되는 상태의 중증도, 치료 기간, 다른 치료의 성질, 적용되는 특정 화합물 또는 생성물/조성물, 이용되는 특정한 화장용으로 허용가능한 담체 등의 요소에 따라 다양할 것이다.

본 조성물은 NFκB-억제제와, NFκB-억제제 이외의 것이지만 IC50이 낮은 항염증성 화합물을 포함한다. 둘 모두의 성분은 피부 및 기타 조직에 항염증 효과들을 제공하며, 이러한 항염증 효과들은 보완적이다. 놀랍게도 본 발명자는 NFκB 억제제와 조합된, IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 항염증성 화합물이 IL-1 및 IL-8 사이토카인의 증가를 억제함을 밝혀냈으며, 이는 달리 개개의 화합물의 사용에 의해 일어날 수도 있다.

본 발명의 일 실시 형태에서, NFκB-억제제와 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 항염증성 화합물의 배합물은 실시예 V에 개시된 IL-1α 분석법에 의해 측정할 때 약 35% 이상의 사이토카인 IL-1α 생성 감소를 제공한다.

본 발명의 다른 실시 형태에서, NFκB-억제제와 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 항염증성 화합물의 배합물은 실시예 VIII에 개시된 IL-8 분석법에 의해 측정할 때 약 80% 이상의 사이토카인 IL-8 생성 감소를 제공한다.

따라서, 본 발명은 IL-1α 분석법에 의해 측정할 때 피부 또는 기타 조직에서 사이토카인 IL-1α 생성을 약 35% 이상만큼 감소시키는 방법을 또한 제공하며, 이는 그러한 피부 또는 기타 조직에 NFκB-억제제와, NFκB-억제제 이외의 것이며 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 항염증성 화합물의 배합물을 국소 도포하는 단계에 의한 것이다. NFκB-억제제와 항염증성 화합물의 배합물은 하기에 추가로 기재되는 바와 같이 국소 조성물의 형태로 투여될 수 있다.

IL-8 분석법에 의해 측정할 때 피부 또는 기타 조직에서 사이토카인 IL-8 생성을 약 80% 이상만큼 감소시키는 방법이 또한 제공되며, 이는 그러한 피부 또는 기타 조직에 NFκB-억제제와, NFκB-억제제 이외의 것이며 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 항염증성 화합물의 배합물을 국소 도포하는 단계에 의한 것이다. NFκB-억제제와 항염증성 화합물의 배합물은 하기에 추가로 기재되는 바와 같이 국소 조성물의 형태로 투여될 수 있다.

NFκB-억제제

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "NFκB-억제제"는 세포 핵 전사 인자 카파-B (NFκB)를 억제하는 화합물을 의미한다. 일 실시 형태에서, NFκB-억제제는, 하기에 정의된 바와 같이 NFκB-억제 시험에 따라 시험할 때, 바람직하게는 1 마이크로그램/밀리리터 내지 약 100 마이크로그램/밀리리터인 농도에서 시험할 경우 NFκB 억제%가 약 30% 이상, 바람직하게는 약 50% 이상, 더욱 바람직하게는 약 70% 이상, 가장 바람직하게는 약 90% 이상이다. 즉, 화합물은 ㎖ 당 1 마이크로그램 내지 ㎖ 당 100 마이크로그램의 범위 내의 적어도 하나의 농도에서 언급된 NFκB 억제%를 나타낸다. 화합물은 ㎖ 당 1 마이크로그램 내지 ㎖ 당 100 마이크로그램의 모든 농도에서 언급된 NFκB 억제%를 제공할 필요는 없으나, 이러한 범위 내의 적어도 하나의 농도에서 언급된 NFκB 억제%를 제공한다.

바람직한 실시 형태에서, NFκB-억제제는 ㎖ 당 10 마이크로그램의 농도에서 시험되는 경우, 적어도 약 35%, 바람직하게는 적어도 약 55%, 더욱 바람직하게는 적어도 약 70%, 가장 바람직하게는 적어도 약 90%의 NFκB 억제%를 갖는다.

NFκB-억제 시험은 하기 방식으로 수행된다. NF-kB에 대한 유전자 리포터를 함유한 안정하게 트랜스펙션된 인간 상피 세포주인 FB293 세포가 사용된다. 이들은, 예를 들어, 파노믹스(Panomics) (미국 캘리포니아주 프레몬트 소재)로부터 입수할 수 있다. FB293은 10% 소 태아 혈청(미국 캘리포니아주 샌디에고 소재의 인비트로겐(Invitrogen)이 보충된 둘베코 변형 이글 배지(Dulbecco's modified Eagle's medium; DMEM)와 같은 적합한 배지 내에서 5×10⁴개의 세포/㎖의 밀도로 도말된다. FB293 세포를 시험 샘플의 존재 하에 100 ng/㎖의 종양 괴사 인자-α (TNFα, 미국 미주리주 세인트 루이스 소재의 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich)로부터 입수가능)로 자극한다. 별도로, 대조 샘플을 시험하며, 여기서 시험 샘플은 적용하지 않는다. 37℃에서 5% CO₂가 있는 상태에서 24시간 인큐베이션 후, 세포는 40 ㎕의 리포터 용해 완충액(프로메가(Promega),미국 위스콘신주 매디슨 소재)을 사용해 용해시킨다. 용해물 중 20 ㎕ 분취물은 루시퍼라제 분석 키트 (프로메가)를 사용하여 분석하고, Lmax 광도계(몰레큘러 디바이시즈(Molecular Devices), 미국 캘리포니아주 서니베일 소재) 내에서 10초 동안 계수되며, 데이터는 상대적 광 단위(relative light unit; RLU)/초로서 나타낸다. 시험 샘플의 NFκB 억제%는 하기와 같이 계산된다:

NFκB 억제율 = [1-( L_샘플 / L_대조군)] *100

(여기서, L_샘플은 샘플의 발광이고, L_대조군은 대조군의 발광임).

