KR20120061863A

KR20120061863A - 신장 손상 및 신부전증의 진단과 예후를 위한 방법 및 조성물

Info

Publication number: KR20120061863A
Application number: KR1020127005940A
Authority: KR
Inventors: 조셉 안데르버그; 제프 그레이; 폴 엠씨페르손; 케빈 나카무라
Original assignee: 아스튜트 메디컬 인코포레이티드
Priority date: 2009-08-07
Filing date: 2010-08-06
Publication date: 2012-06-13
Also published as: BR112012002711A2; US20150044706A1; NZ598034A; WO2011017654A1; AU2010279249B2; HK1167888A1; MX2012001559A; CN102576011A; EP2462440B1; AU2010279249A1; EA201290056A1; MX336280B; US8871459B2; EP2462440A1; CN102576011B; JP5827226B2; US20120264629A1; US9366683B2; EP2462440A4; CA2770393A1

Abstract

본 발명은 신장 손상으로부터 고통을 받거나 또는 신장 손상이 의심스러운 피험자의 모니터링, 진단, 예후 예측, 그리고 치료 요법의 결정을 위한 방법 및 조성물에 관련된다. 특히, 본 발명은 신장 손상의 진단과 예후 바이오마커로서 베타-2-당단백질 1을 검출하는 분석을 사용하는 것에 관련된다.

Description

신장 손상 및 신부전증의 진단과 예후를 위한 방법 및 조성물{Methods and Compositions for Diagnosis and Prognosis of Renal Injury and Renal Failure}

본 발명은 2009년 8월 7일에 출원된 미국 특허가출원 61/232,293에 대한 우선권을 주장하며, 이 출원은 전체 표, 도면, 그리고 청구항을 포함하는 그 전체가 본 발명에 참고 문헌으로서 포함된다.

발명의 배경기술

본 발명의 배경에 대한 다음의 논의는 단지 독자에게 본 발명을 이해시키기 위한 목적으로 제공하며, 본 발명에 종래 기술을 묘사하거나 구성하는 것을 승인하지 않는다.

신장은 신체에서 물 및 용질의 배설을 맡고 있다. 이것의 기능은 산-염기의 균형 유지, 전해질 농도의 조절, 혈액량의 통제, 그리고 혈압의 조절을 포함한다. 그에 따라, 손상 및/또는 질병으로 인한 신장 기능의 상실은 상당한 질병률 및 사망률을 초래한다. 신장 손상의 상세한 논의는 그 전체가 참고 문헌으로써 본 발명에 통합되는 Harrison's Principles of Internal Medicine, 17th Ed., McGraw Hill, New York, pages 1741-1830에 제공되어 있다. 신장 질환 및/또는 손상은 급성 또는 만성일 수 있다. 급성 및 만성 신장 질환은 하기와 같이 기술되었다(그 전체가 참고 문헌으로써 본 발명에 통합되는 Current Medical Diagnosis & Treatment 2008, 47thEd, McGraw Hill, New York, pages 785-815에서 나옴): "급성 신부전은 몇 시간 내지 며칠에 걸쳐, 혈액에 질소성 노폐물 (요소질소와 같은) 및 크레아티닌의 정체를 일으키는 신장 기능의 악화이다. 이들 물질의 정체는 질소 과잉혈증이라 불린다. 만성 신부전(만성 신장 질환)은 몇 달 내지 몇 년에 걸친 신장 기능의 비정상적 상실로부터 초래된다".

급성 신부전(ARF, 또한 급성 신손상, 또는 AKI로 알려짐)은 신사구체 여과에서의 갑작스러운(전형적으로 약 48시간 내지 1주 내에 검출됨) 저하이다. 이 여과 능력의 상실은 보통 신장에 의해 배설되는 질소성(요소 및 크레아티닌) 및 비-질소성 노폐물의 정체, 요배설량의 감소, 또는 둘 모두를 유발한다. ARF는 병원 입원의 약 5%, 심폐 우회술의 4-15%, 그리고 중환자실 입원의 30%까지 악화되는 것으로 보고되었다. ARF는 원인에 따라 신전성, 신성 또는 신후성으로 분류될 수 있다. 신성 질환은 신사구체, 관성, 간질성, 그리고 혈관 이상으로 더욱 구분될 수 있다. ARF의 주요 원인은 그 전체가 참고 문헌으로써 본 발명에 통합되는 Merck Manual 17th ed., Chapter 222에서 각색된 하기 표에 기술된다:

허혈성 ARF의 경우에서, 질병의 추이는 4 단계로 나뉠 수 있다. 몇 시간 내지 며칠간 지속되는 개시 단계 동안, 신장의 감소한 관류가 손상으로 발전한다. 신사구체 초여과가 감소되고, 여과 흐름이 세관 내의 잔해로 인해 감소되고, 손상된 내피 세포를 통한 여과의 역누출이 일어난다. 이 단계 동안 신장 손상이 신장의 재관류에 의해 매개될 수 있다. 개시는 지속되는 허혈성 손상 및 염증에 의해 특징되고 내피 손상 및 혈관 울혈을 수반할 수 있는 확장 단계로 이어진다. 1 내지 2주 동안 지속되는 유지 단계 동안 신장 세포 손상이 일어나고 신사구체 여과 및 요배설량은 최소에 도달한다. 신장 내피 세포가 복구되고 GFR이 점차적으로 회복되는 복구 단계가 따를 수 있다. 그럼에도 불구하고, ARF를 앓는 피험체의 생존률은 약 60%만큼 낮을 수 있다.

방사선 조영제(또한 조영제로 불림) 및 시클로스포린과 같은 다른 신장 독소, 아미노글리코사이드를 포함하는 항생제 및 시스플라틴과 같은 항암 약물에 의해 유발되는 급성 신장 손상은 며칠 내지 약 1주의 기간에 걸쳐 나타난다. 조영제 유발 신증(CIN, 방사선 조영제에 의해 유발되는 AKI)은 신장내 혈관 수축(허혈성 손상으로 이어지는)에 의해, 그리고 신장 관상 상피 세포에 직접적으로 독성인 활성 산소 종의 생성으로부터 유발되는 것으로 생각된다. CIN은 고전적으로, 혈액 요소 질소 및 혈청 크레아티닌의 급성(24-48시간 내에 발생)이지만 가역적(3-5일 피크, 1주 내의 해결) 상승으로서 나타난다.

AKI를 정의하고 검출하기 위해 일반적으로 보고된 기준은 혈청 크레아티닌의 갑작스러운(전형적으로 약 2-7일 내 또는 입원 기간 내) 상승이다. AKI를 정의하고 검출하기 위한 혈청 크레아티닌 상승의 용도가 잘 알려져 있지만, 혈청 크레아티닌 상승의 크기 및 AKI를 정의하기 위해 측정되는 시간은 간행물 사이에서 상당히 다르다. 전통적으로, 100%, 200%와 같은 혈청 크레아티닌의 상대적으로 큰 증가, 2 mg/dL을 넘는 값에 대해 적어도 100%의 증가 및 다른 정의가 AKI를 정의하는데 사용되었다. 그러나 최근의 트렌드는 AKI를 정의하기 위해 더욱 적은 혈청 크레아티닌 상승을 사용하는 쪽으로 기울고 있다. 혈청 크레아티닌 상승, AKI 및 관련된 건강 위험 사이의 상관 관계는 그 전체가 그 안에 나열된 참고 문헌들과 함께 본 발명에 참고 문헌으로써 포함되는 Praught and Shlipak, Curr Opin Nephrol Hypertens 14:265-270, 2005 및 Chertow et al., J Am Soc Nephrol16: 3365-3370, 2005에서 개관되었다. 이들 간행물에서 기술된 것과 같이, 급성 악화 신장 기능(AKI) 및 사망의 증가된 위험 및 다른 해로운 결과는 현재 혈청 크레아티닌의 매우 적은 증가와 관련되어 있는 것으로 알려지고 있다. 이들 증가는 상대(퍼센트) 값 또는 명목 값으로서 결정될 수 있다. 전-손상 값으로부터 20%만큼 적은 혈청 크레아티닌의 상대적 증가가 급성 악화 신장 기능(AKI) 및 증가된 건강 위험을 가리키는 것으로 보고되었지만, AKI 및 증가된 건강 위험을 정의하기 위한 더욱 일반적으로 보고된 값은 적어도 25%의 상대적 증가이다. 0.3 mg/dL, 0.2 mg/dL 또는 심지어 0.1 mg/dL만큼 적은 명목적 증가가 악화하는 신장 기능 및 사망의 증가된 위험을 가리키는 것으로 보고되었다. 혈청 크레아티닌이 이들 역치값까지 증가하는 것에 대한 다양한 기간, 예를 들면, 2일, 3일, 7일, 또는 환자가 병원 또는 중환자실에 있는 시간으로서 정의되는 다양한 기간의 범위가 AKI를 정의하기 위해 사용되었다. 이들 연구는 악화하는 신장 기능 또는 AKI에 대한 특정 역치 혈청 크레아티닌 상승(또는 증가에 대한 기간)이 없고, 오히려 혈청 크레아티닌 증가의 크기가 상승함에 따라 끊임없이 위험이 증가하는 것을 가리킨다.

한 연구(그 전체가 참고문헌으로서 본 발명에 통합되는, Lassnigg et al., J Am Soc Nepphrol 15: 1597-1605, 2004)는 혈청 크레아티닌의 증가 및 감소 모두를 조사하였다. 심장 수술에 이어 -0.1 내지 -0.3 mg/dL의 혈청 크레아티닌의 가벼운 감소를 갖는 환자는 가장 낮은 사망률을 가졌다. 혈청 크레아티닌이 더욱 크게 떨어지거나(-0.4 mg/dL보다 크거나 같게) 혈청 크레아티닌이 임의로 증가한 환자는 더 큰 사망률을 가졌다. 이들 발견으로 저자는 신장 기능에서 심지어 매우 미묘한 변화(수술 후 48시간 이내에 적은 크레아티닌 변화에 의해 검출된 것과 같이) 조차도 환자의 결과에 심각하게 영향을 미친다고 결론을 내렸다. 임상 시험에서 및 임상적 실행에서 AKI를 정의하기 위해 혈청 크레아티닌을 사용하기 위한 단일화된 분류 시스템에 관한 합의에 도달하기 위한 노력에서, 그 전체가 참고문헌으로서 본 발명에 통합되는 Bellomo et al., Crit Care. 8(4): R204-12, 2004에서는 AKI 환자를 계층화하기 위한 하기 분류를 제안하였다:

"위험": 6시간 동안 <0.5 ml/kg 체중/hr의 베이스라인 OR 소변 생산으로부터 1.5배 증가된 혈청 크레아티닌;

"손상": 12시간 동안 <0.5 ml/kg/hr의 베이스라인 OR 소변 생산으로부터 2.0배 증가된 혈청 크레아티닌;

"실패": 베이스라인 OR 크레아티닌 >355 μmol/l(>44의 증가와 함께) 또는 24시간 동안 0.3 ml/kg/hr 이하의 요배설량 또는 적어도 12시간 동안 무뇨증으로부터 3.0배 증가된 혈청 크레아티닌;

그리고 두 개의 임상 결과를 포함한다:

"상실": 4주 이상 동안 신장 대체 요법에 대한 지속적인 요구.

"ESRD": 말기 신장 질환-3달 이상의 투석 요구.

이들 표준은 신장 상태를 분류하는데 유용한 임상 도구를 제공하는 RIFLE 표준으로 불린다. 각각 그 전체가 참고문헌으로써 본 발명에 통합되는 Kellum, Crit. Care Med. 36: S141-45, 2008 및 Ricci et al., Kidney Int.73, 538-546, 2008에서 논의한 것과 같이, RIFLE 표준은 다수의 연구에서 입증된 AKI의 일정한 정의를 제공한다.

더 최근에, 그 전체가 참고문헌으로서 본 발명에 통합되는 Mehta et al., Crit. Care11: R31(doi: 10.1186.cc5713), 2007에서는 RIFLE로부터 변형된, AKI 환자를 계층화하기 위한 하기의 유사한 분류를 제안하였다:

"단계 I": 6시간 이상 동안 시간당 0.5 mL/kg 이하의 베이스라인 OR 요배설량으로부터 0.3 mg/dL(≥ 26.4 μmol/L)보다 크거나 같은 혈청 크레아티닌의 증가 또는 150%(1.5-배)보다 크거나 같은 증가;

"단계 II": 12시간 이상 동안 시간당 0.5 mL/kg 이하의 베이스라인 OR 요배설량으로부터 200%(>2-배) 이상의 혈청 크레아티닌의 증가;

"단계 III": 24시간 동안 시간당 0.3 mL/kg 이하의 적어도 44 μmol/L OR 요배설량 또는 12시간 동안 무뇨증의 급성 증가를 동반하는, 베이스라인 OR 혈청 크레아티닌 ≥ 354 μmol/L로부터 300%(>3-배) 이상의 혈청 크레아티닌의 증가.

CIN 합의 워킹 패널(그 전체가 참고문헌으로서 본 발명에 통합되는, McCollough et al, Rev Cardiovasc Med. 2006; 7(4): 177-197)은 조영제 유발 신증(AKI의 유형)을 정의하기 위하여 25%의 혈청 크레아티닌 상승을 사용한다. 다양한 그룹이 AKI(악화된 신장 기능)를 검출하기 위해 혈청 크레아티닌을 사용하는 것에 대한 약간 다른 표준을 제시하지만, 합의는 0.3 mg/dL 또는 25%와 같은 혈청 크레아티닌의 작은 변화가 AKI를 검출하는데 충분하고, 혈청 크레아티닌 변화의 크기가 AKI의 심각성 및 사망률 위험의 척도라는 것이다.

며칠의 기간에 걸친 일련의 혈청 크레아티닌의 측정이 AKI를 검출하고 진단하는 용인된 방법이고, AKI 환자를 평가하기 위한 가장 중요한 도구 중 하나로 고려되기는 하지만, 혈청 크레아티닌은 일반적으로 AKI 환자의 진단, 평가 및 모니터링에서 몇몇 제한을 가지는 것으로 여겨진다. 혈청 크레아티닌이 AKI에 대한 진단으로 간주되는 값(가령, 0.3 mg/dL 또는 25% 상승)까지 상승하기 위한 기간은 사용한 정의에 따라 48시간 또는 더 길 수 있다. AKI에서의 세포 손상이 몇 시간에 걸쳐 일어날 수 있기 때문에, 48시간 또는 그 이상에서 검출되는 혈청 크레아티닌 상승은 손상의 후기 지표가 될 수 있고, 따라서 혈청 크레아티닌에 의존하는 것은 AKI의 진단을 지연시킬 수 있다. 더욱이, 혈청 크레아티닌은 정확한 신장 상태의 좋은 지표가 아니고, 치료는 신장 기능이 급격히 변하는 AKI의 가장 급성 단계 동안 요구된다. AKI가 있는 일부 환자는 완전히 회복될 것이고, 일부는 투석이 필요할 것이고(단기간 또는 장기간 중 하나), 일부는 사망, 주요 심장 부작용 및 만성 신장 질환을 비롯한 다른 해로운 결과를 가질 것이다. 혈청 크레아티닌이 여과 속도의 마커이기 때문에, AKI(신전성, 신성 또는 신후성 폐색, 혈전색전증, 등)의 원인 또는 신성 질환(예를 들면, 기원이 관상, 신사구체 또는 간질성인)에서 손상의 카테고리 또는 위치를 구별할 수 없다. 요배설량은 유사하게 제한되고, 이러한 것들을 아는 것은 AKI 환자를 관리하고 치료하는데 극히 중요할 수 있다.

이들 제한은 특히 초기 및 전임상 단계뿐만 아니라 신장의 회복 및 복구가 일어날 수 있는 후기 단계에서 AKI를 검출하고 평가하기 위한 더 나은 방법에 대한 필요를 강조한다. 더욱이, AKI에 걸릴 위험이 있는 환자를 더 잘 확인할 필요가 있다.

발명의 개요

피험체에서 신장 기능을 평가하기 위한 방법 및 조성물을 제공하는 것이 본 발명의 목적이다. 본 발명에서 기술한 것과 같이, 베타-2-당단백질 1(Swiss-Prot P02749, 또한 아포리포단백질 H로 알려짐)의 측정이 신장 기능에 대한 손상, 감소된 신장 기능, 및/또는 급성 신부전(급성 신손상으로도 불림)을 앓고 있거나 앓을 위험이 있는 피험체에서 진전된 진단 및 치료요법의 진단, 예후, 위험도 평가, 병기설정, 모니터링, 분류 및 결정에 사용될 수 있다.

이러한 바이오마커는 위험도 평가를 위해(즉, 신장 기능에 대한 앞으로의 손상, 감소된 신장 기능에 대한 앞으로의 진행, ARF에 대한 앞으로의 진행, 신장 기능의 앞으로의 개선, 등에 대한 위험에 있는 피험체를 확인하기 위해); 현재의 질병의 진단을 위해(즉, 신장 기능에 대한 손상을 앓는, 감소된 신장 기능으로 발전된, ARF로 발전된 피험체 등을 확인하기 위해); 신장 기능의 악화 또는 개선에 대한 모니터링을 위하여; 그리고 개선된 또는 악화된 신장 기능, 감소되거나 증가된 사망률 위험, 피험체가 신장 대체 요법(즉, 혈액 투석, 복막 투석, 혈액 여과, 및/또는 신장 이식)을 요구할 감소되거나 증가된 위험, 피험체가 신장 기능에 대한 손상으로부터 회복할 감소되거나 증가된 위험, 피험체가 ARF로부터 회복할 감소되거나 증가된 위험, 피험체가 말기 신장 질환으로 발전할 감소되거나 증가된 위험, 피험체가 만성 신부전으로 발전할 감소되거나 증가된 위험, 피험체가 이식된 신장을 거부할 감소되거나 증가된 위험, 등과 같은 앞으로의 의학적 결과를 예측하기 위하여 사용될 수 있다.

첫 번째 측면에서, 본 발명은 피험체에서의 신장 상태를 평가하는 방법에 관한 것이다. 이들 방법은 피험체로부터 얻은 체액 샘플에서 베타-2-당단백질 1을 검출하기 위해 형성된 분석 방법을 수행하는 것으로 구성된다. 분석 결과, 예를 들면 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 이후, 피험자의 신장 상태와 상호 관련된다. 신장 상태에 대한 이러한 상관관계는 본 명세서에 기술된 바와 같이 분석결과를 피험체의 위험도 평가, 진단, 예후, 병기설정, 분류, 그리고 모니터링 중에서 하나 또는 그 이상에 상호 관련시키는 것을 포함할 수 있다. 이와 같이 본 발명은 신장 손상의 평가를 위해서 베타-2-당단백질 1을 사용한다.

어떤 구체예에서, 본 발명에서 기술한 신장 상태를 평가하는 방법은 피험체의 위험도 평가이다; 즉, 신장 상태에서 하나 이상의 앞으로의 변화의 가능성을 피험체에 지정하는 방법이다. 이들 구체예에서, 분석 결과는 하나 이상의 이런 앞으로의 변화에 대하여 상호 관련된다. 다음은 바람직한 위험도 평가의 구체예이다.

