KR20110119720A

KR20110119720A - 항-ｃｄ 160 모노클로널 항체 및 그 용도

Info

Publication number: KR20110119720A
Application number: KR1020117019343A
Authority: KR
Inventors: 데니스 디디에르로렌트; 올리비에르 초세; 진 카도우체
Original assignee: 모노클로널 안티바디스 테라퓨틱스; 인썸(인스티튜트 내셔날 드 라 싼테 에 드 라 리셰르셰메디칼르)
Priority date: 2009-01-21
Filing date: 2010-01-21
Publication date: 2011-11-02
Also published as: CN102317318A; AU2010207710A1; EP2210903A1; WO2010084158A1; US20110280866A1; EP2389393A1; JP2012515746A; BRPI1005322A2; CA2750444A1

Abstract

본 발명은 CD160에 결합할 수 있는 항체, 또는 그 단편; 상기 항체를 포함하는 약학적 조성물 및 혈관신생 과정에 관여된 내피 세포 증식과 연관된 병리의 치료 및/또는 예방용 약제의 제조를 위한 상기 항체의 용도에 관한 것으로, 상기 항체는 a) 면역글로불린 경쇄로부터의 경쇄 골격 서열; 및 하기 아미노산 서열을 갖는 3개의 경쇄 상보성 영역(CDR)을 포함하는 경쇄: i) 경쇄 CDRl: QSISNH (서열 식별 번호: 1); ii) 경쇄 CDR2: YAS; iii) 경쇄 CDR3: QQSNSWPLT (서열 식별 번호: 2); 및 b) 면역글로불린 중쇄로부터의 중쇄 골격 서열; 및 하기 아미노산 서열을 갖는 3개의 중쇄 상보성 영역(CDR)을 포함하는 중쇄: i) 중쇄 CDRl: GYTFTDYW (서열 식별 번호: 3); ii) 중쇄 CDR2: IYPGDDDA (서열 식별 번호: 4); iii) 중쇄 CDR3: ARRGIAAVVGGFDY (서열 식별 번호: 5)을 포함한다.

Description

항-ＣＤ 160 모노클로널 항체 및 그 용도{ANTI-CD 160 MONOCLONAL ANTIBODIES AND USES THEREOF}

본 발명은 신규의 항-CD160 모노클로널 항체, 특히 마우스-인간 키메릭 항-CD160 항체에 관한 것이다. 항-CD160 항체, 및 이를 포함하는 약학적 조성물은 혈관신생 억제에 유용하다.

NK 세포 메이저 이펙터 기능은 세포용해 활성 및 민감한 타겟 세포에 대해 지시된 케모카인 및 시토카인의 생성을 특징으로 한다. NK 세포는 다양한 활성화된 수용체의 특이적 결합(specific engagement)을 통해 건강한 세포 및 비정상 종양 세포 또는 바이러스 감염된 세포 사이를 구분한다. 대부분의 활성화된 NK 세포 수용체는 그들의 신호 매개 관련 분자에 따라 3개의 그룹으로 나눠질 수 있으나, 독특한 별개의 활성화된 NK 세포 수용체가 CD160으로 확인되었고, 이는 MHC 클래스 I-의존성 면역글로불린(Ig)-유사 분자이다.

CD160은 NK CD56^dim ⁺CD16⁺, 대부분 TCRγδ T 세포, 및 세포독성 이펙터 TCR αβ CD8T 세포로서, 및 거의 모든 창자 상피내 림프구(iIELs)에서, 인간 및 마우스 순환 세포독성 림프구에 의해 발현된다(MAIZA 등, J. Exp . Med ., vol. 178, p: 1124-6, 1993; ANUMANTHAN 등, J. Immunol , vol.161, p:2780-90, 1998).

최종적으로, 지금까지 알려진 다른 활성 수용체와 비교하여, CD160은 하기의 독특한 특징을 나타낸다 : 1) CD160은 NK 유전자 복합체 외부의 염색체 1에서 유전자에 의해 인코딩되고, 2) 다합체 글리코실 포스파티딜 이노시톨(GPI)-고정된 분자이고, 3) 그 세포 표면 발현은 활성화 후 하향 조절된다.

혈관신생은 이전부터 존재하는 혈관으로부터 새로운 모세혈관이 형성되는 것에 의한 근본적 프로세스이다. 이러한 프로세스는 재생, 분화, 반흔화(cicatrisation) 및 기관 재생과 같은 많은 통상적인 생리적 현상에서 필수이다.

혈관신생은 이들 통상적인 생물학적 현상에서 엄격하게 조절되고; 즉, 이는 몇 일의 단기간 동안 촉발되고 이어서 완전히 억제된다. 그러나 많은 병리(pathology)는 침습성, 조절되지 않은 혈관신생과 관련이 있다. 관절염은, 예를 들어, 침습성 신생 혈관에 의해 연골에 가해지는 손상에 의해 유발된 병리가다. 당뇨 망막병증에서, 신생혈관에 의한 망막의 침습은 환자의 실명을 일으키고; 눈 기구의 혈관신생은 실명의 주요 원인이고, 이러한 혈관신생은 20개 이상의 안구 질환의 특징이 된다. 마지막으로, 많은 종양의 성장 및 전이는 혈관신생과 직접 관련이 있다. 종양은 그 자신의 사용을 위해 신생혈관의 성장을 자극한다. 또한, 이러한 신생혈관은 탈출 경로를 제시하고, 이에 의해 종양이 혈액 순환계에 도달할 수 있고, 간. 폐 또는 뼈와 같은 멀리 떨어진 부위에 전이를 일으킨다.

최근, CD160은 혈관신생에 대한 억제 신호 수용체로서 확인되었다(FONS 등, Blood, vol.108(8), p: 2608-15, 2006).

ABTECH 및 INSERM 명의의 WO 03/018048은 혈관신생을 억제하기 위하여, CD160과 결합하는 2개의 용해성 HLA 클래스 I 분자, 즉 sHLA-Gl 및 sHLA-B7에 관한 것이다.

INSERM 명의의 WO 2006/015886은 내피 세포에서 VEGF 또는 FGF2와 같은 프로-혈관형성 인자(pro-angiogenic factor)에 의해 유도된 혈관 형성 및 성장을 억제하기 위한 항-CD160 모노클로널 항체의 용도에 관한 것이다.

본 발명은 하기를 포함하는 항체의 폴리펩티드 서열과 적어도 90%의 상동성을 포함하는 폴리펩티드 서열을 갖는, CD160에 결합할 수 있는 항체, 또는 그 단편에 관한 것이다.

a) 면역글로불린 경쇄로부터의 경쇄 골격 서열; 및 하기 아미노산 서열을 갖는 3개의 경쇄 상보성 영역(CDR)을 포함하는 경쇄:

i) 경쇄 CDRl: QSISNH (서열 식별 번호: 1);

ii) 경쇄 CDR2: YAS;

iii) 경쇄 CDR3: QQSNSWPLT (서열 식별 번호: 2); 및

b) 면역글로불린 중쇄로부터의 중쇄 골격 서열; 및 하기 아미노산 서열을 갖는 3개의 중쇄 상보성 영역(CDR)을 포함하는 중쇄:

i) 중쇄 CDRl: GYTFTDYW (서열 식별 번호: 3);

ii) 중쇄 CDR2: IYPGDDDA (서열 식별 번호: 4);

iii) 중쇄 CDR3: ARRGIAAVVGGFDY (서열 식별 번호: 5).

본 발명은 또한 적어도 하나의 그러한 항-CD160 항체 또는 그 단편, 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.

추가적으로, 본 발명은 그러한 약학적 조성물을 이를 필요로 하는 환자에게 제공하는 것을 포함하는 혈관신생의 억제 방법에 관한 것이다.