하나 이상의 NFκB-억제제는 본 발명의 조성물 중에 임의의 적합한 양, 예를 들어, 약 0.01 중량% 내지 약 10 중량%, 바람직하게는 약 0.1 중량% 내지 약 20 중량%, 더욱 바람직하게는 약 0.1 중량% 내지 약 5 중량%, 훨씬 더욱 바람직하게는 약 0.2 중량% 내지 약 2 중량%로 존재할 수 있다.

일 실시 형태에서, NFκB-억제제는 하기 화합물로 이루어진 군으로부터 선택된다: 치환된 레소르시놀, (E)-3-(4-메틸페닐설포닐)-2-프로펜니트릴(예컨대 "베이(Bay) 11-7082", 미국 미주리주 세인트루이스 소재의 시그마-알드리치로부터 구매가능함), 테트라하이드로커큐미노이드(예컨대 테트라하이드로커큐미노이드 CG, 미국 뉴저지주 피스카타웨이 소재의 사빈사 코포레이션(Sabinsa Corporation)으로부터 입수가능함), 파울로우니아 토멘토사(Paulownia tomentosa) 목재의 추출물 및 이들의 조합.

바람직한 실시 형태에서, NFκB-억제제는 치환된 레소르시놀이다. 레소르시놀은 하기 구조를 갖는 다이하이드록시 페놀 화합물(즉, 1,3 다이하이드록시벤젠)이다:

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "치환된 레소르시놀"은 2, 4, 5, 또는 6 위치에 적어도 하나의 치환체를 포함하는 레소르시놀을 의미한다. 따라서, 치환된 레소르시놀은 1개 내지 4개의 치환체를 가질 수 있다. 상기에 나타낸 바와 같이, 치환된 레소르시놀의 위치 1 및 위치 3은 -OH 기를 포함한다.

치환된 레소르시놀의 모든 치환체는 페닐 (-C₆H₅ 방향족) 부분이 없는 것이 매우 바람직하다. 특정 실시 형태에서, 모든 치환체에는 방향족 부분(헤테로원자가 있거나 없음)이 없다.

또 다른 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 모든 치환체에 케톤 작용기(카르보닐은 2개의 다른 탄소 원자에 결합됨)가 없는 것이 바람직하다.

특정한 바람직한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 모든 치환체에는 페닐 작용기 및 케톤 작용기가 없다.

특정한 바람직한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 5 내지 11개의 탄소 원자, 바람직하게는 5 내지 10개의 탄소 원자, 더욱 바람직하게는 5 내지 9개의 탄소 원자, 가장 바람직하게는 5 내지 8개의 탄소 원자를 포함하는 적어도 하나의 치환체를 포함한다. 특정 다른 실시 형태에서, 적어도 하나의 치환체는 상기 기재된 탄소 원자의 수를 갖는 것과 같은 알킬기를 포함한다. 알킬기는 바람직하게는 불포화된다.

특정 실시 형태에서, 레소르시놀의 4 위치는 치환되고, 특정 실시 형태에서, 4 위치만 치환된다. 또 다른 실시 형태에서, 4 위치는 알킬기로 치환된다. 특정한 바람직한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 알킬기를 포함하는, 4 위치에서 단일 치환체를 포함한다. 특정한 다른 바람직한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 벤젠 고리에 직접 결합된 알킬기로 이루어진, 4 위치에서 단일 치환체를 포함한다.

특히 적합한 치환된 레소르시놀은 4-헥실 레소르시놀 및 4-옥틸레소르시놀, 특히 4-헥실 레소르시놀을 포함한다. 4-헥실레소르시놀 및 4-옥틸레소르시놀의 구조는 하기에서 보여진다:

4-헥실 레소르시놀

4-옥틸레소르시놀

4-헥실 레소르시놀은 미국 뉴저지주 링컨 파크 소재의 사이테온(Sytheon)으로부터 사이노베아 HR(SYNOVEA HR)로서 구매가능하다. 4-옥틸레소르시놀은 미국 코네티컷주 웨스트 하벤 소재의 시티 케미칼즈 엘엘씨(City Chemical LLC)로부터 구매가능하다.

특정 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 2, 4, 5, 또는 6 위치에서 적어도 2개의 치환체를 포함한다. 그러한 치환체는 임의로 연결되어 고리, 예컨대, 황 또는 산소와 같은 헤테로원자를 임의로 포함하는 환형 지방족 탄화수소를 형성할 수 있다. 그러한 연결된 치환체는 5 내지 10개의 탄소 원자, 예를 들어, 8 내지 10개의 탄소 원자를 포함할 수 있고, 임의로 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함한다. 2 및 3 위치를 결합시키는 환형 지방족 치환체를 포함하는 적합한 치환된 레소르시놀의 예는 제아랄라논(Zearalanone) 및 β-제아랄라놀(β-Zearalanol)을 포함한다:

제아랄라논

β-제아랄라놀

제아랄라논 및 β-제아랄라놀은 미국 미주리주 세인트루이스 소재의 시그마 케미칼즈(Sigma Chemicals)로부터 구매가능하다.

특정한 다른 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 할라이드-함유 및/또는 니트로소-함유 치환체를 포함한다. 적합한 예는 벤젠 고리에 직접 결합된 -Cl 또는 -N=O를 함유한다. 이들 치환체는 예를 들어, 2 및 4, 2 및 6, 또는 4 및 6 위치에서 존재할 수 있다. 다이할라이드-치환된 레소르시놀의 예는 2,6-다이클로로레소르시놀이다. 다이니트로소-치환된 레소르시놀의 예는 2,4-다이니트로소소르시놀이다:

2,4-다이니트로소소르시놀

2,6-다이클로로레소르시놀 및 2,4-다이니트로소소르시놀은 미국 코네티컷주 웨스트 하벤 소재의 시티 케미칼 엘엘씨(City Chemical LLC)로부터 입수가능하다.

치환된 레소르시놀은 당업계에 알려진 수단에 의해, 예를 들어, 그 전체가 본원에 참조로서 삽입된 미국 특허 제 4,337,370 호에서 기재된 기술을 사용해 제조된다.