바람직한 위험도 평가 구체예에서, 이들 방법은 신장 기능의 앞으로의 손상에 대한 피험체의 위험을 결정하는 단계를 포함하고, 분석 결과, 예로써 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 신장 기능에 대한 이런 앞으로의 손상의 가능성과 상호 관련된다. 예를 들면, 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 신장 기능에 대한 앞으로의 손상을 앓는 증가된 가능성은 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 높을 때 피험체에 지정된다.

다른 바람직한 위험도 평가 구체예에서, 이들 방법은 앞으로의 감소된 신장 기능에 대한 피험체의 위험을 결정하는 단계를 포함하고, 분석 결과, 예로써 베타-2- 당단백질 1의 측정된 농도는 감소된 신장 기능의 가능성과 상호 관련된다. 예를 들면, 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 앞으로의 감소된 신장 기능의 증가된 가능성은 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 높을 때 피험체에 지정된다.

또 다른 바람직한 위험도 평가 구체예에서, 이들 방법은 신장 기능의 앞으로의 개선에 대한 피험체의 가능성을 결정하는 단계를 포함하고, 분석 결과, 예로써 베타-2- 당단백질 1의 측정된 농도는 신장 기능의 앞으로의 개선의 가능성과 상호 관련된다. 예를 들면, 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 신장 기능의 앞으로의 개선의 증가된 가능성은 측정된 농도가 역치보다 높을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 피험체에 지정된다.

또 다른 바람직한 위험도 평가 구체예에서, 이들 방법은 ARF로의 진행에 대한 피험체의 위험을 결정하는 단계를 포함하고, 분석 결과, 예로써 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 ARF로의 진행의 가능성과 상호 관련된다. 예를 들면, 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 ARF로의 진행의 증가된 가능성은 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 높을 때 피험체에 지정된다.

그리고 다른 바람직한 위험도 평가 구체예에서, 이들 방법은 피험체의 결과적인 위험을 결정하는 단계를 포함하고, 분석 결과, 예로써 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 피험체가 겪는 신장 손상과 관련된 임상 결과의 발생의 가능성과 상호 관련된다. 예를 들면, 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고. 급성 신손상, AKI의 악화 단계로 진행, 사망률, 신장 대체 요법에 대한 요구, 신장 독소의 투여 중지에 대한 요구, 말기 신장 질환, 심부전, 뇌졸중, 심근 경색, 만성 신장 질환으로의 진행, 등 중에서 하나 또는 그 이상의 증가된 가능성은 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 높을 때 피험체에 지정된다.

이런 위험도 평가 구체예에서, 바람직하게는 지정된 가능성 또는 위험은 관심 사건이 피험체로부터 체액 샘플을 얻은 시간으로부터 180일 이내에 발생한다는 것이다. 특히 바람직한 구체예에서, 지정된 가능성 또는 위험은 18개월, 120일, 90일, 60일, 45일, 30일, 21일, 14일, 7일, 5일, 96시간, 72시간, 48시간, 36시간, 24시간, 12시간, 또는 그 이하와 같은 더욱 짧은 기간 내에 일어나는 관심 사건에 관계한다. 피험체로부터 체액 샘플을 얻은 후 0시간에서의 위험은 현재 상태의 진단과 동등하다.

바람직한 위험도 평가 구체예에서, 피험체는 피험체에 이미 존재하는 신전성, 신성 또는 신후성 ARF에 대한 하나 이상의 알려진 위험 인자에 기초한 위험도 평가를 위해 선택된다. 예를 들면, 주요 혈관 수술, 관상 동맥 우회술, 또는 다른 심장 수술을 받고 있거나 받았던 피험체; 이미 존재하는 울혈성 심부전, 전자간증, 경련, 진성 당뇨병, 고혈압, 관상 동맥 질환, 단백뇨, 신장 기능 부전, 정상 범위 이하의 신사구체 여과, 간경변, 정상 범위보다 높은 혈청 크레아티닌, 또는 패혈증을 앓는 피험체; 또는 NSAID, 시클로스포린, 타크로리무스, 아미노글리코사이드, 포스카넷, 에틸렌 글리콜, 헤모글로빈, 미오글로빈, 이포스파마이드, 중금속, 메토트렉사트, 방사선 불투과성 조영제, 또는 스트렙토조토신에 노출된 피험체 모두 본 발명에서 기술한 방법에 따른 위험을 모니터링 하기 위한 바람직한 피험체이다. 이 목록은 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 이 문맥에서 "이미 존재하는"은 체액 샘플을 피험체로부터 얻은 시점에서 위험 인자가 존재한다는 것을 의미한다. 특히 바람직한 구체예에서, 피험체는 신장 기능의 손상, 감소된 신장 기능, 또는 ARF의 기존 진단에 기초하여 위험도 평가를 위해 선택된다.

다양한 방법이 이들 방법에서의 용도를 위한 원하는 역치값에 도달하기 위해 당업자에 의해 사용될 수 있다. 예를 들면, 역치값은 정상 피험체의 집단으로부터 이런 정상 피험체에서 측정된 베타-2-당단백질 1의 75번째, 85번째, 90번째, 95번째 또는 99번째 백분위수를 나타내는 농도를 선별하는 것에 의해 결정될 수 있다. 대안으로, 역치값은 이런 피험체에서 측정된 베타-2-당단백질 1의 75번째, 85번째, 90번째, 95번째, 또는 99번째 백분위수를 나타내는 농도를 선별함으로써, 신장 기능에 손상 또는 감소된 신장 기능을 앓지만 ARF(또는 죽음, 투석, 신장 이식, 등과 같은 일부 다른 임상 결과)로 진행되지 않은 피험체 집단으로부터 결정될 수 있다. 다른 대안에서, 역치값은 동일한 피험체에서 베타-2-당단백질 1의 이전의 측정으로부터 결정될 수 있다; 즉, 피험체에서 베타-2-당단백질 1의 수준의 일시적 변화는 피험체에 대한 위험을 지정하는데 사용할 수 있다. 다시 말하면, 시간의 추이에서 증가하는 농도의 베타 -2-당단백질 1은 농도가 안정적이거나 감소할 때 지정된 위험에 비하여 앞으로의 손상 또는 기존 신장 손상의 진행에 대한 위험이 증가된 피험체를 확인하는데 이용될 수 있다.

두 집단을 구별하기 위한 특정 시험의 능력은 ROC 분석을 사용하여 확립할 수 있다. 예를 들면, 신장 상태에서 하나 이상의 앞으로의 변화에 대한 성향이 있는 "첫 번째" 소집단으로부터 확립된 ROC 곡선 및 이러한 성향이 없는 "두 번째" 소집단은 ROC 곡선을 계산하기 위하여 사용할 수 있고, 곡선 아래의 영역은 시험의 질의 측정을 제공한다. 바람직하게는, 본 발명에서 기술된 시험은 0.5, 바람직하게는 적어도 0.6, 더욱 바람직하게는 0.7, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 0.8, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 0.9, 그리고 가장 바람직하게는 적어도 0.95 이상의 ROC 곡선 영역을 제공한다.

어떤 측면에서, 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 연속 변수로서 취급할 수 있다. 예를 들면, 임의의 특정 농도는 피험체에 대한 신장 기능의 앞으로의 감소에 상응하는 확률로 전환될 수 있다. 또 다른 대안에서, 역치는 피험체의 집단을 신장 상태에서 하나 이상의 앞으로의 변화에 대한 성향이 있는 "첫 번째" 소집단과 이러한 성향이 없는 "두 번째" 소집단으로 분리하는데 허용가능한 수준의 특이도 및 민감도를 제공할 수 있다. 역치값은 시험 정확도의 하기 측정 중의 하나 이상에 의해 이것을 첫 번째 및 두 번째 집단으로 분리하기 위해 선택된다:

1 이상, 바람직하게는 적어도 약 2 또는 그 이상 또는 약 0.5 또는 그 이하, 더욱 바람직하게는 적어도 약 3 또는 그 이상 또는 약 0.33 또는 그 이하, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 약 4 또는 그 이상 또는 약 0.25 또는 그 이하, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 약 5 또는 그 이상 또는 약 0.2 또는 그 이하, 그리고 가장 바람직하게는 적어도 약 10 또는 그 이상 또는 약 0.1 또는 그 이하의 오즈비(odds ratio);

0.2 이상, 바람직하게는 약 0.3 이상, 더욱 바람직하게는 약 0.4 이상, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 약 0.5, 이보다 더욱 바람직하게는 약 0.6, 이보다 더욱 바람직하게는 약 0.7 이상, 이보다 더욱 바람직하게는 약 0.8 이상, 이보다 더욱 바람직하게는 약 0.9 이상, 그리고 가장 바람직하게는 약 0.95 이상의 상응하는 민감도와 함께, 0.5 이상, 바람직하게는 적어도 약 0.6, 더욱 바람직하게는 적어도 약 0.7, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 약 0.8, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 약 0.9 및 가장 바람직하게는 적어도 약 0.95의 특이도;

0.2 이상, 바람직하게는 약 0.3 이상, 더욱 바람직하게는 약 0.4 이상, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 약 0.5, 이보다 더욱 바람직하게는 약 0.6, 이보다 더욱 바람직하게는 약 0.7 이상, 이보다 더욱 바람직하게는 약 0.8 이상, 이보다 더욱 바람직하게는 약 0.9 이상, 그리고 가장 바람직하게는 약 0.95 이상의 상응하는 특이도와 함께, 0.5 이상, 바람직하게는 적어도 약 0.6, 더욱 바람직하게는 적어도 약 0.7, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 약 0.8, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 약 0.9 및 가장 바람직하게는 적어도 약 0.95의 민감도;

적어도 약 75%의 특이도와 결합된 적어도 약 75%의 민감도;

1 이상, 적어도 약 2, 더욱 바람직하게는 적어도 약 3, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 약 5, 그리고 가장 바람직하게는 적어도 약 10의 양성 우도비(likelihood ratio)(민감도/(1-특이도)로서 계산됨); 또는

1 이하, 약 0.5보다 적거나 같은, 더욱 바람직하게는 약 0.3보다 적거나 같은, 그리고 가장 바람직하게는 약 0.1보다 적거나 같은 음성 우도비((1-민감도)/특이도로서 계산됨).

상기 문맥에서 용어 "약"은 주어진 치수의 +/_5%를 지칭한다.

다중 역치는 또한 피험체에서 신장 상태를 평가하는데 사용될 수 있다. 예를 들면, 신장 상태에서 하나 이상의 앞으로의 변화의 성향이 있는 "첫 번째" 소집단 및 이러한 성향이 없는 "두 번째" 소집단은 단일 그룹으로 결합될 수 있다. 이 그룹은 이후 세 개 또는 그 이상의 동등한 부분으로 세분된다(세분의 수에 따라 삼분위수, 사분위수, 오분위수, 등으로 알려짐). 오즈비는 어떤 구획에 그들이 들어갈 것인지에 기초하여 피험체에 지정된다. 만약 삼분위수를 고려한다면, 가장 낮거나 높은 삼분위수는 다른 구획의 비교를 위한 참조로서 사용될 수 있다. 이 참조 구획은 오즈비 1로 지정된다. 두 번째 삼분위수는 첫 번째 삼분위수에 상대적인 오즈비가 지정된다. 즉, 두 번째 삼분위수의 누군가는 첫 번째 삼분위수의 누군가와 비교하여 신장 상태에서 하나 이상의 앞으로의 변화를 겪을 가능성이 3배 이상일 수도 있다. 세 번째 삼분위수 역시 첫 번째 삼분위수에 상대적인 오즈비가 지정된다.

어떤 구체예에서, 분석 방법은 면역분석이다. 이런 분석에서 사용되는 항체는 아래에서 그 용어를 정의하는 것과 같이 전장 베타-2-당단백질 1 단백질에 특이적으로 결합할 것이고, 또한 이에 "관련된" 하나 이상의 폴리펩티드에도 결합할 수 있다. 다수의 면역분석 형식이 당업자에게 알려져 있다. 바람직한 체액 샘플은 소변, 혈액, 혈청, 타액, 눈물, 그리고 혈장으로 구성된 그룹으로부터 선택된다.

상기 방법 단계는 피험체의 위험도 평가를 위한 분리에서 베타-2-당단백질 1 분석 결과가 사용된다는 것을 의미하는 것으로 해석되지 않아야 한다. 오히려, 추가적인 변수 또는 다른 임상적 표시가 본 발명에서 기술한 방법에 포함될 수 있다. 예를 들면, 위험도 평가 방법은 인구 통계 정보(가령, 체중, 성별, 나이, 인종), 병력(가령, 가족력, 수술의 유형, 동맥류, 울혈성 심부전, 전자간증, 경련, 진성 당뇨병, 고혈압, 관상 동맥 질환, 단백뇨, 신장 기능 부전, 또는 패혈증과 같은 이미 존재하는 질병, NSAID, 시클로스포린, 타크로리무스, 아미노글리코사이드, 포스카넷, 에틸렌 글리콜, 헤모글로빈, 미오글로빈, 이포스파마이드, 중금속, 메토트렉사트, 방사선 불투과성 조영제, 또는 스트렙토조토신과 같은 독소 노출의 유형), 임상 변수(가령, 혈압, 온도, 호흡 속도), 위험 점수(APACHE 점수, PREDICT 점수, UA/NSTEMI에 대한 TIMI 위험 점수, 프레이밍햄 위험 점수), 신사구체 여과 속도, 추정 신사구체 여과 속도, 소변 생산 속도, 혈청 또는 혈장 크레아티닌 농도, 소변 크레아티닌 농도, 나트륨 분획 배설율, 소변 나트륨 농도, 소변 크레아티닌 대 혈청 또는 혈장 크레아티닌 비, 소변 비중, 소변 오스몰, 소변 요소질소 대 혈장 요소질소 비, 혈장 BUN 대 크레아티닌 비, 소변 나트륨/(소변 크레아티닌/혈장 크레아티닌)으로서 계산되는 신부전 지표, 혈청 또는 혈장 호중구 젤라티나아제(NGAL) 농도, 소변 NGAL 농도, 혈청 또는 혈장 시스타틴 C 농도, 혈청 또는 혈장 심장 트로포닌 농도, 혈청 또는 혈장 BNP 농도, 혈청 또는 혈장 NT프로BNP 농도, 그리고 혈청 또는 혈장 프로BNP 농도로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 피험체에 대하여 측정된 하나 이상의 변수와 분석 결과를 결합시킬 수 있다. 베타-2-당단백질 1 분석 결과와 결합될 수 있는 신장 기능의 다른 측정은 하기 및 그 전체가 각각 본 발명에 참고문헌으로써 통합되는 기존 문헌에서 기술된다(Harrison's Principles of Internal Medicine, 17^th Ed., McGraw Hill, New York, pages 1741-1830, 그리고 Current Medical Diagnosis & Treatment 2008, 47thEd, McGraw Hill, New York, pages 785-815).

이런 추가의 변수는 베타-2-당단백질 1 분석 결과를 측정하는데 사용된 샘플과 동일한 시간에 얻은 샘플에서 측정되거나 또는 그 보다 빠르거나 늦은 시간에 얻은 샘플에서 측정될 수 있다. 추가의 변수는 또한 동일한 또는 상이한 체액 샘플에서 측정될 수 있다. 예를 들면 베타-2-당단백질 1은 혈청 또는 혈장 샘플에서 측정될 수 있으며 다른 바이오마커는 소변 샘플에서 측정될 수 있다. 이에 더하여, 가능성의 지정은 베타-2-당단백질 1 분석 결과를 하나 이상의 이런 추가 변수의 일시적인 변화와 결합할 수 있다.

다른 구체예에서, 본 발명에서 기술된 신장 상태를 평가하는 방법은 피험체의 신장 손상을 진단하는 방법이다; 즉, 피험체가 신장 기능에 대한 손상, 감소된 신장 기능, 또는 ARF를 앓고 있는지 아닌지를 평가하는 방법이다. 이들 구체예에서, 분석 결과는 신장 상태에서의 변화가 발생할 것인지 아닌지와 상호 관련된다. 하기는 바람직한 진단의 구체예이다.

바람직한 진단의 구체예에서, 이들 방법은 신장 기능에 대한 손상의 발생 여부를 진단하는 단계를 포함하고, 분석 결과, 예로써 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 이런 손상이 발생할 것인지 아닌지와 상호 관련된다. 예를 들면, 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 신장 기능에 대한 손상이 발생할 증가된 가능성은 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 높을 때 피험체에게 지정되고; 대안으로, 측정된 농도가 역치보다 높을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 신장 기능에 대한 손상이 발생하지 않을 감소된 가능성이 피험체에게 지정된다. 하기에 언급한 바와 같이 베타-2-당단백질 1 분석 결과를 사용한 "진단"은 다른 임상적 표시에도 고려될 수 있다.

다른 바람직한 진단의 구체예에서, 이들 방법은 감소된 신장 기능의 발생 여부를 진단하는 단계를 포함하고, 분석결과, 예로써 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 감소된 신장 기능을 유발하는 손상이 발생할 것인지 아닌지와 상호 관련된다. 예를 들면, 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 감소된 신장 기능을 유발하는 손상이 발생할 증가된 가능성은 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 높을 때 피험체에게 지정되고; 대안으로, 측정된 농도가 역치보다 높을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 감소된 신장 기능을 유발하는 손상이 발생하지 않을 감소된 가능성이 피험체에게 지정된다.

또 다른 바람직한 진단의 구체예에서, 이들 방법은 ARF의 발생 여부를 진단하는 단계를 포함하고, 분석 결과, 예로써 ARF를 유발하는 손상이 발생할 것인지 아닌지와 상호 관련된다. 예를 들면, 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 ARF를 유발하는 손상이 발생할 증가된 가능성은 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 높을 때 피험체에게 지정되고; 대안으로, 측정된 농도가 측정된 농도가 역치보다 높을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 ARF를 유발하는 손상이 발생하지 않을 감소된 가능성이 피험체에게 지정된다.

또 다른 바람직한 진단의 구체예에서, 이들 방법은 신장 대체 요법이 필요한 것으로 피험체를 진단하는 단계를 포함하고, 분석 결과, 예로써 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 신장 대체 요법에 대한 필요성과 상호 관련된다. 예를 들면, 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 신장 대체 요법에 대한 현재 필요의 증가된 가능성은 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 높을 때 피험체에게 지정되고; 대안으로, 측정된 농도가 역치보다 높을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 신장 대체 요법에 대한 현재 필요의 감소된 가능성이 피험체에게 지정된다.

또 다른 바람직한 진단의 구체예에서, 이들 방법은 신장 이식이 필요한 것으로 피험체를 진단하는 단계를 포함하고, 분석 결과, 예로써 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 신장 이식에 대한 필요와 상호 관련된다. 예를 들면, 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 신장 이식에 대한 현재 필요의 증가된 가능성은 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 높을 때 피험체에게 지정되고; 대안으로, 측정된 농도가 역치보다 높을 때 지정된 가능성에 비해 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 신장 이식에 대한 현재 필요의 감소된 가능성이 피험체에게 지정된다.