마지막으로, 본 발명은 혈관신생 과정에 관여된 내피 세포 증식과 연관된 병리의 치료 및/또는 예방용 약제의 제조를 위한 적어도 하나의 그러한 항-CD160 항체 또는 그 단편의 용도에 관한 것이다.

도 1은 마우스 CD160 항체의 중쇄의 가변 영역의 아미노산 서열(서열 식별 번호 6) 및 뉴클레오티드 서열(서열 식별 번호 7)이다.
도 2는 마우스 CD160 항체의 경쇄의 가변 영역의 아미노산 서열(서열 식별 번호 8) 및 뉴클레오티드 서열(서열 식별 번호 9)이다.
도 3은 추가의 시스테인 및 정지 코돈의 삽입에 의해 인간 감마 1 면역글로불린 중쇄의 불변영역으로부터 유도된 아미노산 서열 (서열 식별 번호 10) 및 뉴클레오티드 서열 (서열 식별 번호 11)이다.
도 4는 인간 감마 1 면역글로불린 중쇄의 불변 영역의 아미노산 서열 (서열 식별 번호 12) 및 뉴클레오티드 서열 (서열 식별 번호 13)이다. 클로닝 부위(NheⅠ)를 생성하기 위하여 첫번째 AGC 코돈은 GCT에서 변형되었다.
도 5는 인간 감마 4 면역글로불린 중쇄의 불변 영역의 아미노산 서열 (서열 식별 번호 14) 및 뉴클레오티드 서열 (서열 식별 번호 15)이다. 클로닝 부위(NheⅠ)를 생성하기 위하여 첫번째 AGC 코돈은 GCT에서 변형되었다.
도 6은 인간 카파 면역글로불린 경쇄의 불변 영역의 아미노산 서열 (서열 식별 번호 16) 및 뉴클레오티드 서열 (서열 식별 번호 17)이다.
도 7 a)는 인간 VL 신호 펩티드(어두운 부분)를 포함하는 마우스 CD160 항체 경쇄의 재조합 가변 영역의 아미노산 서열 (서열 식별 번호 18) 및 뉴클레오티드 서열 (서열 식별 번호 19)이고, b)는 인간 VL 신호 펩티드(어두운 부분)를 포함하는 마우스 CD160 항체 경쇄의 재조합 가변 영역의 아미노산 서열 (서열 식별 번호 28) 및 뉴클레오티드 서열 (서열 식별 번호 29)이다.
도 8은 인간 VH 신호 펩티드(어두운 부분)를 포함하는 마우스 CD160 항체 중쇄의 재조합 가변 영역의 아미노산 서열 (서열 식별 번호 20) 및 뉴클레오티드 서열 (서열 식별 번호 21)이다.
도 9는 마우스 가변 경쇄 (서열 식별 번호 8) 및 최대의 상동성을 가지는 인간 면역글로불린(서열 식별 번호 22; 수납 번호 AAZ09098) 아미노산 서열 간 정렬이다. CDR 영역이 확인된다(어두운 부분).
도 10은 마우스 가변 중쇄 (서열 식별 번호 6) 및 최대의 상동성을 가지는 인간 면역글로불린 중 하나(서열 식별 번호 23; 수납 번호 3FCTB)의 아미노산 서열 간 정렬이다. CDR 영역이 확인된다(어두운 부분).
도 11은 마우스 가변 중쇄 (서열 식별 번호 6) 및 최대의 상동성을 가지는 인간 면역글로불린 중 하나(서열 식별 번호 24; 수납 번호 AAG00910)의 아미노산 서열 간 정렬이다. CDR 영역이 확인된다(어두운 부분).

한 측면에서, 본 발명은 CD160에 결합할 수 있는 항체, 또는 그 단편에 관한 것으로, 상기 항체는 하기를 포함하는 항체의 폴리펩티드 서열과 적어도 90%, 바람직하게는 95%, 보다 바람직하게는 98%의 상동성을 포함하는 폴리펩티드 서열을 갖는다.

i) 경쇄 CDRl: QSISNH (서열 식별 번호: 1);

ii) 경쇄 CDR2: YAS;

iii) 경쇄 CDR3: QQSNSWPLT (서열 식별 번호: 2); 및

i) 중쇄 CDRl: GYTFTDYW (서열 식별 번호: 3);

ii) 중쇄 CDR2: IYPGDDDA (서열 식별 번호: 4);

iii) 중쇄 CDR3: ARRGIAAVVGGFDY (서열 식별 번호: 5).

항체는 이황화 결합에 의해 상호연결된 2개의 동일한 경쇄(L)(전체 길이일 때 약 25 kDa) 및 2개의 동일한 중쇄(H)(전체 길이일 때 약 50-70 kDa)인, 4개의 폴리펩티드 사슬을 포함하는 테트라머에 해당하는 면역글로불린 분자이다. 경쇄는 카파 및 람다로 분류된다. 중쇄는 감마, 뮤, 알파, 델타, 또는 엡실론으로 분류되고, 각각 IgG, IgM, IgA, IgD, 및 IgE로서 항체의 아이소타입을 정의한다. 각각의 중쇄는 N-말단 중쇄 가변 영역(여기에서 HCVR로 축약됨) 및 중쇄 불변 영역으로 구성된다. 중쇄 불변 영역은 IgG, IgD, 및 IgA에 대해 3 도메인(CHl, CH2, 및 CH3)으로 구성되고; IgM 및 IgE에 대해 4 도메인(CHl, CH2, CH3, 및 CH4)으로 구성된다. 각각의 경쇄는 N-말단 경쇄 가변 영역 (여기에서 LCVR로 축약됨) 및 경쇄 불변 영역으로 구성된다. 경쇄 불변 영역은 하나의 도메인, CL로 구성된다. HCVR 및 LCVR 영역은, 골격 영역(FR)으로 칭해지는 보다 보존된 영역이 중간에 배치된 상보성 결정 영역(CDR)으로 칭해지는 초가변성 영역으로 추가로 세분될 수 있다. 각각의 HCVR 및 LCVR은 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성되고, 하기 순서로 아미노-말단에서부터 카르복시-말단까지 배열된다 : FRl, CDRl, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 각각의 도메인에 대한 아미노산의 배치는 잘 알려진 규약(KABAT, "Sequences of Proteins of Immunological Interest", National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1987 및 l991; CHOTHIA 등, J. MoL Biol ., vol.196, p: 901-17, 1987; CHOTHIA 등, Nature, vol.342, p: 878-83, 1989)에 따른다. 특정 항원에 결합하는 항체의 기능적인 능력은 각각의 경쇄/중쇄 쌍의 가변 영역에 의존하고, CDR에 의해 대부분 결정된다.

여기에서 사용된, 용어 "항체"는, 그 자체로 모노클로널 항체를 나타낸다. 모노클로널 항체는 인간 항체, 키메릭 항체 및/또는 인간화된(humanized) 항체일 수 있다.

여기에서 사용되었을 때, "폴리펩티드 서열 A는 B의 폴리펩티드 서열과 적어도 X%의 상동성을 포함한다"라는 것은, 폴리펩티드 A의 아미노산 서열이 B의 아미노산 서열과 적어도 X% 백분율의 동일성을 가지는 것을 의미한다. 여기에서 사용된, 두 아미노산 서열 간의 "동일성의 백분율"은 최고의 정렬(최적 정렬) 후 얻어진, 비교될 2개의 서열 간 동일한 아미노산 잔기의 백분율을 나타내고, 이러한 백분율은 순수하게 통계적이고, 두 개의 서열 간의 차이점은 그 전체 길이를 따라서 및 랜덤으로 분포되었다. 2개의 아미노산 서열 간의 서열 비교는 예를 들어 웹사이트 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gorf/bl2.html에서 입수 가능한 BLAST 프로그램으로 수행될 수 있고, 사용된 파라미터는 디폴트값에 의해 주어진다(특히, 파라미터 "오픈 갭 페널티(open gap penalty)"에 대해 : 5 및 익스텐션 갭 페널티(extension gap penalty)":2이고, 매트릭스는 예를 들어, 프로그램에 의해 제안된 바와 같이 "BLOSUM 62" 매트릭스에서 선택되고, 비교될 2개의 서열 간의 백분율 동일성은 프로그램에 의해 직접 계산된다).