치환된 레소르시놀은 임의의 적합한 분자량을 가질 수 있다. 특정 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 분자량의 범위는 약 175 내지 약 300이다.

파울로우니아(Paulownia)는 아시아가 기원이고 유럽 및 미국으로 점차적으로 퍼져 나간 식물의 속(genus)이다. 일본에서, 파울로우니아는 "참오동나무(Princess Tree)"로도 불리우는 한 가지 종, 파울로우니아 토멘토사를 구체적으로 말하는 키리(Kiri)로 불리운다. 일반적으로 사용되는 다른 명칭으로는 "여왕나무(empress tree)" "폭스글러브 트리(Foxglove Tree)" "왕실 파울로우니아(Royal Paulownia)" "파오 통(Pao tong)" (중국에서) 및 "오동나무(Odong-Namoo)" (한국에서)가 있다. 학명은 "파울로우니아 토멘토사"이며, 이때 다수의 이명, 즉 "파울로우니아 임페리알리스(Paulownia imperialis)", "파울로우니아 레쿠르바(Paulownia recurva)" 및 "비그노니아 토멘토사(Bignonia tomentosa)"가 다양한 문헌에 보고되어 있다. 파울로우니아 토멘토사는 때로 "현삼과(Scrophulariaceae)"로도 칭해지는 "오동나무과(family Paulowniaceae)"에 속한다. 미국 농무부(plants.USDA.gov) 식물 데이터베이스에서는 파울로우니아 토멘토사 및 파울로우니아 임페리알리스를 이명으로 하여 참오동나무를 고유 상징 "PATO2"로 확인된다.

파울로우니아 토멘토사 목재의 임의의 적합한 추출물이 사용될 수 있다. 일반적으로, 파울로우니아 토멘토사 나무의 목재는 줄기, 가지, 또는 둘 모두의 조합으로부터의 목재를 포함한다. 파울로우니아 토멘토사 목재의 적합한 추출물은 우드 칩(wood chip), 우드 더스트(wood dust) 및/또는 작은 나뭇조각 등으로부터 유도될 수 있다.

치환된 레소르시놀은 안정하고 유효한 양, 예를 들어, 조성물의 중량을 기준으로, 약 0.01% 내지 약 10%, 바람직하게는 약 0.1% 내지 약 5%, 더욱 바람직하게는 약 0.2% 내지 약 2%, 훨씬 더욱 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 1.5%로 조성물 중에 존재한다.

항염증성 화합물

본 발명의 조성물은 NFκB 억제제 이외의 것인 항염증성 화합물을 또한 포함한다. 구체적으로, 항염증성 화합물은 NFκB-억제 시험에 의해 측정될 때 NFκB 억제%가 최대 약 100 마이크로그램/밀리리터의 농도로 시험될 경우 약 30% 미만, 바람직하게는 약 20% 미만, 더 바람직하게는 약 10% 미만이다. 즉, 상기 화합물은 최대 100 마이크로그램/밀리리터까지의 모든 농도에서 약 30% 미만, 바람직하게는 약 20% 미만, 더 바람직하게는 약 10% 미만의 NFκB 억제%를 보여준다.

바람직한 실시 형태에서, 항염증성 화합물은 최대 약 10 마이크로그램/밀리리터인 농도에서 시험될 때 NFκB 억제%가 약 30% 미만, 바람직하게는 약 20% 미만, 더 바람직하게는 약 10% 미만이다.

항염증성 화합물은 본 명세서에 개시된 항염증 분석법에서 인터류킨-2에 있어서 IC50(화합물이 염증의 50% 억제를 성취하는 농도)이 약 70 ㎍/㎖ 이하이다. 바람직한 실시 형태에서, 항염증성 화합물의 IC50은 약 50 ㎍/㎖ 이하, 바람직하게는 약 40 ㎍/㎖ 이하, 더 바람직하게는 약 30 ㎍/㎖ 이하이다.

항염증 분석법은 T-세포 수용체(TCR) 활성화제 피토헤마글루티닌(PHA)에 의해 자극된 인간 림프구에 의한 사이토카인의 생성을 제제가 감소시키는 능력을 평가하며, 이는 하기 방식으로 행해진다. 인간 백혈구를 건강한 성인 남자로부터 백혈구 성분 채집(leukopheresis)을 통하여 수집하고, 무혈청 림프구 성장 배지 (엑스비보(ExVivo-15), 미국 메릴랜드주 워커스빌 소재의 바이오휘태커(Biowhittaker)) 중 1×10⁶개의 세포/㎖의 밀도로 조정한다. 공개된 방법에 따라 시험 샘플의 존재 또는 부재 하에 PBL을 10 ㎍/㎖의 PHA로 자극한다 (문헌[Hamamoto Y., et al. Exp Dermatol 2:231-235, 1993]). 37℃, 5% CO₂에서 48시간 인큐베이션 후, 상청액을 제거하고, 구매가능한 멀티플렉스 사이토카인 검출 키트를 이용하여 사이토카인 함량에 대해 평가한다.

IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 적합한 항염증성 화합물은 하기를 포함한다:

펠로덴드론 아무렌세 피질 추출물(Phellodendron Amurense Cortex Extract; PCE)

피버퓨(Feverfew) (타나세툼 파르테늄(Tanacetum parthenium))

생강(진기베르 오피시날레(Zingiber officinale))은행(긴코 빌로바(Ginko Biloba))

안개나무(Cotinus)(콘티누스 코기그리아(Cotinus coggygria))

구기자(Goji Berry)(라이시움 바르바룸(Lycium barbarum))

밀크시슬(Milk Thistle) 추출물(실리붐 마리아눔(Silybum marianum))

인동덩굴(Honeysuckle)(로니세라 자포니카(Lonicera japonica))

발삼 오브 페루(Basalm of Peru)(마이록실론 페레이라에(Myroxylon pereirae))

세이지(살비아 오피시날리스(Salvia officinalis))

크랜베리 추출물(바시늄 옥시코코스(Vaccinium oxycoccos))

아마란스유(Amaranth Oil)(아마란투스 크루엔투스(Amaranthus cruentus))

석류(푸니카 그라나툼(Punica granatum))

예르베 마테(Yerbe Mate)(일렉스 파라구아리엔시스(Ilex paraguariensis) 잎 추출물)

화이트 릴리(White Lily) 꽃 추출물(릴리움 칸디둠(Lilium Candidum))

올리브 잎 추출물 (올레아 유로파에아(Olea europaea))

플로레틴(Phloretin)(사과 추출물)

리페놀(Lifenol)(홉: 후물루스 루풀루스(Humulus lupulus)) 추출물

리코칼콘(Licochalcone)(감초: 글라이시리자 인플레이트(Glycyrrhiza inflate) 추출물 성분)

심릴리프(Symrelief)(비스아볼올 및 생강 추출물).