다양한 방법이 원하는 역치값에 도달하기 위해 당업자에 의해 사용될 수 있다. 예를 들면, 역치값은 정상 피험체의 집단으로부터 이런 정상 피험체에서 측정된 베타-2-당단백질 1의 75번째, 85번째, 90번째, 95번째, 또는 99번째 백분위수를 나타내는 농도를 선별하는 것에 의해 결정될 수 있다. 다른 대안에서, 역치값은 동일한 피험체에서 베타-2-당단백질 1의 이전의 측정으로부터 결정될 수 있다; 즉, 피험체에서 베타-2-당단백질 1 수준의 일시적 변화는 피험체에 대한 진단을 지정하는데 사용될 수 있다.

또 다른 대안에서, 역치값은 복합된 피험체의 집단을 관심의 질병이 있는 "첫 번째" 소집단, 그리고 관심의 질병이 없는 "두 번째" 소집단으로 구분하는데 허용가능한 수준의 특이도 및 민감도를 제공할 수 있다. 역치값은 시험 정확도의 하기 측정 중의 하나 이상에 의해 이것을 첫 번째 및 두 번째 집단으로 분리하기 위해 선택된다:

적어도 약 75%의 특이도와 결합된 적어도 약 75%의 민감도;

상기 문맥에서 용어 "약"은 주어진 치수의 +/_5%를 지칭한다.

다중 역치는 또한 피험체에서 신장 상태를 평가하는데 사용될 수 있다. 예를 들면, 관심의 질병이 있는 피험체의 "첫 번째" 소집단, 그리고 관심의 질병이 없는 "두 번째" 소집단은 단일 그룹으로 결합될 수 있다. 이 그룹은 이후 세 개 또는 그 이상의 동등한 부분으로 세분된다(세분의 수에 따라 삼분위수, 사분위수, 오분위수, 등으로 알려짐). 오즈비는 어떤 구획에 그들이 들어갈 것인지에 기초하여 피험체에 지정된다. 만약 삼분위수를 고려한다면, 가장 낮거나 높은 삼분위수는 다른 구획의 비교를 위한 참조로서 사용될 수 있다. 이 참조 구획은 오즈비 1로 지정된다. 두 번째 삼분위수는 첫 번째 삼분위수에 상대적인 오즈비가 지정된다. 즉, 두 번째 삼분위수의 누군가는 첫 번째 삼분위수의 누군가와 비교하여 이러한 질병이 있을 가능성이 3배 이상일 수도 있다. 세 번째 삼분위수 역시 첫 번째 삼분위수에 상대적인 오즈비가 지정된다.

어떤 구체예에서, 분석 방법은 면역분석이다. 이런 분석에서 사용되는 항체는 아래에서 그 용어를 정의하는 것과 같이 전장 베타-2-당단백질 1 단백질에 특이적으로 결합할 것이고, 또한 이에 "관련된" 하나 이상의 폴리펩티드에도 결합할 수 있다. 다수의 면역분석 형식이 당업자에게 알려져 있다. 바람직한 체액 샘플은 소변, 혈액, 혈청, 그리고 혈장으로 구성된 그룹으로부터 선택된다.

상기 방법 단계는 피험체의 진단을 위한 분리에서 베타-2-당단백질 1 분석 결과가 사용된다는 것을 의미하는 것으로 해석되지 않아야 한다. 오히려, 추가적인 변수가 본 발명에서 기술한 방법에 포함될 수 있다. 예를 들면, 진단은 인구 통계 정보(가령, 체중, 성별, 나이, 인종), 병력(가령, 가족력, 수술의 유형, 동맥류, 울혈성 심부전, 전자간증, 경련, 진성 당뇨병, 고혈압, 관상 동맥 질환, 단백뇨, 신장 기능 부전, 또는 패혈증과 같은 이미 존재하는 질병, NSAID, 시클로스포린, 타크로리무스, 아미노글리코사이드, 포스카넷, 에틸렌 글리콜, 헤모글로빈, 미오글로빈, 이포스파마이드, 중금속, 메토트렉사트, 방사선 불투과성 조영제, 또는 스트렙토조토신과 같은 독소 노출의 유형), 임상 변수(가령, 혈압, 온도, 호흡 속도), 위험 점수(APACHE 점수, PREDICT 점수, UA/NSTEMI에 대한 TIMI 위험 점수, 프레이밍햄 위험 점수), 신사구체 여과 속도, 추정 신사구체 여과 속도, 소변 생산 속도, 혈청 또는 혈장 크레아티닌 농도, 소변 크레아티닌 농도, 나트륨 분획 배설율, 소변 나트륨 농도, 소변 크레아티닌 대 혈청 또는 혈장 크레아티닌 비, 소변 비중, 소변 오스몰, 소변 요소질소 대 혈장 요소질소 비, 혈장 BUN 대 크레아티닌 비, 소변 나트륨/(소변 크레아티닌/혈장 크레아티닌)으로서 계산되는 신부전 지표, 혈청 또는 혈장 호중구 젤라티나아제(NGAL) 농도, 소변 NGAL 농도, 혈청 또는 혈장 시스타틴 C 농도, 혈청 또는 혈장 BNP 농도, 혈청 또는 혈장 NT프로BNP 농도, 그리고 혈청 또는 혈장 프로BNP 농도로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 피험체에 대하여 측정된 하나 이상의 변수와 분석 결과를 결합시킬 수 있다. 베타-2-당단백질 1 분석 결과와 결합될 수 있는 신장 기능의 다른 측정은 하기 및 그 전체가 각각 본 발명에 참고문헌으로써 통합되는 기존 문헌에서 기술된다(Harrison's Principles of Internal Medicine, 17^th Ed., McGraw Hill, New York, pages 1741-1830, 그리고 Current Medical Diagnosis & Treatment 2008, 47thEd, McGraw Hill, New York, pages 785-815).

이런 추가의 변수는 베타-2-당단백질 1 분석 결과를 측정하는데 사용된 샘플과 동일한 시간에 얻은 샘플에서 측정되거나 또는 그 보다 빠르거나 늦은 시간에 얻은 샘플에서 측정될 수 있다. 추가의 변수는 또한 동일한 또는 상이한 체액 샘플에서 측정될 수 있다. 예를 들면 베타-2-당단백질 1은 혈청 또는 혈장 샘플에서 측정될 수 있으며 다른 바이오마커는 소변 샘플에서 측정될 수 있다. 이에 더하여, 진단 방법은 베타-2-당단백질 1 분석 결과를 하나 이상의 이런 추가 변수의 일시적인 변화와 결합할 수 있다.

또 다른 구체예에서, 본 발명에서 기술한 신장 상태를 평가하는 방법은 피험체에서 신장 손상을 모니터링하는 방법이다; 즉, 신장 기능에 대한 손상, 감소된 신장 기능, 또는 ARF를 앓는 피험체에서 신장 기능이 개선될 것인지 또는 악화될 것인지 평가하는 방법이다. 이들 구체예에서, 분석 결과는 신장 상태의 변화가 발생할 것인지 아닌지와 상호 관련된다. 하기는 바람직한 모니터링의 구체예이다.

바람직한 모니터링의 구체예에서, 이들 방법은 신장 기능에 대한 손상을 앓는 피험체에서 신장 상태를 모니터링하는 단계를 포함하고, 분석 결과, 예로써 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 피험체의 신장 상태의 변화 여부와 상호 관련된다. 예를 들면, 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 측정된 농도가 역치보다 높을 때, 신장 기능의 악화가 피험체에 지정될 수 있고; 대안으로, 측정된 농도가 역치보다 낮을 때, 신장 기능의 개선이 피험체에 지정될 수 있다.

다른 바람직한 모니터링의 구체예에서, 이들 방법은 감소된 신장 기능을 앓는 피험체에서 신장 상태를 모니터링하는 단계를 포함하고, 분석 결과, 예로써 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 피험체의 신장 상태의 변화 여부와 상호 관련된다. 예를 들면, 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 측정된 농도가 역치값보다 높을 때 신장 기능의 악화가 피험체에 지정될 수 있고; 대안으로, 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 신장 기능의 개선이 피험체에게 지정될 수 있다.

또 다른 바람직한 모니터링의 구체예에서, 이들 방법은 급성 신부전을 앓는 피험체에서 신장 상태를 모니터링하는 단계를 포함하고, 분석 결과, 예로써 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 피험체의 신장 상태의 변화 여부와 상호 관련된다. 예를 들면, 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 측정된 농도가 역치보다 높을 때 신장 기능의 악화가 피험체에 지정될 수 있고; 대안으로, 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 신장 기능의 개선이 피험체에 지정될 수 있다.

다른 추가적으로 바람직한 모니터링의 구체예에서, 이들 방법은 신전성, 신성 또는 신후성 ARF에 대하여 하나 이상의 이미 존재하는 알려진 위험 인자에 기인한 신장 기능에 손상의 위험이 있는 피험체에서 신장 상태를 모니터링하는 단계를 포함하고, 분석 결과, 예로써 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 피험체의 신장 상태의 변화 여부와 상호 관련된다. 예를 들면, 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 측정된 농도가 역치보다 높을 때 신장 기능의 악화가 피험체에 지정될 수 있고; 대안으로, 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 신장 기능의 개선이 피험체에 지정될 수 있다.

또 다른 대안에서, 역치값은 복합된 피험체의 집단을 관심의 질병이 있고 신장 기능이 악화된 "첫 번째" 소집단, 그리고 관심의 질병이 있고 신장 기능이 개선된 "두 번째" 소집단으로 구분하는데 허용가능한 수준의 특이도 및 민감도를 제공할 수 있다. 역치값은 시험 정확도의 하기 측정 중의 하나 이상에 의해 이것을 첫 번째 및 두 번째 집단으로 분리하기 위해 선택된다:

적어도 약 75%의 특이도와 결합된 적어도 약 75%의 민감도;

상기 문맥에서 용어 "약"은 주어진 치수의 +/_5%를 지칭한다.

다중 역치는 또한 피험체에서 신장 상태를 모니터링하는데 사용될 수 있다. 예를 들면, 신장 기능이 개선(또는 악화)되고 있는 "첫 번째" 소집단, 그리고 이러한 성향이 없는 "두 번째" 소집단은 단일 그룹으로 결합될 수 있다. 이 그룹은 이후 세 개 또는 그 이상의 동등한 부분으로 세분된다(세분의 수에 따라 삼분위수, 사분위수, 오분위수, 등으로 알려짐). 오즈비는 어떤 구획에 그들이 들어갈 것인지에 기초하여 피험체에 지정된다. 만약 삼분위수를 고려한다면, 가장 낮거나 높은 삼분위수는 다른 구획의 비교를 위한 참조로서 사용될 수 있다. 이 참조 구획은 오즈비 1로 지정된다. 두 번째 삼분위수는 첫 번째 삼분위수에 상대적인 오즈비가 지정된다. 즉, 두 번째 삼분위수의 누군가는 첫 번째 삼분위수의 누군가와 비교하여 향상(또는 악화)될 가능성이 3배 이상일 수도 있다. 세 번째 삼분위수 역시 첫 번째 삼분위수에 상대적인 오즈비가 지정된다.

상기 방법 단계는 피험체의 모니터링을 위한 분리에서 베타-2-당단백질 1 분석 결과가 사용된다는 것을 의미하는 것으로 해석되지 않아야 한다. 오히려, 추가적인 변수가 본 발명에서 기술한 방법에 포함될 수 있다. 예를 들면, 모니터링은 인구 통계 정보(가령, 체중, 성별, 나이, 인종), 병력(가령, 가족력, 수술의 유형, 동맥류, 울혈성 심부전, 전자간증, 경련, 진성 당뇨병, 고혈압, 관상 동맥 질환, 단백뇨, 신장 기능 부전, 또는 패혈증과 같은 이미 존재하는 질병, NSAID, 시클로스포린, 타크로리무스, 아미노글리코사이드, 포스카넷, 에틸렌 글리콜, 헤모글로빈, 미오글로빈, 이포스파마이드, 중금속, 메토트렉사트, 방사선 불투과성 조영제, 또는 스트렙토조토신과 같은 독소 노출의 유형), 임상 변수(가령, 혈압, 온도, 호흡 속도), 위험 점수(APACHE 점수, PREDICT 점수, UA/NSTEMI에 대한 TIMI 위험 점수, 프레이밍햄 위험 점수), 신사구체 여과 속도, 추정 신사구체 여과 속도, 소변 생산 속도, 혈청 또는 혈장 크레아티닌 농도, 소변 크레아티닌 농도, 나트륨 분획 배설율, 소변 나트륨 농도, 소변 크레아티닌 대 혈청 또는 혈장 크레아티닌 비, 소변 비중, 소변 오스몰, 소변 요소질소 대 혈장 요소질소 비, 혈장 BUN 대 크레아티닌 비, 소변 나트륨/(소변 크레아티닌/혈장 크레아티닌)으로서 계산되는 신부전 지표, 혈청 또는 혈장 호중구 젤라티나아제(NGAL) 농도, 소변 NGAL 농도, 혈청 또는 혈장 시스타틴 C 농도, 혈청 또는 혈장 BNP 농도, 혈청 또는 혈장 NT프로BNP 농도, 그리고 혈청 또는 혈장 프로BNP 농도로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 피험체에 대하여 측정된 하나 이상의 변수와 분석 결과를 결합시킬 수 있다. 베타-2-당단백질 1 분석 결과와 결합될 수 있는 신장 기능의 다른 측정은 하기 및 그 전체가 각각 본 발명에 참고문헌으로써 통합되는 기존 문헌에서 기술된다(Harrison's Principles of Internal Medicine, 17^th Ed., McGraw Hill, New York, pages 1741-1830, 그리고 Current Medical Diagnosis & Treatment 2008, 47thEd, McGraw Hill, New York, pages 785-815).

이런 추가의 변수는 베타-2-당단백질 1 분석 결과를 측정하는데 사용된 샘플과 동일한 시간에 얻은 샘플에서 측정되거나 또는 그 보다 빠르거나 늦은 시간에 얻은 샘플에서 측정될 수 있다. 추가의 변수는 또한 동일한 또는 상이한 체액 샘플에서 측정될 수 있다. 예를 들면 베타-2-당단백질 1은 혈청 또는 혈장 샘플에서 측정될 수 있으며 다른 바이오마커는 소변 샘플에서 측정될 수 있다. 이에 더하여, 모니터링 방법은 베타-2-당단백질 1 분석 결과를 하나 이상의 이런 추가 변수의 일시적인 변화와 결합할 수 있다.

또 다른 구체예에서, 본 발명에서 기술한 신장 상태를 평가하는 방법은 피험체에서 신장 손상을 분류하는 방법이다; 즉, 피험체에서의 신장 손상이 신전성, 신성 또는 신후성인지 결정하고; 및/또는 나아가 이들 분류를 급성 관상 손상, 급성 사구체 신염, 급성 세뇨 간질성 신염, 급성 혈관 신증, 또는 침윤성 질병과 같은 세분류로 세분하는 것이다. 이들 구체예에서, 분석 결과는 특정 분류 및/또는 세분류와 관련된다. 하기는 바람직한 분류 구체예이다.

바람직한 분류 구체예에서, 이들 방법은 피험체에서 신장 손상이 신전성, 신성 또는 신후성인지 결정하는 단계; 및/또는 나아가 이들 분류를 급성 관상 손상, 급성 사구체 신염, 급성 세뇨 간질성 신염, 급성 혈관 신증, 또는 침윤성 질병과 같은 세분류로 세분하는 단계를 포함하고, 그리고 분석결과, 예로써 베타-2-당단백질 1의 측정된 농도는 피험체의 손상 분류와 상호 관련된다. 예를 들면 측정된 농도는 역치값에 비교될 수 있고, 그리고 측정된 농도가 역치보다 높을 때 특정 분류가 지정되며; 대안으로, 측정된 농도가 역치보다 낮을 때 다른 분류가 피험체에 지정될 수 있다.

다양한 방법이 원하는 역치값에 도달하기 위해 당업자에 의해 사용될 수 있다. 예를 들면, 역치값은 특정 분류가 되지 않는 피험체의 집단(예로써 "대조"그룹)으로부터 이런 대조 피험체에서 측정된 베타-2-당단백질 1의 75번째, 85번째, 90번째, 95번째, 또는 99번째 백분위수를 나타내는 농도를 선별하는 것에 의해 결정될 수 있다. 다른 대안에서, 역치값은 동일한 피험체에서 베타-2-당단백질 1의 이전의 측정으로부터 결정될 수 있다; 즉, 피험체에서 베타-2-당단백질 1의 수준의 일시적 변화는 피험체에 대한 분류를 지정하는데 사용될 수 있다.

또 다른 대안에서, 역치값은 복합된 피험체의 집단을 특정 분류를 갖는 "첫 번째" 소집단, 그리고 상이한 분류를 갖는 "두 번째" 소집단으로 분리하는데 허용가능한 수준의 특이도 및 민감도를 제공할 수 있다. 역치값은 시험 정확도의 하기 측정 중의 하나 이상에 의해 이것을 첫 번째 및 두 번째 집단으로 분리하기 위해 선택된다:

적어도 약 75%의 특이도와 결합된 적어도 약 75%의 민감도;

상기 문맥에서 용어 "약"은 주어진 치수의 +/_5%를 지칭한다.

다중 역치는 또한 피험체에서 신장 상태를 분류하기 위해 사용될 수 있다. 예를 들면, 특정 분류를 갖는 피험체의 "첫 번째" 소집단, 그리고 상이한 분류를 갖는 "두 번째" 소집단은 단일 그룹으로 결합될 수 있다. 이 그룹은 이후 세 개 또는 그 이상의 동등한 부분으로 세분된다(세분의 수에 따라 삼분위수, 사분위수, 오분위수, 등으로 알려짐). 오즈비는 어떤 구획에 그들이 들어갈 것인지에 기초하여 피험체에 지정된다. 만약 삼분위수를 고려한다면, 가장 낮거나 높은 삼분위수는 다른 구획의 비교를 위한 참조로서 사용될 수 있다. 이 참조 구획은 오즈비 1로 지정된다. 두 번째 삼분위수는 첫 번째 삼분위수에 상대적인 오즈비가 지정된다. 즉, 두 번째 삼분위수의 누군가는 첫 번째 삼분위수의 누군가와 비교하여 특정 분류를 가질 가능성이 3배 이상일 수도 있다. 세 번째 삼분위수 역시 첫 번째 삼분위수에 상대적인 오즈비가 지정된다.