여기에서 사용된 용어 "단편"은 CD160에 결합하는 항체 단편을 의미한다. 예를 들어 CD160에 결합할 수 있는 항체 단편은 Fab(예를 들어, 파파인 소화에 의해), Fab' (예를 들어, 펩신 소화 및 부분 환원에 의해) 및 F(ab')2 (예를 들어, 펩신 소화에 의해), facb (예를 들어, 플라스민 소화에 의해), pFc' (예를 들어, 펩신 또는 플라스민 소화에 의해), Fd (예를 들어, 펩신 소화, 부분 환원 및 재응집에 의해), Fv 또는 scFv (예를 들어, 분자 생물학 기술에 의해) 단편을 포함하고, 이들은 본 발명에 포함된다.

그러한 단편은 기술분야에 알려진 바와 같이 및/또는 여기에서 기재된 바와 같이 효소적 분할, 합성 또는 재조합 기술에 의해 제조될 수 있다. 항체는 또한, 하나 이상의 정지 코돈이 자연적인 정지 부위(natural stop site)의 업스트림에 도입된 항체 유전자를 사용하여 다양한 절단된 형태로 제조될 수 있다. 예를 들어, F(ab')2 중쇄 부분을 인코딩하는 조합 유전자는 CH₁ 도메인 및 중쇄의 힌지 영역을 인코딩하는 DNA 서열을 포함하도록 디자인될 수 있다. 항체의 여러 부분은 종래의 기술에 의해 화학적으로 함께 결합될 수 있거나, 또는 유전자 공학 기술을 사용하여 인접한 단백질로 제조될 수 있다.

"CD160에 결합할 수 있는"이라는 표현은 CD160에 대하여 10^-7 M 미만, 바람직하게는 10^-8 M 미만, 및 보다 바람직하게는 10^-9 M 미만의 K_D를 의미한다.

바람직하게는, 필수는 아니지만, 본 발명에 유용한 항체는 재조합으로 생성되는데, 인간화된 형태로 변환하기 위하여 통상적으로 마우스 또는 적절한 특이성을 가지는 기타 비-인간 항체의 조작이 요구되기 때문이다.

항체는 글리코실화될 수도, 되지 않을 수도 있는데, 글리코실화된 항체가 바람직하다. 잘 알려진 바와 같이, 항체는 이황화 결합을 통해 적절히 가교결합된다.

기술분야에 잘 알려진 바와 같이, 모노클로널 항체는 이를 형성하는 포유동물 면역화의 표준 기술에 의해 적절한 특이성을 가진 채로 손쉽게 생성될 수 있다. 이들 뉴클레오티드 서열은 이어서 조작되어 이들을 인간화된 형태로 제공할 수 있다.

"키메릭 항체"는 마우스 면역글로불린으로부터의 가변 영역 및 인간 면역글로불린의 불변 영역으로 구성된 항체를 의미한다. 이러한 변경은 간단히 인간 항체의 불변 영역을 마우스 불변 영역에 대해 대체하는 것으로 구성되고, 그에 따라 약제학적 용도로 허용가능할 충분히 낮은 면역원성을 가질 수 있는 인간/마우스 키메라를 얻는다.

그러한 키메릭 항체의 많은 제조 방법이 지금까지 보고되어 있으며, 그에 따라 당업자의 일반적인 지식의 일부를 형성한다(예를 들어, 미국 특허 제 5,225,539호 참조).

바람직한 구현예에서, 상기 항체는 키메릭 항체이고, 경쇄 및 중쇄 골격 서열은 각각 마우스 면역글로불린 경쇄 및 중쇄이다.

바람직하게는, 본 발명의 항체는 하기를 포함한다.

a) 면역글로불린 경쇄로부터의 경쇄 골격 서열; 및 하기 아미노산 서열 i) 내지 iii)과, 적어도 90%, 바람직하게는 95%, 및 보다 바람직하게는 98%의 상동성을 가지는 아미노산 서열을 갖는 3개의 경쇄 상보성 영역(CDR)을 포함하는 경쇄 :

i) 경쇄 CDRl: QSISNH (서열 식별 번호: 1);

ii) 경쇄 CDR2: YAS;

iii) 경쇄 CDR3: QQSNSWPLT (서열 식별 번호: 2); 및

b) 면역글로불린 중쇄로부터의 중쇄 골격 서열; 및 하기 아미노산 서열 i) 내지 iii)과, 적어도 90%, 바람직하게는 95%, 및 보다 바람직하게는 98%의 상동성을 가지는 아미노산 서열을 갖는 3개의 중쇄 상보성 영역(CDR)을 포함하는 중쇄 :

i) 중쇄 CDRl: GYTFTDYW (서열 식별 번호: 3);

ii) 중쇄 CDR2: IYPGDDDA (서열 식별 번호: 4);

iii) 중쇄 CDR3: ARRGIAAVVGGFDY (서열 식별 번호: 5).

이러한 바람직한 구현예의 특별한 구현예에서, 상기 항체는 도 2에 도시된 아미노산 서열의 서열 식별 번호 : 8을 가지는 경쇄 가변 영역 (LCVR)을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 도 2에 도시된 핵산 서열의 서열 식별 번호 : 9에 의해 인코딩된 경쇄 가변 영역 (LCVR)을 포함한다.

유리하게는, 상기 항체는 도 7a에 도시된 아미노산 서열의 서열 식별 번호:18 또는 도 7b에 도시된 아미노산 서열의 서열 식별 번호:28을 가지는 경쇄 가변 영역 (LCVR)을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 도 7a에 도시된 핵산 서열의 서열 식별 번호:19 또는 도 7b에 도시된 핵산 서열의 서열 식별 번호:29에 의해 인코딩된 경쇄 가변 영역 (LCVR)을 포함한다.

이러한 바람직한 구현예의 다른 특별한 구현예에서, 상기 항체는 도 1에 도시된 아미노산 서열의 서열 식별 번호 : 6을 가지는 중쇄 가변 영역 (HCVR)을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 도 1에 도시된 핵산 서열의 서열 식별 번호 : 7에 의해 인코딩된 중쇄 가변 영역 (HCVR)을 포함한다.

유리하게는, 상기 항체는 도 8에 도시된 아미노산 서열의 서열 식별 번호:20 을 가지는 중쇄 가변 영역 (HCVR)을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 도 8에 도시된 핵산 서열의 서열 식별 번호:21에 의해 인코딩된 중쇄 가변 영역 (HCVR)을 포함한다.

이러한 바람직한 구현예의 또 다른 특별한 구현예에서, 상기 항체는 인간의 경쇄 및 중쇄로부터의 불변 영역을 추가로 포함한다.

유리하게는, 상기 항체는 하기를 포함하는 그룹에서 선택된 인간의 중쇄로부터의 불변 영역을 포함한다.

· 추가적인 시스테인 및 정지 코돈의 삽입을 포함하는 도 3에 도시된 인간 감마 1 면역글로불린의 중쇄의 재조합 불변 영역(서열 식별 번호: 10);

· 도 4에 도시된 인간 감마 1 면역글로불린의 중쇄의 재조합 불변 영역(서열 식별 번호: 12); 및

· 도 5에 도시된 인간 감마 4 면역글로불린의 중쇄의 재조합 불변 영역(서열 식별 번호: 14);

보다 유리하게는, 상기 항체는 도 6에 도시된 인간 카파 면역글로불린의 인간 경쇄로부터의 불변 영역을 포함한다(서열 식별 번호: 16).