특정한 바람직한 실시 형태에서, 항염증성 화합물은 펠로덴드론 아무렌세 피질 추출물(PCE), 피버퓨(타나세툼 파르테늄), 은행(긴코 빌로바), 안개나무(콘티누스 코기그리아), 구기자(라이시움 바르바룸), 밀크시슬 추출물(실리붐 마리아눔), 아마란스유(아마란투스 크루엔투스), 석류(푸니카 그라나툼), 예르베 마테(일렉스 파라구아리엔시스 잎 추출물), 화이트 릴리 꽃 추출물(릴리움 칸디둠), 올리브 잎 추출물(올레아 유로파에아) 및 플로레틴(사과 추출물)으로부터 선택된다.

특정한 추가의 바람직한 실시 형태에서, 항염증성 화합물은 피퍼퓨(타나세툼 파르테늄), 구기자(라이시움 바르바룸), 밀크시슬 추출물(실리붐 마리아눔), 아마란스유(아마란투스 크루엔투스), 석류(푸니카 그라나툼), 예르베 마테(일렉스 파라구아리엔시스 잎 추출물), 화이트 릴리 꽃 추출물(릴리움 칸디둠), 올리브 잎 추출물(올레아 유로파에아) 및 플로레틴(사과 추출물)으로부터 선택된다.

"피버퓨의 추출물"은, 발명의 명칭이 피버퓨(타나세툼 파르테늄)로부터의 무-파르테놀라이드 생활성 성분 및 이의 제조 방법(PARTHENOLIDE FREE BIOACTIVE INGREDIENTS FROM FEVERFEW (TANACETUM PARTHENIUM) AND PROCESSES FOR THEIR PRODUCTION)인 미국 특허 공개 제2007/0196523호에 개시된상세한 내용에 따라 제조될 수 있는 것과 같은, 식물 "타나세툼 파르테늄"의 추출물을 의미한다. 하나의 특히 적합한 피버퓨 추출물은 미국 뉴욕주 오시닝 소재의 인티그레이티드 보태니컬 테크놀로지즈(Integrated Botanical Technologies)로부터 약 20% 활성 피버퓨로서 구매가능하다.

본 발명의 조성물은 화장용으로 유효한 양의 하나 이상의 항염증성 화합물을 포함할 수 있다. 조성물은 바람직하게는 활성물 기준으로 약 0.1% 내지 약 10%, 더 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 5%의 제2 항염증성 화합물을 포함한다.

본 발명의 조성물에서, NFκB-억제제 대 항염증성 화합물의 중량비는 다양할 수 있다. 예를 들어, NFκB-억제제 및 항염증성 화합물은 약 0.001 내지 약 100, 바람직하게는 약 0.01 내지 약 10, 더욱 바람직하게는 약 0.1 내지 약 10의 중량비 농도(NFκB-억제제의 중량 기준 농도(concentration by weight)를 항염증성 화합물의 중량 기준 농도로 나누어서 결정됨)로 존재할 수 있다.

국소 조성물

본 발명의 조성물은 인간 피부 또는 모발에 국소 도포된다. 제1 및 제2 항염증성 화합물에 더하여, 조성물은 조성물의 약 50 중량% 내지 약 99.99 중량%(예를 들어, 조성물의 약 80 중량% 내지 약 99 중량%)일 수 있는 화장용으로 허용가능한 국소 담체를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 바람직한 실시 형태에서, 화장용으로 허용가능한 국소 담체에는 물이 포함된다.

조성물은 로션, 크림, 젤, 스틱, 스프레이, 연고, 클렌징 액체 워시 및 고형 바아, 샴푸 및 헤어 컨디셔너, 헤어 픽서 (hair fixer), 페이스트, 폼, 파우더, 무스, 면도 크림, 와이프, 패치, 하이드로젤, 필름형성 제품, 얼굴 및 피부 마스크, 필름 및 메이크업, 이를 테면 파운데이션 및 마스카라를 포함하지만 이로 한정되지 않는 매우 다양한 제품 유형으로 제조될 수 있다. 이들 제품 유형은 용액, 현탁액, 에멀젼 예컨대 마이크로에멀젼 및 나노에멀젼, 젤, 고체 및 리포좀을 포함하나 이에 제한되지 않는 여러 유형의 미용적으로 허용가능한 국소 담체를 함유할 수 있다. 다음은 이러한 담체의 제한되지 않는 예이다. 다른 담체는 당업자에 의해 제형화될 수 있다.

본 발명에서 유용한 조성물은 용액으로서 제형될 수 있다. 용액은 전형적으로 수성 또는 유기 용매 (예를 들어, 약 50% 내지 약 99.99% 또는 약 90% 내지 약 99%의 화장품학적으로 허용가능한 수성 또는 유기 용매)를 포함한다. 적합한 유기 용매의 예에는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 (200 내지 600), 폴리프로필렌 글리콜 (425 내지 2025), 글리세롤, 1,2,4-부탄트라이올, 소르비톨 에스테르, 1,2,6-헥산트라이올, 에탄올 및 이들의 혼합물이 포함된다.