상기 방법 단계는 피험체에서 손상의 분류를 위한 분리에서 베타-2-당단백질 1 분석 결과가 사용된다는 것을 의미하는 것으로 해석되지 않아야 한다. 오히려, 추가적인 변수가 본 발명에서 기술한 방법에 포함될 수 있다. 예를 들면, 분류는 인구 통계 정보(가령, 체중, 성별, 나이, 인종), 병력(가령, 가족력, 수술의 유형, 동맥류, 울혈성 심부전, 전자간증, 경련, 진성 당뇨병, 고혈압, 관상 동맥 질환, 단백뇨, 신장 기능 부전, 또는 패혈증과 같은 이미 존재하는 질병, NSAID, 시클로스포린, 타크로리무스, 아미노글리코사이드, 포스카넷, 에틸렌 글리콜, 헤모글로빈, 미오글로빈, 이포스파마이드, 중금속, 메토트렉사트, 방사선 불투과성 조영제, 또는 스트렙토조토신과 같은 독소 노출의 유형), 임상 변수(가령, 혈압, 온도, 호흡 속도), 위험 점수(APACHE 점수, PREDICT 점수, UA/NSTEMI에 대한 TIMI 위험 점수, 프레이밍햄 위험 점수, 심장 수술후 급성 신부전을 예측하기 위한 타커 스코어 등), 신사구체 여과 속도, 추정 신사구체 여과 속도, 소변 생산 속도, 혈청 또는 혈장 크레아티닌 농도, 소변 크레아티닌 농도, 나트륨 분획 배설율, 소변 나트륨 농도, 소변 크레아티닌 대 혈청 또는 혈장 크레아티닌 비, 소변 비중, 소변 오스몰, 소변 요소질소 대 혈장 요소질소 비, 혈장 BUN 대 크레아티닌 비, 소변 나트륨/(소변 크레아티닌/혈장 크레아티닌)으로서 계산되는 신부전 지표, 혈청 또는 혈장 호중구 젤라티나아제(NGAL) 농도, 소변 NGAL 농도, 혈청 또는 혈장 시스타틴 C 농도, 혈청 또는 혈장 BNP 농도, 혈청 또는 혈장 NT프로BNP 농도, 그리고 혈청 또는 혈장 프로BNP 농도로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 피험체에 대하여 측정된 하나 이상의 변수와 분석 결과를 결합시킬 수 있다. 베타-2-당단백질 1 분석 결과와 결합될 수 있는 신장 기능의 다른 측정은 하기 및 그 전체가 각각 본 발명에 참고문헌으로써 통합되는 기존 문헌에서 기술된다(Harrison's Principles of Internal Medicine, 17^th Ed., McGraw Hill, New York, pages 1741-1830, 그리고 Current Medical Diagnosis & Treatment 2008, 47thEd, McGraw Hill, New York, pages 785-815).

다양한 관련된 측면에서, 본 발명은 또한 본 발명에서 기술한 방법을 수행하기 위한 장치 및 키트와 관련된다. 적당한 키트는 본 발명에서 기술한 역치 비교를 수행하기 위한 지침서와 함께, 적어도 하나의 기술된 베타-2-당단백질 1 분석을 수행하기 위한 충분한 시약을 포함한다.

어떤 구체예에서, 이런 분석을 수행하기 위한 시약은 분석 장치에서 제공되고, 이런 분석 장치는 이런 키트에 포함될 수 있다. 바람직한 시약은 하나 이상의 고체상 항체를 포함할 수 있고, 고체상 항체는 고체 지지체에 결합되어 있는 의도된 바이오마커 표적을 검출하는 항체를 포함하고 있다. 샌드위치 면역분석의 경우에, 이런 시약은 또한 하나 이상의 검출 가능하게 표지된 항체를 포함할 수 있고, 이러한 검출 가능하게 표지된 항체는 검출 가능한 표지에 결합하는 의도된 바이오마커 표적을 검출하는 항체를 포함한다. 분석 장치의 일부로서 제공될 수 있는 추가적인 선택적 요소는 하기에서 기술한다.

검출 가능한 표지는 자체로 검출 가능한 분자(가령, 형광 모이어티, 전기화학적 표지, ecl(전기화학적 발광) 표지, 금속 킬레이트, 콜로이드성 금속 입자, 등)뿐만 아니라 검출 가능한 반응 산물(가령, 양고추냉이 페록시다아제, 알칼리 포스파타아제, 등과 같은 효소)의 생산에 의해 또는 그 자신이 검출 가능한 특이적 결합 분자(가령, 이차 항체, 비오틴, 디곡시제닌, 말토오스, 올리고히스티딘, 2,4-디니트로벤젠, 페닐 비산염, ssDNA, dsDNA, 등에 결합하는 표지된 항체)의 사용을 통해 간접적으로 검출될 수 있는 분자를 포함할 수 있다.

신호 발생 요소로부터 신호의 생성은 당업계에 잘 알려진 다양한 광학적, 음향학적, 그리고 전기화학적 방법을 사용하여 수행할 수 있다. 검출 방법의 실례는 형광, 방사화학 검출, 반사율, 흡광도, 전류법, 전도도, 임피던스, 간섭법, 타원편광 분석, 등을 포함한다. 이들 방법 중 어떤 것에서는 고체상 항체가 신호의 생성을 위해 변환기와 결합될 수 있는 한편(가령, 회절 격자, 전기화학적 센서, 등), 다른 것들에서는 신호가 고체상 항체로부터 공간적으로 분리된 변환기에 의해 생성된다(가령, 여기 빛 공급원 및 광학 검출기를 사용하는 형광계). 이 목록은 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 항체-기반 바이오센서는 또한 표지된 분자에 대한 필요를 선택적으로 제거하는 분석물의 존재 또는 양을 결정하기 위하여 사용될 수 있다.

발명의 상세한 설명

본 발명은 베타-2-당단백질 1의 측정을 통해 신장 기능의 손상, 감소된 신장 기능 및/또는 급성 신부전을 앓고 있거나 앓을 위험이 있는 피험체에서 진단, 차별적 진단, 위험도 평가, 모니터링, 분류 및 치료 요법의 결정을 위한 방법 및 조성물과 관련된다.

본 발명의 목적을 위하여, 하기 정의가 적용된다:

본 발명에서 사용된 것과 같이, "신장 기능의 손상"은 신장 기능의 측정에서 측정 가능한 갑작스러운 감소(14일 내, 바람직하게는 7일 내, 더욱 바람직하게는 72시간 내, 그리고 이보다 더욱 바람직하게는 48시간 내)이다. 이런 손상은 예를 들면, 신사구체 여과 속도 또는 추정된 GFR의 감소, 요배설량의 저하, 혈청 크레아티닌의 증가, 혈청 시스타틴 C의 증가, 신장 대체 요법에 대한 요구, 등에 의해 확인할 수 있다. "신장 기능의 개선"은 신장 기능의 측정에서 측정 가능한 갑작스러운 증가(14일 내, 바람직하게는 7일 내, 더욱 바람직하게는 72시간 내, 그리고 이보다 더욱 바람직하게는 48시간 내)이다. GFR을 측정 및/또는 평가하기 위한 바람직한 방법은 하기에서 기술한다.

본 발명에서 사용된 것과 같이, "감소된 신장 기능"은 0.1 mg/dL(≥8.8 μmol/L)보다 크거나 같은 혈청 크레아티닌의 절대적 증가, 20%(베이스라인으로부터 1.2-배)보다 크거나 같은 혈청 크레아티닌의 퍼센트 증가, 또는 요배설량(시간당 0.5 ml/kg 이하의 증명된 요량 감소증)의 감소에 의해 확인되는 신장 기능에서의 갑작스러운 저하(14일 내, 바람직하게는 7일 내, 더욱 바람직하게는 72시간 내, 그리고 이보다 더욱 바람직하게는 48시간 내)이다.

본 발명에서 사용된 것과 같이, "급성 신부전" 또는 "ARF"는 0.3 mg/dl(≥26.4 μmol/l)보다 크거나 같은 혈청크레아티닌의 절대적 증가, 50%(베이스라인으로부터 1.5-배)보다 크거나 같은 혈청 크레아티닌의 퍼센트 증가, 또는 요배설량(적어도 6시간 동안 시간당 0.5 ml/kg 이하의 증명된 요량 감소증)의 감소에 의해 확인되는 신장 기능에서의 갑작스러운 저하(14일 내, 바람직하게는 7일 내, 더욱 바람직하게는 72시간 내, 그리고 이보다 더욱 바람직하게는 48시간 내)이다. 이 용어는 "급성 신손상" 또는 "AKI"와 동의어이다.

본 발명에서 사용된 것과 같이, 용어 "베타-2-당단백질 1"은 베타-2-당단백질 1 전구체에서 유래된 생물학적 샘플에 존재하는 하나 또는 폴리펩티드를 지칭한다(Swiss-Prot P02749 (SEQ ID NO: 1)).

10 20 30 40 50 60

MISPVLILFS SFLCHVAIAG RTCPKPDDLP FSTVVPLKTF YEPGEEITYS CKPGYVSRGG

70 80 90 100 110 120

MRKFICPLTG LWPINTLKCT PRVCPFAGIL ENGAVRYTTF EYPNTISFSC NTGFYLNGAD

130 140 150 160 170 180

SAKCTEEGKW SPELPVCAPI ICPPPSIPTF ATLRVYKPSA GNNSLYRDTA VFECLPQHAM

190 200 210 220 230 240

FGNDTITCTT HGNWTKLPEC REVKCPFPSR PDNGFVNYPA KPTLYYKDKA TFGCHDGYSL

250 260 270 280 290 300

DGPEEIECTK LGNWSAMPSC KASCKVPVKK ATVVYQGERV KIQEKFKNGM LHGDKVSFFC

310 320 330 340

KNKEKKCSYT EDAQCIDGTI EVPKCFKEHS SLAFWKTDAS DVKPC

하기 도메인이 베타-2-당단백질 1에서 확인되었다:

잔기 길이 도메인 ID

1-19 19 신호 서열

20-345 326 베타-2-당단백질 1

더하여, 몇 개의 자연적으로 나타나는 변이체가 확인되었다:

잔기 변화

5 V에서 A로

107 S에서 N으로

154 R에서 H로

266 V에서 L로

325 C에서 G로

335 W에서 S로

이와 관련하여, 당업자는 면역분석으로부터 얻은 신호가 하나 이상의 항체 및 이들 항체가 결합하기 위해 필요한 에피토프를 내포하는 표적 생물분자(즉, 분석물)와 폴리펩티드 사이에서 형성된 복합체의 직접적인 결과임을 이해할 것이다. 이런 분석이 전장 베타-2-당단백질 1 분자를 검출하고 분석 결과가 베타-2-당단백질 1 농도로서 표현될 수 있지만, 분석으로부터의 신호는 실제로, 샘플에서 존재하는 모든 "면역반응성" 폴리펩티드의 결과이다. 베타-2-당단백질 1의 발현은 또한 단백질 측정(닷 블롯, 웨스턴 블롯, 크로마토그래피 방법, 질량 분석, 등과 같은) 및 핵산 측정(mRNA 정량)을 비롯하여, 면역 분석과 다른 수단에 의해 결정될 수 있다. 이 목록은 제한하는 것으로 의도되지 않는다.

본 발명에서 사용된 것과 같이, 용어 분석물의 "존재 또는 양에 신호를 관련시키는 것"은 이런 이해를 반영한다. 분석 신호는 관심 분석물의 알려진 농도를 이용하여 계산된 표준 곡선의 사용을 통해 분석물의 존재 또는 양과 전형적으로 관련된다. 상기 용어가 본 발명에서 사용된 것과 같이, 분석이 분석물의 생리학적으로 상응하는 농도의 존재 또는 양을 가리키는 검출 가능한 신호를 생성할 수 있다면, 분석은 분석물을 "검출하기 위해 설정된다". 항체 에피토프가 8개 아미노산의 차례이기 때문에, 베타-2-당단백질 1을 검출하기 위해 설정된 면역분석은 이들 폴리펩티드가 분석에서 사용된 항체 또는 항체들에 결합하기 위하여 필요한 에피토프를 내포하는 한, 또한 베타-2-당단백질 1 서열과 관련된 폴리펩티드를 검출할 것이다. 베타-2-당단백질 1과 같은 바이오마커에 대하여 본 발명에서 사용된 것과 같이, 용어 "관련된 마커"는 마커 자체에 대한 대용물로서 또는 독립적 바이오마커로서 검출될 수 있는, 특정 마커 또는 그것의 생합성 모체의 하나 이상의 단편을 지칭한다. 또한 용어는 결합 단백질, 수용체, 헤파린, 지질, 당, 등과 같은 추가적인 종과 합성된 베타-2-당단백질 1의 전구체로부터 유래한, 생물학적 샘플에 존재하는 하나 이상의 폴리펩티드를 지칭한다.

본 발명에서 사용된 것과 같이 용어 "피험체"는 인간 또는 비-인간 생명체를 지칭한다. 이런 이유로, 본 발명에서 기술한 방법 및 조성물은 인간 및 가축 질병 모두에서 사용 가능하다. 나아가, 피험체가 바람직하게는 살아있는 생명체이지만, 본 발명에서 기술한 발명은 검시 분석에서도 사용될 수 있다. 바람직한 피험체는 인간, 가장 바람직하게는 본 발명에서 사용된 것과 같이 질병 또는 건강 이상에 대하여 의학적 관리를 받고 있는 살아있는 인간을 가리키는 "환자"이다. 이것은 병리학의 신호에 대해 조사되고 있는, 병이 정의되지 않은 인간을 포함한다.

바람직하게는, 분석물은 샘플에서 측정된다. 이런 샘플은 피험체로부터 얻을 수 있거나, 피험체에게 제공되는 것을 의도한 생물학적 재료로부터 얻을 수 있다. 예를 들면, 샘플은 피험체에게 가능한 이식에 대하여 평가되는 신장으로부터 얻을 수 있고, 분석물 측정은 이미 존재하는 손상에 대하여 신장을 평가하기 위해 사용된다. 바람직한 샘플은 체액 샘플이다.

본 발명에서 사용된 것과 같이 용어 "체액 샘플"은 환자 또는 이식 제공자와 같은 관심있는 피험체의 진단, 예후, 분류 또는 평가의 목적을 위해 얻은 체액의 샘플을 지칭한다. 어떤 구체예에서, 이런 샘플은 진행중인 건강이상의 결과 또는 건강이상에 대한 치료 요법의 효과를 결정하기 위한 목적을 위해 얻을 수 있다. 바람직한 체액 샘플은 혈액, 혈청, 혈장, 뇌척수액, 소변, 타액, 가래, 그리고 흉막삼출액을 포함한다. 또한 당업자는 체액 샘플이 분류 또는 정제 절차, 예를 들면, 전체 혈액의 혈청 또는 혈장 구성 요소로의 분리 이후에, 더욱 용이하게 분석될 것이라는 것을 이해할 것이다.

본 발명에서 사용된 것과 같이 용어 "진단"은 당업자가 환자가 소정의 질병 또는 건강이상을 앓고 있는지 아닌지의 확률("가능성")을 평가 및/또는 결정할 수 있는 방법을 지칭한다. 본 발명의 경우에, "진단"은 샘플이 얻어지고 분석되는 피험체에 대한 급성 신손상 및 ARF의 진단(즉, 발생 또는 비발생)에 도달하기 위하여, 선택적으로 다른 임상적 특징과 함께 본 발명의 베타-2-당단백질 1 분석의 결과를 사용하는 것을 포함한다. 이런 진단이 "결정된다"라는 것은 진단이 100% 정확하다는 것을 암시하는 것으로 의도되지 않는다. 많은 바이오마커가 다중 건강이상을 가리킨다. 당업자는 정보 진공에서 바이오마커 결과를 사용하지 않고, 오히려 진단에 도달하기 위하여 시험 결과를 다른 임상적 표시와 함께 사용한다. 이런 이유로, 미리 결정된 진단 역치의 한 측면에서 측정된 바이오마커 수준은 미리 결정된 진단 역치의 다른 측면에서 측정된 수준에 비해 피험체에서의 질병 발생의 더 큰 가능성을 가리킨다.

유사하게, 예후 위험은 주어진 과정 또는 결과가 일어날 확률("가능성")을 나타낸다. 질병률(가령, 악화된 신장 기능, 앞으로의 ARF, 또는 죽음)의 증가된 확률과 차례로 관련된 예후 지표의 수준 또는 수준의 변화는 환자에서 불리한 결과의 "증가된 가능성을 가리키는" 것으로서 지칭된다.

베타-2-당단백질 1의 분석

일반적으로, 면역 분석은 관심있는 바이오마커를 내포하거나 내포하는 것으로 여겨지는 샘플을 바이오마커에 특이적으로 결합하는 적어도 하나의 항체와 접촉시키는 단계를 포함한다. 그 후에 항체에 대하여 샘플에서의 폴리펩티드의 결합에 의해 형성된 복합체의 존재 또는 양을 나타내는 신호가 생성된다. 따라서 신호는 샘플에서 바이오마커의 존재 또는 양과 관련된다. 바이오마커의 검출 및 분석을 위한 다수의 방법 및 장치가 당업자에게 잘 알려져 있다. 예컨대, 전체 표, 도면, 그리고 청구항을 포함하는 그 전체가 각각 참고문헌으로써 본 발명에 통합되는 미국 특허 6,143,576; 6,113,855; 6,019,944; 5,985,579; 5,947,124; 5,939,272; 5,922,615; 5,885,527; 5,851,776; 5,824,799; 5,679,526; 5,525,524; 및 5,480,792, 그리고 Immunoassay Handbook, David Wild, ed. Stockton Press, New York, 1994를 참조한다.

당업계에서 알려진 분석 장치 및 방법은 관심 바이오마커의 존재 또는 양과 관련된 신호를 생성하기 위하여, 다양한 샌드위치, 경쟁적, 또는 비-경쟁적 분석 형식에서 표지된 분자를 사용할 수 있다. 적당한 분석 형식은 크로마토그래피, 질량 분석기, 그리고 단백질 "블롯팅" 방법을 포함한다. 추가적으로, 바이오센서 및 광학적 면역 분석과 같은, 어떤 방법 및 장치는 표지된 분자를 필요로 하지 않고 분석물의 존재 또는 양을 결정하기 위하여 사용될 수 있다. 예컨대, 모든 표, 도면, 그리고 청구항을 포함하는 전체가 각각 참고문헌으로써 본 발명에 포함되는 미국 특허 5,631,171; 및 5,955,377을 참조한다. 또한, 당업자는 Beckman ACCESS®, Abbott AXSYM®, Roche ELECSYS®, Dade Behring STRATUS® 시스템을 포함하지만 이에 제한되지 않는 로봇식 기계가 면역 분석을 수행하는 능력이 있는 면역 분석 분석기 중에 있음을 인식한다. 하지만 임의의 적당한 면역 분석, 예를 들면, 효소-결합 면역 분석(ELISA), 방사선 동위원소 면역 분석(RIA), 경쟁적 결합 분석, 등이 사용될 수 있다.

항체 또는 다른 폴리펩티드가 분석에서 사용하기 위해 다양한 고체 지지체 위에 고정될 수 있다. 특이적 결합 멤버를 고정화시키기 위해 사용될 수 있는 고체상은 고체상 결합 분석에서 고체상으로서 개발 및/또는 사용된 것들을 포함한다. 적당한 고체상의 실례는 필터, 셀룰로오스-기반 종이, 비드(중합체, 라텍스 및 상자성 입자를 포함), 유리, 실리콘 웨이퍼, 미세입자, 나노입자, TentaGel, AgroGel, PEGA 겔, SPOCC 겔, 그리고 다중-웰 플레이트를 포함한다. 분석 스트립은 고체 지지체 위의 어레이에 항체 또는 다수의 항체를 코팅하는 것에 의해 제조될 수 있다. 그 다음으로 이 스트립을 시험 샘플에 담근 후 착색된 점과 같은 측정 가능한 신호를 생성하기 위한 세척 및 검출 단계를 통해 빠르게 가공될 수 있다. 항체 또는 다른 폴리펩티드는 분석 장치 표면에 직접적으로 접합시키는 것에 의해서 또는 간접 결합에 의해서 분석 장치의 특이적 구역에 결합될 수 있다. 후자의 예시에서, 항체 또는 다른 폴리펩티드는 입자 또는 다른 고체 지지체에 고정되고, 고체 지지체는 장치 표면에 고정될 수 있다.