그럼에도 불구하고, 마우스 항체 및 종종 키메릭 항체는 인간 숙주에 의해 이질적인 것으로 인식되고, 소위 "인간 항-마우스 항체" 또는 "HAMA" 반응을 일으킨다.

용어 "인간화된 항체"는 인간 대상에 대한 투여 후 마우스 가변 서열의 면역원성을 감소시키기 위하여, 마우스 가변 서열의 하나 이상의 아미노산이 상동의 인간 가변 서열의 상응하는 하나 이상의 아미노산에 의해 치환된 항체에 관한 것이다. 항체의 가변 영역 및 궁극적으로 CDR의 이러한 인간화는 현재 기술분야에서 잘 알려진 기술에 의해 행해진다.

그러한 인간화된 항체의 많은 제조 방법이 현재까지 보고되어 있고, 따라서 당업자의 일반적인 지식의 일부를 형성한다.

예로서, 영국 특허 출원 GB 2188638A 및 미국 특허 제5,585,089호는 치환된 항체의 단지 일부만이 상보성 결정 영역, 또는 "CDR"인 재조합 항체가 제조되는 방법을 기재하고 있다. CDR 이식 기술이 사용되어 마우스 CDR, 및 인간 가변 영역 골격 및 불변 영역으로 구성된 항체를 생성한다(예를 들어, RIECHMANN 등, Nature, vol.332, p: 323-327, 1988 참조). 이들 항체는 Fc 의존성 이펙터 기능에 필수적인 인간 불변 영역을 보유하지만, HAMA 반응을 유발할 가능성은 거의 없다.

다른 실시예로서, 가변 영역의 골격 영역은 비-인간 CDR을 실질적으로 온전하게 남겨둔, 또는 심지어 CDR을 인간 게놈으로부터 유도된 서열로 대체한 상응하는 인간 골격 영역에 의해 치환된다(예를 들어 특허 출원 US 2006/258852 참조). 면역계가 인간 면역계에 상응하도록 바꿔진, 유전적으로 변형된 마우스에서 완전하게 인간 항체가 생성된다. 전술한 바와 같이, 단일 사슬 형태를 나타내는 단편을 포함하는, 항체의 면역학적으로 특이적인 단편을 채택하는 것은, 본 발명의 방법에서 사용하기 위해 충분하다.

인간화된 항체는 또한 비-인간 항체로부터의 적어도 하나의 CDR, 인간 골격을 포함하는 항체를 나타내고, 여기에서 존재하는 임의의 불변 영역은 인간 면역 글로불린 불변 영역과 실질적으로 동일, 즉, 적어도 약 85 또는 90%, 바람직하게는 적어도 95% 동일하다. 그러므로, 가능하게는 CDR을 제외하고, 인간화된 항체의 모든 부분은, 하나 이상의 천연의 인간 면역글로불린 서열의 상응하는 부분과 실질적으로 동일하다. 예를 들어, 인간화된 면역글로불린은 통상적으로 키메릭 마우스 가변 영역/인간 불변 영역 항체를 포함하지 않는다.

인간화된 항체는 인간 치료에 사용하기 위해 키메릭 항체 및 비-인간 항체에 대해 적어도 3개의 잠재적인 장점을 갖는다:

1) 이펙터 부분이 인간이기 때문에, 인간 면역계의 다른 부분과 더 잘 상호작용할 수 있다(예를 들어, 보체-의존성 세포독성(CDC) 또는 항체-의존성 세포성 세포독성(ADCC)에 의해 타겟 세포를 보다 효율적으로 파괴한다).

2) 인간 면역계는 인간화된 항체의 C 영역 또는 골격을 이질적인 것으로 인식하지 않을 것이며, 그에 따라 그러한 주입된 항체에 대한 항체 반응은 완전히 이질적인 비-인간 항체 또는 부분적으로 이질적인 키메릭 항체에 대한 것보다 더 적다.

3) 주입된 비-인간 항체는 인간 항체의 반감기보다 훨씬 더 짧은 인간 순환에서의 반감기를 갖는 것으로 보고되어 있다. 주입된 인간화된 항체는 천연적으로 발생하는 인간 항체와 본질적으로 동일한 반감기를 가질 것이며, 더 작고 더 적은 빈도의 투여량이 제공되도록 한다.

예시로서, 인간화된 면역글로불린의 디자인은 하기와 같이 수행될 수 있다: 아미노산이 다음 카테고리에 해당할 경우, 사용될 인간 면역글로불린(억셉터 면역글로불린)의 골격 아미노산은 CDR-제공 비-인간 면역글로불린(도너 면역글로불린)으로부터의 골격 아미노산에 의해 대체된다 : (a) 억셉터 면역글로불린의 인간 골격 영역에서 아미노산은 그 위치에서 인간 면역글로불린에 대해 비통상적이고, 반면 도너 면역글로불린에서 상응하는 아미노산은 그 위치에서 인간 면역글로불린에 대해 통상적이다; (b) 아미노산의 위치는 CDR 중 하나에 바로 인접한다; 또는 (c) 골격 아미노산의 임의의 측쇄 원자는 3차원 면역글로불린 모델 (QUEEN 등, Proc. Natl . Acad . Sci . USA , vol.88, p:2869, 1991)에서 CDR 아미노산의 임의의 원자의 약 5-6 옹스트롬(중심-대-중심) 내에 있다. 억셉터 면역글로불린의 인간 골격 영역에서 아미노산 및 도너 면역글로불린에서 상응하는 아미노산의 각각이 그 위치에서 인간 면역글로불린에 대해 비통상적일 때, 그러한 아미노산은 그 위치에서 인간 면역글로불린에 대해 통상적인 아미노산에 의해 대체된다.

다른 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 인간화된 항체이고, 경쇄 및 중쇄 골격 서열은 각각 인간화된 면역글로불린 경쇄 및 중쇄로부터의 것이다.

본 발명의 인간화된 항체의 바람직한 경쇄 가변 영역 (LCVR)은 서열 식별 번호 : 8과 적어도 하나의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 갖는다. 보다 바람직하게는, 본 발명의 인간화된 항체의 경쇄 가변 영역 (LCVR)은 아미노산 서열인 서열 식별 번호 : 25를 갖고, 상기 아미노산 서열인 서열 식별 번호: 25는 서열 식별 번호 :8과 적어도 하나의 아미노산이 상이하다.

이러한 인간화된 서열은, 잠재적인 면역원성이 감소하도록 인간 면역글로불린 카파 가변 경쇄(서열 식별 번호: 22, 수납 번호 AAZ09098)와 비교 후 골격에 하나 이상의 아미노산 치환이 도입된 항-CD160 마우스 가변 경쇄에 대응한다.

본 발명의 인간화된 항체의 바람직한 중쇄 가변 영역 (HCVR)은, 서열 식별 번호:6과 적어도 하나의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 갖는다. 보다 바람직하게는, 본 발명의 인간화된 항체의 중쇄 가변 영역 (HCVR)은 아미노산 서열인 서열 식별 번호:26을 갖고, 상기 아미노산 서열인 서열 식별 번호:26은 서열 식별 번호:6과 적어도 하나의 아미노산이 상이하다.

이러한 인간화된 서열은, 잠재적인 면역원성이 감소하도록 인간 면역글로불린 가변 중쇄인 서열 식별 번호: 23(수납 번호 3FCTB)과 비교 후 골격에 하나 이상의 아미노산 치환이 도입된 항-CD160 마우스 가변 중쇄에 대응한다.