본 발명에 유용한 조성물은 연화제를 포함하는 용액으로서 제형될 수 있다. 그러한 조성물은 바람직하게는 약 2% 내지 약 50%의 연화제(들)를 함유한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, "연화제"는 예컨대 피부로부터 물의 경피적 상실을 예방함으로써 건조의 예방 또는 완화에 사용되는 물질을 말한다. 연화제의 예에는 식물유, 광유, 지방 에스테르 등이 포함되나, 이에 제한되지 않는다.

로션은 그러한 용액으로부터 제조될 수 있다. 로션은 전형적으로 약 1% 내지 약 20%(예를 들어, 약 5% 내지 약 10%)의 연화제(들) 및 약 50% 내지 약 90%(예를 들어, 약 60% 내지 약 80%)의 물을 함유한다.

용액으로부터 제형화될 수 있는 또 다른 유형의 제품은 크림이다. 크림은 전형적으로 약 5% 내지 약 50% (예를 들어, 약 10% 내지 약 20%)의 연화제(들) 및 약 45% 내지 약 85% (예를 들어, 약 50% 내지 약 75%)의 물을 함유한다.

본 발명의 조성물이 물을 포함하는 것이 바람직하더라도, 조성물은 대안적으로는 무수성일 수 있거나, 물은 포함하지 않으나 유기 및/또는 실리콘 용매, 오일, 지질 및 왁스를 포함하는 연고일 수 있다. 연고는 동물 또는 식물유의 기본 베이스 또는 반고체 탄화수소를 함유할 수 있다. 연고는 약 2% 내지 약 10%의 연화제(들) + 약 0.1% 내지 약 2%의 증점제(들)를 함유할 수 있다.

조성물은 에멀젼으로서 제형될 수 있다. 국소 담체가 에멀젼이라면, 약 1% 내지 약 10%(예를 들어, 약 2% 내지 약 5%)의 국소 담체가 유화제(들)를 함유한다. 유화제는 비이온성, 음이온성 또는 양이온성일 수 있다. 적합한 유화제의 예에는 퍼스널 케어 및 화장품 제형 분야에서와 같이 전형적으로 규명된 것들이 포함된다.

로션 및 크림은 에멀젼으로서 제형화될 수 있다. 전형적으로 그러한 로션은 0.5% 내지 약 5%의 유화제(들)를 함유한다. 그러한 크림은 전형적으로 약 1% 내지 약 20%(예를 들어, 약 5% 내지 약 10%)의 연화제(들); 약 20% 내지 약 80%(예를 들어, 30% 내지 약 70%)의 물; 및 약 1% 내지 약 10%(예를 들어, 약 2% 내지 약 5%)의 유화제(들)를 함유한다.

수중유 유형 및 유중수 유형의 단일 에멀젼 피부 케어 제제, 예컨대 로션 및 크림은 미용 분야에 잘 알려져 있고 본 발명에 유용하다. 다상(multiphase) 에멀젼 조성물, 예컨대 수중유중수 유형 또는 유중수중유 유형이 또한 본 발명에 유용하다. 일반적으로, 그러한 단일 또는 다상 에멀젼은 물, 연화제, 및 유화제를 필수 성분으로서 함유한다.

본 발명의 조성물은 또한 젤(예를 들어, 적합한 젤화제(들)를 사용하여 수성, 알코올, 알코올/물, 또는 오일 젤)로서 제형될 수 있다. 수성 및/또는 알코올성 젤에 적합한 젤화제에는 천연 고무, 아크릴산 및 아크릴레이트 중합체 및 공중합체, 및 셀룰로스 유도체(예를 들어, 하이드록시메틸 셀룰로스 및 하이드록시프로필 셀룰로스)가 포함되나, 이에 제한되지 않는다. 오일(예컨대 광유)에 적합한 젤화제에는 수소화된 부틸렌/에틸렌/스티렌 공중합체 및 수소화된 에틸렌/프로필렌/스티렌 공중합체가 포함되나, 이에 제한되지 않는다. 그러한 젤은 전형적으로 그러한 젤화제를 약 0.1 중량% 내지 5 중량% 함유한다.

본 발명의 조성물은 또한 고체 제형(예를 들어, 왁스-기재 스틱, 비누 바 조성물, 파우더, 또는 파우더를 함유한 와이프) 내로 제형될 수 있다.

본 발명에 유용한 조성물은 전술한 성분 외에도, 피부 및 모발에 사용되는 조성물 내에서 통상적으로 사용되는 광범위하게 다양한 추가의 지용성 물질 및/또는 수용성 물질을 그의 당업계에서 확립된 수준으로 함유할 수 있다.

추가의 화장용 활성제

한 실시 형태에서, 조성물은 추가로 또 다른 화장용 활성제를 함유한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "화장용 활성제"는, 항여드름제, 광택 조절제(shine control agent), 항미생물제, 추가의 항염증제, 항곰팡이제, 항기생충제, 외용 진통제, 썬스크린, 광보호제(photoprotector), 산화방지제, 각질용해제, 계면활성제, 보습제, 영양제, 비타민, 에너지 향상제(energy enhancer), 발한방지제, 아스트린젠트, 데오더란트, 퍼밍제(firming agent), 굳은살 방지제(anti-callous agent), 및 모발 및/또는 피부 컨디셔닝을 위한 제제를 포함하지만 이로 한정되지 않는, 피부 또는 모발 상에서 화장 또는 치료 효과를 갖는 화합물 (예를 들어, 합성 화합물 또는 천연 추출물 또는 천연 공급원으로부터 단리된 화합물)이다.