생물학적 분석은 검출 방법이 필요한데, 결과의 정량을 위한 가장 일반적인 방법 중 하나는 연구할 생물학적 시스템에서 구성 요소 중 하나에 대하여 친화도를 갖는 단백질 또는 핵산에 검출 가능한 표지를 접합시키는 것이다. 검출 가능한 표지는 자체로 검출 가능한 분자(가령, 형광 모이어티, 전기화학적 표지, 금속 킬레이트, 등)뿐만 아니라 검출 가능한 반응 산물(가령, 양고추냉이 페록시다아제, 알칼리 포스파타아제, 등과 같은 효소)의 생산에 의해 또는 그 자신이 검출 가능한 특이적 결합 분자(가령, 비오틴, 디곡시제닌, 말토오스, 올리고히스티딘, 2,4-디니트로벤젠, 페닐 비산염, ssDNA, dsDNA, 등)에 의해 간접적으로 검출될 수 있는 분자를 포함할 수 있다

고체상 및 검출 가능한 표지 접합체의 제조는 종종 화학적 교차-링커의 사용을 포함한다. 교차-결합 시약은 적어도 두 개의 반응기를 내포하고, 일반적으로 동종기능성 교차-링커(동일한 반응기를 내포) 및 이종기능성 교차-링커(동일하지 않은 반응기를 내포)로 나뉜다. 아민, 설프하이드릴기를 통해 결합되거나 비 특이적으로 반응하는 동종이종기능성 교차-링커는 많은 상업적 공급원으로부터 구입가능하다. 말레이미드, 알킬 및 아릴 할로겐화물, 알파-할로아실 및 피리딜 이황화물은 티올 반응기이다. 말레이미드, 알킬 및 아릴 할로겐화물, 그리고 알파-할로아실은 티올 에테르 결합을 형성하기 위하여 설프하이드릴과 반응하는 반면, 피리딜 이황화물은 혼합된 이황화물을 생산하기 위해 설프하이드릴과 반응한다. 피리딜 이황화물 산물은 쪼개질 수 있다. 이미도에스테르 역시 단백질-단백질 교차-결합에 매우 유용하다. 각각이 성공적인 접합을 위한 상이한 속성을 결합하는 다양한 이종기능성 교차-링커가 상업적으로 구입가능하다.

어떤 측면에서, 본 발명은 기술된 베타-2-당단백질 1, 그리고 선택적으로 하나 이상의 다른 마커의 분석을 위한 키트를 제공한다. 키트는 베타-2-당단백질 1과 결합하는 적어도 하나의 항체를 포함하는 적어도 하나의 시험 샘플을 분석하기 위한 시약을 포함한다. 또한, 키트는 본 발명에서 기술한 진단적 및/또는 예후적 상호 관련 중에서 하나 이상을 수행하기 위한 장치 및 지침서를 포함할 수 있다. 바람직한 키트는 분석물에 대하여 샌드위치 분석을 수행하기 위한 항체 쌍, 또는 경쟁적 분석을 수행하기 위한 표지된 종을 포함할 것이다. 바람직하게는, 항체 쌍은 고체상에 접합된 첫 번째 항체 및 검출 가능한 표지에 접합된 두 번째 항체를 포함하고, 각각의 첫 번째 및 두 번째 항체는 베타-2-당단백질 1에 결합한다. 가장 바람직하게는 각각의 항체는 단일 클론 항체이다. 키트의 사용 및 상호 관련의 수행을 위한 지침서는 이를 제조하거나, 수송하거나, 판매하거나, 사용하는 동안의 임의의 시점에서, 키트에 부착되거나 달리 수반되는 임의의 문자로 쓰거나 기록된 재료를 지칭하는 라벨의 형태일 수 있다. 예를 들면, 용어 라벨은 광고 전단 및 브로셔, 포장 재료, 지침서, 오디오 또는 비디오 카세트, 컴퓨터 디스크뿐만 아니라 키트에 직접적으로 찍혀진 문서를 포함한다.

베타-2-당단백질 1 항체

본 발명에서 사용된 것과 같이 용어 "항체"는 항원 또는 에피토프와 특이적 결합 능력이 있는 면역 글로불린 유전자 또는 면역 글로불린 유전자들, 또는 이들의 단편으로부터 유도되거나, 이들을 본떠서 만들었거나, 이들에 의해 실질적으로 암호화되는 펩티드 또는 폴리펩티드를 지칭한다. 예컨대, Fundamental Immunology, 3rd Edition, W. E. Paul, ed., Raven Press, N.Y. (1993); Wilson (1994; J. Immunol. Methods 175:267-273; Yarmush (1992) J. Biochem.Biophys. Methods 25:85-97을 참조한다. 용어 항체는 항원-결합 부분, 즉, (ⅰ) Fab 단편, VL, VH, CL 및 CH1 도메인으로 구성되는 1가 단편; (ⅱ) F(ab')2 단편, 힌지 부위에서 이황화 결합에 의해 연결된 두 개의 Fab 단편으로 구성된 2가 단편; (ⅲ) VH 및 CHl 도메인으로 구성된 Fd 단편; (ⅳ) 항체의 단일 팔의 VL 및 VH 도메인으로 구성된 Fv 단편, (ⅴ) VH 도메인으로 구성되는 dAb 단편(Ward et al., (1989) Nature 341:544-546); 및 (ⅵ) 분리된 상보성 결정 영역(CDR)을 비롯하여, 항원에 결합하기 위한 능력이 남아있는 "항원 결합 위치"(가령, 단편, 하위서열, 상보성 결정 부위(CDR))를 포함한다. 단일 사슬 항체 역시 용어 "항체"에 참고로 포함된다.

본 발명에서 기술한 면역 분석에서 사용된 항체는 바람직하게는 베타-2-당단백질 1에 특이적으로 결합한다. 용어 "특이적 결합"이란 앞에서 언급한 것과 같이, 항체가 의도된 표적에 배타적으로 결합하는 것을 가리키도록 의도되지 않는데, 그 이유는 항체가 결합하는 에피토프를 제시하는 임의의 폴리펩티드에 상기 항체가 결합하기 때문이다. 오히려, 항체는 의도된 표적에 대한 친화도가 적절한 에피토프를 제시하지 않는 비-표적 분자에 대한 친화도와 비교하여 약 5-배 더 크다면 "특이적 결합"이다. 바람직하게는 항체의 친화도는 비-표적 분자에 대한 친화도 보다 표적 분자에 대하여 적어도 약 5배, 바람직하게는 10배, 더욱 바람직하게는 25-배, 이보다 더욱 바람직하게는 50-배, 그리고 가장 바람직하게는 100-배 또는 그 이상 크다. 바람직한 구체예에서, 바람직한 항체는 적어도 약 10⁷ M^-1, 바람직하게는 약 10⁸ M^-1 내지 약 10⁹ M^-1, 약 10⁹ M^-1 내지 약 10¹⁰ M^-1, 또는 약 10¹⁰ M^-1 내지 약 10¹² M^-1의 친화도로 결합한다.

친화도는 K_d=k_off/k_on(k_off는 해리 속도 상수, K_on은 결합 속도 상수 및 K_d는 평형 상수)로서 계산된다. 친화도는 다양한 농도(c)에서 표지된 리간드의 분획(r)을 측정하는 것에 의해 평형상태에서 결정될 수 있다. 데이터는 스캐차드 방정식을 사용하여 그래프화할 수 있다: r/c=K(n-r): r=결합한 리간드의 몰수/평형상태에서 수용체의 몰수; c=평형상태에의 자유 리간드 농도; K=평형상태 결합 상수; 및 n=수용체 분자 당 리간드 결합 부위의 수. 그래프 분석에 의해, r/c는 Y축에 플롯팅하고, r은 X축에 플롯팅함으로써 스캐차드 플롯을 생성한다. 스캐차드 분석에 의한 항체 친화도 측정은 당업계에서 잘 알려져 있다. 예컨대, van Erp et al.,J. Immunoassay 12: 425-43, 1991; Nelson 및 Griswold, Comput. Methods Programs Biomed. 27: 65-8, 1988을 참조한다.

용어 "에피토프"는 항체에 대하여 특이적으로 결합할 수 있는 항원성 결정자를 지칭한다. 에피토프는 일반적으로 아미노산 또는 당 측쇄와 같은 분자의 화학적으로 활성있는 표면 그룹으로 구성되고, 특이적인 3차원 구조의 특징뿐만 아니라 특이적 전하 특징을 갖는다. 구조적 및 비구조적 에피토프는 전자에 대해서는 결합하지만, 후자에 대해서는 변성 용매가 존재할 때에는 결합하지 않는 것으로 구별된다.

다수의 간행물들이 선택된 분석물에 결합하는 것에 대한 폴리펩티드의 라이브러리를 생산 및 선별하기 위하여 파지 디스플레이 기술의 사용을 논의한다. 예컨대, Cwirla et al.,Proc. Natl. Acad. Sci. USA87, 6378-82, 1990; Devlin et al., Science 249, 404-6, 1990, Scott 및 Smith, Science249, 386-88, 1990; 및 Ladner et al., 미국특허 번호 5,571,698을 참조한다. 파지 디스플레이 방법의 기본 개념은 선별될 폴리펩티드를 암호화하는 DNA 및 폴리펩티드 사이의 물리적 회합의 성립이다. 이 물리적 회합은 폴리펩티드를 암호화하는 파지 게놈을 둘러싸는 캡시드의 일부로서 폴리펩티드를 전시하는 파지 입자에 의해 제공된다. 폴리펩티드 및 그들의 유전적 물질 사이의 물리적 회합의 성립은 상이한 폴리펩티드를 제공하는 매우 많은 수의 파지의 동시 집단 선별을 허용한다. 표적에 대한 친화도를 갖는 폴리펩티드를 전시하는 파지는 표적에 결합하고, 이들 파지는 표적에 대한 친화도 선별에 의해 농축된다. 이들 파지로부터 전시된 폴리펩티드의 정체는 그들의 개별 게놈으로부터 결정될 수 있다. 이들 방법을 사용하여 원하는 표적에 대한 결합 친화도를 갖는 것으로 확인된 폴리펩티드는 이후 전통적인 수단에 의해 대량으로 합성될 수 있다. 예컨대, 전체 표, 도면, 그리고 청구항을 포함하는 전체가 본 발명에 참고문헌으로써 포함되는 미국 특허 번호 6,057,098을 참조한다.

이들 방법에 의해 생성된 항체는 이후 관심있는 정제 폴리펩티드를 사용한 친화도 및 특이도에 대한 첫 번째 선별에 의해 선택될 수 있고, 필요하다면, 이들 항체의 친화도 및 특이도에 대한 결과를 결합으로부터 제외되기를 원하는 폴리펩티드와 비교한다. 선별 절차는 마이크로타이터 플레이트의 개별 웰에서의 정제된 폴리펩티드의 고정화를 포함할 수 있다. 가능성 있는 항체 또는 항체의 그룹을 함유하는 용액을 이후 각각의 마이크로타이터 웰에 위치시키고, 약 30분 내지 2시간 동안 배양한다. 마이크로타이터 웰을 이후 세척하고, 표지된 2차 항체(예를 들면, 발생된 항체가 마우스 항체일 때, 알칼리 포스파타아제에 접합된 항-마우스 항체)를 웰에 첨가하고, 약 30분 간 배양한 뒤 세척한다. 웰에 기질을 첨가하면, 고정된 폴리펩티드에 대한 항체가 존재하는 곳에서 변색 반응이 나타날 것이다.

이렇게 확인된 항체는 선택된 분석 설계에서 친화도 및 특이도에 대하여 더 분석될 수 있다. 표적 단백질에 대한 면역 분석의 개발에서, 정제된 표적 단백질은 선택된 항체를 사용한 면역 분석의 민감도 및 특이도를 평가하기 위한 표준으로서 작용한다. 다양한 항체의 결합 친화도가 다를 수 있기 때문에; 어떤 항체 쌍(가령, 샌드위치 분석에서)은 서로 입체적으로 간섭할 수 있고, 항체의 분석 실행은 항체의 절대 친화도 및 특이도보다 더욱 중요한 측정일 수 있다.

분석 상호 관련

베타-2-당단백질 1과 같은 바이오마커의 사용에 대한 언급에서 본 발명에서 사용된 것과 같이 용어 "상호 관련되는"은 소정의 건강이상을 앓고 있는 것으로 알려지거나 소정의 건강이상의 위험이 있는 것으로 알려진 사람에서; 또는 소정의 건강이상이 없는 것으로 알려진 사람에서 그것의 존재 또는 양에 대하여 환자에서 바이오마커의 존재 또는 양을 비교하는 것을 지칭한다. 종종, 이것은 질병의 발생 또는 비발생 또는 일부 앞으로의 결과의 가능성을 가리키는 것으로 선택된, 미리 결정된 역치에 대한 바이오마커 농도의 형태에서 분석 결과를 비교하는 것의 형태를 취한다.

진단 역치의 선별은 다른 것들 중에서, 질병의 확률 고려, 다른 시험 역치에서 진단의 참 및 거짓의 분포, 그리고 진단에 기초한 치료(또는 치료에 대한 실패)의 결과의 평가를 포함한다. 예를 들면, 효능이 높고, 낮은 위험수준을 갖는 특이적 치료를 실행하는 것을 고려할 때, 임상의가 상당한 진단 불확실성을 수용할 수 있기 때문에 시험이 거의 필요하지 않다. 다른 한편, 치료 선택이 덜 효과적이고 더 위험할 때의 상황에서, 임상의는 종종 더 높은 정도의 진단 확실성을 요구한다. 그러므로 진단 역치의 선별에서 비용/이익 분석이 포함된다.

적당한 역치는 다양한 방법으로 결정될 수 있다. 예를 들면, 심장 트로포닌을 사용하여 급성 심근 경색의 진단을 위해 추천된 하나의 진단 역치는 정상 집단에서 보인 농도의 97.5번째 백분위수이다. 다른 방법은 이전의 "베이스라인" 결과가 바이오마커 수준에서 일시적인 변화를 모니터링하기 위해 사용되는 경우에, 동일한 환자로부터 나온 일련의 샘플을 조사하는 것일 수 있다.

또한 집단 연구를 결정 역치를 선택하기 위해 사용할 수 있다. 수신기 작동 특성("ROC")은 레이더 이미지의 분석을 위해 제 2차 세계대전 동안 발전된 신호 검출 이론의 분야로부터 발생되었고, ROC 분석은 종종 "병에 걸리지 않은" 소집단으로부터 "병에 걸린" 소집단을 가장 잘 구분할 수 있는 역치를 선별하는데 사용된다. 이 경우에 양성 오류는 사람이 양성으로 평가되었지만 실제로 질병을 가지고 있지 않았을 때 일어난다. 다른 한편, 음성 오류는 사람이 그들이 건강한 것을 의미하는 음성으로 평가되었지만, 그들이 실제로 질병을 가지고 있을 때 일어난다. ROC 곡선을 그리기 위하여, 결정 역치가 계속해서 변하기 때문에 참 긍정률(TPR) 및 거짓 긍정률(FPR)이 결정된다. TPR이 민감도와 동등하고 FPR이 1-특이도와 동등하기 때문에, ROC 그래프는 때때로 민감도 대 (1-특이도) 플롯으로도 불린다. 완벽한 시험은 1.0의 ROC 곡선 하의 영역을 가질 것이고, 무작위 테스트는 0.5의 영역을 가질 것이다. 역치는 허용 가능한 수준의 특이도 및 민감도를 제공하기 위해 선택된다.

상기 문맥에서, "병에 걸린"은 하나의 특징(질병 또는 이상의 존재 또는 일부 결과의 발생)을 가지고 있는 집단을 지칭하는 것을 의미하고, "병에 걸리지 않은"은 이러한 특징이 없는 집단을 지칭하는 것을 의미한다. 단일 결정 역치가 이런 방법 중 가장 단순한 적용이기는 하지만, 다중 결정 역치가 사용될 수도 있다. 예를 들면, 첫 번째 역치 이하에서, 질병의 부재는 상대적으로 높은 신뢰도로 지정될 수 있고, 두 번째 역치 이상에서, 질병의 존재 역시 상대적으로 높은 신뢰도로 지정될 수 있다. 두 가지 역치 사이는 불확실한 것으로 간주될 수 있다. 이것은 성격상 단지 예시일 뿐이다.

역치 비교에 추가하여, 환자 분류(질병의 발생 또는 비발생, 결과의 가능성, 등)에 대한 분석 결과를 상호 관련시키기 위한 다른 방법은 의사결정 트리, 규칙 세트, 베이지안(Bayesian) 방법, 그리고 신경망 방법을 포함한다. 이들 방법은 복수의 분류 중에서 하나의 분류에 피험체가 속하는 정도를 나타내는 확률값을 만들 수 있다.

시험 정확도의 측정은 Fischer et al., Intensive Care Med. 29: 1043-51, 2003에서 기술된 것과 같이 얻을 수 있고, 주어진 바이오마커의 효율성을 결정하기 위해 사용된다. 이들 측정은 민감도 및 특이도, 예측 값, 우도비, 진단 오즈비, 그리고 ROC 곡선 영역을 포함한다. ROC 플롯의 곡선 아래 영역("AUC")은 분류자가 임의로 선택된 음성 사례보다 임의의 선택된 양성 사례를 더욱 높게 순위 매길 확률과 동등하다. ROC 곡선 아래 영역은 그룹이 연속적 데이터, 또는 윌콕슨 순위 검정일 때 고려되는 두 가지 그룹에서 얻은 점수 사이의 중앙값 차이를 시험하는 맨-휘트니 U 검정에 대한 등가물로서 생각될 수 있다.

앞에서 논의한 것과 같이, 적당한 시험은 이들 다양한 측정에 대한 하나 이상의 다음 결과를 나타낼 수 있다:

0.2 이상, 바람직하게는 0.3 이상, 더욱 바람직하게는 0.4 이상, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 0.5, 이보다 더욱 바람직하게는 0.6 이상, 이보다 더욱 바람직하게는 0.7 이상, 이보다 더욱 바람직하게는 0.8 이상, 이보다 더욱 바람직하게는 0.9 이상, 그리고 가장 바람직하게는 0.95 이상의 상응하는 민감도와 함께 0.5 이상, 바람직하게는 적어도 0.6, 더욱 바람직하게는 적어도 0.7, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 0.8, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 0.9 및 가장 바람직하게는 적어도 0.95의 특이도;

0.2 이상, 바람직하게는 0.3 이상, 더욱 바람직하게는 0.4 이상, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 0.5, 이보다 더욱 바람직하게는 0.6, 이보다 더욱 바람직하게는 0.7 이상, 이보다 더욱 바람직하게는 0.8 이상, 이보다 더욱 바람직하게는 0.9 이상, 그리고 가장 바람직하게는 0.95 이상의 상응하는 특이도와 함께, 0.5 이상, 바람직하게는 적어도 0.6, 더욱 바람직하게는 적어도 0.7, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 0.8, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 0.9 및 가장 바람직하게는 적어도 0.95의 민감도;

적어도 75%의 특이도와 결합된 적어도 75%의 민감도;

0.5 이상, 바람직하게는 적어도 0.6, 더욱 바람직하게는 0.7, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 0.8, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 0.9, 그리고 가장 바람직하게는 적어도 0.95의 ROC 곡선 영역;

1이 아닌, 바람직하게는 적어도 약 2 또는 그 이상 또는 약 0.5 또는 그 이하, 더욱 바람직하게는 적어도 약 3 또는 그 이상 또는 약 0.33 또는 그 이하, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 약 4 또는 그 이상 또는 약 0.25 또는 그 이하, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 약 5 또는 그 이상 또는 약 0.2 또는 그 이하, 그리고 가장 바람직하게는 적어도 약 10 또는 그 이상 또는 약 0.1 또는 그 이하의 오즈비;

1 이상, 적어도 2, 더욱 바람직하게는 적어도 3, 이보다 더욱 바람직하게는 적어도 5, 그리고 가장 바람직하게는 적어도 10의 양성 우도비(민감도/(1-특이도)로서 계산됨); 및/또는

1 이하, 0.5보다 적거나 같은, 더욱 바람직하게는 0.3보다 적거나 같은, 그리고 가장 바람직하게는 0.1보다 적거나 같은 음성 우도비((1-민감도)/특이도로서 계산됨).