바람직하게는, 상기 인간화된 항체는 인간 경쇄 및 중쇄로부터의 불변 영역을 추가로 포함한다. 예로서, 상기 인간화된 항체는 전술한 바와 같은 인간 경쇄 및 중쇄로부터의 불변 영역을 추가로 포함한다.

본 발명의 인간화된 항체를 위한 경쇄 및 중쇄에 대해 기타 서열이 가능하다. 면역글로불린은 2쌍의 경쇄/중쇄 복합체를 가질 수 있고, 적어도 하나의 사슬은 인간 골격 영역 세그먼트에 기능적으로 연결된(functionally joined) 하나 이상의 마우스 상보성 결정 영역을 포함한다.

제2 측면에 따르면, 본 발명은 진단 및/또는 예측 및/또는 치료에 사용하기 위해 전술한 바와 같은 적어도 하나의 항-CD160 항체 또는 그 단편 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.

상기 조성물은 혈관신생의 억제, 혈관신생 병리의 치료를 위해, 바람직하게는 종양 진행을 억제하는데 특히 유용하다.

상기 조성물은 이에 한정되는 것은 아니지만, 용액, 서스펜션, 동결건조 분말, 캡슐 및 정제를 포함하는, 환자에 투여하기 위해 적합한 임의의 약학적 형태일 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 임의의 약학적으로 허용가능한 희석제, 부형제 또는 보조제를 추가로 포함할 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은, 주사용으로, 예를 들어 국소 주사, 경점막 투여, 흡입, 경구 투여, 및 보다 일반적으로 당업자들이 원하는 예측 및/또는 진단 및/또는 치료를 달성하기에 적절한 것으로 발견한 임의의 제형으로 제형화될 수 있다.

본 발명의 항-CD160 항체는 의도된 목적을 달성하는데 효과적인 양으로, 및 선택된 투여 경로에 적합한 복용량으로 상기 약학적 조성물 내에 포함된다.

보다 구체적으로, 치료적 유효량은 치료될 대상의 병태 또는 질환의 증상을 예방, 경감 또는 개선하거나, 또는 상기 질환 또는 병태를 막는데 효과적인 화합물의 양을 의미한다.

의도된 적용에 따라, 본 발명의 항-CD160 항체는 추가적인 구성성분들을 추가로 포함할 수 있다.

예를 들어, 본 발명의 항-CD160 항체가 예측 또는 진단용으로 의도된 경우, 이는 탐지가능한 라벨, 예컨대 플루오로크롬, 또는 효소 활성을 가지는, 또는 방사성을 가지는 개체, 및 보다 일반적으로 상기 화합물의 탐지를 가능하게 하는 임의의 개체를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 항-CD 160 항체는 물론 항-혈관신생 부위의 탐지를 위해 대안적으로 사용될 수 있다.

그러므로 본 발명은 또한 본 발명의 하나 이상의 항-CD160 항체를 포함하는 약학적 조성물 또는 키트에 관한 것으로, 이는 항-혈관신생 부위의 탐지용으로 의도된 것이다.

본 발명의 항-CD160 항체가 이를 필요로 하는 생물에게 치료적 투여용으로 의도된 경우, 이는 면역독소 및/또는 방사성 원소를 추가로 포함할 수 있다.

본 발명의 제3 측면은 전술한 바와 같은 약학적 조성물을 이를 필요로 하는 환자에게 제공하는 것을 포함하는 혈관신생의 억제 방법에 관한 것으로, 약학적 조성물은 전술한 바와 같이 적어도 하나의 항-CD160 항체 또는 그 단편을 포함한다.

여기에서 사용된, 용어 "환자"는 포유동물, 바람직하게는 인간을 나타낸다.

바람직하게는, 이를 필요로 하는 환자는 혈관신생 과정에 관여된 내피 세포 증식과 연관된 병리으로부터 고통받고 있는 환자에 해당한다.

그러한 병리의 예로서, 암(예를 들어 종양 맥관신생), 망막병증(예를 들어, 당뇨 망막병증), 류마티스성 관절염, 각막 또는 신장과 같은 만성 이식편 거부, 이종이식에서 관찰되는 급성 이식편 거부, 혈관종, 혈관육종, 예컨대 카포시 육종(Kaposi's sarcoma) 또는 카스텔맨 증후군(Castelman syndrome), 죽상동맥경화증, 신생혈관증(neovascularization)과 관련된 자궁내막증, 또는 반흔화에 기인한 조직 과도생성을 언급할 수 있다.

본 발명의 제4 측면은, 혈관신생 과정에 관여된 내피 세포 증식과 연관된 병리의 치료 및/또는 예방용 약제의 제조를 위한, 전술한 바와 같은 적어도 하나의 항-CD160 항체 또는 그 단편의 용도에 관한 것이다.

그러한 병리는 암(예를 들어 종양 맥관신생), 망막병증(예를 들어, 당뇨 망막병증), 류마티스성 관절염, 각막 또는 신장과 같은 만성 이식편 거부, 이종이식에서 관찰되는 급성 이식편 거부, 혈관종, 혈관육종, 예컨대 카포시 육종(Kaposi's sarcoma) 또는 카스텔맨 증후군(Castelman syndrome), 죽상동맥경화증, 신생혈관증과 관련된 자궁내막증, 또는 반흔화에 기인한 조직 과도생성을 포함하는 그룹에서 선택된다.

본 발명의 기타 구현예 및 장점은 하기 비-한정적인 실시예에서 상세히 설명된다.

실시예

1) mAb 의 제조 및 정제:

GST 및 CD-160(서열 식별 번호:27; 수납 번호 CAG46665) 간 융합 단백질로 BALB/C 마우스를 면역화하여 MAb를 얻었다. GOUTTEF ANGEAS 등 (Eur . J. Immunol, vol.22, p:2681-5, 1992)에 기재된 바와 같이 NS1로 세포 융합을 행하였다.

스크리닝을 2단계로 수행하였다. 하기 간접적인 면역형광 염색 및 흐름 세포측정 분석에 이어, CD160-GST 융합 단백질과 반응하는 모든 하이브리도마 상청액을 보유하였다. 선택된 mAb를 포함하는 배양액을 한정된 희석에 의해 2회 클로닝하였다.

2) 혈관신생 억제 활성에 대한 스크리닝:

성장 감소형 매트리겔(Growth reduced Matrigel)(BD BIOSCIENCES)을 콜라겐에 희석하고(1/6 v/v) 얼음 위에 두었다. 이러한 용액 160 μl를 타입 I 랫 테일 콜라겐으로 프리코팅된 8-웰 배양 슬라이드의 각각의 웰에 가하고, 37℃에서 1시간 동안 두었다. 겔 형성에 이어, 대조군, FGF-2, sHLA-Gl 또는 하이브리도마 상청액과 혼합된 또는 혼합되지 않은 HUVEC 서스펜션을 습하게 한 5% CO2 인큐베이터에 37℃에서 24시간 동안 매트리겔/콜라겐 겔에 시드하였다.

RUGGERI 등 (Cancer Res ., vol.63(18), p:5978-91, 2003)에 기재된 바와 같이 혈관신생을 정량하였다.

간단하게, 배양 배지를 제거하고, 세포를 PBS로 2회 세척하고, 4% PFA 용액 중 실온에서 30분 동안 고정하였다. 이어서, 세포를 PBS로 2회 세척하고 메이슨 트리크롬 염색으로 염색하였다. 자동화된 컴퓨터-보조 이미지 분석 시스템(Imagenia, Biocom, Les Ulis, France)을 사용하여 마이크로모세관 네트워크의 정도를 측정하고, 각각의 웰에서 모세관의 전체 길이를 판정하였다. 각각의 실험 조건에 대하여 평균 마이크로모세관 네트워크 길이(μm)를 계산하였다. 실험은 세번 수행되었고, 3회 반복되었다.