일 실시 형태에서, 제제는 하이드록시산, 벤조일 퍼옥사이드, D-판테놀, 옥틸 메톡시신니메이트, 이산화티타늄, 옥틸 살리실레이트, 호모살레이트, 아보벤존, 카로테노이드, 아민 (예를 들어, 뉴트롤(neutrol)), 레티노이드, 예를 들어, 레티놀 및 레티닐 팔미테이트, 세라마이드, 다중불포화 지방산, 필수 지방산, 효소, 효소 억제제, 미네랄, 호르몬, 예를 들어 에스트로겐, 스테로이드, 예를 들어, 하이드로코르티손, 2-다이메틸아미노에탄올, 구리염, 예를 들어, 염화구리, 구리를 함유하는 펩티드, 예를 들어, Cu:Gly-His-Lys, 조효소 Q10, 펩티드, 아미노산, 예를 들어, 프롤린, 비타민, 락토비온산, 아세틸-조효소 A, 니아신, 리보플라빈, 티아민, 리보스, 전자 전달체, 예를 들어, NADH 및 FADH2, 및 다른 식물 추출물, 예를 들어, 알로에 베라, 피버퓨, 오트밀 및 이들의 유도체 및 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되지만 이로 한정되지 않는다. 화장용 활성제는 전형적으로 본 발명의 조성물 내에서 조성물의 약 0.001중량% 내지 약 20중량%, 예를 들어, 약 0.005중량% 내지 약 10중량% 예컨대 약 0.01중량% 내지 약 5중량%의 양으로 존재할 것이다.

비타민의 예에는 비타민 A, 비타민 B류, 이를 테면 비타민 B3, 비타민 B5 및 비타민 B12, 비타민 C, 비타민 K 및 알파, 베타, 감마 또는 델타 토코페롤과 같은 비타민 E의 상이한 형태들 또는 이들의 혼합물 및 이들의 유도체가 포함되나, 이에 한정되는 것은 아니다.

하이드록시산의 예에는 글리콜산, 락트산, 말산, 살리실산, 시트르산 및 타르타르산이 포함되나, 이에 제한되지 않는다.

산화방지제의 예에는 수용성 산화방지제, 예를 들어 설프하이드릴 화합물 및 그의 유도체(예를 들어, 소듐 메타바이설파이트 및 N-아세틸-시스테인), 리포산 및 다이하이드로리포산, 레스베라트롤, 락토페린, 및 아스코르브산 및 아스코르브산 유도체(예를 들어, 아스코르빌 팔미테이트 및 아스코르빌 폴리펩타이드)가 포함되나 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 조성물에 사용하기 적합한 유 용해성 산화방지제에는 부틸화 하이드록시톨루엔, 레티노이드 (예를 들어, 레티놀 및 레티닐 팔미테이트), 토코페롤 (예를 들어, 토코페롤 아세테이트), 토코트라이에놀 및 유비퀴논이 포함되지만 이로 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물에 사용되기에 적합한 산화방지제를 함유하는 천연 추출물에는 플라보노이드 및 아이소플라보노이드 및 그들의 유도체(예를 들어, 게니스테인 및 다이아드제인)를 함유하는 추출물, 레스베라트롤을 함유하는 추출물 등이 포함되나, 이에 제한되지 않는다. 이러한 천연 추출물의 예에는 포도씨, 녹차, 소나무 껍질(pine bark), 및 프로폴리스가 포함된다.

기타 물질

다양한 기타 물질이 또한 당업계에 알려진 바와 같이 조성물 내에 존재할 수 있다. 여기에는 보습제, pH 조절제, 킬레이팅제 (예를 들어, EDTA), 향료, 및 방부제 (예를 들어, 파라벤)가 포함된다.

물 또는 알코올 용해성 염료가 또한 본 발명의 조성물에 사용하기에 적합할 수 있다. 본 발명의 조성물을 위해 적합한 염료의 예에는 캐러멜, 카민, 플루오레세인 유도체, 메톡살렌, 트라이옥살렌, 아조 염료, 안트라퀴논 염료, 블루 아줄렌, 구아자줄렌, 카무줄렌, 에리트로신, 벵갈 로즈(bengal rose), 플록신, 시아노신(cyanosin), 다피닌(daphinin), 에오신 G, 코신(cosin) 10B, 애시드 레드(Acid Red) 51, 적색 염료 4, 적색 염료 40, 청색 염료 1, 및 황색 염료 5, 또는 이들의 혼합물이 포함된다.

사용시, 조성물 중의 염료의 양은 조성물의 총 중량을 기준으로 약 0.0001 중량% 내지 약 0.1 중량%, 바람직하게는 약 0.0025 중량% 내지 약 0.025 중량%로 다양할 수 있다.

본 발명의 조성물, 및 그러한 조성물을 함유하는 제형 및 제품은 당업자에게 잘 알려진 방법을 사용해 제조될 수 있다.

사용 방법

본 발명의 조성물은 상기한 바와 같은 피부 노화의 징후 중 하나 이상에 대해 치료를 필요로 하는 포유류 피부에 국소적으로 도포될 수 있다. 일 실시 형태에 있어서, 조성물은 주름선 및 주름 및/또는 탄력 감소에 대한 치료를 필요로 하는 피부에 도포된다. 조성물은 적합한 치료 요법 예를 들어 매달, 매주, 격일로, 매일, 하루에 2회 등에 따라 치료를 필요로 하는 피부에 도포될 수 있다.

특정 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 또한 피부와 관련된 다른 요구를 처리하는 데 유용할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 조성물은 염증후 과다색소침착의 치료, 모공 크기 감소, 여드름 치료, 피지 생성 감소, 및 흉터 완화에 유용할 수 있다. 특정 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 마이크로더마브레이젼(microdermabrasion) 치료와 같은 기계적 또는 물리적 박리제, 살리실산과 같은 각질 용해제 또는 화학적 박리제와 동시에 또는 이의 수 시간 내에 적용될 수 있다. 소정의 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 점막 또는 다른 조직, 예를 들어, 질, 구강, 또는 눈의 조직에 도포된다. 소정의 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 치유를 촉진하기 위해 가벼운 상처 또는 수술후 부위에, 벌레 물린 데, 옻 오른 데, 또는 유사한 피부 상태에, 또는 일반적으로 가려움을 완화하기 위해 도포된다. 소정의 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 피부 자극을 완화시키기 위하여 도포된다. 자극은 피부 케어 제품 및 화장품 중 성분, 예를 들어 레티노이드 및 그 유도체, 벤지올 퍼옥사이드, 알파 하이드록시산 및 그 유도체, 살리실산, 계면활성제, 천연 식물 추출물, 썬스크린 활성제, 우레아 및 보존제 등에 의해 야기되는 외부 기원의 것일 수 있다. 자극은 일광, 바람 또는 면도와 같은 다른 외부 기원의 것일 수 있다. 또한 자극은 여드름, 주사, 아토피성 피부염 및 기타 질환 상태와 같은 내재적 질환 상태에 의해 야기될 수 있다.