추가적 임상적 표시는 본 발명의 베타-2-당단백질 1 분석 결과와 결합될 수 있다. 이들은 신장 상태와 관련된 다른 바이오마커를 포함한다. 실례는 하기를 포함하는데, 이것은 일반적 바이오마커 명칭, 그 뒤에 바이오마커 또는 그것의 모체에 대한 Swiss-Prot 표제 번호를 언급한다: 액틴(P68133); 아데노신 니아미나아제 결합 단백질(DPP4, P27487); 알파-1-산 글리코단백질 1(P02763); 알파-1-마이크로글로불린(P02760); 알부민(P02768); 안지오텐시노게나아제(레닌, P00797); 아넥신 A2(P07355); 베타글루쿠로니다아제 (P08236); B-2-마이크로글로불린(P61679); 베타-갈락시다아제(P16278); BMP-7 (P18075); 뇌 나트륨이뇨펩티드 펩티드(proBNP, BNP-32, NT프로BNP; P16860); 칼슘-결합 단백질 베타(S100-베타, P04271); 탄산무수화효소 (Q16790); 카제인 키나아제 2(P68400); 카텝신 B(P07858); 세룰로플라스민(P00450); 클러스테린(P10909); 보체 C3(P01024); 시스테인-풍부 단백질(CYR61, O00622); 사이토크롬 C(P99999); 상피 성장 인자(EGF, P01133); 엔도테린-1(P05305); 엑소좀 페투인-A(P02765); 지방산-결합 단백질, 심장(FABP3, P05413); 지방산-결합 단백질, 간(P07148); 페리틴(경쇄, P02793; 중쇄 P02794); 프룩토오스-1, 6 바이포스파타아제 (P09467); GRO-알파(CXCL1,(P09341); 성장 호르몬(P01241); 간세포 성장 인자(P14210); 인슐린-유사 성장 인자 I(P01343); 면역 글로불린 G; 면역 글로불린 경쇄(카파 및 람다); 인터페론감마(P01308); 리소자임(P61626); 인터루킨-1알파(P01583); 인터루킨-2 (P60568); 인터루킨-4(P60568); 인터루킨-9(P15248); 인터루킨-12p40(P29460); 인터루킨-13(P35225); 인터루킨-16(Q14005); L1 세포 부착 분자(P32004); 락테이트 디하이드로게나아제(P00338); 류신 아미노펩티다아제(P28838); 메프린 A-알파 서브유니트(Q16819); 메프린A-베타 서브유니트(Q16820); 미드카인(P21741); MIP2-알파(CXCL2, P19875); MMP-2(P08253); MMP-9(P14780); 네트린-1(O95631); 중성 엔도펩티다아제(P08473); 오스테오폰틴(P10451); 신장 유두 항원 1(RPA1); 신장 유두 항원 2(RPA2); 레티놀 결합 단백질(P09455); 리보뉴클레아제; S100 칼슘-결합 단백질 A6(P06703); 혈청 아밀로이드 P 구성요소(P02743); 나트륨/수소 교환 이소폼(NHE3, P48764); 스퍼미딘/스퍼민 N1-아세틸전이효소(P21673); TGF-베타1(P01137); 트랜스페린(P02787); 트레포일 인자 3, Q07654); 톨-유사 단백질 4(O00206); 전체 단백질; 세뇨간질성 신염 항원(Q9UJW2); 유리모둘린(탐-호스폴 단백질, P07911).

위험도 평가의 목적을 위해, 아디포넥틴(Q15848); 알칼리포스파타아제(P05186); 아미노펩티다아제 N(P15144); 칼빈딘D28k(P05937); 시스타틴 C(P01034); F1FO ATP아제의 서브유니트 8(P03928); 감마-글루타밀전이효소(P19440); GSTa(알파-글루타티온-S-전이효소, P08263); GSTpi(글루타티온-S-전이효소 P; GST 클래스-파이; P09211); IGFBP-1(P08833); IGFBP-2(P18065); IGFBP-6(P24592); 막 고정 단백질 1(Itm1, P46977); 인터루킨-6(P05231); 인터루킨-8(P10145); 인터루킨-18(Q14116); IP-10(10 kDa 인터페론-감마-유도 단백질, P02778); IRPR(IFRD1, O00458); 이소발레릴-CoA 디하이드로게나아제(IVD, P26440); I-TAC/CXCL11(O14625); 케라틴19(P08727); Kim-1 (A형 간염 바이러스 세포 수용체 1, O43656); L-아르기닌: 글리신 아미노전이효소(P50440); 렙틴(P41159); 리포칼린2(NGAL, P80188); MCP-1(P13500); MIG(감마 인터페론-유도 모노카인Q07325); MIP-1a(P10147); MIP-3a(P78556); MIP-1베타 (P13236); MIP-1d(Q16663); NAG(N-아세틸-베타-D-글루코사미니다아제, P54802); 유기 이온 트랜스포터(OCT2, O15244); 오스테오프로테제린(O14788); P8 단백질(O60356); 플라스미노겐 활성자 억제자 1(PAI-1, P05121); ProANP(1-98)(P01160); 단백질 포스파타아제 1-베타(PPI-베타, P62140); Rab GDI-베타(P50395); 신장 칼리크레인 (Q86U61); 막 고정 단백질의 RT1. B-1(알파) 사슬(Q5Y7A8); 가용성 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 멤버 1A(sTNFR-I, P19438); 가용성 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 멤버 1B(sTNFR-II, P20333); 메탈로프로테나아제 3의 조직 억제자(TIMP-3, P35625); uPAR(Q03405)이 본 발명의 베타-2-당단백질 1 분석 결과와 결합될 수 있다.

본 발명의 베타-2-당단백질 1 분석 결과와 결합될 수 있는 다른 임상적 표시는 인구 통계 정보(가령, 체중, 성별, 나이, 인종), 병력(가령, 가족력, 수술의 유형, 동맥류, 울혈성 심부전, 전자간증, 경련, 진성 당뇨병, 고혈압, 관상 동맥 질환, 단백뇨, 신장 기능 부전, 또는 패혈증과 같은 이미 존재하는 질병, NSAID, 시클로스포린, 타크로리무스, 아미노글리코사이드, 포스카넷, 에틸렌 글리콜, 헤모글로빈, 미오글로빈, 이포스파마이드, 중금속, 메토트렉사트, 방사선 불투과성 조영제, 또는 스트렙토조토신과 같은 독소 노출의 유형), 임상 변수(가령, 혈압, 온도, 호흡 속도), 위험 점수(APACHE 점수, PREDICT 점수, UA/NSTEMI에 대한 TIMI 위험 점수, 프레이밍햄 위험 점수), 소변 전체 단백질 측정, 신사구체 여과 속도, 추정 신사구체 여과 속도, 소변 생산 속도, 혈청 또는 혈장 크레아티닌 농도, 신장 유두 항원 1(RPA1) 측정; 신장 유두 항원 2(RPA2) 측정; 소변 크레아티닌 농도, 나트륨 분획 배설율, 소변 나트륨 농도, 소변 크레아티닌 대 혈청 또는 혈장 크레아티닌 비, 소변 비중, 소변 오스몰, 소변요소질소 대 혈장 요소질소 비, 혈장 BUN 대 크레아티닌 비, 및/또는 소변 나트륨/(소변 크레아티닌/혈장 크레아티닌)으로서 계산되는 신부전 지표를 포함한다. 베타-2-당단백질 1 분석 결과와 결합될 수 있는 신장기능의 다른 측정은 하기 및 그 전체가 각각 본 발명에 참고문헌으로써 통합되는 기존 문헌에서 기술되었다(Harrison's Principles of Internal Medicine, 17thEd., McGraw Hill, New York, pages 1741-1830, 그리고 Current MedicalDiagnosis & Treatment 2008, 47^th Ed, McGraw Hill, New York, pages 785-815).

이러한 방식으로 분석 결과/임상적 표시를 결합하는 것은 다변량 회기 분석, 로그 선형 모형, 신경망 분석, m-중-n 분석, 의사결정 트리 분석, 등의 사용을 포함할 수 있다. 이 목록은 제한하는 것으로 의도되지 않는다.

급성 신부전의 진단

앞에서 언급한 것과 같이, 본 발명에서 사용된 것과 같은 용어 "급성 신장(또는 신장) 손상" 및 "급성 신장(또는 신장) 실패"는 베이스라인 값으로부터 혈청 크레아티닌의 변화에 관하여 부분적으로 정의된다. ARF의 대부분의 정의는 혈청 크레아티닌 및, 종종, 요배설량의 사용을 포함하는 공통 요소를 갖는다. 환자는 이 비교에서 사용하기 위한 신장 기능의 사용가능한 베이스라인 측정이 없는 신장 기능 장애가 존재할 수 있다. 이런 경우에, 환자가 처음에 정상 GFR을 가졌다고 가정하는 것에 의해 베이스라인 혈청 크레아티닌 값을 평가할 수 있다. 신사구체 여과 속도(GFR)는 단위 시간당 보먼 주머니 내로 신장 신사구체 모세혈관으로부터 여과되는 체액의 부피이다. 신사구체 여과 속도(GFR)는 자유롭게 여과되지만, 재흡수되거나 신장에 의해 분비되지 않아 혈액에서 일정한 수준을 갖는 임의의 화학물질을 측정하는 것에 의해 계산될 수 있다. GFR은 전형적으로 ml/min의 단위로 표현된다:

체표면 영역에 대하여 GFR을 평준화하는 것에 의해, 대략 1.73 m²당 대략 75-100 ml/min의 GFR이 가정될 수 있다. 그러므로 측정된 속도는 혈액의 계산 가능한 부피로부터 비롯하는 소변에서의 물질의 양이다.

몇몇의 다른 기술이 신사구체 여과 속도(GFR 또는 eGFR)를 계산하거나 평가하기 위해 사용되고 있다. 그러나, 임상적 실행에서 크레아티닌 제거가 GFR을 측정하기 위해 사용된다. 크레아티닌은 신체에서 천연적으로 생산된다(크레아티닌은 근육에서 찾을 수 있는, 크레아티닌의 대사산물이다). 그것은 신사구체에 의해 자유롭게 여과되지만, 또한 크레아티닌 제거가 실제 GFR을 10-20% 정도 과대평가할 만큼 매우 적은 양으로 신장 세관에 의해 활발히 분비된다. 이러한 오차 범위는 크레아티닌 제거를 측정하는 것이 용이하다는 점을 고려하면 허용될 수 있다.

크레아티닌 제거(CCr)는 크레아티닌의 소변 농도(UCr), 소변 유속(ⅴ), 그리고 크레아티닌의 혈장 농도(PCr)에 대한 값이 알려졌을 때 계산될 수 있다. 소변 농도 및 소변 유속의 산물이 크레아티닌의 배설 속도를 산출하므로, 크레아티닌 제거는 또한 그것의 혈장 농도에 의해 나눗셈된 그것의 배설 속도(UCrxV)인 것으로 일컬어진다:

하루 아침의 빈-방광으로부터 다음날 아침의 방광의 내용물까지 보통 24시간의 소변 수집을 착수하였고, 이후 비교 혈액 시험을 수행하였다.

다른 크기를 가진 사람들 사이의 결과의 비교를 허용하기 위해, CCr은 종종 체표면 영역(BSA)에 대하여 정정되고, 평균 크기의 남자와 비교하여 ml/min/1.73 m2로 표현된다. 대부분의 어른이 1.7(1.6-1.9) 근처의 BSA를 가지고 있지만, 고도로 비만이거나 마른 환자는 그들의 CCr이 그들의 실제 BSA에 대하여 정정되어야만 한다.

신사구체 여과 속도(GFR)가 떨어짐에 따라, 크레아티닌 분비가 증가하기 때문에, 크레아티닌 제거 측정의 정확도(심지어 수집이 완료되었을 때)는 제한되고, 그러므로 혈청 크레아티닌의 증가가 더 적다. 이런 이유로, 크레아티닌 배설은 여과된 양보다 더 많고, 잠재적으로 GFR의 큰 과대평가(두 배 차이만큼)를 야기한다. 그러나 임상적 목적을 위해서, 신장 기능이 안정될 것인지, 나빠지거나 좋아질 것인지 여부를 결정하는 것은 중요하다. 이것은 종종 혈청 크레아티닌을 단독으로 모니터링하는 것에 의해 결정된다. 크레아티닌 제거와 유사하게, 혈청 크레아티닌은 ARF의 비-안정-상태 조건에서는 GFR를 정확하게 반영하지 않는다. 그럼에도 불구하고, 베이스라인으로부터의 혈청 크레아티닌 변화에 대한 정도는 GFR의 변화를 반영할 것이다. 혈청 크레아티닌은 용이하고 쉽게 측정되며, 신장 기능에 특이적이다.

mL/kg/hr 기초에서 요배설량으로 요배설량을 측정하는 목적을 위해서, 시간별 소변 수집 및 측정이 적절하다. 예를 들면, 오직 24-시간 누적 결과가 사용가능했고, 제공된 환자 체중이 없었던 경우에, RIFLE 요배설량 표준의 근소한 변형이 기술되었다. 예를 들면, Bagshaw et al., Nephrol. Dial.Transplant. 23:1203-1210, 2008은 평균 환자 체중을 70 kg으로 추정하고, 환자는 하기에 기초하여 RIFLE 분류가 지정된다: <35mL/h (위험), <21 mL/h(손상) 또는 <4 mL/h(실패).

치료 요법의 선택

일단 진단이 되면, 임상의는 신장 대체 요법의 시작, 신장에 손상을 주는 것으로 알려진 화합물의 전달의 철회, 신장 이식, 신장에 손상을 주는 것으로 알려진 절차의 지연 또는 회피, 이뇨제 투여의 변형, 목표 유도된 치료의 시작, 등과 같은 진단과 양립할 수 있는 치료 요법을 용이하게 선택할 수 있다. 당업자는 본 발명에서 기술된 진단의 방법과 관련하여 논의된 다수의 질병에 대한 적절한 치료를 인지한다. 예컨대, Merck Manual of Diagnosis 및 Therapy, 17th Ed. Merck Research Laboratories, White house Station, NJ, 1999를 참조한다. 또한, 본 발명에서 기술된 방법 및 조성물이 예후 예측 정보를 제공하므로, 본 발명의 마커는 치료의 경과를 모니터링하는데 사용될 수 있다. 예를 들면, 향상되거나 악화된 예후 상태는 특정 치료가 효능이 있거나 없는 것을 가리킬 수 있다.

당업자는 본 발명이 목적을 수행하고, 언급한 결과 및 이익뿐만 아니라 이들에 내재된 결과 및 이익을 얻기 위해 잘 적응된다는 것을 용이하게 인식할 것이다. 본 발명에서 제공된 실시예는 바람직한 구체예의 예시이며, 발명의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않는다.

실시예 1: 조영제-유도 신증 샘플 수집

이 샘플 수집 연구의 목적은 혈관 내 조영제를 받기 전후에 환자로부터 혈장 및 소변의 샘플 및 임상 데이터를 수집하는 것이다. 요오드화된 조영제의 혈관 내 투여를 포함하는 방사선 사진술/혈관 촬영 절차를 받은 대략 250명의 성인이 등록되었다. 본 연구에 등록되기 위해서는, 각각의 환자는 다음 포함 기준의 전부와 일치해야 하며, 다음 제외 기준 중에서 어느 것과도 일치하지 않아야 한다:

포함 기준

18세 또는 그 이상인 연령의 남성 및 여성;

조영제의 혈관 내 투여를 포함하는 방사선 사진술/혈관 촬영 절차(CT 스캔 또는 관동맥 중재술과 같은)를 받음;

조영제 투여 후 적어도 48시간 동안 입원 치료가 예상됨.

연구 참가에 대한 서면 동의서를 제공하고 모든 연구 절차를 자발적으로 따를 수 있음.

제외 기준

신장 이식 수령자;

조영제 절차 전에 신장 기능이 급성으로 악화됨;

등록 시 이미 투석을 받고 있거나(급성 또는 만성 둘 중 하나) 투석이 절박하게 요구됨;

주요 수술 절차(심폐 우회술을 포함하는 것과 같은) 또는 조영제 투여후 48시간 내에 진전된 신장 손상에 대한 유의미한 위험이 있는 조영제를 사용한 추가적인 이미징 절차를 겪는 것이 예상됨;

이전의 30일 내에 실험적 치료와 함께 개입적 임상 연구에 참가;

인간 면역결핍 바이러스(HIV) 또는 간염 바이러스에 대한 감염이 알려짐

첫 번째 조영제를 투여하기 바로 전에(및 임의의 전-절차 수화 후), EDTA 항-응고 혈액 샘플(10 mL) 및 소변 샘플(10 mL)을 각각의 환자로부터 수득한다. 이후 혈액 및 소변 샘플을 표지 조영제 절차 동안 조영제의 마지막 투여에 이어 4(±0.5), 8(±1), 24(±2), 48(±2), 그리고 72(±2)시간에서 수집한다. 혈액은 직접 정맥 천자를 통해 또는 현존하는 대퇴부 집, 중앙 정맥 선, 말단 정맥 내 선, 또는 헵-락(hep-lock)과 같은 다른 사용가능한 정맥접근을 통해 수득된다. 이들 연구 혈액 샘플은 임상 장소에서 혈장으로 가공되고, 동결시켜 Astute Medical, Inc., San Diego, CA로 발송된다. 연구 소변 샘플은 동결시켜 Astute Medical, Inc. 로 발송된다.

혈청 크레아티닌은 현장에서 첫 번째 조영제 투여 바로 전(임의의 전-절차 수화 후) 및 조영제의 마지막 투여에 이은 4(±0.5), 8(±1), 24(±2) 및 48(±2), 그리고 72(±2) 시간에서(이상적으로 연구 샘플을 수득한 것과 동일한 시간에서) 평가되었다. 추가로, 각각의 환자의 상태는 추가적인 혈청 및 소변 크레아티닌 측정, 투석에 대한 필요, 입원 상태, 그리고 불리한 임상 결과(사망률 포함)에 대하여 30일 동안 평가되었다.