놀랍게도, 모든 하이브리도마 상청액 중 한 상청액이, 이러한 특이한 상청액의 항체가 혈관신생을 억제할 수 있음을 입증하는 FGF-2 매개된 미세 혈관 성장의 억제를 가져왔다.

3) 항-혈관신생 특성을 갖는 항- CD160 항체의 가변 영역의 클로닝

혈관신생을 억제하는 항체를 생성하는 특이적 하이브리도마를 분리하였다. 제조사의 지시에 따라 RNeasy 키트(QIAGEN)로 상기 하이브리도마의 세포로부터 전체 RNA를 추출하였다.

각각 감마 가변 사슬로부터 및 카파 경쇄로부터의 불변 영역의 특이적인 프라이머와 함께 CHARDES 등 (FEBS letters, vol.452, p:386-94, 1999)에 기재된 바와 같은 50 μg의 전체 RNA. 이어서 관심 있는 면역글로불린의 가변 영역을 스크리닝 및 분리하기 위해 CHARDES 등 (1999, 전술과 같음)에 기재된 프로토콜이 사용되었다.

이러한 스크리닝은 관심 있는 면역글로불린의 경쇄 및 중쇄의 가변 영역의 확인을 가능하게 한다(도 1 및 2).

이들 서열은 골격 영역(FR) 및 CDR 위치를 확인하기 위해 IMGT/V-QUEST 사이트(http://imgt.cines.fr/IMGT_vquest/share/textes/index.html)에서 다른 면역글로불린과의 정렬에 의해 분석되었다.

가변 중쇄 및 경쇄에 대해 확인된 CDR 위치는 각각 도 1 및 2에 나타낸다.

4) 항-혈관신생 특성을 갖는 항- CD160 항체의 가변 영역의 인간화 :

면역화를 위해 확인된 가변 영역을 상기 가변 영역과 최대의 상동성을 갖는 인간 면역글로불린과 정렬하였다.

마우스 가변 경쇄 서열 식별 번호: 8과 최대의 상동성을 갖는 인간 면역글로불린(서열 식별 번호: 22; 수납 번호 AAZ09098)이 도 9에 도시된다.

이러한 정렬을 고려하여, 마우스 가변 경쇄를 인간화하기 위해 복수의 치환을 테스트하였다. 테스트된 치환은 하기와 같다 :

* (서열 식별 번호 8의) 위치 17 : N -> E;

* 위치 18: S -> R

* 위치 19: V -> A

* 위치 41: H -> G

* 위치 53: Q -> N

* 위치 80: T -> P

* 위치 84: G -> A

* 위치 100: A -> G

마우스 가변 중쇄 서열 식별 번호: 1과 최대의 상동성을 갖는 인간 면역글로불린(각각 서열 식별 번호: 23 및 서열 식별 번호: 24; 수납 번호 3FCTB 및 AAG00910)이 각각 도 10 및 11에 도시된다.

이러한 정렬을 고려하여, 마우스 가변 중쇄를 인간화하기 위해 복수의 치환을 테스트하였다. 테스트된 치환은 하기와 같다 :

* (서열 식별 번호 6의) 위치 3 : H -> Q;

* 위치 35: Q -> H

* 위치 87: A -> T

5) 키메릭 항체의 구성

인간화된 또는 되지 않은 가변 중쇄 및 경쇄의 서열을, 신호 펩티드들과 그들 각각의 인간 카파 및 IgG1 또는 IgG4 불변 영역 도메인(LEUNG 등 (Hybridoma, vol.13(6), p:469-76, 1994)에 기재된 바와 같음)과 결합하였다.

이들 항체의 항-혈관신생 활성을 전술한 바와 같이 테스트하였다(cf. 2).