당업자는 본 명세서의 설명에 기초하여, 본 발명을 가장 완전한 범위까지 이용할 수 있을 것으로 여겨진다. 하기의 구체적인 실시 형태는 단지 예시적인 것으로 이해되어야 하며, 어떤 방식으로도 본 개시문헌의 나머지를 제한하는 것으로 이해되어서는 안된다. 하기 비제한적인 실시예는 추가로 본 발명을 예시한다.

실시예 I

상기 기재된 NFκB-억제 시험을 베이 11-7082(미국 미주리주 세인트루이스 소재의 시그마-알드리치), 테트라하이드로커큐미노이드 CG(미국 뉴저지주 피스카타웨이 소재의 사빈사 코포레이션(Sabinsa Corporation), 뿐만 아니라 다양한 농도의 4-헥실레소르시놀의 시험 샘플 상에서 수행하였다. 결과를 표 1에 나타내고, 여기서, NF-κB 유전자 리포터 활성화(발광, L)를 시험 샘플 및 대조 샘플에 대해 기록한다. NF-κB 억제%를 또한 기록한다.

[표 1]

베이 11-7082 및 테트라하이드로커큐미노이드 CG는 강한 NF-κB 억제를 나타내었다. 예상치 않게도, 4-헥실레소르시놀이 또한 NFκB 활성화의 상당한 감소를 가져왔다. 더욱 더 예상치 않게도, 4-헥실레소르시놀은 심지어 낮은 농도에서도 상당한 NF-κB 억제를 나타내었다.

실시예 II

각각 농도가 10 ug/㎖인 일련의 치환된 레소르시놀에 대해 전술된 NFκB-억제 시험을 실시하였다. 결과가 표 2에 나타나 있다.

[표 2]

페놀 작용기가 없는 치환체만을 포함하는 치환된 레소르시놀, 케톤 작용기가 없는 치환체만을 포함하는 치환된 레소르시놀, 및 5 내지 11개의 탄소 원자를 갖는 치환체를 포함하는 치환된 레소르시놀에 의해서, 탁월한 NFκB 억제가 제공된다는 것을 표 2의 데이터로부터 알 수 있다.

실시예 III

상기에 설명한 NFκB-억제 시험 및 항염증 분석을 복수의 제제에서 실시하였다. 결과가 하기 표 3a 및 표 3b에 나타나 있다.

표 3a에는 IC50 값이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 본 발명에 따른 항염증성 화합물이 열거되어 있다. 표 3b에는 IC50 값이 70 ㎍/㎖ 초과인 비교용 항염증성 화합물이 열거되어 있다.

[표 3a]

[표 3b]

실시예 IV

본 발명에 따른 조성물, 본 발명의 실시예 Ex. 1을 하기 표 4에 나타낸 성분들을 이용하여 제조하였다.

[표 4]

조성물은 하기 방법으로 제조하였다. 시노베아 HR를 칭량하고 하이드롤라이트 5에 용해하고 탈이온수를 첨가하여 상 A를 형성하였다. 올레오좀 및 핀솔브 TN을 혼합하여 상 B를 형성하였다. 연속하여 혼합하면서 상 B를 상 A에 매우 천천히 첨가하였다. 균일한 에멀젼이 형성될 때까지 15분 동안 혼합을 계속하였다. 고속으로 연속하여 혼합하면서 아리스토플렉스를 에멀젼에 첨가하여 진한, 덩어리가 없는, 균질한 제형을 얻었다.

실시예 V

IL-1α 분석을 복수의 제제에서 실시하여 인간 상피 세포에서 전-염증 매개자(pro-inflammatory mediator), IL-1α 사이토카인의 방출을 조사하였다.

IL-1α 분석을 하기와 같이 행하였다. KB 세포를 ATCC (ATCC#CCL-17, 미국 버지니아주 매너서스 소재)로부터 획득하고, 10% 소 태아 혈청이 보충된 둘베코 변형 이글 배지(DMEM) (미국 캘리포니아주 샌디에고 소재의 인비트로겐 코포레이션) 중 5000개의 세포/웰의 밀도로 96웰 조직 배양물 처리 플레이트에 도말하였다. 48시간 후, 세포를 지시된 농도로 하기에 설명한 제제로 24시간 동안 처리하고, 그 후 상청액을 수집하고, 구매가능한 키트 (미국 매사추세츠주 빌레리카 소재의 밀리포어 코포레이션(Millipore Corp.))를 이용하여 IL-1α 사이토카인 방출에 대하여 분석하였다. 결과가 하기 표 5에 나타나 있다.

[표 5]

결과는 NF-κB 억제제, 예를 들어 4-헥실레소르시놀 및 테트라하이드로커큐미노이드가 NF-κB를 억제할 수 있으면서 사이토카인 IL-1α의 방출을 증가시킬 수 있음을 시사한다.

실시예 VI

실시예 5에서 설명한 바와 같이 추가의 IL-1α 분석을 실시하였다. 비교의 용이함을 위하여, 4-헥실레소르시놀, 플로레틴 및 이들의 조합에 있어서 IL-1α의 기록된 증가를 4-헥실레소르시놀 (20㎍/㎖, 비교예 2)에 대하여 정규화하였다. 테트라하이드로커큐미노이드, 피버퓨 및 이들의 조합에 있어서 IL-1α의 기록된 증가는 테트라하이드로커큐미노이드 (20㎍/㎖, 비교예 3)에 대하여 정규화하였다. 결과가 하기 표 6에 나타나 있다.

[표 6]

결과는 NF-κB 억제제가 사이토카인 IL-1α의 생성을 유도할 수도 있는 반면, 이는 NF-κB 억제제와, IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 항염증성 화합물 (예를 들어, 피버퓨 또는 플로레틴)의 조합에 의해 역전될 수 있음을 보여준다.