조영제 투여 전에, 각각의 환자는 하기 평가에 기초한 위험이 지정된다: 심장 수축 혈압 <80 mm Hg=5점; 동맥내 풍선 펌프=5점; 울혈성 심부전(Ⅲ-IV기 또는 폐 부종 병력)=5점; 연령 >75세=4점; 헤마토크릿(hematocrit) 수준 <39%(남성), <35%(여성)=3점; 당뇨=3점; 조영제 부피= 각 100 mL 당 1점; 혈청 크레아티닌 수준 >1.5 g/dL=4점 또는 추정된 GFR40-60 mL/분/1.73 m²=2점, 20-40 mL/분/1.73 m²=4점, <20 mL/분/1.73 m²=6점. 지정된 위험은 하기와 같다: CIN 및 투석에 대한 위험: 5 또는 그 이하 총점 = CIN 위험 - 7.5%, 투석 위험 - 0.04%; 6 - 10 총점 = CIN 위험 - 14%, 투석 위험 - 0.12%; 11 - 16 총점 = CIN 위험 - 26.1%, 투석 위험 - 1.09%; >16 총점 = CIN 위험 - 57.3%, 투석 위험-12.8%.

실시예 2: 심장 수술 샘플 수집

이 샘플 수집 연구의 목적은 신장 기능에 대한 잠재적 손상이 있는 것으로 알려진 절차인 심혈관 수술을 받기 전후에 환자로부터 혈장 및 소변의 샘플 및 임상 데이터를 수집하는 것이다. 이런 수술을 받은 대략 900명의 성인이 등록되었다. 본 연구에 등록되기 위해서는, 각각의 환자는 하기 포함 기준의 전부와 일치해야 하며, 다음 제외 기준 중에서 어느 것과도 일치하지 않아야 한다:

포함 기준

18세 또는 그 이상인 연령의 남성 및 여성;

심혈관 수술을 받음;

적어도 2의 신장 대체 위험 점수에 대한 토론토/오타와 예측 위험 지표(Wijeysundera et al., JAMA 297: 1801-9, 2007); 및

제외 기준

알려진 임신;

이전의 신장 이식;

등록 전에 신장 기능이 급성으로 악화됨(가령, RIFLE 표준의 임의의 카테고리);

최근 다른 임상 연구에 등록했었거나 약물 주입 또는 AKI에 대한 치료 개입을 포함하는 심장 수술 후 7일 내에 다른 임상 연구에 등록될 것으로 예상됨;

인간 면역결핍 바이러스(HIV) 또는 간염 바이러스에 대한 감염이 알려짐.

첫 번째 절개 전 3시간 내에(및 임의의 전-절차 수화 후), EDTA 항-응고 혈액 샘플(10 mL), 전혈액(3 mL), 그리고 소변 샘플(35 mL)을 각각의 환자로부터 수득하였다. 이후 혈액 및 소변 샘플을 절차에 따라 3(±0.5), 6(±0.5), 12(±1), 24(±2) 및 48(±2) 시간에서, 만약 피험체가 병원에 남아있다면 이후 3일 내지 7일에 매일 수득하였다. 혈액은 직접 정맥 천자를 통해 또는 현존하는 대퇴부 집, 중앙 정맥 선, 말단 정맥 내 선, 또는 헵-락(hep-lock)과 같은 다른 사용가능한 정맥 접근을 통해 수득된다. 이들 연구 혈액 샘플은 동결시켜 Astute Medical, Inc., San Diego, CA로 발송된다. 연구 소변 샘플은 동결시켜 Astute Medical, Inc. 로 발송된다.

실시예 3: 급성으로 아픈 피험체 샘플 수집

이 연구의 목적은 급성으로 아픈 환자로부터 샘플을 수집하는 것이다. 적어도 48시간 동안 ICU에 있을 것으로 예상되는 대략 900명의 성인이 등록될 것이다. 본 연구에 등록되기 위해서는, 각각의 환자는 하기 포함 기준의 전부와 일치해야 하며, 다음 제외 기준 중에서 어느 것과도 일치하지 않아야 한다:

포함 기준

18세 또는 그 이상인 연령의 남성 및 여성;

연구 집단 1: 하기 중 적어도 하나를 갖는 대략 300명의 환자:

쇼크(SBP <90 mmHg 및/또는 MAP >60 mmHg를 유지시키기 위한 혈관 수축 지원의 필요 및/또는 적어도 40 mmHg의 SBP에서 증명된 강하); 및

패혈증;

연구 집단 2: 하기 중 적어도 하나를 갖는 대략 300명의 환자:

등록 24시간 내에 처방 자동화 시스템(CPOE)에서 주문된 IV 항생제

등록 24시간 내의 조영제 노출;

급성 비대상성 심부전과 함께 증가된 복강내압; 및

ICU 승인의 첫 번째 이유로서 심각한 외상 및 등록후 48시간 동안 ICU에서 입원 치료를 받게 될 것 같음;

연구 집단 3: 대략 300명의 환자

급성 신손상에 대하여 알려진 위험 인자로 급성 관리 세팅(ICU 또는 ED)을 통해 병원 치료를 받게 될 것이 예상됨(가령, 패혈증, 저혈압/쇼크(쇼크=심장 수축성 BP <90 mmHg 및/또는 MAP >60 mmHg를 유지시키기 위한 혈관 수축 지원의 필요 및/또는 SBP >40 mmHg에서 증명된 강하), 주요 외상, 방혈, 또는 주요 수술); 및/또는 등록후 적어도 24시간 동안 ICU에 대하여 입원 치료를 받을 것으로 예상됨.

제외 기준

알려진 임신;

자립할 능력이 모자라는 개체;

이전의 신장 이식;

등록 전에 신장 기능이 급성으로 악화됨이 알려짐(가령, RIFLE 표준의 임의의 카테고리);

등록 전 5일 내에 투석을 받았거나(급성 또는 만성 둘 중 하나) 등록 시에 투석이 절박하게 요구됨;

인간 면역결핍 바이러스(HIV) 또는 간염 바이러스에 대한 감염이 알려짐;

오직 앞에서 진술한 SBP <90 mmHg 포함 기준을 만족하고, 그리고 주치의 또는 시험 책임자의 소견에서 쇼크가 없음.

고지에 입각한 동의서를 제공한 후, EDTA 항-응고 혈액 샘플(10 mL) 및 소변 샘플 25-30 mL)을 각각의 환자로부터 수집하였다. 이후 혈액 및 소변 샘플은 조영제 투여(만약 적용가능하다면)후 4(±0.5) 및 8(±1) 시간에서; 등록후 12(±1), 24(±2), 그리고 48(±2) 시간에서, 그리고 그 후 피험체가 병원 치료를 받는 동안 7일 내지 14일까지 매일 수집되었다. 혈액은 직접 정맥 천자를 통해 또는 현존하는 대퇴부 집, 중앙 정맥 선, 말단 정맥 내 선, 또는 헵-락(hep-lock)과 같은 다른 사용가능한 정맥 접근을 통해 수집된다. 이들 연구 혈액 샘플은 임상 장소에서 혈장으로 가공되고, 동결시켜 Astute Medical, Inc., San Diego, CA로 발송된다. 연구 소변 샘플은 동결시켜 Astute Medical, Inc. 로 발송된다.

실시예 4. 베타-2-당단백질 1 면역 분석

베타-2-당단백질 1의 분석물은 표준 샌드위치 효소 면역 분석 기술을 사용하여 측정한다. 분석물에 결합하는 일차 항체는 96웰 폴리스티렌 마이크로플레이트의 웰에 고정된다. 분석물 표준 및 시험 샘플은 적당한 웰에 피펫팅되고, 존재하는 임의의 분석물은 고정된 항체에 의해 결합된다. 임의의 비결합 물질을 씻어낸 후, 분석물에 결합하는 양고추냉이 페록시다아제-접합 이차 항체를 웰에 첨가하고, 그것으로 인해 분석물(만약 존재한다면) 및 일차 항체와 샌드위치 복합체가 형성된다. 임의의 비결합 항체-효소 시약을 제거하기 위해 씻어낸 다음, 테트라메틸벤지딘 및 과산화수소를 포함하는 기질 용액을 웰에 첨가한다. 샘플에서 존재하는 분석물의 양에 따른 비율대로 색깔이 발현된다. 색깔 발현을 정지시키고, 색깔의 강도는 540 nm 또는 570 nm에서 측정한다. 분석물 농도는 분석물 표준으로부터 결정된 표준 곡선과 비교함으로써 시험 샘플에 대하여 배정된다.

실시예 5. 명백히 건강한 제공자 및 만성 질병 환자 샘플

알려진 만성 또는 급성 질병이 없는 제공자("명백히 건강한 제공자")의 인간 소변 샘플은 두 개의 공급업체 (Golden West Biologicals, Inc., 27625 Commerce Center Dr., Temecula, CA 92590 및 Virginia Medical Research, Inc., 915 First Colonial Rd., Virginia Beach, VA 23454)로부터 구매하였다. 소변 샘플을 배송하였고, 적어도 -20℃ 이하에서 동결 보관하였다. 공급업체는 성별, 인종(흑인/백인), 흡연 상태 및 연령을 포함하는 개별 제공자에 대한 인구 통계 정보를 공급하였다.

울혈성 심부전, 관상 동맥 질환, 만성 신장 질환, 만성 폐쇄성 폐질환 질병, 진성 당뇨병 및 고혈압을 포함하는 다양한 만성 질병이 있는 제공자("만성 질병 환자")의 인간 소변 샘플은 Virginia Medical Research, Inc., 915 First Colonial Rd., Virginia Beach, VA 23454로부터 구입하였다. 소변 샘플은 -20℃ 이하에서 배송하였고, 동결 보관하였다. 공급업체는 연령, 성별, 인종(흑인/백인), 흡연 상태 및 음주 습관, 키, 체중, 만성 질병 진단, 최근 약물 복용 및 이전의 수술을 포함하는 각각의 개별 제공자에 대한 사례 보고서 서식을 제공하였다.

실시예 6. RIFLE 단계 0에서 환자의 신장 상태를 평가하기 위한 마커로서 베타-2-당단백질 1의 용도

중환자실(ICU)에 있는 환자는 RIFLE 표준에 의해 결정된 것과 같이 등록한지 7일 내에 도달된 최대 단계에 따라 비-손상(0), 손상의 위험(R), 손상(i), 그리고 실패(F)와 같은 신장 상태에 의해 분류되었다.

두 가지 코호트를 단계 0을 넘어 진행되지 않은 환자(코호트 1) 및 10일 내에 단계 R, I, 또는 F에 도달하는 환자(코호트 2)로 정의하였다. ICU에서 환자 내부에서 일어나는 정상 마커 변동을 설명하고, 그로 인해 AKI 상태를 모니터링하는 것의 유용성을 평가하기 위해, 소변 샘플에서의 마커 수준을 코호트 1에서 수집하였다. 베타-2-당단백질 1 농도는 코호트 2에서 단계 R, I 또는 F에 도달하기 전 0, 24시간, 그리고 48시간에서 피험체로부터 수득한 소변 샘플에서 측정되었다. 다음의 표에서, "최대값 단계 전" 시간은 특정 환자가 코호트에 대하여 정의된 바 가장 낮은 질병 단계에 도달하는 시간에 비하여, +/-12시간인 세 가지 그룹으로 나눠진, 샘플이 수집된 시간을 나타낸다. 예를 들면, 이 실시예에 대한 24시간 전(0 대 R, I, F)은 단계 R(또는 R에서 샘플이 없을 경우 I, 또는 R 또는 I에서 샘플이 없을 경우 F)에 도달하기 전 24시간(+/-12시간)을 의미할 것이다.

베타-2-당단백질 1은 시판하는 분석 시약을 사용하여 표준 면역 분석 방법에 의해 측정되었다. 다음의 실시예에서 농도는 ㎍/mL로 표시하였다. 수신기 작동 특성(ROC)곡선은 베타-2-당단백질 1에 대하여 생성되었고, 각각의 ROC 곡선 아래 영역(AUC)을 측정하였다. 코호트 2에 있는 환자를 또한 혈청 크레아티닌 측정(sCr)에 기초하여, 요배설량(UO)에 기초하여, 또는 혈청 크레아티닌 측정 또는 요배설량 중 어느 하나에 기초하여 단계 R, I, 또는 F를 판정하는 이유에 따라 구별하였다. 즉, 혈청 크레아티닌 측정 단독에 기초하여 단계 R, I, 또는 F로 판정된 환자들의 경우에, 단계 0 코호트는 요배설량에 기초하여 단계 R, I, 또는 F로 판정된 환자를 포함할 수 있고; 요배설량 단독에 기초하여 단계 R, I, 또는 F로 판정된 환자들의 경우에, 혈청 크레아티닌 측정에 기초하여 단계 R, I, 또는 F로 판정된 환자를 포함할 수 있고; 그리고 혈청 크레아티닌 측정 또는 요배설량에 기초하여 단계 R, I, 또는 F로 판정된 환자들의 경우에, 혈청 크레아티닌 측정 및 요배설량 모두에 대하여 단계 0 코호트는 오직 단계 0인 환자를 포함한다. 또한, 혈청 크레아티닌 측정 또는 요배설량에 기초하여 단계 R, I, 또는 F로 판정된 환자들의 경우에, 가장 심각한 RIFLE 단계를 산출하는 판정 방법이 사용되었다.

다음의 통계치를 얻었다:

다음의 표에서, 코호트 2(RIFLE R, I 또는 F로 진행되는 피험체)로부터 코호트 1(RIFLE 0에 남아있는 피험체)을 구별하는 능력은 ROC 분석을 사용하여 측정하였다. SE는 AUC의 표준 오차이고, n은 샘플 또는 개별 환자("pt,"로 표시)의 수이다. 표준 오차는 Hanley, J. A.and McNeil, B. J., The meaning and use of the area under a receiver operating characteristic (ROC) curve. Radiology(1982) 143: 29-36에서 기술한 바와 같이 계산되었고; p값은 양측-꼬리 Z-검정으로 계산되었다.

다양한 역치(또는 "컷오프") 베타-2-당단백질 1 농도 및 코호트 2로부터 코호트 1을 구분하기 위한 관련된 민감도 및 특이도가 다음 표에서 보여준 바와 같이 선택되었다. OR은 특정 컷오프 농도에 대하여 계산된 오즈비이고, 95% CI는 오즈비에 대한 신뢰구간이다.

실시예 7. RIFLE 단계 0 및 R에서 환자의 신장 상태를 평가하기 위한 마커로서 베타-2-당단백질 1의 용도

환자는 실시예 6에서 기술한 것과 같이 분류되고 분석되었다. 그러나 단계 R에는 도달했지만 단계 I 또는 F로 진행되지 않는 환자는 코호트 1에서 비-손상 단계 0으로부터 나온 환자와 같은 그룹으로 넣었다. 본 실시예에서 코호트 2는 오직 단계 I 또는 F로 진행된 환자만을 포함했다. 소변 샘플에서 베타-2-당 단백질 1의 농도는 코호트 1에 대하여 포함된다. 단계 I 또는 F에 도달하는 것의 0, 24, 그리고 48시간 내에 수집된 소변 샘플에서의 베타-2-당 단백질 1의 농도는 코호트 2에 대하여 포함된다.

다음의 통계치를 얻었다:

다음의 표에서 코호트 2(RIFLE I 또는 F로 진행되는 피험체)로부터 코호트 1(RIFLE 0 또는 R에 남아있는 피험체)을 구별하는 능력은 ROC 분석을 사용하여 측정하였다.

실시예 8. 단계 R에서 단계 I 및 F로 진행되는 환자의 신장 상태를 평가하기 위한 마커로서 베타-2-당단백질 1의 용도

환자는 실시예 6에서 기술한 것과 같이 분류되고 분석되었지만, 오직 단계 R에 도달한 환자들만 본 실시예에 포함되었다. 코호트 1은 단계 R에 도달했지만, 10일 내에 단계 I 또는 단계 F로 진행되지 않는 환자를 포함했고, 코호트 2는 단계 I 또는 F로 진행된 환자들만 포함했다. 단계 R에 도달하는 12시간 내에 수집된 소변 샘플에서의 베타-2-당단백질 1 농도는 코호트 1 및 2 모두에 대한 분석에서 포함되었다.

다음의 통계치를 얻었다:

다음의 표에서 코호트 2(RIFLE I 또는 F로 진행되는 피험체)로부터 코호트 1(RIFLE R에 남아있는 피험체)을 구별하는 능력은 ROC 분석을 사용하여 측정하였다.

다양한 역치(또는 "컷오프") 베타-2-당단백질 1 농도 및 코호트 2로부터 코호트 1을 구분하기 위한 관련된 민감도 및 특이도가 하기 표에서 보여준 바와 같이 선택되었다. OR은 특정 컷오프 농도에 대하여 계산된 오즈비이고, 95% CI는 오즈비에 대한 신뢰구간이다.

실시예 9. ICU 환자 집단의 마커로서 베타-2-당단백질 1의 평가

중환자실(ICU)로부터 환자가 다음의 연구에 등록되었다. 각 환자는 RIFLE 기준에 의해 측정된 것과 같이 등록 7일 내에 도달한 최고 단계에 따라 신장 상태에 의해, 비손상(0), 손상의 위험(R), 손상(I), 그리고 실패(F)로 분류되었다. EDTA 항-응고 혈액 샘플(10 mL) 및 소변 샘플 (25-30 mL)을 등록시에, 조영제 투여(만일 가능하다면)후 4(±0.5) 및 8(±1) 시간; 등록후 12(±1), 24(±2), 그리고 48(±2) 시간, 그리고 그 후 피험자가 입원 치료를 받는 동안 7일에서 14일까지 매일 각 환자로부터 수집되었다. 수집된 소변 샘플과 혈액 샘플의 혈장 성분에서 베타-2-당단백질 1은 상업적으로 구입가능한 분석 시약을 사용한 표준 면역분석 방법에 의해서 측정되었다.

두 가지 코호트는 다음 각 표의 도입부에서 기술된 바와 같이 정의되었다. 다음 표에서, 시간 "최대 단계 전"은 코호트에 대해서 정의한 것과 같이 특정 환자가 가장 낮은 질병 단계에 도달하는 시간에 비하여, +/-12시간인 세 가지 그룹으로 나눠진, 샘플이 수집된 시간을 나타낸다. 예를 들면, 0 대 R, I, F를 두 가지 코호트로서 이용하는 "24시간 전"은 단계 R(또는 R에서 샘플이 없을 경우 I, 또는 R 또는 I에서 샘플이 없을 경우 F)에 도달하기 전 24시간(+/-12시간)을 의미할 것이다.