SEQUENCE LISTING <110> MONOCLONAL ANTIBODIES THERAPEUTICS Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale (INSERM) DIDIERLAURENT Denis CHOSE Olivier KADOUCHE Jean <120> ANTI-CD 160 MONOCLONAL ANTIBODIES AND USES THEREOF <130> D25265 <140> PCT/EP2010/050694 <141> 2010-01-21 <150> EP 09305057.3 <151> 2009-01-21 <160> 29 <170> PatentIn version 3.3 <210> 1 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> CDR1 from light chain of anti-CD160 antibody <400> 1 Gln Ser Ile Ser Asn His 1 5 <210> 2 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> CDR3 from light chain of anti-CD160 antibody <400> 2 Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Leu Thr 1 5 <210> 3 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> CDR1 from heavy chain of anti-CD160 antibody <400> 3 Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Trp 1 5 <210> 4 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> CDR2 from heavy chain of anti-CD160 antibody <400> 4 Ile Tyr Pro Gly Asp Asp Asp Ala 1 5 <210> 5 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> CDR3 from heavy chain of anti-CD160 antibody <400> 5 Ala Arg Arg Gly Ile Ala Ala Val Val Gly Gly Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 6 <211> 121 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 6 Gln Val His Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Trp Met Gln Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asp Asp Asp Ala Arg Tyr Thr Gln Lys Phe 50 55 60 Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Ala Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Gly Ile Ala Ala Val Val Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 7 <211> 363 <212> DNA <213> Mus musculus <400> 7 caggttcacc tccagcagtc tggggctgag ctggcaagac ctggggcttc agtgaagttg 60 tcctgcaagg cttctggcta cacctttact gactactgga tgcagtggat aaaacagagg 120 cctggacagg gtctggaatg gattgggtct atttatcctg gagatgatga tgctaggtac 180 actcagaagt tcaggggcaa ggccacattg actgcagata aatcctccag cacagcctac 240 atgcagctca gcagcttggc atctgaagac tctgcggtct attactgtgc aagaaggggt 300 attgctgcgg tagtaggcgg ctttgactac tggggccaag gcaccactct cacagtctcc 360 tca 363 <210> 8 <211> 108 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 8 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Asn Ser Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asn His 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu Ser Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Val Glu Thr 65 70 75 80 Glu Asp Phe Gly Met Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg 100 105 <210> 9 <211> 324 <212> DNA <213> Mus musculus <400> 9 gatattgtgc taactcagtc tccagccacc ctgtctgtga ctccaggaaa tagcgtcagt 60 ctttcctgca gggccagcca aagtattagc aaccacctac actggtatca acaaaaatca 120 catgagtctc caaggcttct catcaagtat gcttcccagt ccatctctgg gatcccctcc 180 aggttcagtg gcagtggatc agggacagat ttcactctca gtatcaacag tgtggagact 240 gaagattttg gcatgtattt ctgtcaacag agtaacagct ggccgctcac gttcggtgct 300 gggaccaagc tggagctaaa acgg 324 <210> 10 <211> 114 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 10 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 100 105 110 Pro Cys <210> 11 <211> 345 <212> DNA <213> homo sapiens <400> 11 gctagcacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 60 ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120 tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240 tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc 300 aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccat gctaa 345 <210> 12 <211> 330 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 12 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 100 105 110 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 115 120 125 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 130 135 140 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 145 150 155 160 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 165 170 175 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 180 185 190 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 195 200 205 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 210 215 220 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu 225 230 235 240 Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 245 250 255 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 260 265 270 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 275 280 285 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 290 295 300 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 305 310 315 320 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325 330 <210> 13 <211> 993 <212> DNA <213> homo sapiens <400> 13 gctagcacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 60 ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120 tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240 tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc 300 aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 360 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 420 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 480 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 540 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 600 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 660 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag 720 ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 780 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 840 ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 900 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 960 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa taa 993 <210> 14 <211> 327 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 14 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 15 <211> 984 <212> DNA <213> homo sapiens <400> 15 gctagcacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60 agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120 tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 240 tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 300 aaatatggtc ccccatgccc atcatgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 360 ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 420 tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 480 ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 540 cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 600 tgcaaggtct ccaacaaagg cctcccgtcc tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 660 gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 720 aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 780 tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 840 gacggctcct tcttcctcta cagcaggcta accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 900 aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac acagaagagc 960 ctctccctgt ctctgggtaa ataa 984 <210> 16 <211> 107 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 16 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 1 5 10 15 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 20 25 30 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 35 40 45 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 50 55 60 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 65 70 75 80 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 85 90 95 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 100 105 <210> 17 <211> 324 <212> DNA <213> homo sapiens <400> 17 cgtacggtgg ctgcaccatc tgtcttcatc ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct 60 ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat aacttctatc ccagagaggc caaagtacag 120 tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt aactcccagg agagtgtcac agagcaggac 180 agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc accctgacgc tgagcaaagc agactacgag 240 aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc catcagggcc tgagttcgcc cgtcacaaag 300 agcttcaaca ggggagagtg ttaa 324 <210> 18 <211> 130 <212> PRT <213> mus musculus <400> 18 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr 20 25 30 Leu Ser Val Thr Pro Gly Asn Ser Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser 35 40 45 Gln Ser Ile Ser Asn His Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu 50 55 60 Ser Pro Arg Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser 85 90 95 Ile Asn Ser Val Glu Thr Glu Asp Phe Gly Met Tyr Phe Cys Gln Gln 100 105 110 Ser Asn Ser Trp Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu 115 120 125 Lys Arg 130 <210> 19 <211> 390 <212> DNA <213> mus musculus <400> 19 atggacatgc gtgtgcccgc tcaactcctg ggcctgctgc tgctctggct cccaggtgcg 60 cgctgtgata ttgtgctaac tcagtctcca gccaccctgt ctgtgactcc aggaaatagc 120 gtcagtcttt cctgcagggc cagccaaagt attagcaacc acctacactg gtatcaacaa 180 aaatcacatg agtctccaag gcttctcatc aagtatgctt cccagtccat ctctgggatc 240 ccctccaggt tcagtggcag tggatcaggg acagatttca ctctcagtat caacagtgtg 300 gagactgaag attttggcat gtatttctgt caacagagta acagctggcc gctcacgttc 360 ggtgctggga ccaagctgga gctaaaacgg 390 <210> 20 <211> 140 <212> PRT <213> mus musculus <400> 20 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Gln Val His Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Asp Tyr Trp Met Gln Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Ile Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asp Asp Asp Ala Arg Tyr Thr 65 70 75 80 Gln Lys Phe Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Ala Ser Glu Asp Ser Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Gly Ile Ala Ala Val Val Gly Gly Phe Asp 115 120 125 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser 130 135 140 <210> 21 <211> 420 <212> DNA <213> mus musculus <400> 21 atggagttcg gcctgagctg gctgttcctg gtggctattc ttaagggtgt ccagtgtcag 60 gttcacctcc agcagtctgg ggctgagctg gcaagacctg gggcttcagt gaagttgtcc 120 tgcaaggctt ctggctacac ctttactgac tactggatgc agtggataaa acagaggcct 180 ggacagggtc tggaatggat tgggtctatt tatcctggag atgatgatgc taggtacact 240 cagaagttca ggggcaaggc cacattgact gcagataaat cctccagcac agcctacatg 300 cagctcagca gcttggcatc tgaagactct gcggtctatt actgtgcaag aaggggtatt 360 gctgcggtag taggcggctt tgactactgg ggccaaggca ccactctcac agtctcctca 420 <210> 22 <211> 107 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 22 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Asn Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Asp Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Thr Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Asn Asn Trp Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 23 <211> 114 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 23 Gln Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Met Ile Asp Pro Asn Ser Gly Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Pro Ser Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Arg Asp Met Asp Tyr Trp Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 24 <211> 114 <212> PRT <213> homo sapiens <220> <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <400> 24 Glu Val Xaa Leu Gln Glx Ser Gly Thr Val Leu Ala Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Arg Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Leu His Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Gly Ile Tyr Pro Gly Asn Arg Asp Thr Arg Tyr Thr Gln Arg Phe 50 55 60 Lys Asp Lys Ala Lys Leu Thr Ala Val Thr Ser Ala Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Asn Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Ile Ile Tyr Phe Asp Tyr Ala Asp Phe Ile Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly <210> 25 <211> 108 <212> PRT <213> artificial <220> <223> humanized variable light chain anti-CD160 antibody <220> <221> misc_feature <222> (17)..(17) <223> X= N or E <220> <221> misc_feature <222> (18)..(18) <223> X= S or R <220> <221> misc_feature <222> (19)..(19) <223> X= V or A <220> <221> misc_feature <222> (41)..(41) <223> X= H or G <220> <221> misc_feature <222> (53)..(53) <223> X= Q or N <220> <221> misc_feature <222> (80)..(80) <223> X= T or P <220> <221> misc_feature <222> (84)..(84) <223> X= G or A <220> <221> misc_feature <222> (100)..(100) <223> X= G or A <400> 25 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Xaa Xaa Xaa Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asn His 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Xaa Glu Ser Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Tyr Ala Ser Xaa Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Val Glu Xaa 65 70 75 80 Glu Asp Phe Xaa Met Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Xaa Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg 100 105 <210> 26 <211> 121 <212> PRT <213> artificial <220> <223> humanized variable heavy chain anti-CD160 antibody <220> <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> X= H or Q <220> <221> misc_feature <222> (35)..(35) <223> X= H or Q <220> <221> misc_feature <222> (87)..(87) <223> X= A or T <400> 26 Gln Val Xaa Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Trp Met Xaa Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ser Ile Tyr Pro Gly Asp Asp Asp Ala Arg Tyr Thr Gln Lys Phe 50 55 60 Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Xaa Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Gly Ile Ala Ala Val Val Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 27 <211> 181 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 27 Met Leu Leu Glu Pro Gly Arg Gly Cys Cys Ala Leu Ala Ile Leu Leu 1 5 10 15 Ala Ile Val Asp Ile Gln Ser Gly Gly Cys Ile Asn Ile Thr Ser Ser 20 25 30 Ala Ser Gln Glu Gly Thr Arg Leu Asn Leu Ile Cys Thr Val Trp His 35 40 45 Lys Lys Glu Glu Ala Glu Gly Phe Val Val Phe Leu Cys Lys Asp Arg 50 55 60 Ser Gly Asp Cys Ser Pro Glu Thr Ser Leu Lys Gln Leu Arg Leu Lys 65 70 75 80 Arg Asp Pro Gly Ile Asp Gly Val Gly Glu Ile Ser Ser Gln Leu Met 85 90 95 Phe Thr Ile Ser Gln Val Thr Pro Leu His Ser Gly Thr Tyr Gln Cys 100 105 110 Cys Ala Arg Ser Gln Lys Ser Gly Ile Arg Leu Gln Gly His Phe Phe 115 120 125 Ser Ile Leu Phe Thr Glu Thr Gly Asn Tyr Thr Val Thr Gly Leu Lys 130 135 140 Gln Arg Gln His Leu Glu Phe Ser His Asn Glu Gly Thr Leu Ser Ser 145 150 155 160 Gly Phe Leu Gln Glu Lys Val Trp Val Met Leu Val Thr Ser Leu Val 165 170 175 Ala Leu Gln Ala Leu 180 <210> 28 <211> 129 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 28 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr 20 25 30 Leu Ser Val Thr Pro Gly Asn Ser Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser 35 40 45 Gln Ser Ile Ser Asn His Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu 50 55 60 Ser Pro Arg Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser 85 90 95 Ile Asn Ser Val Glu Thr Glu Asp Phe Gly Met Tyr Phe Cys Gln Gln 100 105 110 Ser Asn Ser Trp Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu 115 120 125 Lys <210> 29 <211> 387 <212> DNA <213> Mus musculus <400> 29 atggacatgc gtgtgcccgc tcaactcctg ggcctgctgc tgctctggct cccaggtgcg 60 cgctgtgata ttgtgctaac tcagtctcca gccaccctgt ctgtgactcc aggaaatagc 120 gtcagtcttt cctgcagggc cagccaaagt attagcaacc acctacactg gtatcaacaa 180 aaatcacatg agtctccaag gcttctcatc aagtatgctt cccagtccat ctctgggatc 240 ccctccaggt tcagtggcag tggatcaggg acagatttca ctctcagtat caacagtgtg 300 gagactgaag attttggcat gtatttctgt caacagagta acagctggcc gctcacgttc 360 ggtgctggga ccaagctgga gctaaaa 387