실시예 VII

실시예 5에서 설명한 바와 같이 추가의 IL-1α 분석을 실시하였다. 비교의 용이함을 위하여, IL-1α의 기록된 증가를 4-헥실레소르시놀 (20 ㎍/㎖, 비교예 2)에 대하여 정규화하였다.

[표 7]

이들 결과는 NF-κB 억제제와 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 초과인 항염증성 화합물의 배합물이 NF-κB 억제제와 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 항염증성 화합물의 배합물만큼 두드러진 사이토카인 IL-1α 생성 감소를 제공할 수 없음을 보여준다. 상기 데이터는 NF-κB 억제제와 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 초과인 항염증성 화합물의 배합물이 사이토카인 IL-1α의 생성을 35% 미만으로 감소시켰음을 나타낸다.

비교예 9-14에서, 대두는 시험 매질에 용해시키지 않았으며, 대신 분산시켰음을 알아야 한다.

실시예 VIII

분석한 사이토카인이 IL-8임을 제외하고는 실시예 5에 설명한 방법을 이용하여 IL-8 분석을 일련의 조성물에서 실시하였다. IL-8의 감소%를 각각의 샘플에 대하여 계산하였다. 결과가 표 8에 나타나 있다. NF-κB 억제제와 항염증성 화합물의 배합물을 함유하는 샘플에 있어서, 상응하는 용량의 항염증성 화합물에 있어서의 IL-8의 감소%에 대한 IL-8의 감소%를 기록한다.

[표 8]

결과는 NF-κB 억제제와 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 항염증성 화합물의 배합물이 어느 하나의 화합물 단독의 능력과 비교하여 IL-8 발현을 극적으로 감소시켰음을 보여준다.

실시예 IX

NF-κB 억제제 대 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 항염증성 화합물의 비를 변화시킨 것을 제외하고는 실시예 8에 설명한 바와 같이 다른 IL-8 분석법을 실시하였다. 결과가 하기 표 9에 나타나 있다.

[표 9]

이들 결과는 NF-kB 억제제와 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 항염증성 화합물의 배합물의 두드러진 능력 향상은 매우 다양한 중량비에 걸쳐 관찰될 수 있음을 시사한다 (중량비는 각각 본 발명의 실시예, Ex. 13, 14, 및 15에 있어서 10:1, 1:1 및 1:10임).

전체적으로, 본 발명의 항염증성 블렌드는 염증성 사이토카인 IL-1 및 IL-8 둘 모두의 감소를 제공하며, 또한 일반적으로 NFκB-억제를 제공한다.

본 발명이 구체적인 설명과 함께 기술되었지만, 전술한 설명은 예시하고자 하는 것이고, 첨부된 특허청구범위의 범주에 의해 규정되는 본 발명의 범주를 제한하는 것이 아님이 이해된다. 기타 태양, 이점, 및 변경이 특허청구범위 내에 있다.

Claims

NFκB-억제제; 및
NFκB-억제제 이외의 것이며 IC50이 약 70 ㎍/㎖ 이하인 항염증성 화합물을 포함하는, 조성물.
제1항에 있어서, 상기 항염증성 화합물은 IC50이 약 50 ㎍/㎖ 이하인, 조성물.
제1항에 있어서, 상기 항염증성 화합물은 IC50이 약 40 ㎍/㎖ 이하인, 조성물.
제1항에 있어서, 상기 항염증성 화합물은 펠로덴드론 아무렌세 피질 추출물(Phellodendron amurense cortex extract; PCE), 피버퓨(feverfew)(타나세툼 파르테늄(Tanacetum parthenium)), 은행(긴코 빌로바(Ginko Biloba)), 안개나무(cotinus)(콘티누스 코기그리아(Cotinus coggygria)), 구기자(goji berry)(라이시움 바르바룸(Lycium barbarum)), 밀크시슬(milk thistle) 추출물(실리붐 마리아눔(Silybum marianum)), 아마란스유(amaranth oil)(아마란투스 크루엔투스(Amaranthus cruentus)), 석류(푸니카 그라나툼(Punica granatum)), 예르베 마테(yerbe mate)(일렉스 파라구아리엔시스(Ilex paraguariensis) 잎 추출물), 화이트 릴리(white lily) 꽃 추출물(릴리움 칸디둠(Lilium Candidum)), 올리브 잎 추출물(올레아 유로파에아(Olea europaea)), 플로레틴(phloretin)(사과 추출물) 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 추출물인, 조성물.
제1항에 있어서, 상기 항염증성 화합물은 피버퓨(타나세툼 파르테늄), 구기자(라이시움 바르바룸), 밀크시슬 추출물(실리붐 마리아눔), 아마란스유(아마란투스 크루엔투스), 석류(푸니카 그라나툼), 예르베 마테(일렉스 파라구아리엔시스 잎 추출물), 화이트 릴리 꽃 추출물(릴리움 칸디둠), 올리브 잎 추출물(올레아 유로파에아), 플로레틴(사과 추출물) 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 추출물인, 조성물.
제1항에 있어서, 상기 NFκB-억제제는 치환된 레소르시놀, (E)-3-(4-메틸페닐설포닐)-2-프로펜니트릴, 테트라하이드로커큐미노이드, 파울로우니아 토멘토사 목재(Paulownia tomentosa wood)의 추출물 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는, 조성물.
제1항에 있어서, 상기 NFκB-억제제는 치환된 레소르시놀, 테트라하이드로커큐미노이드 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는, 조성물.
제4항에 있어서, 상기 NFκB-억제제는 치환된 레소르시놀, 테트라하이드로커큐미노이드 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는, 조성물.
제5항에 있어서, 상기 NFκB-억제제는 치환된 레소르시놀, 테트라하이드로커큐미노이드 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는, 조성물.
제1항에 있어서, 상기 NFκB-억제제 및 항염증성 화합물은 약 1:10 내지 약 10:1의 중량비로 존재하는, 조성물.