수신기 작동 특성(ROC) 곡선은 베타-2-당단백질 1에 대하여 생성되었고, 각각의 ROC 곡선 아래 영역(AUC)을 측정하였다. 코호트 2의 환자는 또한 혈청 크레아티닌 측정(sCr)에 기초하여, 요배설량(UO)에 기초하여, 또는 혈청 크레아티닌 측정 또는 요배설량 중 어느 하나에 기초하여 코호트 2로 판정하는 이유에 따라 구별하였다. 상기에 기술한 동일 샘플(0 대 R, I, F)을 사용하여 혈청 크레아티닌 측정 단독에 기초하여 단계 R, I, 또는 F로 판정된 환자들의 경우에, 단계 0 코호트는 요배설량에 기초하여 단계 R, I, 또는 F로 판정된 환자를 포함할 수 있고; 요배설량 단독에 기초하여 단계 R, I, 또는 F로 판정된 환자들의 경우에, 단계 0 코호트는 혈청 크레아티닌 측정에 기초하여 단계 R, I, 또는 F로 판정된 환자를 포함할 수 있고; 그리고 혈청 크레아티닌 측정 또는 요배설량에 기초하여 단계 R, I, 또는 F로 판정된 환자들의 경우에, 단계 0 코호트는 혈청 크레아티닌 측정 및 요배설량 모두에 대하여 단계 0인 환자만을 포함한다. 또한, 혈청 크레아티닌 측정 또는 요배설량에 기초하여 판정된 환자들에 대한 데이터에서, 가장 심각한 RIFLE 단계를 산출하는 판정 방법을 사용하였다.

코호트 2로부터 코호트 1을 구별하는 능력은 ROC 분석을 사용하여 측정되었다. SE는 AUC의 표준 오차이고, n은 샘플 또는 개별 환자 ("pt" 로 표시됨)의 수이다. 표준 오차는 Hanley, J. A.and McNeil, B. J., The meaning and use of the area under a receiver operating characteristic (ROC) curve. Radiology(1982) 143: 29-36에서 기술한 바와 같이 계산되었고; p값은 양측-꼬리 Z-검정으로 계산되었고 그리고 표 1-4에서 p<0.05 및 표 5-6에서 p<0.10으로 보고되었다. AUC <0.5는 비교를 위한 음의 진행 마커를 가리키고, AUC >0.5는 비교를 위한 양의 진행 마커를 가리킨다.

다양한 베타-2-당단백질 1의 역치(또는 "컷오프") 농도가 선별되었고, 코호트 2로부터 코호트 1을 구분하기 위한 관련된 민감도 및 특이도가 측정되었다. OR은 특정 컷오프 농도에 대하여 계산된 오즈비이고, 95% CI는 오즈비에 대한 신뢰구간이다.

본 발명은 당업자가 이를 만들고 사용하기 위해 충분히 상세하게 기재되고 예시되긴 했지만, 본 발명의 정신 및 범주에서 벗어나지 않는 여러 대안, 변형, 그리고 개량체가 명백할 것이다. 본 발명에서 제공한 예시는 바람직한 구체예의 전형이고, 예시이며, 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 본 발명의 변형 및 다른 용도가 당업자에 의해 구상될 것이다. 이들 변형은 본 발명의 정신 내에 포함되며, 청구항의 범주에 의해 결정된다.

다양한 치환 및 변형이 여기서 논의한 본 발명에 대하여 본 발명의 범주 및 정신으로부터 벗어나지 않고 만들어질 수 있음이 당업자에게 명백할 것이다.

명세서에서 언급한 모든 특허 및 간행물은 본 발명이 속하는 분야의 당업자의 수준을 가리킨다. 모든 특허 및 간행물은 마치 각각의 개별 간행물이 특이적이고 개별적으로 참고문헌으로써 통합되는 것을 나타내는 것처럼 동일한 범위로 참고문헌으로써 본 발명에 통합된다.

여기서 예증적으로 기술된 본 발명은 본 발명에서 특이적으로 드러내지 않은 임의의 요소 또는 요소들, 제한 또는 제한들의 부재에서 적절하게 실행될 수 있다. 따라서 예를 들면, 본 발명의 각각의 보기에서, 임의의 용어 "포함하는", "본질적으로 구성되는" 및 "구성되는"은 다른 두 용어 중 어느 한쪽과 서로 교체될 수 있다. 사용된 용어 및 표현은 서술의 용어로서 사용되었고, 제한하려는 것이 아니며, 제시되고 기술된 특성 또는 이의 일부분의 임의의 등가물을 배제하는데 이런 용어 및 표현을 사용하려는 의도가 없으며, 본 발명에서 청구한 범주 내에서 여러 변형이 가능함이 인정된다. 따라서 본 발명이 바람직한 구체예 및 선택적인 특징에 의해 특이적으로 개시되긴 했지만, 본 발명에서 개념의 변형 및 변화가 당업자에 의해 재분류될 수 있고, 이런 변형 및 변화는 첨부된 청구범위에 의해 정의되는 본 발명의 범주 내에 있는 것으로 간주된다.

다른 구체예는 하기 청구항 내에서 진술된다.

SEQUENCE LISTING <110> ASTUTE MEDICAL, INC. <120> METHODS AND COMPOSITIONS FOR DIAGNOSIS AND PROGNOSIS OF RENAL INJURY AND RENAL FAILURE <130> AST-15200-PC <140> PCT/US2010/044772 <141> 2010-08-06 <150> 61/232,293 <151> 2009-08-07 <160> 1 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 345 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Ile Ser Pro Val Leu Ile Leu Phe Ser Ser Phe Leu Cys His Val 1 5 10 15 Ala Ile Ala Gly Arg Thr Cys Pro Lys Pro Asp Asp Leu Pro Phe Ser 20 25 30 Thr Val Val Pro Leu Lys Thr Phe Tyr Glu Pro Gly Glu Glu Ile Thr 35 40 45 Tyr Ser Cys Lys Pro Gly Tyr Val Ser Arg Gly Gly Met Arg Lys Phe 50 55 60 Ile Cys Pro Leu Thr Gly Leu Trp Pro Ile Asn Thr Leu Lys Cys Thr 65 70 75 80 Pro Arg Val Cys Pro Phe Ala Gly Ile Leu Glu Asn Gly Ala Val Arg 85 90 95 Tyr Thr Thr Phe Glu Tyr Pro Asn Thr Ile Ser Phe Ser Cys Asn Thr 100 105 110 Gly Phe Tyr Leu Asn Gly Ala Asp Ser Ala Lys Cys Thr Glu Glu Gly 115 120 125 Lys Trp Ser Pro Glu Leu Pro Val Cys Ala Pro Ile Ile Cys Pro Pro 130 135 140 Pro Ser Ile Pro Thr Phe Ala Thr Leu Arg Val Tyr Lys Pro Ser Ala 145 150 155 160 Gly Asn Asn Ser Leu Tyr Arg Asp Thr Ala Val Phe Glu Cys Leu Pro 165 170 175 Gln His Ala Met Phe Gly Asn Asp Thr Ile Thr Cys Thr Thr His Gly 180 185 190 Asn Trp Thr Lys Leu Pro Glu Cys Arg Glu Val Lys Cys Pro Phe Pro 195 200 205 Ser Arg Pro Asp Asn Gly Phe Val Asn Tyr Pro Ala Lys Pro Thr Leu 210 215 220 Tyr Tyr Lys Asp Lys Ala Thr Phe Gly Cys His Asp Gly Tyr Ser Leu 225 230 235 240 Asp Gly Pro Glu Glu Ile Glu Cys Thr Lys Leu Gly Asn Trp Ser Ala 245 250 255 Met Pro Ser Cys Lys Ala Ser Cys Lys Val Pro Val Lys Lys Ala Thr 260 265 270 Val Val Tyr Gln Gly Glu Arg Val Lys Ile Gln Glu Lys Phe Lys Asn 275 280 285 Gly Met Leu His Gly Asp Lys Val Ser Phe Phe Cys Lys Asn Lys Glu 290 295 300 Lys Lys Cys Ser Tyr Thr Glu Asp Ala Gln Cys Ile Asp Gly Thr Ile 305 310 315 320 Glu Val Pro Lys Cys Phe Lys Glu His Ser Ser Leu Ala Phe Trp Lys 325 330 335 Thr Asp Ala Ser Asp Val Lys Pro Cys 340 345

Claims

분석 결과를 제공하기 위하여 피험자로부터 얻은 체액 샘플에 대해 베타-2-당단백질 1을 검출하도록 구성된 분석 방법을 수행하는 단계; 및 분석 결과를 피험자의 신장 상태와 상호 관련시키는 단계를 포함하는 피험자의 신장 상태를 평가하기 위한 방법.
제 1항에 있어서, 상기 상호 관련시키는 단계는 분석 결과를 피험자의 신장상태의 위험도 평가, 진단, 병기설정, 분류, 모니터링 중 한 가지 이상과 관련시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 상기 상호 관련시키는 단계는 분석 결과에 기초한 피험자의 신장 상태에서의 하나 이상의 앞으로의 변화의 가능성을 피험자에 지정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 신장 상태의 하나 이상의 앞으로의 변화는 앞으로의 신장 기능에 대한 손상, 앞으로의 감소된 신장 기능, 앞으로의 신장 기능의 개선, 그리고 앞으로의 급성 신부전(ARF) 중 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 상기 피험자는 급성 신부전이 아닌 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 상기 피험자는 체액 샘플을 얻은 시간 전에 측정된 베이스라인 값에 비하여 혈청 크레아티닌이 1.5배 또는 더 증가되지 않는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 상기 피험자는 체액 샘플을 얻은 시간보다 앞서 12시간 동안 적어도 0.5 ml/kg/hr의 요배설량을 갖는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 피험자는 체액 샘플을 얻은 시간 전에 측정된 베이스라인 값에 비하여 혈청 크레아티닌이 0.3 mg/dL 증가 또는 더 많이 증가되지 않는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 상기 피험자는 (i) 체액 샘플을 얻은 시간 전에 측정된 베이스라인 값에 비하여 혈청 크레아티닌이 1.5배 또는 더 증가되지 않았고, (ii) 체액 샘플을 얻은 시간보다 앞서 12시간 동안 적어도 0.5 ml/kg/hr의 요배설량을 가지며, (iii) 체액 샘플을 얻은 시간 전에 측정된 베이스라인 값에 비하여 혈청 크레아티닌이 0.3 mg/dL 증가 또는 더 많이 증가되지 않는 것을 특징으로 하는 방법.
제1항에 있어서, 피험자는 RIFLE 단계 0 또는 R인 것을 특징으로 하는 방법.
제 10항에 있어서, 상기 피험자는 RIFLE 단계 0이며, 그리고 상기 상호관련 단계는 피험자가 72시간 내에 RIFLE 단계 R, I, 또는 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 10항에 있어서, 상기 피험자는 RIFLE 단계 0 또는 R이며, 그리고 상기 상호관련 단계는 피험자가 72시간 내에 RIFLE 단계 I, 또는 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 12항에 있어서, 상기 피험자는 RIFLE 단계 0이며, 그리고 상기 상호관련 단계는 피험자가 72시간 내에 RIFLE 단계 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 12항에 있어서, 상기 피험자는 RIFLE 단계 R이며, 그리고 상기 상호관련 단계는 피험자가 72시간 내에 RIFLE 단계 I 또는 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 상기 피험자는 RIFLE 단계 0, R 또는 I이며, 그리고 상기 상호관련 단계는 피험자가 72시간 내에 RIFLE 단계 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 15항에 있어서, 상기 피험자는 RIFLE 단계 I이며, 그리고 상기 상호관련 단계는 피험자가 72시간 내에 RIFLE 단계 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 11항에 있어서, 상기 상호관련 단계는 피험자가 48시간 내에 RIFLE 단계R, I 또는 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 12항에 있어서, 상기 상호관련 단계는 피험자가 48시간 내에 RIFLE 단계 I 또는 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 13항에 있어서, 상기 상호관련 단계는 피험자가 48시간 내에 RIFLE 단계 I에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 17항에 있어서, 상기 상호 관련 단계는 피험자가 48시간 내에 RIFLE 단계 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 18항에 있어서, 상기 상호 관련 단계는 피험자가 48시간 내에 RIFLE 단계 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 19항에 있어서, 상기 상호 관련 단계는 피험자가 48시간 내에 RIFLE 단계 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 17항에 있어서, 상기 상호 관련 단계는 피험자가 24시간 내에 RIFLE 단계 R, I, 또는 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 18항에 있어서, 상기 상호 관련 단계는 피험자가 24시간 내에 RIFLE 단계 I, 또는 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 19항에 있어서, 상기 상호 관련 단계는 피험자가 24시간 내에 RIFLE 단계 I, 또는 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 20항에 있어서, 상기 상호 관련 단계는 피험자가 24시간 내에 RIFLE 단계 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 21항에 있어서, 상기 상호 관련 단계는 피험자가 24시간 내에 RIFLE 단계 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 22항에 있어서, 상기 상호 관련 단계는 피험자가 24시간 내에 RIFLE 단계 F에 도달할 가능성을 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 상기 분석 결과는 베타-2-당단백질 1의 측정된 소변 또는 혈장 농도를 포함하고, 그리고 상기 상호 관련 단계는 역치 농도에 대한 상기 측정 농도의 비교, 그리고 측정된 농도가 역치 이상일 때 피험자의 현재 RIFLE 단계에 비하여 악화되는 RIFLE 단계로 진행의 증가된 가능성을 피험자에 지정하거나, 또는 측정 농도가 역치 이하일 때 피험자의 현재 RIFLE 단계에 비하여 악화되는 RIFLE 단계로 진행의 감소된 가능성을 피험자에 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 상기 분석 결과는 베타-2-당단백질 1의 측정된 소변 또는 혈장 농도를 포함하고, 그리고 상기 상호 관련 단계는 역치 농도에 대한 상기 측정 농도의 비교, 그리고 측정된 농도가 역치 이상일 때 신장 대체 요법에 대한 요구로 진행의 증가된 가능성을 피험자에 지정하거나, 또는 측정 농도가 역치 이하일 때 신장 대체 요법에 대한 요구로 진행의 감소된 가능성을 피험자에 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 상기 분석 결과는 베타-2-당단백질 1의 측정된 소변 또는 혈장 농도를 포함하고, 그리고 상기 상호 관련 단계는 역치 농도에 대한 상기 측정 농도의 비교, 그리고 측정된 농도가 역치 이상일 때 피험자의 현재 RIFLE 단계에 비하여 악화되는 RIFLE 단계로 진행의 증가된 가능성을 피험자에 지정하거나, 또는 측정 농도가 역치 이하일 때 피험자의 현재 RIFLE 단계에 비하여, 악화되는 RIFLE 단계로 진행의 감소된 가능성을 피험자에 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 5항에 있어서, 상기 분석 결과는 베타-2-당단백질 1의 측정된 소변 또는 혈장 농도를 포함하고, 그리고 상기 상호 관련 단계는 역치 농도에 대한 상기 측정 농도의 비교, 그리고 측정된 농도가 역치 이상일 때 급성 신부전으로 진행의 증가된 가능성을 지정하거나, 또는 측정 농도가 역치 이하일 때 급성 신부전으로 진행의 감소된 가능성을 피험자에 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 11항에 있어서, 상기 분석 결과는 베타-2-당단백질 1의 측정된 소변 또는 혈장 농도를 포함하고, 그리고 상기 상호 관련 단계는 역치 농도에 대한 상기 측정 농도의 비교, 그리고 측정된 농도가 역치 이상일 때 RIFLE 단계 R, I, 또는 F로 진행의 증가된 가능성을 피험자에 지정하거나, 또는 측정 농도가 역치 이하일 때 RIFLE 단계 R, I, 또는 F로 진행의 감소된 가능성을 피험자에 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 12항에 있어서, 상기 분석 결과는 베타-2-당단백질 1의 측정된 소변 또는 혈장 농도를 포함하고, 그리고 상기 상호 관련 단계는 역치 농도에 대한 상기 측정 농도의 비교, 그리고 측정된 농도가 역치 이상일 때 RIFLE 단계 I 또는 F로 진행의 증가된 가능성을 피험자에 지정하거나, 또는 측정 농도가 역치 이하일 때, RIFLE 단계 I 또는 F로 진행의 감소된 가능성을 피험자에 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 13항에 있어서, 상기 분석 결과는 베타-2-당단백질 1의 측정된 소변 또는 혈장 농도를 포함하고, 그리고 상기 상호 관련 단계는 역치 농도에 대한 상기 측정 농도의 비교, 그리고 측정된 농도가 역치 이상일 때 RIFLE 단계 F로 진행의 증가된 가능성을 피험자에 지정하거나, 또는 측정 농도가 역치 이하일 때 RIFLE 단계 F로 진행의 감소된 가능성을 피험자에 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 14항에 있어서, 상기 분석 결과는 베타-2-당단백질 1의 측정된 소변 또는 혈장 농도를 포함하고, 그리고 상기 상호 관련 단계는 역치 농도에 대한 상기 측정 농도의 비교, 그리고 측정된 농도가 역치 이상일 때 RIFLE 단계 F로 진행의 증가된 가능성을 피험자에 지정하거나, 또는 측정 농도가 역치 이하일 때 RIFLE 단계 I 또는 F로 진행의 감소된 가능성을 피험자에 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 15항에 있어서, 상기 분석 결과는 베타-2-당단백질 1의 측정된 소변 또는 혈장 농도를 포함하고, 그리고 상기 상호 관련 단계는 역치 농도에 대한 상기 측정 농도의 비교, 그리고 측정된 농도가 역치 이상일 때 RIFLE 단계 F로 진행의 증가된 가능성을 피험자에 지정하거나, 또는 측정 농도가 역치 이하일 때 RIFLE 단계 F로 진행의 감소된 가능성을 피험자에 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 16항에 있어서, 상기 분석 결과는 베타-2-당단백질 1의 측정된 소변 또는 혈장 농도를 포함하고, 그리고 상기 상호 관련 단계는 역치 농도에 대한 상기 측정 농도의 비교, 그리고 측정된 농도가 역치 이상일 때 RIFLE 단계 F로 진행의 증가된 가능성을 피험자에 지정하거나, 또는 측정 농도가 역치 이하일 때 RIFLE 단계 F로 진행의 감소된 가능성을 피험자에 지정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 상기 피험자는 피험자에서 이전부터 존재하는 신전성, 신성, 또는 신후성 ARF에 대한 하나 이상의 알려진 위험 인자에 기초하여 신장 상태의 평가를 위해서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 상기 피험자가 울혈성 심부전, 전자간증, 경련, 진성당뇨병, 고혈압, 관상 동맥 질환, 단백뇨증, 심부전증, 정상 범위 이하의 신사구체 여과, 간경변, 정상 범위 이상의 혈청 크레아티닌, 패혈증, 신장 기능의 손상, 감소된 신장 기능, 또는 ARF 중 하나 이상의 현재 진단에 기초하여, 또는 이전에 겪었거나 현재 겪고 있는 주요 혈관 수술, 관상동맥 우회술, 또는 다른 심장 수술에 기초하여, 또는 NSAID, 시클로스포린, 타크로리무스, 아미노글리코사이드, 포스카넷, 에틸렌 글리콜, 헤모글로빈, 미오글로빈, 이포스파마이드, 중금속, 메토트렉사트, 방사선 불투과성 조영제, 또는 스트렙토조토신에 대한 노출에 기초하여 신장 상태의 평가를 위해 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
신장 대체 요법을 받지 않은 피험체의 신장 상태의 진단, 위험 평가, 예후, 분류 및 모니터링을 위한 베타-2-당단백질 1의 측정
급성 신부전이 아닌 피험체의 신장 상태의 진단, 위험 평가, 예후, 분류 및 모니터링을 위한 베타-2-당단백질 1의 측정
피험체의 현재 RIFLE 단계에 비하여 악화된 RIFLE 단계로 진행의 증가된 가능성을 피험체에 지정하기 위한 베타-2-당단백질 1의 측정