Claims

CD160에 결합할 수 있는 항체, 또는 그 단편으로서, 상기 항체가 하기를 포함하는 항체의 폴리펩티드 서열과 90% 이상의 상동성을 포함하는 폴리펩티드 서열을 갖는 것인 항체:
a) 면역글로불린 경쇄로부터의 경쇄 골격 서열; 및 하기 아미노산 서열을 갖는 3개의 경쇄 상보성 영역(CDR)을 포함하는 경쇄:
i) 경쇄 CDRl: QSISNH (서열 식별 번호: 1);
ii) 경쇄 CDR2: YAS;
iii) 경쇄 CDR3: QQSNSWPLT (서열 식별 번호: 2); 및
b) 면역글로불린 중쇄로부터의 중쇄 골격 서열; 및 하기 아미노산 서열을 갖는 3개의 중쇄 상보성 영역(CDR)을 포함하는 중쇄:
i) 중쇄 CDRl: GYTFTDYW (서열 식별 번호: 3);
ii) 중쇄 CDR2: IYPGDDDA (서열 식별 번호: 4);
iii) 중쇄 CDR3: ARRGIAAVVGGFDY (서열 식별 번호: 5).
청구항 1에 있어서,
a) 면역글로불린 경쇄로부터의 경쇄 골격 서열; 및 하기 아미노산 서열 i) 내지 iii)과 90% 이상의 상동성을 가지는 아미노산 서열을 갖는 3개의 경쇄 상보성 영역(CDR)을 포함하는 경쇄:
i) 경쇄 CDRl: QSISNH (서열 식별 번호: 1);
ii) 경쇄 CDR2: YAS;
iii) 경쇄 CDR3: QQSNSWPLT (서열 식별 번호: 2); 및
b) 면역글로불린 중쇄로부터의 중쇄 골격 서열; 및 하기 아미노산 서열 i) 내지 iii)과 90% 이상의 상동성을 가지는 아미노산 서열을 갖는 3개의 중쇄 상보성 영역(CDR)을 포함하는 중쇄:
i) 중쇄 CDRl: GYTFTDYW (서열 식별 번호: 3);
ii) 중쇄 CDR2: IYPGDDDA (서열 식별 번호: 4);
iii) 중쇄 CDR3: ARRGIAAVVGGFDY (서열 식별 번호: 5)
를 포함하는 항체.
청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,
a) 면역글로불린 경쇄로부터의 경쇄 골격 서열; 및 하기 아미노산 서열을 갖는 3개의 경쇄 상보성 영역(CDR)을 포함하는 경쇄:
i) 경쇄 CDRl: QSISNH (서열 식별 번호: 1);
ii) 경쇄 CDR2: YAS;
iii) 경쇄 CDR3: QQSNSWPLT (서열 식별 번호: 2); 및
b) 면역글로불린 중쇄로부터의 중쇄 골격 서열; 및 하기 아미노산 서열을 갖는 3개의 중쇄 상보성 영역(CDR)을 포함하는 중쇄:
i) 중쇄 CDRl: GYTFTDYW (서열 식별 번호: 3);
ii) 중쇄 CDR2: IYPGDDDA (서열 식별 번호: 4);
iii) 중쇄 CDR3: ARRGIAAVVGGFDY (서열 식별 번호: 5)
을 포함하는 항체.
청구항 1 내지 청구항 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 또는 그 단편이 10^-7 M 미만, 바람직하게는 10^-8 M 미만의 K_D로 CD160에 결합할 수 있는 것인, 항체.
청구항 1 내지 청구항 4 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가, 아미노산 서열인 서열 식별 번호: 8, 바람직하게는 서열 식별 번호 : 18 또는 서열 식별 번호 : 28을 갖는 경쇄 가변 영역 (LCVR)을 포함하는 항체.
청구항 1 내지 청구항 5 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가, 아미노산 서열인 서열 식별 번호: 6, 바람직하게는 서열 식별 번호 : 20을 갖는 중쇄 가변 영역 (HCVR)을 포함하는 항체.
청구항 1 내지 청구항 4 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가, 아미노산 서열이 서열 식별 번호: 8과 하나 이상의 아미노산이 상이한 경쇄 가변 영역 (LCVR)을 포함하는 항체.
청구항 7에 있어서, 상기 항체가, 아미노산 서열인 서열 식별 번호: 25를 갖는 경쇄 가변 영역 (LCVR)을 포함하는 항체.
청구항 1 내지 청구항 4 또는 청구항 8 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가, 아미노산 서열이 서열 식별 번호: 6과 하나 이상의 아미노산이 상이한 중쇄 가변 영역 (HCVR)을 포함하는 항체.
청구항 9에 있어서, 상기 항체가, 아미노산 서열인 서열 식별 번호: 26을 갖는 중쇄 가변 영역 (HCVR)을 포함하는 항체.
청구항 1 내지 청구항 10 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간 경쇄 및 중쇄로부터의 불변 영역을 추가로 포함하는 항체.
청구항 11에 있어서, 상기 항체가
a) 하기를 포함하는 그룹에서 선택된 인간의 중쇄로부터의 불변 영역
· 서열이 추가적인 시스테인 및 정지 코돈의 삽입을 포함하는, 서열 식별 번호 : 10을 갖는 인간 감마 1 면역글로불린의 중쇄의 재조합 불변 영역;
· 서열 식별 번호: 12를 갖는 인간 감마 1 면역글로불린의 중쇄의 재조합 불변 영역; 및
· 서열 식별 번호 : 14를 갖는 인간 감마 4 면역글로불린의 중쇄의 재조합 불변 영역; 및
b) 서열 식별 번호: 16을 갖는 인간 카파 면역글로불린의 인간 경쇄로부터의 불변 영역
을 포함하는 항체.
청구항 12에 있어서, 상기 항체가 서열 식별 번호: 10을 갖는 인간 감마 1 면역글로불린의 중쇄의 재조합 불변 영역 및 서열 식별 번호: 16을 갖는 인간 카파 면역글로불린의 인간 경쇄로부터의 불변 영역을 포함하는 항체.
청구항 1 내지 청구항 13 중 어느 한 항에 기재된 하나 이상의 항체, 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물.
혈관신생 과정에 관여된 내피 세포 증식과 연관된 병리(pathology)의 치료 및/또는 예방용 약제의 제조를 위한, 청구항 1 내지 청구항 13 중 어느 한 항에 정의된 하나 이상의 항체의 용도.
청구항 15에 있어서, 상기 병리는 암, 망막병증, 류마티스성 관절염, 만성 이식편 거부, 이종이식에서 관찰되는 급성 이식편 거부, 혈관종, 혈관육종, 죽상동맥경화증, 신생혈관증(neovascularization)과 관련된 자궁내막증, 및 반흔화에 기인한 조직 과도생성을 포함하는 그룹에서 선택된 것인, 용도.
청구항 16에 있어서, 상기 병리는 망막병증에서 선택되는 것인, 용도.
청구항 17에 있어서, 상기 항체가 청구항 13에 정의된 것인, 용도.